【手続補正書】
【提出日】平成22年3月3日(2010.3.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）Nicotiana種または栽培品種の植物細胞内にキメラ遺伝子を導入してトランスジェニック植物細胞を作製することであって、該キメラ遺伝子は、以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメントを含む：
ｉ）植物発現可能プロモーター；
ｉｉ）下記：
（１）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種または栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択され、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドの、ヌクレオチド配列を含む第一のセンスＤＮＡ領域；および
（２）該第一のＤＮＡ領域の相補体に少なくとも９５%の配列同一性を有する少なくとも１９個の連続ヌクレオチドのヌクレオチド配列を含む第二のアンチセンスＤＮＡ領域
を含む転写可能ＤＮＡ領域であって、
該転写可能ＤＮＡ領域から転写されたＲＮＡ分子は、少なくとも、該第一のセンスＤＮＡ領域から転写されたＲＮＡ領域と、該第二のアンチセンスＤＮＡ領域から転写されたＲＮＡ領域との間で二本鎖ＲＮＡ領域を形成することができる、転写可能ＤＮＡ領域；および
ｉｉｉ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域；
ｂ）場合により、トランスフォーメーションされていないNicotiana植物細胞よりも低レベルのβ−１，２−キシロース残基をタンパク質結合Ｎ−グリカン上に有するトランスジェニックNicotiana植物細胞を同定すること；
ｃ）場合により、該トランスジェニックNicotiana植物細胞を再生してトランスジェニックNicotiana植物を得ること；および
ｄ）場合により、トランスフォーメーションされていないNicotiana植物よりも低レベルのβ−１，２−キシロース残基をタンパク質結合Ｎ−グリカン上に有するトランスジェニックNicotiana植物を同定すること
の工程を含む、タンパク質結合Ｎ−グリカン上に低レベルのβ−１，２−キシロース残基を有するNicotiana植物細胞または植物を生産する方法。
【請求項２】
Nicotiana種特異的ＸｙｌＴアミノ酸がNicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴアミノ酸であり、該Nicotiana種が好ましくはNicotiana benthamianaである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列が、配列番号１２または配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドがNicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴヌクレオチドであり、該Nicotiana種が好ましくはNicotiana benthamianaである、請求項１から３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
Nicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子のヌクレオチド配列が、配列番号１１、配列番号１３、または配列番号２１のヌクレオチド配列を含む、請求項１から４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
Nicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸がNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴアミノ酸であり、該Nicotiana栽培品種が好ましくはNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1である、請求項１記載の方法。
【請求項７】
Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列が、配列番号４、配列番号６、配列番号８、または配列番号１０のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１または６記載の方法。
【請求項８】
Nicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴ  ヌクレオチドがNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴヌクレオチドであり、該Nicotiana栽培品種が好ましくはNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1である、請求項１、６または７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
Nicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子またはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列が、配列番号３、配列番号５、配列番号８、配列番号１０、または配列番号１７のヌクレオチド配列を含む、請求項１または６から８のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
第一および第二のＤＮＡ領域が、少なくとも５０個の連続ヌクレオチドを含む、請求項１から９のいずれか１項記載の方法。
【請求項１１】
第一および第二のＤＮＡ領域が、少なくとも２００個の連続ヌクレオチドを含む、請求項１から９のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
タンパク質結合Ｎ−グリカン上に低レベルのβ−１，２−キシロース残基を有するNicotiana植物細胞または植物を生産する方法であって、以下：
ａ）Nicotiana種または栽培品種の植物細胞または植物に一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子を提供することであって、該二本鎖ＲＮＡ分子が二つのＲＮＡ鎖を含み、一つのＲＮＡ鎖が実質的に、Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０から２１個のうち１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０から２１個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種または栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０から２１個のうち１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０から２１個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種または栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドのＲＮＡヌクレオチドからなる、提供；および
ｂ）該一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子を含まない、同じNicotiana植物細胞または植物に比べて低レベルのβ−１，２−キシロース残基をタンパク質結合Ｎ−グリカン上に有する、該一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子を含むNicotiana植物細胞または植物を同定すること
の工程を含む方法。
【請求項１３】
該二本鎖ＲＮＡが、Nicotiana種または栽培品種の植物細胞のゲノムにキメラ遺伝子を組み込むことによって該植物細胞または植物に提供され、トランスジェニック植物細胞を作製し、場合により、該植物細胞を再生してトランスジェニック植物を得る方法であって、該キメラ遺伝子が、以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメント：
ａ）植物発現可能プロモーター；
ｂ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種または栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、アンチセンス方向の、ＤＮＡ領域；および
ｃ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域
を含む、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
二本鎖ＲＮＡが、植物細胞のゲノムにキメラ遺伝子を組み込むことによって該植物細胞または植物に提供され、トランスジェニック植物細胞を作製し、場合により、該植物細胞を再生してトランスジェニック植物を得る方法であって、該キメラ遺伝子が、以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメント：
ａ）植物発現可能プロモーター；
ｂ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、それが相補するNicotiana種特異的または栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、センス方向の、ＤＮＡ領域；および
ｃ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域
を含む、請求項１２記載の方法。
【請求項１５】
二本鎖ＲＮＡが、植物細胞のゲノムにキメラ遺伝子を組むことによって該植物細胞または植物に提供され、トランスジェニック植物細胞を作製し、場合により、該植物細胞を再生してトランスジェニック植物を得る方法であって、該キメラ遺伝子が、以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメント：
ａ）植物発現可能プロモーター；
ｂ）下記：
ｉ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種または栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、アンチセンス方向の、第一のＤＮＡ領域；
ｉｉ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種または栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択され、該ヌクレオチド配列が、該Nicotiana種または栽培品種から好ましくは得ることができ、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、センス方向の、第二のＤＮＡ領域
を含む転写可能ＤＮＡ領域であって、該転写可能ＤＮＡ領域の転写により生成するＲＮＡ分子が、少なくとも該第一のＤＮＡ領域に対応するＲＮＡ領域と、該第二のＲＮＡ領域に対応するＲＮＡ領域との間で塩基対形成することによって二本鎖ＲＮＡ領域を形成することができる転写可能ＤＮＡ領域；および
ｃ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域
を含む、請求項１２記載の方法。
【請求項１６】
Nicotiana種特異的ＸｙｌＴアミノ酸が、Nicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴアミノ酸であり、該Nicotiana種が、好ましくはNicotiana benthamianaである、請求項１２から１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列が、配列番号１２または配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１２から１６のいずれか１項記載の方法。
【請求項１８】
Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドがNicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴヌクレオチドであり、該Nicotiana種が好ましくはNicotiana benthamianaである、請求項１２から１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１９】
Nicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子のヌクレオチド配列が、配列番号１１、配列番号１３、または配列番号２１のヌクレオチド配列を含む、請求項１２から１８のいずれか１項記載の方法。
【請求項２０】
Nicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸がNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴアミノ酸であり、該Nicotiana栽培品種が好ましくはNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1である、請求項１２から１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項２１】
Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列が、配列番号４、配列番号６、配列番号８、または配列番号１０のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１２から１５または２０のいずれか１項記載の方法。
【請求項２２】
Nicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドがNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴヌクレオチドであり、該Nicotiana栽培品種が好ましくはNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1である、請求項１２から１５、２０または２１のいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】
Nicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子またはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列が、配列番号３、配列番号５、配列番号８、配列番号１０、または配列番号１７のヌクレオチド配列を含む、請求項１２から１５、または２０から２２のいずれか１項記載の方法。
【請求項２４】
タンパク質結合Ｎ−グリカン上に低レベルのβ−１，２−キシロース残基を有するNicotiana植物細胞または植物を生産する方法であって、以下：
ａ）以下：
ｉ）配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、または配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメント；
ｉｉ）配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、または配列番号２１のいずれか一つのヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメント；
ｉｉｉ）配列番号４もしくは配列番号６のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から１５１３個の間の連続ヌクレオチドからなるヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメントもしくはオリゴヌクレオチド；
ｉｖ）配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から３５７４個の間の連続ヌクレオチドからなるヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメントもしくはオリゴヌクレオチド；
ｖ）配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のいずれか一つのヌクレオチド配列より選択される２０から３５７４個の間の連続ヌクレオチドからなるヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するためのＤＮＡフラグメントもしくはオリゴヌクレオチド；
ｖｉ）配列番号４もしくは配列番号６のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から２００個の間の連続ヌクレオチドを含むヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド配列；
ｖｉｉ）配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から２００個の間の連続ヌクレオチドを含むヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド配列；
ｖｉｉｉ）配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のいずれか一つのヌクレオチド配列より選択される２０から２００個の間の連続ヌクレオチドを含むヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド配列；または
ｉｘ）配列番号１、配列番号２、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１９、もしくは配列番号２０のいずれか一つのヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド；
の群より選択される手段を用いて、第一のNicotiana種または栽培品種から得ることができるＤＮＡ配列をコードするＸｙｌＴタンパク質のフラグメントを同定すること；
ｂ）該第一または第二のNicotiana種または栽培品種の植物細胞または植物に一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子を提供することであって、該二本鎖ＲＮＡ分子が二つのＲＮＡ鎖を含み、一つのＲＮＡ鎖が実質的に、該ＸｙｌＴタンパク質をコードするＤＮＡフラグメントのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０から２１個の連続ヌクレオチドのＲＮＡヌクレオチド配列からなり、該２０から２１個の連続ヌクレオチドが、それぞれNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするか、または該２０から２１個の連続ヌクレオチドが、それぞれNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む、提供；および
ｃ）該一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子を含まない同じNicotiana植物細胞または植物よりも低レベルのβ−１，２−キシロース残基をタンパク質結合Ｎ−グリカン上に有する、該一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子を含むNicotiana植物細胞または植物を同定すること
の工程を含む方法。
【請求項２５】
一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子の提供が、該ＸｙｌＴタンパク質をコードするＤＮＡフラグメントのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドの第一のヌクレオチド配列であって、該２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするか、または該２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む第一のヌクレオチド配列、および該第一のヌクレオチド配列の相補体である第二のヌクレオチド配列を含む、一つまたは複数の二本鎖ＲＮＡ分子を、植物細胞または植物に提供することによって達成される、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
二本鎖ＲＮＡ分子が、植物細胞のゲノムにキメラＤＮＡを組み込むことによって該植物細胞または植物に提供され、トランスジェニック植物細胞を作製し、場合により該植物細胞を再生してトランスジェニック植物を得る方法であって、該キメラＤＮＡが、以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメント：
ａ）植物発現可能プロモーター；
ｂ）以下：
ｉ）ＸｙｌＴタンパク質をコードするＤＮＡフラグメントのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドのヌクレオチド配列を含む第一のセンスＤＮＡ領域であって、該２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドが、それぞれNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするか、または該２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドが、それぞれNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む、第一のセンスＤＮＡ領域；
ｉｉ）該第一のＤＮＡ領域の相補体と少なくとも９５%の配列同一性を有する少なくとも１９個の連続ヌクレオチドのヌクレオチド配列を含む第二のアンチセンスＤＮＡ領域
を含む転写可能ＤＮＡ領域であって、
該転写可能領域から転写されたＲＮＡ分子が、少なくとも該第一のセンスＤＮＡ領域から転写されたＲＮＡ領域と、該第二のアンチセンスＤＮＡ領域から転写されたＲＮＡ領域との間で二本鎖ＲＮＡ領域を形成することができる転写可能ＤＮＡ領域；および
ｃ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域
を含む、請求項２４記載の方法。
【請求項２７】
タンパク質結合Ｎ−グリカン上に低レベルのβ−１，２−キシロース残基を有するNicotiana植物を、別のNicotiana植物と交配して、タンパク質結合Ｎ−グリカン上に低レベルのβ−１，２−キシロース残基を有するNicotiana子孫植物を得る工程をさらに含む、請求項１から２６のいずれか１項記載の方法。
【請求項２８】
Nicotiana  ＸｙｌＴ  ＤＮＡフラグメントを同定する方法であって、以下：
ａ）Nicotiana種または栽培品種から得ることができるゲノムＤＮＡまたはｃＤＮＡを提供すること；
ｂ）以下の群：
ｉ）配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメント；
ｉｉ）配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のいずれか一つのヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメント；
ｉｉｉ）配列番号４もしくは配列番号６のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から１５１３個の間の連続ヌクレオチドからなるヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメントもしくはオリゴヌクレオチド；
ｉｖ）配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から３５７４個の間の連続ヌクレオチドからなるヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメントもしくはオリゴヌクレオチド；
ｖ）配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のいずれか一つのヌクレオチド配列より選択される２０から３５７４個の間の連続ヌクレオチドからなるヌクレオチド配列を含む、プローブとして使用するための、ＤＮＡフラグメントもしくはオリゴヌクレオチド；
ｖｉ）配列番号４もしくは配列番号６のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から２００個の間の連続ヌクレオチドを含むヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド配列；
ｖｉｉ）配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列より選択される２０から２００個の間の連続ヌクレオチドを含むヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド配列；
ｖｉｉｉ）配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のいずれか一つのヌクレオチド配列より選択される２０から２００個の間の連続ヌクレオチドを含むヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド配列；または
ｉｘ）配列番号１、配列番号２、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１９、もしくは配列番号２０のいずれか一つのヌクレオチド配列を有する、ＰＣＲ反応におけるプライマーとして使用するための、オリゴヌクレオチド；
から手段を選択すること；
ｃ）該ゲノムＤＮＡもしくは該ｃＤＮＡ、および該プライマーを用いてＰＣＲを行うことによって、または該ゲノムＤＮＡもしくは該ｃＤＮＡ、および該プローブを用いてハイブリダイゼーションを行うことによって、該Nicotiana種または栽培品種からＸｙｌＴ  ＤＮＡフラグメントを同定すること
の工程を含む方法。
【請求項２９】
Nicotiana  ＸｙｌＴ  ＤＮＡフラグメントを単離する方法であって、以下：
ａ）請求項２８記載の方法により該Nicotiana  ＸｙｌＴ  ＤＮＡフラグメントを同定すること、および
ｂ）該Nicotiana  ＸｙｌＴ  ＤＮＡフラグメントを単離すること
の工程を含む方法。
【請求項３０】
タンパク質結合Ｎ−グリカン上の低レベルのβ−１，２−キシロース残基と相関するNicotiana  ＸｙｌＴアレルを同定する方法であって、以下：
（ａ）異なる植物系統のNicotiana種または栽培品種の集団、場合により突然変異を誘発された集団を提供すること；
（ｂ）請求項２８記載の方法により、該集団の各植物系統においてNicotiana  ＸｙｌＴアレルを同定すること；
（ｃ）該集団の各植物系統のタンパク質結合Ｎ−グリカン上のβ−１，２−キシロース残基のレベルを分析し、他の植物系統よりも低レベルのβ−１，２−キシロース残基をタンパク質結合Ｎ−グリカン上に有する植物系統を同定すること；
（ｄ）植物系統におけるタンパク質結合Ｎ−グリカン上の該低レベルのβ−１，２−キシロース残基を、特異的Nicotiana  ＸｙｌＴアレルの存在と相関づけること
の工程を含む方法。
【請求項３１】
タンパク質結合Ｎ−グリカン上に低レベルのβ−１，２−キシロース残基を有するNicotiana植物細胞または植物を得る方法であって、以下：
ａ）請求項３０記載の方法によりタンパク質結合Ｎ−グリカン上の低レベルのβ−１，２−キシロース残基と相関するNicotiana  ＸｙｌＴアレルを同定すること；および
ｂ）選択したNicotiana植物系統に該Nicotiana  ＸｙｌＴアレルを導入すること
の工程を含む方法。
【請求項３２】
配列番号１２もしくは配列番号１４のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする単離されたＤＮＡフラグメント、またはNicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするその任意の部分。
【請求項３３】
配列番号１１、配列番号１３、もしくは配列番号２１のヌクレオチド配列を含む、請求項３２記載の単離されたＤＮＡフラグメント、またはNicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含むその任意の部分。
【請求項３４】
配列番号４、配列番号６、配列番号８、もしくは配列番号１０のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする単離されたＤＮＡフラグメント、またはNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするその任意の部分。
【請求項３５】
配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、もしくは配列番号１７のヌクレオチド配列を含む、請求項３４記載の単離されたＤＮＡフラグメント、またはNicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含むその任意の部分。
【請求項３６】
Nicotiana種またはNicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする、請求項２８記載の方法により得ることができる単離されたＤＮＡフラグメント。
【請求項３７】
Nicotiana種またはNicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む、請求項３６記載の単離されたＤＮＡフラグメント。
【請求項３８】
以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメント：
ａ）植物発現可能プロモーター；
ｂ）以下：
ｉ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、アンチセンス方向の、第一のＤＮＡ領域；および
ｉｉ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、センス方向の、第二のＤＮＡ領域
を含む転写可能ＤＮＡ領域であって、
該転写可能ＤＮＡ領域の転写により生成するＲＮＡ分子が、少なくとも該第一のＤＮＡ領域に対応するＲＮＡ領域と、該第二のＲＮＡ領域に対応するＲＮＡ領域との間で塩基対形成することによって二本鎖ＲＮＡ領域を形成することができる転写可能ＤＮＡ領域；および
ｃ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域
を含むキメラ遺伝子。
【請求項３９】
以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメント：
ａ）植物発現可能プロモーター；
ｂ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、センス方向の、ＤＮＡ領域；および
ｃ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域
を含むキメラ遺伝子。
【請求項４０】
以下の作動可能に連結したＤＮＡフラグメント：
ａ）植物発現可能プロモーター；
ｂ）Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする連続ヌクレオチドか、あるいはNicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子もしくはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列またはその相補体より選択される２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドであって、該２０個のうち１９個の連続ヌクレオチドが、Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む連続ヌクレオチドを含む、アンチセンス方向の、ＤＮＡ領域；および
ｃ）植物において機能する転写終結ポリアデニル化シグナルを含むＤＮＡ領域
を含むキメラ遺伝子。
【請求項４１】
Nicotiana種特異的ＸｙｌＴアミノ酸が、Nicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴアミノ酸である、請求項３８〜４０のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４２】
Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列が、配列番号１２または配列番号１４のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項３８〜４１のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４３】
Nicotiana種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドがNicotiana benthamiana特異的ＸｙｌＴヌクレオチドである、請求項３８〜４２のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４４】
Nicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子のヌクレオチド配列が、配列番号１１、配列番号１３、または配列番号２１のヌクレオチド配列を含む、請求項３８〜４３のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４５】
Nicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸が、Nicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴアミノ酸である、請求項３８〜４０のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４６】
Nicotiana  ＸｙｌＴタンパク質をコードするヌクレオチド配列が、配列番号４、配列番号６、配列番号８、または配列番号１０のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項３８〜４０、または４５のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４７】
Nicotiana栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドが、Nicotiana tabacum cv. Petite Havana SR1特異的ＸｙｌＴヌクレオチドである、請求項３８〜４０、４５、または４６のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４８】
Nicotiana  ＸｙｌＴ遺伝子またはNicotiana  ＸｙｌＴ  ｃＤＮＡのヌクレオチド配列が、配列番号３、配列番号５、配列番号８、配列番号１０、または配列番号１７のヌクレオチド配列を含む、請求項３８〜４０または４５〜４７のいずれか１項記載のキメラ遺伝子。
【請求項４９】
請求項３８〜４８のいずれか１項記載のキメラ遺伝子を含む、Nicotiana植物細胞。
【請求項５０】
請求項４９記載のNicotiana植物細胞から実質的になるNicotiana植物。
【請求項５１】
請求項３１記載の方法により得られるNicotiana植物細胞または植物。
【請求項５２】
請求項５０または請求項５１記載のNicotiana植物の種子。
【請求項５３】
Nicotiana植物におけるタンパク質結合Ｎ−グリカン上のβ−１，２−キシロース残基のレベルを減少させるための、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードするヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードする２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドを含む、その任意の部分の使用。
【請求項５４】
Nicotiana植物におけるタンパク質結合Ｎ−グリカン上のβ−１，２−キシロース残基のレベルを減少させるための、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含む２０個のうち少なくとも１９個の連続ヌクレオチドを含むその任意の部分の使用。
【請求項５５】
Nicotiana種または栽培品種におけるＸｙｌＴ遺伝子またはＸｙｌＴ  ｃＤＮＡを同定するための、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードするヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするその任意の部分の使用。
【請求項５６】
Nicotiana種または栽培品種におけるＸｙｌＴ遺伝子またはＸｙｌＴ  ｃＤＮＡを同定するための、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含むその任意の部分の使用。
【請求項５７】
Nicotiana種または栽培品種におけるタンパク質結合Ｎ−グリカン上の低レベルのβ−１，２−キシロース残基と相関するＸｙｌＴ遺伝子のアレルを同定するための、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードするヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするその任意の部分の使用。
【請求項５８】
Nicotiana種または栽培品種におけるタンパク質結合Ｎ−グリカン上の低レベルのβ−１，２−キシロース残基と相関するＸｙｌＴ遺伝子のアレルを同定するための、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含むその任意の部分の使用。
【請求項５９】
Nicotiana種または栽培品種におけるタンパク質結合Ｎ−グリカン上の低レベルのβ−１，２−キシロース残基に相関するＸｙｌＴ遺伝子のアレルを導入するための、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、もしくは配列番号１４のアミノ酸配列を含むタンパク質をコードするヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴアミノ酸を少なくとも一つコードするその任意の部分の使用。
【請求項６０】
Nicotiana種または栽培品種におけるタンパク質結合Ｎ−グリカン上の低レベルのβ−１，２−キシロース残基に相関するＸｙｌＴ遺伝子のアレルを導入するための、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１７、もしくは配列番号２１のヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列の、またはNicotiana種もしくは栽培品種特異的ＸｙｌＴヌクレオチドを少なくとも一つ含むその任意の部分の使用。