【事件の表示】
　特願２０１５−５０５８７３号「植物をプロバイオティクスで処理するための方法」拒絶査定不服審判事件〔平成２５年１０月１７日国際公開、ＷＯ２０１３／１５５１７７、平成２７年４月３０日国内公表、特表２０１５−５１２６５６号、請求項の数（２１）〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　原査定を取り消す。
　本願の発明は、特許すべきものとする。
【理　由】
第１　経緯の概略
　本願は、２０１３年４月１０日（パリ条約による優先権主張外国庁受理：２０１２年４月１１日、米国）を国際出願日とする出願であって、平成２６年１２月１１日に手続補正書が提出され、平成２８年１０月２６日付けで拒絶の理由が通知され、平成２９年４月２８日に意見書及び手続補正書が提出されたが、平成２９年９月２５日付けで拒絶査定がなされた。
　これに対し、平成３０年２月２日に拒絶査定不服審判が請求されると同時に手続補正書が提出されたところ、平成３０年４月６日に前置報告がされ、平成３０年８月１４日に上申書が提出され、当審にて平成３０年１０月９日付けで拒絶の理由が通知され、平成３１年１月１６日に意見書及び手続補正書が提出されたものである。
第２　本願発明
　本願の請求項１〜２１に係る発明（以下、請求項の番号に従って「本願発明１」などという。）は、平成３１年１月１６日の手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１〜２１に記載された事項により特定される、以下のとおりの発明である。
　「【請求項１】
　タバコ材料中のアミノ酸およびタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する方法であって、タバコ植物成分を２つ以上のプロバイオティクスと接触させることを含み、
　前記タバコ植物成分が、タバコ種子、タバコ実生苗、未熟な生きた植物、成熟した生きた植物、収穫された植物、またはそれらの一部分からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ビフィドバクテリウム属、ラクトバシラス属、エンテロコッカス属、プロイオノバクテリウム属（ｐｒｏｉｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス属、サッカロミセス属、ストレプトコッカス属のプロバイオティクス種、およびそれらの混合物からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ラクトバシラス属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスを含む、方法。
　　【請求項２】
　前記タバコ植物成分が、収穫されていない植物である、請求項１に記載の方法。
　　【請求項３】
　前記２つ以上のプロバイオティクスが、ビフィドバクテリウムアドレセンティス、ビフィドバクテリウムアニマリス、ビフィドバクテリウムビフィダム、ビフィドバクテリウムブレヴェ、ビフィドバクテリウムインファンティス、ビフィドバクテリウムラクティス、ビフィドバクテリウムロンガム、ビフィドバクテリウムシュードカテヌラータム、ビフィドバクテリウムシュードロンガム、ビフィドバクテリウム種、ビフィドバクテリウムサーモフィラム、ラクトバシラスアシドフィラス、ラクトバシラスアリメンタリウス、ラクトバシラスアミロボラス、ラクトバシラスブルガリクス、ラクトバシラスビフィダス、ラクトバシラスブレビス、ラクトバシラスカゼイ、ラクトバシラスカウカシクス、ラクトバシラスクリスパータス、ラクトバシラスカルバータス、ラクトバシラスデルブルッキー、ラクトバシラスファーメンタム、ラクトバシラスガリナラム、ラクトバシラスガセリ、ラクトバシラスヘルベティカス、ラクトバシラスジョンソニー、ラクトバシラスラクティス、ラクトバシラスライヒマニ、ラクトバシラスパラカゼイ、ラクトバシラスプランタルム、ラクトバシラスロイテリ、ラクトバシラスラムノサス、ラクトバシラスサリバリウス、ラクトバシラス種、ラクトバシラススポロゲネス、ラクトバシラスラクティス、ストレプトコッカスセルモリス、ストレプトコッカスフェシウム、ストレプトコッカスインファンティス、ストレプトコッカスサーモフィラス、エンテロコッカスフェシウム、ペディオコッカスアシディラクティシ、スタフィロコッカスサーモフィラス、スタフィロコッカスカルノサス、スタフィロコッカスキシロサス、サッカロミセスブラウディ、サッカロミセスセレビシエ、サッカロミセスブラウディ、バシラスセレウスバールトヨ、バシラスサブティリス、バシラスコアギュランス、バシラスリケニフォルミス、およびそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
　　【請求項４】
　前記２つ以上のプロバイオティクスが、前記ビフィドバクテリウム属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスと、前記ラクトバシラス属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスと、を含む、請求項１に記載の方法。
　　【請求項５】
　前記２つ以上のプロバイオティクスが、前記ビフィドバクテリウム属から選択される２つ以上のプロバイオティクス、または前記ラクトバシラス属から選択される２つ以上のプロバイオティクス、を含む、請求項１に記載の方法。
　　【請求項６】
　前記接触させるステップが、水中の溶液、懸濁液、または分散液中で前記２つ以上のプロバイオティクスを適用することを含む、請求項１に記載の方法。
　　【請求項７】
　前記接触させるステップが、前記２つ以上のプロバイオティクス１ｍＬ当たり１×１０５個のコロニー形成単位〜１×１０１０個のコロニー形成単位を含む溶液中で前記２つ以上のプロバイオティクスを適用することを含む、請求項１に記載の方法。
　　【請求項８】
　前記接触させるステップが、１つ以上の界面活性剤を前記タバコに適用することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
　　【請求項９】
　前記接触させるステップ後の前記タバコ材料のアスパラギン含有量が、少なくとも５０重量％低減される、請求項１に記載の方法。
　　【請求項１０】
　前記タバコ植物成分が、鉄管乾燥タバコ、バーレータバコ、オリエンタルタバコ、またはそれらの混合物を含む、請求項１に記載の方法。
　　【請求項１１】
　前記タバコ材料を無煙タバコ製品または喫煙物品に組み込むことをさらに含む、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
　　【請求項１２】
　前記タバコ材料が、カットフィラーの形態である、請求項１１に記載の方法。
　　【請求項１３】
　前記タバコ材料が、タバコブレンドの形態である、請求項１１に記載の方法。
　　【請求項１４】
　前記喫煙物品が、喫煙時の、未処理の対照喫煙物品に対して低減された主流煙のアクリルアミド含有量を特徴とする、請求項１１に記載の方法。
　　【請求項１５】
　主流煙中のアクリルアミドの低減量が、未処理の対照喫煙物品と比較して少なくとも２０重量％である、請求項１４に記載の方法。
　　【請求項１６】
　主流煙中のアクリルアミドの低減量が、未処理の対照喫煙物品と比較して少なくとも４０重量％である、請求項１４に記載の方法。
　　【請求項１７】
　請求項１１に記載の方法に従って調製されたシガレットまたは無煙タバコ製品の形態のタバコ製品。
　　【請求項１８】
　包装材料によって取り囲まれた喫煙可能な材料のロッドと、前記ロッドにその一端で取り付けられたフィルターと、を含むシガレットの形態の喫煙物品の形態のタバコ製品であって、前記喫煙可能な材料が、アスパラギンの含有量を低減させるように２つ以上のプロバイオティクスで前処理されたタバコ植物成分を含むタバコ材料を含み、前記タバコ植物成分が、タバコ種子、タバコ実生苗、未熟な生きた植物、成熟した生きた植物、収穫された植物、またはそれらの一部分からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ビフィドバクテリウム属、ラクトバシラス属、エンテロコッカス属、プロイオノバクテリウム属（ｐｒｏｉｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス属、サッカロミセス属、ストレプトコッカス属のプロバイオティクス種、およびそれらの混合物からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ラクトバシラス属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスを含む、タバコ製品。
　　【請求項１９】
　前記喫煙物品が、喫煙時の、未処理の対照喫煙物品に対して低減された主流煙のアクリルアミド含有量を特徴とする、請求項１８に記載のタバコ製品。
　　【請求項２０】
　主流煙中のアクリルアミドの低減量が、未処理の対照喫煙物品と比較して少なくとも２０重量％である、請求項１９に記載のタバコ製品。
　　【請求項２１】
　主流煙中のアクリルアミドの低減量が、未処理の対照喫煙物品と比較して少なくとも４０重量％である、請求項１９に記載のタバコ製品。」
第３　原査定の概要
　原査定（平成２９年９月２５日付け拒絶査定）の概要は次のとおりである。すなわち、本願発明１〜２１は、以下の引用文献１〜４に記載された発明に基いて、その発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者（以下「当業者」という。）が容易に発明をすることができたものであるから、特許法２９条２項の規定により特許を受けることができない。
　（引用文献）
　１　特開２００５−２７５４５号公報
　２　特開２００６−１８０７１５号公報
　３　特開２００５−１９２４３６号公報
　４　特表２０１１−５２２５５８号公報
第４　当審にて通知した拒絶の理由の概要
　当審にて通知した拒絶の理由の概要は次のとおりである。すなわち、本件出願は、特許請求の範囲の記載が以下の点で不備のため、特許法３６条６項１号、３６条６項２号に規定する要件を満たしていない。
　１　請求項１に記載された「タバコ材料中のアミノ酸およびタバコ特異的ニトロソアミン含有量を修正する方法」とはどのような趣旨を意味するのか不明であるから、本願発明１〜１７は明確でない。 
　２　発明の詳細な説明に具体的に開示された特定のプロバイオティクスによる結果を、本願発明１〜２１の範囲にまで拡張ないし一般化できるものとは認められないから、本願発明１〜２１は、発明の詳細な説明に記載したものであるとは認められない。
第５　原査定についての判断
　１　引用文献、引用発明等
　　（１）　引用文献１
　　　ア　引用文献１には、以下の事項が記載されている。
　・「【請求項１】
脱窒能を有する微生物を葉タバコに処理することを特徴とする葉タバコ中の亜硝酸および／またはニトロソアミン含量を低減する方法。
【請求項２】
亜硝酸が葉タバコ中に蓄積される以前に脱窒能を有する微生物を葉タバコに処理することを特徴とする葉タバコ中の亜硝酸および／またはニトロソアミン含量を低減する方法。
【請求項３】
前記脱窒能を有する微生物がアグロバクテリウム属微生物である請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記脱窒能を有する微生物がアグロバクテリウム・ラジオバクターＬＧ７７（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８３８６）である請求項３に記載の方法。」
　・「【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、葉タバコの乾燥および／または貯蔵中に、葉タバコ中で亜硝酸とアルカロイドなどが反応して生成するタバコ特異的ニトロソアミン（Ｔａｂａｃｃｏ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｎｉｔｒｏｓａｍｉｎｅ；以下「ＴＳＮＡ」と記す）含量を低減する方法に関する。より詳しくは、葉たばこ中の硝酸あるいは亜硝酸を脱窒化することで亜硝酸の蓄積を減少させＴＳＮＡの生成を阻害する方法である。」
　・「【００１３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、収穫直後の黄変期では、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）およびキサントモナス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ）属の微生物など、非腸内微生物（すなわち、好気性微生物）が優勢種であるが、続く褐変期になると、硝酸還元能を有する腸内微生物（すなわち、通性嫌気性微生物）、特にエンテロバクター属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）やパントエア（Ｐａｎｔｏｅａ）属の微生物が優勢種となることを見出した。
【００１４】
通気性嫌気性微生物は、好気性微生物に比較して、高い硝酸還元能を有する。実際に、褐変期に葉面上から分離されたエンテロバクターおよびパントエア属の微生物を葉タバコに添加処理してみると、葉タバコ中に亜硝酸態窒素が蓄積されていた。
【００１５】
葉タバコ中に蓄積された亜硝酸はアルカロイドと反応してＴＳＮＡを生成する。しかしながら、生成された亜硝酸が更なる還元を受けたとすれば、Ｎ２ＯやＮ２などのガス態として放出されるので、葉面での亜硝酸の蓄積はなくなり、それによってＴＳＮＡの生成は抑制されるだろうと予想される。
【００１６】
葉タバコ葉面での亜硝酸還元の手段の１つは、微生物により達成されることが期待される。微生物による硝酸還元の形態は、同化型と異化型に分けられる。同化型還元は、亜硝酸塩を経てアミノ酸を合成し、合成されたアミノ酸は細胞形態の維持や増殖のために利用される。異化型還元には、硝酸呼吸と脱窒があり、微生物の活動のためのエネルギーを得るためのものである。硝酸呼吸は、硝酸塩を亜硝酸塩に還元はするが、それから先の還元までには至らない。これに対して、脱窒は、硝酸塩をＮＯ３‐→ＮＯ２‐→ＮＯ→Ｎ２Ｏ→Ｎ２の反応により還元し、最終的にガス態の窒素として体外に放出することになる。
【００１７】
そこで、本発明者らは亜硝酸を還元する能力を有することが知られているシュードモナス属微生物により葉タバコ中のＴＳＮＡ生成阻害効果を試みた。しかし、シュードモナス属微生物は、葉タバコの乾燥過程において葉タバコの表面上では優勢種になりえないことから、期待した亜硝酸還元効果が得られず、その結果、ＴＳＮＡ低減も十分に達成されなことが判明した。
【００１８】
本発明の目的は、乾燥および貯蔵中に葉タバコ中に蓄積される亜硝酸を還元することにより、葉タバコ中でのＴＳＮＡ生成を阻害し、結果としてＴＳＮＡ含量を低減することである。さらに、葉タバコの香喫味品質に悪影響を与えることなく、また現在行われている乾燥および貯蔵形態を変更せずに葉タバコ中のＴＳＮＡを低減する方法を提供することである。」
　・「【００１９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、葉タバコの乾燥過程において、葉タバコ表面での生存率が高く、かつ脱窒能を有する微生物であってタバコの香喫味に悪影響を与えない微生物を調査した結果、アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）に属する微生物が該当することを見出し本発明を完成した。
すなわち、本発明は、アグロバクテリウムに属し、脱窒能を有する微生物を葉タバコに処理することを特徴とする葉タバコ中の亜硝酸含量および／またはＴＳＮＡを低減する方法を提供する。」
　・「【００２１】
なお、本発明者らにより分離された微生物は、菌学的性質から、アグロバクテリウム・ラジオバクター（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）に属する微生物であると同定され、ＬＧ７７として特許生物寄託センターに寄託されている（ＦＥＲＭ　ＢＰ−８３８６）。
また、ＬＧ７７は、上述のように葉タバコの表層から分離された株であり、葉タバコの品質に悪影響を及ぼさない菌株である。」
　・「【００２７】
本発明の方法に従って、微生物を処理するための時期は、対象となる葉タバコの乾燥前後の何れの期間であってもよいが、少なくとも亜硝酸が葉タバコ中に蓄積される以前、すなわち黄色種にあっては黄変期以前、バーレー種にあっては褐変期前に処理することが望ましい。例えば、収穫直前にほ場で処理し、その後に収穫して乾燥に供してもよい。微生物の処理は、前記期間に１回以上処理してもよい。なお、２回目以降の処理を乾燥後から貯蔵期間に行う場合は、貯蔵開始時に処理することが好ましい。」
　・「【００３８】
［実施例２］脱窒微生物の同定
実施例１で選抜した脱窒能を有する微生物ＬＧ７７菌株の菌学的性質を表１に示す。
・・・
【００４０】
表１に示す結果から、ＬＧ７７菌株は、アグロバクテリウム・ラジオバクターに属すると同定された。
なお、上記の同定は財団法人日本食品分析センターに依頼して行った。
また、ＬＧ７７菌株は、アグロバクテリウム・ラジオバクター  ＬＧ７７として特許生物寄託センターに寄託されている（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８３８６）。」
　・「【００４１】
［実施例３］乾燥期間中の処理による葉タバコ中のＴＳＮＡ生成抑制効果
実施例２に記載した１／１０ＴＳ培地にＬＧ７７菌株を接種し、３０℃で７２時間培養した。培養後、この菌体を含む培地を５、０００ｒｐｍで遠心して菌体を集めた。
得られた菌体を滅菌蒸留水で２回洗浄した後、再度滅菌蒸留水に懸濁した。懸濁液の菌体濃度を１０８〜１０１０ｃｆｕ／ｍＬに蒸留水で調整した。
【００４２】
前述の微生物懸濁液を、収穫して乾燥に供するバーレー種（きたかみ１号）の葉タバコに対して処理した。
処理時期は、収穫直後、収穫３日および８日後の３回で、葉タバコ１枚当たり１０ｍＬとなるように、葉タバコの表裏に噴霧器を使用して処理した。無処理および微生物懸濁液処理と同時に当量の菌体を含有しない滅菌蒸留水を処理したものを対照とした。
・・・
【００４９】
ＴＳＮＡ含量は、３試験区の中で水のみを処理した区が最も高く、乾燥２１日、３２日目で各々３．４５、３．３６μｇ／ｇであった。脱窒菌を処理した葉タバコ中のＴＳＮＡ含量は、３試験区の中で最も低く、乾燥２１日、３２日目で各々２．２２、１．７１μｇ／ｇであり、無処理区の３．０１、２．３３μｇ／ｇと比較しても低かった。
以上の結果から、ＬＧ７７菌株は葉タバコ中のＴＳＮＡ生成を抑制することが示唆された。」
　・「【００５０】
［実施例４］乾燥期間中の処理のよる葉タバコ中の亜硝酸態窒素生成抑制効果実施例３で処理した葉タバコ中の亜硝酸態窒素含量を定量した。・・・
・・・
【００５４】
亜硝酸態窒素含量は、３試験区の中で水のみを処理した区が最も高く、乾燥２１日、３２日目で各々４．５４、５．１７μｇ／ｇであった。脱窒菌を処理した葉タバコ中の亜硝酸態窒素含量は、３試験区の中で最も低く、乾燥２１日、３２日目で、各々３．９３、２．０９μｇ／ｇであり、無処理区と比較しても低かった。
実施例３および実施例４の結果から、葉タバコ中のＴＳＮＡは、葉タバコ中の亜硝酸含量との関連があることが示唆された。すなわち、亜硝酸含量が多いほどＴＳＮＡの生成が多くなることが示唆された。」
　・「【００５５】
［実施例５］乾燥期間中の脱窒菌の定着性
本実験に用いたＬＧ８１菌株は、実施例１で分離したアグロバクテリウム・ラジオバクターに属する脱窒菌Ａであり、ＬＧ３０およびＣＢ３０１菌株は、脱窒能を有するシュードモナス属微生物である。これらの菌株は、葉タバコ葉面上から分離した微生物であり、脱窒能を有する微生物である。
・・・
【００５７】
得られた菌懸濁液を、収穫１日および７日後のバーレー種（きたかみ１号）の葉タバコ１枚当たり１０ｍＬとなるように、葉タバコの表裏に噴霧器を使用して処理した。
・・・
【００６３】
乾燥２０日目の分離微生物数に対する脱窒能を有する微生物の割合を指標としたところ、無処理区、シュードモナス　ｓｐｐ．の処理区において、脱窒能を有する微生物は分離されなかった。一方、アグロバクテリウム・ラジオバクターの処理区では、乾燥２０日でも分離微生物中の３０％近くが脱窒菌であった。また、アグロバクテリウム・ラジオバクター処理区から分離した脱窒能を有する微生物１０菌株を同定したところ、全ての微生物がアグロバクテリウム・ラジオバクターであった。このことから、アグロバクテリウム・ラジオバクターは、葉タバコの乾燥期間中の葉タバコにおいて定着性が高いことが示唆された。」
　　　イ　引用文献１に記載された葉タバコは、包装材料によって取り囲まれた喫煙可能な材料のロッドと、ロッドにその一端で取り付けられたフィルターと、を含むシガレットの形態の喫煙物品の形態のタバコ製品に供されることは明らかである。
　そうすると、上記の記載及び図面の記載からみて、引用文献１には、次の発明（以下、それぞれ「引用発明１」、「引用発明２」という。）が記載されているといえる。
　（引用発明１）
　「葉タバコ中のタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する方法であって、収穫直前の又は収穫した葉タバコをアグロバクテリウム属微生物と接触させることを含む、方法。」
　（引用発明２）
　「包装材料によって取り囲まれた喫煙可能な材料のロッドと、前記ロッドにその一端で取り付けられたフィルターと、を含むシガレットの形態の喫煙物品の形態のタバコ製品であって、前記喫煙可能な材料が、タバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減させるように、収穫直前の又は収穫した葉タバコにアグロバクテリウム属微生物と接触させる処理を行った葉タバコを含む、タバコ製品。」
　　（２）　その他の引用文献
　　　ア　引用文献２には、以下の事項が記載されている。
　・「【請求項１】
　天然タバコ材を抽出溶媒で抽出することによって得られた抽出液をビフィズス菌と接触させ、それにより前記抽出液中のタバコ固有のニトロソアミンを減少させることを特徴とするタバコ抽出液の処理方法。
【請求項２】
　（ａ）天然タバコ材を抽出溶媒で抽出し、該天然タバコ材の成分を含む抽出液と抽出残渣を得る工程、
　（ｂ）前記抽出液をビフィズス菌と接触させて前記抽出液中のタバコ固有のニトロソアミンを減少させる工程、
　（ｃ）前記抽出残渣を用いて再生タバコウエブを調製する工程、
　（ｄ）前記ビフィズス菌と接触させた抽出液の少なくとも一部を前記再生タバコウエブに添加する工程
を包含する再生タバコ材の製造方法。
【請求項３】
　前記請求項２に記載の再生タバコ材の製造方法により製造された再生タバコ材。」
　・「【０００１】
　本発明は、タバコ固有のニトロソアミンを低減するためのタバコ抽出液の処理方法、再生タバコ材の製造方法および再生タバコ材に関する。」
　・「【０００５】
　さらには、特許文献３は、抽出に関するものではないが、葉タバコ自体をスフィンゴモナス・パウシモビリス種およびシュードモナス・フルオレッセンス種に属する特定の微生物で処理することにより葉タバコ中のＴＳＮＡを減少させる方法を開示している。」
　・「【０００６】
・・・
　従って、本発明は、天然タバコ材から得たタバコ抽出液から比較的簡便な手法により、ニコチン量を有意に減少させることなくＴＳＮＡ量を減少させるためのタバコ抽出液の処理方法を提供することを目的とする。また本発明は、ＴＳＮＡ含有量が低減した再生タバコ材の製造方法および再生タバコ材を提供することを目的とする。」
　・「【００１６】
　他方、分離操作Ｓ２から得られた抽出液１３は、ビフィズス菌との接触工程（処理工程）Ｓ４に供する。ビフィズス菌とは、ビフィドバクテリウムと総称される菌株群を指す。かかるビフィズス菌には、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・アドレッセンティスが含まれる。本発明において、この接触工程Ｓ４は、抽出液１３にビフィズス菌を添加し、攪拌することにより行うことができる。ビフィズス菌は、適当な担体に担持させて使用することもできる。ビフィズス菌を用いることにより、タバコ抽出液中のニコチン量を有意に減少させることなく、ＴＳＮＡ量を低減させることができる。」
　・「【００２０】
　以上、本発明を各種態様に沿って説明したが、本発明は上記態様に限定されるものではない。いうまでもなく、上記種々の態様を組み合わせることもできるし、種々の変形等を行うこともできる。例えば、タバコ抽出液をビフィズス菌と接触させる前または接触させた後に、タバコ抽出液を膜分離等の他の成分分離工程に供することができる。
【００２１】
　また、ビフィズス菌の変わりに、ビフィズス菌と同様にタバコ抽出液中でニトロソアミンを低減させる機能を備えた微生物を用いることもできる。」
　　　イ　引用文献３には、以下の事項が記載されている。
　・「【請求項１】
　食品素材の製造、加工、調理時におけるアクリルアミドの生成を抑制することにより食品中のアクリルアミドを低減する方法であって、食品素材が１００℃以上の高温で加熱される前に、微生物菌体を用いて、該食品素材中に含まれるアクリルアミド前駆体を特異的に分解してそれらを減少させることを特徴とするアクリルアミドの低減方法。
・・・
【請求項４】
　微生物菌体が、酢酸菌、パン酵母、ワイン酵母、ビール酵母、及び乳酸菌の群から選択される１種以上である、請求項１に記載の方法。」
　・「【０００１】
　本発明は、食品中のアクリルアミドの低減方法に関するものであり、更に詳しくは、食品素材の製造、加工、調理時におけるアクリルアミドの生成を微生物菌体を利用して抑制することにより食品中に含まれるアクリルアミドを低減させた低アクリルアミド食品の製造方法に関するものである。
　本発明は、例えば、１００℃以上の高温で加熱される加工食品の工業的製造の技術分野において、該食品中に含まれる可能性のあるアクリルアミドをその生成段階で低減させることで、アクリルアミドを含まない低アクリルアミド食品を製造することを可能とする新規食品製造技術及びその製品を提供するものとして有用である。」
　・「【０００２】
　従来、食品製造の技術分野において、例えば、加熱加工食品にアクリルアミドが含まれる可能性のあることが指摘されている。そのとき、アクリルアミドの生成機構は、未解明であったが、アクリルアミドの生成は、糖とアミノ酸によるメイラード反応との類似点があるのでないかと推測されていた。その後、雑誌Ｎａｔｕｒｅの２００２年１０月３日号に、英国のレディングレ大学のＭｏｔｔｒａｍら（非特許文献１参照）とスイスのネスレのＳｔａｄｌｅｒら（非特許文献２参照）は、アミノ酸のアスパラギンとグルコースなどの糖が高温で加熱されるとアクリルアミドができることを同時に発表した。」
　・「【０００６】
　このような状況の中で、本発明者らは、上記従来技術に鑑みて、安全で、かつ、安価な方法で食品中のアクリルアミドを低減する技術を開発することを目標として鋭意研究を積み重ねた結果、食品素材が高温で加熱される前に、特定の微生物菌体を用いて、該食品素材中に含まれるアクリルアミド前駆体を特異的に分解することにより、食品素材の製造、加工、調理時におけるアクリルアミドの生成を抑制することができることを見出し、更に研究を重ねて、本発明を完成するに至った。
　本発明は、微生物菌体を用いて、各種食品素材の製造、加工、調理時においてアクリルアミドの生成を抑制することによって、食品中のアクリルアミドを低減する方法及びその製品を提供することを目的とするものである。」
　・「【０００８】
　・・・本発明の方法で使用する微生物菌体としては、好適には、例えば、酢酸菌（例えば、Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ  ｏｘｙｄａｎｓ  ＮＢＲＣ  １２５２８）、パン酵母（市販品；ドライイースト）、ワイン酵母（市販品）、ビール酵母（市販品）、乳酸菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｃｅ）が例示される。これらの微生物菌体は、古来から食品製造に利用される菌であり、安全性の面で問題がなく、また、変異原性でも問題がないものを選択基準として選択されたものである。
【０００９】
　本発明は、上記基準を基に多くの微生物菌体の中から単純系及び複雑系による実験を探り返すことによって選択した酢酸菌、パン酵母、ワイン酵母、ビール酵母及び乳酸菌を、食品素材を加熱する前に予め各種食品素材（例えば、ポテトスナック原料）に作用させると、アクリルアミドの生成を抑制し得るといった、今までに全く知られていなかった新規知見に基づいて完成されたものである。本発明で、対象となる食品素材としては、多くの食品素材が対象となり、特に、ジャガイモ、グリーンアスパラ、サヤエンドウ、サヤインゲン、ショウガ、オクラやゴボウなどが好適である。本発明では、食品素材、及び食品の種類等は、特に制限されないが、本発明で対象とされる食品は、食品の製造過程で、１００℃以上の高温に加熱調理され、その過程で、アクリルアミドを生成する可能性のある食品を意味するものである。」
　　　ウ　引用文献４には、以下の事項が記載されている。
　・「【請求項１８】
　（ａ）水性または有機溶媒でタバコを処理する工程と、
　（ｂ）酵素でタバコを処理する工程と、
　（ｃ）酵素処理されたタバコを塩溶液ですすぎ洗いする工程と、
　（ｄ）タバコ中の酵素を不活性化する工程とを含み、これら（ａ）から（ｄ）の工程の１つ以上が１つの水平ベルトフィルター上で行われることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項１９】
  タバコの抽出から得られたタバコ抽出液からタンパク質を除去するために該抽出液を処理する工程をさらに含むことを特徴とする請求項２乃至１８いずれか１項記載の方法。
・・・
【請求項２３】
  抽出後のタバコと処理されたタバコ抽出液を再度混合する工程をさらに含むことを特徴とする請求項１９乃至２２いずれか１項記載の方法。」
　・「【０００２】
　タバコ材は、変性されたタバコブレンドとするために処理、加工され、これにより燃焼時に未処理のタバコと比較して特定の成分が選択的に減少または除去された煙を発生させる。しかしながら、タバコの味および喫煙特性が維持されるようにタバコの糖およびニコチン含有量は、この処理によって実質的に影響されないようにするのが好ましい。
【０００３】
　タバコから選択的に成分を除去する、または少なくとも減少させるいくつかの方法が当業界で知られている。これらの方法は、タバコ材が水性または有機溶媒で抽出される抽出工程と、抽出された溶液をろ過、遠心分離などによって不溶性のタバコ残渣から分離する工程と、抽出された溶液を特定の成分を除去するために処理する処理工程とを含む。処理されたタバコ抽出液は、抽出後のタバコと再度組み合わされ、タバコの特定の成分が再生されたタバコ材に確実に保持されるようにする。」
　・「【００３９】
  溶媒は、有機溶液であってもよいが、好ましくは水性溶液または水である。抽出工程の極めて初期の段階では溶媒は、通常水であるが、エタノールまたはメタノールなどのアルコールも含んでもよく、または界面活性剤を含んでもよい。他の溶媒もタバコから抽出される特定の成分によって使用することが可能になる。」
　　　エ　前置報告において引用された引用文献５（特表２００９−５１４８０４号公報）には、以下の事項が記載されている。
　・「【請求項７】
　骨格、関節又は軟骨の障害の治療又は予防のための組成物の製造における、少なくとも１つのラクトフェリン加水分解物の使用であって、ここで、上記加水分解物が、完全又は部分的酵素加水分解物、微生物による完全又は部分的な加水分解物、完全又は部分的な酸加水分解物、完全又は部分的な臭化シアン加水分解物、或いはその混合物である、前記使用。
・・・
【請求項２２】
　前記微生物が、バシラス属、ビフィダス属、エンテロコッカス属、ラクトバシラス属、ラクトコッカス属、ロイコノストック属、ペディオコッカス属、プロピオンバクター属、シュードモナス属、ストレプトコッカス属又はその混合物から選ばれる、請求項７又は１４に記載の使用。」
　・「【０００１】
　本発明は、骨格成長の刺激、骨吸収の阻害、軟骨細胞増殖の刺激、骨芽細胞増殖の刺激、破骨細胞発生の阻害、或いは骨格、関節又は軟骨の障害の治療又は予防のための、少なくとも１つのラクトフェリン断片又はラクトフェリン加水分解物又はその混合物の使用に関する。」
　２　本願発明１について
　　（１）　対比
　本願発明１と引用発明１とを、その有する機能に照らして対比してみるに、引用発明１の「葉タバコ」は、本願発明１の「タバコ材料」、「タバコ植物成分」に相当し、引用発明１の「アグロバクテリウム属微生物」は、本願発明１の「プロバイオティクス」に相当する。
　また、引用発明１の「収穫直前の又は収穫した葉タバコ」は、本願発明１の「成熟した生きた植物」、「収穫された植物」に相当する。
　そして、引用発明１は「葉タバコ中のタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する方法」であるから、本願発明１と、「タバコ材料中」の「タバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する方法」である点で共通する。
　そうすると、本願発明１と引用発明１とは、以下の点で一致し、相違すると認められる。
　（一致点１）
　「タバコ材料中のタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する方法であって、タバコ植物成分をプロバイオティクスと接触させることを含み、
　前記タバコ植物成分が、タバコ種子、タバコ実生苗、未熟な生きた植物、成熟した生きた植物、収穫された植物、またはそれらの一部分からなる群から選択される、方法。」
　（相違点１）
　本願発明１は、「タバコ材料中のアミノ酸およびタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する方法」であって、「タバコ植物成分を２つ以上のプロバイオティクスと接触させることを含み」、「前記２つ以上のプロバイオティクスが、ビフィドバクテリウム属、ラクトバシラス属、エンテロコッカス属、プロイオノバクテリウム属（ｐｒｏｉｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス属、サッカロミセス属、ストレプトコッカス属のプロバイオティクス種、およびそれらの混合物からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ラクトバシラス属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスを含む」のに対し、引用発明１は、「葉タバコ中のタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する方法」であるものの、アミノ酸含有量を低減する方法であるか明らかでなく、「葉タバコをアグロバクテリウム属微生物と接触させる」ものであって、接触させるプロバイオティクスが異なる点。
　　（２）　判断
　引用発明１は、葉タバコを「アグロバクテリウム属微生物」と接触させることを必須とするものであるところ、引用文献１には、アミノ酸含有量を低減することや、ラクトバシラス属やビフィドバクテリウム属等の微生物を利用することについて記載は特段なく（前記１（１））、引用発明１において、葉タバコ中のアミノ酸及びタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減するために、ラクトバシラス属やビフィドバクテリウム属等の微生物を利用することについての動機付けは特段認められない。
　また、引用文献２には、天然タバコ材を抽出溶媒で抽出することによって得られた抽出液をビフィズス菌と接触させることにより、ＴＳＮＡ量を減少させる点が記載されているが（前記１（２）ア）、タバコ植物成分に適用する点については記載がなく、ラクトバシラス属の微生物や、タバコ材料中のアミノ酸含有量を低減することについても記載がない。
　そして、引用文献３には、食品素材が１００℃以上の高温で加熱される前に、例えば、酢酸菌、パン酵母、ワイン酵母、ビール酵母、乳酸菌、といった微生物菌体を用いて、該食品素材中に含まれるアクリルアミド前駆体を特異的に分解してそれらを減少させる点が記載されているが（前記１（２）イ）、タバコ材料に関する記載はなく、ラクトバシラス属やビフィドバクテリウム属等の微生物に関する記載もない。
　このように、引用文献２、３には、前記相違点１に係る構成について記載はない。引用文献４、５をみても（前記１（２）ウ、エ）、この点について記載はなく、周知の技術であるともいえない。
　そして、本願発明１は、「タバコ植物成分を２つ以上のプロバイオティクスと接触させることを含み」、「前記２つ以上のプロバイオティクスが、ビフィドバクテリウム属、ラクトバシラス属、エンテロコッカス属、プロイオノバクテリウム属（ｐｒｏｉｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス属、サッカロミセス属、ストレプトコッカス属のプロバイオティクス種、およびそれらの混合物からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ラクトバシラス属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスを含む」ことにより「タバコ材料中のアミノ酸およびタバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減する」といった効果を奏するものである。
　したがって、引用発明１及び引用文献２〜５に記載された事項に基いて、前記相違点１に係る本願発明１の構成とすることは、当業者が容易に想到することができたものとは認められない。
　以上のとおりであるから、本願発明１は、引用発明１及び引用文献２〜５に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとは認められない。
　３　本願発明２〜１７について
　本願発明１を特定するための事項をすべて含む本願発明２〜１７は、さらに特定された事項を検討するまでもなく、本願発明１と同様の理由により、引用発明１及び引用文献２〜５に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとは認められない。
　４　本願発明１８について
　　（１）　対比
　本願発明１８と引用発明２とをその有する機能に照らして対比してみるに、両者は「包装材料によって取り囲まれた喫煙可能な材料のロッドと、前記ロッドにその一端で取り付けられたフィルターと、を含むシガレットの形態の喫煙物品の形態のタバコ製品」である点で共通する。
　また、引用発明２の「アグロバクテリウム属微生物」は，本願発明１８の「プロバイオティクス」に相当し，引用発明２の「収穫直前の又は収穫した葉タバコ」は、本願発明２の「成熟した生きた植物」、「収穫された植物」に相当し，引用発明２の「アグロバクテリウム属微生物と接触させる処理を行った葉タバコ」は，本願発明１８の「プロバイオティクスで前処理されたタバコ植物成分を含むタバコ材料」に相当する。
　そして、引用発明２は「前記喫煙可能な材料が、タバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減させるように、収穫直前の又は収穫した葉タバコにアグロバクテリウム属微生物と接触させる処理を行った葉タバコを含む」ものであるから、本願発明１８と、「前記喫煙可能な材料」が、「プロバイオティクスで前処理されたタバコ植物成分を含むタバコ材料を含（む）」ものである点で共通する。
　そうすると、本願発明１８と引用発明２とは、以下の点で一致し、相違すると認められる。
　（一致点２）
　「包装材料によって取り囲まれた喫煙可能な材料のロッドと、前記ロッドにその一端で取り付けられたフィルターと、を含むシガレットの形態の喫煙物品の形態のタバコ製品であって、前記喫煙可能な材料が、プロバイオティクスで前処理されたタバコ植物成分を含むタバコ材料を含み、前記タバコ植物成分が、タバコ種子、タバコ実生苗、未熟な生きた植物、成熟した生きた植物、収穫された植物、またはそれらの一部分からなる群から選択される、タバコ製品。
　（相違点２）
　本願発明１８は、「喫煙可能な材料」が、「アスパラギンの含有量を低減させるように２つ以上のプロバイオティクスで前処理されたタバコ植物成分を含むタバコ材料を含み」、「前記２つ以上のプロバイオティクスが、ビフィドバクテリウム属、ラクトバシラス属、エンテロコッカス属、プロイオノバクテリウム属（ｐｒｏｉｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス属、サッカロミセス属、ストレプトコッカス属のプロバイオティクス種、およびそれらの混合物からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ラクトバシラス属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスを含む」のに対し、引用発明２は、「喫煙可能な材料」が、「タバコ特異的ニトロソアミン含有量を低減させるように」「処理を行った葉タバコを含む」ものの、アスパラギンの含有量を低減させる点については明らかでなく、「葉タバコにアグロバクテリウム属微生物と接触させる処理を行った」ものであって，前処理に係るプロバイオティクスが異なる点。
　　（２）　判断
　引用発明２は、葉タバコを「アグロバクテリウム属微生物」と接触させることを必須とするものであるところ、引用文献１には、アスパラギンの含有量を低減することや、ラクトバシラス属やビフィドバクテリウム属等の微生物を利用することについての記載は特段なく（前記１（１））、引用発明２において、葉タバコ中のアスパラギンの含有量を低減するために、ラクトバシラス属やビフィドバクテリウム属等の微生物を利用することについての動機付けは特段認められない。
　また、引用文献２、３には、前記１（２）ア、イの事項が記載されているが、引用文献２には、タバコ植物成分に適用する点、ラクトバシラス属の微生物と組み合わせること、タバコ材料中のアスパラギンの含有量を低減することについて記載がなく、引用文献３には、タバコ材料に関する記載、ラクトバシラス属やビフィドバクテリウム属等の微生物に関する記載がない。
　このように、引用文献２、３には、前記相違点２に係る構成について記載はない。引用文献４、５をみても（前記１（２）ウ、エ）、この点について記載はなく、周知の技術であるともいえない。
　そして、本願発明１８は、「喫煙可能な材料」が、「２つ以上のプロバイオティクスで前処理されたタバコ植物成分を含むタバコ材料を含み」、「前記２つ以上のプロバイオティクスが、ビフィドバクテリウム属、ラクトバシラス属、エンテロコッカス属、プロイオノバクテリウム属（ｐｒｏｉｏｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス属、サッカロミセス属、ストレプトコッカス属のプロバイオティクス種、およびそれらの混合物からなる群から選択され、前記２つ以上のプロバイオティクスが、ラクトバシラス属から選択される少なくとも１つのプロバイオティクスを含む」ことで、「タバコ材料」の「アスパラギンの含有量を低減させる」といった効果を奏するものである。
　したがって、引用発明２及び引用文献２〜５に記載された事項に基いて、前記相違点２に係る本願発明１８の構成とすることは、当業者が容易に想到することができたものとは認められない。
　以上のとおりであるから、本願発明１８は、引用発明２及び引用文献２〜５に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとは認められない。
　５　本願発明１９〜２１について
　本願発明１８を特定するための事項をすべて含む本願発明１９〜２１は、さらに特定された事項を検討するまでもなく、本願発明１８と同様の理由により、引用発明２及び引用文献２〜５に記載された発明に基いて、当業者が容易に発明をすることができたものであるとは認められない。
　６　以上のとおりであるから、原査定を維持することはできない。
第６　当審にて通知した拒絶の理由についての判断
　平成３１年１月１６日の手続補正書により補正された特許請求の範囲は前記第２のとおりであるところ、当該補正により、特許請求の範囲の記載に関する不備は解消した。
第７　むすび
　以上のとおり、原査定の理由及び当審にて通知した拒絶の理由によって、本願を拒絶することはできない。
　他に本願を拒絶すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり審決する。