【手続補正書】
【提出日】平成22年5月7日(2010.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１７】
2009544660.tif 000001
（式中、
Ｒ１は、芳香族もしくはヘテロ芳香族基であるか、または場合により置換されている不飽和アルキル、場合により置換されているシクロアルキルもしくは場合により置換されているＯＣＨ２−に連結された二重結合を有する、ヘテロサイクリル基であり；
Ｒ２は、リンカーであり、そして
Ｌは、標識または複数の同じまたは異なる標識である）
の化合物。
【請求項２】
Ｒ１が、フェニルである、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、パラ−置換されたフェニルである、請求項２に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、１〜３００個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖アルキレン基であって、場合により
（ａ）１個以上の炭素原子が、酸素で置き換えられている、特に３番目毎の炭素原子が、酸素で置き換えられている、例えば１〜１００のエチレンオキシ単位を有するポリエチレンオキシ基；
（ｂ）１個以上の炭素原子が、水素原子を有する窒素で置き換えられており、そして隣接炭素原子が、オキソにより置換されており、アミド官能基−ＮＨ−ＣＯ−を示す；
（ｃ）１個以上の炭素原子が、酸素で置き換えられており、そして隣接炭素原子が、オキソにより置換されており、エステル官能基−Ｏ−ＣＯ−を示す；
（ｄ）２つの隣接炭素原子間の結合が、二重結合または三重結合であり、官能基−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−を示す；
（ｅ）１個以上の炭素原子が、フェニレン、飽和もしくは不飽和シクロアルキレン、飽和もしくは不飽和ビシクロアルキレン、橋かけヘテロ芳香族または橋かけ飽和もしくは不飽和ヘテロサイクリル基で置き換えられている；
（ｆ）２個の隣接炭素原子が、ジスルフィド結合−Ｓ−Ｓ−で置き換えられている；
１〜３００個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖アルキレン基、または２つ以上の、特に２つもしくは３つの、アルキレンおよび／または前記（ａ）〜（ｆ）下に定義された改変されたアルキレン基の組み合わせであり、これらの基は場合により置換基を含有する、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、炭素原子が場合によりアミド官能基−ＮＨ−ＣＯ−で置き換えられている、１〜２５個の炭素原子を有する直鎖アルキレン基である、請求項４に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
Ｌが、分光学的プローブ、特異的結合ペアの１つの部分を表す分子、または固体支持体に共有結合により結合した分子である、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項７】
Ｌが、発蛍光団である、請求項６に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項８】
請求項７に記載の化合物Ｎ−［４−（４−アミノピリミジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル］−テトラメチルローダミン−５−もしくは６−カルボキサミドまたはその混合物。
【請求項９】
請求項７に記載の化合物Ｎ−［４−（４−アミノピリミジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル］−フルオレセイン−５もしくは６−カルボキサミドまたはその混合物。
【請求項１０】
請求項７に記載の化合物Ｎ−［４−（４−アミノピリミジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル］−ジアセチルフルオレセイン−５もしくは６−カルボキサミドまたはその混合物。
【請求項１１】
式８
【化１８】
2009544660.tif 000002
のＮ−［４−（４−アミノピリミジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル］−ＤＹ６４７−カルボキサミドである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１２】
式９
【化１９】
2009544660.tif 000003
のＮ−［４−（４−アミノピリミジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル］−ＤＹ５４７−カルボキサミドである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１３】
式１０
【化２０】
2009544660.tif 000004
のＮ−［４−（４−アミノピリミジン−２−イルオキシメチル）−ベンジル］−Ｃｙ５−カルボキサミドである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１４】
式１２
【化２１】
2009544660.tif 000005
の請求項７に記載の化合物ＢＣ−ビオチン。
【請求項１５】
式１３
【化２２】
2009544660.tif 000006
の請求項７に記載の化合物ＢＣ−ＰＥＧ−ビオチン。
【請求項１６】
式１４
【化２３】
2009544660.tif 000007
の請求項７に記載の化合物ＢＣ−３６０。
【請求項１７】
式１５
【化２４】
2009544660.tif 000008
の請求項７に記載の化合物ＢＣ−４３０。
【請求項１８】
式１６
【化２５】
2009544660.tif 000009
の１つの請求項７に記載の化合物ＢＣ−Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎまたはその混合物。
【請求項１９】
式１７
【化２６】
2009544660.tif 000010
の１つの請求項７に記載の化合物ＢＣ−Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎジピバロイルエステ
またはその混合物。
【請求項２０】
式１８
【化２７】
2009544660.tif 000011
の１つの請求項７に記載の化合物ＢＣ−５０５またはその混合物。
【請求項２１】
（ａ）１７０〜２２０アミノ酸からなり；
（ｂ）少なくとも１つのシステインを含み；
（ｃ）Ｏ２−ベンジルシトシンと反応し、それによって同じ条件下にＯ６−ベンジルグアニンとの反応における場合と少なくとも同じに速く（ｂ）のシステインのメルカプト官能基にベンジル置換基を移行させる、
タンパク質であるアルキルシトシントランスフェラーゼ（ＡＣＴ）。
【請求項２２】
配列番号１に記載のタンパク質；
下記の置換、
Ｒ１１４Ａ、Ｓ１３１Ｖ、Ｅ１４８Ｑ、Ｇ１５７ＷおよびＭ１５９Ｒ；
Ｒ１１４Ｓ、Ｓ１３１Ｔ、Ｄ１３５Ｔ、Ｅ１４８Ｄ、Ｇ１５７ＰおよびＭ１５９Ｅ；
Ｒ１１４Ｎ、Ｓ１３１Ｎ、Ｇ１５７ＡおよびＭ１５９Ｓ；
Ｒ１１４Ａ、Ｓ１３１Ｔ、Ｄ１３５Ｓ、Ｇ１５７ＫおよびＭ１５９Ｅ；
Ｒ１１４Ｅ、Ｓ１３１Ｒ、Ｄ１３５Ａ、Ｇ１５７ＥおよびＭ１５９Ｅ；
Ｒ１１４Ｓ、Ｓ１３１Ｖ、Ｅ１４８Ｑ、Ｇ１５７ＬおよびＭ１５９Ｒ；
Ｒ１１４Ｅ、Ｓ１３１Ｎ、Ｄ１３５Ｎ、Ｇ１５７ＴおよびＭ１５９Ｆ；
により配列番号１とは異なるタンパク質；
および位置１１４、１３１、１３５、１４８、１５７および１５９以外の位置で１個、２個または３個のアミノ酸が異なるこのようなタンパク質；
からなる群より選ばれる、請求項２１に記載のアルキルシトシントランスフェラーゼ（ＡＣＴ）。
【請求項２３】
配列番号１２に記載のタンパク質；
位置６０のアミノ酸が、ＭまたはＩであり、
位置１１４のアミノ酸が、Ａ、Ｅ、Ｎ、ＲまたはＳであり、
位置１２１のアミノ酸が、ＡまたはＶであり、
位置１３１のアミノ酸が、Ｎ、Ｓ、ＴまたはＶであり、
位置１３５のアミノ酸が、Ｄ、ＮまたはＴであり、
位置１４８のアミノ酸が、Ｄ、Ｅ、ＱまたはＶであり、
位置１５３のアミノ酸が、ＬまたはＳであり、
位置１５７のアミノ酸が、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｔ、ＰまたはＷであり、そして
位置１５９のアミノ酸が、Ｅ、Ｆ、Ｍ、Ｒ、ＳまたはＬである、
配列番号１２のタンパク質；
および位置６０、１１４、１２１、１３１、１３５、１４８、１５３、１５７および１５９以外の位置で１個、２個または３個のアミノ酸が異なるこのようなタンパク質；
からなる群より選ばれる、請求項２１に記載のアルキルシトシントランスフェラーゼ（ＡＣＴ）。
【請求項２４】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物から、標識Ｌを、請求項２１に記載のアルキルシトシントランスフェラーゼ、または請求項２１に記載のアルキルシトシントランスフェラーゼを含む融合タンパク質に移行させる方法。
【請求項２５】
関心のあるタンパク質を請求項２１に記載のアルキルシトシントランスフェラーゼを含む融合タンパク質に組み込み、該アルキルシトシントランスフェラーゼ融合タンパク質を請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物と接触させ、そして標識Ｌを認識および／または処理するためにデザインされたシステムにおいて標識Ｌを使用して、前記アルキルシトシントランスフェラーゼ融合タンパク質を検出しそして場合により更に操作する、関心のあるタンパク質を検出および／または操作するための方法。