【手続補正書】
【提出日】平成22年4月23日(2010.4.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルボン酸エステルからペルオキシカルボン酸を生産する方法であって、該方法は：
a）一式の反応成分を備えること、該成分は、以下を含む：
１）以下からなる群より選択される基質：
ｉ）以下の構造を有するエステル：
【化１】
2010512165.tif 000001
［式中、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ7の直鎖または分岐鎖のアルキル（該アルキルは、場合により、
ヒドロキシルまたはＣ1〜Ｃ4アルコキシ基で置換される）であり、Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ10の直鎖または分岐鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ）nＨ、または（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ）nＨであり、
そしてｎは、１〜１０である］；および
ｉｉ）以下の構造を有するグリセリド：
【化２】
2010512165.tif 000002
［式中、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ7の直鎖または分岐鎖のアルキル（該アルキルは、場合により、
ヒドロキシルまたはＣ1〜Ｃ4アルコキシ基で置換される）であり、Ｒ3およびＲ4はそれぞれ、ＨまたはＲ1Ｃ（Ｏ）である］；および
ｉｉｉ）アセチル化単糖、アセチル化二糖およびアセチル化多糖からなる群より選択されるアセチル化糖；
２）過酸素源；および
３）過加水分解活性を有する酵素触媒、該酵素触媒は、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いて参照配列の配列番号２にアラインした場合、シグネチャーモチーフを含む酵素を含み、該シグネチャーモチーフは、以下を含む：
ｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置１１８〜１２０におけるＲＧＱモチーフ；
ｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置１７９〜１８３におけるＧＸＳＱＧモチーフ；および
ｉｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置２９８〜２９９におけるＨＥモチーフ；ならびに
ｂ）該反応成分を適切な水性反応条件下で組合わせることによって、ペルオキシカルボン酸を生産させること、
を含む、上記方法。
【請求項２】
酵素的に生産されたペルオキシカルボン酸組成物を用いて硬表面または無生物を消毒する方法であって、該方法は、以下：
ａ）一式の反応成分を備えること、該成分は、以下を含む：
１）以下からなる群より選択される基質：
ｉ）以下の構造を有するエステル：
【化３】
2010512165.tif 000003
［式中、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ7の直鎖または分岐鎖のアルキル（該アルキルは、場合により、
ヒドロキシルまたはＣ1〜Ｃ4アルコキシ基で置換される）であり、Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ10の直鎖または分岐鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ）nＨ、または（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ）nＨであり、およびｎは、１〜１０である］；および
ｉｉ）以下の構造を有するグリセリド：
【化４】
2010512165.tif 000004
［式中、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ7の直鎖または分岐鎖のアルキル（該アルキルは、場合により、
ヒドロキシルまたはＣ1〜Ｃ4アルコキシ基で置換される）であり、Ｒ3およびＲ4はそれぞれ、ＨまたはＲ1Ｃ（Ｏ）であり；
ｉｉｉ）アセチル化単糖、アセチル化二糖、およびアセチル化多糖からなる群より選択されるアセチル化糖］；
２）過酸素源；および
３）過加水分解活性を有する酵素触媒、該酵素触媒は、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いて参照配列の配列番号２に対応させてアラインした場合、シグネチャーモチーフを含み、該シグネチャーモチーフは、以下を含む：
ｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置１１８〜１２０におけるＲＧＱモチーフ；
ｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置１７９〜１８３におけるＧＸＳＱＧモチーフ；および
ｉｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置２９８〜２９９におけるＨＥモチーフ；
ｂ）該反応成分を適切な水性反応条件下で組合わせることによって、ペルオキシカルボン酸生産物を生成させること；
ｃ）場合により、該ペルオキシカルボン酸生成物を希釈すること；ならびに
ｄ）前記硬表面または無生物を、工程ｂ）または工程ｃ）で生産されたペルオキシカルボン酸と接触させ、それにより、前記表面または前記無生物を消毒すること、
を含む、上記方法。
【請求項３】
酵素のシグネチャーモチーフが、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いて参照配列の配列番号２にアラインした場合、アミノ酸の位置２６７〜２６９にＬＸＤモチーフをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
酵素が、配列番号２に対して少なくとも４０％のアミノ酸同一性を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
酵素が、配列番号２、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、および配列番号３２からなる群より選択されるアミノ酸配列を含むか、または前記アミノ酸配列に１個またはそれ以上のアミノ酸を置換、欠失または付加することによって誘導されたペルヒドロラーゼ活性を有する実質的に類似した酵素である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
アセチル化糖が、グルコースペンタアセテート、キシローステトラアセテート、アセチル化キシラン、β−Ｄ−リボフラノース−１，２，３，５−テトラアセテート、トリ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ガラクタール、およびトリ−Ｏ−アセチル−グルカールからなる群より選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項７】
生産されたペルオキシカルボン酸が、過酢酸、過プロピオン酸、過酪酸、過乳酸、過グリコール酸、過メトキシ酢酸、過β−ヒドロキシ酪酸、およびそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項８】
硬表面または無生物が、タンク、コンベヤー、床、ドレーン、パイプ、クーラー、冷凍庫、器具の表面、壁、バルブ、ベルト、ジョイント、窓、水処理施設、プール、温泉場、発酵タンク、薬剤または生物薬剤の製造装置、薬剤または生物薬剤成分、薬剤または生物薬剤の添加剤、衣類、医療器具、歯科用器具、外科用器具、内視鏡、腹腔鏡、洗浄具、靴、料理用の表面、調理用の表面、浴室の表面、トイレ、家畜、ウシ、乳牛、ヤギ、ウマ、ブタ、牛肉、家禽、豚肉、野菜、果物、海産食物、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
グリセリド基質が、モノアセチン、ジアセチン、トリアセチン、モノプロピオニン、ジプロピオニン、トリプロピオニン、モノブチリン、ジブチリン、トリブチリン、およびそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１０】
酵素触媒が、微生物細胞、透過性微生物細胞、微生物細胞抽出物、部分精製酵素、および精製した酵素からなる群より選択される形態である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の方法によって生産された消毒剤または漂白組成物。
【請求項１２】
ペルオキシカルボン酸を生成させる系であって、該系は、以下を含む：
ａ）以下からなる群より選択される基質：
１）以下の構造を有するエステル：
【化５】
2010512165.tif 000005
［式中、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ7の直鎖または分岐鎖のアルキル（該アルキルは、場合により、
ヒドロキシルまたはＣ1〜Ｃ4アルコキシ基で置換される）であり、Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ10の直鎖または分岐鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアリール、（ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ）nＨ、または（ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ）nＨであり、
そしてｎは、１〜１０である］；および
２）以下の構造を有するグリセリド：
【化６】
2010512165.tif 000006
［式中、Ｒ1は、Ｃ1〜Ｃ7の直鎖または分岐鎖のアルキル（該アルキルは、場合により、
ヒドロキシルまたはＣ1〜Ｃ4アルコキシ基で置換される）であり、Ｒ3およびＲ4はそれぞれ、ＨまたはＲ1Ｃ（Ｏ）である］；および
３）アセチル化単糖、アセチル化二糖、およびアセチル化多糖からなる群より選択されるアセチル化糖；および
ｂ）過酸素源；および
ｃ）過加水分解活性を有する酵素触媒、該酵素触媒は、ＣＬＵＳＴＡＬＷを用いて参照配列の配列番号２に対応させてアラインした場合、シグネチャーモチーフを有する酵素を含み、該シグネチャーモチーフは、以下を含む：
ｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置１１８〜１２０におけるＲＧＱモチーフ；
ｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置１７９〜１８３におけるＧＸＳＱＧモチーフ；および
ｉｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸の位置２９８〜２９９におけるＨＥモチーフ。
【請求項１３】
反応成分のセットを水性反応条件下で組合わせると、過カルボン酸がその場生成する、請求項１２に記載のペルオキシカルボン酸を生成させる系。
【請求項１４】
反応成分が、１つまたはそれ以上のキレート剤、１つまたはそれ以上の湿潤剤、１つまたはそれ以上の腐食抑制剤、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される１つまたはそれ以上の成分をさらに含む、請求項１３に記載のペルオキシカルボン酸を生成させる系。
【請求項１５】
以下を含む製剤：
ａ）酵素触媒（酵素触媒は、ＣＥ−７シグネチャーモチーフを有するペルヒドロラーゼ酵素を含む）、およびモノアセチン、ジアセチン、トリアセチンおよびそれらの混合物からなる群より選択されるカルボン酸エステルを含む第一の混合物；該第一の混合物は、場合により、無機または有機緩衝液、腐食抑制剤、浸潤剤およびそれらの組み合わせからなる群より選択されるさらなる成分を含む；ならびに
ｂ）過酸素源および水を含む第二の混合物（該第二の混合物は、場合により、キレート剤をさらに含む）。
【請求項１６】
以下を含む製剤：
ａ）酵素触媒（ＣＥ−７シグネチャーモチーフを有するペルヒドロラーゼ酵素を含む）、およびアセチル化単糖、アセチル化二糖、アセチル化多糖およびそれらの組合わせからなる群より選択されるアセチル化糖を含む第一の混合物（該第一の混合物は、場合により、無機または有機緩衝液、腐食抑制剤および浸潤剤をさらに含む）；ならびに
ｂ）過酸素源および水を含む第二の混合物（該第二の混合物は、場合により、キレート剤を含む）。
【請求項１７】
請求項１５または１６に記載の第一の混合物および第二の混合物とを組合わせ、それによりペルオキシカルボン酸を生産させることによって生成された消毒製剤。
【請求項１８】
ｋａｔＥにおける破壊とｋａｔＧにおける破壊とを含む組換えエシェリキア・コリ細胞（ただし、該宿主細胞は、エシェリキア・コリＵＭ２ではない）。
【請求項１９】
少なくとも１つのペルヒドロラーゼ活性を有する酵素をさらに含む、請求項１８に記載の組換えエシェリキア・コリ宿主細胞。