【手続補正書】
【提出日】平成22年10月5日(2010.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロモータであるLENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP及びRPL10、そしてその断片又はバリアントで構成された群から選ばれた異種内部プロモータを含む発現ベクター。
【請求項２】
請求項1において、
前記ベクターは、5’の長い末端反復配列(long terminal repeat, LTR)及び3’LTRを含むヌクレオチド配列を有する発現ベクター。
【請求項３】
請求項1において、
前記異種内部プロモータは、LENG8又はその断片或いはバリアントである発現ベクター。
【請求項４】
請求項1において、
前記異種内部プロモータは、UQCRQ又はその断片或いはバリアントである発現ベクター。
【請求項５】
請求項1において、
前記異種内部プロモータは、SNX3又はその断片或いはバリアントである発現ベクター。
【請求項６】
請求項1において、
前記異種内部プロモータは、ITGB4BP又はその断片或いはバリアントである発現ベクター。
【請求項７】
請求項1において、
前記異種内部プロモータは、RPL10又はその断片或いはバリアントである発現ベクター。
【請求項８】
請求項1において、
前記断片は、LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10の一部であり、それぞれ全長(full length) LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10のプロモータの転写活性の20%以上を有している発現ベクター。
【請求項９】
請求項8において、
前記断片は、LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10の一部であり、それぞれ全長LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10のプロモータの転写活性の40%以上を有している発現ベクター。
【請求項１０】
請求項9において、
前記断片は、LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10の一部であり、それぞれ全長LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10のプロモータの転写活性の60%以上を有している発現ベクター。
【請求項１１】
請求項1において、
前記バリアントは、前記LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10の配列と70%以上同一である発現ベクター。
【請求項１２】
請求項11において、
前記バリアントは、前記LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10の配列と80%以上同一である発現ベクター。
【請求項１３】
請求項12において、
前記バリアントは、前記LENG8, UQCRQ, SNX3, ITGB4BP又はRPL10の配列と90%以上同一である発現ベクター。
【請求項１４】
請求項3において、
前記断片は、LENG8の転写開始部位に対し、約-385番目から約-1番目までの配列(配列番号9のヌクレオチド635番目乃至1019番目)を有する発現ベクター。
【請求項１５】
請求項3において、
前記断片は、LENG8の転写開始部位に対し、約-50番目から約+305番目まで及び約+1908番目から約+2121番目までの配列(配列番号9のヌクレオチド970番目乃至1538番目)を有する発現ベクター。
【請求項１６】
請求項15において、
前記断片は、LENG8の転写開始部位に対し、約-100番目から約+305番目まで及び約+1908番目から約+2121番目までの配列(配列番号9のヌクレオチド920番目乃至1538番目)を有する発現ベクター。
【請求項１７】
請求項16において、
前記断片は、LENG8の転写開始部位に対し、約-200番目から約+305番目まで及び約+1908番目から約+2121番目までの配列(配列番号9のヌクレオチド820番目乃至1538番目)を有する発現ベクター。
【請求項１８】
請求項17において、
前記断片は、LENG8の転写開始部位に対し、約-385番目から約+305番目まで及び約+1908番目から約+2121番目までの配列(配列番号9のヌクレオチド635番目乃至1538番目)を有する発現ベクター。
【請求項１９】
請求項18において、
前記断片は、LENG8の転写開始部位に対し、約-1020番目から約+305番目まで及び約+1908番目から約+2121番目までの配列(配列番号9のヌクレオチド1番目乃至1538番目)を含んでいる発現ベクター。
【請求項２０】
請求項7において、
前記断片は、RPL10の転写開始部位に対し、約-350番目から約-1番目までの配列(配列番号8のヌクレオチド651番目乃至1000番目)を有する発現ベクター。
【請求項２１】
請求項7において、
前記断片は、RPL10の転写開始部位に対し、約-50番目から約+143番目までの配列(配列番号8のヌクレオチド951番目乃至1143番目)を有する発現ベクター。
【請求項２２】
請求項21において、
前記断片は、RPL10の転写開始部位に対し、約-100番目から約+143番目までの配列(配列番号8のヌクレオチド901番目乃至1143番目)を有する発現ベクター。
【請求項２３】
請求項22において、
前記断片は、RPL10の転写開始部位に対し、約-200番目から約+143番目までの配列(配列番号8のヌクレオチド801番目乃至1143番目)を有する発現ベクター。
【請求項２４】
請求項23において、
前記断片は、RPL10の転写開始部位に対し、約-350番目から約+143番目までの配列(配列番号8のヌクレオチド651番目乃至1143番目)を有する発現ベクター。
【請求項２５】
請求項24において、
前記断片は、RPL10の転写開始部位に対し、約-500番目から約+143番目までの配列(配列番号8のヌクレオチド501番目乃至1143番目)を有する発現ベクター。
【請求項２６】
請求項25において、
前記断片は、RPL10の転写開始部位に対し、約-1000番目から約+143番目までの配列(配列番号8のヌクレオチド1番目乃至1143番目)を有する発現ベクター。
【請求項２７】
請求項1乃至26の何れか一つにおいて、
前記ベクターは、プラスミドベクターである発現ベクター。
【請求項２８】
請求項1乃至27の何れか一つにおいて、
前記ベクターは、エンハンサーを欠失させたレトロウイルスベクターをコードする発現ベクター。
【請求項２９】
請求項1乃至27の何れか一つにおいて、
前記ベクターは、エンハンサーを欠失させたレトロウイルスベクターである発現ベクター。
【請求項３０】
請求項28又は29において、
前記ベクターは5’LTR及び3’LTRを含むヌクレオチド配列を有し、前記3’LTRのU3領域のエンハンサーエレメントが欠失している発現ベクター。
【請求項３１】
請求項30において、
前記5’LTRのU3領域のエンハンサーエレメントが欠失している発現ベクター。
【請求項３２】
請求項1乃至31の何れか一つにおいて、
前記異種内部プロモータは、前記プロモータの断片又はバリアントであり、前記断片又はバリアントを含む前記ベクターが実質的に野生型プロモータと同様の高いウイルス力価又は高い転写レベルを提供する能力を有する発現ベクター。
【請求項３３】
請求項1乃至32の何れか一つにおいて、
前記プロモータは、一つ以上のスプライシング部位を含んでいる発現ベクター。
【請求項３４】
請求項28乃至31の何れか一つにおいて、
前記ベクターは、オンコレトロウイルス系(oncoretroviral-based)のレトロウイルスベクターである発現ベクター。
【請求項３５】
請求項34において、
前記オンコレトロウイルス系のレトロウイルスベクターは、MLV系のレトロウイルスベクターである発現ベクター。
【請求項３６】
請求項28乃至31の何れか一つにおいて、
前記ベクターは、レンチウイルス系のレトロウイルスベクターである発現ベクター。
【請求項３７】
請求項1乃至36の何れか一つにおいて、
前記ベクターは、前記異種内部プロモータで作動可能に連結された目的ポリヌクレオチドを含み、前記異種内部プロモータを有する前記ベクターは、高いウイルス力価及び目的ポリヌクレオチドの高い転写レベルを提供できる発現ベクター。
【請求項３８】
請求項37において、
前記目的ポリヌクレオチドは、ポリペプチドをコードする発現ベクター。
【請求項３９】
請求項38において、
前記ポリペプチドは、治療タンパク質又はレポータタンパク質である発現ベクター。
【請求項４０】
請求項39において、
前記ポリペプチドは、eGFPである発現ベクター。
【請求項４１】
請求項39において、
前記ポリペプチドは、gp91である発現ベクター。
【請求項４２】
請求項37において、
前記目的ポリペプチドは、RNA, アンチセンスRNA, 小干渉(small interfering)RNA又はリボザイムをコードする発現ベクター。
【請求項４３】
請求項37において、
前記目的ポリヌクレオチドは、ポリアデニル化配列、IRES, インスレーター配列、スプライシング配列又はその一部の組み合わせを更に有している発現ベクター。
【請求項４４】
請求項1乃至43の何れか一つに記載の発現ベクター及び適当な担体を含んでいる組成物。
【請求項４５】
請求項1乃至43の何れかの一つに記載の発現ベクターを有する細胞。
【請求項４６】
請求項45において、
前記細胞は哺乳類の細胞である細胞。
【請求項４７】
請求項46において、
前記細胞はヒト細胞である細胞。
【請求項４８】
請求項46において、
前記細胞が産生細胞株である細胞。
【請求項４９】
請求項48に記載の産生細胞株を、適当な培地において培養するステップと、前記培地を集めるステップと、細胞を含まないウイルスの上清液を得るために前記培地を濾過するステップとを含む、感染性レトロウイルス粒子の生成方法。
【請求項５０】
哺乳類の細胞を請求項49に記載の前記細胞を含まないウイルスの上清液と一緒にインキュベートするステップを含む、哺乳類細胞の導入方法。
【請求項５１】
請求項1乃至43の何れか一つの発現ベクターを含んでいるキット。