【手続補正書】
【提出日】平成22年3月15日(2010.3.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
特定のジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ）パラメータを疾患状態または病状の存在、不在、または重度と相関させる方法であって、
患者試料から得られた特定のＤＰＰの１つまたは複数の識別された部分の少なくとも１つのパラメータを測定するステップと、
前記測定されたＤＰＰパラメータを前記疾患状態または病状の存在、不在、または重度と相関させるステップと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
各部分は１つまたは複数のＤＰＰアイソフォームを含有することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
各部分は１つのＤＰＰアイソフォームを含有することを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項４】
１つまたは複数の部分はＤＰＰアイソフォームを含有せず、他の部分は１つまたは複数のＤＰＰアイソフォームを含有することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記疾患状態は代謝病状態、癌、ウイルス感染、および自己免疫疾患からなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記疾患状態はＩＩ型糖尿病であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記パラメータは、量、濃度、活性、発現、翻訳後修飾型、および翻訳後修飾量からなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記パラメータはＤＰＰ活性であり、前記測定は、直接的または間接的に検出可能な基質におけるＤＰＰ活性の加水分解産物の存在または量を検出するアッセイを介して行われることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記特定のＤＰＰはＤＰＰ−ＩＶであり、前記パラメータはＤＰＰ−ＩＶ活性であることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記基質はＸ−Ｙ−Ｒであり、式中、Ｘは任意のアミノ酸であり、Ｙはプロリン、アラニン、またはアルギニンであり、Ｒは任意の検出可能な標識であることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記パラメータは、１つまたは複数のＤＰＰアイソフォームに特異的な抗体またはレクチンを用いて測定されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
複数のＤＰＰパラメータが測定されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記患者試料は、組織、血液、血漿、血清、唾液、涙、粘液、尿、羊水、滑膜関節液、精液、脳脊髄液、およびこれらの組合せからなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
疾患状態の存在、不在、または重度をオペレータに伝達するステップをさらに含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記伝達ステップは、電子スクリーン、デジタルスクリーン、印刷可能物、および可聴信号からなる群から選択される媒体に疾患状態を表示することを含むことを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記患者試料中に存在する特定のＤＰＰのＤＰＰ部分を識別するステップをさらに含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記識別ステップは前記測定ステップの前に行われることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記識別ステップは前記測定ステップと同時に行われることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記患者試料は前記測定ステップの前に処理されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記処理は、均質化、希釈、濃縮、凍結、およびこれらの組合せからなる群から選択されることを特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記識別ステップは物理的分離または単離によって行われることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
前記識別ステップはゲルフリー型式を用いて行われることを特徴とする請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ゲルフリー型式は、フリーフロー電気泳動およびマトリックスフリー電気泳動からなる群から選択されることを特徴とする請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＤＰＰ部分はＤＰＰアイソフォームの等電点に基づいて識別されることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも２つの前記ＤＰＰ部分が存在することを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２６】
前記相関ステップは、測定されたパラメータを標準の対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記相関ステップは、測定されたパラメータを内部対照の対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
前記パラメータは、前記少なくとも２つの部分に関して測定されることを特徴とする請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記相関ステップは、少なくとも１つの部分のパラメータを少なくとも２つの部分に関するすべての測定された対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記相関ステップは、少なくとも１つの部分のパラメータを全部分に関するすべての測定された対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記相関ステップは、少なくとも１つの部分の測定されたパラメータを少なくとも１つの他の部分の、対応する測定されたパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
前記相関ステップは、２つ以上の部分に関するすべての測定されたパラメータを標準の対応する全パラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記相関ステップは、２つ以上の部分に関するすべての測定されたパラメータを内部対照の対応する全パラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３４】
前記特定のＤＰＰはＤＰＰ−ＩＶであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３５】
あるジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ）パラメータを疾患状態または病状の存在、不在、または重度と相関させる方法であって、
患者試料から得られた１つまたは複数の識別されたＤＰＰアイソフォームの少なくとも１つのパラメータを測定するステップと、
前記測定されたＤＰＰパラメータを前記疾患状態または病状の存在、不在、または重度と相関させるステップと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項３６】
前記疾患状態は代謝病状態、癌、ウイルス感染、および自己免疫疾患からなる群から選択されることを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記パラメータは、量、濃度、活性、発現、翻訳後修飾型、および翻訳後修飾量からなる群から選択されることを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
複数のＤＰＰパラメータが測定されることを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項３９】
前記患者試料は、組織、血液、血漿、血清、唾液、涙、粘液、尿、羊水、滑膜関節液、精液、脳脊髄液、およびこれらの組合せからなる群から選択されることを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項４０】
疾患状態の存在、不在、または重度をオペレータに伝達するステップをさらに含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項４１】
前記患者試料中のＤＰＰアイソフォームを識別するステップをさらに含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項４２】
前記識別ステップは前記測定ステップの前に行われることを特徴とする請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記識別ステップは前記測定ステップと同時に行われることを特徴とする請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
前記患者試料は前記測定ステップの前に処理されることを特徴とする請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
前記識別ステップは、物理的分離または単離によって行われることを特徴とする請求項４１に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＤＰＰ部分は、ＤＰＰアイソフォームの等電点に基づいて識別されることを特徴とする請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記相関ステップは、測定されたパラメータを標準の対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項４８】
前記相関ステップは、測定されたパラメータを内部対照の対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項４９】
前記相関ステップは、少なくとも１つのアイソフォームのパラメータを２つ以上の他のアイソフォームに関するすべての測定された対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項５０】
前記相関ステップは、少なくとも１つのアイソフォームのパラメータを全アイソフォームに関するすべての測定された対応するパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記相関ステップは、少なくとも１つのアイソフォームの測定されたパラメータを少なくとも１つの他のアイソフォームの、対応する測定されたパラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項５２】
前記相関ステップは、２つ以上のアイソフォームに関するすべての測定されたパラメータを標準の対応する全パラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項５３】
前記相関ステップは、２つ以上のアイソフォームに関するすべての測定されたパラメータを内部対照の対応する全パラメータと比較することを含むことを特徴とする請求項３５に記載の方法。
【請求項５４】
特定のジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ）パラメータをＩＩ型糖尿病の存在、不在、または重度と相関させる方法であって、
患者試料から得られたＤＰＰ−ＩＶアイソフォームの１つまたは複数の識別された部分の少なくとも１つのパラメータを測定するステップと、
前記測定されたパラメータをＩＩ型糖尿病の存在、不在、または重度と相関させるステップと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項５５】
測定された各部分は、１つまたは複数のＤＰＰ−ＩＶアイソフォームを含有することを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
測定された各部分は、１つのＤＰＰ−ＩＶアイソフォームを含有することを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
１つまたは複数の部分はＤＰＰ−ＩＶアイソフォームを含有せず、他の部分は１つまたは複数のＤＰＰ−ＩＶアイソフォームを含有することを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
前記パラメータは、量、濃度、活性、発現、翻訳後修飾型、および翻訳後修飾量からなる群から選択されることを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
前記パラメータは、ＤＰＰ−ＩＶ活性であることを特徴とする請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記ＤＰＰ−ＩＶ活性は、標識基質におけるＤＰＰ−ＩＶ活性の加水分解産物の存在または量を検出するアッセイを介して測定されることを特徴とする請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記基質はＸ−Ｙ−Ｒであり、式中、Ｘは任意のアミノ酸であり、Ｙは、アラニン、プロリン、またはアルギニンであり、Ｒは任意の検出可能な標識であることを特徴とする請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記パラメータは、１つまたは複数のＤＰＰアイソフォームに特異的な抗体またはレクチンを用いて測定されることを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項６３】
複数のＤＰＰ−ＩＶパラメータが測定されることを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項６４】
前記患者試料は、血液、血漿、血清、およびこれらの組合せからなる群から選択されることを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項６５】
ＩＩ型糖尿病の存在、不在、または重度をオペレータに伝達するステップをさらに含むことを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項６６】
ＤＰＰ−ＩＶを部分に識別するステップをさらに含むことを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項６７】
前記識別ステップは前記測定ステップの前に行われることを特徴とする請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記ＤＰＰ−ＩＶアイソフォームは等電点に基づいて識別されることを特徴とする請求項５４に記載の方法。
【請求項６９】
前記測定されるパラメータはＤＰＰ−ＩＶ活性であることを特徴とする請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
連続した範囲の部分の活性が測定されることを特徴とする請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記連続した範囲の部分にわたって活性プロフィールを得るステップをさらに含むことを特徴とする請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
ａ．約ｐＨ４．４以下のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォーム中に存在する連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性のパーセントが約９０％を超えないこと、
ｂ．約ｐＨ４．１５以下のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォー
ム中に存在する連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性の
パーセントが約６０％を超えないこと、
ｃ．連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性の少なくとも約１０％が、約ｐＨ４．４以上のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォームに存在すること、
ｄ．連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性の少なくとも約４０％が、約ｐＨ４．１５以上のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォームに存在すること、
ｅ．連続した範囲における総測定活性の少なくとも約１０％と関連付けられる、約ｐＨ４．４における、ＤＰＰ−ＩＶ活性プロフィールのピーク、
ｆ．連続した範囲における総測定活性の少なくとも約１０％と関連付けられる、約ｐＨ４．８における、ＤＰＰ−ＩＶ活性プロフィールのピーク、
ｇ．ＤＰＰ−ＩＶ活性プロフィールにおける、内部陰性対照と比較して、より高いｐＨへのシフト、
ｈ．ＤＰＰ−ＩＶ活性プロフィールにおける、陰性標準と比較して、より高いｐＨへのシフト、および
ｉ．これらの組合せ
からなる群から選択された活性プロフィール特徴と糖尿病の存在を相関させることを特徴とする請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
ａ．連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性の少なくとも約９０％が、約ｐＨ４．２以下のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォームに存在すること、
ｂ．連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性の少なくとも約６０％が、約ｐＨ３．９以下のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォームに存在すること、
ｃ．約ｐＨ４．２以上のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォーム中に存在する連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性のパーセントが、約１０％を超えないこと、
ｄ．約ｐＨ３．９以上のｐＨ範囲と関連付けられる等電点で識別されるアイソフォーム中に存在する連続した範囲における、すべての測定された部分の総ＤＰＰ−ＩＶ活性のパーセントが約４０％を超えないこと、
ｅ．ＤＰＰ−ＩＶ活性プロフィールにおける、内部陽性対照と比較して、より低いｐＨへのシフト、
ｆ．ＤＰＰ−ＩＶ活性プロフィールにおける、陽性標準と比較して、より低いｐＨへのシフト、および
ｇ．これらの組合せ
からなる群から選択された活性プロフィール特徴と糖尿病の不在を相関させることを特徴とする請求項７１に記載の方法。