【手続補正書】
【提出日】平成21年12月1日(2009.12.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
両性リポソームおよびDNAi オリゴヌクレオチドを含む混合物。
【請求項２】
両性リポソームが 4〜8の等電点を有する請求項 1の混合物。
【請求項３】
両性リポソームがpH 7.4で正味の負の電荷を有するかまたは中性であり、pH 4で正味の正の電荷を有する請求項 1または 2の混合物。
【請求項４】
両性リポソームが両性脂質を含む脂質相から形成されている請求項 1、2または3の混合物。
【請求項５】
脂質相が5 〜 30 mol% の両性脂質を含む請求項 4の混合物。 
【請求項６】
両性脂質が HistChol、HistDG、isoHistSuccDG、アシルカルノシンおよびHCCholからなる群から選択される請求項 4または5の混合物。
【請求項７】
両性リポソームが、両性の性質を有する脂質成分の混合物を含む脂質相から形成されている請求項 1、2または3の混合物。
【請求項８】
脂質成分の混合物がアニオン性またはカチオン性成分を含み、かかる成分の少なくとも１つが pH 応答性である請求項 7の混合物。
【請求項９】
脂質成分の混合物が、(i) 安定なカチオン性脂質および荷電可能なアニオン性脂質、(ii)荷電可能なカチオン性脂質および荷電可能なアニオン性脂質、ならびに(iii) 安定なアニオン性脂質および荷電可能なカチオン性脂質からなる群から選択される請求項 8の混合物。
【請求項１０】
脂質成分がDOGSucc、POGSucc、DMGSucc、DPGSucc、DGSucc、DMPS、DPPS、DOPS、POPS、DMPG、DPPG、DOPG、POPG、DMPA、DPPA、DOPA、POPA、CHEMSおよび Cet-P からなる群から選択される１以上のアニオン性脂質を含む請求項 9の混合物。
【請求項１１】
脂質成分がDMGSucc、DOPA、CHEMSおよび Cet-Pからなる群から選択される１以上のアニオン性脂質を含む請求項 9または請求項 10の混合物。
【請求項１２】
脂質成分がDMTAP、DPTAP、DOTAP、DC-Chol、MoChol、HisChol、DPIM、CHIM、DORIE、DDAB、DAC-Chol、TC-Chol、DOTMA、DOGS、(C18)2Gly+N,N-ジオクタデシルアミド-グリシン、CTAP、CPyC、DODAP およびDOEPCからなる群から選択される１以上のカチオン性脂質を含む請求項 8 〜11のいずれかの混合物。
【請求項１３】
脂質成分がDOTAP、DC-Chol、MoCholおよびHisCholからなる群から選択される１以上のカチオン性脂質を含む請求項 8 〜11のいずれかの混合物。
【請求項１４】
アニオン性脂質が CHEMS であり、カチオン性脂質がMoCholである、請求項 7の混合物。
【請求項１５】
アニオン性脂質がCHEMSであり、カチオン性脂質がDOTAPである、請求項 7の混合物。
【請求項１６】
アニオン性脂質がCet-P であり、カチオン性脂質が MoCholである、請求項 7の混合物。
【請求項１７】
アニオン性脂質がDMGSucc であり、カチオン性脂質がMoCholである、請求項 7の混合物。
【請求項１８】
脂質相がさらに中性脂質を含む請求項 4 〜17のいずれかの混合物。
【請求項１９】
中性脂質がステロールおよびその誘導体を含む請求項 18の混合物。
【請求項２０】
中性脂質が中性リン脂質を含む請求項 18の混合物。
【請求項２１】
中性リン脂質がホスファチジルコリンを含む請求項 20の混合物。
【請求項２２】
ホスファチジルコリンがPOPC、OPPC、天然または水添ダイズ PC、天然または水添卵 PC、DMPC、DPPCまたはDOPC およびそれらの誘導体からなる群から選択される請求項 21の混合物。
【請求項２３】
ホスファチジルコリンが POPCである請求項 22の混合物。
【請求項２４】
中性リン脂質がホスファチジルコリンとホスホエタノールアミンとの混合物を含む請求項 20の混合物。
【請求項２５】
ホスファチジルコリンがPOPC、OPPC、天然または水添ダイズ PC、天然または水添卵 PC、DMPC、DPPCまたはDOPC およびそれらの誘導体からなる群から選択され、ホスファチジルエタノールアミンがDOPE、DMPE、DPPEおよびそれらの誘導体からなる群から選択される、請求項 24の混合物。
【請求項２６】
ホスファチジルコリンがPOPCであり、ホスファチジルエタノールアミンが DOPEである、請求項 25の混合物。
【請求項２７】
中性脂質がPOPCおよびコレステロールである請求項 18の混合物。
【請求項２８】
両性リポソームが DOPE、POPC、CHEMS および MoCholを含む請求項 24の混合物。
【請求項２９】
両性リポソームがPOPC、DOPE、MoCholおよび DMGSuccを含む請求項 24の混合物。
【請求項３０】
両性リポソームがPOPC、Chol、CHEMS およびDOTAPを含む請求項 27の混合物。
【請求項３１】
両性リポソームがPOPC、Chol、CetP およびMoCholを含む請求項 27の混合物。
【請求項３２】
両性リポソームを含む混合物であり、 
両性リポソームが、
PNT-100 (配列番号1251);
両性の性質を有する脂質成分の混合物、
ここで、脂質成分の混合物がアニオン性およびカチオン性成分を含み、かかる成分の少なくとも１つが pH 応答性である、および、
中性脂質、
を含み、
中性脂質がホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンまたはステロールを含み、混合物が 30 〜 70 mole %の両性脂質および 30 〜 60 mole %の中性脂質を含む、混合物。
【請求項３３】
カチオン性脂質が DMTAP、DPTAP、DPTAP、DOTAP、DC-Chol、TC-Chol、MoChol、HisChol、DPIM、CHIM、DORIE、DDAB、DAC-Chol、TC-Chol、DOTMA、DOGS、(C18)2Gly+N,N-ジオクタデシルアミド-グリシン、CTAB、CPyC、DODAP、DOEPC およびそれらの誘導体からなる群から選択され、アニオン性脂質がDOGSucc、POGSucc、DMGSucc、DPGSucc、DGSucc、DMPS、DPPS、DOPS、POPS、DMPG、DPPG、DOPG、POPG、DMPA、DPPA、DOPA、POPA、CHEMS、Cet-P およびそれらの誘導体からなる群から選択され、ここで、ホスファチジルコリンが POPC、OPPC、天然または水添ダイズ PC、天然または水添卵 PC、DMPC、DPPC または DOPC およびそれらの誘導体からなる群から選択され、ホスファチジルエタノールアミンが  DOPE、DMPE、DPPE およびそれらの誘導体からなる群から選択され、ステロールがコレステロールまたはその誘導体である、請求項 32の混合物。 
【請求項３４】
カチオン性脂質がDOTAP、DC-Chol、MoChol および HisCholからなる群から選択され、アニオン性脂質がDMGSucc、DOPA、CHEMS および Cet-Pからなる群から選択される、請求項 32の混合物。
【請求項３５】
カチオン性脂質が MoCholであり、アニオン性脂質が CHEMSである、請求項 32の混合物。
【請求項３６】
混合物が10 〜 60 mole%の MoCholおよび 10 〜 30 mole%の CHEMSを含む請求項 35の混合物。
【請求項３７】
カチオン性脂質がDOTAPであり、アニオン性脂質が CHEMSである、請求項 32の混合物。
【請求項３８】
混合物が10 〜 30 mole%の CHEMSおよび 5 〜 40 mole%の DOTAPを含む請求項 37の混合物。
【請求項３９】
カチオン性脂質が MoCholであり、アニオン性脂質が Cet-Pである、請求項 32の混合物。
【請求項４０】
混合物が 10 〜 60 mole%の MoChol および5 〜 30 mole%の Cet-Pを含む請求項 39の混合物。
【請求項４１】
カチオン性脂質がMoCholであり、アニオン性脂質がDMGSuccである、請求項 32の混合物。
【請求項４２】
混合物が20 〜 60 mole%の MoCholおよび20 〜 60 mole%の DMGSuccを含む請求項 41の混合物。
【請求項４３】
中性脂質がPOPC およびDOPEを含む請求項 32の混合物。
【請求項４４】
混合物が 5 〜 40 mole%の POPCおよび20 〜 50 mole%の DOPEを含む請求項 44の混合物。
【請求項４５】
中性脂質がPOPCおよび Cholを含む請求項 32の混合物。
【請求項４６】
混合物が10 〜 50 mole%の POPCおよび30 〜 50 mole%の Cholを含む請求項 45の混合物。
【請求項４７】
両性リポソームが POPC、DOPE、MoChol および CHEMSを含む請求項 32の混合物。
【請求項４８】
混合物が 3〜20 mole%の POPC、10 〜 60 mole%の DOPE、10 〜 60 mole%の MoCholおよび10 〜 60 mole%の CHEMSを含む請求項 47の混合物。
【請求項４９】
POPC/DOPE/MoChol/CHEMSのモル比が約 6/24/47/23である請求項 47の混合物。
【請求項５０】
POPC/DOPE/MoChol/CHEMSのモル比が15/45/20/20である請求項 47の混合物。
【請求項５１】
両性リポソーム がPOPC、DOPE、DMGSucc およびMoCholを含む請求項 32の混合物。
【請求項５２】
混合物が3〜20 mole%の POPC、10 〜 40 mole%の DOPE、15 〜 60 mole%の DMGSuccおよび15 〜 60 mole%の MoCholを含む請求項 51の混合物。
【請求項５３】
POPC/DOPE/DMGSucc/MoChol のモル比が約 6/24/23/47である請求項 52の混合物。
【請求項５４】
POPC/DOPE/DMGSucc/MoChol のモル比が約 6/24/47/23である請求項 52の混合物。
【請求項５５】
両性リポソームが POPC、Chol、CHEMSおよびDOTAPを含む請求項 32の混合物。
【請求項５６】
混合物が10 〜 50 mole%の POPC、20 〜 60 mole%の Chol、10 〜 40 mole%の CHEMS および5 〜 20 mole%の DOTAPを含む請求項 55の混合物。
【請求項５７】
POPC/Chol/CHEMS/DOTAPのモル比が約 30/40/20/10である請求項 56の混合物。
【請求項５８】
両性リポソームが POPC、Chol、Cet-P およびMoCholを含む請求項 32の混合物。
【請求項５９】
混合物が10 〜 40 mole%の POPC、20 〜 50 mole%の Chol、5 〜 30 mole%の Cet-Pおよび10 〜 40 mole%の MoCholを含む請求項 58の混合物。
【請求項６０】
POPC/Chol/Cet-P/MoCholのモル比が約 35/35/10/20である請求項 59の混合物。
【請求項６１】
両性リポソームが50 〜500 nmのサイズを含む請求項1-60のいずれかの混合物。
【請求項６２】
両性リポソームが80 〜 300 nmのサイズを含む請求項 1-61のいずれかの混合物。
【請求項６３】
両性リポソームが90 〜 200 nmのサイズを含む請求項 1-61のいずれかの混合物。
【請求項６４】
両性リポソームが脂質濃度約 10 〜 100 mM またはそれ以下において少なくとも 2 mg/mlのDNAi オリゴヌクレオチド濃度を有する請求項 1-63のいずれかの混合物。
【請求項６５】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1249のヌクレオチド500-2026またはその相補鎖に生理的条件下でハイブリダイズするDNAi  オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項６６】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1249のヌクレオチド500-1525またはその相補鎖に生理的条件下でハイブリダイズするDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項６７】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1249のヌクレオチド800-1225またはその相補鎖に生理的条件下でハイブリダイズするDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項６８】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1249 のヌクレオチド 900-1125またはその相補鎖に生理的条件下でハイブリダイズするDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項６９】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1249のヌクレオチド950-1075またはその相補鎖に生理的条件下でハイブリダイズするDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項７０】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1249のヌクレオチド970-1045またはその相補鎖に生理的条件下でハイブリダイズするDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項７１】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1250、1251、1252、1253、1267-1447 およびそれらの相補鎖からなる群から選択されるDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項７２】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1250、1251、1267、1268、1276、1277、1285、1286 およびそれらの相補鎖からなる群から選択されるDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項７３】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1250、1251、1289-1358 およびそれらの相補鎖からなる群から選択されるDNAi オリゴマーを含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項７４】
DNAi オリゴヌクレオチドが配列番号1250 または1251を含む請求項 1-64のいずれかの混合物。
【請求項７５】
以下の工程を含む方法：
(a)請求項 1-64のいずれかの混合物およびbcl-2遺伝子を発現することが出来るインビトロの細胞または非ヒト動物を提供する工程、 および、
(b)混合物をインビトロの細胞または非ヒト動物に導入する工程。
【請求項７６】
混合物の導入の結果、細胞の増殖の低下、または細胞死の誘導が起こる、請求項 75の方法。
【請求項７７】
細胞が癌細胞である請求項 75の方法。
【請求項７８】
混合物が非ヒト動物に0.01 mg 〜100 mg /kg体重の用量で導入される請求項７５の方法。
【請求項７９】
混合物が非ヒト動物に１日１回以上導入される請求項７５の方法。
【請求項８０】
混合物が非ヒト動物に連続的に導入される請求項７５の方法。
【請求項８１】
混合物が非ヒト動物に、局所、肺、眼内、鼻腔内、非経口および医療機器からなる群から選択される１以上の投与経路により導入される請求項７５の方法。
【請求項８２】
細胞が細胞培養物である請求項７５の方法。
【請求項８３】
被験化合物をインビトロの細胞または非ヒト動物に導入する工程をさらに含む請求項７５の方法。
【請求項８４】
被験化合物が化学療法薬である請求項８３の方法。
【請求項８５】
非ヒト動物が膵臓癌、結腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺癌、リンパ腫、卵巣癌および黒色腫からなる群から選択される癌を有する請求項８４の方法。
【請求項８６】
bcl-2遺伝子を発現することが出来る細胞または動物に導入するための、請求項 1-64のいずれかの混合物を含む組成物。
【請求項８７】
組成物の導入の結果、細胞の増殖の低下、または細胞死の誘導が起こる、請求項８６の組成物。
【請求項８８】
細胞が癌細胞である請求項８６の組成物。
【請求項８９】
動物に0.01 mg 〜100 mg /kg体重の用量で導入される請求項８６の組成物。
【請求項９０】
動物に１日１回以上導入される請求項８６の組成物。
【請求項９１】
動物に連続的に導入される請求項８６の組成物。
【請求項９２】
動物に、局所、肺、眼内、鼻腔内、非経口および医療機器からなる群から選択される１以上の投与経路により導入される請求項８６の組成物。
【請求項９３】
細胞が細胞培養物である請求項８６の組成物。
【請求項９４】
細胞または動物への被験化合物の導入と併用される請求項８６の組成物。
【請求項９５】
被験化合物が化学療法薬である請求項９４の組成物。
【請求項９６】
動物が膵臓癌、結腸癌、乳癌、膀胱癌、肺癌、白血病、前立腺癌、リンパ腫、卵巣癌および黒色腫からなる群から選択される癌を有する請求項９５の組成物。
【請求項９７】
請求項 1〜74のいずれかの混合物を含む医薬組成物。
【請求項９８】
両性リポソームおよび配列番号1251または 1250を含むDNAi オリゴヌクレオチドを含む混合物であり、リポソームがPOPC、DOPE、MoChol および CHEMSをPOPC/DOPE/MoChol/CHEMSのモル比15/45/20/20にて含む混合物。
【請求項９９】
両性リポソームおよび配列番号1251または 1250を含むDNAi オリゴヌクレオチドを含む混合物であり、リポソームがPOPC、DOPE、MoChol および CHEMSをPOPC/DOPE/MoChol/CHEMSのモル比6/24/47/23にて含む混合物。