(57)【要約】本開示は、ＴＲＥＭ−２の活性化を促進する抗ＴＲＥＭ−２抗体および抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を治療的に使用する方法を包含する。
2022500081.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）配列番号４を含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号７を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項２】
軽鎖可変領域が配列番号３またはアミノ酸配列ＩＶＳから選択される１以上の配列をさらに含み；かつ／または重鎖可変領域が配列番号５または配列番号６から選択される１以上の配列をさらに含む、請求項１記載の単離された抗体。
【請求項３】
軽鎖可変領域が配列番号３、アミノ酸配列ＩＶＳおよび配列番号４を含み；かつ／または重鎖可変領域が配列番号５、配列番号６および配列番号７を含む、請求項２記載の単離された抗体。
【請求項４】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１である、先行請求項のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項５】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２である、先行請求項のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項６】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２である、先行請求項のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７】
（ａ）配列番号１１を含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号１４を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項８】
軽鎖可変領域が配列番号１０またはアミノ酸配列ＫＶＳから選択される１以上の配列をさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１４または配列番号１５から選択される１以上の配列をさらに含む、請求項７記載の単離された抗体。
【請求項９】
軽鎖可変領域が配列番号１０、アミノ酸配列ＫＶＳおよび配列番号１１を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１２、配列番号１３および配列番号１４を含む、請求項８記載の単離された抗体。
【請求項１０】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号８である、請求項７〜９のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項１１】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号９である、請求項７〜１０のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項１２】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号８であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号９である、請求項７〜１１のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項１３】
（ａ）配列番号１８を含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号２１を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項１４】
軽鎖可変領域が配列番号１７またはアミノ酸配列ＫＶＳから選択される１以上の配列をさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１９または配列番号２０から選択される１以上の配列をさらに含む、請求項１３記載の単離された抗体。
【請求項１５】
軽鎖可変領域が配列番号１７、アミノ酸配列ＫＶＳおよび配列番号１８を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１９、配列番号２０および配列番号２１を含む、請求項１４記載の単離された抗体。
【請求項１６】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１５である、請求項１３〜１５のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項１７】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１６である、請求項１３〜１６のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項１８】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１５であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１６である、請求項１３〜１７のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項１９】
（ａ）配列番号２５を含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号２８を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項２０】
軽鎖可変領域が配列番号２４またはアミノ酸配列ＫＶＳから選択される１以上の配列をさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号２６または配列番号２７から選択される１以上の配列をさらに含む、請求項１９記載の単離された抗体。
【請求項２１】
軽鎖可変領域が配列番号２４、アミノ酸配列ＫＶＳおよび配列番号２５を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号２６、配列番号２７および配列番号２８を含む、請求項２０記載の単離された抗体。
【請求項２２】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２２である、請求項１９〜２１のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項２３】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２３である、請求項１９〜２２のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項２４】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２２であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２３である、請求項１９〜２３のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項２５】
（ａ）配列番号３２を含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号３５を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項２６】
軽鎖可変領域が配列番号３１またはアミノ酸配列ＫＶＳから選択される１以上の配列をさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号３３または配列番号３４から選択される１以上の配列をさらに含む、請求項２５記載の単離された抗体。
【請求項２７】
軽鎖可変領域が配列番号３１、アミノ酸配列ＫＶＳおよび配列番号３２を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５を含む、請求項２６記載の単離された抗体。
【請求項２８】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２９である、請求項２５〜２７のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項２９】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３０である、請求項２５〜２８のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項３０】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２９であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３０である、請求項２５〜２９のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項３１】
（ａ）配列番号３９を含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号４２を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項３２】
軽鎖可変領域が配列番号３８またはアミノ酸配列ＷＡＳから選択される１以上の配列をさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号４０または配列番号４１から選択される１以上の配列をさらに含む、請求項３１記載の単離された抗体。
【請求項３３】
軽鎖可変領域が配列番号３８、アミノ酸配列ＷＡＳおよび配列番号３９を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号４０、配列番号４１および配列番号４２を含む、請求項３２記載の単離された抗体。
【請求項３４】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３６である、請求項３１〜３３のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項３５】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３７である、請求項３１〜３４のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項３６】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３６であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３７である、請求項３１〜３５のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項３７】
各可変領域のフレームワーク領域が、ヒトフレームワーク領域配列と少なくとも７５％の配列同一性を有する、先行請求項のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項３８】
ヒト定常領域配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する１以上の定常領域または定常領域の一部をさらに含む、先行請求項のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項３９】
モノクローナル抗体または抗体フラグメントである、先行請求項のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項４０】
モノクローナル抗体である、先行請求項のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項４１】
（ａ）配列番号４のＬ３を含む軽鎖可変領域、および／または（ｂ）配列番号７のＨ３を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項４２】
軽鎖可変領域が配列番号３のＬ１、アミノ酸配列ＩＶＳを含むＬ２またはそれらの任意の組合せをさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号５のＨ１、配列番号６のＨ２またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項４１記載の単離された抗体。
【請求項４３】
軽鎖可変領域が配列番号３のＬ１、アミノ酸配列ＩＶＳを含むＬ２および配列番号４のＬ３を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号５のＨ１、配列番号６のＨ２および配列番号７のＨ３を含む、請求項４２記載の単離された抗体。
【請求項４４】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１である、請求項４１〜４３のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項４５】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２である、請求項４１〜４４のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項４６】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２である、請求項４１〜４５のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項４７】
（ａ）配列番号１１のＬ３を含む軽鎖可変領域、および／または（ｂ）配列番号１４のＨ３を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項４８】
軽鎖可変領域が配列番号１０のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２またはそれらの任意の組合せをさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１２のＨ１、配列番号１３のＨ２またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項４７記載の単離された抗体。
【請求項４９】
軽鎖可変領域が配列番号１０のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２および配列番号１１のＬ３を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１２のＨ１、配列番号１３のＨ２および配列番号１４のＨ３を含む、請求項４８記載の単離された抗体。
【請求項５０】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号８である、請求項４７〜４９のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項５１】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号９である、請求項４７〜５０のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項５２】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号８であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号９である、請求項４７〜５１のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項５３】
（ａ）配列番号１８のＬ３を含む軽鎖可変領域、および／または（ｂ）配列番号２１のＨ３を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項５４】
軽鎖可変領域が配列番号１７のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２またはそれらの任意の組合せをさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１９のＨ１、配列番号２０のＨ２またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項５３記載の単離された抗体。
【請求項５５】
軽鎖可変領域が配列番号１７のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２および配列番号１８のＬ３を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号１９のＨ１、配列番号２０のＨ２および配列番号２１のＨ３を含む、請求項５４記載の単離された抗体。
【請求項５６】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１５である、請求項５３〜５５のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項５７】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１６である、請求項５３〜５６のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項５８】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１５であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号１６である、請求項５３〜５７のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項５９】
（ａ）配列番号２５のＬ３を含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号２８のＨ３を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項６０】
軽鎖可変領域が配列番号２４のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２またはそれらの任意の組合せをさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号２６のＨ１、配列番号２７のＨ２またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項５９記載の単離された抗体。
【請求項６１】
軽鎖可変領域が配列番号２４のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２および配列番号２５のＬ３を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号２６のＨ１、配列番号２７のＨ２および配列番号２８のＨ３を含む、請求項６０記載の単離された抗体。
【請求項６２】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２２である、請求項５９〜６１のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項６３】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２３である、請求項５９〜６２のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項６４】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２２であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２３である、請求項５９〜６３のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項６５】
（ａ）配列番号３２のＬ３を含む軽鎖可変領域、および／または（ｂ）配列番号３５のＨ３を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項６６】
軽鎖可変領域が配列番号３１のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２またはそれらの任意の組合せをさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号３３のＨ１、配列番号３４のＨ２またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項６５記載の単離された抗体。
【請求項６７】
軽鎖可変領域が配列番号３１のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２および配列番号３２のＬ３を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号３３のＨ１、配列番号３４のＨ２および配列番号３５のＨ３を含む、請求項６６記載の単離された抗体。
【請求項６８】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２９である、請求項６５〜６７のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項６９】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３０である、請求項６５〜６８のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７０】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号２９であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３０である、請求項６５〜６９のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７１】
（ａ）配列番号３９のＬ３を含む軽鎖可変領域、および／または（ｂ）配列番号４２のＨ３を含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体。
【請求項７２】
軽鎖可変領域が配列番号３８のＬ１、アミノ酸配列ＷＡＳを含むＬ２またはそれらの任意の組合せをさらに含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号４０のＨ１、配列番号４１のＨ２またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項７１記載の単離された抗体。
【請求項７３】
軽鎖可変領域が配列番号３８のＬ１、アミノ酸配列ＷＡＳを含むＬ２および配列番号３９のＬ３を含み；かつ／または、重鎖可変領域が配列番号４０のＨ１、配列番号４０のＨ２および配列番号４２のＨ３を含む、請求項７２記載の単離された抗体。
【請求項７４】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３６である、請求項７１〜７３のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７５】
重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３７である、請求項７１〜７４のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７６】
軽鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３６であり、重鎖可変領域のアミノ酸配列が配列番号３７である、請求項７１〜７５のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７７】
各可変領域のフレームワーク領域が、ヒトフレームワーク領域配列と少なくとも７５％の配列同一性を有する、請求項４１〜７６のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７８】
ヒト定常領域配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する１以上の定常領域または定常領域の一部をさらに含む、請求項４１〜７７のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項７９】
モノクローナル抗体または抗体フラグメントである、請求項４１〜７７のいずれかに記載の単離された抗体。
【請求項８０】
治療有効量の少なくとも１つの抗ＴＲＥＭ−２抗体を投与することを含み、該抗体が先行請求項のいずれかに記載の抗体である、必要とする対象の脳におけるアミロイドプラーク負荷および／またはＣＡＡ負荷を減少させる方法。
【請求項８１】
抗体が末梢投与される、請求項８０記載の方法。
【請求項８２】
抗体が（任意で、中枢神経系内に直接）局所投与される、請求項８１記載の方法。
【請求項８３】
海馬におけるアミロイドプラーク負荷が減少する、請求項８０〜８２のいずれかに記載の方法。
【請求項８４】
皮質におけるアミロイドプラーク負荷が減少する、請求項８０〜８２のいずれかに記載の方法。
【請求項８５】
大脳皮質の表面上の穿通細動脈および／または大脳皮質の表面上の軟膜細動脈におけるＣＡＡ負荷が減少する、請求項８２記載の方法。
【請求項８６】
抗体が、請求項１〜４０のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項８０〜８５のいずれかに記載の方法。
【請求項８７】
抗体が、（ａ）請求項１〜６；（ｂ）請求項７〜１２；（ｃ）請求項１３〜１８；（ｄ）請求項１９〜２４；（ｅ）請求項２５〜３０；または（ｆ）請求項３１〜３６のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項８６記載の方法。
【請求項８８】
（ａ）抗体の各可変領域のフレームワーク領域が、ヒトフレームワーク領域配列と少なくとも７５％の配列同一性を有するか；（ｂ）抗体が、ヒト定常領域配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する１以上の定常領域または定常領域の一部をさらに含むか；（ｃ）抗体がモノクローナル抗体または抗体フラグメントであるか；または（ｄ）（ａ）〜（ｃ）の任意の組合せである、請求項８７記載の方法。
【請求項８９】
抗体が、請求項４１〜７９のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項８０〜８５のいずれかに記載の方法。
【請求項９０】
抗体が、（ａ）請求項４１〜４６；（ｂ）請求項４７〜５２；（ｃ）請求項５３〜５８；（ｄ）請求項５９〜６４；（ｅ）請求項６５〜７０；または（ｆ）請求項７１〜７６のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項８６記載の方法。
【請求項９１】
（ａ）抗体の各可変領域のフレームワーク領域が、ヒトフレームワーク領域配列と少なくとも７５％の配列同一性を有するか；（ｂ）抗体が、ヒト定常領域配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する１以上の定常領域または定常領域の一部をさらに含むか；（ｃ）抗体がモノクローナル抗体または抗体フラグメントであるか；または（ｄ）（ａ）〜（ｃ）の任意の組合せである、請求項９０記載の方法。
【請求項９２】
治療有効量の少なくとも１つの抗ＴＲＥＭ−２抗体を投与することを含み、該抗体が請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体である、必要とする対象における少なくとも１つのＡβプラークに関連する症状または少なくとも１つのＣＡＡに関連する症状を処置する方法。
【請求項９３】
処置が、対象におけるＡβプラークの少なくとも１つの症状もしくは徴候または少なくとも１つのＣＡＡに関連する症状を予防し、軽減し、元に戻し、または改善することを含む、請求項９２記載の方法。
【請求項９４】
Ａβプラークに関連する症状またはＣＡＡに関連する症状が、神経変性、認知機能障害、行動の変化、言語機能異常、情動制御不全、発作、神経系構造の障害、神経系機能の障害、アルツハイマー病の発症のリスクの増加、または脳アミロイド血管症の発症のリスクの増加から選択される、請求項９２または９３に記載の方法。
【請求項９５】
抗体が全身投与される、請求項９２〜９４のいずれかに記載の方法。
【請求項９６】
抗体が（任意で、中枢神経系内に直接）局所投与される、請求項９２〜９５のいずれかに記載の方法。
【請求項９７】
抗体が、請求項１〜４０のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項９２〜９６のいずれかに記載の方法。
【請求項９８】
抗体が、（ａ）請求項１〜６；（ｂ）請求項７〜１２；（ｃ）請求項１３〜１８；（ｄ）請求項１９〜２４；（ｅ）請求項２５〜３０；または（ｆ）請求項３１〜３６のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項９７記載の方法。
【請求項９９】
（ａ）抗体の各可変領域のフレームワーク領域が、ヒトフレームワーク領域配列と少なくとも７５％の配列同一性を有するか；（ｂ）抗体が、ヒト定常領域配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する１以上の定常領域または定常領域の一部をさらに含むか；（ｃ）抗体がモノクローナル抗体または抗体フラグメントであるか；または（ｄ）（ａ）〜（ｃ）の任意の組合せである、請求項９８記載の方法。
【請求項１００】
抗体が、請求項４１〜７９のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項９２〜９６のいずれかに記載の方法。
【請求項１０１】
抗体が、（ａ）請求項４１〜４６；（ｂ）請求項４７〜５２；（ｃ）請求項５３〜５８；（ｄ）請求項５９〜６４；（ｅ）請求項６５〜７０；または（ｆ）請求項７１〜７６のいずれかに記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体である、請求項１００記載の方法。
【請求項１０２】
（ａ）抗体の各可変領域のフレームワーク領域が、ヒトフレームワーク領域配列と少なくとも７５％の配列同一性を有するか；（ｂ）抗体が、ヒト定常領域配列と少なくとも９０％の配列同一性を有する１以上の定常領域または定常領域の一部をさらに含むか；（ｃ）抗体がモノクローナル抗体または抗体フラグメントであるか；または（ｄ）（ａ）〜（ｃ）の任意の組合せである、請求項１０１記載の方法。
【請求項１０３】
請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体および薬学的に許容され得る担体または賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項１０４】
分散剤、緩衝剤、界面活性剤、保存剤、可溶化剤、等張化剤、または安定化剤をさらに含む、請求項１０３記載の医薬組成物。
【請求項１０５】
前記担体が、生理食塩水、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、ヒト血清アルブミン、緩衝物質、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩類もしくは電解質、プロタミン硫酸塩、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール、羊毛脂、またはそれらの組合せを含む、請求項１０３または１０４に記載の医薬組成物。
【請求項１０６】
薬剤としての使用のための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０７】
ＣＮＳにおけるアミロイドプラーク負荷および／またはＣＡＡ負荷を減少させるのに使用するための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０８】
少なくとも１つのＡβプラークに関連する症状または少なくとも１つのＣＡＡに関連する症状の処置における使用のための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【請求項１０９】
アルツハイマー病の処置における使用のための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【請求項１１０】
ＴＲＥＭ−２の活性化を必要とする対象の処置における使用のための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【請求項１１１】
ＣＮＳにおけるアミロイドプラーク負荷および／またはＣＡＡ負荷を減少させるための薬剤の製造における使用のための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【請求項１１２】
少なくとも１つのＡβプラークに関連する症状または少なくとも１つのＣＡＡに関連する症状の処置のための薬剤の製造における使用のための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【請求項１１３】
アルツハイマー病の処置のための薬剤の製造における使用のための、請求項１〜７９のいずれかに記載の抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１８年９月１１日に出願された米国仮出願第６２／７２９，４５８号の優先権を主張し、この開示は参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表の参照
本願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩ形式で提出された配列表を含み、これは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。２０１９年９月１０日に作成されたＡＳＣＩＩコピーはSequence_Listing_ST25.txtという名称であり、サイズは２０ＫＢバイトである。
【背景技術】
【０００３】
ＴＲＥＭ−２は骨髄系細胞上に発現するトリガー受容体２（triggering receptor expressed on myeloid cells 2）としても知られており、ヒトではＴＲＥＭ２によってコードされているタンパク質である。ＴＲＥＭ−２は、ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞および破骨細胞上に発現する自然免疫系の受容体である。ＴＲＥＭ−２は免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーである。ＴＲＥＭ−２がトリガーされると、ＴＲＥＭ−２は膜貫通型アダプタータンパク質ＴＹＲＯＢＰ／ＤＡＰ１２を介してシグナルを伝達し、病原体および細胞片の貪食を活性化するとともに、細胞の代謝機能、生存および増殖を支持する。また、ＴＲＥＭ−２の抗炎症性が報告されており、ＴＲＥＭ−２はマクロファージおよびミクログリアにおいて炎症性サイトカインの発現および分泌を抑制する。選択的スプライシングによりＴＲＥＭ−２の異なるアイソフォームをコードする転写バリアントが生じ、ＴＲＥＭ２のミスセンス変異によりシグナル伝達の増加もしくは減少および／または推定リガンドに対する親和性の増加もしくは減少を伴うＴＲＥＭ−２の機能性バリアントならびに機能喪失バリアントが生じる。
【０００４】
マウスモデルにおけるＴＲＥＭ−２依存的な表現型は、ＴＲＥＭ−２が自然免疫系の応答の制御に重要な役割を果たしていることを示している。さらに、可溶性ＴＲＥＭ−２フラグメントのＣＳＦレベルの上昇は、多くの疾患において神経損傷のマーカーと同時に生じる炎症経路の変化を示唆している。
【０００５】
したがって、ＴＲＥＭ−２に特異的に結合し、様々な細胞型（ミクログリア、マクロファージ、樹状細胞および破骨細胞など）においてＴＲＥＭ−２の活性を調節する抗体が必要とされている。
【発明の概要】
【０００６】
本開示は、（ａ）配列番号１由来のＬ１、配列番号１由来のＬ２、配列番号１由来のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号２由来のＨ１、配列番号２由来のＨ２、配列番号２由来のＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【０００７】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号３のＬ１、アミノ酸配列ＩＶＳを含むＬ２、配列番号４のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号５を含むＨ１、配列番号６を含むＨ２、配列番号７を含むＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【０００８】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号８由来のＬ１、配列番号８由来のＬ２、配列番号８由来のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号９由来のＨ１、配列番号９由来のＨ２、配列番号９由来のＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【０００９】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号１０のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号１１のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号１２を含むＨ１、配列番号１３を含むＨ２、配列番号１４を含むＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１０】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号１５由来のＬ１、配列番号１５由来のＬ２、配列番号１５由来のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号１６由来のＨ１、配列番号１６由来のＨ２、配列番号１６由来のＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１１】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号１７のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号１８のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号１９を含むＨ１、配列番号２２を含むＨ２、配列番号２１を含むＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１２】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号２２由来のＬ１、配列番号２２由来のＬ２、配列番号２２由来のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号２３由来のＨ１、配列番号２３由来のＨ２、配列番号２３由来のＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１３】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号２４のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号２５のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号２６を含むＨ１、配列番号２７を含むＨ２、配列番号２８を含むＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１４】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号２９由来のＬ１、配列番号２９由来のＬ２、配列番号２９由来のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号３０由来のＨ１、配列番号３０由来のＨ２、配列番号３０由来のＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１５】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号３１のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号３２のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号３３を含むＨ１、配列番号３４を含むＨ２、配列番号３５を含むＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１６】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号３６由来のＬ１、配列番号３６由来のＬ２、配列番号３６由来のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号３７由来のＨ１、配列番号３７由来のＨ２、配列番号３７由来のＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１７】
別の態様において、本開示は、（ａ）配列番号３８のＬ１、アミノ酸配列ＷＡＳを含むＬ２、配列番号３９のＬ３またはそれらの任意の組合せを含む軽鎖可変領域；および／または（ｂ）配列番号４０を含むＨ１、配列番号４１を含むＨ２、配列番号４２を含むＨ３またはそれらの任意の組合せを含む重鎖可変領域を含む、単離された抗ＴＲＥＭ−２抗体を包含する。該抗体を含む組成物（限定されないが、医薬組成物を含む）が本明細書において想定される。ある実施態様において、該抗体はヒト化抗体である。
【００１８】
本発明の他の態様および反復が以下に詳述される。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
本願は、カラーの写真を少なくとも１枚含んでいる。カラーの写真を含む本特許出願の出願公開のコピーは、請求および必要な手数料の納付により庁から提供される。
【００２０】
【図１】図１は、抗ＴＲＥＭ−２抗体ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０およびＨＪ２３．１３による処理に反応したＴＲＥＭ−２の活性化を示す用量反応曲線のグラフである。ＴＲＥＭ−２の活性化を、陰性対照に対する％ＧＦＰ（ｙ軸）として報告する。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
出願人は、ＴＲＥＭ−２の活性化を促進する抗ＴＲＥＭ−２抗体（「抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体」と呼ばれる）および抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を治療的に使用する方法を発見した。例えば、本明細書に開示される抗ＴＲＥＭ−２抗体は、神経変性疾患（アルツハイマー病（ＡＤ）、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、プリオン病、およびパーキンソン病（ＰＤ）など）を有する対象において神経変性を減少させ得る。特に、本明細書に開示される抗ＴＲＥＭ−２抗体はＡβアミロイドーシスを有する対象において神経変性を減少させ得、それによりアミロイド関連神経毒性を制限し得る。本発明は、抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体がＡβアミロイドーシスを有する対象（限定されないが、脳のＡβプラークを特徴とする疾患と診断された対象、脳の血管性Ａβプラークを特徴とする疾患と診断された対象、Ａβプラークに関連する症状を有すると診断された対象、ＣＡＡに関連する症状を有すると診断された対象、Ａβプラークに関連する症状および／またはＣＡＡに関連する症状を有し得るか、または有しない可能性があるＡβアミロイドーシスの臨床徴候を有する対象、アルツハイマー病と診断された対象、およびＣＡＡと診断された対象を含む）の処置を提供するという発見を包含する。無症候性患者においてＡβアミロイドーシスの臨床徴候を同定する方法は当分野で公知であり、以下で議論されている。他の用途もまた、以下に詳述されている。
【００２２】
Ｉ．定義
特に明示しない限り、「ＴＲＥＭ−２」は「ヒトＴＲＥＭ−２」を指し、そのすべてのアイソフォーム、バリアントおよび機能性フラグメントを包含する。「組換えＴＲＥＭ−２」は、核酸の発現およびそのタンパク質への翻訳を支持する系（例えば、原核細胞、真核細胞または無細胞発現系）に導入された核酸によってコードされているＴＲＥＭ−２を指す。組換えタンパク質を産生する方法は当分野で周知であり、本明細書で開示される組換えＴＲＥＭ−２の産生は特定の系に限定されない。
【００２３】
用語「対象」は、ヒトまたはヒトＴＲＥＭ−２を発現する非ヒト動物を指す。
【００２４】
本明細書における用語「処置する」、「処置している」または「処置」は、治療的な処置および予防的な手段の両方を指し、その目的は望ましくない生理学的変化または疾患／障害を予防または遅延させる（軽減する）ことである。有益または望ましい臨床結果には、限定されないが、検出可能または不可能な、症状の緩和、疾患の程度の減少、疾患の状態の安定化（すなわち、悪化しないこと）、疾患の進行の遅延または減速、疾患の状態の改善または緩和、および（部分的または全体的な）寛解が含まれる。「処置」はまた、処置を受けていない場合に予想される生存期間と比較した生存期間の延長を意味し得る。処置を必要とする人には、既に疾患、病気もしくは障害を有する人、および疾患、病気もしくは障害を有しやすい人、または疾患、病気もしくは障害を予防すべき人が含まれる。
【００２５】
用語「Ａβ」は、アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）と呼ばれる大きなタンパク質のカルボキシ末端の領域に由来するペプチドを指す。ＡＰＰをコードする遺伝子は２１番染色体上に存在する。Ａβには、毒作用を有し得る多くの形態が存在する：Ａβペプチドは通常３７〜４３アミノ酸配列長であるが、切断および修飾によって全体のサイズが変化し得る。Ａβペプチドは、可溶性および不溶性のコンパートメント、単量体、オリゴマーおよび凝集体の形態、および細胞内または細胞外において見出され得、他のタンパク質または分子と複合体を形成してい得る。Ａβの有害作用または毒作用は、上述した形態のいずれかまたはすべてに起因し得、具体的に記載されていない他の形態に起因し得る。例えば、そのような２つのＡβアイソフォームにはＡβ４０およびＡβ４２が含まれ；Ａβ４２アイソフォームは特に原線維形成性(fibrillogenic)または不溶性であり、病態に関連している。
【００２６】
「Ａβアミロイドーシス」は、脳または脳血管におけるＡβ沈着（典型的にはアミロイドプラークまたはＣＡＡの形態である）の根拠として臨床的に定義されている。Ａβアミロイドーシスに関連する疾患には、限定されないが、発症前アルツハイマー病、アルツハイマー病（ＡＤ）、脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）、レビー小体型認知症、および封入体筋炎が含まれる。「Ａβアミロイドーシスに関連する疾患を発症するリスクの増加」とは、対象の年齢、家族歴、遺伝子状態および他の公知の危険因子を考慮して予想されるリスクよりも上昇しているリスクを指す。
【００２７】
「Ａβアミロイドーシスの臨床徴候」は、当分野で公知のＡβ沈着の尺度を指す。Ａβアミロイドーシスの臨床徴候には、限定されないが、アミロイドイメージング（例えば、ＰｉＢ ＰＥＴ、ｆｌｕｏｒｂｅｔａｐｉｒまたは当分野で公知の他のイメージング法）によって同定されるＡβ沈着、または脳脊髄液（ＣＳＦ）Ａβ４２もしくはＡβ４２／４０比の減少によって同定されるＡβ沈着が含まれ得る。例えば、Klunk WE et al. Ann Neurol 55(3) 2004およびFagan AM et al. Ann Neurol 59(3) 2006を参照、これらはそれぞれ、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。Ａβアミロイドーシスの臨床徴候はまた、米国特許第１４／３６６，８３１号、第１４／５２３，１４８号および第１４／７４７，４５３号（これらはそれぞれ、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されているように、Ａβの代謝の測定値（特に、Ａβ４２代謝の単独の測定値または他のＡβバリアント（例えば、Ａβ３７、Ａβ３８、Ａβ３９、Ａβ４０および／または全Ａβ）の代謝の測定値と比較したＡβ４２代謝の測定値）を含み得る。さらなる方法が、Albert et al. Alzheimer’s & Dementia 2007 Vol. 7, pp. 170-179; McKhann et al., Alzheimer’s & Dementia 2007 Vol. 7, pp. 263-269;およびSperling et al. Alzheimer’s & Dementia 2007 Vol. 7, pp. 280-292に記載されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。重要なことに、Ａβアミロイドーシスの臨床徴候を有する対象はＡβ沈着に関連する症状を有していてもよく、有していなくてもよい。しかし、Ａβアミロイドーシスの臨床徴候を有する対象は、Ａβアミロイドーシスに関連する疾患を発症するリスクが増加している。
【００２８】
「Ａβプラークに関連する症状」および「ＣＡＡに関連する症状」は、アミロイド線維と呼ばれる規則的に整列した線維性凝集体から構成されるアミロイドプラークまたはＣＡＡの形成にそれぞれ起因するか、または関連する任意の症状を指す。例示的なＡβプラークに関連する症状には、限定されないが、神経変性、認知機能障害、記憶障害、行動の変化、情動制御不全、発作、神経系の構造または機能の障害、およびアルツハイマー病またはＣＡＡの発症または悪化のリスクの増加が含まれ得る。神経変性には、神経細胞の構造の変化（毒性タンパク質の細胞内蓄積、タンパク質凝集などの分子的変化、および軸索または樹状突起の形状または長さの変化、ミエリン鞘の組成の変化、ミエリン鞘の減少などのマクロレベルの変化を含む）、神経細胞の機能の変化、神経細胞の機能の喪失、神経細胞の死、またはそれらの任意の組合せが含まれ得る。認知機能障害には、限定されないが、記憶力、注意力、集中力、言語、抽象的思考、創造性、実行機能、計画性および組織性の欠如が含まれ得る。行動の変化には、限定されないが、身体的または言語的攻撃性、衝動性、抑制力の低下、無気力、自発性の低下、性格の変化、アルコール、タバコまたは薬物の乱用、および他の依存症に関連した行動が含まれ得る。情動制御不全には、限定されないが、うつ病、不安、躁病、易刺激性および感情失禁が含まれ得る。発作には、限定されないが、全般性強直性間代性発作、複雑部分発作および非てんかん性心因性発作が含まれ得る。神経系の構造または機能の障害には、限定されないが、水頭症、パーキンソン病、睡眠障害、精神病、平衡障害および協調障害が含まれ得る。これには、不全単麻痺、不全片麻痺、四肢不全麻痺、運動失調、バリズムおよび振戦などの運動障害が含まれ得る。これにはまた、嗅覚、触覚、味覚、視覚および聴覚を含む感覚の喪失または機能障害が含まれ得る。さらに、これには、腸および膀胱の機能障害、性機能障害、血圧および体温の調節障害などの自律神経系の障害が含まれ得る。最後に、これには、視床下部および下垂体の機能障害に起因し得るホルモンの障害（成長ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、卵胞刺激ホルモン、ゴナドトロピン放出ホルモン、プロラクチンならびに他の多数のホルモンおよび調節因子の欠乏および調節障害など）が含まれ得る。
【００２９】
本明細書における用語「抗体」は最も広い意味で使用され、様々な抗体および抗体様構造（限定されないが、完全長のモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体および多特異性抗体（例えば、二重特異性抗体、三重特異性抗体など）、ならびに所望の抗原結合活性を示す重鎖抗体および抗体フラグメントを含む）を包含する。抗原の結合に関与する抗体のドメインは「可変領域」または「可変ドメイン」と呼ばれ、以下でさらに詳細に記述される。単一の可変ドメインは、抗原結合特異性を与えるのに十分であり得る。必ずしもそうではないが、好ましくは本発見において有用な抗体は組換えにより産生される。抗体はグリコシル化されていてもされていなくてもよいが、グリコシル化された抗体が好ましい場合がある。「単離された」抗体は、その自然環境の構成要素から分離されている抗体である。いくつかの実施態様において、抗体は、当分野で公知の方法により決定される９５％または９９％よりも高い純度に精製される。
【００３０】
本明細書に記載されている抗体に加えて、本発明の抗体と実質的に同一の機能を有する抗体模倣物またはアプタマーを当分野で公知の方法を用いて設計することが可能であり得る。「抗体模倣物」は抗原に特異的に結合できるが、抗体とは構造的に関連しないポリペプチドまたはタンパク質を指す。抗体模倣物は、約３ｋＤａ〜約２０ｋＤａの質量を有する。抗体模倣物の限定されない例は、ａｆｆｉｂｏｄｙ分子、アフィリン、アフィマー、アルファボディ、アンチカリン、アビマー、ＤＡＲＰｉｎおよびモノボディである。アプタマーはＲＮＡまたは一本鎖ＤＮＡオリゴヌクレオチドから構成され、標的に対して高い特異性および親和性を有する低分子核酸リガンドの分類である。アプタマーは構造的認識によって標的と相互作用および結合し、これは抗原抗体反応に類似したプロセスである。アプタマーの分子量は抗体よりも低く、通常約８〜２５ｋＤａである。
【００３１】
用語「完全長抗体」および「インタクト抗体」は互換的に使用され得、天然の抗体構造に実質的に類似した構造を有するか、または本明細書で定義されるＦｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指す。天然抗体の基本構造単位は四量体を含む。各四量体は２つの同一のポリペプチド鎖の対から構成され、各対は１つの「軽」鎖（約２５ｋＤａ）および１つの「重」鎖（約５０〜７０ｋＤａ）を有する。軽鎖はガンマ、ミュー、アルファおよびラムダに分類される。重鎖はガンマ、ミュー、アルファ、デルタまたはイプシロンに分類され、抗体のアイソタイプをそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥと規定する。各軽鎖および重鎖のアミノ末端部分は、抗原認識に主に関与する約１００〜１１０またはそれ以上のアミノ酸配列の可変領域（それぞれＶＬおよびＶＨ）を含む。各鎖のカルボキシ末端部分は、エフェクター機能に主に関与する定常領域を規定する。軽鎖および重鎖において、可変領域および定常領域は約１２以上のアミノ酸配列の「Ｊ」領域によって連結されており、重鎖は約１０以上のアミノ酸配列の「Ｄ」領域を含む。インタクト抗体は、当分野で公知であるようにジスルフィド結合を介して適切に架橋されている。
【００３２】
抗体の重鎖および軽鎖の可変ドメインは一般に類似した構造を有しており、各ドメインは４つの保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）および３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む（例えば、Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007)参照）。単一のＶＨまたはＶＬドメインは抗原結合特異性を与えるのに十分であり得る。さらに、特定の抗原に結合する抗体は、抗原に結合する抗体由来のＶＨまたはＶＬドメインを用いてそれぞれ相補的なＶＬまたはＶＨドメインのライブラリーをスクリーニングすることにより単離され得る。例えば、Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993); Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)参照。
【００３３】
「フレームワーク領域」または「ＦＲ」は、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは、一般に４つのＦＲドメイン（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ４）からなる。したがって、ＨＶＲおよびＦＲの配列は、一般に以下の配列で生じる：ＦＲ１−ＨＶＲ１−ＦＲ２−ＨＶＲ２−ＦＲ３−ＨＶＲ３−ＦＲ４。重鎖および軽鎖のＦＲドメインは、当分野で公知であるように、異なっていてもよい。
【００３４】
本明細書における用語「超可変領域」または「ＨＶＲ」は、配列が超可変性であり（一般に「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」とも呼ばれる）、かつ／または構造的に規定されたループ（「超可変ループ」）を形成し、かつ／または抗原接触残基（「抗原接触」）を含む可変ドメインの各領域を指す。一般に、抗体は６つのＨＶＲ（ＶＨに３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）およびＶＬに３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３））を含む。本明細書において、「可変領域に由来するＨＶＲ」は、元の可変領域の対応するＨＶＲと比較して２つ以下のアミノ酸置換を有するＨＶＲを指す。本明細書における例示的なＨＶＲには以下が含まれる：本開示の様々な抗体について以下に規定される、（ａ）アミノ酸残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、９１〜９６（Ｌ３）、２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）および９６〜１０１（Ｈ３）において生じる超可変性ループ（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)）；（ｂ）アミノ酸残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、８９〜９７（Ｌ３）、３１〜３５ｂ（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）および９５〜１０２（Ｈ３）において生じるＣＤＲ（Kabat et al.,Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)）；（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ〜３６（Ｌ１）、４６〜５５（Ｌ２）、８９〜９６（Ｌ３）、３０〜３５ｂ（Ｈ１）、４７〜５８（Ｈ２）および９３〜１０１（Ｈ３）において生じる抗原接触（MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262: 732-745 (1996)）；（ｄ）ＣＤＲ１−ＩＭＧＴ（２７〜３８位）、ＣＤＲ２−ＩＭＧＴ（５６〜６５位）およびＣＤＲ３−ＩＭＧＴ領域（１０５〜１１６位または１０５〜１１７位）、これらはＩＭＧＴに特有の番号付けに基づく（Lefranc, "The IMGT unique numbering for Immunoglobulins, T cell receptors and Ig-like domains," The Immunologist, 1999, 7: 132-136; Lefranc et al., Nucleic Acids Research, 2009, 37(Database issue): D1006-D1012; Ehrenmann et al., "Chapter 2: Standardized Sequence and Structure Analysis of Antibody Using IMGT," in Antibody Engineering Volume 2, Eds. Roland E. Kontermann and Stefan Dubel, 2010, Springer-Verlag Berlin Heidelberg, doi: 10.1007/978-3-642-01147-4; www.imgt.org/IMGTScientificChart/Nomenclature/IMGT-FRCDRdefinition.html）、および（ｅ）（ａ）、（ｂ）、（ｃ）および／または（ｄ）の組合せ。特に示さない限り、配列識別番号が割り当てられている可変ドメインのＨＶＲ残基および他の残基（例えばＦＲ残基）は、上述のＩＭＧＴに特有の番号付けに基づいて番号付けされている。
【００３５】
本明細書における用語「Ｆｃ領域」は、定常領域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を規定するために使用される。本用語は、天然配列のＦｃ領域およびバリアントＦｃ領域を含む。ある実施態様において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６またはＰｒｏ２３０から重鎖のカルボキシ末端まで広がっている。しかし、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は存在してもしなくてもよい。本明細書で特に明記しない限り、Ｆｃ領域または定常領域のアミノ酸残基の番号付けは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991に記載されているＥＵナンバリングシステム（ＥＵインデックスとも呼ばれる）に従っている。
【００３６】
「バリアントＦｃ領域」は、天然のＦｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して１以上のアミノ酸置換および／または改変されたグリコシル化パターンにより天然のＦｃ領域とは異なり得るアミノ酸配列を含む。例として、バリアントＦｃ領域は、天然配列のＦｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域において約１〜約１０個のアミノ酸置換または約１〜約５個のアミノ酸置換を有し得る。本明細書におけるバリアントＦｃ領域は、天然配列のＦｃ領域および／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、少なくとも約９０％の相同性または少なくとも約９５％の相同性を有し得る。
【００３７】
「抗体フラグメント」は、インタクト抗体が結合する抗原に結合するインタクト抗体の一部を含むインタクト抗体以外の分子を指す。抗体フラグメントの限定されない例には、限定されないが、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；単鎖形態の抗体およびその高次バリアント；単一ドメイン抗体、および抗体フラグメントから形成された多特異性抗体が含まれる。
【００３８】
単鎖形態の抗体およびその高次形態には、限定されないが、単一ドメイン抗体、単鎖バリアントフラグメント（ｓｃＦｖ）、二価のｓｃＦｖ（ｄｉ−ｓｃＦｖ）、三価のｓｃＦｖ（ｔｒｉ−ｓｃＦｖ）、四価のｓｃＦｖ（ｔｅｔｒａ−ｓｃＦｖ）、二重特異性抗体、三重特異性抗体および四重特異性抗体が含まれ得る。ｓｃＦｖは、リンカーによって接続される重鎖および軽鎖の可変領域から構成される。すべてではないが、ほとんどの場合、リンカーはペプチドであり得る。リンカーペプチドは、好ましくは約５〜３０アミノ酸長または約１０〜２５アミノ酸長である。通常、リンカーは、適切なフォールディングおよび活性結合部位の生成を妨げることなく可変ドメインの安定化を可能にする。好ましい実施態様において、リンカーペプチドは、グリシンおよびセリンまたはスレオニンに富んでいる。ＳｃＦｖはファージディスプレイを容易にするために使用され得、またはフローサイトメトリーもしくは免疫組織化学に使用され得、または標的ドメインとして使用され得る。ｓｃＦｖを作製および使用する方法は当分野で公知である。ｓｃＦｖはまた、ヒト定常ドメイン（例えば、重鎖定常ドメインはＩｇＧドメイン（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４など）に由来するか、またはＩｇＡ、ＩｇＭもしくはＩｇＥ由来の重鎖定常ドメインに由来する）に結合してい得る。二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体および高次のバリアントは通常、リンカーペプチドの長さを０〜数個のアミノ酸に変化させることによって作成される。あるいは、多価結合の抗体バリアントが、可変ドメインに連結した自己集合性ユニットを用いて作製され得ることは当分野で周知である。
【００３９】
「単一ドメイン抗体」は、単一の単量体可変抗体ドメインからなる抗体フラグメントを指す。
【００４０】
多特異性抗体には、二重特異性抗体、三重特異性抗体または４つ以上の特異性を有する抗体が含まれる。多特異性抗体は、１つの抗体の重鎖および軽鎖を１つ以上の他の抗体の重鎖および軽鎖と組み合わせることによって作成され得る。これらの鎖は共有結合してい得る。
【００４１】
「モノクローナル抗体」は、単一のコピーまたはクローンに由来する抗体を指し、これは例えば任意の真核生物、原核生物またはファージのクローンを含む。「モノクローナル抗体」は、ハイブリドーマ技術によって産生された抗体に限定されない。モノクローナル抗体は、当分野で周知のハイブリドーマ技術、ならびに組換え技術、ファージディスプレイ技術、合成技術またはこのような技術の組合せおよび当分野でよく知られている他の技術を用いて産生され得る。さらに、モノクローナル抗体は、当分野で公知の方法により検出可能な標識で標識され得、固相に固定化され得、かつ／または異種化合物（例えば酵素または毒素）と結合され得る。
【００４２】
「重鎖抗体」は、２本の重鎖からなる抗体を指す。重鎖抗体は、ラクダ、ラマ、アルパカ、サメなどに由来するＩｇＧ様抗体または軟骨魚類由来のＩｇＮＡＲであり得る。
【００４３】
「ヒト化抗体」は、非ヒト抗体が投与後にヒトの免疫応答を誘発するリスクを低下させるように改変されているが、元の非ヒト抗体に類似した結合特異性および親和性を保持している非ヒト抗体を指す。ヒト化抗体は、非ヒト抗体と同一または類似のエピトープに結合する。用語「ヒト化抗体」は、非ヒト超可変領域（「ＨＶＲ」）を有する抗体の配列を変化させることによってヒト抗体生殖系列由来のアミノ酸配列から部分的または完全に構成されている抗体を含む。最も単純なこのような変化はマウス定常領域をヒト抗体の定常領域に単に置換することからなり得、したがってこれは医薬品用途として許容され得るのに十分低い免疫原性を有し得るヒト／マウスキメラを生じ得る。好ましくは、抗体の可変領域は、当分野で現在周知の技術によってヒト化される。例えば、可変領域のフレームワーク領域は対応するヒトフレームワーク領域で置換され得るが、１つ、いくつかまたは６つすべての非ヒトＨＶＲが保持され得る。いくつかのフレームワーク残基は、非ヒトＶＬドメインまたはＶＨドメイン（例えば、ＨＶＲ残基が由来する非ヒト抗体）からの対応する残基で置換され得、例えばヒト化抗体の特異性または親和性を回復または改善し得る。実質的にヒトフレームワーク領域は、公知のヒトフレームワーク配列と少なくとも約７５％の相同性（すなわち、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％の配列同一性）を有する。ＨＶＲはまた、完全ヒト生殖系列フレームワーク領域または実質的にヒトであるフレームワーク領域の文脈において、抗原に対する結合活性および親和性が維持または増強されるようにランダム変異され得る。上述したように、本発見の方法における使用のためには、抗体フラグメントを用いれば十分である。さらに、本明細書における用語「ヒト化抗体」は、実質的なヒトフレームワーク領域および非ヒト抗体由来の少なくとも１つのＨＶＲを含み、存在する任意の定常領域が実質的にヒトであることを含む抗体を指す。実質的にヒト定常領域は、公知のヒト定常配列と少なくとも約９０％（すなわち、約９０％、約９５％または約９９％の配列同一性）を有する。したがって、ヒト化抗体のすべての部分（ＨＶＲを除き得る）は、１以上の生殖系列ヒト免疫グロブリン配列の対応する対と実質的に同一である。
【００４４】
必要に応じて、ヒト化免疫グロブリンの設計は以下のように実施され得るか、または当業者が精通している類似の方法を用いて実施され得る（例えば、Almagro, et al. Front. Biosci. 2008, 13(5):1619-33参照）。マウス抗体の可変領域を、最も類似したヒト生殖系列配列に（例えばＢＬＡＳＴまたは類似のアルゴリズムを用いて）アラインメントする。マウス抗体配列由来のＣＤＲ残基を、類似のヒト「アクセプター」生殖系列に移植する。次いで、元のマウス抗体に類似した結合親和性を有するヒト化抗体を達成するために、ＣＤＲ付近またはフレームワーク内の１つ以上の位置（例えば、Ｖｅｒｎｉｅｒ位置）を元のマウスのアミノ酸に戻してもよい。通常、異なる復帰変異を有するいくつかのバージョンのヒト化抗体を作製し、活性について経験的に試験する。親のマウス抗体に最も類似した性質を有し、マウスフレームワークの復帰が最も少ないヒト化抗体バリアントを最終的なヒト化抗体候補として選択する。
【００４５】
ＩＩ．抗ＴＲＥＭ−２抗体
本明細書における「抗ＴＲＥＭ−２抗体」は、約０．１ｐＭ〜約１０μＭ、好ましくは約０．１ｐＭ〜約１μＭ、より好ましくは約０．１ｐＭ〜約１００ｎＭの親和性定数または相互作用の親和性（ＫＤ）で組換えヒトＴＲＥＭ−２に結合する単離された抗体を指す。抗原に対する抗体の親和性を決定する方法は当分野で公知であり、実施例においてさらに説明される。本明細書において有用な抗ＴＲＥＭ−２抗体には、治療量で対象に投与されるのに適した抗ＴＲＥＭ−２抗体が含まれる。
【００４６】
本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体はアゴニスト抗体であり、これは抗体が天然リガンドの結合を模倣した様式でＴＲＥＭ−２と結合することを意味し、抗体介在性の下流のシグナル伝達またはアゴニズムを生じる。
【００４７】
本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体は、抗ＴＲＥＭ−２抗体が認識または結合するエピトープに関して記述または特定され得る。抗体の抗原結合ドメインに特異的に相互作用する標的ポリペプチドの部分が「エピトープ」である。ＴＲＥＭ−２は、タンパク質の供給源（例えば、マウス、ラット、カニクイザル、ヒトなど）、バリアント（例えば、Ｒ４７Ｈ、Ｒ６２Ｈ、Ｒ６２Ｃ、Ｇ５５Ｒ、Ａ２８Ｖなど）、タンパク質の立体構造状態（例えば、凝集、不溶性、可溶性、翻訳後修飾など）およびタンパク質の位置（例えば、細胞内、細胞外、粒子における他のタンパク質または分子との複合体形成、アミロイドプラーク内など）に応じて、任意の数のエピトープを含み得る。さらに、ＴＲＥＭ−２上の「エピトープ」は線状エピトープまたは立体構造エピトープであり得、いずれの場合においても非ポリペプチド要素を含み得る（例えば、エピトープは炭水化物または脂質側鎖を含み得る）ことに留意すべきである。用語「親和性」は、個々のエピトープの抗体の抗原結合部位への結合の強さの尺度を指す。
【００４８】
本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体は、その交差反応性に関して記述または特定され得る。用語「交差反応性」は、ある抗原に特異的な抗体が第２の抗原と反応する能力を指し、２つの異なる抗原性物質間の関連性の尺度を指す。したがって、抗体がその形成を誘発したエピトープ以外のエピトープに結合する場合、該抗体は交差反応性である。交差反応性エピトープは、一般に誘導エピトープと同じ相補的な構造的特徴を多く含み、一部の例では実際に元のエピトープよりも良く適合し得る。例えば、ある抗体は、関連しているが同一ではないエピトープ（例えば、参照エピトープと（当分野で公知の方法を用いて計算される）少なくとも約８５％、少なくとも約９０％または少なくとも約９５％の同一性を有するエピトープ）に結合するという点において、ある程度の交差反応性を有する。抗体は、参照エピトープと約９５％未満、約９０％未満または約８５％未満の同一性を有するエピトープに結合しない場合、交差反応性をほとんどまたは全く有しないと記述され得る。抗体は、あるエピトープの他の任意の類似体、オルソログまたはホモログに結合しない場合、該エピトープに対して「高度に特異的」であるとみなされ得る。
【００４９】
本開示の抗ＴＲＥＭ−２抗体は、バリアントＦｃ領域を有していてもいなくてもよい。いくつかの例では、Ｆｃ領域はミクログリア細胞上のＦｃ受容体に対する親和性を増加または減少させるように、および／またはグリコシル化パターンを変化させるように改変され得る。
【００５０】
ある例において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号１に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＬ、または配列番号２に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨを含む。配列番号１に由来するＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＬは、配列番号３のＬ１、アミノ酸配列ＩＶＳを含むＬ２、配列番号４のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体１〜７）。配列番号２に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号５のＨ１、配列番号６のＨ２、配列番号７のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体８〜１４）。配列番号２に由来する１以上のＨＶＲを含む抗体は、配列番号１に由来する１以上のＨＶＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）をさらに含み得る。ＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。好ましい実施態様において、ＶＬは、配列番号３のＬ１、アミノ酸配列ＩＶＳを含むＬ２、配列番号４のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体１５〜６３）。上記の様々な実施態様において、抗体はヒト化抗体であり得、または抗体は、配列番号１と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＬ、および／または配列番号２と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＨを有し得る。上記の各実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は任意で、実質的にヒトである（すなわち、公知のヒトフレームワーク配列との少なくとも９０％、９５％または９９％の配列同一性）１以上の定常領域または定常領域の一部を含み得る。本開示は配列番号１、２、３、４、５、６および７の対応する核酸配列を包含し、これらは当業者によって容易に決定され得、本開示の抗体を発現させるためにベクターまたは他の大きなＤＮＡ分子（染色体など）に組み込まれ得る。
【００５１】
別の例において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号８に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＬ、または配列番号９に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨを含む。配列番号８に由来するＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＬは、配列番号１０のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号１１のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体６４〜７０）。配列番号９に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号１２のＨ１、配列番号１３のＨ２、配列番号１４のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体７１〜７７）。配列番号９に由来する１以上のＨＶＲを含む抗体は、配列番号８に由来する１以上のＨＶＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）をさらに含み得る。ＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。好ましい実施態様において、ＶＬは、配列番号１０のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号１１のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体７８〜１２６）。上記の様々な実施態様において、抗体はヒト化抗体であり得、または抗体は、配列番号９と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＬ、および／または配列番号１０と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＨを有し得る。上記の各実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は任意で、実質的にヒトである（すなわち、公知のヒトフレームワーク配列との少なくとも９０％、９５％または９９％の配列同一性）１以上の定常領域または定常領域の一部を含み得る。本開示は配列番号８、９、１０、１１、１２、１３および１４の対応する核酸配列を包含し、これらは当業者によって容易に決定され得、本開示の抗体を発現させるためにベクターまたは他の大きなＤＮＡ分子（染色体など）に組み込まれ得る。
【００５２】
別の例において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号１５に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＬ、または配列番号１６に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨを含む。配列番号１５に由来するＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＬは、配列番号１７のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号１８のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体１２７〜１３３）。配列番号１６に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号１９のＨ１、配列番号２０のＨ２、配列番号２１のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体１３４〜１４０）。配列番号１６に由来する１以上のＨＶＲを含む抗体は、配列番号１５に由来する１以上のＨＶＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）をさらに含み得る。ＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。好ましい実施態様において、ＶＬは、配列番号１７のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号１８のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体１４１〜１８９）。上記の様々な実施態様において、抗体はヒト化抗体であり得、または抗体は、配列番号１５と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＬ、および／または配列番号１６と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＨを有し得る。上記の各実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は任意で、実質的にヒトである（すなわち、公知のヒトフレームワーク配列との少なくとも９０％、９５％または９９％の配列同一性）１以上の定常領域または定常領域の一部を含み得る。本開示は配列番号１５、１６、１７、１８、１９、２０および２１の対応する核酸配列を包含し、これらは当業者によって容易に決定され得、本開示の抗体を発現させるためにベクターまたは他の大きなＤＮＡ分子（染色体など）に組み込まれ得る。
【００５３】
別の例において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号２２に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＬ、または配列番号２３に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨを含む。配列番号２２に由来するＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＬは、配列番号２４のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号２５のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体１９０〜１９６）。配列番号２３に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号２６のＨ１、配列番号２７のＨ２、配列番号２８のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体１９７〜２０３）。配列番号２３に由来する１以上のＨＶＲを含む抗体は、配列番号２２に由来する１以上のＨＶＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）をさらに含み得る。ＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。好ましい実施態様において、ＶＬは、配列番号２４のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号２５のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体２０４〜２５２）。上記の様々な実施態様において、抗体はヒト化抗体であり得、または抗体は、配列番号２２と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＬ、および／または配列番号２３と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＨを有し得る。上記の各実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は任意で、実質的にヒトである（すなわち、公知のヒトフレームワーク配列との少なくとも９０％、９５％または９９％の配列同一性）１以上の定常領域または定常領域の一部を含み得る。本開示は配列番号２２、２３、２４、２５、２６、２７および２８の対応する核酸配列を包含し、これらは当業者によって容易に決定され得、本開示の抗体を発現させるためにベクターまたは他の大きなＤＮＡ分子（染色体など）に組み込まれ得る。
【００５４】
別の例において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号２９に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＬ、または配列番号３０に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨを含む。配列番号２９に由来するＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＬは、配列番号３１のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号３２のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体２５３〜２５９）。配列番号３０に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号３３のＨ１、配列番号３４のＨ２、配列番号３５のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体２６０〜２６６）。配列番号３０に由来する１以上のＨＶＲを含む抗体は、配列番号２９に由来する１以上のＨＶＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）をさらに含み得る。ＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。好ましい実施態様において、ＶＬは、配列番号３１のＬ１、アミノ酸配列ＫＶＳを含むＬ２、配列番号３２のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体２６７〜３１５）。上記の様々な実施態様において、抗体はヒト化抗体であり得、または抗体は、配列番号２９と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＬ、および／または配列番号３０と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＨを有し得る。上記の各実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は任意で、実質的にヒトである（すなわち、公知のヒトフレームワーク配列との少なくとも９０％、９５％または９９％の配列同一性）１以上の定常領域または定常領域の一部を含み得る。本開示は配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４および３５の対応する核酸配列を包含し、これらは当業者によって容易に決定され得、本開示の抗体を発現させるためにベクターまたは他の大きなＤＮＡ分子（染色体など）に組み込まれ得る。
【００５５】
別の例において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号３６に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＬ、または配列番号３７に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨを含む。配列番号３６に由来するＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＬは、配列番号３８のＬ１、アミノ酸配列ＷＡＳを含むＬ２、配列番号３９のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体３１６〜３２２）。配列番号３７に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号４０のＨ１、配列番号４１のＨ２、配列番号４２のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体３２３〜３２９）。配列番号３７に由来する１以上のＨＶＲを含む抗体は、配列番号３６に由来する１以上のＨＶＲを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）をさらに含み得る。ＨＶＲは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはそれらの任意の組合せであり得る。好ましい実施態様において、ＶＬは、配列番号３８のＬ１、アミノ酸配列ＷＡＳを含むＬ２、配列番号３９のＬ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ａの抗体３３０〜３７８）。上記の様々な実施態様において、抗体はヒト化抗体であり得、または抗体は、配列番号３６と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＬ、および／または配列番号３７と９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９もしくは１００％の同一性を有するＶＨを有し得る。上記の各実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は任意で、実質的にヒトである（すなわち、公知のヒトフレームワーク配列との少なくとも９０％、９５％または９９％の配列同一性）１以上の定常領域または定常領域の一部を含み得る。本開示は配列番号３６、３７、３８、３９、４０、４１および４２の対応する核酸配列を包含し、これらは当業者によって容易に決定され得、本開示の抗体を発現させるためにベクターまたは他の大きなＤＮＡ分子（染色体など）に組み込まれ得る。
【００５６】
いくつかの実施態様において、上述の例示的な各抗体はバリアントＦｃ領域（限定されないが、ミクログリアＦｃＲとの天然の相互作用を変化させるように改変されたバリアントＦｃ領域を含む）を含み得る。
表Ａ
【表１−１】
2022500081.tif 000003
【表１−２】
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【表１−３】
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【表１−４】
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【表１−５】
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【表１−６】
2022500081.tif 000008
【００５７】
別の例において、抗ＡｐｏＥ抗体は、配列番号４５のコンセンサス配列を含む軽鎖可変領域を有する。軽鎖可変領域は、配列番号４４のコンセンサス配列および／またはアミノ酸配列（Ｉ／Ｋ）ＶＳを含むコンセンサス配列をさらに含み得る。例示的な実施態様において、配列番号４４、４５および４６は、それぞれＬ１、Ｌ２およびＬ３である（例えば、表Ｂの抗体１〜７）。
【００５８】
いくつかの実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号２に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨをさらに含み得る。配列番号２に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号５のＨ１、配列番号６のＨ２、配列番号７のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ｂの抗体８〜５６）。
【００５９】
いくつかの実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号９に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨをさらに含み得る。配列番号９に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号１２のＨ１、配列番号１３のＨ２、配列番号１４のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ｂの抗体５７〜１０５）。
【００６０】
いくつかの実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号１６に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨをさらに含み得る。配列番号１６に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号１９のＨ１、配列番号２０のＨ２、配列番号２１のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ｂの抗体１０６〜１５４）。
【００６１】
いくつかの実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号２３に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨをさらに含み得る。配列番号２３に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号２６のＨ１、配列番号２７のＨ２、配列番号２８のＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ｂの抗体１５５〜２０３）。
【００６２】
いくつかの実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、配列番号３０に由来する１以上のＨＶＲを有するＶＨをさらに含み得る。配列番号３０に由来するＨＶＲは、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３またはそれらの任意の組合せであり得る。ある実施態様において、ＶＨは、配列番号３３のＨ１、配列番号３４のＨ２、アミノ酸配列（Ｉ／Ｋ）ＶＳを含むＨ３またはそれらの任意の組合せを含み得る（例えば、表Ｂの抗体２０４〜２５２）。
表Ｂ
【表２−１】
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【表２−２】
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【表２−３】
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【表２−４】
2022500081.tif 000012
【００６３】
他の例において、本開示の抗ＴＲＥＭ−２抗体は、ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０またはＨＪ２３．１３である。さらなる他の例において、本開示の抗ＴＲＥＭ−２抗体は、ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０またはＨＪ２３．１３に由来するヒト化抗体である。
【００６４】
他の例において、本開示の抗ＴＲＥＭ−２抗体は、参照抗体のそのエピトープへの結合を競合的に阻害する。抗体が、参照抗体の所定のエピトープへの結合を少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％または少なくとも９０％遮断する程度に、該エピトープに優先的に結合する場合、抗体は参照抗体の所定のエピトープへの結合を競合的に阻害すると記述される。競合阻害は、当分野で公知の任意の方法（例えば、競合ＥＬＩＳＡアッセイ）によって決定され得る。いくつかの実施態様において、本開示の抗ＴＲＥＭ−２抗体は、ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０またはＨＪ２３．１３のヒトＴＲＥＭ−２への結合を競合的に阻害する。
【００６５】
ＩＩＩ．処置方法
別の態様において、本開示は、必要とする対象においてＴＲＥＭ−２の活性化を増加させる方法を提供する。本方法は、治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体をそれを必要とする対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、セクションＩＩに記載されている。対象がヒトである特定の実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、生きているヒト対象への投与に適応している（例えば、ヒト化されている）。様々な実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、（ａ）表Ａから選択される抗体、（ｂ）表Ｂから選択される抗体、（ｃ）ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０またはＨＪ２３．１３のヒトＴＲＥＭ−２への結合を競合的に阻害する抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体、（ｄ）ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０もしくはＨＪ２３．１３、または（ｅ）ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０もしくはＨＪ２３．１３のヒト化誘導体である。
【００６６】
ＴＲＥＭ−２の活性化を評価する方法は当分野で公知であり、限定されないが、ＴＲＥＭ−２によって活性化される細胞内メディエーターまたはシグナル伝達カスケードの増加を測定することを含む。例えば、ＴＲＥＭ−２の活性化は、以下から選択されるＴＲＥＭ−２の活性の増加をもたらし得る：ＴＲＥＭ−２のＤＡＰ１２への結合；ＤＡＰ１２のＴＲＥＭ−２への結合；ＤＡＰ１２のリン酸化；ＰＩ３Ｋの活性化；ＩＬ−１２ｐ７０、ＩＬ−６およびＩＬ−１０からなる群から選択される１つ以上の抗炎症メディエーター（例えばサイトカイン）の発現の上昇；ＩＦＮ−ａ４、ＩＦＮ−ｂ、ＩＬ−６、ＩＬ−１２ｐ７０、ＩＬ−１β、ＴＮＦ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１０、ＩＬ−８、ＣＲＰ、ケモカインタンパク質ファミリーのＴＧＦ−ベータメンバー、ＩＬ−２０ファミリーメンバー、ＩＬ−３３、ＬＩＦ、ＩＦＮ−ガンマ、ＯＳＭ、ＣＮＴＦ、ＴＧＦ−ベータ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８およびＣＲＰからなる群から選択される１つ以上の炎症促進性メディエーターの発現の低下；ＴＮＦ−α、ＩＬ−６またはその両方の発現の低下；細胞外シグナル制御キナーゼ（ＥＲＫ）のリン酸化；Ｃ−Ｃケモカイン受容体７（ＣＣＲ７）の発現の上昇；ＣＣＬ１９およびＣＣＬ２１発現細胞へのミクログリア細胞走化性の誘導；骨髄由来樹状細胞が抗原特異的Ｔ細胞増殖を誘導する能力の増加、正常化またはその両方；破骨細胞産生の誘導、破骨細胞形成率の増加またはその両方；樹状細胞、マクロファージ、ミクログリア細胞、Ｍ１マクロファージおよび／またはミクログリア細胞、活性化されたＭ１マクロファージおよび／またはミクログリア細胞、Ｍ２マクロファージおよび／またはミクログリア細胞、単球、破骨細胞、皮膚のランゲルハンス細胞、およびクッパー細胞のうち１つ以上の生存および／または機能の増加；アポトーシス性神経細胞のクリアランス、神経組織片のクリアランス、非神経組織片のクリアランス、細菌または他の異物のクリアランス、病原タンパク質のクリアランス、病原ペプチドのクリアランス、および病原核酸のクリアランスからなる群から選択される１種類以上のクリアランスの誘導；アポトーシス性神経細胞、神経組織片、非神経組織片、細菌、他の異物、病原タンパク質、病原ペプチドまたは病原核酸のうち１つ以上の貪食の誘導；破壊されたＴＲＥＭ−２／ＤＡＰ１２依存性遺伝子発現の正常化；Ｓｙｋ、ＺＡＰ７０またはその両方のＴＲＥＭ−２／ＤＡＰ１２複合体への補充；Ｓｙｋのリン酸化；樹状細胞、マクロファージ、単球および／またはミクログリア上のＣＤ８３および／またはＣＤ８６の発現の上昇；ＴＮＦ−α、ＩＬ−１０、ＩＬ−６、ＭＣＰ−１、ＩＦＮ−ａ４、ＩＦＮ−ｂ、ＩＬ−１β、ＩＬ−８、ＣＲＰ、ケモカインタンパク質ファミリーのＴＧＦ−ベータメンバー、ＩＬ−２０ファミリーメンバー、ＩＬ−３３、ＬＩＦ、ＩＦＮ−ガンマ、ＯＳＭ、ＣＮＴＦ、ＴＧＦ−ベータ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８およびＣＲＰからなる群から選択される１以上の炎症性サイトカインの分泌の減少；１つ以上の炎症性受容体の発現の低下；ＭＣＳＦのレベルが低下した条件下でのマクロファージ、��状細胞、単球および／またはミクログリアによる貪食の増加；正常レベルのＭＣＳＦの存在下でのマクロファージ、樹状細胞、単球および／またはミクログリアによる貪食の減少；１つ以上のＴＲＥＭ−２依存性遺伝子の活性の増加；およびそれらの任意の組合せ。
【００６７】
様々な実施態様において、ＴＲＥＭ−２の活性化の増加は、細胞表面上のＴＲＥＭ−２のクラスター形成を誘導または保持する。他の実施態様において、ＴＲＥＭ−２の活性化の増加は、以下からなる群から選択されるＴＲＥＭ−２の活性を増加させる：ＴＲＥＭ−２のＤＡＰ１２への結合；ＤＡＰ１２のリン酸化；マクロファージ、ミクログリア細胞、Ｍ１ミクログリア細胞、活性化されたＭ１ミクログリア細胞、Ｍ２ミクログリア細胞、樹状細胞、マクロファージ、Ｍ１マクロファージ、活性化されたＭ１マクロファージ、Ｍ２マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚のランゲルハンス細胞、および／またはクッパー細胞の生存の増加；ＩＬ−６の発現の上昇；Ｓｙｋのリン酸化；樹状細胞上のＣＤ８３および／またはＣＤ８６の発現の上昇；マクロファージ、樹状細胞、単球および／またはミクログリアによる貪食の増加；および１つ以上のＴＲＥＭ−２依存性遺伝子の活性の増加、ここで任意で、１つ以上のＴＲＥＭ−２依存性遺伝子は１つ以上の活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）転写因子を含む；ならびにそれらの任意の組合せ。他の実施態様において、ＴＲＥＭ−２の活性化の増加は、自然免疫細胞の生存を誘導または促進する。
【００６８】
処置を必要とする対象には、限定されないが、以下からなる群から選択される疾患、障害または傷害を有する対象が含まれる：認知症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー病、血管性認知症、混合型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、タウオパチー疾患、那須・ハコラ病、脳卒中、急性外傷、慢性外傷、ループス、急性大腸炎および慢性大腸炎、創傷治癒、クローン病、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、肥満、マラリア、本態性振戦、中枢神経系ループス、ベーチェット病、パーキンソン病、レビー小体型認知症、多系統萎縮症、シャイ・ドレーガー症候群、進行性核上性麻痺、大脳皮質基底核変性症、急性散在性脳脊髄炎、肉芽腫性障害、サルコイドーシス、加齢性疾患、発作、脊髄損傷、外傷性脳損傷、加齢黄斑変性症、緑内障、網膜色素変性症、網膜変性症、呼吸器感染症、敗血症、眼感染症、全身感染症、ループス、関節炎、多発性硬化症、低骨密度、骨粗鬆症、骨形成、大理石骨病、骨パジェット病、およびがん、ここでこれらは先行実施態様のいずれかに記載の単離された抗体を治療有効量で個体に投与することを含む。本開示の他の態様は、以下からなる群から選択される疾患、障害または傷害を有する個体の予防、リスクの低減または処置における使用のための先行実施態様のいずれかに記載の単離された抗体に関する：認知症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー病、血管性認知症、混合型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、タウオパチー疾患、那須・ハコラ病、脳卒中、急性外傷、慢性外傷、ループス、急性大腸炎および慢性大腸炎、創傷治癒、クローン病、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、肥満、マラリア、本態性振戦、中枢神経系ループス、ベーチェット病、パーキンソン病、レビー小体型認知症、多系統萎縮症、シャイ・ドレーガー症候群、進行性核上性麻痺、大脳皮質基底核変性症、急性散在性脳脊髄炎、肉芽腫性障害、サルコイドーシス、加齢性疾患、発作、脊髄損傷、外傷性脳損傷、加齢黄斑変性症、緑内障、網膜色素変性症、網膜変性症、呼吸器感染症、敗血症、眼感染症、全身感染症、ループス、関節炎、多発性硬化症、低骨密度、骨粗鬆症、骨形成、大理石骨病、骨パジェット病、およびがん。本開示の他の態様は、以下からなる群から選択される疾患、障害または傷害を有する個体の予防、リスクの低減または処置のための薬物の製造における先行実施態様のいずれかに記載の単離された抗体の使用に関する：認知症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー病、血管性認知症、混合型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、タウオパチー疾患、那須・ハコラ病、脳卒中、急性外傷、慢性外傷、ループス、急性大腸炎および慢性大腸炎、創傷治癒、クローン病、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、肥満、マラリア、本態性振戦、中枢神経系ループス、ベーチェット病、パーキンソン病、レビー小体型認知症、多系統萎縮症、シャイ・ドレーガー症候群、進行性核上性麻痺、大脳皮質基底核変性症、急性散在性脳脊髄炎、肉芽腫性障害、サルコイドーシス、加齢性疾患、発作、脊髄損傷、外傷性脳損傷、加齢黄斑変性症、緑内障、網膜色素変性症、網膜変性症、呼吸器感染症、敗血症、眼感染症、全身感染症、ループス、関節炎、多発性硬化症、低骨密度、骨粗鬆症、骨形成、大理石骨病、骨パジェット病、およびがん。様々な実施態様において、処置を必要とする対象は、神経変性疾患を有する対象である。ある実施態様において、神経変性疾患を有する対象は、アルツハイマー病（ＡＤ）、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、プリオン病、那須・ハコラ病および多発性硬化症、またはパーキンソン病（ＰＤ）などを有する対象である。他の実施態様において、処置を必要とする対象は、脳卒中を発症したことがあるか、または脳卒中を発症するリスクがある対象である。他の実施態様において、処置を必要とする対象は、急性疼痛または慢性疼痛を有する対象である。
【００６９】
別の態様において、本開示はＡβアミロイドーシスを処置する方法を提供し、該方法は治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体をそれを必要とする対象に投与することを含む。本開示はまた、脳のＡβプラークを特徴とする疾患と診断された対象を処置する方法を提供し、該方法は治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を対象に投与することを含む。本開示はまた、脳における血管性Ａβプラークを特徴とする疾患と診断された対象を処置する方法を提供し、該方法は治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を対象に投与することを含む。本開示はまた、脳におけるＡβプラークを特徴とする疾患の進行を予防する方法を提供し、該方法は治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体をそれを必要とする対象に投与することを含む。本開示はまた、アルツハイマー病と診断された対象を処置する方法を提供し、該方法は治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を対象に投与することを含む。本開示はまた、ＣＡＡと診断された対象を処置する方法を提供し、該方法は治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、セクションＩＩに記載されている。対象がヒトである特定の実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、生きているヒト対象への投与に適応している（例えば、ヒト化されている）。
【００７０】
ある実施態様において、本開示は、脳におけるＡβプラークを特徴とする疾患の進行を予防するか、または進行の速度を遅延させる方法を提供する。本方法は、治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体をそれを必要とする対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を含む。脳におけるＡβプラークを特徴とする疾患の進行（Ａβアミロイドーシスの臨床徴候の悪化、タウ病理の発症もしくは悪化、Ａβプラーク関連症状の悪化、またはＣＡＡ関連症状の悪化を含む）は、当分野で公知の方法および本明細書に記載されている方法によって評価され得る。例示的な実施態様において、臨床徴候はアミロイドプラーク負荷、タウ病理である。
【００７１】
別の実施態様において、本開示は、Ａβアミロイドーシスの臨床徴候を改善する方法を提供する。本方法は、治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体をそれを必要とする対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を含む。Ａβアミロイドーシスの改善された臨床徴候の限定されない例には、アミロイドプラーク負荷の減少、アミロイドプラーク負荷の安定化（すなわち、さらなる増加がない）、ＣＳＦ Ａβ４２濃度の上昇、ＣＳＦ Ａβ４２／Ａβ４０比率の上昇、安定同位体標識動態法(stable isotope labeling kinetics)により測定されるＡβ４２／Ａβ４０ピーク時間比の低下（例えば、１に近づくような低下）、安定同位体標識動態法により測定されるＡβ４２／Ａβ４０ ＦＴＲ比の低下（例えば、１に近づくような低下）、および安定同位体標識後のＡβ４２の相対的な標識とＡβ４０（または別のＡβペプチド）の相対的な標識との比率の１に近づくような変化が含まれ得る。上記の各実施態様において、臨床徴候の改善（すなわち変化）は、少なくとも統計的に有意である。ある実施態様において、該変化は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０％であり得る。いくつかの実施態様において、該変化は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０または９５％であり得る。他の実施態様において、該変化は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１００、１２５、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００または４５０％であり得る。
【００７２】
別の実施態様において、本開示は、対象の脳におけるアミロイドプラーク負荷を減少させる方法を提供する。本方法は、治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、本明細書に開示された抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を含む。本発明の方法は、対象の海馬におけるアミロイドプラーク負荷を減少させ得、かつ／または対象の大脳皮質におけるアミロイドプラーク負荷を減少させ得る。上記の各実施態様において、アミロイドプラーク負荷は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０％減少してい得る。いくつかの実施態様において、アミロイドプラーク負荷は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０または９５％減少してい得る。他の実施態様において、アミロイドプラーク負荷は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１００、１２５、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００または４５０％減少してい得る。
【００７３】
別の実施態様において、本開示は、対象の脳におけるＣＡＡ負荷を減少させる方法を提供する。本方法は、治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を、大脳皮質の表面上の穿通細動脈および／または軟膜細動脈に線維性のＡβを有する対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を含む。本発明の方法は、対象の大脳皮質の表面上の穿通細動脈および／または軟膜細動脈におけるＣＡＡ負荷を減少させ得る。上記の各実施態様において、ＣＡＡ負荷は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０％減少してい得る。いくつかの実施態様において、アミロイドプラーク負荷は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０または９５％減少してい得る。他の実施態様において、アミロイドプラーク負荷は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１００、１２５、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００または４５０％減少してい得る。
【００７４】
別の実施態様は、必要とする対象の脳における不溶性Ａβ４２レベルを低下させる方法を含む。本方法は、治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を対象に投与することを含む。ある例において、本方法は、対象の脳における不溶性Ａβ４０レベルを低下させることをさらに含む。別の例において、本方法は、対象の脳における可溶性Ａβ４０、Ａβ４２レベルまたはそれらの組合せと比較して、不溶性Ａβ４０レベルを選択的に低下させること、不溶性Ａβ４２レベルを低下させること、またはそれらの組合せを含む。
【００７５】
Ａβのレベルは、例えば以下から選択される１つ以上の技術によってＡβを分析することを含む、当分野で公知の任意の適切な方法によって評価され得る：ウエスタンブロット、免疫沈降、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、蛍光活性化細胞分取法（ＦＡＣＳ）、二次元ゲル電気泳動、質量分析（ＭＳ）、マトリクス支援レーザー脱離／イオン化飛行時間型ＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）、表面増強レーザー脱離イオン化飛行時間型（ＳＥＭＩ−ＴＯＥ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、高速タンパク質液体クロマトグラフィー（ＦＰＬＣ）、多次元液体クロマトグラフィー（ＬＣ）およびその後のタンデム質量分析（ＭＳ／ＭＳ）、ならびにレーザーデンシトメトリー。Ａβのインビボでのイメージングは、アミロイドプラーク負荷を評価するのに特に適している。インビボでのイメージング法の限定されない例として、陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）、単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、近赤外（ＮＩＲ）光学イメージング、または磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）が挙げられる。適切な造影剤が当分野で公知である（例えばＰＩＢなど）。
【００７６】
別の実施態様において、本開示は、対象におけるＡβプラークに関連する症状および／またはＣＡＡに関連する症状を改善する方法を提供する。本方法は、ＴＲＥＭ−２に特異的に結合する治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を、少なくとも１つのＡβプラークに関連する症状および／または少なくとも１つのＣＡＡに関連する症状を有する対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を含む。改善されたＡβプラークに関連する症状の限定されない例は、上記で特定されている。ある実施態様において、改善されたＡβプラークに関連する症状には、炎症の減少、神経変性の減少、認知低下の遅延、認知機能の改善、行動の変化の改善、情動制御不全の改善、および／または発作の減少が含まれ得る。上記の各実施態様において、症状の改善（すなわち変化）は少なくとも統計的に有意である。ある実施態様において、該変化は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０％であり得る。いくつかの実施態様において、該変化は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０または９５％であり得る。他の実施態様において、該変化は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１００、１２５、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００または４５０％であり得る。
【００７７】
別の実施態様において、本開示は、対象におけるミクログリアの生存率を増加させ、かつ／またはＡβプラークに関連したミクログリアを増加させる方法を提供する。本方法は、ＴＲＥＭ−２に特異的に結合する治療有効量の抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を、少なくとも１つのＡβプラークに関連する症状および／または少なくとも１つのＣＡＡに関連する症状を有する対象に投与することを含む。適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体を含む。好ましくは、該増加は統計的に有意である。ある実施態様において、該増加は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０％であり得る。いくつかの実施態様において、該増加は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０または９５％であり得る。他の実施態様において、該増加は、未処置の対象または陰性対照で処置された対象と比較して少なくとも１００、１２５、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００または４５０％であり得る。
【００７８】
上記の各実施態様について、適切な抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体はセクションＩＩに記載されている。ある実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体は、（ａ）表Ａから選択される抗体、（ｂ）表Ｂから選択される抗体、（ｃ）ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０またはＨＪ２３．１３のヒトＴＲＥＭ−２への結合を競合的に阻害する抗ＴＲＥＭ−２アゴニスト抗体、（ｄ）ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０もしくはＨＪ２３．１３、または（ｅ）ＨＪ２３．４、ＨＪ２３．７、ＨＪ２３．８、ＨＪ２３．９、ＨＪ２３．１０もしくはＨＪ２３．１３のヒト化誘導体である。
【００７９】
本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体は、治療物質、プロドラッグ、ペプチド、タンパク質、酵素、ウイルス、生体応答修飾物質、医薬物質またはＰＥＧに結合してい得る。ある実施態様において、治療物質は、薬物、放射性同位体、レクチンまたは毒素であり得る。免疫毒素である複合体は、当分野で広く記載されている。毒素は従来のカップリング技術によって抗体に共役され得、またはタンパク質毒素部分を含む免疫毒素は融合タンパク質として産生され得る。放射性同位体を結合した抗ＴＲＥＭ−２抗体を免疫療法に使用する場合、白血球の分布ならびに安定性および放出などの要素に応じて特定の同位体が選択され得る。自己免疫応答に応じて、いくつかの放射体が使用され得る。一般に、α粒子およびβ粒子を放出する放射性同位体が免疫療法に利用される。ある実施態様において、射程の短い高エネルギーのα放射体（２１２Ｂｉなど）が使用され得る。治療目的のために本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体に結合され得る放射性同位体の例には、限定されないが、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、８９Ｚｒ、９０Ｙ、６７Ｃｕ、６４Ｃｕ、１１１Ｉｎ、２１２Ｂｉ、２１２Ａｔ、２１１Ｐｂ、４７Ｓｃ、１０９Ｐｄおよび１８８Ｒｅが含まれる。抗ＴＲＥＭ−２抗体に共役され得る他の治療物質ならびにエクスビボおよびインビボでの治療プロトコルは公知であるか、または当業者によって容易に確認され得る。
【００８０】
抗ＴＲＥＭ−２抗体または抗ＴＲＥＭ−２抗体を含む組成物の投与は、標準的かつ有効な技術を用いて実施され、末梢投与（すなわち、中枢神経系への投与ではない投与）または中枢神経系への局所投与を含む。末梢投与には、限定されないが、静脈内投与、腹腔内投与、皮下投与、肺内投与、経皮投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、頬側投与、舌下投与または座薬投与が含まれる。局所投与（中枢神経系（ＣＮＳ）への直接投与を含む）には、限定されないが、腰部、脳室内もしくは実質内のカテーテルを介した投与、または外科的に埋め込まれた放出制御製剤を用いた投与が含まれる。
【００８１】
効果的な投与のための医薬組成物が選択された投与方法に適するように計画的に設計され、薬学的に許容され得る賦形剤（適合性の分散剤、緩衝剤、界面活性剤、保存剤、可溶化剤、等張化剤および安定化剤など）が必要に応じて使用される。Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton Pa., 16Ed ISBN: 0-912734-04-3の最新版（これは参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）は、実践者に一般的に知られている製剤化技術の概要を提供する。（例えば、本発見において有用な抗体をリポソームに封入するか、または極性基を遮断することによって）本発見において有用な抗体の溶解度特性を変化させ、より親油性にすることは特に有用であり得る。
【００８２】
投与する製剤における抗体の濃度は有効量であり、約０．１重量％の低濃度から約１５または約２０重量％の高濃度までの範囲であり、必要に応じて選択される特定の投与方法に従って主に液量および粘度などに基づいて選択される。生きている対象に注射するための典型的な組成物は、１ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水の滅菌緩衝水および約１〜１０００ｍｇの本明細書に開示されている抗体のいずれか１つまたは組合せを含むように構成され得る。製剤は作製後に無菌濾過され得るか、または微生物学的に許容され得るように作製され得る。静脈内注入のための典型的な組成物は、１〜２５０ｍＬの体積の液体（滅菌リンゲル液など）および１〜１００ｍｇ／ｍｌまたはそれ以上の濃度の抗ＴＲＥＭ−２抗体を有し得る。本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体は、保存のために凍結または凍結乾燥され得、使用の前に適切な滅菌担体で再構成され得る。凍結乾燥および再構成は、様々な程度の抗体活性の減少をもたらし得る（例えば、従来の免疫グロブリンでは、ＩｇＭ抗体はＩｇＧ抗体よりも活性の減少が大きい傾向がある）。投与量は有効量であり、補正のために調整される必要があり得る。一般的に医薬品グレードの品質である製剤のｐＨは、（化学的および物理的な）抗体の安定性と投与時の対象に対する快適性のバランスを取って選択される。一般に、４〜８の間のｐＨが許容される。投与量は、投与が成功した個体のサイズ、体重および他の生理学的特徴に基づいて個体ごとに様々である。
【００８３】
本明細書において、用語「治療有効量」は、物質（例えば抗ＴＲＥＭ−２抗体）を投与された対象に測定可能で有益な効果（すなわち有意な有効性）をもたらす物質の量を意味する。本発見に従って投与される化合物の治療有効量または用量は標準的な臨床技術を用いて決定され、症例を取り巻く状況（特に、投与される抗体、投与経路および処置される症状の状態を含む）によって影響され得る。典型的な用量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの本明細書に記載の抗ＴＲＥＭ−２抗体を含み得る。用量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。投与の頻度は、症状を有効に処置するために必要に応じて毎日または週もしくは月に１回、２回、３回もしくはそれ以上であり得る。
【００８４】
疾患自体に対する処置の投与のタイミングおよび処置期間は、症例を取り巻く状況によって決定される。処置期間は、一度のみの単回投与から生涯にわたる治療的処置の過程までの範囲であり得る。
【００８５】
上述の方法は、タンパク質（ヒト化抗体など）の投与について最も便利で最も適切かつ効果的であると考えられるが、適切な製剤が本明細書で利用される場合、適切な適応により、他の有効な投与技術（脳室内投与、経皮投与および経口投与など）が利用され得る。さらに、当業者は、タンパク質性物質自体の代わりに上述の抗体のいずれかをコードする本発明のポリヌクレオチドを使用してもよい。
【００８６】
さらに、生分解性フィルムおよびマトリックス、浸透圧ミニポンプ、またはデキストランビーズ、アルギン酸もしくはコラーゲンに基づく送達系を用いた放出制御製剤を利用することが望ましい場合がある。
【００８７】
ＩＶ．診断または追跡方法
本開示はまた、検出可能なシグナル（すなわち、測定可能な物質または測定可能なシグナルを生成する物質）を結合している抗ＴＲＥＭ−２抗体を提供する。限定されない例として、様々な酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、放射性物質、様々な陽電子放出断層撮影法を用いた陽電子放出金属、および非放射性常磁性金属イオンが挙げられる。本開示による診断物質としての使用のために抗体に結合され得る金属イオンについて、例えば米国特許第４，７４１，９００号参照。適切な酵素の例には、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼまたはアセチルコリンエステラーゼが含まれる；適切な補欠分子族複合体の例には、ストレプトアビジン／ビオチンおよびアビジン／ビオチンが含まれる；適切な蛍光物質の例には、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミン(dichlorotriazinylamine)フルオレセイン、ダンシルクロリドまたはフィコエリスリンが含まれる；発光物質の例には、ルミノールが含まれる；生物発光物質の例には、ルシフェラーゼ、ルシフェリンおよびエクオリンが含まれる；ならびに適切な放射性物質の例には、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１１１Ｉｎまたは９９Ｔｃが含まれる。物質によって生成されたシグナルは、例えば単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）または陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）によって測定され得る。
【００８８】
検出可能なシグナルを結合している抗ＴＲＥＭ−２抗体は、（例えば、臨床試験の手順の一部として神経変性疾患の発症または進行をモニタリングし、例えば所定の処置および／または予防レジメンの有効性を決定するために）診断に使用され得る。患者の処置は、神経変性疾患の進行のレベルに基づいて調整され得る。
【００８９】
いくつかの実施態様において、脳のアミロイドプラークを特徴とする神経変性疾患または脳における血管性アミロイドプラークを特徴とする神経変性疾患のために処置されている対象の疾患進行を評価する方法が提供され、該方法は以下を含む：（ａ）本明細書に記載されている測定可能なシグナルを生成する物質で標識された本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体（すなわち、「標識された抗ＴＲＥＭ−２抗体」）を投与する、ここでシグナルは投与後の患者において測定される；（ｂ）（ａ）の投与後に、標識された抗ＴＲＥＭ−２またはその抗原結合フラグメントを１以上の時間間隔で投与する、ここでシグナルは投与後の患者において測定される；および（ｃ）（ａ）の投与後に１以上の時間間隔で患者において測定されたシグナルの変化に基づいて、患者における疾患進行を評価する；ここで、シグナルの増加は患者における神経変性疾患の進行を示す。ある実施態様において、対象は、同一であるが標識されていない形態の抗ＴＲＥＭ−２抗体で処置されている。ある実施態様において、対象は、標識された抗ＴＲＥＭ−２抗体のヒトＴＲＥＭ−２への結合を競合的に阻害する抗ＴＲＥＭ−２抗体で処置されている。ある実施態様において、対象は、標識された抗ＴＲＥＭ−２抗体のヒトＴＲＥＭ−２への結合を競合的に阻害しない抗ＴＲＥＭ−２抗体で処置されている。ある実施態様において、対象は、当分野で公知の他の薬物で処置されている。
【００９０】
他の実施態様において、脳のアミロイドプラークを特徴とする神経変性疾患または脳における血管性アミロイドプラークを特徴とする神経変性疾患のために処置されている対象の疾患進行を評価する方法が提供され、該方法は以下を含む：（ａ）本明細書に記載されている測定可能なシグナルを生成する物質で標識された本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体（すなわち、「標識された抗ＴＲＥＭ−２抗体」）を投与する、ここでシグナルは投与後の患者において測定される；（ｂ）対象において測定されたシグナルと、１以上の対照の対象に標識された抗体またはその抗原結合フラグメントを投与した後に測定されたシグナルとの比較を検討することにより、対象の病態を評価する；ここで、対照の対象に対する患者において生成されたシグナルの増加は、脳のアミロイドプラークの増加と相関する；および（ｃ）患者の病態に適した治療により患者を処置する。「対照の対象」は、任意の正常な健常対象（または対象のプール）、異なる疾患の程度を有する対象、または疾患の初期段階にある実際の試験対象を指す。ある実施態様において、治療は、同一であるが標識されていない形態の抗ＴＲＥＭ−２抗体である。ある実施態様において、治療は、標識された抗ＴＲＥＭ−２抗体のヒトＴＲＥＭ−２への結合を競合的に阻害する抗ＴＲＥＭ−２抗体である。ある実施態様において、治療は、標識された抗ＴＲＥＭ−２抗体のヒトＴＲＥＭ−２への結合を競合的に阻害しない抗ＴＲＥＭ−２抗体である。ある実施態様において、治療は、抗Ａβ抗体、抗タウ抗体、ガンマセクレターゼ阻害剤、ベータセクレターゼ阻害剤、コリンエステラーゼ阻害剤、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、または当分野で公知の他の薬物を伴う。
【００９１】
本開示はまた、試験対象における脳のアミロイドプラークの量を測定するためか、神経変性疾患のために処置されている患者の疾患進行を評価するためか、または処置を必要とする患者における脳のアミロイドプラークを特徴とする神経変性疾患を処置するための、本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体の使用を提供する。
【００９２】
Ｖ．医薬組成物
本開示は、投与を容易にし、活性物質の安定性を促進するために、セクションＩＩに開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体を含む医薬組成物を包含する。例えば、本開示の抗ＴＲＥＭ−２抗体は少なくとも１つの薬学的に許容され得る担体または賦形剤と混合され得、これは適切な対象（すなわち「処置を必要とする対象」または「それを必要とする対象」）などの生きている対象に効果的にうまく投与される（与えられる）医薬組成物をもたらし得る。本明細書に開示されている抗ＴＲＥＭ−２抗体を調製し、それを必要とする対象に投与する方法は当業者に周知であるか、または当業者によって容易に決定される。抗ＴＲＥＭ−２抗体の投与経路は、例えば、末梢、経口、非経口、吸入または局所によるものであり得る。
【００９３】
効果的な投与のための医薬組成物が選択された投与方法に適するように計画的に設計され、薬学的に許容され得る賦形剤（適合性の担体、分散剤、緩衝剤、界面活性剤、保存剤、可溶化剤、等張化剤および安定化剤など）が必要に応じて使用される。
【００９４】
薬学的に許容され得る担体の限定されない例として、生理食塩水、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（ヒト血清アルブミンなど）、緩衝物質（リン酸塩など）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩類もしくは電解質（プロタミン硫酸塩など）、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール、羊毛脂、またはそれらの組合せが挙げられる。
【００９５】
微生物の作用の予防は、様々な抗菌物質および抗真菌物質（例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸およびチメロサールなど）によって達成され得る。多くの場合、等張性物質（例えば、糖、多価アルコール（マンニトール、ソルビトールなど）、または塩化ナトリウム）が組成物中に含まれ得る。
【００９６】
注射用組成物の持続的吸収は、組成物中に吸収を遅延させる物質（例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチン）を含めることによってもたらされ得る。
【００９７】
本明細書において開示されている組成物は、保存のために凍結または凍結乾燥され得、使用の前に適切な滅菌担体で再構成され得る。
【００９８】
いくつかの実施態様において、抗ＴＲＥＭ−２抗体は、非経口投与のために製剤化され得る。非経口投与のための調製物には、滅菌された水溶液もしくは非水溶液、懸濁液および乳濁液が含まれる。非水溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（オリーブオイルなど）、および注射用有機エステル（オレイン酸エチルなど）である。水性担体には、水、アルコール溶液／水溶液、乳濁液または懸濁液（生理食塩水および緩衝媒体を含む）が含まれる。非経口媒体には、塩化ナトリウム溶液、ブドウ糖リンゲル液(Ringer's dextrose)、ブドウ糖および塩化ナトリウム、乳酸リンゲル液、または固定油が含まれる。静脈内投与用媒体には、液体および栄養分補充物質ならびに電解質補充物質（ブドウ糖リンゲル液に基づく物質など）などが含まれる。保存剤および他の添加物（例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤および不活性ガスなど）が存在し得る。非経口製剤は、単回ボーラス投与、注入または負荷ボーラス投与およびその後の維持投与であり得る。これらの組成物は、特定の固定間隔または変動間隔で（例えば、１日１回または「必要に応じて」）投与され得る。
【００９９】
本明細書に開示されている特定の医薬組成物は、許容され得る剤形（例えば、カプセル、錠剤、水性懸濁液または溶液を含む）で経口投与され得る。特定の医薬組成物はまた、鼻腔エアロゾルまたは吸入により投与され得る。このような組成物は、ベンジルアルコールもしくは他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティを増強するための吸収促進剤、および／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を用いて生理食塩水の溶液として調製され得る。
【０１００】
担体物質と組み合わせて単一の剤形を生成するための抗ＴＲＥＭ−２抗体の量は、処置される宿主および特定の投与方法に応じて様々である。組成物は、単回投与もしくは複数回投与として、または確立された期間にわたって輸液で投与され得る。投与レジメンはまた、最適な所望の反応（例えば治療反応または予防反応）を与えるために調整され得る。
【実施例】
【０１０１】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施態様を示すために含まれている。以下の実施例において開示されている技術は本発明の実施において良好に機能するように本発明者らによって発見された技術を示していることが当業者に理解されるはずである。しかしながら、当業者は、本開示を考慮して、開示されている特定の実施態様において多くの変更がなされ得、これは本発明の精神および範囲から逸脱することなく同様または類似の結果を得ることを理解するはずであり、したがって、添付の実施例および図面に記載または示されているあらゆる事項は限定的な意味ではなく説明として解釈されるべきである。
【０１０２】
実施例１
ＴＲＥＭ−２に対するマウスモノクローナル抗体を作製し、配列決定した。簡潔に述べると、抗体を作製するために、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）と融合させたヒトＴＲＥＭ−２フラグメント（配列番号４３）をＢ６Ｃ３バックグラウンドの野生型マウスに腹腔内（ＩＰ）注射した。０日目、１４日目および２８日目に１００μｇの抗原（２００μｌ ＰＢＳ＋２００μｌフロイント完全アジュバント中）を注射した。骨髄腫細胞をマウスの脾臓細胞に融合させる３日前に、ＰＢＳ中の５０μｇの抗原での最後のブーストをＩＰ注射した。血清を２１日目および３５日目にＴＲＥＭ−２に対する直接ＥＬＩＳＡによって検査した。力価が１：１０，０００を超えていた場合、骨髄腫細胞を標準的なプロトコルによってマウス脾臓細胞と融合させ、次いでハイブリドーマクローンを単離した。
表１
【表３】
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【０１０３】
実施例２
ＴＲＥＭ−２の結合を評価するために、細菌または哺乳類により産生されたＴＲＥＭ−２を用いてＥＬＩＳＡによって抗体をスクリーニングした。活性を評価するために、ヒトＴＲＥＭ２およびＮＦＡＴ−ＧＦＰレポーターを外因的に発現する２Ｂ４細胞を用いて用量反応曲線を作成した。この細胞株において、ＴＲＥＭ２の活性化は細胞内のカルシウムを上昇させ、これはＮＦＡＴ依存的なＧＦＰ発現をもたらす。
【０１０４】
簡潔に述べると、９６ウェルの薄型透明ボトムプレートに、炭酸緩衝液（ｐＨ９．６）中の１００μＬの抗体を１ｎＭ〜１０００ｎＭの範囲の濃度で４℃において一晩コーティングした。プレートをＰＢＳで洗浄し、ヒトＴＲＥＭ２およびＮＦＡＴ応答性プロモーターによって駆動するＧＦＰレポーター遺伝子を安定に共発現する２Ｂ４細胞を各ウェルに５０，０００細胞播種した。２４時間後に細胞をＢｉｏＴｅｋ Ｃｙｔａｔｉｏｎ５装置で画像化し、ＧＦＰ発現細胞の割合を算出した。ＴＲＥＭ２を発現せず、ＧＦＰレポーター遺伝子を発現した細胞を陰性対照として使用し、該細胞は抗体に対する反応を何ら示さなかった（図１）。
【表４−１】
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【表４−２】
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【図１】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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