(57)【要約】  クロストリジウム毒素活性成分の効果および持続時間を延長させる医薬組成物が記載される。本組成物は、液体または固体組成物であってもよく、本出願に記載される非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む。いくつかの実施形態において、本組成物は、ポロキサマーおよびポリソルベートから選択される界面活性剤と、メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、エチレンジアミン四酢酸、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、任意選択で、例えば、トレハロース、スクロースから選択される等張化剤および／または凍結乾燥保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ）と、を含む。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬組成物であって、
（ｉ）クロストリジウム毒素活性成分と、
（ｉｉ）非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、を含み、
前記非架橋ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量が、２５０ｋＤａ〜２．４ＭＤａまたは４．６ＭＤａ〜８ＭＤａであり、前記医薬組成物が、架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない、医薬組成物。
【請求項２】
さらに
（ｉ）トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、
（ｉｉ）ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、
（ｉｉｉ）メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、エチレンジアミン四酢酸、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記クロストリジウム毒素活性成分が、ボツリヌス毒素である、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記等張化剤が、トレハロースである、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
トレハロースは、約１〜１５重量％の量で存在する、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記界面活性剤が、ポロキサマーである、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ポロキサマーは、約０．５〜８重量％の量で存在する、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記酸化防止剤がメチオニンである、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項９】
メチオニンは、約０．０１〜０．５重量％の量で存在する、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記組成物は、トレハロースと、ポロキサマー１８８と、メチオニンと、を含む、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記酸化防止剤は、Ｎ−アセチルシステインを含む、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量が約４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａである、請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量が約１．５８ＭＤａである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記組成物がアルブミンを含まない、請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記組成物は、非架橋ヒアルロン酸またはその塩１ミリグラムあたり１０単位までのクロストリジウム毒素を含む、請求項１〜１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
（ｉ）クロストリジウム毒素活性成分と、
（ｉｉ）４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａの重量平均分子量を有する非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、
（ｉｉ）約１〜１５重量％の量のトレハロースと、
（ｉｉｉ）約０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、
（ｉｖ）約０．０５〜５重量％の量のメチオニンと、を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記クロストリジウム毒素活性成分が、ボツリヌス毒素である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
メチオニンは、約０．０５〜２重量％の量である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ポロキサマーは、約２〜６重量％の量である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
トレハロースは、約５〜１２重量％の量である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、約８ｗ／ｗ％のトレハロースと、４ｗ／ｗ％のポロキサマー１８８と、０．２ｗ／ｗ％のメチオニンと、を含む、請求項１〜２０のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記組成物が液体であり、アルブミンを含まない、請求項１〜２１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記組成物が凍結乾燥され、アルブミンを含まない、請求項１〜２１のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約０．２〜１０重量％の量で存在する、請求項１〜２３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２５】
非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約１．２重量％の量で存在する、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記医薬組成物は、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない医薬組成物と比較して、クロストリジウム毒素活性成分の有効性および／または持続時間を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、および１００％増加させる、請求項１〜２５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２７】
医薬組成物であって、
（ｉ）非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、
（ｉｉ）トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、
（ｉｉｉ）ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、
（ｉｖ）メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、エチレンジアミン四酢酸、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含み、
前記非架橋ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量が、約４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａであり、前記医薬組成物は、架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない、医薬組成物。
【請求項２８】
うつ病を治療するための方法であって、
請求項１〜２７のいずれかに記載の組成物の投与を提供することを含む、方法。
【請求項２９】
心不整脈を治療するための方法であって、
請求項１〜２７のいずれかに記載の組成物の投与を提供することを含む、方法。
【請求項３０】
眉間の皺を治療する方法であって、
請求項１〜２７のいずれかに記載の組成物の投与を提供することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、を含み、非架橋ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量が２５０ｋＤａ〜２．４ＭＤａまたは４．６ＭＤａ〜８ＭＤａである、医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬組成物は、少なくとも１つの活性成分（例えば、クロストリジウム毒素）と、例えば、１つ以上の賦形剤、緩衝液、担体、安定剤、防腐剤および／または増量剤とを含有し、所望な診断結果または治療効果を達成するために患者に投与するのに適した製剤である。本明細書で開示される医薬組成物は、診断、治療、美容、および／または研究上の有用性を有する。
【０００３】
嫌気性のグラム陽性菌Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍは、ボツリヌスニューロトキシン毒素と呼ばれる強力なポリペプチドニューロトキシンを産生し、このニューロトキシンは、ヒトおよび動物において、ボツリヌス症と呼ばれる神経麻痺性疾患を引き起こす。７種類の一般的に免疫学的に異なるボツリヌスニューロトキシンが特性決定されており、これらはそれぞれボツリヌスニューロトキシン血清型Ａ、Ｂ、Ｃ１、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧであり、各々が、型特異的な抗体による中和によって区別される。ボツリヌス毒素の異なる血清型は、これらに罹患する動物種および誘発する麻痺の重症度と持続時間において異なっている。ボツリヌス毒素は、コリン作動性運動ニューロンに対して明らかに高い親和性で結合し、このニューロン内に移動し、アセチルコリンの放出を遮断する。
【０００４】
ボツリヌス毒素は、様々な治療状態および美容状態の治療に使用されてきた。ボツリヌス毒素Ａ型（Ａｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃ．、ＢＯＴＯＸ（登録商標））は、眼瞼痙れん、斜視、頚部ジストニア、多汗および眉間の皺の治療のために市販されている。ＢＯＴＯＸ（登録商標）は、無菌の真空乾燥した形態で梱包された、精製されたボツリヌス毒素Ａ型複合体と、アルブミンと、塩化ナトリウムとからなる。ＢＯＴＯＸ（登録商標）の各バイアルは、防腐剤を含まない無菌の真空乾燥した形態で、約１００単位（Ｕ）のクロストリジウムボツリヌス毒素Ａ型の精製されたニューロトキシン複合体と、０．５ミリグラムのヒト血清アルブミンと、０．９ミリグラムの塩化ナトリウムとを含有する。ヒトでの使用が承認された他の市販のボツリヌスニューロトキシンとしては、ＤＹＳＰＯＲＴ（登録商標）（Ｂｅａｕｆｏｕｒ  Ｉｐｓｅｎ、ポートンダウン、イングランド）、ＸＥＯＭＩＮ（登録商標）（Ｍｅｒｚ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ＧｍｂＨ、フランクフルト、ドイツ）、ＪＥＡＵＶＥＡＵ（Ｅｖｏｌｕｓ、ニューポートビーチ、カリフォルニア）、およびＭＹＯＢＬＯＣ（登録商標）（Ｓｏｌｓｔｉｃｅ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、サンフランシスコ、カリフォルニア）が挙げられる。
【０００５】
ボツリヌス毒素複合体の神経毒性構成要素の分子量は、約１５０ｋＤである。ボツリヌス毒素は、典型的には、１５０ｋＤのボツリヌス毒素タンパク質分子と、会合した非毒素タンパク質と、を含む複合体として、クロストリジウムボツリヌス菌によって作られる。したがって、ボツリヌス毒素Ａ型複合体は、９００ｋＤ、５００ｋＤおよび３００ｋＤの複合体形態として、クロストリジウム菌によって作られ得る。
【０００６】
顔面筋へのボツリヌス毒素の注射は、注射された筋肉を弱めることによって、麻痺した筋肉を覆う皮膚中の運動過多性の皺を減少させ得る（Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｕｒｇ．Ｏｎｃｏｌ．，Ｊａｎｕａｒｙ  １９９０；１６（１）：８３）。ボツリヌス毒素は、特定の顔の皺を減らす美容目的で、顔面筋、例えば、眼輪筋、皺眉筋および前頭筋に注射されてきた。注射の有効性を評価する方法は、筋電図および／または写真技術を介する方法である（Ｇｕｅｒｒｉｓｓｉ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｐｌａｓｔ  Ｓｕｒｇ，１９９７；３９（５）：４４７−５３）。頚部ジストニアを治療するために胸鎖乳突筋へのボツリヌス毒素の注射の効果を評価するために、筋電図も使用されてきた（Ｄｒｅｓｓｌｅｒ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｎｅｕｒｏｌ  ２０００；４３：１３−１６）。この技術において、表面電極は、注射点から固定された距離に、典型的には、注射点から１ｃｍおよび３ｃｍに配置される。表面電極を使用して、注射された筋肉の最大随意収縮の間の複合筋活動電位（ＣＭＡＰ）の振幅および面積を測定する。典型的には、ＣＭＡＰは、筋肉麻痺効果の開始とともに減少し、麻痺効果が消失するにつれて増加する。
【０００７】
運動過多性の顔面の皺を治療するためにボツリヌス毒素の有効性を決定するために、デジタル画像分析などの写真方法も使用されてきた（Ｈｅｃｋｍａｎｎ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ  ２００１；４５：５０８−５１４）。任意の所与のボツリヌス毒素調製物の効力も、デジタル外転スコア（ＤＡＳ）アッセイを用いることによって日常的に評価することができ、ＤＡＳアッセイは、マウスまたはラットの後肢筋に注射した後のボツリヌス毒素の局所筋肉の弱化有効性を測定する（Ｂｒｏｉｄｅ，Ｒ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｔｏｘｉｃｏｎ，２０１３，７１：１８−２４）。
【０００８】
改善された効果および／または効果の持続時間を与えるクロストリジウム毒素（例えば、ボツリヌス毒素）を含む製剤が必要とされる。
【発明の概要】
【０００９】
一態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、を含み、非架橋ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量が、２５０キロダルトン（ｋＤａ）〜２．４メガダルトン（ＭＤａ）または４．６ＭＤａ〜８ＭＤａである、医薬組成物が提供される。
【００１０】
別の態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、等張化剤と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む医薬組成物が提供される。
【００１１】
別の態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む医薬組成物が提供される。
【００１２】
別の態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、凍結乾燥保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ）と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む医薬組成物が提供される。
【００１３】
別の態様において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、等張化剤と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む医薬組成物が提供される。
【００１４】
別の態様において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む医薬組成物が提供される。
【００１５】
別の態様において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、凍結乾燥保護剤と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む医薬組成物が提供される。
【００１６】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ボツリヌス毒素を含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、トレハロースを含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、塩化ナトリウムを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ポロキサマーおよび／またはポリソルベートを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ポロキサマー１８８および／またはポリソルベート２０を含む。いくつかの実施形態において、酸化防止剤は、Ｌ−メチオニン、Ｎ−アセチル−システイン（ＮＡＣ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩（ＥＤＴＡ）、ＥＤＴＡ類似体、エチレングリコール−ビス（２−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、ＥＧＴＡ類似体、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、ＤＴＰＡ類似体、アスコルビン酸、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、組成物は、緩衝剤をさらに含む。一実施形態において、緩衝剤は、ヒスチジン緩衝液を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、５〜７のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、組成物は、液体製剤である。いくつかの実施形態において、組成物は、固体凍結乾燥製剤である。
【００１７】
いくつかの実施形態において、組成物は、第１の部分と第２の部分とを含み、第１の部分は、クロストリジウム毒素活性成分と、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と、を含み、第２の部分は、緩衝液に溶解または懸濁させた非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含み、第１の部分と第２の部分は、液体組成物を形成するように組み合わせ可能である。一実施形態において、第１の部分は、固体凍結乾燥組成物である。別の実施形態において、第１の部分は、液体製剤である。
【００１８】
別の態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースと、ポロキサマーまたはポリソルベートと、Ｌ−メチオニンまたはＮＡＣと、を含む液体医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ボツリヌス毒素を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡまたはこれらの類似体をさらに含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ヒスチジン緩衝液を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物のｐＨは、５〜７の範囲である。いくつかの実施形態において、Ｌ−メチオニンの相対重量は、約０．１％〜約０．３％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＮＡＣの相対重量は、約０．１％〜約０．５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＥＤＴＡの相対重量は、約０．０１％〜約０．０５％の範囲である。いくつかの実施形態において、トレハロースの相対重量は、約１．０〜約１０％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポロキサマー１８８の相対重量は、約０．５％〜約５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポリソルベートの相対重量は、約０．０２％〜約０．０６％の範囲である。
【００１９】
別の実施形態において、液体医薬組成物が提供される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、ＮＡＣ、アスコルビン酸、ブチル化ヒドロキシトルエン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外しており、別の実施形態において、酸化防止剤がメチオニンである場合、組成物は、ポリソルベートを除外している。一実施形態において、組成物は、動物タンパク質安定剤を除外している。
【００２０】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。
【００２１】
別の実施形態において、液体組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーと、メチオニンと、を含み、任意選択で、二糖類を含む、動物タンパク質を含まない組成物である。一実施形態において、液体組成物は、二糖類を除外している。
【００２２】
さらなる実施形態において、液体組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、キレート化剤、犠牲酸化防止剤、連鎖停止剤、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸化防止剤と、を含む、動物タンパク質を含まない組成物である。一実施形態において、酸化防止剤は、キレート化剤と連鎖停止剤との組み合わせを含む。
【００２３】
さらに別の実施形態において、液体組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマー界面活性剤と、メチオニンと、任意選択で、二糖類を含む、動物タンパク質を含まない組成物である。一実施形態において、液体組成物は、二糖類を除外している。
【００２４】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースまたはスクロースと、ポロキサマーと、メチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。
【００２５】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、１〜１５重量％の量のトレハロースと、０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、０．０５〜５重量％の量のメチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。
【００２６】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、ポロキサマーと、メチオニン、ＮＡＣ、アスコルビン酸、ブチル化ヒドロキシトルエン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。
【００２７】
別の実施形態において、液体組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、ポロキサマーと、キレート化剤、犠牲酸化防止剤、連鎖停止剤、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸化防止剤と、を含む、動物タンパク質を含まない組成物である。
【００２８】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーと、キレート化剤と、連鎖停止剤とで構成される液体組成物が提供される。
【００２９】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーと、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体から選択されるキレート化剤と、ＮＡＣとで構成される液体組成物が提供される。
【００３０】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーと、メチオニンとで構成される液体組成物が提供される。
【００３１】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、キレート化剤と、連鎖停止剤とで構成される液体組成物が提供される。
【００３２】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体から選択されるキレート化剤と、ＮＡＣとで構成される液体組成物が提供される。
【００３３】
前述の実施形態のうちのいずれかにおいて、組成物が、いくつかの実施形態において、エマルションではなく、および／または両親媒性物質を含むナノ粒子を除外していることが想定される。
【００３４】
別の態様において、本開示は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースと、ポロキサマーまたはポリソルベートと、ＮＡＣと、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体から選択されるキレート化剤と、を含む、固体医薬組成物を提供する。代替の実施形態において、固体医薬組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースと、ポロキサマーと、Ｌ−メチオニンと、を含む。いくつかの実施形態において、固体医薬組成物は、ヒスチジン緩衝液をさらに含む。いくつかの実施形態において、Ｌ−メチオニンの相対重量は、約０．１％〜約０．３％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＮＡＣの相対重量は、約０．０１％〜約０．５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ＥＤＴＡの相対重量は、約０．０１％〜約０．０５％の範囲である。いくつかの実施形態において、トレハロースの相対重量は、約１．０〜約１０％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポロキサマーの相対重量は、約０．５％〜約５％の範囲である。いくつかの実施形態において、ポリソルベートの相対重量は、約０．０２％〜約０．０６％の範囲である。
【００３５】
一実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、およびこれらの組み合わせから選択される二糖類と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、ＢＨＴ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、アスコルビン酸、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。
【００３６】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、およびこれらの組み合わせから選択される二糖類と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、キレート化剤、犠牲酸化防止剤、連鎖停止剤、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸化防止剤と、を含む、動物タンパク質を含まない組成物である。
【００３７】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースまたはスクロースと、ポロキサマーと、メチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。
【００３８】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、１〜１５重量％の量のトレハロースと、０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、０．０５〜５重量％の量のメチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。
【００３９】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、ポロキサマーと、メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。
【００４０】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、ポロキサマーと、キレート化剤、犠牲酸化防止剤、連鎖停止剤、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸化防止剤と、を含む、動物タンパク質を含まない組成物である。
【００４１】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、キレート化剤と、連鎖停止剤とで構成される凍結乾燥組成物が提供される。
【００４２】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体から選択されるキレート化剤と、ＮＡＣとで構成される凍結乾燥組成物が提供される。
【００４３】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマーと、連鎖停止剤とで構成される凍結乾燥組成物が提供される。一実施形態において、凍結乾燥組成物は、キレート化剤を除外している。一実施形態において、連鎖停止剤は、ＮＡＣである。
【００４４】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマーと、メチオニンとで構成される凍結乾燥組成物が提供される。
【００４５】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマーと、キレート化剤と、連鎖停止剤とで構成される凍結乾燥組成物が提供される。
【００４６】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマーと、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体から選択されるキレート化剤と、ＮＡＣとで構成される凍結乾燥組成物が提供される。
【００４７】
別の実施形態において、凍結乾燥組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマーと、ＮＡＣと、を含み、任意選択で、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体を含む、動物タンパク質を含まない組成物である。一実施形態において、凍結乾燥組成物は、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体を除外している。
【００４８】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される凍結乾燥保護剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、ＮＡＣとで構成される凍結乾燥組成物が提供される。
【００４９】
特定の実施形態において、凍結乾燥組成物は、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤を用いて再構成される。少なくとも一実施形態において、凍結乾燥組成物は、患者への投与前にＮａＣｌを含む再構成ビヒクルを用いて再構成される。
【００５０】
固体または液体組成物の前述の実施形態のいずれかにおいて、これらの成分、ポリビニルピロリドン、ポリプロピレングリコールおよびポリエチレングリコールのジブロックコポリマー、ならびに／またはイノシトール、ラクチロール、イソマルト、キシリトール、エリスリトールなどのポリアルコールのうちの１つ以上が、任意の組み合わせで、除外されることが想定される。固体または液体組成物の前述の実施形態のいずれかにおいて、組成物が動物タンパク質を含まないことが想定される。
【００５１】
別の態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤および／または凍結乾燥保護剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む医薬組成物が想定される。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外しており、組成物が液体であり、酸化防止剤がメチオニンである実施形態において、界面活性剤は、ポリソルベートを除外している。組成物は、液体または固体であってもよい。
【００５２】
別の態様において、医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースまたはスクロースと、ポロキサマーと、メチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。組成物は、液体または固体であってもよい。
【００５３】
別の態様において、医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、１〜１５重量％の量のトレハロースと、０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、０．０５〜５重量％の量のメチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。組成物は、液体または固体であってもよい。
【００５４】
別の態様において、医薬組成物が想定される。組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、ポロキサマーと、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。組成物は、液体または固体であってもよい。
【００５５】
別の態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、Ｎ−アセチルシステイン、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む医薬組成物が提供される。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外しており、組成物が液体であり、酸化防止剤がメチオニンである実施形態において、界面活性剤は、ポリソルベートを除外している。組成物は、液体または固体であってもよい。一実施形態において、組成物は、等張化剤および／または凍結乾燥保護剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、等張化剤は、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される。代替の実施形態において、凍結乾燥保護剤は、トレハロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される。一実施形態において、等張化剤および／または凍結乾燥保護剤は、二糖類である。一実施形態において、二糖類は、トレハロースおよびスクロースから選択される。
【００５６】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、組成物が、架橋ヒアルロン酸を含まないことが想定される。
【００５７】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、組成物が、クロストリジウム毒素活性成分を含む組成物と、非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩および非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩ではない希釈剤を含む組成物とを混合することによって、または非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩と、クロストリジウム毒素活性成分および希釈剤を含む組成物とを混合することによって、調製することができることが想定される。
【００５８】
液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、クロストリジウム毒素活性成分の濃度が、０．２〜２．０ｎｇ／ｍＬまたは約０．２〜１０ｎｇ／ｍＬであることが想定される。
【００５９】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、クロストリジウム毒素活性成分の濃度が、約１０Ｕ／ｍＬ〜約２００Ｕ／ｍＬまたは約１０Ｕ／ｍＬ〜約１００Ｕ／ｍＬであることが想定される。
【００６０】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、組成物が、非架橋ヒアルロン酸またはその塩１ミリグラムあたり１０単位までのクロストリジウム毒素活性成分を含むことが想定される。固体または液体組成物の別の実施形態において、組成物が、非架橋ヒアルロン酸またはその塩１ミリグラムあたり４０単位までのクロストリジウム毒素活性成分を含むことが想定される。
【００６１】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、クロストリジウム毒素活性成分が、ボツリヌス毒素Ａ型またはオナボツリヌス毒素Ａであることが想定される。
【００６２】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、組成物が、クロストリジウム毒素活性成分を何ら含まなくてもよいことが想定される。
【００６３】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、非架橋ヒアルロン酸の重量平均分子量が、約４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、例えば、４５０ｋＤａ〜１．６ＭＤａであることが想定される。
【００６４】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、非架橋ヒアルロン酸の重量平均分子量が、約１．５８ＭＤａであることが想定される。
【００６５】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、非架橋ヒアルロン酸の濃度が、固体または液体組成物の合計重量に基づいて０．１〜５０重量％、例えば、約０．２〜１０重量％または約０．４〜５重量％、例えば、約０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、または６重量％であることが想定される。
【００６６】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、医薬組成物は、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない医薬組成物と比較して、クロストリジウム毒素活性成分の有効性および／または持続時間を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、および１００％増加させることができる。かかる医薬組成物のいくつかの特定の実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約１．２重量％の量で存在し、約１．５８Ｍｄａの重量平均分子量を有する。
【００６７】
固体または液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、組成物が、ボツリヌス毒素Ａ型と、約１．５８ＭＤａの重量平均分子量を有する、約１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、を含む場合、ボツリヌス毒素Ａ型の効果の有効性および／または持続時間は、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない組成物の効果の有効性および／または持続時間の約２倍であり得る。
【００６８】
液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、医薬組成物の粘度が、２５℃、０．１／秒の剪断速度で約０．０１Ｐａ−ｓ〜約０．２Ｐａ−ｓ（約１０ｃｐｓ〜約２００ｃｐｓ）であることが想定される。一実施形態において、組成物は、０．１／秒の剪断速度、２５℃で約５〜５００Ｐａ−ｓの粘度を有する。別の実施形態において、組成物は、０．１／秒の剪断速度、２５℃で約５０〜２５０Ｐａ−ｓの粘度を有する。
【００６９】
別の態様において、うつ病を治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７０】
別の態様において、心不整脈を治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７１】
別の態様において、眉間の皺を治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７２】
別の態様において、頚部ジストニアのための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。一実施形態において、本方法は、異常な頭部位置および首の疼痛の重症度を低減するのに有効である。
【００７３】
別の態様において、側眼角の皺のための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７４】
別の態様において、額の皺のための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７５】
別の態様において、抗コリン薬に対する応答が不十分であるか、または抗コリン薬に対して不耐性である成人における、切迫性尿失禁、尿意切迫感、および頻尿の症状を有する過活動膀胱を治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７６】
別の態様において、抗コリン薬に対する応答が不十分であるか、または抗コリン薬に対して不耐性である成人における、神経学的状態（例えば、脊髄損傷（ＳＣＩ）、多発性硬化症（ＭＳ））に関連する排尿過活動に起因する尿失禁を治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７７】
別の態様において、慢性偏頭痛（頭痛が１日４時間以上持続する日が月に１５日以上）を有する成人患者における頭痛を治療するため、または頭痛の予防的治療のための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７８】
別の態様において、成人患者および小児患者（２〜１７歳）における上肢および／または下肢痙れんを治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。
【００７９】
別の態様において、腋窩多汗症を治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。一実施形態において、本方法は、腋窩多汗症が重症であり、および／または局部薬剤によって不十分に管理されるヒト対象を対象とする。
【００８０】
別の態様において、斜視を治療するための方法が想定される。本方法は、本明細書に記載の実施形態および態様のいずれかに従う組成物の投与を提供すること、投与するように指示すること、または投与することを含む。一実施形態において、斜視は、１２歳以上のヒト患者における斜視である。
【図面の簡単な説明】
【００８１】
【図１Ａ】ラットにボツリヌス毒素血清型Ａ（ＢｏＮＴ／Ａ）を含む組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、非架橋ヒアルロン酸を欠いた組成物（対照）は、４．７Ｕ／ｋｇ（白色四角）、９．４Ｕ／ｋｇ（白色丸）、および１６．４Ｕ／ｋｇ（白色三角）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与され、１．２重量％の直鎖非架橋ヒアルロン酸（重量平均ＭＷが１５００ｋＤａ）を含む組成物は、４．７Ｕ／ｋｇ（黒色四角）および９．４Ｕ／ｋｇ（黒色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与される。
【図１Ｂ】ラットにＢｏＮＴ／Ａを含む組成物を、２．９６Ｕ／ｋｇの用量でＢｏＮＴ／Ａを含む組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、１．２重量％の直鎖非架橋ヒアルロン酸（重量平均ＭＷが１５００ｋＤａ）を含む１つの組成物（黒色ひし形）と、直鎖非架橋ヒアルロン酸を含まない対照組成物（白色ひし形）を用いる。
【図１Ｃ】ラットにＢｏＮＴ／Ａを含む組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、１つを除く全ての組成物は、４．７Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量で投与され、１つの対照である比較組成物は、９．４Ｕ／ｋｇで投与され（白色丸）、試験組成物は、１．２％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ、黒色四角）、２％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ、黒色ひし形）、３％の非架橋ヒアルロン酸（ＬＭＷ、黒色丸）、および０．６％の非架橋ヒアルロン酸（ＨＨＭＷ、黒色の反転した三角）を含んでおり、比較物である対照組成物は、非架橋ヒアルロン酸を欠いており、４．７Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ（白色四角）または９．４Ｕ／ｋｇ（白色丸）で投与された。
【図２】ラットにＢｏＮＴ／Ａを含む組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、組成物は、１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸を含む（黒色四角）か、または架橋ヒアルロン酸を含まない（白色四角）。
【図３】ラットに、非架橋ヒアルロン酸を欠いており、９Ｕ／ｋｇ（白色丸）、５．１Ｕ／ｋｇ（白色四角）、もしくは２．８Ｕ／ｋｇ（白色三角）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与されたボツリヌス毒素対照組成物、または１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ）を含み、９Ｕ／ｋｇ（黒色丸）、５．１Ｕ／ｋｇ（黒色四角）、もしくは２．８Ｕ／ｋｇ（黒色三角）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与された組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフである。
【図４】ラットに、非架橋ヒアルロン酸を欠いており、２．８５Ｕ／ｋｇ（白色三角）もしくは９Ｕ／ｋｇ（白色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与されたボツリヌス毒素対照組成物、または１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ）を含み、２．８５Ｕ／ｋｇ（黒色三角）もしくは９Ｕ／ｋｇ（黒色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与された組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフである。
【図５】ラットに、非架橋ヒアルロン酸を欠いており、２．９６Ｕ／ｋｇ（白色三角）、４．７０Ｕ／ｋｇ（白色四角）、もしくは９．４Ｕ／ｋｇ（白色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与されたボツリヌス毒素対照組成物、または１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ）を含み、２．９６Ｕ／ｋｇ（黒色三角）、４．７０Ｕ／ｋｇ（黒色四角）、もしくは９．４Ｕ／ｋｇ（黒色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与された組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフである。
【図６】ラットに、９．４Ｕ／ｋｇで投与されるボツリヌス毒素組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、このボツリヌス毒素は、ヒスチジン、トレハロース、界面活性剤（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  Ｐ１８８）およびメチオニンを含む組成物（ｐＨ６）、非架橋ヒアルロン酸を含まない組成物（対照、白色四角）、または１５００ｋＤａの平均ＭＷを有する１．２％の非架橋ヒアルロン酸を含む組成物（黒色丸）、または７００ｋＤａの平均ＭＷを有する２．３％の非架橋ヒアルロン酸を含む組成物（黒色三角）中にある。
【図７】ラットに、９．４Ｕ／ｋｇで投与されるボツリヌス毒素組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、このボツリヌス毒素は、ヒスチジン、トレハロース、界面活性剤（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  Ｐ１８８）およびメチオニンを含む組成物（ｐＨ６）、非架橋ヒアルロン酸を含まない組成物（対照、白色四角）、または０．６重量％で１５００ｋＤａの平均ＭＷを有する非架橋ヒアルロン酸を含む組成物（白色丸）、１．２重量％で含むもの（白色三角）、１．６重量％で含むもの（黒色丸）、および２．０重量％で含むもの（黒色三角）中にある。
【図８】ラットに、９．４Ｕ／ｋｇで投与されるボツリヌス毒素組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、このボツリヌス毒素組成物は、以下の表Ａで特定される種々のビヒクル中、１５００ｋＤａの平均ＭＷを有する１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸を含み、表中で割り当てられる製剤番号は、以下のような記号に対応する。製剤１（対照、非架橋ヒアルロン酸なし）、白色四角；製剤２、白色三角；製剤３、黒色四角；製剤４、黒色丸；製剤５、黒色三角；製剤６、反転した三角；製剤７、黒色ひし形。
【発明を実施するための形態】
【００８２】
本明細書に記載の組成物は、実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分および／または非架橋ヒアルロン酸またはその塩の安定な液体および／または安定な固体医薬組成物を対象とする。いくつかの実施形態において、組成物は、界面活性剤および酸化防止剤と、任意選択で、等張化剤および／または凍結乾燥保護剤のうちの１つ以上をさらに含む。特定の液体組成物において、二糖類の形態での凍結乾燥保護剤は、任意選択である。
【００８３】
また、以下に記載されるように、本組成物は、本明細書で提供される組成物を用い、例えば、うつ病（例えば、大うつ病性障害）、頭痛（例えば、偏頭痛、緊張性頭痛など）、疼痛、心房細動、多汗症、筋痙縮、頚部ジストニア、眼瞼痙れん、過活動膀胱（例えば、神経因性排尿筋過活動、および特発性過活動膀胱）、膀胱痛（例えば、間質性膀胱炎、および膀胱痛症候群）、皮膚状態（例えば、皺、微小な皺、過剰な皮脂産生、座瘡、および酒さ）、病的症状などを含め、種々の疾患、障害、および状態の治療のための方法に有用である。実施形態は、例えば、筋肉内、皮内、皮下などの注射、点滴、静脈内、経皮、および局部を含む、種々の投与技術を含んでいてもよい。
【００８４】
定義
本明細書で使用される場合、以下に記載される単語または用語は、以下の定義を有する。
【００８５】
「１つの（ａ）」および「１つの（ａｎ）」という冠詞は、その冠詞の文法的な対象の１つ、または１つより多く（すなわち、少なくとも１つ）を指すために本明細書で使用される。一例として、「要素（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つの要素、または１つより多い要素を意味する。
【００８６】
本明細書で使用される「約」または「およそ」は、当業者によって決定されるような特定の値に対する許容される誤差範囲内であることを意味し、一部には、その値がどのように測定されるか、または決定されるか（すなわち、測定系の限界）に依存する。例えば、「約」は、当該技術分野における実施あたり、１以内、または１を超える標準偏差を意味する場合がある。特定の値が、本出願および特許請求の範囲に記載されている場合、特に明記しない限り、「約」という用語は、特定の値に対する許容される誤差範囲内であることを意味する。「約」という用語は、記載される項目、数、百分率、または期間の値を定量化する場合、記載されている項目、百分率、パラメータ、または期間の値の＋１０％または−１０％の範囲を指す。
【００８７】
「投与」または「投与する」は、対象に医薬組成物を摂取する（すなわち、投与する）工程、または医薬組成物を摂取した対象を意味する。本明細書で開示される医薬組成物は、様々な方法によって局所投与することができる。例えば、筋肉内、皮内、皮下投与、髄腔内投与、腹腔内投与、局部（経皮）、点滴、および移植（例えば、高分子インプラントまたはミニ浸透圧ポンプなどの徐放性デバイス）は、全て適切な投与経路であり得る。
【００８８】
「緩和する」は、疼痛、頭痛、もしくは任意の症状の発生、または状態または障害の原因の減少を意味する。したがって、緩和としては、ある程度の減少、大幅な減少、ほぼ完全な減少、および完全な減少が挙げられる。
【００８９】
「動物タンパク質を含まない」とは、血液由来の、血液に貯蔵された、および他の動物に由来する産物または化合物が存在しないことを意味する。「動物」は、哺乳動物（ヒトなど）、鳥類、爬虫類、魚類、昆虫類、クモ類、または他の動物種を意味する。「動物」は、細菌などの微生物を除外する。したがって、動物タンパク質を含まない医薬組成物は、ボツリヌスニューロトキシンを含んでいてもよい。例えば、「動物タンパク質を含まない」医薬組成物は、血清由来アルブミン、ゼラチン、および免疫グロブリンなどの他の動物由来タンパク質を実質的に含まないか、または本質的に含まないか、または全く含まない医薬組成物を意味する。動物タンパク質を含まない医薬組成物の一例は、ボツリヌス毒素（活性成分として）と、安定剤もしくは賦形剤としての適切な多糖類を含むか、またはこれらからなる医薬組成物である。
【００９０】
「酸化防止剤」は、活性成分を酸素との反応から保護する任意の化合物を指す。酸化防止剤は、大きく以下の３つのカテゴリーに分類することができる。（ｉ）特定の活性成分よりも容易に酸素と反応し、したがって、酸素を捕捉することができる、犠牲酸化防止剤、例えば、アスコルビン酸および亜硫酸塩、（ｉｉ）酸素を消費することによって、ラジカル鎖の増殖中に攻撃される水素原子に対する弱い結合に起因して、安定なラジカルを形成する分子である、連鎖停止剤、例えば、メチオニン、ＮＡＣ、グルタチオン、リポ酸、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、およびシステイン、（ｉｉｉ）金属との複合体を形成することによって、遷移金属の触媒活性を低下させる、キレート化剤、例えば、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡおよびＤＴＰＡ、ならびにこれらの類似体。
【００９１】
「生物活性」は、生物に対する薬物の有益な効果または有害な効果を記載する。薬物が複合体化学混合物である場合、この活性は、物質の活性成分によって発揮されるが、他の構成成分によって改変され得る。生物活性は、効力として、またはインビボＬＤ50もしくはＥＤ50アッセイによる毒性として、または例えば参照により本明細書に組み込まれているＵ．Ｓ．２０１０／０２０３５５９およびＵ．Ｓ．２０１０／０２３３８０２に記載されるような細胞に基づく効力アッセイなどのインビトロアッセイによって、評価することができる。
【００９２】
「ボツリヌス毒素」は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍによって産生されるニューロトキシン、および非クロストリジウム種による組換えによって作製されたボツリヌス毒素（またはその軽鎖もしくは重鎖）を意味する。「ボツリヌス毒素」という句は、本明細書で使用される場合、ボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧ、ならびにこれらのサブタイプおよび任意の他の種類のサブタイプ、またはそれぞれの場合に、上述のいずれかの任意の再操作されたタンパク質、類似体、誘導体、ホモログ、一部分、副次的な部分、バリアント、または変種を包含する。「ボツリヌス毒素」は、本明細書で使用される場合、「修飾されたボツリヌス毒素」も包含する。さらに、本明細書で使用される「ボツリヌス毒素」は、ボツリヌス毒素複合体（例えば、３００、６００および９００ｋＤａ複合体）、ならびに複合体タンパク質が会合していないボツリヌス毒素の神経毒素構成要素（１５０ｋＤａ）も包含する。
【００９３】
「クロストリジウム毒素」は、全体的な細胞機構を実行し、それによってクロストリジウム毒素が細胞内に毒を侵入させることができるクロストリジウム毒素株によって産生される任意の毒素を指し、低アフィニティもしくは高アフィニティのクロストリジウム毒素受容体に対するクロストリジウム毒素の結合、毒素／受容体複合体の内部移行、細胞質へのクロストリジウム毒素軽鎖の移行、およびクロストリジウム毒素基質の酵素改変を包含する。クロストリジウム毒素の非限定的な例としては、ボツリヌス毒素、例えば、ＢｏＮＴ／Ａ（すなわち、ボツリヌス毒素血清型Ａ）、ＢｏＮＴ／Ｂ、ＢｏＮＴ／Ｃ1、ＢｏＮＴ／Ｄ、ＢｏＮＴ／Ｅ、ＢｏＮＴ／Ｆ、ＢｏＮＴ／Ｇ、テタヌス毒素（ＴｅＮＴ）、バラティ毒素（ＢａＮＴ）、およびブチリカム毒素（ＢｕＮＴ）が挙げられる。ＢｏＮＴ／Ｃ2細胞毒素およびＢｏＮＴ／Ｃ3細胞毒素は、ニューロトキシンではなく、「クロストリジウム毒素」という用語から除外される。クロストリジウム毒素という用語は、およそ１５０ｋＤａのクロストリジウム毒素単独（すなわち、ＮＡＰを含まない）も含む。クロストリジウム毒素としては、天然に存在するクロストリジウム毒素バリアント、例えば、クロストリジウム毒素アイソフォームおよびクロストリジウム毒素サブタイプ、天然に存在しないクロストリジウム毒素バリアント、例えば、保存的クロストリジウム毒素バリアント、非保存的クロストリジウム毒素バリアント、クロストリジウム毒素キメラバリアントおよびその活性なクロストリジウム毒素断片、またはこれらの任意の組み合わせが挙げられる。クロストリジウム毒素は、クロストリジウム毒素複合体も含み、クロストリジウム毒素および非毒素関連タンパク質（ＮＡＰ）、例えば、ボツリヌス毒素複合体、テタヌス毒素複合体、バラティ毒素複合体、およびブチリカム毒素複合体を含む複合体を指す。クロストリジウム毒素複合体の非限定的な例としては、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍによって産生されるもの、例えば、９００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ａ複合体、３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｂ複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｃ1複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｅ複合体、および３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｆ複合体が挙げられる。
【００９４】
「クロストリジウム毒素活性成分」は、対象または患者への投与時または投与後に効果を発揮するクロストリジウム毒素の任意の部分を含有する分子を指す。本明細書で使用される場合、「クロストリジウム毒素」という用語は、（ｉ）およそ１５０ｋＤａのクロストリジウム毒素と、非毒素関連タンパク質（ＮＡＰ）とまとめて称される他のタンパク質と、を含むクロストリジウム毒素複合体、（ｉｉ）およそ１５０ｋＤａのクロストリジウム毒素単独（すなわち、ＮＡＰを含まない）、または（ｉｉｉ）修飾クロストリジウム毒素、例えば、再標的化クロストリジウム毒素を包含する。
【００９５】
「変形（ｄｅｆｏｒｍｉｔｙ）」は、美容的、物理的もしくは機能的な不規則性、欠陥、異常、不完全性、奇形、窪み、または歪みを意味する。
【００９６】
「希釈剤」は、医薬組成物中のクロストリジウム毒素活性成分以外の構成要素を意味する。
【００９７】
生物学的な活性成分に適用される「有効量」は、対象に所望な変化を引き起こすのに一般的に十分な成分の量を意味する。例えば、所望な効果が、自己免疫障害の症状の低減である場合、成分の有効量は、自己免疫障害の症状を少なくとも実質的に低下させ、顕著な毒性を引き起こさない量である。
【００９８】
「有効量」は、クロストリジウム毒素組成物に添加される賦形剤または賦形剤の特定の組み合わせの量を参照しつつ使用される場合、クロストリジウム毒素活性成分の所望な初期の回復した効力を達成するのに必要な各賦形剤の量を指す。この実施形態の態様において、有効量の賦形剤または賦形剤の組み合わせによって、例えば、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％または少なくとも１００％の初期の回復した効力が得られる。この実施形態の他の態様において、治療有効濃度のクロストリジウム毒素活性成分によって、治療される滋養物に関連する症状を、例えば、最大で１０％、最大で２０％，最大で３０％、最大で４０％、最大で５０％、最大で６０％、最大で７０％、最大で８０％、最大で９０％、または最大で１００％低減する。
【００９９】
「重鎖」は、ボツリヌスニューロトキシンの重鎖を意味する。重鎖は、約１００ｋＤａの分子量を有し、Ｈ鎖、またはＨと呼ばれることがある。
【０１００】
ＨCは、Ｈ鎖のカルボキシル末端セグメントとほぼ等しいボツリヌスニューロトキシンのＨ鎖に由来する断片（約５０ｋＤａ）、またはインタクトなＨ鎖中のその断片に対応する部分を意味する。ＨCは、免疫原性であり、運動ニューロンへの高親和性のシナプス前結合に関与する天然または野生型のボツリヌスニューロトキシンの一部を含有すると考えられる。
【０１０１】
ＨNは、Ｈ鎖のアミノ末端セグメントとほぼ等しいボツリヌスニューロトキシンのＨ鎖に由来する断片（約５０ｋＤａ）、またはＨ鎖中のインタクト内のその断片に対応する部分を意味する。ＨNは、細胞内エンドソーム膜を横切るＬ鎖の移行に関与する天然または野生型のボツリヌスニューロトキシンの一部を含有すると考えられる。
【０１０２】
「軽鎖」は、クロストリジウムニューロトキシンの軽鎖を意味する。軽鎖は、約５０ｋＤａの分子量を有し、Ｌ鎖、Ｌ、またはボツリヌスニューロトキシンのタンパク質分解ドメイン（アミノ酸配列）と呼ばれることがある。
【０１０３】
ＬＨNまたはＬ−ＨNは、Ｌ鎖を含むクロストリジウムニューロトキシンに由来する断片、またはＨNドメインに連結するその機能性断片を意味する。ＬＨNまたはＬ−ＨNは、ＨCドメインを除去するか、または修飾するためのタンパク質分解により、インタクトなクロストリジウムニューロトキシンから得ることができる。
【０１０４】
「インプラント」は、制御放出（例えば、パルス放出または連続放出）組成物、または薬物送達系を意味する。インプラントは、例えば、人体に注射、挿入、または移植することができる。
【０１０５】
「液体組成物」、「液体医薬組成物」、または「液体製剤」は、長期間にわたって、緩衝剤などの液体医薬賦形剤中に保存することが可能であり、その結果、必要に応じて臨床医がすぐに使用できる、薬物または生物剤の薬学的に活性な調製物を指す。液体医薬組成物は、凍結乾燥プロセスを行わずに製造される。
【０１０６】
「局所投与」は、動物の身体の表面または内部の医薬品の生物学的効果が望ましい部位またはその近傍に、例えば、筋肉内または真皮内もしくは真皮下注射または局部投与によって、医薬品を直接投与することを意味する。局所投与は、静脈内投与または経口投与などの全身性投与経路を除く。局部投与は、医薬薬剤が患者の皮膚に適用される局所投与の一種である。
【０１０７】
「凍結乾燥保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ）」または「凍結乾燥保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）」は、凍結乾燥プロセス中にクロストリジウム毒素活性成分を保護するために、凍結乾燥製剤に含まれる物質を意味する。凍結乾燥保護剤としては、例えば、ポリヒドロキシ化合物、例えば、糖類（単糖類、二糖類、および多糖類）、ポリアルコール、およびこれらの誘導体が挙げられる。本明細書で開示される凍結乾燥製剤とともに使用可能な例示的な凍結乾燥保護剤としては、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、ラフィノース、マルトース、グリセロール、ラクトース、フルクトース、ガラクトース、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１０８】
「凍結乾燥組成物」、「凍結乾燥医薬組成物」、「凍結乾燥製剤」、または「固体組成物」は、凍結乾燥プロセス、凍結して乾燥させるプロセス、または真空乾燥プロセスが行われたクロストリジウム毒素活性成分を含有する製剤を指し、患者への投与前に、例えば、生理食塩水または水などの再構成ビヒクルを用いて再構成することができる。凍結乾燥組成物は、凍結して乾燥させた組成物または真空乾燥組成物であり得る。
【０１０９】
「修飾されたボツリヌス毒素」は、天然ボツリヌス毒素と比較して、そのアミノ酸の少なくとも１つが欠失し、修飾され、または置き換えられたボツリヌス毒素を意味する。さらに、修飾されたボツリヌス毒素は、組換え産生されたニューロトキシン、または組換えによって作られたニューロトキシンの誘導体もしくは断片であってもよい。修飾されたボツリヌス毒素は、天然ボツリヌス毒素の少なくとも１つの生物活性、例えば、ボツリヌス毒素受容体に結合する能力、またはニューロンからの神経伝達物質放出を阻害する能力を保持している。修飾されたボツリヌス毒素の一例は、１つのボツリヌス毒素血清型（例えば血清型Ａ）由来の軽鎖と、異なるボツリヌス毒素血清型（例えば血清型Ｂ）由来の重鎖と、を有するボツリヌス毒素である。修飾されたボツリヌス毒素の別の例は、サブスタンスＰなどの神経伝達物質に連結したボツリヌス毒素である。
【０１１０】
本明細書で使用される「分子量」は、重量平均分子量であり、当該技術分野で知られているように測定され、計算される（例えば、Ｆｒｅｄ  Ｂｉｌｌｍｅｙｅｒ，Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８４，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，ｐｐ．１６−１９）。
【０１１１】
「変異」は、天然に存在するタンパク質または核酸配列の構造改変を意味する。例えば、核酸変異の場合、変異は、ＤＮＡ配列中の１つ以上のヌクレオチドの欠失、付加または置換であってもよい。タンパク質配列変異の場合、変異は、タンパク質配列中の１つ以上のアミノ酸の欠失、付加または置換であってもよい。例えば、タンパク質配列を構成する特定のアミノ酸は、別のアミノ酸、例えば、アラニン、アスパラギン、システイン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、ロイシン、メチオニン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、スレオニン、バリン、トリプトファン、チロシン、または任意の他の天然に存在するかまたは天然に存在しないアミノ酸または化学修飾されたアミノ酸といったアミノ酸を含む群から選択されるアミノ酸に置換されてもよい。タンパク質配列に対する変異は、ＤＮＡ配列に対する変異の結果であってもよく、転写され、得られたｍＲＮＡが翻訳される場合、変異したタンパク質配列を生じる。タンパク質配列に対する変異は、所望な変異を含むペプチド配列を所望なタンパク質配列に融合することによって作成することもできる。
【０１１２】
「非架橋ヒアルロン酸またはその塩」は、２５０ｋＤａ〜２．４ＭＤａまたは４．６ＭＤａ〜８ＭＤａの重量平均分子量を有する非架橋ヒアルロン酸またはその塩を指す。
【０１１３】
「患者」は、医療または獣医医療を受けるヒトまたは非ヒト対象を意味する。したがって、本明細書に開示される組成物は、例えば哺乳動物などの任意の動物の治療に使用することができる。
【０１１４】
「末梢投与する」または「末梢投与」は、真皮下、皮内、経皮、または皮下投与を意味するが、筋肉内投与を除外する。「末梢」とは、真皮下の位置であることを意味し、内臓部位を除外する。
【０１１５】
「医薬組成物」は、活性医薬成分、例えば、ボツリヌス毒素などのクロストリジウム毒素活性成分と、少なくとも１つのさらなる成分、例えば、安定剤または賦形剤などと、を含む組成物を意味する。したがって、医薬組成物は、ヒト患者などの対象への診断的投与または治療的投与に好適な製剤である。医薬組成物は、例えば、凍結乾燥もしくは真空乾燥した状態、凍結乾燥もしくは真空乾燥した医薬組成物の再構成後に形成される溶液で、または再構成を必要としない溶液または固体としてのものであってもよい。
【０１１６】
「薬理学的に許容される賦形剤」は、「薬理学的賦形剤」または「賦形剤」と同義であり、哺乳動物に投与されたときに、長期的または永続的な有害な影響を実質的に有さない任意の賦形剤を指し、例えば、安定剤、増量剤、低温保護剤、凍結乾燥保護剤、添加剤、ビヒクル、担体、希釈剤、または補助剤などの化合物を包含する。賦形剤は、一般に、活性成分と混合され、または活性成分を希釈するか、または封入することが可能であり、固体、半固体、または液体の薬剤であり得る。クロストリジウム毒素活性成分を含む医薬組成物が、活性成分を薬学的に許容される組成物へと加工するのを容易にする１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含んでいてもよいことも想定される。任意の薬理学的に許容される賦形剤が、クロストリジウム毒素活性成分と不適合でない限り、薬学的に許容される組成物中のその使用が想定される。薬理学的に許容される賦形剤の非限定的な例は、例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｈｏｗａｒｄ  Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，７ｔｈ  ｅｄ．１９９９）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０ｔｈ  ｅｄ．２０００）、Ｇｏｏｄｍａｎ  ＆  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｊｏｅｌ  Ｇ．Ｈａｒｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ，１０ｔｈ  ｅｄ．２００１）、およびＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｃ．Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＰｈＡ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００３）に見出すことができ、それらの各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１１７】
医薬組成物の構成成分は、単一組成物中に含まれてもよく（すなわち、任意の必要な再構成流体を除き、全ての構成成分が、医薬組成物の初期配合時に存在する）、または２成分系として、例えば、再構成ビヒクルを用いて再構成され、再構成ビヒクルが、例えば、医薬組成物の初期配合中には存在しない成分を含む、真空乾燥した組成物であってもよい。２成分系は、２成分系の第１の構成要素との長期保管には十分に適合性ではない成分を組み込むことを可能にするなど、いくつかの利益を提供することができる。例えば、再構成ビヒクルは、使用期間、例えば１週間の冷蔵保存中に微生物増殖に対して十分な保護を与えるが、その間に毒素を分解し得る２年間の冷凍庫保存期間中には存在しないような防腐剤を含んでいてもよい。ボツリヌス毒素または他の成分と長時間にわたって適合性とはなり得ない他の成分は、この様式で組み込むことができる。すなわち、適切な使用時に、第２のビヒクル（例えば、再構成ビヒクル）に添加される。医薬組成物は、ベンジルアルコール、安息香酸、フェノール、パラベン、およびソルビン酸などの防腐剤も含んでもよい。医薬組成物は、例えば、賦形剤、例えば、表面活性剤、分散剤、不活性希釈剤、造粒剤および崩壊剤、結合剤、滑沢剤、防腐剤、ゼラチンなどの生理学的に分解可能な組成物、水性ビヒクルおよび溶媒、油性ビヒクルおよび溶媒、懸濁剤、分散剤もしくは湿潤剤、乳化剤、粘滑剤、緩衝液、塩類、増粘剤、充填剤、酸化防止剤、安定剤、および薬学的に許容される高分子または疎水性材料、ならびに当該技術分野で知られており、例えば、Ｇｅｎａｒｏ，ｅｄ．，１９８５，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（本明細書に参照により組み込まれる）に記載される他の成分を含んでいてもよい。
【０１１８】
「多糖類」は、２個より多い糖分子単量体の多量体を意味する。単量体は、同じであってもよく、または異なっていてもよい。
【０１１９】
「安定剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）」、「安定剤（ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）」または「安定剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ）」は、医薬組成物の効力が、不安定な組成物と比較して増加するように、クロストリジウム毒素活性成分を安定化するように作用する物質を意味する。
【０１２０】
「安定剤」は、賦形剤を含むことができ、タンパク質および非タンパク質分子を含むことができる。
【０１２１】
「界面活性剤」は、天然または合成の両親媒性化合物を指す。界面活性剤は、非イオン性、両性イオン性、またはイオン性であり得る。界面活性剤の非限定的な例としては、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１２２】
「治療製剤」は、障害または疾患、例えば、末梢筋の活動過多（すなわち、痙縮）によって特徴付けられる障害または疾患を治療し、それによって軽減するために使用可能な製剤を意味する。
【０１２３】
「治療有効濃度」、「治療有効量」、「有効量」、「有効用量」および「治療有効用量」は、所望の治療効果を達成するために必要なクロストリジウム毒素活性成分の最小用量を指し、治療される滋養物に関連する症状を低減するのに十分な用量を含む。
【０１２４】
本明細書で使用される「ＴＥＭ」は、「標的化エキソサイトーシス調節因子（Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｅｘｏｃｙｔｏｓｉｓ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒ）」または「再標的化エンドペプチダーゼ」と同義である。一般に、ＴＥＭは、クロストリジウム毒素軽鎖由来の酵素ドメインと、クロストリジウム毒素重鎖由来の移行ドメインと、標的化ドメインと、を含む。ＴＥＭの標的化ドメインは、天然に存在するクロストリジウム毒素によって利用される天然クロストリジウム毒素受容体以外の受容体に対して分子を標的化する、改変された細胞標的化能を提供する。この再標的化能は、クロストリジウム毒素の天然に存在する結合ドメインを、非クロストリジウム毒素受容体について結合活性を有する標的化ドメインと置き換えることによって達成される。ＴＥＭは、非クロストリジウム毒素受容体に結合するが、細胞質へのＴＥＭ／受容体複合体の内部移行、小胞膜および二本鎖分子における孔の形成、細胞質への酵素ドメインの移行、および標的細胞のＳＮＡＲＥ複合体の構成要素に対するタンパク質分解効果の発揮を含め、中毒プロセスの他のステップを全て行う。
【０１２５】
「等張化剤」は、等張性を提供するために製剤に含まれる低分子量賦形剤を意味する。等張化剤の非限定的な例としては、トレハロースまたはスクロースなどの二糖類、ソルビトールまたはマンニトールなどのポリアルコール、グルコースなどの単糖類、ならびに塩化ナトリウム、塩化カルシウム、および塩化カリウムなどの塩が挙げられる。
【０１２６】
「局部投与」は、ニューロトキシンの全身投与を除外する。言い換えれば、従来の治療的経皮方法とは異なり、ボツリヌス毒素の局部投与は、顕著な量、例えば、大部分のニューロトキシンが患者の循環系に入らない。
【０１２７】
「治療する」は、皺、痙縮、窪み、疼痛（例えば、頭痛）、膀胱過活動などの状態または障害の少なくとも１つの症状を、一時的に、または永続的に軽減する（またはなくす）ことを意味する。
【０１２８】
本明細書で使用される場合、「単位」または「Ｕ」という用語は、ＬＤ50用量、または細胞に基づく効力アッセイ（ＣＢＰＡ）によって決定される用量を指す。ＬＤ50用量は、クロストリジウム毒素、クロストリジウム毒素複合体または修飾されたクロストリジウム毒素を注射されたマウスの５０％が死滅した、クロストリジウム毒素活性成分、クロストリジウム毒素複合体または修飾されたクロストリジウム毒素の量であると定義される。ＣＢＰＡ用量は、米国特許第８，６１８，２６１号に記載されるように決定され、そのアッセイの詳細は、参照により本明細書に組み込まれる。一例として、１００単位バイアル中、ＢＯＴＯＸ（登録商標）の商品名で、アーバイン、カリフォルニアのＡｌｌｅｒｇａｎ，  Ｉｎｃ．から入手可能な市販のボツリヌス毒素Ａ型（精製されたニューロトキシン複合体）約５０ピコグラムは、マウスにおけるＬＤ50（すなわち、１単位）を有する。１単位のＢＯＴＯＸ（登録商標）は、約５０ピコグラム（約５６アトモル）のボツリヌス毒素Ａ型複合体を含有し、１単位（Ｕ）は、各１８〜２０グラムの体重の雌Ｓｗｉｓｓ  Ｗｅｂｓｔｅｒマウスに腹腔内注射したときのＬＤ50に対応する。
【０１２９】
「バリアント」は、標的細胞によって認識され、標的細胞によって内部移行され、標的細胞中のＳＮＡＲＥ（ＳＮＡＰ（可溶性ＮＳＦ接続タンパク質）受容体）タンパク質を触媒によって開裂する野生型ボツリヌス毒素に対して少なくとも１つのアミノ酸の置き換え、修飾、付加または欠失によって修飾された、クロストリジウムニューロトキシン、例えば、野生型ボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、またはＧを意味する。
【０１３０】
バリアントニューロトキシン構成要素の一例は、置換され、修飾され、欠失され、および／または付加された１つ以上のアミノ酸を有するボツリヌス毒素のバリアント軽鎖を含んでいてもよい。このバリアント軽鎖は、エキソサイトーシス、例えば、神経伝達物質小胞の放出を妨げる同じ能力またはより良好な能力を有していてもよい。さらに、バリアントの生物学的効果は、親化学物質と比較して、低い場合がある。例えば、あるアミノ酸配列が除去されたボツリヌス毒素Ａ型のバリアント軽鎖は、親（または天然）ボツリヌス毒素Ａ型軽鎖よりも短い生物学的持続性を有していてもよい。
【０１３１】
医薬組成物
本明細書で開示される医薬組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、重量平均分子量が約２．５ＭＤａ未満または約２．４ＭＤａ未満である非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、を含む。好ましい実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約２５０ｋＤａ〜約２．５ＭＤａの重量平均分子量を有する。別の実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約４．５ＭＤａ〜約８ＭＤａの重量平均分子量を有する。さらに他の実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約５００ｋＤａ〜５０００ｋＤａ、約５００ｋＤａ〜約２５００ｋＤａ未満、または約５００ｋＤａ〜約２０００ｋＤａの重量平均分子量を有する。一実施形態において、医薬組成物は、その塩を含め、架橋ヒアルロン酸を含まない。すなわち、医薬組成物は、架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない。
【０１３２】
組成物は、クロストリジウム毒素活性成分を含む組成物と、非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩および非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩ではない希釈剤を含む組成物とを混合することによって、または非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩と、クロストリジウム毒素活性成分および非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩ではない希釈剤を含む組成物とを混合することによって、またはクロストリジウム毒素活性成分、非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩、および希釈剤を一緒に混合することによって、調製することができる。
【０１３３】
第１の態様において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む（またはこれらからなるか、またはこれらから本質的になる）医薬組成物が記載される。組成物は、一実施形態において、固体組成物、例えば、使用前に再構成される凍結乾燥粉末であってもよい。別の実施形態において、組成物は、液体組成物であり、すなわち、組成物は、液体形態で製造され、保管される。組成物が、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を欠く組成物と比較して、クロストリジウム毒素活性成分の効果の持続時間の延長を示すことを示す試験が行われた。
【０１３４】
実施例１に記載される第１の試験において、モデルクロストリジウム毒素活性成分としてのボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、界面活性剤と、酸化防止剤と、を含む液体組成物が調製された。組成物は、異なる分子量および固有粘度を有するヒアルロン酸ナトリウム粉末と、二糖類、界面活性剤および酸化防止剤とを混合して、ヒアルロン酸を含有する組成物を形成し、次いで、ヒアルロン酸を含有する組成物にボツリヌス毒素溶液を混合し、種々の濃度のボツリヌス毒素を含むボツリヌス毒素−ヒアルロン酸製剤を調製することによって、調製することができた。表１は、各組成物中のヒアルロン酸の分子量または固有粘度を、組成物中の他の成分とともにまとめたものである。
【０１３５】
表２は、ボツリヌス毒素とヒアルロン酸組成物を含む組成物をまとめたものであり、さらに、ボツリヌス毒素を含むが、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない（任意のヒアルロン酸またはその塩を含まない）、いくつかの比較物である対照組成物中の成分をまとめたものである。
【表１】
2022500426.tif 000003
1略語：ＬＭＷ：低分子量、ＨＭＷ：高分子量、ＨＨＭＷ：非常に高分子量。
2粘度は、２５℃で、かつ約０．１秒の剪断速度で決定される（実施例１）。
3本明細書に記載されるように測定した重量平均ＭＷは、１３１６ｋＤａであった。
4本明細書に記載されるように測定した重量平均ＭＷは、１５６８ｋＤａであった。
【表２】
2022500426.tif 000004
【０１３６】
表２のボツリヌス毒素−ヒアルロン酸製剤を、効果の持続時間についてインビボで試験した。実施例２に記載されるように、試験製剤および対照製剤を、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した。ラットＤＡＳ（デジタル外転スコア）アッセイを使用して、製剤の有効性を評価し、ラットの麻痺は、０〜４までのスコア付けされるＤＡＳ応答によって評価され、４は、最大麻痺を表す。結果は、図１Ａ〜１Ｃに示される。
【０１３７】
図１Ａは、試験組成物および対照（比較物）組成物の注射後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳを示す。非架橋ヒアルロン酸を欠く対照組成物は、上の表２に示される希釈剤（２０ｍＭのヒスチジン、ｐＨ６、８％のトレハロース、４％のポロキサマー１８８、および０．２％のメチオニン）中の２８．２Ｕ／ｍＬ、５６．４Ｕ／ｍＬ、および９８．７Ｕ／ｍＬの濃度でボツリヌス毒素Ａ型（ＢｏＮＴ／Ａ）を含んでいた。これらの対照組成物をラットに注射して、それぞれ４．７Ｕ／ｋｇ（白色四角）、９．４Ｕ／ｋｇ（白色丸）、および１６．４Ｕ／ｋｇ（白色三角）のＢｏＮＴ／Ａ用量を得た。直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物は、１．２％のＨＡ（重量平均分子量が１５００ｋＤａ）で構成され、対照組成物と同じ希釈剤（２０ｍＭのヒスチジン、ｐＨ６、８％のトレハロース、４％のポロキサマー１８８、および０．２％のメチオニン）中に２８．２Ｕ／ｍＬおよび５６．４Ｕ／ｍＬでＢｏＮＴ／Ａを含んでいた。これらの組成物をラットに注射して、それぞれ４．７Ｕ／ｋｇ（黒色四角）および９．４Ｕ／ｋｇ（黒色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量を得た。図１Ａのデータは、直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物を用いて治療された動物におけるラットＤＡＳピーク応答および持続時間の増加によって実証されるように、直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物が、ボツリヌス毒素の効果の持続時間を改善したことを示す。直鎖非架橋ヒアルロン酸が組成物中に含まれる場合、およそ２倍の明らかな用量増加が提供された。
【０１３８】
図１Ｂは、より低い濃度のＢｏＮＴ／Ａを含む組成物についての結果を示す。試験組成物および対照組成物は、両方とも１７．９Ｕ／ｍＬの濃度を有しており、注射を介して２．９６Ｕ／ｋｇまで投与された。試験組成物（黒色ひし形）は、１．２重量％の直鎖非架橋ヒアルロン酸（重量平均分子量が１５００ｋＤａ）を含んでおり、一方、比較対照組成物（白色ひし形）は、直鎖非架橋ヒアルロン酸を含んでいなかった。比較物である対照組成物で治療された動物と比較して、直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物で治療された動物についてのＤＡＳスコアにおいて、応答の増加および効果の持続時間の延長が観察される。比較物である対照組成物で治療された動物と比較して、直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物で治療された動物について、持続時間（ラットＤＡＳスコアが１に戻るまでの時間と定義される）のおよそ２倍の増加が観察された。
【０１３９】
図１Ｃは、異なる量および異なる分子量の直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物のインビボ試験からのデータを示す。９．４Ｕ／ｋｇで投与した１つの比較物製剤（白色丸）を除き、ＢｏＮＴ／Ａを含む組成物を４．７Ｕ／ｋｇで投与した。試験組成物（上の表２）は、１．２％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ、黒色四角）、２％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ、黒色ひし形）、３％の非架橋ヒアルロン酸（ＬＭＷ、黒色丸）、および０．６％の非架橋ヒアルロン酸（ＨＨＭＷ、黒色の反転した三角）を含む組成物を含んでいた。比較物である対照組成物は、非架橋ヒアルロン酸を欠いており、４．７Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ（白色四角）または９．４Ｕ／ｋｇ（白色丸）で投与された。直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物は、対照組成物と比較して、より高いＤＡＳスコアから実証されるように、応答の増加および効果の持続時間の延長が提供され、ＤＡＳスコアが高いほど、時間が長くなる。効果の持続時間の延長は、直鎖非架橋ヒアルロン酸を含む組成物で治療された動物について、ＤＡＳスコアが１に戻るのに必要な時間がより長いことから明らかである。
【０１４０】
実施例３に記載される別の試験において、ボツリヌス毒素を含む組成物は、対照として、粉末ボツリヌス毒素（ＢＯＴＯＸ（登録商標））を等張性生理食塩水（０．９重量％塩化ナトリウム）で再構成することによって調製した。２０ｍＭのヒスチジン、ｐＨ６、８％のトレハロース、４％のポロキサマー１８８、および０．２％のメチオニン中に１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（ＭＷ  １５００ｋＤａ）をさらに含む試験組成物を同様に調製した。組成物の効果および効果の持続時間を、ＤＡＳアッセイを使用して試験し、結果を図２に示す。試験組成物および対照組成物は、両方とも５．１Ｕ／ｋｇで投与され、注射から約３日後に最大麻痺に達した。ピーク麻痺時に平均ＤＡＳが４０％増加することによって実証されるように、非架橋ヒアルロン酸を含む組成物（黒色四角）は、同じ用量で、より効果的であった。非架橋ヒアルロン酸を含む組成物（黒色四角）はまた、９日目に対照組成物（白色四角）がベースラインの１ＤＡＳに戻り、約１６日後のいつかに試験組成物（黒色四角）がベースラインの１ＤＡＳに戻ることによって実証されるように、効果のより長い持続時間を達成した。このことは、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含む組成物で提供される場合、同じ用量のボツリヌス毒素から、効果の持続時間のほぼ２倍の向上および効果の少なくとも約２５％の増加が提供されることに相当する。
【０１４１】
さらなる組成物を調製し、ＤＡＳアッセイを使用して、効果の持続時間および効果の程度について評価した。これらの組成物および試験は、図３〜図８を参照しつつ説明される。
【０１４２】
ＢＯＴＯＸ（登録商標）の商品名で販売されている市販のＢｏＮＴ／Ａに非架橋ヒアルロン酸を添加する効果を比較するために、試験を設計した。対照として種々のＢｏＮＴ／Ａ用量レベルで投薬するために、粉末ボツリヌス毒素（ＢＯＴＯＸ（登録商標））を、等張生理食塩水（０．９重量％の塩化ナトリウム）を用いて再構成した。粉末ボツリヌス毒素（ＢＯＴＯＸ（登録商標））を、生理食塩水を用いて再構成し、次いで、２０ｍＭヒスチジン、ｐＨ６、８％トレハロース、４％ポロキサマー１８８、および０．２％メチオニンと、１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ  ＭＷ）とを試験組成物として合わせた。対照および試験組成物を、２．８４Ｕ／ｋｇ、５．０６Ｕ／ｋｇおよび９Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量で、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用するＤＡＳ応答によって評価し、４は最大麻痺を表す。図３は、組成物を注入した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳを示し、各Ｎは、６匹のラット／用量で構成される独立した試験である。９Ｕ／ｋｇ（白色丸）、５．１Ｕ／ｋｇ（白色四角）、または２．８Ｕ／ｋｇ（白色三角）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与された、非架橋ヒアルロン酸を欠くボツリヌス毒素組成物は、９Ｕ／ｋｇ（黒色丸）、５．１Ｕ／ｋｇ（黒色四角）、または２．８Ｕ／ｋｇ（黒色三角）の同じＢｏＮＴ／Ａ用量で投与された、非架橋ヒアルロン酸またはその塩（１５００ｋＤａ）を含む組成物と比較して、麻痺という観点で有効性が低く、効果の持続時間が短かった。９Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量では、非架橋ヒアルロン酸を含む組成物は、２１日間の効果を提供し（効果の持続時間は、ＤＡＳスコアがスコア１に戻るまでの日数であると定義される）、一方、非架橋ヒアルロン酸を含まず、９Ｕ／ｋｇを投与された対照組成物は、１５．５日間の効果を提供した。したがって、一実施形態において、ボツリヌス毒素と非架橋ヒアルロン酸とを含む組成物は、同じ投与経路、同じ毒素用量または効力で投与される場合、非架橋ヒアルロン酸を含まないボツリヌス毒素組成物と比較して、少なくとも約３０％、３５％、または４０％まで効果の持続時間が改善する。
【０１４３】
２０ｍＭヒスチジン、ｐＨ６、８重量％トレハロース、４重量％界面活性剤（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  Ｐ−１８８）、および０．２重量％メチオニンの中にＢｏＮＴ／Ａを含む組成物、１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ  ＭＷ）を含む組成物、または非架橋ヒアルロン酸を含まない組成物を調製した。組成物を、２．８５Ｕ／ｋｇおよび９Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量で、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用するＤＡＳ応答によって評価し、４は最大麻痺を表す。図４は、組成物を注入した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳを示し、各Ｎは、６匹のラット／用量で構成される独立した試験である。非架橋ヒアルロン酸を含むボツリヌス毒素組成物は、改善された効果と、より長い効果持続時間を提供した。非架橋ヒアルロン酸を含み、２．８５Ｕ／ｋｇで投与された組成物（黒色三角）は、約１．６のピークＤＡＳを有する、非架橋ヒアルロン酸を含まない同じ用量での組成物（白色三角）と比較して、約２．５のピークＤＡＳを有していた。９Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量では、非架橋ヒアルロン酸を含む組成物（黒色丸）は、２４日間の効果を提供し（効果の持続時間は、ＤＡＳスコアがスコア１に戻るまでの日数であると定義される）、一方、非架橋ヒアルロン酸を含まず、９Ｕ／ｋｇを投与された対照組成物（白色丸）は、１４．５日間の効果を提供した。したがって、一実施形態において、ボツリヌス毒素と非架橋ヒアルロン酸とを含む組成物は、同じ投与経路、同じ毒素用量または効力で投与される場合、非架橋ヒアルロン酸を含まないボツリヌス毒素組成物と比較して、少なくとも約３０％、３５％、４０％または４５％まで効果の持続時間が改善する。
【０１４４】
別の試験は、２．９６Ｕ／ｋｇ〜９．４Ｕ／ｋｇの範囲の毒素用量レベルで、効果の有効性および持続時間を評価した。ＢｏＮＴ／Ａ、２０ｍＭヒスチジン、ｐＨ６、８重量％トレハロース、４重量％界面活性剤（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  Ｐ−１８８）、および０．２重量％メチオニンを有し、１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ  ＭＷ）を含む組成物、または非架橋ヒアルロン酸を含まない組成物を調製した。組成物を、２．９６Ｕ／ｋｇ、４．７０Ｕ／ｋｇおよび９．４０Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量で、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用するＤＡＳ応答によって評価し、４は最大麻痺を表す。図５は、ラットに、非架橋ヒアルロン酸を欠き、２．９６Ｕ／ｋｇ（白色三角）、４．７０Ｕ／ｋｇ（白色四角）、または９．４Ｕ／ｋｇ（白色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与されたボツリヌス毒素対照組成物、または２．９６Ｕ／ｋｇ（黒色三角）、４．７０Ｕ／ｋｇ（黒色四角）、または９．４Ｕ／ｋｇ（黒色丸）のＢｏＮＴ／Ａ用量で投与された１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ）を含む組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフである。非架橋ヒアルロン酸を含む組成物は、より大きな効果に加えて、より長い効果持続時間を提供した。したがって、１．５倍、１．７倍または２倍長い効果持続時間を提供するボツリヌス毒素と非架橋ヒアルロン酸とを含む組成物が提供される。他の実施形態において、１．２倍、１．３倍または１．４倍長い効果持続時間を提供するボツリヌス毒素と非架橋ヒアルロン酸とを含む組成物が提供される。
【０１４５】
非架橋ヒアルロン酸の分子量または固有粘度に起因する効果の持続時間および効果の程度に対する影響は、１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸１５００ｋＤａ平均ＭＷまたは２．３重量％の７００ｋＤａ平均ＭＷを含むＢｏＮＴ／Ａ組成物を調製することによって評価された。この試験における組成物は、さらに、２０ｍＭヒスチジン、ｐＨ６、８重量％トレハロース、４重量％界面活性剤（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  Ｐ１８８）、および０．２重量％メチオニンを含んでいた。組成物を、９．４Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量で、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用するＤＡＳ応答によって評価し、４は最大麻痺を表す。図６は、ラットに注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳを示す。非架橋ヒアルロン酸を含まない組成物（対照、白色四角）は、１５日間の効果を提供し（ＤＡＳ＝１に戻ると定義される）、一方、１．２重量％の１５００ｋＤａ平均ＭＷを有する非架橋ヒアルロン酸（黒色丸）または２．３重量％の７００ｋＤａ平均ＭＷ（黒色三角）を含む組成物は、それぞれ、２２日および２４日の効果持続時間を達成した。これと一致して、非架橋ヒアルロン酸を含む組成物は、非架橋ヒアルロン酸を含まない組成物と比較して、ボツリヌス毒素の効果持続時間が約１．５倍〜約２倍延長される。
【０１４６】
異なる濃度の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ平均ＭＷを有する）を含む組成物を調製した。この試験において、組成物は、ＢｏＮＴ／Ａ、２０ｍＭヒスチジン、ｐＨ６、８重量％トレハロース、４重量％界面活性剤（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  Ｐ１８８）、０．２重量％メチオニンを含み、非架橋ヒアルロン酸を含まない（対照、白色四角）か、または０．６重量％（白色丸）、１．２重量％（白色三角）、１．６重量％（黒色丸）、または２．０重量％（黒色三角）の非架橋ヒアルロン酸を含んでいた。組成物を、９．４Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量で、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用するＤＡＳ応答によって評価し、４は最大麻痺を表す。図７は、ラットに、９．４Ｕ／ｋｇで投与されたこれらのボツリヌス毒素組成物を注射した後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフである。０．６〜２．０重量％の非架橋ヒアルロン酸を含む組成物が、全て、非架橋ヒアルロン酸を含まない対照組成物と比較して、より長い効果持続時間を提供したため、非架橋ヒアルロン酸によって提供される、より長い効果持続時間は、非架橋ヒアルロン酸の割合に依存しないことが観察される。組成物の粘度を剪断速度０．１／秒、２５℃で測定し、１０Ｐａ−ｓ〜５８０Ｐａ−ｓの範囲であることがわかった。したがって、一実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩とボツリヌス毒素とを含み、約１〜１０００Ｐａ−ｓまたは約１〜７５０Ｐａ−ｓの粘度を有する組成物は、同じ毒素用量および同じ投与経路で投与された非架橋ヒアルロン酸を含まない同様の組成物よりも５０％、６０％、７５％、８０％、または１００％大きい効果持続時間を提供する。
【０１４７】
別の試験において、ＢｏＮＴ／Ａと１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸（１５００ｋＤａ  ＭＷ）とを含む組成物を、種々の希釈剤から調製した。以下の表Ａは、組成物をまとめたものである。
【表３】
2022500426.tif 000005
【０１４８】
表Ａの組成物を、９．４Ｕ／ｋｇのＢｏＮＴ／Ａ用量でラットの前脛骨筋に筋肉内注射した。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用してＤＡＳ応答によって評価し、４は、最大麻痺を表す。図８は、ボツリヌス毒素組成物のラットへの注射後の時間（日数）の関数としての平均ＤＡＳのグラフであり、表Ａに割り当てられた製剤番号は、以下の記号に対応している。製剤１（対照、非架橋ヒアルロン酸なし）、白色四角；製剤２、白色三角；製剤３、黒色四角；製剤４、黒色丸；製剤５、黒色三角；製剤６、反転した三角；製剤７、黒色ひし形。非架橋ヒアルロン酸によって提供される効果のより長い持続時間が、全ての種々のビヒクルに対して達成されることが観察された。製剤５（黒色三角）をｐＨ５に調整し（全ての他の製剤はｐＨ６であった）、最も長い効果の持続時間を提供した。したがって、一実施形態において、ｐＨが約４．７０〜６．５０、４．７５〜６．５０、４．８０〜６．５０、４．８５〜６．５０、４．９０〜６．５０、４．９５〜６．５０、４．９８〜６．５０、４．９９〜６．５０、５．００〜６．５０、４．７０〜６．３０、４．７５〜６．３０、４．８０〜６．３０，４．８５〜６．３０、４．９０〜６．３０、４．９５〜６．３０、４．９８〜６．３０、４．９９〜６．３０、５．００〜６．３０、４．７０〜６．２０、４．７５〜６．２０、４．８０〜６．２０，４．８５〜６．２０、４．９０〜６．２０、４．９５〜６．２０、４．９８〜６．２０、４．９９〜６．２０、５．００〜６．２０、４．７０〜６．１０、４．７５〜６．１０、４．８０〜６．１０，４．８５〜６．１０、４．９０〜６．１０、４．９５〜６．１０、４．９８〜６．１０、４．９９〜６．１０、５．００〜６．１０、または５．００〜６．００である、非架橋ヒアルロン酸またはその塩とボツリヌス毒素とを含む組成物が想定される。選択されたｐＨでのこれらの組成物は、同じ毒素用量および同じ投与経路で投与された非架橋ヒアルロン酸を含まない同様の組成物よりも５０％、６０％、７５％、８０％または１００％長い効果の持続時間を提供する。
【０１４９】
したがって、クロストリジウム毒素活性成分（例えば、ボツリヌス毒素）と、約１．２重量％の約４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、例えば、４５０ｋＤａ〜１．６ＭＤａ  ＭＤａ（さらに例えば、約１．４〜１．６ＭＤａ）の重量平均分子量を有する非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースと、ポロキサマーと、メチオニンと、を含む医薬組成物が提供される。医薬組成物は、アルブミンを含まなくてもよく、架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない。かかる医薬組成物は、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない医薬組成物と比較して、クロストリジウム毒素活性成分の有効性および／または持続時間を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、および１００％増加させることができる。
【０１５０】
一実施形態において、本明細書に開示される医薬組成物は、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない医薬組成物と比較して、クロストリジウム毒素活性成分の有効性および／または持続時間を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、および１００％増加させる。
【０１５１】
別の実施形態において、本明細書に開示される医薬組成物は、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含む組成物と、ボツリヌス毒素、二糖類、界面活性剤および酸化防止剤を含む凍結乾燥製剤とを混合することによって、またはボツリヌス毒素を含む組成物と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含む組成物、二糖類、界面活性剤および酸化防止剤を含む凍結乾燥製剤とを混合することによって、調製することができる。一実施形態において、凍結乾燥組成物は、ボツリヌス毒素、および／または非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩、トレハロース、ポリソルベートもしくはポロキサマー、ならびにメチオニンもしくはＮＡＣを含んでいてもよい。別の実施形態において、凍結乾燥組成物は、ボツリヌス毒素、および／または非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩、二糖類、ポロキサマーおよびポリソルベートから選択される界面活性剤、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤を含んでいてもよい。別の実施形態において、凍結乾燥組成物は、ボツリヌス毒素、および／または非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩、トレハロース、ポロキサマー界面活性剤（例えば、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ（登録商標）Ｐ−１８８）および安定化酸化防止剤としてのメチオニンを含んでいてもよい。表３は、例示的な凍結乾燥製剤中の構成要素を列挙する。
【表４】
2022500426.tif 000006
各製剤はさらに、クロストリジウム毒素活性成分および／または非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩を含む。Ｔｒｅｈ＝トレハロース、Ｐ１８８＝ポロキサマーＰ１８８、Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン、ＮＡＣ＝Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン。
【０１５２】
別の実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、等張化剤と、界面活性剤と、酸化防止剤とで構成される液体組成物を調製することができる。液体溶液は、非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩と、クロストリジウム毒素活性成分を含む液体溶液とを、モデルとしてのボツリヌス毒素、二糖類等張化剤、ポロキサマー界面活性剤、および酸化防止剤を使用して混合することによって、またはクロストリジウム毒素活性成分を含む組成物と、非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩、二糖類等張化剤、ポロキサマー界面活性剤、および酸化防止剤を含む液体組成物とを、モデルとしてのボツリヌス毒素を使用して混合することによって、調製することができる。二糖類等張化剤は、トレハロースであってもよく、ポロキサマー界面活性剤は、ポロキサマーＰ１８８であってもよい。３種類の例示的な製剤を表４に示し、各々が同量のボツリヌス毒素（１００単位／ｍＬ）および非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩（０．２〜１０ｗ／ｗ％）、８ｗ／ｗ％のトレハロース、および４ｗ／ｗ％のポロキサマーＰ１８８をヒスチジン緩衝液中に含む。製剤１０は、酸化防止剤を含まず、製剤１１は、ＮＡＣを含有しており、製剤１２は、Ｌ−メチオニンを含有していた。
【表５】
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【０１５３】
別の実施形態において、液体組成物は、ｐＨ６．０のヒスチジン緩衝液中、１００Ｕ／ｍＬのボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、８ｗ／ｗ％のトレハロースと、４ｗ／ｗ％のポロキサマーＰ１８８とを用いて調製することができる。各製剤は、以下の表５に記載されるように、異なる酸化防止剤または酸化防止剤の組み合わせを含む。試験した酸化防止剤には、ＮＡＣ、Ｌ−メチオニン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−グルタチオン、亜硫酸ナトリウム、没食子酸プロピル、およびＥＤＴＡナトリウム塩が含まれていた。
【表６】
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1各製剤は、１００Ｕ／ｍＬのボツリヌス毒素と、０．２〜１０ｗ／ｗ％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、８ｗ／ｗ％のトレハロースと、２０ｍＭヒスチジン緩衝液、ｐＨ６．０中の４ｗ／ｗ％のポロキサマーＰ１８８と、特定の酸化防止剤と、を含有する。
2ＮＡＣ＝Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン、Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン、ＴＲＰ＝Ｌ−トリプトファン、ＧＳＨ＝Ｌ−グルタチオン、ＮａＳｕｌ＝亜硫酸ナトリウム、ＰｒｐＧａｌ＝没食子酸プロピル、ＥＤＴＡ＝エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩。
【０１５４】
したがって、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、界面活性剤と、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む、液体または溶液形態での組成物が想定される。さらなる実施形態において、組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、界面活性剤と、（ｉ）メチオニンから選択される酸化防止剤と、（ｉｉ）ＮＡＣ、およびＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体から選択されるキレート化剤と、を含む、液体または溶液形態である。
【０１５５】
別の実施形態において、液体組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、等張化剤と、界面活性剤と、犠牲酸化防止剤、キレート化剤酸化防止剤、連鎖停止剤、酸化防止剤、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸化防止剤と、を含む。
【０１５６】
別の実施形態において、液体組成物は、表６に示されるように、ｐＨ６．０のヒスチジン緩衝液中、１００Ｕ／ｍＬのボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、４ｗ／ｗ％のポロキサマーＰ１８８と、０．２ｗ／ｗ％のメチオニンと、８ｗ／ｗ％のトレハロースまたはスクロースを用いて調製することができる。
【表７】
2022500426.tif 000009
*各製剤は、ヒスチジン緩衝液中、１００Ｕ／ｍＬのボツリヌス毒素と、０．２〜１０ｗ／ｗ％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、４ｗ／ｗ％のポロキサマーＰ１８８と、０．２ｗ／ｗ％のメチオニンとを含んでいた。
【０１５７】
一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分（例えば、ボツリヌス毒素）と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースと、ポロキサマー界面活性剤と、メチオニンとで構成される液体組成物が想定される。
【０１５８】
別の実施形態において、ｐＨ６．０の２０ｍＭヒスチジン緩衝液中、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーＰ１８８（４ｗ／ｗ％）またはポリソルベート（ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０、０．０４ｗ／ｗ％）と、トレハロース（８ｗ／ｗ％）と、メチオニン（０．２ｗ／ｗ％）とを含む液体組成物を調製することができる（表７）。ポロキサマーＰ１８８を含む組成物は、製剤番号３０として特定され、ポリソルベートを含む製剤は、製剤番号３２として特定される。
【表８】
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*各製剤は、ヒスチジン緩衝液中、１００Ｕ／ｍＬのボツリヌス毒素と、０．２〜１０ｗ／ｗ％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、８ｗ／ｗ％のトレハロースと、０．２ｗ／ｗ％のメチオニンとを含んでいる。
【０１５９】
一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分（例えば、ボツリヌス毒素）と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースと、ポロキサマー界面活性剤と、メチオニンとで構成される液体組成物が提供される。
【０１６０】
別の実施形態において、液体組成物は、モデルクロストリジウム毒素活性成分としてのボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩とを用いて調製することができる。組成物は、ポロキサマー界面活性剤が存在した状態または存在しない状態、トレハロースが存在した状態または存在しない状態、およびメチオニンが存在した状態または存在しない状態で調製することができる。組成物の詳細を表８に示す。
【表９】
2022500426.tif 000011
*各製剤は、ｐＨ６．０の２０ｍＭヒスチジン緩衝液中にあり、非架橋ヒアルロン酸またはその塩の濃度は、０．２〜１０ｗ／ｗ％である。
【０１６１】
一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分（例えば、ボツリヌス毒素）と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマー界面活性剤と、メチオニンなどの酸化防止剤とで構成される液体組成物が想定される。別の実施形態において、二糖類も含まれる。
【０１６２】
別の実施形態において、液体組成物は、モデルクロストリジウム毒素活性成分としてのボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩とを用いて調製することができる。組成物は、ポロキサマー界面活性剤を含む状態、またはポリソルベートを含む状態で、二糖類が存在した状態または存在しない状態で調製することができる。全ての製剤はメチオニンを含む。組成物の詳細を表９に示す。
【表１０】
2022500426.tif 000012
1全ての製剤は、１００Ｕ／ｍＬのボツリヌス毒素と、０．２〜１０ｗ／ｗ％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、を含む。Ｔｒｅｈ＝トレハロース、Ｓｕｃ＝スクロース、Ｐ−１８８＝ポロキサマーＰ１８８、ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０＝ポリソルベート、Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン、2緩衝液＝２０ｍＭのＨｉｓ、ｐＨ６．０。
【０１６３】
一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分（例えば、ボツリヌス毒素）と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーまたはポリソルベート界面活性剤と、トレハロースまたはスクロースと、メチオニンなどの酸化防止剤とで構成される液体組成物が想定される。
別の実施形態において、等張化剤を含まない液体組成物を調製した。ボツリヌス毒素を、モデルクロストリジウム毒素活性成分として使用した。組成物を、ポロキサマー界面活性剤またはポリソルベート界面活性剤のいずれかを用いて、酸化防止剤としてメチオニンを用いて調製した。組成物の詳細を表１０に示す。
【表１１】
2022500426.tif 000013
*両方の製剤は、ｐＨ６．０の２０ｍＭヒスチジン緩衝液中にあり、０．２〜１０ｗ／ｗ％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩をさらに含有する。Ｐ−１８８＝ポロキサマーＰ１８８、Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン
【０１６４】
別の実施形態において、液体組成物は、ｐＨ６．０の２０ｍＭヒスチジン緩衝液中、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸もしくはその塩と、ポロキサマーＰ１８８（４％ｗ／ｗまたは０．６％ｗ／ｗ）と、トレハロース（２％ｗ／ｗまたは８％ｗ／ｗ）と、酸化防止剤−（ｉ）ＥＤＴＡおよびＮＡＣ（それぞれ、０．０３％ｗ／ｗおよび０．２％ｗ／ｗ）、または（ｉｉ）メチオニン（０．２％ｗ／ｗ）とを含む液体組成物を調製することができる。各製剤は、バイアルあたり３０〜２００Ｕのボツリヌス毒素を含んでいた。組成物の概要を表１１に記載する。
【表１２】
2022500426.tif 000014
全ての製剤は、０．２〜１０ｗ／ｗ％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩をさらに含む。
【０１６５】
したがって、一実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外しており、別の実施形態において、酸化防止剤がメチオニンである場合、組成物は、ポリソルベートを除外している。
【０１６６】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。一実施形態において、組成物は、等張化剤を除外している。
【０１６７】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、ポロキサマーと、メチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。
【０１６８】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、１〜１５重量％の量の二糖類等張化剤と、０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、０．０５〜５重量％の量の酸化防止剤と、を含む。別の実施形態において、組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、１〜１５重量％の量のトレハロースと、０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、０．０５〜５重量％の量のメチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。別の実施形態において、液体医薬組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、２〜１５重量％または１〜１０重量％の量のトレハロースと、０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、０．０５〜５重量％の量のメチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。
【０１６９】
別の実施形態において、液体医薬組成物が想定される。組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤と、ポロキサマーと、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミンを除外している。
【０１７０】
前述の実施形態のうちのいずれかにおいて、組成物が、いくつかの実施形態において、エマルションではなく、および／または両親媒性物質を含むナノ粒子を除外していることが想定される。
【０１７１】
凍結乾燥組成物を調製することができる。調製された組成物は、モデルクロストリジウム毒素としてのボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、界面活性剤と、酸化防止剤としてのメチオニンと、を含んでいた。製剤を凍結乾燥し、−２０℃または４０℃で約２週間保存することができる。固体組成物を表１２に示す。
【表１３】
2022500426.tif 000015
*各製剤は、２００Ｕ／バイアルのＢｏＮＴ／Ａと、０．２〜１０ｗ／ｗ％の非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、を含み、ｐＨ６．０の２０ｍＭヒスチジン緩衝液中にある。
【０１７２】
一実施形態において、凍結乾燥組成物が提供され、この組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーと、メチオニンと、トレハロースと、を含む。
【０１７３】
一実施形態において、凍結乾燥組成物が提供され、この組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、ポロキサマーと、メチオニンと、トレハロースと、を含む。
【０１７４】
一実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤および／または凍結乾燥保護剤と、ポロキサマー、ポリソルベート、およびこれらの組み合わせから選択される界面活性剤と、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。いくつかの実施形態において、固体組成物は、凍結乾燥保護剤を含む。いくつかの実施形態において、凍結乾燥保護剤は、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、またはこれらの組み合わせを含む。特定の実施形態において、凍結乾燥組成物は、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤を用いて再構成される。少なくとも一実施形態において、凍結乾燥組成物は、患者への投与前にＮａＣｌを含む再構成ビヒクルを用いて再構成される。少なくとも一実施形態において、ＮａＣｌは、再構成ビヒクル中に０．９％（ｗ／ｗ）の量で存在する。他の実施形態において、ＫＣｌは、張度調整に好適な量で、組成物中に含まれる。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。
【０１７５】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースまたはスクロースと、ポロキサマーと、メチオニンと、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。一実施形態において、凍結乾燥医薬組成物は、クロストリジウム毒素活性成分としてのボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、トレハロースと、ポロキサマーと、メチオニンと、を含む。
【０１７６】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、１〜１５重量％の量のトレハロースと、０．５〜８重量％の量のポロキサマーと、０．０５〜５重量％の量のメチオニンと、を含む。別の実施形態において、組成物は、クロストリジウム毒素活性成分（例えば、ボツリヌス毒素）と、８重量％のトレハロースと、４重量％のポロキサマーと、０．２重量％のメチオニンと、を含む。一実施形態において、ボツリヌス毒素は、約２００単位の量で存在する。別の実施形態において、ボツリヌス毒素は、約５０単位の量で存在する。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。
【０１７７】
別の実施形態において、固体または凍結乾燥医薬組成物が想定される。組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、二糖類と、ポロキサマーと、メチオニン、ＮＡＣ、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、これらの類似体、およびこれらの組み合わせから選択される酸化防止剤と、を含む。一実施形態において、組成物は、アルブミン、ヒドロキシアルキルデンプン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン酸、アスパラギン、ポリアルコール、グリシン、および／またはポリビニルピロリドンを除外している。
【０１７８】
別の実施形態において、凍結乾燥組成物は、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩と、等張化剤および／または凍結乾燥保護剤と、界面活性剤と、犠牲酸化防止剤、キレート化剤酸化防止剤、連鎖停止剤、酸化防止剤、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸化防止剤と、を含む。いくつかの実施形態において、凍結乾燥クロストリジウム医薬組成物は、凍結乾燥保護剤を含む。いくつかの実施形態において、凍結乾燥保護剤は、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、またはこれらの組み合わせを含む。
【０１７９】
固体または液体組成物の前述の実施形態のいずれかにおいて、これらの成分、ポリビニルピロリドン、ポリプロピレングリコールおよびポリエチレングリコールのジブロックコポリマー、および／またはイノシトール、ラクチロール、イソマルト、キシリトール、エリスリトールなどのポリアルコールのうちの１つ以上が、任意の組み合わせで、除外されることが想定される。
【０１８０】
一実施形態において、本明細書で開示される液体組成物は、患者への投与前に、非架橋ヒアルロン酸ナトリウム粉末と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まない凍結乾燥製剤（例えば、上に開示した凍結乾燥製剤のいずれかであるが、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含まないもの）とを、ＮａＣｌまたはＫＣｌを含む再構成ビヒクルで再構成することによって、調製することができる。少なくとも一実施形態において、ＮａＣｌまたはＫＣｌは、再構成ビヒクル中に０．９％（ｗ／ｗ）の量で存在する。
【０１８１】
固体または液体組成物の前述の実施形態のいずれかにおいて、非架橋ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量が、約４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、例えば、４５０ｋＤａ〜１．６ＭＤａ、例えば約１．５８ＭＤａであってもよいことが想定される。
【０１８２】
固体または液体組成物の前述の実施形態のいずれかにおいて、非架橋ヒアルロン酸またはその塩の濃度が、約０．２〜１０重量％、０．２〜９重量％、０．２〜８重量％、０．２〜６重量％、０．３〜１０重量％、０．３〜９重量％、０．３〜６重量％、０．３〜５重量％、０．４〜５重量％、０．５〜５重量％、０．５〜２．５重量％、０．５〜２重量％、０．７５〜２重量％、１〜２重量％であることが想定される。他の実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩の濃度は、およそ以下の値、少なくともおよそ以下の値であるか、またはおよそ以下の値のいずれかの間である：０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、または６重量％。
【０１８３】
液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、医薬組成物の粘度が、２５℃、０．１／秒の剪断速度で、約０．０１Ｐａ−Ｓ〜約０．２Ｐａ−ｓ（約１０ｃｐｓ〜約２００ｃｐｓ）であることが想定される。一実施形態において、組成物は、２５℃、０．１／秒の剪断速度で、約５００Ｐａ−ｓ未満の粘度を有する。他の実施形態において、組成物は、２５℃、０．１／秒の剪断速度で、約４７５Ｐａ−ｓ、４５０Ｐａ−ｓ、４００Ｐａ−ｓ、３５０Ｐａ−ｓ、３００Ｐａ−ｓ、２５０Ｐａ−ｓ、２２５Ｐａ−ｓ、２００Ｐａ−ｓ、１７５Ｐａ−ｓ、１５０Ｐａ−ｓ、１２５Ｐａ−ｓまたは１１０Ｐａ−ｓ未満の粘度を有する。他の実施形態において、組成物は、２５℃、０．１／秒の剪断速度で、約１〜５００Ｐａ−ｓ、２〜５００Ｐａ−ｓ、５〜５００Ｐａ−ｓ、１０〜５００Ｐａ−ｓ、２０〜５００Ｐａ−ｓ、３０〜５００Ｐａ−ｓ、５０〜５００Ｐａ−ｓ、７５〜５００Ｐａ−ｓ、８０〜５００Ｐａ−ｓ、９０〜５００Ｐａ−ｓ、１０〜４００Ｐａ−ｓ、２０〜４００Ｐａ−ｓ、３０〜４００Ｐａ−ｓ、５０〜４００Ｐａ−ｓ、７５〜４００Ｐａ−ｓ、８０〜４００Ｐａ−ｓ、９０〜４００Ｐａ−ｓ、１０〜３００Ｐａ−ｓ、２０〜３００Ｐａ−ｓ、３０〜３００Ｐａ−ｓ、５０〜３００Ｐａ−ｓ、７５〜３００Ｐａ−ｓ、８０〜３００Ｐａ−ｓ、９０〜３００Ｐａ−ｓ、１０〜２５０Ｐａ−ｓ、２０〜２５０Ｐａ−ｓ、３０〜２５０Ｐａ−ｓ、５０〜２５０Ｐａ−ｓ、７５〜２５０Ｐａ−ｓ、８０〜２５０Ｐａ−ｓ、９０〜２５０Ｐａ−ｓ、１０〜２００Ｐａ−ｓ、２０〜２００Ｐａ−ｓ、３０〜２００Ｐａ−ｓ、５０〜２００Ｐａ−ｓ、７５〜２００Ｐａ−ｓ、８０〜２００Ｐａ−ｓ、９０〜２００Ｐａ−ｓ、１０〜１５０Ｐａ−ｓ、２０〜１５０Ｐａ−ｓ、３０〜１５０Ｐａ−ｓ、５０〜１５０Ｐａ−ｓ、７５〜１５０Ｐａ−ｓ、８０〜１５０Ｐａ−ｓ、９０〜１５０Ｐａ−ｓの粘度を有する。他の実施形態において、粘度は、およそ以下の値、少なくともおよそ以下の値であるか、またはおよそ以下の値のいずれかの間である：実施例１に記載されるように測定すると、２５℃、０．１／秒の剪断速度で、１０Ｐａ−ｓ、１５Ｐａ−ｓ、２０Ｐａ−ｓ、２５Ｐａ−ｓ、３０Ｐａ−ｓ、４０Ｐａ−ｓ、４５Ｐａ−ｓ、５０Ｐａ−ｓ、５５Ｐａ−ｓ、６０Ｐａ−ｓ、６５Ｐａ−ｓ、７０Ｐａ−ｓ、７５Ｐａ−ｓ、８０Ｐａ−ｓ、８５Ｐａ−ｓ、９０Ｐａ−ｓ、９５Ｐａ−ｓ、１００Ｐａ−ｓ、１１０Ｐａ−ｓ、１２５Ｐａ−ｓ、１５０Ｐａ−ｓ、１７５Ｐａ−ｓ、２００Ｐａ−ｓ、２２５Ｐａ−ｓ、２５０Ｐａ−ｓ、２７５Ｐａ−ｓ、３００Ｐａ−ｓ、３２５Ｐａ−ｓ、３５０Ｐａ−ｓ、３７５Ｐａ−ｓ、４００Ｐａ−ｓ、４２５Ｐａ−ｓ、４５０Ｐａ−ｓ、４７５Ｐａ−ｓ、５００Ｐａ−ｓ、５５０Ｐａ−ｓ、６００Ｐａ−ｓ、６５０Ｐａ−ｓ、７００Ｐａ−ｓ、８００Ｐａ−ｓ、９００Ｐａ−ｓ、１０００Ｐａ−ｓ。
【０１８４】
液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、組成物が、非架橋ヒアルロン酸またはその塩１ミリグラムあたり１０単位まで、例えば、６単位までのクロストリジウム毒素を含んでいてもよいことが想定される。
【０１８５】
液体組成物の前述の態様／実施形態のいずれかにおいて、クロストリジウム毒素の濃度が、約０．２〜２．５ｎｇ／ｍＬ、例えば、およそ以下の値、以下の値より上の間、または少なくともおよそ以下の値であってもよいことが想定される：０．２、０．４、０．６、０．８、１．０、１．２、１．４、１．５、１．６、１．８、２．０、２．１、２．２、２．４、２．５、３．０、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５または１０、１２、または１５ｎｇ／ｍＬ。別の実施形態において、本明細書に記載の固体または液体組成物のいずれかにおけるクロストリジウム毒素の濃度が、約１０Ｕ／ｍＬ〜約２００Ｕ／ｍＬ、例えば、およそ以下の値、以下の値より上の間、または少なくともおよそ以下の値であってもよいことが想定される：１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７５、９０、１００、１１０、１２５、１３５、１５０、１６０、１７５、１９０、または２００Ｕ／ｍＬ。
【０１８６】
固体または液体組成物の前述の実施形態のいずれかにおいて、組成物が、クロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩および希釈剤を含む組成物とを混合することによって調製することができることが想定される。したがって、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含み、クロストリジウム毒素活性成分を含まない以外は上に開示した固体または液体組成物のいずれかと同一である組成物も提供される。
【０１８７】
医薬組成物の構成要素
本発明の医薬組成物は、クロストリジウム毒素またはクロストリジウム毒素活性成分と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩、例えば、約４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、例えば、４５０ｋＤａ〜１．６ＭＤａおよび約１．４〜１．６ＭＤａを含む。当業者は、本明細書の記載がクロストリジウム毒素活性成分を指すことを理解するであろうが、クロストリジウム毒素は、本明細書に記載の組成物にも使用され得る。したがって、クロストリジウム毒素活性成分という用語が使用されるが、クロストリジウム毒素が同様に想定されることを理解されたい。一実施形態において、治療有効濃度のクロストリジウム毒素活性成分が組成物中に存在する。一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分は、治療される滋養物に関連する症状を、例えば、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％低減する。この実施形態の他の態様において、治療有効濃度のクロストリジウム毒素活性成分は、治療される滋養物に関連する症状を、例えば、最大で１０％、最大で２０％、最大で３０％、最大で４０％、最大で５０％、最大で６０％、最大で７０％、最大で８０％、最大で９０％、または最大で１００％低減する。
【０１８８】
任意の量のクロストリジウム毒素活性成分が、本明細書で開示されるクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化する際に添加されてもよく、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分は、回収可能であることが想定される。この実施形態の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、少なくとも０．１Ｕ／ｍｌ、少なくとも１．０Ｕ／ｍｌ、少なくとも１０Ｕ／ｍｌ、少なくとも５０Ｕ／ｍｌ、少なくとも１００Ｕ／ｍｌ、少なくとも２００Ｕ／ｍｌ、または少なくとも１０００Ｕ／ｍｌである。この実施形態の他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、最大で０．１Ｕ／ｍｌ、最大で１．０Ｕ／ｍｌ、最大で１０Ｕ／ｍｌ、最大で５０Ｕ／ｍｌ、最大で１００Ｕ／ｍｌ、最大で２００Ｕ／ｍｌ、または最大で１０００Ｕ／ｍｌである。この実施形態のさらに他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約０．１Ｕ／ｍｌ〜約１０００Ｕ／ｍｌ、または約１．０Ｕ／ｍｌ〜約１０００Ｕ／ｍｌである。この実施形態のさらに他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約０．００１Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌ，約０．０１Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌ，約０．１Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌ、または約１．０Ｕ／ｍｌ〜約１００Ｕ／ｍｌである。
【０１８９】
この実施形態の他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、少なくとも１．０ｐｇ、少なくとも１０ｐｇ、少なくとも１００ｐｇ、少なくとも１．０ｎｇ、少なくとも１０ｎｇ、少なくとも１００ｎｇ、少なくとも１．０μｇ、少なくとも１０μｇ、少なくとも１００μｇ、または少なくとも１．０ｍｇである。この実施形態のさらに他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、最大で１．０ｐｇ、最大で１０ｐｇ、最大で１００ｐｇ、最大で１．０ｎｇ、最大で１０ｎｇ、最大で１００ｎｇ、最大で１．０μｇ、最大で１０μｇ、最大で１００μｇ、または最大で１．０ｍｇである。この実施形態のさらに他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約１０μｇ、約１０ｐｇ〜約１０μｇ、約１００ｐｇ〜約１０μｇ、約１．０ｎｇ〜約１０μｇ、約１０ｎｇ〜約１０μｇ、または約１００ｎｇ〜約１０μｇである。この実施形態のさらに他の態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約１．０μｇ、約１０ｐｇ〜約１．０μｇ、約１００ｐｇ〜約１．０μｇ、約１．０ｎｇ〜約１．０μｇ、約１０ｎｇ〜約１．０μｇ、または約１００ｎｇ〜約１．０μｇである。この実施形態のさらなる態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約５．０μｇ、約１０ｐｇ〜約５．０μｇ、約１００ｐｇ〜約５．０μｇ、約１．０ｎｇ〜約５．０μｇ、約１０ｎｇ〜約５．０μｇ、または約１００ｎｇ〜約５．０μｇである。この実施形態のさらなる態様において、製剤に添加されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、約１．０ｐｇ〜約１０μｇ、約１０ｐｇ〜約１０μｇ、約１００ｐｇ〜約１０μｇ、約１．０ｎｇ〜約１０μｇ、約１０ｎｇ〜約１０μｇ、または約１００ｎｇ〜約１０μｇである。
【０１９０】
この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、ＢｏＮＴ／Ａ、ＢｏＮＴ／Ｂ、ＢｏＮＴ／Ｃ1、ＢｏＮＴ／Ｄ、ＢｏＮＴ／Ｅ、ＢｏＮＴ／Ｆ、ＢｏＮＴ／Ｇ、モザイクＢｏＮＴ、例えば、ＢｏＮＴ／ＤＣ、ＴｅＮＴ、ＢａＮＴ、またはＢｕＮＴを含む。別の実施形態において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、クロストリジウム毒素としてクロストリジウム毒素バリアントを含む。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、天然に存在するクロストリジウム毒素活性成分バリアントまたは天然に存在しないクロストリジウム毒素バリアントを含む。この実施形態の他の態様において、クロストリジウム毒素医薬組成物は、ＢｏＮＴ／Ａバリアント、ＢｏＮＴ／Ｂバリアント、ＢｏＮＴ／Ｃ1バリアント、ＢｏＮＴ／Ｄバリアント、ＢｏＮＴ／Ｅバリアント、ＢｏＮＴ／Ｆバリアント、ＢｏＮＴ／Ｇバリアント、ＴｅＮＴバリアント、ＢａＮＴバリアント、またはＢｕＮＴバリアントを含み、バリアントは、天然に存在するバリアントまたは天然に存在しないバリアントのいずれかである。
【０１９１】
本発明の医薬組成物の態様は、一部には、クロストリジウム毒素活性成分としてのクロストリジウム毒素複合体を提供する。本明細書で使用される場合、「クロストリジウム毒素複合体」という用語は、クロストリジウム毒素と、会合したＮＡＰとを含む複合体、例えば、ボツリヌス（Ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）毒素複合体、テタヌス（Ｔｅｔａｎｕｓ）毒素複合体、バラティ（Ｂａｒａｔｉｉ）毒素複合体、およびブチリカム（Ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）毒素複合体を指す。クロストリジウム毒素複合体の非限定的な例としては、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍによって酸性されるもの、例えば、９００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ａ複合体、３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ａ複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｂ複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｃ１複合体、５００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｄ複合体、３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｅ複合体、および３００ｋＤａ  ＢｏＮＴ／Ｆ複合体が挙げられる。クロストリジウム毒素複合体は、Ｓｃｈａｎｔｚ（上記）（１９９２）、Ｈｕｉ  Ｘｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｉｍａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｆｒｅｅ  Ｓｙｓｔｅｍ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  ｆｏｒ  Ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ  ａ  Ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ  Ｔｏｘｉｎ、米国特許第７，３５４，７４０号に記載される方法を用いて精製することができ、それらの各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。クロストリジウム毒素複合体は、例えば、Ｌｉｓｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．（キャンベル、カリフォルニア）、Ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ポートンダウン、英国）、Ｗａｋｏ（大阪、日本）、およびＳｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（セントルイス、ミズーリ）から得ることができる。
【０１９２】
医薬組成物は、ほとんどの実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩を含む。ヒアルロン酸（ヒアルロナンとも呼ばれる）は、関節、結合組織および眼に見られる、天然に存在する多糖類である。ヒアルロン酸は、グルクロン酸およびＮアセチルグルコサミンの反復二量体単位で構成される長い非分岐多糖類であるグリコサミノグリカン（ムコ多糖類）である。米国特許第４，６３６，５２４号、同第４，７１３，４４８号、同第５，０９９，０１３号、および同第５，１４３，７２４号は、特定のヒアルロン酸、およびそれを作製するための方法を開示している。ヒアルロン酸の塩形態としては、例えば、ヒアルロン酸のナトリウム、カリウム、カルシウム形態（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム、ヒアルロン酸カリウム、ヒアルロン酸カルシウム）が挙げられる。
【０１９３】
本明細書に記載の試験において、以下の特性を有する非架橋ヒアルロン酸が使用された。
【表１４】
2022500426.tif 000016
【０１９４】
本明細書に記載の組成物における使用のための非架橋ヒアルロン酸またはその塩の重量平均分子量は、一般的に、約２．５ＭＤａ未満または約２．４ＭＤａ未満である。一実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約２５０ｋＤａ〜約２．４ＭＤａの重量平均分子量を有する。別の実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約４．６ＭＤａ〜約８ＭＤａの重量平均分子量を有する。さらに他の実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約３００ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、３００ｋＤａ〜１．５ＭＤａ、３００ｋＤａ〜１．２５ＭＤａ、３００ｋＤａ〜１．０ＭＤａ、３００ｋＤａ〜９０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜８０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜７０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜６０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜５０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜４０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜３０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜２０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、４００ｋＤａ〜１．５ＭＤａ、４００ｋＤａ〜１．２５ＭＤａ、４００ｋＤａ〜１．０ＭＤａ、４００ｋＤａ〜９０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜８０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜７０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜６０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜５０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜４０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜３０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜２０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、５００ｋＤａ〜１．５ＭＤａ、５００ｋＤａ〜１．２５ＭＤａ、５００ｋＤａ〜１．０ＭＤａ、５００ｋＤａ〜９０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜８０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜７０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜６０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜５０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜４０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜３０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜２０００ｋＤａ、６５０〜２０００ｋＤａ、６５０〜１８００ｋＤａ、１０００〜２０００ｋＤａ、１２００〜１８００ｋＤａ、１３００〜１７００ｋＤａ、１４００〜１６００ｋＤａの重量平均分子量を有する。一実施形態において、非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、約１５００ｋＤａまたは１５８０ｋＤａの重量平均分子量を有する。
【０１９５】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の組成物における使用のための非架橋ヒアルロン酸またはその塩は、数平均分子量（Ｍｎ）に対する重量平均分子量（ＭＷ）に対応する、約１〜３、約１〜２、約１．０５〜１．７５、１．０５〜１．６０、１．０５〜１．５０、１．０５〜１．４０、１．０５〜１．３５、または１．０５〜１．２５の多分散性指数を有する。
【０１９６】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、非タンパク質賦形剤を含む。本明細書で使用される場合、「非タンパク質賦形剤」という用語は、少なくとも１５個のアミノ酸を含む、ポリペプチドではない任意の賦形剤を指す。任意の非タンパク質賦形剤が、本明細書に開示されるクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が、非タンパク質賦形剤を用いて回収されることが想定される。
【０１９７】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、糖を含む。本明細書で使用される場合、「糖」という用語は、１〜１０個の単糖単位を含む化合物、例えば、単糖類、二糖類、三糖類、および４〜１０個の単糖単位を含むオリゴ糖を指す。任意の糖が、本明細書に開示されるクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が、糖を用いて回収されることが想定される。いくつかの実施形態において、例えば、凍結乾燥組成物において、糖は、凍結乾燥保護剤として機能することができる。いくつかの他の実施形態において、例えば、凍結乾燥製剤または液体製剤において、糖は、等張化剤として機能することができる。単糖類は、アルドース、ジアルドース、アルドケトース、ケトースおよびジケトースを含む、３個以上の炭素原子を含むポリヒドロキシアルデヒドまたはポリヒドロキシケトン、および環状形態、デオキシ糖およびアミノ糖、ならびにこれらの誘導体であり、但し、親である単糖類は、（潜在的に）カルボニル基を有する。単糖類としては、グリセルアルデヒドおよびジヒドロキシアセトンなどのトリオース、エリスロース、エリスルロースおよびトレオースなどのテトロース、アラビノース、リキソース、リボース、リブロース、キシロース、キシルロースなどのペントース、アロース、アルトロース、フルクトース、フコース、ガラクトース、グルコース、グロース、イドース、マンノース、プシコース、ラムノース、ソルボース、タガトース、タロースおよびトレハロースなどのヘプトース、セドヘプツロースおよびマンノヘプツロースなどのオクトース、オクツロースおよび２−ケト−３−デオキシ−マンノ−オクトネートなどのオクトース、シアロースなどのノノース、ならびにデコースが挙げられる。オリゴ糖類は、少なくとも２つの単糖単位がグリコシド結合によって接続している化合物である。単位の数に従って、オリゴ糖類は、二糖類、三糖類、四糖類、五糖類、六糖類、七糖類、八糖類、九糖類、十糖類などと称される。オリゴ糖は、非分枝状、分枝状、または環状であってもよい。一般的な二糖類としては、限定されないが、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、ゲンチオビオース、コージビオース、ラミナリビオース、マンノビオース、メリビオース、ニゲロース、ルチノース、およびキシロビオースが挙げられる。一般的な三糖類としては、限定されないが、ラフィノース、アカルボース、マルトトリオース、およびメレジトースが挙げられる。糖賦形剤の特定の使用の他の非限定的な例は、例えば、Ａｎｓｅｌ（上記）（１９９９）、Ｇｅｎｎａｒｏ（上記）（２０００）、Ｈａｒｄｍａｎ（上記）（２００１）、およびＲｏｗｅ（上記）（２００３）に見出すことができ、それらの各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１９８】
一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、糖を含む。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、単糖類を含む。この実施形態の他の態様において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、二糖類、三糖類、四糖類、五糖類、六糖類、七糖類、八糖類、九糖類、または十糖類を含む。この実施形態のさらに他の態様において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、２〜１０個の単糖単位を含むオリゴ糖を含む。
【０１９９】
任意の量の糖が、本明細書に開示されるクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が、この糖量を用いて回収されることが想定される。この実施形態の態様において、製剤に添加される糖の量は、約０．１％（ｗ／ｗ）、約０．５％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．５％（ｗ／ｗ）、約２．０％（ｗ／ｗ）、約２．５％（ｗ／ｗ）、約３．０％（ｗ／ｗ）、約３．５％（ｗ／ｗ）、約４．０％（ｗ／ｗ）、約４．５％（ｗ／ｗ）、約５．０％（ｗ／ｗ）、約５．５％（ｗ／ｗ）、約６．０％（ｗ／ｗ）、約６．５％（ｗ／ｗ）、約７．０％（ｗ／ｗ）、約７．５％（ｗ／ｗ）、約８．０％（ｗ／ｗ）、約８．５％（ｗ／ｗ）、約９．０％（ｗ／ｗ）、約９．５％（ｗ／ｗ）、約１０％（ｗ／ｗ）、約１５％（ｗ／ｗ）、約２０％（ｗ／ｗ）、約２５％（ｗ／ｗ）、約３０％（ｗ／ｗ）、または約３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態の他の態様において、製剤に添加される糖の量は、少なくとも０．１％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３０％（ｗ／ｗ）、または少なくとも３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態のさらに他の態様において、製剤に添加される糖の量は、最大で０．１％（ｗ／ｗ）、最大で０．５％（ｗ／ｗ）、最大で１．０％（ｗ／ｗ）、最大で１．５％（ｗ／ｗ）、最大で２．０％（ｗ／ｗ）、最大で２．５％（ｗ／ｗ）、最大で３．０％（ｗ／ｗ）、最大で３．５％（ｗ／ｗ）、最大で４．０％（ｗ／ｗ）、最大で４．５％（ｗ／ｗ）、最大で５．０％（ｗ／ｗ）、最大で５．５％（ｗ／ｗ）、最大で６．０％（ｗ／ｗ）、最大で６．５％（ｗ／ｗ）、最大で７．０％（ｗ／ｗ）、最大で７．５％（ｗ／ｗ）、最大で８．０％（ｗ／ｗ）、最大で８．５％（ｗ／ｗ）、最大で９．０％（ｗ／ｗ）、最大で９．５％（ｗ／ｗ）、最大で１０％（ｗ／ｗ）、最大で１５％（ｗ／ｗ）、最大で２０％（ｗ／ｗ）、最大で２５％（ｗ／ｗ）、最大で３０％（ｗ／ｗ）、または最大で３５％（ｗ／ｗ）である。
【０２００】
一実施形態において、本発明のクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、二糖類を含む。一般的な二糖類としては、限定されないが、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース、ゲンチオビオース、コージビオース、ラミナリビオース、マンノビオース、メリビオース、ニゲロース、ルチノース、およびキシロビオースが挙げられる。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、スクロースを含む。特定の一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、トレハロースを含む。この実施形態の態様において、製剤に添加される製剤に添加される二糖類の量は、約０．１％（ｗ／ｗ）、約０．５％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．５％（ｗ／ｗ）、約２．０％（ｗ／ｗ）、約２．５％（ｗ／ｗ）、約３．０％（ｗ／ｗ）、約３．５％（ｗ／ｗ）、約４．０％（ｗ／ｗ）、約４．５％（ｗ／ｗ）、約５．０％（ｗ／ｗ）、約５．５％（ｗ／ｗ）、約６．０％（ｗ／ｗ）、約６．５％（ｗ／ｗ）、約７．０％（ｗ／ｗ）、約７．５％（ｗ／ｗ）、約８．０％（ｗ／ｗ）、約８．５％（ｗ／ｗ）、約９．０％（ｗ／ｗ）、約９．５％（ｗ／ｗ）、約１０％（ｗ／ｗ）、約１５％（ｗ／ｗ）、約２０％（ｗ／ｗ）、約２５％（ｗ／ｗ）、約３０％（ｗ／ｗ）、または約３５％（ｗ／ｗ）である。
【０２０１】
本発明の医薬組成物の態様は、一部には、界面活性剤を提供する。任意の界面活性剤が、本明細書に開示されるクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が、この界面活性剤量を用いて回収されることが想定される。界面活性剤の非限定的な例としては、ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ（商標登録）２０）、ポリソルベート４０（ＴＷＥＥＮ（商標登録）４０）、ポリソルベート６０（ＴＷＥＥＮ（商標登録）６０）、ポリソルベート６１（ＴＷＥＥＮ（商標登録）６１）、ポリソルベート６５（ＴＷＥＥＮ（商標登録）６５）、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（商標登録）８０）、およびポリソルベート８１（ＴＷＥＥＮ（商標登録）８１）などのポリソルベート、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １２４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｌ４４）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８１（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｌ６１）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８２（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｌ６２）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｌ６４）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｆ６８）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ２３７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｆ８７）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ３３８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｌ１０８）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（商標登録）Ｆ１２７）などのポロキサマー（ポリエチレン−ポリプロピレンコポリマー）、ＢＲＩＪ（商標登録）３０、およびＢＲＩＪ（商標登録）３５などのポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、２−ドデコキシエタノール（ＬＵＢＲＯＬ（登録商標）−ＰＸ）、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル（ＴＲＩＴＯＮ（商標登録）Ｘ−１００）、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、ソルトールＨＳ１５、３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）、３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳＯ）、スクロースモノラウレート、またはコール酸ナトリウムが挙げられる。界面活性剤賦形剤の他の非限定的な例は、例えば、Ａｎｓｅｌ（上記）（１９９９）、Ｇｅｎｎａｒｏ（上記）（２０００）、Ｈａｒｄｍａｎ（上記）（２００１）、およびＲｏｗｅ（上記）（２００３）に見出すことができ、それらの各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２０２】
したがって、一実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、界面活性剤を含む。この実施形態の態様において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、ポリソルベート、ポロキサマー、ポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、２−ドデコキシエタノール、ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル、ドデシル硫酸ナトリウム、３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート、３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホネート、スクロースモノラウレート、およびコール酸ナトリウムを含む。
【０２０３】
任意の量の界面活性剤が、本明細書に開示されるクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化するのに有用であり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が、この界面活性剤量を用いて回収されることが想定される。この実施形態の態様において、製剤に添加される界面活性剤の量は、約０．０１％（ｗ／ｗ）、約０．０２％（ｗ／ｗ）、約０．０３％（ｗ／ｗ）、約０．０４％（ｗ／ｗ）、約０．０５％（ｗ／ｗ）、約０．０６％（ｗ／ｗ）、約０．０７％（ｗ／ｗ）、約０．０８％（ｗ／ｗ）、約０．０９％（ｗ／ｗ）、約０．１％（ｗ／ｗ）、約０．５％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．５％（ｗ／ｗ）、約２．０％（ｗ／ｗ）、約２．５％（ｗ／ｗ）、約３．０％（ｗ／ｗ）、約３．５％（ｗ／ｗ）、約４．０％（ｗ／ｗ）、約４．５％（ｗ／ｗ）、約５．０％（ｗ／ｗ）、約５．５％（ｗ／ｗ）、約６．０％（ｗ／ｗ）、約６．５％（ｗ／ｗ）、約７．０％（ｗ／ｗ）、約７．５％（ｗ／ｗ）、約８．０％（ｗ／ｗ）、約８．５％（ｗ／ｗ）、約９．０％（ｗ／ｗ）、約９．５％（ｗ／ｗ）、約１０％（ｗ／ｗ）、約１５％（ｗ／ｗ）、約２０％（ｗ／ｗ）、約２５％（ｗ／ｗ）、約３０％（ｗ／ｗ）、または約３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態の他の態様において、製剤に添加される界面活性剤の量は、少なくとも０．０１％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０２％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０３％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０４％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０５％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０６％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０７％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０８％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．０９％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．１％（ｗ／ｗ）、少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも３．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも４．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも５．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも６．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも７．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも８．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．０％（ｗ／ｗ）、少なくとも９．５％（ｗ／ｗ）、少なくとも１０％（ｗ／ｗ）、少なくとも１５％（ｗ／ｗ）、少なくとも２０％（ｗ／ｗ）、少なくとも２５％（ｗ／ｗ）、少なくとも３０％（ｗ／ｗ）、または少なくとも３５％（ｗ／ｗ）である。この実施形態のさらに他の態様において、製剤に添加される界面活性剤の量は、最大で０．０１％（ｗ／ｗ）、最大で０．０２％（ｗ／ｗ）、最大で０．０３％（ｗ／ｗ）、最大で０．０４％（ｗ／ｗ）、最大で０．０５％（ｗ／ｗ）、最大で０．０６％（ｗ／ｗ）、最大で０．０７％（ｗ／ｗ）、最大で０．０８％（ｗ／ｗ）、最大で０．０９％（ｗ／ｗ）、最大で０．１％（ｗ／ｗ）、最大で０．５％（ｗ／ｗ）、最大で１．０％（ｗ／ｗ）、最大で１．５％（ｗ／ｗ）、最大で２．０％（ｗ／ｗ）、最大で２．５％（ｗ／ｗ）、最大で３．０％（ｗ／ｗ）、最大で３．５％（ｗ／ｗ）、最大で４．０％（ｗ／ｗ）、最大で４．５％（ｗ／ｗ）、最大で５．０％（ｗ／ｗ）、最大で５．５％（ｗ／ｗ）、最大で６．０％（ｗ／ｗ）、最大で６．５％（ｗ／ｗ）、最大で７．０％（ｗ／ｗ）、最大で７．５％（ｗ／ｗ）、最大で８．０％（ｗ／ｗ）、最大で８．５％（ｗ／ｗ）、最大で９．０％（ｗ／ｗ）、最大で９．５％（ｗ／ｗ）、最大で１０％（ｗ／ｗ）、最大で１５％（ｗ／ｗ）、最大で２０％（ｗ／ｗ）、最大で２５％（ｗ／ｗ）、最大で３０％（ｗ／ｗ）、または最大で３５％（ｗ／ｗ）である。
【０２０４】
いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、ポロキサマーを含む。本発明の医薬組成物とともに使用可能なポロキサマーとしては、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １２４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ４４）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８１（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６１）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８２（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６２）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８４（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ６４）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８８（例えば、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ６８、ＫＯＬＬＩＰＨＯＲ（登録商標）Ｐ  １８８）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ２３７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ８７）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ３３８（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ１０８）、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７）が挙げられる。いくつかの実施形態において、ポロキサマー１８８は、より有利であり得る。
【０２０５】
いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、ポリソルベートを含む。本発明の医薬組成物とともに使用可能なポリソルベートとしては、ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）２０）、ポリソルベート４０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）４０）、ポリソルベート６０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６０）、ポリソルベート６１（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６１）、ポリソルベート６５（ＴＷＥＥＮ（登録商標）６５）、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）、およびポリソルベート８１（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８１）が挙げられる。いくつかの実施形態において、ポリソルベート２０は、いくつかの他のポリソルベートよりも有利であり得る。
【０２０６】
本発明の医薬組成物の態様は、一部には、少なくとも酸化防止剤を提供する。酸化防止剤の非限定的な例としては、限定されないが、メチオニン、システイン、ＮＡＣ、グルタチオニン、リポ酸、亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、ビタミンＥおよびＴｒｏｌｏｘ  Ｃを含む類似体、キレート化剤、例えば、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩）、ＥＧＴＡ（エチレングリコール−ビス（２−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸）、ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）、これらの類似体または誘導体、ならびにこれらの組み合わせが挙げられる。この実施形態の態様において、製剤に添加される酸化防止剤の量は、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約０．１０％（ｗ／ｗ）の範囲である。
【０２０７】
本明細書に開示されるクロストリジウム毒素活性成分医薬組成物が、任意選択で、限定されないが、他の薬学的に許容される構成要素（または医薬構成要素）を含んでいてもよく、他の薬学的に許容される構成要素（または医薬構成要素）としては、限定されないが、緩衝液、防腐剤、等張性調整剤、塩、酸化防止剤、浸透圧調整剤、乳化剤、甘味剤、または香味剤などが含まれることがさらに想定される。得られる製剤が薬学的に許容されることを条件に、ｐＨを調整するための様々な緩衝液および手段を使用して、本明細書に開示される医薬組成物を調製することができる。そのような緩衝液としては、限定されないが、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、中性緩衝生理食塩水、およびリン酸緩衝生理食塩水が挙げられる。酸または塩基を使用して、必要に応じて医薬組成物のｐＨを調整できることが理解される。任意の緩衝化ｐＨレベルが、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化するのに有用な場合があり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が、この有効なｐＨレベルを用いて回収されることが想定される。この実施形態の一態様において、有効なｐＨレベルは、少なくとも約ｐＨ５．０、少なくとも約ｐＨ５．５、少なくとも約ｐＨ６．０、少なくとも約ｐＨ６．５、少なくとも約ｐＨ７．０または約ｐＨ７．５である。この実施形態の別の態様において、有効なｐＨレベルは、最大で約ｐＨ５．０、最大で約ｐＨ５．５、最大で約ｐＨ６．０、最大で約ｐＨ６．５、最大で約ｐＨ７．０または最大で約ｐＨ７．５である。この実施形態のさらに別の態様において、有効なｐＨレベルは、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ８．０であり、有効なｐＨレベルは、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ７．０であり、有効なｐＨレベルは、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ６．０であり、約ｐＨ５．５〜約ｐＨ８．０であり、有効なｐＨレベルは、約ｐＨ５．５〜約ｐＨ７．０であり、有効なｐＨレベルは、約ｐＨ５．５〜約ｐＨ５．０であり、約ｐＨ５．５〜約ｐＨ７．５であり、有効なｐＨレベルは、約ｐＨ５．５〜約ｐＨ６．５である。
【０２０８】
本明細書で開示される医薬組成物は、再構成されたとき、または注射時に、約５〜８のｐＨを有することができる。特定の実施形態において、組成物は、８未満、例えば、７．９、または７．８、または７．７、または７．６、または７．５、または７．４、または７．３、または７．２、または７．１、または７．０、または６．９、または６．８、または６．７、または６．６、または６．５、または６．４、または６．３、または６．２、または６．１、または６．０、または５．９、または５．８、または５．７、または５．６、または５．５、または５．４、または５．３、または５．２、または５．１などのｐＨを有する。いくつかの実施形態において、ｐＨは５〜７の範囲である。
【０２０９】
任意の濃度の緩衝液が、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物を製剤化するのに有用な場合があり、但し、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分が、この有効な濃度の緩衝液を用いて回収されることが想定される。この実施形態の態様において、緩衝液の有効濃度は、少なくとも０．１ｍＭ、少なくとも０．２ｍＭ、少なくとも０．３ｍＭ、少なくとも０．４ｍＭ、少なくとも０．５ｍＭ、少なくとも０．６ｍＭ、少なくとも０．７ｍＭ、少なくとも０．８ｍＭ、または少なくとも０．９ｍＭである。この実施形態の他の態様において、緩衝液の有効濃度は、少なくとも１．０ｍＭ、少なくとも２．０ｍＭ、少なくとも３．０ｍＭ、少なくとも４．０ｍＭ、少なくとも５．０ｍＭ、少なくとも６．０ｍＭ、少なくとも７．０ｍＭ、少なくとも８．０ｍＭ、または少なくとも９．０ｍＭである。この実施形態のさらなる他の態様において、緩衝液の有効濃度は、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２０ｍＭ、少なくとも３０ｍＭ、少なくとも４０ｍＭ、少なくとも５０ｍＭ、少なくとも６０ｍＭ、少なくとも７０ｍＭ、少なくとも８０ｍＭ、または少なくとも９０ｍＭである。この実施形態のさらなる他の態様において、緩衝液の有効濃度は、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも２００ｍＭ、少なくとも３００ｍＭ、少なくとも４００ｍＭ、少なくとも５００ｍＭ、少なくとも６００ｍＭ、少なくとも７００ｍＭ、少なくとも８００ｍＭ、または少なくとも９００ｍＭである。この実施形態のさらなる態様において、緩衝液の有効濃度は、最大で０．１ｍＭ、最大で０．２ｍＭ、最大で０．３ｍＭ、最大で０．４ｍＭ、最大で０．５ｍＭ、最大で０．６ｍＭ、最大で０．７ｍＭ、最大で０．８ｍＭ、または最大で０．９ｍＭである。この実施形態のさらなる他の態様において、緩衝液の有効濃度は、最大で１．０ｍＭ、最大で２．０ｍＭ、最大で３．０ｍＭ、最大で４．０ｍＭ、最大で５．０ｍＭ、最大で６．０ｍＭ、最大で７．０ｍＭ、最大で８．０ｍＭ、または最大で９．０ｍＭである。この実施形態のさらなる他の態様において、緩衝液の有効濃度は、最大で１０ｍＭ、最大で２０ｍＭ、最大で３０ｍＭ、最大で４０ｍＭ、最大で５０ｍＭ、最大で６０ｍＭ、最大で７０ｍＭ、最大で８０ｍＭ、または最大で９０ｍＭである。この実施形態のさらなる他の態様において、緩衝液の有効濃度は、最大で１００ｍＭ、最大で２００ｍＭ、最大で３００ｍＭ、最大で４００ｍＭ、最大で５００ｍＭ、最大で６００ｍＭ、最大で７００ｍＭ、最大で８００ｍＭ、または最大で９００ｍＭである。この実施形態のなおさらなる態様において、緩衝液の有効濃度は、約０．１ｍＭ〜約９００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約５００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約１００ｍＭ、０．１ｍＭ〜約９０ｍＭ、０．１ｍＭ〜約５０ｍＭ、１．０ｍＭ〜約９００ｍＭ、１．０ｍＭ〜約５００ｍＭ、１．０ｍＭ〜約１００ｍＭ、１．０ｍＭ〜約９０ｍＭ、または１．０ｍＭ〜約５０ｍＭである。
【０２１０】
本明細書に記載の実施形態は、複数のボツリヌス毒素血清型、例えば、ボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ1、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＧからなる群から選択されるボツリヌス毒素血清型を含む組成物を用いて実施され得る。特定の実施形態において、精製されたボツリヌス毒素を使用することができる。他の実施形態において、修飾されたボツリヌス毒素を使用してもよい。
【０２１１】
いくつかの実施形態において、組成物は、任意選択で、ＮａＣｌも含んでいてもよい。ＮａＣｌは、特に好ましくは、ボツリヌス毒素と、トレハロースまたはスクロースと、ポロキサマー１８８と、メチオニンと、を含む組成物中に含まれてもよく、特に好ましくは、ボツリヌス毒素と、トレハロースまたはスクロースと、ポロキサマー１８８と、メチオニンと、を含む液体組成物中に含まれる。いくつかの凍結乾燥製剤において、ＮａＣｌは、再構成ビヒクル中で等張化剤として機能してもよい。一実施形態において、ＮａＣｌは、再構成ビヒクル中に０．９％（ｗ／ｗ）の量で存在してもよい。
【０２１２】
いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、凍結乾燥した（すなわち、凍結させて乾燥させた）か、または真空乾燥させた粉末として製剤化されてもよく、これらは、患者への投与前に、適切な流体、例えば、生理食塩水または水で再構成されてもよい。代替の実施形態において、医薬組成物は、水溶液または懸濁液として製剤化することができる。
【０２１３】
いくつかの実施形態において、固体クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、ボツリヌス毒素と、非架橋ヒアルロン酸またはその塩（例えば、約４５０ｋＤａ〜２．０ＭＤａ、例えば、４５０ｋＤａ〜１．６ＭＤａ、約１．４〜１．６ＭＤａ、および約１４００〜１６００ｋＤａ）と、等張化剤および／または凍結乾燥保護剤と、ポロキサマーおよび／またはポリソルベートと、酸化防止剤と、を含む。いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、ボツリヌス毒素を含む。いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、トレハロースを含む。いくつかの実施形態において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、ポロキサマー１８８またはポリソルベート２０を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ＥＤＴＡ  ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、またはこれらの類似体を含む。代替の実施形態において、組成物は、メチオニンおよび／またはＮＡＣを含む。これらの代替の実施形態の態様において、組成物は、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、またはこれらの類似体をさらに含む。いくつかの実施形態において、組成物は、緩衝剤をさらに含む。一実施形態において、組成物は、ヒスチジン緩衝液を含む。いくつかの実施形態において、二糖類、ポロキサマーおよび酸化防止剤の相対重量は、以下の範囲内である：トレハロース：１〜１５％、１〜１０％、または２〜１５％もしくは２〜１０％、ポロキサマー：０．５〜８％または０．５〜５％、メチオニン：０．０１〜５％、０．０２〜３％、０．０５〜１％、０．０５〜０．５％。いくつかの実施形態において、トレハロース、ポロキサマーおよびメチオニンの相対重量は、以下の範囲内である：トレハロース：１〜１５％、１〜１０％、または２〜１５％もしくは２〜１０％、ポロキサマー：０．５〜８％または０．５〜５％、メチオニン：０．０１〜５％、０．０２〜３％、０．０５〜１％、０．０５〜０．５％。いくつかの実施形態において、トレハロース、ポロキサマーおよびメチオニンの相対重量は、それぞれ、以下の範囲内である：１〜１０％、０．５〜５％および０．１〜０．３％。他の実施形態において、トレハロース、ポリソルベートおよびメチオニンの相対重量は、それぞれ、以下の範囲内である：１〜１５％、０．０２％〜０．０６％および０．１〜０．３％。他の実施形態において、トレハロース、ポリソルベートおよびメチオニンの相対重量は、それぞれ、以下の範囲内である：１〜１０％、０．０２％〜０．０６％および０．１〜０．３％。いくつかの実施形態において、ＥＤＴＡまたはＥＤＴＡ類似体の相対重量は、約０．０１〜０．１０％である。いくつかの実施形態において、ＮＡＣの相対重量は、０．０１〜０．５％の範囲である。
【０２１４】
これらの実施形態の態様において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、固体（すなわち、凍結乾燥したか、または真空乾燥させた）組成物として製剤化される。いくつかの実施形態において、固体クロストリジウム医薬組成物は、凍結乾燥保護剤を含む。いくつかの実施形態において、好ましい凍結乾燥保護剤としては、スクロース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール、グルコース、またはこれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態において、固体医薬組成物は、０．０１〜０．５％の相対重量でＮＡＣを含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡまたはこれらの類似体をさらに含む。代替の実施形態において、固体医薬組成物は、メチオニンおよびＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、またはこれらの類似体を含む。
【０２１５】
一実施形態において、組成物は、ボツリヌス毒素Ａ型と、１．２％（ｗ／ｗ）の非架橋ヒアルロン酸またはその塩（重量平均分子量が約１．５８ＭＤａである）と、８％（ｗ／ｗ）のトレハロースと、４％（ｗ／ｗ）のポロキサマー１８８と、０．２％（ｗ／ｗ）のメチオニンと、ヒスチジン緩衝液とからなる固体組成物である。一実施形態において、固体組成物は、患者への投与前にＮａＣｌを含む再構成ビヒクルを用いて再構成される。一実施形態において、ＮａＣｌは、再構成ビヒクル中に０．９％（ｗ／ｗ）の量で存在してもよい。
【０２１６】
これらの実施形態の代替の態様において、クロストリジウム毒素活性成分医薬組成物は、液体として製剤化される。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、トレハロース、スクロース、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、グルコース、およびこれらの組み合わせから選択される等張化剤を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、０．１〜０．５％の相対重量でＮＡＣを含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ＮＡＣと、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、ＤＴＰＡ、およびこれらの類似体から選択されるキレート剤と、を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、ヒスチジン緩衝液を含む。いくつかの実施形態において、液体医薬組成物は、５〜７のｐＨを有する。
【０２１７】
一実施形態において、組成物は、ボツリヌス毒素Ａ型と、１．２％（ｗ／ｗ）の非架橋ヒアルロン酸またはその塩（重量平均分子量が約１．５８ＭＤａである）と、８％（ｗ／ｗ）のトレハロースと、４％（ｗ／ｗ）のポロキサマー１８８と、０．２％（ｗ／ｗ）のメチオニンと、ヒスチジン緩衝液ｐＨ６とからなる液体組成物である。
【０２１８】
治療方法
複数の実施形態において、疾患、障害、状態などを治療する方法であって、それを必要とする対象に対し、本明細書に記載の医薬組成物を、患者の機能を改善するのに十分な量で投与することを含む、方法が記載される。特定の実施形態において、疾患は、神経筋性の疾患であり、例えば、筋肉およびその神経制御に影響を与える疾患、例えば、過活動膀胱などである。特定の実施形態は、疼痛の治療、例えば、頭部痛、または背部痛、または筋肉痛などの治療に関する。特定の実施形態において、方法は、例えば、うつ病、不安症などを含む精神障害の治療を包含する。
【０２１９】
本明細書に記載の組成物および方法は、例えば、アカラシア、裂肛、アニスムス、眼瞼痙れん、脳性麻痺、頚部ジストニア、頸性頭痛、片側顔面痙れん、汗疱状湿疹、嚥下障害、発声障害、食道蠕動低下、食道の輪状筋肉（ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  ｍｕｓｃｕｌａｒ  ｒｉｎｇ）、内斜視（乳児）、アイリフト、顔面ミオキミア、歩行困難（特発性のつま先歩き）、全身性ジストニア、片側顔面痙れん、過緊張性の顔面の皺（眉間、額、目尻の小皺、下がった口角）、多汗症、失禁（特発性または神経性）、薬物乱用頭痛、偏頭痛、ミオクローヌス、例えば咬筋などが関与する筋肉質量または活動低下、筋筋膜性疼痛症候群、閉塞性の尿症状、膵管癒合不全膵炎、パーキンソン病、恥骨直腸筋症候群、手術による創傷のつっぱり減少、唾液分泌過多、唾液腺粘液腫、第六神経麻痺、痙縮、発話／発声障害、斜視、手術付加物（眼科）、遅発性ジスキネジー、顎関節症、緊張性頭痛、胸郭出口症候群、捻転性筋緊張異常、斜頸、トゥレット症候群、振戦、むち打ちに関連する頚部痛、疼痛、かゆみ、炎症、アレルギー、がんおよび良性腫瘍、熱、肥満、感染症、ウイルスおよび細菌、高血圧、心不整脈、血管攣縮、アテローム性動脈硬化症、内皮過形成、静脈血栓塞栓症、静脈瘤、アフタ性口内炎、唾液分泌過多、顎関節症、多汗症、臭汗症、尋常性ざ瘡、酒さ、色素過剰、過形成性瘢痕、ケロイド、タコおよび魚の目、皮膚の皺、過剰皮脂産生、乾癬、皮膚炎、アレルギー性鼻炎、鼻詰まり、後鼻漏、くしゃみ、耳垢、漿液および化膿性中耳炎、扁桃およびアデノイド増殖症、耳鳴り、めまい、空間識失調、嗄声、咳、睡眠時無呼吸、いびき、緑内障、結膜炎、ぶどう膜炎、斜視、グレーブス病、過剰な毛髪成長、脱毛、喘息、気管支炎、肺気腫、粘液産生、胸膜炎、血液凝固障害、骨髄増殖性障害、好酸球、好中球、マクロファージおよびリンパ球が関与する障害、免疫寛容および移植、自己免疫障害、嚥下障害、胃酸逆流、裂孔ヘルニア、胃炎および胃酸過多、下痢および便秘、痔、尿失禁、前立腺肥大、勃起不全、持続勃起症およびペロニー病、精巣上体炎、避妊、月経痙れん、早産予防、子宮内膜症および筋腫、関節炎、骨関節炎、リウマチ、滑液包炎、腱炎、腱滑膜炎、線維筋痛、発作性障害、痙縮、頭痛、および神経痛の治療、症状の減少、および／または予防に有用であり得る。
【０２２０】
特定の実施形態において、患者は、任意の９０日間にわたって投与されるボツリヌス毒素は最大で３６０Ｕに制限される。
【０２２１】
神経／筋肉の状態の治療
一実施形態において、神経筋疾患は、多汗症である。多汗症を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、腋窩あたり約５９Ｕ、または腋窩あたり約５８Ｕ、または腋窩あたり約５７Ｕ、または腋窩あたり約５６Ｕ、または腋窩あたり約５５Ｕ、または腋窩あたり約５４Ｕ、または腋窩あたり約５３Ｕ、または腋窩あたり約５２Ｕ、または腋窩あたり約５１Ｕ、または腋窩あたり約５０Ｕ、または腋窩あたり約４９Ｕ、または腋窩あたり約４８Ｕ、または腋窩あたり約４７Ｕ、または腋窩あたり約４６Ｕ、または腋窩あたり約４５Ｕ、または腋窩あたり約４４Ｕ、または腋窩あたり約４３Ｕ、または腋窩あたり約４２Ｕ、または腋窩あたり約４１Ｕ、または腋窩あたり約４０Ｕ、または腋窩あたり約３９Ｕ、または腋窩あたり約３８Ｕ、または腋窩あたり約３７Ｕ、または腋窩あたり約３６Ｕ、またはそれ以下を摂取する。一実施形態において、合計５０Ｕを、およそ１〜２ｃｍ離れた１０〜１５部位に皮内注射する。
【０２２２】
一実施形態において、神経筋疾患は、片側顔面痙れんである。片側顔面痙れんを患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約１．５〜１５Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、治療あたり、約１．５〜３Ｕ、１．５〜５Ｕ、１．５〜７Ｕ、１．５〜１０Ｕ、１．５〜１２Ｕ、１．５〜１５Ｕ、５〜１０Ｕ、５〜１５Ｕ、または１０〜１５Ｕを摂取し、片側顔面痙れんを有する患者に投与される。なおさらなる例において、対象は、治療あたり、約１．５Ｕ、約２Ｕ、約２．５Ｕ、約３Ｕ、約３．５Ｕ、約４Ｕ、約４．５Ｕ  約５Ｕ、約５．５Ｕ、約６Ｕ、約６．５Ｕ、約７Ｕ、約７．５Ｕ、約８Ｕ、約８．５Ｕ、約９Ｕ、約９．５Ｕ、約１０Ｕ、約１０．５Ｕ、約１１Ｕ、約１１．５Ｕ、約１２Ｕ、約１２．５Ｕ、約１３Ｕ、約１３．５Ｕ、約１４Ｕ、約１４．５Ｕ、または約１５Ｕ摂取し、片側顔面痙れんを有する患者に投与される。治療あたり１５Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために片側顔面痙れんを有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２２３】
一実施形態において、神経筋疾患は、頚部ジストニアである。頚部ジストニアを患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約１５〜３００Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、約３５〜２５０Ｕ、６５〜２００Ｕ、８５〜１７５Ｕ、１０５〜１６０Ｕ、または１２５〜１４５Ｕを摂取し、頚部ジストニアを有する患者に投与される。一実施形態において、胸鎖乳突筋への投与量は、１００Ｕ以下に制限される。治療あたり３００Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために頚部ジストニアを有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２２４】
一実施形態において、神経筋疾患は、眼瞼痙れんである。眼瞼痙れんを患う対象は、例えば、上眼瞼の内側および外側の瞼板前部の眼輪筋と、下眼瞼の外側の瞼板前部の眼輪筋に注射される約１．２５〜２．５Ｕの本明細書に記載の医薬組成物を摂取する。さらなる例において、対象は、注射部位あたり、約１．５Ｕ、約１．６Ｕ、約１．７Ｕ、約１．８Ｕ、約１．９Ｕ、約２．０Ｕ、約２．１Ｕ、約２．２Ｕ、約２．３Ｕ、約２．４Ｕ、約２．５Ｕ、またはそれ以上を摂取する。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２２５】
一実施形態において、神経筋疾患は、斜視である。斜視を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の注射部位あたり、約１．２５〜２．５Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、治療反応を達成するための注射部位あたり、約１．５Ｕ、約１．６Ｕ、約１．７Ｕ、約１．８Ｕ、約１．９Ｕ、約２．０Ｕ、約２．１Ｕ、約２．２Ｕ、約２．３Ｕ、約２．４Ｕ、約２．５Ｕ、またはそれ以上を摂取する。複数の実施形態において、より低い用量が、微小な偏位の治療に使用される。複数の実施形態において、２０プリズム直径未満の垂直筋および水平筋の斜視は、注射部位あたり１．２５〜２．５Ｕで治療することができる。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２２６】
一実施形態において、神経筋疾患は、筋痙縮である。筋痙縮を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約２０〜２００Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、治療あたり、約２０〜３０Ｕ、２０〜４０Ｕ、２０〜６０Ｕ、２０〜８０Ｕ、２０〜１００Ｕ、２０〜１２５Ｕ、２０〜１５０Ｕ、または２０〜１７５Ｕを摂取し、筋痙縮を有する患者に投与される。なおさらなる例において、対象は、治療あたり、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、約１５０Ｕ、約１５５Ｕ、約１６０Ｕ、約１６５Ｕ、約１７０Ｕ、約１７５Ｕ、約１８０Ｕ、約１８５Ｕ、約１９０Ｕ、約１９５Ｕ、または約２００Ｕを摂取し、筋痙縮を有する患者に投与される。一実施形態において、上腕二頭筋には、４つの注射部位に分割して１００Ｕ〜２００Ｕを注射することができる。一実施形態において、橈側手根屈筋には、１つの注射部位に１２．５Ｕ〜５０Ｕを注射することができる。一実施形態において、尺側手根屈筋には、１つの注射部位に１２．５Ｕ〜５０Ｕを注射することができる。一実施形態において、深指屈筋には、１つの注射部位に３０Ｕ〜５０Ｕを注射することができる。一実施形態において、浅指屈筋には、１つの注射部位に３０Ｕ〜５０を注射することができる。治療あたり２００Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために筋痙縮を有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２２７】
疼痛の治療
別の実施形態において、疼痛を治療するための方法であって、それを必要とする対象に対し、本明細書に記載の医薬組成物を、疼痛を減らすのに十分な量で投与するステップを含む、方法。別の実施形態において、患者は、筋膜性疼痛、偏頭痛、緊張性頭痛、神経因性疼痛、顔面痛、腰痛、副鼻洞性頭痛、顎関節疾患と関連する疼痛、筋痙縮または頚部ジストニアと関連する疼痛、術後創部痛、または神経痛を患っている。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２２８】
一実施形態において、患者は、顔面痛を患っている。顔面痛を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約４〜４０Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、治療あたり、約４〜１０Ｕ、４〜１５Ｕ、４〜２０Ｕ、４〜２５Ｕ、４〜３０Ｕ、４〜３５Ｕ、７〜１５Ｕ、７〜２０Ｕ、７〜２５Ｕ、７〜３０Ｕ、７〜３５Ｕ、または７〜４０Ｕを摂取し、顔面痛を有する患者に投与される。なおさらなる例において、対象は、治療あたり、約４Ｕ、約５Ｕ、約７．５Ｕ、約１０Ｕ、約１２．５Ｕ、約１５Ｕ、約１７．５Ｕ、約２０．０Ｕ、約２２．５Ｕ、約２５．０Ｕ、約２７．５Ｕ、約３０．０Ｕ、約３２．５Ｕ、約３５Ｕ、約３７．５Ｕ、または約４０Ｕ摂取し、顔面痛を有する患者に投与される。治療あたり４０Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために顔面痛を有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２２９】
一実施形態において、患者は、筋膜性疼痛を患っている。筋膜性疼痛を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約５〜１００Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、治療あたり、約５〜１０Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜４０単位、５〜５０単位、５〜６０単位、５〜７０単位、５〜８０単位、５〜９０Ｕ、１０〜２０Ｕ、１０〜３０Ｕ、１０〜５０Ｕ、または１０〜６０Ｕ、または１０〜７０Ｕ、または１０〜８０Ｕ、１０〜９０Ｕ、または１０〜１００Ｕを摂取し、筋膜性疼痛を有する患者に投与される。さらなる例において、対象は、治療あたり、約５Ｕ、約１０Ｕ、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、または約１００Ｕを摂取する。治療あたり１００Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために筋膜性疼痛を有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２３０】
一実施形態において、対象は、腰痛を患っている。腰痛を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約１５〜１５０Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、治療あたり、約１５〜３０Ｕ、１５〜５０Ｕ、１５〜７５Ｕ、１５〜１００Ｕ、１５〜１２５Ｕ、１５〜１５０Ｕ、２０〜１００Ｕ、２０〜１５０Ｕ、または１００〜１５０Ｕを摂取する。なおさらなる例において、対象は、腰痛を軽減するための治療あたり、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、または約１５０Ｕを摂取する。治療あたり１５０Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために腰痛を有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２３１】
一実施形態において、患者は、片頭痛を患っており、患者が、１ヶ月あたり４時間以上、１５日以上の偏頭痛を患っているものを含む。片頭痛を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約０．５〜２００Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、偏頭痛を軽減するための治療あたり、約５〜１９０Ｕ、１５〜１８０Ｕ、２５〜１７０Ｕ、３５〜１６０Ｕ、４５〜１５０Ｕ、５５〜１４０Ｕ、６５〜１３０Ｕ、７５〜１２０Ｕ、８５〜１１０Ｕ、または９５〜１０５Ｕを摂取する。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２３２】
例えば、治療部位あたり、約０．５Ｕ、約１．０Ｕ、約１．５Ｕ、約２．０Ｕ、約２．５Ｕ、約３．０Ｕ、約３．５Ｕ、約４．０Ｕ、約４．５Ｕ、約５．０Ｕ、約５．５Ｕ、約６．０Ｕ、約６．５Ｕ、約７．０Ｕ、約７．５Ｕ、約８．０Ｕ、約８．５Ｕ、約９．０Ｕ、約９．５Ｕ、約１０．０Ｕ、約１２Ｕ、約１５Ｕ、約１７Ｕ、約２０Ｕ、約２２Ｕ、約２５Ｕ、約２７Ｕ、約３０Ｕ、約３２Ｕ、約３５Ｕ、約３７Ｕ、約４０Ｕ、約４２Ｕ、約４５Ｕ、約４７Ｕ、または約５０Ｕが、偏頭痛を有する患者に投与される。患者は、例えば、２部位、３部位、４部位、５部位、６部位、７部位、８部位、９部位、１０部位、１１部位、１２部位、１３部位、１４部位、１５部位、１６部位、１７部位、１８部位、１９部位、２０部位、２１部位、２２部位、２３部位、２４部位、２５部位、２６部位、２７部位、２８部位、２９部位、３０部位、３１部位、３２部位、またはそれ以上などの複数の部位で治療することができる。一実施形態において、偏頭痛を患っている患者に、皺眉筋（各々５Ｕを２回注射）、鼻根筋（５Ｕを１回注射）、前頭筋（各々５Ｕを４回注射）、側頭筋（各々５Ｕを８回注射）、後頭筋（各々５Ｕを６回注射）、傍脊柱筋群（各々５Ｕを４回注射）、および僧帽筋（各々５Ｕを６回注射）を介して、０．１ｍＬ注射あたり５Ｕを３１回注射する。正中線に注射することができる鼻根筋を除き、全ての筋肉は、特定の実施形態において、注射部位の半分を頭頚部の左側に、半分を頭頚部の右側に、左右対称に注射することができる。治療あたり２００Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために偏頭痛を有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２３３】
一実施形態において、患者は、副鼻洞性頭痛を患っている。副鼻洞性頭痛を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約４〜４０Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、副鼻洞性頭痛を軽減するための治療あたり、約４〜１０Ｕ、４〜１５Ｕ、４〜２０Ｕ、４〜２５Ｕ、４〜３０Ｕ、４〜３５Ｕ、７〜１５Ｕ、７〜２０Ｕ、７〜２５Ｕ、７〜３０Ｕ、７〜３５Ｕ、または７〜４０Ｕを摂取する。なおさらなる例において、対象は、治療あたり、約４Ｕ、約５Ｕ、約７．５Ｕ、約１０Ｕ、約１２．５Ｕ、約１５Ｕ、約１７．５Ｕ、約２０．０Ｕ、約２２．５Ｕ、約２５．０Ｕ、約２７．５Ｕ、約３０．０Ｕ、約３２．５Ｕ、約３５Ｕ、約３７．５Ｕ、または約４０Ｕを摂取する。治療あたり４０Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために副鼻洞性頭痛を有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２３４】
一実施形態において、患者は、緊張性頭痛を患っている。緊張性頭痛を患う対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり、約５〜５０Ｕを摂取する。さらなる例において、治療あたり、約５〜１０Ｕ、５〜１５Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜２５Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜３５Ｕ、５〜４０Ｕ、５〜４５Ｕ、１０〜２０Ｕ、１０〜２５Ｕ、１０〜３０Ｕ、１０〜３５Ｕ、１０〜４０Ｕ、または１０〜４５Ｕが、緊張性頭痛を有する患者に投与される。なおさらなる例において、対象は、緊張性頭痛を軽減するために施される治療あたり、約５Ｕ、約１０Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、または約５０Ｕを摂取する。一実施形態において、緊張性頭痛を患っている患者に、皺眉筋（各々５Ｕを２回注射）、鼻根筋（５Ｕを１回注射）、前頭筋（各々５Ｕを４回注射）、側頭筋（各々５Ｕを８回注射）、後頭筋（各々５Ｕを６回注射）、傍脊柱筋群（各々５Ｕを４回注射）、および僧帽筋（各々５Ｕを６回注射）を介して、０．１ｍＬ注射あたり５Ｕを３１回注射する。正中線に注射することができる鼻根筋を除き、全ての筋肉は、特定の実施形態において、注射部位の半分を頭頚部の左側に、半分を頭頚部の右側に、左右対称に注射することができる。治療あたり２００Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために緊張性頭痛を有する患者に投与されてもよい。治療活動は、複数の治療を含むことができる。
【０２３５】
一実施形態において、患者は、急性または再発性の慢性副鼻腔炎と関連する副鼻洞性頭痛または顔面痛を患っている。例えば、本明細書に記載の医薬組成物を、鼻粘膜または副鼻腔を覆う皮下構造に投与することができ、製剤の投与によって、急性の再発性または慢性の副鼻腔炎と関連する頭痛および／または顔面痛を減らす。さらなる実施形態において、本明細書に記載の医薬製剤のいずれかを、鼻粘膜または副鼻腔を覆う皮下構造、例えば、篩骨洞、上顎洞、乳様蜂巣、前頭洞、および蝶形骨洞からなる群から選択される副鼻腔のうちの１つ以上を覆う皮下構造に投与することができる。別の実施形態において、副鼻腔を覆う皮下構造は、額、頬骨、側頭、後耳介、および唇からなる群から選択される領域のうちの１つ以上の中にある。複数の実施形態において、各々５Ｕの複数回の注射を投与して、急性または再発性の慢性副鼻腔炎と関連する副鼻洞性頭痛または顔面痛を治療する。
【０２３６】
別の実施形態において、急性または再発性の慢性副鼻腔炎と関連する副鼻洞性頭痛または顔面痛を患っている患者は、本明細書に記載の医薬製剤のいずれかを患者の罹患領域に投与することによって治療される。さらなる実施形態において、本明細書で開示される医薬製剤は、副鼻腔を支配する三叉神経の突起部に投与される。
【０２３７】
急性または再発性の慢性副鼻腔炎と関連する副鼻洞性頭痛または顔面痛を患っている患者は、多くは、鼻炎、副鼻腔過分泌および／または化膿性鼻汁を含む症状を示す。一実施形態において、本明細書に記載の医薬組成物で治療される患者は、治療の前に、副鼻腔過分泌および化膿性鼻汁の症状を示す。
【０２３８】
本明細書で想定される実施形態は、急性または再発性の慢性副鼻腔炎と関連する副鼻洞性頭痛または顔面痛を患っている患者を治療するための方法を提供し、この対象は、神経痛を患っている。特定の実施形態において、神経痛は、三叉神経痛である。別の実施形態において、神経痛は、感覚神経に対する圧縮力に関連しており、内因性神経損傷、脱髄疾患、または遺伝障害に関連しており、代謝障害に関連しており、中枢神経血管疾患に関連しており、または外傷に関連している。別の実施形態において、疼痛は、抜歯または歯の矯正に関連している。
【０２３９】
泌尿器系障害の治療
一実施形態において、過活動膀胱（ＯＡＢ）、例えば、神経学的状態に起因するもの（ＮＯＡＢ）、または特発性ＯＡＢ（ＩＯＡＢ）を患っている患者を治療するための方法が提供される。例えば、本明細書に記載の医薬製剤を、膀胱またはその近傍、例えば、排尿筋に投与することができ、製剤の投与によって、過活動膀胱と関連する切迫性尿失禁を減らす。特定の実施形態において、投与量は、例えば、２００Ｕ、またはそれ以上、またはそれ以下などであってもよい。例えば、投与量は、治療あたり、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、約１５０Ｕ、約１６０Ｕ、約１７０Ｕ、約１８０Ｕ、約１９０Ｕ、約２００Ｕ、約２１０Ｕ、約２２０、約２３０Ｕ、約２４０Ｕ、またはそれ以上などであってもよい。患者に、例えば、２部位、３部位、４部位、５部位、６部位、７部位、８部位、９部位、１０部位、１１部位、１２部位、１３部位、１４部位、１５部位、１６部位、１７部位、１８部位、１９部位、２０部位、２１部位、２２部位、２３部位、２４部位、２５部位、２６部位、２７部位、２８部位、２９部位、３０部位、３１部位、３２部位、３３部位、３４部位、３５部位、３６部位、３７部位、３８部位、またはそれ以上などの複数の部位で注射することができる。一実施形態において、ＯＡＢを患っている患者は、排尿筋への注射あたり、およそ６．７Ｕの３０回の１ｍＬ注射で治療される。
【０２４０】
一実施形態において、例えば、神経学的状態に起因して、神経因性排尿筋過活動（ＮＤＯ）を患っている患者を治療するための方法が提供される。例えば、医薬製剤を膀胱またはその近傍、例えば、排尿筋に投与することができ、製剤の投与によって、過活動膀胱と関連する切迫性尿失禁を減らす。特定の実施形態において、投与量は、例えば、２００Ｕ、またはそれ以上、またはそれ以下などであってもよい。例えば、投与量は、治療あたり、約１５Ｕ、約２０Ｕ、約２５Ｕ、約３０Ｕ、約３５Ｕ、約４０Ｕ、約４５Ｕ、約５０Ｕ、約５５Ｕ、約６０Ｕ、約６５Ｕ、約７０Ｕ、約７５Ｕ、約８０Ｕ、約８５Ｕ、約９０Ｕ、約９５Ｕ、約１００Ｕ、約１０５Ｕ、約１１０Ｕ、約１１５Ｕ、約１２０Ｕ、約１２５Ｕ、約１３０Ｕ、約１３５Ｕ、約１４０Ｕ、約１４５Ｕ、約１５０Ｕ、約１６０Ｕ、約１７０Ｕ、約１８０Ｕ、約１９０Ｕ、約２００Ｕ、約２１０Ｕ、約２２０、約２３０Ｕ、約２４０Ｕ、またはそれ以上などであってもよい。患者には、例えば、２部位、３部位、４部位、５部位、６部位、７部位、８部位、９部位、１０部位、１１部位、１２部位、１３部位、１４部位、１５部位、１６部位、１７部位、１８部位、１９部位、２０部位、２１部位、２２部位、２３部位、２４部位、２５部位、２６部位、２７部位、２８部位、２９部位、３０部位、３１部位、３２部位、またはそれ以上などの複数の部位で注射することができる。一実施形態において、ＮＤＯを患っている患者は、排尿筋への注射あたり、およそ６．７Ｕの３０回の１ｍＬ注射で治療される。
【０２４１】
美容的特徴の治療
別の実施形態において、軟組織特徴を美容的に修正するための方法であって、本明細書に記載の少なくとも１つの医薬組成物を、この特徴を修正するのに十分な量で、それを必要とする対象に投与するステップを含む、方法が提供される。さらなる実施形態において、医薬組成物は、単一の病巣または複数の病巣のいずれかに、経皮または経粘膜注射によって投与される。
【０２４２】
複数の実施形態において、医薬製剤は、対象の顔または頚部に投与される。さらなる実施形態において、医薬製剤は、皺を減らすのに十分な量で対象に投与される。例えば、製剤を、眉の間および鼻梁における縦皺を減らすのに十分な量で、対象の眉の間に投与することができる。医薬製剤は、眼角にある皺を減らすのに十分な量で、対象の片眼または両眼のいずれかの近くに投与することもできる。一実施形態において、組成物は、滑らかな皮膚に局所的に注射することができる。別の実施形態において、医薬製剤は、対象の額の水平皺を減らすのに十分な量で、対象の額に投与することもできる。さらに別の実施形態において、医薬製剤は、頚部の筋帯を減らすのに十分な量で、対象の頚部に投与される。一実施形態において、医薬組成物は、筋肉を緩和させ、および／または咬筋の質量を減少させるために、咬筋に適用される。
【０２４３】
さらなる実施形態において、患者は、顔の皺を患っている。顔の皺を患っている対象は、例えば、医薬製剤の治療あたり約１〜１００Ｕを摂取することができる。さらなる例において、対象は、治療あたり、約１〜１０Ｕ、１〜２０Ｕ、１〜３０Ｕ、１〜４０Ｕ、１〜５０Ｕ、１〜６０Ｕ、１〜７０Ｕ、１〜８０Ｕ、１〜９０Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜４０Ｕ、５〜５０Ｕ、５〜６０Ｕ、５〜７０Ｕ、５〜８０Ｕ、５〜９０Ｕ、または５〜１００Ｕを摂取する。なおさらなる例において、対象は、治療あたり、約１Ｕ、約１０Ｕ、約２０Ｕ、約３０Ｕ、約４０Ｕ、約５０Ｕ、約６０Ｕ、約７０Ｕ、約８０Ｕ、約９０Ｕ、または約１００Ｕを摂取する。治療あたり１００Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために炎症または炎症性障害を患っている患者に投与されてもよい。
【０２４４】
炎症の治療
別の実施形態において、炎症を治療するための方法であって、本明細書に記載の医薬組成物を、炎症を減らすのに十分な量で、それを必要とする対象に投与するステップを含む、方法。特定の実施形態において、医薬製剤は、筋力低下を生じさせることなく患者に投与される。一実施形態において、医薬製剤は、炎症状態を有する患者に投与される。特定の実施形態において、炎症状態は、神経性炎症である。別の実施形態において、対象は、関節リウマチまたは胃腸炎症性疾患を患っている。
【０２４５】
さらなる実施形態において、患者は、炎症性障害を患っている。炎症性障害を患っている対象は、例えば、本明細書に記載の医薬組成物の治療あたり約１〜１００Ｕを摂取する。さらなる例において、対象は、治療あたり、約１〜１０Ｕ、１〜２０Ｕ、１〜３０Ｕ、１〜４０Ｕ、１〜５０Ｕ、１〜６０Ｕ、１〜７０Ｕ、１〜８０Ｕ、１〜９０Ｕ、５〜２０Ｕ、５〜３０Ｕ、５〜４０Ｕ、５〜５０Ｕ、５〜６０Ｕ、５〜７０Ｕ、５〜８０Ｕ、５〜９０Ｕ、または５〜１００Ｕを摂取する。なおさらなる例において、対象は、治療あたり、約１Ｕ、約１０Ｕ、約２０Ｕ、約３０Ｕ、約４０Ｕ、約５０Ｕ、約６０Ｕ、約７０Ｕ、約８０Ｕ、約９０Ｕ、または約１００Ｕを摂取する。治療あたり１００Ｕより多くの投与量もまた、治療反応を達成するために炎症または炎症性障害を患っている患者に投与されてもよい。
【０２４６】
皮膚状態の治療
皮膚障害を治療するための方法は、ボツリヌスニューロトキシンを、患者の皮膚障害の位置、例えば、患者の顔、手、または足などに局所投与するステップを含んでいてもよい。このニューロトキシンは、約１０-3単位／患者の体重（ｋｇ）〜約３５単位／患者の体重（ｋｇ）の量で局所投与することができる。例えば、このニューロトキシンは、約１０-2単位／患者の体重（ｋｇ）〜約２５単位／患者の体重（ｋｇ）の量で局所投与される。さらなる例において、このニューロトキシンは、約１０-1単位／ｋｇ〜約１５単位／ｋｇの量で投与される。１つの方法において、このニューロトキシンは、本明細書に記載の組成物中、約１Ｕ／ｋｇ〜約１０Ｕ／ｋｇの量で局所投与される。臨床的な設定において、皮膚障害を効果的に治療するために、１Ｕ〜３０００Ｕのニューロトキシン、例えば、ボツリヌス毒素Ａ型またはＢ型を、局部適用または皮下投与によって皮膚障害の位置に投与することが有利な場合がある。
【０２４７】
ボツリヌス毒素の投与は、皮膚の複数の部位で行われてもよく、隣接する注射部位は、約０．１〜１０ｃｍ、または約０．５〜約５ｃｍ、例えば、約１．５〜約３ｃｍ離れている。毒素は、ボツリヌス毒素Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、またはモザイク毒素のうちのいずれかであり得る。投与される量は、製造業者の仕様、毒素の種類、および投与様式に応じて、０．１〜１０００Ｕ、または約１〜約４０、または約５〜約１０Ｕで変動し得る。所望の変化を維持するためのこれらの投与の繰り返し時間範囲は、注射される位置、調節される状態、および患者の状態に実質的に従って変動する。したがって、繰り返し時間は、約１週間〜約５０週間で変動し得るが、一般的な範囲は、約４〜約２５週間、またはさらには約１２週間〜約１６週間である。
【０２４８】
投与部位（例えば注射部位）間の距離は、約１ｍｍ〜約１０ｃｍ、好適には約５ｍｍ〜約５ｃｍ、より通常は約１ｃｍ〜約３ｃｍで変動し得る。したがって、例えばボツリヌスＡを、約０．５〜約１０ｃｍ離して、約０．１〜約１０Ｕの皮内注射によって好適に投与し得る。
【０２４９】
別の実施形態において、皮膚障害を治療するための方法であって、本明細書に記載の医薬組成物を、皮脂分泌または粘膜分泌を減らすのに十分な量で、それを必要とする対象に投与するステップを含む、方法が提供される。さらなる実施形態において、本明細書に記載の医薬組成物は、筋力低下を生じさせることなく患者に投与される。特定の実施形態において、本明細書に記載の医薬組成物は、眼瞼または結膜のうちの１つ以上の部位に注射される。別の実施形態において、製剤は、身体表面に投与される。
【０２５０】
別の実施形態において、医薬製剤は、皮膚細菌または真菌（限定されないが、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、ＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓおよびＭｏｒａｘｅｌｌａが挙げられる）の増殖を減らすのに十分な量で投与される。例えば、本明細書に記載の医薬組成物は、皮膚感染を軽減するために、眼瞼、頭皮、足、鼠径部、および腋窩からなる群から選択される領域に投与される。
【０２５１】
うつ病の治療
別の実施形態において、うつ病を治療するための方法が提供される。うつ病は、精神医学のためのハンドブック、例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、ワシントンＤ．Ｃ．（１９９４）によって公開されたＤｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（ＤＳＭ−ＩＶ）に与えられる基準に従って定義され、別個に診断される、認識されているうつ病の形態の一般的な用語である。ＤＳＭ−ＩＶにおいて、うつ病性障害は、気分障害の下に分類されており、大うつ病性障害、気分変調障害、および特に明記されていないうつ病性障害（または「非定型」）の３種類に分けられる。一般に、うつ病性症候群が、メランコリー、非定型、またはこれら２つのある程度の混合状態であるか否かにかかわらず、抑圧された気分が存在し、または全ての活動における関心または快楽の喪失が少なくとも２週間存在するときに、大うつの診断が与えられる。
【０２５２】
うつ病は、多くの場合、運動活動の増加または遅延などの精神運動異常に関連する。多くのうつ病者は、顔の表情筋が、抑圧されているか、または悲しい表情に見える「うつ病顔」によっても認識することができる。例えば、眉がよせられ、眉の内側端部が上がり、顔の表情が認識可能に悲しく、および／または不安であるように、口の角度が下がる場合がある。前頭筋、鼻根筋、皺眉筋および眼輪筋といった４つの主要な筋肉群が、しかめ面に関与している（Ｗｅｉｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｄｅｒｍ  Ｓｕｒｇ．２４：１１７２−１１７４，１９９８）。皺眉筋は、「にらみ顔（ｓｃｏｗｌ）」筋肉としても知られている。
【０２５３】
うつ病と診断されたか、またはうつ病エピソードを経験している対象は、本明細書に記載の医薬組成物のいずれかを投与することによって治療される。さらなる実施形態において、本明細書で開示される医薬製剤は、皮下注射を介して患者に投与される。実施例１０は、ボツリヌス毒素、トレハロース、ポロキサマー界面活性剤、およびメチオニンを含む組成物中の治療有効量のボツリヌス毒素を投与することによって、うつ病の一形態を有する人の治療を記載する。組成物は、しかめ面またはにらみ顔に関与する顔面筋に投与される。ニューロトキシンは、対象をしかめ面および／またはにらみ顔にする能力に影響を与え、それによって、うつ病を治療する。より一般的に、治療有効量のボツリヌス毒素Ａを、前頭筋、鼻根筋、皺眉筋、眼輪筋、または口角下制筋（オトガイ三角筋）のうちの１つ以上に注射することができる。
【０２５４】
別の実施形態において、本方法は、本明細書に記載の組成物中の治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分を、しかめ面、にらみ顔、または悲しい表情に関与する顔面筋に投与することを含む。クロストリジウム毒素活性成分は、顔面筋を部分的または完全に麻痺させ、それによって、対象をしかめ面および／またはにらみ顔にするか、または悲しい表情にする能力に影響を与え、それによって、うつ病を治療する。例えば、クロストリジウム毒素活性成分ボツリヌス毒素を、界面活性剤、酸化防止剤、および任意選択で等張性調整剤とともに含む治療有効量の組成物を、眼輪筋、前頭筋、鼻根筋、皺眉筋、または口角下制筋（オトガイ三角筋）のうちの１つ以上に注射することができる。特定の例において、ボツリヌス毒素Ａを含む組成物は、眉間の上にある鼻根筋に注射される。他の投与点およびパラダイムは、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，７５８，８７２号に開示されている。
【０２５５】
本方法の他の実施形態において、単一エピソードまたは再発のいずれかの中等度から重度の大うつ病性障害（ＭＤＤ）を有する成人対象は、治療のために想定され、ＭＤＤ診断は、ＤＳＭ−ＩＶ−ＴＲ基準に基づいている。一実施形態において、単回治療が想定され、他の実施形態において、単回の繰り返し治療が想定され、治療は、２〜６、２〜４，または３〜６ヶ月の間隔で繰り返される。投与されるクロストリジウム毒素活性成分の量は、例えば、３０Ｕまたは５０Ｕであり、いくつかの実施形態において、用量は、複数の注射に分けられる。一実施形態において、複数の注射は、６であり、別の実施形態において、８である。一実施形態において、３０Ｕが、額の眉間領域（鼻根筋および皺眉筋）に対する６回の注射に分けられる。一実施形態において、５０Ｕが、額の眉間領域（鼻根筋および皺眉筋）に対する８回の注射に分けられる。
【０２５６】
有効な治療は、例えば、Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ−Ａｓｂｅｒｇ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｒａｔｉｎｇスケールとして知られる臨床評価など、当該技術分野で知られている主要な有効性尺度によって示される。追加の有効性尺度：臨床ＣＧＩ−Ｓスコア（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｌｏｂａｌ  Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｈａｎｇｅスコア）、臨床ＨＡＭ−Ｄ１７総スコア（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ  ｆｏｒ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ）。
【０２５７】
心不整脈の治療
別の実施形態において、心不整脈を治療するための方法が提供される。不整脈は、心臓の電気伝導系の正常な機能を妨害することによって引き起こされる。通常、心腔（心房と心室）は、協調的に収縮する。収縮する信号は、洞房結節で開始する電気インパルスであり、このインパルスは、心房を通って伝わり、心房を刺激して収縮させる。このインパルスは、房室結節を通過し、次いで、心室を通って伝わり、心室を刺激して収縮させる。伝導系に沿ってどこかで問題が発生し、種々の不整脈を引き起こす可能性がある。心筋自体に問題が生じ、収縮する信号に異なる応答を引き起こし、不整脈も引き起こすか、または正常な伝導系とは独立して心室を収縮させる場合もある。
【０２５８】
不整脈には、頻脈、徐脈、およびリズムが乱れた真の不整脈が挙げられる。不整脈は、心臓のポンプ機能の著しい低下を引き起こす場合、致死性に分類される。ポンプ機能が数秒より長く、著しく低下すると、血液循環が本質的に停止し、数分以内に臓器損傷（例えば脳損傷）が起こる場合がある。致死性不整脈には、心室細動、さらに急速かつ持続的な心室頻拍、または無脈が含まれ、他の不整脈の持続性エピソードが含まれ得る。さらなる種類の不整脈には、心房細動または粗動、多源性心房頻拍、発作性上室頻拍、ウォルフ・パーキンソン・ホワイト症候群、洞性頻脈、洞性徐脈、心臓ブロックに関連する徐脈、洞不全症候群、および異所性心拍が含まれる。
【０２５９】
したがって、心不整脈を治療するための方法が提供され、本方法は、治療有効量のクロストリジウム毒素活性成分を含む本明細書に記載の組成物を投与するステップを含み、本組成物は、心不整脈を有するか、または心不整脈のリスクがある患者の心臓に局所投与される。特に治療可能な不整脈としては、徐脈および頻脈が挙げられる。一実施形態において、組成物は局所投与され、このことは、治療される心筋に、その中に、またはその近傍に直接投与されることを意味する。局所投与としては、心膜内投与、心臓内カテーテル挿入、および組成物の直接心筋注射の投与経路が挙げられる。
【０２６０】
実施例４は、ボツリヌス毒素、トレハロース、ポロキサマー界面活性剤、およびＮＡＣを含む組成物中の治療有効量のボツリヌス毒素を投与することによって、心臓手術を受けている人の治療を記載する。一実施形態において、組成物は、心臓の１つ以上の心外膜脂肪への注射を介して投与される。投与される用量は、１つの例示的な実施形態において、総用量１２５Ｕまで、心外膜脂肪あたり２５Ｕ。別の例示的な実施形態において、総用量２５０Ｕまで、心外膜脂肪あたり５０Ｕが投与される。
【０２６１】
有効な治療は、例えば、４週間または治療後４週間のＥＣＧによって測定される、例えば、心房細動（ＡＦ）の発生率の例えば主要な有効性エンドポイントによって示される。さらなる有効性エンドポイントとしては、入院期間、ＩＣＵでの滞在期間、再入院率、抗凝固薬の使用、手術後心房細動のための介入手技（例えば、アブレーション、ペースメーカー移植、電気的または薬理学的なカーディオバージョン）の必要性が挙げられる。
【実施例】
【０２６２】
以下の実施例は、本発明の組成物および方法の実施形態および態様を例示するものであり、その範囲を限定することを意図するものではない。
【０２６３】
実施例１
ボツリヌス毒素組成物を含有するヒアルロン酸（ＨＡ）の製造および試験
ボツリヌス毒素−ヒアルロン酸製剤を、異なる分子量および固有粘度のヒアルロン酸ナトリウムを以下のような異なる濃度で用いて調製した。種々の分子量および固有粘度の非架橋ヒアルロン酸ナトリウム粉末を、２０ｍＭのヒスチジン、ｐＨ６、８％のトレハロース、４％のポロキサマー１８８、および０．２％のメチオニンの溶液に溶解した。上の表１は、組成物中の構成要素および各構成要素の量をまとめたものである。各組成物の粘度を、Ａｎｔｏｎ  Ｐａｒｒ  Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒを用い、０．０１／ｓ〜１００／ｓまで様々な剪断速度で測定し、値は、０．１／秒の剪断速度、２５℃で報告された。
【０２６４】
ボツリヌス毒素Ａ型（ＢｏＮＴ／Ａ）を含む溶液を、表１のそれぞれのヒアルロン酸組成物に混合し、種々の濃度のボツリヌス毒素を有する、ボツリヌス毒素と直鎖非架橋ヒアルロン酸の組成物を形成する。上の表２は、調製した組成物をまとめたものである。比較対照のために、非架橋ヒアルロン酸を含まないいくつかの組成物を調製した。組成物を２〜８℃で約４８時間保管して、インビボでの投薬の前に、捕捉された空気を散逸させた。
【０２６５】
実施例２
非架橋ヒアルロン酸を含む組成物中のボツリヌス毒素の持続時間の延長
実施例１で調製したボツリヌス毒素−ヒアルロン酸組成物と比較対照組成物を、ラットＤＡＳ（デジタル外転スコア）アッセイを用いてインビボで試験し、効果の持続時間を評価した。試験組成物または対照組成物を、２５Ｇ針を使用して、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した（５０μＬ）。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用してＤＡＳ応答によって評価し、４は、最大麻痺を表す。結果は、図１Ａ〜１Ｃに示される。
【０２６６】
実施例３
非架橋ヒアルロン酸存在下でのボツリヌス毒素の持続時間の延長
市販の製品ＢＯＴＯＸ（登録商標）を使用して、粉末ボツリヌス毒素を、等張生理食塩水（０．９重量％の塩化ナトリウム）を用いて再構成することによって、ボツリヌス毒素血清型Ａ溶液を調製した。このＢｏＮＴ／Ａ溶液を、対照として使用するためにシリンジに充填した。ＢｏＮＴ／Ａ溶液を、２０ｍＭヒスチジン、ｐＨ６、８％トレハロース、４％ポロキサマー１８８、および０．２％メチオニンの中に１．２重量％の非架橋ヒアルロン酸ナトリウム（平均ＭＷが１５００ｋＤａ）を含む製剤とシリンジ混合した（上の表１を参照）。試験組成物および対照組成物を、２５Ｇ針を使用して、ラットの前脛骨筋に筋肉内注射した注射した（５０μＬ）。ラットの麻痺を、０〜４のスコアを使用してＤＡＳ応答によって評価し、４は、最大麻痺を表す。結果を図２に示す。
【０２６７】
実施例４
心不整脈を治療するための方法
２０ｍＭのヒスチジン緩衝液（ｐＨ５．５）中のボツリヌス毒素Ａ型（ＢｏＮＴ／Ａ、５０Ｕ）、１．２重量％のＨＡまたはその塩（重量平均分子量が約１．５８ＭＤａ）、２重量％のトレハロース、４重量％のポロキサマーＰ１８８、０．３重量％のＮＡＣで構成される製剤が提供される。
【０２６８】
白人男性が心臓手術を受けている。外科手術の一部として、７５Ｕのボツリヌス毒素の合計用量を提供するための再構成組成物の量は、男性の心臓の３つの心外膜脂肪への注射を介して投与するために均等に分割される。医療スタッフは、手術中または手術後に不整脈はないと報告している。
【０２６９】
本開示の趣旨および範囲から逸脱することなく、当業者によって多くの変更および改変がなされてもよい。したがって、記載されている実施形態は、例示目的でのみ掲載されており、実施形態は、以下の特許請求の範囲を制限するものと解釈されるべきではないと理解されなくてはならない。したがって、以下の特許請求の範囲は、文字どおりに示される要素の組み合わせだけではなく、実質的に同じ結果を得るために実質的に同じ方法で実質的に同じ機能を果たす全ての同等の要素を含むものであると読み取られる。このように、特許請求の範囲は、上に記載されているもの、概念的に同等であるもの、および本開示の概念を組み合わせたものを含むものと理解される。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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