(57)【要約】  本発明は、炎症の処置、その進行の低減、及び治癒に、それを必要とする対象において使用するためのレクチンに関する。該レクチンを含む医薬組成物も記載されている。レクチンは、配列番号１の配列又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するアミノ酸配列を含み得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症の治療又は予防に、それを必要とする対象において使用するためのレクチンタンパク質。
【請求項２】
レクチンタンパク質が、配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のレクチンタンパク質。
【請求項３】
レクチンタンパク質が、配列番号２、３、又は４に対して少なくとも６０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１又は２に記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項４】
レクチンタンパク質が、配列番号２、配列番号３、又は配列番号４からなる群より選択されたアミノ酸配列を含む、請求項２に記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項５】
レクチンタンパク質が組換え体である、請求項１〜４のいずれかに記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項６】
アミノ酸配列が、配列番号１に対して少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の相同性を有する、請求項２〜４のいずれか一項に記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項７】
レクチンタンパク質が、炎症性サイトカインの分泌を抑制することができる、請求項１〜６のいずれかに記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項８】
レクチンタンパク質が、血中のＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）レベルを減少させることができる、請求項１〜７のいずれかに記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項９】
レクチンタンパク質が、抗シトルリン化タンパク質活性及び／又はコラーゲンレベルを刺激することができる、請求項１〜８のいずれかに記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１０】
対象が慢性炎症性疾患を有する、請求項１〜９のいずれかに記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１１】
慢性炎症性疾患が、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ（ＲＡ）、肝炎、喘息、過敏性腸疾患（クローン病、大腸炎、及び過敏性腸症候群（ＩＢＳ）を含む）、側頭動脈炎、アトピー性皮膚炎、全身性ループス、多発性硬化症、又はサルコイドーシスである、請求項９に記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１２】
慢性炎症性疾患が、関節リウマチ（ＲＡ）である、請求項１０に記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１３】
対象が急性炎症を有する、請求項１〜８のうちの一項に記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１４】
急性炎症が、アレルギー性反応、感染、又は外傷によって引き起こされる、請求項１２に記載の使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１５】
前記処置が、炎症若しくは慢性炎症性疾患を治癒すること、又は炎症に伴う症状を低減させることを含む、請求項１〜１４のいずれかに記載の、使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１６】
前記予防が、炎症の発症を予防すること、又は慢性炎症性疾患の進行を予防若しくは緩徐化することを含む、請求項１〜１５のいずれかに記載の、使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１７】
前記治療又は予防が、レクチンタンパク質を１〜５０mg/kgの用量で投与する工程を含む、請求項１〜１６のいずれかに記載されている使用のためのレクチンタンパク質。
【請求項１８】
レクチンタンパク質と薬学的に許容される希釈剤又は賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項１９】
レクチンタンパク質又は請求項１８の医薬組成物を対象に投与する工程を含む、対象における炎症の治療法又は予防法。
【請求項２０】
炎症が炎症性疾患である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
炎症性疾患が関節炎である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
レクチンタンパク質が組換えレクチンである、請求項１９〜２１のうちの一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記方法が、レクチンタンパク質を１〜５０mg/kgの用量で投与する工程を含む、請求項１９〜２２のうちの一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年９月１６日に出願されたインド仮出願番号第２０１８２１００９６６７号の恩典を請求し、その全内容が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、炎症性疾患をはじめとする、炎症の予防、治療、及び治癒のためのレクチンタンパク質の使用に関する。
【０００３】
発明の背景
炎症は、治癒プロセスを惹起する化学シグナルの多因子ネットワークをトリガーすることによって、損傷組織をさらなる感染から防御することに寄与する。これは、重要な血球（好中球、単球、及び好酸球）の活性化及び損傷部位への遊走を含む。細胞（マクロファージ、肥満細胞、内皮細胞、及びシュワン細胞）は、神経再生に必要とされるサイトカイン及び特定の増殖因子を分泌し、最終的には、正常な微小環境が再構築される。
【０００４】
創傷治癒に関連した炎症（正常な炎症）は、通常、自然治癒する；しかしながら、収束因子のいずれかの調節不全により、異常が起こり得、最終的には急性又は慢性の炎症によって特徴付けられる発病に至り得る。慢性炎症は、長期の炎症であり、数か月間、さらには数年間にわたり続き得、一方、急性炎症は、急速に始まり、短期間のうちに重症となる炎症である。慢性炎症としては、乾癬／乾癬性関節炎、関節リウマチ（ＲＡ）、急性肝炎、喘息、及び過敏性腸疾患が挙げられ、これは、間に合うように良好に管理されそして良好に処置される必要がある。慢性炎症によって引き起こされる損傷は、不可逆性であり、非常に痛みがある。
【０００５】
現在、炎症性疾患のいくつかを処置するのに使用される薬物療法は、疾患の種類に応じて変更される。一般的に使用される薬物療法としては以下が挙げられる：
【０００６】
鎮痛薬は、疼痛を低減させるのを助けるが、炎症に対する効果は全くない。例としては、アセトアミノフェン（タイレノール、その他）、トラマドール（ウルトラム、ウルトラセト、その他）、及びオキシコドン含有麻薬（パーコセット、オキシコンチン、その他）、又はヒドロコドン（ノルコ、ビコプロフェン、その他）が挙げられる。非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）は、疼痛及び炎症の両方を低減させる。ＮＳＡＩＤｓとしては、イブプロフェン（アドビル、モトリンＩＢ、その他）及びナプロキセンナトリウム（アリーブ）が挙げられる。反対刺激剤のクリーム及び軟膏のいくつかの種類は、メントール又はカプサイシンを含有している。疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤｓ）は、関節リウマチを処置するために使用されることが多い。ＤＭＡＲＤｓは、免疫系が関節を攻撃するのを緩徐化するか又は止めさせる。例としては、メトトレキサート（トレクサール）及びヒドロキシクロロキン（プラケニル）が挙げられる。「ＪＡＫ阻害剤」として知られるＤＭＡＲＤｓの新規な下位カテゴリーは、生体の免疫応答に関与している、ヤヌスキナーゼすなわちＪＡＫの経路を遮断する。トファシチニブは、このクラスに属する。生物学的製剤とは異なり、それは経口摂取することができる。典型的にはＤＭＡＲＤｓと併用される、生物学的応答修飾剤は、免疫応答に関与する、様々なタンパク質分子に標的化する、遺伝子工学操作された薬物である。それらは、Ｂ細胞／Ｔ細胞阻害剤、選択的な共刺激修飾薬である。例としては、エタネルセプト（エンブレル）、セルトリズマブ（シムジア）、リツキシマブ（リツキサン）、及びインフリキシマブ（レミケード）が挙げられる。プレドニゾン及びコルチゾンなどの副腎皮質ステロイドは、炎症を低減させ、免疫系を抑制する。
【０００７】
薬物療法には、治療法（理学療法、冷熱療法）、体重減少、装具、運動、経皮的神経電気刺激法、及び手術を伴い得る。しかしながら、上記の各薬物療法は、それ自体に副作用を有する。それ故、生物学的製剤は選択肢であり続ける。これらの薬物は、ＤＭＡＲＤｓのサブセットである。生物学的製剤は、伝統的なＤＭＡＲＤｓよりも迅速に作用し得、注射されるか又は注入によって投与される。生物学的製剤は炎症プロセスの特定の段階を標的化するので、いくつかの他の炎症性疾患の処置が全免疫応答を一掃するように、全免疫応答を一掃することはない。炎症性疾患を有する多くの人々において、生物学的製剤は、他の処置があまり助けにならなかった時でさえも、該疾患を緩徐化、修飾、又は停止することができる。今日、炎症性疾患の処置に認可されている生物学的製剤は非常に少ない。それらは非常に費用が高く、少ない生産及び高い需要に因り、殆ど入手できない。したがって、炎症性疾患の処置のための選択肢を提供する必要性が充足されておらず、ここでの選択肢は、その作用に対して非常に特異的であり、安価であり、そして市場のニーズを効果的に達成する。
【０００８】
本発明の目的
それ故、本発明の目的は、炎症性疾患の処置のための非常に特異的かつ効果的な生物学的製剤を提供することである。
【０００９】
本発明のさらに別の目的は、炎症性疾患の処置のための経済的かつ効果的な方法を提供することである。
【００１０】
本発明の別の目的は、炎症性疾患の処置のための組換えタンパク質を提供することである。
【００１１】
本発明のさらに別の目的は、組換えタンパク質を使用した炎症性疾患の処置法を提供することである。
【００１２】
本発明のさらに別の目的は、炎症性疾患に苦しむ対象における、該疾患を治癒又はその作用を低減させるための方法を提供することである。
【００１３】
発明の要約
本発明の第一の態様によると、対象における炎症の治療又は予防に使用するためのレクチンタンパク質が提供される。
【００１４】
レクチンは、高度に特異的な糖鎖結合タンパク質であり、これは、他の分子の糖部分に高度に特異的である巨大分子である。レクチンは、細胞レベル及び分子レベルで認識を行ない、細胞、糖鎖、及びタンパク質の関与する生物学的な認識現象において数多くの役割を果たす。それらは、糖タンパク質に結合し沈降させ、赤血球を凝集させる、二価又は多価の糖鎖結合タンパク質である。動物に見られるレクチンは、細胞相互作用を補助することが多いことが判明し、一方、植物レクチンは、潜在的な捕食者又は病原体を防ぐことが知られている。
【００１５】
精製されたレクチンは、血液型判定にも使用されるので、臨床現場において重要である。個人の赤血球上の糖脂質及び糖タンパク質のいくつかは、レクチンによって同定され得る。多くのレクチンが、悪性増殖の早期検出を示すバイオマーカーとして、又はオートファジー誘導物質として使用され、一方、他のレクチンもまた、アポトーシスを通して癌性増殖を抑制する能力を示す。制御不能な細胞増殖に因り、糖鎖部分のいくつかは、癌細胞上の抗原として発現している。レクチンは、悪性腫瘍に特異的に結合するので、癌療法において薬物送達剤として使用される。さらに、レクチンはまた、癌関連経路を調節もするので、それらは、癌の診断剤及び治療剤としての可能性も有する。
【００１６】
レクチンが結合し、癌細胞表面上に特徴付けられている、いくつかの抗原が存在する；大半の抗原は特定の種類の癌に対して特異的であり、これらの抗原に対するレクチンの結合により、癌細胞におけるアポトーシスの誘導を通して、癌増殖は抑制され得る。現在、大半の市販されているレクチンは、植物及び他の真核生物に由来する。
【００１７】
白絹病菌（スクレロチウム・ロルフシー）（Sclerotium rolfsii）のレクチン（ＳＲＬ）は、土壌由来の植物病原真菌Ｓ．ロルフシーの菌核体から単離されたレクチンである。ＳＲＬは、ヒト大腸癌、卵巣癌、及び白血病細胞に結合することが示されている。
【００１８】
驚くべきことには、本発明者らは今回、レクチンが、炎症の処置に有用であることを発見した。
【００１９】
本発明の第二の態様によると、レクチンタンパク質と薬学的に許容される希釈剤又は賦形剤とを含む、医薬組成物が提供される。
【００２０】
本発明の第三の態様によると、対象における炎症の治療法又は予防法が提供され、該方法は、レクチン又は本発明の第二の態様の医薬組成物を対象に投与する工程を含む。
【００２１】
レクチンは、配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するアミノ酸配列を含み得る。いくつかの実施態様では、レクチンは、配列番号２、３、又は４に対して少なくとも６０％の相同性を有するアミノ酸配列を含み得る。いくつかの実施態様では、レクチンは、配列番号１に対して少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の相同性を有する、アミノ酸配列を含む。いくつかの実施態様では、レクチンは、配列番号１、２、３、又は４のアミノ酸配列を含む。レクチンは組換え体であってもよい。
【００２２】
さらなる態様では、本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質を使用した、炎症性疾患の処置法に関する。
【００２３】
本発明はさらに、対象における炎症性疾患の処置に使用するための、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質に関する。
【００２４】
別の態様では、本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質を使用した、対象における炎症性疾患の予防のための、又は発症の予防のための、又は進行の予防のための方法に関する。
【００２５】
本発明はさらに、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質を使用した、対象における炎症性疾患を治癒又はその作用を低減させるための方法に関する。
【００２６】
本発明はさらに、対象における炎症性疾患を治癒するために、その進行を予防するために、又はその作用を低減するために使用する、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質に関する。
【００２７】
またさらなる態様では、本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質を使用した、対象における関節炎の処置法に関する。
【００２８】
本発明はさらに、対象における関節炎の処置に使用するための、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質に関する。
【００２９】
さらなる態様では、本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質を使用した、対象における関節炎の予防のための、又はその発症の予防のための、又はその進行の予防のための方法に関する。
【００３０】
本発明はさらに、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質を使用した、対象における関節炎を治癒又はその作用を低減させる方法に関する。
【００３１】
本発明はまた、対象における関節炎を治癒、又はその進行を予防、又はその作用を低減するのに使用するための、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質に関する。
【００３２】
本発明はまた、炎症性疾患の処置法に関する。該方法は、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質の投与を含む。レクチンタンパク質は、約１mgから５０mg/kg（対象の体重）の範囲内の量で投与され得る。レクチンタンパク質は、そのままで、又は薬学的に許容される剤形で投与され得る。
【００３３】
配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチンタンパク質、又は配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するレクチンタンパク質は、溶液又は懸濁液を静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、皮下に、皮内に注射することによって、デポ剤の注射によって、髄腔内に、経皮的に、舌下に、又は経口的方法、局所的方法、又は吸入による方法によって対象に投与され得る。
【００３４】
本明細書において使用する「レクチン」という用語は、糖鎖結合タンパク質を指す。
【００３５】
本明細書において使用する「タンパク質」という用語は、アミノ酸残基のポリマーを指す。
【００３６】
本明細書において使用する「アミノ酸」という用語は、天然アミノ酸及び合成アミノ酸、並びに、天然アミノ酸と類似した機能を有するアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣体を指す。天然アミノ酸は、遺伝子コードによってコードされるアミノ酸であり、これは、タンパク質原生アミノ酸（すなわち、細胞内での翻訳中に生合成的にタンパク質に取り込まれたアミノ酸）を含む。天然アミノ酸はまた、細胞内で翻訳後に修飾されたアミノ酸も含む。合成アミノ酸は、非標準アミノ酸、例えばセレノシステイン及びピロリジンを含む。典型的には、合成アミノ酸は、タンパク質原生アミノ酸ではない。
【００３７】
アミノ酸は、異なる生化学的特性に応じて分類され得ることが理解される。例としては、極性アミノ酸、非極性アミノ酸、酸性アミノ酸及び塩基性アミノ酸が挙げられる。１つの実施態様では、アミノ酸の修飾のために使用されるアミノ酸は、極性、非極性、酸性、塩基性、セレノシステイン、ピロリジン、及び非標準からなる群より選択されるがこれらに限定されない少なくとも１つである。
【００３８】
本明細書において使用する「相同性」又は「相同な」という用語は、所与の領域又は部分にわたり少なくとも部分的な同一性を共有する、２つ以上の参照された実体を指す。相同性又は同一性の区域、領域、又はドメインは、相同性若しくは同一性を共有するか又は同じである、２つ以上の参照された実体の部分を指す。したがって、２つの配列が、１つ以上の配列領域にわたり同一である場合、それらはこれらの領域において同一性を共有する。実質的な相同性は、構造的に又は機能的に保存されている分子を指し、よって該分子は、参照分子の、又は該分子が相同性を共有する参照分子の関連する／対応する領域若しくは部分の、１つ以上の構造若しくは機能（例えば生物学的機能又は活性）のうち少なくとも部分的な構造若しくは機能を有するか又は有すると予測される。
【００３９】
１つの実施態様では、２つの配列間の「相同性」の比率は、デフォールトパラメーターを用いてＢＬＡＳＴＰアルゴリズムを使用して決定される（Altschul et al. Nucleic Acids Res. 1997 Sep 1;25(17):3389-402）。特に、ＢＬＡＳＴアルゴリズムは、インターネット上でＵＲＬ：https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgiを使用してアクセスすることができる。代替的な実施態様では、グローバル配列アラインメントでは、２つの配列間の同一性相同性の比率は、デフォールトパラメーターを使用して、ＥＭＢＯＳＳ Ｎｅｅｄｌｅアルゴリズムを使用して決定される。特に、ＥＭＢＯＳＳ Ｎｅｅｄｌｅアルゴリズムは、インターネット上でＵＲＬ：https://www.ebi.ac.uk/Tools/psa/emboss_needleを使用してアクセスすることができる。
【００４０】
特記されていない限り、「相同性」という用語は、本明細書において「同一性」という用語と同義語として使用される。
【００４１】
炎症は、典型的には、膨張、赤み、熱感を帯びた斑点の症状を生体上に呈する。しかしながら、炎症は、明らかな症状を全く伴うことなく起こる場合もある。炎症は、高感度のＣ反応性タンパク質及び白血球数を測定することによって検出され得る。これらは、血液検査を用いて測定され得る。
【００４２】
血中タンパク質であるＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は、ＣＲＰレベルは炎症が増すにつれて上昇するので、炎症の最善の指標の１つである。いくつかの実施態様では、「炎症」という用語は、対象が、少なくとも１．０mg/Ｌ、少なくとも３．０mg/Ｌ、又は少なくとも１０．０mg/ＬのＣ反応性タンパク質濃度の血液を有することを意味する。
【００４３】
高い白血球数は、感染、ストレス、炎症、外傷、アレルギー、又は特定の疾患を示し得る。
【００４４】
成人の白血球数の正常範囲は一般的に、４，０００〜１０，５００個の細胞/mL（血液）である。１０，５００超は、高いと判断される。いくつかの実施態様では、「炎症」という用語は、対象が少なくとも１０，５００個の細胞/mLの白血球数を有することを意味する。
【００４５】
インシュリンは、膵臓によって産生され貯蔵されるホルモンであり、このホルモンは血中グルコースレベルを調節するのを助ける。インシュリン抵抗性は、インシュリンの作用に応答する能力が低下している。結果として、生体は追加の量のインシュリンを産生し、これは体内の炎症プロセスを増加させる。臨床範囲は、２．６〜２４．９μIU/mLであり；至適範囲は１．０〜５．０μIU/mLである。
【００４６】
いくつかの実施態様では、「炎症」という用語は、対象が少なくとも５．０μIU/mL又は少なくとも２４．９μIU/mLのインシュリンレベルを有することを意味する。
【００４７】
ヘモグロビンＡ１Ｃ（ＨｂＡ１ｃ）は、過去３カ月間にわたる、平均の血中グルコース量すなわち血糖を提供する（赤血球の寿命は３カ月間である）。ヘモグロビンＡ１ｃ（すなわち糖化ヘモグロビン）は、グルコースがヘモグロビン（酸素を運ぶ赤血球中のタンパク質）に付着すると、血中に形成される。血中のグルコースレベルが高ければ高いほど、より多くの糖化ヘモグロビンが形成される。慢性的に上昇した血糖は、酵素及び他のタンパク質分子と反応して、終末糖化産物（ＡＧＥ）が作り出される。ＡＧＥは、非常に炎症性であり、生体全体の組織に損傷を及ぼす。結果は、神経学的及び心血管的合併症であり、これは糖尿病ではよくある。臨床範囲は４．８％〜５．６％であり；至適範囲は４．５％〜５．２％である。ＨｂＡ１ｃレベルは典型的には、糖化していないヘモグロビンと比較した糖化ヘモグロビンの比率として、又は無次元の単位として測定される。いくつかの実施態様では、「炎症」という用語は、対象が、少なくとも５．２％又は少なくとも５．６％のＨｂＡ１ｃレベルを有することを意味する。
【００４８】
フェリチンは、鉄を貯蔵する血液細胞タンパク質である。低レベルのフェリチンは、鉄欠乏症を示し、これは、赤血球数の減少である貧血を引き起こす。ＣＲＰと同様に、フェリチンは、急性期反応物質である。これにより、慢性疾患プロセスを検出する際に、フェリチン検査は有用となる。上昇したレベルのフェリチンは、炎症を示し得る。臨床範囲は３０〜４００ng/mLであり；至適範囲は女性では１０〜３００ng/mLであり、男性では２３〜３３６g/mLである。
【００４９】
いくつかの実施態様では、「炎症」という用語は、対象が、少なくとも２００ng/mL、少なくとも３００ng/mL、又は少なくとも３３６ng/mLのフェリチンレベルを有することを意味する。
【００５０】
赤血球分布幅（ＲＤＷ）は、生体内の炎症を検出するための優れた検査である。ＲＤＷは、全ての原因に由来する死亡リスク及び血流の感染の「頑強な予測因子」である。ＲＤＷは、全体的な炎症及び酸化ストレスを反映する。ＲＤＷは、個体における赤血球の全集団を構成する、赤血球のサイズのばらつきを表現する。血管のサイズは、血液細胞の成熟と大いに関係し、これは、葉酸及びビタミンＢ１２などのメチル化剤に依存する。臨床範囲は１２．３〜１５．４％であり；至適範囲は１１．６〜１５％である。
【００５１】
いくつかの実施態様では、「炎症」という用語は、対象が少なくとも１５％、又は少なくとも１５．１％の赤血球分布幅を有することを意味する。
【００５２】
リウマチ因子は、血液成分のγグロブリンに対して作用する抗体である。臨床範囲は２０IU/mL又はそれ以上であり；至適範囲は０〜２０IU/mLである。
【００５３】
いくつかの実施態様では、「炎症」という用語は、対象が少なくとも２０IU/mLのリウマチ因子レベルを有することを意味する。
【００５４】
Ｔ細胞及びマクロファージはどちらも、炎症応答の一部としてＩＬ−６を分泌し、よって、対象において上昇したＩＬ−６は全身炎症を示し得る。
【００５５】
添付配列の簡単な説明
・配列番号１は、天然のスクレロチウム・ロルフシー（Sclerotium rolfsii）のレクチンのアミノ酸配列を示す。
・配列番号２は、Ｓ．ロルフシーのレクチンのアミノ酸配列の変異体を示す（国際公開公報第２０１０/０９５１４３号ではＲｅｃ−２として報告）。
・配列番号３は、Ｓ．ロルフシーのレクチンのアミノ酸配列の変異体を示す（国際公開公報第２０１０/０９５１４３号ではＲｅｃ−３として報告）。
・配列番号４は、Ｓ．ロルフシーのレクチンのアミノ酸配列の変異体を示す（国際公開公報第２０１４/２０３２６１号に報告）。
【００５６】
配列番号１は、以下の配列
【化１】
2022500040.tif 000002
を有する。
【００５７】
配列番号２は、以下の配列：
【化２】
2022500040.tif 000003
を有する。
【００５８】
配列番号３は、以下の配列：
【化３】
2022500040.tif 000004
を有する。
【００５９】
配列番号４は、以下の配列：
【化４】
2022500040.tif 000005
を有する。
【００６０】
配列番号１の配列と比較した、配列番号２〜４の配列の相違に下線が付されている。
【００６１】
発明の詳細な説明
本発明は、炎症の治療又は予防に、それを必要とする対象において使用するためのレクチンを提供する。
【００６２】
レクチンは、天然であってもよい。本発明の１つの実施態様では、レクチンは、真菌及び植物からなる群に由来するがこれらに限定されない。いくつかの実施態様では、レクチンは、土壌由来の植物病原真菌、例えばＳ．ロルフシーに由来する。「に由来」によって、レクチンはその天然環境から単離され得るか、又はレクチンは天然配列と同一若しくは類似したアミノ酸配列を含むことが理解されるだろう。レクチンは、天然配列に対して少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の相同性を有するアミノ酸配列を含み得る。レクチンは、Ｓ．ロルフシーから単離されていてもよい。
【００６３】
レクチンは、配列番号１に対して少なくとも６０％の相同性を有するアミノ酸配列を含み得る。いくつかの実施態様では、レクチンは、配列番号２、３、又は４に対して少なくとも６０％の相同性を有するアミノ酸配列を含み得る。いくつかの実施態様では、アミノ酸配列は、配列番号１に対して少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の相同性を有する。いくつかの実施態様では、アミノ酸配列は、配列番号２、３、又は４に対して少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の相同性を有する。
【００６４】
配列番号２は、配列番号１に対して９８％の相同性を有する。配列番号３は、配列番号１に対して９６％の相同性を有する。配列番号４は、配列番号１に対して９１％の相同性を有する。
【００６５】
いくつかの実施態様では、レクチンは、配列番号２、配列番号３、又は配列番号４からなる群より選択されたアミノ酸配列を含む。
【００６６】
レクチンは組換え体でもよいし、又は、それは新規に合成されてもよい。本明細書では、「組換え体」という用語は、レクチン遺伝子を、宿主細胞（例えば細菌又は酵母）に導入し、その後、遺伝子を発現させることにより、レクチンを産生することを意味する。組換えタンパク質を調製するための方法は、当業者には周知であろう。例えば、レクチンをコードしている核酸配列を含んでいる、組換えＤＮＡ分子、例えばプラスミド又はウイルスベクターが提供され得る。核酸配列は、適切な宿主細胞においてレクチンの発現を制御することのできるプロモーターに作動可能に連結されていてもよい。組換えＤＮＡ分子は、当技術分野において公知の方法を使用して、例えば形質転換によって、適切な宿主細胞に挿入され得る。適切な宿主細胞としては、原核細胞（例えばＥ．ｃｏｌｉ）及び下等真核細胞（例えば酵母細胞）並びに高等真核細胞の両方が挙げられる。その後、宿主細胞を、適切な条件下で培養することができ、これにより、組換えレクチンが発現される。よって、組換えレクチンを、宿主細胞からの発現産物としての単離により得ることができる。組換えタンパク質は、当技術分野において公知である慣用的な技術、典型的には慣用的なクロマトグラフィー法によって精製され得る。
【００６７】
レクチンは、少なくとも１つの抗炎症活性を有していてもよい。
【００６８】
いくつかの実施態様では、レクチンは、炎症性サイトカインの分泌を抑制又は低減することができる。
【００６９】
当技術分野においては公知であるように、サイトカインは、細胞シグナル伝達に関与する小さなタンパク質である。サイトカインとしては、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、リンホカイン、及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）が挙げられる。本明細書において使用する「インターロイキン」（ＩＬ）としては、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２６、ＩＬ−２３、ＩＬ−２０、及びＩＬ−１５が挙げられる。
【００７０】
レクチンは、ＩＬ−８、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１−β、ＩＦＮ−γ、及びＧＭ−ＣＳＦから選択された１つ以上の炎症性サイトカインの分泌を抑制又は低減することができる場合がある。
【００７１】
レクチンが、炎症性サイトカインの分泌を抑制又は低減する能力は、本明細書に記載の方法をはじめとする、標準的な技術を使用して決定され得る。例えば、レクチンの存在下において（例えばＩＦＮ−γ又はリポ多糖による）炎症性刺激後に分泌される炎症性サイトカインのレベルを決定し、レクチンの非存在下において炎症性刺激後に分泌されるサイトカインのレベルと比較することができる。細胞培養上清（インビトロ試験用）又は血清試料（インビボ試験用）などの試料中のサイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡなどの標準的な技術を使用して決定され得る。
【００７２】
いくつかの実施態様では、レクチンは、炎症性サイトカインの分泌を、５〜５０％、１０〜４０％、１５〜３５％、又は２０〜３０％減少させることができる。
【００７３】
いくつかの実施態様では、レクチンは、血中のＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）レベルを減少させることができる。血中のＣＲＰレベルは、本明細書に記載の技術などの、標準的な技術を使用して決定され得る。例えば、レクチンが全く投与されていないコントロール対象と比較して、１０mg/kgあたりのレクチンを投与された対象において、血中のＣＲＰレベルを、少なくとも２％、少なくとも５％、又は少なくとも１０％減少させることができる場合がある。
【００７４】
いくつかの実施態様では、レクチンは、アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）活性及び／又はコラーゲンレベルを刺激（すなわち増加）することができる。例えば細胞溶解液中のＡＬＰレベルは、公知のアッセイ、例えばｐ−ニトロフェニルホスフェート（ＰＮＰＰ）アッセイによって決定され得る。例えば細胞溶解液中のコラーゲンレベルもまた、公知のアッセイ、例えばＳｉｒｃｏｌｌ色素ベースアッセイを使用して決定され得る。レクチンは、ＡＬＰ活性レベルを、レクチンで処理されていない適切な対照と比較して、５〜５０％、又は１０〜４０％増加させることができる場合がある。レクチンは、コラーゲンレベルを、レクチンで処理されていない適切な対照と比較して、２〜５０％又は３〜４０％増加させることができる場合がある。
【００７５】
本明細書において使用する「炎症」という用語は、対象におけるあらゆる種類の炎症性免疫応答に関する。炎症は、慢性炎症性疾患に関連していても、又はそれは急性炎症であってもよい。
【００７６】
慢性炎症は、長期の炎症であり、数か月間、さらには数年間にわたり続き得、一方、急性炎症は、急速に始まり、短期間のうちに重度となる炎症である。慢性炎症としては、乾癬／乾癬性関節炎、関節リウマチ（ＲＡ）、急性肝炎、喘息、及び過敏性腸疾患が挙げられ、これは、間に合うように良好に管理されそして良好に処置される必要がある。慢性炎症によって引き起こされる損傷は、不可逆性であり、非常に痛みがある。
【００７７】
「慢性炎症」及び「慢性炎症性疾患」は、本明細書全体において同義語として使用される。
【００７８】
いくつかの実施態様では、対象は、慢性炎症性疾患を有する。有利には、レクチンタンパク質は、対象における慢性炎症性疾患の治療又は予防に使用され得る。
【００７９】
慢性炎症性疾患は、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ（ＲＡ）、肝炎、喘息、過敏性腸疾患（クローン病、大腸炎、又は過敏性腸症候群（ＩＢＳ）など）、側頭動脈炎、アトピー性皮膚炎、全身性ループス、多発性硬化症、又はサルコイドーシスであり得る。
【００８０】
いくつかの実施態様では、慢性炎症性疾患は、関節リウマチ（ＲＡ）である。
【００８１】
関節リウマチは、以下の因子を使用して測定又は診断され得る。
【００８２】
抗核抗体（ＡＮＡ）−ループスを有するヒト血中によく見られる、ＡＮＡ（細胞核に対して指向される異常な抗体）はまた、多発性筋炎、強皮症、シェーグレン症候群、混合結合組織病、又は関節リウマチの存在も示唆し得る。これらの抗体の特定のサブセットを検出する検査を使用して、特定の疾患又は関節炎の型の診断を確定することができる。
【００８３】
いくつかの実施態様では、対象は、対象が検出可能なレベルの抗核抗体を有している場合に関節リウマチを有すると考える。
【００８４】
リウマチ因子（ＲＦ）−血液成分のγグロブリンに対して作用する抗体のレベルを検出及び測定するために設計された、この検査はしばしば、関節リウマチを有する人々において陽性である。２０IU/mL以上のレベルは疾患を示すと考えられる。
【００８５】
いくつかの実施態様では、対象は、対象が少なくとも２０IU/mLのリウマチ因子レベルを有する場合、関節リウマチを有すると考えられる。
【００８６】
抗環状シトルリン化ペプチド（抗ＣＣＰ）−抗シトルリン化タンパク質抗体（ＡＣＰＡ）とも呼ばれる、この検査（リウマチ因子の試験と同様に）は関節リウマチを有する人々の約６０〜８０％に存在する、特定の自己抗体の存在を探す。抗ＣＣＰ抗体を有する大半の患者はリウマチ因子も陽性であるが、リウマチ因子抗体は、感染を含む、多くの他の容態を有する患者においても生じ得る。抗ＣＣＰは、関節リウマチにより特異的であり、好ましい検査となっている。
【００８７】
いくつかの実施態様では、対象は、対象が、２０単位/ミリリットル（μ/ml）より高い検出可能なレベルの抗シトルリン化タンパク質抗体を有する場合、関節リウマチを有すると考えられる。
【００８８】
尿酸−血中の尿酸レベルを測定することによって、この検査は、過剰な尿酸が結晶化し、関節及び他の組織内に沈着物を形成し、炎症及び重度の疼痛を引き起こす場合に起こる容態である、痛風の診断を助ける。正常な尿酸レベルは、女性では２．４〜６．０mg/dL、男性では３．４〜７．０mg/dLである。
【００８９】
いくつかの実施態様では、対象は、対象が、少なくとも６．０mg/dL又は少なくとも７．０mg/dLの尿酸レベルを有する場合、関節リウマチを有すると考えられる。
【００９０】
ＨＬＡ組織型判定−血中の特定の遺伝子マーカーの存在を検出する、この検査はしばしば、強直性脊椎炎（脊椎及び仙腸関節の炎症を含む疾患）又は反応性関節炎（尿道、眼、及び関節の炎症を含む疾患）の診断を確定することができる。遺伝子マーカーのＨＬＡ−Ｂ２７は、これらのいずれかの疾患を有する人々にほぼ常に存在する。
【００９１】
いくつかの実施態様では、対象は、対象が遺伝子マーカーＨＬＡ−Ｂ２７を有する場合、関節リウマチを有すると考えられる。
【００９２】
赤血球沈降速度−ＥＳＲ又は「赤沈速度」とも呼ばれる、この検査は、どのくらい速く赤血球が、１時間の経過で、互いにくっつき、落下し、ガラス管の底に沈降（沈降物のように）するかを測定する。赤沈速度が高ければ高いほど、炎症の量は多くなる。この赤沈速度は、１時間の間に赤血球が管を落下する距離で測定される。正常範囲は、女性では０〜２９mm/ｈであり、男性では０〜２０mm/ｈである。感染又は貧血をはじめとする、上昇した赤血球沈降速度を引き起こし得る、多くの容態が存在する。
【００９３】
いくつかの実施態様では、対象は、対象が少なくとも２０mm/ｈ又は少なくとも２９mm/ｈの赤血球沈降速度を有する場合、関節リウマチを有すると考えられる。
【００９４】
Ｃ反応性タンパク質−この検査は、ＣＲＰとも呼ばれるが、これは全身炎症を測定する別の血液検査である。それは、炎症の存在下において増加する、肝臓によって産生される物質を測定する。
【００９５】
いくつかの実施態様では、対象は、対象が少なくとも１．０mg/Ｌ、少なくとも３．０mg/Ｌ、又は少なくとも１０．０mg/ＬのＣ反応性タンパク質濃度の血液を有する場合、関節リウマチを有すると考えられる。
【００９６】
ライム病の血清学的検査−この検査は、ライム病を引き起こす感染病原体に対する免疫応答を検出し、よって、これを使用して、疾患の診断を確定することができる。
【００９７】
いくつかの実施態様では、対象は、急性炎症を有する。有利には、レクチンタンパク質は、対象における急性炎症の治療又は予防に使用され得る。
【００９８】
急性炎症は、アレルギー反応、化学物質又は放射線への対象の曝露、感染又は外傷によって引き起こされ得る。感染は、細菌性、ウイルス性、真菌性、又は寄生虫性であり得る。
【００９９】
「処置」という用語は、炎症若しくは基礎にある慢性炎症性疾患を実質的に治癒（すなわち消失）すること、又は炎症に関連した症状を（永久的に又は一過性にのいずれかで）低減することを含むことが理解されるだろう。このような症状としては、腫脹、疼痛、掻痒、熱、発赤（例えば皮膚の）、機能欠失（例えば、関節又は手足の）、及び呼吸困難が挙げられ得る。
【０１００】
「予防」という用語は、炎症の発症を予防すること、又は炎症若しくは基礎にある慢性炎症性疾患を予防若しくはその進行を緩徐化することを含み得ることが理解されるだろう。
【０１０１】
治療又は予防は、治療有効量のレクチンを対象に投与する工程を含み得る。いくつかの実施態様では、レクチンは、０．１〜１０００mg/kg、０．５〜１００mg/kg、又は１〜５０mg/kgの用量で投与される。投与される予定のレクチンの量を、処置される容態の性質及び対象に応じて決定することは当業者の能力の範囲内であろう。
【０１０２】
したがって、本発明はまた、レクチンタンパク質と薬学的に許容される希釈剤又は賦形剤とを含む、医薬組成物を提供する。例示的な希釈剤及び賦形剤としては、滅菌水、生理食塩水、及び／又は薬学的に許容される緩衝液が挙げられる。
【０１０３】
本発明はさらに、対象における炎症の治療法又は予防法を提供し、該方法は、レクチン又は本明細書に記載のような医薬組成物を対象に投与する工程を含む。
【０１０４】
レクチン又は組成物の投与は、注射（静脈内（ボーラス又は注入）、動脈内、腹腔内、皮下（ボーラス又は注入）、脳室内、筋肉内、又はくも膜下を含む）、経口摂取（例えば錠剤、ゲル剤、ロゼンジ剤、又は液剤の）、吸入、局所、粘膜（例えば口腔粘膜、鼻腔粘膜、又は直腸粘膜）を介して、噴霧剤、錠剤、経皮パッチ、皮下埋込剤の剤形での、又は坐剤の剤形での送達による、を含むがこれらに限定されない、任意の適切な経路により得る。
【０１０５】
いくつかの実施態様では、レクチン（配列番号１、２、３、又は４のアミノ酸配列を有するレクチンなど）又は本明細書に記載のような医薬組成物は、対象に、経腸的に、非経口的に、又は局所的に投与される。レクチン又は医薬組成物は、固体（例えば錠剤又はカプセル剤）、凍結乾燥粉末、液体（例えば液剤又は懸濁剤）、半固体、又は当業者には公知であるような任意の他の形態である、剤形で投与されてもよい。レクチン又は医薬組成物は、対象に、液剤又は懸濁剤を静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、又は皮内に注射することによって、デポ剤の注射によって、投与され得るか、あるいは、それはくも膜下腔内に、経皮的に、舌下に、又は経口による、局所による、若しくは吸入による方法によって投与され得る。
【０１０６】
対象は、哺乳動物の対象であり得る。いくつかの実施態様では、対象はヒトである。特に、対象は、炎症又は炎症性疾患を患っているか又はそれからの予防を所望しているヒト対象であり得る。
【０１０７】
図面及び表の説明
本発明はこれから、以下の図面及び表を参照することによって説明されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【０１０８】
【図１】リポ多糖誘発性サイトカイン放出マウスモデルを使用した、インビボ試験における、炎症性サイトカインの抑制に対する組換えレクチンの効果。
【図２】アジュバント誘発性関節炎（ＡＩＡ）ラットモデルを使用した、足の腫脹に対する組換えレクチンの効果。
【図３】アジュバント誘発性関節炎（ＡＩＡ）ラットモデルを使用した、骨の破壊に対する組換えレクチンの効果。
【図４】アジュバント誘発性関節炎（ＡＩＡ）ラットモデルを使用した、ＣＲＰレベル及びＩＬ−６の抑制に対する組換えレクチンの効果。
【０１０９】
表１：２４時間後のヒト滑膜細胞株（ＳＷ９８２）におけるサイトカイン分泌に対する、組換えレクチンの効果。表２：４８時間後のマウス脾臓細胞におけるサイトカイン分泌に対する、組換えレクチンの効果。表３：２４時間後のマウスマクロファージ細胞株（ＲＡＷ２６４．７）におけるサイトカイン分泌に対する、配列番号２の効果。表４：５日後の骨芽細胞株（ＭＧ−６３）におけるＡＬＰ活性及びコラーゲンレベルに対する、配列番号２の効果。
【０１１０】
炎症性疾患は、免疫系の障害によって引き起こされる疾患である。炎症性疾患は、慢性炎症性疾患又は急性炎症性疾患であり得る。炎症性疾患としては、関節炎、乾癬、側頭動脈炎、皮膚炎、過敏性腸疾患（ＩＢＳ）、全身性ループス、肝炎、喘息、アレルギー反応、サルコイドーシス、及び当業者によって理解されているような類似した疾患が挙げられる。
【０１１１】
炎症の発病に重要な役割を果たす、重要なシグナル伝達経路は、ＭＡＰＫ／ＥＧＦＲ／Ｒａｓ／Ｒａｆ、カンナビノイド受容体２（ＣＮＲ２）、ＩＬ−４／ＳＴＡＴ、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ＦＯＸＯ３、ＴＮＦ−α／ＪＮＫ、ＮＬＲＰ３及びＮＬＲＰ１、ＰＴＰＮ２２、ＰＡＤＩ４、ＳＴＡＴ４、ＴＲＡＦ１−Ｃ５及びＴＮＦＡＩＰ３、ＭｙＤ８８、ＩＲＡＫｓ、及びＴＲＡＦ６である。
【０１１２】
本発明は、レクチン、例えば、配列番号１、２、３、又は４のアミノ酸配列を有するレクチンを使用した、炎症性疾患の処置に関する。本発明はまた、レクチン、例えば配列番号１、２、３、又は４のアミノ酸配列を有するレクチンを使用した、対象における炎症性疾患の予防のための、その発症の予防のための、又はその進行の予防のための方法にも関する。本発明はさらに、レクチン、例えば、配列番号１、２、３、又は４のアミノ酸配列を有するレクチンを使用した、対象における炎症性疾患を治癒するための、又はその作用を低減するための方法に関する。
【０１１３】
本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチン又はその相同体を使用した、対象における関節炎の処置法に関する。本発明はさらに、対象における関節炎の処置に使用される、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチン又はその相同体に関する。本発明はまた、配列番号１のアミノ酸配列を有する組換えレクチン又はその相同体を使用した、対象における関節炎の発症の予防のための又はその進行の予防のための方法も提供する。さらに、本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を有する組換えレクチン又はその相同体を使用した、対象における関節炎を治癒するための又はその作用を低減するための方法に関する。
【０１１４】
出願人の以前の特許出願である第３５０／ＭＵＭ／２００９号は、糖質抗原（Ｇａｌβ１−３ＧａｌＮＡｃ−α−Ｏ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）に対して高い結合特異性を有する、配列番号１のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを開示する。レクチンは、一般的に炎症を引き起こすことが知られている。しかしながら、本発明者らは、驚くべきことに、配列番号１、２、３、又は４のアミノ酸配列を有するレクチンが、抗炎症性であることを発見した。詳述されている研究は、関節炎に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの有効性を確認した。本発明の新規及び発明的な態様は、関節炎を引き起こす炎症などの、炎症の予防、治癒、又はその増殖の低減における、レクチン、例えば配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの使用である。
【０１１５】
炎症の発病に重要な役割を果たす重要なシグナル伝達経路の調節に対する、配列番号２の配列を有する組換えレクチンの効果を、細胞ベースアッセイにおいて評価した。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、関節炎に関連した炎症の発病において重要な経路である、シグナル伝達経路の抑制を示した。以下に詳述されている、これらの結果は、関節炎に関連した炎症における、レクチン、例えば配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの可能性ある有効な効果を示唆する。
【０１１６】
配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンのインビトロでの試験は、炎症誘発性サイトカインを抑制することによる強力な抗炎症活性、及び、炎症の発病において重要な役割を果たすシグナル伝達経路の抑制を実証した。それはまた、ヒト骨芽細胞におけるＡＬＰ活性及びコラーゲンレベルも刺激し、このことは抗炎症能を支持する。
【０１１７】
滑膜線維芽細胞は、炎症の起こった関節炎を示す関節における軟骨及び骨を破壊する、過剰なレベルの炎症性サイトカインを産生する。ヒト滑膜細胞の細胞株は、炎症性サイトカインの発現によって特徴付けられる。ヒト滑膜細胞の細胞株に関するインビトロでの細胞ベースアッセイを、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを使用して実施することにより、ＩＦＮ−γによる刺激に対する、炎症性サイトカイン、例えばインターロイキン、インターフェロン、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、ＰＩ３Ｋδ/γ、及びＴＮＦ−αの分泌に対するその効果を評価した。免疫細胞マウス脾臓細胞に対するインビトロでの細胞ベースリポ多糖誘発アッセイ、及びマウスマクロファージ細胞株ＲＡＷ２６４．７に対するインビトロでの細胞ベースＩＦＮ−γ刺激アッセイにおける、配列番号２のアミノ酸を有する組換えレクチンを使用する効果も評価された。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、炎症性サイトカインの分泌を有意に抑制した。インターフェロンγ（ＩＮＦ−γ）による刺激に対する、ＩＬ−８及びＩＬ−６の分泌は、滑膜細胞において、それぞれ１０％から３０％、及び２０％から５０％抑制された（表１）。同様に、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、リポ多糖を用いて刺激された脾臓細胞における、ＴＮＦ−α及びＩＬ−１−βの分泌をそれぞれ、１５から３５％、及び２０から３２％抑制した（表２）。ＩＦＮ−γを用いて刺激されたマウスマクロファージ（ＲＡＷ２６４．７）細胞株におけるＴＮＦ−αの分泌の抑制は、５から３０％であった（表３）。結果は、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンが、滑膜細胞株における重要な炎症性サイトカイン並びに免疫細胞を抑制することを実証した。
【０１１８】
配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、ヒト骨芽細胞の細胞株における刺激に対する、骨マーカー、例えばアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）活性及びコラーゲンレベルのその効果について評価された。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、対照と比較して、骨芽細胞におけるＡＬＰ活性を１０％から４５％刺激した。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンはまた、対照と比較して、コラーゲンレベルを３％から５０％刺激した（表４）。
【０１１９】
配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンはまた、リポ多糖誘発性サイトカイン放出マウスモデルを使用した、インビボ試験における、炎症性サイトカインの抑制に対するその効果についても試験された。マウスを、リポ多糖（ＬＰＳ）のみ（５０μg/動物）、及び配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチン（２〜５０mg/kg（体重））と併用したＬＰＳ（５０μg/動物）で処置した。配列番号２の配列を有する組換えレクチンの投薬は、リポ多糖の注射の１時間前に行なわれた。正常な対照の動物は、５mL/kgの投薬容量のＴＢＳ（トリス緩衝化食塩水）の投与を受けた。全ての用量は、腹腔内に投与された。ＴＮＦ−α（６７５．７±７６．６pg/mL）及びＩＬ−６（３２５６．０±２０３．１pg/mL）の過剰な分泌が、リポ多糖のみが注射された場合に、血清中に観察された。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、サイトカインの分泌を有意に抑制した（図１）。特に、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、約２０mg/kg（体重）の濃度でそれぞれ、ＴＮＦ−αの分泌を、３０％まで抑制した（４７１．８±４８．３pg/mL）。同様に、ＩＬ−６の分泌は、約２０mg/kg（体重）の濃度で４３％まで抑制した（１８６６．２±１３９．３pg/mL）。
【０１２０】
配列番号２の配列を有する組換えレクチンの効果はさらに、アジュバント誘発性関節炎（ＡＩＡ）ラットモデルにおいて試験された。動物に、２０mg/kg（体重）の濃度で配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを２１日間（アジュバントの注射後８日目から２８日目まで）腹腔内に注射した。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを用いての処置は、ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎動物と比較して、足及び足首の厚さを有意に低減した（図２）。ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎動物の足首関節のＸ線検査のスコア化は、正常な対照動物と比較した場合、骨の重度の破壊を示した。骨破壊の有意な寛解が、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを用いて処置された動物において明らかであった（図３）。ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群は、正常な対照と比較した場合、関節角の有意な減少を示した。約２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを用いて処置された動物は、用量依存的に、関節の可動度を増加させ、比率の改善はそれぞれ最大３４．２％であった。効果は、用量依存的であることが示された。なぜなら、より低用量の組換えレクチンは、関節可動度のより低い改善を示したからである。さらに、組換えレクチンを用いての処置は、ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎動物と比較して、２２％まで低下した、血清中の尿酸のレベルを示した。Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は肝臓によって産生され、血中に認められ得る。一般的に、サイトカインと同様に、血中のＣＲＰレベルも、炎症に応答して上昇する。ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎動物は、増加した血清中ＣＲＰ及びＩＬ−６レベルを示した。ＣＲＰレベルの有意な減少が、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンで処置された動物において観察された（図４）。本発明は、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンが、ＦＣＡ（フロイント完全アジュバント）誘発性関節炎ラットモデルにおいて、用量依存的に関節炎の進行及び重症度を有意に低減することを実証する。よって、本発明は、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチン又はその相同体を使用した、炎症性疾患の処置法を提供する。それは、対象における炎症性疾患の治療法、その発症の予防法、その進行の予防法に、又は治癒するために、若しくはその作用を低減するために使用され得る。
【０１２１】
前記方法は、約１から５０mg/kg（対象の体重）の範囲内の、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチン又はその相同体の投与を含み得、ここでの配列番号１のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、そのままで、又は薬学的に許容される剤形で投与される。
【０１２２】
配列番号１のアミノ酸配列を有する組換えレクチン又はその相同体の好ましい範囲は、約５から３０mg/kg（対象の体重）である。配列番号１のアミノ酸配列を有する組換えレクチン又はその相同体の最も好ましい範囲は、約５から２０mg/kg（対象の体重）である。
【０１２３】
配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの抗関節炎効果は、少なくとも１０％から最大１００％である。
【０１２４】
実施例
以下の実施例は、本発明を実施する最善のモードを実証するために示される。実施例は、いずれにしても本発明の範囲を制限するものではない。
【０１２５】
実施例１：
試験は、ヒト滑膜細胞の細胞株（ＳＷ９８２）における炎症性サイトカイン（ＩＬ−８及びＩＬ−６）の分泌に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果を評価するために実施された。組換えレクチンは、細胞株からの炎症性サイトカインの分泌の抑制を示した。
【０１２６】
ヒト滑膜細胞（ＳＷ９８２）の細胞をまず２４時間培養し、血清を６時間かけて枯渇させ、続いて、炎症性刺激（１００ng/mlのＩＦＮ−γ）と共に、無細胞毒性濃度（１ng/ml〜１０００ng/ml）の配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを用いてさらに２４時間かけて細胞を処置する。上清中のサイトカイン（ＩＬ−６及びＩＬ−８）のレベルは、ＥＬＩＳＡによって決定された。サイトカインの分泌に対する組換えレクチンの抑制作用は、以下のように計算された：
サイトカインの抑制％＝［（Ａ−Ｂ）/Ａ］×１００
ここで、
Ａ＝対照細胞（ＩＮＦ−γのみ）におけるサイトカイン濃度。
Ｂ＝処置された細胞（組換えレクチン＋ＩＦＮ−γ）におけるサイトカイン濃度。
【０１２７】
配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、ＩＦＮ−γによる刺激に対する、滑膜細胞（ＳＷ９８２）からのＩＬ−８の分泌を抑制し（１１．２％〜２７．９％）、ＩＦＮ−γによる刺激に対する滑膜細胞（ＳＷ９８２）からのＩＬ−６の分泌を抑制した（２３．７％〜４９．４％）ことが認められた。
【０１２８】
実施例２：
別の試験は、免疫細胞（マウス脾臓細胞及びマウスマクロファージ細胞株（ＲＡＷ２６４．７））からの炎症性サイトカイン（ＴＮＦ−α及びＩＬ−１−β）の分泌に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果を決定するために実施された。
【０１２９】
脾臓細胞は、Ｃ５７ＢＬ／６マウスから単離され、２５ng/mlのリポ多糖と共に、無細胞毒性濃度（１ng/ml〜１０００ng/ml）の配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンで４８時間処置した。
【０１３０】
ＲＡＷ２６４．７細胞を２４時間培養し、血清をさらに２４時間かけて枯渇させ、続いて、無細胞毒性濃度（１ng/ml〜１０００ng/ml）の配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチン及び炎症性刺激ＩＦＮ−γ（１００ng/ml）を用いて２４時間かけて細胞を共処置した。上清中のサイトカイン（ＴＮＦ−α及びＩＬ−１−β）のレベルはＥＬＩＳＡによって決定された。
【０１３１】
サイトカインの分泌に対する、組換えレクチンの抑制作用は、以下のように計算された：
サイトカインの抑制％＝［（Ａ−Ｂ）/Ａ］×１００
ここで、
Ａ＝対照細胞（リポ多糖又はＩＮＦ−γのみ）におけるサイトカイン濃度。
Ｂ＝処置された細胞（組換えレクチン＋リポ多糖又はＩＦＮ−γ）におけるサイトカイン濃度。
【０１３２】
マウス脾臓細胞では、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンが、リポ多糖による刺激に対する脾臓細胞からのサイトカインの分泌の抑制を示したことが観察された（ＴＮＦ−αでは１７．２％〜３２．９％、ＩＬ−１−βでは２３．５％〜３０．４％）
【０１３３】
マウスマクロファージ（ＲＡＷ２６４．７）では、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、リポ多糖による刺激に対するマクロファージ（ＲＡＷ２６４．７）からのＴＮＦ−αの分泌を抑制した。
【０１３４】
実施例３：
別の試験は、ヒト骨芽細胞の細胞株（ＭＧ−６３）における骨マーカー（アルカリホスファターゼ及びコラーゲン）に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果を決定するために実施された。まず、ＭＧ−６３細胞を２４時間培養し、血清をさらに２４時間かけて枯渇させ、続いて、無細胞毒性濃度（１ng/ml〜１０００ng/ml）の濃度の配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンを用いて細胞を５日間処置した。細胞溶解液中のアルカリホスファターゼ活性は、ＰｎＰＰベースアッセイによって決定された。細胞溶解液中のコラーゲンレベルは、Ｓｉｒｃｏｌｌ色素ベースアッセイによって決定された。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、ヒト骨芽細胞の細胞株（ＭＧ−６３）におけるアルカリホスファターゼ活性（１１％〜４２．８％）及びコラーゲンレベル（３．２％〜４５．３％）を増加させた。
【０１３５】
実施例４：
別の試験は、関節リウマチの発病において重要な役割を果たしている重要なシグナル伝達経路に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果を考察するために実施された。
【０１３６】
重要なシグナル伝達経路の調節に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果は、Ｇｅｎｅｂｌａｚｅｒ及びＴａｎｇｏ技術を使用した細胞ベースアッセイにおいて決定された。
【０１３７】
配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、以下の経路（ＭＡＰＫ／ＥＧＦＲ／Ｒａｓ／Ｒａｆ、カンナビノイド受容体２（ＣＮＲ２）、ＩＬ−４／ＳＴＡＴ、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ＦＯＸＯ３、及びＴＮＦ−α／ＪＮＫ）を抑制したことが認められ、関節リウマチの場合に有利に働く配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチン又はその相同体の示唆された役割をさらに強化する。
【０１３８】
インビボでの実験
実施例５：
別の試験は、リポ多糖誘発性サイトカイン放出マウスモデルにおける、炎症性サイトカイン（ＴＮＦ−α及びＩＬ６）に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果を調べるために実施された。
【０１３９】
３０匹の雌のＣ５６ＢＬ６マウスを、体重に基づいて無作為化し、５つの群に割り当てた（ｎ＝６）。リポ多糖の投与を受けている群では（Ｇ２）、１回量の５０μg/動物のリポ多糖が腹腔内（ＩＰ）に注射された。１０及び２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチン＋リポ多糖の投与を受けている群では（Ｇ３及びＧ４）、１０及び２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの１回の腹腔内注射が、リポ多糖の注射の１時間前に投与された。１mg/kgのデキサメタゾン（Ｇ５）＋リポ多糖の群では、１mg/kgのデキサメタゾンの１回の腹腔内注射が、リポ多糖の注射の１時間前に投与された。正常な対照動物（Ｇ１）は、５mL/kgの投薬容量のトリス緩衝化食塩水の腹腔内投与を受けた。
【０１４０】
血液は、リポ多糖を用いての処置から９０分後に回収され、血液を血清の回収のために遠心分離にかけた。血清試料を−８０℃で保存した。血清中のＴＮＦ−α及びＩＬ−６は、ＥＬＩＳＡキットを使用して測定された。
【０１４１】
血清サイトカインレベル
トリス緩衝化食塩水で処置されたマウスの血清中のＴＮＦ−αは、１０２．３±９．２pg/mLであり、一方、トリス緩衝化食塩水で処置されたマウスの血清中のＩＬ−６濃度は、２０４．０±１４．３pg/mLであった。
【０１４２】
平均して６７５．７±７６．６pg/mLまでの、血清中ＴＮＦ−αレベルの有意な増加が、９０分目においてリポ多糖群において観察された。これは、それぞれ１０mg/kg及び２０mg/kgの、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンによって、５６６．２±５２．３及び４７１．８±４８．３pg/mLまで抑制され、それぞれ１６．２％及び３０．２％の減少率を示した。
【０１４３】
平均して３２５６．０±２０３．１pg/mLまでの、血清中ＩＬ−６レベルの有意な増加が、９０分目においてリポ多糖群において観察された。これは、それぞれ１０mg/kg及び２０mg/kgの、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンによって、２６０１．３±２６８．２及び１８６６．２±１３９．３pg/mLまで抑制され、それぞれ２０．１％及び４２．７％の減少率を示した。
【０１４４】
簡潔に言えば、配列番号１のアミノ酸配列を有するレクチン又はその相同体は、リポ多糖誘発性炎症マウスモデルにおける、炎症誘発性サイトカインであるＴＮＦ−α及びＩＬ−６を抑制するその能力に因り、有望な抗炎症活性を有することが実証される。
【０１４５】
実施例６：
別の試験は、アジュバント誘発性関節炎ラットモデルに対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果を見るために実施された。
【０１４６】
アジュバント関節炎は、１００μL（０．５mg）の乾燥させたマイコバクテリウム・ブチリカム（Mycobacterium butyricum）−完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）（コンドレックス社）を３４匹のラットの左後足（０日目）に注射することによって誘発された。実験０日目に、２４匹の動物が選択され、無作為化され、各々６匹の４つの群に割り当てられた。
【０１４７】
群は、以下の通りであった：
Ｇ１：正常な対照。
Ｇ２：アジュバント誘発性関節炎の対照（ＡＩＡ）＋トリス緩衝化食塩水
Ｇ３：ＡＩＡ＋１０mg/Kgの組換えレクチン。
Ｇ４：ＡＩＡ＋２０mg/Kgの組換えレクチン。
Ｇ５：ＡＩＡ＋０．５mg/Kgのデキサメタゾン。
【０１４８】
配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチン化合物を、アジュバント注射後、２つの群（Ｇ３及びＧ４）に８日目から２８日目に投与した（計２１日間の処置）。対照群には以下が投与された。正常な対照動物（Ｇ１、ｎ＝６）の左後足に、１００μLのパラフィンオイルを０日目に注射し、その後、８日目から２８日目に、トリス緩衝化食塩水（５mL/kg）を腹腔内に投薬した。別の対照群は、０日目に完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）の投与を受け、続いて、８日目から２８日目にトリス緩衝液食塩水を腹腔内に注射した（Ｇ２）。配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの投与を受けた群では、１０及び２０mg/kgの薬物（それぞれＧ３及びＧ４）の腹腔内注射を、１日１回２１日間（８日目から２８日目に）投与した。デキサメタゾンの群では（Ｇ５）、０日目に完全フロイントアジュバントを投与した後、０．５mg/kgのデキサメタゾンの腹腔内注射を１日１回２１日間（８日目から２８日目に）投与した。
【０１４９】
足の厚さは、デジタルマイクロメーター（ミツトヨ社）によって測定された。足関節の角度（度）も記録された。アジュバントの注射後２８日目、及び処置後２１日目に、全血を動物から回収し、遠心分離にかけて血清を分離した。血清試料を、−８０℃で保存した。血清中尿酸及びＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）及びＩＬ−６は、下記のキットを使用して測定された。
【０１５０】
【表１】
2022500040.tif 000006
【０１５１】
関節破壊の評価（Ｘ線検査による評価）：
終了日に（２８日目）、股関節の下の後足を区分化した。後足のＸ線写真を撮影した。Ｘ線写真上の骨損傷の重症度は、骨膜炎及び骨破壊の等級付けによって評価された。
【０１５２】
ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）の後足のＸ線検査は、遠位脛骨、足根、中足、及び踵骨における骨の重度の組織崩壊（骨膜炎及び破壊）を示した。２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は、この骨膜炎及び骨破壊を中等度に寛解し（Ｇ４）、一方、１０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンは、明白な効果を示した（Ｇ３）。０．５mg/kg（腹腔内）のデキサメタゾンは、有意な寛解を示した（Ｇ５）。
【０１５３】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルの足首骨のＸ線検査に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果
ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）の足首関節Ｘ線検査は、正常な動物（Ｇ１）と比較した場合、重度の骨の破壊を示した。１０mg/kg及び２０mg/kgの（Ｇ３及びＧ４）の配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は、この骨破壊を軽度から中等度に寛解した。０．５mg/kg（腹腔内）のデキサメタゾンは、有意な寛解を示した（Ｇ５）。
【０１５４】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルの関節角度（関節の可動度）に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果
ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）は、正常な対照群（Ｇ１）と比較した場合、関節角度の有意な減少を示した。１０mg/kg及び２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は（Ｇ３及びＧ４）、用量依存的に関節可動度を増加させ、それぞれの改善率は７．９％及び３４．２％であった。０．５mg/kgのデキサメタゾンは、６１．８％の有意な寛解（Ｇ５）を示した。
【０１５５】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルの後足及び足首の厚さに対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの抑制効果
ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）は、後足及び足首の厚さの有意な増加を示した。２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は、後足及び足首の腫脹を有意に低減し（Ｇ４）、一方、１０mg/kgは、弱い効果を示した（Ｇ３）。０．５mg/kg（腹腔内）のデキサメタゾンは、有意な寛解を示した（Ｇ５）。
【０１５６】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルの血清中尿酸レベルに対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果
デキサメタゾンは、アジュバント誘発性関節炎ラットにおいて血清中尿酸レベルを有意に低減した（Ｇ５）。１０mg/kg及び２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は（Ｇ３及びＧ４）、尿酸レベルを用量依存的に低減し、それぞれ減少率は１１．０％及び２２．０％であった。
【０１５７】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルにおける血清中ＩＬ−６及びＣＲＰレベルに対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの効果
Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は、トリス緩衝化食塩水（ＴＢＳ）処置ラット（Ｇ１）の血清中において２９０．６±１５．５pg/mLであり、一方、ＴＢＳ処置ラットの血清中のＩＬ−６濃度は、２６５．８±２２．７pg/mLであった。平均して６９８９．２±４７５．２pg/mLまでの血清中ＩＬ−６レベルの有意な増加が、関節炎群（Ｇ２）において観察された。これは、１０mg/kg及び２０mg/kgの用量の、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンによって、それぞれ６２１９．８±３５９．８及び５３９３．６±４２０．４pg/mLまで抑制され（Ｇ３及びＧ４）、それぞれ１１．０％及び２２．８％の減少率を示した。
【０１５８】
平均して７４８．２±２１．８pg/mLまでの血清中ＣＲＰレベルの有意な増加が、関節炎群（Ｇ２）において観察された。これは、１０mg/kg及び２０mg/kgの、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンによって、それぞれ７２６．４±３６．６及び５２３．３±１１０．５pg/mLまで抑制され（Ｇ３及びＧ４）、それぞれ２．９％及び３０．１％の減少率を示した。
【０１５９】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルにおける胸腺及び脾臓の重量に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチン及びデキサメタゾンの効果
ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）は、正常な対照群（Ｇ１）と比較した場合、胸腺の重量の有意な減少を示した。１０mg/kg及び２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は（Ｇ３及びＧ４）、Ｇ２群と比較して、それぞれ１４．４８％の増加及び３．９８％の減少を示した。０．５mg/kg（腹腔内）のデキサメタゾン）は、Ｇ２群と比較して、胸腺の重量のかなりの減少（すなわち１９．３３％）を示した。
【０１６０】
ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）は、正常な対照群（Ｇ１）と比較した場合、脾臓の重量の僅かな増加を示した。１０mg/kg及び２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は（Ｇ３及びＧ４）、Ｇ２群と比較して、それぞれ４０．５５％及び１２．１７％の増加を示した。０．５mg/kg（腹腔内）のデキサメタゾンは、Ｇ２群と比較して、脾臓の重量の有意な減少（すなわち５１．５７％）を示した。
【０１６１】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルの血液学的検査に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチン及びデキサメタゾンの効果
ビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）は、正常な対照群（Ｇ２）と比較した場合、試験された全ての血液学的パラメーターの中等度からかなりの変化を示した。１０mg/kg及び２０mg/kgの配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチンの２１日間の腹腔内注射は（Ｇ３及びＧ４）、関節炎によって引き起こされた変化を改変しなかった。しかしながら、０．５mg/kg（腹腔内）のデキサメタゾンは、Ｇ２群と比較して、血液学的検査値の中等度からかなりの変化（すなわち白血球−６０．３％の減少、赤血球−２３．４％の増加、ヘモグロビン−２５．２％の増加、及びヘマトクリット値−２２．４％の増加）を示した。
【０１６２】
アジュバント誘発性関節炎ラットモデルの体重に対する、配列番号２のアミノ酸配列を有する組換えレクチン及びデキサメタゾンの効果
組換えレクチンで処置された群（Ｇ３及びＧ４）及びビヒクルで処置されたアジュバント誘発性関節炎群（Ｇ２）は、体重の増加において、正常な対照群（Ｇ１）と類似した傾向を示した。しかしながら、０．５mg/kg（腹腔内）のデキサメタゾン群（Ｇ５）は、処置全期間において体重の増加を全く示さなかった。
【０１６３】
【表２】
2022500040.tif 000007
【０１６４】
【表３】
2022500040.tif 000008
【０１６５】
【表４】
2022500040.tif 000009
【０１６６】
【表５】
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【図１】
2022500040.tif 000011
【図２】
2022500040.tif 000012
【図３】
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【図４】
2022500040.tif 000014
【配列表】
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【国際調査報告】
2022500040.tif 000015
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