(57)【要約】本発明は、皮膚科治療で利点を有することが見いだされた、且つ局所化粧品として採用することができる、有効なテトラセルミス（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ）抽出物のような新規の抽出物及びそのような抽出物を得る方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
抽出物乾燥重量に基づいて以下：
（ａ）全組成の≧１０重量％の総ミネラルと
（ｂ）全組成の≧５重量％のマンニトールと
（ｃ）全組成の≧３重量％の、遊離ガラクトースと結合ガラクトースの合計である総ガラクトースと
（ｄ）全組成の≧４重量％の、遊離グルコースと結合グルコースの合計である総グルコースと
（ｅ）全組成の≧３重量％の総アミノ酸と
（ｆ）全組成の≧２重量％の総窒素とを含む、テトラセルミス・スエシカ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ）抽出物。
【請求項２】
抽出物乾燥重量に基づいて以下：
（ａ）全組成の１１〜２５重量％の総ミネラルと
（ｂ）全組成の６〜１５重量％のマンニトールと
（ｃ）全組成の４〜１５重量％の、遊離ガラクトースと結合ガラクトースの合計である総ガラクトースと
（ｄ）全組成の４〜１０重量％の、遊離グルコースと結合グルコースの合計である総グルコースと
（ｅ）全組成の４〜１０重量％の総アミノ酸と
（ｆ）全組成の３〜５重量％の総窒素と、を含む、請求項１に記載のテトラセルミス・スエシカ抽出物。
【請求項３】
テトラセルミス抽出物を得る方法であって、２−プロパノン、エタノール、水、メタノール、イソプロパノール、及びこれら抽出剤の２以上の混合物から成る群から選択される液状抽出剤でテトラセルミスの凍結乾燥または乾燥させた生細胞を抽出する工程を含み、その際、前記抽出が、（ａ）６０℃を上回る温度にて最大８時間の細胞物質の前記抽出剤への暴露と、（ｂ）前記抽出物を得るための前記細胞物質の除去とを含む、方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法によって得られる請求項１または２に記載のテトラセルミス抽出物。
【請求項５】
前記テトラセルミスの分類がテトラセルミス種、さらに好ましくはテトラセルミス・スエシカである請求項３または４に記載の方法または産物。
【請求項６】
さらにナイアシンアミドを含む請求項１、２、４または５に記載のテトラセルミス抽出物を含む組み合わせ組成物。
【請求項７】
テトラセルミス抽出物のナイアシンアミドに対する重量比の範囲が１：１００００〜１：１、好ましくは１：５００〜１：１０であり、重量はすべて乾燥重量に基づいて算出される請求項６に記載の組み合わせ組成物。
【請求項８】
（ａ）乾燥重量に基づいて算出される０．５〜８０重量％、好ましくは１〜１０重量％の、請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物と、
（ｂ）０．５〜９０重量％の水、好ましくは３０〜７０重量％の水と
（ｃ）０．５〜９０重量％の液状担体、好ましくは２０〜６０重量％のグリセリンと
（ｄ）任意で０．１〜５重量％の１以上の保存剤または保存剤システムと、含む、テトラセルミス抽出液濃縮物。
【請求項９】
（ａ）乾燥重量に基づいて算出される０．５〜１０重量％の、請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物と
（ｂ）３０〜７０重量％の水と
（ｃ）２０〜５０重量％のグリセリンと
（ｄ）５〜２０重量％の１，２−ペンタンジオールと
（ｅ）任意で０．１〜５重量％の１以上の保存剤または保存剤システムと、を含む、液状テトラセルミス抽出液濃縮物。
【請求項１０】
（ａ）乾燥重量に基づいて算出される０．５〜１０重量％の、請求項１、２、４、５、６及び７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物と
（ｂ）０．５〜８重量％の水と
（ｃ）５０〜９８重量％の固形担体、好ましくはマルトデキストリンと、を含む、固形テトラセルミス抽出液濃縮物。
【請求項１１】
ヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、脂漏性皮膚炎、尋常性座瘡、創傷治癒、組織再生、炎症後の過剰色素沈着、炎症関連疾患、フケまたは癜風を治療するまたは予防するために薬物として使用するための請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物もしくは組み合わせ組成物、または請求項８〜１０のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出液濃縮物。
【請求項１２】
請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物もしくは組み合わせ組成物、または請求項８〜１０のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出液濃縮物と、任意で補助物質とを含む、皮膚疾患を治療するのに使用するための皮膚科製品または治療薬。
【請求項１３】
請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物もしくは組み合わせ組成物、または請求項８〜１０のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出液濃縮物と、任意で補助物質及び／または香料とを含む、非治療用製品または化粧品であって、前記化粧品が皮膚及び／または毛髪の手入れ用製品である、非治療用製品または化粧品。
【請求項１４】
前記製品における乾燥重量に基づいて算出されるテトラセルミス抽出物またはテトラセルミス抽出液濃縮物の量が０．０００１〜１０重量％、好ましくは０．００５〜３重量％である請求項１２に記載の皮膚科製品もしくは治療薬または請求項１３に記載の化粧品。
【請求項１５】
皮膚の手入れ、洗浄、日焼け止めもしくは保護における塗布のための、または皮脂の低減のための請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物もしくは組み合わせ組成物、または請求項８〜１０のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出液濃縮物の非治療上の使用または化粧での使用。
【請求項１６】
（ａ）皮膚接合部の刺激
（ｂ）皮膚抗微生物性ペプチドの刺激
（ｃ）ＣＯＸ−２遺伝子の発現及びプロスタグランジンが介在する影響の低減
（ｄ）炎症後の過剰色素沈着の低減
（ｅ）フィラグリンの刺激
のための請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物もしくは組み合わせ組成物、または請求項８〜１０のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出液濃縮物の使用。
【請求項１７】
（ａ）皮膚の表皮完全性の改善のための
（ｂ）大気汚染または微粒子状物質が誘導する影響の予防のための
（ｃ）皮膚バリアの機能障害の予防のための
請求項１、２、４〜７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物もしくは組み合わせ組成物、または請求項８〜１０のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出液濃縮物の非治療上の使用または化粧での使用。
【請求項１８】
さらに、以下：
他の皮脂低減剤
抗ニキビ剤
フケ防止剤
他の抗炎症剤
ＴＲＰＶ１アンタゴニスト
抗痒み剤
抗微生物剤、特に抗プロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）剤、抗マラセチア（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）剤の１以上を含む、請求項１２〜１４のいずれか１項に記載の治療薬または化粧品。
【請求項１９】
請求項１１または１２に記載の疾患の治療における薬物として使用するための請求項１８に記載の治療薬。
【請求項２０】
請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の非治療上の塗布で使用するための、または皮膚及び／または毛髪の手入れのための化粧品として使用するための請求項１８に記載の化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のテトラセルミス（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ）抽出物と、皮膚科的処置で利点を有することが見いだされた、且つ局所化粧品として採用することができるこのテトラセルミス抽出物を得る方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
文書ＥＰ２１９３７８５Ａ２は、テトラセルミス・スエシカ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ）の抽出に関するが、プロセスは低温で実施される。これらの抽出物は特にアミノ酸及び糖の成分に関して様々な組成を有する。驚くべきことに、この組成を持つ抽出物はテトラセルミス・スエシカ抽出物を採用する局所塗布のスキントリートメント特性に効果を有することが見いだされた。
【０００３】
皮脂腺（ＳＧ）は、手のひら及び足の裏と足の甲を除いて身体の皮膚のどこにでも見いだされる皮膚の付属器である。皮脂腺は同じ腺内で１以上の小葉から成る。ＳＧは皮脂と呼ばれる天然油を分泌し、それは汗と共に関与して皮膚を覆う皮脂膜を構成する。ヒトの皮脂は、およそ４０〜６０％のトリグリセリド、ジグリセリド及び遊離の脂肪酸と、２５〜３０％の蝋エステルと、１２〜１５％のスクアレンと、３〜６％のコレステロールエステルと、１．５〜２．５％のコレステロールとの複雑な混合物である。
【０００４】
環境毒物及びＵＶ光を含む環境ストレスに対するバリアとしてのその役割において、皮膚はＳＧによって支えられ、皮脂は皮膚の健常な状態及び外見にとって重要な機能を有する。それは、バリアの保護及び維持、特に、表皮を経由する水分喪失の調節、摩擦に対する皮膚及び毛髪の保護、皮膚バイオフィルムの維持及び皮膚表面への抗酸化剤（スクアレン、補酵素Ｑ１０及びビタミンＥ）の送達において役割を担う。さらに、それは表皮の発生、体臭、及びフェロモンの生成に関与する。皮脂はホルモンのシグナル伝達、表皮の分化及び紫外線（ＵＶ）照射からの保護に直接関与する。それはまた皮膚の天然の微生物叢の組成及び増殖も調節する。
【０００５】
ＳＧには２つの型、毛包脂腺単位で毛包につながるもの、及び独立して（毛包と関連しない）存在するものがある。それらが毛包に関連する場合、１以上の腺が各毛包を取り囲んでもよく、腺自体は立毛筋によって取り囲まれる。ＳＧは特に顔面、頭皮及び背中の正中線にて特に豊富である。それらは顔面では最大４００〜９００個の腺／ｃｍ２に達することができる。それらはまた、まぶたの無毛領域（無毛皮膚）（マイボーム腺と呼ばれる）、耳（耳垢腺）、鼻、陰茎、小陰唇、頬の内部口腔粘膜（Ｆｏｒｄｙｃｅのスポット）及び乳首にも見いだされる。
【０００６】
皮脂腺細胞はＳＧ内での主要な細胞である。その目的は、ホロクリン分泌と呼ばれる独特のプロセスである、完全な成熟細胞の分化及び崩壊を介した皮脂の産生及び分泌である。皮脂腺細胞は基底膜に面する単層で配置される未分化細胞に分類されてもよい。それらは増殖し、分化している細胞の絶え間ない流れを生じるので幹細胞の特徴を担う。腺小葉の中心に向かって増殖して、基底細胞は早期分化細胞型、進行した分化細胞型、完全な分化細胞型及び成熟皮脂腺細胞に徐々に分化する。特徴的に、皮脂腺細胞の細胞質における脂質の蓄積は分化の進行に伴って上昇する。完全に分化した皮脂腺細胞及び成熟皮脂腺細胞では、核はひずみ、崩壊し、細胞は破裂する。皮脂は皮脂管に流出し、次いで毛幹の周囲の毛包に放出される。いったん分泌されると、その発生が幾つかの防御機構によって及び周囲酸素との接触によって制御される種々の生体異物によって皮脂は定着させられる。酸素及び微生物は「ネイティブな」皮脂を転換し、トリグリセリドの脂肪酸への崩壊は最も顕著な活動である。
【０００７】
皮脂腺細胞は皮脂に存在するあらゆる脂質クラスの合成に十分な酵素的機構を持つ。皮脂の脂肪酸は、奇数または偶数の炭素数を伴った直鎖及び分岐鎖の種、長鎖、及び独特な不飽和を含む大きな多様性を特徴とする。酢酸塩、プロピオン酸塩、イソ酪酸塩、イソ吉草酸塩及び２−メチル−酪酸塩を用いて、マロニル−ＣｏＡに由来する２炭素部分の付加による伸長によって様々な脂肪酸を作り出す。Δ６不飽和化酵素（脂肪酸不飽和化酵素２）及びΔ９不飽和化酵素（ステアロイル−ＣｏＡ不飽和化酵素）の活性によって不飽和化が生じる。
【０００８】
リノール酸は脂腺脂質の合成に直接関与し、漏斗の表皮脂質に組み込まれると見なされている。β−酸化の活性化を介してリノール酸は２炭素前駆体に変換され、それは生合成経路のスターターであるアセチル−ＣｏＡを生じる。後者はスクアレン及び蝋エステルの形成につながる。リノール酸は必須脂肪酸なので、その血漿レベルは皮脂腺細胞におけるその濃度を多分調節する。それに続いて脂肪酸を用いてトリグリセリド、コレステロール及び蝋エステルを合成する。
【０００９】
トリグリセリドは脂肪酸とグリセロールから合成される。モノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＭＧＡＴ）酵素はモノアシルグリセロールをジアシルグリセロールに変換し、それはトリアシルグリセロール合成の一方の経路における最後から２番目の工程である。アシルＣｏＡ／ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ）１及び２はトリグリセリド合成における最終工程を触媒する重要な酵素である。蝋エステルは脂肪−アシル−ＣｏＡ還元酵素及び蝋シンターゼ酵素を含む２工程プロセスにて生成される。飽和脂肪酸はそのモノ不飽和物よりも優先的に含まれる。酵素アシル−ＣｏＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ１（ＡＣＡＴ１）はＳＧにて高度に発現され、それは細胞質の脂肪滴へのコレステリルエステルの取り込みを可能にする。コレステロール及びスクアレンはそれらの生合成の最初の工程を共有する。スクアレンはコレステロール生合成の最後の直鎖中間体である。
【００１０】
ＮＨＲファミリーのメンバーである肝臓−Ｘ受容体（ＬＸＲ）はコレステロールの恒常性及び脂質代謝で決定的な役割を担う。ＳＺ９５皮脂腺細胞のＬＸＲリガンドによる処理は細胞における脂肪滴の蓄積を高めたが、それは、ＬＸＲα受容体及び既知のＬＸＲの標的、例えば、脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳＮ）及びステロール調節要素結合タンパク質−１（ＳＲＥＢＰ−１）の発現の誘導を介して説明され得る。
【００１１】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）は核ホルモン受容体（ＮＨＲ）ファミリーのメンバーであり、皮膚における脂質代謝に関与するものを含む種々の遺伝子の転写調節因子として作用する。種々の脂肪酸、エイコサノイド及びプロスタノイド（プロスタグランジン、プロスタサイクリン及びトロンボキサンを含む）はＰＰＡＲを活性化する。ＰＰＡＲはヒトＳＧ及びヒトＳＺ９５皮脂腺細胞にて発現される。ＰＰＡＲγは皮脂腺細胞の発達（増殖）及び脂質生成を活性化する。ＰＰＡＲγは酸化的ストレスが介在するプロスタグランジンＥ２の産生に関与し、ヒトＳＺ９５皮脂腺細胞にてＣＯＸ−２の発現を誘導する。
【００１２】
プロスタグランジンは多数の増殖因子及び環境刺激に応答して合成される脂質メディエーターである。プロスタグランジンの産生はシクロオキシゲナーゼ酵素（ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２）の活性に依存する。皮脂腺細胞は生体内及び試験管内でプロスタグランジンシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２）とも呼ばれるシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）を産生する。皮脂腺の発達におけるＣＯＸ−２の重要性は誘導性ＣＯＸ−２アイソフォームの過剰発現を標的としたトランスジェニックマウスにおいて見られる。これらのマウスが皮脂腺の過形成、皮脂産生の増加及び脂ぎった被毛を発症するということは、皮脂腺細胞の増殖及び脂質代謝におけるＣＯＸ−２及びプロスタグランジンの重要な役割を示唆している。
【００１３】
ＳＧの機能は種々の他の因子、たとえば、増殖因子によって制御される。インスリン様増殖因子１（ＩＧＦ−１）はヒト皮脂腺細胞における脂質合成の誘導において重要な役割を担う。ＩＧＦ−１は脂肪酸合成の遺伝子を優先的に調節するＳＲＥＢＰ−１を誘導することによって脂質生成を高める。
【００１４】
皮脂腺細胞当たりの高い比率の皮脂産生が脂腺エステルにおける低レベルのリノール酸エステルを生じ、濾胞上皮を必須脂肪酸欠乏や、ニキビ形成を生じる特徴的な過角化にさらす。皮脂産生の薬剤による抑制は皮脂のリノール酸濃度を高め、濾胞の過角化を緩和する。
【００１５】
皮脂腺の望ましくない活動亢進が、例えば、顔面で生じる。ここで、皮脂の過剰産生は大きな毛穴を伴うことが多いテカテカした、脂ぎった、審美的に望ましくない外見（油性肌）を皮膚に与える。人口動態の世界的な研究は、油性肌が米国女性の７０％及び日本女性の６２％の共通の懸念であることを明らかにした。過剰な皮脂は毛穴を遮断し、皮膚上で生活する細菌に栄養を提供する。それは、例えば、面皰のような他の軽い染みを促進し得る。場合によっては、過剰な皮脂の存在下では、例えば、座瘡のようなさらに重篤な障害が発生し得る。尋常性座瘡は最大８５％の青年を冒し、成人まで持続することが多い最も一般的な炎症性の皮膚状態である。病態形成は多因子性であり、皮脂腺の活動亢進を含み；皮脂の排出率は座瘡の重症度に相関し、座瘡の転帰を予測する。皮脂腺は相対的に無酸素であり、座瘡で重要な役割を担うプロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）のような通性嫌気性菌の増殖を支え、その密度は皮脂排出率の上昇に伴って増える。
【００１６】
拡大した毛穴は皮膚表面の視覚的な局所変化を呈する状態を指す。医学的懸念ではないが、拡大した毛穴は多数の人々にとって化粧上の懸念である。拡大した顔面毛穴には３つの主な臨床的原因、すなわち、高い皮脂排出、毛穴周囲の弾性の低下、及び毛包体積の増加がある。従って、皮膚の局所容貌に対する毛穴の影響を減らす方法の１つは皮脂の過剰な産生及び蓄積を減らすことである。
【００１７】
皮脂腺による皮脂の過剰産生は毛髪の手入れにも役割を担う。頭皮の皮脂腺の過剰な皮脂産生は脂ぎった髪の原因であり、重大な審美的な課題と見なされている。薬用シャンプー及び薬用ローションの形態で多数の化粧トリートメントが皮脂の頭皮での過剰産生を沈静化すると提案されている。しかしながら、化粧品会社は、特に天然成分から得られるのであれば、新しい製品を継続して求めている。脂漏症は、普通、掻痒を伴う豊富でゆるく付着した薄片の小片を特徴とする頭皮の障害であるフケの発生に関与する。フケは世界人口の５０％を冒す。頭皮のこの顕著な落屑は、炎症及び紅斑を伴うフケの重度の形態である脂漏性皮膚炎に発展し得る。フケ及び脂漏性皮膚炎の病因は３つの因子：皮脂腺の分泌、微生物叢（親油性真菌、マラセチア（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）、特に、Ｍ．グロボーサ（Ｍ．ｇｌｏｂｏｓａ）及びＭ．レストリクタ（Ｍ．ｒｅｓｔｒｉｃｔａ））及び個々の易罹患性に依存すると思われる。従って、皮脂産生の調節はフケ及び脂漏性皮膚炎の予防についての重要な論点であり、本発明はとりわけ、この課題に関する。
【００１８】
最後に、女性の外性器は多数の皮脂腺を有するので、皮脂産生を調節するのに好適な化合物は私的な衛生製品にも適用することができる。恥丘、大陰唇、小陰唇及び膣前提の外側は皮脂腺が豊富であり、その皮脂分泌は細菌微生物叢と相互作用し、生殖器部のｐＨを調節する。新鮮な皮脂は有意な量の遊離の脂肪酸を含有していないが、これらは細菌により産生されたリパーゼの効果として放出され、生殖器環境の酸性化を誘導する。従って、皮脂の調節は生殖器の微生物叢の変化、過敏、掻痒等を防ぐための重要な条件を表すことができる。
【００１９】
結果として、産業界は皮脂産生を減らすのに好適な新しい作用物質を見いだすことに強い関心を寄せる。理想的には、作用物質は、天然起源であり、製造が容易であり、保管し易く、安全であり、且つ多数の様々な製剤にて、特に化粧品及び皮膚や毛髪用の皮膚科製剤にて、及び私的な衛生調製品にて使用できる。
【００２０】
皮膚科学文献は、例えば、レチノイド様１３−シスレチノイン酸（イソトレチノイン）、全トランス−レチノイン酸、アダパレン、その塩または誘導体、スピロノラクトン及びシプロテロンのようなアンドロゲン、抗生剤、好ましくは、クリンダマイシン、エリスロマイシン及びテトラサイクリン、ならびに抗アンドロゲンのような、皮脂を減らす能力について検討されている多数の物質を引用する研究を含有している。しかしながら、これらはほとんど、主として座瘡を治療するように意図され、皮脂を減らすことは補助的目的である処方薬である。他の既知の皮脂低減剤は、たとえば、ナイアシンアミド、５α−還元酵素阻害剤Ｄ−パンテノール、α−ヒドロキシ酸、たとえば、サリチル酸及び乳酸、ピルビン酸（α−ケト酸）、脂肪族ジカルボン酸、たとえば、アゼライン酸、Ｌ−カルニチン、バクチノール、１，２−デカンジオール、センキュノリド−Ａ及びセンキュノリド−Ｂを含有するセロリ（Ａｐｉｕｍ  ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ）種子油、キラヤ（Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ）抽出物、エナンチアクロランタ（Ｅｎａｎｔｉａ  ｃｈｌｏｒａｎｔｈａ）樹皮抽出物、セイヨウナツユキソウ（Ｓｐｉｒａｅａ  ｕｌｍａｒｉａ）抽出物、ブチルアボケート、ビタミンＢ６（ピリドキシンとしても知られる）またはその塩、ビタミンＢ３（ナイアシンまたはニコチン酸としても知られる）またはその塩または誘導体、ベンゾイルペルオキシド、フロレチン、チャノキ（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ）抽出物及び含有されるポリフェノール、たとえば、エピガロカテキン−３−没食子酸塩、アカツメクサ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ  ｐｒｅｔｅｎｓｅ）花抽出物、ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｓｏｊａ）種子抽出物、イソフラボノイドまたはイソフラボノイドを含有する抽出物、好ましくは、ビオカニンＡ、ゲニステイン、ダイゼイン、ゲニスチン、及びダイジンを含む。
【００２１】
バリア／機械的な接着及び密着結合／分化
【００２２】
陸生動物及びヒトの体表面は大気及び機械的ストレスにさらされており、それは双方とも生物と環境の間での直接界面における生細胞の持続と相いれない。皮膚の層を成している表皮はその環境から生物を物理的に分離し、脱水、化学物質、物理的損傷及び微生物に対する構造的な且つ機能的な防御の最前線として役立つ。表皮の生細胞の層は２つの異なるレベルでバリアの形成及び維持に決定的である。第１に、角化細胞は複雑な空間的及び時間的な分化過程を経て最終的に皮膚の最外層の保護的死細胞層を形成する。この分化の損傷は、たとえば、アトピー性皮膚炎で見られるように角質層（ＳＣ）のバリア機能の低下を生じる。第２に、生細胞層自体は、同一の及び異なる表皮層の細胞間で密着した機械的結合を提供することによってバリアを形成する。このバリアを確立するために生細胞は細胞骨格に細胞間接触を連結する細胞間結合、たとえば、密着結合、（角質）デスモソーム及び接着結合によって互いに接続する必要がある。
【００２３】
接着結合は、細胞間接着を細胞骨格に連結し、それによって細胞の集団の挙動を調整する経細胞ネットワークを作り出す細胞間構造である。接着結合は動的実体であり、細胞骨格動態及び細胞極性を調節するシグナル構築基盤としても機能する。そのようなものとして、それらは、接着の次の多様な範囲の他の細胞性プロセス、たとえば、細胞の形状、分裂、増殖、アポトーシス及びバリア機能を調節する。接着結合の分子基盤は２つの細胞接着受容体複合体、古典的なカドヘリン／カテニン複合体とネクチン／アファジン複合体によって形成され、その双方はアクチン細胞骨格に連結することができる。古典的なカドヘリンは、その細胞質面でカテニンと相互作用する単一膜貫通Ｃａ２＋依存性の細胞接着分子である。古典的なカドヘリンの２つの型：主として毛包の周囲及びその中で基底層にて発現されるＰ−カドヘリン（カドヘリン３）及び表皮のあらゆる層に見いだされるＥ−カドヘリン（カドヘリン１）は表皮で発現される。
【００２４】
デスモソームは主として細胞粘着に関与する「機械的な」結合である［１４］。それらは、接着結合の古典的カドヘリン類似するカドヘリンスーパーファミリーの一部であるデスモソームカドヘリンで構成される。デスモグレイン１〜４及びデスモコリン１〜３はヒト表皮で見いだされる。デスモソームカドヘリンの細胞内末端はケラチンフィラメントが結合する接着斑を形成するアダプタータンパク質の分子ネットワークに挿入される。角化細胞が表皮層を通って移動するにつれて、それらは細胞周辺で絶えずデスモソームを形成し、回収する。この代謝回転の間、結合を構成する分子も（構造の物理的解離がなくても）絶えず置き換えられる。角化細胞分化のレベルに従って、下部表皮区分に由来するデスモグレイン２及び３は上部の生きている表皮層にてデスモグレイン１及び４によって進行性に置き換えられる。同じ方法でデスモコリン３はデスモコリン１によって置き換えられる。デスモソームのこの分化依存性の組成はその機械的な安定性の向上と一致する。
【００２５】
密着結合（ＴＪ）は閉塞結合である。それらは上皮細胞間の細胞間隙を封止し、この構造の「密着性」は環境因子によって劇的に調節され、生理的要求に対処する。多数のＴＪタンパク質がヒト（及び／またはマウス）の表皮及びその培養した角化細胞で同定されている。それらには、クローディン、ＴＪ関連ＭＡＲＶＥＬタンパク質（ＴＡＭＰ）及び接合部接着分子（ＪＡＭ）膜貫通ファミリーと同様に幾つかのＴＪプラークタンパク質（例えば、密着帯／ＺＯ及びシングリン）が挙げられる。興味深いことに、表皮の免疫染色によって同定されるＴＪタンパク質のほとんどが顆粒層の細胞・細胞の境界に位置しており（例えば、ｃｌｄｎｓ−１、−４、−６、−７、−１１、−１２、−１８、オクルディン、ＺＯ−１、ＺＯ−２、シングリン）、そこで機能的なＴＪバリアが見いだされている。表皮バリア機能が密着結合成分を必要とするという機能的な証拠は、顆粒層のバリア機能の損傷に起因する大量の経表皮水分損失（ＴＥＷＬ）が原因で死亡するクローディン欠損マウスに由来する。培養角化細胞を用いて、ＴＪは水及び様々なサイズの分子と同様にイオンに対するバリアを形成することが示された。
【００２６】
結合の遺伝子及びタンパク質を刺激することによって表皮の完全性を強化し、それによって防御機能を高める作用物質も頭皮の恒常性を促進し、従って、特に作用物質が皮脂低減活性も持つのであれば、フケにも有益であることが期待できる。
【００２７】
皮脂／バリア汚染
【００２８】
世界の空気の状態２０１７と題する世界保健機関（ＷＨＯ）の年次報告によれば、世界人口の９０％を超える人々が不健康な空気の地域で生活している。大気汚染という用語には、交通排気ガスが含まれるが、これらに限定されず、この文脈では産業排気ガスを忘れてはならない。大気汚染はこの文脈では放出された気体汚染だけでなく放出された粒子も意味している。ただし、ゴム車輪の摩擦による粒子も含まれる。大気汚染に関与する粒子は多環式芳香族炭化水素（ＰＡＨ）を結合していてもよいが、これらＰＡＨが豊富なものに限定されない。プリンターによって放出されるカーボンブラック粒子は室内で発生している大気汚染の課題である。別の課題は石炭または薪によって室内で加熱し、調理することによる大気汚染の生成である。
【００２９】
大気汚染の最も一般な成分の１つは粒子の動力学的直径に従ってＰＭ１０、微細ＰＭ、及び超微細粒子として分類される微粒子状物質（ＰＭ）である。ＰＭ１０（直径１０μｍ未満の粒子）は粉塵、産業排出物及び交通排出物に由来する粒子で構成される。２．５μｍ未満のさらに小さいＰＭの直径は微細ＰＭ（ＰＭ２．５）として定義され；ＰＭ２．５は主として、有機炭素化合物、硝酸塩、及び硫酸塩で構成される。汚染、特に周囲の大気汚染への疫学的な調査はＰＭが、例えば、アトピー性皮膚炎、座瘡、乾癬及びアレルギー反応のような炎症性皮膚疾患の進行と相関することを示した。
【００３０】
環境の／外因性の因子は分泌される皮脂の性質及び量に関与する。従って、例えば、汚染は天然のものであれ、ヒトの活動によるもの（オゾン、産業、農業、喫煙、等）であれ、皮脂の組成に影響を及ぼし、その分泌を刺激するとも考えられる。従って、低濃度（１及び１０μｇ／ｍｌ）のＰＭ２．５は培養皮脂腺細胞にて脂質合成を促進することが示された（Ｑ．Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．２０１７，４０（４），１０２９−１０３６）。
【００３１】
さらに、ヒト角化細胞の細胞株に関する研究が皮膚のバリアの機能不全の発症におけるＣＯＸ２／ＰＧＥ２（プロスタグランジンＥ２）とフィラグリンとの間の相互作用を実証したということは、ＰＭがＣＯＸ２タンパク質のレベル、ｍＲＮＡの発現、プロモーター活性及びＰＧＥ２の産生の有意な且つ用量依存性の上昇を引き起こし、最終的にフィラグリンの下方調節を生じる証拠を提供している。
【００３２】
ヒト皮膚の反復する大気汚染への曝露もまた、角化細胞と、皮膚のメラニン産生細胞であるメラニン細胞とのクロストークに起因して色素の染みの形成を支援することが示された。
【００３３】
従って、一方では皮脂腺の皮脂産生を減らし、他方ではデスモソーム結合、接着結合及び密着結合のタンパク質を刺激することによって表皮の完全性を強化し、それによって微粒子状物質の浸透と他の脂質合成を促進する環境刺激とを減らす作用物質は特に有利である。
【００３４】
抗微生物性のペプチド及びタンパク質
【００３５】
抗微生物性のペプチド及びタンパク質（ＡＭＰ）は病原性微生物による感染から界面を保護する古風な且つ効率的な先天的防御機構である。ヒトでは、皮膚のＡＭＰは主として角化細胞、好中球、皮脂腺細胞または汗腺によって産生され、構造的にまたは炎症性刺激の後に発現される。アトピー性皮膚炎患者の皮膚病変はβ−デフェンシン及びカテリシジンＬＬ−３７の発現の低下を示す。加えて、ＡＭＰのレベルの低下は火傷及び慢性創傷に関連する。対照的にＡＭＰの過剰発現は、乾癬及び酒さ、稀に超感染を生じる炎症性皮膚疾患で見られるように、皮膚感染に対する保護の向上につながることができる。他の皮膚疾患では、例えば、尋常性座瘡の患者では、炎症または感染の皮膚部位にて高いレベルのＡＭＰが見いだされることが多いということは、感染からの保護におけるこれらのペプチドの役割を示している。広いスペクトルの抗微生物活性、細菌耐性の低い発生率及び免疫調節剤としてのその機能は、その臨床用途についてＡＭＰの魅力的な特徴である。
【００３６】
α及びβのファミリーを含むデフェンシンは哺乳類にて最大の且つ最も研究されているＡＭＰのファミリーの１つである。ヒトのデフェンシンはグラム陽性及びグラム陰性の細菌、ウイルス、真菌及び一部の原虫に対して広いスペクトルの抗微生物活性を有し、自然免疫系の重要な成分である。
【００３７】
β−デフェンシンは、皮膚、消化管、尿路及び気道を含む上皮表面を防御する抗微生物活性を持つカチオン系ペプチドである。ＤＥＦＢ１遺伝子座によってコードされるヒトβ−デフェンシン１ペプチド（ｈＢＤ−１）はグラム陽性及びグラム陰性の細菌に対して作用する。ジスルフィド結合の還元の後、ｈＢＤ−１は日和見性の病原性真菌カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する強力なＡＭＰとなる。それは、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対してＬＬ−３７またはリゾチームとの相乗効果を示す。
【００３８】
Ｓ１００タンパク質は２つのカルシウム結合ＥＦハンドモチーフを特徴とする低分子量のカチオン系タンパク質である。それらは、たとえば、カルシウム依存性の細胞のシグナル伝達、細胞増殖及び抗微生物性防御のような種々の細胞性プロセスに関与する。
【００３９】
Ｃａ２＋結合Ｓ１００タンパク質であるソリアシン（Ｓ１００Ａ７）は、乾癬病変で発見され、正常な上皮細胞にて低レベルで発現される。ソリアシンの病巣発現は皮膚、特に高密度の細菌に関連する局在で見いだされる。加えて、ペプチドは皮脂腺と同様に脂腺皮膚の表皮に蓄積し、外皮表面に分泌される。それはＥ．ｃｏｌｉに対して優先的に抗菌活性を呈する。抗微生物活性を持つＳ１００Ａファミリーの別のメンバーは、２つのカルシウム結合タンパク質Ｓ１００Ａ８及びＳ１００Ａ９のヘテロ複合体であるカルプロテクチンである。カルプロテクチンはとりわけ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐｐ．）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）及び表皮ブドウ球菌（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）に対して抗菌特性を発揮し、同様に真菌カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対して静真菌活性を発揮する。
【００４０】
アドレノメデュリン（ＡＭ）は角化細胞を含む多種多様な細胞によって産生される多機能ペプチドである。それは皮膚の増殖調節因子としての役割を有し、外皮の防御バリアにて抗微生物剤として寄与する。
【００４１】
表皮の完全性／炎症／炎症後の過剰色素沈着
【００４２】
炎症を生じる皮膚損傷は、皮脂産生を誘導するだけでなく、特に浅黒い肌（皮膚型ＩＩＩ〜ＶＩ）の人々にて炎症後の過剰色素沈着（ＰＩＨ）も生じ得る。そのような損傷は、例えば、座瘡病変である。また、大気汚染／微粒子状物質（ＰＭ）も黒皮症及び他の顔面色素異常症の発症についての病原因子として浮上する。
【００４３】
ＰＧＥ２は、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）酵素によって制御される酵素カスケードを介して生成されるアラキドン酸の最も豊富な代謝産物の１つである。ＣＯＸ−２は皮膚細胞での複数の炎症性刺激に応答して誘導される。ＰＧＥ２は、ＰＫＣ−ζ（タンパク質キナーゼＣゼータ）の活性化を生じるＧタンパク質共役受容体ＥＰ１及びＥＰ３を介してメラニン細胞におけるその効果に介在する。ＰＧＥ２はメラニン細胞樹状突起の形成及びメラノソーム輸送を刺激する。さらに、メラニン細胞におけるＣＯＸ−２のノックダウンはチロシナーゼ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、ｇｐ１００及びＭＩＴＦの発現を低下させることを示し、チロシナーゼの酵素活性も低下させた。さらに、ＣＯＸ−２のｓｉＲＮＡを形質移入したメラニン細胞は顕著に低下したα−メラニン細胞が刺激するホルモン（α−ＭＳＨ）誘導のメラニン産生を示した。
【００４４】
ＣＯＸ−２及びＰＧＥ２はＰＩＨにて重要な役割を担うことがこうして証明された。
【００４５】
化粧品及び皮膚科学の分野における微細藻類の開発に関する従来技術は幾つかの例を提供している。
【００４６】
ＦＲ２９８０６９８Ａ１（Ｇｅｌｙｍａ）は微細藻類テトラセルミス  チュイ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｃｈｕｉ）及び微細藻類フクス  スピラリス（Ｆｕｃｕｓ  ｓｐｉｒａｌｉｓ）に由来する抽出物の組み合わせた活性を活用することによる皮脂産生の調節を開示している。ミネラルの生体蓄積、現下、生体利用できる亜鉛の生体蓄積を誘導するために、制御された代謝誘導培養プロセスによるバイオテクノロジーによってテトラセルミス  チュイ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｃｈｕｉ）が得られる。従って、抽出物は亜鉛が豊富な培地での培養によって得られたテトラセルミス  チュイ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｃｈｕｉ）から調製され、１０〜２０００ｐｐｍの亜鉛含量を特徴とする。開示によれば、テトラセルミス  チュイ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｃｈｕｉ）はＴｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ（テトラセルミス・スエシカ）とはその化学組成が異なる。５α−還元酵素の阻害と同様にインターロイキン（ＩＬ）−８及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−αの阻害に起因する皮脂低減活性はテトラセルミス  チュイ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｃｈｕｉ）とフクス  スピラリス（Ｆｕｃｕｓ  ｓｐｉｒａｌｉｓ）の合わせた抽出物についてのみ示され、個々の抽出物については示されないので、それらの一方だけまたは双方がこれらの活性を示すのかどうかは明らかではない。
【００４７】
ＫＲ２０１３０１５０３７は、Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ（テトラセルミス・スエシカ）またはＣｈｌｏｒｅｌｌａ  ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ（クロレラ  アリプソイデア）から抗炎症性機能及び抗座瘡機能を持つ物質を単離するための抽出方法を開示している。有効な抽出物は微細藻類のバイオマスを脱塩し、脱水し、それを粉末に加工することによって得られる。この前処理の後、微細藻類を酢酸エチルで直接抽出する（ＴＳ−６０００）、または１％水酸化ナトリウム水溶液で抽出する（＝アルカリ抽出）。次いでアルカリ混合物をＨＣｌで中和し、抽出溶液を濾過によって分離し、酢酸エチルを加え、有機相を分離する（ＴＳ−２０００）。これら２つの親油性抽出物はマクロファージの炎症性サイトカイン、すなわち、一酸化窒素（ＮＯ）、ＩＬ−６及びＴＮＦαの分泌を阻害する。抽出物の抗座瘡効果はプロピオニバクテリウム  アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）に対する抗菌活性から推測される。皮脂低減活性を有するＴｅｔａｒｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ（テトラセルミス・スエシカ）の効能はない。
【００４８】
ＷＯ２０１６０２０３３９Ａ２（Ｃｕｔｅｃｈ）は、Ｃ１〜Ｃ４脂肪族アルコール、酢酸エチル、水またはそれらの混合物から成る群から選択される溶媒による抽出によって入手可能である、ヒト皮脂腺の代謝の調節因子としての活性を示す微細藻類、塩生植物及び砂上生植物の抽出物を開示している。明確に記載されているのは、Ｃｈｌｏｒｏｃｏｃｃｕｍ（クロロコックム）属、Ｔｈａｌａｓｓｉｏｓｉｒａ（タラシオシーラ）属、Ｍｏｎｏｄｕｓ（モノダス）属及びＣｈａｅｔｏｃｅｒｏｓ（キートケロス）属に属する微細藻類から得られた抽出物の皮脂低減活性である。Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ（テトラセルミス）からの抽出物は開示されていない。
【００４９】
ＦＲ２８９４４７３Ａ１（Ｄａｎｉｅｌ  Ｊｏｕｖａｎｃｅ）は、脂肪細胞または前脂肪細胞における脂肪酸及び脂質の代謝に関与する酵素、すなわち、アセチル補酵素Ａカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）、グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｇａ３ＰＤＨ）、脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）、リポタンパク質リパーゼ（ＬＰＬ）を阻害するための幾つかの微細藻類バイオマスのペーストまたは懸濁液（Ｃｈｒｏｍｕｌｉｎａ（ヒカリモ）、Ａｓｔｅｒｉｏｎｅｌｌａ（アステリオネラ）及びＴｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ（テトラセルミス））から得られた調製物の使用を開示している。生物学的データは提供されていない。
【００５０】
Ｃ．Ｓａｎｓｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｐｏｒｔｓ（２０１７），７，４１２１５  ＣＯＤＥＮ：ＳＲＣＥＣ３；ＩＳＳＮ：２０４５−２３２２）は、高レベルのカロテノイド、たとえば、キサントフィルルテイン、ビオラキサンチン、ネオキサンチン、アンテラキサンチン及びロロキサンチンのエステルを含有する、ならびに強力な抗酸化剤及びＨ２Ｏ２によって損傷されたヒト肺癌細胞（Ａ５４９）にてプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）のレベルを低下させる活性を含有するＴｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ（テトラセルミス・スエシカ）のエタノール／水抽出物を記載している。
【００５１】
ＵＳ２０１０１４３２６７Ａ１（Ｓｙｍｒｉｓｅ）は、角化膜タンパク質成分、たとえば、フィラグリン及び／またはインボルクリンのレベルを刺激するための、とりわけ、Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｐ（テトラセルミス属）から得られた抽出物の使用を記載している。抽出物は、Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｐ．（テトラセルミス属）、好ましくはＴｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ（テトラセルミス・スエシカ）の生存可能な凍結融解細胞または乾燥細胞をヘキサン、酢酸エチル、エタノール、水、メタノール、イソプロパノール及びこれらの抽出剤の２以上の混合物から成る群から選択される液状抽出剤で５０℃以下の温度にて最大２４時間抽出することによって得られる。実施例３３〜４０及び４１〜４８によれば、５μｇ／ｍｌでの連続エタノール抽出物が生体外ヒト皮膚にてインボルクリン及びフィラグリンを増やすために最も有効な抽出物である。
【００５２】
ＷＯ２０１７０６８４２４は、座瘡のまたは座瘡傾向がある油性肌の治療のためのジヒドロミリセチンと亜鉛塩、好ましくはグルコン酸亜鉛と、有利にはバイオカニンＡまたはバイオカニンＡを含む植物抽出物とを含む化粧品組成物または皮膚用組成物を開示している。組成物はまた、好ましくはキシリトール、ソルビトールまたはマンニトールの群から選択されるポリオールも含有することができる。この組成物におけるポリオールについて機能は与えられておらず、ポリオールがそれ自体皮脂低減活性を持つことを示していない。
【００５３】
座瘡を発症する傾向がある油性肌を管理するためにメロテルペンを含む組成物を開示しているＥＰ２５８３６６２も同じである。
【００５４】
ＷＯ２０１７１２０４６８は、約０．５％〜約８０％のイナゴマメガム、約０．５％〜約８０％のキサンタンガム、約２０％〜約８０％のマンニトール及び約０．５％〜約８０％の脱水硫酸カルシウムを含む持続放出用の送達系の一部として与えられるマンニトールによる、たとえば、アトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、湿疹、尋常性座瘡、または掻痒を合併している内臓疾患を含む掻痒状態を治療するためのナルブフィンの治療上の使用を記載している。マンニトールの皮脂低減活性に関する指示はない。
【００５５】
微細藻類の生物多様性は非常に高く、大部分が未だに不確かである：今日まで約３５，０００種の微細藻類が記載されているが、未知の種の数は２００，０００〜８００，０００とさまざまであると推定される。これら生物の適応性は、特定の及び多様化した環境応力を持続させる、または他の生物と上手く競合するのに好適な稀で且つ生物活性がある化合物をそれらが合成できるようにする。様々な生物種が様々な物質を含むことは一般に知られている。従って、１つの微細藻類種の使用によって得られる効果は異なる微細藻類種の使用によって得られる効果を予測するのに使用することはできない。
【発明の概要】
【００５６】
従って、本発明の課題は皮脂産生を減らすのに好適な新しい作用物質及び新しい作用物質を得る方法を提供することだった。
【００５７】
本発明によって解決されるべきもう１つの課題は、ヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害を治療するまたは予防するための新しい化粧用または皮膚用の組成物及び製品を得ること、ならびに化粧及び治療の応用のためのこれら組成物の使用であった。
【００５８】
本発明に関する課題は以下によって解決される。
【００５９】
テトラセルミス・スエシカ（Ｔｅｔｒａｓｅｌｍｉｓ  ｓｕｅｃｉｃａ）抽出物、その際、テトラセルミス・スエシカ抽出物は全組成の≧１０重量％で総ミネラルを含み；
テトラセルミス・スエシカ抽出物は全組成の≧５重量％でマンニトールを含み；
テトラセルミス・スエシカ抽出物は全組成の≧３重量％で遊離の及び結合したガラクトースの合計である総ガラクトースを含み；
テトラセルミス・スエシカ抽出物は全組成の≧２重量％で遊離の及び結合したグルコースの合計である総グルコースを含み；
テトラセルミス・スエシカ抽出物は全組成の≧３重量％で総アミノ酸を含み；
テトラセルミス・スエシカ抽出物は全組成の≧２重量％で総窒素を含む。成分の比率は抽出物の乾燥抽出物重量に基づく。
【００６０】
テトラセルミス抽出物を得る方法及び前記方法の生成物；テトラセルミス抽出物を得る方法は、テトラセルミスの（好ましくは生存している）凍結乾燥細胞または乾燥細胞を２−プロパノン、エタノール、水、メタノール、イソプロパノール及びこれら抽出剤の２以上の混合物から成る群から選択される液状抽出剤で抽出する工程を含み、その際、抽出は、（ａ）６０℃を超える温度での８時間までの細胞物質の抽出剤への曝露と、（ｂ）抽出物を得るための細胞物質の除去とを含む。好ましくは、抽出物は乾燥させたテトラセルミス・スエシカ抽出物であり；この場合、方法はさらに抽出する抽出剤を取り除く工程（ｃ）を含む。抽出工程はテトラセルミスの生存している凍結乾燥したまたは乾燥した細胞で実施されることが好都合である。
【００６１】
テトラセルミス抽出物を含み、且つさらにナイアシンアミドを含む組み合わせ組成物。
【００６２】
テトラセルミス抽出液の濃縮物、その際、テトラセルミス抽出液の濃縮物は０．５〜８０重量％のテトラセルミス抽出物またはテトラセルミス抽出物とナイアシンアミドの組み合わせ組成物を含み；その際、テトラセルミス抽出液の濃縮物はさらに０．５〜９０重量％の水を含み；テトラセルミス抽出液の濃縮物はさらに０．５〜９０重量％の担体を含み；テトラセルミス抽出液の濃縮物はさらに０．１〜５重量％の１以上の保存剤または保存剤システムを含む。
【発明を実施するための形態】
【００６３】
テトラセルミス・スエシカ藻類はしばらくの間、イタリアで培養されており、例えば、オルベテッロ（Ｏｒｂｅｔｅｌｌｏ）におけるイタリアの孵化場で培養されていた。さらに、異なる起源のテトラセルミス・スエシカの６つの株がＣＣＡＰ（藻類及び原虫の培養株保存施設）、例えば、ＣＣＡＰ６６／４、ＣＣＡＰ６６／２２Ａ、ＣＣＡＰ６６／２２Ｂ、ＣＣＡＰ６６／２２Ｃ、ＣＣＡＰ６６／２２Ｄ及びＣＣＡＰ６６／３８から入手可能である。しかしながら、テトラセルミス・スエシカ藻類の培養株保存施設のような他の供給源を本発明のための生物材料の潜在的供給源と見なすことができる。
【００６４】
日光または人工光のもとでの光バイオリアクターまたは大型のポリエチレンのバッグもしくはタンクにおける培養によってテトラセルミスのバイオマスを得ることができる。培養は室内または戸外で発生することができる。微細藻類バイオマスが好適な細胞密度に達すると、遠心分離または沈殿または綿状沈殿または細胞物質の完全性を保つのに好適な他の技法によってそれを回収することができる。次いで、回収したバイオマスを新鮮な状態で（生存可能で）もしくは、例えば、凍結乾燥もしくは噴霧乾燥によって乾燥させて使用するか、あるいは好適な技法によって処理する。抽出用の原料として、今までのところ、未抽出のバイオマスまたは前の抽出から、もしくは、たとえば、酢酸エチル、ヘキサン、シクロヘキサン、アセトン、二酸化炭素、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、もしくは有機溶媒の混合物のような有機溶媒による処理から生じる残留バイオマスを使用することができる。
【００６５】
特に、本発明はテトラセルミス抽出物を得る新規の方法に関する。さらに具体的には、このプロセスはテトラセルミス抽出物における着色成分を取り除く。これは抽出物における明度を高める効果を有する。
【００６６】
驚くべきことに、微細藻類テトラセルミス・スエシカの抽出物は非常に効率的に皮脂産生を減らすことが今や見いだされた。
【００６７】
さらに、驚くべきことに、テトラセルミス抽出物は、例えば、デスモソーム（「機械的」）結合、密着結合、接着結合及びギャップ結合のような細胞間接着に関連する表皮結合及び組織の完全性と同様に隣接細胞間でのイオン、セカンドメッセンジャー及び小型代謝産物の交換の許可に関与する多数の遺伝子を強力に上方調節することが見いだされた。
【００６８】
さらに、テトラセルミス抽出物は驚くべきことに、創傷治癒、組織再生及びバリア形成のような過程に関連する分化及び再上皮形成に関連する遺伝子を調節する。
【００６９】
さらに、テトラセルミス抽出物は驚くべきことに、抗微生物性ペプチドの遺伝子発現を高めた。
【００７０】
思いの外、皮膚における水／グリセロールの輸送に重要であるアクアポリン３の発現はテトラセルミス抽出物による処理によっても刺激された。
【００７１】
さらに、テトラセルミス抽出物は驚くべきことに、ＣＯＸ−２遺伝子の発現を強力に下方調節するとともにＣＯＸ−２の酵素活性を阻害することが発見されたが、それは皮脂産生の低下及び炎症過程や紅斑の抑制を生じるだけでなく、ヒト皮膚のＰＩＨに対して有益な効果を有するとも期待できる。
【００７２】
従って、第１の態様では、本発明は
（ａ）全組成の１０重量％以上の総ミネラルと、
（ｂ）全組成の５重量％以上のマンニトールと、
（ｃ）全組成の３重量％以上の、遊離のガラクトースと結合したガラクトースの合計である総ガラクトースと、
（ｄ）全組成の４重量％以上の、遊離のグルコースと結合したグルコースの合計である総グルコースと、
（ｅ）全組成の３重量％以上の総アミノ酸と、
（ｆ）全組成の２重量％以上の総窒素とを含むテトラセルミス抽出物に関する。
成分比率は抽出物の乾燥抽出物重量に基づく。
【００７３】
従って、テトラセルミス・スエシカ抽出物はその組成で従来技術と区別される。特に、公文書ＥＰ２１９３７８５Ａ２で行われたような低温での抽出の結果は本発明の高温抽出と比較して表２に示されている。この組成は糖及びアミノ酸の配分で著しい差異を示す。特に、グルコースのレベルが高温抽出についてさらに高いということは、最高水準でのたった３．５重量％と比べて全組成の４重量％を超えるグルコースの量をもたらす。
【００７４】
テトラセルミス・スエシカ抽出物は好ましくは、６０℃を上回る温度にて液状抽出剤によってテトラセルミス・スエシカの細胞を抽出することによって得られる。テトラセルミス・スエシカの細胞は好ましくは新鮮で（生存可能で）、例えば、凍結乾燥もしくは噴霧乾燥によって乾燥させて使用され、また他の好適な技法によって処理される。
【００７５】
抽出に好適な液状抽出剤は、極性溶媒、すなわち、１５を上回る誘電率を持つ溶媒である。好ましくは、テトラセルミス・スエシカ細胞の抽出は、２−プロパノン、エタノール、水、メタノール、イソプロパノール、及びこれら溶媒の２以上の混合物から成る群から選択される極性溶媒によって実施される。
【００７６】
抽出は６０℃を上回る温度にて最大８時間細胞物質を抽出剤に曝露することによって実施される。テトラセルミス・スエシカ細胞の抽出が完了した後、細胞物質を取り除いて抽出物を得る。好ましくは、抽出物は乾燥させたテトラセルミス・スエシカ抽出物である。この場合、抽出する抽出剤は抽出された物質から取り除かれる。
【００７７】
これによって、０．５〜４時間の曝露時間が好まれ、皮膚の皮脂産生を有意に減らすことができるテトラセルミス抽出物を提供する。一層さらに好ましいのは、皮脂を減らす高い能力を持つ抽出物を提供する１〜３時間の細胞物質の抽出剤への曝露時間である（操作実施例３及び６を参照のこと）。
【００７８】
得られた抽出物はまた強い濃緑色を示さないが、得られたテトラセルミス抽出物を医学用及び／または化粧用及び／または他の組成物で適用する際に好ましいベージュ色を示す（操作実施例１を参照のこと）。
【００７９】
さらに、７０℃以上の温度が好ましい。この温度は得られるテトラセルミス抽出物の皮脂低減能に有益に影響を及ぼすことが見いだされたが、テトラセルミス抽出物の好ましい着色も提供した。
【００８０】
一層さらに好ましいのは７５℃以上の曝露中の温度であり、最も好ましいのは７５〜９５℃の範囲の温度である。この温度は、着色の上で指名された利益及び皮脂低減能を提供するだけでなく、表皮結合、抗微生物性ペプチド、皮膚における水／グリセロール輸送、と同様にＣＯＸ−２の調節に関与する遺伝子の遺伝子発現に驚くべきことに影響を及ぼす特殊なテトラセルミス抽出物も提供する（操作実施例１、５、７、８、９を参照のこと）。
【００８１】
好ましくは、テトラセルミス・スエシカ抽出物は、抽出物の乾燥重量に基づいて全組成の６〜１２重量％の、一層さらに好ましくは、全組成の８〜１１重量％の間の遊離の及び結合したガラクトースの合計である総ガラクトース含量を有する。これはまた、テトラセルミス・スエシカ抽出物に基づいた化粧品及び薬物の改善された皮膚水和特性にもつながる。
【００８２】
好ましくは、テトラセルミス・スエシカ抽出物は、抽出物の乾燥重量に基づいて全組成の４〜１０重量％の、一層さらに好ましくは、全組成の６〜９重量％の間の遊離の及び結合したグルコースの合計である総グルコース含量を有する。これはテトラセルミス・スエシカ抽出物に基づいた特に化粧品及び薬物における改善された皮膚水和特性にもつながる。
【００８３】
好ましくは、テトラセルミス・スエシカ抽出物は、抽出物の乾燥重量に基づいて全組成の０．２〜１．５重量％の、一層さらに好ましくは、全組成の０．６〜１重量％の間の遊離の及び結合したアルギニンの合計である総アルギニン含量を有する。
【００８４】
好ましくは、テトラセルミス・スエシカ抽出物は、抽出物の乾燥重量に基づいて全組成の０．２〜１．０重量％の、一層さらに好ましくは、全組成の０．３〜０．５重量％の間の遊離の及び結合したアスパラギンの合計である総アスパラギン含量を有する。
【００８５】
好ましくは、テトラセルミス・スエシカ抽出物は、抽出物の乾燥重量に基づいて全組成の０．７重量％未満の、一層さらに好ましくは、全組成の０．２〜０．３重量％の間の遊離の及び結合したアスパラギン酸の合計である総アスパラギン酸含量を有する。
【００８６】
好ましくは、テトラセルミス・スエシカ抽出物は、抽出物の乾燥重量に基づいて全組成の１．０重量％未満の、一層さらに好ましくは、全組成の０．４〜０．６重量％の間の遊離の及び結合したオルニチンの合計である総オルニチン含量を有する。
【００８７】
本出願では、上記で示されたように及び本出願の全体を通して、テトラセルミス・スエシカ抽出物は好ましくは、抽出する抽出剤を部分的にまたは好ましくは完全に取り除くことによって得られる乾燥させたテトラセルミス・スエシカ抽出物である。抽出剤が部分的に取り除かれるのであれば、そのときは、残りの抽出剤は０．５〜１０重量％の間の量で抽出物に存在する。場合によっては、乾燥工程を経ないで液状のネイティブ形態でテトラセルミス・スエシカ抽出物を採用することが好ましい。あるいは、部分的に乾燥させる前に、さらなる物質、例えば、グリセリンが加えられてもよい。そのような場合、通常、その中に溶解された有効成分を伴った水性グリセリン溶媒系が達成される。
【００８８】
この抽出物は皮脂産生を減らすのに非常に効率的であることが見いだされた。これは１０〜１４重量％でマンニトールを含む抽出物について特に効果的だった。これは、そのような抽出物の皮脂低減効果を記載している操作実施例３及び６によって裏付けられている。好ましくは、抽出物は１５〜３０重量％の総ミネラルを含んだ。抽出物が７〜２０重量％の総ガラクトースを含むことも好ましい。これによって好ましい範囲内でのガラクトースの量は抽出物の保存可能期間を増やす。さらに、抽出物が５〜１３重量％の総グルコースを含有することが好まれ、それも抽出物の保存可能期間を増やしている。さらに、抽出物が少なくとも６重量％の、しかし、１６重量％以下の総アミノ酸を含有することも好ましい。最後に、抽出物が全組成の３〜７重量％の総窒素を含有することが好ましい。
【００８９】
上記に示されたように、抽出物は非乾燥ネイティブ抽出物のような液状形態で採用することもできるが、これは乾燥形態であってもよく、上記成分は乾燥抽出物に基づいて算出される。
【００９０】
第１の態様の好ましい第１の変形では、テトラセルミス・スエシカ抽出物は、
（ａ）全組成の１１〜２５重量％の総ミネラルと
（ｂ）全組成の６〜１５重量％のマンニトールと、
（ｃ）全組成の４〜１５重量％の遊離の及び結合したガラクトースの合計である総ガラクトースと、
（ｄ）全組成の４〜１０重量％の遊離の及び結合したグルコースの合計である総グルコースと、
（ｅ）全組成の４〜１０重量％の総アミノ酸と、
（ｆ）全組成の３〜５重量％の総窒素を含む。
再び、成分比率は乾燥抽出物に基づく。
【００９１】
本発明に係る抽出物は高いガラクトース及びグルコースの含量を特徴とする。加えて、室温での抽出によって得られるテトラセルミス・スエシカ抽出物と比べて、アミノ酸のうち、アルギニン及びアスパラギンが豊富である（表２を参照のこと）。豊富なアルギニン及びアスパラギンは、抽出物の皮脂低減効果にもかかわらず、その水分保持能によって表皮の皮膚水和を高めると想定される。ガラクトース及びグルコースは、アスパラギンと同様に抽出物の保存可能期間も増やす。
【００９２】
第１の態様の第１の変形に係るテトラセルミス・スエシカ抽出物はこれによって特に顕著な皮脂低減効果を有することが判明する。
【００９３】
第２の態様では、本発明は、テトラセルミスの生存可能な凍結乾燥したまたは乾燥した細胞を、２−プロパノン、エタノール、水、メタノール、イソプロパノール、及びこれら抽出剤の２以上の混合物から成る群から選択される液状抽出剤で抽出する工程を含むテトラセルミス抽出物を得る方法に関するものであり、抽出は（ａ）６０℃を上回る温度にて最大８時間の細胞物質の抽出剤への曝露と、（ｂ）抽出物を得るための細胞物質の除去とを含む。好ましくは、抽出物は乾燥させたテトラセルミス・スエシカ抽出物であり；この場合、方法はさらに、抽出する抽出剤を取り除く工程（ｃ）を含む。
【００９４】
これによって、この期間はテトラセルミス抽出物の製造時間を短縮するので製造のコスト及び尽力を軽減するだけでなく、皮膚の皮脂産生を有意に減らすことができるテトラセルミス抽出物も提供するので、０．５〜４時間の曝露時間が好ましい。
【００９５】
一層さらに好ましいのは１〜３時間の細胞物質の抽出剤への曝露時間である。これによってこの範囲内での曝露時間はさらに製造時間及び製造コストを減らすが、強い濃緑色を示さないが、得られたテトラセルミス抽出物を医学用及び／または化粧用及び／または他の組成物で適用する際に好ましいベージュ色を示す皮脂を減らす能力が高い抽出物も提供する（操作実施例３及び６を参照のこと）。
【００９６】
さらに、７０℃以上の温度が好ましい。この温度は得られるテトラセルミス抽出物の皮脂低減能に有益に影響を及ぼすことが見いだされたが、テトラセルミス抽出物の好ましい着色も提供した。
【００９７】
一層さらに好ましいのは７５℃以上の曝露中の温度であり、最も好ましいのは７５〜９５℃の範囲の温度である。この温度は、上で名付けられた着色の利益及び皮脂低減能を提供するだけでなく、表皮結合、抗微生物性ペプチド、皮膚における水／グリセロール輸送、と同様にＣＯＸ−２の調節に関与する遺伝子の遺伝子発現に驚くべきことに影響を及ぼす特殊なテトラセルミス抽出物も提供する（操作実施例１、５、７、８、９を参照のこと）。
【００９８】
抽出剤のテトラセルミスのマトリクスに対する比は好ましくは８０：１〜３：１の間である。さらに好ましくは２０：１〜８：１である。抽出剤が少ないこの相対的に低い比率は改善された脱色効果につながる。
【００９９】
特に好ましい一般的な抽出プロセスは浸軟、再浸軟、温浸、撹拌浸軟、ボルテックス抽出、超音波抽出、対向流抽出、浸透、再浸透、エバコレーション（減圧抽出）、臨界前のまたは超臨界の流体抽出、ジアコレーション、及び連続還流のもとでの固相／液相抽出である。浸透が一層さらに好まれ、有利な規模拡大特性を有することが見いだされた。
【０１００】
好ましいサイズ縮小法は凍結粉砕である。
【０１０１】
抽出プロセスのために好ましい溶媒は、水または有機溶媒、例えば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、アセトンの水との混合物である。好ましくは、６０℃を上回る、及びさらに詳しくは７０℃を上回る温度の熱湯が使用される。
【０１０２】
抽出する抽出剤を取り除く別の好ましい方法は、テトラセルミスのバイオマス／細胞の除去後に水性抽出物溶液にグリセリンを加え、水の一部を取り除くことによる。さらに好ましいのは、たとえば、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム及び乳酸のような保存剤または保存剤システムをそのとき抽出物に加えることである。
【０１０３】
任意で、抽出時間は、出発物質、抽出プロセス、抽出温度、及び溶媒の原料に対する比に応じて修正することができる。
【０１０４】
抽出プロセスの後、得られた粗精製抽出物は任意で、他の典型的な工程、例えば、精製及び／またはさらなる脱色に供されてもよい。
【０１０５】
第３の態様では、第１の態様に係るテトラセルミス抽出物は、上記に記載されているような第２の方法態様に係る本発明の方法及びその好ましい変異形によって得られる。
【０１０６】
さらに高い抽出温度での本発明の方法を適用することによって、皮膚の状態、皮膚疾患または皮膚の染みを改善するのに効果的である好都合な特性、特に好都合な組成を持つテトラセルミス抽出物を得ることが可能であった。
【０１０７】
さらに、本発明の前の態様に記載されている方法によって獲得される組成物は密着結合の動態（操作実施例１２）に有益に影響を及ぼすことができ、ヒトの皮膚における表皮結合、抗微生物性ペプチド、水／グリセロール輸送と同様にＣＯＸ−２の調節（操作実施例１、５、７、８、９）に関与する遺伝子の遺伝子発現に影響を及ぼすのに特に好適である。
【０１０８】
テトラセルミスの分類がテトラセルミス種、さらに好ましくはテトラセルミス・スエシカであることが上記に記載されているような方法及び生成物で特に好ましい。テトラセルミスは一般に好適であるけれども、皮膚の治療または予防の観察される有益な点はテトラセルミス・スエシカ抽出物について特に顕著である。
【０１０９】
ナイアシンアミドとの相乗作用
【０１１０】
ニコチンアミドとしても知られるナイアシンアミド（Ｉ）はビタミンＢファミリー、特にビタミンＢ複合体における水溶性ビタミンであり、食物で見いだされ、栄養補助食品及び肌や毛髪の手入れにおける化粧品成分として使用される。
【化１】
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【０１１１】
それは、既知の皮脂低減剤（Ｚ．Ｄ．Ｄｒａｅｌｏｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｏｓｍｅｔ  Ｌａｓｅｒ  Ｔｈｅｒ．２００６，８（２），９６−１０１）、強力な抗炎症剤及び抗座瘡剤（Ｆ．Ｍ．Ｗａｌｏｃｋｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｔｈｅｒ．２０１７，３０（５）．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｄｔｈ．１２４８１）である。ニコチンアミドはまた生体内で表皮透過バリアも改善する。
【０１１２】
本発明によれば、本発明のさらなる第４の態様は、さらにナイアシンアミドを含む、本明細書に記載されている本発明に係るテトラセルミス抽出物を含む組み合わせ組成物である。
【０１１３】
ナイアシンアミドと併用したテトラセルミス抽出物が特に良好な皮脂低減活性を示すことは予測できなかった。驚くべきことに、テトラセルミス抽出物とナイアシンアミドは皮脂腺の総脂質含量、すなわち、皮脂のレベルを高度に相乗的に低下させることが我々の実験によって見いだされた。このことは本発明の操作実施例４によって裏付けられている。ナイアシンアミドに対するテトラセルミスの強化効果は予想されていない。
【０１１４】
特に効果的なのは、組成物における併用であり、その際、テトラセルミスのナイアシンアミドに対する重量比の範囲は１：１００００〜１：１、好ましくは１：２５００〜１：１、さらに好ましくは１：５００〜１：１０、最も好ましくは１：４００〜１：３００である。再び、重量比はテトラセルミス抽出物の乾燥重量に基づいて算出される。
【０１１５】
好ましいのはテトラセルミス抽出物とナイアシンアミドとから成るまたはそれらを含む皮脂低減組成物であり、その際、テトラセルミス抽出物は最終（肌の手入れ）製品の総重量を基にして０．０１〜０．０５重量％の抽出物の量で、及びナイアシンアミドは０．５〜５重量％の量で使用される。
【０１１６】
このように調整された製剤におけるテトラセルミス抽出物及びナイアシンアミドの量は相乗的な皮脂低減能を有することが見いだされた。
【０１１７】
さらに、テトラセルミス抽出物は抽出液濃縮物の形態で使用することができる。好ましくは、本発明の第５の態様によれば、前記テトラセルミス抽出液濃縮物は、
（ａ）０．５〜８０重量％の第５の態様に係るテトラセルミス抽出物または本発明に従って上記に記載されているような組み合わせ組成物と
（ｂ）０．５〜９０重量％の水と
（ｃ）０．５〜９０重量％の担体とを含む。
重量比はテトラセルミス抽出物の乾燥重量に基づいて算出される。
【０１１８】
さらに好ましいのは０．５〜３０重量％含量の上記に記載されているようなテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物である。さらに、１０〜８０重量％の水の含量がさらに好ましく採用される。さらに、１５〜７０重量％担体の含量が好ましい。
【０１１９】
好ましくは、上記濃縮物はさらに０．１〜５重量％の１以上の保存剤または保存剤システムを含む。別の好ましい形態では、濃縮物は安定剤も含む。
【０１２０】
この量の保存剤または保存剤システムまたは安定剤が、たとえば、好ましいテトラセルミス抽出液濃縮物の皮脂除去能のような有益な特徴に否定的な影響を及ぼすことなく、第５の態様に記載されているような抽出液濃縮物の保存可能期間に対してプラスに影響を及ぼすことが見いだされたので、一層さらに好ましいのは０．５〜２重量％の１以上の保存剤または保存剤システムまたは安定剤の使用である。
【０１２１】
各成分の量はそれが化粧品規制７６／７６８ＥＥＣ及びＥＵ規制９５／１７ＥＣに準拠するように選択される。好ましくは、保存剤は化粧品規制７６／７６８ＥＥＣの付属書６パートＡ及びＢで列挙されたクラス及び化合物に従って採用される。さらに特定の好ましい保存剤は安息香酸、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、乳酸、ソルビン酸カリウム、フェノキシエタノール、またはそれらの組み合わせである。乳酸が好ましい。最も好ましいのはソルビン酸である。保存剤ブースターは好ましくは、ヒドロキシアセトフェノン、１，２−ペンタンジオール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオールまたはそれらの組み合わせである。しかしながら、１，２−ペンタンジオールは二次液状担体としてもさらに多い量で使用されてもよい。
【０１２２】
さらに好ましくは、上記濃縮物は液状または固体の濃縮物である。濃縮物が液状濃縮物であれば、それは有利に１〜７０重量％の水、さらに好ましくは３０〜６０重量％の水を含む。
【０１２３】
さらに好ましくは、テトラセルミス抽出液濃縮物は、
（ａ）０．５〜１０重量％の本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物と
（ｂ）１〜７０重量％の水と
（ｃ）０．５〜８５重量％の液状担体、好ましくはグリセリンと
（ｄ）任意で０．１〜５重量％の保存剤または保存剤システムとを含む液状テトラセルミス抽出液濃縮物である。
重量比はテトラセルミス抽出物の乾燥重量に基づいて算出される。
【０１２４】
テトラセルミス抽出液濃縮物は好ましくは、２〜３重量％のテトラセルミス抽出物質、好ましくは２．５重量％のテトラセルミス抽出物質を含む。
【０１２５】
一層さらに好ましい液状テトラセルミス抽出液濃縮物は、乾燥重量に基づいて算出された以下：
（ａ）１〜１０重量％の本明細書に記載されているようなテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物と
（ｂ）３０〜７０重量％の水と
（ｃ）２０〜６０重量％のグリセリンと
（ｄ）任意で０．１〜５重量％の１以上の保存剤または保存剤システムとを含むものである。
【０１２６】
テトラセルミス抽出液濃縮物が
（ａ）０．５〜１０重量％の本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物と
（ｂ）４０〜６５重量％の水と
（ｃ）２５〜５５重量％のグリセリンと
（ｄ）０．１〜１重量％のソルビン酸カリウムと
（ｅ）０．１〜１重量％の安息香酸ナトリウムと
（ｆ）０．１〜５重量％の乳酸とを含む液状テトラセルミス抽出液濃縮物である場合、それは特に好ましい。
重量比はテトラセルミス抽出物の乾燥重量に基づいて算出される。
【０１２７】
液状テトラセルミス抽出液濃縮物は好ましくは、抽出及び抽出物溶液由来のバイオマスの分離の後、抽出剤の部分的なまたは完全な除去、及び、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、ブチレングリコール、１，３−プロパンジオール、１，２−ペンタンジオール、１，２−ヘキサンジオール、好ましくはグリセリン、またはこれらの２以上の混合物のような液状担体の任意の添加、及び保存剤または保存剤システムの任意の添加によって作製される。そのようなシステムは任意で０．１〜５重量％の保存剤を含むことができる。
【０１２８】
液状担体１，２−ペンタンジオールは特に好ましい（ヒドロライト−５）。それは保存剤として機能することができるが、またグリセリンとの組み合わせで、１，２−ペンタンジオールは優れた液状担体の組み合わせであることが見いだされた。好ましいのは、液状担体としてのグリセリンと１，２−ペンタンジオールの組み合わせが水と一緒になって抽出液濃縮物を形成することである。
【０１２９】
（ａ）乾燥重量に基づいて算出された０．５〜１０重量％の請求項１、２、４及び７のいずれか１項に記載のテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物と
（ｂ）３０〜７０重量％の水と
（ｃ）２０〜５０重量％のグリセリンと
（ｄ）５〜２０重量％の１，２−ペンタンジオールと
（ｅ）任意で０．１〜５重量％の１以上の保存剤または保存剤システムとを含む液状テトラセルミス抽出液濃縮物。
【０１３０】
好ましくは、グリセリンの水に対する比は０．３：１〜１．２：１だった一方で、１，２−ペンタンジオールの水に対する比は０．０３：１〜０．４：１だった。
【０１３１】
本発明の濃縮物用の良好な保存剤及び特に上記システムは好ましくは乳酸と組み合わせた安息香酸ナトリウムまたはソルビン酸カリウムである。これら保存剤化合物の組み合わせはテトラセルミス抽出液濃縮物と共に上手く機能した。
【０１３２】
好ましいテトラセルミス抽出物溶液は、テトラセルミスのバイオマス／細胞の除去の後、水性抽出物溶液にグリセリンを加え、次いで水の一部を取り除くことによって得ることができる。この後、それはさらに有益であるが、例えば、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム及び／または乳酸のような保存剤または保存剤システムを加えて皮膚疾患の治療に採用することができる好ましい溶液を得るのにあらゆる場合に必要であるわけではない。
【０１３３】
従って、好ましいテトラセルミス抽出物溶液は、２〜３重量％のテトラセルミス・スエシカ抽出物質、好ましくは２．５重量％のテトラセルミス・スエシカ抽出物質と、
４０〜６０重量％の水と、３０〜５０重量％のグリセリンと、０．１〜１重量％の安息香酸ナトリウムと、０．１〜０．５重量％のソルビン酸カリウムとを含み、その際、ｐＨは追加で含まれる乳酸によって調整される。
重量比はテトラセルミス抽出物の乾燥重量に基づいて算出される。
【０１３４】
好ましいのはまた、テトラセルミス抽出液濃縮物が、
（ａ）０．５〜１０重量％の本発明に係るテトラセルミスまたは組み合わせ組成物と
（ｂ）０．５〜８重量％の水と
（ｃ）５０〜９８重量％の固形担体、好ましくはマルトデキストリンとを含む固形テトラセルミス抽出液濃縮物であることである。
重量比はテトラセルミス抽出物の乾燥重量に基づいて算出される。
【０１３５】
別の好ましい形態では、固形テトラセルミス抽出液濃縮物は保存剤または保存剤システムを含む。
【０１３６】
固形テトラセルミス抽出液濃縮物は、抽出剤の前もっての部分的除去の有無にかかわらず、抽出及び抽出溶液由来のバイオマスの分離の後、及び例えば、マルトデキストリン、デキストリンまたはシクロデキストリンのような修飾デンプン、ラクトース、修飾セルロース、キサンタンガム、ゲランガム、グアーガム、アラビアガム、ガティガム、トラガカントガムまたはローカストビーンガムのようなガム、二酸化珪素、好ましくはマルトデキストリンまたはこれらの２以上の混合物のような固形担体の任意の添加の後、例えば噴霧乾燥、凍結乾燥または真空乾燥のような好適なプロセスを用いた乾燥によって、有益に製造される。
【０１３７】
上記の液状また固形のテトラセルミス抽出液濃縮物は、最終製品の０．０００１〜１０重量％、好ましくは０．００１〜５重量％及び最も好ましくは０．００５〜３重量％の量で肌及び毛髪の手入れ及び洗浄のための化粧製品及び／または皮膚科製品及び／または医薬品で採用することができる。
【０１３８】
これら液状また固形のテトラセルミス抽出液濃縮物は良好な保管特性を示し、取り扱い易く、投与し易く及び製剤化し易いことが見いだされた。
【０１３９】
さらなる本発明の第６の態様では、特に好ましいのは、皮膚関連の疾患及び病状を治療するための薬物として使用される、本明細書に記載されているようなテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物またはテトラセルミス抽出液濃縮物である。
【０１４０】
特に好ましいのは、ヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、脂漏性皮膚炎（脂漏症）、尋常性座瘡、創傷治癒、組織再生、炎症後過剰色素沈着、炎症関連疾患、フケ、または癜風を治療するまたは予防するための薬物として使用される本明細書に記載されているようなテトラセルミス抽出物である。癜風の治療は好ましくはマラセチア菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）を減らすことによって達成される。
【０１４１】
これによって、現在の第６の態様によって記載されているようなテトラセルミス抽出物がヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、炎症関連疾患、座瘡及びフケを治療するまたは予防するための薬物として使用されることがさらに好まれ、その際、テトラセルミス抽出物が以前記載された態様に従ってテトラセルミス・スエシカから得られる抽出物であることが最も好ましい。
【０１４２】
興味深いことに、好ましくはテトラセルミス・スエシカから得られる、さらに好ましくは本発明の第２の発明態様に従って調製されるテトラセルミス抽出物はヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、炎症関連疾患、座瘡及びフケを予防するまたは治療するための薬物として使用されると特に効果的である。
【０１４３】
さらに、特に好ましいのは、ヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、脂漏性皮膚炎（脂漏症）、尋常性座瘡、創傷治癒、組織再生、炎症後過剰色素沈着、炎症関連疾患、フケ、または癜風を治療するまたは予防するための薬物として使用される、本発明によって記載されているような組み合わせ組成物である。癜風の治療は好ましくはマラセチア菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）を減らすことによって達成される。
【０１４４】
一層さらに好ましいのは、ヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、尋常性座瘡または脂漏性皮膚炎を治療するまたは予防するための薬物としての本明細書に記載されているような組み合わせ組成物の使用であり、その際、テトラセルミス抽出物が以前記載された態様に従ってテトラセルミス・スエシカから得られる抽出物であることが最も好ましい。
【０１４５】
驚くべきことに、前の発明態様によって記載されているようなナイアシンアミドとテトラセルミス抽出物との併用は、特に含有されるテトラセルミス抽出物が本発明の第２の態様に従って調製される場合、ヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、尋常性座瘡または脂漏性皮膚炎を治療するまたは予防するための薬物として使用されると特に効果的である。
【０１４６】
さらに、ヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、脂漏性皮膚炎（脂漏症）、尋常性座瘡、創傷治癒、組織再生、炎症後過剰色素沈着、炎症関連疾患、フケ、または癜風を治療するまたは予防するための薬物として使用される、本明細書に記載されているようなテトラセルミス抽出液濃縮物は特に好ましい。癜風の治療は好ましくはマラセチア菌（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）を減らすことによって達成される。
【０１４７】
これによって、テトラセルミス抽出液濃縮物はヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、炎症関連疾患、または座瘡を治療するまたは予防するための薬物として使用されることが非常に好まれ、その際、テトラセルミス抽出物は前に記載された態様に従ってテトラセルミス・スエシカから得られた抽出物であることが最も好ましい。
【０１４８】
本発明の前の発明態様に記載されているようなテトラセルミス抽出物を含むテトラセルミス抽出液濃縮物または組み合わせ組成物はヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、炎症関連疾患、または座瘡を治療するまたは予防するための薬物として使用されると効果的であることが見いだされている。これによって、テトラセルミス抽出液濃縮物は本発明の第２の態様によって請求される方法によって得られるテトラセルミス抽出物を含有することが好まれ、そのようなものとして、テトラセルミス抽出液濃縮物はヒトの毛髪及び／または皮膚の機能障害、炎症関連疾患、または座瘡を治療するまたは予防するための薬物として使用されると特に効果的である。
【０１４９】
さらに好ましいのは、本発明の係る皮膚科製品または治療用製品が、本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物またはテトラセルミス抽出液濃縮物と、皮膚疾患を治療するための任意の補助物質とを含むことである。
【０１５０】
製剤はまた、製剤の総重量に基づいて最大９９重量％、好ましくは５〜８０重量％の量で元々の抽出剤または好ましくは水のような溶媒を含有することもできる。これによって、本発明に係る製剤が、例えば、Ｗ／Ｏ（油中水）エマルション、Ｏ／Ｗ（水中油）エマルション、Ｗ／Ｏ／Ｗ（水中油中水）エマルション、Ｏ／Ｗ／Ｏ（油中水中油）エマルションであることが一層さらに好ましい。溶媒はまた、上記に示されている量での溶媒系であってもよく、グリセリンをある程度含有してもよい。
【０１５１】
補助物質及び添加剤は、製剤の総重量に基づいて０．１〜９９重量％、好ましくは１〜９０重量％、好ましくは６０〜８０重量％の量で含まれ得る。
【０１５２】
補助物質及び／または添加剤は、冷却剤、成膜物質、抗酸化剤、ビタミン類、２−ヒドロキシカルボン酸、皮膚着色剤、皮膚保湿物質、脂肪／脂肪酸、蝋状物質または化粧製剤もしくは皮膚科製剤の従来の構成成分、例えば、アルコール、ポリオール、ポリマー、泡状安定剤、電解物質、有機溶媒、シリコーン誘導体またはキレート剤、芳香剤、発泡を防ぐ物質、染料、着色作用を有する顔料、増粘剤、表面活性物質、乳化剤、植物の一部及び植物抽出物、動物抽出物、プロポリス、タンパク質、タンパク質加水分解物及び酵母抽出物の群の１以上から選択されることが好ましい。
【０１５３】
これによって、成膜物質が、例えば、ポリビニルピロリドンまたはキトサンまたはその誘導体から選択されること、
ビタミン類が、例えば、ビタミンＣ及び誘導体、トコフェロール及び誘導体、ビタミンＡ及び誘導体から選択されること、
２−ヒドロキシカルボン酸が、例えば、クエン酸、リンゴ酸、Ｌ−、Ｄ−またはｄｌ−乳酸から選択されること、
皮膚着色剤がクルミ抽出物またはジヒドロキシアセトンから選択されること、
皮膚保湿剤が、例えば、グリセロールまたは尿素から選択されること、
脂肪酸が、モノ飽和またはポリ飽和脂肪酸またはα−ヒドロキシ酸またはポリヒドロキシ脂肪酸またはそれらの誘導体、例えば、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸またはアラキドン酸及びそれらの天然のまたは合成のエステルのいずれかから、またはそれらの亜群の組み合わせから選択されること、
キレート剤が、例えば、エチレンジアミン四酢酸及び誘導体から選択されること、
増粘剤が、二酸化珪素、珪酸アルミニウム、例えば、ベントナイト、多糖類またはその誘導体、例えば、ヒアルリン酸、グアーガム、キサンタンガム、ヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはアルロース誘導体、特に有利にはポリアクリレート、例えば、カルボポールまたはポリウレタンから選択されること、
植物の一部及び植物抽出物が、例えば、アルニカ、アロエ、サルオガセ、ツタ、イラクサ、チョウセンニンジン、ヘナ、カモミール、マリーゴールド、ローズマリー、セージ、ツクシ、カラスムギ、ショウガ、ホップ、コムギまたはタイムのいずれかから、またはそれらの組み合わせから選択されることは、前記化合物群が補助物質及び／または添加剤として採用される場合、特に好ましい。
【０１５４】
さらなる第７の発明態様では、我々は化粧品を提示する。特に好ましいのは、本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物またはテトラセルミス抽出液濃縮物と、任意で補助物質及び／または芳香剤とを含む化粧品であり、その際、化粧品はヒトの肌及び／または毛髪の手入れ用の製品である。
【０１５５】
さらに好ましいのは、以前言及されたような皮膚科製品または治療用製品または本発明に係る化粧品が製品の総重量に基づいて０．０００１〜１０重量％、好ましくは０．００５〜３重量％の量のテトラセルミス抽出物またはテトラセルミス抽出液濃縮物を製品にて含むことである。重量比はテトラセルミス抽出物の乾燥重量に基づいて算出される。
【０１５６】
さらに、上記に記載されているような皮膚科製品または治療用製品で採用されるテトラセルミス抽出物またはテトラセルミス抽出液濃縮物は本発明の第２の態様に従って調製されることが好ましい。さらに、前記テトラセルミス抽出物または前記テトラセルミス抽出液濃縮物はテトラセルミス・スエシカから調製されることが好ましい。
【０１５７】
別の好ましい変形では、本発明は、肌及び／または毛髪を手入れする、洗浄する、日光から保護するまたは保護する適用のための本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物またはテトラセルミス抽出液濃縮物の非治療上の使用または化粧用の使用に言及する。
【０１５８】
本発明に係る好ましい組成物は肌及び／または毛髪の治療、保護、手入れ及び洗浄のための、または化粧製品としての、着けたまま製品または洗い流し製品としての、最も好ましくは着けたまま製品としての製品の群から選択される。
【０１５９】
本発明に係る製剤は好ましくはエマルションの形態である。
【０１６０】
これによって、本発明に係る製剤は、例えば、Ｗ／Ｏ（油中水）エマルション、Ｏ／Ｗ（水中油）エマルション、Ｗ／Ｏ／Ｗ（水中油中水）エマルション、Ｏ／Ｗ／Ｏ（油中水中油）エマルション、ＰＩＴエマルション、Ｐｉｃｋｅｒｉｎｇエマルション、油含量の低いエマルション、マイクロエマルションまたはナノエマルション、例えば、製造方法及び成分に依存した油（脂肪油または脂肪酸エステル、特にＣ６〜Ｃ３２−脂肪酸、Ｃ２〜Ｃ３０−エステルまたはシリコーン油）における溶液、分散液、懸濁液、クリーム、ローションまたはミルク、ゲル（ヒドロゲル、ハイドロ分散ゲル、オレオゲルを含む）、スプレー（例えば、ポンプスプレーまたは高圧ガスによるスプレー）または化粧拭き取りのための泡状物または浸漬溶液、界面活性剤、例えば、石鹸、合成界面活性剤、液状洗浄剤、シャワー及び風呂の調製物、風呂製品（カプセル、油、錠剤、塩、バスソルト、石鹸、等）、発泡性製剤、肌の手入れの製品、例えば、エマルション（上記に記載されているような）、軟膏、ペースト、ゲル（上記に記載されているような）、油、バルサム、血清、粉末（例えば、顔面粉末、身体粉末）、トニック、マスク、ペン、スティック、ロールオン、ポンプ、エアゾール（発泡性、非発泡性または発泡後）、脱臭剤及び／または制汗剤、口内洗浄液及び洗口液、足の手入れ製品（角質溶解剤、脱臭剤を含む）、防虫剤、日焼け止め、日焼け後製剤、髭剃り製品、髭剃り後バルム、髭剃り前及び髭剃り後のローション、脱毛剤、毛髪の手入れ製品、例えば、シャンプー（２成分入りシャンプー、フケ防止シャンプー、ベビーシャンプー、頭皮用シャンプー、濃縮シャンプーを含む）、コンディショナー、ヘアトニック、ヘアウォーター、ヘアリンス、スタイリングクリーム、ポマード、パーマ及びセット用のローション、ヘアスプレー、スタイリング助剤（例えば、ジェルまたはワックス）、ヘアスムージング剤（もつれた髪をほぐす作用剤、縮毛矯正剤）、毛髪染料、例えば、一時的に直接染める毛髪染料、半永続的な毛髪染料、永続的な毛髪染料、ヘアコンディショナー、ヘアムース、眼の手入れ製品、化粧品、化粧除去剤またはベビー製品であることが一層さらに好ましい。
【０１６１】
本発明に係る製剤は特に好ましくは、エマルションの形態、特に、Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ／Ｗ、Ｏ／Ｗ／Ｏエマルションの形態、ＰＩＴエマルション、Ｐｉｃｋｅｒｉｎｇエマルション、油含量の少ないエマルション、マイクロエマルションまたはナノエマルション、ゲル（ヒドロゲル、ヒドロ分散ゲル、オレオゲルを含む）、界面活性剤（例えば、石鹸、合成界面活性剤、液状洗浄剤）、溶液（例えば、トニック、顔面トナーまたはウェットティッシュ用の含侵溶液として）、スプレー（例えば、ポンプスプレーまたは高圧ガスによるスプレー）またはシャンプー（２成分入りシャンプー、フケ防止シャンプー、ベビーシャンプー、敏感頭皮用シャンプー、濃縮シャンプーを含む）、コンディショナー、ヘアトニック、ヘアマスクまたはヘアウォーターの形態である。
【０１６２】
別の好ましい第８の態様では、我々は皮脂を減らすための本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物またはテトラセルミス抽出液濃縮物の化粧用の使用を記載している。
【０１６３】
本発明のさらに好ましい第９の態様は
（ａ）皮膚接合部の刺激、
（ｂ）皮膚の抗微生物性ペプチドの刺激、
（ｃ）ＣＯＸ−２遺伝子の発現及びプロスタグランジンが介在する効果の低減、
（ｄ）炎症後の過剰色素沈着の低減、
（ｅ）フィラグリンの刺激
のための本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物またはテトラセルミス抽出液濃縮物の使用である。
【０１６４】
好ましくは、本発明に係るテトラセルミス抽出物または組み合わせ組成物またはテトラセルミス抽出液濃縮物は、
（ａ）皮膚の表皮完全性の改善のために、
（ｂ）例えば、大気汚染または微粒子状物質が誘導する影響のような外部刺激を防ぐために
（ｃ）皮膚バリアの機能障害を防ぐために
美容上使用される。
【０１６５】
代替の好ましい変形は、さらに以下：他の皮脂低減剤、抗ニキビ剤、フケ防止剤、他の抗炎症剤、ＴＲＰＶ１アンタゴニスト、かゆみ止め剤、抗微生物剤、特に、抗プロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）剤、抗マラセチア（Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ）剤の１以上を含む本発明に係る治療用製品または化粧品である。
【０１６６】
我々は現在、本発明に従って本明細書に記載されているような任意の疾患の、特に皮膚疾患のための治療にて薬物として使用するために前の変形に従って治療用製品も開示している。
【０１６７】
我々は現在、本発明に従って本明細書に記載されているような非治療上の応用での、特に皮膚の保護のための使用のための上記で言及したような化粧品も開示している。
【０１６８】
製剤では、特にそれらが異なる経路を介して作用するのでさらに顕著な活性が期待できるならば、テトラセルミス抽出物を他の皮脂低減剤及び／または抗ニキビ剤と併用してもよい。皮膚の脂漏性状態は細菌及び真菌の増殖にとって、その結果、不純な皮膚または座瘡の発症にとって理想的な栄養媒体であるので、油性肌の予防及び／または治療のための組成物は同様に不純な皮膚または座瘡の予防及び／または治療のための好ましい組成物である。好適な作用物質は、例えば、１３−シス−レチノイン酸（イソトレチノイン）、全トランス−レチノイン酸のようなレチノイド、アダパレン、その塩または誘導体、スピロノラクトン及びシプロテロンのようなアンドロゲン阻害剤、抗生剤、好ましくは、クリンダマイシン、エリスロマイシン及びテトラサイクリン、亜鉛または亜鉛塩、及び抗アンドロゲン、５−α−還元酵素阻害剤、Ｄ−パンテノール、α−ヒドロキシ酸、例えば、サリチル酸及び乳酸、ピルビン酸（α−ケト酸）、脂肪族ジカルボン酸、例えば、アゼライン酸、Ｌ−カルニチン、バクチオール、１，２−デカンジオール、センキュノリド−Ａ及びセンキュノリド−Ａ含有のＡｐｉｕｍ  ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ種子油、Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ抽出物、Ｅｎａｎｔｉａ  ｃｈｌｏｒａｎｔｈａ樹皮抽出物、Ｓｐｉｒａｅａ  ｕｌｍａｒｉａ抽出物、ブチルアボケート、ビタミンＢ６（ピリドキシンとしても知られる）またはその塩または誘導体、ビタミンＢ３（ナイアシンまたはニコチン酸としても知られる）またはその塩または誘導体、ベンゾイルペルオキシド、フロレチン、Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ抽出物及び含有されるポリフェノール、例えば、エピガロカテキン−３−没食子酸、アカツメクサ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ  ｐｒｅｔｅｎｓｅ）抽出物、ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  Ｓｏｊａ）種子抽出物、イソフラボノイドまたはイソフラボノイド含有抽出物、好ましくはバイオカニンＡ、ゲニステイン、ゲニスチン及びダイジンである。
【０１６９】
好ましくは、皮膚の皮脂濃度の低減のための製剤用の好ましい補助物質、添加剤及び／または活性化合物と組み合わせた上述の製品群も、油性肌、不純な皮膚または座瘡の予防及び／または治療のための製剤として好ましい。
【０１７０】
局所塗布用の好ましい化粧上または治療上の皮膚科製剤は、以下の構成成分を含む、または以下：皮膚の皮脂濃度を低下させるのに十分である量のテトラセルミス、特にテトラセルミス・スエシカ、と同様に１以上の活性化合物から成る。さらに好ましくは、前記製剤は２、３、または４の活性化合物の組み合わせを含む。
【０１７１】
好ましくは、活性化合物は以下の群：抗アンドロゲン、イソフラボノイド含有抽出物、レチノイド、ビタミン、有機ペルオキシド、有機エーテル、有機酸またはアルコールにおける化合物クラスの１以上から選択される。
【０１７２】
さらに好ましくは、活性化合物は、１，２−デカンジオール、バクチオール、サリチル酸、乳酸、アゼライン酸、レチノイド、好ましくは１３−シス−レチノイン酸（イソトレチノイン）、全トランス−レチノイン酸、アダパレン、その塩または誘導体、ベンゾイルペルオキシド、Ｄ−パンテノール、ビタミンＢ６（ピリドキシンとしても知られる）またはその塩、例えば、ピリドキシン・ＨＣｌまたは誘導体、ビタミンＢ３（ナイアシンまたはニコチン酸としても知られる）またはその塩または誘導体、ブチルアボケート、ファルネソール、フェノキシエタノール、アカツメクサ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ  ｐｒｅｔｅｎｓｅ）抽出物、イソフラボノイドまたはイソフラボノイド含有抽出物、好ましくは、バイオカニンＡ、ゲニステイン、ダイゼイン、ゲニスチン及びダイジン、及び抗アンドロゲン、好ましくは、５−α−還元酵素阻害剤から選択される。
【０１７３】
一層さらに好ましくは、１以上の活性化合物は、１，２−デカンジオール、サリチル酸、乳酸、アゼライン酸、ベンゾイルペルオキシド、Ｄ−パンテノール、１３−シス−レチノイン酸（イソトレチノイン）、全トランス−レチノイン酸、アダパレン、その塩または誘導体、バクチオール、エリスロマイシン、イオウ、ブチルアボケート、ファルネソール、フェノキシエタノール、ピリドキシン・ＨＣｌ、アカツメクサ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ  ｐｒｅｔｅｎｓｅ）抽出物、バイオカニンＡ、ゲニステイン、ダイゼイン、ゲニスチン、ダイジン、及び５−α−還元酵素阻害剤から成る群から選択される。
【０１７４】
一層さらに好ましい１以上の活性化合物は、１，２−デカンジオール、サリチル酸、アゼライン酸、ベンゾイルペルオキシド、Ｄ−パンテノール、１３−シス−レチノイン酸（イソトレチノイン）、全トランス−レチノイン酸、アダパレン、その塩または誘導体、バクチオール、エリスロマイシン、ブチルアボケート、フェノキシエタノール、ピリドキシン・ＨＣｌ、アカツメクサ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ  ｐｒｅｔｅｎｓｅ）抽出物、バイオカニンＡ、ゲニステイン、ダイゼイン、及び５−α−還元酵素阻害剤から成る群から選択される。
【０１７５】
最も好ましい１以上の活性化合物は、１，２−デカンジオール、サリチル酸、アゼライン酸、ベンゾイルペルオキシド、Ｄ−パンテノール、アダパレン、バクチオール、エリスロマイシン、ブチルアボケート、ピリドキシン・ＨＣｌ及びバイオカニンＡから成る群から選択される。
【０１７６】
さらに、活性化合物としてナイアシンを含むことは非常に好ましい。
【０１７７】
好ましくは、１以上の活性化合物はフケ防止活性剤と組み合わせられる。特にこれらが異なる生物学的経路を介して作用するならば、さらに顕著な全体的な効果が見いだされる。フケ防止剤は、アゾール類、例えば、クリンバゾール、ケトコナゾール、イトラコナゾール、エコナゾール及びエルビオール；ヒドロキシピリドン類、例えば、オクトピロックス（ピロクトンオラミン）、シクロピロックス、リロピロックス及びＭＥＡ−ヒドロキシオクチルオキシピリジノン；角質溶解剤、例えば、サリチル酸及び他のヒドロキシ酸；ストロビルリン類、例えば、アゾキシストロビン及び金属キレート剤、例えば、１，１０−フェナントロリンから成る群から選択される１つの物質または混合物であってもよい。
【０１７８】
実施形態では、アゾール抗微生物剤は、ベンズイミダゾール、ベンゾチアゾール、ビフォナゾール、ブタコナゾール硝酸塩、クリンバゾール、クロトリマゾール、クロコナゾール、エベルコナゾール、エコナゾール、エルビオール、フェンチコナゾール、フルチマゾール、イソコナゾール、ケトコナゾール、ラノコナゾール、メトロニダゾール、ミコナゾール、ネチコナゾール、オモコナゾール、オキシコナゾール硝酸塩、セルタコナゾール、スルコナゾール硝酸塩、チオコナゾール、チアゾール、及びそれらの混合物から成る群から選択されるイミダゾールであり、またはアゾール抗微生物剤はテルコナゾール、イトラコナゾール及びそれらの混合物から成る群から選択されるトリアゾールである。
【０１７９】
実施形態では、好ましいフケ防止剤は０．１重量％〜１０重量％の量で、さらなる実施形態では、０．２５重量％〜８重量％、その上さらなる実施形態では、０．５重量％〜６重量％の量で存在してもよい。
【０１８０】
本発明に係るテトラセルミス抽出物に由来するまたはそれに基づく製品及び濃縮物は、室温で液体または結晶性であり、且つ紫外線放射を吸収することができ、長波放射線の形態で吸収されたエネルギーを放出することができる日焼け防止因子、例えば、有機物質（光フィルター）、例えば、二酸化チタン（ＴｉＯ２）または酸化亜鉛（ＺｎＯ）のような熱フィルターまたは無機ＵＶフィルターと組み合わせてもよい。
【０１８１】
本発明に係る、好ましい化粧用の組成物及び製品、好ましくは、局所製剤は４−アミノ安息香酸及び誘導体、サリチル酸誘導体、ベンゾフェノン誘導体、ジベンゾイルメタン誘導体、アクリル酸ジフェニル、３−イミダゾール−４−イルアクリル酸及びそのエステル、ベンゾフラン誘導体、マロン酸ベンジリデン誘導体、１以上のオルガノシリコンラジカルを含有するポリマーＵＶ吸収剤、桂皮酸誘導体、カンファー誘導体、トリアニリノ−ｓ−トリアジン誘導体、２−ヒドロキシフェニルベンゾトリアゾール誘導体、フェニルベンズイミダゾールスルホン酸誘導体及びその塩、アントラニル酸メンチルエステル、ベンゾトリアゾール誘導体及びインドール誘導体から成る群から選択される１、２、３以上の日焼け止め因子を含む。
【０１８２】
本発明に係る製剤及び製品は少なくとも１つのＵＶ−Ａフィルター及び／または少なくとも１つのＵＶ−Ｂフィルター及び／または広帯域フィルター及び／または少なくとも１つの無機顔料を有利に含有する。本発明に係る製剤は好ましくは少なくとも１つのＵＶ−Ｂフィルターまたは広帯域フィルター、さらに特に好ましくは少なくとも１つのＵＶ−Ａフィルター及び少なくとも１つのＵＶ−Ｂフィルターを含有する。
【０１８３】
本発明に係る製剤及び製品では、テトラセルミス抽出物は、好ましくはそれらの作用物質が座瘡関連のＰ．ａｃｎｅｓ及び／またはフケ関連のＭａｌａｓｓｅｚｉａ  ｓｐに作用するＣＯＸ−２／ＰＧＥ２及び／または抗ニキビ剤及び／または抗微生物剤とは異なる経路を介して作用するならば、抗炎症剤または刺激抑制剤と組み合わせてもよい。製剤が不純な皮膚、座瘡傾向があるもしくは座瘡の油性肌または敏感な油性肌または敏感な油性頭皮またはフケでの使用を対象とするならば、これらの組み合わせは特に有益である。
【０１８４】
本発明の組成物及び製品は、抗炎症性成分及び／または赤み及び／または痒みを改善する成分を含有してもよく、特に、抗炎症性有効成分または発赤及び痒みを緩和する有効成分として有利に使用され、そのリストは他のステロイド性抗炎症剤の添加によって拡大することができるハイドロコルチゾン、デキサメタゾン、デキサメタゾンリン酸塩、メチルプレドニゾロン、またはコルチゾンから成る群から選択されるコルチコイド型のステロイド性物質を含有してもよい。非ステロイド性抗炎症剤も使用することができる。ここで引用することができるその例は、オキシカム類、例えば、ピロキシカムまたはテノキシカム；サリチル酸塩、例えば、アスピリン、ジサルシド、ソルプリンまたはフェンドサル；酢酸誘導体、例えば、ジクロフェナク、フェンクロフェナク、インドメタシン、スリンダック、トルメチンまたはクリンダナク；フェナメート類、例えば、メフェナミック、メクロフェナミック、フルフェナミックまたはニフルミック；プロピオン酸誘導体、例えば、イブプロフェン、ナプロキセン、ベノキサプロフェンまたはピラゾール類、例えば、フェニルブタゾン、オキシフェニルブタゾン、フェブラゾンまたはアザプロパゾンである。アントラニル酸誘導体、特にＷＯ２００４０４７８３３Ａ１に記載されているアベナンスラミドは本発明に係る組成物における好ましい抗痒み成分である。
【０１８５】
有用であるのはまた、炎症及び／または発赤及び／または痒みを緩和する物質または物質の混合物の天然のまたは天然に存在する抗炎症剤／抗刺激剤の混合物、特に、カモミール、Ａｌｏｅ  ｖｅｒａ、Ｃｏｍｍｉｐｈｏｒａ種、Ｒｕｂｉａ種、ヤナギ、ヤナギ−ハーブ、カラスムギ、キンセンカ、アルニカ、セイヨウオトギリソウ、セイヨウスイカズラ、ローズマリー、Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａ  ｉｎｃａｒｎａｔａ、マンサク、ショウガまたはＥｃｈｉｎａｃｅａに由来する抽出物または分画；好ましくはカモミール、Ａｌｏｅ  ｖｅｒａ、カラスムギ、キンセンカ、アルニカ、セイヨウスイカズラ、ローズマリー、マンサク、ショウガまたはＥｃｈｉｎａｃｅａに由来する抽出物または分画から成る群から選択され、及び／または純粋な物質、天然のα−ビサボロール、合成のビサボロール、アピゲニン、アピゲニン−７−グルコシド、ギンゲロール、ショガオール、ジンジャージオール、デヒドロジンジャージオン、パラドール、特に天然のまたは合成の６−パラドール、天然に存在するアベナンスラミド、好ましくはアベナンスラミドＡ、アベナンスラミドＢ、アベナンスラミドＣ、アベナンスラミドＤ、アベナンスラミドＥ、非天然のまたは天然に存在しないアベナンスラミド、好ましくはジヒドロアベナンスラミドＤ、ジヒドロアベナンスラミドＥ、トラニラスト、ボスウェリン酸、フィトステロール、グリシリジン、グラブリジン、スクラレオリド及びリコチャルコンＡであり；好ましくは、天然のα−ビサボロール、合成のビサボロール、天然のアベナンスラミド、非天然のアベナンスラミド、好ましくはジヒドロアベナンスラミドＤ（ＷＯ２００４０４７８３３Ａ１に記載されているような）、ショウガ抽出物、ギンゲロール、ショガオール、ジンジャージオール、デヒドロジンジャージオン、パラドール、特に天然のまたは合成の６−パラドール、ボスウェリン酸、フィトステロール、グリシリジン、及びリコチャルコンＡ、及び／またはアラントイン、スクラレオリド、パンテノール、（偽−）セラミド［好ましくはセラミド２、ヒドロキシプロピルビスパルミタミドＭ  ＥＡ、セチルオキシプロピルグリセリルメトキシプロピルミリスタミド、Ｎ−（ｌ−ヘキサデカノイル）−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（１−ヘキサデシル）エステル、ヒドロキシエチルパルミチルオキシヒドロキシプロピルパルミタミド］、フィトステロール、キトサン、及びβ−グルカン、特にカラスムギ由来の１，３−１，４−グルカンから成る群から選択される。
【０１８６】
本発明に係る製剤または製品における抗刺激物質または抗炎症性物質の総量は好ましくは、それぞれ製剤または製品の総重量に基づいて０．０００１〜２０重量％、好ましくは０．０００１〜１０重量％、特に０．００１〜５重量％の範囲である。
【０１８７】
一過性受容体電位カチオンチャネルサブファミリーＶメンバー１（ＴＲＰＶ１）アンタゴニスト
【０１８８】
本発明の製品と組み合わせることができる好適な化合物は、ＴＲＰＶ１アンタゴニストのようなその作用に基づいて皮膚神経の過敏症を軽減するようなものであり、これらには好ましくは、例えば、ＷＯ２００９０８７２４２Ａ１に記載されているようなトランス−４−ｔｅｒｔ−ブチルシクロヘキサノール、またはμ−受容体の活性化によるＴＲＰＶ１の間接的なモジュレーターである、例えば、アセチルテトラペプチド−１５が含まれる。
【０１８９】
発明製剤におけるテトラセルミス抽出物はフケ防止剤と組み合わせてもよい。好適なフケ防止剤は、ピロクトンオラミン（１−ヒドロキシ−４−メチル−６−（２，４，４−トリメチルペンチル）−２−（１Ｈ）−ピリジノンモノエタノールアミン塩）、バイピバル（クリンバゾール）、Ｋｅｔｏｃｏｎａｚｏｌ（登録商標）（２ＲＳ，４ＳＲ）−１−（４−｛４−［−２−（２，４−ジクロルフェニル）−２−（イミダゾール−１−イルメチル）−１，３−ジオキソラン−４−イルメトキシ］フェニル｝ピペラジン−１−イル）エタノン、ケトコナゾール、エルビオール、二硫化セレニウム、コロイド状イオウ、イオウポリエチレングリコールソルビタンモノオレエート、イオウリシノールポリエトキシレート、イオウタールジスチレート、サリチル酸（またはヘキサクロロフェンとの併用で）、ウンデシレン酸、スルホコハク酸モノエタノールアミドＮａ塩、ラメポンＳ（タンパク質／ウンデシレン酸縮合物）、亜鉛ピリチオン、アルミニウムピリチオン及びマグネシウムピリチオン／ジピリチオン硫酸マグネシウムである。
【０１９０】
局所塗布用のさらに好ましい化粧製剤は以下の構成成分を含む、または以下の構成成分から成る：
−皮膚の皮脂濃度を下げるのに十分である量のテトラセルミス抽出物；
−１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０以上の、好ましくは２以上の、さらに好ましくは３以上の洗浄補助物質；
−任意で１以上のさらなる補助物質及び／または添加剤。
そのような化粧製剤は脂ぎった油性肌及び／または不純な皮膚を洗浄するのに特に好適である。
【０１９１】
製剤では、本発明のテトラセルミスの抽出物及び製品はまた、特にこれらが皮膚を守るための追加の局所物理的バリアを提供するので、成膜剤と組み合わせてもよい。例えば、ＰＭのような外的刺激は皮脂産生を高め、バリアの機能障害につながるので、それらは、特に有益であるテトラセルミス抽出物の表皮完全性改善効果を増大させるであろう。
【０１９２】
典型的な成膜剤は、例えば、キトサン、微細結晶キトサン、四級化キトサン、ポリビニルピロリドン、ビニルピロリドン／酢酸ビニルコポリマー、アクリル酸系列のポリマー、四級セルロース誘導体、コラーゲン、ヒアルロン酸及びその塩、カラスムギ由来の１，３−１，４−グルカンまたは酵母もしくはキノコ由来の１，３−１，６−グルカンのようなβ−グルカン及び類似の化合物である。
【実施例】
【０１９３】
実験セクション
【０１９４】
実施例１：テトラセルミス・スエシカ抽出物の調製
【０１９５】
３ｇの凍結乾燥したテトラセルミス・スエシカのバイオマスと３０ｇの水とを混合し、８０℃で２時間撹拌した。バイオマスから液状抽出物を分離し、抽出したバイオマスに３０ｇの水を加え、混合物を８０℃でさらに２時間撹拌した。遠心分離によって液体をバイオマスから分離し、双方の抽出溶液を合わせ、凍結乾燥によって水を取り除いた。抽出は３つの異なるバイオマスのバッチで実施した。
【０１９６】
比較のために、ＵＳ２０１０１４３２６７Ａ１での記載に係る水性抽出物を同じ３つのバイオマスのバッチから調製し、水は凍結乾燥によって取り除いた。
【表１】
2022500349.tif 000003
【０１９７】
加熱した抽出は室温での抽出と比べると、十分に同等のごくわずかに少ない高い抽出収率が得られるが、驚くべきことに、はるかに明るい色合いの抽出物が得られ、それは、消費者が着色の少ない製品の方を好むので化粧品成分としての使用には特に有利である。熱処理は、バイオマスにおける酵素が不活化されるという追加の利点を有し、それは、生存可能なまたは不活化していないバイオマスを使用する場合、特に有利である。さらに、低温での水によるまたは水含量の高い抽出剤システムによる抽出にとって特に難題である細菌、真菌または酵母による微生物汚染が高温（＞５０℃）にて抽出することによって阻止される。
【表２】
2022500349.tif 000004
【０１９８】
ＲＴと８０℃での抽出物についての値を比較すると、特定の成分は保存されるのに対して他は低温抽出でそれぞれ変化することが明らかである。特に、ガラクトース及びグルコースの含量は有意に異なる（それぞれ、７．８から９．７重量％に及び３．５から７．０重量％に増えている）。また、特定のアミノ酸、例えば、アルギニン及びアスパラギンの含量も有意に上昇している（それぞれ、０．１７から０．８重量％に及び０．１９から０．３９重量％に）。一部の他のアミノ酸は選択的に低下し、例えば、アスパラギン酸は０．７６重量％から０．２７重量％に低下し、オルニチンは１．２６重量％から０．５４重量％に低下している。ほとんどの無機物成分はリン酸塩を除いて全体として保存されている。
【０１９９】
実施例２：テトラセルミス・スエシカ抽出物の液体型の調製
【０２００】
実施例１に従って８０℃での抽出で得られた４．６ｇのテトラセルミス・スエシカ抽出物の乾燥物質に、１．９７ｇの水と７９ｇのグリセリン（９９．５％）と０．５％の安息香酸ナトリウムと０．２％のソルビン酸カリウム（双方とも液体混合物の総重量に基づく）とを加え、混合物のｐＨを乳酸の助けを借りて４．５に合わせ、屈折率（ｎ２０／Ｄ）が１．３９６でマンニトール含量が０．２９％の黄色っぽいベージュから薄茶色の溶液を得た。
【０２０１】
別の液体型については、実施例１に従って８０〜９０℃での抽出で得られた２５ｇのテトラセルミス・スエシカ抽出物の乾燥物質を４８３ｇの水と３９２ｇのグリセリン（９９．５％）に溶解し、１００ｇの１,２−ペンタンジオール（ヒドロライト−５）を加えた。薄黄緑色の透明からやや濁った溶液が得られた。Ｌ＊ａ＊ｂ＊カラーシステムに係る色彩：Ｌ＊８８．４、ａ＊−１３．６、ｂ＊４７．５、ｐＨ７．６、マンニトール含量：０．２８％。
【０２０２】
実施例３：生体外ヒト皮脂腺の総脂質含量に対するテトラセルミス・スエシカ抽出物（乾燥した）の効果
【０２０３】
ヒト皮膚外植片から微細に切り出したヒト皮脂腺の器官培養を行って、実施例１での記載に従って調製したテトラセルミス・スエシカ抽出物の皮脂レベルに対する調節活性を評価した。抽出物は乾燥形態で採用する。
【０２０４】
全層皮膚試料の表皮を取り除いた後、微細ハサミと外科用メスを用いて皮脂腺を慎重に取り出した。次いで、微細切断した皮脂腺を８つの群にプールし、５００μＬの改変Ｗｉｌｌｉａｍ’ｓＥ培地に浸した２４穴プレートにて最大６日間培養した。２４時間の順化の後、培養培地を交換し、調べる抽出物を含有する培地に置き換えた。培養の３日目と５日目に培地を新しくした。６日目に腺を回収し、脂質及びタンパク質の定量に使用した。バイオマスで変動する腺の推定生産性を同等にするために、それらの皮脂総含量を概算し、腺組織から抽出したタンパク質で割って、産生された皮脂と組織タンパク質との間で比（すなわち、脂質のｍｇ／タンパク質のｍｇ）を得た。
【０２０５】
そうするために、１００μＬのイソプロピルアルコールにて皮脂腺群をホモジネートして、脂質を抽出し、タンパク質を不溶にした。遠心分離の後、抽出した皮脂を含有する上清を回収し、分析した。真空乾燥エバポレーターを用いて残りのペレットを乾燥させ、次いで５０μＬのタンパク質溶解緩衝液の存在下でバラバラにした。適当なインキュベート時間の後、この抽出混合物を遠心分離し、上清を回収し、分析した。直接検出ＩＲ分光計（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いた赤外線分光分析によって、イソプロピルアルコールに溶解した脂質及び溶解緩衝液に溶解したタンパク質を定量した。定量したタンパク質に対して定量した脂質を基準化することによって脂質総量を得た（すなわち、脂質のｍｇ／タンパク質のｍｇ）。処理群から得た、皮脂腺の各群によって産生された基準化された脂質、すなわち、皮脂の量を未処理対照群のそれと比較し、調節活性を比率で算出した。陽性対照として５μＭのカプサイシン処理を実験設定に含めた。カプサイシンは皮脂生成を阻害するのに好適な唐辛子の有効成分である［Ｔoｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍ．（２００９），１２９：３２９−３３９］。統計的解析については、並べ替え検定を伴う一元配置分散分析とそれに続くＤｕｎｎｅｔｔの並べ替え検定によって群間差異を評価した。
【０２０６】
抽出物への反応をさらに良好に理解するために、器官培養の１日目と６日目で生死判別試験を行った。レザズリンをウェルに加え（１：１１）、２時間インキュベートした。インキュベートの終了時、等量の培地を蛍光計（励起：５６０ｎｍ、放射：５９０ｎｍ）で読み取った。残留するレザズリンを排除するために、次いで培地を正常培地に２時間置き換えた。この後、試験試料を含有する培地で培地を再び置き換えた。各ウェルにおける生存性は６日目と１日目との間での比率の差異として測定した。
【０２０７】
ドナーの応答性及び個体間の変動性を評価するために、３人の異なるドナーの皮膚試料から得た皮脂腺で抽出物を調べた。
【表３】
2022500349.tif 000005
【０２０８】
結果は、８０℃での抽出によって得られたテトラセルミス・スエシカ水抽出物（乾燥させた）が驚くべきことに、その生存性に影響を及ぼすことなくヒト皮脂腺の基準化した総脂質、すなわち、皮脂含量の非常に有効な低減剤であることを示している。それは陽性対照であるカプサイシンよりも効果的であり、５倍低い濃度でさえ有効である。さらに、３人のドナーすべてから得られた皮脂腺は抽出物に反応した（ドナー応答性：１００％）。
【０２０９】
実施例４：生体外ヒト皮脂腺の総脂質含量に対するテトラセルミス・スエシカ抽出物（乾燥させた）とナイアシンアミドの相乗効果
【０２１０】
実施例３に記載されているものと同じ実験設定を用いてテトラセルミス・スエシカ抽出物とナイアシンアミドの併用を相乗活性について評価した。
【０２１１】
相乗作用指数ＳＩの算出にはＫｕｌｌの方程式：
ＳＩ＝Ｃ×Ｄ／Ａ＋Ｃ×Ｅ／Ｂを使用したが、
その際、
Ａ＝濃度ｘでのテトラセルミス・スエシカ抽出物による脂質の低減
Ｂ＝濃度ｙでのナイアシンアミドによる脂質の低減
Ｃ＝濃度ｘ／２でのテトラセルミス・スエシカ抽出物と濃度ｙ／２でのナイアシンアミドの組み合わせによる脂質の低減
Ｄ＝テトラセルミス・スエシカ抽出物についての≧０．５（併用で調べた半分濃度に起因して）の係数
Ｅ＝ナイアシンアミドについての≧０．５（併用で調べた半分濃度に起因して）の係数
２つの併用した成分の相加活性についてはＳＩ＝１が得られるのに対してＳ＜１は拮抗活性（観察された有効性が相加より低い）を示し、ＳＩ＞１は相乗活性（観察された有効性が相加より高い）を示す。この実験の結果を表４に要約する。
【表４】
2022500349.tif 000006
【０２１２】
１．６７４という得られたＳＩは、テトラセルミス・スエシカ水抽出物とナイアシンアミドの併用が驚くべきことに、ヒト皮脂腺の脂質総含量、すなわち、皮脂レベルを相乗的に低減することを明瞭に証明している。
【０２１３】
実施例５：ヒト皮脂腺細胞の遺伝子発現に対するテトラセルミス・スエシカ抽出物（乾燥させた）の効果
【０２１４】
供給業者の指示書に従って、皮膚初代ヒト皮脂腺細胞（Ｚｅｎ−Ｂｉｏから購入した、白人ドナーの顔面（Ｔゾーン）局在に由来する）を皮脂基本培地にて５％ＣＯ２、３７℃で培養した。８０℃での抽出によって実施例１に従って得たテトラセルミス・スエシカ水抽出物の０．０１％及び０．１％で、または溶媒対照としてのＤＭＳＯで皮脂腺細胞を２４時間処理した。各実験は３つ組で実施した。抽出物で処理した細胞におけるゲノムの標的発現レベルをＤＭＳＯ処理と比べてＲＴ−ｑＰＣＲによって測定した。
【０２１５】
抽出物によって２４時間刺激した皮脂腺細胞由来のｍｉＲＮＡを伴った全ＲＮＡを製造元の指示書に従ってＱｉａｑｕｉｃｋ  ＲＮＡ単離キット（Ｑｕｉａｇｅｎ由来）を用いて抽出し、精製した。ｍＲＮＡの目的定量については、製造元の指示書に従ってＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ  ＶＩＬＯ  ｃＤＮＡ合成キット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）によって全ＲＮＡを逆転写した。単離したＲＮＡの純度は分光光度計：２６０／２８０比≧１．５〜２（ＲＮＡ抽出物はタンパク質混入物を含まない）によって決定した。ＲＱ値を算出し、結果を内在性対照ＧＡＰＤＨの発現に対して基準化した。対応のない両側ｔ検定（＊ｐ値＜０．０５）を用いて統計的解析を行った。この実験の結果を表５に要約する。
【表５】
2022500349.tif 000007
【０２１６】
結果は、テトラセルミス・スエシカ水抽出物が脂肪酸、トリグリセリド及びコレステロールの産生に関与する遺伝子の大半を抑制し、それによって皮脂腺細胞の脂質、すなわち、皮脂の産生を低減することを明瞭に示している。分析され、脂質の合成及び貯蔵ならびに皮脂腺サイズを調節することが知られる主要な経路が含まれる。
【０２１７】
乾燥テトラセルミス・スエシカ水抽出物は、脂質の産生及び貯蔵に関与する遺伝子、例えば、脂肪酸（ＳＲＥＢＦ１、ＳＣＤ、ＡＰＯＣ１）、トリグリセリド（ＤＧＡＴ１）及びコレステロール（ＡＣＡＴ１）に関与する遺伝子を調節することができ、且つアジポネクチン（ＡＤＩＰＯＲ１、ＡＰＰＬ１）、ＬＸＲ／ＲＸＲ／ＰＰＡＲＡ（ＳＲＥＢＰＦ１、ＮＨ１Ｈ３（ＬＸＲａ）、ＡＣＡＴ１、及びプロスタグランジン（ＰＴＳＧ２（ＣＯＸ２））を含む専用の経路を調節することができる。
【０２１８】
０．０１％でのテトラセルミス・スエシカ水抽出物による処理は７つの遺伝子（ＡＰＯＣ１、ＳＲＥＢＰＦ１、ＡＰＰＬ１、ＡＤＩＰＯＲ１、ＭＧＡＴ１、ＡＣＡＴ１、ＰＴＳＧ２（ＣＯＸ−２））を統計的に下方調節した。
【０２１９】
０．１％での乾燥テトラセルミス・スエシカ水抽出物による処理は８つの遺伝子（ＳＲＥＢＦ１、ＮＲ１Ｈ３（ＬＸＲａ）、ＡＰＰＬ１、ＡＤＩＰＯＲ１、ＤＧＡＴ１、ＭＧＡＴ１、ＳＣＤ、ＰＴＳＧ２（ＣＯＸ−２）を統計的に下方調節した。
【０２２０】
抽出物は、脂肪酸産生（ＳＲＥＢＦ１、ＳＣＤ、ＡＰＯＣ１）、ジグリセリド（ＭＧＡＴ１）、トリグリセリド（ＤＧＡＴ１）及びコレステロール（ＡＣＡＴ１）に関与する遺伝子を抑制することによって脂質産生を低減することができる。
【０２２１】
ＩＧＦ−１はヒト皮脂腺細胞における脂質合成の誘導にて役割を担っている。ＳＥＢ−１皮脂腺細胞では、ＩＧＦ−１は脂肪酸合成の遺伝子を優先的に調節するＳＲＥＢＦ１の誘導によって脂質生成を高める。
【０２２２】
ＳＣＤは皮脂腺にて高度に発現されている；ＳＣＤは飽和脂肪酸、パルミチン酸（１６：０）及びステアリン酸（１８：０）のそれぞれシス−モノ不飽和脂肪酸（ＭＵＦＡ）、パルミトレイン酸（１６：１ｎ７）及びオレイン酸（１８：１ｎ９）への変換を主として触媒するΔ９脂肪酸不飽和化酵素である。ＭＵＦＡは、皮脂の成分であるトリグリセリド、コレステロールエステル及び蝋エステルの形成にて重要なエステル化基質として役立つ。
【０２２３】
ＡＰＯＣ１を過剰発現するトランスジェニックマウスは皮脂腺形成不全及び高トリグリセリド血症を有した。
【０２２４】
ＤＧＡＴ１はトリグリセリド合成の最終で且つ律速の工程を触媒する。
【０２２５】
ＭＧＡＴ１はタンパク質結合性及び脂質結合性のオリゴ糖の合成に関与する。アシル−ＣｏＡ：モノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＭＧＡＴ）遺伝子は腸管における脂肪吸収でのその役割で最もよく知られる。ＭＧＡＴ１は脂肪アシル−ＣｏＡをジアシルグリセロールに取り込むことによってジアシルグリセロール合成を触媒することに特異的なＭＧＡＴ活性を哺乳類の細胞株で示すことが示されている。
【０２２６】
ＡＣＡＴ１は遊離のコレステロールからのコレステリルエステルの形成を触媒する酵素であり、皮脂腺で高度に発現され、そこでそれはコレステリルエステルの細胞質脂質液滴への取り込みを可能にする。
【０２２７】
脂質の産生及び貯蔵を誘導する主要な経路はＬＸＲ／ＲＸＲ／ＰＰＡＲＡ及びアジポネクチンである。実際、ＬＸＲリガンドによるＳＺ９５皮脂腺細胞の処理は細胞にて脂質液滴の蓄積を高め、アジポネクチンで処理した皮脂腺細胞では脂質合成が顕著に高められることが示された。従って、ＬＸＲ／ＲＸＲ／ＰＰＡＲＡ経路の活性化に関与する核受容体をコードするＮＲ１Ｈ３（ＬＸＲａ）は抽出物によって抑制される。
【０２２８】
アジポネクチン経路の活性化に関与するアジポネクチン受容体ＡＤＩＰＯＲ１及びそのリガンドＡＰＰＬ１も低減される。皮脂腺細胞の３Ｄ培養では、アジポネクチンで処理した皮脂腺細胞にて脂質合成が顕著に高められた。
【０２２９】
ＰＴＧＳ２（ＣＯＸ−２）の遺伝子発現レベルで顕著な効果が驚くべきことに観察された。ＰＴＧＳ２（ＣＯＸ−２）は皮脂腺細胞の機能で重要な役割を担う。シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）を過剰発現するトランスジェニックマウスは皮脂腺過形成に起因して高い皮脂レベルを示した。従って、ＰＴＧＳ２（ＣＯＸ−２）の低減は皮脂腺サイズ及び皮脂産生の低減につながると期待することができる。
【０２３０】
実施例６：テトラセルミス・スエシカ抽出物（乾燥させた）による生体内皮脂の低減
【０２３１】
２群の１５人の白人志願者による無作為顔面分割試験がそれぞれ行われた。志願者は自宅にて額半分の双方に試験品を１日２回（朝夕）４週間塗布した。試験品は実施例１に従って８０℃での抽出によって調製した０．０５％のテトラセルミス・スエシカ抽出物を伴った及び伴わないヒドロ分散ゲルだった。陽性対照／参照として、ヒドロ分散ゲルにて製剤化した２％ナイアシンアミドと１％Ｄ−パンテノールの組み合わせ（Ｚ．Ｄ．Ｄｒａｅｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｃｏｓｍｅｔ．Ｌａｓｅｒ  Ｔｈｅｒ．２００６，８：２，９６−１０１）を使用した。読み出しは随時皮脂レベル（皮脂計）であり、皮脂の表面比率及び活発な毛穴の数（双方ともＳｅｂｕｆｉｘ（登録商標）ホイルを備えたＶｉｓｉｏｓｃａｎ（登録商標））及び読み取りはベースライン（ｔ０）で及び４週後（ｔ１）に行った。
【表６】
2022500349.tif 000008
【０２３２】
結果は生体内でもテトラセルミス・スエシカ水抽出物の強力な皮脂低減活性を明瞭に表している。３つの読み出し（−１０．８％の随時皮脂レベル、−３１．３％の皮脂表面比率及び−２５．７％の活発な毛穴の数）すべてを有意に低減した抽出物は最良の活性がある。陽性対照／参照である２％ナイアシンアミドと１％Ｄ−パンテノールの組み合わせは随時皮脂レベルを−１６．５％有意に低減したが、皮脂表面比率及び活発な毛穴の数では有意な低減を得ることができなかった。プラセボは３つの読み出しのいずれにも有意な効果を有さなかった。
【０２３３】
実施例７：ヒト角化細胞の遺伝子発現に対するテトラセルミス・スエシカ抽出物（乾燥させた）の効果
【０２３４】
供給業者の指示書に従ってＨＫＧＳキット（Ｇｉｂｃｏ）を含むＥｐｉＬｉｆｅ培地（Ｇｉｂｃｏ）にて５％ＣＯ２、３７℃でヒト新生児表皮角化細胞（ｎＨＥＫ）を培養した。
【０２３５】
８０℃で抽出することによって実施例１に従って得た０．０２５％のテトラセルミス・スエシカ水抽出物でまたは溶媒対照としての培地で細胞を２４時間処理した。抽出物で処理した細胞におけるゲノムの目的発現レベルを培地処理と比べてＲＴ−ｑＰＣＲによって測定した。
【０２３６】
ＲＮｅａｓｙ（登録商標）ミニキット、Ｑｉａｇｅｎを用いてＲＮＡの単離が行われた。２６０ｎｍでの吸収を測定することによって、μＣｕｖｅｔｔｅＧ１．０及びＢｉｏＰｈｏｔｏｍｅｔｅｒ，Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆを用いて全ＲＮＡ濃度を測定した。Ｅ２６０／２８０及びＥ２６０／２３０のような純度制御値を同時に算出した。供給業者の指示書に従って、高性能ＲＮＡ−ｔｏ−ｃＤＮＡキット，Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓを用いて逆転写を行った。ＰＣＲサーモサイクラー、Ｂｉｏｍｅｔｒａにて試料を処理した。
【０２３７】
迅速リアルタイムＰＣＲについては、ＲＮＡ分解酵素を含まない水とＴａｑＭａｎＴＭ  Ｆａｓｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ，Ａｐｐｌｉｅｄ  ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓでｃＤＮＡを希釈した。ＳｔｅｐＯｎｅ  Ｐｌｕｓ  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ，Ａｐｐｌｉｅｄ  ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓを用いて定量リアルタイムＰＣＲを行った。解析はＳｔｅｐＯｎｅソフトウェア及び２−ΔＣＴ法で行った（内在性の対照ＨＴＲＰ１の発現に対して基準化した）。
【０２３８】
上方調節については≧２．０のＲＧ値及び下方調節については＜０．５のＲＱ値が適切であると見なされる。
【表７ａ−１】
2022500349.tif 000009
【表７ａ−２】
2022500349.tif 000010
【０２３９】
結果は、テトラセルミス抽出物が驚くべきことに、細胞間接着に関連するデスモソーム（「機械的」）結合、接着結合及びギャップ結合のような表皮結合、ならびに皮膚細胞における隣接細胞間でのイオン、セカンドメッセンジャー及び小分子代謝物の交換の許容に関与する多数の遺伝子を上方調節することを明瞭に示している。これらの接着構造は細胞の構造及び完全性に必須であるだけでなく、組織の発達及び形態形成にも必須である。デスモソーム内での突然変異は、例えば、多数の皮膚脆弱性疾患の根底にある原因である。
【０２４０】
さらに、分化、再上皮形成及び水／グリセロール輸送に関連する遺伝子はテトラセルミス抽出物による処理によって調節される。
【０２４１】
別の実験では、８０℃または室温（１８〜２３℃）で抽出することによって微細藻類バイオマスの異なるバッチから実施例１に従って得た０．０２５％の乾燥テトラセルミス・スエシカ水抽出物または溶媒対照としての培地で細胞を２４時間処理した。抽出物で処理した細胞における選択した遺伝子のゲノムの目的発現レベルを上記に記載されているような培地処理と比較してＲＴ−ｑＰＣＲによって測定した。
【表７ｂ】
2022500349.tif 000011
【０２４２】
結果は、６つの遺伝子（ＫＲＴ１、ＫＲＴ１０、ＣＳＰ１４、ＤＣＳ１、ＤＳＰ、ＣＴＮＮＢ１）が８０℃で調製された抽出物によって上方調節されたのに対して室温で調製した抽出物は効果を有さなかったことを示している。選択した遺伝子のうち６つ（ＳＰＲＲＡ１、ＳＰＲＲ１Ｂ、ＤＳＧ１、ＣＬＤＮ１、ＯＣＬＮ、ＣＧＮ）は双方の抽出物によって上方調節された。
【０２４３】
実施例８：ＡＭＰの遺伝子発現に対するテトラセルミス・スエシカ抽出物（乾燥させた）の効果
ＨａＣａＴ角化細胞をＥｐｉＬｉｆｅ培地（Ｇｉｂｃｏ）にて５％ＣＯ２、３７℃で培養した。
【０２４４】
８０℃で抽出することによって実施例１に従って得た０．０５％の乾燥テトラセルミス・スエシカ水抽出物でまたは溶媒対照としての培地で細胞を２４時間処理した。抽出物で処理した細胞における選択した遺伝子のゲノムの目的発現レベルを培地処理と比較してＲＴ−ｑＰＣＲによって測定した。
【０２４５】
ＲＮｅａｓｙ（登録商標）ミニキット、Ｑｉａｇｅｎを用いてＲＮＡの単離が行われた。２６０ｎｍでの吸収を測定することによって、μＣｕｖｅｔｔｅＧ１．０及びＢｉｏＰｈｏｔｏｍｅｔｅｒ，Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆを用いて全ＲＮＡ濃度を測定した。Ｅ２６０／２８０及びＥ２６０／２３０のような純度制御値を同時に算出した。供給業者の指示書に従って、ＲＮＡ−ｔｏ−ｃＤＮＡキット，Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓを用いて逆転写を行った。ＰＣＲサーモサイクラー、Ｂｉｏｍｅｔｒａにて試料を処理した。
【０２４６】
迅速リアルタイムＰＣＲについては、ＲＮＡ分解酵素を含まない水とＴａｑＭａｎＴＭ  Ｆａｓｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ，Ａｐｐｌｉｅｄ  ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓでｃＤＮＡを希釈した。ＳｔｅｐＯｎｅ  Ｐｌｕｓ  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ，Ａｐｐｌｉｅｄ  ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓを用いて定量リアルタイムＰＣＲを行った。解析はＳｔｅｐＯｎｅソフトウェア及び２−ΔＣＴ法で行った（内在性の対照ＨＴＲＰ１の発現に対して基準化した）。
【０２４７】
上方調節については≧２．０のＲＧ値及び下方調節については＜０．５のＲＱ値が適切であると見なされる。
【表８】
2022500349.tif 000012
【０２４８】
結果は、テトラセルミス抽出物が驚くべきことに、皮膚細胞における例えば、β−デフェンシン、アドレノメデュリン及びソリアシンのような抗微生物性ペプチドの遺伝子発現も上方調節することを明瞭に示している。
【０２４９】
実施例９：シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）−２阻害アッセイ
【０２５０】
ＣＯＸ−２はプロスタグランジン、例えば、ＰＧＥ２の合成のための誘導性律速酵素である。ＣＯＸ−２／ＰＧＥ２は角化細胞及び皮脂腺細胞によって発現される。被験物質である乾燥テトラセルミス・スエシカ水抽出物をアッセイ緩衝液（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、１００ｍＭ）に溶解し、９６ウェルのハーフエリアマイクロプレートに入れる。補酵素ＨＥＭＥと蛍光分析基質１０−アセチル−３,７−ジヒドロキシ−フェノキサニン（ＡＤＨＰ）とＣＯＸ−２とを加える。マイクロプレート振盪器上で６００ｒｐｍにて２分間ハーフエリアマイクロプレートをインキュベートする。その後、基質アラキドン酸を加える。ＣＯＸ−２はアラキドン酸をプロスタグランジンエンドペルオキシドＧ２（ＰＧＧ２）に変換する。ＰＧＧ２は対応するアルコールＰＧＨ２に還元される。この反応の間にＡＤＨＰは蛍光レゾルフィンを生じる。５３５ｎｍの励起波長及び５９０ｎｍの発光波長にてレゾルフィンを定量する。
【０２５１】
被験物質の存在下でのＣＯＸ−２活性の阻害は、以下の方程式：
ＣＯＸ−２の阻害［％］＝１００−［（レゾルフィン被験物質−ＣＯＸ−２なしでのレゾルフィン対照）／（レゾルフィン対照−ＣＯＸ−２なしでのレゾルフィン対照）×１００］
に従って算出した。
略記は以下の意味を有する：
レゾルフィン被験物質：被験物質とＣＯＸ−２とを伴ったウェルにおけるレゾルフィン濃度
レゾルフィン対照：被験物質を含まないが、ＣＯＸ−２を含むウェルにおけるレゾルフィン濃度
ＣＯＸ−２なしでのレゾルフィン対照：被験物質もＣＯＸ−２も含まないウェルにおけるレゾルフィン濃度
結果は少なくとも２つの独立した実験に由来する平均値である。
【表９】
2022500349.tif 000013
【０２５２】
結果は、テトラセルミス抽出物がＣＯＸ−２酵素活性も阻害することを示している。
【０２５３】
実施例１０：生体外のヒト皮膚―フィラグリン
【０２５４】
培養培地（改変Ｗｉｌｌｉａｍ’ｓＥ培地）に接触したステンレス鋼の穴あきリングの空気・液体界面にておよそ８×３ｍｍ（φ×厚さ）の皮膚試料を最大６日間培養した。２４時間の順化の後、８０℃で抽出することによって実施例１に従って得た乾燥テトラセルミス・スエシカ水抽出物を０．３ｐｐｍでまたは溶媒対照としての培地をヒト皮膚外植片（各処理当たり６つの外植片）に局所で塗布した。培養の６日目、皮膚試料を適当な媒体に包埋し、液体窒素で凍結した。特異的な免疫蛍光染色に供したクリオスタット切片でフィラグリンの定量分析を行った。処理当たり１２の皮膚切片を選択した抗体（フィラグリン：ウサギポリクローナル、ＳａｎｔａＣｒｕｚ）で免疫染色した。蛍光顕微鏡を用いて各切片を撮影し、得られた画像を解析した。表皮（角質層を除く）内での染色の強度及び分布を評価することによって各スライドに存在する抗原の量を評価した。次いで得られたデータを基底膜の長さに対して基準化した。
【表１０】
2022500349.tif 000014
【０２５５】
結果は、テトラセルミス・スエシカ抽出物が局所塗布の後、生体外のヒト皮膚の表皮フィラグリンのレベルを高めることを明瞭に示している。
【０２５６】
実施例１１：生体外のヒト皮膚―粒子状物質（ＰＭ）が誘導するバリアの損傷
【０２５７】
ディーゼル微粒子状物質によって誘導される皮膚バリアの損傷に対するテトラセルミス・スエシカ水抽出物（乾燥させた）の保護効果を評価するために、生体外ヒト皮膚外植片を使用した。Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌ（登録商標）１６５０ｂは米国標準技術局（ＮＩＳＴ）から入手し、ディーゼル微粒子状物質及び類似のマトリクスにおける選択された多環式芳香族炭化水素（ＰＡＨ）及びニトロ置換ＰＡＨ（ニトロ−ＰＡＨ）の測定用の分析法を評価することでの使用を目的とする。それは、粒子蓄積の２００運転時間の後、希釈管設備の熱交換機から回収された。種々の条件下で作動する幾つかの直接噴射４サイクルのディーゼルエンジンを使用してこの微粒子状物質を生成し、それは頑丈なディーゼルエンジンの粒子放出の代表であるはずである。培養培地（改変Ｗｉｌｌｉａｍ’ｓＥ培地）に接触したステンレス鋼の穴あきリングにて環境湿度でおよそ８×３ｍｍ（φ×厚さ）の皮膚試料を最大３日間培養した。１６５０ｂをＰＢＳに懸濁した。０．０１％及び０．０５％の乾燥テトラセルミス・スエシカ水抽出物を伴わない（プラセボ）及び伴ったヒドロ分散ゲルを製剤化した（表１２）。２４時間の順化の後、皮膚外植片に製剤を局所で塗布し、その後、それらを乾燥させるためにインキュベータの外側で微粒子状物質１６５０ｂを９０分間適用した。その後、ディーゼル微粒子を１０μｇ／ｃｍ２で処理した及び未処理の皮膚に局所で適用した。製剤の塗布及び１６５０ｂによる処理は毎日新しくした。
【０２５８】
３日目に、皮膚外植片を回収し、皮膚バリアの特性を評価した。ローダミンＢはインタクトの皮膚に浸透できないので、ローダミンＢが表皮内部で検出されればされるほど、皮膚バリアの損傷は大きい。従って、皮膚外植片をローダミンＢで染色し、その後の画像の取得と解析のために凍結固定し、クリオスタットで切断した。ローダミンＢの蛍光の解析は表皮領域内で実施した。各皮膚外植片について、２枚の切片を利用し、蛍光画像を取得した。各画像について、イメージＪアプリケーション（ＮＩＨ、ＵＳＡ）を介して蛍光を評価することによって真皮上層を解析した。次いで、得られた値を選択した領域の寸法に対して基準化した。
【表１１】
2022500349.tif 000015
【表１２】
2022500349.tif 000016
【０２５９】
予想通り、微粒子状物質１６５０ｂはローダミンＢの皮膚への浸透を有意に高めたので皮膚バリアの損傷を有意に高めた。
【０２６０】
プラセボは１６５０ｂ単独処理に対してローダミンＢの浸透の１５％の低下につながった。テトラセルミス・スエシカ抽出物は、１６５０ｂ単独処理に対して３０及び４５％の及びプラセボ＋１６５０ｂの処理に対して１９及び３５％のローダミンＢの浸透の用量依存性の低下につながった。
【０２６１】
実施例１２：ＴＥＥＲアッセイ
【０２６２】
経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）は上皮単層の細胞培養モデルにて密着結合動態に完全性を測定するための広く受け入れられている定量法である。ＴＥＥＲの値は細胞バリアの完全性または強度の強力な指標である。組織の高い抵抗は高い密度の結果である。従って、高い抵抗は改善された皮膚バリアに関係する。
【０２６３】
０．４７ｃｍ２の細胞培養インサートにてインサート当たり１．５×１０５個の細胞の濃度でヒト新生児表皮角化細胞（ｎＨＥＫ）を播いた。細胞培養培地との４日間のインキュベートの後、実施例１にある記載に従って調製したテトラセルミス・スエシカ抽出物を以下でリストにしたように最終体積で細胞培養培地内に８日間体系的に適用した。物質の処理に続いて、ＴＥＥＲを測定した。細胞培養培地を対照として使用した。
【０２６４】
【表１３】
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【０２６５】
結果は、テトラセルミス・スエシカ抽出物が未処理（培地対照）と比べるとＴＥＥＲ値を高めたことを明瞭に示している。
【０２６６】
実施例１３：製剤化実施例
製剤１〜２２では、以下の２つの香油ＰＦＯ１及びＰＦＯ２を芳香剤としてそれぞれ使用した（ＤＰＧ＝ジプロピレングリコール）。
【表１４】
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【０２６７】
【表１５】
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【表１６−１】
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【表１６−２】
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【表１６−３】
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【表１６−４】
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【表１６−５】
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【表１６−６】
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【表１６−７】
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【表１６−８】
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【表１６−９】
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【表１６−１０】
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【表１７−１】
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【表１７−２】
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【表１７−３】
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【表１７−４】
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【表１７−５】
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【表１７−６】
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【表１７−７】
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【表１７−８】
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【国際調査報告】
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