【手続補正書】
【提出日】平成22年5月13日(2010.5.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
野生型ＬＥＣ１プロモータに対して欠失を含むＬＥＣ１プロモータの単離断片であって、前記単離断片は、アラビドプシスの非胚植物生長性組織においてプロモータ活性を有し、図１に示す配列の少なくとも５００塩基、またはその機能的同等物を含み、前記機能的同等物もまた、アラビドプシスの非胚植物生長性組織においてプロモータ活性を有し、かつ、配列アラインメントプログラムＣＬＵＳＴＡＬ  Ｗ（Ｃｈｅｎｎａら、２００３，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  ３１，３４９７−３５００）で測定したとき、図１に示す配列の少なくとも５００塩基の一部分において９５％の配列同一性を示す、単離断片。
【請求項２】
非胚組織において、胚内で同じ構築物によって引き起こされる発現のレベルの少なくとも１０％が引き起こされる、請求項１に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項３】
非胚組織において、胚内で同じ構築物によって引き起こされる発現のレベルの少なくとも５０％が引き起こされる、請求項１または２のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項４】
非胚組織において、胚内で同じ構築物によって引き起こされる発現のレベルのほぼ１００％が引き起こされる、請求項１、２または３のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項５】
完全な野生型ＬＥＣ１プロモータに対してプロモータ断片から少なくとも１０００塩基が欠失している、前記請求項のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項６】
完全な野生型ＬＥＣ１プロモータに対してプロモータ断片から少なくとも１５００塩基が欠失している、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項７】
完全な野生型ＬＥＣ１プロモータに対してプロモータ断片から少なくとも２０００塩基が欠失している、請求項１〜４のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項８】
図１に示す完全な野生型ＬＥＣ１プロモータ配列に対して２５００、３０００、３２００または３２５６までの塩基が欠失している、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項９】
前記プロモータ断片から欠失し、したがって非存在である部分が、完全長プロモータの−１５００〜−２０００位に存在する配列部分を含み、−１位が開始コドンの上流の最初の塩基であり、開始コドンが、図１の四角で囲んだＡＴＧコドンのいずれかであり得る、請求項１〜４のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項１０】
前記プロモータ断片から欠失した部分が、完全長プロモータの−１０００〜−２５００位に存在する配列部分を含み、−１位が開始コドンの上流の最初の塩基であり、開始コドンが、図１の四角で囲んだＡＴＧコドンのいずれかであり得る、請求項１〜４のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項１１】
前記プロモータ断片から欠失した部分が、完全長プロモータの−５００〜−３５００位に存在する配列部分を含み、−１が開始コドンの上流の最初の塩基であり、開始コドンが、図１の四角で囲んだＳＴＧコドンのいずれかであり得る、請求項１〜４のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項１２】
前記プロモータ断片から欠失した野生型プロモータの部分が、完全長プロモータ４３６〜−３７９２位に存在する配列部分を含み、−１位が開始コドンの上流の最初の塩基であり、開始コドンが、図１の四角で囲んだＡＴＧコドンのいずれかであり得る、請求項１〜４のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項１３】
構造的コード配列に、非胚植物細胞内に存在する場合に該コード配列が発現されるように作動可能に連結されている、前記請求項のいずれかに記載の単離断片。
【請求項１４】
前記コード配列が、図２に示す野生型ＬＥＣ１コード配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するポリペプチドをコードするＬＥＣ１コード配列である、請求項１３に記載の単離断片。
【請求項１５】
前記コード配列が、図２に示す野生型ＬＥＣ１コード配列と９０％の配列同一性を有するポリペプチドをコードするＬＥＣ１コード配列である、請求項１３に記載の単離断片。
【請求項１６】
前記コード配列が、図２に示す野生型ＬＥＣ１コード配列と少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチドをコードするＬＥＣ１コード配列である、請求項１３に記載の単離断片。
【請求項１７】
野生型ＬＥＣ１プロモータに対して欠失を含むＬＥＣ１プロモータの単離断片であって、前記単離断片が非胚植物生長性組織においてリプレッサ活性を有し、図１に示す配列の少なくとも４００塩基、またはその機能的同等物を含み、前記機能的同等物が４００塩基部分において少なくとも９５％の配列同一性を示す、単離断片。
【請求項１８】
少なくとも５００塩基を含む、請求項１７に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項１９】
少なくとも１０００塩基を含む、請求項１７に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項２０】
少なくとも１５００塩基を含む、請求項１７に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項２１】
２０００、２５００または３０００までの塩基を含む、請求項１７に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項２２】
プロモータ開始部位の上流の４３６〜３７９６塩基間に存在する、図１に示す野生型完全ＬＥＣ１プロモータ配列の少なくとも５００塩基の部分を含むか、または前記部分と少なくとも９５％の配列同一性を示す、請求項１７に記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項２３】
植物において発現されると、前記植物の胚性形質の獲得を引き起こし、生長性組織内でのデンプンおよび／または油分もしくは脂肪酸などの蓄積を引き起こすＬＥＣ１と作動可能に連結された状態である、請求項１〜２２のいずれかに記載のＬＥＣ１プロモータの単離断片。
【請求項２４】
前記請求項のいずれか１項に記載の単離プロモータ断片を含む核酸構築物。
【請求項２５】
コード配列に作動可能に連結されたプロモータ断片を含む、請求項２４に記載の核酸構築物。
【請求項２６】
コード配列がＬＥＣ１コード配列である、請求項２５に記載の核酸構築物。
【請求項２７】
以下：植物細胞内への構築物の導入を容易にするＴ−ＤＮＡ；構築物が適当な宿主細胞内で増幅されるのを可能にする複製起点；ポリペプチドをコードし、請求項１〜２２いずれかに記載のプロモータ断片に作動可能に連結された核酸配列；選択可能マーカー（抗生物質耐性遺伝子など）；エンハンサーエレメント；および適当な宿主細胞において活性である構成的または誘導性の１つ以上のさらなるプロモータの１つ以上を含む、請求項２４〜２６のいずれかに記載の核酸構築物。
【請求項２８】
転写される配列を、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離断片と作動可能に連結された状態に配置する工程、および適当な宿主細胞内で該プロモータ断片の制御下で配列の転写を引き起こす工程を含む、核酸配列の転写を引き起こす方法。
【請求項２９】
請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離断片を、植物細胞内にコード配列と作動可能に連結された状態に配置する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離断片および転写される配列を、植物細胞内に導入される同じ構築物上に存在させる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離断片および転写される配列を、植物細胞内に導入される異なる構築物上に、宿主細胞ゲノム内への組込み後にプロモータおよびコード配列が植物細胞内で作動可能に連結された状態に配置されるように存在させる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
転写される配列が植物細胞に内在性のものであり、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離断片の導入、およびその後、標的遺伝子の充分近傍の宿主細胞ゲノム内に組み込まれることにより、内在配列の転写が、請求項１〜２２のいずれか１項のプロモータ断片の制御下でもたらされる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
転写される配列の存在および／または請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離断片の存在が、レポーターアッセイを用いてモニターされる、請求項２８〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
植物内に、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離断片を導入すること、および／または請求項２４に記載の核酸構築物を導入することを含む、植物の改変方法。
【請求項３５】
実施により成熟植物の胚性組織の形成がもたらされる、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
実施により、成熟植物においてデンプンまたは別の貯蔵分子の蓄積がもたらされる、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３７】
実施により、肥大した胚軸を示す植物の生成がもたらされる、請求項３４〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
請求項１〜２２のいずれか１項に記載の単離プロモータ断片が、植物細胞内に導入され、核酸コード配列と作動可能に連結された状態に配置され、形質転換植物細胞から小植物（ｐｌａｎｔｌｅｔ）および／または植物が生成される、請求項３７に記載の植物の改変方法。
【請求項３９】
植物細胞が単子葉植物または双子葉植物から得たものである、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
請求項３８に記載の方法によって生成される改変植物細胞。
【請求項４１】
請求項３８に記載の方法によって生成される改変植物もしくは小植物またはその子孫であって、前記植物または小植物の子孫が導入プロモータ断片を保持している、改変植物もしくは小植物またはその子孫。