【誤訳訂正書】
【提出日】平成22年6月8日(2010.6.8)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１をコードするヌクレオチド配列またはその相補体を含む単離した核酸。
【請求項２】  該ヌクレオチド配列が配列番号：１に記載の配列または、配列番号：１のヌクレオチド７４〜４４２を含むヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載の単離した核酸。
【請求項３】  請求項１に記載の単離した核酸を含むベクター。
【請求項４】  請求項３に記載のベクターでトランスフェクトした細胞。
【請求項５】  請求項１に記載の単離した核酸でトランスフェクトした細胞。
【請求項６】  請求項１に記載の単離した核酸を含む非ヒト・トランスジェニック動物。
【請求項７】  配列番号：２に記載のＭｉＲＰ１ポリペプチド配列の変異体をコードする単離した核酸であって、該変異体は、アミノ酸８にてＡｌａ、アミノ酸９にてＧｌｕ、アミノ酸５４にてＴｈｒおよびアミノ酸５７にてＴｈｒよりなる群から選択されるアミノ酸変化以外は配列番号：２を含む単離した核酸。
【請求項８】  該核酸は配列番号：１に記載されたヌクレオチド配列の変異体を含み、該変異体は、ヌクレオチド９５にてＡからＧ；ヌクレオチド９８にてＣからＧ；ヌクレオチド２３４にてＴからＣ；およびヌクレオチド２４３にてＴからＣよりなる群から選択されるヌクレオチド変化以外は配列番号：１に記載されたヌクレオチド７４〜４４２を含む、請求項７の単離した核酸。
【請求項９】  請求項７に記載の単離した核酸を含むベクター。
【請求項１０】  請求項９に記載のベクターでトランスフェクトした細胞。
【請求項１１】  請求項７に記載の単離した核酸でトランスフェクトした細胞。
【請求項１２】  配列番号：２に記載されたアミノ酸配列を含む単離したポリペプチド。
【請求項１３】  配列番号：２に記載のＭｉＲＰ１ポリペプチド配列の変異体であって、該変異体は、アミノ酸８にてＡｌａ、アミノ酸９にてＧｌｕ、アミノ酸５４にてＴｈｒおよびアミノ酸５７にてＴｈｒよりなる群から選択されるアミノ酸変化以外は配列番号：２を含む単離したポリペプチド。
【請求項１４】  配列番号：２に記載されたポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸のエキソンを増幅する方法であって、プライマー対を用いることを特徴とする該方法。
【請求項１５】  ＭｉＲＰ１の多型性を検出する方法であって、対象の組織試料から単離されたＭｉＲＰ１の配列またはその発現産物をＭｉＲＰ１の野生型配列またはその発現産物と比較することを含み、ＭｉＲＰ１の野生型配列は配列番号：２に記載されたアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードし、組織試料から単離されたＭｉＲＰ１の配列またはその発現産物における変異が該組織試料中のＭｉＲＰ１における多型性を示すことを特徴とする該方法。
【請求項１６】  ＱＴ延長症候群のリスクの指標となるＭｉＲＰ１における多型性を検出する方法であって、対象の組織試料から単離されたＭｉＲＰ１の配列またはその発現産物をＭｉＲＰ１の野生型配列またはその発現産物と比較することを含み、ＭｉＲＰ１の野生型配列は配列番号：２に記載されたアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードし、組織試料から単離されたＭｉＲＰ１の配列またはその発現産物における変異がＱＴ延長症候群のリスクの指標となる組織試料のＭｉＲＰ１における多型性を示し、該変異ＭｉＲＰ１タンパク質はアミノ酸８にてＡｌａ、アミノ酸９にてＧｌｕ、アミノ酸５４にてＴｈｒおよびアミノ酸５７にてＴｈｒよりなる群から選択されるアミノ酸変化以外は配列番号：２を含むことを特徴とする該方法。
【請求項１７】  ＱＴ延長症候群の治療または予防に有用な薬物をスクリーニングする方法であって：
（ａ）野生型ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を発現する細胞を、電流を測定するための浴液に入れ；
（ｂ）工程（ａ）の細胞における誘導Ｋ＋電流を測定し；
（ｃ）野生型ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１の変異体をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を発現する細胞を、電流を測定するための浴液に入れ、該変異体はアミノ酸８にてＡｌａ、アミノ酸９にてＧｌｕ、アミノ酸５４にてＴｈｒおよびアミノ酸５７にてＴｈｒよりなる群から選択されるアミノ酸変化以外は配列番号：２を含み；
（ｄ）工程（ｃ）の細胞における誘導Ｋ＋電流を測定し；
（ｅ）薬物を工程（ｃ）の浴液に添加し；
（ｆ）工程（ｅ）の細胞における誘導Ｋ＋電流を測定し；ついで、
（ｇ）該薬物が、野生型ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を発現する細胞において該薬物不存在下で観測される電流と比較して、野生型ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１の変異体をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を発現する細胞において観測される誘導Ｋ＋電流により近いもしくはより近くない誘導Ｋ＋電流を生じたかどうかを決定し、
ここに、野生型ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１の変異体をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を発現する細胞において観測される誘導Ｋ＋電流により近い誘導Ｋ＋電流を生じた薬物がＱＴ延長症候群の治療または予防に有用であることを特徴とする該方法。
【請求項１８】  工程（ａ）の細胞が野生型ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１をコードするヌクレオチド配列を含む核酸で共トランスフェクトされ、工程（ｃ）の細胞が野生型ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１の変異体をコードするヌクレオチド配列を含む核酸で共トランスフェクトされていることを特徴とする請求項１７記載の方法。
【請求項１９】  （ｉ）工程（ａ）の細胞、（ｉｉ）工程（ｃ）の細胞、または（ｉｉｉ）工程（ａ）および（ｃ）の細胞をＲＮＡでトランスフェクトすることを特徴とする請求項１７記載の方法。
【請求項２０】  薬物が高速遅延整流カリウム電流（ＩＫｒ）に影響する能力を決定する方法であって、
（ａ）変異ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を発現する細胞を、電流を測定するための浴液に入れ；
（ｂ）工程（ａ）の細胞における第１の誘導Ｋ＋電流を測定するかまたは検出し；
（ｃ）薬物を工程（ａ）の浴液に添加し；
（ｄ）工程（ｃ）の細胞における第２の誘導Ｋ＋電流を測定し；次いで、
（ｅ）工程（ｃ）における薬物の添加が、該第１の誘導Ｋ＋電流を第２の誘導Ｋ＋電流と比較して、ＩＫｒを阻害するか、促進するか、または変化させるかどうかを決定することを特徴とする該方法。
【請求項２１】  薬物が高速遅延整流カリウム電流（ＩＫｒ）に影響する能力を決定する方法であって、
（ａ）変異ＨＥＲＧおよび配列番号：２に記載されたヒトＭｉＲＰ１の変異体をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を発現する細胞を、電流を測定するための浴液に入れ、該変異体はアミノ酸８にてＡｌａ、アミノ酸９にてＧｌｕ、アミノ酸５４にてＴｈｒおよびアミノ酸５７にてＴｈｒよりなる群から選択されるアミノ酸変化以外は配列番号：２を含み；
（ｂ）工程（ａ）の細胞における第１の誘導Ｋ＋電流を測定するかまたは検出し；
（ｃ）薬物を工程（ａ）の浴液に添加し；
（ｄ）工程（ｃ）の細胞における第２の誘導Ｋ＋電流を測定し；次いで、
（ｅ）工程（ｃ）における薬物の添加が、該第１の誘導Ｋ＋電流を第２の誘導Ｋ＋電流と比較して、ＩＫｒを阻害するか、促進するか、または変化させるかどうかを決定することを特徴とする該方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２３５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２３５】
実施例１１
ヒトＭｉＲＰ１における突然変異は不整脈と関連する
ＭｉＲＰ１突然変異体は心臓不整脈を引き起こすという仮説を検定するために、本発明者らは、薬物−誘導不整脈を持つ２０人の患者および遺伝性または散発性不整脈を持つが、それらのＫＶＬＱＴ１、ＨＥＲＧ、ＳＣＮ５Ａ、またはＫＣＮＥ１遺伝子に突然変異を持たない２３０人の患者のパネルをスクリーニングした。また、１，０１０個人の対照集団を評価した。ＳＳＣＰおよびＤＮＡ配列決定による分析は、３つの異常および１つの多形を明らかにした。
Ｑ９Ｅ−ｈＭｉＲＰ１。薬物−誘導不整脈を持つ２０人の患者のうち一人は
ｈＫＣＮＥ２のヌクレオチド＋２５においてＣからＧへのトランスバージョンを有し、ｈＭｉＲＰ１の推定細胞外ドメインにおいてＱ９からＥへの置換を生じた。この突然変異は１，０１０人の対照個人では同定されなかった。該患者は、高血圧、インスリン非依存性糖尿病および発作の病歴を持つ７６歳のアフリカンアメリカ人女性である。２つのベースライン心電図は、ボーダーライン延長された心拍につき修正したＱＴ間隔を示した（ＱＴｃ＝４６０ミリ秒）。心電図記録は、温和ないし中程度の散在性運動低下を持つ同心性左心室肥大を明らかとしたが、心室拡張は明らかにしなかった。該患者が肺炎で入院が許可され、７用量の静脈内エリスロマイシン（６時間ごとに５００ｍｇ）治療し、次いで、経口クラリスロマイシン（１２時間ごとに５００ｍｇ）にスイッチした。２用量のクラリスロマイシンの後に心電図は５４０ミリ秒のＱＴｃを示した。該患者はＴｄＰおよびＶＦを発症し、細動除去を必要とした。その時点で、彼女は低カリウム血症であり、２．８ｍｅｑ／Ｌの血清ナトリウムレベルであった。