(57)【要約】  式（Ｉ）に示される化合物、または式（Ｉ）に示される化合物の異性体、立体異性体、幾何異性体、互変異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学的に許容される塩またはプロドラッグである。2022501390.tif 000062【選択図】なし
2022501390.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物であって、互いに結合した腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群を含み、前記腫瘍マトリックス調節群は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記細胞毒性群は腫瘍細胞を殺すために使用されることを特徴とする、化合物。
【請求項２】
前記腫瘍マトリックス調節群は、カルシポトリオール、シクロパミン、ガンシクロビル、フィンゴリモド、オールトランスレチノイン酸及びヒアルロニダーゼから選ばれる少なくとも１つを含むことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記細胞毒性群は、トリプトライド、パクリタキセル、ドセタキセル、アドリアマイシン、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シスプラチン、イリノテカン、オキサリプラチン、ペメトレキセド、カペシタビン、エピルビシン、ソラフィーニ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、エベロリムス、スニチニブ、イブルチニブ、クリゾチニブ、パゾパニブ、カーフィルゾミ、トファシチニブ、アキシチニブ、レゴフィニル、ベロフィーニ、シロリムス、ペナチニブ、レバチニブ、オラベニ、セリチニブ、ロミデプシン、アレクチニブ、ベリスタット、ボスチニブ、ヴァンデタニ、カボチニブ、アファチニブ、トラメチニブ、ダラフェニブ及びラパチニブから選ばれる少なくとも１つを含み、
任意選択で、前記化合物は酵素分解架橋剤をさらに含み、
任意選択で、前記酵素分解架橋剤は、以下のような構造の少なくとも１つを含み、
2022501390.tif 000043
ことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
化合物であって、以下の１つの構造または前記構造の異性体、立体異性体、幾何異性体、互変異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学的に許容される塩またはプロドラッグを含み、
2022501390.tif 000044
ただし、Ｒ１は、独立してカルシポトリオール、シクロパミン、ガンシクロビル、フィンゴリモド、オールトランスレチノイン酸またはヒアルロニダーゼであり、
Ｒ２は、独立してトリプトライド、パクリタキセル、ドセタキセル、アドリアマイシン、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シスプラチン、イリノテカン、オキサリプラチン、ペメトレキセド、カペシタビン、エピルビシン、ソラフィーニ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、エベロリムス、スニチニブ、イブルチニブ、クリゾチニブ、パゾパニブ、カーフィルゾミ、トファシチニブ、アキシチニブ、レゴフィニル、ベロフィーニ、シロリムス、ペナチニブ、レバチニブ、オラベニ、セリチニブ、ロミデプシン、アレクチニブ、ベリスタット、ボスチニブ、ヴァンデタニ、カボチニブ、アファチニブ、トラメチニブ、ダラフェニブまたはラパチニブである、化合物。
【請求項５】
以下の１つの構造を含み、
2022501390.tif 000045
2022501390.tif 000046
2022501390.tif 000047
2022501390.tif 000048
2022501390.tif 000049
2022501390.tif 000050
2022501390.tif 000051
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2022501390.tif 000053
2022501390.tif 000054
2022501390.tif 000055
2022501390.tif 000056
2022501390.tif 000057
2022501390.tif 000058
ことを特徴とする請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
化合物であって、式（Ｉ）に示される化合物、または式（Ｉ）に示される化合物の異性体、立体異性体、幾何異性体、互変異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学的に許容される塩またはプロドラッグである  
2022501390.tif 000059
、化合物。
【請求項７】
式（Ｉ）に示される化合物の異性体は式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）に示される構造を有する
2022501390.tif 000060
ことを特徴とする請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
医薬組成物であって、請求項１〜７に記載の化合物を有効成分として含むことを特徴とする、医薬組成物。
【請求項９】
薬学的に許容される賦形剤をさらに含むことを特徴とする、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記医薬組成物はミセル、乳剤、アルブミンナノ粒子、リポソーム、カプセル剤、丸剤、錠剤、顆粒剤、経口液剤、経口軟膏、エアロゾルまたはスプレーの形態であり、
好ましくは、前記医薬組成物はミセルの形態であり、且つ前記ミセルはポリエチレングリコールポリ乳酸ブロック共重合体、モノメトキシポリエチレングリコールポリ乳酸、モノメトキシポリエチレングリコールポリ乳酸グリコール酸共重合体、モノメトキシポリエチレングリコールポリカプロラクトン、モノメトキシポリエチレングリコールポリトリメチレンカーボネート及びモノメトキシポリエチレングリコールポリアミノ酸の少なくとも１つにより形成されることを特徴とする、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
他の抗膵臓癌薬物をさらに含み、前記他の抗膵臓癌薬物は５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ、ゲムシタビン、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ、ナノパクリタキセル／ゲムシタビンの組合わせ及びＯＮＩＶＹＤＥTMの１つまたは複数を含むことを特徴とする、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
癌の治療または予防に使用される薬物の調製における請求項１〜７のいずれかに記載の化合物または請求項８〜１１のいずれかに記載の医薬組成物の用途。
【請求項１３】
前記癌は膵臓癌、肝臓癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌または線維芽細胞腫であり、
好ましくは、前記癌は膵臓癌であることを特徴とする、請求項１２に記載の用途。
【請求項１４】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物を調製する方法であって、第１結合成分と第２結合成分を接続反応するステップを含み、前記第１結合成分は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記第２結合成分は腫瘍細胞を殺すために使用されることを特徴とする、方法。
【請求項１５】
前記接続反応は、第１結合成分、第２結合成分、及びリンカーが同時に存在するという条件の下で行われ、前記リンカーは式（８８）〜式（９７）に示される化合物の少なくとも１つであり、
2022501390.tif 000061
ただし、ｎは１〜１０であることを特徴とする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記第１結合成分はカルシポトリオールであり、前記第２結合成分はトリプトライドであり、前記リンカーは式（８８）に示される化合物であることを特徴とする、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記第１結合成分と前記第２結合成分のモル比は１：１であることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医療分野に関し、具体的には、本発明は、化合物及びその用途に関し、より具体的には、本発明は化合物、式（Ｉ）に示される化合物、化合物を含む医薬組成物、化合物及び組成物の用途、並びに化合物の調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
膵臓癌は、悪性度が非常に高く、診断や治療の両方とも困難である消化管の悪性腫瘍であり、約９０％は腺管上皮に由来する腺管腺癌である。その罹患率と死率は、近年大幅に増加している。５年生存率は、５％未満であり、最も予後の悪い悪性腫瘍の一つである。膵臓癌の早期診断率は高くなく、外科的死率は高く、治癒率は非常に低い。
【０００３】
膵臓癌の原因はよくわかっていない。その発生は、喫煙、飲酒、高脂肪および高タンパク質の食事、過剰なコーヒーの消費、環境汚染、および遺伝的要因に関連していて、最近の調査報告によると、糖尿病患者の膵臓癌の発生率は一般の人よりも大幅に高いことがわかって、また、慢性膵炎の患者は膵臓癌の発生率と一定の関係があることに気づき、慢性膵炎の患者の膵臓癌の割合が大幅に増加していることがわかり、さらに、職業、環境、地理など、この病気の発生に関連する多くの要因がある。
【０００４】
膵臓癌の臨床症状は、癌の場所、疾患の期間、転移の有無及び隣接する臓器の関与の状況によって決められる。その臨床的特徴は、疾患全体の短期間の経過、疾患の急速な進行および急速な悪化である。最も一般的なのは上腹部の不快感と痛みである。意識的な痛みがあるが、すべての患者が圧痛を持っているわけではなく、圧痛がある場合、意識的な痛みの部位と同じである。
【０００５】
既存の研究によると、膵臓癌の組織病理学的特徴は、マトリックスが癌組織の大部分、約８０％を占め、癌細胞が少数を占めることが認められる。膵臓癌組織のこの病理学的特徴は、その非常に乏しい血管系につながり、その投薬は困難であり、免疫療法は効果がない。
【０００６】
したがって、膵臓癌の効果的な治療法を見つけることは、科学者が解決しようとする主要な問題である。
【発明の概要】
【０００７】
本出願は、次の事実と問題についての発明者の発見と理解に基づいてなされたものである。
【０００８】
膵臓癌組織では、癌細胞は実際には約２０％しか占めておらず、そのうちの７０％以上が細胞外マトリックス（ｓｔｒｏｍａ）である。細胞外マトリックスには、線維芽細胞、免疫および炎症細胞、内皮細胞、及び複雑な細胞外メディエーターが含まれる。臨床症状は、膵臓癌組織のテクスチャーが硬いことであり、病理学的検査により、多数のコラーゲン線維が比較的少数の膵臓癌細胞を取り囲んでいることがわかった。これらの少量の癌細胞は腫瘍マトリックスの「保護」の下で体の免疫系の監視をスムーズに回避し、不当な増殖、分化及び転移を行うことができる。
【０００９】
Ｓｔｒｏｍａの発生と発達は膵臓星細胞（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｓｔｅｌｌａｔｅ  ｃｅｌｌ、  ＰＳＣ）に直接関係がある。ＰＳＣは、膵臓腺房細胞の基部に位置する筋線維芽細胞であり、通常の状況では、ＰＳＣが休止状態にあり、その細胞質内には、ビタミンＡを含む多数の脂肪滴が含まれ、通常は、細胞外マトリックスの合成と分解のための酵素または阻害剤を分泌して、細胞外マトリックスの分泌と分解のバランスを維持するようにする。膵臓が損傷したり、膵臓の炎症が起こったりすると、ＰＳＣは細胞キナーゼ、成長因子、低酸素圧等などの刺激によって活性化され、活性化されたＰＳＣは細胞質内の脂肪滴を失うと同時に、急速に増殖し、多数の細胞成長因子受容体（血管内皮成長因子受容体ＶＥＧＦＲ、線維芽細胞成長因子受容体など）、細胞外マトリックスタンパク質（コラーゲン、ラミニン、インテグリンを含む）及びマトリックスタンパク質分解酵素阻害剤（メタロプロテイナーゼ阻害剤、ヒアルロニダーゼ阻害剤など）などを分泌する。ＰＳＣの活性化は、膵臓癌組織外の各成分のバランスを崩し、多数の結合組織が過形成し、マトリックス分解酵素の分泌が減少し、一方が減少するとともに、もう一方が増長することによって、腫瘍外マトリックスの含有量が大幅に増加してしまう。このような複雑なｓｔｒｏｍａに富む微小環境は、免疫監視から腫瘍細胞を保護し、多くの免疫療法を無効にする一方で、腫瘍血管の形成を制限し、物理的障壁として、抗腫瘍化学療法剤の腫瘍細胞への侵入を大幅に制限し、それにより、化学療法剤はその効力を失い、最終的に腫瘍の進化、浸潤および転移を促進する。
【００１０】
これによると、特に膵臓癌ｓｔｒｏｍａによって生成される「原因」−活性化されたＰＳＣについて、本出願の発明者は、小分子薬を使用してＰＳＣを「休眠」させることによって、ｓｔｒｏｍａの生成を減少する。それと同時に、小分子化学療法剤は化学的に結合されることによって、膵臓腫瘍細胞と膵臓星細胞を同時に標的とする二重標的機能を備え、且つより優れた製剤及び創薬可能性を有するカップリング分子を取得し、小分子薬の薬物動態特性を改善するために適切な薬物製剤をさらに使用することにより、ｓｔｒｏｍａの生成及び癌細胞の抑制に対して最良の相乗効果を達成し、それにより、膵臓癌腫瘍の薬剤耐性環境を改善し、腫瘍細胞の効果的な死滅を向上させる。
【００１１】
本出願の具体的な手段設計及び作用効果は以下の通りである。
ＰＳＣに作用する小分子阻害剤はカルシポトリオール（Ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｏｌ、  Ｃａｌ）を例として、非常に効果的な小分子化学療法薬はトリプトライド（Ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ、  ＴＰ）を例とする。発明者は、トリプトライドとカルシポトリオールを酵素分解架橋剤を介して接続し、新しい、二重標的カップリング化合物を合成するように設計され、本出願において、この化合物は「Ｃａｌｌｉｄｅ」と呼ばれる。ＴＰオリジナル薬と比べて、Ｃａｌｌｉｄｅの分子量が増加し、結晶化傾向が遅く、且つ疎水性が高くなる。したがって、様々なナノ薬物送達システム（例えばポリマーミセル、アルブミン複合ナノ粒子、リポソームなど）は、Ｃａｌｌｉｄｅのロードと送達が容易であり、それによりＣａｌｌｉｄｅの薬物動態を最適化し、腫瘍部位でのＣａｌｌｉｄｅの濃縮を向上させ、ＴＰの毒性副作用を低下させる。同時に、Ｃａｌｌｉｄｅはインビボでエステラーゼによって触媒作用され分解されてＣａｌとＴＰを生成し、それにより、ＣａｌとＴＰの薬物動態をより良く同期させ、ＰＳＣ休眠（カルシポトリオール）と膵臓癌腫瘍細胞（トリプトライド）の抑制という二重標的、相乗効果を実現し、且つ毒性副作用が大幅に削減される。
【００１２】
これに基づいて、本発明の第１態様において、本発明は、化合物を提供する。本発明の実施例によれば、互いに結合した腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群を含み、前記腫瘍マトリックス調節群は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記細胞毒性群は腫瘍細胞を殺すために使用される。本発明の実施例による化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による化合物の薬物動態特性が向上され、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群の薬物動態を同期させ、マトリックス（ｓｔｒｏｍａ）の生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果があり、腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬剤の毒性副作用が大幅に低下される。
【００１３】
本発明の実施例によれば、上記の化合物は以下の追加の技術的特徴のうちの少なくとも１つをさらに含んでもよい。
【００１４】
本発明の実施例によれば、前記腫瘍マトリックス調節群は、カルシポトリオール（Ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｏｌ、Ｃａｌ）、シクロパミン（Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ）、ガンシクロビル（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ、ＧＣＶ）、フィンゴリモド（Ｆｉｎｇｏｌｉｍｏｄ）、オールトランスレチノイン酸（ａｌｌ−ｔｒａｎｓ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ、ＡＴＲＡ）及びヒアルロニダーゼ（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ、ＨＡ）から選ばれる少なくとも１つを含む。
【００１５】
本発明の実施例によれば、前記細胞毒性群は、トリプトライド（Ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ、  ＴＰ）、パクリタキセル、ドセタキセル、アドリアマイシン、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シスプラチン、イリノテカン、オキサリプラチン、ペメトレキセド、カペシタビン、エピルビシン、ソラフィーニ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、エベロリムス、スニチニブ、イブルチニブ、クリゾチニブ、パゾパニブ、カーフィルゾミ、トファシチニブ、アキシチニブ、レゴフィニル、ベロフィーニ、シロリムス、ペナチニブ、レバチニブ、オラベニ、セリチニブ、ロミデプシン、アレクチニブ、ベリスタット、ボスチニブ、ヴァンデタニ、カボチニブ、アファチニブ、トラメチニブ、ダラフェニブ及びラパチニブから選ばれる少なくとも１つを含む。
【００１６】
上記の腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群を任意に組み合わせることによって得られた化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することを実現でき、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。
【００１７】
本発明の実施例によれば、前記化合物は酵素分解架橋剤をさらに含む。さらに、前記化合物はインビボで酵素によって触媒作用され分解されて腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物を生成し、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物の薬物動態をより良く同期させ、ＰＳＣ休眠と腫瘍細胞の抑制を促進する相乗効果を実現する。
【００１８】
本発明の実施例によれば、前記酵素分解架橋剤は、以下のような構造の少なくとも１つを含む。
2022501390.tif 000003
【００１９】
本発明の第２態様において、本発明は化合物を提供する。本発明の実施例によれば、以下の１つの構造または前記構造の異性体、立体異性体、幾何異性体、互変異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学的に許容される塩またはプロドラッグを含む。
2022501390.tif 000004
【００２０】
ただし、Ｒ１は独立して、カルシポトリオール、シクロパミン、ガンシクロビル、フィンゴリモド、オールトランスレチノイン酸またはヒアルロニダーゼであり、
Ｒ２は独立して、トリプトライド、パクリタキセル、ドセタキセル、アドリアマイシン、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シスプラチン、イリノテカン、オキサリプラチン、ペメトレキセド、カペシタビン、エピルビシン、ソラフィーニ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、エベロリムス、スニチニブ、イブルチニブ、クリゾチニブ、パゾパニブ、カーフィルゾミ、トファシチニブ、アキシチニブ、レゴフィニル、ベロフィーニ、シロリムス、ペナチニブ、レバチニブ、オラベニ、セリチニブ、ロミデプシン、アレクチニブ、ベリスタット、ボスチニブ、ヴァンデタニ、カボチニブ、アファチニブ、トラメチニブ、ダラフェニブまたはラパチニブである。
【００２１】
本発明の実施例による化合物はインビボで酵素によって触媒作用され分解されて腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物を生成する。さらに、該化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による化合物の薬物動態特性が向上され、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群の薬物動態を同期させ、マトリックス（ｓｔｒｏｍａ）の生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果があり、癌腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬物の毒性副作用を大幅に低下させる。
【００２２】
本発明の実施例によれば、以下の１つの構造を含む。
2022501390.tif 000005
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2022501390.tif 000019
【００２３】
本発明の実施例による上記の化合物は、互いに結合した腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群を含み、前記腫瘍マトリックス調節群は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記細胞毒性群は腫瘍細胞を殺すために使用される。本発明の実施例による化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による上記の化合物の薬物動態特性が向上され、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群的薬物動態を同期させ、マトリックス（ｓｔｒｏｍａ）の生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果があり、癌腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬物の毒性副作用を大幅に低下させる。
【００２４】
本発明の第３態様において、本発明は化合物を提供する。本発明の実施例によれば、前記化合物は式（Ｉ）に示される化合物、または式（Ｉ）に示される化合物の異性体、立体異性体、幾何異性体、互変異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学的に許容される塩またはプロドラッグであり、
2022501390.tif 000020
【００２５】
本発明の実施例による化合物は、１）膵臓癌組織内の膵臓星細胞及び膵臓癌腫瘍細胞を効果的に同時に制御する。２）ＴＰと比べて、Ｃａｌｌｉｄｅの薬物動態特性は大幅に最適化され、毒性は大幅に低減される。３）高い臨床的関連性を備える膵臓癌のトランスジェニックマウスモデルでは、該化合物は、従来の膵臓癌を治療するための一次治療薬、例えばゲムシタビンと比べて、腫瘍動物の中央値生存期間を顕著に延長させる。
【００２６】
本発明の実施例によれば、前記式（Ｉ）に示される化合物の異性体は式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）に示される。
2022501390.tif 000021
【００２７】
本発明の実施例による上記式（ＩＩ）と式（ＩＩＩ）に示される化合物は、式（Ｉ）に示される化合物と同様の性質を有する。即ち、膵臓癌組織内の膵臓星細胞と膵臓癌腫瘍細胞を効果的に同時に制御することができ、ＴＰと比べて、式（ＩＩ）と式（ＩＩＩ）に示される化合物の薬物動態特性は大幅に最適化され、毒性は大幅に低減され、且つ、高い臨床的関連性を備える膵臓癌のトランスジェニックマウスモデルでは、従来の膵臓癌を治療するための一次治療薬、例えばゲムシタビンと比べて、腫瘍動物の中央値生存期間を顕著に延長させる。
【００２８】
本発明の第４態様において、本発明は医薬組成物を提供する。本発明の実施例によれば、前記医薬組成物は前述の化合物を有効成分として含む。本発明の実施例による医薬組成物は、癌組織内のマトリックスの形成を効果的に制御するとともに腫瘍をより効果的に治療することができる。本発明の実施例による医薬組成物は従来の癌治療薬と比較して、より長い半減期と治療ウィンドウ、及び著しく低減される治療毒性を有する。
【００２９】
本発明の実施例によれば、上記医薬組成物は以下の追加の技術的特徴のうちの少なくとも１つをさらに含むことができる。
本発明の実施例によれば、前記医薬組成物は、薬学的に許容される賦形剤をさらに含む。
【００３０】
本発明の実施例によれば、前記医薬組成物は、ミセル、乳剤、アルブミンナノ粒子、リポソーム、カプセル剤、丸剤、錠剤、顆粒剤、経口液剤、経口軟膏、エアロゾルまたはスプレーの形である。それにより、投与が容易である。
【００３１】
本発明の実施例によれば、前記医薬組成物はミセルの形であり、且つ前記ミセルは、ポリエチレングリコール-ポリ乳酸ブロック共重合体、モノメトキシポリエチレングリコールポリ乳酸、モノメトキシポリエチレングリコールポリ乳酸グリコール酸共重合体、モノメトキシポリエチレングリコールポリカプロラクトン、モノメトキシポリエチレングリコールポリトリメチレンカーボネート及びモノメトキシポリエチレングリコールポリアミノ酸の少なくとも１つによって形成される。それにより、有効成分は、人体の細網内皮系の食作用や他のインビボ環境の影響から保護され、患部でゆっくりと放出されるだけでなく、有効成分の薬物負荷及び生物学的利用能を効果的に向上でき、それにより、癌の治療または予防の効果をよりよく発揮する。
【００３２】
本発明の実施例によれば、前記医薬組成物は他の抗膵臓癌薬物をさらに含み、前記他の抗膵臓癌薬物は、５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ、ゲムシタビン、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ、ナノパクリタキセル／ゲムシタビンの組み合わせ及びＯＮＩＶＹＤＥTMの１つまたは複数を含む。他の膵臓癌治療薬物と組み合わせると、膵臓癌に対する前記医薬組成物の治療効果がより著しい。
【００３３】
本発明の第５態様において、本発明は、薬物の調製における前述の化合物または前述の医薬組成物の用途を提供し、前記薬物は、癌の治療または予防に使用される。本発明の実施例によるカップリング化合物または医薬組成物中の有効成分は、インビボで腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物に効果的に分解されることができ、腫瘍マトリックス調節群は腫瘍マトリックスの成長を効果的に抑制でき、細胞毒性群は細胞毒性効果を発揮して、腫瘍細胞の効果的な死滅を達成し、さらに、本発明の実施例による化合物または医薬組成物は、癌の治療または予防のために効果的に使用されることができる。
【００３４】
本発明の実施例によれば、上記の用途は以下の追加の技術的特徴のうちの少なくとも１つをさらに含んでもよい。
本発明の実施例によれば、前記癌は、膵臓癌、肝臓癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌または線維芽細胞腫である。発明者は、上記の腫瘍は明らかなマトリックス微小環境を有し、本発明の実施例による化合物または医薬組成物を使用して、上記癌の治療効果により優れたことを発見した。
【００３５】
本発明の実施例によれば、前記癌は膵臓癌である。本発明の実施例による化合物または医薬組成物を使用して、膵臓癌に対する治療効果がより顕著である。
【００３６】
本発明の第６態様において、本発明は前述の化合物を調製する方法を提供する。本発明の実施例によれば、前記方法は、第１結合成分と第２結合成分を接続反応するステップを含み、前記第１結合成分は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記第２結合成分は腫瘍細胞を殺すために使用される。本発明の実施例による上記方法によって得られる化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による方法によって得られる化合物の薬物動態特性が向上され、第１結合成分と第２結合成分の薬物動態を同期させ、マトリックスの生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果を発揮し、癌腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬物の毒性副作用を大幅に低下させる。
【００３７】
本発明の実施例によれば、上記方法は以下の追加の技術的特徴のうちの少なくとも１つをさらに含んでもよい。
【００３８】
本発明の実施例によれば、前記接続反応は、第１結合成分、第２結合成分、及びリンカーが同時に存在するという条件の下で行われ、前記リンカーは式（８８）〜式（９７）に示される化合物の少なくとも１つである。
2022501390.tif 000022
【００３９】
ただし、ｎは１−１０である。式（８８）〜式（９７）に示される化合物は、第１結合成分と第２結合成分を化学的に結合して、安定な上記の化合物を形成するための効果的なリンカーとして使用することができる。
【００４０】
本発明の実施例によれば、前記第１結合成分はＣａｌであり、前記第２結合成分はＴＰであり、前記リンカーは式（８８）に示される化合物である。それにより、接続反応は効率が高い。
【００４１】
本発明の実施例によれば、前記第１結合成分と前記第２結合成分のモル比は１：１である。それにより、第２結合成分は腫瘍細胞の抑制作用が顕著であり、第１結合成分は癌マトリックスの形成の抑制作用が顕著であり、両者の相乗的な治療効果は顕著である。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】本発明の実施例による合成式（Ｉ）に示される化合物（ここでＣａｌｌｉｄｅと呼ばれ、合成経路の化合物５である）とＣａｌｌｉｄｅロードミセルの調製（ここでＣａｌｌｉｄｅＮＰと呼ばれる）である。
【図２】本発明の実施例によるブタ肝臓エステラーゼ（Ｐｏｒｃｉｎｅ  ｌｉｖｅｒ  Ｅｓｔｅｒａｓｅ、ＰＬＥ）があるまたはないという条件の下でＴＰ、Ｃａｌ、ＴＰ／Ｃａｌ  ａｎｄ  ＣａｌｌｉｄｅＮＰで細胞を処理した後、細胞の生存率の結果図である。
【図３】本発明の実施例による投薬後のラットにおける血漿薬物-時間曲線及び薬物の薬物動態パラメータ図である。
【図４】本発明の実施例による投薬後のマウスの体重変化（上）と精巣指数（下）の結果図である。
【図５】本発明の実施例による投薬後のインビトロのマウス由来膵臓星細胞と膵臓癌細胞の平滑筋アクチンとコラーゲンの表現状況図である。
【図６】本発明の実施例による投薬後のインビボのマウス由来膵臓星細胞と膵臓癌細胞を同所性モデルに共移植する腫瘍抑制とマウス生存率の延長効果図である。
【図７】本発明の実施例によるＴＰはＣＤＸモデルでＣａｌｌｉｄｅＮＰよりも効果的に腫瘍の成長を抑制できる図である。
【図８】本発明の実施例によるＣａｌｌｉｄｅＮＰはヒト異種移植モデルにおいて膵臓癌腫瘍の成長を効果的に低減することができる図である。
【図９】本発明の実施例による投薬前後のヌードマウスの写真である。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
以下、本発明の実施例を詳細に説明する。以下で説明される実施例は例示的なものであり、本発明を説明するためにのみ使用されるが、本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。実施例に具体的な技術または条件が示されていない場合、本分野内の文献に記載されている技術または条件に従って、または製品仕様に従って実行される。メーカーなしで用いられる試薬または機器はすべて、商業的に購入できる従来の製品である。
【００４４】
ここで、本発明のある実施手段を詳細に説明し、その例は、付随する構造式及び化学式によって示される。本発明は、請求項によって定義される本発明の範囲に含まれるすべての代替、修正、および同等の技術的解決策を網羅することを意図する。当業者は、本発明に記載されるものと類似または同等の多くの方法及び材料を使用して、本発明を実施できることを認識すべきである。本発明は本発明に記載の方法及び材料に決して限定されない。組み合わせた文献、特許及び類似の材料の１つまたは複数は本出願と異なるか矛盾する場合（定義された用語、用語の使用、記述された技術などを含むが、これらに限定されない）、本出願が優先するものとする。
【００４５】
明確にするために、本発明のある特徴は、複数の独立した実施手段で説明されたが、単一の実施例で組合わせて提供されてもよいことをさらに認識すべきである。逆に、簡潔にするために、本発明の様々な特徴は、単一の実施手段で説明されたが、個別にまたは任意の適切なサブ組合わせで提供されてもよい。
【００４６】
特に明記しない限り、本発明で使用されるすべての科学技術用語は当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本発明に関連するすべての特許及び刊行物は対照により全体が本発明に組み込まれる。
【００４７】
特に明記しない限り、本発明で使用される以下の定義が適用されるべきである。本発明の目的のために、化学元素は元素の周期表のＣＡＳバージョン、及び「化学及び学ハンドブック」、第７５版、１９９４と一致している。なお、有機化学の一般原則について、「Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、  Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ、  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ、  Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：  １９９９、  及び「Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」  ｂｙ  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｂ．  Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：  ２００７の記載を参照でき、その全内容は、参照により本発明に組み込まれる。
【００４８】
特に明記しない限り、または文脈に明らかな矛盾がある場合を除き、ここで使用される冠詞「一」、「１つ（種）」及び「前記」は、「少なくとも１つ」または「１つまたは複数」を含むことを意図する。したがって、ここで使用されるこれらの冠詞は、１つまたは１つ以上（即ち少なくとも１つ）目的語の冠詞を指す。例えば、「一成分」とは、１つまたは複数の成分を指し、即ち、１つ以上の成分が前記実施手段の実施形態に採用または使用されると考えられる。
【００４９】
化合物
本発明の第１態様において、本発明は化合物を提供する。本発明の実施例によれば、前記化合物は互いに結合した腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群を含み、前記腫瘍マトリックス調節群は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記細胞毒性群は腫瘍細胞を殺すために使用される。本発明の実施例による化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による化合物の薬物動態特性が向上され、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群の薬物動態を同期させ、マトリックスｓｔｒｏｍａの生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果を果たし、癌腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬物の毒性副作用を大幅に低下させる。
【００５０】
本発明の実施例によれば、前記腫瘍マトリックス調節群は、カルシポトリオール（Ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｏｌ、  Ｃａｌ）、シクロパミン（Ｃｙｃｌｏｐａｍｉｎｅ）、ガンシクロビル（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ、  ＧＣＶ）、フィンゴリモド（Ｆｉｎｇｏｌｉｍｏｄ）、オールトランスレチノイン酸（ａｌｌ−ｔｒａｎｓ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ、  ＡＴＲＡ）以及びヒアルロニダーゼ（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ、  ＨＡ）から選ばれる少なくとも１つを含む。カルシポトリオール（Ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｏｌ、  Ｃａｌ）はＶＤＲリガンドであり、ＰＳＣの主な調節因子であり、ＰＳＣの休止状態への復帰の調節に参加し、それにより、マトリックス含有量を誘導し、シクロパミンは、Ｈｅｄｇｅｈｏｇシグナル伝達経路におけるＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄ（Ｓｍｏ）タンパク質に結合でき、それにより、該タンパク質の活性を抑制し、マトリックスの形成を減少させ、ガンシクロビルは、競合によりデオキシグアノシンの三価リン酸塩とＤＮＡポリメラーゼとの結合を阻害することによって腫瘍マトリックス内の過剰増殖するα−ＳＭＡ陽性線維芽細胞の数を抑制でき、それにより、マトリックスの含有量を減らし、フィンゴリモドは、スフィンゴシンリン酸塩受容体の調節剤として、ＡＭＰＫ／ｍＴＯＲ経路を阻害し、細胞のオートファジーを抑制し、細胞のアポトーシスを促進することによって、膵臓星細胞の活性化を抑制し、オールトランスレチノインはビタミンＡの類似体であり、その作用機序はカルシポトリオールと同じで、腫瘍が生成する線維芽細胞ビタミン受容体に作用してマトリックスの含有量を減らすことができ、ヒアルロニダーゼは、腫瘍マトリックスの重要な組成部分であるヒアルロン酸を効果的に分解し、マトリックスの密度と含有量を直接減少させることができる。
【００５１】
本発明の実施例によれば、前記細胞毒性群は、トリプトライド（Ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ、  ＴＰ）、パクリタキセル、ドセタキセル、アドリアマイシン、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シスプラチン、イリノテカン、オキサリプラチン、ペメトレキセド、カペシタビン、エピルビシン、ソラフィーニ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、エベロリムス、スニチニブ、イブルチニブ、クリゾチニブ、パゾパニブ、カーフィルゾミ、トファシチニブ、アキシチニブ、レゴフィニル、ベロフィーニ、シロリムス、ペナチニブ、レバチニブ、オラベニ、セリチニブ、ロミデプシン、アレクチニブ、ベリスタット、ボスチニブ、ヴァンデタニ、カボチニブ、アファチニブ、トラメチニブ、ダラフェニブ及びラパチニブから選ばれる少なくとも１つを含む。トリプトライド（Ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ、  ＴＰ）は強力なＴＦＩＩＡＨ阻害剤であり、ＦＩＩＡＨは普遍的な転写因子であり、転写されるＤＮＡをプロモーターに動員して転写し、且つこれらのＤＮＡを巻き出し、また、細胞のＤＮＡが損傷している場合、遺伝子修復の過程でＴＦＩＩＡＨもＤＮＡを巻き出すために使用され、癌細胞の過剰な増殖はいずれも、ＤＮＡの転写、及び関連するｍＲＮＡの表現を伴い、したがって、ＴＦＩＩＡＨは正常組織よりも高度表現しており、癌を治療するための化学療法薬物の標的となり、ＴＰは効果的な膵臓癌治療薬物であり、パクリタキセルとドセタキセルは、腫瘍細胞チューブリンの合成を阻害するために使用でき、それにより、腫瘍細胞の増殖を抑制し、腫瘍の抑制作用を果たし、且つ薬物濃度の増加に伴い、インビトロ細胞の生存率は徐々に低下し、アドリアマイシンは、ＲＮＡとＤＮＡの合成を阻害することができ、ＲＮＡへの抑制作用が最も強く、抗腫瘍スペクトルが広く、様々な腫瘍に効果があり、サイクル非特異的薬剤に属し、様々な成長サイクルの腫瘍細胞に殺傷効果があり、細胞増殖試験結果の分析を通じて、細胞の死率は薬物濃度に関連し、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシンは細胞毒性キノリンアルカロイドであり、ＤＮＡトポイソメラーゼ（ＴＯＰＯ  Ｉ）を阻害でき、Ｔｏｐｏ  Ｉ−ＤＮＡによって形成される複合体に結合し、壊れたＤＮＡ鎖が再接合できないようにこの複合体を安定化させ、ＤＮＡ複製及びＲＮＡ合成を阻止し、細胞周期Ｓ期に特異的な薬剤であり、Ｇ０期の細胞に効果がなく、Ｇ１、Ｇ２及びＭ期の細胞にわずかな致死性があり、また、ＤＮＡ構造を直接破壊する可能性があり、したがって、癌細胞の増殖は特定の細胞周期に制限され、それにより、腫瘍細胞の成長に対する抑制作用を達成し、イリノテカンはカンプトテシンの半合成誘導体であり、カンプトテシンはトポイソメラーゼＩに特異的に結合でき、後者は可逆的な一本鎖切断を誘発し、それにより、ＤＮＡの二本鎖構造を巻き出し、癌細胞の死亡を促進し、５−フルオロウラシルは、ウラシルの類似体であるフルオロウラシルであり、細胞内で効果的なフルオロウラシルデオキシヌクレオチドに変換でき、細胞内チミジル酸シンターゼによるデオキシリボ核酸のチミジル酸への変換を阻止することによって、ＤＮＡの合成を干渉し、ゲム���タビンは、ジフルオロヌクレオシド抗代謝抗癌剤であり、デオキシシチジンの水溶性類似体であり、リボヌクレオチドレダクターゼの阻害酵素代替物であり、腫瘍細胞のＤＮＡ複製の過程でＤＮＡの合成を阻止し、それにより、腫瘍細胞の成長を抑制し、シスプラチンは、ＤＮＡに結合して架橋を引き起こすことができ、それにより、ＤＮＡの機能を破壊し、且つ細胞の有糸分裂を抑制し、細胞非特異的薬剤であり、癌細胞の増殖が抑制され、オキサリプラチンは、水和誘導体を生成してＤＮＡに作用し、鎖内及び鎖間架橋を形成することにより、ＤＮＡの合成を阻害し、細胞毒性及び抗腫瘍活性を生成し、ペメトレキセドは、構造上でピロピリミジン基をコアとして含む抗葉酸製剤であり、正常な細胞内葉酸依存性代謝プロセスを破壊することにより、細胞複製を阻害し、それにより、腫瘍の成長を抑制し、カペシタビンは、インビボで５−ＦＵの抗代謝フルオロピリミジンデオキシヌクレオシドカルバメート薬に変換でき、細胞分裂を抑制して、ＲＮＡとタンパク質（ｐｒｏｔｅｉｎ）の合成を妨害でき、さらに癌細胞増殖を抑制し、エピルビシンは、アドリアマイシンの異性体であり、作用機序は、ＤＮＡ核酸塩基ペア間に直接挿入し、転写プロセスを妨害し、ｍＲＮＡの形成を阻止し、それにより、ＤＮＡとＲＮＡの合成を抑制する。
【００５２】
小分子標的薬及びその標的は次の通りであり、ソラフィーニ（ＰＤＧＦ／ＶＥＧＦ）、ゲフィチニブ（ＥＧＦＲ）、エルロチニブ（ＥＧＦＲ／ＨＥＲ２）、イマチニブ（Ｂｃｒ−Ａｂｌ）、ニロチニブ（Ｂｃｒ−Ａｂｌ）、ダサチニブ（Ｂｃｒ−Ａｂｌ）、エベロリムス（Ｂｃｒ−Ａｂｌ）、スニチニブ（ＰＤＧＦ／ＶＥＧＦ）、イブルチニブ（ＢＴＫ）、クリゾチニブ（ＡＬＫ）、パゾパニブ（ＰＤＧＦ／ＶＥＧＦ）、カーフィルゾミ（２６Ｓ  ｐｒｏｔｅａｓｏｍ）、トファシチニブ（ＪＡＫ）、アキシチニブ（ＶＥＧＦＲ）、レゴフィニル（マルチキナーゼ阻害剤）、ベロフィーニ（Ｂ−Ｒａｆ）、シロリムス（ｍＴＯＲ）、ペナチニブ（Ｂｃｒ−Ａｂｌ）、レバチニブ（ＲＴＫ）、オラベニ（ＰＡＲＰ）、セリチニブ（ＡＬＫ）、ロミデプシン（ＨＤＡＣ）、アレクチニブ（ＡＬＫ）、ベリスタット（ＨＤＡＣ）、ボスチニブ（Ｓｒｃ／Ａｂｌ）、ヴァンデタニ（マルチキナーゼ阻害剤）、カボチニブ（Ｃ−Ｍｅｔ）、アファチニブ（ＥＧＦＲ）、トラメチニブ（ＭＥＫ１／２）、ダラフェニブ（ＢＲＡＦ）、ラパチニブ（ＥＧＦＲ／ｅｒｂ２）。以上の小分子標的薬に基づいてそれぞれの標的に対して、薬物は癌細胞の表面または関連する標的に特異的に結合することができ、それにより、癌細胞を特異的に殺し、正常細胞に対する毒性副作用を大幅に減らす。
【００５３】
本発明のカップリング化合物の設計構想に基づいて、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用するために、発明者は、様々な異なる薬物カップリング分子を設計して合成する。異なる分解性リンカーを使用した後、薬物はインビボで様々な程度に分解される可能性があり、薬物カップリング分子の一部は腫瘍マトリックスに対する抑制作用を果たし、他の部分は腫瘍細胞の死滅を達成する。さらに、異なる製剤及び治療計画の設計を通じて、発明者は、腫瘍マトリックスの抑制と癌細胞の死滅との間のバランスを取り、相乗効果の目的を達成するようにする。
【００５４】
本発明の実施例によれば、前記化合物は、酵素分解架橋剤をさらに含む。さらに前記化合物はインビボで酵素によって触媒作用され分解されて腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物を生成し、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物の薬物動態をより良く同期させ、ＰＳＣ休眠と腫瘍細胞の抑制を促進する相乗効果を実現する。
【００５５】
本発明の実施例によれば、前記酵素分解架橋剤は、以下のような構造の少なくとも１つを含む。
2022501390.tif 000023
【００５６】
他の態様において、本発明は化合物を提供する。本発明の実施例によれば、以下の１つの構造または前記構造の異性体、立体異性体、幾何異性体、互変異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学的に許容される塩またはプロドラッグを含む。
2022501390.tif 000024
【００５７】
ただし、Ｒ１は独立して、カルシポトリオール、シクロパミン、ガンシクロビル、フィンゴリモド、オールトランスレチノイン酸またはヒアルロニダーゼであり、
Ｒ２は独立して、トリプトライド、パクリタキセル、ドセタキセル、アドリアマイシン、カンプトテシン、ヒドロキシカンプトテシン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、シスプラチン、イリノテカン、オキサリプラチン、ペメトレキセド、カペシタビン、エピルビシン、ソラフィーニ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、エベロリムス、スニチニブ、イブルチニブ、クリゾチニブ、パゾパニブ、カーフィルゾミ、トファシチニブ、アキシチニブ、レゴフィニル、ベロフィーニ、シロリムス、ペナチニブ、レバチニブ、オラベニ、セリチニブ、ロミデプシン、アレクチニブ、ベリスタット、ボスチニブ、ヴァンデタニ、カボチニブ、アファチニブ、トラメチニブ、ダラフェニブまたはラパチニブである。
【００５８】
本発明の実施例による化合物はインビボで酵素によって触媒作用され分解されて腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物を生成する。さらに該化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による化合物の薬物動態特性が向上され、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群の薬物動態を同期させ、マトリックス（ｓｔｒｏｍａ）の生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果があり、癌腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬物の毒性副作用を大幅に低下させる。
【００５９】
本発明の更なる具体的な実施例によれば、以下の１つの構造を含む。
2022501390.tif 000025
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【００６０】
ただし、化合物（１）〜化合物（２７）は、カルシポトリオールとトリプトライドを酵素分解性リンカーを介して接続することにより形成されるカップリング化合物であり、化合物（２８）〜化合物（５７）はカルシポトリオールとゲムシタビンを酵素分解性リンカーを介して接続することにより形成されるカップリング化合物であり、化合物（５８）〜化合物（８７）はカルシポトリオールとパクリタキセルを酵素分解性リンカーを介して接続することにより形成されるカップリング化合物である。
【００６１】
本発明の実施例による上記の化合物は、互いに結合した腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群を含み、前記腫瘍マトリックス調節群は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記細胞毒性群は腫瘍細胞を殺すために使用される。本発明の実施例による化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による上記の化合物の薬物動態特性が向上され、腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群の薬物動態を同期させ、マトリックス（ｓｔｒｏｍａ）の生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果があり、癌腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬物の毒性副作用を大幅に低下させる。
【００６２】
他の態様において、本発明は、化合物を提供する。本発明の実施例によれば、該化合物は、式（Ｉ）に示される化合物、または式（Ｉ）に示される化合物の異性体（例えば化合物ＩＩ、化合物ＩＩＩ）立体異性体、幾何異性体、互変異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学的に許容される塩またはプロドラッグを有する。
2022501390.tif 000040
【００６３】
本発明の実施例による上記の化合物は、トリプトライドとカルシポトリオールを酵素分解性リンカーを介して接続して合成した新しい、二重標的カップリング化合物であり、本出願はこの化合物を「Ｃａｌｌｉｄｅ」と呼ぶ。ＴＰオリジナル薬と比べて、Ｃａｌｌｉｄｅの分子量が増加され、結晶化傾向が遅く、且つ疎水性が高くなる。様々なナノ薬物送達システム（例えばポリマーミセル、アルブミン複合ナノ粒子、リポソームなど）は、Ｃａｌｌｉｄｅのロードと送達が容易であり、Ｃａｌｌｉｄｅの薬物動態を最適化し、Ｃａｌｌｉｄｅが腫瘍部位での濃縮を向上させ、ＴＰの毒性副作用を減らす。それと同時に、Ｃａｌｌｉｄｅはインビボでエステラーゼによって触媒作用され分解されてＣａｌとＴＰを生成し、これによりＣａｌとＴＰの薬物動態をより良く同期させ、ＰＳＣ休眠（カルシポトリオール）の促進と膵臓癌腫瘍細胞（トリプトライド）の抑制の相乗効果を達成し、且つ毒性副作用が大幅に削減される。本発明の実施例によるカップリング化合物は、膵臓癌組織中のマトリックスの形成を効果的に制御してＴＰの効果的な凝集を実現し、膵臓癌のより効果的な治療を実現する。本発明の実施例による化合物は、従来の治療膵臓癌薬物ＴＰよりも長い半減期及び治療ウィンドウ及び著しく低減され治療毒性を有する。
【００６４】
「異性体」とは、分子式が同じであるが原子配置が異なる化合物を指す。簡単に言えば、化合物の分子式は同じであるが、構造が異なるという現象を異性現象と呼び、分子式が同じであるが、構造が異なる化合物は互いに異性体である。多くの異性体は同様な特性を有する。有機化学では、異性体は類似の物質（同じ官能基を含む）または異なる種類の物質（異なる官能基を含む）である可能性がある。
【００６５】
「立体異性体」とは、化学構造は同じであるが、空間内の原子または基の配置方式が異なる化合物を指す。立体異性体は、エナンチオ異性体、ジアステレオ異性体、立体配座異性体（回転異性体）、幾何異性体（シス/トランス）異性体、アトロプ異性体などを含む。
【００６６】
「キラル」とは、その鏡像と重なることができない分子を指し、「アキラル」とは、その鏡像と重なることができる分子を指す。
【００６７】
「エナンチオ異性体」とは、重なることができないが互いに鏡像である化合物の２つの異性体を指す。
【００６８】
「ジアステレオ異性体」とは、２つまたは複数のキラル中心を有し、その分子が互いに鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオ異性体には、融点、沸点、スペクトル特性、反応性などの異なる物理的特性がある。ジアステレオ異性体混合物は、電気泳動やＨＰＬＣなどのクロマトグラフィーの高分解能分析手順によって分離できる。
【００６９】
本発明で使用される立体化学的定義及び規則は、一般的に、Ｓ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ、  Ｅｄ．、  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ  （１９８４）  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ、  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；  ａｎｄ  Ｅｌｉｅｌ、  Ｅ．  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｎ、  Ｓ．、  “Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”、  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、  Ｉｎｃ．、  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、  １９９４に従う。
【００７０】
多くの有機化合物は光学活性の形で存在し、即ち平面偏光の平面を回転させる能力がある。光学活性化合物を説明する場合、接頭辞ＤとＬまたはＲとＳでその１つまたは複数のキラル中心に関する分子の絶対配置を示す。接頭辞ｄとｌまたは（＋）と  （−）は、化合物によって引き起こされる平面偏光の回転を指定するために使用される記号であり、（−）またはｌは、化合物が左旋性であることを示す。接頭辞が（＋）またはｄである化合物は右旋性であることを示す。ある具体的な立体異性体はエナンチオ異性体であり、このような異性体の混合物をエナンチオ異性体混合物と呼ぶ。エナンチオ異性体の５０：５０混合物は、ラセミ混合物またはラセミ体と呼ばれ、化学反応またはプロセスには立体選択性または立体特異性がない場合に、このような状況が発生する可能性がある。
【００７１】
本発明に開示された化合物の任意の非対称原子（例えば、炭素など）は、（Ｒ）−、（Ｓ）−または（Ｒ、  Ｓ）−配置などのラセミまたはエナンチオマー濃縮された形で存在する。ある実施手段において、各非対称原子は、（Ｒ）−または（Ｓ）−  配置で少なくとも５０％のエナンチオマー過剰、少なくとも６０％のエナンチオマー過剰、少なくとも７０％のエナンチオマー過剰、少なくとも８０％のエナンチオマー過剰、少なくとも９０％のエナンチオマー過剰、少なくとも９５％のエナンチオマー過剰、または少なくとも９９％のエナンチオマー過剰を有する。
【００７２】
出発物質及び方法の選択に応じて、本発明の化合物は、可能な異性体の中の１つまたはそれらの混合物、例えばラセミ体及びジアステレオ異性体混合物（非対称炭素原子の数に応じて）の形で存在する。光学活性の（Ｒ）−または（Ｓ）−異性体は、キラルシントンまたはキラル試薬を使用して調製するか、従来の技術を使用して分離することができる。化合物が二重結合を含む場合、置換基はＥまたはＺ配置であり、化合物が２つの置換シクロアルキルを含む場合、シクロアルキルの置換基はシスまたはトランス配置を有する可能性がある。
【００７３】
得られた任意の立体異性体の混合物は、例えば、クロマトグラフィー法および／または分別結晶法によって、成分の物理的および化学的特性の違いに基づいて、純粋または実質的に純粋な幾何異性体、エナンチオ異性体、ジアステレオ異性体に分離することができる。
【００７４】
既知の方法を使用して任意の最終生成物または中間体のラセミ体を当業者によく知られている方法によって光学エナンチオマーに分解することができ、例えば得られたそのジアステレオマー塩を分離する。ラセミ生成物は、例えばキラル吸着剤を使用する高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などのキラルクロマトグラフィーによっても分離することができる。特に、エナンチオ異性体は不斉合成によって調製されることができ、例えば、Ｊａｃｑｕｅｓ、  ｅｔ  ａｌ．、  Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ、  Ｒａｃｅｍａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  （Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、  １９８１）；Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  （２ｎｄ  Ｅｄ．  Ｒｏｂｅｒｔ  Ｅ．  Ｇａｗｌｅｙ、  Ｊｅｆｆｒｅｙ  Ａｕｂe、  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、  Ｏｘｆｏｒｄ、  ＵＫ、  ２０１２）；Ｅｌｉｅｌ、  Ｅ．Ｌ．  Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  （ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、  ＮＹ、  １９６２）；Ｗｉｌｅｎ、  Ｓ．Ｈ．  Ｔａｂｌｅｓ  ｏｆ  Ｒｅｓｏｌｖｉｎｇ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  ｐ．  ２６８  （Ｅ．Ｌ．  Ｅｌｉｅｌ、  Ｅｄ．、  Ｕｎｉｖ．  ｏｆ  Ｎｏｔｒｅ  Ｄａｍｅ  Ｐｒｅｓｓ、  Ｎｏｔｒｅ  Ｄａｍｅ、  ＩＮ  １９７２）；Ｃｈｉｒａｌ  Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ：  Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  （Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ、  Ｇ．  Ｅｄ．、  Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  Ｖｅｒｌａｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ．  ＫＧａＡ、  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、  Ｇｅｒｍａｎｙ、  ２００７）を参照できる。
【００７５】
「互変異性体」または「互変異性形態」という用語は、低エネルギー障壁（ｌｏｗ  ｅｎｅｒｇｙ  ｂａｒｒｉｅｒ）を介して互いに変換できる異なるエネルギー有する構造異性体を指す。互変異性が可能である場合（溶液中など）、互変異性体の化学バランスに達することができる。例えば、プロトン互変異性体  （ｐｒｏｔｏｎｔａｕｔｏｍｅｒ）（プロトン転移互変異性体（ｐｒｏｔｏｔｒｏｐｉｃ  ｔａｕｔｏｍｅｒ）とも呼ばれる）は、例えケト-エノール異性化やイミン-エナミン異性化などのプロトン移動による相互変換を含む。原子価互変異性体（ｖａｌｅｎｃｅ  ｔａｕｔｏｍｅｒ）はいくつかの結合電子の再結合による相互変換を含む。ケト-エノール互変異性の具体例は、ペンタン−２,４−ジオン及び４−ヒドロキシペント−３−エン−２−オン互変異性体の相互変換である。互変異性の他の例は、フェノール-ケトン互変異性である。フェノール-ケトン互変異性の具体例は、ピリジン−４−オール及びピリジン−４（１Ｈ）−オン互変異性体の相互変換である。特に明記しない限り、本発明の化合物のすべての互変異性形態は、本発明の範囲内である。
【００７６】
本発明で使用される「プロドラッグ」という用語は、インビボでの化合物の式（Ｉ）に示される化合物への変換を表す。このような変換は、血液中のプロドラッグの加水分解、または血液または組織内の母体構造への酵素的変換の影響を受ける。本発明のプロドラッグ化合物はエステルであり得、従来の発明において、プロドラッグとして使用できるエステルは、フェニルエステル類、脂肪族（Ｃ１−２４）エステル類、アシルオキシメチルエステル類、炭酸エステル、カルバメート類及びアミノ酸エステル類がある。例えば本発明における化合物は、ヒドロキシル基を含み、即ちこれをアシル化して、プロドラッグの形態の化合物を得ることができる。他のプロドラッグ形態は、リン酸エステルを含み、例えば、これらのリン酸エステル類化合物が親ヒドロキシル基のリン酸化によって得られる。プロドラッグの完全な議論については、以下の文献、Ｔ．  Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｖ．  Ｓｔｅｌｌａ、  Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、  Ｖｏｌ．  １４  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ、  Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．  Ｒｏｃｈｅ、  ｅｄ．、  Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、  １９８７、  Ｊ．  Ｒａｕｔｉｏ  ｅｔ  ａｌ．、  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、  ２００８、  ７、  ２５５−２７０、  ａｎｄ  Ｓ．  Ｊ．  Ｈｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｏｆ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ、  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、  ２００８、  ５１、  ２３２８−２３４５を参照できる。
【００７７】
「代謝産物」とは、具体的な化合物またはその塩がインビボで代謝作用によって得られる生成物を指す。化合物の代謝産物は、当技術分野で周知の技術によって同定することができ、その活性は、本発明に記載されるような実験方法によって特徴付けることができる。このような生成物は、酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱脂、酵素的切断などを介して化合物を投与することによって得ることができる。対応的に、本発明は、本発明の化合物を哺乳動物と一定期間で十分に接触させることによって生成される代謝産物を含む、化合物の代謝産物を含む。
【００７８】
本発明で使用される「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の有機塩と無機塩を指す。薬学的に許容される塩は、例えば文献、Ｓ．  Ｍ．  Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．、  ｄｅｓｃｒｉｂｅ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  ｓａｌｔｓ  ｉｎ  ｄｅｔａｉｌ  ｉｎ  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、  １９７７、  ６６：  １−１９．に記載されているように、この分野の発明者によく知られている。薬学的に許容される非毒性酸性塩は、アミノ基と反応して形成される塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩などの無機酸性塩、酢酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、マロン酸塩などの有機酸性塩、またはイオン交換などの本や文献に記載されている他の方法によるこれらの塩を含むが、これらに制限されない。他の薬学的に許容される塩は、アジペート、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、プロピオン酸シクロペンチル、ジグルコン酸、ラウリル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトネート、グリセロホスフェート塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、カプロン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクツロン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオネート、ピクリン酸、ピバレート塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などを含む。適切な塩基で得られる塩は、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム及びＮ＋（Ｃ１−４アルキル）４の塩を含む。本発明はまたＮ基を含む任意の化合物によって形成される第四級アンモニウム塩を構想する。水溶性または油溶性または分散性の生成物は、四級化によって得られることができる。アルカリ金属またはアルカリ土類金属塩は、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどを含む。薬学的に許容される塩は、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、Ｃ１−８スルホン酸塩及び芳香族スルホン酸塩などの適切な非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム塩及び対イオン形成に抵抗するアミンカチオンを含む。
【００７９】
本発明の「溶媒和物」とは、１つまたは複数の溶媒分子と本発明の化合物とによって形成される会合複合体を指す。溶媒和物を形成する溶媒は、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、酢酸、及びアミノエタノールを含むが、これらに制限されない。「水和物」という用語は、水である溶媒分子によって形成される会合複合体を指す。
【００８０】
本発明で使用される用語は、任意の疾患または病気を「治療」し、いくつかの実施手段において、「治療」とは、疾患または病気（即ち疾患またはその臨床症状の少なくとも１つの発達を遅らせるか、または予防または低減する）を改善することを指す。他の実施手段において、「治療」とは、患者が知覚できない可能性のある身体パラメータを含む、少なくとも１つの身体パラメータを緩和または改善することを指す。他の実施手段において、「治療」とは、身体上（例えば知覚可能な症状の安定化など）または生理学的（例えば身体のパラメーターの安定化など）または上記の両方から疾患または病気を調節することを指す。他の実施手段において、「治療」とは、疾患または病気の発症、発生または悪化を予防または遅延させることを指す。
【００８１】
製薬上許容される酸付加塩は、無機酸と有機酸と形成できるものであっても良く、例えば酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、臭化物/臭化水素酸塩、重炭酸塩/炭酸塩、重硫酸塩/硫酸塩、樟脳スルホン酸塩、塩化物/塩酸塩、クロロフィリン、クエン酸塩、エタンジスルホネート、フマル酸塩、グルコヘプトネート、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヒプリエート、ヨウ化水素酸塩/ヨウ化物、イセチオネート、乳酸塩、ラクトビオネート、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、プロピオン酸二酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、メチル硫酸塩、ナフトエート、ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモエート、リン酸塩/リン酸塩/リン酸塩二水素塩、ポリガラクトネート、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トルエンスルホン酸塩及びトリフルオロ酢酸塩などが挙げられる。
【００８２】
それにより誘導して塩を得る無機酸は、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを含む。
【００８３】
それにより誘導して塩を得る有機酸は、例えば酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ‐トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などを含む。
【００８４】
製薬上許容される塩基付加塩は、無機塩基と有機塩基で形成されることができる。
【００８５】
それにより誘導して塩を得る無機塩基は、例えばアンモニウム塩と周期表のＩ族からＸＩＩ族の金属を含む。ある実施手段において、該塩は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛、及び銅から誘導され、特に適切な塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、及びマグネシウムの塩を含む。
【００８６】
それにより誘導して塩を得る有機塩基は、第一級、第二級及び第三級アミンを含み、置換アミンが天然に存在する置換アミン、環状アミン、塩基性イオン交換樹脂などを含む。ある有機アミンは、例えば、イソプロピルアミン、ベンザチン（ｂｅｎｚａｔｈｉｎｅ）、コリン（ｃｈｏｌｉｎａｔｅ）、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、リジン、メグルミン（ｍｅｇｌｕｍｉｎｅ）、ピペラジン及びトロメタミンを含む。
【００８７】
本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法により、親化合物、塩基性または酸性部分から合成されることができる。一般的に、このような塩は、これらの化合物の遊離酸形態を化学量論量の適切な塩基（例えばＮａ、Ｃａ、ＭｇまたはＫの水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩など）と反応させ、またはこれらの化合物の遊離酸形態を化学量論量の適切な酸と反応させることによって調製されることができる。このような反応は、通常、水または有機溶媒または両者の混合物中で行われる。一般に、適切な場合に、ジエチルエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体を使用する必要がある。例えば「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ′  ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、第２０版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、  Ｅａｓｔｏｎ、  Ｐａ．、  １９８５及び「医薬品塩のハンドブック：特性、選択および用途（Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ、  ａｎｄ  Ｕｓｅ）」、  Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｗｅｒｍｕｔｈ  （Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、  Ｇｅｒｍａｎｙ、  ２００２）から他の適切な塩のリストを見つけることができる。
【００８８】
また、本発明に開示された化合物及びそれらの塩は、それらの水和物の形態またはその溶媒（例えばエタノール、ＤＭＳＯなど）を含む形態で得られることができ、それらの結晶化のために使用される。本発明に開示される化合物は、薬学的に許容される溶媒（水を含む）と本質的にまたは設計により溶媒和物を形成することができ、したがって、本発明は、溶媒和及び非溶媒和の形態を含むことを意図する。
【００８９】
本発明で与えられる任意の構造式はまた、これらの化合物の非同位体濃縮形態及び同位体濃縮形態を表すことを意図する。同位体濃縮の化合物は、１つまたは複数の原子が、選択された原子量または質量数を有する原子によって置き換えられることを除いて、本発明で与えられる一般式によって記載される構造を有する。本発明の化合物に導入される例示的な同位体は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、及び塩素の同位体、例えば２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、１８Ｆ、  ３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ及び１２５Ｉを含む。
【００９０】
他方で、本発明による化合物は、本発明で定義された同位体濃縮された化合物、例えば、３Ｈ、１４Ｃ及び１８Ｆなどの放射性同位体が存在するそれらの化合物、または２Ｈと１３Ｃの非放射性同位体が存在する化合物を含む。このような同位体濃縮された化合物は、代謝研究（１４Ｃを使用）、反応速度論研究（例えば２Ｈまたは３Ｈを使用）、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）などの検出またはイメージング技術または薬物または基質組織分布の測定を含む単一光子放射型コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）で使用するか、または患者の放射線療法で使用することができる。１８Ｆ濃縮された化合物は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴの研究に特に理想的である。同位体濃縮された式（Ｉ）に示される化合物は当業者によく知られている従来の技術によって、または本発明の実施例及び調製プロセスに記載されるように、以前に使用された非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用して調製することができる。
【００９１】
なお、より重い同位体、特に重水素（即ち、２ＨまたはＤ）の置換は、より高い代謝安定性からもたらすある治療上の利点を提供することができる。例えば、インビボの半減期の増加または必要な投与量の減少または治療指数の改善からもたらす。本発明における重水素は、式（Ｉ）化合物の置換基と見なされることを理解すべきである。同位体濃縮係数によってこのような重い同位体、特に重水素の濃度を定義することができる。本発明で使用される「同位体濃縮係数」という用語は、指定された同位体の同位体存在比と天然存在比の間の比率を指す。本発明の化合物の置換基が重水素として指定される場合、該化合物が指定された重水素原子ごとに、少なくとも３５００（指定された重水素原子ごとに５２．５％の重水素ドーピング）、少なくとも４０００（６０％の重水素ドーピング）、少なくとも４５００（６７．５％の重水素ドーピング）、少なくとも５０００（７５％の重水素ドーピング）、少なくとも５５００（８２．５％の重水素ドーピング）、少なくとも６０００（９０％の重水素ドーピング）、少なくとも６３３３．３（９５％の重水素ドーピング）、少なくとも６４６６．７（９７％の重水素ドーピング）、少なくとも６６００（９９％の重水素ドーピング）または少なくとも６６３３．３（９９．５％の重水素ドーピング）の同位体濃縮係数を有する。本発明の薬学的に許容される溶媒和物は、結晶化溶媒が同位体的に置換されるＤ２Ｏ、アセトン−ｄ６、ＤＭＳＯ−ｄ６などであるそれらの溶媒和物を含む。
【００９２】
医薬組成物
本発明の第２態様において、本発明は、医薬組成物を提供する。本発明の実施例によれば、該医薬組成物は前述の化合物を有効成分として含む。本発明の実施例による医薬組成物は、癌組織内のマトリックスの形成を効果的に制御するとともに腫瘍をより効果的に治療することができる。本発明の実施例による医薬組成物は、従来の治療腫瘍薬物と比べて、より長い半減期、治療ウィンドウ、及び著しく低減される治療毒性を有する。
【００９３】
本発明の実施例によれば、前記医薬組成物は、薬学的に許容される賦形剤をさらに含む。
【００９４】
本発明の実施例によれば、前記医薬組成物の剤形は特に限定されるものではなく、当業者は実際の状況に応じて柔軟に選択することができる。本発明の実施例によれば、前記医薬組成物はミセル、乳剤、カプセル剤、丸剤、錠剤、顆粒剤、経口液剤、経口軟膏、エアロゾルまたはスプレーの形態である。それにより、投与が容易である。
【００９５】
ポリマーミセルは、薬物担体として、ますます注目を集めている。ポリマーミセルは独特のコアシェル構造を形成でき、外殻は親水性セグメントで形成され、コアは疎水性セグメントで形成され、このように、疎水性薬物をミセルのコアに包み、且つ装填された薬物を保護することができる。ミセルの粒径は一般に１０−１００ナノメートルであり、人体の細網内皮系（ＲＥＳ）の食作用及びその他の人のインビボ環境の影響を回避できると同時に、固形腫瘍の高い透過性と保持効果（ＥＰＲ）を高めることができる。このため、本発明の実施例によれば、前記医薬組成物はミセルの形態であり、且つ前記ミセルの担体は分解性両親媒性ポリマーであり、ポリエチレングリコールポリ乳酸ジブロック共重合体（ＰＥＧ−ＰＬＡ）、モノメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）ポリ乳酸（左旋性、右旋性、ラセミ）、ｍＰＥＧ−ＰＬＡ、モノメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）ポリ乳酸グリコール酸共重合体（異なる比率）、ｍＰＥＧ−ＰＬＧＡ、モノメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ｍＰＥＧ−ＰＣＬ、モノメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）ポリトリメチレン炭酸エステル（ＰＴＭＣ）、ｍＰＥＧ−ＰＴＭＣまたはモノメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）ポリアミノ酸（ポリリジン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、ポリオルニチン、ポリアルギニン、ポリヒスチジンなど）を含み、各ポリマーの各ブロックの分子量は、必要に応じて設計及び合成できる。例えばポリエチレングリコールポリ乳酸ジブロック共重合体（ＰＥＧ−ＰＬＡ）の分子量は２０００−２０００であり、当業者は、以下の合成構想を使用することができ、ＰＥＧ−ＰＬＡの合成は、モノヒドロキシＰＥＧを開始剤として、ラクチドを重合モノマーとして、開環重合によって形成されるブロックポリマーである。ＰＥＧのモル量を変えず、ラクチドモノマーのモル濃度を変えると、ＰＬＡセグメントの長さを制御できるため、ＰＥＧ鎖長が同じでＰＬＡ鎖長が異なるポリマーを得ることができ、同様に、異なる分子量のＰＥＧを使用し、ラクチドの濃度を固定することで、異なるＰＥＧ鎖長と一定のＰＬＡ鎖長のＰＥＧ−ＰＬＡを設計及び合成することもできる。このため、両親媒性ブロックポリマーの２つのセグメントは、化学合成の方法によって、両者の重合濃度と比率を調整して任意の分子量を得ることができる。さらに、研究により、ポリマー鎖長が異なり、薬物の負荷容量、形成されたミセルのインビボ及びインビトロ安定性、並びにインビボ及びインビトロでの薬物放出速率などが異なることを示した。本発明に基づいてポリマーの種類と特性を調整することによって製剤の最適化を行うことによって、より良好なインビボ及びインビトロの治療効果が得られる可能性が非常に高い。例えば、本発明の実施例によれば、ＰＥＧ−ＰＬＡの合成はモノヒドロキシＰＥＧを開始剤として、ラクチドを重合モノマーとして、開環重合によって形成されるブロックポリマーである。ＰＥＧのモル量を変えず、ラクチドモノマーのモル濃度を変えると、ＰＬＡセグメントの長さを制御できるため、ＰＥＧ鎖長が同じでＰＬＡ鎖長が異なるポリマーを得ることができ、同様に、異なる分子量のＰＥＧを使用し、ラクチドの濃度を固定することで、異なるＰＥＧ鎖長と一定のＰＬＡ鎖長のＰＥＧ−ＰＬＡを設計及び合成することもできる。このため、両親媒性ブロックポリマーの２つのセグメントは、化学合成の方法によって、両者の重合濃度と比率を調整して任意の分子量を得ることができる。さらに、研究により、ポリマー鎖長が異なり、薬物の負荷容量、形成されたミセルのインビボ及びインビトロ安定性、並びにインビボ及びインビトロでの薬物放出速率などが異なることを示した。本発明の実施例に基づいてポリマーの種類と特性を調整することによって製剤の最適化を行うことによって、より良好なインビボ及びインビトロの治療効果を有する製剤が得られることも本出願の保護範囲内である。それにより、有効成分が人体の細網内皮系によって除去され、毒性がないモノマーに分解されてインビトロに排出されるのを阻止することができ、且つ親水性セグメントのＰＥＧは、水に溶けやすく、流れやすく及び毒性が低い利点があり、長い循環効果を実現できる。なお、ミセル体系は、有効成分の薬物負荷及び生物学的利用能を効果的に向上でき、それにより、癌の治療または予防の効果をよりよく発揮する。
【００９６】
本発明の実施例によれば、前記医薬組成物は他の抗膵臓癌薬物をさらに含み、前記他の抗膵臓癌薬物は５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ、ゲムシタビン、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ、ナノパクリタキセル／ゲムシタビンの組み合わせ及びＯＮＩＶＹＤＥTMの１つまたは複数を含む。他の膵臓癌治療薬物と組み合わせると、前記医薬組成物は膵臓癌に対してより顕著な治療効果を果たす。
【００９７】
本発明の化合物は、そのラセミ混合物、異性体、エナンチオ異性体、ジアステレオ異性体、回転異性体、Ｎ−オキシド、多形体、溶媒和物及び薬学的に許容される塩、並びに活性代謝産物の形態として製造及び調製することができ、式（Ｉ）に示される化合物またはその代謝産物、エナンチオ異性体、ジアステレオ異性体、Ｎ−オキシド、多形体、溶媒和物または薬学的に許容される塩、薬学的に許容される担体、並びに選択的に賦形剤を含む医薬組成物を含む化合物を製造することも可能である。
【００９８】
本発明の医薬組成物は、投与量単位で製造及び投与することができ、各単位は、一定量の少なくとも１つの本発明による化合物および／または生理学的に許容される少なくとも１つの付加塩を含む。該化合物は、低投与量レベルでも有効であり、且つ比較的毒性がないため、投与量が非常に広い範囲で変化することができる。該化合物は、治療上有効な低マイクロモルで投与することができ、必要に応じて投与量を患者が耐えることができる最大投与量まで増やすことができる。
【００９９】
治療に使用できる場合、式（Ｉ）に示される治療有効量の化合物及びその薬学的に許容される塩は、未処理の化学物質として投与することができ、医薬組成物の有効成分として提供することもできる。したがって、本発明の内容は医薬組成物をさらに提供し、該医薬組成物は、治療有効量の式（Ｉ）に示される化合物またはその薬学的に許容される塩及び１つまたは複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む。
【０１００】
実際に、従来の医薬品化合物技術に従って、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩は、有効成分として密接に混合する方法で医薬担体と組み合わせることができる。担体は、例えば経口または非経口（静脈内を含む）、様々な形態を有することができ、投与に望まれる製剤の形態によって決められる。したがって、前記医薬組成物は、カプセル、カシェ、または錠剤などの経口投与に適した別個の単位として存在することができ、これらのそれぞれは所定量の有効成分を含む。なお、前記組成物は、粉末、顆粒剤、溶液、水性液体中の懸濁液、非水性液体、水中油型乳剤または油中水型液体乳剤の形態で存在できる。上に示した一般的な剤形に加え、前記化合物またはその薬学的に許容される塩は、制御放出手段および／または送達装置によって投与することもできる。前記組成物は、製薬業界の任意の方法で調製することができる。一般に、このような方法は、有効成分と担体（１つまたは複数の必須成分を構成する）を組み合わせるステップを含む。一般に、前記組成物は、有効成分と液体担体または細かく分割された固体担体または両者を均一且つ密接に混合することによって調製される。そして、前記製品を簡単に希望の形態に作製することができる。
【０１０１】
使用される医薬担体は、固体、液体または気体であり得る。固体担体の例は、ラクトース、石膏粉末、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、及びステアリン酸を含む。液体担体の例は、シロップ、ピーナッツオイル、オリーブオイル、及び水である。気体担体の例は、二酸化炭素と窒素を含む。
【０１０２】
本発明で使用される「治療有効量」という用語とは、有意義な患者の利益を示すのに十分な各活性グループ分の総量を指す。別々な有効成分を使用して別々に投与する場合、該用語が該成分のみを指す。組み合わせて使用する場合、該用語は、組合せ、順次または同時投与に関わらず、治療効果を引き起こす有効成分の合計量を指す。式（Ｉ）に示される化合物及びその薬学的に許容される塩は以上の通りである。担体、希釈剤または賦形剤は、製剤の他の成分と適合性があり、及びレシピエントに無害であるという意味で許容可能でなければならない。本発明の内容の他の態様によれば、薬物製剤を調製するための方法をさらに提供し、該方法は、式（Ｉ）に示される化合物またはその薬学的に許容される塩と１つまたは複数の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤を均一に混合する。本発明で使用される「薬学的に許容される」という用語は、このような化合物、原料、組成物および／または剤形を指し、合理的な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または合理的な利益/リスク比に応じた他の問題や合併症がなく、患者の組織との接触に適し、所定の用途に効果的に使用される。
【０１０３】
通常、本発明の化合物は、同様な効果を発揮するための物質の任意の従来の投与方法によって治療有効量で投与される。適切な投与量の範囲は、典型的に、毎日１−５００ｍｇ、好ましくは毎日１−１００ｍｇ、最も好ましくは毎日１−３０ｍｇであり、治療される疾患の重症度、投与対象の年齢及び相対的な健康状況、使用される化合物の効力、投与の経路と形態、投与の対象となる適応症、及び関連する開業医の好みと経験などの様々な要因によって決められる。前記疾患を治療する分野の当業者は、過度の実験をせず、個人的な知識および本出願の開示に依存するだけで所与の疾患に対する本発明の化合物の治療有効量を決定することができる。
【０１０４】
本発明の化合物の投与は、患者の必要に応じて行うことができ、例えば、経口投与、経鼻投与、非経口投与（皮下、静脈内、筋肉内、胸骨内及び注入）、吸入投与、直腸投与、膣内投与、体表面投与、局所投与、経皮投与及び経眼投与である。
【０１０５】
錠剤、ソフトカプセル、カプセル、カプレット、顆粒、ロゼンジ及びバルク粉末の固体剤形などの様々な固体経口剤形を本発明の化合物の投与に使用することができる。本発明の化合物は、単独でまたは本分野で知られる様々な薬学的に許容される担体、希釈剤（例えば、スクロース、マンニトール、ラクトース、デンプン）及び賦形剤と組み合わせて投与することができ、懸濁剤、可溶化剤、緩衝剤、結合剤、崩壊剤、防腐剤、着色剤、香味剤、潤滑剤などを含むが、これらに限定されない。徐放性カプセル、錠剤及びゲルもまた、本発明の化合物の投与に有利である。
【０１０６】
錠剤は、プレスまたは型成形によって調製されることができ、任意選択で１つまたは複数の補助成分または補助剤を使用することができる。プレス錠剤は、自由に流動する形態（例えば粉末または顆粒）の有効成分を適切な機械でプレスして調製されることができ、任意選択で結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、界面活性剤または分散剤と混合する。成形錠剤は、不活性希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械で成形して調製される。各錠剤は、好ましくは、約０．ｌｍｇから約５００ｍｇの有効成分を含み、各カシェまたはカプセルは、好ましくは、約０．１ｍｇから約５００ｍｇの有効成分を含む。したがって、錠剤、カシェまたはカプセル（１日１回、２回または３回）を１錠または２錠服用する場合、錠剤、カシェまたはカプセルには、０．ｌｍｇ、１ｍｇ、５ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇまたは５００ｍｇの有効成分が容易に含まれる。
【０１０７】
本発明の化合物はまた、水溶液および無水溶液、乳剤、懸濁液、シロップ及び秘薬を含む様々な液体経口剤形で投与することができる。このような剤形は、水などの本分野で知られている不活性希釈剤、及び防腐剤、潤滑剤、甘味料、及び香味料などの本分野で知られている賦形剤をさらに含むことができる。並びに、本発明の化合物を乳化および／または懸濁液にするための試薬をさらに含む。本発明の化合物は、等張性滅菌溶液の形態で、例えば、静脈内注射によって注射して投与することができる。他の調製物も可能である。
【０１０８】
本発明の化合物の直腸投与用の坐剤は、化合物をカカオバター、サリチル酸塩及びポリエチレングリコールなどの適切な賦形剤と混合することによって調製することができる。
【０１０９】
膣内投与用の製剤は、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレーの形態であり得、有効成分に加えて、例えば本分野で知られている適切な担体をさらに含む。
【０１１０】
局所投与に使用される場合、医薬組成物は、皮膚、目、耳または鼻への投与に適したクリーム、軟膏、塗布剤、ローション、乳濁液、懸濁液、ゲル、溶液、ペースト、粉末、スプレー及び滴の形態であり得る。局所投与はまた、例えば経皮パッチによる経皮投与をさらに含むことができる。
【０１１１】
呼吸器疾患の治療に対して、本発明の化合物は、好ましくは吸入によって投与される。この目的のために、粉末として（好ましくは微粉化された形態）直接投与されるか、またはそれらを含むスプレー溶液剤または懸濁液を介して投与されることができる。
【０１１２】
吸入可能な調製物は、吸入可能な粉末、噴射剤を含む計量エアロゾルまたは噴射剤を含まない吸入可能な製剤を含む。
【０１１３】
本発明の粉末化合物に希釈剤または担体を加えることができ、前記希釈剤または担体は、通常無毒であり且つラクトースまたは呼吸可能部分を改善するのに適した他の任意の添加剤などの本発明の化合物に対して化学的に不活性である。
【０１１４】
例えばハイドロフルオロアルカンのガス状噴射剤を含む吸入エアロゾルは、溶液または分散形態の本発明の化合物を含むことができる。噴射剤駆動製剤は、共溶媒、安定剤、および任意選択で他の賦形剤などの他の成分を含むことができる。
【０１１５】
本発明の化合物を含む噴射剤を含まない吸入可能な製剤は、水性媒体、アルコール性媒体、または水性アルコール性媒体中の溶液または懸濁液の形態であり得、それらは、従来の技術で知られるジェットネブライザーまたは超音波ネブライザーによって、またはソフトミストネブライザー（ｓｏｆｔ−ｍｉｓｔ  ｎｅｂｕｌｉｚｅｒｓ）例えばＲｅｓｐｉｍａｔ(R)によって送達することができる。
【０１１６】
本発明の化合物は、単独な活性剤として投与し、または他の薬物有効成分と組み合わせて投与することができ、前記他の薬物有効成分は、現在膵臓癌の治療に使用されている、例えば、５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ、ゲムシタビン、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ、ナノパクリタキセル／ゲムシタビンの組合わせ、及びＯＮＩＶＹＤＥTMに開示される化合物を含む。
【０１１７】
好ましくは、単独でまたは他の有効成分と組み合わせる式（Ｉ）に示される化合物は、予防および／または治療するための特徴が癌症である。
【０１１８】
「組み合わせて使用される」または「組み合わせ」という用語は、各成分が同時にまたは多かれ少なかれ同時に、または次々に別々に投与することができるという意味として理解されるべきである。いくつかの実施例において、１つの治療薬／薬物有効成分は朝に投与され、他はその日の後半に投与されることができる。他の実施例において、治療薬／薬物有効成分は、１日１回投与され、他は、１周１回投与される。理解すべきなのは、各成分は次々に直接投与される場合、もう１つの成分の投与の遅延は組み合わせの有益な効果の喪失を引き起こしてはならない。
【０１１９】
同時投与は任意の適切な経路で行うことができ、且つ好ましくは、経口経路または静脈内経路または筋肉内経路または皮下注射により、これらの治療薬を必要とする対象に投与し、それによって該投与形態は、各治療薬の一定の比率を有する。
【０１２０】
各治療薬の多かれ少なかれ同時投与または連続投与は、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路、及び粘膜組織を介した吸収を含むがこれらに限定されない任意の適切な経路によって行うことができる。これらの治療薬は、同じ経路または異なる経路で投与することができる。例えば、該組合わせの両方の治療薬は経口投与されることができる。
【０１２１】
本発明の化合物は医薬組成物に含まれることができる。前記医薬組成物は、有効成分としての本発明に記載される化合物またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含み、且つ、任意選択で他の治療成分または補助剤（ａｄｊｕｖａｎｔ）を含む。
【０１２２】
前記組成物は経口、直腸、局所及び非経口（皮下、筋肉内及び静脈内）投与に適した組成物を含み、与えられた状況であるが、最適な経路は、具体的な宿主、及びそのために前記有効成分を投与する病状の性質と重症度によって決められる。前記医薬組成物は、容易に単位投与量の形態で存在でき、且つ医薬分野で周知の任意の方法を使用して調製することができる。
【０１２３】
前記化合物を含むクリーム、軟膏、ゼリー、溶液または懸濁液は、局所使用に使用することができる。本発明の目的のために、局所使用の範囲に経口ローション及び洗口剤が含まれる。
【０１２４】
非経口投与に適した医薬組成物は、水中の有効成分の溶液または懸濁液として作製されることができる。例えばヒドロキシプロピルセルロースの適切な表面活性剤を含むことができる。グリセリン、液体ポリエチレングリコール及びそれらの混合物（油中）で分散液を調製することもできる。なお、微生物の有害な増殖を防ぐために防腐剤を含むこともできる。
【０１２５】
注射使用に適したそれらの医薬組成物は、無菌の水溶液または分散液を含む。前記組成物は、そのような無菌の注射可能な溶液または分散液の即時調製のための無菌の粉末の形態であり得る。すべての場合において、最終的な注射可能な形態は無菌でなければならず、容易に注射できるように効果的に流動性でなければならない。
【０１２６】
前記医薬組成物は、製造及び貯蔵の条件で安定でなければならないため、微生物（例えば細菌及び真菌など）の汚染作用から保護することが好ましい。前記担体は、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール）、植物油及びその適切な混合物を含む溶媒または分散媒体であり得る。
【０１２７】
前記医薬組成物は、エアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、散布剤などの局所使用に適した形態である得る。なお、前記組成物は、経皮装置での使用に適した形態であり得、従来の加工方法によって、化合物またはその薬学的に許容される塩を使用してこれらの製剤を調製することができる。一例として、クリーム及び軟膏は、親水性材料、水、及び約５ｗｔ％から約１０ｗｔ％の化合物を混合して、所望の粘稠度を有するクリームまたは軟膏を製造することによって調製される。
【０１２８】
本発明は、このような治療を必要とする患者の膵臓癌を治療するための方法を提供し、該方法は、治療有効量の少なくとも１つの式（Ｉ）に示される化合物、またはその薬学的に許容される塩または溶媒和物を前記患者に組み合わせて投与するステップを含む。
【０１２９】
本発明の化合物の投与量は、治療される具体的な疾患、症状の重症度、投与経路、投与量間隔の頻度、使用される具体的な化合物、化合物の効力、毒物学的特性及び薬物動態学的特徴を含む様々な要素によって決められる。
【０１３０】
担体材料と組み合わせて単位投与量の形態を生成することができる有効成分の量は、治療される宿主及び特定の投与方法によって変化する。例えば、経口投与によって人へ投与したい製剤は、容易に約０．５ｍｇから約５  ｇの活性剤を含み、適切かつ便利な量の担体材料（総組成物の約５％から約９５％を占めることができる）と複合することができる。単位投与量の形態は、一般に約１ｍｇから約１０００ｍｇの有効成分を含み、通常２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇまたは１０００ｍｇである。
【０１３１】
任意の特定の患者に対して、具体的な投与量レベルは、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、食事、投与タイミング、投与経路、排泄率、薬剤の組合わせ、及び治療を受けている特定の疾患の重症度などの一連の要素によって決められる。
【０１３２】
薬物の調製における化合物または医薬組成物の用途
本発明の第３態様において、本発明は薬物の調製における前述の化合物または前述の医薬組成物の用途を提供し、前記薬物は、癌の治療または予防に使用される。本発明の実施例による化合物または医薬組成物における有効成分は、インビボで腫瘍マトリックス調節群と細胞毒性群薬物に効果的に分解されることができ、腫瘍マトリックス調節群は腫瘍マトリックスの成長を効果的に抑制でき、細胞毒性群はインビボで細胞毒性効果を発揮して、腫瘍細胞の効果的な死滅を達成し、さらに、本発明の実施例による化合物または医薬組成物は、癌の治療または予防のために効果的に使用されることができる。
【０１３３】
本発明の実施例によれば、前記癌は膵臓癌、肝臓癌、乳癌、皮膚癌、前立腺癌または線維芽細胞腫である。上記癌症の種類は、一定の疾患の期間に大量の腫瘍マトリックスを持ち、これらの癌は、活性化されたｓｔｒｏｍａｌ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓを有するため、膵臓癌と類似の複雑な腫瘍微小環境（血管の不妊、化学療法薬に対する非感受性または耐性、免疫抑制など）を有し、さらに、腫瘍細胞及びこれらのマトリックス線維芽細胞も類似の相互作用を有し、本発明の実施例による化合物はこれらの腫瘍の活性化されたｓｔｒｏｍａ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓを調節することができ、それにより、これらの腫瘍組織におけるｓｔｒｏｍａの含有量を減少させ、より多くの第２結合成分を腫瘍細胞に入らせ、腫瘍細胞への死滅作用を実現する。具体的に、これらの腫瘍微小環境の報告について、文献（Ｍａｒｇａｒｅｔａ  Ｍ．Ｍｕｅｌｌｅｒ．Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ、２００４）を参照できる。
【０１３４】
好ましくは、前記癌は膵臓癌である。本発明の実施例による化合物または医薬組成物を使用して、膵臓癌に対する治療効果がより顕著である。
【０１３５】
本発明の化合物または薬学的に許容される組成物の「有効量」または「有効投与量」とは、本発明に言及された１つまたは複数の病気の重症度を処理または軽減する有効量である。本発明の方法によれば、化合物及び組成物は、任意の投与量及び任意の投与経路で疾患の重症度を効果的に処理または軽減するために使用される。必需な正確な量は、患者の状況によって変化し、人種、年齢、患者の一般的な条件、感染の重症度、特別な要因、投与方法などによって決められる。本発明で論じられるように、化合物または組成物は、１つまたは複数の他の治療薬と組み合わせて投与されることができる。
【０１３６】
化合物の調製方法
本発明の第４態様において、本発明は前述の化合物を調製することができる方法を提供する。本発明の実施例によれば、前記方法は、第１結合成分と第２結合成分を接続反応するステップを含み、前記第１結合成分は腫瘍マトリックスを調節するために使用され、前記第２結合成分は腫瘍細胞を殺すために使用される。本発明の実施例による上記方法によって得られる化合物は、腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に同時に作用することができ、それにより、腫瘍マトリックスを排除または減少すると同時に腫瘍細胞を殺す目的を達成する。本発明の実施例による方法によって得られる化合物の薬物動態特性が向上され、第１結合成分と第２結合成分の薬物動態を同期させ、マトリックスの生成と癌細胞の抑制に優れた相乗効果を発揮し、癌腫瘍の薬剤耐性環境が改善され、腫瘍細胞の効果的な死滅が大幅に向上され、それと同時に、薬物の毒性副作用を大幅に低下させる。本発明の実施例によれば、前記接続反応はリンカーの存在下で行われた。リンカーの種類は、第１結合成分と第２結合成分を接続反応して、インビボで酵素的加水分解を行うことができる限り、特に限定されない。
【０１３７】
本発明の具体的な実施例によれば、前記接続反応は、第１結合成分、第２結合成分、及びリンカーが同時に存在するという条件の下で行われ、前記リンカーは式（８８）〜式（９７）に示される化合物の少なくとも１つである。
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【０１３８】
ただし、ｎは１−１０である。式（８８）〜（９７）に示される化合物は、第１結合成分と第２結合成分を化学的に結合して安定なカップリング化合物を形成するための効果的なリンカーとして使用することができる。本発明の更なる具体的な実施例によれば、前記第１結合成分はＣａｌであり、前記第２結合成分はＴＰであり、式（Ａ）に示される化合物はＴＰであり、式（Ｂ）に示される化合物はＣａｌであり、
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【０１３９】
前記接続反応は式（８８）に示される化合物をリンカーとして、接続反応は効率が高い。
【０１４０】
本発明の実施例によれば、前記式（Ａ）に示される化合物と式（Ｂ）に示される化合物の質量比は１：１である。それにより、ＴＰは腫瘍細胞の抑制作用が顕著であり、Ｃａｌは膵臓癌マトリックスの形成に対する抑制作用が顕著であり、両者の相乗的な治療効果が明らかである。
【０１４１】
本発明の具体的な実施例によれば、前述の化合物の調製方法は図１Ａに示すように、以下のステップを含む。
【０１４２】
ステップ１、ＴＰ−ＣＯＯＨの合成について、トリプトライド（３２４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（Ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ、ＣＨ２Ｃｌ２）溶液に無水コハク酸（Ｓｕｃｃｉｎｉｃ  ａｎｈｙｄｒｉｄｅ、６３０ｍｇ、６．３ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅ  、  ＤＭＡＰ、７６５ｍｇ、６．３ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（Ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ、ＴＥＡ、７８３μＬ、０．９８ｍｍｏｌ）を加える。化合物溶液を室温で撹拌し、２４ｈ反応させ、反応の進行をカラムクロマトグラフィーによって検出する。反応終了後、ジクロロメタン、塩水で順次に洗浄し、有機相を収集する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥した後、濾過して蒸留する。得られた粗生成物をシリカゲルカラムで精製し、移動相を１００：１のジクロロメタン：メタノールで、白色３８０ｍｇのＴＰ−ＣＯＯＨを取得し、収率は約９２％である。
【０１４３】
ステップ２、ＴＰ−ＣＯＯＨ（６４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液にカルシポトリオール（Ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｏｌ、  Ｃａｌ、５７ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（８４．３ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）及びジシクロヘキシルカルボジイミド（Ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ、ＤＣＣ、  １４３ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を加える。混合物溶液を室温で撹拌して２４ｈ反応させ、反応の進行をカラムクロマトグラフィーによって検出する。反応完了後、適切なジクロロメタンを加えて希釈し、０．１Ｍの希塩酸溶液と塩水で順次洗浄し、有機相を収集し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥した後、濾過して蒸留する。得られた粗生成物をシリカゲルカラムで精製し、移動相を１００：１のジクロロメタン：メタノールで、白色１０ｍｇのＣａｌｌｉｄｅ固体を取得し、収率は約１５％である。
【０１４４】
本発明の更なる態様において、本発明は、ミセルの調製方法をさらに提供する。本発明の実施例によれば、合成方法の模式図は図１Ｂに示すように、該方法は、以下のステップを含む。
【０１４５】
１ｍｇのＣａｌｌｉｄｅと１９ｍｇのポリエチレングリコール-ポリ乳酸ブロック共重合体（Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ  −  ｐｏｌｙｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｂｌｏｃｋ  ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ、ＰＥＧ−ＰＬＡ  ）を量り、５ｍｌのアセトニトリルで５０ｍｌの丸底フラスコに溶解し、１ｍｉｎ超音波処理して完全に溶解させる。６０℃の水浴で溶媒を回転して蒸発させ、透明なフィルムを取得し、溶媒が蒸発した後、残留の有機溶媒を除去するために３０分間回転蒸発し続ける。丸底フラスコ内に５ｍｌの６０℃の予熱された生理食塩水を加え、超音波水和を行い、薬物を包むポリマーミセルを取得し、ＣａｌｌｉｄｅＮＰと呼ばれる。ポリマーミセル溶液の粒子径を動的光散乱装置によって分析し、その外観形態を透過型電子顕微鏡によって分析し、結果を図１Ｃに示す。
【０１４６】
本発明者は、本発明の該方法を使用して前記ミセルを迅速かつ効果的に調製して取得することができ、且つ操作が簡単で、制御しやすく、機器に特別な要件がなく、大規模製造に適することを見出した。また、ＴＰは著しく凝集され、ＴＦＩＩＡＨを効果的に阻害でき、Ｃａｌは膵臓癌マトリックスの形成を効果的に抑制でき、化合物の半減期と治療ウィンドウはＴＰに対して大幅に向上され、したがって、化合物は膵臓癌に対する治療効果がより顕著であり、且つ化合物の治療毒性副作用が顕著に低下される。本発明の実施例による方法によって調製されるミセルは、良好な安定性を有し、癌、特に膵臓癌を治療または予防するために効果的に使用されることができる。
【０１４７】
以下、本発明の実施例を詳細に説明する。以下で説明される実施例は例示的なものであり、本発明を説明するためにのみ使用されるが、本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。実施例に具体的な技術または条件が示されていない場合、本分野内の文献に記載されている技術または条件に従って、または製品仕様に従って実行される。メーカーなしで用いられる試薬または機器はすべて、商業的に購入できる従来の製品である。
【０１４８】
実施例１  化合物Ｃａｌｌｉｄｅのインビトロ分解試験
試験材料：リン酸塩緩衝液（ＰＢＳ、Ｐｈ＝７．２−７．４）、ブタ肝臓エステラ  ーゼ、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
試験方法：ＨＰＬＣ法
試験過程：５ｍｌのブタ肝臓エステラーゼがある（またはない）ＰＢＳ緩衝液に、５０マイクロリットルの１ｍｇ／ｍｌのＣａｌｌｉｄｅ（エタノール溶液による可溶化）を加え、３７℃条件下で撹拌し、それぞれ１ｍｉｎ、５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、８ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈで２００マイクロリットルの溶液を取り、濾過し、ＨＰＬＣで溶液中のＣａｌｌｉｄｅ、カルシポトリオールの濃度を測定する。
【０１４９】
結果：ブタ肝臓エステラーゼがない条件下で、Ｃａｌｌｉｄｅは分解できず、時間を４８ｈに延長しても、溶液中のＣａｌｌｉｄｅの濃度が変化せず、ブタ肝臓エステラーゼが存在する場合、Ｃａｌｌｉｄｅは単一のカルシポトリオールに分解でき、且つ時間の延長に伴って、Ｃａｌｌｉｄｅの濃度が低下し、カルシポトリオールの濃度が上昇する（試験結果を図１Ｄに示す）。
【０１５０】
結論：本研究で合成された新しい化合物Ｃａｌｌｉｄｅはエステラーゼの触媒作用の下で成功に分解することができる。
【０１５１】
実施例２    Ｃａｌｌｉｄｅの細胞毒性試験
試験材料：それぞれＭＩＡ  ＰａＣａ−２、ＰＡＮＣ−１、ＳＷ１９９０、ＳＷ１９９０−ＧＥＭである４種の膵臓癌細胞株、細胞培養培地、及びマイクロプレートリーダー
試験方法：ＤＮＡ  ａｓｓａｙ法
試験過程：膵臓癌細胞を培養、消化し、培養培地を細胞懸濁液に再懸濁し、９６ウェルプレートに接種し、ウェルあたり４０００個の細胞である。試験グループを５グループに分け、それぞれＴＰグループ、Ｃａｌグループ、ＴＰとＣａｌの物理的混合グループ（ＴＰ／Ｃａｌ）、エステラーゼのないＣａｌｌｉｄｅ−ＤＭＳＯグループ（Ｃａｌｌｉｄｅ  ｗｉｔｈｏｕｔ  ＰＬＥ）、１０ＵのエステラーゼのあるＣａｌｌｉｄｅ−ＤＭＳＯグループ（Ｃａｌｌｉｄｅ  ｗｉｔｈ  １０Ｕ  ＰＬＥ）、エステラーゼのないＣａｌｌｉｄｅＮＰグループ（ＣａｌｌｉｄｅＮＰ  ｗｉｔｈｏｕｔ  ＰＬＥ）、１０ＵのエステラーゼのあるＣａｌｌｉｄｅＮＰグループ（ＣａｌｌｉｄｅＮＰ  ｗｉｔｈ  １０Ｕ  ＰＬＥ）である。各グループは、５ｎＭ、１０ｎＭ、２０ｎＭ、４０ｎＭ、８０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭの合計８つの濃度で調製し、各濃度を６つのウェルで繰り返す。投与２４ｈ後、薬液を吸引し、ＰＢＳで２回洗浄し、Ｈｕｓｔｅｄ色素を添加し、マイクロプレートリーダーで分析し、細胞の相対生存率曲線を描き、各化合物のＩＣ５０を計算する。
【０１５２】
結果：従来の細胞毒性薬物として、ＴＰは４種の膵臓癌細胞すべてに対して高い殺傷効果を持ち、ＩＣ５０＝２０ｎＭ程度である。Ｃａｌは、乾癬を臨床治療する薬物として、発明者によって研究された投与量範囲内で癌細胞に殺傷効果がない。本研究で合成された化合物Ｃａｌｌｉｄｅは、エステラーゼを添加せずに細胞に任意の毒性副作用がない。しかし、ブタ肝臓エステラーゼの触媒作用下で、ＣａｌｌｉｄｅはＴＰ（またはＴＰ−ＣＯＯＨ）に分解して細胞殺傷効果を生み出す可能性がある。純粋な化合物Ｃａｌｌｉｄｅと比較して、Ｃａｌｌｉｄｅのミセル製剤は同様な細胞毒性作用を持つ。ＣａｌｌｉｄｅＮＰはエステラーゼを添加せずに同様に細胞に対して任意の毒性副作用がない。しかし、ブタ肝臓エステラーゼの触媒作用下で、ＣａｌｌｉｄｅＮＰにおけるＣａｌｌｉｄｅはＴＰ（またはＴＰ−ＣＯＯＨ）に分解して細胞殺傷効果を生み出すことができ、且つＩＣ５０がＴＰと比べて４−７倍（試験結果を図２に示す）向上された。
【０１５３】
結論：本研究で調製されたＣａｌｌｉｄｅとＣａｌｌｉｄｅＮＰはエステラーゼを添加する触媒分解条件下ですべて成功に分解でき、有効成分を形成して癌細胞の死滅作用を果たす。しかし、ミセルがＣａｌｌｉｄｅ分解に対する保護効果により、Ｃａｌｌｉｄｅの放出と分解が抑制されるため、ＣａｌｌｉｄｅＮＰのＩＣ５０値が増加し、細胞毒性作用が低下する。
【０１５４】
実施例３    ＣａｌｌｉｄｅＮＰのラットＰＫ試験
試験材料：ラット、システムＳＤ、６−９週齢。分析機器：アジレント１２９０／６４６０  トリプル四重極質量分析計、米国製。
【０１５５】
試験方法：クロマトグラフィー−質量スペクトル併用分析
試験過程：１２つのＳＤラットをランダムに４グループに分け、各グループに３つである。それぞれＴＰ（０．３ｍｇ／ｋｇ）、ＴＰ／Ｃａｌ  （０．３／０．３５  ｍｇ／ｋｇ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（０．３ｍｇ／ｋｇ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（０．６ｍｇ／ｋｇ）投与する。各ラットについて、５ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、８ｈで、３００マイクロリットルの血液を眼窩から収集し、４℃の下で１００００ｒｐｍで遠心分離し、上澄みの血漿を収集する。血漿を酢酸エチル／水で抽出し、ボルテックスし、超音波処理し、４℃で遠心分離し、上澄みを窒素保護下で蒸発乾固し、次に、移動相アセトニトリル／水に溶解し、遠心分離して上澄みを取り、注入する。
【０１５６】
結果：ＴＰは遊離薬物であるため、血漿中のタンパク質に結合する能力が弱く、分析と測定により、血漿中の遊離ＴＰ薬物の濃度が高く、半減期が短いことが示され、これも、ＴＰの深刻なインビボ毒性の理由の１つである。ＴＰとＣａｌを物理的に混合した後、ＴＰの薬物動態の関連するパラメータを改善せず、これも、ＴＰとＣａｌを物理的に混合した毒性が遊離ＴＰの毒性と同等である理由である。ＣａｌｌｉｄｅはＴＰのプロドラッグとして、血漿中で遊離ＴＰを生成する濃度が大幅に低下され、血漿半減期を延長し、血漿平均滞留時間を延長し、これは、Ｃａｌｌｉｄｅの低毒性効果と長期的な効果に直接関係する（試験結果を図３に示す）。
【０１５７】
結論：ＣａｌｌｉｄｅはＴＰのプロドラッグとして、ポリマーミセルを介して送達され、インビボ薬物動態特性を大幅に改善し、遊離ＴＰの深刻な毒性副作用を軽減し、ＴＰの抗癌作用効果を向上させる。
【０１５８】
実施例４    ＣａｌｌｉｄｅＮＰのマウス短期、長期投与の毒性試験
試験材料：ＢＡＬＢ／Ｃマウス
試験方法：ＢＡＬＢ／Ｃマウスを５グループに分け、Ｓａｌｉｎｅ対照グループとＴＰ、Ｃａｌ、ＴＰ／Ｃａｌ、ＣａｌｌｉｄｅＮＰという４グループの投与グループである。対照グループに５つのマウス、試験グループの各グループに高、中、低の３種の投与量であり、１投与量あたり５つのマウス、合計６５つのマウスである。投与量：ＴＰ（０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ）、Ｃａｌ（０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、１．８ｍｇ／ｋｇ）、ＴＰ／Ｃａｌ（０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、１．８ｍｇ／ｋｇ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、１．８ｍｇ／ｋｇ）、週に一度、尾静脈注射で投与する。
【０１５９】
結果：ＴＰグループのマウスには１．８ｍｇ／ｋｇを事前に投与し、１回の投与ですべてのマウスが死亡したため、ＴＰの高、中、低投与量を上記の投与量として設計した。それでも、ＴＰグループのマウスはすべて明らかな毒性反応を示し、投与終了後、マウスは鈍く無気力であり、特に１．２ｍｇ／ｋｇのＴＰ投与量では、マウスの精神状態の悪さに加えて、マウスの尾部注射部位に重度の皮膚潰瘍が発生し、マウスの体重が大幅に減少し、解剖学的結果により、マウスの臓器、特に精巣には異なる程度の壊死が発生し、精巣の相対重量が大幅に軽減され、精原細胞と精母細胞の形態が深刻に損傷していることを示した。ＴＰ／Ｃａｌグループのマウス状態は上記の状況と同様であり、遊離のＴＰによる毒性副作用はマウスの健康状態に非常に悪い影響を及ぼす。これに対して、Ｃａｌグループのどのマウスも前述の有害症状を示さず、マウスの健康状態が良好である。ＣａｌｌｉｄｅＮＰグループのマウスは、投与終了後、上記の有害症状が明らかに減少し、高投与量の試験グループのみはマウス精神状態が悪いが、対照グループと比べて、体重と各臓器に大きな変化がない（試験結果を図４に示す）。
【０１６０】
結論：ＴＰと比べて、Ｃａｌｌｉｄｅの長期毒性は大幅に減少し、これは、発明者がＣａｌｌｉｄｅの抗腫瘍効果作用をさらに検証するための前提である。
【０１６１】
実施例５    ＣａｌｌｉｄｅＮＰの相乗効果が膵臓星細胞及び膵臓癌細胞に対するインビトロ作用効果
試験材料：トランスジェニックマウスにおける初代培養膵臓星細胞及び膵臓癌細胞。膵臓癌細胞はレンチウイルストランスフェクション法によりルシフェラーゼ遺伝子をトランスフェクトする。
【０１６２】
試験方法：インビトロ共培養、免疫蛍光組織化学分析
試験過程：自発的に腫瘍を形成するＫＰＣマウスを取り、解剖により腫瘍組織を取得し、インビトロでの物理的破壊と酵素的加水分解によって初代膵臓星細胞と膵臓癌細胞を分離及び培養する。
【０１６３】
個々の膵臓星細胞を１２ウェルプレートで培養し、ウェルあたり１０万の細胞であり、ＴＰ（１０ｎＭ）、Ｃａｌ（１００ｎＭ）、ＴＰ／Ｃａｌ（１０／１００ｎＭ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（１００ｎＭ）で処理し、２４時間インキュベートし、次に、免疫蛍光染色により各ウェルの細胞の平滑筋アクチンとコラーゲンの含有量を分析する。
【０１６４】
膵臓星細胞及び膵臓癌細胞を１：１の比率で１２ウェルプレートで培養し、ウェルあたり合計１０万の細胞であり、ＴＰ（１０ｎＭ）、Ｃａｌ（１００ｎＭ）、ＴＰ／Ｃａｌ（１０／１００ｎＭ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（１００ｎＭ）で処理し、２４時間インキュベートし、次に、免疫蛍光染色により、各ウェルの細胞の平滑筋アクチンとコラーゲンの含有量を分析する。
【０１６５】
結果：単一の膵臓星細胞に対して、ＴＰで処理された細胞の平滑筋アクチンとコラーゲンの含有量は対照グループの細胞と明らかな違いがなく、Ｃａｌで処理された細胞の関連タンパク質表現レベルは低下し、蛍光強度が明らかに減少し、ＴＰ／Ｃａｌ及びＣａｌｌｉｄｅＮＰの作用傾向は同じである。共培養した膵臓星細胞と膵臓癌細胞では、対照グループにおける単一の膵臓星細胞と比較して、相互の関連タンパク質の表現レベルが明らかに増加し、ＴＰで処理された関連タンパク質の表現レベル変化が明らかではなく、Ｃａｌ、ＴＰ／Ｃａｌ及びＣａｌｌｉｄｅＮＰで処理された細胞の関連タンパク質表現レベルは大幅に低下する（試験結果を図５に示す）。
【０１６６】
結論：Ｃａｌｌｉｄｅは、エステラーゼの触媒分解下でＣａｌを生成し、Ｃａｌリモデリングによって活性化されたＰＳＣの作用下で細胞の平滑筋アクチンとコラーゲンの含有量を減らすと同時に、膵臓星細胞と膵臓癌細胞との間の相互作用を弱めることができる。
【０１６７】
実施例６  ＣａｌｌｉｄｅＮＰの膵臓星細胞と膵臓癌細胞を共移植した同所性モデルに基づくインビボ抗腫瘍効果試験
試験材料：膵臓星細胞、ルシフェラーゼをトランスフェクトした膵臓癌細胞、ヌードマウス、システムＢｌａｂ／Ｃ  ｎｕｄｅ、６−８週齢。
【０１６８】
試験方法：膵臓星細胞とルシフェラーゼをトランスフェクトした膵臓癌細胞懸濁液を１：１の比率で均一に混合し、密度が１００００個／４０μＬの密度で膵臓部位に接種し、接種体積が４０μＬである。
【０１６９】
試験過程：２種の細胞を消化して遠心分離し、ＰＢＳを再回転した後１：１の比率で混合し、次に、この細胞混合液とマトリゲルを１：１の比率で混合して均一に吹き付ける。清華大学倫理委員会の審査を前提にヌードマウスに関連手術を行い、均一に吹き付けた細胞懸濁液４０μＬをインスリン針で膵臓部位に注射し、次に、創傷を縫合して鎮静剤を皮下注射する。細胞注射の約１週間後、各マウスに０．１ｍｌのフルオレセインナトリウム塩溶液を腹腔内注射し、１０ｍｉｎ後、マウスをイソフルランで麻酔し、小動物のインビボイメージャーでマウスの膵臓部位の蛍光信号のサイズを検出する。その後、マウスをランダムにグループ分け、各グループに７つであり、それぞれＴＰ（０．３ｍｇ／ｋｇ）、Ｃａｌ（０．３５ｍｇ／ｋｇ）、ＴＰ／Ｃａｌ（０．３／０．３５ｍｇ／ｋｇ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（０．６ｍｇ／ｋｇ）投与する。２日に１回投与し、合計７回投与し、各投与後にマウスの体重を測定する。４回投与した後、同様に、小動物のインビボイメージャーでマウスの膵臓部位の蛍光信号のサイズを検出する。すべての投与が完了した後、小動物のインビボイメージャーでマウスの膵臓部位の蛍光信号のサイズを検出する。同時に、マウスの生存率状況を記録する。試験終了後、マウスの腫瘍組織を取り、組織免疫染色の方法により腫瘍組織部位の平滑筋アクチンとコラーゲンの表現状況を検出する（試験結果を図６に示す）。
【０１７０】
結果：対照グループと比較し、ＴＰグループの腫瘍抑制効果は明らかではないが、毒性は明らかであり、７回の投与後、マウスの体重は顕著に減少し、且つ同様に１つのマウスが死亡し、Ｃａｌグループは腫瘍抑制効果がなく、膵臓癌細胞と対照グループは蛍光信号が明らかな違いがなく、マウス生存率にも明らかな違いがなく、ＴＰ／Ｃａｌグループのマウス腫瘍細胞の蛍光信号は減少するが、腫瘍重量の変化に明らかな違いがなく、その腫瘍抑制効果及びマウス生存率への寄与は限られ、ＣａｌｌｉｄｅＮＰグループのマウスの膵臓癌細胞の蛍光信号は明らかに減少し、対照グループと比べて、マウス生存率が顕著に延長され、且つ腫瘍組織免疫染色により、平滑筋アクチンとコラーゲンの含有量が低減することを示し、これはＣａｌｌｉｄｅＮＰの腫瘍抑制効果と直接関係する。
【０１７１】
結論：ＣａｌｌｉｄｅＮＰは膵臓星細胞と膵臓癌細胞を相乗的に抑制することによって、膵臓星細胞と膵臓癌細胞を共移植した同所性モデルの腫瘍サイズを顕著に抑制してマウスの生存期間を延長することができる。
【０１７２】
実施例７  ＣａｌｌｉｄｅＮＰの膵臓癌ＭＩＡ  ＰａＣａ−２細胞株に基づくインビボ抗腫瘍効果試験
試験材料：ＭＩＡ  ＰａＣａ−２細胞株、
試験方法：ＭＩＡ  ＰａＣａ−２細胞株に基づくマウス皮下腫瘍モデルの確立、投与後、試験グループの各化合物が腫瘍に対する抑制効果及び毒性副作用を評価する。
【０１７３】
試験過程：マウスに腋窩と腹部の下に０．１ｍｌのＭＩＡ  ＰａＣａ−２細胞懸濁液を注射し、腫瘍の成長状況を監視し、腫瘍のサイズが約１００ｍｍ３である場合、マウスをランダムに５グループに分け、Ｓａｌｉｎｅ対照グループ及びＴＰ、Ｃａｌ、ＴＰ／Ｃａｌ、ＣａｌｌｉｄｅＮＰグループという４つの投与グループであり、各グループに８つである。投与量は、ＴＰ（０．３ｍｇ／ｋｇ）、Ｃａｌ（０．３ｍｇ／ｋｇ）、ＴＰ／Ｃａｌ（０．３／０．３５ｍｇ／ｋｇ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（０．３ｍｇ／ｋｇ、理論的にＴＰに完全に分解した投与量）であり、週に１回、尾静脈注射によって投与される。腫瘍のサイズを２日ごとに測定する。
【０１７４】
結果：図７に示すように、Ｓａｌｉｎｅグループと比較して、Ｃａｌグループに抗腫瘍効果がない。他のグループは非常に明らかな腫瘍の成長の抑制作用がある。マウスを解剖した後、腫瘍を分離して測定し、ＴＰ、ＴＰ／Ｃａｌ、ＣａｌｌｉｄｅＮＰグループ腫瘍の重量は対照グループよりもはるかに小さい。注意すべきなのは、ＴＰグループの腫瘍のサイズはＴＰ／ＣａｌとＣａｌｌｉｄｅＮＰグループの両方よりも小さく、これは、ＴＰ／Ｃａｌは、ＴＰ生理塩水溶液とＣａｌミセル製剤の物理的混合物であり、両方の相互作用によりＴＰの影響が減少し、ＣａｌｌｉｄｅＮＰが機能するための前提条件は、ＴＰに分解されることであるが、インビボのエステラーゼの分布と濃度が不確実であるため、ＣａｌｌｉｄｅＮＰの分解は完全ではなく、ＣａｌｌｉｄｅＮＰの分解及び分解生成物ＴＰの抗腫瘍効果がある程度制限される。（またはＣａｌｌｉｄｅＮＰがＴＰのＰＫを変え、且つ分解生成物がＴＰ−ＣＯＯＨである可能性がある）
【０１７５】
結論：ＭＩＡ  ＰａＣａ−２細胞株に基づくマウス皮下腫瘍モデルでは、ＣａｌｌｉｄｅＮＰは腫瘍の成長を効果的に抑制することができ、且つ明らかな毒性副作用がない。また、ＣａｌｌｉｄｅＮＰはＴＰに完全に分解されることができないため、その抗腫瘍作用が純粋なＴＰよりもやや弱い。
【０１７６】
実施例８  ＣａｌｌｉｄｅＮＰの膵臓癌ヒト化腫瘍に基づくインビボ抗腫瘍効果試験
試験材料：ヒト化の膵臓癌組織
試験方法：ヒト化の膵臓癌組織に基づくマウス皮下腫瘍モデルの確立
試験過程：ヒト化の膵臓癌組織のマウス皮下腫瘍モデルを確立し、ＴＰ（０．３  ｍｇ／ｋｇ）、ＣａｌｌｉｄｅＮＰ（０．３ｍｇ／ｋｇ、理論的にＴＰに完全に分解した後の投与量）、週に１回、尾静脈注射によって投与される。１週間後ＣａｌｌｉｄｅＮＰの投与量を０．６ｍｇ／ｋｇまで増加する。
【０１７７】
結果：実験の最初の週では、ＴＰの腫瘍成長の抑制効果は非常に明らかであるが、ＣａｌｌｉｄｅＮＰはその結果がなく、発明者が投与量を２倍にした後、ＣａｌｌｉｄｅＮＰは徐々により良い腫瘍抑制効果を示し始める。これは、ＣａｌｌｉｄｅＮＰの投与量が０．３ｍｇ／ｋｇである場合、インビボのＴＰへのＣａｌｌｉｄｅ分解の速度と程度がＴＰの有効治療濃度に到達できないためであり、投与量を２倍にした後、Ｃａｌｌｉｄｅの利点が現れ始め、腫瘍抑制の効率は徐々にＴＰを超え、腫瘍成長抑制曲線の傾きはＴＰよりも大きい。これは、ＣａｌｌｉｄｅＮＰが適切な濃度と投与量の条件下でＴＰと同等またはそれ以上の腫瘍抑制効果を示すことができることを表す（図５に示す）。また、マウスの精神状態、尾静脈注射部位の皮膚状況から、ＣａｌｌｉｄｅＮＰはすべて良好な安全性を示す（図９に示す）。腫瘍組織の免疫組織化学染色結果はまた、Ｃａｌｌｉｄｅの分解によって生成されたＣａｌが腫瘍マトリックスに影響を及ぼし、腫瘍組織のフィブリン含有量が明らかに減少すると同時に、腫瘍細胞のアポトーシスを伴う（図８）。
【０１７８】
結論：ヒト化のマウス皮下移植瘤モデルでは、ＣａｌｌｉｄｅＮＰは優れた抗腫瘍能を示し、それと同時に、その安全性は単一のＴＰよりもはるかに優れる。また、良好な抗腫瘍効果は腫瘍マトリックスへの弱め作用及び腫瘍細胞への死滅の二重作用機序から由来する。
【０１７９】
以上のように、本研究で調製された新しい化合物Ｃａｌｌｉｄｅは、ブタ肝臓エステラーゼの触媒作用下で腫瘍マトリックスを調節するＣａｌ及び腫瘍細胞の死滅作用を有するＴＰによく分解されることができ、インビボの長期投与毒性はＴＰと比較して大幅に減少する。異なるマウス腫瘍モデルでは、ＣａｌｌｉｄｅＮＰはいずれも良好な抗腫瘍効果を示す。腫瘍マトリックスと腫瘍細胞に相乗的に作用する二重作用機序によって膵臓癌への有効治療を達成する。
【０１８０】
本明細書の説明において、「一実施例」、「いくつかの実施例」、「例」、「具体的な例」、または「いくつかの例」などの参照用語の説明は、該実施例または例と組み合わせて説明する具体的な特徴、構造、材料または特点が本発明の少なくとも１つ実施例または例に含まれることを意味する。本明細書において、上記用語の例示的な叙述は必ずしも同じ実施例または例を指すとは限らない。また、説明される具体的な特徴、構造、材料または特点は、任意の１つまたは複数の実施例または例において適切な方法で組み合わせることができる。なお、矛盾がない場合、当業者は、本明細書に説明される異なる実施例または例及び異なる実施例または例の特徴を結合及び組み合わせることができる。
【０１８１】
本発明の実施例を以上に示して説明したが、上記の実施例は例示であり、本発明の限定として理解することはできないことを理解でき、当業者は、本発明の範囲内で上記の実施例に対して変化、修正、置換及び変形を行うことができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
2022501390.tif 000071
【国際調査報告】
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2022501390.tif 000073
2022501390.tif 000074
2022501390.tif 000075
2022501390.tif 000076
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