【手続補正書】
【提出日】平成22年2月10日(2010.2.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号：１もしくは配列番号：２に示されるヌクレオチド配列またはその相補体を含むＤＮＡ分子。
【請求項２】
配列番号：３、配列番号：４もしくは配列番号：５に示されるヌクレオチド配列またはその相補体を含む、請求項１のＤＮＡ分子。
【請求項３】
配列番号：５で示されるヌクレオチド配列またはその相補体を含む、請求項２のＤＮＡ分子。
【請求項４】
請求項１から３のいずれかに記載のＤＮＡ分子を含むトランスジェニックトウモロコシ植物細胞。
【請求項５】
請求項１から３のいずれかに記載のＤＮＡ分子を含むトランスジェニックトウモロコシ植物またはその一部。
【請求項６】
請求項５に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物の種子であって、当該ＤＮＡ分子を含む種子。
【請求項７】
トランスジェニックトウモロコシ植物またはその一部であって、前記トウモロコシ植物の種子は、受入番号PTA-7455としてAmerican Type Culture Collectionに寄託されている、トランスジェニックトウモロコシ植物またはその一部。
【請求項８】
Cry2AbをコードするＤＮＡならびに配列番号：１および配列番号：２のヌクレオチド配列を有するＤＮＡが、前記トウモロコシ植物またはその一部の細胞におけるゲノムの一部を形成している、昆虫抵抗性トウモロコシ植物またはその一部。
【請求項９】
Cry1A.105をコードするＤＮＡをさらに含む、請求項８に記載の昆虫抵抗性トウモロコシ植物またはその一部。
【請求項１０】
請求項８または９に記載の昆虫抵抗性トウモロコシ植物の種子であって、Cry2AbをコードするＤＮＡならびに配列番号：１および配列番号：２のヌクレオチド配列を有するＤＮＡを含む、種子。
【請求項１１】
請求項５に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物またはその一部に由来する組成物であって、検出可能な量の前記ＤＮＡ分子を含み、コーンミール、コーン油、コーンケーキ、トウモロコシ種子、トウモロコシ胚芽、コーンスターチ、トウモロコシ粉、トウモロコシ花粉、トウモロコシ花柱、コーン浸出液、コーンモルト、コーンシュガー、コーンシロップ、コーン油から生産されるマーガリン、乾燥蒸留粕（ＤＤＧＳ）、化粧品およびバルキング剤よりなる群から選択される商品生産物である、組成物。
【請求項１２】
昆虫抵抗性トウモロコシ植物を作出する方法であって、
（ａ）請求項５に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物と、異なるトウモロコシ植物とを交配し；
（ｂ）工程（ａ）の交配に由来する少なくともひとつの子孫植物を得；ついで、
（ｃ）配列番号：１および配列番号：２に示されるヌクレオチド配列を含む子孫を選択することを含み、ここに、選択される子孫が昆虫抵抗性トウモロコシ植物である、方法。
【請求項１３】
前記選択工程（ｃ）が、工程（ｂ）で得られた少なくともひとつの子孫植物を核酸増幅反応に付し、配列番号：１または配列番号：２に示される少なくとも一つのヌクレオチド配列を含むアンプリコンを生成する子孫を選択するか、または、工程（ｂ）で得られた少なくともひとつの子孫植物をハイブリダイゼーション反応に付し、ストリンジェントな条件下において、配列番号：１および配列番号：２よりなる群から選択される１以上のＤＮＡ配列とハイブリダイズするプローブにハイブリダイズする子孫を選択することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
昆虫抵抗性トウモロコシ植物を作出する方法であって、
（ａ）トウモロコシ植物細胞を請求項１から３のいずれかに記載のＤＮＡ分子で形質転換し；ついで、
（ｂ）前記ＤＮＡ分子を含み、かつ、昆虫抵抗性であるトウモロコシ植物を、前記形質転換細胞から再生することを含む方法。
【請求項１５】
昆虫の侵入からトウモロコシ植物を保護するための方法であって、鱗翅目害虫の食餌中に、請求項５、７、８および９のいずれかに記載のトランスジェニックトウモロコシ植物またはその一部の細胞または組織を殺虫的に有効な量提供することを特徴とする方法。
【請求項１６】
前記鱗翅目害虫が、ヨトウムシ（Spodoptera frugiperda）、アワノメイガ（Ostrinia nubilalis）、オオタバコガ（Helicoverpa zea）、トウモロコシノメイガ（Diatraea grandiosella）およびタマナヤガ（Agrotis ipsilon）よりなる群から選択される請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
第１のＤＮＡ分子および第２のＤＮＡ分子を含むＤＮＡ分子対であって、いずれのＤＮＡ分子も、配列番号：３もしくは配列番号：５またはその相補体の十分な長さの連続的なヌクレオチドであって、トウモロコシ植物MON89034またはその子孫から抽出されたＤＮＡに対する診断であるＤＮＡプライマーまたはプローブとして機能する、ＤＮＡ分子対。
【請求項１８】
第１のＤＮＡ分子が、配列番号：３もしくは配列番号：５またはその相補体の導入遺伝子領域の任意の部分の連続した１１以上のヌクレオチドを含み、第２のＤＮＡ分子が、配列番号：３またはその相補体の５’フランキングトウモロコシゲノムＤＮＡ領域の同様の長さを含む、請求項１７に記載のＤＮＡ分子対。
【請求項１９】
第１のＤＮＡ分子が、配列番号：５の異種挿入ＤＮＡ部分に対して相補的な連続的な少なくとも１５ヌクレオチドを含み、第２のＤＮＡ分子が、配列番号：３のトウモロコシゲノム部分からの少なくとも１５ヌクレオチドを含む、請求項１８に記載のＤＮＡ分子対。
【請求項２０】
第１のＤＮＡ分子が、配列番号：５のヌクレオチド約２０６０位からヌクレオチド約１２,２０８位に特異的にハイブリダイズし、第２のＤＮＡ分子が、配列番号：３のヌクレオチド約１位からヌクレオチド約２０５０位に対応する逆相補配列に特異的にハイブリダイズする、請求項１８に記載のＤＮＡ分子対。
【請求項２１】
第１のＤＮＡ分子および第２のＤＮＡ分子を含むＤＮＡ分子対であって、いずれのＤＮＡ分子も、配列番号：４もしくは配列番号：５またはその相補体の十分な長さの連続的なヌクレオチドであって、トウモロコシ植物MON89034またはその子孫から抽出されたＤＮＡに対する診断であるＤＮＡプライマーまたはプローブとして機能する、ＤＮＡ分子対。
【請求項２２】
第１のＤＮＡ分子が、配列番号：４もしくは配列番号：５またはその相補体の導入遺伝子領域の任意の部分の連続した１１以上のヌクレオチドを含み、第２のＤＮＡ分子が、配列番号：４またはその相補体の３’フランキングトウモロコシゲノムＤＮＡ領域の同様の長さを含む、請求項２１に記載のＤＮＡ分子対。
【請求項２３】
第１のＤＮＡ分子が、配列番号：５の異種挿入ＤＮＡ部分に対して相補的な連続的な少なくとも１５ヌクレオチドを含み、第２のＤＮＡ分子が、配列番号：４のトウモロコシゲノム部分に対して相補的な連続的な少なくとも１５ヌクレオチドを含む、請求項２２に記載のＤＮＡ分子対。
【請求項２４】
第１のＤＮＡ分子が、配列番号：５のヌクレオチド１位からヌクレオチド約１１３０５位に対応する逆相補配列に特異的にハイブリダイズし、第２のＤＮＡ分子が、配列番号：４のヌクレオチド約２１位からヌクレオチド約９１４位に特異的にハイブリダイズする、請求項２２に記載のＤＮＡ分子対。
【請求項２５】
第１のＤＮＡ分子が配列番号：６を含み、第２のＤＮＡ分子が配列番号：７を含む、請求項１７から２４いずれかに記載のＤＮＡ分子対。
【請求項２６】
生物学的サンプル中の配列番号：３、配列番号：４および配列番号：５よりなる群から選択されるＤＮＡ分子の存在を検出する方法であって、
（ａ）生物学的サンプルを、配列番号：３もしくはその相補体、配列番号：４もしくはその相補体または配列番号：５もしくはその相補体の十分な長さの連続的なヌクレオチドであって、トウモロコシ植物MON89034またはその子孫から抽出されたＤＮＡに対する診断であるＤＮＡプライマーまたはプローブとして機能する、ＤＮＡプライマー対と接触させ；
（ｂ）核酸増幅反応条件に供し；
（ｃ）核酸増幅反応を行って、ＤＮＡアンプリコン分子を生成し；ついで、
（ｄ）前記ＤＮＡアンプリコン分子を検出することを含み、ここに、配列番号：１、配列番号：２およびそれらの相補体の少なくとも一つを含むアンプリコンの検出が、前記生物学的サンプル中の前記ＤＮＡ分子の存在を示唆するものである方法。
【請求項２７】
前記生物学的サンプルがトウモロコシ植物から抽出されたＤＮＡサンプルである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
生物学的サンプル中の配列番号：３、配列番号：４および配列番号：５よりなる群から選択されるＤＮＡ分子の存在を検出する方法であって、
（ａ）生物学的サンプルを、ストリンジェントな条件下において前記ＤＮＡ分子とハイブリダイズし、かつ、前記ストリンジェントな条件下において前記ＤＮＡ分子を含有しない生物学的サンプルとはハイブリダイズしないＤＮＡプローブと接触させ；
（ｂ）前記生物学的サンプルおよびＤＮＡプローブをストリンジェントなハイブリダイゼーション条件に供し；ついで、
（ｃ）前記生物学的サンプルへの前記ＤＮＡプローブのハイブリダイゼーションを検出することを含み、ここに、ハイブリダイゼーションの検出が、前記生物学的サンプル中のＤＮＡ分子の存在を示唆するものである方法。
【請求項２９】
前記生物学的サンプルがトウモロコシ植物から抽出されたＤＮＡサンプルである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＤＮＡプローブが配列番号：１もしくは配列番号：２またはその相補体である、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＤＮＡプローブが少なくともひとつのフルオロフォアで標識されている、請求項２８から３０いずれかに記載の方法。
【請求項３２】
前記生物学的サンプルが、コーンミール、コーン油、コーンケーキ、トウモロコシ種子、トウモロコシ胚芽、コーンスターチ、トウモロコシ粉、トウモロコシ花粉、トウモロコシ花柱、コーン浸出液、コーンモルト、コーンシュガー、コーンシロップ、コーン油から生産されるマーガリン、乾燥蒸留粕（ＤＤＧＳ）、化粧品およびバルキング剤よりなる群から選択される、請求項２６または２８に記載の方法。
【請求項３３】
配列番号：３、配列番号：４または配列番号：５と相同性であるかまたは相補的な十分な長さの連続的なヌクレオチドであって、トウモロコシ事象MON89034および／またはその子孫に対して特異的なＤＮＡプライマーまたはプローブとして機能するヌクレオチドである少なくともひとつのＤＮＡ分子を含む、ＤＮＡ検出キット。
【請求項３４】
前記少なくともひとつのＤＮＡ分子が、配列番号：１、配列番号：２またはその相補体を含む、請求項３３に記載のＤＮＡ検出キット。
【請求項３５】
前記少なくともひとつのＤＮＡ分子が、配列番号：１、配列番号：２またはその相補体を含む、請求項３４に記載のＤＮＡ検出キット。
【請求項３６】
請求項１７から２５いずれかに記載のＤＮＡ分子対を含む、請求項３３に記載のＤＮＡ検出キット。
【請求項３７】
生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034を含むトウモロコシ植物のＤＮＡの接合状態を決定する方法であって、
（ａ）前記サンプルを、（１）トウモロコシ事象MON89034 DNAを含む核酸増幅反応に用いるとき、トウモロコシ事象MON89034に対する診断である第１のアンプリコンを生成し、（２）トウモロコシ事象MON89034 ＤＮＡ以外のトウモロコシゲノムＤＮＡを含む核酸増幅反応に用いるとき、トウモロコシ事象MON89034 DNA以外のトウモロコシゲノムＤＮＡに対する診断である第２のアンプリコンを生成する、配列番号：６、配列番号：７および配列番号：１０を含むキットと接触させ；
（ｂ）核酸増幅反応を行い；ついで、
（ｃ）そのようにして生成されたアンプリコンを検出することを含み、ここに、両方のアンプリコンの存在の検出は、前記サンプルがトウモロコシ事象MON89034 ＤＮＡに対してヘテロ接合性であることを示唆するものであって、第１のアンプリコンのみの検出は、前記サンプルがトウモロコシ事象MON89034 ＤＮＡに対してホモ接合性であることを示唆するものである、方法。
【請求項３８】
前記プライマーキットが、さらに配列番号：１４および配列番号：１５を一緒に使用する、請求項３７に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
発明の要旨
本発明は、American Type Culture Collection（ATCC）に受入番号PTA-7455として２００６年３月２８日に寄託された種子を有する、MON89034と命名されたトランスジェニックトウモロコシ植物およびその（挿入されたトランスジェニックDNAに相当する少なくとも１つの対立遺伝子も含む限り）トウモロコシ事象MON89034と識別不能な子孫に関する。本発明の別の態様は、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４および配列番号：５よりなる群から選択されるポリヌクレオチドを含む、子孫植物もしくは種子またはトウモロコシ事象MON89034の植物および種子の再生可能な一部である。本発明はまた、トウモロコシ事象MON89034の植物体の一部分を含み、その植物体の一部分が、上で示したようなポリヌクレオチドを少なくとも含む限り、これらの一部分として、花粉、胚珠、花、苗条、根、柄、花柱、雄穂、穂および葉が挙げられるが、これらに限定されない。MON89034事象に対応するトウモロコシ植物の分野におけるMON89034のゲノム内に含まれる新規遺伝的組成物およびMON89034からの製品（例えば、粗挽き粉、小麦粉、油、パルプおよび残渣バイオマス（biomass left over））は、本発明の一態様である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
本発明の一態様によれば、MON89034と命名された新規トウモロコシ植物由来の導入遺伝子／ゲノム挿入領域の存在を検出するための組成物および方法が提供される。配列番号：１（配列番号：５の２０５１位〜２０７１位に位置する）および配列番号：２（１１２９５位〜１１３１４位に位置する）およびその相補体よりなる群から選択されるMON89034の少なくとも１つの結合配列を含むDNA配列が提供される；ここで、結合配列は、ゲノムに挿入された異種DNAと挿入部位に隣接するトウモロコシ細胞由来のDNAとの間の境界に係り、その結合配列は、その事象についての診断である（図１）。トウモロコシ事象MON89034およびこれらのDNA分子を含む種子は、本発明の一態様である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
トウモロコシ事象MON89034由来の新規導入遺伝子／ゲノム挿入領域を含むDNA配列である配列番号：３および配列番号：４（図１）は、本発明の態様である。これらの分子を含むトウモロコシ植物および種子もまた、本発明の態様である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
トウモロコシ植物もしくは種子またはその植物もしくは種子MON89034から得られる製品であって、そのゲノムDNAは、配列番号：５およびその相補体から本質的になるDNA分子を含む。トウモロコシ植物もしくは種子またはその植物もしくは種子MON89034から得られる製品であって、そのゲノムDNAは、上記トウモロコシ植物もしくは種子または製品から単離されるとき、配列番号：５のヌクレオチド２０６１〜１１３０５およびその相補体を組み込んでいるDNA分子を含む。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
本明細書中で開示される組成物を使用するDNA検出キットが提供される。そのキットは、サンプル中のトウモロコシ事象MON89034 DNAの同定に有用であり、少なくとも、適切な事象DNAを含むトウモロコシ植物を育種するための方法に適用され得る。そのキットは、配列番号：１〜７に示されるような配列から選択されるセグメントと相同であるかもしくはそれに対して相補的なDNAプライマーおよび／またはプローブ、あるいは、配列表に示されるようなDNAの導入遺伝子の遺伝的エレメント内に含まれたDNAに相同であるかもしくはそれに対して相補的なDNAプライマーまたはプローブを備える。これらのDNA配列は、サンプル中の標的DNAの存在についての診断であるポリヌクレオチドの存在を検出するための、DNA増幅反応において使用され得るか、またはDNAハイブリダイゼーション法においてプローブとして使用され得る。熱的増幅反応における所定のアンプリコンの生成は、サンプル中のPTA-7455ゲノムDNAに対応するDNAの存在についての診断である。ハイブリダイゼーションが選択される場合、生物学的サンプルへのプローブのハイブリダイゼーションの検出は、サンプル中のMON89034トランスジェニック事象DNAの存在についての診断である。典型的には、サンプルは、トウモロコシもしくはトウモロコシ製品またはトウモロコシを使用した副産物である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034の結合配列である配列番号：１または配列番号：２を検出するためのキットが提供される。そのキットは、配列番号：１もしくは配列番号：２またはその相補体よりなる群から選択される配列であるか、またはそれらに対して完全に相補的であるポリヌクレオチドプローブを備え、また、核酸増幅反応において使用するためのプライマー対を備える。そのプライマー対は、配列番号：３のトウモロコシゲノム部分由来の連続的な少なくとも約15〜約50ヌクレオチドからなる第１プライマーおよび配列番号：５の異種挿入DNA部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15〜約50ヌクレオチドからなる第２プライマーと呼ばれ得る。ポリヌクレオチドプライマー対の第１のプライマーは、配列番号：３のヌクレオチド約1位から約2050位に示される配列に対応する逆相補配列に特異的にハイブリダイズし、そして、前記ポリヌクレオチドプライマー対の第２のプライマーは、配列番号：５のヌクレオチド約2060位からヌクレオチド約12,208位に示されるような配列に特異的にハイブリダイズし、そして、それらは、互いに向かって伸長して、配列番号：１を含むアンプリコンを形成し、前記アンプリコンは、サンプル中のMON89034事象DNAの存在についての診断である。プライマーの異なる対は、配列番号：４のトウモロコシゲノム部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15〜約50ヌクレオチドからなる第１プライマーおよび配列番号：５の異種挿入DNA部分の連続的な少なくとも約15〜約50ヌクレオチドからなる第２プライマーと呼ばれ得る。ポリヌクレオチドプライマー対の第１のプライマーは、配列番号：４のヌクレオチド約21位からヌクレオチド約914位に示されるような配列に特異的にハイブリダイズし、そして、ポリヌクレオチドプライマー対の第２のプライマーは、配列番号：５のヌクレオチド約1位から約11,305位に示される配列に対応する逆相補配列に特異的にハイブリダイズし、そして、それらは、互いに向かって伸長して、配列番号：２を含むアンプリコンを形成し、前記アンプリコンは、前記サンプル中のMON89034事象DNAの存在についての診断である。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
トウモロコシ植物の標的鱗翅目害虫に対して毒性である組成物もまた本発明によって提供される。標的鱗翅目害虫の食餌中に提供されるトランスジェニック植物細胞の組成物（ここで、各トランスジェニックトウモロコシ植物細胞は、そのゲノム内に、配列番号：１と配列番号：２の両方に示されるような配列に対応するポリヌクレオチドを、配列番号：１と配列番号：２との間に配列番号：５に示されるような連続的なヌクレオチド配列とともに含む）は、トウモロコシ植物または細胞が連続的なヌクレオチド配列内に含まれる発現カセットからCry1A.105および／またはCry2Ab2を発現している限り、トウモロコシ植物またはトウモロコシ植物細胞に対する鱗翅目昆虫の侵入から保護するために有効である。トランスジェニックトウモロコシ種子の形態でのそのような組成物は、受入番号PTA-7455としてAmerican Type Culture Collectionに寄託されている。そのような昆虫抵抗性トウモロコシ植物またはその一部は、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４および配列番号：５よりなる群から選択される少なくとも１つのヌクレオチド配列を有するDNAをそのような植物の細胞のゲノム内に含む。本明細書中で参照される診断配列を有する昆虫抵抗性トウモロコシ植物の子孫および種子もまた、本発明の範囲内に含まれる。そのような昆虫抵抗性トウモロコシ植物は、トランスジェニックトウモロコシ植物事象MON89034と、異なるトウモロコシ植物とを交配し、そして、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４および配列番号：５よりなる群から選択される少なくとも１つのヌクレオチド配列を解析することによって昆虫抵抗性子孫を選択する工程を含む方法において作出され得る。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７７】
左および右ボーターセグメントならびにボーターセグメント間において２つの連結された植物発現カセット（第１の発現カセットはCry1A.105をコードし、第２の発現カセットはCry2Abをコードし、ここで、各カセットは、第１または第２のカセットと命名されるかに関係なく、交換可能であり得る）からなるトランスジェニックトウモロコシ植物事象MON89034を生じる、トウモロコシゲノムに挿入されるpMON38850プラスミドDNAの一部を、詳細な分子解析によって特徴付けた。これらの解析を行うことにより、上記ボーターおよびそのボーター間における所望の２つの発現カセットからなる１つだけの、かつ、無傷の挿入セグメントを含む事象（トウモロコシゲノム内の組み込み部位の数）、コピー数（1遺伝子座内の形質転換ＤＮＡ(T-DNA)のコピー数）および挿入遺伝子カセットの完全性（すなわち、プラスミドpMON38850中に存在すると知られている配列からの任意の再編成または配列バリエーションが存在しないこと）が同定された。無傷のCry1A.105コード領域ならびに植物発現カセットの各々の調節エレメント、プロモーター、イントロンおよびポリアデニル化配列ならびにプラスミドpMON38850骨格DNA領域を含むDNA分子プローブを使用した。すべての事象の解析から得られたデータから、MON89034が、1コピーのCry1A.105発現カセットとともに、単一のT-DNA挿入を含むことが証明された。無傷の遺伝子カセットに連結されているか、または連結されていない、形質転換ベクターpMON38850由来のさらなるエレメントは、MON89034ゲノムにおいて検出されなかった。最後に、PCRおよびDNA配列解析を行うことによって、5’および3’挿入部と植物ゲノムとの結合を決定し、その挿入物内のエレメントの組成を確認し（例えば、図1を参照のこと）、そして、トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034をもたらす、トウモロコシ植物ゲノムに挿入されたDNAの完全な配列を決定した。その完全な挿入配列は、挿入されたDNAのいずれかの末端におけるトウモロコシゲノムフランキング配列の一部とともに、配列番号：５に示されるような配列に示されている。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７９】
サンプル中の事象MON89034を同定するために使用される例示的な方法は、事象特異的エンドポイントTAQMAN（登録商標） PCRにおいて説明され、このPCRについての条件の例は、表1および表2に記載される。このアッセイにおいて使用されるDNAプライマーは、プライマーSQ2842（配列番号：６）、SQ2843（配列番号：７）、6FAM（商標）標識プライマーPB880（配列番号：１４）およびVIC（商標）標識プライマーPB2931（配列番号：１５）であり、6FAMおよびVICは、DNAプライマーに結合したApplied Biosystems（Foster City, CA）製の蛍光（florescent）色素製品である。TAQMAN（登録商標） MGBプローブについては、TaqDNAポリメラーゼの5’−エキソヌクレアーゼ活性により、そのプローブがフルオロフォアとクエンチャーとの間において5’末端から切断される。クエンチャーおよびフルオロフォアが、標的DNA鎖にハイブリダイズするとき、それらは、3次元空間において十分に離れ、それにより、蛍光（フルオロフォア励起波長）シグナルがもたらされる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
【表１】
2009538153.tif 000001