(57)【要約】  本発明は、４０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、０．０１％（ｗ／ｖ）〜０．１％（ｗ／ｖ）の界面活性剤と、５ｍＭ〜１００ｍＭの緩衝剤と、１０ｍＭ〜５００ｍＭの少なくとも１つの安定剤とを、４．５〜７．０の範囲のｐＨで含む、安定な液体医薬製剤に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬製剤であって、
−４０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
−０．０１％〜０．１％（ｗ／ｖ）の界面活性剤と、
−５ｍＭ〜１００ｍＭの緩衝剤と、
−１０ｍＭ〜５００ｍＭの少なくとも１つの安定剤とを、
４．５〜７．０の範囲のｐＨで含む、医薬製剤。
【請求項２】
前記ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体が、配列番号１の重鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ−Ｈ１）、配列番号２のＣＤＲ−Ｈ２、および配列番号３のＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域と、配列番号４の軽鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ−Ｌ１）、配列番号５のＣＤＲ−Ｌ２、および配列番号６のＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域と、を含む、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
前記ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体が、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む、請求項１または２に記載の医薬製剤。
【請求項４】
前記ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体の濃度が、４０ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲であり、特に、５０ｍｇ／ｍｌである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項５】
前記界面活性剤がポリソルベートである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項６】
前記ポリソルベートが、０．０１％〜０．１％（ｗ／ｖ）の範囲の濃度、特に０．０４％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項７】
前記緩衝剤が、ヒスチジン緩衝液、特に、塩化ヒスチジン緩衝液である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項８】
前記緩衝剤が、１０〜３０ｍＭの範囲の濃度、特に、２０ｍＭの濃度を有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項９】
前記製剤のｐＨが、５．０〜６．５の範囲、特に、６．０である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１０】
少なくとも１つの安定剤が、塩類、糖類およびアミノ酸類からなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１１】
前記少なくとも１つの安定剤が、糖、特に、スクロースである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１２】
前記少なくとも１つの安定剤が、１４０〜２５０ｍＭの範囲の濃度、特に、２１０〜２３０ｍＭの範囲の濃度で存在する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１３】
塩類、糖類およびアミノ酸類の群から選択される第１の安定剤と、第２の安定剤としてのメチオニンと、を含む、請求項１０に記載の医薬製剤。
【請求項１４】
前記第１の安定剤が、１２０〜３００ｍＭの濃度で存在し、前記第２の安定剤メチオニンが、５〜２５ｍＭの濃度で存在する、請求項１３に記載の医薬製剤。
【請求項１５】
前記ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体が、ヒトＣＳＦ−１ＲフラグメントｄｅｌＤ４（配列番号１１）およびヒトＣＳＦ−１Ｒ細胞外ドメイン（配列番号１２）に１：５０以下の比率で結合する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１６】
４０〜１００ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０３〜０．０５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２１０〜２３０ｍＭのスクロースと、
任意選択で、５〜２５ｍＭのメチオニンとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１７】
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２２０ｍＭのスクロースと、
１０ｍＭのメチオニンとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１８】
液体形態、凍結乾燥した形態、または凍結乾燥した形態から再構築された液体形態である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項１９】
がんを治療する際に使用するための請求項１〜１８のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２０】
別の治療薬剤、特に、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用を遮断する薬剤と組み合わせて使用するための請求項１〜１９のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２１】
色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）または腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）を治療する際に使用するための請求項１〜１８のいずれか一項に記載の医薬製剤。
【請求項２２】
がんを治療するため、または色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）もしくは腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）を治療するために有用な医薬の調製のための請求項１〜１８のいずれか一項に記載の製剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体分子の製剤、その製剤を調製するためのプロセス、およびその製剤の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトＣＳＦ−１受容体（ＣＳＦ−１Ｒ；コロニー刺激因子１受容体；同義語：Ｍ−ＣＳＦ受容体；マクロファージコロニー刺激因子１受容体、Ｆｍｓがん原遺伝子、ｃ−ｆｍｓ、配列番号１３）は、１９８６年から知られている（Ｃｏｕｓｓｅｎｓ，Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２０（１９８６）２７７−２８０）。ＣＳＦ−１Ｒは、ＣＳＦ−１（コロニー刺激因子１、Ｍ−ＣＳＦ、マクロファージコロニー刺激因子とも呼ばれる）のための受容体であり、このサイトカインの生物学的効果を媒介する（Ｓｈｅｒｒ，Ｃ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  ４１（１９８５）６６５−６７６）。コロニー刺激因子−１受容体（ＣＳＦ−１Ｒ）（ｃ−ｆｍｓとも呼ばれる）のクローニングは、最初にＲｏｕｓｓｅｌ，Ｍ．Ｆ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２５（１９８７）５４９−５５２に記載された。この刊行物において、ＣＳＦ−１Ｒが、Ｃｂｌに結合することによって受容体の下方制御を制御する阻害性チロシン９６９リン酸化の消失を含め、タンパク質のＣ末端テール部における変化に依存する形質転換能を有していることが示された（Ｌｅｅ，Ｐ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｍｂｏ  Ｊ．１８（１９９９）３６１６−３６２８）。インターロイキン−３４（ＩＬ−３４）と呼ばれるＣＳＦ−１Ｒのための第２のリガンドも同定された（Ｌｉｎ，Ｈ．，ｅｔ  ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３２０（２００８）８０７−８１１）。
【０００３】
コロニー刺激因子１（ＣＳＦ−１）およびその受容体ＣＳＦ−１Ｒは、マクロファージおよびその前駆体の遊走、分化、および生存を制御する。ＣＳＦ−１Ｒは、いくつかの既知のがん原遺伝子を含む、成長因子受容体の受容体タンパク質チロシンキナーゼ（ｒＰＴＫ）ファミリーのメンバーである。軟組織のびまん性腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）（または、色素性絨毛結節性滑膜炎［ＰＶＮＳ］として知られる）は、大きな関節に影響を与える稀な増殖性疾患であり、ＣＳＦ−１の過剰発現によって特徴付けられる。ＴＧＣＴ患者の大部分において、ＣＳＦ−１をコードする遺伝子を含む染色体転座が、滑膜表層内の細胞によるこのサイトカインの過剰発現を引き起こす。これにより、主に、大きな腫瘍塊を形成する非悪性の単核細胞および多核細胞である、ＣＳＦ−１Ｒを発現する細胞の大規模な動員が起こる。辺縁切除術または完全滑膜切除術は、依然としてＴＧＣＴの治療選択肢ではあるが、この障害は、局所的に破壊性であり、再発性の腫瘍成長に起因して、時には切断手術が必要となる。エマクツズマブは、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体であり、この稀な疾患を治療することに成功したことが示されている（Ｃａｓｓｉｅｒ，Ｐ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．１６（２０１５）９４９−９５６）。
【０００４】
ＣＳＦ−１Ｒシグナル伝達の主な生物学的効果は、造血前駆細胞からマクロファージ系株（破骨細胞を含む）への分化、増殖、遊走、および生存である。ＣＳＦ−１Ｒの活性化は、そのリガンドであるＣＳＦ−１（Ｍ−ＣＳＦ）およびＩＬ−３４によって媒介される。ＣＳＦ−１Ｒに対するＣＳＦ−１（Ｍ−ＣＳＦ）の結合は、ホモ二量体の形成およびチロシンリン酸化によるキナーゼの活性化を誘導する（Ｌｉ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ，ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ．１０（１９９１）２７７−２８８、Ｓｔａｎｌｅｙ，Ｅ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｄｅｖ．４６（１９９７）４−１０）。
【０００５】
生物学的に活性なホモ二量体ＣＳＦ−１は、ＣＳＦ−１受容体の細胞外ドメイン（ＣＳＦ−１Ｒ−ＥＣＤ）のサブドメインＤ１〜Ｄ３中のＣＳＦ−１Ｒに結合する。ＣＳＦ−１Ｒ−ＥＣＤは、５つの免疫グロブリン様サブドメイン（Ｄ１〜Ｄ５と指定される）を含む。細胞外ドメイン（ＣＳＦ−１Ｒ−ＥＣＤ）のサブドメインＤ４〜Ｄ５は、ＣＳＦ−１結合には関与しない。（Ｗａｎｇ，Ｚ．，ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １３（１９９３）５３４８−５３５９）。サブドメインＤ４は、二量体化に関与する（Ｙｅｕｎｇ，Ｙ−Ｇ．，ｅｔ  ａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＆  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ２（２００３）１１４３−１１５５、Ｐｉｘｌｅｙ，Ｆ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １４（２００４）６２８−６３８）。配列番号１１のヒトＣＳＦ−１ＲフラグメントｄｅｌＤ４（ヒトＣＳＦ−１Ｒ−ＥＣＤのＤ４サブドメインが欠失したヒトＣＳＦ−１Ｒフラグメント）に結合する抗体は、ＷＯ２０１１／０７００２４Ａ１に記載されている。これらの抗体は、Ｄ４およびＤ５の中に位置するそのエピトープとの受容体二量体化界面を遮断し、したがって、固有である。これらの抗体の１つは、エマクツズマブまたはＲＧ７１５５である。そのＣＤＲおよびＶＨ／ＶＬ配列は、本明細書に開示されている。
【０００６】
抗体分子は、タンパク質医薬群の一部として、物理的および化学的な分解を非常に受けやすい。化学的な分解は、結合形成または開裂を介するタンパク質の修飾を含む任意のプロセスを含み、新しい化学物質が得られる。種々の化学反応は、タンパク質に影響を与えることが知られている。これらの反応は、ペプチド結合の開裂を含む加水分解、ならびに脱アミド化、異性化、酸化および分解を含んでいてもよい。物理的な分解は、より高次の構造の変化を指し、変性、表面への吸着、凝集および沈殿を含む。タンパク質の安定性は、例えば、アミノ酸配列、グリコシル化パターン等のタンパク質自体の特徴によって影響され、温度、溶媒ｐＨ、賦形剤、界面、または剪断速度等の外的な影響によって影響される。そのため、製造、貯蔵および投与の間の分解反応に対してタンパク質を保護するための最適な製剤化条件を明確にすることが重要である。（Ｍａｎｎｉｎｇ，Ｍ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．（１９８９），”Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ”，Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ  ６（１１），９０３−９１８、Ｚｈｅｎｇ，Ｊ．Ｙ．，Ｊａｎｉｓ，Ｌ．Ｊ．（２００５），”Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｐＨ，ｂｕｆｆｅｒ  ｓｐｅｃｉｅｓ，ａｎｄ  ｓｔｏｒａｇｅ  ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ  ｏｎ  ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ａ  ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ＬＡ２９８”，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ３０８，４６−５１。）治療用抗体の安定な液体製剤は、製剤が高濃度で抗体を含むべきであるとき、得るのが特に困難である。
【０００７】
したがって、本発明の目的は、所望な投薬を可能にし、患者への抗体の簡便な投与を可能にする、可能な限り必要な賦形剤が少なくてすむ抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体のための安定な製剤を提供することである。
【０００８】
本発明の製剤は、目に見える粒子が生成することなく、２〜８℃の意図した貯蔵温度で２４時間貯蔵した際に良好な安定性を示し、ライン内フィルタを必要とすることなく静脈内投与が可能であり、より大きな治療簡便性を可能にする。薬物製品の製造または輸送中に潜在的に起こる物理的ストレス条件をシミュレーションするために、振とうおよび複数回の凍結解凍ステップが液体製剤に適用された。本発明の製剤は、振とうおよび凍結解凍によるストレスを適用した後、良好な安定性を示す。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、ＣＳＦ−１Ｒに結合する抗体の安定な高用量医薬製剤、その製剤を調製するためのプロセス、およびその製剤の使用に関する。
【００１０】
一態様では、本発明は、医薬製剤であって、
−４０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
−０．０１％〜０．１％（ｗ／ｖ）の界面活性剤と、
−５ｍＭ〜１００ｍＭの緩衝剤と、
−１０ｍＭ〜５００ｍＭの少なくとも１つの安定剤とを、
４．５〜７．０の範囲のｐＨで含む、医薬製剤を指す。
【００１１】
特定の態様では、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、配列番号１の重鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ−Ｈ１）、配列番号２のＣＤＲ−Ｈ２、および配列番号３のＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域と、配列番号４の軽鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ−Ｌ１）、配列番号５のＣＤＲ−Ｌ２、および配列番号６のＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域と、を含む。より特定的には、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。
【００１２】
本発明の製剤は、液体形態、凍結乾燥した形態、または凍結乾燥した形態から再構築された液体形態で提供されてもよい。
【００１３】
本発明の医薬製剤に有用なＣＳＦ−１Ｒに対する抗体を、本明細書で以下に詳細に記載する。
【００１４】
好ましい態様では、本発明の製剤に含まれるＣＳＦ−１Ｒに対する抗体の濃度は、４０〜１００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは４０〜７５ｍｇ／ｍｌ、より好ましくは４０〜６０ｍｇ／ｍｌの範囲である。特に好ましくは、５０ｍｇ／ｍｌの濃度である。
【００１５】
別の態様では、医薬製剤は、界面活性剤を０．０１％〜０．１％（ｗ／ｖ）の範囲の濃度で含む。本発明の製剤において、界面活性剤の濃度は、重量／体積（ｗ／ｖ）で表される百分率として記載される。好ましくは、医薬製剤は、界面活性剤を０．０２％〜約０．０５％（ｗ／ｖ）の範囲の濃度、最も好ましくは０．０４％（ｗ／ｖ）の濃度で含む。界面活性剤がポリソルベートである、請求項１または２に記載の医薬製剤。本発明で使用するのに好ましい界面活性剤は、ポリオキシエチレン−ソルビタン脂肪酸エステル類（すなわち、ポリソルベート類）、好ましくは、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０である。特定の態様では、界面活性剤は、ポリソルベート２０である。
【００１６】
さらなる態様では、本発明の医薬製剤は、緩衝剤を含む。好ましくは、緩衝剤は、ヒスチジン緩衝液である。ヒスチジン緩衝液は、ヒスチジン、一般的にはＬ−ヒスチジンを緩衝剤として含む緩衝液である。最も好ましいのは、Ｌ−ヒスチジン／ＨＣｌ緩衝液であり、Ｌ−ヒスチジン／ＨＣｌ緩衝液は、Ｌ−ヒスチジンまたはＬ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩との混合物を含み、塩酸を用いてｐＨ調整が達成されている。特に断りのない限り、「ヒスチジン」という用語は、本明細書で緩衝剤を記載するために使用される場合、Ｌ−ヒスチジン／ＨＣｌ緩衝液、特に、塩化ヒスチジン緩衝液を指す。一態様では、緩衝剤は、１０〜３０ｍＭの範囲の濃度、より特定的には、２０ｍＭの濃度を有する。
【００１７】
好ましくは、製剤のｐＨは、５．０〜６．５の範囲、特に約６．０である。したがって、製剤のｐＨは、好ましくは６．０である。使用される緩衝剤にかかわらず、ｐＨは、当該技術分野で知られている酸または塩基、例えば、塩酸、酢酸、リン酸、硫酸およびクエン酸、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムを用いて調整することができる。
【００１８】
別の態様では、本発明の医薬製剤は、少なくとも１つの安定剤を含み、少なくとも１つの安定剤は、塩類、糖類およびアミノ酸類からなる群から選択される。特定の態様では、少なくとも１つの安定剤は、糖、特に、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトースおよびラフィノースからなる群から選択されるオリゴ糖である。より特定的には、糖は、スクロースである。好ましい態様では、安定剤または糖は、１４０〜２５０ｍＭの範囲の濃度、特に、２１０〜２３０ｍＭの範囲の濃度で存在する。好ましくは、糖は、２２０ｍＭの濃度で存在する。
【００１９】
さらに別の態様では、本発明の医薬製剤は、塩類、糖類およびアミノ酸類の群から選択される第１の安定剤と、第２の安定剤としてのメチオニンと、を含む。好ましい態様では、第１の安定剤は、１２０〜３００ｍＭの濃度で存在し、第２の安定剤メチオニンは、５〜２５ｍＭの濃度で存在する。より好ましくは、メチオニンは、１０ｍＭの濃度で存在する。
【００２０】
本発明の製剤に含まれるＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、好ましくは、ヒトＣＳＦ−１ＲフラグメントｄｅｌＤ４（配列番号１１）およびヒトＣＳＦ−１Ｒ細胞外ドメイン（配列番号１２）に１：５０以下の比率で結合する抗体である。
【００２１】
特定の一態様では、本発明は、医薬製剤であって、
４０〜１００ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０３〜０．０５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２１０〜２３０ｍＭのスクロースと、
任意選択で、５〜２５ｍＭのメチオニンとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、医薬製剤に関する。
【００２２】
特定の一態様では、本発明の医薬製剤は、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２２０ｍＭのスクロースと、
１０ｍＭのメチオニンとを、
６．０±０．５のｐＨで含む。
【００２３】
さらなる態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２２０ｍＭのスクロースとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００２４】
別の態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８と、
２２０ｍＭのスクロースとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００２５】
さらなる態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
１３０ｍＭの塩化ナトリウムとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００２６】
別の態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
１３０ｍＭの塩化ナトリウムと、
１０ｍＭのメチオニンとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００２７】
さらなる態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８と、
１３０ｍＭの塩化ナトリウムとを、
６．０±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００２８】
別の態様では、本発明の医薬製剤は、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２２０ｍＭのスクロースとを、
５．５±０．５のｐＨで含む。
【００２９】
別の態様では、本発明の医薬製剤は、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２２０ｍＭのスクロースと、
１０ｍＭのメチオニンとを、
５．５±０．５のｐＨで含む。
【００３０】
さらなる態様では、本発明の医薬製剤は、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８と、
２２０ｍＭのスクロースとを、
５．５±０．５のｐＨで含む。
【００３１】
さらなる態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
１３０ｍＭの塩化ナトリウムとを、
５．５±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００３２】
別の態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
１３０ｍＭの塩化ナトリウムと、
１０ｍＭのメチオニンとを、
５．５±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００３３】
さらなる態様では、医薬製剤であって、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８と、
１３０ｍＭの塩化ナトリウムとを、
５．５±０．５のｐＨで含む、医薬製剤が本明細書で提供される。
【００３４】
別の態様では、本発明の医薬製剤は、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２４０ｍＭのトレハロースとを、
６．０±０．５のｐＨで含む。
【００３５】
さらなる態様では、本発明の医薬製剤は、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０と、
２４０ｍＭのトレハロースと、
１０ｍＭのメチオニンとを、
６．０±０．５のｐＨで含む。
【００３６】
別の態様では、本発明の医薬製剤は、
５０ｍｇ／ｍｌのＣＳＦ−１Ｒに対する抗体と、
２０ｍＭのＬ−ヒスチジンと、
０．０４％（ｗ／ｖ）のポロキサマー１８８と、
２４０ｍＭのトレハロースとを、
６．０±０．５のｐＨで含む。
【００３７】
さらなる態様では、本発明は、がんまたは転移の治療において使用するための、本明細書で以前に記載した医薬製剤に関する。別の態様では、本明細書で以前に記載した医薬製剤は、骨量減少の治療に使用するためのものである。さらなる態様では、本明細書で以前に記載した医薬製剤は、炎症性腸疾患等の炎症性疾患の治療に使用するためのものである。好ましい態様では、本明細書で以前に記載した医薬製剤は、色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）または腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）の治療に使用するためのものである。
【００３８】
別の態様では、本明細書で以前に記載した医薬製剤は、別の治療薬剤、特に、別の免疫療法と組み合わせて使用するためのものである。特定の一態様では、医薬製剤は、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用を遮断する薬剤と組み合わせて使用するためのものである。別の態様では、本発明は、がんまたは転移を治療するのに有用な医薬を調製するための本明細書で以前に記載した医薬製剤の使用に関する。別の態様では、骨量減少の治療に有用な医薬を調製するための本明細書で以前に記載した医薬製剤の使用が提供される。さらなる態様では、炎症性腸疾患等の炎症性疾患の治療に有用な医薬を調製するための本明細書で以前に記載した医薬製剤の使用が提供される。好ましい態様では、色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）または腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）の治療に有用な医薬を調製するための本明細書で以前に記載した医薬製剤の使用が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本発明は、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体を含む安定な医薬製剤に関する。
【００４０】
「医薬製剤」または「医薬組成物」という用語は、活性成分の生物学的活性が明白に有効であることを可能にするような形態であり、製剤が投与される対象にとって毒性があるさらなる構成要素を含まない調製物を指す。
【００４１】
本発明の製剤と組み合わせて本明細書で使用される「液体」という用語は、大気圧下、少なくとも約２℃〜約８℃の温度で液体である製剤を示す。
【００４２】
本発明の製剤と組み合わせて本明細書で使用される「凍結乾燥した」という用語は、それ自体が当該技術分野で知られている凍結乾燥方法によって製造される製剤を示す。溶媒（例えば、水）は、凍結の後、真空下での氷の昇華および高温での残留水の離脱によって除去される。凍結乾燥物は、通常、残留水分量が約０．１〜５％（ｗ／ｗ）であり、粉末として、または物理的に安定なケーキとして存在する。凍結乾燥物は、再構築媒体の添加後に迅速に溶解することによって特性決定される。
【００４３】
本発明の製剤と組み合わせて本明細書で使用される「再構築された形態」という用語は、凍結乾燥され、再構築媒体の添加によって再溶解する製剤を示す。好適な再構築媒体は、限定されないが、注射用水（ＷＦＩ）、注射用静菌性水（ＢＷＦＩ）、塩化ナトリウム溶液（例えば、０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ）、グルコース溶液（例えば、５％グルコース）、界面活性剤含有溶液（例えば、０．０１％ポリソルベート２０）、ｐＨ緩衝溶液（例えば、リン酸緩衝溶液）を含む。
【００４４】
本発明の製剤は、生理学的に十分に忍容性であり、容易に調製することができ、正確に分配することができ、貯蔵期間にわたって、繰り返される凍結解凍サイクルおよび機械的ストレスの間、分解生成物および凝集物に関して安定である。
【００４５】
「安定な」製剤は、製剤中のタンパク質（例えば、抗体）が、その物理的安定性および化学的安定性を本質的に保持しており、そのため、貯蔵中のその生物学的活性を保持している製剤である。
【００４６】
「安定な液体医薬抗体製剤」は、冷蔵温度（２〜８℃）で少なくとも１２ヶ月間、特定的には２年間、より特定的には３年間、顕著な変化が観察されない液体抗体製剤である。安定性の基準は、以下の通りである。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）によって測定される場合、抗体単量体の１０％以下、特定的には５％以下が分解する。さらに、溶液は、視覚分析によって、無色または透明から、わずかに乳白色である。製剤のタンパク質濃度は、±１０％以下の変化を有する。１０％以下、特定的に、５％以下の凝集が生成する。安定性は、ＵＶ分光法、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）、イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥ−ＨＰＬＣ）、比濁法および目視検査等、当該技術分野で知られている方法によって測定される。
【００４７】
「抗体」という用語は、全長抗体および抗体フラグメントに限定されないが、これらを含む、抗体構造の種々の形態を包含する。本発明の抗体は、特に、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、抗体フラグメント、または、本発明の特徴的な性質が維持されている限りにおいて、さらなる遺伝子操作された抗体である。より特定的には、抗体は、ヒト化モノクローナル抗体、特に、組換えヒト化抗体である。特定の態様では、ヒト化抗体は、ヒトＩｇＧ１アイソタイプの抗体である。
【００４８】
「ヒト化抗体」という用語は、フレームワークまたは「相補性決定領域」（ＣＤＲ）が、親免疫グロブリンと比較して、異なる特異性を有する免疫グロブリンのＣＤＲを含むように修飾された抗体を指す。好ましい実施形態では、マウスＣＤＲがヒト抗体のフレームワーク領域に接合され、「ヒト化抗体」を調製する。Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２（１９８８）３２３−３２７、およびＮｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３１４（１９８５）２６８−２７０を参照されたい。特に好ましいＣＤＲは、キメラ抗体について上に示した抗原を認識する配列を表すものに対応する。本発明に包含される「ヒト化抗体」の他の形態は、特に、Ｃ１ｑ結合および／またはＦｃ受容体（ＦｃＲ）結合という観点で、本発明に係る特性を作り出すために、定常領域が、元々の抗体の定常領域からさらに修飾されるか、または変更されているものである。
【００４９】
「ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体」は、ヒトＣＳＦ−１Ｒに特異的に結合する抗体である。特に有用なＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０７００２４Ａ１号（その全体が本明細書に参照によって組み込まれる）に記載される抗体である。これらの抗体は、ヒトＣＳＦ−１ＲフラグメントｄｅｌＤ４（細胞外サブドメインＤ１−Ｄ３およびＤ５を含む、配列番号１１）およびヒトＣＳＦ−１Ｒ細胞外ドメイン（ＣＳＦ−１Ｒ−ＥＣＤ）（細胞外サブドメインＤ１−Ｄ５を含む、配列番号１２）に１：５０以下の比率で結合するという点で固有である。したがってＤ４およびＤ５の中に位置するそのエピトープを用い、受容体二量体化界面を遮断することができる。
【００５０】
「特異的に結合する」とは、その結合が抗原選択性であり、望ましくない相互作用または非特異的な相互作用とは判別することができることを意味する。抗原結合部分が特定の抗原決定基に結合する能力は、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）または当業者には知られている他の技術、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ機器で分析される）（Ｌｉｌｊｅｂｌａｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｌｙｃｏ  Ｊ  １７，３２３−３２９（２０００））、および従来の結合アッセイ（Ｈｅｅｌｅｙ，Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｓ  ２８，２１７−２２９（２００２））のいずれかによって測定することができる。一実施形態では、無関係なタンパク質に対する抗原結合部分の結合度は、例えばＳＰＲによって測定される抗原に対する抗原結合部分の結合の約１０％未満である。特定の実施形態では、抗原に結合する抗原結合部分、またはこの抗原結合部分を含む抗体は、解離定数（ＫＤ）が、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば、１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）である。
【００５１】
特定の態様では、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、配列番号１の重鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ−Ｈ１）、配列番号２のＣＤＲ−Ｈ２、および配列番号３のＣＤＲ−Ｈ３を含む重鎖可変領域と、配列番号４の軽鎖ＣＤＲ１（ＣＤＲ−Ｌ１）、配列番号５のＣＤＲ−Ｌ２、および配列番号６のＣＤＲ−Ｌ３を含む軽鎖可変領域と、を含む。より特定的には、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。特定の好ましい態様では、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、ヒトＩｇＧ１抗体であり、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖と、を含む。この抗体は、エマクツズマブまたはＲＧ７１５５と呼ばれる。
【００５２】
「可変領域」または「可変ドメイン」という用語は、抗原に対する抗体の結合に抗体重鎖または軽鎖のドメインを指す。天然の抗体の重鎖および軽鎖（それぞれＶＨおよびＶＬ）の可変ドメインは、一般的に、同様の構造を有し、それぞれのドメインは、４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）と、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）と、を含む。抗原結合特異性を与えるために、単一のＶＨまたはＶＬドメインで十分な場合がある。可変領域配列と組み合わせて本明細書で使用される場合、「Ｋａｂａｔ番号付け」は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）によって記載される番号付けシステムを指す。
【００５３】
本明細書で使用される「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、配列内で高頻度可変性であり、抗原結合特異性を決定する、抗体可変ドメインの領域のそれぞれを指す。ＨＶＲは、「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）由来のアミノ酸残基を含む。一般的に、抗体は、ＶＨに３つ（ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３）、ＶＬに３つ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３）の６つのＣＤＲを含む。    本明細書における例示的なＣＤＲは、
（ａ）アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）、および９６−１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））、
（ｂ）アミノ酸残基２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）、８９−９７（Ｌ３）、３１−３５ｂ（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）、および９５−１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））、ならびに
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ−３６（Ｌ１）、４６−５５（Ｌ２）、８９−９６（Ｌ３）、３０−３５ｂ（Ｈ１）、４７−５８（Ｈ２）、および９３−１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触（ＭａｃＣａｌｌｕｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２−７４５（１９９６））を含む。
【００５４】
特に断りのない限り、ＣＤＲは、上記のＫａｂａｔらに従い決定される。当業者は、ＣＤＲの表記が、上記のＣｈｏｔｉａ、上記のＭｃＣａｌｌｕｍ、または任意の他の科学的に許容される命名システムに従い決定することもできることを理解するであろう。
【００５５】
「フレームワーク」または「ＦＲ」は、相補性決定領域（ＣＤＲ）以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般的に、    ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４の４つのＦＲドメインからなる。したがって、ＣＤＲおよびＦＲ配列は、一般的に、ＶＨ（またはＶＬ）において以下の配列：    ＦＲ１−ＣＤＲ−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−ＣＤＲ−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−ＣＤＲ−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４で表される。
【００５６】
「エピトープ」という用語は、抗体に対して特異的に結合することができる任意のポリペプチド決定基を含む。特定の実施形態では、エピトープ決定基は、分子の化学的に活性な表面基、例えば、アミノ酸類、糖側鎖、ホスホリル、またはスルホニルを含み、特定の実施形態では、特定の三次元構造特徴、および／または特定の電荷特徴を有していてもよい。エピトープは、抗体によって結合される抗原の領域である。
【００５７】
「定常領域」または「定常ドメイン」は、抗原に対する抗体の結合に直接的には関与しないが、種々のエフェクター機能を示す。抗体または免疫グロブリンは、それらの重鎖の定常領域のアミノ酸配列に応じて、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭといったクラスに分けられ、これらのうちのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２へとさらに分けることができる。本発明で使用される抗体は、特定的にはＩｇＧ型の抗体であり、より特定的には、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４ヒトサブタイプの抗体である。
【００５８】
「Ｆｃ領域」という用語は、本明細書では定常領域の少なくとも一部分を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。この用語は、天然配列Ｆｃ領域と可変Ｆｃ領域を含む。一態様では、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から、またはＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端まで延びている。しかし、宿主細胞によって産生される抗体は、重鎖のＣ末端から１つ以上、特定的に１つまたは２つのアミノ酸の翻訳後開裂を受けてもよい。したがって、完全長重鎖をコードする特定の核酸分子の発現によって、宿主細胞によって産生する抗体は、完全長重鎖を含んでいてもよく、または完全長重鎖の開裂したバリアントを含んでいてもよい。これは、重鎖の最後の２つのＣ末端アミノ酸がグリシン（Ｇ４４６）およびリシン（Ｋ４４７、Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックスによる番号付け）である場合であってもよい。したがって、Ｆｃ領域のＣ末端リシン（Ｌｙｓ４４７）、またはＣ末端グリシン（Ｇｌｙ４４６）およびリシン（Ｌｙｓ４４７）が存在してもよく、または存在していなくてもよい。Ｆｃ領域を含む重鎖のアミノ酸配列は、特に断りのない場合には、Ｃ末端のグリシン−リシンジペプチドを含まずに本明細書で示される。一態様では、本発明の抗体に含まれる、本明細書で明記したＦｃ領域を含む重鎖は、さらなるＣ末端のグリシン−リシンジペプチド（Ｇ４４６およびＫ４４７、ＫａｂａｔのＥＵインデックスに従った番号付け）を含む。一態様では、本発明の抗体に含まれる、本明細書で明記したＦｃ領域を含む重鎖は、さらなるＣ末端のグリシン残基（Ｇ４４６、ＫａｂａｔのＥＵインデックスに従った番号付け）を含む。本明細書で特に明記されない限り、Ｆｃ領域または定常領域におけるアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９９１に記載される、ＥＵ番号付けシステム（ＥＵインデックスとも呼ばれる）に従う。
【００５９】
医薬製剤に含まれるＣＳＦ−１Ｒに対する抗体の濃度は、４０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌの範囲、特定的には４０ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲、より特定的には４０ｍｇ／ｍｌ〜６０ｍｇ／ｍｌの範囲、最も特定的には５０ｍｇ／ｍｌである。
【００６０】
本明細書で使用される「界面活性剤」という用語は、薬学的に許容される表面活性薬剤を示す。好ましくは、非イオン性界面活性剤が使用される。薬学的に許容される界面活性剤の例としては、限定されないが、ポリオキシエチレン−ソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｂｒｉｊ）、アルキルフェニルポリオキシエチレンエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）、およびドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）が挙げられる。好ましいポリオキシエチレン−ソルビタン脂肪酸エステルは、ポリソルベート２０（ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、Ｔｗｅｅｎ  ２０（商標）の商標で販売される）およびポリソルベート８０（ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、Ｔｗｅｅｎ  ８０（商標）の商標で販売される）である。好ましいポリエチレン−ポリプロピレンコポリマーは、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ６８またはＰｏｌｏｘａｍｅｒ  １８８（商標）の名称で販売されているものである。好ましいポリオキシエチレンアルキルエーテルは、Ｂｒｉｊ（商標）の商標で販売されているものである。好ましいアルキルフェニルポリオキシエチレンエーテルは、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘの商標で販売されており、最も好ましくは、ｐ−ｔｅｒｔ−オクチルフェノキシポリエトキシエタノール（Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００（商標）の商標で販売される）である。本発明での使用に好ましい界面活性剤は、ポリオキシエチレン−ソルビタン脂肪酸エステル、好ましくは、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０、最も好ましくは、ポリソルベート２０である。別の好ましい界面活性剤は、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  １８８（商標）である。
【００６１】
本明細書で使用される「緩衝剤」という用語は、医薬調製物のｐＨを安定化させる、薬学的に許容される賦形剤を示す。好適な緩衝液は、当該技術分野でよく知られており、文献中に見出すことができる。好ましい薬学的に許容される緩衝液は、限定されないが、ヒスチジン緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、酢酸緩衝液、アルギニン緩衝液、リン酸緩衝液、またはこれらの混合物を含む。したがって、緩衝剤は、ヒスチジン塩類、クエン酸塩類、コハク酸塩類、酢酸塩類、リンゴ酸塩類、リン酸塩類および乳酸塩類である。特に興味深い緩衝剤は、Ｌ−ヒスチジン、またはＬ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩またはＬ−ヒスチジン酢酸塩との混合物を含み、当該技術分野で知られている酸または塩基を用いてｐＨ調整されている。上述の緩衝液は、一般的に、約５ｍＭ〜約１００ｍＭの量、特定的には約１０ｍＭ〜約３０ｍＭの量、より特定的には約２０ｍＭの量で使用される。使用される緩衝液とは独立して、当該技術分野で知られている酸または塩基、例えば、塩酸、酢酸、リン酸、硫酸およびクエン酸、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムを用い、ｐＨを４．５〜７．０の範囲の値、特定的には５．０〜６．０の範囲の値、最も特定的にはｐＨ６．０±０．０３に調整することができる。
【００６２】
「安定剤」という用語は、製造、貯蔵および適用の間の化学的な分解および／または物理的な分解から活性医薬成分および／または製剤を保護する、薬学的に許容される賦形剤を示す。安定剤としては、限定されないが、糖類、アミノ酸類、ポリオール類（例えば、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、デキストラン、グリセロール、アラビトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、シクロデキストリン類（例えば、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエチル−β−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン）、ポリエチレングリコール類（例えば、ＰＥＧ  ３０００、ＰＥＧ  ３３５０、ＰＥＧ  ４０００、ＰＥＧ  ６０００）、アルブミン類（ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ））、塩類（例えば、塩化ナトリウム（生理食塩水）、塩化マグネシウム、塩化カルシウム）、本明細書で以下に定義されるようなキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）が挙げられる。本発明で特に使用される安定剤は、糖類、ポリオール類およびアミノ酸類からなる群から選択される。安定剤は、製剤中に、約１０ｍＭ〜約５００ｍＭの量、特定的には約１４０〜約２５０ｍＭの量、より特定的には約２１０ｍＭ〜約２４０ｍＭの量で存在し得る。より特定的には、スクロースまたはトレハロースは、約２２０ｍＭ〜約２４０ｍＭの量で安定剤として使用される。
【００６３】
本明細書で使用される「糖」という用語は、単糖類およびオリゴ糖類を含む。単糖は、単純糖類およびその誘導体、例えば、アミノ糖類を含む、酸によって加水分解可能ではない単量体炭水化物である。糖類は、通常は、そのＤ配座である。単糖類の例としては、グルコース、フルクトース、ガラクトース、マンノース、ソルボース、リボース、デオキシリボース、ノイラミン酸が挙げられる。オリゴ糖は、分枝鎖または直鎖のいずれかのグリコシド結合を介して接続する１つより多い単量体糖単位からなる炭水化物である。オリゴ糖内の単量体糖単位は、同一であってもよく、または異なっていてもよい。単量体糖単位の数に応じて、オリゴ糖は、二糖、三糖、四糖、五糖等の糖である。多糖類とは対照的に、単糖類およびオリゴ糖類は、水溶性である。オリゴ糖類の例としては、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトースおよびラフィノースが挙げられる。本発明で使用するのに好ましい糖類は、スクロースおよびトレハロース（すなわち、α，α−Ｄ−トレハロース）であり、最も好ましくは、スクロースである。トレハロースは、トレハロース二水和物として利用可能である。糖類は、製剤中に、約１０〜約５００ｍＭの量、好ましくは約２００〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約２２０〜約２５０ｍＭの量、特定的には約２２０ｍＭまたは約２４０ｍＭの量、最も好ましくは約２２０ｍＭの量で存在し得る。
【００６４】
本明細書で使用される「アミノ酸」という用語は、カルボン酸基に対してα位に位置するアミノ部分を有する薬学的に許容される有機分子を示す。アミノ酸類の例として、限定されないが、アルギニン、グリシン、オルニチン、リシン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、イソロイシン、ロイシン、アラニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、メチオニン、セリン、プロリンが挙げられる。使用されるアミノ酸は、好ましくは、それぞれの場合に、Ｌ形態である。塩基性アミノ酸類、例えば、アルギニン、ヒスチジン、またはリシンは、好ましくは、その無機塩類の形態で（有利には、塩酸塩類、すなわち、アミノ酸塩酸塩類の形態で）使用される。本発明における使用に好ましいアミノ酸は、メチオニンである。メチオニンは、好ましくは、約５〜約２５ｍＭ、最も好ましくは約１０ｍＭの濃度で使用される。
【００６５】
安定剤中のサブグループは、凍結保護剤である。「凍結保護剤」という用語は、凍結乾燥プロセス、その後の貯蔵および再構成の間、不安定化条件に対して不安定な活性成分（例えば、タンパク質）を保護する、薬学的に許容される賦形剤を示す。凍結保護剤は、限定されないが、糖類、ポリオール類（例えば、糖アルコール類）およびアミノ酸類からなる群を含む。好ましい凍結保護剤は、スクロース、トレハロース、ラクトース、グルコース、マンノース、マルトース、ガラクトース、フルクトース、ソルボース、リファノース、ノイラミン酸等の糖類、グルコサミン、ガラクトサミン、Ｎ−メチルグルコサミン（「メグルミン」）等のアミノ糖類、マンニトールおよびソルビトール等のポリオール類、ならびにアルギニンおよびグリシン等のアミノ酸、またはこれらの混合物からなる群から選択することができる。凍結保護剤は、一般的には、約１０〜５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００〜約３００ｍＭの量で使用される。
【００６６】
安定剤中のさらなるサブグループは、酸化防止剤である。「酸化防止剤」という用語は、活性医薬成分の酸化を防ぐ、薬学的に許容される賦形剤を示す。酸化防止剤は、限定されないが、アスコルビン酸、グルタチオン、システイン、メチオニン、クエン酸、ＥＤＴＡを含む。酸化防止剤は、約０．０１〜約１００ｍＭの量、好ましくは約５〜約５０ｍＭの量、より好ましくは約５〜約２５ｍＭの量で使用され得る。
【００６７】
本発明の製剤は、１つ以上の等張化剤も含んでいてもよい。「等張化剤」という用語は、製剤の張度を調節するために使用される薬学的に許容される賦形剤を示す。製剤は、低張性、等張性または高張性であってもよい。等張性は、一般的に、通常はヒト血清の浸透圧（約２５０〜３５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）に対する溶液の浸透圧に関する。本発明の製剤は、低張性、等張性または高張性であってもよいが、好ましくは等張性である。高張性製剤は、液体であるか、または固体形態（例えば、凍結乾燥した形態）から再構築された液体であり、比較されるいくつかの他の溶液、例えば、生理学的塩溶液および血清と同じ張度を有する溶液を示す。好適な等張化剤は、限定されないが、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、およびアミノ酸類または糖類、例えば、グルコースの群からの任意の構成要素を含む。等張化剤は、一般的に、約５ｍＭ〜約５００ｍＭの量で使用される。安定剤および等張化剤の中に、両方の様式で機能し得る、すなわち、同時に安定剤および等張化剤であり得る化合物群が存在する。その例は、糖類、アミノ酸類、ポリオール類、シクロデキストリン類、ポリエチレングリコール類および塩類の群に見出すことができる。同時に安定剤および等張化剤であり得る糖の一例は、トレハロースである。
【００６８】
本明細書で使用される「ポリオール類」という用語は、１つより多いヒドロキシ基を有する薬学的に許容されるアルコール類を示す。好適なポリオール類は、限定されないが、マンニトール、ソルビトール、グリセリン、デキストラン、グリセロール、アラビトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、およびこれらの組み合わせを含む。ポリオール類は、約１０ｍＭ〜約５００ｍＭの量、特定的には約１０〜約２５０ｍＭの量、より特定的には約２００〜約２５０ｍＭの量で使用され得る。
【００６９】
製剤は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤等のアジュバントも含有し得る。滅菌化手順によって、および種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等を含むことの両方によって、微生物の存在の予防が確保され得る。防腐剤は、一般的に、約０．００１〜約２％（ｗ／ｖ）の量で使用される。防腐剤は、限定されないが、エタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クロロ−ｍ−クレゾール、メチルまたはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウムを含む。
【００７０】
医薬製剤は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤等のアジュバントも含有し得る。滅菌化手順によって、および種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等を含むことの両方によって、微生物の存在の予防が確保され得る。防腐剤は、一般的に、約０．００１〜約２％（ｗ／ｖ）の量で使用される。防腐剤は、限定されないが、エタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クロロ−ｍ−クレゾール、メチルまたはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウムを含む。
【００７１】
本発明の製剤は、当該技術分野で知られている種々の方法によって投与することができる。当業者に理解されるように、投与の経路および／または態様は、所望な結果に依存して変わり得る。特定の投与経路によって本発明の製剤を投与するために、製剤を希釈剤で希釈することが必要な場合がある。薬学的に許容される希釈剤としては、生理食塩水、グルコース、Ｒｉｎｇｅｒ溶液および緩衝液水溶液が挙げられる。
【００７２】
好ましくは、本発明の製剤は、静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、または任意の他の非経口投与手段、例えば、医薬分野で知られているものによって投与される。好ましい態様では、医薬製剤は、ＩＶ注入によって投与される。静脈注射によって投与される場合、ボーラス注射として、または連続注入として投与され得る。例えば、本発明の医薬製剤を滅菌生理食塩水溶液で希釈し、臨床現場で通常使用される注入ポンプを用いて投与されてもよい。
【００７３】
本明細書で使用される「非経口投与」および「非経口で投与される」という句は、経腸投与および局所投与以外の投与態様を意味し（通常は注射による）、限定されないが、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、関節包内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内、硬膜外および胸骨内の注射および注入が挙げられる。
【００７４】
本発明の医薬製剤は、一度に、または一連の治療にわたって、患者に好適に投与され、その後の診断からの任意の時間に患者に投与されてもよく、単一治療として、または本明細書で上に記載した状態を治療する際に有用な他の薬物または治療と組み合わせて投与されてもよい。
【００７５】
ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、液体医薬組成物中のたった１つの活性成分であってもよい。または、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、１つ以上の他の治療的に活性な成分と組み合わせて、例えば、同時に、連続して、または別個に投与されてもよい。本明細書で使用される「活性成分」という用語は、関連する用量で薬理学的効果、例えば、治療効果を有する成分を指す。したがって、液体医薬組成物中のＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、他の抗体成分、例えば、ＣＤ４０抗体、ＶＥＧＦ抗体またはＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用を遮断する薬剤を含む、他の活性成分を伴っていてもよい。特に、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用を遮断する薬剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗ＰＤ１抗体である。より特定的には、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用を遮断する薬剤は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ペムブロリズマブおよびニボルマブからなる群から選択される。特定の態様では、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用を遮断する薬剤は、アテゾリズマブである。特定の態様では、ＣＤ４０抗体は、セリクレルマブである。別の好ましい態様では、ＶＥＧＦ抗体は、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ）である。
【００７６】
医薬組成物は、好適には、治療有効量の抗体を含む。本明細書で使用される「治療有効量」という用語は、標的とする疾患または状態を治療し、軽減するか、もしくは予防し、または検出可能な治療効果、薬理学的効果または予防効果を示すのに必要な治療薬剤の量を指す。任意の抗体について、治療有効量は、細胞培養アッセイにおいて、または動物モデル、通常は、げっ歯類、ウサギ、イヌ、ブタまたは霊長類においてのいずれかで、最初に概算することができる。動物モデルを使用して、投与の適切な濃度範囲および経路を決定することもできる。次いで、このような情報を使用して、ヒトにおける投与のための有用な用量および経路を決定することができる。
【００７７】
ヒト対象のための正確な治療有効量は、疾患状態の重篤度、対象の全体的な健康、対象の年齢、体重および性別、食事、投与の時間および頻度、薬物の組み合わせ、反応感度および治療に対する忍容性／応答に依存して変わる。この量は、通常の実験によって決定することができ、臨床医の判断の範囲内である。特定の態様では、ＣＳＦ−１Ｒに対する抗体は、６００〜１２００ｍｇの（固定された）用量で、特定的には７５０〜１１００ｍｇの用量で、より特定的には７５０〜１０００ｍｇの用量で、さらにより特定的には９００〜１０００ｍｇの用量で投与される。好ましい態様では、用量は、１０００ｍｇである。
【００７８】
本発明の好ましい態様では、医薬製剤は、治療サイクルで使用するためのものである。特に、治療サイクルは、２〜４週間、好ましくは、１８〜２４日間の長さを有する。より好ましくは、治療サイクルは、（約）３週間の長さを有する。
【００７９】
医薬製剤は、簡便には、所定量のＣＳＦ−１Ｒに対する抗体を含有する単位剤形で提示され得る。特定の態様では、医薬製剤は、２〜８℃の貯蔵のために、バイアルで提供され得る。好ましい態様では、医薬製剤は、２０ｍｌのサイズのバイアルで提供され得る。別の好ましい態様では、医薬製剤は、５０ｍｌのサイズのバイアルで提供され得る。
【００８０】
インビボ投与のために使用される安定な製剤は、滅菌性である必要がある。これは、滅菌濾過膜による濾過により容易に達成される。製剤は、シリンジまたは注入システムによって製剤が送達可能である程度まで流体である必要がある。水に加えて、担体は、等張性緩衝生理食塩水溶液、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコール等）、およびこれらの好適な混合物であってもよい。その高い安定性の観点で、本発明の医薬製剤は、インラインフィルタを必要とせずに静脈内投与することができ、したがって、インラインフィルタを用いて投与する必要がある従来の製剤よりも取り扱いがかなり簡便である。Ｓｔｅｒｉｆｉｘ（登録商標）等のインラインフィルタは、静脈内溶液またはラインであってもよい任意の粒子、空気、または微生物の投与を防ぐために静脈内医薬の注入ラインに取り付ける必要がある。５〜２０ミクロンサイズ以上の粒子は、肺毛細管を通る血流を閉塞させる能力を有し、肺塞栓症等の合併症を引き起こす場合がある。外来粒子も、注射部位で静脈炎を引き起こす場合があり、フィルタは、静脈炎の発生を減らすのに役立つだろう。
【００８１】
本発明の安定な医薬製剤は、当該技術分野で知られている方法、例えば、限外濾過−透析濾過、透析、添加および混合、凍結乾燥、再構築、およびこれらの組み合わせによって調製することができる。本発明の製剤の調製の例は、本明細書で以下に見出すことができる。
【００８２】
したがって、本発明は、本発明の製剤を調製するためのプロセスを含む。上述のプロセスは、予想される緩衝剤組成物を含有する透析濾過緩衝液に対する抗体を緩衝液交換し、必要な場合、透析濾過による抗体の濃縮、その後、抗体溶液に原料溶液として賦形剤（例えば、スクロース、塩化ナトリウム、メチオニン）を添加し、その後、抗体／賦形剤溶液に原料溶液として界面活性剤を添加し、最後に、緩衝液溶液を用い、抗体の濃度を所望な最終濃度に調整し、それによって、最終的な賦形剤および界面活性剤の濃度にも達することを含む。
【００８３】
または、賦形剤を、抗体を含む出発溶液に固体として添加することもできる。抗体が固体の形態（例えば、凍結乾燥物）である場合、本発明の製剤は、まず、抗体を、任意選択で１つ以上の賦形剤を含む水または緩衝剤溶液に溶解し、次いで、原料溶液または固体としてさらなる賦形剤を添加することによって調製することができる。抗体は、有利には、全てのさらなる賦形剤を含む溶液に直接溶解することもできる。本発明の製剤に存在する１つ以上の賦形剤は、例えば、抗体を調製した後に行われる精製の最終ステップにおいて、製剤の賦形剤のうちの１つ、１つより多く、または好ましくは全てを含む溶液に抗体を直接的に溶解することによって、抗体を調製するためのプロセスの間または終了時に、既に添加されていてもよい。抗体および賦形剤を含む溶液が、まだ所望なｐＨを有していない場合には、酸または塩基を添加することによって、好ましくは、緩衝系に既に存在する酸または塩基を用いて調整される。その後に、滅菌濾過される。
【００８４】
本発明の安定な液体医薬製剤も、凍結乾燥した形態、または凍結乾燥した形態から再構築された液体形態であってもよい。「凍結乾燥した形態」は、当該技術分野で知られている凍結乾燥方法によって製造される。凍結乾燥物は、通常、残留水分含有量が約０．１〜５％（ｗ／ｗ）であり、粉末として、または物理的に安定なケーキとして存在する。「再構築された形態」は、再構築媒体の添加後に迅速に溶解することによって凍結乾燥物から得ることができる。好適な再構築媒体は、限定されないが、注射用水（ＷＦＩ）、注射用静菌性水（ＢＷＦＩ）、塩化ナトリウム溶液（例えば、０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ）、グルコース溶液（例えば、５％（ｗ／ｖ）グルコース）、界面活性剤含有溶液（例えば、０．０１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０）、ｐＨ緩衝溶液（例えば、リン酸緩衝溶液）を含む。
【００８５】
本発明は、さらに、疾患を治療する際に使用するための本発明の製剤、または疾患を治療するために、特に、がんを治療するために有用な医薬を調製するための本発明の製剤の使用、ならびに色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）または腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）の治療における本発明の製剤の使用を含む。
【００８６】
本明細書で使用される「がん」という用語は、例えば、肺がん、非小細胞肺（ＮＳＣＬ）がん、肺細気管支肺胞がん、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭部もしくは頸部のがん、皮膚もしくは眼内の黒色腫、子宮がん、卵巣がん、直腸がん、肛門領域のがん、胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、結腸がん、乳がん、子宮がん、卵管の癌腫、子宮内膜の癌腫、子宮頸部の癌腫、膣の癌腫、外陰の癌腫、ホジキン病、食道のがん、小腸のがん、内分泌系のがん、甲状腺のがん、副甲状腺のがん、副腎のがん、軟組織の肉腫、尿道のがん、陰茎のがん、前立腺がん、膀胱のがん、腎臓または尿管のがん、腎細胞癌腫、腎盂の癌腫、中皮腫、肝細胞がん、胆道がん、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、脊髄軸腫瘍、脳幹グリオーマ、多形膠芽細胞腫、星細胞種、神経鞘腫、上衣腫、髄芽腫、髄膜腫、扁平上皮がん、下垂体腺腫、リンパ腫、リンパ球性白血病（上述のがんのいずれかの難治性態様を含む）、または上述のがんの１つ以上の組み合わせであってもよい。好ましい態様では、がんは、乳がん、大腸がん、黒色腫、頭頸部がん、肺がんまたは前立腺がんである。別の好ましい態様では、このようながんは、乳がん、肺がん、結腸がん、卵巣がん、黒色腫がん、膀胱がん、腎がん、腎臓がん、肝臓がん、頭頸部がん、大腸がん、膵臓がん、胃癌腫がん、食道がん、中皮腫、前立腺がん、白血病、リンパ腫、骨髄腫である。好ましい一態様では、このようながんは、さらに、ＣＳＦ−１もしくはＣＳＦ−ＩＲの発現または過剰発現によって特徴付けられる。別の態様では、本発明の医薬製剤は、原発性腫瘍と新しい転移の同時治療に使用するためのものである。さらなる態様では、本発明の医薬製剤は、歯周炎、ヒスチオサイトーシスＸ、骨粗鬆症、骨のパジェット病（ＰＤＢ）、がん療法に起因する骨量減少、人工関節周囲の骨溶解、糖コルチコイド誘導性骨粗鬆症、関節リウマチ、乾癬性関節炎、骨関節炎、炎症性関節炎、および炎症の治療に使用するためのものである。別の好ましい態様では、医薬製剤は、黒色腫、泌尿器膀胱がん（ＵＣＢ）、または肺がん（例えば、非小細胞肺（ＮＳＣＬ）がん）において使用するためのものである。別の好ましい態様では、医薬製剤は、腎細胞癌腫（ＲＣＣ）または頭頸部扁平上皮がん（ＨＮＳＣＣ）において使用するためのものである。特に好ましい態様では、本発明の医薬製剤は、色素性絨毛結節性滑膜炎（ＰＶＮＳ）または腱滑膜巨細胞腫（ＴＧＣＴ）の治療に使用するためのものである。
【表１−１】
2022500386.tif 000002
【表１−２】
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【表１−３】
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【実施例】
【００８７】
本発明の静脈内（ｉ．ｖ．）投与のための液体薬物製品製剤は、以下のように開発された。
【００８８】
実施例１：初期製剤スクリーニングのための液体製剤の調製
表１に列挙されるｈｕＭＡｂ  ＣＳＦ−１Ｒ液体製剤Ｆ１〜Ｆ１６を、５０ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度で調製した。
【００８９】
抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体（エマクツズマブ）は、組換えタンパク質の産生から、ＷＯ２０１１／０７００２４に記載されるような一般的に知られている技術によって製造した。この実施例に従って医薬製剤を調製するために、抗体を、約５．５のｐＨで、２０ｍＭヒスチジン緩衝液（Ｌ−ヒスチジン／ＨＣｌ緩衝液）中、約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で提供した。この実施例で使用されるＣＳＦ−１Ｒ抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、ヒト化抗体である。
【００９０】
本発明の製剤の賦形剤は、実践で広く使用され、当業者に知られている。したがって、それをここで詳細に説明する必要はない。
【００９１】
液体製剤を調製するために、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体を、予想される緩衝液組成物を含む透析濾過緩衝液に対して緩衝液を交換し、限外濾過によって、抗体濃度が約８０ｍｇ／ｍＬになるまで濃縮した。限外濾過操作の終了後、賦形剤（例えば、スクロース、メチオニン）を原料溶液として抗体溶液に加えた。次いで、界面活性剤を１２５倍原料溶液として加えた。最終的に、タンパク質濃度を、緩衝液を用い、最終的な抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体濃度が約５０ｍｇ／ｍＬになるように調整した。
【００９２】
全ての製剤を０．２２μｍ低タンパク質結合フィルタを介して滅菌濾過し、ＥＴＦＥ（エチレンとテトラフルオロエチレンのコポリマー）でコーティングされたゴムストッパおよびアルクリンプキャップで閉じられた滅菌６ｍＬガラスバイアルに無菌状態で充填した。充填容積は、約２．４ｍＬであった。これらの製剤は、異なるＩＣＨ気候条件（５℃、２５℃および４０℃）で異なる時間間隔で貯蔵し、振とう（振とう頻度２００ｍｉｎ−１、５℃および２５℃で１週間）および凍結解凍ストレス法（−８０℃／＋５℃で５サイクル）によってストレスを加えた。
【表２】
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【００９３】
以下の分析方法によって、ストレス試験を適用する前および後に、試料を分析した。
●ＵＶ分光法
●サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）
●イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＣ）
●溶液の透明度および乳白度
●分析タンパク質Ａクロマトグラフィー
●目視検査
【００９４】
ＵＶ分光法は、タンパク質含有量を決定するために使用され、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  λ３５  ＵＶ分光光度計で、２４０ｎｍ〜４００ｎｍの波長範囲で行われた。未希釈のタンパク質試料を、対応する製剤緩衝液を用い、約０．５ｍｇ／ｍｌまで希釈した。タンパク質濃度を等式１に従って計算した。
【数１】
2022500386.tif 000006
【００９５】
２８０ｎｍでのＵＶ光吸光度を、３２０ｎｍで散乱する光について補正し、希釈因子と乗算し、希釈因子は、未希釈試料および希釈緩衝液の計量した質量および密度から決定された。分子を、キュベットの経路長ｄと吸光係数εの積で除算した。
【００９６】
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用して、製剤中の可溶性高分子量種（凝集物）および低分子量加水分解生成物（ＬＭＷ）を検出した。この方法は、Ｗａｔｅｒｓ  Ｗ２４８７  Ｄｕａｌ  Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒを備え、Ｗａｔｅｒｓ  ＢｉｏＳｕｉｔｅ  ２５０カラムが取り付けられたＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２６９５  ＨＰＬＣ機器で行われた。インタクトな単量体、凝集物および加水分解生成物を、移動相として０．２Ｍ  Ｋ２ＨＰＯ４／０．２５Ｍ  ＫＣＬ（ｐＨ７．０）を用い、均一濃度の溶出プロファイルによって分離し、２８０ｎｍの波長で検出した。
【００９７】
イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＣ）を行い、製剤中の抗体の正味の電荷を変える化学分解生成物を検出した。この方法は、Ｗａｔｅｒｓ  Ｗ２４８７  Ｄｕａｌ  Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒを備え、（検出波長２８０ｎｍ）、ＭａｂＰａｃ  ＳＣＸ−１０、４ｍｍ×１５０ｍｍカラムを取り付けたＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２６９５  ＨＰＬＣ機器を使用した。５ｍＭ  ＭＥＳ、１５ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ６．５および５ｍＭ  ＢＩＣＩＮＥ、３０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ８．５および５ｍＭ  ＢＩＣＩＮＥ、１Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ８．５をそれぞれ、０．５ｍＬ／分の流速で移動相Ａ、ＢおよびＣとして使用した。
【表３】
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【００９８】
透明度および乳白度は、比濁分析方法によって、Ｆｏｒｍａｚｉｎｅ  Ｔｕｒｂｉｄｉｔｙ  Ｕｎｉｔｓ（ＦＴＵ）として測定された。未希釈試料を、直径１１ｍｍの透明ガラスチューブに移し、ＨＡＣＨ  ２１００ＡＮ濁度計に入れた。
【００９９】
分析タンパク質Ａクロマトグラフィーを行い、抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体のＦｃ部分内の４つの保存されたメチオニン側鎖の酸化状態をモニタリングした。この方法は、Ｗａｔｅｒｓ  Ｗ２４８７  Ｄｕａｌ  Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ（検出波長２８０ｎｍ）を有し、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ＵＳＡ製のＰｏｒｏｓ  Ａ７２０  ４．６ｍｍ×５０ｍｍカラムを取り付けたＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２６９５  ＨＰＬＣ機器で行った。Ｇｉｂｃｏ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製のＰＢＳおよび０．１Ｍの酢酸、０．１５Ｍの塩化ナトリウム、ｐＨ２．８を、それぞれ移動相ＡおよびＢとして、２．０ｍＬ／分の流速で使用した。
【表４】
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【０１００】
Ｓｉｍｐｌｅｘ  Ａｍｐｏｕｌｅ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ＯＰＴＩＭＡ  Ｉを用いることによって、目に見える粒子の存在について試料を観察した。
【０１０１】
製剤Ｆ１〜Ｆ１６についての安定性試験の結果が、以下の表に示される。製剤Ｆ２は、最大の抗体安定性および粒子を含まない抗体製剤を得るのに最も望ましいものであると決定された。
【０１０２】
実施例１：液体抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体製剤の組成および安定性データ
Ｆ１は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、２２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポリソルベート２０の組成を有する液体製剤である。
【表５】
2022500386.tif 000009
【表６】
2022500386.tif 000010
【０１０３】
Ｆ２は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、２２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポリソルベート２０、１０ｍＭのメチオニンの組成を有する液体製剤である。
【表７】
2022500386.tif 000011
【表８】
2022500386.tif 000012
【表９】
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【０１０４】
Ｆ３は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、２２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポロキサマー１８８の組成を有する液体製剤である。
【表１０】
2022500386.tif 000014
【表１１】
2022500386.tif 000015
【０１０５】
Ｆ４は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、１３０ｍＭのＮａＣｌ、０．０４％のポリソルベート２０の組成を有する液体製剤である。
【表１２】
2022500386.tif 000016
【表１３】
2022500386.tif 000017
【０１０６】
Ｆ５は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、１３０ｍＭのＮａＣｌ、０．０４％のポリソルベート２０、１０ｍＭのメチオニンの組成を有する液体製剤である。
【表１４】
2022500386.tif 000018
【表１５】
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【０１０７】
Ｆ６は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、１３０ｍＭのＮａＣｌ、０．０４％のポロキサマー１８８の組成を有する液体製剤である。
【表１６】
2022500386.tif 000020
【表１７】
2022500386.tif 000021
【０１０８】
Ｆ７は、ｐＨ５．５で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、２２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポリソルベート２０の組成を有する液体製剤である。
【表１８】
2022500386.tif 000022
【表１９】
2022500386.tif 000023
【０１０９】
Ｆ８は、ｐＨ５．５で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、２２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポリソルベート２０、１０ｍＭのメチオニンの組成を有する液体製剤である。
【表２０】
2022500386.tif 000024
【表２１】
2022500386.tif 000025
【０１１０】
Ｆ９は、ｐＨ５．５で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、２２０ｍＭのスクロース、０．０４％のポロキサマー１８８の組成を有する液体製剤である。
【表２２】
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【表２３】
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【０１１１】
Ｆ１０は、ｐＨ５．５で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１３０ｍＭのＮａＣｌ、０．０４％のポリソルベート２０の組成を有する液体製剤である。  
【表２４】
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【表２５】
2022500386.tif 000029
【０１１２】
Ｆ１１は、ｐＨ５．５で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１３０ｍＭのＮａＣｌ、０．０４％のポリソルベート２０、１０ｍＭのメチオニンの組成を有する液体製剤である。
【表２６】
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【表２７】
2022500386.tif 000031
【０１１３】
Ｆ１２は、ｐＨ５．５で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジン酢酸塩、１３０ｍＭのＮａＣｌ、０．０４％のポロキサマー１８８の組成を有する液体製剤である。
【表２８】
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【表２９】
2022500386.tif 000033
【０１１４】
Ｆ１３は、ｐＨ６．０で、２５ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、２４０ｍＭのトレハロース、０．０２％のポリソルベート２０の組成を有する液体製剤である。  
【表３０】
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【表３１】
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【０１１５】
Ｆ１４は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、２４０ｍＭのトレハロース、０．０４％のポリソルベート２０の組成を有する液体製剤である。
【表３２】
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【表３３】
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【０１１６】
Ｆ１５は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、２４０ｍＭのトレハロース、０．０４％のポリソルベート２０、１０ｍＭのメチオニンの組成を有する液体製剤である。
【表３４】
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【表３５】
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【０１１７】
Ｆ１６は、ｐＨ６．０で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体、２０ｍＭのヒスチジンＨＣｌ、２４０ｍＭのトレハロース、０．０４％のポロキサマー１８８の組成を有する液体製剤である。  
【表３６】
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【表３７】
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【０１１８】
実施例２：バイアル中に製剤Ｆ２を含む液体抗ＣＳＦ−１Ｒ抗体薬物製品の組成および安定性データ
製剤Ｆ２に基づく２つの薬物製品を製造し、良好な安定性を示した。薬物製品１は、２０ｍｌガラスバイアル中に９．０ｍＬの製剤Ｆ２を含有し、薬物製品２は、５０ｍｌガラスバイアル中に４６．４ｍＬの製剤Ｆ２を含有する。
【表３８】
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【表３９】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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