【手続補正書】
【提出日】平成22年8月6日(2010.8.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一つのＩｇＧ  Ｆｃ領域を含み、未精製の抗体調製物とは性質の異なる単離ポリペプチドであって、該単離ポリペプチドのシアル化能が該未精製の抗体調製物より高い、単離ポリペプチド。
【請求項２】
該少なくとも一つのＩｇＧ  Ｆｃ領域がα２，６結合により各末端シアル酸部分に結合する少なくとも一つのガラクトース部分でグリコシル化され、該ポリペプチドが未精製の抗体調製物に比してより高い抗炎症活性を有する、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
【請求項３】
該少なくとも一つのＩｇＧ  Ｆｃ領域がα２，６結合により各末端シアル酸部分に結合する少なくとも一つのガラクトース部分でグリコシル化され、該ポリペプチドが未精製の抗体調製物に比してＦｃ活性化レセプターに対する結合能が低い、請求項１または２に記載の単離ポリペプチド。
【請求項４】
該Ｆｃ活性化レセプターがＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＣおよびＦｃγＲＩＩＩＡからなる群より選択される、請求項３に記載の単離ポリペプチド。
【請求項５】
ヒトのＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域を有し、未精製抗体に比してα２，６結合により各シアル酸末端部分に結合する少なくとも一つのガラクトース部分の含量が高い、請求項１〜４のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項６】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの抗炎症性が向上した、請求項１〜５のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項７】
ｉｎ  ｖｉｖｏでの抗炎症性が向上した、請求項１〜６のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項８】
天然に存在する抗体源由来である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項９】
組換え抗体源由来である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１０】
該未精製の抗体調製物がＩＶＩＧを有する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１１】
少なくとも一つのガラクトース部分とタンパク質の多糖鎖中の各末端シアル酸との間のα２，６結合を生じる活性が向上した細胞系由来である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１２】
α−（２，６）シアリルトランスフェラーゼによる処理で修飾される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１３】
精製される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の単離ポリペプチドおよび適当な担体または希釈剤を含む薬剤。
【請求項１５】
Ｆｃ領域の多糖鎖のシアル化能(sialylation)を変更することを有する、Ｆｃ領域を含むポリペプチドの性質の調節方法。
【請求項１６】
該性質は、未精製の抗体調製物より抗炎症活性が高い、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
シアル化を変更する段階が、
末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖を有する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチド、および末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖が欠損する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチドを含む、少なくとも一のＦｃ領域を含むポリペプチドの未精製源を用意し；さらに
末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖が欠損する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチドに対する末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖を有する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチドの割合を増加させる、
ことを有する、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
該少なくとも一のＦｃ領域を含むポリペプチドの未精製源は、ヒトの未精製ＩｇＧ抗体を含む、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
該少なくとも一のＦｃ領域を含むポリペプチドの未精製源は、発現系に核酸配列を含むベクターを発現させることから提供され、ここで、該核酸配列はＩｇＧ抗体に翻訳される、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
該発現システムは、細菌、真菌、植物、脊椎動物及び無脊椎動物の発現系、ならびにこれらの組合せからなる群より選択されるＮ−結合グリコシル化(N-linked glycosylation)が可能である修飾宿主発現系を有する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖が欠損する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチドに対する末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖を有する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチドの割合を増加させる段階が、末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖が欠損する少なくとも一のＦｃ領域を含むポリペプチドを除去することによって達成される、請求項１５〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
該除去は、物理的または化学的方法によって達成される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
該除去は、ＨＰＬＣ、レクチンアフィニティクロマトグラフィー、高ｐＨアニオン交換クロマトグラフィー、及びこれらの組合せからなる群より選択される方法によって達成される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
該レクチンアフィニティクロマトグラフィーは、ガラクトース部分と末端シアル酸との間のα２，３結合に対するよりα２，６結合に対する方が親和性の低いレクチンを用いて実施される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖が欠損する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチドに対する末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖を有する少なくとも一のＦｃ領域を含む複数のポリペプチドの割合を増加させる段階が、末端シアル酸がα２，６結合を介してガラクトース部分に連結してなる多糖鎖を有する少なくとも一のＦｃ領域を含むポリペプチドの未精製源を増やすこと(enrichment)によって達成される、請求項１５〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
該増やすこと(enrichment)は、ＨＰＬＣ、レクチンアフィニティクロマトグラフィー、高ｐＨアニオン交換クロマトグラフィー、及びこれらの組合せからなる群より選択される方法によって達成される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
該レクチンアフィニティクロマトグラフィーは、ガラクトース部分と末端シアル酸との間のα２，３結合に対するよりα２，６結合に対する方が親和性の高いレクチンを用いて実施される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
該増やすことは、少なくとも一のＦｃ領域を含むポリペプチドに結合する糖質と末端シアル酸との間のα２，６結合を作製する酵素との化学反応によって実施される、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
該酵素は、α−（２，６）シアリルトランスフェラーゼである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
炎症性疾患を治療するための、請求項１４に記載の薬剤。
【請求項３１】
該炎症性疾患は、関節炎、血小板減少症、および腎炎からなる群より選択される、請求項３０に記載の薬剤。