(57)【要約】本発明の態様は、遺伝子操作しているγδ−Ｔ細胞または遺伝子操作していないγδ−Ｔ細胞を用いて血液腫瘍を治療するための組成物及び方法を含む。いくつかの実施形態において、γδ−Ｔ細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）コンストラクトを含む。このＣＡＲコンストラクトは、抗ＣＤ２０結合ドメインまたは抗Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）結合ドメイン、ＣＤ８ヒンジ及び膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン、それらの組み合わせ、またはそれらの全てを含むことが可能である。このＣＡＲコンストラクトは、ｓＩＬ１５ドメインなどの分泌した一般的なガンマ鎖サイトカインをコードするドメインを含み得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする単離した核酸配列であって、そこにおいて前記ＣＡＲが、
ａ．血液腫瘍細胞の表面で発現される腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に特異的に結合する結合ドメインと、
ｂ．ＣＤ８αヒンジドメインと、
ｃ．ＣＤ８α膜貫通ドメインと、
ｄ．共刺激シグナル伝達領域が、任意で４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）共刺激シグナル伝達領域及びＣＤ２７共刺激シグナル伝達領域から選択される、前記共刺激シグナル伝達領域と、
ｅ．ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインと、を含む、前記核酸配列。
【請求項２】
前記（ａ）〜（ｅ）が、５’から３’の順序である、請求項１に記載の単離した核酸配列。
【請求項３】
前記結合ドメインがＣＤ２０に特異的に結合する、請求項１または２に記載の単離した核酸配列。
【請求項４】
請求項３に記載の単離した核酸配列であって、そこにおいて
ａ．前記結合ドメインが、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７及び９Ｃ１１、好ましくは３Ｈ７からなる群から選択された抗ＣＤ２０抗体が結合するＣＤ２０中のエピトープと選択的に結合する、または前記抗ＣＤ２０抗体と共に結合するために競合し、及び／または
ｂ．前記結合ドメインが、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７及び９Ｃ１１、好ましくは３Ｈ７からなる群から選択される抗ＣＤ２０抗体の相補性決定領域を含む、前記核酸配列。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか一項に記載の単離した核酸配列であって、そこにおいて前記結合ドメインが、
ａ．重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列の配列番号がそれぞれ９９及び１０７である、前記ＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列と、    
ｂ．配列番号１０１、１０３及び１０５のそれぞれ重鎖相補性決定領域１、２及び３配列と、配列番号１０９、１１１及び１１３のそれぞれ軽鎖相補性決定領域１、２及び３配列と、
ｃ．前記ＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ３が、配列番号３４５及び３５３、２０１及び２０９ならびに、２４９及び２５７からなる群から選択される、前記重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）と、
ｄ．前記ＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列が、配列番号がそれぞれ３３９及び３４７、１９５及び２０３ならびに２４３及び２５１からなる群から選択される前記重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列と軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列及び／または
ｅ．前記ＨＣＤＲ３ドメインが、式Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９のアミノ酸配列を含み、式中Ｘ１＝Ａ、ＶまたはＴ、Ｘ２＝Ｋ、Ｘ３＝Ｄ、Ｘ４＝Ｐ、ＦまたはＧ、Ｘ５＝ＳまたはＨ、Ｘ６＝Ｙ、Ｘ７＝Ｇ、Ｘ８＝ＳまたはＨ、Ｘ９＝ＧまたはＦ、Ｘ１０＝ＳまたはＹ、Ｘ１１＝Ｙ、ＮまたはＳ、Ｘ１２＝Ｙ、ＧまたはＨ、Ｘ１３＝Ｇ、ＬまたはＳ、Ｘ１４＝Ｙ、ＭまたはＤ、Ｘ１５＝Ｙ、ＤまたはＶ、Ｘ１６＝Ｇ、Ｖまたは非存在、Ｘ１７＝Ｍまたは非存在、Ｘ１８＝Ｄまたは非存在、Ｘ１９＝Ｖまたは非存在（配列番号３６９）であり、さらにＬＣＤＲ３ドメインが、Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９のアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１＝Ｑ、Ｘ２＝Ｑ、Ｘ３＝ＲまたはＳ、Ｘ４＝Ｎ、ＹまたはＦ、Ｘ５＝Ｎ、Ｄ、またはＹ、Ｘ６＝Ｗ、Ｘ７＝Ｐ、Ｘ８＝Ｌ、Ｘ９＝Ｔ（配列番号３７０）である、前記重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）ドメイン及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）ドメインをコードする、前記核酸配列。
【請求項６】
前記結合ドメインがＣＤ１９またはＢＣＭＡに特異的に結合する、請求項１または２に記載の単離した核酸配列。
【請求項７】
前記結合ドメインがＢＣＭＡに特異的に結合する、請求項６に記載の単離した核酸配列。
【請求項８】
請求項７に記載の単離した核酸配列であって、そこにおいて
ａ．前記結合ドメインが、配列番号２７及び２８、配列番号２９及び３０、ならびに配列番号３１及び３２からなる群から選択される配列を有する抗ＢＣＭＡ結合領域と結合したＢＣＭＡのエピトープと選択的に結合する、または前記抗ＢＣＭＡ結合領域と結合するために競合し、及び／または
ｂ．前記結合ドメインが、配列番号２７及び２８、配列番号２９及び３０、ならびに配列番号３１及び３２からなる群から選択される配列を有する抗ＢＣＭＡ結合領域の相補性決定領域を含む、前記核酸配列。
【請求項９】
請求項１から８のいずれか一項に記載の単離した核酸配列であって、そこにおいて前記ＣＡＲが、
ａ．配列番号１（ＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）または配列番号２（ＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）を含むＣＤ８αヒンジドメイン、
ｂ．配列番号３（ＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ）を含むＣＤ８α膜貫通ドメイン及び／または
ｃ．
（ｉ）配列番号４（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）もしくは、
（ｉｉ）配列番号５（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）を含むＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む、前記核酸配列。
【請求項１０】
請求項９に記載の単離した核酸配列であって、そこにおいて前記ＣＡＲが、
ａ．配列番号６（ＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ）を含む４−１ＢＢ共刺激シグナル伝達領域もしくは
ｂ．配列番号７（ＱＲＲＫＹＲＳＮＫＧＥＳＰＶＥＰＡＥＰＣＨＹＳＣＰＲＥＥＥＧＳＴＩＰＩＱＥＤＹＲＫＰＥＰＡＣＳＰ）を含むＣＤ２７共刺激シグナル伝達領域を含み、または、
前記単離した核酸が、配列番号６を含む前記４−１ＢＢ共刺激シグナル伝達領域及び配列番号７を含む前記ＣＤ２７共刺激シグナル伝達領域をコードする、前記核酸配列。
【請求項１１】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の単離した核酸配列であって、そこにおいて前記核酸配列が、さらに
ａ．分泌されたサイトカインあるいは
ｂ．分泌された一般的なガンマ鎖インターロイキンあるいは
ｃ．分泌されたＩＬ−１５であって、好ましくは、そこにおいて前記ＩＬ−１５が、配列番号３４の配列を含む、より好ましくは、そこにおいて前記ＩＬ−１５が、配列番号３３の分泌シグナル配列に動作可能に連結された３４の配列を含む、もしくはそこにおいて前記ＩＬ−１５が、配列番号４９の分泌シグナル配列に動作可能に連結された配列番号３４の配列を含む、前記分泌されたＩＬ−１５あるいは、
ｄ．分泌された共通ガンマ鎖インターロイキンであって、好ましくはＩＬ−１５及び前記インターロイキンまたはインターロイキン分泌シグナルのアミノ末端のマルチシストロン性リンカー領域であり、好ましくは、そこにおいて前記マルチシストロン性リンカー領域が、配列番号４３〜４５、４７もしくは、５２〜５５もしくはそれらの組み合わせのいずれか１つの配列を含む、または、配列番号５６または６０などの内部リボソーム侵入部位をコードする、前記分泌された共通ガンマ鎖インターロイキンをコードする、前記核酸配列。
【請求項１２】
請求項１〜５、９〜１０または１１のいずれか一項に記載の単離した核酸配列であって、そこにおいて前記結合ドメインがＣＤ２０に特異的に結合し、かつ前記核酸が配列番号８、９、１０、１１、１２、２０、４６、４８、または５７及び５８をコードする、前記核酸配列。
【請求項１３】
前記核酸が、配列番号１３、１４、１５、１６、１７、５０、５１、または５９の配列を含む、請求項１２に記載の単離した核酸配列。
【請求項１４】
前記結合ドメインがＢＣＭＡに特異的に結合し、かつ前記核酸が配列番号３５、３６、３７、または３８をコードする、請求項１から２、６から１０、または１１のいずれか一項に記載の単離した核酸配列。
【請求項１５】
前記核酸が、配列番号３９、４０、４１、または４２の配列を含む、請求項１４に記載の単離した核酸配列。
【請求項１６】
請求項１から１５に記載の先行する単離した核酸のいずれか１つによりコードされるアミノ酸配列を含むキメラ抗原受容体を含むポリペプチド。
【請求項１７】
請求項１６に記載のポリペプチドを含む、または請求項１から１５のいずれか一項によるＣＡＲコンストラクトをコードする核酸を含むγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、前記ポリペプチドの結合ドメインまたは前記γδＴ細胞の表面上でＣＡＲをコードする前記核酸を機能的に発現する、前記γδＴ細胞。
【請求項１８】
請求項１７に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、前記腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞に対して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／またはｉｎ  ｖｉｖｏの細胞傷害活性を示す、前記γδＴ細胞。
【請求項１９】
請求項１８のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞の前記血液腫瘍細胞傷害活性が、ＣＡＲコンストラクトを含まない対照γδＴ細胞において、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／またはｉｎ  ｖｉｖｏの血液腫瘍細胞傷害活性の生来のレベルよりも大きい、前記γδＴ細胞。
【請求項２０】
請求項１９に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、ＨＬＡクラスＩ＋血液腫瘍細胞に対して血液腫瘍細胞傷害活性の増大を示す、前記γδＴ細胞。
【請求項２１】
請求項１８から２０のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記血液腫瘍細胞傷害活性または血液腫瘍細胞傷害活性の増大が、前記血液腫瘍細胞との最初の接触後、約、少なくとも、または少なくとも約６日から１８０日間持続する、前記γδＴ細胞。
【請求項２２】
請求項１８から２１のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、前記腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞との接触に応答して増殖する、前記γδＴ細胞。
【請求項２３】
請求項１８から２２のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、前記δＴ細胞の表面上でＣＡＲをコードする前記核酸を機能的に発現しない対照γδＴ細胞と比較して、前記腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞との接触に応答して増殖が増大する、前記γδＴ細胞。
【請求項２４】
請求項１８から２３のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、前記腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す前記血液腫瘍細胞を含む宿主生物中で増殖する、前記γδＴ細胞。
【請求項２５】
請求項２２から２４のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞の増殖またはγδＴ細胞の増殖の増大が、前記血液腫瘍細胞との最初の接触後、約、少なくとも、または少なくとも約６日から１８０日間持続する、前記γδＴ細胞。
【請求項２６】
請求項１７から２５のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、前記血液腫瘍細胞との接触後に腫瘍壊死因子アルファまたはインターフェロンガンマを含む炎症誘発性サイトカインを発現する、前記γδＴ細胞。
【請求項２７】
請求項１７から２６のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて同種異系宿主に投与されたαβＴ細胞によって示された移植片対宿主応答と比較して、同種異系宿主に導入された場合、前記γδＴ細胞が示す移植片対宿主応答が、低下、実質的な低下、実質的にない、またはなくなる、前記γδＴ細胞。
【請求項２８】
請求項１７から２７のいずれか一項に記載のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記γδＴ細胞が、δ１、δ２、δ３、またはδ４γδＴ細胞、好ましくはδ２−γδＴ細胞、より好ましくはδ１γδＴ細胞である、前記γδＴ細胞。
【請求項２９】
請求項１７から２８のいずれか１項に記載の複数のγδＴ細胞。
【請求項３０】
請求項２９に記載の複数のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記複数が、少なくとも約１０８γδＴ細胞、好ましくは約１０８γδＴ細胞から約１０１１のγδＴ細胞を含む、前記複数のγδＴ細胞。
【請求項３１】
請求項２９または３０に記載の複数のγδＴ細胞であって、そこにおいて前記複数が、少なくとも６０％、８０％、または約６０％もしくは８０％から約９０％もしくは９５％のδ１、δ２、δ３、またはδ４γδＴ細胞、好ましくはδ１またはδ２γδＴ細胞、より好ましくはδ２−γδＴ細胞、最も好ましくはδ１γδＴ細胞である組成物を含む、前記複数のγδＴ細胞。
【請求項３２】
請求項１７から２８のいずれか一項に記載のγδＴ細胞または請求項２９から３１のいずれか一項に記載の複数のγδＴ細胞を作製する方法であって、そこにおいて前記方法が、請求項１から１５のいずれか一項に記載の単離した核酸配列を含むコンストラクトでγδＴ細胞（複数可）をトランスフェクトすることを含む、前記方法。
【請求項３３】
前記方法がレトロウイルス形質導入を含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
請求項３２または３３に記載の方法であって、そこにおいて前記方法がｅｘ  ｖｉｖｏでの前記γδＴ細胞（複数可）の増殖を含み、そこにおいて前記ｅｘ  ｖｉｖｏでの増殖が、前記単離した核酸配列のトランスフェクションの前及び／または後に実施される、前記方法。
【請求項３５】
薬学的に受容可能な賦形剤と、請求項１７から２８のいずれか一項に記載のγδＴ細胞、または請求項２９から３１のいずれか一項に記載の複数のγδＴ細胞とを含む医薬組成物。
【請求項３６】
血液腫瘍細胞を殺傷する方法であって、前記方法が、腫瘍細胞の殺傷に有効な量である、請求項１７から２８のいずれか一項に記載のγδＴ細胞、請求項２９から３１のいずれか一項に記載の複数のγδＴ細胞または請求項３５に記載の医薬組成物と、前記血液腫瘍細胞を接触させることを含む、前記方法。
【請求項３７】
請求項３６に記載の方法であって、そこにおいて前記方法が、治療上有効な量である、前記γδＴ細胞（複数可）または前記医薬組成物を、前記血液腫瘍細胞を含む宿主生物に導入することを含む、前記方法。
【請求項３８】
請求項３７に記載の方法であって、そこにおいて前記方法が、前記血液腫瘍細胞を含む宿主生物に、治療上有効な量である、前記γδＴ細胞（複数可）または前記医薬組成物を導入し、同時にまたは連続して、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法を投与することを含む、前記方法。
【請求項３９】
請求項３８に記載の方法であって、そこにおいて前記一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の投与方法が、前記γδＴ細胞（複数可）の導入と同時に、または一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の有効量を連続して投与することで、前記導入したγδＴ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大させることを含み、好ましくは、そこにおいて前記方法がＩＬ−２を投与することを含み、より好ましくは、そこにおいて前記方法がＩＬ−１５を投与することを含む、前記方法。
【請求項４０】
請求項３９に記載の方法であって、そこにおいて前記一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法が、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の有効な量を投与することで、前記γδＴ細胞（複数可）を導入する前及び／または導入後に、前記導入したγδＴ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大させることを含む、前記方法。
【請求項４１】
請求項３８から４０のいずれか一項に記載の方法であって、そこにおいて前記一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法が、前記γδＴ細胞（複数可）を導入する前のリンパ球の枯渇化を含む、前記方法。
【請求項４２】
請求項３８から４０のいずれか一項に記載の方法であって、そこにおいて前記一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法が、前記導入したγδＴ細胞（複数可）からの１種または複数種の一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の分泌を含む、前記方法。
【請求項４３】
請求項３７から４２のいずれか一項に記載の方法であって、そこにおいて前記方法が、対照の生物と比較して、前記宿主生物のｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍量を減少させ、及び／または前記宿主生物の平均生存時間を増加させ、そこにおいて前記対照の生物が、前記γδＴ細胞（複数可）または前記医薬組成物とともに処置しない、前記方法。
【請求項４４】
前記方法が、治療が必要な対象のがんを治療する方法である、請求項３６から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
腫瘍細胞の殺傷に有効な量である、請求項１７から２８のいずれか一項に記載のγδＴ細胞、請求項２９から３１のいずれか一項に記載の複数のγδＴ細胞または、治療が必要な対象の血液腫瘍細胞癌を治療する薬物の製造における請求項３５に記載の医薬組成物の利用。
【請求項４６】
治療が必要な対象のがんを治療する方法であって、前記方法が、
ａ．前記がんがＣＤ２０の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞を含む、治療上有効な量のγδＴ細胞を投与することまたは、
ｂ．前記がんが、ＢＣＭＡの細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞を含む、治療上有効な量のγδＴ細胞を投与することを含む、前記方法。
【請求項４７】
請求項４６に記載の方法であって、そこにおいて前記方法が、γδＴ細胞の投与と同時に、または連続して一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法を含む、前記方法。
【請求項４８】
請求項４６または４７に記載の方法であって、そこにおいて前記方法が、前記γδＴ細胞の複数回投与を実施することを含み、そこにおいて前記複数回投与の間の間隔が、少なくとも約１週間、好ましくは少なくとも約２、３、４、５、６、７、８または１２週間、及び／または６か月または１２か月に１回以下である、前記方法。
【請求項４９】
請求項４６から４８のいずれか一項に記載の方法で用いる医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年１０月１日出願の米国仮出願第６２／７３９８２２号の優先権を主張し、その内容は、あらゆる目的のために本明細書全体に組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。２０１９年１２月１７日に作成された上記のＡＳＣＩＩコピ−は、ＡＤＣ−０００５−ＰＣＴ＿ＳＬ．ｔｘｔという名前で、サイズは１４７６１６バイトである。
【背景技術】
【０００３】
養子免疫細胞療法は、基本的なリンホカイン活性化及び／または腫瘍浸潤に焦点を当てた初期から、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）などの遺伝子操作された抗原受容体を発現させるために、これらの免疫細胞を遺伝子操作するようなごく最近の戦略まで、３０年間以上、絶え間なく繰り返し受けられてきた。その中で、これらのアプロ−チの治癒上の可能性についていくつかのヒント及び兆候が見られていたが、まだ行うべきことが多く存在している。特に、ＣＡＲ−Ｔリンパ球による腫瘍根絶の成功は、ＣＡＲ−Ｔ細胞の持続性及びエフェクター機能に依存するが、そのどちらかが過剰になると、患者の移植片対宿主効果が誘発される可能性がある。したがって、当技術分野では、有効性と安全性のバランスをとることを目的として、Ｔ細胞とＮＫ細胞の両方、特にαβＴ細胞で無数の共刺激戦略を試験している。注目すべきことに、αβＴ細胞と比較して、γδＴ細胞の共刺激要件に関する現状の理解の欠如を考慮すると、同種異系γδＴ細胞へのこれらの様々なアプロ−チの任意の実際の翻訳は、よく見ても不確実である。例えば、Ｒｉｂｏｔ  ｅｔ  ａｌ．，「Ｓｅａｒｃｈｉｎｇ  ｆｏｒ“ｓｉｇｎａｌ  ２”：ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  γδ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ」、Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．（２０１１）６８：２３４５−２３５５を参照のこと。
【０００４】
したがって、細胞の特異性または選択性を改善するために、例えば移植片対宿主（ＧＶＨ）効果を低減または回避することにより、細胞の安全性を改善するために、例えばエフェクター機能の抑制を回避して細胞の有効性を改善するためにならびに対象への投与時の細胞の活性及び／または生存を改善するために、依然として、戦略を改善する必要がある。そのようなニ−ズを満たす方法、細胞、組成物、キット及びシステムを提供する。
【発明の概要】
【０００５】
本発明の態様は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする単離した核酸配列を含み、そこにおいてＣＡＲは、血液腫瘍細胞の表面で発現する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に特異的に結合する結合ドメインを含み、この結合ドメインは、例えば、ＣＤ８αのヒンジドメイン、例えば、ＣＤ８αの膜貫通ドメイン、共刺激シグナル伝達領域などであり、そこにおいて、共刺激シグナル伝達領域は、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）共刺激シグナル伝達領域及びＣＤ２７共刺激シグナル伝達領域、ならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインから任意に選択される。
【０００６】
本発明の態様は、本明細書に記載される通り遺伝子操作していないγδＴ細胞、ならびに本明細書に記載される通りＣＡＲコンストラクトをコードする核酸を含むγδＴ細胞をさらに含み、そこにおいてγδＴ細胞は、γδＴ細胞の表面上のＣＡＲをコードする核酸を機能的に発現する。本発明の態様は、本明細書に記載される通り、複数の遺伝子操作されたまたは遺伝子操作されていないγδＴ細胞をさらに含む。本発明の態様は、本明細書に記載のγδＴ細胞または複数のγδＴ細胞を作製する方法をさらに含み、そこにおいてこの方法は、本明細書に記載のコンストラクトでγδＴ細胞（複数可）をトランスフェクトすることを含む。本発明の態様は、本明細書に記載される通り、薬学的に受容可能な賦形剤及びγδＴ細胞または複数のγδＴ細胞を含む医薬組成物をさらに含む。本発明の態様は、本明細書に記載される通り、腫瘍細胞傷害の有効量であるγδＴ細胞と、血液腫瘍細胞を接触させることをさらに含む。
【０００７】
一態様において、本発明は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする単離した核酸配列を提供し、そこにおいて、ＣＡＲは、（ａ）血液腫瘍細胞の表面で発現する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）と特異的に結合する結合ドメインと、（ｂ）ＣＤ８αヒンジドメインなどのヒンジドメインと、（ｃ）ＣＤ８α膜貫通ドメインなどの膜貫通ドメインと、（ｄ）共刺激シグナル伝達領域または共刺激シグナル伝達領域の組み合わせであり、任意で、そこにおいて、共刺激シグナル伝達領域は、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）共刺激シグナル伝達領域及びＣＤ２７共刺激シグナル伝達領域から選択される共刺激シグナル伝達領域と、（ｅ）ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインなどのシグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態において、前述のエレメント（ａ）〜（ｅ）は、単離した核酸のセンス鎖上に５’から３’の順でコードされている。
【０００８】
いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＣＤ２０と特異的に結合する。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７及び９Ｃ１１、好ましくは３Ｈ７からなる群から選択された抗ＣＤ２０抗体が結合するＣＤ２０中のエピトープと選択的に結合する、またはその抗ＣＤ２０抗体と共に結合するために競合する。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７及び９Ｃ１１、好ましくは３Ｈ７からなる群から選択される抗ＣＤ２０抗体の相補性決定領域を含む。
【０００９】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列をコードする。例えば、そこにおいて、このＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列は、それぞれ配列番号９９及び１０７であり、配列番号がそれぞれ１０１、１０３及び１０５の重鎖相補性決定領域１、２及び３配列と、配列番号がそれぞれ１０９、１１１及び１１３の軽鎖相補性決定領域１、２及び３配列と、重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）であって、そこにおいて、ＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ３は、配列番号３４５及び３５３、２０１及び２０９、ならびに２４９及び２５７からなる群から選択されるＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ３と、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列であって、そこにおいてＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列は、配列番号３３９及び３４７、１９５及び２０３ならびに２４３及び２５１からなる群から選択されるＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列、及び／または、重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）ドメイン及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）ドメインであって、そこにおいて、ＨＣＤＲ３ドメインは、式Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９のアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１＝Ａ、ＶまたはＴ、Ｘ２＝Ｋ、Ｘ３＝Ｄ、Ｘ４＝Ｐ、ＦまたはＧ、Ｘ５＝ＳまたはＨ、Ｘ６＝Ｙ、Ｘ７＝Ｇ、Ｘ８＝ＳまたはＨ、Ｘ９＝ＧまたはＦ、Ｘ１０＝ＳまたはＹ、Ｘ１１＝Ｙ、ＮまたはＳ、Ｘ１２＝Ｙ、ＧまたはＨ、Ｘ１３＝Ｇ、ＬまたはＳ、Ｘ１４＝Ｙ、ＭまたはＤ、Ｘ１５＝Ｙ、ＤまたはＶ、Ｘ１６＝Ｇ、Ｖまたは非存在、Ｘ１７＝Ｍまたは非存在、Ｘ１８＝Ｄまたは非存在、Ｘ１９＝Ｖまたは非存在（配列番号３６９）であり、ＬＣＤＲ３ドメインは、Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９のアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１＝Ｑ、Ｘ２＝Ｑ、Ｘ３＝ＲまたはＳ、Ｘ４＝Ｎ、ＹまたはＦ、Ｘ５＝Ｎ、Ｄ、またはＹ、Ｘ６＝Ｗ、Ｘ７＝Ｐ、Ｘ８＝Ｌ、Ｘ９＝Ｔ（配列番号３７０）である。
【００１０】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、ＣＤ１９またはＢＣＭＡに特異的に結合する結合ドメインをコードする。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＢＣＭＡに特異的に結合する。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、配列番号２７及び２８、配列番号２９及び３０、ならびに配列番号３１及び３２からなる群から選択される配列を有する抗ＢＣＭＡ結合領域と結合したＢＣＭＡのエピトープと選択的に結合する、またはその抗ＢＣＭＡ結合領域と結合するために競合する。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、配列番号２７及び２８、配列番号２９及び３０、ならびに配列番号３１及び３２からなる群から選択される配列を有する抗ＢＣＭＡ結合領域の相補性決定領域を含む。
【００１１】
前述のいずれか１つまたは本明細書に記載される通りのいくつかの実施形態において、ＣＡＲは、配列番号１（ＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥ  ＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）または配列番号２（ＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲ  ＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）を含むＣＤ８αヒンジドメインを含む。前述のいずれか１つまたは本明細書に記載される通りのいくつかの実施形態において、ＣＡＲは、配列番号３（ＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ）を含むＣＤ８α膜貫通ドメインを含む。
【００１２】
前述のいずれか１つまたは本明細書に記載される通りいくつかの実施形態において、ＣＡＲは、配列番号４（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）または配列番号５（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭ  ＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）を含むＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む。
【００１３】
前述のいずれか１つまたは本明細書に記載される通りのいくつかの実施形態において、ＣＡＲは、配列番号６（ＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ）を含む４−１ＢＢ共刺激シグナル伝達領域または配列番号７（ＱＲＲＫＹＲＳＮＫＧＥＳＰＶＥＰＡＥＰＣＨ  ＹＳＣＰＲＥＥＥＧＳＴＩＰＩＱＥＤＹＲＫＰＥＰＡＣＳＰ）を含むＣＤ２７共刺激シグナル伝達領域を含む。前述のいずれか１つまたは本明細書に記載される通りのいくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号６を含む４−１ＢＢ共刺激シグナル伝達領域及び配列番号７を含むＣＤ２７共刺激シグナル伝達領域をコードする。
【００１４】
前述のいずれか１つまたは本明細書に記載される通りのいくつかの実施形態において、単離した核酸は、分泌されたサイトカイン、もしくは分泌された一般的なガンマ鎖インターロイキンまたは、ＩＬ−１５などの分泌された一般的なガンマ鎖インターロイキンをコードし、好ましくは、ＩＬ−１５などのこの分泌された一般的なガンマ鎖インターロイキンは、分泌シグナル配列（例えば、配列番号３３または４９の分泌シグナル）に動作可能に連結されたインターロイキンポリペプチド配列を含む。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、分泌されたＩＬ−１５をコードし、好ましくは、そこにおいてＩＬ−１５は、配列番号３４の配列を含み、より好ましくは、そこにおいてＩＬ−１５は、配列番号３３の分泌シグナル配列に動作可能に連結された３４の配列を含む、またはそこにおいてＩＬ−１５は、配列番号４９の分泌シグナル配列に動作可能に連結された配列番号３４の配列を含む。場合によっては、分泌されたサイトカイン、一般的なガンマ鎖インターロイキン及び／またはＩＬ−１５は、結合領域、ヒンジ及び膜貫通ドメイン、シグナル伝達ドメイン及び／または共刺激エンドドメインにカルボキシ末端がコードされている。場合によっては、分泌されたサイトカイン、一般的なガンマ鎖インターロイキン及び／またはＩＬ−１５は、結合領域、ヒンジ及び膜貫通ドメイン、シグナル伝達ドメイン及び／または共刺激エンドドメインのセンス鎖３’にコードされる。
【００１５】
いくつかの実施形態において、核酸は、ＣＡＲ及び分泌されたサイトカイン、一般的なガンマ鎖サイトカイン、または別々のポリペプチドとしてＩＬ−１５の翻訳を容易にするように構成されたマルチシストロン性リンカー領域をコードする。いくつかの実施形態において、マルチシストロン性リンカー領域は、自己切断配列及び／または切断ポリペプチド配列をコードする。場合によっては、自己切断配列は、Ｐ２Ａ、Ｆ２Ａ、Ｔ２Ａ、またはＥ２Ａ自己切断配列である。場合によっては、切断配列は、フューリン切断配列である。場合によっては、切断配列（例えば、フューリン切断配列）は、自己切断配列のアミノ末端である。いくつかの実施形態において、マルチシストロン性リンカー領域は、内部リボソーム侵入部位をコードする。いくつかの実施形態において、核酸は、インターロイキンもしくはサイトカインまたはインターロイキンもしくはサイトカイン分泌シグナルに、マルチシストロン性リンカー領域のアミノ末端をコードし、好ましくは、そこにおいてこのマルチシストロン性リンカー領域は、配列番号４３〜４５、４７もしくは５２〜５５またはそれらの組み合わせのいずれか１つの配列を含む、または例えば配列番号５６もしくは６０の内部リボソーム侵入部位をコードする。
【００１６】
いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＣＤ２０に特異的に結合し、核酸は、配列番号８、９、１０、１１、１２、４６、４８、または５７及び５８をコードする。いくつかの実施形態において、核酸は、配列番号１３、１４、１５、１６、１７、５０、５１または５９の配列を含む。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＢＣＭＡに特異的に結合し、核酸は、配列番号３５、３６、３７または３８をコードする。いくつかの実施形態において、核酸は、配列番号３９、４０、４１または４２の配列を含む。
【００１７】
いくつかの態様において、本発明は、前述の単離した核酸のいずれか１つにより、または本明細書に記載される通りコードされるポリペプチドまたは複数のポリペプチドを提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、前述のポリペプチドまたは複数のポリペプチドのいずれか１つを含むγδＴ細胞などのＴ細胞を提供する。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、Ｔ細胞の表面上に本明細書に記載される通り機能性結合ドメインを発現する。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、ＩＬ−１５などの一般的なガンマ鎖インターロイキンなどのサイトカインを分泌する。
【００１８】
いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞に対して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／またはｉｎ  ｖｉｖｏの細胞傷害活性を示す。いくつかの実施形態において、これらの例えば、γδ、Ｔ細胞の血液腫瘍細胞傷害活性は、例えば、γδ、Ｔ細胞などのＣＡＲコンストラクトを含まない対照において、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／またはｉｎ  ｖｉｖｏの血液腫瘍細胞傷害活性の生来のレベルよりも大きい。いくつかの実施形態において、例えば、γδ、Ｔ細胞は、ＨＬＡクラスＩ＋血液腫瘍細胞に対して血液腫瘍細胞傷害活性が増大する。いくつかの実施形態において、血液腫瘍細胞傷害活性または血液腫瘍細胞傷害活性の増大は、血液腫瘍細胞との最初の接触後、約、少なくとも、または少なくとも約６日から１８０日間持続する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、例えば、γδ、Ｔ細胞は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞との接触に応答して増殖する。いくつかの実施形態において、γδ、Ｔ細胞などの表面上でＣＡＲをコードする核酸を機能的に発現しない、γδ、Ｔ細胞などの対照と比較して、例えばγδ、Ｔ細胞は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞との接触に応答して増殖が増大する。いくつかの実施形態において、例えば、γδ、Ｔ細胞は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞を含む宿主生物において増殖する。
【００２０】
いくつかの実施形態において、γδ、Ｔ細胞などの細胞増殖またはγδ、Ｔ細胞の細胞増殖の増大は、血液腫瘍細胞との最初の接触後、約、少なくとも、または少なくとも約６日から１８０日間持続する。いくつかの実施形態において、例えば、γδ、Ｔ細胞は、血液腫瘍細胞との接触後に、腫瘍壊死因子アルファ及び／またはインターフェロンガンマなどの炎症誘発性サイトカイン（複数可）を発現する。いくつかの実施形態において、例えば、γδ、Ｔ細胞は、血液腫瘍細胞との接触後に、細胞表面でＣＡＲをコードした核酸を機能的に発現しない対照であるＴ細胞よりも多い量で、腫瘍壊死因子アルファ及び／またはインターフェロンガンマなどの炎症誘発性サイトカイン（複数可）を発現する。
【００２１】
いくつかの実施形態において、同種異系宿主が投与されたαβＴ細胞によって示された移植片対宿主応答と比較して、同種異系宿主が導入された場合、例えば、γδ、Ｔ細胞で示される移植片対宿主応答が、低下、実質的な低下、実質的にない、またはなくなる。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞はγＴ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞はδＴ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞はγδＴ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、δ１、δ２、δ３またはδ４Ｔ細胞であり、好ましくはδ２−δＴ細胞、より好ましくはδ１δＴ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、δ１、δ２、δ３またはδ４γδＴ細胞であり、好ましくはδ２−γδＴ細胞、より好ましくはδ１γδＴ細胞である。
【００２２】
別の態様において、本発明は、前述γδ、Ｔ細胞などのいずれか１つの複数、または本明細書に記載される通りγδ、Ｔ細胞などの複数を提供する。いくつかの実施形態において、複数は、少なくとも約１０８の例えば、γδ、Ｔ細胞、好ましくは約１０８の例えば、γδ、Ｔ細胞、約１０１１の例えば、γδ、Ｔ細胞を含む。いくつかの実施形態において、複数は、少なくとも６０％、８０％、または約６０％もしくは８０％から約９０％もしくは９５％のδ１、δ２、δ３、またはδ４γδＴ細胞、好ましくはδ１またはδ２γδＴ細胞、より好ましくはδ２−γδＴ細胞、最も好ましくはδ１γδＴ細胞である組成物を含む。
【００２３】
いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書に記載される通り例えばγδ、Ｔ細胞、または本明細書に記載される通り複数のγδ、Ｔ細胞などを作製する方法を提供し、そこにおいて、この方法は、本明細書に記載される通り単離した核酸配列を含むコンストラクトを有するＴ細胞（複数可）をトランスフェクトすることを含む。場合によっては、この方法は、例えば、ガンマ、レトロウイルス形質導入を含む。場合によっては、この方法は、ｅｘ  ｖｉｖｏでのＴ細胞（複数可）の増殖を含み、そこにおいて、このｅｘ  ｖｉｖｏでの増殖は、単離した核酸配列のトランスフェクションの前及び／または後に実施される。場合によっては、この方法は、ｅｘ  ｖｉｖｏでのＴ細胞（複数可）の増殖を含み、そこにおいて、このｅｘ  ｖｉｖｏでの増殖は、単離した核酸配列のトランスフェクションの前及び後に実施される。場合によっては、この方法は、ｅｘ  ｖｉｖｏでのＴ細胞（複数可）の増殖を含み、そこにおいて、このｅｘ  ｖｉｖｏでの増殖は、単離した核酸配列のトランスフェクションの後に実施される。いくつかの実施形態において、この方法は、トランスフェクションの約３０日以内に、本明細書に記載のＣＡＲを機能的に発現する、約１０８の例えばγδ、Ｔ細胞から、約１０１１の例えばγδ、Ｔ細胞を作製することを含む。
【００２４】
別の態様において、本発明は、薬学的に受容可能な賦形剤及び本明細書に記載されるγδ、Ｔ細胞などを含む医薬組成物を提供する。
【００２５】
別の態様において、本発明は、血液腫瘍細胞を殺傷する方法を提供し、この方法は、腫瘍細胞殺傷に有効な量の、例えば、γδ、Ｔ細胞、複数のそのような細胞及び／または本明細書に記載される通りそのような細胞を含む医薬組成物と、血液腫瘍細胞を接触させることを含む。いくつかの実施形態において、この方法は、治療上有効な量の、例えば、γδ、Ｔ細胞（複数可）または医薬組成物を、血液腫瘍細胞を含む宿主生物に導入することを含む。いくつかの実施形態において、方法には、血液腫瘍細胞を含む宿主生物に、治療上有効な量である、例えば、γδ、Ｔ細胞（複数可）または医薬組成物を導入し、同時にまたは連続して、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法を含む。
【００２６】
いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の投与方法は、例えば、γδ、Ｔ細胞（複数可）の導入と同時に、または一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の有効量を連続して投与することで、その導入した例えばγδ、Ｔ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大させ、好ましくは、そこにおいてこの方法はＩＬ−２を投与することを含み、より好ましくは、そこにおいて、この方法は、ＩＬ−１５を投与することを含む。いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法は、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の有効な量を投与することで、Ｔ細胞（複数可）を導入する前及び／または導入後に、導入したＴ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大させることを含む。いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法は、Ｔ細胞（複数可）を導入する前のリンパ球の枯渇化を含む。
【００２７】
いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法は、導入したＴ細胞（複数可）からの１種または複数種の一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の分泌を含む。いくつかの実施形態において、この方法は、対照の生物と比較して、宿主生物のｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍量を減少させ、及び／または宿主生物の平均生存時間を増加させ、そこにおいて、対照の生物は、Ｔ細胞（複数可）または医薬組成物とともに処置しない。いくつかの実施形態において、この方法は、治療が必要な対象のがんを治療する方法である。いくつかの実施形態において、本発明は、例えば、γδ、Ｔ細胞、複数の例えば、γδ、Ｔ細胞（複数可）、または治療が必要な対象の血液腫瘍細胞を治療する際に用いるための本明細書に記載の医薬組成物を提供する。
【００２８】
一態様において、本発明は、治療上有効な量のγδＴ細胞を投与することでがんを治療する方法を提供し、そこにおいて、がんはＣＤ２０の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞であり、または、治療上有効な量のγδＴ細胞を投与することでがんを治療する方法を提供し、そこにおいて、がんはＢＣＭＡの細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞を含む。いくつかの実施形態において、この方法は、γδＴ細胞の投与と同時に、または連続して、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法を投与することを含む。いくつかの実施形態において、この方法は、γδＴ細胞の複数回投与を実施することを含み、そこにおいて、この複数回投与の間の間隔は、少なくとも約１週間、好ましくは少なくとも約２、３、４、５、６、７、８または１２週間、及び／または６か月または１２か月に１回以下である。いくつかの実施形態において、本発明は、前述の治療方法のいずれか１つを用いるための医薬組成物を提供する。
【００２９】
参照による援用
本明細書で言及される全ての出版物、特許及び特許出願は、各出版物、特許または特許出願が、参照により組み込まれるために、個別的かつ具体的に示された場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】１つの共刺激シグナル伝達エンドドメイン（左）または２つの共刺激シグナル伝達エンドドメイン（右）を含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）の実施形態の概略図を示す。本明細書で用いる共刺激シグナル伝達エンドドメインは、共刺激エンドドメイン（ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｅｎｄｏｄｏｍａｉｎ）または共刺激エンドドメイン（ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  ｅｎｄｏｄｏｍａｉｎ）とも呼ばれる。模範的なＣＡＲにおいて有用である模範的な共刺激シグナル伝達エンドドメインには、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４１ＢＢ）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＣＤ２７、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、ＴＬＲ２及びそれらの組み合わせが含まれるがこれらに限定されない。
【図２】ＣＤ２０内のエピトープに特異的に結合する結合ドメインの配列を示す。図２では、登場順に、それぞれ、配列番号３３５〜３６３、９９、３６４、１０７及び３６５〜３６８を開示する。
【図３】形質導入していないＶδ１細胞及び様々なＣＤ２０特異的ＣＡＲコンストラクトで形質導入されたＶδ１細胞によるＣＤ２０発現正常Ｂ細胞のアポトーシス誘導を示す。
【図４】リンパ腫細胞株に対するＣＤ２０特異的ＣＡＲγδＴ細胞の強力な細胞毒性活性を示す。
【図５】Ｒａｊｉ細胞に対して本明細書に記載の遺伝子操作されたＣＡＲγδＴ細胞の細胞毒性を示す。上：３Ｂ９、２Ｂ７、３Ｈ７及び９Ｃ１１のＣＤＲを含む結合ドメインは、４−１ＢＢ共刺激エンドドメイン及びＣＤ３ζシグナル伝達ドメインをコードするＣＡＲコンストラクトで試験している。
【図６】Ｒａｊｉ細胞に対して本明細書に記載の遺伝子操作されたＣＡＲγδＴ細胞の細胞毒性を示す。上：３Ｈ７のＣＤＲを含む結合ドメインを試験している。下：示す通り、３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン及び様々な共刺激エンドドメインを含むＣＡＲを発現するγδＴ細胞のＲａｊｉ細胞に対する細胞毒性を示している。３Ｈ７−ＣＤ２７ｚ  ＣＡＲには、３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、ＣＤ２７共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインがある。３Ｈ７−５．１には、３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインがある。
【図７】示したγδＴ細胞の再投与を伴う細胞毒性アッセイの結果を示す。矢印は再投与の時間を示している。
【図８】皮下Ｒａｊｉ細胞ＮＯＤ  ｓｃｉｄガンマ（ＮＳＧ）マウスモデルにおける本明細書に記載のγδＴ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を示す。
【図９】ｉｎ  ｖｉｖｏの腫瘍内のＣＤ２０特異的γδＣＡＲ−Ｔ細胞の表を説明しており、γδＣＡＲ−Ｔ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏ増殖及び腫瘍の排除を示す。
【図１０】ＣＤ２０＋リンパ腫腫瘍及び他の器官におけるＣＤ２０特異的γδＣＡＲ−Ｔ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏ増殖を示す。
【図１１】播種性Ｒａｊｉ細胞ＮＯＤ  ｓｃｉｄガンマ（ＮＳＧ）マウスモデルにおける本明細書に記載のγδＴ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を示す。
【図１２】移植片対宿主（ＧＶＨ）応答を誘導することなく、ヒトＩＬ−１５を発現するＳＲＧ−１５マウスモデルにおけるＣＤ２０特異的γδＣＡＲ−Ｔ細胞による播種性Ｒａｊｉ腫瘍の有効な治療を示す。対照的に、ＣＤ２０特異的αβＣＡＲ−Ｔ細胞は致死的なＧＶＨ応答を誘発する。
【図１３】遺伝子操作されたγδＣＡＲ−Ｔ細胞及び遺伝子操作していないγδＣＡＲ−Ｔ細胞を製造するための製造工程を示す。
【図１４】Ｒａｊｉ細胞を皮下移植した後に異なる移植部位でＲａｊｉ細胞を再投与した（６２日目）ＮＳＧマウスにおけるｓＩＬ１５を発現するＣＤ２０ ＣＡＲ Ｖδ１Ｔ細胞の治療の有効性及び持続性を示す。
【図１５】示した抗Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）ｓｃＦｖ  ＣＡＲコンストラクトを有するＶδ１細胞の形質導入効率を示す。ＢＣＭＡは、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１７（ＴＮＦＲＳＦ１７）としても知られている。
【図１６】多発性骨髄腫ＢＣＭＡ＋細胞株パネルに対する様々な抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲコンストラクトで形質導入されたＶδ１Ｔ細胞の細胞毒性活性を示す。ＳＣＡＢＥＲ−Ｌｕｃ細胞株は、ＢＣＭＡ陰性の対照細胞株である。
【図１７】多発性骨髄腫及びバーキットリンパ腫ＢＣＭＡ＋細胞株パネルに対する様々な抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲコンストラクトで形質導入されたＶδ１Ｔ細胞の細胞毒性活性を示す。
【図１８】皮下移植したＮＣＩ−Ｈ９２９細胞に対する抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲＶδ１Ｔ細胞のｉｎ  ｖｉｖｏでの治療の有効性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
定義：
本明細書を解釈する目的のために、下の定義を適用するが、適当と認められる場合には、単数形で用いられる用語はその複数形も含み、逆もまた同様である。説明される任意の定義が、参照により本明細書に組み込まれる任意の文書と矛盾する場合には、下記に説明する定義が優先されるものとする。別段に定義されない限り、本明細書で用いられる全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。
【００３２】
本明細書で用いられる用語「約」は、量、時間的な持続期間などの測定可能な値を指す場合には、開示される方法を実施するためにその変動が適切であるように、特定値から±２０％または±１０％、より好ましくは±５％、さらにより好ましくは±１％及びさらにいっそうより好ましくは±０．１％の変動を包含するように意図される。
【００３３】
本明細書で用いられる用語「γδＴ細胞（ガンマデルタＴ細胞）」は、１つのγ鎖及び１つのδ鎖で構成される、異なるＴ細胞受容体（ＴＣＲ）、すなわちγδＴＣＲがそれらの表面で発現するＴ細胞のサブセットを指す。「γδＴ細胞」という用語は、ナイーブ、エフェクターメモリ、セントラルメモリ及び最終分化型γδＴ細胞と同様に、特に、Ｖδ１及びＶδ２、Ｖδ３γδＴ細胞を含むがこれらに限定されないγδＴ細胞の全てのサブセットを含む。さらなる例として、「γδＴ細胞」という用語は、Ｖγ２、Ｖγ３、Ｖγ５、Ｖγ８、Ｖγ９、Ｖγ１０及びＶγ１１γδＴ細胞と同様に、Ｖδ４、Ｖδ５、Ｖδ７及びＶδ８γδＴ細胞を含む。いくつかの実施形態において、γδＴ細胞は、Ｖδ１−、Ｖδ２−またはＶδ１−及びＶδ２−である。遺伝子操作した及び遺伝子操作していないγδＴ細胞及び／またはそれらのサブタイプを作製及び用いるための組成物及び方法には、ＵＳ２０１６／０１７５３５８、ＷＯ２０１７／１９７３４７、ＵＳ９４９９７８８、ＵＳ２０１８／０１６９１４７、ＵＳ９９０７８２０、ＵＳ２０１８／０１２５８８９及びＵＳ２０１７／０１９６９１０に記載されているものが含まれるが、これらに限定されない。これらのそれぞれの内容は、この遺伝子操作した及び遺伝子操作していないγδＴ細胞及び／またはそれらのサブタイプを作製及び用いるための組成物及び方法などが、あらゆる目的のために参照により組み込まれる。本出願はさらに、任意で機能性ＴＣＲを形成するために第２のポリペプチドと組み合わせて、１つのγ鎖または１つのδ鎖を発現するＴ細胞、または他の遺伝子操作された白血球もしくはリンパ球について考察する。１つのγ鎖または１つのδ鎖を発現するこのような遺伝子操作された白血球またはリンパ球は、本方法において用いられてもよく、または本明細書に記載の組成物中に存在してもよい。
【００３４】
本明細書で用いる用語「Ｔリンパ球」または「Ｔ細胞」は、ＣＤ３（ＣＤ３＋）及びＴ細胞受容体（ＴＣＲ＋）を発現する、または発現した免疫細胞を指す。Ｔ細胞は細胞性免疫において中心的な役割を果たす。ＣＤ３及びＴＣＲを「発現した」Ｔ細胞は、ＣＤ３及び／またはＴＣＲ細胞表面の発現を排除するように遺伝子操作されている。
【００３５】
本明細書で用いる用語「ＴＣＲ」または「Ｔ細胞受容体」は、アルファ−ベータもしくはガンマ−デルタ受容体またはそれらの組み合わせを形成する二量体異種細胞表面シグナル伝達タンパク質を指す。αβＴＣＲは、ＭＨＣ分子により提示される抗原を認識するが、γδＴＣＲはＭＨＣの提示とは独立して抗原を認識することが可能である。
【００３６】
「ＭＨＣ」（主要組織適合遺伝子複合体）という用語は、細胞表面の抗原提示タンパク質をコードする遺伝子のサブセットを指す。ヒトの場合、これらの遺伝子はヒト白血球抗原（ＨＬＡ）遺伝子と言う。本明細書では、略語ＭＨＣまたはＨＬＡは、区別なく用いられる。
【００３７】
本明細書で用いる「活性化」は、検出可能な細胞増殖を誘導するために十分に刺激されたＴ細胞の状態を指す。活性化は、誘導されたサイトカイン産生及び検出可能なエフェクター機能と関連している可能性もある。「活性化Ｔ細胞」という用語は、中でも、細胞分裂を起こしているＴ細胞を指す。
【００３８】
本明細書で用いる用語「抗体」は、抗原と特異的に結合する免疫グロブリン分子を指す。抗体は、天然由来または組換え源由来の無処置の免疫グロブリンであり得て、さらに無処置の免疫グロブリンの免疫反応性部分であり得る。典型的には、抗体は免疫グロブリン分子の四量体である。本発明の抗体は、例えば、ポリクロナール抗体、モノクロナール抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ及びＦ（ａｂ）２、ならびに一本鎖抗体及びヒト化抗体を含む様々な形態で存在し得る（Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｉｎ：Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ；Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９，Ｉｎ：Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．；Ｈｏｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５：５８７９−５８８３；Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６）。
【００３９】
「抗体フラグメント」という用語は、無処置の抗体の一部を指し、無処置の抗体の抗原決定可変領域を指す。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖフラグメント、線状抗体、ｓｃＦｖ抗体及び抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
本明細書で用いる「抗体重鎖」は、自然に存在するコンフォメーションで抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖のうち大きい方を指す。
【００４１】
本明細書で用いる「抗体軽鎖」は、自然に存在するコンフォメーションで抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖のうち小さい方を指す。κ及びλ軽鎖は、２つの主要な抗体軽鎖アイソタイプを指す。
【００４２】
本明細書で用いる用語「合成抗体」は、例えば、本明細書に記載される通りバクテリオファージにより発現される抗体のように組換えＤＮＡ技術を用いて作製される抗体を意味する。また、この用語は、抗体をコードするＤＮＡ分子を合成することで作製され、そのＤＮＡ分子は抗体タンパク質または抗体を指定するアミノ酸配列を発現する抗体を意味すると解釈されるべきであり、そこにおいて、ＤＮＡまたはアミノ酸配列は、利用可能で、当技術分野で周知の合成ＤＮＡまたはアミノ酸配列技術を用いて得られる。
【００４３】
本明細書で用いる用語「抗原」または「Ａｇ」は、免疫応答を誘発する分子として定義される。この免疫応答には、抗体産生もしくは特定の免疫適格細胞の活性化のどちらか、またはその両方を含み得る。当業者は、タンパク質またはペプチドを含む任意の高分子が抗原として役立ち得ることを理解するであろう。さらに、抗原は組換えまたはゲノムＤＮＡに由来し得る。したがって、熟練者は、免疫応答を誘発するタンパク質をコードするヌクレオチド配列または部分ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡは、本明細書で用いられる用語「抗原」をコードすることを理解するであろう。さらに、当業者は、抗原が遺伝子の完全長ヌクレオチド配列によりのみコードされる必要がないことを理解するであろう。本発明が、これに限定されないが、１種以上の遺伝子の部分ヌクレオチド配列の使用を含み、さらにこれらのヌクレオチド配列が、所望の免疫応答を誘発させるために様々な組み合わせで配置されることは、容易に明らかである。さらに、熟練者は、抗原が「遺伝子」によりコードされる必要が全くないことを理解するであろう。抗原が産生される、合成される、または生体試料由来であり得ることは容易に明らかである。このような生体試料には、組織試料、腫瘍試料、細胞、または生体液が含まれ得るが、これらに限定されない。
【００４４】
「エピトープ」という用語は、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体に特異的に結合することが可能な、任意のタンパク質決定因子、脂質または炭水化物決定因子を含む。エピトープ決定基は通常、アミノ酸、脂質または糖側鎖などの分子の活性表面群からなり、通常、特定の３次元構造特性ならびに特定の電荷特性を有する。平衡解離定数（ＫＤ）が１０−６〜１０−１２Ｍの範囲にある場合、抗体は抗原に特異的に結合すると言われている。
【００４５】
抗体３Ｂ９、９Ｃ１１、３Ｈ７、２Ｂ７及び１０Ｆ２は、ＣＤ２０を特異的に認識する抗体の模範的な実施形態を表す。これらの抗体、そのフラグメント及びそれらの相補性決定領域は、ＵＳ２００９／００３５３２２にも記載されており、それぞれ３Ｂ９−１０、９Ｃ１１−１４、３Ｈ７−６、２Ｂ７−７及び１０Ｆ２−１３と呼ばれている。本明細書に記載される通り、これらの抗体、そのフラグメント及びそれらの相補性決定領域は、抗ＣＤ２０キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）コンストラクトを生成する際ならびに、ＣＤ２０を発現する血液腫瘍を治療するためにＣＡＲ−Ｔ細胞を遺伝子操作する及び用いる際に有用である。
【００４６】
結合ドメイン２１５８７Ｎ、１６７４７Ｐ、１６７１１Ｐ及び１６７１６Ｐは、ＢＣＭＡを特異的に認識する結合ドメインの模範的な実施形態を示す。これらの抗体、そのフラグメント及びそれらの相補性決定領域は、２０１９年７月１８日に出願されたＵＳ１６／５１６０２８にも記載されており、その内容は、あらゆる目的のためにその全体が、特に結合ドメイン、抗体、抗体フラグメント、相補性決定領域、この相補性決定領域を含むポリペプチド、この相補性決定領域をコードする核酸ならびに本明細書に記載のエピトープ特異性を決定するためのエピトープ特異性及びアッセイが参照により組み込まれる。場合によっては、２１５８７Ｎ、１６７４７Ｐ、１６７１１Ｐ及び１６７１６Ｐは、それぞれＨ２ａＭ２１５８７Ｎ、Ｈ１Ｈ１６７４７Ｐ、Ｈ１Ｈ１６７１１Ｐ、Ｈ１Ｈ１６７１６Ｐと言う。本明細書に記載される通り、これらの抗体、そのフラグメント及びそれらの相補性決定領域は、抗ＢＣＭＡキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）コンストラクトを作製する際ならびにＢＣＭＡを発現する血液腫瘍を治療するためにＣＡＲ−Ｔ細胞を遺伝子操作する及び用いる際に有用である。
【００４７】
本明細書で用いる用語「キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）」は、例えば、人工Ｔ細胞受容体、Ｔ体、一本鎖免疫受容体、キメラＴ細胞受容体、またはキメラ免疫受容体を指す場合があり、また特定の免疫エフェクター細胞に人工的な特異性を移植する、遺伝子操作された受容体を包含する。ＣＡＲは、モノクロナール抗体の特異性をＴ細胞に付与するために用いられてもよく、それにより、例えば、養子細胞療法で用いるために、多数の特異的Ｔ細胞を産生させることが可能である。特定の実施形態において、ＣＡＲは、例えば、腫瘍関連抗原に対する細胞の特異性を方向付ける。いくつかの実施形態において、ＣＡＲは、細胞内活性化ドメイン（標的の腫瘍細胞などの標的細胞と標的部分の結合時にＴ細胞を活性化させることが可能になる）、膜貫通ドメイン及び長さが変化し得る細胞外ドメインを含み、さらに疾病または疾患に関連する、例えば腫瘍−抗原結合領域を含む。特定の態様において、ＣＡＲは、ＣＤ３−ゼータ膜貫通ドメイン及びエンドドメインに融合した、モノクロナール抗体由来の一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）の融合を含む。他のＣＡＲデザインの特異性は、受容体のリガンド（ペプチドナーど）またはデクチンなどのパターン認識受容体に由来する場合がある。特定の場合において、抗原認識ドメインの間隔を変えて、活性化誘導細胞死を減らすことが可能である。特定の場合において、ＣＡＲは、ＣＤ３ζ、ＦｃＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＤＡＰ１０／１２及び／またはＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＴＬＲ（例えば、ＴＬＲ２）などのような共刺激シグナル伝達を追加するためのドメインを含む。場合によっては、分子は、共刺激分子、イメージング（例えば、陽電子放出断層撮影）用のレポーター遺伝子、プロドラッグを付加する際に、Ｔ細胞を条件付きで切除する遺伝子産物、ホーミング受容体、ケモカイン、ケモカイン受容体、サイトカイン及びサイトカイン受容体などのＣＡＲと共に共発現され得る。さらに、当業者は、共刺激ドメインが遺伝子の完全長ヌクレオチド配列によりのみコードされる必要がないことを理解するであろう。本発明が、これに限定されないが、１種以上の遺伝子の部分ヌクレオチド配列の使用を含み、さらにこれらのヌクレオチド配列が、所望の免疫応答を誘発させるために様々な組み合わせで配置されることは、容易に明らかである。
【００４８】
本明細書で用いる用語「抗腫瘍効果」は、腫瘍体積の減少、腫瘍細胞数の減少、転移数の減少、平均余命の増加または、がん状態に関連する様々な生理的症状の改善により、明らかになり得る生物学的効果を指す。また、「抗腫瘍効果」は、そもそも腫瘍の発生を予防する本発明のペプチド、ポリヌクレオチド、細胞及び抗体の能力によって明らかにされ得る。
【００４９】
「自己抗原」という用語は、本発明では、免疫系により異物であると誤って認識される任意の自己抗原を意味する。自己抗原は、細胞タンパク質、リン酸化タンパク質、細胞表面タンパク質、細胞脂質、核酸、細胞表面受容体を含む糖タンパク質を含むが、これらに限定されない。
【００５０】
本明細書で用いる用語「自己由来」は、後に再導入される個体と同じ個体に由来する任意の材料を指すように意図される。
【００５１】
本明細書で用いる用語「同種異系」は、後に同じ種の別の動物に導入される、動物に由来する任意の材料を指すように意図される。
【００５２】
「治療上有効な量」という用語は、研究者、獣医師、医師または他の臨床医に求められている、組織、系または対象の生物学的または医学的応答を誘発する、組成物の量を指す。「治療上有効な量」という用語は、投与された場合に、治療中の疾患または疾病（例えば、血液癌）の兆候または症状について、その発症を予防するため、またはその兆候もしくは症状の１つもしくは複数をある程度緩和するために十分な組成物の量を含む。治療上有効な量は、組成物、疾病及びその重症度ならびに治療される対象の年齢、体重などに依存して変化する。
【００５３】
本明細書で用いる用語である、疾病を「治療する」とは、対象が経験する疾病または疾患の少なくとも１つの兆候または症状について、頻度または重症度を低下させることを意味する。
【００５４】
１種または複数種の治療薬と「併用した場合の」投与は、同時（併用）及び任意の順序の連続した投与を含む。
【００５５】
本明細書で用いる用語「薬学的に受容可能な」は、化合物の生物学的活性または特性を抑制せず、かつ比較的無毒性である塩、担体または希釈剤などの材料を指すが、これらに限定されない。換言すれば、この材料は、所望されない生物学的効果を引き起こすこと、またはそれが含まれる組成物の構成成分のいずれとも有害な形で作用することもなく、個体に投与され得る。
【００５６】
「コードする」は、ヌクレオチドの定義される配列（すなわち、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ及びｍＲＮＡ）またはアミノ酸の定義された配列のどちらかを有する生物学的方法で、他のポリマー及び高分子を合成するためのテンプレートとしての役割を果たすための遺伝子、ｃＤＮＡ、またはｍＲＮＡなどのポリヌクレオチド中のヌクレオチドの特定の配列の固有の特性と、それから得られる生物学的特性とを指す。したがって、その遺伝子に対応するｍＲＮＡの転写及び翻訳が、細胞または他の生物学的システムにおいてタンパク質を作製する場合、その遺伝子はタンパク質をコードする。ｍＲＮＡの配列と同一で、通常、配列表で提供されるヌクレオチド配列であるコード鎖と、遺伝子またはｃＤＮＡの転写のテンプレートとして使用される非コード鎖の両方が、その遺伝子またはｃＤＮＡのタンパク質または他の産物をコードすると言うことが可能である。
【００５７】
「単離した」とは、自然状態から変化または除去したことを意味する。例えば、生きている動物中に自然に存在する核酸またはペプチドは「単離」されないが、その自然状態の共存物質から部分的または完全に分離された同じ核酸またはペプチドは「単離」される。単離した核酸またはタンパク質は、実質的に精製された形態で存在することができ、または、例えば、宿主細胞などの非天然環境に存在し得る。
【００５８】
特に明記しない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、相互の縮重バージョンでありかつ同じアミノ酸配列をコードする全ヌクレオチド配列を含む。タンパク質及びＲＮＡをコードするヌクレオチド配列はイントロンを含み得る。
【００５９】
「患者」、「対象」、「個体」などの用語は、本明細書では区別なく用いられ、本明細書に記載の方法に従順な任意の動物を指す。特定の非限定的実施形態において、患者、対象または個体は、ヒトである。
【００６０】
抗体に関して、本明細書で用いられる用語「特異的に結合する」は、特定の抗原を認識するが、試料中の他の分子を実質的に認識または結合しない抗体を意味する。例えば、１つの種から得た抗原に特異的に結合する抗体は、１種または複数種の種から得たその抗原とも結合し得る。しかし、そのような異種間の反応性は、それ自体が特性に応じた抗体の分類を変えるものではない。別の例において、抗原に特異的に結合する抗体は、抗原の様々な対立遺伝子と結合し得る。しかし、このような交差反応性は、それ自体が特性に応じた抗体の分類を変えるものではない。場合によっては、「特異的結合（ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｂｉｎｄｉｎｇ）」または「特異的に結合すること（ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙ  ｂｉｎｄｉｎｇ）」という用語は、抗体、タンパク質またはペプチドと第２の化学種との相互作用に関して用いられ得るが、この相互作用は、化学種の特定の構造（例えば、抗原決定基またはエピトープ）の存在に依存する、例えば、抗体は、通常タンパク質というよりは特定のタンパク質構造を認識及び結合することを意味する。抗体がエピトープ「Ａ」に特異的である場合、標識した「Ａ」及び抗体を含む反応において、エピトープＡ（または、遊離の非標識のＡ）を含む分子が存在すると、抗体に結合する標識Ａの量は減少する。
【００６１】
いくつかの実施形態において、特異的結合は、少なくとも約１ｘ１０−８Ｍ以下の平衡解離定数によって特徴付けられ得る（例えば、ＫＤが小さいほど結合は強くなる）。２つの分子が特異的に結合するかどうかを決定するための方法は、当技術分野で周知であり、例えば、平衡透析、表面プラズモン共鳴などが含まれる。さらに、第１の抗原及び１種もしくは複数種の付加的抗原に結合する多重特異性抗体、または抗原の２つの異なる領域に結合する二重特異性抗体は、それにもかかわらず、本明細書で使用される「特異的に結合する」抗体と見なされる。
【００６２】
血液癌は、血液または骨髄において起きるがんである。血液（または血行性）がんの例には、急性白血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病及び骨髄芽球性、前骨髄細胞性、骨髄単球性、単球性及び赤白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病及び慢性リンパ性白血病）、真性多血症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（低悪性度及び高悪性度）、多発性骨髄腫、ウォルデンストロムマクログロブリン血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、有毛細胞白血病及び骨髄異形成などの白血病が含まれる。望ましい実施形態において、血液癌は、ＣＤ２０を発現または過剰発現する。望ましい実施形態において、血液癌は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１７（ＴＮＦＲＳＦ１７）としても知られているＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）を発現または過剰発現する。
【００６３】
「発現カセット」は、発現される転写物またはポリペプチドをコードする核酸に操作可能に連結された発現制御配列を含む核酸を指す。発現カセットは、発現に十分なシス作用エレメントを含み、発現のための他のエレメントは、宿主細胞により、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ発現システムにおいて供給され得る。発現カセットは、コスミド、プラスミド（例えば、リポソーム中のネイキッドもしくはリポソームに含まれるもの）、またはウイルス（例えば、レンチウイルス、レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルス）などのベクターの構成成分であり得る。発現カセットは、γδＴ細胞などの宿主細胞に存在し得る。
【００６４】
範囲：本開示全体を通して、本発明の様々な態様は、範囲形式で提示され得る。範囲形式での説明は、単に便宜上及び簡潔にするためのものであり、本発明の範囲に対する柔軟性のない制限として解釈されるべきではないことを理解されたい。したがって、範囲の説明は、その範囲内の個々の数値だけでなく、全ての可能な部分範囲を具体的に開示していると見なされるべきである。例えば、１から６などの範囲の記述は、１から３、１から４、１から５、２から４、２から６、３から６などの部分範囲、ならびに、１、２、２．７、３、４、５、５．３及び６などの範囲内の個々の数字を具体的に開示していると見なされるべきである。これは、範囲の幅に関係なく適用される。
【００６５】
キメラ抗原受容体コンストラクト：
本発明の態様には、ＣＡＲをコードする核酸、ならびにそのような核酸を含むコンストラクト及びベクターが含まれる。場合によっては、核酸は、例えば、異種性の、発現カセットの構成成分である。いくつかの実施形態において、核酸は、例えば、異種性の、レトロウイルスベクターの構成成分である。いくつかの実施形態において、核酸は、例えば異種性の、αβまたはγδＴ細胞、好ましくは、γδＴ細胞の構成成分である。いくつかの実施形態において、核酸は、例えば異種性の、γ＋Ｔ細胞及び／またはδ＋Ｔ細胞の構成成分である。いくつかの実施形態において、核酸は、例えば異種性の、α−Ｔ細胞及び／またはβ−Ｔ細胞の構成成分である。
【００６６】
本明細書に記載されているのは、血液腫瘍細胞の表面で発現される腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に特異的に結合するＣＡＲ結合ドメインをコードする核酸である。模範的なＴＡＡには、ＣＤ１９、ＣＤ２０及びＢＣＭＡが含まれる。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、米国特許第９５４０４４５号に記載のＣＤ１９結合ドメインなどのＣＤ１９結合ドメインであり、その内容は、その全体ならびに、あらゆる目的のために特に結合ドメイン、抗体、抗体フラグメント、相補性決定領域、この相補性決定領域を含むポリペプチド、この相補性決定領域をコードする核酸ならびに本明細書に記載のエピトープ特異性を決定するためのエピトープ特異性及びアッセイが参照により組み込まれる。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、米国特許出願第２００９／００３５３２２に記載されているＣＤ２０結合ドメインなどのＣＤ２０結合ドメインであり、その内容は、その全体ならびに、あらゆる目的のために特に結合ドメイン、抗体、抗体フラグメント、相補性決定領域、この相補性決定領域を含むポリペプチド、この相補性決定領域をコードする核酸ならびに本明細書に記載のエピトープ特異性を決定するためのエピトープ特異性及びアッセイが参照により組み込まれる。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＷＯ２０１８／１３３８７７に記載されているＢＣＭＡ結合ドメインなどのＢＣＭＡ結合ドメインまたは、２０１９年７月１８日に出願されたＵＳ１６／５１６０２８に記載のＢＣＭＡ結合ドメインであり、その各内容は、その全体ならびに、あらゆる目的のために特に結合ドメイン、抗体、抗体フラグメント、相補性決定領域、この相補性決定領域を含むポリペプチド、この相補性決定領域をコードする核酸ならびに本明細書に記載のエピトープ特異性を決定するためのエピトープ特異性及びアッセイが参照により組み込まれる。典型的には、結合ドメインをコードする領域は、リンカー領域（例えば、ＣＤ８αヒンジドメインをコードする領域）の５’である。
【００６７】
いくつかの実施形態において、結合ドメインは、細胞の表面上で完全長の機能的ポリペプチドで発現されるように抗原に結合する。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＭＨＣ：抗原複合体において提示されるように、抗原に結合する。いくつかの実施形態において、結合ドメインは、ＨＬＡが制限された方式で抗原に結合する。ＭＨＣ：抗原複合体に対して特異性を示す結合ドメインは、例えばＷＯ／２０１６／１９９１４０及びＷＯ／２０１６／１９９１４１に記載されており、その各内容は、その全体ならびに、あらゆる目的のために特に結合ドメイン、抗体、抗体フラグメント、相補性決定領域、この相補性決定領域を含むポリペプチド、この相補性決定領域をコードする核酸ならびに本明細書に記載のエピトープ特異性を決定するためのエピトープ特異性及びアッセイが参照により組み込まれる。
【００６８】
模範的なＣＤ２０結合ドメインには、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７、９Ｃ１１もしくは１０Ｆ２、または３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７もしくは９Ｃ１１または３Ｈ７と結合するＣＤ２０内のエピトープと選択的に結合する、あるいは、その３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７、９Ｃ１１もしくは１０Ｆ２、または３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７もしくは９Ｃ１１または３Ｈ７と結合するために競合する結合ドメインが含まれるが、これらに限定されない。追加的または代替的に、ＣＤ２０結合ドメインは、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７、９Ｃ１１及び１０Ｆ２からなる群から選択される、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７及び９Ｃ１１からなる群から選択される、または３Ｈ７からなる群から選択される抗ＣＤ２０抗体の相補性決定領域を含む抗ＣＤ２０抗体の相補性決定領域を含み得る。本開示はまた、本明細書で提供される配列と結合するために競合するＣＤ２０、ＣＤ１９及びＢＣＭＡ結合ドメインについて考察する。
【００６９】
既知の方法を用いることにより、ＣＤ２０結合ドメインが、参照抗体もしくは結合ドメインと同じエピトープに結合する、またはその参照抗体もしくは結合ドメインと結合するために競合するかどうかを決定することが可能である。例えば、試験抗体が参照結合ドメインと同じエピトープに結合するかどうかを決定するためには、参照結合ドメインを飽和条件下でＣＤ２０に結合させることで可能になる。次に、ＣＤ２０分子に結合する試験結合ドメインの能力を評価することが可能である。この試験する結合ドメインが、参照結合ドメインとの飽和結合に続いてＣＤ２０に結合することが可能である場合、この試験結合ドメインは、参照結合ドメインとは異なるエピトープに結合すると結論付けられる。一方で、試験結合ドメインが、参照結合ドメインとの飽和結合に続いてＣＤ２０に結合できない場合、この試験結合ドメインは、参照結合ドメインにより結合されるエピトープと同じエピトープに結合し得る。
【００７０】
結合ドメインが、参照結合ドメインと結合するために競合する場合、上述した結合方法論は、２つの方向で実施される。第１の方向では、参照結合ドメインを飽和条件下でＣＤ２０に結合させ、続いてＣＤ２０分子への試験結合ドメインの結合を評価する。第２の方向では、試験結合ドメインを飽和条件下でＣＤ２０分子に結合させ、続いてＣＤ２０分子への参照結合ドメインの結合を評価する。両方の方向において、第１の（飽和）結合ドメインのみがＣＤ２０分子に結合可能である場合は、試験結合ドメイン及び参照結合ドメインは、ＣＤ２０への結合のために競合すると結論付けられる。当業者により理解されるように、参照結合ドメインと結合するために競合する結合ドメインは、必ずしも参照結合ドメインと同一のエピトープに結合し得るとは限らないが、重複するまたは隣接するエピトープに結合することにより参照結合ドメインの結合を立体的に遮断し得る。抗ＣＤ２０結合ドメインとの競合及びエピトープ結合を決定するための上述した方法は、同様に、抗ＣＤ１９結合ドメイン及び抗ＢＣＭＡ結合ドメインに適用され得る。
【００７１】
２つの結合ドメインが、それぞれが抗原への他方の結合を競争的に阻害（ブロック）する場合、同じまたは重複するエピトープに結合する。つまり、１倍、５倍、１０倍、２０倍、または１００倍過剰な一方の結合ドメインは、競合的結合アッセイで測定される通り、他方の結合を少なくとも５０％、例えば７５％、９０％、さらには９９％阻害する（例えば、Ｊｕｎｇｈａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９０  ５０：１４９５−１５０２を参照のこと）。その代わりに、一方の結合ドメインの結合を減少または排除する抗原の本質的に全てのアミノ酸変異が他方の結合を減少または排除する場合、２つの結合ドメインは同じエピトープを有する。一方の結合ドメインの結合を減少または排除するいくつかのアミノ酸変異が、他方の結合を減少または排除する場合、２つの結合ドメインは重複したエピトープを有する。
【００７２】
さらに日常的な実験（例えば、ペプチド変異及び結合分析）を実施することで、観察された試験結合ドメインの結合の欠如が、実際に参照結合ドメインと同じエピトープへの結合によるものであるか、または立体的障害（または他の現象）が、観察された結合の欠如の原因であるかどうかを確かめることが可能である。この種の実験は、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、表面プラズモン共鳴、フローサイトメトリー、または当技術分野で利用可能な他の任意の定量的または定性的結合アッセイを用いて実施され得る。
【００７３】
本開示は、ＣＤＲまたはフレームワーク領域において、本明細書で提供される配列に対して「実質的同一性」または「実質的類似性」を有する抗体及びＣＡＲを提供する。用語「実質的同一性」または「実質的に同一」は、核酸またはそのフラグメントを指す場合、他の核酸（または他の核酸の相補鎖）と至適に整列させた場合、以下で述べるようにＦＡＳＴＡ、ＢＬＡＳＴまたはＧＡＰなどの任意の既知の配列同一性のアルゴリズムにより測定される通り、ヌクレオチド配列の同一性が、例えば、ヌクレオチド塩基の少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、少なくとも９９．５％、または１００％存在することを示す。参照核酸分子と実質的同一性を有する核酸分子は、特定の例において、参照核酸分子によりコードされるポリペプチドと同じまたは実質的に類似のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードし得る。
【００７４】
ポリペプチドに適用する場合、用語「実質的類似性」または「実質的類似の」は、デフォルトのギャップウエイトを用いるプログラムＧＡＰまたはＢＥＳＴＦＩＴなどにより至適に整列させた場合、２つのペプチド配列が少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、少なくとも９９．５％、または１００％の配列同一性を共有していることを意味する。いくつかの態様において、同一ではない残基の位置は、保存的なアミノ酸の置換により異なる。「保存的なアミノ酸の置換」とは、アミノ酸残基が、類似した化学特性（電荷または疎水性など）を有する側鎖（Ｒ基）を有する別のアミノ酸残基により置換されることである。概して、保存的なアミノ酸の置換は、タンパク質の機能特性を実質的に変化させない。２つまたは複数のアミノ酸配列が、保存的置換により互いに異なる場合、同一性のパーセントまたは程度は、置換の保存的な性質により修復するように上方調整されてもよい。この調整を行う方法は、当業者に周知である。例えば、Ｐｅａｒｓｏｎ（１９９４）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２４：３０７−３３１を参照のこと。そしてこれは、本明細書に参照により組み込まれる。類似の化学特性の側鎖を有するアミノ酸基の例には、１）脂肪族側鎖：グリシン、アラニン、バリン、ロイシン及びイソロイシン、２）脂肪族ヒドロキシル側鎖：セリン及びスレオニン、３）アミド含有側鎖：アスパラギン及びグルタミン、４）芳香族側鎖：フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン、５）塩基性側鎖：リジン、アルギニン及びヒスチジン、６）酸性側鎖：アスパラギン酸及びグルタミン酸ならびに７）硫黄含有側鎖：システインとメチオニンが含まれる。好ましい保存的なアミノ酸の置換基は、バリン−ロイシン−イソロイシン、フェニルアラニン−チロシン、リジン−アルギニン、アラニン−バリン、グルタメート−アスパルテート及びアスパラギン−グルタミンである。その代わりに、保存的な置換は、Ｇｏｎｎｅｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５６：１４４３  ４５で開示されている、ＰＡＭ２５０対数尤度行列に正の値を有する任意の変化であり、参照により本明細書に組み込まれる。「適度に保存的な」置換とは、ＰＡＭ２５０対数尤度行列で負でない値を有する任意の変化である。
【００７５】
ポリペプチドの配列同一性及び／または類似性は、典型的には、配列分析ソフトウェアを用いて測定される。タンパク質分析ソフトウェアは、保存的なアミノ酸の置換を含む種々の置換、削除及びその他の修飾に割り当てられた類似性を測定する際に用いる、類似する配列をマッチングさせる。例えば、ＧＣＧソフトウェアはデフォルトのパラメータを用いられ得るＧＡＰ及びＢＥＳＴＦＩＴなどのプログラムを含み、生命体の様々な種の相同的ポリペプチドナーどの近縁種であるポリペプチドの間または、野生型タンパク質とその変異タンパク質の間の配列相同性または配列同一性を測定する。例えば、ＧＣＧ  Ｖｅｒｓｉｏｎ６．１を参照のこと。ポリペプチド配列は、デフォルトのまたは推奨のパラメータ、つまりＧＣＧ  Ｖｅｒｓｉｏｎ６．１のプログラムでＦＡＳＴＡを用いても比較され得る。ＦＡＳＴＡ（ＦＡＳＴＡ２及びＦＡＳＴＡ３など）は、クエリ配列と検索配列と間の最適なオーバーラップ領域のアラインメント及び配列同一性パーセントを提供する（Ｐｅａｒｓｏｎ（２０００）上記）。配列は、ギャップ開始ペナルティが１２、ギャップ拡張ペナルティが２、ＢＬＯＳＵＭ行列が６２のアフィンギャップ検索を用いてＳｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ相同性検索アルゴリズムを用いて比較し得る。様々な生命体から得た大量の配列を含むデータベースと、本明細書に開示される配列を比較する場合、他の好ましいアルゴリズムは、デフォルトのパラメータを用いるコンピュータプログラムＢＬＡＳＴ、特にＢＬＡＳＴＰまたはＴＢＬＡＳＴＮである。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０及び（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２を参照のこと。この各内容は、参照により組み込まれる。
【００７６】
１種または複数種の置換（例えば、保存的置換）を有する本明細書に開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲアミノ酸配列のいずれかの変異体を含む抗ＣＤ２０、抗ＢＣＭＡ、または抗ＣＤ１９ＣＡＲを本明細書で提供する。例えば、本開示は、本明細書で開示されたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲ（例えばＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、２０以下、１９以下、１８以下、１７以下、１６以下、１５以下、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下または１のアミノ酸置換を備えたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲアミノ酸配列を有する抗ＣＤ２０ＣＡＲを含む。例えば、抗ＣＤ２０ＣＡＲは、本明細書で開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、及び／またはＣＤＲ（例えば、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比べて、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１のアミノ酸置換（保存的なアミノ酸の置換など）を含み得る。
【００７７】
同様に、本開示は、本明細書で開示されたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲ（例えばＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、２０以下、１９以下、１８以下、１７以下、１６以下、１５以下、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下または１のアミノ酸置換を備えたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲアミノ酸配列を有する抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲを含む。例えば、抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲは、本明細書で開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、及び／またはＣＤＲ（例えば、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比べて、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１のアミノ酸置換（保存的なアミノ酸の置換など）を含み得る。
【００７８】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、そこにおいて、ＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ３は、配列番号３４５（ＡＫＤＰＳＹＧＳＧＳＹＨＳＹＹＧＭＤＶ）及び３５３（ＱＱＲＦＮＷＰＬＴ）、２０１（ＶＫＤＦＨＹＧＳＧＳＮＹＧＭＤＶ）及び２０９（ＱＱＳＮＤＷＰＬＴ）ならびに２４９（ＴＫＤＧＳＹＧＨＦＹＳＧＬＤＶ）及び２５７（ＱＱＲＹＹＷＰＬＴ）からなる群から選択される。
【００７９】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、そこにおいて、ＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列は、配列番号３３９（ＥＥＱＬＶＥＳＧＧＤＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＨＤＹＴＭＨ  ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＳＬＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＰＳＹＧＳＧＳＹＨＳＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ）及び３４７（ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥ  ＲＡＴＬＳＣＷＡＳＱＳＩＳＲＹＬＶＷＹＱＱＫＣＧＱＡＰＲＬＬＩＹＥＡＳＫＲＡＴＧＩＰＶＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＦＮＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ）、１９５（ＥＶＱＬＡＥＳＧＧＤＬＶＱＳＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳ  ＧＩＴＦＨＤＹＡＭＨＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＤＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＤＤＴＡＬＹＹＣＶＫＤＦＨＹＧＳＧＳＮＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＰ）ならびに２０３（ＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬ  ＳＭＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＲＮＬＡＷＹＱＱＫＶＧＱＡＰＲＬＬＩＳＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＮＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＳＮＤＷＰＬＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫ）、２４３（ＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲ  ＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＤＴＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＴＫＤＧＳＹＧＨＦＹＳＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ）及び２５１（ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＶＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＤＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＹＹＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ）からなる群から選択される。
【００８０】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）ドメイン及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）ドメインを有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、そこにおいて、ＨＣＤＲ３ドメインは、式Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４−Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９のアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１＝Ａ、ＶまたはＴ、Ｘ２＝Ｋ、Ｘ３＝Ｄ、Ｘ４＝Ｐ、ＦまたはＧ、Ｘ５＝ＳまたはＨ、Ｘ６＝Ｙ、Ｘ７＝Ｇ、Ｘ８＝ＳまたはＨ、Ｘ９＝ＧまたはＦ、Ｘ１０＝ＳまたはＹ、Ｘ１１＝Ｙ、ＮまたはＳ、Ｘ１２＝Ｙ、ＧまたはＨ、Ｘ１３＝Ｇ、ＬまたはＳ、Ｘ１４＝Ｙ、ＭまたはＤ、Ｘ１５＝Ｙ、ＤまたはＶ、Ｘ１６＝Ｇ、Ｖまたは非存在、Ｘ１７＝Ｍまたは非存在、Ｘ１８＝Ｄまたは非存在、Ｘ１９＝Ｖまたは非存在（配列番号３６９）であり、ＬＣＤＲ３ドメインは、Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９のアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１＝Ｑ、Ｘ２＝Ｑ、Ｘ３＝ＲまたはＳ、Ｘ４＝Ｎ、ＹまたはＦ、Ｘ５＝Ｎ、Ｄ、またはＹ、Ｘ６＝Ｗ、Ｘ７＝Ｐ、Ｘ８＝Ｌ、Ｘ９＝Ｔ（配列番号３７０）である。
【００８１】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、そこにおいて、ＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列は、配列番号９９（ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ）及び１０７（ＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲ  ＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫ）である。
【００８２】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）及び軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープと結合する、その抗ＣＤ２０結合ドメインと競合する、または、その抗ＣＤ２０結合ドメインそのものである抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、そこにおいて、ＨＣＤＲ及びＬＣＤＲ配列は、それぞれ、配列番号９９のＨＣＤＲ配列及び配列番号１０７のＬＣＤＲ配列である。
【００８３】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号１０１（ＧＦＴＦＹＤＹＡ）であるまたはそれを含むＨＣＤＲ１、配列番号１０３（ＩＳＷＮＳＧＹＩ）であるまたはそれを含むＨＣＤＲ２及び／または配列番号１０５（ＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶ）であるまたはそれを含むＨＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープに結合する、その抗ＣＤ２０結合ドメインと競合する、またはその抗ＣＤ２０結合ドメインそのものである、抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号１０９（ＱＳＶＳＳＮ）であるまたはそれを含むＬＣＤＲ１、配列番号１１１（ＧＡＳ）であるまたはそれを含むＬＣＤＲ２及び／または配列番号１１３（ＱＱＹＮＮＷＰＩＴ）であるまたはそれを含むＬＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープに結合する、その抗ＣＤ２０結合ドメインと競合する、またはその抗ＣＤ２０結合ドメインそのものである、抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号１０１であるまたはそれを含むＨＣＤＲ１、配列番号１０３であるまたはそれを含むＨＣＤＲ２、配列番号１０５であるまたはそれを含むＨＣＤＲ３、配列番号１０９であるまたはそれを含むＬＣＤＲ１、配列番号１１１であるまたはそれを含むＬＣＤＲ２及び配列番号１１３であるまたはそれを含むＬＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープに結合する、その抗ＣＤ２０結合ドメインと競合する、またはその抗ＣＤ２０結合ドメインそのものである、抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号１０１を含むＨＣＤＲ１、配列番号１０３を含むＨＣＤＲ２、配列番号１０５を含むＨＣＤＲ３、配列番号１０９を含むＬＣＤＲ１、配列番号１１１を含むＬＣＤＲ２及び配列番号１１３を含むＬＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。
【００８４】
模範的なＢＣＭＡ結合ドメインは、ＷＯ２０１８／１３３８７７に記載されているＢＣＭＡ結合ドメインまたは２０１９年７月１８日に出願されたＵＳ１６／５１６０２８に記載されているＢＣＭＡ結合ドメインにより結合する、またはそれらのドメインと結合するために競合するＢＣＭＡ内のエピトープに選択的に結合する結合ドメインが含まれるが、これらに限定されない。代用的または追加的に、ＢＣＭＡ結合ドメインは、ＷＯ２０１８／１３３８７７に記載されている抗ＢＣＭＡ抗体またはキメラ抗原受容体、ならびに２０１９年７月１８日に出願されたＵＳ１６／５１６０２８に記載される抗ＢＣＭＡ抗体またはキメラ抗原受容体からなる群から選択される抗ＢＣＭＡ抗体の相補性決定領域を含み得る。
【００８５】
模範的なＢＭＣＡ結合ドメインには、抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲ１６７１６Ｐ、抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲ１６７４７Ｐ及び／または抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲ２１５８７Ｎにより結合するＢＣＭＡ中のエピトープと選択的に結合する、またはそれらと結合するために競合する結合ドメインが含まれるが、これらに限定されない。代用的または追加的に、ＢＣＭＡ結合ドメインは、抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲ１６７１６Ｐ、抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲ１６７４７Ｐ及び抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲ２１５８７Ｎからなる群から選択される抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲの相補性決定領域を含み得る。
【００８６】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖相補性決定領域３（ＨＣＤＲ３）及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を有する抗ＢＣＭＡ結合ドメインをコードし、そこにおいて、ＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ３は、配列番号２１（ＲＡＧＤＮＷＮＷＦＤＰ）及び配列番号２２（ＱＱＡＫＳＶＰＦＴ）、配列番号２３（ＥＧＧＮＹＧＭＤＶ）及び配列番号２４（ＱＱＡＮＳＦＰＰＴ）ならびに配列番号２５（ＦＡＥＹＣＧＧＮＩＣＹＹＹＧＭＤＶ）及び配列番号２６（ＱＱＣＧＧＳＰＷＴ）からなる群から選択される。
【００８７】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列を有する抗ＢＣＭＡ結合ドメインをコードし、そこにおいて、ＨＣＶＲ配列及びＬＣＶＲ配列は、１６７１６Ｐ結合ドメインＨＣＶＲ配列番号２７（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＶＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＩＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＲＡＧＤＮＷＮＷＦＤＰＷＧＱＧＴＬＶＴＶ）及び１６７１６Ｐ結合ドメインＬＣＶＲ配列番号２８（ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＲＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＡＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＫＳＶＰＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ）と、１６７４７Ｐ結合ドメインＨＣＶＲ配列番号２９（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶ  ＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＩＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＹＩＳＳＳＧＳＳＩＫＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＮＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶ）と、１６７４７Ｐ結合ドメインＬＣＶＲ配列番号３０（ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＮＮＷ  ＬＶＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＴＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＳＦＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ）と、２１５８７Ｎ結合ドメインＨＣＶＲ配列番号３１（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＮＹＹＹＷＮＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＳＹＳＧＮＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＡＴＳＲＮＱＦＳＬＴＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＦＡＥＹＣＧＧＮＩＣＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶ）と、２１５８７Ｎ結合ドメインＬＣＶＲ配列番号３２（ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＦＳＣＲＡＳＱＳＶＧＳＳＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＲＬＭＹＧＡＳＮＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＣＧＧＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ）とからなる群から選択される。
【００８８】
本明細書では、１つまたは複数の置換（保存的な置換など）を有する本明細書で開示されたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲアミノ酸配列のいずれかの変異体を含む抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲを提供する。例えば、本開示は、本明細書で開示されたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲ（例えばＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、２０以下、１９以下、１８以下、１７以下、１６以下、１５以下、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下または１のアミノ酸置換を備えたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲアミノ酸配列を有する抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲを含む。例えば、抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲは、本明細書で開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、及び／またはＣＤＲ（例えば、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比べて、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１のアミノ酸置換（保存的なアミノ酸の置換など）を含み得る。
【００８９】
本明細書に記載の模範的な結合ドメインは、典型的には、アミノ末端からカルボキシ末端の順に、重鎖領域とそれに続く軽鎖領域（ＶＨ−ＶＬ）を含む。結合ドメインにおけるＶＨ領域及びＶＬ領域の特定の順序が明示的または暗黙的に説明されている場合、本開示は、例えば、ｓｃＦＶまたはｓｃＦｖ結合ドメインを含むＣＡＲにおいてＶＨ及びＶＬ領域の順番が反転している代替の実施形態を記述しているようにも理解される。したがって、ＶＨ−ＶＬの順序の説明は、例えば、ｓｃＦＶまたはｓｃＦｖ結合ドメインを含むＣＡＲにおける代替のＶＬ−ＶＨの順序も説明するものである。さらに、ＶＬ−ＶＨの順序の説明は、例えば、ｓｃＦＶまたはｓｃＦｖ結合ドメインを含むＣＡＲにおける代替のＶＨ−ＶＬの順序も説明するものである。
【００９０】
概して、本明細書に記載のＣＡＲをコードする核酸は、結合ドメインを膜貫通ドメインに連結させるペプチドリンカーをコードする細胞外リンカー部を含む。模範的なリンカー部分には、ＣＤ８αヒンジドメインをコードするリンカー部分、例えば、配列番号１（ＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）または配列番号２（ＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）が含まれるが、これらに限定されない。典型的には、ペプチドリンカーをコードする領域（例えば、ＣＤ８αヒンジドメイン）は、結合ドメインをコードする領域の３’及び膜貫通ドメインをコードする領域の５’である。
【００９１】
本明細書に記載のＣＡＲをコードする核酸は、膜貫通ドメインを含む。膜貫通ドメインは、細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒンジを、１種または複数種の細胞内シグナル伝達成分に連結することが可能である。例えば、膜貫通ドメインは、抗原結合ドメイン、例えばヒンジを、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン及び任意に１つまたは２つの共刺激エンドドメインと連結することが可能である。模範的な膜貫通ドメインには、ＣＤ８α膜貫通ドメイン、例えば、配列番号３（ＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ）が含まれるが、これらに限定されない。典型的には、膜貫通ドメイン（例えば、ＣＤ８α膜貫通ドメイン）をコードする領域は、ペプチドリンカー（例えば、ＣＤ８αヒンジドメイン）をコードする領域の３’であり、１つまたは複数の細胞質ドメインをコードする領域の５’である。
【００９２】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、１種または複数種の細胞質ドメインを含む細胞質領域をコードする。細胞質領域をコードする領域は、典型的には、膜貫通ドメインをコードする領域の３’である。細胞質ドメインは、典型的には、γδＴ細胞増殖、細胞毒性活性及び／または炎症誘発性サイトカイン発現（例えば、ＴＮＦ−αまたはＩＦＮγ）の活性化シグナルを提供するシグナル伝達ドメインである。模範的な細胞質ドメインは、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインである。いくつかの実施形態において、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインは、配列番号４（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲ  ＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態において、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインは、配列番号５（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶ  ＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態において、細胞質領域は、例えば配列番号４及び５からそれぞれ独立して選択された、複数（例えば、２、３、４、５、または６）のＣＤ３ζシグナル伝達ドメインなどの複数（例えば、２、３、４、５、または６）のシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態において、細胞質領域は、複数（例えば、２、３、４、５、または６）の非ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン及びＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態において、細胞質領域は、非ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン及び複数の（例えば、２、３、４、５、または６）ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む。
【００９３】
細胞質領域は、１種または複数種の共刺激エンドドメインを含み得る。１種または複数種の共刺激エンドドメインをコードする領域は、シグナル伝達ドメインをコードする領域の５’または３’であり得る。いくつかの実施形態において、１種または複数種の共刺激エンドドメインをコードする領域は、シグナル伝達ドメインをコードする領域の５’であり得る。いくつかの実施形態において、１種または複数種の共刺激エンドドメインをコードする領域は、シグナル伝達ドメインの領域の５’であり、１種または複数種の共刺激エンドドメインをコードする付加的な領域は、シグナル伝達ドメインの３’である。模範的な共刺激エンドドメインには、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＣＤ２７、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、Ｄａｐ１０、Ｄａｐ１２、ＤＮＡｍ−１、２Ｂ４、ＳＬＡＭドメイン及びＴＬＲ２共刺激エンドドメインならびにそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
【００９４】
いくつかの実施形態において、コンストラクトは、少なくとも１種の４−１ＢＢ共刺激エンドドメインと、任意で、４−１ＢＢ、２Ｂ４、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８及びＣＤ２７共刺激エンドドメインから選択される第２の共刺激エンドドメインとをコードする。いくつかの実施形態において、コンストラクトは、少なくとも２種の４−１ＢＢ共刺激エンドドメインあるいは４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８及びＣＤ２７から選択される１、２、３、もしくは４またはそれ以上の共刺激エンドドメインと組み合わせた２種の４−１ＢＢ共刺激エンドドメインをコードする。いくつかの実施形態において、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインは、配列番号６（ＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴ  ＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ）を含む。
【００９５】
いくつかの実施形態において、コンストラクトは、１種のＣＤ２７共刺激エンドドメインと、任意で、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８及びＣＤ２７共刺激エンドドメインから選択される第２の共刺激エンドドメインとをコードする。いくつかの実施形態において、コンストラクトは、ＣＤ２７共刺激エンドドメイン及び４−１ＢＢ共刺激エンドドメインをコードする。いくつかの実施形態において、コンストラクトは、２種のＣＤ２７共刺激エンドドメインをコードする。いくつかの実施形態において、ＣＤ２７共刺激エンドドメインは、配列番号７（ＱＲＲＫＹＲＳＮＫＧＥＳＰＶＥＰＡＥＰＣＨＹＳＣＰＲＥＥＥＧＳＴＩＰＩＱＥＤ  ＹＲＫＰＥＰＡＣＳＰ）を含む。
【００９６】
いくつかの実施形態において、コンストラクトは、Ｔ細胞（ＣＡＲ−Ｔ細胞など）の活性化、細胞毒性及び／または持続性を支持するサイトカインなどのＣ末端ポリペプチドの分泌を促進するように動作可能に連結された分泌シグナル、例えば、配列番号３３（ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰ）をコードする。いくつかの実施形態において、コンストラクトは、ＩＬ−１５などの一般的なガンマ鎖サイトカインまたはその活性フラグメント、例えば、配列番号３４（ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤ  ＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ）の分泌を促進するように動作可能に連結された分泌シグナル、例えば、配列番号３３をコードする。模範的な一般的なガンマ鎖サイトカインには、ＩＬ−２及びＩＬ−１５が含まれる。いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−７及びＩＬ−１５から選択される。いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカインは、ＩＬ−１５である。ｓＩＬ１５をコードするコドン最適化核酸配列を含むＩＬ−１５配列は、本明細書及びＷＯ２００７／０３７７８０に開示されている。
【００９７】
いくつかの実施形態において、コンストラクトは、１種または複数種のマルチシストロン性リンカー領域を、例えば、シグナル伝達ドメイン及び／または共刺激エンドドメインと、サイトカインの分泌を促進するように動作可能に連結された分泌シグナルとの間でコードする。マルチシストロン性リンカー領域は、単一の転写産物からの複数の別個のポリペプチドの生成を容易にするポリペプチド配列またはＲＮＡ配列の領域である。いくつかの実施形態において、マルチシストロン性リンカー領域は、切断配列をコードする。好適な切断配列には、Ｐ２Ａ、Ｆ２Ａ、Ｅ２Ａ、もしくはＴ２Ａ切断配列などの自己切断配列及び／またはフューリンなどの内因性プロテアーゼにより切断される配列が含まれる。
【００９８】
いくつかの実施形態において、切断配列はＰ２Ａ切断配列である。いくつかの実施形態において、切断配列はフューリン切断配列である。いくつかの実施形態において、切断配列はＰ２Ａ及びフューリン切断配列である。いくつかの実施形態において、切断配列は配列番号４３（ＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＰ２Ａ切断配列である。いくつかの実施形態において、切断配列は配列番号４４（ＲＡＫＲ）のフューリン切断配列である。いくつかの実施形態において、切断配列は配列番号４５（ＲＡＫＲＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧ  ＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＰ２Ａ＋フューリン切断配列である。
【００９９】
いくつかの実施形態において、切断配列は配列番号５２（ＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＰ２Ａ切断配列であるまたはそのＰ２Ａ切断配列を含む。いくつかの実施形態において、切断配列は配列番号５３（ＶＫＱＴＬＮＮＦＤＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ）のＦ２Ａ切断配列であるまたはそのＦ２Ａ切断配列を含む。いくつかの実施形態において、切断配列は配列番号５４（ＱＣＴＮＹＡＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ）のＥ２Ａ切断配列であるまたはそのＥ２Ａ切断配列を含む。いくつかの実施形態において、切断配列は配列番号５５（ＥＧＲＳＬＬＴＣＧＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＴ２Ａ切断配列であるまたはそのＴ２Ａ切断配列を含む。ある態様において、複数の自己切断配列は、シグナル伝達及び／または共刺激ドメインのカルボキシ末端、ならびにコードされた分泌サイトカイン（例えば、ＩＬ−１５などの一般的なガンマ鎖サイトカイン）のアミノ末端をコードされ得て、そこにおいて、複数の自己切断配列は、好ましくはＰ２Ａ切断配列、Ｔ２Ａ切断配列、Ｅ２Ａ切断配列及びＦ２Ａ切断配列からなる群から独立して選択される。ある態様において、１種または複数種の自己切断配列と、内因性プロテアーゼにより切断された１種または複数種の配列は、本明細書に記載のコンストラクトでコードされる。特定の実施形態においては、内因性プロテアーゼ認識部位は、自己切断配列のアミノ末端にコードされる。
【０１００】
いくつかの実施形態において、マルチシストロン性リンカー領域は、内部リボソーム侵入部位をコードする。模範的な内部リボソーム侵入部位は、配列番号５６（ＣＴＡＡＣＧＴＴＡＣＴＧＧＣＣＧＡＡＧＣＣＧＣＴＴＧＧＡＡＴＡＡＧＧＣＣＧＧＴＧＴＧＣＧＴＴＴＧＴＣＴＡＴＡＴＧＴＴＡＴＴＴＴＣＣＡＣＣＡＴＡＴＴＧＣＣＧＴＣＴＴＴＴＧＧＣＡＡＴＧＴＧＡＧＧＧＣＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＣＴＧＴＣＴＴＣＴＴＧＡＣＧＡＧＣＡＴＴＣＣＴＡＧＧＧＧＴＣＴＴＴＣＣＣＣＴＣＴＣＧＣＣＡＡＡＧＧＡＡＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＧＴＴＧＡＡＴＧＴＣＧＴＧＡＡＧＧＡＡＧＣＡＧＴＴＣＣＴＣＴＧＧＡＡＧＣＴＴＣＴＴＧＡＡＧＡＣＡＡＡＣＡＡＣＧＴＣＴＧＴＡＧＣＧＡＣＣＣＴＴＴＧＣＡＧＧＣＡＧＣＧＧＡＡＣＣＣＣＣＣＡＣＣＴＧＧＣＧＡＣＡＧＧＴＧＣＣＴＣＴＧＣＧＧＣＣＡＡＡＡＧＣＣＡＣＧＴＧＴＡＴＡＡＧＡＴＡＣＡＣＣＴＧＣＡＡＡＧＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＣＣＡＧＴＧＣＣＡＣＧＴＴＧＴＧＡＧＴＴＧＧＡＴＡＧＴＴＧＴＧＧＡＡＡＧＡＧＴＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＣＣＴＣＡＡＧＣＧＴＡＴＴＣＡＡＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＡＡＧＧＡＴＧＣＣＣＡＧＡＡＧＧＴＡＣＣＣＣＡＴＴＧＴＡＴＧＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＴＧＧＧＧＣＣＴＣＧＧＴＧＣＡＣＡＴＧＣＴＴＴＡＣＡＴＧＴＧＴＴＴＡＧＴＣＧＡＧＧＴＴＡＡＡＡＡＡＡＣＧＴＣＴＡＧＧＣＣＣＣＣＣＧＡＡＣＣＡＣＧＧＧＧＡＣＧＴＧＧＴＴＴＴＣＣＴＴＴＧＡＡＡＡＡＣＡＣＧＡＴＧＡＴＡ）によりコードされる。
【０１０１】
別の模範的な内部リボソーム侵入部位は、配列番号６０（ＡＧＣＡＧＧＴＴＴＣＣＣＣＡＡＣＴＧＡＣＡＣＡＡＡＡＣＧＴＧＣＡＡＣＴＴＧＡＡＡＣＴＣＣＧＣＣＴＧＧＴＣＴＴＴＣＣＡＧＧＴＣＴＡＧＡＧＧＧＧＴＡＡＣＡＣＴＴＴＧＴＡＣＴＧＣＧＴＴＴＧＧＣＴＣＣＡＣＧＣＴＣＧＡＴＣＣＡＣＴＧＧＣＧＡＧＴＧＴＴＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＣＴＧＴＴＧＣＴＴＣＧＴＡＧＣＧＧＡＧＣＡＴＧＡＣＧＧＣＣＧＴＧＧＧＡＡＣＴＣＣＴＣＣＴＴＧＧＴＡＡＣＡＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＧＧＣＣＡＡＡＡＧＣＣＡＣＧＣＣＣＡＣＡＣＧＧＧＣＣＣＧＴＣＡＴＧＴＧＴＧＣＡＡＣＣＣＣＡＧＣＡＣＧＧＣＧＡＣＴＴＴＡＣＴＧＣＧＡＡＡＣＣＣＡＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＡＣＡＴＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＡＣＣＣＡＣＡＣＡＣＴＧＧＴＧＡＣＡＧＧＣＴＡＡＧＧＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＧＧＴＡＣＣＣＣＧＡＧＧＴＡＡＣＡＣＧＣＧＡＣＡＣＴＣＧＧＧＡＴＣＴＧＡＧＡＡＧＧＧＧＡＣＴＧＧＧＧＣＴＴＣＴＡＴＡＡＡＡＧＣＧＣＴＣＧＧＴＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＴＣＴＡＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＧＧＴＧＡＣＣＧＧＡＧＧＴＣＧＧＣＡＣＣＴＴＴＣＣＴＴＴＧＣＡＡＴＴＡＣＴＧＡＣＣＡＣ）によりコードされる。
【０１０２】
さらに好適な内部リボソーム侵入部位には、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０１０  Ｊａｎ；３８（Ｄａｔａｂａｓｅ  ｉｓｓｕｅ）：Ｄ１３１−６．ｄｏｉ：１０．１０９３／ｎａｒ／ｇｋｐ９８１．Ｅｐｕｂ２００９年１１月１６日に記載されているもの、ｉｒｅｓｉｔｅ．ｏｒｇに記載されているもの、ＷＯ２０１８／２１５７８７に記載されているもの、ＧｅｎＢａｎｋ  ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＫＰ０１９３８２．１に記載されている配列及びＧｅｎＢａｎｋ  ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｏ．ＬＴ７２７３３９．１で開示されているＩＲＥＳエレメントが含まれるが、これらに限定されない。
【０１０３】
切断自己切断及びＩＲＥＳエレメントなどの付加的マルチシストロン性リンカー領域は、ＵＳ２０１８／０３６０９９２及びＵＳ８８６５４６７に開示されている。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号８（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＱＲＲＫＹＲＳＮＫＧＥＳＰＶＥＰＡＥＰＣＨＹＳＣＰＲＥＥＥＧＳＴＩＰＩＱＥＤＹＲＫＰＥＰＡＣＳＰＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、ＣＤ２７共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｈ７−ＣＤ８−ＣＤ２７ｚポリペプチドをコードする。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号９（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＴＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＮＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶＩＳＷＮＳＤＳＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＨＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＨＹＧＳＧＳＹＹＹＹＱＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：３Ｂ９結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｂ９−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号１０（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下ドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｈ７−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【０１０７】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号１１（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＡＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＲＤＹＴＭＨＷＶＲＱＧＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＤＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＶＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＬＳＧＴＹＲＤＹＦＹＧＶＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：２Ｂ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む２Ｂ７−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号１２（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＶＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＴＳＱＴＴＴＳＹＬＡＷＹＲＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＡＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＬＲＴＮＷＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＱＶＱＬＶＥＳＧＧＤＳＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＹＭＴＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＦＩＳＳＳＧＳＴＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＶＫＫＳＬＹＬＱＭＮＲＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＥＰＧＮＹＶＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：９Ｃ１１結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む９Ｃ１１−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号２０（Ｍ  Ｓ  Ｖ  Ｐ  Ｔ  Ｑ  Ｖ  Ｌ  Ｇ  Ｌ  Ｌ  Ｌ  Ｌ  Ｗ  Ｌ  Ｔ  Ｄ  Ａ  Ｒ  Ｃ  Ｅ  Ｉ  Ｖ  Ｍ  Ｔ  Ｑ  Ｓ  Ｐ  Ａ  Ｔ  Ｌ  Ｓ  Ｖ  Ｓ  Ｐ  Ｇ  Ｅ  Ｒ  Ｔ  Ｔ  Ｌ  Ｓ  Ｃ  Ｒ  Ａ  Ｓ  Ｑ  Ｓ  Ｖ  Ｓ  Ｓ  Ｎ  Ｌ  Ａ  Ｗ  Ｙ  Ｌ  Ｑ  Ｋ  Ｐ  Ｇ  Ｑ  Ａ  Ｐ  Ｒ  Ｌ  Ｌ  Ｉ  Ｙ  Ｇ  Ａ  Ｓ  Ｔ  Ｒ  Ａ  Ｔ  Ｇ  Ｉ  Ｐ  Ａ  Ｒ  Ｆ  Ｓ  Ｇ  Ｓ  Ｇ  Ｓ  Ｇ  Ｔ  Ｅ  Ｆ  Ｉ  Ｌ  Ｔ  Ｉ  Ｓ  Ｓ  Ｌ  Ｑ  Ｓ  Ｅ  Ｄ  Ｆ  Ａ  Ｖ  Ｙ  Ｙ  Ｃ  Ｑ  Ｑ  Ｙ  Ｎ  Ｎ  Ｗ  Ｐ  Ｉ  Ｔ  Ｆ  Ｇ  Ｑ  Ｇ  Ｔ  Ｒ  Ｌ  Ｅ  Ｉ  Ｋ  Ｇ  Ｇ  Ｇ  Ｇ  Ｓ  Ｇ  Ｇ  Ｇ  Ｇ  Ｓ  Ｇ  Ｇ  Ｇ  Ｇ  Ｅ  Ｖ  Ｑ  Ｌ  Ｖ  Ｅ  Ｓ  Ｇ  Ｇ  Ｇ  Ｌ  Ｖ  Ｑ  Ｐ  Ｇ  Ｒ  Ｓ  Ｌ  Ｒ  Ｌ  Ｓ  Ｃ  Ａ  Ａ  Ｓ  Ｇ  Ｆ  Ｔ  Ｆ  Ｙ  Ｄ  Ｙ  Ａ  Ｍ  Ｈ  Ｗ  Ｖ  Ｒ  Ｑ  Ａ  Ｐ  Ｇ  Ｋ  Ｇ  Ｌ  Ｅ  Ｗ  Ｖ  Ｓ  Ｇ  Ｉ  Ｓ  Ｗ  Ｎ  Ｓ  Ｇ  Ｙ  Ｉ  Ｇ  Ｙ  Ａ  Ｄ  Ｓ  Ｖ  Ｋ  Ｇ  Ｒ  Ｆ  Ｔ  Ｉ  Ｓ  Ｒ  Ｄ  Ｎ  Ａ  Ｋ  Ｎ  Ｓ  Ｌ  Ｙ  Ｌ  Ｑ  Ｍ  Ｎ  Ｓ  Ｌ  Ｒ  Ａ  Ｅ  Ｄ  Ｔ  Ａ  Ｌ  Ｙ  Ｙ  Ｃ  Ａ  Ｋ  Ｄ  Ｎ  Ｓ  Ｙ  Ｇ  Ｋ  Ｆ  Ｙ  Ｙ  Ｇ  Ｌ  Ｄ  Ｖ  Ｗ  Ｇ  Ｑ  Ｇ  Ｔ  Ｔ  Ｖ  Ｔ  Ｖ  Ｓ  Ｓ  Ｔ  Ｔ  Ｔ  Ｐ  Ａ  Ｐ  Ｒ  Ｐ  Ｐ  Ｔ  Ｐ  Ａ  Ｐ  Ｔ  Ｉ  Ａ  Ｓ  Ｑ  Ｐ  Ｌ  Ｓ  Ｌ  Ｒ  Ｐ  Ｅ  Ａ  Ｃ  Ｒ  Ｐ  Ａ  Ａ  Ｇ  Ｇ  Ａ  Ｖ  Ｈ  Ｔ  Ｒ  Ｇ  Ｌ  Ｄ  Ｆ  Ａ  Ｃ  Ｄ  Ｉ  Ｙ  Ｉ  Ｗ  Ａ  Ｐ  Ｌ  Ａ  Ｇ  Ｔ  Ｃ  Ｇ  Ｖ  Ｌ  Ｌ  Ｌ  Ｓ  Ｌ  Ｖ  Ｉ  Ｔ  Ｌ  Ｙ  Ｃ  Ｒ  Ｖ  Ｋ  Ｆ  Ｓ  Ｒ  Ｓ  Ａ  Ｄ  Ａ  Ｐ  Ａ  Ｙ  Ｑ  Ｑ  Ｇ  Ｑ  Ｎ  Ｑ  Ｌ  Ｙ  Ｎ  Ｅ  Ｌ  Ｎ  Ｌ  Ｇ  Ｒ  Ｒ  Ｅ  Ｅ  Ｙ  Ｄ  Ｖ  Ｌ  Ｄ  Ｋ  Ｒ  Ｒ  Ｇ  Ｒ  Ｄ  Ｐ  Ｅ  Ｍ  Ｇ  Ｇ  Ｋ  Ｐ  Ｑ  Ｒ  Ｒ  Ｋ  Ｎ  Ｐ  Ｑ  Ｅ  Ｇ  Ｌ  Ｙ  Ｎ  Ｅ  Ｌ  Ｑ  Ｋ  Ｄ  Ｋ  Ｍ  Ａ  Ｅ  Ａ  Ｙ  Ｓ  Ｅ  Ｉ  Ｇ  Ｍ  Ｋ  Ｇ  Ｅ  Ｒ  Ｒ  Ｒ  Ｇ  Ｋ  Ｇ  Ｈ  Ｄ  Ｇ  Ｌ  Ｙ  Ｑ  Ｇ  Ｌ  Ｓ  Ｔ  Ａ  Ｔ  Ｋ  Ｄ  Ｔ  Ｙ  Ｄ  Ａ  Ｌ  Ｈ  Ｍ  Ｑ  Ａ  Ｌ  Ｐ  Ｐ  Ｒ）、以下ドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｈ７−ＣＤ３ｚポリペプチドをコードする。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、３Ｈ７−ＣＤ８−２７ｚポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号１３（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＣＡＡＣＧＡＣＧＣＡＡＧＴＡＣＣＧＣＴＣＣＡＡＴＡＡＡＧＧＡＧＡＧＴＣＡＣＣＡＧＴＡＧＡＡＣＣＣＧＣＣＧＡＡＣＣＴＴＧＴＣＡＣＴＡＴＴＣＡＴＧＴＣＣＡＣＧＣＧＡＡＧＡＧＧＡＧＧＧＴＴＣＡＡＣＧＡＴＣＣＣＴＡＴＴＣＡＧＧＡＡＧＡＴＴＡＣＡＧＡＡＡＧＣＣＧＧＡＡＣＣＴＧＣＴＴＧＴＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＣＧＣＡＧＣＧＣＣＧＡＣＧＣＣＣＣＴＧＣＣＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＧＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＧＡＡＣＣＴＧＧＧＣＡＧＧＣＧＧＧＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＡＡＧＣＧＣＡＧＡＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＣＧＧＣＡＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＣＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＴＡＡＣＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＣＡＡＧＡＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＣＧＡＧＡＴＣＧＧＣＡＴＧＡＡＧＧＧＣＧＡＧＣＧＧＣＧＡＣＧＣＧＧＣＡＡＧＧＧＣＣＡＣＧＡＣＧＧＣＣＴＧＴＡＣＣＡＧＧＧＣＣＴＧＴＣＣＡＣＣＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＧＴＴＡＧ）の配列を含む。
【０１１１】
いくつかの実施形態において、３Ｈ７−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号１４（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【０１１２】
いくつかの実施形態において、３Ｂ９−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号１５（ＡＴＧＡＧＣＧＴＴＣＣＡＡＣＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＴＣＴＧＣＴＣＴＧＧＴＴＧＡＣＴＧＡＣＧＣＴＡＧＧＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＡＡＴＧＡＣＣＣＡＡＴＣＣＣＣＡＧＣＣＡＣＴＣＴＣＴＣＣＧＴＴＡＧＣＣＣＡＧＧＴＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＴＣＴＴＡＧＴＴＧＣＡＧＧＧＣＴＡＧＴＣＡＡＴＣＣＧＴＡＴＣＴＡＧＣＡＡＣＣＴＧＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＡＡＡＧＣＣＣＧＧＡＣＡＡＧＣＧＣＣＧＣＧＧＴＴＧＴＴＧＡＴＣＴＡＴＧＧＧＡＣＧＡＧＣＡＣＡＣＧＡＧＣＴＡＣＧＧＧＴＡＴＴＣＣＧＧＣＣＡＧＧＴＴＣＴＣＡＧＧＧＴＣＴＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＡＴＴＧＡＣＧＡＴＣＡＧＴＡＧＴＣＴＧＣＡＡＴＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＣＧＣＣＧＴＴＴＡＣＴＡＴＴＧＣＣＡＡＣＡＧＴＡＣＡＡＴＡＡＴＴＧＧＣＣＧＣＴＣＡＣＡＴＴＣＧＧＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＡＡＧＧＴＣＧＡＧＡＴＴＡＡＧＧＧＡＧＧＴＧＧＧＧＧＴＡＧＴＧＧＧＧＧＣＧＧＧＧＧＧＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＡＧＧＴＡＣＡＧＴＴＧＧＴＡＧＡＡＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＴＴＧＧＴＴＣＡＡＣＣＴＧＧＡＣＧＧＡＧＴＣＴＧＡＧＡＴＴＧＴＣＴＴＧＣＧＴＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＴＴＴＡＣＴＴＴＣＡＡＴＧＡＴＴＡＣＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＡＣＧＣＣＡＧＧＣＧＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＴＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＴＴＣＣＧＴＧＡＴＡＴＣＣＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＡＴＡＧＴＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＣＧＡＴＡＧＴＧＴＡＡＡＡＧＧＡＡＧＧＴＴＴＡＣＡＡＴＣＴＣＴＡＧＧＧＡＴＡＡＣＧＣＴＡＡＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＴＡＣＣＴＴＣＡＡＡＴＧＣＡＴＡＧＴＣＴＣＣＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＡＧＣＣＴＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＴＧＣＴＡＡＧＧＡＣＡＡＴＣＡＴＴＡＴＧＧＡＡＧＣＧＧＧＴＣＡＴＡＴＴＡＴＴＡＣＴＡＴＣＡＡＴＡＴＧＧＧＡＴＧＧＡＴＧＴＧＴＧＧＧＧＴＣＡＧＧＧＡＡＣＧＡＣＣＧＴＴＡＣＧＧＴＡＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【０１１３】
いくつかの実施形態において、２Ｂ７−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号１６（ＡＴＧＴＣＣＧＴＡＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＧＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＡＣＴＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＡＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＡＴＧＣＡＴＣＣＡＡＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＣＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＡＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＣＧＴＡＧＣＡＡＣＴＧＧＣＣＧＣＴＣＡＣＴＴＴＣＧＧＣＧＧＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＧＡＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＣＧＡＧＡＴＴＡＴＡＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＧＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＡＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＡＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＴＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＧＣＴＣＡＧＴＧＧＧＡＣＣＴＡＣＡＧＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＴＡＣＧＧＡＧＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、９Ｃ１１−ＣＤ８−ＢＢｚポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号１７（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＴＧＴＧＧＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＡＣＣＡＧＴＣＡＧＡＣＴＡＣＴＡＣＣＡＧＣＴＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＧＡＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＡＴＧＣＡＴＣＣＡＡＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＡＣＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＴＧＣＧＴＡＣＣＡＡＣＴＧＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＡＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＣＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＡＣＴＣＧＧＴＣＡＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＣＡＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＡＴＧＡＣＴＴＧＧＡＴＣＣＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＴＴＣＡＴＴＣＡＴＴＡＧＴＡＧＴＡＧＴＧＧＡＡＧＴＡＣＣＡＴＡＴＡＴＴＡＴＧＣＡＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＴＣＡＡＧＡＡＧＴＣＡＴＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＡＧＡＣＴＧＡＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＧＡＧＡＧＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＡＣＧＴＣＴＡＴＴＡＣＧＧＴＡＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【０１１５】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、ＣＤ８αヒンジ領域をコードするコドン最適化配列を含む。模範的なコドン最適化ＣＤ８αヒンジ領域核酸配列には、配列番号１８（ＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡ  ＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴ）が含まれるが、これに限定されない。いくつかの実施形態において、ＣＤ８αヒンジ領域は、以下の配列番号１９（ＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴ）によりコードされる。
【０１１６】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、３Ｂ９結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号１８をコードする以下の配列を含む。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、２Ｂ７結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号１８をコードする以下の配列を含む。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、９Ｃ１１結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号１８をコードする以下の配列を含む。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、３Ｈ７結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号１９をコードする以下の配列を含む。
【０１１７】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号３５（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＶＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＩＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＲＡＧＤＮＷＮＷＦＤＰＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＲＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＡＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＫＳＶＰＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下ドメイン：１６７１６Ｐ結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【０１１８】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号３６（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＩＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＹＩＳＳＳＧＳＳＩＫＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＮＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＮＮＷＬＶＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＴＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＳＦＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下ドメイン：１６７４７Ｐ結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【０１１９】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号３７（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＮＹＹＹＷＮＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＳＹＳＧＮＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＡＴＳＲＮＱＦＳＬＴＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＦＡＥＹＣＧＧＮＩＣＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＦＳＣＲＡＳＱＳＶＧＳＳＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＲＬＭＹＧＡＳＮＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＣＧＧＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下ドメイン：２１５８７Ｎ結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【０１２０】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号３８（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＹＩＳＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＹＩＳＳＳＧＳＳＩＫＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＮＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＮＮＷＬＶＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＴＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＳＦＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲＲＡＫＲＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ＊）、以下ドメイン：１６７４７Ｐ結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン、フューリン＋Ｐ２Ａ切断ドメイン、分泌シグナルならびにｓＩＬ１５ドメインを順番に含む抗ＢＣＭＡ−ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【０１２１】
いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲ１６７１６Ｐポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号３９（ＡＴＧＡＧＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＡＧＡＣＧＣＡＡＧＧＴＧＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＣＴＧＧＴＧＣＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＴＣＴＴＧＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＴＡＧＣＴＣＣＴＡＣＧＴＧＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＣＧＣＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＴＧＣＣＡＴＣＡＴＣＧＧＣＴＣＴＧＧＣＧＧＣＡＧＣＡＣＡＴＡＣＴＡＴＧＣＣＧＡＣＡＧＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＴＡＡＣＴＣＴＡＡＧＡＡＴＡＣＡＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＡＧＧＧＣＡＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＣＧＣＣＡＡＧＡＧＡＧＣＣＧＧＣＧＡＣＡＡＣＴＧＧＡＡＴＴＧＧＴＴＴＧＡＴＣＣＡＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＡＧＴＧＴＣＴＡＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＣＧＡＣＡＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＣＣＣＡＴＣＣＴＣＴＧＴＧＡＧＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＧＧＣＧＡＴＡＧＧＧＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＴＧＴＣＧＣＧＣＣＴＣＴＣＡＧＧＧＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＴＧＧＣＴＧＧＣＡＴＧＧＴＡＣＣＡＧＡＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＣＡＡＧＧＣＣＣＣＴＡＡＧＣＴＧＣＴＧＡＴＣＴＡＴＧＣＡＧＣＡＴＣＴＡＧＣＣＴＧＣＡＧＡＧＣＧＧＡＧＴＧＣＣＴＴＣＣＣＧＧＴＴＣＴＣＴＧＧＡＡＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＣＣＣＴＧＡＣＡＡＴＣＴＣＣＴＣＴＣＴＧＣＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＣＧＣＣＡＣＣＴＡＣＴＡＴＴＧＴＣＡＧＣＡＧＧＣＣＡＡＧＴＣＣＧＴＧＣＣＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＧＧＣＣＣＣＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＧＡＴＡＴＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡ���ＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【０１２２】
いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲ１６７４７Ｐポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号４０（ＡＴＧＡＧＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＡＧＡＣＧＣＡＡＧＧＴＧＣＣＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＣＴＧＧＴＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＴＣＣＴＧＣＧＣＣＧＣＣＴＣＴＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＴＡＧＣＧＡＣＴＡＣＴＡＴＡＴＣＴＣＣＴＧＧＡＴＣＡＧＧＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＴＡＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＴＣＴＧＧＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＡＡＧＴＡＴＧＣＣＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＴＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＴＴＣＴＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＣＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＡＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＣＧＣＣＡＧＡＧＡＧＧＧＣＧＧＣＡＡＴＴＡＴＧＧＣＡＴＧＧＡＣＧＴＧＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＡＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＴＡＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＣＧＡＣＡＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＡＣＡＧＡＧＣＣＣＡＴＣＣＡＧＣＧＴＧＡＧＣＧＣＣＡＧＣＧＴＧＧＧＣＧＡＴＡＧＧＧＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＴＧＴＣＧＣＧＣＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＡＴＣＡＡＣＡＡＴＴＧＧＣＴＧＧＴＧＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＡＧＧＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＧＡＴＣＴＡＴＧＣＡＧＣＣＡＣＣＴＣＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＧＡＧＴＧＣＣＴＡＧＣＣＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＴＧＧＡＡＧＣＧＧＡＡＣＣＧＡＣＴＴＴＡＣＣＣＴＧＡＣＡＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＴＧＣＣＡＣＡＴＡＣＴＡＴＴＧＴＣＡＧＣＡＧＧＣＣＡＡＣＴＣＣＴＴＣＣＣＣＣＣＴＡＣＣＴＴＴＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＡＡＡＧＣＴＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＴＧＧＧＧＣＧＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡ���ＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲ２１５８７Ｎポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号４１（ＡＴＧＡＧＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＡＧＡＣＧＣＡＡＧＧＴＧＣＣＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＴＣＴＧＧＣＣＣＴＧＧＣＣＴＧＧＴＧＡＡＧＣＣＡＴＣＣＧＡＧＡＣＣＣＴＧＴＣＴＣＴＧＡＣＣＴＧＣＡＣＡＧＴＧＡＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＡＴＣＡＡＴＴＡＣＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＣＴＧＧＡＴＣＡＧＧＣＡＧＣＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＡＴＣＧＧＣＴＡＣＡＴＣＡＧＣＴＡＴＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＡＡＴＴＡＣＡＡＣＣＣＴＴＣＴＣＴＧＡＡＧＡＧＣＡＧＧＧＴＧＡＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＧＣＣＡＣＡＴＣＣＣＧＣＡＡＴＣＡＧＴＴＣＡＧＣＣＴＧＡＣＡＣＴＧＡＧＣＴＣＣＧＴＧＡＣＣＧＣＡＧＣＡＧＡＣＡＣＡＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＣＧＣＡＡＧＧＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＡＣＴＧＣＧＧＡＧＧＣＡＡＣＡＴＣＴＧＴＴＡＴＴＡＣＴＡＴＧＧＣＡＴＧＧＡＣＧＴＧＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＡＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＴＡＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＡＧＡＴＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＴＣＣＣＣＡＧＧＣＡＣＡＣＴＧＴＣＴＣＴＧＡＧＣＣＣＴＧＧＡＧＡＧＡＧＧＧＣＣＡＣＡＴＴＣＴＣＴＴＧＴＣＧＣＧＣＣＴＣＣＣＡＧＴＣＴＧＴＧＧＧＣＴＣＣＴＣＴＴＴＴＣＴＧＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＣＡＣＧＧＡＧＡＣＴＧＡＴＧＴＡＴＧＧＡＧＣＡＴＣＣＡＡＴＡＧＧＧＣＡＡＣＣＧＧＡＡＴＣＣＣＡＧＡＣＡＧＡＴＴＣＡＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＣＴＣＴＧＧＣＡＣＡＧＡＣＴＴＣＡＣＣＣＴＧＡＣＡＡＴＣＡＧＣＡＧＡＣＴＧＧＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＣＣＡＧＣＡＧＴＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＣＣＡＴＧＧＡＣＣＴＴＴＧＧＣＣＡＧＧＧＡＡＣＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣ���ＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲ１６７４７Ｐ＋ｓＩＬ１５ポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号４２（ＡＴＧＡＧＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＡＧＡＣＧＣＡＡＧＧＴＧＣＣＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＣＴＧＧＴＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＴＣＣＴＧＣＧＣＣＧＣＣＴＣＴＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＴＡＧＣＧＡＣＴＡＣＴＡＴＡＴＣＴＣＣＴＧＧＡＴＣＡＧＧＣＡＧＧＣＡＣＣＴＧＧＣＡＡＧＧＧＡＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＴＡＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＴＣＴＧＧＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＡＡＧＴＡＴＧＣＣＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＴＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＴＴＣＴＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＣＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＡＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＣＧＣＣＡＧＡＧＡＧＧＧＣＧＧＣＡＡＴＴＡＴＧＧＣＡＴＧＧＡＣＧＴＧＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＡＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＴＡＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＣＧＡＣＡＴＣＣＡＧＡＴＧＡＣＡＣＡＧＡＧＣＣＣＡＴＣＣＡＧＣＧＴＧＡＧＣＧＣＣＡＧＣＧＴＧＧＧＣＧＡＴＡＧＧＧＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＴＧＴＣＧＣＧＣＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＡＴＣＡＡＣＡＡＴＴＧＧＣＴＧＧＴＧＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＡＧＧＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＧＡＴＣＴＡＴＧＣＡＧＣＣＡＣＣＴＣＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＧＡＧＴＧＣＣＴＡＧＣＣＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＴＧＧＡＡＧＣＧＧＡＡＣＣＧＡＣＴＴＴＡＣＣＣＴＧＡＣＡＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＴＧＣＣＡＣＡＴＡＣＴＡＴＴＧＴＣＡＧＣＡＧＧＣＣＡＡＣＴＣＣＴＴＣＣＣＣＣＣＴＡＣＣＴＴＴＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＡＡＡＧＣＴＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＴＧＧＧＧＣＧＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡ���ＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＣＧＣＧＣＧＡＡＧＣＧＡＴＣＡＧＧＣＡＧＣＧＧＧＧＣＧＡＣＡＡＡＴＴＴＣＡＧＣＣＴＴＣＴＧＡＡＡＣＡＡＧＣＡＧＧＣＧＡＣＧＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＣＣＧＧＴＣＣＡＡＴＧＧＣＣＴＴＡＣＣＡＧＴＧＡＣＣＧＣＣＴＴＧＣＴＣＣＴＧＣＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＧＣＴＧＣＴＣＣＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＧＣＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＴＡＡＴＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＴＧＡＡＧＡＴＣＴＴＡＴＴＣＡＡＴＣＴＡＴＧＣＡＴＡＴＴＧＡＴＧＣＴＡＣＴＴＴＡＴＡＴＡＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＴＧＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＡＴＧＡＡＧＴＧＣＴＴＴＣＴＣＴＴＧＧＡＧＴＴＡＣＡＡＧＴＴＡＴＴＴＣＡＣＴＴＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＡＴＧＣＡＡＧＴＡＴＴＣＡＴＧＡＴＡＣＡＧＴＡＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＡＣＡＡＣＡＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＡＡＴＧＧＧＡＡＴＧＴＡＡＣＡＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＧＣＡＡＡＧＡＡＴＧＴＧＡＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＧＡＡＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＴＡＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＴＧＡ）の配列を含む。
【０１２５】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号４６（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ＊）、以下ドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン、Ｐ２Ａ切断ドメイン（ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ、配列番号４７）、分泌シグナルならびにｓＩＬ１５ドメインを順番に含む抗ＣＤ２０ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【０１２６】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号４８（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰＭＲＩＳＫＰＨＬＲＳＩＳＩＱＣＹＬＣＬＬＬＮＳＨＦＬＴＥＡＧＩＨＶＦＩＬＧＣＦＳＡＧＬＰＫＴＥＡＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ＊）、以下ドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン、配列番号４７のＰ２Ａ切断ドメイン、配列番号４９（ＭＲＩＳＫＰＨＬＲＳＩＳＩＱＣＹＬＣＬＬＬＮＳＨＦＬＴＥＡＧＩＨＶＦＩＬＧＣＦＳＡＧＬＰＫＴＥＡ）の分泌シグナルならびにｓＩＬ１５ドメインを順番に含む抗ＣＤ２０ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【０１２７】
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２０ＣＡＲ＋ｓＩＬ１５ポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号５０（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＧＧＴＡＧＣＧＧＧＧＣＴＡＣＧＡＡＣＴＴＣＴＣＣＣＴＴＣＴＴＡＡＡＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＣＧＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＴＡＴＧＧＣＣＴＴＡＣＣＡＧＴＧＡＣＣＧＣＣＴＴＧＣＴＣＣＴＧＣＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＧＣＴＧＣＴＣＣＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＧＣＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＴＡＡＴＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＴＧＡＡＧＡＴＣＴＴＡＴＴＣＡＡＴＣＴＡＴＧＣＡＴＡＴＴＧＡＴＧＣＴＡＣＴＴＴＡＴＡＴＡＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＴＧＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＡＴＧＡＡＧＴＧＣＴＴＴＣＴＣＴＴＧＧＡＧＴＴＡＣＡＡＧＴＴＡＴＴＴＣＡＣＴＴＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＡＴＧＣＡＡＧＴＡＴＴＣＡＴＧＡＴＡＣＡＧＴＡＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＡＣＡＡＣＡＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＡＡＴＧＧＧＡＡＴＧＴＡＡＣＡＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＧＣＡＡＡＧＡＡＴＧＴＧＡＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＧＡＡＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＴＡＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＴＧＡ）の配列を含む。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２０ＣＡＲ＋ｓＩＬ１５ポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号５１（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＧＧＴＡＧＣＧＧＧＧＣＴＡＣＧＡＡＣＴＴＣＴＣＣＣＴＴＣＴＴＡＡＡＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＣＧＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＴＡＴＧＡＧＡＡＴＴＴＣＧＡＡＡＣＣＡＣＡＴＴＴＧＡＧＡＡＧＴＡＴＴＴＣＣＡＴＣＣＡＧＴＧＣＴＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＡＣＴＴＣＴＡＡＡＣＡＧＴＣＡＴＴＴＴＣＴＡＡＣＴＧＡＡＧＣＴＧＧＣＡＴＴＣＡＴＧＴＣＴＴＣＡＴＴＴＴＧＧＧＣＴＧＴＴＴＣＡＧＴＧＣＡＧＧＧＣＴＴＣＣＴＡＡＡＡＣＡＧＡＡＧＣＣＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＴＡＡＴＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＴＧＡＡＧＡＴＣＴＴＡＴＴＣＡＡＴＣＴＡＴＧＣＡＴＡＴＴＧＡＴＧＣＴＡＣＴＴＴＡＴＡＴＡＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＴＧＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＡＴＧＡＡＧＴＧＣＴＴＴＣＴＣＴＴＧＧＡＧＴＴＡＣＡＡＧＴＴＡＴＴＴＣＡＣＴＴＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＡＴＧＣＡＡＧＴＡＴＴＣＡＴＧＡＴＡＣＡＧＴＡＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＡＣＡＡＣＡＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＡＡＴＧＧＧＡＡＴＧＴＡＡＣＡＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＧＣＡＡＡＧＡＡＴＧＴＧＡＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＧＡＡＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＴＡＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＴＧＡ）の配列を含む。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、配列番号５７（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ＊）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む抗ＣＤ２０ＣＡＲポリペプチドをコードするが、配列番号５７をコードする領域の内部リボソーム侵入部位（例えば配列番号５６によってコードされた部位）を介して、この単離した核酸は、配列番号５８（ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰ  ＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ＊）、配列番号３３の分泌シグナル及びｓＩＬ１５ドメインをさらにコードする。
【０１３０】
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２０ＣＡＲ＋ｓＩＬ１５ポリペプチドをコードする単離した核酸は、配列番号５９（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＧＡＧＴＡＣＴＧＣＧＧＣＣＧＣＴＡＣＧＴＡＡＡＴＴＣＣＧＣＣＣＣＴＣＴＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＣＣＣＣＴＡＡＣＧＴＴＡＣＴＧＧＣＣＧＡＡＧＣＣＧＣＴＴＧＧＡＡＴＡＡＧＧＣＣＧＧＴＧＴＧＣＧＴＴＴＧＴＣＴＡＴＡＴＧＴＴＡＴＴＴＴＣＣＡＣＣＡＴＡＴＴＧＣＣＧＴＣＴＴＴＴＧＧＣＡＡＴＧＴＧＡＧＧＧＣＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＣＴＧＴＣＴＴＣＴＴＧＡＣＧＡＧＣＡＴＴＣＣＴＡＧＧＧＧＴＣＴＴＴＣＣＣＣＴＣＴＣＧＣＣＡＡＡＧＧＡＡＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＧＴＴＧＡＡＴＧＴＣＧＴＧＡＡＧＧＡＡＧＣＡＧＴＴＣＣＴＣＴＧＧＡＡＧＣＴＴＣＴＴＧＡＡＧＡＣＡＡＡＣＡＡＣＧＴＣＴＧＴＡＧＣＧＡＣＣＣＴＴＴＧＣＡＧＧＣＡＧＣＧＧＡＡＣＣＣＣＣＣＡＣＣＴＧＧＣＧＡＣＡＧＧＴＧＣＣＴＣＴＧＣＧＧＣＣＡＡＡＡＧＣＣＡＣＧＴＧＴＡＴＡＡＧＡＴＡＣＡＣＣＴＧＣＡＡＡＧＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＣＣＡＧＴＧＣＣＡＣＧＴＴＧＴＧＡＧＴＴＧＧＡＴＡＧＴＴＧＴＧＧＡＡＡＧＡＧＴＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＣＣＴＣＡＡＧＣＧＴＡＴＴＣＡＡＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＡＡＧＧＡＴＧＣＣＣＡＧＡＡＧＧＴＡＣＣＣＣＡＴＴＧＴＡＴＧＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＴＧＧＧＧＣＣＴＣＧＧＴＧＣＡＣＡＴＧＣＴＴＴＡＣＡＴＧＴＧＴＴＴＡＧＴＣＧＡＧＧＴＴＡＡＡＡＡＡＡＣＧＴＣＴＡＧＧＣＣＣＣＣＣＧＡＡＣＣＡＣＧＧＧＧＡＣＧＴＧＧＴＴＴＴＣＣＴＴＴＧＡＡＡＡＡＣＡＣＧＡＴＧＡＴＡＴＴＡＡＴＴＡＡＧＣＣＡＣＣＧＣＣＡＴＧＧＣＣＴＴＡＣＣＡＧＴＧＡＣＣＧＣＣＴＴＧＣＴＣＣＴＧＣＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＧＣＴＧＣＴＣＣＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＧＣＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＴＡＡＴＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＴＧＡＡＧＡＴＣＴＴＡＴＴＣＡＡＴＣＴＡＴＧＣＡＴＡＴＴＧＡＴＧＣＴＡＣＴＴＴＡＴＡＴＡＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＴＧＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＡＴＧＡＡＧＴＧＣＴＴＴＣＴＣＴＴＧＧＡＧＴＴＡＣＡＡＧＴＴＡＴＴＴＣＡＣＴＴＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＡＴＧＣＡＡＧＴＡＴＴＣＡＴＧＡＴＡＣＡＧＴＡＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＡＣＡＡＣＡＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＡＡＴＧＧＧＡＡＴＧＴＡＡＣＡＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＧＣＡＡＡＧＡＡＴＧＴＧＡＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＧＡＡＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＴＡＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＴＧＡ）の配列を含む。
【０１３１】
いくつかの実施形態において、単離した核酸は、直鎖状核酸である。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、環状核酸である。いくつかの実施形態において、単離した核酸は、プラスミドベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、ウイルスベクター、レトロウイルスベクター、またはレンチウイルスベクターなどのベクターである。いくつかの実施形態において、単離した核酸、または例えば、結合ドメイン膜貫通ドメイン及び１種または複数種のシグナル伝達及び／または共刺激エンドドメインを含む、単離した核酸の連続した一部は、宿主γδＴ細胞などの宿主細胞のゲノムに組み込まれる。模範的な実施形態において、単離した核酸はレトロウイルスベクターである。
【０１３２】
γδＴ細胞：
本発明の態様は、本明細書に記載の単離した核酸を機能的に発現し、それによりγδＴ細胞の表面でＣＡＲを発現するγδＴ細胞を含む。
【０１３３】
本発明の態様は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞に対してｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏの細胞毒性活性を有するγδＴ細胞を代用的または追加的に含み得る。場合によっては、細胞毒性活性は生来の活性である。場合によっては、細胞毒性は、血液腫瘍細胞の表面で発現するＴＡＡに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲコンストラクトの存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、このγδＴ細胞において、γδＴ細胞の血液腫瘍細胞傷害活性が、対照γδＴ細胞におけるｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／またはｉｎ  ｖｉｖｏの血液腫瘍細胞傷害活性の生来のレベルより大きいことを示す。場合によっては、対照γδＴ細胞はＣＡＲコンストラクトを含まない。場合によっては、対照γδＴ細胞は、本明細書に記載の結合ドメイン、本明細書に記載のヒンジ領域、本明細書に記載の膜貫通ドメイン、本明細書に記載のシグナル伝達ドメイン及び／または本明細書に記載の共刺激エンドドメインを欠くＣＡＲコンストラクトを含む。
【０１３４】
場合によっては、細胞毒性は、ＣＤ２０またはＣＤ２０内のエピトープに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲコンストラクトの存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、γδＴ細胞は、本明細書に記載の単離した核酸によりコードされるＣＤ２０特異的ＣＡＲを機能的に発現する。
【０１３５】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のγδＴ細胞は、ＨＬＡに制限された（例えば、ＨＬＡクラスＩに制限された）細胞毒性を示し得る。他の実施形態においては、ほとんど（＞５０％）、実質的に全て（＞９０％）、または全ての細胞毒性活性は、ＨＬＡに制限（例えば、ＨＬＡクラスＩに制限）されない。ＨＬＡに制限される細胞毒性活性は、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡクラスＩ）（ｎｕｌｌ）腫瘍細胞株に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性を、ＨＬＡ＋（例えば、ＨＬＡクラスＩ＋）腫瘍細胞株に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性と比較することにより評価することが可能である。いくつかの実施形態において、ＨＬＡに制限される細胞毒性活性は、Ｔ細胞受容体様結合ドメインの使用により、少なくとも部分的に、有意に（＞２５％）、または完全に提供される。結合ドメインのようなＴ細胞受容体は、ＭＨＣ分子と複合体中の細胞の表面に提示されたときに抗原を特異的に認識する結合ドメインである。Ｔ細胞受容体様結合ドメインは、例えば、ＷＯ２０１６／１９９１４１にさらに記載されている。
【０１３６】
本明細書に記載のγδＴ細胞は、強力及び／または持続的な血液腫瘍細胞傷害活性を示すことが可能である。場合によっては、血液腫瘍細胞傷害活性は、血液腫瘍細胞との最初の接触から少なくとも約６日から１２０日間、または少なくとも約６日から１８０日間持続する可能性がある。場合によっては、本明細書に記載のγδＴ細胞またはその子孫の血液腫瘍細胞傷害活性は、血液腫瘍細胞との最初の接触からまたは本明細書に記載のγδＴ細胞の投与から、少なくとも約６日から１２０日、または少なくとも約６日から１８０日間持続することが可能である。この持続的な血液腫瘍細胞傷害活性はｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏ、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏとｉｎ  ｖｉｖｏの両方で示され得る。
【０１３７】
本発明の態様は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現または過剰発現を示す細胞との接触に応じて増殖するγδＴ細胞を代用的または追加的に含み得る。腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を示す細胞は、正常なＢ細胞などの正常な血液細胞であってもよい。腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現または過剰発現を示す細胞は、血液腫瘍細胞であってもよい。場合によっては、増殖は生来の活性である。場合によっては、増殖は、血液細胞または血液腫瘍細胞の表面で発現するＴＡＡに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲコンストラクトの存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２０％もしくは＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、γδＴ細胞は、対照のγδＴ細胞と比較して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／またはｉｎ  ｖｉｖｏのより高いレベルの増殖を示す。場合によっては、対照γδＴ細胞はＣＡＲコンストラクトを含まない。場合によっては、対照γδＴ細胞は、本明細書に記載の結合ドメイン、本明細書に記載のヒンジ領域、本明細書に記載の膜貫通ドメイン、本明細書に記載のシグナル伝達ドメイン及び／または本明細書に記載の共刺激エンドドメインを欠くＣＡＲコンストラクトを含む。
【０１３８】
場合によっては、増殖は、ＣＤ２０またはＣＤ２０内のエピトープに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲコンストラクトの存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２０％もしくは＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、ＣＤ２０の細胞表面発現を示す血液細胞または血液腫瘍細胞との接触に応答して増殖を示すγδＴ細胞は、本明細書に記載の単離した核酸によりコードされるＣＤ２０特異的ＣＡＲを機能的に発現する。
【０１３９】
本明細書に記載のγδＴ細胞は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現または過剰発現を示す血液細胞または血液腫瘍細胞を含む宿主生物において強力及び／または持続的な増殖を示すことが可能である。場合によっては、増殖は、血液腫瘍細胞との最初の接触から、またはγδＴ細胞の宿主生物への投与日から、少なくとも約６日から１２０日間、または少なくとも約６日から１８０日間持続し得る。場合によっては、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現または過剰発現を示す血液細胞または血液腫瘍細胞を含む宿主生物における、本明細書に記載のγδＴ細胞またはその子孫の増殖は、血液細胞または血液腫瘍細胞との最初の接触から、またはγδＴ細胞の宿主生物への最初の投与日から、少なくとも約６日から１２０日間、または少なくとも約６日から１８０日間持続し得る。場合によっては、宿主生物中の増殖は、ＣＤ２０またはＣＤ２０内のエピトープに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲコンストラクトの存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２０％もしくは＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、ＣＤ２０の細胞表面発現を示す血液細胞または血液腫瘍細胞を含む宿主生物中の増殖を示すγδＴ細胞は、本明細書に記載の単離した核酸によりコードされるＣＤ２０特異的ＣＡＲを機能的に発現する。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のγδＴ細胞は、血液細胞または血液腫瘍細胞との接触後に、腫瘍壊死因子アルファまたはインターフェロンガンマなどの炎症誘発性サイトカインを発現、または持続的に発現する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のγδＴ細胞またはその子孫は、血液細胞または血液腫瘍細胞を含む宿主生物中などで、血液細胞または血液腫瘍細胞との接触後に、腫瘍壊死因子アルファまたはインターフェロンガンマなどの炎症誘発性サイトカインを発現、または持続的に発現する。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、γδＴ細胞またはγδＴ細胞を含む医薬組成物は、同種異系宿主に導入されたときに、移植片対宿主応答を実質的に示さない、または示さない。いくつかの実施形態において、γδＴ細胞またはγδＴ細胞を含む医薬組成物は、同種異系宿主に導入されたときに、移植片対宿主応答を臨床的に受容可能なレベルで示す。いくつかの実施形態において、臨床的に受容可能なレベルとは、治療上有効な治療を達成するためにγδＴ細胞治療の中止を必要としない移植片対宿主応答の量である。いくつかの実施形態において、移植片対宿主応答（ＧｖＨＤ）の臨床的に受容可能なレベルは、適用可能なＩＢＭＴＲ評価尺度により、グレードＣよりも重症度が低い急性応答である。急性移植片対宿主反応の重症度は、皮膚、肝臓及び消化管の関与の程度を評価することで決定される。個々の臓器の病変のステージが組み合わされて、予後的意義を有する全体的なグレードが作製される。グレードＩ（Ａ）ＧｖＨＤは軽度の疾病、グレードＩＩ（Ｂ）ＧｖＨＤは中等度、グレードＩＩＩ（Ｃ）は重度、グレードＩＶ（Ｄ）は生命を脅かすものと見なす。ＩＢＭＴＲグレーディングシステムでは、急性ＧｖＨＤの重症度を次のように定義している（Ｒｏｗｌｉｎｇｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌ  １９９７；９７：８５５）：  
●グレードＡ−肝臓や胃腸の病変がなく、ステージ１の皮膚病変のみ（体の＜２５％の斑状丘疹状皮疹）
●グレードＢ−ステージ２の皮膚病変、ステージ１から２の腸または肝臓の病変
●グレードＣ−任意の臓器系のステージ３の病変（全身性紅皮症、ビリルビン６．１〜１５．０ｍｇ／ｄＬ、下痢１５００〜２０００ｍＬ／日）
●グレードＤ−任意の臓器系のステージ４の病変（水疱の形成を伴う全身性紅皮症、ビリルビン＞１５ｍｇ／ｄＬ、下痢＞２０００ｍＬ／日または疼痛またはイレウス）。
Ｓｃｈｏｅｍａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｖｏｌｕｍｅ  ５３，ｐａｇｅｓ１４０１−１４１５（２０１８）の表１及び表２も参照のこと。また、これは急性ＧｖＨＤを評価及びグレーディングするための基準も開示している。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、γδＴ細胞、またはγδＴ細胞を含む医薬組成物は、同種異系宿主に投与された、対照αβＴ細胞または対照αβＴ細胞を含む対照医薬組成物により示された移植片対宿主応答と比較して、同種異系宿主に導入された場合、移植片対宿主応答の減少または実質的な減少を示す。場合によっては、対照αβＴ細胞は、同種異系の遺伝子操作していない対照αβＴ細胞である。場合によっては、対照αβＴ細胞は、ＣＡＲを含まない、または参照γδＴ細胞と同じＣＡＲを含まない。
【０１４３】
本明細書に記載のγδＴ細胞は、δ１、δ２、δ３もしくはδ４γδＴ細胞、またはそれらの組み合わせであり得る。場合によっては、γδＴ細胞は、ほとんど（＞５０％）、実質的に（＞９０％）、本質的に全て、または完全にδ２−γδＴ細胞である。場合によっては、γδＴ細胞は、ほとんど（＞５０％）、実質的に（＞９０％）、本質的に全て、または完全にδ１γδＴ細胞である。
【０１４４】
γδＴ細胞は、同種異系または自己由来ドナーから入手可能である。γδＴ細胞は、ｅｘ  ｖｉｖｏで、部分的または完全的に精製または精製されないかつ増幅され得る。ｅｘ  ｖｉｖｏで増幅するための方法及び組成物には、ＷＯ２０１７／１９７３４７に記載されているものが含まれるが、これに限定されない。増幅は、ＣＡＲコンストラクトがγδＴ細胞（複数可）に導入される前もしくは後、または前後に実施され得る。
【０１４５】
本明細書に記載のγδＴ細胞は、養子細胞移植で用いるために、例えば、凍結保存して保存され得る。
【０１４６】
腫瘍細胞を阻害または殺傷する方法
血液腫瘍細胞に対して細胞毒性活性を有する、１種もしくは複数種の遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物を、任意の順序でまたは同時に対象に投与し得る。同時に投与される場合、本発明の複数の遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物は、静脈内注射などの単一の統一された形態で、または複数の静脈内注入、皮下注射または錠剤などの複数の形態で提供され得る。本発明の遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作されたγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物は、単一のパッケージまたは複数のパッケージに一緒にまたは別々に包装され得る。本発明の遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作されたγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物の１つまたはその全ては、複数の用量で与えられ得る。同時に投与されない場合、複数の投与間のタイミングは、約１週間、１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、または約１年まで変化し得る。場合によっては、本発明の遺伝子操作していない濃縮されたγδＴ細胞集団、遺伝子操作した濃縮されたγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物は、対象への投与後にｉｎ  ｖｉｖｏで、対象の体内で増殖し得る。１種または複数種の遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、１種または複数種の遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物を凍結して、同じ細胞調製物での複数の処置をするための細胞を提供することが可能である。本開示の１種または複数種の遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、１種または複数種の遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物ならびにそれを含む医薬組成物は、キットとして包装され得る。キットは、遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物ならびにそれを含む組成物の使用に関する指示（書面による指示など）を含み得る。
【０１４７】
場合によっては、血液癌を治療する方法は、遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物の治療上有効な量を対象に投与することを含み、そこにおいて、投与することで、血液癌を治療する。いくつかの実施形態において、遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物の治療上有効な量は、少なくとも約１０秒、３０秒、１分、１０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、１２時間、２４時間、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、２週間、３週間、１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、または１年投与される。いくつかの実施形態において、遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物の治療上有効な量は、少なくとも１週間投与される。いくつかの実施形態において、遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物の治療上有効な量は、少なくとも２週間投与される。
【０１４８】
本明細書に記載の遺伝子操作していないγδＴ細胞集団、遺伝子操作したγδＴ細胞集団及び／またはそれらの混合物は、疾病もしくは症状の発生前、発生中もしくは発生後に投与することが可能であり、γδＴ細胞集団を含む医薬組成物を投与するタイミングは変化し得る。例えば、γδＴ細胞集団は、予防薬として用いることが可能であり、疾病もしくは症状が発生する可能性を低減するために、症状または疾病の傾向が見られる対象に連続的に投与することが可能である。初回投与は、本明細書に記載の任意の製剤を用いる本明細書に記載の任意の経路によるなどの実用的な任意の経路を介して行われ得る。いくらかの実施例において、本開示のγδＴ細胞集団の投与は、静脈内投与である。γδＴ細胞集団の１回または複数回の投与量は、血液癌の発症後、実行可能になり次第すぐと、例えば、約２４時間から約４８時間、約４８時間から約１週間、約１週間から約２週間、約２週間から約１か月、約１か月から約３か月の免疫病を治療するために必要な時間の間投与され得る。いくつかの実施形態において、γδＴ細胞集団の１回または複数回の投与量は、がんの発症後と、他の治療の前後とに何年も投与され得る。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、γδＴ細胞集団は、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法で同時にまたは連続して投与される。本明細書で使用される「一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法」は、少なくとも１つの一般的なガンマ鎖サイトカインのレベルが対象において上昇するように、対象の生理的状態を変化させる方法または方法の組み合わせを指す。いくつかの実施形態において、この方法は、ＩＬ−２、ＩＬ−７及びＩＬ−１５からなる群から選択される１種以上の一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）のレベルを上昇させ、好ましくは、そこにおいて、この方法は対象におけるＩＬ−１５のレベルを上昇させる。いくつかの実施形態において、この方法はリンパ球の枯渇化を含む。いくつかの実施形態において、この方法は、対象に１種または複数種の一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を投与することを含む。場合によっては、ＩＬ−２、ＩＬ−７及び／またはＩＬ−１５、好ましくはＩＬ−１５が投与される。いくつかの実施形態において、この方法は、投与されたγδＴ細胞などから、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を分泌することを含む。場合によっては、ＩＬ−２、ＩＬ−７及び／またはＩＬ−１５、好ましくはＩＬ−１５が分泌される。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の投与方法は、γδＴ細胞（複数可）を導入する前のリンパ球の枯渇化を含む。いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の投与方法は、γδＴ細胞（複数可）の導入と同時に、または一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の有効量を連続して投与することで、その導入したγδＴ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大させることを含み、好ましくは、そこにおいてこの方法は、ＩＬ−２またはその１種もしくは複数種のミメティックを投与することを含み、より好ましくは、そこにおいてこの方法は、ＩＬ−１５またはその１種もしくは複数種のミメティックを投与することを含む。一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の投与量は、γδＴ細胞（複数可）を導入する前及び／または導入後に、導入したγδＴ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大し得る。ＩＬ−１５の模範的な量には、ＩＬ−１５に対して２４時間ごとに０．０１〜１０μｇ／ｋｇ／用量の間が含まれるがこれに限定されない。ＩＬ−２の模範的な量には、８〜４８時間ごとに約３×１０６と約２２×１０６ユニットが含まれるが、これらに限定されない。例えば、ＲＣＣでのＩＬ２の投薬計画は、最大１４回の投与で１５分間にわたって注入される６００，０００国際単位／ｋｇ（０．０３７ｍｇ／ｋｇ）静注、８時間おきである。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の投与方法は、γδＴ細胞（複数可）の投与前と、γδＴ細胞（複数可）の導入との同時の投与前と、またはその導入したγδＴ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはそれらの組み合わせを増大させるために有効な一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の連続した投与前とのリンパ球の枯渇化を含む。
【実施例】
【０１５２】
実施例１
１ｘ１０６／ｍＬのヒトＰＢＭＣを、２４ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ）に、ＩＬ−２（１００Ｕ／ｍＬ）存在下で５日間、プレコートした抗Ｖδ１抗体Ｄ１−０８またはＤ１−３５上に、改変細胞の培養培地で活性化させた（ＷＯ２０１７／１９７３４７を参照のこと）。５日目に、レトロネクチン存在下で、キメラ抗原受容体（２Ｂ７−５．１、配列番号１１と、３Ｂ９−５．１、配列番号９と、３Ｈ７−５．１、配列番号１０と、９Ｃ１１−５．１、配列番号１２）をコードするγ−レトロウイルスコンストラクトとともに、細胞培養物に形質導入した。６日目に、細胞を改変細胞の培養培地に戻し、必要に応じてフィーディング及びＩＬ−２の補充によりさらに増殖させた。１７、１８、または１９日目に細胞を回収し、ＡｕｔｏＭＡＣＳ（登録商標）キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）を用いて、残存するαβＴ細胞を枯渇させた。γδ細胞集団の純度と形質導入効率を、ＦＡＣＳにより評価した。並行して、形質導入していない細胞培養物を、レトロウイルスの上清を添加することなく、同じ方法で増殖させた。図３に示す通り、複数のドナーから得た形質導入していない増殖したＶδ１細胞は、同種異系のドナーの正常なＢ細胞に対して細胞毒性を示していない。ＣＤ２０ＣＡＲをＶδ１細胞に導入すると、正常なＢ細胞に対してこれらの細胞に強力な細胞毒性が付与された。細胞毒性は、４時間のアッセイでフローサイトメトリーにより、％アネキシンＶ＋細胞として測定した。
【０１５３】
実施例２
Ｖδ１細胞は、上述と同じ方法で活性化、形質導入及び増殖させた。３Ｈ７  ＣＡＲコンストラクト、配列番号１０は、２つのＣＤ２０＋細胞株である、Ｄａｕｄｉ及びＲａｊｉに対する細胞毒性を実証するために用いた。図４に示す通り、ＣＡＲを導入することで、遺伝子操作していないＶδ１細胞の生来の細胞毒性が増した。
【０１５４】
実施例３
Ｖδ１細胞は、上記と同じ方法で活性化、形質導入及び増殖させた。４つの異なるコンストラクト（配列番号９、１０、１１、１２）を、増殖中にＶδ１細胞に導入し、Ｒａｊｉ−Ｌｕｃ細胞に対して試験した。細胞毒性は、様々なＥ／Ｔ比で１８時間共培養した後に、発光基質Ｄ−ルシフェリン（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を添加後、全発光測定により測定した。ＦＩＧ．５に示す通り、本明細書に記載の４−１ＢＢ共刺激エンドドメインを含む抗ＣＤ２０ＣＡＲ細胞は、Ｒａｊｉ細胞に対して強力な細胞傷害活性を示した。
【０１５５】
実施例４
ＣＡＲコンストラクトは、いくつかの異なるドメイン及びＣＤ２０結合ドメイン（３Ｈ７−ＣＤ３ｚ、配列番号２０と、３Ｈ７−５．１、配列番号１０と、３Ｈ７−ＣＤ２７ｚ、配列番号８）で作製した。上記の通り、ＣＡＲコンストラクトを導入し、前の実施例で説明したように、細胞毒性をＲａｊｉ−Ｌｕｃ細胞に対して試験した（様々なＥ／Ｔ比における１８時間の細胞毒性）。図６は、様々なシグナル伝達及び／または共刺激エンドドメイン（複数可）を有するＲａｊｉ細胞に対して強力な細胞傷害活性を示す。
【０１５６】
実施例５
様々なＣＡＲコンストラクトを、増殖したＶδ１細胞に導入し、ＩｎｃｕＣｙｔｅ（登録商標）の機器を用いて、標的細胞の再投与による長期の細胞毒性アッセイ（シリアルキリング）で試験した。手短に言えば、Ｒａｊｉ細胞をＮｕｃＲｅｄ試薬で標識し、細胞の全蛍光を経時的に記録した。任意のサイトカインを添加せずに、細胞は、増殖培地中でＥ／Ｔ比３で７２時間共培養させた。７２時間経過後、培養物を別の用量のＲａｊｉ細胞で再投与し、死滅についてモニタした。この手順は、Ｒａｊｉ細胞が除去された培養物で１４４時間まで繰り返した。図７で、３Ｈ７−ＩＣＯＳｚは、４−１ＢＢ共刺激エンドドメインがＩＣＯＳエンドドメイン（ＷＬＴＫＫＫＹＳＳＳＶＨＤＰＮＧＥＹＭＦＭＲＡＶＮＴＡＫＫＳＲＬＴＤＶＴＬ（配列番号３５４））に置き換えられたコンストラクトである。
【０１５７】
実施例６
Ｒａｊｉ細胞をＮＳＧマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ）に皮下移植した。腫瘍が約１００ｍｍ３のサイズに達したら、動物をｉｎ  ｖｉｖｏで様々な共刺激共刺激エンドドメイン（「ｃｏ−ｓｔｉｍ」または「ｃｏｓｔｉｍ」）の有効性を比較するために、５×１０６Ｖδ１ＣＤ２０ＣＡＲ＋細胞で処置した。動物には、試験が終わるまで週に３回、ＩＬ−２（６００００Ｕ／用量）を同時に投与した。図８に示す通り、試験したコンストラクトは、ＮＳＧマウスの血液腫瘍を治療する際に強力なｉｎ  ｖｉｖｏ有効性を示した。理論に束縛されるものではないが、３Ｈ７−５．１、３Ｈ７−ＣＤ３ｚ及び３Ｈ７−ＣＤ２７ｚの最適化されたＣＡＲコンストラクトは、最適化されていないＣＡＲコンストラクトと比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏの腫瘍制御、増殖、活性化、持続性及び／または細胞毒性が優れていると仮定される。
【０１５８】
実施例７
Ｒａｊｉ細胞をＮＳＧマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ）に皮下移植した。腫瘍が約１００ｍｍ３に達したら、動物をＣｅｌｌＴｒａｃｅ  Ｖｉｏｌｅｔで予め標識した５×１０６Ｖδ１ＣＤ２０ＣＡＲ＋細胞で処置した。２日目と６日目に、腫瘍及び他の様々な臓器を抽出、消化し、得られた細胞懸濁液を（Ａ）γδＴ細胞及びＲａｊｉ細胞の存在（図９）ならびに（Ｂ）ＣｅｌｌＴｒａｃｅ  Ｖｉｏｌｅｔ色素希釈により証明されるγδ細胞の増殖（図１０）について分析した。動物には、６日目まで週に３回、同時にＩＬ−２（６００００Ｕ／用量）を投与した。図９に示す通り、導入されたγδＴ細胞は、腫瘍内環境で強力に増加し、２日目から６日目までγδＴ細胞に対する腫瘍細胞の比率の有意な減少を促進した。図１０に示す通り、γδＴ細胞は強力かつ優先的に腫瘍内空間で増殖した。
【０１５９】
実施例８
ＮＳＧマウスには、Ｒａｊｉ−Ｌｕｃ細胞（０．５ｍｌ／動物）を接種した。４日目に、動物を８．７ｘ１０６Ｖδ１ＣＡＲ＋細胞（配列番号１０）または同じコンストラクトで形質導入した６．８ｘ１０５αβＴ細胞で処置した。動物の生存について、１４０日間にわたってモニタした。全ての動物には、０日目、１日目及び２日目にＩＬ−２の３回投与（６００００／動物）を投与した（図１１）。図１１に示す通り、本明細書に記載のγδＴ細胞の投与によって、血液癌を有する対象の生存時間が増大した。
【０１６０】
実施例９
ヒトＩＬ−１５を発現するＳＲＧ−１５マウス（Ｈｅｒｎｄｌｅｒ−Ｂｒａｎｄｓｔｅｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ，２０１７）にＲａｊｉ−Ｌｕｃ細胞（０．５ｘ１０６／動物）を接種した。４日目に、動物を２０．２ｘ１０６のＶδ１ＣＡＲ＋細胞（配列番号１０）または同じコンストラクトで形質導入した１．９ｘ１０６αβＴ細胞で処置した。動物の生存について、７０日間にわたってモニタした。（図１２）。図１２に示す通り、導入したγδＴ細胞は、ＧｖＨＤ応答を誘発しなかった。対照的に、導入したαβＴ細胞はＧｖＨＤ応答を誘発した。
【０１６１】
実施例１０
ＮＳＧマウスの右後腹部にＲａｊｉ細胞（１ｘ１０６／動物）を皮下接種した。腫瘍体積が、約１００ｍｍ３に達したら、マウスを無作為化して、ＣＤ２０ＣＡＲまたは、ＣＡＲＣＤ２０及び可溶性ＩＬ−１５をコードする５ｘ１０６Ｖδ１ＣＡＲ  Ｔ細胞で処置した。動物には、試験が終わるまで、ＩＬ−２（６００００Ｕ／用量、Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ、週３回）を同時に投与した。６２日目に、測定可能な腫瘍がなかったＣＤ２０＋ｓＩＬ１５ＣＡＲ  Ｔ群の４匹の動物に、反対（左）の腹部に１ｘ１０６のＲａｊｉ細胞を皮下に再投与した。動物の対照群も腫瘍の増殖動態を実証するために含めた。結果を図１４に示す。図１４に示す通り、異種性である可溶性ＩＬ−１５をコードする核酸コンストラクトを有するγδＣＡＲ−Ｔ細胞を投与することで、６０日を超えて（例えば、６０から１１０日）続く持続的な抗腫瘍効果がもたらされた。
【０１６２】
実施例１１
ＩＬ−２（１００Ｕ／ｍＬ）存在下で５日間抗Ｖδ１抗体Ｄ１−０８またはＤ１−３５でプレコートした２４ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ）で、成長培地中の１ｘ１０６／ｍＬのヒトＰＢＭＣを活性化させた。５日目に、細胞培養物は、レトロネクチンの存在下で、ＢＣＭＡキメラ抗原受容体（配列番号３５〜３８）をコードするγ−レトロウイルスコンストラクトで形質導入された。６日目に、細胞を成長培地に戻し、必要に応じてフィーディング及びＩＬ−２の補充によりさらに増殖させた。１７、１８、または１９日目に細胞を回収し、ＡｕｔｏＭＡＣＳ（登録商標）キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ）を用いて、残存するαβＴ細胞を枯渇させた。γδ細胞集団の純度と形質導入効率を、ＦＡＣＳにより評価した（図１５）。手短に言えば、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、１μｇ／ｍＬの可溶性遺伝子組換えビオチン化ＢＣＭＡ（Ａｃｒｏ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）で細胞をインキュベートすることにより染色した。結合の検出は、ストレプトアビジン−ＢＶ４２１を製造元が推奨する１：５００の希釈率で用いて実施した。並行して、形質導入していない細胞培養物を、レトロウイルスの上清を添加することなく、同じ方法で増殖させた。増殖した細胞を、ＢＣＭＡ陽性細胞株のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性アッセイで試験した。図１６及び図１７に示す通り、形質導入していない増殖Ｖδ１細胞は、ＢＣＭＡを様々な程度で発現することが知られている、多発性骨髄腫及びバーキットリンパ腫細胞株に対してある程度の細胞毒性を誘発した。この細胞毒性は、ＢＣＭＡ  ＣＡＲコンストラクトを導入することにより強化された。細胞毒性は、示したＥ／Ｔ比で１８時間共培養した後に、発光基質Ｄ−ルシフェリン（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を添加後、９６ウェルプレートで全発光測定により測定した。ＢＣＭＡ陰性ＳＣＡＢＥＲ細胞株を対照として用いた。
【０１６３】
実施例１２
ＮＣＩ−Ｈ９２９多発性骨髄腫細胞（１ｘ１０６／動物）を、ＮＳＧマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ）に皮下移植した。腫瘍が約２００ｍｍ３のサイズに達したら、動物を１６７１６Ｐ及び１６７４７Ｐ  ｓｃＦｖ由来のＣＡＲコンストラクトをｉｎ  ｖｉｖｏでの有効性を比較するために、５×１０６Ｖδ１ＢＣＭＡ  ＣＡＲ＋細胞で処置した。動物には、試験が終わるまで週に３回、ＩＬ−２（１３０００ＩＵ／用量、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標））を同時に投与した。結果を図１８に示す。図１９に示す通り、抗ＢＣＭＡ  ＣＡＲ＋細胞は、強力なｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍負荷制御を示した。
【０１６４】
前述は本発明の原理を単に例示したものに過ぎない。当業者であれば、本明細書では明示的に説明または図示していないが、本発明の原理を具体化し、その趣旨及び範囲内に含まれる様々な構成を考案することが可能であろうことが理解されよう。さらに、本明細書中に列挙した全ての実施例及び条件付き言語は、主に、本発明の原理及び本技術を促進するために本発明者らが寄与する概念への読者の理解を支援することを意図したものであり、そのような具体的に列挙した実施例及び条件に限定されるものではないと解釈すべきである。さらに、本発明の原理、態様及びそれらの特定の実施例を列挙する本明細書中の全ての記述は、その構造的等価物と機能的等価物の両方を包含することを意図している。さらに、そのような均等物は、現在公知の等価物及び将来開発される等価物の両方、すなわち構造にかかわらず同じ機能を発揮するように開発された任意の要素を含むことが意図されている。したがって、本発明の範囲は、本明細書に示し、記載した模範的な態様に限定されることを意図されてはいない。むしろ、本発明の範囲及び趣旨は、添付の特許請求の範囲により具体化される。
【図１】
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【図２−１】
2022501074.tif 000003
【図２−２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【配列表】
2022501074000001.app
【国際調査報告】
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2022501074.tif 000022
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