【手続補正書】
【提出日】平成22年8月4日(2010.8.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
目的の抗原と担体タンパク質を含むワクチン組成物であって、（ｉ）目的の抗原の５０％以下が該担体タンパク質と架橋し、かつ（ｉｉ）該抗原が該担体タンパク質に捕捉されて複合体を形成する、前記ワクチン組成物。
【請求項２】
前記複合体の直径が１０ｎｍ〜１００μｍである、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項３】
前記複合体の直径が約１００ｎｍ〜１００μｍである、請求項２に記載のワクチン組成物。
【請求項４】
前記複合体の直径が約１００ｎｍ〜１０μｍである、請求項２に記載のワクチン組成物。
【請求項５】
前記複合体を哺乳動物に投与すると、該哺乳動物でＴ細胞依存性免疫応答が誘発される、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項６】
前記抗原：前記担体タンパク質のモル比が、１：１０〜１０：１である、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項７】
前記担体タンパク質が多量体である、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項８】
前記多量体が、少なくとも５個のサブユニットを含む、請求項７に記載のワクチン組成物。
【請求項９】
前記多量体がホモ多量体である、請求項７に記載のワクチン組成物。
【請求項１０】
前記担体タンパク質が、少なくとも１個の別の担体タンパク質と共有結合している、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項１１】
前記共有結合が、リジン側鎖の一級アミノ基と、アスパラギン酸もしくはグルタミン酸側鎖のカルボキシ基との間のペプチド結合を含む、請求項１０に記載のワクチン組成物。
【請求項１２】
前記共有結合が、式
【化１】
2010500354.tif 000001
［式中、Ｒｎは、１〜１２炭素原子の直鎖もしくは分枝鎖アルキル、１〜１２原子の直鎖もしくは分枝鎖ヘテロアルキル、２〜１２炭素原子の直鎖もしくは分枝鎖アルケン、２〜１２炭素原子の直鎖もしくは分枝鎖アルキン、５〜１０炭素原子の芳香族残基、３〜１０原子の環系、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２−（式中、ｑは１〜４である）、または２個のアルデヒド基を結合する化学結合である。］の化合物を含む、請求項１０に記載のワクチン組成物。
【請求項１３】
前記共有結合が、グルタルアルデヒド、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、カルボジイミド、またはビス−ビアゾ化ベンジジンを含む、請求項１０に記載のワクチン組成物。
【請求項１４】
前記共有結合が、二官能基架橋剤を含む、請求項１０に記載のワクチン組成物。
【請求項１５】
前記二官能基架橋剤が、グルタルアルデヒド、ビス［スルホスクシンイミジル］スベレート、またはアジプイミド酸ジメチルである、請求項１４に記載のワクチン組成物。
【請求項１６】
前記担体タンパク質が非共有結合している、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項１７】
前記非共有結合が、疎水性相互作用、イオン性相互作用、ファンデルワールス相互作用、または水素結合を含む、請求項１６に記載のワクチン組成物。
【請求項１８】
前記担体タンパク質が、ジフテリア毒素もしくはその変異体、ジフテリアトキソイド、破傷風毒素もしくはその変異体、破傷風トキソイド、緑膿菌外毒素Ａもしくはその変異体、コレラ毒素Ｂサブユニット、破傷風毒素フラグメントＣ、細菌性フラゲリン、ニューモリシン、髄膜炎菌の外膜タンパク質、緑膿菌Ｈｃｐ１タンパク質、大腸菌熱不安定性エンテロトキシン、志賀様毒素、ヒトＬＴＢタンパク質、ニューモリシン、リステリオリシンＯ（または関連タンパク質）、細菌細胞全体からのタンパク質抽出物、炭疽菌防御抗原のドミナントネガティブ変異体（ＤＮＩ）、または大腸菌β−ガラクトシダーゼである、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項１９】
前記細菌細胞全体が、緑膿菌または連鎖球菌細胞である、請求項１８に記載のワクチン組成物。
【請求項２０】
前記細菌性フラゲリンが、コレラ菌フラゲリンタンパク質である、請求項１８に記載のワクチン組成物。
【請求項２１】
前記志賀様毒素が、赤痢菌ＳｌｔＢ２タンパク質である、請求項１８に記載のワクチン組成物。
【請求項２２】
前記目的の抗原が、多糖、ポリアルコール、またはポリアミノ酸である、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項２３】
前記多糖が、肺炎連鎖球菌多糖、野兎病菌多糖、炭疽菌多糖、インフルエンザ菌多糖、チフス菌多糖、サルモネラ種多糖、赤痢菌多糖、または髄膜炎菌多糖である、請求項２２に記載のワクチン組成物。
【請求項２４】
前記肺炎連鎖球菌多糖が、莢膜型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ａ、７Ｂ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ａ、９Ｌ、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｆ、１１Ａ、１１Ｂ、１１Ｃ、１１Ｄ、１１Ｆ、１２Ａ、１２Ｂ、１２Ｆ、１３、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１５Ｆ、１６Ａ、１６Ｆ、１７Ａ、１７Ｆ、１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１８Ｆ、１９Ａ、１９Ｂ、１９Ｃ、１９Ｆ、２０、２１、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ａ、２４Ｂ、２４Ｆ、２５Ａ、２５Ｆ、２７、２８Ａ、２８Ｆ、２９、３１、３２Ａ、３２Ｆ、３３Ａ、３３Ｂ、３３Ｄ、３３Ｆ、３４、３５Ａ、３５Ｂ、３５Ｆ、３６、３７、３８、３９、４０、４１Ａ、４１Ｆ、４２、４３、４４、４５、４６、４７Ａ、４７Ｆ、または４８である、請求項２３に記載のワクチン組成物。
【請求項２５】
前記目的の抗原が、微生物の莢膜ポリマーである、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項２６】
前記微生物の莢膜ポリマーが、炭疽菌のポリ−γ−Ｄ−グルタミン酸である、請求項２５に記載のワクチン組成物。
【請求項２７】
前記ワクチン組成物が、第２の目的の抗原をさらに含む、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項２８】
前記ワクチン組成物が、複数の目的の抗原を含む、請求項１に記載のワクチン組成物。
【請求項２９】
（ｉ）目的の抗原と担体タンパク質とを混合して、該抗原と該担体タンパク質の混合物を形成するステップ、および（ｉｉ）該目的の抗原を該担体タンパク質で捕捉するステップを含むワクチン組成物の作製方法であって、該ワクチン組成物中、該目的の抗原の５０％以下が該担体タンパク質と架橋する、前記作製方法。
【請求項３０】
前記ワクチン組成物が、製薬上許容される賦形剤をさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記捕捉ステップが、前記混合物から前記抗原と前記担体タンパク質を沈殿させるステップを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記ワクチン組成物中、前記抗原：前記担体タンパク質のモル比が、１：１０〜１０：１である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記担体タンパク質が非共有結合的に架橋してマトリックスを形成する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
前記非共有結合が、疎水性相互作用、イオン性相互作用、ファンデルワールス相互作用、または水素結合を含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記担体タンパク質が、ジフテリア毒素もしくはその変異体、ジフテリアトキソイド、破傷風毒素もしくはその変異体、破傷風トキソイド、緑膿菌外毒素Ａもしくはその変異体、コレラ毒素Ｂサブユニット、破傷風毒素フラグメントＣ、細菌性フラゲリン、ニューモリシン、リステリオリシンＯ、髄膜炎菌の外膜タンパク質、緑膿菌Ｈｃｐ１タンパク質、大腸菌熱不安定性エンテロトキシン、志賀様毒素、ヒトＬＴＢタンパク質、細菌細胞全体からのタンパク質抽出物、炭疽菌防御抗原のドミナントネガティブ変異体（ＤＮＩ）、または大腸菌β−ガラクトシダーゼである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３６】
前記目的の抗原が、多糖、ポリアルコール、またはポリアミノ酸である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３７】
前記多糖が、肺炎連鎖球菌多糖、野兎病菌多糖、炭疽菌多糖、インフルエンザ菌多糖、チフス菌多糖、赤痢菌種多糖、サルモネラ種多糖、または髄膜炎菌多糖である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記肺炎連鎖球菌多糖が、莢膜型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ａ、７Ｂ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ａ、９Ｌ、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｆ、１１Ａ、１１Ｂ、１１Ｃ、１１Ｄ、１１Ｆ、１２Ａ、１２Ｂ、１２Ｆ、１３、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１５Ｆ、１６Ａ、１６Ｆ、１７Ａ、１７Ｆ、１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１８Ｆ、１９Ａ、１９Ｂ、１９Ｃ、１９Ｆ、２０、２１、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ａ、２４Ｂ、２４Ｆ、２５Ａ、２５Ｆ、２７、２８Ａ、２８Ｆ、２９、３１、３２Ａ、３２Ｆ、３３Ａ、３３Ｂ、３３Ｄ、３３Ｆ、３４、３５Ａ、３５Ｂ、３５Ｆ、３６、３７、３８、３９、４０、４１Ａ、４１Ｆ、４２、４３、４４、４５、４６、４７Ａ、４７Ｆ、または４８である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記目的の抗原が、微生物の莢膜ポリマーである、請求項２９に記載の方法。
【請求項４０】
前記微生物の莢膜ポリマーが、炭疽菌のポリ−γ−Ｄ−グルタミン酸である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
第２の目的の抗原を捕捉するステップをさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項４２】
複数の目的の抗原が前記担体タンパク質に捕捉される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記捕捉ステップ（ｉｉ）が前記担体タンパク質と架橋するリンカーを加えるステップを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項４４】
前記架橋が、前記担体タンパク質中のシッフ塩基を還元するステップを含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記担体タンパク質が、少なくとも１個の別の担体タンパク質と共有結合している、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記共有結合が、二官能基架橋剤を含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記二官能基架橋剤が、グルタルアルデヒド、ビス［スルホスクシンイミジル］スベレート、またはアジプイミド酸ジメチルである、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記リンカーが、式
【化２】
2010500354.tif 000002
［式中、Ｒｎは、１〜１２炭素原子の直鎖もしくは分枝鎖アルキル、１〜１２原子の直鎖もしくは分枝鎖ヘテロアルキル、２〜１２炭素原子の直鎖もしくは分枝鎖アルケン、２〜１２炭素原子の直鎖もしくは分枝鎖アルキン、５〜１０炭素原子の芳香族残基、３〜１０原子の環系、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑＣＨ２ＣＨ２−（式中、ｑは１〜４である）、または２個のアルデヒド基を結合する化学結合である。］の化合物である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４９】
被験体中で目的の抗原に対する免疫応答を誘発するための医薬の製造における、請求項１に記載のワクチン組成物の使用。
【請求項５０】
前記医薬がT細胞依存性免疫応答を誘発するのに有効である、請求項４９に記載の使用。