(57)【要約】  本明細書では、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクト、ならびに製剤及びこれらの使用方法について記載する。
2022501402.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象に抗原結合コンストラクトを投与する方法であって、
ヒトＣＤ８に結合する標識された抗原結合コンストラクトを対象に与えることを含み、
前記標識は８９Ｚｒを含み、
前記標識は注入時に０．５〜３ｍＣｉ±の放射線を与え、
０．２〜１０ｍｇの量の総抗原結合コンストラクトが前記対象に与えられる、前記方法。
【請求項２】
患者を治療する方法であって、
がんと診断されたヒト患者に、ある用量のヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することであって、前記用量は、
約０．５〜３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び
約１０ｍｇ以下の前記抗原結合コンストラクトを含む、ことと、
前記用量の投与後の第１の時点に前記患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することで前記第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、前記第１の時点は前記投与することの約６時間〜３６時間後である、ことと、
前記第１の患者画像に基づいて前記患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、
前記がんの第１の治療を前記患者に投与することと、
前記第１の治療の投与後に前記がんと診断された前記ヒト患者に第２の用量の前記抗原結合コンストラクトを投与することと、
第２の患者画像に基づいて前記患者体内の前記１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することと、
前記第１の患者画像と前記第２の患者画像とを比較することと、前記第１と第２の患者画像の比較に基づいて前記がんの第２の治療を前記患者に投与することと、を含む、前記方法。
【請求項３】
前記比較することは、前記第１の治療が奏功していることを示し、したがって第１の治療が継続されることを示す浸潤の増加が前記第２の画像に見られるかどうかを判定することであって、前記第２の画像の浸潤に変化がないかまたは減少が見られる場合、前記第１の治療が奏功していないことを示す、ことと、前記第１と第２の患者画像の比較に基づいて前記がんの第２の治療を前記患者に投与することと、を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
患者を治療する方法であって、
がんと診断されたヒト患者に、ある用量のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することであって、前記用量は、
注入時に約０．５〜３．６ｍＣｉの放射能を与えるＣＤ８  ＰＥＴトレーサー、及び
約５μｇ〜約５０ｍｇのＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを含む、ことと、
前記用量の投与後の第１の時点に前記患者体内の前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを検出することで前記第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、前記第１の時点は前記投与することの約１時間〜３６時間後である、ことと、
前記第１の患者画像に基づいて前記患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの第１の存在量及び／または分布を決定することと、
前記がんの第１の治療を前記患者に投与することと、
前記第１の治療の投与後に前記がんと診断された前記ヒト患者に第２の用量の前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することと、
第２の患者画像に基づいて前記患者体内の前記１つ以上の組織及び／または新生物中の前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの第２の存在量及び／または分布を決定することと、
前記第１の患者画像と前記第２の患者画像とを比較することと、前記第１と第２の患者画像の比較に基づいて前記がんの第２の治療を前記患者に投与することと、を含む、前記方法。
【請求項５】
前記第１の存在量は、第１の患者画像上の前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーまたは前記８９Ｚｒシグナルの第１の強度であり、前記第２の存在量は、前記第２の患者画像上の前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーまたは前記８９Ｚｒシグナルの第２の強度である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
腫瘍の位置が、前記第１の患者画像と比較した前記第２の患者画像内の放射線の増加として示される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記第１の時点が前記投与することの２０〜３４時間後であり、前記第２の存在量及び／または分布を決定することが、前記第２の用量の投与の２０〜３４時間後に行われる、請求項２〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーが、３時間よりも短い半減期を有するＰＥＴ同位体を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項９】
対象を治療する方法であって、
新生物を有し、免疫療法（「ＩＯＴ」）による治療を受けている患者に、ヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することであって、
前記抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含み、
前記抗原結合コンストラクトが前記対象に免疫応答を引き起こさず、
前記検出可能なマーカーが８９Ｚｒを含み、
前記検出可能なマーカーが注入時に０．５〜３ｍＣｉ±２０％の放射能を与え、
０．２〜１０ｍｇの量の総抗原結合コンストラクトが前記患者に与えられる、ことと、
前記抗原結合コンストラクトの分布を監視することで前記新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、
前記新生物の前記ＴＩＬ状態が陽性でない場合に前記患者に代替的なＩＯＴを投与することと、前記新生物の前記ＴＩＬ状態が陽性となるまで上記の方法を繰り返すことと、を含む、前記方法。
【請求項１０】
前記監視することが、前記投与することの８時間以内に行われる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記監視することまたは更なる第２の監視することが、前記投与することの３６時間前に行われる、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を与えることと、
候補治療薬を含む療法を前記対象に投与することと、
前記候補治療薬を含む前記療法を投与した後、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて前記対象の前記腫瘍内の前記ＣＤ８細胞の第２の画像を与えることと、
前記第１と第２の画像を比較して、
ａ）前記腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうか、または
ｂ）前記腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、
ａ）の場合、前記対象に前記療法を継続するように指示することと、を含む、前記方法。
【請求項１３】
ｂ）の場合、別のラウンドの療法を投与することと、前記腫瘍内の前記ＣＤ８細胞の第３の画像を与えることと、前記第１と第３の画像を比較して、前記腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、前記腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、前記療法を中断することと、を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを使用して前記対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を与えることと、
候補治療薬を含む療法を前記対象に投与することと、
前記療法を投与した後、前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを使用して前記対象の前記腫瘍内の前記ＣＤ８細胞の第２の画像を与えることと、
前記第１と第２の画像を比較して、
ａ）前記腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうか、または
ｂ）前記腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、
ａ）の場合、前記対象に前記療法を継続するように指示することと、を含む、前記方法。
【請求項１５】
ヒト対象を治療する方法であって、
ヒト対象に候補治療薬を投与することと、
前記ヒト対象の腫瘍のサイズが前記候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、
前記候補治療薬の後で前記サイズが増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して前記腫瘍内に存在するＣＤ８の量が前記候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、
ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大が腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、前記患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、前記患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する、前記方法。
【請求項１６】
ヒト対象に標識を投与する方法であって、
対象に１８Ｆを投与することと、
約６時間以内に前記対象の１８Ｆ分布について前記対象のＰＥＴスキャンを行うことと、
前記対象にＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することであって、前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは８９Ｚｒを含む、ことと、
前記ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの投与の約３６時間以内に８９Ｚｒの分布について前記対象にＰＥＴスキャンを行うことと、を含む、前記方法。
【請求項１７】
前記対象または患者に治療薬が投与され、前記治療薬が、イピリムマブ、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、及びデュルバルマブのうちの少なくとも１つから選択される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記対象または患者に治療薬が投与され、前記治療薬が、ＢＭＳ−１００１、ＢＭＳ−１１１６、ＣＡ−１７０、ＣＡ−３２７、イミキモド、レシキモド、８５２Ａ、ＶＴＸ−２３３７、ＡＤＵ−Ｓ１００、ＭＫ−１４５４、イブルチニブ、３ＡＣ、イデラリシブ、ＩＰＩ−５４９、エパカドスタット、ＡＴ−３８、ＣＰＩ−４４４、ビパデナント、プレラデナント、ＰＢＦ、ＡＺＤ４６３５、ガルニセルチブ、ＯＴＸ０１５／ＭＫ−８６２８、ＣＰＩ−０６１０のうちの少なくとも１つから選択される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記対象または患者に治療薬が投与され、前記治療薬は、ＬＡＧ−３に対する抗体、ＴＩＧＩＴに対する抗体、ＭＫ−４２８０、ＭＫ−７６８４、及び／または上記のいずれかとキイトルーダとの組み合わせのうちの少なくとも１つから選択される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトがミニボディまたはダイアボディであり、抗原結合コンストラクトが重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域がヒトアミノ酸配列から本質的に構成され、前記軽鎖可変領域がヒトアミノ酸配列から本質的に構成される、請求項１〜３、５〜７、９〜１１、１２、１３、１５、１７、１８、または１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記抗原結合コンストラクトが、配列番号１４７内の３つの重鎖ＣＤＲと配列番号１４７内の３つの軽鎖ＣＤＲとを含む、請求項１〜３、５〜７、９〜１１、１２、１３、１５、１７、１８、または１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記抗原結合コンストラクトが、配列番号１４７の重鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域と、配列番号１４７の軽鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である軽鎖可変領域とを含む、請求項１〜３、５〜７、９〜１１、１２、１３、１５、１７、１８、または１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記対象または患者が、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病、悪性リンパ腫、扁平細胞癌（例えば、扁平上皮細胞癌）、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌、消化器癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿道癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、多発性骨髄腫及びＢ細胞リンパ腫、脳腫瘍、頭頸部癌、成人及び小児の固形癌ならびに固形腫瘍のうちの１つ以上のがんから選択されるがんを有する、請求項１〜３、５〜７、９〜１１、１２、１３、１５、１７、１８、または１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記治療が、限定されるものではないが、本明細書で提供される免疫チェックポイント阻害剤、ＩＯＴ、または化学療法剤を含む、本明細書で提供される療法のうちの少なくとも１つを含む、請求項２〜１５及び１７のいずれか１項に記載の治療の方法。
【請求項２５】
前記ヒトＣＤ８が、ヒトＣＤ８α鎖である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトが、ヒトＣＤ８β鎖よりもヒトＣＤ８α鎖に対して選択的である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記抗原結合コンストラクトが、ヒトＣＤ８α鎖よりもヒトＣＤ８β鎖に対して選択的である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記α鎖が、配列番号１３４の配列を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ヒトＣＤ８が、ヒトＣＤ８β鎖である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記検出可能なマーカーの増加が、ＣＤ８浸潤の増加があることを示す、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
第１の画像から第２の画像へのＣＤ８  ＰＥＴトレーサーからのシグナルの増加が、腫瘍内の浸潤の増加があることを示す、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
浸潤の増加が、第１の療法が前記腫瘍に対して有効であることを示し、
浸潤の増加が、第１の画像と第２の画像との間のＰＥＴ検出シグナルの増加によって示され、
前記ＰＥＴ検出シグナルが、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーまたはＣＤ８抗原結合コンストラクトの検出可能なマーカーからのものである、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＰＥＴ検出シグナルの増加が少なくとも１０％である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＰＥＴ検出シグナルの増加が少なくとも１００％である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＰＥＴ検出シグナルの増加が少なくとも１０００％である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
標準取り込み値（「ＳＵＶ」）を決定することを更に含む、請求項１〜１５及び１７のいずれか１項に記載の方法であって、前記ＳＵＶを決定する方法は、
ｒを決定することであって、ｒは、ＰＥＴスキャナーにより関心領域（「ＲＯＩ」）内で測定される、前記抗原結合コンストラクトからの放射線の放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である、ことと、
ａ’を決定することであって、ａ’は、前記注入された検出可能なマーカーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である、ことと、
患者の体重ｗを決定することと、
ＳＵＶを、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果として決定することと、を更に含む、前記方法。
【請求項３７】
第２のＲＯＩについて前記プロセスを繰り返して第２の合計シグナルレベルを決定することと、前記第１と前記第２の合計シグナルレベルを比較することと、を更に含み、前記第１の合計シグナルレベルが前記第２の合計シグナルレベルよりも低い場合、前記第２のＲＯＩ内の増加したＣＤ８の存在を示す、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化するための非侵襲的方法であって、
（ａ）ＣＤ８に選択的に結合する、ＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されたトレーサーをヒト対象に投与することと、
（ｂ）（ａ）の１〜３６時間以内に、ＩＨＣ（免疫組織化学）の非存在下でＰＥＴにより前記対象内の前記トレーサーの分布を監視することと、を含み、ＰＥＴスキャンは、前記対象内の組織のある体積に選択された量のＣＤ８保有細胞よりも多い量が浸潤しているかまたは少ない量が浸潤しているかを示す、前記方法。
【請求項３９】
３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−標識抗原結合コンストラクトと、
２０ｍＭのヒスチジンと、
５％スクロースと、
５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウムと、
１４１〜１９４のアルギニンと、
２〜２０ｍＭのグルタミン酸と、を含む、診断用組成物。
【請求項４０】
前記対象の体重１ｋｇ当たり１〜２５０μｇの抗原結合コンストラクトが存在し、前記抗原結合コンストラクトがミニボディである、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
ＣＤ８組成物の製剤であって、
サイズが１０５ｋＤａ未満であるＣＤ８抗原結合コンストラクトと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトに関連付けられた８９Ｚｒ放射性標識であって、前記製剤に対して０．５よりも高いが３．６（または３．０）ｍＣｉよりも低い放射線を与える前記放射性標識と、を含み、
ヒトに投与されるように構成されている、前記製剤
【請求項４２】
前記放射性標識が、０．５よりも高いが１．０ｍＣｉよりも低い放射線を与える、請求項４１に記載の製剤。
【請求項４３】
前記放射性標識が０．７５ｍＣｉよりも低い放射線を与える、請求項４２に記載の製剤。
【請求項４４】
請求項１〜３、５〜７、９〜１３、１５、または１７〜３８のいずれか１項に記載の方法において使用するための、または薬剤として使用するための抗原結合コンストラクト。
【請求項４５】
請求項４〜８、１４、１６、１７〜１９、または２４〜３８のいずれか１項に記載の方法において使用するための、または薬剤として使用するためのＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【請求項４６】
前記放射性標識が、０．５よりも高いが１．０ｍＣｉよりも低い放射線を与える、請求項４４に記載の抗原結合コンストラクト、または請求項４５に記載のＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【請求項４７】
前記放射性標識が０．７５ｍＣｉよりも低い放射線を与える、請求項４４に記載の抗原結合コンストラクト、または請求項４５に記載のＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【請求項４８】
イメージング、検出、診断、手術、ステージ分類、治療、治療の監視、疾患の進行の監視、及び療法の監視のうちの少なくとも１つで使用するための請求項３９または４０に記載の組成物、請求項４１〜４３に記載の製剤、請求項４４、４６または４７に記載の抗原結合コンストラクト、または請求項４５、４６または４７に記載のＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【請求項４９】
イメージング、検出、診断、手術、ステージ分類、治療、治療の監視、疾患の進行の監視、及びＣＤ８依存性疾患、場合によりがんの療法の監視のうちの少なくとも１つで使用するための請求項３９または４０に記載の組成物、請求項４１〜４３に記載の製剤、請求項４４、４６、または４７に記載の抗原結合コンストラクト、または請求項４５、４６、または４７に記載のＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権
本出願はＰＣＴであり、２０１８年９月２８日出願の米国特許出願第６２／７３８，９３８号、及び２０１９年３月２９日出願の米国特許出願第６２／８２６，６０６号に対する優先権を主張するものであり、両特許出願は、それらの全体を参照することにより本明細書に援用する。
【０００２】
配列表
本出願は、電子形式の配列表とともに出願されている。配列表は、２０１９年９月２７日に作成された、１２６，１２４バイトのサイズを有し、名称がＩＧＮＡＢ０４７ＷＯＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔであるファイルとして提供される。配列表の電子形式の情報を、本明細書に参照によりその全体を援用する。
【背景技術】
【０００３】
本技術は一般的にはＣＤ８に関係したイメージング及び治療的側面に関するものである。
【０００４】
関連出願の記載
ＣＤ８（分化抗原群）は、Ｔ細胞のサブクラス（細胞傷害性Ｔ細胞を含む）の特異的マーカーである膜貫通糖タンパク質である。ＣＤ８は、ＣＤ８αとＣＤ８βサブユニットのヘテロ二量体またはＣＤ８αのホモ二量体として組み立てられる。組み立てられた二量体ＣＤ８複合体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）とともに共受容体として作用し、ＭＨＣクラスＩ細胞による抗原提示を認識する。ＣＤ８は、Ｔ細胞の発達及び成熟Ｔ細胞の活性化に役割を担っている。Ｔ細胞の局在化の変化は、免疫応答の進行を反映することができ、時間とともに生じ得る。
【０００５】
米国特許出願公開第２０１６００２４２０９号に記載されるものを含む、ＣＤ８を標的とした様々な抗原結合コンストラクトが存在している。
【発明の概要】
【０００６】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８を監視するための方法が提供される。本方法は、対象にＣＤ８ミニボディを与えることであって、ＣＤ８ミニボディが図１Ｃに示されるＣＤ８に結合し、ミニボディが検出可能なマーカーで標識されている、与えることと、対象へのＣＤ８ミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視することと、を含む。
【０００７】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８を監視する方法は、対象にＣＤ８ミニボディを与えることであって、ＣＤ８ミニボディが図１Ｃに示されるＣＤ８に結合し、ミニボディが検出可能なマーカーで標識されている、与えることと、対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視することであって、監視することにより、対象内で１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した組織を検出可能であり、監視することがＰＥＴによって行われる、監視することと、を含む。
【０００８】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８陽性細胞を可視化する方法は、対象にＣＤ８ミニボディを与えることであって、ＣＤ８ミニボディが検出可能なマーカーで標識されており、ＣＤ８ミニボディの配列がヒト化されていてヒトＣＤ８に結合する、与えることと、対象へのＣＤ８ミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視することであって、監視することにより、対象内で１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８陽性細胞が浸潤した組織を検出可能であり、監視することがＰＥＴによって行われる、監視することと、を含む。
【０００９】
いくつかの実施形態では、細胞数（例えば、５００個以下）は、深さ１０ミクロンまたは３０ミクロン当たりである。
【００１０】
いくつかの実施形態では、ヒト体内の細胞を可視化する方法は、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることであって、手段が検出可能な標識を含む、与えることと、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の対象への投与の６〜３６時間以内に対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第１の分布を監視及び決定することと、を含む。
【００１１】
いくつかの実施形態では、ミニボディを対象に投与する方法は、ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることを含み、標識されたミニボディによって３ｍＣｉ±２０％の放射線が対象に与えられ、０．２〜１０ｍｇの量の総タンパク質が対象に与えられる。
【００１２】
いくつかの実施形態では、ミニボディを対象に投与する方法は、ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることを含み、標識されたミニボディによって０．７５〜１．５±２０％ｍＣｉの放射線が対象に与えられ、０．２〜１０ｍｇの量の総タンパク質が対象に与えられる。
【００１３】
いくつかの実施形態では、患者を治療する方法は、がんと診断されたヒト患者に、ある用量のヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することを含み、用量は、約３ｍＣｉの放射能を提供する８９Ｚｒ標識された抗原結合コンストラクトと、約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトとを含む。方法は更に、用量の投与後の第１の時点において患者体内の８９Ｚｒ標識された抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点が投与の約６時間〜３６時間後である、生成することと、第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、１つ以上の組織中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布に基づいてがんの第１の治療を患者に投与することと、を含む。
【００１４】
いくつかの実施形態では、腫瘍を治療する方法は、対象内の腫瘍にミニボディが結合して標識された腫瘍を形成するように対象にミニボディを投与することを含み、ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、ミニボディは検出可能な標識に結合されている。ミニボディが標識された腫瘍を形成する際にいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合する場合、免疫チェックポイント阻害剤からなる群から選択される治療を投与すること。ミニボディが標識された腫瘍を形成する際にすべての腫瘍全体にわたって結合する場合、免疫チェックポイント阻害剤は投与しない。
【００１５】
いくつかの実施形態では、対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合するヒトミニボディを投与することと、ヒトミニボディの分布を監視して新生物内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物の少なくとも第１のＴＩＬ状態に基づいて患者を治療することと、を含む。
【００１６】
いくつかの実施形態では、対象内のＣＤ８分布を分析する方法は、第１のＰＥＴ画像により検出可能なマーカーの分布の画像を提供することであって、検出可能なマーカーがＣＤ８ミニボディに結合されており、ＣＤ８ミニボディがヒトＣＤ８に結合し、ＣＤ８ミニボディは対象に免疫応答を引き起こさない、提供することと、対象の第２のＰＥＴ画像によりＦＤＧマーカーの分布の画像を提供することと、第１のＰＥＴ画像の第２のＰＥＴ画像上へのオーバーレイを含む第３のＰＥＴ画像を生成することと、第３のＰＥＴ画像に基づいて腫瘍をＴＩＬとして特定することと、を含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、少なくとも１つの新生物のＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、を含む。場合により、これを、状態がＴＩＬ陽性となるまで継続する。
【００１８】
いくつかの実施形態では、対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合に患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、を含む。場合により、これを、状態がＴＩＬ陽性となるまで継続する。
【００１９】
いくつかの実施形態では、腫瘍を特徴付ける方法は、ヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトをヒト対象に適用することであって、抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、適用することと、検出可能なマーカーの分布を監視することと、検出可能なマーカーの分布に基づいて画像を生成することと、ユーザーが腫瘍を特徴付けることができるような形で画像をユーザーに対して表示することと、を含む。
【００２０】
いくつかの実施形態では、画像を生成する方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することであって、抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、適用することと、腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出し、検出された各検出可能なマーカーに対して正のピクセルを割り当てることと、割り当てられた各正のピクセルの分布に基づいて画像を生成することであって、画像が非一時的コンピュータ可読媒体に格納される、生成することと、を含む。
【００２１】
いくつかの実施形態では、陽電子放出断層撮影（「ＰＥＴ」）の方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーを対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、光子対の検出を利用して、同時事象のリストによってトレーサー源を局在化することであって、同時事象は、シンチレーターからの出力を受け取ってそれを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、局在化することと、を含み、対象内の組織または新生物１ｍｍ３当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。
【００２２】
いくつかの実施形態では、診断用組成物を製造する方法は、ミニボディをデスフェリオキサミンと結合させてＤＦ−ミニボディを形成することと、ＤＦ−ミニボディを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識されたミニボディを形成することと、放射性標識されたミニボディを精製することと、放射性標識されたミニボディを非放射性ミニボディと混合して診断用組成物を形成することと、を含み、ミニボディと非放射性ミニボディはＣＤ８の同じエピトープに結合する。
【００２３】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−標識ミニボディ、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、１４１〜１９４のアルギニン、及び２〜２０ｍＭのグルタミン酸を含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、構造：
【化１】
2022501402.tif 000003
を有する標識されたミニボディを含み、
式中、ミニボディは、配列番号１、３、１６の、または１４７内の重鎖可変領域と、配列番号７、９、１５の、または１４７内の軽鎖可変領域とを含み、組成物は少なくとも３ｍＣｉの放射線を提供する。
【００２５】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、構造：
【化２】
2022501402.tif 000004
を有する標識されたミニボディを含み、
式中、ミニボディは、配列番号１、３、１６の、または１４７内の重鎖可変領域と、配列番号７、９、１５の、または１４７内の軽鎖可変領域とを含み、組成物は少なくとも３ｍＣｉの放射線を提供する。
【００２６】
いくつかの実施形態では、組成物は、活性マーカーを含む、ＣＤ８に結合する第１のミニボディと、ＣＤ８に結合する第２のミニボディとを含み、第２のミニボディは不活性マーカーを含むかまたは活性マーカーを欠く。
【００２７】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、放射性標識に結合された第１のＣＤ８ミニボディと、放射性標識に結合されていない第２のＣＤ８ミニボディとを含み、第１及び第２のＣＤ８ミニボディは同じ配列を有し、組成物は約３ｍＣｉの放射線を与え、組成物は総質量１．５〜１０ｍｇのタンパク質を提供する。
【００２８】
いくつかの実施形態では、対象をイメージングする方法は、上記に提供された組成物のいずれか１つの第１の用量を投与することと、対象をイメージングして第１の画像を得ることと、上記に提供された組成物のいずれか１つの第２の用量を投与することと、対象をイメージングして第２の画像を得ることと、第１の画像と第２の画像とを比較することと、を含む。
【００２９】
いくつかの実施形態では、標準取り込み値を決定する方法は、抗原結合コンストラクトを対象に適用することであって、抗原結合コンストラクトは放射性プローブを含む、適用することと、ｒを決定することであって、ｒは、抗原結合コンストラクトからの放射線のＲＯＩ内でＰＥＴスキャナーによって測定される放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である、決定することと、ａ’を決定することであって、ａ’は、注入された放射性標識トレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である、決定することと、患者の体重ｗを決定することと、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果としてＳＵＶを決定することと、を含む。
【００３０】
いくつかの実施形態では、画像を分析する方法は、画像を提供することと、画像をマーキングすることにより画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）を定義することと、第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内のシグナル強度の平均値を決定することと、第１のＲＯＩ内の各シグナル強度を合計して第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルを得ることと、を含み、第１のＲＯＩは対象に投与された抗原結合コンストラクトに関連付けられた検出可能なマーカーの量のデータを表す。
【００３１】
いくつかの実施形態では、対象に抗原結合コンストラクトを投与する方法が提供される。方法は、ヒトＣＤ８に結合する標識された抗原結合コンストラクトを対象に与えることを含む。標識は８９Ｚｒを含み、標識は注入時に０．７５（または０．５）〜３ｍＣｉ±２０％の放射線を与え、０．２〜１０ｍｇの量の総抗原結合コンストラクトが対象に与えられる。
【００３２】
いくつかの実施形態では、患者を治療する方法が提供される。方法は、ａ）がんと診断されたヒト患者に、ある用量のヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．７５（または０．５）〜３．６ｍＣｉの放射能を提供する８９Ｚｒ標識された抗原結合コンストラクトと、約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトとを含む、投与することと、ｂ）患者体内の８９Ｚｒ標識された抗原結合コンストラクトを、用量の投与後の第１の時点で検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点は投与の約６〜３６時間後である、生成することと、ｃ）第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、ｄ）患者にがんの第１の治療を投与することと、ｅ）第１の治療を投与した後、がんと診断されたヒト患者に第２の用量の抗原結合コンストラクトを投与することと、ｆ）第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することと、ｇ）第１の患者画像と第２の患者画像とを比較し、第１と第２の患者画像の比較に基づいてがんの第２の治療を患者に投与することと、を含む。
【００３３】
いくつかの実施形態では、患者を治療する方法が提供される。方法は、ａ）がんと診断されたヒト患者に、ある用量のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することであって、用量は、約０．７５（または０．５）〜３．６ｍＣｉの放射能を提供するＣＤ８  ＰＥＴトレーサーと、約５μｇ〜約５０ｍｇ（または約２０μｇ〜１０ｍｇ）のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーとを含む、投与することと、ｂ）患者体内のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを、用量の投与後の第１の時点で検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点は投与の約1〜３６時間後である、生成することと、ｃ）第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの第１の存在量及び／または分布を決定することと、ｄ）患者にがんの第１の治療を投与することと、ｅ）第１の治療を投与した後、がんと診断されたヒト患者に第２の用量のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することと、ｆ）第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの第２の存在量及び／または分布を決定することと、ｇ）第１の患者画像と第２の患者画像とを比較し、第１と第２の患者画像の比較に基づいてがんの第２の治療を患者に投与することと、を含む。
【００３４】
いくつかの実施形態では、方法は、新生物を有し、免疫療法（「ＩＯＴ」）による治療を受けている患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することであって、抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含み、抗原結合コンストラクトが対象に免疫応答を引き起こさず、検出可能なマーカーが８９Ｚｒを含み、検出可能なマーカーが注入時に０．５〜３ｍＣｉ±２０％の放射能を与え、０．２〜１０ｍｇの量の総抗原結合コンストラクトが患者に与えられる、投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合に患者に代替的なＩＯＴを投与することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性となるまで上記の方法を繰り返すことと、を含む。
【００３５】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法が提供される。方法は、ｉ）ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、ｉｉ）候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、ｉｉｉ）候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、ｉｖ）第１と第２の画像を比較して、ａ）腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すか、またはｂ）腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかを判定し、ａ）の場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。
【００３６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法が提供される。方法は、ｉ）ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、ｉｉ）候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、ｉｉｉ）療法を投与した後、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを使用して対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、ｉｖ）第１と第２の画像を比較して、ａ）腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すか、またはｂ）腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかを判定し、ａ）の場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。
【００３７】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法が提供される。方法は、ａ）候補治療薬をヒト対象に投与することと、ｂ）ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、ｃ）候補治療薬後にサイズが増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含む。ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大が腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行（ｐｓｅｕｄｏｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ）を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。
【００３８】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法が提供される。方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、対象にＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することであって、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは８９Ｚｒを含む、投与することと、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの投与の約３６時間以内に８９Ｚｒの分布について対象にＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。いくつかの実施形態では、１８Ｆは、３時間よりも短い半減期を有する任意のＰＥＴ同位体である。
【００３９】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−標識抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、１４１〜１９４のアルギニン、及び２〜２０ｍＭのグルタミン酸を含む。
【００４０】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８組成物の製剤は、サイズが１０５ｋＤａ未満であるＣＤ８抗原結合コンストラクトと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトに会合した８９Ｚｒ放射性標識であって、製剤に対して０．５ｍＣｉよりも高いが３．６（または３．０）ｍＣｉよりも低い放射線を提供する放射性標識と、を含み、製剤はヒトに投与されるように構成される。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１Ａ】ＣＤ８への二価の結合を有するミニボディの概略図のいくつかの実施形態を示す。
【図１Ｂ】ミニボディの概略図のいくつかの実施形態を示す。
【図１Ｃ】ＣＤ８αの一例を示す。
【図２Ａ】ヒト抗体（４Ｄ５ｖ８）及び本明細書のヒト化ＶＨ領域（ＩＡＢ−ヒトＣＤ８コンストラクト）に対するＯＫＴ８可変重鎖（ＶＨ）領域のアラインメントのいくつかの実施形態を示す。ＣＤＲ領域（Ｃｈｏｔｈｉａ）のいくつかの実施形態がボックスで囲まれた領域により示されている。
【図２Ｂ】ヒト化ＶＬ領域及びＩＡＢ−ヒトＣＤ８コンストラクトに対するＯＫＴ８可変軽鎖（ＶＬ）領域のアラインメントのいくつかの実施形態を示す。ＣＤＲ領域（Ｃｈｏｔｈｉａ）のいくつかの実施形態がボックス領域により示されている。
【図３Ａ】抗原への二価の結合を示すｃｙｓ−ダイアボディの概略図のいくつかの実施形態を示す。
【図３Ｂ】抗原への二価の結合を示すｃｙｓ−ダイアボディの概略図を示す。
【図４】キメラＩＡＢ−ヒトＣＤ８ミニボディのＶＬ−ＶＨ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図５】キメラＩＡＢ−ヒトＣＤ８ミニボディのＶＨ−ＶＬ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図６】ヒト化ＩＡＢ−ヒトＣＤ８ミニボディのＶＬ−ＶＨ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図７】ヒト化ＩＡＢ−ヒトＣＤ８ミニボディのＶＨ−ＶＬ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図８】ヒト化ＩＡＢ−ヒトＣＤ８  ｃｙｓ−ダイアボディのＶＬ−５−ＶＨ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図９】ヒト化ＩＡＢ−ヒトＣＤ８  ｃｙｓ−ダイアボディのＶＨ−５−ＶＬ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１０】ヒト化ＩＡＢ−ヒトＣＤ８  ｃｙｓ−ダイアボディのＶＬ−８−ＶＨ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１１】ヒト化ＩＡＢ−ヒトＣＤ８  ｃｙｓ−ダイアボディのＶＨ−８−ＶＬ配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ａ】ｃｙｓ−ダイアボディの配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｂ】ミニボディの配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｃ】ＶＬの配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｄ】ヒトＶＬの配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｅ】ＶＨの配列のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｆ】ヒトＶＨの配列（バージョン１からのバージョン「ａ」）のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｇ】ヒトＶＨの配列（バージョン１からのバージョン「ｂ」）のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｈ】ヒトＶＨの配列（バージョン２からのバージョン「ｃ」）のいくつかの実施形態を示す。
【図１２Ｉ】ヒトＶＨの配列（バージョン２からのバージョン「ｃ」）のいくつかの実施形態を示す。
【図１３】ｐｃＤＮＡ（商標）３．１／ｍｙｃ−Ｈｉｓ（−）バージョンＡ、Ｂ、Ｃのベクターマップのいくつかの実施形態を示す。
【図１４】標的の有無を検出する方法のいくつかの実施形態を示す。
【図１５】ＩＡＢ２２Ｍγ２  ＥＨ１のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１６】ＩＡＢ２２Ｍγ２  ＥＨ２バリアントのいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１７Ａ】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ１のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１７Ｂ】ＩＡＢ２２Ｍγ２  ＮＨ１のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１７Ｃ】ＩＡＢ２２Ｍγ２  ＮＨ２のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１８】表３に示されるヒンジバリアントのいくつかの実施形態の図である（γ１  ＥＨ１（上）、γ１  ＥＨ３（中央）、γ１  ＥＨ４（下））。
【図１９Ａ】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ３のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１９Ｂ】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ５のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１９Ｃ】ＩＡＢ２２Ｍγ３／γ１  ＥＨ６のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１９Ｄ】ＩＡＢ２２Ｍγ３／γ１  ＥＨ７のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図１９Ｅ】ＩＡＢ２２Ｍγ３／γ１  ＥＨ８のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図２０】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ２のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図２１】異なる抗原特異性を有するＭｂのＶＬ及びＶＨドメインのタンパク質配列情報を示す。
【図２２】リンカー配列の様々な実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図２３】ヒンジ領域の様々な実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図２４】ＣＨ３ドメインの様々な実施形態のタンパク質配列情報を示す。
【図２５】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ１（Ｍ１）及びＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ３（Ｍ１）のそれぞれの実施形態のタンパク質配列のアラインメントを示す。配列の違いはボックス内に示されている。
【図２６】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ３（Ｍ１）の一実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。シグナル配列、ＣＤＲ配列、リンカー配列、及びヒンジ配列がボックス内に示されている。
【図２７】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ５（Ｍ１）の一実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。
【図２８】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ７（Ｍ１）の一実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。
【図２９】ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ８（Ｍ１）の一実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。
【図３０】ＩＡＢ２２Ｍγ２  ＥＨ２（Ｍ１）の一実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。
【図３１】ＶＨ−Ｋ６７Ｒの多型を有するＩＡＢ２２Ｍγ２  ＥＨ２（Ｍ１）の一実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。
【図３２】ＩＡＢ２２ＭのＶＨドメインの一実施形態のタンパク質配列を示す。
【図３３】ヒト（ホモ・サピエンス）由来のＴ細胞表面糖タンパク質ＣＤ８α鎖の一実施形態のタンパク質配列を示す。
【図３４】ヒト（ホモ・サピエンス）由来のＴ細胞表面糖タンパク質ＣＤ８β鎖の一実施形態のタンパク質配列を示す。
【図３５】操作されたミニボディ（Ｍｂ）の図を示す。
【図３６】ヒトＩｇＧ１に基づくＭｂのヒンジの様々な実施形態の図を示す（γ１  ＥＨ１（上）及びγ１  ＥＨ２（下））。
【図３７】ヒトＩｇＧ２に基づくＭｂのヒンジの様々な実施形態の図を示す（γ２  ＥＨ１（上）及びγ２  ＥＨ２（下））。
【図３８】ヒトＩｇＧ２に基づく更なるＭｂのヒンジの様々な実施形態の図を示す（γ２  ＮＨ１（上）及びγ２  ＮＨ２（下））。
【図３９】ＣＤ８ミニボディのいくつかの実施形態を示す。
【図４０】本開示のいくつかの実施形態に従う８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの製造を示す概略図である。
【図４１】本開示のいくつかの実施形態に従う８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの製造における単位ステップ及びそれぞれの試験を示すフロー図を示す。
【図４２】ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ−４８８で予め標識したＩＡＢ２２Ｍ２ＣをＨＰＢ−ＡＬＬ（Ａ）及び精製ヒトＴ細胞（Ｂ）に対して用いた競合ＦＡＣＳアッセイの結果を示す。
【図４３】ヒトＰＢＭＣを使用したＴ細胞増殖アッセイの結果を示す。
【図４４】ヒトＰＢＭＣサイトカイン放出アッセイの結果を示す。
【図４５】ヒトＰＢＭＣを使用したＴ細胞生存アッセイ（Ａ）及びＴ細胞増殖アッセイ（Ｂ）の結果を示す。
【図４６】ヒトにおける静脈内用量２０μｇ／ｋｇの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃについて予測された薬物動態パラメータを示す、表３を示す。
【図４７】ヒトＣＤ３４幹細胞を移植したＮＳＧマウスの血液中のＴ細胞集団のＦＡＣＳ分析のベースラインの結果を示す。
【図４８】ヒトＣＤ３４幹細胞を移植したＮＳＧマウスの血液中のＴ細胞集団のＦＡＣＳ分析の２４時間における結果を示す。
【図４９】ヒトＣＤ３４前駆細胞を移植したマウスから得た血清試料に対して行ったＬｅｇｅｎｄＰｌｅｘ（商標）Ｔｈ１ビーズアッセイの結果を示す。
【図５０】８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ２についてのＰＥＴの結果を示す。
【図５１】８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ２についてのＰＥＴの結果を示す。
【図５２】８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ２についてのＰＥＴの結果を示す。
【図５３】８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ２についてのＰＥＴの結果を示す。
【図５４】８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ２についてのＰＥＴの結果を示す。
【図５５】いくつかの抗原結合コンストラクトの使用のスケジュールのフロー図である。
【図５６】スクリーニング及び患者選択のための本明細書で提供される様々な方法のいくつかの実施形態のフロー図である。図の凡例は図５６の５６２４に示されている。
【図５７】治療開始及び有効性の監視のための本明細書で提供される様々な方法のいくつかの実施形態のフロー図である。図の凡例は図５７の５７１９に示されている。
【図５８】毒性についての治療の監視のための本明細書で提供される異なる方法のいくつかの実施形態のフロー図である。図の凡例は図５８の５８２４に示されている。
【図５９】製品コンセプトの使用事例のスクリーニング及び患者選択のための本明細書で提供される異なる方法のいくつかの実施形態のフロー図である。図の凡例は図５９の５９２０に示されている。
【図６０】製品使用事例の治療開始及び有効性の監視のための本明細書で提供される様々な方法のいくつかの実施形態のフロー図である。図の凡例は図６０の６０１９に示されている。
【図６１】製品使用事例の毒性についての治療の監視のための本明細書で提供される様々な方法のいくつかの実施形態のフロー図である。図の凡例は図６１の６１２５に示されている。
【図６２Ａ】実施例８５に概要が示される中央読影デザインを示すグラフである。
【図６２Ｂ】ステージＩに参加した各被験者のＳＵＶ平均から求めた参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｃ】ステージＩに参加した各被験者のＳＵＶ平均から求めた参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｄ】ステージＩに参加した各被験者のＳＵＶ平均から求めた参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｅ】ステージＩに参加した各被験者のＳＵＶ平均から求めた参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｆ】ステージＩに参加した各被験者のＳＵＶ平均から求めた参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｇ】ステージＩに参加した各被験者のＳＵＶ平均から求めた参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｈ】ステージＩに参加した各被験者のＳＵＶ平均から求めた参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｉ】０．５ｍｇ及び１．５ｍｇのステージＩ及びＩＩにおける棒グラフである。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｊ】０．５ｍｇ及び１．５ｍｇのステージＩ及びＩＩにおける棒グラフである。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｋ】リンパ節取り込みの頻度を示すグラフである。
【図６２Ｌ】標的腫瘍病変の平均時点のそれぞれにおけるＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク取り込み値の分布のプロットである。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｍ】標的腫瘍病変の平均時点のそれぞれにおけるＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク取り込み値の分布のプロットである。グラフの下の凡例の順序はグラフ内の棒の順序を示す。
【図６２Ｎ】８９Ｚｒで標識された抗原結合コンストラクトが投与の６時間または６日間以内に標的（ＣＤ８）に結合する能力を示すＰＥＴスキャンを一般的に示す。
【図６３Ａ】放射性トレーサー取り込みとＩＨＣ分析によって測定されたＣＤ８＋Ｔ細胞数との相関についての定量的結果を提供する各ステップを示すチャートである。
【図６３Ｂ】回帰係数（ｒ２）を含む、ベースライン（ａ）及び治療中（ｂ）の生検試料のＳＵＶベースの測定値（ＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク）と平均のＣＤ８＋Ｔ細胞数との間の線形の関係を示すグラフである。
【図６３Ｃ】回帰係数（ｒ２）を含む、ベースライン（ａ）及び治療中（ｂ）の生検試料のＳＵＶベースの測定値（ＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク）と平均のＣＤ８＋Ｔ細胞カウントとの間の線形の関係を示すグラフである。
【図６３Ｄ】ＳＵＶ最大（ａ）及びＳＵＶピーク（ｂ）についてベースラインと治療中の結果を一緒にプロットした場合の回帰係数（ｒ２）を含めた線形の関係を示すグラフである。
【図６４Ａ】いくつかの異なる時点にわたる２人の被験者からのＰＥＴ画像を示す。
【図６４Ｂ】腫瘍微小環境をより完全に特徴付けるためのＦＤＧのＰＥＴとＣＤ８のＰＥＴとの組み合わせを示す。
【図６４Ｃ】腫瘍微小環境をより完全に特徴付けるためのＦＤＧのＰＥＴとＣＤ８のＰＥＴとの組み合わせを示す。
【図６４Ｄ】レスポンダーの画像（ＰＥＴ／ＣＴ）である。
【図６４Ｅ】様々な治療の有効性を試験するためにミニボディコンストラクトを使用した結果を示すＰＥＴスキャン及び融合ＰＥＴ／ＣＴスキャンである。
【図６４Ｆ】ノンレスポンダーの画像（ＰＥＴ及びＰＥＴ／ＣＴスキャン）である。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
本開示は、インビボで非侵襲的な方法により、ＣＤ８分子、ひいてはＣＤ８＋Ｔ細胞を可視化するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃのような本開示の放射性標識された抗原結合コンストラクトが、インビボでヒト患者体内のＣＤ８＋Ｔ細胞を検出するためのＰＥＴ造影剤である。いくつかの実施形態では、本開示の方法は、免疫療法に対する局所及び全身の免疫応答のより深い理解を与え、患者にとって一般的に優れた免疫療法またはがん療法を選択し、かつ／またはがん治療のための新規な免疫治療薬をもたらすことができる。
【００４３】
本明細書では、ＣＤ８の発現に関連した様々ながんを監視、診断、及び治療することに関連する様々な方法及び組成物を、そのための様々な組成物を含めて提供し、及びその更なる代替的使用を提供する。本明細書に提供されるいくつかの実施形態は、対象内のＣＤ８分子及び／またはＣＤ８＋Ｔ細胞などのＣＤ８保有細胞の分布を監視することを可能とする。いくつかの実施形態では、これは、標識され、ヒトＣＤ８に結合する、ミニボディなどの抗原結合コンストラクトによって少なくとも一部が実現される。
【００４４】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトの特性は、抗原結合コンストラクト（検出可能なマーカーと結合されるかまたは会合させられる）の優れた分布の時間計測を可能とし、同日イメージングが行える、または単一用量で複数日のイメージングが行える。
【００４５】
本明細書で提供されるいくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍または新生物のより詳細な特徴付けを可能とする。例えば、本プロセスは、様々なＣＤ８保有細胞がどのように、またはどれだけ効果的に腫瘍または新生物に浸潤するかを測定することを可能とする。このプロセスに基づけば、例えば、ある状態から別の状態へと腫瘍の状態を変化させるのにどの治療法が最も効果的であるかを調べるための代替的な治療法を提供することにより、対象にとっての適正な療法の選択を決定することができる。例えば、免疫表現型を観察することができることによって、対象の現在の免疫表現型が何であるか（例えば、免疫砂漠型（ｉｍｍｕｎｅ  ｄｅｓｅｒｔ）、免疫排除型（ｉｍｍｕｎｅ  ｅｘｃｌｕｄｅｄ）、またはＴＩＬ陽性（または炎症型））を決定し、次いで、その状態を変化させるべきか、状態を変化させるにはどの療法を用いるべきか、及び、新たな状態を考慮した場合、どのようなその後の療法を用いるべきかを決定することができる。
【００４６】
当業者であれば、本発明で用いるところの「腫瘍の特徴付け」とは、「免疫砂漠型、免疫排除型、またはＴＩＬ陽性（または炎症型）」以外にも多様な語及び表現によって表され得る点は理解されよう。医療従事者によっては、観察された結果を記述するために「ホット（ｈｏｔ）」、「コールド（ｃｏｌｄ）」または「中間（ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ）」の尺度を用いるであろう。他の特徴付けでは、腫瘍の場所（浸潤辺縁部、腫瘍表面、腫瘍中心部）、または密度（免疫の密度及び量）などのＣＤ８保有リンパ球に関するより詳細な組織学的情報を提供することができる。他の特徴付けは、「ホット」な腫瘍が均一に浸潤しているか、または不均一に浸潤しているかを区別することができる。医療従事者によっては、ホット（ｈｏｔ）、変化−排除型（ａｌｔｅｒｅｄ−ｅｘｃｌｕｄｅｄ）、変化−免疫抑制型（ａｌｔｅｒｅｄ−ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ）、及びコールド（ｃｏｌｄ）のより包括的な腫瘍の４つのカテゴリー分類を好む場合もある。かかる語及び表現のいずれも、本発明の観察される結果を記述するうえで許容されるものであり、本明細書におけるいずれの１つの表現の使用も、他のいずれの適切な観察の記述の使用も排除することを意図するものではない。
【００４７】
更に、これらのＣＤ８抗原結合コンストラクトの使用により得られる情報を分析及び特徴付けするための様々な方法も提供され、例えば、対象に適正な療法を提供することを可能とする。
【００４８】
本明細書で提供されるように、これらのＣＤ８抗原結合コンストラクト、方法、及び製剤を使用することは、新生物のＣＤ８状態を判定するのに有用となり得る。次に、この情報を様々な方法で用いることで、例えば、概して、免疫療法が対象にとって良好に適合したものであるかどうか（例えば、新生物がＴＩＬ陽性か）を判定することができる。あるいは、この情報を対象で様々な療法をスクリーニングするために用いて、特定の免疫療法が、対象がその免疫療法を受ける場合に対象において有効であるかどうか（例えば、新生物が初期には免疫排除型または免疫砂漠型であるが、ＴＩＬ陽性（すなわち、炎症型）に変化するかどうか）を判定することもできる。一般的に言うと、提供される方法のいずれのもの（監視または治療するための、などの）もいずれかの構成に使用することができる。したがって、特定の状況または実施形態におけるある方法の開示は、他の方法（対応する特定の状況または実施形態における）を開示することも意図している。これは、ただ単に、その後のステップが変化する（例えば、ｉ）免疫療法をＴＩＬ陽性である対象に投与するか、ｉｉ）免疫療法（または新たな免疫療法）を対象に投与して対象の腫瘍表現型をＴＩＬ陽性に変化させる）ということである。
【００４９】
以下のセクションでは、様々な用語の様々な定義の簡単な一覧、及びいくつかの用語について様々な実施形態を示す。このセクションに続いて、様々な方法の詳細な記載、ならびに本明細書に提供される発明において企図される様々な選択肢及び実施形態に関する更なる詳細を示す。そのセクションの後には一連の実施例が続く。
定義及び様々な実施形態
【００５０】
定義及び様々な実施形態
定義されない限り、当業者によって理解される用語の平易で通常の意味が適用される。
【００５１】
ある状態を「治療する」または「治療」とは、その状態を予防すること、その状態の発症及び／または発現の速度を遅延すること、その状態の発現のリスクを低減すること、その状態に伴う症状の発現を予防及び／または遅延すること、その状態に伴う症状を軽減または終焉させること、その状態の完全寛解または部分寛解をもたらすこと、またはこれらの特定の組み合わせを指すことができる。「予防する」という用語は、障害または疾患の絶対的な阻止は必要としない。治療には、対象の腫瘍または新生物の免疫表現型を（砂漠型から排除型、ＴＩＬ陽性型へ）変化させること、及びその特定の表現型の腫瘍に対するその後の治療的適用が含まれる。
【００５２】
「治療有効量」または「治療有効用量」とは、標的条件を予防する、治療する、疾患及び／または症状の発症を遅延する、及び／または状態に伴う症状を軽減するといった所望の治療効果を対象にもたらす量である。この量は、限定されるものではないが、治療化合物の特性（活性、薬物動態、薬力学、及びバイオアベイラビリティーを含む）、対象の生理学的条件（年齢、性別、疾患の種類及びステージ、一般的な身体の状態、与えられた用量に対する応答性、及び薬剤の種類を含む)、製剤中の薬学的に許容される担体（複数可）の性質、及び／または投与の経路を含む広範な要因に応じて異なる。臨床及び薬学分野における当業者であれば、例えば、化合物の投与に対する対象の応答を監視し、本開示を考慮のうえ、それに応じて用量を調整することにより、通常の実験によって治療有効量を決定することが可能である。更なる手引きについては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２１．ｓｕｐ．ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕｎｉｖ．ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（ＵＳＩＰ），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，２００５を参照されたい。
【００５３】
「ＣＤ８  ＰＥＴトレーサー」という用語は、ＣＤ８に会合するかまたは選択的に結合して、マーカーまたは標識をＣＤ８分子と会合させることができる任意の分子を意味する。これには、抗原結合コンストラクト、抗体、ミニボディ、ダイアボディ、ｃｙｓ−ダイアボディ、ナノボディなどの態様が含まれる。ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの範囲内に更に含まれるものとして、ＣＤ８に特異的に結合し、ＰＥＴマーカーまたはＰＥＴで検出可能な標識が会合する（例えば、連結または共有結合させる）ことが可能な小ペプチド及び分子がある。ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの更なる例としては、ＷＯ２０１７／１７６７６９に開示されるものなどのＣＤ８特異的捕捉剤が挙げられ、当該公報の全体を、かかるＣＤ８特異的捕捉剤に関して参照により本明細書に援用する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれも、以下のいずれかの捕捉剤を含む、ＷＯ２０１７／１７６７６９に示されるようなＣＤ８捕捉剤（または単に「リガンド」）を用いることができる。
【００５４】
（１）ＨＧＲＧＨ−リンカー−ｗｐｌｒｆ：エピトープ２Ｃ（ＡＡＥＧＬＤＴＱＲ）及びエピトープＩＮ （ＳＱＦＲＶＳＰＬＤ）を標的とする。
【００５５】
（２）ＨＧＲＧＨ−リンカー−ＡＫＹＲＧ：エピトープ２Ｃ （ＡＡＥＧＬＤＴＱＲ）及びエピトープＩＮ （ＳＱＦＲＶＳＰＬＤ）を標的とする。
【００５６】
（３）Ｇｈｔｗｐ−リンカー−ｈＧｒＧｈ：エピトープ２Ｎ （ＦＬＬＹＬＳＱＮＫＰ）及びエピトープ２Ｃ（ＡＡＥＧＬＤＴＱＲ）を標的とする。
【００５７】
（４）ＰＷＴＨＧ−リンカー−ＡＫＹＲＧ：エピトープ２Ｎ（ＦＬＬＹＬＳＱＮＫＰ）及びエピトープＩＮ（ＳＱＦＲＶＳＰＬＤ）を標的とする。
【００５８】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８に結合する分子は、以下のうちの１つ以上からなるかまたは１つ以上を含む。
１）
【００５９】
ａ．ＨＧＳＹＧ、ｂ．ＫＲＬＧＡ、ｃ．ＡＫＹＲＧ、ｄ．ｈａｌｌｗ、ｅ．ｌｒＧｙｗ、ｆ．ｖａｓｈｆ、ｇ−ｎＧｎｖｈ、ｈ．ｗｐｌｒｆ、ｉ．ｒｗｆｎｖ、ｊｈａｖｗｈ、ｋ．ｗｖｐｌｗ、１．ｆｆｒｌｙ、及びｍ．ｗｙｙＧｆのうちの少なくとも１つと８０〜１００％同一である配列、または
２）
【００６０】
ａ．ＡＧＤＳＷ、ｂ．ＨＶＲＨＧ、ｃ．ＨＧＲＧＨ、ｄ．ＴＨＰＴＴ、ｅ．ＦＡＧＹＨ、ｆ．ＷＴＥＨＧ、ｇ．ＰＷＴＨＧ、ｈ．ＴＮＤＦＤ、ｉ．ＬＦＰＦＤ、ｊ．ｓｌｒｆＧ、ｋ．ｙｆｒＧｓ、１．ｗｎｗｖＧ、ｍ．ｖａｗｌＧ、ｎ．ｆｈｖｈＧ、ｏ．ｗｖｓｎｖ、ｐ．ｗｓｖｎｖ、ｑ．ＩｎｓｈＧ、ｒ．ｙＧＧｖｒ、ｓ．ｎｓｖｈＧ、ｔ．ｔｔｖｈＧ、ｕ．ｆｄｖＧｈ、ｖ．ｒｈＧｗｋ、ｗ．Ｇｈｔｗｐ、及びｘ．ｈＧｒＧｈからなる群から選択されるアミノ酸配列と８０〜１００％同一である配列。
【００６１】
いくつかの実施形態では、捕捉剤をスクリーニング及び／または調製するための方法は、いずれも本明細書に参照によりその全容を援用する、国際公開第ＷＯ２０１２／１０６６７１、同第ＷＯ２０１３／０３３５６１、同第ＷＯ２０１３／００９８６９、及び同第ＷＯ２０１４／０７４９０７にみることができる。いくつかの実施形態では、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは、２００ｋＤＡ、１７０ｋＤａ、１５０ｋＤａ、１２０ｋＤａ、１０５ｋＤａ、１００ｋＤａ、８０ｋＤａ、５０ｋＤａ、３０ｋＤａ、１０ｋＤａ、５ｋＤａ、または２ｋＤａ未満である。
【００６２】
「抗原結合コンストラクト」という用語は、種々の抗体のすべてを、それらの結合フラグメントを含めて含む。更に含まれるものとして、１個、２個、３個、４個、５個、及び／または６個のＣＤＲを含むコンストラクトがある。いくつかの実施形態では、これらのＣＤＲは、従来の抗体中でそれらの適切なフレームワーク領域間に分布することができる。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、重鎖及び／または軽鎖の可変領域内に含まれ得る。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、重鎖及び／または軽鎖内に位置することができる。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、単一のペプチド鎖内に位置することができる。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、互いに共有結合された２つ以上のペプチド内に位置することができる。いくつかの実施形態では、それらは互いにジスルフィド結合によって共有結合され得る。いくつかの実施形態では、それらは連結分子または部分によって連結され得る。いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、ダイアボディ及び／または一価のｓｃＦｖなどの非共有結合性のものである。特に本明細書に示されない限り、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトは、示される標的分子に結合する。この用語には、ミニボディも含まれる。
【００６３】
「ＣＤ８抗原結合コンストラクト」という用語は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを指す。これには、ミニボディ、ｃｙｓ−ダイアボディ、ｓｃＦＶなどが含まれる。この用語には、明示的に、または文脈の意味合いにより除外されない限り、完全長抗体も含まれる。ＣＤ８は、「ヒトＣＤ８」を意味し、これはヒトＣＤ８α鎖：ＨＧＮＣ：ＨＧＮＣ：１７０６  Ｅｎｓｅｍｂｌ：ＥＮＳＧ０００００１５３５６３ＭＩＭ：１８６９１０、ヒトＣＤ８β鎖ＨＧＮＣ：ＨＧＮＣ：１７０７  Ｅｎｓｅｍｂｌ：ＥＮＳＧ０００００１７２１１６ＭＩＭ：１８６７３０を意味する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、一本鎖である。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、連結された多重鎖である。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、ヒト化されている。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、ヒトに（繰り返し）投与される際に免疫原性をまったく示さないかまたは低い免疫原性を示す。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒト化されており、ヒトに（繰り返し）投与される際に免疫原性をまったく及びヒト示さないかまたは低い免疫原性を示す。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、特に断らない限り、検出可能な標識を含む。
【００６４】
「細胞増殖性疾患」及び「増殖性疾患」という用語は、一定程度の異常細胞増殖を伴う疾患を指す。一実施形態では、細胞増殖性疾患はがんである。
【００６５】
本明細書で使用するところの「腫瘍」という用語は、良性であるか悪性であるかによらず、すべての新生物細胞の成長及び増殖、ならびにすべての前がん性及びがん性細胞及び組織を指す。「がん」、「がん性」、「細胞増殖性疾患」、「増殖性疾患」及び「腫瘍」という用語は、本明細書で言及される場合、相互排他的ではない。「新生物」という用語は、「腫瘍」という用語を包含する。
【００６６】
「腫瘍」とは、特に断らない限り、固体腫瘍を意味し、対象内の新生物及びヒト細胞のあらゆる異常な細胞増殖を含む（ただし、外的生物による感染は含まない）。
【００６７】
「腫瘍の表面」または「腫瘍表面」とは、対象の正常（例えば、非腫瘍及び非腫瘍由来）細胞と接触している腫瘍塊の外周を意味する。これは、「腫瘍辺縁部」または「腫瘍境界部」と互換的に呼ばれる場合もある。細胞レベルでは、これは厚さが数個の細胞〜数百個の細胞の範囲であり得、周囲の正常細胞と不均一に統合され得る。
【００６８】
「がん」及び「がん性」という用語は、調節されない細胞増殖によって一般的に特徴付けられる、哺乳動物における生理学的状態を指す、またはこれを述べて言う。がんの例としては、限定されるものではないが、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病またはリンパ系腫瘍が挙げられる。かかる癌のより特定の例としては、扁平細胞癌（例えば、扁平上皮細胞癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌を含む肺癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化器癌を含む胃癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿道癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、多発性骨髄腫及びＢ細胞リンパ腫、脳腫瘍及び頭頸部癌、ならびに関連する転移が挙げられる。「がん」という用語には、成人及び小児の固形癌が含まれる。いくつかの実施形態では、癌は、固形腫瘍であり得る。
【００６９】
「標的」または「標的分子」という用語は、ＣＤ８タンパク質を意味する。ＣＤ８タンパク質の例は当該技術分野では周知であり、例えば、配列番号２４、図１Ｃ、または図３３、または図３４のＣＤ８タンパク質が挙げられる。例えばＣＤ８に対する抗原結合コンストラクトの結合に関して、ＣＤ８という用語は、ＣＤ８のα鎖、ＣＤ８のβ鎖、ならびにＣＤ８のα及びβ鎖の両方を意味する。
【００７０】
「抗体」という用語には、限定されるものではないが、例えば、細胞内抗体、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、抗体フラグメント、及びヘテロコンジュゲート抗体（例えば、二重特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディなど）などの遺伝子操作または別様に改変された免疫グロブリンの形態が挙げられる。「抗体」という用語には、ｃｙｓ−ダイアボディ及びミニボディが含まれる。したがって、「抗体」に関して本明細書で提供されるすべての実施形態はそれぞれ、別様に明示的に示されない限り、ｃｙｓ−ダイアボディ及び／またはミニボディの実施形態としても企図される。「抗体」という用語には、免疫グロブリンファミリーのポリペプチド、または対応する抗原と非共有結合により可逆的にかつ特異的な形で結合することができる免疫グロブリンのフラグメントからなるポリペプチドが含まれる。例示的な抗体の構造単位は、四量体を含む。いくつかの実施形態では、完全長抗体は、ポリペプチド鎖の２つの同じ対からなり、各対は１本の「軽」鎖と１本の「重」鎖とを有する（ジスルフィド結合によって結合されている）。認識されている免疫グロブリン遺伝子としては、κ、λ、α、γ、δ、ε、及びμ定常領域遺伝子、ならびに無数の免疫グロブリン可変領域の遺伝子が挙げられる。完全長鎖の場合、軽鎖はκまたはλのいずれかとして分類される。完全長鎖では、重鎖は、λ、μ、α、δ、またはεとして分類され、これはそれぞれ、免疫グロブリンのＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥクラスを規定する。各鎖のＮ末端は、主として抗原認識に関与する約１００個〜１１０個以上のアミノ酸からなる可変領域を規定する。可変軽鎖（ＶＬ）及び可変重鎖（ＶＨ）という用語は、それぞれ軽鎖及び重鎖のこれらの領域を指す。本明細書で使用するところの「抗体」とは、抗体及びそのフラグメントのすべての変形を包含する。したがって、この概念の範囲内には、完全長抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、及び同じ結合特異性を有するこれらのフラグメントの多量体バージョン（例えば、Ｆ（ａｂ’）２）が含まれる。いくつかの実施形態では、抗体は所望の標的に特異的に結合する。
【００７１】
「相補性決定ドメイン」または「相補性決定領域（「ＣＤＲ」）」は、互換的にＶＬ及びＶＨの超可変領域を指す。ＣＤＲは、標的タンパク質に対する特異性を有する抗体鎖の標的タンパク質結合部位である。いくつかの実施形態では、ＶＬ及び／またはＶＨのそれぞれに３個のＣＤＲが存在し（Ｎ末端からＣＤＲ１〜３と順に番号付けされる）、可変領域の１５〜２０％を構成している。ＣＤＲは、標的タンパク質のエピトープと構造的に相補的であり、したがって結合特異性に直接関与している。いわゆるフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるＶＬまたはＶＨの残りの部分は、アミノ酸配列の変化はより小さい（Ｋｕｂｙ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ  ｅｄ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ４．Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ＆  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２０００）。
【００７２】
ＣＤＲ及びフレームワーク領域の位置は、例えば、下記の当該技術分野では周知の様々な定義を用いて決定することができる。Ｋａｂａｔ（Ｗｕ，Ｔ．Ｔ．，Ｅ．Ａ．Ｋａｂａｔ．１９７０．Ａｎ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｖａｒｉａｂｌｅ  ｒｅｇｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｂｅｎｃｅ  Ｊｏｎｅｓ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ａｎｄ  ｍｙｅｌｏｍａ  ｌｉｇｈｔ  ｃｈａｉｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１３２：２１１−２５０、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，Ｗｕ，Ｔ．Ｔ．，Ｐｅｒｒｙ，Ｈ．，Ｇｏｔｔｅｓｍａｎ，Ｋ．，ａｎｄ  Ｆｏｅｌｌｅｒ，Ｃ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  ｅｄ．，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１−９１７（１９８７）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４２：８７７−８８３（１９８９）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：７９９−８１７（１９９２）；Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７−７４８（１９９７））、ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓデータベース（ＩＭＧＴ）（ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／でワールドワイブウェブ上）Ｇｉｕｄｉｃｅｌｌｉ，Ｖ．，Ｄｕｒｏｕｘ，Ｐ．，Ｇｉｎｅｓｔｏｕｘ，Ｃ．，Ｆｏｌｃｈ，Ｇ．，Ｊａｂａｄｏ−Ｍｉｃｈａｌｏｕｄ，Ｊ．，Ｃｈａｕｍｅ，Ｄ．ａｎｄ  Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．−Ｐ．ＩＭＧＴ／ＬＩＧＭ−ＤＢ，ｔｈｅ  ＩＭＧＴ（登録商標）ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  ｄａｔａｂａｓｅ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  ａｎｄ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，３４，Ｄ７８１−Ｄ７８４（２００６），ＰＭＩＤ：１６３８１９７９、Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．−Ｐ．，Ｐｏｍｍｉｅ，Ｃ．，Ｒｕｉｚ，Ｍ．，Ｇｉｕｄｉｃｅｌｌｉ，Ｖ．，Ｆｏｕｌｑｕｉｅｒ，Ｅ．，Ｔｒｕｏｎｇ，Ｌ．，Ｔｈｏｕｖｅｎｉｎ−Ｃｏｎｔｅｔ，Ｖ．ａｎｄ  Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｇ．，ＩＭＧＴ  ｕｎｉｑｕｅ  ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  ａｎｄ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｖａｒｉａｂｌｅ  ｄｏｍａｉｎｓ  ａｎｄ  Ｉｇ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ  Ｖ−ｌｉｋｅ  ｄｏｍａｉｎｓ  Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２７，５５−７７（２００３）．ＰＭＩＤ：１２４７７５０１、Ｂｒｏｃｈｅｔ，Ｘ．，Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．−Ｐ．及びＧｉｕｄｉｃｅｌｌｉ，Ｖ．ＩＭＧＴ／Ｖ−ＱＵＥＳＴ：ｔｈｅ  ｈｉｇｈｌｙ  ｃｕｓｔｏｍｉｚｅｄ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  ＩＧ  ａｎｄ  ＴＲ  ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ  Ｖ−Ｊ  ａｎｄ  Ｖ−Ｄ−Ｊ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ，３６，Ｗ５０３−５０８（２００８）、ＡｂＭ（Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ���ＵＳＡ，８６：９２６８−９２７２（１９８９）、ｔｈｅ  ｃｏｎｔａｃｔ  ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ（ＭａｃＣａｌｌｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２６２：７３２−７４５（１９９６））、及び／またはｔｈｅ  ａｕｔｏｍａｔｉｃ  ｍｏｄｅｌｉｎｇ  ａｎｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｔｏｏｌ  Ｈｏｎｅｇｇｅｒ  Ａ，Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  Ａ．（ワールドワイドウェブでｂｉｏｃ．ｕｚｈ．ｃｈ／ａｎｔｉｂｏｄｙ／Ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ）。
【００７３】
「結合特異性決定因子」または「ＢＳＤ」という用語は、抗体の結合特異性を決定するために必要な相補性決定領域内の最小の連続的または不連続的なアミノ酸配列を互換的に指す。最小の結合特異性決定因子は、１つ以上のＣＤＲ配列内に位置し得る。いくつかの実施形態では、最小の結合特異性決定因子は、抗体の重鎖及び軽鎖のＣＤＲ３配列の一部または完全長内に位置する（すなわち、それのみによって決定される）。いくつかの実施形態では、重鎖可変領域のＣＤＲ３は、抗原結合コンストラクトの特異性にとって充分である。
【００７４】
腫瘍の表面に関して「偏った形で結合する」及び  「偏らない形で結合する」という用語は、検出可能な標識が腫瘍表面に顕著に結合していることが観察される（腫瘍の内部には比較的結合が少ないかまたは結合がない）（＝「偏った」）腫瘍の画像、または検出可能な標識が腫瘍の表面に顕著には結合しておらず（＝「偏らない」）、例えば腫瘍の内部全体に均一もしくは不均一に分散してもよく、または腫瘍にまったく存在しなくともよい腫瘍の画像を指す。「偏った」は、腫瘍の体積に大きく浸透することなくいずれかの腫瘍辺縁部に選択的に結合していることを含む。
【００７５】
「関心領域」または「ＲＯＩ」という用語は、ヒト対象内のＣＤ８分布の画像内または画像上で、場合により自動化または半自動化画像処理方法の支援により、ヒトオペレータによって選択される画像のサブ領域であって、腫瘍を特定するかまたは他の診断法（例えば、ＦＤＧ−ＰＥＴ、ＣＴスキャン、ＭＲＩ、生検、目視検査）に基づいて腫瘍を含むことが予想される画像の領域を狭く取り囲んだサブ領域を意味する。
【００７６】
「疑似進行（Ｐｓｅｕｄｏｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ）」及び「疑似進行（Ｐｓｅｕｄｏ−ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ）」という用語は、学術文献及び本明細書では互換的に用いられる。超進行（Ｈｙｐｅｒ−ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ）は、免疫療法の開始後の疾患進行の急速な増加である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される疑似進行の方法のいずれも超進行に同様に適用することができる。
【００７７】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む組成物に関連して「活性マーカー」という用語は、「検出可能な標識」と互換的であり、放射を認識する指定された検出方法を用いて、インタロゲーションに基づく放射により、または自然放射により検出することが可能な化学部分または化合物を意味し、かかるマーカーは蛍光イメージング成分または放射性標識を含む。「不活性マーカー」とは、指定された検出方法を用いて、化学的分解により、または化合物もしくは化学部分のかかる検出方法による検出を不能とする以前の自然放射により、検出することができなくなった化合物またはコンストラクト上の化学部分を指す。
【００７８】
対象に投与された、８９Ｚｒに結合されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視、検出、比較、または観察することとの関連において「分布」という用語は、対象の全身または身体部分に対するＣＤ８抗原結合コンストラクトに結合させた検出可能な標識の生態分布の視覚的画像であって、平坦な画像（２次元）として、またはコンピュータ支援３次元表現（ホログラムを含む）として表現することができ、オペレータまたは臨床医がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を個々の組織レベル及び個々の腫瘍レベルで観察するうえで有用なフォーマットの画像を意味する。先進的なイメージングの形態では、「分布」は、全身または身体部分のスキャンの視覚的画像でない場合もあり、代わりに対象内の腫瘍の有無、及び腫瘍のＴＩＬ状態のコンピュータ化された評価のレポートの場合もある。「１８Ｆの分布と８９Ｚｒの分布との比較」は、個々の組織及び腫瘍を比較することができるように各分布における対象のスキャンをアラインすることを必要とする。
【００７９】
固形腫瘍における応答評価基準（「ＲＥＣＩＳＴ」）。腫瘍応答のコンピュータ断層撮影（ＣＴ）による解剖学的イメージングにおいて最も一般的な基準はＲＥＣＩＳＴである。これは、変化に留意するために腫瘍のサイズを評価するものであり、成長は治療が奏功していない指標であり、腫瘍サイズの減少は奏功した治療を示す。
【００８０】
固形腫瘍におけるＰＥＴ応答基準（「ＰＥＲＣＩＳＴ」）。１８Ｆ−ＦＤＧによる陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）による代謝性腫瘍応答評価の核イメージングでは、基準は、「固形腫瘍におけるＰＥＴ応答基準」（ＰＥＲＣＩＳＴ）である。
【００８１】
本明細書で使用するところの「抗体可変軽鎖」または「抗体可変重鎖」とは、それぞれＶＬまたはＶＨを含むポリペプチドを指す。内因性ＶＬは、遺伝子セグメントＶ（可変）及びＪ（接合）によってコードされ、内因性ＶＨは、Ｖ、Ｄ（多様性）、及びＪによってコードされる。ＶＬ及びＶＨのそれぞれは、ＣＤＲならびにフレームワーク領域を含む。本出願では、抗体可変軽鎖及び／または抗体可変重鎖を、随時まとめて「抗体鎖」と呼ぶ場合がある。これらの用語は、当業者によれば容易に認識されるように、ＶＬまたはＶＨの基本構造を壊さない変異を有する抗体鎖を包含する。いくつかの実施形態では、完全長の重鎖及び／または軽鎖が企図されるされる。いくつかの実施形態では、重鎖及び／または軽鎖の可変領域のみが存在するものとみなされる。
【００８２】
抗体は、インタクトな免疫グロブリンとして、または各種のペプチダーゼによる消化によって生成されるいくつかのフラグメントとして存在し得る。したがって、例えば、ペプシンは、抗体をヒンジ領域のジスルフィド結合よりも下で消化してＦａｂ’の二量体であるＦ（ａｂ）’２フラグメントを生成する。Ｆａｂ’はそれ自体、軽鎖（ＶＬ−ＣＬ）がジスルフィド結合によってＶＨ−ＣＨ１と結合したものである。Ｆ（ａｂ）’２は、穏やかな条件下で還元してヒンジ領域のジスルフィド結合を切断し、それによりＦ（ａｂ）’２二量体をＦａｂ’単量体に転換することができる。このＦａｂ’単量体は、ヒンジ領域の一部を有するＦａｂである （Ｐａｕｌ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ３ｄ  ｅｄ．（１９９３））。インタクトな抗体の消化に関して様々な抗体フラグメントが定義されるが、当業者であれば、こうしたフラグメントは化学的に、または組換えＤＮＡ法によってデノボ合成することができる点は認識されよう。したがって、本明細書で使用するところの「抗体」という用語には、全抗体の改変によって生成される抗体フラグメント、または組換えＤＮＡ法によってデノボ合成されるもの（例えば、一本鎖Ｆｖ）またはファージディスプレイライブラリーを用いて同定されるもの（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４ （１９９０））も含まれる。
【００８３】
モノクローナルまたはポリクローナル抗体を調製するには、当該技術分野では周知の任意の手法を用いることができる（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ＆  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５−４９７  （１９７５）、Ｋｏｚｂｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４：７２  （１９８３）、Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，ｐｐ．７７−９６．Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５、Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｓｈｉｘｉａ  Ｗａｎｇ，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ２０１１：１  １−４、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００５  Ｏｃｔ  １；９６（２）：３０５−１３、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ；Ｓｈａｒｏｎ  Ｊ，Ｌｉｅｂｍａｎ  ＭＡ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＢＲ、及びＤｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ．２００６  Ｊｕｌ，１１（１３−１４）：６５５−６０，Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ｔｈｅ  ｎｅｘｔ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｈａｕｒｕｍ  ＪＳを参照）。一本鎖抗体の作製方法 （米国特許第４，９４６，７７８号）を改変して本発明のポリペプチドに対する抗体を作製することができる。また、トランスジェニックマウスまたは他の哺乳動物などの他の動物を使用して完全ヒトモノクローナル抗体を発現させることもできる。あるいは、ファージディスプレイライブラリー技術を用いて選択された抗原に対する高親和性結合物質を同定することもできる（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，前出、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９−７８３，（１９９２）を参照）。
【００８４】
非ヒト抗体をヒト化または霊長類化するための方法は、当該技術分野では周知である。一般に、ヒト化抗体は、ヒト以外の由来源から１個以上のアミノ酸残基が導入されている。これらの非ヒトアミノ酸残基はしばしばインポート残基と呼ばれ、通常はインポート可変ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、「ドナー」及び「アクセプター」配列という用語を用いることができる。ヒト化は、Ｗｉｎｔｅｒ及び共同研究者の方法（例えば、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６（１９８８）及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２）を参照）に従い、齧歯類ＣＤＲ（複数可）をヒト抗体の対応する配列に置換することによって基本的に行うことができる。したがって、こうしたヒト化抗体はキメラ抗体であり、インタクトなヒト可変ドメインよりも大幅に小さい部分が非ヒト種由来の対応する配列によって置換されている（米国特許第４，８１６，５６７号）。実際には、ヒト化抗体は一般的には、いくつかの相補性決定領域（「ＣＤＲ」）残基及び場合によりいくつかのフレームワーク（「ＦＲ」）残基が齧歯類抗体の同様の部位からの残基により置換されたヒト抗体である。
【００８５】
「キメラ抗体」は、（ａ）抗原結合部位（可変領域）が、異なる、または改変されたクラス、エフェクター機能及び／または種の定常領域と、または例えば、酵素、毒素、ホルモン、増殖因子、及び薬剤などの新たな特性をキメラ抗体に与える完全に異なる分子と連結されるように定常領域、またはその部分が、改変、置換、または交換されるか、あるいは（ｂ）可変領域、またはその部分が、異なる、または改変された抗原特異性を有する可変領域で改変、置換、または交換された抗体分子である。
【００８６】
抗体には、他のタンパク質と化学的に結合されるか、または他のタンパク質との融合タンパク質として発現された１つ以上の免疫グロブリン鎖が更に含まれる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、一価のｓｃＦＶコンストラクトであり得る。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは二重特異性コンストラクトであり得る。二重特異性または二官能性抗体とは、２つの異なる重鎖／軽鎖の対と２つの異なる結合部位を有する人工的なハイブリッド抗体である。本発明の他の抗原結合フラグメントまたは抗体部分としては、二価のｓｃＦｖ（ダイアボディ）、抗体分子が２個の異なるエピトープを認識する二重特異性ｓｃＦｖ、単一結合ドメイン（ｓｄＡｂまたはナノボディ）、及びミニボディが挙げられる。
【００８７】
「抗体フラグメント」という用語には、限定されるものではないが、抗体の１つ以上の抗原結合フラグメント単独、または、限定されるものではないがＦａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｒＩｇＧ（還元型ＩｇＧ）、ｓｃＦｖフラグメント（一価、三価、など）、シングルドメインフラグメント（ナノボディ）、ペプチボディ、ミニボディ、及びｃｙｓ−ダイアボディを含む他の分子との組み合わせが挙げられる。「ｓｃＦｖ」という用語は、従来の二本鎖抗体の重鎖と軽鎖の可変ドメインが接続されて一本鎖を形成した一本鎖のＦｖ（「ｆｒａｇｍｅｎｔ ｖａｒｉａｂｌｅ」）を指す。
【００８８】
薬学的に許容される担体は、対象となる化合物を１つの組織、臓器、または身体の部分から別の組織、臓器、または身体の部分へと搬送または輸送することに関わる、薬学的に許容される材料、組成物、またはビヒクルであり得る。例えば、担体は、液体もしくは固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒、または封入材料、またはこれらの何らかの組み合わせとすることができる。担体の各成分は、製剤の他の成分に適合するという点で「薬学的に許容される」。各成分は、成分が接触し得るあらゆる組織、臓器、または身体の部分との接触に適したものである必要もあり、これは、成分が毒性、刺激、アレルギー反応、免疫原性、またはその治療効果を過度に上回る他のいずれの合併症のリスクも有してはならないことを意味する。本明細書に記載される医薬組成物は、任意の適切な投与経路により投与することができる。投与経路とは、限定されるものではないが、エアロゾル、腸内、鼻腔内、眼内、経口、非経口、直腸内、経皮（例えば、局所クリームまたは軟膏、パッチ）、または膣内を含む、当該技術分野では周知の任意の投与経路のことを指すことができる。「経皮」投与は、局所クリームまたは軟膏を用いて、または経皮パッチによって行うことができる。「非経口」とは、眼窩下、点滴、動脈内、嚢内、心内、皮内、筋肉内、腹腔内、肺内、髄腔内、胸骨内、鞘内、子宮内、静脈内、くも膜下、被膜下、皮下、経粘膜、または経気管を含む、一般的に注射を伴う投与経路を指す。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、介入または切除時の局所投与として術中に投与することができる。
【００８９】
「ＣＤ８依存性疾患」という用語には、免疫学的要素（がん免疫療法に対する反応を含む）があるがん、自己免疫疾患、炎症性疾患、ならびに、限定されるものではないが、肺癌、卵巣癌、大腸癌、黒色腫などを含むがんが含まれる。
【００９０】
ミニボディは、完全長抗体よりも小さい分子量を有する一方で抗原に対する二価の結合特性を維持している抗体の形式である。ミニボディは、そのより小さいサイズのため、系からのクリアランスがより速く、腫瘍組織を標的とする場合の浸透性が高い。強力な標的化能力を速やかなクリアランスと併せ持つミニボディは、診断用イメージング、及び長時間の循環時間が患者の投薬または線量測定の悪化につながり得る細胞毒性／放射性ペイロードの送達にとって有利である。
【００９１】
抗原、例えばタンパク質と抗体または抗体由来の結合物質との間の相互作用の記述との関連で使用される場合、「特異的に（または選択的に）結合する」という表現は、例えば、生物学的試料中、例えば、血液、血清、血漿、または組織試料中のタンパク質及び他の生物学的物質の不均質集団中の抗原の存在の決定要因である結合反応を指す。したがって、指定された免疫アッセイ条件下において、いくつかの実施形態で、特定の結合特異性を有する抗体または結合物質は、特定の抗原とバックグラウンドの少なくとも２倍で結合し、試料中に存在する他の抗原とは有意な量で実質的に結合しない。かかる条件下での抗体または結合物質への特異的結合は、抗体または結合物質が特定のタンパク質に対するその特異性について選択されている必要があり得る。様々なイムノアッセイのフォーマットを用いて特定のタンパク質に特異的な免疫反応性を示す抗体を選択することができる。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイが、タンパク質に特異的な免疫反応性を示す抗体を選択するために通常使用される（例えば、特異的免疫反応性を決定するために用いることができるイムノアッセイの形式及び条件の記載については、Ｈａｒｌｏｗ  ＆  Ｌａｎｅ，Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９９８）を参照されたい）。一般的に、特異的または選択的な結合反応は、バックグラウンドシグナルの少なくとも２倍のシグナル、より一般的にはバックグラウンドの少なくとも１０〜１００倍のシグナルを発生する。
【００９２】
「平衡解離定数」（ＫＤ、Ｍ）という用語は、解離速度定数（ｋｄ、時間−１）を結合速度定数（ｋａ、時間−１、Ｍ−１）で除したもののことを指す。平衡解離定数は、当該技術分野では任意の周知の方法で測定することができる。本明細書の抗体は一般的に約１０−７または１０−８Ｍ、例えば、約１０−９Ｍまたは１０−１０Ｍ未満、いくつかの実施形態では、約１０−１１Ｍ、１０−１２Ｍ、または１０−１３Ｍ未満の平衡解離定数を有する。
【００９３】
核酸またはタンパク質に用いられる場合、「単離された」という用語は、核酸またはタンパク質が自然状態でそれらが関連する他の細胞成分を本質的に含まないことを示す。いくつかの実施形態では、これは乾燥物または水溶液であってよい。純度及び均質性均質性は、ポリアクリルアミドゲル電気泳動または高速液体クロマトグラフィーなどの分析化学の手法を用いて決定することができる。調製物中に存在する主な化学種であるタンパク質は、実質的に精製されている。詳細には、単離された遺伝子は、その遺伝子に隣接し、対象とする遺伝子以外のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームから分離されている。「精製された」という用語は、核酸またはタンパク質が電気泳動ゲル中に本指摘に１本のバンドを生じることを意味する。いくつかの実施形態では、これは、インビボ条件下で、核酸またはタンパク質が、少なくとも純度８５％、より好ましくは少なくとも純度９５％、及び最も好ましくは少なくとも純度９９％の存在する分子であることを意味する。
【００９４】
「核酸」または「ポリヌクレオチド」という用語は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）またはリボ核酸（ＲＮＡ）及び一本鎖または二本鎖の形態のこれらのポリマーを指す。特に限定されない限り、この用語には、参照核酸と同様の結合特性を有し、天然に存在するヌクレオチドと同様の形で代謝される天然ヌクレオチドの既知の類似体を含む核酸が含まれる。特に示されない限り、特定の核酸配列は、明示的に示される配列と並んで、保存的に改変されたそのバリアント（例えば、縮重コドン置換物）、アレル、オルソログ、ＳＮＰ、及び相補的配列を暗黙的に含む。詳細には、縮重コドン置換は、１つ以上の選択された（またはすべての）コドンの３番目の位置が混合塩基及び／またはデオキシイノシン残基で置換された配列を作製することによって達成することができる（Ｂａｔｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．１９：５０８１（１９９１）、Ｏｈｔｓｕｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２６０：２６０５−２６０８（１９８５）、及びＲｏｓｓｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ  ８：９１−９８  （１９９４））。
【００９５】
「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」という用語は、本明細書ではアミノ酸残基のポリマーを呼称するうえで互換的に使用される。これらの用語は、１つ以上のアミノ酸残基が対応する天然に存在するアミノ酸の人工的な化学模倣体であるようなアミノ酸ポリマー、ならびに天然に存在するアミノ酸ポリマー及び天然に存在しないアミノ酸ポリマーに適用される。
【００９６】
「アミノ酸」という用語は、天然に存在するアミノ酸及び合成アミノ酸、ならびに天然に存在するアミノ酸と同様に機能するアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣体のことを指す。天然に存在するアミノ酸とは、遺伝子コードによってコードされるもの、及び、例えばヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタミン酸、及びＯ−ホスホセリンなどの後で修飾されたアミノ酸である。「アミノ酸類似体」とは、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的化学構造（すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基、及びＲ基に結合したα炭素）を有する化合物（例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムなど）のことを指す。かかる類似体は、修飾されたＲ基（例えばノルロイシン）または修飾されたペプチド骨格を有するが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的化学構造を保持している。アミノ酸模倣体とは、アミノ酸の一般的化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様に機能する化合物のことを指す。
【００９７】
「保存的に改変された変異体」とは、アミノ酸及び核酸配列の両方に適用される。特定の核酸配列に関して、保存的に改変された変異体とは、同一または本質的に同一のアミノ酸配列をコードする核酸を指すか、または核酸がアミノ酸をコードしていない場合は、本質的に同じ配列を指す。遺伝子コードの縮重のため、多数の機能的に同じ核酸が任意の特定のタンパク質をコードする。例えば、コドンＧＣＡ、ＧＣＣ、ＧＣＧ及びＧＣＵはすべて、アミノ酸のアラニンをコードする。したがって、あるコドンによってアラニンが指定されているすべての位置において、コードされたポリペプチドを変化させることなくそのコドンを記載された対応するコドンのいずれかに変化させることができる。かかる核酸の変異は「サイレント変異」であり、保存的に改変された変形の１つの種類である。あらゆるポリペプチドをコードする本明細書のすべての核酸配列はそれぞれ、核酸のすべての可能なサイレント変異も記載する。当業者であれば、核酸内の各コドン（通常、メチオニンに対する唯一のコドンであるＡＵＧ、通常、トリプトファンに対する唯一のコドンであるＴＧＧを例外として）を変更して機能的に同じ分子を得ることができる点は認識されよう。したがって、あるポリペプチドをコードする核酸の各サイレント変異は、それぞれの記載される配列に暗黙的に含まれる。
【００９８】
アミノ酸配列に関し、コードされた配列中の１個のアミノ酸またはわずかな割合のアミノ酸を変化、付加、または欠失させる核酸、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質配列に対する置換、欠失または付加は、この変化がアミノ酸の化学的に類似したアミノ酸との置換をもたらす「保存的に改変されたバリアント」である点は当業者には認識されよう。機能的に類似したアミノ酸を与える保存的置換表は、当該技術分野では周知のものである。そのような保存的に改変されたバリアントは、本発明の多型バリアント、種間ホモログ、及びアレル以外のものであり、これらを除外しない。
【００９９】
以下の８つのグループはそれぞれ、互いに保存的置換であるアミノ酸を含む。１）アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）、３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）、４）アルギニン（Ｒ）、リシン（Ｋ）、５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）、６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）、７）セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、及び８）システイン（Ｃ）、メチオニン（Ｍ）（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ（１９８４）を参照）。
【０１００】
「配列同一性の割合（％）」は、比較ウインドウ上で最適にアラインされた２つの配列同士を比較することによって求めることができ、比較ウインドウ内のポリヌクレオチド配列の部分は、２つの配列の最適なアラインメントについて、付加も欠失も含まない参照配列（例えば、本発明のポリペプチド）と比較して付加または欠失（すなわち、ギャップ）を含むことができる。この割合（％）は、同一の核酸塩基またはアミノ酸残基が両方の配列に存在する位置の数を求めて一致位置の数を得て、一致位置の数を比較ウインドウ内の位置の総数で割り、その結果を１００倍して配列同一性の割合（％）を得ることによって計算される。
【０１０１】
２つ以上の核酸またはポリペプチド配列との関連で「同一」または「同一」率（％）という用語は、同じ配列である２つ以上の配列または部分配列を指す。２つの配列は、以下の配列比較アルゴリズムのうちの１つを用いてまたは手作業によるアラインメント及び目視検査により測定して比較ウインドウまたは指定された領域上で最大の一致となるように比較及びアラインされる場合に２つの配列が同じアミノ酸残基またはヌクレオチドの指定の割合（％）（例えば、指定された領域にわたり、または指定されない場合には参照配列の配列全体にわたって７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性）を有する場合に「実質的に同一」である。本明細書で提供されるいくつかの実施形態は、本明細書において例示されるポリペプチドまたはポリヌクレオチド（図２Ａ、２Ｂまたは４〜１１、１２Ｃ〜１２Ｉのいずれか１つに例示される可変領域、図２Ａ、２Ｂまたは１２Ｃ〜１２Ｉのいずれか１つに例示されるＣＤＲ、図２Ａ、２Ｂまたは１２Ｃ〜１２Ｉのいずれか１つに例示されるＦＲ、及び図１２Ａ〜１２Ｉ、または４〜１１のいずれか１つに例示される核酸配列）とそれぞれ実質的に同一であるポリペプチドまたはポリヌクレオチドを提供する。場合により、同一性は、少なくとも約１５個、２５個、または５０個のヌクレオチド長の領域にわたって、またはより好ましくは、ヌクレオチド長１００個〜５００個または１０００個以上のヌクレオチド長の領域にわたって、または参照配列の完全長にわたって存在する。アミノ酸配列に関して、同一性または実質的な同一性は、少なくとも５個、１０個、１５個、または２０個のアミノ酸長、場合により少なくとも約２５個、３０個、３５個、４０個、５０個、７５個、または１００個のアミノ酸長、場合により少なくとも１５０個、２００個、または２５０個のアミノ酸長の領域にわたって、または参照配列の完全長にわたって存在し得る。より短いアミノ酸配列、例えば２０個以下のアミノ酸からなるアミノ酸配列に関して、いくつかの実施形態では、本明細書で定義される保存的置換に従って１個または２個のアミノ酸残基が保存的に置換されている場合に実質的な同一性が存在する。
【０１０２】
配列比較では、一般的に、１つの配列が、試験配列が比較される参照配列として機能する。配列比較アルゴリズムを用いる場合、試験配列及び参照配列をコンピュータに入力し、必要な場合には部分配列座標を指定し、配列アルゴリズムプログラムのパラメータを指定する。デフォルトのプログラムパラメータを用いるか、または代替的なパラメータを指定することができる。次いで、配列比較アルゴリズムが、プログラムパラメータに基づいて、参照配列に対する試験配列の配列同一率（％）を算出する。
【０１０３】
本明細書で使用するところの「比較ウインドウ」は、ある配列を同じ数の連続した位置からなる参照配列と２つの配列を最適にアラインした後に比較することができる、２０個〜６００個、通常は約５０個〜約２００個、より通常は約１００個〜約１５０個からなる群から選択される連続した位置の数のいずれか１つのセグメントへの参照を含む。比較する配列のアライメントの方法は、当該技術分野では周知のものである。比較する配列の最適なアラインメントは、例えば、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ（１９７０），Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２ｃの局所相同性アルゴリズムによって、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ（１９７０），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３の相同性アラインメントアルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎ  ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ（１９８８），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４の類似性の探索法によって、これらのアルゴリズムのコンピュータ処理による実行（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．におけるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、及びＴＦＡＳＴＡ）によって、または手作業によるアラインメント及び目視検査によって実施することができる（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９５ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）を参照）。
【０１０４】
配列同一率（％）及び配列類似性を決定するのに適したアルゴリズムの２つの例は、ＢＬＡＳＴ及びＢＬＡＳＴ２．０アルゴリズムであり、これらについては、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９７７）Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２及びＡｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０にそれぞれ記載されている。ＢＬＡＳＴ解析を行うためのソフトウェアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎを通じて公に入手可能である。このアルゴリズムでは、データベース配列中の同じ長さの語とアラインした場合に特定の正の値の閾値Ｔに一致するかまたはこれを満たす、クエリー配列中の長さＷの短い語を特定することによって、高スコアの配列ペア（ＨＳＰ）を最初に特定することを行う。Ｔは、隣接単語スコア閾値と呼ばれる（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，前出）。これらの初期の隣接語のヒットは、これらの語を含むより長いＨＳＰをみつけるための検索を開始するためのシードとしての役割を果たす。語のヒットを、累積アラインメントスコアを増加させることが可能である限り、各配列に沿って両方向に延長する。ヌクレオチド配列の場合には、累積スコアは、パラメータＭ（一致する残基のペアに対するリウォードスコア、常に＞０）、及びＮ（不一致の残基のペアに対するペナルティースコア、常に＜０）を用いて計算する。アミノ酸配列の場合には、スコアリング行列を使用して累積スコアを計算する。累積アラインメントスコアがその最大到達値から量Ｘだけ低下するか、累積スコアが１つ以上の負のスコアの残基アラインメントの累積のために０以下になるか、またはどちらかの配列の末端に達した時点で各方向への語ヒットの延長を停止する。ＢＬＡＳＴアルゴリズムパラメーターのＷ、ＴおよびＸはアラインメントの感度および速さを決定する。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列用）は、語長（Ｗ）＝１１、期待値（Ｅ）＝１０、Ｍ＝５、Ｎ＝−４、および両鎖の比較をデフォルトとして使用する。アミノ酸配列の場合、ＢＬＡＳＴＰプログラムでは、語長（Ｗ）＝３、期待値（Ｅ）＝１０、及びＢＬＯＳＵＭ６２スコアリング行列（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ （１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：１０９１５参照）アラインメント（Ｂ）＝５０、期待値（Ｅ）＝１０、Ｍ＝５、Ｎ＝−４、および両鎖の比較をデフォルトとして使用する。
【０１０５】
ＢＬＡＳＴアルゴリズムは２つの配列間の類似性の統計的分析も行う（例えば、Ｋａｒｌｉｎ  ａｎｄ  Ａｌｔｓｃｈｕｌ （１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３−５７８７を参照）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって与えられる類似性の目安の１つとして、２個のヌクレオチドまたはアミノ酸配列間で偶然に一致が生じる確率の指標を与える最小合計確率（Ｐ（Ｎ））がある。例えば、ある核酸は、この試験核酸と参照核酸との比較における最小合計確率が約０．２未満、より好ましくは約０．０１未満、最も好ましくは約０．００１未満である場合に参照核酸と類似しているものとみなされる。
【０１０６】
下記で述べるように、２個の核酸配列またはポリペプチドが実質的に同一であることの１つの指標は、第１の核酸によってコードされたポリペプチドが、第２の核酸によってコードされたポリペプチドに対して作製された抗体と免疫学的な交差反応性を示すことである。したがって、いくつかの実施形態では、あるポリペプチドは第２のポリペプチドと、例えば２つのペプチドが保存的置換によってのみ異なる場合に一般的に実質的に同一である。２個の核酸配列が実質的に同一であることの別の指標として、下記で述べるように、２つの分子またはそれらの相補体がストリンジェントな条件下で互いにハイブリダイズすることがある。２個の核酸配列が実質的に同一であることの更に別の指標は、同じプライマーを用いて配列を増幅することができることである。
【０１０７】
「対象」、「患者」、及び「個体」という用語は、検査及び／または治療される実体を互換的に指す。これには、例えば、哺乳動物、例えばヒトまたはヒト以外の霊長類の哺乳動物が含まれる。哺乳動物は、例えば、マウス、ラット、ウサギ、ハムスターなどの実験哺乳動物であってもよい。いくつかの実施形態では、哺乳動物は農業用哺乳動物（例えば、ウマ、ヒツジ、ウシ、ブタ、ラクダ）またはペット用哺乳動物（例えば、イヌ、ネコ）の場合もある。
【０１０８】
「治療許容量」または「治療有効用量」という用語は、所望の結果をもたらすのに充分な量を互換的に指す。いくつかの実施形態では、「治療許容量」は、望ましくない副作用を誘発または引き起こさない。治療許容量は、最初に低用量を投与し、その後、所望の効果が得られるまでその用量を徐々に増やすことによって決定することができる。
【０１０９】
「共投与」という用語は、個体の血中、または試験する試料中の２つの活性剤の投与を指す。共投与される活性剤は、同時に、または順次に投与することができる。
【０１１０】
「標識」または「検出可能なマーカー」は、本明細書では互換的に使用され、抗体と直接結合されるかまたは間接的に関連付けられることによって「標識された」抗体を生成する検出可能な化合物または組成物を指す。標識は、それ自体で検出可能であってもよく（例えば、放射性同位体標識または蛍光標識）、または酵素標識の場合では、検出可能な基質化合物または組成物の化学変化を触媒してもよい。
【０１１１】
「免疫ＰＥＴ」という用語は、放射性標識された抗体の陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）に対して用いられる用語である。
【０１１２】
本明細書で使用するところの「細胞毒性剤」という用語は、細胞機能を阻害または防止し、細胞死または破壊を引き起こす物質を指す。この用語は、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位体）、化学療法剤（例えば、メトトレキサート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド類（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシン、または他の挿入剤、核溶解酵素などの酵素及びそのフラグメント、抗生物質、ならびに、細菌、真菌、植物または動物由来の、それらのフラグメント及び／または変異体を含む小分子毒素または酵素活性毒素、毒素、増殖阻害剤、薬剤部分、ならびに下記に開示される様々な抗腫瘍または抗がん剤を含むことを意図している。他の細胞毒性剤を下記に記載する。殺腫瘍剤は腫瘍細胞の破壊を引き起こす。
【０１１３】
「毒素」は、細胞の増殖または分裂に有害な作用を有することができる任意の物質である。
【０１１４】
「化学療法剤」とは、がんの治療に有用な化合物である。化学療法剤の例としては、チオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（商標）シクロホスファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、イムプロスルファン、及びピポスルファンなどのアルキルスルホネート類；ベンゾドーパ、カルボクオン、メツレドーパ、及びウレドーパなどのアジリデン類；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド及びトリメチロロメラミンを含むエチレンイミン類及びメチルアメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）類；アセトゲニン類（特にブラタシン及びブラタシノン）；δ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ（商標））；β−ラパコン；ラパコール；コルヒチン類；ベツリン酸；カンプトテシン（合成類似体トポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（商標））、ＣＰＴ−１１（イリノテカン、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（商標））、アセチルカンプトテシン、スコポレクチン及び９−アミノカンプトテシンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン及びビゼレシン合成類似体を含む）；ポドフィロトキシン；ポドフィリン酸；テニポシド；クリプトフィシン類（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イフォスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード類；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン及びラニムスチンなどのニトロソウレア類；エネジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンγ１Ｉ及びカリケアマイシンωＩ１（例えば、Ａｇｎｅｗ，Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３−１８６（１９９４）を参照）などの抗生物質；ジネマイシンＡを含むジネマイシン；エスペラマイシン；ならびにネオカルジノスタチン発色団及び関連色素タンパク質エネジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（商標）ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン、ストレプトニグリン、��トレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジン類似体；カルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン類；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎薬；フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）などの葉酸補充薬；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エフロルニチン；エリプチニウムアセテート；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン；マイタンシン及びアンサマイトシンなどのマイタンシノイド類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（特にＴ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ（商標）、ＦＩＬＤＥＳＩＮ（商標））；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；チオテパ；タキソイド類、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標）クレモフォールフリーのアルブミン操作されたパクリタキセルのナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌ．）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（商標）ドセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロランブシル；ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（商標））；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン（ＶＥＬＢＡＮ（商標））；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イフォスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン（ＯＮＣＯＶＩＮ（商標））；オキサリプラチン；ロイコボビン；ビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（商標））；ノバントロン；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；イバンドロネート；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；��フルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド類；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（商標））；上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体；ならびにＣＨＯＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、及びプレドニゾロンの併用療法の略称）、及びＦＯＬＦＯＸ（オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））を５−ＦＵ及びロイコボビンと組み合わせた治療レジメンの略称）などの上記の２つ以上の組み合わせが挙げられる。
【０１１５】
この定義には、がんの増殖を促進し得るホルモンの作用を調節、低減、遮断または阻害するように作用し、しばしば全身（ｓｙｓｔｅｍｉｃ）または全身（ｗｈｏｌｅ−ｂｏｄｙ）治療薬の形態をとる抗ホルモン剤も含まれる。これらはそれ自体がホルモンであり得る。例として、例えば、タモキシフェン（ＮＡＬＶＡＤＥＸ（商標）タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン（ＥＶＩＳＴＡ（商標））、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン及びトレミフェン（ＦＥＲＥＳＴＯＮ（商標））を含む抗エストロゲン薬及び選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）；抗プロゲステロン薬；エストロゲン受容体ダウンレギュレーター（ＥＲＤ）；卵巣を抑制または停止させるように機能する薬剤、例えば、酢酸ロイプロリド（ＬＵＰＲＯＮ（商標）及びＥＬＩＧＡＲＤ（商標））、酢酸ゴセレリン、酢酸ブセレリン及びトリプテレリンなどの黄体ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニスト；フルタミド、ニルタミド及びビカルタミドなどの抗アンドロゲン薬；副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール（ＭＥＧＡＳＥ（商標））、エキセメスタン（ＡＲＯＭＡＳＩＮ（商標））、ホルメスタニー（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、ボロゾール（ＲＩＶＩＳＯＲ（商標））、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（商標））、及びアナストロゾール（ＡＲＩＭＩＤＥＸ（商標））が挙げられる。更に、化学療法剤のかかる定義には、クロドロネート（例えば、ＢＯＮＥＦＯＳ（登録商標）またはＯＳＴＡＣ（登録商標））、エチドロネート（ＤＩＤＲＯＣＡＬ（登録商標））、ＮＥ−５８０９５、ゾレドロン酸／ゾレドロネート（ＺＯＭＥＴＡ（登録商標））、アレンドロネート（ＦＯＳＡＭＡＸ（登録商標））、パミドロネート（ＡＲＥＤＩＡ（登録商標））、チルドロン酸（ＳＫＥＬＩＤ（登録商標））またはリセドロネート（ＡＣＴＯＮＥＬ（登録商標））などのビスホスホネート；ならびにトロキサシタビン（１，３−ジオキソレンヌクレオシドシトシン類似体）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、例えば、ＰＫＣ−α、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ及び上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）などの、異常な細胞増殖に関与しているシグナル伝達経路で遺伝子の発現を阻害するもの；ＴＨＥＲＡＴＯＰＥ（登録商標）ワクチン及び遺伝子療法ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン及びＶＡＸＩＤ（登録商標）ワクチンなどのワクチン；トポイソメラーゼ１阻害剤（ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標））；ｒｍＲＨ（例えば、ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標））；ラパチニブジトシラート（ＥｒｂＢ−２及びＧＷ５７２０１６としても知られるＥＧＦＲ二重チロシンキナーゼ小分子阻害剤）；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が含まれる。
【０１１６】
本明細書で使用される場合、「増殖阻害剤」とは、インビトロまたはインビボで細胞の増殖を阻害する化合物または組成物を指す。したがって、増殖阻害剤とは、Ｓ期の細胞の割合を大幅に低下させるものである。増殖阻害剤の例としては、Ｇ１期の停止及びＭ期の停止を誘導する薬剤などの、細胞周期の進行を阻止する（Ｓ期以外のところで）薬剤が挙げられる。古典的なＭ期阻害剤としては、ビンカ類（ビンクリスチン及びビンブラスチン）、タキサン類、ならびにドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、及びブレオマイシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤が挙げられる。例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、及びａｒａ−ＣなどのＤＮＡアルキル化剤のようなＧ１を停止するこれらの薬剤は、Ｓ期の停止にも影響が及ぶ。更なる情報は、Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ  ａｎｄ  Ｉｓｒａｅｌ，ｅｄｓ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  １のＭｕｒａｋａｍｉらによる“Ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄ  ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ”（ＷＢ  Ｓａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，１９９５）の表題の論文の特にｐ．１３に見られる。タキサン類（パクリタキセル及びドセタキセル）は、イチイの木から得られる抗がん剤である。ヨーロッパイチイから得られるドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲ（商標）Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ）は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（商標），Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）の半合成類似体である。パクリタキセル及びドセタキセルは、チューブリン二量体からの微小管の組み立てを促進し、脱重合を防ぐことにより微小管を安定化させることで、細胞の有糸分裂の阻害につながる。
【０１１７】
「免疫療法」（「免疫刺激」及び「ＩＯＴ」とも呼ばれる）とは、疾患に対する宿主の免疫応答を刺激する療法（例えば、薬剤または治療過程）による疾患の予防または治療を意味する。多くの疾患は免疫療法で治療可能である。近年の学術文献は、具体的には免疫腫瘍学を指してしばしば免疫療法を用いているが、これは腫瘍または新生物の免疫回避特性を低下させ、それにより、自然または改変された免疫細胞にがん性組織を識別させて排除することを目的としたがん治療を意味する。本明細書で使用するところの免疫療法とは、文脈によって別様である旨が具体的に示されない限り、免疫腫瘍学を指す。「免疫療法」は、文脈によって、免疫療法剤またはかかる薬剤の使用方法を指す場合もある。各種の免疫療法剤が今日、利用可能であり、更に多くが臨床及び前臨床開発中である。よく知られた免疫療法剤としては、限定されるものではないが、チェックポイント阻害剤（「ＣＰＩ」）療法（例えば、抗ＰＤ−１ （Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）ペムブロリズマブ）または抗ＰＤ−Ｌ１（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標）ニボルマブ）結合剤）、ＩＬ２及びそのフラグメントまたはプロドラッグ（例えば、ＰＥＧ結合ＩＬ２のプロドラッグであるＮＫＴＲ−２１４ （アルデスロイキン））、他のＣＤ１２２（ＩＬ２ＲＢインターロイキン２受容体サブユニットβ）結合リガンド、ＧＡｄ−ＮＯＵＳ−２０新生抗原ワクチン（Ｄ’Ａｌｉｓｅ ｅｔ ａｌ ２０１７；ＮＫＴＲ−２１４活性を高め得る）、Ｔ細胞二重特異性剤療法、Ｔ細胞枯渇を逆転させるための療法、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）の阻害（例えばエパカドスタット（ＩＮＣＢ０２４３６０）による）、及びＣＡＲ−Ｔ療法が挙げられる。
【０１１８】
「免疫チェックポイント阻害剤」（しばしば「ＩＣＩ」と呼ばれる）、または「チェックポイント阻害剤」（しばしば「ＣＰＩ」）または「免疫チェックポイント遮断阻害剤」という用語及びすべての同様な用語は、免疫療法のサブクラスを意味する。例としては、Ｔ細胞などのある種の免疫系細胞及び特定のがん細胞が産生する特定のタンパク質を遮断する分子が挙げられる。これらのタンパク質は、免疫応答を抑制する助けとなり、Ｔ細胞ががん細胞を殺傷することを防ぐことができる。これらのタンパク質が遮断されると、免疫系は自由に活性化され、Ｔ細胞ががん細胞を殺傷することができる。いくつかの実施形態としては、抗ＰＤ１及び抗ＰＤ−Ｌ１結合剤、抗ＣＴＬＡ４剤、ならびに限定されるものではないが、抗ＣＴＬＡ−４／Ｂ７−１／Ｂ７−２をはじめとする多重特異性剤が挙げられる。更なる免疫療法としては、イピリムマブ（ヤーボイ）、ペムブロリズマブ（キイトルーダ）、ニボルマブ（オプジーボ）、アテゾリズマブ（テセントリク）、アベルマブ（バベンシオ）、及びデュルバルマブ（イミフィンジ）などのチェックポイント阻害剤が挙げられる。ＩＯＴには、トレメリムマブ及びピジリズマブも含まれる。ＢＭＳ−１００１、ＢＭＳ−１１１６、ＣＡ−１７０、ＣＡ−３２７、イミキモド、レシキモド、８５２Ａ、ＶＴＸ−２３３７、ＡＤＵ−Ｓ１００、ＭＫ−１４５４、イブルチニブ、３ＡＣ、イデラリシブ、ＩＰＩ−５４９、エパカドスタット、ＡＴ−３８、ＣＰＩ−４４４、ビパデナント、プレラデナント、ＰＢＦ、ＡＺＤ４６３５、ガルニセルチブ、ＯＴＸ０１５／ＭＫ−８６２８、ＣＰＩ−０６１０を含む小分子ＩＣＩも開発中である（Ｋｅｒｒ ａｎｄ Ｃｈｉｓｏｌｍ （２０１９）Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， ２０１９， ２０２：１１−１９を参照）。
【０１１９】
ＩＯＴには、ＣＰＩではないが、やはりがんに対する宿主免疫系を活性化するか、または腫瘍をＣＰＩ療法に対して感受性とする他のモダリティも含まれる。そのような代替的なＩＯＴとしては、限定されるものではないが、サイトカインＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＬ−１２、ＧＭ− ＣＳＦ及びＩＦＮα（Ｓｙｎｔｈｏｒｘ  ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓのＴＨＯＲ−７０７；及びＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓのベムペガルデスロイキン（ＮＫＴＲ−２１４）を含む）などのＴ細胞免疫調節薬；各種の他のインターフェロン及びインターロイキン；ＴＧＦβ１阻害剤（Ｓｃｈｏｌａｒ Ｒｏｃｋによって開発中のＳＲＫ−１８など）；腫瘍溶解療法（腫瘍溶解性ウイルス療法）；Ｔ細胞療法（ＣＡＲ−Ｔ細胞療法を含む）養子細胞療法；がんワクチン（予防ベース及び治療ベースの両方）が挙げられる。免疫療法には、腫瘍細胞に腫瘍関連抗原を発現または暴露させる標的化療法を含む、腫瘍細胞内の新生抗原の負荷を増加させる戦略も含まれる（Ｇａｌｏｎ  ａｎｄ  Ｂｒｕｎｉ  （２０１９）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙｖ．１８，ｐａｇｅｓ１９７−２１８を参照）。更なるＩＯＴとしては、ＴＬＲ９リガンド（Ｃｈｅｃｋｍａｔｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ａ２Ａ／Ａ２Ｂ二重アンタゴニスト（Ａｒｃｕｓ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）及びＩＤＯ−１及びアルギナーゼなどの内因性酵素を標的とするワクチン接種ペプチド（ＩＯ Ｂｉｏｔｅｃｈ）が挙げられる。ＩＯＴには、ＨＳ−１１０、ＨＳ−１３０及びＰＴＸ−３５（Ｈｅａｔ Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）が含まれる。
【０１２０】
当業者には、免疫療法同士を互いに併用することができることが認識されよう。免疫療法は、がんの場合における放射線療法、あらゆる種類の化学療法（上記で述べた細胞毒性剤、化学療法剤、抗ホルモン剤、及び増殖阻害剤を含む）、及び外科的切除を含む、疾患の他の療法の前、後、またはそれらと組み合わせて用いることもできる。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８に対して、またはＣＤ８を介して作用する任意の療法を用いることができる。これは「ＣＤ８療法」と呼ばれる。これには、免疫療法、細胞療法、ワクチン、免疫応答／機能を促進する／回復する治療薬、ＣＤ８＋Ｔ細胞の存在、活性化、数、または腫瘍病変に対する輸送に影響するあらゆる治療、化学療法、腫瘍溶解性ウイルス、放射線療法、細胞療法が含まれる。
【０１２２】
「腫瘍浸潤リンパ球」または「ＴＩＬ」は、固形腫瘍の境界部内に見られるＣＤ８保有Ｔ細胞などのリンパ球を指す。
【０１２３】
「腫瘍浸潤リンパ球状態」または「ＴＩＬ状態」または他の同様の用語は、リンパ球、及び特にＣＤ８保有Ｔ細胞が腫瘍または新生物または腫瘍間質内に浸透することができる程度を意味する。新生物は、ＣＤ８細胞が腫瘍または腫瘍間質自体の中へ浸透することができ、腫瘍または腫瘍間質自体の中で見出される場合にＴＩＬ陽性として特徴付けられる。ＴＩＬ陽性は、ＴＩＬ陽性均一（腫瘍の内部全体にわたって均一な分布）またはＴＩＬ陽性不均一（腫瘍の内部で顕著に不均一な分布、または部分的な分布）に更に分類することができる。ＴＩＬ陽性腫瘍は、「炎症型」として記述することもできる。新生物は、腫瘍または新生物にＣＤ８＋Ｔ細胞がほとんど浸潤していない（例えば、一般的なバックグラウンドノイズシグナルとは別に）場合にＴＩＬ陰性として特徴付けられる。一般的に、これらのＴＩＬ陰性新生物は、免疫排除型または免疫砂漠型である。
【０１２４】
「ＰＥＴ」は、分子レベルでヒトの臓器及び組織の機能及び代謝を観察するために使用することができる診断技術である。ＰＥＴでは、陽電子放射性薬（例えば、１８Ｆ−ＦＤＧ）をヒトの体内に注入することができる。ＦＤＧが用いられる場合、フルデオキシグルコース（ＦＤＧ）の代謝はグルコースと同様であるため、ＦＤＧはグルコースを消化する細胞内に集まる。急速に増殖中の腫瘍組織による放射性薬の取り込みは異なる。１８Ｆの崩壊によって放出される陽電子と組織中の電子とは消滅反応を行って逆方向に同じエネルギーを有する２個のガンマ光子を生成する。人体を取り囲んだ検出器アレイによって、同時測定法を用いて２個の光子を検出し、陽電子の陽電子情報を決定することができる。次いで、画像再構成ソフトウェアを用いて陽電子情報を処理することにより、人体内の陽電子の断層像を構成することができる。いくつかの状況では、標識（例えば１８Ｆ）が抗原結合コンストラクトに結合されるかまたは関連付けられた免疫ＰＥＴを用いることができる。かかる実施形態では、抗原結合コンストラクトの結合特性及び分布特性によって決まる抗原結合コンストラクトの分布を監視することができる。例えば、ＣＤ８を標的とするミニボディが用いられる場合、ＰＥＴを用いて宿主の系におけるＣＤ８分子の分布を監視することができる。ＰＥＴシステムは当該技術分野では周知のものであり、例えば、米国特許出願公開第２０１７０３５７０１５号、同第２０１７０１５３３３７号、同第２０１５０１９６２６６号、同第２０１５００８７９７４号、同第２０１２０３１８９８８号、同第２００９０１５９８０４号が挙げられ、これらの公報のそれぞれの全容をＰＥＴ及びその使用に関するそれらの記載について本明細書に参照によって援用する。
【０１２５】
本明細書で提供される実施形態及び対応する詳細な説明は、コンピュータメモリ内のソフトウェアまたはデータビットに対する操作のアルゴリズム及び記号表現に関して提示され得る。これらの説明及び表現は、それによって当業者がその成果の実質を他の当業者に効果的に伝えるようなものである。アルゴリズムとは、この用語が本明細書で使用される場合、及び一般的に使用される場合、所望の結果をもたらすステップの首尾一貫したシーケンスであると考えられる。それらのステップは、物理量の物理的操作を必要とするものである。通常、必ずしもではないが、これらの量は、記憶、伝達、合成、比較、及び他の形で操作することができる光学的、電気的、または磁気的信号の形態をとる。これらの信号は、ビット、値、要素、記号、文字、項、数字など呼ぶことが主として一般的な使用の理由からしばしば便利であることが証明されている。
【０１２６】
以下の説明では、例示的な実施形態は、特定のタスクを実行するかまたは特定の抽象データ型を実行するルーチン、プログラム、オブジェクト、コンポーネント、データ構造などを含むプログラムモジュールまたは機能的プロセスとして実施され得る操作の動作及び記号表現に関して記述され得、既存のネットワーク要素で既存のハードウェアを用いて実施され得る。かかる既存のハードウェアは、１つ以上の中央演算装置（ＣＰＵ）、デジタルシグナルプロセッサ（ＤＳＰ）、特定用途向け集積回路、フィールドプログラマブルゲートアレイ（ＦＰＧＡ）コンピュータなどを含むことができる。
【０１２７】
例示的な実施形態のソフトウェアで実施される態様は、一般的に何らかの形態のプログラム記憶媒体上でコード化するか、または何らかのタイプの伝送媒体上で実施することができる。プログラム記憶媒体（例えば、非一時的記憶媒体）は、磁気的（例えば、フロッピーディスクまたはハードドライブ）または光学的（例えば、コンパクトディスク・リード・オンリー・メモリ、すなわち「ＣＤ  ＲＯＭ」）なものであってよく、リードオンリー型またはランダムアクセス型であってよい。同様に、伝送媒体は、ツイストペアケーブル、同軸ケーブル、光ファイバ、または当該技術分野では周知の他の何らかの適切な送信媒体であってよい。例示的な実施形態はこれらのいずれの特定の実施の態様によっても限定されない。
【０１２８】
しかしながら、これらの用語及び同様の用語はいずれも適切な物理量と関連付けられるべきものであり、これらの量に適用されたあくまで便宜的な呼び名である点には留意されなければならない。特に別途断らない限り、または考察より明らかであるように、「処理する」または「計算する」または「算出する」または「判定する」または「表示する」などの用語は、コンピュータシステムのレジスタ及びメモリ内で物理的、電子的な量として表現されたデータを操作し、コンピュータシステムのメモリもしくはレジスタまたは他のそのような情報記憶、伝送、または表示装置内で物理量として同様に表現された他のデータに変換するコンピュータシステム、または同様の電子的計算装置／ハードウェアの動作及び処理のことを指す。
【０１２９】
イメージング−応答の監視
いくつかの実施形態では、対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、ＩＯＴを投与することと、ＲＯＩ内の対象の治療後ＣＤ８分布を提供することと、を含む。治療後ＣＤ８分布は、ＩＯＴの投与の３５日以内に得る。治療後ＣＤ８分布とベースラインＣＤ８分布とを比較して対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布を提供することを含む。いくつかの実施形態では、対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することを含む。いくつかの実施形態では、対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、ＩＯＴを投与することと、を含む。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、ＩＯＴを投与することと、ＲＯＩ内の対象の治療後ＣＤ８分布を提供することと、を含む。
【０１３２】
対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する方法のいくつかの実施形態では、治療後ＣＤ８分布をＩＯＴの投与の５、１０、１５、２０、２５、または３０日以内に得る。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、チェックポイント阻害剤を投与することと、ＲＯＩ内の対象のチェックポイント阻害剤ＣＤ８分布を提供することと、を含む。チェックポイント阻害剤ＣＤ８分布は、ＩＯＴの投与の３５日以内に得る。チェックポイント阻害剤ＣＤ８分布をベースラインＣＤ８分布と比較して対象がチェックポイント阻害剤に応答性を有するかどうかを判定する。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布を提供することを含む。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することを含む。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、チェックポイント阻害剤を投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法は、ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、チェックポイント阻害剤を投与することと、ＲＯＩ内の対象のチェックポイント阻害剤ＣＤ８分布を提供することと、を含む。
【０１３６】
チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法のいくつかの実施形態では、治療後ＣＤ８分布をＩＯＴの投与の３〜８日以内に得る。チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法のいくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤ＣＤ８分布をＩＯＴの投与の５、１０、１５、２０、２５、または３０日以内に得る。チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法のいくつかの実施形態では、治療後ＣＤ８分布を、ＩＯＴの投与の３〜５日、４〜６日、５〜７日、または６〜８日以内に得る。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、療法の有効性を監視する方法は、対象の第１のＣＤ８画像を提供することであって、対象が療法のベースラインにある、ことと、対象に療法を投与することと、対象の第２のＣＤ８画像を提供することと、を含む。対象に療法が投与されてから少なくとも１日が経過している。ＣＤ８造影剤の有意な増加がない場合、対象は療法に応答していない。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、療法の有効性を監視する方法は、第１のＣＤ８画像を提供することを含む。いくつかの実施形態では、療法の有効性を監視する方法は、療法のベースラインにある対象の第１のＣＤ８画像を提供することを含む。いくつかの実施形態では、療法の有効性を監視する方法は、療法のベースラインにある対象の第１のＣＤ８画像を提供することと、対象に療法を投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、療法の有効性を監視する方法は、療法のベースラインにある対象の第１のＣＤ８画像を提供することと、対象に療法を投与することと、対象の第２のＣＤ８画像を提供することと、を含む。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、腫瘍の分析方法は、対象内の腫瘍における、候補治療薬に応答した相対ＣＤ８浸潤度を特徴付けることを含み、前記特徴付けることは、放射性標識を含むＣＤ８抗原結合コンストラクトによりＣＤ８浸潤度が増加したかまたは減少したかを観察することを含む。ＣＤ８浸潤の増加は、候補治療薬が治療薬として機能していることを示す。ＣＤ８浸潤の減少は、候補治療薬が治療薬として機能していないことを示す。腫瘍のサイズは、候補治療薬が投与される前と候補治療薬が投与された後との間で増大している。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、腫瘍の分析方法は、対象内の腫瘍における相対ＣＤ８浸潤度を特徴付けることを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍の分析方法は、候補治療薬の投与に応答した対象内の腫瘍における相対ＣＤ８浸潤度を特徴付けることを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍の分析方法は、候補治療薬に応答した対象内の腫瘍における相対ＣＤ８浸潤度を特徴付けることを含み、前記特徴付けることは、ＣＤ８浸潤度が増加したかまたは減少したかを観察することを含む。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、腫瘍の分析方法は、対象内の腫瘍における、候補治療薬に応答した相対ＣＤ８浸潤度を特徴付けることを含み、前記特徴付けることは、放射性標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトによりＣＤ８浸潤度が増加したかまたは減少したかを観察することを含む。
【０１４２】
非侵襲性イメージングのためのＣＤ８抗原結合コンストラクトの使用
いくつかの実施形態では、ＰＥＴによりヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布を可視化する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の６〜３６時間以内に対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。監視することは、１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８陽性細胞が浸潤した対象内の組織を検出することができる。監視することは、ＰＥＴにより行われ、分布を可視化するための画像に変換される。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、ＰＥＴによりヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布を可視化する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴによりヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布を可視化する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴによりヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布を可視化する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、ＰＥＴによりヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布を可視化する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の６〜３６時間以内に対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０１４５】
ＰＥＴによりヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布を可視化する方法のいくつかの実施形態では、監視することは、１ｍｍ２当たり１、５、１０、２５、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００個未満、または上記の値の任意の２つによって定義される範囲内の値のＣＤ８陽性細胞が浸潤した対象内の組織を検出することができる。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、ヒト体内の細胞を可視化する方法は、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることであって、手段が検出可能な標識を含む、与えることと、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の対象への投与の６〜３６時間以内に対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第１の分布を監視及び判定することと、を含む。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、ヒト体内の細胞を可視化する方法は、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることを含み、手段は検出可能な標識を含む。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、ヒト体内の細胞を可視化する方法は、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることであって、手段が検出可能な標識を含む、与えることと、対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第１の分布を監視及び判定することと、を含む。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、ヒト体内の細胞を可視化する方法は、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることであって、手段が検出可能な標識を含む、与えることと、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の対象への投与の６〜３６時間以内に対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第１の分布を監視及び判定することと、を含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、ＰＥＴ検出可能な標識が対象内の既知のまたは疑わしい腫瘍に浸透した程度を評価することと、を含む。腫瘍は、ＰＥＴ検出可能な標識が腫瘍に浸透していた場合にＴＩＬ陽性であり、浸透していなかった場合にはＴＩＬ陰性である。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、対象内のＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、対象内のＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、ＰＥＴ検出可能な標識が対象内の既知のまたは疑わしい腫瘍に浸透した程度を評価することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布をＰＥＴにより判定することと、対象に免疫療法を投与することと、その後、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布をＰＥＴにより判定することと、を含む。第１の分布と第２の分布との差は変化を示す。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布をＰＥＴにより判定することと、を含む。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布をＰＥＴにより判定することと、対象に免疫療法を投与することと、を含む。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布をＰＥＴにより判定することと、対象に免疫療法を投与することと、その後、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布をＰＥＴにより判定することと、を含む。がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法のいくつかの実施形態では、第２の分布は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与の１０日以内に得られた対象の第２のＰＥＴ画像に基づいて判定される。がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法のいくつかの実施形態では、第２の分布は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの対象への第２の投与に基づいて判定される。
【０１５８】
ＴＩＬ陽性腫瘍のＣＤ８  Ｔ細胞密度の定量化
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、その後、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布をＰＥＴにより監視することと、を含む。監視することは、ＴＩＬ陽性腫瘍を特定する。監視することは、対象内の１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、対象内の１ｍｍ２当たり５００個超または５００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、対象内の１ｍｍ２当たり２００個超または２００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、１００個〜５００個／ｍｍ２超またはこれ未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、１％未満のＣＤ８保有細胞、１〜５０％のＣＤ８保有細胞、または５０％超のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、４ミクロンの組織切片で細胞の２．５〜２５％のＩＨＣ測定値に相当するＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、対応する腫瘍の１ｍｍ３当たり１０，０００〜１００，０００個のＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、低い（コールド）または高い（ホット）、対応する腫瘍のＣＤ８保有細胞の細胞強度のうちの少なくとも１つを提供する。いくつかの実施形態では、この割合（％）は、対応する腫瘍内で推定される全腫瘍細胞当たりのＣＤ８保有細胞の割合（％）として計算することができる。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、その後、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布をＰＥＴにより監視することと、を含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、その後、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布をＰＥＴにより監視することと、を含み、監視することは、ＴＩＬ陽性腫瘍を特定する。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、その後、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布をＰＥＴにより監視することと、を含み、監視することは、ＴＩＬ陽性腫瘍を特定し、監視することは、対象内の１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、対象内の１ｍｍ２当たり５００個超または５００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、対象内の１ｍｍ２当たり２００個超または２００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、１００個〜５００個／ｍｍ２超またはこれ未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、１％未満のＣＤ８保有細胞、１〜５０％のＣＤ８保有細胞、または５０％超のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、４ミクロンの組織切片で細胞の２．５〜２５％のＩＨＣ測定値に相当するＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、対応する腫瘍の１ｍｍ３当たり１０，０００〜１００，０００個のＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、及び低い（コールド）または高い（ホット）、対応する腫瘍のＣＤ８保有細胞の細胞強度のうちの１つ以上を与える。
【０１６１】
ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８保有細胞の腫瘍浸潤は代替的に、対応する腫瘍の生検に対して行われる免疫組織化学法によって確認される。
【０１６２】
ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８保有細胞の腫瘍浸潤密度は、対応する腫瘍の生検によって確認されない。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象内の腫瘍の状態についてのレポートを得る。いくつかの実施形態では、レポートは、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法の結果を含むセクションを含む。いくつかの実施形態では、レポートは、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法の結果を含むセクション、及び場合により、対象の対応する腫瘍の生検結果についてのセクションを含む。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、レポートは、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法の結果を含むセクション、及び場合により、ＲＥＣＩＳＴまたはＰＥＲＣＩＳＴ基準に従った腫瘍の状態についてのセクションを含む。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、レポートは、ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法の結果を含むセクション、場合により、対象の対応する腫瘍の生検結果についてのセクション、及び場合により、ＲＥＣＩＳＴまたはＰＥＲＣＩＳＴ基準に従った腫瘍の状態についてのセクションを含む。
【０１６６】
脳
いくつかの実施形態では、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法は、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することと、を含む。分布内のＣＤ８集中領域の特定は、対象の脳内の固形腫瘍の存在を示す。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法は、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、を含む。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法は、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することと、を含む。いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することであって、分布内のＣＤ８集中領域の特定が対象の脳内の固形腫瘍の存在を示す、提供することと、を含む方法によって腫瘍を特定することと、免疫療法、放射線、及び／または化学療法を用いて対象を治療することと、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することと、を含む方法を繰り返すことと、を含む。分布内のＣＤ８集中領域の特定が、対象の脳内の固形腫瘍の存在を示すことで、Ｂにおける治療後に腫瘍のサイズまたはＴＩＬ状態が変化したかどうかを判定し、治療が有効であるかどうかを判定する。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む方法によって腫瘍を特定することを含む。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、を含む方法によって腫瘍を特定することを含む。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、を含む方法によって腫瘍を特定することを含む。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することであって、分布内のＣＤ８集中領域の特定が対象の脳内の固形腫瘍の存在を示す、提供することと、を含む方法によって腫瘍を特定することと、免疫療法、放射線、及び／または化学療法を用いて対象を治療することと、を含む。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することであって、分布内のＣＤ８集中領域の特定が対象の脳内の固形腫瘍の存在を示す、提供することと、を含む方法によって腫瘍を特定することと、免疫療法、放射線、及び／または化学療法を用いて対象を治療することと、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む方法を繰り返すことと、を含む。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することであって、分布内のＣＤ８集中領域の特定が対象の脳内の固形腫瘍の存在を示す、提供することと、を含む方法によって腫瘍を特定することと、免疫療法、放射線、及び／または化学療法を用いて対象を治療することと、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、を含む方法を繰り返すことと、を含む。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、腫瘍の治療の有効性を判定する方法は、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することであって、分布内のＣＤ８集中領域の特定が対象の脳内の固形腫瘍の存在を示す、提供することと、を含む方法によって腫瘍を特定することと、免疫療法、放射線、及び／または化学療法を用いて対象を治療することと、ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、少なくとも対象の頭部をＰＥＴによりスキャンすることと、脳内のＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することと、を含む方法を繰り返すことと、を含む。
【０１７６】
腫瘍の治療の有効性を判定する方法のいくつかの実施形態では、治療が有効でない場合、代替的な治療を対象に投与する。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８保有細胞を監視する方法は、図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、ＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されているＣＤ８ミニボディをヒト対象に与えることと、対象内のミニボディの分布を監視することと、を含む。監視することは、対象内の組織体積に、選択された量よりも多いＣＤ８保有細胞が浸潤しているか、または少ないＣＤ８保有細胞が浸潤しているかを区別する。監視することはＰＥＴにより行われる。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８保有細胞を監視する方法は、ＣＤ８ミニボディをヒト対象に与えることを含む。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８保有細胞を監視する方法は、図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合するＣＤ８ミニボディをヒト対象に与えることを含む。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８保有細胞を監視する方法は、図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、ＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されているＣＤ８ミニボディをヒト対象に与えることを含む。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８保有細胞を監視する方法は、図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、ＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されているＣＤ８ミニボディをヒト対象に与えることと、対象内のミニボディの分布を監視することと、を含む。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法は、ヒト対象にミニボディを投与することであって、ミニボディはＰＥＴ検出可能なマーカーで標識され、ミニボディ配列はヒト化されており、ヒトＣＤ８に結合する、投与することと、対象へのミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のミニボディの分布を監視することと、を含む。方法は、組織の体積に、対象内の選択された量よりも多いＣＤ８保有細胞が浸潤しているか、または少ないＣＤ８保有細胞が浸潤しているかを区別することができる。監視することはＰＥＴにより行われる。いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法は、ＣＤ８ミニボディをヒト対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法は、ＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されたＣＤ８ミニボディをヒト対象に投与することを含む。
【０１８３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法は、ヒト対象にミニボディを投与することを含み、ミニボディはＰＥＴ検出可能なマーカーで標識され、ミニボディ配列はヒト化されておりヒトＣＤ８に結合する。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法は、ヒト対象にミニボディを投与することであって、ミニボディはＰＥＴ検出可能なマーカーで標識され、ミニボディ配列はヒト化されておりヒトＣＤ８に結合する、投与することと、対象へのミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のミニボディの分布を監視することと、を含む。
【０１８５】
ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８保有細胞の選択された量は、１００〜５００細胞／ｍｍ２のＩＨＣ測定値に相当する。ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８保有細胞の選択された量は、４ミクロンの組織切片で細胞の２．５〜２５％のＩＨＣ測定値に相当する。ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８保有細胞の選択された量は、１ｍｍ３当たり１０，０００〜１００，０００細胞である。ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８保有細胞の選択された量は、１ｍｍ３当たり１，０００〜１０００，０００細胞である。
【０１８６】
ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法のいくつかの実施形態では、組織は厚さ４ミクロンである。ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法のいくつかの実施形態では、取り込み時間はすべてのＣＤ８抗原結合コンストラクト間で一貫している。
【０１８７】
本明細書で提供される実施形態のいずれにおいても、抗原結合コンストラクトは自然界には存在しない人工コンストラクトであってよい。
【０１８８】
治療方法
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される観察の方法のいずれかを対象を治療する方法と組み合わせるかまたは対象を治療する方法で補うことができる。
【０１８９】
いくつかの実施形態では、患者を治療する方法が提供される。方法は、がんと診断されたヒト患者にある用量のヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することを含む。いくつかの実施形態では、用量は、約０．７〜３ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む。方法は更に、用量の投与後の第１の時点に患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することで第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することを含み、第１の時点は投与の約６時間〜３６時間後である。方法は更に、第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織（及び／または新生物）中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、１つ以上の組織中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布に基づいてがんの第１の治療（がんを破壊するかまたは表現型を変化させるように設計された）を患者に投与することと、を含む。
【０１９０】
いくつかの実施形態では、方法は更に、第１の治療の投与後に、第２の時点に対応した、抗原結合コンストラクトの標的について第２の部位特異的情報を含む第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織（及び／または新生物）中のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することを含む。方法は更に、第１と第２の患者画像の比較に基づいてがんの第２の治療を患者に投与することを含むことができる。
【０１９１】
いくつかの実施形態では、方法は、第１と第２の患者画像の比較に基づいて第２の治療の治療用量を最適化することを更に含む。
【０１９２】
いくつかの実施形態では、腫瘍を治療する方法は、対象にミニボディを投与することによりミニボディを対象内の腫瘍に結合させて標識された腫瘍を形成することを含む方法が提供される。ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、また、ミニボディは検出可能な標識に結合される。ミニボディが標識された腫瘍を形成する際に腫瘍の表面に偏った形で結合している場合には免疫チェックポイント阻害剤を投与し、ミニボディが標識された腫瘍を形成する際に腫瘍全体にわたって結合している場合には免疫チェックポイント阻害剤を投与しない。ミニボディが標識された腫瘍を形成する際にすべての腫瘍全体にわたって結合している場合、免疫チェックポイント阻害剤を投与しない。
【０１９３】
いくつかの実施形態では、腫瘍を治療する方法が提供される。方法は、対象内の腫瘍にミニボディが結合して標識された腫瘍を形成するように対象にミニボディを投与することを含み、ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、ミニボディは検出可能な標識に結合されている。ミニボディが標識された腫瘍を形成する際にいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合している場合には、免疫チェックポイント阻害剤からなる群から選択される治療を投与し、ミニボディが標識された腫瘍を形成する際にすべての腫瘍全体にわたって結合している場合には免疫チェックポイント阻害剤を投与しない。
【０１９４】
いくつかの実施形態では、対象を治療する方法が提供される。方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、少なくとも１つの新生物のＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、を含む。これにより、新生物をＴＩＬ陽性に転換することができる。
【０１９５】
いくつかの実施形態では、対象を治療する方法であって、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合（例えば、砂漠型又は免疫排除型などのＴＩＬ陰性である）に患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、を含む方法が提供される。場合により、この変法を、状態がＴＩＬ陽性となるまで継続する。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第１の画像を提供することに応じて、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、第１と第２の画像を比較して、ａ）腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すか、またはｂ）腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかを判定し、ａ）の場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。
【０１９７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第１の画像を与えることに応じて、候補治療薬を含む療法を対象に投与することを含む。
【０１９８】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍の第１の画像を提供することに応じて、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第２の画像を提供することと、を含む。
【０１９９】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第１の画像を提供することに応じて、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後でＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第２の画像を提供した後、第１と第２の画像を比較することを含む。
【０２００】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第１の画像を提供することに応じて、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後でＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第２の画像を提供した後、第１と第２の画像を比較して腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、を含む。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第１の画像を提供することに応じて、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、及びＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第２の画像を提供した後、第１と第２の画像を比較して、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、を含む。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第１の画像を提供することに応じて、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後でＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第２の画像を提供した後、第１と第２の画像を比較して、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、腫瘍が増加したＣＤ８の浸潤を示した場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。
【０２０３】
ＩＯＴを用いた治療方法
いくつかの実施形態では、治療を行い、投与する候補治療薬を決定する方法が提供される。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、第１と第２の画像を比較して、ａ）腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すか、またはｂ）腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかを判定し、ａ）の場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、を含む。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、治療する腫瘍（この文脈における第１の腫瘍）を監視するのではなく、異なる腫瘍（この文脈における第２の腫瘍）を監視し、第１の腫瘍の治療を第２の腫瘍の状態または応答性に基づいたものとすることができる。これは、本明細書で提供される実施形態のいずれについても行うことができる。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、を含む。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、第１と第２の画像を比較することと、を含む。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、第１と第２の画像を比較して、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、を含む。
【０２０９】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、第１と第２の画像を比較して、腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、を含む。
【０２１０】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、第１と第２の画像を比較して、腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示した場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。
【０２１１】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、別のラウンドの療法を投与することと、腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を提供することと、第１と第３の画像を比較して、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、療法を中断すること。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、療法は放射線療法を含む。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の画像は、対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の画像である。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の画像は、対象からのものではない腫瘍内のＣＤ８細胞の画像である。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の画像はデータベースからの個人のものであるか、または個人の集団からのデータの集合である。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、代替的な候補治療薬を含む療法を投与する。
【０２１２】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、代替的な候補治療薬を含む療法を投与し、療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を提供する。
【０２１３】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、代替的な候補治療薬を含む療法を投与し、療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を提供して、第３と第２または第３と第１の画像を比較する。
【０２１４】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、代替的な候補治療薬を含む療法を投与し、療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を提供し、第３と第２または第３と第１の画像を比較して、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定する。
【０２１５】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、代替的な候補治療薬を含む療法を投与し、療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を提供し、第３と第２または第３と第１の画像を比較して、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定する。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、代替的な候補治療薬を含む療法を投与し、療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を提供し、第３と第２または第３と第１の画像を比較して、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示した場合、対象に代替的な候補治療薬を含む療法を継続するように指示する。
【０２１６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法による治療を中断することと、を含む。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、免疫療法による治療を中断することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法による治療を中断することと、を含む。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法による治療を継続することと、を含む。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、免疫療法による治療を継続することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法による治療を継続することと、を含む。
【０２２０】
いくつかの実施形態では、方法は、以前にＩＯＴによる治療を受けていない未処置の患者を以前にＩＯＴによる治療を受けている患者から区別することを可能とする。いくつかの実施形態では、方法は、以前にＩＯＴによる治療を受けている患者に対して用いられる。
【０２２１】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、対象に免疫療法を投与することと、次いで対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法を中断することと、を含む。
【０２２２】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、対象に免疫療法を投与することを含む。
【０２２３】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、対象に免疫療法を投与することと、次いで対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、を含む。
【０２２４】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、対象に免疫療法を投与することと、次いで対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０２２５】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、対象に免疫療法を投与することと、次いで対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法を中断することと、を含む。
【０２２６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法を投与することと、を含む。
【０２２７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０２２８】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０２２９】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法を投与することと、を含む。
【０２３０】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法を投与しないように助言することと、を含む。
【０２３１】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０２３２】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０２３３】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法を投与しないように助言することと、を含む。
【０２３４】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、代替的な免疫療法を投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０２３５】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０２３６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、代替的な免疫療法を投与することと、を含む。
【０２３７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法を投与することと、を含む。
【０２３８】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、を含む。
【０２３９】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、を含む。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法を投与することと、を含む。
【０２４１】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、免疫療法の選択についての情報を与える患者試料中の更なるバイオマーカーのレベルの測定を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、免疫療法の選択についての情報を与える患者試料中の更なるバイオマーカーのレベルの測定を含み、更なるバイオマーカーは、ＰＤ−Ｌ１の状態、Ｔ細胞受容体のクローン性、変異負荷、新生抗原負荷、免疫遺伝子シグネチャー、及び多重免疫組織化学の中から選択される。
【０２４２】
腫瘍状態の特定及び化合物の投与
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象内の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合し、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている、形成することと、腫瘍内または周囲のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を検出することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトがいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合している場合、免疫療法からなる群から選択される治療を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形ですべての腫瘍全体にわたって結合している場合、免疫チェックポイント阻害剤を投与しないことと、またはＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形で結合しているが腫瘍の内部には存在していない場合、免疫療法を投与することと、を含む。
【０２４３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０２４４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することを含む。
【０２４５】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することを含み、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合する。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することを含み、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合し、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合し、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている、形成することと、腫瘍内または周囲のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を検出することと、を含む。
【０２４８】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合し、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている、形成することと、腫瘍内または周囲のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を検出することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトがいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合している場合、免疫療法からなる群から選択される治療を投与することと、を含む。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合し、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている、形成することと、腫瘍内または周囲のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を検出することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形ですべての腫瘍全体にわたって結合している場合、免疫チェックポイント阻害剤を投与しないことと、を含む。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合し、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている、形成することと、腫瘍内または周囲のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を検出することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形で結合しているが腫瘍の内部には存在していない場合、免疫療法を投与することと、を含む。
【０２５１】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視して、腫瘍内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物の少なくとも第１のＴＩＬ状態に基づいて患者を治療することと、を含む。
【０２５２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視して、腫瘍内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、を含む。
【０２５３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視して、腫瘍内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物の少なくとも第１のＴＩＬ状態に基づいて患者を治療することと、を含む。
【０２５４】
ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１のＴＩＬ状態は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトがすべての特定された腫瘍の体積全体にわたって結合している場合である。ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、第２のＴＩＬ状態は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトがいずれかの腫瘍辺縁部に偏った形で結合している場合である。
【０２５５】
ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、対象が第２のＴＩＬ状態を有する場合に免疫療法を対象に適用する。ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、対象が第１のＴＩＬ状態を有する場合に免疫療法は対象に投与されない。ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、少なくとも第１のＴＩＬ状態が、臨床試験のためにヒト被験者を分類または選択すること、治療に対してヒト対象を推奨するかまたはヒト対象の適格性を判定すること、療法に対するヒト対象の応答を予測すること、及び／または放射線療法、化学療法、生物療法、及び免疫療法からなる群の中から選択される療法に対する応答を予測すること、のうちの少なくとも１つに用いられる。ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを監視することは、腫瘍の内部領域または体積と比較して腫瘍表面のＣＤ８陽性細胞への結合の増加を示す、腫瘍表面における検出可能なマーカーの分布の関数として行われる。ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを監視することは、腫瘍の内部領域または体積における検出可能なマーカーの分布の関数として行われる。
【０２５６】
ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを監視することが、腫瘍の内部領域または体積と比較して腫瘍表面のＣＤ８陽性細胞への結合の増加を示す、腫瘍表面における検出可能なマーカーの分布の関数として達成される場合、対象に免疫療法が与えられる。
【０２５７】
ヒト対象の腫瘍を治療する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを監視することが、腫瘍の内部領域または体積と比較して腫瘍表面のＣＤ８陽性細胞への結合の増加を示す、腫瘍表面における検出可能なマーカーの分布の関数として行われる場合、対象に免疫療法が与えられ、腫瘍の内部領域または体積と比較して腫瘍表面のＣＤ８陽性細胞への結合の増加を示す、腫瘍表面における検出可能なマーカーの分布がかかる免疫療法による治療後に持続する場合、対象に代替的な免疫療法が与えられる。
【０２５８】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、少なくとも１つの新生物のＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与してＴＩＬ状態を陰性から陽性に転換することと、を含む。
【０２５９】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者に抗原結合コンストラクトを投与することを含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することを含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、を含む。
【０２６０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、少なくとも１つの新生物のＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、を含む。
【０２６１】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、少なくとも１つの新生物のＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与してＴＩＬ状態を陰性から陽性に転換することと、を含む。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合に患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を新生物のＴＩＬ状態が陽性になるまで投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０２６３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、を含む。
【０２６４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合に患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、を含む。
【０２６５】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合に患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を、新生物のＴＩＬ状態が陽性になるまで投与することと、を含む。
【０２６６】
ヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、監視することは、投与の８時間以内に行われる。ヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、監視すること、または第２の監視することは、投与の３６時間前に行われる。
【０２６７】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することと、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合に治療を継続することと、腫瘍がコールドな腫瘍である場合には療法を第２の療法に変更することと、ヒト対象が第１の治療を受けていない場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することと、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合に対象にＩＯＴを投与することと、を含む。
【０２６８】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することを含む。
【０２６９】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することと、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合、治療を継続することと、を含む。
【０２７０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することと、腫瘍がコールドな腫瘍である場合、療法を第２の療法に変更することと、を含む。
【０２７１】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することを含む。
【０２７２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の腫瘍を治療する方法は、ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することと、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合、対象にＩＯＴを投与することと、を含む。
【０２７３】
いくつかの実施形態では、患者の治療を選択する方法は、ヒト患者にＣＤ８結合コンストラクトを投与することと、患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、腫瘍がコールドな腫瘍である場合に腫瘍のＴＩＬ状態を変化させるＩＯＴを投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、患者の治療を選択する方法は、ヒト患者にＣＤ８結合コンストラクトを投与することを含む。
【０２７４】
いくつかの実施形態では、患者の治療を選択する方法は、ヒト患者にＣＤ８結合コンストラクトを投与することと、患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、を含む。
【０２７５】
いくつかの実施形態では、患者の治療を選択する方法は、ヒト患者にＣＤ８結合コンストラクトを投与することと、患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、腫瘍がコールドな腫瘍である場合にＩＯＴを投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、患者の治療を選択する方法は、ヒト患者にＣＤ８結合コンストラクトを投与することと、患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、腫瘍がコールドな腫瘍である場合に腫瘍のＴＩＬ状態を変化させるＩＯＴを投与することと、を含む。
【０２７６】
いくつかの実施形態では、対象の治療を変更する方法は、第１の治療を行っているヒト対象を提供することと、ＣＤ８結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有するかどうかを判定することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有する場合、療法を継続することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陰性である腫瘍を有する場合、第１の療法を中止することと、を含む。
【０２７７】
いくつかの実施形態では、対象の治療を変更する方法は、第１の治療を行っているヒト対象を特定することを含む。いくつかの実施形態では、対象の治療を変更する方法は、第１の治療を行っているヒト対象を特定することと、ＣＤ８結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、対象の治療を変更する方法は、第１の治療を行っているヒト対象を与えることと、ＣＤ８結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有するかどうかを判定することと、を含む。いくつかの実施形態では、対象の治療を変更する方法は、第１の治療を行っているヒト対象を特定することと、ＣＤ８結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有するかどうかを判定することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有する場合、療法を継続することと、を含む。
【０２７８】
いくつかの実施形態では、対象の治療を変更する方法は、第１の治療を行っているヒト対象を特定することと、ＣＤ８結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有するかどうかを判定することと、対象が第１の治療下でＴＩＬ陰性である腫瘍を有する場合、第１の療法を中止することと、を含む。
【０２７９】
本明細書で使用するところの、ＴＩＬ状態に基づいて「治療を選択する」及び「治療を変更する」とは、１つ以上の治療薬または１つ以上の治療の治療過程の投与を選択する、中止する、追加する、組み合わせる、または変更することのうちの１つ以上を意味し得る。薬剤または治療は免疫療法であってもよく、または化学療法、放射線または手術であってもよい。一般的に、腫瘍が既知の腫瘍のクラスのメンバーとして特定されている場合、治療は、かかる腫瘍の標準治療として知られているものの中から選択される。あるいは、治療は医師及び患者の裁量で用いられる実験的治療であってもよい。上記の一例として、免疫療法との関連における第一選択となる療法は、通常、ＰＤ１またはＣＴＬＡ４免疫チェックポイント阻害剤による単剤療法である。第二選択となる療法は、多くの場合でチェックポイント阻害剤の組み合わせである。この発展途上の分野では推奨される治療アプローチは頻繁に変わる。本発明の統一的な特徴の１つは、そのような治療アプローチを、投与されたＣＤ８抗原結合コンストラクトのＰＥＴイメージングによって１つ以上の腫瘍のＣＤ８のＴＩＬ状態の迅速で非侵襲的な判定に基づいて選択する（または反対に無視する）ことができるようになったことである。
【０２８０】
ホット／変化排除型／変化免疫抑制型／コールドのスケールを用いたＣＤ８のＴＩＬ状態に応じて推奨することができる治療の概要が、本明細書に参照によって特定的に援用するところのＧａｌｏｎ  ａｎｄ  Ｂｒｕｎｉ（２０１９）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｖ．１８，ｐ．１９７−２１８の図３に記載されている。本発明は、今やＣＤ８のＴＩＬ状態を判定するための、また、それにより、治療の適切な選択を行うための方法に対する重要な改善点を提供する。
【０２８１】
本発明によって影響される治療アプローチの１つの例を、免疫療法に応答する一般的ながん、すなわち黒色腫及び肺癌に見ることができる。これらのがん及び他のがんは脳に転移し得る。かかる状態に対する現在の標準治療としては、以下を含む。
【０２８２】
悪性黒色腫の場合：（１０万人当たり２．８〜３．１人の発生率）。第一選択治療：手術＋単独または組み合わせのチェックポイント阻害剤（ＰＤ−１またはＰＤ−１＋ＣＴＬＡ−４）。第二選択治療：第１治療に応じて、第１選択療法の繰り返し、化学療法、免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせ、または腫瘍が特定の変異を獲得している場合には標的化療法。
【０２８３】
非小細胞癌（ＮＳＣＬ）の場合： （１０万人当たり５２〜７５人の発生率）。第一選択治療：手術（または放射線療法）＋化学療法。第二選択治療：異なる化学療法剤（ドセタキセル、ゲムシタビン、ペメトレキセド、及びエルロチニブ、または特定の癌遺伝子が変異を示す場合には標的化療法（アファチニブ、オシメルチニブ、クリゾチニブ、アレクチニブ、及びセリチニブ）、または免疫療法。
【０２８４】
侵攻型の脳腫瘍である多形性膠芽腫（ＧＢＭ）の場合： （１０万人当たり３．１９人の発生率）。第一選択治療は最大の外科的切除、放射線療法、及びテモゾロミドとの同時及び補助化学療法。第二選択治療：異なる化学療法（プロカルバジン／ロムスチン／ビンクリスチン（ＰＣＶ））または化学療法＋生物製剤（ベバシズマブ／イリノテカン（ＢＩ））。
【０２８５】
これらの例示的治療を、今や本発明により提供されるＣＤ８のＴＩＬ状態の迅速で非侵襲的な判定によって与えられる理解によって改善することができる。
【０２８６】
いくつかの実施形態では、方法は、ヒト対象の腫瘍のＴＩＬ状態を判定するための非侵襲的方法を含む。方法は、ａ．対象にＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与すること、ｂ．対象のＰＥＴ画像を得ること、及びｃ．ＰＥＴ画像の腫瘍のＳＵＶに基づいて対象の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、ＳＵＶは、Ｌ３椎骨と大動脈に対する腫瘍ＰＥＴ放射の比に基づいて計算される。
【０２８７】
治療−コールドとホットの組み合わせ
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、用量の投与後の第１の時点で患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点が投与の約６〜３６時間後である、生成することと、第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、患者に１つ以上の腫瘍内のＣＤ８の第１の存在量及び／または分布に対する第１の治療を投与することと、を含む。
【０２８８】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０２８９】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含み、用量は、８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含み、用量は、放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含み、用量は、約０．５ｍＣｉ〜３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含み、用量は８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを含み、用量は約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は約０．５ｍＣｉ〜３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することと、を含む。
【０２９１】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを含み、用量は約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することと、を含む。
【０２９２】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含み、用量は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む。
【０２９３】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は約０．５ｍＣｉ〜３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することと、を含む。
【０２９４】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、用量の投与後の第１の時点で患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することと、を含む。
【０２９５】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、用量の投与後の第１の時点で患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することと、を含む。
【０２９６】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、用量の投与後の第１の時点で患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点が用量の投与の約６〜３６時間後である、生成することと、を含む。
【０２９７】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、用量の投与後の第１の時点で患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点が投与の約６〜３６時間後である、生成することと、第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、を含む。
【０２９８】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む、投与することと、用量の投与後の第１の時点で患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点が投与の約６〜３６時間後である、生成することと、第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、患者に１つ以上の腫瘍内のＣＤ８の第１の存在量及び／または分布に対する第１の治療を投与することと、を含む。
【０２９９】
いくつかの実施形態では、第１の時点は、用量の投与の約１、４、８、１２、１６、２０、２４、２８、３２、３６、４０、４４、もしくは４８時間後、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値である。
【０３００】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第１の治療の投与後に、患者体内の１つ以上の組織及び／または腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することを含む。
【０３０１】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第１の治療の投与後に、第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することを含む。
【０３０２】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第１の治療の投与後に、第２の時点に対応した第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することを含む。
【０３０３】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第１の治療の投与後に、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの標的についての第２の部位特異的情報を含む第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することを含む。
【０３０４】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第１の治療の投与後に、第２の時点に対応した、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの標的についての第２の部位特異的情報を含む第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することを含む。
【０３０５】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第１の治療の投与後に、第２の時点に対応した、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの標的についての第２の部位特異的情報を含む第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することと、第１と第２の患者画像の比較に基づいて腫瘍の第２の治療を患者に投与することと、を含む。
【０３０６】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第２の治療の治療用量を最適化することを含む。
【０３０７】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は更に、第１と第２の患者画像の比較に基づいて第２の治療の治療用量を最適化することを含む。
【０３０８】
治療−全体的なアプローチ
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして身体内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により、対象の身体内の少なくとも２つの別々の腫瘍を特定することと、２つの別々の腫瘍のそれぞれの腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）状態を判定することと、少なくとも２つの腫瘍のＴＩＬ状態が同じである場合に第１の療法を対象に投与するか、または少なくとも２つの腫瘍のＴＩＬ状態が異なる場合に第２の療法を対象に投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含み、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは標識されている。
【０３０９】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含み、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている。
【０３１０】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンすることと、を含む。
【０３１１】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして身体内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、を含む。
【０３１２】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして身体内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、対象の身体内の少なくとも２つの別々の腫瘍を特定することと、を含む。
【０３１３】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして身体内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により、対象の身体内の少なくとも２つの別々の腫瘍を特定することと、を含む。
【０３１４】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして身体内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により、対象の身体内の少なくとも２つの別々の腫瘍を特定することと、２つの別々の腫瘍のそれぞれの腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）状態を判定することと、を含む。
【０３１５】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして身体内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により、対象の身体内の少なくとも２つの別々の腫瘍を特定することと、２つの別々の腫瘍のそれぞれの腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）状態を判定することと、少なくとも２つの腫瘍のＴＩＬ状態が同じである場合に第１の療法を対象に投与することと、を含む。
【０３１６】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして身体内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により、対象の身体内の少なくとも２つの別々の腫瘍を特定することと、２つの別々の腫瘍のそれぞれの腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）状態を判定することと、少なくとも２つの腫瘍のＴＩＬ状態が異なる場合に第２の療法を対象に投与することと、を含む。
【０３１７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象の身体の少なくとも３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、もしくは９９％、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値をスキャンすることと、を含む。
【０３１８】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、少なくとも２つの腫瘍が同じかまたは異なっているかを判定することは、少なくとも２つの腫瘍の状態及び位置を表示することを含む。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、表示することは、少なくとも２つの腫瘍の位置の２Ｄまたは３Ｄ表現を含む。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、８９Ｚｒと関連付けられる。
【０３１９】
いくつかの実施形態では、対象に抗原結合コンストラクトを投与する方法が提供される。方法は、ヒトＣＤ８に結合する標識された抗原結合コンストラクトを対象に与えることを含む。標識は８９Ｚｒを含み、標識は注入時に０．７５（または０．５）〜３ｍＣｉ±２０％の放射線を与え、０．２〜１０ｍｇの量の総抗原結合コンストラクトが対象に与えられる。
【０３２０】
放射線の量について述べた本発明で提供される実施形態のいずれにおいても、この量は、対象への注射時または適用時（例えば、その時点）に存在する放射線の量であってよい。
【０３２１】
いくつかの実施形態では、患者を治療する方法が提供される。方法は、ａ）がんと診断されたヒト患者に、ある用量のヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することであって、用量は、約０．７５（または０．５）〜３．６ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識された抗原結合コンストラクトと、約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトとを含む、投与することと、ｂ）患者体内の８９Ｚｒ標識された抗原結合コンストラクトを、用量の投与後の第１の時点で検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点は投与の約６〜３６時間後である、生成することと、ｃ）第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、ｄ）患者にがんの第１の治療を投与することと、ｅ）第１の治療を投与した後、がんと診断されたヒト患者に第２の用量の抗原結合コンストラクトを投与することと、ｆ）第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することと、ｇ）第１の患者画像と第２の患者画像とを比較し、第１と第２の患者画像の比較に基づいてがんの第２の治療を患者に投与することと、を含む。
【０３２２】
いくつかの実施形態では、上記の方法において、比較することは、第２の画像に、第１の治療が奏功していることを示し、したがって第１の治療が継続されることを示す浸潤の増加が見られるかどうかを判定することを含み、第２の画像の浸潤に変化がないかまたは減少が見られる場合、第１の治療が奏功していないことを示し、第１と第２の患者画像の比較に基づいてがんの第２の治療が患者に投与される。
【０３２３】
いくつかの実施形態では、患者を治療する方法が提供される。方法は、ａ）がんと診断されたヒト患者に、ある用量のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することであって、用量は、約０．７５（または０．５）〜３．６ｍＣｉの放射能を与えるＣＤ８  ＰＥＴトレーサーと、約５μｇ〜約５０ｍｇ（または約２０μｇ〜１０ｍｇ）のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーとを含む、投与することと、ｂ）患者体内のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを、用量の投与後の第１の時点で検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、第１の時点は投与の約1〜３６時間後である、生成することと、ｃ）第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの第１の存在量及び／または分布を決定することと、ｄ）患者にがんの第１の治療を投与することと、ｅ）第１の治療を投与した後、がんと診断されたヒト患者に第２の用量のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することと、ｆ）第２の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの第２の存在量及び／または分布を決定することと、ｇ）第１の患者画像と第２の患者画像とを比較し、第１と第２の患者画像の比較に基づいてがんの第２の治療を患者に投与することと、を含む。
【０３２４】
いくつかの実施形態では、対象を治療する方法は、新生物を有し、免疫療法（「ＩＯＴ」）による治療を受けている患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することであって、抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含み、抗原結合コンストラクトが対象に免疫応答を引き起こさず、検出可能なマーカーが８９Ｚｒを含み、検出可能なマーカーが注入時に０．５〜３ｍＣｉ±２０％の放射能を与え、０．２〜１０ｍｇの量の総抗原結合コンストラクトが患者に与えられる、投与することと、抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合に患者に代替的なＩＯＴを投与することと、新生物のＴＩＬ状態が陽性となるまで上記の方法を繰り返すことと、を含む。
【０３２５】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、第１の存在量は、第１の患者画像上のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーまたは８９Ｚｒシグナルの第１の強度であり、第２の存在量は、第２の患者画像上のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーまたは８９Ｚｒシグナルの第２の強度である。
【０３２６】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、腫瘍の位置は、第１の患者画像と比較した第２の患者画像内の放射線の増加として示される。
【０３２７】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、第１の時点は、投与の２０〜３４時間後であり、第２の存在量及び／または分布を決定することは、第２の用量の投与の２０〜３４時間後に行われる。
【０３２８】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは、１８Ｆを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは、３時間よりも短い半減期を有するＰＥＴ同位体を含む。
【０３２９】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、監視することは、投与の８時間以内に行われる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、観察すること、または更に第２の監視することは、投与の３６時間以内に行われる。
【０３３０】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法が提供される。方法は、ｉ）ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することと、ｉｉ）候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、ｉｉｉ）候補治療薬を含む療法を投与した後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、ｉｖ）第１と第２の画像を比較して、ａ）腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すか、またはｂ）腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかを判定し、ａ）の場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。いくつかの実施形態では、ｂ）の場合、別のラウンドの療法を投与して、腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を与え、第１と第３の画像を比較して、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、療法を中断する。
【０３３１】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法が提供される。方法は、ｉ）ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの第１の画像を提供することと、ｉｉ）候補治療薬を含む療法を対象に投与することと、ｉｉｉ）療法を投与した後、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを使用して対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像を与えることと、ｉｖ）第１と第２の画像を比較して、ａ）腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すか、またはｂ）腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかを判定し、ａ）の場合、対象に療法を継続するように指示することと、を含む。
【０３３２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法が提供される。方法は、ａ）候補治療薬をヒト対象に投与することと、ｂ）ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、ｃ）候補治療薬後にサイズが増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含む。ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大が腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行（ｐｓｅｕｄｏｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ）を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。
【０３３３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法が提供される。方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、対象にＣＤ８  ＰＥＴトレーサーを投与することであって、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは８９Ｚｒを含む、投与することと、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーの投与の約３６時間以内に８９Ｚｒの分布について対象にＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。１８ＦのＰＥＴの時間は、例えば、０．５、１、２、３、４、５または６時間（その間の任意の範囲を含む）とすることができる。８９ＺｒのＰＥＴの時間は、例えば、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、または３６時間（その間の任意の範囲を含む）とすることができる。
【０３３４】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、対象または患者に治療薬が投与され、治療薬は、イピリムマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、及びデュルバルマブのうちの少なくとも１つから選択される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、対象または患者に治療薬が投与され、治療薬は、ＢＭＳ−１００１、ＢＭＳ−１１１６、ＣＡ−１７０、ＣＡ−３２７、イミキモド、レシキモド、８５２Ａ、ＶＴＸ−２３３７、ＡＤＵ−Ｓ１００、ＭＫ−１４５４、イブルチニブ、３ＡＣ、イデラリシブ、ＩＰＩ−５４９、エパカドスタット、ＡＴ−３８、ＣＰＩ−４４４、ビパデナント、プレラデナント、ＰＢＦ、ＡＺＤ４６３５、ガルニセルチブ、ＯＴＸ０１５／ＭＫ−８６２８、ＣＰＩ−０６１０のうちの少なくとも１つから選択される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、対象または患者に治療薬が投与され、治療薬は、ＬＡＧ−３、ＴＩＭ３、Ｂ７−Ｈ４及び／またはＴＩＧＩＴ、または代替的にＭＫ−４２８０、ＭＫ−７６８４、及び／または上記のいずれかとキイトルーダとの組み合わせのうちの１つ以上に対して選択的な抗原結合コンストラクトのうちの少なくとも１つから選択される。
【０３３５】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、ミニボディまたはダイアボディであり、抗原結合コンストラクトは、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、重鎖可変領域はヒトアミノ酸配列から本質的に構成され、軽鎖可変領域はヒトアミノ酸配列から本質的に構成される。
【０３３６】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、抗原結合コンストラクトは、配列番号１６〜１４７のうちの３つの重鎖ＣＤＲと、配列番号１５〜１４７のうちの３つの軽鎖ＣＤＲとを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、抗原結合コンストラクトは、配列番号１、３、１６の、または１４７内の重鎖可変領域と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域と、配列番号７、９、１５の、または１４７内の軽鎖可変領域と少なくとも８０％同一である軽鎖可変領域とを含む。
【０３３７】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号１４７の配列と少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９％、またはそれ以上同一である。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号１４７の配列と少なくとも７０、７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９％、またはそれ以上類似している。
【０３３８】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、対象または患者は、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病、悪性リンパ腫、扁平細胞癌（例えば、扁平上皮細胞癌）、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌、消化器癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿道癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、多発性骨髄腫及びＢ細胞リンパ腫、脳腫瘍、頭頸部癌、成人及び小児の固形癌ならびに固形腫瘍のうちの１つ以上のがんから選択されるがんを有する。
【０３３９】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、治療は、限定されるものではないが、本明細書で提供される免疫チェックポイント阻害剤、ＩＯＴ、または化学療法剤を含む、本明細書で提供される療法のうちの少なくとも１つを含む。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、ヒトＣＤ８は、ヒトＣＤ８α鎖である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、抗原結合コンストラクトは、ヒトＣＤ８β鎖よりもヒトＣＤ８α鎖に対して選択的である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、抗原結合コンストラクトは、ヒトＣＤ８α鎖よりもヒトＣＤ８β鎖に対して選択的である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、α鎖は、配列番号１３４の配列である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、ヒトＣＤ８は、ヒトＣＤ８β鎖である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、β鎖は、配列番号１３５の配列である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、検出可能なマーカーの増加は、ＣＤ８浸潤の増加を示す。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、第１の画像から第２の画像へのＣＤ８  ＰＥＴトレーサーからのシグナルの増加は、腫瘍への浸潤の増加を示す。
【０３４１】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、浸潤の増加は、第１の療法が腫瘍に対して有効であることを示し、ここで、浸潤の増加は、第１の画像と第２の画像との間のＰＥＴ検出シグナルの増加によって示され、ＰＥＴ検出シグナルは、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーまたはＣＤ８抗原結合コンストラクトの検出可能なマーカーからのものである。
【０３４２】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、ＰＥＴ検出シグナルの増加は、少なくとも１０％である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、ＰＥＴ検出シグナルの増加は、少なくとも１００％である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、ＰＥＴ検出シグナルの増加は、少なくとも１０００％である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、ＰＥＴの増加は、少なくとも５０００％である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つにおいて、ＰＥＴ検出シグナルの増加は、少なくとも１０，０００％である。
【０３４３】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、標準取り込み値（「ＳＵＶ」）を決定することを更に含み、ＳＵＶを決定する方法は、ａ）ｒを決定すること（ただし、ｒは、ＰＥＴスキャナーにより関心領域（「ＲＯＩ」）内で測定される、抗原結合コンストラクトからの放射線の放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である）と、ｂ）ａ’を決定すること（ただし、ａ’は、注入された検出可能なマーカーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である）と、ｃ）ｗを決定すること（ただし、ｗは、患者の体重である）と、ｄ）ＳＵＶを、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果として決定することと、を含む。
【０３４４】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、方法は更に、第２のＲＯＩについてプロセスを繰り返して第２の合計シグナルレベルを決定することと、第１と第２の合計シグナルレベルを比較することと、を含み、第１の合計シグナルレベルが第２の合計シグナルレベルよりも低い場合、第２のＲＯＩ内の増加したＣＤ８の存在を示す。
【０３４５】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれか１つ（限定されないが、治療する、または診断する、またはイメージングする方法を含む）において、試料は厚さ２０ミクロンで分析される。
【０３４６】
監視方法
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８を監視するための方法が提供される。方法は、ＣＤ８ミニボディを対象に与えることを含む。ＣＤ８ミニボディは、図１Ｃに示されるＣＤ８配列に結合し、ミニボディは検出可能なマーカーで標識されている。方法は更に、対象へのＣＤ８ミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視することを含む。いくつかの実施形態では、任意の抗原結合コンストラクトを用いることができる。いくつかの実施形態では、用いられるミニボディは、８９Ｚｒのような標識または検出可能なマーカーを伴う、図３９（配列１４７）のものなどの本明細書で指定されるもののうちの１つである。方法は、宿主内のＣＤ８の分布を、他の方法との組み合わせで、または単独で監視することを可能とする。いくつかの実施形態では、宿主内のＣＤ８分布を監視及び／または決定することにより、ＣＤ８＋Ｔ細胞などのＣＤ８＋細胞の分布の表現を提供する。したがって、本明細書で提供されるコンストラクトの１つ以上のものを用いることで、宿主内のＣＤ８＋Ｔ細胞を監視することができる。
【０３４７】
いくつかの実施形態では、対象へのＣＤ８ミニボディの投与とその後の監視との間の時間の長さは、特定の用途で必要とされるまたは適切な長さである。いくつかの実施形態では、時間の長さは、６〜３６時間以内、例えば、１０〜３２、１２〜３０、１４〜３０、または１８〜２８時間である。いくつかの実施形態では、投与と監視（例えばＰＥＴによる）との間の時間の長さは、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、または３６時間であり、上記の値のうちの任意の２つの間で定義される任意の範囲を含む。これらの範囲は、本明細書で提供される方法のいずれにも適用することができる。
【０３４８】
いくつかの実施形態では、インビボでＣＤ８を監視するための方法が提供される。方法は、ＣＤ８ミニボディを対象に与えることを含み、ＣＤ８ミニボディは図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、また、ミニボディは検出可能なマーカーで標識されている。方法は更に、対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視することを含み、監視することは、対象内の１ｍｍ２当たり（例えば、深さ２０ミクロンで）５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した組織を検出することができる。監視することは、ＰＥＴによって行われる。
【０３４９】
いくつかの実施形態では、ミニボディ（または任意の抗原結合コンストラクト）は、ヒトＣＤ８（配列番号２４、図１Ｃ、図３３、または図３４のものを含む）に結合するカテゴリーのものである。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは他のＣＤ８配列にも結合することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトはヒト以外のＣＤ８には結合しない。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは天然に存在するヒトＣＤ８に結合することができる。
【０３５０】
いくつかの実施形態では、検出の感度は、５００細胞／ｍｍ３未満の感度であり得、例えば、２００、２５０、３００、３５０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、４９５、４９９、または５００個未満であり、上記の値のうちの任意の２つの間で定義される範囲を含む。いくつかの実施形態では、１ｍｍ２当たり５００細胞よりも多い値が、検出の感度のレベルとなり得る（例えば、深さ２０ミクロン）。本明細書で提供される時間の長さのいずれも、投与の時間と対象内での検出との間に用いることができる。
【０３５１】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８陽性細胞を可視化するための方法が提供される。方法は、ＣＤ８ミニボディを対象に与えることを含む。ＣＤ８ミニボディは、検出可能なマーカーで標識されている。ＣＤ８ミニボディの配列はヒト化または脱免疫化されており、ヒトＣＤ８に結合する。方法は更に、対象へのＣＤ８ミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視することを含み、監視することは、対象内の１ｍｍ２当たり（例えば、深さ２０ミクロンで）５００個以下のＣＤ８陽性細胞が浸潤した組織を検出することができ、監視することはＰＥＴによって行われる。
【０３５２】
いくつかの実施形態では、ヒト体内の細胞を可視化する方法が提供される。方法は、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることを含み、手段は検出可能な標識を含む。方法は更に、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の対象への投与の６〜３６時間以内に対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第１の分布を監視及び決定することを含む。
【０３５３】
いくつかの実施形態では、対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段は、本明細書で提供されるＣＤ８抗原結合コンストラクトのうちのいずれか１つ以上である。いくつかの実施形態では、手段は、本明細書の図または表のいずれか１つに示される配列のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、手段は、本明細書で提供される抗原結合コンストラクトのいずれかからの６個のＣＤＲすべてを含む任意の抗原結合コンストラクトである。
【０３５４】
いくつかの実施形態では、方法は更に、第１の分布を監視及び決定した後、対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第２の分布を監視及び決定することと、第１と第２の分布を比較して分布の変化を判定することと、を含む。
【０３５５】
いくつかの実施形態では、方法は更に、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えるのと同時、またはその前に対象に第１の治療薬を投与することを含む。分布の変化を用いて第１の治療薬の有効性を判定する。分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の増加を示す場合、第１の治療薬の少なくとも第２の用量を対象に投与し、分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の減少を示す場合、第２の治療薬を対象に投与する。
【０３５６】
いくつかの実施形態では、方法は更に、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えるのと同時、またはその前に対象に第１の治療薬を投与することを含む。分布の変化を用いて第１の治療薬の有効性を判定する。分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の増加を示す場合、第１の治療薬の少なくとも第２の用量を対象に投与し、分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の無変化または減少を示す場合、第１の治療薬の第２の用量を対象に投与しない。
【０３５７】
いくつかの実施形態では、方法は更に、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えるのと同時、またはその前に対象に第１の治療薬を投与することを含む。分布の変化を用いて第１の治療薬の有効性を判定する。分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の無変化または増加を示す場合、第１の治療薬の少なくとも第２の用量を対象に投与し、分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の減少を示す場合、第１の治療薬の第２の用量を対象に投与しない。
【０３５８】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段のいずれかを用い、または本明細書で提供されるＣＤ８に対する抗原結合コンストラクトのいずれかを用いて、対象内のＣＤ８及び／またはＣＤ８＋細胞及び／またはＣＤ８＋Ｔ細胞の分布の変化を判定することができる。この変化は、例えば、可能性のある、または現在の治療薬、及び／またはその製剤、及び／またはその量、及び／またはその投与計画の有効性を判定することを含む様々な選択肢で用いることができる。下記でより詳細に述べるように、方法は、新生物のＴＩＬ状態を監視するために用いることもできる。
【０３５９】
いくつかの実施形態では、対象にミニボディを投与する方法が提供される。方法は、ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることを含む。ミニボディによって投与される適切な量の放射線を与えることができる。いくつかの実施形態では、３ｍＣｉ±２０％の放射線が、標識されたミニボディによって対象に与えられ、０．２〜１０ｍｇの総タンパク質が対象に与えられる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される任意の量の放射線を対象に投与することができ、その放射能の少なくとも一部の送達システムは１．５〜１０ｍｇの総タンパク質とする。
【０３６０】
いくつかの実施形態では、対象にミニボディを投与する方法が提供される。方法は、ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることを含み、標識されたミニボディによって０．７５（または０．５）〜１．５±２０％ｍＣｉの放射線が対象に与えられ、０．２〜１０ｍｇの量の総タンパク質が対象に与えられる。より低線量の放射線が用いられる場合、いくつかの実施形態では、第１の用量の後の３〜４日以内に第２の用量を投与することができ、これにより、より鮮明な画像を得ることができる。
【０３６１】
いくつかの実施形態では、０．５、０．６、０．７、０．７５、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３ｍＣｉ、またはそれ以上のｍＣｉの放射線が、０．２、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０ｍｇまたはそれ以上のｍｇのミニボディまたは抗原結合コンストラクトを用いて対象に投与される。いくつかの実施形態では、約３ｍＣｉの線量で、更なる用量の投与を行わずに、６〜３６時間で最初の画像、及び３〜１０日（場合により１４日）で第２の画像を得ることができる。
【０３６２】
ＰＥＴによるイメージング
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、本明細書で提供される組成物または製剤のいずれか１つ以上を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布が対象内に生じることを指定の時間にわたって待つことと、スキャニングのための指定の時間にわたってＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、本明細書で提供される組成物または製剤のいずれか１つ以上を投与することを含む。
【０３６３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、本明細書で提供される組成物または製剤のいずれか１つ以上を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布が対象内に生じることを指定の時間にわたって待つことと、を含む。
【０３６４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、本明細書で提供される組成物または製剤のいずれか１つ以上を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布が対象内に生じることを指定の時間にわたって待つことと、スキャニングのための指定の時間にわたってＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についての指定の時間は、１時間〜３６時間である。ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布の指定の時間は、５時間〜２４時間である。ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についての指定の時間は、０．２５時間、０．５時間、１時間、４時間、８時間、１２時間、１６時間、２０時間、２４時間、２８時間、３２時間、３６時間、４０時間、４４時間、４８時間、５２時間、５６時間、６０時間、６４時間、６８時間、または７２時間、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値である。
【０３６５】
ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、スキャニングのための指定の時間は、１０分間〜１時間の間である。ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、スキャニングのための指定の時間は、１２分間〜４０分間の間である。ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、スキャニングのための指定の時間は、約１２〜約２０分間であり、放射性標識は、０．５ｍＣｉよりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を与える。ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、放射性標識は、１．０ｍＣｉよりも低い放射線を与える。ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、ＰＥＴスキャンは対象内の位置、分布、比、及び／または腫瘍状態を得るために行われる。
【０３６６】
ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、ＰＥＴスキャンは対象内の位置、分布、比、及び／または腫瘍状態を得るために行われ、ＰＥＴスキャン装置はヒト用に構成される。
【０３６７】
ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、スキャニングのための指定の時間は、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、または６０分間、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値である。
【０３６８】
ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法のいくつかの実施形態では、放射性標識は、約０．２５、０．５、０．７５、１．０、１．２５、１．５、１．７５、または２ｍＣｉ、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値の放射線を与える。
【０３６９】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することであって、ミニボディが放射性標識に結合されており、ミニボディを投与することが、０．５ｍＣｉよりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を与える、ことと、１〜３６時間待つことと、１５〜３０分間にわたってＰＥＴスキャンを行ってスキャニングすることと、を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される、放射線の量、時間の長さまたは待ち時間に関する範囲のいずれかをこの実施形態との関連で用いることができる。
【０３７０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ミニボディを投与することを含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することを含む。
【０３７１】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することを含み、ミニボディは放射性標識に結合されている。
【０３７２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することを含み、ミニボディは放射性標識に結合されており、ミニボディを投与することは、０．５ｍＣｉよりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を与える。
【０３７３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することであって、ミニボディは放射性標識に結合されている、投与することと、１〜３６時間待つことと、を含む。
【０３７４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することであって、ミニボディは放射性標識に結合されており、ミニボディを投与することが、０．５ｍＣｉよりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を与える、投与ことと、１〜３６時間待つことと、を含む。
【０３７５】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＰＥＴスキャンを行う方法は、ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することであって、ミニボディが放射性標識に結合されており、ミニボディを投与することが、０．５ｍＣｉよりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を与える、投与することと、１〜３６時間待つことと、１５〜３０分間にわたってＰＥＴスキャンを行ってスキャニングすることと、を含む。
【０３７６】
いくつかの実施形態では、陽電子放出断層撮影（「ＰＥＴ」）の方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、光子対の検出を利用して、同時事象のリストによってトレーサー源を局在化することであって、同時事象は、シンチレーターからの出力を受け取り、それを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、局在化することと、を含み、対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される、ＣＤ８陽性細胞の数に関する範囲のいずれかをこの実施形態との関連で用いることができる。
【０３７７】
いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、光子対の検出を利用して、同時事象のリストによってトレーサー源を局在化することであって、同時事象は、シンチレーターからの出力を受け取り、それを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、局在化することと、を含み、対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。
【０３７８】
いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、トレーサーを投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーを投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、ンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、光子対の検出を利用してトレーサー源を局在化することと、を含む。
【０３７９】
いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、光子対の検出を利用して、同時事象のリストによってトレーサー源を局在化することであって、同時事象は、シンチレーターからの出力を受け取り、それを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、局在化することと、を含む。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、ＰＥＴの方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、光子対の検出を利用して、同時事象のリストによってトレーサー源を局在化することであって、シンチレーターからの出力を受け取り、それを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、局在化することと、を含み、対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。いくつかの実施形態では、対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約２５０〜約５５０個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約２００〜約６００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。いくつかの実施形態では、対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約１５０〜約６００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。
【０３８２】
いくつかの実施形態では、対象内のＣＤ８分布を分析する方法が提供される。方法は、第１のＰＥＴ画像により、検出可能なマーカーの分布の画像を提供することを含む。検出可能なマーカーは、ＣＤ８ミニボディに結合されている。ＣＤ８ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、また、ＣＤ８ミニボディは対象に免疫応答を引き起こさない。方法は更に、対象の第２のＰＥＴ画像によりＦＤＧマーカー（例えば、フルデオキシグルコース（１８Ｆ））の分布の画像を与えることと、第１のＰＥＴ画像の第２のＰＥＴ画像上へのオーバーレイを含む第３のＰＥＴ画像を生成することと、第３のＰＥＴ画像に基づいて腫瘍をＴＩＬとして特定することと、を含む。
【０３８３】
いくつかの実施形態では、対象内のＣＤ８分布を分析する方法が提供される。方法は、第１のＰＥＴ画像により、検出可能なマーカーの分布の画像を提供することを含む。検出可能なマーカーは、ＣＤ８ミニボディに結合されている。ＣＤ８ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、また、ＣＤ８ミニボディは対象に免疫応答を引き起さない。方法は、対象の第２のＰＥＴ画像により、ＦＤＧマーカー（例えば、フルデオキシグルコース（１８Ｆ））の分布の画像を提供することを含む。第１及び第２のＰＥＴ画像の画像に基づいて腫瘍の状態を特定する。
【０３８４】
いくつかの実施形態では、ＭＲＩ及び／またはＣＴスキャンを行って腫瘍の位置を特定することができる。これは、本明細書で提供される方法のいずれについても行うことができる。次に、本明細書で提供される他の方法を用いて腫瘍または新生物の活性状態及びそのＴＩＬ状態を判定することができる。
【０３８５】
イメージング−二重投与／二重イメージングのオプション
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトが８９Ｚｒに結合されている、投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の約３６時間以内に８９Ｚｒの分布について対象にＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することを含む。
【０３８６】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象のＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、を含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、を含み、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは８９Ｚｒに結合されている。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトが８９Ｚｒに結合されている、投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の約３６時間以内に対象にＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。
【０３８８】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は、対象に１８Ｆを投与することと、約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行うことと、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトが８９Ｚｒに結合されている、投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の約３６時間以内に８９Ｚｒの分布について対象にＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。
【０３８９】
ヒト対象に標識を投与する方法のいくつかの実施形態では、約２時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行う。
【０３９０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は更に、１８Ｆの分布を８９Ｚｒの分布と比較して、互いに重複する１８Ｆまたは８９Ｚｒの分布が高くなっている対象の領域があるかどうかを判定することを含み、１８Ｆが高くなっている領域は、同じ領域で重複して８９Ｚｒも高くなっている場合にはＴＩＬ陽性である腫瘍を示し、同じ領域で重複して高くなっている８９Ｚｒがない場合にはＴＩＬ陰性として判定される。
【０３９１】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は更に、１８Ｆの分布を８９Ｚｒの分布と比較することを含む。いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は更に、１８Ｆの分布を８９Ｚｒの分布と比較して、互いに重複する１８Ｆまたは８９Ｚｒの分布が高くなっている対象の領域があるかどうかを判定することを含む。
【０３９２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は更に、１８Ｆの分布を８９Ｚｒの分布と比較して、互いに重複する１８Ｆまたは８９Ｚｒの分布が高くなっている対象の領域があるかどうかを判定することを含み、１８Ｆが高くなっている領域について、同じ領域で重複して８９Ｚｒも高くなっている場合にはその領域はＴＩＬ陽性の腫瘍を示す。
【０３９３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象に標識を投与する方法は更に、１８Ｆの分布を８９Ｚｒの分布と比較して、互いに重複する１８Ｆまたは８９Ｚｒの分布が高くなっている対象の領域があるかどうかを判定することを含み、１８Ｆが高くなっている領域について、同じ領域で重複して８９Ｚｒも高くなっている場合にはその領域はＴＩＬ陽性の腫瘍を示し、１８Ｆが高くなっている領域について、同じ領域で重複して高くなっている８９Ｚｒがない場合にはその領域はＴＩＬ陰性と判定される。
【０３９４】
ヒト対象に標識を投与する方法のいくつかの実施形態では、１８Ｆを投与することとＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することとの間の時間の長さは、１０日間以内である。ヒト対象に標識を投与する方法のいくつかの実施形態では、１８Ｆを投与することとＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することとの間の時間の長さは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０日間、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値である。
【０３９５】
いくつかの実施形態では、ヒト対象の画像を準備する方法が提供される。いくつかの実施形態では、方法は、ＭＲＩまたはＦＤＧ−ＰＥＴスキャンの表現を含む第１のデータセットを提供することであって、ＭＲＩまたはＦＤＧ−ＰＥＴスキャンは少なくとも１つの腫瘍を示す、提供することと、８９Ｚｒ−ＣＤ８抗原結合コンストラクトのＰＥＴスキャンの表現を含む第２のデータセットを提供することであって、第２のデータセットは少なくとも１つのＣＤ８の関心領域（「ＲＯＩ」）を示す、提供することと、２つのデータセットから合成画像を生成することと、を含み、合成画像は、少なくとも１つの腫瘍と少なくとも１つのＣＤ８のＲＯＩとの比較を提供する。
【０３９６】
いくつかの実施形態では、対象内のＣＤ８分布を分析する方法は、第１のＰＥＴ画像により検出可能なマーカーの分布の画像を提供することであって、検出可能なマーカーはＣＤ８抗原結合コンストラクトに結合されている、提供することと、対象の第２のＰＥＴ画像によりＦＤＧマーカーの分布の画像を提供することと、第１のＰＥＴ画像の第２のＰＥＴ画像上へのオーバーレイを含む第３のＰＥＴ画像を生成することと、第３のＰＥＴ画像に基づいて腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、を含む。
【０３９７】
対象内のＣＤ８分布を分析する方法のいくつかの実施形態では、ＦＤＧマーカーは、１８Ｆである。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンして少なくとも１つの腫瘍を特定することと、ヒト対象内の８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についてスキャンして対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、少なくとも１つの腫瘍の位置が対象内の８９Ｚｒのいずれか１つ以上の高まっている濃度と重複している場合に腫瘍を炎症型として特定することと、を含む。いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンすることを含む。
【０３９９】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンすることを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンして少なくとも１つの腫瘍を特定することを含む。
【０４００】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンして少なくとも１つの腫瘍を特定することと、ヒト対象内の８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についてスキャニングすることと、を含む。
【０４０１】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンして少なくとも１つの腫瘍を特定することと、ヒト対象内の８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についてスキャンして対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、を含む。
【０４０２】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンして少なくとも１つの腫瘍を特定することと、ヒト対象内の８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についてスキャンして対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、少なくとも１つの腫瘍の位置が対象内の８９Ｚｒのいずれか１つ以上の高まっている濃度と重複している場合に腫瘍を炎症型として特定することと、を含む。腫瘍特性を特定するための方法のいくつかの実施形態では、８９Ｚｒの１つ以上の高まっている濃度は、腫瘍増殖の少なくとも１つの領域ではない位置に対して高くなっている。腫瘍特性を特定するための方法のいくつかの実施形態では、８９Ｚｒの１つ以上の高まっている濃度は、腫瘍増殖の少なくとも１つの領域ではないが、腫瘍を含む同じ臓器内である位置に対して高くなっている。
【０４０３】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、８９Ｚｒの高まっている濃度と腫瘍の位置に重複がない場合に腫瘍をＩＯＴで治療することを更に含む。
【０４０４】
腫瘍特性を特定するための方法のいくつかの実施形態では、少なくとも１つの腫瘍の位置が、対象内の８９Ｚｒの少なくとも１つの高まっている濃度と重複しない場合、対象に候補治療薬を投与して腫瘍の状態を免疫排除型または免疫砂漠型から浸潤型へと変化させる。いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は更に、ヒト対象内の８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布についてスキャンすることを繰り返して対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度の位置が候補治療薬によって変化したかどうかを特定することと、少なくとも１つの腫瘍の位置が８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布からの対象内の８９Ｚｒのいずれか１つ以上の高まっている濃度と重複している場合に腫瘍を炎症型として特定することと、を含む。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内の１８Ｆの分布を特定して腫瘍の表現を描写することと、８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内のＣＤ８分布の表現において対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、腫瘍の表現をＣＤ８分布の表現と比較して２つの表現の重複領域を特定することと、を含む。腫瘍位置でかつ８９Ｚｒの濃度が高まっている領域は、炎症状態にあってＩＯＴを必要としない腫瘍を示し、腫瘍が存在するが８９Ｚｒの高まっている濃度は存在しない領域は、炎症状態になく、ＴＩＬ状態を調節するためにＩＯＴを必要とする腫瘍を表す。
【０４０６】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることを含む。
【０４０７】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行うことと、を含む。
【０４０８】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内の１８Ｆの分布を特定することと、を含む。
【０４０９】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内の１８Ｆの分布を特定して腫瘍の表現を描写することと、を含む。
【０４１０】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内の１８Ｆの分布を特定して腫瘍の表現を描写することと、８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に与えることと、を含む。いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内の１８Ｆの分布を特定して腫瘍の表現を描写することと、８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内のＣＤ８分布の表現において対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、を含む。
【０４１１】
いくつかの実施形態では、腫瘍特性を特定するための方法は、１８Ｆを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内の１８Ｆの分布を特定して腫瘍の表現を描写することと、８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に与えることと、対象のＰＥＴスキャンを行って対象内のＣＤ８分布の表現において対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、腫瘍の表現をＣＤ８分布の表現と比較して２つの表現の重複領域を特定することと、を含む。
【０４１２】
腫瘍特性を特定するための方法のいくつかの実施形態では、腫瘍位置でかつ８９Ｚｒの濃度まっている高い領域は、炎症状態にあってＩＯＴを必要としない腫瘍を示し、腫瘍が存在するが８９Ｚｒの高まっている濃度は存在しない領域は、炎症状態になく、ＴＩＬ状態を調節するためにＩＯＴを必要とする腫瘍を表す。腫瘍特性を特定するための方法のいくつかの実施形態では、第１の時点で１８Ｆを対象に投与するか、またはＭＲＩスキャンを行い、第１の時点後の１０日以内に８９Ｚｒを対象に投与する。
【０４１３】
腫瘍特性を特定するための方法のいくつかの実施形態では、第１の時点で、１８Ｆを対象に投与するか、またはＭＲＩスキャンを行い、第１の時点後の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０日以内に、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値で８９Ｚｒを対象に投与する。いくつかの実施形態では、画像のそれぞれは、ディスプレイによってユーザーに提示される。いくつかの実施形態では、画像のうちの１つ以上は、メモリに格納されるかまたはコンピュータ可読媒体上に記録される。いくつかの実施形態では、第１と第２の画像にはそれぞれ異なる色が割り当てられ、それらのシグナル及び／またはシグナル強度の重複、または重複のないことが第３のＰＥＴ画像で容易に可視化される。いくつかの実施形態では、対象内のがんまたは新生物の局所的活動または存在を示すものであれば、ＦＤＧによる第２のＰＥＴイメージングに代わるものとしていずれのイメージングのオプションも用いることができる。
【０４１４】
いくつかの実施形態では、ＦＤＧ画像は、対象内の腫瘍または新生物の領域を提示または画定する。第１のイメージング（ＣＤ８に基づく画像）の重複によって、画定された腫瘍または新生物のＴＩＬの程度または量を決定することができる。したがって、第１の画像の検出可能なマーカー（ＣＤ８）が、腫瘍または新生物として対象内で（ＦＤＧ  ＰＥＴなどによる第２の画像により）画定された領域に存在しない場合、その新生物はＣＤ８砂漠型またはＣＤ８排除型（例えば、存在したとしても極めて少ない数のＣＤ８＋Ｔ細胞が腫瘍内に存在する）として特定することができる。あるいは、第１の画像が、新生物として画定された領域の辺縁部のみにＣＤ８が存在することを示す場合、腫瘍は、ＣＤ８＋Ｔ細胞に関して免疫排除型腫瘍として特定することができる。最後に、第１の画像が、新生物として画定された領域全体にわたってＣＤ８が存在することを示す場合、腫瘍は、ＴＩＬ浸潤型として特定することができる。
【０４１５】
いくつかの実施形態では、ヒト対象内のＣＤ８分布を監視する方法が提供される。方法は、第１のＰＥＴスキャンを提供することであって、第１のＰＥＴスキャンはＣＤ８ミニボディのＰＥＴスキャンを含む、提供することと、第２のＰＥＴスキャンを提供することであって、第２のＰＥＴスキャンはフルオロデオキシグルコース（「ＦＤＧ」）のＰＥＴスキャンを含む、提供することと、第１と第２のＰＥＴスキャンの共局在化がある場合、ＴＩＬ新生物に適した療法で対象を治療することと、第１と第２のＰＥＴスキャンの顕著な共局在化がない場合、免疫排除型腫瘍または免疫砂漠型腫瘍に適した療法で対象を治療することと、を含む。
【０４１６】
いくつかの実施形態では、ＴＩＬ陽性新生物に適した治療は、Ｔ細胞活性を増大させる（例えば、ＰＤ−Ｌ１、ＭＥＫ、ＦＡＰ−ＩＬ２ｖ、ＶＥＧＦ、ＣＥＡ−ＩＬ２ｖ、ＣＳｆ−１Ｒ、Ａ２Ａ、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ３８療法）、またはＴ細胞を再誘導及び関与させる（例えば、ＣＥＡ  ＣＤ３またはＣＤ２０  ＣＤ３療法）ことによって腫瘍を破壊することを狙った戦略を含む免疫療法のうちの少なくとも１つである。腫瘍がＴＩＬ陽性（または同様の用語）として示される場合、これらの療法のいずれかを本明細書で提供される方法のいずれかで用いることができる。いくつかの実施形態では、療法は、標準的な化学療法と並んで、外部からのビーム及び標的化放射線療法を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞を増加または調節することが示されている療法を使用することができる。いくつかの実施形態では、ＣＡＲＴ療法を使用することができる。いくつかの実施形態では、療法は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の存在、活性化、数、または腫瘍病変に対する輸送に影響する任意の治療を含むことができる。これには、化学療法、腫瘍溶解性ウイルス、ワクチン、放射線療法、細胞療法などを挙げることができる。いくつかの実施形態では、腫瘍をＴＩＬ陰性からＴＩＬ陽性に転換しようとする場合、腫瘍がＴＩＬ陰性（例えば、免疫排除型または免疫砂漠型）からＴＩＬ陽性に転換されるまで、異なる療法、量、方法、組み合わせなどを変え続けることができる。
【０４１７】
いくつかの実施形態では、免疫排除型に適した治療は、間質バリアを乗り越えること（例えば、ヒアルロナン）、腫瘍にＴ細胞を動員すること（例えば、ＶＥＧＦ及びＣＸＣＲ４療法）、またはＴ細胞を再誘導及び関与させること（例えば、ＣＥＡ  ＣＤ３またはＣＤ２０  ＣＤ３療法）ことにより、腫瘍の浸潤をもたらすアプローチのうちの１つ以上である。腫瘍が免疫排除型（または同様の用語）として示される場合、これらの療法のいずれかを本明細書で提供される方法のいずれかで用いることができる。いくつかの実施形態では、免疫砂漠型の新生物に適した治療は、抗原産生及び提示を増加させることによって高められたＴ細胞のプライミング、動員、及び再誘導によりＴ細胞免疫を高めること、抗原を生成／放出／送達すること（限定されるものではないが、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＣＤ１９、ＨＤＡＣ、ＥＺＨ２、ＤＮＭＴ、ＨＥＲ２、ＢＲＡＦ、ＥＧＦＲ−ＴＫＩ、ＡＬＫ、ＰＡＲＰ、ＭＥＫ療法を含む）、抗原提示及びＴ細胞プライミングを増加させること（ＣＤ４０療法）、ならびにＴ細胞を再誘導及び関与させること（例えば、ＣＥＡ  ＣＤ３またはＣＤ２０  ＣＤ３療法）の戦略のうちの１つ以上である。腫瘍が免疫砂漠型（または同様の用語）として示される場合、これらの療法のいずれかを本明細書で提供される方法のいずれかで用いることができる。いくつかの実施形態では、免疫排除型とは、抗腫瘍Ｔ細胞が腫瘍部位に集積するが腫瘍微小環境に効率的に浸潤できないこと、Ｔ細胞が腫瘍間質に浸潤できないことにより無効化されていることを意味する。いくつかの実施形態では、免疫砂漠型とは、既存の免疫が存在せず、腫瘍特異的Ｔ細胞が効果的に生成されていないことを意味する。いくつかの実施形態では、ＴＩＬ陽性または「炎症型」とは、Ｔ細胞が腫瘍に浸潤しており、腫瘍部位に既存の免疫が存在していることを意味する。いくつかの実施形態では、ワクチンをこれらの選択肢のいずれか及び／または間葉上皮転換の調節に使用することができる。抗腫瘍Ｔ細胞は腫瘍細胞に集積するが腫瘍微小環境に効率的に浸潤することはできない。Ｔ細胞は腫瘍間質に浸潤できないことにより無効化されている。したがって、律速段階は、腫瘍間質を通じたＴ細胞の浸透である。抗腫瘍Ｔ細胞は腫瘍細胞に集積するが腫瘍微小環境に効率的に浸潤することはできない。Ｔ細胞は腫瘍間質に浸潤できないことにより無効化されている。したがって、律速段階は、腫瘍間質を通じたＴ細胞の浸透である。抗腫瘍Ｔ細胞は腫瘍細胞に集積するが腫瘍微小環境に効率的に浸潤することはできない。Ｔ細胞は腫瘍間質に浸潤できないことにより無効化されている。したがって、律速段階は、腫瘍間質を通じたＴ細胞の浸透である。抗腫瘍Ｔ細胞は腫瘍細胞に集積するが腫瘍微小環境に効率的に浸潤することはできない。Ｔ細胞は腫瘍間質に浸潤できないことにより無効化されている。したがって、律速段階は、腫瘍間質を通じたＴ細胞の浸透である。
【０４１８】
いくつかの実施形態では、腫瘍を特徴付けする方法が提供される。方法は、ヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクト（本明細書で提供されるミニボディなど）をヒト対象に適用することを含み、抗原結合コンストラクトは検出可能なマーカーを含む。方法は更に、検出可能なマーカーの分布を監視することと、検出可能なマーカーの分布に基づく画像を生成することと、ユーザーが腫瘍を特徴付けることができるような形で画像をユーザーに表示することと、を含む。
【０４１９】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供または生成される画像の１つ以上は、メモリに格納するかまたはユーザーに表示するか及び／またはＰＥＴデータから処理するか、または他のＰＥＴデータと組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、画像は非一時的コンピュータ可読媒体に格納される。
【０４２０】
いくつかの実施形態では、複数回、例えば少なくとも２〜３００回のＰＥＴスキャンを行うことができる。いくつかの実施形態では、線量及び／または方法は、対象にがんがなくなるまで０．２５、０．５、１、２、３、４、５、または６か月おきのＰＥＴスキャンを許容する。いくつかの実施形態では、例えば１ｍｉＣ未満（例えば０．７または０．７５）のより低い放射線量は、本明細書で提供される方法のいずれにおいても対象の継続的な監視を許容する。
【０４２１】
いくつかの実施形態では、画像を生成する方法が提供される。方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することを含み、抗原結合コンストラクトは検出可能なマーカーを含む。方法は更に、腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出することと、検出された検出可能なマーカーのそれぞれに正のピクセルを割り当てることと、を含む。方法は更に、割り当てられたそれぞれの正のピクセルの分布に基づいた画像を生成することを含み、画像は非一時的コンピュータ可読媒体に格納される。
【０４２２】
いくつかの実施形態では、陽電子放出断層撮影（「ＰＥＴ」）の方法が提供される。方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーを対象に投与することと、シンチレーターを提供することと、シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出することと、光子対の検出を利用して、同時事象のリストによってトレーサー源を局在化することであって、同時事象は、シンチレーターからの出力を受け取り、それを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、局在化することと、を含む。いくつかの実施形態では、トレーサーは、検出可能なマーカーまたは標識を有するＣＤ８ミニボディを含む。いくつかの実施形態では、対象内の組織または新生物（例えば、厚さ２０ミクロンの切片の）１ｍｍ２当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である。本明細書で提供される他の任意の細胞カウントの範囲もこの方法に適用することができる。
【０４２３】
いくつかの実施形態では、対象をイメージングする方法が提供される。方法は、本明細書で提供される組成物のいずれか１つの第１の用量を投与することと、対象をイメージングして第１の画像を得ることと、本明細書で提供される組成物のいずれか１つの第２の用量を投与することと、対象をイメージングして第２の画像を得ることと、第１の画像と第２の画像とを比較することと、を含む。
【０４２４】
いくつかの実施形態では、比較は、対象の治療応答の評価を助ける。これにより、例えば、対象における特定の薬剤または療法の有効性を測定する際に腫瘍状態の変化（ＴＩＬ陽性または免疫排除型及び／または免疫砂漠型間の）または腫瘍のサイズもしくは数の変化を示すことができる。
【０４２５】
いくつかの実施形態では、比較は、対象に与えられる治療用量を決定するために用いられる。例えば、第１の画像を得た後に第１の可能な用量を対象に投与する。次いで、第２の画像を第１の画像と比較して特定の用量における変化が好ましいか否かを判定することができる。その後、用量を上方または下方に調節し、更なる画像を得ることができる。これを用いることで、例えば、配合、濃度、組み合わせ、投与頻度、代替化合物、更なる賦形剤、投与のタイミング、療法の間に対象に起きている更なる活動を含む治療の任意の可変要素を試験することができる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法を用いて腫瘍の表現型を免疫砂漠型、免疫排除型、及び／またはＴＩＬ陽性（または炎症型）から、またはそれらの間で変えられるかどうかを確認することができる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法を用いて腫瘍の治療における特定の治療化合物の、腫瘍自体を低減または殺滅するうえでの有効性を確認することができる。いくつかの実施形態では、どちらの目的も採用することができる。
【０４２６】
いくつかの実施形態では、治療前ベースラインとなるＣＤ８のＰＥＴスキャンによって、腫瘍病変のＴＩＬ状態についての情報を得ることができる。更に、任意のＣＤ８  Ｔ細胞に作用する治療後、１〜８週間以内に取得された治療後のＣＤ８のＰＥＴスキャンによって、ベースラインと比較したＴＩＬ状態に対する治療の効果を検出することができる。ＴＩＬ状態のそのような機能的変化を、その患者の最終的な治療応答及び臨床転帰と関連付けることができる。したがってＣＤ８  ＰＥＴスキャンは、ＣＴ、ＭＲＩ、またはＦＤＧ  ＰＥＴスキャンによる標準治療のフォローアップイメージングによって現在検出されるよりも大幅に早く転帰を予測することができる。
【０４２７】
いくつかの実施形態では、単一の腫瘍／新生物またはそのクラスターを単純にスキャンするのではなく、対象の全身または関連する部分にプロセスを適用する。より低い放射線の線量及びＣＤ８コンストラクトのより高い有効性を適切な方法と組み合わせることで、可視化を対象の一部分のみに限定する必要がなくなり、代わりに抗原結合コンストラクトを対象にわたってまたは対象の全体に抗原結合コンストラクト（例えば、本明細書で提供されるミニボディ）を分布させるうえで充分なレベル及び適切な形で適用することができる。いくつかの実施形態では、体内の腫瘍の大半がイメージングされた時点で、より完全及び／または効果的な予測、ならびに適切な治療に関する判断を行うことができる。いくつかの実施形態では、少なくとも２つの腫瘍が同時にイメージングされ、例えば、２、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００個以上の腫瘍が１回のＰＥＴまたはスキャニングのセッションでイメージングされる。いくつかの実施形態では、対象の体積の少なくとも１０％が１回のセッションでスキャンされ、例えば、対象の体積の１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５、９６、９７、９８、９９、または１００％が１回のセッションでスキャンされる。これらのセッション、ならびに対象の体積の腫瘍の数及び／または存在について、複数回（例えば、週１回、週２回、月１回、２か月または３か月おき）にわたってスキャンすることができる。
【０４２８】
治療−ＰＥＴ／ＭＲＩ画像の組み合わせ
本明細書で提供されるいくつかの実施形態によれば、ＣＤ８の分布を、それ自体で、または他のイメージング技術と組み合わせて監視することにより、任意の１つの療法が対象においてどの程度効果的に機能しているかを監視することができる。本明細書で提供されるいくつかの実施形態によれば、様々なＣＤ８のイメージング技術を組み合わせることができる。
【０４２９】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとａ）ＭＲＩまたはｂ）ＣＴとの合成画像を提供することであって、合成画像は少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８関心領域（ＲＯＩ）との重複を強調し、少なくとも１つの腫瘍の領域はａ）ＭＲＩデータまたはｂ）ＣＴデータによって画定され、ＣＤ８  ＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される、提供することと、ＰＥＴとａ）ＭＲＩまたはｂ）ＣＴとの合成画像を検討して患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、腫瘍がＴＩＬ陰性である場合にＩＯＴ治療を与えることと、を含む。
【０４３０】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩとの合成画像を提供することを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＣＴとの合成画像を提供することを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩ及び／またはＣＴとの合成画像を与えることを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩとの合成画像を提供することを含み、合成画像は、少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調する。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＣＴとの合成画像を提供することを含み、合成画像は、少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調する。いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩ及び／またはＣＴとの合成画像を提供することを含み、合成画像は、少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調する。
【０４３１】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩ及び／またはＣＴとの合成画像を提供することを含み、合成画像は、少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調し、少なくとも１つの腫瘍の領域はＭＲＩデータによって画定され、ＣＤ８  ＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される。
【０４３２】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩ及び／またはＣＴとの合成画像を提供することを含み、合成画像は、少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調し、少なくとも１つの腫瘍の領域はＣＴデータによって画定され、ＣＤ８  ＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される。
【０４３３】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩ及び／またはＣＴとの合成画像を提供することであって、合成画像は少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調し、少なくとも１つの腫瘍の領域はＭＲＩデータまたはＣＴデータによって画定され、ＣＤ８  ＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される、提供することと、ＰＥＴとＭＲＩとの合成画像を検討して患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、を含む。
【０４３４】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩ及び／またはＣＴとの合成画像を提供することであって、合成画像は少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調し、少なくとも１つの腫瘍の領域はＭＲＩデータまたはＣＴデータによって画定され、ＣＤ８  ＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される、提供することと、ＰＥＴとＣＴとの合成画像を検討して患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、を含む。
【０４３５】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法は、対象のＰＥＴとＭＲＩ及び／またはＣＴとの合成画像を提供することであって、合成画像は少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調し、少なくとも１つの腫瘍の領域はＭＲＩデータまたはＣＴデータによって画定され、ＣＤ８  ＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される、提供することと、ＰＥＴとＭＲＩまたはＣＴとの合成画像を検討して患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、腫瘍がＴＩＬ陰性である場合に患者にＩＯＴ治療を与えることと、を含む。
【０４３６】
治療−特定の腫瘍
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態及び二次腫瘍状態を特定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態に基づいて対象に第１の療法を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与してその後の一次腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態を用いて対象のその後の適切な治療を決定することと、を含む。いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含む。
【０４３７】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含み、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは標識されている。
【０４３８】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することを含み、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている。
【０４３９】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態腫瘍状態を特定することと、を含む。
【０４４０】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態及び二次腫瘍状態を特定することと、を含む。
【０４４１】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態を特定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、を含む。
【０４４２】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態を特定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態に基づいて対象に第１の療法を投与することと、を含む。
【０４４３】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態を特定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態に基づいて対象に第１の療法を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与してその後の一次腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、を含む。
【０４４４】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態を特定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態に基づいて対象に第１の療法を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与してその後の一次腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態を用いて対象のその後の適切な治療を決定することと、を含む。
【０４４５】
いくつかの実施形態では、がんを有するヒト対象を治療する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することであって、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識で標識されている、投与することと、対象の体内の少なくとも一次腫瘍状態及び二次腫瘍状態を特定することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態に基づいて対象に第１の療法を投与することと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与してその後の一次腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、一次腫瘍のＴＩＬ状態を用いて対象のその後の適切な治療を決定することと、を含む。
【０４４６】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、二次腫瘍のＴＩＬ状態も第１の療法の後で判定される。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、二次腫瘍のＴＩＬ状態も第１の療法の後で判定されるが、このＴＩＬ状態は一次腫瘍の治療には用いられない。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、一次腫瘍のＴＩＬ状態は、第１の療法が第１の腫瘍に対して有効であることを示す。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、一次腫瘍のＴＩＬ状態は、第１の療法が第１の腫瘍に対して有効であることを示し、したがって、第１の治療は継続される。
【０４４７】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の療法は二次腫瘍に対しては有効ではない。がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の療法は二次腫瘍に対しては有効ではなく、第１の治療は継続される。
【０４４８】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の療法は一次腫瘍に対しては有効ではない。
【０４４９】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の療法は一次腫瘍に対しては有効ではないが、二次腫瘍に対して有効である。
【０４５０】
がんを有するヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、第１の療法は一次腫瘍に対しては有効ではないが、二次腫瘍に対しては有効であり、方法は、対象に二次療法を投与することを更に含む。
【０４５１】
監視／治療の更なる実施形態
本明細書で提供される実施形態のいずれも、個々に示した１つ以上の要素を、以下の実施形態及び／または代替形態の１つ以上とともに含むか、または以下の実施形態及び／または代替形態の１つ以上で置き換えることができる。
【０４５２】
本明細書で提供される実施形態のいずれにおいても、ＳＵＶ値（ピーク、平均、変化など）の重要性を判定するには、ＳＵＶ値は標準値または参照値と比較される。いくつかの実施形態では、この基準値または参照値は、設定値または規定値とすることができる。いくつかの実施形態では、基準値または参照値はＰＥＴ画像自体であるが、別の位置からのものである。いくつかの実施形態では、基準値または参照値は、ＰＥＴ画像からのものであり、肝臓、脾臓、骨髄（Ｌ３椎骨）、骨格筋（Ｌ５の右傍脊椎筋）及び／または大動脈におけるレベルのうちの１つ以上である。いくつかの実施形態では、これは、腫瘍における変化の大きさに対する、参照領域のうちの１つにおける変化の大きさに関する視覚的な比較である。したがって、本明細書で提供される実施形態のいずれにおいても、検出可能なマーカー（例えば、シグナル、ＣＤ８抗原結合など）の変化を監視することで、肝臓、脾臓、骨髄（Ｌ３椎骨）、骨格筋（Ｌ５の右傍脊椎筋）及び／または大動脈の１つ以上における変化（または変化がないこと）と比較した、腫瘍位置における変化を監視することができる。
【０４５３】
本明細書で提供されるように、これらのＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用すること、方法、及び製剤は、新生物のＣＤ８状態を判定するのに有用となり得る。次に、この情報を様々な方法で用いることで、免疫療法が対象にとって良好に適合したものであるかどうか（例えば、新生物がＴＩＬ陽性か）を判定することができる。あるいは、この情報を対象で様々な療法をスクリーニングするために用いて、特定の免疫療法が、対象がその免疫療法を受ける場合に対象において有効であるかどうか（例えば、新生物が最初は免疫排除型または免疫砂漠型であるが、ＴＩＬ陽性（すなわち、炎症型）に変化するかどうか）を判定することもできる。一般的に言うと、提供される方法のいずれのもの（監視または治療するための、などの）もいずれかの構成に使用することができる。したがって、特定の状況または実施形態におけるある方法の開示は、他の方法（対応する特定の状況または実施形態における）を開示することも意図している。
【０４５４】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８を監視することは、ａ）腫瘍の内部領域または体積と比較して外側辺縁部における結合の増加を示す腫瘍の外側辺縁部における検出可能なマーカーの分布、ｂ）腫瘍の内部領域または体積における（例えば、腫瘍全体にわたった）検出可能なマーカーの分布、またはｃ）腫瘍の位置に顕著に偏っていない、または関連していない検出可能なマーカーの分布（例えば、免疫砂漠）を判定することの関数として行われる。いくつかの実施形態では、ａ）の場合、非免疫療法ベースの療法を対象に与える。ｂ）またはｃ）の場合、免疫療法ベースの療法を対象に与える。このタイプのアプローチは、すべての状況で免疫療法の使用を必要とするわけではなく、免疫療法がその対象に適切であるかどうかを判定することを可能とする。他の実施形態では、特定の免疫療法が、選択肢ｂ）またはｃ）（免疫療法が機能していない状況）を選択肢ａ）（対象に対して免疫療法が機能している）に転換するうえでどの程度奏功しているかを判定するためにＣＤ８を監視することができる。
【０４５５】
いくつかの実施形態では、ａ）は、腫瘍の最外周部にマーカーが少なくとも１％多く存在するものとして定義され、腫瘍の最外周部は、腫瘍の画像の面積の（例えば）１、２、４、５、６、７、８、９、または１０％以下である。いくつかの実施形態では、これは画像上の面積あたりの計数密度として求められる。
【０４５６】
いくつかの実施形態では、様々な分布パターン間のあらゆる相対的な差も、腫瘍のタイプを特徴付ける際に考慮することができる。いくつかの実施形態では、ａ）は、他の状況に対して１つの状況で少なくとも１つの１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％の増加が存在している（例えば、外周に偏っている、と、全体的に一様である、と、存在しない）。いくつかの実施形態では、ａ）における増加は、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０倍、またはそれ以上である。いくつかの実施形態では、ｂ）は、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％の増加である。いくつかの実施形態では、ｂ）における増加は、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０倍、またはそれ以上である。ｂ）における増加は、新生物を取り囲む外側または非新生物組織と比較して新生物の内側のマーカーまたはマーカーからのシグナルの増加であり得る。いくつかの実施形態では、比較は、既知のコントロール、すなわち例えば、腫瘍がないことが分かっているコントロールに対する腫瘍面積の比較であってよい。いくつかの実施形態では、比較は、ポジティブコントロールに対して、またはａ）、ｂ）、またはｃ）の条件を満たすことが分かっている組織に対して行うこともできる。いくつかの実施形態では、ａ）は、免疫排除型腫瘍に代表的である。いくつかの実施形態では、ｂ）は、ＴＩＬ腫瘍（または炎症型）に代表的である。いくつかの実施形態では、ｃ）は、免疫砂漠型腫瘍に代表的である。
【０４５７】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８シグナルはＣＤ８＋Ｔ細胞の数を示し、これは新生物または腫瘍に局在化する場合もしない場合もある。共局在化は、腫瘍または新生物量を特定することを可能とする任意の技術によって判定することができる。いくつかの実施形態では、ＣＤ８分子の分布（または電子ファイル内のそのような情報を表す画像もしくはデータの中のシグナル、またはピクセル）を用いてＣＤ８  Ｔ細胞の分布及び／または腫瘍もしくは新生物がＣＤ８＋及び／または浸潤型であるか否か、またはＣＤ８＋Ｔ細胞を介した腫瘍の浸潤度もしくは腫瘍の浸潤の変化が判定される。
【０４５８】
いくつかの実施形態では、ｂ）は、内側領域と外側領域との間の画像強度の差が１００％以下である状態として定義され、ここで、外側領域は、腫瘍の画像の面積の１０％以下である腫瘍の最外周部として定義される。すなわち、ｂ）は、腫瘍の外側表面と比較して腫瘍内部に比較的少ないまたはわずかな分布が見られることを示す。換言すれば、ＣＤ８を有する細胞は新生物に浸潤することができる。いくつかの実施形態では、浸潤が検出可能である限り、ｂ）が当てはまる。いくつかの実施形態では、ｂ）の程度の変化を監視する（例えば、外周部と内側部分との間の分布が改善しているか（より均一となっているか）または減少しているか（腫瘍内部により少ないＣＤ８が存在するようにより偏っているか））。
【０４５９】
本明細書で提供される実施形態のいずれも、下記表０．１Ａに示されるＰＥＴスキャンプロセスのパラメータのいずれかまたはすべて、または他の任意のパラメータのセットを適宜、用いることができる。
【０４６０】
【表１】
2022501402.tif 000005
【０４６１】
本明細書で提供されるいくつかの実施形態では、シグナルについて相対「強度」が記述される。これを記述する別の選択肢はシグナル分布である。ＴＩＬ陽性の状態では、検出可能なマーカーは腫瘍全体にわたって見出される。すなわち、腫瘍全体にわたってシグナル分布の偏りは比較的小さく、検出可能なマーカーは腫瘍内部に存在している。免疫排除の状態では、抗原結合コンストラクトに対する検出可能なマーカーの分布は腫瘍または新生物の外周部に偏っている。免疫砂漠の状態では、抗原結合コンストラクトに対する検出可能なマーカーは、腫瘍のどの部分でも腫瘍の外側と比較して少なくなるような偏り方をしている。本明細書で提供される実施形態のいずれも、相対強度またはシグナル強度または分布またはシグナル分布に関して記述することができる。更に、「シグナル」または「ピクセル」に関して記述された実施形態は、抗原結合コンストラクト及び／または検出可能なマーカーの実際の位置も開示する点は理解されるべきである。したがって、これらの用語は、本出願の全体を通じて適宜、互換することができる。
【０４６２】
いくつかの実施形態では、外周部と内側領域との間の区別（ａとｂとを区別する）は、既知のＴＩＬ陽性腫瘍と既知のＣＤ８排除型腫瘍とによって定義することができる。いくつかの実施形態では、区別は数値的なものとすることができ、例えば、腫瘍の最も外側の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０％を外周部として定義し、この外側領域によって囲まれた残りの領域を内部領域とすることができる。他の値も適宜用いることができる。いくつかの実施形態では、外周部と内側領域との比または比率（％）を用いることができる。例えば、ＣＤ８のシグナルまたは分布（またはＣＤ８標識またはマーカー）の５０、６０、７０、８０、９０、９５、９６、９７、９８、９９、または１００％が外周部に存在する場合、状況に応じて腫瘍はｂ）（ＴＩＬ）よりも、よりａ）（排除型）となり得る。言うまでもなく、腫瘍内部に顕著なシグナルが存在しない場合、腫瘍は依然、選択肢ｃ）（免疫砂漠型）である。
【０４６３】
いくつかの実施形態では、画像または分析はＰＥＴスキャン及び／またはＣＴ画像の両方とすることができる。すなわち、本明細書で提供される実施形態のいずれにおいても、イメージングに関する限り、「ＰＥＴ」と言う場合には、ＰＥＴ画像と組み合わされたＣＴ画像の更なる追加を含むことも企図される（例えば、融合ＰＥＴ／ＣＴ画像またはスキャンプロセスまたは結果）。したがって、いくつかの実施形態では、スキャンまたはスキャニングプロセスまたは同様のものについて言及した本明細書で提供される方法は、ＰＥＴスキャンまたはＰＥＴ及びＣＴスキャンを含み得る。様々な実施形態において、ＣＴスキャンは、特定の臓器に関してより良好な情報を可能とする。
【０４６４】
いくつかの実施形態では、療法の有効性を監視する場合、腫瘍の状態及び腫瘍の状態の変化を監視することができる（例えば、ＴＩＬ陽性、免疫排除型（外周部のみ）または免疫砂漠型（腫瘍に付随するＴ細胞がまったくない））。いくつかの実施形態では、各カテゴリー内での変化、例えば、腫瘍がＴＩＬまたは免疫排除型のどちらに近くなっているかを観察する。いくつかの実施形態では、あらゆるプラスの変化（ＴＩＬに向かう）は、療法がそのような移行について奏功していることを示す。いくつかの実施形態では、変化は、少なくとも５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％である。いくつかの実施形態では、変化は少なくとも２、３、４、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００倍である。いくつかの実施形態では、あらゆるマイナスの変化（ＴＩＬから遠ざかる、または免疫排除型に近づく）は、療法が奏功していないことを示す。いくつかの実施形態では、変化は、少なくとも５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％である。いくつかの実施形態では、変化は少なくとも２、３、４、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００倍である。
【０４６５】
いくつかの実施形態では、監視することは、投与の６時間以内に行われる。いくつかの実施形態では、監視することは、投与の８時間以内に行われる。いくつかの実施形態では、監視することは、投与の１〜４８時間に行われる。例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、または４８時間であり、上記の値のうちの任意の２つの間で定義される任意の範囲を含む。理解されるように、より早期の監視（例えば、投与と同時を含む、５時間よりも前）を、ネガティブコントロールを得るため、または前の投与から残留している標識またはマーカーがあるかどうかを判定するために行うことができる。一般的に、６〜３６時間が、対象とする組織全体にマーカーが分布するのに適正な時間の量を提供する。
【０４６６】
いくつかの実施形態では、１回より多い、例えば、２、３、４、５、６、７回またはそれ以上の監視ステップを行うことができる。いくつかの実施形態では、監視、または第２の監視は、投与の３６時間前に行われる。同様のことを、監視ステップの他の繰り返しに適用することができる。いくつかの実施形態では、その後の監視ステップは、抗原結合コンストラクトの再投与を含む。
【０４６７】
いくつかの実施形態では、複数の抗原結合コンストラクトを同時に適用することができる。いくつかの実施形態では、対象にＦＤＧ及び／または１８Ｆなどの他の診断薬を投与してもよく、腫瘍をイメージングし、及び／またはＣＤ８データと共局在化させることができる。いくつかの実施形態では、腫瘍または新生物をイメージングまたは可視化するための任意の選択肢を、ＣＤ８と腫瘍に共局在化させることができるように、ＣＤ８イメージングの現在のアプローチと組み合わせることができる。
【０４６８】
本明細書で提供される監視及び／または治療の方法のすべては、対象の観点からも企図され、人称を代えることができる。したがって、本明細書で提供される実施形態のいずれも、例えば、与える、または投与する、のではなく、受ける、といったように対象の観点から言い換えることができる。したがって、いくつかの実施形態では、対象は最初に監視プロセスを受けて、監視プロセスを経た後、特定の腫瘍タイプに基づいて適切な療法を受ける。同様に、いくつかの実施形態では、対象は、最初に第１の試験治療薬を投与され、第１の治療薬の有効性を監視して更なる第１の治療薬を投与されるべき（そして実際に投与する）かまたは代替的な治療薬を投与されるべきかを判定する。
【０４６９】
いくつかの実施形態では、監視することは、第１のＰＥＴスキャンを提供することによって達成される。いくつかの実施形態では、第１または第２のまたはその後の監視することは、ＣＴスキャンなどの代替的なスキャンによって達成される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを監視することを可能とするあらゆるスキャニングシステムまたは方法を使用することができる。いくつかの実施形態では、これを、腫瘍または新生物の位置及び形状を監視または判定することを可能とするあらゆるスキャンニングシステムまたは方法と、２つのシステムからの結果を組み合わせることで共局在化があるかどうかを判定することを可能とするものである限り、組み合わせることができる。
【０４７０】
いくつかの実施形態では、監視することは更に、第２のＰＥＴフルオロデオキシグルコース（「ＦＤＧ」）ＰＥＴスキャンを提供することを含む。いくつかの実施形態では、腫瘍のイメージングを可能とするあらゆるスキャンを用いることができる。
【０４７１】
いくつかの実施形態では、第１のスキャンと第２のスキャンとを比較することで新生物中にＣＤ８の共局在化があるかどうかを判定することができる。いくつかの実施形態では、第１のスキャンと第２のスキャンとを比較することで対象に投与された療法が対象の健康状態を改善しているか、または腫瘍の免疫状態を変化させているか（例えば、免疫排除型からＴＩＬ陽性に）を判定することができる。
【０４７２】
いくつかの実施形態では、新生物は、既知の腫瘍である。いくつかの実施形態では、既知の腫瘍は、本明細書で提供されるがんのタイプのいずれか１つ以上から選択される。
【０４７３】
いくつかの実施形態では、治療は、ａ）特定された腫瘍の状態に従って腫瘍を直接治療すること（例えば、ＴＩＬ陽性腫瘍に対するＴＩＬ陽性に適した療法または免疫砂漠型腫瘍に対する免疫砂漠型に適した療法）、またはｂ）免疫砂漠型腫瘍を免疫排除型またはＴＩＬ陽性腫瘍に転換する（その時点で適切な療法が与えられる）ための、または免疫排除型をＴＩＬ陽性腫瘍に転換する（その時点で対象にＴＩＬ療法を投与することができる）ための進行中の治療（監視を行いながら時間とともに変更することができる）を含む。本明細書で提供される療法のいずれかを、特定の腫瘍状態に対して適宜投与することができる。
【０４７４】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８の分布の決定は、ＰＥＴによって観察されるＣＤ８陽性細胞の密度を決定することを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ８の決定は、ＰＥＴにより、対象内のＣＤ８陽性Ｔ細胞をイメージングすることによって行われる。
【０４７５】
いくつかの実施形態では、対象を治療する方法が提供される。方法は、新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合するヒトミニボディを投与することと、ヒトミニボディの分布を監視して新生物内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、新生物の少なくとも第１のＴＩＬ状態（例えば、免疫砂漠型、免疫排除型、またはＴＩＬ陽性であるか）に基づいて患者を治療することと、を含む。
【０４７６】
いくつかの実施形態では、対象は、第１のＴＩＬ状態判定と第２のＴＩＬ状態判定との間である療法を受けている。次いで、ＴＩＬ状態に対するこの療法の有効性を判定することができる。療法は、第１のラウンド中、または第２のＴＩＬ状態判定後のいずれかに変えることで、その対象に対して療法をどのように改善し、かつ／またはカスタマイズできるかを試すこともできる。このプロセスにより、例えば、投薬のタイミング、投薬量、異なる療法の組み合わせ、腫瘍の状態に基づく療法の変更（例えば、免疫砂漠型の腫瘍であった場合のＴＩＬ状態に対する）を含む、任意の可変要素を変更及び監視することができる。いくつかの実施形態では、療法が機能しない、または所望通りに機能しない場合、第１の療法を中止し、その後、第２の異なる療法を投与する。いくつかの実施形態では、第１の療法を中止しないが、第２の及び／または更なる数の療法を加える。したがって、この方法は、ある療法の有効性を監視し、第１の療法が奏功していない場合により良好な療法を選択することを可能とする（直接的治療として、または免疫排除型及び／または免疫砂漠型の腫瘍または新生物をＴＩＬ陽性の腫瘍または新生物に転換する選択肢として）。
【０４７７】
疑似進行
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される一部の方法の別の利点は、臨床医が腫瘍進行を疑似進行から区別することを可能とすることである。抗腫瘍免疫応答の性質は、腫瘍の増殖または新たな病変の出現のいずれかとして、見かけ上の疾患の進行を作り出す場合がある。（１）これは、疑似進行（Ｐｓｅｕｄｏ−ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ）として知られる。疑似進行は腫瘍細胞の増殖を反映していないが、疾患の進行として誤って分類されるおそれがある。（１）実際には、疑似進行は、免疫療法などの治療剤によって誘導され得る抗腫瘍免疫の獲得を反映している。免疫細胞が腫瘍部位に浸潤する際、腫瘍が増殖しているように見える場合があり、または新たな病変が出現する場合がある。（１）適応免疫応答を開始するのに必要とされる時間のため、疑似進行は、充分な応答が生じるまでの間、引き続き腫瘍増殖を反映する場合もある。（１、３）疑似進行を疾患の進行から区別することは困難な場合がある。（１）組織学的確認は常に可能というわけではない。本明細書で提供されるいくつかの実施形態は、疑似進行を識別して区別するための便宜のよい、迅速な方法を提供する。疑似進行は、新生物のＴＩＬ陰性状態からＴＩＬ陽性状態への変化が観察され、同時に新生物の総体積が継続的な成長を示すことにより識別される。進行を疑似進行として安全に分類することができる場合、患者は、既存の治療計画を変えずに継続することが理想である。（１．Ｗｏｌｃｈｏｋ  ＪＤ，Ｈｏｏｓ  Ａ，Ｏ’Ｄａｙ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ：Ｉｍｍｕｎｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ．Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００９；１５：７４１２−７４２０．２．Ｃｈｉｏｕ  ＶＬ，Ｂｕｒｏｔｔｏ  Ｍ．Ｐｓｅｕｄｏｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｅ−Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２０１５；３３：３５４１−３５４３．  ３．Ｈａｌｅｓ  ＲＫ，Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ  Ｊ，Ｒｉｂａｓ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．Ａｓｓｅｓｓｉｎｇ  ｏｎｃｏｌｏｇｉｃ  ｂｅｎｅｆｉｔ  ｉｎ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｇｅｎｔｓ．Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ．２０１０；２１：１９４４−１９５１．）
【０４７８】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、サイズが候補治療薬の後に増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することを含む。
【０４７９】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、を含む。
【０４８０】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、サイズが候補治療薬の後に増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含む。
【０４８１】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、サイズが候補治療薬の後に増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大がある場合、腫瘍の進行を示す。
【０４８２】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、サイズが候補治療薬の後に増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大がある場合、腫瘍の疑似進行を示す。
【０４８３】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、サイズが候補治療薬の後に増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大がある場合、腫瘍の進行を示し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。
【０４８４】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、サイズが候補治療薬の後に増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大がある場合、腫瘍の疑似進行を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続する。
【０４８５】
いくつかの実施形態では、ヒト対象を治療する方法は、ヒト対象に候補治療薬を投与することと、ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、サイズが候補治療薬の後に増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。ヒト対象を治療する方法のいくつかの実施形態では、患者は疑似進行を有することが疑われる者として最初に特定される。
【０４８６】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、次いで対象に候補免疫療法を投与することと、次いで対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出することと、を含み、ＣＤ８の結合の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の結合の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。
【０４８７】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０４８８】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することを含む。
【０４８９】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布を検出することと、を含む。
【０４９０】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、第１のＲＯＩを検出することと、を含む。
【０４９１】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、次いで対象に候補免疫療法を投与することと、を含む。
【０４９２】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、次いで対象に候補免疫療法を投与することと、次いで対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出することと、を含み、ＣＤ８の結合の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の結合の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。
【０４９３】
いくつかの実施形態では、ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法は、ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、次いで対象に候補免疫療法を投与することと、次いで対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出することと、を含み、ＣＤ８の結合の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の結合の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。
【０４９４】
いくつかの実施形態では、腫瘍を有するヒト対象を治療する方法であって、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、対象に候補免疫療法を投与して、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出することと、を含み、第１のＲＯＩに対する第２のＲＯＩの面積（対象に対する）が同じかまたはより大きく、かつＣＤ８浸潤の増加を示す場合、候補免疫療法の投与を継続し、または第１のＲＯＩに対する第２のＲＯＩの面積（対象に対する）が同じかまたはより大きく、かつＣＤ８浸潤の増加を示さない場合、候補免疫療法の投与を中断することと、を含む方法が提供される。
【０４９５】
いくつかの実施形態では、第１のＴＩＬ状態は、ヒトミニボディが腫瘍の体積の全体にわたって結合する状態であり、第２のＴＩＬ状態は、ヒトミニボディが腫瘍辺縁部に選択的に結合する状態であり、対象が第２のＴＩＬ状態（例えば、免疫排除型、または他の実施形態では免疫砂漠型）を有する場合、特定の療法または免疫療法が対象に適用される。いくつかの実施形態では、対象が第１のＴＩＬ状態を有している場合、対象の身体は既に腫瘍を標的化しているので免疫療法を対象に適用しない。いくつかの実施形態では、ＴＩＬ陽性腫瘍を標的化するのに適した療法が使用される。
【０４９６】
いくつかの実施形態では、第１のＴＩＬ状態は、ヒトミニボディがすべての特定された腫瘍の体積全体にわたって結合する場合であり（例えば、炎症型またはＴＩＬ陽性）、第２のＴＩＬ状態は、ヒトミニボディが腫瘍の体積に均一に浸潤することなくいずれかの腫瘍辺縁部に選択的に結合する場合である（例えば、免疫排除型）。「体積全体にわたって結合する」とは、腫瘍が免疫排除型でも免疫砂漠型でもないことを意味する。代わりに、腫瘍は、宿主内で機能できるようなレベルでＴ細胞を侵入させる。これはしばしば、ＴＩＬ陽性または「炎症型」と呼ばれる場合がある。結合が腫瘍の体積全体にわたって生じる状況に対して、結合が「腫瘍辺縁部において」または「主として腫瘍辺縁部において」生じる状況もある。これらは異なる状況である。ＴＩＬ陽性（または炎症型）の状況で、腫瘍辺縁部に一定量の結合が生じることは技術的には正しいが、Ｔ細胞が腫瘍内部に存在していることと概ね同等である。これに対して、何かが「辺縁部に」結合しているとして特徴付けられる場合、これは辺縁部において他の場所よりもより顕著な結合が生じていることを示す。すなわち、これは、腫瘍の辺縁部に局在化の偏りがあることを示している。いくつかの実施形態では、腫瘍は、細胞が腫瘍の体積に均一に浸透することなく、少なくともいくらかの結合が腫瘍辺縁部にある場合、免疫排除型である。
【０４９７】
実施形態では、この状態は、ａ）臨床試験のためにヒト被験者を分類または選択すること、ｂ）治療に対してヒト対象を推奨するかまたはヒト対象の適格性を判定すること、ｃ）療法に対するヒト対象の応答を予測すること、及び／または、ｄ）放射線療法、化学療法、生物療法、及び免疫療法からなる群の少なくとも１つから選択される療法に対する応答を予測すること、のうちの少なくとも１つに用いられる。いくつかの実施形態では、方法は、免疫刺激、チェックポイント阻害剤療法、ウイルスベクター療法（例えば、Ｎｅｋｔａｒ）、ワクチン療法、二重特異性薬剤療法、化学療法、Ｔ細胞枯渇療法（例えば、トリプトファン）、ＩＤＯ療法、ＣＡＲ−Ｔ療法、及び／またはＰＤＬ１阻害療法のうちの１つ以上を含む。
【０４９８】
いくつかの実施形態では、腫瘍のＴＩＬ状態を用いて、臨床医は療法に対する応答を予測及び／または計画することができる。臨床医は、ＴＩＬ状態を用いて放射線療法、化学療法、生物療法（腫瘍標的化治療用生物製剤）、及び免疫療法の中から選択される治療を選択するかまたは推奨することができる。
【０４９９】
前臨床イメージングデータによれば、１ｍｍ２当たり約４００〜１２０００細胞の範囲のＣＤ８＋Ｔ細胞の密度をイメージングすることが可能であることが示されている。患者からの腫瘍試料が１ｍｍ２当たり５８〜７２３０細胞のＣＤ８＋Ｔ細胞密度を含むことが示されており［Ｔｕｍｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４］、これは、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃが、患者体内の当たり４００細胞／ｍｍ２超の様々な細胞密度で腫瘍をイメージングできることを示している。
【０５００】
いくつかの実施形態では、方法または組成物のいずれか１つ以上は、以下の態様のうちの１つ以上を含むことができる（組成物の場合ではそのように含むように構成することができる）。
【０５０１】
放射性医薬の側面に関しては以下を適用することができる。化合物は、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃとすることができる。８９Ｚｒは、陽電子Ｅ平均が３９８ＫｅＶ、Ｅ最大が８９７ＫｅＶであり、１８Ｆとは大きく異なる値である。一部のスキャナーは、画像取得のために８９Ｚｒ同位体を選択するオプションを有しているものがある。他のものは、８９Ｚｒの設定をマニュアル入力することで利することができる。８９Ｚｒイメージングの適切な入力パラメータとしては（あくまで例として）Ｔ１／２＝３．３日（７８．４１時間または４７０５分または２８２，２７６秒）及び／または陽電子存在比０．２２７（２２．７％）が挙げられる。適正な設定値が用いられない場合、ポストイメージング処理アルゴリズムによって回復することのできない画像品質の大きな低下につながる。
【０５０２】
投薬の側面に関しては、３（±２０％）ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（０．２〜１．５ｍｇのタンパク質）を使用することができる（あくまで例として）。用量は各時点にわたって一定とすることができる。フォローアップスキャンでは、放射性トレーサーの用量は、患者の体重に大きな変化がない限り、正味のベースライン用量から±１０％であるべきである。
【０５０３】
モードに関して、２Ｄ、３Ｄリストモード、またはＴＯＦなどの多くのオプションを用いることができる。可能な場合には、取得はリストモードで行うことができる。
【０５０４】
患者の体位に対して、腕を横に置いた仰臥位をはじめとする多くのオプションを用いることができる。ＣＴ及びＰＥＴ取得間で体位を一定に保つ必要がある。
【０５０５】
スキャン位置／カバレッジに関して様々なオプションを考慮することができる。メラノーマの対象の場合、頭蓋頂部から上肢を含む足を用いることができる。メラノーマ以外の対象の場合、頭蓋頂部から膝まで、または対象の一貫したスキャンカバレッジを確実とする対象領域を用いることができる。
【０５０６】
透過スキャンパラメータに関して、あくまで例として、以下を含む様々なオプションが利用可能である。
１４０ｋＶｐ，
ｍＡ：
ｏ １〜２時間の注入後スキャン：低線量ＣＴ（８０ｍＡ）
ｏ ６〜８時間（任意選択）、２４時間、４８時間、９２〜１４４時間の注入後
スキャン：低線量ＣＴ（１０ｍＡ）
・ＣＴ１回転当たり０．８秒
・スライス厚さ＝３〜５ｍｍ
・テーブル速度＝１５ ｍｍ／回転
・ピッチ：１．５：１
【０５０７】
放射スキャンに関して様々なオプションが利用可能である。あくまで例として、以下が適切であり得る： 各ベッド位置につき２〜７分、及び対象の身長に応じて単一のベッド位置が適切な解剖学的カバレッジを提供し得る。
【０５０８】
画像再構成に関して様々なオプションが利用可能である。あくまで例として、以下が適切であり得る：
再構成アルゴリズムは各時点にわたって一貫している必要がある。
定量的反復再構成が好ましい。
正規化、デッドタイム、ランダム事象、散乱、減衰、及び感度についての補正
【０５０９】
いくつかの実施形態では、行列は１２８×１２８またはこれよりも良好なものとすることができる。
【０５１０】
いくつかの実施形態では、以下の視野を用いることができる：減衰補正なし及び／または減衰補正有り
【０５１１】
いくつかの実施形態では、患者はイメージングに先立って膀胱を空にしておく必要がある。
【０５１２】
いくつかの実施形態では、以下も適用することができる：ＤＩＣＯＭ要件。投与の位置は、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの小型のサンプルバイアル（容器）を調製し、これを患者の足首、または計画されたスキャニング視野（大腿または膝）の下部にスキャニングの間に置くことで生物線量測定分析の参照点として機能し得る。サンプルバイアルの目的は、生物線量測定の推定に必要なスキャナーのカウントの較正用の既知量の８９Ｚｒ活性の外部のソースを与えることである。このサンプルバイアルの調製及び保管の例示的な１つの実施は以下のように行う。
１）ツベルクリン注射器を使用した注入後、提供されたバイアルから０．１５ｃｃの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを取り出す。
２）線量校正器に入れ、測定値及び測定時間を記録する。これらの値をデータ送信フォームのコメント欄でＩＥに報告する（補遺ＶＩを参照）。
３）１０ｃｃの注射器中で、５ｃｃの通常の生理食塩水で希釈する。
４）注射器を二重の袋に入れ、漏れないように密封する。
５）各スキャンでサンプルバイアルを患者の足首付近または計画されたスキャニング視野（大腿の中央または大腿より下のイメージングを行わない場合には膝）の下部に置く。
６）各スキャニングの間に適切な遮蔽を施して冷蔵庫の中で保管し、患者の最終スキャン後に廃棄する。
【０５１３】
標的分子の有無を検出する方法
抗原結合コンストラクトを使用してインビボ及び／またはインビトロで標的分子の有無を検出することができる。本明細書で提供されるミニボディのいずれかを含め、抗原結合コンストラクトのいずれかを、本明細書で提供される方法及び／または製剤のいずれにおいても使用することができる。したがって、いくつかの実施形態は、標的の有無を検出する方法を含む。方法は、抗原結合コンストラクトを試料に適用することを含むことができる。方法は、標的分子であるＣＤ８への抗原結合コンストラクトの結合、または結合がないことを検出することを含むことができる。
【０５１４】
図１４は、インビトロでＣＤ８の有無を検出する方法のいくつかの実施形態を示す。図１４に示される各ステップは任意の順番で行うことができ、かつ／または必要に応じて繰り返す及び／または省略することができる点、ならびに更なるステップを必要に応じて方法に追加することができる点は理解されよう。本明細書に記載される抗原結合コンストラクトを試料に適用することができる（１００）。場合により洗浄を行うことができる（１１０）。場合により、２次抗原結合コンストラクトを試料に適用することができる（１２０）。場合により洗浄を行うことができる（１３０）。標的分子への抗原結合コンストラクトの結合、または結合がないことを検出することができる（１４０）。
【０５１５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトはインビボで試料に適用される。抗原結合コンストラクトは対象に投与することができる。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは対象内に注入される。いくつかの実施形態では、注入は静脈内である。いくつかの実施形態では、注入は腹腔内である。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは局所的または局在的（介在的または手術中の適用の場合）に適用される。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトが入ったカプセルが、例えば経口または腹腔内で対象に適用される。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、対象による免疫原性応答を低減するように選択される。例えば、ヒト対象の場合、抗原結合コンストラクトを本明細書に記載されるようにヒト化することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトのインビボでの適用後、試料または試料の一部を宿主から採取することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトを、本明細書に記載されるようにインビボで適用し、インビボで所定の時間インキュベートし、インビトロでの分析用、例えば、本明細書に記載される標的分子に結合した抗原結合コンストラクトまたは結合した抗原結合コンストラクトのないことをインビトロで検出するために試料を採取する。
【０５１６】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトはインビトロで試料に適用される。いくつかの実施形態では、試料は、対象から新しく採取されたもの、例えば生検である。いくつかの実施形態では、試料は対象から採取された後、インキュベートされる。いくつかの実施形態では、試料は固定される。いくつかの実施形態では、試料は臓器及び／または組織全体を含む。いくつかの実施形態では、試料は、１つ以上の全細胞を含む。いくつかの実施形態では、試料は細胞抽出物、例えばライセートからのものである。いくつかの実施形態では、溶液中の抗原結合コンストラクトは試料中の溶液に加えられる。いくつかの実施形態では、溶液中の抗原結合コンストラクトが溶液を含まない試料、例えば凍結乾燥試料に加えられ、これにより試料は溶液で戻される。いくつかの実施形態では、凍結乾燥された抗原結合コンストラクトが溶液を含む試料に加えられ、これにより抗原結合コンストラクトは溶液で再構成される。
【０５１７】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは必要に応じてインビトロ分析用に試料とともにインキュベートされる。抗原結合コンストラクトは、約１０日間以内、例えば約１０日間、９、８、７、６、５、４、３、２、もしくは１日間以内、または約２３時間以内、例えば約２３時間、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、０．７５、０．５、０．２５、もしくは０．１時間以内、または記載された値のうちの任意の２つの間の範囲を含む時間にわたってインキュベートすることができる。いくつかの実施形態では、インキュベーションは抗原結合コンストラクトが投与された対象の体内で行われる。いくつかの実施形態では、インキュベーションはインキュベーターの中で行われる。いくつかの実施形態では、インキュベーターは、固定された温度、例えば約２１℃、室温、２５℃、２９℃、３４℃、３７℃、または４０℃に維持される。
【０５１８】
いくつかの実施形態では、標的に結合されない抗原結合コンストラクトは必要に応じて試料から除去される。いくつかの実施形態では、試料は洗浄される。試料を洗浄することは、結合していない抗原結合コンストラクトを含む溶液を除去し、抗原結合コンストラクトを含んでいない溶液、例えば緩衝溶液を加えることを含むことができる。いくつかの実施形態では、インビトロ試料は、例えば結合していない抗原結合コンストラクトを含む溶液を吸引、ピペッティング、ポンピング、または排液し、抗原結合コンストラクトを含んでいない溶液を加えることによって洗浄される。いくつかの実施形態では、インビボ試料は、例えば、抗原結合コンストラクトを含んでいない溶液を対象に投与するか、または局所の抗原結合コンストラクト投与の部位を洗浄することによって洗浄される。いくつかの実施形態では、洗浄は、少なくとも２回、例えば少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、または２０回行われる。いくつかの実施形態では、１回乃至複数回の洗浄の後、少なくとも約５０％、例えば、少なくとも約５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の未結合抗体が試料から除去される。
【０５１９】
いくつかの実施形態では、未結合の抗原結合コンストラクトは試料から除去される。抗原結合コンストラクトの試料への適用後、標的に結合した抗原結合コンストラクトは、標的に結合していない抗原結合コンストラクトと平衡状態に達するため、抗原結合コンストラクトの適用から一定時間の後には、標的に結合した抗原結合コンストラクトの量が大きく増加することはない。この時間の後、標的に結合していない抗原結合コンストラクトの量の少なくとも一部を除去することができる。いくつかの実施形態では、未結合の抗原結合コンストラクトは、抗体またはフラグメントが投与された対象の代謝または他の体内のプロセスによって除去される。いくつかの実施形態では、未結合の抗原結合コンストラクトは、未結合の抗原結合コンストラクトを破壊または不安定化させる物質、例えば、プロテアーゼまたは中和抗体を加えることによって除去される。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトの投与の１日後には、適用された抗原結合コンストラクトの少なくとも３０％、例えば、少なくとも約３０％、４０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、または９９．９％が除去されている。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトの投与の２日後には、適用された抗原結合コンストラクトの少なくとも４０％、例えば、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％、９９％、または９９．９％が除去されている。
【０５２０】
いくつかの実施形態では、標的であるＣＤ８の有無が検出される。標的の有無は、試料中の抗原結合コンストラクトの有無に基づいて検出することができる。例えば洗浄及び／または代謝による除去による試料からの抗原結合コンストラクトの除去及び／または排出後に試料中に残存する抗原結合コンストラクトは標的の存在を示すことができ、試料中に抗原結合コンストラクトが存在しないことは標的が存在しないことを示すことができる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは腎臓による除去についてバイアスされるように構成される。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは肝臓による除去についてバイアスされるように構成される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｈＩｇＧ２またはＩｇＧ２ヒンジ及び／またはＣＨ３領域の少なくとも一部を含む抗原結合コンストラクトは、肝臓を介して相当の割合が排出されるように構成される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＩｇＧ２ヒンジ及び／またはＣＨ３領域の少なくとも一部を含む抗原結合コンストラクトは、肝臓を介して相当の割合が排出されるが、腎臓を介しては実質的に排出されないように構成される。いくつかの実施形態では、肝臓において除去される抗原結合コンストラクトと腎臓において除去される抗原結合コンストラクトとの比は、少なくとも２：１、例えば約２：１、３：１、３．５：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、２０：１、３０：１、４０：１、５０：１、１００：１、または２００：１であり、記載される値のいずれかの間の範囲を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、腎臓よりも肝臓を介して除去される可能性が高くなる分子量を有するように除去の間、二量体に維持される。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、約６０ｋＤａの腎閾値よりも大きい、例えば、約６５ｋＤａ、７０ｋＤａ、８０ｋＤａ、９０ｋＤａ、１００ｋＤａ、１２０ｋＤａ、１５０ｋＤａ、または２００ｋＤａ、または記載される値のうちの任意の２つの間の範囲を含む原子質量を維持する。
【０５２１】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、本明細書に記載される検出可能なマーカーを含む。したがって、抗原結合コンストラクトの存在を、検出可能なマーカーを検出することによって推測することができる。
【０５２２】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトを検出するために２次抗原結合コンストラクトが用いられる。２次抗原結合コンストラクトは、抗原結合コンストラクトに特異的に結合することができる。例えば、２次抗原結合コンストラクトは、抗体の宿主型に対する、または抗原結合コンストラクト自体に対する、ポリクローナルまたはモノクローナル抗体、ダイアボディ、ミニボディなどを含むことができる。２次抗原結合コンストラクトは、本明細書に記載される検出可能なマーカーと結合させることができる。２次抗原結合コンストラクトは、試料に適用することができる。いくつかの実施形態では、２次抗原結合コンストラクトは、抗原結合コンストラクトとほぼ同じ要領で試料に適用することができる。例えば、抗原結合コンストラクトが対象に注入される場合、２次抗原結合コンストラクトも対象内に注入することができる。
【０５２３】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトの結合または結合がないことは、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）、単一光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）、核磁気共鳴イメージング（ＮＭＲ）、または蛍光放射の検出のうちの少なくとも１つによって検出される。ＰＥＴは、限定されるものではないが、マイクロＰＥＴイメージングを含むことができる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトの結合または結合がないことは、２つ以上のイメージングの形態によって検出される。いくつかの実施形態では、検出は、近赤外線（ＮＩＲ）及び／またはチェレンコフ放射であってよい。
【０５２４】
いくつかの実施形態は、免疫系の診断的イメージングのための、Ｔ細胞のサブセットの表面に見られる特異的バイオマーカーであるヒトＣＤ８の検出を含む。標的分子のイメージングはＴ細胞の局在化のインビボ検出を可能とする。Ｔ細胞の局在化の変化は、免疫応答の進行を反映することができ、様々な治療または更には疾患状態の結果として、時間とともに生じ得る。例えば、Ｔ細胞の局在化をイメージングすることは、免疫療法において有用となり得る。養子免疫療法は、患者自身のＴ細胞をインビトロで操作して患者体内に再び導入する療法の一形態である。この治療の形態では、Ｔ細胞のイメージングは、治療の状態を維持及び／または判定するうえで有用となり得る。したがって、いくつかの実施形態では、標的分子の局在化は、薬剤の開発における作用機序、有効性、及び／または安全性を分析するうえで有用となり得、かつ／または疾患の臨床管理に役立ち得る。
【０５２５】
いくつかの実施形態では、標的に特異的に結合する抗原結合コンストラクトのＣＤＲ（例えば抗体ＯＫＴ８の）が、ミニボディ及びｃｙｓ−ダイアボディの構成に調整されている。マウス抗体のＣＤＲをヒトミニボディとｃｙｓ−ダイアボディのフレームワーク上にグラフトすることによって、キメラ抗体が作製されている。抗体のＶドメインは、通常、内部ジスルフィド結合を形成する２個のシステインを含んでいる。ＯＫＴ８のＶＨは、フレームワーク３（ＦＲ３）内に余分なシステインを１個有しており、このシステインが凝集につながり、その結果小胞体内での保持につながり得ることからタンパク質の発現を妨げ得る。そのため、いくつかの実施形態は、フレームワーク内の余分なシステインを置換するセリンを有するように作製されたミニボディを含む。
【０５２６】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８＋細胞を第１の抗原にターゲティングする方法が提供される。方法は、二重特異性抗原結合コンストラクトを試料に適用することを含むことができる。二重特異性抗原結合コンストラクトは、本明細書に記載されるＣＤＲ抗原結合コンストラクトを含むことができる。二重特異性抗体は、例えば、ミニボディまたはｃｙｓ−ダイアボディの１個、２個、３個、４個、５個、または６個のＣＤＲ、ｓｃＦｖ、または単量体などの、第１の抗原に結合する抗原結合コンストラクトを含むことができる。いくつかの実施形態では、二重特異性抗体は、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトの１個、２個、または３個のＨＣＤＲ及び／または本明細書に記載される抗原結合コンストラクトの１個、２個、または３個のＬＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗原結合コンストラクトは、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトのｓｃＦｖを含むことができる。いくつかの実施形態では、二重特異性抗原結合コンストラクトは、本明細書に記載されるＶＨまたはＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗原結合コンストラクトは、本明細書に記載されるミニボディまたはｃｙｓ−ダイアボディの単量体を含む。いくつかの実施形態では、二重特異性抗原結合コンストラクトは、インビボで、例えば対象の臓器または組織中で試料に適用される。いくつかの実施形態では、二重抗原結合コンストラクトは、インビトロ試料に適用される。いずれか１つの理論に限定されずに言うなら、いくつかの実施形態では、二重特異性抗原結合コンストラクトは、標的陽性細胞上の標的に結合し、かつ、第１の細胞上の第１の抗原（ＣＤ８と異なっていてもよい）に結合することで、標的陽性細胞を第１の細胞に近接させる。例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞をがん細胞と近接させ、そのがん細胞に対する免疫応答を促進することができる。
【０５２７】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ８抗原結合コンストラクトを、ヒトＣＤ８＋Ｔ細胞を特異的にターゲティングする造影剤とすることができる。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ８複合体は、ＣＤ８を発現するＴ細胞の特定のサブクラスに直接結合し、その局在化を検出することができる。いくつかの実施形態では、ＣＤ８に交差結合することができる操作されたフラグメントによって、Ｔ細胞受容体を介したシグナル伝達を増強し、対象がウイルス病原体を排除し、腫瘍抗原及びワクチンに応答する能力を高めることができる。
【０５２８】
いくつかの実施形態では、ミニボディ及びｃｙｓ−ダイアボディのフォーマットは、親抗体の高い結合親和性及び特異性を維持しながら、診断用イメージングにおいて望ましい薬物動態特性を有する。完全長の親抗体を用いたイメージングと比較して、これらのフラグメントはより速やかに排出されるが、迅速な高コントラストイメージングのために抗原をターゲティングすることができる。同じ好ましい薬物動態特性は免疫応答をターゲティングするうえで有利であり、より制御されたＴ細胞刺激を可能とし、過剰刺激の望ましくない作用（例えばサイトカインストーム）を防止することができる。前臨床モデルにおいて、ミニボディ及びｃｙｓ−ダイアボディのより短い血清中半減期は、ミニボディでは注入の約１６〜２０時間後、ｃｙｓ−ダイアボディでは注入の２〜６時間後の最適なイメージングを可能としている。同日イメージングは、患者のケア管理に関して外来診療所における大きな利点を提供し得るものである。
【０５２９】
更に、ｃｙｓ−ダイアボディの抗体フォーマットは、Ｃ末端システインテールを有している。これらの２個のスルフヒドリル基（穏やかな還元後）は、ｃｙｓ−ダイアボディの結合活性を妨げない放射性標識などの機能性部分を部位特異的に結合させるための戦略を提供するものである。
【０５３０】
いくつかの実施形態では、これらの抗原結合コンストラクトは、診断用造影剤とすることができる（ヨウ素１２４、Ｃｕ６４、またはＺｒ８９（ＰＥＴイメージング用）またはフルオロフォア（蛍光イメージング用）などの適切な放射性同位体による標識後）。臨床用造影剤として、これらのＣＤ８抗原結合コンストラクトは、治療を監視するうえで役立ち、患者選択用のツールとして用いることができる。
【０５３１】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトを、ＣＤ８に対する高特異性かつ高親和性の結合が求められる用途で使用することができる。診断用イメージング以外では、これらのフラグメントは、異なる官能基の結合に応じて異なる目的を果たすことができる。
【０５３２】
適切な赤外または蛍光色素を結合させることで、これらのコンストラクトを画像誘導手術におけるターゲティング剤として使用することができる。
【０５３３】
いくつかの実施形態では、フラグメントに結合された官能基への修飾に加えて、二重特異性フラグメント（フラグメントが２つの異なる抗原に結合できる）を使用することにより、ＣＤ８＋細胞を第２の抗原と一体に保持することが可能である。二重特異性の完全長抗体は、がんの免疫療法において免疫系の細胞傷害性細胞を腫瘍細胞に近づけるために用いられている。したがって、そのような実施形態も適切な抗原結合コンストラクトについて企図される。
【０５３４】
いくつかの実施形態では、本明細書において、ヒトＣＤ８αにインビトロ及びインビボの両方で結合し、特異的にターゲティングすることが可能な操作されたｓｃＦＶ、ミニボディ、及びｃｙｓ−ダイアボディ抗体フラグメントが提供される。
【０５３５】
組成物／製剤／キット
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法に適したいずれかの組成物を、記載の方法において用いることができる。いくつかの実施形態では、使用される組成物は、３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−標識ミニボディ、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、１４１〜１９４のアルギニン、及び２〜２０ｍＭのグルタミン酸を少なくとも含む。いくつかの実施形態では、放射線の量は、０．５〜３．６ｍＣｉの間、例えば０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５及び３．６であり、上記の値のうちの任意の２つによって定義される任意の量を含む。いくつかの実施形態では、１０、１５、２０、２５、または３０ｍＭのヒスチジンが存在してよく、上記の値のうちの任意の２つによって定義される任意の量を含む。いくつかの実施形態では、２、３、４、５、６、７、８、９または１０％のスクロース、またはスクロースの代替物を使用することができ、上記の値のうちの任意の２つによって定義される任意の量を含む。いくつかの実施形態では、塩化ナトリウムの量は、４０、４５、５０、５５、６０、６５、または７０ｍＭであってよく、上記の値のうちの任意の２つによって定義される任意の量を含む。いくつかの実施形態では、アルギニンの量は、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、または１６０ ｍＭであってよく、上記の値のうちの任意の２つによって定義される任意の量を含む。いくつかの実施形態では、グルタミン酸の量は、１、２、５、１０、２０、２５、または３０ｍＭであってよく、上記の値のうちの任意の２つによって定義される任意の量を含む。いくつかの実施形態では、放射線の量は、０．５〜１の間であり、例えば、０．７ｍＣｉまたは０．７５ｍＣｉであってよい。いくつかの実施形態では、このような低量の放射線によって、標識されたミニボディの後続の繰り返し投与間の時間をより短くすることができる。
【０５３６】
いくつかの実施形態では、対象の体重１ｋｇ当たり１〜２５０μｇのミニボディまたは抗原結合コンストラクトが使用され、例えば、１、２、３、４、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、または２５０を使用することができ、上記の値のうちの任意の２つによって定義される任意の量を含む。
【０５３７】
いくつかの実施形態では、組成物は、１．２〜１．５ｍｇの標識されたミニボディ（または抗原結合コンストラクト、より高量であってよい）を含む。
【０５３８】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、構造：
【化３】
2022501402.tif 000006
を有する標識されたミニボディを含む。
【０５３９】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、構造：
【化４】
2022501402.tif 000007
を有する標識された抗原結合コンストラクトを含み、式中、ミニボディは、配列番号１、３、または１６の重鎖可変領域（または１４７内の重鎖可変領域）と、配列番号７、９、または１５の軽鎖可変領域（または１４７内の軽鎖可変領域）とを含み、組成物は少なくとも３ｍＣｉの放射線を提供する。
【０５４０】
いくつかの実施形態では、金属キレート剤は、デフェロキサミン（「ＤＦ」）である。いくつかの実施形態では、金属キレート剤はＤＯＴＡである。いくつかの実施形態では、金属キレート剤はＰＣＴＡである。いくつかの実施形態では、金属キレート剤はＤＴＰＡである。いくつかの実施形態では、金属キレート剤はＮＯＤＡＧＡである。いくつかの実施形態では、これら（または他のもの）のいずれかを使用してイソチオシアネート、ＮＨＳ−エステル、ＣＨＸ−Ａ”−ＤＴＰＡ、ＨＢＥＤ、ＮＯＴＡ、ＤＯ２Ｐ、サイクラム、ＴＥＴＡ、ＴＥ２Ｐ、ＳＢＡＤ、ＮＯＴＡＭ、ＤＯＴＡＭ、ＰＣＴＡ、ＮＯ２Ａ、またはマレイミドとしての修飾を有することでタンパク質と結合させることができる。検出可能なマーカーが放射性金属または常磁性イオンである場合、いくつかの実施形態では、マーカーを、これらのイオンを結合するための１つ以上のキレート基が結合された長いテールを有する試薬と反応させることができる。長いテールは、イオンを結合するためのキレート基を結合させることができるペンダント基を有するポリリシン、多糖類、または他の誘導体化された、もしくは誘導体化可能な鎖などのポリマーであってよい。実施形態に従って使用することができるキレート基の例としては、限定されるものではないが、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、ＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＮＯＧＡＤＡ、ＮＥＴＡ、デフェロキサミン（ＤｆＯ）、ポルフィリン、ポリアミン、クラウンエーテル、ビス−チオセミカルバゾン、ポリオキシム、及びこれらに類する基が挙げられる。キレートは、免疫反応性の低下が最小であり、凝集及び／または内部架橋が最小であるように分子との結合を形成することができる基によって抗原結合コンストラクトと結合させることができる。同じキレートは、マンガン、鉄、及びガドリニウムなどの非放射性金属と錯体化される場合に、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトまたは担体と使用される際にＭＲＩで有用である。ＮＯＴＡ、ＮＯＧＡＤＡ、ＤＯＴＡ、及びＴＥＴＡなどの大員環キレートが、限定されるものではないが、それぞれ、ガリウム、イットリウム、及び銅の放射性核種を含む様々な金属及び放射性金属と使用される。ＲＡＩＴ用の２２３Ｒａのような核種を安定的に結合する目的で関心が寄せられている大員環ポリエーテルなどの他の環状キレートも使用することができる。ある特定の実施形態では、キレート部分を用いてＡｌ−１８Ｆ錯体などのＰＥＴ造影剤を標的化分子と結合させてＰＥＴ分析に使用することができる。
【０５４１】
いくつかの実施形態では、ミニボディ（例えば、配列番号１４７）は、図３９に示される重鎖可変領域及び図３９に示される軽鎖可変領域を更に含み、組成物は少なくとも０．７〜１．５〜３ｍＣｉの放射線を提供する。いくつかの実施形態では、図３９に示されるＣＤＲのみが、ミニボディまたは抗原結合コンストラクトに用いられる。
【０５４２】
いくつかの実施形態では、活性マーカー（例えば、検出可能なマーカー）を含む、ＣＤ８に結合する第１のミニボディと、不活性マーカーを含むかまたは活性マーカーを欠く（例えば、検出可能なマーカーが示すような存在またはシグナルを示さない）、ＣＤ８に結合する第２のミニボディとを含む組成物が提供される。
【０５４３】
いくつかの実施形態では、第１のミニボディと第２のミニボディとは組成物中に約１：７の比で存在する。
【０５４４】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、放射性標識に結合された第１のＣＤ８ミニボディと、放射性標識に結合されていない第２のＣＤ８ミニボディとを含む。第１と第２のＣＤ８ミニボディは同じ配列を有してもよく、組成物は約０．７〜１．５〜３ｍＣｉの放射線を提供し、また、組成物は総質量１．５〜１０ｍｇのタンパク質を提供する。
【０５４５】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される組成物のいずれかを本明細書で提供される方法のいずれかで使用することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される態様を提供するように構成されているものであれば、いずれのＣＤ８抗原結合コンストラクトも本方法で使用することができる。
【０５４６】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８ミニボディは、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変領域はヒトアミノ酸配列で本質的に構成され、軽鎖可変領域はヒトアミノ酸配列から本質的に構成される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＣＤ８ミニボディ（または抗原結合コンストラクト）のいずれか１つ以上を使用することができ、ＣＤ８ミニボディ（または抗原結合コンストラクト）は、配列番号２４、図１Ｃ、または図３３、または図３４の配列からなるＣＤ８配列に結合する。
【０５４７】
いくつかの実施形態では、ミニボディ（または抗原結合コンストラクト：配列番号１４７）は、図３９の重鎖ＣＤＲ（例えば、配列番号１４７内の重鎖ＣＤＲ）と図３９の軽鎖ＣＤＲ（例えば、配列番号１４７内の重鎖ＣＤＲ）とを含む。
【０５４８】
いくつかの実施形態では、ミニボディ（または抗原結合コンストラクト）は、図３９の重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１４７内の重鎖ＣＤＲ）と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域と、図３９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号１４７内の重鎖ＣＤＲ）と少なくとも８０％同一である軽鎖可変領域とを含む。
【０５４９】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−標識抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、１４１〜１９４のアルギニン、及び２〜２０ｍＭのグルタミン酸のうちの１つ以上を含むことができる。更なる実施形態では、対象の体重１ｋｇ当たり１〜２５０μｇの抗原結合コンストラクトが存在し、抗原結合コンストラクトはミニボディまたはダイアボディである。いくつかの実施形態では、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは抗原結合コンストラクトに置き換えられる。
【０５５０】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８組成物の製剤（ＣＤ８を検出するための）は、サイズが１０５ｋＤａ未満であるＣＤ８抗原結合コンストラクトと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトに関連付けられた８９Ｚｒ放射性標識であって、製剤に対して０．５よりも高いが３（または３．６）ｍＣｉよりも低い放射線を提供する、８９Ｚｒ放射性標識との１つ以上を含むことができ、製剤はヒトに投与されるように構成される。更なる実施形態では、放射性標識は、０．５ｍＣｉよりも高いが１．０ｍＣｉよりも低い放射線を提供する。更なる実施形態では、放射性標識は、０．７５ｍＣｉよりも低い放射線を提供する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、ミニボディまたはダイアボディである。いくつかの実施形態では、ＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは抗原結合コンストラクトに置き換えられる。
【０５５１】
低い放射線量
いくつかの実施形態では、ＣＤ８組成物の製剤は、サイズが１０５ｋＤａ未満のＣＤ８抗原結合コンストラクトと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトと関連付けられた８９Ｚｒ放射性標識とを含む。放射性標識は、０．５ｍＣｉよりも高いが３ｍＣｉよりも低い製剤の放射線を提供する。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８組成物の製剤は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ８組成物の製剤は、サイズが１０５ｋＤａ未満のＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む。
【０５５２】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８組成物の製剤は、サイズが１０５ｋＤａ未満のＣＤ８抗原結合コンストラクトと、ＣＤ８抗原結合コンストラクトと関連付けられた８９Ｚｒ放射性標識とを含む。
【０５５３】
ＣＤ８組成物の製剤のいくつかの実施形態では、放射性標識は、０．５ｍＣｉよりも高いが１．０ｍＣｉよりも低い放射線を提供する。ＣＤ８組成物の製剤のいくつかの実施形態では、放射性標識は、０．７５ｍＣｉよりも低い放射線を提供する。
【０５５４】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８ミニボディ製剤は、少なくとも１．５ｍｇのＣＤ８ミニボディと、１．５ｍＣｉ以下の８９Ｚｒとを含む。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。
【０５５５】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８ミニボディ製剤は、少なくとも１．５ｍｇのＣＤ８ミニボディと、１．５ｍＣｉ以下の８９Ｚｒとを含み、製剤はヒトに投与されるように構成される。
【０５５６】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８ミニボディ製剤は、少なくとも１．５ｍｇのＣＤ８ミニボディと、１．５ｍＣｉ以下の８９Ｚｒとを含む。
【０５５７】
ホット／コールド
いくつかの実施形態では、組成物は、活性マーカーを有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む第１の部分と、不活性マーカーを有するかまたは活性マーカーを欠くＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む第２の部分とを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、第１の部分と第２の部分とを含む。
【０５５８】
いくつかの実施形態では、組成物は、活性マーカーを有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む第１の部分を含む。
【０５５９】
いくつかの実施形態では、組成物は、不活性マーカーを有するかまたは活性マーカーを欠くＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む第２の部分を含む。いくつかの実施形態では、第１の部分と第２の部分とは、組成物中に約１：１〜約１：５０または約１：７のモル比で存在する。
【０５６０】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、放射性標識に結合された第１のＣＤ８抗原結合コンストラクトと、放射性標識に結合されていない第２のＣＤ８抗原結合コンストラクトとを含む。第１と第２のＣＤ８抗原結合コンストラクトが同じアミノ酸配列を有し、１：１〜１：５０のモル比で存在する。組成物は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍｇの放射線を提供し、組成物は０．１〜１０ｍｇの総マスタンパク質を提供する。いくつかの実施形態では、診断用組成物は、第１のＣＤ８抗原結合コンストラクトと、第２のＣＤ８抗原結合コンストラクトとを含む。いくつかの実施形態では、診断用組成物は、放射性標識に結合された第１のＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む。
【０５６１】
いくつかの実施形態では、診断用組成物は、放射性標識に結合されていない第２の抗原結合コンストラクトを含む。
【０５６２】
診断用組成物のいくつかの実施形態では、総質量のタンパク質は０．５〜１０ｍｇである。
【０５６３】
いくつかの実施形態では、診断用組成物を製造する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトをデスフェリオキサミンと結合させてＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、ＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、放射性標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを放射性標識されていない（非放射性（コールド））ＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトと混合して診断用組成物を形成することと、を含む。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。
【０５６４】
いくつかの実施形態では、診断用組成物を製造する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトをデスフェリオキサミンと結合させてＤｆ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することを含む。
【０５６５】
いくつかの実施形態では、診断用組成物を製造する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトをデスフェリオキサミンと結合させてＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、ＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、を含む。
【０５６６】
いくつかの実施形態では、診断用組成物を製造する方法は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトをデスフェリオキサミンと結合させてＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、ＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、放射性標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを放射性標識されていない（非放射性（コールド））ＤＦ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトと混合して診断用組成物を形成することと、を含む。
【０５６７】
製剤／アルギニン
いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、アルギニン、及び２〜２０Ｍのグルタミン酸を含む。組成物は、診断薬としてヒト対象に投与されるように構成される。いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む。
【０５６８】
いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクト、及び２０ｍＭのヒスチジンを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、及び５％スクロースを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、及び５１〜５２ｍＭの塩化ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜５２ｍＭの塩化ナトリウム、及びアルギニンを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、アルギニン、及び２〜２０Ｍのグルタミン酸を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトと、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、アルギニン、及び２〜２０Ｍのグルタミン酸のうちの１つ以上と、を含む。いくつかの実施形態では、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトはミニボディであり、組成物は、対象の体重１ｋｇ当たり１〜２５０μｇを含む。
【０５６９】
この組成物のいくつかの実施形態では、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトはミニボディであり、組成物は、対象の体重１ｋｇ当たり０．５〜５００、０．２５〜７５０、または０．１２５〜１０００μｇを含む。この組成物のいくつかの実施形態では、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトはミニボディであり、組成物は、１．２〜１．５ｍｇのＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む。いくつかの実施形態では、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトはミニボディであり、組成物は、１．１〜１．６、１．０〜１．７、０．９〜１．８、０．８〜１．９、または０．７〜２．０ ｍｇのＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む。
【０５７０】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤は、ＣＤ８抗原結合コンストラクト、及び遊離アルギニンを含む。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤は、抗原結合コンストラクトを含む。
【０５７１】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤は、ＣＤ８抗原結合コンストラクト、及び遊離アルギニンを含む。
【０５７２】
ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤のいくつかの実施形態では、遊離アルギニンは、８０〜２００ｍＭで存在する。ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤のいくつかの実施形態では、遊離アルギニンは、６０〜２５０ｍＭで存在する。ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤のいくつかの実施形態では、遊離アルギニンは、４０〜３００ｍＭで存在する。Ｃｄ８抗原結合コンストラクト製剤のいくつかの実施形態では、遊離アルギニンは、約１０、２０、４０、８０、１２０、１６０、２００、２４０、２８０、または３２０ ｍＭ、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値で存在する。
【０５７３】
抗原結合コンストラクト（抗体と結合フラグメントを含む）
抗原結合コンストラクトは、標的分子に特異的に結合するかまたは標的分子と免疫学的反応性を有する免疫グロブリンまたは免疫グロブリン関連分子の１つ以上の部分を含む分子である。ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトのいずれをも、本明細書で提供される組成物（製剤など）または方法のいずれかにおいて使用することができる。
【０５７４】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、免疫系の診断的イメージングにおける、Ｔ細胞のサブセットの表面に見られる特異的バイオマーカーであるヒトＣＤ８の検出を可能とする。ＣＤ８のイメージングはＴ細胞の局在化のインビボ検出を可能とする。Ｔ細胞の局在化の変化は、免疫応答の進行を反映することができ、様々な治療または更には疾患状態の結果として、時間とともに生じ得る。
【０５７５】
いくつかの実施形態では、これは、免疫療法におけるＴ細胞の局在化をイメージングするうえで有用である。養子免疫療法は、患者自身のＴ細胞をインビトロで操作して患者体内に再び導入する療法の一形態である。この治療の形態では、Ｔ細胞のイメージングは、治療の状態を判定するうえで有用である。
【０５７６】
更に、ＣＤ８は、ウイルス病原体を排除し、腫瘍に対する免疫を与えるように機能する細胞溶解性Ｔ細胞の活性化に重要な下流のシグナル伝達経路の活性化に役割を有している。ＣＤ８陽性Ｔ細胞は、抗原提示細胞のＭＨＣＩタンパク質内に提示される短いペプチドを認識することができる。いくつかの実施形態では、ＣＤ８を標的とする操作されたフラグメントによって、Ｔ細胞受容体を介したシグナル伝達を増強し、対象がウイルス病原体を排除し、腫瘍抗原に応答する能力を高めることができる。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗原結合コンストラクトはアゴニストであってよく、ＣＤ８標的を活性化することができる。いくつかの実施形態では、アゴニストであるｓｃＦｖ、ミニボディ、ｃｙｓ−ダイアボディ、及び／または抗体が提供される。いくつかの実施形態では、アゴニスト抗原結合コンストラクトには、本明細書で提供されるＣＤＲ、重鎖可変領域、または軽鎖可変領域のうちの１つ以上が含まれる。いくつかの実施形態では、アゴニストは、ＣＤ８を介して下流のシグナル伝達経路を活性化して、ウイルス病原体を排除し、腫瘍に対する免疫を与えるように機能する細胞溶解性Ｔ細胞を活性化することができる。
【０５７７】
いくつかの状況では、完全長の抗体をイメージングに使用することは、完全長抗体の長い血清中半減期のため、完全長抗体ではイメージング時間を投与の１週間よりも後に予定する必要があるために最適ではない。
【０５７８】
免疫細胞のサブタイプをイメージングするための別の標的ベースのアプローチでは、小分子を用いる。例えば、内因性免疫系の診断用イメージングの１つのアプローチでは、１８Ｆ−フルオロ酢酸（［１８Ｆ］ＦＡＣ）などの細胞の代謝経路における変化を検出する小分子トレーサーが使用されている。こうしたトレーサーは代謝経路の変化を検出することから、主として活性化Ｔ細胞を含む代謝活性の高まっている細胞集団を標的とする。このアプローチの制約は、活性化されたＴ細胞のサブセットのみが検出されることであり、これに対して、抗ＣＤ８抗体フラグメントを用いたイメージングでは、標的が活性化されたＣＤ８細胞と休止状態のＣＤ８細胞の両方で発現されることからＣＤ８発現細胞の集団全体が検出される。いくつかの実施形態では、両方のアプローチを採用することができる。
【０５７９】
いくつかの実施形態では、ミニボディのフォーマットは、ヒトＩｇＧ１のＣＨ３ドメインに結合された一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦＶ）をそれぞれの単量体が有するホモ二量体である（例えば、図１Ａ及び１Ｂを参照）。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、１８個のアミノ酸からなるＧｌｙＳｅｒリッチリンカーによって連結された重鎖可変（ＶＨ）ドメインと軽鎖可変（ＶＬ）ドメインとから構成されている。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、１０個のアミノ酸からなるＧｌｙＳｅｒリンカーがつなげられたヒトＩｇＧ１の上部及びコアヒンジ領域（１５残基）によってヒトＩｇＧ１のＣＨ３ドメインに連結される。ミニボディ（ＶＨ−ＶＬ−ＣＨ３）は、ＣＨ３ドメイン間の会合及びヒンジ領域内のジスルフィド結合の形成のために安定した二量体として存在する。ミニボディを分泌させるには、重鎖可変ドメインのＮ末端にシグナル配列を融合させる。いくつかの実施形態では、ＧｌｙＳｅｒ残基が柔軟性を与える。いくつかの実施形態では、グルタミン及び／またはリシン残基を付加することで可溶性を高めることができる。
【０５８０】
可変領域の方向が異なる（ＶＨからＶＬとＶＬからＶＨ）キメラＩＡＢ−ｈｕＣＤ８ミニボディの２つのバリアントも作製されている。どの抗体Ｖドメインも内部ジスルフィド結合を形成する２個のシステインを含んでいる。ＯＫＴ８のＶＨは、フレームワーク３（ＦＲ３）内に余分なシステインを１個有しており、このシステインが凝集につながり、その結果、小胞体（ＥＲ）内での保持につながり得ることからタンパク質の発現を妨げるおそれがある。キメラミニボディは、フラグメント内の余分なシステインをセリンに置き換えて作製されている（マウスＶＨのＣ８４Ｓ）。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される実施形態のいずれも、Ｃ８４Ｓの調整を含むように調整することができる。表０．１、０．２、及び０．３は、本明細書で提供される様々な抗原結合コンストラクトの構成のコアとなる実施形態の概要を与えるものである。
【０５８１】
【表２】
2022501402.tif 000008
【０５８２】
【表３−１】
2022501402.tif 000009
【表３−２】
2022501402.tif 000010
【０５８３】
【表４】
2022501402.tif 000011
【０５８４】
表０．１、表０．２、及び表０．３（配列番号は、図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）は、ミニボディ（表０．１及び表０．２）及びｃｙｓ−ダイアボディ（表０．３）に使用することができる単量体の配列の構成である。表の各行は、単量体コンストラクトの配列を表し、左から右にＮ末端からＣ末端を表している。いくつかの実施形態では、各単量体コンストラクトの示された配列は互いに直接連結される。したがって、いくつかの実施形態では、コンストラクトは、表０．１、表０．２、及び表０．３の単一の行に示されるコンストラクトのいずれかを含むことができる(配列番号は、図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照)。いくつかの実施形態では、コンストラクトは、表０．１、表０．２、及び表０．３の任意の組み合わせを含むことができる(配列番号は、図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照)。いくつかの実施形態では、例えば、第１行、第２列の第１の要素を、第１行の第３列 から第１行の第４列まで、第１行の第５列まで、第１行の第６列までと組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、第３列と第６列とを互いに入れ替えることができる。いくつかの実施形態では、第１行、第２列の第１の要素を、第１行の第３列から第２行の第４列まで、第２行の第５列まで、第２行の第６列までと組み合わせることができる。したがって、これらの表は、単一の行内で、及び異なる行にわたって（列を入れ替えることで）すべての可能な組み合わせを表す。
【０５８５】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、もしくは１４７のＨＣＤＲ１の重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）、配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２もしくは１４７のＨＣＤＲ２の重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）、配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、もしくは１４７のＨＣＤＲ３の重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）、配列番号９、１５、４２もしくは１４７のＬＣＤＲ１の軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）、配列番号９、１５、４２、もしくは１４７のＬＣＤＲ２の軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）、及び／または配列番号９、１５，４２、もしくは１４７のＬＣＤＲ３の軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４８または１４７のＨＣＤＲ１のＨＣＤＲ１、配列番号４８または１４７のＨＣＤＲ２のＨＣＤＲ２、配列番号４８または１４７のＨＣＤＲ３のＨＣＤＲ３、配列番号４２または１４７のＬＣＤＲ１のＬＣＤＲ１、配列番号４２または１４７のＬＣＤＲ２のＬＣＤＲ２、及び配列番号４２または１４７のＬＣＤＲ３のＬＣＤＲ３を含む（配列番号は、図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０５８６】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、上記のＣＤＲのうちの６個、５個、４個、３個、２個、または１個を含む（ＣＤＲのいくつかの実施形態は、図２Ａ、２Ｂ、１２Ｃ〜１２Ｉ、または図３９に示される）。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、ＨＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、標的分子に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、本明細書で提供されるＣＤＲを有する抗体の１つ以上と結合について競合する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、本明細書に記載される少なくとも３個の重鎖ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、重鎖ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、本明細書で提供される重鎖ＣＤＲ２配列のいずれか１つを更に含む。
【０５８７】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトはヒトの、またはヒト化されたものである。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、少なくとも１つのヒトフレームワーク領域、またはヒトフレームワーク領域と少なくとも約８０％の配列同一性、例えば少なくとも１つの約８０％、８５％、９０％、９３％、９５％、９７％、または９９％の同一性を有するフレームワーク領域を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７のＨＦＲ１の重鎖ＦＲ１（ＨＦＲ１）、配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７のＨＦＲ２の重鎖ＦＲ２（ＨＦＲ２）、配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７のＨＦＲ３の重鎖ＦＲ３（ＨＦＲ３）、配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７のＨＦＲ４の重鎖ＦＲ４（ＨＦＲ４）、配列番号９、１５、４２、または１４７のＬＦＲ１の軽鎖ＦＲ１（ＬＦＲ１）、配列番号９、１５、４２、または１４７のＬＦＲ２の軽鎖ＦＲ２（ＬＦＲ２）、配列番号９、１５、４２、または１４７のＬＦＲ３の軽鎖ＦＲ３（ＬＦＲ３）、及び配列番号９、１５、４２、または１４７のＬＦＲ４の軽鎖ＦＲ４（ＬＦＲ４）を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４８または１４７のＨＦＲ１の重鎖ＦＲ１（ＨＦＲ１）、配列番号４８または１４７のＨＦＲ２の重鎖ＦＲ２（ＨＦＲ２）、配列番号４８または１４７のＨＦＲ３の重鎖ＦＲ３（ＨＦＲ３）、配列番号４８または１４７のＨＦＲ４の重鎖ＦＲ４（ＨＦＲ４）、配列番号４２または１４７のＬＦＲ１の軽鎖ＦＲ１（ＬＦＲ１）、配列番号４２または１４７のＬＦＲ２の軽鎖ＦＲ２（ＬＦＲ２）、配列番号４２または１４７のＬＦＲ３の軽鎖ＦＲ３（ＬＦＲ３）、及び配列番号４２または１４７のＬＦＲ４の軽鎖ＦＲ４（ＬＦＲ４）を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、記載されるＦＲのうちの８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個、または１個を含む（配列番号は、図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０５８８】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、検出可能なマーカーを含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、治療剤を含む。
【０５８９】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、二価である。二価の抗原結合コンストラクトは、少なくとも第１の抗原結合ドメイン、例えば第１のｓｃＦｖ、と、少なくとも第２の抗原結合ドメイン、例えば第２のｓｃＦｖ、とを含むことができる。いくつかの実施形態では、二価の抗原結合コンストラクトは、少なくとも２個の単量体、例えば少なくとも２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個の単量体を含み、そのそれぞれが抗原結合ドメインを有する多量体である。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、ミニボディである。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、例えばｃｙｓ−ダイアボディを含むダイアボディである。ｓｃＦｖ及び／またはミニボディ及び／またはｃｙｓ−ダイアボディは、本明細書で提供されるＣＤＲならびに重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域のいずれも含むことができる（例えば、図２Ａ、２Ｂ、及び１２Ｃ〜１２Ｉに提供されるＣＤＲ配列）。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、一価のｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、図２Ａ、図１２Ｅ〜１２Ｉ、または配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７のＨＣＤＲ１のＨＣＤＲ１、図２Ａ、図１２Ｅ〜１２Ｉ、または配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７のＨＣＤＲ２のＨＣＤＲ２、図２Ａ、図１２Ｅ〜１２Ｉ、または配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７のＨＣＤＲ３のＨＣＤＲ３、図２Ｂ、図１２Ｃ、図１２Ｄ、配列番号９、１５、４２、または１４７のＬＣＤＲ１のＬＣＤＲ１、図２Ｂ、図１２Ｃ、図１２Ｄ、配列番号９、１５、４２、または１４７のＬＣＤＲ２のＬＣＤＲ２、及び図２Ｂ、図１２Ｃ、図１２Ｄ、配列番号９、１５、４２、または１４７のＬＣＤＲ３のＬＣＤＲ３を含む一価のｓｃＦｖが提供される。いくつかの実施形態では、配列番号４８または１４７のＨＣＤＲ１のＨＣＤＲ１、配列番号４８または１４７のＨＣＤＲ２のＨＣＤＲ２、配列番号４８または１４７のＨＣＤＲ３のＨＣＤＲ３、配列番号４２または１４７のＬＣＤＲ１のＬＣＤＲ１、配列番号４２または１４７のＬＣＤＲ２のＬＣＤＲ２、及び配列番号４２または１４７のＬＣＤＲ３のＬＣＤＲ３を含む一価のｓｃＦｖが提供される。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、図１２Ｄに示されるＣｈｏｔｈｉａに従って定義される（配列番号は図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０５９０】
いくつかの実施形態では、一価のｓｃＦｖは、図２Ａ、図４〜１１、図１２Ｃ〜１２Ｉ、または配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７の重鎖可変領域の重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、一価のｓｃＦｖは、図２Ｂ、図４〜１１、図１２Ｃ、図１２Ｄ、配列番号９、１５、４０、４２、または１４７の軽鎖可変領域の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、一価のｓｃＦｖは、図２Ａ、図４〜１１、図１２Ｃ〜１２Ｉ、または配列番号３、６、１６、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７の重鎖可変領域の重鎖可変領域と、図２Ｂ、図４〜１１、図１２Ｃ、図１２Ｄ、配列番号９、１５、４０、４２、または１４７の軽鎖可変領域の軽鎖可変領域とを含む。いくつかの実施形態では、一価のｓｃＦｖは、配列番号４８または１４７の重鎖可変領域の重鎖可変領域と、配列番号４２または１４７の軽鎖可変領域の軽鎖可変領域とを含む（配列番号は図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０５９１】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、二重特異性である。二重特異性抗体は、少なくとも第１の結合ドメイン、例えば第１のエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖと、少なくとも第２の結合ドメイン、例えば第２のエピトープに特異的に結合するｓｃＦｖと、を含むことができる。したがって、二重特異性抗原結合コンストラクトは、２つ以上のエピトープに結合することができる。いくつかの実施形態では、第１のエピトープと第２のエピトープとは同じ抗原の部分であり、したがって二重特異性抗原結合コンストラクトは、同じ抗原の２つのエピトープに結合することができる。いくつかの実施形態では、第１のエピトープは第１の抗原の部分であり、第２のエピトープは第２の抗原の部分であり、したがって二重特異性抗原結合コンストラクトは、２つの異なる抗原に結合することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、２つのエピトープに同時に結合する。
【０５９２】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号３、６、１６、１８、２０、２２、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７の重鎖可変領域の重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号３と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号６と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４４と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４６と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４８と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号５０と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号５２と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域を有する（配列番号は図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号５２と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域を有する。
【０５９３】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号９、１６、１８、２０、２２、４０、または４２を含む軽鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号９と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む軽鎖可変鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４０と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む軽鎖可変鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４２と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む軽鎖可変鎖可変領域を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトはヒトの抗原結合コンストラクトであり、少なくとも上記に示した重鎖及び軽鎖可変領域と少なくとも同程度の同一性を有する重鎖可変領域、軽鎖可変領域、または重鎖及び軽鎖を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、配列番号４８と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む重鎖可変領域と、配列番号４２と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む軽鎖可変鎖可変領域と、を含む（配列番号は図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０５９４】
本明細書で提供されるいくつかの実施形態は、本明細書で提供される１つ以上の抗原結合コンストラクトと、標的分子への結合について競合する抗原結合コンストラクトを含む。いくつかの実施形態では、競合する抗原結合コンストラクトは、参照抗原結合コンストラクトと標的分子上の同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、参照抗原結合コンストラクトは標的分子の第１のエピトープに結合し、競合する抗原結合コンストラクトは標的分子の第２のエピトープに結合するが、競合する抗原結合コンストラクトは例えば、参照抗原結合コンストラクトの結合を立体的に阻害することによって、または標的分子にコンフォメーション変化を誘導することによって、参照抗原結合コンストラクトの標的分子への結合を妨げる。いくつかの実施形態では、第１のエピトープは第２のエピトープと重複する。いくつかの実施形態では、表０．１及び／または表０．２の列３と列５を入れ替えることができる。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖ、ミニボディ、及び／またはダイアボディにおいて本明細書で提供される重鎖可変領域のいずれかを本明細書の軽鎖可変領域のいずれかと組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、表０．１、表０．２、及び表０．３の重鎖及び／または軽鎖可変領域（列３及び列５）のいずれかを互いに、または別の軽鎖または重鎖可変領域と交換することによって抗原結合コンストラクト（ｓｃＦｖ、ｃｙｓ−ダイアボディ、ミニボディ、または抗体など）を作製することができる。
【０５９５】
いくつかの実施形態では、ミニボディ及びｃｙｓ−ダイアボディのフォーマットは、親抗体の高い結合親和性及び特異性を維持しながら、診断用イメージング及びある特定の治療用途において有利な薬物動態特性を有する。完全長の親抗体を用いたイメージングと比較して、これらのフラグメントは抗原をターゲティングした後、系から速やかに除去されて速やかな高コントラストイメージングを可能とする点で、薬物動態はこれらのフラグメントではより望ましいものとなっている。いくつかの実施形態では、ミニボディ及びｃｙｓ−ダイアボディのより短い血清中半減期のため、ミニボディでは注入後、約８〜４８時間、ｃｙｓ−ダイアボディでは注入後、２〜２４時間と、広範囲の時間にわたってイメージングを行うことが可能である。このような速やかな血清クリアランスは良好な組織浸透性と相まって同日イメージングを可能とし、患者のケア管理に関して外来診療所における大きな利点を与えるものである。
【０５９６】
更に、ｃｙｓ−ダイアボディの抗体フォーマットは、Ｃ末端システインテールを特徴とする。これらの２個のスルフヒドリル基（穏やかな還元後）は、ｃｙｓ−ダイアボディの結合活性を妨げる必要のない放射性標識などの機能性部分を部位特異的に結合させるための戦略を与えるものである。
【０５９７】
標的分子に結合するダイアボディ
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトはダイアボディとすることができる。ダイアボディは、第１のポリペプチド鎖上で軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結された重鎖（ＶＨ）可変ドメインを含む第１のポリペプチド鎖を含むことができる。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとはリンカーによって連結することができる。リンカーは、第１のポリペプチド鎖状の２個のドメイン間の対合の可能性を低減する適切な長さのものとすることができ、第２のポリペプチド鎖は、第２のポリペプチド鎖上の重鎖可変ドメインＶＨに連結された軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含み、これらは第２のポリペプチド鎖上の２個のドメイン間の顕著な対合を可能としないような短いリンカーによって連結される。
【０５９８】
いくつかの実施形態では、リンカーの適切な長さによって第１及び第２のポリペプチド鎖の相補的なドメイン間の鎖の対合が促され、２個の機能的抗原結合部位を有する二量体分子の組み立てを促進することができる。したがって、いくつかの実施形態では、ダイアボディは二価である、いくつかの実施形態では、ダイアボディは、システインで連結されたダイアボディである（Ｃｙｓ−Ｄｂ）。２つの抗原に対するＣｙｓ−Ｄｂの結合の概略を図３Ａ及び３Ｂに示す。
【０５９９】
いくつかの実施形態では、リンカーはペプチドであってよい。いくつかの実施形態では、リンカーは、そのような組み立てを促進する任意の適切な長さ、例えば、アミノ酸１〜２０個、例えば５〜１０個のアミノ酸長であってよい。本明細書に更に記載されるように、一部のｃｙｓ−ダイアボディは、５〜８個のアミノ酸長のペプチドリンカーを含むことができる。いくつかの実施形態では、リンカーは、アミノ酸で、またはアミノ酸のみで構成される必要はなく、例えば、修飾アミノ酸を含むことができる（例えば、Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｔｏ  Ｓｅｒｕｍ  Ｐｒｏｔｅａｓｅｓ  ｂｙ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅｉｒ  Ａｍｉｎｏ  Ｇｒｏｕｐｓ，  Ｒｏｓｓｅｌｌａ  Ｇａｌａｔｉ，Ａｌｅｓｓａｎｄｒａ  Ｖｅｒｄｉｎａ，Ｇｉｕｌｉａｎａ  Ｆａｌａｓｃａ，ａｎｄ  Ａｌｂｅｒｔｏ  Ｃｈｅｒｓｉ，（２００３）Ｚ．Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ，５８ｃ，５５８−５６１を参照）。いくつかの実施形態では、リンカーは、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、または２０個のアミノ酸長であってよい。いくつかの実施形態では、リンカーは、２〜３０オングストロームの長さ、例えば２．５〜２７オングストロームであってよい。
【０６００】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、ヒト化ｃｙｓ−ダイアボディを含む。ヒト化ｃｙｓ−ダイアボディは、軽鎖可変（ＶＬ）ドメインに連結された重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、及びＣ末端のシステインを含むことができる。いくつかの実施形態では、ヒト化ｃｙｓ−ダイアボディはホモ二量体である。いくつかの実施形態では、ヒト化ダイアボディはヘテロ二量体である。いくつかの実施形態では、それぞれがシステイン末端残基を有する個別の単量体が提供される。
【０６０１】
いくつかの実施形態では、ヒト化ｃｙｓ−ダイアボディのｓｃＦｖは、ＶＨ−ＶＬの配向またはＶＬ−ＶＨの配向を有する。本明細書で使用するところの、ＶＨ−ＶＬ（本明細書では「ＶＨＶＬ」と称する場合もある）の配向は、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメイン（ＶＨ）が軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）の上流にあることを意味し、ＶＬＶＨの配向は、ｓｃＦｖのＶＬドメインがＶＨドメインの上流にあることを意味する。本明細書で使用するところの「上流」とは、アミノ酸のＮ末端に近い方向、またはヌクレオチド配列の５’末端に近い方向である。
【０６０２】
抗体可変領域同士を、本明細書に記載されるリンカーによって互いに連結することができる。いくつかの実施形態では、リンカーは本明細書に記載されるＧｌｙＳｅｒリンカーである。
【０６０３】
いくつかの実施形態では、ｃｙｓ−ダイアボディは、検出可能なマーカーを含む。
【０６０４】
ｃｙｓ−ダイアボディは、単量体のペアを含む。各単量体は、ポリペプチドを含むことができる。いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチド同士は同じである（例えば、ｃｙｓ−ダイアボディはホモ２量体であってよい）。いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチド同士は異なる（例えば、ｃｙｓ−ダイアボディはヘテロ二量体であってよい）。
【０６０５】
いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１２を含む（図８を参照）。いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１２（ｃｙｓ−ダイアボディ（ＶＬ−５−ＶＨ））と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む（配列番号は図８のものを参照）。
【０６０６】
いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１３を含む（図９を参照）。いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１３（ｃｙｓ−ダイアボディ（ＶＨ−５−ＶＬ））と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む（配列番号は図９のものを参照）。
【０６０７】
いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１４（ＶＬ−８−ＶＨ）を含む（図１０を参照）。いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１４と少なくとも約８０％の同一性、例えば少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有する配列を有する。
【０６０８】
いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１５（ヒト化ＩＡＢ−ヒトＣＤ８ ｃｙｓ−ダイアボディ（ＶＨ−８−ＶＬ））を含む（図１１を参照）。いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１５と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有する配列を有する。
【０６０９】
いくつかの実施形態では、いくつかの実施形態において、単量体のポリペプチドは、配列番号１４７を含む。いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、配列番号１４７と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有する配列を有する。
【０６１０】
いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは表０．３に示される組み合わせ部分のいずれかを含み、表０．３に記載される単量体と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有する配列を有する単量体のポリペプチドを含む。
【０６１１】
いくつかの実施形態では、システイン同士は互いに架橋される。いくつかの実施形態では、システインは還元されており、したがって、これらのテール形成システイン同士は互いにジスルフィド結合を形成しない。いくつかの実施形態では、「テール形成」システインのうちの１つ以上が、蛍光プローブなどの１つ以上の検出可能なマーカーと共有結合を形成する。
【０６１２】
当業者によれば理解されるように、本開示では「ｃｙｓ−ダイアボディ」について一般的に述べているが、代替的な構成を用いて同じ、または同様の目的を実現することができる。いくつかの実施形態では、システインのうちの１つ以上に代えて任意の共有結合を介して修飾可能な部分を用いることができる。例えば、これには、ＧｌｙＳｅｒリンカー、ＧｌｙＬｅｕリンカー、及び／または短いタグの後に続くインサートシステインが含まれ得る。いくつかの実施形態では、コイルドコイル及びロイシンジッパーを介して連結を確立することができる。いくつかの実施形態では、「テール」自体がその末端に官能基を有してもよく、これにより、テールはジスルフィド結合自体の代わりにポリペプチドのそれぞれの末端の所望の残基及び／または位置に選択的に結合することができる。いくつかの実施形態では、テールが２つのポリペプチド鎖の間の空間を与えるのではなく、重鎖または軽鎖ポリペプチドの末端に、共有結合を介して修飾可能な部分を直接結合することができるが、２個の共有結合を介して修飾可能な部分同士はリンカーによって連結することができる。
【０６１３】
いくつかの実施形態では、標的分子に結合するキメラｃｙｓ−ダイアボディが提供される。いくつかの実施形態では、キメラｃｙｓ−ダイアボディは、ＶＬ−ＶＨフォーマットの単量体を含み、配列番号１２または１４の配列（図８または１０）、または配列番号１２または１４の配列と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、キメラｃｙｓ−ダイアボディは、ＶＨ−ＶＬフォーマットの単量体を含み、配列番号１３または１５の配列（図９または１１）、または配列番号１３または１５の配列と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む。
【０６１４】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるコンストラクトのいずれも（ｃｙｓ−ダイアボディ実施形態として記載される構成を含む）ｓｃＦｖ実施形態として提供することができる。かかる実施形態では、コンストラクトは、テール上にシステインを含むことができるが、単に架橋されてない。他の実施形態では、コンストラクトはテールにシステインを有する必要はなく、またはテールそのものを有する必要がない。
【０６１５】
リンカー及び／またはテールの選択肢
いくつかの実施形態では、個々の抗体について、重鎖軽鎖可変ドメインと軽鎖可変ドメインとを異なる方法で結合することができる。そのため、異なるリンカーの長さの使用によって、ジスルフィド結合の形成を確実とするようなコンフォメーションの柔軟性及び運動範囲を与えることができる。
【０６１６】
いくつかの実施形態では、２つのリンカー長さは、アミノ酸約１〜５０個、例えば、アミノ酸２〜１５個、２〜１４個、３〜１３個、４〜１０個、またはアミノ酸５個〜アミノ酸８個の間のどこか（及びこれらを含む）である。いくつかの実施形態では、ダイアボディのペア内の各リンカーは、同じ長さであってよい。いくつかの実施形態では、ペア内の各リンカーは、異なる長さであってよい。いくつかの実施形態では、所望の組み合わせを可能とし、かつ／または促進するものである限り、リンカー長のペアの任意の組み合わせを用いることができる。いくつかの実施形態では、修飾アミノ酸を用いることができる。
【０６１７】
図８〜１１は、４つのＣｙｓ−Ｄｂバリアント、すなわちＶＨ−５−ＶＬ、ＶＨ−８−ＶＬ、ＶＬ−５−ＶＨ、及びＶＬ８ＶＨを示す （図８〜１１、及び表０．３を参照）。４つすべての変異体を作製し、その発現及び結合を試験することで、新たなＣｙｓ−Ｄｂのそれぞれについてタンパク質生産の所望のフォーマットを特定することができる。これらの変異体のセットを評価することは、ジスルフィド架橋が利用できる場合に高品質で安定したタンパク質を確実に生産するうえで役立ち得る。したがって、Ｃｙｓ−Ｄｂを操作するうえで、ミニボディにおけるような１つではなく、２つの異なるリンカー長、ならびに、ＶＨ−ＶＬ及びＶＬ−ＶＨの可変領域の両方の配向を用いることができる。
【０６１８】
いくつかの実施形態では、リンカーはＧｌｙＳｅｒリンカーである。ＧｌｙＳｅｒリンカーは、Ｇｌｙ及びＳｅｒ残基に富んだポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＧｌｙＳｅｒリンカーのアミノ酸残基の少なくとも約４０％、例えば、少なくとも約４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、ｏｒ ９０％は、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、またはＧｌｙとＳｅｒの組み合わせである。いくつかの実施形態では、ＧｌｙＳｅｒリンカーは、少なくとも約２個のアミノ酸長、例えば約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、または４０個のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号２８、３０、及び／または３６のうちの少なくとも１つを含む（図１２Ａ）。
【０６１９】
いくつかの実施形態では、ダイアボディのＣ末端にシステインが付加される。システインは、ダイアボディ複合体が共有システイン結合を形成することを可能とし、放射性標識などの機能的部分を部位特異的に結合させるのに利用可能な硫黄残基の選択肢を与える。いくつかの実施形態では、抗体自体の末端を、システインを含むように改変することができる。いくつかの実施形態では、テール配列、例えば（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ）がＣ末端に付加される。いくつかの実施形態では、システインテール配列は、ｃｙｓ−ダイアボディの２個の単量体同士が互いにジスルフィド結合を形成することを可能とする。いくつかの実施形態では、システインテール配列は、ｃｙｓ−ダイアボディが、検出可能なマーカー及び／または治療剤などの検出可能な部分とジスルフィド結合を形成することを可能とする。システインテールのスルフヒドリル基は、例えば、検出可能なマーカー及び／または治療剤などの所望の機能的部分の部位特異的結合に先立って穏やかな還元を受けてもよい。いくつかの実施形態では、テールは、少なくとも約１個のアミノ酸長、例えば約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、または４０個のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、テールは、配列番号３２のうちの少なくとも１つを含む（図１２Ａ）。いくつかの実施形態では、テールは３〜８個のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、テールは、コイルドコイル及び／またはロイシンジッパーを含むことができる。上記で述べたように、いくつかの実施形態では、システインはＣ末端に配置されるが、これは、システインがＣ末端の最後のアミノ酸として配置されることは必要としない。代わりに、これは、システインがタンパク質のＣ末端に配置された残基のいずれかの部分であり得ることを意味する。
【０６２０】
いくつかの実施形態では、２個のＣ末端間を連結する選択肢を、直接及び／または間接の架橋を与えるシステインによって得ることができる。
【０６２１】
標的分子に結合するミニボディ
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、ミニボディであるか、またはミニボディを含む。本明細書に記載される「ミニボディ」は、各単量体が、ヒンジ配列などのリンカーによってヒトＩｇＧ１のＣＨ３ドメインに連結された一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）であるホモ２量体である。いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、図１２Ｂの配列番号５３〜６０に示されるヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ２ヒンジ配列である。いくつかの実施形態では、ＣＨ３配列は、図１２Ａ及び１２Ｂの配列番号３７〜３８及び配列番号８０〜８１のＩｇＧ１  ＣＨ３、またはＩｇＧ２  ＣＨ３配列を含む。
【０６２２】
いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、人工ヒンジ配列である。いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、４つのクラスのうちのいずれか１つ以上からのＩｇＧヒンジであってよい。人工ヒンジ配列は、ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ２ヒンジの一部と、ＧｌｙＳｅｒリンカー（この部分をＶＨとＶＬ領域とを連結する一般的リンカーから区別する場合、「延長部」としても知られる）配列とを含むことができる。
【０６２３】
いくつかの実施形態では、人工ヒンジ配列は、ヒトＩｇＧ１ヒンジの最初の約１４または１５個の残基及びそれに続く延長配列を含む。いくつかの実施形態では、延長部は本明細書に示されるもののいずれであってもよい。いくつかの実施形態では、延長部は、６、７、８、９または１０個のアミノ酸長のＧｌｙＳｅｒ延長配列であってよい。いくつかの実施形態では、人工ヒンジ配列は、ＩｇＧ１ヒンジの最初の約１５個の残基、及びそれに続く約１０個のアミノ酸長のＧｌｙＳｅｒ延長配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ３ドメイン間の会合のため、ミニボディは安定した二量体として存在する。
【０６２４】
いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、ヒトＩｇＧ２ヒンジ配列を含む。いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、ＩｇＧ２人工ヒンジ配列を含む。いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、天然のｈＩｇＧ２ＩｇＧ２配列（「ＮＨ」）を含む。本明細書の実施形態と組み合わせて用いることができる例示的な天然ヒンジ配列が、図１２Ｂの配列番号５５に示されている。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるコンストラクトのいずれか及びすべてのものをｈＩｇＧ２ヒンジ領域とともに使用することができる。
【０６２５】
いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、図１２Ｂの配列番号５５の天然ヒトＩｇＧ２配列を含む。いくつかの実施形態では、ヒンジ配列は、人工ＩｇＧ２ヒンジ配列を含む。いくつかの実施形態では、天然ＩｇＧ２配列は、人工ヒンジ延長（EH）配列を含む。いくつかの実施形態では、人工ヒンジ延長配列は、図１２Ｂの配列番号７９を含む。いくつかの実施形態では、人工ヒンジ配列は、ヒトＩｇＧ２ヒンジ配列の最初の約１２〜１５個、例えば１２個の残基、及びそれに続く約６、７、８、９、１０、１１、または１２個のアミノ酸長のＧｌｙＳｅｒ延長配列を含む。本明細書の実施形態と組み合わせて用いることができる例示的な人工ヒンジ配列が、図１２Ｂの配列番号７９に示されている。いくつかの実施形態では、上記に述べたヒンジ領域（例えば表０．１または０．２）のいずれもミニボディに用いることができる。いくつかの実施形態では、表０．１または表０．２に示されるヒンジ配列のいずれかをＩｇＧ２ヒンジ領域に置き換えることができる。いくつかの実施形態では、表０．１または表０．２のコンストラクトのいずれか、及び／または図面に示されるコンストラクトのいずれかを、ｈＩｇＧ２またはＩｇＧ２の一部または全体に置き換えることができる。
【０６２６】
いくつかの実施形態では、ミニボディのｓｃＦｖ配列は、ＣＤＲ及び／またはＦＲ、及び／または本明細書に記載されるダイアボディ配列と同様及び／または同じである可変領域を含むことができる（例えば、図２Ａ、図２Ｂ、図４、図５、図６、図７、図８、図９、図１０、図１１、及び図１２Ｃ〜１２Ｉ、ならびに表０．１及び表０．２にみられる）。いくつかの実施形態では、ミニボディのｓｃＦｖは、本明細書に記載されるｃｙｓ−ダイアボディのｓｃＦｖと同一の配列（ＣＤＲ、複数のＣＤＲ、６個のＣＤＲの完全なセット、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、重鎖及び軽鎖可変領域など）を有する。
【０６２７】
いくつかの実施形態では、ミニボディは、配列番号３、６、９、１６、１８、２０、２２、３４、３６、３８、５３〜６０、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、１４７の配列、及び／または表０．１及び／または表０．２の構成の配列と少なくとも約８０％同一、例えば、少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３、９４、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％同一の配列を有する（配列番号は、図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０６２８】
いくつかの実施形態では、ミニボディは、配列番号３、６、９、１６、１８、２０、２２、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、または１４７の配列と少なくとも約８０％同一、例えば、少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一の可変鎖領域を有する（配列番号は、図１２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０６２９】
ｓｃＦｖは、ＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨの配向を有することができる。いくつかの実施形態では、ＶＨとＶＬとは、アミノ酸リンカー配列によって互いに連結される。アミノ酸リンカーは、本明細書に記載されるリンカーであってよい。いくつかの実施形態では、リンカーはＧｌｙＳｅｒリッチであり、約１５〜２０個のアミノ酸長である。別の実施形態では、リンカーはＧｌｙＳｅｒリッチであり、１８個のアミノ酸長である。いくつかの実施形態では、リンカー長は、アミノ酸約１〜５０個、例えば、アミノ酸２〜３０個、３〜２０個、４〜１５個、またはアミノ酸５個〜アミノ酸８個の間（これらを含む）で異なる。いくつかの実施形態では、ミニボディのｓｃＦｖは、本明細書に記載されるｃｙｓ−ダイアボディのｓｃＦｖと少なくとも約８０％同一、例えば、少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３、９４、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一の配列を有する。ｓｃＦｖは、ＶＨＶＬまたはＶＬＶＨの配向を有することができる。
【０６３０】
いくつかの実施形態では、ミニボディのそれぞれの単量体は、Ｎ末端からＣ末端にかけて、以下の要素を有する：（ａ）ＶＬドメインに連結されたＶＨドメインを含み、標的分子に結合するｓｃＦｖ配列、（ｂ）ヒトＩｇＧ１ヒンジ領域を含むヒンジ延長ドメイン、及び（ｃ）ヒトＩｇＧのＣＨ３配列。いくつかの実施形態では、ミニボディのそれぞれの単量体は、Ｎ末端からＣ末端に以下の要素を有する：（ａ）ＶＬドメインに連結されたＶＨドメインを含み、標的分子に結合するｓｃＦｖ配列、（ｂ）本明細書に記載されるＩｇＧ２ヒンジ領域を含むヒンジ延長ドメイン、及び（ｃ）ヒトＩｇＧのＣＨ３配列。いくつかの実施形態では、ミニボディのそれぞれの単量体は、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＣＨ３を含む。いくつかの実施形態では、ミニボディのそれぞれの単量体は、ＩｇＡまたはＩｇＤのＣＨ３ドメイン及び／またはＩｇＭ及び／またはＩｇＥのＣＨ４ドメインを含むことができる。いくつかの実施形態では、ミニボディは、細胞、細胞株、または本明細書に記載される他の適切な発現系によって発現させることができる核酸によりコードされる。したがって、細胞または細胞株で発現させた際にミニボディの分泌を可能とするため、シグナル配列をｓｃＦｖのＮ末端に融合させることができる。
【０６３１】
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖ、ミニボディ、ｃｙｓ−ダイアボディ、及び／または抗体は、図２Ａ及び／または図２Ｂに示され、アスタリスクにより示されるヒト化配列中の１つ以上の残基を含む。いくつかの実施形態では、図２Ａまたは図２Ｂでアスタリスクにより示される残基のうちの１つ以上が存在するが、残りの配列は異なり得る。例えば、配列は、配列の残りの部分と８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９％またはそれ以上の同一性を有することができる。いくつかの実施形態では、ヒト及び／またはヒト化抗原結合コンストラクトは、図２Ａのアスタリスクにより示される残基のうちの１つ以上、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、または４７個を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、図２Ａの下線で示した残基のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、図２Ａの下線で示されていない残基のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、図２Ａの下線で示されていない残基のうちの１つ以上、及びボックスで囲ったＣＤＲ部分を含むが、他の残基は変化してもよい。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、
【０６３２】
上記に代えて、及び／または上記に加えて、抗原結合コンストラクトは、図２Ａまたは図２Ｂのアスタリスクにより示される残基のうちの１つ以上、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個を含むことができる。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、図２Ａまたは図２Ｂの下線で示されていない残基のうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、図２Ａまたは図２Ｂの下線で示されていない残基のうちの１つ以上、及びボックスで囲ったＣＤＲ部分を含むが、他の残基は変化してもよい。いくつかの実施形態では、ＣＤＲの残基は維持され、かつアスタリスクにより示される残基は維持されるが、他の残基のうちの１つ以上は変化してもよい。
【０６３３】
いくつかの実施形態では、標的分子に結合するキメラミニボディが提供される。いくつかの実施形態では、キメラミニボディは、ＶＬ−ＶＨフォーマットの単量体を含み、配列番号１６または２０の配列、または配列番号１６または２０の配列と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、キメラミニボディは、ＶＨ−ＶＬフォーマットの単量体を含み、配列番号の配列１８または２２の配列、または配列番号１８または２２の配列と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有する配列を含む（配列番号は、図２Ａ〜１２Ｉのものを参照）。
【０６３４】
いくつかの実施形態では、単量体のポリペプチドは、表０．１及び表０．２に記載される単量体と少なくとも約８０％の同一性、例えば、少なくとも約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の同一性を有する配列を有する単量体のポリペプチドを含む、表０．１及び表０．２に示される組み合わせ部分のいずれかを含む。
【０６３５】
いくつかの実施形態では、ミニボディは、ヒトＩｇＧ２ヒンジバリアント、すなわち、延長ヒンジ（γ２ ＥＨ２）（図１６）または天然ヒンジ（γ２  ＮＨ１）（図１７Ｂ）のいずれかを有するように作製されたＩＡＢ２２Ｍ  Ｍｂとすることができる。
【０６３６】
使用可能なミニボディのいくつかの実施形態の更なる構造的態様が、図１７Ａ、図１７Ｂ、及び図１６に示されており、ＣＤ８結合コンストラクトの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ−γ１−ＥＨ１（図１７Ａ）、−γ２  ＮＨ１（図１７Ｂ）、及び−γ２  ＥＨ２（図１６）バリアントを含む。
【０６３７】
いくつかの実施形態では、ミニボディは、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ   γ２  ＮＨ２のいくつかの実施形態のタンパク質配列情報を示す図１７Ｃに示されるものであってよい。
【０６３８】
いくつかの実施形態では、ミニボディは、図１８に示されるヒンジ変異体を含むことができる。
【０６３９】
いくつかの実施形態では、ミニボディは、ＩｇＧ１配列から誘導された操作されたヒンジＥＨ２、ＥＨ３を含む（γ１  ＥＨ２（図２０）及びγ１  ＥＨ３（図１９Ａ））。
【０６４０】
いくつかの実施形態では、一価のｓｃＦｖは、図２１の軽鎖可変領域を含む。
【０６４１】
いくつかの実施形態では、ミニボディは、図２２に示されるリンカー配列のうちの１つ以上を含むことができる。
【０６４２】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるヒンジ領域（例えば、表０．４）のいずれかを、本明細書で提供されるミニボディのうちのいずれか１つ以上に適用することができる。
【０６４３】
【表５−１】
2022501402.tif 000012
【表５−２】
2022501402.tif 000013
【０６４４】
抗原結合コンストラクトの各要素のいくつかの実施形態が、ＣＨ３ドメインの異なる実施形態のタンパク質配列情報を示した図２４に示されている。
【０６４５】
図２５は、ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ１（Ｍ１）及びＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ３（Ｍ１）のそれぞれの実施形態のタンパク質配列のアラインメントを示す。配列の違いはボックス内に示されている。いくつかの実施形態では、これらのコンストラクトのうちの１つ以上、または異なるコンストラクト間で保存された配列を含む代替的なコンストラクトを使用することができる。
【０６４６】
図２６は、ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ３（Ｍ１）の実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。シグナル配列、ＣＤＲ配列、リンカー配列、及びヒンジ配列がボックス内に示されている。いくつかの実施形態では、これらの要素のうちの１つ以上を、本明細書で提供される方法または本明細書で提供される製剤のうちのいずれか１つ以上において、一緒にまたは別々に用いることができる。
【０６４７】
図２７は、ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ５（Ｍ１）の実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。いくつかの実施形態では、これらの要素のうちの１つ以上を、本明細書で提供される方法または本明細書で提供される製剤のうちのいずれか１つ以上において、一緒にまたは別々に用いることができる。
【０６４８】
図２８は、ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ７（Ｍ１）の実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。いくつかの実施形態では、これらの要素のうちの１つ以上を、本明細書で提供される方法または本明細書で提供される製剤のうちのいずれか１つ以上において、一緒にまたは別々に用いることができる。
【０６４９】
図２９は、ＩＡＢ２２Ｍγ１  ＥＨ８（Ｍ１）の実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。いくつかの実施形態では、これらの要素のうちの１つ以上を、本明細書で提供される方法または本明細書で提供される製剤のうちのいずれか１つ以上において、一緒にまたは別々に用いることができる。
【０６５０】
図３０は、ＩＡＢ２２Ｍγ２  ＥＨ２（Ｍ１）の実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。いくつかの実施形態では、これらの要素のうちの１つ以上を、本明細書で提供される方法または本明細書で提供される製剤のうちのいずれか１つ以上において、一緒にまたは別々に用いることができる。
【０６５１】
図３１は、ＶＨ−Ｋ６７Ｒの多型を有するＩＡＢ２２Ｍγ２  ＥＨ２（Ｍ１）の実施形態のＤＮＡ及び翻訳されたタンパク質配列を示す。いくつかの実施形態では、これらの要素のうちの１つ以上を、本明細書で提供される方法または本明細書で提供される製剤のうちのいずれか１つ以上において、一緒にまたは別々に用いることができる。
【０６５２】
図３２は、ＩＡＢ２２ＭのＶＨドメインの実施形態のタンパク質配列を示す。いくつかの実施形態では、このコンストラクトの要素のうちの１つ以上を、本明細書で提供される方法または本明細書で提供される製剤のうちのいずれか１つ以上において、一緒にまたは別々に用いることができる。
【０６５３】
本明細書に記載されるように、抗原結合コンストラクトはＣＤ８に結合することができる。これらのＣＤ８タンパク質は当該技術分野では周知のものである。かかるタンパク質の例としては、例えば、ＣＤ８（例えば、α鎖）（図３３：配列番号１３４）及びＣＤ８（例えば、β鎖）（図３４：配列番号１３５）が挙げられる。
【０６５４】
図３５は、操作されたミニボディ（Ｍｂ）の図を示す。いくつかの実施形態では、このコンストラクトを、本明細書で提供される構成（方法、製剤など）のうちの１つ以上で用いることができる。
【０６５５】
図３６は、ヒトＩｇＧ１に基づくＭｂのヒンジの異なる実施形態の図を示す（γ１  ＥＨ１（上）及びγ１  ＥＨ２（下））。いくつかの実施形態では、これらの要素を、本明細書で提供されるＣＤ８抗原結合コンストラクトの構成（方法、製剤など）のうちの１つ以上で用いることができる。
【０６５６】
図３７は、ヒトＩｇＧ２に基づくＭｂのヒンジの異なる実施形態の図を示す（γ２  ＥＨ１（上）及びγ２  ＥＨ２（下））。いくつかの実施形態では、これらの要素を、本明細書で提供されるＣＤ８抗原結合コンストラクトの構成（方法、製剤など）のうちの１つ以上で用いることができる。
【０６５７】
図３８は、ヒトＩｇＧ２に基づく更なるＭｂのヒンジの異なる実施形態の図を示す（γ２  ＮＨ１（上）及びγ２  ＮＨ２（下））。いくつかの実施形態では、これらの要素を、本明細書で提供されるＣＤ８抗原結合コンストラクトの構成（方法、製剤など）のうちの１つ以上で用いることができる。
【０６５８】
図３９は、ＣＤ８ミニボディのいくつかの実施形態を示す。いくつかの実施形態では、このコンストラクトを、本明細書で提供される他の構成（方法、製剤など）のいずれかで用いることができる。いくつかの実施形態では、この分子は、本明細書で提供される方法のうちの１つ以上で使用される場合、または本明細書で提供される製剤のうちの１つ以上の一部として使用される場合、他のＣＤ８抗原結合コンストラクトに対する改良となる。いくつかの実施形態では、この分子は、システインを介して、以下の検出可能なマーカー：
【化５】
2022501402.tif 000014
または、
【化６】
2022501402.tif 000015
の、通常は２個の検出可能なマーカーに連結される。
【０６５９】
抗原結合コンストラクトの修飾
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトは、少なくとも１つの修飾を含む。例示的な修飾としては、限定されるものではないが、グリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、既知の保護／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質切断、及び、細胞性リガンドまたは他のタンパク質との結合が挙げられる。限定されるものではないが、特異的化学切断、アセチル化、ホルミル化、及びツニカマイシンの代謝合成を含む既知の方法により多くの化学修飾のいずれかを行うことができる。いくつかの実施形態では、誘導体は、１つ以上の非天然アミノ酸を含むことができる。
【０６６０】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトを別の物質と結合することで抗標的結合体を形成する。本明細書に記載される結合体は、抗原結合コンストラクトを、脂質、炭水化物、タンパク質、または他の原子及び分子と連結する既知の方法により調製することができる。いくつかの実施形態では、結合体は、適切な連結または結合を用いた部位特異的結合により形成される。部位特異的結合体は、抗原結合コンストラクトの結合活性をより保存しやすい。物質は、ジスルフィド結合の形成を介して還元された抗原結合コンストラクトのヒンジ領域において結合または連結することができる。例えば、ｓｃＦｖフラグメントのＣ末端のシステイン残基、例えば、本明細書に記載されるｃｙｓ−ダイアボディ中に導入することができるシステイン残基の導入により、抗原結合部位から離れた部位で広範な薬剤との部位特異的なチオール反応性カップリングが可能となる。結合体を形成するために使用される他の連結または結合としては、限定されるものではないが、共有結合、非共有結合、スルフィド結合、ヒドラゾン結合、ヒドラジン結合、エステル結合、アミド結合、及びアミノ結合、イミノ結合、チオセミカルバゾン結合、セミカルバゾン結合、オキシム結合、及び炭素−炭素結合が挙げられる。
【０６６１】
検出可能なマーカー
いくつかの実施形態では、修飾された抗原結合コンストラクトは、検出可能なマーカーと結合される。本明細書で使用するところの「検出可能なマーカー」とは、標的分子、細胞、組織、臓器などの位置及び／または量を診断、検出、または可視化するうえで有用な原子、分子、または化合物を含む。本明細書の実施例に従って使用することが可能な検出可能なマーカーとしては、限定されるものではないが、放射性物質（例えば、放射性同位体、放射性核種、放射性標識または放射性トレーサー）、色素、造影剤、蛍光化合物または分子、生体発光化合物または分子、酵素及び増強剤（例えば、常磁性イオン）が挙げられる。更に、特定のナノ粒子、例えば、量子ドット及び金属ナノ粒子（後述する）は検出剤としての使用に適当であり得る。いくつかの実施形態では、検出可能なマーカーは、インドシアニングリーン（ＩＣＧ）である。特定の文脈（例えば、ＰＥＴ）で使用される場合、ＰＥＴによって可視化される検出可能なマーカーが用いられる。
【０６６２】
本明細書の実施形態に従って検出可能なマーカーとして使用することが可能な例示的な放射性物質としては、限定されるものではないが、１８Ｆ、１８Ｆ−ＦＡＣ、３２Ｐ、３３Ｐ、４５Ｔｉ、４７Ｓｃ、５２Ｆｅ、５９Ｆｅ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、７５Ｓｃ、７７Ａｓ、８６Ｙ、９０Ｙ、８９Ｓｒ、８９Ｚｒ、９４Ｔｃ、９４Ｔｃ、９９ｍＴｃ、９９Ｍｏ、１０５Ｐｄ、１０５Ｒｈ、１１１Ａｇ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１４２Ｐｒ、１４３Ｐｒ、１４９Ｐｍ、１５３Ｓｍ、１５４−１５８Ｇｄ、１６１Ｔｂ、１６６Ｄｙ、１６６Ｈｏ、１６９Ｅｒ、１７５Ｌｕ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１８９Ｒｅ、１９４Ｉｒ、１９８Ａｕ、１９９Ａｕ、２１１Ａｔ、２１１Ｐｂ、２１２Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２１３Ｂｉ、２２３Ｒａ  及び２２５Ａｃが挙げられる。検出可能なマーカーとして使用することが可能な例示的な常磁性イオン物質としては、限定されるものではないが、遷移金属及びランタニド金属（原子番号６〜９、２１〜２９、４２、４３、４４、または５７〜７１）のイオンが挙げられる。これらの金属には、Ｃｒ、Ｖ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｌａ、Ｃｅ、Ｐｒ、Ｎｄ、Ｐｍ、Ｓｍ、Ｅｕ、Ｇｄ、Ｔｂ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｅｒ、Ｔｍ、Ｙｂ及びＬｕのイオンが挙げられる。
【０６６３】
検出可能なマーカーが放射性金属または常磁性イオンである場合、いくつかの実施形態では、マーカーを、これらのイオンを結合するための１つ以上のキレート基が結合された長いテールを有する試薬と反応させることができる。長いテールは、イオンを結合するためのキレート基を結合させることができるペンダント基を有するポリリシン、多糖類、または他の誘導体化された、もしくは誘導体化可能な鎖などのポリマーであってよい。実施形態に従って使用することができるキレート基の例としては、限定されるものではないが、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、ＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＮＯＧＡＤＡ、ＮＥＴＡ、デフェロキサミン（ＤｆＯ）、ポルフィリン、ポリアミン、クラウンエーテル、ビス−チオセミカルバゾン、ポリオキシム、及びこれらに類する基が挙げられる。キレートは、免疫反応性の低下が最小であり、凝集及び／または内部架橋が最小であるように分子との結合を形成することができる基によって抗原結合コンストラクトと結合させることができる。同じキレートは、マンガン、鉄、及びガドリニウムなどの非放射性金属と錯体化される場合に、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトまたは担体と使用される際にＭＲＩで有用である。ＮＯＴＡ、ＮＯＧＡＤＡ、ＤＯＴＡ、及びＴＥＴＡなどの大員環キレートが、限定されるものではないが、それぞれ、ガリウム、イットリウム、及び銅の放射性核種を含む様々な金属及び放射性金属と使用される。ＲＡＩＴ用の２２３Ｒａのような放射性核種を安定的に結合する目的で関心が寄せられている大員環ポリエーテルなどの他の環状キレートも使用することができる。ある特定の実施形態では、キレート部分を用いてアルミニウム−１８Ｆ錯体などのＰＥＴ造影剤を標的化分子と結合させてＰＥＴ分析に使用することができる。
【０６６４】
本開示の実施形態に従って検出可能なマーカーとして使用することが可能な例示的な造影剤としては、限定されるものではないが、バリウム、ジアトリゾエート、エチオダイズド油、クエン酸ガリウム、イオカルミン酸、イオセタミン酸、ヨーダミド、ヨージパミド、ヨードキサム酸、イオグラミド、イオヘキシル、イオパミドール、イオパノ酸、イオプロセム酸、イオセファム酸、イオセル酸、イオスラミドメグルミン、イオセメチン酸、イオタスル、ヨーテトル酸、イオタラム酸、イオトロクス酸、イオキサグル酸、イオキソトリゾ酸、イポダート、メグルミン、メトリザミド、メトリゾエート、プロピリオドン、および塩化タリウム、またはこれらの組み合わせが挙げられる。
【０６６５】
本開示の実施形態に従って検出可能なマーカーとして使用することが可能な生物発光及び蛍光化合物または分子及び色素としては、限定されるものではないが、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ＯＲＥＧＯＮ ＧＲＥＥＮ（商標）、ローダミン、Ｔｅｘａｓ ｒｅｄ、テトラローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、Ｃｙ３、Ｃｙ５、など）、蛍光マーカー（例えば、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、フィコエリトリン、など）、腫瘍関連プロテアーゼにより活性化される自己消光蛍光化合物、酵素（例えば、ルシフェラーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、など）、ナノ粒子、ビオチン、ジゴキシゲニン、またはこれらの組み合わせが挙げられる。
【０６６６】
本開示の実施形態に従って検出可能なマーカーとして使用することが可能な酵素としては、限定されるものではないが、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、酸性ホスファターゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、β−グルクロニダーゼ、またはβ−ラクタマーゼが挙げられる。かかる酵素を、クロモゲン、蛍光性化合物、または発光性化合物と組み合わせて使用することで検出可能なシグナルを発生させることができる。
【０６６７】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトはナノ粒子に結合される。「ナノ粒子」という用語は、そのサイズがナノメートル単位で測定される微小粒子、例えば、少なくとも１つの寸法が約１００ｎｍである粒子を指す。ナノ粒子は、可視光を吸収せずに散乱するほど充分に小さいため、検出可能な物質として使用することができる。例えば、金ナノ粒子は高い可視光消光特性を有し、溶液中で暗赤色〜黒色にみえる。その結果、ナノ粒子に結合された抗原結合コンストラクトを含む組成物は、対象内のＴ細胞のインビボイメージングに使用することができる。サイズ範囲の小さい方の端では、ナノ粒子はしばしばクラスターと呼ばれる。金属、誘電体、及び半導体ナノ粒子、ならびにハイブリッド構造（例えば、コア−シェルナノ粒子）が形成されている。ナノスフェア、ナノロッド、及びナノカップは、成長させられた形状のほんのいくつかである。半導体量子ドット及びナノ結晶はナノ粒子の更なる種類の例である。かかるナノ粒子は、抗原結合コンストラクトと結合された場合、本明細書に記載されるＴ細胞のインビボ検出用の造影剤として使用することができる。
キット
【０６６８】
いくつかの実施形態では、キットが提供される。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトを含む。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載される抗原結合コンストラクトを産生する細胞株を含む。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載される検出可能なマーカーを含む。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載される治療剤を含む。いくつかの実施形態では、キットは、バッファーを含む。いくつかの実施形態では、キットは、ポジティブコントロール、例えば、ＣＤ８、ＣＤ８＋細胞、またはそれらのフラグメントを含む。いくつかの実施形態では、キットは、ネガティブコントロール、例えば、ＣＤ８を実質的に含まない表面または溶液を含む。いくつかの実施形態では、キットは、パッケージングを含む。いくつかの実施形態では、キットは、説明書を含む。いくつかの実施形態では、キットは、組成物に関する以下のもの、すなわち、受領日、分注日、分注量、薬剤が分注された患者の識別番号のうちの１つ以上についての文書、紙面、または他の媒体を含む。
【０６６９】
核酸
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトのポリペプチドは、核酸によってコードされ、インビボまたはインビトロで発現されてもよく、またはこれらのＰＥＴは化学的に合成されてもよい。したがって、いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトをコードする核酸が提供される。いくつかの実施形態では、核酸は、ｃｙｓ−ダイアボディまたはミニボディの一部または単量体をコードする。いくつかの実施形態では、核酸は、２個以上の単量体、例えば少なくとも２個の単量体をコードする。複数の単量体をコードする核酸は、少なくとも２個の単量体の間に核酸切断部位を含んでもよく、２個以上の単量体の間に転写または翻訳開始部位をコードしてもよく、及び／または２個以上の単量体の間にタンパク質分解標的部位をコードしてもよい。
【０６７０】
いくつかの実施形態では、発現ベクターが、本明細書に開示される抗原結合コンストラクトをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、発現ベクターは、哺乳動物で発現させるためのｐｃＤＮＡ３．１（商標）／ｍｙｃ−Ｈｉｓ （−）のバージョンＡベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ， Ｉｎｃ．）、またはそのバリアント（図１３を参照）を含む。ｐｃＤＮＡ３．１発現ベクターは、哺乳動物で発現させるためのＣＭＶプロモーターと、哺乳動物（ネオマイシン）及び／または細菌（アンピシリン）の選択マーカーの両方を含む（図１０を参照）。いくつかの実施形態では、発現ベクターはプラスミドを含む。いくつかの実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター、例えばレトロウイルスベクターまたはアデノウィルスベクターを含む。各実施形態において、ベクターは、コスミド、ＹＡＣ、またはＢＡＣを含む。
【０６７１】
いくつかの実施形態では、ミニボディ単量体の少なくとも１つをコードするヌクレオチド配列は、配列番号１７、１９、２１、２３、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１のうちの少なくとも１つ、またはこれらと少なくとも約８０％の同一性、例えば約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の同一性を有する配列を含む。
【０６７２】
いくつかの実施形態では、ｃｙｓ−ダイアボディの少なくとも１つをコードするヌクレオチド配列は、配列番号７７、７８、１０、１１、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、またはこれらと少なくとも約８０％の同一性、例えば約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上の同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、配列番号１４７の配列をコードするヌクレオチドが提供される。
【０６７３】
組成物の製造方法
いくつかの実施形態では、診断用組成物の製造方法が提供される。方法は、ミニボディをデスフェリオキサミンと結合させてＤＦ−ミニボディを形成することと、ＤＦ−ミニボディを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識されたミニボディを形成することと、放射性標識されたミニボディを精製することと、放射性標識されたミニボディを非放射性ミニボディと混合して診断用組成物を形成することと、を含み、ミニボディと非放射性ミニボディはＣＤ８の同じエピトープに結合する。
【０６７４】
図４０は、標識されたミニボディを製造するための反応機構を示しており、これについては下記実施例でもより詳細に説明する（例えば、実施例１０）。
【０６７５】
データ及び分析
いくつかの実施形態では、非一時的コンピュータ可読媒体が提供される。非一時的コンピュータ可読媒体は、本明細書に提供される方法によって得られた、ＰＥＴスキャンの画像に関する格納されたデータを含む。
【０６７６】
腫瘍中のＦＤＧ蓄積の速度及び／または総量を測定するためのいくつかの方法が存在する。ＰＥＴスキャナーは、放射性トレーサー濃度と直接関連しているインビボの放射能濃度「ｋＢｑ／ｍｌ」を測定するように設計されている。しかしながら、いくつかの実施形態では、関心の対象となるのは放射性トレーサーの相対組織取り込みである。実際に生じる変動の２つの最も重要な要因は、注入された放射性トレーサーの量と患者のサイズである。これらの変動を少なくとも一次まで補償するため、標準取り込み値（ＳＵＶ）が放射性トレーサー取り込みの相対的尺度として広く用いられている。ＳＵＶの基本的表現は下式である。
ＳＵＶ＝ｒ（ａ’／ｗ）
式中、ｒは、関心領域（ＲＯＩ内でＰＥＴスキャナーによって測定される放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）であり、ａ’は、注入された放射性標識トレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）であり、ｗは、トレーサーの分布体積の代わりに用いられる患者の体重（ｇ）である。すべての注入された放射性トレーサーが保持され、身体全体に均一に分布する場合、注入された放射性トレーサーの量または患者サイズによらず、ＳＵＶはどこでも１ｇ／ｍｌとなる。ＳＵＶは、１ｍｌの組織の重さが１ｇｍであるという仮定の下で無次元量である。
【０６７７】
いくつかの実施形態では、ユーザーは、画像の単一の断面上に２Ｄの関心領域（ＲＯＩ）を描くか、または病変／臓器などに複数の断面にわたって３Ｄの関心体積（ＶＯＩ）を描く。画像分析ソフトウェアは、ＲＯＩ／ＶＯＩ内のすべての個々のボクセル（ピクセルの３Ｄ体積等価物）のシグナル強度をみて、最大値を選択し、すべてのシグナル強度の平均値を計算する。各ボクセルのＳＵＶは、対象となる放射性トレーサーの放射能濃度を表すように予め校正されたその特定のボクセル内のシグナル強度に基づいて自動的に計算することができる。次いで、ソフトウェアは、指定されたＲＯＩまたはＶＯＩからの出力値としてＳＵＶ平均またはＳＵＶ最大を与える。
【０６７８】
いくつかの実施形態では、標準取り込み値を決定する方法が提供される。方法は、抗原結合コンストラクトを対象に適用することであって、抗原結合コンストラクトは放射性プローブを含む、適用することと、ｒを決定することであって、ｒは、抗原結合コンストラクトからの放射線のＲＯＩ内でＰＥＴスキャナーによって測定される放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である、決定することと、ａ’を決定することであって、ａ’は、注入された放射性標識トレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である、決定することと、患者の体重ｗを決定することと、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果としてＳＵＶを決定することと、を含む。
【０６７９】
いくつかの実施形態では、画像を分析する方法が提供される。方法は、画像を提供することと、画像をマーキングすることにより画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）を定義することと、第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内のシグナル強度の平均値を決定することと、第１のＲＯＩ内の各シグナル強度を合計して第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルを得ることと、を含む。第１のＲＯＩは、対象に投与された抗原結合コンストラクトに関連付けられた検出可能なマーカーの量のデータを表す。
【０６８０】
いくつかの実施形態では、方法は更に、プロセスを第２のＲＯＩについて繰り返して第２の合計シグナルレベルを決定することと、第１と第２の合計シグナルレベルを比較することと、を含む。第１の合計シグナルレベルが第２の合計シグナルレベルよりも大きい場合、第２のＲＯＩ内に存在するＣＤ８がより少ないことを示す。
【０６８１】
いくつかの実施形態では、第１のＲＯＩは第２のＲＯＩと同じ位置であるが、第１のＲＯＩが第１の時点で提供され、第２のＲＯＩが第２の時点で提供され、候補治療薬が、第１の時点の後であるが第２の時点の前に投与されている点で異なる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法における可変要素またはオプションのいずれかを、本明細書で提供されるデータを分析する方法に適用することができる。
【０６８２】
いくつかの実施形態では、標準取り込み値を決定する方法は、抗原結合コンストラクトを対象に適用することであって、抗原結合コンストラクトは放射性プローブを含む、適用することと、ｒを決定することであって、ｒは、抗原結合コンストラクトからの放射線のＲＯＩ内でＰＥＴスキャナーによって測定される放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である、決定することと、ａ’を決定することであって、ａ’は、注入された放射性標識トレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である、決定することと、患者の体重ｗを決定することと、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果としてＳＵＶを決定することと、を含む。
【０６８３】
いくつかの実施形態では、標準取り込み値を決定する方法は、抗原結合コンストラクトを対象に適用することを含む。
【０６８４】
いくつかの実施形態では、標準取り込み値を決定する方法は、放射性プローブを含む抗原結合コンストラクトを対象に適用することを含む。
【０６８５】
いくつかの実施形態では、標準取り込み値を決定する方法は、抗原結合コンストラクトを対象に適用することであって、抗原結合コンストラクトは放射性プローブを含む、適用することと、ｒを決定することであって、ｒは、抗原結合コンストラクトからの放射線のＲＯＩ内でＰＥＴスキャナーによって測定される放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である、決定することと、ａ’を決定することであって、ａ’は、注入された放射性標識トレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である、決定することと、患者の体重ｗを決定することと、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果としてＳＵＶを決定することと、を含む。いくつかの実施形態では、画像を分析する方法は、画像を提供することと、画像をマーキングすることにより画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）を定義することと、第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内のシグナル強度の平均値を決定することと、第１のＲＯＩ内の各シグナル強度を合計して第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルを得ることと、を含む。第１のＲＯＩは、対象に投与された抗原結合コンストラクトに関連付けられた検出可能なマーカーの量のデータを表す。いくつかの実施形態では、画像を分析する方法は、画像を提供することと、画像をマーキングすることにより画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）を定義することと、第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度を決定することと、第１のＲＯＩ内のシグナル強度の平均値を決定することと、第１のＲＯＩ内の各シグナル強度を合計して第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルを得ることと、を含む。
【０６８６】
いくつかの実施形態では、画像を分析する方法は更に、画像を分析する方法を第２のＲＯＩについて繰り返して第２の合計シグナルレベルを決定することと、第１と第２の合計シグナルレベルを比較することと、を含む。第１の合計シグナルレベルが第２の合計シグナルレベルよりも大きい場合、第２のＲＯＩ内に存在するＣＤ８がより少ないことを示す。画像を分析する方法のいくつかの実施形態では、第１のＲＯＩは第２のＲＯＩと同じ位置であるが、第１のＲＯＩが第１の時点で提供され、第２のＲＯＩが第２の時点で提供され、候補治療薬が、第１の時点の後であるが第２の時点の前に投与されている点で異なる。
【０６８７】
いくつかの実施形態では、画像を生成する方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することであって、抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、適用することと、腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出し、検出された各検出可能なマーカーに対して正のピクセルを割り当てることと、割り当てられた各正のピクセルの分布に基づいて画像を生成することと、を含む。いくつかの実施形態では、画像は非一時的コンピュータ可読媒体に格納される。
【０６８８】
いくつかの実施形態では、画像を生成する方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することを含む。
【０６８９】
いくつかの実施形態では、画像を生成する方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することを含み、抗原結合コンストラクトは検出可能なマーカーを含む。
【０６９０】
いくつかの実施形態では、画像を生成する方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することであって、抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、ことと、腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出し、検出された各検出可能なマーカーに対して正のピクセルを割り当てることと、を含む。
【０６９１】
いくつかの実施形態では、画像を生成する方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することであって、抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、適用することと、腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出し、検出された各検出可能なマーカーに対して正のピクセルを割り当てることと、割り当てられた各正のピクセルの分布に基づいて画像を生成することと、を含む。
【０６９２】
いくつかの実施形態では、非一時的コンピュータ可読媒体は、ＰＥＴスキャンの画像に関するデータを含み、データは、本明細書に提供されるイメージング方法のいずれかによって得られる。
【０６９３】
免疫ＰＥＴ
ＰＥＴイメージングシステムは、患者の組織中の陽電子放出同位体の分布に基づいて画像を生成する。同位体は通常、Ｆ−１８、Ｃ−１１、Ｎ−１３、またはＯ−１５のような陽電子放出同位体が、体内で容易に代謝されるかまたは局在化する分子（例えば、グルコース）または体内の受容体部位に化学的に結合する分子に共有結合を介して結合されたものからなるプローブ分子の注入によって患者に投与される。場合によっては、同位体は、イオン性溶液として、または吸入によって投与される。Ｆａｂ抗体（５０ｋＤａ）または、共有結合を介して結合されたＭａｂのＶＨ−ＶＬ領域の対合された二量体であるダイアボディ（５５ｋＤａ）（Ｓｈｉｖｅｌｙ  ｅｔ  ａｌ（２００７）Ｊ  Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  ４８：１７０−２）などの小分子の免疫ＰＥＴ造影剤は、短い循環中半減期、高い組織浸透性を示し、注射の２〜４時間後に最適な腫瘍対バックグラウンド比に達することから、広く利用可能な１８Ｆ（１０９．８分）などの半減期の短い同位体の使用が容易となるために特に有用となり得る。
【０６９４】
抗原結合コンストラクトは、反応性部分、活性化部分、または反応性システインチオール基を介して抗体に共有結合させることができる任意の標識部分と結合させることができる（Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０４：１４７−１５、Ｈａｒｌｏｗ  Ｅ．ａｎｄ  Ｌａｎｅ，Ｄ．（１９９９）Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇｓ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｌｕｎｄｂｌａｄ  Ｒ．Ｌ．（１９９１）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ，２ｎｄ  ｅｄ．ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．）。結合される標識は、以下の機能を有することができる：（ｉ）検出可能なシグナルを提供すること、（ｉｉ）第２の標識と相互作用して第１または第２の標識によって提供される検出可能なシグナルを改変する（例えば、ＦＲＥＴ（蛍光共鳴エネルギー移動）を与える）こと、（ｉｉｉ）抗原または配位子との相互作用を安定化させる、または結合の親和性を高めること、（ｉｖ）電荷、疎水性度、形状、または他の物理的パラメータにより、例えば、電気泳動の移動性または細胞浸透性などの移動性に影響を及ぼすこと、または（ｖ）配位子親和性、抗体／抗原結合、またはイオン錯体化を調節するための捕捉部分を提供すること。
【０６９５】
標識されたシステインを有するように操作された抗原結合コンストラクトは、例えば、特定の細胞、組織、または血清中の対象とする抗原の発現を検出するための診断アッセイで有用となり得る。診断用途では、抗体は通常、検出可能な部分で標識される。以下のカテゴリーに大きく分類することができる多くの標識が利用可能である。
【０６９６】
抗体は、放射性同位体金属と結合、キレート化、または他の形で錯体化する配位子試薬で標識することができ、試薬は、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １  ａｎｄ  ２，Ｃｏｌｉｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｅｄ．Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，Ｐｕｂｓ．（１９９１）に記載される方法を用いて抗体の操作されたシステインチオールとの反応性を有する。金属イオンと錯体化することができるキレート化配位子としては、ＤＯＴＡ、ＤＯＴＰ、ＤＯＴＭＡ、ＤＴＰＡ及びＴＥＴＡ（Ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｓ，Ｄａｌｌａｓ，Ｔｅｘ．）が挙げられる。放射性核種を、本明細書の抗体−薬物結合体との錯体化によりターゲティングすることができる（Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２３（９）：１１３７−１１４６）。
【０６９７】
ＤＯＴＡ−マレイミド（４−マレイミドブチラミドベンジル−ＤＯＴＡ）などのリンカー試薬を、アミノベンジル−ＤＯＴＡと、イクロロぎ酸イソプロピル（Ａｌｄｒｉｃｈ）で活性化した４−マレイミド酪酸（Ｆｌｕｋａ）との反応に続き、Ａｘｗｏｒｔｈｙ  ｅｔ  ａｌ（２０００）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７（４）：１８０２−１８０７）の手順を行うことにより調製することができる。ＤＯＴＡ−マレイミド試薬は、システインを有するように操作した抗体の遊離システインアミノ酸と反応し、抗体上に金属錯体化配位子を提供する（Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ（１９９８）Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．９：７２−８６）。ＤＯＴＡ−ＮＨＳ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸モノ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）などのキレート化リンカー標識試薬が市販されている（Ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｓ，Ｄａｌｌａｓ，Ｔｅｘ．）。放射性核種で標識した抗体を用いた受容体標的イメージングは、腫瘍組織中の抗体の進行的な蓄積の検出及び定量化により、経路活性化のマーカーを提供することができる（Ａｌｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ（１９９８）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８：１２０７−１２１０）。結合された放射性標識金属は、リソソーム分解後に細胞内に留まる。
【０６９８】
イメージング実験用の抗体標識として適切な金属キレート錯体は、米国特許第５，３４２，６０６号、米国特許第５，４２８，１５５号、米国特許第５，３１６，７５７号、米国特許第５，４８０，９９０号、米国特許第５，４６２，７２５号、米国特許第５，４２８，１３９号、米国特許第５，３８５，８９３号、米国特許第５，７３９，２９４号、米国特許第５，７５０，６６０号、米国特許第５，８３４，４５６号、Ｈｎａｔｏｗｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ（１９８３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６５：１４７−１５７、Ｍｅａｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ（１９８４）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１４２：６８−７８、Ｍｉｒｚａｄｅｈ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１：５９−６５、Ｍｅａｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  １９９０，  Ｓｕｐｐｌ．１０：２１−２６；Ｉｚａｒｄ  ｅｔ  ａｌ（１９９２）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．３：３４６−３５０、Ｎｉｋｕｌａ  ｅｔ  ａｌ（１９９５）Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２２：３８７−９０；Ｃａｍｅｒａ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２０：９５５−６２、Ｋｕｋｉｓ  ｅｔ  ａｌ（１９９８）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．３９：２１０５−２１１０、Ｖｅｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４４：１６６３−１６７０、Ｃａｍｅｒａ  ｅｔ  ａｌ（１９９４）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２１：６４０−６４６、Ｒｕｅｇｇ  ｅｔ  ａｌ（１９９０）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５０：４２２１−４２２６、Ｖｅｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４４：１６６３−１６７０、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６１：４４７４−４４８２、Ｍｉｔｃｈｅｌｌ，  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４４：１１０５−１１１２、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１０：１０３−１１１、Ｍｉｅｄｅｒｅｒ  ｅｔ  ａｌ（２００４）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４５：１２９−１３７、ＤｅＮａｒｄｏ  ｅｔ  ａｌ（１９９８）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４：２４８３−９０、Ｂｌｅｎｄ  ｅｔ  ａｌ（２００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ＆  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  １８：３５５−３６３、Ｎｉｋｕｌａ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４０：１６６−７６、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ（１９９８）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．３９：８２９−３６、Ｍａｒｄｉｒｏｓｓｉａｎ  ｅｔ  ａｌ（１９９３）Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２０：６５−７４、Ｒｏｓｅｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ＆  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，１４：２０９−２０に開示されている。
【０６９９】
（ｂ）希土類キレート（ユーロピウムキレート）などの蛍光標識、ＦＩＴＣ、５−カルボキシフルオロセイン、６−カルボキシフルオロセインを含む、フルオレセインタイプ；ＴＡＭＲＡを含むローダミンタイプ；ダンシル；リサミン；シアニン；フィコエリトリン；テキサスレッド；及びこれらの類似体。蛍光標識は、例えば前出のＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙに開示される方法を用いて抗体と結合させることができる。蛍光色素及び蛍光標識試薬としては、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ（Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）及びＰｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ．）から市販されるものが挙げられる。
【０７００】
（ｃ）様々な酵素−基質標識が入手可能または開示されている（米国特許第４，２７５，１４９号）。酵素は一般的に、様々な方法を使用して測定することができる発色性基質の化学的変化を触媒する。例えば、酵素は、基質の色変化を触媒し得、基質の色変化は、分光光度計で測定することができる。あるいは、酵素は、基質の蛍光または化学発光を変化させ得る。蛍光の変化を定量化するための方法は上記に記載されている。化学発光基質は、化学反応より電子的に励起状態となった後、光を放射し得、この光を測定するか（例えば化学発光測定装置を使用して）またはこの光が蛍光受容体にエネルギーを供与することができる。酵素標識の例としては、ルシフェラーゼ（例えば、ホタルルシフェラーゼ及び細菌ルシフェラーゼ、米国特許第４，７３７，４５６号）、ルシフェリン、２，３−ジヒドロフタラジンジオン、リンゴ酸デヒドロゲナーゼ、ウレアーゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）などのペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ（ＡＰ）、β−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖オキシダーゼ（例えば、グルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、及びグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ）、複素環式オキシダーゼ（ウリカーゼ及びキサンチンオキシダーゼなど）、ラクトペルオキシダーゼ、ミクロペルオキシダーゼなどが挙げられる。酵素を抗体と結合するための方法は、Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎ  ｅｔ  ａｌ（１９８１）“Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｅ−Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ”，  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍ．（ｅｄ  Ｊ．Ｌａｎｇｏｎｅ  ＆  Ｈ．Ｖａｎ  Ｖｕｎａｋｉｓ），Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ７３：１４７−１６６に記載されている。
【０７０１】
標識された抗原結合コンストラクトは、以下のような生体医学及び分子イメージングの様々な方法及び技術によるイメージングバイオマーカー及びプローブとして有用である：（ｉ）ＭＲＩ（核磁気共鳴イメージング）、（ｉｉ）マイクロＣＴ（コンピュータ断層撮影）、（ｉｉｉ）ＳＰＥＣＴ（単一光子放出コンピュータ断層撮影）、（ｉｖ）陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）または免疫陽電子放出断層撮影（免疫ＰＥＴ）（ｖａｎ  Ｄｏｎｇｅｎ  Ｇ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ  “Ｉｍｍｕｎｏ−ＰＥＴ：ａ  ｎａｖｉｇａｔｏｒ  ｉｎ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ  ２００７；１２：１３７９−８９．（ｖ）生物発光、（ｖｉ）蛍光、及び（ｖｉｉ）超音波。免疫シンチグラフィーは、放射性物質で標識した抗体を動物またはヒト患者に投与し、抗体が局在化した体内の部位の写真を撮影するイメージング手法である（米国特許第６，５２８，６２４号）である。イメージングバイオマーカーは、正常な生物学的プロセス、病原プロセス、または治療的介入に対する薬理学的応答の指標として客観的に測定及び評価することができる。バイオマーカーはいくつかのタイプのものであり得る。０型は、疾患の天然の履歴マーカーであり、既知の臨床指標、例えば、関節リウマチにおける滑液包炎症のＭＲＩ評価と縦方向に相関する。Ｉ型マーカーは、作用機序が臨床転帰と関連しない場合もあるが、作用機序に従って介入の影響を捕捉する。ＩＩ型マーカーは、代理エンドポイントとして機能し、バイオマーカーの変化またはバイオマーカーからのシグナルが臨床的有益性を予測することで、例えばＣＴによる関節リウマチの測定された骨侵食などの標的応答を「検証」する。したがって、イメージングバイオマーカーは、（ｉ）標的タンパク質の発現、（ｉｉ）標的タンパク質への治療薬の結合（すなわち、選択性）、ならびに（ｉｉｉ）クリアランス及び半減期の薬物動態データについての薬力学的（ＰＤ）治療情報を提供することができる。検査室ベースのバイオマーカーに対するインビボのイメージングマーカーの利点としては、非侵襲的治療、定量可能な全身評価、反復投与及び評価（すなわち複数時点）、ならびに前臨床（小動物）から臨床（ヒト）結果に潜在的に移行可能な効果が挙げられる。いくつかの用途では、バイオイメージングは前臨床試験における動物実験に取って代わるか、またはその回数を最小限に抑える。
【０７０２】
ペプチドの標識方法は周知のものである（Ｈａｕｇｌａｎｄ，２００３，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｐｒｏｂｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｂｒｉｎｋｌｅｙ，１９９２，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．３：２、Ｇａｒｍａｎ，（１９９７）Ｎｏｎ−Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｌａｂｅｌｌｉｎｇ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ、Ｍｅａｎｓ（１９９０）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１：２；Ｇｌａｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９７５）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｔ．Ｓ．Ｗｏｒｋ  ａｎｄ  Ｅ．Ｗｏｒｋ，Ｅｄｓ．）Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｌｕｎｄｂｌａｄ，Ｒ．Ｌ．ａｎｄ  Ｎｏｙｅｓ，Ｃ．Ｍ．（１９８４）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｖｏｌｓ．Ｉ  ａｎｄ  ＩＩ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｐｆｌｅｉｄｅｒｅｒ，Ｇ．（１９８５）“Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ”，Ｍｏｄｅｒｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｈ．Ｔｓｃｈｅｓｃｈｅ，Ｅｄ．，Ｗａｌｔｅｒ  ＤｅＧｒｙｔｅｒ，Ｂｅｒｌｉｎ  ａｎｄ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、及びＷｏｎｇ（１９９１）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｉｎｇ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．）、Ｄｅ  Ｌｅｏｎ−Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  ｅｔ  ａｌ（２００４）Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．１０：１１４９−１１５５、Ｌｅｗｉｓ  ｅｔ  ａｌ（２００１）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１２：３２０−３２４；Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ（２００２）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１３：１１０−１１５、Ｍｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ（２００５）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１６：２３７−２４０を参照）。
【０７０３】
充分に近接した蛍光レポーターとクエンチャーの２つの部分で標識されたペプチド及びタンパク質は、ＦＲＥＴ（蛍光共鳴エネルギー移動）を起こす。レポーター基は通常、ある特定波長の光によって励起されてアクセプターまたはクエンチャー基にエネルギーを移行する蛍光色素であり、最大輝度の発光に適切なストークスシフトがみられる。蛍光色素には、フルオレセイン及びローダミン、及びそれらの誘導体など、芳香族性が拡張された分子が含まれる。蛍光レポーターは、インタクトなペプチド内のクエンチャー部分によって部分的または顕著に消光され得る。ペプチドがペプチダーゼまたはプロテアーゼによって切断される際に蛍光の検出可能な増加が測定される場合もある（Ｋｎｉｇｈｔ，Ｃ．（１９９５）“Ｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃ  Ａｓｓａｙｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ  Ｅｎｚｙｍｅｓ”，  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，２４８：１８−３４）。
【０７０４】
生検：
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に与えることと、特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの高いレベルに基づいて特定の腫瘍を生検に選択することと、特定の腫瘍から試料を採取することと、を含む。本明細書で提供されるＣＤ８の検出の実施形態のいずれにおいても、方法は、いくつかの実施形態では生検を行わずに行うことができる。同様に、いくつかの実施形態では、ＣＤ８の検出（例えば、ＣＤ８抗原結合コンストラクトまたはＣＤ８  ＰＥＴトレーサーなど）を用いる方法のいずれにおいても、方法は、侵襲的な技術または方法を用いずに（例えば、ＩＨＣが行われない、または必要とされない）行うことができる。
【０７０５】
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に与えることを含む。
【０７０６】
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に提供することと、特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの高まっているレベルに基づいて特定の腫瘍を生検に選択することと、を含む。
【０７０７】
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に提供することと、特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの高まっているレベルに基づいて特定の腫瘍を生検に選択することと、特定の腫瘍から試料を採取することと、を含む。
【０７０８】
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に提供することと、特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの分布に基づいて、生検するための腫瘍内の特定の位置を選択することと、腫瘍内の特定の位置から試料を採取することと、を含む。特定の位置は、腫瘍の内部または腫瘍の表面上にある。
【０７０９】
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に提供することを含む。
【０７１０】
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に提供することと、特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの分布に基づいて、生検するための腫瘍内の特定の位置を選択することと、を含む。
【０７１１】
いくつかの実施形態では、対象に生検を行う方法は、ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に提供することと、特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの分布に基づいて、生検するための腫瘍内の特定の位置を選択することと、腫瘍内の特定の位置から試料を採取することと、を含む。
【０７１２】
ｉｒＡＥ
いくつかの実施形態では、免疫関連有害事象（ｉｒＡＥ）を検出する方法は、チェックポイント阻害剤療法を行っているヒト対象を特定することと、検出可能な標識を含むＣＤ８抗原結合コンストラクトをヒト対象に投与することと、対象内の検出可能な標識を監視して免疫関連毒性があるかどうかを判定することと、を含む。ｉｒＡＥは、ＰＤ−１−ＰＤＬ−１軸（または他の標的）を標的とする多くのＩＯＴは、消化管、肺、及び甲状腺をはじめとする正常組織に対する免疫攻撃も促進し得ることから生じ得る。このような免疫関連有害事象は相当の頻度で生じ、一部の患者では、重篤な、時として致命的な結果をもたらす。ヒト化されたＣＰＩの長いインビボｔ１／２が、これらの毒性に寄与していることが示唆されている。免疫関連毒性は、ＣＤ８結合の局在化の増加により示される。したがって、本発明は、ＣＰＩによって引き起こされる非腫瘍組織のｉｒＡＥを特定するための迅速で非侵襲的な方法を提供するものである。方法は、免疫ＰＥＴをＣＤ８抗原結合コンストラクトとともに用いることで、ＣＰＩ療法を投与している患者の非腫瘍組織へのＣＤ８保有細胞の異常な集積特定する。免疫関連毒性が重症または不可逆的である場合にはチェックポイント阻害剤療法を停止し、免疫関連毒性が重症または不可逆的でない場合にはチェックポイント阻害剤療法を保留して、ＣＤ８レベルが低いレベルに戻るまでＣＤ８レベルの監視を続ける。いくつかの実施形態では、ｉｒＡＥを検出する方法は、チェックポイント阻害剤療法を行っているヒト対象を特定することを含む。ｉｒＡＥを検出する方法のいくつかの実施形態では、腫瘍の位置が、どの臓器または系がｉｒＡＥを生じているかを示す。
【０７１３】
上記のいずれかと組み合わせる／それらに置き換わることができる更なる実施形態
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、０．５〜３．０ｍＣｉ±２０％の量の放射線量が投与される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、０．５〜３．０ｍＣｉ±１０％の量の放射線量が投与される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、０．５〜３．０ｍＣｉ±５％の量の放射線量が投与される。
【０７１４】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、０．４〜３．６ｍＣｉの量の放射線量が投与される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、０．４５〜３．３ｍＣｉの量の放射線量が投与される。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、０．４７５〜３．１５ｍＣｉの量の放射線量が投与される。
【０７１５】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、抗原結合コンストラクトの量は、０．２〜１０ｍｇである。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、抗原結合コンストラクトの量は、約０．１、０．２． ０．５、１、２．５、５、７．５、１０、１２．５、１５、１７．５、または２０ｍｇ、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値である。
【０７１６】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＣＤ８抗原結合コンストラクトのサイズは１０５ｋＤａ未満である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＣＤ８抗原結合コンストラクトのサイズは、約７５、８０、８５、９０、９５、１００、または１０５ ｋＤａ未満、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値である。
【０７１７】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは、８９Ｚｒに結合される。
【０７１８】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、抗原結合コンストラクトの投与後、プロセスの次工程の前に６〜３６時間が経過する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、抗原結合コンストラクトの投与後、プロセスの次工程の前に約６、９、１２、１５、１８、２１、２４、２７、３０、３３、または３６時間、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値の時間が経過する。
【０７１９】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＰＥＴスキャン時間は４０分間未満である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＰＥＴスキャン時間は約３０、２５、２０、１５、１０、または５分間、または上記の値のうちの任意の２つによって定義される範囲内の値の時間である。
【０７２０】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＰＥＴスキャン時間は、２５分間未満かつ２分間超である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＰＥＴスキャン時間は２５分間未満かつ５分間超である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＰＥＴスキャン時間は２５分間未満かつ１０分間超である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＰＥＴスキャン時間は２５分間未満かつ１５分間超である。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＰＥＴスキャン時間は２５分間未満かつ２０分間超である。
【０７２１】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象に治療薬が投与され、治療薬は、エフチラジモド・α（ｅｆｔｉｌａｇｉｍｏｄ ａｌｐｈａ）、レラトリマブ、ＯＭＰ−３１３Ｍ３２、ＥＯＳ８８４４４８８、ＴＪＴ６、ＡＢ１５４、及び二重ＴＩＧＩＴ／ＰＤ−Ｌ１標的化小分子薬のうちの少なくとも１つから選択される。
【０７２２】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象に治療薬が投与され、治療薬は、ＬＡＧ−３に対する抗体、ＴＩＧＩＴに対する抗体、ＭＫ−４２８０、ＭＫ−７６８４、及び／または上記のいずれかとキイトルーダとの組み合わせのうちの少なくとも１つから選択される。
【０７２３】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象に治療薬が投与され、治療薬は、ＥＯＳ８８４４４８８、ＴＪＴ６、ＡＢ１５４、オーリジーン、及び二重ＴＩＧＩＴ／ＰＤ−Ｌ１阻害剤のうちの少なくとも１つから選択される。
【０７２４】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、状態は、（Ａ）ｉ）免疫炎症型、またはｉｉ）免疫排除型もしくは免疫砂漠型、（Ｂ）均一な浸潤、不均一な浸潤、及び／または（Ｃ）炎症型腫瘍について、高度、中度、低度の炎症のうちの１つ以上から選択される。
【０７２５】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体の少なくとも３０％が、ＣＤ８＋ＴＩＬ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体の少なくとも４０％が、ＣＤ８＋Ｔ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体の少なくとも５０％が、ＣＤ８＋Ｔ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体の少なくとも６０％が、ＣＤ８＋Ｔ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体の少なくとも７０％が、ＣＤ８＋Ｔ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体の少なくとも８０％が、ＣＤ８＋Ｔ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体の少なくとも９０％が、ＣＤ８＋Ｔ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、対象の身体１００％が、ＣＤ８＋Ｔ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる。
【０７２６】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＣＤ８＋Ｔ細胞の存在、ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化、ＣＤ８＋Ｔ細胞の数、または腫瘍病変に対するＣＤ８＋Ｔ細胞の輸送を変化させる治療を更に含む。
【０７２７】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、治療は、化学療法、腫瘍溶解ウイルス、ワクチン、放射線療法、細胞療法などのうちの少なくとも１つを含む。
【０７２８】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、または本明細書で提供される組成物のいずれかにおいて、ＣＤ８ミニボディは、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、重鎖可変領域はヒトアミノ酸配列から本質的に構成され、軽鎖可変領域はヒトアミノ酸配列から本質的に構成される。
【０７２９】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ＣＤ８ミニボディは、配列番号２４、１３４、及び／または１３５（図３４及び３３）のうちの少なくとも１つの配列からなるＣＤ８配列に結合する。
【０７３０】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ミニボディは、本明細書で提供されるＣＤＲの配列番号のいずれかの重鎖ＣＤＲと、本明細書で提供されるＣＤＲの配列番号のいずれかの軽鎖ＣＤＲとを含む。
【０７３１】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、ミニボディは、本明細書で提供される重鎖の配列番号のいずれかの重鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域と、本明細書で提供される重鎖の配列番号のいずれかの軽鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域とを含む。
【０７３２】
本明細書の方法の実施形態のいずれかにおいて、既知の腫瘍は、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病、悪性リンパ腫、扁平細胞癌（例えば、扁平上皮細胞癌）、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌、消化器癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿道癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、多発性骨髄腫及びＢ細胞リンパ腫、脳腫瘍、頭頸部癌、成人及び小児の固形癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、古典的ホジキンリンパ腫、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、尿路上皮癌、高頻度マイクロサテライト不安定性癌、子宮頸癌、メルケル細胞癌、食道癌、皮膚扁平上皮癌、前立腺癌、鼻咽頭癌、小細胞肺中皮腫、原発性縦隔Ｂ細胞性リンパ腫、及び固形腫瘍のうちの１つ以上のがんから選択される。
【０７３３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法で使用するための、または薬剤として使用するための抗原結合コンストラクトが提供される。
【０７３４】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法で使用するための、または薬剤として使用するためのＣＤ８  ＰＥＴトレーサーが提供される。
【０７３５】
いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトまたはＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは、０．５よりも高いが１．０ｍＣｉよりも低い放射線を与える放射性標識を有する。いくつかの実施形態では、抗原結合コンストラクトまたはＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは０．７５ｍＣｉよりも低い放射線を与える放射性標識を有する。
【０７３６】
いくつかの実施形態では、製剤、抗原結合コンストラクト、またはＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは、イメージング、検出、診断、手術、ステージ分類、治療、治療の監視、疾患の進行の監視、及び療法の監視のうちの少なくとも１つで使用するためのものである。
【０７３７】
いくつかの実施形態では、組成物、製剤、抗原結合コンストラクト、またはＣＤ８  ＰＥＴトレーサーは、イメージング、検出、診断、手術、ステージ分類、治療、治療の監視、疾患の進行の監視、及びＣＤ８依存性疾患、場合によりがんの療法の監視のうちの少なくとも１つで使用するためのものである。
【０７３８】
更なる実施形態
いくつかの実施形態では、患者ケアサイクルと、スクリーニング及び患者選択用の診断テストを含むダイナミックワークフローが提供される（図５６）。
【０７３９】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定される（５６０８）。
【０７４０】
いくつかの実施形態では、がんを有すると特定された患者 （５６０８）が、がんのタイプ、イメージングデータ（ＣＴ、ＰＥＴ、ＭＲＩ、ＵＳ）、腫瘍生検及び病理学、臨床検査、分子診断テスト（例えば、ＰＣＲ、シークエンシング）に基づいて診断及びステージ分類される（５６０９）。
【０７４１】
いくつかの実施形態では、がんを有すると特定された患者（５６０８）からの腫瘍生検（５６１０）が診断及びステージ分類され（５６０９）、標準治療マーカー及び更なるバイオマーカーの基準について腫瘍生検を試験することに基づいてスクリーニング及び患者選択に用いられる（５６１１）。
【０７４２】
いくつかの実施形態では、がんを有すると特定された患者（５６０８）からの腫瘍組織生検（５６１０）が診断及びステージ分類され（５６０９）、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１を標的とするＣＰＩ療法の予後マーカーであるＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣについてスクリーニングされる（５６０１）。いくつかの実施形態では、ペムブロリズマブまたはその代替薬がＰＤ−Ｌ１陽性ＮＳＣＬＣ、胃癌及び子宮頸癌に適応される。
【０７４３】
いくつかの実施形態では、がんを有すると特定された患者（５６０８）からの腫瘍組織生検（５６１０）が診断及びステージ分類され（５６０９）、ＭＳＩ−ＨまたはｄＭＭＲ患者に適応されるいくつかのＣＰＩを用いたＣＰＩ療法の予後マーカーとして用いられるマイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）についてスクリーニングされる（５６０２）。いくつかの実施形態では、ペムブロリズマブまたはその代替薬がすべてのＭＳＩ−Ｈ腫瘍における使用に適応される。いくつかの実施形態では、ニボルマブまたはその代替薬がＭＳＩ−ＨまたはｄＭＭＲ転移性ＣＲＣに適応される。
【０７４４】
いくつかの実施形態では、がんを有すると特定された患者（５６０８）からの腫瘍生検（５６１０）が診断及びステージ分類され（５６０９）、腫瘍変異負荷の新たなマーカーであるＴＭＢについてスクリーニングされる（５６０３）（Ｆ１ＣＤｘ）。いくつかの実施形態では、高いＴＭＢはＣＰＩ療法に対する応答についての予測を与えることができる。いくつかの実施形態では、腫瘍タイプ及び試験による変動性、ならびにカットオフ測定基準の定義のため、臨床試験としてＴＭＢを実施することは困難な場合がある。
【０７４５】
いくつかの実施形態では、がんを有すると特定された患者（５６０８）からの腫瘍生検（５６１０）が診断及びステージ分類され（５６０９）、ＩＨＣにより腫瘍免疫マーカー（ＴＩＭ）についてスクリーニングされる（５６０４）。いくつかの実施形態では、ＴＩＭは、腫瘍が免疫学的に活性であったかどうか、例えば、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の存在及びタイプを評価するために使用される。
【０７４６】
いくつかの実施形態では、腫瘍生検（５６１０）を検査して得られた情報に基づき、腫瘍のタイプ及びステージがＣＰＩに適格であるかどうかが判定される（５６１２）。
【０７４７】
いくつかの実施形態では、腫瘍生検（５６１０）を検査して得られた情報に基づき、腫瘍がアクショナブルドライバー変異を含むかどうかが判定される（５６１３）。
【０７４８】
いくつかの実施形態では、腫瘍生検（５６１０）を検査して得られた情報に基づき、腫瘍のタイプ及びステージがＣＰＩに適格であるかどうか及び腫瘍がアクショナブルドライバー変異を含むかどうかが判定される（５６１３）。
【０７４９】
いくつかの実施形態では、腫瘍がアクショナブルドライバー変異を有していた場合（５６１３）、標的化療法と組み合わせた、またはその後の二次選択療法としての免疫療法を考慮した（５６１６）変異特異的療法（５６１５）を用いる。
【０７５０】
いくつかの実施形態では、腫瘍のタイプ及びステージがＣＰＩに適格である場合（５６１２）、ＩＨＣによるＰＤ−Ｌ１についてのスクリーニング（５６０１）、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）（５６０２）、及びＴＭＢ（５６０３）についてのスクリーニング、ならびに循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）（５６０５）、ＰＤＬ−１のＰＥＴイメージング（５６０６）、Ｔ細胞活性のマーカー（グランザイムＢ、ＶｉｓＡｃｔ、またはＩＬ２）（５６０７）などの更なるバイオマーカーの評価、及び臨床評価を伴う、ＣＰＩ適格性スクリーニングを行う（５６１４）。
【０７５１】
いくつかの実施形態では、腫瘍がアクショナブルドライバー変異を有していなかった場合（５６１３）、ＩＨＣによるＰＤ−Ｌ１についてのスクリーニング（５６０１）、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）（５６０２）、及びＴＭＢ（５６０３）についてスクリーニング、ならびに循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）（５６０５）、ＰＤＬ−１のＰＥＴイメージング（５６０６）、Ｔ細胞活性のマーカー（グランザイムＢ、ＶｉｓＡｃｔ、またはＩＬ２）（５６０７）などの更なるバイオマーカーの評価、及び臨床評価を伴う、ＣＰＩ適格性スクリーニングを行う（５６１４）。
【０７５２】
いくつかの実施形態では、更なるバイオマーカーの評価は、ＣＴＣ（循環腫瘍細胞）について患者血液試料をスクリーニングすることを含む（５６０５）。
【０７５３】
いくつかの実施形態では、更なるバイオマーカーの評価は、ＰＤＬ−１  ＩＨＣ検査の可能な代替検査としてＰＥＴによりＰＤＬ−１について腫瘍組織生検をイメージングすること（５６０６）を含む。
【０７５４】
いくつかの実施形態では、更なるバイオマーカーの評価は、細胞内サイトカイン染色によってグランザイムＢ、ＶｉｓＡｃｔ（登録商標）（Ｃｅｌｌ Ｓｌｉｇｈｔ）、及びＩＬ２を測定することによりＴ細胞活性について腫瘍組織生検をイメージングすること（５６０７）を含む。
【０７５５】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５６１７）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５６２１）。
【０７５６】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＩＨＣ（５６０１）及びＰＥＴによるＰＤ−Ｌ１（５６０６）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明したかどうかを判定する（５６１８）。がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明した場合（５６１８）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５６２１）、すなわち、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５６２３）。
【０７５７】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＩＨＣ（５６０１）及びＰＥＴによるＰＤ−Ｌ１（５６０６）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明したかどうかを判定する（５６１８）。がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明した場合（５６１８）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５６２１）、すなわち、患者を代替的／他の療法に適応すべきかどうかを判定する（５６２２）。
【０７５８】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１のＩＨＣ（５６０１）及びＰＥＴによるＰＤ−Ｌ１（５６０６）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明したかどうかを判定する（５６１８）。がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明した場合（５６１８）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５６２１）、すなわち、患者をＣＰＩ療法（５６２２）及び代替的／他の療法（５６２３）に適応すべきかどうかを判定する。
【０７５９】
いくつかの実施形態では、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）（５６０２）、及びＴＭＢ（５６０３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんが高い変異負荷を有することが判明したかどうかを判定する（５６１９）。がんが高い変異負荷を有することが判明した場合（５６１９）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５６２１）、すなわち、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５６２２）。
【０７６０】
いくつかの実施形態では、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）（５６０２）、及びＴＭＢ（５６０３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんが高い変異負荷を有することが判明したかどうかを判定する（５６１９）。がんが高い変異負荷を有することが判明した場合（５６１９）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５６２１）、すなわち、患者を代替的／他の療法に適応すべきかどうかを判定する（５６２３）。
【０７６１】
いくつかの実施形態では、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）（５６０２）、及びＴＭＢ（５６０３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんが高い変異負荷を有することが判明したかどうかを判定する（５６１９）。がんが高い変異負荷を有することが判明した場合（５６１９）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５６２１）、すなわち、患者をＣＰＩ療法（５６２３）及び代替的／他の療法（５６２２）に適応すべきかどうかを判定する。
【０７６２】
いくつかの実施形態では、腫瘍免疫マーカー（５６０４）、及びＴ細胞活性（５６０７）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんの免疫微小環境がホットな腫瘍免疫応答を有するかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有するかを判定する（５６２０）。がんが「ホット」な腫瘍免疫応答を示す場合（５６２０）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５６２２）を判定する（５６２１）。
【０７６３】
いくつかの実施形態では、腫瘍免疫マーカー（５６０４）、及びＴ細胞活性（５６０７）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんの免疫微小環境がホットな腫瘍免疫応答を有するかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有するかを判定する（５６２０）。がんが「ホット」な腫瘍免疫応答を示す場合（５６２０）、患者を代替的／他の療法（５６２３）に適応すべきか否かを判定する（５６２１）。
【０７６４】
いくつかの実施形態では、腫瘍免疫マーカー（５６０４）、及びＴ細胞活性（５６０７）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５６１４）に基づき、がんの免疫微小環境がホットな腫瘍免疫応答を有するかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有するかを判定する（５６２０）。がんが「ホット」な腫瘍免疫応答を示す場合（５６２０）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかまたは代替的／他の療法（５６２３）に適応すべきか否かを判定する（５６２１）。
【０７６５】
いくつかの実施形態では、患者ケアサイクルと、治療の開始及び有効性を監視するための診断テストを含むダイナミックワークフローが提供される（図５７）。
【０７６６】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法に適応される患者が特定される（５７１１）。
【０７６７】
いくつかの実施形態では、治療レジメンが選択され、ＣＰＩ療法に適応される患者（５７１１）に療法が開始される（５７１２）。
【０７６８】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法に適応される患者（５７１１）に対して選択される治療レジメン及び開始される療法（５７１２）は、単独または複合ＣＰＩ、選択ＣＰＩ  Ｒｘ（ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４）、及び／または非ＣＤ８療法を含む。いくつかの実施形態では、承認されたＣＰＩには、ＰＤ−１チェックポイント阻害剤（ペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、ＰＤ−Ｌ１チェックポイント阻害剤（アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤（イピリムマブ）、または代替薬が含まれる。その後、いくつかの実施形態では、イメージング及び／または臨床評価に基づいて療法の有効性が監視される。
【０７６９】
いくつかの実施形態では、療法の有効性が監視される（５７１３）。
【０７７０】
いくつかの実施形態では、イメージング（５７２０）及び／または臨床評価に基づいて療法の有効性が監視される（５７１３）。
【０７７１】
いくつかの実施形態では、標準治療のイメージング（５７２０）に基づいて療法の有効性が監視され（５７１３）、有効性は、全体の臨床評価を伴う、ＣＴによる腫瘍負荷の判定（５７０８）を含む。いくつかの実施形態では、臨床試験におけるＣＴによる腫瘍負荷の評価（５７０８）において、ＣＴによる腫瘍負荷は、造影ＣＴ（５７０８）のＲＥＣＩＳＴ １．１基準により判定される。いくつかの実施形態では、ＣＴによる腫瘍負荷の評価は、ベースライン及び（ｔ１）約６〜１２週間、（ｔ２）ｔ１の約４〜１２週間後、その後、約６〜１２週間置きのイメージングを含む（５６０８）。
【０７７２】
いくつかの実施形態では、標準治療のイメージング（５７２０）に基づいて療法の有効性が監視され（５７１３）、有効性はＰＥＴ（５７０９）による腫瘍代謝の評価を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＴによる腫瘍代謝の評価（５７０９）は、腫瘍代謝を腫瘍増殖及び活性の指標として監視するためのＦＤＧ−ＰＥＴによるイメージングを伴う（５７０９）。
【０７７３】
いくつかの実施形態では、ＣＴによる腫瘍負荷の判定（５７０８）に基づいて、治療に対する応答があるかどうかに関する判定が行われる（５７１４）。
【０７７４】
いくつかの実施形態では、ＰＥＴによる腫瘍代謝の評価（５７０９）に基づいて、治療に対する応答があるかどうかに関する判定が行われる（５７１４）。
【０７７５】
いくつかの実施形態では、ＣＴによる腫瘍負荷の判定（５７０８）及びＰＥＴによる腫瘍代謝の評価（５７０９）に基づいて、治療に対する応答があるかどうかに関する判定が行われる（５７１４）。
【０７７６】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答があると判定された場合、療法が完了しているかどうかが判定される（５７１６）。
【０７７７】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答があると判定された場合、療法が完了しているかどうかが判定される（５７１６）。療法が完了していない場合、ＣＰＩ療法は継続される（５７１７）。
【０７７８】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答があると判定された場合、療法が完了しているかどうかが判定される（５７１６）。
【０７７９】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答があると判定された場合、療法が完了しているかどうかが判定される（５７１６）。療法が完了している場合、ＣＰＩ療法は停止される（５７１８）。
【０７８０】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答がないと判定された場合、更なるイメージング及び／または臨床評価が行われる。
【０７８１】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答がないと判定された場合、更なるイメージング及び／または臨床評価は、疑似進行を除外することを含む（５７１０）。ＣＴによる腫瘍負荷のイメージング（５７０８）が進行を示す場合、患者をその後少なくとも４週間フォローアップしてその後の ｉＲＣまたはｉＲＥＣＩＳＴガイダンスを確認して疑似進行を除外する（５７１０）。いくつかの実施形態では、ＦＤＧ−ＰＥＴも用いられる（５７０９）。
【０７８２】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答がないと判定された場合、疑似進行を除外する更なるイメージング及び／または臨床評価が行われ（５７１０）、場合により、有効性が監視される（５７１３）。
【０７８３】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答がないと判定された場合、療法は変更される（５７１５）。
【０７８４】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答がないと判定された場合、ＣＰＩの用量またはレジメンの変更を含めて、療法は変更される（５７１５）。
【０７８５】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答がないと判定された場合、非ＣＰＩ療法を含めて、療法は変更される（５７１５）。
【０７８６】
いくつかの実施形態では、治療に対する応答の評価（５７１４）に基づいて、治療に対する応答がないと判定された場合、ＣＰＩの用量またはレジメンの変更及び非ＣＰＩ療法を含めて、療法は変更される（５７１５）。
【０７８７】
いくつかの実施形態では、患者ケアサイクルと、毒性について治療を監視するための診断テストを含むダイナミックワークフローが提供される（図５８）。
【０７８８】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法を行っている患者が特定される（５８１３）。
【０７８９】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法を行っている患者が特定され（５８１３）、治療レジメンが選択され、療法が開始される（５８１４）。
【０７９０】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法を行っている患者が特定され（５８１３）、治療レジメンが選択され、単独または複合ＣＰＩ、選択ＣＰＩ  Ｒｘ（ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４）、及び／または非ＣＤ８療法を含む、療法が開始される（５８１４）。いくつかの実施形態では、承認されたＣＰＩには、ＰＤ−１チェックポイント阻害剤（ペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、ＰＤ−Ｌ１チェックポイント阻害剤（アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤（イピリムマブ）、または代替薬が含まれる。
【０７９１】
いくつかの実施形態では、治療レジメンが選択され、治療が開始される（５８１４）、ＣＰＩ治療を行っている患者（５８１３）は、毒性（免疫関連有害事象ｉｒＡＥ）について監視される（５８１５）。
【０７９２】
いくつかの実施形態では、治療レジメンを選択し、治療が開始される（５８１４）、ＣＰＩ治療を行っている患者（５８１３）は、患者履歴、イメージング、及び／または臨床検査に基づいて毒性（ｉｒＡＥ）について監視される（５８１５）。
【０７９３】
いくつかの実施形態では、治療レジメンを選択し、治療が開始される（５８１４）、ＣＰＩ治療を行っている患者（５８１３）は、毒性（ｉｒＡＥ）について監視される（５８１５）。いくつかの実施形態では、標準治療のモニタリングテスト（５８２３）は、免疫関連毒性検出（５８１１）及びｉｒＡＥの鑑別診断（５８１２）を含む。
【０７９４】
いくつかの実施形態では、治療レジメンを選択し、治療が開始される（５８１４）、ＣＰＩ治療を行っている患者（５８１３）は、毒性（ｉｒＡＥ）について監視される（５８１５）。いくつかの実施形態では、標準治療のモニタリングテストは、患者履歴、臨床検査、及び／またはＣＴ及び／またはＭＲＩに基づくイメージングを含む免疫関連毒性検出（５８１１）を含む。
【０７９５】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性検出（５８１１）に基づく毒性についての監視の後、毒性に関して判定が行われる（５８１６）。
【０７９６】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性検出（５８１１）に基づく毒性についての監視の後、毒性に関して判定が行われる（５８１６）。毒性がない場合、ＣＰＩ治療は継続／再開される（５８１７）。
【０７９７】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性検出（５８１１）に基づく毒性についての監視の後、毒性に関して判定が行われる（５８１６）。毒性がない場合、単独または複合ＣＰＩ療法を含め、ＣＰＩ治療は継続／再開される（５８１７）。
【０７９８】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性検出（５８１１）に基づく毒性についての監視の後、毒性に関して判定が行われる（５８１６）。毒性がある場合、ｉｒＡＥの鑑別診断（５８１２）に基づく評価を行って免疫関連毒性の診断を確定し、他の原因を除外し、患者毒性の直接管理を行う。この評価には、患者履歴、臨床検査、イメージングによる診断が含まれる。
【０７９９】
いくつかの実施形態では、ｉｒＡＥの鑑別診断に基づく評価（５８１２）の後、場合により、免疫療法を継続しながら毒性を治療する（５８１８）。
【０８００】
いくつかの実施形態では、ｉｒＡＥの鑑別診断に基づく評価（５８１２）の後、毒性が重症または不可逆的であるかどうかが判定される（５８１９）。
【０８０１】
いくつかの実施形態では、ｉｒＡＥの鑑別診断に基づく評価（５８１２）の後、毒性が重症または不可逆的であることが判定された場合（５８１９）、ＣＰＩ治療は停止され、免疫抑制剤が開始される（５８２２）。
【０８０２】
いくつかの実施形態では、ｉｒＡＥの鑑別診断に基づく評価（５８１２）の後、毒性が重症または不可逆的であることが判定された場合（５８１９）、ＣＰＩ治療は停止され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始される（５８２２）。
【０８０３】
いくつかの実施形態では、ｉｒＡＥの鑑別診断に基づく評価（５８１２）の後、毒性が重症または不可逆的でないことが判定された場合（５８１９）、ＣＰＩ治療は保留され、免疫抑制剤が開始される（５８２０）。
【０８０４】
いくつかの実施形態では、ｉｒＡＥの鑑別診断に基づく評価（５８１２）の後、毒性が重症または不可逆的でないことが判定された場合（５８１９）、ＣＰＩ治療は保留され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始される（５８２０）。
【０８０５】
いくつかの実施形態では、毒性が重症または不可逆的でないことが判定された（５８１９）後、かつＣＰＩ治療が保留され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始された（５８２０）後、毒性が解消されたかどうかが評価される（５８２１）。
【０８０６】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（５８２１）が、毒性が解消されていないことを示した場合、ＣＰＩ治療は停止され、免疫抑制剤が開始される（５８２２）。
【０８０７】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（５８２１）が、毒性が解消されていないことを示した場合、ＣＰＩ治療は停止され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始される（５８２２）。
【０８０８】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（５８２１）が、毒性が解消されたことを示した場合、ＣＰＩ治療は継続／再開される（５８１７）。
【０８０９】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（５８２１）が、毒性が解消されたことを示した場合、単独または複合ＣＰＩ療法を含むＣＰＩ治療が継続／再開される（５８１７）。
【０８１０】
いくつかの実施形態では、患者ケアサイクルと、製品コンセプト使用事例についてのスクリーニング及び患者選択用の診断テストを含むダイナミックワークフローが提供される（図５９）。
【０８１１】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定される（５９０４）。
【０８１２】
いくつかの実施形態では、がんを有すると特定された患者 （５９０４）が、がんのタイプ、イメージングデータ（ＣＴ、ＰＥＴ、ＭＲＩ、ＵＳ）、腫瘍生検及び病理学、臨床検査、分子診断テスト（例えば、ＰＣＲ、シークエンシング）に基づいて診断及びステージ分類される（５９０５）。
【０８１３】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、Ｔ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）。
【０８１４】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、インビボのＴ細胞輸送の検出（５９０１）を含むＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）。
【０８１５】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、インビボのＴ細胞輸送の検出（５９０１）を含むＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）ことで、療法の決定が導かれる。いくつかの実施形態では、インビボのＴ細胞輸送の検出（５９０１）は、患者の全身の免疫状態（例えば、Ｔ細胞輸送）の目安を与える（５９２１）。
【０８１６】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、インビボのＴ細胞輸送の検出（５９０１）を含むＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）ことで、療法の決定が導かれる。いくつかの実施形態では、インビボのＴ細胞輸送の検出（５９０１）は、（ｉ）全体のがん免疫負荷、及び／または（ｉｉ）各腫瘍病変の免疫状態（例えば、Ｔ細胞輸送）を含む、患者のがんの免疫状態（例えば、Ｔ細胞輸送）（５９２２）の目安を与える。
【０８１７】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、インビボのＴ細胞輸送の検出（５９０１）を含むＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）ことで、療法の決定が導かれる。いくつかの実施形態では、インビボのＴ細胞輸送の検出（５９０１）は、（ｉ）全体のがん免疫負荷、及び／または（ｉｉ）各腫瘍病変の免疫状態（例えば、Ｔ細胞輸送）を含む、患者の全身の免疫状態（５９２１）（例えば、Ｔ細胞輸送）及び患者のがんの免疫状態（例えば、Ｔ細胞輸送）（５９２２）の目安を与える。
【０８１８】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、療法選択を導くために用いられる疾患予後の試験（５９０２）としてＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）。
【０８１９】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、ＣＰＩ療法に対する応答を予測するための試験（５９０３）としてＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）。
【０８２０】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、ＣＰＩ療法に対する応答を予測するための試験（５９０３）としてＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）ことで、ＣＰＩ療法が有益となることからＣＰＩ療法を使用するべき患者が特定される（５９２３）。
【０８２１】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、ＣＰＩ療法に対する応答を予測するための試験（５９０３）としてＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）ことで、ＣＰＩ療法が有用とならないことからＣＰＩ療法を使用するべきでない患者が特定される（５９２４）。
【０８２２】
いくつかの実施形態では、がんを有する患者が特定され（５９０４）、診断及びステージ分類され（５９０５）、腫瘍生検が採取され（５９０６）、ＣＰＩ療法に対する応答を予測するための試験（５９０３）としてＴ細胞のＰＥＴイメージングが行われる（５９０７）ことで、Ａ．ＣＰＩ療法が有益となることからＣＰＩ療法を使用するべき患者が特定され（５９２３）、また、ＣＰＩ療法が有用とならないことからＣＰＩ療法を使用するべきでない患者が特定される（５９２４）。
【０８２３】
いくつかの実施形態では、腫瘍生検を検査（５９０６）して得られた情報に基づき、またはＴ細胞のＰＥＴイメージング（５９０７）に基づき、腫瘍のタイプ及びステージがＣＰＩに適格であるかどうかが判定される（５９０８）。
【０８２４】
いくつかの実施形態では、腫瘍生検を検査（５９０６）して得られた情報に基づき、またはＴ細胞のＰＥＴイメージング（５９０７）に基づき、腫瘍がアクショナブルドライバー変異を含むかどうかが判定される（５９０９）。
【０８２５】
いくつかの実施形態では、腫瘍生検を検査（５９０６）して得られた情報に基づき、またはＴ細胞のＰＥＴイメージング（５９０７）に基づき、腫瘍のタイプ及びステージがＣＰＩに適格であるかどうか（５９０８）、及び腫瘍がアクショナブルドライバー変異を含むかどうか（５９０９）が判定される。
【０８２６】
いくつかの実施形態では、腫瘍がアクショナブルドライバー変異を有していた場合（５９０８）、標的化療法と組み合わせた、またはその後の二次選択療法としての免疫療法を考慮した（５９１２）変異特異的療法（５９１１）を用いる。
【０８２７】
いくつかの実施形態では、腫瘍のタイプ及びステージがＣＰＩに適格である場合（５９０８）、ＩＨＣによりＰＤ−Ｌ１について（５６０１、図５６）、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）（５６０２、図５６）、及びＴＭＢ（５６０３、図５６）についてのスクリーニング、ならびに更なるバイオマーカーの評価（５６０５〜５６０７、図５６）、及び臨床評価を伴う、ＣＰＩ適格性スクリーニングを行う（５９１０）。
【０８２８】
いくつかの実施形態では、腫瘍がアクショナブルドライバー変異を含んでいなかった場合（５９０９）、ＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣ（５６０１、図５６）、マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）及びミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）（５６０２、図５６）、及びＴＭＢ（５６０３、図５６）についてのスクリーニング、ならびに更なるバイオマーカーの評価（５６０５〜５６０７、図５６）、及び臨床評価を伴う、ＣＰＩ適格性スクリーニングを行う（５９１０）。
【０８２９】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１７）。
【０８３０】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明したかどうかを判定する（５９１４）。がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明した場合（５９１４）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否かを判定する（５９１７）。
【０８３１】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明したかどうかを判定する（５９１４）。がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明した場合（５９１４）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者を代替的／他の療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１８）。
【０８３２】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明したかどうかを判定する（５９１４）。がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明した場合（５９１４）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１９）。
【０８３３】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明したかどうかを判定する（５９１４）。がんがＰＤ−Ｌ１＋であることが判明した場合（５９１４）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者を代替的／他の療法に適応すべきかどうか（５９１８）、または患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１９）。
【０８３４】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんが高い変異負荷を有することが判明したかどうかを判定する（５９１５）。がん高い変異負荷を有することが判明した場合（５９１５）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否かを判定する（５９１７）。
【０８３５】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんが高い変異負荷を有することが判明したかどうかを判定する（５９１５）。がんが高い変異負荷を有することが判明した場合（５９１５）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者を代替的／他の療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１８）。
【０８３６】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんが高い変異負荷を有することが判明したかどうかを判定する（５９１５）。がんが高い変異負荷を有することが判明した場合（５９１５）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１９）。
【０８３７】
いくつかの実施形態では、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんが高い変異負荷を有することが判明したかどうかを判定する（５９１５）。がん高い変異負荷を有することが判明した場合（５９１５）、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者を代替的／他の療法に適応すべきかどうか（５９１８）、及び患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１９）。
【０８３８】
いくつかの実施形態では、代替法として、インビボでのＴ細胞輸送の検出（５９０１）、療法の選択を導くために用いられる疾患予後についての検査（５９０２）、及び／またはＣＰＩ療法に対する応答を予測するための検査（５９０３）を含む、標準的及び更なるバイオマーカー（５９１３）についてのＣＰＩ適格性スクリーニング（５９１０）に基づき、がんがホットな腫瘍免疫応答を有したかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有したかが判定される（５９１６）。
【０８３９】
いくつかの実施形態では、がんがホットな腫瘍免疫応答を有したかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有したかの判定（５９１６）に基づき、がんが「ホット」な腫瘍免疫応答を示したと判定された場合、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否かを判定する（５９１７）。
【０８４０】
いくつかの実施形態では、がんがホットな腫瘍免疫応答を有したかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有したかの判定（５９１６）に基づき、がんが「ホット」な腫瘍免疫応答を示したと判定された場合、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者を代替的／他の療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１８）。
【０８４１】
いくつかの実施形態では、がんがホットな腫瘍免疫応答を有したかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有したかの判定（５９１６）に基づき、がんが「ホット」な腫瘍免疫応答を示したと判定された場合、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者をＣＰＩ療法に適応すべきかどうかを判定する（５９１９）。
【０８４２】
いくつかの実施形態では、がんがホットな腫瘍免疫応答を有したかまたはコールドな腫瘍免疫応答を有したかの判定（５９１６）に基づき、がんが「ホット」な腫瘍免疫応答を示したと判定された場合、患者をＣＰＩ療法に適応すべきか否か（５９１７）、すなわち、患者をＣＰＩ療法（５９１９）に適応すべきかまたは代替的／他の療法（５９１８）に適応すべきかを判定する。
【０８４３】
いくつかの実施形態では、患者ケアサイクルと、治療の開始及び製品使用事例の有効性を監視するための診断テストを含むダイナミックワークフローが図６０に示される。
【０８４４】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法を行っている患者が特定される（６０１０）。
【０８４５】
いくつかの実施形態では、治療レジメンが選択され、ＣＰＩ療法に適応される患者（６０１０）に療法が開始される（６０１１）。
【０８４６】
いくつかの実施形態では、療法が選択され、療法の有効性が監視され、Ｔ細胞ＰＥＴイメージングに基づくイメージングによって療法が調整される（６０１４）。
【０８４７】
いくつかの実施形態では、治療レジメンが選択され、ＣＰＩ療法に適応される患者（６０１０）に療法が開始され（６０１１）、その患者に有効である可能性が最も高い療法（単独または複合）が選択される（６００５）。
【０８４８】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法に適応される患者（６０１０）に対して選択される治療レジメン及び開始される療法（６０１１）は、単独または複合ＣＰＩ、選択ＣＰＩ  Ｒｘ（ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４）、及び／または非ＣＤ８療法を含む。いくつかの実施形態では、承認されたＣＰＩには、ＰＤ−１（ペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、及びＣＴＬＡ−４（イピリムマブ）、または代替薬が含まれる。その後、いくつかの実施形態では、イメージング及び／または臨床評価に基づいて療法の有効性が監視される。
【０８４９】
いくつかの実施形態では、療法の有効性は、免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）における腫瘍の病変間不均一性（ｉｎｔｅｒ−ｌｅｓｉｏｎ  ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ）の測定に基づき、Ｔ細胞ＰＥＴイメージング（６０１４）によって監視される（６０１２）ことで治療判断が導かれる（６００４）。
【０８５０】
いくつかの実施形態では、療法の有効性は、免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）を早期検出するためのＴ細胞ＰＥＴイメージング（６０１４）によって監視される（６０１２）ことで、免疫療法に対する薬力学的応答を監視して療法に対する応答があるかどうかが判定される（６００６）。
【０８５１】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答があると判定される（６０１３）。
【０８５２】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答があると判定された場合（６０１３）、療法が完了したかどうかが判定される（６０１６）。
【０８５３】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答についての評価がなされた場合（６０１３）で、かつ療法が完了していないと判定された場合（６０１６）、単独または複合ＣＰＩ治療に基づいてＣＰＩ治療が継続される（６０１７）。
【０８５４】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答についての評価がなされた場合（６０１３）で、かつ療法が完了していると判定された場合（６０１６）、療法の期間が評価され、療法をいつ終了するかが決定され［ＰＰ８］ （６００９）、ＣＰＩ治療が終了される（６０１８）。
【０８５５】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答についての評価がなされた場合（６０１３）に、療法に対する応答がないと判定された場合、疑似進行と真の進行との鑑別診断（６００７）を行うためのＴ細胞ＰＥＴイメージングが行われる（６０１４）。
【０８５６】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答についての評価がなされた場合（６０１３）に、療法に対する応答がないと判定された場合、疑似進行と真の進行との鑑別診断（６００７）を行うためのＴ細胞ＰＥＴイメージングが行われ（６０１４）、場合により、療法の有効性を監視する（６０１２）。
【０８５７】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答についての評価がなされた場合（６０１３）に、療法に対する応答がないと判定された場合、疑似進行と真の進行との鑑別診断（６００７）を行うためのＴ細胞ＰＥＴイメージングが行われ（６０１４）、単独療法から複合療法に切り替え（単独療法の失敗後の複合ＣＰＩの有効性の予測）、及び／またはＣＰＩの用量またはレジメンの変更及び／または非ＣＰＩ療法の使用を行うことによって療法を変更するかどうかが判定される（６０１５）。
【０８５８】
いくつかの実施形態では、療法に対する応答があるかどうかに関する判定（６００６）を行うために免疫療法に対する薬力学的応答を監視するための免疫活性化（例えば、Ｔ細胞輸送）の早期検出に基づき、療法に対する応答についての評価がなされた場合（６０１３）に、療法に対する応答がないと判定された場合、疑似進行と真の進行との鑑別診断（６００７）を行うためのＴ細胞ＰＥＴイメージングが行われ（６０１４）、単独療法から複合療法に切り替え（単独療法の失敗後の複合ＣＰＩの有効性の予測）、及び／またはＣＰＩの用量またはレジメンの変更及び／または非ＣＰＩ療法の使用を行うことによって療法を変更するかどうかが判定され（６０１５）、ＣＰＩ治療が終了される（６０１８）。
【０８５９】
いくつかの実施形態では、患者ケアサイクルと、毒性について治療を監視するための診断テストを含むダイナミックワークフローが提供される（図６１）。
【０８６０】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法を行っている患者が特定される（６１１２）。
【０８６１】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法を行っている患者が特定され（６１１２）、治療レジメンが選択され、療法が開始される（６１１３）。
【０８６２】
いくつかの実施形態では、ＣＰＩ療法を行っている患者が特定され（６１１２）、治療レジメンが選択され、単独または複合ＣＰＩ、選択ＣＰＩ  Ｒｘ（ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４）、及び／または非ＣＤ８療法を含む、療法が開始される（６１１３）。いくつかの実施形態では、承認されたＣＰＩには、ＰＤ−１（ペムブロリズマブ、ニボルマブ、セミプリマブ）、ＰＤ−Ｌ１（アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、及びＣＴＬＡ−４（イピリムマブ）、または代替薬が含まれる。
【０８６３】
いくつかの実施形態では、治療レジメンを選択し、治療が開始される（６１１３）、ＣＰＩ治療を行っている患者（６１１２）は、毒性（ｉｒＡＥ）について監視される（６１１４）。
【０８６４】
いくつかの実施形態では、治療レジメンを選択し、治療が開始される（６１１３）、ＣＰＩ治療を行っている患者（６１１２）は、患者履歴、イメージング、及び／または臨床検査に基づいて毒性（ｉｒＡＥ）について監視される（６１１４）。
【０８６５】
いくつかの実施形態では、治療レジメンを選択し、治療が開始される（６１１３）、ＣＰＩ治療を行っている患者（６１１２）は、毒性（ｉｒＡＥ）について監視される（６１１４）。いくつかの実施形態では、モニタリングテストは、Ｔ細胞ＰＥＴイメージングに基づく（６１２２）。
【０８６６】
いくつかの実施形態では、治療レジメンを選択し、治療が開始される（６１１３）、ＣＰＩ治療を行っている患者（６１１２）は、患者が症状を示す前の免疫関連毒性（ｉｒＡＥ）の初期の徴候またはリスクについて監視するための予測または早期検出方法（６１１０）として、Ｔ細胞ＰＥＴイメージング（６１２２）に基づいて毒性（ｉｒＡＥ）について監視される（６１１４）。
【０８６７】
いくつかの実施形態では、患者が症状を示す前の免疫関連毒性（ｉｒＡＥ）の初期の徴候またはリスクについて監視するための予測または早期検出方法（６１１０）としての毒性についての監視（６１１４）後、毒性に関する判定が行われる（６１１５）。
【０８６８】
いくつかの実施形態では、患者が症状を示す前の免疫関連毒性（ｉｒＡＥ）の初期の徴候またはリスクについて監視するための予測または早期検出（６１１０）としての毒性についての監視（６１１４）後、毒性に関する判定が行われる（６１１５）。毒性がない場合、単独または複合ＣＰＩ療法に基づいてＣＰＩ治療は継続される（６１１６）。
【０８６９】
いくつかの実施形態では、患者が症状を示す前の免疫関連毒性（ｉｒＡＥ）の初期の徴候またはリスクについて監視するための予測または早期検出方法（６１１０）としての毒性についての監視（６１１４）後、毒性に関する判定が行われる（６１１５）。毒性がある場合、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断に関する評価が行われる（６１１１）。
【０８７０】
いくつかの実施形態では、患者が症状を示す前の免疫関連毒性（ｉｒＡＥ）の初期の徴候またはリスクについて監視するための予測または早期検出方法（６１１０）としての毒性についての監視（６１１４）後、毒性に関する判定が行われる（６１１５）。毒性がある場合、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断に関する評価が行われ（６１１１）、場合により、免疫療法を継続しながら毒性を治療する（６１１７）。
【０８７１】
いくつかの実施形態では、患者が症状を示す前の免疫関連毒性（ｉｒＡＥ）の初期の徴候またはリスクについて監視するための予測または早期検出方法（６１１０）としての毒性についての監視（６１１４）後、毒性に関する判定が行われる（６１１５）。毒性がある場合、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断に関する評価を行って（６１１１）免疫関連毒性と非免疫関連状態とを区別する（６１２３）。
【０８７２】
いくつかの実施形態では、患者が症状を示す前の免疫関連毒性（ｉｒＡＥ）の初期の徴候またはリスクについて監視するための予測または早期検出方法（６１１０）としての毒性についての監視（６１１４）後、毒性に関する判定が行われる（６１１５）。毒性がある場合、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断に関する評価を行って（６１１１）腫瘍関連毒性と薬剤関連毒性とを区別する（６１２４）。
【０８７３】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断（６１１１）が行われた後、毒性が重症または不可逆的であるかどうかが判定される（６１１８）。
【０８７４】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断（６１１１）が行われた後、毒性が重症または不可逆的であると判定された場合（６１１８）、ＣＰＩ治療は停止され、免疫抑制剤が開始される（６１２１）。
【０８７５】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断（６１１１）が行われた後、毒性が重症または不可逆的であると判定された場合（６１１８）、ＣＰＩ治療は停止され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始される（６１２１）。
【０８７６】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断（６１１１）が行われた後、毒性が重症または不可逆的でないと判定された場合、ＣＰＩ治療は保留され、免疫抑制剤が開始される（６１１９）。
【０８７７】
いくつかの実施形態では、免疫関連毒性と免疫に関連のない徴候及び症状とを区別するためのｉｒＡＥの鑑別診断（６１１１）が行われた後、毒性が重症または不可逆的でないと判定された場合、ＣＰＩ治療は保留され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始される（６１１９）。
【０８７８】
いくつかの実施形態では、毒性が重症または不可逆的でないことが判定された後、かつＣＰＩ治療が保留され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始された（６１１９）後、毒性が解消されたかどうかが評価される（６１２０）。
【０８７９】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（６１２０）が、毒性が解消されたことを示した場合、ＣＰＩ治療は継続される（６１１６）。
【０８８０】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（６１２０）が、毒性が解消されたことを示した場合、単独または複合ＣＰＩ療法を含むＣＰＩ治療が継続される（６１１６）。
【０８８１】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（６１２０）が、毒性が解消されていないことを示した場合、ＣＰＩ治療は停止され、免疫抑制剤が開始される（６１２１）。
【０８８２】
いくつかの実施形態では、毒性が解消されたかどうかの評価（６１２０）が、毒性が解消されていないことを示した場合、ＣＰＩ治療は停止され、ステロイド及び／または免疫抑制剤を含む免疫抑制剤が開始される（６１２１）。
【０８８３】
更なる番号付け実施形態
以下の実施形態は、任意選択的組み合わせとして記載されるものであり、限定的なものではない。これらの番号付けされた構成は、他の番号付けされた構成のいずれとも組み合わせることができ、本明細書で提供される実施形態または開示のいずれとも組み合わせることができる。
【０８８４】
構成の番号：
１．インビボでＣＤ８を監視する方法であって、
ＣＤ８ミニボディを対象に与えることであって、前記ＣＤ８ミニボディは図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、また、前記ミニボディは検出可能なマーカーで標識されている、前記与えることと、
前記対象への前記ＣＤ８ミニボディの投与の６〜３６時間以内に前記対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視することと、
を含む、前記方法。
【０８８５】
２．インビボでＣＤ８を監視する方法であって、
ＣＤ８ミニボディを対象に与えることであって、前記ＣＤ８ミニボディは図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、また、前記ミニボディは検出可能なマーカーで標識されている、前記与えることと、
前記対象内の前記ＣＤ８ミニボディの分布を監視することと、を含み、前記監視することは、前記対象内の１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した組織を検出することができ、前記監視することは、ＰＥＴにより行われる、
前記方法。
【０８８６】
３．インビボでＣＤ８陽性細胞を可視化する方法であって、
対象にＣＤ８ミニボディを与えることであって、前記ＣＤ８ミニボディが検出可能なマーカーで標識されており、前記ＣＤ８ミニボディの配列がヒト化されていてヒトＣＤ８に結合する、前記与えることと、
前記対象への前記ＣＤ８ミニボディの投与の６〜３６時間以内に前記対象内の前記ＣＤ８ミニボディの分布を監視することと、を含み、前記監視することは、前記対象内の１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８陽性細胞が浸潤した組織を検出することができ、前記監視することはＰＥＴによって行われる、
前記方法。
【０８８７】
４．ヒト体内の細胞を可視化する方法であって、
ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることであって、前記手段は検出可能な標識を含む、前記与えることと、
ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する前記手段の前記対象への投与の６〜３６時間以内に前記対象内のヒトＣＤ８陽性細胞に結合する前記手段の第１の分布を監視及び決定することと、
を含む、前記方法。
【０８８８】
５．前記第１の分布を監視及び決定した後、前記対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する前記手段の第２の分布を監視及び決定することと、
前記第１と第２の分布を比較して分布の変化を判定することと、
を含む、構成４に記載の方法。
【０８８９】
６．ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する前記手段を前記対象に与えるのと同時、またはその前に前記対象に第１の治療薬を投与することを更に含み、
前記分布の変化を用いて前記第１の治療薬の有効性が判定され、
前記分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の増加を示す場合、前記第１の治療薬の少なくとも第２の用量を対象に投与し、
前記分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の減少を示す場合、第２の治療薬を前記対象に投与する、
構成５に記載の方法。
【０８９０】
７．ヒトＣＤ８陽性細胞に結合する前記手段を前記対象に与えるのと同時、またはその前に前記対象に第１の治療薬を投与することを更に含み、
前記分布の変化を用いて前記第１の治療薬の有効性が判定され、
前記分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の増加を示す場合、前記第１の治療薬の少なくとも第２の用量を対象に投与し、
前記分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の無変化または減少を示す場合、前記第１の治療薬の第２の用量を前記対象に投与しない、
構成５に記載の方法。
【０８９１】
８．ヒトＣＤ８陽性細胞に結合する前記手段を前記対象に与えるのと同時、またはその前に前記対象に第１の治療薬を投与することを更に含み、
前記分布の変化を用いて前記第１の治療薬の有効性が判定され、
前記分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の無変化または増加を示す場合、前記第１の治療薬の少なくとも第２の用量を対象に投与し、
前記分布の変化が腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の量の減少を示す場合、前記第１の治療薬の第２の用量を前記対象に投与しない、
構成５に記載の方法。
【０８９２】
９．対象にミニボディを投与する方法であって、
ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることを含み、前記標識されたミニボディによって３ｍＣｉ±２０％の放射線が前記対象に与えられ、０．２〜１０ｍｇの量の総タンパク質が前記対象に与えられる、
前記方法。
【０８９３】
１０．対象にミニボディを投与する方法であって、
ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることを含み、前記標識されたミニボディによって０．７５〜１．５±２０％ｍＣｉの放射線が前記対象に与えられ、０．２〜１０ｍｇの量の総タンパク質が前記対象に与えられる、
前記方法。
【０８９４】
１１．患者を治療する方法であって、
がんと診断されたヒト患者に、ある用量のヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することであって、前記用量は、
約３ｍＣｉの放射能を与える８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び
約１０ｍｇ以下の前記抗原結合コンストラクトを含む、
前記投与することと、
前記用量の投与後の第１の時点に前記患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することで前記第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、前記第１の時点は前記投与することの約６時間〜３６時間後である、前記生成することと、
前記第１の患者画像に基づいて前記患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、
前記１つ以上の組織中のＣＤ８細胞の前記第１の存在量及び／または分布に基づいて前記がんの第１の治療を前記患者に投与することと、
を含む、前記方法。
【０８９５】
１２．前記第１の治療の投与後に、第２の時点に対応した、前記抗原結合コンストラクトの前記標的について第２の部位特異的情報を含む第２の患者画像に基づいて前記患者体内の前記１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することと、
前記第１と第２の患者画像の比較に基づいて前記がんの第２の治療を前記患者に投与することと、
を含む、構成８に記載の方法。
【０８９６】
１３．前記第１と第２の患者画像の比較に基づいて前記第２の治療の治療用量を最適化することを更に含む、構成９に記載の方法。
【０８９７】
１４．腫瘍を治療する方法であって、
対象にミニボディを投与して、前記対象内の腫瘍に前記ミニボディが結合して標識された腫瘍を形成するすることであって、前記ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、前記ミニボディは検出可能な標識に結合されている、前記形成することと、
前記ミニボディが前記標識された腫瘍を形成するうえでいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合する場合、免疫チェックポイント阻害剤からなる群から選択される治療を投与することと、
前記ミニボディが前記標識された腫瘍を形成するうえですべての腫瘍全体にわたって結合する場合、免疫チェックポイント阻害剤を投与しないことと、
を含む、前記方法。
【０８９８】
１５．対象を治療する方法であって、
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合するヒトミニボディを投与することと、
前記ヒトミニボディの分布を監視することで前記新生物内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、
前記新生物の少なくとも前記第１のＴＩＬ状態に基づいて前記患者を治療することと、
を含む、前記方法。
【０８９９】
１６．第１のＴＩＬ状態は、前記ヒトミニボディがすべての特定された腫瘍の体積全体にわたって結合する場合であり、第２のＴＩＬ状態は、前記ヒトミニボディが前記腫瘍の前記体積に均一に浸潤することなくいずれかの腫瘍辺縁部に選択的に結合する場合である、構成１２に記載の方法。
【０９００】
１７．前記対象が前記第２のＴＩＬ状態を有する場合に前記対象に適切な免疫療法が適用される、請求項１３に記載の方法。
【０９０１】
１８．前記対象が前記第１のＴＩＬ状態を有している場合、身体が腫瘍と適切に戦っているので免疫療法を前記対象に適用しない、構成１２に記載の方法。
【０９０２】
１９．少なくとも前記第１のＴＩＬ状態が、
ａ．臨床試験のために前記ヒト対象を分類または選択すること、
ｂ．治療に対して前記ヒト対象を推奨するかまたは前記ヒト対象の適格性を判定すること、
ｃ．療法に対する前記ヒト対象の応答を予測すること、及び／または
ｄ．
ｉ．放射線療法、
ｉｉ．化学療法、
ｉｉｉ．生物療法、及び
ｉｖ．免疫療法
からなる群の中から選択される療法に対する応答を予測すること、
のうちの少なくとも１つに用いられる、構成１２〜１５のいずれか１つに記載の方法。
【０９０３】
２０．前記ＣＤ８を監視することが、
ａ）前記腫瘍の内部領域または体積と比較して外側辺縁部における結合の増加を示す前記腫瘍の前記外側辺縁部における検出可能なマーカーの分布、または
ｂ）前記腫瘍の内部領域または体積への検出可能なマーカーの分布
の関数として達成される、構成１〜５及び１２のいずれか１つに記載の方法。
【０９０４】
２１．ａ）の場合、前記対象に免疫療法ベースの療法を与えることで前記腫瘍をＴＩＬ陽性に転換し、ａ）がかかる免疫療法による治療後に持続する場合には、前記対象に代替的な免疫療法ベースの療法を与える、
構成１７に記載の方法。
【０９０５】
２２．ａ）は、前記腫瘍の最外周部にマーカーが少なくとも１０％多く存在するものとして定義され、前記腫瘍の前記最外周部は、前記腫瘍の画像の面積の１０％以下である、構成１７に記載の方法。
【０９０６】
２３．ｂ）は、内側領域と外側領域との間の画像強度の差が１００％以下である状態として定義され、前記外側領域は、前記腫瘍の画像の面積の１０％以下である前記腫瘍の最外周部として定義される、構成１７に記載の方法。
【０９０７】
２４．対象内のＣＤ８分布を分析する方法であって、
第１のＰＥＴ画像により検出可能なマーカーの分布の画像を提供することであって、前記検出可能なマーカーはＣＤ８ミニボディに結合されており、前記ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、前記ＣＤ８ミニボディは前記対象に免疫応答を引き起こさない、前記提供することと、
前記対象の第２のＰＥＴ画像によりＦＤＧマーカーの分布の画像を与えることと、
前記第１のＰＥＴ画像の前記第２のＰＥＴ画像上へのオーバーレイを含む第３のＰＥＴ画像を生成することと、
前記第３のＰＥＴ画像に基づいて腫瘍をＴＩＬとして特定することと、
を含む、前記方法。
【０９０８】
２５．対象を治療する方法であって、
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記抗原結合コンストラクトの分布を監視して前記新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、
少なくとも１つの新生物の前記ＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与して前記ＴＩＬ状態を陰性から陽性に転換することと、
を含む、前記方法。
【０９０９】
２６．対象を治療する方法であって、
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記抗原結合コンストラクトの分布を監視して前記新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、
前記新生物の前記ＴＩＬ状態が陽性でない場合に前記新生物の前記ＴＩＬ状態が陽性となるまで前記患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、
を含む、前記方法。
【０９１０】
２７．前記監視が、前記投与の８時間以内に行われる、構成２４に記載の方法。
【０９１１】
２８．前記監視または第２の監視が、前記投与の３６時間前に行われる、構成２４または２５に記載の方法。
【０９１２】
２９．腫瘍を特徴付ける方法であって、
ヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトをヒト対象に適用することであって、前記抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、前記適用することと、
前記検出可能なマーカーの分布を監視することと、
前記検出可能なマーカーの分布に基づいて画像を生成することと、
ユーザーが腫瘍を特徴付けることができるような形で前記画像を前記ユーザーに対して表示することと、
を含む、前記方法。
【０９１３】
３０．画像を生成する方法であって、
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することであって、前記抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、前記適用することと、
腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出し、検出された各前記検出可能なマーカーに対して正のピクセルを割り当てることと、
割り当てられた各前記正のピクセルの分布に基づいて画像を生成することであって、前記画像が非一時的コンピュータ可読媒体に格納される、前記生成することと、を含む、前記方法。
【０９１４】
３１．陽電子放出断層撮影「ＰＥＴ」の方法であって、
ＣＤ８に結合するトレーサーを対象に投与することと、
シンチレーターを提供することと、
前記シンチレーターを使用して前記トレーサーによって生成された光子対を検出することと、
前記光子対の検出を利用して、同時事象のリストによって前記トレーサー源を局在化することであって、前記同時事象は、前記シンチレーターからの出力を受け取り、それを前記同時事象リストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、前記局在化することと、を含み、前記対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である、前記方法。
【０９１５】
３２．診断用組成物を製造する方法であって、
ミニボディをデスフェリオキサミンと結合させてＤＦ−ミニボディを形成することと、
前記ＤＦ−ミニボディを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識されたミニボディを形成することと、
前記放射性標識されたミニボディを精製することと、
前記放射性標識されたミニボディを非放射性ミニボディと混合して診断用組成物を形成することと、を含み、前記ミニボディと前記非放射性ミニボディはＣＤ８の同じエピトープに結合する、
前記方法。
【０９１６】
３３．３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−標識ミニボディと、
２０ｍＭのヒスチジンと、
５％スクロースと、
５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウムと、
１４１〜１９４のアルギニンと、
２〜２０ｍＭのグルタミン酸と、
を含む、診断用組成物。
【０９１７】
３４．前記対象の体重１ｋｇ当たり１〜２５０μｇのミニボディが存在する、構成３１に記載の組成物。
【０９１８】
３５．１．２〜１．５ｍｇの標識されたミニボディが存在する、構成３１に記載の組成物。
【０９１９】
３６．診断用組成物であって、
構造：
【化７】
2022501402.tif 000016
または
【化８】
2022501402.tif 000017
を有する標識されたミニボディを含む診断用組成物であって、前記ミニボディは、配列番号１、３、１６の、または１４７内の重鎖可変領域と、配列番号７、９、１５の、または１４７内の軽鎖可変領域とを含み、前記組成物は少なくとも３ｍＣｉの放射線を提供する、
前記診断用組成物。
【０９２０】
３７．活性マーカーを含む、ＣＤ８に結合する第１のミニボディと、
ＣＤ８に結合する第２のミニボディであって、前記第２のミニボディは不活性マーカーを含むかまたは活性マーカーを欠く、前記第２のミニボディと、
を含む、組成物。
【０９２１】
３８．前記第１のミニボディと前記第２のミニボディとが前記組成物中に約１：７の比で存在する、構成１に記載の組成物。
【０９２２】
３９．診断用組成物であって、
放射性標識に結合された第１のＣＤ８ミニボディと、
放射性標識に結合されていない第２のＣＤ８ミニボディと、を含み、前記第１及び第２のＣＤ８ミニボディが同じ配列を有し、前記組成物は約３ｍＣｉの放射線を提供し、前記組成物は１．５〜１０ｍｇの総マスタンパク質を提供する、前記診断用組成物。
【０９２３】
４０．対象をイメージングする方法であって、
上記に提供された前記組成物のいずれか１つの第１の用量を投与することと、
前記対象をイメージングして第１の画像を得ることと、
上記に提供された前記組成物のいずれか１つの第２の用量を投与することと、
前記対象をイメージングして第２の画像を得ることと、
前記第１の画像と前記第２の画像とを比較することと、を含む、
前記方法。
【０９２４】
４１．前記比較が、前記対象の治療応答の評価を助ける、構成３８に記載の方法。
【０９２５】
４２．前記比較が、前記対象に与えられる治療用量を決定するために用いられ、前記第１の画像を得た後に第１の可能な用量が前記対象に投与される、構成３８に記載の方法。
【０９２６】
４３．前記ＣＤ８ミニボディが、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域はヒトアミノ酸配列から本質的に構成され、前記軽鎖可変領域はヒトアミノ酸配列から本質的に構成される、構成１〜２８及び３７〜３９のいずれか１つに記載の方法、または構成３０〜３６のいずれか１つに記載の組成物。
【０９２７】
４４．前記ＣＤ８ミニボディが、配列番号１３４及び／または１３５の配列からなるＣＤ８配列に結合する、構成１〜２８及び３７〜３９のいずれか１つに記載の方法、または構成３０〜３６のいずれか１つに記載の組成物。
【０９２８】
４５．前記ミニボディが、本明細書で提供されるＣＤＲの配列番号のいずれかの重鎖ＣＤＲと、本明細書で提供されるＣＤＲの配列番号のいずれかの軽鎖ＣＤＲとを含む、構成１〜２８及び３７〜３９のいずれか１つに記載の方法。
【０９２９】
４６．前記ミニボディが、本明細書で提供される重鎖の配列番号のいずれかの重鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域と、本明細書で提供される重鎖の配列番号のいずれかの軽鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域とを含む、構成１〜２８及び３７〜３９のいずれか１つに記載の方法。
４７．監視することを含む前記構成のいずれか１つに記載の方法であって、前記監視することが、第１のＰＥＴスキャンを提供することによって達成される、前記方法。
【０９３０】
４８．前記監視することが更に、第２のＰＥＴフルオロデオキシグルコース（「ＦＤＧ」）ＰＥＴスキャンを提供することを含む、構成４４に記載の方法。
【０９３１】
４９．第１及び第２のスキャンを含む前記構成のいずれか１つに記載の方法であって、前記第１のスキャンと前記第２のスキャンとを比較することで新生物中に前記ＣＤ８の共局在化があるかどうかを判定する、前記方法。
【０９３２】
５０．新生物を含む前記構成のいずれか１つに記載の方法であって、前記新生物が既知の腫瘍である、前記方法。
【０９３３】
５１．前記既知の腫瘍が、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病、悪性リンパ腫、扁平細胞癌（例えば、扁平上皮細胞癌）、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌、消化器癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿道癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、多発性骨髄腫及びＢ細胞リンパ腫、脳腫瘍、頭頸部癌、成人及び小児の固形癌ならびに固形腫瘍のうちの１つ以上のがんから選択される、請求項１〜２８及び３７〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【０９３４】
５２．前記治療が、限定されるものではないが、本明細書で提供される免疫チェックポイント阻害剤、ＩＯＴ、または化学療法剤を含む、本明細書で提供される療法のうちの少なくとも１つを含む、構成１〜２８のいずれか１項に記載の治療の方法。
【０９３５】
５３．ＣＤ８分布が、ＰＥＴによって観察されるＣＤ８陽性細胞の密度を決定することを含む、構成１〜２８及び３７〜３９のいずれか１つに記載の方法。
【０９３６】
５４．ＰＥＴスキャンの画像に関するデータを含む非一時的コンピュータ可読媒体であって、前記データが、上記の構成１〜２８及び３７〜３９のいずれか１つに記載の方法によって得られたものである、前記非一時的コンピュータ可読媒体。
【０９３７】
５５．標準取り込み値を決定する方法であって、
放射性プローブを含む抗原結合コンストラクトを対象に適用することと、
ｒを決定することであって、ｒは、ＰＥＴスキャナーによりＲＯＩ内で測定される、抗原結合コンストラクトからの放射線の放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である、前記適用することと、
ａ’を決定することであって、ａ’は、注入された放射性標識されたトレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である、前記決定することと、
患者の体重ｗを決定することと、
ＳＵＶを、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果として決定することと、を含む、
前記方法。
【０９３８】
５６．画像を分析する方法であって、
画像を提供することと、
前記画像をマーキングすることにより前記画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）を定義することと、
前記第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度を決定することと、
前記第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度を決定することと、
前記第１のＲＯＩ内の前記シグナル強度の平均値を決定することと、
前記第１のＲＯＩ内の各シグナル強度を合計して前記第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルを得ることと、を含み、前記第１のＲＯＩは、対象に投与された抗原結合コンストラクトに関連付けられた検出可能なマーカーの量のデータを表す、
前記方法。
【０９３９】
５７．第２のＲＯＩについて構成２の前記プロセスを繰り返して第２の合計シグナルレベルを決定することと、前記第１と前記第２の合計シグナルレベルを比較することと、を更に含み、前記第１の合計シグナルレベルが前記第２の合計シグナルレベルよりも低い場合、前記第２のＲＯＩ内の増加したＣＤ８の存在を示す、構成５５に記載の方法。
【０９４０】
５８．前記第１のＲＯＩが前記第２のＲＯＩと同じ位置であるが、前記第１のＲＯＩが第１の時点で提供され、前記第２のＲＯＩが第２の時点で提供され、候補治療薬が、前記第１の時点の後であるが前記第２の時点の前に投与されている点で異なる、構成５６に記載の方法。
【０９４１】
５９．前記組織が厚さ２０ミクロンである、構成２、３、または２８のいずれかに記載の方法。
【０９４２】
６０．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて前記対象内の腫瘍の第１の画像を提供することと、
候補治療薬を含む療法を前記対象に投与することと、
前記候補治療薬を含む前記療法を投与した後、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて前記対象内の腫瘍のＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、
前記第１と第２の画像を比較して、
ａ）前記腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうか、または
ｂ）前記腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、
ａ）の場合、前記対象に前記療法を継続するように指示することと、
を含む、
前記方法。
【０９４３】
６１．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を与えることと、
候補治療薬を含む療法を前記対象に投与することと、
前記候補治療薬を含む前記療法を投与した後、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて前記対象の前記腫瘍内の前記ＣＤ８細胞の第２の画像を提供することと、
前記第１と第２の画像を比較して、
ａ）前記腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうか、または
ｂ）前記腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、
ａ）の場合、前記対象に前記療法を継続するように指示することと、を含む、
前記方法。
【０９４４】
６２．ｂ）の場合、別のラウンドの療法を投与することと、前記腫瘍内のＣＤ８細胞の第３の画像を提供することと、前記第１と第３の画像を比較して、前記腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定することと、前記腫瘍が同じかまたは減少したＣＤ８浸潤を示した場合、前記療法を中断することと、を含む構成６１に記載の方法。
【０９４５】
６３．前記療法が放射線療法を含む、構成６１に記載の方法。
【０９４６】
６４．前記第１の画像が、前記対象の前記腫瘍内の前記ＣＤ８細胞の画像である、構成６１の方法。
【０９４７】
６５．前記第１の画像が、前記対象からのものではない前記腫瘍内のＣＤ８細胞の画像である、構成６１に記載の方法。
【０９４８】
６６．前記第１の画像はデータベースからの個人のものであるか、または個人の集団からのデータの集合である、構成６２に記載の方法。
【０９４９】
６７．ｂ）の場合、代替的候補治療薬を含む療法を投与し、前記療法を投与した後、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて前記対象の前記腫瘍内の前記ＣＤ８細胞の第３の画像を提供することと、
前記第３と第２または第３と第１の画像を比較して、
ｃ）前記腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうか、または
ｄ）前記腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかを判定し、
ｃ）の場合、前記対象に前記代替的候補治療薬を含む前記療法を継続するように指示することと、
を含む、構成６１に記載の方法。
【０９５０】
６８．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記対象内の少なくとも１つの腫瘍が前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法による治療を中断することと、
を含む、前記方法。
【０９５１】
６９．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記対象内の少なくとも１つの腫瘍が前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法による治療を継続することと、
を含む、前記方法。
【０９５２】
７０．がんを有するヒト対象を治療する方法であって
前記対象に免疫療法を投与することと、
次いで前記対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記対象内のすべての腫瘍が前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、前記免疫療法を中断することと、
を含む、前記方法。
【０９５３】
７１．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、
前記対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記対象内の少なくとも１つの腫瘍が前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法を投与することと、
を含む、前記方法。
【０９５４】
７２．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、
前記対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記対象内のすべての腫瘍が前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法を投与しないように助言することと、
を含む、前記方法。
【０９５５】
７３．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、
前記対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記対象内の少なくとも１つの腫瘍が前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、代替的免疫療法を投与することと、
を含む、前記方法。
【０９５６】
７４．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、
前記対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記対象内のすべての腫瘍が前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、前記免疫療法を投与することと、
を含む、前記方法。
【０９５７】
７５．前記免疫療法の選択についての情報を与える患者試料中の更なるバイオマーカーのレベルの測定を更に含む、構成６１〜７４に記載の方法。
【０９５８】
７６．前記更なるバイオマーカーが、ＰＤ−Ｌ１の状態、Ｔ細胞受容体のクローン性、変異負荷、新生抗原負荷、免疫遺伝子シグネチャー、及び多重免疫組織化学の中から選択される、構成７５に記載の方法。
【０９５９】
７７．ヒト対象の腫瘍を治療する方法であって、
前記対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することであって、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合し、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている、前記形成することと、
前記腫瘍内または周囲の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を検出することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトがいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合している場合、免疫療法からなる群から選択される治療を投与することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形ですべての腫瘍全体にわたって結合している場合、免疫チェックポイント阻害剤を投与しないことと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形で結合しているが腫瘍の内部には存在していない場合、免疫療法を投与することと、を含む、前記方法。
【０９６０】
７８．ヒト対象の腫瘍を治療する方法であって、
ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視して、前記腫瘍内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、
前記新生物の少なくとも前記第１のＴＩＬ状態に基づいて前記患者を治療することと、
を含む、前記方法。
【０９６１】
７９．第１のＴＩＬ状態は、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトがすべての特定された腫瘍の体積全体にわたって結合している場合であり、第２のＴＩＬ状態は、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトがいずれかの腫瘍辺縁部に偏った形で結合している場合である、構成７８に記載の方法。
【０９６２】
８０．前記対象が前記第２のＴＩＬ状態を有する場合に前記対象に免疫療法が適用される、構成７９に記載の方法。
【０９６３】
８１．前記対象が前記第１のＴＩＬ状態を有する場合に前記対象に免疫療法が投与されない、構成７９に記載の方法。
【０９６４】
８２．少なくとも前記第１のＴＩＬ状態が、
ａ．臨床試験のために前記ヒト対象を分類または選択すること、
ｂ．治療に対して前記ヒト対象を推奨するかまたは前記ヒト対象の適格性を判定すること、
ｃ．療法に対する前記ヒト対象の応答を予測すること、及び／または
ｄ．
ｉ．放射線療法、
ｉｉ．化学療法、
ｉｉｉ．生物療法、及び
ｉｖ．免疫療法からなる群の中から選択される療法に対する応答を予測すること、
のうちの少なくとも１つに用いられる、構成７８〜８１のいずれか１つに記載の方法。
【０９６５】
８３．前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを監視することが、
ａ）前記腫瘍の内部領域または体積と比較して腫瘍表面のＣＤ８陽性細胞への結合の増加を示す、前記腫瘍表面における前記検出可能なマーカーの分布、または
ｂ）前記腫瘍の内部領域または体積への前記検出可能なマーカーの分布
の関数として行われる、構成７８〜８２のいずれか１つに記載の方法。
【０９６６】
８４．ａ）の場合、前記対象に免疫療法を与えることと、ａ）がかかる免疫療法による治療後に持続する場合には、前記対象に代替的な免疫を与える、
構成８３に記載の方法。
【０９６７】
８５．ヒト対象を治療する方法であって、
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記抗原結合コンストラクトの分布を監視して前記新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、
少なくとも１つの新生物の前記ＴＩＬ状態が陰性である場合に前記患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与して前記ＴＩＬ状態を陰性から陽性に転換することと、
を含む、前記方法。
【０９６８】
８６．ヒト対象を治療する方法であって、
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記抗原結合コンストラクトの分布を監視して前記新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定することと、
前記新生物の前記ＴＩＬ状態が陽性でない場合に前記新生物の前記ＴＩＬ状態が陽性となるまで前記患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与することと、
を含む、前記方法。
【０９６９】
８７．前記監視することが、前記投与の８時間以内に行われる、構成８６に記載の方法。
【０９７０】
８８．前記監視することまたは第２の監視することが、前記投与の３６時間前に行われる、構成８６または８７に記載の方法。
【０９７１】
８９．ヒト対象の腫瘍を治療する方法であって、
ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、前記対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することと、前記対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合、前記治療を継続することと、前記腫瘍がコールドな腫瘍である場合、前記療法を第２の療法に変更することと、
前記ヒト対象が第１の治療を受けていない場合、ＣＤ８結合分子により、前記対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定することと、前記対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合、前記対象にＩＯＴを投与することと、
を含む、前記方法。
【０９７２】
９０．患者の治療を選択する方法であって、
ヒト患者にＣＤ８結合コンストラクトを投与することと、
前記患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、前記腫瘍がコールドな腫瘍である場合に前記腫瘍の前記ＴＩＬ状態を変化させるＩＯＴを投与することと、
を含む、前記方法。
【０９７３】
９１．対象の治療を変更する方法であって、
第１の治療を行っているヒト対象を提供することと、
ＣＤ８結合コンストラクトを前記ヒト対象に投与することと、
前記対象が前記第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有するかどうかを判定することと、
前記対象が前記第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有する場合、前記療法を継続することと、前記対象が前記第１の治療下でＴＩＬ陰性である腫瘍を有する場合、前記第１の療法を中止することと、
を含む、前記方法。
【０９７４】
９２．腫瘍を有するヒト対象を治療する方法であって、
前記対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することであって、前記用量は、
約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射能を提供する８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び
約１０ｍｇ以下の前記抗原結合コンストラクト
を含む、前記投与することと、
前記用量の投与後の第１の時点で前記患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出することで前記第１の時点に対応した第１の患者画像を生成することであって、前記第１の時点は前記投与することの約６〜３６時間後である、前記生成することと、
前記第１の患者画像に基づいて前記患者体内の１つ以上の腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の第１の存在量及び／または分布を決定することと、
前記患者に前記１つ以上の腫瘍内のＣＤ８の前記第１の存在量及び／または分布に対する第１の治療を投与することと、
を含む、前記方法。
【０９７５】
９３．前記第１の治療の投与後に、第２の時点に対応した、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの標的についての第２の部位特異的情報を含む第２の患者画像に基づいて前記患者体内の前記１つ以上の組織及び／または腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の存在量及び／または分布を決定することと、
前記第１と第２の患者画像の比較に基づいて前記腫瘍の第２の治療を前記患者に投与することと、
を更に含む、構成９２に記載の方法。
【０９７６】
９４．前記第１と第２の患者画像の比較に基づいて前記第２の治療の治療用量を最適化することを更に含む、構成９３に記載の方法。
【０９７７】
９５．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、
前記対象の身体の少なくとも３０％をスキャンして前記身体内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を決定することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記分布により、前記対象の身体内の少なくとも２つの別々の腫瘍を特定することと、
前記２つの別々の腫瘍のそれぞれの腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）状態を判定することと、
前記少なくとも２つの腫瘍の前記ＴＩＬ状態が同じである場合に第１の療法を前記対象に投与するか、または前記少なくとも２つの腫瘍の前記ＴＩＬ状態が異なる場合に第２の療法を前記対象に投与することと、
を含む、前記方法。
【０９７８】
９６．前記少なくとも２つの腫瘍が同じかまたは異なっているかを判定することは、前記少なくとも２つの腫瘍の前記状態及び位置を表示することを含む、構成９５に記載の方法。
【０９７９】
９７．前記表示することは、前記少なくとも２つの腫瘍の前記位置の２Ｄまたは３Ｄ表現を含む、構成９５の方法。
【０９８０】
９８．前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトが、８９Ｚｒと関連付けられている、構成９５に記載の方法。
【０９８１】
９９．がんを有するヒト対象を治療する方法であって、
検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、
前記対象の身体内の少なくとも一次腫瘍状態及び二次腫瘍状態を特定することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により前記一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、
前記一次腫瘍の前記ＴＩＬ状態に基づいて前記対象に第１の療法を投与することと、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与してその後の前記一次腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、
前記一次腫瘍の前記ＴＩＬ状態を用いて前記対象のその後の適切な治療を決定することと、
を含む、前記方法。
【０９８２】
１００．前記二次腫瘍の前記ＴＩＬ状態も前記第１の療法の後で判定されるが、前記ＴＩＬ状態は前記一次腫瘍の治療には用いられない、構成９９に記載の方法。
【０９８３】
１０１．前記一次腫瘍の前記ＴＩＬ状態は、前記第１の療法が前記第１の腫瘍に対して有効であることを示し、したがって、第１の治療が継続される、構成１００の方法。
【０９８４】
１０２．前記第１の療法は前記二次腫瘍に対しては有効ではなく、前記第１の治療が継続される、構成１０１に記載の方法。
【０９８５】
１０３．前記第１の療法は一次腫瘍に対しては有効ではないが、前記二次腫瘍に対しては有効であり、方法が、二次療法を前記対象に投与することを更に含む、構成１００に記載の方法。
【０９８６】
１０４．ＣＤ８組成物の製剤であって、
サイズが１０５ｋＤａ未満であるＣＤ８抗原結合コンストラクトと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトに関連付けられた８９Ｚｒ放射性標識であって、前記製剤に対して０．５よりも高いが３（または３．６）ｍＣｉよりも低い放射線を提供する前記放射性標識と、を含み、
ヒトに投与されるように構成されている、
前記製剤。
【０９８７】
１０５．前記放射性標識が、０．５よりも高いが１．０ｍＣｉよりも低い放射線を提供する、構成１０４に記載の製剤。
【０９８８】
１０６．前記放射性標識が０．７５ｍＣｉよりも低い放射線を提供する、構成１０４または１０５に記載の製剤。
【０９８９】
１０７．少なくとも１．５ｍｇのＣＤ８ミニボディと、
１．５ｍＣｉ以下の８９Ｚｒと、を含み、ヒトに投与されるように構成されている、ＣＤ８ミニボディ製剤。
【０９９０】
１０８．活性マーカーを有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む第１の部分と、
不活性マーカーを有するかまたは活性マーカーを欠く第２の部分と、
を含む、組成物。
【０９９１】
１０９．前記第１の部分と前記第２の部分とが、前記組成物中に約１：１〜約１：５０または約１：７のモル比で存在する、構成１０８に記載の組成物。
【０９９２】
１１０．放射性標識に結合された第１の抗原結合コンストラクトと、
放射性標識に結合されていない第２の抗原結合コンストラクトと、
を含む、診断用組成物であって、
前記第１と第２のＣＤ８抗原結合コンストラクトが同じアミノ酸配列を有し、１：１〜１：５０のモル比で存在し、
前記組成物は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射線を提供し、
前記組成物は、総質量０．１〜１０ｍｇのタンパク質を与える、前記診断用組成物。
【０９９３】
１１１．前記総質量タンパク質が０．５〜１０ｍｇである、構成１１０の診断用組成物。
【０９９４】
１１２．診断用組成物を製造する方法であって、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトをデスフェリオキサミンと結合させてＤｆ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、
前記Ｄｆ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することと、
前記放射性標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトと放射性標識されていない（非放射性）Ｄｆ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトとを混合して診断用組成物を形成することと、を含み、製剤がヒト投与のために構成されている、
前記方法。
【０９９５】
１１３．８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトと、
２０ｍＭのヒスチジンと、
５％スクロースと、
５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウムと、
１４１〜１９４のアルギニンと、
２〜２０Ｍのグルタミン酸と、を含み、診断薬としてヒト対象に投与されるように構成された、
組成物。
【０９９６】
１１４．前記８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトがミニボディであり、前記組成物が前記対象の体重１ｋｇ当たり１〜２５０μｇを含む、構成１１３の組成物。
１１５．１．２〜１．５ｍｇのＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む、構成１１４に記載の組成物。
【０９９７】
１１６．ＣＤ８抗原結合コンストラクトと、
遊離アルギニンと、を含み、ヒトに投与されるように構成されている、
ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤。
【０９９８】
１１７．前記アルギニンが、８０〜２００ｍＭで存在する、構成１１６に記載のＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤。
【０９９９】
１１８．ヒト対象でＰＥＴスキャンを行うための方法であって、
組成物または製剤を含む構成の前記組成物または製剤のいずれか１つ以上を投与することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布が前記対象内に生じることを指定の時間にわたって待つことと、
スキャニングのための指定の時間にわたってＰＥＴスキャンを行うことと、
を含む、前記方法。
【１０００】
１１９．前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布のための指定の時間が、１時間〜３６時間である、構成１１８に記載の方法。
【１００１】
１２０．前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布のための指定の時間が、５時間〜２４時間である、構成１１８または１１９に記載の方法。
【１００２】
１２１．前記スキャニングのための指定の時間が、１０分間〜１時間の間である、構成１１８〜１２０のいずれか１つに記載の方法。
【１００３】
１２２．前記スキャニングのための指定の時間が、１２分間〜４０分間の間である、構成１１８〜１２１のいずれか１つに記載の方法。
【１００４】
１２３．前記スキャニングのための指定の時間が、約１２〜約２０分間であり、前記放射性標識が、０．５よりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を提供する、構成１１８〜１２２のいずれか１つに記載の方法。
【１００５】
１２４．前記放射レベルが１．０ｍＣｉよりも低い放射線である、構成１１８〜１２３のいずれか１つに記載の方法。
【１００６】
１２５．ＰＥＴスキャンは前記対象内の位置、分布、比、及び／または腫瘍状態を得るために行われ、前記ＰＥＴスキャンの装置がヒト用に構成されている、構成１１８〜１２４のいずれか１つに記載の方法。
【１００７】
１２６．ヒト対象でＰＥＴスキャンを行うための方法であって、
ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することであって、前記ミニボディは放射性標識に結合されており、前記ミニボディを投与することは、０．５よりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を提供する、前記投与することと、
１〜３６時間待つことと、
１５〜３０分間にわたってＰＥＴスキャンを行ってスキャニングすることと、
を含む、前記方法。
【１００８】
１２７．陽電子放出断層撮影（「ＰＥＴ」）の方法であって、
ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することと、
シンチレーターを提供することと、
前記シンチレーターを使用して前記トレーサーによって生成された光子対を検出することと、
前記光子対の検出を利用して、同時事象のリストによって前記トレーサー源を局在化することであって、前記同時事象は、前記シンチレーターからの出力を受け取り、それを前記同時事象リストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される、前記局在化することと、を含み、前記対象内の組織または新生物１ｍｍ３当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞を検出することが可能である、
前記方法。
【１００９】
１２８．腫瘍を有するヒト対象を治療する方法であって、
前記対象のＰＥＴとａ）ＭＲＩまたはｂ）ＣＴとの合成画像を提供することであって、前記合成画像は少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８  ＲＯＩとの重複を強調し、前記少なくとも１つの腫瘍の領域は、ａ）ＭＲＩデータまたはｂ）ＣＴデータによって画定され、前記ＣＤ８  ＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される、提供することと、
前記ＰＥＴとａ）ＭＲＩまたはｂ）ＣＴとの合成画像を検討して患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定することと、
前記腫瘍がＴＩＬ陰性である場合に前記患者にＩＯＴ治療を与えることと、を含む、前記方法。
【１０１０】
１２９．ヒト対象を治療する方法であって、
ヒト対象に候補治療薬を投与することと、
前記ヒト対象の腫瘍のサイズが前記候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定することと、
前記候補治療薬の後で前記サイズが増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して前記腫瘍内に存在するＣＤ８の量が前記候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定することと、を含み、
ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大が腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、前記患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、前記患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する、
前記方法。
【１０１１】
１３０．前記患者が、疑似進行を有することが疑われる者として最初に特定される、構成１２９に記載の方法。
【１０１２】
１３１． ヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行を腫瘍の疑似進行から区別する方法であって、
ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、
次いで前記対象に候補免疫療法を投与することと、
次いで前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出することと、を含み、
ＣＤ８の結合の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示すのに対して、ＣＤ８の結合の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示し、前記患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続し、前記患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する、
前記方法。
【１０１３】
１３２．腫瘍を有するヒト対象を治療する方法であって、
前記対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することと、前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、
前記対象に候補免疫療法を投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出することと、を含み、
ａ）前記第１のＲＯＩに対する前記第２のＲＯＩの面積（対象に対する）が同じかまたはより大きく、かつＣＤ８浸潤の増加を示す場合、前記候補免疫療法の投与を継続するか、または
ｂ）前記第１のＲＯＩに対する前記第２のＲＯＩの面積（対象に対する）が同じかまたはより大きく、かつＣＤ８浸潤の増加を示さない場合、前記候補免疫療法の投与を中断することと、を含む、
前記方法。
【１０１４】
１３３．ヒト対象に標識を投与する方法であって、
対象に１８Ｆを投与することと、
約６時間以内に前記対象の１８Ｆ分布について前記対象のＰＥＴスキャンを行うことと、
８９Ｚｒに結合されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の約３６時間以内に８９Ｚｒの分布について前記対象にＰＥＴスキャンを行うことと、
を含む、前記方法。
【１０１５】
１３４．約２時間以内に前記対象の１８Ｆ分布について前記対象の前記ＰＥＴスキャンを行う、構成１３３に記載の方法。
【１０１６】
１３５．前記１８Ｆの分布を前記８９Ｚｒの分布と比較して、互いに重複する１８Ｆまたは８９Ｚｒの分布が高まっている前記対象の領域があるかどうかを判定することを更に含み、１８Ｆが高まっている領域は、同じ領域で重複して８９Ｚｒも高まっている場合にはＴＩＬ陽性である腫瘍を示し、同じ領域で重複して高まっている８９Ｚｒがない場合にはＴＩＬ陰性として判定される、構成１３３に記載の方法。
【１０１７】
１３６． 前記１８Ｆを投与することと前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することとの間の時間の長さは、１０日間以内である、構成１３３に記載の方法。
【１０１８】
１３７．ヒト対象の画像を準備する方法であって、
ＭＲＩまたはＦＤＧ−ＰＥＴスキャンの表現を含む第１のデータセットを提供することであって、前記ＭＲＩまたはＦＤＧ−ＰＥＴスキャンが少なくとも１つの腫瘍を示す、前記提供することと、
８９Ｚｒ−ＣＤ８抗原結合コンストラクトのＰＥＴスキャンの表現を含む第２のデータセットを提供することであって、前記第２のデータセットが少なくとも１つのＣＤ８の関心領域（「ＲＯＩ」）を示す、前記提供することと、
前記２つのデータセットから合成画像を生成することであって、前記合成画像は、前記少なくとも１つの腫瘍と前記少なくとも１つのＣＤ８のＲＯＩとの比較を提供する、ことと、を含む、
前記方法。
【１０１９】
１３８．対象内のＣＤ８分布を分析する方法であって、
第１のＰＥＴ画像により検出可能なマーカーの分布の画像を提供することであって、前記検出可能なマーカーがＣＤ８抗原結合コンストラクトに結合されている、前記提供することと、
前記対象の第２のＰＥＴ画像によりＦＤＧマーカーの分布の画像を提供することと、
前記第１のＰＥＴ画像の前記第２のＰＥＴ画像上へのオーバーレイを含む第３のＰＥＴ画像を生成することと、
前記第３のＰＥＴ画像に基づいて腫瘍のＴＩＬ状態を特定することと、
を含む、前記方法。
【１０２０】
１３９．前記ＦＤＧマーカーが１８Ｆである、構成１３８に記載の方法。
【１０２１】
１４０．腫瘍特性を特定するための方法であって、
ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンして少なくとも１つの腫瘍を特定することと、
前記ヒト対象内の８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についてスキャンして前記対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、
前記少なくとも１つの腫瘍の位置が前記対象内の８９Ｚｒのいずれか１つ以上の高まっている濃度と重複している場合に前記腫瘍を炎症型として特定することと、
を含む、前記方法。
【１０２２】
１４１．前記８９Ｚｒの１つ以上の高まっている濃度は、前記腫瘍増殖の少なくとも１つの領域ではないが、前記腫瘍を含む同じ臓器内である位置に対して高くなっている、構成１４０に記載の方法。
【１０２３】
１４２．前記８９Ｚｒの高まっている濃度と前記腫瘍の位置に重複がない場合に前記腫瘍をＩＯＴで治療することを更に含む、構成１４０に記載の方法。
【１０２４】
１４３．前記少なくとも１つの腫瘍の位置が、前記対象内の前記８９Ｚｒの少なくとも１つの高まっている濃度と重複しない場合、前記対象に候補治療薬を投与して前記腫瘍の状態を免疫排除型または免疫砂漠型から浸潤型へと変化させる、構成１４０に記載の方法。
【１０２５】
１４４．前記ヒト対象内の前記８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布についてスキャンすることを繰り返して前記対象内の前記８９Ｚｒの高まっている濃度の位置が前記候補治療薬によって変化したかどうかを特定することと、
前記少なくとも１つの腫瘍の位置が前記８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記第２の分布からの前記対象内の８９Ｚｒのいずれか１つ以上の高まっている濃度と重複している場合に腫瘍を炎症型として特定することと、
を更に含む、構成１４３に記載の方法。
【１０２６】
１４５．腫瘍特性を特定するための方法であって、
対象に１８Ｆを与えることと、
前記対象のＰＥＴスキャンを行って前記対象内の１８Ｆの分布を特定して前記腫瘍の表現を描写することと、
８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に与えることと、
前記対象のＰＥＴスキャンを行って前記対象内のＣＤ８分布の表現において前記対象内の８９Ｚｒの高まっている濃度を特定することと、
前記腫瘍の表現を前記ＣＤ８分布の表現と比較して前記２つの表現の重複領域を特定することと、を含み、腫瘍位置でかつ８９Ｚｒの濃度が高まっている領域は、炎症状態にあってＩＯＴを必要としない腫瘍を示し、腫瘍が存在するが８９Ｚｒの高まっている濃度は存在しない領域は、炎症状態になく、ＴＩＬ状態を調節するためにＩＯＴを必要とする腫瘍を表す、
前記方法。
【１０２７】
１４６．第１の時点で１８Ｆを前記対象に投与するかまたはＭＲＩスキャンを行い、前記第１の時点後の１０日以内に８９Ｚｒを前記対象に投与する、構成１３８〜１４５のいずれか１つに記載の方法。
【１０２８】
１４７．ヒト対象の脳内の固形腫瘍を特定するための方法であって、
ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、
ＰＥＴにより、前記対象の少なくとも頭部をスキャンすることと、
前記脳内の前記ＰＥＴ検出可能な標識の分布を提供することと、を含み、
前記分布内のＣＤ８集中領域の特定は、前記対象の前記脳内の固形腫瘍の存在を示す、前記方法。
【１０２９】
１４８．腫瘍の治療の有効性を判定する方法であって、
Ａ．構成１４７の方法によって前記腫瘍を特定することと、
Ｂ．免疫療法、放射線、及び／または化学療法を用いて前記対象を治療することと、
Ｃ． 構成１４７に記載の方法を繰り返して前記腫瘍のサイズまたはＴＩＬ状態が前記Ｂにおける治療後に変化したかどうかを判定することにより、前記治療が有効であるかどうかを判定することと、
を含む、前記方法。
【１０３０】
１４９．前記治療が有効でない場合、代替的な治療を前記対象に投与する、構成１４８に記載の方法。
【１０３１】
１５０．インビボでＣＤ８保有細胞を監視する方法であって、
ＣＤ８ミニボディをヒト対象に与えることであって、前記ＣＤ８ミニボディは図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、また、前記ミニボディはＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されている、前記与えることと、
前記対象内の前記ミニボディの分布を監視することと、を含み、前記監視することは、前記対象内の組織体積に、選択された量よりも多いＣＤ８保有細胞が浸潤しているか、または少ないＣＤ８保有細胞が浸潤しているかを区別し、前記監視することは、ＰＥＴにより達成される、
前記方法。
【１０３２】
１５１．ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化する方法であって、
ヒト対象にＣＤ８ミニボディを投与することであって、前記ミニボディはＰＥＴ検出可能なマーカーで標識され、前記ミニボディ配列はヒト化されておりヒトＣＤ８に結合する、前記投与することと、前記対象への前記ミニボディの投与の６〜３６時間以内に前記対象内の前記ミニボディの分布を監視することと、を含み、前記方法は、組織の体積に前記対象内の選択された量よりも多いＣＤ８保有細胞が浸潤しているかまたは少ないＣＤ８保有細胞が浸潤しているかを区別することができ、前記監視することはＰＥＴにより達成される、前記方法。
【１０３３】
１５２．ＣＤ８保有細胞の前記選択された量が、１００〜５００細胞／ｍｍ２のＩＨＣ測定値に相当する、構成１５１の方法。
【１０３４】
１５３．ＣＤ８保有細胞の前記選択された量が、４ミクロンの組織切片で細胞の２．５〜２５％のＩＨＣ測定値に相当する、構成１５１〜１５３のいずれか１つに記載の方法。
【１０３５】
１５４．ＣＤ８保有細胞の前記選択された量が、１ｍｍ３当たり１０，０００〜１００，０００細胞である、構成１５１〜１５３のいずれか１つに記載の方法。
【１０３６】
１５５．前記組織が厚さ４ミクロンである、構成１５１〜１５４のいずれかに記載の方法。
【１０３７】
１５６．取り込み時間がすべてのＣＤ８抗原結合コンストラクト間で一貫している、構成１５１〜１５５のいずれか１つに記載の方法。
【１０３８】
１５７．ヒト対象の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法であって、
ａ）ＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、
ｂ）その後、前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布をＰＥＴにより監視することと、
を含み、
前記監視することが、ＴＩＬ陽性腫瘍を特定し、
前記監視することが、
ａ）前記対象内の１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
ｂ）前記対象内の１ｍｍ２当たり５００個超または５００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
ｃ）前記対象内の１ｍｍ２当たり２００個超または２００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
ｄ）１００個〜５００個／ｍｍ２超またはこれ未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
ｅ）１％未満のＣＤ８保有細胞、１〜５０％のＣＤ８保有細胞、または５０％超のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
ｆ）４ミクロンの組織切片で細胞の２．５〜２５％のＩＨＣ測定値に相当するＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、
ｇ）対応する腫瘍の１ｍｍ３当たり１０，０００〜１００，０００個のＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、
ｈ）低い（コールド）または高い（ホット）、対応する腫瘍のＣＤ８保有細胞の細胞強度、
のうちの少なくとも１つを提供する、
前記方法。
【１０３９】
１５８．ＣＤ８保有細胞の腫瘍浸潤が代替的に、対応する腫瘍の生検に対して行われる免疫組織化学法によって確認される、構成１５７に記載の方法。
【１０４０】
１５９．ＣＤ８保有細胞の腫瘍浸潤密度は、対応する腫瘍の生検によって確認されない、構成１５８に記載の方法。
【１０４１】
１６０．がんを有するヒト対象内の腫瘍の状態についてのレポートであって、
ａ．構成１５７の方法の結果を含むセクションと、
ｂ．場合により、前記対象の対応する腫瘍の生検結果についてのセクションと、
ｃ．場合により、ＲＥＣＩＳＴまたはＰＥＲＣＩＳＴ基準に従った前記腫瘍の状態についてのセクションと、
を含む、前記レポート。
【１０４２】
１６１．ＰＥＴによりヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布を可視化する方法であって、
ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、
前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の６〜３６時間以内に前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することであって、前記監視することは、前記対象内の１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８陽性細胞が浸潤した組織を検出することができ、前記監視することはＰＥＴによって行われ、前記分布を可視化するための画像に変換される、前記監視することと、
を含む、前記方法。
【１０４３】
１６２．ヒト体内の細胞を可視化する方法であって、
ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることであって、前記手段は検出可能な標識を含む、前記与えることと、
ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する前記手段の前記対象への投与の６〜３６時間以内に前記対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する前記手段の第１の分布を監視及び決定することと、
を含む、前記方法。
【１０４４】
１６３．ヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する方法であって、
ＰＥＴ検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、前記対象内の前記ＰＥＴ検出可能な標識を有する前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することと、
前記ＰＥＴ検出可能な標識が前記対象内の既知のまたは疑わしい腫瘍に浸透した程度を評価することと、を含み、腫瘍は、前記ＰＥＴ検出可能な標識が腫瘍に浸透していた場合にＴＩＬ陽性であり、浸透していなかった場合にはＴＩＬ陰性である、
前記方法。
【１０４５】
１６４．がんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化をイメージングする方法であって、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記対象に投与することと、
前記対象内の前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布をＰＥＴにより判定することと、
前記対象に免疫療法を投与することと、
その後、前記対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布をＰＥＴにより判定することと、を含み、前記第１の分布と前記第２の分布との差は変化を示す、
前記方法。
【１０４６】
１６５．前記第２の分布が、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することの１０日以内に得られた前記対象の第２のＰＥＴ画像に基づいて判定される、構成１６４に記載の方法。
【１０４７】
１６６．前記第２の分布が、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトの前記対象への第２の投与に基づいて判定される、構成１６４に記載の方法。
【１０４８】
１６７．対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する方法であって、
ＲＯＩ内の前記対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、
ＩＯＴを投与することと、
前記ＲＯＩ内の前記対象の治療後ＣＤ８分布を提供することであって、前記治療後ＣＤ８分布は、前記ＩＯＴを投与することの３５日以内に得られる、前記提供することと、
前記治療後ＣＤ８分布と前記ベースラインＣＤ８分布とを比較して前記対象が前記ＩＯＴに応答しているかどうかを判定することと、
を含む、前記方法。
【１０４９】
１６８．チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性を予測する方法であって、
ＲＯＩ内の前記対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により提供することと、
チェックポイント阻害剤を投与することと、
前記ＲＯＩ内の前記対象のチェックポイント阻害剤ＣＤ８分布を提供することであって、前記チェックポイント阻害剤ＣＤ８分布は、前記ＩＯＴを投与することの３５日以内に得られる、前記提供することと、
前記チェックポイント阻害剤ＣＤ８分布を前記ベースラインＣＤ８分布と比較して前記対象が前記チェックポイント阻害剤に応答性を有するかどうかを判定することと、
を含む、前記方法。
【１０５０】
１６９．前記治療後ＣＤ８分布が、前記ＩＯＴを投与することの３〜８日以内に得られる、構成１６８に記載の方法。
【１０５１】
１７０．療法の有効性を監視する方法であって、
対象の第１のＣＤ８画像を提供することであって、前記対象が療法のベースラインにある、前記提供することと、
前記対象に療法を投与することと、
前記対象の第２のＣＤ８画像を提供することと、を含み、前記対象に療法が投与されてから少なくとも１日が経過しており、ＣＤ８造影剤の有意な増加がない場合、前記対象は療法に応答していない、
前記方法。
【１０５２】
１７１．腫瘍の分析方法であって、
候補治療薬に応答した対象内の腫瘍における相対ＣＤ８浸潤度を特徴付けることを含み、前記特徴付けることは、放射性標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトによりＣＤ８浸潤度が増加したかまたは減少したかを観察することを含み、ＣＤ８浸潤の増加は、前記候補治療薬が治療薬として機能していることを示し、ＣＤ８浸潤の減少は、前記候補治療薬が治療薬として機能していないことを示し、前記腫瘍のサイズが、前記候補治療薬が投与される前と前記候補治療薬が投与された後との間で増大している、前記方法。
【１０５３】
１７２．標準取り込み値を決定する方法であって、
放射性プローブを含む抗原結合コンストラクトを対象に適用することと、
ｒを決定することであって、ｒは、ＰＥＴスキャナーによりＲＯＩ内で測定される、抗原結合コンストラクトからの放射線の放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である、前記決定することと、
ａ’を決定することであって、ａ’は、注入された放射性標識されたトレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である、前記決定することと、
患者の体重ｗを決定することと、
ＳＵＶを、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果として決定することと、
を含む、前記方法。
【１０５４】
１７３．  画像を分析する方法であって、
画像を提供することと、
前記画像をマーキングすることにより前記画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）を定義することと、
前記第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度を決定することと、
前記第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度を決定することと、
前記第１のＲＯＩ内の前記シグナル強度の平均値を決定することと、
前記第１のＲＯＩ内の各シグナル強度を合計して前記第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルを得ることと、を含み、前記第１のＲＯＩは、対象に投与された抗原結合コンストラクトに関連付けられた検出可能なマーカーの量のデータを表す、
前記方法。
【１０５５】
１７４．第２のＲＯＩについて構成９７の前記プロセスを繰り返して第２の合計シグナルレベルを決定することと、前記第１と前記第２の合計シグナルレベルを比較することと、を更に含み、前記第１の合計シグナルレベルが前記第２の合計シグナルレベルよりも低い場合、前記第２のＲＯＩ内の増加したＣＤ８の存在を示す、構成１７３に記載の方法。
【１０５６】
１７５．前記第１のＲＯＩが前記第２のＲＯＩと同じ位置であるが、
前記第１のＲＯＩが第１の時点で提供され、前記第２のＲＯＩが第２の時点で提供され、候補治療薬が、前記第１の時点の後であるが前記第２の時点の前に投与されている点で異なる、構成１７３に記載の方法。
【１０５７】
１７６．画像を生成する方法であって、
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することであって、前記抗原結合コンストラクトが検出可能なマーカーを含む、前記適用することと、
腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出し、検出された各前記検出可能なマーカーに対して正のピクセルを割り当てることと、
割り当てられた各前記正のピクセルの分布に基づいて画像を生成することであって、前記画像が非一時的コンピュータ可読媒体に格納される、前記生成することと、
を含む、前記方法。
【１０５８】
１７７．ＰＥＴスキャンの画像に関するデータを含む非一時的コンピュータ可読媒体であって、前記データが、ＰＥＴスキャンを含む上記の構成のいずれか１つに記載の方法によって得られたものである、前記非一時的コンピュータ可読媒体。
【１０５９】
１７８．対象の生検を行う方法であって、
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを前記対象に与えることと、
特定の腫瘍内の前記抗原結合コンストラクトの高まっているレベルに基づいて、生検を行う前記特定の腫瘍を選択することと、
前記特定の腫瘍から試料を採取することと、
を含む、前記方法。
【１０６０】
１７９．対象の生検を行う方法であって、
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを前記対象に与えることと、
特定の腫瘍内の前記抗原結合コンストラクトの分布に基づいて、生検を行うための前記腫瘍内の特定の位置を選択することと、
前記腫瘍内の前記特定の位置から試料を採取することと、を含み、前記特定の位置が、ａ）前記腫瘍の内部にあるか、またはｂ）前記腫瘍の表面上にある、
前記方法。
【１０６１】
１８０．免疫関連有害事象（ｉｒＡＥ）を検出する方法であって、
チェックポイント阻害剤療法を行っているヒト対象を特定することと、
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを前記ヒト対象に投与することであって、前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識を有する、前記投与することと、
前記対象内の前記検出可能な標識を監視して、免疫関連毒性があるかどうかを判定することであって、前記免疫関連毒性がＣＤ８結合の増加によって示される、前記判定することと、
前記免疫関連毒性が重症または不可逆的である場合、前記チェックポイント阻害剤療法を中止することと、
前記免疫関連毒性が重症または不可逆的でない場合、前記チェックポイント阻害剤療法を保留して、ＣＤ８レベルがより低いレベルに戻るまでＣＤ８レベルを引き続き監視することと、
を含む、前記方法。
【１０６２】
１８１．腫瘍の位置がどの臓器または系が免疫関連有害事象（ｉｒＡＥ）を有しているかを示す、構成１８０に記載の方法。
【１０６３】
１８２．前記比較が、前記ｉｒＡＥの重症度の指標を与える、構成１８０に記載の方法。
【１０６４】
１８３．０．５〜３．０ｍＣｉ±２０％の量の放射線量が投与される、放射線を含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０６５】
１８４．０．４〜３．６ｍＣｉの量の放射線量が投与される、放射線を含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０６６】
１８５．前記抗原結合コンストラクトの量が０．２〜１０ｍｇである、抗原結合コンストラクトを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０６７】
１８６．前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトのサイズが１０５ｋＤａ未満である、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０６８】
１８７．前記ＣＤ８抗原結合コンストラクトが８９Ｚｒに結合されている、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０６９】
１８８．抗原結合コンストラクトの投与後、プロセスの次ステップの前に６〜３６時間が経過する、抗原結合コンストラクトの投与を含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０７０】
１８９．ＰＥＴスキャン時間が、４０分間未満である、ＰＥＴスキャンを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０７１】
１９０．ＰＥＴスキャン時間が、２５分間未満かつ２分間超である、ＰＥＴスキャンを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０７２】
１９１．前記対象に治療薬が投与され、前記治療薬が、エフチラジモド・α（ｅｆｔｉｌａｇｉｍｏｄ ａｌｐｈａ）、レラトリマブ、ＯＭＰ−３１３Ｍ３２、ＥＯＳ８８４４４８８、ＴＪＴ６、ＡＢ１５４、及び二重ＴＩＧＩＴ／ＰＤ−Ｌ１標的化小分子薬のうちの少なくとも１つから選択される、構成１〜３２、４０〜５３、５５〜１０３、１１２、１１８〜１５９、及び１６１〜１９０のいずれか１つに記載の方法。
【１０７３】
１９２．前記対象に治療薬が投与され、前記治療薬が、ＬＡＧ−３に対する抗体、ＴＩＧＩＴに対する抗体、ＭＫ−４２８０、ＭＫ−７６８４、及び／または上記のいずれかとキイトルーダとの組み合わせのうちの少なくとも１つから選択される、構成１〜３２、４０〜５３、５５〜１０３、１１２、１１８〜１５９、及び１６１〜１９１のいずれか１つに記載の方法。
１９３．前記対象に治療薬が投与され、前記治療薬が、ＥＯＳ８８４４４８８、ＴＪＴ６、ＡＢ１５４、オーリジーン、及び二重ＴＩＧＩＴ／ＰＤ−Ｌ１阻害剤のうちの少なくとも１つから選択される、構成１〜３２、４０〜５３、５５〜１０３、１１２、１１８〜１５９、及び１６１〜１９２のいずれか１つに記載の方法。
【１０７４】
１９４．前記状態が、
Ａ）ｉ）免疫炎症型、またはｉｉ）免疫排除型または免疫砂漠型、
Ｂ）均一な浸潤、不均一な浸潤、及び／または
Ｃ）炎症型腫瘍の場合、高度、中度、低度の炎症、
のうちの１つ以上から選択される、構成１〜３２、４０〜５３、５５〜１０３、１１２、１１８〜１５９、及び１６１〜１９３のいずれか１つに記載の方法。
【１０７５】
１９５．対象の身体の少なくとも３０％が、ＣＤ８＋ＴＩＬ負荷についてＰＥＴによりスキャンされる、構成１〜３２、４０〜５３、５５〜１０３、１１２、１１８〜１５９、及び１６１〜１９４のいずれか１つに記載の方法。
【１０７６】
１９６．ＣＤ８＋Ｔ細胞の存在、ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化、ＣＤ８＋Ｔ細胞の数、または腫瘍病変に対するＣＤ８＋Ｔ細胞の輸送を変化させる治療を更に含む、構成１〜３２、４０〜５３、５５〜１０３、１１２、１１８〜１５９、及び１６１〜１９５のいずれか１つに記載の方法。
【１０７７】
１９７．前記治療が、化学療法、腫瘍溶解ウイルス、ワクチン、放射線療法、細胞療法などのうちの少なくとも１つを含む、治療を含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０７８】
１９８．前記ＣＤ８ミニボディが、重鎖可変領域と軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域がヒトアミノ酸配列から本質的に構成され、前記軽鎖可変領域がヒトアミノ酸配列から本質的に構成される、組成物を含む構成のいずれか１つに記載の方法、または組成物を含む構成のいずれか１つに記載の組成物。
【１０７９】
１９９．前記ＣＤ８ミニボディが、配列番号１３４及び／または１３５の配列からなるＣＤ８配列に結合する、ＣＤ８ミニボディを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０８０】
２００．前記ミニボディが、本明細書で提供されるＣＤＲの配列番号のいずれかの重鎖ＣＤＲと、本明細書で提供されるＣＤＲの配列番号のいずれかの軽鎖ＣＤＲとを含む、ミニボディを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０８１】
２０１．前記ミニボディが、本明細書で提供される重鎖の配列番号のいずれかの重鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域と、本明細書で提供される重鎖の配列番号のいずれかの軽鎖アミノ酸配列と少なくとも８０％同一である重鎖可変領域とを含む、ミニボディを含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０８２】
２０２．前記既知の腫瘍が、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、及び白血病、悪性リンパ腫、扁平細胞癌（例えば、扁平上皮細胞癌）、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、及び肺扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃癌、消化器癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、尿道癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、黒色腫、多発性骨髄腫及びＢ細胞リンパ腫、脳腫瘍、頭頸部癌、成人及び小児の固形癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、古典的ホジキンリンパ腫、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、尿路上皮癌、高頻度マイクロサテライト不安定性癌、子宮頸癌、メルケル細胞癌、食道癌、皮膚扁平上皮癌、前立腺癌、鼻咽頭癌、小細胞肺中皮腫、原発性縦隔Ｂ細胞性リンパ腫、及び固形腫瘍のうちの１つ以上のがんから選択される、既知の腫瘍を含む構成のいずれか１つに記載の方法。
【１０８３】
２０３．先行構成のいずれか１つに記載の方法において使用するための、または薬剤として使用するための抗原結合コンストラクト。
【１０８４】
２０４．先行構成のいずれか１項に記載の方法において使用するための、または薬剤として使用するためのＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【１０８５】
２０５．前記放射性標識が、０．５よりも高いが１．０ｍＣｉよりも低い放射線を提供する、先行構成のいずれか１つに記載の抗原結合コンストラクト、またはＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【１０８６】
２０６．前記放射性標識が０．７５ｍＣｉよりも低い放射線を提供する、先行構成のいずれか１つに記載の抗原結合コンストラクト、またはＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【１０８７】
２０７．イメージング、検出、診断、手術、ステージ分類、治療、治療の監視、疾患の進行の監視、及び療法の監視のうちの少なくとも１つで使用するための、先行構成のいずれか１つに記載の組成物、製剤、抗原結合コンストラクト、またはＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【１０８８】
２０８．イメージング、検出、診断、手術、ステージ分類、治療、治療の監視、疾患の進行の監視、及びＣＤ８依存性疾患、場合によりがんの療法の監視のうちの少なくとも１つで使用するための、先行構成のいずれか１つに記載の組成物、製剤、抗原結合コンストラクト、またはＣＤ８  ＰＥＴトレーサー。
【１０８９】
２０９．ヒト対象内のＣＤ８保有細胞を可視化するための非侵襲的方法であって、
（ａ）ＣＤ８に選択的に結合する、ＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されたトレーサーをヒト対象に投与することと、
（ｂ）（ａ）の１〜３６時間以内に、ＩＨＣ（免疫組織化学）の非存在下でＰＥＴにより前記対象内の前記トレーサーの分布を監視することと、を含み、ＰＥＴスキャンが、前記対象内の組織のある体積に選択された量のＣＤ８保有細胞よりも多い量が浸潤しているかまたは少ない量が浸潤しているかを示す、前記方法。
【実施例】
【１０９０】
実施例１
ホルマリン固定され、パラフィンに包埋された正常なヒト及び癌組織の免疫組織化学的（ＩＨＣ）染色を、検証されている抗ＣＤ８試薬（クローンＣ８／１４４Ｂ、Ｄａｋｏ）を使用して行ってＣＤ８＋Ｔ細胞の分布を調べた。結果は、正常な脾臓、扁桃、リンパ節、及び胸腺、ならびに腸をはじめとする様々な他の臓器においてＣＤ８＋Ｔ細胞の特異的な膜及び細胞質の染色を示した。黒色腫及び肺癌の染色は、ＣＤ８＋Ｔ細胞はほとんどが散在的かつ凝集しない形で分布しており、疾患状況において特定の解剖学的構造と強い関連を示さなかった。
【１０９１】
実施例２
デスフェリオキサミン（Ｄｆ）に結合され、陽電子放出放射性核種ジルコニウム８９（８９Ｚｒ、Ｔ１／２：７８．４時間）で放射性標識された、ＣＤ８糖タンパク質に対して高親和性を有する（結合ＥＣ５０＝０．４ｎＭ）約８０ｋＤａのミニボディ（Ｍｂ）である８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃが、ヒト体内のＣＤ８＋Ｔ細胞のイメージングを行うために開発された。Ｍｂフラグメントは、各モノマーが改変ＩｇＧ１ヒンジ配列を介してヒトＩｇＧ１のＣＨ３ドメインに結合された一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦＶ）を有する二価のホモ二量体である。ＭｂはＦｃ受容体の相互作用ドメインを欠いており、インタクトなｍＡｂと比較して小さいサイズを有している。ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ヒトＣＤ８を標的とするＯＫＴ８抗体のヒト化可変重鎖及び軽鎖配列から遺伝子操作により作製された（すなわち、それに関する情報を用いて開発された）ものである。
【１０９２】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの安全性及び潜在的有効性についてインビトロ及びインビボ試験を行って評価がなされた。ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ及びＤｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ＣＤ−８を発現する精製されたヒトＴ細胞及びＨＰＢ−ＡＬＬ白血病細胞（ＤＳＭＺ， Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ， Ｇｅｒｍａｎｙ）と高い親和性で結合し、ＥＣ５０はそれぞれ、０．４ｎＭ及び０．３ｎＭである。結合親和性及び特異性は、ジルコニウムとの結合及びキレート化によって影響されなかった。１０人の健康なドナーから得た末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を用いた試験では、ドナーＴ細胞を可溶性のまたは固定化されたＭｂタンパク質に曝露した場合にＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖または枯渇に対して測定可能または再現可能な影響は示されず、サイトカインの安定した活性化も示されなかった。ＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖及び生存率に対する飽和濃度の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの影響を評価した試験でも影響は認められなかった。
【１０９３】
ＣＤ３４＋幹細胞を移植したヒト化ＮＳＧ（商標）マウスにてインビボで行われた前臨床試験では、静脈内投与後にＣＤ８＋Ｔ細胞集団またはサイトカイン放出に対するＤｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの急性の影響は示されなかった。これに対して、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃと同じエピトープに結合する同じ可変配列を有する完全長のヒトＩｇＧ１分子であるＩＡＢ２２ＦＬは、ヒト−ＣＤ３４  ＮＳＧ（商標）マウスでＣＤ８＋Ｔ細胞の枯渇を引き起こした。ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、ならびにＴ細胞の枯渇及びサイトカイン活性化を誘導することが知られている別の抗体であるＯＫＴ３と比較してＤｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの不活性な薬理学的性質は、ＣＨ２ドメイン及び対応するインタクトなＩｇＧに伴うエフェクター機能の除去によるものと考えられる。第１相臨床試験で提案されたヒトでの開始用量である１．５ｍｇは、ＣＤ８＋Ｔ細胞及びサイトカイン放出に対する悪影響が認められなかったこれらの毒性試験でヒト化マウスに投与された用量よりも１６．６倍低い。
【１０９４】
行われた非ヒト霊長類（ＮＨＰ）ＧＬＰ試験は、Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの０、２、１０、または２５ｍｇ／ｋｇ／用量で２回用量の週１回の静脈内投与は、早期の死、総括的所見、臓器重量の変化、ならびに末期及び回復時点の両方で顕微鏡的所見をもたらさないことを示した。この毒性試験からの最大無毒性量（ＮＯＡＥＬ）は２５ｍｇ／ｋｇと決定され、全タンパク質１．５ｍｇ、５及び１０ｍｇの計画されたヒト用量を支持するものである。ＮＨＰ試験で投与された最大可能容量である２５ｍｇ／ｋｇは、６０ｋｇのヒトへの１．５ｍｇの薬剤または７０ｋｇのヒトへの１．７５ｍｇの薬剤の投与と同等であった。これらの用量は、提案された１．５ｍｇの開始用量に対して１０００倍を上回る安全域を、また、１０ｍｇの用量で６０または７０ｋｇのヒトに対してそれぞれ１５０及び１７０倍の安全域を提供するものである。
【１０９５】
前臨床イメージング及び生体分布試験によって好ましい薬物動態が示され、ＮＳＧ（商標）マウスにヒトＰＢＭＣを移植することによって確立された移植片対宿主拒絶反応（ＧｖＨＤ）モデルにおいて、またマトリゲルプラグアッセイにおいて浸潤ＣＤ８＋Ｔ細胞を検出する８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの能力が実証された。
【１０９６】
実施例３
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの製造プロセスは、各患者に対する単位用量を調製するためにＩＡＢ２２Ｍ２Ｃへの結合及び放射性標識の両方を組み入れたものとした。図４０に示されるように、デスフェリオキサミン（Ｄｆ）をＩＡＢ２２Ｍ２Ｃのリシン残基に結合させて中間体のＤｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを作製した後、陽電子放出放射性核種８９Ｚｒ（シュウ酸塩として）で放射性標識した。放射性標識及び精製の後、生成物を製剤化してコホート特異的な用量とし、投与に先立って滅菌濾過する。
【１０９７】
図４０：デスフェリオキサミン（Ｄｆ）の化学構造と反応させられ、放射性標識されて製剤８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを生成するＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  Ｍｂ（図３９に示される配列を有する。配列番号１４７）。ＤＳ＝薬剤物質、ＤＰ＝製剤。
【１０９８】
出発参照物質として使用したＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  Ｍｂは、パブリックドメインのマウス抗ヒトＣＤ８モノクローナル抗体（ｍＡｂ）ＯＫＴ８である。ＯＫＴ８の可変領域から得たＤＮＡ配列情報をＣＤＲグラフティングによりヒト化し、マウスフレームワーク内のアミノ酸をヒトでの使用に適したアミノ酸に置換した。得られたヒト化可変ドメインは、ヒトに抗薬物抗体（ＡＤＡ）反応を誘発する可能性は低いものと予測された。ヒト化した可変ＶＬ配列とＶＨ配列とをアミノ酸１８個の高Ｇｌｙ−Ｓｅｒリンカー配列により連結してｓｃＦＶを形成し、これをヒトＩｇＧ１のＣＨ３ドメインに改変ヒトＩｇＧ１ヒンジ配列を介して連結してＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを生成した。
【１０９９】
薬剤物質ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ｃＧＭＰ（ｃｕｒｒｅｎｔ  ｇｏｏｄ  ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  ｐｒａｃｔｉｃｅ、現行医薬品適正製造基準）、及びＬｏｎｚａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ  ｐｌｃ（Ｓｌｏｕｇｈ，ＵＫ）による一般的な生物製剤基準に従って製造、試験、及び出荷されている。
【１１００】
デスフェリオキサミン（Ｄｆ）キレート剤（１−（４−イソチオシアネートフェニル）−３−［６，１７−ジヒドロキシ−７，１０，１８，２１−テトラオキソ−２７−［Ｎアセチルヒドロキシルアミノ）− ６，１１，１７，２２−テトラ−アザヘプタイコサン］チオ尿素）；Ｂ−７０５）（ＧＭＰグレード）のイソチオシアネート活性化体をＩＡＢ２２Ｍ２Ｃに結合して、キレート剤：ミニボディ比（ＣＭＲ）が約２である重要な中間体としてＤｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを生成した。最終的な製剤である８９Ｚｒ−Ｄｆ− ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを、８９Ｚｒ−シュウ酸塩と反応させることにより製造した。反応後、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを過剰標のキレート剤ＤＴＰＡでチャレンジして遊離または緩く結合した８９Ｚｒ−シュウ酸塩をすべて除去した。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃをゲル濾過により８９Ｚｒ−ＤＴＰＡから分離し、製剤化バッファー中にバッファー交換した。次いで、生成物を０．２μｍＰＶＤＦ膜に通して滅菌濾過し、品質管理用の試料を取り除けた。結合及び放射性標識プロセスを示すフロー図を図４１に示す。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ＰＥＴ薬剤についてのｃＧＭＰ及びＰＥＴ用放射性医薬品についてのＵＳＰ要件に従って製造した。
【１１０１】
製造プロセスは、各患者に対する単位用量を調製するためにＩＡＢ２２Ｍ２Ｃへの結合及び放射性標識の両方を組み入れたものとした。放射性標識に進む前に、結合させた中間体Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃに対して分析的検査を行った。Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ中間体のインプロセス試験の規格を表３．１に示す。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃのリリース試験及び判定基準を表３．２に記載する。
【１１０２】
【表６】
2022501402.tif 000018
【１１０３】
【表７】
2022501402.tif 000019
【１１０４】
最終的な製剤は、投与される総タンパク質用量に応じて、２０ｍＭヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭ塩化ナトリウム、１４１〜１９４ｍＭアルギニン、及び２〜２０ｍＭグルタミン酸中で製剤化した３．０（±２０％）ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃとした。投与経路は、点滴静注とした。用量は室温で保存し、合成の終了から２４時間以内に使用した。
【１１０５】
いくつかの実施形態では、最終的な製剤を容器内に入れることができる。ラベルを容器上に配するか、または容器に付属させることができる。いくつかの実施形態では、バルクの物質の場合、ラベルは−６５℃以下での保存を指示し、タンパク質濃度は３．０±０．３ｍｇ／ｍｌである。いくつかの実施形態では、薬剤物質の場合、ラベルは、２０ｍＭヒスチジン、１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．２Ｍ  Ｌ−アルギニン塩酸塩、ｐＨ６．５、及び２〜８℃での保存を記載する。適切な組成物は対応するバイアルのそれぞれに入れられる。いくつかの実施形態では、インプロセスバイアルラベルが用いられる。ラベルは、ロット番号、較正実施日、期限切れ日、ＩＲＢ、較正実施時間、期限切れ時間、活性、質量及び体積のうちの１つ以上に関する記録のためのスペースを有する。
【１１０６】
実施例４
ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、及び８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃのインビトロ特性を調べるための非臨床的試験を行って、異なるドナーから得られたＣＤ８過剰発現細胞株、精製したヒトＴ細胞、及び末梢血単核球（ＰＢＭＣ）における結合及び機能特性を確立した。機能アッセイには、ポジティブコントロール、すなわちヒトのＴ細胞を活性化することが知られている２種類の参照ＩｇＧであるＯＫＴ３及びＴＧＮ１４１２を含めた。ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、インタクトな抗体に存在するＣＨ１及びＣＨ２を欠いているため、結合させない形態及びそれぞれのＤＦ結合形態のいずれの薬理学的作用も、主として細胞表面上のＣＤ８抗原の結合により媒介される。これまでのところ、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、Ｚｒ−Ｄｆ− ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、及び８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのいずれもＣＤ８特異的な有害な薬理学的作用を媒介せず、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを免疫療法及び他の療法に応じてＣＤ８＋Ｔ細胞の免疫ＰＥＴイメージング用の薬剤として使用できることを示している。
【１１０７】
結合親和性及び特異性
細胞表面に発現されたヒトＣＤ８に対するＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ及びＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの結合親和性及び特異性を、ヒトＣＤ８（ＩｍａｇｉｎＡｂ，Ｉｎｃ．）を発現するように操作したＨＰＢ−ＡＬＬ白血病細胞（ＤＳＭＺ、Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）、精製ヒトＴ細胞、及びＰＣ３前立腺癌細胞を含むいくつかの細胞タイプについてフローサイトメトリーによって評価した。細胞ベースの競合結合アッセイの結果を図４２Ａ及び４２Ｂに示す。
【１１０８】
ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ヒトＴ細胞及びＨＰＢ−ＡＬＬ細胞株で発現したＣＤ８にそれぞれ０．４ｎＭ及び０．３ｎＭのＥＣ５０で結合した。ＤＦとの結合及びＺｒとのキレート化は、ＨＰＢ−ＡＬＬまたはヒトＴ細胞で発現したヒトＣＤ８へのＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの結合に有意な影響を示さなかった。ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ及びＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの両方のＩＣ５０値は同様であり、この結合アッセイでは、０．９〜１．５ｎＭの範囲であった。
【１１０９】
培養ヒト末梢血単核球（ＰＢＭＣ）によるインビトロ増殖アッセイ
Ｔ細胞を適切な刺激（例えば、抗原またはＴＣＲ架橋）により刺激することにより、インビトロで培養した場合に増殖させてサイトカインを分泌させることができる。ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ及びＤｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣがＴ細胞増殖を刺激する能力をドナーから単離されたヒトＰＢＭＣを用いて評価した。ＯＫＴ３ならびにＴＧＮ１４１２をポジティブコントロールとして用いた。アッセイでは、ＴＧＮ１４１２などの潜在的な活性化ｍＡｂ［Ｒｏｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１］に対するＴ細胞応答を検出するために最適化されたＲＥＳＴＯＲＥプロトコールを用いてプレインキュベーションを行った。組織培養プレートへのタンパク質の固定化は、Ｔ細胞受容体複合体架橋を促進してより強力な分裂促進応答をもたらす［Ｓｔｅｂｂｉｎｇｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００７］。Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、ならびにコントロール抗体ＯＫＴ３及びＴＧＮ１４１２が組織培養プレートに固定化されたタンパク質の存在下で増殖を刺激する能力を評価し、図４３に結果を示す。
【１１１０】
図４３：４人の同じヒトドナーから得たヒトＰＢＭＣを、示された濃度の固定化された各試験化合物と４日間インキュベートした後のＴ細胞増殖に対するＯＫＴ３、Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（２２−１６０２０９−０３）、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ （ＣＨＴ０２０９１６）、ＩＡＢ２２ＦＬ、ＴＧＮ１４１２、Ｄｆ−Ｍｂコントロール及びヒトＩｇＧアイソタイプコントロールの効果（＊＊＊＊ Ｐ＜０．０００１）。
【１１１１】
４人の異なるヒトドナーから得たＰＢＭＣを固定化されたＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、ＤＦコントロールＭｂ、またはアイソタイプコントロール抗体の存在下でインキュベートした場合、測定可能な増殖は検出されなかった。これに対して、プレートに結合させたＯＫＴ３は、ヒトＩｇＧ１コントロールと比較した場合に統計的に有意な増殖応答を誘導した（一元配置分散分析とダネット多重比較を用いた分析：ｐ＜０．０００１）。
【１１１２】
培養ヒトＰＢＭＣからのサイトカイン放出
インビボ及びインビトロでのＴ細胞の活性化は、ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ及びＴＮＦ−αを含む炎症促進性サイトカインの分泌を伴う。Ｄｆ−ＩＡＢ２２ＭＣ及びＩＡＢ２２ＭＣをヒトＰＢＭＣと培養した場合にサイトカイン放出を誘発する能力について評価した。５人のドナーから得たヒトＰＢＭＣを、ＲＥＳＴＯＲＥプロトコールを用いて予備培養して試験物質Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ及びＩＡＢ２２Ｍ２ＣならびにＴＧＮ１４１２及びＯＣＴ３の活性を評価した。この試験では、試験物質を水性培地（溶液）に加えるか、または局在化シグナルの送達を再現するため、試験物質を固体支持体上に固定化した後に試験物質の評価を行った。結果を図４４に示す。
【１１１３】
図４４：溶液中（左パネル）または固定化後（右パネル）にＯＫＴ３、Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ （２２−１６０２０９−０３）、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ （ＣＨＴ０２０９１６）、ＩＡＢ２２ＦＬ、Ｄｆ−Ｍｂコントロール及びＩｇＧ１アイソタイプコントロールと１８時間インキュベートしたヒトＰＢＭＣからのサイトカイン放出。サイトカインレベルは、ＬｅｇｅｎｄＰｌｅｘ（商標）マルチプレックスビーズアッセイを用いて測定した。
【１１１４】
結果は、５人の異なるドナーから得たヒトＰＢＭＣを可溶性または固定化したＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ、ＩＡＢ２２ＦＬ、Ｄｆ−コントロールＭｂ、及びアイソタイプコントロール抗体と、一次及び二次サイトカイン放出に充分な時間である１８時間にわたってインキュベートした場合に、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、またはＩＬ−２の有意な放出を示さなかった。固定化したＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃまたは水性Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃとのインキュベーション後、１人のドナーからのＰＢＭＣでＩＬ−６の増加が検出された。試験物質が溶液中またはプレート上に固定化されて与えられた場合、５人のドナーからのＰＢＭＣにおいて、ＯＫＴ３が安定したサイトカイン放出を刺激した。これに対して、ＴＧＮ１４１２は、ＯＫＴ３よりも低いサイトカイン放出を媒介したが、ＰＢＭＣを固定化した試験物質とインキュベートした場合に一貫してサイトカイン放出を増加させた。
【１１１５】
Ｔ細胞の増殖、生存率に対する８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの効果。
Ｔ細胞の増殖及び生存率に対する放射性標識された８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの潜在的な効果をインビトロで評価した。すべての調製物は、細胞上に存在する推定されるＣＤ８受容体の数に対して約２０倍の過剰量の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣまたはＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを含んだ。ＲＥＳＴＯＲＥ処理したヒトＰＢＭＣを、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃまたは非標識Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  Ｍｂ調製物と３７℃で２時間インキュベートした。インキュベーション及び洗浄後、細胞を計数し、増殖を刺激するための１μｇ／ｍＬのＯＫＴ３を添加したかまたは添加しない５０ＩＵ／ｍＬのＩＬ−２及び１０％熱不活化ヒト血清を含むＲＰＭＩ培地中で組織培養プレートに播種した。細胞を１日置きに６日間にわたって計数してＯＫＴ３に応答した生存率または増殖率を測定した。Ｍｂで処理しない細胞または非放射性Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃで処理しない細胞をコントロールとして用いた。結果を図４５に示す。
【１１１６】
図４５：ヒトＰＢＭＣを、示された放射性標識された化合物及びコントロール化合物と２、４及び６日間にわたってインキュベーションした後の（Ａ）Ｔ細胞の生存率、及び（Ｂ）Ｔ細胞の増殖率に対する、非処理と比較した８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（１０μＣｉ／μｇ）、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（０．１μＣｉ／μｇ）、及びＺｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの効果。
【１１１７】
放射性標識された８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ＣＤ８＋Ｔ細胞の生存を支持する培地中での２、４、及び６日間のインキュベーション後に細胞生存率に対する統計的に有意な影響を示さなかった（二元配置分散分析とテューキー多重比較検定）。細胞生存率は、非放射性Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃまたは非処理のコントロールと比較した場合に８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃで処理した細胞で変化はなかった。更に、放射性標識された８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃとのインキュベーションは、二元配置分散分析とテューキー多重比較検定を用いて、２、４、及び６日間のインキュベーション後、ＯＫＴ３及びＩＬ−２により刺激したＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖に統計的に有意な影響を示さなかった。２日目及び４日目に存在した生細胞の数と比較した場合に評価したすべての条件下で６日目に細胞数の統計的に有意な増加が測定された（二元配置分散分析とテューキー多重比較検定を用いて、ｐ＜０．０００１）。これらの結果は、高比放射能の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣへのヒトＰＢＭＣの曝露がＣＤ８＋Ｔ細胞の生存率にも増殖率にも測定可能な影響を及ぼさなかったことを示すものである。
【１１１８】
実施例７
標準的な医療措置の一環として１つ以上のチェックポイント阻害剤（ＣＩ）による治療を受けている転移性黒色腫を有する患者において第１相、非盲検、単施設、非ランダム化、単一用量の安全性試験を行った。これは、３ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを１．５、５、及び１０ｍｇの総マスタンパク質用量として投与した、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）イメージングを用いた用量漸増試験であった。安全性試験及び評価を各試験来院にわたって行った。この試験で収集されたデータを用いてＰＥＴ／ＣＴイメージング及び８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを用いてＣＤ８＋活性を検出するためのより優れた時点及びタンパク質用量を評価及び推奨した。副次評価項目には、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴが、ＣＤ８  Ｔ細胞が存在し得るリンパ系器官及び腫瘍部位に局在化する能力を判定すること、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴシグナルを、任意の生検により得られた組織試料中のＣＤ８発現Ｔ細胞及び他の免疫バイオマーカー（例えば、ＰＤ１、ＰＤ−Ｌ１、ＩＦＮ−γ、及びＣＤ１０７ａ）と関連付けること、及び腫瘍部位における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴの取り込みを、フォローアップの従来のイメージングで評価された腫瘍応答と関連付けること、が含まれた。
【１１１９】
用量の最適化及び画像収集のタイミングを含む８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの初期の安全性及び実施可能性が確立された時点で、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの反復投与（２回）の安全性を評価した。製品開発では、免疫療法の投与に際して治療応答及び治療用量の最適化をよりよく評価するために反復投与及び反復イメージングの実施可能性を検証することを行った。
【１１２０】
実施例８
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの使用は、広範囲のよく制御された非臨床インビトロ及びインビボ評価に基づけば、ヒト被験者に顕著なリスクを示さず、ＣＤ８を標的とするＭｂの機能的活性を示さなかった。
【１１２１】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃはヒト化抗体フラグメントであるため、輸液反応のリスクが存在する。ＰＳＭＡを標的とした放射性標識されたＭｂフラグメントを用いた以前の試験では、輸液反応の事例は試験した５７人の患者でみられなかった。輸液反応を発症するリスクは、静脈内ジフェンヒドラミン（２５〜５０ｍｇ）及び経口アセトアミノフェン（６５０ｍｇ）の前投薬によって低減することができる（実施例９を参照）。
【１１２２】
ヒト抗薬物抗体（ＡＤＡ）試験を、異なる放射性標識された試験Ｍｂ（８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２Ｍ）を投与した被験者において評価した。４７検体の評価可能な血清試料のうち、５検体が免疫反応性であった。免疫反応性の一過性または永続性は確立されなかった。これらの陽性試料における力価は低く、総タンパク質用量とは相関しておらず、製品に対する抗体を生成しなかった患者からこれらの患者を差別化したいずれの安全性の知見とも関連がみられなかった。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃが免疫原性をもたらすかどうかは解明されていない。
【１１２３】
実施例９
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの用量を、注射器ポンプを使用して５〜１０分間の時間をかけて注入した。注入後、ＩＶ用チューブを１０〜２０ｃｃの注入用標準生理食塩水でゆっくりと洗浄した。輸液反応またはアレルギー反応の可能性のため、各コホートに組み入れられた最初の患者を、注入後、２時間にわたって、生じ得る有害作用（ＡＥ）について、被験者管理の変更につながる注入前から注入後にかけてのバイタルサインの臨床的に有意な変化について監視する。この監視では注入前、及び５分毎に６０分間、その後、１５分毎にもう１時間、バイタルサインを監視する。あるコホートの最初の被験者がなんらのＡＥも有さない場合、次の被験者のバイタルサインを１時間監視する。この監視では注入前、及び５分毎に１５分間、その後、１５分毎に１時間、バイタルサインを監視する。コホート内でＡＥが検出される場合、２時間の監視時間に戻す。より長い監視時間を、主治医の判断により実施することができる。
【１１２４】
重い輸液反応の場合、直ちに注入を中止する。重い輸液反応の徴候及び症状としては、蕁麻疹、低血圧、血管性浮腫、低酸素症、気管支痙攣、肺浸潤、急性呼吸促迫症候群、心筋梗塞、心室細動、及び／または心原性ショックが挙げられる。重症度の低い、または軽度の輸液反応（心肺障害を伴わない徴候または症状）の場合、症状が改善するまで注入速度を一時的に低下させるかまたは注入を止め、その後、より遅い速度で注入を継続する。
【１１２５】
実施例１０
放射性標識
一般的な放射性標識手順を用いて８９Ｚｒによる試験的標識を行った。製剤としての８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを、薬物ＩＡＢ２２Ｍ２ＣにデスフェリオキサミンイソチオシアネートＢ−７０５（Ｄｆ）を結合させた後、ジルコニウム−８９（８９Ｚｒ）で放射性標識することによって製造する。簡単に述べると、８９Ｚｒシュウ酸塩のｐＨ中和溶液をＤｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃと３〜３０ｍＣｉ／ｍｇの範囲の比放射能となるように混合する。この溶液を、室温で３０分〜１時間の範囲の時間でインキュベートする。終了時に５ｍＭのＤＰＴＡ溶液（ｐＨ７〜８）により反応を停止し、放射性標識された生成物を、適切な製剤化バッファーで平衡化したＧ−２５Ｓｅｐｈａｄｅｘカラムを使用して脱塩することによって回収する。精製に先立って、反応標識効率をｉＴＬＣにより評価する。最終の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ製剤を、放射性標識と結合させていない非放射性ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ及び製剤化バッファーを用いて、注入時に投与される用量が３．０ｍＣｉとなるように調製する。
【１１２６】
【表８】
2022501402.tif 000020
【１１２７】
実施例１１
異なる患者に実施例７〜９に概要を示すように、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを投与した。各患者のイメージングの結果を図５０〜図５４に示す。
【１１２８】
被験者における記載のミニボディの使用の結果によって、コンストラクトが多くの更なるより優れた性質を有することが確認された。薬剤に関連した有害事象または副作用は報告されなかった。更に、これらの結果により、このコンストラクトを使用してＣＤ８  Ｔ細胞を観察することができることも確認された。更に、組成物及び方法によって得られたシグナルにより、ＰＥＴによるがん患者のＣＤ８免疫系の際立った可視化がなされた。更に、これらの結果により、腫瘍局在化の同日イメージングが可能であることが示された。
【１１２９】
結果は、低いバックグラウンド活性も示した。これは、既知の腫瘍の領域における正確な解釈を与えるはずである（共局在化）。例えば、患者１（黒色腫）は、腫瘍と共局在化した巣状の筋肉内取り込みを示した。患者２（肝臓）は、既知の腫瘍領域及び放射線掩蔽性の病変と共局在化した多巣状の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みを示した。患者３（肺）は、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの共局在化を示さず、これは、腫瘍自体の内部に充分なＣＤ８  Ｔ細胞密度がないことと関連していると考えられる（ＩＯＴで治療した被験者の３０％が応答しないため）。これらの結果は、前臨床研究に基づいた初期の目的と一致している。これらの結果は、がんに対する免疫療法の選択を含む本明細書で提供される方法においてインビボのＣＤ８の分布を特定及び監視するうえでの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの有効性を示すものである。
【１１３０】
実施例１１の結果は、本方法が複数の日数にわたって安定したイメージングを可能とし得ることも示している。したがって、いくつかの実施形態では、イメージングは２日、３日、４日、またはそれ以上の日数にわたって行われる。
【１１３１】
実施例１２
２ステージの第１相試験において、選択された固形悪性腫瘍を有する１５人の成人患者で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの安全性、忍容性、薬物動態（ＰＫ）特性、及び放射線量測定について調べた。試験は用量漸増ステージを含み、被験者の１人ずつでミニボディタンパク質用量レベル（医薬品有効成分：ＡＰＩ）を０．２ｍｇ、０．５ｍｇ、１．０ｍｇ、１．５ｍｇ、５．０ｍｇ、及び１０．０ｍｇに増加させた後、用量コホート拡大ステージを行い、薬物動態及び線量測定を９人の被験者において０．５ｍｇ及び１．５ｍｇのＡＰＩで更に調べた。すべての患者に３ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを投与した。
【１１３２】
すべての用量レベルは安全に使用できることが分かった。１５人の被験者のいずれにおいても薬物関連有害事象は報告されなかった。いずれの被験者から採取された血液試料も、サイトカインレベルまたは抗薬物抗体測定によって測定した場合に免疫応答のエビデンスを示さなかった。
【１１３３】
生体内分布及びトレーサー排出の用量比例的傾向が観察され、５ｍｇ及び１０ｍｇのＡＰＩ用量で血液プールクリアランスは最も遅かったのに対して、１．５ｍｇ以下のＡＰＩ用量では数時間以内の血液プールからの速やかなクリアランスが認められた。脾臓、骨髄、及びリンパ節などのＣＤ８細胞が存在する組織は、すべての用量範囲で可視化され、取り込みのＡＰＩ用量依存的傾向を示した。肝臓及び腎臓も、顕著な、ただしＡＰＩ用量依存的取り込みを示し、トレーサーは主として肝臓より排出された。腫瘍病変及び転移性（標的）リンパ節では変化するトレーサー取り込みがみられたのに対して、筋肉、肺、及び脳などのＣＤ８の少ない組織ではすべてのＡＰＩ用量にまたがった一貫して低いバックグラウンドの取り込みがみられた。すべての組織活性は、０．５ｍｇ及び１．５ｍｇのＡＰＩ用量の拡大コホート間で比較的似通っていた。
【１１３４】
１５人すべての被験者で線量測定を行ったところ、有効放射線量（ＩＣＲＰ１０３）は１．７〜２．７レム／ｍＣｉの範囲であり、平均は２．４レム／ｍＣｉであった。投与されたＡＰＩ用量と有効放射線量との間に相関は認められなかった。
【１１３５】
実施例１３
本実施例は更に、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの２つの用量の安全度を確立し、有効性の確認を与え、臨床的有用性の更なるエビデンスを与えるものである。
【１１３６】
これは、転移性固形腫瘍を有する患者で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（ＣＤ８トレーサー）を用いた陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ／ＣＴ）の非盲検、複数用量試験である。この試験では、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの反復投与の安全性を評価し、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ病変陽性とＣＤ８＋Ｔ細胞浸潤リンパ球（ＴＩＬ）との関係性を確立し、腫瘍病変、及びＴ細胞リッチ組織を含む参照組織におけるベースライン及び治療後の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みを評価し、腫瘍病変における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みの潜在的変化をベースラインと治療後とＴ細胞リッチ組織を含む参照組織との間で測定し、腫瘍病変内のＣＤ８＋ＴＩＬの潜在的変化を生検試料におけるベースラインと治療後との間で測定し、ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘで８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの生体内分布を評価する。
【１１３７】
試験によって確認される目的としては、
・８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの反復投与の安全性の評価（ＣＤ８  ＰＥＴトレーサー）
・８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴの病変陽性度とＣＤ８＋Ｔ細胞浸潤リンパ球（ＴＩＬ）との関係性の確立
・腫瘍病変、及びＴ細胞リッチ組織を含む参照組織におけるベースライン及び治療後の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの評価
・腫瘍病変における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みのベースラインと治療後とＴ細胞リッチ組織を含む参照組織との間での潜在的変化の測定
・生検試料におけるベースラインと治療後との間での腫瘍病変内のＣＤ８＋ＴＩＬの潜在的変化の測定
・ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘでの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの生体内分布の評価
・真のスタンダードと最もよく相関する視覚的及び半定量的８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ測定の探索
・ＩＨＣによって確認されるＣＤ８＋Ｔ細胞を検出することに対する８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴの正の予測値、負の予測値、感度、及び特異性の推定
・ベースラインと治療の５〜７日後の病変と参照組織との間の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ分布の潜在的変化の評価及び測定
・全血試料中で測定される治療前及び治療後の対象の遺伝子発現の評価
・臨床転帰を含む視覚的及び半定量的８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ測定の探索
・被験者ベースのＲＥＣＩＳＴ１．１の放射線学応答及び各病変ベースのウォーターフォールプロット分析による視覚的及び半定量的８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ測定の評価
・ＩＨＣによる８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みと免疫浸潤物及び他の分子バイオマーカー（ＣＤ４、ＣＤ８、ＰＤ−１及びＰＤ−Ｌ１）の発現との相関の評価。
【１１３８】
実施例１３の試験設計
選択／除外基準を満たす適格被験者に、がん治療の開始前の１週間以内、及びがん治療の開始の４及び５週間後にＩＶ注入液として８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを投与する。被験者に胸部、腹部及び骨盤（ＳＣＣＨＮの場合、頸部も含む）の慣例のＣＴまたはＭＲＩを行うか、及び／または全身の１８ＦＤＧ−ＰＥＴスキャンを８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの最初の注入前の４５日以内にすべて行う。新鮮な腫瘍生検（１〜３検体のコア生検）をベースライン（１回目の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入の２８〜７日前、または８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ ＰＥＴ／ＣＴスキャン後及び癌治療の開始前）、及び８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの２回目の注入及びそれに伴うＰＥＴ／ＣＴスキャンの０〜２週間後に行う。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの１回目の注入前の３か月以内に得られたアーカイブの腫瘍生検組織をベースラインの新鮮な生検の代わりに提出してもよい。ＰＥＴ／ＣＴスキャン（ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘ）を、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃのそれぞれの注入の２４±３時間後に得る。場合により、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴをがん治療の開始後の５〜７以内に得る。抗薬物抗体（ＡＤＡ）血液試料を以下の時点、すなわち、ベースライン、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの２回目の注入を投与する前、及び試験終了時の安全性フォローアップの来院時で採取する。
【１１３９】
詳細な試験スケジュール及び各来院時の評価を下記表に示す。一般的な適用スケジュールを図５５に示す。
【表Ａ】
2022501402.tif 000021
【１１４０】
米国、カナダ、及びヨーロッパ内の２０箇所に及ぶ施設からおよそ４０人の被験者がこの試験に組み入れられた。被験者は、以下の基準を満たす場合に組み入れに適格とする。
１．転移性固形腫瘍を有する患者
２．１回目の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入前の４５日以内のＣＴ／ＭＲＩ（ＲＥＣＩＳＴ基準１．１）において文書で記録された少なくとも１つの測定可能な病変
３．治験責任医師の評価にしたがってアクセス可能であり、生検に適格である。ＲＥＣＩＳＴで測定可能な単一の病変のみが存在する場合、治験責任医師によって腫瘍生検が応答のＲＥＣＩＳＴ評価を妨げ得るかどうかが判定される。
４．米国東海岸がん臨床試験グループ （ＥＣＯＧ）パーフォーマンスステータスが２以下である。
５．がん治療を受ける患者についての治療実施医療機関のケアの基準より、または治験責任医師の判断によってすべての臨床的安全性検査値を満たす。
６．年齢が１８才以上である。
【１１４１】
被験者は、以下の基準のいずれも満たさない場合に試験の組み入れに適格とする。
１．治験責任医師及び／またはＩｍａｇｉｎＡｂ社の意見によればプロトコールの目的を達成できない重症の非悪性疾患または状態。
２．ＲＥＣＩＳＴで測定可能な単一の病変であって、その生検が治験責任医師の評価によれば応答のＲＥＣＩＳＴ評価を妨げる可能性が高い病変を有する患者。
３．治験責任医師及び／またはＩｍａｇｉｎＡｂ社の意見によればプロトコールの目的を達成できない脾臓疾患を有するか、脾臓摘出を受けた患者。
４．妊婦または授乳中の母親。
【１１４２】
投薬情報
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、デスフェリオキサミン（Ｄｆ）と結合され、ヒト体内のＣＤ８＋Ｔ細胞をイメージングするために８９Ｚｒで放射性標識された、ＣＤ８糖タンパク質に高い親和性を有する（結合ＥＣ５０＝０．４ｎＭ）分子量約８０ｋＤａのミニボディ（Ｍｂ）である。ＡＰＩが０．５ｍｇ〜１．５ｍｇの３．０（±２０％）ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを、がん治療の開始前の１週間以内、及びＩＯＴの開始の４〜５週間後に５〜１０分間をかけて静脈内投与する。患者に、少なくとも２回のＰＥＴ／ＣＴスキャンを行う（頭蓋頂部から足までのイメージング）。
【１１４３】
調剤された用量を、輸液ポンプによりＩＶ注入液として５分間以上の時間をかけて注入した後、生理食塩水でフラッシュする。全注入時間は、５〜１０分間とするべきである。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入前及び注入の１５（±５分）分後にバイタルサインを評価する。
【１１４４】
腫瘍の生検
１回目の注入前、−２８〜−７日以内、または１回目の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャン後及びがん治療の開始前、及び８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの２回目の注入が行われた０〜２週間後に、ＲＥＣＩＳＴ測定可能な病変（皮膚病変を除く）からの新鮮な腫瘍生検を、中央検査機関の生検マニュアルに含まれる指示に従って行う。
【１１４５】
ＰＥＴ／ＣＴスキャナーの検証
すべての参加研究実施施設にわたって最も正確かつ一貫したイメージングデータを生成することでこの研究におけるデータ収集及び分析を支援するため、核医学医療機関（ＮＭＳＣＲ）（Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（臨床試験核医学協会））が、この試験で用いられる各参加実施施設のＰＥＴ／ＣＴスキャナーの検証を行う。
【１１４６】
ＮＭＳＣＲは、ファントム（寸法：幅１６インチ×長さ１４インチ×高さ７インチ）及びある用量の８９Ｚｒを、ファントムイメージングを実施するための詳細な指示とともにこの試験で使用されるＰＥＴスキャナー（複数可）に対する検証を行う各実施施設に提供する。検証が完了した後、実施施設はＮＭＳＣＲに分析用のデータを提出する。
【１１４７】
ＰＥＴ／ＣＴスキャナーの検証が完了した時点で、ＮＭＳＣＲは検証証明書及び検証済みのスキャナーに固有の設定パラメータを与えた後、各実施施設はこの試験の最初の組み入れ被験者のイメージングを開始することができる。各実施施設は、検証済みのＰＥＴ／ＣＴスキャナーを、ファントムで検証した手順から生成された設定パラメータとともに使用してプロトコールのとおりにこの試験に組み入れられた被験者をスキャンすることが求められる。
【１１４８】
ＰＥＴ／ＣＴイメージング
既知の疾患を有するかまたは疾患が疑われる更なる領域を含む、頭蓋頂部から大腿中央までの全身スキャン（ＷＢＳ）を、８９Ｚｒイメージングに特定した取得設定値を用いて得る。
【１１４９】
実施例１３の結果は、以下のうちの１つ以上を与える。
【１１５０】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの反復投与の安全性及び忍容性を、局所及び全身の徴候ならびに輸液反応の症状、ＣＴＣＡＥ基準による有害事象の発生、検査機関での検査結果の変化、バイタルサイン、及び１２誘導心電図（ＥＣＧ）の所見により評価する。
【１１５１】
ＳＵＶベースの定量的測定（例えば、ＳＵＶ最大、ＳＵＶピーク、ＳＵＶ平均、ＣＤ８取り込みが増加した腫瘍組織の体積として定義されるＣＤ８腫瘍体積、及び腫瘍：参照比）によって測定される生検した腫瘍の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みを分析し、ＣＤ８＋ＴＩＬ密度を生検試料のＩＨＣによって求める。
【１１５２】
腫瘍中のベースライン及び治療後の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みならびに分布の評価、ならびに以下によって決定される、観察ペア間のあらゆる変化の測定：
ｏＳＵＶベースの定量的測定（例えば、ＳＵＶ最大、ＳＵＶピーク、ＳＵＶ平均、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ体積、ＳＵＶ平均×腫瘍体積として定義される総ＣＤ８指数）
ｏ主要なイメージング取り込みパターン（不均質性）分析（目視及びソフトウェアベース）。
【１１５３】
関与リンパ節及び全身のリンパ節を含むリンパ系器官中のベースライン及び治療後の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みならびに分布の評価、ならびに以下によって決定される、ペア観察間のあらゆる変化の測定：
ｏ目視及びＳＵＶベースの定量的測定（例えば、ＳＵＶ最大、ＳＵＶピーク、ＳＵＶ平均、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃリンパ節取り込み体積、ＳＵＶ平均×リンパ節体積として定義される総ＣＤ８指数）。
ｏ高まっている８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性により特定されるリンパ節鎖の位置及び数として定義されるリンパ節鎖の視認性。
ｏ脾臓及びリンパ節を含むリンパ組織、骨髄及び他の参照臓器などの他のＴ細胞リッチ組織内の取り込みの変化のパターン（複数可）。
【１１５４】
ベースラインから治療後のＰＥＴスキャンまでのＳＵＶベースの定量的分析（例えば、ＳＵＶ最大、ＳＵＶピーク、ＳＵＶ平均、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ体積、組織モデリング／コンパートメント分析、及び腫瘍：参照比）によって測定される生検した腫瘍の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの変化の測定値、及び、がん治療の開始前及び開始の４〜７週間後に得られた生検試料からのＩＨＣにより測定されたＣＤ８＋ＴＩＬ密度の変化によって測定される真のスタンダードとの相関。
【１１５５】
ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＩＯＴでの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの生体内分布パターン、及びベースラインと治療後の間の生体内分布のあらゆる変化の記述。
【１１５６】
全血ナノストリング分析によって測定される治療前及び治療後の被験者の遺伝子発現プロファイルの評価。
【１１５７】
以下に基づいた、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みと放射線応答との相関：
ｏ視覚的及び半定量的なＳＵＶベースの分析と比較したＲＥＣＩＳＴ１．１によって比較した被験者応答率の相関
ｏウォーターフォールプロット分析をベースライン及びがん療法後の半定量的なＳＵＶ分析とともに用いたがん療法後の病変直径の変化により測定される標的病変応答率の相関
【１１５８】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みと臨床転帰（決定された応答率、応答の持続時間、１２週における疾患安定性率、規定の間隔でのＰＦＳ）。
【１１５９】
ＩＨＣによる、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの腫瘍及びリンパ節取り込みと免疫浸潤物及び他の分子マーカー（ＣＤ８）の発現との相関
【１１６０】
ベースラインからがん療法の開始の５〜７日後までの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込み及び分布の変化の評価。
【１１６１】
実施例１３に関する更なる詳細を以下の段落に示す。
用量は、中央製造施設により、核医学部門の研究施設の放射性医薬品薬局に配送された。受領時に、資格を有する担当者が、治験薬が調剤マニュアル、すべての規制当局に従い、治験責任医師の処方指示に従って良好な状態であり、在庫管理がなされ、適切に保管され、ラベル表示及び調剤されていることを確認する。
【１１６２】
調剤に先立ち、資格を有する担当者が８９Ｚｒの線量を線量校正器で測定する。次いで、注射器を、遮蔽されたキャリア内に放射性注入及び投与用の専用のＩＶ注入ポンプとともに入れる。用量投与後、資格を有する担当者は、実施施設の核医学薬剤師による残留放射能測定を行うために注射器を返還する。測定された放射能の値及び測定時間、ならびに総注射体積を文書に記録する。
【１１６３】
取得及び再構成パラメータは、スキャナーのファントム検証に基づいて各実施施設に提供される推奨にしたがって得る必要があり、可能な場合は常にリストモードで得ることで仮想放射能線量の再構成を後日行えるようにする必要がある。既知の疾患を有するかまたは疾患が疑われる更なる領域を含む、頭蓋頂部から大腿中央までの全身スキャン（ＷＢＳ）を、８９Ｚｒイメージングについて最適化された収集設定値を用いてすべてのスキャン来院で得る必要がある。
【１１６４】
実施例１４
本実施例は、実施例７〜９及び実施例１１を含む、本明細書で提供されるいくつかの実施形態の投薬及び投与の詳細に関する更なるガイダンスを与えるものである。
【１１６５】
投薬投与
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、デスフェリオキサミン（Ｄｆ）と結合され、ヒト体内のＣＤ８＋Ｔ細胞をイメージングするために８９Ｚｒで放射性標識された、ＣＤ８糖タンパク質に高い親和性を有する（結合ＥＣ５０＝０．４ｎＭ）分子量約８０ｋＤａのミニボディ（Ｍｂ）である。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃをデスフェリオキサミン（Ｄｆ）と結合した後、８９Ｚｒで放射性標識してＰＥＴ造影剤を生成することにより製造される。
【１１６６】
３．０（±２０％）ｍＣｉの単一用量の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを、来院２においてイメージングを行うために注入した（１日目）。患者に、５回のＰＥＴ／ＣＴスキャンを行った（頭蓋頂部から足までのイメージング）。患者に固有の校正ファントムを各ＰＥＴ／ＣＴスキャンで下腿に沿って配置した。
・ 絶食：８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ注入またはＰＥＴ／ＣＴイメージングに先立って絶食は必要としなかった。
・ ８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ用のＩＶカテーテル挿入
・ＰＥＴスキャン：可能な場合、２本の静脈内（ＩＶ）カテーテル（ヘパロック、２０〜２４ゲージ）を放射性医薬投与用と血液試料採取用に配置するか、または注入または試料採取用に中心ラインを使用した。ＩＶカテーテルはその日のイメージングセッションの終了時に抜去した。２本のラインが可能でない場合、注入とＰＫ試料採取の両方に１本のラインを使用し、注入とＰＫ試料採取の間に１０ｃｃの生理食塩水でフラッシュを行った。
【１１６７】
ＰＥＴ／ＣＴスキャン用の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ製剤
約２０〜２５ｍｇのＩＡＢ２２Ｍ２Ｃをデスフェリオキサミンと結合し、結合体の一部（約１ｍｇ）を直ちに８９Ｚｒで放射性標識して６ｍＣｉ／ｍｇの比放射能を得るプロセスを用いて、中央製造施設で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ製剤を調製した。３ｍＣｉの患者用単位用量を調製し、資格を有する核医学薬剤師の監視の下、調製及び調剤した。ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの無菌添加後に用量を調剤し、用量漸増用に０．２ｍｇ、０．５ｍｇ、１．０ｍｇ、１．５ｍｇ、５．０ｍｇ及び１０．０ｍｇの全体の総タンパク質用量とした。
【１１６８】
各単一用量を、その被験者用に用量を調製した特定の被験者に単回ＩＶ投与するために中央製造施設で放射性標識した。すべての製剤について、ｃＧＭＰのすべての要件に従った薬剤番号付けのシステムを用いた。これにより、各被験者について、任意の用量の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを識別し、生産工程にまで追跡できるようにした。調製された８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃトレーサーは、中央製造施設の安全な場所において周囲温度で遮蔽して保管し、２〜８℃で発送した後、注入用に調剤するために放射性医薬品薬局に配送した。
【１１６９】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの放射性医薬品薬局での調剤
用量は、中央製造施設により、核医学部門の研究施設の放射性医薬品薬局に配送された。受領時に、核医学薬剤師が、治験薬がすべての規制当局に従い、治験責任医師の処方指示に従って良好な状態であり、在庫管理がなされ、適切に保管され、ラベル表示及び調剤されていることを確認した。少量の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（１０ｃｃの生理食塩水中、５０±５マイクロキュリー）が入った更なる注射器バイアルが、患者固有の校正ファントムとして用いるため、中央製造施設によって放射性医薬品薬局に提供された。
【１１７０】
調剤に先立ち、８９Ｚｒの線量が中央製造施設の核医学薬剤師によって線量校正器で測定された。次いで、注射器を、遮蔽されたキャリア内に放射性注入及び投与用の専用のＩＶ注入ポンプとともに入れた。用量投与後、治療担当医師は、中央製造施設の核医学薬剤師による残留放射能測定を行うために注射器を返還した。
【１１７１】
少量の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（１０ｃｃの生理食塩水中、５０±５マイクロキュリー）が入った更なる注射器バイアルを、各イメージングセッションで実施施設の放射性医薬品薬局から取得された患者固有の校正ファントムとして用いた。このバイアルを、各イメージング時間ウインドウで患者画像の取得の間にスキャナー内に配置した。バイアルは、使用しないときは、イメージングの来院間で治験実施医療機関のポリシー及び手順に従って適切な遮蔽容器内で保管した。
【１１７２】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入及び介入
調剤された用量を、核医学医師の直接監視の下、輸液ポンプによりＩＶ注入液として５分間以上の時間をかけて注入した後、生理食塩水でフラッシュした。各コホートに組み入れられた最初の患者を、注入後、２時間にわたって、生じ得るＡＥについて、被験者管理の変更につながる注入前から注入後にかけてのバイタルサインの臨床的に有意な変化について監視した。この監視は、以下を含んだ。
・注入前、及び１０分毎に６０分間のバイタルサイン、
・１５分毎（±５分）に更に１時間のバイタルサイン。
【１１７３】
あるコホートの最初の被験者がなんらの輸液関連ＡＥも有さない場合、以下のように次の被験者のバイタルサインを１時間監視した。
・注入前、及び１０分毎に６０分間のバイタルサイン。
【１１７４】
コホート内でＡＥが検出された場合、２時間の監視時間に戻した。より長い監視時間を、主治医の判断により実施した。重篤な輸液反応の徴候及び症状としては、蕁麻疹、低血圧、血管性浮腫、低酸素症、気管支痙攣、肺浸潤、急性呼吸促迫症候群、心筋梗塞、心室細動、及び／または心原性ショックが挙げられる。重症度の低い、または軽度の輸液反応（心肺障害を伴わない徴候または症状）の場合、症状が改善するまで注入速度の一時的な低下または注入の停止を行い、その後、より遅い速度で注入を継続した。
【１１７５】
実施例１５
本実施例では、イメージングのスケジュール及びイメージングのパラメータについての詳細を示す。このアプローチは実施例７〜９及び実施例１１で用いたものである。
【１１７６】
イメージングのスケジュール
２０１５−２２Ｍ２Ｃ−０１プロトコールのイメージングは、下記表に概要を示すプロトコールのイメージングスケジュールに従い、下記に示す画像収集のパラメータを用いて取得する必要がある。
【１１７７】
【表Ｂ】
2022501402.tif 000022
【１１７８】
ＩｍａｇｉｎＡｂ ２０１５−２２Ｍ２Ｃ−０１の画像取得のパラメータは以下のリストに示されている。
【１１７９】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ（全身）
放射性医薬品
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ
８９Ｚｒは、１８Ｆとは大きく異なる、３９８ＫｅＶの陽電子Ｅ平均及び／または８９７ＫｅＶのＥｍａｘを有する。一部のスキャナーは、画像取得用の８９Ｚｒ同位体を選択するためのオプションを有するものがある。他のスキャナーは、８９Ｚｒの設定値をマニュアルで入力する必要があるものもある。適切な８９Ｚｒイメージングの入力パラメータには、Ｔ１／２＝３．３日（７８．４１時間または４７０５分または２８２，２７６秒）及び０．２２７（２２．７％）の陽電子存在比が含まれる。
【１１８０】
用量
３（±２０％）ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ（０．２〜１．５ｍｇのタンパク質）
用量は各時点にわたって一定である必要がある。フォローアップスキャンでは、放射性トレーサーの線量は、患者の体重に大きな変化がない限り、正味のベースライン線量から±１０％でなければならない。
【１１８１】
モード
２Ｄ， ３Ｄ リスト−モード、またはＴＯＦ
可能な場合には、収集はリストモードで行われる。
【１１８２】
患者体位
腕を横に置いた仰臥位
ＣＴ及びＰＥＴ収集間で体位を一定に保つ必要がある。
【１１８３】
スキャン位置／カバレッジ
黒色腫の被験者：上肢を含む頭蓋頂部から足
黒色腫以外の被験者：頭蓋頂部から膝、または試験全体を通じて被験者の一貫したスキャンカバレッジを確実とする対象領域。
【１１８４】
透過スキャンのガイドライン
・１４０ ｋＶｐ
・ｍＡ
ｏ １〜２時間の注入後スキャン：低線量ＣＴ（８０ｍＡ）
ｏ ６〜８時間（任意選択）、２４時間、４８時間、９２〜１４４時間の注入後
スキャン：低線量ＣＴ（１０ｍＡ）
・ＣＴ１回転当たり０．８秒
・スライス厚さ＝３〜５ｍｍ
・テーブル速度＝１５ｍｍ／回転
・ピッチ：１．５：１
【１１８５】
放射スキャン
各ベッド位置につき２〜７分
対象の身長に応じて単一のベッド位置が適切な解剖学的カバレッジを与え得る。
【１１８６】
イメージ再構成
再構成アルゴリズムは各時点にわたって一貫している必要がある。定量的反復再構成が好ましい。正規化、デッドタイム、ランダム事象、散乱、減衰、及び感度についての補正
【１１８７】
マトリクス
１２８×１２８ またはそれよりも良好
【１１８８】
ビュー
減衰補正なし
減衰補正有り
【１１８９】
患者への事前指示
イメージングに先立って被験者に膀胱を空にしてもらう。
【１１９０】
更なる指示
ＤＩＣＯＭ要件を観察し、これに従うことができる。
【１１９１】
各施設は、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの小型のサンプルバイアル（容器）を調製する必要があり、これを患者の足首、または計画されたスキャニング視野（大腿または膝）の下部にスキャニングの間に置くことで生物線量測定分析の参照点として機能し得る。サンプルバイアルの目的は、生物線量測定の推定に必要なスキャナーの計数の較正用の既知量の８９Ｚｒ活性の外部のソースを与えることである。このサンプルバイアルの調製及び保管の１つの実施は以下のように行う。
１）ツベルクリン注射器を使用して、注入後、提供されたたバイアルから０．１５ｃｃの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを取り出す。
２）線量校正器に入れ、測定値及び測定時間を記録する。これらの値をデータ送信フォームのコメント欄でＩＥに報告する（補遺ＶＩを参照）。
３）１０ｃｃの注射器中で、５ｃｃの通常の生理食塩水で希釈する。
４）注射器を二重の袋に入れ、漏れないように密封する。
５）各スキャンでサンプルバイアルを患者の足首付近または計画されたスキャニング視野（大腿の中央または大腿より下のイメージングを行わない場合には膝）の下部に置く。
６）各スキャニングの間に適切な遮蔽を施して冷蔵庫の中で保管し、患者の最終スキャン後に廃棄する。
【１１９２】
実施例１６−診断及び／または治療用組成物
本実施例では、以下の例のいずれかで使用することができる様々な組成物の概要を示す。
【１１９３】
診断用組成物は、ミニボディをデスフェリオキサミンと結合させてＤｆ−ミニボディを形成することを含む方法によって製造される。Ｄｆ−ミニボディを、８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識されたミニボディを形成する。放射性標識されたミニボディを精製する。放射性標識されたミニボディを、非放射性ミニボディと混合して診断用組成物を形成する。ミニボディ及び非放射性ミニボディはＣＤ８上の同じエピトープに結合する。
【１１９４】
診断用組成物は、３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−標識ミニボディ、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、１４１〜１９４のアルギニン、及び２〜２０ｍＭのグルタミン酸を含む。
【１１９５】
診断用組成物は、構造：
【化９】
2022501402.tif 000023
【１１９６】
または
【化１０】
2022501402.tif 000024
を有する標識ミニボディまたは抗原結合コンストラクトを含む。ミニボディは、配列番号１、３、１６の、または１４７の中の重鎖可変領域と、配列番号７、９、１６の、または１４７の中の軽鎖可変領域とを含む。組成物は少なくとも３ｍＣｉの放射線を与える。
【１１９７】
組成物は、活性マーカーを含む、ＣＤ８に結合する第１のミニボディと、ＣＤ８に結合する第２のミニボディとを含む。第２のミニボディは、不活性マーカーを有するかまたは活性マーカーを欠く。
【１１９８】
診断用組成物は、放射性標識に結合された第１のＣＤ８ミニボディと、放射性標識に結合されていない第２のＣＤ８ミニボディとを含む。第１と第２のＣＤ８ミニボディは同じ配列を有する。組成物は約３ｍＣｉの放射線を与える。組成物は、総質量１．５〜１０ｍｇのタンパク質を与える。
【１１９９】
組成物は、８９Ｚｒ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクト、２０ｍＭのヒスチジン、５％スクロース、５１〜６２ｍＭの塩化ナトリウム、アルギニン、及び２〜２０Ｍのグルタミン酸を含む。組成物は、診断薬としてヒト対象に投与されるように構成される。
【１２００】
組成物は、活性マーカーを有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む第１の部分と、不活性マーカーを有するかまたは活性マーカーを欠くＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む第２の部分とを含む。
【１２０１】
診断用組成物は、放射性標識に結合された第１のＣＤ８抗原結合コンストラクトと、放射性標識に結合されていない第２のＣＤ８抗原結合コンストラクトとを含む。第１と第２のＣＤ８抗原結合コンストラクトは同じアミノ酸配列を有し、１：１のモル比、または代替として１：５０のモル比で存在する。組成物は、約０．５ｍＣｉ〜約３．６ｍＣｉの放射線を与える。組成物は、総質量０．１ｍｇまたは代替として１０ｍｇのタンパク質を与える。
【１２０２】
実施例１７−インビボのＣＤ８監視
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２０３】
ＣＤ８ミニボディを対象に与えることによる方法によってＣＤ８がインビボで監視され、ここで、ＣＤ８ミニボディは図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、ミニボディは検出可能なマーカーで標識されている。対象へのＣＤ８ミニボディの投与の６時間以内に、または代替として３６時間以内に、対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２０４】
実施例１８−インビボのＣＤ８監視
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２０５】
ＣＤ８ミニボディを対象に与えることによる方法によってＣＤ８がインビボで監視され、ここで、ＣＤ８ミニボディは図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合し、ミニボディは検出可能なマーカーで標識されている。対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視する。監視することは、１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した対象内の組織を検出することができる。監視することはＰＥＴにより達成される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２０６】
実施例１９−ＣＤ８陽性細胞の可視化
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２０７】
ＣＤ８陽性細胞が、対象にＣＤ８ミニボディを与えることによる方法によって可視化され、ＣＤ８ミニボディは検出可能なマーカーで標識されており、ＣＤ８ミニボディの配列はヒト化されていてヒトＣＤ８に結合する。対象へのＣＤ８ミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のＣＤ８ミニボディの分布を監視する。監視することは、１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８陽性細胞が浸潤した対象内の組織を検出することができる。監視することはＰＥＴにより達成される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２０８】
実施例２０−ヒト体内の細胞の可視化
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２０９】
ヒト体内の細胞が、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることによる方法によって可視化され、この手段は検出可能な標識を含む。ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の対象への投与の６〜３６時間以内に対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第１の分布を監視する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２１０】
実施例２１−ミニボディの投与方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２１１】
ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることによる方法によってミニボディが対象に投与される。標識されたミニボディによって３ｍＣｉ±２０％の放射線が対象に与えられる。０．２〜１０ｍｇの量の総タンパク質が対象に与えられる。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２１２】
実施例２２−ミニボディの投与方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２１３】
ヒトＣＤ８に結合する標識されたミニボディを対象に与えることによる方法によってミニボディが対象に投与される。標識されたミニボディによって０．７５〜１．５±２０％ｍＣｉの放射線が対象に与えられる。０．２〜１０ｍｇの量の総タンパク質が対象に与えられる。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２１４】
実施例２３−治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２１５】
がんと診断されたヒト患者にある用量のヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によって患者が治療される。用量は、約３ｍＣｉの放射能を提供する８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクト、及び約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む。用量の投与後の第１の時点において患者体内の８９Ｚｒ標識された抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像が生成され、第１の時点は投与の約６時間〜３６時間後であり、第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の組織及び／または新生物中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布が決定され、１つ以上の組織中のＣＤ８細胞の第１の存在量及び／または分布に基づいてがんの第１の治療が患者に投与される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２１６】
実施例２４−腫瘍の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２１７】
対象にミニボディを投与することによりミニボディを対象内の腫瘍に結合させて標識された腫瘍を形成することによる方法によって腫瘍が治療される。ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、また、ミニボディは検出可能な標識に結合されている。ミニボディが標識された腫瘍を形成するうえでいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合する場合、免疫チェックポイント阻害剤からなる群から選択される治療が投与される。ミニボディが標識された腫瘍を形成するうえですべての腫瘍全体にわたって結合する場合、免疫チェックポイント阻害剤は投与されない。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２１８】
実施例２５−新生物の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２１９】
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合するヒトミニボディを投与することによる方法によって対象が治療される。ヒトミニボディの分布を監視して新生物中の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態が判定され、新生物の少なくとも第１のＴＩＬ状態に基づいて患者が治療される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２２０】
実施例２６−ＣＤ８分布の分析
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２２１】
対象内のＣＤ８の分布が、第１のＰＥＴ画像により、検出可能なマーカーの分布の画像を与えることによる方法によって分析される。検出可能なマーカーはＣＤ８ミニボディに結合されており、ＣＤ８ミニボディはヒトＣＤ８に結合し、また、ＣＤ８ミニボディは対象に免疫応答を引き起さない。対象の第２のＰＥＴ画像によりＦＤＧマーカーの分布の画像が与えられる。第１のＰＥＴ画像の第２のＰＥＴ画像上へのオーバーレイを含む第３のＰＥＴ画像が生成される。第３のＰＥＴ画像に基づいて腫瘍がＴＩＬ特定される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２２２】
実施例２７−新生物の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２２３】
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によって対象が治療される。抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定する。少なくとも１つの新生物のＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与してＴＩＬ状態を陰性から陽性に転換する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２２４】
実施例２８−新生物の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２２５】
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によって対象が治療される。抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定する。新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合には新生物のＴＩＬ状態が陽性となるまで患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２２６】
実施例２９−腫瘍の特徴付け
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２２７】
ヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトをヒト対象に適用することを含む方法によって腫瘍が特徴付けられる。抗原結合コンストラクトは検出可能なマーカーを含む。検出可能なマーカーの分布を監視する。検出可能なマーカーの分布に基づいて画像が生成される。ユーザーが腫瘍を特徴付けることができるような形で画像がユーザーに対して表示される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２２８】
実施例３０−画像の生成方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２２９】
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することを含む方法によって画像が生成される。抗原結合コンストラクトは検出可能なマーカーを含む。腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーが検出され、検出された各検出可能なマーカーに対して正のピクセルが割り当てられる。割り当てられた各正のピクセルの分布に基づいて画像が生成され、画像は非一時的コンピュータ可読媒体に格納される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２３０】
実施例３１−ＰＥＴの方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２３１】
ＣＤ８に結合するトレーサーを対象に投与することを含む方法によって陽電子放出断層撮影（「ＰＥＴ」）が行われる。シンチレーターが提供される。シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出する。光子対の検出を利用して、同時事象のリストによってトレーサー源を局在化し、同時事象は、シンチレーターからの出力を受け取り、それを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される。対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞が検出される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２３２】
実施例３２−標準取り込み値（ＳＵＶ）の決定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２３３】
抗原結合コンストラクトを対象に適用することによる方法によって標準取り込み値（ＳＵＶ）が決定される。抗原結合コンストラクトは、放射性プローブを含む。ｒを決定する。ここで、ｒは、ＰＥＴスキャナーによりＲＯＩ内で測定される、抗原結合コンストラクトからの放射線の放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である。ａ’を決定する。ここで、ａ’は、注入された放射性標識されたトレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である。ｗを決定する。ここで、ｗは、患者の体重である。ＳＵＶを決定する。ここで、ＳＵＶは、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果である。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２３４】
実施例３３−画像の分析方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２３５】
画像が方法により分析される。画像が提供される。画像をマーキングすることにより画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）が定義される。第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度が決定される。第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度が決定される。第１のＲＯＩ内のシグナル強度の平均値が決定される。第１のＲＯＩ内の各シグナル強度が合計されて第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルが得られる。第１のＲＯＩは、対象に投与された抗原結合コンストラクトに関連付けられた検出可能なマーカーの量のデータを表す。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２３６】
実施例３４−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２３７】
方法により、がんを有するヒト対象が治療される。ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍の第１の画像を提供することに応じて、候補治療薬を含む療法が対象に投与される。候補治療薬を含む療法が投与された後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象内の腫瘍のＣＤ８細胞の第２の画像が提供される。第１と第２の画像を比較して、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうか、または腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかが判定される。腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示す場合、対象は療法を継続するように指示される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２３８】
実施例３５−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２３９】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第１の画像を提供することによる方法によってがんを有するヒト対象が治療される。候補治療薬を含む療法が対象に投与される。候補治療薬を含む療法が投与された後、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを用いて対象の腫瘍内のＣＤ８細胞の第２の画像が提供される。第１と第２の画像を比較して、腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示すかどうか、または腫瘍が同じかもしくは減少したＣＤ８浸潤を示すかどうかが判定される。腫瘍が増加したＣＤ８浸潤を示す場合、対象は療法を継続するように指示される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２４０】
実施例３６−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２４１】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することによる方法によってがんを有するヒト対象が治療される。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視する。対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法による治療を中断する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２４２】
実施例３７−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２４３】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与して対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視することによる方法によってがんを有するヒト対象が治療される。対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法による治療を継続する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２４４】
実施例３８−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２４５】
免疫療法を対象に投与することによる方法によってがんを有するヒト対象が治療される。次いで、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与する。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視する。対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法を中断する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２４６】
実施例３９−がんの治療方法
【１２４７】
方法により、がんを有するヒト対象が治療される。以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与する。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視する。対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、免疫療法を投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２４８】
実施例４０−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２４９】
がんを有するヒト対象が治療される。以前に免疫療法による治療を受けていない対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与する。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視する。対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法を投与しないように対象に助言する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２５０】
実施例４１−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２５１】
がんを有するヒト対象が治療される。以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与する。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視する。対象内の少なくとも１つの腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陰性であった場合、代替的な免疫療法を投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２５２】
実施例４２−がんの治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２５３】
がんを有するヒト対象が治療される。以前に免疫療法による治療を受けている対象において、対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与する。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視する。対象内のすべての腫瘍がＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布に従ってＴＩＬ陽性であった場合、免疫療法を投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２５４】
実施例４３−腫瘍の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２５５】
対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することにより、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象内の腫瘍内のＣＤ８細胞に結合させて標識された腫瘍を形成することによる方法によってヒト対象の腫瘍が治療される。ＣＤ８抗原結合コンストラクトはヒトＣＤ８に結合する。ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識に結合されている。腫瘍内または周囲のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を検出する。ＣＤ８抗原結合コンストラクトがいずれかの腫瘍の表面に偏った形で結合している場合、免疫療法からなる群から選択される治療を投与する。ＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形ですべての腫瘍全体にわたって結合している場合、免疫チェックポイント阻害剤を投与しない。ＣＤ８抗原結合コンストラクトが偏らない形で結合しているが腫瘍の内部には存在していない場合、免疫療法を投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２５６】
実施例４４−治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２５７】
ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によってヒト対象の腫瘍が治療される。ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布を監視して、腫瘍内の第１の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定する。新生物の少なくとも第１のＴＩＬ状態に基づいて患者を治療する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２５８】
実施例４５−新生物の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２５９】
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によってヒト対象が治療される。抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定する。少なくとも１つの新生物のＴＩＬ状態が陰性である場合に患者に免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与してＴＩＬ状態を陰性から陽性に転換する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２６０】
実施例４６−新生物の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２６１】
新生物を有する患者にヒトＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によってヒト対象が治療される。抗原結合コンストラクトの分布を監視して新生物内の腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）状態を判定する。新生物のＴＩＬ状態が陽性でない場合には新生物のＴＩＬ状態が陽性となるまで患者に代替的な免疫療法（「ＩＯＴ」）を投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２６２】
実施例４７−対象の腫瘍の治療
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２６３】
方法によってヒト対象内の腫瘍が治療される。ヒト対象が第１の治療を受けている場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定し、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合に治療を継続し、腫瘍がコールドな腫瘍である場合には療法を第２の治療に変更する。ヒト対象が第１の治療を受けていない場合、ＣＤ８結合分子により、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有するかどうかを判定し、対象内の腫瘍がＣＤ８細胞を有している場合、対象にＩＯＴを投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２６４】
実施例４８−患者の治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２６５】
ヒト患者にＣＤ８結合コンストラクトを投与することによる方法によって患者の治療が選択される。患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する。腫瘍がコールドな腫瘍である場合に腫瘍のＴＩＬ状態を変化させるＩＯＴを投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２６６】
実施例４９−治療方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２６７】
第１の治療を行っているヒト対象を特定することによる方法によって対象の治療が変更される。ＣＤ８結合コンストラクトをヒト対象に投与する。対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有するかどうかを判定する。対象が第１の治療下でＴＩＬ陽性である腫瘍を有する場合、療法を継続する。対象が第１の治療下でＴＩＬ陰性である腫瘍を有する場合、第１の療法を中止する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２６８】
実施例５０−腫瘍を有するヒトを治療する方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２６９】
対象にある用量のＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によって腫瘍を有するヒト対象が治療される。用量は、約０．５ｍＣｉ、または代替例では約３．６ｍＣｉの放射能を提供する８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを含む。用量は、約１０ｍｇ以下の抗原結合コンストラクトを含む。用量の投与後の第１の時点で患者体内の８９Ｚｒ標識抗原結合コンストラクトを検出して第１の時点に対応した第１の患者画像を生成する。第１の時点は投与の約６時間後、または代替例では３６時間後である。第１の患者画像に基づいて患者体内の１つ以上の腫瘍内のＣＤ８陽性細胞の第１の存在量及び／または分布を決定する。患者に１つ以上の腫瘍内のＣＤ８の第１の存在量及び／または分布に対する第１の治療を投与する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２７０】
実施例５１−がんを有するヒトを治療する方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２７１】
検出可能な標識で標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することによる方法によってがんを有するヒト対象が治療される。対象の身体内の少なくとも一次腫瘍状態及び二次腫瘍状態を特定する。ＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布により一次腫瘍のＴＩＬ状態を特定する。一次腫瘍のＴＩＬ状態に基づいて対象に第１の療法を投与する。ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与してその後の一次腫瘍のＴＩＬ状態を判定する。一次腫瘍のＴＩＬ状態を用いて対象のその後の適切な治療を決定する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２７２】
実施例５２−ＣＤ８組成物の製剤
ＣＤ８組成物の製剤は、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを含む。ＣＤ８抗原結合コンストラクトはサイズが１０５ｋＤａ未満であり、８９Ｚｒ放射性標識がＣＤ８抗原結合コンストラクトに関連付けられている。放射性標識は、０．５よりも高いが３ｍＣｉよりも低い製剤の放射線を提供する。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。
【１２７３】
実施例５３−ＣＤ８ミニボディ製剤
ＣＤ８ミニボディ製剤は、少なくとも１．５ｍｇのＣＤ８ミニボディと、１．５ｍＣｉ以下の８９Ｚｒとを含む。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。
【１２７４】
実施例５４−診断用組成物の製造方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２７５】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトをデスフェリオキサミンと結合させてＤｆ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成することによる方法によって診断用組成物が製造される。Ｄｆ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトを８９Ｚｒで放射性標識して放射性標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトを形成する。放射性標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトと放射性標識されていない（非放射性）Ｄｆ標識ＣＤ８抗原結合コンストラクトとを混合して診断用組成物を形成する。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２７６】
実施例５５−ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤
ＣＤ８抗原結合コンストラクト製剤は、ＣＤ８抗原結合コンストラクト、及び遊離アルギニンを含む。製剤は、ヒトに投与されるように構成される。
【１２７７】
実施例５６−ＰＥＴスキャン方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２７８】
ヒトＣＤ８抗原に結合するミニボディを投与することを含む方法によってＰＥＴスキャンがヒト対象に実施される。ミニボディは放射性標識に結合されている。ミニボディが投与され、０．５よりも高いが１．１ｍＣｉよりも低い放射線を提供する。１〜３６時間の待ち時間の後、１５〜３０分間のスキャニング時間にわたってＰＥＴスキャンを実施する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２７９】
実施例５７−ＰＥＴの方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２８０】
陽電子放出断層撮影（「ＰＥＴ」）の方法は、ＣＤ８に結合するトレーサーをヒト対象に投与することを含む。シンチレーターが提供される。シンチレーターを使用してトレーサーによって生成された光子対を検出する。光子対の検出を利用して同時事象のリストによってトレーサー源を局在化し、同時事象は、シンチレーターからの出力を受け取り、それを同時事象のリストに変換するように構成されたプロセッサによって処理される。対象内の組織または新生物１ｍｍ２当たり約３００〜約５００個のＣＤ８陽性細胞が検出される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２８１】
実施例５８−腫瘍を有するヒトを治療する方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２８２】
方法により、腫瘍を有するヒト対象が治療される。対象のＰＥＴとａ）ＭＲＩまたはｂ）ＣＴとの合成画像が提供される。合成画像は、少なくとも１つの腫瘍の領域とＣＤ８のＲＯＩとの重複を強調する。少なくとも１つの腫瘍の領域は、ａ）ＭＲＩデータまたはｂ）ＣＴデータによって画定され、ＣＤ８のＲＯＩはＰＥＴデータによって画定される。ＰＥＴとａ）ＭＲＩまたはｂ）ＣＴとの合成画像を検討して患者の腫瘍のＴＩＬ状態を判定する。腫瘍がＴＩＬ陰性である場合に患者にＩＯＴ治療を与える。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２８３】
実施例５９−候補治療薬でヒトを治療する方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２８４】
方法によってヒト対象が治療される。ヒト対象に候補治療薬を投与する。ヒト対象の腫瘍のサイズが候補治療薬に応答して増大したかまたは減少したかを判定する。候補治療薬の後でサイズが増大していた場合、ＣＤ８抗原結合コンストラクトを使用して腫瘍内に存在するＣＤ８の量が候補治療薬に応答して増加したかまたは減少したかを判定する。ＣＤ８の量の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示す。ＣＤ８の量の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示す。患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続する。患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２８５】
実施例６０−腫瘍の進行の腫瘍の疑似進行からの区別
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２８６】
ヒト対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与することによる方法によってヒト患者における免疫療法後の腫瘍の進行が腫瘍の疑似進行から区別される。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出する。対象に候補免疫療法を投与する。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出する。ＣＤ８の結合の増加を伴わない腫瘍サイズの増大は腫瘍の進行を示す。ＣＤ８の結合の増加を伴う腫瘍サイズの増大は腫瘍の疑似進行を示す。患者が腫瘍の疑似進行を有している場合には治療を継続する。患者が腫瘍の進行を有している場合には治療を変更する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２８７】
実施例６１−腫瘍を有するヒトを治療する方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２８８】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することと、対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布及び第１のＲＯＩを検出することと、による方法によって腫瘍を有するヒト対象が治療される。対象に候補免疫療法を投与する。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布及び第２のＲＯＩを検出する。第１のＲＯＩに対する第２のＲＯＩの面積（対象に対する）が同じかまたはより大きく、かつＣＤ８浸潤の増加を示す場合、候補免疫療法の投与を継続する。第１のＲＯＩに対する第２のＲＯＩの面積（対象に対する）が同じかまたはより大きく、かつＣＤ８浸潤の増加を示さない場合、候補免疫療法の投与を中断する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２８９】
実施例６２−標識の投与方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２９０】
１８Ｆを対象に投与することによる方法によって標識をヒト対象に投与する。約６時間以内に対象の１８Ｆ分布について対象のＰＥＴスキャンを行う。対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトを投与する。ＣＤ８抗原結合コンストラクトは８９Ｚｒに結合されている。ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の約３６時間以内に８９Ｚｒの分布について対象にＰＥＴスキャンを行う。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２９１】
実施例６３−ヒト画像の準備方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２９２】
ＭＲＩまたはＦＤＧ−ＰＥＴスキャンの表現を含む第１のデータセットを与えることによる方法によってヒト対象の画像が準備される。ＭＲＩまたはＦＤＧ−ＰＥＴスキャンは少なくとも１つの腫瘍を示す。８９Ｚｒ−ＣＤ８抗原結合コンストラクトのＰＥＴスキャンの表現を含む第２のデータセットが与えられる。第２のデータセットは少なくとも１つのＣＤ８の関心領域（「ＲＯＩ」）を示す。２つのデータセットから合成画像が生成され、合成画像は、少なくとも１つの腫瘍と前記少なくとも１つのＣＤ８のＲＯＩとの比較を与える。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２９３】
実施例６４−ＣＤ８の分析
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２９４】
対象内のＣＤ８の分布が、第１のＰＥＴ画像により、検出可能なマーカーの分布の画像を与えることによる方法によって分析される。検出可能なマーカーは、ＣＤ８抗原結合コンストラクトに結合されている。対象の第２のＰＥＴ画像によりＦＤＧマーカーの分布の画像が与えられる。第１のＰＥＴ画像の第２のＰＥＴ画像上へのオーバーレイを含む第３のＰＥＴ画像が生成される。第３のＰＥＴ画像に基づいて腫瘍のＴＩＬ状態が特定される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２９５】
実施例６５−腫瘍特性の特定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２９６】
ヒト対象内の１８Ｆの分布についてスキャンして少なくとも１つの腫瘍を特定することによる方法によって腫瘍の特性が特定される。ヒト対象内の８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布についてスキャンを行って対象内の８９Ｚｒの高い濃度が特定される。少なくとも１つの腫瘍の位置が対象内の８９Ｚｒのいずれか１つ以上の高い濃度と重複している場合に腫瘍が炎症型として特定される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２９７】
実施例６６−腫瘍特性の特定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１２９８】
対象に１８Ｆを与えることによる方法によって腫瘍の特性が特定される。対象のＰＥＴスキャンを行って対象内の１８Ｆの分布を特定して腫瘍の表現を描写する。８９Ｚｒ標識されたＣＤ８抗原結合コンストラクトが対象に与えられる。対象のＰＥＴスキャンを行って対象内のＣＤ８分布の表現において対象内の８９Ｚｒの高い濃度を特定する。腫瘍の表現をＣＤ８分布の表現と比較して２つの表現の重複領域を特定する。腫瘍位置でかつ８９Ｚｒの濃度が高い領域は、炎症状態にあってＩＯＴを必要としない腫瘍を示す。腫瘍が存在するが８９Ｚｒの高い濃度は存在しない領域は、炎症状態になく、ＴＩＬ状態を調節するためにＩＯＴを必要とする腫瘍を表す。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１２９９】
実施例６７−脳内の固形腫瘍の特定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３００】
ＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することによる方法によってヒト対象の脳内の固形腫瘍が特定される。対象の少なくとも頭部のＰＥＴスキャニングが行われる。脳内の前記ＰＥＴ検出可能な標識の分布が得られる。分布内のＣＤ８集中領域の特定は、対象の脳内の固形腫瘍の存在を示す。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３０１】
実施例６８−ＣＤ８保有細胞の監視
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３０２】
ＣＤ８ミニボディをヒト対象に与えることによる方法によってインビボでＣＤ８保有細胞が監視される。ＣＤ８ミニボディは、図１Ｃに示されるヒトＣＤ８に結合する。ミニボディは、ＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されている。対象内のミニボディの分布が監視される。監視することは、対象内の組織体積に、選択された量よりも多いＣＤ８保有細胞が浸潤しているか、または少ないＣＤ８保有細胞が浸潤しているかを区別する。監視することは、ＰＥＴにより行われる。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３０３】
実施例６９−ＣＤ８保有細胞の可視化
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３０４】
ヒト対象にＣＤ８ミニボディを投与することによる方法によってヒト対象内のＣＤ８保有細胞が可視化される。ミニボディはＰＥＴ検出可能なマーカーで標識されている。ミニボディ配列はヒト化されておりヒトＣＤ８に結合する。対象へのミニボディの投与の６〜３６時間以内に対象内のミニボディの分布が監視される。方法は、組織の体積に、対象内の選択された量よりも多いＣＤ８保有細胞が浸潤しているか、または少ないＣＤ８保有細胞が浸潤しているかを区別することができる。監視することは、ＰＥＴにより行われる。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３０５】
実施例７０−腫瘍のＴＩＬ状態の判定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３０６】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することによる方法によってヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態が判定される。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布がＰＥＴにより監視される。監視することは、ＴＩＬ陽性腫瘍を特定する。監視することは、
【１３０７】
対象内の１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
【１３０８】
対象内の１ｍｍ２当たり５００個超または５００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
【１３０９】
対象内の１ｍｍ２当たり２００個超または５００個未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
【１３１０】
１００個〜５００個／ｍｍ２超またはこれ未満のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
【１３１１】
１％未満のＣＤ８保有細胞、１〜５０％のＣＤ８保有細胞、または５０％超のＣＤ８保有細胞が浸潤した腫瘍、
【１３１２】
４ミクロンの組織切片で細胞の２．５〜２５％のＩＨＣ測定値に相当するＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、
【１３１３】
対応する腫瘍の１ｍｍ３当たり１００００〜１０００００個のＣＤ８保有細胞を含む腫瘍、
【１３１４】
低い（コールド）または高い（ホット）、対応する腫瘍のＣＤ８保有細胞の細胞強度、のうちの少なくとも１つを与える。
【１３１５】
これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３１６】
実施例７１−ＣＤ８保有細胞の分布の可視化
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３１７】
ヒト対象内のＣＤ８保有細胞の分布がＰＥＴにより可視化される。対象にＣＤ８抗原結合コンストラクトが投与される。ＣＤ８抗原結合コンストラクトはＰＥＴ検出可能な標識で標識されている。対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布が、ＣＤ８抗原結合コンストラクトの投与の６〜３６時間に監視される。監視することは、１ｍｍ２当たり５００個以下のＣＤ８陽性細胞が浸潤した対象内の組織を検出することができる。監視することは、ＰＥＴにより行われ、分布を可視化するための画像に変換される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３１８】
実施例７２−ヒト体内の細胞の可視化
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３１９】
ヒト体内の細胞が、ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段を対象に与えることによる方法によって可視化される。手段は検出可能な標識を含む。ヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の対象への投与の６〜３６時間以内に対象内のヒトＣＤ８陽性細胞と結合する手段の第１の分布を監視する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３２０】
実施例７３−腫瘍のＴＩＬ状態の判定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３２１】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することによる方法によってヒト対象内の腫瘍のＴＩＬ状態が判定される。ＣＤ８抗原結合コンストラクトはＰＥＴ検出可能な標識で標識されている。対象内のＰＥＴ検出可能な標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトの分布が監視される。ＰＥＴ検出可能な標識が対象内の既知のまたは疑わしい腫瘍に浸透した程度が評価される。腫瘍は、ＰＥＴ検出可能な標識が腫瘍に浸透していた場合にＴＩＬ陽性であり、浸透していなかった場合にはＴＩＬ陰性である。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３２２】
実施例７４−ＣＤ８の分布の変化の判定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３２３】
ＣＤ８抗原結合コンストラクトを対象に投与することによる方法によってがんを有するヒト対象内のＣＤ８細胞の分布の変化がイメージングされる。ＰＥＴを用いて対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第１の分布が判定される。対象に免疫療法が投与される。ＰＥＴを用いて対象内のＣＤ８抗原結合コンストラクトの第２の分布が判定される。第１の分布と第２の分布との差は変化を示す。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３２４】
実施例７５−ＩＯＴに対する応答性の評価
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３２５】
ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法によって与えることによる方法によって、対象がＩＯＴに応答しているかどうかが判定される。ＩＯＴが投与される。ＲＯＩ内の対象の治療後ＣＤ８分布が与えられる。治療後ＣＤ８分布は、ＩＯＴの投与の３５日以内に得られる。治療後ＣＤ８分布とベースラインＣＤ８分布とを比較して対象がＩＯＴに応答しているかどうかを判定する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３２６】
実施例７６−チェックポイント阻害剤への応答性の予測
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３２７】
ＲＯＩ内の対象のベースラインＣＤ８分布をインビボの方法により与えることによる方法によって、チェックポイント阻害剤に対する対象の応答性が予測される。チェックポイント阻害剤が投与される。ＲＯＩ内の対象のチェックポイント阻害剤ＣＤ８分布が与えられる。チェックポイント阻害剤ＣＤ８分布は、ＩＯＴの投与の３５日以内に得られる。チェックポイント阻害剤ＣＤ８分布をベースラインＣＤ８分布と比較して対象がチェックポイント阻害剤に応答性を有するかどうかが判定される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３２８】
実施例７７−療法の有効性の監視
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３２９】
対象の第１のＣＤ８画像を与えることによる方法によって療法の有効性が監視される。対象は療法のベースラインにある。対象に療法が投与される。対象の第２のＣＤ８画像が与えられる。対象に療法が投与されてから少なくとも１日が経過している。ＣＤ８造影剤の有意な増加がない場合、対象は療法に応答していない。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３３０】
実施例７８−腫瘍の分析方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３３１】
候補治療薬に応答した対象内の腫瘍における相対ＣＤ８浸潤度を特徴付けることによる方法によって腫瘍が分析される。放射性標識を有するＣＤ８抗原結合コンストラクトによりＣＤ８浸潤度が増加したかまたは減少したかが観察される。ＣＤ８浸潤の増加は、候補治療薬が治療薬として機能していることを示す。ＣＤ８浸潤の減少は、候補治療薬が治療薬として機能していないことを示し、腫瘍のサイズは、候補治療薬が投与される前と候補治療薬が投与された後との間で増大している。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３３２】
実施例７９−標準取り込み値（ＳＵＶ）の決定
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３３３】
抗原結合コンストラクトを対象に適用することによる方法によって標準取り込み値（ＳＵＶ）が決定される。抗原結合コンストラクトは、放射性プローブを含む。ｒを決定する。ここで、ｒは、ＰＥＴスキャナーによりＲＯＩ内で測定される、抗原結合コンストラクトからの放射線の放射能濃度（ｋＢｑ／ｍｌ）である。ａ’を決定する。ここで、ａ’は、注入された放射性標識されたトレーサーの崩壊補正量（ｋＢｑ）である。ｗを決定する。ここで、ｗは、患者の体重である。ＳＵＶを、ｒ（ａ’／Ｗ）の結果として決定する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３３４】
実施例８０−画像の分析方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３３５】
画像を与えることにより、画像が分析される。画像をマーキングすることにより画像上に第１の関心領域（ＲＯＩ）が定義される。第１のＲＯＩ内のデータポイントのシグナル強度を決定される。第１のＲＯＩ内の最大シグナル強度が決定される。第１のＲＯＩ内のシグナル強度の平均値が決定される。第１のＲＯＩ内の各シグナル強度を合計して第１のＲＯＩについて第１の合計シグナルレベルが得られる。第１のＲＯＩは、対象に投与された抗原結合コンストラクトに関連付けられた検出可能なマーカーの量のデータを表す。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３３６】
実施例８１−画像の生成方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３３７】
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを適用することにより画像が生成される。抗原結合コンストラクトは検出可能なマーカーを含み、腫瘍内のある位置内の少なくとも１つの検出可能なマーカーを検出し、検出された各検出可能なマーカーに対して正のピクセルを割り当てることと、割り当てられた各正のピクセルの分布に基づいて画像を生成することとを含み、画像は非一時的コンピュータ可読媒体に格納される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３３８】
実施例８２−生検方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３３９】
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に与えることにより対象の生検が行われる。特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの高いレベルに基づいて、生検を行う特定の腫瘍が選択され、特定の腫瘍から試料が採取される。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３４０】
実施例８３−生検方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３４１】
ＣＤ８に結合する抗原結合コンストラクトを対象に与え、特定の腫瘍内の抗原結合コンストラクトの分布に基づいて、生検するための腫瘍内の特定の位置を選択し、腫瘍内の特定の位置から試料を採取することにより、対象の生検が行われる。特定の位置は、腫瘍のａ）内部またはｂ）腫瘍の表面上にある。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３４２】
実施例８４−免疫関連有害事象（ｉｒＡＥ）の検出方法
実施例１６の組成物のうちの１つが、本実施例で使用するために選択される。
【１３４３】
チェックポイント阻害剤療法を行っているヒト対象を特定することにより免疫関連有害事象（ｉｒＡＥ）が検出される。ＣＤ８抗原結合コンストラクトがヒト対象に投与される。ＣＤ８抗原結合コンストラクトは検出可能な標識を有する。対象内の検出可能な標識を監視して、免疫関連毒性があるかどうかが判定される。免疫関連毒性はＣＤ８結合の増加によって示される。免疫関連毒性が重症または不可逆的である場合、チェックポイント阻害剤療法を中止する。免疫関連毒性が重症または不可逆的でない場合、チェックポイント阻害剤療法を保留してＣＤ８レベルがより低いレベルに戻るまでＣＤ８レベルを引き続き監視する。これを、対象の治療及び／または診断に用いることができる。
【１３４４】
実施例８５−第１相
【１３４５】
２０１５−２２Ｍ２Ｃ−０１臨床試験の画像中央判定を、単独放射線学判定例に従って行った（一人の放射線科医が特定の被験者のイメージングを判定することを意味する）。読影の開始に先立って、ＩＥがこの試験の単独の読影者を選択及び訓練した。被験者について収集された８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴ時点を、予備試験の従来のイメージングスキャン（複数可）とともに読影者に同時にわたして評価を行ってもらった。読影者は、各８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴ時点及び従来のイメージングスキャンについて評価を行い、読図に署名して承認する前に各時点及びモダリティ間で前後に行き来することができた。評価に署名がされた後、ロックをし、データ変更または再評価によってのみ編集できるようにした。図６２Ａに中央読影の設計の概要を示し、図内の番号付けされた各ステップを図に従って説明する。
【１３４６】
以下のステップを、各被験者について中央読影に適用した。
１．従来のイメージングで特定された標的病変の選択及び測定：
・    予備試験の従来のイメージングスキャンを用いて病変及び／または異常リンパ節を特定した。これらの病変を、２次元定規を用いて予備試験スキャンで測定した。
ｏ短軸が１０ミリメートル（ｍｍ）以上であるリンパ節は異常とみなしたが、これは絶対的な必要条件ではなく、形態学によって明らかに異常であるが短軸が１０ｍｍ未満であった場合には、標的病変として選択した。
ｏ予備試験の従来のイメージングスキャンが１８Ｆ−ＦＤＧ−ＰＥＴであった場合、２次元直径に加えて病変のＳＵＶを測定した。
ｏ従来のイメージングにより特定された標的病変を臓器当たり最大３つ選択した。
３つよりも多い病変があった場合、最も大きい３つのリンパ節及び／または固体腫瘍を選択した。異常なリンパ節及び／または固体腫瘍の両方が存在した場合、それぞれの少なくとも１つを選択した。
・    ８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャンのそれぞれの各標的病変のＳＵＶを測定した。病変が８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャン上で見えなかった場合には病変をＰＥＴ陰性として示し、病変が他の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャン（複数可）で可視化されているその領域のＳＵＶ、または従来のスキャン上のその位置に相当する同等の解剖学的部位におけるＳＵＶを更に測定した。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ上で標的病変が測定されなかった場合には、分析フォームにコメントを入力した。
ｏ    病変がＰＥＴ陽性であった場合、取り込みのタイプを、各８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴの時点における各病変について均一型、辺縁型、混合型、または中央型として示した。
２．８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴで特定された標的病変の選択及び測定
・    一連の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ上に示された最大で３つの病変／異常リンパ節を、予備試験の従来のイメージングスキャン上で見られなかった場合に選択することができた。
o  一連の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴにわたって取り込みを示した病変／異常リンパ節が３つよりも多かった場合、最大の取り込みを示した３つのリンパ節を選択した。
o     これらの病変のＳＵＶをそれぞれの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ上で測定した。いずれの病変も８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ上で測定できなかった場合にはこれを分析フォームにコメントを入力することにより示した。
o     これらの病変のそれぞれを、予備試験の従来のイメージングスキャン上で測定するかまたはマーキングした。従来のイメージング上で視認できなかった場合を除いて各病変を２次元定規を用いて測定し、従来のイメージング上で視認できなかった場合にはその位置を矢印でマーキングして「存在せず」として評価し、アノテーションをまったくつけることができなかった場合には分析フォームにコメントを記録することによりこれを示した。
３．各リンパ節鎖の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ上での取り込みについての評価：
・    各リンパ節鎖で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴの取り込みがあるかどうかについて示した。
o     リンパ節鎖は、頸部、鎖骨上、腋窩、縦隔、肺門、腸間膜、後下腿、後腹膜、傍大動脈、骨盤、及び鼠径を含む。
４．リンパ様及び非リンパ様参照組織のＳＵＶの測定：
・    以下の参照組織のＳＵＶを測定した：肝臓、脾臓、大動脈、筋肉、骨髄、肺、及び左腎。参照組織は、非関与であり、ＰＥＴ陰性として評価されなければならない。いずれの参照組織も測定できなかった場合、説明コメントを入力した。参照組織は以下のように測定した：
o     肝臓−右葉内の直径約３ｃｍの関心体積（ＶＯＩ）
o     脾臓−脾臓内の直径約１．５ｃｍのＶＯＩ
o     大動脈−胸中部位置の直径約１．５ｃｍのＶＯＩ
o     筋肉−Ｌ５の傍脊椎筋の直径約１．５ｃｍのＶＯＩ
o     骨髄−Ｌ５または同様の椎体内の約１．５ｃｍのＶＯＩ
o     肺−右下葉内の直径約３ｃｍのＶＯＩ
o     左腎−左腎内の約３ｃｍのＶＯＩ左腎を用いることができない場合（例えば、被験者が左腎を有していない場合）には右腎を用いることができる。
５．最適な８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャン（複数可）の選択：
・    すべての８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャンを検討した後、ＰＥＴ／ＣＴ上で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの最適な分布を示したスキャン（複数可）を示した。ＣＤ８＋Ｔ細胞の存在と一致する最も限局した８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ取り込みを示した時点（複数可）を最適時点（複数可）とみなした。
・    最適スキャンの評価では、複数のスキャンを最適として示すかまたは１枚のみのスキャンを最適として評価することができる。あるいは、いずれのスキャンも最適として選択しないことも許容された。これはいずれの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ上も取り込みを示さなかった場合に予想された。最適スキャンが選択されず、いずれかの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴが取り込みを示した場合には、説明を与えるコメントを入力した。
イメージングのスケジュールの概要を下記表８５．１Ａに示す。
【１３４７】
【表９】
2022501402.tif 000025
【１３４８】
参照組織における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込み
両方のコホートからの参照組織における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みを利用可能な各スキャンで各時点において測定した。参照組織には、ＣＤ８＋ＴＩＬリッチ集団の予想される部位として脾臓、骨髄（Ｌ５椎骨）、及びリンパ節を含めた。リンパ節の取り込みは、リンパ節が正常なサイズ（従来のイメージングでの短軸直径が１５ｍｍ未満）、正常な形態学であり、かつ／またはＰＥＴスキャンが判定に利用可能であった場合にＦＤＧ取り込みがなかった場合にＣＤ８＋ＴＩＬリッチな参照組織の一部として含めた。肝臓、肺、腎臓（左腎）及び筋肉（傍脊椎筋）は、それらの予想される低いＣＤ８＋ＴＩＬ密度のために参照組織として選択した。大動脈は、血液プール（循環リザーバ−動脈入力関数）活性における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性の尺度として選択した。
【１３４９】
表８５．１Ｂは、すべての被験者について参照組織中の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性を示す。表及び図面に示される時間は、文書中で特に断らない限りはスキャンが収集された平均時間を表す点に留意されたい。例えば、プロトコールに記載される１〜２時間、６〜８時間、２４時間、４８時間、及び５〜７日間のスキャン収集時点は、それぞれ、平均で１．６時間、６．２時間、２４．３時間、４８．４時間及び１３５．０時間で得られたものである。示された患者データに基づき、ユーザーは、やはり本明細書に開示される分析方法のいずれかを適用して診断結果を導き、本明細書に記載される治療の判断を下すことができる。
【１３５０】
【表１０−１】
2022501402.tif 000026
【表１０−２】
2022501402.tif 000027
【表１０−３】
2022501402.tif 000028
【表１０−４】
2022501402.tif 000029
【表１０−５】
2022501402.tif 000030
【表１０−６】
2022501402.tif 000031
【表１０−７】
2022501402.tif 000032
【１３５１】
図６２Ｂ〜６２Ｈは、ステージＩに組み入れた各被験者のＳＵＶ平均から決定された参照組織の時間活性曲線（ＴＡＣ）を示す。
【１３５２】
ステージＩ及びＩＩに組み入れられた被験者を含む８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの、詳細には０．５ｍｇ及び１．５ｍｇでの参照組織の取り込みの評価を、図６２Ｉ及び図６２Ｊに示す。各グラフは、ＣＤ８＋ＴＩＬリッチ及び非ＣＤ８＋ＴＩＬリッチな参照臓器の組織として示されている。
【１３５３】
大半の被験者において、被験者の両方のコホートでの頸部、胸部、腹部、骨盤、及び鼠径管全体にわたって正常なサイズのリンパ節の可視化が認められた。リンパ節取り込みの頻度を以下で図６２Ｋに示す。頸部及び鼠径管におけるリンパ節取り込みが、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みが最も高い頻度で可視化された部位であったのに対して、骨盤リンパ節は可視化された取り込みが最も低い部位であった。
腫瘍組織中の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ
【１３５４】
本明細書に記載されるように、腫瘍病変における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃトレーサーの取り込みの共局在化の測定では、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃに先立って得られた従来のイメージング（ＣＴ及び／またはＦＤＧ  ＰＥＴ）で観察された最大で３つの腫瘍の部位及び領域を特定した。これらの病変を、標的病変（Ｔ０１、Ｔ０２またはＴ０３）として以下の表及び図面に示した。
【１３５５】
独立した読影者が、１５人の被験者すべての従来のイメージング上に認められた腫瘍病変の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性（ＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク）を測定した。
【１３５６】
表８５．２及び表８５．３は、読影者によって選択されたＴ０Ｘ病変のそれぞれの取り込み値を示す。
【１３５７】
【表１１−１】
2022501402.tif 000033
【表１１−２】
2022501402.tif 000034
【１３５８】
【表１２−１】
2022501402.tif 000035
【表１２−２】
2022501402.tif 000036
【１３５９】
標的腫瘍病変の平均時点のそれぞれにおけるＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク取り込み値の分布のプロットを、それぞれ図６２Ｌ及び図６２Ｍに示す。表８５．４は、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃのリンパ節病変：大動脈の経時的な取り込みの概要を示す。
【１３６０】
【表１３】
2022501402.tif 000037
【１３６１】
ＩＥは、転移性固形悪性腫瘍を有する選択された被験者における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴスキャンの第Ｉ相試験に組み入れられた被験者の中央盲検独立判定を実施している。この試験は、単一読影者のパラダイムとして実施された。この試験のイメージングの目的は、参照臓器組織及び腫瘍内のＣＤ８＋ＴＩＬ集団の検出用のＰＥＴ剤として８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを使用する実現可能性を判定することであった。この分析では、リンパ系臓器（脾臓、骨髄、及びリンパ節）及び腫瘍内の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ放射性トレーサーの分布の定性的及び定量的評価の両方を行った。
【１３６２】
ＰＥＴ／ＣＴスキャンのこの特定の定量的評価は、ＣＤ８＋ＴＩＬ活性の尺度としてＳＵＶ分析に主として着目したものである。更に、このデータセットから、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩが８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入後のＰＥＴ／ＣＴスキャン収集の最良のタイミングとともに導出された。
【１３６３】
試験プロトコールの設計
ステージＩは、急速用量漸増フェーズとした。単一の被験者を、０．２ｍｇ、０．５ｍｇ、１．０ｍｇ、１．５ｍｇ、５．０ｍｇ及び１０．０ｍｇの６つの非標識ＡＰＩタンパク質の用量のうちの１つに組み入れた。このフェーズの目的は、非ＣＤ８＋リッチ臓器組織の低いバックグラウンド活性を維持しつつ、ＣＤ８＋リッチな臓器組織内のＣＤ８＋ＴＩＬシンクの飽和に基づいてスキャン最適化のための一定範囲のタンパク質用量を試験すること、及び、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴスキャン上の腫瘍の共局在化を検出することの実現可能性を評価することであった。
【１３６４】
ステージＩＩは、０．５ｍｇ（ｎ＝４）及び１．５ｍｇ（ｎ＝５）の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩタンパク質用量で組み入れられた更に９人の被験者を含む用量拡大フェーズとした。このフェーズの目的は、リンパ系及び非リンパ系参照臓器組織の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みの挙動を更に定義するとともに、腫瘍共局在化を調べることにある。
【１３６５】
ステージＩの結果及び根拠
ステージＩの被験者からの結果は、試験したすべてのタンパク質用量レベルでＣＤ８＋ＴＩＬリッチな臓器組織の安定した８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性の取り込み、及び非ＣＤ８＋ＴＩＬリッチな臓器組織の比較的低い取り込みを示した。参照臓器組織のＳＵＶ平均の評価（図６２Ｂ〜６２Ｉ）に基づき、以下の観察を行った（ＳＵＶ平均の使用は、参照組織の活性を測定するためのアプローチの１つである。参照組織のＳＵＶ最大またはピーク測定値に対するＳＵＶ平均の利点は、ＳＵＶピーク及びＳＵＶ最大と比較して均一な活性を有することが予想される臓器系内のより統計的にロバストなシグナルに関連している。）。
１．脾臓及び骨髄ではすべてのタンパク質用量レベルで８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性の強い可視化がみられ、正常サイズのリンパ節では取り込みは異なった。０．２ｍｇの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩ用量が最も多数の正常サイズのリンパ節ステーションを示したのに対して、他の用量レベルはリンパ節取り込みを示した。
２．試験したすべてのＡＰＩ用量で、ＣＤ８＋リッチな臓器組織と比較して非ＣＤ８＋リッチな臓器組織で比較的低い８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みがみられ、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの腫瘍共局在化の潜在的検出のためのバックグラウンド環境への好ましい標的を示唆するものである。
３．ＣＤ８＋ＴＩＬがリッチであることが知られている臓器組織で最も高い８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みがみられ、すべてのタンパク質用量レベルで脾臓＞骨髄＞リンパ節の取り込みであった。（部分体積の補正及びカウントリカバリ効果を可能とするためのＰＥＴ／ＣＴスキャナーのそれぞれのカウントリカバリ係数は未知であった。 換言すれば、小さな解剖学的構造（例えば、リンパ節）は、同様のＣＤ８＋ＴＩＬ密度を有するにもかかわらず、より大きな臓器よりも低いＳＵＶ平均を有する場合がある。）
４．非ＣＤ８＋ＴＩＬリッチな臓器組織の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃのシグナルは比較的低いＳＵＶ平均の値を有し、このクラスの参照臓器組織では肝臓が最も高い活性を有し、肺及び脊髄筋で最も低いシグナルがみられた。
５．８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩの用量を増加させることでＣＤ８＋ＴＩＬリッチな参照臓器組織のＳＵＶ平均の値が低くなった一方で、非ＣＤ８＋ＴＩＬリッチな臓器組織の取り込みへの影響はわずかであった。
６．ＴＡＣは、ほとんどすべての臓器組織で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの経時的変化を示し、将来的にＴ細胞輸送を調べることを可能とする可能性がある。
ａ．ＣＤ８＋ＴＩＬリッチな臓器組織のＴＡＣは、０．２ｍｇ〜１．５ｍｇのＡＰＩ用量の対象で経時的に減少したが、５．０ｍｇ及び１０．０ｍｇでは経時的に増加した。
ｂ．非ＣＤ８＋ＴＩＬリッチな臓器組織のＴＡＣはより変動が大きかったが、ほとんどすべてのタンパク質用量で経時的にＳＵＶ平均の値が増加する傾向がみられた。
７．大動脈（血液プール）クリアランスは概ね速やかであったが、トレーサーのＡＰＩ用量の増加に伴って遅くなった。
【１３６６】
これらの結果は、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃが一般的な受容体飽和挙動特性に従っており、より高用量の非標識８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩは、ＣＤ８＋ＴＩＬ受容体のより多くの結合、占有率、及び飽和度（いわゆる、ＣＤ８＋シンクの飽和）、ならびに、非ＣＤ８＋リッチな臓器組織への８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ剤の分布のシフト（すなわち、肝臓などのクリアランス臓器でより高い取り込み）及び血液プールからのより遅いクリアランスのために、より低い８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みにつながることを示唆するものである。これらの知見は、前臨床モデルからの報告されている結果と一致している。
【１３６７】
更に、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みのＴＡＣパターンの変化が、５．０ｍｇよりも高い用量で認められた。例えば、５．０ｍｇ未満のＡＰＩ用量のＴＡＣは、ＣＤ８＋リッチな臓器の参照組織から経時的な８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性の低下（クリアランス）を示したのに対して、５．０ｍｇ以上のＡＰＩ用量は、経時的に増加する８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの蓄積を示した。これは、これらのより高い用量レベルでは、リンパ系臓器の組織のＣＤ８＋可視化から得られるそれ以上の利点がないことを示唆した。最後に、０．５ｍｇ及び１．５ｍｇの用量レベルは、０．２ｍｇの用量レベルと比較してリンパ系のリッチな臓器組織（特にリンパ節）において大幅に低い８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの全体的取り込みを示し、また、１．０ｍｇの用量レベルでは腫瘍病変の実際のターゲティングがみられなかったため、治験依頼者は、プロトコールのステージＩＩにおける更なる検証では０．５ｍｇ及び１．５ｍｇの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩ用量レベルに主眼を置くことを選択した。
【１３６８】
用量拡大における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ参照組織及び腫瘍病変の局在化の
結果
各臓器組織における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みは、ステージＩ及びＩＩの被験者への組み入れに関係なく０．５ｍｇ及び１．５ｍｇ（図６２Ｉ及び図６２Ｊ）で大きく似通っていた。このことは、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みは、これらの参照臓器組織において潜在的なＣＤ８＋ＴＩＬ検出のための安定したシグナルを発生することを示している。更に、正常リンパ節における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みが多くの被験者で認められた。正常なリンパ節ステーションが特定される頻度は、解剖学的位置によって異なった（図６２Ｋ）。正常なサイズのリンパ節は、胸部、腹部、及び骨盤よりも頭頸部及び鼠径管でより高頻度で認められた。頸部及び鼠径管のリンパ節は、他の部位と比較して環境的、感染性、及び炎症性プロセスに曝露される一般的な部位であり、外来抗原に曝露される際にこれらのリンパ節でＣＤ８＋ＴＩＬ集団が増殖する機会が多くなる。更に、これらのリンパ節はＰＥＴカメラ検出器及び薄い周囲の軟部組織に比較的近接している（すなわち、減衰効果）ため、より深部の正常リンパ節よりも容易に検出可能となり得る。
【１３６９】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを使用した正常サイズのリンパ節の可視化及び従来のイメージングまたは１８Ｆ−ＦＤＧ−ＰＥＴ取り込みによる転移性疾患を示唆する形態学的知見の欠如は、これらのリンパ節ステーションに転移性腫瘍デポジットが存在しなかった可能性を必ずしも完全に除外しない。この試験に組み入れられた被験者のいずれのコホートからも、これらのリンパ節の良性の性質を確認するための計画された生検は行われなかった。しかしながら、正常な被験者で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを使用した試験は、本発明者らの研究に組み入れられた被験者と比較してリンパ節ステーションの可視化の検出及び頻度のどちらも健康な正常集団では同様であることが期待されることからこの問題をより直接的に解決すると考えられる。
【１３７０】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの腫瘍共局在化の評価
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ／ＣＴシグナルの腫瘍共局在化の結果によって以下のことが示された。
１．シグナルは、１５人の被験者のうち、９人の腫瘍病変で検出された。腫瘍共局在化は、０．２ｍｇのＡＰＩ用量で組み入れられた１人の被験者のうち１人で、０．５ｍｇのＡＰＩ用量で組み入れられた５人の被験者のうち４人で、１．０ｍｇのＡＰＩ用量に組み入れられた０人の被験者で、１．５ｍｇのＡＰＩ用量に組み入れられた６人の被験者のうち３人で、５．０ｍｇのＡＰＩ用量に組み入れられた０人の被験者で、及び、１０．０ｍｇのＡＰＩ用量のコホートに組み入れられた１人の被験者でみられた。病変のすべての取り込みは、本質的に均一とみなされた。
２．ＰＥＴで可視化された腫瘍のＳＵＶ （最大及びピーク）は、約１．０〜５９の範囲であった。１．５ｍｇのＡＰＩ用量のコホートの病変では、外れ値の病変（１．５ｍｇのＡＰＩのコホートの１人の被験者からの脾臓病変）を除外した場合でも０．５ｍｇのＡＰＩ用量のコホートの病変よりも高い８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃシグナルがみられた。
３．ＴＡＣは、すべての８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩ用量レベルですべての被験者からのすべての腫瘍を評価した場合に経時的な８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの増加を示し、２４〜４８時間でＴＡＣは概ね平坦であった。
４．８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを腫瘍タイプによって層別化した場合、黒色腫及びＮＳＣＬＣ腫瘍病変は、同様の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込み値及びＴＡＣを有した。ＨＣＣを有する１人の対象が、他の組織学と比較して高いＳＵＶ値を有した。
５．平均の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃシグナルは、リンパ節疾患よりも非リンパ節疾患で一般的に低かった。
７．異なるＡＰＩ用量にわたって腫瘍病変の異なる範囲のシグナルが認められた。これは、病変のタイプ、治療歴、腫瘍転移負荷のばらつき、ならびに被験者及び病変にまたがった予想されるＣＤ８＋ＴＩＬ密度のばらつきに関連すると考えられる。
８．病変のサイズ及びタイプが、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃシグナルに影響を及ぼし得る。例えば、リンパ節疾患における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みは、大きな病変（＞３０ｍｍ）よりも小さな病変（＜１０ｍｍ）でより高いシグナルを示す傾向にあり、ＴＡＣに基づけばより小さい病変でより速やかにプラトーに達する。しかしながら、非リンパ節疾患では、病変が大きくなるほどシグナルは高くなるが、シグナルのプラトーはリンパ節疾患と似ている。脾臓病変をサイズ分析から除外した場合でも、病変が大きくなるほどシグナルが高くなる同様のパターンは、０．５ｍｇのＡＰＩ用量で依然認められるが、１．５ｍｇの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ用量では認められない。したがって、これらの結果は注意して解釈する必要がある。次の相の試験でこれらの観察結果の更なる検討を行う必要があるかもしれない。
９．異なる解剖学的部位に位置する病変の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃシグナルは、他の解剖学的部位（２個の脾臓病変を除く）と比較して肝臓の病変において最も高い取り込みを示している。肝臓腫瘍内のシグナルのどの程度の寄与が、肺におけるより低い正常な取り込みと比較してより高い正常な８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの肝臓活性の部分容積効果からのカウントの「ｓｐｉｌｌ−ｉｎ（染み込み）」効果によるものかは不明である。
【１３７１】
これらの結果を合わせると、腫瘍病変における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの共局在化は多くの被験者で実現可能であることが示された。更に、腫瘍共局在化は、０．５ｍｇ及び１．５ｍｇのＡＰＩ用量の両方で認められ、どちらかの用量が他方と比べて明らかな利点があるわけではなく、多くの場合で２４〜４８時間に同様のシグナルのプラトーを示した。
【１３７２】
腫瘍：参照（大動脈−血液プール）活性
測定される８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴシグナルは、非特異的取り込み（組織血液体積割合、ならびに向上した浸透性及び保持率などの他の組織特性に依存する）及び標的化ＣＤ８＋受容体介在型の特異的取り込みの両方で構成される。ＰＥＴシグナルへのこれら２つの寄与を区別することが含まれてもよい。しかしながら、腫瘍取り込みと大動脈活性との比を評価することは、動脈入力関数に対して正規化することにより、非特異的取り込みの影響を低減するうえで役立ち得る。リンパ節疾患と非リンパ節疾患は同様のＴＡＣを示したが、特にリンパ節病変において時間の経過とともにより高い８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性を示した。これらの結果には、サイズ、ＡＰＩ用量レベル、または腫瘍のタイプに関係なく、すべての腫瘍病変が含まれた。これらの結果は、薬剤が体内から排出されるに従って非特異的取り込みが大動脈（動脈入力関数）活性と平行するはずであるため、特異的ＣＤ８＋ＴＩＬ結合が腫瘍部位で生じていることを示唆するものである。
【１３７３】
腫瘍病変及び参照組織における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みの結果の概要
上記の知見は、０．２ｍｇ〜１０．０ｍｇで試験されたすべての８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ用量で、ＣＤ８＋ＴＩＬリッチ集団及び腫瘍病変を有する両方の参照臓器組織がみられることを示している。ステージＩで５．０ｍｇ及び１０．０ｍｇの用量を試験して得られた結果は、これらのレベルにおける非ＣＤ８＋ＴＩＬリッチ組織の取り込みの増加、大動脈クリアランスの遅延、及び腫瘍内の低いＴ細胞密度の集団におけるＣＤ８＋ＴＩＬ受容体の潜在的ブロッキングを考慮すると、高いターゲット対バックグラウンドレベルを維持するうえで好ましくない条件を示した。更に、０．２ｍｇのＡＰＩ用量は、高いリンパ系組織の取り込み及びリンパ節可視化の両方のため、少なすぎる非標識ＡＰＩと感じられた。１．０ｍｇの用量は、脾臓及び骨髄で予想された取り込みを示したが、腫瘍の可視化も顕著なリンパ節取り込みも認められなかった。０．５ｍｇ及び１．５ｍｇのＡＰＩ療養を用いた用量拡大（ステージＩＩ）を行った。このステージでは、０．５ｍｇ及び１．５ｍｇのタンパク質用量は、１）リンパ系及び非ＣＤ８＋リッチ参照臓器組織内の好ましいシグナル、２）ＳＵＶ分析及び腫瘍：大動脈比の両方による２４時間までの好ましいＴＡＣＳ、及び３）リンパ節及び非リンパ節病変の両方における腫瘍共局在化を示した。１．５ｍｇのＡＰＩ用量レベルは、０．５ｍｇのＡＰＩ用量と比較してより高いシグナルを示す。これらの結果に基づけば、１．５ｍｇの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩ及び２４時間における画像の収集は、ＲＰ２Ｐの用量に適したオプションであった。０．５ｍｇの用量も、イメージングで許容される代替的な量とすることができる。
【１３７４】
１．５ｍｇの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩ用量は、低い非ＣＤ８＋リッチ臓器組織のバックグラウンド活性を維持しながら、リンパ系臓器及び腫瘍病変の可視化の点で好ましい特性を示した。注入の２４時間後までにリンパ節及び非リンパ節腫瘍病変が多くの被験者で可視化され、適切なバックグラウンド活性は第ＩＩ相試験でこの時点を用いることを推奨するためのエビデンスを与えるものである。０．５Ｍｇの用量も、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴイメージングで許容される代替的な量とすることができる。しかしながら、放射線量測定、生体内分布試験、及び安全性シグナルからの更なる情報を、ＲＰ２Ｄの最終選択を行う際に考慮する必要がある。このレポートに含まれる転移性固形悪性腫瘍を有する選択された患者における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴスキャンの第Ｉ相試験の結果は、ＣＤ８＋ＴＩＬ免疫系を可視化するうえでの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの大きな価値を示している。
【１３７５】
上記の第Ｉ相試験の更なる結果が図６２Ｎに示されており、図は、８９Ｚｒで標識された抗原結合コンストラクトが投与の６時間または６日間以内に標的（ＣＤ８）に結合する能力を示すＰＥＴスキャンを一般的に示している。
【１３７６】
第Ｉ相データの結果の概要を、様々な治療における様々な腫瘍をイメージングし、ＳＵＶ値を得てその値及びバックグラウンドシグナルの相対的考察から陽性または陰性の浸潤状態を判定する能力に関して、表８５．５に示す。
【１３７７】
【表１４−１】
2022501402.tif 000038
【表１４−２】
2022501402.tif 000039
【１３７８】
実施例８６−第ＩＩ相
【１３７９】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃは、ＣＤ８＋Ｔ細胞受容体に対するその特異性及び高い親和性、促進された血液クリアランス、不活性な免疫原性、ならびにエフェクター機能を維持した、ジルコニウム標識されたＣＤ８ミニボディである。ＩＡＢのファースト・イン・ヒューマン（Ｆｉｒｓｔ−ｉｎ−ヒトｍａｎ）第Ｉ相試験（治験番号２０１５−２２Ｍ２Ｃ−０１−２）の結果により、腫瘍病変及びリンパ系臓器の視覚化についてのイメージング特性を維持しながら、また、低い非ＣＤ８＋Ｔ細胞臓器組織のバックグラウンド活性を維持しながら、好ましい安全性プロファイル及び生体内分布が示された。第Ｉ（１）相試験では注入１〜２時間後の早い時間に腫瘍病変の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの共局在化が検出されたが、データの最終分析によれば、０．５ｍｇ〜１．５ｍｇのＡＰＩで３．０ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを使用して注入２４時間後に全身のＰＥＴイメージング収集を行うことが、第ＩＩ相試験の目的を追求するうえで有益なイメージング条件を与えると結論付けられた。
【１３８０】
第ＩＩ相試験の目的及び評価項目：
第ＩＩ相試験ＩＡＢ−ＣＤ８−２０１は、転移性固形腫瘍を有する患者における陽電子放出断層撮影／コンピュータ断層撮影（ＰＥＴ／ＣＴ）用の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの非盲検、複数用量試験とした。簡単に述べると、この試験の具体的な画像ベースの主目的及び副次的目的には以下が含まれた。
１．一次評価項目
ＳＵＶベースの定量的測定値（例えば、ＳＵＶ最大、ＳＵＶピーク、ＳＵＶ平均、及び腫瘍：参照比）及び生検試料からの免疫組織化学（ＩＨＣ）により測定されたＣＤ８＋ＴＩＬ測定値によって測定される、生検された腫瘍内の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みを分析する。
２．二次評価項目
・    来院３（ベースライン）及び来院７（治療下）における腫瘍病変、リンパ系臓器、及びＴ細胞リッチ組織を含む参照組織中の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの評価
・    腫瘍病変における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みのベースラインと治療下とＴ細胞リッチ組織を含む参照組織との間での潜在的変化の測定。
【１３８１】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャン分析を独立した中央イメージング判定により実施した。定量的ＩＨＣ分析及び定性的病理学的読影、ならびに実施された測定を用いた統計学的分析も同様に独立して行った。
イメージングのスケジュール
ＰＥＴ／ＣＴ及び画像分析用の画像誘導下生検スキャンデータの収集
【１３８２】
表８６．１に示されるイメージング来院スケジュールに概要が示されるように、全身の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴイメージングデータを注入後の最大３つの異なる時点で収集した。収集される強制的８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ画像には、１．５ｍｇのＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩで３．０±２０％ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入の２４±３時間後における、来院３（ＰＥＴベースラインと呼ぶ）及び来院７（ＰＥＴＴｘと呼ぶ）を含めた。来院５（ＰＥＴ５日目、任意選択のスキャン）の画像収集は、ＩＯＴの開始（来院４）の５〜７日後に実施することができる。本実施例のすべての画像は、すべての実施施設のすべてのスキャナーについて提供される、ＩＭに従った、ＮＭＣＴＧレポート（２）により与えられるスキャナー固有の収集パラメータに従って取得した。収集された画像は、ＩＲＣ（３）に示されるように更なる分析を行うために転送される。臨床試験分析に含まれるためには、被験者は、少なくとも１回の許容される８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴスキャンを受けていなければならない。
【１３８３】
【表１５】
2022501402.tif 000040
【１３８４】
画像収集のパラメータ
画像収集のパラメータ及び分析方法
ＩｍａｇｉｎＡｂ第ＩＩ相プロトコール番号ＩＡＢ−ＣＤ８−２０１における画像収集用の５人の患者で使用されたパラメータを下記の表８６．２に示す。
【１３８５】
【表１６】
2022501402.tif 000041
【１３８６】
画像分析の方法：
ＣＤ８  Ｔ細胞を測定するためのＩＨＣ分析の方法
上記に概要を示し（表８６．１）、第ＩＩ相プロトコールＩＡＢ−ＣＤ８−２０１にみられるように画像誘導下コア生検試料をベースライン（来院１）及び治療下の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャン（来院８）の０〜１４日後に採取した。生検試料が分析に含まれるためには、被験者は、少なくとも１回の許容される（診断品質）の生検試料を有していなければならない。採取した試料は、生検プロトコールに記載されるようにして送付した（５）。コア生検試料の病理組織学的分析を、ＢＩＯＣＡＲＥプロトコールマニュアルに概要が示される方法に従って行った。ＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントを、（ＣＤ８抗体［ＳＰ５７］）で染色したコア生検試料に対して自動化定量検出アルゴリズムを使用して測定した（６）。ＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントの結果を、画像誘導下生検において採取した総組織面積１平方ｍｍ当たりのＣＤ８＋細胞の平均数として報告した（７）。ＣＤ８＋Ｔ細胞染色及び腫瘍含量の定量的確認を、ＣＤ８＋Ｔ細胞のＩＨＣの解釈における専門知識を有する有資格病理学者により中央判定した。病理学的判定により得られたが、このレポートには含まれていない更なる情報としては、（１）ＣＤ８＋Ｔ細胞ベースのＨスコア、（２）組織試料の腫瘍及び壊死率（％）、（３）全組織試料中のＣＤ８  Ｔ細胞の割合（％）の推定、（４）ＣＤ８＋Ｔ細胞分布の位置、及び（５）ＣＤ８＋Ｔ細胞の腫瘍内分布に対する腫瘍辺縁分布に関する定量的結果が挙げられる。
【１３８７】
中央イメージング判定の設計及び方法
第ＩＩ相のＩＡＢ−ＣＤ８−２０１臨床試験における中央イメージング判定を、ＩＲＣに概要が示されるようにして単一読影者パラダイムを用いて実施した（３）。この分析を行うために選択された読影者は、公開されているＲＥＣＩＳＴ １．１基準の実践的な知識を含む適切な教育及び資格を有する、ＰＥＴ解釈及び８９Ｚｒイメージングにおける専門知識を備えた有資格の放射線科医及び核医学専門医である。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴ解釈の診断的解釈の専用の読影者訓練及び試験セッションを、第Ｉ相の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの臨床試験からの５つの試験ケーススタディーを用いたリモートオンライン訓練法を用いて実施した。
【１３８８】
このレポートに含まれる解釈読影を行うため、地域の研究施設が、安全な転送サービス（ＡＧＭｅｄＮｅｔ）を使用して、ＣＴ誘導下生検イメージングセッション（来院１及び来院８）からの非特定化されたＨＩＰＡＡ適合画像データセット及び来院３及び来院７からの対応する８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴを提出した。画像は、イメージングマニュアルに示されたパラメータに適合するように品質を確認した（９）。クエリフリーなスキャンを、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴスキャン及び従来のイメージングテストの解釈に使用されるように構成及び検証されたＰＥＴ分析用ワークステーション（ｍｉｎｔ Ｌｅｓｉｏｎ， ｖ３．２．３）に転送した。
【１３８９】
画像解釈を行うため、コア生検針の先端の配置を含む画像シリーズを含むＣＴ誘導下生検スキャンによって、ＣＴ誘導下生検画像上の標的病変（複数可）を特定した。
【１３９０】
特定後、読影者が、画像解釈及び分析を行うための適切な８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴスキャン上の病変生検の同じ領域を選択した。読影者に、ベースラインの生検誘導下画像とベースラインの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴを１回の読影セッションとして一緒に評価し、治療下の画像誘導下生検スキャンと治療下の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴスキャンを２回目の読影セッションとして評価するように指示した。
【１３９１】
定量的画像分析
来院３及び来院７からの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ画像の画像解釈には、放射性トレーサーの取り込みとＩＨＣ分析によって測定したＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントとの相関についての定量的結果を与える以下のステップが含まれた（図６３Ａ）。
１．生検ＣＴ上で生検腫瘍病変（複数可）を特定する。中央読影者が、生検ＣＴを判定して標的病変の位置、及びその病変内の生検針の位置を特定する必要がある。
２．８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴスキャン上の生検した病変の位置を特定する。
３．８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴスキャン上の生検腫瘍病変上の生検針が配置された位置にＶＯＩを描き(ＶＯＩに位置を割り当てる)、ＳＵＶベースの測定値を得る。
oＳＵＶ最大
oＳＵＶピーク
oＳＵＶ平均
４．各病変について、ＣＴＡＣ上の病変サイズの近似値及び参照組織のＳＵＶ測定値を含む質問票に記入する。参照組織のＳＵＶ平均を得るため、読影者は、胸部Ａｏ（ＶＯＩは、大動脈の管腔内に含まれていなければならず、直径約１．５ｃｍ３でなくともよい）、肝臓、脾臓、骨髄（Ｌ３椎体）、右傍脊椎筋（Ｌ３椎体における）に適切なサイズのＶＯＩを置くことにより、参照組織上にＲＯＩを描く必要がある。
【１３９２】
一次評価項目の統計的分析
生検した組織試料を、ベースラインの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴ及びＩＯＴ治療の前である来院１、及び治療下の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴの収集の０〜２週間後である来院８の２つの時点で取得した。
【１３９３】
生検した病変及び参照組織から収集されたすべての定量的ＰＥＴイメージングデータ（ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘ）の測定値に対して記述統計分析を行った。この記述統計分析には、算術平均、標準偏差、中央値、最大値、最小値、ならびに生検病変からのＳＵＶ値の第１及び第３四分位数（ＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク）及び参照組織（ＳＵＶ平均）の測定値が含まれる。
【１３９４】
更に、参照組織と比較した生検された病変の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの標的：参照（Ｔ：Ｒ）比を、各８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ時点（すなわちＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャン）における参照組織からのＳＵＶ平均に対する、生検された病変からのＳＵＶ最大及びＳＵＶピークについて計算した。Ｔ：Ｒ比の推定値に含めるために選択された参照組織には、大動脈、正常な肝臓、脾臓、正常な骨髄（Ｌ３椎骨で計算した）、及び右傍脊椎筋（Ｌ５椎体で計算した）が含まれる。回帰分析（ピアソン線形相関を用いた）を行って、ＩＨＣ測定値に関して参照組織からの活性によって正規化されたＳＵＶ最大とＳＵＶピークの測定値の関係を評価した。
【１３９５】
再帰分析（ピアソン線形相関を用いた）を行って、ＩＨＣで測定されたＣＤ８＋Ｔ細胞カウントをゴールドスタンダードとして用いて腫瘍病変内のＣＤ８＋Ｔ細胞の信頼性の高い指標としての８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴシグナルの診断性能のエビデンスを与えた。ＰＥＴイメージングの測定値と生検した病変からのＩＨＣとの相関を含む一次評価項目分析を行うため、ＰＥＴベースラインスキャンからのＳＵＶ最大及びＳＵＶピークをベースライン（来院１）生検からのＩＨＣ測定値と比較したのに対して、ＰＥＴＴｘスキャンからのＳＵＶピークは治療下（来院８）の生検と比較した。この分析で用いたＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントには、ＩＨＣ分析において報告された組織面積１平方ｍｍ当たりの平均のＣＤ８＋細胞のカウントが含まれた。統計的有意性はｐ値≦０．０５として定義した。オーバーフィッティングの補正は行わなかった。
【１３９６】
ベースラインから治療下の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃスキャンまでの参照組織の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの変化を評価するため、参照組織のＳＵＶ平均の測定値を、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの絶対変化及び変化率（％）の両方に基づいて計算した。生検された病変について、ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャンからのＳＵＶ最大及びＳＵＶピークを用いて、両方の生検セッションにおける組織サンプリングで同じ病変が選択されたという仮定の下、ベースラインからの絶対変化及び変化率（％）を計算した。この分析では、すべての生検は、ベースラインの被験者の左脳頭頂葉病変のみを例外として同じ病変からのものとした。
【１３９７】
結果及び分析
ベースライン及び治療下の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴスキャンの両方と生検を支障なく完了した５人の被験者すべてを表８６．３に示す。
【１３９８】
【表１７】
2022501402.tif 000042
【１３９９】
以下の点に留意されたい。
１．被験者ＢＡ：実施施設ＰＩとの個人的やりとりによって、ベースラインで皮質骨の部分（生検試料１）及び骨髄穿刺液（生検試料２）を含む同じ骨病変から２つの別々の生検を得た。試料の腫瘍組織が多く（試料２で９０％に対して試料１で４０％）、試料生検１において皮質骨を溶解するために必要とされる脱灰処理がＳＰ５７抗体によるＣＤ８＋Ｔ細胞の染色に影響する可能性があったことから、試料生検２からのＩＨＣ  ＣＤ８＋Ｔ細胞の結果をこのレポートに含めることを選択した。
２．被験者ＢＢ：ベースラインで異なる解剖学的位置からの２つの別々の組織試料を中央病理学判定用に提出した。試料生検１が左脳頭頂葉の転移性病変からのアーカイブ組織を含んだのに対して試料生検２は左肺上葉病変を含んだ。両方の試料及びそれらの対応する８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ病変分析の結果をこのレポートに含めた。
３．被験者ＢＡのベースライン（来院２）試験を除き、すべての被験者にベースライン及び治療下のスキャン注入来院の両方で３±２０ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを投与した。しかしながら、被験者ＢＡには、予想された３．０ｍＣｉ用量のうちの約１．４ｍＣｉを投与した。被験者ＢＡに対する低用量の注入にもよらず、画像品質は中央読影者により、合格として評価されたしかしながら、ＰＥＴベースラインスキャンの結果はこのレポートに含めた。
【１４００】
すべての生検試料はＢＩＯＣＡＲＥ  Ｍｅｄｉｃａｌに支障なく受領及び評価され、自動ＩＨＣ分析の結果は更なる統計的計算を行うためにＡＭＡＲＥＸに送付された。
ベースライン及び治療下のＰＥＴスキャンにおける参照組織の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込み
【１４０１】
ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャンにおける参照組織の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みを各被験者で評価した。参照組織は、肝臓、脾臓、骨髄（Ｌ３椎骨）、骨格筋（Ｌ５の右傍脊椎筋）及び大動脈を含む。表８６．４Ａは、各被験者の各参照領域においてＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘで測定されたＳＵＶ平均を示す。各スキャンについて、算術平均、標準偏差、中央値、及び四分位数（第１及び第３）、最小値及び最大値も示す。
【１４０２】
【表１８】
2022501402.tif 000043
【１４０３】
ベースライン及び治療下のＰＥＴスキャンにおける生検した病変の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込み
ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャンからの生検した病変の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みを各被験者で評価した。それぞれの生検した病変のＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク値を測定し、表８６．４Ｂに記録した。各参照領域について来院におけるすべての値について算術平均、標準偏差、中央値、及び四分位数（第１及び第３）を計算し、表に示した。
【１４０４】
【表１９】
2022501402.tif 000044
５人の被験者から採取したベースライン及び治療下の生検試料に行われたＩＨＣによるＣＤ８  Ｔ細胞分析の測定値
【１４０５】
ベースラインの来院１及び治療下の来院８で上記で報告された５人の被験者から受け取った生検試料に対してＩＨＣ分析を行った。このＩＨＣ分析から、総組織面積（平方ｍｍ）にわたったＣＤ８陽性細胞の総数を、下記表８６．５に示されるように各来院の各生検試料について評価した。
【１４０６】
【表２０】
2022501402.tif 000045
生検した病変のベースライン及び治療下のＰＥＴスキャンにおける、ＰＥＴ測定値ＳＵＶ最大、ＳＵＶピークを用いた８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みと、ＣＤ８  Ｔ細胞のＩＨＣ測定値との相関
【１４０７】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みとＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントとの間の関係を調べるため、ピアソンの「ｒ」相関を用いて、ＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャンにおける生検した病変からのＳＵＶ値（ＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク）と来院１及び来院８で収集されたＩＨＣ測定値との間で回帰分析を行った。表８６．６は、ベースライン及び治療下におけるＰＥＴ測定値とそれぞれのＩＣＨ測定値との間の相関分析（それぞれ、表８６．６Ａ及びＢ）ならびに合わせた結果（表８６．６Ｃ）を示す。分析は、ＳＵＶ最大及びＳＵＶピークに基づいた相関を含む。
【１４０８】
【表２１】
2022501402.tif 000046
【１４０９】
【表２２】
2022501402.tif 000047
【１４１０】
【表２３】
2022501402.tif 000048
【１４１１】
図６３Ｂ及び図６３Ｃは、回帰係数（ｒ２）を含むベースライン（ａ）及び治療下（ｂ）の生検試料のＳＵＶベースの測定値（ＳＵＶ最大及びＳＵＶピーク）と平均のＣＤ８＋Ｔ細胞カウントとの間の線形の関係を示す。
図６３Ｄは、ＳＵＶ最大（ａ）及びＳＵＶピーク（ｂ）についてベースラインと治療下の結果を一緒にプロットした場合の回帰係数（ｒ２）を含む線形の関係を示す。ベースラインの被験者ＢＡのＳＵＶ値が図に含まれている点に留意されたい。
【１４１２】
標的 （生検した病変）：参照組織比
ベースラインの生検病変のＳＵＶ最大と参照組織のＳＵＶ平均との間のＳＵＶ比の平均及び標準偏差は、それぞれ、１．８３±０．７４（大動脈）、０．４７±０．２６（肝臓）、０．０６±０．０２（脾臓）、０．５２±０．２０（骨髄）及び３．１０±１．６８（筋肉）である。同様に、大動脈、肝臓、脾臓、骨髄（Ｌ３椎骨）、及び右傍脊椎筋Ｌ５を用いた治療下の生検病変のＳＵＶ最大と参照組織のＳＵＶ平均との間のＳＵＶ比の平均及び標準偏差は、それぞれ、１．１０±０．８３（大動脈）、０．３０±０．２６（肝臓）、０．０４±０．０２（脾臓）、０．３２±０．２２（骨髄）及び１．９２±１．２８（筋肉）である。
【１４１３】
病変のＳＵＶピーク：参照のＳＵＶ平均を用いて上記と同様の計算を行った。平均及び標準偏差は、それぞれ、１．５４±０．６９ （大動脈）、０．３９±０．１７（肝臓）、０．０５±０．０２（脾臓）、０．４３±０．１８（骨髄）及び２．４６±１．３２（筋肉）である。同様に、平均及び標準偏差の治療下の腫瘍：参照比は、それぞれ、１．０７±０．４７（大動脈）、０．２７±０．１２（肝臓）、０．０４±０．０２（脾臓）、０．３０±０．１２（骨髄）及び１．７３±０．９１（筋肉）である。
【１４１４】
表８６．７（Ａ及びＢ）は、各データポイントを分析の独立した変数として用いた、ＳＵＶ比（ＳＵＶ最大／ＳＵＶ平均またはＳＵＶピーク／ＳＵＶ平均）により表されるＰＥＴ測定値と、ＰＥＴベースライン／Ｔｘとすべての生検と組み合わせた結果のＩＨＣ測定値との間の相関分析を示す。
【１４１５】
【表２４】
2022501402.tif 000049
【１４１６】
【表２５】
2022501402.tif 000050
【１４１７】
参照組織及び生検した病変における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの変化
表８６．８及び表８６．９は、それぞれ、生検した病変及び参照組織の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの絶対変化及び変化率（％）を示す。生検した病変についてはＳＵＶ最大及びＳＵＶピークの両方の値の変化を計算したのに対して、参照組織ではＳＵＶ平均の値を用いた。病変分析の表に含めるためには、ベースライン及び治療下で同じ病変を生検する必要がある点に留意されたい。そのため、左脳頭頂葉転移は含まれなかった。更に、被験者の腹膜のベースラインにおけるＳＵＶピークは、極めて低いＳＵＶ（０．０２）のために、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの推定の信頼性が低くなることから含めなかった。
【１４１８】
【表２６】
2022501402.tif 000051
【１４１９】
【表２７】
2022501402.tif 000052
【１４２０】
【表２８】
2022501402.tif 000053
【１４２１】
本実施例は、ベースライン及び治療下のＰＥＴ／ＣＴスキャン及び同時に腫瘍病変の生検を行った５人の被験者から生検した腫瘍試料中のＣＤ８＋Ｔ細胞を検出するための８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴの診断性能の最初の分析を与えるものである。本実施例に含まれる更なる情報には、選択された参照組織中の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの測定値、及びベースラインと治療下のスキャンの間の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの変化が含まれる。
【１４２２】
表８６．３は、最初の５人の被験者におけるＰＥＴ及びＩＨＣによるＣＤ８＋Ｔ細胞の評価を行うための生検病変の腫瘍タイプ及び位置の概要を示す。５人の被験者のうち、３人が転移性非小細胞肺癌を有し、２人が転移性腎細胞癌を有した。このレポートのすべての被験者はＣＡＲＴＩに組み入れられ、８９ＺｒのＰＥＴイメージングに対して特別に適合された人体測定用ファントムを使用してＮＭＣＴＧによって適格とされた同じＰＥＴ／ＣＴシステムでイメージングを行った。この点に関し、患者及び時点間でのＰＥＴスキャナーの問題による８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みの変動性が潜在的に最小化された。被験者に、ベースラインで約１．４ｍＣｉの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを投与した。その結果、静脈内投与されたＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＡＰＩは１．５ｍｇよりも少なかった。それにもかかわらず、画像品質は、この情報に対して盲検化された中央判定者によって合格とみなされた。
【１４２３】
５人の被験者からの生検試料の位置には、肺腫瘍（ｎ＝２、被験者ＮＢＢ及びＢＥ）、骨病変（ｎ＝２、被験者ＢＡ及びＢＤ）、脳転移（ｎ＝１、ベースラインの被験者ＢＢ）、及び腹膜転移（ｎ＝１、被験者ＢＣ）が含まれた。特記すべき点として、被験者ＢＡは、右腸骨転移を有しており、ベースラインで骨生検及び骨髄穿刺を行った。その後の試料からのＣＤ８＋Ｔ細胞のＩＨＣの結果を用いて、このレポートの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みとの相関を調べた。これは、第１の試料中の骨梁の脱灰がＣＤ８＋Ｔ細胞の結合を妨げる可能性があり、第１の試料と比較して第２の試料は採取された組織のより大きな領域にわたってより多くの腫瘍細胞を含んでいた（すなわち、それぞれ、４０％の腫瘍細胞に対して９０％の腫瘍細胞）という病理学者による指摘に基づいたものである。
【１４２４】
ＰＥＴ測定とＣＤ８  Ｔ細胞のカウントのＩＨＣ測定値との相関
表８６．６及び図６３Ｂ〜図６３Ｄは、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みとＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントとの相関を示している。表８６．６Ｃ及び図６３Ｄから理解されるように、ベースラインＰＥＴからのものかまたは治療下ＰＥＴからのものかに関係なく、すべての生検病変が分析に含まれる場合、ＳＵＶ最大とＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントとの間に正の相関がみられる（ピアソンのｒ＝０．５、ｐ値＝０．０９、ｒ２＝０．２）。同様に、ＳＵＶピークの取り込みとＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントとは、ＳＵＶ最大ほどロバストではないが正の相関を示す傾向にある（ピアソンのｒ＝０．５、ｐ値＝０．１４、ｒ２＝０．２１８６）。
【１４２５】
更に、ＰＥＴｔｘのＳＵＶ最大及びＳＵＶピークの取り込みとＳＵＶ最大の測定値における治療下のＣＤ８＋Ｔ細胞カウントとの間には正の相関がみられた(ＳＵＶ最大では、ピアソンのｒ＝０．８、ｐ値＝０．１０、ｒ２＝０．６に対して、ＳＵＶピークでは、ピアソンのｒ＝０．８、ｐ値＝０．１１、ｒ２＝０．６)。ＰＥＴベースラインのＳＵＶ最大の測定値とＣＤ８＋Ｔ細胞カウント（ピアソンのｒ＝０．４、ｐ値＝０．４８、ｒ２＝０．１）と、ＳＵＶピーク（ピアソンのｒ＝０．４、ｐ値＝０．４８、ｒ２＝０．１）との間にはそれほどロバストでない相関が認められた。被験者ＢＡのベースラインのＳＵＢ病変の測定値を除外した場合に相関統計の改善が認められた（ここにデータは示さないがフォローレポートには含まれる）。
【１４２６】
８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴによるＣＤ８  Ｔ細胞の検出性の閾値は、第ＩＩ相試験の目的の１つである。図８６Ｂ〜８６Ｄの線形回帰グラフを検討したところ、ＣＤ８  Ｔ細胞のカウントがおよそ１５０個／ｍｍ２以上である場合、ベースラインでより低用量の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを注入した被験者で認識されている問題にもよらず、これらのデータポイントは１５０個／ｍｍ２未満のデータポイントよりも回帰直線のより近くに位置する傾向があることが示された。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴによるＣＤ８＋Ｔ細胞を検出するための最終閾値は、より多くの被験者及び生検試料から利するものと考えられる。
【１４２７】
生検した病変及び参照組織における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みの結果の概要
本実施例では、参照組織の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの測定された取り込み、及びＰＥＴＴｘとＰＥＴベースラインとの間の参照組織における変化について述べる。実施例８５の結果と一致して、腫瘍病変及び参照組織における放射性トレーサーの取り込みは、定量的視点から、及び以前に報告されている値の範囲内の両方で同様であった（１）。しかしながら、この試験は、ＩＯＴの前後で腫瘍及び参照組織における取り込みの変化を評価するように設計されたものである。この点に関し、表８６．４及び表８６．８及び表８６．９は、ＰＥＴベースラインとＰＥＴＴｘスキャンの間で認められる変化を強調している。一般に、参照組織における取り込みの値は、ベースラインにおけるよりも治療下のスキャンでより高い傾向にあり、わずかな変化（脾臓組織における９．１％）からそれぞれ、骨髄及び肝臓における２２．０及び２８．４％の範囲にわたる。胸大動脈及び筋肉の取り込みもそれぞれ２８．８％及び５６．５％だけより高かった。しかしながら、各スキャン間の絶対変化はそれほど顕著ではなく、特にこれらの後の２つの参照組織における平均絶対差は０．５ＳＵＶ単位未満であった。
【１４２８】
平均のＳＵＶｒは、ベースライン及び治療下のデータからのＳＵＶ最大及びＳＵＶピークを用いるかどうかによらず、同様であった。ＳＵＶｒ値は、標的領域のＰＥＴ取り込みの測定値を正規化するためにしばしば用いられる。これらの値を回帰に用いた場合（表８６．７Ａ及びＢ）、脾臓からのＳＵＶ平均で割ったＳＵＶ最大及びＳＵＶピークはどちらも、他の参照組織を用いて行った相関の結果と比較して両方に対して最も高いｒ値０．６との相関を示している。参照として脾臓を用いた相関も、低いｐ値（ｐ＜０．０５）で有意な関係を示した。骨髄または大動脈などの他の参照領域を用いた場合、ＳＵＶ最大（骨髄：ピアソンのｒ＝０．５、ｐ＝０．１９、大動脈：ピアソンのｒ＝０．４、ｐ＝０．１８）及びＳＵＶピーク（骨髄：ピアソンのｒ＝０．５、ｐ＝０．１１、大動脈：ピアソンのｒ＝０．４、ｐ＝０．１６）の両方で正の相関が観察された。参照組織としての骨髄に対してＳＵＶ最大を用いて計算した比は、相関係数０．５（脾臓に次ぎ、２番目によい値）を与え、ｐ値は有意性に向かう傾向を示した（０．０５＜ｐ＜０．１０）。
【１４２９】
これらの結果を解釈するうえで留意しなければならないいくつかの考慮事項がある。このデータセットは比較的小さい。本実施例では、ＩＨＣデータ相関用の腫瘍組織試料を与えるためにコア生検を用いている。コア生検試料は総腫瘍マスのわずかな割合にしか相当しないため、この方法は、全腫瘍内の細胞マス及び細胞分布の誤った表現を含むサンプリングエラーにつながり得る。今回のイメージング分析方法は、中央ＰＥＴ読影者に対して腫瘍内の生検針が見える部分の周囲の領域にＲＯＩ分析を制限することを要求することによって、この制約を補完しようとするものである。このアプローチは、腫瘍の隔離した部分の両方のＳＵＶのシグナルの変動性の増大、ならびにコア生検試料が取得されたＰＥＴ／ＣＴ上の正確な位置にＲＯＩを配置する際の不確定性につながり得る。被験者ＢＡ及びＢＣなどの一部の例では、病変のサイズが小さいため、病変全体を８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴスキャン上で評価した。他の例では、病変の一部のみをＲＯＩに含めた。腫瘍全体の体積を含むように生検病変の分析を変更する別の方法が検討されている。
【１４３０】
今までにイメージングされた最初の５人で認められた更なる観察としては、
１．８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの反復注入による薬剤関連ＳＡＥは報告されていない。安全性の監視は継続されている。
２．画像の品質及びプロトコールに対する適合性は画像収集を必要とし、処理はＩＭの中央コア検査機関の指示によって効果的に実行された。
３．８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ活性の分布は第Ｉ相でみられたものと同じ取り込みのパターンに従っているようであり、ベースラインと治療下のスキャンの間で参照組織の取り込みにおける８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みのパターンに明らかな変化はない。
４．ベースラインと治療下のスキャンの間で腫瘍病変及びリンパ節における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みのダイナミックレンジが引き続きみられる。
５．ＲＣＣを有する被験者の骨病変及び腹膜転移における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みは中央読影者によりベースライン及び治療下のスキャンの両方について陰性として解釈されたのに対して、肺病変における取り込みはＮＳＣＬＣを有する両方の被験者で陽性と解釈された。
６．１人の被験者で、ベースラインと比較して治療下の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴスキャン上で所属リンパ節（縦隔）に新たな、かつ増加する取り込みがみられ、原発性腫瘍病変中の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの量は療法後に増加したようであった。
７．ＣＡＲＴＩの地域のＰＩとのディスカッションにより、一部の被験者（陰性、陽性のＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャンの両方を有するもの）はＩＯＴに応答しなかったのに対して、被験者ＢＢ（陽性のＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャンを有する）は治療に応答した点が指摘された。更に、被験者ＢＥは臨床的疑似進行を生じたが（陽性のＰＥＴベースライン及びＰＥＴＴｘスキャン）、緩和ケアを受けることを選択した。ＢＤについては今回の臨床情報はない。
【１４３１】
本実施例で示された結果は、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの反復投与によって高品質の全身の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャンが得られることを示すものである。単純なＳＵＶ法と、ＩＨＣによるＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントを用いた８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込み間の正の相関は、生検した病変のすべてで統計的有意性に向かう傾向を示し、治療下のデータポイントではより強い相関がみられた。更に、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込み及び組織に関しての知見は、第Ｉ相の結果と同様である。今回のデータは、がんを有する人でＣＤ８＋Ｔ細胞を検出する８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの能力を実証するうえで極めて有望である。
参考文献
１．Ｐａｎｄｉｔ−Ｔａｓｋａｒ  Ｎ．，ｅｔ．ａｌ．  Ｆｉｒｓｔ−ｉｎ−ヒトｍａｎ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｗｉｔｈ  ８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ａｎｔｉ−ＣＤ８  ｍｉｎｉ−ｂｏｄｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｏｌｉｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ：ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｌｅｓｉｏｎ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ．  ＪＮＭ  ２０１９：（ａｃｃｅｐｔｅｄ  ｆｏｒ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ）．
２．ＮＭＣＴＧ  Ａ  ｓｃａｎｎｅｒ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｒｅｐｏｒｔ  ｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  ＮＭＣＴＧ  ａｓ  ａ  ｐａｒｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｃａｎｎｅｒ  ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｐｒｏｃｅｓｓ，ＡＭＡＲＥＸ  ＴＭＦ  Ｓｉｔｅ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ２．１０．３  ＳＩＩＳＡ
３．Ｉｍａｇｅ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｃｈａｒｔｅｒ  “ＩＡ０１０＿ＩＲＣ”  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．０  ｄａｔｅｄ  ２９Ｊｕｌ２０１９  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｅｎｄｐｏｉｎｔ．
４．Ｉｍａｇｅ  Ｇｕｉｄｅｄ  Ｂｉｏｐｓｙ  Ｍａｎｕａｌ  “ＩＡ０１０１−ＩＧＢＭ”  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０  ｄａｔｅｄ  １５Ａｕｇ２０１９  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｅｎｄｐｏｉｎｔ．
５．ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  Ｓｈｉｐｐｉｎｇ  Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０  Ｄａｔｅ  １５ＦＥＢ２０１９  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  ＩｍａｇｉｎＡｂ．
６．Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  Ｒｅｐｏｒｔ  “ＣＤ８  ［ＳＰ５７］  Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＩＨＣ  Ａｓｓａｙ  Ｓｔａｉｎｉｎｇ−ＩｍａｇｉｎＡｂ”  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．０  ｄａｔｅｄ  ３ＭＡＲ２０１９  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  ＢＩＯＣＡＲＥ  Ｍｅｄｉｃａｌ．
７．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｆｏｒ  ＣＤ８  ａｎｄ  Ｈ−ｓｃｏｒｅ  Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｒｅｐｏｒｔ  ＢＣＭ  ＩＡＢ−ＣＤ８−２０１／０２  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．０  ｄａｔｅｄ  ８ＭＡＲ２０１９  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  ＢＩＯＣＡＲＥ  Ｍｅｄｉｃａｌ．
８．Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ，Ｅ．，Ｔｈｅｒａｓｓｅ，Ｐ．，Ｂｏｇａｅｒｔｓ，Ｊ．，ｅｔ．ａｌ．  Ｎｅｗ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ  ＲＥＣＩＳＴ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  （ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１）．  ２００９  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．  ２００８；４５：（９７−１１０）．
９．Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｍａｎｕａｌ  “ＩＡ０１０−ＩＭ”  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．０  ｄａｔｅｄ  １４ＳＥＰ２０１８  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｅｎｄｐｏｉｎｔ．
【１４３２】
実施例８６からの個々の被験者の測定値の概要
表８６．１０は、各被験者について生検した病変のすべてのＳＵＶ最大及びＳＵＶピークの値を示す。また、ベースライン及び治療下における８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴについて各患者のすべての参照組織のＳＵＶ平均の値も示す。また、各患者のベースライン及び治療下のＩＨＣ分析の測定値も示す。
【１４３３】
【表２９−１】
2022501402.tif 000054
【表２９−２】
2022501402.tif 000055
【表２９−３】
2022501402.tif 000056
【表２９−４】
2022501402.tif 000057
【表２９−５】
2022501402.tif 000058
【表２９−６】
2022501402.tif 000059
【表２９−７】
2022501402.tif 000060
【表２９−８】
2022501402.tif 000061
【表２９−９】
2022501402.tif 000062
【表２９−１０】
2022501402.tif 000063
【１４３４】
本実施例からの更なるＰＥＴ画像が図６４Ｄ〜図６４Ｆに示されている。
【１４３５】
レスポンダー画像が図６４Ｄに示されている（第ＩＩ相、ＩＡＢ−ＣＤ８−２０１、レスポンダー：患者ＢＥ、腫瘍タイプ：ＮＳＣＬＣ、治療タイプ：オプジーボ）。非小細胞肺癌を診断された６０才被験者。画像は、オプジーボ療法の開始の前（治療前）及び開始後の１か月以内（治療下）で、１１１±２０％ＭＢｑの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入の２４±３時間後に収集した。８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ融合画像は、生検した左肺上葉腫瘍の取り込みを示し（白い丸；病変は３ｃｍ以上の病変）、治療前の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みが治療下で増加している。ベースライン及び治療下の取り込みを、視覚評価スコア３（Ｌ３で算出された正常椎骨と同等）のものを陽性として視覚的に評価した。これらの画像に使用したグレーのカラースケールは、ＳＵＶの下限値０〜ＳＵＶの上限値５までの範囲である。
【１４３６】
図６４Ｅは、異なる治療の有効性を試験するためにミニボディコンストラクトを使用した結果を示すＰＥＴスキャン及び融合ＰＥＴ／ＣＴスキャンである。画像は、転移性非小細胞肺癌を診断された７５才の男性のベースライン及び治療下（キイトルーダ、カルボプラチン、パクリタキセル）からの軸位断融合ＰＥＴ／ＣＴ画像である。画像は、１１１±２０％ＭＢｑの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入の２４±３時間後に収集した。矢印は、左上肺の３ｃｍよりも大きい転移性病変を示す。この病変をベースライン及び治療下で生検した。ベースライン及び治療下の取り込みを、視覚評価スコア２（大動脈と骨髄との間の取り込み（Ｌ３正常椎骨で算出））のものを陽性として視覚的に評価した。したがって、これは、本発明のミニボディを使用したイメージングがＩＯＴ療法の有効性を判定できることを実証するものである。
【１４３７】
ノンレスポンダーの画像が図６４Ｆに示されている（患者ＢＣ、腫瘍タイプ：ＲＣＣ、治療タイプ：オプジーボ、第ＩＩ相、ＩＡＢ−ＣＤ８−２０１）。ノンレスポンダーは、転移性腎細胞癌を診断された６７才被験者であった。画像は、オプジーボ療法の開始の前（治療前）及び開始後の１か月以内（治療下）で、１１１±２０％ＭＢｑの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの注入の２４±３時間後に収集した。
【１４３８】
表８６．１１及び表８６．１２は、判定を容易にするための被験者の画像評価（ＳＵＶ値及びＣＤ８＋細胞の数）及び被験者に行った治療の概要を示す。表８６．１２に示されるように、本方法は、レスポンダーとノンレスポンダーとを識別することを可能とする。
【１４３９】
【表３０】
2022501402.tif 000064
【１４４０】
【表３１】
2022501402.tif 000065
【１４４１】
実施例８７−画像分析
【１４４２】
本実施例は、画像分析のオプションについて概要を述べる。
【１４４３】
画像解釈を行うため、コア生検針の先端の配置を含む画像シリーズを含むＣＴ誘導下生検スキャンによって、ＣＴ誘導下生検画像上の標的病変（複数可）を特定した。特定後、読影者が、画像解釈及び分析を行うための適切な８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴスキャン上の同じ病変を選択した。読影者に、ベースラインの生検誘導下画像とベースラインの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴを１回の読影セッションとして一緒に評価し、治療下の画像誘導下生検スキャンと治療下の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２ＣのＰＥＴ／ＣＴスキャンを２回目の読影セッションとして評価するように指示した。
【１４４４】
定性的画像分析
【１４４５】
以下に、参照組織の取り込みを考慮に入れない、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの定性的な一般化された病変取り込みのプロセスの概要を示す。このアプローチでは、読影者は、病変を以下のように評価するように訓練された。
・    陽性（生検した病変に何らかの取り込みが認められる）
・    陰性（生検した病変に取り込みが認められない）
・    不確か（生検した病変の取り込みが不確か）
このアプローチは、放射線医及び核医学専門医によって腫瘍学（５）被験者におけるＦＤＧ−ＰＥＴスキャンを解釈するために使用されている方法（複数可）に似ている。
以下に、選択された参照組織と比較した８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの病変取り込みに基づく視覚スコアスケールを考慮に入れない、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの一般化された病変取り込みのプロセスの概要を示す。このスケールは、Ｌｕｇａｎｏ基準にみられるＤｅａｕｖｉｌｌｅ基準（６）に従ったリンパ腫の分析においてＦＤＧ  ＰＥＴスキャンに使用されるものと同様のアプローチに基づいて構築されたものである。この８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ取り込みの評価システムでは、以下の定義に従って１〜５点のスコアを生検した病変に割り当てた。
・    ＶＳ１＝取り込み＜血液プール（大動脈）；
・    ＶＳ２＝大動脈＜取り込み＜正常なＬ３椎体；
・    ＶＳ３＝取り込みが骨髄に等しい（正常なＬ３椎体）；
・    ＶＳ４＝取り込み＞正常なＬ３椎体
・    ＶＳ５＝取り込み＞＞正常なＬ３椎体
これらの参照組織は、これらの解剖学的部位のそれぞれにみられる低い（大動脈）〜高い（骨髄）ＣＤ８＋Ｔ細胞濃度の範囲を与えるためのものである。
定量的画像分析
治療前及び治療下からの８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ画像の画像解釈には、放射性トレーサーの取り込みとＩＨＣ分析によって測定したＣＤ８＋Ｔ細胞のカウントとの相関についての定量的結果を与える以下のステップが含まれた。
１．１．１．ＣＴ誘導下生検を行った８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴ上の治療前または治療下の腫瘍病変を特定する。
１．１．２．ＣＴＡＣで生検病変の病変サイズを推定する（将来的な分析用に病変をサイズによっても層別化して（＜３ｃｍまたは＞３ｃｍ）、病変のサイズがＰＥＴスキャン上で８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃの取り込みにどのように影響し得るかについて理解を深める。腫瘍増殖速度は被験者間で異なり得るため、８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ  ＰＥＴ／ＣＴスキャンからのＣＴＡＣによる病変サイズは、腫瘍病変の最も近いサイズ推定値を表すはずである。しかしながら、ＣＴＡＣスキャンは、診断ＣＴまたはＭＲＩと比較して正確な病変サイズの測定値について充分な診断品質のものではない場合がある。）。
１．１．３．生検腫瘍病変の周りにＶＯＩを描いて以下のＳＵＶベースの測定値を得る。
１．ＳＵＶ最大
２．ＳＵＶピーク
３．ＳＵＶ平均
４．ＣＤ８  ＳＵＶ負荷（ＳＵＶ平均×等輪郭体積（Ｉｓｏｃｏｎｔｏｕｒ  ｖｏｌｕｍｅ））
２．２．４  終了後、直径約３ｃｍのＶＯＩを参照組織上に置いてＳＵＶ平均の値を得る。参照組織には、胸部Ａｏ（ＶＯＩは大動脈の管腔内に含まれていなければならず、直径約３ｃｍでなくともよい）、肝臓、脾臓、骨髄（Ｌ３椎体）、右傍脊椎筋（Ｌ５椎体における）が含まれる。
表８７．１は、画像収集パラメータの概要を示す。
【１４４６】
【表３２】
2022501402.tif 000066
本実施例の参考文献
１．２．Ｐａｎｄｉｔ−Ｔａｓｋａｒ  Ｎ．，ｅｔ．ａｌ．  Ｆｉｒｓｔ−ｉｎ−ヒトｍａｎ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｗｉｔｈ  ８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡｂ２２ｍ＠ｃ  ａｎｔｉ−ＣＤ８  ｍｉｎｉ−ｂｏｄｙ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｏｌｉｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ：ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，ｂｉｏｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｌｅｓｉｏｎ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ．  ＪＮＭ  ２０１９：（ｉｎ  ｐｒｅｓｓ）．
１．３．Ｉｍａｇｅ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｃｈａｒｔｅｒ  “ＩＡ０１０＿ＩＲＣ”  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．０  ｄａｔｅｄ  ２９Ｊｕｌ２０１９  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｅｎｄｐｏｉｎｔ．
１．４．Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒ，Ｅ．，Ｔｈｅｒａｓｓｅ，Ｐ．，Ｂｏｇａｅｒｔｓ，Ｊ．，ｅｔ．ａｌ．  Ｎｅｗ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ  ＲＥＣＩＳＴ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  （ｖｅｒｓｉｏｎ  １．１）．  ２００９  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．  ２００８；４５：（９７−１１０）．
１．５．Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｍａｎｕａｌ  “ＩＡ０１０−ＩＭ”  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １．０  ｄａｔｅｄ  １４ＳＥＰ２０１８  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ｂｙ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｅｎｄｐｏｉｎｔ．
１．６．Ｈｏｆｆｍａｎ  ＭＳ．，ａｎｄ  Ｈｉｃｋｓ  ＲＪ．  Ｈｏｗ  ｗｅ  ｒｅａｄ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｃ  ＦＤＧ  ＰＥＴ／ＣＴ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｇ．  ２０１６；１６  ：３５
１．７．Ｂａｒｒｉｎｇｔｏｎ  ＳＦ．，ａｎｄ  Ｋｌｕｇｅ  Ｒ．  ＦＤＧ  ＰＥＴ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ  ｉｎ  Ｈｏｄｇｋｉｎ  ａｎｄ  ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ  ｌｙｍｐｈｏｍａｓ  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｕｃｌ．  Ｍｅｄ  Ｍｏｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ．  ２０１７；４４（Ｓｕｐｐｌ  １）：９７−１１０
【１４４７】
実施例８８
本実施例からの更なるＰＥＴ画像が図６４Ｄ〜図６４Ｆに示されている。
【１４４８】
図６４Ａは、いくつかの異なる時点にわたる２人の被験者からのＰＥＴ画像を示す。ＣＤ８抗原結合分子と関連付けられた追加の検出可能なマーカーからの丸で囲われた位置のシグナルの増加を観察することができる。
【１４４９】
図６４Ｂ及び図６４Ｃは、腫瘍微小環境をより完全に特徴付けるためのＦＤＧのＰＥＴとＣＤ８のＰＥＴとの組み合わせを示す。図に示されるように、ＦＤＧは腫瘍を特定する目的で使用することができるのに対して、ＣＤ８抗原結合コンストラクトは浸潤を判定する目的で使用することができる。
実施例８９−１．０ｍＣｉ以下の投薬
実施例１０の方法に調整を加えて用いることで、注入の時点で患者に投与される用量が約０．５ｍＣｉ、約０．７５ｍＣｉ、または約１．０ｍＣｉとなるように（それぞれの場合で＋２０％の放射線）８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ製剤を調製する。非放射性の結合されていないＩＡＢ２２Ｍ２Ｃ及び製剤バッファーを含む、投与される用量の他のすべての成分は同じとする。患者への投与の実施施設から地理的に離れている場合がある一般的な中央製造施設からの出荷要件のため、製造時の放射線量は投与される線量よりも大幅に高くなっていることが観察される。
異なる患者に、実施例７〜９に概要を示すような用量の８９Ｚｒ−Ｄｆ−ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃを投与する。患者のイメージングを、好ましくは投与の２〜２４時間後、最も好ましくは投与の２〜６時間後に行う。
それぞれの場合で＋２０％である、約０．５ｍＣｉ、約０．７５ｍＣｉ、または約１．０ｍＣｉの低い用量の利点は、１）与えられる全体の放射線量がより低いことによる患者の安全性の向上、２）イメージングセンターへの１日の来院の間に投与とイメージングを行うことを可能とする速やかなイメージング、３）製造の柔軟性の向上（これにより、必要な最終線量がより低いため、不測の配達の遅れに対応することができる）、４）本明細書の他の部分に記載される診断及び治療の洞察と同等な、またはこれを与えるのに少なくとも不適切ではないイメージングの結果、及び当業者には明らかであろう他の理由の点から顕著である。
【図１Ａ】
2022501402.tif 000067
【図１Ｂ】
2022501402.tif 000068
【図１Ｃ】
2022501402.tif 000069
【図２Ａ】
2022501402.tif 000070
【図２Ｂ】
2022501402.tif 000071
【図３Ａ】
2022501402.tif 000072
【図３Ｂ】
2022501402.tif 000073
【図４】
2022501402.tif 000074
【図５】
2022501402.tif 000075
【図６】
2022501402.tif 000076
【図７】
2022501402.tif 000077
【図８】
2022501402.tif 000078
【図９】
2022501402.tif 000079
【図１０】
2022501402.tif 000080
【図１１】
2022501402.tif 000081
【図１２Ａ】
2022501402.tif 000082
【図１２Ｂ−１】
2022501402.tif 000083
【図１２Ｂ−２】
2022501402.tif 000084
【図１２Ｃ】
2022501402.tif 000085
【図１２Ｄ】
2022501402.tif 000086
【図１２Ｅ】
2022501402.tif 000087
【図１２Ｆ】
2022501402.tif 000088
【図１２Ｇ】
2022501402.tif 000089
【図１２Ｈ】
2022501402.tif 000090
【図１２Ｉ】
2022501402.tif 000091
【図１３】
2022501402.tif 000092
【図１４】
2022501402.tif 000093
【図１５】
2022501402.tif 000094
【図１６】
2022501402.tif 000095
【図１７Ａ】
2022501402.tif 000096
【図１７Ｂ】
2022501402.tif 000097
【図１７Ｃ】
2022501402.tif 000098
【図１８】
2022501402.tif 000099
【図１９Ａ】
2022501402.tif 000100
【図１９Ｂ】
2022501402.tif 000101
【図１９Ｃ】
2022501402.tif 000102
【図１９Ｄ】
2022501402.tif 000103
【図１９Ｅ】
2022501402.tif 000104
【図２０】
2022501402.tif 000105
【図２１】
2022501402.tif 000106
【図２２】
2022501402.tif 000107
【図２３−１】
2022501402.tif 000108
【図２３−２】
2022501402.tif 000109
【図２４】
2022501402.tif 000110
【図２５】
2022501402.tif 000111
【図２６−１】
2022501402.tif 000112
【図２６−２】
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【図２６−３】
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【図２７−１】
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【図２７−２】
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【図２８−１】
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【図２８−２】
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【図２９−１】
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【図２９−２】
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【図３０−１】
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【図３０−２】
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【図３１−１】
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【図３１−２】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図６２Ａ】
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【図６２Ｂ】
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【図６２Ｃ】
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【図６２Ｄ】
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【図６２Ｅ】
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【図６２Ｆ】
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【図６２Ｇ】
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【図６２Ｈ】
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【図６２Ｉ】
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【図６２Ｊ】
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【図６２Ｋ】
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【図６２Ｌ】
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【図６２Ｍ】
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【図６２Ｎ】
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【図６３Ａ】
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【図６３Ｂ】
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【図６３Ｃ】
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【図６３Ｄ】
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【図６４Ａ】
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【図６４Ｂ】
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【図６４Ｃ】
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【図６４Ｄ】
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【図６４Ｅ】
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【図６４Ｆ】
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【配列表】
2022501402000001.app
【国際調査報告】
2022501402.tif 000179
2022501402.tif 000180
2022501402.tif 000181