【手続補正書】
【提出日】平成22年9月27日(2010.9.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸番号217で切断されたヒトDLL4のN末端断片(SEQ ID NO: 25)に特異的に結合する、モノクローナル抗体。
【請求項２】
ヒトDLL4 DSLドメイン(SEQ ID NO: 26)内のアミノ酸を含むエピトープに結合する、請求項1記載のモノクローナル抗体。
【請求項３】
アミノ酸番号66〜73 (QAVVSPGP)を含むエピトープに結合する、請求項1または2記載のモノクローナル抗体。
【請求項４】
アミノ酸番号139〜146 (LISKIAIQ)を含むエピトープに結合する、請求項1〜3のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項５】
アミノ酸番号66〜73 (QAVVSPGP)および139〜146 (LISKIAIQ)を含むエピトープに結合する、請求項1〜4のいずれか一項記載のモノクローナル抗体。
【請求項６】
(i) CDRアミノ酸配列CDR1 (SEQ ID NO: 1)、CDR2 (SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、またはSEQ ID NO: 4)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 5)を含む、重鎖可変領域; ならびに
(ii) CDRアミノ酸配列CDR1 (SEQ ID NO: 9)、CDR2 (SEQ ID NO: 10)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 11)を含む、軽鎖可変領域
を含む、ヒトDLL4に特異的に結合する抗体。
【請求項７】
重鎖可変領域が、CDRアミノ酸配列CDR1 (SEQ ID NO: 1)、CDR2 (SEQ ID NO: 3)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 5)を含み、かつ軽鎖可変領域が、CDRアミノ酸配列CDR1 (SEQ ID NO: 9)、CDR2 (SEQ ID NO: 10)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 11)を含む、請求項6記載の抗体。
【請求項８】
SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、およびSEQ ID NO: 8からなる群より選択されるアミノ酸を含む重鎖可変領域を含む、ヒトDLL4に特異的に結合する抗体。
【請求項９】
重鎖可変領域がSEQ ID NO: 7のアミノ酸を含む、請求項8記載の抗体。
【請求項１０】
SEQ ID NO: 12のアミノ酸を含む軽鎖可変領域を含む、請求項1〜8のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１１】
(a) SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、またはSEQ ID NO: 8に対し少なくとも90%の配列同一性を有する重鎖可変領域；および
(b) SEQ ID NO: 12に対し少なくとも90%の配列同一性を有する軽鎖可変領域
を含む、ヒトDLL4に特異的に結合する抗体。
【請求項１２】
SEQ ID NO: 7を含む重鎖可変領域およびSEQ ID NO: 12を含む軽鎖可変領域を含む、ヒトDLL4に特異的に結合する抗体。
【請求項１３】
ATCC寄託番号PTA-8427またはPTA-8425で寄託したプラスミドによりコードされる抗体と同じ重鎖ポリペプチド配列および軽鎖ポリペプチド配列を含む、抗体。
【請求項１４】
ATCC寄託番号PTA-8670で寄託したプラスミドによりコードされる21M18抗体中に包含される重鎖可変領域CDRアミノ酸配列および軽鎖可変領域CDRアミノ酸配列を包含する、モノクローナル抗体。
【請求項１５】
ATCC寄託番号PTA-8427またはPTA-8425で寄託したプラスミドによりコードされる抗体と、ヒトDLL4への特異的結合について競合する、ヒト化抗体。
【請求項１６】
ヒト化抗体である、請求項1〜15のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１７】
ヒト抗体である、請求項1〜15のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１８】
二重特異性抗体である、請求項1〜17のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１９】
IgG1抗体である、請求項1〜18のいずれか一項記載の抗体。
【請求項２０】
IgG2抗体である、請求項1〜18のいずれか一項記載の抗体。
【請求項２１】
ヒトDLL1またはヒトDLL3と交差反応しない、請求項1〜20のいずれか一項記載の抗体。
【請求項２２】
マウスDLL4と交差反応しない、請求項1〜21のいずれか一項記載の抗体。
【請求項２３】
約0.1μMまたはそれ未満のKDを有する、請求項1〜22のいずれか一項記載の抗体。
【請求項２４】
請求項1〜22のいずれか一項記載の抗体および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項２５】
癌を処置するための医薬の製造における、請求項1〜22のいずれか一項記載の抗体の使用。
【請求項２６】
抗体が固形腫瘍における癌幹細胞頻度を低下させる、請求項24記載の抗体の使用。
【請求項２７】
癌が結腸癌である、請求項25記載の抗体の使用。
【請求項２８】
請求項1〜23のいずれか一項記載の抗体を発現する、細胞。
【請求項２９】
ATCC寄託番号PTA-8670で寄託した、ハイブリドーマ。
【請求項３０】
請求項1〜23のいずれか一項記載の抗体またはその可変領域をコードするポリヌクレオチドに対し少なくとも90%同一であるポリヌクレオチドを含む、ポリヌクレオチド。
【請求項３１】
請求項1〜23のいずれか一項記載の抗体またはその可変領域をコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項３２】
SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、またはSEQ ID NO: 15に対し少なくとも90%同一であるポリヌクレオチドを含む、ポリヌクレオチド。
【請求項３３】
SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15、またはSEQ ID NO: 16を含む、ポリヌクレオチド。
【請求項３４】
請求項30〜33のいずれか一項記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
概要
ヒトDLL4 N末端領域(SEQ ID NO: 27)およびヒトDSLドメイン(SEQ ID NO: 26)の組み合わせによって形成されるヒトデルタ様リガンド4 (DLL4)エピトープに特異的に結合する抗体が提供され、該抗体は腫瘍増殖に影響を与える。同様に、本開示の抗体および薬学的に許容される媒体を含む薬学的組成物を提供する。さらに、本開示のDLL4抗体の治療上有効量を投与する段階を含む、癌を処置する方法を提供する。
[請求項101]
ヒトDLL4 N末端領域(SEQ ID NO: 27)内のアミノ酸を含むヒトDLL4エピトープに特異的に結合する単離抗体であって、癌幹細胞を含む腫瘍の増殖に影響を与える抗体。
[請求項102]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域(SEQ ID NO: 27)およびヒトDLL4 DSL (SEQ ID NO: 26)の組み合わせによって形成される、請求項101記載の単離抗体。
[請求項103]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 DSL (SEQ ID NO: 26)内のアミノ酸をさらに含む、請求項101記載の単離抗体。
[請求項104]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域のアミノ酸番号66〜73 (QAVVSPGP)を含む、請求項102記載の単離抗体。
[請求項105]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域のアミノ酸V68、V69、およびP71を含む、請求項104記載の単離抗体。
[請求項106]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域のアミノ酸番号139〜146 (LISKIAIQ)を含む、請求項102記載の単離抗体。
[請求項107]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域のアミノ酸K142およびA144を含む、請求項106記載の単離抗体。
[請求項108]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域のアミノ酸番号66〜73 (QAVVSPGP)および139〜146 (LISKIAIQ)を含む、請求項102記載の単離抗体。
[請求項109]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域のアミノ酸V68、V69、P71、K142、およびK144を含む、請求項108記載の単離抗体。
[請求項110]
影響が腫瘍体積の低減である、前記請求項のいずれか一項記載の単離抗体。
[請求項111]
モノクローナル抗体である、請求項101〜109のいずれか一項記載の抗体。
[請求項112]
キメラ抗体である、請求項101〜109のいずれか一項記載の抗体。
[請求項113]
ヒト化抗体である、請求項101〜109のいずれか一項記載の抗体。
[請求項114]
ヒト抗体である、請求項101〜109のいずれか一項記載の抗体。
[請求項115]
IgG抗体である、請求項113記載のヒト化抗体。
[請求項116]
IgGがIgG2である、請求項115記載のヒト化抗体。
[請求項117]
抗体断片である、請求項113記載のヒト化抗体。
[請求項118]
抗体断片がFab断片である、請求項117記載のヒト化抗体。
[請求項119]
(i) CDRアミノ酸配列CDR1 (SEQ ID NO: 1)、CDR2 (SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、またはSEQ ID NO: 4)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 5)を含む、重鎖可変領域; ならびに
(ii) CDRアミノ酸配列CDR1 (SEQ ID NO: 9)、CDR2 (SEQ ID NO: 10)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 11)を含む、軽鎖可変領域
を含む、請求項101〜109のいずれか一項記載の単離抗体。
[請求項120]
2007年9月28日付でATCCに寄託されかつATCC寄託番号__を持つハイブリドーマにより産生される、請求項119記載の単離抗体。
[請求項121]
2007年9月28日付でATCCに寄託されかつATCC寄託番号__を持つハイブリドーマにより産生される抗体と、ヒトDLL4への特異的結合について競合する抗体。
[請求項122]
ヒトDLL4 N末端領域(SEQ ID NO: 27)内のアミノ酸を含むヒトDLL4エピトープに特異的に結合するヒト化抗体であって、(i) 非ヒト抗原決定領域とヒト重鎖可変フレームワーク領域とを含む重鎖可変領域ならびに(ii) 非ヒト抗原決定領域とヒト軽鎖可変フレームワーク領域とを含む軽鎖可変領域を含む、抗体。
[請求項123]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 N末端領域(SEQ ID NO: 27)およびヒトDLL4 DSL (SEQ ID NO: 26)の組み合わせによって形成される、請求項122記載のヒト化抗体。
[請求項124]
ヒトDLL4エピトープがヒトDLL4 DSL (SEQ ID NO: 26)内のアミノ酸をさらに含む、請求項122記載のヒト化抗体。
[請求項125]
ヒト重鎖可変フレームワーク領域中の少なくとも1つの残基が置換されている、請求項123記載のヒト化抗体。
[請求項126]
少なくとも1つの置換が、非ヒト抗原決定領域を含む抗体中の対応する位置を占める残基の置換である、請求項125記載のヒト化抗体。
[請求項127]
ヒト重鎖可変フレームワーク領域中の5つまたは6つの残基が置換されている、請求項125記載のヒト化抗体。
[請求項128]
Kabat番号付与システムに基づき、ヒト可変フレームワーク領域中の少なくとも1つの置換が、16H、20H、27H、28H、38H、および48Hからなる群より選択される位置にある、請求項125記載のヒト化抗体。
[請求項129]
Kabat番号付与システムに基づき、ヒト可変フレームワーク領域中の少なくとも1つの置換が、20H、28H、38H、48H、および69Hからなる群より選択される位置にある、請求項125記載のヒト化抗体。
[請求項130]
Kabat番号付与システムに基づき、位置16H、20H、27H、28H、38H、および48Hが置換されている、請求項127記載のヒト化抗体。
[請求項131]
Kabat番号付与システムに基づき、位置20H、28H、38H、48H、および69Hが置換されている、請求項127記載のヒト化抗体。
[請求項132]
重鎖非ヒト抗原決定領域が、CDRアミノ酸配列CDR1 (SEQ ID NO: 1)、CDR2 (SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、またはSEQ ID NO: 4)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 5)を含む、請求項122〜131のいずれか一項記載のヒト化抗体。
[請求項133]
ヒト軽鎖可変フレームワーク領域中の少なくとも1つの残基が置換されている、請求項122〜131のいずれか一項記載のヒト化抗体。
[請求項134]
少なくとも1つの置換が、非ヒト抗原決定領域を含む抗体中の対応する位置を占める残基の置換である、請求項133記載のヒト化抗体。
[請求項135]
ヒト軽鎖可変フレームワーク領域中の2つの残基が置換されている、請求項133記載のヒト化抗体。
[請求項136]
Kabat番号付与システムに基づき、ヒト可変フレームワーク領域中の少なくとも1つの残基が、22Lおよび36Lからなる群より選択される位置にある、請求項133記載のヒト化抗体。
[請求項137]
Kabat番号付与システムに基づき、位置22Lおよび36Lが置換されている、請求項135記載のヒト化抗体。
[請求項138]
軽鎖非ヒト抗原決定領域がCDR1 (SEQ ID NO: 9)、CDR2 (SEQ ID NO: 10)、およびCDR3 (SEQ ID NO: 11)を含む、請求項133〜137のいずれか一項記載のヒト化抗体。
[請求項139]
重鎖可変領域がSEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、またはSEQ ID NO: 8を含む、請求項122記載のヒト化抗体。
[請求項140]
軽鎖可変領域がSEQ ID NO: 12を含む、請求項122記載のヒト化抗体。
[請求項141]
重鎖可変領域がSEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 7、またはSEQ ID NO: 8を含み、かつ軽鎖可変領域がSEQ ID NO: 12を含む、請求項122記載のヒト化抗体。
[請求項142]
ヒトDLL4 N末端領域(SEQ ID NO: 27)内のアミノ酸を含むヒトDLL4エピトープに特異的に結合する単離抗体であって、Notch受容体とDLL4との結合を阻害する抗体。
[請求項143]
ATCCに寄託したプラスミド(ATCC寄託番号PTA-8427またはPTA-8425)によりコードされる抗体と、ヒトDLL4への特異的結合について競合する、抗体。
[請求項144]
ATCC番号PTA-8427またはPTA-8425で寄託されたプラスミドによりコードされるヒト化抗体。
[請求項145]
(i) 前記請求項のいずれか一項記載の抗体; および
(ii) 薬学的に許容される担体
を含む、薬学的組成物。
[請求項146]
請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体をコードする、単離ポリヌクレオチドベクター。
[請求項147]
請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体をコードする1つまたは複数のポリヌクレオチドベクターを含む、宿主細胞。
[請求項148]
癌の処置で用いるための、請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体。
[請求項149]
癌を処置するための医薬の製造における、請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体の使用。
[請求項150]
第2の治療剤と組み合わせた治療上有効量の抗体を患者に投与する段階を含む、請求項149記載の使用。
[請求項151]
抗体および第2の治療剤が同時にまたは連続的に投与される、請求項150記載の使用。
[請求項152]
第2の治療剤が化学療法剤である、請求項150記載の使用。
[請求項153]
化学療法剤がフルオロウラシルまたはイリノテカンである、請求項152記載の使用。
[請求項154]
第2の治療剤が第2の治療抗体である、請求項150記載の使用。
[請求項155]
第2の治療抗体が抗EGF受容体抗体または抗VEGF抗体である、請求項154記載の使用。
[請求項156]
第2の治療剤が放射線療法である、請求項150記載の使用。
[請求項157]
患者試料を請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体と接触させる段階、および患者試料におけるDLL4発現の局在性に基づき癌を診断する段階を含む、癌を診断する方法。
[請求項158]
(i) 抗体をコードする一つまたは複数のポリヌクレオチド発現ベクターで宿主細胞を形質転換する段階;
(ii) 抗体の発現を可能にする条件の下で宿主細胞を培養する段階; および
(iii) 抗体を培養培地から精製する段階
を含む、請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体を製造する方法。
[請求項159]
請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体を発現する、形質転換細胞株。
[請求項160]
2007年9月28日付でATCCに寄託されかつATCC寄託番号__を持つ抗体21M18を分泌するハイブリドーマ。
[請求項161]
21M18 H9L2 (ATCC寄託番号PTA-8427)または21M18 H7L2 (ATCC寄託番号PTA-8425)をコードする、プラスミド。
[請求項162]
ATCC番号PTA-8427またはPTA-8425で寄託されたプラスミドをトランスフェクトした細胞を培養することにより、抗体21M18 H9L2または抗体21M18 H7L2を作製する方法。
[請求項163]
容器およびその中に含有されている組成物を含むキットであって、組成物が、請求項101〜144のいずれか一項記載の抗体を含み、かつ、該組成物を用いて癌を処置できることを示す添付文書をさらに含む、キット。