【手続補正書】
【提出日】平成22年6月7日(2010.6.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
幹細胞を培養する方法であって、該幹細胞をコラーゲンバイオファブリックと共に培養液中で培養することを含み、前記コラーゲンバイオファブリックが、胎盤に由来し、かつ前記幹細胞が、前記コラーゲンバイオファブリックに対して外来性である、前記方法。
【請求項２】
幹細胞を増殖させる方法であって、前記幹細胞が増殖されるように、前記幹細胞をコラーゲンバイオファブリックと共に培養液中で培養することを含む、前記方法。
【請求項３】
幹細胞を分化させる方法であって、前記細胞の分化のために十分な時間の間コラーゲンバイオファブリックと共に培養液中で前記細胞を培養することを含む、前記方法。
【請求項４】
前記コラーゲンバイオファブリックが哺乳動物胎盤から単離された羊膜を含む、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項５】
前記コラーゲンバイオファブリックが哺乳動物胎盤から単離された絨毛膜を含む、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項６】
前記コラーゲンバイオファブリックが哺乳動物胎盤からの羊膜及び絨毛膜を含む、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項７】
前記コラーゲンバイオファブリックが前記培養液と接触する前に実質的に乾燥している、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項８】
前記コラーゲンバイオファブリックが、該コラーゲンバイオファブリックが由来する胎盤に対して内在性の細胞を含む、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項９】
前記コラーゲンバイオファブリックが、該コラーゲンバイオファブリックが由来する胎盤に対して外来性の細胞を含む、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項１０】
前記幹細胞が胎盤幹細胞である、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項１１】
前記幹細胞が間充織幹細胞、造血幹細胞、胎盤血若しくは臍帯血由来幹細胞、骨髄由来幹細胞又は成体体細胞幹細胞である、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
【請求項１２】
前記成体体細胞幹細胞が神経幹細胞、肝臓幹細胞、膵臓幹細胞、内皮幹細胞、心臓幹細胞、又は筋肉幹細胞である、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
前記幹細胞が、24時間以上、2日間以上、又は7日間以上培養される、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
前記幹細胞が、少なくとも24時間、少なくとも2日間、又は少なくとも１週間増殖される、請求項2記載の方法。
【請求項１５】
前記コラーゲンバイオファブリックの上で体細胞を培養することを更に含む、請求項3記載の方法。
【請求項１６】
前記細胞が神経性細胞に分化される、請求項3記載の方法。
【請求項１７】
前記分化が、前記細胞をβメルカプトエタノール又はブチルヒドロキシアニゾールと接触させることを含む、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
前記コラーゲンバイオファブリックが前記βメルカプトエタノール又はブチルヒドロキシアニゾールを含む、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
前記神経細胞が、神経成長因子受容体の産生；神経成長因子をコードする遺伝子の発現；神経フィラメント重鎖の産生；又は神経フィラメント重鎖をコードする遺伝子の発現；を示す、請求項16記載の方法。
【請求項２０】
前記細胞が脂肪細胞に分化される、請求項3記載の方法。
【請求項２１】
前記分化が、前記細胞をデキサメサゾン、インドメタシン、インスリン、及び3-イソブチル-1-メチルキサンチンと接触させることを含む、請求項20記載の方法。
【請求項２２】
前記コラーゲンバイオファブリックが前記デキサメサゾン、インドメタシン、インスリン及び3-イソブチル-1-メチルキサンチンを含む、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
前記脂肪細胞が、脂肪親和性染色によって検出可能な細胞質内脂肪小胞の産生；リパーゼをコードする遺伝子の発現；又はリパーゼの産生；を示す、請求項20記載の方法。
【請求項２４】
前記細胞が軟骨細胞に分化される、請求項3記載の方法。
【請求項２５】
前記分化が、前記細胞をトランスフォーミング増殖因子β-3と接触させることを含む、請求項24記載の方法。
【請求項２６】
前記コラーゲンバイオファブリックが、前記トランスフォーミング増殖因子β-3を含む、請求項25記載の方法。
【請求項２７】
前記軟骨細胞が、軟骨細胞の細胞形態学的特徴；コラーゲン2の産生；コラーゲン2をコードする遺伝子の発現、コラーゲン9の産生；又はコラーゲン9をコードする遺伝子の発現；を示す、請求項24記載の方法。
【請求項２８】
前記細胞が骨細胞に分化される、請求項3記載の方法。
【請求項２９】
前記分化が、前記細胞をデキサメサゾン、アスコルビン酸-2-ホスフェート及びグリセロリン酸と接触させることを含む、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
前記コラーゲンバイオファブリックが前記デキサメサゾン、アスコルビン酸-2-ホスフェート及びグリセロリン酸を含む、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
前記骨細胞が、骨細胞のカルシウムレベル特徴；アルカリホスファターゼの産生；アルカリホスファターゼをコードする遺伝子の発現；オステオポンチンの産生；又はオステオポンチンをコードする遺伝子の発現；を示す、請求項28記載の方法。
【請求項３２】
前記細胞が肝細胞に分化される、請求項3記載の方法。
【請求項３３】
前記分化が、前記細胞を肝細胞増殖因子及び上皮細胞増殖因子と接触させることを含む、請求項32記載の方法。
【請求項３４】
前記コラーゲンバイオファブリックが前記肝細胞増殖因子及び上皮細胞増殖因子を含む、請求項33記載の方法。
【請求項３５】
前記肝細胞が、肝細胞特異的な遺伝子の発現又は肝細胞特異的なタンパク質の産生を示す、請求項32記載の方法。
【請求項３６】
前記細胞が膵細胞に分化される、請求項3記載の方法。
【請求項３７】
前記分化が、前記細胞を塩基性線維芽細胞増殖因子、トランスフォーミング増殖因子β-1、及びネスチン-ポジティブニューロン細胞による条件培地と接触させることを含む、請求項36記載の方法。
【請求項３８】
前記コラーゲンバイオファブリックが塩基性線維芽細胞増殖因子及びトランスフォーミング増殖因子β-1を含む、請求項37記載の方法。
【請求項３９】
前記膵細胞がインスリンの産生又はインスリンをコードする遺伝子の発現を示す、請求項36記載の方法。
【請求項４０】
前記細胞が心臓細胞に分化される、請求項3記載の方法。
【請求項４１】
前記分化が、前記細胞をレチノイン酸、塩基性線維芽細胞増殖因子及びトランスフォーミング増殖因子と接触させることを含む、請求項40記載の方法。
【請求項４２】
前記コラーゲンバイオファブリックが、前記レチノイン酸、基礎線維芽細胞増殖因子及びトランスフォーミング増殖因子を含む、請求項41記載の方法。
【請求項４３】
前記分化が、前記細胞をカルジオトロピンと接触させることを含む、請求項40記載の方法。
【請求項４４】
前記コラーゲンバイオファブリックが前記カルジオトロピンを含む、請求項41記載の方法。
【請求項４５】
前記心臓細胞が、拍動；心臓アクチンの産生；又は心臓アクチンをコードする遺伝子の発現；を示す、請求項40記載の方法。
【請求項４６】
細胞に対する化合物の毒性を決定する方法であって、前記細胞を該細胞の生存のために適した条件下でコラーゲンバイオファブリックと共に培養すること；前記細胞を該化合物と接触させること；及び同等の条件下で培養され、かつ前記化合物と接触していない細胞と比較して、アポトーシス、壊死若しくは細胞死、又はアポトーシス、壊死若しくは細胞死に向かう傾向を示す前記細胞の代謝パラメーターの変化を同定すること；を含み、前記変化が同定される場合、前記化合物が前記細胞に対して有毒である、前記方法。
【請求項４７】
前記細胞が、体細胞、胎盤幹細胞、間充織幹細胞、造血幹細胞、胎盤血若しくは臍帯血由来幹細胞、骨髄由来幹細胞又は成体体細胞幹細胞である、請求項46記載の方法。
【請求項４８】
前記成体体細胞幹細胞が神経幹細胞、肝臓幹細胞、膵臓幹細胞、内皮幹細胞、心臓幹細胞又は筋肉幹細胞である、請求項47記載の方法。
【請求項４９】
幹細胞を培養する方法であって、前記幹細胞を複数の胎盤幹細胞を含むコラーゲンバイオファブリックと共に培養すること；及び前記幹細胞の生存に適した条件下で前記幹細胞を培養すること；を含む、前記方法。
【請求項５０】
前記コラーゲンバイオファブリックがヒアルロン酸を含む、請求項1又は49記載の方法。
【請求項５１】
前記ヒアルロン酸が前記コラーゲンバイオファブリックに対して架橋される、請求項50記載の方法。