【手続補正書】
【提出日】平成22年3月26日(2010.3.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトGM-CSFRαに対する単離された結合構造要素であって、GM-CSFRαへのGM-CSFの結合を阻害し、配列番号206に示すヒトGM-CSFRαの位置226-230のTyr-Leu-Asp-Phe-Glnの少なくとも1つの残基に結合し、表面プラズモン共鳴アッセイにおいて5nM以下の親和性(KD)でヒトGM-CSFRαの細胞外ドメインに結合する、前記結合構造要素。
【請求項２】
抗体分子を含む、請求項１記載の結合構造要素。
【請求項３】
1組の相補性決定領域CDR1、CDR2およびCDR3ならびにフレームワークを含む抗体VHドメインであって、前記1組の相補性決定領域が、アミノ酸配列配列番号3または配列番号173を有するCDR1、アミノ酸配列配列番号4を有するCDR2ならびに配列番号5;配列番号15;配列番号25;配列番号35;配列番号45;配列番号55;配列番号65;配列番号75;配列番号85;配列番号95;配列番号105;配列番号115;配列番号125;配列番号135;配列番号145;配列番号155;配列番号165;配列番号175;配列番号185;および配列番号195;からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するCDR3を含むかあるいは1個または2個のアミノ酸置換を有する前記1組のCDR配列を含む前記抗体VHドメインを含む、請求項２記載の結合構造要素。
【請求項４】
相補性決定領域CDR1、CDR2およびCDR3ならびにフレームワークを含み、VH CDR3におけるKabat残基H97がSである抗体VHドメインを含む、請求項２または請求項３記載の結合構造要素。
【請求項５】
VH CDR3が以下の残基:
Kabat残基H95におけるV、N、AまたはL;
Kabat残基H99におけるS、F、H、P、TまたはW;
Kabat残基H100BにおけるA、T、P、S、VまたはH
の1以上をさらに含む、請求項４記載の結合構造要素。
【請求項６】
Kabat残基H95がVである、請求項５記載の結合構造要素。
【請求項７】
Kabat残基H99がSである、請求項５または請求項６記載の結合構造要素。
【請求項８】
Kabat残基H100BがAまたはTである、請求項５〜７のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項９】
VH CDR3が、配列番号5、配列番号15、配列番号35、配列番号45、配列番号55、配列番号65、配列番号75、配列番号85、配列番号95、配列番号105、配列番号115、配列番号125、配列番号135、配列番号145、配列番号155、配列番号165、配列番号175、配列番号185および配列番号195からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、請求項５記載の結合構造要素。
【請求項１０】
VH CDR1におけるKabat残基H34がIである、請求項４〜９のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項１１】
VH CDR1がアミノ酸配列配列番号3を有する、請求項４〜１０のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項１２】
VH CDR2がKabat残基H54におけるEおよび/またはKabat残基H57におけるIを含む、請求項４〜１１のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項１３】
VH CDR2がアミノ酸配列配列番号4を有する、請求項４〜１２のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項１４】
VHドメインフレームワークにおけるKabat残基H17がSである、請求項４〜１３のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項１５】
相補性決定領域CDR1、CDR2およびCDR3ならびにフレームワークを含む抗体VLドメインを含む、請求項４〜１４のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項１６】
VL CDR3が以下の残基:
Kabat残基L90におけるS、TまたはM;
Kabat残基L92におけるD、E、Q、S、MまたはT;
Kabat残基L96におけるS、P、IまたはV
の1以上を含む、請求項１５記載の結合構造要素。
【請求項１７】
Kabat残基L90がSである、請求項１６記載の結合構造要素。
【請求項１８】
Kabat残基L92がDまたはEである、請求項１６または請求項１７記載の結合構造要素。
【請求項１９】
Kabat残基L95AがSである、請求項１６〜１８のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２０】
Kabat残基L96がSである、請求項１６〜１９のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２１】
VL CDR3が配列番号10、配列番号20、配列番号40、配列番号50、配列番号60、配列番号70、配列番号80、配列番号90、配列番号100、配列番号110、配列番号120、配列番号130、配列番号140、配列番号150、配列番号160、配列番号170、配列番号180、配列番号190および配列番号200からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、請求項１５または１６に記載の結合構造要素。
【請求項２２】
VL CDR1が、以下の残基:
Kabat残基27AにおけるS;
Kabat残基27BにおけるN;
Kabat残基27CにおけるI;
Kabat残基32におけるD;
の1以上を含む、請求項１５〜２１のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２３】
VL CDR1がアミノ酸配列配列番号8を有する、請求項１５〜２２のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２４】
VL CDR2が以下の残基:
Kabat残基51におけるN;
Kabat残基52におけるN;
Kabat残基53におけるK
の1以上を含む、請求項１５〜２３のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２５】
VL CDR2がアミノ酸配列配列番号9を有する、請求項１５〜２４のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２６】
Kabat残基H94がIである抗体VHドメインを含む、請求項２〜２５のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２７】
表面プラズモン共鳴アッセイにおいて1nM以下の親和性(KD)でヒトGM-CSFRα細胞外ドメインに結合する、請求項1〜２６のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項２８】
表面プラズモン共鳴アッセイにおいて0.5nM以下の親和性(KD)でヒトGM-CSFRα細胞外ドメインに結合する、請求項２７記載の結合構造要素。
【請求項２９】
7pMヒトGM-CSFを用いるTF-1細胞増殖アッセイにおいて60pM以下のIC50中和能を有する、請求項１〜２８のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項３０】
7pMヒトGM-CSFを用いるTF-1細胞増殖アッセイにおいて10pM以下のIC50中和能を有する、請求項２９記載の結合構造要素。
【請求項３１】
7pMヒトGM-CSFを用いるヒト顆粒球形態変化アッセイにおいて50pM以下のIC50中和能を有する、請求項１〜３０のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項３２】
7pMヒトGM-CSFを用いるヒト顆粒球形態変化アッセイにおいて25pM以下のIC50中和能を有する、請求項３１記載の結合構造要素。
【請求項３３】
1nMヒトGM-CSFを用いる単球TNFα放出アッセイにおいて100pM以下のIC50中和能を有する、請求項１〜３２のいずれかに記載の結合構造要素。
【請求項３４】
ヒトGM-CSFRαに対する単離された結合構造要素であって、1組の相補性決定領域HCDR1、HCDR2およびHCDR3、LCDR1、LCDR2およびLCDR3を含み、
HCDR1が配列番号３であり、HCDR2が配列番号４であり、HCDR3が配列番号５であり、LCDR1が配列番号８であり、LCDR2が配列番号９であり、LCDR3が配列番号１０である；
HCDR1が配列番号１３であり、HCDR2が配列番号１４であり、HCDR3が配列番号１５であり、LCDR1が配列番号１８であり、LCDR2が配列番号１９であり、LCDR3が配列番号２０である；
HCDR1が配列番号３３であり、HCDR2が配列番号３４であり、HCDR3が配列番号３５であり、LCDR1が配列番号３８であり、LCDR2が配列番号３９であり、LCDR3が配列番号４０である；
HCDR1が配列番号４３であり、HCDR2が配列番号４４であり、HCDR3が配列番号４５であり、LCDR1が配列番号４８であり、LCDR2が配列番号４９であり、LCDR3が配列番号５０である；
HCDR1が配列番号５３であり、HCDR2が配列番号５４であり、HCDR3が配列番号５５であり、LCDR1が配列番号５８であり、LCDR2が配列番号５９であり、LCDR3が配列番号６０である；
HCDR1が配列番号６３であり、HCDR2が配列番号６４であり、HCDR3が配列番号６５であり、LCDR1が配列番号６８であり、LCDR2が配列番号６９であり、LCDR3が配列番号７０である；
HCDR1が配列番号７３であり、HCDR2が配列番号７４であり、HCDR3が配列番号７５であり、LCDR1が配列番号７８であり、LCDR2が配列番号７９であり、LCDR3が配列番号８０である；
HCDR1が配列番号８３であり、HCDR2が配列番号８４であり、HCDR3が配列番号８５であり、LCDR1が配列番号８８であり、LCDR2が配列番号８９であり、LCDR3が配列番号９０である；
HCDR1が配列番号９３であり、HCDR2が配列番号９４であり、HCDR3が配列番号９５であり、LCDR1が配列番号９８であり、LCDR2が配列番号９９であり、LCDR3が配列番号１００である；
HCDR1が配列番号１０３であり、HCDR2が配列番号１０４であり、HCDR3が配列番号１０５であり、LCDR1が配列番号１０８であり、LCDR2が配列番号１０９であり、LCDR3が配列番号１１０である；
HCDR1が配列番号１１３であり、HCDR2が配列番号１１４であり、HCDR3が配列番号１１５であり、LCDR1が配列番号１１８であり、LCDR2が配列番号１１９であり、LCDR3が配列番号１２０である；
HCDR1が配列番号１２３であり、HCDR2が配列番号１２４であり、HCDR3が配列番号１２５であり、LCDR1が配列番号１２８であり、LCDR2が配列番号１２９であり、LCDR3が配列番号１３０である；
HCDR1が配列番号１３３であり、HCDR2が配列番号１３４であり、HCDR3が配列番号１３５であり、LCDR1が配列番号１３８であり、LCDR2が配列番号１３９であり、LCDR3が配列番号１４０である；
HCDR1が配列番号１４３であり、HCDR2が配列番号１４４であり、HCDR3が配列番号１４５であり、LCDR1が配列番号１４８であり、LCDR2が配列番号１４９であり、LCDR3が配列番号１５０である；
HCDR1が配列番号１５３であり、HCDR2が配列番号１５４であり、HCDR3が配列番号１５５であり、LCDR1が配列番号１５８であり、LCDR2が配列番号１５９であり、LCDR3が配列番号１６０である；
HCDR1が配列番号１６３であり、HCDR2が配列番号１６４であり、HCDR3が配列番号１６５であり、LCDR1が配列番号１６８であり、LCDR2が配列番号１６９であり、LCDR3が配列番号１７０である；
HCDR1が配列番号１７３であり、HCDR2が配列番号１７４であり、HCDR3が配列番号１７５であり、LCDR1が配列番号１７８であり、LCDR2が配列番号１７９であり、LCDR3が配列番号１８０である；
HCDR1が配列番号１８３であり、HCDR2が配列番号１８４であり、HCDR3が配列番号１８５であり、LCDR1が配列番号１８８であり、LCDR2が配列番号１８９であり、LCDR3が配列番号１９０である；または、
HCDR1が配列番号１９３であり、HCDR2が配列番号１９４であり、HCDR3が配列番号１９５であり、LCDR1が配列番号１９８であり、LCDR2が配列番号１９９であり、LCDR3が配列番号２００である、
前記単離された結合構造要素。
【請求項３５】
HCDR1がアミノ酸配列配列番号５３であり、
HCDR2がアミノ酸配列配列番号５４であり、
HCDR3がアミノ酸配列配列番号５５であり、
LCDR1がアミノ酸配列配列番号５８であり、
LCDR2がアミノ酸配列配列番号５９であり、
LCDR3がアミノ酸配列配列番号６０である、
請求項３４記載の結合構造要素。
【請求項３６】
抗体分子を含む、請求項３４または３５記載の結合構造要素。
【請求項３７】
抗体VHドメインアミノ酸配列配列番号５２および抗体VLドメインアミノ酸配列配列番号５７を含む抗体分子である、請求項３６記載の結合構造要素。
【請求項３８】
抗体分子がヒト抗体分子またはヒト化抗体分子である、請求項２〜３３のいずれかまたは請求項３６記載の結合構造要素。
【請求項３９】
VHドメインフレームワークがヒト生殖系列のVH1 DP5またはVH3 DP47フレームワークである、請求項３８記載の結合構造要素。
【請求項４０】
VLドメインフレームワークがヒト生殖系列のVλ 1 DPL8、Vλ 1 DPL3またはVλ 6_6aフレームワークであるVLドメインを含む、請求項３８または請求項３９記載の結合構造要素。
【請求項４１】
GM-CSFRαへのGM-CSFの結合を阻害するヒトGM-CSFRαに対する単離された抗体分子であって、表面プラズモン共鳴アッセイにおいて５nM以下の親和性(KD)でヒトGM-CSFRαの細胞外ドメインに結合し、配列番号52で示されるVHドメインのアミノ酸配列を有するVHドメインまたは1個もしくは2個のアミノ酸改変を有するそれらの変種および配列番号57で示されるVLドメインのアミノ酸配列を有するVLドメインまたは1個もしくは2個のアミノ酸改変を有するそれらの変種を含み、前記アミノ酸改変が置換、挿入および欠失からなる群から選択される、前記抗体分子。
【請求項４２】
抗体分子がIgG4である、請求項２〜３３もしくは３６〜４０のいずれかに記載の結合構造要素または請求項４１記載の抗体分子
【請求項４３】
請求項１〜４２のいずれかに記載の結合構造要素または抗体分子および薬学的に許容される賦形剤を含む組成物。
【請求項４４】
請求項1〜４２のいずれかに記載の結合構造要素または抗体分子をコードする核酸配列を含む単離された核酸分子。
【請求項４５】
請求項４４記載の核酸分子を含むin vitroの宿主細胞。
【請求項４６】
請求項４５記載の宿主細胞を培養することを含む、請求項1〜４２のいずれかに記載の結合構造要素または抗体分子を製造する方法。
【請求項４７】
結合構造要素を精製することをさらに含む、請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
請求項１〜４２のいずれかに記載の結合構造要素または抗体を含む、関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患または骨髄性白血病治療用組成物。