(57)【要約】 【解決手段】  本開示は、関節痛の治療のための医薬組成物に関するものである。この組成物は、１種または複数種のリン脂質を含む脂質混合物、及び有効量の治療剤またはその薬学的に許容される塩を含み、前記医薬組成物中のリン脂質の総量は、約２０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、任意に７０ｍＭ〜１１０ｍＭである。また、関節注射による関節痛の治療における医薬組成物の使用も提供される。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療剤を関節に送達するための医薬組成物であって、
（ａ）１種または複数種のリン脂質を含む脂質混合物と、
（ｂ）有効量の治療剤またはその薬学的に許容される塩と、を含み、
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、前記医薬組成物１ｍＬあたり約２０μｍоｌから約１５０μｍоｌである、医薬組成物。
【請求項２】
前記治療剤がステロイドである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記治療剤が関節内コルチコステロイドである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記治療剤が、デキサメタゾンリン酸ナトリウム、デキサメタゾン、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸ナトリウム、酢酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、フロ酸モメタゾン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンヘキサセトニド、トリアムシノロンヘキサセトニド、二酢酸トリアムシノロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、酢酸メチルプレドニゾロン、テブト酸プレドニゾロン、酢酸ヒドロコルチゾン、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、ハルシノニド、フルオコルトロン、フルオシノロンアセトニド、またはこれらの組み合わせである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ステロイドがデキサメタゾンリン酸ナトリウムである、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項６】
デキサメタゾンリン酸ナトリウムが、医薬組成物１ｍＬあたり約６ｍｇ〜約１８ｍｇの範囲の量で存在する、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
デキサメタゾンリン酸ナトリウムが、医薬組成物１ｍＬあたり約６ｍｇ〜約１２ｍｇの範囲の量で存在する、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
デキサメタゾンリン酸ナトリウムが、医薬組成物１ｍＬあたり約１２ｍｇの量で存在する、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記脂質混合物が、コレステロールを更に含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記脂質混合物が、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）及びジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、医薬組成物１ｍＬあたり約３０μｍоｌ〜約１４０μｍоｌの範囲である、請求項１〜請求項１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、医薬組成物１ｍｌあたり約４５μｍоｌ〜約１３５μｍоｌの範囲である、請求項１〜請求項１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、医薬組成物１ｍｌあたり約５０μｍоｌ〜約１２０μｍоｌの範囲である、請求項１〜請求項１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、医薬組成物１ｍｌあたり約６０μｍоｌ〜約１１０μｍоｌの範囲である、請求項１〜請求項１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、医薬組成物１ｍｌあたり約７０μｍоｌ〜約１００μｍоｌである、請求項１〜請求項１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
関節痛治療用の関節注射剤の製造のための医薬組成物の使用であって、前記医薬組成物は、
（ａ）１種または複数種のリン脂質からなる脂質混合物と、
（ｂ）有効量の治療剤またはその薬学的に許容される塩と、を含み、
関節注射１回分あたりの前記１種または複数種のリン脂質の総量が約２０μｍоｌ〜約１５０μｍоｌであり、関節注射１回分あたりの１種または複数種のリン脂質の総量が１５０μｍｏｌを超える医薬組成物の有効性と比較して、医薬組成物の有効性が増強される、関節痛治療用の関節注射剤の製造のための医薬組成物の使用。
【請求項１７】
前記治療剤がステロイドである、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記治療剤が関節内コルチコステロイドである、請求項１６に記載の使用。
【請求項１９】
前記治療剤が、デキサメタゾンリン酸ナトリウム、デキサメタゾン、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸ナトリウム、酢酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、フロ酸モメタゾン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンヘキサセトニド、トリアムシノロンヘキサセトニド、二酢酸トリアムシノロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、酢酸メチルプレドニゾロン、テブト酸プレドニゾロン、酢酸ヒドロコルチゾン、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、ハルシノニド、フルオコルトロン、フルオシノロンアセトニド、またはこれらの組み合わせである、請求項１６に記載の使用。
【請求項２０】
前記ステロイドがデキサメタゾンリン酸ナトリウムである、請求項１７に記載の使用。
【請求項２１】
デキサメタゾンリン酸ナトリウムが、関節注射１回分あたり約６ｍｇ〜約１８ｍｇの範囲の量で存在する、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
デキサメタゾンリン酸ナトリウムが、関節注射１回分あたり約１２ｍｇの量で存在する、請求項２０に記載の使用。
【請求項２３】
前記脂質混合物が、コレステロールを更に含む、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２４】
前記脂質混合物が、ＤＯＰＣ及びＤＯＰＧを含む、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２５】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、関節注射１回分あたり約３０μｍоｌ〜約１４０μｍоｌの範囲である、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２６】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、関節注射１回分あたり約４５μｍоｌ〜約１３５μｍоｌの範囲である、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２７】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、関節注射１回分あたり約５０μｍоｌ〜約１２０μｍоｌの範囲である、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２８】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、関節注射１回分あたり約６０μｍоｌ〜約１１０μｍоｌの範囲である、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２９】
前記１種または複数種のリン脂質の総量が、関節注射１回分あたり約９０μｍоｌである、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３０】
前記有効性が、関節痛、圧痛、一過性の朝のこわばり、関節運動時のクレピタス音から選択される少なくとも１つの臨床的徴候の軽減を指す、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３１】
前記医薬組成物は、関節痛が消失するまで、１週間ごと、２週間ごと、６週間ごと、１ヶ月ごと、２ヶ月ごと、３ヶ月またはそれ以上の期間ごと、６ヶ月またはそれ以上の期間ごとに１回投与される、請求項１６〜請求項２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３２】
関節痛の治療を要する対象に、請求項１〜請求項１５のいずれか一項に記載の医薬組成物の有効量を関節内に投与することを含む、関節痛を治療する方法
【請求項３３】
前記関節痛が関節炎によるものである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記関節炎が、乾癬、反応性関節炎、または、エーラス-ダンロス症候群、ヘモクロマトーシス、肝炎、ライム病、シェーグレン病、橋本甲状腺炎、セリアック病、非セリアックグルテン過敏症、炎症性腸疾患、ヘノッホ・ショーンライン紫斑病、再発性熱を伴うＤ型高免疫グロブリン血症、サルコイドーシス、ウィップル病、ＴＮＦ受容体関連周期性症候群、多発性血管炎を伴う肉芽腫症、家族性地中海熱、全身性エリテマトーデスに起因する関節炎である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記医薬組成物を、関節痛が消失するまで、１週間ごと、２週間ごと、６週間ごと、１ヶ月ごと、２ヶ月ごと、３ヶ月またはそれ以上の期間ごと、６ヶ月またはそれ以上の期間ごとに１回投与する、請求項３２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、関節への送達に適した医薬組成物、及び治療剤の治療効果の増強と副作用の最小限化との間のバランスがとれた関節痛を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
関節痛を抑制するための治療法は、関節組織に治療剤、特に抗炎症剤を局所的に送達させることにより、関節の炎症や痛みを軽減するために開発されてきた。変形性関節症及び他の炎症性疾患に関連する関節痛を一時的に緩和するのに有効であることが示されている。
【０００３】
関節組織への治療剤の送達の一般的な方法は文献に詳しく記載されているが、それらの有効性には往々にして限りがある。関節内での治療剤のファーマコキネティクス及びファーマコダイナミクスに影響を与える要因としては様々あるが、例えば、選択された治療剤の化学物理的特性、マクロファージによる微粒子ビヒクルのクリアランス作用、及び送達プラットフォームの特性が挙げられる。
【０００４】
上記で概説した欠陥の観点から、関節痛を治療するための治療法の改良として、持続的（３〜６ヶ月）な治療効果、そしてより強力な治療効果を有する治療法が必要とされており、このような治療法としてはまた副作用プロファイル、特に軟骨損傷、軟骨細胞損傷、または血漿コルチゾール値の異常な減少に関連する副作用プロファイルが低減されていることが好ましい。本開示は、このような需要及びその他の需要に対応する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本開示の一実施形態によれば、以下のように構成される治療剤の関節への送達に適した医薬組成物が提供される。即ち、
（ａ）１種または複数種のリン脂質を含む脂質混合物と、
（ｂ）有効量の治療剤またはその薬学的に許容される塩と、を含む医薬組成物であって、
前記医薬組成物中の前記１種または複数種のリン脂質の総量が、前記医薬組成物１ｍＬ（ミリリットル）あたり約２０μｍоｌから約１５０μｍоｌである、治療剤の関節への送達に適した医薬組成物が提供される。
【０００６】
また、関節痛を治療する以下の方法も提供される。即ち、関節痛の治療を要する対象に、本開示に従って有効量の医薬組成物を関節内に投与することを含む、関節痛を治療する方法が提供される。
【０００７】
また、関節痛治療用の関節注射剤の製造のための医薬組成物の以下の使用も提供される。即ち、関節痛治療用の関節注射剤の製造のための医薬組成物の使用であって、前記医薬組成物は、
（ａ）１種または複数種のリン脂質からなる脂質混合物と、
（ｂ）有効量の治療剤またはその薬学的に許容される塩と、を含むよう構成されたものであり、
関節注射１回分あたりの前記１種または複数種のリン脂質の総量が約２０μｍоｌ〜約１５０μｍоｌであり、関節注射１回分あたりのリン脂質の総量が１５０μｍｏｌを超える医薬組成物の有効性と比較して、医薬組成物の有効性が増強される、関節痛治療用の関節注射剤の製造のための医薬組成物の使用が提供される。
【０００８】
本概要は、特許請求の対象の主要なまたは本質的な特徴を特定することを意図したものではなく、また、特許請求の範囲を決定するために単独で使用されることを意図したものでもない。特許請求の対象は、明細書全体、任意のまたはすべての図面、及び各請求項における適切な部分を参照して解釈されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】本願による医薬組成物における、それぞれ異なる量でリン脂質を用いた際の放出プロファイルを示す線グラフである。
【００１０】
【図２】治験デザインを模式的に示す図である。
【００１１】
【図３】治験プロセスを模式的に示す図である。
【００１２】
【図４Ａ】本開示の医薬組成物中の６ｍｇ及び１２ｍｇのＤＳＰ（デキサメタゾンリン酸ナトリウム）を投与された被験者に関連する疼痛ＶＡＳスコアを示す図である。
【図４Ｂ】本開示の医薬組成物中の６ｍｇ及び１２ｍｇのＤＳＰを投与された被験者に関連する疼痛ＶＡＳスコアの平均値の変化を示す図である。
【００１３】
【図５Ａ】本開示の医薬組成物中の６ｍｇ及び１２ｍｇのＤＳＰを投与された被験者におけるＷＯＭＡＣスコアの平均値の変化を示す線グラフである。
【図５Ｂ】本開示の医薬組成物中の６ｍｇ及び１２ｍｇのＤＳＰを投与された被験者におけるＷＯＭＡＣスコアの平均値の変化を示す線グラフである。
【図５Ｃ】本開示の医薬組成物中の６ｍｇ及び１２ｍｇのＤＳＰを投与された被験者におけるＷＯＭＡＣスコアの平均値の変化を示す線グラフである。
【図５Ｄ】本開示の医薬組成物中の６ｍｇ及び１２ｍｇのＤＳＰを投与された被験者におけるＷＯＭＡＣスコアの平均値の変化を示す線グラフである。
【００１４】
【図６】本開示の医薬組成物中の６ｍｇ、１２ｍｇ、１８ｍｇのＤＳＰを投与された被験者における１２週目、１６週目、２０週目及び２４週目までのＷＯＭＡＣスコアの平均変化を示す線グラフである。
【００１５】
【図７】動物モデルでの本開示の医薬組成物を投与された被験動物における臨床視覚的関節炎スコア（ＶＡＳ）のチャートであり、試験品は１６日目に投与されたものであり、実線矢印は治療日を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
定義
以下の用語は、上記及び本開示全体を通して使用されるように、特に明記しない限り、以下の意味を有すると理解されるべきである。
【００１７】
本明細書で使用される場合、単数形「一」、「一つ」及び「該」は、文脈から明確に指示されない限り、複数であることを排除しない。
【００１８】
本明細書に記載されているすべての数値は、「約〜」として理解されるべきである。また、本明細書で用いられるように、「約〜」とは、具体的な数値の±１０％を指す。
【００１９】
本明細書で使用される「関節注射」という用語は、関節痛の部位またはその近くにおける局所注射、関節内注射または関節周囲注射を含む。
【００２０】
本明細書で使用される「有効量」は、関節の痛み、炎症、関節のこわばり及び腫れなどの関節痛を引き起こす疾患の症状及び徴候を軽減し、且つ、治療剤の注入に関連する副作用を軽減するに足る医薬組成物の用量を指す。ここでいう軽減は、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはその間の任意の量の軽減であり得る。
【００２１】
本明細書で使用される「治療する」、「治療される」、または「治療」という用語は、関節痛を引き起こす進行性の構造組織損傷を未然に（例えば予防的に）防ぐ、遅延させる、阻止するまたは逆転させることを含む。また、本出願を通して、治療とは、既知の技術によって測定し得る関節痛の軽減、緩和、阻止または遅延、あるいは関節痛の完全な改善の方法を意味する。これらには、いくつか例を挙げると、臨床検査、血清または関節吸引物の画像化または分析（例えば、リウマチ因子、赤血球沈降速度）が含まれるが、これらに限定されない。例えば、本開示での方法は、治療前の対象または対照対象と比較して、対象の関節痛が約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％減少するよう治療することが想定される。治療には、単回の関節注射または所望の間隔での複数回の関節注射が含まれる。
【００２２】
「対象」という用語は、関節痛を有する脊椎動物、または関節痛の治療が必要とみなされる脊椎動物を指すことができる。対象は、温血動物、例えば霊長類などの哺乳類、より好ましくはヒトを含む。ヒト以外の霊長類も対象である。対象という用語には、猫、犬などの飼い慣らされた動物、家畜（例えば、牛、馬、豚、羊、山羊など）及び実験動物（例えば、マウス、ウサギ、ラット、アレチネズミ、モルモットなど）を含む。したがって、獣医学的な用途及び医学的製剤も、本開示の意図に含まれる。
【００２３】
「関節痛」という用語は、１つまたは複数の関節の炎症や痛みを伴う関節の障害または疾患を指す。本明細書で使用される「関節痛」という用語は、既知または未知の、様々な病因及び原因の様々なタイプ及びサブタイプの関節炎を含み、リウマチ性関節炎、変形性関節炎、感染性関節炎、乾癬性関節炎、痛風性関節炎、ループスに伴う関節炎、または滑液包炎、腱滑膜炎、上顆炎、滑膜炎、あるいは他の障害により影響された疼痛性局所組織を含むが、これらに限定されない。
【００２４】
本開示の治療剤の「薬学的に許容される塩」は、塩基で形成される酸性の治療剤の塩、即ち、アルカリ及びアルカリ土類金属塩、例えばナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムのような塩基付加塩、並びにアンモニウム、トリメチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム及びトリス（ヒドロキシメチル）メチルアンモニウム塩のような４アンモニウム塩を含む。同様に、鉱酸、有機カルボン酸、有機スルホン酸、例えば、塩酸、メタンスルホン酸、マレイン酸などの酸付加塩も塩基性治療剤に提供することができる。
【００２５】
医薬組成物
一実施形態において、本開示は、１種または複数種のリン脂質を含む脂質混合物と、有効量の治療剤またはその薬学的に許容される塩とを含む医薬組成物であって、医薬組成物中における１種または複数種のリン脂質の総量が、医薬組成物１ｍＬあたり約２０μｍоｌから約１５０μｍоｌである医薬組成物が提供される。
【００２６】
一実施形態において、本開示の医薬組成物は、治療剤の放出が３ヵ月、４か月、５か月、６ヵ月以上にわたって、あるいは２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、１６週間、１７週間、１８週間、１９週間、２０週間、２１週間、２２週間、２２週間、または２３週間持続する。
【００２７】
他の実施形態において、本開示の医薬組成物は、その有効性が、医薬組成物１ｍＬあたりのリン脂質の総量が約１５０μｍｏｌ以上となる医薬組成物の有効性と比較して増強される。また更に他の実施形態において、本開示の医薬組成物は治療剤の治療効果が持続し、且つ治療剤の副作用が軽減される。
【００２８】
一実施形態において、医薬組成物１ｍＬあたりのリン脂質の総量は５０μｍоｌ〜１４０μｍоｌである。他の実施形態において、医薬組成物１ｍＬあたりのリン脂質の総量は４５μｍоｌ〜１３５μｍоｌである。更に他の実施形態において、医薬組成物１ｍＬあたりのリン脂質の総量は５０μｍоｌ〜１２０μｍоｌである。更に他の実施形態において、医薬組成物１ｍＬあたりのリン脂質の総量は６０μｍоｌ〜１１０μｍоｌである。
【００２９】
一実施形態において、本開示の医薬組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤、希釈剤、ビヒクル、担体、有効成分のための媒体、防腐剤、抗凍結剤またはそれらの組み合わせを更に含む。
【００３０】
一実施形態において、本開示の医薬組成物は、コレステロールの含有の有無に関わらず、１種または複数種のリン脂質と、１種または複数種の緩衝剤とを混合してリポソームを形成し、リポソームを１種または複数種の増量剤と共に凍結乾燥してケーキ状の脂質混合物を形成し、脂質混合物のケーキを治療剤を含む溶液で再構成して水性懸濁液を形成することによって調製される。
【００３１】
別の実施形態において、本開示の医薬組成物は、コレステロールの含有の有無に関わらず、１種または複数種のリン脂質を溶媒中で混合し、次いで溶媒を除去して、粉末またはフィルム形態の脂質混合物を形成し、脂質混合物の粉末またはフィルムを治療剤を含む溶液で再構成して水性懸濁液を形成することによって調製される。別の実施形態では、本開示の医薬組成物は、コレステロールの含有の有無に関わらず、１種または複数種のリン脂質を溶媒中で混合し、次いで、溶解した脂質溶液を水溶液中に注入してリポソームを形成することによって調製される。その後、リポソームは、トラックエッチングしたポリカーボネート膜を介してろ過することにより、ダウンサイズされる。溶媒は、半自動タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）システムを用いた緩衝液に対する透析濾過によって除去される。次いで、透析濾過されたリポソーム溶液を、凍結乾燥して粉末形態にし、脂質混合物の粉末またはフィルムを、治療剤を含む溶液で再構成して、水性懸濁液を形成する。
【００３２】
実施形態によって、本開示の医薬組成物は、約１０％〜約５０％の脂質関連の治療剤、または約５０％〜約９０％の非関連の治療剤を含む。「非関連形態」との用語は、医薬組成物のリン脂質／コレステロール画分からゲル濾過を介して分離可能な治療剤分子を指し、即時放出成分を提供する。他の実施形態では、リン脂質及びコレステロールの組み合わせの治療剤に対する重量比は、約５〜８０対１であり、更に別の実施形態では、リン脂質及びコレステロールの組み合わせの治療剤に対する重量比は、約５〜４０対１である。リン脂質及びコレステロールの組み合わせの治療剤に対する重量比は、例えば、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５または８０対１であり得る。
【００３３】
実施形態によって、本開示の医薬組成物における治療剤の濃度は、約１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭまたはそれ以上であり得、そして任意に、約１０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１５ｍＭ〜約４０ｍＭ、約２０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約１５ｍＭ〜約３５ｍＭ、約１５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約２０ｍＭ〜約２５ｍＭの範囲を取り得る。
【００３４】
いくつかの実施形態では、各投与ごとの医薬組成物の総量は、約０．５ｍＬから約１．５ｍＬの範囲であり、そして任意に約１．０ｍＬとすることができる。
【００３５】
脂質混合物
ここで提供される医薬組成物の脂質混合物とは、リン脂質またはリン脂質の混合物を指す。脂質混合物は、医薬組成物に添加される前に、フィルム、ケーキ、顆粒または粉末の形態であってもよいが、これらに限定されない。
【００３６】
一実施形態では、リン脂質またはリン脂質の混合物は、コレステロールの含有の有無に関わらず、脂質混合物として更に加工される前に、予めリポソームに形成される。
【００３７】
別の実施形態では、リン脂質またはリン脂質の混合物は、コレステロールの含有の有無に関わらず、脂質混合物として更に加工される前に、予めリポソームに形成されていない。
【００３８】
リポソームは、ナノサイズであり、内部の水性薬剤担持成分を囲む脂質一重層または脂質二重層からなる。リポソームの非限定的な例としては、小型ユニラメラ小胞（ＳＵＶ）、大型ユニラメラ小胞（ＬＵＶ）、多胞性リポソーム（ＭＶＬ）及び多ラメラ小胞（ＭＬＶ）が挙げられる。
【００３９】
脂質混合物は、一重層構造または二重層構造を形成するか、またはそれに取り込まれることができる様々な脂質から調製することができる。本開示で使用される脂質は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルグリセロール（ＰＧ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ホスファチジン酸（ＰＡ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）のうちの一種または複数種の脂質を含むが、これらに限定されない。実施形態によって、脂質混合物は、卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ、卵ホスファチジルグリセロール（ＥＰＧ）、卵ホスファチジルエタノールアミン（ＥＰＥ）、卵ホスファチジルセリン（ＥＰＳ）、卵ホスファチジン酸（ＥＰＡ）、卵ホスファチジルイノシトール（ＥＰＩ）、大豆ホスファチジルコリン（ＳＰＣ）、大豆ホスファチジルグリセロール（ＳＰＧ）、大豆ホスファチジルエタノールアミン（ＳＰＥ）、大豆ホスファチジルセリン（ＳＰＳ）、大豆ホスファチジン酸（ＳＰＡ）、大豆ホスファチジルイノシトール（ＳＰＩ）、またはこれらの組み合わせを含む。別の実施形態では、脂質混合物は、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、l，2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ヘキサデシルホスホコリン（ＨＥＰＣ）、水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルステアロイルホスファチジルコリン（ＰＳＰＣ）、パルミトイルステアロイルホスファチジルグリセロール（ＰＳＰＧ）、モノオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＭＯＰＥ）、l-パルミトイル-2-オレオイル-sn-グリセロ-3-ホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、ポリエチレングリコールジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ-ＤＳＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰＳ）、1,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、ジミリストイルホスファチジルセリン（ＤＭＰＳ）、ジステアロイルホスファチジルセリン（ＤＳＰＳ）、ジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）、l,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスファチジン酸（ＤＯＰＡ）、ジミリストイルホスファチジン酸（ＤＭＰＡ）、ジステアロイルホスファチジン酸（ＤＳＰＡ）、ジパルミトイルホスファチジルイノシトール（ＤＰＰＩ）、l,2-ジオレオイル-sn-グリセロ-3-ホスファチジルイノシトール（ＤＯＰＩ）、ジミリストイルホスファチジルイノシトール（ＤＭＰＩ）、ジステアロイルホスファチジルイノシトール（ＤＳＰＩ）、またはこれらの組み合わせを含む。
【００４０】
実施形態によって、脂質混合物は、第１のリン脂質及び第２のリン脂質を含む。いくつかの実施形態では、第１のリン脂質は、ＥＰＣ、ＥＰＥ、ＳＰＣ、ＳＰＥ、ＤＰＰＣ、ＤＯＰＣ、ＤＭＰＣ、ＨＥＰＣ、ＨＳＰＣ、ＤＳＰＣ、ＤＯＰＥ、ＰＳＰＣ、ＭＯＰＥ、ＰＯＰＣからなる群から選択され、第２のリン脂質は、ＰＧ、ＰＳ、ＰＡ、ＰＩ、ＥＰＧ、ＥＰＳ、ＥＰＡ、ＥＰＩ、ＳＰＧ、ＳＰＥ、ＳＰＳ、ＳＰＡ、ＳＰＩ、ＤＰＰＧ、ＤＯＰＧ、ＤＭＰＧ、ＤＳＰＧ、ＰＳＰＧ、ＤＰＰＳ、ＤＯＰＳ、ＤＭＰＳ、ＤＳＰＳ、ＤＰＰＡ、ＤＯＰＡ、ＤＭＰＡ、ＤＳＰＡ、ＤＰＰＩ、ＤＯＰＩ、ＤＭＰＩ、ＤＳＰＩ、及びリン脂質分子に結合した高水和性の柔軟な中性ポリマーの長鎖を有する親水性ポリマーからなる群から選択される。親水性ポリマーの例としては、分子量約２０００ダルトン〜約５０００ダルトンのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、メトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）、ガングリオシドＧＭｉ、ポリシアル酸、ポリ乳酸（ポリラクチドとも）、ポリグリコール酸（ポリグリコリドとも）、ポリ乳酸ポリグリコール酸、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリメトキサゾリン、ポリエチルオキサゾリン、ポリヒドロキシエチルオキサゾリン、ポリヒドロキシプロピルオキサゾリン、ポリアスパルトアミド、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド、ポリメタクリルアミド、ポリジメチルアクリルアミド、ポリビニルメチルエーテル、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシメチルセルロースやヒドロキシエチルセルロースなどの誘導体化されたセルロース類、合成ポリマーなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４１】
一実施形態では、脂質混合物は、ステロールを更に含む。本開示で使用されるステロールは特に限定されないが、その例として、コレステロール、フィトステロール（シトステロール、スティグマステロール、フコステロール、スピナステロール、ブラシカステロールなど）、エルゴステロール、コレスタノン、コレステノン、コプロステノール、コレステリル-2'-ヒドロキシエチルエーテル、及びコレステリル-4'-ヒドロキシブチルエーテルが挙げられる。脂質混合物のステロール成分は、存在する場合、リポソーム、脂質小胞または脂質粒子の調製の分野で従来から使用されているステロールのいずれかであり得る。別の実施形態では、脂質混合物は、約１０％〜約３３％のコレステロール、約１５モル％〜約３０モル％未満のコレステロール、約１８モル％〜約２８モル％のコレステロール、または約２０モル％〜約２５モル％のコレステロールを含む。
【００４２】
例示的な実施形態では、脂質混合物は、第１のリン脂質、第２のリン脂質、及びステロールを、モル％で、２９．５％〜９０％：３％〜３７．５％：１０％〜３３％の比で含む。
【００４３】
更なる実施形態では、第１のリン脂質はＤＯＰＣ、ＰＯＰＣ、ＳＰＣ、またはＥＰＣであり、第２のリン脂質はＰＥＧ-ＤＳＰＥまたはＤＯＰＧである。
【００４４】
一実施形態では、脂質混合物は、脂肪酸またはカチオン性脂質（すなわち、生理的ｐＨで正味の正電荷を運ぶ脂質）を含まない。
【００４５】
実施形態によって、脂質混合物は、そのリポソームが標的分子を有する標的細胞に特異的に結合することを可能にするために、ターゲティング部分として機能するペプチドや抗体の脂質コンジュゲートを更に含んでもよい。標的分子の非限定的な例としては、ＴＮＦ-αやＣＤ２０といったＢ細胞表面抗原が挙げられるが、これらに限定されるものではない。他の抗原としては、ＣＤ１９、ＨＥＲ−３、ＧＤ２、Ｇｐ７５、ＣＳ１タンパク質、メソセリン、ｃＭｙｃ、ＣＤ２２、ＣＤ４、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ１２３、ＣＤ１３８、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ７４、ＣＤ３０、Ｇｐ７５、ＣＤ３８、ＣＤ３３、ＧＤ２、ＶＥＧＦ、またはＴＧＦも使用することができる。
【００４６】
本開示で調製されるリポソームは、小胞を形成するために使用される従来の技術によって生成することができる。これらの技術には、エーテル注入法（Deamerら、Acad. Sci. (1978) 308: 250）、界面活性剤法（Brunnerら、Biochim. Biophys. Acta (1976) 455: 322)、凍結融解法(Pickら, Arch. Biochim. Biophys. (1981) 212: 186）、逆相蒸散法（Szokaら、Biochim. Biophys. Acta. (1980) 601: 559 71）、超音波処理法（Huangら、Biochemistry (1969) 8: 344）、エタノール注入法（Kremerら、Biochemistry (1977) 16: 3932）、エクストルージョン法（Hopeら、Biochim. Biophys. Acta (1985) 812:55 65）、フレンチプレス法（Barenholzら、FEBS Lett. (1979) 99: 210）、及びSzoka, F., Jr.らによる, Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9:467 (1980)に記載された方法が含まれる。上記の方法はすべて、小胞の形成のための基本的な技術であり、これらの方法は参照により本明細書に組み込まれるものとする。滅菌後、予め形成されたリポソームを無菌的に容器に入れ、凍結乾燥して粉末またはケーキを形成する。脂質混合物が予め形成されたリポソームを含む実施形態では、前記リポソームを溶媒注入法により得て、その後、凍結乾燥して脂質混合物を形成する。脂質混合物は、１種または複数種の増量剤を含む。一実施形態では、脂質混合物は、１種または複数種の緩衝剤を更に含む。
【００４７】
増量剤としては、ポリオールや、マンニトール、グリセロール、ソルビトール、デキストロース、スクロース、などの糖アルコールや、トレハロースや、ヒスチジン、グリシン、などのアミノ酸などが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい増量剤の一種としてマンニトールが挙げられる。
【００４８】
緩衝剤としては、リン酸ナトリウム一塩基性二水和物及びリン酸ナトリウム二塩基性無水物が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４９】
脂質混合物が予めリポソームに形成されていない脂質を含む実施形態では、脂質混合物は、エタノール、メタノール、t-ブチルアルコール、エーテル及びクロロホルムといった適切な有機溶媒に溶解し、加熱、真空蒸発、窒素蒸発、凍結乾燥、またはその他の通常の溶媒除去方法によって乾燥することによって調製することができる。
【００５０】
本開示に対応した脂質混合物の調製の具体例を以下に記載する。
【００５１】
治療剤
治療剤は、ステロイド、インドメタシンなどの非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳ  ＡＩＤ）、疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）、またはこれらの内の２種以上の組み合わせの他、これらの内の１種または複数種と本明細書に特に記載されていない他の成分または化合物との組み合わせであることができる。ＤＭＡＲＤには、メトトレキサート、レフルノミド、スルファサラジン、シクロホスファミド、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、ｄ−ペニシラミン、抗マラリア薬（ヒドロキシクロロキンなど）などの低分子薬剤が含まれる。また、ＤＭＡＲＤには生物学的物質も含まれ、例えば、腫瘍壊死因子ａ（ＴＮＦ−ａ）アンタゴニスト（例えば、米国カレッジビルにあるワイス社から商品名エンブレルとして市販されているエタネルセプト、米国イリノイ州アボットパークにあるアボット・ラボラトリーズ社から商品名ヒュミラとして市販されているアダリムマブ）、インターロイキン―１受容体拮抗薬、インターロイキン―６受容体拮抗薬、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、ＣＴＬＡ−４−Ｉｇ、ＲＧＤペプチドなどが挙げられる。
【００５２】
１つの例示的な実施形態では、治療剤は、デキサメタゾンリン酸ナトリウム（ＤＳＰ）などの実質的に水溶性のステロイドであり、溶液の形態である。別の例示的な実施形態では、治療剤は、インドメタシンの許容可能な塩などの、実質的に水溶性のＮＳＡＩＤである。更に別の例示的な実施形態では、治療剤は、メトトレキサートの許容可能な塩などの実質的に水溶性のＤＭＡＲＤ、またはＴＮＦ-ａアンタゴニストである。更に別の例示的な実施形態では、治療剤は、リン脂質またはパルミテートなどの脂肪酸に共有結合していないものである。
【００５３】
本開示による治療剤は、脂質混合物を懸濁させて本開示の医薬組成物を得るために、ｄｄＦＵＯまたは適切な緩衝液のいずれかに混合して治療剤を含む溶液とすることができる。また、実施形態によって、治療剤は、リン脂質などの脂質またはパルミチン酸などの脂肪酸に共有結合していない。
【００５４】
治療剤または薬剤は、薬学的製剤（ヒトならびに動物用の製剤、及び研究、実験ならびに関連用途の製剤を含む）に適した薬学的に許容される賦形剤及び他の成分と組み合わせることができる。実施形態によっては、クエン酸緩衝液が使用され、好ましくはクエン酸ナトリウムが使用される。他の実施形態では、キレート剤が使用され、好ましくはＥＤＴＡが使用される。
【００５５】
本明細書に記載の医薬組成物における治療剤は、関節注射に適した治療剤またはその薬学的に許容される塩を含む。一実施形態では、治療剤は、関節内（ＩＡ）注射に適している。関節内注射は、以下のステップ：（１）治療対象の関節において適切な注射部位を特定してマークすること、（２）滅菌技術を用いて注射部位を滅菌し、任意に局所麻酔薬を投与すること、（３）注射針を関節腔に挿入すること、及び（４）薬剤を関節腔に注入すること、を含む。実施形態により、注射針の挿入は、超音波誘導下で行うこともできる。少量の滑液を吸引して、針の先端が関節腔内にあることを確認する。
【００５６】
本開示で有用なステロイドには、任意の天然由来ステロイドホルモン、合成ステロイド及びその誘導体が含まれる。ステロイドの例としては、これらに限定されないが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、チキソコルトールピバラート、フルオシノロン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロン、モメタゾン、アムシノニド、ブデソニド、デソニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸ナトリウム、デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸ナトリウム（ＤＳＰ）、フルオコルトロン、ヒドロコルチゾン-17-ブチレート、ヒドロコルチゾン-17-バレレート、ジプロピオン酸アルクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、プレドニカルベート、クロベタゾン-17-ブチレート、クロベタゾール-17-プロピオネート、フルオコルトロンカプロエート、フルオコルトロンピバレート、酢酸フルプレドニデン、ジフルプレドネート、ロテプレドノール、フルオロメトロン、メドリゾンリメキソロン、ベクロメタゾン、クロプレドノール、コルチバゾール、デオキシコルトン、ジフルオロコルトロン、フルクロロロン、フルオロコルチゾン、フルメタゾン、フルニソリド、フルオロコルトロン、フルランドレノロン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、パラメタゾン、またはこれらの混合物である。例示的な実施形態では、ステロイドは、水溶性ステロイドである。水溶性ステロイドには、天然由来ステロイドホルモン、合成ステロイド、及びそれらの誘導体が含まれる。水溶性ステロイドには、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、ＤＳＰ、ヒドロコルチゾン-17-バレレート、フルオロコルチゾン、フルドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、パラメタゾン、及びプレレノンが含まれるが、これらに限定されない。一例では、本開示の医薬組成物を得るためにケーキの形態で脂質混合物を再構成するために、約２ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｍＬ、約４ｍｇ〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約６ｍｇ〜約４０ｍｇ／ｍＬ、約８ｍｇ〜約２０ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ〜約１６ｍｇ／ｍＬのＤＳＰ溶液を、上述のような治療剤を含む溶液として使用することができる。別の例示的な実施形態では、ステロイドは、クープマン分類によるグループＢ及びグループＣのステロイドから選択される（S. Coopmanらによる「Identification of cross reaction patterns in allergic contact dermatitis from topical corticosteroids」Br J Dermatol. 1989 Jul;l2l(l):27-34）を参照)。
【００５７】
治療剤の薬学的に許容される塩には、非毒性の無機または有機塩基から形成される非毒性の塩が含まれる。非毒性の塩は、例えば、カリウム、ナトリウム、リチウム、カルシウム、あるいはマグネシウムといったアルカリまたはアルカリ土類金属の水酸化物等の無機塩基から、またはアミン等の有機塩基から形成することができる。
【００５８】
治療剤の薬学的に許容される塩には、非毒性の無機酸または有機酸から形成される非毒性の塩も含まれる。有機酸及び無機酸の例としては、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、チョール酸、パモ酸、ムチン酸、Ｄ−グルタミン酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、ソルビン酸、安息香酸等が挙げられる。
【００５９】
治療剤は、関節炎の症状または兆候を軽減するために、関節注射によって有効量を投与することができる。一実施形態では、治療剤は、ステロイド、特に関節内コルチコステロイド（例えば、これらに限定されないが、酢酸ヒドロコルチゾン、酢酸メチルプレドニゾロン、酢酸デキサメタゾンナトリウム、酢酸ベタメタゾン、プレドニゾロン、トリアミシノロンアセトニド、トリアムシノロンヘキサセトニドといったコルチコステロイド）を指し、これを、医薬組成物１ｍＬあたりの用量で、約０．１ｍｇ〜約３００ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約１８ｍｇ、約１ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１ｍｇ〜約２０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１８ｍｇ、約４ｍｇ〜約３００ｍｇ、約４ｍｇ〜約１００ｍｇ、約４ｍｇ〜約２０ｍｇ、約４ｍｇ〜約１８ｍｇ、約６ｍｇ〜約１８ｍｇ、約６ｍｇ〜約１６ｍｇ、約８ｍｇ〜約１６ｍｇ、約６ｍｇ〜約１２ｍｇ、約６ｍｇ〜約１６ｍｇの範囲の用量で投与することができる。
【００６０】
ヒトにおける治療剤の効果的な投与量は、当技術分野で知られている推奨または標準的な投与量よりも多くてもよく、例えば、参照により本明細書に組み込まれる「The Orthopaedic Journal of Sports Medicine, 3(5), 2325967115581163 (DOI: 10.1177/2325967115581163)」を参照されたい。例えば、治療剤としてのトリアムシノロンヘキサセトニドの推奨される有効かつ耐容性のある投与量は２０ｍｇであるが、本発明に係る組成物及び方法における治療剤の投与量は、少なくとも２０ｍｇ以上であってもよい。
【００６１】
なお、投与される治療剤の用量は、治療対象疾患の重症度、特定の製剤、及び体重や被治療者の全体的な状態及び副作用の重症度などの他の臨床的要因にも依存する。
【００６２】
医薬組成物の使用
医薬組成物は、治療対象疾患に対して適切な期間にわたって、単回または複数回投与され得る。医薬組成物は、利便性を考慮した上で、適切な間隔、例えば、１週間ごと、２週間ごと、６週間ごと、１ヶ月ごと、２ヶ月ごと、３ヶ月またはそれ以上の期間ごと、６ヶ月またはそれ以上の期間ごとに１回の間隔で投与してよく、あるいは疾患（即ち関節痛）の症状と徴候が寛解するまで投与してもよい。
【００６３】
一群の実施形態では、少なくとも２回の関節注射による複数回投与治療において、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、１６週間、１７週間、１８週間、１９週間、２０週間、２１週間、２２週間及び２３週間からなる群から選択された投与間隔で投与される。
【００６４】
実施形態によって、医薬組成物は、関節注射１回分につき約０．５ｍＬ〜約１．５ｍＬ、約０．６ｍＬ〜約１．２ｍＬ、約０．８ｍＬ〜約１．２ｍＬの範囲の量、または約１．０ｍＬで投与される。
【００６５】
関節痛を治療する方法
本開示の一態様は、以下の方法の提供に向けたものであり、即ち、対象における関節痛を治療する方法であって、本明細書に記載の医薬組成物の有効量を、関節痛の治療を必要とする対象に投与することを含み、それによって、治療剤によって誘発される副作用が、即時放出または標準的な治療薬製剤の投与後の対象における副作用と比較して低減されること、及び、医薬組成物の治療剤の有効性及び放出速度が、医薬組成物１ｍＬあたり約１５０μｍоｌ以上のリン脂質を含む医薬組成物の有効性及び放出速度と比較して増大されることとの少なくともいずれかが達成される。一実施形態において、対象者は、変形性関節症、関節リウマチ、急性痛風関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、または、エーラス-ダンロス症候群、ヘモクロマトーシス、肝炎、ライム病、シェーグレン病、橋本甲状腺炎、セリアック病、非セリアックグルテン過敏症、炎症性腸疾患、ヘノッホ・ショーンライン紫斑病、再発性熱を伴うＤ型高免疫グロブリン血症、サルコイドーシス、ウィップル病、ＴＮＦ受容体関連周期性症候群、多発性血管炎を伴う肉芽腫症、家族性地中海熱、全身性エリテマトーデスに起因する関節炎を患った患者である。
【００６６】
ここで有効性とは、疾患に対して好ましい臨床反応を誘導する治療剤の能力を意味する。また、有効性とは、不安定性や身体的障害につながる関節痛、圧痛、一過性の朝のこわばり、関節運動時のクレピタス音などの臨床的徴候の軽減を指す。一実施形態では、治療剤の有効性は、ＷＯＭＡＣ  ＯＡ指数、ＶＡＳスコアなどによって決定される。実施形態によっては、本明細書に記載の医薬組成物からの治療剤の持続的な定常放出は、例えば軟骨細胞のアポトーシス、プロテオグリカンの損失、関節軟骨のシスト、関節軟骨の劣化または関節破壊などの関節軟骨の損傷または破壊といった副作用を誘発しない。本明細書に記載の対象における副作用の減少は、本明細書に記載の医薬組成物を配合していない、例えば、脂質混合物を配合していない治療剤を注射した対象と比較して、１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％の範囲とすることができる。このような効果は、治療剤、例えば酢酸トリアムシノロン（ＴＣＡ）への曝露が、関節軟骨の損傷または破壊を引き起こすことがよく知られていることから、予測し得ないものである。
【００６７】
本明細書で提供される医薬組成物は、様々な付加的な化学物質のいずれかと組み合わせて使用することができ、これらに限定されないが例えば鎮痛剤（例としてブピバカイン、ロピバカイン、リドカイン）またはヒアルロン酸製剤（例としてSynvisc One）と組み合わせて使用することができる。実施形態によっては、本願請求項に記載の医薬組成物及び付加的な化学物質は、単一の治療用組成物となるよう製剤され、本願請求項に記載の医薬組成物及び付加的な化学物質が同時に投与される。また別の態様として、本願請求項に記載の医薬組成物及び付加的な化学物質は、互いに分離されており、例えば、それぞれが別の治療用組成物に製剤され、本願請求項に記載の医薬組成物及び付加的な化学物質が、単回投与または複数回投与にて、同じ経路または異なる経路で、治療計画中に同時に、または異なる時間に投与される。
【００６８】
以下の実施例は、本開示を更に説明するものである。これらの実施例は、単に本開示の具体例を示すことを目的としており、本発明を限定する根拠と解釈されるべきではない。
【００６９】
実施例１．脂質混合物の調製
ＤＯＰＣ、ＤＯＰＧ及びコレステロールを含む脂質を６７．５：７．５：２５のモル％で配合し、フラスコ内で約４０℃の９９．９％エタノールに溶解して脂質溶液を形成した。脂質の溶解には、卓上型超音波浴処理機を使用した。
【００７０】
溶解した脂質溶液を、蠕動ポンプにより１００ｍＬ／分で１．０ｍＭリン酸ナトリウム溶液に添加し、プロリポソーム懸濁液を形成した。次に、このプロリポソーム懸濁液を、孔径０．２μｍのポリカーボネートメンブレンに６〜１０回通した。これによりリポソームの平均小胞径が約１２０ｎｍ〜１４０ｎｍであるリポソーム混合物が得られた（英国、ウスターシャーにあるマルバーン社（Malvern Instruments Ltd）によるMalvern ZetaSizer Nano ZS-90で測定）。
【００７１】
リポソーム混合物を、ミリポアペリコン２ミニ限外ろ過モジュールバイオマックス―１００Ｃ（Millipore Pellicon 2 Mini Ultrafiltration Module Biomax-100C） (０．１ｍ２)（米国マサチューセッツ州ビレリカにあるミリポア社（Millipore Corporation）による製造)を備えたタンジェンシャルフローろ過システムにより透析及び濃縮を行い、その後０．２μｍの滅菌フィルターを用いて滅菌した。
【００７２】
ろ過したリポソーム混合物の脂質濃度をリン酸測定で定量し、ろ過したリポソーム混合物にマンニトールを２％の濃度で配合した後、０．２μｍの減菌フィルターを用いて再度滅菌した。滅菌されたリポソーム混合物を凍結乾燥し、ケーキ形態の脂質混合物を得た。
【００７３】
実施例２．医薬組成物の調製
本開示による医薬組成物は、実施例１に記載された脂質混合物を、ＤＳＰ溶液と混合することによって調製されたものである。ＤＳＰ溶液は、１３．２ｍｇ／ｍＬのデキサメタゾンリン酸ナトリウム（ＤＳＰ）（Ｃ２２Ｈ２８ＦＮａ２Ｏ８Ｐ、分子量５１６．４１ｇ／Ｌ）及び４ｍｇ／ｍＬのクエン酸ナトリウムを含むＤＳＰ溶液である。これにより調整された医薬組成物は、ＤＳＰ医薬組成物として以下で用いられ、その１ｍＬあたりのＤＳＰ及びリン脂質の含量は、それぞれ約１２．０ｍｇ／ｍＬ及び９０μｍｏｌであった。
【００７４】
実施例３．医薬組成物の制御放出
第ＩＩ相の用量設定臨床環境でインビトロ放出試験を実施した。実施例２の医薬組成物を異なるＤＳＰ用量でヒト合成滑液（ｈｓＳＦ）に注入し、各時点でＤＳＰの放出量を測定した。
【００７５】
ヒト合成滑液（ｈｓＳＦ）
ヒト合成滑液の組成を表１に示した。簡単に説明すると、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を３０ｍｇ／ｍＬの濃度になるように０．９％の生理食塩水で溶解した。１％のヒアルロン酸（ＨＡ、Ｍｗ＝１．３５×１０６Ｄａ）をＢＳＡ溶液に加え、ヒアルロン酸が完全に溶解するように、混合物を室温で２時間、穏やかに撹拌した。この溶液のｐＨは７．３であった。ヒトの合成滑液には、細菌の増殖を抑制するため０．２％のアジ化ナトリウムを加えた。
【表１】
2022500364.tif 000003
【００７６】
ＤＳＰ医薬組成物のインビトロ放出
ＤＳＰ医薬組成物のリポソームからのＤＳＰの放出は、異なる時間間隔での封入効率の変化を検出することにより測定した。簡単に言うと、様々な量のＤＳＰ医薬組成物を、所定の温度（３７℃）の合成滑液に懸濁し、撹拌棒を用いて１５０ｒｐｍで撹拌した（表２）。適切な時間間隔で、懸濁液を回収し、ＳＰＥカラムを介して懸濁液を溶出させて遊離ＤＳＰを回収し、以下のような手順で封入効率を測定した。
【表２】
2022500364.tif 000004
【００７７】
封入効率
ＳＰＥカートリッジを用いてリポソームから遊離ＤＳＰを分離した後、採取したサンプルの封入効率の吸光度を測定した。ＳＰＥカラムは、１ｍＬのメタノールで湿らせてから更に１ｍＬの蒸留水で湿らせて使用に供された。その後、１ｍＬの生理食塩水でカラムを平衡化してから、回収した懸濁液を充填した。懸濁液を充填した後、ＳＰＥカラムを３ｍＬの蒸留水で洗浄し、２ｍＬの溶出緩衝液（２ＭＮＨ４ＯＡｃ／ＭｅＯＨ／ＡＣＮ＝２／９／９（ｖ／ｖ）を含む）で遊離ＤＳＰを溶出した。遊離ＤＳＰを含む溶出画分を、ＵＶ-ｖｉｓ分光光度計を用いて２４０ｎｍでモニターした。封入効率（％）は、[1-(Ifree/12)]×100として計算した。式中、12はサンプル溶液中のＤＳＰの理論値（mg/mL）であり、Ifreeは遊離ＤＳＰ濃度である。
【００７８】
リン脂質の総量を調整することで、ＤＳＰの放出を制御できるというデータが得られた（表３、図１）。いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、医薬組成物において脂質の総量が多くＤＳＰの用量が比較的多い（表３における番号５の組成物）場合は、ＤＳＰの関節環境への少量で且つ緩徐な放出が起きる一方、脂質の総量が少なくＤＳＰの用量も少ない場合は、時間の経過に連れて充分且つ持続可能なレベルの遊離ＤＳＰを生成することができなくなると考えられる。下記の第ＩＩ相の用量設定臨床試験の結果を総合すると、関節痛の治療に用いる治療剤の放出制御には、適切な量のリン脂質を含む医薬組成物が望ましいと考えられる。滑液の体積が一般的に１ｍＬ〜７０ｍＬの範囲であることに基づくと、医薬組成物１ｍＬあたりの実質的なリン脂質濃度を２０μｍоｌから１５０μｍоｌの範囲とすると、滑液７ｍＬあたり約９０μｍоｌの所望の有効脂質濃度の達成が図れる。
【表３】
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実施例４．変形性膝関節症患者におけるデキサメタゾンリン酸ナトリウム（ＤＳＰ）医薬組成物の有効性及び安全性に関する無作為オープンラベル治験
【００７９】
方法
台湾の台北市にある３箇所の治験地で、１２週間にわたる無作為オープンラベル、並行、単回投与の第Ｉ／ＩＩ相治験を実施した。治験デザインの模式図が図２に示されている。本治験は、各治験地で被験者を募集するにあたって、事前に各治験地における治験審査委員会の承認を得た。本治験は、米国ＣＦＲ２１章パート３１２．２０、ヘルシンキ宣言、及びＩＣＨ（International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use、医薬品規制調和国際会議）の臨床治験ガイドラインに規定された原則に準拠して実施された。治験プロトコルは、ClinicalTrial.gov（NCT02803307）に登録されている。本治験に参加してもらうにあたって、すべての患者から書面によるインフォームドコンセントを得た。
【００８０】
２０歳以上で、スクリーニング来診の少なくとも６ヶ月前から変形性膝関節症（ＯＡ）の診断書が出されている患者を本治験に募集した。ＯＡの診断は、米国リウマチ協会による特発性の変形性膝関節症分類基準（Arthritis Rheum. 1986;29:1039-49）における臨床的及び放射線学的基準に基づいて行われた。更に、治験対象となり得る条件として、Kellgren-Lawrence分類（Ｋ−Ｌ分類）(Br J Ind Med. 1952;9:197-207)に基づいて膝の重症度が少なくともグレード２であること、対象者におけるベースラインでのVisual Analog Scale（ＶＡＳ）の疼痛スコアが４以上であること、治験プロトコルを理解でき、参加に同意できることを条件とした。一方、治験対象から除外する場合として、ベースライン時から遡って３０日以内に全身性コルチコステロイドを使用したことがある場合、ベースライン時から遡って７日以内にＮＳＡＩＤｓ、鎮痛剤、リハビリテーション療法を使用したことがある場合、ライター症候群、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、全身性硬化症、炎症性筋炎、混合結合組織病、回帰性リウマチ、関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、ベーチェット病、炎症性腸疾患に伴う関節炎、サルコイドーシス、血管炎、クリオグロブリン血症、アミロイドーシスの既往歴を有する場合、または投与前に他方の膝に急性感染症または感染症に関連する炎症の臨床的徴候及び症状があった場合は、治験対象から除外した。
【００８１】
計４６名の変形性膝関節症の患者をスクリーニングし、治験対象選定基準を満たした４０名の患者を、２つの群に無作為に割り付けた。スクリーニング来診は、治験開始前の１４日以内に行った。片側の膝のみが治験対象の膝として選択され、治験薬の投与とその後の評価が行われた。もう一方の膝に潜在的な急性炎症や感染症が発生した場合は、治験薬の投与を中止した。対象となった被験者を、無作為に２つの群に１：１で分けて、実施例２に記載の方法で調製したＤＳＰ医薬組成物を、以下の２種の用量レベルでそれぞれ単回投与した。（１）約４５μｍоｌのリン脂質を含む６ｍｇのＤＳＰ（Ａ群）、（２）約９０μｍоｌのリン脂質を含む１２ｍｇのＤＳＰ（Ｂ群）。この研究で使用されたＤＳＰ医薬組成物は、上記の各実施例に記載された方法で調製され、再構成後に、ＤＳＰの短時間（即時）作用型と長時間作用型の両方を提供するように設計された。各被験者に対して、１回の関節内注射後、１２週間にわたって評価が行われた。
【００８２】
この研究の主要目的は、２種の異なる用量レベルでのＤＳＰ医薬組成物の安全性及び忍容性を評価することにある。安全性の評価は、有害事象（ＡＥ）、重篤な有害事象（ＳＡＥ）、バイタルサイン、及び、身体診察、心電図、臨床検査の変化に基づいて行った。また、この研究の副次的な目的は、被験者及び医師が報告した疼痛スコア（ＶＡＳ）、ＷＯＭＡＣ(Western Ontario and McMaster Universities osteoarthritis Index)関節炎指数スコア、及び治験対象の膝のＩＧＡＲＴ（Investigator Global Assessment of Response to Therapy）の変化を測定することにより、ＤＳＰ医薬組成物の有効性を評価することにある。ＶＡＳとＷＯＭＡＣの評価は、第０週、第１週、第４週、第８週、第１２週にそれぞれ行い、ＩＧＡＲＴの評価は、第１週、第４週、第８週、第１２週に行った。膝の痛みのスコアはＶＡＳスケールを用いて評価した（スケールは０［痛み／不快感なし］から１０［これまでで最悪の痛み／不快感］の範囲）。ＷＯＭＡＣ指標は、痛み（５項目）、こわばり（２項目）、身体機能（１７項目）の３つのサブスケールを含み、各サブスケールのスコアは０〜４である。治験薬の投与に対する患者の反応は、ベースライン時を除く各定期受診日において、治験責任医師がＩＧＡＲＴ評価で５段階の評価（効果なし、乏しい、可、良好、優良）のうち１つを選択して決定した。
【００８３】
統計解析
本治験のサンプルサイズは、事前に設定した検定力の想定により決定されたものではない。本治験では、計４０名の変形性膝関節症の患者の登録が計画された。すべての統計的評価は両側評価とし、有意水準０．０５で評価した。欠損データ（早期中止によるものを含む）はインプットされなかった。連続評価項目（血漿コルチゾールの安全性評価、ＷＯＭＡＣ指標、ＶＡＳスコア）については、観察回数、平均値、中央値、標準偏差、最小値、最大値などの記述統計を、ベースラインからの変化とともに生データに示した。また、連続変数については、治療群の間の差を比較するためにウィルコクソンの順位和検定(Wilcoxon rank sum test)を用いて分析し、ベースラインからの変化を比較するためにウィルコクソンの符号順位検定（Wilcoxon signed-rank test）を用いた。分類別評価項目（ＩＧＡＲＴ、ＷＯＭＡＣ及びＶＡＳにおいてベースラインから３０％または５０％以上の減少を達成した患者数）については、回数及びパーセンテージを用いた。群の間の差を比較するために、カイ二乗検定を実施し、データが少ない場合はフィッシャーの正確検定を適用した。すべての統計解析は、ＳＡＳ（登録商標）ソフトウェア（SAS System for Windows 7、バージョン9.3）を用いて行った。本研究では、安全性の解析には安全性集団を用い、有効性の解析には治療企図（ＩＴＴ、intent-to-treat）集団とパープロトコル（ＰＰ、per-protocol）集団を用いた。安全性集団は、ＤＳＰ医薬組成物を任意の用量で投与されたすべての被験者と定義した。ＩＴＴ集団は、ＤＳＰ医薬組成物を総量で少なくとも１回投与され、ベースライン後に有効性評価を少なくとも１回受けた被験者と定義した。ＰＰ集団は、ＩＴＴ集団の中で、主要なプロトコル逸脱・違反がなかった全ての被験者と定義した。４０名の被験者全員が安全性集団とＩＴＴ集団に含まれた。Ａ群の６名とＢ群の７名を含む１３名の被験者がＰＰ集団に含まれた。主な結論は、ＰＰ集団に基づいている。
【００８４】
結果
本研究では、計４６名の対象者がスクリーニングされ、そのうち６名はスクリーニング失敗であった。４０名が被験者として本研究に登録され、そのうち３９名が適格基準を満たした。この他、スクリーニング前の６ヵ月以内に変形性膝関節症と診断された被験者が更に１名登録された。被験者は２０名ずつのＡ群とＢ群に無作為に分けられ、それぞれ関節内注射１回分につき４５μｍоｌのリン脂質を含む６ｍｇのＤＳＰと、９０μｍоｌのリン脂質を含む１２ｍｇのＤＳＰが投与された。被験者の処置の概要を図３に、被験者のデモグラフィック情報を表４に示す。
【表４】
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【００８５】
４０名の被験者は全員が東アジア出身であった。平均年齢は６７．４歳で、８名（２０％）が男性であった。被験者は、ＫＬ分類評価でグレード２（ｎ＝１２）、グレード３（ｎ＝２０）、グレード４（ｎ＝８）に分類された。
【００８６】
本治験では、重篤な有害事象や、離脱または死亡につながる有害事象は発生しなかった。コルチコステロイドの長期使用は、血糖値の上昇、更には糖尿病につながる可能性があるため、ＨｂＡ１ｃの変化を測定した。ベースライン（０週目）から１２週目までのＨｂＡ１ｃの平均値の変化において、Ａ群、Ｂ群ともに、統計的に有意な差は認められなかった。
【００８７】
コルチゾールの一過性の減少は、コルチコステロイドのＩＡ注射を受けた患者の生理学的反応としてよく知られている。コルチゾールの平均値は、注射の１週間後にベースラインからの減少を示したが、正常範囲内にとどまり、副腎不全の兆候または症状が報告された被験者はいなかった。
【００８８】
ＰＰ集団において、被験者及び医師が関連する疼痛スコア（ＶＡＳスコア）の平均値は、Ａ群、Ｂ群ともに、１２週目の試験終了までの各定期来診時に、ベースラインからの持続的な減少を示した（図４Ａ及び図４Ｂ）。Ａ群のベースラインから第１週、第４週、第８週、第１２週までの被験者のＶＡＳの平均値の変化は、それぞれ−２．４５、−１.９０、−１.８０、−１.９５であった。Ｂ群では、ベースラインから第１週、第４週、第８週、第１２週までの被験者のＶＡＳの平均値の変化は、それぞれ−３．９０、−３．２３、−３．３３、−３．１４であった。統計的有意性（ｐ＜０．０５）は、Ｂ群のベースラインから各定期来診日までの平均値の変化でのみ達成された。Ａ群のベースラインから第１週、第４週、第８週、第１２週までの医師関連のＶＡＳの平均値の変化は、それぞれ−２．９５、−４．３３、−３．２２、−４．９０であった。Ｂ群では、ベースラインから第１週、第４週、第８週、第１２週までの医師関連のＶＡＳの平均値の変化は、それぞれ−３．４１、−３．０３、−３．８０、−４．３３であった。ベースラインからの平均変化量は、Ａ群のベースラインから第８週までの平均変化量（−３．２２±１．７８、ｐ＝０．０６２５）を除いて、すべて統計的に有意であった。同様の傾向はＩＴＴ集団においても認められた。
【００８９】
ベースラインから各定期来診日までのＷＯＭＡＣの痛み、こわばり、身体機能の各サブスケールのスコア減少は、Ａ群に比べてＢ群においてより顕著に観察された（図５Ａ〜５Ｄ）。ベースライン時（０週目）のＷＯＭＡＣ総合スコアの平均値は、ＰＰ集団のＡ群が３７．８３＋１９．９０、Ｂ群が４３．２９＋１５．１６（平均＋ＳＤ）であった。ベースラインから第１週、第４週、第８週、第１２週までのＷＯＭＡＣ総合スコアの平均値の変化は、Ａ群ではそれぞれ−１２．１７、−８．３３、−９．００、−１０．８３、Ｂ群ではそれぞれ−１９．００、−２２．２９、−２０．７１、−２０．１４であった。同様の傾向はＩＴＴ集団においても認められた。
【００９０】
ＩＴＴ及びＰＰ集団の両方において、第１週、第４週、第８週、及び第１２週のＩＧＡＲＴ評価で、Ａ群とＢ群との間に統計的な有意性は認められなかった。ＰＰ集団（ｎ＝１３）では、治験責任医師による第１週から第１２週までの評価で、Ａ群の３３〜６７％の患者が反応良好と評価され、Ｂ群の４３〜１００％の患者が反応良好と評価された。また、ＩＴＴ集団（ｎ＝２０）では、治験責任医師による第１週から第１２週までの評価で、Ａ群の５０〜６５％の患者が反応良好と評価され、Ｂ群の４５〜６０％の患者が反応良好と評価された。
【００９１】
今回の第Ｉ／ＩＩ相治験では、ＤＳＰ医薬組成物の関節内注射は、変形性膝関節症（ＯＡ）を患うすべての被験者に良好な忍容性が認められた。本治験で報告された他の有害事象（ＡＥ）は、治療に関連しておらず、これらの有害事象のほとんどは重症度が低かった。重篤な有害事象（ＳＡＥ）、重大な有害事象（注射関連局所反応）、または離脱または死亡のいずれかにつながる有害事象は発生しなかった。
【００９２】
ＤＳＰ医薬組成物は、ウサギ及びビーグル犬において、プロテオグリカン消失などの顕微鏡的所見を示さなかった。また、遊離デキサメタゾン、トリアムシノロンなどのステロイドでは複数回の関節内投与の結果として軟骨損傷が報告されているのに対し、ＤＳＰ医薬組成物では単回または複数回の関節内投与の後も、動物実験において軟骨損傷や軟骨毒性の誘発が起きなかった。
【００９３】
デキサメタゾンは、長時間作用型のコルチコステロイドであるトリアムシノロンに匹敵する痛みの軽減と関節炎の改善を示した。このことは、徐放性プロファイルを有するＤＳＰ医薬組成物が、同クラスの他の薬剤よりも遥かに長い期間にわたってデキサメタゾンの治療効果を高め続けることができる可能性を示唆している。
【００９４】
今回の第Ｉ／ＩＩ相治験は、１ｍＬあたり２０μｍоｌ〜１５０μｍоｌまたは総量で８０μｍоｌ〜１１０μｍоｌのリン脂質を含むＤＳＰ医薬組成物を、変形性膝関節症の被験者に関節内注射で投与した初めての治験である。本治験では、ＤＳＰ医薬組成物６ｍｇ〜１２ｍｇを１２週間以上投与することで、他のコルチコステロイドに比べてより長い作用時間にわたって治療効果が得られることが示された。ＤＳＰ医薬組成物の単回投与後、疼痛ＶＡＳスコアにおける疼痛緩和及びＷＯＭＡＣ  ＯＡ指数における症状緩和が１２週間にわたり持続する傾向が認められた。
実施例５．変形性膝関節症患者におけるＤＳＰ医薬組成物の有効性の比較分析
【００９５】
変形性膝関節症患者におけるＤＳＰ医薬組成物の２種の異なる用量レベルでの安全性及び治療効果を探索するための多施設、二重盲検、プラセボ対照の第ＩＩ相臨床試験が２０１８年８月に完了した。この臨床試験では、平均年齢６３．９歳、中等度の変形性膝関節症、及び疼痛ＶＡＳスコア５〜９である７５名の患者を３つの異なる試験群に無作為に割り付け、それぞれに（ａ）ＤＳＰ１２ｍｇ及びリン脂質９０μｍоｌを含む医薬組成物（以下、ＴＬＣ５９９  １２ｍｇと表記）、（ｂ）ＤＳＰ１８ｍｇ及びリン脂質１３５μｍоｌを含む医薬組成物（以下、ＴＬＣ５９９  １８ｍｇと表記）、または（ｃ）プラセボ対照（生理食塩水）（以下、単にプラセボと表記）を単回関節内投与した。
【００９６】
主要評価項目は、第１２週までのＷＯＭＡＣ疼痛スコアによるベースラインからの平均変化量の評価である。また、ＷＯＭＡＣ疼痛スコア、ＷＯＭＡＣ身体機能スコア、ＶＡＳ疼痛スコアの、第２４週までの様々な時点でのベースラインからの変化といった他の分析が、臨床的に耐久性のある反応者の割合などの他の分析と共に、副次的評価項目に含まれた。安全性と有効性の評価は、３日目、１週目、及び２４週目までの４週ごとに行われた。
【００９７】
ＷＯＭＡＣ疼痛評価指標を用いた結果、ＴＬＣ５９９  １２ｍｇは、３日目から１２週目までにおいて、プラセボと比較して、統計学的に有意な疼痛緩和の改善を示し、主要評価項目を満たした。更に、ＴＬＣ５９９  １２ｍｇは、図６及び表５に示すように、３日目から１６週目、２０週目、２４週目までにおいて、プラセボと比較して、持続的かつ統計学的に有意な疼痛緩和の改善を示し、少なくとも２４週間の疼痛制御の持続性が反映された。また、ＴＬＣ５９９  １２ｍｇは、１２週目、１６週目、２０週目、２４週目において、プラセボと比較して統計学的に有意な疼痛緩和の改善を示した。
【００９８】
【表５】
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【００９９】
同様の結果は、ＷＯＭＡＣ身体機能スコアを効果指標として用いても観察された。ＴＬＣ５９９  １２ｍｇを投与された患者は、３日目から１２週目、１６週目、２０週目、２４週目までにおいて、プラセボと比較してＷＯＭＡＣ身体機能スコアの大幅な改善を示した（ｐ＜０．０５）。
【０１００】
更に、同様の結果は、ＶＡＳ疼痛スコアを効果指標としても観察された。ＴＬＣ５９９  １２ｍｇは、３日目から１２週目、１６週目、２０週目、２４週目までにおいて、プラセボと比較して統計学的に有意な疼痛緩和の改善を示し、ここでも少なくとも６ヶ月間の疼痛制御の持続性が反映された。また、ＴＬＣ５９９  １２ｍｇは、１２週目、１６週目、２０週目、２４週目において、プラセボと比較して、統計学的に有意な疼痛緩和の改善を示した。
【０１０１】
コルチゾールの一過性の減少は、コルチコステロイドの関節内注射を受けた患者の生理学的反応としてよく知られている。したがって、本治験で認められたコルチゾールの減少は、綿密にモニターされたコルチコステロイドの関節内注射に対する薬力学的反応として予想内であった。血中コルチゾール濃度の臨床検査値の異常は、２つの例外（中等度のコルチゾール低下１例、重度のグルココルチコイド欠損１例）を除き、強度は軽度と報告された。これらのコルチゾール検査値の異常は、いずれも低コルチゾール血症に起因すると思われる徴候や症状を伴うものではなく、すべて治療や後遺症なしに解決された。これらの事象のほとんどは、３日目の時点で発生し、そのうちのほとんどは、次の１週目の診察までに解消された。
【０１０２】
ＴＬＣ５９９  １２ｍｇに含まれる遊離デキサメタゾンの総量（約４０％）は、関節内注射に使用される典型的な即放性ＤＳＰ用量（４ｍｇ）をわずかに上回っている。
【０１０３】
本治験で認められた治験薬投与下の有害事象（ＴＥＡＥ、Treatment-emergent Adverse Event）は、調査対象となった集団において想定内のものであった。ＴＬＣ５９９は、一般的に安全で良好な忍容性を示した。更に、ＴＬＣ５９９  １２ｍｇはＴＬＣ５９９  １８ｍｇよりも、全体的なＴＥＡＥ、薬物関連のＡＥ、コルチゾール関連のＡＥの発生率が低かった。
【０１０４】
本試験では、毎回の来診時に空腹時血糖値をモニタリングした。ＴＬＣ５９９  １２ｍｇ群の患者１名に血糖値上昇のＴＥＡＥが確認され（２つの個別の事象、１つは軽度、１つは中等度）、ＴＬＣ５９９  １８ｍｇ群の患者１名に空腹時血糖値低下のＡＥが確認された（軽度）。但し、血糖値上昇（両方の事象）は、試験治療との関連性がないと判断された。
【０１０５】
注目すべきは、これらの患者は治験中にＨｂＡ１ｃの異常を示さなかったことである。したがって、血糖値の上昇は一過性で軽度であったと考えられる。
実施例６．変形性関節症の動物モデルにおけるＤＳＰ医薬組成物中の脂質含有量の効果の評価
【０１０６】
脂質含有量の変化及び薬剤と脂質の相互作用が関節への送達に適した医薬組成物としてのインビボ性能に及ぼす影響を評価するために、脂質含有量の多いＤＳＰ及び少ないＤＳＰを調製し、以下のように指示された条件で効果発現の可能性を評価した。
【０１０７】
ＤＳＰ医薬組成物の脂質含有量がＤＳＰの治療活性に及ぼす影響を調べるために、ＩＩ型コラーゲン誘導関節炎（ＣＩＡ）モデルラットを使用した。計３０匹のルイスラットを、１日目にフロイント不完全アジュバント（ＦＩＡ）で乳化したＩＩ型コラーゲンで誘発し、８日目に尾部皮内注射で再び増強した。関節炎の重症度を示す臨床視覚的関節炎スコア（Clinical Score）は、０から４までの関節炎指数を用いて等級付けした（表６参照）。両後肢のスコアを合計して各ラットの合計スコアとし、よって個々のラットの最大可能スコアは８である。１７日目に、疾患の誘発に成功し臨床視覚的関節炎スコアの合計が８となり、ラットの両肢に試験品を投与した。それぞれ脂質の総量が異なるＤＳＰ医薬組成物を、それぞれ結果的に脂質含有量が以下の表７に示される通り異なることを除いて実施例２に記載された方法と同様の方法で調製した。また、対照群として、脂質を含まない食塩水及び１２ｍｇ／ｍＬのリン酸デキサメタゾン溶液［Dexamethasone Phosphate (ＤＰ)注射液］（調剤されていない薬剤）を用いた。
【表６】
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【表７】
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【０１０８】
関節への送達に適した医薬組成物中の脂質含有量と臨床視覚的スコア評価に基づく抗関節炎効果との間に相関関係があることを示す結果が得られた（図７）。
【０１０９】
インビボ有効性試験の結果、ＴＬＣ５９９製剤では脂質含有量の多寡（ＤＳＰ医薬組成物１ｍＬあたりリン脂質６７μｍоｌ以上）にかかわらず、調剤されていない薬剤に比べて有効性の延長期間が少なくとも２．５倍増加したことが報告された。しかしながら、上記の実施例３と併せて、本実施例によるＤＳＰ医薬組成物の脂質含有量の範囲（ＤＳＰ医薬組成物１ｍＬあたり６７μｍоｌ以上のリン脂質、例えば約７０μｍоｌ〜約１２０μｍоｌ）であれば、より長い抗関節炎作用の持続時間が得られることが推測される。したがって、本開示による医薬組成物は、特に示されたような投与範囲であれば、示された脂質含有量においてＤＳＰの持続的な放出を実際に提供でき、治療効果の向上と治療薬の副作用の最小化との間のバランスを達成することが可能となる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図５Ｄ】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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