【手続補正書】
【提出日】平成21年11月24日(2009.11.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１のポリマー材料に包埋された１以上のシュウ酸塩分解酵素を含有する粒子を含む組成物であって、包埋酵素が、84mM HClおよび3.2mg/mlペプシンを含むUSP人工胃液中、pH＞2、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して、同じバッチ由来の１以上の非包埋遊離酵素の活性の少なくとも2倍の活性を維持する、組成物。
【請求項２】
１以上のシュウ酸塩分解酵素の活性が、pHが1.0〜4.5の範囲であるバッファー水溶液中で60分間インキュベーションし、初期活性を100％と設定した場合に最大30％に減少する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記活性が、初期活性を100％と設定した場合に最大40％に減少する、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記活性が、初期活性を100％と設定した場合に最大80％に減少する、請求項２または３に記載の組成物。
【請求項５】
１以上のシュウ酸塩分解酵素の活性が、pHが1.0〜4.5の範囲のバッファー水溶液中で2時間インキュベーションし、初期活性を100％と設定した場合に、最大20％に減少する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記活性が、初期活性を100％と設定した場合に最大30％に減少する、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記バッファーが、プロテアーゼをさらに含む、請求項２〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記プロテアーゼがペプシンである、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
ペプシンの濃度が0.5mg/ml〜10mg/mlの範囲である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
１以上のシュウ酸塩分解酵素が、単離／精製酵素である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
１以上のシュウ酸塩分解酵素が、シュウ酸デカルボキシラーゼ、オキサリルCoAデカルボキシラーゼ、またはシュウ酸オキシダーゼとホルミルCoAトランスフェラーゼとの組み合わせからなる群より選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
１以上のシュウ酸塩分解酵素が、シュウ酸デカルボキシラーゼである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
１以上の包埋シュウ酸塩分解酵素が、84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞2、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して、同じバッチ由来の１以上の非包埋遊離酵素の活性の少なくとも2倍の活性を維持する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記第１のポリマー材料が、それ自身および／または１以上の酵素に架橋結合する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞2、37℃で少なくとも30分間のインキュベーションに際して維持される酵素活性のレベルが、架橋結合していないが同じバッチの組成物と比較して、少なくとも2倍に増加する、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記粒子が第２のポリマー材料でコーティングされている、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞2、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して維持される酵素活性のレベルが、第２のポリマー材料でコーティングされていないが同じバッチの組成物と比較して、少なくとも2倍に増加する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記第１のポリマー材料および／または前記第２のポリマー材料が、それ自身に、および／または互いに、および／または１以上の酵素に架橋結合する、請求項１６または１７に記載の組成物。
【請求項１９】
84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞1、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して維持される酵素活性のレベルが、架橋結合および第２のポリマー材料の層の両方を有さないが同じバッチの組成物と比較して、少なくとも2倍に増加する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記架橋結合が物理的架橋結合によって形成される、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記架橋結合が化学的架橋剤の使用によって形成される、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記化学的架橋剤が、ジアルデヒド、1-エチル-3[3-ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド（EDC）、ジスクシンイミジルスベラート（DSS）、およびN-[p-マレイミドフェニル]イソシアナート（PMPI）からなる群より選択される、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記ジアルデヒドが、グルタルアルデヒドおよびグリオキサルからなる群より選択される、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ジアルデヒドがグルタルアルデヒドである、請求項２２または２３に記載の組成物。
【請求項２５】
化学的架橋剤と１以上の酵素および／または第１のポリマー材料および／または第２のポリマー材料との間の結合が、還元剤によって還元された、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記還元剤が、NaBH4およびNaCNBH3からなる群より選択される、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞1、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して維持される酵素活性のレベルが、還元剤に曝露されていない同じバッチの組成物と比較して、少なくとも2倍に増加する、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
１以上の包埋酵素が、84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞1、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して、同じバッチ由来の１以上の非包埋遊離酵素の活性の少なくとも2倍の活性を維持する、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２９】
１以上の包埋酵素が、84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞1、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して、これらの初期活性の少なくとも50％を維持する、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３０】
１以上の酵素が、84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞1、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して、これらの初期活性の95％〜100％を維持する、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３１】
前記第１のポリマー材料、および前記第２のポリマー材料（存在する場合）が、低分子に対して浸透性であり、１以上の酵素によって触媒される反応の基質および産物が前記ポリマー材料を介して拡散できる、請求項１〜３０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記粒子が、50nm〜1mmの直径を有する、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記第１のポリマー材料および／または前記第２のポリマー材料が、84mM HClおよび3.2mg/mlペプシン中、pH＞1、37℃で少なくとも60分間のインキュベーションに際して、無傷のままである、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３４】
前記第１のポリマー材料および／または前記第２のポリマー材料が多糖類である、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記多糖類が、キトサン、アルギン酸塩、ペクチン、およびヒアルロン酸からなる群より選択される、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記第１のポリマー材料および前記第２のポリマー材料が同一であるかまたは異なる、請求項１６〜３５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３７】
前記第１のポリマー材料、および前記第２のポリマー材料（存在する場合）のポリマー割合が、1％〜10％である、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３８】
200gのホウレンソウ中に存在するシュウ酸塩の少なくとも40％が、20mgの1以上のシュウ酸塩分解酵素を含む組成物によって1時間以内にpH 2.5で分解される、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の組成物。