【手続補正書】
【提出日】平成22年8月3日(2010.8.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
パラフィン含有試料からリボ核酸を分離する方法であって、
(a)イオン性界面活性剤の存在下、試料を約50〜85℃にて約1〜60分間加温してパラフィン相及び水相を生成する工程と、
(b)パラフィン相から水相を取り出す工程と、
(c)水相にプロテアーゼを添加し、水相を約25〜80℃にて約5〜60分間インキュベートする工程
とを含む方法。
【請求項２】
パラフィン含有試料がホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織試料である、請求項1記載の方法。
【請求項３】
加温が約64〜85℃である、請求項1記載の方法。
【請求項４】
加温が約60〜75℃である、請求項1記載の方法。
【請求項５】
加温が約72℃である、請求項1記載の方法。
【請求項６】
加温が約1〜30分間である、請求項1記載の方法。
【請求項７】
加温が約10分間である、請求項1記載の方法。
【請求項８】
イオン性界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、又はサルコシンである、請求項1記載の方法。
【請求項９】
プロテアーゼがプロテイナーゼKである、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
インキュベートが約35〜70℃である、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
インキュベートが約55〜65℃である、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
インキュベートが約56〜58℃である、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
インキュベートが約5〜30分間である、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
インキュベートが約10分間である、請求項1記載の方法。
【請求項１５】
水相からリボ核酸を精製する工程をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項１６】
精製工程が、TRIZOL沈殿、イソチオシアン酸グアニジン、陰イオン交換クロマトグラフィ、シリカ法による精製、ChargeSwitch(登録商標)精製、又は核酸ハイブリダイゼーションを含む、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
パラフィン含有試料からリボ核酸を分離する方法であって、
(a)イオン性界面活性剤の存在下、試料を約50〜85℃にて約1〜60分間加温してパラフィン相及び水相を生成する工程と、
(b)水相にプロテアーゼを添加し、水相を約25〜80℃にて約5〜60分間インキュベートする工程
とを含む方法。
【請求項１８】
パラフィン相から水相を取り出す工程をさらに含む、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
パラフィン含有試料はホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織試料である、請求項18記載の方法。
【請求項２０】
加温が約64℃〜約85℃の間である、請求項18記載の方法。
【請求項２１】
加温が約60〜75℃である、請求項18記載の方法。
【請求項２２】
加温が約72℃である、請求項18記載の方法。
【請求項２３】
加温が約1〜30分間である、請求項18記載の方法。
【請求項２４】
加温が約10分間である、請求項18記載の方法。
【請求項２５】
イオン性界面活性剤がSDS又はサルコシンである、請求項18記載の方法。
【請求項２６】
プロテアーゼがプロテイナーゼKである、請求項18記載の方法。
【請求項２７】
インキュベートが約35〜70℃である、請求項18記載の方法。
【請求項２８】
インキュベートが約55〜65℃である、請求項18記載の方法。
【請求項２９】
インキュベートが約56〜58℃である、請求項18記載の方法。
【請求項３０】
インキュベートが約5〜30分間である、請求項18記載の方法。
【請求項３１】
インキュベートが約10分間である、請求項18記載の方法。
【請求項３２】
水相からリボ核酸を精製する工程をさらに含む、請求項18記載の方法。
【請求項３３】
精製工程が、TRIZOL沈殿、イソチオシアン酸グアニジン、陰イオン交換クロマトグラフィ、シリカ法による精製、ChargeSwitch(登録商標)精製、又は核酸ハイブリダイゼーションを含む、請求項32記載の方法。
【請求項３４】
パラフィン含有試料からリボ核酸を分離する方法であって、イオン性界面活性剤及びプロテアーゼの存在下で試料を約50〜85℃にて約1〜60分間加温してパラフィン相及び水相を生成する工程を含む、方法。
【請求項３５】
パラフィン相から前記水相を取り出す工程をさらに含む、請求項34記載の方法。
【請求項３６】
パラフィン含有試料がホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織試料である、請求項35記載の方法。
【請求項３７】
加温が約64〜85℃である、請求項35記載の方法。
【請求項３８】
加温が約60〜75℃である、請求項35記載の方法。
【請求項３９】
加温が約65℃である、請求項35記載の方法。
【請求項４０】
加温が約1分〜約30分間である、請求項35記載の方法。
【請求項４１】
加温が約10分間である、請求項40記載の方法。
【請求項４２】
イオン性界面活性剤がSDS又はサルコシンである、請求項35記載の方法。
【請求項４３】
プロテアーゼがプロテイナーゼKである、請求項35記載の方法。
【請求項４４】
水相からリボ核酸を精製する工程をさらに含む、請求項35記載の方法。
【請求項４５】
精製工程が、TRIZOL沈殿、イソチオシアン酸グアニジン、陰イオン交換クロマトグラフィ、シリカ法による精製、ChargeSwitch(登録商標)精製、又は核酸ハイブリダイゼーションを含む、請求項44記載の方法。
【請求項４６】
パラフィン含有試料からデオキシリボ核酸を分離する方法であって、
(a)界面活性剤の存在下、試料を約75〜100℃にて約1〜60分間加温して、パラフィン相及び水相を生成する工程と、
(b)パラフィン相から水相を取り出す工程と、
(c)水相にプロテアーゼを添加し、水相を約25〜80℃にて約5〜60分間インキュベートする工程
とを含む方法。
【請求項４７】
パラフィン含有試料がホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)試料である、請求項46記載の方法。
【請求項４８】
加温が約85〜100℃である、請求項46記載の方法。
【請求項４９】
加温が約100℃である、請求項46記載の方法。
【請求項５０】
加温が約1〜30分間である、請求項46記載の方法。
【請求項５１】
加温が約10分間である、請求項46記載の方法。
【請求項５２】
界面活性剤がイオン性界面活性剤である、請求項46記載の方法。
【請求項５３】
イオン性界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、又はサルコシンである、請求項52記載の方法。
【請求項５４】
界面活性剤が非イオン性界面活性剤である、請求項46記載の方法。
【請求項５５】
非イオン性界面活性剤がTriton X-114、NP-40又はTween-20である、請求項54記載の方法。
【請求項５６】
プロテアーゼがプロテイナーゼKである、請求項46記載の方法。
【請求項５７】
インキュベートが約35〜70℃である、請求項46記載の方法。
【請求項５８】
インキュベートが約55〜65℃である、請求項46記載の方法。
【請求項５９】
インキュベートが約62℃である、請求項46記載の方法。
【請求項６０】
インキュベートが約5〜30分間である、請求項46記載の方法。
【請求項６１】
インキュベートが約10分間である、請求項46記載の方法。
【請求項６２】
水相からデオキシリボ核酸を精製する工程をさらに含む、請求項46記載の方法。
【請求項６３】
精製工程が、TRIZOL沈殿、イソチオシアン酸グアニジン、陰イオン交換クロマトグラフィ、シリカ法による精製、ChargeSwitch(登録商標)精製、又は核酸ハイブリダイゼーションを含む、請求項62記載の方法。
【請求項６４】
パラフィン含有試料からデオキシリボ核酸を分離する方法であって、
(a)界面活性剤の存在下で試料を約75〜100℃にて約1〜60分間加温して、パラフィン相及び水相を生成する工程と、
(b)水相にプロテアーゼを添加し、水相を約75〜100℃で約5〜60分間インキュベートする工程
とを含む方法。
【請求項６５】
パラフィン含有試料がホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)試料である、請求項64記載の方法。
【請求項６６】
加温が約85〜100℃である、請求項64記載の方法。
【請求項６７】
加温が約100℃である、請求項64記載の方法。
【請求項６８】
加温が約1〜30分間である、請求項64記載の方法。
【請求項６９】
加温が約10分間である、請求項64記載の方法。
【請求項７０】
界面活性剤がイオン性界面活性剤である、請求項64記載の方法。
【請求項７１】
イオン性界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、又はサルコシンである、請求項70記載の方法。
【請求項７２】
界面活性剤が非イオン性界面活性剤である、請求項64記載の方法。
【請求項７３】
非イオン性界面活性剤がTriton X-114、NP-40又はTween-20である、請求項72記載の方法。
【請求項７４】
プロテアーゼがプロテイナーゼKである、請求項64記載の方法。
【請求項７５】
インキュベートが約35〜70℃である、請求項64記載の方法。
【請求項７６】
インキュベートが約55〜65℃である、請求項64記載の方法。
【請求項７７】
インキュベートが約62℃である、請求項64記載の方法。
【請求項７８】
インキュベートが約5〜30分間である、請求項64記載の方法。
【請求項７９】
インキュベートが約10分間である、請求項64記載の方法。
【請求項８０】
水相からデオキシリボ核酸を精製する工程をさらに含む、請求項64記載の方法。
【請求項８１】
精製工程が、TRIZOL沈殿、イソチオシアン酸グアニジン、陰イオン交換クロマトグラフィ、シリカ法による精製、ChargeSwitch(登録商標)精製、又は核酸ハイブリダイゼーションを含む、請求項80記載の方法。