【事件の表示】
　特願２０１４−５２７３３０「フマリルアセト酢酸ヒドロラーゼ（ＦＡＨ）欠損及び免疫不全ラット、並びにそれらの使用」拒絶査定不服審判事件〔平成２５年　３月　７日国際公開、ＷＯ２０１３／０３２９１８、平成２６年　９月２９日国内公表、特表２０１４−５２５２４８、請求項の数（３４）〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　原査定を取り消す。
　本願の発明は、特許すべきものとする。
【理　由】
第１　手続の経緯
　この出願は、２０１２年（平成２４年）８月２４日（パリ条約による優先権主張外国庁受理　２０１１年８月２６日　米国）を国際出願日とする特許出願であって、以降の主な手続の経緯は以下のとおりである。
　　平成２８年　６月　７日付け：拒絶理由通知書
　　平成２８年　９月　９日　　：意見書、手続補正書の提出
　　平成２８年　９月３０日付け：拒絶査定
　　平成２９年　２月１３日　　：審判請求書の提出
　　平成３０年　２月１４日付け：拒絶理由通知書
　　平成３０年　６月２０日　　：意見書、手続補正書の提出
　　平成３０年１０月１２日付け：拒絶理由通知書
　　平成３０年１２月　７日　　：意見書、手続補正書の提出
第２　原査定の概要
　原査定（平成２８年９月３０日付け拒絶査定）の概要は次のとおりである（なお、原査定時の請求項３５は平成３０年６月２０日付け手続補正書により削除されたため、同項に対する原査定の概要は省くこととする。）。
　本願請求項１〜３、５、８〜１４、１６、２１、２２及び３０〜３４に係る発明は、以下の引用文献１に記載された発明であるから、特許法２９条１項３号に該当し、特許を受けることができず、また、当該引用文献１に記載された発明に基づいて、その発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者（以下「当業者」という。）が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない。
　本願請求項１〜３４に係る発明は、以下の引用文献２に記載された発明、並びに引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明できたものであり、また、本願請求項１〜５及び８〜３４に係る発明は、以下の引用文献３及び４それぞれに記載された発明、並びに引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであり、さらに、本願請求項６及び７に係る発明は、以下の引用文献３及び４それぞれに記載された発明、並びに引用文献１、２、５及び６に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない。
　引用文献１：米国特許出願公開第２０１１／００３００７２号明細書
　引用文献２：国際公開第２０１０／１２７２７５号
　引用文献３：特表２０１０−５２８６６１号公報
　引用文献４：Nat Biotechnol., 2007, Vol.25, p.903-910
　引用文献５：GENES  DEVELOPMENT, 1993, Vol.7, p.2298-2307
　引用文献６：国際公開第２００６／０９０７２４号
第３　当審の拒絶理由通知書の概要
　平成３０年２月１４日付けで当審が通知した拒絶理由（以下「当審拒理」という。）の概要は次のとおりである（なお、原査定時の請求項３５は平成３０年６月２０日付け手続補正書により削除されたため、同項に対する当審拒理の概要は省くこととする。）。
　本願請求項１〜３４に係る発明は、以下の引用例１に記載された発明であるから、特許法２９条１項３号に該当し、特許を受けることができず、また、当該引用例１に記載された発明、及び引用例２〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない。
　本願請求項１〜３４に係る発明は、以下の引用例２及び３にそれぞれ記載された発明、並びに引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない。
　引用例１：米国特許出願公開第２０１１／００３００７２号明細書（原査定時の引用文献１）
　引用例２：国際公開第２０１０／１２７２７５号（原査定時の引用文献２）
　引用例３：特表２０１０−５２８６６１号公報（原査定時の引用文献３）
　引用例４：SCIENCE, 2009, Vol.325 (5939) p.433
　引用例５：PLoS ONE, 2010, Vol.5 (1) e8870 (p.1/7-7/7)
　引用例６：Trends Genet., 2010, Vol.26 (12) p.510-518
　引用例７：Hypertension, Mar 2011, Vol.57 (3) p.614-619
　また、平成３０年１０月１２日付けで当審が通知した拒絶理由は、特許請求の範囲の軽微な記載不備を指摘するもので、平成３０年１２月７日にされた手続補正により解消した。
第４　本願発明
　本願の請求項１〜３４に係る発明（以下、それぞれ「本願発明１」〜「本願発明３４」という。）は、平成３０年１２月７日にされた手続補正により補正された特許請求の範囲の請求項１〜３４に記載された事項により特定されるものであるところ、本願発明１及び１４は、その請求項１及び１４に記載された事項により特定される、次のとおりのものである。
「【請求項１】
　ゲノムが、Ｆａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合であり、前記破壊が機能的ＦＡＨタンパク質発現の低下及び肝機能を減退させる、遺伝子組換えＦａｈ欠損ラットであって、移植された異種肝細胞を含む、遺伝子組換えＦａｈ欠損ラット。」
「【請求項１４】
　請求項１〜１０に記載のいずれか一項に記載の遺伝子組換えＦａｈ欠損ラットを得るために、ゲノムがＦａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合である第１のＦａｈ欠損ラットに異種肝細胞を移植するステップと、
　前記異種肝細胞を増殖させ、それによりラット生体内で前記異種肝細胞を増殖させるステップと、
を含む、ラット生体内における異種肝細胞の増殖方法。」
第５　引用文献の記載事項及び引用発明
１　引用文献の記載
（１）引用例１
　原査定の拒絶の理由で「引用文献１」として引用され、また、当審拒理で「引用例１」として引用した米国特許出願公開第２０１１／００３００７２号明細書（以下「引用例１」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。
（１−ア）「本発明は、一般的に、免疫不全タンパク質をコードする少なくとも１つの編集された染色体配列を備える、遺伝的に改変された動物又は細胞に関する。特に、本発明は、動物または細胞中の免疫不全タンパク質をコードする染色体配列を編集するための、ジンクフィンガーヌクレアーゼが媒介する方法の使用に関する。」（［０００２］）
（１−イ）「単一、二重及び三重ノックアウト動物が明確に考慮される。単独で、又は免疫不全に関連する１又は複数の他のタンパク質と組み合わせて編集可能な…ラット染色体配列には、フマリルアセト酢酸ヒドロラーゼ（ＦＡＨ）、　…（Ｒａｇ１）、…　（Ｒａｇ２）、…　（Ｆｏｘｏ１）、ＤＮＡＰＫ…、ＩＬ２γ受容体が含まれている。一実施形態では、遺伝子改変されたラットは、…ＦＡＨをコードする、編集された染色体配列を含んでいてもよい。フマリルアセト酢酸ヒドロラーゼの突然変異は、重篤な免疫不全を引き起こす可能性がある。ウロキナーゼを発現するアデノウイルスでの前処理後、このようなラットには、肝臓生検を含む複数に由来するヒト肝細胞を高度に移植し得る。…ヒト肝細胞を高度に再増殖可能な遺伝子改変ラットは、薬物開発および研究用途において多くの潜在的用途を有するであろう。以上からみて、改変されたＦＡＨを有するラットは、組織培養のための高品質のヒト肝細胞を産生するための、また、薬物代謝産物の毒性を試験するための、さらに、複製用ヒト肝細胞に依存性の病原体を評価するための、強いプラットフォームとして機能する有用なモデル系となろう。」（［００２４］）
（１−ウ）「実施例３　Ｒａｇ２遺伝子座を編集するＺＦＮの同定
　…ラットＲａｇ２遺伝子…について、推定上の亜鉛フィンガー結合部位が調べられた。ＺＦＮを、本質的に実施例１に記載したように構築及び試験した。このアッセイにより、５′−ａｃＧＴＧＧＴＡＴＡＴａＧＣＣＧＡＧｇａａａａａｇｔｇｔ−３′…及び５′−ａｔＡＣＣＡＣＧＴＣＡＡＴＧＧＡＡｔｇｇｃｃａｔａｔｃｔ−３′を結合標的とするＺＦＮペアがＲａｇ２遺伝子座内を切断することが明らかとなった。
　実施例４　Ｒａｇ２遺伝子座の編集
　…Ｒａｇ２に対して活性なＺＦＮペアをコードするｍＲＮＡをラット胚にマイクロインジェクションした。該注入した胚を培養し、得られた動物からＤＮＡを抽出した。Ｒａｇ２遺伝子座の標的領域を、適切なプライマーを用いてＰＣＲ増幅した。増幅されたＤＮＡを適当なベクターにサブクローニングし、標準的な方法を用いて配列決定した。図２は、２匹の動物の編集されたＲａｇ２遺伝子座のＤＮＡ配列を示す。第１の動物はエクソン３の標的配列における１３ｂｐの欠失を有し、第２の動物はエクソン３の標的配列における２ｂｐの欠失を有した。これらの欠失は、Ｒａｇ２をコードする領域のリーディングフレームを破壊する。」（［０１２２］〜［０１２３］）
（２）引用例２
　原査定の拒絶の理由で「引用文献２」として引用され、また、当審拒理で「引用例２」として引用した国際公開第２０１０／１２７２７５号（以下「引用例２」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。
（２−ア）「【請求項１】
　ヒト肝細胞を免疫不全のＦａｈ欠損マウスに移植する工程であって、ここで、（ｉ）該マウスは、さらにＩＬ−１Ｒの発現について欠損型であるか、若しくは（ｉｉ）該マウスにＩＬ−１Ｒアンタゴニストが投与される工程；並びに
　該ヒト肝細胞が増大するのを可能にする工程であって、それにより該ヒト肝細胞が増大する工程
を含む、インビボでのヒト肝細胞を増大させる方法。
…
【請求項３】
　前記免疫不全のＦａｈ欠損マウスが、Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含み、該破壊は機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下をもたらす、請求項１または請求項２に記載の方法。
…」（特許請求の範囲）
（２−イ）「フマリルアセト酢酸ヒドラーゼ（ＦＡＨ）：チロシン異化の最終ステップに触媒作用を及ぼす代謝酵素。Ｆａｈ遺伝子のホモ接合体欠失を有するマウスは、肝ｍＲＮＡ発現の変化および重度の肝機能障害を示す（…）。また、該Ｆａｈ遺伝子の点変異は、肝不全および出生後の致死を生じることも示している（…）。」（１８頁２４〜２９行）
（２−ウ）「本明細書に記載の方法の一実施形態では、肝細胞の注入の前に、Ｆａｈ欠損マウスに、該マウスにおける肝臓疾患の発症を抑止する、遅延させる、または予防する薬剤が投与される。…かかる薬剤の一例は、２−（２−ニトロ−４−トリフルオロ−メチル−ベンゾイル）−１，３シクロヘキサンジオン（ＮＴＢＣ）である。ＮＴＢＣは、Ｆａｈ欠損マウスにおける肝臓疾患の発症を調節するために投与される。用量、投薬スケジュールおよび投与方法は、Ｆａｈ欠損マウスにおける肝臓の機能不全を抑制するために、必要に応じて調整され得る。
　一部の実施形態では、ＮＴＢＣは約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２．０ｍｇ／ｋｇ／日の用量で投与される。…ＮＴＢＣは、ヒト肝細胞の注入前、及び／又は肝細胞の注入後に選択された期間、投与され得る。…
　ＮＴＢＣは、限定されないが、飲料水にて、食品にて、または注射によってなどの任意の適当な手段によって投与され得る。」（３５頁５〜３１行）
（３）引用例３
　原査定の拒絶の理由で「引用文献３」として引用され、また、当審拒理で「引用例３」として引用した特表２０１０−５２８６６１号公報（以下「引用例３」という。）には、以下の事項が記載されている。
（３−ア）「【請求項１】
生体内でヒト肝細胞を増大させる方法であって、
ｉ）単離されたヒト肝細胞をＲａｇ２−／−／Ｉｌ２ｒｇ−／−マウスに移植するステップであって、前記マウスが、Ｆａｈの発現が欠損している、ステップと、
ｉｉ）前記ヒト肝細胞を、少なくとも約２週間増大させるステップと、
ｉｉｉ）前記マウスからヒト肝細胞を採取するステップと、を含む、方法。
【請求項２】
前記マウスが、前記Ｆａｈ遺伝子において、欠失に対してホモ接合体である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記マウスが、Ｆａｈ−／−／Ｒａｇ２−／−／Ｉｌ２ｒｇ−／−（ＦＲＧ）マウスである、請求項２に記載の方法。」（特許請求の範囲）
（３−イ）「　フマリルアセト酢酸ヒドラーゼ（ＦＡＨ）：チロシン異化の最終ステップに触媒作用を及ぼす代謝酵素。Ｆａｈ遺伝子のホモ接合体欠失を有するマウスは、肝ｍＲＮＡ発現の変化および重度の肝機能障害を示す（…）。該Ｆａｈ遺伝子の点変異はまた、肝不全および出生後の致死を生じることも示している（…）。」（【００３６】）
（３−ウ）「本明細書に記載される方法の一実施形態において、肝細胞注入前、該Ｆａｈ欠損マウスに、該マウスにおける肝臓疾患の発症を阻害、予防、または遅延する薬剤が投与される。…このような一薬剤は、２−（２−ニトロ−４−トリフルオロ−メチル−ベンゾイル）−１，３シクロヘキサンジオン（ＮＴＢＣ）である。ＮＴＢＣは、該Ｆａｈ欠損マウスにおける肝臓疾患の発症を調節するために投与される。用量、投与スケジュール、および投与方法は、該Ｆａｈ欠損マウスにおける肝機能障害を予防するために必要に応じ、調整することができる。一実施形態において、該ＮＴＢＣは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日から約０．５０ｍｇ／ｋｇ／日の用量で投与される。…ＮＴＢＣは、飲料水内投与、食物内投与、または注入が挙げられるが、これらに限定されない、任意の適した手段により投与することができる。…」（【００６０】）
（４）引用例４
　当審拒理で「引用例４」として引用した「SCIENCE, 2009, Vol.325 (5939) p.433」（以下「引用例４」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。
（４−ア）「ジンクフィンガーヌクレアーゼを胚にマイクロインジェクションすることにより産生されたノックアウトラット」（４３３頁表題）
（４−イ）「研究用ラットは、ゲノムの標的化された改変が大変難しいにもかかわらず、ヒト疾患関連形質の遺伝学的解剖のための十分に確立されたモデルである。我々は、特定のラット遺伝子機能を除去し、ノックアウトラットを創出するために、操作されたジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）の適用を研究した。」（４３３頁左欄１〜８行）
（４−ウ）「…２つの内在性ラット遺伝子である、イムノグロブリンＭ（ＩｇＭ）及びＲａｂ３８を標的とする…ＺＦＮ試薬の設計及び検証は、（３）に記載されたように実施され、（４）に詳述されている。…
　我々は、ＺＦＮをコードする、異なる濃度の（表Ｓ１）ＤＮＡ又はｍＲＮＡを前核又は細胞質内注入することにより、…９１の近交系ＦＨＨ（…Ｒａｂ３８　ＺＦＮ）及び２７９３の非近交系ＳＤ（…ＩｇＭ　ＺＦＮ）の胚にＺＦＮを導入した。最初に得られた２９５の動物のスクリーニングにより、標的突然変異を有する３５（１２％）の動物が得られた。
　…３２のＩｇＭ変異体及び１つのＲａｂ３８変異体は、２５〜１００％破壊された標的染色体を有していた（図Ｓ１）。最初に得られた１８の動物の配列分析により、３〜１８７塩基対の範囲の対立遺伝子欠失が明らかになったところ、特に、１匹の動物は、ＩｇＭについて両アレルに変異を有していた（表Ｓ１）。さらに、ＺＦＮ媒介遺伝子破壊は、…各標的配列について高い忠実度を示した（図Ｓ２、Ｓ３）。野生型動物への繁殖後、…３つのＩｇＭ突然変異は、生殖細胞を介して遺伝し…た（表Ｓ１、図Ｓ４）。」（４３３頁左欄１６〜右欄５行）
（５）引用例５
　当審拒理で「引用例５」として引用した「PLoS ONE, 2010, Vol.5 (1) e8870 (p.1/7-7/7)」（以下「引用例５」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。
（５−ア）「ジンクフィンガーヌクレアーゼを用いた、Ｘ連鎖重症複合免疫不全（Ｘ−ＳＣＩＤ）を有するノックアウトラットの作製」（１頁表題）
（５−イ）「背景：ラットは研究用モデルとして広く利用されているものの、生殖系列に分化できるラット胚性幹（ＥＳ）細胞を利用できないことが、遺伝子機能を解明することを目的とした研究にとって大きな欠点であった。最近、植物、ショウジョウバエ、ゼブラフィッシュなどを含む多種多様な生物において、ゲノム特異的二本鎖切断を生じさせることによって標的遺伝子に変異を誘導するために、ジンク−フィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮｓ）が成功裡に利用された。
　方法論／主な所見：我々は、ラットインターロイキン２受容体γ（Ｉｌ２ｒｇ）遺伝子座（このヒト及びマウスでのオーソロガスの突然変異はＸ連鎖重症複合免疫不全（Ｘ−ＳＣＩＤ）を引き起こす。）のＺＦＮ誘導性遺伝子ターゲティングについてここで報告する。特別に設計されたＺＦＮｓをコードするｍＲＮＡを受精卵母細胞の前核に共注入することにより、２０％以上の割合で遺伝子改変された子孫が得られ、それらは、様々な欠失／挿入変異を有していた。ＺＦＮにより変異を導入された最初のラット達は、重篤な複合免疫不全の表現型とともに、それらの遺伝子変化を忠実に次世代に伝えた。
　結論と意義：ＺＦＮ技術の使用が、遺伝子標的された、ヒト疾患モデルラットを作製するための新たな戦略であることは、遺伝子ノックアウトラットを効率的かつ迅速に生み出すことにより示されている。加えて、この研究で樹立されたＸ−ＳＣＩＤラットは、薬物治療又は遺伝子治療を評価するための価値あるｉｎ　ｖｉｖｏツールであるとともに、異種移植された悪性腫瘍の治療を試験するためのモデル系でもある。」（１頁要旨１〜１３行）
（６）引用例６
　当審拒理で「引用例６」として引用した「Trends Genet., 2010, Vol.26 (12) p.510-518」（以下「引用例６」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。
（６−ア）「ラットにおける遺伝子ターゲティング：進歩と機会」（１頁表題）
（６−イ）「ラットは、長い間、生理学者、薬理学者及び神経科学者により支持されたモデルであった。しかし、この２０年間を超えて、マウスにおける遺伝子改変技術及び広範なゲノム資源を理由に、これらの分野の多くの研究者がマウスを用いるようになっている。ラットのゲノム資源はほぼ補足されているものの、遺伝子ターゲティングがはるかに遅れており、多くの研究者にとってラットの価値が限られたものとなっている。この２年間で、トランスポゾン及びジンクフィンガーヌクレアーゼを介した遺伝子ノックアウト技術の進展、並びに胚性及び誘導性多能性幹細胞の樹立及び培養技術の進展により、ラットの遺伝子研究のための新たな機会が創出された。ここでは、生物医学研究のためにラットを使用している研究者に、これらの新しい技術に関する、高度な説明、及び潜在的な用途を提供する。」（１頁要旨１〜９行）
（６−ウ）「ラットへＺＦＮを適用した最初の実験は、驚くほど高い効率で遺伝子中の部位特異的変異を生じさせた（２５、２６）。ＺＦＮは、標準トランスジェニックマイクロインジェクション技術（…）を介して、in vitro転写されたＺＦＮをコードする核酸と一細胞胚を結びつけることにより、遺伝性の部位特異的標的突然変異をラットに生じさせるために使用することができる。最初期の細胞分裂の間にＺＦＮが作用すると、結果として得られる子孫において改変された染色体の割合が高くなる。改変された対立遺伝子は、生殖系列を介して遺伝し、また、ユニークな変異対立遺伝子を有する複数の株を確立するために戻し交配され得る。」（５頁下から７行〜最終行）
（６−エ）「最初に報告されて以来、他の２つのグループが、このアプローチ（…）を用いて、ラット遺伝子ノックアウトを報告しており、また、我々は１０か月の間に５４遺伝子をノックアウトしてきた。このプロトコールは、標的遺伝子あたり平均２９７（範囲７１〜１２８３）胚への注入を要し、２９（範囲３〜２０８）の生存仔をスクリーニングし、結果として、遺伝子あたり平均３．５（範囲１〜１４）のノックアウトされた最初の動物をえることができ、非常に効率的である（…）。この多くの標的遺伝子ノックアウトは、このアプローチの再現性を示すとともに、現在商業的に所有されるＺＦＮ試薬ライブラリーが、全ではないもののほとんどのラットゲノム遺伝子を標的とし、ノックアウトするのに十分であることも示している。また、非常に効率良くインターロイキン２受容体γをノックアウトすることによる、Ｘ連鎖重症複合免疫不全（Ｘ−ＳＣＩＤ）ラットモデルの公表（２６）によって示されるように、このアプローチは非常に迅速である。標的部位の選択から、公表された同型接合ノックアウト表現型まで、この研究は約１２か月（…）を要した。この早さと容易さは前例のないものであり、ラットを使用することに興味を有する研究者にとって、全く新しい研究の機会を開くものである。」（７頁２段落１〜１４行）
（７）引用例７
　当審拒理で「引用例７」として引用した「Hypertension, Mar 2011, Vol.57 (3) p.614-619」（以下「引用例７」という。）には、以下の事項が記載されている（英語から日本語への翻訳は当審が行った。）。
（７−ア）「レニンノックアウトラットの作製と特徴付け」（６１４頁表題）
（７−イ）「…我々は、ＳＳ／ＪｒＨｓｄＭｃｗｉ（ＳＳ）ラットにおいて、レニン遺伝子を標的とし、レニンをノックアウトするように設計されたジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）を使用した。レニンに対するＺＦＮは、エキソン５において１０ｂｐの欠失を引き起こし、フレームシフト突然変異を生じさせた。Ｒｅｎ−／−ラットでは、血漿レニン活性は検出されず、腎臓の傍糸球体細胞にはレニンタンパク質は存在しなかった。」（６１４頁要旨２〜５行）
（７−ウ）「ＺＦＮによるレニン遺伝子ＫＯラットの作製
　…ラットレニン遺伝子に特異的なＺＦＮ構築物がSigma-Aldrichにより設計、構築及び検証された。…以前述べたとおり（３）、レニンのＺＦＮをコードするｍＲＮＡは、２μｇ／μｌとなるよう、マイクロインジェクション緩衝液（…）中で希釈され、SS/JrHsdMcwi（ＳＳ）ラットの一細胞胚に注入された。…」（６１４頁右欄１１〜２５行）
２　引用発明
（１）引用例１に基づく引用発明１
　摘記事項（１−ウ）からみて、引用例１には、ラットＲａｇ２遺伝子座を編集するＺＦＮをマイクロインジェクションしたラット胚を培養することにより動物を得たこと、該動物から抽出したＤＮＡを配列決定したところ、Ｒａｇ２遺伝子座のエクソン３のリーディングフレームが破壊されていたことが記載されている。
　ここで、ラット胚を培養することにより得られる動物がラットであることは明らかであるから、引用例１には、「Ｒａｇ２遺伝子座のエクソン３のリーディングフレームが破壊されたラット」に係る発明（以下「引用発明１」という。）が記載されていると認められる。
（２）引用例２に基づく引用発明２
　摘記事項（２−ア）からみて、引用例２には、マウスの生体内でヒト肝細胞を増大させる方法が記載されているところ、当該マウスは「免疫不全のＦａｈ欠損マウス」であること、当該マウスに「ヒト肝細胞」が移植されること、及び当該Ｆａｈ欠損マウスは「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含み、該破壊は機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下」がもたらされていることが記載されている。また、摘記事項（２−イ）からみて、引用例２には、「Ｆａｈ遺伝子のホモ接合体欠失を有するマウス」が「重度の肝機能障害を示す」ことが記載されている。
　以上からみて、引用例２には、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含むことにより、機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下がもたらされ、重度の肝機能障害を示す、Ｆａｈ欠損マウスであって、ヒト肝細胞が移植されているＦａｈ欠損マウス」に係る発明（以下「引用発明２」という。）が記載されていると認められる。
（３）引用例３に基づく引用発明３
　摘記事項（３−ア）からみて、引用例３には、マウスの生体内でヒト肝細胞を増大させる方法が記載されているところ、当該マウスには「単離されたヒト肝細胞」が移植されること、当該マウスは「Ｆａｈの発現が欠損している」ものであること、及び当該マウスが「Ｆａｈ−／−／Ｒａｇ２−／−／Ｉｌ２ｒｇ−／−（ＦＲＧ）マウス」であることが記載されている。
　以上からみて、引用例３には、「Ｆａｈの発現が欠損しており、単離されたヒト肝細胞が移植されている、Ｆａｈ−／−／Ｒａｇ２−／−／Ｉｌ２ｒｇ−／−（ＦＲＧ）マウス」に係る発明（以下「引用発明３」という。）が記載されていると認められる。
第６　対比、判断
１　本願発明１について
　事案に鑑み、引用発明２を主引用発明とした場合の本願発明１の容易想到性についてまず検討し、次に、引用発明３を主引用発明とした場合を、最後に、引用発明１を主引用発明とした場合の本願発明１の容易想到性について検討する。
（１）引用発明２を主引用発明とした場合
ア　対比
　本願発明１と引用発明２とを対比する。引用発明２の「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含む」は、本願発明１の「ゲノムが、Ｆａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合」であることに相当する。また、引用発明２のマウスは、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含むことにより、機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下がもたらされ、重度の肝機能障害を示す」ものであるから、この点は、本願発明１の「前記破壊」すなわち「Ｆａｈ遺伝子における破壊」により、「機能的ＦＡＨタンパク質発現の低下及び肝機能を減退させる」に対応するものである。
　したがって、本願発明１と引用発明２との一致点及び相違点は次のとおりと認められる。
（一致点）「ゲノムが、Ｆａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合であり、前記破壊が機能的ＦＡＨタンパク質発現の低下及び肝機能を減退させる、遺伝子組換えＦａｈ欠損動物であって、移植された異種肝細胞を含む、遺伝子組換えＦａｈ欠損動物。」である点。
（相違点）動物が、本願発明は「ラット」であるのに対して、引用発明は「マウス」である点。
イ　相違点についての判断
（ア）　摘記事項（４−ア）〜（４−ウ）からみて、引用例４には、ＩｇＭ遺伝子を標的とするジンクフィンガーヌクレアーゼ（以下「ＺＦＮ」という。）を胚にマイクロインジェクションすることにより、ＩｇＭノックアウトラットを作製したことが記載されている。また、摘記事項（５−ア）及び（５−イ）からみて、引用例５には、Ｉｌ２ｒｇ遺伝子を標的とするＺＦＮを受精卵母細胞の前核に共注入することにより、Ｉｌ２ｒｇノックアウトラットを作製したことが記載されている。さらに、摘記事項（７−ア）〜（７−ウ）からみて、引用例７には、レニン遺伝子を標的とするＺＦＮを一細胞胚に注入することにより、レニンノックアウトラットを作製したことが記載されている。加えて、摘記事項（６−ア）〜（６−エ）からみて、引用例６には、ＺＦＮを介した遺伝子ノックアウト技術を用いて、すなわち、標準トランスジェニックマイクロインジェクション技術を介して、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ転写されたＺＦＮをコードする核酸と一細胞胚を結びつけることにより、遺伝性の部位特異的標的突然変異をラットに生じさせる技術を用いて、１０か月の間に、５４のラット遺伝子をノックアウトしたことが記載されている。
　以上からみて、本願優先日前から、ラットの胚や受精卵に対して特定の遺伝子を標的とするＺＦＮを作用させ、当該特定の遺伝子をノックアウトしたラットが種々作製されていたといえるから、本願優先日当時、ＺＮＦを用いたいわゆるゲノム編集技術により特定の遺伝子をノックアウトしたラットを作製する手法自体は当業者にとって周知の技術であったといえる。
　そして、本願優先日当時、ラットは、マウスと同様に広く研究に用いられている動物であったといえる（摘記事項（４−イ）、（５−イ）及び（６−イ））。
　したがって、引用例４〜７の記載、及び本願優先日当時の技術常識からみて、引用発明２のマウスをラットに置き換えようとすること自体は、当業者が容易に想到し得るといえる。
（イ）　そこで、本願優先日当時、引用発明２のマウスを実際にラットに置き換えることを当業者が容易になし得たか否かを検討する。ここで、引用発明２のマウスは、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含むことにより、機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下がもたらされ、重度の肝機能障害を示す、Ｆａｈ欠損マウスであって、ヒト肝細胞が移植されているＦａｈ欠損マウス」であるところ、このマウスをラットに置き換えるためには、まず、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含むことにより、機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下がもたらされ、重度の肝機能障害を示す、Ｆａｈ欠損マウス」を作製し、その後、当該Ｆａｈ欠損マウスにヒト肝細胞を移植することにより、「ヒト肝細胞が移植されているＦａｈ欠損マウス」を作製することは明らかである。そして、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含むことにより、機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下がもたらされ、重度の肝機能障害を示す、Ｆａｈ欠損ラット」を作製するにあたっては、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含む」Ｆａｈ欠損ラットを作製する必要があることも明らかである。そこで、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含む」Ｆａｈ欠損ラットを実際に作製することを当業者が容易になし得たか否かを検討する。
　引用例４〜７の記載及び本願優先日当時の技術常識を考慮すると、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含む」Ｆａｈ欠損ラットを実際に作製するにあたり、当業者は、以下のａ及びｂの作製方法を容易に想起し得るといえる（なお、記載を簡略化するため、以下では、Ｆａｈ遺伝子がホモ接合型で破壊されている場合を「Ｆａｈ−／−」、ヘテロ接合型で一方のＦａｈ遺伝子のみが破壊されている場合を「Ｆａｈ＋／−」、及び破壊されていないＦａｈ遺伝子をホモ接合型で有する場合を「Ｆａｈ＋／＋」という。）。
ａ　ＺＦＮを用いたゲノム編集技術によりＦａｈ−／−のラット胚を作製し、当該Ｆａｈ−／−ラット胚を偽妊娠の雌ラット子宮に戻してＦａｈ−／−ラット個体を作製する。
ｂ　ＺＦＮを用いたゲノム編集技術によりＦａｈ＋／−のラット胚を作製し、当該Ｆａｈ＋／−ラット胚を偽妊娠の雌ラット子宮に戻してＦａｈ＋／−ラット個体を作製した後、当該Ｆａｈ＋／−ラット個体どうしを交配することによりＦａｈ−／−ラット個体を作製する。
（ウ）　ここで、請求人は、平成２８年９月９日付け意見書において、要するに、Ｆａｈ−／−であることは、胎児ラットにおいては致命的であるものの、胎児マウスにおいては致命的ではなく、妊娠期間を生き延びて新生児として死ぬため、Ｆａｈ−／−ラットの肝機能をサポートするためには、受胎時からＮＴＢＣによる治療を要する一方、Ｆａｈ−／−マウスは妊娠期間中のＮＴＢＣによる治療を要しない旨を主張する。
　また、本願明細書の実施例６には、要するに、ラットＦａｈ遺伝子を標的とする転写活性化因子様エフェクタヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）を用いたゲノム編集技術により、３種類のＦａｈ＋／−ラット胚（Ｆａｈ−ｍ１、Ｆａｈ−ｍ２及びＦａｈ−ｍ３）を作製し、当該３種類のＦａｈ＋／−ラット胚から３種類のＦａｈ＋／−ラット個体を作製し、得られた３種類のＦａｈ＋／−ラット個体の交配により、３つのコロニ（ＳＳ−Ｆａｈ−ｍ１、ＳＳ−Ｆａｈ−ｍ２及びＳＳ−Ｆａｈ−ｍ３）を作製したことが具体的に記載されているとともに（【０１８３】）、これらのコロニ形成にあたり、如何なる治療もなしには、Ｆａｈ＋／−ラット個体の相互交配において、ヘテロ接合の子孫（当審注：本願図１３からみて「ホモ接合」の誤記と認める。）が観察されないので、ラットにおけるＦａｈ−／−は胚致死を引き起こす一方、Ｆａｈ＋／−ラット個体の飼育の飲料水にＮＴＢＣを投与すると（８ｍｇ／ｍＬ）、これらの変異の致死的な影響からラットを救うことができること、妊娠中にＮＴＢＣによる治療を行わない場合、Ｆａｈ−／−ラット個体は誕生せず、母親の飲料水へのＮＴＢＣの添加により、Ｆａｈ−／−ラット個体が誕生したことが記載されている（【０１８６】及び図１３）。
（エ）　前記（ウ）で示した事項を考慮すると、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、前記（イ）で示したａの作製方法によりＦａｈ−／−ラット個体を作製するに当たっては、Ｆａｈ−／−のラット胚を戻した偽妊娠の雌ラットに対して、また、前記（イ）で示したｂの作製方法によりＦａｈ−／−ラット個体を作製するに当たっては、Ｆａｈ＋／−のラット個体どうしの交配により妊娠した雌ラットに対して、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する必要があるといえる。すなわち、当該ａ及びｂいずれの作製方法においても、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する必要があるといえる。
　そこで、引用例２の記載をみてみると、摘記事項（２−イ）からみて、引用例２には、マウスにおけるＦａｈ遺伝子変異が、マウス出生後の致死を生じさせることが記載されており、また、摘記事項（２−ウ）からみて、引用例２には、Ｆａｈ欠損マウスにおける肝臓の機能不全を抑制し、肝臓疾患の発症を抑止、遅延又は予防するために、ＮＴＢＣを投与することが記載されている。
　しかし、これらの記載からは、Ｆａｈ−／−マウスが出生後に死亡すること、出生後のＦａｈ−／−マウス自身の死亡や肝臓疾患の発症を抑制するためにはＮＴＢＣの投与が必要であることは理解できるものの、Ｆａｈ−／−マウス胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−マウス胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する必要があることまでは理解できず、また、Ｆａｈ−／−マウス以外のマウスすなわちＦａｈ＋／＋及びＦａｈ＋／−マウス自身のためにＮＴＢＣを投与する必要があることも理解できない。
　そうすると、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する動機付けを引用例２の記載から見いだすことはできない。また、前記（イ）で示したａの作製方法で用いる偽妊娠の雌ラットは健康面で問題のない「Ｆａｈ＋／＋」又は「Ｆａｈ＋／−」の雌ラットを用いるといえ、また、前記（イ）で示したｂの作製方法で用いる妊娠した雌ラットは「Ｆａｈ＋／−」であるから、これらのＦａｈ＋／＋及びＦａｈ＋／−ラットである母体自身のために、ＮＴＢＣを投与する動機付けを引用例２の記載から見いだすことはできない。また、当該動機付けを、引用例４〜７の記載から見いだすこともできない。
　したがって、本願優先日当時、引用例２及び４〜７の記載から、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に出生させるために必要な手法であるというべき、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与することを当業者が容易に想到し得たとはいえず、よって、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することを当業者が容易になし得たともいえない。
（オ）　以上からみて、前記（ア）で検討したとおり、引用発明２のマウスをラットに置き換えようとすること自体は当業者が容易に想到し得ることであるといえるものの、前記（エ）で検討したとおり、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することを当業者が容易になし得たとはいえない。
　そうすると、引用発明２のマウスをラットに置き換えた、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含むことにより、機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下がもたらされ、重度の肝機能障害を示す、Ｆａｈ欠損ラット」を実際に作製することを当業者が容易になし得たともいえない。
　したがって、本願発明１は、引用例２に記載された発明、及び引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえない。
（２）引用発明３を主引用発明とした場合
ア　対比
　本願発明１と引用発明３とを対比する。引用発明３の「Ｆａｈ−／−」は、本願発明１の「ゲノムが、Ｆａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合」であることに相当し、また、引用発明３において、「Ｆａｈ−／−」に起因して、Ｆａｈの発現が欠損していることは明らかである。また、摘記事項（３−イ）からみて、引用発明３は、「Ｆａｈ−／−」であることにより、重度の肝機能障害を示すものである。そうすると、引用発明３のマウスは、「Ｆａｈ−／−」に起因して、Ｆａｈの発現が欠損し、かつ、重度の肝機能障害を示すものであるといえ、この点は、本願発明１の「前記破壊」すなわち「Ｆａｈ遺伝子における破壊」により、「機能的ＦＡＨタンパク質発現の低下及び肝機能を減退させる」に対応するものである。
　したがって、本願発明１と引用発明３との一致点及び相違点は次のとおりと認められる。
（一致点）「ゲノムが、Ｆａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合であり、前記破壊が機能的ＦＡＨタンパク質発現の低下及び肝機能を減退させる、遺伝子組換えＦａｈ欠損動物であって、移植された異種肝細胞を含む、遺伝子組換えＦａｈ欠損動物。」である点。
（相違点）動物が、本願発明は「ラット」であるのに対して、引用発明は「マウス」である点。
イ　相違点についての判断
（ア）　前記（１）イ（ア）で検討したとおり、引用例４〜７の記載、及び本願優先日当時の技術常識からみて、引用発明３のマウスをラットに置き換えようとすること自体は、当業者が容易に想到し得ることといえる。
（イ）　そこで、本願優先日当時、引用発明３のマウスを実際にラットに置き換えることを当業者が容易になし得たか否かを検討する。ここで、引用発明２のマウスは、「Ｆａｈの発現が欠損しており、単離されたヒト肝細胞が移植されている、Ｆａｈ−／−／Ｒａｇ２−／−／Ｉｌ２ｒｇ−／−（ＦＲＧ）マウス」であるところ、このマウスをラットに置き換えるためには、前記（１）イ（イ）で検討したとおり、Ｆａｈ−／−ラットを作製する必要があることは明らかである。そこで、Ｆａｈ−／−ラットを実際に作製することを当業者が容易になし得たか否かを検討すると、そのようなＦａｈ−／−ラットを作製するにあたり、前記（１）イ（イ）で検討したとおり、当業者は、以下のａ及びｂの作製方法を容易に想起し得るといえる。
ａ　ＺＦＮを用いたゲノム編集技術によりＦａｈ−／−のラット胚を作製し、当該Ｆａｈ−／−ラット胚を偽妊娠の雌ラット子宮に戻してＦａｈ−／−ラット個体を作製する。
ｂ　ＺＦＮを用いたゲノム編集技術によりＦａｈ＋／−のラット胚を作製し、当該Ｆａｈ＋／−ラット胚を偽妊娠の雌ラット子宮に戻してＦａｈ＋／−ラット個体を作製した後、当該Ｆａｈ＋／−ラット個体どうしを交配することによりＦａｈ−／−ラット個体を作製する。
（ウ）　そして、前記（１）イ（ウ）で示した事項を考慮すると、前記（１）イ（エ）で検討したとおり、前記（イ）で示したａ及びｂいずれの作製方法においても、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する必要があるといえる。
　そこで、引用例３の記載をみてみると、摘記事項（３−イ）からみて、引用例３には、マウスにおけるＦａｈ遺伝子変異が、マウス出生後の致死を生じさせることが記載されており、また、摘記事項（３−ウ）からみて、引用例３には、Ｆａｈ欠損マウスにおける肝機能障害を予防し、肝臓疾患の発症を阻害、予防又は遅延するために、ＮＴＢＣを投与することが記載されてはいる。
　しかし、これらの記載からは、Ｆａｈ−／−マウスが出生後に死亡すること、出生後のＦａｈ−／−マウス自身の死亡や肝臓疾患の発症を抑制するためにはＮＴＢＣの投与が必要であることは理解できるものの、Ｆａｈ−／−マウス胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−マウス胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する必要があることまでは理解できず、また、Ｆａｈ−／−マウス以外のマウスすなわちＦａｈ＋／＋及びＦａｈ＋／−マウス自身のためにＮＴＢＣを投与する必要があることも理解できない。
　そうすると、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する動機付けを引用例３の記載から見いだすことはできない。また、前記（イ）で示したａの作製方法で用いる偽妊娠の雌ラットは健康面で問題のない「Ｆａｈ＋／＋」又は「Ｆａｈ＋／−」の雌ラットを用いるといえ、また、前記（イ）で示したｂの作製方法で用いる妊娠した雌ラットは「Ｆａｈ＋／−」であるから、これらのＦａｈ＋／＋及びＦａｈ＋／−ラットである母体自身のために、ＮＴＢＣを投与する動機付けを引用例３の記載から見いだすことはできない。また、当該動機付けを、引用例４〜７の記載から見いだすこともできない。
　したがって、本願優先日当時、引用例３及び４〜７の記載から、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に出生させるために必要な手法であるというべき、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与することを当業者が容易に想到し得たとはいえず、よって、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することを当業者が容易になし得たともいえない。
（エ）　以上からみて、前記（ア）で検討したとおり、引用発明３のマウスをラットに置き換えようとすること自体は当業者が容易に想到し得ることであるといえるものの、前記（ウ）で検討したとおり、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することを当業者が容易になし得たとはいえない。
　そうすると、引用発明３のマウスをラットに置き換えた、「Ｆａｈ遺伝子にホモ接合型破壊を含むことにより、機能性ＦＡＨタンパク質の発現低下がもたらされ、重度の肝機能障害を示す、Ｆａｈ欠損ラット」を実際に作製することを当業者が容易になし得たともいえない。
　したがって、本願発明１は、引用例３に記載された発明、及び引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえない。
（３）引用発明１を主引用発明とした場合
ア　対比
　本願発明１と引用発明１とを対比する。引用発明１の「Ｒａｇ２遺伝子座のエクソン３のリーディングフレームが破壊」は、本願発明１の「遺伝子における破壊」に相当する。
　したがって、本願発明１と引用発明１との一致点及び相違点は次のとおりと認められる。
（一致点）「遺伝子における破壊を有する、遺伝子組換え欠損ラット。」である点。
（相違点１）欠損する遺伝子について、本願発明１は「Ｆａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合」であるのに対し、引用発明１は「Ｒａｇ２遺伝子座のエクソン３のリーディングフレームが破壊」されたものである点。
（相違点２）遺伝子組換え欠損ラットが、本願発明１は「前記破壊が機能的ＦＡＨタンパク質発現の低下及び肝機能を減退させる」ものであるのに対し、引用発明１はそのような特定がなされていない点。
（相違点３）遺伝子組換え欠損ラットが、本願発明１は「移植された異種肝細胞を含む」ものであるのに対し、引用発明１はそのような特定がなされていない点。
イ　相違点についての判断
　まず相違点１について検討する。摘記事項（１−ア）からみて、引用例１には、ＺＦＮを用いたゲノム編集技術により、免疫不全タンパク質をコードする染色体配列を編集し、遺伝的に改変された動物又は細胞を作製することが記載され、また、摘記事項（１−イ）からみて、引用例１には、Ｒａｇ２遺伝子が免疫不全に関連する遺伝子であることが記載されているから、引用発明１の「Ｒａｇ２遺伝子座のエクソン３のリーディングフレームが破壊されたラット」は、Ｒａｇ２遺伝子が破壊されることによる免疫不全を有するものであるといえる。そして、摘記事項（１−イ）からみて、引用例１には、免疫不全に関連するＦａｈ遺伝子、Ｒａｇ１遺伝子、Ｒａｇ２遺伝子などを編集することにより、単一、二重及び三重ノックアウト動物を作製することが記載されている。
　そうすると、引用発明１の「Ｒａｇ２遺伝子座のエクソン３のリーディングフレームが破壊されたラット」において、ＺＮＦを用いたゲノム編集技術により、さらにＦａｈ遺伝子を破壊しようとすること自体は、当業者が容易に想到し得ることといえる。
　しかし、前記（１）及び（２）で検討したとおり、引用発明１のラットのＦａｈ遺伝子を破壊し、Ｆａｈ−／−ラット個体を作製するためには、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する必要があるといえる。
　しかし、引用例１には、その点に関する記載や示唆はなく、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する動機付けを引用例１の記載から見いだすことはできない。また、当該動機付けを引用例２〜７の記載から見いだすこともできない。
　したがって、本願優先日当時、引用例１〜７の記載から、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に出生させるために必要な手法であるというべき、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与することを当業者が容易に想到し得たとはいえず、よって、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することを当業者が容易になし得たともいえない。
　以上からみて、引用発明１の「Ｒａｇ２遺伝子座のエクソン３のリーディングフレームが破壊されたラット」において、ＺＮＦを用いたゲノム編集技術により、さらにＦａｈ遺伝子を破壊すること自体は、当業者が容易に想到し得ることであるといえるものの、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することを当業者が容易になし得たとはいえない。
　したがって、相違点２及び３についての容易想到性を検討をするまでもなく、本願発明１は、引用例１に記載された発明、及び引用例２〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえない。
（４）小括
　前記（１）〜（３）で検討したとおり、本願発明１は、引用例１に記載された発明、及び引用例２〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえず、また、引用例２及び３にそれぞれ記載された発明、並びに引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるともいえない。
２　本願発明２〜１３について
　本願発明２〜１３は、請求項１を引用し、本願発明１をさらに限定するものであるから、本願発明１と同様の理由により、引用例１に記載された発明、及び引用例２〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえず、また、引用例２及び３にそれぞれ記載された発明、並びに引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるともいえない。
３　本願発明１４について
　前記第４に示したとおり、本願発明１４は、ラット生体内における異種肝細胞の増殖方法に係る発明であるところ、当該ラットとして、「ゲノムがＦａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合である…Ｆａｈ欠損ラット」を用いるものである。
　ここで、「ゲノムがＦａｈ遺伝子における破壊に対してホモ接合である…Ｆａｈ欠損ラット」、すなわち、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することは、前記１〜３で検討したとおり、引用例２及び３にそれぞれ記載された発明並びに引用例４〜７に記載された発明に基づいても、また、引用例１に記載された発明及び引用例２〜７に記載された発明に基づいても、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。
　したがって、本願発明１４は、引用例１に記載された発明、及び引用例２〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえず、また、引用例２及び３にそれぞれ記載された発明、並びに引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるともいえない。
４　本願発明１５〜３４について
　本願発明１５〜３４は、請求項１４を引用し、本願発明１４をさらに限定するものであるから、本願発明１４と同様の理由により、引用例１に記載された発明、及び引用例２〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえず、また、引用例２及び３にそれぞれ記載された発明、並びに引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるともいえない。
５　まとめ
　以上からみて、本願発明１〜３４は、引用例１に記載された発明、及び引用例２〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものとはいえず、また、引用例２及び３にそれぞれ記載された発明、並びに引用例４〜７に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるともいえない。
第７　原査定について
　前記第６の１（１）〜（３）で検討したとおり、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する動機付けを、原査定の引用文献１〜３（当審拒理の引用例１〜３）の記載から見いだすことはできない。
　そして、原査定の引用文献４として引用された「Nat Biotechnol., 2007, Vol.25, p.903-910」は、特許文献である原査定の引用文献３（当審拒理の引用例３）に対応する学術論文であり、記載内容も概ね同様であると認められるから、原査定の引用文献３（当審拒理の引用例３）と同様の理由により、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与する動機付けを、原査定の引用文献４の記載から見いだすことはできない。
　また、原査定の引用文献５として引用された「GENES  DEVELOPMENT, 1993, Vol.7, p.2298-2307」には、Ｆａｈ欠損マウスが出生後１２時間以内に死亡することが記載されている（要旨）ものの、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与することが必要であることは記載も示唆もされていない。
　さらに、原査定の引用文献６として引用された「国際公開第２００６／０９０７２４号」には、トランスジェニックラットについての記載はあるものの、ラットのＦａｈ遺伝子を欠損させることに関する記載はなく、Ｆａｈ−／−ラット胎児が出生前に死亡することを防止するために、Ｆａｈ−／−ラット胎児を有する母体に対し、妊娠期間の間、ＮＴＢＣを投与することが必要であることは記載も示唆もされていない。
　以上からみて、原査定の引用文献１〜６全ての記載を考慮しても、本願優先日当時、Ｆａｈ−／−ラット個体を実際に作製することを当業者が容易になし得たとはいえない。
　したがって、本願請求項１〜３、５、８〜１４、１６、２１、２２及び３０〜３４に係る発明が、原査定の引用文献１に記載された発明であるとはいえず、また、本願請求項１〜３、５、８〜１４、１６、２１、２２及び３０〜３４に係る発明が、原査定の引用文献１に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえない。また、本願発明１〜３４が、原査定の引用文献２に記載された発明、並びに原査定の引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明できたものであるとはいえない。さらに、本願発明１〜５及び８〜３４は、原査定の引用文献３及び４それぞれに記載された発明、並びに原査定の引用文献１、５及び６に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたもであるとはいえず、また、本願発明６及び７に係る発明は、原査定の引用文献３及び４それぞれに記載された発明、並びに原査定の引用文献１、２、５及び６に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとはいえない。
第８　むすび
　以上のとおりであるから、原査定の拒絶理由、及び当審で通知した拒絶理由によって、本願を拒絶することはできない。
　また、他に本願を拒絶すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり審決する。