(57)【要約】  本明細書では、それを必要とする対象におけるがんの、処置、防止、および／または改善に関する方法および組成物が開示される。特定の態様では、本技術は、単独で、または他の薬剤と、腫瘍溶解性組成物および免疫療法用組成物として組み合わせた、ＯＸ４０Ｌを発現させるように操作された、Ｅ３Ｌの欠失（ＭＶＡΔＥ３Ｌ）を含む改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、ＯＸ４０Ｌを発現させるように操作された、Ｃ７Ｌの欠失（ＭＶＡΔＣ７Ｌ）を含むＭＶＡウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、ＯＸ４０ＬおよびヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）を発現させるように操作されたＭＶＡΔＣ７Ｌ（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、Ｅ５Ｒの欠失を含むＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ）、ＯＸ４０Ｌを発現させるように操作された、Ｃ７Ｌの欠失を含むワクシニアウイルス（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ）（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作されたＶＡＣＶΔＣ７Ｌ（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、Ｅ５Ｒの欠失を含むＶＡＣＶ（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）、Ｍ３１Ｒの欠失を含む粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ）、またはこれらの組合せを含む遺伝子操作ポックスウイルスまたは組換えポックスウイルスの使用に関する。
2022501339.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項２】
ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸をさらに含む、請求項１に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項３】
突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む、請求項１または請求項２に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項３に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項５】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項４に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項６】
突然変異体のＣ７遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項７】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項６または請求項７に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項９】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子をさらに含む、請求項２〜８のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項１０】
ＯＸ４０Ｌが、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１１】
ＯＸ４０Ｌが、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される、請求項１０に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１２】
ＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子内から発現される、請求項１１に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１３】
ＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌが、Ｃ７遺伝子内から発現される、請求項３〜１０のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１４】
ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１５】
以下の特徴：
腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；
脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および
組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減
のうちの１つまたは複数を呈する、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１６】
腫瘍細胞が、黒色腫細胞を含む、請求項１５に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項１８】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１９】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項１７または請求項１８に記載の免疫原性組成物。
【請求項２０】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または請求項１７〜１９のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項２１】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
免疫応答の誘導、増強、または促進が、以下：
腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および
脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大
のうちの１つまたは複数を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項２０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項２５または請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項１〜１６のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項１７〜１９のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項３３】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項３２〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
突然変異体のＥ３遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項４０】
突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む、請求項３９に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４１】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項４０に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４２】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項４１に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４３】
ＯＸ４０Ｌが、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される、請求項３９〜４２のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４４】
ＯＸ４０Ｌが、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される、請求項４３に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４５】
ＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子内から発現される、請求項４４に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４６】
ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項３９〜４５のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４７】
以下の特徴：
腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；
脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および
組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減
のうちの１つまたは複数を呈する、請求項３９〜４６のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４８】
腫瘍細胞が、黒色腫細胞を含む、請求項４７に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項４９】
請求項３９〜４８のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項５０】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項４９に記載の免疫原性組成物。
【請求項５１】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項４９または請求項５０に記載の免疫原性組成物。
【請求項５２】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項３９〜４８のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項５３】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
免疫応答の誘導、増強、または促進が、以下：
腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および
脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと比較した増大
のうちの１つまたは複数を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項５２〜５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項５２〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項５２〜５６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５８】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項５２〜５６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５９】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項５７または請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６２】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項５７〜５９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６４】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項３９〜４８のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項６５】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６９】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項７０】
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項６５〜６９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７１】
突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項７２】
ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸をさらに含む、請求項７１に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項７３】
突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む、請求項７１または請求項７２に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項７４】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項７３に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項７５】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項７４に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項７６】
突然変異体のＣ７遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項７１〜７５のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項７７】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項７１〜７５のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項７８】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項７６または請求項７７に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項７９】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子をさらに含む、請求項７２〜７８のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項８０】
ＯＸ４０Ｌが、ワクシニアウイルス遺伝子内から発現される、請求項７１〜７９のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８１】
ＯＸ４０Ｌが、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される、請求項８０に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８２】
ＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子内から発現される、請求項８１に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８３】
ＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌが、Ｃ７遺伝子内から発現される、請求項７３〜８０のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８４】
ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項７１〜８３のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８５】
ｈＩＬ−１２をコードする異種核酸と、抗ｈｕＣＴＬＡ−４をコードする異種核酸とをさらに含む、請求項８３に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２）。
【請求項８６】
以下の特徴：
腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；
脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および
組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減
のうちの１つまたは複数を呈する、請求項７１〜８５のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８７】
腫瘍細胞が、黒色腫細胞を含む、請求項８６に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項８８】
請求項７１〜８７のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項８９】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項８８に記載の免疫原性組成物。
【請求項９０】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項８８または請求項８９に記載の免疫原性組成物。
【請求項９１】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項７１〜８７のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または請求項８８〜９０のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項９２】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
免疫応答の誘導、増強、または促進が、以下：
腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および
脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大
のうちの１つまたは複数を含む、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項９１〜９３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９５】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項９１〜９４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９６】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項９１〜９５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９７】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項９１〜９５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項９６または請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０２】
ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項９６〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０３】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項７１〜８７のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項８８〜９０のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項１０４】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０９】
ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項１０３〜１０８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１０】
配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位の間の核酸配列、またはこの一部が、ＯＸ４０Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられており、ＭＶＡが、Ｃ７突然変異体をさらに含む、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルスの核酸配列。
【請求項１１１】
配列番号１の１８，４０７〜１８，８５９位の間の核酸配列、またはこの一部が、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている、請求項１１０に記載の組換えＭＶＡ。
【請求項１１２】
配列番号１の７５，７９８〜７５，８６８位の間の核酸配列、またはこの一部が、ＯＸ４０Ｌをコードするか、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられており、ＭＶＡが、Ｅ３突然変異体をさらに含む、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルスの核酸配列。
【請求項１１３】
配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位の間の核酸配列、またはこの一部が、ＯＸ４０Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられており、ＶＡＣＶが、Ｃ７突然変異体をさらに含む、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）の核酸配列。
【請求項１１４】
配列番号２の１５，７１６〜１６，１６８位の間の核酸配列、またはこの一部が、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている、請求項１１３に記載の組換えＶＡＣＶ。
【請求項１１５】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列。
【請求項１１６】
請求項３９〜４８のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列。
【請求項１１７】
請求項７１〜８７のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列。
【請求項１１８】
請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または請求項１７〜１９のいずれか１項に記載の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項１１９】
請求項３９〜４８のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項１２０】
請求項７１〜８７のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または請求項８８〜９０のいずれか１項に記載の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項１２１】
突然変異体のＣ７遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１２２】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、請求項３〜１６のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１２３】
突然変異体のＥ３遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、請求項３９〜４８のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１２４】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、請求項４０〜４８のいずれか１項に記載の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１２５】
突然変異体のＣ７遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、請求項７１〜８７のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１２６】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、請求項７３〜８７のいずれか１項に記載の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス。
【請求項１２７】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、対象へと、抗原と、突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を含む、治療有効量のアジュバントとを投与するステップを含む方法。
【請求項１２８】
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸をさらに含む、請求項１２７に記載の方法（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項１２９】
ウイルスが、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む、請求項１２７または請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３０】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１２９に記載の方法。
【請求項１３１】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項１３０に記載の方法。
【請求項１３２】
突然変異体のＣ７遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項１２７〜１３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３３】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１２７〜１３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３４】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項１３２または１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子をさらに含む（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）、請求項１２８〜１３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３６】
ＯＸ４０Ｌが、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される、請求項１２７〜１３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３７】
ＯＸ４０Ｌが、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される、請求項１３６に記載の方法。
【請求項１３８】
ＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子内から発現される、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
ＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌが、Ｃ７遺伝子内から発現される、請求項１２９〜１３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４０】
ウイルスが、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項１２７〜１３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４１】
抗原が、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１２７〜１４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４２】
投与ステップが、抗原およびアジュバントを、１つまたは複数の用量で投与することを含み、かつ／または抗原およびアジュバントが、別個に、逐次的に、または同時に投与される、請求項１２７〜１４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４３】
対象へと、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む、請求項１２７〜１４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４４】
抗原およびアジュバントが、免疫チェックポイント遮断剤の投与と別個に、逐次的に、または同時に、対象へと送達される、請求項１４３に記載の方法。
【請求項１４５】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項１２７〜１４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４６】
免疫応答の誘導、増強、または促進が、以下：
インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）の、脾臓内、流入領域リンパ節内、および／または血清中のＴ細胞内発現レベルの、非処置対照試料と比較した上昇；
抗原特異的Ｔ細胞の脾臓内レベル、流入領域リンパ節内レベル、および／または血清中レベルの、非処置対照試料と比較した上昇；ならびに
抗原特異的免疫グロブリンの血清レベルの、非処置対照試料と比較した上昇
のうちの１つまたは複数を含む、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１４７】
抗原特異的免疫グロブリンが、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２である、請求項１４６に記載の方法。
【請求項１４８】
抗原およびアジュバントが、腫瘍内投与、筋内投与、皮内投与、または皮下投与されるように製剤化される、請求項１２７〜１４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４９】
腫瘍が、黒色腫、結腸直腸がん、乳がん、膀胱がん、前立腺がん、肺がん、膵臓がん、卵巣がん、皮膚の扁平上皮癌、メルケル細胞癌、胃がん、肝がん、および肉腫からなる群から選択される、請求項１２７〜１４８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５０】
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスが、約１０5〜約１０10プラーク形成単位（ｐｆｕ）の、投与１回当たりの投与量で投与される、請求項１２７〜１４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５１】
対象が、ヒトである、請求項１２７〜１５０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５２】
請求項１２７〜１４０のいずれか１項に記載の抗原およびアジュバントを含む免疫原性組成物。
【請求項１５３】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１５２に記載の免疫原性組成物。
【請求項１５４】
抗原が、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１５２または請求項１５３に記載の免疫原性組成物。
【請求項１５５】
抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む、請求項１５２〜１５４のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項１５６】
使用のための指示書、容器手段、ならびに（ａ）抗原；および（ｂ）請求項１２７〜１４０のいずれか１項に記載のアジュバントの各々の個別の部分を含むキット。
【請求項１５７】
抗原が、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１５６に記載のキット。
【請求項１５８】
（ｃ）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む、請求項１５６または請求項１５７に記載のキット。
【請求項１５９】
抗原が、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である、請求項１４１〜１５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６０】
抗原が、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である、請求項１５４または請求項１５５に記載の免疫原性組成物。
【請求項１６１】
抗原が、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である、請求項１５７または請求項１５８に記載のキット。
【請求項１６２】
突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作された改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ５Ｒ）。
【請求項１６３】
ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項１６２に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項１６４】
突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１６３に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項１６５】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項１６４に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項１６６】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む、請求項１６５に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項１６７】
突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子をさらに含む、請求項１６６に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌウイルス（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ΔＣ１１Ｒ）。
【請求項１６８】
突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項１６７に記載のウイルス。
【請求項１６９】
突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１６８に記載のウイルス。
【請求項１７０】
突然変異体のＷＲ１９９遺伝子をさらに含む、請求項１６６〜１６９のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ΔＷＲ１９９）。
【請求項１７１】
突然変異体のＷＲ１９９遺伝子が、異種核酸分子を含む、１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項１７０に記載のウイルス。
【請求項１７２】
突然変異体のＷＲ１９９遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１７０に記載のウイルス。
【請求項１７３】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む、請求項１６４に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項１７４】
異種核酸が、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される、請求項１６３〜１７３のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項１７５】
突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む、請求項１６２〜１７４のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項１７６】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１７５に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項１７７】
突然変異体のＣ７遺伝子をさらに含む、請求項１６２〜１７６のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項１７８】
突然変異体のＣ７遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項１７７に記載のウイルス。
【請求項１７９】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１７８に記載のウイルス。
【請求項１８０】
突然変異体のＥ３Ｌ遺伝子（ΔＥ３Ｌ）をさらに含む、請求項１６２〜１７６のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項１８１】
突然変異体のＥ３Ｌ遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項１８０に記載のウイルス。
【請求項１８２】
突然変異体のＥ３Ｌ遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項１８１に記載のウイルス。
【請求項１８３】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項１８１または請求項１８２に記載のウイルス。
【請求項１８４】
１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む、請求項１８３に記載のウイルス。
【請求項１８５】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシン（ｔｙｐｒｓｉｎｅ）キナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸を含む、請求項１８１または請求項１８２に記載のウイルス。
【請求項１８６】
請求項１６２〜１８５のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項１８７】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１８６に記載の免疫原性組成物。
【請求項１８８】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項１８６または請求項１８７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１８９】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項１６２〜１８５のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または請求項１８６〜１８８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項１９０】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項１８９に記載の方法。
【請求項１９１】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項１８９または請求項１９０に記載の方法。
【請求項１９２】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、前立腺癌、または乳房外ページェット病（ＥＭＰＤ）である、請求項１８９〜１９１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９３】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項１７７〜１９２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９４】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項１７７〜１９２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項１９３または請求項１９４に記載の方法。
【請求項１９６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９９】
ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項１９３〜１９５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２００】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項１６２〜１８５のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項１８６〜１８８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項２０１】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項２００に記載の方法。
【請求項２０２】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項２０１に記載の方法。
【請求項２０３】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０４】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０６】
ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項２０１または請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０７】
請求項１６２〜１８５のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスをコードする核酸。
【請求項２０８】
請求項１６２〜１８５のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項２０９】
突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）。
【請求項２１０】
ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９（ΔＷＲ１９９）のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項２０９に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項２１１】
突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項２１０に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項２１２】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項２１１に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項２１３】
１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む、請求項２１２に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項２１４】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む、請求項２１１に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項２１５】
異種核酸が、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される、請求項２１０〜２１４のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項２１６】
突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む、請求項２０９〜２１５のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項２１７】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項２１６に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項２１８】
突然変異体のＣ７遺伝子をさらに含む、請求項２０９〜２１５のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項２１９】
突然変異体のＣ７遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項２１８に記載のウイルス。
【請求項２２０】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項２１９に記載のウイルス。
【請求項２２１】
請求項２０９〜２２０のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項２２２】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項２２１に記載の免疫原性組成物。
【請求項２２３】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項２２１または請求項２２２に記載の免疫原性組成物。
【請求項２２４】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項２０９〜２２０のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または請求項２２１〜２２３のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項２２５】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項２２４に記載の方法。
【請求項２２６】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項２２４または請求項２２５に記載の方法。
【請求項２２７】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項２２４〜２２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２８】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項２２４〜２２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２９】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項２２４〜２２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３０】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項２２８または請求項２２９に記載の方法。
【請求項２３１】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２３０に記載の方法。
【請求項２３２】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項２３０に記載の方法。
【請求項２３３】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項２３０に記載の方法。
【請求項２３４】
ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項２２８〜２３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３５】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項２０９〜２２０のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項２２１〜２２３のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項２３６】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項２３５に記載の方法。
【請求項２３７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項２３６に記載の方法。
【請求項２３８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２３９】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２４０】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２４１】
ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項２３６または請求項２３７に記載の方法。
【請求項２４２】
請求項２０９〜２２０のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスをコードする核酸。
【請求項２４３】
請求項２０９〜２２０のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項２４４】
突然変異体のＭ３１Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作された粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ）。
【請求項２４５】
ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９の、粘液腫オーソログのうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項２４４に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス。
【請求項２４６】
突然変異体のＭ３１Ｒ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項２４４または請求項２４５に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス。
【請求項２４７】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項２４６に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項２４８】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む、請求項２４７に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項２４９】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む、請求項２４６に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項２５０】
異種核酸が、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるワクシニアウイルス遺伝子の粘液腫オーソログ内から発現される、請求項２４５〜２４９のいずれか１項に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス。
【請求項２５１】
ワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子の、突然変異体の粘液腫オーソログをさらに含む、請求項２４４〜２５０のいずれか１項に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス。
【請求項２５２】
突然変異体のＴＫ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項２５１に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス。
【請求項２５３】
ワクシニアウイルスＣ７遺伝子の、突然変異体の粘液腫オーソログをさらに含む、請求項２４４〜２５２のいずれか１項に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス。
【請求項２５４】
突然変異体のＣ７遺伝子が、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む、請求項２５３に記載のウイルス。
【請求項２５５】
突然変異体のＣ７遺伝子が、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項２５４に記載のウイルス。
【請求項２５６】
請求項２４４〜２５５のいずれか１項に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項２５７】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項２５６に記載の免疫原性組成物。
【請求項２５８】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項２５６または請求項２５７に記載の免疫原性組成物。
【請求項２５９】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項２４４〜２５５のいずれか１項に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または請求項２５６〜２５８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項２６０】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項２５９に記載の方法。
【請求項２６１】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項２５９または請求項２６０に記載の方法。
【請求項２６２】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項２５９〜２６１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６３】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項２５９〜２６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６４】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項２５９〜２６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項２６３または請求項２６４に記載の方法。
【請求項２６６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２６５に記載の方法。
【請求項２６７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項２６５に記載の方法。
【請求項２６８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項２６５に記載の方法。
【請求項２６９】
ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項２６３〜２６５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７０】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項２４４〜２５５のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項２５６〜２５８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項２７１】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項２７０に記載の方法。
【請求項２７２】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項２７１に記載の方法。
【請求項２７３】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７４】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７６】
ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項２７１または請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７７】
請求項２４４〜２５５のいずれか１項に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスをコードする核酸。
【請求項２７８】
請求項２４４〜２５５のいずれか１項に記載のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項２７９】
突然変異体のＢ２Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ）。
【請求項２８０】
ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項２７９に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス。
【請求項２８１】
ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒのうちの１つまたは複数から選択される、請求項２８０に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス。
【請求項２８２】
突然変異体のＢ２Ｒ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項２８１に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス。
【請求項２８３】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む、請求項２８２に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。
【請求項２８４】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む、請求項２８２または請求項２８３に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌウイルス（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項２８５】
１つまたは複数の遺伝子カセットが、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む、請求項２８２に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。
【請求項２８６】
異種核酸が、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される、請求項２８０〜２８５のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス。
【請求項２８７】
請求項２７９〜２８６のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項２８８】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項２８７に記載の免疫原性組成物。
【請求項２８９】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項２８７または請求項２８８に記載の免疫原性組成物。
【請求項２９０】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項２７９〜２８６のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス、または請求項２８７〜２８９のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項２９１】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項２９０に記載の方法。
【請求項２９２】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項２９０または請求項２９１に記載の方法。
【請求項２９３】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項２９０〜２９２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９４】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項２９０〜２９３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９５】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項２９０〜２９３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項２９４または請求項２９５に記載の方法。
【請求項２９７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項２９６に記載の方法。
【請求項２９８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項２９６に記載の方法。
【請求項２９９】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項２９６に記載の方法。
【請求項３００】
ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項２９４〜２９６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０１】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項２７９〜２８６のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項２８７〜２８９のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項３０２】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項３０１に記載の方法。
【請求項３０３】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項３０２に記載の方法。
【請求項３０４】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項３０３に記載の方法。
【請求項３０５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項３０３に記載の方法。
【請求項３０６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項３０３に記載の方法。
【請求項３０７】
ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項３０２または請求項３０３に記載の方法。
【請求項３０８】
請求項２７９〜２８６のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスをコードする核酸。
【請求項３０９】
請求項２７９〜２８６のいずれか１項に記載のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項３１０】
（ｉ）突然変異体のＭ６３Ｒ遺伝子（ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ）；（ｉｉ）突然変異体のＭ６４Ｒ遺伝子（ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ））；および（ｉｉｉ）突然変異体のＭ６２Ｒ遺伝子（ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ）から選択される１つまたは複数の突然変異体を含むように遺伝子操作された粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）。
【請求項３１１】
ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９（ΔＷＲ１９９）の粘液腫オーソログ、または粘液腫Ｍ３１Ｒ（ΔＭ３１Ｒ）のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む、請求項３１０に記載のＭＹＸＶウイルス。
【請求項３１２】
突然変異体のＭ６３Ｒ遺伝子、Ｍ６４Ｒ遺伝子、および／またはＭ６２Ｒ遺伝子が、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、請求項３１０または請求項３１１に記載のＭＹＸＶウイルス。
【請求項３１３】
異種核酸が、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ２Ｒ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるワクシニアウイルス遺伝子の粘液腫オーソログ内から発現される、請求項３１１または請求項３１２に記載のＭＹＸＶウイルス。
【請求項３１４】
請求項３１０〜３１３のいずれか１項に記載のＭＹＸＶウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項３１５】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項３１４に記載の免疫原性組成物。
【請求項３１６】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項３１４または請求項３１５に記載の免疫原性組成物。
【請求項３１７】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項３１０〜３１３のいずれか１項に記載のＭＹＸＶウイルス、または請求項３１４〜３１６のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項３１８】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項３１７に記載の方法。
【請求項３１９】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項３１７または請求項３１８に記載の方法。
【請求項３２０】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項３１７〜３１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２１】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項３１７〜３２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２２】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項３１７〜３２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２３】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項３２１または請求項３２２に記載の方法。
【請求項３２４】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項３２３に記載の方法。
【請求項３２５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項３２３に記載の方法。
【請求項３２６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項３２３に記載の方法。
【請求項３２７】
ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、および／またはＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、および／またはＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項３２１〜３２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２８】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項３１０〜３１３のいずれか１項に記載のウイルス、または請求項３１４〜３１６のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項３２９】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項３２８に記載の方法。
【請求項３３０】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項３２９に記載の方法。
【請求項３３１】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３２】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３３】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３４】
ＭＹＸＶウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、ＭＹＸＶウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項３２９または請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３５】
請求項３１０〜３１３のいずれか１項に記載のＭＹＸＶウイルスをコードする核酸。
【請求項３３６】
請求項３１０〜３１３のいずれか１項に記載のＭＹＸＶウイルスと、使用のための指示書とを含むキット。
【請求項３３７】
ｈＩＬ−１２をコードする異種核酸分子をさらに含む、請求項１８０〜１８５のいずれか１項に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項３３８】
ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２を含む、請求項３３７に記載のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス。
【請求項３３９】
突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子をさらに含む、請求項３３８に記載のＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ウイルス（ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ）。
【請求項３４０】
ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαをコードする核酸分子をさらに含む、請求項３３９に記載のＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ウイルス。
【請求項３４１】
突然変異体のΔＥ３Ｌ８３Ｎ、突然変異体のチミジンキナーゼ（ΔＴＫ）、突然変異体のＢ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、突然変異体のＷＲ１９９（ΔＷＲ１９９）、および突然変異体のＷＲ２００（ΔＳＲ２００）をさらに含み、抗ＣＴＬＡ−４をコードする核酸分子、およびＩＬ−１２をコードする核酸分子を含む、請求項２１３に記載のＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌウイルス（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００）。
【請求項３４２】
ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαをコードする核酸分子をさらに含む、請求項３４１に記載のＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ウイルス（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα）。
【請求項３４３】
突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子（ΔＣ１１Ｒ）をさらに含む、請求項３４１に記載のＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ウイルス（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ）。
【請求項３４４】
ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαをコードする核酸分子をさらに含む、請求項３４３に記載のＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒウイルス（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ）。
【請求項３４５】
突然変異体のＭ６２Ｒ遺伝子（ΔＭ６２Ｒ）、突然変異体のＭ６３Ｒ遺伝子（ΔＭ６３Ｒ）、および突然変異体のＭ６４Ｒ遺伝子（ΔＭ６４Ｒ）を含むように遺伝子操作された、請求項３１０または請求項３１１に記載のＭＹＸＶウイルス（ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ）。
【請求項３４６】
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、およびＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１��／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４
からなる群から選択される組換えポックスウイルス。
【請求項３４７】
請求項３４６に記載の組換えポックスウイルスをコードする核酸配列。
【請求項３４８】
請求項３４６に記載の組換えポックスウイルスを含むキット。
【請求項３４９】
請求項３４６に記載の組換えポックスウイルスを含む免疫原性組成物。
【請求項３５０】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項３４９に記載の免疫原性組成物。
【請求項３５１】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項３４９または請求項３５０に記載の免疫原性組成物。
【請求項３５２】
それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、請求項３４９に記載の組換えポックスウイルス、または請求項３４９〜３５１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法。
【請求項３５３】
処置が、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む、請求項３５２に記載の方法。
【請求項３５４】
組成物が、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される、請求項３５２または請求項３５３に記載の方法。
【請求項３５５】
腫瘍が、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である、請求項３５２〜３５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５６】
組成物が、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む、請求項３５２〜３５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５７】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項３５２〜３５６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項３５６または請求項３５７に記載の方法。
【請求項３５９】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項３５８に記載の方法。
【請求項３６０】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項３５８に記載の方法。
【請求項３６１】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項３５８に記載の方法。
【請求項３６２】
組換えポックスウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、腫瘍の処置において、組換えポックスウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項３５６〜３５８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６３】
免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、請求項３４６に記載のウイルス、または請求項３４９〜３５１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項３６４】
対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む、請求項３６３に記載の方法。
【請求項３６５】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または
１つまたは複数の抗がん薬が、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル，ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される、
請求項３６４に記載の方法。
【請求項３６６】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む、請求項３６５に記載の方法。
【請求項３６７】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＰＤ−１抗体を含む、請求項３６５に記載の方法。
【請求項３６８】
１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤が、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む、請求項３６５に記載の方法。
【請求項３６９】
組換えポックスウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せが、免疫応答の刺激において、組換えポックスウイルスまたは免疫チェックポイントの投与と比較した相乗効果を及ぼす、請求項３６３〜３６５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７０】
ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４から選択される場合に、抗ＣＴＬＡ−４の発現の代わりに、またはこれに加えて、抗ＰＤ１抗体、抗ＰＤＬ１抗体、または抗ＣＴＬＡ−４と抗ＰＤ１抗体との組合せを発現させるように操作されていてもよい、
請求項３４６に記載の組換えポックスウイルス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、それらの開示が、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる、２０１８年９月１５日に出願された、米国特許仮出願第６２／７３１，８７６号、２０１８年１１月１４日に出願された、米国特許仮出願第６２／７６７，４８５号、および２０１９年４月３日に出願された、米国特許仮出願第６２／８２８，９７５号に対する優先権を主張する。
【０００２】
連邦政府による後援を受けた研究に関する言明
本発明は、米国国立保健研究所により与えられる、ＡＩ０７３７３６、ＡＩ０９５６９２、ＡＲ０６８１１８、およびＣＡ００８７４８号の下にある政府助成によりなされた。米国連邦政府は、本発明において、一定の権利を有する。
【０００３】
技術分野
本開示の技術は、一般に、腫瘍学、ウイルス学、および免疫療法の分野に関する。特に、本技術は、ＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された、Ｅ３Ｌの欠失を含む（ＭＶＡΔＥ３Ｌ）、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；ＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された、Ｃ７Ｌの欠失を含む（ＭＶＡΔＣ７Ｌ）、組換えＭＶＡウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌを発現させるように操作された組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｃ７Ｌの欠失、Ｅ５Ｒの欠失を含み、ｈＦｌｔ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｅ５Ｒの欠失（ＭＶＡΔＥ５Ｒ）を含むように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｅ５Ｒの欠失を含み、ｈＦｌｔ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｅ３Ｌの欠失、Ｅ５Ｒの欠失を含み、ｈＦｔｌ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｅ５Ｒの欠失、Ｃ１１Ｒの欠失を含み、ｈＦｌｔ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ）；Ｅ３Ｌの欠失、Ｅ５Ｒの欠失、Ｃ１１Ｒの欠失を含み、ｈＦｌｔ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ）；ＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された、Ｃ７Ｌの欠失を含む（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ）、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように遺伝子操作された組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｅ５Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）；Ｅ５Ｒの欠失、チミジンキナーゼ（ＴＫ）の欠失を含み、抗ＣＴＬＡ−４、ｈＦｌｔ３Ｌ、およびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＶＡＣＶ（ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｂ２Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎの欠失およびＢ２Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ）；Ｅ５Ｒの欠失およびＢ２Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎの欠失、Ｅ５Ｒの欠失、およびＢ２Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎの欠失、チミジンキナーゼ（ＴＫ）の欠失、およびＥ５Ｒの欠失を含み、抗ＣＴＬＡ−４、ｈＦｌｔ３Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、およびＩＬ−１２を発現させるように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎの欠失、チミジンキナーゼ（ＴＫ）��欠失、Ｅ５Ｒの欠失、およびＢ２Ｒの欠失を含み、抗ＣＴＬＡ−４、ｈＦｌｔ３Ｌ、ＯＸ４０Ｌ、およびＩＬ−１２を発現させるように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ）；Ｍ３１Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＭＹＸＶ（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ）；Ｍ３１Ｒの欠失を含み、ｈＦｌ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＹＸＶ（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｍ６３Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＭＹＸＶ（ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ）；Ｍ６４Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＭＹＸＶ（ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ）；ＷＲ１９９の欠失を含むように遺伝子操作されたＭＶＡ（ＭＶＡΔＷＲ１９９）；Ｅ５Ｒの欠失、ＷＲ１９９の欠失を含み、ｈＦｌｔ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作されたＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）；もしくはこれらの組合せを含む、ポックスウイルスの、単独における、または免疫チェックポイント遮断剤、免疫モジュレーター、および／もしくは抗がん薬と組み合わせた免疫療法用組成物、および／または腫瘍溶解性組成物としての使用に関する。一部の実施形態では、本開示の技術は、以下：ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌを含むがこれらに限定されない免疫調節タンパク質のうちのいずれか１つもしくは複数をコードする遺伝子など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるようにさらに改変された、前出のウイルスのうちのいずれか１つに関する。一部の実施形態では、ウイルス骨格は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、および／またはＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、遺伝子の欠失または突然変異を含むように、さらに改変される。一部の実施形態では、本開示の技術は、前出のウイルスのうちのいずれか１つの、ワクチンアジュバントとしての使用に関する。特に、本技術は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、および熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒの、がんワクチン中の、腫瘍抗原のためのワクチンアジュバントとしての、単独における、またはがん免疫療法剤としての使用のための、免疫チェックポイント遮断（ＩＣＢ）抗体と組み合わせた使用に関する。一部の実施形態では、本開示の技術は、前出のウイルスのうちのいずれか１つの、ワクチンベクターとしての使用に関する。特に、本技術は、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの、がんワクチンのための、ワクチンベクターとしての使用に関する。一部の実施形態では、本技術は、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α，ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＣＴＬＡ−４、およびＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＣＴＬＡ−４、もしくはこれらの組���せから選択される組換えポックスウイルスであって、単独における、または免疫チェックポイント遮断剤、免疫モジュレーター、および／もしくは抗がん薬と組み合わせた免疫療法用組成物および／もしくは腫瘍溶解性組成物としての組換えポックスウイルスに関する。
【背景技術】
【０００４】
以下の記載は、読者の理解の一助となるために提示される。提示される情報または引用される参考文献のうちのいずれも、先行技術であると認めるものではない。
黒色腫などの悪性腫瘍は、従来型の治療に対して、遺伝的に耐性であり、治療上の難題を提示する。免疫療法は、調査研究の発展領域であり、ある特定の種類のがんの処置のための、さらなる選択肢である。免疫療法は、免疫系が、腫瘍細胞を同定し、破壊のために、それらをターゲティングするように刺激されうるという根拠に依拠する。がん細胞による抗原の提示、および腫瘍細胞に対して潜在的に反応しうる免疫細胞の存在にもかかわらず、多くの症例では、免疫系は、活性化されないか、または積極的に抑制される。この現象に対する鍵は、免疫系の細胞に、免疫系の他の細胞を阻害するように強要することにより、自身を、免疫応答からを保護する、腫瘍の能力である。腫瘍は、抗腫瘍免疫応答を回避するように、多数の免疫調節機構を発生させる。したがって、宿主抗腫瘍免疫を増強し、腫瘍細胞を、破壊のためにターゲティングする、免疫療法の改善が必要とされている。
【発明の概要】
【０００５】
一態様では、本開示は、突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を提示する。一部の実施形態では、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸をさらに含む（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子を含む組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ウイルスは、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）をさらに含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌは、Ｃ７遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ��Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、組換えＭＶＡウイルスは、以下の特徴：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減のうちの１つまたは複数を呈する。一部の実施形態では、腫瘍細胞は、黒色腫細胞を含む。
【０００６】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、本技術の免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントを含む。
【０００７】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大のうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【０００８】
別の態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、本技術のウイルス（例えば、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、または本技術の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。
【０００９】
別の態様では、本開示は、突然変異体のＥ３遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を提示する。一部の実施形態では、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失を含む。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、組換えＭＶＡウイルスは、以下の特徴：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減のうちの１つまたは複数を呈する。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、腫瘍細胞は、黒色腫細胞を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ３遺伝子は、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非���能的タンパク質として発現されている。
【００１０】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、本技術の免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体を含む。一部の実施形態では、本技術の免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントを含む。
【００１１】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと比較した増大のうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌまたは免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００１２】
別の態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、本技術のウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、または本技術の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を、対象へと投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌまたは免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００１３】
別の態様では、本開示は、突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸を含む（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ウイルスは、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）をさらに含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ワクシニアウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌは、Ｃ７遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、ウイルスは、��ＩＬ−１２をコードする異種核酸と、抗ｈｕＣＴＬＡ−４をコードする異種核酸とをさらに含む（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２）。一部の実施形態では、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、以下の特徴：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減のうちの１つまたは複数を呈する。一部の実施形態では、腫瘍細胞は、黒色腫細胞を含む。
【００１４】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体を含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントを含む。
【００１５】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大のうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬもしくはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００１６】
別の態様では、本開示は、免疫応答を刺激するための方法であって、対象へと、有効量の、本技術のウイルス（例えば、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、または本技術の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。
【００１７】
別の態様では、本開示は、配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位の間の核酸配列が、ＯＸ４０Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられ、ＭＶＡが、Ｃ７突然変異体をさらに含む、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルスの核酸配列を提示する。本技術のＭＶＡウイルスについての、一部の実施形態では、配列番号１の１８，４０７〜１８，８５９位の間の核酸配列は、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列置きかえられている。
【００１８】
別の態様では、本開示は、配列番号１の７５，７９８〜７５，８６８位の間の核酸配列が、ＯＸ４０Ｌをコードするか、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられ、ＭＶＡが、Ｅ３突然変異体をさらに含む、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルスの核酸配列を提示する。
別の態様では、本開示は、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位の間の核酸配列が、ＯＸ４０Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられ、ＶＡＣＶが、Ｃ７突然変異体をさらに含む、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）の核酸配列を提示する。本技術の組換えＶＡＣＶについての、一部の実施形態では、配列番号２の１５，７１６〜１６，１６８位の間の核酸配列は、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列置きかえられている。
【００１９】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列を提示する。
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列を提示する。
別の態様では、本開示は、本技術のいずれか１つによる、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列を提示する。
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００２０】
別の態様では、本開示は、本技術のいずれか１つによる、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００２１】
一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＣ７遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＥ３遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本技術は、突然変異体のＣ７遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提供する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。
【００２２】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、対象へと、抗原と、突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を含む、治療有効量のアジュバントとを投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸をさらに含む（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ウイルスは、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）をさらに含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌは、Ｃ７遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。
【００２３】
一部の実施形態では、抗原は、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。
【００２４】
一部の実施形態では、投与ステップは、抗原およびアジュバントを、１つまたは複数の用量で投与することを含み、かつ／または抗原およびアジュバントは、別個に、逐次的に、または同時に投与される。
一部の実施形態では、方法は、対象へと、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。
【００２５】
一部の実施形態では、抗原およびアジュバントは、免疫チェックポイント遮断剤の投与と別個に、逐次的に、または同時に、対象へと送達される。
一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：（ｉ）インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）の、脾臓内、流入領域リンパ節内、および／または血清中のＴ細胞内発現レベルの、非処置対照試料と比較した上昇；（ｉｉ）抗原特異的Ｔ細胞の脾臓内レベル、流入領域リンパ節内レベル、および／または血清中レベルの、非処置対照試料と比較した上昇；ならびに（ｉｉｉ）抗原特異的免疫グロブリンの血清レベルの、非処置対照試料と比較した上昇のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、抗原特異的免疫グロブリンは、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２である。
【００２６】
一部の実施形態では、抗原およびアジュバントは、腫瘍内投与、筋内投与、皮内投与、または皮下投与されるように製剤化される。
一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸直腸がん、乳がん、膀胱がん、前立腺がん、肺がん、膵臓がん、卵巣がん、皮膚の扁平上皮癌、メルケル細胞癌、胃がん、肝がん、および肉腫からなる群から選択される。
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、約１０5〜約１０10プラーク形成単位（ｐｆｕ）の、投与１回当たりの投与量で投与される。
方法についての一部の実施形態では、対象は、ヒトである。
【００２７】
一態様では、本開示は、抗原および本技術のアジュバントを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、抗原は、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。
【００２８】
一態様では、本開示は、使用のための指示書、容器手段、ならびに（ａ）抗原；および（ｂ）本技術のアジュバントの各々の個別の部分を含むキットを提示する。キットについての一部の実施形態では、抗原は、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。
【００２９】
一部の実施形態では、キットは、（ｃ）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。
【００３０】
本技術の方法についての、一部の実施形態では、抗原は、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である。
本技術の免疫原性組成物についての、一部の実施形態では、抗原は、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である。
【００３１】
本技術のキットについての、一部の実施形態では、抗原は、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である。
一態様では、本開示は、突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作された改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ５Ｒ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のＣ７遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。
【００３２】
一態様では、本開示は、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【００３３】
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。
【００３４】
一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００３５】
一態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００３６】
一態様では、本開示は、本明細書で記載される、操作ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスをコードする核酸を提示する。
一態様では、本開示は、本明細書で記載される、操作ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００３７】
一態様では、本開示は、突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のＣ７遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。
【００３８】
一態様では、本開示は、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【００３９】
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。
【００４０】
一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００４１】
一態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００４２】
一態様では、本開示は、本技術の操作ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスをコードする核酸を提示する。
一態様では、本開示は、本技術の操作ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００４３】
一態様では、本開示は、突然変異体のＭ３１Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作された粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９の、粘液腫オーソログのうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＭ３１Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるワクシニアウイルス遺伝子の粘液腫オーソログ内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子の、突然変異体の粘液腫オーソログをさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ウイルスは、ワクシニアウイルスＣ７遺伝子の、突然変異体の粘液腫オーソログをさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。
【００４４】
一態様では、本開示は、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【００４５】
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。
【００４６】
一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００４７】
一態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００４８】
一態様では、本開示は、本技術の操作ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスをコードする核酸を提示する。
一態様では、本開示は、本技術の操作ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００４９】
一態様では、本開示は、突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を提示する。一部の実施形態では、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸をさらに含む（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子を含む組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ウイルスは、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）をさらに含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌは、Ｃ７遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ��Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、組換えＭＶＡウイルスは、以下の特徴：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減のうちの１つまたは複数を呈する。一部の実施形態では、腫瘍細胞は、黒色腫細胞を含む。
【００５０】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、本技術の免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントを含む。
【００５１】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大のうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置する方法についての、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００５２】
別の態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、本技術のウイルス（例えば、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、または本技術の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。
【００５３】
別の態様では、本開示は、突然変異体のＥ３遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を提示する。一部の実施形態では、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失を含む。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、組換えＭＶＡウイルスは、以下の特徴：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減のうちの１つまたは複数を呈する。本技術のウイルスについての、一部の実施形態では、腫瘍細胞は、黒色腫細胞を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ３遺伝子は、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非���能的タンパク質として発現されている。
【００５４】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、本技術の免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体を含む。一部の実施形態では、本技術の免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントを含む。
【００５５】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大のうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌまたは免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００５６】
別の態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、本技術のウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、または本技術の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を、対象へと投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌまたは免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００５７】
別の態様では、本開示は、突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子とを含む組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸を含む（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ウイルスは、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）をさらに含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ワクシニアウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌは、Ｃ７遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、ウイルスは、��ＩＬ−１２をコードする異種核酸と、抗ｈｕＣＴＬＡ−４をコードする異種核酸とをさらに含む（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２）。一部の実施形態では、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、以下の特徴：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇の誘導；脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大の誘導；および組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞における腫瘍体積の、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスと接触させられた腫瘍細胞と比較した低減のうちの１つまたは複数を呈する。一部の実施形態では、腫瘍細胞は、黒色腫細胞を含む。
【００５８】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体を含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントを含む。
【００５９】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：腫瘍細胞中のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスを感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスと比較した増大のうちの１つまたは複数を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法についての、一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌと、免疫チェックポイント遮断剤との組合せは、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬもしくはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、または免疫チェックポイント遮断剤単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００６０】
別の態様では、本開示は、免疫応答を刺激するための方法であって、対象へと、有効量の、本技術のウイルス（例えば、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０ＬまたはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）、または本技術の免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。
【００６１】
別の態様では、本開示は、配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位の間の核酸配列が、ＯＸ４０Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられ、ＭＶＡが、Ｃ７突然変異体をさらに含む、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルスの核酸配列を提示する。本技術のＭＶＡについての、一部の実施形態では、配列番号１の１８，４０７〜１８，８５９位の間の核酸配列は、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列置きかえられている。
別の態様では、本開示は、配列番号１の７５，７９８〜７５，８６８位の間の核酸配列が、ＯＸ４０Ｌをコードするか、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられ、ＭＶＡが、Ｅ３突然変異体をさらに含む、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルスの核酸配列を提示する。
【００６２】
別の態様では、本開示は、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位の間の核酸配列が、ＯＸ４０Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられ、ＶＡＣＶが、Ｃ７突然変異体をさらに含む、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）の核酸配列を提示する。本技術の組換えＶＡＣＶについての、一部の実施形態では、配列番号２の１５，７１６〜１６，１６８位の間の核酸配列は、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列置きかえられている。
【００６３】
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列を提示する。
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列を提示する。
別の態様では、本開示は、本技術のいずれか１つによる、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスをコードする核酸配列を提示する。
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
別の態様では、本開示は、本技術のいずれか１つによる、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
別の態様では、本開示は、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルス、または本技術の免疫原性組成物と、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００６４】
一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＣ７遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＥ３遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。一部の実施形態では、本技術は、突然変異体のＣ７遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提供する。一部の実施形態では、本開示は、突然変異体のＴＫ遺伝子が、少なくとも部分的に欠失されているか、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提示する。
【００６５】
別の態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、対象へと、抗原と、突然変異体のＣ７遺伝子と、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸とを含む組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を含む、治療有効量のアジュバントとを投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸をさらに含む（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含み、ウイルスは、ＴＫ遺伝子の少なくとも一部の、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む、突然変異体のＴＫ遺伝子（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ）をさらに含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＭＶＡウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌは、ＴＫ遺伝子内から発現され、ｈＦｌｔ３Ｌは、Ｃ７遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはＥ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。
【００６６】
一部の実施形態では、抗原は、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。
【００６７】
一部の実施形態では、投与ステップは、抗原およびアジュバントを、１つまたは複数の用量で投与することを含み、かつ／または抗原およびアジュバントは、別個に、逐次的に、または同時に投与される。
一部の実施形態では、方法は、対象へと、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。
【００６８】
一部の実施形態では、抗原およびアジュバントは、免疫チェックポイント遮断剤の投与と別個に、逐次的に、または同時に、対象へと送達される。
一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：（ｉ）インターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）の、脾臓内、流入領域リンパ節内、および／または血清中のＴ細胞内発現レベルの、非処置対照試料と比較した上昇；（ｉｉ）抗原特異的Ｔ細胞の脾臓内レベル、流入領域リンパ節内レベル、および／または血清中レベルの、非処置対照試料と比較した上昇；ならびに（ｉｉｉ）抗原特異的免疫グロブリンの血清レベルの、非処置対照試料と比較した上昇のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、抗原特異的免疫グロブリンは、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２である。
【００６９】
一部の実施形態では、抗原およびアジュバントは、腫瘍内投与、筋内投与、皮内投与、または皮下投与されるように製剤化される。
一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸直腸がん、乳がん、膀胱がん、前立腺がん、肺がん、膵臓がん、卵巣がん、皮膚の扁平上皮癌、メルケル細胞癌、胃がん、肝がん、および肉腫からなる群から選択される。
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、約１０5〜約１０10プラーク形成単位（ｐｆｕ）の、投与１回当たり投与量で投与される。
方法についての一部の実施形態では、対象は、ヒトである。
【００７０】
一態様では、本開示は、抗原および本技術のアジュバントを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、抗原は、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。
【００７１】
一態様では、本開示は、使用のための指示書、容器手段、ならびに（ａ）抗原；および（ｂ）本技術のアジュバントの各々の個別の部分を含むキットを提示する。キットについての一部の実施形態では、抗原は、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。
【００７２】
一部の実施形態では、キットは、（ｃ）抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。
【００７３】
本技術の方法についての、一部の実施形態では、抗原は、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である。
本技術の免疫原性組成物についての、一部の実施形態では、抗原は、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である。
【００７４】
本技術のキットについての、一部の実施形態では、抗原は、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原である。
【００７５】
一態様では、本開示は、突然変異体のＥ５Ｒを含むように遺伝子操作された改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ５Ｒ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のＣ７遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌウイルスは、突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ΔＣ１１Ｒ）をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では���突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌウイルスは、突然変異体のＷＲ１９９遺伝子（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ΔＷＲ１９９）をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＷＲ１９９遺伝子は、異種核酸分子を含む、１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＷＲ１９９遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、突然変異体のＥ３Ｌ遺伝子（ΔＥ３Ｌ）をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ３Ｌ遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ３Ｌ遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシン（ｔｙｐｒｓｉｎｅ）キナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸を含む。
【００７６】
一態様では、本開示は、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【００７７】
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。
【００７８】
一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００７９】
一態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００８０】
一態様では、本開示は、本明細書で記載される、操作ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスをコードする核酸を提示する。
一態様では、本開示は、本明細書で記載される、操作ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００８１】
一態様では、本開示は、突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のＣ７遺伝子をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。
【００８２】
一態様では、本開示は、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【００８３】
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。
【００８４】
一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００８５】
一態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００８６】
一態様では、本開示は、本技術の操作ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスをコードする核酸を提示する。
一態様では、本開示は、本技術の操作ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【００８７】
一態様では、本開示は、突然変異体のＭ３１Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作された粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９の、粘液腫オーソログのうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＭ３１Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ遺伝子（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるワクシニアウイルス遺伝子の粘液腫オーソログ内から発現される。一部の実施形態では、ウイルスは、ワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子の、突然変異体の粘液腫オーソログをさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＴＫ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、ウイルスは、ワクシニアウイルスＣ７遺伝子の、突然変異体の粘液腫オーソログをさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットの挿入を含む。一部の実施形態では、突然変異体のＣ７遺伝子は、遺伝子の全部または少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。
【００８８】
一態様では、本開示は、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【００８９】
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。
【００９０】
一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００９１】
一態様では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００９２】
一態様では、本開示は、本技術の操作ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスをコードする核酸を提示する。
一態様では、本開示は、本技術の操作ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
一態様では、本開示は、突然変異体のＢ２Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ）を提示する。
【００９３】
一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、またはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒのうちの１つまたは複数から選択される。一部の実施形態では、突然変異体のＢ２Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ＯＸ４０Ｌをコードする異種核酸分子を含む（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子をさらに含む（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、１つまたは複数の遺伝子カセットは、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）をコードする異種核酸分子を含む（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ）。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるウイルス遺伝子内から発現される。
【００９４】
一部の実施形態では、本開示は、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
一部の実施形態では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。
【００９５】
一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。
【００９６】
一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。
一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。
【００９７】
一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００９８】
一部の実施形態では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【００９９】
一部の実施形態では、本開示は、本技術のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスをコードする核酸を提示する。
一部の実施形態では、本開示は、本技術のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスと、使用のための指示書とを含むキットを提示する。
【０１００】
一態様では、本開示は、（ｉ）突然変異体のＭ６３Ｒ遺伝子（ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ）；（ｉｉ）突然変異体のＭ６４Ｒ遺伝子（ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ））；および（ｉｉｉ）突然変異体のＭ６２Ｒ遺伝子（ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ）から選択される１つまたは複数の突然変異体を含むように遺伝子操作された粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）を提示する。一部の実施形態では、ウイルスは、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちの１つもしくは複数をコードする異種核酸分子、および／またはワクシニアウイルスチミジンキナーゼ（ＴＫ）、Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）、Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）、ＩＬ１８ＢＰ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、もしくはＷＲ１９９（ΔＷＲ１９９）の粘液腫オーソログ、または粘液腫Ｍ３１Ｒ（ΔＭ３１Ｒ）のうちのいずれか１つもしくは複数の欠失をさらに含む。一部の実施形態では、突然変異体のＭ６３Ｒ遺伝子、Ｍ６４Ｒ遺伝子、および／またはＭ６２Ｒ遺伝子は、遺伝子の少なくとも一部の、異種核酸分子を含む１つまたは複数の遺伝子カセットによる置きかえを含む。一部の実施形態では、異種核酸は、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、Ｃ７遺伝子、Ｃ１１遺伝子、Ｋ３遺伝子、Ｆ１遺伝子、Ｆ２遺伝子、Ｆ４遺伝子、Ｆ６遺伝子、Ｆ８遺伝子、Ｆ９遺伝子、Ｆ１１遺伝子、Ｆ１４．５遺伝子、Ｊ２遺伝子、Ａ４６遺伝子、Ｅ３Ｌ遺伝子、Ｂ２Ｒ遺伝子、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）遺伝子、Ｅ５Ｒ遺伝子、Ｋ７Ｒ遺伝子、Ｃ１２Ｌ遺伝子、Ｂ８Ｒ遺伝子、Ｂ１４Ｒ遺伝子、Ｎ１Ｌ遺伝子、Ｋ１Ｌ遺伝子、Ｃ１６遺伝子、Ｍ１Ｌ遺伝子、Ｎ２Ｌ遺伝子、およびＷＲ１９９遺伝子からなる群から選択されるワクシニアウイルス遺伝子の粘液腫オーソログ内から発現される。
【０１０１】
一部の実施形態では、本開示は、本技術のＭＹＸＶウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【０１０２】
一部の実施形態では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、本技術のＭＹＸＶウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。
【０１０３】
一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、および／またはＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、および／もしくはＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【０１０４】
一部の実施形態では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルスまたは免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、ＭＹＸＶウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、ＭＹＸＶウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【０１０５】
一部の実施形態では、本開示は、ＭＹＸＶウイルスをコードする核酸を提示する。
一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−１２をコードする異種核酸分子をさらに含む。一部の実施形態では、ウイルスは、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２を含む。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子をさらに含む（ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ）。一部の実施形態では、ウイルスは、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαをコードする核酸分子をさらに含む。一部の実施形態では、ウイルスは、突然変異体のΔＥ３Ｌ８３Ｎ、突然変異体のチミジンキナーゼ（ΔＴＫ）、突然変異体のＢ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、突然変異体のＷＲ１９９（ΔＷＲ１９９）、および突然変異体のＷＲ２００（ΔＳＲ２００）をさらに含み、抗ＣＴＬＡ−４をコードする核酸分子、ＩＬ−１２をコードする核酸分子を含む（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００）。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ウイルスは、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαをコードする核酸分子をさらに含む（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα）。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ウイルスは、突然変異体のＣ１１Ｒ遺伝子（ΔＣ１１Ｒ）をさらに含む（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ）。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒウイルスは、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαをコードする核酸分子をさらに含む（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ）。
【０１０６】
一部の実施形態では、本技術のＭＹＸＶウイルスは、突然変異体のＭ６２Ｒ遺伝子（ΔＭ６２Ｒ）、突然変異体のＭ６３Ｒ遺伝子（ΔＭ６３Ｒ）、および突然変異体のＭ６４Ｒ遺伝子（ΔＭ６４Ｒ）を含むように遺伝子操作される（ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ）。
【０１０７】
一態様では、本開示は、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α，ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＣＴＬＡ−４、およびＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＣＴＬＡ−４からなる群から選択される組換えポックスウイルスを提示��る。
【０１０８】
一部の実施形態では、本開示は、組換えポックスウイルスをコードする核酸配列を提示する。
一部の実施形態では、本開示は、組換えポックスウイルスを含むキットを提示する。
一部の実施形態では、本開示は、組換えポックスウイルスを含む免疫原性組成物を提示する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む。
【０１０９】
一部の実施形態では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、腫瘍へと、有効量の、組換えポックスウイルス、または免疫原性組成物を含む組成物を送達するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。
一部の実施形態では、組成物は、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との同時的組合せもしくは逐次的組合せにより投与される。
一部の実施形態では、腫瘍は、黒色腫、結腸癌、乳癌、膀胱癌、または前立腺癌である。
【０１１０】
一部の実施形態では、組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤をさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、組換えポックスウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、腫瘍の処置において、組換えポックスウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【０１１１】
一部の実施形態では、本開示は、免疫応答を刺激する方法であって、対象へと、有効量の、ウイルス、または免疫原性組成物を投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、方法は、対象へと、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤；１つまたは複数の抗がん薬；フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）；およびこれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の薬剤を、別個に、逐次的に、または同時に投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択され；かつ／または１つまたは複数の抗がん薬は、Ｍｅｋ阻害剤（Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（ベバシズマブ）、ならびにこれらの任意の組合せからなる群から選択される。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＰＤ−１抗体を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、抗ＣＴＬＡ−４抗体を含む。一部の実施形態では、組換えポックスウイルスの、免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、および／またはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）との組合せは、免疫応答の刺激において、組換えポックスウイルス、または免疫チェックポイント遮断剤、抗がん薬、もしくはフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）単独の投与と比較した相乗効果を及ぼす。
【図面の簡単な説明】
【０１１２】
【図１】チミジンキナーゼ遺伝子（ＴＫ；Ｊ２Ｒ）の遺伝子座における、ｐＣＢベクターのプラスミドＤＮＡと、ＭＶＡΔＥ３ＬウイルスのゲノムＤＮＡとの相同組換えの概略を示す図である。ｐＣＢ−ｇｐｔプラスミドを使用して、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下にある、マウスＯＸ４０Ｌ遺伝子を、ＴＫ遺伝子座へと挿入した。この場合、薬物選択マーカー（ｇｐｔ）は、ワクシニアｐ７．５プロモーターの制御下にある。発現カセットを、各側において、ＴＫ遺伝子の部分配列である、フランキング領域（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）で挟んだ。
【図２Ａ−２Ｂ】ＯＸ４０Ｌの、組換えウイルスである、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌからの発現についての検証を示す図である。図２Ａは、ｍＯＸ４０Ｌ遺伝子およびＴＫ遺伝子の、ＭＶＡΔＥ３ＬおよびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌウイルスゲノム内のＰＣＲ増幅についての画像である。図２Ｂ：ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを感染させたＢ１６−Ｆ１０細胞内の、ｍＯＸ４０Ｌの発現を示す、代表的ＦＡＣＳプロットである。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫細胞に、１０のＭＯＩで、２４時間にわたり感染させた。次いで、細胞を、ＰＥコンジュゲート抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体で染色した。
【図３Ａ−３Ｈ】ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、Ｂ１６−Ｆ１０両側腫瘍モデルにおいて、遠隔腫瘍内の、腫瘍浸潤エフェクターＴ細胞の活性化の、ＭＶＡΔＥ３Ｌと比較した増大をもたらしたことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫両側腫瘍植込みモデルを使用した。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、２×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳを、右脇腹の大型腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり、腫瘍内（ＩＴ）注射した。腫瘍を、２回目の注射の２日後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球を、ＦＡＣＳにより解析した。図３Ａ〜３Ｃ：ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳによる処置の後における、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットである。図３Ｄ：ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフである。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝３または４）である（**Ｐ＜０．０１；ｔ検定）。図３Ｅ〜３Ｇ：ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳによる処置の後における、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットである。図３Ｈ：ＣＤ４+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフである。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝３または４）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。
【図４Ａ−４Ｂ】ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０ＬのＩＴ注射が、脾臓内の、抗腫瘍ＣＤ８＋  Ｔ細胞の、ＭＶＡと比較した増大をもたらしたことを示す、代表的ＥＬＩＳＰＯＴブロットおよびグラフである。Ｂ１６−Ｆ１０保有マウスを、３日間を隔てて、２回にわたる、２×１０7ｐｆｕのＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、またはＰＢＳのＩＴ注射で処置した。脾臓は、２回目の注射の２日後に回収した。ＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞（１５０，０００個）と、精製ＣＤ８+Ｔ細胞（３００，０００個）とを、９６ウェルプレート内で共培養することにより実施した。図４Ａ：左から右へと、三連試料についてのＥＬＩＳＰＯＴの画像である。図４Ｂ：精製ＣＤ８+Ｔ細胞３００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポット数についてのグラフである。各バーは、個々のマウス（ｎ＝３または４）に由来する脾臓試料を表す。
【図５Ａ−５Ｃ】図５Ａおよび５Ｂは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌを作出するための、２ステップの相同組換えの概略を示す図である。図５Ａ：第１のステップ：ｈＦｌｔ３ＬおよびＧＦＰの発現カセットを、Ｃ７遺伝子座へと挿入する（Ｃ７遺伝子を置きかえる）ための、Ｃ７遺伝子座を挟む、Ｃ６遺伝子およびＣ８遺伝子における、ｐＵＣ５７ベクターのプラスミドＤＮＡと、ＭＶＡウイルスのゲノムＤＮＡとの相同組換えである。ヒトＦｌｔ３Ｌ遺伝子は、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下にある。ＧＦＰは、ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある。図５Ｂ：第２のステップ：ｍｕＯＸ４０Ｌおよび薬物選択マーカーの発現カセットを、ＴＫ（Ｊ２Ｒ）遺伝子座へと挿入するための、ＴＫ（Ｊ２Ｒ）遺伝子座における、ｐＣＢベクターのプラスミドＤＮＡと、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３ＬウイルスのゲノムＤＮＡとの相同組換えである。マウスＯＸ４０Ｌ遺伝子は、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下にある。薬物選択マーカーであるｇｐｔは、ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある。図５Ｃは、ウイルスゲノムのＤＮＡを、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの発現を検証するＰＣＲにより解析したことを示し、トランス遺伝子の挿入を確認する。
【図６】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌを感染させた、Ｂ１６−Ｆ１０細胞系内およびＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞系内の、ｈＦｌｔ３Ｌの発現を裏付ける、ＦＡＣＳ解析による、一連のドットプロットである。細胞を、１０のＭＯＩで、２４時間にわたり感染させてから、抗体による染色およびＦＡＣＳ解析を行った。ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ感染細胞は、ＧＦＰマーカーを発現させた。
【図７】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌを感染させた、Ｂ１６−Ｆ１０細胞系内およびＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞系内の、マウスＯＸ４０Ｌの発現を裏付ける、ＦＡＣＳ解析による、一連のドットプロットである。細胞を、１０のＭＯＩで、２４時間にわたり感染させてから、抗体による染色およびＦＡＣＳ解析を行った。
【図８Ａ−８Ｃ】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、Ｂ１６−Ｆ１０両側マウス黒色腫モデルにおいて、遠隔腫瘍内の、腫瘍浸潤エフェクターＣＤ８+Ｔ細胞の活性化の、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌと比較した増大をもたらしたことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌの腫瘍内（ＩＴ）注射（２×１０7ｐｆｕ）を、右脇腹の大型腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり実施した。注射なしの遠隔腫瘍を、２回目の注射の２日後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球を、ＦＡＣＳにより解析した。図８Ａ：ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍｕＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌによる処置の後における、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットである。図８Ｂ：遠隔における、注射なしの腫瘍１グラム当たりのＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフである。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４または５）である（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；ｔ検定）。図８Ｃ：遠隔における、注射なしの腫瘍１グラム当たりの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフである。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４または５）である（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；ｔ検定）。
【図９Ａ−９Ｃ】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、Ｂ１６−Ｆ１０両側マウス黒色腫モデルにおいて、遠隔腫瘍内の、腫瘍浸潤エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞の活性化の、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌと比較した増大をもたらしたことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌの腫瘍内（ＩＴ）注射（２×１０7ｐｆｕ）を、右脇腹の大型腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり実施した。遠隔における、注射なしの腫瘍を、２回目の注射の２日後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球を、ＦＡＣＳにより解析した。図９Ａ：ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍｕＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌによる処置の後における、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットである。図９Ｂ：遠隔における、注射なしの腫瘍１グラム当たりのＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフである。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４または５）である（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；ｔ検定）。図９Ｃ：遠隔における、注射なしの腫瘍１グラム当たりの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフである。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４または５）である（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；ｔ検定）。
【図１０Ａ−１０Ｂ】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０ＬのＩＴ注射が、脾臓内の、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌと比較して強力な、抗腫瘍ＣＤ８+Ｔ細胞応答をもたらしたことを示す、代表的ＥＬＩＳＰＯＴブロットおよびグラフである。Ｂ１６−Ｆ１０保有マウスを、３日間を隔てて、２回にわたる、２×１０7ｐｆｕのＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３ＬのＩＴ注射で処置した。脾臓は、２回目の注射の２日後に回収した。ＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞（１５０，０００個）と、精製ＣＤ８+Ｔ細胞（３００，０００個）とを、９６ウェルプレート内で共培養することにより実施した。図１０Ａ：左から右へと、三連試料についてのＥＬＩＳＰＯＴの画像である。図１０Ｂ：精製ＣＤ８+Ｔ細胞３００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポット数についてのグラフである。各バーは、個々のマウス（ｎ＝５）に由来する脾臓試料を表す。
【図１１Ａ−１１Ｇ】マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫両側腫瘍植込みモデルにおいて、ＩＴにおける、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌと、全身送達による、免疫チェックポイント遮断抗体である、抗ＣＴＬＡ−４または抗ＰＤ−Ｌ１との組合せが、腫瘍の増殖を遅延させ、生存を延長することを示すデータについてのグラフ表示である。図１１Ａは、Ｂ１６−Ｆ１０両側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームである。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹への５×１０5個、および左脇腹への１×１０5個）。腫瘍植込みの９日後、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射（２×１０7ｐｆｕ）を、右脇腹の大型腫瘍へと、毎週２回実施した。マウス１匹当たり２５０μｇの、抗ＣＴＬＡ−４または抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、腹腔内に施した。腫瘍サイズを測定し、マウスの生存をモニタリングした。図１１Ｂおよび１１Ｃは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置後の日数経過にわたる、注射ありの腫瘍（図１１Ｂ）および注射なしの腫瘍（図１１Ｃ）の体積を示すデータについてのグラフ表示である。図１１Ｄおよび１１Ｅは、注射ありの腫瘍（図１１Ｄ）および注射なしの腫瘍（図１１Ｅ）の初期体積、ならびにＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置後、７日目および１１日目における体積を示すデータについてのグラフ表示である。図１１Ｆは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置で処置された腫瘍保有マウスについての、カプラン−マイヤー生存曲線のグラフである（ｎ＝１０、**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１；マンテル−コックス検定）。図１１Ｇは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＣＴＬＡ−４抗体、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置されたマウスの生存中央値を示す表である。
【図１２】Ｂ１６−Ｆ１０片側大型腫瘍モデルで処置されたマウスにおける、腫瘍増殖曲線を示すデータについての、一連のグラフ表示である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと（細胞５×１０5個）植え込んだ。植込みの１１日後、ウイルスを、毎週２回、腫瘍内注射し、抗ＣＴＬＡ−４または抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、毎週２回、腹腔内注射した。
【図１３Ａ−１３Ｃ】図１３Ａおよび１３Ｂは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈｕＯＸ４０Ｌを作出するための、２ステップの相同組換えの概略である。図１３Ａ：第１のステップ：ｈＦｌｔ３ＬおよびＧＦＰの発現カセットを、Ｃ７遺伝子座へと挿入する（Ｃ７遺伝子を置きかえる）ための、Ｃ７遺伝子座を挟む、Ｃ６遺伝子およびＣ８遺伝子における、ｐＵＣ５７ベクターのプラスミドＤＮＡと、ＭＶＡウイルスのゲノムＤＮＡとの相同組換えである。ヒトＦｌｔ３Ｌ遺伝子は、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下にある。ＧＦＰは、ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある。図１３Ｂ：第２のステップ：ｈｕＯＸ４０ＬおよびｍＣｈｅｒｒｙの発現カセットを、ＴＫ（Ｊ２Ｒ）遺伝子座へと挿入するための、Ｊ２Ｒ（ＴＫ）遺伝子座を挟む、Ｊ１Ｒ遺伝子およびＪ３Ｒ遺伝子（ＴＫ−ＲおよびＴＫ−Ｌ）における、ｐＵＣ５７ΔＴＫ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｍＣｈｅｒｒｙのプラスミドＤＮＡと、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３ＬウイルスのゲノムＤＮＡとの相同組換えである。ヒトＯＸ４０Ｌ遺伝子は、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下にある。ｍＣｈｅｒｒｙは、ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある。図１３Ｃ：ＰＣＲによる、ｈＯＸ４０Ｌ遺伝子およびｈＦｌｔ３Ｌ遺伝子のインサートを含有するが、ＴＫ（Ｊ２Ｒ）遺伝子を欠く、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈｕＯＸ４０Ｌの、３つの独立のクローンの検証である。Ｈ１、ｈ２、およびＨ３は、個々の組換えＭＶＡである。「＋」：ＰＣＲ反応についての陽性対照である。
【図１４Ａ−１４Ｂ】初代ニワトリ胚線維芽細胞（ＣＥＦ）内の、親ＭＶＡ、およびＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを含む組換えウイルスの、多段階の増殖を示す、２つのグラフである。図１４Ａは、ＣＥＦ内の、これらのウイルスについての、多段階の増殖曲線である。略述すると、ＣＥＦに、上述のウイルスを、０．０５のＭＯＩで感染させた。細胞は、１、２４、４８、および７２時間後に回収した。ウイルス力価は、系列希釈、および共焦点顕微鏡下で、ＧＦＰ+細胞巣をカウントすることにより、ＢＨＫ２１細胞上で決定した。図１４Ｂは、感染の７２時間後における、感染の１時間後に対する、ウイルス力価のｌｏｇ（倍数変化）を示す。
【図１５Ａ−１５Ｂ】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌウイルスを感染させた、ＢＨＫ２１細胞内、およびヒト単球由来樹状細胞（ｍｏ−ＤＣ）内の、ｈＯＸ４０Ｌの発現を示すＦＡＣＳデータについての、一連の代表的ドットプロットである。図１５Ａ：ＢＨＫ２１細胞に、モック感染させるか、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の２４時間後に回収し、ＰＥコンジュゲート抗ｈＯＸ４０Ｌ抗体で染色してから、ＦＡＣＳ解析を行った。図１５Ｂ：ヒトｍｏＤＣは、１０μｇ／ｍｌのポリイノシン酸−ポリシチジル酸で処置するか、または熱不活化ＭＶＡ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）、もしくはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、１のＭＯＩで感染させた。感染の２４時間後、細胞を回収し、ＰＥコンジュゲート抗ｈＯＸ４０Ｌ抗体で染色してから、ＦＡＣＳ解析を行った。非処置のマウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞は、陰性対照として使用した。
【図１６Ａ−１６Ｂ】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌ感染ＢＨＫ２１細胞内（図１６Ａ）、およびＢ１６−Ｆ１０細胞内（図１６Ｂ）内の、ｈＯＸ４０Ｌ  ｍＲＮＡレベルを示すデータについての、一連のグラフ表示である。ＢＨＫ２１またはＢ１６−Ｆ１０細胞に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させた。感染の８および１６時間後、細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ウイルスのＥ３Ｌ遺伝子およびｈＯＸ４０Ｌ遺伝子の発現について検討した。
【図１７】ワクシニアウイルスによる、ウイルス早期遺伝子発現プラスミドを構築するワークフローを示す概略図である。７２のウイルス早期遺伝子を選択した。ＰＣＲを実施して、目的の遺伝子を、ワクシニアウイルスゲノムから増幅した。ＰＣＲの第２のラウンドにより、アダプターを、ＰＣＲ産物の両末端へと付加した。次いで、ＤＮＡ断片を、ｐＤＯＮＲ（商標）／ＺＥＯへとクローニングし、次いで、哺乳動物用の発現ベクターである、ｐｃＤＮＡ（商標）３．２−ＤＥＳＴへとクローニングした。その後、ＤＮＡ構築物を、シーケンシングにより検証した。次いで、プラスミドＤＮＡを使用して、ＨＥＫ−２９３Ｔ細胞に、これらを、下記に記載される、他のプラスミドと共にトランスフェクトした。
【図１８】二重ルシフェラーゼスクリーニング戦略を示す図である。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、ｃＧＡＳおよびＳＴＩＮＧの発現プラスミドを、ＩＦＮ−βルシフェラーゼプラスミドおよびｐＲＬ−ＴＫと共に共トランスフェクトした。ウイルス遺伝子を発現させるプラスミドまたはベクターも、併せてトランスフェクトした。２４時間後、ルシフェラーゼシグナルを測定した。相対ルシフェラーゼ活性は、ホタルルシフェラーゼ活性を、レニラ属（Ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼ活性に照らして正規化することにより、任意単位として表した。
【図１９Ａ−１９Ｃ】ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ依存性ＩＦＮβ−ｌｕｃ活性を阻害する、ワクシニアウイルスＯＲＦについての、二重ルシフェラーゼスクリーニングの結果を示す図である。図１９Ａ〜１９Ｃ：ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、表示の、ＩＦＮβ−ｌｕｃレポーター、マウスｃＧＡＳ、ヒトＳＴＩＮＧ、およびワクシニアウイルスＯＲＦを発現させるプラスミドをトランスフェクトした。二重ルシフェラーゼアッセイを、トランスフェクションの２４時間後に実施した。アデノウイルスＥ１Ａ遺伝子を、陽性対照として使用した。
【図２０Ａ−２０Ｅ】ワクシニアウイルスの、Ｂ１８、Ｅ５、Ｋ７、Ｃ１１、およびＢ１４が、ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧにより誘導されるＩＦＮβプロモーター活性を阻害することを示す図である。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、表示の、ＩＦＮＢルシフェラーゼレポーター、ｃＧＡＳ、ＳＴＩＮＧ、および発現プラスミドをトランスフェクトし、ルシフェラーゼ活性を、トランスフェクションの２４時間後にアッセイした。図２０Ａ：マウスｃＧＡＳを、発現プラスミドと共に共トランスフェクトした。図２０Ｂ：ヒトｃＧＡＳを、発現プラスミドと共に共トランスフェクトした。図２０Ｃ：マウスｃＧＡＳを、Ｋ７Ｒ、Ｅ５Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｃ１１Ｒ、およびＢ１８Ｒの、ＦＬＡＧでタグ付けされたワクシニアＯＲＦと共に共トランスフェクトした。図２０Ｄおよび２０Ｅは、熱不活化ＭＶＡの感染（図２０Ｄ）、またはＩＳＤ処置（図２０Ｅ）による、Ｅ５、Ｂ１４、Ｋ７、またはＢ１８を過剰発現させる細胞内の、ＩＦＮＢの誘導を示す図表である。
【図２１】ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ依存性ＩＦＮβ−ｌｕｃ活性を阻害する、ワクシニアウイルスＯＲＦについての、さらなる二重ルシフェラーゼスクリーニングの結果を示す図である。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、表示の、ＩＦＮβ−ｌｕｃレポーター、マウスｃＧＡＳ、ヒトＳＴＩＮＧ、およびワクシニアウイルスＯＲＦを発現させるプラスミドをトランスフェクトした。二重ルシフェラーゼアッセイを、トランスフェクションの２４時間後に実施した。アデノウイルスＥ１Ａ遺伝子を、陽性対照として使用した。
【図２２】配列番号１に明示され、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：Ｕ９４８４８．１により与えられる、ＭＶＡゲノム配列を示す図である。
【図２３】配列番号２に明示され、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＹ２４３３１２．１により与えられる、ワクシニアウイルス（ウェスタンリザーブ株；ＷＲ）ゲノム配列を示す図である。
【図２４Ａ−２４Ｂ】マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞内の、ワクシニアウイルス、およびＥ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌ、およびＶＡＣ−ＴＫ-−抗ｍｕＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌを含む組換えウイルスの、多段階の増殖を示す、２つのグラフである。図２４Ａは、Ｂ１６−Ｆ１０細胞内の、これらのウイルスの、多段階の増殖である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、上述のウイルスを、０．１のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の１、２４、４８、および７２時間後に回収し、ウイルス収量（ｌｏｇ  ｐｆｕ）は、ＢＳＣ４０細胞上の滴定により決定した。ウイルス収量を、感染後時間に対してプロットした。図２４Ｂは、感染の７２時間後における、感染の１時間後に対する、ウイルス力価のｌｏｇ（倍数変化）を示す。
【図２５】Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ウイルス、またはＥ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌウイルスを感染させた、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞内の、抗ｍＣＴＬＡ−４抗体、マウスＯＸ４０Ｌ、およびヒトＦｌｔ３Ｌの発現についての、ウェスタンブロット解析を示す図である。Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ウイルス、またはＥ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌウイルスを、１０のＭＯＩで感染させるか、またはモック感染させた。細胞溶解物は、感染の７、２４、および４８時間後に回収し、１０％のＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用して、細胞溶解物中のポリペプチドを分離した。ＨＲＰコンジュゲート抗マウスＩｇＧ（重鎖および軽鎖）、抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体、および抗ヒトＦｌｔ３Ｌ抗体を使用して、抗ｍＣＴＬＡ−４抗体、マウスＯＸ４０Ｌタンパク質、およびヒトＦｌｔ３Ｌタンパク質のそれぞれを検出した。
【図２６】Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＶＡＣ−ＴＫ-−抗ｍＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌウイルスを感染させた、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞内の、マウスＯＸ４０Ｌタンパク質の表面発現を示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-ベクター、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-ベクター、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＶＡＣ−ＴＫ-−抗ｍＣＴＬＡ−４／Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌウイルスを、５のＭＯＩで感染させるか、またはモック感染させた。細胞は、感染の２４時間後に回収し、ＰＥコンジュゲート抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体で染色し、ＦＡＣＳにより解析した。データを、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（ＦｌｏｗＪｏ、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）で解析した。
【図２７】Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫片側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームを示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０Ｌを、毎週２回、腫瘍内注射した。マウス１匹当たり２５０μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、腹腔内に施した。腫瘍サイズを測定し、マウスの生存をモニタリングした。
【図２８Ａ−２８Ｃ】ＰＢＳ（図２８Ａ）、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ（図２８Ｂ）、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（図２８Ｃ）による処置後の日数経過にわたる、腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である。
【図２９Ａ−２９Ｂ】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置されたマウスについての生存研究を裏付ける図である。図２９Ａは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置で処置された腫瘍保有マウスについての、カプラン−マイヤー生存曲線のグラフである（ｎ＝５〜１０、**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１；マンテル−コックス検定）。図２９Ｂは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置されたマウスの生存中央値を示す表である。
【図３０】ＭＣ３８片側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームを示す図である。略述すると、ＭＣ３８黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０Ｌを、毎週２回、腫瘍内注射した。マウス１匹当たり２５０μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、腹腔内に施した。腫瘍サイズを測定し、マウスの生存をモニタリングした。
【図３１Ａ−３１Ｃ】ＰＢＳ（図３１Ａ）、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ（図３１Ｂ）、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（図３１Ｃ）による処置後の日数経過にわたる、腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である。
【図３２Ａ−３２Ｂ】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置されたマウスについての生存研究を裏付ける図である。図３２Ａは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置された腫瘍保有マウスについての、カプラン−マイヤー生存曲線のグラフである（ｎ＝４〜８、**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１；マンテル−コックス検定）。図３２Ｂは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置されたマウスの生存中央値を示す表である。
【図３３】ＭＢ４９片側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームを示す図である。略述すると、ＭＢ４９黒色腫細胞２．５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの８日後、４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０Ｌを、毎週２回、腫瘍内注射した。マウス１匹当たり２５０μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、腹腔内に施した。腫瘍サイズを測定し、マウスの生存をモニタリングした。
【図３４Ａ−３４Ｄ】ＰＢＳ（図３４Ａ）、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ（図３４Ｂ）、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（図３４Ｃ）、または抗ＰＤ−Ｌ１抗体（図３４Ｄ）による処置後の日数経過にわたる、腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である。
【図３５Ａ−３５Ｂ】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置で処置されたマウスについての生存研究を裏付ける図である。図３５Ａは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置された腫瘍保有マウスについての、カプラン−マイヤー生存曲線のグラフである（ｎ＝１０、*Ｐ＜０．０５、**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１；マンテル−コックス検定）。図３５Ｂは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＰＤ−Ｌ１抗体で処置されたマウスの生存中央値を示す表である。
【図３６】雌ＭＭＴＶ−ＰｙＶｍＴマウスから単離された腫瘍についての代表的グラフを示す図である。略述すると、マウスを、９２日齢の平均値潜伏期間で、触知可能な乳腺腫瘍を発症した後における、毎週２回の、ＰＢＳ、４×１０7のｐｆｕのＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射で処置した。マウス１匹当たり２５０μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体を、毎週２回、腹腔内に施した。腫瘍サイズを測定し、マウスの生存をモニタリングした。
【図３７】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置後の日数経過にわたる、腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である（Ｐ０：ＰＢＳ；Ｖ１：ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍｕＯＸ４０Ｌ；Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３：ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍｕＯＸ４０Ｌ＋抗ＰＤ−Ｌ１）。
【図３８】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置後における、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍内の、ＣＤ８+Ｔ細胞およびＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。
【図３９】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置後における、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍内の、ＣＤ８+ＣＤ６９+ＣＤ１０３+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。
【図４０】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１抗体による処置後における、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍内の、ＣＤ４+ＣＤ６９+ＣＤ１０３+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。
【図４１Ａ−４１Ｂ】Ｂ１６−Ｆ１０−ｈＦｌｔ３ＬまたはＢ１６−Ｆ１０−ｍＯＸ４０Ｌ安定的細胞系による、ｈＦｌｔ３Ｌ（図４１Ａ）またはｍＯＸ４０Ｌ（図４１Ｂ）の発現を示す、代表的ＦＡＣＳプロットである。
【図４２】Ｂ１６−Ｆ１０両側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームを示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込み、Ｂ１６−Ｆ１０−ｈＦｌｔ３Ｌ黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、ＰＢＳ、または４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＣ７Ｌを、両側の脇腹の腫瘍へと、毎週２回、腫瘍内注射した。腫瘍を、２回目の注射の２日後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を、ＦＡＣＳにより解析した。
【図４３Ａ−４３Ｄ】ＰＢＳまたはＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置後の日数経過にわたる、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹または左脇腹における、腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である。
【図４４Ａ−４４Ｅ】ＰＢＳまたはＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置の後における、腫瘍浸潤ＣＤ８+Ｔ細胞（図４４Ａ）、腫瘍浸潤ＣＤ８+グランザイムＢ+Ｔ細胞（図４４Ｂ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+Ｔ細胞（図４４Ｃ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+グランザイムＢＴ細胞+（図４４Ｄ）、および腫瘍浸潤ＣＤ４+ＦｏｘＰ３+Ｔ細胞（図４４Ｅ）の百分率についてのグラフである（ｎ＝５、*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、****Ｐ＜０．０００１；一元ＡＮＯＶＡ）。
【図４５Ａ−４５Ｅ】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置の後における、腫瘍１グラム当たりの腫瘍浸潤ＣＤ８+Ｔ細胞（図４５Ａ）、腫瘍浸潤ＣＤ８+グランザイムＢ+Ｔ細胞（図４５Ｂ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+Ｔ細胞（図４５Ｃ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+グランザイムＢ+Ｔ細胞（図４５Ｄ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+ＦｏｘＰ３+Ｔ細胞（図４５Ｅ）の絶対数についてのグラフである（ｎ＝５、*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、****Ｐ＜０．０００１；一元ＡＮＯＶＡ）。
【図４６】Ｂ１６−Ｆ１０両側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームを示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込み、Ｂ１６−Ｆ１０−ＯＸ４０Ｌ黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、ＰＢＳ、または４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＣ７Ｌを、両側の脇腹の腫瘍へと、毎週２回、腫瘍内注射した。腫瘍を、２回目の注射の２日後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を、ＦＡＣＳにより解析した。
【図４７Ａ−４７Ｄ】ＰＢＳまたはＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置後の日数経過にわたる、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹または左脇腹における、腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である。
【図４８Ａ−４８Ｅ】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置の後における、腫瘍浸潤ＣＤ８+Ｔ細胞（図４８Ａ）、腫瘍浸潤ＣＤ８+グランザイムＢ+Ｔ細胞（図４８Ｂ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+Ｔ細胞（図４８Ｃ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+グランザイムＢ+Ｔ細胞（図４８Ｄ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+ＦｏｘＰ３+Ｔ細胞（図４８Ｅ）の百分率についてのグラフである（ｎ＝５、*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、****Ｐ＜０．０００１；一元ＡＮＯＶＡ）。
【図４９Ａ−４９Ｅ】ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置の後における、腫瘍１グラム当たりの腫瘍浸潤ＣＤ８+Ｔ細胞（図４９Ａ）、腫瘍浸潤ＣＤ８+グランザイムＢ+Ｔ細胞（図４９Ｂ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+Ｔ細胞（図４９Ｃ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+グランザイムＢ+Ｔ細胞（図４９Ｄ）、腫瘍浸潤ＣＤ４+ＦｏｘＰ３+Ｔ細胞（図４９Ｅ）の絶対数についてのグラフである（ｎ＝５、*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、****Ｐ＜０．０００１；一元ＡＮＯＶＡ）。
【図５０Ａ−５０Ｂ】ＦＴＹ７２０の作用機構、およびその化学構造を示す図である。図５０Ａは、Gong et al. Front. Immunol. (2014), Naive T cells circulate between lymphoid organs and blood中の図面からの転載である。感染時または腫瘍の植込み時に、抗原提示細胞は、抗原を提示して、コグネイトＴ細胞をプライミングし、次いで、これらを、エフェクターＴ細胞およびメモリーＴ細胞へと増殖および分化させる。エフェクターＴ細胞は、感染部位または腫瘍へと動員され、メモリーＴ細胞は、再循環する。ＦＴＹ７２０（図５０Ｂ）、スフィンゴシン−１−リン酸受容体モジュレーターは、リンパ球の、リンパ器官からの逸出を阻止する。
【図５１】Ｂ１６−Ｆ１０片側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームを示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、ＰＢＳ、または４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌを、２回にわたり、腫瘍内注射した。マウス１匹当たり２５μｇのＦＴＹ７２０を、初回のＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍｕＯＸ４０Ｌ注射の１日前から、処置期間中、毎日、腹腔内に施した。腫瘍サイズを測定し、マウスの生存をモニタリングした。
【図５２Ａ−５２Ｄ】ＦＴＹ７２０処置を伴うか、または伴わない、ＰＢＳまたはＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置後の日数経過にわたる、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスにおける腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である。
【図５３Ａ−５３Ｂ】ＦＴＹ７２０処置を伴うか、または伴わない、ＰＢＳまたはＭＶＡΔＣ７Ｌによる処置後の日数経過にわたる、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスにおける腫瘍の体積を示すデータについてのグラフ表示である。
【図５３Ｃ−５３Ｄ】ＦＴＹ７２０を伴うか、または伴わない、ＰＢＳ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌで処置された、腫瘍保有マウスの、カプラン−マイヤー生存曲線についてのグラフ（ｎ＝５〜１０、**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１；マンテル−コックス検定）である。
【図５４Ａ−５４Ｂ】ポックスウイルスファミリーの間における、ワクシニアＥ５のドメイン構成および配列保存を示す図である。図５４Ａは、ワクシニアＥ５についての概略図である。Ｅ５は、Ｎ末端ドメインを構成する、３２８アミノ酸のタンパク質に続く、２つのＢＥＮドメインである。ＢＥＮは、ＢＡＮＰ／ＳＭＡＲ１、ポックスウイルスＥ５Ｒ、およびＮＡＣ１における、その存在にちなんで名付けられた。ＢＥＮドメイン含有タンパク質は、クロマチンの構成と、転写の調節と、おそらく、ウイルスＤＮＡの構成とに関与する。図５４Ｂは、ワクシニアＥ５が、ポックスウイルスファミリー内で、高度に保存的であることを裏付ける概略図である。
【図５５Ａ−５５Ｃ】ＶＡＣＶΔＥ５Ｒが、鼻腔内感染モデルで、高度に弱毒化されることを示す図である。図５５Ａは、ワクシニアゲノムのＥ５Ｒ遺伝子を挟む、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスを作出するためのスキームを示す。図５５Ｂは、野生型ＶＡＣＶ（２×１０6ｐｆｕ）、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ（２×１０6ｐｆｕ）、またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒ（２×１０7ｐｆｕ）の鼻腔内感染後の日数経過にわたる、体重減少を示す。図５５Ｃは、野生型ＶＡＣＶ（２×１０6ｐｆｕ）、またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒ（２×１０6ｐｆｕまたは２×１０7ｐｆｕ）を感染させたマウスについての、カプラン−マイヤー生存曲線を示す。
【図５６Ａ−５６Ｂ】ＶＡＣＶΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮ−βタンパク質の分泌を誘導することを裏付ける図である。図５６Ａは、ＭＶＡ、ＶＡＣＶ、またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させたＢＭＤＣについての、ＲＴ−ＰＣＲ結果を示す。細胞は、感染の８時間後に回収した。ＲＮＡを抽出し、ＲＴ−ＰＣＲを実施した。図５６Ｂは、ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＶＡＣＶ、またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させたことを示す。上清は、感染の２１時間後に回収した。ＩＦＮ−βタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図５７Ａ−５７Ｄ】ＢＭＤＣ内およびＢＭＤＭ内の、ＭＶＡΔＥ５ＲおよびＭＶＡΔＫ７Ｒによる、ＩＦＮＢ遺伝子の誘導を示す図である。図５７Ａは、ＭＶＡゲノムのＥ５Ｒ遺伝子を挟む、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスを作出するためのスキームを示す。図５７Ｂは、ＭＶＡゲノムのＫ７Ｒ遺伝子を挟む、Ｋ５，６Ｌ遺伝子座およびＦ１Ｌ遺伝子座における相同組換えを介して、ＭＶＡΔＫ７Ｒウイルスを作出するためのスキームを示す。図５７Ｃは、ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＫ７Ｒを、１０のＭＯＩで感染させたことを示す。細胞は、感染の６時間後に回収した。ＩＦＮＢ遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲにより測定した。図５７Ｄは、ＢＭＤＭに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＫ７Ｒを、１０のＭＯＩで感染させたことを示す。細胞は、感染の６時間後に回収した。ＩＦＮＢ遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲにより測定した。
【図５８Ａ−５８Ｃ】ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させたことを示す図である。細胞は、感染の６時間後に回収した。ＩＦＮＡ（図５８Ａ）、ＣＣＬ４（図５８Ｂ）、およびＣＣＬ５（図５８Ｃ）の遺伝子発現は、定量的ＲＴ−ＰＣＲにより決定した。
【図５９Ａ−５９Ｃ】ＭＶＡΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、ＢＭＤＣからの、高レベルのＩＦＮＢ遺伝子およびウイルスＥ３Ｒ遺伝子の発現、ならびにＩＦＮ−βタンパク質の分泌を誘導することを示す図である。図５９Ａおよび５９Ｂは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒ（「熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒ」）により誘導されたＩＦＮＢ遺伝子（図５９Ａ）、およびウイルスのＥ３Ｒ遺伝子（図５９Ｂ）の発現についての、リアルタイム定量的ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）解析を示す。ＢＭＤＣは、骨髄細胞を、ｍＧＭ−ＣＳＦの存在下で培養することにより発生させた。細胞に、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスを、０．２５、１、３、または１０のＭＯＩで感染させた。細胞を、感染の１時間後に洗浄し、未使用の培地を添加した。細胞は、感染の１４時間後に回収した。ＩＦＮＢ遺伝子およびＥ３遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲにより決定した。図５９Ｃ：ＢＭＤＣに、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスを、０．２５、１、３、または１０のＭＯＩで感染させた。上清は、感染の１４時間後に回収した。上清中の、ＩＦＮ−β濃度は、ＥＬＩＳＡにより測定した。
【図６０Ａ−６０Ｄ】ＭＶＡΔＥ５Ｒにより誘導されたＩＦＮＢ遺伝子の発現およびＩＦＮ−βの分泌が、ｃＧＡＳに依存したことを示す図である。図６０Ａは、野生型ＢＭＤＣ内およびｃＧＡＳ-/-ＢＭＤＣ内の、ＭＶＡΔＥ５Ｒによる、ＩＦＮＡの誘導を示す。図６０Ｂは、野生型ＢＭＤＣ内およびｃＧＡＳ-/-ＢＭＤＣ内の、ＭＶＡΔＥ５Ｒによる、ＩＦＮＡの誘導を示す。図６０Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させた、野生型ＢＭＤＣ内およびｃＧＡＳ-/-ＢＭＤＣ内内の、ワクシニアＥ３Ｒ遺伝子の発現を示す。ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の６時間後に回収した。ＲＮＡを抽出した。リアルタイム定量的ＰＣＲ解析を実施した。図６０Ｄは、ＭＶＡΔＥ５Ｒが、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒと比較して、高レベルのＩＦＮ−βタンパク質の分泌を誘導し、誘導が、ｃＧＡＳに、完全に依存することを示す。野生型ＢＭＤＣまたはｃＧＡＳ-/-ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、同等のＭＯＩで感染させた。上清は、感染の８および１６時間後に回収した。上清中の、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより測定した。
【図６１Ａ−６１Ｂ】ＭＶＡΔＥ５Ｒにより誘導された、ＢＭＤＣからの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現およびＩＦＮＢタンパク質の分泌が、ＳＴＩＮＧに依存することを示す図である。図６１Ａは、野生型マウスまたはＳＴＩＮＧGt/Gtマウスに由来するＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させたことを示す。細胞は、感染の８時間後に回収し、ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施した。ＩＦＮＢ遺伝子発現の誘導倍数を示す。図６１Ｂは、骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）が、野生型マウスまたはＳＴＩＮＧGt/Gtマウスに由来する骨髄細胞をＭ−ＣＳＦ（マクロファージコロニ刺激因子）の存在下で培養することにより発生したことを示す。ＢＭＤＭに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させた。上清は、感染の１６時間後に回収し、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより測定した。
【図６２Ａ−６２Ｄ】ＭＶＡΔＥ５Ｒにより誘導される、ＩＦＮ−βタンパク質の分泌が、ＩＲＦ３、ＩＲＦ７、およびＩＦＮＡＲを要求することを示す図である。図６２Ａは、野生型ＢＭＤＣまたはＩＲＦ３-/-ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させたことを示す。上清は、感染の８および１６時間後に回収した。ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。図６２Ｂは、野生型ＢＭＤＭまたはＩＲＦ３-/-ＢＭＤＭに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させたことを示す。上清は、感染の８および１６時間後に回収した。ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。図６２Ｃは、野生型ＢＭＤＣまたはＩＲＦ７-/-ＢＭＤＣに、ＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させたことを示す。上清は、感染の２１時間後に回収した。上清中の、ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。図６２Ｄは、野生型ＢＭＤＣ、ｃＧＡＳ-/-ＢＭＤＣ、またはＩＦＮＡＲ-/-ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させたことを示す。上清は、感染の１６時間後に回収した。ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図６３Ａ−６３Ｃ】野生型ＶＡＣＶにより誘導されるｃＧＡＳの分解が、プロテアソーム依存性経路に媒介されることを裏付ける図である。図６３Ａは、マウス胎児線維芽細胞を、シクロヘキシミド（ＣＨＸ）、プロテアソーム阻害剤である、ＭＧ１３２、汎カスパーゼ阻害剤である、Ｚ−ＶＡＤ、またはＡＫＴ１／２阻害剤ＶＩＩＩで、３０分間にわたりで前処理したことを示す。次いで、ＭＥＦに、各薬物の存在下で、野生型ＶＡＣＶを感染させた。細胞は、感染の６時間後に回収した。ウェスタンブロット解析は、抗ｃＧＡＳおよび抗ＧＡＰＤＨ抗体により実施した。図６３Ｂは、ＭＥＦを、ＤＭＳＯまたはＭＧ１３２で処理したことを示す。細胞は、処理の、２、４、および６時間後に回収した。ウェスタンブロット解析は、抗ｃＧＡＳおよび抗ＧＡＰＤＨ抗体により実施した。図６３Ｃは、野生型ＶＡＣＶの、ＢＭＤＣへの感染が、ｃＧＡＳの分解を結果としてもたらしたのに対し、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒの感染は、ｃＧＡＳの分解を結果としてもたらさなかったことを裏付ける。ＭＧ１３２の存在下で、野生型ＶＡＣＶにより誘導されるｃＧＡＳの分解は阻止された。ＢＭＤＣに、ＭＧ１３２の存在下または非存在下で、野生型ＶＡＣＶまたはＶＡＣＶΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の２、４、および６時間後に回収した。ウェスタンブロット解析を、抗ｃＧＡＳおよび抗ＧＡＰＤＨ抗体を使用して実施した。
【図６４】ＭＶＡ内のＥ５Ｒ遺伝子が、ＢＭＤＣ内の、ｃＧＡＳの分解の媒介において重要であることを裏付ける図である。ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の２、４、６、８、および１２時間後に回収した。ウェスタンブロット解析は、抗ｃＧＡＳおよび抗ＧＡＰＤＨ抗体を使用して実施した。
【図６５】ＭＶＡΔＥ５Ｒが、ＭＶＡと比較して、高レベルの、リン酸化Ｓｔａｔ２を誘導することを裏付ける図である。ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の２、４、６、８、および１２時間後に回収した。ウェスタンブロット解析は、抗ホスホＳＴＡＴ２抗体、抗ＳＴＡＴ２抗体、および抗ＧＡＰＤＨ抗体を使用して実施した。
【図６６】ＭＶＡΔＥ５Ｒが、感染ありのＢＭＤＣ内の、高レベルのｃＧＡＭＰ産生を誘導することを示す図である。ＢＭＤＣ  ２．５×１０6個に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の２、４、６および８時間後に回収した。ｃＧＡＭＰ濃度は、細胞溶解物を、２つの誘導的レポーター構築物の安定的組込みにより、ヒトＴＨＰ−１単球細胞系から導出され、透過処理された、分化ＴＨＰ１−Ｄｕａｌ（商標）細胞と共にインキュベートすることにより測定した。上清は、２４時間後に回収し、ルシフェラーゼ活性（ＩＲＦ経路活性化についての指標としての）を測定した。ｃＧＡＭＰレベルは、ｃＧＡＭＰ標準物質と比較することにより計算した。
【図６７Ａ−６７Ｂ】ＭＶＡΔＥ５Ｒが、形質細胞様樹状細胞からの、ＩＦＮ−βタンパク質の分泌を誘導することを示す図である。図６７Ａは、脾臓細胞から分取された、ｐＤＣ（Ｂ２２０+ＰＤＣＡ−１+）１．２×１０5個に、ＭＶＡ、熱不活化ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させたことを示す。感染なしの脾臓細胞を、対照として組み入れた。上清は、感染の１８時間後に回収した。上清中の、ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより測定した。図６７Ｂは、Ｆｌｔ３Ｌ−ＢＭＤＣから分取された、ｐＤＣ（Ｂ２２０+ＰＤＣＡ−１+）４×１０5個に、ＭＶＡ、熱不活化ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させたことを示す。感染なしの、分取ｐＤＣを、対照として組み入れた。上清は、感染の１８時間後に回収した。上清中の、ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより測定した。
【図６８】ＭＶＡΔＥ５Ｒにより誘導される、ｐＤＣからのＩＦＮ−βの分泌が、ｃＧＡＳに依存することを示す図である。ｐＤＣは、野生型マウス、ｃＧＡＳ-/-マウス、またはＭｙＤ８８-/-マウス得られた、Ｆｌｔ３Ｌと共に培養されたＢＭＤＣ（Ｂ２２０+ＰＤＣＡ−１+）から分取した。細胞２×１０5個に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させた。トランスフェクションなしの対照を組み入れた。上清は、感染の１８時間後に回収した。上清中の、ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより測定した。
【図６９】ＭＶＡΔＥ５Ｒ感染が、ｃＧＡＳ依存性経路を介して、ＣＤ１０３+ＤＣからの、ＩＦＮ−βタンパク質の分泌を誘導することを示す図である。ＣＤ１０３+ＤＣは、野生型マウス、ｃＧＡＳ-/-マウス、またはＭｙＤ８８-/-マウス得られた、Ｆｌｔ３Ｌと共に培養されたＢＭＤＣ（ＣＤ１１ｃ+ＣＤ１０３+）から分取した。細胞２×１０5個に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させた。トランスフェクションなしの対照を組み入れた。上清は、感染の１８時間後に回収した。上清中の、ＩＦＮ−βレベルは、ＥＬＩＳＡにより測定した。
【図７０】ＭＶＡΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、ＭＶＡと比較して、低レベルの細胞死を結果としてもたらすことを示す図である。ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞を、感染の１６時間後に採取し、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ固定型生存率色素で染色し、フローサイトメトリー解析にかけた。
【図７１Ａ−７１Ｂ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ感染が、ＤＣの成熟を、ｃＧＡＳ依存的に促進することを示す図である。野生型マウスおよびＧＡＳ-/-マウスに由来するＢＭＤＣに、ＭＶＡ−ＯＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＶＡを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の１６時間後に回収し、ＤＣ成熟マーカー：ＣＤ４０（図７１Ａ）およびＣＤ８６（図７１Ｂ）について染色した。
【図７２Ａ−７２Ｇ】ＭＶＡΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、Ｔ細胞の活性化により測定される、抗原の交差提示を促進することを示す図である。ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、３のＭＯＩで、３時間にわたり感染させ、次いで、ＯＶＡと共に、３時間にわたりインキュベートした。ＯＶＡを洗い流し、次いで、細胞を、ＯＴ−Ｉ細胞（ＯＶＡ257-264ＳＩＩＮＦＥＫＬペプチドを認識する）と共に、３日間にわたりインキュベートした。ＯＴ−１細胞を、抗ＣＤ６９抗体および抗ＣＤ８抗体で染色し、フローサイトメトリーにより解析した。上清を回収し、ＩＦＮ−γレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。ドットプロットは、ＣＤ６９を発現させる、ＣＤ８＋細胞を裏付ける。
【図７３】ＭＶＡΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、活性化Ｔ細胞による、ＩＦＮ−γの産生により測定される、抗原の交差提示を促進することを示す図である。ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、３のＭＯＩで、３時間にわたり感染させ、次いで、ＯＶＡと共に、３時間にわたりインキュベートした。ＯＶＡを洗い流し、次いで、細胞を、ＯＴ−Ｉ細胞（ＯＶＡ257-264ＳＩＩＮＦＥＫＬペプチドを認識する）と共に、３日間にわたりインキュベートした。ＯＴ−１細胞を、抗ＣＤ６９抗体および抗ＣＤ８抗体で染色し、フローサイトメトリーにより解析した。上清を回収し、ＩＦＮ−γレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。図７３は、ＢＭＤＣ：Ｔ細胞共培養物の上清中の、ＩＦＮ−γレベルを示す。
【図７４】ＶＡＣＶΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、活性化Ｔ細胞による、ＩＦＮ−γの産生により測定される、抗原の交差提示を促進することを示す図である。ＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒを、３のＭＯＩで、３時間にわたり感染させるか；またはＢＭＤＣを、ｃＧＡＭＰまたはモック対照と共に、３時間にわたりインキュベートした。その後、ＢＭＤＣを、ＯＶＡと共に、３時間にわたりインキュベートし、次いで、ＯＶＡを洗い流した。次いで、細胞を、ＯＴ−Ｉ細胞（ＯＶＡ257-264ＳＩＩＮＦＥＫＬペプチドを認識する）と共に、３日間にわたりインキュベートした。上清を回収し、ＩＦＮ−γレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図７５Ａ−７５Ｃ】Ｅ５Ｒ遺伝子の、ＭＶＡからの欠失が、ワクチン接種の効能を改善することを示す図である。図７５Ａは、ワクチン接種戦略のスキームである。０日目に、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、皮膚乱切または皮内注射を介して、ＭＶＡ−ＯＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＶＡを、２×１０7ｐｆｕで、ワクチン接種した。脾臓は、１週間後に、安楽死させたマウスから採取し、ＯＶＡ257-264（ＳＩＩＮＦＥＫＬ）ペプチド（１０μｇ／ｍｌ）でパルス処理されたＢＭＤＣと共に、１２時間にわたり共培養した。次いで、ＣＤ８+Ｔ細胞内の、細胞内ＩＦＮ−γレベルを、フローサイトメトリーにより測定した（*ｐ＜０．０５；**ｐ＜０．０１）。図７５Ｂは、皮膚乱切を介する、ＭＶＡ−ＯＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＶＡのワクチン接種の後における、活性化ＣＤ８+Ｔ細胞を示す。図７５Ｃは、ＭＶＡ−ＯＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＶＡの皮内注射を介するワクチン接種の後における、活性化ＣＤ８+Ｔ細胞を示す。
【図７６Ａ−７６Ｂ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ感染が、マウス初代線維芽細胞からの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現およびＩＦＮ−βの分泌を、ｃＧＡＳ依存的に誘導することを示す図である。皮膚線維芽細胞は、雌野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス、および雌ｃＧＡＳ-/-Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスから発生させた。細胞に、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、熱不活化ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させた。細胞および上清は、感染の１６時間後に回収した。図７６Ａは、野生型細胞内およびｃＧＡＳ-/-細胞内の、ＩＦＮＢ遺伝子の発現についてのＲＴ−ＰＣＲ結果を示す。図７６Ｂは、ＥＬＩＳＡにより測定された、感染ありの野生型細胞およびｃＧＡＳ-/-細胞の上清中の、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルを示す。
【図７７Ａ−７７Ｄ】ＭＶＡΔＥ５Ｒが、ｃＧＡＳ欠損初代皮膚線維芽細胞内、またはＩＦＮＡＲ１欠損初代皮膚線維芽細胞内で、そのＤＮＡを複製する、その能力を獲得することを示す図である。野生型マウス、ｃＧＡＳ-/-マウス、またはＩＦＮＡＲ１-/-マウスに由来する、初代皮膚線維芽細胞に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、３のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の１、４、１０、および２４時間後に回収した。ウイルスＤＮＡのコピー数は、定量的ＰＣＲにより決定した。図７７Ａは、ＭＶＡを感染させた、野生型皮膚線維芽細胞内、ｃＧＡＳ-/-皮膚線維芽細胞内、またはＩＦＮＡＲ１-/-皮膚線維芽細胞内のＤＮＡコピー数を示す。図７７Ｂは、ＭＶＡの感染の１時間後におけるＤＮＡコピー数と比較した倍数変化を示す。図７７Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させた、野生型皮膚線維芽細胞内、ｃＧＡＳ-/-皮膚線維芽細胞内、またはＩＦＮＡＲ１-/-皮膚線維芽細胞内のＤＮＡコピー数を示す。図７７Ｄは、ＭＶＡΔＥ５Ｒの感染の１時間後におけるＤＮＡコピー数と比較した倍数変化を示す。
【図７８Ａ−７８Ｄ】ＭＶＡΔＥ５Ｒが、ｃＧＡＳ欠損初代皮膚線維芽細胞内で、感染性子孫ウイルスを発生させる、その能力を獲得することを示す図である。野生型マウス、ｃＧＡＳ-/-マウス、またはＩＦＮＡＲ１-/-マウスに由来する、初代皮膚線維芽細胞に、ＭＶＡまたはＭＶＡΔＥ５Ｒを、０．０５のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の１、２４、および４８時間後に回収した。ウイルス力価は、ＢＨＫ２１細胞上の滴定により決定した。図７８Ａは、野生型皮膚線維芽細胞内、ｃＧＡＳ-/-皮膚線維芽細胞内、またはＩＦＮＡＲ１-/-皮膚線維芽細胞内の、感染後の時間経過にわたるＭＶＡ力価を示す。図７８は、ＭＶＡの感染の１時間後におけるウイルス力価と比較した倍数変化を示す。図７８Ｃは、野生型皮膚線維芽細胞内、ｃＧＡＳ-/-皮膚線維芽細胞内、またはＩＦＮＡＲ１-/-皮膚線維芽細胞内の、感染後の時間経過にわたるＭＶＡΔＥ５Ｒ力価を示す。図７８Ｄは、ＭＶＡΔＥ５Ｒの感染の１時間後におけるウイルス力価と比較した倍数変化を示す。
【図７９Ａ−７９Ｂ】ＭＶＡΔＥ５Ｒの、マウス黒色腫細胞への感染が、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮ−βタンパク質の分泌を、ＳＴＩＮＧ依存的に誘導することを示す図である。図７９Ａは、野生型Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫細胞内およびＳＴＩＮＧ-/-Ｂ１６−Ｆ１０細胞内の、ＭＶＡΔＥ５Ｒによる、ＩＦＮＢの誘導についてのＲＴ−ＰＣＲ結果を示す。野生型Ｂ１６−Ｆ１０細胞およびＳＴＩＮＧ-/-Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の１８時間後に回収した。ＲＮＡを抽出し、定量的リアルタイムＰＣＲ解析を実施した。図７９Ｂは、感染の１８時間後に回収された、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを感染させた野生型Ｂ１６−Ｆ１０細胞およびＳＴＩＮＧ-/-Ｂ１６−Ｆ１０細胞の上清中の、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルについてのＥＬＩＳＡ結果を示す。
【図８０】ＭＶＡΔＥ５Ｒの、マウス黒色腫細胞への感染が、免疫原性細胞死の特徴である、ＡＴＰの放出を誘導することを示す図である。Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、野生型ワクシニア、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。上清は、感染の４８時間後に回収した。ＡＴＰレベルは、ＡＴＰｌｉｔｅ  １ｓｔｅｐ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  ＡＴＰ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を使用することにより決定した。
【図８１】ＭＶＡゲノムの、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、ｈＦｌｔ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌを発現させる、組換えＭＶＡΔＥ５Ｒを作出するスキームを示す図である。合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ｈＦｌｔ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌの両方を発現させるようにデザインされた、単一の発現カセットを挿入するのに、ｐＵＣ５７ベクターを使用した。ｈＦｌｔ３Ｌのコード配列と、ｈＯＸ４０Ｌのコード配列とを、フーリン切断部位に続いて、Ｐｅｐ２Ａ配列を含むカセットで隔てた。Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、ｈＦｌｔ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌのための発現カセットの挿入を結果としてもたらす。
【図８２Ａ−８２Ｂ】組換えＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌウイルスが、ＰＣＲ解析により決定される通り、予測された挿入を果たしたことを示す図である。レーン１は、Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ製の１ｋｂに加えた、ＤＮＡラダーを示す。レーン２は、Ｆ０／Ｒ５プライマー対を使用し、予測サイズを１１２０ｂｐとするバンドを示す。レーン３は、Ｆ２／Ｒ２プライマー対を使用し、予測サイズを１１６６ｂｐとするバンドを示す。レーン４は、Ｆ５／Ｒ０プライマー対を使用し、予測サイズを１１３６ｂｐとするバンドを示す。
【図８３Ａ−８３Ｃ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌウイルスが、ｈＦｌｔ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌの両方を、感染細胞の表面に発現させることを示す図である。図８３Ａは、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌを、２４時間にわたり感染させたＢＨＫ２１細胞による、Ｙ軸上のｈＦｌｔ３Ｌの発現、およびＸ軸上のｈＯＸ４０Ｌの発現についてのＦＡＣＳ解析のドットプロットである。細胞に、１０のＭＯＩで感染させた。モック感染である、ウイルスなしの対照を組み入れた。図８３Ｂは、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌを、２４時間にわたり感染させた、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫による、Ｙ軸上のｈＦｌｔ３Ｌの発現、およびＸ軸上のｈＯＸ４０Ｌの発現についてのＦＡＣＳ解析のドットプロットである。細胞に、１０のＭＯＩで感染させた。モック感染である、ウイルスなしの対照を組み入れた。図８３Ｃは、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌを、２４時間にわたり感染させた、ヒト黒色腫細胞である、ＳＫ−ＭＥＬ２８による、Ｙ軸上のｈＦｌｔ３Ｌの発現、およびＸ軸上のｈＯＸ４０Ｌの発現についてのＦＡＣＳ解析のドットプロットである。細胞に、１０のＭＯＩで感染させた。モック感染である、ウイルスなしの対照を組み入れた。
【図８４】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ感染ＢＨＫ２１細胞内の、ｈＦｌｔ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌの発現についてのウェスタンブロット結果を示す図である。ＢＨＫ２１細胞に、モック感染させるか、またはＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌを感染させた。細胞溶解物は、感染の２４時間後に回収した。ウェスタンブロット解析は、抗ｈＦｌｔ３Ｌ抗体および抗ｈＯＸ４０Ｌ抗体を使用して実施した。
【図８５Ａ−８５Ｂ】ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを作出するスキームを示す図である。図８５Ａは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、抗体の重鎖および軽鎖を発現させるようにデザインされた、単一の発現カセットを伴うｐＣＢベクターの概略を示す。９Ｄ９の重鎖（ｍｕＩｇＧ２ａ）のコード配列と、軽鎖のコード配列とを、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てて、リボソームスキッピングを可能とした。両側において、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子に挟まれた、ワクシニアＰｓＥ／Ｌの制御下にある、抗ｍｕ−ＣＴＬＡ−４遺伝子、ならびにワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある、大腸菌キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子（ｇｐｔ）を含有する、ｐＣＢプラスミドを構築した。抗ｍｕ−ＣＴＬＡ−４を、ＴＫ遺伝子座から発現させる組換えウイルスは、ＴＫ遺伝子座における、ｐＣＢプラスミドＤＮＡと、ウイルスゲノムＤＮＡとの相同組換えを介して作出した。図８５Ｂは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ヒトＦｌｔ３ＬおよびマウスＯＸ４０Ｌの両方を、単一の発現カセット内の融合タンパク質として発現させる場合の概略である。ヒトＦｌｔ３Ｌのコード配列と、マウスＯＸ４０Ｌのコード配列とを、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てた。両側において、Ｅ４Ｌ遺伝子と、Ｅ６Ｒ遺伝子とに挟まれた、ヒトＦｌｔ３Ｌと、マウスＯＸ４０Ｌとの融合遺伝子を含有するｐＵＣ５７プラスミドを構築した。ヒトＦｌｔ３Ｌと、マウスＯＸ４０Ｌとの融合タンパク質を、Ｅ５Ｒ遺伝子座から発現させる組換えウイルスは、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における、ｐＵＣ５７プラスミドと、ウイルスゲノムＤＮＡとの相同組換えを介して作出した。
【図８６Ａ−８６Ｃ】組換えワクシニアウイルスである、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−Ｅ５Ｒ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを検証するＰＣＲ解析のスキームおよび結果、ならびに組換えウイルスを感染させた細胞による抗ＣＴＬＡ−４抗体の発現についての、ウェスタンブロットの結果を示す図である。図８６Ａは、異なる遺伝子断片を、挿入された、ｐＵＣ５７発現プラスミドによる発現カセットから増幅するのに使用されるプライマーの概略を示す。プライマー対である、ｆ１／ｒ１を使用して、全発現カセットを含有する、２７９５ｂｐのＰＣＲ断片を作出した。このプライマー対はまた、組換えウイルスの純度を点検するのにも使用した。プライマー対である、ｆ０／ｒ５を使用して、発現カセットが、ウイルスゲノム内の、右側の位置へと挿入されたことを確認した。ヒトＦｌｔ３Ｌ遺伝子は、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−Ｅ５Ｒ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌに由来するプライマー対である、ｆ１／ｒ３またはｆｏ／ｒ２を使用して増幅した。マウスＯＸ４０Ｌ遺伝子は、プライマー対である、ｆ４／ｒ１を使用して作出した。加えて、最後に、ｐＣＢ−Ｒ４プライマー対およびＴＫ−Ｆ５プライマー対を使用して、ＴＫ遺伝子座内に挿入される、抗ｍｕ−ＣＴＬＡ−４遺伝子を、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−Ｅ５Ｒ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ組換えウイルス、またはＭＶＡ−ＴＫ-−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−Ｅ５Ｒ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ組換えウイルスから作出した。図８６Ｂは、図８６Ａに記載されたプライマー対を使用する、ＰＣＲ結果のゲル画像と、プライマー対により増幅されるＤＮＡ断片の予測サイズを提示する表とを示す。図８６Ｃは、モック感染させるか、またはＥ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-ベクター、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４、Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−Ｃ７Ｌ-−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−Ｅ５Ｒ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させた、ヒトＳＫ−ＭＥＬ−２８黒色腫細胞についてのウェスタンブロットの結果を示す。細感染の２４時間後に、細胞溶解物を回収し、１０％のＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用して、ポリペプチドを分離した。ＨＲＰ連結抗マウスＩｇＧ（重鎖および軽鎖）抗体を使用して、全長（ＦＬ）の抗ｍｕＣＴＬＡ−４抗体の重鎖（ＨＣ）および軽鎖（ＬＣ）を検出した。
【図８７】ポックスウイルスファミリーの複数のメンバーに由来する、Ｅ５オーソログの、タンパク質配列のアライメントを示す図である。
【図８８Ａ−８８Ｂ】図８８Ａは、ワクシニアウイルスおよび改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）に由来するＥ５の、タンパク質配列のアライメントを示す。図８８Ｂは、ワクシニアウイルスおよび粘液腫ウイルスに由来するＥ５の、タンパク質配列のアライメントを示す。
【図８９Ａ−８９Ｂ】粘液腫ウイルスである、Ｍ３１Ｒが、ｃＧＡＳおよびＳＴＩＮＧにより誘導されるＩＦＮ−β経路を阻害することを示す図である。図８９Ａは、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、マウスｃＧＡＳ、ヒトＳＴＩＮＧを、Ｅ５Ｒ、Ｍ３１Ｒと併せて発現させるプラスミド、またはｐｃＤＮＡベクター対照を発現させるプラスミドをトランスフェクトしたことを示す。２４時間後、ルシフェラーゼシグナルを決定した。図８９Ｂは、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、マウスＳＴＩＮＧを、Ｅ５Ｒ、Ｍ３１Ｒと併せて発現させるプラスミド、またはｐｃＤＮＡベクター対照を発現させるプラスミドをトランスフェクトしたことを示す。２４時間後、ルシフェラーゼシグナルを決定した。
【図９０Ａ−９０Ｂ】ワクシニアＥ５が、ｃＧＡＳのユビキチン化を促進することを示す図である。図９０Ａは、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、Ｆｌａｇ−ｃＧＡＳおよびＨＡ−ユビキチンをトランスフェクトしたことを示す。２４時間後、細胞に、野生型ＶＡＣＶまたはＶＡＣＶΔＥ５Ｒを感染させた。細胞溶解物は、６時間後に回収した。ｃＧＡＳは、抗Ｆｌａｇ抗体で免疫沈降させ、ユビキチン化は、抗ＨＡ抗体により検出した。図９０Ｂは、全細胞溶解物（ＷＣＬ）中の、ｃＧＡＳおよびβ−アクチンについての、ウェスタンブロット解析を示す。
【図９１Ａ−９１Ｃ】ＩＴにおける、ＭＶＡΔＥ５Ｒが、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫片側腫瘍植込みモデルにおいて、腫瘍の増殖を遅延させ、生存を延長することを示すデータについてのグラフ表示である。図９１Ａは、Ｂ１６−Ｆ１０片側腫瘍植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームである。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの８日後、ＰＢＳ、４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡを、毎週２回、腫瘍内注射した。腫瘍サイズを測定し、マウスの生存をモニタリングした。図９１Ｂは、ＰＢＳ、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡによる処置で処置された腫瘍保有マウスについての、カプラン−マイヤー生存曲線のグラフである（ｎ＝５、*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；マンテル−コックス検定）。図９１Ｃは、ＰＢＳ、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡで処置されたマウスの生存中央値を示す表である。
【図９２Ａ−９２Ｅ】ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、ＭＶＡΔＥ５Ｒと比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮ−βタンパク質の分泌を結果としてもたらすことを示す図である。図９２Ａ〜９２Ｃは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒウイルスの作出の概略を示す。第１のステップは、Ｃ８Ｌ遺伝子座およびＣ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、Ｃ７Ｌ遺伝子を、ＰｓＥ／Ｌプロモーターの制御下にあるｈＦｌｔ３Ｌで置きかえる、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌの作出を伴う（図９２Ａ）。第２のステップは、ＴＫ遺伝子座における相同組換えを介して、ＴＫ遺伝子を、ＰｓＥ／Ｌプロモーターの制御下にあるｍＯＸ４０Ｌで置きかえる、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの作出を伴う（図９２Ｂ）。結果として得られるウイルスを、図５Ａおよび５Ｂに記載した。第３のステップは、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、Ｅ５Ｒ遺伝子を、Ｐ７．５プロモーターの制御下にあるｍＣｈｅｒｒｙで置きかえて、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒを作出することである（図９２Ｃ）。図９２Ｄは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒを感染させたＢＭＤＣ内の、ＩＦＮＢ遺伝子の発現についてのＲＴ−ＰＣＲ結果を示す。野生型およびＩＦＮＡＲ-/-のＢＭＤＣにモック感染させるか、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、もしくはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の１６時間後に回収し、ＲＴ−ＰＣＲを実施した。図９２Ｅは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒを感染させたＢＭＤＣの上清中の、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルについてのＥＬＩＳＡ結果を示す。野生型およびＩＦＮＡＲ-/-のＢＭＤＣにモック感染させるか、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、もしくはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。上清は、感染の１６時間後に回収し、ＥＬＩＳＡを実施して、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルを測定した。
【図９３Ａ−９３Ｂ】ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬおよびＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＶＡ−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを作出するスキームを示す図である。図９３Ａは、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを作出するスキームを示す。合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ヒトＦｌｔ３ＬおよびマウスＯＸ４０Ｌの両方を、単一の発現カセット内の融合タンパク質として発現させるために、ｐＵＣ５７プラスミドを構築する。ヒトＦｌｔ３Ｌのコード配列と、マウスＯＸ４０Ｌのコード配列とを、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てた。ヒトＦｌｔ３Ｌと、マウスＯＸ４０Ｌとの融合タンパク質を、Ｅ５Ｒ遺伝子座から発現させる組換えウイルスは、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ５Ｒ遺伝子座における、ｐＵＣ５７プラスミドと、ＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスゲノムとの相同組換えを介して作出した。図９３Ｂは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＶＡ−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを作出するスキームを示す。ヒトＦｌｔ３Ｌと、マウスＯＸ４０Ｌとの融合タンパク質を、Ｅ５Ｒ遺伝子座から発現させる組換えウイルスは、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ５Ｒ遺伝子座における、ｐＵＣ５７プラスミドと、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＶＡウイルスゲノムとの相同組換えを介して作出した。
【図９４Ａ−９４Ｂ】図９４Ａ：ＩＳＲＥ−ホタルルシフェラーゼレポーター、粘液腫Ｍ６２Ｒ、粘液腫Ｍ６２Ｒ−ＨＡ、粘液腫Ｍ６４Ｒ、粘液腫Ｍ６４Ｒ−ＨＡと併せて、レニラ属ルシフェラーゼを発現させる対照プラスミドである、ｐＲＬ−ＴＫ、ワクシニアＣ７Ｌ発現プラスミドまたは対照プラスミドをトランスフェクトされたＨＥＫ２９３Ｔ細胞についての二重ルシフェラーゼアッセイを示す図である。トランスフェクションの２４時間後に、採取の前に、さらに２４時間にわたり、細胞を、ＩＦＮ−βで処置した。図９４Ｂ：ＩＦＮＢ−ホタルルシフェラーゼレポーター、レニラ属ルシフェラーゼを発現させる対照プラスミドである、ｐＲＬ−ＴＫ、および粘液腫Ｍ６２Ｒ、粘液腫Ｍ６２Ｒ−ＨＡ、粘液腫Ｍ６４Ｒ、粘液腫Ｍ６４Ｒ−ＨＡと併せて、ＳＴＩＮＧを発現させるプラスミド、ワクシニアＣ７Ｌ発現プラスミドまたは対照プラスミドをトランスフェクトされたＨＥＫ２９３Ｔ細胞についての二重ルシフェラーゼアッセイを示す図である。細胞は、トランスフェクションの２４時間後に採取した。
【図９５】ＭＶＡゲノムの、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、ｈＦｌｔ３ＬおよびｍＯＸ４０Ｌを発現させる、組換えＭＶＡΔＥ５Ｒを作出するスキームを示す図である。合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ｈＦｌｔ３ＬおよびｍＯＸ４０Ｌの両方を発現させるようにデザインされた、単一の発現カセットを挿入するのに、ｐＵＣ５７ベクターを使用した。ｈＦｌｔ３Ｌのコード配列と、ｍＯＸ４０Ｌのコード配列とを、フーリン切断部位に続いて、Ｐｅｐ２Ａ配列を含むカセットで隔てた。Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、ｈＦｌｔ３ＬおよびｍＯＸ４０Ｌのための発現カセットの挿入を結果としてもたらす。
【図９６Ａ−９６Ｂ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌウイルスが、ｈＦｌｔ３ＬおよびｍＯＸ４０Ｌの両方を、感染細胞の表面上で発現させることを示す図である。図９６Ａは、ＢＨＫ２１細胞、マウス黒色腫細胞である、Ｂ１６−Ｆ１０、またはヒト黒色腫細胞である、ＳＫ−ＭＥＬ２８による、Ｙ軸上のｈＦｌｔ３Ｌの発現、およびＸ軸上のｍＯＸ４０Ｌの発現についてのＦＡＣＳ解析のドットプロットを示す。細胞に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで、２４時間にわたり感染させた。ウイルスなしの、モック感染対照を組み入れた。図９６Ｂは、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳを感染させた、感染ありの、ＢＨＫ２１細胞、Ｂ１６−Ｆ１０細胞、およびＳＫ−ＭＥＬ２８細胞上の、ヒトＦｌｔ３ＬおよびマウスＯＸ４０Ｌ蛍光強度中央地（ＭＦＩ）についてのグラフを示す。
【図９７】図９７〜１０２は、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、Ｂ１６−Ｆ１０両側腫瘍モデルにおいて、注射ありの遠隔腫瘍内、および注射なしの遠隔腫瘍内、ならびに脾臓内の、腫瘍浸潤エフェクターＴ細胞の活性化の、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、または熱不活化ＭＶＡと比較した増大をもたらしたことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図９７は、実験スキームを示す。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、２×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、等量の熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳを、右脇腹の大型腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり、腫瘍内（ＩＴ）注射した。２回目の注射の２日後に、脾臓を採取し、ＥＬＩＳＰＯＴ解析を実施して、脾臓内の、腫瘍特異的Ｔ細胞を査定した。また、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の両方を単離し、腫瘍浸潤リンパ球を、ＦＡＣＳにより解析した。
【図９８Ａ−９８Ｂ】ＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、実施した。照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞（１５０，０００個）と、脾臓細胞（１，０００，０００個）とを、９６ウェルプレート内で共培養することによりを示す図である。図９８Ａは、左から右へと、三連試料についてのＥＬＩＳＰＯＴの画像を示す。図９８Ｂは、精製ＣＤ８+Ｔ細胞１，０００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポット数についてのグラフを示す。各バーは、個々のマウス（ｎ＝３〜８）（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１、ｔ検定）に由来する脾臓試料を表す。
【図９９Ａ−９９Ｃ】図９９Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す。図９９Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図９９Ｃは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフ）を示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）である。
【図１００Ａ−１００Ｃ】図１００Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１００Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（*Ｐ＜０．０５；ｔ検定）。図１００Ｃは、ＣＤ４+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフ）を示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）である。
【図１０１Ａ−１０１Ｃ】図１０１Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１０１Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（****Ｐ＜０．０００１、ｔ検定）。図１０１Ｃは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフ）を示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）（*Ｐ＜０．０５；****Ｐ＜０．０００１、ｔ検定）である。
【図１０２Ａ−１０２Ｃ】図１０２Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１０２Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（**Ｐ＜０．０１；ｔ検定）。図１０２Ｃは、ＣＤ４+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフ）を示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１；****Ｐ＜０．０００１、ｔ検定）である。
【図１０３Ａ−１０４Ｃ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、注射ありの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+調節性Ｔ細胞を低減したが、注射なしの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+調節性Ｔ細胞を低減しなかったことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１０３Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１０３Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１０３Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（*Ｐ＜０．０５、ｔ検定）。図１０４Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射なしの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１０４Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である。図１０４Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である。
【図１０５Ａ−１０５Ｃ】図１０５Ａ〜１０９Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、注射ありの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+調節性Ｔ細胞を、優先的に低減することを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１０５Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射なしの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１０５Ｂは、注射ありの腫瘍内の、ＣＤ４+細胞のうちの、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１０５Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（*Ｐ＜０．０５、ｔ検定）。
【図１０６Ａ−１０６Ｃ】図１０６Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射なしの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１０６Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である。図１０６Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である。
【図１０７Ａ−１０７Ｃ】図１０７Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射なしの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３-ＣＤ４+細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１０７Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３-ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である。図１０７Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＯＸ４０+ＦｏｘＰ３-ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である。
【図１０８】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射なしの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＣＤ８+細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。
【図１０９Ａ−１０９Ｃ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、注射ありの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+調節性Ｔ細胞の低減の、ＭＶＡΔＥ５Ｒと比較した増大を結果としてもたらすことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１０９Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＰＢＳによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１０９Ｂは、注射ありの腫瘍内の、ＣＤ４+細胞のうちの、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１、ｔ検定）。図１０９Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜９）である（**Ｐ＜０．０１、ｔ検定）。
【図１１０】図１１０〜１１５Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、Ｂ１６−Ｆ１０両側マウス黒色腫モデルにおいて、ＯＸ４０-/-マウスの、注射ありの遠隔腫瘍内、および注射なしの遠隔腫瘍内の、腫瘍浸潤エフェクターＣＤ８+Ｔ細胞および腫瘍浸潤エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞の活性化の、野生型マウスと比較した増大をもたらしたことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１１０は、実験スキームを示す。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの１０日後、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳの腫瘍内注射（４×１０7ｐｆｕ）を、右脇腹の大型腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり実施した。注射ありの遠隔腫瘍、および注射なしの遠隔腫瘍の両方を、２回目の注射の２日後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球を、ＦＡＣＳにより解析した。
【図１１１Ａ−１１１Ｅ】図１１１Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１１１Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１１Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１１Ｄは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１１Ｅは、腫瘍１グラム当たりのグランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。
【図１１２Ａ−１１２Ｅ】図１１２Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１１２Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１２Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１２Ｄは、ＣＤ４+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１２Ｅは、腫瘍１グラム当たりのグランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。
【図１１３Ａ−１１３Ｂ】図１１３Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射が、ＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞を低減できないことを示す図である。ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置の後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットである。図１１３Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。
【図１１４Ａ−１１４Ｃ】図１１４Ａ〜１１５Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射が、野生型マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞およびＯＸ４０+ＦｏｘＰ３-ＣＤ４+Ｔ細胞を低減することを裏付ける図である。図１１４Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１１４Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１４Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。
【図１１５Ａ−１１５Ｃ】図１１５Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３-ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１１５Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３-ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。図１１５Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＯＸ４０+ＦｏｘＰ３-ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜１０）である。
【図１１６Ａ−１１６Ｅ】図１１６Ａ〜１１９Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、ＯＸ４０-/-マウスの、遠隔における、注射なしの腫瘍内の、腫瘍浸潤エフェクターＣＤ８+Ｔ細胞および腫瘍浸潤エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞の増殖および活性化の、野生型マウスと比較した増大を結果としてもたらすことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１１６Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す。図１１６Ｂは、ＣＤ４５+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１６Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１６Ｄは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１６Ｅは、腫瘍１グラム当たりのグランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。
【図１１７Ａ−１１７Ｃ】図１１７Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射なしの腫瘍内の、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１１７Ｂは、ＣＤ８+細胞のうちの、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１７Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＫｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。
【図１１８Ａ−１１８Ｅ】図１１８Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１１８Ｂは、ＣＤ４５+細胞のうちの、ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１８Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１８Ｄは、ＣＤ４+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１８Ｅは、腫瘍１グラム当たりのグランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。
【図１１９Ａ−１１９Ｃ】図１１９Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、野生型マウスおよびＯＸ４０-/-マウスに由来する、注射なしの腫瘍内の、Ｋｉ６７+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１１９Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、Ｋｉ６７+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。図１１９Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＫｉ６７+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜１０）である。
【図１２０】図１２０〜１２４Ｂは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射は、Ｔ細胞を、リンパ器官から動員せずに、抗腫瘍効果を誘導することが可能であったことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１２０は、実験スキームを示す。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの９日後、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳの腫瘍内注射（４×１０7ｐｆｕ）を、右脇腹の大型腫瘍へと、９および１２日目に、２回実施した。注射ありの腫瘍を、２回目の注射の２日後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球を、ＦＡＣＳにより解析した。リンパ球が、リンパ器官から逸出するのを阻止するＦＴＹ７２０（２５μｇ）は、７、９、１１、および１３日目に、マウスの腹腔内へと施した。
【図１２１】図１２１（上パネル）は、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の両方の、時間経過にわたる腫瘍体積についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。図１２１（下パネル）は、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の両方の、初回の注射の６日目における腫瘍体積についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。
【図１２２Ａ−１２２Ｄ】ＦＴＹ７２０またはＤＭＳＯの腹腔内送達と組み合わせた、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、マウスに由来する、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１２２Ｂは、ＣＤ４５+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。図１２２Ｃは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。図１２２Ｄは、ＣＤ８+細胞のうちの、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。
【図１２３Ａ−１２３Ｃ】図１２３Ａは、ＦＴＹ７２０またはＤＭＳＯの腹腔内送達と組み合わせた、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、マウスに由来する、注射ありの腫瘍のうちの、腫瘍流入領域リンパ節内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１２３Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。図１２３Ｃは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。
【図１２４Ａ−１２４Ｂ】図１２４Ａは、ＦＴＹ７２０またはＤＭＳＯの腹腔内送達と組み合わせた、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳによる処置後における、マウスに由来する、注射ありの腫瘍のうちの、腫瘍流入領域リンパ節内の、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１２４Ｂは、ＣＤ８+細胞のうちの、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝７〜８）である。
【図１２５】図１２５〜１２９Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内送達が、マウスＡＴ３乳がん脂肪パッド植込みモデルにおいて、腫瘍の増殖を遅延させ、注射ありの腫瘍内の、ＣＤ８+Ｔ細胞を活性化させ、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞を低減することを示すデータについてのグラフ表示である。図１２５は、マウス乳がんＡＴ３脂肪パッド植込みモデルのための、腫瘍の植込みおよび処置のスキームである。略述すると、ＡＴ３細胞（１×１０6個）を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの、第４乳腺脂肪体へと植え込んだ。腫瘍植込みの１４日後、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳの腫瘍内注射（６×１０7ｐｆｕ）を、３日間を隔てて、２回にわたり実施した。注射ありの腫瘍を測定し、ＦＡＣＳ解析のために採取した。
【図１２６Ａ−１２６Ｂ】図１２６Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置の後における、注射ありのＡＴ３腫瘍の、時間経過にわたる腫瘍体積についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。初回の注射後６日目における、注射ありの腫瘍の、腫瘍質量についてのグラフである。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２６Ｂは、６日目における腫瘍質量を示す。*＝ｐ＜０．０５である。
【図１２７Ａ−１２７Ｅ】図１２７Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射ありの、ＡＴ３腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１２７Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２７Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２７Ｄは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２７Ｅは、腫瘍１グラム当たりのグランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。
【図１２８Ａ−１２８Ｅ】図１２８Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射ありの、ＡＴ３腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１２８Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２８Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２８Ｄは、ＣＤ４+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２８Ｅは、腫瘍１グラム当たりのグランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。
【図１２９Ａ−１２９Ｃ】図１２９Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳによる処置後における、注射ありの、ＡＴ３腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１２９Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。図１２９Ｃは、腫瘍１グラム当たりのＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５）である。
【図１３０】図１３０〜１３１Ｂは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ送達と、抗ＰＤ−Ｌ１の腹腔内送達との組合せが、両側Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫植込みモデルにおいて、治療効能の増強を結果としてもたらすことを示すデータについてのグラフ表示である。図１３０は、実験スキームを示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への１×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳを、右脇腹の大型腫瘍へと、毎週２回、腫瘍内（ＩＴ）注射した。マウスの１つの群にはまた、毎週２回、ＩＴにおける、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌと共に、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（２５０μｇ）も施した。腫瘍体積およびマウスの生存をモニタリングした。
【図１３１Ａ−１３１Ｂ】図１３１Ａは、腫瘍内における、ＰＢＳ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＩＴにおける、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、ＩＰにおける、抗ＰＤ−Ｌ１の組合せで処置されたマウスの、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の両方の腫瘍体積を示す図である。図１３１Ｂは、３つの群についての、カプラン−マイヤー生存曲線を示す図である。
【図１３２Ａ−１３２Ｂ】図１３２Ａ−１３４Ｂは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌの、ＢＭＤＣへの感染が、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮ−βタンパク質の分泌を誘導し；ｅｘ  ｖｉｖｏにおける、ヒト腫瘍（乳房外ページェット病）への、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌの感染が、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の増大、およびＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の低減を結果としてもたらすことを示すデータについてのグラフ表示である。図１３２Ａは、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させたＢＭＤＣについての、ＲＴ−ＰＣＲ結果を示す図である。細胞は、感染の６時間後に回収した。ＲＮＡを抽出し、ＲＴ−ＰＣＲを実施した。図１３２Ｂは、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させたＢＭＤＣ内の、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルを示す図である。上清は、感染の１９時間後に回収した。ＩＦＮ−βタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１３３Ａ−１３３Ｂ】図１３３Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳの、２日間にわたる感染後における、ヒト腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１３３Ｂは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳの、２日間にわたる感染後における、ヒト腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。
【図１３４Ａ−１３４Ｂ】図１３４Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳ対照の、２日間にわたる感染後における、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイム+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す図である。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝３）である。図１３４Ｂは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳ対照の、２日間にわたる感染後における、ＣＤ４+細胞のうちの、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す図である。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝３）である。
【図１３５Ａ−１３５Ｃ】図１３５Ａ〜１３７Ｂは、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒが、ＢＭＤＣ内およびＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞内で、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＥ３Ｌと比較して、高レベルのＩ型ＩＦＮを誘導することを示すデータについてのグラフ表示である。図１３５Ａ〜１３５Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒゲノム、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌゲノムの、Ｅ２Ｌ遺伝子座およびＥ４ＬＲ遺伝子座における相同組換えを介して、組換えＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５ＲおよびＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを作出するスキームを示す図である。Ｅ２Ｌ遺伝子座およびＥ４Ｌ遺伝子座において生じた相同組換えは、ＭＶＡΔＥ５Ｒゲノム、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌゲノムからの、Ｅ３Ｌ遺伝子の欠失を結果としてもたらす。
【図１３６】ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＭＶＡ、または熱不活化ＭＶＡと比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現を誘導することを示す図である。野生型マウスまたはｃＧＡＳ-/-マウスに由来するＢＭＤＣに、ＭＶＡ、熱不活化ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。感染の６時間後に細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現について検討した。
【図１３７Ａ−１３７Ｂ】ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒの、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞への感染が、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒと比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮ−βタンパク質の分泌を誘導することを示す図である。図１３７Ａは、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた、野生型Ｂ１６−Ｆ１０細胞、またはＭＤＡ５-/-Ｂ１６−Ｆ１０細胞、またはＳＴＩＮＧ-/-ＭＤＡ５-/-Ｂ１６−Ｆ１０細胞による、定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を示す。感染の１６時間後に細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現について検討した。図１３７Ｂは、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた、野生型Ｂ１６−Ｆ１０細胞、またはＭＤＡ５-/-Ｂ１６−Ｆ１０細胞、またはＳＴＩＮＧ-/-ＭＤＡ５-/-Ｂ１６−Ｆ１０細胞内の、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルを示す。上清は、感染の２４時間後に回収し、上清中の、ＩＦＮ−βタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１３８】図１３８〜１３９Ｂは、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌが、ヒトＦｌｔ３ＬおよびマウスＯＸ４０Ｌのトランス遺伝子を、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞内で発現させ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内送達が、Ｂ１６−Ｆ１０マウス黒色腫モデルにおいて、強力な全身抗腫瘍Ｔ細胞応答を誘導したことを示すデータについてのグラフ表示である。図１３８は、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを感染させたＢ１６−Ｆ１０細胞上の、ｍＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの発現を裏付けるＦＡＣＳデータを示す。Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞を、感染の１時間後に洗浄し、感染の２４時間後に採取した。ＦＡＣＳのために、細胞を、抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体または抗ｈＦｌｔ３Ｌ抗体で篩にかけた。
【図１３９Ａ−１３９Ｂ】ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、脾臓内の、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌと比較して強力な、抗腫瘍特異的Ｔ細胞をもたらしたことを示す。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、２×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、等量の熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳを、右脇腹の大型腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり、腫瘍内（ＩＴ）注射した。２回目の注射の２日後に、脾臓を採取し、ＥＬＩＳＰＯＴ解析を実施して、脾臓内の、腫瘍特異的Ｔ細胞を査定した。ＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞（１５０，０００個）と、脾臓細胞（１，０００，０００個）とを、９６ウェルプレート内で共培養することにより実施した。図１３９Ａは、同じ処置群内のマウスに由来する脾臓細胞の組合せによる三連試料についてのＥＬＩＳＰＯＴの画像を示す。図１３９Ｂは、脾臓細胞１，０００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポット数についてのグラフを示す。各ドットは、個々のマウス（ｎ＝５〜６）に由来する、脾臓細胞試料（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１、ｔ検定）を表す。
【図１４０−１４１Ｂ】ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内送達が、野生型およびβ２Ｍ-/-のＢ１６−Ｆ１０腫瘍細胞の両方の増殖を遅延させたことを示すデータについてのグラフ表示である。図１４０は、実験スキームを示す。略述すると、野生型またはｂ２Ｍ-/-のＢ１６−Ｆ１０腫瘍細胞（２×１０5個）（これらは、本発明者らの実験室内で、ＣＲＩＳＰＲ−ｃａｓ９技術により作出された）を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの右脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの１０日後、腫瘍に、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを、毎週２回注射した。腫瘍体積を測定し、マウスの生存をモニタリングした。図１４１Ａは、ＰＢＳ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌで、腫瘍内において処置されたマウスにおける、注射ありの、野生型およびｂ２Ｍ-/-のＢ１６−Ｆ１０腫瘍の腫瘍体積を示す。図１４１Ｂは、４つの群についての、カプラン−マイヤー生存曲線を示す。
【図１４２】図１４２〜１４８は、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、ＡＴ３両側腫瘍植込みモデルにおいて、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌと比較して、注射ありの腫瘍内の、腫瘍浸潤エフェクターＴ細胞の活性化の増大もたらし、マクロファージおよびＤＣの百分率を低減したことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１４２は、実験スキームを示す図である。略述すると、ＡＴ３乳がん細胞１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの、第４乳腺脂肪体へと植え込んだ。腫瘍植込みの１２日後、６×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＰＢＳを、両側の脇腹の腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり、腫瘍内（ＩＴ）注射した。注射ありの腫瘍を単離した。腫瘍浸潤リンパ球および骨髄細胞を、ＦＡＣＳにより解析した。
【図１４３Ａ−１４３Ｅ】図１４３Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１４３Ｂは、ＣＤ４５+細胞のうちの、ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４３Ｃは、ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４３Ｄは、ＣＤ８+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）である。図１４３Ｅは、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）である。
【図１４４Ａ−１４４Ｃ】図１４４Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１４４Ｂは、ＣＤ８+細胞のうちの、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）である。図１４４Ｃは、Ｋｉ６７+ＣＤ８+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）である。
【図１４５Ａ−１４５Ｅ】図１４５Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１４５Ｂは、ＣＤ３+細胞のうちの、ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４５Ｃは、ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４５Ｄは、ＣＤ４+細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）である。図１４５Ｅは、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±Ｔ細胞である（Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。
【図１４６Ａ−１４６Ｃ】図１４６Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１４６Ｂは、ＣＤ４+細胞のうちの、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４６Ｃは、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭである（Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。
【図１４７Ａ−１４７Ｃ】図１４７Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌによる処置後における、注射ありの腫瘍内の、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１４７Ｂは、ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+細胞のうちの、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４７Ｃは、ＯＸ４０+ＦｏｘＰ３+ＣＤ４+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。
【図１４８Ａ−１４８Ｈ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、注射ありの腫瘍内の、マクロファージおよびＤＣの百分率を低減することを示す、一連のデータを示す図である。図１４８Ａは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌによる処置の後における、注射ありの腫瘍内の、マクロファージの百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である。図１４８Ｂは、マクロファージの絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４８Ｃは、ＤＣの百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４８Ｄは、ＤＣの絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４８Ｅは、ＣＤ１１ｂ+ＤＣの百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４８Ｆは、ＣＤ１１ｂ+ＤＣの絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４８Ｇは、ＣＤ１０３+ＤＣの百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。図１４８Ｈは、ＣＤ１０３+ＤＣの絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝４〜６）である（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１、ｔ検定）。
【図１４９−１５０】ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射の、抗ＰＤ−Ｌ１抗体および抗ＣＴＬＡ−４抗体との組合せが、ＭＭＴＶ−ＰｙＭＴ乳がんモデルにおいて、優れた抗腫瘍効能を及ぼしたことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１４９は、実験スキームを示す。最初の腫瘍が触知可能となった後で、４×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬまたはＰＢＳを、腫瘍へと、毎週２回、腫瘍内（ＩＴ）注射した。２５０μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体および１００μｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体、またはアイソタイプ対照抗体を、各マウスへと、毎週２回、腹腔内注射した。腫瘍体積は、毎週２回測定した。図１５０は、ＩＴにおける、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ、およびＩＰにおける、抗ＰＤ−Ｌ１抗体および抗ＣＴＬＡ−４抗体による処置の後における、腫瘍増殖曲線のグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝３〜４）である。
【図１５１】図１５１〜１５２Ｂは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌからの、Ｃ１１Ｒ遺伝子の欠失が、ＢＭＤＣ内の、ＩＦＮの産生を増大させることを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１５１は、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ΔＣ１１Ｒを作出するための、相同組換えの概略を示す図である。
【図１５２Ａ−１５２Ｂ】ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ΔＣ１１Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、ＭＶＡΔＥ５ＲまたはＭＶＡと比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現（図１５２Ａ）およびＩＦＮＢタンパク質の分泌（図１５２Ｂ）を誘導することを示す図である。野生型マウスに由来するＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ΔＣ１１Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。ＩＦＮＢ遺伝子の発現を評価するために、感染の６時間後に細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現について検討した。ＢＭＤＣからの、ＩＦＮ−ｂタンパク質の分泌について調べるために、感染の１９時間後に、上清を回収した。ＩＦＮ−ｂタンパク質レベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１５３】図１５３〜１５４Ｃは、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌからの、ＷＲ１９９遺伝子の欠失が、ＢＭＤＣ内の、ＩＦＮの産生を増大させることを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１５３は、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ΔＷＲ１９９を作出するための、相同組換えの概略を示す図である。Ｂ１７Ｌ遺伝子座およびＢ１９Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、２つのＦＲＴ部位で挟まれた、ＷＲ１９９の欠失およびｍｃｈｅｒｒｙのための発現カセットの挿入を結果としてもたらす。
【図１５４Ａ−１５４Ｃ】図１５４Ａは、ＰＢＳ、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、または熱不活化ＭＶＡを、１０のＭＯＩで感染させた、野生型マウスまたはｃＧＡＳ-/-マウスに由来するＢＭＤＣ内の、ＩＦＮＢ遺伝子の発現を示す。図１５４Ｂ〜１５４Ｃは、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ΔＣ１１Ｒの、ＢＭＤＣへの感染が、ＭＶＡΔＥ５ＲまたはＭＶＡと比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現（図１５４Ｂ）およびＩＦＮＢタンパク質の分泌（図１５４Ｃ）を誘導することを示す。野生型マウスに由来するＢＭＤＣに、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ΔＣ１１Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。ＩＦＮＢ遺伝子の発現を評価するために、感染の６時間後に細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現について検討した。ＢＭＤＣからの、ＩＦＮ−βタンパク質の分泌について調べるために、感染の１９時間後に、上清を回収した。ＩＦＮ−βタンパク質レベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１５５】ワクシニアウイルス（ＷＲ）ゲノムの、Ｂ１Ｒ遺伝子座およびＢ３Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、組換えＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスを作出するスキームを示す図である。Ｂ１Ｒ遺伝子座およびＢ３Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、ワクシニアウイルス（ＷＲ）ゲノムからの、Ｂ２Ｒ遺伝子の欠失を結果としてもたらす。
【図１５６Ａ−１５６Ｂ】ＶＡＣＶΔＢ２Ｒが、鼻腔内感染モデルで、高度に弱毒化されたことを示す図である。図１５６Ａは、高用量のＶＡＣＶΔＢ２Ｒ（Ｈ、２×１０7ｐｆｕ）、または低用量のＶＡＣＶΔＢ２Ｒ（Ｌ、２×１０6ｐｆｕ）の鼻腔内感染の後における体重減少を示す。図１５６Ｂは、高用量のＶＡＣＶΔＢ２Ｒ（Ｈ、２×１０7ｐｆｕ）、または低用量のＶＡＣＶΔＢ２Ｒ（Ｌ、２×１０6ｐｆｕ）を鼻腔内感染させたマウスについての、カプラン−マイヤー生存曲線を示す。
【図１５７Ａ−１５７Ｂ】組換えＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、およびＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒウイルスの作出の概略を示す図である。図１５７Ａは、ワクシニアＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎゲノムの、Ｂ１Ｒ遺伝子座およびＢ３Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＢ２Ｒが作出される結果として、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎゲノムからの、Ｂ２Ｒ遺伝子の欠失がもたらされることを示す。図１５７Ｂは、ワクシニアＶＡＣＶΔＥ５Ｒゲノム、またはワクシニアＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５Ｒゲノムのそれぞれの、Ｂ１Ｒ遺伝子座およびＢ３Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、およびＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒが作出されることを示す。Ｂ１Ｒ遺伝子座およびＢ３Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒゲノム、またはＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５Ｒゲノムのそれぞれからの、Ｂ２Ｒ遺伝子の欠失を結果としてもたらす。
【図１５８】ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、およびＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒが、鼻腔内感染モデルで、高度に弱毒化されることを示す図である。野生型マウスに、２×１０7ｐｆｕの、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、またはＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒを鼻腔内感染させ、生存および体重減少を、毎日モニタリングした。この図は、これらの５つ異なるウイルスの鼻腔内感染の後における体重減少を示す。
【図１５９Ａ−１５９Ｂ】ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、およびＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒの、マウスＢＭＤＣへの感染が、ＶＡＣＶΔＢ２ＲまたはＶＡＣＶΔＥ５Ｒと比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮＢタンパク質の分泌を誘導することを示す図である。図１５９Ａは、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔ８３Ｎ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５Ｒ、またはＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた、野生型ＢＭＤＣ細胞内、およびｃＧＡＳノックアウトＢＭＤＣ細胞内の、ＩＦＮＢ遺伝子の発現を示す。感染の６時間後に細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現について検討した。図１５９Ｂは、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔ８３Ｎ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５Ｒ、またはＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた、野生型ＢＭＤＣ細胞内、およびｃＧＡＳノックアウトＢＭＤＣ細胞内の、ＩＦＮ−γタンパク質の分泌を示す。上清は、感染の２４時間後に回収し、上清中の、ＩＦＮ−γタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１６０】ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、およびＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒの、マウスＢＭＤＣへの感染が、ＶＡＣＶΔＢ２ＲまたはＶＡＣＶΔＥ５Ｒと比較して、高レベルの、ＳＴＩＮＧ、ＩＲＦ３、およびＴＢＫ１のリン酸化を誘導することを示す図である。野生型ＢＭＤＣ細胞に、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５Ｒ、またはＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞溶解物は、異なる時点で回収した。ＳＴＩＮＧ、ＩＲＦ３、およびＴＢＫ１のリン酸化は、リン酸化したＳＴＩＮＧ、ＩＲＦ３、およびＴＢＫ１のそれぞれに対する抗体により検出した。
【図１６１】まず、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮゲノムのＴＫ遺伝子座における相同組換えを介して、次いで、Ｅ５Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、抗ｍｕＣＴＬＡ−４抗体、ならびにｈＦｌｔ３Ｌタンパク質、ｍＯＸ４０Ｌタンパク質、およびｍＩＬ１２タンパク質を発現させる、組換えＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＴＫΔＥ５Ｒウイルスを作出する、段階的戦略のスキームを示す図である。ｐＣＢベクターを使用して、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下で、抗ｍｕＣＴＬＡ−４抗体の、重鎖および軽鎖を発現させるように、単一の発現カセットを挿入した。ＴＫ−Ｌ部位およびＴＫ−Ｒ部位において生じた相同組換えは、抗ｍｕＣＴＬＡ−４抗体の発現カセットの、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎゲノム上のＴＫ遺伝子座への挿入を結果としてもたらす。ｐＵＣ５７ベクターを使用して、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ融合タンパク質、およびｍＩＬ−１２の両方を発現させるようにデザインされた、２つの発現カセットを挿入した。ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌのコード配列を、フーリン切断部位に続く、Ｐｅｐ２Ａ配列で隔てた。ｍＩＬ１２の、ｐ４０サブユニットのコード配列と、ｐ３０サブユニットのコード配列とを、フーリン切断部位に続く、Ｐｅｐ２Ａ配列で隔てた。ｐ３０サブユニットのＣ末端に、マトリックス結合性配列でタグ付けした。Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えは、ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬおよびｍＩＬ１２のための発現カセットの、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ゲノムの、Ｅ５Ｌ遺伝子座への挿入を結果としてもたらす。
【図１６２】ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）ゲノムの、Ｂ１Ｒ遺伝子座およびＢ３Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、Ｂ２Ｒ遺伝子の欠失を伴う、組換えＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２ウイルスを作出するスキームを示す図である。Ｂ１Ｒ遺伝子座およびＢ３Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒウイルス（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ）を作出するための、ウイルスゲノムからの、Ｂ２Ｒ遺伝子の欠失を結果としてもたらす。
【図１６３】ＢＳＣ４０細胞内の、組換えウイルスである、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）、およびＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ）の、野生型ＶＡＣＶと比較した、多段階増殖曲線を示す図である。ＢＳＣ４０細胞に、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２、およびＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒを、０．０１のＭＯＩで感染させた。ウイルス試料は、異なる時点で回収し、ウイルス力価は、ＢＳＣ４０細胞を使用して決定した。
【図１６４Ａ−１６４Ｂ】ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ）の、マウスＢＭＤＣへの感染が、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）と比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮ−γタンパク質の分泌を誘導することを示す図である。図１６４Ａは、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、または熱不活化ＭＶＡを、１０のＭＯＩで感染させた、野生型ＢＭＤＣ細胞内の、ＩＦＮＢ遺伝子の発現を示す。感染の６時間後に細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現について検討した。図１６４Ｂは、図１６４Ａと同じ感染における、ＩＦＮ−γタンパク質の分泌を示す。上清は、感染の２４時間後に回収し、上清中の、ＩＦＮ−γタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。
【図１６５Ａ−１６５Ｃ】ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）を感染させた、Ｂ１６−Ｆ１０細胞内、およびウイルスを注射した腫瘍内の、トランス遺伝子である、抗ｍｕＣＴＬＡ−４、ｍＯＸ４０Ｌ、またはヒトＦｌｔ３Ｌの発現を示す図である。図１６５Ａは、マウス抗ＣＴＬＡ−４およびヒトＦｌｔ３Ｌが、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）を感染させた、Ｂ１６−Ｆ１０細胞内で発現されることを裏付けるウェスタンブロットを示す。ＦＬ：全長の抗ｍｕＣＴＬＡ−４；ＨＣ：抗ｍｕＣＴＬＡ−４の重鎖；ＬＣ：抗ｍｕＣＴＬＡ−４の軽鎖である。図１６５Ｂは、マウス黒色腫細胞である、Ｂ１６−Ｆ１０上の、ｍＯＸ４０発現についてのＦＡＣＳ解析のドットプロットを示す。細胞に、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＧＦＰを発現させる）を、１０のＭＯＩで、２４時間にわたり感染させた。ウイルスなしの、モック感染対照を組み入れた。細胞を、抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体で染色した。図１６５Ｃは、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）ウイルスの腫瘍内注射の後における、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫の腫瘍内の、ｍＩＬ−１２の発現を示す。皮内に植え込まれたＢ１６−Ｆ１０黒色腫の腫瘍に、１００μｌのＰＢＳ中に、４×１０7ｐｆｕの、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）を注射し、腫瘍は、処置の４８時間後に回収した。腫瘍試料を溶解させ、マウスＩＬ−１２の発現について、抗ｐ４０抗体を使用する、ウェスタンブロットにより検討した。
【図１６６Ａ−１６６Ｄ】図１６６Ａ〜１６６Ｃは、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）ウイルスの、３つの、異なるマウスがん細胞系への感染の後における、マウスＩＬ−１２の、発現および分泌を示す図である。腫瘍細胞に、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２を感染させるか、またはモック感染させた。上清は、ウイルス感染の２４および４８時間後に回収し、細胞培養物上清中の、ＩＬ−１２の濃度は、ＥＬＩＳＡにより決定した。図１６６Ａは、ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒを感染させた、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞内の、ｍＩＬ−１２レベルを示す。図１６６Ｂは、ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒを感染させた、４Ｔ１乳がん細胞内の、ｍＩＬ−１２レベルを示す。図１６６Ｃは、ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒを感染させた、ＭＣ３８結腸がん細胞内の、ｍＩＬ−１２レベルを示す。図１６６Ｄは、ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒで処置されたマウスにおける、血清ｍＩＬ−１２レベルを示す。ウイルスの腫瘍内注射の、４８時間および７２時間後、マウスを安楽死させ、血液／血清を、ＥＬＩＳＡによるサイトカイン測定のために回収した。
【図１６７Ａ−１６７Ｂ】両側Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍植込みモデルで、単独における、または抗ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせた、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）の腫瘍内送達の、抗腫瘍効能を示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への１×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、４×１０7ｐｆｕの、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）、熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳを、右脇腹の大型腫瘍へと、毎週２回、腫瘍内（ＩＴ）注射した。マウスの１つの群にはまた、毎週２回、ＩＴにおける、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）と共に、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（２５０μｇ）も施した。腫瘍体積およびマウスの生存をモニタリングした。図１６７Ａは、腫瘍内における、ＰＢＳ、もしくはＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）、熱不活化ＭＶＡ、またはＩＴにおける、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）に加えた、ＩＰにおける、抗ＰＤ−Ｌ１の組合せで処置されたマウスの、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の両方の腫瘍体積を示す。図１６７Ｂは、４つの群についての、カプラン−マイヤー生存曲線を示す。
【図１６８Ａ−１６８Ｂ】ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２ΔＢ２Ｒ（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ）の腫瘍内注射が、脾臓内の、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｍＩＬ−１２（ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）、または熱不活化ＭＶＡと比較して強力な、抗腫瘍特異的Ｔ細胞をもたらしたことを示す図である。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、４×１０7ｐｆｕの、ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＯＶ−ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、等量の熱不活化ＭＶＡ、またはＰＢＳを、右脇腹の大型腫瘍へと、３日間を隔てて、２回にわたり、腫瘍内（ＩＴ）注射した。２回目の注射の２日後に、脾臓を採取し、ＥＬＩＳＰＯＴ解析を実施して、脾臓内の、腫瘍特異的Ｔ細胞を査定した。ＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞（１５０，０００個）と、脾臓細胞（１，０００，０００個）とを、９６ウェルプレート内で共培養することにより実施した。図１６８Ａ：脾臓細胞１，０００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポット数についてのグラフである。各ドットは、個々のマウス（ｎ＝４）に由来する脾臓細胞（*Ｐ＜０．０５；**Ｐ＜０．０１、****Ｐ＜０．０００１、ｔ検定）を表す。図１６８Ｂ：同じ処置群内のマウスに由来する脾臓細胞の組合せによる三連試料についてのＥＬＩＳＰＯＴの画像である。
【図１６９】まず、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮゲノムのＴＫ遺伝子座における相同組換えを介して、次いで、Ｅ５Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、抗ｈｕＣＴＬＡ−４抗体、ならびにｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＯＸ４０Ｌ、およびｈＩＬ１２タンパク質を発現させる、組換えＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３ＮΔＴＫΔＥ５Ｒウイルスを作出する、段階的戦略のスキームを示す図である。ｐＣＢベクターを使用して、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下で、抗ｈｕＣＴＬＡ−４抗体の、重鎖および軽鎖を発現させるように、単一の発現カセットを挿入した。ＴＫ−Ｌ部位およびＴＫ−Ｒ部位において生じた相同組換えは、Ｎ末端の８３アミノ酸をコードする、Ｅ３Ｌ遺伝子のＤＮＡ断片を欠失させることにより作出された、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎゲノム上のＴＫ遺伝子座への、抗ｈｕＣＴＬＡ−４抗体の発現カセットの挿入を結果としてもたらす。ｐＵＣ５７ベクターを使用して、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ融合タンパク質、およびｍＩＬ−１２の両方を発現させるようにデザインされた、２つの発現カセットを挿入した。ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌのコード配列を、フーリン切断部位に続く、Ｐｅｐ２Ａ配列で隔てた。ｈＩＬ１２の、ｐ４０サブユニットのコード配列と、ｐ３０サブユニットのコード配列とを、フーリン切断部位に続く、Ｐｅｐ２Ａ配列で隔てた。ｐ３０サブユニットのＣ末端に、マトリックス結合性配列でタグ付けした。Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えは、ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０ＬおよびｈＩＬ１２のための発現カセットの、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｍｕＣＴＬＡ−４ゲノムの、Ｅ５Ｌ遺伝子座への挿入を結果としてもたらす。
【図１７０】粘液腫ΔＭ１２７−ｍｃｈｅｒｒｙゲノムの、Ｍ０６２Ｒ遺伝子座およびＭ０６４Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、Ｍ０６３Ｒ遺伝子の欠失を伴う、組換え粘液腫ウイルス（ローザンヌ株）を作出するスキーム、ならびに粘液腫ΔＭ１２７−ｍｃｈｅｒｒｙゲノムの、Ｍ０６３Ｒ遺伝子座およびＭ０６５Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、Ｍ０６４Ｒ遺伝子の欠失を伴う、組換え粘液腫ウイルス（ローザンヌ株）を作出するスキームを示す図である。Ｍ０６２Ｒ遺伝子座およびＭ０６４Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、粘液腫ΔＭ０６３Ｒウイルスを作出するための、ウイルスゲノムからの、Ｍ０６３Ｒ遺伝子の欠失を結果としてもたらす。Ｍ０６３Ｒ遺伝子座およびＭ０６５Ｒ遺伝子座において生じた相同組換えは、粘液腫ΔＭ０６４Ｒウイルスを作出するための、ウイルスゲノムからの、Ｍ０６４Ｒ遺伝子の欠失を結果としてもたらす。
【図１７１Ａ−１７１Ｂ】粘液腫ΔＭ０６４Ｒおよび粘液腫ΔＭ０６３Ｒの、マウスＢＭＤＣへの感染が、Ｍ０１２７の欠失遺伝子もまた含有する、ｍｃｈｅｒｒｙを発現させる親粘液腫ウイルス（粘液腫−ｍｃｈｅｒｒｙ）と比較して、高レベルの、ＩＦＮＢ遺伝子の発現、およびＩＦＮ−Βタンパク質の分泌を誘導することを示す図である。ＢＭＤＣ細胞に、粘液腫−ｍｃｈｅｒｒｙ、粘液腫ΔＭ０６３Ｒ、粘液腫ΔＭ０６４Ｒ、またはＭＶＡを、１０のＭＯＩで感染させた。感染の６時間後に細胞を回収し、ＲＮＡを抽出した。定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現について検討した。図１７１Ａは、感染ＢＭＤＣ内の、ＩＦＮＢ遺伝子の発現についての、ＲＴ−ＰＣＲ結果を示す。上清は、感染の２４時間後に回収し、上清中の、ＩＦＮ−Βタンパク質のレベルは、ＥＬＩＳＡにより決定した。図１７１Ｂは、感染ＢＭＤＣの、上清中の、ＩＦＮ−Βタンパク質のレベルについてのＥＬＩＳＡ結果を示す。
【図１７２】図１７２〜１７４Ｂは、粘液腫ΔＭ０６４Ｒまたは粘液腫−ｍｃｈｅｒｒｙの腫瘍内注射が、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫モデルにおいて、エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞およびエフェクターＣＤ８+Ｔ細胞の活性化をもたらすことを示すデータについての、一連のグラフ表示である。図１７２は、実験スキームを示す。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６Ｊマウスの左脇腹および右脇腹の皮内へと植え込んだ（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への２．５×１０5個）。腫瘍植込みの７日後、２×１０7ｐｆｕの、粘液腫−ｍＣｈｅｒｒｙ、粘液腫ΔＭ０６４Ｒ、ＭＶＡΔＥ５ＲまたはＰＢＳを、右脇腹の大型腫瘍へと、腫瘍内（ＩＴ）注射した。注射の２日後、注射ありの腫瘍を単離し、腫瘍浸潤リンパ球を、ＦＡＣＳにより解析した。図１７２は、粘液腫Δ０Ｍ６４Ｒまたは粘液腫−ｍｃｈｅｒｒｙの腫瘍内注射が、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫モデルにおいて、エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞およびエフェクターＣＤ８+Ｔ細胞の活性化をもたらすことを示す。
【図１７３Ａ−１７３Ｃ】図１７３Ａは、粘液腫−ｍＣｈｅｒｒｙ、粘液腫ΔＭ０６４Ｒ、ＭＶＡΔＥ５ＲまたはＰＢＳによる処置がなされた、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１７３Ｂは、注射ありの腫瘍内の、ＣＤ４５+Ｔ細胞の絶対数についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜８）である。図１７３Ｃは、ＣＤ８+Ｔ細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜８）（*Ｐ＜０．０５、ｔ検定）である。
【図１７４Ａ−１７４Ｂ】図１７４Ａは、粘液腫−ｍＣｈｅｒｒｙ、粘液腫ΔＭ０６４Ｒ、ＭＶＡΔＥ５ＲまたはＰＢＳによる処置がなされた、注射ありの腫瘍内の、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞についての代表的ドットプロットを示す図である。図１７４Ｂは、ＣＤ４+Ｔ細胞のうちの、グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞の百分率についてのグラフを示す。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝５〜８）（**Ｐ＜０．０１；***Ｐ＜０．００１；****Ｐ＜０．０００１、ｔ検定）である。
【発明を実施するための形態】
【０１１３】
本技術についての、実質的な理解を提示するために、下記では、本技術の、ある特定の態様、方式、実施形態、変動、および特徴について、多様なレベルの詳細において記載されることを理解されたい。
【０１１４】
Ｉ．定義
下記では、本明細書で使用される、ある特定の用語の定義が提示される。そうでないことが規定されない限りにおいて、本明細書で使用される、全ての技術用語および科学用語は、一般に、本技術が属する技術分野の当業者により一般に理解される意味と同じ意味を有する。
本明細書、および付属の特許請求の範囲で使用される、単数形の「ある（ａ）」、「ある（ａｎ）」、および「その」は、内容がそうでないことを、明確に指示しない限りにおいて、複数の指示対象を含む。例えば、「ある細胞」に対する言及は、２つまたはこれを超える細胞の組合せを含むなどである。
本明細書で使用される、「約」という用語は、測定において生じる可能性があり、当業者に明らかとなる、実験誤差の範囲を包含する。
本明細書で使用される、「アジュバント」という用語は、腫瘍抗原を含む抗原に対する、宿主の免疫応答を増強、増進、または強化する物質を指す。
【０１１５】
本明細書で使用される、薬剤または薬物の、対象への「投与」は、その意図された機能を果たすように、対象へと、化合物を導入または送達する、任意の経路を含む。投与は、経口投与、鼻腔内投与、非経口投与（静脈内投与、筋内投与、皮内投与、腹腔内投与、または皮下）、直腸内投与、鼻腔内投与、腫瘍内投与、または局所投与を含むがこれらに限定されない、任意の適切な経路により実行されうる。投与は、自己投与および別人による投与を含む。
本明細書で使用される、「抗原」という用語は、抗体（またはその抗原結合性断片）が選択的に結合する分子を指す。標的抗原は、タンパク質、炭水化物、核酸、脂質、ハプテン、または他の天然に存在する化合物もしくは合成化合物でありうる。一部の実施形態では、抗原は、腫瘍抗原含有全細胞ワクチンなどの全細胞内に含有される。一部の実施形態では、標的抗原は、がん関連抗原またはネオ抗原を包含し、がん細胞内に存在するが、非がん細胞内に存在しない分子、およびがん細胞内で、非がん細胞内と比較して上方調節される分子など、腫瘍または非腫瘍がんにより発現される、タンパク質または他の分子を含む。
【０１１６】
本明細書で、ウイルスと共に使用される場合の、「弱毒化された」とは、弱毒化されていない対応物と比較して、毒力または病原性が低減されているが、なお生存可能であるか、または生存しているウイルスを指す。典型的に、弱毒化は、ウイルスなどの感染作用物質の、感染対象に対する有害性または毒性を、弱毒化されていないウイルスと比較して低下させる。これは、死滅ウイルスまたは完全不活化ウイルスと対照的である。
【０１１７】
本明細書で使用される、「併用投与」とは、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）と組み合わせた、第２の治療モダリティーの投与を指す。例えば、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）と時間的に近接して投与される、免疫チェックポイント遮断剤、免疫モジュレーター、および／または抗がん薬である。例えば、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤および／またはＣＴＬＡ−４阻害剤（より具体的な実施形態では、これらの抗体）は、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルスと同時に（すなわち、共時的に）投与される（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０���、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）（上記で言明された通り、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９が、腫瘍内投与または全身投与される場合は、静脈内注射または腫瘍内注射により）場合もあり、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ��Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９の投与の前に、またはこの後で投与される場合もある。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９と、免疫チェックポイント遮断剤、免疫モジュレーター、および／または抗がん薬とが、約１〜約７日間隔てて、なおまたは３週間隔てて投与される場合、これは、やはり、本明細書で言明される、「時間的な近接」の中にあり、したがって、このような投与は、「併用」投与として扱われるであろう。
【０１１８】
本明細書では、「対応する野生型株」または「対応する野生型ウイルス」という用語は、操作ＭＶＡ株もしくは操作ＭＶＡウイルス、操作ワクシニア株もしくは操作ワクシニアウイルス、または操作粘液腫株もしくは操作粘液腫ウイルスが、そこから導出された、野生型ＭＶＡ株、野生型ワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）株、または野生型粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）株を指すのに使用される。本明細書で使用された、野生型ＭＶＡ株もしくは野生型ＭＶＡウイルス、野生型ワクシニア株もしくは野生型ワクシニアウイルス、または野生型粘液腫株もしくは野生型粘液腫ウイルスは、特定の目的の遺伝子を破壊するか、もしくは欠失させ（ノックアウトし）、かつ／または異種核酸を発現させるように操作されていない、株またはウイルスである。例えば、一部の実施形態では、野生型ＭＶＡ株もしくは野生型ＭＶＡウイルス、野生型ワクシニア株もしくは野生型ワクシニアウイルス、または野生型粘液腫株もしくは野生型粘液腫ウイルスは、Ｃ７遺伝子を破壊するか、または欠失させ（ノックアウトし）、ＯＸ４０Ｌを発現させるように操作されていない株またはウイルスである。他の実施形態では、野生型ＭＶＡ株もしくは野生型ＭＶＡウイルス、野生型ワクシニア株もしくは野生型ワクシニアウイルス、または野生型粘液腫株もしくは野生型粘液腫ウイルスは、Ｅ５Ｒ（またはＭ３１Ｒ）遺伝子を破壊するか、または欠失させる（ノックアウトする）ように操作されていない、株またはウイルスである。操作ＭＶＡ株もしくは操作ＭＶＡウイルス、操作ワクシニア株もしくは操作ワクシニアウイルス、または操作粘液腫株もしくは操作粘液腫ウイルスは、単独において、または本明細書で記載される、さらなる改変（例えば、さらなる免疫調節タンパク質を発現させ、かつ／またはさらなる遺伝子欠失を含むように操作された）と組み合わせて、Ｃ７遺伝子を破壊するか、または欠失させ（ノックアウトし）、ＯＸ４０Ｌを発現させるように改変されている場合もある。加えて、または代替的に、操作ＭＶＡ株もしくは操作ＭＶＡウイルス、操作ワクシニア株もしくは操作ワクシニアウイルス、または操作粘液腫株もしくは操作粘液腫ウイルスは、単独における、または本明細書で記載される、さらなる改変（例えば、さらなる免疫調節タンパク質を発現させ、かつ／またはさらなる遺伝子欠失を含むように操作された）と組み合わせた、Ｅ５Ｒ（またはＭ３１Ｒ）遺伝子を破壊するか、または欠失させる（ノックアウトする）ように改変されている場合もある。本明細書では、「対応するＭＶＡΔＥ３Ｌ株」または「対応するＭＶＡΔＥ３Ｌウイルス」という用語は、Ｅ３Ｌの欠失単独を有する、ＭＶＡ株またはＭＶＡウイルス（すなわち、他の遺伝子欠失または遺伝子付加を含まない、ＭＶＡΔＥ３Ｌ株またはＭＶＡΔＥ３Ｌウイルス）を指すのに使用される。本明細書では、「対応するＭＶＡΔＣ７Ｌ株」または「対応するＭＶＡΔＣ７Ｌウイルス」という用語は、Ｃ７Ｌの欠失単独を有する、ＭＶＡ株またはＭＶＡウイルス（すなわち、他の遺伝子欠失または遺伝子付加を含まない、ＭＶＡΔＣ７Ｌ株またはＭＶＡΔＣ７Ｌウイルス）を指すのに使用される。本明細書では、「対応するＭＶＡΔＥ５Ｒ株」または「対応するＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス」という用語は、Ｅ５Ｒの欠失単独を有する、ＭＶＡ株またはＭＶＡウイルス（すなわち、他の遺伝子欠失または遺伝子付加を含まない、ＭＶＡΔＥ５Ｒ株またはＭＶＡΔＥ５Ｒウイルス）を指すのに使用される。本明細書では、「対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌ株」または「対応するＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルス」という用語は、Ｃ７Ｌの欠失単独を有する、ワクシニア株またはワクシニアウイルス（すなわち、他の遺伝子欠失または遺伝子付加を含まない、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ株またはＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルス）を指すのに使用される。本明細書では、「対応するＶＡＣＶΔＥ５Ｒ株」または「対応するＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス」という用語は、Ｅ５Ｒの欠失単独を有する、ワクシニア株またはワクシニアウイルス（すなわち、他の遺伝子欠失または遺伝子付加を含まない、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ株またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルス）を指すのに使用される。
【０１１９】
本明細書で使用された、「〜を送達すること」および「〜を接触させること」という用語は、これが、腫瘍への局所投与により（腫瘍内において）なされるのであれ、例えば、静脈内経路によりなされるのであれ、本開示の、１つまたは複数の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）を、腫瘍微小環境内に貯留することを指す。用語は、腫瘍自体に到達する、操作ウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）に焦点を絞る。一部の実施形態では、「〜を送達すること」は、「〜を投与すること」と同義であるが、特定の投与箇所、例えば、腫瘍内を念頭に置いて使用される。
【０１２０】
本明細書では、「破壊」および「突然変異」という用語は、遺伝子素材内の、検出可能かつ遺伝性の変化を指すように、互換的に使用される。突然変異は、挿入、欠失、置換（例えば、トランジション、トランスバージョン）、転位、逆位、ノックアウト、およびこれらの組合せを含みうる。突然変異は、単一のヌクレオチドだけを伴う場合（例えば、点突然変異または一塩基多型）もあり、複数のヌクレオチドを伴う場合もある。一部の実施形態では、突然変異は、突然変異の表現型効果が検出されない、サイレント突然変異である。他の実施形態では、突然変異は、表現型の変化を引き起こす、例えば、コードされる産物の発現レベルを変更するか、またはコードされる産物自体を変更する。一部の実施形態では、破壊または突然変異は、遺伝子産物（例えば、タンパク質またはＲＮＡ）の発現レベルを、野生型株と比較して低下した、遺伝子の破壊を結果としてもたらしうる。他の実施形態では、破壊または突然変異は、野生型株から発現されるタンパク質の活性と比較して低度の活性で発現されるタンパク質を結果としてもたらしうる。
【０１２１】
本明細書で使用される、「有効量」または「治療有効量」とは、１または複数の投与量で、ある期間にわたり投与されると、疾患の軽減、治癒、または緩和において、所望の生物学的結果をもたらすのに十分な、薬剤の量を指す。本開示では、有効量の、本技術の、１つまたは複数の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）は、（適切な期間にわたり、適切な頻度で投与された場合）がん細胞の数を低減するか；または腫瘍サイズを低減するか、もしくは腫瘍を根絶するか；またはがん細胞の、周辺臓器への浸潤を阻害し（すなわち、緩徐化させるか、または停止させ）；転移性増殖を阻害し（すなわち、緩徐化させるか、または停止させ）；腫瘍の増殖を阻害し（安定化させるか、または止め）；腫瘍の処置を可能とし；かつ／または腫瘍に対する免疫応答を誘導および促進する量を含む。任意の個々の症例における、適切な治療量は、本開示に照らして、規定の実験を使用する、当業者により決定されうる。このような決定は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、効果的であることが見出された量、および動物において効果的であることが見出された量で始まりうる。治療有効量は、当初、培養物中の細胞へと、利益を付与することが見出された、１つまたは複数の濃度に基づき決定されるであろう。有効量は、細胞培養物中のデータから外挿され、本明細書で詳述される因子などに基づき、上方または下方に補正されうる。ウイルス構築物の有効量は、低用量または高用量も投与されうるが、一般に、約１０5〜約１０10プラーク形成単位（ｐｆｕ）の範囲内にある。一部の実施形態では、投与量は、約１０6〜１０9ｐｆｕである。一部の実施形態では、単位投与量は、１〜１０ｍＬの範囲内の容量中で投与される。ｐｆｕの、ウイルス粒子との等価性は、使用される、具体的なｐｆｕ滴定法に応じて異なりうる。一般に、ｐｆｕは、ウイルス粒子約５〜１００個と等価である。治療有効量の、ｈＦｌｔ３Ｌトランス遺伝子保有ウイルスは、規定の投与期間にわたり、規定の投与頻度における、１回または複数回の分割投���で投与されうる。例えば、本開示に従うｈＦｌｔ３Ｌ保有ウイルスの治療有効量は、対象の疾患状態、年齢、性別、体重、および全般的健康状態、ならびにウイルス構築物が、特定の対象において、特定のがんに対する、所望の免疫応答を誘発する効力などの因子に従い変動しうる。
【０１２２】
本明細書で開示される、ウイルスベースの免疫刺激剤に、特に言及する場合の、「有効量」または「治療有効量」とは、腫瘍細胞の増殖を低減するか、阻害するか、もしくは抑制し、これにより、腫瘍を低減もしくは根絶するのに十分であるか、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、もしくは対象における転移性の拡散を阻害するか、低減するか、もしくは抑制するのに十分であるか、または場合により、転移性拡散の低減、阻害、および／もしくは抑制のうちの１つまたは複数を、最終的に結果としてもたらす、腫瘍に対する免疫応答を誘発および促進するのに十分である量の、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）を含む組成物を指す。腫瘍細胞の増殖の、低減、阻害、または根絶は、壊死、アポトーシス、もしくは免疫応答、または前出のうちの、２つまたはこれを超える組合せ（しかし、アポトーシスの促進は、例えば、腫瘍溶解性ウイルスについて観察される因子と同じ因子に起因するのではない可能性がある）の結果でありうる。治療有効量は、組成物中で使用される、特定のウイルス、処置される対象の年齢および状態、腫瘍形成の程度、他の治療モダリティーの存在または非存在などの因子に応じて変動しうる。同様に、投与される組成物の投与量、およびその投与頻度も、有効成分の効力、投与された場合の、その活性の持続時間、投与経路、対象の体格、年齢、性別、および全身状態、有害反応の危険性、および医療従事者の判断など、様々な因子に依存するであろう。組成物は、注射用溶液など、様々な剤形で投与される。
【０１２３】
免疫チェックポイント阻害剤を伴う組合せ療法に、特に言及する場合における、免疫チェックポイント遮断剤についての「有効量」または「治療有効量」とは、腫瘍微小環境内の免疫抑制を反転させるか、または低減し、処置される対象における宿主免疫を活性化させるか、または増強するのに十分な、免疫チェックポイント遮断剤の量を意味する。免疫チェックポイント遮断剤は、ＣＴＬＡ−４（細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４）などのＣＤ２８阻害剤に対する阻害性抗体（例えば、イピリムマブ）、抗ＰＤ−１（プログラム死１）阻害性抗体（例えば、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ）、および抗ＰＤ−Ｌ１（プログラム死リガンド１）阻害性抗体（ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＳＢ  ００１０７１８０）のほか、ＬＡＧ−３（リンパ球活性化遺伝子３）、ＴＩＭ３（Ｔ細胞免疫グロブリン／ムチン３）、Ｂ７−Ｈ３、ＴＩＧＩＴ（ＩｇドメインおよびＩＴＩＭドメインを伴うＴ細胞免疫受容体）に対する阻害性抗体、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ  １２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、またはＰＤＲ００１、およびこれらの組合せを含むがこれらに限定されない。複数回投与の臨床試験が完了し、他の薬剤への外挿を可能としているので、当技術分野の技術では、前出の投与量範囲が公知であるか、または当技術分野の技術の範囲内に、たやすく収まる。
【０１２４】
一部の実施形態では、腫瘍は、特定のチェックポイントを発現させるが、免疫チェックポイント遮断剤は、より一般に、腫瘍細胞、間質細胞、および腫瘍浸潤免疫細胞により誘発される、腫瘍内の免疫抑制機構を阻止するので、本技術の文脈では、これが、厳密に必要なわけではない。
【０１２５】
例えば、ＣＴＬＡ−４阻害剤である、イピリムマブは、黒色腫における手術後の、アジュバント療法剤として投与される場合、３週間ごとに、９０分間にわたる、１〜２ｍｇ／ｍＬずつ、合計４回の投与にわたる、のべ注入量３ｍｇ／ｋｇで投与される。この治療は、重度の、致死性の場合もある、免疫媒介性有害反応を伴うことが多く、これが、投与されうる忍容用量ならびに累積量を制限する。１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）と共に併用投与される場合の、イピリムマブの用量および／または累積量を低減することが可能であることが予期される。特に、下記で明示さる実験結果に照らすと、それが、前出のＭＶＡウイルスの一方または両方と併用で、腫瘍へと直接投与される場合の、ＣＴＬＡ−４阻害剤の用量を低減することも、さらに可能であることが予期される。したがって、イピリムマブについて、上記で提示された量は、併用投与において、患者へと施される、特定の投与量および累積量を決定するための出発点でありうる。
【０１２６】
別の例として述べると、ペムブロリズマブは、２５ｍｇ／ｍＬへと希釈された、黒色腫におけるアジュバント療法剤としての投与に処方される。ペムブロリズマブは、３週間ごとに、２ｍｇ／ｋｇの投与量で、３０分間にわたり投与される。これは、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）の併用投与における、投与量および投与の決定における出発点でありうる。
【０１２７】
ニボルマブもまた、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）と組み合わせて投与される、チェックポイント阻害剤の投与量および投与レジメンの決定における出発点として用いられうる。ニボルマブは、隔週で、６０分間にわたる静脈内注入としての、３ｍｇ／ｋｇの投与に処方される。
【０１２８】
アゴニスト抗体などの免疫刺激剤もまた、がんに対する免疫療法として調べられている。例えば、抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳの細胞外ドメインに結合し、ＩＣＯＳシグナル伝達の活性化、およびＴ細胞の活性化をもたらす。抗ＯＸ４０抗体は、ＯＸ４０に結合し、Ｔ細胞の活性化、増殖、および生存をもたらす、Ｔ細胞受容体によるシグナル伝達を強化しうる。他の例は、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲに対するアゴニスト抗体を含む。
【０１２９】
免疫刺激性アゴニスト抗体は、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）の腫瘍内注射と組み合わせて、全身において使用されうる。代替的に、免疫刺激性アゴニスト抗体は、腫瘍内送達を介する、１つまたは複数の、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９）と、同時に（すなわち、共時的に）、または逐次的に、併用されうる。
【０１３０】
本明細書では、「免疫調節薬」という用語は、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）を指すのに使用される。
【０１３１】
本明細書では、「操作された」または「遺伝子操作された」という用語は、例えば、ゲノムの破壊により、遺伝子的に変更されるか、改変されるか、または変化させられるように操られた生物を指すのに使用される。例えば、「操作ワクシニアウイルス株」、「操作された改変ワクシニアアンカラウイルス」、または「操作粘液腫ウイルス」とは、遺伝子的に変更されるか、改変されるか、または変化させられるように操られた、ワクシニア株、改変ワクシニアアンカラ株、または粘液腫株を指す。本文脈では、「操作された」または「遺伝子操作された」は、組換えワクシニアウイルス、組換え改変ワクシニアアンカラウイルス、および組換え粘液腫ウイルスを含む。
【０１３２】
本明細書では、「遺伝子カセット」という用語は、ＤＮＡ配列の、１つまたは複数の選択された制限部位の間に挿入されうる、１つまたは複数の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、選択用マーカー、またはこれらの組合せ）をコードし、これらを発現させることが可能な、ＤＮＡ配列を指すのに使用される。一部の実施形態では、遺伝子カセットの挿入は、遺伝子の破壊を結果としてもたらす。一部の実施形態では、遺伝子の破壊は、遺伝子の少なくとも一部の、目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、選択用マーカー、またはこれらの組合せ）をコードするヌクレオチド配列を含む遺伝子カセットによる置きかえを伴う。
本明細書で使用される、「異種核酸」とは、ウイルスへと導入されているが、それが導入されたウイルス内で、天然において見出される配列のコピーではない、核酸、ＤＮＡ、またはＲＮＡを指す。このような異種核酸は、それが導入されたウイルス内で、天然において見出される配列のコピーであるセグメントを含みうる。
遺伝子について記載される全ての場合に、本明細書で使用される、遺伝子は、ヒト（ｈまたはｈｕ）またはマウス（ｍまたはｍｕ）の明示が、互換的に使用される場合があり、限定的であることが意図されないように、ヒト遺伝子の場合もあり、マウス遺伝子の場合もある。例えば、ｍＩＬ−１２について記載される場合、ｈＩＬ−１２で、記載される構築物中のｍＩＬ−１２が置換される場合もあり、この逆の場合もある。
【０１３３】
本明細書で使用される、「ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα」は、それらの各々が、参照により本明細書に組み込まれる、Van den Bergh et al., Pharmacology & Therapeutics 170:73-79 (2017); Kowalsky et al. , Molecular Therapy 26(10):2476-2486 (2018); Stoklasek et al., J. Immunol. 177:6072-6080; Duboi et al., J. Immunol. 180:2099-2106 (2008); Epardaud et al, Cancer Res. 68:2972-2983 (2008);およびDubois et al., Immunity 17:537-547 (2002)において記載されている、膜結合型ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαトランス提示構築物および融合タンパク質を包含する。
【０１３４】
本明細書で使用される、「免疫チェックポイント阻害剤」または「免疫チェックポイント遮断剤」または「免疫チェックポイント遮断性阻害剤」とは、１つまたは複数のチェックポイントタンパク質の活性を、完全に、または部分的に低減するか、阻害するか、これらに干渉するか、またはこれらをモジュレートする分子を指す。チェックポイントタンパク質は、Ｔ細胞の活性化または機能を調節する。チェックポイントタンパク質は、ＣＤ２８受容体ファミリーのメンバーである、ＣＴＬＡ−４、ならびにそのリガンドである、ＣＤ８０およびＣＤ８６；ＰＤ−１、ならびにそのリガンドである、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２；ＬＡＧ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＭ３、ＩＣＯＳ、ＩＩ  ＤＬＢＣＬ、ＢＴＬＡ、または前出のうちの、２つもしくはこれを超えるチェックポイントタンパク質の任意の組合せを含むがこれらに限定されない。本明細書における使用のために想定される、免疫チェックポイント遮断剤の非限定例は、ＣＴＬＡ−４（細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４）などのＣＤ２８阻害剤に対する阻害性抗体（例えば、イピリムマブ）、抗ＰＤ−１（プログラム死１）阻害性抗体（例えば、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ）、および抗ＰＤ−Ｌ１（プログラム死リガンド１）阻害性抗体（ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＳＢ  ００１０７１８０）のほか、ＬＡＧ−３（リンパ球活性化遺伝子３）、ＴＩＭ３（Ｔ細胞免疫グロブリン／ムチン３）、Ｂ７−Ｈ３、ＴＩＧＩＴ（ＩｇドメインおよびＩＴＩＭドメインを伴うＴ細胞免疫受容体）に対する阻害性抗体、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ  １２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、またはＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０１３５】
本明細書で使用される、「免疫応答」とは、がん性細胞、転移性腫瘍細胞に対する選択的損傷、これらの破壊、またはヒト体内からの、これらの消失などを結果としてもたらす、リンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球、および上記の細胞または肝臓により産生される可溶性高分子（抗体、サイトカイン、および補体を含む）のうちの１つまたは複数の作用を指す。免疫応答は、細胞、すなわち、Ｔ細胞機能の変更（モジュレーション、例えば、著明な増強、刺激、活性化、機能不全、または阻害）である、Ｔ細胞応答などの細胞応答を含みうる。Ｔ細胞応答は、特定の種類のＴ細胞、またはＴ細胞のサブセット、例えば、エフェクターＣＤ４+細胞、ＣＤ４+ヘルパー細胞、エフェクターＣＤ８+細胞、ＣＤ８+細胞傷害性細胞、またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の、発生、増殖もしくは拡大、または刺激を含みうる。このようなＴ細胞のサブセットは、１つまたは複数の細胞受容体または細胞表面分子（例えば、ＣＤまたは分化抗原分子）を検出することにより同定されうる。Ｔ細胞応答はまた、他の細胞の分化または増殖に影響を及ぼす、可溶性メディエーター（例えば、サイトカイン、リンホカイン、サイトカイン結合性タンパク質、またはインターロイキン）などの細胞因子の発現の変更（統計学的に有意な増大または減少）も含みうる。例えば、Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ−α／β）は、自然免疫の、極めて重要な調節因子である（Huber et al., Immunology 132(4):466-474 (2011)）。動物研究およびヒト研究は、抗原認識および抗腫瘍免疫応答の初期の、ＣＤ４+Ｔ細胞およびＣＤ８+Ｔ細胞の両方の運命に対する、直接的な影響における、ＩＦＮ−α／βの役割を示している。Ｉ型ＩＦＮは、樹状細胞の活性化に応答して誘導され、樹状細胞は、自然免疫系の前哨である。免疫応答はまた、体液性（抗体）応答も含みうる。
【０１３６】
本明細書では、「免疫原性組成物」という用語は、組成物へと曝露された哺乳動物において、免疫応答を誘発する組成物を指すのに使用される。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、および／もしくはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、抗原、前出の操作ウイルスのうちのいずれか１つもしくは複数を含むアジュバント、ならびに／または単独における、もしくは免疫チェックポイント遮断性阻害剤と組み合わせた、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、および／もしくは熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを含むアジュバントを含む。本明細書で使用される免疫原性組成物は、ワクチンを包含する。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、腫瘍抗原含有全細胞ワクチン（例えば、照射全細胞ワクチン）を含む。
【０１３７】
本明細書で使用される、「不活化ＭＶＡ」という用語は、感染性であり、非複製性であるが、感染ＤＣ細胞内の、Ｉ型ＩＦＮ産生を抑制しない、熱不活化ＭＶＡ（Ｈｅａｔ−ｉＭＶＡ）および／またはＵＶ不活化ＭＶＡを指す。本明細書で使用される、「不活化ワクシニアウイルス」という用語は、熱不活化ワクシニアウイルスおよび／またはＵＶ不活化ワクシニアウイルスを含む。熱およびＵＶ放射線の組合せにより不活化された、ＭＶＡまたはワクシニアウイルスもまた、本開示の範囲内にある。
本明細書で使用される、熱不活化ＭＶＡ（Ｈｅａｔ−ｉＭＶＡ）および「熱不活化ワクシニアウイルス」とは、その免疫原性、または標的細胞（腫瘍細胞）に侵入するその能力を破壊しないが、残余のウイルス複製能、ならびに宿主の免疫応答を阻害する因子を除去する条件下で、熱処理へと曝露された、ＭＶＡおよびワクシニアウイルスのそれぞれを指す。このような条件の例は、約５０〜約６０℃の範囲内の温度への、約１時間にわたる曝露である。他の時間および温度も、当業者により決定されうる。
本明細書で使用される、「ＵＶ不活化ＭＶＡ」および「ＵＶ不活化ワクシニアウイルス」とは、その免疫原性、または標的細胞（腫瘍細胞）に侵入するその能力を破壊しないが、残余のウイルス複製能を除去するＵＶ条件下への曝露により不活化された、ＭＶＡおよびワクシニアウイルスのそれぞれを指す。本方法において有用でありうる、このような条件の例は、例えば、３６５ｎｍのＵＶバルブを、約３０分間〜約１時間にわたり使用する、ＵＶへの曝露である。ＵＶ波長および曝露についての、これらの条件の、他の限界値も、当業者により決定されうる。
【０１３８】
「〜をノックアウトする」、「ノックアウト遺伝子」、または「遺伝子の欠失」とは、ヌル突然変異（例えば、遺伝子によりコードされる野生型産物が発現されない、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現される、または非機能的である突然変異）を含む遺伝子を指す。一部の実施形態では、ノックアウト遺伝子は、異種配列（例えば、異種核酸を含む１つまたは複数の遺伝子カセット配列）、または遺伝子を非機能的とする、遺伝子自体の、遺伝子操作された非機能的配列を含む。他の実施形態では、ノックアウト遺伝子とは、野生型遺伝子の一部を欠くことである。例えば、一部の実施形態では、野生型遺伝子配列のうちの、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、または少なくとも約６０％が、欠失される。他の実施形態では、ノックアウト遺伝子とは、野生型遺伝子配列のうちの、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約１００％を欠くことである。他の実施形態では、ノックアウト遺伝子は、野生型遺伝子配列の、最大で１００％を含みうる（例えば、野生型遺伝子配列のうちの一部は、欠失されうる）が、また、その中に挿入された、１つまたは複数の異種核酸配列および／または非機能的核酸配列も含む。
【０１３９】
本明細書で使用される、「転移」とは、がんの、その原発部位から、身体の隣接組織または遠位位置への拡散を指す。がん細胞（がん幹細胞を含む）は、原発腫瘍を離れ、リンパ管および血管を透過し、血流を通して循環し、身体の別の箇所の正常組織内で増殖しうる。転移とは、原発腫瘍を離れ、血液またはリンパを通して移動し、遠隔部位で停止する、腫瘍細胞（またはがん幹細胞）上で偶発する、逐次的過程である。別の部位に至ると、がん細胞は、血管またはリンパ管壁を再透過し、増え続け、最終的に、新たな腫瘍（転移性腫瘍）を形成する。一部の実施形態では、この新たな腫瘍は、転移性（または続発）腫瘍と称される。
【０１４０】
本明細書で使用される、「ＭＶＡ」とは、「改変ワクシニアアンカラ」を意味し、ワクシニアアンカラ株に由来し、ワクチンおよびワクチンアジュバントとしての使用のために開発された、高度な弱毒化株を指す。元のＭＶＡは、ニワトリ胚細胞を介する継代培養により、野生型アンカラ株から単離された。このようにして処理されて、野生型アンカラ株は、霊長動物（ヒトを含むこと）細胞内で効率的に複製されるその能力を含め、野生型ワクシニアのゲノムのうちの約１５％を喪失した（Mayr et al., Zentralbl Bakteriol B 167:375-390 (1978)）。ＭＶＡは、感染性疾患または腫瘍に対する、遺伝子またはワクチン接種の送達のための組換えベクターとしての開発に適切な候補であると考えられる（Verheust et al., Vaccine 30(16):2623-2632 (2012)）。ＭＶＡは、１７８ｋｂの長さのゲノムを有し、配列は、Antoine et al., Virol. 244(2): 365-396 (1998)において、最初に開示された。配列はまた、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：Ｕ９４８４８．１（配列番号１）においても開示されている。臨床グレードのＭＶＡは、Ｂａｖａｒｉａｎ  Ｎｏｒｄｉｃ  Ａ／Ｓ  Ｋｖｉｓｔｇａａｒｄ、Ｄｅｎｍａｒｋから市販されており、一般に入手可能である。加えて、ＭＶＡは、ＡＴＣＣ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、およびＣＭＣＮ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  Ｐａｓｔｅｕｒ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  Ｎａｔｉｏｎａｌｅ  ｄｅｓ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｓ）  Ｐａｒｉｓ、Ｆｒａｎｃｅからも入手可能である。
【０１４１】
本明細書では、「ＭＶＡΔＣ７Ｌ」という用語は、Ｃ７遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＣ７Ｌ」は、機能的なＣ７Ｌ遺伝子を欠き、感染性であるが、非複製性であり、宿主の免疫系に侵入するその能力が、さらに損なわれている、ＭＶＡの欠失突然変異体を含む。本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＣ７Ｌ」は、機能的なＣ７タンパク質を発現させない組換えＭＶＡウイルスを包含する。一部の実施形態では、ΔＣ７Ｌ突然変異体は、Ｃ７Ｌ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＣ７Ｌ」は、ＭＶＡゲノム内のＣ７の位置（例えば、配列番号１の１８，４０７〜１８，８５９位）に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）（「ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた組換えＭＶＡ核酸配列を包含する。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換えＭＶＡウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＭＶＡゲノムのＴＫ遺伝子座（例えば、配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌは、Ｃ７Ｌ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換えＭＶＡウイルス（「ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌ（ここで、「ｈ」または「ｈｕ」は、ヒトタンパク質を名指す）のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなる異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなるウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように、さらに改変される。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０は、Ｅ５Ｒ遺伝子が、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、選択用マーカー（例えば、ｍＣｈｅｒｒｙ）で置きかえられた、Ｅ５Ｒの欠失を含むように、さらに改変される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌは、１つまたは複数の異種遺伝子を、Ｅ５Ｒ遺伝子座など、他の遺伝子座内から発現させるように改変される。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌは、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、「ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＶＡウイルスを包含する。他の実施形態では、本技術の組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に言及されるもの以外の、さらなる異種遺伝子、および／またはウイルス遺伝子の突然変異を含有しない。
【０１４２】
「ＭＶＡΔＥ３Ｌ」という用語は、機能的なＥ３Ｌ遺伝子を欠き、感染性であるが、非複製性であり、宿主の免疫系に侵入するその能力が、さらに損なわれている、ＭＶＡの欠失突然変異体を意味する。ＭＶＡΔＥ３Ｌは、腫瘍抗原またはウイルス抗原を導入するためのワクチンベクターとして使用されている。突然変異体のＭＶＡ  Ｅ３Ｌノックアウトおよびその調製物については、例えば、米国特許第７，０４９，１４５号において記載されている。本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＥ３Ｌ」は、ＯＸ４０Ｌ（「ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように改変された、組換えＭＶＡを包含する。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換えＭＶＡウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなる異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つのウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように、さらに改変される。他の実施形態では、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に指し示されるもの以外の、任意のさらなる異種遺伝子を発現させず、かつ／または任意のさらなる、ウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含まない。
【０１４３】
本明細書では、「ＭＶＡΔＥ５Ｒ」という用語は、Ｅ５Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＥ５Ｒ」は、機能的なＥ５Ｒ遺伝子を欠き、感染性であるが、非複製性であり、宿主の免疫系に侵入するその能力が、さらに損なわれている、ＭＶＡの欠失突然変異体を含む。本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＥ５Ｒ」は、機能的なＥ５タンパク質を発現させない、組換えＭＶＡウイルスを包含する。一部の実施形態では、ΔＥ５Ｒ突然変異体は、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＥ５Ｒ」は、ＭＶＡゲノム内のＥ５Ｒの位置（例えば、配列番号１の３８，４３２〜３９，３８５位）に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）（「ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた組換えＭＶＡ核酸配列を包含する。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒは、Ｅ５Ｒ遺伝子座が、１つまたは複数の異種遺伝子を発現させるように改変された、組換えＭＶＡを包含する。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒは、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、「ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＶＡを包含する。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換えＭＶＡウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＭＶＡゲノムのＴＫ遺伝子座（例えば、配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒは、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換えＭＶＡウイルス（「ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の操作ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌ（ここで、「ｈ」または「ｈｕ」は、ヒトタンパク質を名指す）のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７Ｌ（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなるウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本技術のＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に言及されるもの以外の、さらなる異種遺伝子、および／またはウイルス遺伝子の突然変異を含有しない。
【０１４４】
本明細書では、「ＭＶＡΔＷＲ１９９」という用語は、ＷＲ１９９遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＷＲ１９９」は、機能的なＷＲ１９９遺伝子を欠き、感染性であるが、非複製性であり、宿主の免疫系に侵入するその能力が、さらに損なわれている、ＭＶＡの欠失突然変異体を含む。本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＷＲ１９９」は、機能的なＥ５タンパク質を発現させない、組換えＭＶＡウイルスを包含する。一部の実施形態では、ΔＷＲ１９９突然変異体は、ＷＲ１９９遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＭＶＡΔＷＲ１９９」は、ＭＶＡゲノム内のＷＲ１９９の位置（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＹ６０３３５５において明示された配列の、１５８，３９９〜１６０，１４３位）に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＭＶＡΔＷＲ１９９−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）（「ＭＶＡΔＷＲ１９９−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた組換えＭＶＡ核酸配列を包含する。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＷＲ１９９は、ＷＲ１９９遺伝子座が、１つまたは複数の異種遺伝子を発現させるように改変された、組換えＭＶＡを包含する。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＷＲ１９９は、ＷＲ１９９遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、「ＭＶＡΔＷＲ１９９−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＶＡを包含する。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＷＲ１９９ウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換えＭＶＡウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＭＶＡゲノムのＴＫ遺伝子座（例えば、配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＭＶＡΔＷＲ１９９−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＭＶＡΔＷＲ１９９−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＷＲ１９９は、ＷＲ１９９遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、Ｏ��４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換えＭＶＡウイルス（「ＭＶＡΔＷＲ１９９−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の操作ＭＶＡΔＷＲ１９９ウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌ（ここで、「ｈ」または「ｈｕ」は、ヒトタンパク質を名指す）のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７Ｌ（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；および／またはＮ２Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなるウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本技術のＭＶＡΔＷＲ１９９ウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に言及されるもの以外の、さらなる異種遺伝子、および／またはウイルス遺伝子の突然変異を含有しない。
【０１４５】
本明細書では、「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ」という用語は、Ｃ７遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、ワクシニア突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ」は、機能的なＣ７タンパク質を発現させない、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）を包含する。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスは、ウェスタンリザーブ（ＷＲ）株に由来する。一部の実施形態では、ΔＣ７Ｌ突然変異体は、Ｃ７Ｌ遺伝子配列の全部または大部分の代わりに、異種配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ」は、ＶＡＣＶゲノム内のＣ７の位置（例えば、配列番号２の１５，７１６〜１６，１６８位）に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）遺伝子（「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた、組換えワクシニアウイルスの核酸配列を包含する。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換えワクシニアウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座（例えば、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌは、Ｃ７Ｌ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換えワクシニアウイルス（「ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなる異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下のワクシニアウイルスの欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つのウイルス遺伝子の突然変異もしく��欠失を含むように、さらに改変される。例えば、一部の実施形態では、本技術の開示は、組換えＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスを提供する。他の実施形態では、本技術の組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に指し示されるもの以外の、任意のさらなる異種遺伝子を発現させず、かつ／または任意のさらなる、ウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含まない。
【０１４６】
本明細書では、「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ」という用語は、Ｅ５Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、ワクシニア突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ」は、機能的なＥ５タンパク質を発現させない、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）を包含する。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスは、ウェスタンリザーブ（ＷＲ）株に由来する。一部の実施形態では、ΔＥ５Ｒ突然変異体は、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分の代わりに、異種配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ」は、ＶＡＣＶゲノム内のＥ５Ｒの位置（例えば、配列番号２の４９，２３６〜５０，２６１位）に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）遺伝子（「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた、組換えワクシニアウイルスの核酸配列を包含する。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換えワクシニアウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座（例えば、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒは、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換えワクシニアウイルス（「ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の操作ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下のワクシニアウイルスの欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７Ｌ（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つのウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。例えば、一部の実施形態では、本技術の開示は、組換えＶＡＣＶΔＥ３Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ＣＴＬＡ−４−ＯＸ４０Ｌ−ΔＥ５Ｒウイルスを提供する。別の例として述べると、一部の実施形態では、ワクシニアゲノムのＴＫ遺伝子座は、相同組換えを介して、抗ＣＴＬＡ−４など、抗体の重鎖および軽鎖の両方を発現させるように改変され、この場合、重鎖および軽鎖のコード配列は、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられて、ＶＡＣＶ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４をもたらす。一部の実施形態では、ＶＡＣＶ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４ゲノムはＥ５Ｒの欠失を含むようにさらに改変され、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−Ｅ５Ｒ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ（またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）などの組換えウイルスを形成する。他の実施形態では、本技術のＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に指し示されるもの以外の、任意のさらなる異種遺伝子を発現させず、かつ／または任意のさらなる、ウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含まない。
【０１４７】
本明細書では、「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ」という用語は、Ｂ２Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、ワクシニア突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ」は、機能的なＢ２タンパク質を発現させない、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）を包含する。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスは、ウェスタンリザーブ（ＷＲ）株に由来する。一部の実施形態では、ΔＢ２Ｒ突然変異体は、Ｂ２Ｒ遺伝子配列の全部または大部分の代わりに、異種配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ」は、ＶＡＣＶゲノム内のＢ２Ｒの位置（例えば、配列番号２の１６４，８５６〜１６５，５３０位）に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）遺伝子（「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた、組換えワクシニアウイルスの核酸配列を包含する。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換えワクシニアウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座（例えば、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒは、Ｂ２Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換えワクシニアウイルス（「ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の操作ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下のワクシニアウイルスの欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７Ｌ（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つのウイルス遺伝子の突然変異もしくは��失を含むように改変される。別の例として述べると、一部の実施形態では、ワクシニアゲノムのＴＫ遺伝子座は、相同組換えを介して、抗ＣＴＬＡ−４など、抗体の重鎖および軽鎖の両方を発現させるように改変され、この場合、重鎖および軽鎖のコード配列は、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられて、ＶＡＣＶ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４をもたらす。一部の実施形態では、ＶＡＣＶ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４ゲノムは、Ｂ２Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられる、Ｂ２Ｒの欠失を含むように、さらに改変される。他の実施形態では、本技術のＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に指し示されるもの以外の、任意のさらなる異種遺伝子を発現させず、かつ／または任意のさらなる、ウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含まない。
【０１４８】
本明細書では、「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ」という用語は、Ｍ３１Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、粘液腫突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。粘液腫ウイルスＭ３１Ｒは、ワクシニアウイルスＥ５Ｒのオーソログである。本明細書で使用される、「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ」は、機能的なＭ３１Ｒタンパク質を発現させない、組換え粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）を包含する。一部の実施形態では、ΔＭ３１Ｒ突然変異体は、Ｍ３１Ｒ遺伝子配列の全部または大部分の代わりに、異種配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ」は、ＭＹＸＶゲノム内のＭ３１Ｒの位置（例えば、ＭＹＸＶゲノムの３０，１３８〜３１，３１９位）に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）遺伝子（「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた、組換え粘液腫ウイルスの核酸配列を包含する。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒは、Ｍ３１Ｒ遺伝子座が、１つまたは複数の異種遺伝子を発現させるように改変された、組換えＭＹＸＶを包含する。例えば、一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒは、Ｍ３１Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＹＸＶを包含する。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームをさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換え粘液腫ウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座（例えば、粘液腫ゲノムの５７，７９７〜５８，３３３位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒは、Ｍ３１Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換え粘液腫ウイルス（「ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の操作ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下のワクシニアウイルスの欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７Ｌ（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９などの欠失の、粘液腫オーソログのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つのウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本技術のＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に指し示されるもの以外の、任意のさらなる異種遺伝子を発現させず、かつ／または任意のさらなる、ウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含まない。
【０１４９】
本明細書では、「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ」という用語は、Ｍ６３Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、粘液腫突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ」は、機能的なＭ６３Ｒタンパク質を発現させない、組換え粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）を包含する。一部の実施形態では、ΔＭ６３Ｒ突然変異体は、Ｍ６３Ｒ遺伝子配列の全部または大部分の代わりに、異種配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ」は、ＭＹＸＶゲノム内のＭ６３Ｒの位置に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）遺伝子（「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた、組換え粘液腫ウイルスの核酸配列を包含する。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒは、Ｍ６３Ｒ遺伝子座が、１つまたは複数の異種遺伝子を発現させるように改変された、組換えＭＹＸＶを包含する。例えば、一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒは、Ｍ６３Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＹＸＶを包含する。加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換え粘液腫ウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座（例えば、粘液腫ゲノムの５７，７９７〜５８，３３３位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒは、Ｍ６３Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換え粘液腫ウイルス（「ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の操作ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ���１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下のワクシニアウイルスの欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７Ｌ（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９などの欠失の、粘液腫オーソログのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つのウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒは、さらなる粘液腫遺伝子の欠失（例えば、ΔＭ３１Ｒ、ΔＭ６２Ｒ、および／またはΔＭ６４Ｒ）を含むように、さらに操作される。他の実施形態では、本技術のＭＹＸＶΔＭ６３Ｒウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に指し示されるもの以外の、任意のさらなる異種遺伝子を発現させず、かつ／または任意のさらなる、ウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含まない。
【０１５０】
本明細書では、「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ」という用語は、Ｍ６４Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）、粘液腫突然変異体ウイルス、またはこのウイルスを含むワクチンを指すように使用される。本明細書で使用される、「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ」は、機能的なＭ６４Ｒタンパク質を発現させない、組換え粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）を包含する。一部の実施形態では、ΔＭ６４Ｒ突然変異体は、Ｍ６４Ｒ遺伝子配列の全部または大部分の代わりに、異種配列を含む。例えば、本明細書で使用される、「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ」は、ＭＹＸＶゲノム内のＭ６４Ｒの位置に対応する核酸配列が、ヒトＯＸ４０Ｌ（「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ−ＯＸ４０Ｌ」）、またはヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）遺伝子（「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ」）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられた、組換え粘液腫ウイルスの核酸配列を包含する。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒは、Ｍ６４Ｒ遺伝子座が、１つまたは複数の異種遺伝子を発現させるように改変された、組換えＭＹＸＶを包含する。例えば、一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒは、Ｍ６４Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ」などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＹＸＶを包含する。加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルスは、機能的なチミジンキナーゼ（ＴＫ）タンパク質を発現させない、組換え粘液腫ウイルスを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座（例えば、粘液腫ゲノムの５７，７９７〜５８，３３３位）へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させる（「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ−ＯＸ４０Ｌ−ＴＫ（−）」；「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）」）。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒは、Ｍ６４Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）で置きかえられ、第２の目的の遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入された、組換え粘液腫ウイルス（「ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ」）を包含する。一部の実施形態では、本技術の操作ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ���１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下のワクシニアウイルスの欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７Ｌ（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９などの欠失の、粘液腫オーソログのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つのウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒは、さらなる粘液腫遺伝子の欠失（例えば、ΔＭ３１Ｒ、ΔＭ６２Ｒ、および／またはΔＭ６３Ｒ）を含むように、さらに操作される。他の実施形態では、本技術のＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルスは、ウイルス名の下に、具体的に指し示されるもの以外の、任意のさらなる異種遺伝子を発現させず、かつ／または任意のさらなる、ウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含まない。
【０１５１】
本明細書で使用される、「腫瘍溶解性ウイルス」とは、がん細胞に優先的に感染し、このような細胞内で複製され、その複製過程を介して、がん細胞の溶解を誘導するウイルスを指す。天然に存在する腫瘍溶解性ウイルスの非限定的例は、水疱性口炎ウイルス、レオウイルスのほか、アデノウイルス、ニューカッスル病ウイルス、および単純ヘルペスウイルスなど、腫瘍選択性となるように操作されたウイルスを含む（例えば、Nemunaitis, J. Invest. New Drugs 17(4):375-86 (1999); Kirn, DH et al., Nat. Rev. Cancer 9(1):64-71(2009); Kirn et al., Nat. Med. 7:781 (2001); Coffey et al., Science 282:1332 (1998)を参照されたい）。ワクシニアウイルスは、多くの種類の細胞に感染するが、腫瘍細胞が、複製に好適な代謝を有し、これもまた、複製に好適な、ある特定の経路の活性化を呈し、これもまた、ウイルスの複製に好適な、自然免疫系を回避する環境を創出するという事実のために、腫瘍細胞内で、優先的に複製される。
【０１５２】
本明細書で使用される、治療用物質または治療用組成物の投与の文脈で使用される場合の、「非経口」とは、消化管を介する投与以外の、任意の投与経路を含む。本明細書で開示される方法で特に妥当な投与経路は、静脈内投与（例えば、肝内送達のための、肝門静脈を介する投与を含む）、腫瘍内投与、または髄腔内投与である。
【０１５３】
「薬学的に許容される賦形剤」、「薬学的に許容される希釈剤」、「薬学的に許容される担体」、または「薬学的に許容されるアジュバント」という用語は、一般に安全であり、非毒性であり、かつ、生物学的にも、他の点でも、有害でない、医薬組成物の調製に有用な、賦形剤、希釈剤、担体、および／またはアジュバントを指し、医薬への使用に許容可能な、賦形剤、希釈剤、担体、およびアジュバントを含む。本明細書および特許請求の範囲において使用される、「薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、担体、および／またはアジュバント」は、１つまたは複数の、このような賦形剤、希釈剤、担体、およびアジュバントを含む。
【０１５４】
本明細書で使用される、障害または状態の「防止」、これら「を防止する」、またはこれら「を防止すること」とは、統計学的標本中、処置された標本において、非処置対照標本と比べて、障害もしくは状態の発生を低減するか、または障害もしくは状態の、１つもしくは複数の症状の開始を、非処置対照標本と比べて遅延させる、１つまたは複数の化合物を指す。
例えば、ウイルスまたは細胞または核酸またはタンパク質またはベクターに言及して、本明細書で使用される場合の、「組換え」という用語は、ウイルス、細胞、核酸、タンパク質、またはベクターが、異種核酸もしくは異種タンパク質の導入、または天然の核酸もしくはタンパク質の変更により改変されているか、あるいは素材が、そのように改変されたウイルスまたは細胞に由来することを指し示す。したがって、例えば、組換えウイルスまたは組換え細胞は、ウイルスもしくは細胞の天然（非組換え）形態内では見出されない遺伝子を発現させるか、または組み換えていなければ、異常に発現されるか、過小に発現されるか、もしくは全く発現されない、天然遺伝子を発現させる。
【０１５５】
本明細書で使用される、「充実性腫瘍」とは、リンパ腫、白血病、および多発性骨髄腫などの血液がんを除く、全ての新生物性細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈおよびｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）、ならびに全ての前がん性細胞および前がん性組織、ならびにがん性細胞およびがん性組織を指す。充実性腫瘍の例は、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫（ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ  ｓａｒｃｏｍａ）、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍などの軟部組織肉腫、および他の骨腫瘍（例えば、骨肉腫（ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ）、悪性線維性組織球腫）、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、扁平上皮がん、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝がん、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胚性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、脳／ＣＮＳ腫瘍（例えば、星状細胞腫、神経膠腫、神経膠芽腫、非定型奇形腫様／横紋筋様腫瘍、胚細胞腫瘍、胚性腫瘍、上衣腫などの小児腫瘍）、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、希突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫を含むがこれらに限定されない。本開示の組成物および方法が有用となる、最も一般的な充実性腫瘍の一部は、頭頸部がん、直腸腺癌、神経膠腫、髄芽腫、尿路上皮癌、膵腺癌、子宮がん（例えば、子宮内膜がん、卵管がん）、卵巣がん、子宮頸がん、前立腺腺癌、非小細胞肺がん（上皮がんおよび腺癌）、小細胞肺がん、黒色腫、乳癌、膀胱がん、非浸潤性乳管癌、腎細胞癌、および肝細胞癌、副腎腫瘍（例えば、副腎皮質癌）、食道がん、眼がん（例えば、黒色腫、網膜芽細胞腫）、胆嚢がん、消化器がん、ウィルムス腫瘍、心臓がん、頭頸部がん、喉頭／下咽頭がん、口腔（ｏｒａｌ）がん（例えば、口唇がん、口腔（ｍｏｕｔｈ）がん、唾液腺がん）、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、腹膜がん、下垂体がん、カポジ肉腫、小腸がん、胃がん、精巣がん、胸腺がん、甲状腺がん、副甲状腺がん、膣腫瘍、および前出のうちのいずれかの転移を含む。
【０１５６】
本明細書では、「対象」、「個体」、または「患者」という用語は、互換的に使用され、個体の生物、脊椎動物、哺乳動物、またはヒトでありうる。一部の実施形態では、「対象」とは、がんに罹患する可能性があり、このように罹患した場合に、処置の必要がある、任意の動物（哺乳動物、ヒト、または他の動物）患者を意味する。一部の実施形態では、「対象」とは、ヒトを意味する。
【０１５７】
一部の実施形態では、本明細書で使用される、「相乗的治療効果」は、少なくとも２つの薬剤の組合せによりもたらされ、組合せによらない、薬剤の個別の投与から生じる効果を超える、相加的治療効果を超える治療効果を反映する。一部の実施形態では、「相乗的治療効果」は、少なくとも２つの薬剤の組合せによりもたらされる、薬剤の個別の投与と比べた、治療効果の増強を反映する。例えば、低用量の、１つまたは複数の薬剤は、疾患または障害の処置において使用される結果として、治療効能の増大および副作用の低下もたらす。
【０１５８】
本明細書で使用される、「〜を処置すること」、「〜を処置する」、「処置された」、または「処置」は、ヒトなどの対象における、本明細書で記載される疾患または障害の処置を対象とし、（ｉ）疾患もしくは障害を阻害すること、すなわち、その発生を止めること；（ｉｉ）疾患もしくは障害を和らげること、すなわち、障害の退縮をもたらすこと；（ｉｉｉ）障害の進行を緩徐化させること；および／または（ｉｖ）疾患もしくは障害の１つもしくは複数の症状を阻害すること、これらを和らげること、もしくはこれらの進行を緩徐化させることを含む。一部の実施形態では、処置とは、疾患と関連する症状が、例えば、緩和されるか、軽減されるか、治癒されるか、または寛解状態に置かれることを意味する。一部の実施形態では、「〜を阻害すること」とは、腫瘍の増殖を低減するか、または緩徐化させることを意味する。一部の実施形態では、腫瘍の増殖の阻害は、例えば、５％またはこれを超える、１０％またはこれを超える、２０％またはこれを超える、３０％またはこれを超える、４０％またはこれを超える、５０％またはこれを超える、６０％またはこれを超える、７０％またはこれを超える、８０％またはこれを超える、または９０％またはこれを超える阻害でありうる。一部の実施形態では、阻害は、完全な阻害でありうる。
また、記載される、医学的な疾患および状態の、多様な処置または防止の方式は、「実質的な」処置または防止を意味することが意図され、これは、全体的な処置または防止を含むが、また、全体的処置または防止に満たない処置または防止も含み、この場合、一部の、生物学的に妥当であるか、または医学的に妥当な結果が達成されることも理解されたい。
【０１５９】
本明細書で使用される、「腫瘍免疫」とは、腫瘍が、免疫系による認識および除去を回避する、１つまたは複数の過程を指す。したがって、治療概念として、腫瘍免疫は、このような回避が、弱められるか、または消失し、腫瘍が、免疫系により、認識および攻撃される（本明細書の後出では、「抗腫瘍免疫」と称される）場合に、「処置される」。腫瘍認識の例は、腫瘍への結合であり、腫瘍攻撃の例は、腫瘍の低減（数、サイズ、またはこれらの両方）および腫瘍の除去である。
【０１６０】
本明細書で使用される、「Ｔ細胞」とは、様々な細胞媒介性獲得免疫反応に参与する、胸腺由来リンパ球を指す。本明細書で使用される、「エフェクターＴ細胞」は、ヘルパーＴ細胞、キラーＴ細胞、および調節性Ｔ細胞を含む。
本明細書で使用される、「ヘルパーＴ細胞」とは、ＣＤ４+Ｔ細胞を指し；ヘルパーＴ細胞は、ＭＨＣクラスＩＩ分子に結合した抗原を認識する。異なるサイトカインを産生する、少なくとも２種類のヘルパーＴ細胞である、Ｔｈ１およびＴｈ２が存在する。
本明細書で使用される、「細胞傷害性Ｔ細胞」とは、通例、その表面上に、ＣＤ８分子マーカー（ＣＤ８+）を保有し、特異的抗原性分子を、その表面上に有する、標的Ｔ細胞を破壊することにより、細胞媒介性免疫において機能するＴ細胞を指す。細胞傷害性Ｔ細胞はまた、パーフォリンにより形成された小孔を介して、標的Ｔ細胞に侵入し、アポトーシス（細胞死）を誘導しうる、セリンプロテアーゼである、グランザイムも放出する。グランザイムは、細胞傷害性表現型のマーカーとして用いられる。細胞傷害性Ｔ細胞の他の名称は、ＣＴＬ、細胞質ゾルＴ細胞、細胞質ゾルＴリンパ球、キラーＴ細胞、またはキラーＴリンパ球を含む。細胞傷害性Ｔ細胞の標的は、ウイルス感染細胞、細菌性寄生虫もしくは原虫性寄生虫を感染させた細胞、またはがん細胞を含みうる。大半の細胞傷害性Ｔ細胞は、それらの細胞表面上に存在するタンパク質である、ＣＤ８を有する。ＣＤ８は、クラスＩＭＨＣ分子の一部へと誘引される。典型的に、細胞傷害性Ｔ細胞は、ＣＤ８+細胞である。
本明細書で使用される、「腫瘍浸潤白血球」とは、がん（黒色腫など）に罹患した対象の白血球であって、循環内にとどまるか、または循環（血液またはリンパ液）を離れ、腫瘍へと遊走した白血球を指す。
【０１６１】
本明細書で使用される、「ベクター」は、適正な制御エレメントが付随する場合、複製が可能であり、細胞間で遺伝子配列を導入しうる、プラスミド、ファージ、トランスポゾン、コスミド、染色体、人工染色体、ウイルス、ビリオンなど、任意の遺伝子のエレメントを含む。したがって、用語は、クローニング媒体および発現媒体のほか、ウイルスベクターを含む。一部の実施形態では、有用なベクターは、転写される核酸セグメントが、プロモーターの転写制御下に配置されたベクターであることが想定される。「プロモーター」とは、細胞の合成機構、または導入された合成機構により認識され、遺伝子の特異的転写を誘発するように要求されるＤＮＡ配列を指す。「作動的に配置された」、「作動的に連結された」、「制御下に」、または「転写制御下に」という語句は、プロモーターが、ＲＮＡポリメラーゼの誘発および遺伝子の発現を制御する核酸との関連で、適正な位置および配向性にあることを意味する。「発現ベクターまたは発現構築物」という用語は、核酸をコードする配列の一部または全部の転写が可能な核酸を含有する、任意の種類の遺伝子構築物を意味する。一部の実施形態では、発現は、例えば、転写される遺伝子から、生物学的に活性のポリペプチド産物、または阻害性ＲＮＡ（例えば、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）をもたらす、核酸の転写を含む。本技術に従う、ｐＣＢ−ＯＸ４０Ｌ−ｇｐｔベクターの非限定例は、配列番号３に明示される。本技術に従う、ｐＵＣ５７−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＧＦＰベクターの非限定例は、配列番号４に明示される。ｐＵＣ５７−ｄｅｌＣ７−ｈＯＸ４０Ｌ−ｍＣｈｅｒｒｙベクターの非限定例は、配列番号５に明示される。
【０１６２】
本明細書では、「毒力」という用語は、病原体が疾患を引き起こす、相対能力を指すように使用される。本明細書では、「毒力の弱毒化」または「毒力の低減」という用語は、病原体が疾患を引き起こす、相対能力の低減を指すのに使用される。
【０１６３】
ＩＩ．免疫系およびがん
悪性腫瘍は、従来型の治療に対して、遺伝的に耐性であり、治療上の難題を提示する。免疫療法は、調査研究の発展領域となり、ある特定の種類のがんの処置のための、さらなる選択肢となっている。免疫療法は、免疫系が、腫瘍細胞を同定し、破壊のために、それらをターゲティングするように刺激されうるという根拠に依拠する。
【０１６４】
多数の研究が、がん進行における、免疫系構成要素の、示差的存在の重要性を裏書きしている（Jochems et al., Exp. Biol. Med. 236(5):567-579 (2011)）。臨床データは、高密度の腫瘍浸潤リンパ球が、臨床転帰の改善と連関することを示唆する（Mlecnik et al., Cancer Metastasis Rev. 30:5-12, (2011)）。ロバストなリンパ球浸潤と、患者生存との相関が、黒色腫、卵巣がん、頭頸部がん、乳がん、膀胱がん、尿路上皮がん、直腸がん、肺がん、肝細胞がん、胆嚢がん、および食道がんを含む、多様な種類のがんにおいて報告されている（Angell et al., Current Opinion in Immunology 25:1-7, (2013)）。腫瘍免疫浸潤物は、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）、単球、好中球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナイーブリンパ球およびメモリーリンパ球、Ｂ細胞およびエフェクターＴ細胞（Ｔリンパ球）を含み、主に、腫瘍細胞により発現される抗原の認識、および後続の、細胞傷害性Ｔ細胞による、腫瘍細胞の破壊の一因となる。
【０１６５】
がん細胞による抗原の提示、および腫瘍細胞に対して、潜在的に反応しうる免疫細胞の存在にもかかわらず、多くの症例では、免疫系は、活性化されないか、または積極的に抑制される。この現象に対する鍵は、免疫系の細胞に、免疫系の他の細胞を阻害するように強要することにより、自身を、免疫応答からを保護する、腫瘍の能力である。腫瘍は、抗腫瘍免疫応答を回避するように、多数の免疫調節機構を発生させる。例えば、腫瘍細胞は、免疫阻害性サイトカイン（ＴＧＦ−βなど）を分泌するか、またはこれらのサイトカインを分泌するように、ＣＤ４+調節性Ｔ細胞およびマクロファージなどの免疫細胞を、腫瘍病変内で誘導する。腫瘍はまた、ＣＤ４+Ｔ細胞に、調節性表現型を発現させるように、バイアスをかける能力も有する。その全体的な結果は、Ｔ細胞応答の機能不全、およびアポトーシスの誘導の機能不全、またはＣＤ８+細胞傷害性Ｔ細胞の、抗腫瘍免疫能力の低減である。加えて、腫瘍と関連する、腫瘍細胞の表面上の、ＭＨＣクラスＩの発現の変更は、それらを、免疫応答に対して「見えなく」する（Garrido et al. Cancer Immunol. Immunother. 59(10):1601-1606 (2010)）。加えて、抗原提示機能および樹状細胞（ＤＣ）の阻害は、抗腫瘍免疫の回避に寄与する（Gerlini et al. Am. J. Pathol. 165(6):1853-1863 (2004)）。
【０１６６】
さらに、免疫編集と共に、腫瘍微小環境の、局所免疫抑制的性格は、標的抗原を発現させない、がん細胞の亜集団の逃避をもたらしうる。したがって、免疫系の抗腫瘍活性の保存および／または回復を促進する手法の発見は、大きな治療的利益をもたらすであろう。
【０１６７】
免疫チェックポイントは、抗腫瘍免疫の、腫瘍媒介性下方調節に関与しており、治療標的として使用されている。Ｔ細胞の機能異常は、受容体のＣＤ２８ファミリーのメンバーである、阻害性受容体の、ＣＴＬＡ−４およびプログラム死１ポリペプチド（ＰＤ−１）の発現の誘導と共時的に生じることが裏付けられている。ＰＤ−１は、ＰＤ−１に加えて、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４、ＩＣＯＳ、およびＢＴＬＡを含む、受容体のＣＤ２８ファミリーの、阻害性メンバーである。しかし、黒色腫の処置における、免疫療法の使用に関する有望性が、臨床使用により強調され、抗ＣＴＬＡ−４薬（イピリムマブ）および抗ＰＤ−１薬（例えば、ペムブロリズマブおよびニボルマブ）の、規制機関による承認によっても強調されているが、患者の、これらの免疫療法に対する応答は、限定的である。Ｔ細胞内の、これらの阻害性シグナル（例えば、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、およびＰＤ−１のリガンドである、ＰＤ−Ｌ１）の遮断に焦点を当てた臨床試験は、Ｔ細胞抑制の反転が、免疫療法の成功に、極めて重要であることを示している（Sharma et al., Science 348(6230):56-61 (2015); Topalian et al., Curr. Opin. Immunol. 24(2):202-217 (2012)）。これらの観察は、がんに対して免疫系を生かす、新規の治療法の開発に対する必要を強調する。
【０１６８】
ＩＩＩ．ポックスウイルス：ワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）、改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス、および粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）
操作ワクシニアウイルスなどのポックスウイルスは、転移性がんのための腫瘍溶解療法として、最前線にある（Kirn et al., Nature Review Cancer 9:64-71 (2009)）。ポックスウイルスファミリーのメンバーである、ワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）は、短い生活環と、遠隔組織への効率的な血行拡散とを有する、大型のＤＮＡウイルスである。ポックスウイルスは、がん細胞内で、複数のトランス遺伝子を発現させ、治療効能を増強するためのベクターとして好適である（Breitbach et al., Current pharmaceutical biotechnology 13:1768-1772 (2012)）。前臨床研究および臨床研究は、従来の治療に不応性の進行がんの処置に、腫瘍溶解性ワクシニアウイルスおよび他のポックスウイルスを使用することの効能を裏付けている（Park et al., Lacent Oncol. 9:533-542 (2008); Kirn et al., PLoS Med 4:e353 (2007); Thorne et al., J. Clin. Invest. 117:3350-3358 (2007)）。ポックスウイルスベースの腫瘍溶解療法は、細胞溶解、アポトーシス、および壊死の組合せを介して、がん細胞を死滅させる利点を有する。ポックスウイルスベースの腫瘍溶解療法はまた、免疫細胞の、腫瘍への動員、および抗腫瘍獲得免疫応答の発生を容易とする、自然免疫センシング経路も誘発する。臨床試験における、現行の腫瘍溶解性ワクシニア株（例えば、ＪＸ−５９４）は、複製性株である。現行の腫瘍溶解性ワクシニア株は、腫瘍選択性を増強するために、チミジンキナーゼを欠失させ、免疫応答を刺激するために、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）など、トランス遺伝子を発現させる、野生型ワクシニアを使用する（Breitbach et al., Curr. Pharm. Biotechnol. 13:1768-1772 (2012)）。しかし、多くの研究は、野生型ワクシニアが、抗原提示細胞（ＡＰＣ）に対して、免疫抑制効果を及ぼし（Engelmayer et al., J. Immunol. 163:6762-6768 (1999); Jenne et al., Gene Therapy 7:1575-1583 (2000); P. Li et al., J. Immunol. 175:6481-6488 (2005); Deng et al., J. Virol. 80:9977-9987 (2006)）、このために、免疫抑制効果および腫瘍自体の免疫回避効果を付加することを示している。
【０１６９】
ワクシニアウイルス（ウェスタンリザーブ株；ＷＲ）のゲノム配列は、配列番号２に明示され、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＹ２４３３１２．１により与えられる。
改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルスもまた、ポックスウイルスファミリーのメンバーである。ＭＶＡは、ニワトリ胚線維芽細胞（ＣＥＦ）上における、ワクシニアウイルスアンカラ株（ＣＶＡ）の、約５７０代にわたる継代培養により作出された（Mayr et al., Infection 3:6-14 (1975)）。これらの長期にわたる継代の帰結として、結果として得られるＭＶＡウイルスは、広範にわたるゲノム欠失を含有し、鳥類細胞に対する宿主細胞拘束性が大きい（Meyer et al., J. Gen. Virol. 72:1031-1038 (1991)）。様々な動物モデルにおいて、結果として得られるＭＶＡは、著明に無毒性であることが示された（Mayr et al., Dev. Biol. Stand. 41:225-34 (1978)）。
【０１７０】
ＭＶＡの安全性および免疫原性は、臨床試験において、特に、ヒト天然痘に対して、広範にわたり調べられ、記録されている。これらの研究は、１２０，０００人を超える個体を含み、ヒトにおいて、優れた有効性および安全性を裏付けた。さらに、他のワクシニアベースのワクチンと比較して、ＭＶＡは、良好な特異的免疫応答を誘発しながら、毒力（感染性）が弱められている。したがって、ＭＶＡは、特異的免疫応答を誘導する能力を伴う、安全なワクチンベクターとして確立されている。
上記で言及された特徴のために、ＭＶＡは、組換え遺伝子発現および組換えワクチンに使用される、操作ＭＶＡベクターの開発のための、魅力的な候補ウイルスとなった。ワクチンベクターとして、ＭＶＡは、ＨＩＶ、結核、およびマラリアのほか、がんを含む、多数の病理学的状態に対して調べられている（Sutter et al., Curr. Drug Targets Infect. Disord. 3:263-271(2003); Gomez et al., Curr. Gene Ther. 8:97-120 (2008)）。
【０１７１】
ヒト単球由来樹状細胞（ＤＣ）への、ＭＶＡの感染は、共刺激分子の上方調節、および炎症促進性サイトカインの分泌により特徴づけられる、ＤＣの活性化を引き起こすことが裏付けられている（Drillien et al., J. Gen. Virol. 85:2167-2175 (2004)）。この点で、ＭＶＡは、ＤＣを活性化させることができない、標準的な野生型ワクシニアウイルス（野生型ＶＡＣ）と異なる。樹状細胞は、２つの主要な亜型：通常樹状細胞（ｃＤＣ）および形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）へと分類されうる。前者、とりわけ、ＣＤ１０３+／ＣＤ８α+亜型は、特に、抗原の、Ｔ細胞への交差提示に適合されており；後者は、Ｉ型ＩＦＮの、強力な産生細胞である。
【０１７２】
ウイルスの、ヒト細胞への感染は、自然免疫応答（防御の最前線）により媒介される、Ｉ型インターフェロン、とりわけ、インターフェロン−アルファ（α）の活性化を結果としてもたらす。これは、通常、活性化Ｔ細胞（ＣＴＬおよびヘルパーＴ細胞の両方）の動員および増殖を伴い、最終的に、抗体の産生を伴う、免疫学的「カスケード」の活性化をもたらす。しかし、ウイルスは、宿主の免疫応答を減弱させる因子を発現させる。ＭＶＡは、野生型ＶＡＣより良好な免疫原であり、哺乳動物細胞内の複製が低度である（例えば、Brandler et al., J. Virol. 84:5314-5328 (2010)を参照されたい）。
しかし、ＭＶＡは、完全に非複製性ではなく、また一部の残留免疫抑制活性を含有する。しかしながら、ＭＶＡは、処置された対象の生存を延長することが示されている。
ＭＶＡゲノム配列は、配列番号１に明示され、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：Ｕ９４８４８．１により与えられる。
【０１７３】
粘液腫ウイルス（ＭＹＸＶ）は、ポックスウイルス科（Ｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ）内の、レポリポックスウイルス属（Ｌｅｐｏｒｉｐｏｘｖｉｒｕｓ）の原型メンバーである。ＭＹＸＶローザンヌ株のゲノム（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＦ１７０７２６．２により与えられる）は、１６１．８ｋｂｐのサイズであり、約１７１の遺伝子をコードする。ゲノムの中心領域が、全てのポックスウイルス内で、高度に保存的な、１００未満の遺伝子をコードするのに対し、ゲノムの末端領域は、免疫の調節および宿主との相互作用因子をコードする固有の遺伝子であって、宿主免疫系および他の抗ウイルス応答の妨害に関与する固有の遺伝子についてエンリッチされている。粘液腫ウイルスは、極めて限定的な宿主域、およびカイウサギだけに対する病原性を呈する。天然におけるその狭い宿主域にもかかわらず、ＭＹＸＶは、多様なクラスのヒトがん細胞に、生産的に感染することが示されている。ＭＹＸＶの腫瘍溶解剤としての魅力的な特徴は、多様なヒトがん細胞に生産的に感染するその能力と、マウスおよびヒトを含む全ての非ウサギ被験宿主におけるその一貫した安全性とを含む。一部の実施形態では、粘液腫ウイルスは、ローザンヌ株に由来する。
【０１７４】
Ｖ．ワクシニアウイルスＣ７タンパク質、およびＣ７の欠失を含む、ＭＶＡもしくはワクシニアウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ）、または粘液腫Ｃ７オーソログの欠失を含む粘液腫ウイルス
ワクシニアウイルスＣ７タンパク質は、哺乳動物細胞内のワクシニアウイルス生活環に重要な宿主域因子である。Ｃ７Ｌ相同体は、哺乳動物宿主に感染するポックスウイルスのほとんど全てにおいて存在する。宿主域遺伝子であるＣ７ＬおよびＫ１Ｌの両方の欠失により、ウイルスは、ヒト細胞内での複製が不可能になる（Perkus et al., Virology, 1990）。Ｋ１ＬおよびＣ７Ｌの両方の、突然変異体ウイルス欠損は、ＳＡＭＤ９がノックアウトされると、ヒトＨｅＬａ細胞内で複製されるその能力を獲得する（Sivan et al., MBio, 2015）。Ｋ１およびＣ７のいずれも、ＳＡＭＤ９と相互作用することが見出されている（Sivan et al., MBio, 2015）。ＩＲＦ１の過剰発現は、Ｃ７Ｌ／Ｋ１Ｌ二重欠失ワクシニアウイルスの宿主制限をもたらす（Meng et al., Journal of Virology, 2012）。Ｃ７およびＫ１のいずれも、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、ＳＡＭＤ９と相互作用する（Sivan et al., MBio, 2015）。Ｃ７が、ＩＦＮの産生またはこれによるシグナル伝達を直接モジュレートするのかどうかは、知られていない。Ｉ型ＩＦＮは、ウイルス感染に対する宿主防御において、重要な役割を果たすが、ＩＦＮ経路に対する免疫モジュレーションにおけるＣ７の役割は、明らかではない。
【０１７５】
理論に束縛されることを望まずに述べると、ワクシニアＣ７は、Ｉ型ＩＦＮの誘導およびＩＦＮによるシグナル伝達の阻害剤であると考えられる。ＴＡＮＫ結合キナーゼ１（ＴＢＫ１）は、核酸を含む、多様な病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）に対する自然免疫応答の誘導において、極めて重要な役割を果たすセリン／トレオニンキナーゼである。一方で、５’三リン酸のＲＮＡおよびｄｓＲＮＡのそれぞれを検出する、ＲＩＧ−ＩおよびＭＤＡ５などのＲＩＧ−Ｉ様受容体は、ミトコンドリアタンパク質であるＩＰＳ−１またはＭＡＶＳと相互作用し、ＴＢＫ１の活性化およびリン酸化をもたらす。エンドソームのｄｓＲＮＡは、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）に結合し、これは、ＴＲＩＦおよびＴＲＡＦ３の動員、ならびにＴＢＫ１活性化を結果としてもたらす。他方で、細胞質ゾルＤＮＡは、細胞質ゾルＤＮＡセンサーである環状ＧＭＰ−ＡＭＰシンターゼ（ｃＧＡＳ）により検出されえ、これは環状ＧＭＰ−ＡＭＰ（ｃＧＡＭＰ）の産生をもたらす。ｃＧＡＭＰは、小胞体（ＥＲ）局在化アダプターであるＳＴＩＮＧに結合し、ＴＢＫ１の動員および活性化をもたらす。ＴＢＫ１が、転写因子であるＩＲＦ３をリン酸化すると、ＩＲＦ３は、核へと移行して、ＩＦＮＢ遺伝子の発現を活性化させる。理論に束縛されることを望まずに述べると、Ｃ７は、ＲＮＡウイルス、ＤＮＡウイルス、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸、免疫刺激性ＤＮＡ（ＩＳＤ）を含む、多様な刺激により、ＩＦＮＢの誘導を阻害すると考えられる。Ｃ７は、ＴＢＫ１／ＩＲＦ３複合体のレベルで、その阻害効果を及ぼしうる。分泌されたＩ型ＩＦＮが、ＩＦＮＡＲに結合すると、これは、ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達経路の活性化をもたらす。リン酸化されたＳＴＡＴ１およびＳＴＡＴ２は、核へと移行し、そこで、ＩＲＦ９と一緒に、ＩＦＮ刺激遺伝子（ＩＳＧ）の発現を活性化させる。理論に束縛されることを望まずに述べると、ＩＦＮＢの誘導を阻害する、その能力加えて、Ｃ７はまた、ＳＴＡＴ２とのその相互作用を介して、ＩＦＮＡＲシグナル伝達も阻止し、これにより、ＩＦＮ−βにより誘導されるＳＴＡＴ２のリン酸化を阻止すると考えられる。理論に束縛されることを望まずに述べると、ワクシニアＣ７は、Ｉ型ＩＦＮの産生およびこれによるシグナル伝達に対する、二重の阻害性の役割を果たすと考えられる。既往の研究は、野生型ワクシニアからの、Ｃ７Ｌの欠失（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ）が、ウイルスの弱毒化を結果としてもたらし、ＭＶＡからの、Ｃ７Ｌの欠失（ＭＶＡΔＣ７Ｌ）が、免疫刺激性機能の、ＭＶＡと比較した増強をもたらすことを示している。
【０１７６】
異所性のＣ７発現は、ＳＴＩＮＧ、ＴＢＫ１、またはＩＲＦ３により誘導される、ＩＦＮＢおよびＩＳＲＥ（インターフェロン刺激性応答エレメント）のプロモーターの活性化を阻止することが示されている。Ｃ７を過剰発現させるマウスマクロファージ細胞系またはヒトマクロファージ細胞系は、ＤＮＡまたはＲＮＡの刺激に対する自然免疫応答、またはＤＮＡウイルスもしくはＲＮＡウイルスの感染を鈍化させたことが示されている。また、Ｃ７の過剰発現が、ＩＦＮ−β処置により誘導される、ＩＳＧ遺伝子の発現を弱めることも示されている。Ｃ７Ｌの欠失を伴うＭＶＡ（ＭＶＡΔＣ７Ｌ）の、ｃＤＣへの感染は、ＭＶＡより高レベルのＩ型ＩＦＮを誘導することが示されている。Ｃ７は、Ｓｔａｔ２のリン酸化の阻止を介して、ＩＦＮ−βにより誘導されるＪａｎｕｓキナーゼ／シグナル伝達物質、および転写（ＪＡＫ／ＳＴＡＴ）シグナル伝達経路の活性化因子を阻止することが示されている。Ｃ７は、共免疫沈降研究により裏付けられる通り、Ｓｔａｔ２と直接相互作用することが示されている。
ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＡＢ９６４０５．１により与えられる、例示的な全長ワクシニアウイルスＣ７宿主域タンパク質（配列番号６）は、下記に提示される。
【０１７７】
【化１】
2022501339.tif 000003
粘液腫ウイルスは、３つのＣ７オーソログである、Ｍ６２、Ｍ６３、Ｍ６４を有する。粘液腫Ｍ６４は、ワクシニアＣ７と、配列同一性は、２３％を有するに過ぎないが、類似の構造特徴を共有する。粘液腫Ｍ６２は、ヒト細胞内の、ＶＡＣＶΔＫ１ＬΔＣ７Ｌの複製欠損をレスキューしうる。粘液腫Ｍ６３の欠失は、ウサギ細胞内で非複製性である組換えウイルスを結果としてもたらす。一部の実施形態では、本開示の技術は、ＭＹＸＶΔＭ６４ＲまたはＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌなどの、操作粘液腫ウイルスを提供する。
【０１７８】
ＶＩ．ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）
ＯＸ４０リガンド（ＯＸ４０Ｌ）、およびその結合パートナーである腫瘍壊死因子受容体ＯＸ４０は、ＴＮＦＲ／ＴＮＦスーパーファミリーのメンバーであり、活性化ＣＤ４  Ｔ細胞上および活性化ＣＤ８  Ｔ細胞上、ならびに多数の他のリンパ細胞上および非リンパ細胞上で発現される。ＯＸ４０Ｌ−ＯＸ４０間相互作用は、ＯＸ４０を発現させるＴ細胞のための、生存シグナルおよび活性化シグナルをもたらす。加えて、ＯＸ４０は、Ｔｒｅｇの分化および活性も抑制し、この過程をさらに増幅する。ＯＸ４０およびＯＸ４０Ｌはまた、Ｔ細胞、抗原提示細胞、ＮＫ細胞、およびＮＫＴ細胞からのサイトカイン産生も調節し、サイトカイン受容体によるシグナル伝達をモジュレートする。本技術の組換えウイルスであるＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、およびＭＹＸＶΔＭ３１ＲのＯＸ４０Ｌは、ｈｕＯＸ４０Ｌの場合もあり、ｍｕＯＸ４０Ｌの場合もある。
例示的なヒトＯＸ４０Ｌ（ｈｕＯＸ４０Ｌ）の核酸配列（配列番号７）およびポリペプチド配列（配列番号８）は、下記に提示される。
ｈｕＯＸ４０Ｌ−ＯＲＦ（配列番号７）：
【０１７９】
【化２】
2022501339.tif 000004
ｈｕＯＸ４０Ｌポリペプチド（配列番号８）
【化３】
2022501339.tif 000005
例示的なマウスＯＸ４０Ｌ（ｍｕＯＸ４０Ｌ）の核酸配列（配列番号９）およびポリペプチド配列（配列番号１０）は、下記に提示される。
ｍｕＯＸ４０Ｌ−ＯＲＦ（コドン最適化）（配列番号９）：
【化４】
2022501339.tif 000006
2022501339.tif 000007
ｍｕＯＸ４０Ｌポリペプチド（配列番号１０）：
【化５】
2022501339.tif 000008
【０１８０】
ＶＩＩ．ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）
骨髄細胞の増殖を刺激する、Ｉ型膜貫通タンパク質である、ヒトＦｍｓ様チロシンキナーゼ３リガンド（ｈＦｌｔ３Ｌ）は、１９９４年にクローニングされた（Lyman et al., 1994）。ｈＦｌｔ３Ｌの使用は、骨髄移植のための調製物中の幹細胞動員、樹状細胞の拡大などのがん免疫療法のほか、ワクチンアジュバントを含む、多様な前臨床状況および臨床状況において調べられている。組換えヒトＦｌｔ３Ｌ（ｒｈｕＦｌｔ３Ｌ）は、５００例を超えるヒト対象において調べられ、生体活性であり、安全であり、かつ、忍容良好である。増殖因子である、Ｆｌｔ３Ｌの、ＣＤ８α+／ＣＤ１０３+ＤＣおよびｐＤＣを含む、ＤＣのサブセットの発生における、極めて重要な役割の理解に、大きな進歩がなされている。
【０１８１】
ＣＤ１０３+／ＣＤ８α+ＤＣは、腫瘍抗原特異的ＣＤ８+Ｔ細胞の自発性交差プライミングに要求される。ＣＤ１０３+ＤＣは、腫瘍内に、低密度で存在し、腫瘍抗原について、高存在度の腫瘍関連マクロファージと競合することが報告されている。ＣＤ１０３+ＤＣは、ナイーブＣＤ８+Ｔ細胞のほか、活性化ＣＤ８+Ｔ細胞を刺激することが固有に可能であり、養子Ｔ細胞療法の成功に、極めて重要である（Broz, et al. Cancer Cell, 26(5):638-52 (2014)）。Ｓｐｒａｎｇｅｒらは、発がん性シグナル伝達経路であるＷＮＴ／β−カテニンの活性化が、腫瘍内の、ＣＤ１０３+ＤＣおよび抗腫瘍Ｔ細胞の低減をもたらすことについて報告した（Spranger et al., 2015）。Ｆｌｔ３Ｌと共に培養された骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）の腫瘍内送達は、抗ＣＴＬＡ−４免疫療法と、抗ＰＤ−Ｌ１免疫療法との組合せに対する応答性をもたらす（Spranger et al., 2015）。ＣＤ１０３+ＤＣの増殖因子であるＦｌｔ３Ｌの全身投与、およびポリイノシン酸−ポリシチジル酸（ＴＬＲ３アゴニスト）の腫瘍内注射は、腫瘍内のＣＤ１０３+ＤＣ集団を拡大し、活性化させ、マウス黒色腫モデルおよびＭＣ３８結腸がんモデルにおいて、免疫療法に対する耐性を克服するか、またはにこれに対する応答性を増強した。
【０１８２】
近年における、多様な充実性腫瘍内の、腫瘍ネオ抗原の発見は、充実性腫瘍が、通例、人によって異なる、固有のネオ抗原を擁することを指し示す（Castle et al., Cancer Res 72:1081-1091 (2012); Schumacher et al., Science 348:69-74 (2015)）。本明細書で開示される遺伝子操作ウイルスまたは組換えウイルスは、腫瘍抗原を発現させることによって、それらの活性を及ぼすのではない。本遺伝子操作ＭＶＡウイルスまたは本組換えＭＶＡウイルスの腫瘍内送達は、腫瘍ネオ抗原の、効率的な交差提示、および腫瘍内の、抗腫瘍獲得免疫の発生を可能とし（かつ、また、全身への拡大も可能とし）、したがって、腫瘍細胞により発現される腫瘍分化抗原およびネオ抗原を、惹起腫瘍に対する免疫応答に利用する、「ｉｎ  ｓｉｔｕがんワクチン接種」をもたらす。
【０１８３】
腫瘍内の体細胞突然変異によりもたらされたネオ抗原の存在にもかかわらず、腫瘍抗原特異的Ｔ細胞の機能は、複数の阻害性機構により制止されることが多い（Mellman et al., Nature 480, 480-489 (2011)）。例えば、活性化Ｔ細胞上の、細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）の上方調節は、Ｔ細胞共刺激剤であるＣＤ２８と競合して、樹状細胞（ＤＣ）上のＣＤ８０（Ｂ７１）／ＣＤ８６（Ｂ７．２）と相互作用し、これにより、Ｔ細胞の活性化および増殖を阻害する場合がある。ＣＴＬＡ−４はまた、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）上でも発現され、Ｔｒｅｇの阻害機能を媒介する、重要な役割を果たしうる（Wing et al., Science 322:271-275 (2008); Peggs, et al., J. Exp. Med. 206:1717-1725 (2009)）。加えて、腫瘍細胞上の、ＰＤ−Ｌ／ＰＤ−Ｌ２の発現は、ＣＤ２８ファミリーの阻害性受容体であるＰＤ−１の活性化をもたらし、Ｔ細胞の疲弊をもたらしうる。ＣＴＬＡ−４およびプログラム死１ポリペプチド（ＰＤ−１）などの阻害性受容体に対する抗体を利用する免疫療法は、動物研究における、目覚ましい前臨床活性、および転移性がんを伴う患者における臨床応答を示し、ＦＤＡにより、転移性黒色腫、非小細胞肺がんのほか、腎細胞癌の処置について承認されている（Leach et al., Science 271:1734-1746 (1996); Hodi et al., NEJM 363:711-723 (2010); Robert et al., NEJM 364:2517-2526 (2011); Topalian et al., Cancer Cell 27:450-461 (2012); Sharma et al., Science 348(6230):56-61 (2015)）。
【０１８４】
ＶＩＩＩ．ΔＥ３ＬおよびＥ３ＬΔ８３Ｎ
ポックスウイルスは、複数の自然免疫シグナル伝達経路を、これらの経路の、細胞外構成要素および細胞内構成要素を阻止するタンパク質をコードすることにより、回避し、アンタゴナイズすることに、並外れて熟達している（Seet et al. Annu. Rev. Immunol. 21:377-423 (2003)）。細胞内自然免疫シグナル伝達の、ポックスウイルスアンタゴニストの中の最大のものは、それがなければ、ワクシニアウイルス感染により活性化されうるＰＫＲ経路およびＮＦ−κＢ経路を阻害しうる、ワクシニアウイルスＺ−ＤＮＡ／ｄｓＲＮＡ二重結合性タンパク質であるＥ３（Cheng et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:4825-4829 (1992); Deng et al., J. Virol. 80:9977-9987 (2006)）である。Ｅ３Ｌ遺伝子を欠く突然変異体ワクシニアウイルス（ΔＥ３Ｌ）は、宿主域が限定されており、ＩＦＮに対して、高度に感受性であり、致死性ポックスウイルス感染の動物モデルにおいて、毒力が低減されている（Beattie et al., Virus Genes 1289-94 (1996); Brandt et al., Virology 333263-270 (2004)）。近年の研究は、培養細胞系への、ΔＥ３Ｌウイルスの感染が、野生型ワクシニアウイルスによる感染時には遮蔽される、炎症促進性応答を誘発することを示している（Deng et al., J. Virol. 80:9977-9987 (2006); Langland et al. J. Virol. 80:10083-10095）。マウス表皮樹状細胞系への、野生型ワクシニアウイルスの感染は、ＴＬＲアゴニストであるリポ多糖（ＬＰＳ）およびポリイノシン酸−ポリシチジル酸に対する炎症促進性応答を弱めたが、この効果は、Ｅ３Ｌの欠失により減弱された。さらに、樹状細胞への、ΔＥ３Ｌウイルスの感染は、外因性アゴニストの非存在下で、ＮＦ−κＢ活性化を誘発した（Deng et al., J. Virol. 80:9977-9987 (2006)）。野生型ワクシニアウイルスの、マウス角化細胞への感染が、炎症促進性のサイトカインおよびケモカインの産生を誘導しないのに対し、ΔＥ３Ｌウイルスの感染は、ミトコンドリア抗ウイルスシグナル伝達タンパク質（ＭＡＶＳ；細胞質ゾルＲＮＡセンサーである、ＲＩＧ−ＩおよびＭＤＡ５のアダプター）および転写因子である、ＩＲＦ３により媒介される細胞質ゾルｄｓＲＮＡセンシング経路に依存する、マウス角化細胞からの、ＩＦＮ−β、ＩＬ−６、ＣＣＬ４、およびＣＣＬ５の産生を誘導する（Deng et al., J. Virol. 82(21):10735-10746 (2008)）。
【０１８５】
Ｚ−ＤＮＡ結合性ドメインを欠失させたＥ３ＬΔ８３Ｎウイルスは、鼻腔内感染モデルにおいて、野生型ワクシニアウイルスの、１，０００分の1に弱毒化される（Brandt et al., 2001）。Ｅ３ＬΔ８３Ｎはまた、頭蓋内接種モデルにおいて、野生型ワクシニアと比較して、神経毒性も低減した（Brandt et al., 2005）。Ｚ−ＤＮＡへの結合の低下を結果としてもたらす、Ｅ３のＺ−ＤＮＡ結合性ドメイン内の突然変異（Ｙ４８Ａ）は、神経毒性の低下をもたらす（Kim et al., 2003）。Ｅ３のＮ末端Ｚ−ＤＮＡ結合性ドメインは、ウイルスの病原性において重要であるが、それが、ワクシニアウイルスに対する、宿主の自然免疫センシングに影響を及ぼすのかについては、十分に理解されていない。粘液腫ウイルスの、マウス形質細胞様樹状細胞への感染は、ＴＬＲ９／ＭｙＤ８８／ＩＲＦ５／ＩＲＦ７依存性経路を介して、Ｉ型ＩＦＮの産生を誘導するが、野生型ワクシニアの感染は、これを誘導しない（Dai et al., 2011）。粘液腫ウイルスのＥ３オーソログである、Ｍ０２９は、Ｅ３のｄｓＲＮＡ結合性ドメインを保持するが、Ｅ３のＺ−ＤＮＡ結合性ドメインを欠く。Ｅ３のＺ−ＤＮＡ結合性ドメインは、マウスおよびヒトのｐＤＣ内の、ポックスウイルスセンシングの阻害において、重要な役割を果たす（が、おそらく、Ｚ−ＤＮＡ結合活性自体は、この役割を果たさない）ことが見出された（Dai et al., 2011；Cao et al., 2012）。
【０１８６】
Ｅ３Ｌの欠失は、ワクシニアウイルスの複製を、許容性ＲＫ１３細胞内のＩＦＮ阻害に対して感受性にし、ΔＥ３Ｌが、ＨｅＬａ細胞内またはＢＳＣ４０細胞内では複製されえない宿主域表現型を結果としてもたらす（Chang et al., 1995）。Ｅ３のＣ末端ｄｓＲＮＡ結合性ドメインが、宿主域効果の一因となるのに対し、Ｎ末端のＺ−ＤＮＡ結合性ドメインを欠失させたＥ３ＬΔ８３Ｎウイルスは、ＨｅＬａ細胞内およびＢＳＣ４０細胞内で、複製コンピテントである（Brandt et al., 2001）。
【０１８７】
チミジンキナーゼを欠失させたワクシニアウイルス（ウェスタンリザーブ株；ＷＲ）は、非分裂細胞内で高度に弱毒化されるが、形質転換細胞内では複製性である（Buller et al., 1988）。ＴＫが欠失されたワクシニアウイルスは、ｉｎ  ｖｉｖｏの腫瘍細胞内で、選択的に複製される（Puhlmann et al., 2000）。Ｔｈｏｒｎｅらは、ＷＲ株が、正常細胞内と比べた、腫瘍細胞系内のバースト比が、他のワクシニア株と比較して最高度であることを示した（Thorne et al., 2007）。
【０１８８】
ＩＸ．ワクシニアウイルスＥ５は、細胞質ゾルＤＮＡセンサーである、ｃＧＡＳの、主要な阻害剤である
細胞質ゾルＤＮＡセンサーであるｃＧＡＳは、ウイルス核酸の検出において、重要な役割を果たし、これは、Ｉ型ＩＦＮの産生をもたらす。通常樹状細胞への、高度に弱毒化されたワクシニア株である、改変ワクシニアウイルスアンカラ（ＭＶＡ）の感染は、ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ依存性機構を介して、ＩＦＮの産生を誘導することが示されている。しかし、ＭＶＡの感染は、ｃＧＡＳの分解を誘発する。ワクシニアウイルス（ＶＡＣＶ）は、２００を超える遺伝子をコードする細胞質ＤＮＡウイルスである。実施例節で記載される通り、二重ルシフェラーゼ系を使用して、７０のワクシニアウイルス早期遺伝子を、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞内の、ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ経路の阻害についてスクリーニングした。ワクシニアＥ５Ｒは、ｃＧＡＳの主要な阻害剤であり、ｃＧＡＳの分解を媒介する、鍵となるタンパク質であることが見出された。ＭＶＡΔＥ５Ｒは、骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）、骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）、および初代皮膚線維芽細胞を含む、複数の細胞型において、ＭＶＡより、はるかに高レベルのＩ型ＩＦＮを誘導する（図５７Ｃおよび５７Ｄ；７６Ａおよび７６Ｂ）。ＭＶＡΔＥ５Ｒに媒介されるＩ型ＩＦＮの産生は、ｃＧＡＳに依存する（図５８Ａ〜５８Ｃ）。さらに、ＭＶＡΔＥ５Ｒは、ｃＧＡＳ-/-皮膚線維芽細胞内で、複製能を獲得する（図７７Ｃおよび７７Ｄ）。ワクチンベクターとして、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＶＡの、皮膚乱切によるワクチン接種または皮内ワクチン接種は、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、ＭＶＡ−ＯＶＡよりはるかに高度の、ＯＶＡ特異的ＣＤ８+Ｔ細胞応答をもたらす（図７５Ｂおよび７５Ｃ）。ＭＶＡΔＥ５Ｒの腫瘍内注射は、ＭＶＡと比較して、強力な抗腫瘍免疫応答および良好な生存をもたらす（図９１Ａ〜９１Ｃ）。最後に、鼻腔内感染モデルにおいて、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒは、野生型ＶＡＣＶと比較して、少なくとも１０００分の１に弱毒化される（図５５Ｂ）。まとめると、これらの結果は、Ｅ５が、細胞質ゾルＤＮＡセンサーであるｃＧＡＳをターゲティングする、鍵となるウイルス毒力因子であり、これにより、Ｉ型ＩＦＮの産生を阻害することの、強力な証拠を提示する。本技術の発明者らは、まず、免疫回避における、Ｅ５Ｒの役割について記載する。
ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＡＢ５９８２５．１（配列番号２０）により与えられる、例示的な、全長ワクシニアウイルスＥ５Ｒ宿主域タンパク質は、下記に提示される。
【０１８９】
【化６】
2022501339.tif 000009
ワクシニアウイルスＥ５Ｒの粘液腫オーソログは、Ｍ３１Ｒである。ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＡＦ１４９１９．１（配列番号２１）により与えられる、例示的な、全長粘液腫ウイルスＭ３１Ｒタンパク質は、下記に提示される。
【０１９０】
【化７】
2022501339.tif 000010
Ｘ．本技術の操作ポックスウイルス株
ＭＶＡΔＣ７Ｌ
本技術の開示は、Ｃ７Ｌ突然変異体の改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（すなわち、ＭＶＡΔＣ７Ｌ；Ｃ７Ｌの欠失を含むＭＶＡウイルス；突然変異体のＣ７Ｌ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＭＶＡ）、またはＯＸ４０Ｌなど、１つまたは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように操作されたウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を含む免疫原性組成物、およびがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する。一部の実施形態では、ＭＶＡウイルスのＣ７遺伝子は、Ｃ７遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、Ｃ７ノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。一部の実施形態では、ΔＣ７Ｌ突然変異体は、Ｃ７Ｌ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡゲノム内のＣ７の位置（例えば、配列番号１の１８，４０７〜１８，８５９位）に対応する核酸配列は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌを結果としてもたらす、ヒトＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列置きかえられている。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする結果として、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む（例えば、図５Ａを参照されたい）。
【０１９１】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌは、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作される。一部の実施形態では、ＭＶＡウイルスのチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子（例えば、配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位）は、ＴＫ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換えを介して、ＴＫ遺伝子のノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。結果として得られるＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）ウイルスは、両側において、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）に挟まれた、１つまたは複数の発現カセットを含むように（例えば、図５Ｂを参照されたい）、さらに操作される。一部の実施形態では、発現カセットは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ＯＸ４０ＬまたはｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、組換えウイルスは、Ｃ７遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、Ｃ７遺伝子座において、相同組換え法を介して、Ｃ７ノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように、さらに改変される。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌをコードする発現カセットが、Ｃ７遺伝子座へと挿入される一方、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする発現カセットは、ＴＫ遺伝子座へと挿入される。
【０１９２】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、５’〜３’方向に、プロテアーゼ切断部位（例えば、フーリン切断部位）、および２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列をコードするヌクレオチド配列により隔てられた、２つまたはこれを超える、目的の特異的遺伝子をコードする、２つまたはこれを超えるオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＣ７Ｌは、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ（例えば、図９３Ａを参照されたい）などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＶＡウイルスを包含する。別の例として述べると、一部の実施形態では、本技術は、３つの個別の改変により形成される、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒウイルスを提供する。第１の改変は、Ｃ８Ｌ遺伝子座およびＣ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、Ｃ７Ｌ遺伝子を、ｈＦｌｔ３Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む異種核酸配列で置きかえ、これにより、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌを形成することを伴う。第２の改変では、ＴＫ遺伝子は、ＴＫ遺伝子座における相同組換えを介して、ＯＸ４０Ｌをコードするオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む異種核酸配列で置きかえられ、これにより、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを形成する。第３の改変では、Ｅ５Ｒ遺伝子は、Ｅ４Ｌ遺伝子座およびＥ６Ｒ遺伝子座における相同組換えを介して、ｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む異種核酸配列で置きかえられ、これにより、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０ＬΔＥ５Ｒ（例えば、図９２Ａを参照されたい）を形成する。
【０１９３】
一部の実施形態では、上記で記載された、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなる異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数を含むように改変される。
【０１９４】
ある特定の実施形態では、上記で記載したトランス遺伝子が、ＴＫ遺伝子座へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させうるが、他の適切な組込み遺伝子座も選択されうる。例えば、ＭＶＡは、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、いくつかの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。したがって、一部の実施形態では、これらの遺伝子は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。例えば、一部の実施形態では、本技術は、トランス遺伝子である、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、ＩＬ−１５、および／またはＩＬ−２１を、Ｅ５Ｒ遺伝子座内から発現させる、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌウイルスを提供する。他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、またはＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌ）以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＣ７Ｌ、もしくはＣ７ＬおよびＴＫ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０１９５】
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセットをさらに含む（図５Ａ〜５Ｂ）。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
本技術に従う、ＯＸ４０Ｌ発現構築物のオープンリーディングフレームの非限定例は、配列番号３および５（表１）に示される。本技術に従う、ｈＦｌｔ３Ｌ発現構築物の非限定例は、配列番号４（表１）に示される。
【０１９６】
【表１−１】
2022501339.tif 000011
【表１−２】
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【表１−３】
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【表１−４】
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【表１−５】
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【表１−６】
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【表１−７】
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【表１−８】
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ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：Ｕ９４８４８．１により与えられる、ＭＶＡウイルスゲノム配列（配列番号１）は、図２２に提示される。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌを発現させる、操作ＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスは、配列番号３および５により例示される発現構築物などの発現構築物を、ＴＫ遺伝子座の位置（例えば、配列番号１の７５，５６０〜７６，０９３位）に対応するＭＶＡゲノム領域へと挿入することにより作出される。加えて、または代替的に、一部の実施形態では、操作ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌは、配列番号４により例示される発現構築物などの発現構築物を、Ｃ７遺伝子座（例えば、配列番号１の１８，４０７〜１８，８５９位）に対応するＭＶＡゲノム領域へと挿入することにより、ｈＦｌｔ３Ｌを発現させるように、さらに改変される。
【０１９７】
ＭＶＡΔＥ３Ｌ
本技術の開示は、Ｅ３Ｌ突然変異体の改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（すなわち、ＭＶＡΔＥ３Ｌ；Ｅ３Ｌの欠失を含むＭＶＡウイルス；突然変異体のＥ３Ｌ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＭＶＡウイルス）、またはＯＸ４０Ｌなど、１つまたは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように操作されたウイルス（ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）を含む免疫原性組成物、およびがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する。一部の実施形態では、ＭＶＡウイルスのチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子は、ＴＫ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、ＴＫノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。結果として得られるＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）ウイルスは、両側において、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）に挟まれた、１つまたは複数の発現カセットを含むように、さらに操作される。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌゲノム内のＴＫの位置（例えば、配列番号１の７５，７９８〜７５，８６８位）に対応する核酸配列は、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを結果としてもたらす、ヒトＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、発現カセットは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする、単一のオープンリーディングフレームを含む。
【０１９８】
上記で記載された、ある特定の実施形態では、トランス遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させうるが、他の適切な組込み遺伝子座も選択されうる。例えば、ＭＶＡは、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、いくつかの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。したがって、一部の実施形態では、これらの遺伝子は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。
【０１９９】
一部の実施形態では、上記で記載された、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、他の異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｃ７；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの他のウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＥ３Ｌ、もしくはＥ３ＬおよびＴＫ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０２００】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌは、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作される。一部の実施形態では、組換えウイルスは、Ｅ３遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、Ｅ３遺伝子座において、相同組換え法を介して、Ｅ３ノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように、さらに改変される。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌをコードする発現カセットが、Ｅ３遺伝子座へと挿入される一方、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする発現カセットは、ＴＫ遺伝子座へと挿入される。
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、５’〜３’方向に、プロテアーゼ切断部位（例えば、フーリン切断部位）、および２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列をコードするヌクレオチド配列により隔てられた、２つまたはこれを超える、目的の特異的遺伝子をコードする、２つまたはこれを超えるオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む。
【０２０１】
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセット（例えば、図１を参照されたい）をさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
本技術に従う、ＯＸ４０Ｌ発現構築物のオープンリーディングフレームの非限定例は、上記の表１に示される。
【０２０２】
ＭＶＡΔＥ５Ｒ
本技術の開示は、Ｅ５Ｒ突然変異体の、改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（すなわち、ＭＶＡΔＥ５Ｒ；Ｅ５Ｒの欠失を含むＭＶＡウイルス；突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＭＶＡ）、またはウイルスを含む免疫原性組成物、およびがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する。一部の実施形態では、ＭＶＡウイルスのＥ５Ｒ遺伝子は、Ｅ５Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、Ｅ５Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。一部の実施形態では、ΔＥ５Ｒ突然変異体は、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡゲノム内のＥ５Ｒの位置（例えば、配列番号１の３８，４３２〜３９，３８５位）に対応する核酸配列は、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌを結果としてもたらす、ヒトＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする結果として、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。
【０２０３】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数から選択される異種遺伝子など、１つもしくは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させ、かつ／または以下の欠失もしくは突然変異：Ｃ７（ΔＣ７）；Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ（ΔＥ５Ｒ）；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの他のウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように操作される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、またはＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９から選択される。
【０２０４】
一部の実施形態では、ＭＶＡウイルスのチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子は、ＴＫ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、ＴＫノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。結果として得られるＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）ウイルスは、両側において、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）に挟まれた、１つまたは複数の発現カセットを含むように、さらに操作される。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒゲノム内のＴＫの位置（例えば、配列番号１の７５，７９８〜７５，８６８位）に対応する核酸配列は、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを結果としてもたらす、ヒトＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、発現カセットは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする、単一のオープンリーディングフレームを含む。
【０２０５】
上記で記載された、ある特定の実施形態では、トランス遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）が、ＴＫ遺伝子座へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させうるが、他の適切な組込み遺伝子座も選択されうる。例えば、ＭＶＡは、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、いくつかの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。したがって、一部の実施形態では、これらの遺伝子は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。
他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＥ５Ｒ、もしくはＥ５ＲおよびＴＫ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０２０６】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒは、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作される。一部の実施形態では、組換えウイルスは、Ｅ５Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、Ｅ５Ｒ遺伝子座において、相同組換え法を介して、Ｅ５Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように、さらに改変される。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌをコードする発現カセットが、Ｅ５Ｒ遺伝子座へと挿入される一方、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする発現カセットは、ＴＫ遺伝子座へと挿入される。
【０２０７】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、５’〜３’方向に、プロテアーゼ切断部位（例えば、フーリン切断部位）、および２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列をコードするヌクレオチド配列により隔てられた、２つまたはこれを超える、目的の特異的遺伝子をコードする、２つまたはこれを超えるオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む。例えば、一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒは、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ（例えば、図８１を参照されたい）などの組換えウイルスを形成する、組換えＭＶＡを包含する。
【０２０８】
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセットをさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
本技術に従う、発現構築物および欠失構築物のオープンリーディングフレームの非限定例は、表２に示される。
【０２０９】
【表２−１】
2022501339.tif 000019
【表２−２】
2022501339.tif 000020
【表２−３】
2022501339.tif 000021
【表２−４】
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【表２−５】
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【表２−６】
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【表２−７】
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【表２−８】
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【表２−９】
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【表２−１０】
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【表２−１１】
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【表２−１２】
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【表２−１３】
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【表２−１４】
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【表２−１５】
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一部の実施形態では、操作ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、配列番号２２〜２４および３２（表２）により例示される発現構築物などの発現構築物を、Ｅ５Ｒ遺伝子座の位置（例えば、配列番号１の３８，４３２〜３９，３８５位；またはＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＹ６０３３５５に明示された配列の、３８，３８９〜３９，３８９位）に対応するＭＶＡゲノム領域へと挿入することにより作出される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、配列番号３１により例示される発現構築物などの発現構築物を、Ｅ３Ｌ遺伝子座（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＹ６０３３５５に明示された配列の、３６，９３１〜３７，４９７位）に対応するＭＶＡゲノム領域へと挿入することにより、さらに操作される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ５Ｒウイルスは、配列番号３３により例示される発現構築物などの発現構築物を、Ｃ１１Ｒ遺伝子座（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＹ６０３３５５に明示された配列の、４，１６０〜４，７８５位）に対応するＭＶＡゲノム領域へと挿入することにより、さらに操作される。
本技術に従う、ＭＶＡΔＫ７Ｒ構築物のオープンリーディングフレームの非限定例は、配列番号２５（表３）に示される。
【０２１０】
【表３−１】
2022501339.tif 000034
【表３−２】
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【表３−３】
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【表３−４】
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ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ
本技術の開示は、Ｃ７Ｌ突然変異体のワクシニアウイルス（すなわち、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ；Ｃ７Ｌの欠失を含むＶＡＣＶ；突然変異体のＣ７Ｌ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ）、またはＯＸ４０Ｌなど、１つまたは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように操作されたウイルスを含む免疫原性組成物、およびがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスのＣ７遺伝子は、Ｃ７遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、Ｃ７ノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。一部の実施形態では、ΔＣ７Ｌ突然変異体は、Ｃ７Ｌ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノム内のＣ７の位置（例えば、配列番号２の１５，７１６〜１６，１６８位）に対応する核酸配列は、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌを結果としてもたらす、ヒトＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする結果として、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。
【０２１１】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌは、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作される。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスのチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子（例えば、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位）は、ＴＫ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換えを介して、ＴＫ遺伝子のノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。結果として得られるＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）ウイルスは、両側において、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）に挟まれた、１つまたは複数の発現カセットを含むように、さらに操作される。一部の実施形態では、発現カセットは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、組換えウイルスは、Ｃ７遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、Ｃ７遺伝子座において、相同組換え法を介して、Ｃ７ノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように、さらに改変される。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌをコードする発現カセットが、Ｃ７遺伝子座へと挿入される一方、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする発現カセットは、ＴＫ遺伝子座へと挿入される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−抗ＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ウイルスは、ＯＸ４０Ｌをコードする結果として、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌをもたらすように、さらに改変される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＩＬ−１２を発現させる結果として、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２をもたらすように、さらに改変される。
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、５’〜３’方向に、プロテアーゼ切断部位（例えば、フーリン切断部位）、および２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列をコードするヌクレオチド配列により隔てられた、２つまたはこれを超える、目的の特異的遺伝子をコードする、２つまたはこれを超えるオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む。
【０２１２】
一部の実施形態では、本技術の開示は、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４−ＯＸ４０Ｌウイルスを提供する。一部の実施形態では、本技術の開示は、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−抗ＣＴＬＡ−４−ＯＸ４０Ｌウイルスを提供する。
一部の実施形態では、上記で記載された、組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの、さらなる異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの他のウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、またはＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌ）以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＣ７Ｌ、もしくはＣ７ＬおよびＴＫ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０２１３】
ある特定の実施形態では、上記で記載したトランス遺伝子が、ＴＫ遺伝子座へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させうるが、他の適切な組込み遺伝子座も選択されうる。例えば、ＶＡＣＶは、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、いくつかの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。したがって、一部の実施形態では、これらの遺伝子は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。
【０２１４】
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセットをさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
【０２１５】
ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ
本技術の開示は、Ｅ５Ｒ突然変異体のワクシニアウイルス（すなわち、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ；Ｅ５Ｒの欠失を含むＶＡＣＶ；突然変異体のＥ５Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ）、またはＯＸ４０Ｌなど、１つまたは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように操作されたウイルス（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）を含む免疫原性組成物、およびがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスのＥ５Ｒ遺伝子は、Ｅ５Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、Ｅ５Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。一部の実施形態では、ΔＥ５Ｒ突然変異体は、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノム内のＥ５Ｒの位置（例えば、配列番号２の４９，２３６〜５０，２６１位）に対応する核酸配列は、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＯＸ４０Ｌを結果としてもたらす、ヒトＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする結果として、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。
【０２１６】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒは、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作される。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスのチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子（例えば、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位）は、ＴＫ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換えを介して、ＴＫ遺伝子のノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。結果として得られるＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）ウイルスは、両側において、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）に挟まれた、１つまたは複数の発現カセットを含むように、さらに操作される。一部の実施形態では、発現カセットは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、組換えウイルスは、Ｅ５Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、Ｅ５Ｒ遺伝子座において、相同組換え法を介して、Ｅ５Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように、さらに改変される。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌをコードする発現カセットが、Ｅ５Ｒ遺伝子座へと挿入される一方、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする発現カセットは、ＴＫ遺伝子座へと挿入される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ウイルスは、ＯＸ４０Ｌをコードする結果として、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌをもたらすように、さらに改変される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＩＬ−１２を発現させる結果として、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２もたらすように、さらに改変される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒは、単独における、または本明細書で記載される、１つまたは複数のさらなる改変と組み合わせた、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαをコードする核酸を含むように操作される（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα）。例えば、一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒαは、ＯＸ４０Ｌをコードする核酸を含むように、さらに操作される（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ）。
【０２１７】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、５’〜３’方向に、プロテアーゼ切断部位（例えば、フーリン切断部位）、および２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列をコードするヌクレオチド配列により隔てられた、２つまたはこれを超える、目的の特異的遺伝子をコードする、２つまたはこれを超えるオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む。例えば、一部の実施形態では、ワクシニアゲノムのＴＫ遺伝子座は、相同組換えを介して、抗ＣＴＬＡ−４など、抗体の重鎖および軽鎖の両方を発現させるように改変され、この場合、重鎖および軽鎖のコード配列は、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられて、ＶＡＣＶ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４をもたらす。一部の実施形態では、ＶＡＣＶ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４ゲノムは、Ｅ５Ｒの欠失を含むようにさらに改変され、Ｅ５Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｌｔ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−Ｅ５Ｒ-−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ（またはＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）−抗ＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）（例えば、図８５Ａを参照されたい）などの組換えウイルスを形成する。
【０２１８】
一部の実施形態では、上記で記載された、遺伝子操作ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスまたは組換えＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの他のウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、またはＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌ）以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＥ５Ｒ、もしくはＥ５ＲおよびＴＫ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０２１９】
ある特定の実施形態では、上記で記載したトランス遺伝子が、ＴＫ遺伝子座へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させうるが、他の適切な組込み遺伝子座も選択されうる。例えば、ＶＡＣＶは、Ｃ７、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、いくつかの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。したがって、一部の実施形態では、これらの遺伝子は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。
他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＥ５Ｒ、もしくはＥ５ＲおよびＴＫ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセットをさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
本技術に従う、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ構築物のオープンリーディングフレームの非限定例は、配列番号２６〜２８（表４）に示される。
【０２２０】
【表４−１】
2022501339.tif 000038
【表４−２】
2022501339.tif 000039
【表４−３】
2022501339.tif 000040
【表４−４】
2022501339.tif 000041
【表４−５】
2022501339.tif 000042
【表４−６】
2022501339.tif 000043
【表４−７】
2022501339.tif 000044
【表４−８】
2022501339.tif 000045
【表４−９】
2022501339.tif 000046
一部の実施形態では、操作ＶＡＣＶΔＥ５Ｒウイルスは、配列番号２６〜２８（表４）により例示される発現構築物などの発現構築物を、Ｅ５Ｒ遺伝子座の位置（例えば、配列番号２の４９，２３６〜５０，２６１位）に対応するＶＡＣＶゲノム領域へと挿入することにより作出される。
例えば、ｐＣＢプラスミドベースのベクターを使用して、ＶＡＣＶのＴＫ遺伝子座へと挿入するための、抗ＣＴＬＡ−４抗体のオープンリーディングフレームの非限定例は、配列番号２９（表５）に示される。
【０２２１】
【表５−１】
2022501339.tif 000047
【表５−２】
2022501339.tif 000048
本技術に従い、例えば、ｐＵＣ５７ベクターを使用して、例えば、Ｅ５Ｒ遺伝子座へと挿入するための、ＩＬ−１２発現構築物であって、例えば、ＶＡＣＶ−Ｅ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２構築物が操作される、ＩＬ−１２発現構築物の非限定例は、配列番号３５〜３８（表５Ａ）（また、図１６９も参照されたい）に示される。
【０２２２】
【表６−１】
2022501339.tif 000049
【表６−２】
2022501339.tif 000050
【表６−３】
2022501339.tif 000051
【表６−４】
2022501339.tif 000052
一部の実施形態では、本技術の操作ＶＡＣＶウイルスは、ＴＫ遺伝子座の位置（例えば、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位）に対応するＶＡＣＶゲノム領域へと挿入される、配列番号２９（表５）により例示される発現構築物などの発現構築物を含む。
【０２２３】
ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ
ＶＡＣＶ  Ｂ２Ｒ遺伝子は、宿主における、ｃＧＡＳ−ＳＴＩＮＧによる自然免疫に対するウイルスの回避において役割を果たすヌクレアーゼである、ポキシンをコードする。本技術の開示は、Ｂ２Ｒ突然変異体のワクシニアウイルス（すなわち、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ；Ｂ２Ｒの欠失を含むＶＡＣＶ；突然変異体のＢ２Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ）、またはＯＸ４０Ｌなど、１つまたは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように操作されたウイルス（ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）を含む免疫原性組成物、およびがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスのＢ２Ｒ遺伝子は、Ｂ２Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、Ｂ２Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。一部の実施形態では、ΔＢ２Ｒ突然変異体は、Ｂ２Ｒ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノム内のＢ２Ｒの位置（例えば、配列番号２の１６４，８５６〜１６５，５３０位）に対応する核酸配列は、異種核酸配列置きかえられている。一部の実施形態では、異種核酸配列は、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、蛍光タンパク質（例えば、ｇｐｔ、ＧＦＰ、ｍＣｈｅｒｒｙ）である。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、機能的なＢ２Ｒタンパク質を発現させない、組換えＶＡＣＶを包含する。一部の実施形態では、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ）は、ＶＡＣＶゲノムのＢ２Ｒ遺伝子座へと挿入され、Ｂ２Ｒ遺伝子を分断し、これを消失させる。
【０２２４】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒは、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作される。一部の実施形態では、ワクシニアウイルスのチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子（例えば、配列番号２の８０，９６２〜８１，０３２位）は、ＴＫ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換えを介して、ＴＫ遺伝子のノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。結果として得られるＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＴＫ（−）ウイルスは、両側において、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）に挟まれた、１つまたは複数の発現カセットを含むように、さらに操作される。一部の実施形態では、発現カセットは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、組換えウイルスは、Ｂ２Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、Ｂ２Ｒ遺伝子座において、相同組換え法を介して、Ｂ２Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように、さらに改変される。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌをコードする発現カセットが、Ｂ２Ｒ遺伝子座へと挿入される一方、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする発現カセットは、ＴＫ遺伝子座へと挿入される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ウイルスは、ＯＸ４０Ｌをコードする結果として、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌをもたらすように、さらに改変される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＩＬ−１２を発現させる結果として、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２もたらすように、さらに改変される。一部の実施形態では、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ゲノムは、Ｂ２Ｒの欠失を含むように改変される（ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ）（例えば、図１６８を参照されたい）。
【０２２５】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、５’〜３’方向に、プロテアーゼ切断部位（例えば、フーリン切断部位）、および２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列をコードするヌクレオチド配列により隔てられた、２つまたはこれを超える、目的の特異的遺伝子をコードする、２つまたはこれを超えるオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む。
【０２２６】
一部の実施形態では、上記で記載された、遺伝子操作ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス、または組換えＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ（ΔＥ５Ｒ）；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの他のウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。一部の実施形態では、遺伝子操作ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルス、または組換えＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−ΔＥ５Ｒ−Ｅ３ＬΔ８３Ｎ、およびＶＡＣＶΔＢ２Ｒ−Ｅ３ＬΔ８３Ｎから選択される。他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／または本明細書のウイルス名の下に提示されるウイルス遺伝子以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０２２７】
ある特定の実施形態では、上記で記載したトランス遺伝子が、Ｂ２Ｒ遺伝子座へと挿入され、Ｂ２Ｒ遺伝子を分断し、これを消失させるか、またはこれを置きかえうるが、他の適切な組込み遺伝子座も選択されうる。例えば、ＶＡＣＶは、Ｃ７、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、いくつかの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。したがって、一部の実施形態では、これらの遺伝子は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセットをさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、本技術に従うＶＡＣＶΔＢ２Ｒの欠失構築物の非限定例は、配列番号３０（表７）に示される。
【０２２８】
【表７−１】
2022501339.tif 000053
【表７−２】
2022501339.tif 000054
【表７−３】
2022501339.tif 000055
一部の実施形態では、操作ＶＡＣＶΔＢ２Ｒウイルスは、配列番号３０（表７）により例示される発現構築物などの発現構築物を、Ｂ２Ｒ遺伝子座の位置（例えば、配列番号２の１６４，８５６〜１６５，５３０位）に対応するＶＡＣＶゲノム領域へと挿入することにより作出される。
【０２２９】
ＭＶＡΔＷＲ１９９
本技術に従う、ＭＶＡΔＷＲ１９９構築物のオープンリーディングフレームの非限定例は、配列番号３４（表８）に示される。一部の実施形態では、ΔＷＲ１９９突然変異体を含むＭＶＡは、例えば、配列番号３４により例示されるＷＲ１９９ノックアウトプラスミドなどを伴う発現構築物を、ＷＲ１９９遺伝子座の位置（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＹ６０３３５５において明示された配列の、１５８，３９９〜１６０，１４３位）（例えば、図１５３を参照されたい）に対応するＭＶＡゲノム領域へと挿入することにより作出される。
【０２３０】
【表８−１】
2022501339.tif 000056
【表８−２】
2022501339.tif 000057
【表８−３】
2022501339.tif 000058
ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ
粘液腫Ｍ３１Ｒは、ＶＡＣＶ  Ｅ５Ｒに対するオーソログである（図８８Ｂを参照されたい）。本技術の開示は、Ｍ３１Ｒ突然変異体の粘液腫ウイルス（すなわち、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ；Ｍ３１Ｒの欠失を含むＭＹＸＶ；突然変異体のＭ３１Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＭＹＸＶ）、またはウイルスを含む免疫原性組成物、およびがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスは、がん免疫療法剤としての使用のために、ＯＸ４０Ｌなど、１つまたは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように操作される（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌ）。一部の実施形態では、粘液腫ウイルスは、ローザンヌ株（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＦ１７０７２６．２により与えられる）に由来する。一部の実施形態では、粘液腫ウイルスのＭ３１Ｒ遺伝子は、Ｍ３１Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換え法を介して、Ｍ３１Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。一部の実施形態では、ΔＭ３１Ｒ突然変異体は、Ｍ３１Ｒ遺伝子配列の、全部または大部分の代わりに、異種核酸配列を含む。例えば、一部の実施形態では、ＭＹＸＶゲノム内のＭ３１Ｒの位置（例えば、粘液腫ゲノムの３０，１３８〜３１，３１９位）に対応する核酸配列は、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＯＸ４０Ｌを結果としてもたらす、ヒトＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする結果として、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。
【０２３１】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒは、ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように操作される。一部の実施形態では、粘液腫ウイルスのチミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子（例えば、粘液腫ゲノムの５７，７９７〜５８，３３３位）は、ＴＫ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、相同組換えを介して、ＴＫ遺伝子のノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。結果として得られるＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＴＫ（−）ウイルスは、両側において、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−ＬおよびＴＫ−Ｒ）に挟まれた、１つまたは複数の発現カセットを含むように、さらに操作される。一部の実施形態では、発現カセットは、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ＯＸ４０Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、組換えウイルスは、Ｍ３１Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）よう、Ｍ３１Ｒ遺伝子座において、相同組換え法を介して、Ｍ３１Ｒノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように、さらに改変される。一部の実施形態では、発現カセットは、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードする結果として、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌをもたらす、単一のオープンリーディングフレームを含む。一部の実施形態では、ＯＸ４０Ｌをコードする発現カセットが、Ｍ３１Ｒ遺伝子座へと挿入される一方、ｈＦｌｔ３Ｌをコードする発現カセットは、ＴＫ遺伝子座へと挿入される。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）ウイルスは、ＯＸ４０Ｌをコードする結果として、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌをもたらすように、さらに改変される。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌウイルスは、ｈＩＬ−１２を発現させる結果として、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−抗ＣＴＬＡ−４−ＴＫ（−）−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２もたらすように、さらに改変される。
【０２３２】
一部の実施形態では、上記で記載された、遺伝子操作ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルス、または組換えＭＹＸＶΔＭ３１Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの他のウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、またはＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌ）以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＭ３１Ｒ、もしくはＭ３１ＲおよびＴＫ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０２３３】
ある特定の実施形態では、上記で記載したトランス遺伝子が、ＴＫ遺伝子座へと挿入され、ＴＫ遺伝子を分断し、これを消失させうるが、他の適切な組込み遺伝子座も選択されうる。例えば、ＭＹＸＶは、Ｃ７、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９を含むがこれらに限定されない、いくつかの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。したがって、一部の実施形態では、これらの遺伝子は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。
【０２３４】
加えて、または代替的に、一部の実施形態では、異種核酸配列は、５’〜３’方向に、プロテアーゼ切断部位（例えば、フーリン切断部位）、および２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列をコードするヌクレオチド配列により隔てられた、２つまたはこれを超える、目的の特異的遺伝子をコードする、２つまたはこれを超えるオープンリーディングフレームを含む発現カセットを含む。例えば、一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒは、Ｍ３１Ｒ遺伝子配列の全部または大部分が、第１の目的の特異的遺伝子（例えば、ｈＦｔｌ３Ｌ）、および第２の目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ）で置きかえられ、この場合、第１の目的の特異的遺伝子のコード配列と、第２の目的の特異的遺伝子のコード配列とが、フーリン切断部位に続き、２Ａペプチド（Ｐｅｐ２Ａ）配列を含むカセットで隔てられ、これにより、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌなどの組換えウイルスを形成する、組換えＭＹＸＶを包含する。
【０２３５】
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセットをさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
【０２３６】
ＭＹＸＶΔＭ６３ＲおよびＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ
本技術の開示は、Ｍ６３Ｒ突然変異体の粘液腫ウイルス（すなわち、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ；Ｍ６３Ｒの欠失を含むＭＹＸＶ；突然変異体のＭ６３Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＭＹＸＶ）、およびＭ６４Ｒ突然変異体の粘液腫ウイルス（すなわち、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、Ｍ６４Ｒの欠失を含むＭＹＸＶ；突然変異体のＭ６４Ｒ遺伝子を含むように遺伝子操作されたＭＹＸＶ）、またはウイルスを含む免疫原性組成物、ならびにがん免疫療法剤としてのそれらの使用に関する。一部の実施形態では、Ｍ６３ＲまたはＭ６４Ｒの突然変異体は、ＭＹＸＶΔＭ１２７  ｍＣｈｅｒｒｙゲノムへと挿入される（例えば、図１７０を参照されたい）。一部の実施形態では、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲウイルスまたはＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルスは、がん免疫療法剤としての使用のために、本明細書で開示されるものなど、１つまたは複数の、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を発現させるように操作される。一部の実施形態では、粘液腫ウイルスは、ローザンヌ株（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＦ１７０７２６．２により与えられる）に由来する。一部の実施形態では、粘液腫ウイルスのＭ６３Ｒ遺伝子またはＭ６４Ｒ遺伝子は、相同組換え法を介して、Ｍ６３ＲまたはＭ６４Ｒ遺伝子が、発現されていないか、影響を及ぼさない程度の低レベルで発現されているか、または非機能的タンパク質として発現されている（例えば、ヌル突然変異である）ように、Ｍ６３ＲまたはＭ６４Ｒのノックアウトを結果としてもたらす、１つまたは複数の発現カセットを含む異種核酸配列を含む破壊を含有するように操作される。一部の実施形態では、ΔＭ６３Ｒ突然変異体またはΔＭ６４Ｒ突然変異体は、異種核酸配列（例えば、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）をコードするオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列）を含む。
【０２３７】
一部の実施形態では、上記で記載された、遺伝子操作ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒウイルスもしくは遺伝子操作ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルス、または組換えＭＹＸＶΔＭ６３Ｒウイルスもしくは組換えＭＹＸＶΔＭ６４Ｒウイルスは、ｈＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、ｈＩＬ−２、ｈＩＬ−１２、ｈＩＬ−１５、ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ｈＩＬ−１８、ｈＩＬ−２１、抗ｈｕＣＴＬＡ−４、抗ｈｕＰＤ−１、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１、ＧＩＴＲＬ、４−１ＢＢＬ、もしくはＣＤ４０Ｌのうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの異種遺伝子を発現させ、かつ／または以下の欠失：Ｅ３Ｌ（ΔＥ３Ｌ）；Ｅ３ＬΔ８３Ｎ；Ｃ７（ΔＣ７Ｌ）；Ｂ２Ｒ（ΔＢ２Ｒ）、Ｂ１９Ｒ（Ｂ１８Ｒ；ΔＷＲ２００）；Ｅ５Ｒ；Ｋ７Ｒ；Ｃ１２Ｌ（ＩＬ１８ＢＰ）；Ｂ８Ｒ；Ｂ１４Ｒ；Ｎ１Ｌ；Ｃ１１Ｒ；Ｋ１Ｌ；Ｍ１Ｌ；Ｎ２Ｌ；および／もしくはＷＲ１９９のうちのいずれか１つもしくは複数など、少なくとも１つの他のウイルス遺伝子の突然変異もしくは欠失を含むように改変される。他の実施形態では、本明細書のウイルス名の下に提示される異種遺伝子以外の、さらなる異種遺伝子は付加されず、かつ／またはＭ６３ＲもしくはＭ６４Ｒ以外の、さらなるウイルス遺伝子は、破壊されたり、欠失されたりしない。
【０２３８】
一部の実施形態では、異種ヌクレオチド配列は、選択用マーカーの発現を方向付けることが可能なプロモーターに作動可能に連結された、選択用マーカーをコードするオープンリーディングフレームを含む、さらなる発現カセットをさらに含む。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、赤色蛍光タンパク質をコードする、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。
本技術に従う、ＭＶＡΔ６３ＲおよびＭＶＡΔ６４Ｒ構築物のオープンリーディングフレームの非限定例は、配列番号３９および４０（表９）に示される。
【０２３９】
【表９−１】
2022501339.tif 000059
【表９−２】
2022501339.tif 000060
【表９−３】
2022501339.tif 000061
【表９−４】
2022501339.tif 000062
【表９−５】
2022501339.tif 000063
ＸＩ．黒色腫
最も致死性のがんのうちの１つである黒色腫は、米国および全世界において、最も速く増殖するがんである。大半の症例において、進行性の黒色腫は、化学療法および放射線を含む、従来型の治療に対して、耐性である。結果として、転移性黒色腫を伴う人々は、予後が極めて不良であり、平均余命は、６〜１０カ月間に過ぎない。発見黒色腫のうちの約５０％が、ＢＲＡＦ（鍵となる腫瘍促進性遺伝子）内に突然変異を有するという発見は、この疾患に対するターゲティング療法への扉を開いた。ＢＲＡＦ阻害剤による、早期の臨床試験は、ＢＲＡＦ突然変異を伴う黒色腫を伴う患者において、目覚ましいが、残念ながら、持続不可能な応答を示した。したがって、これらの患者のほか、ＢＲＡＦ突然変異を伴わない黒色腫のための、代替的処置戦略が、火急に必要とされている。
【０２４０】
ヒト病理学的データは、黒色腫病変内の、Ｔ細胞浸潤物の存在が、患者生存の延長と、正に相関することを指し示す（Oble et al., Cancer Immun. 9:3 (2009)）。黒色腫に対する保護における、免疫系の重要性は、免疫活性化因子であるＩＦＮ−α２ｂおよびＩＬ−２などによる免疫療法の部分的成功（Lacy et al., Expert Rev. Dermatol. 7(1):51-68 (2012)）、ならびに転移性黒色腫を伴う患者の、薬剤単独としての、または組合せ療法における、抗ＣＴＬＡ−４および抗ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１を含む免疫チェックポイント療法に対する、予測外の臨床応答（Sharma & Allison, Science 348(6230)”56-61 (2015); Hodi et al., NEJM 363(8):711-723 (2010); Wolchok et al., Lancet Oncol. 11(6) :155-164 (2010); Topalian et al., NEJM 366(26) :2443-2454 (2012); Wolchok et al., NEJM 369(2): 122-133 (2013); Hamid et al., NEJM 369(2) :134-144 (2013); Tumeh et al., Nature 515(7528) :568-571 (2014)）によりさらに裏書きされる。しかし、多くの患者は、免疫チェックポイント遮断療法単独には、応答できない。
【０２４１】
ＸＩＩ．腫瘍免疫における、Ｉ型ＩＦＮおよび細胞質ゾルＤＮＡセンシング経路
Ｉ型ＩＦＮは、宿主による抗腫瘍免疫において、重要な役割を果たす（Fuertes et al., Trends Immunol. 34:67-73 (2013)）。ＩＦＮＡＲ１欠損マウスは、腫瘍細胞の植込みの後で、腫瘍を発症しやすく；ＩＦＮＡＲ１欠損マウスでは、自発性腫瘍特異的Ｔ細胞プライミングもまた、不全となる（Diamond et al., J. Exp. Med. 208:1989-2003 (2011); Fuertes et al., J. Exp. Med. 208:2005-2016 (2011)）。より近年の研究は、細胞質ゾルＤＮＡセンシング経路が、腫瘍由来ＤＮＡに対する自然免疫センシングに重要であり、これは、抗腫瘍ＣＤ８+Ｔ細胞免疫の発生をもたらすことを示している（Woo et al., Immunity 41:830-842 (2014)）。この経路はまた、放射線により誘導される抗腫瘍免疫においても役割を果たす（Deng et al., Immunity 4: 843-852 (2014)）。がんを伴う患者では、自発性抗腫瘍Ｔ細胞応答が検出されうるが、がんは、最終的に、大半の患者において、宿主による抗腫瘍免疫を凌駕する。腫瘍免疫抑制性微小環境を変更するための、新規の戦略であれば、がん治療に有益であろう。
【０２４２】
ＸＩＩＩ．免疫応答
特定の免疫系の活性（抗体および／もしくはサイトカインの産生、または細胞媒介性免疫の活性化など）の上方調節による、免疫応答の誘導に加えて、免疫応答はまた、ホメオスタシスを再確立し、宿主自身の臓器および組織に対する、過剰な損傷を防止するように、検出可能な免疫の抑制、弱毒化、または他の任意の下方調節も含みうる。一部の実施形態では、本開示の方法に従い誘導される免疫応答は、エフェクターＴ細胞（例えば、ヘルパーＴ細胞、キラーＴ細胞、調節性Ｔ細胞）を発生させる。一部の実施形態では、本開示の方法に従い誘導される免疫応答は、腫瘍細胞の死、または腫瘍細胞が繁殖する能力の喪失を、直接的に、または間接的にもたらしうるエフェクターＣＤ８+（抗腫瘍細胞傷害性ＣＤ８+）Ｔ細胞もしくは活性化ヘルパーＴ（ＴH）細胞（例えば、エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞）、またはこれらの両方を発生させる。
【０２４３】
本開示の組成物および方法による、免疫応答の誘導は、様々な、周知の免疫学的パラメータのうちのいずれかを検出することにより決定されうる（Takaoka et al., Cancer Sci. 94:405-11 (2003); Nagorsen et al., Crit. Rev. Immunol. 22:449-62 (2002)）。したがって、免疫応答の誘導は、免疫学的アッセイを含む、多数の周知のアッセイのうちのいずれかにより確立されうる。このようなアッセイは、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける、可溶性免疫グロブリンもしくは抗体の決定；サイトカイン、ケモカイン、ホルモン、増殖因子などの可溶性メディエーター、ならびに他の可溶性低分子ペプチド、炭水化物、ヌクレオチド、および／もしくは脂質メディエーター；免疫系細胞の、機能的特性もしくは構造的特性の変更、例えば、細胞の増殖、運動性の変更、細胞内のカチオン勾配もしくはカチオン濃度（カルシウムなど）の変更により決定される、細胞活性化状態の変化；細胞内ポリペプチドのリン酸化もしくは脱リン酸化；特異的遺伝子の発現もしくは細胞質ゾル内の挙動など、特殊な活性の誘導；表面抗原発現プロファイルの変更、もしくはアポトーシス（プログラム細胞死）の開始を含む、免疫系細胞による細胞分化；または免疫応答の存在が検出されうる、他の任意の基準を含むがこれらに限定される必要がない。例えば、免疫細胞型を識別する、細胞表面マーカーは、ＣＤ４+細胞、ＣＤ８+細胞、またはＮＫ細胞に結合する、特異的抗体により検出されうる。検出されうる、他のマーカーおよび細胞成分は、インターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β（ＩＦＮＢ）、ＩＬ−６、およびＣＣＬ５を含むがこれらに限定されない。免疫応答を検出するための一般的方法は、フローサイトメトリー、ＥＬＩＳＡ、免疫組織化学を含むがこれらに限定されない。これらのアッセイおよび同様のアッセイを実施するための手順は、広く知られており、例えば、Letkovits (Immunology Methods Manual: The Comprehensive Sourcebook of Techniques, Current Protocols in Immunology, 1998)において見出されうる。
【０２４４】
ＸＩＶ．本技術の医薬組成物および医薬調製物
本明細書では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ��ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４を含み、例えば、水、生理食塩液、トリス緩衝液、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、これらの適切な混合物、および植物油を含有する、溶媒または分散媒でありうる、担体または希釈剤を含有しうる、医薬組成物が開示される。適正な流体性は、例えば、レシチンなど、コーティングの使用により維持される場合があり、分散液の場合は、要求される粒子サイズの維持により維持される場合があり、界面活性剤の使用により維持される場合がある。微生物作用の防止は、多様な抗菌剤および抗真菌剤および保存剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによりもたらされうる。一部の実施形態では、等張剤、例えば、糖または塩化ナトリウム、および緩衝剤が組み入れられる。注射用組成物の長時間吸収は、組成物中の、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンまたは担体分子の使用によりもたらされうる。他の賦形剤は、保湿剤または乳化剤を含みうる。一般に、当業者に明らかな通り、注射用調製物に適する賦形剤が組み入れられうる。
【０２４５】
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−��Ｌ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４を含む医薬組成物および医薬調製物は、従来型の混合工程、溶解工程、顆粒化工程、乳化工程、カプセル化工程、封入工程、または凍結乾燥工程により製造されうる。ウイルス性医薬組成物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏ、またはｅｘ  ｖｉｖｏにおける使用に適するウイルス性調製物の製剤化を容易とする、１つまたは複数の、生理学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、または補助剤を使用する、従来の方式で製剤化されうる。組成物は、１つまたは複数の、さらなる生物学的に活性の薬剤と組み合わされる場合があり、非経口投与または腫瘍内投与に適する、本開示の医薬剤（生物学的薬剤を含む）または獣医科組成物を作出するように、薬学的に許容される、担体、希釈剤、または賦形剤と共に製剤化されうる。
【０２４６】
当業者により理解される通り、多くの種類の製剤が可能である。当技術分野で十分に認識されている通り、選び出される、特定の種類は、選び出される投与経路に依存する。例えば、一般に、注射による投与、例えば、静脈内注射のために、全身用製剤がデザインされるほか、腫瘍内送達のためにデザインされる製剤もある。一部の実施形態では、全身製剤または腫瘍内製剤は、滅菌製剤である。
【０２４７】
滅菌注射用溶液は、要求に応じて、本明細書で列挙される、多様な他の成分を伴う、要求量の、適切な溶媒中に、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４���および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４を組み込むことに続き、適切な滅菌手段により調製される。一般に、分散液は、多様な、滅菌処理された有効成分を、基本分散媒と、上記で列挙された成分に由来する、要求される他の成分とを含有する、滅菌媒体へと組み込むことにより調製される。滅菌注射用溶液を調製するための滅菌粉末の場合、好ましい調製法は、ウイルスに加えた、既に滅菌濾過されたその溶液に由来する、任意のさらなる所望の成分の粉末をもたらす、真空乾燥法および凍結乾燥法である。
【０２４８】
一部の実施形態では、本開示の、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ��Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４による組成物は、水溶液中、またはハンクス液、リンゲル液、マンニトール溶液、もしくは生理食塩緩衝液中など、生理学的に適合性の溶液中もしくは緩衝液中で製剤化されうる。ある特定の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３��−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４による組成物のうちのいずれかは、ポリエチレングリコール、ポリソルベート８０、１−ドデシルヘキサヒドロ−２Ｈ−アゼピン−２−オン（ラウロカプラン）、オレイン酸、クエン酸ナトリウム、トリスＨＣｌ、デキストロース、プロピレングリコール、マンニトール、ポリソルベートである、ポリエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０）、ミリスチン酸イソプロピル、ベンジルアルコール、イソプロピルアルコール、エタノール、スクロース、トレハロースなどの懸濁剤、安定化剤、浸透剤または分散剤、緩衝剤、凍結保護剤または保存剤などの製剤化剤を含有することが可能であり、当技術分野で公知（Pramanick et al., Pharma Times 45(3):65-76 (2013)）の、他のこのような製剤化剤は、一般に、本開示の組成物のうちのいずれかの中で使用されうる。
【０２４９】
本開示の生物学的薬剤または医薬組成物は、組成物が、対象へと投与されると、その中に含有されるウイルスが、腫瘍細胞に感染可能となるように製剤化されうる。投与後における、血清中、腫瘍内、および、所望の場合、他の組織内のウイルスレベルは、十分に確立された、抗体ベースのアッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ、免疫組織化学など）など、多様な技法によりモニタリングされうる。
【０２５０】
本技術の操作ポックスウイルスは、約１０ｍＭのトリス、１４０ｍＭのＮａＣｌ  ｐＨ  ７．７中で製剤化された、１ｍＬ当たりの力価を、３．５×１０7ｐｆｕとして、−８０℃で保管されうる。ワクチンショットを調製するために、例えば、アンプル内、好ましくは、ガラス製のアンプル内の、２％のペプトンおよび１％のヒトアルブミンの存在下で、１００ｍＬのリン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）中に、ウイルス粒子１０2〜１０8個または１０2〜１０9個が、凍結乾燥されうる。代替的に、注射用調製物は、操作ポックスウイルスの、製剤中の、段階的な凍結乾燥によっても作製されうる。この製剤は、マンニトール、デキストラン、糖、グリシン、ラクトース、もしくはポリビニルピロリドンなどのさらなる添加剤、または抗酸化剤もしくは不活性ガス、安定化剤、もしくはｉｎ  ｖｉｖｏにおける投与に適する組換えタンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）など、他の添加剤を含有しうる。次いで、ガラス製のアンプルがシーリングされ、４℃〜室温の間で、数カ月間にわたり保管されうる。一部の実施形態では、アンプルは、−２０℃を下回る温度で保管される。
【０２５１】
治療のために、凍結乾燥物は、生理食塩液またはトリス緩衝液などの水溶液中に溶解され、全身投与または腫瘍内投与されうる。投与方式、用量、および投与回数は、当業者により最適化されうる。
本開示に従う医薬組成物は、さらなるアジュバントを含みうる。本明細書で使用される、「アジュバント」とは、腫瘍抗原に対する宿主の免疫応答を、増強、増進、または強化する物質を指す。典型的なアジュバントは、水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウムなどのアルミニウム塩、Ｑｕｉｌ  Ａ、細菌細胞壁のペプチドグリカン、ウイルス様粒子、多糖、ｔｏｌｌ様受容体、ナノ粒子などでありうる（Aguilar et al., Vaccine 25:3752-3762 (2007)）。
【０２５２】
ＸＶ．本技術の治療法
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における充実性腫瘍を処置するための方法であって、対象へと、有効量の：ＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された、Ｅ３Ｌの欠失を含む（ＭＶＡΔＥ３Ｌ）、組換え改変ワクシニアアンカラ（ＭＶＡ）ウイルス（ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；ＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された、Ｃ７Ｌの欠失を含む（ＭＶＡΔＣ７Ｌ）、組換えＭＶＡウイルス（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌを発現させるように操作された組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ（ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｃ７Ｌの欠失、Ｅ５Ｒの欠失を含み、ｈＦｌｔ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｅ５Ｒの欠失を含むように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ）；Ｅ５Ｒの欠失を含み、ｈＦｌｔ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＶＡ（ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；ＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された、Ｃ７Ｌの欠失を含む（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ）、組換えワクシニアウイルス（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；ＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの両方を発現させるように遺伝子操作された組換えＶＡＣＶΔＣ７Ｌ（ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｅ５Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＶＡＣＶ（ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ）；Ｅ５Ｒの欠失、チミジンキナーゼ（ＴＫ）の欠失を含み、抗ＣＴＬＡ−４、ｈＦｌｔ３Ｌ、およびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＶＡＣＶ（ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；Ｍ３１Ｒの欠失を含むように遺伝子操作されたＭＹＸＶ（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ）；Ｍ３１Ｒの欠失を含み、ｈＦｌ３ＬおよびＯＸ４０Ｌを発現させるように遺伝子操作された組換えＭＹＸＶ（ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）；および／またはＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２���、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／もしくはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、またはこれらの組合せから選択される、さらなる操作ポックスウイルスを投与するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、処置は、以下：対象における免疫応答を、腫瘍に対して誘導するか、または対象における、腫瘍に対して進行中の免疫応答を増強もしくは促進すること、腫瘍のサイズを低減すること、腫瘍を根絶すること、腫瘍の増殖を阻害すること、腫瘍の転移性増殖を阻害すること、腫瘍細胞のアポトーシスを誘導すること、あるいは対象の生存を延長することのうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、免疫応答の誘導、増強、または促進は、以下：腫瘍細胞内のエフェクターＴ細胞のレベルの、対応する、ＭＶＡ株、ＭＶＡΔＥ３Ｌ株、ＭＶＡΔＣ７Ｌ株、ＶＡＣＶ株、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ株、またはＭＹＸＶ株を感染させた腫瘍細胞と比較した上昇；および脾臓におけるエフェクターＴ細胞の産生の、対応する、ＭＶＡ株、ＭＶＡΔＥ３Ｌ株、ＭＶＡΔＣ７Ｌ株、ＶＡＣＶ株、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ株、またはＭＹＸＶ株と比較した増大のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、対象は、ヒトである。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦ���ｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４を含む、本技術の組成物は、対象へと、腫瘍内注射もしくは静脈内注射、または腫瘍内注射と静脈内注射との、同時的（すなわち、共時的）もしくは逐次的組合せにより投与される。
【０２５３】
一部の実施形態では、対象は、黒色腫、結腸癌、乳がん、前立腺がん、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫（ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ  ｓａｒｃｏｍａ）、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、および他の骨腫瘍（例えば、骨肉腫（ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ）、悪性線維性組織球腫）、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、膵臓がん、卵巣がん、扁平上皮がん、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝がん、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胚性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、脳／ＣＮＳ腫瘍（例えば、星状細胞腫、神経膠腫、神経膠芽腫、非定型奇形腫様／横紋筋様腫瘍、胚細胞腫瘍、胚性腫瘍、上衣腫などの小児腫瘍）、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、希突起神経膠腫、髄膜腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、頭頸部がん、直腸腺癌、神経膠腫、尿路上皮癌、子宮がん（例えば、子宮内膜がん、卵管がん）、非小細胞肺がん（上皮がんおよび腺癌）、非浸潤性乳管癌、および肝細胞癌、副腎腫瘍（例えば、副腎皮質癌）、食道がん、眼がん（例えば、黒色腫、網膜芽細胞腫）、胆嚢がん、消化器がん、心臓がん、喉頭／下咽頭がん、口腔（ｏｒａｌ）がん（例えば、口唇がん、口腔（ｍｏｕｔｈ）がん、唾液腺がん）、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、腹膜がん、下垂体がん、カポジ肉腫、小腸がん、胃がん、胸腺がん、甲状腺がん、副甲状腺がん、膣腫瘍、および前出のうちのいずれかの転移などのがんを伴うと診断される。
【０２５４】
ＸＶＩ．他の活性薬剤との組合せ療法
一部の実施形態では、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔ���６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４）は、（ｉ）１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤；（ｉｉ）１つまたは複数の抗がん薬；ならびに（ｉｉｉ）免疫調節薬（すなわち、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０））の任意の組合せと組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。一部の実施形態では、本技術の操作ポックスウイルス（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４）の、（ｉ）１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤；（ｉｉ）１つまたは複数の抗がん薬；ならびに（ｉｉｉ）免疫調節薬（すなわち、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０））のうちのいずれか１つまたは複数との組合せ投与は、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。
【０２５５】
Ａ．免疫チェックポイント遮断剤および免疫系刺激剤
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４は、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤と組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、ＰＤ−１（プログラム死１）、ＰＤ−Ｌ１（プログラム死リガンド１）、またはＣＴＬＡ−４（細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４）のうちのいずれか１つまたは複数をターゲティングしうる（例えば、抗ｈｕＰＤ−１抗体、抗ｈｕＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ｈｕＣＴＬＡ−４抗体）。
【０２５６】
一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤は、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、およびデュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ  ００１０７１８０、ＬＡＧ−３（リンパ球活性化遺伝子３）に対する阻害性抗体、ＴＩＭ３（Ｔ細胞免疫グロブリン／ムチン３）、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ（ＩｇドメインおよびＩＴＩＭドメインを伴うＴ細胞免疫受容体）、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ  １２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ）、ＤＬＢＣＬ（びまん性Ｂ細胞リンパ腫）阻害剤、ＢＴＬＡ（Ｂ  ａｎｄ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ａｔｔｅｎｕａｔｏｒ）、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される。複数回投与の臨床試験が完了し、他の薬剤への外挿を可能としているので、当技術分野の技術では、前出の投与量範囲が公知であるか、または当技術分野の技術の範囲内に、たやすく収まる。
【０２５７】
例を目的とし、限定を目的とせずに述べると、一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫系刺激剤は、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ）刺激剤、抗原提示細胞（ＡＰＣ）刺激剤、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、およびｔｏｌｌ様受容体刺激剤の中から選択される。
【０２５８】
一部の実施形態では、ＮＫ刺激剤は、ＩＬ−２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲＡ複合体、ＩＬ−１８、およびＩＬ−１２を含むがこれらに限定されない。一部の実施形態では、ＮＫ刺激剤は、以下の受容体：ＮＫＧ２、ＫＩＲ２ＤＬ１／Ｓ１、ＫＲＩ２ＤＬ５Ａ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ４６、ＮＫｐ４４、またはＮＫｐ３０のうちの少なくとも１つを刺激する抗体を含む。
一部の実施形態では、ＡＰＣ刺激剤は、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、ＣＤ４０、ＣＤ３０、ＣＤ２７、ＯＸ−４０、および４−１ＢＢを含むがこれらに限定されない。
【０２５９】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４と、１つもしくは複数の免疫チェックポイント阻害剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤との組合せは、相乗効果を結果としてもたらす。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５��ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４と、１つもしくは複数の免疫チェックポイント阻害剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤との組合せは、抗腫瘍効果の増強を結果としてもたらす。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４と、抗ＰＤ−Ｌ１との組合せは、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶ
ＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４と、抗ＰＤ−１との組合せは、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ���ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４と、抗ＣＴＬＡ−４との組合せは、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。
【０２６０】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤との組合せは、下記の第ＸＶＩ  Ｂ節およびＸＶＩ  Ｃ節で記載される、１つもしくは複数の抗がん薬、および／または免疫調節薬と、さらに組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、��ＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤、ならびに下記の第ＸＶＩ  Ｂ節およびＸＶＩ  Ｃ節で記載される、１つもしくは複数の抗がん薬、および／または免疫調節薬との組合せは、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。
【０２６１】
抗ＯＸ４０抗体に続く、免疫チェックポイント阻害剤である抗ＰＤ−１抗体の逐次的（すなわち、連続的）投与は、組合せの治療効能を改善する結果として、腫瘍進行の遅延と、場合によって、完全な腫瘍退縮とをもたらすことが報告されている（例えば、Shrimali et al., Cancer Immunol. Res.5(9): OF1-OF12 (2017); Messenheimer et al., Clin. Cancer Res. 23(20):6165-6177 (2017)を参照されたい）。しかし、同じ研究は、抗ＯＸ４０抗体と、抗ＰＤ−１抗体との同時的（すなわち、共時的）投与は、ＯＸ４０抗体の抗腫瘍効果を打ち消し、マウスにおいて、処置転帰の不良を結果としてもたらすことを示す（Shrimali et al., (2017); Messenheimer et al., (2017)を参照されたい）。これに対して、図１１Ｂ〜１１Ｇに示される通り、マウス黒色腫モデルにおける、本技術の、ＯＸ４０Ｌトランス遺伝子を発現させるウイルス（例えば、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ）と、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ＋抗ＰＤ−Ｌ１、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ＋抗ＣＴＬＡ−４、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ＋抗ＰＤ−１（図示しない））との同時的（すなわち、共時的）投与である組合せ投与は、驚くべきことに、かつ、予測外に、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の両方における、対照と比較した、抗腫瘍効果の増強、および生存の延長を結果としてもたらす。一部の実施形態では、本技術の、ＯＸ４０Ｌトランス遺伝子を発現させるウイルス、例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈ���ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、およびＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、ならびに／または１つもしくは複数の免疫チェックポイント阻害剤（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体）の組合せは、驚くべきことに、かつ、予測外に、免疫チェックポイント阻害剤と、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体との組合せと比較した、抗腫瘍効果の増強を結果としてもたらす。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２Δ���２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、およびＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、ならびに１つまたは複数の免疫チェックポイント阻害剤（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体）の組合せは、驚くべきことに、かつ、予測外に、充実性腫瘍の処置に関して、免疫チェックポイント阻害剤と、抗ＯＸ４０アゴニスト抗体との組合せと比較した相乗効果を結果としてもたらす。
【０２６２】
Ｂ．抗がん薬
ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２などの受容体チロシンキナーゼは、Ｒａｓ−Ｒａｆ−Ｍｅｋ−Ｅｒｋ（Ｒａｓ−ＭＡＰＫ）経路を介して、腫瘍細胞の増殖および生存の促進に関与している。ＲａｆおよびＭｅｋはまた、上流の受容体チロシンキナーゼ、またはＲａｓ−ＭＡＰＫシグナル伝達を駆動する、ＲＡＳ内もしくはＲＡＦ内の機能獲得突然変異からの発がん性シグナルを阻害するための標的でもある。黒色腫を含むがん内の、鍵となる活性化突然変異の同定は、ＭＡＰＫ経路に沿ったターゲティング療法の開発をもたらしている。例えば、ＢＲＡＦ内の活性化突然変異は、黒色腫がんの過半において生じ、これらの大部分は、ＢＲＡＦV600E突然変異を含み、ＭＡＰＫシグナル伝達経路を、構成的に活性化させる。これは、浸潤性を含む、転移性挙動の増大をもたらす一方で、アポトーシスを低減する（すなわち、がん細胞の生存を延長する）。この経路に由来する病原性シグナル伝達を緩和する、いくつかの抗がん薬が開発されている。この経路をターゲティングする、焦点化療法は、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＢＲＡＦ、ＲＡＦ、およびＭＥＫの阻害剤を含む。
【０２６３】
チェックポイント阻害剤（ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４）およびＭＡＰＫ−経路ターゲティング療法の組合せからなる免疫療法は、例えば、ＢＲＡＦ陽性進行性黒色腫において、有望な結果を示している。ＭＡＰＫ経路の活性化が、免疫逃避に寄与するのに対し、ＭＡＰＫ経路の阻害は、免疫抑制性因子の抑制、ならびにＰＤ−Ｌ１など、ある特定の、他の免疫調節タンパク質の調節異常を介して、より好適な免疫環境に寄与することが報告されている。さらに、前臨床モデルにおいて、腫瘍溶解性ヘルペスウイルス（Ｔ−Ｖｅｃ）が、ＭＡＰＫ経路阻害との二重の組合せで、単剤単独と比較して、がん細胞死を増大させることが示されているほか、ＭＡＰＫ−阻害剤、Ｔ−Ｖｅｃ、およびチェックポイント阻害剤（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体）の三重の組合せは、相乗的な免疫刺激効果を示した。ＭＡＰＫ経路の阻害による、ロバストな免疫応答は、流入ＣＤ８  Ｔ細胞の活性化の増大、ならびに分泌されるＩＦＮレベルおよびＴＮＦ−αレベルの上昇と、強く関連する。
【０２６４】
本明細書で裏付けられる通り、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、およびＭＹＸＶΔＭ３１Ｒなど、Ｅ５Ｒ（またはそのオーソログ）の欠失を含む、本技術の組換えウイルス構築物は、ＩＦＮ遺伝子の発現レベルを、対応する野生型ウイルスと比較して、１０００倍を超えて、著明に増大させる（図６０Ａを参照されたい）。
【０２６５】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４は、Ｍｅｋ阻害剤（例えば、Ｕ０１２６、セルミチニブ（ＡＺＤ６２４４）、ＰＤ９８０５９、トラメチニブ、コビメチニブ）、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、ラパチニブ（ＬＰＮ）、エルロチニブ（ＥＲＬ））、ＨＥＲ２阻害剤（例えば、ラパチニブ（ＬＰＮ）、トラスツズマブ）、Ｒａｆ阻害剤（例えば、ソラフェニブ（ＳＦＮ））、ＢＲＡＦ阻害剤（例えば、ダブラフェニブ、ベムラフェニブ）、抗ＯＸ４０抗体、ＧＩＴＲアゴニスト抗体、抗ＣＳＦＲ抗体、ＣＳＦＲ阻害剤、パクリタキセル、ＴＬＲ９アゴニストであるＣｐＧ、およびＶＥＧＦ阻害剤（例えば、ベバシズマブ）からなる群から選択される１つまたは複数の抗がん薬と組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。
【０２６６】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、１つまたは複数の抗がん薬との組合せは、第ＸＶＩ  Ａ節で記載された、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤と、さらに組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦ��ｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、１つまたは複数の抗がん薬、ならびに１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤との組合せは、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。
【０２６７】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、１つまたは複数の抗がん薬との組合せは、第ＸＶＩ  Ａ節で記載された、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤、ならびに／または第ＸＶＩ  Ｃ節で記載される免疫調節薬と、さらに組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ��ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、１つまたは複数の抗がん薬、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、または免疫系刺激剤、および／または免疫調節薬との組合せは、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。
【０２６８】
Ｃ．免疫調節薬
フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）は、多発性硬化症を処置するのに使用される、経口活性の免疫調節薬である。フィンゴリモドは、リンパ球が、リンパ節から逸出するのを阻止する、スフィンゴシン−１−リン酸受容体モジュレーターとして作用する。
【０２６９】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４は、ＦＴＹ７２０と組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。
【０２７０】
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、ＦＴＹ７２０との組合せは、第ＸＶＩ  Ａ節で記載された、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤、ならびに／または第ＸＶＩ  Ｂ節で記載された抗がん薬と、さらに組み合わされるか、またはこれらと個別に、逐次的に、もしくは同時に（すなわち、共時的に）投与される。一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、ＦＴＹ７２０、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または免疫系刺激剤、および／または抗がん薬との組合せは、充実性腫瘍の処置に関して、相乗効果を結果としてもたらす。
【０２７１】
ＸＶＩＩ．操作されたＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−��２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４ウイルスを含むキット
本開示は、本明細書で記載される操作ポックスウイルス、例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４のうちの１つまたは複数を含む１つまたは複数の組成物を、操作ポックスウイルスの、処置される対象への投与のための指示書と併せて含むキットを提示する。指示書は、下記で提示される、１つまたは複数の組成物を投与するための、投与量レジメンを指し示しうる。
【０２７２】
一部の実施形態では、キットはまた、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤を、操作ポックスウイルス、例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１���−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４による組成物との併用投与のために含む、さらなる組成物も含みうる。
【０２７３】
一部の実施形態では、キットはまた、１つまたは複数の抗がん薬を、操作ポックスウイルス、例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／���たはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４による組成物との併用投与のために含む、さらなる組成物も含みうる。
【０２７４】
一部の実施形態では、キットはまた、免疫調節薬を、操作ポックスウイルス、例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶ��Ｍ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４による組成物との併用投与のために含む、さらなる組成物も含みうる。
【０２７５】
一部の実施形態では、キットはまた、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤、ならびに１つまたは複数の抗がん薬を、操作ポックスウイルス、例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔ���６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４による組成物との併用投与のために含む、さらなる組成物も含みうる。
【０２７６】
一部の実施形態では、キットはまた、１つもしくは複数の免疫チェックポイント遮断剤、および／または１つもしくは複数の免疫系刺激剤、１つまたは複数の抗がん薬、ならびに免疫調節薬の、任意の組合せを、操作ポックスウイルス、例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１��／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４による組成物との併用投与のために含む、さらなる組成物も含みうる。
【０２７７】
ＸＶＩＩＩ．ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−Ｉ��−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、有効量および投与量
一般に、対象は、低用量または高用量も投与されうるが、約１０6〜約１０10プラーク形成単位（ｐｆｕ）の範囲の投与量のＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴ���Ａ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４を投与される。一部の実施形態では、投与量は、約１０2〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０3〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０4〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０5〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０6〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０7〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０8〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０9〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０7〜約１０9ｐｆｕである。ｐｆｕの、ウイルス粒子との等価性は、使用される、具体的なｐｆｕ滴定法に応じて異なりうる。一般に、ｐｆｕは、ウイルス粒子約５〜１００個と等価であり、０．６９  ｐｆｕは、約１  ＴＣＩＤ５０である。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の治療有効量は、規定の投与期間にわたり、規定の投与頻度における、１回または複数回の分割投与で投与されうる。
【０２７８】
例えば、当業者に明らかな通り、本開示に従う、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３��Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の治療有効量は、対象の疾患状態、年齢、性別、体重、および全般的健康状態、ならびにＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔ���３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４が、特定の対象において、所望の免疫応答（治療に対する対象の応答）を誘発する能力などの因子に従い変動しうる。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹ���ＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、対象への送達では、投与量はまた、一般的な医学的状態、既往歴、疾患の種類および進行、腫瘍負荷、腫瘍内の、腫瘍浸潤免疫細胞の存在または非存在などの因子に応じても変動するであろう。
【０２７９】
一部の実施形態では、本開示の組成物を、投与の容易さ、および投与量の均一性のために、単位剤形製剤化することが有利でありうる。「本明細書で使用される単位剤形」とは、哺乳動物の処置対象のための単位投与量として適切な、物理的に個別の単位であって；各単位が、要求される薬学的または獣医学的に許容される担体と合わされて所望の治療効果をもたらすように計算された所定数量の活性材料を含有する、個別の単位を指す。
【０２８０】
ＸＩＸ．ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−��５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の、投与および治療レジメン
医薬組成物は、典型的に、その意図される投与経路と適合性となるように製剤化される。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸ���ΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の投与は、１つを超える経路を使用して達成されうる。投与経路の例は、非経口投与（例えば、静脈内投与、筋内投与、腹腔内投与、皮内投与、皮下投与）、腫瘍内投与、髄腔内投与、鼻腔内投与、全身投与、経皮投与、イオン導入投与、皮内投与、眼内投与、または局所投与を含むがこれらに限定されない。一実施形態では、直接的な局所反応が所望される場合、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３���ΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４は、例えば、腫瘍内注射により、腫瘍へと、直接投与される。加えて、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３��−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の投与経路は、変動しうる、例えば、初回投与は、腫瘍内注射を使用し、後続の投与は、静脈内注射を介するか、またはこれらの任意の組合せとする。治療有効量の、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９
、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４の注射は、規定の投与期間にわたり、規定の投与頻度で投与されうる。ある特定の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ���Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４は、他の治療処置と共に使用されうる。例えば、本技術の組換えポックスウイルスは、巨大な原発腫瘍に罹患する対象のための、ネオアジュバント（術前）状況、またはアジュバント（術後）状況において投与されうる。このような、最適化された治療レジメンは、手術などの一次療法の前または後において、腫瘍に対する免疫応答を誘導し、対象における腫瘍負荷を低減することが予期される。さらに、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴ���Ａ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４は、化学療法または放射線など、他の治療処置と共に投与されうる。
【０２８１】
ある特定の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−��Ｘ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４ウイルスは、毎週または毎月、少なくとも１回投与されるが、必要な場合、数週間、数カ月間、数年間にわたり、なおまたは利益が持続する限りにおいて、無期限に、毎週２回など、より高頻度で投与されうる。忍容され、利益の持続または増大を結果としてもたらす場合、より高頻度の投与が想定される。本方法の利益は、以下：がん細胞の数の低減、腫瘍サイズの低減、腫瘍の根絶、がん細胞の、周辺臓器への浸潤の阻害、転移性増殖の阻害または安定化または根絶、腫瘍の増殖の阻害または安定化、および生活の質の安定化または改善を含むがこれらに限定されない。さらに、利益は、腫瘍に対する免疫応答の誘導、エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞の活性化、エフェクターＣＤ８+Ｔ細胞の増大、または調節性ＣＤ４+細胞の低減を含みうる。例えば、黒色腫の文脈では、利益は、黒色腫の初期診断から、１、２、３、４、５年、またはこれを超える年数以内の、再発または転移の欠如でありうる。同様の評価は、結腸がんおよび他の充実性腫瘍についてもなされうる。
【０２８２】
ある特定の、他の実施形態では、腫瘍塊または腫瘍細胞を、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−���ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４により処置する。
【０２８３】
ＸＸ．ベクター
一部の実施形態では、ｐＣＢプラスミドベースのベクターが、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下で、ＯＸ４０Ｌ（マウスＯＸ４０ＬまたはヒトＯＸ４０Ｌ）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を挿入するのに使用される。ベクターを構築するための方法については、記載されている（M. Puhlmann, C. K. Brown, M. Gnant, J. Huang, S. K. Libutti, H. R. Alexander, D. L. Bartlett, Vaccinia as a vector for tumor-directed gene therapy: Biodistribution of a thymidine kinase-deleted mutant Cancer Gene Therapy 7(1):66-73 (2000)を参照されたい）。ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）遺伝子が、選択用マーカーとして使用される。例示的な、ｐＣＢ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｇｐｔベクターの核酸配列は、配列番号３に明示される。一部の実施形態では、ｐＵＣ５７プラスミドベースのベクターが、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下で、ＯＸ４０Ｌ（マウスＯＸ４０ＬまたはヒトＯＸ４０Ｌ）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を挿入するのに使用される。一部の実施形態では、ｐＭＡプラスミドベースのベクターが、合成の、ワクシニア早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）の制御下で、ＯＸ４０Ｌ（マウスＯＸ４０ＬまたはヒトＯＸ４０Ｌ）など、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を挿入するのに使用される。ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にあるｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子が、選択用マーカーとして使用される。例示的な、ｐＵＣ５７−ｈＯＸ４０Ｌ−ｍＣｈｅｒｒｙベクターの核酸配列は、配列番号５に明示される。さらなる例示的な、本技術のベクターの核酸配列は、表２〜５に示される。
【０２８４】
一部の実施形態では、これらの発現カセットは、各側における、ＴＫ遺伝子の部分配列（ＴＫ−Ｌ、ＴＫ−Ｒ）で挟まれる。プラスミドＤＮＡ、およびＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、またはＭＹＸＶΔＭ３１ＲのゲノムＤＮＡのＴＫ遺伝子座において生じる相同組換えは、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、またはＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを作出するための、ＯＸ４０Ｌおよび選択用マーカーの発現カセットの、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、またはＭＹＸＶΔＭ３１ＲのゲノムＤＮＡのＴＫ遺伝子座への挿入を結果としてもたらす。加えて、または代替的に、ウイルス内の、ＴＫ遺伝子座以外の、適切な遺伝子座も使用されうるであろう。プラスミドＤＮＡ、およびＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＭＹＸＶ、またはＭＹＸＶΔＭ３１ＲのゲノムＤＮＡの、適切なウイルス遺伝子の遺伝子座において生じる相同組換えは、本明細書で記載される組換えポックスウイルスなどの組換えポックスウイルスを作出するための、１つもしくは複数の、目的の特異的遺伝子（例えば、ＯＸ４０Ｌ、ｈＦｌｔ３Ｌ、抗ＣＴＬＡ−４など）、および／または選択用マーカーの発現カセットの、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＭＹＸＶ、またはＭＹＸＶΔＭ３１ＲのゲノムＤＮＡの、ウイルス遺伝子の遺伝子座への挿入を結果としてもたらす。
【０２８５】
一部の実施形態では、ＭＶＡゲノムの１８，４０７〜１８，８５９位の配列（配列番号１）は、ｇｐｔまたはｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカーと、ＯＸ４０Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、ＭＶＡゲノムの７５，５６０〜７６，０９３位の配列（配列番号１）は、ｇｐｔまたはｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカーと、ＯＸ４０Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノムの１５，７１６〜１６，１６８位の配列（配列番号２）は、ｇｐｔまたはｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカーと、ＯＸ４０Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、ＭＶＡゲノムの７５，７９８〜７５，８６８位の配列（配列番号１）は、ｇｐｔまたはｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカーと、ＯＸ４０Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノムの８０，９６２〜８１，０３２位の配列（配列番号２）は、ｇｐｔまたはｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカーと、ＯＸ４０Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。組換えウイルスは、適切な組換えウイルスが得られるまで、選択により濃縮され、４〜５ラウンドにわたりプラーク精製される。
【０２８６】
同様に、一部の実施形態では、ｐＵＣ５７プラスミドベースのベクターも、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の特異的遺伝子（ＳＧ）を、ＭＶＡウイルスゲノム骨格またはＶＡＣＶウイルスゲノム骨格へと挿入するのに使用される。ＧＦＰは、選択用マーカーとして使用されうる。例示的なｐＵＣ５７−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＧＦＰベクターの核酸配列は、配列番号４に明示される。一部の実施形態では、これらの発現カセットは、各側における、Ｃ７遺伝子の部分配列で挟まれる。加えて、または代替的に、ウイルス内の、Ｃ７遺伝子座以外の、適切な遺伝子座も使用されうるであろう。プラスミドＤＮＡおよびＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＭＶＡ、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＭＹＸＶ、またはＭＹＸＶΔＭ３１ＲのゲノムＤＮＡの、Ｃ７遺伝子座において生じる相同組換えは、ｈＦｌｔ３Ｌおよび選択用マーカーの発現カセットの、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ、ＭＶＡ、ＶＡＣＶ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＭＹＸＶ、またはＭＹＸＶΔＭ３１ＲのゲノムＤＮＡの、Ｃ７遺伝子座への挿入を結果としてもたらす。
【０２８７】
一部の実施形態では、ＭＶＡゲノムの１８，４０７〜１８，８５９位の配列（配列番号１）は、ＧＦＰなどの選択用マーカーと、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、ＭＶＡゲノムの７５，５６０〜７６，０９３位の配列（配列番号１）は、ｇｐｔまたはｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカーと、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノムの１５，７１６〜１６，１６８位の配列（配列番号２）は、ＧＦＰなどの選択用マーカーと、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノムの８０，９６２〜８１，０３２位の配列（配列番号２）は、ＧＦＰなどの選択用マーカーと、ｈＦｌｔ３Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）とをコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。組換えウイルスは、適切な組換えウイルスが得られるまで、選択により濃縮され、４〜５ラウンドにわたりプラーク精製される。
【０２８８】
一部の実施形態では、ＭＶＡゲノムの３８，４３２〜３９，３８５位の配列（配列番号１）は、ｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカー、ならびに／またはｈＦｌｔ３Ｌおよび／もしくはＯＸ４０Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）をコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列で置きかえられている。組換えウイルスは、適切な組換えウイルスが得られるまで、選択により濃縮され、４〜５ラウンドにわたりプラーク精製される。
一部の実施形態では、ＶＡＣＶゲノムの４９，２３６〜５０，２６１位の配列（配列番号２）は、ｍＣｈｅｒｒｙなどの選択用マーカー、ならびに／またはｈＦｌｔ３Ｌおよび／もしくはＯＸ４０Ｌなど、目的の遺伝子（ＳＧ）をコードする、１つまたは複数のオープンリーディングフレームを含む異種核酸配列置きかえられている。組換えウイルスは、適切な組換えウイルスが得られるまで、選択により濃縮され、４〜５ラウンドにわたりプラーク精製される。
【０２８９】
一部の実施形態では、ｐＣＢ−ＯＸ４０Ｌ−ｇｐｔベクター、またはｐＵＣ５７−ＯＸ４０Ｌ−ｍＣｈｅｒｒｙベクター、またはｐＵＣ５７−ＯＸ４０Ｌ−ｍＣｈｅｒｒｙベクター、およびｐＵＣ５７−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＧＦＰベクターの両方が、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌ、またはＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを作出するために、ＯＸ４０Ｌを、ＴＫ遺伝子座へと挿入し、ｈＦｌｔ３Ｌを、Ｃ７遺伝子座へと挿入するのに使用される。
【０２９０】
ＭＶＡゲノム、ＶＡＣＶゲノム、またはＭＹＸＶゲノムへの組込みに適する、他の任意の発現ベクター、ならびに代替的プロモーター、調節エレメント、選択用マーカー、切断部位、および／またはＭＶＡ、ＶＡＣＶ、もしくはＭＹＸＶの非必須挿入領域が使用されうることが理解される。一部の実施形態では、選択用マーカーは、生物発光タンパク質、蛍光タンパク質、または化学発光タンパク質である、レポータータンパク質である。一部の実施形態では、レポータータンパク質は、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子（ｇｐｔ）である。一部の実施形態では、選択用マーカーは、ｍＣｈｅｒｒｙ遺伝子である。ＭＶＡ、ＶＡＶＣ、およびＭＹＸＶは、Ｃ１１、Ｋ３、Ｆ１、Ｆ２、Ｆ４、Ｆ６、Ｆ８、Ｆ９、Ｆ１１、Ｆ１４．５、Ｊ２、Ａ４６、Ｅ３Ｌ、Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｃ１２Ｌ、Ｂ８Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｎ１Ｌ、Ｃ１１Ｒ、Ｋ１Ｌ、Ｃ１６、Ｍ１Ｌ、Ｎ２Ｌ、およびＷＲ１９９（またはこれらのオーソログ）を含む、直鎖状ゲノムの末端における、多くの免疫モジュレーター遺伝子をコードする。これらの遺伝子（またはこれらのオーソログ）は、ウイルスの免疫活性化特性を潜在的に増強し、トランス遺伝子の挿入を可能とするように、欠失されうる。
【０２９１】
ＸＸＩ．がんを処置するための、アジュバントとしての、本技術の操作ポックスウイルス株の、対象への送達
Ａ．組成物
免疫活性化がんワクチンアジュバント
近年における、がんネオ抗原の発見は、がんワクチン接種、およびワクチン接種効果を増強するための、がんワクチン接種の、免疫チェックポイント遮断剤との組合せに対する、新たな関心を呼び起こしている。抗腫瘍免疫応答を最大化させうる、効果的なワクチンアジュバントの開発は、がんワクチンの成功に、極めて重要である。
【０２９２】
がんワクチンは、がん抗原と、免疫アジュバントとを含む。がん抗原は、一般に、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、および発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原を含む。がん抗原は、照射腫瘍細胞、腫瘍細胞溶解物またはペプチドをロードされた樹状細胞（ＤＣ）、抗原をコードする、ＤＮＡまたはＲＮＡのほか、がん抗原をコードするトランス遺伝子を伴う、腫瘍溶解性ウイルスの形態で提供されうる。樹状細胞（ＤＣ）とは、ナイーブＴ細胞をプライミングして、抗原特異的Ｔ細胞応答を発生させるために重要な、プロフェッショナルの抗原提示細胞である。免疫アジュバントとは、ＤＣによる抗原の取込み、ならびに／またはＤＣの成熟および活性化を促進する薬剤である。ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、ポリイノシン酸−ポリシチジル酸（ＴＬＲ３アゴニスト）、ＣｐＧ（ＴＬＲ９アゴニスト）、イミキモド（ＴＬＲ７アゴニスト）のほか、ＳＴＩＮＧアゴニストを含む、いくつかの免疫アジュバントは、前臨床試験モデルおよび臨床試験状況において、ワクチン効能を改善することが示されている。
【０２９３】
アジュバント療法剤としての、本技術の操作ポックスウイルス株
本技術の開示は、本明細書で記載される、操作ポックスウイルス株（例えば、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２��ΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒ）の、ワクチンアジュバントとしての使用に関する。一部の実施形態では、本技術の開示は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌの、ワクチンアジュバントとしての使用に関する。一部の実施形態では、本技術の開示は、熱不活化ワクシニア（熱不活化ＭＶＡ、熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒ）と組み合わせた、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌの、ワクチンアジュバントとしての使用に関する。熱不活化ＭＶＡは、ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ依存性経路を介して、通常ＤＣ（ｃＤＣ）内の、Ｉ型ＩＦＮを誘導し、また、ＴＬＲ７／ＭｙＤ８８依存性機構を介して、形質細胞様ＤＣ（ｐＤＣ）内の、Ｉ型ＩＦＮも誘導することが示されている。さらに、熱不活化ＭＶＡの腫瘍内注射は、注射ありの腫瘍を根絶し、単剤療法として、または免疫チェックポイント遮断剤（ＩＣＢ）と組み合わせて、全身性抗腫瘍免疫の発生をもたらす。
【０２９４】
標的抗原
本明細書で開示される、組成物および方法は、抗原またはネオ抗原の選出しにより限定されることが意図されない。抗原およびネオ抗原の、多数の例が提示されるが、当業者は、本明細書で開示されるアジュバントを、選択した抗原またはネオ抗原と共に、容易に利用しうる。本技術の治療レジメンにおいて使用されうる、例示的な、非限定的標的抗原は、腫瘍分化抗原、がん精巣抗原、ネオ抗原、発がん性ウイルス感染と関連する腫瘍の場合におけるウイルス抗原、ＧＰＡ３３、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＧＤ２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、ｐ１５、ｇｐ７５、ベータ−カテニン、ＥｒｂＢ２、がん抗原１２５（ＣＡ−１２５）、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＲＡＧＥ、ＭＡＲＴ（黒色腫抗原）、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＣ−３、ＭＵＣ−４、ＭＵＣ−５ａｃ、ＭＵＣ−１６、ＭＵＣ−１７、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質１および２、Ｐｍｅｌ１７（ｇｐ１００）、ＧｎＴ−ＶイントロンＶ配列（Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶイントロンＶ配列）、前立腺がんｐｓｍ、ＰＲＡＭＥ（黒色腫抗原）、β−カテニン、ＥＢＮＡ（エプスタイン−バーウイルス核抗原）１〜６、ｐ５３、ｋｒａｓ、肺抵抗タンパク質（ＬＲＰ）Ｂｃｌ−２、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）、Ｋｉ−６７、ＣＥＡＣＡＭ６、結腸特異性抗原ｐ（ＣＳＡｐ）、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ヒトパピローマウイルスＥ６およびＥ７、ならびにこれらの組合せを含む。一部の実施形態では、抗原は、Ｍ２７（ＲＥＧＶＥＬＣＰＧＮＫＹＥＭＲＲＨＧＴＴＨＳＬＶＩＨＤ）（配列番号１７）、Ｍ３０（ＰＳＫＰＳＦＱＥＦＶＤＷＥＮＶＳＰＥＬＮＳＴＤＱＰＦＬ）（配列番号１８）、Ｍ４８（ＳＨＣＨＷＮＤＬＡＶＩＰＡＧＶＶＨＮＷＤＦＥＰＲＫＶＳ）（配列番号１９）、およびこれらの組合せからなる群から選択されるネオ抗原を含む。標的抗原はまた、上記で列挙された抗原の、免疫活性部分を含む、断片または融合ポリペプチドでもありうる。
【０２９５】
免疫チェックポイント遮断剤（ＩＣＢ）
一部の実施形態では、本技術の免疫原性組成物は、１つまたは複数の免疫チェックポイント遮断剤をさらに含む。免疫チェックポイント遮断（ＩＣＢ）抗体は、免疫療法の最前線にあり、手術、放射線、および化学療法を含む、がん管理選択肢の支柱のうちの１つとして受容されている。免疫チェックポイントは、抗腫瘍免疫の下方調節に関与しているため、免疫チェックポイントタンパク質またはそれらのリガンド（ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、またはＰＤ−Ｌ１）をターゲティングする薬剤および抗体は、抗腫瘍Ｔ細胞の脱阻害に成功し、これにより、活性化Ｔ細胞の増殖および生存をもたらしている。これは、黒色腫、非小細胞肺がん、腎細胞癌、ホジキンリンパ腫、頭頸部がん、尿路上皮癌、メルケル細胞癌、ＰＤ−Ｌ１+胃腺癌のほか、ＭＳＩ（ｍｉｓｍａｔｃｈ  ｒｅｐａｉｒ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ａｎｄ  ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ  ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ）高転移性充実性腫瘍を含む、多様な組織型の進行がんを伴う患者のために、ＦＤＡによる、複数の免疫チェックポイント遮断（ＩＣＢ）剤の承認をもたらした。
【０２９６】
免疫チェックポイント遮断剤の非限定例は、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１およびこれらの任意の組合せを含む１つまたは複数のチェックポイントタンパク質の活性をモジュレートする薬剤または抗体を含む。
【０２９７】
本技術医薬組成物および医薬調製物
本明細書では、抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−��Ｘ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして含み、例えば、水、生理食塩液、トリス緩衝液、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、これらの適切な混合物、および植物油を含有する、溶媒または分散媒でありうる、担体または希釈剤を含有しうる、医薬組成物が開示される。一部の実施形態では、医薬組成物は、抗原およびＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌおよび熱不活化ＭＶＡを、アジュバントとして含む。適正な流体性は、例えば、レシチンなど、コーティングの使用により維持される場合があり、分散液の場合は、要求される粒子サイズの維持により維持される場合があり、界面活性剤の使用により維持される場合がある。微生物作用の防止は、多様な抗菌剤および抗真菌剤および保存剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによりもたらされうる。一部の実施形態では、等張剤、例えば、糖または塩化ナトリウム、および緩衝剤が組み入れられる。注射用組成物の長時間吸収は、組成物中の、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンまたは担体分子の使用によりもたらされうる。他の賦形剤は、保湿剤または乳化剤を含みうる。一般に、当業者に明らかな通り、注射用調製物に適する賦形剤が組み入れられうる。
【０２９８】
抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−Ｉ��−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして含む医薬組成物および医薬調製物は、従来型の混合工程、溶解工程、顆粒化工程、乳化工程、カプセル化工程、封入工程、または凍結乾燥工程により製造されうる。医薬組成物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｖｉｖｏ、またはｅｘ  ｖｉｖｏにおける使用に適する調製物の製剤化を容易とする、１つまたは複数の、生理学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、または補助剤を使用する、従来の方式で製剤化されうる。組成物は、１つまたは複数の、さらなる生物学的に活性の薬剤（例えば、ＧＭ−ＣＳＦの併用投与）と組み合わされる場合があり、非経口投与または腫瘍内投与に適する、本開示の医薬剤（生物学的薬剤を含む）または獣医科組成物を作出するように、薬学的に許容される、担体、希釈剤、または賦形剤と共に製剤化されうる。
【０２９９】
当業者により理解される通り、多くの種類の製剤が可能である。当技術分野で十分に認識されている通り、選び出される、特定の種類は、選び出される投与経路に依存する。例えば、一般に、注射による投与、例えば、静脈内注射のために、全身用製剤がデザインされるほか、腫瘍内送達のためにデザインされる製剤もある。一部の実施形態では、全身製剤または腫瘍内製剤は、滅菌製剤である。
【０３００】
滅菌注射用溶液は、要求に応じて、本明細書で列挙される、多様な他の成分を伴う、要求量の、適切な溶媒中に、抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗Ｃ���ＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして組み込むことに続き、適切な滅菌手段により調製される。一般に、分散液は、多様な、滅菌処理された有効成分を、基本分散媒と、上記で列挙された成分に由来する、要求される他の成分とを含有する、滅菌媒体へと組み込むことにより調製される。滅菌注射用溶液を調製するための滅菌粉末の場合、好ましい調製法は、ウイルスに加えた、既に滅菌濾過されたその溶液に由来する、任意のさらなる所望の成分の粉末をもたらす、真空乾燥法および凍結乾燥法である。
【０３０１】
一部の実施形態では、本開示の、抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ��ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒによる組成物は、水溶液中、またはハンクス液、リンゲル液、マンニトール溶液、もしくは生理食塩緩衝液中など、生理学的に適合性の溶液中もしくは緩衝液中で製剤化されうる。ある特定の実施形態では、抗原および熱不活化ＭＶＡまたは熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒによる組成物のうちのいずれかは、ポリエチレングリコール、ポリソルベート８０、１−ドデシルヘキサヒドロ−２Ｈ−アゼピン−２−オン（ラウロカプラン）、オレイン酸、クエン酸ナトリウム、トリスＨＣｌ、デキストロース、プロピレングリコール、マンニトール、ポリソルベートである、ポリエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０）、ミリスチン酸イソプロピル、ベンジルアルコール、イソプロピルアルコール、エタノール、スクロース、トレハロースなどの懸濁剤、安定化剤、浸透剤または分散剤、緩衝剤、凍結保護剤または保存剤などの製剤化剤を含有することが可能であり、当技術分野で公知の、他のこのような製剤化剤は、一般に、本開示の組成物のうちのいずれかの中で使用されうる。
【０３０２】
一部の実施形態では、本技術の組成物は、−８０℃で保管されうる。ワクチンショットを調製するために、例えば、アンプル内、好ましくは、ガラス製のアンプル内の、２％のペプトンおよび１％のヒトアルブミンの存在下で、１００ｍＬのリン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）中に、ウイルス粒子１０2〜１０8個または１０2〜１０9個個が、凍結乾燥されうる。代替的に、注射用調製物は、組換えウイルスの、製剤中の、段階的な凍結乾燥によっても作製されうる。この製剤は、マンニトール、デキストラン、糖、グリシン、ラクトース、もしくはポリビニルピロリドンなどのさらなる添加剤、または抗酸化剤もしくは不活性ガス、安定化剤、もしくはｉｎ  ｖｉｖｏにおける投与に適する組換えタンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）など、他の添加剤を含有しうる。次いで、ガラス製のアンプルがシーリングされ、４℃〜室温の間で、数カ月間にわたり保管されうる。一部の実施形態では、アンプルは、−２０℃を下回る温度で保管される。
【０３０３】
治療のために、凍結乾燥物は、生理食塩液またはトリス緩衝液などの水溶液中に溶解され、全身投与または腫瘍内投与されうる。投与方式、用量、および投与回数は、当業者により最適化されうる。
【０３０４】
本開示に従う、抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−��Ｘ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして含む医薬組成物は、水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウムなどのアルミニウム塩、Ｑｕｉｌ  Ａ、細菌細胞壁のペプチドグリカン、ウイルス様粒子、多糖、ｔｏｌｌ様受容体、ナノ粒子などを含む、さらなるアジュバントを含みうる。
【０３０５】
ワクチン
一部の実施形態では、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒアジュバント、ならびに１つまたは複数の抗原を含む組成物は、ワクチンへと製剤化される。一部の実施形態では、組成物は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを、アジュバントとして含む。一部の実施形態では、組成物は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌおよび熱不活化ＭＶＡを、アジュバントとして含む。一部の実施形態では、ワクチンは、腫瘍抗原含有全細胞ワクチン（例えば、照射全細胞ワクチン）である。一部の実施形態では、ワクチンは、それと共に製剤化された抗原に対する免疫応答を誘発するように、対象へと投与される。
【０３０６】
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／Ｉ��−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒの、がんワクチンの免疫アジュバントとしての、有効量および投与量
一般に、対象は、低用量または高用量も投与されうるが、約１０6〜約１０10プラーク形成単位（ｐｆｕ）の範囲の投与量のＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴ���Ａ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを投与される。一部の実施形態では、投与量は、約１０2〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０3〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０4〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０5〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０6〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０7〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０8〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０9〜約１０10ｐｆｕの範囲である。一部の実施形態では、投与量は、約１０7〜約１０9ｐｆｕである。ｐｆｕの、ウイルス粒子との等価性は、使用される、具体的なｐｆｕ滴定法に応じて異なりうる。一般に、ｐｆｕは、ウイルス粒子約５〜１００個と等価であり、０．６９  ＰＦＵは、約１  ＴＣＩＤ５０である。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯ��４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒの治療有効量は、規定の投与期間にわたり、規定の投与頻度における、１回または複数回の分割投与で投与されうる。
【０３０７】
例えば、当業者に明らかな通り、本開示に従う、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３��Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒの、アジュバントとしての治療有効量は、対象の疾患状態、年齢、性別、体重、および全般的健康状態、ならびにＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒが、特定の対象において、所望の免疫応答（治療に対する対象の応答）を誘発する能力などの因子に従い変動しうる。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ��０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒの、対象への送達では、投与量はまた、一般的な医学的状態、既往歴、疾患の種類および進行、腫瘍負荷、腫瘍内の、腫瘍浸潤免疫細胞の存在または非存在などの因子に応じても変動するであろう。
【０３０８】
一部の実施形態では、本開示の組成物を、投与の容易さ、および投与量の均一性のために、単位剤形製剤化することが有利でありうる。「本明細書で使用される単位剤形」とは、哺乳動物の処置対象のための単位投与量として適切な、物理的に個別の単位であって；各単位が、要求される薬学的または獣医学的に許容される担体と合わされて所望の治療効果をもたらすように計算された所定数量の活性材料を含有する、個別の単位を指す。
【０３０９】
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／Ｉ��−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒ  ４０Ｌの、がんワクチンの免疫アジュバントとしての投与および治療レジメン
医薬組成物は、典型的に、その意図される投与経路と適合性となるように製剤化される。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸ���ΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒの、免疫原性組成物（例えば、ワクチン）中のアジュバントとしての投与は、１つを超える経路を使用して達成されうる。投与経路の例は、非経口投与（例えば、静脈内投与、筋内投与、腹腔内投与、皮内投与、皮下投与）、腫瘍内投与、髄腔内投与、鼻腔内投与、全身投与、経皮投与、イオン導入投与、皮内投与、眼内投与、または局所投与を含むがこれらに限定されない。一実施形態では、直接的な局所反応が所望される場合、抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして含む、本技術の医薬組成物は、例えば、腫瘍内注射により、腫瘍へと、直接投与される。一部の実施形態では、抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ���１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして含む、本技術の医薬組成物は、腫瘍床と比べて、末梢において投与される。加えて、投与経路は、変動しうる、例えば、初回投与は、腫瘍内注射を使用し、後続の投与は、静脈内注射を介するか、またはこれらの任意の組合せとする。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−Δ
Ｅ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒの、がんワクチン注射におけるアジュバントとしての治療有効量は、規定の投与期間にわたり、規定の投与頻度で投与されうる。ある特定の実施形態では、本技術の医薬組成物は、化学療法または放射線など、他の治療処置と共に使用されうる。一部の実施形態では、治療有効量の、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−��Ｃ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして含む、本技術の医薬組成物は、免疫チェックポイント遮断療法と共に使用されうる。
【０３１０】
ある特定の実施形態では、抗原およびＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦ��ｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを、アジュバントとして含む医薬組成物は、毎週または毎月、少なくとも１回投与されるが、必要な場合、数週間、数カ月間、数年間にわたり、なおまたは利益が持続する限りにおいて、無期限に、毎週２回など、より高頻度で投与されうる。忍容され、利益の持続または増大を結果としてもたらす場合、より高頻度の投与が想定される。本方法の利益は、以下：がん細胞の数の低減、腫瘍サイズ（例えば、腫瘍体積）の低減、腫瘍の根絶、がん細胞の、周辺臓器への浸潤の阻害、転移性増殖の阻害または安定化または根絶、腫瘍の増殖の阻害または安定化、および生活の質の安定化または改善を含むがこれらに限定されない。さらに、利益は、腫瘍に対する免疫応答の誘導、ＩＦＮ−γ+ＣＤ８+Ｔ細胞の増大、ＩＦＮ−γ+ＣＤ４+Ｔ細胞の増大、エフェクターＣＤ４+Ｔ細胞の活性化、エフェクターＣＤ８+Ｔ細胞の増大、または調節性ＣＤ４+細胞の低減を含みうる。例えば、黒色腫の文脈では、利益は、黒色腫の初期診断から、１、２、３、４、５年、またはこれを超える年数以内の、再発または転移の欠如でありうる。同様の評価は、結腸がんおよび他の充実性腫瘍についてもなされうる。
【０３１１】
Ｂ．方法
一態様では、本開示は、それを必要とする対象における免疫応答を増強することにより、充実性腫瘍を処置するための方法であって、対象へと、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ���ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを含む１つまたは複数の抗原およびアジュバントを含む免疫原性組成物を投与し、これにより、免疫応答を増強することを介して、腫瘍を処置するステップを含む方法を提示する。一部の実施形態では、アジュバントは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを含む。一部の実施形態では、アジュバントは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌおよび熱不活化ＭＶＡを含む。
【０３１２】
一部の実施形態では、本開示は、方法であって、抗原に対する免疫応答を誘発するために、１つまたは複数の抗原と、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗ＣＴＬＡ���４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒとしてのアジュバントとを含む免疫原性組成物を、対象へと投与するステップを含む方法を提示する。
【０３１３】
本明細書で開示される方法についての一部の実施形態では、投与ステップは、免疫原性組成物を、複数回投与で投与することを含む。
【０３１４】
一部の実施形態では、本明細書で記載される方法は、対象へと、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＣＴＬＡ−４抗体、イピリムマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、ラムブロリズマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ−４７３６、ＭＳＢ００１０７１８０、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＧＩＴ、ＡＭＰ−２２４、ＭＤＸ−１１０５、アレルマブ、トレメリムマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ−９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ−０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ−６４６９、ＣＰ−８７０，８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ−５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳ、ＤＬＢＣＬ阻害剤、ＢＴＬＡ、ＰＤＲ００１、およびこれらの任意の組合せからなる群から選択される免疫チェックポイント遮断剤を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、免疫原性組成物は、免疫チェックポイント遮断剤の投与と別個に、逐次的に、または同時に、対象へと送達される。
【０３１５】
Ｃ．キット
一部の実施形態では、キットが提供される。一部の実施形態では、キットは、容器手段、ならびに（ａ）抗原；および（ｂ）ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ、ＶＡＣＶ−ＴＫ-−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３ＮΔＥ５ＲΔＢ２Ｒ、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＶＡＣＶＥ３ＬΔ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ΔＢ２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６３Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６４Ｒ、ＭＶＡΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ΔＷＲ１９９、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ、ＭＶＡΔＥ３ＬΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｍＯＸ４０ＬΔＷＲ１９９−ｈＩＬ−１２ΔＣ１１Ｒ−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５α、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ５Ｒ−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−ＯＸ４０Ｌ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００ΔＣ１１Ｒ、ＶＡＣＶΔＥ３Ｌ８３Ｎ−ΔＴＫ−抗−ｈｕＣＴＬＡ−４−ΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌ−ｈＩＬ−１２ΔＢ２ＲΔＷＲ１９９ΔＷＲ２００−ｈＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲαΔＣ１１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ、ＭＹＸＶΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα、ＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−抗Ｃ���ＬＡ−４、および／またはＭＹＸＶΔＭ６２ＲΔＭ６３ＲΔＭ６４ＲΔＭ３１Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＯＸ４０Ｌ−ＩＬ−１２−ＩＬ−１５／ＩＬ−１５Ｒα−抗ＣＴＬＡ−４、および／または熱不活化ＭＶＡΔＥ５Ｒを含むアジュバントの各々の個別の部分を含む。一部の実施形態では、アジュバントは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌを含む。一部の実施形態では、アジュバントは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ＯＸ４０Ｌおよび熱不活化ＭＶＡを含む。
【実施例】
【０３１６】
本技術は、いかなる形でも、限定的であるものとしては見なされるべきではない、以下の実施例により、さらに例示される。
【０３１７】
一般的な材料および方法
ウイルスおよび細胞系：ＭＶＡウイルスは、Ｇｅｒｄ  Ｓｕｔｔｅｒ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｕｎｉｃｈ）により恵与され、ＢＨＫ−２１細胞（ベビーハムスター腎臓細胞；ＡＴＣＣ  ＣＣＬ−１０）内で繁殖させた。ＭＶＡは、市販されており、かつ／または一般に入手可能である。ＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスは、Ｇｅｒｄ  Ｓｕｔｔｅｒ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｕｎｉｃｈ）により恵与され、ＢＨＫ−２１細胞内で繁殖させた。ＭＶＡΔＥ３Ｌウイルスの作出法については、記載されている（Hornemann et al., 2003）。ウイルスは、３６％のスクロースクッションを介して精製した。熱不活化ＭＶＡは、精製されたＭＶＡウイルスを、５５℃で、１時間にわたりインキュベートすることにより作出される。ＢＨＫ−２１は、１０％ＦＢＳ、０．１ｍＭの非必須アミノ酸（ＮＥＡＡ）、および５０ｍｇ／ｍｌのゲンタマイシンを含有する、イーグル最小必須培地（イーグルＭＥＭは、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；型番：１１０９５−０８０から購入することができる）中で培養した。マウス黒色腫細胞系である、Ｂ１６−Ｆ１０は、当初は、Ｉ．Ｆｉｄｌｅｒ（ＭＤ  Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒ）から得た。Ｂ１６−Ｆ１０細胞は、１０％のＦＢＳ、１ｍｌ当たり１００単位のペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、０．１ｍＭのＮＥＡＡ、２ｍＭのＬ−グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、および１０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液を補充した、ＲＰＭＩ  １６４０培地中で維持した。全ての細胞を、５％ＣＯ2インキュベーター内、３７℃で増殖させた。ヒト黒色腫ＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞は、完全ＲＰＭＩ  １６４０培地中で培養した。ヒト単球由来樹状細胞を培養するために、完全ＲＰＭＩ  １６４０に、１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１％のペニシリン／ストレプトマイシン（Ｍｅｄｉａ  Ｌａｂ、ＭＳＫＣＣ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ）、５０μＭの２−ＭＥ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ  Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）、１％のＬ−グルタミン（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）、および熱不活化正常ヒト血清（特定の実験のために指定される、ｖ／ｖで１％または１０％；Ｇｅｍｉｎｉ  Ｂｉｏ−Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｗｅｓｔ  Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ、ＣＡ）を補充した。滅菌、組換え、内毒素非含有、発熱物質非含有、マイクプラズマ非含有、および担体非含有のヒトサイトカインを使用して、未成熟血液および成熟血液によるｍｏＤＣを作出した。全ての培地および試薬は、内毒素非含有であった。全ての細胞を、５％ＣＯ２インキュベーター内、３７℃で増殖させた。
【０３１８】
マウス：６〜１０週齢の間の、雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入し、ｉｎ  ｖｉｖｏ実験のために使用した。これらのマウスは、Ｓｌｏａｎ  Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅにおける、動物施設内で維持した。全ての手順は、Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ  ｏｆ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈにおける推奨に、厳格に従い実施した。プロトコールは、Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  Ｅｔｈｉｃｓ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ  ｏｆ  Ｓｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅにより承認された。
【０３１９】
組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌウイルスの作出：ＢＨＫ２１細胞を、６ウェルプレートへと継代した。翌日、細胞に、ＭＶＡΔＥ３Ｌを、０．５の感染多重度（ＭＯＩ）で感染させた。１〜２時間後、２μｌのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００により、細胞に、０．７５μｇのｐＣＢ−ｍＯＸ４０Ｌ−ｇｐｔ構築物をトランスフェクトした。２日後、細胞を回収し、３回にわたり、凍結／融解させた。純粋なＭＶＡΔＥ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌを選択するために、ＭＰＡ、キサンチン、およびヒポキサンチンを含む、ｇｐｔ選択培地中の、さらなる培養を介して、組換えウイルスを選択し、４〜６ラウンドにわたる選択の後に、プラーク精製した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子の一部を欠き、ｍＯＸ４０Ｌの挿入を伴うことを検証した。
ＰＣＲによる、組換えウイルスである、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ｍＯＸ４０Ｌの検証：ＰＣＲ反応を使用して、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）ｍＯＸ４０Ｌ組換えウイルスの純度を検証した。ＰＣＲ反応のために使用されたプライマー配列は、ＴＫ−Ｆ４：  ５’−ＴＴＧＴＣＡＴＣＡＴＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡ−３’（配列番号１１）、ＴＫ−Ｒ４：  ５’−ＴＣＣＴＴＣＧＴＴＴＧＣＣＡＴＡＣＧＣＴ−３’（配列番号１２）、ＯＸ４０Ｌ−Ｆ：  ５’−ＣＧＴＴＧＴＡＡＧＣＧＧＣＡＴＣＡＡＧＧ−３’（配列番号１３）、ＯＸ４０Ｌ−Ｒ：  ５’−ＡＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＡＧＣＧＡＣＴＡＣ−３’（配列番号１４）である。
【０３２０】
ｍＯＸ４０ＬおよびｈＦｌｔ３Ｌの発現についてのＦＡＣＳ解析：マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞（１×１０6）またはＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞に、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させた。細胞は、感染の２４時間後に回収し、ＦＡＣＳ解析の前に、ＰＥコンジュゲート抗マウスＯＸ４０Ｌまたは抗ｈＦｌｔ３Ｌ抗体で染色した。
【０３２１】
フローサイトメトリー解析により、腫瘍浸潤リンパ球を査定するための、腫瘍の植込み、およびウイルスの腫瘍内注射：本技術では、両側腫瘍植込みモデルを使用した。Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの、右脇腹（細胞５×１０5個）および左脇腹（細胞２．５×１０5個）における剃毛皮膚の皮内へと植え込んだ。植込みの７日後、麻酔下にあるマウスの、右脇腹の大型腫瘍（直径約３ｍｍまたはこれを超える）に、毎週２回、組換えウイルスまたはＰＢＳを注射した。２回目の注射の２または３日後に、腫瘍を採取し、秤量した。次いで、腫瘍を切り刻んでから、無血清ＲＰＭＩ培地中の、リベラーゼ（１ｍｌ当たり１．６７  Ｗｕｅｎｓｃｈ単位）およびＤＮアーゼ（０．２ｍｇ／ｍｌ）を伴う、３７℃で、３０分間にわたるインキュベーションにかけた。細胞懸濁液は、７０μｍのナイロンフィルターを通してすり潰すことにより作出し、次いで、完全ＲＰＭＩ培地で洗浄した。細胞を、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ４５抗体、抗ＣＤ４抗体、および抗ＣＤ８抗体による、表面の標識付けのために加工し、また、細胞内グランザイムＢ染色のためにも加工した。生細胞は、固定型色素である、ｅＦｌｕｏｒ５０６（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を使用することにより、死細胞から識別した。生細胞は、透過処理キット（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を使用して、さらに透過処理し、グランザイムＢについて染色した。データは、ＬＳＲＩＩフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）を使用して収集した。データは、ＦｌｏｗＪｏソフトウェア（ＦｌｏｗＪｏ、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）で解析した。
【０３２２】
ＩＦＮ−γ  ＥＬＩＳＰＯＴアッセイ：Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの、右脇腹（細胞５×１０5個）および左脇腹（細胞２．５×１０5個）の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの７日後、右脇腹の腫瘍に、ＰＢＳまたは組換えウイルスを注射した。注射は、３日後に、１回繰り返した。２回目の注射の２または３日後に、脾臓を、異なるウイルスで処置されたマウスから摘出し、７０μｍのストレーナー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）を通してすり潰した。ＡＣＫ  Ｌｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を使用して、赤血球を溶解させ、細胞は、完全ＲＰＭＩ培地中に再懸濁させた。Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ製のＣＤ８α（Ｌｙ−２）ＭｉｃｒｏＢｅａｄｓを使用して、ＣＤ８+Ｔ細胞を精製した。製造元のプロトコール（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）に従い、ＥＬＩＳＰＯＴ（Ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ＩｍｍｕｎｏＳｐｏｔ）アッセイを実施して、腫瘍特異性ＩＦＮ−γ+＋ＣＤ８+Ｔ細胞活性を測定した。ＣＤ８+Ｔ細胞を、ＲＰＭＩ培地中で、照射されたＢ１６細胞と、１：１の比（各細胞２５０，０００個ずつ）で混合し、ＥＬＩＳＰＯＴプレートを、３７℃で１６時間にわたりインキュベートしてから、染色した。
【０３２３】
組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌウイルスの作出：２ステップの組換えを使用して、このウイルスを作出した。第１のステップは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌを作出することである。ｐＵＣ５７ベクターを構築して、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）下にある、ｈＦｌｔ３Ｌ遺伝子と、選択マーカーとして使用される、ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にあるＧＦＰとを含む発現カセットを、ＭＶＡのＣ７Ｌ遺伝子座へと挿入した。この発現カセットを、Ｃ７Ｌ遺伝子の左側および右側における、Ｃ８ＬおよびＣ６Ｒの部分配列で挟んだ。ＢＨＫ２１細胞に、ＭＶＡを、０．５の感染多重度（ＭＯＩ）で、１時間にわたり感染させ、次いで、上記で記載したプラスミドＤＮＡをトランスフェクトした。感染細胞は、４８時間後に回収した。組換えウイルスは、ＧＦＰ+細胞巣の、希釈系列選択により選択した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌが、Ｃ７Ｌ遺伝子を欠き、ｈＦｌｔ３Ｌの挿入を伴うことを検証した。ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを作出する、第２のステップ：両側において、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子に挟まれた、ワクシニアＰｓＥ／Ｌの制御下にある、コドン最適化ｍＯＸ４０Ｌ遺伝子、ならびにワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある、大腸菌キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子（ｇｐｔ）を含有する、ｐＣＢプラスミドを構築した。ＢＨＫ２１細胞に、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌを、０．５の感染多重度（ＭＯＩ）で、１時間にわたり感染させ、次いで、上記で記載したプラスミドＤＮＡをトランスフェクトした。感染細胞は、４８時間後に回収した。組換えウイルスは、ＭＰＡ、キサンチン、およびヒポキサンチンを含む、ｇｐｔ選択培地中の、さらなる培養を介して選択し、プラーク精製した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌが、Ｃ７Ｌ遺伝子、およびＴＫ遺伝子の一部を欠くが、ｈＦｌｔ３ＬおよびｍＯＸ４０Ｌの両方の挿入を伴うことを検証した。両側において、ＴＫ遺伝子に挟まれた、ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にあるｇｐｔ遺伝子を含有する、ｐＣＢプラスミドにより、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）もまた構築した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）が、Ｃ７Ｌ遺伝子、およびＴＫ遺伝子の一部を欠くが、ｈＦｌｔ３Ｌの挿入を伴うことを検証した。
【０３２４】
両側腫瘍植込みモデル、および免疫チェックポイント遮断剤の存在下または非存在下における、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射：略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの、左脇腹および右脇腹（右脇腹への５×１０5個、および左脇腹への１×１０5個）の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、右脇腹の大型腫瘍に、２×１０7ｐｆｕの、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを腫瘍内注射した。マウスはまた、抗ＣＴＬＡ−４（注射１回当たりマウス１匹当たり１００μｇ）、または抗ＰＤ−Ｌ１（注射１回当たりマウス１匹当たり２５０μｇ）を含む、免疫チェックポイント遮断抗体の腹腔内送達でも、毎週２回処置した。腫瘍サイズを測定し、腫瘍に、毎週２回、繰り返し注射した。マウスの生存をモニタリングした。腫瘍体積は、以下の式：ｌ（長さ）×ｗ（幅）×ｈ（高さ）／２に従い計算した。苦痛の徴候のために、または腫瘍の直径が、１０ｍｍに到達したらマウスを安楽死させた。
【０３２５】
片側皮内腫瘍植込み、および大型の確立された腫瘍の処置のための、免疫チェックポイント遮断剤の存在下または非存在下における、ウイルス組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射：Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの、右脇腹（細胞５×１０5個）における剃毛皮膚の皮内へと植え込んだ。植込みの９日後、腫瘍が直径５ｍｍとなったら、麻酔下にあるマウスの腫瘍に、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ（５×１０7ｐｆｕ）またはＰＢＳを、注射する。ウイルスは、毎週２回注射した。マウスはまた、抗ＣＴＬＡ−４（注射１回当たりマウス１匹当たり１００μｇ）、抗ＰＤ−１（注射１回当たりマウス１匹当たり２５０μｇ）、または抗ＰＤ−Ｌ１（注射１回当たりマウス１匹当たり２５０μｇ）を含む、免疫チェックポイント遮断抗体の腹腔内送達でも、毎週２回処置した。腫瘍体積は、以下の式：ｌ（長さ）×ｗ（幅）×ｈ（高さ）／２に従い計算した。マウスの生存をモニタリングした。苦痛の徴候のために、または腫瘍の直径が、１０ｍｍに到達したらマウスを安楽死させた。
【０３２６】
ニワトリ初代胚線維芽細胞（ＣＥＦ）の調製：ＳＰＦ卵（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ、型番：１０１００３２６）に由来する９〜１１日齢のニワトリ胚を使用した。胚は、１０ｃｃのシリンジを通して、５０ｍＬの滅菌ＥＰ管へとすり潰すことにより、切り刻んだ。２．５％のトリプシン／ＥＤＴＡによる、３７℃で、５分間にわたる消化の後、７０μＭのナイロン製ストレーナーを通して、細胞懸濁液を濾過した。細胞懸濁液を、ペレット化させ、完全ＭＥＭ培地中に再懸濁させ、次いで、細胞層がコンフルエントとなるまで、Ｔ−７５フラスコ内で培養した。
初代ニワトリ胚線維芽細胞（ＣＥＦ）内の、多段階の増殖：ＣＥＦ細胞５×１０5個を、６ウェルプレート内に播種し、一晩にわたり培養した。細胞に、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、０．０５のＭＯＩで、１時間にわたり感染させた。接種物を除去し、細胞を、ＰＢＳで、１回洗浄し、未使用の培地と共にインキュベートした。細胞は、感染の１、２４、４８、および７２時間後に回収した。３サイクルにわたる凍結および融解の後、試料を超音波処理し、系列希釈およびＢＨＫ２１細胞の感染により、ウイルス力価を決定した。共焦点顕微鏡を使用して、カウンティングのために、ＧＦＰ+細胞巣を視覚化した。
【０３２７】
ヒト単球由来樹状細胞の作出：ヒト検体の、全ての回収および使用は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ａｎｄ  Ｐｒｉｖａｃｙ  Ｂｏａｒｄ  ｏｆ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ、ＭＳＫＣＣにより審査および承認されたプロトコールに準拠した。バフィーコートは、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｎｔｅｒにおいて、健常ドナーから得、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓｗｅｄｅｎ）上の、標準的な遠心分離により分離した。プラスチック接着性の組織培養ＰＢＭＣは、ｍｏＤＣ前駆体を含んだが、これらを、完全ＲＰＭＩ  １６４０：ＧＭ−ＣＳＦ（１０００ＩＵ／ｍｌ）およびＩＬ−４（５００ＩＵ／ｍｌ）を補充した、１％のヒト血清中で培養した。未使用培地およびサイトカインを、４８時間ごとに再補充した。未成熟（６日目）ｍｏＤＣに、熱不活化ＭＶＡ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、１のＭＯＩで感染させるか、または１０μｇ／ｍｌのポリイノシン酸−ポリシチジル酸で処置した。細胞は、処置の２４時間後に回収し、ＰＥコンジュゲート抗ｈＯＸ４０Ｌ抗体で染色してから、ＦＡＣＳ解析にかけた。
【０３２８】
二重ルシフェラーゼレポーターアッセイ：ルシフェラーゼ活性は、製造元の指示書（Ｐｒｏｍｅｇａ）に従い、二重ルシフェラーゼレポーターアッセイシステムを使用して測定した。略述すると、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、ホタルルシフェラーゼレポーター構築物、レニラ属ルシフェラーゼレポーター構築物のほか、他の発現構築物を含む発現プラスミドをトランスフェクトした。マウスｃＧＡＳ（５０ｎｇ）およびｈＳＴＩＮＧ（１０ｎｇ）は、阻害剤を同定する目的で、最適未満の投与量で使用した。トランスフェクトされる、ウイルス遺伝子を含有するプラスミドは、２００ｎｇで使用した。ＩＦＮＢ−ホタルルシフェラーゼレポーター、および対照プラスミドである、ｐＲＬ−ＴＫは、それぞれ、５０ｎｇおよび１０ｎｇで使用した。トランスフェクションの２４時間後に、細胞を回収し、溶解させた。２０μｌの細胞溶解物を、５０μｌのＬＡＲＩＩと共にインキュベートして、ホタルルシフェラーゼ活性を測定し、次いで、５０μｌのＳｔｏｐ  ＆  Ｇｌｏ  Ｒｅａｇｅｎｔと共にインキュベートして、レニラ属ルシフェラーゼ活性を測定した。相対ルシフェラーゼ活性は、ＩＦＮＢプロモーターまたはＩＳＲＥプロモーター下にある、ホタルルシフェラーゼ活性を、対照プラスミドである、ｐＲＬ−ＴＫからの、レニラ属ルシフェラーゼ活性に照らして、正規化することにより、任意単位として表した。誘導倍数は、ある特定の被験条件下における相対ルシフェラーゼ活性を、バックグラウンド条件下における相対ルシフェラーゼ活性で除することにより計算した。
【０３２９】
ワクシニアＥ５、Ｋ７、Ｂ１４、Ｂ１８を発現させるレトロウイルスの作出：ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、６ウェルプレートへと継代した。翌日、細胞に、１０μｌのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００により、３つのプラスミド：ＶＳＶＧ（１μｇ）；ｇａｇ／ｐｏｌ（２μｇ））；およびＰＱＣＸＩＰ−Ｅ５、Ｋ７、Ｂ１４、Ｂ１８（２μｇ）をトランスフェクトした。２日後、細胞上清を回収し、０．４５μｍのフィルターを通して濾過し、−８０℃で保管した。
ＦＬＡＧでタグ付けされた、ワクシニアのＥ５、Ｋ７、Ｂ１４、またはＢ１８を、安定的に発現させる、ＲＡＷ２６４．７細胞系の作出：ＲＡＷ２６４．７細胞を、６ウェルプレートへと継代した。翌日、細胞に、Ｅ５、Ｋ７、Ｂ１４、またはＢ１８を発現させるレトロウイルスを、５のＭＯＩで感染させた。２日後、培養培地を、５μｇ／ｍｌのピューロマイシンを含有する、未使用のＤＭＥＭ培地で置きかえた。１週間後、生存細胞は、ＦＬＡＧでタグ付けされた、Ｅ５、Ｋ７、Ｂ１４、またはＢ１８を安定的に発現させる細胞である。ＦＬＡＧでタグ付けされた、Ｅ５、Ｋ７、Ｂ１４、またはＢ１８の発現は、抗ＦＬＡＧ抗体を使用するウェスタンブロット解析により検証した。
【０３３０】
ＲＮＡの単離および定量的リアルタイムＰＣＲ：ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉキット（Ｑｉａｇｅｎ）により、ＲＮＡを、全細胞溶解物から抽出し、Ｆｉｒｓｔ  Ｓｔｒａｎｄ  ｃＤＮＡ合成キット（Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ）により逆転写した。定量的リアルタイムＰＣＲは、遺伝子特異的プライマーを使用する、ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲＭａｔｅｒ  Ｍｉｘ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）およびＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ７５００  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）により、三連で実施した。相対発現は、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）のレベルに照らして正規化した。
【０３３１】
試薬：試薬の市販品の供給源は、以下の通りであった：抗ｈＦｌｔ３Ｌ抗体は、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒから購入し、抗ｈＦｌｔ３Ｌに対する二次抗体（ＰＥコンジュゲートヤギ抗マウス）は、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ製であった。ＰＥコンジュゲートｍＯＸ４０Ｌ、およびＰＥコンジュゲート抗ｈＯＸ４０Ｌ抗体は、それぞれ、ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓおよびＲ  ＆  Ｄから購入した。抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ４５抗体、抗ＣＤ８抗体、および抗グランザイムＢ抗体は、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）から購入した。ＣＤ８αマイクロビーズは、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ、ＭＡ）製であった。ＥＬＩＳＰＯＴアッセイキットは、Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ、ＮＪ）から購入した。治療用抗ＣＴＬＡ４（クローン９Ｈ１０および９Ｄ９）、抗ＰＤ１（クローンＲＭＰ１−１４）、抗ＰＤ−Ｌ１（クローン１０Ｆ．９Ｇ２）は、ＢｉｏＸｃｅｌｌから購入し；フローサイトメトリーのために使用される抗体は、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（ＣＤ４５．２  Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７００、ＣＤ３  ＰＥ−Ｃｙ７、ＣＤ４  ＡＰＣ−ｅｆｌｕｏｒ７８０、ＣＤ８  ＰｅｒＣＰ−ｅｆｌｕｏｒ７１０）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（ＣＤ４Ｑドット６０５、グランザイムＢＰＥ−Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、グランザイムＢＡＰＣ）から購入した。
【０３３２】
統計：対応のない両側スチューデントｔ検定を、研究における、２つの群の比較のために使用した。生存データは、ログランク（マンテル−コックス）検定により解析した。有意であると見なされるｐ値を、図中に、以下：*：Ｐ＜０．０５；**：Ｐ＜０．０１；***：Ｐ＜０．００１；****：Ｐ＜０．０００１の通りに表示する。
【０３３３】
Ｂ２Ｍ、ＭＤＡ５、ＳＴＩＮＧのノックアウト細胞系の作出：Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ３０００試薬（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、８００ｎｇのＣａｓ９発現プラスミド（Ａｄｄｇｅｎｅを介して、Ｃｈｕｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た）、および８００ｎｇの、各ｇＲＮＡ発現プラスミドをトランスフェクトした。細胞を、トランスフェクション後、少なくとも２日間にわたり増殖させた。次いで、ＣＲＩＳＰＲ構築物の成功について調べた。ＳＴＩＮＧ  ＣＲＩＳＰＲおよびＭＤＡ５  ＣＲＩＳＰＲの場合、標的エクソンを、特異的プライマーにより、ゲノムから、ＰＣＲ増幅し、次いで、２単位のＴ７エンドヌクレアーゼ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ｂｉｏｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから得た）で、９０分間にわたり消化した。消化の後、アガロースゲル電気泳動を実施して、Ｔ７が、ＣＲＩＳＰＲの成功を指し示す、ＰＣＲ単位複製配列を切断したのかどうかを決定した。ｇＲＮＡ効能を確認した後、個々の細胞を、９６ウェルプレートへと播種し、クローン分離株へと拡大した。拡大の後、さらなるラウンドのＰＣＲ増幅およびＴ７消化を使用して、クローン分離株をスクリーニングした。後続のウェスタンブロット解析は、標的タンパク質（ＳＴＩＮＧまたはＭＤＡ５）の喪失を確認した。ベータ２マイクログロブリン（Ｂ２Ｍ）ＣＲＩＳＰＲの場合、ＦＡＣＳ解析を使用して、ＣＲＩＳＰＲの成功を検証してから、Ｂ２Ｍ欠損細胞を、９６ウェルプレートへと分取し、クローン分離株へと拡大した。
【０３３４】
乳房外ページェット病（ＥＭＰＤ）を伴う患者に由来する、ヒト腫瘍組織：ヒト腫瘍組織は、ＩＲＢにより承認された、Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｓｌｏａｎ  Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒにおける臨床試験プロトコール第０６−１０７号に登録された、乳房外ページェット病（ＥＭＰＤ）を伴う患者から得た。３〜４ｍｍのパンチ生検は、診療所における主治医が実施した。氷上のＲＰＭＩ培地中の腫瘍組織を、検査室へと移送した。検査室に到着したら、それらを、外科用メスで、小断片へと切り刻み、これに、ＭＶＡΔＥ５Ｒ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ｈＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させた。感染の４８時間後、組織を、コラゲナーゼＤにより、３７℃で、４５分間にわたり消化した。次いで、これらを濾過し、ＣＤ３、ＣＤ４、およびＣＤ８に対する表面抗体で染色した。この後、これらを透過処理し、グランザイムＢおよびＦｏｘｐ３に対する抗体で染色した。
【０３３５】
（実施例１）
マウスＯＸ４０Ｌを発現させる、ＴＫの欠失を伴う、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌの作出
本実施例は、マウスＯＸ４０Ｌを発現させる、ＴＫの欠失を含む組換えワクシニアＭＶＡΔＥ３Ｌウイルス（ｍＯＸ４０Ｌ）の作出について記載する。図１は、合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）を使用して、ｍＯＸ４０Ｌを発現させるようにデザインされた発現カセットの概略を示す。ＴＫ遺伝子座における、ｐＣＢプラスミドＤＮＡと、ウイルスゲノムＤＮＡとの相同組換えを介する、標準的な組換えウイルス技術を使用して、両側において、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子に挟まれた、ワクシニアＰｓＥ／Ｌの制御下にある、コドン最適化ｍＯＸ４０Ｌ遺伝子、ならびにワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある、大腸菌キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子（ｇｐｔ）を含有するプラスミドを構築した（図１）。ＢＨＫ２１細胞に、ＭＶＡΔＥ３Ｌを、０．０５の感染多重度（ＭＯＩ）で、１時間にわたり感染させ、次いで、上記で記載したプラスミドＤＮＡをトランスフェクトした。感染細胞は、４８時間後に回収した。組換えウイルスは、ＭＰＡ、キサンチン、およびヒポキサンチンを含む、ｇｐｔ選択培地中の、さらなる培養を介して選択し、プラーク精製した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌが、ＴＫ遺伝子の一部を欠くが、ｍＯＸ４０Ｌの挿入を伴うことを検証した（図２Ａ）。ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌウイルスを感染させた、Ｂ１６−Ｆ１０細胞上の、ｍＯＸ４０Ｌの発現は、抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体を使用する、ＦＡＣＳ解析により決定した（図２Ｂ）。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０細胞に、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させた。感染の２４時間後、細胞を、ＰＥコンジュゲート抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体で染色した。感染細胞の表面上の、ｍＯＸ４０Ｌの発現は、ＦＡＣＳ解析により査定した。図２Ｂは、感染細胞の大部分が、ｍＯＸ４０Ｌを発現させることを示す。
【０３３６】
（実施例２）
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射は、Ｂ１６−Ｆ１０両側腫瘍植込みモデルにおいて、遠隔腫瘍内の、腫瘍浸潤エフェクターＴ細胞の活性化の、ＭＶＡΔＥ３Ｌと比較した増大を結果としてもたらす
Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫内の、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３Ｌの腫瘍内注射が、ＣＤ８+Ｔ細胞およびＣＤ４+Ｔ細胞の活性化および増殖をもたらすのかどうかについて評価するために、両側腫瘍植込みモデルを使用した。Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの、右脇腹（細胞５×１０5個）および左脇腹（細胞２．５×１０5個）における剃毛皮膚の皮内へと植え込んだ。植込みの７日後、麻酔下にあるマウスの、右脇腹の大型腫瘍（直径約３ｍｍまたはこれを超える）に、毎週２回、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを注射した。２回目の注射の３日後に、腫瘍を採取し、細胞を、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ４５抗体、抗ＣＤ４抗体、および抗ＣＤ８抗体による、表面の標識付けのために加工し、また、細胞内グランザイムＢ染色のためにも加工した。注射なしの腫瘍内の、生存免疫細胞浸潤物を、ＦＡＣＳにより解析した。注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢを発現させるＣＤ８+Ｔ細胞の、ＰＢＳで処置されたマウスの腫瘍内の１８％、およびＭＶＡΔＥ３Ｌで処置されたマウスの腫瘍内の１７％から、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌで処置されたマウスの腫瘍内の５３％への劇的な増大が見られた（図３Ａ〜３Ｄ）。また、注射なしの腫瘍内の、グランザイムＢを発現させるＣＤ４+Ｔ細胞の、腫瘍内ウイルス処置の後における、ＰＢＳで処置されたマウスの腫瘍内の０．６％から、ＭＶＡΔＥ３Ｌで処置されたマウスの腫瘍内の４．３％から、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌで処置されたマウスの腫瘍内の２４％への有意の増大も見られた（図３Ｅ〜３Ｈ）。これらの結果は、組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、注射なしの腫瘍内の、細胞傷害性ＣＤ８+Ｔ細胞および／または細胞傷害性ＣＤ４+Ｔ細胞の誘導において、その親ウイルスであるＭＶＡΔＥ３Ｌより強力であることを裏付ける。
【０３３７】
（実施例３）
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射は、全身性抗腫瘍ＣＤ８+Ｔ細胞免疫の発生をもたらす
ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３Ｌの腫瘍内注射による処置の後で、マウスが、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫のがんに対する、全身性抗腫瘍Ｔ細胞免疫を獲得したのかどうかについて評価するために、ＥＬＩＳｐｏｔ（Ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ＩｍｍｕｎｏＳｐｏｔ）を使用した。Ｂ１６−Ｆ１０細胞（それぞれ、５×１０5および２．５×１０5個）を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの右脇腹および左脇腹の剃毛皮膚の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの７日後、右脇腹の腫瘍（直径約３ｍｍ）に、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを注射した。３日後に、注射を繰り返すのに続き、２回目の注射の３日後に、安楽死させた。ＥＬＩＳｐｏｔを実施して、組換えウイルスで処置されたマウスの脾臓内の、抗腫瘍特異的ＣＤ８+Ｔ細胞の発生について評価した。略述すると、ＣＤ８+Ｔ細胞を、脾臓細胞から単離し、細胞３×１０5個を、抗ＩＦＮ−γコーティングＢＤ  ＥＬＩＳｐｏｔ  ｐｌａｔｅ  ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ内、３７℃で、照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞１．５×１０5個と共に、一晩にわたり培養した。ＣＤ８+Ｔ細胞を、γ照射器で照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞で刺激し、ＩＦＮ−γの分泌を、抗ＩＦＮ−γ抗体で検出した。図４Ａは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌで処置された、個々のマウスに由来するＣＤ８+Ｔ細胞３００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポットについての代表的画像を示す。図４Ｂは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＥ３Ｌ、またはＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌで処置された、各群内の、個々のマウスに由来するＣＤ８+Ｔ細胞３００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポットの数を示す。これらの結果は、ＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射が、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫両側植込みモデルの、処置マウスにおける、抗腫瘍ＣＤ８+Ｔ細胞の発生で、ＭＶＡΔＥ３Ｌより効果的であることを裏付ける。したがって、これらの結果は、本技術の組換えＭＶＡΔＥ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌが、対象における免疫応答の増強または促進、および対象内部の、細胞傷害性ＣＤ８+Ｔ細胞の増大において効果的であることを裏付ける。
【０３３８】
（実施例４）
マウスＯＸ４０Ｌを発現させる、ＴＫの欠失を伴う、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌの作出
本実施例は、マウスＯＸ４０Ｌ（ｍＯＸ４０Ｌ）を発現させる、ＴＫの欠失を含む組換えワクシニアＭＶＡΔＣ７Ｌウイルスの作出について記載する。図５Ａは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌを作出する、第１のステップを示す。合成の、ワクシニアウイルス早期／後期プロモーター（ＰｓＥ／Ｌ）と、選択マーカーとして使用される、ワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にあるＧＦＰとを使用して、ｈＦｌｔ３Ｌを発現させるようにデザインされた発現カセットを含む、ｐＵＣ５７ベクターを構築して、ＭＶＡの目的の特異的遺伝子（ＳＧ）である、Ｃ７Ｌ遺伝子座へと挿入した。発現カセットを、Ｃ７Ｌ遺伝子の左側および右側における、Ｃ８ＬおよびＣ６Ｒの部分配列で挟んだ（図５Ａ）。ＢＨＫ２１細胞に、ＭＶＡを、０．５の感染多重度（ＭＯＩ）で、１時間にわたり感染させ、次いで、上記で記載したプラスミドＤＮＡをトランスフェクトした。感染細胞は、４８時間後に回収した。組換えウイルスは、ＧＦＰ+細胞巣の、希釈系列選択により選択した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌが、Ｃ７Ｌ遺伝子を欠くが、ｈＦｌｔ３Ｌの挿入を伴うことを検証した（データは示さない）。図５Ｂは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを作出する、第２のステップを示す。両側において、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子に挟まれた、ワクシニアＰｓＥ／Ｌの制御下にある、コドン最適化ｍＯＸ４０Ｌ遺伝子、ならびにワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある、大腸菌キサンチン−グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子（ｇｐｔ）を含有するプラスミドを構築した。ＢＨＫ２１細胞に、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌを、０．５の感染多重度（ＭＯＩ）で、１時間にわたり感染させ、次いで、上記で記載したプラスミドＤＮＡをトランスフェクトした。感染細胞は、４８時間後に回収した。組換えウイルスは、ＭＰＡ、キサンチン、およびヒポキサンチンを含む、ｇｐｔ選択培地中の、さらなる培養を介して選択し、プラーク精製した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌが、Ｃ７Ｌ遺伝子、およびＴＫ遺伝子の一部を欠くが、ｈＦｌｔ３ＬおよびｍＯＸ４０Ｌの両方の挿入を伴うことを検証した。これに対して、親ＭＶＡゲノムは、予測される通り、Ｃ７Ｌ遺伝子およびＴＫ遺伝子を含有する（図５Ｃ）。ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌウイルスを感染させた、マウスＢ１６−Ｆ１０細胞上およびヒトＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞上の、ｍＯＸ４０Ｌの発現は、抗ｈＦｌｔ３Ｌ抗体（図６）および抗ｍＯＸ４０Ｌ抗体（図７）を使用する、ＦＡＣＳ解析により決定した。マウスＢ１６−Ｆ１０細胞およびＳＫ−ＭＥＬ２８細胞のいずれの大部分も、ｍＯＸ４０Ｌを、高度に発現させた（図７）。
【０３３９】
（実施例５）
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内（ＩＴ）注射は、Ｂ１６−Ｆ１０両側腫瘍植込みモデルにおいて、活性化ＣＤ８+Ｔ細胞および活性化ＣＤ４+Ｔ細胞の、注射なしの遠隔腫瘍への動員をもたらす
ＩＴにおける、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌが、全身性抗腫瘍免疫の発生を結果としてもたらすのかどうかについて評価するために、両側Ｂ１６−Ｆ１０腫瘍植込みモデルを使用した。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの、右脇腹（細胞５×１０5個）および左脇腹（細胞２．５×１０5個）における剃毛皮膚の皮内へと植え込んだ。植込みの７日後、右脇腹の大型腫瘍に、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌを、２×１０7ｐｆｕのＭＯＩで、毎週２回注射するか、または等量の熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ（熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ）を注射した。２回目の注射の２日後、腫瘍を採取し、細胞を、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ４５抗体、抗ＣＤ４抗体、および抗ＣＤ８抗体による、表面の標識付けのために加工し、また、細胞内グランザイムＢ染色のためにも加工した。注射なしの腫瘍内の、生存免疫細胞浸潤物を、ＦＡＣＳにより解析した。ＩＴにおける、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌは、注射なしの腫瘍内の、他の処置群と比較して、最高数の腫瘍１グラム当たりの全ＣＤ８+Ｔ細胞、ならびに腫瘍１グラム当たりの全グランザイムＢ+ＣＤ８+Ｔ細胞を結果としてもたらした（図８Ａ〜８Ｃ）。注目すべきことに、ＩＴにおける、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌは、注射なしの腫瘍内の、他の処置群と比較して、最高数の腫瘍１グラム当たりの全ＣＤ４+Ｔ細胞、ならびに腫瘍１グラム当たりの全グランザイムＢ+ＣＤ４+Ｔ細胞を結果としてもたらした（図９Ａ〜９Ｃ）。これらの結果は、ＩＴにおける、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌが、注射なしの腫瘍の、細胞傷害性ＣＤ８+Ｔ細胞および細胞傷害性ＣＤ４+Ｔ細胞の誘導において、その親ウイルスである、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌより効果的であることを裏付ける。加えて、この、操作組換えＭＶＡは、抗腫瘍ＣＤ８+Ｔ細胞応答および抗腫瘍ＣＤ４＋Ｔ細胞応答の誘導において、不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌより強力である。
【０３４０】
（実施例６）
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射は、ＭＶＡΔＣ７Ｌと比較して、最強度の全身抗腫瘍性ＣＤ８+Ｔ細胞免疫をもたらす
ＥＬＩＳｐｏｔを実施して、実施例５で記載した通り、組換えウイルスで処置されたマウスの脾臓内の、抗腫瘍特異的ＣＤ８+Ｔ細胞の発生について評価した。略述すると、ＣＤ８+Ｔ細胞を、脾臓細胞から単離し、細胞３×１０5個を、抗ＩＦＮ−γコーティングＢＤ  ＥＬＩＳｐｏｔ  ｐｌａｔｅ  ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ内、３７℃で、照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞１．５×１０5個と共に、一晩にわたり培養した。ＣＤ８+Ｔ細胞を、γ照射器で照射されたＢ１６−Ｆ１０細胞で刺激し、ＩＦＮ−γの分泌を、抗ＩＦＮ−γ抗体で検出した。図１０Ａは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌで処置された、個々のマウスに由来するＣＤ８+Ｔ細胞３００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポットについての代表的画像を示す。図１０Ｂは、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、または熱不活化ＭＶＡΔＣ７Ｌで処置された、各群内の、個々のマウスに由来するＣＤ８+Ｔ細胞３００，０００個当たりのＩＦＮ−γ+スポットの数を示す。これらの結果は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射が、マウスＢ１６−Ｆ１０黒色腫両側植込みモデルの、処置マウスにおける、抗腫瘍ＣＤ８+Ｔ細胞の発生で、ＭＶＡΔＣ７Ｌより効果的であることを裏付ける。
【０３４１】
（実施例７）
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射は、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の両方の根絶、またはこれらの腫瘍の増殖の遅延、およびマウスの生存の延長において効果的である
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ送達が、抗腫瘍効果をもたらすのかどうかについて調べるために、両側マウスＢ１６−Ｆ１０腫瘍植込みモデルを使用した。略述すると、Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫細胞を、Ｃ５７Ｂ／６マウスの左脇腹および右脇腹（右脇腹へ５×１０5個、および左脇腹への１×１０5個）の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ（２×１０7ＰＦＵ）を、右脇腹の大型腫瘍へと、毎週２回、併用の、抗ＣＴＬＡ−４抗体（９Ｄ９クローン、マウス１匹当たり１００μｇ）、または抗ＰＤ−Ｌ１（マウス１匹当たり２５０μｇ）、またはアイソタイプ対照の腹腔内（ＩＰ）注射と共に送達した。腫瘍サイズは、毎週２回測定し、マウスの生存についてモニタリングした（図１１Ａ）。個々のマウスの、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の体積を、図１１Ｂおよび図１１Ｃに示す。０、７、および１１日目における、注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍の体積を、図１１Ｄおよび図１１Ｅに示す。ＰＢＳで処置されたマウスでは、腫瘍は、急速に増殖し、これは、早期の死を結果としてもたらし、生存中央値は、７日間であった（図１１Ｆおよび１１Ｇ）。ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌの腫瘍内注射は、腫瘍の増殖を遅延させ、生存を、ＰＢＳと比較して改善し、生存中央値は、１４日間へと延長された（図１１Ｆおよび１１Ｇ）。Ｂ１６−Ｆ１０黒色腫は、極めて侵襲性の腫瘍である。本発明者らは、腫瘍植込みの後、処置を開始する前に、９日間にわたり、意図的に待機した。
【０３４２】
（実施例８）
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射の、免疫チェックポイント遮断剤の全身送達との組合せは、相乗的な抗腫瘍応答を発生させる
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ送達と、抗ＣＴＬＡ−４または抗ＰＤ−Ｌ１の全身送達との組合せは、ウイルス単独のＩＴ送達と比較して、優れた抗腫瘍効能を及ぼした。注射ありの腫瘍および注射なしの腫瘍のいずれの平均腫瘍体積も、ウイルス単独のＩＴ送達、またはＰＢＳによるモック処置と比較した場合に、ＩＴ  ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ＋抗ＰＤ−Ｌ１群において小さく、ＩＴ  ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ＋抗ＣＴＬＡ−４群がこれに続いた（図１１Ｂ〜１１Ｅ）。マウスの生存中央値は、ＩＴ  ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ＋抗ＣＴＬＡ−４群では、２１日間へと延長され、ＩＴ  ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ＋抗ＰＤ−Ｌ１群では、２６．５日間へと延長された（図１１Ｆおよび１１Ｇ）。この結果は、両側マウス腫瘍モデルにおいて、ＩＴにおける、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌにより誘導される抗腫瘍効果が、免疫チェックポイント遮断の存在下で増強されうることを裏付ける。このＢ１６−Ｆ１０腫瘍モデルでは、免疫チェックポイント遮断抗体単独は、効果的ではなく、これは、本発明者らの検査室を含む、多くの検査室により示されている。
【０３４３】
（実施例９）
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ注射の、免疫チェックポイント遮断剤の全身送達との組合せは、大型の確立されたＢ１６−Ｆ１０黒色腫の退縮および根絶において、ウイルス単独のＩＴ送達より効果的である
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬのＩＴ送達と、抗ＣＴＬＡ−４、抗ＰＤ−１、または抗ＰＤ−Ｌ１の全身送達との組合せが、大型の確立されたＢ１６−Ｆ１０黒色腫に対して、ウイルス単独のＩＴ送達と比較して、優れた抗腫瘍効能を及ぼしたのかどうかについて調べるために、細胞５×１０5個を、Ｃ５７Ｂ／６マウスの右脇腹の皮内へと植え込んだ。腫瘍植込みの９日後、腫瘍が直径５ｍｍとなったら、マウスを、ＩＴにおける、ＰＢＳ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ単独、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、ＩＰにおける抗ＣＴＬＡ−４、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、ＩＰにおける抗ＰＤ−１、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌに加えた、ＩＰにおける抗ＰＤ−Ｌ１で、毎週２回処置した。腫瘍体積を測定し、マウスの生存をモニタリングした。ＩＴにおける、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ単独も、ある程度の抗腫瘍効果を及ぼすが、ＩＴにおけるウイルスの、抗ＰＤ−１との組合せが、最良の相乗効果を及ぼし、これに、ＩＴにおけるウイルスに加えた、抗ＰＤ−Ｌ１の組合せ、およびＩＴにおけるウイルスに加えた、抗ＣＴＬＡ−４の組合せが続いた。
【０３４４】
（実施例１０）
ヒトＯＸ４０Ｌを発現させる、ＴＫの欠失を伴う、組換えＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３の作出
本実施例は、ヒトＯＸ４０Ｌ（ｈＯＸ４０Ｌ）を発現させる、ＴＫの欠失を含む組換えワクシニアＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌウイルスの作出について記載する。図１３Ａは、実施例４に記載された、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌを作出する、第１のステップを示す。図１３Ｂは、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを作出するための、第２のステップを示す。両側において、チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子に挟まれた、ワクシニアＰｓＥ／Ｌの制御下にある、ヒトＯＸ４０Ｌ遺伝子、ならびにワクシニアＰ７．５プロモーターの制御下にある、ｍＣｈｅｒｒｙを含有するプラスミドを構築した。ＢＨＫ２１細胞に、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌを、０．５の感染多重度（ＭＯＩ）で、１時間にわたり感染させ、次いで、上記で記載したプラスミドＤＮＡをトランスフェクトした。感染細胞は、４８時間後に回収した。組換えウイルスは、ｍＣｈｅｒｒｙ細胞巣の採取を介して選択し、プラーク精製した。ＰＣＲ解析を実施して、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌが、Ｃ７Ｌ遺伝子、およびＴＫ遺伝子の一部を欠くが、ｈＦｌｔ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌの両方の挿入を伴うことを検証した（データは示さない）。インサートはまた、配列の精度を検証するように、シーケンシングにもかけた。
【０３４５】
（実施例１１）
組換えウイルスである、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬおよびＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌは、ニワトリ胚線維芽細胞内で、効率的に複製される
ＭＶＡは一般に、ニワトリ胚線維芽細胞（ＣＥＦ）内で製造される。組換えＭＶＡウイルスである、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０ＬおよびＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌが、ＣＥＦ内で複製されるのかどうかについて調べるために、多段階の複製アッセイを実施した。ＣＥＦ細胞５×１０5個を、６ウェルプレート内に播種し、一晩にわたり培養した。細胞に、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、０．０５のＭＯＩで、１時間にわたり感染させた。接種物を除去し、細胞を、ＰＢＳで、１回洗浄し、未使用の培地と共にインキュベートした。細胞は、感染の１、２４、４８、および７２時間後に回収した。ウイルス力価は、ＢＨＫ２１細胞上で決定した。図１４Ａは、ＣＥＦ内の、ＭＶＡ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｍＯＸ４０Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌの、感染後の時間経過にわたるウイルス力価を示す。全てのウイルスは、ＣＥＦ内で、効率的に複製され、力価は、１，０００を超えて、１０，０００倍へと増大した（図１４Ｂ）。組換えＭＶＡウイルスは、ウイルス力価を、親ＭＶＡと比較して、わずかに低減した（図１４Ａおよび１４Ｂ）。
【０３４６】
（実施例１２）
組換えウイルスである、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌは、感染細胞の表面上で、ｈＯＸ４０Ｌタンパク質を発現させる
ＦＡＣＳ解析を使用して、感染細胞の表面上の、ｈＯＸ４０Ｌの発現を決定した。略述すると、ＢＨＫ２１細胞に、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３ＬまたはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、１０のＭＯＩで感染させた。感染の２４時間後、細胞を、ＰＥコンジュゲート抗ｈＯＸ４０Ｌ抗体で染色した。感染細胞の表面上の、ｈＯＸ４０Ｌの発現は、ＦＡＣＳ解析により査定した。図１５Ａは、感染ＢＨＫ２１細胞内の、ＧＦＰおよびｈＯＸ４０Ｌの発現レベルを示す。
【０３４７】
ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌが、ヒト単球由来ＤＣ（ｍｏ−ＤＣ）に感染しうるのかどうかについて調べるために、接着性ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、ヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＩＬ−４の存在下で、５日間にわたり培養した。６日目に、細胞は、１０μｇ／ｍｌのポリイノシン酸−ポリシチジル酸で処置するか、または熱不活化ＭＶＡ、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）、もしくはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、１のＭＯＩで感染させた。感染の２４時間後、細胞を回収し、ＰＥコンジュゲート抗ｈＯＸ４０Ｌ抗体で染色してから、ＦＡＣＳ解析を行った。ベースラインでは、ヒトｍｏ−ＤＣは、マウスＢ１６−Ｆ１０細胞と比較して、ｈＯＸ４０Ｌを発現させる。ポリイノシン酸−ポリシチジル酸による処置は、細胞表面上の、ｈＯＸ４０Ｌの発現の、わずかな増大をもたらす。熱不活化ＭＶＡの感染は、ｈＯＸ４０Ｌの発現を低減する。ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３ＬおよびＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌの両方の、ｍｏ−ＤＣへの感染は、それぞれ、約５０％および７５％のＧＦＰ+細胞を結果としてもたらした。ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌの感染だけが、感染ありのｍｏ−ＤＣ上の、ｈＯＸ４０Ｌの発現の増大をもたらした（図１５Ｂ）。これらの結果は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌが、ヒトｍｏ−ＤＣに、効果的に感染し、感染細胞の表面上で、ｈＯＸ４０Ｌを発現させることを指し示す。これは、ＯＸ４０Ｌ−ＯＸ４０間相互作用を介して、Ｔ細胞と相互作用するほか、抗原特異的であり、かつ、活性化した、ＣＤ８+Ｔ細胞およびＣＤ４+Ｔ細胞の、生存および増殖を促進するためにも、潜在的に重要でありうる。
【０３４８】
（実施例１３）
組換えウイルスである、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌは、感染細胞内で、ｈＯＸ４０Ｌ  ｍＲＮＡを、高レベルで発現させる
定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を使用して、感染ありの、ＢＨＫ２１細胞内、およびＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞内の、ｈＯＸ４０Ｌ  ｍＲＮＡの発現レベルを評価した。略述すると、ＢＨＫ２１細胞およびＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞に、ＭＶＡ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ｈＦｌｔ３Ｌ、またはＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌを、８または１６時間にわたり感染させた。ＲＮＡを、細胞から抽出し、定量的ＲＴ−ＰＣＲ解析を実施して、ｈＯＸ４０Ｌ  ｍＲＮＡの発現について評価した。ワクシニアＥ３ＬのｍＲＮＡレベルについてもまた評価した。ＢＨＫ２１細胞およびＢ１６−Ｆ１０黒色腫細胞への感染は、感染の８および１６時間後において、Ｅ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌの両方の発現を結果としてもたらす。Ｅ３ＬおよびｈＯＸ４０Ｌの両方の、１６時間後におけるｍＲＮＡレベルは、感染の８時間後におけるｍＲＮＡレベルより高度であった（図１６Ａおよび１６Ｂ）。総じて、ｈＯＸ４０Ｌの発現は、ＭＶＡΔＣ７Ｌ−ＴＫ（−）−ｈＯＸ４０Ｌ感染ＢＨＫ２１細胞内で、Ｂ１６−Ｆ１０細胞内と比較して高度であり、これは、ＢＨＫ２１（許容性）細胞内およびＢ１６−Ｆ１０（非許容性）細胞内の、このウイルスの複製効率と符合する。
【０３４９】
（実施例１４）
ワクシニアウイルス早期遺伝子の、発現ベクターへのクローニング
ワクシニアウイルス早期遺伝子を、ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ細胞質ゾルＤＮＡセンシング経路を阻害する、それらの能力についてスクリーニングした。これを行うために、７２のワクシニアウイルス早期遺伝子を選択し、それらのオープンリーディングフレームをＰＣＲ増幅し、Ｇａｔｅｗａｙ  Ｃｌｏｎｉｎｇ技術を使用して、発現ベクター（ｐｃＤＮＡ３．２−ＤＥＳＴ）へとクローニングした（図１７）。
【０３５０】
（実施例１５）
ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ経路のウイルス性阻害剤を同定するためのスクリーニング戦略
二重ルシフェラーゼアッセイシステムを使用して、ＳＶ４０大型Ｔ抗原で形質転換されたヒト胎児腎臓細胞系である、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞内で、ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ経路に対する、ワクシニアウイルスによる、潜在的阻害剤についてスクリーニングした（図１８）。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、ＩＦＮＢ−ホタルルシフェラーゼレポーターを発現させるプラスミド、Ｒｅｎｉｌｌａ属ルシフェラーゼ、マウスｃＧＡＳ、ヒトＳＴＩＮＧ、および表示される、個々のワクシニアウイルス早期遺伝子を発現させる対照プラスミドである、ｐＲＬ−ＴＫをトランスフェクトした。マウスｃＧＡＳ（５０ｎｇ）およびｈＳＴＩＮＧ（１０ｎｇ）は、阻害剤を同定する目的で、最適未満の投与量で使用した。トランスフェクトされる、ウイルス遺伝子を含有するプラスミドは、２００ｎｇで使用した。ＩＦＮＢ−ホタルルシフェラーゼレポーター、および対照プラスミドである、ｐＲＬ−ＴＫは、それぞれ、５０ｎｇおよび１０ｎｇで使用した。二重ルシフェラーゼアッセイを、トランスフェクションの２４時間後に実施した。相対ルシフェラーゼ活性は、ホタルルシフェラーゼ活性を、レニラ属ルシフェラーゼ活性に照らして正規化することにより、任意単位として表した。アデノウイルスのＥ１Ａは、ＳＴＩＮＧとの相互作用を介して、この経路を阻害することが示されており（Lau et al., Science (2015)）、このスクリーニングアッセイのための、陽性対照として使用した。
【０３５１】
（実施例１６）
ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ経路を阻害する潜在的可能性を有する、８つのワクシニアウイルス早期遺伝子の同定
上記で記載した二重ルシフェラーゼアッセイシステムを使用して、ワクシニアウイルスによる、ｃＧＡＳ／ＳＴＩＮＧ経路の阻害剤についてスクリーニングした。合計８つのワクシニアウイルス早期遺伝子（Ｂ１８Ｒ（ＷＲ２００）、Ｅ５Ｒ、Ｋ７Ｒ、Ｂ１４Ｒ、Ｃ１１Ｒ胣궼볯겼胣꺼볯겼胣誁苣뎁볯늼볯馼볯覼苣膀臣꺁뗧꾷臣鲽鳥蒚飩뎮觥ꢁ臣ꚁ郥骮臣龁胣鎁苣覂臣꾃苣랂菣ꊂ苣ꒂ菣릂韦龜臩鶼귥꺁臣ꆁ臣閼臣袼볯醼볯늼볯랼볯銼볯邼볯膀볯閼볯膀볯鞼볯膀볯醼볯늼胣誁苣뎁볯醼볯늼볯ꮁ雩馁苣螃菣뾂苣膀鯥醼볯ꆼ胣醼볯ꎼ臣몤臣芀臣貂苣꾁胣ꦼ黥ꦼ볯꺼뗧袐胦뾂菣醃苣ꪳ苣뎂菣覃臣讂胣ꊼ볯颼볯袼볯늼볯邼볯覼苣ꮐ苣膀볯讞볯ꚼ볯뮳臣膀藥ꖟ臣뮘껥龩菨銂鳦馁苣膀룤ꢃ臣Ꚃ苣ꮃ苣몁볤邭볯䆈捬浡⁩瑥愠⹬‬ㄨ㤹⤵볯銂郥肂胣ꮼ볯늼胣ꊼ볯钼볯誁苣뎁볯醼볯늼臣膀菣꾂苣讃苣꺁꿦鮊鯥邭臣鞁臣風볨閁苣ꚁ臣讂臣膀볯閼볯膀볯鞼볯膀볯醼볯늼胣誁苣뎁볯醼볯늼臣膀볯讞볯ꚼ볯貵럨ꮁ臣醁苣립觥꾁胣ꪜ臣ꎧ飦閁苣ꚁ臣ꪁ臣袼敂普敩摬攠⁴污Ⱞ䨠‮敇⹮嘠物汯‮㈨㄰⤳‬桃湥攠⁴污Ⱞ⠠〲㠰㬩䴠䍣祯攠⁴污Ⱞ⠠〲〱㬩䴠牡楴⁮瑥愠⹬‬㈨㄰⤲볯芀볯閼볯꾁胣Ꚃ苣궃苣벃菣ꢁ雩ꎀ臣讂胣Ꚃ苣ꮃ苣ꦗ鳦뾂菣醃苣ꪳ臣芁苣鎁臣貁ꃥ誑臣貂臣蒁苣袼畍捲慩中捩汯獡攠⁴污Ⱞ⠠㤱㤹覼胣超雧麛臩ꮁ臣醁苣鶁臣립觥ꮁ臣蒁臣꾁胣놠釥閁苣ꚁ臣ꪁ臣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖袼껥붖뻤醼볯覼戼㹲ꊼ볯颼볯膀볯閼볯膀볯鞼볯膀볯醼볯늼胣뺁臣꾁볯醼볯늼臣躁觥몙迧貁胣ꢼ볯ꮼ볯馼볯銈볯내菨薆臣膀뷯Ꞽ볯뎼臣袂臣袽볯뒼볯꺼볯꺁藥袃菣뎃苣閃苣꾂苣ꞃ菣ꮁ苣誂ꫨ躰臣貂苣膀볯ꚼ볯ꊼ臩鶼귥꺁駧뺏苣许雦뾪꿧馁苣鎁臣꺁ꋧ趪戼㹲 ꊼ볯颼볯袼볯늼볯邼볯覼胣ꖼ볯늼胣ꮼ볯늼胣ꎼ볯醼볯膀臣袂臣ꊼ볯钼볯貁胣莽볯ꆼ볯込볯뒼볯꺼볯ꮁ苣誂ꫨ躰臣貂苣ꦼ볯꺼볯몁볤邭臣몙迧ꮁ臣蒁臣膀飩뎮胦꺁뷥늉苣鲞臣馁臣ꢁ苣몢ꫨ馁苣龁苣ꮁ胣ꢼ볯ꮼ볯馼볯뒼듧麃臣膀볯ꚼ볯ꊼ裢鮃苣ꮃ菣랂菣Ꞃ菣벃苣것菣벃苣벃苣몙迧閁臣讂菣ꦃ苣龃菣膀菣讃菣麱菣랂菣Ꞃ菣벃苣膀菣Ꚃ苣莽볯ꆼ볯袼鯥銼볯ꆼ볯膀臣龁臣銃菣莽볯ꆼ볯袼鯥銼볯ꊼ볯膀菣袃볯뒼볯꺼볯膀ꇨ몤臣貂苣膀胥薀臣꾃苣랂菣ꊂ苣ꒂ菣릂韦龜臩鶼귥꺁臣讁胣붙胦뺯藧ꢁ臣ꚁ臣ꖼ볯ꆼ苣몙迧閁臣讂꿥ꞅ菣ꦃ苣龃菣ꞁ臣讂胣邽볯겼裢뒼볯銂藥袃菣뎃苣閃苣꾂菣鞁臣芀볯醼볯늼볯랼볯銼볯邼볯몁볤邭胣ꖼ볯늼臩鶼귥膀볯鞼볯몁볤邭胣ꎼ볯醼볯몁볤邭胣뺁臣꾁볯醼볯늼臩鶼귥꺁臩낉駧뺏臣膀菣Ꚃ苣莽볯ꆼ볯込菣袃볯뒼볯꺼볯ꮁ苣誂ꫨ躰臣貂苣膀볯ꚼ볯ꊼ臩鶼귥꺁駧뺏臣躽룦銂뗧鲞臣鞁臣节臣覂臣龁볯뎛볯邼볯覼胣ꖼ볯늼臩鶼귥膀볯鞼볯몁볤邭胣ꎼ볯醼볯몁볤邭胣뺁臣꾁볯醼볯늼臩鶼귥꺁臩낉駧뺏臣膀菣袃뷯Ꞽ볯뎼볯銃菣뎼볯ꦼ볯Ꞽ臣袂苣颪냥閁苣讂胣ꦼ볯꺼볯몁볤邭臣몙迧꺁뷤鮸苣邵黦ꢁ臣ꚁ苣龁苣鞁臣芀臣讁臣膀볯醼볯늼볯랼볯銼볯邼볯꺁臩낉駧뺏臣膀菣袃뷯Ꞽ볯뎼볯銃菣뎼볯ꦼ볯Ꞽ臣袂苣颪냥閁苣讂胣ꦼ볯꺼볯몁볤邭臣몙迧銂飩뎮臣趁臣讁臣龁볯뎛볯邼볯覼胣뎛볯邼볯꾁胣ꚼ볯ꆼ볯ꞁ苣낂믤醁臣貂臣Ꚃ苣ꮃ苣몁볤邭臣芁苣膀볯醼볯늼볯랼볯銼볯邼볯膀볯閼볯膀볯鞼볯膀볯醼볯늼胣뺁臣꾁볯醼볯늼臣膀菣Ꚃ苣莽볯ꆼ볯込菣袃볯뒼볯꺼볯ꮁ苣誂ꫨ躰臣貂苣膀볯ꚼ볯ꊼ臩鶼귥꺁駧뺏苣뮘껥馁苣鎁臣貁迥붃臣芁臣龁臣ꢁ苣몤臣芀㰊䥄㹖胣邼볯閼볯醀⼼䥄㹖袼껥붖뻤醼볯覼戼㹲ꚼ볯ꆼ볯ꞁ苣낂믤醁臣貂臣ꖼ볯늼臩鶼귥膀볯醼볯늼臩鶼귥膀볯鞼볯몁볤邭胣誁苣뎁볯醼볯늼臩鶼귥꺁胣覮껥蒚菣Ꚃ苣麃苣궃菣ꆂ菣뢂듧麃돧薆臣躁觥몙迧꾁胣놆룤뮴賥궼볯ꆼ臣龄鿦膀臣龁臣超雧몈뿦Ꞁ볯꺼볯꺁菣ꦃ菣릂菣Ꞃ苣랂菣뎃臣袂苣颪냥閁苣讂胣ꦼ볯꺼볯몁볤邭臣몙迧銂飩뎮臣讂戼㹲 ꖼ볯늼裢ꚼ볯ꆼ볯몁볤邭胣ꊼ볯钼볯銈볯겼볯Ꞽ臩鶼귥膀볯겼볯Ꞽ裢ꮼ볯늼臩鶼귥膀臣龁臣ꊼ볯颼볯銈볯겼볯Ꞽ臩鶼귥銂臩낉駧뺏臣鮁苣覮껥蒚듧麃돧ꞁ臣讂胣늼볯랼볯隼볯躼볯銂뷤몇臣龁胣ꖕ뿨馁苣ꢁ胣ꎼ볯뚼菣궃菣벃苣벃룤ꮁ臣讂胣꾃苣랂菣ꊂ볯閼볯銈볯겼볯Ꞽ臩鶼귥膀볯醼볯늼裢ꚼ볯ꆼ볯몁볤邭胣ꚼ볯ꆼ볯銈볯鞼볯몁볤邭胣뺁臣꾁볯醼볯늼裢ꚼ볯ꆼ볯몁볤邭臣몙迧讧꿧ꦉ臣膀菣ꖃ菣궃菣ꒂ苣뎃臩麊菣벃苣벃臣銂郥覜臣讂菣袃菣Ꚃ苣ꮃ苣銂胣늼볯랼볯隼볯躼볯뢁臣ꊽ돨躰藥鞁臣芀꿥ꞅ듧麃돧銂뷤몇臣讂臣ꮁ胣겖觧뢁諦麃菣ꮂ菣銂볤蚁ꧧ馃苣뾂菣节臣龁뷤ꢔ臣龁胣겖觧邀胦내菨銂뻥膀믤许臣龮꣩꺁臣膂臣뾽铧鞁臣芀듧麃臣膀蛧趸듦隌볯뚼볯銂蓦鎟臣鮁苣讁胣뺁臣꾁藥ꮖ裥肿胦꒼볯ꆼ볯ꦼ볯꒼볯袼볯邼볎뷯込뷯貽볯銂菣ꦃ菣릂菣Ꞃ苣袃臣龁胣ꚇ뷧꺁볯銼駦鎖뻥膀듧麃苣麛迥鞁臣芀볯꺼볯銂駧龔臣鮁胣骮蟩蒚볯뒼裢낼볯늼苣龮雦鞁臣膀볯ꚼ볯ꊼ臩鶼귥꺁駧뺏苣뮟껥鞁臣芀꿥ꞅ듧麃돧薆臣膀蛧趸듦隌볯뚼볯꺁蓦鎟臣龁臣ꦼ볯꒼臣袂苣ꚇ뷧꾁胣鶁苣麁苣膀볯ꚼ볯ꊼ臩鶼귥꺁胣颼胣鎼볯趀臣颪냥銂뗧鲞臣鞁臣节臣覂臣龁胣ꦼ볯꺼볯꺁ꫨ躰臣膀볯閼胣ꊼ볯钼胣ꮼ볯膀臣龁臣ꊼ볯颼苣躁觥몙迧閁臣讂듧麃蛥ꞁ胣閡釨ꮁ뷤鮸臣貂臣袼鯥銼볯覼胣鎁苣覂臣邵黦꾁胣꾃苣랂菣ꊂ臣膀볯閼볯膀볯醼볯늼胣ꮼ볯늼胣誁苣뎁볯醼볯늼臣膀듧麃돨뺂菣꒼볯ꆼ苣뎃苣뎃苣貵럨銂飩뎮臣膀볯ꚼ볯ꊼ臩鶼귥꺁ꫨ躰苣뮘귦馁苣鎁臣銂賦鞁ꓧ馁胣ં䐼噉邀볯鎼볯钼胣㲑䐯噉ਾ볯龮雦设볯馼볯㲉牢ਾ뗧鮏臣궼볯ꆼ铎볯閼볯Ꚃ苣ꮃ苣膀볯뚼볯캡ꮼ볯늼苣ꒂ菣릂胣뺁臣꾁볯뚼볯캡ꊼ볯钼볯Ꚃ苣ꮃ苣꺁뷤몇戼㹲 ꖼ볯늼胣ꮼ볯늼胣誁苣뎁볯醼볯늼臣膀藥ꮖ菣뢂菣것菣랂菣뎃臣誁臣讂뷥늉苣膀臣覂臣몢ꯧ馁苣龁苣ꮁ胣궼볯ꆼ铎볯閼볯Ꚃ苣ꮃ苣膀볯뚼볯캡ꮼ볯늼苣ꒂ菣릂胣誁苣뎁볯뺁臣꾁볯뚼볯캡ꊼ볯钼볯Ꚃ苣ꮃ苣꺁뷤몇苣몢ꯧ馁苣芀뷯ꖼ볯늼볯ꚼ볯馃苣뾂菣膀뷯ꮼ볯늼볯ꚼ볯馃苣뾂菣膀臣龁臣邽볯醼볯늼볯ꚼ볯馃苣뾂菣銂꟦覯臣ꚁ胣꺛髧꺁觧낕髧몁볤邭볯뎼볯覼苣膀볯뚼볯꺁胣ꖼ볯늼臩鶼귥Ꞻ胣ꮼ볯늼臩鶼귥Ꞻ胣뺁臣꾁볯醼볯늼臩鶼귥Ꞻ臣ꢁ賦ꖅ臣讂胣鎁臣뒠郥膀菣꾂苣讃苣낼볯躼볯鞃菣ꊃ菣뾂菣꺁裥ꆾ룤ꮁ臣讂볯ꚼ볯銂胣뢁諦麃菣ꮂ菣ꢁ臣ꚁ뷤ꢔ臣讂胣ꊼ볯ꮼ볯醼듧麃臣膀볯膽뷯몼苣몙迧閁臣讂볯뚼볯Ꚃ苣ꮃ苣銂胣邼볯邼볯꺁볯꾼볯ꞁ胣醼駦鎖臣辂臣誂蓦鎟臣鮁胣ꆬ臣ꞁ胣誸꣨ꞁ꣨覼臣龁菣ꦃ苣龃菣꒼볯ꆼ苣袃菣뎃苣閃苣꾂菣馁苣芀蓦鎟듧麃臣膀볯颼駦鎖뻥ꮁ鯥躏臣讂胣蒵迦袁苣ꒂ菣릂臣膀볯閼볯몁볤邭뫥膀볯鞼볯몁볤邭뫥膀臣龁臣ꊼ볯钼볯몁볤邭뫥뢁臣Ꞽ볯낼臣뾌藥銂볤蚁胣鶁苣覂臣醷觨趛藥ꮁ苣誂郥骮臣讂胣붙胦꾂菣벃菣꾁胣钼胣閼鯥ꮁ苣龁苣鞃菣벃苣뺲ꏨ馁苣芀곦蒁臣膀볯ꎼ볯ꎧ黦銂껥붖臣ꚁ胣蒵迦袁苣ꒂ菣릂臣芁苣膀볯뚼볯캡ꖼ볯늼胣궼볯ꆼ铎볯鞼볯膀臣龁臣궼볯ꆼ铎볯醼볯늼臣膀臣貂臣貂胣ꖼ볯늼胣ꮼ볯늼胣뺁臣꾁볯醼볯늼苣ꪖꓥ鞁臣鎁臣銂ꋧ趪臣讂胣ં䐼噉邀볯鎼볯閼胣㲑䐯噉ਾ볯龮雦设볯邼볯㲉牢ਾ볯뚼볯캡ꖼ볯늼胣궼볯ꆼ铎볯鞼볯膀臣龁臣궼볯ꆼ铎볯醼볯늼臣膀뷯꒼볯뢁臣龄鿦꾁胣궼볯ꆼ苣誂ꯩ것菣ꮃ臣膀볯讞볯ꚼ볯몁볤邭臣몙迧銂ꫨ躰臣讂戼㹲 궼볯ꆼ臣膀胩뢸꣦뚊듧麃볯莽볯ꎼ볯뢁臣龄鿦꾁胣莽볯ꆼ볯込볯뒼볯꺼볯込볯늼볯鎼뻤颭胦龩꟦銂믤鞁臣膀볯讞볯ꚼ볯銂ꫨ躰臣讂臣ꢁ臣몤臣貂臣蒁苣芀볯閼볯膀볯鞼볯膀臣龁臣ꊼ볯钼볯貁胣내菨ꪳ苣ꮃ볯꺼볯뮂菣랂菣낂뗧꾷臣颪냥ꮁ臣蒁臣膀飩뎮胦꺁뷥늉苣鲞臣馁臣讁臣蚁臣ꮁ臣蒁臣뾪臣讂臣膂臣膀ꫩ蒫铧ꖝ볯ꎼ볯ꊼ볯꒼볯覼臣膀볯뚼볯캡ꖼ볯늼胣궼볯ꆼ铎볯鞼볯膀臣袂臣込臣龁臣궼볯ꆼ铎볯醼볯늼臣뺯臣讂蟨뚄藥ꮖ뿥钭苣膀볯뚼볯ꮁ꿥馁苣ꪇ蓧超雧鲿귧ꢁ꿥钯臣ꚁ꟨邞臣讂胣ꊼ볯꒼볯ꮁ胣궼볯ꆼ铎볯閼볯膀볯뚼볯캡ꮼ볯늼胣궼볯ꆼ铎볯醼볯늼胣뺁臣꾁볯뚼볯銂胣醼볯꺁볯꾼볯ꞁ蓦鎟臣鮁苣芀듧麃臣膀蓦鎟臣鎼駦鎖뻥誁苣뎁볯芙雩貾臣麛迥馁苣芀볯讞볯ꚼ볯몁볤邭臣몙迧것菣ꮃ臣膀껥辇髧낼볯늼꟨邞臣袂苣몱껥馁苣芀볯뚼볯캡ꖼ볯늼胣궼볯ꆼ铎볯鞼볯膀臣龁臣궼볯ꆼ铎볯醼볯늼臣龄鿦꾁胣龄鿦꺁볯芙雩貾臣袂臣隼駦鎖뻥ꮁ臣醁苣膀뷯꒼볯薆臣膀볯뚼볯袂苣膀釨躘臣颫菣馃菣꺁胣ꦼ黥ꦼ볯꺼臩鶼귥꺁駧뺏苣颪냥馁苣鎁臣貁뫤龜臣貂苣芀볯뚼볯캡ꖼ볯늼胣궼볯ꆼ铎볯鞼볯膀臣龁臣궼볯ꆼ铎볯醼볯늼臣膀菣袃藥ꮖ듧麃蛥꺁胣颫菣馃菣꺁볯讞볯ꚼ볯몁볤邭臣뮴胦隌苣颪냥馁苣꺁臣ꦁ臣讁臣ꒁ臣ꚁꫨ릁苣龁苣ꮁ胣莺臣뾽铧閁苣讂胣蚈賥뒼볯낼裢醼듧麃苣ꦈ铧馁苣芀볯ꢼ볯銈볯내菨ꮁ胣궼볯ꆼ铎볯閼볯膀볯뚼볯캡ꮼ볯늼胣궼볯ꆼ铎볯醼볯늼胣뺁臣꾁볯뚼볯銂胣醼볯꺁볯꾼볯ꞁ蓦鎟臣鮁胣ꆬ臣ꞁ胣龄鿦꺁볯芙雩貾臣袂臣隼駦鎖뻥ꮁ鯥躏臣讂胣궼볯ꆼ铎볯閼볯膀볯뚼볯캡ꮼ볯늼胣뺁臣꾁볯뚼볯캡ꊼ볯钼볯꺁蓦鎟臣膀볯ꢼ볯銈볯내菨薆臣膀볯뚼볯袂苣颫菣馃菣꺁胣ꦼ黥ꦼ볯꺼臩鶼귥꺁駧뺏苣颪냥馁苣鎁臣貁뫤龜臣貂苣芀臣貂苣꺁뗧鲞臣膀볯閼볯膀볯鞼볯膀臣袂臣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