【誤訳訂正書】
【提出日】平成22年5月19日(2010.5.19)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  遊離形または塩形における、式Ｉ
【化１】
2002518504.tif 000001
〔式中、
波線は結合“ａ”がcisまたはtrans形で存在することを示し；
Ｒ２は不存在または酸素であり；“ａ”は単または二重結合であり；“ｂ”は不存在または単結合であり；そして、“ｃ”は不存在または単結合であり（ただし、Ｒ２が酸素であるとき、“ｂ”および“ｃ”の両方は単結合であり、そして、“ａ”は単結合であり；Ｒ２が不存在であるとき、“ｂ”および“ｃ”は不存在であり、そして、“ａ”は二重結合であり；“ａ”が二重結合であるとき、Ｒ２、“ｂ”および“ｃ”は不存在である）；
Ｒ３はＣ１−Ｃ７アルキル；−ＣＨ＝ＣＨ２；−Ｃ≡ＣＨ；−ＣＨ２Ｆ；−ＣＨ２Ｃｌ；−ＣＨ２−ＯＨ；−ＣＨ２−Ｏ−(Ｃ１−Ｃ６−アルキル)；および−ＣＨ２−Ｓ−(Ｃ１−Ｃ６−アルキル)からなる群から選択される基であり；
Ｒ４およびＲ５は、独立して水素、メチルまたはヒドロキシ保護基から選択され；そして
Ｒ１は以下：
【化２】
2002518504.tif 000002
で示される基である〕
で示される化合物。
【請求項２】  Ｒ２が不存在または酸素であり；“ａ”が単または二重結合であり；“ｂ”が不存在または単結合であり；そして、“ｃ”が不存在または単結合であり（ただし、Ｒ２が酸素であるとき、“ｂ”および“ｃ”の両方は単結合であり、そして、“ａ”は単結合であり；Ｒ２が不存在であるとき、“ｂ”および“ｃ”は不存在であり、そして、“ａ”は二重結合であり；“ａ”が二重結合であるとき、Ｒ２、“ｂ”および“ｃ”は不存在である）；
Ｒ３がメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル；−ＣＨ＝ＣＨ２；−Ｃ≡ＣＨ；−ＣＨ２Ｆ；−ＣＨ２Ｃｌ；−ＣＨ２−ＯＨ；−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３；および−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ３からなる群から選択される基であり；
Ｒ４およびＲ５が水素であり；そして
Ｒ１が以下：
【化３】
2002518504.tif 000003
で示される基である、請求項１に記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】  式Ｉｄ
【化４】
2002518504.tif 000004
〔式中、Ａはメチルチオであり、そして
Ｄは水素、フルオロ、ヒドロキシまたはメチルである〕
で示される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】  式Ｉｅ
【化５】
2002518504.tif 000005
〔式中、Ａはメチルチオであり、そして
Ｄは水素、フルオロ、ヒドロキシまたはメチルである〕
で示される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項５】  以下の式からなる群：
【化６】
2002518504.tif 000006
から選択される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項６】  請求項１から５のいずれかに記載の化合物と薬学的に許容される担体を含む、医薬製剤。
【請求項７】  増殖性疾患の処置に使用するための請求項１から５のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】  増殖性疾患の処置用医薬の製造における、請求項１から５のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項９】  活性成分として増殖性疾患の処置に有効である量の請求項１から５のいずれかに記載の化合物を、少なくとも一つの薬学的に許容される担体と共に含む、増殖性疾患の処置のために温血動物への投与に適した医薬組成物。
【請求項１０】  式II
【化７】
2002518504.tif 000007
〔式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ａ、ｂおよびｃおよび波線は請求項１の式Ｉで定義の意味を有する〕
で示されるヨウ化物と、式III
Ｒ１−Ｓｎ(Ｒ)３                                          (III)
〔式中、Ｒ１は請求項１の式Ｉで定義の意味を有し、ＲはＣ１−Ｃ７アルキルである〕
で示されるスズ化合物をカップリングさせることを特徴とする、請求項１から５のいずれかに記載の化合物の合成法。
【請求項１１】  式IV
【化８】
2002518504.tif 000008
〔式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、ａ、ｂおよびｃおよび波線は請求項１の式Ｉで定義の意味を有する〕
で示されるスズ化合物と、式Ｖ
Ｒ１−Ｉ                                (Ｖ)
〔式中、Ｒ１は請求項１の式Ｉで定義の意味を有する〕
のヨウ化物をカップリングさせることを特徴とする、請求項１から５のいずれかに記載の化合物の合成法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００３】
発明の背景
エポシロン(１−５)は、天然物質であり、α−およびβ−チューブリンサブユニットの重合化の促進および得られる微小管集合体の安定化により、パクリタキセル耐性腫瘍細胞に対してさえ、細胞毒性を示す。エポシロンは、その微小管結合部位からパクリタキセル(TAXOL(登録商標)の活性本体)を離し、微小管の安定化に関してパクリタキセルよりも、より強力であると報告されている。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
本発明の他の態様は、式
【化３９】
2002518504.tif 000009
(式中、Ｑは水素または好ましくはメチルである)
の化合物の合成法および／または式
【化４０】
2002518504.tif 000010
の化合物の合成法に関する。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２６】
1A9、1A9PTX10(α−チューブリン変異体)および1A9PTX22(α−チューブリン変異体)細胞系での細胞毒性試験は、式Ｉの化合物の細胞毒性活性を示すことができる。天然に存在するエポシロン１および２と同様に、式Ｉの化合物は変更α−チューブリン細胞系1A9PTX10および1A9PTX22に対して有意な活性を示す。式Ｉの化合物に関して、好ましいＩＣ５０値(式Ｉの阻害剤なしのコントロールと比較して、腫瘍細胞の最大の半分の成長阻害が見られる濃度)は、１から１０００nM、好ましくは１から２００nMの範囲である。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
本発明の化合物が腫瘍生育を阻害する能力は、以下の細胞系による以下のアッセイで示すことができる：
抗癌剤スクリーニングのための比色細胞毒性アッセイ
使用する比色細胞毒性アッセイはSkehan et al (Journal of National Cancer Inst 82:1107-1112, 1991)を適合させる。本方法は、９６ウェルマイクロタイタープレートの付着および懸濁培養の細胞性タンパク質の測定のための速い、感受性の、そして安価な方法を提供する。本方法は、National Cancer Instituteの疾病指向性インビトロ抗癌剤発見スクリーンに適している。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
特に、トリクロロ酢酸で固定した培養を３０分、１％酢酸に溶解した０.４％(wt/vol)スルホローダミンＢ(ＳＲＢ)で染色する。非結合色素を１％酢酸での４回の洗浄により除去し、タンパク質結合色素を１０mM非緩衝化トリス塩基[トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン]で、コンピューターインターフェース、９６ウェルマイクロタイタープレートリーダーでの光学密度測定のために抽出する。ＳＲＢアッセイ結果は、細胞の数およびLowry and Bradfordアッセイの両方で測定した細胞性タンパク質の値と、まばらなサブコンフルエンスから重層超コンフルエンスの範囲の密度で直線である。５６４nmでのシグナル対ノイズ比は、１,０００細胞／ウェルで約１.５である。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２９】
ＳＲＢアッセイは、非破壊的な、いつまでも安定な、そして裸眼で可視の熱量測定終点を提供する。これは、医薬誘導細胞毒性の感受性の測定を提供する。ＳＲＢは４８８nmのレーザー励起で強く蛍光し、静的蛍光血球計算により１細胞レベルで定量的に測定できる(Skehan et al (Journal of National Cancer Inst 82:1107-1112, 19901))。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３２】
腫瘍細胞に対する効果は、以下の方法でまた示すことができる：
ＤＭＳＯ中式Ｉの試験化合物の貯蔵溶液(１０mM)を調製し、−２０℃で貯蔵する。ヒトKB-31および(多剤耐性、P-gp 170過発現)KB-8511類表皮癌細胞はDr. M. Baker, Roswell Park Memorial Institute(Buffalo, NY, USA)からである(記載に関してはまたAkiyama et al., Somat. Cell. mol. Genetics 11, 117-126(1985)およびFojo A., et al., Cancer Res. 45, 3002-3007(1985)参照  −  KB-31およびKB-8511、両方ともＫＢ−細胞系の誘導株(American Type Culture Collection)であり、ヒト類表皮癌細胞である。KB-31細胞は、ウシ血清(M. A. Bioproducts)、Ｌ−グルタミン(Flow)、ペニシリン(５０単位／ml)およびストレプトマイシン(５０μｇ／ml(Flow)を使用して単層培養できる；次いで、それらを約２２時間の倍増速度で生育させ、相対的平板効率は約６０％である。KB-8511は、KB-31細胞系から由来する変異体であり、コルヒチンでの処理サイクルにより得られ、これはKB-31細胞と比較してコルヒチンに約４０倍の相対的耐性を有する)。細胞を、３７℃で５％ｖ／ｖ  ＣＯ２および８０％相対的湿度のインキュベーター中、１０IUペニシリン、１０μｇ／mlストレプトマイシンおよび５％ウシ胎児血清添加、リボヌクレオシドおよびデオキシリボヌクレオシド含有ＭＥＭ  Alpha−培地中(Gibco BRL)でインキュベートする。細胞を１.５×１０３細胞／ウェルに９６ウェルマイクロタイタープレートに広げ、一晩インキュベートする。培養培地中の試験化合物の連続希釈を１日目に添加する。次いで、プレートを更に４日間インキュベートし、その後、３.３％ｖ／ｖグルタールアルデヒドを使用して固定して水で洗浄し、最後に０.０５％ｗ／ｖメチレンブルーで染色する。再び洗浄後、染色を３％ＨＣｌで溶出し、６６５nmの光学密度をSpectraMax 340(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)で測定する。ＩＣ５０値をデータを数学的にSoftPro2.0プログラム(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)および式
[(ＯＤ処理)−(ＯＤ開始)]／[(ＯＤコントロール)−(ＯＤ開始)]×１００
に適合させて計算する。ＩＣ５０を、インキュベーション時間の最後の、試験化合物なしのコントロールと比較して、５０％の細胞の数をもたらす試験化合物の濃度として定義する(細胞生育の最大半分阻害の濃度)。式Ｉの化合物は、好ましくは、ここでは０.１×１０−９から５００×１０−９Ｍ、好ましくは、０.１から６０nMの間の範囲のＩＣ５０を示す。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３８】
ヒト肺腺癌A549(ATCC CCL 185；５８歳白人男性の肺癌組織から単離)；上皮形態を示し、シチジンジホスホコリン経路を利用して、高いパーセントの不飽和脂肪酸を有するレシチンを合成できる；染色体６および染色体１の長腕を含むサブテロセントリック(subtelocentric)マーカー染色体が、全ての中期で見られる。ヒト乳癌ZR-75-1(ATCC CRL 1500；浸潤管癌の６３歳白人女性の転移腹水滲出液から単離)；は、乳上皮起源である；細胞はエストロゲンおよび他のステロイドホルモンの受容体を有し、超三倍体(hypertriloid)染色体数を有する。ヒト上皮(口)癌細胞系KB-8511(上皮(口)KB-31癌細胞系由来Ｐ−ｇｐ過発現細胞系)をDr. R. M. Baker, Roswell Park Memorial Institute(Buffalo, N. Y., USA)(記載に関しては、Akiyama et al., Somat. Cell. mol. Genetics 11, 117-126(1985)および Fojo A., et al., Cancer Res. 45, 3002-3007(1985)参照)から得、先に記載のように培養する(Meyer, T., et al., Int. J. Cancer 43, 851-856(1989))。KB-8511細胞は、KB-31と同様に、ＫＢ細胞系(ATCC)由来であり、それらはヒト上皮癌細胞である；KB-31細胞は、１０％ウシ胎児血清(M. A. Bioproducts)、Ｌ−グルタミン(Flow)、ペニシリン(５０単位／ml)およびストレプトマイシン(５０mg／ml(Flow)添加ダルベッコ修飾イーグル培地(D-MEM)で生育できる；それらは、２２時間の倍増時間で生育し、相対的平板効率は約６０％である。KB-8511は、コルヒチン処理サイクルの使用によりKB-31細胞系から由来する細胞系である；それらは、KB-31細胞系と比較した場合、約４０倍の相対的耐性をコルヒチンに対して示す；それは、KB-31と同様の条件下で生育できる。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６０】
化合物／塩の変換：
式Ｉの化合物は、式Ｉの異なる化合物に、標準のまたは新規の方法により変換できる。
例えば、式中、Ｒ２が不存在、ｂおよびｃが不存在およびａが２重結合であり、他の部分は式Ｉの化合物で記載の通りである式Ｉの化合物は、式中、Ｒ２がＯならびにｂおよびｃが存在し、ａが１重結合である対応するエポキシドに変換できる。好ましくは、エポキシド化は、(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸((＋)−ＤＥＴ)(好ましくは約０.５当量)、Ｔｉ(ｉ−ＰｒＯ)４(好ましくは約０.５当量)、tert−ブチルヒドロペルオキシド(好ましくは約２.２当量)およびモレキュラーシーブ、特に４Åモレキュラーシーブの存在下、適当な溶媒、例えば、塩化メチレン、および所望により、デカンのようなアルカン中、低温、好ましくは−７８から０℃、特に約−４０℃で行う；または過酸化水素(好ましくは約３０当量)、アセトニトリル(好ましくは約６０当量)、塩基、特にＫＨＣＯ３(好ましくは約１０当量)の存在下、適当な溶媒、例えば、アルコール、好ましくはメタノール中、１０および４０℃の間の好ましい温度、例えば、約２５℃で行う。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６８】
式Ｖのヨウ化物は既知であり、文献の方法で得ることができ、またはそれらは商品として入手可能である。例えば、２−ヨード−６−メチルピリジンは、Klei, E.; Teuben, J. H.J. Organomet. Chem. 1981, 214, 53-64に従って；２−ヨード−５−メチルピリジンはTalik, T.;Talik, Z. Rocz. Chem. 1968, 42, 2061-76に従って；および２−ヨード−４−メチルピリジンはTalik, T.;Talik, Z. Rocz. Chem. 1968, 42, 2061-76, Yamamoto, Y.;Yanagi, A. Heterocycles 1981,16,1161-4またはKatritzky, A. R.; Eweiss, N. F.; Nie, P.-L. JCS, Perkin trans I 1979, 433-5に従って得ることができる。式Ｖの対応するヒドロキシメチル置換体は、例えば、上記のヨウ素のメチル基のＳｅＯ２による酸化、続くアルデヒドの、例えば、ＮａＢＨ４またはＤＩＢＡＬＨの還元、またはメチル基の酸化による酸基の形成(例えば、ＫＭｎＯ４での)および、例えば、ＤＩＢＡＬによるエステルの還元により利用可能となる。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７６】
本発明はまた、該増殖性疾患の処置に有効な一定量の活性剤を、少なくとも一つの薬学的に許容される担体と共に含む、温血動物、特にヒトに、前記で定義の増殖性疾患の処置のために投与することが適した医薬組成物に関する。有効量の薬学的活性成分を、単独でまたは明白な量の薬学的に許容される担体と共に含む、本発明の医薬組成物は、温血動物(ヒトまたは動物)への経鼻、経直腸または経口のような経腸、または、筋肉内または静脈内のような非経腸投与のためのものである。活性成分の投与量は、温血動物の種類、体重、年齢および個々の状態、個々の薬物動態データ、処置する疾病および投与形態に依存する；好ましくは、投与量は下記で定義のような好ましい投与量であり、小児科処置が意図される場合、適当に適合させる。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００８０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００８０】
油中の懸濁液は、油成分として、注射目的で習慣的な植物、合成または半合成油を含む。それらは、それ自体、酸成分として８から２２、特に１２から２２炭素原子を有する長鎖脂肪酸を含む液体脂肪酸エステル、例えば、ラウリン酸、トリデシル酸、ミリスチン酸、ペンタデシル酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、ベヘン酸または対応する不飽和酸、例えば、オレイン酸、エライジン酸、エルカ酸、ブラシジン酸(brasidic acid)またはリノレン酸を特記でき、所望により、抗酸化剤、例えば、ビタミンＥ、βカロテンまたは３,５−ジ−tert−ブチル−４−ヒドロキシトルエンの添加をする。これらの脂肪酸エステルのアルコール成分は最大６炭素原子を有し、モノ−またはポリヒドロキシ、例えば、モノ−、ジ−またはトリ−ヒドロキシ、アルコール、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールまたはペンタノールまたはそれらの異性体であるが、特にグリコールおよびグリセロールである。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９０】
輸液溶液は、静脈内投与する製剤で一般に用いられる他の賦形剤を含み得る。賦形剤は抗酸化剤を含む。輸液は、製剤のアンプルまたはバイアルを、適当な容器、例えば輸液袋またはビン中、水性媒体、例えば、ＷＦＩ中の５％ｗ／ｖグルコース溶液または特に０.９％塩化ナトリウム溶液と混合する。作った輸液は、好ましくは、作ってから直ぐに、または短時間、例えば、６時間以内に使用する。輸液を入れる容器は、輸液と非反応性の慣用の容器から選択し得る。前記のガラスのタイプから製造したガラス容器が好ましいが、プラスチック容器、例えば、プラスチック輸液袋の使用も好ましいことがある。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００９９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００９９】
実施例３：エポシロンＥおよび関連側鎖修飾アナログの、シュティレ結合に基づく方法を介した全合成
エポシロンＥ(３)の最初の全合成は、重要段階が、ヨウ化ビニル７とチアゾール部分(８ｈ、スキーム２ａ)の間のシュティレ結合(Stille et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1986, 25,508-524;Farina et al. J. Org. React. 1997,50,1-65)である方法により達成される。閉環オレフィン複分解(ＲＣＭ)を介して製造するマクロラクトンコアフラグメント７を、続いて、生物学的評価のための様々な側鎖修飾エポシロンアナログ(９)(スキーム２ｂ)への簡便なそして柔軟性のある接近を提供するために使用する。７へ近づくために使用するＲＣＭ反応はまたtrans−マクロラクトン(１１、スキーム２ｂ)を提供し、これはシュティレ結合法への別の鋳型として働き、アナログ１０の更なるアレイを提供する。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０８】
スタナン(８ｈ、８ｊ、８ｑ−ｒ)の合成をまた共通前駆体２０から達成する(スキーム５)。このように、２,４−ジブロモチアゾール２０のパラジウム触媒アルケニル化[ｎ−Ｂｕ３ＳｎＣＨ＝ＣＨ２、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４、トルエン、１００℃]は、モノブロミド２１ｑを得、これはハロゲン−金属交換(ｎ−ＢｕＬｉ、Ｅｔ２Ｏ、−７８℃)に付し、続いてトリ−ｎ−ブチルスズ塩化物でクエンチし所望のスタナン８ｑを供給する。中間体ビニルブロミド２１ｑの還元(Ｈ２、ＰｔＯ２、ＥｔＯＨ、２５℃)は、エチルチアゾール２１ｒへの到達を提供し、これをスタナン８ｒに、８ｑに関して記載したのと同じ方法で変換する。スタナン８ｈおよび８ｊの合成は、重要なヒドロキシメチルチアゾール２１ｈを介して達成される。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０９】
スキーム５に示されるように、このアルコールは、それ自体、ジブロミド２０から、リチウム化(ｎ−ＢｕＬｉ、Ｅｔ２Ｏ、−７８℃)および続くＤＭＦでの停止を含む２段階で得、中間体アルデヒド２２を得、それを還元(ＮａＢＨ４、ＭｅＯＨ、２５℃)し、所望のアルコール２１ｈを６３％の全体的収率で供給する。２１ｈのスタナン８ｈへの変換は、ヒドロキシル基(ＴＢＳＣｌ、イミダゾール、ＣＨ２Ｃｌ２、９６％)、スズ化(ｉ．ｎ−ＢｕＬｉ、Ｅｔ２Ｏ、−７８℃；ii．ｎ−Ｂｕ３ＳｎＣｌ、８５％)および続く脱保護(ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、２５℃、９５％)を含む３段階シークエンスを必要とする。得られるスタナン８ｈの(ＤＡＳＴ、ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃)のフッ素化は、スタナン８ｊへの直接の到達を５７％収率で提供する。
【誤訳訂正１８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１０】
所有している必要な成分で、重要なシュティレ結合を試験する。二つの別の反応条件の設定を適切に証明する(スキーム３)。方法Ａは、所望のヨウ化ビニル(７または１１)のトルエン溶液と、適当なスタナン８の触媒量のＰｄ(ＰＰｈ３)４存在下の８０−１００℃での１５から４０分の加熱を含む。このプロトコールは、スタナン８ｂと８ｈの結合に使用される。残りのスタナン８ｄおよび８ｊを、別の穏やかな方法である方法Ｂを使用して結合し、ヨウ化ビニル(７または１１)およびスタナン８の混合物のＤＭＦ溶液を、ＰｄＣｌ２(ＭｅＣＮ)２と２５℃で処理する。ヨウ化ビニル７およびスタナン８ｈの結合は、マクロラクトン１８ｈを提供し、これは天然エポシロンＥ(３)(スキーム６ａ)の前駆体として働く。
【誤訳訂正１９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１４】
−スキーム６ｂ：
【化７０】
2002518504.tif 000011
修飾Ｃ２６および側鎖を有するエポシロンアナログのレトロ合成分析の説明。
本合成は、エポシロンＥおよび関連アナログ(スキーム３)の合成に使用したヨウ化ビニル１３(スキーム７)から開始する。
【誤訳訂正２０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１７】
アリルヒドロキシル基(ＴＢＳＣｌ、イミダゾール、ＤＭＦ、０から２５℃)の保護は、シリルエーテル２５(８４％)を提供し、それをアルデヒド２６に２段階ジヒドロキシル化−グリコール開裂シークエンス(ＯｓＯ４、ＮＭＯ、ＴＨＦ／ｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ、０から２５℃；次いで、ＮａＩＯ４、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、０℃、２段階で８２％)で変換する。安定化イリド２７(ベンゼン、環流；Marshall et al. J. Org. Chem. 1986, 51, 1735-1741; Bestmann et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1965, 4, 645-660)での立体制御ウィッティッヒ反応は、エステル２８を単一幾何学異性体として、９８％収率で提供する。後者の化合物の還元(ＤＩＢＡＬ、ＴＨＦ、−７８℃)は、アルコール２９を提供し、それをトリフェニルメチル(トリチル)誘導体３０として保護する(ＴｒＣｌ、４−ＤＭＡＰ、ＤＭＦ、７０℃、９５％)。
【誤訳訂正２１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１８】
最終オレフィンの同化を、次いで選択的ヒドロホウ素化−酸化により達成し、アルコール３１(９−ＢＢＮ、ＴＨＦ、０℃；次いで、ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ２、０℃)を得、それを更に、ジヨウジド３２(Ｉ２、イミダゾール、Ｐｈ３Ｐ、０℃)に全体の収率９２％で変換する。Ｃ８立体中心の導入を、次いで、エンダーのアルキル化プロトコール(プロピオンアルデヒド、ＬＤＡ、ＴＨＦのＳＡＭＰヒドラゾン、０℃；次いで、−１００℃およびＴＨＦ中の３２の添加；Ender's et al. Asymmetric Synthesis 1984; Morrison, J. D., Ed.; Academic Press, Orlando, Vol. 3, p. 275-339; SAMPの贈与に関して、Prof. Endersに感謝する)を使用して達成し、ＳＡＭＰヒドラゾン３３の形成を、７１％収率でもたらす。ニトリル３４(ＭＭＰＰ、ＭｅＯＨ／リン酸緩衝液ｐＨ７、０℃、８９％)および続く還元(ＤＩＢＡＬ、トルエン、−７８℃)は、所望のアルデヒド３５を８８％収率で提供する。
【誤訳訂正２２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２２】
先に、我々のエポシロンＢおよび関連アナログ(ＬＤＡ、ＴＨＦ、−７８から−４０℃)およびアルデヒド３５の合成に使用した、ケトン３６のアドール反応は、アルコール３７および３８を６６％の全体的収率で提供し、所望の６Ｒ,７Ｓジアステレオ異性体(３７)は中程度の選択性である。回収したアルドール生産物３７の分離およびシリル化(ＴＢＳＯＴｆ、２,６−ルチジン、ＣＨ２Ｃｌ２、−２０から０℃)は、トリス−シリルエーテル３９を９０％収率で提供する。１級シリルエーテル保護基(ＨＦ・ｐｙｒ.ピリジン／ＴＨＦ溶液、０℃)の選択的除去は、アルコール４０(８４％)を提供し、それを酸４２に、アルデヒド４１から、２段階方法により酸化する[Swern；次いで、ＮａＣｌＯ２、２−メチル−２−ブテン、ＮａＨ２ＰＯ４、ｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ、２５℃、２段階で９８％)。Ｃ１５シリコン保護基(ＴＢＡＦ、ＴＨＦ、０から２５℃)の除去は、ヒドロキシ−酸４３(９５％)を提供し、マクロラクトン工程の基礎を成す。この重要な段階は、ヤマグチ条件下(２,４,６−トリクロロベンゾイルクロライド、Ｅｔ３Ｎ、ＴＨＦ；次いで、４−ＤＭＡＰのトルエン溶液に添加、０.００５Ｍ、７５℃；Inanaga et al. Bull. Chem. Soc. Jpn. 1979, 52, 1989; Mulzer et al. Synthesis 1992, 215-228; Nicolaou et al. Chem. Eur. J. 1996, 2, 847-868)で達成され、保護エポシロンコア４４を８４％の収率で得る。全体的脱保護(ＨＦ・ｐｙｒ.、ＴＨＦ、０から２５℃、８６％)は、重要なヨウ化ビニル中間体２４の合成を完了させる。
【誤訳訂正２３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２４】
−スキーム９：
【化７３】
2002518504.tif 000012
エポシロンアナログ５４−５６および５８、５９およびデスオキシエポシロン４５−４９および５０−５３の合成。試薬および条件：(ａ)方法Ａ：１.７当量の８、１３mol％Ｐｄ(ＰＰｈ３)４、トルエン、１００℃、２時間、１５％；方法Ｂ：１.５−２.０当量の８、１０−２０mol％Ｐｄ(ＭｅＣＮ)２Ｃｌ２、ＤＭＦ、２５℃、１５−３３時間、４１−５６％；(ｂ)１.０５−１.４当量のＤＡＳＴ、ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃、１０分、２６−５８％；(ｃ)０.５当量  (＋)−ＤＥＴ、０.５当量  Ｔｉ(ｉ−ＰｒＯ)４、２.２当量のｔ−ＢｕＯＯＨ、−４０℃、ＣＨ２Ｃｌ２、４Åモレキュラーシーブ、１−２時間、５２−８９％、ＤＥＴ＝酒石酸ジエチル。
【誤訳訂正２４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２６】
Ｃ２６ヒドロキシ官能性の存在は、エポシロン生産物の更なる合成の簡便な取り扱いを提供する。例えば、Ｃ２６アルコール４５−４７および４９をＤＡＳＴ(ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃)で処理し、フッ素化エポシロンアナログ５０−５３を中程度の収率で、スキーム９に記載のように得る。あるいは、基質４５および４６の、カツキ−シャープレス条件下[(＋)−ＤＥＴ、Ｔｉ(ｉ−ＰｒＯ)４、ｔ−ＢｕＯＯＨ、４Åモレキュラーシーブ、ＣＨ２Ｃｌ２、−４０℃；Katsuki, T.;Sharpless, K. B. J. Am. Chem. Soc. 1980, 102, 5976-5978]での非対称エポキシド化は、各々エポシロン５４および５５をもたらす。続く、ＤＡＳＴ処理(ＣＨ２Ｃｌ２、−７８℃)は、更なるアナログ５８および５９を、また中程度の収率で提供する。この際、５４および５５のようなエポキシドを試験し、ヨウ化ビニル２４の非対称エポキシド化を達成し、共通中間体を得、次いで、それはシュティレ結合の基質として働く。エポキシド官能性とシュティレ条件の適合性の最初の保留にもかかわらず、この実験で必要なエポキシド５７は、４５および４６の合成の記載のように、オレフィン２４から、８１％収率で製造する。我々のうれしい驚きとして、スタナン８ｒを使用した標準結合法の適用は、エポシロンアナログ５６の十分な製造をもたらす(７０％変換に基づいて７３％)。
【誤訳訂正２５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１２９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１２９】
Ｃ２６置換エポシロン６６−６８の合成。試薬および条件：(ａ)１５当量のＥｔ３Ｎ、８.０当量  ＴＭＳＣｌ、ＤＭＦ、２５℃、１２時間；(ｂ)シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２、２５℃、１２時間、２段階で９８％；(ｃ)３.０当量のＮＭＯ、１０mol％ＴＰＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、２５℃、４０分、９０％；(ｄ)９.７当量のＰｈ３Ｐ＋ＣＨ３Ｂｒ−のＮａＮＨ２との混合物)、ＴＨＦ、−５℃、６５％(ｅ)２５当量のＨ２ＮＮＨ２、１６当量のＨ２Ｏ２、ＥｔＯＨ、０℃、３時間；(ｆ)ＨＦ・ｐｙｒ.ピリジンのＴＨＦ溶液、０から２５℃、２時間、２段階で７５％；(ｇ)１.７−２.３当量の８、０.２−０.３mol％Ｐｄ(ＭｅＣＮ)２Ｃｌ２、ＤＭＦ、２５℃、１５−２３時間、５２−７９％。ＴＰＡＰ＝テトラプロピルアンモニウム過ルテニウム酸。
【誤訳訂正２６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３２】
実施例４：本発明の化合物の式
表：本発明の化合物の式：
【表２】
2002518504.tif 000013
【表３】
2002518504.tif 000014
【表４】
2002518504.tif 000015
【表５】
2002518504.tif 000016
【誤訳訂正２７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３３】
実施例５：生物学的結果
上記の方法(式Ｉの化合物によるチューブリン解重合化の阻害を、ブタ脳微小管で測定し、２５μlエポシロンＢと比較する；細胞性アッセイは、上記でKB-31細胞に関して記載したものと同じである)にしたがって、以下の表に示す結果が、式Ｉの化合物で得られる：
【表６】
2002518504.tif 000017
ａ)試験化合物５μM濃度対エポシロンＢ２５μMのチューブリン重合化の導入(％で)
ｂ)類表皮
ｃ)類表皮(Ｐ−ｇｐ過発現)
ｄ)肺
ｅ)大腸
【誤訳訂正２８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４２】
合成プロトコール
全般：全ての反応は、特記しない限り、アルゴン雰囲気下、乾燥した、新たに蒸留した溶媒で、無水条件下で行う。テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)およびジエチルエーテル(エーテル)を、ナトリウム−ベンゾフェノンから、ジクロロメタン(ＣＨ２Ｃｌ２)、ベンゼン(ＰｈＨ)およびトルエンを水素化カルシウムから蒸留する。無水溶媒はまた商品として入手可能な活性化アルミナカラムを通すことにより得る。収率は、特記しない限り、クロマトグラフィーおよび分光学的(１Ｈ  ＮＭＲ)で均質な材料を言及する。全ての製造工程で使用する溶液は、特記し無い限り飽和である。全ての試薬は、最高品質の商品を購入し、特記しない限り、更に精製することなく使用する。全ての反応は、０.２５mm  E.  Merckシリカゲルプレート(６０Ｆ−２５４)で、可視化剤としてのＵＶ光、展開剤として７％エタノール性リンモリブデン酸またはｐ−アニスアルデヒド溶液および加熱を使用して行われる薄層クロマトグラフィーでモニターする。E. Merckシリカゲル(６０、粒子サイズ０.０４０−０.０６３mm)をフラッシュカラムクロマトグラフィーに使用する。分取薄層クロマトグラフィー分離は、０.２５、０.５０または１mm  E. Merckシリカゲルプレート(６０Ｆ−２５４)で行う。ＮＭＲスペクトルは、Bruker DRX-600、AMX-500、AMX-400またはAC-250装置を使用して記録し、残りの非重水素化溶媒を内部対象として換算する。以下の略語を多重性の説明に使用する：ｓ、１重；ｄ、２重；ｔ、３重；ｑ、４重；ｍ、多重；バンド、数個の重複シグナル；ｂ、広い。ＩＲスペクトルをPerkin-Elmer 1600シリーズFT-IRスペクトロメーターで記録する。光学回転をPerkin-Elmer 241偏光計で記録する。高解像度マススペクトル(ＨＲＭＳ)を、VG ZAB-ZSEマススペクトロメーターで、高速原子衝撃(ＦＡＢ)条件下で記録する。
【誤訳訂正２９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４３】
スキーム３に説明のcis−マクロラクトンジオール７。ヨウ化物１６(３０５mg、０.４９１mmol)のＴＨＦ(８.２mL、０.０６Ｍ)溶液に、２５℃で、ＨＦ・ｐｙｒ.(２.７mL)を添加し、得られる溶液を同じ温度で２７時間撹拌する。次いで、反応を飽和水性ＮａＨＣＯ３(１００mL)およびＥｔＯＡｃ(１００mL)の注意深い添加により停止させ、得られる２相混合物を２５℃で２時間撹拌する。次いで、抽出物を分離し、有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ３(１００mL)および食塩水(１００mL)で洗浄し、次いで、乾燥させる(ＭｇＳＯ４)。フラッシュクロマトグラフィーによる精製(シリカゲル、２０から５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、ジオール７(２０８mg、８４％)を得る。Ｒｆ＝０.２１(シリカゲル、２５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−５３.１(ｃ  １.３７、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表８】
2002518504.tif 000018
Ｃ２２Ｈ３５ＩＯ５の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６３９.０５８４、実測値６３９.０５５７。
【誤訳訂正３０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４５】
スキーム４に説明のような２−チオメチル−４−ブロモチアゾール２１ｂ。２,４−ジブロモチアゾール２０(８２mg、０.３４mmol、１.０当量)をエタノール(２.３mL、０.１５Ｍ)に溶解し、ナトリウムチオメトキシド(７５mg、１.０２mmol、３.０当量)で処理する。反応混合物を２５℃で２時間撹拌し、その時間の後、反応の完了が１Ｈ  ＮＭＲにより確立する。混合物を水(５mL)に注ぎ、エーテル(２×５mL)で抽出する。合わせた有機相を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、溶媒を蒸発して残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)で精製し、２−チオメチル−４−ブロモチアゾール２１ｂを得る。Ｒｆ＝０.５８(シリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１０】
2002518504.tif 000019
Ｃ４Ｈ４ＢｒＮＳ２の計算値(Ｍ＋)２０９／２１１、実測値２０９／２１１。
【誤訳訂正３１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４７】
スキーム４に説明のような２−メトキシ−４−ブロモチアゾール２１ｐ。２,４−ジブロモチアゾール２０(２５３mg、１.０４mmol、１.０当量)のＭｅＯＨ(１０.５mL、０.１Ｍ)溶液に、ＮａＯＨ(５５５mg、１３.９mmol、１３.３当量)を添加し、得られる溶液を２５℃でＴＬＣがジブロミドの消滅を示すまで撹拌する(約１６時間)。次いで、得られる黄色溶液をエーテル(１０mL)と飽和水性ＮＨ４Ｃｌ(１０mL)の間で分配し、相を分離する。水性相をエーテル（１０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、注意深く減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１０％エーテルのヘキサン溶液)により、２−メトキシ−４−ブロモチアゾール２１ｐを揮発性油状物として得る(１３８mg、８２％)。Ｒｆ＝０.５６(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)；ＩＲ(フィルム)
【表１２】
2002518504.tif 000020
Ｃ５Ｈ６ＢｒＮＳＯの計算値(Ｍ＋)２０７／２０９、実測値２０７／２０９。
【誤訳訂正３２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１６２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１６２】
スキーム２および３に説明のようなエポシロンＥ(３)。ラクトン１８ｈ(１０.０mg、０.０２０mmol、１.０当量)のメタノール(６００μL、０.０３Ｍ)溶液に、アセトニトリル(３２μL、０.６０６mmol、３０当量)、ＫＨＣＯ３(１０mg、０.１０２mmol、５当量)および過酸化水素(２７μL、３５％ｗ／ｗ水溶液、０.３０３mmol、１５当量)を添加し、反応混合物を２５℃で３時間撹拌する。更なるアセトニトリル(３２μL、０.６０６mmol、３０当量)、ＫＨＣＯ３(１０mg、０.１０２mmol、５当量)および過酸化水素(２７μL、３５％ｗ／ｗ水溶液、０.３０３mmol、１５当量)を次いで添加し、更に３時間撹拌を続ける。反応混合物を次いで直接シリカゲルの短プラグを通して濾過をし、エーテルで溶出し、濾液を減圧下で濃縮する。分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、未反応出発物質１８ｈ(５.０mg、５０％)およびエポシロンＥ(３)(３.４mg、３３％)を得る。Ｒｆ＝０.５６(シリカゲル、６６％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ＝−２７.５(ｃ  ０.２０、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(フィルム)
【表２６】
2002518504.tif 000021
Ｃ２６Ｈ３９ＮＯ７Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ＋)５１０.２５２５、実測値５１０.２５３９。
【誤訳訂正３３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１６６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１６６】
スキーム３に説明のようなtrans−マクロラクトン１９ｄ。ヨウ化ビニル１１(１４mg、０.０２８mmol、１.０当量)、スタナン８ｄ(２３mg、０.０５５mmol、２.０当量)およびＰｄＣｌ２(ＭｅＣＮ)２(２.０mg、０.００８mmol、０.３当量)の脱気ＤＭＦ(２８０μL、０.１Ｍ)の溶液を２５℃で２０時間、マクロラクトン１８ｄの製造に関して記載の方法にしたがって撹拌し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)の後、マクロラクトン１９ｄ(１２mg、８６％)を得る。Ｒｆ＝０.２７(シリカゲル、６６％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−２８.０(ｃ  ０.４８、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３０】
2002518504.tif 000022
Ｃ２７Ｈ４１ＮＯ６Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６４０.１７０９、実測値６４０.１７３１。
【誤訳訂正３４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１７３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１７３】
スキーム７に説明のようなメチルエステル２８。アルデヒド２６(１９.６ｇ、５５.２mmol、１.０当量)および安定化イリド２７(５０.２ｇ、１３４.０mmol、２.４当量)[４−ブロモ−１−ブテンから：(ｉ)ホスホニウム塩形成；(ii)ＫＨＭＤＳによるアニオン形成；および(iii)ＭｅＯＣ(Ｏ)Ｃｌ)での停止により製造](Marshall, J. A., et al., J. Org. Chem. 51, 1735-1741 (1986)およびBestmann, H. J., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1965, 645-60参照)のベンゼン(５５０mL、０.１Ｍ)溶液を、１.５時間加熱還流する。２５℃に冷却後、混合物を濾過し、その溶媒を減圧下除去する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、９から１７％エーテルのヘキサン溶液)により、メチルエステル２８(２４.５ｇ、９８％)を得る。Ｒｆ＝０.３７(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−７.２５(ｃ  １.６、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３７】
2002518504.tif 000023
Ｃ１８Ｈ３１ＩＯ３Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)５８３.０１４２、実測値５８３.０１５９。
【誤訳訂正３５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１７５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１７５】
スキーム７に説明のようなトリフェニルメチルエーテル３０。アルコール２９(２３.５ｇ、５５.７mmol、１.０当量)をＤＭＦ(３００mL、０.１５Ｍ)に溶解し、４−ＤＭＡＰ(１１.３ｇ、９２.５mmol、１.７当量)および塩化トリチル(２２.１ｇ、７９.３mmol、１.４当量)を添加する。反応混合物を８０℃で２１時間撹拌し、室温に冷却し、溶媒を減圧下除去する。得られる残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、目的のエーテル３０を油状物として得る(３５.３ｇ、９５％)。Ｒｆ＝０.８８(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−０.７４(ｃ  ０.３、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表３９】
2002518504.tif 000024
Ｃ３６Ｈ４５ＩＯ２Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｅ＋)７９７.１２８８、実測値７９７.１３０９。
【誤訳訂正３６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１７６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１７６】
スキーム７に記載のようなアルコール３１。オレフィン３０(３５.３ｇ、５３.１mmol、１.０当量)をＴＨＦ(５３mL、１.０Ｍ)に溶解し、溶液を０℃に冷却する。９−ＢＢＮ(１４９mL、ＴＨＦ中０.５Ｍ、７４.５mmol、１.４当量)を１.５時間にわたり滴下し、得られる混合物を９時間、０℃で撹拌する。水性ＮａＯＨ(１０６mLの３Ｎ溶液、３１９.０mmol、６.０当量)、続いて水性Ｈ２Ｏ２(３２mL、水中３０％ｗ／ｗ、３１９.０mmol、６.０当量)を添加する。撹拌を１時間、０℃で続け、その後反応混合物をエーテル(５００mL)および水(５００mL)で希釈する。有機相を分離し、水性相をエーテル(２×５００mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を食塩水(１Ｌ)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、９から５０％エーテルのヘキサン溶液)により、１級アルコール３１(３４.６ｇ、９５％)を得る。Ｒｆ＝０.５４(シリカゲル、６０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−３.５(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４０】
2002518504.tif 000025
Ｃ３６Ｈ４７ＩＯ３Ｓｉの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)８１５.１３９４、実測値８１５.１４３０。
【誤訳訂正３７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８１】
スキーム８に説明のようなトリス−(シリルエーテル)３７および３８。ケトン３６(Nicolaou, K. C., et al., J. Am. Chem. Soc. 119, 7974-91 (1997)参照)(１.２０ｇ、２.９９mmol、１.４当量)のＴＨＦ(４.３mL)溶液に、５分にわたり新たに調製したＬＤＡ[ジイソプロピルアミン(４２４μL、３.０３mmol、１.４５当量)をｎ−ＢｕＬｉ(２.００mL、ヘキサン中１.５２Ｍ、３.０４mmol、１.４５当量)に０℃で添加し、５分後、ＴＨＦ(４.３mL)を添加して調製]に−７８℃で滴下する。１.５時間、−７８℃で撹拌後、溶液を−４０℃に３０分にわたり温める。反応混合物を次いで、−７８℃に冷却し、アルデヒド３５(１.５１ｇ、２.０９mmol、１.０当量)のＴＨＦ(１２.５mL)溶液を１５分にわたり滴下する。得られる混合物を１時間、−７８℃で撹拌し、次いで、飽和水性ＡｃＯＨ(ＴＨＦ中１Ｍ溶液３.１mL、３.１０mmol、１.５当量)の滴下により停止させる。混合物を次いで、２５℃に温め、エーテル(２５mL)および飽和水性ＮＨ４Ｃ１(２５mL)の間で分配する。水性相をエーテル(３×２５mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、４から２０％エーテルのヘキサン溶液)により、未反応ケトン(５０２mg、４２％)、望ましくないアルドール生産物３８(７０５mg、２７％)および望ましいアルドール生産物３７および未反応アルデヒド３５の混合物を得る[１.１３６ｇ、(１Ｈ  ＮＭＲにより約９：１の比率の３７：３５)](即ち、３７の３９％収率)。この混合物を、直接、次段階に使用する。３７：(主要)(３５を含む混合物から無色油状物として、フラッシュカラムクロマトグラフィーシリカゲル(１０から１７％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により得る。Ｒｆ＝０.２２(シリカゲル、１０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−２０.０(ｃ  ０.３、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４５】
2002518504.tif 000026
Ｃ６０Ｈ９７ＩＯ６Ｓｉの計算値３(Ｍ＋Ｃｓ＋)１２５７.４６９２、実測値１２５７.４６３９.３８：(少量)無色油状物；Ｒｆ＝０.３８(シリカゲル、２０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−１１.９(ｃ２.９、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表４６】
2002518504.tif 000027
Ｃ６０Ｈ９７ＩＯ６Ｓｉ３の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)１２５７.４６９２、実測値１２５７.４７４９。
【誤訳訂正３８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８６】
スキーム８に説明のようなヒドロキシ酸４３。カルボン酸４２(９５６mg、０.８３９mmol、１.０当量)のＴＨＦ(１７mL)溶液を、０℃でＴＢＡＦ(５.０mL、ＴＨＦ中１.０Ｍ、５.００mmol、６.０当量)で処理し、混合物を２５℃に１９時間にわたり温める。次いで、反応を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ(４０mL)の添加により停止し、生産物をＥｔＯＡｃ(３×４０mL)で抽出する。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２中５％ＭｅＯＨ)により、ヒドロキシ酸４３を黄色油状物として得る(８１７mg、９５％)。Ｒｆ＝０.２７(シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２中５％ＭｅＯＨ)；[α]２２Ｄ−１１.４(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５１】
2002518504.tif 000028
Ｃ５４Ｈ８１ＩＯ７Ｓｉ２の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)１１５７.３６２０、実測値１１５７.３６６９。
【誤訳訂正３９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８７】
スキーム８に説明のようなマクロラクトン４４。ヒドロキシ酸４３(１.０６ｇ、１.０４mmol、１.０当量)のＴＨＦ(１５mL,０.０７Ｍ)溶液に、Ｅｔ３Ｎ(８７０μL、０.２４mmol、６.０当量)および２,４,６−トりクロロベンゾイルクロライド(３９０μL、２.５０mmol、２.４当量)を添加する。反応混合物を０℃で１．５時間撹拌し、次いで、ゆっくり２時間にわたりシリンジポンプを介して４−ＤＭＡＰ(２８０mg、２.２９mmol、２.２当量)のトルエン(２０８mL、４３を基本にして０.００５Ｍ)溶液を７５℃で添加する。混合物をその温度で更に０.５時間撹拌し、次いで減圧下濃縮する。得られる残渣をシリカゲルのプラグを通して濾過し、５０％エーテルのヘキサン溶液で溶出する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、１７％エーテルのヘキサン溶液)により、マクロラクトン４４を無色泡状物として得る(８７７mg、８４％)。Ｒｆ＝０.１９(１０％エーテルのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−７.４(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５２】
2002518504.tif 000029
Ｃ５４Ｈ７９ＩＯ６Ｓｉ２の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)１１３９.３５１４、実測値１１３９.３４５９。
【誤訳訂正４０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１８８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１８８】
スキーム８に説明のようなトリオール２４。マクロラクトン４４(６０８mg、０.６０４mmol、１.０当量)のＴＨＦ(４５mL)に、０℃でＨＦｐｙｒ.(１５mL)を添加する。得られる混合物を２５℃に１５時間にわたり温め、次いで、０℃に冷却して飽和水性ＮａＨＣＯ３(５０mL)の注意深い添加により停止させる。生産物を次いで、ＥｔＯＡｃ(３×５０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、次いで、減圧下で濃縮する。フラッシュカラムクロマトグラフィー(シリカゲル、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、トリオール２４を無色泡状物として得る(２８０mg、８６％)。Ｒｆ＝０.３２(シリカゲル、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−３２.１(ｃ  ０.２、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表５３】
2002518504.tif 000030
Ｃ２３Ｈ３７ＩＯ６の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６６９.０６８９、実測値６６９.０７１１。
【誤訳訂正４１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９８】
スキーム９に説明のようなエポキシド５４。アリルアルコール４５(２５.４mg、０.０４９mmol、１.０当量)および４ÅモレキュラーシーブのＣＨ２Ｃｌ２(０.５０mL)溶液に、−４０℃で(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸(４１μL、ＣＨ２Ｃｌ２中０.５９Ｍ、０.０２４mmol、０.５当量)、続いてチタニウムイソプロポキシド(５５μL、ＣＨ２Ｃｌ２中０.３５Ｍ、０.０１９mmol、０.４当量)を滴下する。１時間、その温度の後、ｔ−ブチルヒドロキシペルオキサイド(デカン中２２μLの５Ｍ溶液、０.１１０mmol、２.２当量)を添加し、反応混合物を−３０℃で２時間撹拌する。反応混合物をセライトを通して飽和水性Ｎａ２ＳＯ４(１０mL)に濾過し、ＥｔＯＡｃ(１０mL)で溶出する。得られる２相性混合物を次いで１時間撹拌し、相を分離する。水性相をＥｔＯＡｃ(３×１０mL)で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、減圧下濃縮する。分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)により、エポキシド５４(１３.５mg、５２％)を得る。Ｒｆ＝０.２３(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)：[α]２２Ｄ−５５.４(ｃ  ０.０６、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６３】
2002518504.tif 000031
Ｃ２７Ｈ４０ＦＮＯ７Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ＋)５４２.２５８８、実測値５４２.２５７５。
【誤訳訂正４２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９９】
スキーム９に説明のようなエポキシド５５。アリルアルコール４６(２２mg、０.０４２mmol、１.０当量)および４ÅモレキュラーシーブのＣＨ２Ｃｌ２(４２０μL)溶液に、−４０℃で(＋)−ジエチル−Ｄ−酒石酸(４μL、０.０２１mmol、０.５当量)、続いてチタニウムイソプロポキシド(５μL、０.０１６mmol、０.４当量)を滴下し、１時間その温度の後、ｔ−ブチルヒドロペルオキサイド(１８μLデカン中５Ｍ溶液、０.０９２mmol、２.２当量)を、エポキシド５４の合成に関して記載の方法に従って滴下し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)の後、エポキシド５５(１６mg、７０％)を得る。Ｒｆ＝０.２５(シリカゲル、８０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；[α]２２Ｄ−４４.８(ｃ  １.４、ＣＨＣｌ３)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６４】
2002518504.tif 000032
Ｃ２７Ｈ４１ＮＯ８Ｓの計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)６７２.１６０７、実測値６７２.１５８４。
【誤訳訂正４３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２００
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２００】
スキーム９に説明のようなフッ化物５８。トリオール５４(５.０mg、０.００９mmol、１.０当量)のＣＨ２Ｃｌ２(１mL、０.０１Ｍ)溶液を、−７８℃でＤＡＳＴ(ＣＨ２Ｃｌ２中０.２５mLの０.１Ｍ溶液、０.０２５mmol、１.０５当量)で、フッ化物５０の合成に関して記載の方法にしたがって処理し、分取薄層クロマトグラフィー(２５０mmシリカゲルプレート、６０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)後、フッ化物５８(２.０mg、４１％)を得る。Ｒｆ＝０.２２(シリカゲル、５０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液)；ＩＲ(薄フィルム)
【表６５】
2002518504.tif 000033
ＭＳ(エレクトロスプレー)、Ｃ２７Ｈ３９Ｆ２ＮＯ６Ｓの計算値(Ｍ＋Ｈ＋)５４４、実測値５４４。
【誤訳訂正４４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２０５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２０５】
スキーム１０に説明のようなアルデヒド６２。アルコール６１(２０mg、０.０２９mmol、１.０当量)および４ÅモレキュラーシーブのＣＨ２Ｃｌ２(０.２５mL)懸濁液に、ＮＭＯ(１０mg、０.０８５mmol、３.０当量)、続いてＴＰＡＰ(１mg、０.００３mmol、０.１当量)を添加する。得られるスラリーを２５℃で４０分撹拌し、次いで、シリカの短プラグを通して濾過し、アルデヒド６２(１８mg、９０％)を得る。Ｒｆ＝０.６６(シリカゲル、６０％Ｅｔ２Ｏのヘキサン溶液)；ＩＲ(薄フィルム)
【表７０】
2002518504.tif 000034
Ｃ２９Ｈ５１ＩＯ７Ｓｉ２の計算値(Ｍ＋Ｃｓ＋)８２７.１２７２、実測値８２７.１３０４。
【誤訳訂正４５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２１１】
チューブリン重合化および細胞毒性アッセイ
チューブリン重合化を、Bollag et Cancer Res. 1995, 55, 2325-2333により開発された濾過比色法により測定する。精製チューブリン(１mg／mL)を３７℃で３０分、各化合物(２０mM)のＭＥＭ緩衝液[(１００mM  ２−(Ｎ−モルホリノ)エタンスルホン酸、ｐＨ６.７５、１mMエチレングリコールビス(β−アミノエチルエーテル)、Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラ酢酸、および１mM  ＭｇＣｌ２]溶液の存在下、インキュベートする；次いで、混合物を、非重合化チューブリンを除去するために９６ウェルMillipore Multiscreen Durapore親水性０.２２μmポアサイズ濾過プレートで濾過する；回収した重合化チューブリンをアミドブラック溶液で染色し、Milecular Devices Microplate Readerでの色素溶液の吸光度の測定により定量する。全ての細胞系の成長を先に記載にように９６ウェルプレートでのタンパク質の定量により評価する。簡単に、５００個の細胞をプレートの各ウェルに蒔き、種々の濃度のエポシロンと３７℃で加湿した５％ＣＯ２中、４日間インキュベートする。細胞の５０％トリクロロ酢酸での固定後、タンパク質の量に対応する光学密度を２５mM  ＮａＯＨ溶液(５０％メタノール：５０％水)中で、５４６nmの波長で測定する。ＩＣ５０を細胞成長を５０％阻害するのに必要な医薬の投与量として定義する。