(57)【要約】患者における肝傷害（例えば、肝虚血再灌流（ＩＲＩ））又は肝不全（例えば、急性肝不全）を処置するための方法を本明細書で提供し、抗Ｃ５剤（例えば、エクリズマブ又はラブリズマブなどの、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含む。抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの抗Ｃ５剤を患者に投与することによって、患者における１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン及び／又は１つ若しくは複数のケモカインのレベルを減少させ、好中球浸潤を減少させ、血清アルブミンを増加させ、プロトロンビン時間（ＰＴ）を減少させ、かつ国際標準化比（ＩＮＲ）を減少させる方法も提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝外傷を経験した患者における肝虚血再灌流障害（ＩＲＩ）を処置する方法であって、有効量の抗Ｃ５剤を前記患者に投与することを含む方法。
【請求項２】
前記処置が、処置前のベースラインと比較して、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン及び／又は１つ若しくは複数のケモカインの減少をもたらす、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記処置が、処置前のベースラインと比較して、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦα、ＣＸＣＬ−１及びＣＸＣＬ−２の１つ又は複数の減少をもたらす、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記処置が、処置前のベースラインと比較して、ＡＳＴ、ＡＬＴ及びＴ−ｂｉｌからなる群から選択される１つ又は複数の実質損傷マーカーの減少をもたらす、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記処置が、処置前のベースラインと比較して、好中球浸潤及び／又は血小板凝集の減少をもたらす、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記処置が、鈴木スコアリングシステムに基づいて、少なくとも１スコアの改善をもたらす、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記処置が、処置前のベースラインと比較して肝細胞アポトーシスの減少をもたらす、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
肝細胞アポトーシスが、一本鎖ＤＮＡ染色及び／又は切断カスパーゼ−３のウエスタンブロット法による処理の前及び／又は後に評価される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
肝外傷を経験した患者における１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン及び／又は１つ若しくは複数のケモカインのレベルを減少させる方法であって、有効量の抗Ｃ５剤を前記患者に投与することを含み、それにより、処置前のベースラインレベルと比較して、前記患者における前記１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン及び／又は１つ若しくは複数のケモカインのレベルを減少させる方法。
【請求項１０】
前記１つ又は複数の炎症性サイトカインが、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦαからなる群から
選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記１つ又は複数のケモカインが、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２である、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
肝外傷を経験した患者における好中球浸潤を減少させる方法であって、有効量の抗Ｃ５剤を前記患者に投与することを含み、それにより、処置前のベースライン好中球レベルと比較して、好中球レベルを減少させる方法。
【請求項１３】
急性肝不全であると判断された患者を処置する方法であって、有効量の抗Ｃ５剤を前記患者に投与することを含む方法。
【請求項１４】
前記処置が、血清アルブミンの正常レベルへの移行をもたらす、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記処置が、９．５〜１３．５秒の間のプロトロンビン時間（ＰＴ）及び／又は０．８〜１．１の間の国際標準化比（ＩＮＲ）をもたらす、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記処置が、肝性脳症、タンパク質合成障害、黄疸、右上腹部の疼痛、腹部膨満、悪心、嘔吐、倦怠感、見当識障害、錯乱、及び／又は眠気の低減又は休止からなる群から選択される少なくとも１つの治療効果を生み出す、請求項１３から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記処置が、キングズカレッジ基準システム、末期肝疾患モデル（ＭＥＬＤ）スコアリングシステム、急性生理機能及び慢性健康評価（ＡＰＡＣＨＥ）ＩＩスコアリングシステム及び／又はクリチ基準を介して評価された、ベースラインからの変化を生み出す、請求項１３から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
急性肝不全であると判断された患者における血清アルブミンを増加させる方法であって、有効量の抗Ｃ５剤を前記患者に投与することを含み、それにより、投与前のベースライン血清アルブミンレベルと比較して、前記患者の血清アルブミンを増加させる方法。
【請求項１９】
前記患者の血清アルブミンが、前記抗Ｃ５剤の投与前に、１デシリットルあたり３．４グラム未満である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記患者の血清アルブミンが、前記抗Ｃ５剤の投与後に、１デシリットルあたり３．４グラム〜５．４グラムの間である、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
急性肝不全であると判断された患者におけるプロトロンビン時間（ＰＴ）を減少させる方法であって、有効量の抗Ｃ５剤を前記患者に投与することを含み、それにより、前記患者の投与前のＰＴと比較して、前記患者のＰＴ時間を減少させる方法。
【請求項２２】
前記患者のＰＴが、前記抗Ｃ５剤の投与前に、１３．５秒より大きい、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記患者のＰＴが、前記抗Ｃ５剤の投与後に、９．５〜１３．５秒の間である、請求項２１又は２２に記載の方法。
【請求項２４】
急性肝不全であると判断された患者における国際標準化比（ＩＮＲ）を減少させる方法であって、有効量の抗Ｃ５剤を前記患者に投与することを含み、それにより、前記患者の投与前のＩＮＲと比較して、前記患者のＩＮＲを減少させる方法。
【請求項２５】
前記患者のＩＮＲが、前記抗Ｃ５剤の投与前に、１．５より大きい、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記患者のＩＮＲが、前記抗Ｃ５剤の投与後に、０．８〜１．１の間である、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記減少が、処置後の２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、４８時間、又は７２時間において評価される、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記抗Ｃ５剤が、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントである、請求項１から２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、それぞれ配列番号１、２、及び３に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の重鎖配列、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の軽鎖配列を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号７を含む重鎖可変領域及び配列番号８を含む軽鎖可変領域を含む、請求項２８又は２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号１０を含む重鎖及び配列番号１１を含む軽鎖を含む、請求項２８から３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記抗体が、エクリズマブである、請求項２８から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントが、それぞれ配列番号１９、１８、及び３に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３の重鎖配列、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の軽鎖配列を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３４】
前記抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントが、ヒト新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合する変異体ヒトＦｃ定常領域をさらに含み、変異体ヒトＦｃ  ＣＨ３定常領域は、それぞれＥＵ番号付けされた、ネイティブヒトＩｇＧ  Ｆｃ定常領域のメチオニン４２８及びアスパラギン４３４に対応する残基におけるＭｅｔ−４２９−Ｌｅｕ及びＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号１２を含む重鎖可変領域及び配列番号８を含む軽鎖可変領域を含む、請求項２８及び３３から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号１３に示される重鎖定常領域をさらに含む、請求項２８及び３３から３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号１４に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド及び配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む、請求項２８及び３３から３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記抗体がラブリズマブである、請求項２８及び３３から３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、それぞれ配列番号２１、２２及び２３に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号２４、２５、及び２６に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４０】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号２７に明示される配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２８に明示される配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２８又は３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、それぞれ配列番号２９、３０及び３１に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号３２、３３、及び３４に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４２】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号３５に明示される配列を含む重鎖可変領域及び配列番号３６に明示される配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２８又は４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、それぞれ配列番号３７、３８及び３９に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号４０、４１及び４２に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４４】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号４３に明示される配列を含む重鎖可変領域及び配列番号４４に明示される配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項２８又は４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号４５に明示される配列を含む重鎖及び配列番号４６に明示される配列を含む軽鎖を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４６】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号４７に明示される重鎖可変領域配列及び配列番号４８に明示される配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項４７】
前記抗体又はその抗原結合性フラグメントが、配列番号４９に明示される重鎖配列及び配列番号５０に明示される軽鎖配列を含む、請求項２８又は４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記抗Ｃ５剤が、静脈内投与される、請求項１から４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
患者における肝虚血再灌流障害（ＩＲＩ）を処置又は予防するためのキットであって、
（ａ）ある用量の抗Ｃ５剤；及び
（ｂ）請求項１から４８のいずれか一項に記載の方法における、前記抗Ｃ５剤の使用説明書を備えるキット。
【請求項５０】
急性肝不全であると判断された患者を処置するためのキットであって、
（ａ）ある用量の抗Ｃ５剤；及び
（ｂ）請求項１から４９のいずれか一項に記載の方法における、前記抗Ｃ５剤の使用説明書を備えるキット。
【請求項５１】
前記抗Ｃ５剤が、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントである、請求項４９又は５０に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１８年９月１７日に出願された米国特許仮出願第６２／７３２，４５９号の利益を主張する。該仮特許出願の全容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、その全容が参照により本明細書に組み込まれる。２０１９年９月１２日に作成された上記のＡＳＣＩＩコピーは、ＡＸＪ−２５５ＰＣ＿ＳＬ．ｔｘｔという名称で、サイズは５８，７８０バイトである。
【背景技術】
【０００３】
虚血再灌流障害（ＩＲＩ）は、低酸素症（組織中の酸素欠乏）によって引き起こされる臓器における細胞損傷が、酸素輸送の回復後に増悪する現象である（Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓらによる、Ａｒｃｈ  Ｔｒａｕｍａ  Ｒｅｓ．２０１３年８月；２（２）：６３〜７０頁及びＥｌｉａｓ−Ｍｉｒｏ  Ｍらによる、Ｉｓｃｈｅｍｉａ−Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｌｉｖｅｒ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ２０１１：Ｐａｓｔ  ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ２０１２年を参照のこと）。かなり重度の場合、ＩＲＩ後の炎症反応は、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）又は多臓器不全症候群（ＭＯＤＳ）を引き起こし得る（Ｖｉｄｅｌａ  ＬＡらによる、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２００９年；１（１）：７２〜８頁を参照のこと）。肝ＩＲＩは、移植、外傷、ショック、及び肝血液供給が一時的に中断される待機的肝手術の状況で起きる。
【０００４】
急性肝不全（劇症肝不全としても公知）は、通常は既存の肝疾患がない人に、急速に起きる（例えば、数日又は数週間で）肝機能の損失（例えば、肝細胞の８０〜９０％の機能の喪失）である。急性肝不全は、肝疾患の病歴のない患者において、発症から２６週間以内に精神的変化（脳症）の発生を伴う異常な血液凝固の証拠（例えば、国際標準化比＞１．５）を有する急性肝炎の症候群として定義される（例えば、Ｐｏｌｓｏｎ  Ｊ、Ｌｅｅ  ＷＭ；Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００５年；４１：１１７９〜１１９７頁及びＳｌｅｉｓｅｎｇｅｒ＆Ｆｏｒｄｔｒａｎ’ｓ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｎｄ  ｌｉｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ（ＰＤＦ）（第９版）を参照のこと）。
米国では毎年ほぼ２，０００件の急性肝不全の症例があり、肝疾患による全死亡の６％を占める（Ｓｉｎｇｈらによる、Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１６年６月；８３（６）：４５３〜４６２頁及びＬｅｅ  ＷＭらによる、Ａｃｕｔｅ  ｌｉｖｅｒ  ｆａｉｌｕｒｅ：ｓｕｍｍａｒｙ  ｏｆ  ａ  ｗｏｒｋｓｈｏｐ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００８年；４７：１４０１〜１４１５頁を参照のこと）。この疾患は高い死亡率をもたらし、早期の認識及び移植施設を備えた三次医療センターへの移送が重大な意味を持つ。肝ＩＲＩは、診療において頻繁に起こりかつ主要な合併症であり、肝機能を損ない、術後の罹患率、死亡率、回復、及び予後全般を増加させる。したがって、本発明の目的は、肝ＩＲＩを有する患者（例えば、外科手術を含むあらゆる種類の身体的傷害による）、及び急性肝不全であると判断された患者を処置するための改善された方法を提供することである。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ａｒｃｈ  Ｔｒａｕｍａ  Ｒｅｓ．２０１３年８月；２（２）：６３〜７０頁
【非特許文献２】Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２００９年；１（１）：７２〜８頁
【非特許文献３】Ｐｏｌｓｏｎ  Ｊ、Ｌｅｅ  ＷＭ；Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００５年；４１：１１７９〜１１９７頁
【非特許文献４】Ｓｌｅｉｓｅｎｇｅｒ＆Ｆｏｒｄｔｒａｎ’ｓ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｎｄ  ｌｉｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ（ＰＤＦ）（第９版）
【非特許文献５】Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１６年６月；８３（６）：４５３〜４６２頁
【非特許文献６】Ａｃｕｔｅ  ｌｉｖｅｒ  ｆａｉｌｕｒｅ：ｓｕｍｍａｒｙ  ｏｆ  ａ  ｗｏｒｋｓｈｏｐ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００８年；４７：１４０１〜１４１５頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
患者における肝傷害又は肝不全を処置するための組成物及び方法を本明細書で提供し、ポリペプチド、ポリペプチド類似体、核酸、核酸類似体、及び小分子などの抗Ｃ５剤を患者に投与することを含む。例示的な抗Ｃ５剤は、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントである。
【０００７】
一態様では、肝外傷（例えば、外科手術を含むあらゆる種類の身体的傷害による）を経験した患者における肝虚血再灌流障害（ＩＲＩ）を処置する方法は、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの有効量の抗Ｃ５剤を患者に投与することを含む。一実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、肝細胞アポトーシスの減少をもたらす（例えば、一本鎖ＤＮＡ染色及び／又は切断カスパーゼ−３のウエスタンブロット法によって評価される）。一実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、肝細胞アポトーシスが１．５分の１、２分の１、２．５分の１、３分の１、又は３．５分の１に減少する。
【０００８】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）において、正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【０００９】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、１つ又は複数の実質損傷マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ、及び／又はＴ−ｂｉｌ）の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、１つ又は複数の実質損傷マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ及び／又はＴ−ｂｉｌ）において、マーカーに関して正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００１０】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、好中球浸潤の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、好中球浸潤において、好中球の正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００１１】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、血小板凝集の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、血小板凝集において、血小板凝集の正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００１２】
別の実施形態では、本処置は、表１に明示される肝ＩＲＩ後の肝損傷の評価用の鈴木スコアリングシステムによって評価して、少なくとも１スコアの改善をもたらす（例えば、Ｍａｔｔｈｉａｓ  Ｂｅｈｒｅｎｄｓらによる、Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｓｕｒｇ．、２０１０年３月；１４（３）：５２８〜５３５頁、Ｓｕｚｕｋｉ  Ｓらによる、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９９３年；５５（６）：１２６５〜７２頁、及びＳｕｚｕｋｉ  Ｓらによる、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９９１年；５２：９７９〜９８頁を参照のこと）。例えば、患者は、（１）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア３、（２）処置前にはスコア３及び処置後にはスコア２、（３）処置前にはスコア２及び処置後にはスコア１、又は（４）処置前にはスコア１及び処置後にはスコア０を有し得る。別の実施形態では、本処置は、少なくとも２、３、又は４スコアの改善をもたらす。例えば、患者は、（１）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア２、（２）処置前にはスコア３及び処置後にはスコア１、（３）処置前にはスコア２及び処置後にはスコア０、（４）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア１、（５）処置前にはスコア３及び処置後にはスコア０、又は（６）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア０を有し得る。
【００１３】
肝外傷を経験した患者における１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）のレベルを、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの有効量の抗Ｃ５剤を患者に投与することにより減少させ、それにより、処置前のベースラインレベルと比較して、患者における１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン及び／又は１つ若しくは複数のケモカインのレベルを減少させる方法も提供する。一実施形態では、本方法は、処置前のベースラインと比較して、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本方法は、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）において、正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００１４】
さらに、肝外傷（例えば、外科手術を含むあらゆる種類の身体的傷害による）を経験した患者における好中球浸潤を、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの有効量の抗Ｃ５剤を患者に投与することにより減少させ、それにより、処置前のベースライン好中球レベルと比較して、好中球レベルを減少させる方法も提供する。一実施形態では、本方法は、処置前のベースラインと比較して、好中球浸潤の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、好中球浸潤において、好中球の正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００１５】
別の態様では、急性肝不全であると判断された患者を処置する方法を提供し、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの有効量の抗Ｃ５剤を患者に投与することを含む。一実施形態では、本処置は、血清アルブミンの正常レベルへの移行をもたらす。別の実施形態では、本処置は、患者が９．５〜１３．５秒の間のプロトロンビン時間（ＰＴ）を有するという結果をもたらす。別の実施形態では、本処置は、患者が、０．８〜１．１の間の国際標準化比（ＩＮＲ）を有するという結果をもたらす。別の実施形態では、本処置は、患者が９．５〜１３．５秒の間のＰＴ及び０．８〜１．１の間のＩＮＲを有するという結果をもたらす。
【００１６】
一実施形態では、本処置は、肝性脳症、タンパク質合成障害、黄疸、右上腹部の疼痛、腹部膨満、悪心、嘔吐、倦怠感、見当識障害、錯乱、及び／又は眠気の低減又は休止からなる群から選択される少なくとも１つの治療効果を生み出す。別の実施形態では、本処置は、キングズカレッジ基準システム、末期肝疾患モデル（ＭＥＬＤ）スコアリングシステム、急性生理機能及び慢性健康評価（ＡＰＡＣＨＥ）ＩＩスコアリングシステム及び／又はクリチ（Ｃｌｉｃｈｙ）基準を介して評価された、ベースラインからの変化を生み出す。
【００１７】
さらなる態様では、急性肝不全であると判断された患者における血清アルブミンを増加させる方法を提供し、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの有効量の抗Ｃ５剤を患者に投与することを含み、それにより、投与前のベースライン血清アルブミンレベルと比較して、患者の血清アルブミンを増加させる。一実施形態では、患者の血清アルブミンは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与前には１デシリットルあたり３．４グラム未満である。別の実施形態では、患者の血清アルブミンは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後、１デシリットルあたり３．４グラム〜５．４グラムの間である。
【００１８】
さらなる態様では、急性肝不全であると判断された患者におけるＰＴを減少させる方法を提供し、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含み、それにより、比較した患者のＰＴ時間を減少させる。一実施形態では、患者のＰＴは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与前には１３．５秒より大きい。別の実施形態では、患者のＰＴは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後に９．５〜１３．５秒の間である。
【００１９】
さらなる態様では、急性肝不全であると判断された患者におけるＩＮＲを減少させる方法、該方法は、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含み、それにより、患者のＩＮＲを減少させる。一実施形態では、患者のＩＮＲは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与前に１．５より大きい。別の実施形態では、患者のＩＮＲは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後、０．８〜１．１の間である。
【００２０】
本明細書に記載の評価、例えば、肝細胞アポトーシス、サイトカイン、ケモカイン、実質損傷マーカー、好中球浸潤、血小板凝集、ＰＴ、ＩＮＲ、及び／又は身体的症状における減少は、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後の任意の時間に決定することができる。一実施形態では、その減少は、処置後の２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、４８時間、又は７２時間において評価される。
【００２１】
本明細書に記載の方法では、任意の好適な抗Ｃ５剤を使用することができる。一実施形態では、抗Ｃ５剤は、ポリペプチド、ポリペプチド類似体、核酸、核酸類似体、又は小分子である。別の実施形態では、薬剤−Ｃ５剤は、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントである。例示的な抗Ｃ５抗体は、それぞれ配列番号１０及び１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖を含むエクリズマブ（ソリリス（登録商標））、又はその抗原結合性フラグメント及び変異体である。他の実施形態では、抗体は、エクリズマブの重鎖及び軽鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）又は可変領域（ＶＲ）を含む。したがって、一実施形態では、抗体は、配列番号７に示される配列を有するエクリズマブの重鎖可変（ＶＨ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のドメイン、並びに配列番号８に示される配列を有するエクリズマブの軽鎖可変（ＶＬ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１、２、及び３に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の重鎖配列、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の軽鎖配列を含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号７及び配列番号８に明示されるアミノ酸配列を有するＶＨ及びＶＬ領域を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１０に明示される重鎖及び配列番号１１に明示される軽鎖ポリペプチドを含む。
【００２２】
別の例示的な抗体は、それぞれ配列番号１４及び１１に明示される配列を有する重鎖及び軽鎖を含むラブリズマブ（ＡＬＸＮ１２１０及び抗体ＢＮＪ４４１としても公知）、又はその抗原結合性フラグメント及び変異体である。他の実施形態では、抗体は、ラブリズマブの重鎖及び軽鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）又は可変領域（ＶＲ）を含む。したがって、一実施形態では、抗体は、配列番号１２に示される配列を有するラブリズマブの重鎖可変（ＶＨ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のドメイン、並びに配列番号８に示される配列を有するラブリズマブの軽鎖可変（ＶＬ）領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８、及び３に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の重鎖配列、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の軽鎖配列を含む。
【００２３】
別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１２及び配列番号８に明示されるアミノ酸配列を有するＶＨ及びＶＬ領域を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１３に明示される重鎖定常領域を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号１４に明示される重鎖ポリペプチド及び配列番号１１に明示される軽鎖ポリペプチドを含む。別の実施形態では、抗体は、ヒト新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合する変異体ヒトＦｃ定常領域を含み、変異体ヒトＦｃ  ＣＨ３定常領域は、それぞれＥＵ番号付けされた、ネイティブヒトＩｇＧ  Ｆｃ定常領域のメチオニン４２８及びアスパラギン４３４に対応する、残基におけるＭｅｔ−４２９−Ｌｅｕ及びＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む。
【００２４】
別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８、及び３に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の重鎖配列、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示されるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の軽鎖配列、並びにヒト新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合する変異体ヒトＦｃ定常領域を含み、変異体ヒトＦｃ  ＣＨ３定常領域は、それぞれＥＵ番号付けされた、ネイティブヒトＩｇＧ  Ｆｃ定常領域のメチオニン４２８及びアスパラギン４３４に対応する、残基におけるＭｅｔ−４２９−Ｌｅｕ及びＡｓｎ−４３５−Ｓｅｒ置換を含む。
【００２５】
別の実施形態では、抗体は、ｐＨ７．４及び２５℃において、０．１ｎＭ≦ＫＤ≦１ｎＭの範囲にある親和性解離定数（ＫＤ）を伴い、ヒトＣ５に結合する。別の実施形態では、抗体は、ＫＤ≧１０ｎＭを伴い、ｐＨ６．０及び２５℃においてヒトＣ５に結合する。さらに別の実施形態では、抗体の［（ｐＨ６．０及び２５℃におけるヒトＣ５に対する抗体又はその抗原結合性フラグメントのＫＤ）／（ｐＨ７．４及び２５℃におけるヒトＣ５に対する抗体又はその抗原結合性フラグメントのＫＤ）］は、２５より大きい。
【００２６】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、米国特許第８，２４１，６２８号及び同第８，８８３，１５８号に記載される７０８６抗体である。一実施形態では、抗体は、７０８６抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む（米国特許第８，２４１，６２８号及び同第８，８８３，１５８号を参照のこと）。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、それぞれ配列番号２１、２２及び２３に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号２４、２５、及び２６に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、配列番号２７に明示される配列を有する７０８６抗体のＶＨ領域、及び配列番号２８に明示される配列を有する７０８６抗体のＶＬ領域を含む。
【００２７】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、また米国特許第８，２４１，６２８号及び同第８，８８３，１５８号に記載される８１１０抗体である。一実施形態では、抗体は、８１１０抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、それぞれ配列番号２９、３０及び３１に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号３２、３３、及び３４に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号３５に明示される配列を有する８１１０抗体のＶＨ領域、及び配列番号３６に明示される配列を有する８１１０抗体のＶＬ領域を含む。
【００２８】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、ＵＳ２０１６／０１７６９５４Ａ１に記載される３０５ＬＯ５抗体である。一実施形態では、抗体は、３０５ＬＯ５抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、それぞれ配列番号３７、３８及び３９に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号４０、４１、及び４２に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号４３に明示される配列を有する３０５ＬＯ５抗体のＶＨ領域、及び配列番号４４に明示される配列を有する３０５ＬＯ５抗体のＶＬ領域を含む。
【００２９】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、Ｆｕｋｕｚａｗａ  Ｔらによる、Ｒｅｐ．２０１７年４月２４日；７（１）：１０８０に記載されるＳＫＹ５９抗体である。一実施形態では、抗体は、ＳＫＹ５９抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、配列番号４５を含む重鎖及び配列番号４６を含む軽鎖を含む。
【００３０】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、ＵＳ２０１７０３５５７５７に記載されるＲＥＧＮ３９１８抗体（Ｈ４Ｈ１２１６６ＰＰとしても公知）である。一実施形態では、抗体は、配列番号４７を含む重鎖可変領域、及び配列番号４８を含む軽鎖可変領域を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号４９を含む重鎖及び配列番号５０を含む軽鎖を含む。
【００３１】
別の実施形態では、抗体は、上記の抗体（例えば、エクリズマブ、ラブリズマブ、７０８６抗体、８１１０抗体、３０５ＬＯ５抗体、ＳＫＹ５９抗体、又はＲＥＧＮ３９１８抗体）と、結合について、及び／又はＣ５上での同じエピトープとの結合について競合する。別の実施形態では、抗体は、上記の抗体と少なくとも約９０％の可変領域アミノ酸配列同一性を有する（例えば、少なくとも約９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の可変領域同一性）。
【００３２】
抗Ｃ５剤（例えば、抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、任意の好適な手段によって患者に投与することができる。一実施形態では、薬剤は静脈内投与される。別の実施形態では、薬剤は経口投与される。別の実施形態では、薬剤は皮下投与される。別の実施形態では、薬剤は、約４００ｍｇ、４０５ｍｇ、４１０ｍｇ、４２０ｍｇ、４２５ｍｇ、４３０ｍｇ、４３５ｍｇ、４４０ｍｇ、４４５ｍｇ、４５０ｍｇ、４５５ｍｇ、４６０ｍｇ、４６５ｍｇ、４７０ｍｇ、４７５ｍｇ、４８０ｍｇ、４８５ｍｇ、４９０ｍｇ、４９５ｍｇ、５００ｍｇ、５０５ｍｇ、５１０ｍｇ、５１５ｍｇ、５２０ｍｇ、５２５ｍｇ、５３０ｍｇ、５３５ｍｇ、５４０ｍｇ、５４５ｍｇ、５５０ｍｇ、５５５ｍｇ、５６０ｍｇ、５６５ｍｇ、５７０ｍｇ、５７５ｍｇ、５８０ｍｇ、５８５ｍｇ、５９０ｍｇ、５９５ｍｇ、６００ｍｇ、６０５ｍｇ、６１０ｍｇ、６１５ｍｇ、６２０ｍｇ、６２５ｍｇ、６３０ｍｇ、６３５ｍｇ、６４０ｍｇ、６４５ｍｇ、６５０ｍｇ、６５５ｍｇ、６６０ｍｇ、６６５ｍｇ、６７０ｍｇ、６７５ｍｇ、６８０ｍｇ、６８５ｍｇ、６９０ｍｇ、６９５ｍｇ、７００ｍｇ、７０５ｍｇ、７１０ｍｇ、７１５ｍｇ、７２０ｍｇ、７２５ｍｇ、７３０ｍｇ、７３５ｍｇ、７４０ｍｇ、７４５ｍｇ、７５０ｍｇ、７５５ｍｇ、７６０ｍｇ、７６５ｍｇ、７７０ｍｇ、７７５ｍｇ、７８０ｍｇ、７８５ｍｇ、７９０ｍｇ、７９５ｍｇ、８００ｍｇ、８０５ｍｇ、８１０ｍｇ、８１５ｍｇ、８２０ｍｇ、８２５ｍｇ、８３０ｍｇ、８３５ｍｇ、８４０ｍｇ、８４５ｍｇ、８５０ｍｇ、８５５ｍｇ、８６０ｍｇ、８６５ｍｇ、８７０ｍｇ、８７５ｍｇ、８８０ｍｇ、８８５ｍｇ、８９０ｍｇ、８９５ｍｇ、９００ｍｇ、９０５ｍｇ、９１０ｍｇ、９１５ｍｇ、９２０ｍｇ、９２５ｍｇ、９３０ｍｇ、９３５ｍｇ、９４０ｍｇ、９４５ｍｇ、９５０ｍｇ、９５５ｍｇ、９６０ｍｇ、９６５ｍｇ、９７０ｍｇ、９７５ｍｇ、９８０ｍｇ、９８５ｍｇ、９９０ｍｇ、９９５ｍｇ、１０００ｍｇ、１００５ｍｇ、１０１０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０２０ｍｇ、１０２５ｍｇ、１０３０ｍｇ、１０３５ｍｇ、１０４０ｍｇ、１０４５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０５５ｍｇ、１０６０ｍｇ、１０６５ｍｇ、１０７０ｍｇ、１０７５ｍｇ、１０８０ｍｇ、１０８５ｍｇ、１０９０ｍｇ、１０９５ｍｇ、１１００ｍｇ、１１５０ｍｇ、１２００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１３００ｍｇ、１３５０ｍｇ、又は１４００ｍｇの用量で投与される抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントである。一実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、単回投与で投与される。別の実施形態では、複数回投与の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）が投与される。
【００３３】
抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、及び単独で、又は１つ若しくは複数の追加の治療剤と組み合わせて（例えば、別々に又は同時に）投与することができる。一実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、３つ以下の追加の薬剤と組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、２つ以下の追加の薬剤と組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、１つ以下の追加の薬剤と組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、単独で投与される。
【００３４】
抗Ｃ５剤（例えば、エクリズマブ若しくはラブリズマブなどの、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）、及び薬学的に許容される担体を、本明細書に記載の方法における使用に適応した治療有効量で含む医薬組成物を含むキットも提供する。例えば、一実施形態では、患者における肝虚血再灌流障害（ＩＲＩ）を処置又は予防するためのキットを提供し、該キットは、（ａ）ある用量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）；及び（ｂ）本明細書に記載の任意の方法における、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の使用説明書を備える。別の実施形態では、急性肝不全であると判断された患者を処置するためのキットを提供し、該キットは、（ａ）ある用量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）；及び（ｂ）本明細書に記載の任意の方法における、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の使用説明書を備える。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１は、温虚血再灌流障害のマウスモデルを示す概略図である。
【図２】図２Ａは、Ｃ５ＷＴマウスに腹腔内（ｉ．ｐ．）投与されたＢＢ５．１の、ＣＨ５０に対する効果を示す。図２Ｂは、Ｃ５ＷＴマウスに静脈内（ｉ．ｖ．）投与されたＢＢ５．１の、ＣＨ５０に対する効果を示す。
【図３】図３は、抗Ｃ５抗体の投与を伴う場合かつ伴わない場合の、虚血中、再灌流中、ＩＲＩ後の２時間、ＩＲＩ後の６時間、ＩＲＩ後の１日、ＩＲＩ後の３日、及びＩＲＩ後の４日における溶血活性（ＣＨ５０  Ｕ／ｍｌ）を示す。
【図４】図４は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、及びＫＯ−抗Ｃ５Ａｂに関する、肝虚血再灌流後の最大２４時間までの、ＡＬＴ（Ｕ／ｍｌ）放出を示す。
【図５】図５Ａは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔ、ＷＴ−疑似物質、及びＫＯ−疑似物質に関する、肝虚血再灌流後２時間におけるＡＬＴ放出（Ｕ／ｍｌ）を示す。図５Ｂは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔ、ＷＴ−疑似物質、及びＫＯ−疑似物質に関する、肝虚血再灌流後６時間におけるＡＬＴ放出（Ｕ／ｍｌ）を示す。
【図６】図６Ａは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔに関して、虚血再灌流後２時間に鈴木スコアによって評価された組織病理学的評価を示す。図６Ｂは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔに関して、虚血再灌流後６時間に鈴木スコアによって評価された組織病理学的評価を示す。
【図７】図７は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔに関する、ＩＲＩ後の２時間におけるＣＤ４１染色を示す。
【図８】図８Ａは、虚血再灌流後の２時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＩＬ−１βを示す。図８Ｂは、虚血再灌流後の２時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＩＬ−６を示す。図８Ｃは、虚血再灌流後の２時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＴＮＦ−αを示す。図８Ｄは、虚血再灌流後の２時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＣＸＣＬ−１を示す。図８Ｅは、虚血再灌流後の２時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＣＸＣＬ−２を示す。図８Ｆは、虚血再灌流後の６時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＩＬ−１βを示す。図８Ｇは、虚血再灌流後の６時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＩＬ−６を示す。図８Ｈは、虚血再灌流後の６時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＴＮＦ−αを示す。図８Ｉは、虚血再灌流後の６時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＣＸＣＬ−１を示す。図８Ｊは、虚血再灌流後の６時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価されたＣＸＣＬ−２を示す。
【図９】図９Ａは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の２時間におけるＦ４／８０＋細胞（全肝臓マクロファージ）を示す。図９Ｂは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の６時間におけるＦ４／８０＋細胞（全肝臓マクロファージ）を示す。図９Ｃは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の２時間におけるＣＤ１１ｂ細胞（浸潤性マクロファージ）を示す。図９Ｄは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の６時間におけるＣＤ１１ｂ細胞（浸潤性マクロファージ）を示す。
【図１０】図１０は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の６時間におけるＬｙ６Ｇ細胞染色を示す。抗Ｃ５Ａｂ及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔは好中球浸潤を低減した。
【図１１】図１１は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の６時間におけるｓｓＤＮＡ染色を示す。
【図１２】図１２は、ＷＴ−疑似物質、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−疑似物質、ＫＯ−対照ＩｇＧ、及びＫＯ−抗Ｃ５Ａｂに関して、ウエスタンブロット法で評価された、虚血再灌流後の６時間における切断カスパーゼ−３を示す。
【図１３】図１３は、ＷＴ−疑似物質、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔに関して、ウエスタンブロット法で評価された、虚血再灌流後の６時間における切断カスパーゼ−３を示す。
【図１４】図１４は、急性／劇症肝不全のマウスモデルを描いた概略図である。
【図１５】図１５は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬の処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与後の０時間、２時間、４時間、及び６時間のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。
【図１６】図１６は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与後６時間のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。
【図１７】図１７は、ＫＯ−ビヒクル及びＷＴ−ビヒクルの処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の投与後１２時間のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。
【図１８】図１８Ａは、ＷＴ−対照及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスにおける、ＩＬ−１βのレベルを示す。図１８Ｂは、ＷＴ−対照及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスにおける、ＩＬ−６のレベルを示す。図１８Ｃは、ＷＴ−対照及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスにおける、ＴＮＦαのレベルを示す。図１８Ｄは、ＷＴ−対照及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスにおける、ＣＸＣＬ−１のレベルを示す。図１８Ｅは、ＷＴ−対照及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスにおける、ＣＸＣＬ−２のレベルを示す。
【図１９】図１９は、組織学的分析を介して評価された、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔの処置済みマウスの傷害グレードの比較である。
【図２０】図２０は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるｓｓＤＮＡ染色を示す。
【図２１】図２１は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬に関する、２時間、４時間、及び６時間におけるｓｓＤＮＡ染色を示す。
【図２２】図２２は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＬｙ６Ｇ染色を示す。
【図２３】図２３は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＦ４／８０染色を示す。
【図２４】図２４は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬に関する、２時間、４時間、６時間におけるＦ４／８０染色を示す。
【図２５】図２５は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＣＤ１１ｂ染色を示す。
【図２６】図２６は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＣＤ４１１染色を示す。
【図２７】図２７は、ＷＴ−疑似物質、ＷＴ−対照ＩｇＧ、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスに関する、６時間における切断カスパーゼ−３／β−アクチン比を示す。
【図２８】図２８は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスに関する、２時間、４時間、及び６時間における、ザイモサンを用いた溶血活性を示す。
【図２９】図２９は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスに関する、２時間、４時間、及び６時間における、Ｃ５−枯渇ヒト血清を用いた溶血活性を示す。
【図３０】図３０は、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−対照ＩｇＧの処置済みマウスに関する、経時的な生存曲線を示す。
【図３１】図３１は、急性／劇症肝不全のマウスモデルを示す概略図であり、抗Ｃ５Ａｂの静脈内注射はＬＰＳ／Ｄ−ＧａＩＮ注射の２時間後に遅らせる。
【図３２】図３２は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ（２時間において投与）、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ（４時間において投与）の処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与後のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。
【図３３】図３３は、７０％肝部分切除術における肝臓再生に対するＣ５遮断の影響を評価するためのマウスモデルを示す概略図である。
【図３４Ａ】図３４Ａは、４８時間におけるＡＬＴレベルを示すグラフである。
【図３４Ｂ】図３４Ｂは、４８時間におけるＣＨ５０レベルを示すグラフである。
【図３４Ｃ】図３４Ｃは、肝臓重量を示すグラフである。
【図３４Ｄ】図３４Ｄは、４８時間における生存率を示すグラフである。
【図３５Ａ】図３５Ａは、野生型疑似物質、野生型対照ＩｇＧ、及び野生型抗Ｃ５抗体群に関する、４８時間後のＢｒｄＵ陽性細胞の百分率を示すグラフである。
【図３５Ｂ】図３５Ｂは、４８時間後のＡＬＴ（ＩＵ／Ｌ）対％ＢＲｄＵ陽性細胞を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
Ｉ．定義
本明細書で使用される場合、「対象」又は「患者」という用語は、哺乳動物（例えば、急性肝不全を有するか、又は外科手術を含むあらゆる種類の身体的傷害による肝外傷を経験した患者（例えば、ヒト））である。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「効果的処置」は、有益な効果、例えば、疾患又は障害の少なくとも１つの症状の軽快をもたらす処置を指す。有益な効果は、ベースラインを超える改善、すなわち、本方法に基づく治療の開始前に行われた測定又は観察を越える改善という形をとることができる。効果的処置は、急性肝不全又は肝外傷の少なくとも１つの症状の軽減を指す場合がある。例えば、急性肝不全の状況では、効果的処置には、肝性脳症、タンパク質合成障害、黄疸、右上腹部の疼痛、腹部膨満、悪心、嘔吐、倦怠感、見当識障害、錯乱、及び／又は眠気からなる群から選択される１つ又は複数の症状の軽減が含まれる。別の実施形態では、効果的処置は、血清アルブミンの正常レベルへの移行、９．５〜１３．５秒の間のＰＴ、及び／又は０．８〜１．１の間の国際標準化比（ＩＮＲ）をもたらす。肝外傷の状況では、効果的処置は、以下：肝細胞アポトーシス、１つ又は複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ又は複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）のレベル、実質損傷マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ及び／又はＴ−ｂｉｌ）、好中球浸潤、及び／又は血小板凝集のうちの１つ又は複数における減少をもたらし得る。
【００３８】
「有効量」という用語は、所望の生物学的、治療的、及び／又は予防的結果を提供する薬剤の量を指す。その結果は、疾患の１つ又は複数の徴候、症状、又は原因の低減、軽快、緩和、低下、遅延、及び／若しくは軽減、又は生命システムの任意の他の所望の変化であり得る。一例では、「有効量」は、急性肝不全又は肝外傷の少なくとも１つの症状を軽減することが臨床的に証明されている、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの抗Ｃ５剤の量である。有効量は、１回又は複数回の投与で投与することができる。
【００３９】
ＩＩ．抗Ｃ５剤
ヒト補体成分Ｃ５の阻害剤は、例えば、小分子、ポリペプチド、ポリペプチド類似体、核酸、又は核酸類似体であり得る。
【００４０】
本明細書で使用される「小分子」は、約６ｋＤａ未満、最も好ましくは約２．５ｋＤａ未満の分子量を有する薬剤を指す。多くの製薬会社は、多くの場合は真菌、細菌、又は藻類の抽出物である小分子のアレイを含む化学的及び／又は生物学的な混合物の広範なライブラリを所有しており、それらは本出願の任意のアッセイでスクリーニングできる。本出願は、数ある中でも、微小化学物質ライブラリ、ペプチドライブラリ、又は天然物の収集物の使用を企図している。タンらは、小型の細胞ベースのアッセイと適合する、２００万を超える合成化合物を有するライブラリについて記載している（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９８）１２０：８５６５〜８５６６頁）。このようなライブラリを使用して、ヒト補体成分Ｃ５の阻害剤をスクリーニングし得ることは、本出願の範囲内である。Ｃｈｅｍｂｒｉｄｇｅ  ＤＩＶＥＲＳｅｔなどの、市販の化合物ライブラリは多数ある。ライブラリは、ＮＣＩ開発治療プログラムからのＤｉｖｅｒｓｉｔｙセットなどの学術研究者からも入手できる。合理的薬物設計もまた利用することができる。例えば、合理的薬物設計では、ヒト補体成分Ｃ５タンパク質に関する結晶又は溶液の構造情報の使用を利用することができる。例えば、Ｈａｇｅｍａｎｎらによる（２００８）、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２８３（１２）：７７６３〜７５頁及びＺｕｉｄｅｒｗｅｇらによる（１９８９）、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２８（１）：１７２〜８５頁に記載される構造を参照されたい。合理的薬物設計は、公知の化合物、例えば、Ｃ５の公知の阻害剤（例えば、ヒト補体成分Ｃ５タンパク質に結合する抗体又はその抗原結合性フラグメント）に基づいて達成することもできる。
【００４１】
ペプチド模倣物は、対象ポリペプチドの少なくとも一部が修飾されている化合物であり、ペプチド模倣物の三次元構造は、対象ポリペプチドの三次元構造と実質的に同じままである。ペプチド模倣物は、それ自体、対象ポリペプチド配列内に１つ又は複数の置換又は他の修飾を含むポリペプチドである、本開示の対象ポリペプチドの類似体であり得る。あるいは、対象ポリペプチド配列の少なくとも一部は、対象ポリペプチドの三次元構造が実質的に保持されるように、非ペプチド構造で置き換えられてもよい。言い換えれば、対象ポリペプチド配列内の１つ、２つ、又は３つのアミノ酸残基が、非ペプチド構造によって置き換えられてもよい。さらに、対象ポリペプチドの他のペプチド部分が、非ペプチド構造で置き換えられてもよいが、必ずしも置き換える必要はない。ペプチド模倣物（ペプチドと非ペプチド類似体の両方）は、改善された特性（例えば、タンパク質分解の減少、生物学的利用能の保持の増加又は増加）を有し得る。ペプチド模倣物は、一般に経口投与の利用可能性が改善されており、そのためヒト又は動物の障害の処置に特に適したものとなる。ペプチド模倣物は、同様の二次元化学構造を有する場合もそうでない場合もあるが、共通の三次元構造的な特徴及び形状を共有することに留意されたい。各ペプチド模倣物はさらに、１つ又は複数の固有の追加の結合要素を有し得る。
【００４２】
核酸阻害剤は、ヒト補体成分Ｃ５をコードする内在性遺伝子の発現を減少させるために使用することができる。核酸拮抗薬は、例えば、ｓｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、リボザイム、三重らせん形成剤、アプタマー、又はアンチセンス核酸であり得る。ｓｉＲＮＡは、オーバーハングを任意選択で含む低分子の二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）である。例えば、ｓｉＲＮＡの二重鎖領域は、約１８〜２５ヌクレオチドの長さ、例えば、約１９、２０、２１、２２、２３、又は２４ヌクレオチドの長さである。一部の実施形態では、ｓｉＲＮＡ配列は、標的ｍＲＮＡに正確に相補的であり得る。ｄｓＲＮＡ及びｓｉＲＮＡは、特に、哺乳動物細胞（例えば、ヒト細胞）における遺伝子発現を停止させるために使用することができる。例えば、Ｃｌｅｍｅｎｓらによる（２０００）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：６４９９〜６５０３頁；Ｂｉｌｌｙらによる（２００１）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９８：１４４２８〜１４４３３頁；Ｅｌｂａｓｈｉｒらによる（２００１）、Ｎａｔｕｒｅ  ４１１：４９４〜８頁；Ｙａｎｇらによる（２００２）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：９９４２〜９９４７頁、及び米国特許出願公開第２００３０１６６２８２号、同第２００３０１４３２０４号、同第２００４００３８２７８号、及び同第２００３０２２４４３２号を参照されたい。アンチセンス剤は、例えば、約８〜約８０の核酸塩基（すなわち、約８〜約８０ヌクレオチド）、例えば、約８〜約５０の核酸塩基、又は約１２〜約３０の核酸塩基を含み得る。アンチセンス化合物には、標的核酸にハイブリダイズしてその発現を調節する、リボザイム、外部ガイド配列（ＥＧＳ）オリゴヌクレオチド（オリゴザイム）、及び他の短い触媒ＲＮＡ又は触媒オリゴヌクレオチドが含まれる。アンチセンス化合物は、標的遺伝子の配列に相補的である、一続きの少なくとも８つの連続した核酸塩基を含むことができる。オリゴヌクレオチドは、その標的核酸配列に対して１００％相補的で特異的にハイブリダイズする必要はない。オリゴヌクレオチドの標的に対する結合が標的分子の正常な機能を妨害して有用性の喪失を引き起こす場合、かつ特異的結合が望まれる条件下、すなわち、インビボアッセイ若しくは治療的処置の場合には生理学的条件下において、又はインビトロアッセイの場合にはアッセイが実施される条件下において、オリゴヌクレオチドの非標的配列に対する非特異的結合を回避するのに十分な程度の相補性がある場合に、オリゴヌクレオチドは特異的にハイブリダイズ可能である。アンチセンスオリゴヌクレオチドとｍＲＮＡ（例えば、ヒトＣ５タンパク質をコードするｍＲＮＡ）とのハイブリダイゼーションは、ｍＲＮＡの１つ又は複数の正常な機能を妨害し得る。妨害されるｍＲＮＡの機能には、ＲＮＡが関与し得る、例えば、ＲＮＡのタンパク質翻訳部位への転座、ＲＮＡからタンパク質への翻訳、１つ又は複数のｍＲＮＡ種を生成するためのＲＮＡのスプライシング、及び触媒活性などの全ての重要な機能が含まれる。ＲＮＡに対する特定のタンパク質の結合はまた、ＲＮＡに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションによっ���妨害され得る。例示的なアンチセンス化合物には、例えば、ヒト補体成分Ｃ５タンパク質をコードするｍＲＮＡのような標的核酸に特異的にハイブリダイズする、ＤＮＡ又はＲＮＡ配列が含まれる。相補性領域は、約８から約８０の間の核酸塩基に及び得る。化合物は、１つ又は複数の修飾核酸塩基を含むことができる。
【００４３】
修飾核酸塩基には、例えば、５−ヨードウラシル、５−ヨードシトシンなどの５−置換ピリミジン、及びＣ．置換５−プロピニルシトシン及びＣ．置換５−プロピニルウラシルなどのＣ．置換５−プロピニルピリミジンが含まれ得る。他の好適な修飾核酸塩基には、例えば、７−置換−８−アザ−７−デアザプリン及び例えば、７−ヨード−７−デアザプリン、７−シアノ−７−デアザプリン、７−アミノカルボニル−７−デアザプリンのような７−置換−７−デアザプリンが含まれる。これらの例には、６−アミノ−７−ヨード−７−デアザプリン、６−アミノ−７−シアノ−７−デアザプリン、６−アミノ−７−アミノカルボニル−７−デアザプリン、２−アミノ−６−ヒドロキシ−７−ヨード−７−デアザプリン、２−アミノ−６−ヒドロキシ−７−シアノ−７−デアザプリン、及び２−アミノ−６−ヒドロキシ−７−アミノカルボニル−７−デアザプリンが含まれる。例えば、米国特許第４，９８７，０７１号；同第５，１１６，７４２号；及び米国特許第５，０９３，２４６号；「Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ＲＮＡ  ａｎｄ  ＤＮＡ」，Ｄ．Ａ．Ｍｅｌｔｏｎ編集、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｎ．Ｙ．（１９８８）；Ｈａｓｅｌｈｏｆｆ  ａｎｄ  Ｇｅｒｌａｃｈによる（１９８８）、Ｎａｔｕｒｅ  ３３４：５８５〜５９頁；Ｈｅｌｅｎｅ，Ｃ．による（１９９１）、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄ  ６：５６９〜８４頁；Ｈｅｌｅｎｅによる（１９９２）、Ａｎｎ．ＮＹ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．６６０：２７〜３６頁；及びＭａｈｅｒによる（１９９２）、Ｂｉｏａｓｓａｙｓ  １４：８０７〜１５頁を参照されたい。
【００４４】
アプタマーは、細胞表面タンパク質を含むほとんど全ての分子を認識し、特異的に結合するために使用することができる短いオリゴヌクレオチド配列である。指数関数的濃縮（ＳＥＬＥＸ）プロセスによるリガンドの系統的な進化は強力であり、そのようなアプタマーを容易に特定するために使用することができる。アプタマーは、成長因子及び細胞表面抗原などの、治療及び診断に重要な広範囲のタンパク質に対して作製され得る。これらのオリゴヌクレオチドは、抗体が有するのと同様の親和性及び特異性を有し、標的に結合する（例えば、Ｕｌｒｉｃｈによる（２００６）、Ｈａｎｄｂ  Ｅｘｐ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１７３：３０５〜３２６頁を参照されたい）。
【００４５】
ＩＩＩ．抗Ｃ５抗体
本明細書に記載の抗Ｃ５抗体は、補体成分Ｃ５（例えば、ヒトＣ５）に結合し、Ｃ５のフラグメントＣ５ａ及びＣ５ｂへの開裂を阻害する。本発明における使用に好適な抗Ｃ５抗体（又はそれに由来するＶＨ／ＶＬドメイン）は、当技術分野で周知の方法を使用して生成することができる。あるいは、当技術分野で認められている抗Ｃ５抗体を使用することができる。Ｃ５との結合に関して、これらの当技術分野で認められている抗体のいずれかと競合する抗体又は他の任意の薬剤も使用することができる。
【００４６】
「抗体」という用語は、少なくとも１つの抗体由来の抗原結合部位（例えば、ＶＨ／ＶＬ領域若しくはＦｖ、又はＣＤＲ）を含むポリペプチドを示す。抗体には、公知の形態の抗体が含まれる。例えば、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、又はキメラ抗体であり得る。抗体はまた、Ｆａｂ、Ｆａｂ’２、ＳｃＦｖ、ＳＭＩＰ、アフィボディ（登録商標）、ナノボディ、又はドメイン抗体であり得る。抗体はまた、以下のアイソタイプ：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＡｓｅｃ、ＩｇＤ、及びＩｇＥのいずれかであり得る。抗体は、自然起源の抗体であり得るか、又はタンパク質工学技術によって改変された（例えば、突然変異、欠失、置換、非抗体部分との結合により）抗体であり得る。例えば、抗体は、抗体の特性（例えば、機能的特性）を変化させる１つ又は複数の変異アミノ酸（自然起源の抗体と比較して）を含み得る。例えば、多数のそのような改変は、当該技術分野で公知であり、例えば、半減期、エフェクター機能、及び／又は患者における抗体に対する免疫応答などに影響を与える。抗体という用語はまた、少なくとも１つの抗体由来の抗原結合部位を含む、人工又は操作されたポリペプチド構築物を含む。
【００４７】
エクリズマブ（ソリリス（登録商標）としても公知）は、それぞれ配列番号１０及び１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖を含む抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント及び変異体である。エクリズマブの可変領域は、ＰＣＴ／ＵＳ１９９５／００５６８８及び米国特許第６，３５５，２４５号に記載されており、その教示は参照により本明細書に組み込まれる。エクリズマブの完全な重鎖及び軽鎖は、ＰＣＴ／ＵＳ２００７／００６６０６に記載されており、その教示は参照により本明細書に組み込まれる。一実施形態では、抗Ｃ５抗体は、配列番号７に明示される配列を有する、エクリズマブのＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のドメイン、並びに配列番号８に明示される配列を有する、エクリズマブのＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１、２及び３に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号７及び配列番号８に明示されるアミノ酸配列を有するＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【００４８】
例示的な抗Ｃ５抗体は、それぞれ配列番号１４及び１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖を含むラブリズマブ、又はその抗原結合性フラグメント及び変異体である。ラブリズマブ（ＢＮＪ４４１及びＡＬＸＮ１２１０としても公知）は、ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０１９２２５及び米国特許第９，０７９，９４９号に記載されており、その教示は参照により本明細書に組み込まれる。ラブリズマブ、ＢＮＪ４４１、及びＡＬＸＮ１２１０という用語は、本文書全体で互換的に使用され得るが、全て同じ抗体を指す。ラブリズマブは、ヒト補体タンパク質Ｃ５に選択的に結合し、補体活性化中にＣ５ａ及びＣ５ｂへのその開裂を阻害する。この阻害は、微生物のオプソニン作用及び免疫複合体の排除に必要不可欠な補体活性化（例えば、Ｃ３及びＣ３ｂ）の近位又は早期の成分を維持しながら、炎症誘発性メディエーターＣ５ａの放出及び細胞溶解性ポア形成膜侵襲複合体（ＭＡＣ）Ｃ５ｂ−９の形成を妨げる。
【００４９】
他の実施形態では、抗体は、ラブリズマブの重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。例えば、一実施形態では、抗体は、配列番号１２に明示される配列を有する、ラブリズマブのＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のドメイン、並びに配列番号８に明示される配列を有する、ラブリズマブのＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８及び３に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１２及び配列番号８に明示されるアミノ酸配列を有するＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【００５０】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、それぞれ配列番号２０及び１１に示される配列を有する重鎖及び軽鎖を含む抗体ＢＮＪ４２１、又はその抗原結合性フラグメント及び変異体である。ＢＮＪ４２１（ＡＬＸＮ１２１１としても公知）は、ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０１９２２５及び米国特許第９，０７９，９４９号に記載されており、その教示は参照により本明細書に組み込まれる。
【００５１】
他の実施形態では、抗体は、ＢＮＪ４２１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。したがって、一実施形態では、抗体は、配列番号１２に明示される配列を有する、ＢＮＪ４２１のＶＨ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のドメイン、並びに配列番号８に明示される配列を有する、ＢＮＪ４２１のＶＬ領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１９、１８及び３に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号４、５、及び６に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号１２及び配列番号８に明示されるアミノ酸配列を有するＶＨ及びＶＬ領域を含む。
【００５２】
ＣＤＲの正確な境界は、さまざまな方法に基づいてさまざまに定義されている。一部の実施形態では、軽鎖又は重鎖の可変ドメイン内のＣＤＲ又はフレームワーク領域の位置は、Ｋａｂａｔらによる、［（１９９１）「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．」ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ］により定義された通りであり得る。このような場合、ＣＤＲは、「ＫａｂａｔのＣＤＲ」（例えば、「ＫａｂａｔのＬＣＤＲ２」又は「ＫａｂａｔのＨＣＤＲ１」）と表すことができる。一部の実施形態では、軽鎖又は重鎖の可変領域のＣＤＲの位置は、Ｃｈｏｔｈｉａらによる（１９８９）、Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７７〜８８３頁により定義された通りであり得る。したがって、これらの領域は、「ＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲ」（例えば、「ＣｈｏｔｈｉａのＬＣＤＲ２」又は「ＣｈｏｔｈｉａのＨＣＤＲ３」）と表すことができる。一部の実施形態では、軽鎖及び重鎖の可変領域のＣＤＲの位置は、Ｋａｂａｔ−Ｃｈｏｔｈｉａを組み合わせた定義によって定義される通りであり得る。そのような実施形態では、これらの領域は、「組合せＫａｂａｔ−ＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲ」と表すことができる。Ｔｈｏｍａｓらによる、［（１９９６）Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ）３３（１７／１８）：１３８９〜１４０１頁］は、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの定義に基づくＣＤＲ境界の識別を例示している。
【００５３】
一部の実施形態では、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体は、以下のアミノ酸配列を含むか、又はそれからなる重鎖ＣＤＲ１を含む：ＧＨＩＦＳＮＹＷＩＱ（配列番号１９）。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体は、以下のアミノ酸配列を含むか、又はそれからなる重鎖ＣＤＲ２を含む：ＥＩＬＰＧＳＧＨＴＥＹＴＥＮＦＫＤ（配列番号１８）。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体は、以下のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＨＩＦＳＮＹＷＩＱＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＧＨＴＥＹＴＥＮＦＫＤＲＶＴＭＴＲＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＦＦＧＳＳＰＮＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１２）。
【００５４】
一部の実施形態では、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体は、以下のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＧＡＳＥＮＩＹＧＡＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＧＡＴＮＬＡＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＮＶＬＮＴＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号８）。
【００５５】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、米国特許第８，２４１，６２８号及び同第８，８８３，１５８号に記載される７０８６抗体である。一実施形態では、抗体は、７０８６抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む（米国特許第８，２４１，６２８号及び同第８，８８３，１５８号を参照のこと）。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、それぞれ配列番号２１、２２及び２３に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号２４、２５、及び２６に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、配列番号２７に明示される配列を有する７０８６抗体のＶＨ領域、及び配列番号２８に明示される配列を有する７０８６抗体のＶＬ領域を含む。
【００５６】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、また米国特許第８，２４１，６２８号及び同第８，８８３，１５８号に記載される８１１０抗体である。一実施形態では、抗体は、８１１０抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、それぞれ配列番号２９、３０及び３１に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号３２、３３、及び３４に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号３５に明示される配列を有する８１１０抗体のＶＨ領域、及び配列番号３６に明示される配列を有する８１１０抗体のＶＬ領域を含む。
【００５７】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、ＵＳ２０１６／０１７６９５４Ａ１に記載される３０５ＬＯ５抗体である。一実施形態では、抗体は、３０５ＬＯ５抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、それぞれ配列番号３７、３８及び３９に明示される配列を有する重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメイン、並びにそれぞれ配列番号４０、４１、及び４２に明示される配列を有する軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のドメインを含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号４３に明示される配列を有する３０５ＬＯ５抗体のＶＨ領域、及び配列番号４４に明示される配列を有する３０５ＬＯ５抗体のＶＬ領域を含む。
【００５８】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、Ｆｕｋｕｚａｗａ  Ｔらによる、Ｒｅｐ．２０１７年４月２４日；７（１）：１０８０に記載されるＳＫＹ５９抗体である。一実施形態では、抗体は、ＳＫＹ５９抗体の重鎖及び軽鎖ＣＤＲ又は可変領域を含む。別の実施形態では、抗体又はその抗原結合性フラグメントは、配列番号４５を含む重鎖及び配列番号４６を含む軽鎖を含む。
【００５９】
別の例示的な抗Ｃ５抗体は、ＵＳ２０１７０３５５７５７に記載されるＲＥＧＮ３９１８抗体（Ｈ４Ｈ１２１６６ＰＰとしても公知）である。一実施形態では、抗体は、配列番号４７を含む重鎖可変領域、及び配列番号４８を含む軽鎖可変領域を含む。別の実施形態では、抗体は、配列番号４９を含む重鎖及び配列番号５０を含む軽鎖を含む。
【００６０】
本明細書に記載の抗Ｃ５抗体は、一部の実施形態では、変異体ヒトＦｃ定常領域が由来するネイティブヒトＦｃ定常領域の親和性より大きい親和性で、ヒト新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合する変異体ヒトＦｃ定常領域を含み得る。例えば、Ｆｃ定常領域は、変異体ヒトＦｃ定常領域が由来するネイティブヒトＦｃ定常領域に対して、１つ又は複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、又は８つ以上）のアミノ酸置換を含み得る。該置換により、相互作用のｐＨ依存性を維持しながら、ｐＨ６．０においてＦｃＲｎに対する変異体Ｆｃ定常領域を含むＩｇＧ抗体の結合親和性が増加され得る。抗体のＦｃ定常領域における１つ又は複数の置換が、ｐＨ６．０において（相互作用のｐＨ依存性を維持しながら）ＦｃＲｎに対するＦｃ定常領域の親和性を増加させるかどうかを検査する方法は、当技術分野で公知である。
【００６１】
ＦｃＲｎに対する抗体Ｆｃ定常領域の結合親和性を増強する置換は当技術分野で公知であり、例えば、（１）Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａらによる（２００６）、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２８１：２３５１４〜２３５２４頁に記載されるＭ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ三重置換；（２）Ｈｉｎｔｏｎらによる（２００４）、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７９：６２１３〜６２１６頁及びＨｉｎｔｏｎらによる（２００６）、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １７６：３４６〜３５６頁に記載されるＭ４２８Ｌ又はＴ２５０Ｑ／Ｍ４２８Ｌの置換；及び（３）Ｐｅｔｋｏｖａらによる（２００６）、Ｉｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １８（１２）：１７５９〜６９頁に記載されるＮ４３４Ａ又はＴ３０７／Ｅ３８０Ａ／Ｎ４３４Ａの置換を含む。追加の置換ペアリング：Ｐ２５７Ｉ／Ｑ３１１Ｉ、Ｐ２５７Ｉ／Ｎ４３４Ｈ、及びＤ３７６Ｖ／Ｎ４３４Ｈは、例えば、Ｄａｔｔａ−Ｍａｎｎａｎらによる（２００７）、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２８２（３）：１７０９〜１７１７頁に記載され、その開示は、その全容が参照により本明細書に組み込まれる。
【００６２】
一部の実施形態では、変異体定常領域は、バリンに関してＥＵアミノ酸残基２５５における置換を有する。一部の実施形態では、変異体定常領域は、アスパラギンに関してＥＵアミノ酸残基３０９における置換を有する。一部の実施形態では、変異体定常領域は、イソロイシンに関してＥＵアミノ酸残基３１２における置換を有する。一部の実施形態では、変異体定常領域は、ＥＵアミノ酸残基３８６における置換を有する。
【００６３】
一部の実施形態では、変異体Ｆｃ定常領域は、それが由来するネイティブ定常領域に対して、３０以下（例えば、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、又は２以下）のアミノ酸の置換、挿入、又は欠失を含む。一部の実施形態では、変異体Ｆｃ定常領域は、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｎ４３４Ｓ、Ｍ４２８Ｌ、Ｖ２５９Ｉ、Ｔ２５０Ｉ、及びＶ３０８Ｆからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、変異体ヒトＦｃ定常領域は、それぞれＥＵ番号付けにおいて、ネイティブヒトＩｇＧのＦｃ定常領域の４２８位にメチオニン及び４３４位にアスパラギンを含む。一部の実施形態では、変異体Ｆｃ定常領域は、例えば、米国特許第８，０８８，３７６号に記載されるような、４２８Ｌ／４３４Ｓ二重置換を含む。
【００６４】
一部の実施形態では、これらの突然変異の正確な位置は、抗体工学により、ネイティブヒトＦｃ定常領域の位置から移行され得る。例えば、ＩｇＧ２／４キメラＦｃで使用される場合の４２８Ｌ／４３４Ｓ二重置換は、ＢＮＪ４４１（ラブリズマブ）に見られるＭ４２９Ｌ及びＮ４３５Ｓ変異のように、４２９Ｌ及び４３５Ｓに対応し得て、米国特許第９，０７９，９４９号に記載され、その開示は、その全容が参照により本明細書に組み込まれる。
【００６５】
一部の実施形態では、変異体定常領域は、ネイティブヒトＦｃ定常領域に対して、アミノ酸位置２３７、２３８、２３９、２４８、２５０、２５２、２５４、２５５、２５６、２５７、２５８、２６５、２７０、２８６、２８９、２９７、２９８、３０３、３０５、３０７、３０８、３０９、３１１、３１２、３１４、３１５、３１７、３２５、３３２、３３４、３６０、３７６、３８０、３８２、３８４、３８５、３８６、３８７、３８９、４２４、４２８、４３３、４３４又は４３６（ＥＵ番号付け）における置換を含む。一部の実施形態では、置換は、以下からなる群から選択される：２３７位のグリシンの代わりにメチオニン、２３８位のプロリンの代わりにアラニン；２３９位のセリンの代わりにリシン；２４８位のリシンの代わりにイソロイシン；２５０位のスレオニンの代わりにアラニン、フェニルアラニン、イソロイシン、メチオニン、グルタミン、セリン、バリン、トリプトファン、又はチロシン；２５２位のメチオニンの代わりにフェニルアラニン、トリプトファン、又はチロシン；２５４位のセリンの代わりにスレオニン；２５５位のアルギニンの代わりにグルタミン酸；２５６位のスレオニンの代わりにアスパラギン酸、グルタミン酸、又はグルタミン；２５７位のプロリンの代わりにアラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、セリン、スレオニン、又はバリン；２５８位のグルタミン酸の代わりにヒスチジン；２６５位のアスパラギン酸の代わりにアラニン；２７０位のアスパラギン酸の代わりにフェニルアラニン；２８６位のアスパラギンの代わりにアラニン、又はグルタミン酸；２８９位のスレオニンの代わりにヒスチジン；２９７位のアスパラギンの代わりにアラニン；２９８位のセリンの代わりにグリシン；３０３位のバリンの代わりにアラニン；３０５位のバリンの代わりにアラニン；３０７位のスレオニンの代わりにアラニン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、バリン、トリプトファン、又はチロシン；３０８位のバリンの代わりにアラニン、フェニルアラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、プロリン、グルタミン、又はスレオニン；３０９位のロイシン又はバリンの代わりにアラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、又はアルギニン；３１１位のグルタミンの代わりにアラニン、ヒスチジン、又はイソロイシン；３１２位のアスパラギン酸の代わりにアラニン又はヒスチジン；３１４位のロイシンの代わりにリシン又はアルギニン；３１５位のアスパラギンの代わりにアラニン又はヒスチジン；３１７位のリシンの代わりにアラニン；３２５位のアスパラギンの代わりにグリシン；３３２位のイソロイシンの代わりにバリン；３３４位のリシンの代わりにロイシン；３６０位のリシンの代わりにヒスチジン；３７６位のアスパラギン酸の代わりにアラニン；３８０位のグルタミン酸の代わりにアラニン；３８２位のグルタミン酸の代わりにアラニン；３８４位のアスパラギン又はセリンの代わりにアラニン；３８５位のグリシンの代わりにアスパラギン酸又はヒスチジン；３８６位のグルタミンの代わりにプロリン；３８７位のプロリンの代わりにグルタミン酸；３８９位のアスパラギンの代わりにアラニン又はセリン；４２４位のセリンの代わりにアラニン；４２８位のメチオニンの代わりにアラニン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、セリン、スレオニン、バリン、トリプトファン、又はチロシン；４３３位のヒスチジンの代わりにリシン；４３４位のアスパラギンの代わりにアラニン、フェニルアラニン、ヒスチジン、セリン、トリプトファン、又はチロシン；４３６位のチロシン又はフェニルアラニンの代わりにヒスチジン、全てＥＵの番号付けにおける。
【００６６】
本明細書に記載の方法における使用に好適な抗Ｃ５抗体は、一部の実施形態では、配列番号１４に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド及び／又は配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。あるいは、本明細書に記載の方法における使用のための抗Ｃ５抗体は、一部の実施形態では、配列番号２０に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチド及び／又は配列番号１１に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む。
【００６７】
一実施形態では、抗体は、ｐＨ７．４及び２５℃において（そうでない場合は、生理学的条件下で）、少なくとも０．１（例えば、少なくとも０．１５、０．１７５、０．２、０．２５、０．２７５、０．３、０．３２５、０．３５、０．３７５、０．４、０．４２５、０．４５、０．４７５、０．５、０．５２５、０．５５、０．５７５、０．６、０．６２５、０．６５、０．６７５、０．７、０．７２５、０．７５、０．７７５、０．８、０．８２５、０．８５、０．８７５、０．９、０．９２５、０．９５、又は０．９７５）ｎＭである親和性解離定数（ＫＤ）を伴い、Ｃ５に結合する。一部の実施形態では、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントのＫＤは、１以下（例えば、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、又は０．２以下）ｎＭである。
【００６８】
他の実施形態では、［（ｐＨ６．０、℃における、Ｃ５に対する抗体のＫＤ）／（ｐＨ７．４、２５℃における、Ｃ５に対する抗体のＫＤ）］は、２１より大きい（例えば、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３５０、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１５００、２０００、２５００、３０００、３５００、４０００、４５００、５０００、５５００、６０００、６５００、７０００、７５００、又は８０００より大きい）。
【００６９】
抗体がタンパク質抗原に結合するかどうか、かつ／又はタンパク質抗原に対する抗体の親和性を決定する方法は、当技術分野で公知である。例えば、タンパク質抗原に対する抗体の結合は、ウエスタンブロット法、ドットブロット法、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅシステム；Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ  ＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓｗｅｄｅｎ  ａｎｄ  Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）、又は酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）などの、これらに限定されないが、多様な技術を使用して、検出及び／又は定量化することができる。例えば、Ｂｅｎｎｙ  Ｋ．Ｃ．Ｌｏによる（２００４）、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ」、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ（ＩＳＢＮ：１５８８２９０９２１）；Ｊｏｈｎｅらによる（１９９３）、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈ  １６０：１９１〜１９８頁；Ｊｏｎｓｓｏｎらによる（１９９３）、Ａｎｎ  Ｂｉｏｌ  Ｃｌｉｎ  ５１：１９〜２６頁；及びＪｏｎｓｓｏｎらによる（１９９１）、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １１：６２０〜６２７頁を参照されたい。加えて、親和性（例えば、解離定数及び会合定数）を測定する方法は、作業例に明示される。
【００７０】
本明細書で使用される場合、「ｋａ」という用語は、抗原に対する抗体の会合の速度定数を指す。「ｋｄ」という用語は、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についての速度定数を指す。また、「ＫＤ」という用語は、抗体−抗原相互作用の平衡解離定数を指す。平衡解離定数は、動力学的速度定数の比から推定される、ＫＤ＝ｋａ／ｋｄ。このような決定は、好ましくは２５℃又は３７℃で測定される（作業例を参照のこと）。例えば、ヒトＣ５に結合する抗体の動態は、抗体を固定化するための抗Ｆｃ捕捉法を使用して、ＢＩＡｃｏｒｅ３０００機器で、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を介して、ｐＨ８．０、７．４、７．０、６．５、及び６．０において決定され得る。
【００７１】
一実施形態では、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントは、Ｃ５タンパク質（例えば、ヒトＣ５タンパク質）のＣ５ａ及び／又はＣ５ｂ活性フラグメントの生成又は活性を遮断する。この遮断効果により、抗体は、例えば、Ｃ５ａの炎症誘発効果及び細胞表面におけるＣ５ｂ−９膜侵襲複合体（ＭＡＣ）の生成を阻害する。
【００７２】
本明細書に記載の特定の抗体又は治療薬が、Ｃ５開裂を阻害するかどうかを決定する方法は、当技術分野で公知である。ヒト補体成分Ｃ５の阻害は、対象の体液中の補体の細胞溶解能力を低減し得る。体液中に存在する補体の細胞溶解能力のそのような低減は、例えば、Ｋａｂａｔ及びＭａｙｅｒ（編）による、「Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第２版」、１３５〜２４０頁、Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ、ＩＬ、ＣＣ  Ｔｈｏｍａｓによる（１９６１）、１３５〜１３９頁に記載された溶血アッセイなどの従来の溶血アッセイなどの、当技術分野で周知の方法、又は、例えば、Ｈｉｌｌｍｅｎらによる（２００４）、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５０（６）：５５２頁に記載されるニワトリ赤血球溶血法などの、そのアッセイの従来的な変形法により測定することができる。候補化合物が、ヒトＣ５の形態Ｃ５ａ及びＣ５ｂへの開裂を阻害するかどうかを決定する方法は、当技術分野で公知であり、Ｅｖａｎｓらによる（１９９５）、Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３２（１６）：１１８３〜９５頁に記載される。例えば、体液中のＣ５ａ及びＣ５ｂの濃度及び／又は生理学的活性は、当技術分野で周知の方法により測定することができる。Ｃ５ｂに関して、溶血アッセイ又は本明細書で論じられる可溶性Ｃ５ｂ−９のアッセイを使用することができる。当技術分野で公知の他のアッセイも使用することができる。これら又は他の好適な種類のアッセイを使用して、ヒト補体成分Ｃ５を阻害することができる候補薬剤をスクリーニングすることができる。
【００７３】
ＥＬＩＳＡなどの、これに限定されないが、免疫学的技術を使用して、Ｃ５及び／又はその分割生成物のタンパク質濃度を測定して、生物学的に活性な生成物へのＣ５の変換を阻害する、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントの能力を決定することができる。一部の実施形態では、Ｃ５ａ生成が測定される。一部の実施形態では、Ｃ５ｂ−９ネオエピトープ特異的抗体を使用して、終末補体の形成を検出する。
【００７４】
溶血アッセイを使用して、補体活性化に対する抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントの阻害活性を決定することができる。インビトロにおける血清検査溶液中の、古典的補体経路媒介性の溶血に対する、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントの効果を決定するために、例えば、溶血素でコーティングされたヒツジ赤血球又は抗ニワトリ赤血球抗体で感作されたニワトリ赤血球が、標的細胞として使用される。溶解の百分率は、阻害剤の非存在下で起こる溶解に等しい１００％溶解を考慮することによって正規化される。一部の実施形態では、古典的補体経路は、例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ（登録商標）古典的経路補体キット（Ｗｉｅｓｌａｂ（登録商標）ＣＯＭＰＬ  ＣＰ３１０、Ｅｕｒｏ−Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ、スウェーデン）で利用される、ヒトＩｇＭ抗体によって活性化される。手短に言えば、検査血清は、ヒトＩｇＭ抗体の存在下で、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントと共にインキュベートされる。生成されるＣ５ｂ−９の量は、混合物を酵素複合化された抗Ｃ５ｂ−９抗体及び蛍光発生基質と接触させ、適切な波長における吸光度を測定することによって測定される。対照として、検査血清は、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントの非存在下でインキュベートされる。一部の実施形態では、検査血清は、Ｃ５ポリペプチドで再構成されたＣ５欠損血清である。
【００７５】
代替経路媒介性の溶血に対する抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントの効果を決定するために、未感作のウサギ又はモルモットの赤血球を標的細胞として使用することができる。一部の実施形態では、血清検査溶液は、Ｃ５ポリペプチドで再構成されたＣ５欠損血清である。溶解の百分率は、阻害剤の非存在下で起こる溶解に等しい１００％溶解を考慮することによって正規化される。一部の実施形態では、代替補体経路は、例えば、Ｗｉｅｓｌａｂ（登録商標）代替経路補体キット（Ｗｉｅｓｌａｂ（登録商標）ＣＯＭＰＬ  ＡＰ３３０、Ｅｕｒｏ−Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ、スウェーデン）で利用される、リポ多糖分子によって活性化される。手短に言えば、検査血清は、リポ多糖の存在下で、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントと共にインキュベートされる。生成されるＣ５ｂ−９の量は、混合物を酵素複合化された抗Ｃ５ｂ−９抗体及び蛍光発生基質と接触させ、適切な波長における蛍光を測定することによって測定される。対照として、検査血清は、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントの非存在下でインキュベートされる。
【００７６】
一部の実施形態では、Ｃ５活性又はその阻害は、ＣＨ５０ｅｑアッセイを使用して定量化される。ＣＨ５０ｅｑアッセイは、血清中の古典的補体価の合計を測定する方法である。この検査は、抗体感作赤血球を古典的補体経路の活性化因子として使用し、検査血清のさまざまな希釈液を使用して、５０％溶解（ＣＨ５０）を行うのに必要とされる量を決定する溶解アッセイである。溶血率は、例えば、分光光度計を使用して決定することができる。ＣＨ５０ｅｑアッセイは、測定される溶血にＴＣＣ自体が直接関与するため、終末補体複合体（ＴＣＣ）形成の間接的な測定を提供する。
【００７７】
該アッセイは、当業者により周知であり、一般的に実施されている。簡単に言えば、古典的補体経路を活性化するために、無希釈の血清試料（例えば、再構成されたヒト血清試料）が、抗体感作赤血球を含むマイクロアッセイウェルに添加され、それによってＴＣＣを生成する。次に、活性化された血清は、捕捉試薬（例えば、ＴＣＣの１つ又は複数の成分に結合する抗体）でコーティングされたマイクロアッセイウェル中で希釈される。活性化された試料中に存在するＴＣＣは、マイクロアッセイウェルの表面をコーティングしているモノクローナル抗体に結合する。ウェルを洗浄し、各ウェルに、検出可能に標識され、結合したＴＣＣを認識する検出試薬を添加する。検出可能な標識は、例えば、蛍光標識又は酵素標識であり得る。アッセイ結果は、１ミリリットルあたりのＣＨ５０単位当量（ＣＨ５０  Ｕ  Ｅｑ／ｍＬ）で表される。
【００７８】
阻害は、例えば、それが終末補体価に関係するので、例えば溶血アッセイ又はＣＨ５０ｅｑアッセイにおいて、同様の条件及び等モル濃度下での対照抗体（又はその抗原結合性フラグメント）の効果と比較して、終末補体の活性における、少なくとも５（例えば、少なくとも６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５又は６０）％の減少を含む。本明細書で使用される場合、実質的阻害は、少なくとも４０（例えば、少なくとも４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、又は９５以上）％の、所与の活性（例えば、終末補体価）の阻害を指す。一部の実施形態では、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体は、エクリズマブのＣＤＲ（すなわち、配列番号１〜６）に対して１つ又は複数のアミノ酸置換を含むが、溶血アッセイ又はＣＨ５０ｅｑアッセイにおけるエクリズマブの補体阻害活性の、少なくとも３０（例えば、少なくとも３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、又は９５）％を保持している。
【００７９】
一実施形態では、抗体は、本明細書に記載の抗体と、結合について、及び／又はＣ５上での同じエピトープとの結合について競合する。２つ以上の抗体に関する「同じエピトープに結合する」という用語は、所与の方法によって決定されるように、抗体がアミノ酸残基の同じセグメントに結合することを意味する。抗体が、本明細書に記載の抗体について「Ｃ５上の同じエピトープ」に結合するかどうかを決定する技術には、例えば、エピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のＸ線分析などのエピトープマッピング法及び水素／重水素交換質量分析（ＨＤＸ−ＭＳ）が含まれる。他の方法では、抗原配列内のアミノ酸残基の修飾による結合の喪失が、エピトープ成分の指標と考えられることが多い場合、ペプチド抗原フラグメント又は抗原の突然変異体に対する抗体の結合を監視する。加えて、エピトープマッピング用の計算コンビナトリアル法も使用することができる。これらの方法は、コンビナトリアルファージディスプレイ法ペプチドライブラリから特定の短鎖ペプチドを親和性単離する、目的の抗体の能力に依存する。同じＶＨとＶＬ、又は同じＣＤＲ１、２、及び３の配列を有する抗体は、同じエピトープに結合することが期待される。
【００８０】
「標的に対する結合について別の抗体と競合する」抗体は、標的に対する他の抗体の結合を阻害する（部分的又は完全に）抗体を指す。２つの抗体が標的に対する結合について互いに競合するかどうかは、すなわち、一方の抗体が、他方の抗体の標的に対する結合を阻害するかどうか、及びその程度は、公知の競合実験を使用して決定することができる。特定の実施形態では、抗体は、別の抗体と競合し、標的に対する別の抗体の結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％阻害する。阻害又は競合のレベルは、どの抗体が「遮断抗体」（すなわち、最初に標的と共にインキュベートされる冷式抗体）であるかに応じて異なり得る。競合抗体は、同じエピトープ、重複するエピトープ、又は隣接するエピトープに結合する（例えば、立体障害によって証明される）。
【００８１】
本明細書に記載の方法で使用される、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメントは、当技術分野で認められている多様な技術を使用して生成することができる。モノクローナル抗体は、当業者によく知られている様々な技術によって得ることができる。簡単に言えば、所望の抗原で免疫化された動物からの脾臓細胞は、一般に骨髄腫細胞との融合によって不死化される（Ｋｏｈｌｅｒ＆Ｍｉｌｓｔｅｉｎによる、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：５１１〜５１９頁（１９７６）を参照のこと）。不死化の代替方法には、エプスタインバーウイルス、癌遺伝子、又はレトロウイルスを用いる形質転換、又は当技術分野で周知の他の方法が含まれる。単一の不死化細胞から生じるコロニーは、抗原に対する所望の特異性及び親和性の抗体の産生についてスクリーニングされ、そのような細胞によって産生されるモノクローナル抗体の収量は、脊椎動物宿主の腹腔への注射を含む様々な技術によって高めることができる。あるいは、Ｈｕｓｅらによる、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４６：１２７５〜１２８１頁（１９８９）に概説された一般的なプロトコルに基づいて、ヒトＢ細胞からのＤＮＡライブラリをスクリーニングすることにより、モノクローナル抗体又はその結合フラグメントをコードするＤＮＡ配列を単離することができる。
【００８２】
ＩＶ．組成物及び投与
本明細書に記載の方法における使用のための、抗体又はその抗原結合性フラグメントなどの抗Ｃ５剤を含む組成物（例えば、製剤）もまた、本明細書で提供する。該組成物は、対象に投与するための医薬溶液として製剤化することができる。医薬組成物は、一般に、薬学的に許容される担体を含む。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、生理学的に適合するあらゆる全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などを指し、これらを含む。本組成物は、例えば、酸付加塩又は塩基付加塩のような薬学的に許容される塩、糖、炭水化物、ポリオール及び／又は浸透圧調整剤を含むことができる。
【００８３】
本組成物は、標準的な方法に基づいて製剤化することができる。医薬製剤は十分に確立された技術であり、例えば、Ｇｅｎｎａｒｏによる（２０００）、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」、第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（ＩＳＢＮ：０６８３３０６４７２）；Ａｎｓｅｌらによる（１９９９）、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」、第７版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（ＩＳＢＮ：０６８３３０５７２７）；及びＫｉｂｂｅによる（２０００）、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ」、第３版、（ＩＳＢＮ：０９１７３３０９６Ｘ）にさらに記載されている。一部の実施形態では、組成物は、例えば、好適な濃度で、２〜８℃（例えば、４℃）における保存に好適な緩衝液として製剤化することができる。一部の実施形態では、組成物は、０℃未満の温度（例えば、−２０℃又は−８０℃）における貯蔵用に製剤化することができる。一部の実施形態では、組成物は、最大２年間（例えば、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１か月、１年、１年半、又は２年）、２〜８℃（例えば、４℃）における貯蔵用に製剤化することができる。したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載の組成物は、２〜８℃（例えば、４℃）における少なくとも１年間の貯蔵において安定である。
【００８４】
医薬組成物は、多様な形態であり得る。これらの形態には、例えば、液体溶液（例えば、注射可能及び注入可能な溶液）、分散液又は懸濁液、錠剤、丸薬、散剤、リポソーム及び坐剤などの、液体、半固体及び固体の剤形が含まれる。好ましい形態は、意図された投与様式及び治療用途に、ある程度依存する。例えば、全身的又は局所的な送達を目的とした組成物を含む組成物は、注射可能又は注入可能な溶液の形態であり得る。したがって、組成物は、非経口様式（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、又は筋肉内の注射）による投与用に製剤化することができる。本明細書で使用される場合、「非経口投与」、「非経口的に投与される」、及び他の文法的に同等の語句は、経腸及び局所投与以外の、通常は注射による投与様式を指し、限定されないが、静脈内、鼻腔内、眼内、肺、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、真皮内、肺内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外、脳内、頭蓋内、頸動脈内及び胸骨内への注射及び注入が含まれる。
【００８５】
抗Ｃ５剤（例えば、抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、任意の好適な手段によって患者に投与することができる。一実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、静脈内投与される。別の実施形態では、抗Ｃ５剤は、約４００ｍｇ、４０５ｍｇ、４１０ｍｇ、４２０ｍｇ、４２５ｍｇ、４３０ｍｇ、４３５ｍｇ、４４０ｍｇ、４４５ｍｇ、４５０ｍｇ、４５５ｍｇ、４６０ｍｇ、４６５ｍｇ、４７０ｍｇ、４７５ｍｇ、４８０ｍｇ、４８５ｍｇ、４９０ｍｇ、４９５ｍｇ、５００ｍｇ、５０５ｍｇ、５１０ｍｇ、５１５ｍｇ、５２０ｍｇ、５２５ｍｇ、５３０ｍｇ、５３５ｍｇ、５４０ｍｇ、５４５ｍｇ、５５０ｍｇ、５５５ｍｇ、５６０ｍｇ、５６５ｍｇ、５７０ｍｇ、５７５ｍｇ、５８０ｍｇ、５８５ｍｇ、５９０ｍｇ、５９５ｍｇ、６００ｍｇ、６０５ｍｇ、６１０ｍｇ、６１５ｍｇ、６２０ｍｇ、６２５ｍｇ、６３０ｍｇ、６３５ｍｇ、６４０ｍｇ、６４５ｍｇ、６５０ｍｇ、６５５ｍｇ、６６０ｍｇ、６６５ｍｇ、６７０ｍｇ、６７５ｍｇ、６８０ｍｇ、６８５ｍｇ、６９０ｍｇ、６９５ｍｇ、７００ｍｇ、７０５ｍｇ、７１０ｍｇ、７１５ｍｇ、７２０ｍｇ、７２５ｍｇ、７３０ｍｇ、７３５ｍｇ、７４０ｍｇ、７４５ｍｇ、７５０ｍｇ、７５５ｍｇ、７６０ｍｇ、７６５ｍｇ、７７０ｍｇ、７７５ｍｇ、７８０ｍｇ、７８５ｍｇ、７９０ｍｇ、７９５ｍｇ、８００ｍｇ、８０５ｍｇ、８１０ｍｇ、８１５ｍｇ、８２０ｍｇ、８２５ｍｇ、８３０ｍｇ、８３５ｍｇ、８４０ｍｇ、８４５ｍｇ、８５０ｍｇ、８５５ｍｇ、８６０ｍｇ、８６５ｍｇ、８７０ｍｇ、８７５ｍｇ、８８０ｍｇ、８８５ｍｇ、８９０ｍｇ、８９５ｍｇ、９００ｍｇ、９０５ｍｇ、９１０ｍｇ、９１５ｍｇ、９２０ｍｇ、９２５ｍｇ、９３０ｍｇ、９３５ｍｇ、９４０ｍｇ、９４５ｍｇ、９５０ｍｇ、９５５ｍｇ、９６０ｍｇ、９６５ｍｇ、９７０ｍｇ、９７５ｍｇ、９８０ｍｇ、９８５ｍｇ、９９０ｍｇ、９９５ｍｇ、１０００ｍｇ、１００５ｍｇ、１０１０ｍｇ、１０１５ｍｇ、１０２０ｍｇ、１０２５ｍｇ、１０３０ｍｇ、１０３５ｍｇ、１０４０ｍｇ、１０４５ｍｇ、１０５０ｍｇ、１０５５ｍｇ、１０６０ｍｇ、１０６５ｍｇ、１０７０ｍｇ、１０７５ｍｇ、１０８０ｍｇ、１０８５ｍｇ、１０９０ｍｇ、１０９５ｍｇ、１１００ｍｇ、１１５０ｍｇ、１２００ｍｇ、１２５０ｍｇ、１３００ｍｇ、１３５０ｍｇ、又は１４００ｍｇの用量で投与される抗体又はその抗原結合性フラグメントである。一実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、単回投与で投与される。別の実施形態では、複数回投与の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）が投与される。
【００８６】
抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、及び単独で、又は１つ若しくは複数の追加の治療剤と組み合わせて（例えば、別々に又は同時に）投与することができる。一実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、３つ以下の追加の薬剤と組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、２つ以下の追加の薬剤と組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、１つ以下の追加の薬剤と組み合わせて投与される。別の実施形態では、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）は、単独で投与される。
【００８７】
Ｖ．肝虚血再灌流障害（ＩＲＩ）に関連する方法
虚血再灌流障害（ＩＲＩ）は、低酸素症（組織中の酸素欠乏）によって引き起こされる臓器における細胞損傷が、酸素輸送の回復後に増悪する現象である（Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓらによる、Ａｒｃｈ  Ｔｒａｕｍａ  Ｒｅｓ．２０１３年８月；２（２）：６３〜７０頁及びＥｌｉａｓ−Ｍｉｒｏ  Ｍらによる、Ｉｓｃｈｅｍｉａ−Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｌｉｖｅｒ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ２０１１：Ｐａｓｔ  ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ．２０１２を参照のこと）。ＩＲＩは、局所的な虚血発作及び炎症媒介性の再灌流障害という２つの相互に関連する段階を含む動的なプロセスである（Ｚｈａｉ  Ｙらによる、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２０１３年；１０（２）：７９〜８９頁を参照のこと）。この概念は、中枢神経系、肝臓、心臓、肺、腸、骨格筋、腎臓などのいくつかの臓器系で発生する（Ｅｌｔｚｓｃｈｉｇ  ＨＫらによる、Ｂｒ  Ｍｅｄ  Ｂｕｌｌ．２００４年；７０：７１〜８６頁を参照のこと）。かなり重度の場合、ＩＲＩ後の炎症反応は、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）又は多臓器不全症候群（ＭＯＤＳ）を引き起こすことさえあり得る（Ｖｉｄｅｌａ  ＬＡらによる、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２００９年；１（１）：７２〜８頁を参照のこと）。
【００８８】
肝ＩＲＩは、診療において頻繁に起こりかつ主要な合併症であり、肝機能を損ない、術後の罹患率、死亡率、回復、及び予後全般を増加させる。肝臓は、高エネルギー必要量を有する臓器であり、酸素供給に大きく依存し、低酸素状態又は無酸素状態の影響を受けやすい（Ｔｅｏｈ  ＮＣによる、Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２０１１年；２６  Ｓｕｐｐｌ  １：１８０〜７頁を参照のこと）。肝ＩＲＩは、温虚血と冷虚血に分類され得る。温虚血は、移植、外傷、ショック、及び肝血液供給が一時的に中断される待機的肝臓手術の状況で起きる。また、一部の種類の中毒性肝傷害、類洞閉塞及びバッド−キアリ症候群においても起こり得る（Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ  Ｖらによる、Ｗｏｒｌｄ  Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２０１２年；４（４）：１１９〜２８を参照のこと）。冷蔵虚血は、移植前の臓器保存中に起きる。クッパー細胞（ＫＣ）の活性化、酸化ストレス及び炎症性サイトカインシグナル伝達のアップレギュレーションを含む多くの要因が肝ＩＲＩの一因となる（ｖａｎ  Ｇｏｌｅｎ  ＲＦらによる、Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２０１３年；２８（３）：３９４〜４００頁を参照のこと）。この多様な機構は、病態生理学全体にそれぞれ異なる程度の原因となっている。
【００８９】
肝ＩＲＩは、外傷の状況でも、例えば、肝外傷の状況での肝切除、特に重度傷害の場合にも存在する。（Ｂａｎｇａ  ＮＲらによる、Ｂｒ  Ｊ  Ｓｕｒｇ．２００５年；９２（５）：５２８〜３８頁を参照のこと）。さまざまなクランプ手技による術中の肝血液供給の停止は、切除中に必要になることがあり、必然的に肝臓を温ＩＲＩに曝す。さらに、肝臓は、生物に関して一種の生化学的工場としての役割、同様にその解剖学的及び生理学的な立場を有し、外傷を有する患者が頻繁に遭遇する虚血に対して脆弱である。
【００９０】
虚血期間中に、細胞傷害を助長するいくつかの機能的変化が細胞レベルで発生する（Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓらによる、Ａｒｃｈ  Ｔｒａｕｍａ  Ｒｅｓ．２０１３年、８月；２（２）：６３〜７０頁及びＣａｓｉｌｌａｓ−Ｒａｍｉｒｅｚ  Ａらによる、Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．２００６年；７９（２０）：１８８１〜９４頁を参照のこと）。特に、酸化的リン酸化の減少は、アデノシン−５’−三リン酸（ＡＴＰ）の枯渇及びカルシウム恒常性の乱れをもたらす（Ｄｅ  Ｇｒｏｏｔ  Ｈらによる、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ．２００７年；３９（２）：４８１〜４頁を参照のこと）。虚血中の肝細胞への酸素の不足はまた、ミトコンドリアの脱エネルギー、Ｈ＋及びＮａ＋の恒常性の変化、並びに最終的には類洞内皮細胞（ＳＥＣ）及びＫＣの膨潤を引き起こす（Ｍａｓｓｉｐ−Ｓａｌｃｅｄｏ  Ｍらによる、Ｌｉｖｅｒ  Ｉｎｔ．２００７年；２７（１）：６〜１６頁を参照のこと）。活性酸素種（ＲＯＳ）の産生を伴うＫＣの活性化、肝細胞における誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）のアップレギュレーション、並びに好中球媒介性の傷害をもたらす炎症性サイトカイン、ケモカイン、及び接着分子のアップレギュレーションは全て、炎症に関連する損傷の主要な原因となる現象である（Ｂｉｌｚｅｒ  Ｍらによる、Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２０００年；３２（３）：５０８〜１５頁を参照のこと）。
【００９１】
一態様では、肝外傷（例えば、外科手術を含むあらゆる種類の身体的傷害による）を経験した患者における肝虚血再灌流障害（ＩＲＩ）を処置する方法は、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含む。一実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、肝細胞アポトーシスの減少をもたらす（例えば、一本鎖ＤＮＡ染色及び／又は切断カスパーゼ−３のウエスタンブロット法によって評価される）。一実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、肝細胞アポトーシスが１．５分の１、２分の１、２．５分の１、３分の１、又は３．５分の１に減少する。
【００９２】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）において、正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００９３】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、１つ又は複数の実質損傷マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ、及び／又はＴ−ｂｉｌ）の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、１つ又は複数の実質損傷マーカー（例えば、ＡＳＴ、ＡＬＴ及び／又はＴ−ｂｉｌ）において、マーカーに関して正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００９４】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、好中球浸潤の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、好中球浸潤において、好中球の正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００９５】
別の実施形態では、本処置は、処置前のベースラインと比較して、血小板凝集の減少をもたらす（例えば、２５％ｍ、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、血小板凝集において、血小板凝集の正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００９６】
別の実施形態では、本処置は、表１に明示される、肝ＩＲＩ後の肝損傷の評価用の鈴木スコアリングシステムによって評価して、少なくとも１スコアの改善をもたらす（例えば、Ｍａｔｔｈｉａｓ  Ｂｅｈｒｅｎｄｓらによる、Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｓｕｒｇ．２０１０年３月；１４（３）：５２８〜５３５頁、Ｓｕｚｕｋｉ  Ｓらによる、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９９３年；５５（６）：１２６５〜７２頁、及びＳｕｚｕｋｉ  Ｓらによる、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．１９９１年；５２：９７９〜９８を参照のこと）。例えば、患者は、（１）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア３、（２）処置前にはスコア３及び処置後にはスコア２、（３）処置前にはスコア２及び処置後にはスコア１、又は（４）処置前にはスコア１及び処置後にはスコア０を有し得る。別の実施形態では、本処置は、少なくとも２、３、又は４スコアの改善をもたらす。例えば、患者は、（１）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア２、（２）処置前にはスコア３及び処置後にはスコア１、（３）処置前にはスコア２及び処置後にはスコア０、（４）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア１、（５）処置前にはスコア３及び処置後にはスコア０、又は（６）処置前にはスコア４及び処置後にはスコア０を有し得る。
【表１】
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【００９７】
肝外傷を経験した患者における１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）のレベルを、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することにより減少させ、それにより、処置前のベースラインレベルと比較して、患者における１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン及び／又は１つ若しくは複数のケモカインのレベルを減少させる方法も提供する。一実施形態では、本方法は、処置前のベースラインと比較して、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本方法は、１つ若しくは複数の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、及び／又はＴＮＦα）及び／又は１つ若しくは複数のケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ−１及び／又はＣＸＣＬ−２）において、正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００９８】
さらに、肝外傷（例えば、外科手術を含むあらゆる種類の身体的傷害による）を経験した患者における好中球浸潤を、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することにより減少させ、それにより、処置前のベースライン好中球レベルと比較して、好中球レベルを減少させる方法も提供する。一実施形態では、本方法は、処置前のベースラインと比較して、好中球浸潤の減少をもたらす（例えば、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の減少）。別の実施形態では、本処置は、好中球浸潤において、好中球の正常レベル内、又は正常レベルと考えられるレベルを１０％、１５％、又は２０％越える範囲内までの減少をもたらす。
【００９９】
本明細書に記載される評価、例えば、肝細胞アポトーシス、サイトカイン、ケモカイン、実質損傷マーカー、好中球浸潤、及び／又は血小板凝集における減少は、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後の任意の時間に決定することができる。一実施形態では、その減少は、処置後の２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、４８時間、又は７２時間において評価される。
【０１００】
ＶＩ．急性肝不全に関連する方法
急性肝不全（劇症肝不全としても公知）は、通常は既存の肝疾患がない人に、急速に起きる（例えば、数日又は数週間で）肝機能の損失（例えば、肝細胞の８０〜９０％の機能の喪失）である。急性肝不全は、肝疾患の病歴のない患者において、発症から２６週間以内に精神的変化（脳症）の発生を伴う異常な血液凝固の証拠（例えば、国際標準化比＞１．５）を有する急性肝炎の症候群として定義される（例えば、Ｐｏｌｓｏｎ  Ｊ、Ｌｅｅ  ＷＭによる；Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００５年；４１：１１７９〜１１９７頁及びＳｌｅｉｓｅｎｇｅｒ＆Ｆｏｒｄｔｒａｎ’ｓ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ａｎｄ  ｌｉｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ（ＰＤＦ）（第９版）を参照のこと）。
【０１０１】
急性肝不全という用語は、予後の目的で使用されていた劇症肝不全、超急性肝不全、亜急性肝不全などの古い用語に取って代わった。超急性肝不全（発症から７日以内の脳症の発生として定義される）の患者は、一般に医学的管理を伴い良好な予後を示すが、亜急性肝不全（発症から５〜２６週間以内の脳症の発生として定義される）の患者は、肝移植なしでは予後が不良である（例えばＯ’Ｇｒａｄｙ  ＪＧらによる、Ｌａｎｃｅｔ  １９９３年；３４２：２７３〜２７５頁、及びＯｓｔａｐｏｗｉｃｚ  Ｇらによる；ＵＳ  Ａｃｕｔｅ  Ｌｉｖｅｒ  Ｆａｉｌｕｒｅ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ．Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｏｆ  ａ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ａｃｕｔｅ  ｌｉｖｅｒ  ｆａｉｌｕｒｅ  ａｔ  １７  ｔｅｒｔｉａｒｙ  ｃａｒｅ  ｃｅｎｔｅｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ．Ａｎｎ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｍｅｄ  ２００２年；１３７：９４７〜９５４頁を参照のこと）。
【０１０２】
急性肝不全は、肝細胞が著しく損傷され、もはや機能できなくなったときに起きる。考えられる原因には、アセトアミノフェンの過剰摂取、処方薬（例えば、抗生物質、非ステロイド性抗炎症薬及び抗けいれん薬）、薬草補助剤（例えば、カバ、マオウ、スカルキャップ及びメグサハッカ）、ウイルス（例えば、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｅ型肝炎、エプスタインバーウイルス、サイトメガロウイルス及び単純ヘルペスウイルス）、毒素（例えば、タマゴテングダケ及び四塩化炭素）、自己免疫疾患、血管疾患（例えば、バッド−キアリ症候群）、代謝性疾患（例えば、ウィルソン病及び妊娠性急性脂肪肝）、癌、並びに敗血症性ショックが含まれる。しかし、急性肝不全の多くの症例には明らかな原因がない。
【０１０３】
米国では毎年ほぼ２，０００件の急性肝不全の症例があり、肝疾患による全死亡の６％を占める（Ｌｅｅ  ＷＭらによる、Ａｃｕｔｅ  ｌｉｖｅｒ  ｆａｉｌｕｒｅ：ｓｕｍｍａｒｙ  ｏｆ  ａ  ｗｏｒｋｓｈｏｐ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００８年；４７：１４０１〜１４１５頁を参照のこと）。急性肝不全は、男性より女性に好発し、他の人種より白人に好発する。発生率のピークはかなり若い年齢（例えば、３５〜４５歳）である（例えば、Ｓｉｎｇｈらによる、Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１６年６月；８３（６）：４５３〜４６２頁及びＢｅｒｎａｌらによる、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２０１３年；３６９：２５２５〜２５３４頁を参照のこと）。急性肝不全の診断は、それぞれ、理学的検査、検査所見、患者の履歴、及び精神状態変化を確立する既往歴、凝固障害、発症の速さ、並びに既知の以前の肝疾患の欠如に基づく。急性肝不全は、過度の出血及び脳内圧を含む重篤な合併症を引き起こし得る。急性肝不全の症状には、肝性脳症、タンパク質合成障害（例えば、血清アルブミンのレベル及び血中のプロトロンビン時間によって測定される）、黄疸、右上腹部の疼痛、腹部膨満、悪心、嘔吐、倦怠感、見当識障害若しくは錯乱、及び／又は眠気が含まれるが、これらに限定されない。急性肝不全は、多くの場合、脳浮腫、出血及び出血障害、感染症、及び／又は腎不全を含む合併症を引き起こし得る。
【０１０４】
したがって、一態様では、急性肝不全であると判断された患者を処置する方法を提供し、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含む。一実施形態では、本処置は、肝性脳症、タンパク質合成障害、黄疸、右上腹部の疼痛、腹部膨満、悪心、嘔吐、倦怠感、見当識障害、錯乱、及び／又は眠気の低減又は休止からなる群から選択される少なくとも１つの治療効果を生み出す。
【０１０５】
肝機能を評価する１つの方法は、アルブミンレベルを介することである。アルブミンは、肝臓で産生される最も豊富なタンパク質である。血中の血清アルブミンの典型的な値は、１デシリットルあたり３．４〜５．４グラムである。１デシリットルあたり３．４グラム未満の血清アルブミンは低いと考えられる。肝不全の間、血清アルブミンレベルは低い。その半減期が長い（２〜３週間）ため、アルブミンは慢性肝不全の評価に最も有用である。したがって、一実施形態では、本明細書に記載の方法は、血清アルブミンの正常レベルへの移行をもたらす。
【０１０６】
一態様では、急性肝不全であると判断された患者における血清アルブミンを増加させる方法を提供し、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含み、それにより、投与前のベースライン血清アルブミンレベルと比較して、患者の血清アルブミンを増加させる。一実施形態では、患者の血清アルブミンは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与前は、１デシリットルあたり３．４グラム未満である。別の実施形態では、患者の血清アルブミンは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後、１デシリットルあたり３．４グラム〜５．４グラムの間である。
【０１０７】
肝機能を測定するための別の手段は、プロトロンビン時間（ＰＴ）及び／ＩＮＲ（国際標準化比）である。肝臓は、血液凝固カスケードに必要な凝固タンパク質の大部分を生成する。重度の肝傷害は、凝固因子の肝臓合成の低減につながり、その結果としてＰＴの延長又はＩＮＲの増加に至り、これは、世界中のＰＴレベルの報告を統一する方法である。凝固因子はアルブミンよりも半減期が短いため、ＰＴ（又はＩＮＲ）は急性肝不全と慢性肝不全の両方の存在を評価するのに有用である。
【０１０８】
プロトロンビン時間検査（「ＰＴ」又は「プロタイム」検査とも呼ばれる）は、血液が凝固するまでにかかる時間を測定する血液検査である。プロトロンビン時間検査は、出血の問題を調べ、同様に血餅を防ぐ薬物が作用しているかどうかを調べるために使用することができる。
【０１０９】
血液が凝固する（血餅となる）には、血液凝固因子が必要である。プロトロンビン、又は第ＩＩ因子は、肝臓によって作製される凝固因子の１つである。ビタミンＫは、プロトロンビン及び他の凝固因子を作製するために必要である。プロトロンビン時間は、５つの異なる血液凝固因子（第Ｉ、第ＩＩ、第Ｖ、第ＶＩＩ、及び第Ｘ因子）が存在するかどうかを確認するため、重要な検査である。プロトロンビン時間は、血液希釈薬（例えば、ワルファリン）、低レベルの血液凝固因子、いずれかの凝固因子の活性の変化、いずれかの凝固因子の欠如、阻害剤、及び／又は凝固因子の使用の増加によって長くなる。異常なプロトロンビン時間は、肝疾患若しくは肝傷害、又は血液希釈剤による処置によって引き起こされることが多い。
【０１１０】
プロトロンビン時間は、凝固カスケードの外因性及び最終的な共通経路の完全性の尺度である。これは、組織因子及び第ＶＩＩ因子、第ＩＩ因子（プロトロンビン）、第Ｖ因子、第Ｘ因子、並びにフィブリノーゲンで構成される。この検査は、カルシウム及び外因性経路の活性化因子であるトロンボプラスチンを血液試料に添加し、フィブリン血栓形成に必要な時間（秒単位）を測定することによって実行される。プロトロンビン時間の正常な基準範囲は９．５〜１３．５秒である。ただし、正常範囲は大きく変動し、検査を実行する検査室に応じて異なる。したがって、一実施形態では、本明細書に記載の方法は、患者が９．５〜１３．５秒の間のプロトロンビン時間（ＰＴ）を有するという結果をもたらす。
【０１１１】
別の態様では、急性肝不全であると判断された患者におけるＰＴを減少させる方法を提供し、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含み、それにより、比較した患者のＰＴ時間を減少させる。一実施形態では、患者のＰＴは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与前には１３．５秒より大きい。別の実施形態では、患者のＰＴは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後に９．５〜１３．５秒の間である。
【０１１２】
プロトロンビン時間は、機器、さらに重要なことに、使用される試薬によって影響を受ける検査室間の著しい変動性を有し得る。トロンボプラスチン試薬における変動性を相殺し、ワルファリンを投与されている患者のＰＴの標準化を強化するために、世界保健機関（ＷＨＯ）は、１９８３年に国際標準化比（ＩＮＲ）を導入した（Ｔａｊｉｒｉ  Ｋらによる、Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｌ．２０１５年；６５（３）：１９１〜６頁、Ｏｈａｒａ  Ｍらによる、ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．２０１４年；９（８）：ｅ１０５８９１、Ｒｏｈｒｅｒ  ＭＪらによる、Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１９９２年；２０（１０）：１４０２〜５頁、及びＬｅｖｙ  ＪＨらによる、Ｃｌｉｎ  Ｌａｂ  Ｍｅｄ．２０１４年；３４（３）：４５３〜７７頁を参照のこと）。ＩＮＲは、ＰＴを標準化することを目的として、１つの検査室から作成されたＰＴが世界中の任意の他の検査室から作成されたＰＴと比較できるＩＮＲ値をもたらす（Ｎｇ  ＶＬ、Ｃｌｉｎ  Ｌａｂ  Ｍｅｄ．２００９年；２９（２）：２５３〜６３頁を参照のこと）。その製造元によって割り当てられた国際感度指数（ＩＳＩ）を要因とすることにより、特定の検査室で使用される試薬の感度を説明することは、基本的に、患者のＰＴの数学的変換である（Ｋａｍａｌ  ＡＨらによる、Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒｏｃ．２００７年；８２（７）：８６４〜７３頁を参照のこと）。ＩＳＩは、ＷＨＯ国際標準試薬と比較したビタミンＫ依存性因子（ＩＩ、ＶＩＩ、ＩＸ、Ｘ）における低減に対する試薬の感度の尺度である。次に、ＩＮＲは次の式を使用して算出される：ＩＮＲ＝［患者ＰＴ／平均ＰＴ］ＩＳＩ。この式では、患者ＰＴは測定されたプロトロンビン時間であり、平均ＰＴは特定の検査室で検査された男女の少なくとも２０人の健康な被験者の幾何平均ＰＴであり、ＩＳＩは各試薬−機器の組み合わせに固有の国際感度指数である。通常のＩＮＲは０．８〜１．１である。０．１増加するごとに、血液がわずかに薄くなる（例えば、凝固にさらに時間がかかる）ことを意味する。急性肝不全は、異常な凝固の証拠を伴う急性肝炎の症候群として定義される（例えば、国際標準化比＞１．５）。したがって、一実施形態では、本明細書に記載の方法は、患者が０．８〜１．１の間の国際標準化比（ＩＮＲ）を有するという結果をもたらす。別の実施形態では、本処置は、患者が９．５〜１３．５秒の間のＰＴ及び０．８〜１．１の間のＩＮＲを有するという結果をもたらす。
【０１１３】
さらなる態様では、急性肝不全であると判断された患者におけるＩＮＲを減少させる方法を提供し、該方法は、有効量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）を患者に投与することを含み、それにより、患者のＩＮＲを減少させる。一実施形態では、患者のＩＮＲは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与前に１．５より大きい。別の実施形態では、患者のＩＮＲは、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後、０．８〜１．１の間である。
【０１１４】
本明細書に記載の評価、例えば、ＰＴ、ＩＮＲ、及び／若しくは身体的症状における減少、並びに／又は血清アルブミンレベルにおける増加は、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の投与後の任意の時間に決定することができる。一実施形態では、その減少又は増加は、処置後の２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、４８時間、又は７２時間に評価される。
【０１１５】
最終的に肝移植を受ける必要があり得る予後不良の患者を特定するために、さまざまな基準が使用されてきた（Ｓｉｎｇｈらによる、Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１６年６月；８３（６）：４５３〜４６２を参照のこと）。したがって、一実施形態では、本明細書に記載の方法は、キングズカレッジ基準システム、末期肝疾患モデル（ＭＥＬＤ）スコアリングシステム、急性生理機能及び慢性健康評価（ＡＰＡＣＨＥ）ＩＩスコアリングシステム及び／又はクリチ基準を介して評価された、ベースラインからの変化をもたらす。これらの基準のそれぞれは、以下でさらに詳細に開示される。
【０１１６】
キングズカレッジ基準システムは、予後に最も一般的に使用される（Ｃｌｅｍｍｅｓｅｎ  ＪＯらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １９９９年；２９：６４８〜６５３頁、Ｐａｕｗｅｌｓ  Ａらによる、Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ  １９９３年；１７：１２４〜１２７頁、Ａｎａｎｄ  ＡＣらによる、Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ  １９９７年；２６：６２〜６８頁、Ｓｃｈｍｉｄｔ  ＬＥらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００７年；４５：７８９〜７９６頁、及びＢｅｒｎｕａｕ  Ｊらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １９８６年；６：６４８〜６５１頁を参照のこと）。その主な欠点は、それが脳症の患者にのみ適用可能であり、患者がこの段階に達すると、状態が急速に悪化することが多く、肝移植を待っている間に死亡することである。
【０１１７】
これらの独創的な論文で、Ｏ’Ｇｒａｄｙらは、英国ロンドンのキングスカレッジの肝臓ユニットで１９８３年〜１９８５年の間に処置されたＡＬＦ患者５８８人からのデータを調査した（Ｏ’Ｇｒａｄｙ  ＪＧらによる、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １９８９年；９７：４３９〜４４５頁を参照のこと）。この大規模な患者コホートの多変量解析により、無移植生存率の個別の予測因子が、（ａ）パラセタモール誘発性及び（ｂ）非パラセタモール誘発性のＡＬＦに適用されることが明らかになった（表２）（Ｒｅｎｎｅｒによる、Ｆｏｒｕｍ  ｏｎ  Ｌｉｖｅｒ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ４６（２００７）５５３〜５８２頁を参照のこと）。
【表２】
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【０１１８】
モデルは、同じ施設で１９８６年から１９８７年の間に処置された１７５人のＡＬＦ患者の独立コホートにおいて検証された。それぞれ、パラセタモール誘発性及び非パラセタモール誘発性のＡＬＦにおいて、陽性的中率（すなわち、死亡が予測された患者で観察された死亡率）は８４％及び９８％であり、陰性適中率（すなわち、生存が予測された患者で観察された生存率）は、８６％及び８２％であった。これは、８５％及び９５％の予測精度に相当する。キングズカレッジ基準は、入院時に容易に利用できる単純なパラメータに基づいており、世界中の肝移植のためにＡＬＦ患者を選択するために広く使用されている。ただし、これらは３０年以上前に処置を受けた患者のコホートに由来し、ＡＬＦ患者の救命医療管理は過去２０年間で劇的な進歩を遂げた。
【０１１９】
末期肝疾患モデル（ＭＥＬＤ）スコアは、キングズカレッジ基準に代わるものである。入院時の高ＭＥＬＤスコアは進行した疾患を意味し、高ＭＥＬＤスコアを有する患者は、低スコアを有する患者より予後が悪い傾向がある（Ｓｃｈｍｉｄｔ  ＬＥらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００７年を参照のこと）。ＭＥＬＤスコアリングシステムは、最初は、経頸静脈的肝内門脈大循環シャント（ＴＩＰＳ）処置を受けた患者の手術後３か月以内の死亡率を予測するために開発され、その後、予後の決定及び肝移植を受ける優先順位付けに有用であることがわかった（Ｍａｌｉｎｃｈｏｃらによる（２０００）、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．３１（４）：８６４〜７１頁、Ｋａｍａｔｈ，Ｐらによる（２００１）、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．３３（２）：４６４〜７０頁、及びＫａｍａｔｈらによる（２００７）、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．４５（３）：７９７〜８０５頁を参照のこと）。ＭＥＬＤスコアは、全米臓器共有ネットワーク（ＵＮＯＳ）及びＥｕｒｏｔｒａｎｓｐｌａｎｔによって、肝移植の割り当てに優先順位を付けるために使用される（Ｋａｍａｔｈらによる（２００７）、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．４５（３）：７９７〜８０５頁及びＪｕｎｇ，Ｇ．Ｅらによる（２００８）、Ｄｅｒ  Ｃｈｉｒｕｒｇ．７９（２）：１５７〜６３頁を参照のこと）。
【０１２０】
ＭＥＬＤは、患者の血清ビリルビン、血清クレアチニン、及びプロトロンビン時間の国際標準化比（ＩＮＲ）に関する値を使用して、生存を予測する。これは、次の式に基づいて算出される：ＭＥＬＤ＝３．７８×ｌｎ［血清ビリルビン（ｍｇ／ｄＬ）］＋１１．２×ｌｎ［ＩＮＲ］＋９．５７×ｌｎ［血清クレアチニン（ｍｇ／ｄＬ）］＋６．４３（Ｋａｍａｔｈらによる（２００７）、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．４５（３）：７９７〜８０５頁を参照のこと）。ＭＥＬＤスコアは整数として報告されるため、上記の式の結果は四捨五入される。ＵＮＯＳは、ＭＥＬＤスコアに次の修正を加えた（ＵＮＯＳ（２００９−０１−２８）を参照のこと）。「ＭＥＬＤ／ＰＥＬＤ計算機の考証」）：患者が透析を過去７日間に２回受けた場合、使用する血清クレアチニンの値は４．０ｍｇ／ｄＬになる。１未満の正の数（０より大きくかつ１未満）の自然対数は負の値となるため、３つの因子のいずれかからの減算を防ぐために、１未満の任意の値には１の値が与えられる（すなわち、ビリルビンが０．８の場合は、１．０の値が使用される）。その後、肝疾患の病因は、肝疾患の複数の原因を有する患者を分類する方法などの難点を提起したため、モデルから削除された。肝疾患の病因を除外することによるＭＥＬＤスコアの修正は、３か月の生存を予測する際のモデルの精度に有意な影響を与えることはなかった。
【０１２１】
入院患者のＭＥＬＤスコアを解釈する際に、３か月の死亡率の観察（１９９９年１１月から２００１年１２月の間に、ＯＰＴＮ待機リストに２Ａ又は２Ｂのステータスで追加された慢性肝疾患を有する成人肝移植候補者３４３７人を考慮）が、Ｗｉｅｓｎｅｒらにより、（全米臓器共有肝疾患重症度スコア委員会のためのネットワーク（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｎｅｔｗｏｒｋ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎ  Ｓｈａｒｉｎｇ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｓｃｏｒｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）（２００３）「末期肝疾患モデル（ＭＥＬＤ）及びドナー肝臓の割当」。Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ、１２４（１）：９１〜６頁）に記載され、以下の表３に明示される。妥当な肝移植候補である、２４を超えるＭＥＬＤスコアを有する患者は、前述の経頸静脈的肝内門脈大循環シャント（ＴＩＰＳ）の留置がおそらく最も効果的である。
【表３】
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【０１２２】
急性生理機能及び慢性健康評価（ＡＰＡＣＨＥ）スコアも使用することができ、キングズカレッジ基準より感度が高いと考えられる（Ｌａｒｓｏｎ  ＡＭ、Ｐｏｌｓｏｎ  Ｊ、Ｆｏｎｔａｎａ  ＲＪらによる；Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００５年；４２：１３６４〜１３７２頁を参照のこと）。ＡＰＡＣＨＥ  ＩＩ及びＩＩＩスコアは、それぞれ１９８５年及び１９９１年にＫｎａｕｓらによって開発され、主に集中治療室（ＩＣＵ）に入院したすべての疾患カテゴリーの重症患者に使用される（Ｋｎａｕｓ  ＷＡらによる、Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１９８５年；１３：８１８〜８２９頁及びＫｎａｕｓ  ＷＡらによる、Ｃｈｅｓｔ．１９９１；１００：１６１９〜１６３６頁を参照のこと）。２つのスコアリングシステムは、慢性的な健康状態の評価方法、含まれる生理学的変数の数（１２対１７）、及び合計スコアにおいて異なる。肝機能の特定のパラメータ（すなわち、血清ビリルビン及びアルブミン）は、ＡＰＡＣＨＥ  ＩＩＩスコアリングシステムにのみ含まれる。肝硬変患者の重要な転帰予測因子であることが公知のいくつかの予後変数（例えば、プロトロンビン時間）及び治療に対する反応の他の指標（例えば、輸血された血液単位）は、急性生理学スコアによって測定されない（Ｉｎｆａｎｔｅ−Ｒｉｖａｒｄ  Ｃらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｌｏｇｙ．１９８７年；７：６６０〜６６４頁、Ｆｅｒｒｏ  Ｄらによる、Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１９９２年；２７：８５２〜８５６頁、ＬｅＭｏｉｎｅ  Ｏらによる、Ｇｕｔ．１９９２年；３３：１３８１〜１３８５頁、及びＣｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ  Ｅらによる、Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１９８９年；２４：９９９〜１００６頁を参照のこと）。ＡＰＡＣＨＥ  ＩＩ及びＩＩＩスコアは、医療ＩＣＵに入院した肝硬変患者のリスク階級化に首尾よく使用されている（Ｚａｕｎｅｒ  ＣＡらによる、Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１９９６年；２２：５５９〜５６３頁、Ｚａｕｎｅｒ  Ｃらによる、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２０００年；１２：５１７〜５２２頁、Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ  ＪＥらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．１９９６年；２３：１３９３〜１４０１頁、Ｗｅｈｌｅｒ  Ｍらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２００１年；３４：２５５〜２６１頁、及びＡｇｇａｒｗａｌ  Ａらによる、Ｃｈｅｓｔ．２００１年；１１９：１４８９〜９７頁を参照のこと）。
【０１２３】
ＡＰＡＣＨＥ  ＩＩスコアを算出するために、１２の一般的な生理学的及び臨床検査値（温度、平均動脈圧、心拍数、呼吸数、酸素負荷（ＰａＯ２又はＡ−ａＤｏ２）、動脈ｐＨ、血清ナトリウム、血清カリウム、血清クレアチニン、ヘマトクリット、白血球数及びグラスゴーコーマスコア）は０から４までマーク付けされ、０が正常、４が最も異常である（Ｋｎａｕｓ  ＷＡらによる、Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．１９８５年；１３：８１８〜８２９頁を参照のこと）。これらの値の合計は、患者の年齢を調整するマーク及び慢性的な健康問題（重度の臓器不全又は免疫無防備状態の患者）を調整するマークに加算され、ＡＰＡＣＨＥ  ＩＩスコアに到達する。
【０１２４】
ＡＰＡＣＨＥ  ＩＩＩスコアは０〜２９９の範囲であり、１７の生理学的測定値（急性生理学スコア）の異常の程度に関するマーク、年齢の調整、及び免疫機能を低下させかつ病院生存に影響を与える７つの併存疾患の調整から導き出される（Ｋｎａｕｓ  ＷＡらによる、Ｃｈｅｓｔ．１９９１年；１００：１６１９〜１６３６頁を参照のこと）。１７の生理学的変数には、１１の検査パラメータ（ヘマトクリット、白血球数、血清クレアチニン、血清ＢＵＮ、血清ナトリウム、血清アルブミン、血清ビリルビン、血糖、ＰａＯ２、Ａ−ａＤＯ２、及び酸塩基異常のスコアリング）、５つのバイタルサイン（脈拍、平均血圧、体温、呼吸数、尿量）並びに修正されたグラスゴーコーマスコアが含まれる。
【０１２５】
クリチ基準も使用することができる（Ｐａｕｗｅｌｓ  Ａらによる、Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ  １９９３年；１７：１２４〜１２７頁及びＢｅｒｎｕａｕ  Ｊらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １９８６年；６：６４８〜６５１頁を参照のこと）。Ｂｅｒｎｕａｕらは、ＨＢＶ関連急性肝不全を有し、主に１９７０年代に処置された１１５人の患者について１９８６年に報告し、多変量解析により、第Ｖ因子レベル、患者の年齢、血清中のＨＢｓＡｇの欠如、及び血清α−フェトタンパク質濃度が生存の独立した予測因子であることを示した（Ｂｅｒｎｕａｕ  Ｊらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １９８６年；６：６４８〜６５１頁を参照のこと）。これらのパラメータは、Ｂｉｓｍｕｔｈらによって、１９８６年から１９９１年の間にパリのＰａｕｌ  Ｂｒｏｕｓｓｅ病院の肝ユニットに急性肝不全で入院した患者における、同所性肝移植（ＯＬＴ）の患者の選択について採用された（Ｂｉｓｍｕｔｈ  Ｈらによる、Ｔｈｅ  Ｐａｕｌ  Ｂｒｏｕｓｓｅ  ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ．Ａｎｎ  Ｓｕｒｇ  １９９５年；２２２：１０９〜１１９頁を参照のこと）。いわゆるクリチ基準は、肝性脳症の存在かつ第Ｖ因子レベルが＜２０％（患者の年齢が３０歳未満の場合）又は＜３０％（患者の年齢が３０歳以上の場合）である。基準を満たした急性肝不全の１３９人の患者のうち、１人が回復し、２２人が移植を待ちながら死亡し、１１６人が移植を受け、脂肪肝を伴わずＡＢＯ適合性全肝移植を受けた患者のうち、１年生存率は８１％であった（Ｒｅｎｎｅｒによる、Ｆｏｒｕｍ  ｏｎ  Ｌｉｖｅｒ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ４６（２００７）５５３〜５８２頁を参照のこと）。このデータは、クリチ基準が、肝移植を必要とする急性肝不全患者を非常に正確に選択できることを示していると考えられる。それらはその目的のためにフランスで広く使用されている。しかし、この研究では、基準を満たさなかった患者の死亡率について結論を出すことはできない。
【０１２６】
急性肝不全の原因を証明することの補助に加えて、肝生検も予後診断手段として使用することができる。生検における７０％を超える肝細胞壊死により、９０％の特異性及び５６％の感度を伴い、死亡を予測する（Ｄｏｎａｌｄｓｏｎ  ＢＷらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  １９９３年；１８：１３７０〜１３７６頁を参照のこと）。低リン血症は、急性肝不全を有する患者における肝機能の回復を示すことが報告されている（Ｓｃｈｍｉｄｔ  ＬＥらによる、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００２年；３６：６５９〜６６５頁を参照のこと）。肝臓が再生するにつれて、そのエネルギー必要量は増加する。エネルギーを供給するために、アデノシン三リン酸の産生が増加し、リンは細胞外から細胞内の区画に移動して、このプロセス中に増加するリンの必要を満たす。２．９ｍｇ／ｄＬ以上の血清リンレベルは、適切な肝細胞再生が行われていないことを意味するため、急性肝不全患者における予後不良を示していると考えられる。
【０１２７】
ＶＩＩ．キット
抗Ｃ５剤（例えば、エクリズマブ若しくはラブリズマブなどの、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）、及び薬学的に許容される担体を、本明細書に記載の方法における使用に適応した治療有効量で含む医薬組成物を含むキットもまた、本明細書で提供する。キットは、任意選択で、例えば、投与スケジュールを含む、開業医（例えば、医師、看護師、又は患者）が、キットに含まれる組成物を、肝外傷（例えば、外科手術を含むあらゆる種類の身体的傷害による）を経験した患者に、又は急性肝不全であると判断された患者に、投与することを可能にする使用説明書を含み得る。
【０１２８】
一実施形態では、患者における肝虚血再灌流障害（ＩＲＩ）を処置又は予防するためのキットを提供し、該キットは、（ａ）ある用量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）；及び（ｂ）本明細書に記載の任意の方法における、抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の使用説明書を備える。別の実施形態では、急性肝不全であると判断された患者を処置するためのキットを提供し、該キットは、（ａ）ある用量の抗Ｃ５剤（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）；及び（ｂ）本明細書に記載の任意の方法における、抗Ｃ５抗体（例えば、抗Ｃ５抗体又はその抗原結合性フラグメント）の使用説明書を備える。
【０１２９】
以下の実施例は単なる例示であり、本開示を読むと、当業者には多くの変形及び同等物が明らかになるので、本開示の範囲を限定するものとして決して解釈されるべきではない。
【０１３０】
本出願を通して引用される全ての参考文献、ジェンバンク登録物、特許及び公開特許出願の内容は、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
【０１３１】
実施例
実施例１：マウスの前臨床研究
前臨床マウス研究は、マウスのＣ５に特異的に結合し、Ｃ５ａとＣ５ｂ−９の両方の活性を阻害するマウスＩｇＧ１アイソタイプ抗体であるＢＢ５．１ｍＡｂを使用して、Ｃ５遮断の効果を評価するために実施された（Ｗａｎｇ  Ｙらによる、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １９９６年８月；９３：８５６３〜８頁を参照のこと）。ＢＢ５．１ｍＡｂは、エクリズマブに匹敵する、終末補体価の阻害効果を有し、ラットではＣ５と交差反応性を有する（Ｔｈｏｍａｓ  ＴＣらによる、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １９９６年；３３（１７／１８）：１３８９〜４０１頁を参照のこと）。
【０１３２】
第一の目的は、肝移植と同様に肝手術における肝臓の温虚血と冷虚血の両方／再灌流障害を含む、重大な肝疾患に対する抗補体Ｃ５抗体の治療効果を検証することであった。第二の目的は、急性肝不全／劇症肝炎などの重大な肝疾患に対する抗補体Ｃ５抗体の治療効果を検証することであった。
【０１３３】
１．  温虚血−再灌流障害のマウスモデル：
Ｃ５ノックアウト（ＫＯ、Ｂ１０Ｄ２／ｏＳｎ）及び対応する野生型（Ｂ１０Ｄ２／ｎＳｎ）のマウスを、左葉及び中葉に対し、７０％の部分的肝虚血に９０分間曝露した。全てのマウスを、小動物用麻酔器（ＭＫ−Ａ１１０、室町機械株式会社、東京、日本）を介してイソフルランで麻酔した。加熱パッドで、体温を３６．５±０．５℃に維持した。正中切開による開腹後、左葉及び中葉を動員し、それらの葉への血管茎を注意深く囲み、非外傷性微小血管クリップを使用して９０分間クランプした。クリップを取り外すことによって、再灌流を開始した。図１に示されるように、虚血前に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１ｍＡｂ（２０、４０、及び６０ｍｇ／ｋｇ）又は対照免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）のいずれかを虚血の３０分前に静脈内投与した。対照のＷＴ／ＫＯマウスを、対照免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）で前処理した。偽手術されたマウスは同じ手順を受けたが、血管閉塞はなかった。Ｃ５ａ受容体拮抗薬（Ｃ５ａＲ−Ａｎｔ：ＰＭＸ５３）を、肝虚血／再灌流障害（ＩＲＩ）における優勢なカスケード（Ｃ５ａ又はＣ５ｂ）を明らかにするための特定の例で、ＷＴマウスに投与した。
【０１３４】
再灌流の２、６、及び２４時間後にマウスを犠牲死させ、血漿Ｃｌｑ、Ｂａ、Ｃ５ａ及びＣ５ｂ−９終末補体複合体Ｃ５ｂ−９をＥＬＩＳＡで評価した。補体の溶血活性を、ザイモサンの存在下でマウス血清をインキュベートした後、感作されていないヒツジ赤血球の溶血の程度から推定した。溶血の機構は、いわゆる反応性溶解（逸脱溶解、バイスタンダー（ｂｙｓｔａｎｄｅｒ）溶解）であり、血清補体活性化が赤血球膜上ではなく、赤血球に近い液相において進行するときに、赤血球が溶解する。さらに、実質損傷のマーカー（すなわち、ＡＳＴ、ＡＬＴ、及びＴ−Ｂｉｌ）並びに細小血管障害の生化学的マーカー（すなわち、血小板数、ＬＤＨ放出、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、及び超高分子量フォンウィルブランド因子（ＵＬ−ｖＷＦ）多量体）を評価した。末梢血中の血清アラニンアミノトランスフェラーゼ（ｓＡＬＴ）レベル（肝細胞傷害の指標）を、自動臨床分析装置を備えた標準的な分光光度法によって測定した。肝微小循環を、レーザードプラ流速計０２Ｃ０（ｏｘｙｇｅｎ  ｔｏ  ｓｅｅ）により、ｗｗｗ．ｌｅａ．ｄｅ／ｅｎｇ／ｉｎｄｅｘｅ．ｈｔｍｌに記載されるように測定した。サイトカイン及びケモカイン（すなわち、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、及びＣＸＣＬ−２）も評価した。
【０１３５】
以下の組織学的評価：多形核白血球（ＰＭＮ）浸潤、鈴木スコアによって定量化された肝損傷、ＴＵＮＥＬアッセイ、及びＣ４ｄ免疫染色を実施した。肝パラフィン切片（厚さ４ｍｍ）をヘマトキシリン−エオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色した。肝ＩＲＩの重症度（例えば、壊死、類洞うっ血、及び小葉中心性風船化）を、０から４のスケールで修正された鈴木基準で盲目的にグレード分けした。
【０１３６】
肝臓切片を脱パラフィンした後、クエン酸緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ６．０）で抗原を回収した。Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｂｌｏｃｋ  Ｓｅｒｕｍ−Ｆｒｅｅ（Ｘ０９０９、ＤＡＫＯ、東京、日本）で３０分間ブロッキングした後、該切片を、マウスＬｙ６−Ｇ、ｓｓＤＮＡ、ＣＤ１１ｂ、及びＦ４／８０に対するラットモノクローナル抗体（ｍＡｂ）と共にインキュベートした。ビオチン化ウサギ抗ラットＩｇＧとのインキュベーション後、免疫ペルオキシダーゼ（ＶＥＣＴＡＳＴＡＩＮ  Ｅｌｉｔｅ  ＡＢＣ  Ｋｉｔ、Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｓ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ）を該切片に適用した。陽性細胞を、１０高倍率視野（ＨＰＦ）／セクション（Ｘ４００）で盲目的にカウントした。負の対照は、一次抗体の代わりに正常なラットＩｇＧと共にインキュベートすることによって調製した。
【０１３７】
肝実質における血小板凝集を評価するために、マウスＣＤ４１に対するラットｍＡｂを肝臓凍結切片に適用した。Ａｌｅｘａ４８８標識ヤギ抗ラットＩｇＧとのインキュベーション後、染色した切片を、４，６−ジアミジノ−２−フェニルインドールを含むＶｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ封入剤（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）でカバーした。該切片を、ＢＺ−９０００蛍光顕微鏡（Ｋｅｙｅｎｃｅ、大阪、日本）で観察した。陽性細胞を、１０高倍率視野（ＨＰＦ）／セクション（Ｘ４００）で盲目的にカウントした。ＣＤ４１陽性面積を、Ｉｍａｇｅ  Ｊソフトウェア（国立衛生研究所、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ、ＵＳＡ）を使用して定量化した。
【０１３８】
全ＲＮＡを、ＲＮｅａｓｙ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ、Ｖｅｎｌｏ、オランダ）を使用して肝臓組織から抽出し、相補ＤＮＡを、Ｏｍｎｉｓｃｒｉｐｔ  ＲＴキット（Ｑｉａｇｅｎ）により調製した。定量的ＲＴ−ＰＣＲを、ＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓリアルタイムＰＣＲシステム（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、東京、日本）を使用して実施した。標的遺伝子の発現を、ハウスキーピング遺伝子であるグリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）に対する比によって算出した。
【０１３９】
全てのデータを、平均±標準誤差（ＳＥＭ）として表す。実験群間の差異は、対になっていないデータに関する一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用して分析し、その後、必要に応じて、事後検定により、処置済み動物をＷＴ対照群と比較した。Ｐ＜０．０５は統計的に有意であると考えられた。
【０１４０】
図２Ａ〜図２Ｂは、Ｃ５ＷＴマウスに、ｉ．ｐ．（図２Ａ）又はｉ．ｖ（図２Ｂ）投与されたＢＢ５．１の、ＣＨ５０に対する効果を示す。ＢＢ５．１の単回静脈内注射は少なくとも３日間ＣＨ５０を完全に抑制したが、ｉ．ｐ．注射による効果は十分ではなかった。図３は、抗Ｃ５抗体の投与を伴う場合かつ伴わない場合で、虚血中、再灌流中、ＩＲＩ後の２時間、ＩＲＩ後の６時間、ＩＲＩ後の１日、ＩＲＩ後の３日、及びＩＲＩ後の４日における溶血活性（ＣＨ５０  Ｕ／ｍｌ）を示す。図３に示されるように、補体活性化は再灌流の２時間後にピークに達し、抗Ｃ５ｍＡｂの投与によって完全に阻害された。
【０１４１】
図４は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、及びＫＯ−抗Ｃ５Ａｂに関する、肝虚血再灌流後の最大２４時間までの、ＡＬＴ（Ｕ／ｍｌ）放出を示す。図５Ａ〜図５Ｂは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔ、ＷＴ−疑似物質、及びＫＯ−疑似物質に関する、肝虚血再灌流後の２時間（図５Ａ）及び６時間（図５Ｂ）におけるＡＬＴ放出（Ｕ／ｍｌ）を示す。
【０１４２】
図６Ａ〜図６Ｂは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔに関して、虚血再灌流後の２時間（図６Ａ）及び６時間（図６Ｂ）において、鈴木スコアによって評価された組織病理学的評価を示す。
【０１４３】
図７は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔに関する、ＩＲＩ後の２時間におけるＣＤ４１染色を示す。図７に示されるように、肝類洞における血小板凝集は、抗Ｃ５Ａｂ、Ｃ５ａＲ拮抗薬により、及びＫＯ−抗Ｃ５Ａｂにおいて有意に低下した。
【０１４４】
図８Ａ〜図８Ｊは、虚血再灌流後の２時間及び６時間において、ｑＲＴ−ＰＣＲによって評価された、ＩＬ−１β（図８Ａ及び図８Ｆ）、ＩＬ−６（図８Ｂ及び図８Ｇ）、ＴＮＦ−α（図８Ｃ及び図８Ｈ）、ＣＸＣＬ−１（図８Ｄ及び図８Ｉ）、並びにＣＸＣＬ−２（図８Ｅ及び図８Ｊ）を示す。図８Ａ〜図８Ｊに示されるように、抗Ｃ５Ａｂ、Ｃ５ａＲ−拮抗薬、及びＫＯ−抗Ｃ５Ａｂは全て、６時間で炎症性サイトカイン／ケモカインをダウンレギュレートした。
【０１４５】
図９Ａ〜図９Ｄは、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の２時間及び６時間におけるＦ４／８０＋細胞（全肝臓マクロファージ）（図９Ａ及び図９Ｂ）並びにＣＤ１１ｂ細胞（浸潤性マクロファージ）（図９Ｃ及び図９Ｄ）を示す。Ｆ４／８０＋細胞はＩＲＩにおいて減少し、ＣＤ１１ｂ細胞はＩＲＩにおいて増加した。抗Ｃ５Ａｂ、Ｃ５ａＲ拮抗薬、及びＣ５ノックアウトは全て、２時間においてＦ４／８０＋細胞を保持し、６時間においてＣＤ１１ｂ＋細胞の活性化を抑制した。
【０１４６】
図１０は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の６時間におけるＬｙ６Ｇ細胞染色を示す。抗Ｃ５Ａｂ及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔは好中球浸潤を低減した。全Ｃ５阻害では、単独のＣ５ａＲ拮抗作用より大きな改善が見られた。
【０１４７】
図１１は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔに関する、虚血再灌流後の６時間におけるｓｓＤＮＡ染色を示す。再度、抗Ｃ５Ａｂ及びＷＴ−Ｃ５ａ−Ａｎｔは好中球浸潤を低減した。全Ｃ５阻害では、単独のＣ５ａＲ拮抗作用より大きな改善が見られた。
【０１４８】
図１２は、ＷＴ−疑似物質、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−疑似物質、ＫＯ−対照ＩｇＧ、及びＫＯ−抗Ｃ５Ａｂに関して、ウエスタンブロット法で評価した、虚血再灌流後の６時間における切断カスパーゼ−３を示す。図１３は、ＷＴ−疑似物質、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔに関して、ウエスタンブロット法で評価した、虚血再灌流後の６時間における切断カスパーゼ−３を示す。
【０１４９】
溶血アッセイにより、補体活性化が、抗−Ｃ５−Ａｂ（４０ｍｇ／ｋｇ）の少なくとも３日間の静脈内投与によって完全に阻害されることが明らかになった。血清ＡＬＴは、再灌流後の２時間及び６時間において、［ＷＴ＋抗−Ｃ５−Ａｂ］及びＫＯ動物（［ＫＯ＋対照ＩｇＧ］及び［ＫＯ＋抗−Ｃ５−Ａｂ］）において、対照［ＷＴ＋対照ＩｇＧ］における血清ＡＬＴより有意に低下した。（全てＰ＜０．００１）。組織病理学的分析はまた、Ｃ５−ノックアウト及び抗−Ｃ５−Ａｂによる組織損傷が対照より有意に少ないことを示した（Ｐ＜０．０１）。ＣＤ４１に関する免疫組織化学は、肝類洞における血小板凝集が再灌流後２時間で抗Ｃ５−Ａｂによって有意に少ないことを実証した（Ｐ＜０．０１）。さらに、Ｃ５阻害は、炎症性サイトカイン（ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α及びケモカイン（ＣＸＣＬ−１及び−２）を有意にダウンレギュレートし、その後６時間において好中球浸潤を有意に低下させた（Ｐ＜０．００１）。酸化的損傷マーカーである８−ヒドロキシ−２−デオキシグアノシンもまた、Ｃ５阻害によって有意に減少した（Ｐ＜０．０１）。一本鎖ＤＮＡ染色と切断カスパーゼ−３のウエスタンブロットは両方とも、抗−Ｃ５−Ａｂが肝細胞アポトーシスを有意に減少させることを実証した（それぞれ、Ｐ＜０．０１及びＰ＜０．０５）。Ｃ５ａ受容体拮抗薬は、ほとんどのパラメータにおいて抗−Ｃ５−Ａｂと同等の保護を発揮したが、好中球浸潤及び肝細胞アポトーシスは、Ｃ５ａ受容体拮抗作用単独より、全Ｃ５阻害によって有意に改善された。
【０１５０】
抗Ｃ５抗体は、主にＣ５ａ媒介性のカスケードを介して、初期段階において血小板凝集及びサイトカイン／ケモカイン産生を阻害するだけでなく、再灌流の後期段階においてその後の好中球浸潤、酸化的損傷、及び肝細胞アポトーシスを減弱させることにより、肝ＩＲＩを有意に減弱させた。
【０１５１】
２．  急性／劇症肝不全のマウスモデル
図１４に示すように、雄のＣ５欠損（ＫＯ、Ｂ１０Ｄ２／ｏＳｎ）マウス及び対応する野生型（Ｂ１０Ｄ２／ｎＳｎ）マウス（９〜１２週齢）に、ＬＰＳ／Ｄ−ＧａＩＮ負荷を施し、急性劇症肝不全（ＡＬＦ）を誘発させた。抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１ｍＡｂ（２０、４０、又は６０ｍｇ／ｋｇ）又はビヒクルのいずれかを、ＬＰＳ／Ｄ−ＧａＩＮ投与の６０分前に静脈内投与した。低血糖及び電解質平衡異常を回避するために、負荷後１２時間ごとに、乳酸リンゲルと混合した１０％グルコース水を含む溶液の皮下注射（２５ｍＬ／ｋｇ）を計画した。６時間、１２時間、２４時間、及び７２時間後に、マウスを犠牲死させ、血漿Ｃｌｑ、Ｂａ、Ｃ５ａ及びＣ５ｂ−９終末補体複合体Ｃ５ｂ−９をＥＬＩＳＡにより評価した。加えて、実質損傷マーカー（すなわち、ＡＳＴ、ＡＬＴ、及びＴ−Ｂｉｌ）並びに細小血管障害の生化学的マーカー（すなわち、血小板数、ＬＤＨ放出、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、及び超高分子量フォンウィルブランド因子（ＵＬ−ｖＷＦ）多量体）を評価した。肝微小循環を、レーザードプラ流速計０２Ｃ０（ｏｘｙｇｅｎ  ｔｏ  ｓｅｅ）により、ｗｗｗ．ｌｅａ．ｄｅ／ｅｎｇ／ｉｎｄｅｘｅ．ｈｔｍｌに記載されるように測定した。サイトカイン及びケモカイン（すなわち、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、及びＣＸＣＬ−２）も評価した。以下の組織学的評価：多形核白血球（ＰＭＮ）浸潤、鈴木スコアによって定量化された肝損傷、ＴＵＮＥＬアッセイ、及びＣ４ｄ免疫染色もまた実施した。
【０１５２】
図１５は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬の処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与後の０時間、２時間、４時間、及び６時間のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。図１６は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与後６時間のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。図１７
【０１５３】
は、ＫＯ−ビヒクル及びＷＴ−ビヒクルの処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の投与後１２時間のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。図１５〜図１７から明らかなように、抗Ｃ５抗体とＣ５ノックアウトの両方が、ＬＰＳ／Ｄ−ＧＡＩＮ注射後の６時間において肝傷害を有意に軽快させた。対照的に、Ｃ５ａＲ拮抗薬は、肝傷害の軽減において全Ｃ５阻害ほど効果的ではなかった。
【０１５４】
図１８Ａ〜図１８Ｅは、ＷＴ対照及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスにおけるＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦα、ＣＸＣＬ−１、及びＣＸＣＬ−２のレベルを示す。簡単に言えば、サイトカイン／ケモカインは、ＬＰＳ／Ｄ−ＧＡＩＮ注射後２時間に早くも増加し始めた。
【０１５５】
図１９は、組織学的分析を介して評価された、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ−Ａｎｔの処置済みマウスの傷害グレードの比較である。組織学的グレード（アポトーシス／壊死）：０［なし］、０．５［最小］、１［軽度］、１．５［軽度から中等度］、２［中等度］、２．５［中等度から顕著］、及び３［顕著］。図１９に示されるように、抗Ｃ５抗体とＣ５ノックアウトの両方が、ＬＰＳ／Ｄ−ＧＡＩＮ注射後の６時間において肝傷害を有意に軽快させた。
【０１５６】
図２０は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるｓｓＤＮＡ染色を示す。図２０に示されるように、抗Ｃ５抗体とＣ５ノックアウトの両方がアポトーシスを有意に抑制した。
【０１５７】
図２１は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬に関する、２時間、４時間、及び６時間におけるｓｓＤＮＡ染色を示す。図２１に示されるように、アポトーシスの変化は、対照群では６時間において顕著となった。この変化は、Ｃ５／Ｃ５ａ阻害によって抑制された。
【０１５８】
図２２は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＬｙ６Ｇ染色を示す。図２２から明らかなように、抗Ｃ５抗体とＣ５ノックアウトの両方が好中球浸潤を有意に抑制した。
【０１５９】
図２３は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＦ４／８０染色を示す。図２３から明らかなように、抗Ｃ５抗体とＣ５ノックアウトの両方がＦ４／８０＋細胞を維持した。
【０１６０】
図２４は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬に関する、２時間、４時間、及び６時間におけるＦ４／８０染色を示す。図２４から明らかなように、Ｆ４／８０＋細胞は、対照群では６時間まで徐々に減少した。
【０１６１】
図２５は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＣＤ１１ｂ染色を示す。図２６から明らかなように、Ｃ５−ノックアウトはＣＤ１１ｂ＋細胞を抑制した。
【０１６２】
図２６は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−Ｃ５ａＲ拮抗薬、ＷＴ疑似物質、及びＫＯ疑似物質の処置済みマウスに関する、６時間におけるＣＤ４１１染色を示す。図２７から明らかなように、類洞における血小板血栓形成は、抗Ｃ５抗体とＣ５ノックアウトの両方によって有意に減少した。
【０１６３】
図２７は、ＷＴ−疑似物質、ＷＴ−対照ＩｇＧ、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスに関する、６時間における切断カスパーゼ−３／β−アクチン比を示す。
【０１６４】
図２８は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスに関する、２時間、４時間、及び６時間における、ザイモサンを用いた溶血活性を示す。図２９は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスに関する、２時間、４時間、及び６時間における、Ｃ５−枯渇ヒト血清を用いた溶血活性を示す。図２８〜図２９から明らかなように、抗Ｃ５抗体の投与はマウスの溶血活性を完全に阻害した。
【０１６５】
加えて、膜侵襲複合体（ＭＡＣ）染色を６時間において評価した。ＭＡＣ沈着は、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂの処置済みマウスでは６時間において観察されなかった（データは示さず）。
【０１６６】
図３０は、ＫＯ−抗Ｃ５Ａｂ、ＫＯ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、及びＷＴ−対照ＩｇＧの処置済みマウスに関する、経時的な生存曲線を示す。図３０から明らかなように、抗Ｃ５抗体とＣ５ノックアウトの両方がマウスの生存率を有意に改善した。
【０１６７】
図３１は、急性／劇症肝不全のマウスモデルを示す概略図であり、抗Ｃ５Ａｂの静脈内注射はＬＰＳ／Ｄ−ＧａＩＮ注射の２時間後に遅らせる。図３２は、ＷＴ−対照ＩｇＧ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ、ＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ（２時間において投与）、及びＷＴ−抗Ｃ５Ａｂ（４時間において投与）の処置済みマウスに関する、ＬＰＳ（２０μｇ／ｋｇ）及びＤ−ＧＡＩＮ（２００ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内投与後のＡＬＴ放出（ＩＵ／Ｌ）を示す。
【０１６８】
要約すると、抗Ｃ５抗体は、ＬＰＳ  Ｄ−ＧａＩＮ注射後の急性肝不全を有意に減弱させた。肝傷害は注射後６時間には明らかであり、サイトカイン／ケモカインは注射後２時間に早くもアップレギュレートされた。
【０１６９】
３．  マウスの７０％肝部分切除術における肝臓再生に対するＣ５遮断の影響
Ｃ５ノックアウト（ＫＯ、Ｂ１０Ｄ２／ｏＳｎ）及び対応する野生型（Ｂ１０Ｄ２／ｎＳｎ）のマウスを使用した。図３３に示されるように、７０％肝切除を受ける３０分前に、対照ＩｇＧ又は４０ｍｇ／ｋｇの抗Ｃ５抗体（ＢＢ５．１ｍＡｂ）のいずれかをマウスに静脈内投与した。血液／組織試料を、再灌流後の２時間、６時間、及び２４時間において取得した。肝臓のＩＬ−６及びＴＮＦαを３時間において測定した。４８時間において、ＡＬＴ（図３４Ａ）及びＣＨ５０（図３４Ｂ）を評価し、肝臓重量を測定し（図３４Ｃ）、生存率（図３４Ｄ）を評価した。ブロモデオキシウリジン（ＢＲｄＵ、５−ブロモ−２’−デオキシウリジン、ＢｒｄＵ、ＢＵｄＲ、ＢｒｄＵｒｄ、及びブロクスウリジンとしても公知）染色も実施した。ＢＲｄＵは、チミジンの類似体である合成ヌクレオシドである。ＢｒｄＵは、生体組織中で増殖している細胞の検出に一般的に使用される。図３５Ａは、野生型疑似物質、野生型対照ＩｇＧ、及び野生型抗Ｃ５抗体群に関する、４８時間後のＢｒｄＵ陽性細胞の百分率を示す。図３５Ｂは、４８時間後のＡＬＴ（ＩＵ／Ｌ）対％ＢＲｄＵ陽性細胞を示す。
【０１７０】
要約すると、ＢＢ５．１によるＣＦ遮断は、肝臓再生に悪影響を及ぼすことはなかった。肝臓再生は、対照群とＢＢ５．１群の両方における肝損傷に反比例した。
【０１７１】
実施例２：マウスの前臨床研究
以下の追加の前臨床動物研究を、ラットＣ５において実施する。
１．  同所性全肝移植のラットモデル
【０１７２】
オスのルイスラット（２５０〜３００ｇ）をドナー及びレシピエントとして使用する。ドナーラットからの全肝臓を回収し、洗い流した後、ウィスコンシン大学溶液（１．１Ｗ）中で４℃において２４時間保存した後、動脈化を行わず、鎌田のカフ技術を使用して血行再建術を行い、レシピエントに移植する（ルイスからルイス）。レシピエントにおいて、ＡＴＭ６０２ｍＡｂ（２０ｍｇ／ｋｇ）又はビヒクル（生理食塩水）のいずれかを、陰茎静脈を介して２回（再灌流の５分前及び６０分前）、静脈内投与する。再灌流の２時間後、６時間後、及び２４時間後に、ラットを犠牲死させ、血液及び肝臓の試料を収集する。
【０１７３】
血漿Ｃｌｑ、Ｂａ、Ｃ５ａ及びＣ５ｂ−９終末補体複合体Ｃ５ｂ−９を、ＥＬＩＳＡによって評価する。加えて、実質損傷マーカー（すなわち、ＡＳＴ、ＡＬＴ、及びＴ−Ｂｉｌ）並びに細小血管障害の生化学的マーカー（すなわち、血小板数、ＬＤＨ放出、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、及び超高分子量フォンウィルブランド因子（ＵＬ−ｖＷＦ）多量体）を評価する。肝微小循環を、レーザードプラ流速計０２Ｃ０（ｏｘｙｇｅｎ  ｔｏ  ｓｅｅ）により、ｗｗｗ．ｌｅａ．ｄｅ／ｅｎｇ／ｉｎｄｅｘｅ．ｈｔｍｌに記載されるように測定する。サイトカイン及びケモカイン（すなわち、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、及びＣＸＣＬ−２）もまた評価する。以下の組織学的評価：多形核白血球（ＰＭＮ）浸潤、鈴木スコアによって定量化された肝損傷、ＴＵＮＥＬアッセイ、及びＣ４ｄ免疫染色もまた実施する。
【０１７４】
２．  ２０％部分肝移植のラットモデル
この手順では、右上葉、下葉、及び総傍大静脈肝葉（ｐａｒａｃａｖａｌ  ｌｉｖｅｒ  ｌｏｂｅ）を肝移植片として使用し、これは、臨床診療における成人から成人への生体肝移植（ＬＤＬＴ）を模倣して、総肝臓体積のおよそ２０％である。部分的な肝臓移植片を回収し、洗い流した後、ＨＴＫ溶液中で４℃においてで６時間保存した後、動脈化を行わず、鎌田のカフ技術を使用して血行再建術を行い、ルイスラットに移植する。レシピエントラットにおいて、ＡＴＭ６０２ｍＡｂ（２０ｍｇ／ｋｇ）又はビヒクル（生理食塩水）のいずれかを、陰茎静脈を介して２回（再灌流の５分前及び６０分前）、静脈内投与する。再灌流の２時間後、６時間後、２４時間、及び７２時間後に、ラットを犠牲死させ、血液及び肝臓の試料を収集する。
【０１７５】
血漿Ｃｌｑ、Ｂａ、Ｃ５ａ及びＣ５ｂ−９終末補体複合体Ｃ５ｂ−９を、ＥＬＩＳＡによって評価する。加えて、実質損傷マーカー（すなわち、ＡＳＴ、ＡＬＴ、及びＴ−Ｂｉｌ）並びに細小血管障害の生化学的マーカー（すなわち、血小板数、ＬＤＨ放出、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、及び超高分子量フォンウィルブランド因子（ＵＬ−ｖＷＦ）多量体）を評価する。肝微小循環を、レーザードプラ流速計０２Ｃ０（ｏｘｙｇｅｎ  ｔｏ  ｓｅｅ）により、ｗｗｗ．ｌｅａ．ｄｅ／ｅｎｇ／ｉｎｄｅｘｅ．ｈｔｍｌに記載されるように測定する。サイトカイン及びケモカイン（すなわち、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、及びＣＸＣＬ−２）もまた評価する。以下の組織学的評価：多形核白血球（ＰＭＮ）浸潤、鈴木スコアによって定量化された肝損傷、ＴＵＮＥＬアッセイ、及びＣ４ｄ免疫染色もまた実施する。動物の生存は術後１０日目まで評価される。
【０１７６】
３．  急性／劇症肝不全のラットモデル：
急性肝不全の進行におけるＣ５阻害の保護効果を確認するために、ラットモデルを利用する。オスのルイスラット（２００〜２５０ｇ）に、チオアセトアミド（ＴＡＡ）負荷（４００ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．２回）を施す。ＡＴＭ６０２ｍＡｂ（２０、４０、若しくは６０ｍｇ／ｋｇ）又はビヒクルのいずれかを、ＴＡＡ投与の６０分前に静脈内投与する。低血糖及び電解質平衡異常を回避するために、ＴＡ負荷後１２時間ごとに、乳酸リンゲルと混合した１０％グルコース水を含む溶液の皮下注射（２５  ０ｍＬ／ｋｇ）を行う。１２時間、２４時間、及び７２時間後に、ラットを犠牲死させ、血漿Ｃｌｑ、Ｂａ、Ｃ５ａ及びＣ５ｂ−９終末補体複合体Ｃ５ｂ−９をＥＬＩＳＡにより評価する。加えて、実質損傷マーカー（すなわち、ＡＳＴ、ＡＬＴ、及びＴ−Ｂｉｌ）並びに細小血管障害の生化学的マーカー（すなわち、血小板数、ＬＤＨ放出、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、及び超高分子量フォンウィルブランド因子（ＵＬ−ｖＷＦ）多量体）を評価する。肝微小循環を、レーザードプラ流速計０２Ｃ０（ｏｘｙｇｅｎ  ｔｏ  ｓｅｅ）により、ｗｗｗ．ｌｅａ．ｄｅ／ｅｎｇ／ｉｎｄｅｘｅ．ｈｔｍｌに記載されるように測定する。サイトカイン及びケモカイン（すなわち、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、及びＣＸＣＬ−２）もまた評価する。以下の組織学的評価：多形核白血球（ＰＭＮ）浸潤、鈴木スコアによって定量化された肝損傷、ＴＵＮＥＬアッセイ、及びＣ４ｄ免疫染色もまた実施する。
【表４】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４Ａ】
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【図３４Ｂ】
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【図３４Ｃ】
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【図３４Ｄ】
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【図３５Ａ】
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【図３５Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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