(57)【要約】  本発明は、乾癬または全身性エリテマトーデスの処置に有用な式Ｉ：の化合物（式中、Ｒはメチルまたはエチルである）またはその薬学的に許容される塩を提供する。2022500370.tif 000039
2022500370.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
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（式中、Ｒはメチルまたはエチルである）
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒがメチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒがエチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
前記化合物が、
【化２】
2022500370.tif 000035
である、請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
前記化合物が、
【化３】
2022500370.tif 000036
である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
前記化合物が、
【化４】
2022500370.tif 000037
である、請求項１または請求項３のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
前記化合物が、
【化５】
2022500370.tif 000038
である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
患者の乾癬を処置する方法であって、有効量の請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を、そのような処置が必要な患者に投与することを含む、方法。
【請求項９】
患者の全身性エリテマトーデスを処置する方法であって、有効量の請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を、そのような処置が必要な患者に投与することを含む、方法。
【請求項１０】
治療に使用するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
乾癬の処置に使用するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
全身性エリテマトーデスの処置に使用するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
乾癬を処置するための医薬の製造のための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１４】
全身性エリテマトーデスを処置するための医薬の製造のための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１５】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と共に含む、薬学的組成物。
【請求項１６】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む、薬学的組成物を調製するためのプロセス。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ＴＹＫ２のシュードキナーゼドメイン（ＪＨ２）に結合し、特定のサイトカインシグナル伝達、特にＩＬ−２３およびＩＦＮαシグナル伝達を阻害する特定の新規化合物、この化合物を含む薬学的組成物、乾癬などの特定の自己免疫疾患を処置するためにこの化合物を使用する方法、ならびにこの化合物の合成に有用な中間体およびプロセスに関する。
【０００２】
本発明は、特定の炎症誘発性サイトカインのＴＹＫ２シグナル伝達によって媒介されると考えられる乾癬および／または他の自己免疫疾患の処置の分野にある（例えば、Ｊ．Ｓ．Ｔｏｋａｒｓｋｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．２９０（１７），ｐａｇｅｓ  １１０６１−１１０７４（２０１５）を参照されたい。乾癬は慢性皮膚病であり、一般人口の約２％が罹患していると推定される。乾癬の処置選択肢には、例えば、コルチコステロイドなどの局所治療、紫外線Ｂ（ＵＶＢ）光などの光線療法、およびメトトレキサートおよびアプレミラストなどの全身療法が挙げられる。残念ながら、そのような薬剤は効果的な処置を常に提供するとは限らず、種々の有害な副作用を伴う可能性がある。したがって、乾癬および全身性エリテマトーデスなどの自己免疫疾患の処置には満たされていないニーズがあり、新しい処置選択肢が望まれる。
【０００３】
ＷＯ２０１７／０８７５９０は、ＴＹＫ２に作用してシグナル伝達阻害を引き起こすことによるＩＬ−１２、ＩＬ−２３、および／またはＩＦＮαの調節を通じて、乾癬または全身性エリテマトーデスなどの自己免疫状態の処置に有用な特定のイミダゾピリダジン化合物を開示する。米国特許第７，５５７，１１０号は、炎症性疾患および自己免疫疾患などのキナーゼ媒介性障害の処置に有用なキナーゼ阻害剤として、特定のピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体を開示する。特定のイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンＴＹＫ２シュードキナーゼリガンドは、ＴＹＫ２シグナル伝達の強力かつ選択的な阻害剤としてＲ．Ｍｏｓｌｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，ｖｏｌ．８，ｐａｇｅｓ  ７００−７１２（２０１７）によって開示される。
【０００４】
ＴＹＫ２  ＪＨ２ドメインに作用し、ＩＬ−２３およびＩＦＮαのシグナル伝達を阻害するさらなる化合物が望まれる。本発明は、ＴＹＫ２  ＪＨ２ドメインに結合する特定の新規化合物を提供する。さらに、本発明は、ＩＬ−２３およびＩＦＮαシグナル伝達を阻害する特定の新規化合物を提供する。したがって、本発明は、乾癬および全身性エリテマトーデスなどの自己免疫疾患を処置するのに有用な特定の新規化合物を提供する。
【０００５】
したがって、本発明は、式Ｉ
【化１】
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式中、Ｒはメチルまたはエチルである
の化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００６】
本発明はまた、乾癬を、そのような処置を必要とする患者において処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を、その患者に投与することを含む、方法を提供する。本発明は、全身性エリテマトーデスを、そのような処置を必要とする患者において処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を、その患者に投与することを含む、方法をさらに提供する。本発明は、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬性関節炎、関節リウマチ、円形脱毛症、アトピー性皮膚炎、軸性脊椎関節炎、および多発性硬化症からなる群から選択される疾患を、そのような処置を必要とする患者において処置する方法であって、式Ｉの化合物の有効量またはその薬学的に許容される塩をその患者に投与することを含む方法をさらに提供する。
【０００７】
さらに、本発明は、治療、特に乾癬の処置における使用のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。加えて、本発明は、全身性エリテマトーデスの処置における使用のための式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。本発明はまた、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬性関節炎、関節リウマチ、円形脱毛症、アトピー性皮膚炎、軸性脊椎関節炎、および多発性硬化症からなる群から選択される疾患の処置における使用のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【０００８】
本発明はまた、乾癬を処置するための医薬の製造のための、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。加えて、本発明は、全身性エリテマトーデスを処置するための医薬の製造のための、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。本発明はまた、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬性関節炎、関節リウマチ、関節炎、円形脱毛症、アトピー性皮膚炎、軸性脊椎関節炎、および多発性硬化症からなる群から選択される疾患を処置するための医薬の製造のための、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【０００９】
本発明は、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と共に含む、薬学的組成物をさらに提供する。本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と混合することを含む、薬学的組成物を調製するためのプロセスをさらに提供する。本発明はまた、式Ｉの化合物の合成のための新規の中間体およびプロセスを包含する。
【００１０】
本明細書で使用される場合、「処置すること」、「処置」、または「処置する」という用語は、既存の症状または障害の進行または重症度を抑制すること、遅延させること、阻止すること、または改善することを含む。
【００１１】
本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、哺乳類、特にヒトを指す。
【００１２】
本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、患者に単回または複数回投与すると、診断中または処置中の患者に所望の効果を提供する、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩の量または投与量を指す。
【００１３】
当業者は、既知の技術を用いて、類似の状況下で得られた結果を観察することにより、有効量を決定することができる。患者のための有効量を決定する際には、患者の人種、そのサイズ、年齢、および全体的な健康状態、関与する特定の疾患または障害、疾患または障害の程度または関与または重症度、個々の患者の反応、投与される特定の化合物、投与の法式、投与される製剤の生物学的利用能特性、選択された投与レジメン、付随する薬物の使用、ならびに他の関連する状況を含むが、これらに限定されない、多数の要因が担当診断医によって考慮される。本発明の化合物は、約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約８ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内に入る１日あたりの投薬量を提供するための単位剤形として調製される。
【００１４】
本発明の化合物は、本化合物を生物学的に利用可能にする、いずれかの経路によって投与される薬学的組成物として製剤化される。より好ましくは、そのような組成物は経口投与用である。このような薬学的組成物およびこれを調製するためのプロセスは、当技術分野で周知である（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌ．Ｖ．Ａｌｌｅｎ，Ｅｄｉｔｏｒ，２２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０１２を参照されたい）。
【００１５】
式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩は、本発明の処置方法において特に有用であり、すべての配置、エナンチオマー、およびラセミ体を含むそれらの混合物が本発明の範囲内で企図されるが、特定の配置が好ましい。以下の段落は、そのような配置を記載する。これらの選好が、本発明の処置方法および化合物の両方に適用可能であることが理解されるであろう。
【００１６】
本発明の化合物は、
【化２】
2022500370.tif 000004
【化３】
2022500370.tif 000005
【化４】
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【化５】
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およびそれらの薬学的に許容される塩を含む。
【００１７】
式Ｉａ（ｉｉ）および式Ｉｂ（ｉｉ）の化合物が好ましく、式Ｉａ（ｉｉ）の化合物およびその薬学的に許容される塩が特に好ましい。
【００１８】
以下の調製に記載される特定の中間体は、１つ以上の窒素保護基を含んでもよい。保護基は、特定の反応条件および実施される特定の変換に応じて、当業者によって認識されるように変化し得ることが理解される。保護および脱保護条件は、当業者に周知であり、文献（例えば、”Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｆｏｕｒｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｂｙ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．２００７を参照されたい）に記載される。
【００１９】
個々の異性体、エナンチオマー、およびジアステレオマーは、選択的結晶化技術またはキラルクロマトグラフィなどの方法によって、本発明の化合物の合成における任意の好都合な時点において、当業者により分離または分割されてもよい（例えば、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓ，ｅｔ  ａｌ．，”Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８１、およびＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，”Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９９４を参照されたい）。
【００２０】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩を、例えば、当技術分野で周知の標準的な条件下、ジエチルエーテルなどの好適な溶媒中、本発明の化合物の適切な遊離塩基の、適切な薬学的に許容される酸の反応によって形成することができる。加えて、そのような塩の形成は、窒素保護基の脱保護と同時に起こり得る。例えば、Ｇｏｕｌｄ，Ｐ．Ｌ．，“Ｓａｌｔ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｂａｓｉｃ  ｄｒｕｇｓ，”Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，３３：２０１−２１７（１９８６）、Ｂａｓｔｉｎ，Ｒ．Ｊ．，ｅｔ  ａｌ．“Ｓａｌｔ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｎｅｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｔｉｔｉｅｓ，”Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，４：４２７−４３５（２０００）、およびＢｅｒｇｅ，Ｓ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，６６：１−１９，（１９７７）を参照されたい。
【００２１】
特定の略語は次のように定義される。「ＢＯＰ」は、（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを指す。「ＢｒｅｔｔＰｈｏｓ」は、ジシクロヘキシル［３，６−ジメトキシ−２’，４’，６’−トリス（１−メチルエチル）［１，１’−ビフェニル］−２−イル］ホスフィンを指す。「ｔ−ＢｕＯＨ」は、ｔ−ブタノールおよびｔ−ブチルアルコールを指す。「ＢＳＡ」はウシ血清アルブミンを指す。「ＣＤＩ」は、１，１’−カルボニルジイミダゾールを指す。「ＤＣＣ」は、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミドを指す。「ＤＣＭ」は、ジクロロメタンを指す。「ＤＥＭ」は、マロン酸ジエチルを指す。「ＤＩＣ」は、１，３−ジイソプロピルカルボジイミドを指す。「ＤＩＥＡ」は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを指す。「ＤＭＡＰ」は、ジメチルアミノピリジンを指す。「ＤＭＥＭ」は、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ  Ｍｅｄｉｕｍを指す。「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを指す。「ＤＭＳＯ」は、ジメチルスルホキシドを指す。「ＤＰＰＡ」は、ジフェニルホスホリルアジドを指す。「ＥＤＣＩ」は、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩を指す。「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを指す。「ＥｔＯＨ」は、エタノールおよびエチルアルコールを指す。「ＦＢＳ」は、ウシ胎児血清を指す。「ＨＡＴＵ」は、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェートを指す。「ＨＢＴＵ」は、（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）（ジメチルアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタニミニウムヘキサフルオロホスフェートを指す。「ＨＥＰＥＳ」は、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸を指す。「ＨＯＡｔ」は、１−ヒドロキシ−７−アゾベンゾトリアゾールを指す。「ＨＯＢｔ」は、１−ヒドロキシルベンゾトリアゾール水和物を指す。「ＩＦＮα」は、インターフェロンアルファを指す。「ＩＬ−１２」は、インターロイキン１２を指す。「ＩＬ−２３」は、インターロイキン２３を指す。「ＩＰＡ」は、イソプロパノールおよびイソプロピルアルコールを指す。「ＪＡＫ」は、ヤヌスキナーゼを指す。「ＬｉＨＭＤＳ」は、リチウムヘキサメチルジシラジドを指す。「ＭｅＩ」は、ヨウ化メチルを指す。「ＭｅＮＨ２」は、メチルアミンを指す。「ＭｅＯＨ」は、メタノールおよびメチルアルコールを指す。「ＭＴＢＥ」は、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを指す。「ＮａＯＥｔ」は、ナトリウムエトキシドを指す。「ＮｉＮＴＡ」は、ニッケル−ニトリロ三酢酸を指す。「ＰＢＳ」は、リン酸緩衝生理食塩水を指す。「Ｐｄ（ＯＡｃ）２」は、酢酸パラジウム（ＩＩ）を指す；「ＰｙＢＯＰ」は、（ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）を指す。；「ＰｙＢｒＯＰ」は、ブロモ（トリピロリジニル）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを指す。「ＲＰＭ」は、１分あたりの回転数を指す。「ＲＰＭＩ」は、Ｒｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎ���ｔｉｔｕｔｅを指す。「ＳＰＡ」は、シンチレーション近接アッセイを指す。「Ｔ３Ｐ」は、２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスホリナン−２，４，６−トリオキシドを指す。「ＴＥＡ」は、トリエチルアミンを指す。「ＴＦＡ」は、トリフルオロ酢酸を指す。「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを指す。「ＴＹＫ２」は、チロシンキナーゼ２を指す。「ＵＶＢ」は、紫外線Ｂを指す。「ＳＴＡＴ」は、転写タンパク質のシグナル伝達物質および活性化因子を指す。「ＹＳＩ」は、ケイ酸イットリウムを指す。
【００２２】
本発明の化合物またはその塩は、当業者に既知の種々の手順によって調製することができ、そのうちのいくつかを、以下のスキーム、調製、および実施例で例示する。以下のスキームにおける各ステップの生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィ、濾過、粉砕、および結晶化を含む、当技術分野で周知の従来の方法によって回収することができる。以下のスキームにおいて、すべての置換基は、別途指示のない限り、すでに定義されたとおりである。試薬および出発材料は、当業者にとって容易に入手可能である。本発明の範囲を限定することなく、以下のスキーム、調製、および実施例を、本発明をさらに例示するために提供する。
【００２３】
【化６】
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【００２４】
スキーム１、ステップＡは、化合物（１）へのＤＥＭの添加、および引き続いたＥｔＯＨなどの溶媒中、約８０℃でＮａＯＥｔまたはカリウムｔ−ブトキシドなどの好適な塩基を使用して化合物（２）の環化を示す。
【００２５】
ステップＢにおいて、化合物（２）の７−ヒドロキシおよび５−オキソ基を、ＰＯＣｌ３などの好適な塩素源およびピリジンなどの好適な有機塩基を使用して、アセトニトリルなどの好適な溶媒中、約５０〜１００℃で塩素化して、化合物（３）を得ることができる。
【００２６】
ステップＣにおいて、化合物（３）の７−クロロ基の選択的求核芳香族置換を、当技術分野で周知の条件下、１−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−メチル−メタンアミンなどの求核試薬およびＤＩＥＡなどの好適な有機塩基を使用して、周囲温度で１，４−ジオキサンなどの好適な溶媒中で実施して、化合物（４）を得ることができる。
【００２７】
ステップＤにおいて、Ｂｕｃｈｗａｌｄカップリングを、当技術分野で周知の条件下、２−メトキシアニリンまたは２−エトキシアニリンなどのアミンと共に化合物（４）に対して実施して、Ｐｄ（ＯＡｃ）２およびＢｒｅｔｔＰｈｏｓなどの好適な触媒およびリガンドの組み合わせ、および約１，４−ジオキサンなどの溶媒中の炭酸カリウムなどの好適な塩基を使用して、約１２０℃でマイクロ波加熱しつつ実施して化合物（５）を形成することができる。
【００２８】
化合物（５）を、１，４−ジオキサンおよびＥｔＯＨなどの溶媒中のＮａＯＨ水溶液で約９０℃で処理して、ステップＥに示すようにエステルの塩基性加水分解により化合物（６）を得ることができる。
【００２９】
ステップＦにおいて、ＤＭＦなどの好適な溶媒中のＤＩＥＡなどの好適な有機塩基およびＢＯＰなどの好適なカップリング剤を使用して、化合物（６）および３−アミノ−１−メチル−ピロリジン−２−オンなどのアミンとの間でアミドカップリングを実施して、化合物（７）を得ることができる。当業者は、カルボン酸およびアミンとの反応から生じるアミド形成のためのいくつかの適切な方法があることを認識するであろう。例えば、ＤＩＥＡまたはＴＥＡなどの有機塩基を含むまたは含まないカップリング試薬の存在下でのアミン化合物の適切なカルボン酸との反応は、ステップＦの化合物を提供することができる。カップリング試薬には、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣＩなどのカルボジイミド、またはＣＤＩなどのカルボニルジイミダゾールが挙げられる。ＨＯＢｔおよびＨＯＡｔなどのアミドカップリング添加剤をまた使用して、反応を増強することができる。加えて、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、ＰｙＢＯＰ、およびＰｙＢｒＯＰなどの非求核性アニオンのウロニウムまたはホスホニウム塩を、より伝統的なカップリング試薬の代わりに使用することができる。ＤＭＡＰなどの添加剤を使用して反応を増強し得る。
【００３０】
ステップＧにおいて、化合物（７）を、ＤＣＭなどの好適な溶媒中、ＴＦＡなどの好適な酸を使用する標準条件下で脱保護して、式Ｉの化合物を得る。
【００３１】
スキーム２は、式Ｉのラセミ性化合物の追加の合成を提供する。
【００３２】
【化７】
2022500370.tif 000009
【００３３】
スキーム２、ステップＡにおいて、化合物（３）の７−クロロ基上の選択的求核芳香族置換を、周囲温度でＴＨＦなどの好適な溶媒中のＭｅＮＨ２などの適切な求核試薬を使用する当技術分野で周知の条件下で実施して、化合物（８）を得ることができる。
【００３４】
ステップＢにおいて、２−メトキシアニリンまたは２−エトキシアニリンなどのアミンで、標準的なマイクロ波条件下、化合物（８）に対してＢｕｃｈｗａｌｄカップリングを実施して、塩化アリルパラジウム（ＩＩ）ダイマーおよび（Ｒ）−（＋）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチルなどの好適な触媒およびリガンド系を、１，４−ジオキサン、２−メチル−２−ブタノールおよび酢酸などの適切な溶媒系中の炭酸カリウムなどの好適な塩基と共に、１０５℃で加熱しつつ使用して、化合物（９）を形成することができる。
【００３５】
化合物（９）を、ＥｔＯＨなどの好適な溶媒中、水酸化リチウム水溶液などの好適な塩基で約９０℃で処理して、ステップＣに示すように、エステルの塩基性加水分解により化合物（１０）を得ることができる。
【００３６】
ステップＤは、ＤＩＥＡなどの好適な有機塩基およびＥＤＣＩなどの好適なカップリング剤を、ＨＯＢｔなどの好適な添加剤と共に、ＴＨＦなどの溶媒中で使用する、化合物（１０）および３−アミノ−１−メチル−ピロリジン−２−オンなどのアミンとの間で、スキーム１、ステップＦに一般的に記載されるような、当技術分野で周知の条件下でのアミドカップリングによる式Ｉの形成を示す。
【００３７】
【化８】
2022500370.tif 000010
【００３８】
スキーム３、ステップＡにおいて、化合物（１２）の形成を、０〜２２℃のＤＭＦなどの溶媒中、ＤＩＥＡなどの好適な有機塩基およびＨＡＴＵなどの好適なカップリング剤を使用する、化合物（１１）およびＭｅＮＨ２の間のスキーム１、ステップＦに一般的に記載されるような当技術分野で周知の条件下でのアミドカップリングとして示す。
【００３９】
ステップＢでは、ジメチルスルホニウムヨージド塩を形成するための化合物（１２）へのＭｅＩの添加、続いて０〜グラフィ（ヘキサン中０２２℃でのＴＨＦなどの好適な溶媒中、ＬｉＨＭＤＳなどの好適な塩基での処理を使用して、環化化合物（１３）を得ることができる。
【００４０】
ステップＣにおいて、化合物（１３）を、約５５℃のアセトニトリルなどの好適な溶媒中、４−メチルベンゼンスルホン酸などの好適な酸を使用して標準条件下で脱保護し、続いてＭＴＢＥなどの溶媒を添加して化合物（１４）を沈殿させる。
【００４１】
【化９】
2022500370.tif 000011
【００４２】
スキーム４において、式Ｉａ（ｉｉ）の形成を、約８０℃のＥｔＯＡｃなどの溶媒中、ピリジンなどの好適な有機塩基およびＴ３Ｐなどの好適なカップリング剤を使用する、化合物（１０）および化合物（１４）の間のスキーム１、ステップＦに一般的に記載されるような当技術分野で周知の条件下でのアミドカップリングとして示す。
【００４３】
調製１
【化１０】
2022500370.tif 000012
【００４４】
スキーム１、ステップＡ：エチル５−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（１２．５ｇ、８０．６ｍｍｏｌ）、およびＤＥＭ（１８．５ｍＬ、１２１ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（９０ｍＬ）に溶解する。この混合物に、ＮａＯＥｔ（ＥｔＯＨ中２１ｍ％、４５．１ｍｌ、１２１ｍｍｏｌ）を加え、反応物を９０℃で２４時間撹拌する。この後、反応物を周囲温度まで冷却する。次に、混合物を５Ｎ  ＨＣｌ水溶液で酸性にし、得られた沈殿物を濾過して、表題化合物を白色の固体として得る（１１．７ｇ、６５．１％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２２４（Ｍ＋Ｈ）。
【００４５】
代替的調製１
スキーム１、ステップＡ：ＥｔＯＨ（６．００Ｌ）中のエチル５−アミノ−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（４００ｇ、２．５８モル）およびＤＥＭ（５８４ｍＬ、３．８７モル）の溶液に、カリウムｔ−ブトキシド（５７８ｇ、５．１６ｍｏｌ）を、２５℃、窒素下で加える。溶液を８０℃で１２時間撹拌し、次に反応物を２２℃まで冷却する。反応混合物を０．１Ｎ  ＨＣｌ（２Ｌ）で希釈し、５Ｎ  ＨＣｌでｐＨを３に調整する。混合物を濾過し、フィルターケーキを水（８００ｍＬ）で洗浄する。固体を真空下で恒重量まで乾燥させて、表題化合物をオフホワイトの固体として得る（４６０ｇ、８１％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２２４（Ｍ＋Ｈ）。
【００４６】
調製２
【化１１】
2022500370.tif 000013
【００４７】
スキーム１、ステップＢ：エチル７−ヒドロキシ−５−オキソ−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（１１．７ｇ、５２．４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５０ｍＬ）に懸濁し、窒素で５分パージする。この混合物に、ＰＯＣｌ３（１４．８ｍｌ、１５７ｍｍｏｌ）、続いてピリジン（４．２８ｍＬ、５２．４ｍｍｏｌ）を５０℃で加え、次いで反応物を１００℃で５時間撹拌する。この後、反応物を周囲温度まで冷却し、氷／水混合物に注ぐ。この混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和し、得られた沈殿物を濾過して、表題化合物を白色固体として得る（１３ｇ、９５．３％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）２６０／２６２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４８】
代替的調製２
スキーム１、ステップＢ：アセトニトリル（２Ｌ）中のエチル７−ヒドロキシ−５−オキソ−４Ｈ−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（４００ｇ、１．７９ｍｏｌ）の懸濁液へ、ＰＯＣｌ３（４１６ｍＬ、４．４８ｍｏｌ）およびピリジン（２１７ｍｌ、２．６９ｍｏｌ）を窒素下５０℃で滴下する。反応物を８０℃で１２時間撹拌する。反応混合物を蒸発させ、残留物を水（２Ｌ）に注ぐ。反応混合物を濾過し、固体を水（８００ｍＬ）で洗浄する。固体を真空下で恒重量まで乾燥させて、表題化合物をオレンジ色の固体として得る（３６０ｇ、６６％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）２６０／２６２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４９】
調製３
【化１２】
2022500370.tif 000014
【００５０】
スキーム１、ステップＣ：エチル５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（５ｇ、１９．２ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（４０ｍＬ）に溶解する。この混合物に、１−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−メチル−メタンアミン（３．５ｇ、２０ｍｍｏｌ）、続いてＤＩＥＡ（６．７ｍＬ、３８．４ｍｍｏｌ）を加え、反応物を周囲温度で２時間撹拌する。この後、反応を水（１００ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出する。次に、合わせた有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させる。この残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン中０〜７０％のＥｔＯＡｃ）で精製して、表題化合物を濃厚な透明な油として得、これは静置すると白色の固体に固化する（３．５５ｇ、４９．３％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）３７５／３７７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５１】
調製３ａ
【化１３】
2022500370.tif 000015
スキーム２、ステップＡ：エチル５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（５０．０ｇ、１９２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２５０ｍＬ）に加え、溶液を１０℃まで冷却する。次に、ＭｅＮＨ２の溶液（エタノール中３３％ｗ／ｗ）（７９ｍＬ、６３４ｍｍｏｌ）を加え、温度を２０℃未満に保つ。反応混合物を撹拌し、２２℃まで温め、４時間撹拌する。次に水（３００ｍＬ）を加え、混合物をさらに１時間撹拌する。
【００５２】
得られた固体を濾過により収集し、ＴＨＦ／水混合物（２：３）（１００ｍＬ）および水（４００ｍＬ）で洗浄する。次に、固体を真空（１０ｍｂａｒ／５０℃）下で恒重量まで乾燥させて、表題化合物を淡褐色の固体（４９．５ｇ、９０％）として得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ（３５Ｃｌ／３７Ｃｌ）２５５／２５７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５３】
調製４
【化１４】
2022500370.tif 000016
スキーム１、ステップＤ：４つのマイクロ波バイアルのそれぞれに、エチル５−クロロ−７−［（４−メトキシフェニル）メチル−メチル−アミノ］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（２．５ｇ、６．７ｍｍｏｌ）および２−メトキシアニリン（０．９ｇ、７．３ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（１７ｍＬ）に溶解する。この混合物に炭酸カリウム（１．４ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え、続いてＢｒｅｔｔＰｈｏｓ（０．３７ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（０．１５ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を加える。反応物を１２０℃まで２時間マイクロ波処理する。この後、反応物を周囲温度まで冷却する。反応混合物を合わせ、珪藻土で濾過し、蒸発させる。得られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン中３０−５０％ＥｔＯＡｃ）で精製して、表題化合物をオフホワイトの泡状物（１０．８ｇ、８８．０％）として得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ４６２（Ｍ＋Ｈ）。
【００５４】
以下の化合物を、調製４の方法と本質的に類似する様式で調製する。
【表１】
2022500370.tif 000017
【００５５】
調製４ａ
【化１５】
2022500370.tif 000018
スキーム２、ステップＢ：メカニカルスターラー、濃縮器、および窒素入口を備える１Ｌの３口丸底フラスコに、エチル５−クロロ−７−（メチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（５３．０ｇ、１９７．７ｍｍｏｌ）、２−メトキシアニリン（２５．１ｇ、２０３．９ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（６０．０ｇ、４３４．１ｍｍｏｌ）、続いて１，４−ジオキサン（２５０ｍＬ）および無水２−メチル−２−ブタノール（２５０ｍｌ）を添加する。混合物を撹拌し、窒素で３０分間パージする。次に、酢酸（２３．０ｍＬ、４０１．４ｍｍｏｌ）、塩化アリルパラジウム（ＩＩ）ダイマー（０．４ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）、および（Ｒ）−（＋）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル（１．３７ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）を加え、窒素パージを１５分間続ける。次に、反応混合物を１０５℃で２０時間加熱する。この後、加熱を停止し、水（４００ｍＬ）を糸状で加える。得られた混合物を撹拌しながら周囲温度まで冷却し、次にさらに１５℃まで２時間冷却する。得られた固体を濾過により収集し、水／ｔ−アミルアルコール（９：１）混合物（３×１００ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）で洗浄する。固体を真空（１０ｍｂａｒ／３５℃）下で恒重量まで乾燥させて、表題化合物をベージュ色の固体（６６．５ｇ、９５．６％）として得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３４２（Ｍ＋Ｈ）。
【００５６】
以下の化合物を、調製４ａの方法に本質的に類似する様式で調製する。
【表２】
2022500370.tif 000019
【００５７】
調製６
【化１６】
2022500370.tif 000020
スキーム１、ステップＥ：エチル５−（２−メトキシアニリノ）−７−［（４−メトキシフェニル）メチル−メチル−アミノ］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（１０．８ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（１１７ｍＬ）およびＥｔＯＨ（４．７ｍＬ）に溶解する。この混合物に２．５Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（３７ｍＬ、９３．６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を９０℃で２０時間撹拌する。この後、反応物を周囲温度まで冷却し、蒸発させて揮発性有機物を除去する。次に、残りの水溶液を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液で約ｐＨ５にし、固体沈殿物をクロロホルム／ＩＰＡ（３：１）（３×３００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、表題化合物をオフホワイトの固体として得る（９．５４ｇ、８９．９％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４３４（Ｍ＋Ｈ）。
【００５８】
以下の化合物を、調製６の方法と本質的に類似する様式で調製する。
【表３】
2022500370.tif 000021
【００５９】
調製６ａ
【化１７】
2022500370.tif 000022
スキーム２、ステップＣ：エチル５−（２−メトキシアニリノ）−７−（メチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキシレート（５．９８ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（４８ｍＬ）、水（３０ｍＬ）および水酸化リチウム（１．２ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）の混合物を４時間還流する。この後、反応混合物を７０℃まで冷却し、ＨＣｌ（１０％ｗ／ｗ）を加えることによって中和してｐＨ２に調整する。次に、反応混合物を２℃まで冷却し、２時間撹拌する。得られた固体を濾過により収集し、水（３０ｍＬ）で洗浄する。固体を真空下で恒重量まで乾燥させて、表題化合物をクリーム固体として得る（５．５５ｇ、１００％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１４（Ｍ＋Ｈ）。
【００６０】
以下の化合物を、調製６ａの方法に本質的に類似する様式で調製する。
【表４】
2022500370.tif 000023
【００６１】
調製８
【化１８】
2022500370.tif 000024
スキーム１、ステップＦ：ＤＭＦ（３．５ｍＬ）中の５−（２−メトキシアニリノ）−７−［（４−メトキシフェニル）メチル−メチル−アミノ］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボン酸（０．３０ｇ、０．６９ｍｍｏｌ）およびラセミ性３−アミノ−１−メチル−ピロリジン−２−オン（０．０９５ｇ、０．８３ｍｍｏｌ）に、ＢＯＰ（０．４１ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．４８ｍＬ、２．７７ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を窒素下、周囲温度で６０時間撹拌する。この後、反応物を飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出する。有機層を水および飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させる。この残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ中の２〜４％  ＭｅＯＨ）によって精製して、表題化合物（０．３０ｇ、８３．２％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ５３０（Ｍ＋Ｈ）。
【００６２】
以下の化合物を、調製８の方法に本質的に類似する様式で調製する。
【表５】
2022500370.tif 000025
【００６３】
調製１０
【化１９】
2022500370.tif 000026
スキーム１、ステップＧ：５−（２−メトキシアニリノ）−７−［（４−メトキシフェニル）メチル−メチル−アミノ］−Ｎ−［ｒａｃ−１−メチル−２−オキソ−ピロリジン−３−イルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド（０．３ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１１．５ｍＬ）およびＴＦＡ（１１．５ｍＬ）中の溶液を、周囲温度で４時間撹拌する。この後、反応物を蒸発させて揮発性有機物を除去する。残留物をＤＣＭ（２０ｍＬ）およびメタノール中の７Ｍアンモニア（４ｍＬ）で処理する。得られた混合物を１０分間撹拌し、蒸発させる。次に、残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ中の２〜８％  ＭｅＯＨ）によって精製して、表題化合物（０．１８ｇ、７４．２％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１０（Ｍ＋Ｈ）。
【００６４】
以下の化合物を、調製１０の方法に本質的に類似する様式で調製する。
【表６】
2022500370.tif 000027
【００６５】
代替的調製１１
【化２０】
2022500370.tif 000028
スキーム２、ステップＤ：５−（２−エトキシアニリノ）−７−（メチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボン酸（４．５ｇ、８．９ｍｍｏｌ）、ラセミ性３−アミノ−１−メチル−ピリミジン−２−オン（１．２ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１．８ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８９ｍＬ）に懸濁する。この混合物に、ＥＤＣＩ（２．６ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６．２ｍＬ、３６．０ｍｍｏｌ）を０℃で加える。反応物を周囲温度まで温め、窒素下で１８時間撹拌する。この後、反応物を蒸発させて揮発性有機物を除去する。得られた残留物を水（３００ｍＬ）で処理し、クロロホルム／ＩＰＡ（３：１）（３×３００ｍＬ）の混合物で抽出する。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、蒸発させる。次に、残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ中の３−１０％  ＭｅＯＨ）によって精製して、表題化合物（３．５ｇ、９２．０％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２４（Ｍ＋Ｈ）。
【００６６】
調製１２
【化２１】
2022500370.tif 000029
スキーム３、ステップＡ：ＤＭＦ（４Ｌ）中の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−メチオニン（４００ｇ、１．６ｍｏｌ）、メチルアミン塩酸塩（１６２．４７ｇ、２．４ｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（７００ｍＬ、４．０１ｍｏｌ）の溶液を０℃まで冷却し、ＨＡＴＵ（７３２．１ｇ、１．９２ｍｏｌ）を加える。反応物を周囲温度まで温める。２時間撹拌した後、溶媒を蒸発させる。次に、水（１０Ｌ）を加え、水溶液をＤＣＭ（２×３Ｌ）で抽出する。有機層を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（３Ｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させる。得られた残留物を、ヘキサン中のＥｔＯＡｃで溶出するシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、表題化合物を白色の固体として得る（３６８ｇ、８７％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２６３（Ｍ＋Ｈ）。
【００６７】
調製１３
【化２２】
2022500370.tif 000030
スキーム３、ステップＢ：ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（１Ｒ）−１−（メチルカルバモイル）−３−メチルスルファニル−プロピル］カルバメート（３６８ｇ、１．４０ｍｏｌ）およびＭｅＩ（３．６８Ｌ、５９．１１ｍｏｌ）の混合物を、周囲温度で１８時間撹拌する。次に、混合物を蒸発させる。得られた粗製ジメチルスルホニウムヨージド塩（２１０ｇ、０．５２ｍｏｌ）の一部分をＴＨＦ（４．７Ｌ）に溶解し、窒素雰囲気下で０℃まで冷却し、ＬｉＨＭＤＳ（ＴＨＦ中の１．００Ｍ溶液（１．１６Ｌ、１．１６ｍｏｌ）を滴下する。次に、反応混合物を周囲温度まで温める。４時間後、水（２．４Ｌ）を加え、溶媒を蒸発させて半分の体積にする。混合物をＤＣＭ（２×３Ｌ）で抽出する。有機物を合わせて蒸発させる。残留物を、ＤＣＭ中のＭｅＯＨで溶出するシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、表題化合物を白色の固体として得る（５０ｇ）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ２１５（Ｍ＋Ｈ）。キラルＨＰＬＣ：Ｒｔ（保持時間）＝９．１３分；ＬＣカラム：ＣｈｉｒａｌＰＡｃ  ＩＡ  ＯＤ  ４．６×２５０ｍｍ  ５μｍ；アイソクラティック：０．１％  ジエチルアミン／ヘキサン／エタノール（８５／１５）；カラム温度：２５℃；流速：１．０ｍＬ／分。旋光度：［α］Ｄ２０＝＋５３°（Ｃ＝０．５、ＭｅＯＨ）。
【００６８】
調製１４
【化２３】
2022500370.tif 000031
スキーム３、ステップＣ：アセトニトリル（５００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−［（３Ｒ）−１−メチル−２−オキソ−ピロリジン−３−イル］カルバメート（４６ｇ、２１４．６９ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸（７４．５ｇ、４３３ｍｍｏｌ）を５５℃で加熱し、４時間撹拌する。次に、ＭＴＢＥ（１Ｌ）を添加し、混合物を２２℃まで冷却する。得られた固体を濾過により収集し、追加のＭＴＢＥで洗浄し、真空下で恒重量まで乾燥させて、表題化合物を白色の固体として得る（６０ｇ、９５％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  １１５（Ｍ＋Ｈ）。旋光度：［α］Ｄ２０＝＋３１．３°（Ｃ＝０．５、ＭｅＯＨ）。
【００６９】
実施例１
【化２４】
2022500370.tif 000032
スキーム４：ピリジン（１５０ｍｌ）中の５−（２−メトキシアニリノ）−７−（メチルアミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボン酸（５０ｇ、１５９．６ｍｍｏｌ）および（３Ｒ）−３−アミノ−１−メチル−ピロリジン−２−オン；ｐ−トルエンスルホニル塩（６０ｇ、２２２ｍｍｏｌ）の混合物を、周囲温度で１５分間撹拌する。次に、Ｔ３Ｐ（ＥｔＯＡｃ中の１．６７Ｍ  溶液、１８５ｍＬ、３０９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で３時間加熱する。反応混合物を６０℃まで冷却し、水（６００ｍＬ）を加える。反応物を周囲温度まで冷却し、得られた固体を濾過により収集し、水（１００ｍＬ）で洗浄する。
【００７０】
得られた湿った固体をＤＭＳＯ（３００ｍＬ）に溶解し、６０℃まで加熱する。活性炭（２ｇ）を加え、６０℃で３０分間撹拌する。次に、混合物を珪藻土で濾過する。濾過した溶液に水（３００ｍＬ）を滴下し、温度を６０℃に保つ。混合物を周囲温度まで冷却し、得られた固体を濾過により収集し、水（１００ｍＬ）で洗浄する。固体を真空下で恒重量に乾燥させて、表題化合物を白色固体として得る（５２ｇ、７８％）。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１０（Ｍ＋Ｈ）。キラルＳＦＣ：Ｒｔ（保持時間）＝１．６３分；ＳＦＣカラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ（４．６×１００ｍｍ）５μｍ；アイソクラティック：ＩＰＡ（０．２％ＩＰＡｍ）；カラム温度：４０℃；流速：５．０ｍＬ／分。旋光度：［α］Ｄ２０＝−４．１９°（Ｃ＝０．３、ＭｅＯＨ）。
【００７１】
代替的実施例１
５−（２−メトキシアニリノ）−７−（メチルアミノ）−Ｎ−［（３Ｒ）−１−メチル−２−オキソ−ピロリジン−３−イル］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミド
【００７２】
５−（２−メトキシアニリノ）−７−（メチルアミノ）−Ｎ−［ｒａｃ−１−メチル−２−オキソ−ピロリジン−３−イル］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミドのラセミ性混合物を、キラルクロマトグラフィにより精製して、最初に溶出するエナンチオマーを表題化合物として得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１０（Ｍ＋Ｈ）。精製条件：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ−Ｈ；移動相：ＭｅＯＨ中の１０％  ＡＣＮ；流速：３０ｍＬ／分；ＵＶＷ：２２５ｎｍ；保持時間：２．５３分。
（Ｓエナンチオマー保持時間：３．７８分）。
【００７３】
実施例２
【化２５】
2022500370.tif 000033
５−（２−エトキシアニリノ）−７−（メチルアミノ）−Ｎ−［ｒａｃ−１−メチル−２−オキソ−ピロリジン−３−イル］ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−カルボキサミドのラセミ性混合物を、キラルクロマトグラフィにより精製して、最初に溶出するエナンチオマーを表題化合物として得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２４（Ｍ＋Ｈ）。精製条件：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤ−Ｈ；移動相：ＣＯ２中の４０％  ＥｔＯＨ；流速：７０ｇ／分；ＵＶＷ：２６０ｎｍ；保持時間：２．５６分。
（Ｓエナンチオマー保持時間：４．２８分）。
【００７４】
シンチレーション近接アッセイによるＴＹＫ２  ＪＨ２への結合
Ｎ末端Ｈｉｓ６タグを持つヒトＪＡＫ（細胞質チロシンキナーゼのＪａｎｕｓファミリー）ファミリーチロシンキナーゼ２  （ＴＹＫ２）のシュードキナーゼドメイン（ＪＨ２）を、バキュロウイルスで発現させ、Ｎｉ−ＮＴＡアフィニティーおよびサイズ排除クロマトグラフィによって精製する。イットリウム（ＹＳｉ）Ｈｉｓタグシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）ビーズ（カタログ番号ＰＲＮＱ００９６）を、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓから購入する。３Ｈ−Ｎ−［（１Ｒ）−１−［３−［８−メチル−５−（メチルアミノ）−８Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イル］フェニル］エチル］−２−（メチルスルホニル）ベンズアミドを、Ｑｕｏｔｉｅｎｔ  Ｂｉｏによって合成し、６３Ｃｉ／ｍｍｏｌの比活性および濃度６．７８μＭを有し、エタノールに保存される（カタログ番号ＴＲＱ４１６７８）（例えば、Ｊ．Ｓ．Ｔｏｋａｒｓｋｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．２９０（１７），ｐａｇｅｓ  １１０６１−１１０７４（２０１５）およびＲ．Ｍｏｓｌｉｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，ｖｏｌ．８，ｐａｇｅｓ  ７００−７１２（２０１７）をまた参照されたい）。
【００７５】
実施例１の３倍、１０点段階希釈を１００％  ＤＭＳＯ（２００ｎＬ）で調製し、音響液体処理を使用して、９６ウェル、白色、透明底、非結合表面アッセイプレート（Ｃｏｓｔａｒ  ３６０４）に移す。パーセント阻害を決定するために使用された対照ウェルは、ＤＭＳＯ（２００ｎＬ）または低温の非標識阻害剤（２００ｎＬ、１０ｍＭ、２００μＭ  最終濃度）のいずれかを含んだ。アッセイバッファー（５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、０．００５％  Ｔｗｅｅｎ−２０）中の、Ｈｉｓタグ付きＴＹＫ２  ＪＨ２（２０μＬの７．１ｎＭ）および３Ｈ−Ｎ−［（１Ｒ）−１−［３−［８−メチル−５−（メチルアミノ）−８Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イル］フェニル］エチル］−２−（メチルスルホニル）ベンズアミド（５０ｎＭ）を、希釈した阻害剤に添加する。室温で２時間のインキュベーション後、０．２％  ＢＳＡを含むリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中のＹＳｉ銅Ｈｉｓ−Ｔａｇ  ＳＰＡビーズ（１００μＬの０．５ｍｇ／ｍＬ）を各ウェルに添加する。室温で１５分後、Ｔｒｉｌｕｘ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａを使用して放射能をカウントする。各阻害剤濃度の放射性リガンド結合のパーセント阻害を計算し、実施例１の化合物について０．０４５μＭ（±０．０１６μＭ、ｎ＝３）および実施例２の化合物について０．０４０μＭ（±０．０１２μＭ、ｎ＝４）のＩＣ５０を与えるＧｅｎｅｄａｔａ  Ｓｃｒｅｅｎｅｒ（登録商標）を使用して、４パラメータ非線形ロジスティック方程式に適合させ、平均の標準誤差（ＳＥＭ）を有するＧｅｏＭｅｔｒｉｃ平均として表す。この結果は、実施例１および実施例２の化合物がインビトロでＴＹＫ２  ＪＨ２ドメインに結合することを実証する。
【００７６】
ＴＦ１細胞におけるｐＳＴＡＴ１を介したＩＦＮαシグナル伝達の阻害
ＴＦ１細胞（ＡＴＣＣ、ＣＬ−２００３）を、１０％  透析ＦＢＳ、０．１ｍｇ／ｍｌ  アンピシリン、および２ｎｇ／ｍＬ  顆粒球マクロファージコロニー刺激因子を添加したＲＰＭＩ１６４０（ＧＩＢＣＯ）で培養する。ＴＦ１細胞（ウェルあたり１００Ｋ）を、無血清ＤＭＥＭ中、９６ウェルのポリ−Ｄ−リジン被覆プレートに播種し、３７℃で５％  ＣＯ２下一晩インキュベートする。実施例１を、ＤＭＳＯで段階希釈し、細胞に加え、３７℃で１時間インキュベートする。次に、細胞を１０ｎｇ／ｍｌ  ＩＦＮα２で３７℃、２０分間刺激する。培地を除去した後、細胞を、Ｈａｌｔプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤カクテル（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ＃７８４４１）を含むバッファー中、室温で３０分間溶解する。ｐ−Ｓｔａｔ１（Ｔｙｒ７０１）の量を、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ  Ｕｌｔｒａ  ｐ−Ｓｔａｔ１（Ｔｙｒ７０１）アッセイキット（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ＃ＡＬＳＵ−ＰＳＴ１−Ａ５０Ｋ）を使用して、ベンダーの推奨プロトコルに従って６１５ｎｍでの発光として定量化する。各阻害剤濃度のパーセント阻害を計算し、実施例１の化合物について０．００８μＭ（±０．００１μＭ、Ｎ＝５）および実施例２の化合物について０．０１０μＭ（±０．００１μＭ、ｎ＝４）のＩＣ５０を与えるＧｅｎｅｄａｔａ  Ｓｃｒｅｅｎｅｒ（登録商標）を使用して４パラメータ非線形ロジスティック方程式に適合させ、平均の標準誤差（ＳＥＭ）を有するＧｅｏＭｅｔｒｉｃ平均として表す。この結果は、実施例１および実施例２の化合物が、ＴＦ１細胞におけるｐＳＴＡＴ１を介したＩＦＮαシグナル伝達の阻害剤であることを実証する。
【００７７】
ＩＬ２３  ｐＳＴＡＴ３ＡｌｐｈａＬＩＳＡアッセイ
内因性ＩＬ２３受容体を発現するＩＬ２依存性Ｋｉｔ２２５細胞に、ホタルルシフェラーゼに連結されたＬｅｎｔｉ  ＳＴＡＴ３  Ｒｅｐｏｒｔｅｒ（ＳＡＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  ＣＬＳ−６０２８Ｌ）を、安定的に形質導入させる。これらの細胞を使用して、ＡｌｐｈａＬＩＳＡテクノロジー（ＴＧＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  ＡＬＳＵ−ＴＳＴ３−Ａ５０Ｋ）を使用するＩＬ２の存在下のＩＬ２３による誘導に続くＳＴＡＴ３リン酸化によって引き起こされる遺伝子発現を定量化することによって、ＴＹＫ２活性を監視する。細胞を、１０％  ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  １００８２）、１ＸＰｅｎ／Ｓｔｒｅｐ（Ｇｉｂｃｏ  １５１４０−１２２）、２００ｎｇ／ｍｌ  ピューロマイシン（Ｓｉｇｍａ  Ｐ９６２０）、および新鮮な１０ｎｇ／ｍｌ  組換えヒトＩＬ２（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ２０２−ＩＬ−５０）を添加したＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃｏ  ２２４００）で培養する。
【００７８】
アッセイ準備のために、細胞をＤＭＥＭ（Ｓｉｇｍａ  Ｄ５７９６）中のＢｉｏｃｏａｔブラックポリ−ｄ−リジン被覆透明底３８４ウェルプレート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  Ｂｉｏ−Ｃｏａｔ  ３５−４６４０）内に３００，０００細胞／ウェルで分注し、３７℃で一晩インキュベートさせる。ＤＭＳＯに可溶化された化合物を、１：３で段階希釈し、１０点濃度応答曲線を作成する（最終ＤＭＳＯ＝０．１％）。細胞を、実施例１と共に３７℃で１時間プレインキュベートし、次にＩＬ２３（最終２５ｎｇ／ｍｌ）で３０分間刺激する。２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した後、細胞ペレットを、１：１溶解バッファー（ＴＧＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＨａｌｔ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ＆Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ阻害剤カクテル（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  １８６１２８１）の混合物で３０分間溶解する。ＡｌｐｈａＬＩＳＡ反応を、ベンダーが推奨するプロトコルに従って実行し、ルシフェラーゼレベルを、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して測定する。相対的ＩＣ５０を、実施例１の化合物について０．００９μＭ（±０．００１μＭ、Ｎ＝４）および実施例２の化合物について０．０１０μＭ（±０．００２μＭ、ｎ＝３）のＩＣ５０を与える４パラメータ非線形ロジスティック方程式（ＧｅｎｅＤａｔａ  Ｓｃｒｅｅｎｅｒ  １３．０．５）を使用して計算し、平均の標準誤差（ＳＥＭ）を有するＧｅｏＭｅｔｒｉｃ平均として表す。この結果は、実施例１および実施例２の化合物が、細胞ベースのアッセイにおいてＩＬ−２３シグナル伝達の阻害剤であることを実証する。
【手続補正書】
【提出日】令和3年3月8日(2021.3.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2022500370.tif 000040
（式中、Ｒはメチルまたはエチルである）
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒがメチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒがエチルである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
前記化合物が、
【化２】
2022500370.tif 000041
である、請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
前記化合物が、
【化３】
2022500370.tif 000042
である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
前記化合物が、
【化４】
2022500370.tif 000043
である、請求項１または請求項３のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
前記化合物が、
【化５】
2022500370.tif 000044
である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、患者における乾癬を処置するための薬学的組成物。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む、患者における全身性エリテマトーデスを処置するための薬学的組成物。
【請求項１０】
乾癬の治療剤の製造における、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１１】
全身性エリテマトーデスの治療剤の製造における、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１２】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩と、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と、を含む薬学的組成物。
【請求項１３】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む、薬学的組成物を調製するためのプロセス。
【国際調査報告】
2022500370.tif 000045
2022500370.tif 000046