【手続補正書】
【提出日】平成22年9月17日(2010.9.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本発明の方法に用いられるべきＮＰＡＲアゴニストは、ポリクローナル抗体、またはモノクローナル抗体もしくはその抗原結合フラグメントであり得る。具体的な態様では、これらは、ヒト抗体である。治療法においてＮＰＡＲアゴニストとして使用されるべきモノクローナル抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体または前述のいずれかの抗原結合フラグメントであってもよく、該フラグメントには、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントおよびＦｖフラグメントが含まれ得る。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
内皮機能不全の治療を必要とする対象の部位で内皮機能不全を治療する方法であって、該方法は、治療有効量の非タンパク質分解的に活性化されたトロンビン受容体のアゴニストを該対象に投与することを含み、ここで、該部位は、血管形成により損傷を受けた動脈、慢性皮膚潰瘍、骨誘導を必要とする部位または心臓血管再開通を必要とする部位ではない、方法。
（項目２）
前記対象が、高血圧、うっ血性心不全、冠動脈疾患、脳卒中、脳血管疾患、末梢血管疾患、糖尿病、勃起機能不全、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、肺高血圧症、高ホモシステイン血症、鎌状赤血球病、子癇前症、慢性腎障害、慢性腎機能不全、敗血症、多臓器障害、炎症性大腸炎、および放射線損傷からなる群から選択される１以上の疾患または状態に罹患している、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記対象が高血圧に罹患している、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記対象がアテローム性動脈硬化症に罹患している、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記対象が末梢血管疾患に罹患している、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記アゴニストが全身投与される、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記アゴニストが慢性的に投与される、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記方法が、内皮機能不全と関連したアルギナーゼのアップレギュレーションをブロックする、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記方法が、内皮一酸化窒素シンターゼの活性化またはアップレギュレーションを促進する、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記方法が一酸化窒素の産生を増加させる、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記アゴニストが、アミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｒを含むトロンビンペプチド誘導体であり、ここで、Ｒは、セリンエステラーゼ保存配列である、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記トロンビンペプチド誘導体が、約１２〜約２３個のアミノ酸を含む、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記セリン保存配列が、Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号１４）、または少なくとも６個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、ただし、セリンエステラーゼ保存配列における０、１、２または３個のアミノ酸が配列番号１４の対応する位置とは異なっている、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記セリンエステラーゼ保存配列が、Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号１４）、または少なくとも９個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、ただし、セリンエステラーゼ保存領域における０、１または２個のアミノ酸が配列番号１４における対応するアミノ酸の保存的置換体である、項目１２に記載の方法。
（項目１５）
前記セリンエステラーゼ保存配列が、Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号１５）、または少なくとも６個のアミノ酸を有する配列番号１５のＣ末端切断フラグメントを含み、ここで、Ｘ１がＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２がＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目１２に記載の方法。
（項目１６）
前記トロンビンペプチド誘導体が、アミノ酸配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ（配列番号１６）を含む、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号１７）、または少なくとも６個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、ここで、該ペプチドにおける０、１、２、または３個のアミノ酸が配列番号１７の対応する位置とは異なっている、項目１２に記載の方法。
（項目１８）
前記トロンビン誘導体が、Ｃ末端のアミドを含み、場合により、アシル化されたＮ末端を含み、ここで、該Ｃ末端のアミドは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂによって表され、ここで、ＲａおよびＲｂは、独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０置換または非置換脂肪族基であり、あるいはＲａおよびＲｂは、それらが結合される窒素と一緒になってＣ１−Ｃ１０非芳香族複素環基を形成し、該Ｎ末端アシル基は、ＲｃＣ（Ｏ）−によって表され、ここで、Ｒｃは、水素、Ｃ１−Ｃ１０置換もしくは非置換脂肪族基、またはＣ１−Ｃ１０置換もしくは非置換芳香族基である、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記トロンビンペプチド誘導体が、非置換であるＮ末端、および非置換であるＣ末端、またはＣ（Ｏ）ＮＨ２で表されるＣ末端アミドを含む、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号１７）を含むポリペプチド、または少なくとも６個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、該ペプチドにおける０、１、または２個のアミノ酸は、配列番号１７における対応するアミノ酸の保存的置換体である、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号１）を有するポリペプチドを含み、ここで、Ｘ１は、ＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２は、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
Ｘ１はＧｌｕであり、Ｘ２はＰｈｅである、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号６）、少なくとも１４個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＮ末端切断フラグメント、または少なくとも１８個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＣ末端切断フラグメントを含み、ただし、該トロンビン誘導体における位置１〜９および１４〜２３での０、１、２または３個のアミノ酸は、配列番号６の対応する位置でのアミノ酸とは異なっている、項目１９に記載の方法。
（項目２４）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号６）、少なくとも１４個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＮ末端切断フラグメント、または少なくとも１８個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＣ末端切断フラグメントを含み、ただし、トロンビン誘導体の位置１〜９および１４〜２３での０、１、または２個のアミノ酸は、配列番号６の対応する位置でアミノ酸の保存的置換体である、項目１９に記載の方法。
（項目２５）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号２）、少なくとも１４個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＮ末端切断フラグメント、または少なくとも１８個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＣ末端切断フラグメントを含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記トロンビンペプチド誘導体が、ポリペプチドＨ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−ＮＨ２（配列番号３）である、項目２４に記載の方法。
（項目２７）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号３９）、または少なくとも６個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、ここで、該ペプチドにおける０、１、２、または３個のアミノ酸は配列番号３９の対応する位置とは異なり、ただし、Ｘａａは、アラニン、グリシン、セリン、またはＳ−保護システインである、項目１２に記載の方法。
（項目２８）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ｃ末端のアミドを含み、場合により、アシル化されたＮ末端を含み、ここで、該Ｃ末端のアミドは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂによって表され、ここで、ＲａおよびＲｂは、独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０置換または非置換脂肪族基であり、あるいはＲａおよびＲｂは、それらが結合される窒素と一緒になってＣ１−Ｃ１０非芳香族複素環基を形成し、該Ｎ末端アシル基は、ＲｃＣ（Ｏ）−によって表され、ここで、Ｒｃは、水素、Ｃ１−Ｃ１０置換もしくは非置換脂肪族基、またはＣ１−Ｃ１０置換もしくは非置換芳香族基である、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記トロンビンペプチド誘導体が、非置換であるＮ末端、および非置換であるＣ末端、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２で表されるＣ末端アミドを含む、項目２７に記載の方法。
（項目３０）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号３９）、または少なくとも６個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、ただし、該ポリペプチドにおける０、１、または２個のアミノ酸は、配列番号３９における対応するアミノ酸の保存的置換体である、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
Ｘａａがアラニンである、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号４）のアミノ酸配列を含み、ここで、Ｘ１は、ＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２は、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目２９に記載の方法。
（項目３３）
前記トロンビンペプチド誘導体が、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号２０）、または配列番号２０のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ただし、該トロンビンペプチド誘導体における０、１または２個のアミノ酸は、配列番号２０の対応する位置のアミノ酸とは異なっている、項目２９に記載の方法。
（項目３４）
前記トロンビンペプチド誘導体が、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号２０）、または配列番号２０のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ただし、該トロンビンペプチド誘導体における０、１または２個のアミノ酸は、配列番号２０の対応する位置でアミノ酸の保存的置換体である、項目２９に記載の方法。
（項目３５）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号５）のアミノ酸配列、または配列番号５のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
Ｘａａがアラニンである、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号５）のアミノ酸配列を含み、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目２９に記載の方法。
（項目３８）
Ｘａａがアラニンである、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
Ｘ１がＧｌｕであり、Ｘ２がＰｈｅである、項目３７に記載の方法。
（項目４０）
前記トロンビンペプチド誘導体が、ポリペプチドＨ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−ＮＨ２（配列番号２２）である、項目２９に記載の方法。
（項目４１）
前記アゴニストが、２つのトロンビンペプチド誘導体を含むペプチド二量体であり、該トロンビンペプチド誘導体は、独立して、配列番号１７のアミノ酸配列（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ）または少なくとも６個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、ただし、該ポリペプチドにおける０、１、２、または３個のアミノ酸は、配列番号１７の対応する位置とは異なり；該トロンビンペプチド誘導体は、場合によりＣ末端アミドを含み；該トロンビンペプチド誘導体は、場合によりアシル化されたＮ末端を含む、項目１に記載の方法。
（項目４２）
前記二量体が、本質的に単量体を含まない、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記トロンビンペプチド誘導体は同一である、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記トロンビンペプチド誘導体が、ジスルフィド結合を介して共有結合される、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記トロンビンペプチド誘導体が、約１２〜約２３個のアミノ酸からなる、項目４４に記載の方法。
（項目４６）
前記トロンビンペプチド誘導体は、Ｃ末端アミド、場合によりアシル化されたＮ末端を含み、ここで、該Ｃ末端アミドは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂによって表され、ＲａおよびＲｂは、独立して、水素、Ｃ１−Ｃ１０置換または非置換脂肪族基であり、あるいはＲａおよびＲｂは、それらが結合される窒素と一緒になってＣ１−Ｃ１０非芳香族複素環基を形成し、該Ｎ末端アシル基は、ＲｃＣ（Ｏ）−によって表され、ここで、Ｒｃは、水素、Ｃ１−Ｃ１０置換もしくは非置換脂肪族基、またはＣ１−Ｃ１０置換もしくは非置換芳香族基である、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
前記トロンビンペプチド誘導体が、各々、非置換であるＮ末端；および非置換であるであるＣ末端、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２で表されるＣ末端アミドを含む、項目４５に記載の方法。
（項目４８）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号１７）のアミノ酸配列または少なくとも６個のアミノ酸を有するそのＣ末端切断フラグメントを含み、ただし、該トロンビンペプチド誘導体における０、１または２個のアミノ酸は、配列番号１７における対応するアミノ酸の保存的置換体である、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号１）を含み、ここで、Ｘ１がＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２がＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目４７に記載の方法。
（項目５０）
前記トロンビンペプチド誘導体が、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号６）、または配列番号６のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ただし、該トロンビンペプチド誘導体における０、１、２または３個のアミノ酸は、配列番号６の対応する位置のアミノ酸とは異なっている、項目４７に記載の方法。
（項目５１）
前記トロンビンペプチド誘導体が、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号６）、または配列番号６のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ただし、トロンビンペプチド誘導体における０、１、２または３個のアミノ酸は、配列番号６の対応する位置でのアミノ酸の保存的置換体である、項目４７に記載の方法。
（項目５２）
前記トロンビンペプチド誘導体が、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号２）、または配列番号２のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目４７に記載の方法。
（項目５３）
前記トロンビンペプチド誘導体は、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号２）を含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目４７に記載の方法。
（項目５４）
Ｘ１がＧｌｕであり、Ｘ２がＰｈｅである、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記トロンビンペプチド誘導体が、アミノ酸配列Ｈ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ−ＮＨ２（配列番号４０）を含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２は、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、項目４６に記載の方法。
（項目５６）
Ｘ１がＧｌｕであり、Ｘ２がＰｈｅである、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記アゴニストが、２つのトロンビン誘導体を含むペプチド二量体であり、各々、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号６）を有し、ここで、該トロンビンペプチド誘導体は、ジスルフィド結合によって共有結合される、項目１に記載の方法。
（項目５８）
前記アゴニストが、下記の構造式：
【化４】
2010504336.tif 000001
によって表されるペプチド二量体である、項目１に記載の方法。
（項目５９）
前記アゴニストが、相補的ペプチドに結合する抗体またはその抗原結合フラグメントであり、ここで、該相補的ペプチドが、トロンビンの一部分をコードするヌクレオチド配列の補体によってコードされる、項目１に記載の方法。
（項目６０）
前記トロンビンの部分が、哺乳動物のトロンビンの一部である、項目５９に記載の方法。
（項目６１）
前記トロンビンの部分が、ヒトトロンビンの一部である、項目５９に記載の方法。
（項目６２）
前記トロンビンの部分が、トロンビン受容体結合ドメインまたはその一部である、項目５９に記載の方法。
（項目６３）
前記トロンビン受容体結合ドメインまたはその一部が、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号６）を含むトロンビン受容体結合ドメインである、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記トロンビン受容体結合ドメインまたはその一部が、トロンビン受容体結合ドメインの一部である、項目６２に記載の方法。
（項目６５）
前記トロンビン受容体結合ドメインの一部が、アミノ酸配列Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ（配列番号７）を含む、項目６４に記載の方法。
（項目６６）
前記相補的ペプチドが、アンチセンスＲＮＡ鎖の５’−３’配列によってコードされる、項目５９に記載の方法。
（項目６７）
前記相補的ペプチドが、アンチセンスＲＮＡ鎖の３’−５’配列によってコードされる、項目５９に記載の方法。
（項目６８）
前記相補的ペプチドが、アミノ酸配列Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ（配列番号３０）を含む、項目５９に記載の方法。
（項目６９）
前記相補的ペプチドが、アミノ酸配列Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（配列番号３２）を含む、項目５９に記載の方法。
（項目７０）
前記相補的ペプチドが、アミノ酸配列Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ（配列番号３３）を含む、項目５９に記載の方法。
（項目７１）
前記相補的ペプチドが、アミノ酸配列Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ（配列番号３４）を含む、項目５９に記載の方法。
（項目７２）
前記抗体または抗原結合ラグメントが抗体である、項目５９に記載の方法。
（項目７３）
前記抗体がポリクローナル抗体である、項目５９に記載の方法。
（項目７４）
前記抗体または抗原結合フラグメントがモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントである、項目５９に記載の方法。
（項目７５）
前記抗体または抗原結合フラグメントが、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、および前述のいずれかの抗原結合フラグメントからなる群から選択される、項目５９に記載の方法。
（項目７６）
前記抗体または抗原結合フラグメントが抗原結合フラグメントである、項目５９に記載の方法。
（項目７７）
前記抗原結合フラグメントが、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントおよびＦｖフラグメントからなる群から選択される、項目７６に記載の方法。
（項目７８）
前記方法が、治療有効量の血管新生増殖因子を前記対象に投与することをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目７９）
前記血管新生増殖因子が、ヒトＶＥＧＦ−Ａである、項目７８に記載の方法。
（項目８０）
前記アゴニストが、配列番号３からなるポリペプチドである、項目７８に記載の方法。
（項目８１）
前記血管新生増殖因子が、ヒトＶＥＧＦ−Ａである、項目８０に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
内皮機能不全の治療を必要とする対象の部位で内皮機能不全を治療するための組成物であって、該組成物は、治療有効量の非タンパク質分解的に活性化されたトロンビン受容体のアゴニストを含み、ここで、該部位は、血管形成により損傷を受けた動脈、慢性皮膚潰瘍、骨誘導を必要とする部位または心臓血管再開通を必要とする部位ではない、組成物。
【請求項２】
前記対象が、高血圧、うっ血性心不全、冠動脈疾患、脳卒中、脳血管疾患、末梢血管疾患、糖尿病、勃起機能不全、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、肺高血圧症、高ホモシステイン血症、鎌状赤血球病、子癇前症、慢性腎障害、慢性腎機能不全、敗血症、多臓器障害、炎症性大腸炎、および放射線損傷からなる群から選択される１以上の疾患または状態に罹患している、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記アゴニストが、アミノ酸配列Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｒを含むトロンビンペプチド誘導体であり、ここで、Ｒは、セリンエステラーゼ保存配列であり、そして該トロンビンペプチド誘導体が、約１２〜約２３個のアミノ酸を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記トロンビンペプチド誘導体が、非置換であるＮ末端、および非置換であるＣ末端、またはＣ（Ｏ）ＮＨ２で表されるＣ末端アミドを含み、
該トロンビンペプチド誘導体が、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌのアミノ酸配列（配列番号２）、少なくとも１４個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＮ末端切断フラグメント、または少なくとも１８個のアミノ酸を有するトロンビンペプチド誘導体のＣ末端切断フラグメントを含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記トロンビンペプチド誘導体が、ポリペプチドＨ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−ＮＨ２（配列番号３）である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記トロンビンペプチド誘導体が、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｘａａ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号５）のアミノ酸配列、または配列番号５のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌであり、Ｘａａは、アラニン、グリシン、セリン、またはＳ−保護システインであり、そして該トロンビンペプチド誘導体が、非置換であるＮ末端、および非置換であるＣ末端、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２で表されるＣ末端アミドを含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項７】
前記アゴニストが、２つのトロンビンペプチド誘導体を含むペプチド二量体であり、該トロンビンペプチド誘導体は、独立して、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号２）のアミノ酸配列、または配列番号２のアミノ酸１０〜１８を含むそのフラグメントを含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌであり、
該二量体が、本質的に単量体を含まず、
該トロンビンペプチド誘導体は同一であり、
該トロンビンペプチド誘導体が、ジスルフィド結合を介して共有結合され、
該トロンビンペプチド誘導体が、１２〜２３個のアミノ酸からなり、
該トロンビンペプチド誘導体が、各々、非置換であるＮ末端；および非置換であるＣ末端、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２で表されるＣ末端アミドを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記トロンビンペプチド誘導体は、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｘ１−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｘ２−Ｖａｌ（配列番号２）を含み、ここで、Ｘ１はＧｌｕまたはＧｌｎであり、Ｘ２はＰｈｅ、Ｍｅｔ、Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＶａｌである、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
Ｘ１がＧｌｕであり、Ｘ２がＰｈｅである、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記アゴニストが、２つのトロンビン誘導体を含むペプチド二量体であり、各々、アミノ酸配列Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ（配列番号６）を有し、ここで、該トロンビンペプチド誘導体は、ジスルフィド結合によって共有結合される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記アゴニストが、下記の構造式：
【化４】
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によって表されるペプチド二量体である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
治療有効量の血管新生増殖因子と組み合わせて投与されることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記血管新生増殖因子が、ヒトＶＥＧＦ−Ａである、請求項１２に記載の組成物。