【手続補正書】
【提出日】平成22年5月20日(2010.5.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
（発明の要旨）
本発明は、野生型および変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヘモグロビンよりもはるかに低いＮＯ反応性を有しており、したがって、ＮＯ担体として所望されることの驚くべき発見に一部基づく。所望される場合には、ＮＯ担体としてのＨ−ＮＯＸタンパク質の使用をさらに最適化させるために、ＮＯおよびＯ２リガンドへのそれらの結合を変化させるための変異がＨ−ＮＯＸタンパク質に導入され得る。いくつかの実施形態においては、ＮＯ担体としてのＨ−ＮＯＸタンパク質の使用によっては、有機硝酸塩のような現在の血管拡張剤の使用によって生じる耐性よりも少ない耐性が生じる。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
（ｉ）薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数がヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性がヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満である薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
（項目２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．１倍〜１０倍の間である、項目１に記載の薬学的組成物。
（項目３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．５倍〜２倍の間である、項目２に記載の薬学的組成物。
（項目４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１００分の１未満である、項目１〜３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１，０００分の１未満である、項目４に記載の薬学的組成物。
（項目６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１〜５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間である、項目１〜６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目７に記載の薬学的組成物。
（項目９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目８に記載の薬学的組成物。
（項目１０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目１〜９のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目１１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目１０に記載の薬学的組成物。
（項目１２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目１１に記載の薬学的組成物。
（項目１３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目１〜１２のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目１４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１〜１３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目１５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１〜１４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目１６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１〜１５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目１７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１〜１６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目１８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１〜１７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目１９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１〜１８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２０）
ヘムがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目１〜１９のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が変異タンパク質である、項目１〜２０のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目２１に記載の薬学的組成物。
（項目２３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、前記遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目２０および２１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、項目１〜２４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目１〜２５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  ８  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４８に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目１〜２６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２８）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１〜２７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目２９）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２８に記載の薬学的組成物。
（項目３０）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の約２５個〜約２００個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２８および２９のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目３１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数１】
2009538133.tif 000001
【数２】
2009538133.tif 000002
からなる群より選択される、項目１〜３０のいずれか１項に記載の記載の薬学的組成物。
（項目３２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下からなる群より選択される、項目３１に記載の薬学的組成物：野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ
β１（１−３８５）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−２１７）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−１９４）、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｌ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｏｐｈｉｌｉａ  １  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、およびＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ。
（項目３３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、項目１〜３２のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目３４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質であるか、またはヒトタンパク質由来である、項目３３に記載の薬学的組成物。
（項目３５）
前記ヒトタンパク質がβ１であるか、またはβ１由来である、項目３４に記載の薬学的組成物。
（項目３６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質であるか、または細菌タンパク質由来である、項目１〜３２のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目３７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質であるか、またはＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質由来である、項目３６に記載の薬学的組成物。
（項目３８）
ＮＯがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目１〜３７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目３９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質を含む１つ以上のリポソームまたはナノ粒子を含む、項目１〜３８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目４０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目１〜３８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目４１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目４０に記載の薬学的組成物。
（項目４２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載の変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質である、項目１〜４１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目４３）
（ｉ）薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
（項目４４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目４３に記載の薬学的組成物。
（項目４５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目４４に記載の薬学的組成物。
（項目４６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目４３〜４５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目４７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目４６に記載の薬学的組成物。
（項目４８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目４３〜４７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目４９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目４３〜４８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目４３〜４９のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目４３〜５０のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目４３〜５１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目４３〜５２のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目４３〜５３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目４３〜５４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５６）
ヘムがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目４３〜５５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が変異タンパク質である、項目４３〜５６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目５８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目５７に記載の薬学的組成物。
（項目５９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目５７および５８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、項目４３〜５９のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、項目４３〜６０のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えらる少なくとも１つの変異を含む、項目４３〜６１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  ８  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４８に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目４３〜６２のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６４）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目４３〜６３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６５）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目６４に記載の薬学的組成物。
（項目６６）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の約２５個〜約２００個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目６４および６５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数３】
2009538133.tif 000003
【数４】
2009538133.tif 000004
からなる群より選択される、項目４３〜６６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目６８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下からなる群より選択される、項目６７に記載の薬学的組成物：野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ
β１（１−３８５）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−２１７）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−１９４）、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｌ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｏｐｈｉｌｉａ  １  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、およびＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ。
（項目６９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、項目４３〜６８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目７０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質であるか、またはヒトタンパク質由来である、項目６９に記載の薬学的組成物。
（項目７１）
前記ヒトタンパク質がβ１であるか、またはβ１由来である、項目７０に記載の薬学的組成物。
（項目７２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質であるか、または細菌タンパク質由来である、項目４３〜６８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目７３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質であるか、またはＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質由来である、項目７２に記載の薬学的組成物。
（項目７４）
ＮＯがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目４３〜７３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目７５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質を含む１つ以上のリポソームまたはナノ粒子を含む、項目４３〜７４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目７６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目４３〜７５のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目７７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目７６に記載の薬学的組成物。
（項目７８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載の変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質である、項目４３〜７７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
（項目７９）
個体へＮＯを送達する方法であって、前記方法は、前記送達を必要とする個体へ有効量のＮＯを送達するために十分な量のＨ−ＮＯＸタンパク質を前記個体へ投与する工程を含み、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数はヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性はヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満である、方法。
（項目８０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．１倍〜１０倍の間である、項目７９に記載の方法。
（項目８１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．５倍〜２倍の間である、項目８０に記載の方法。
（項目８２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１００分の１未満である、項目７９〜８１のいずれか１項に記載の方法。
（項目８３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１，０００分の１未満である、項目８２に記載の方法。
（項目８４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目７９〜８３のいずれか１項に記載の方法。
（項目８５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間である、項目７９〜８４のいずれか１項に記載の方法。
（項目８６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目８５に記載の方法。
（項目８７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目８６に記載の方法。
（項目８８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目７９〜８７のいずれか１項に記載の方法。
（項目８９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目８８に記載の方法。
（項目９０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目８９に記載の方法。
（項目９１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目７９〜９０のいずれか１項に記載の方法。
（項目９２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目７９〜９１のいずれか１項に記載の方法。
（項目９３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目７９〜９２のいずれか１項に記載の方法。
（項目９４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目７９〜９３のいずれか１項に記載の方法。
（項目９５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目７９〜９４のいずれか１項に記載の方法。
（項目９６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目７９〜９５のいずれか１項に記載の方法。
（項目９７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目７９〜９６のいずれか１項に記載の方法。
（項目９８）
ヘムがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目７９〜９７のいずれか１項に記載の方法。
（項目９９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が変異タンパク質である、項目７９〜９８のいずれか１項に記載の方法。
（項目１００）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目９９に記載の方法。
（項目１０１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目９９および１００のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、項目７９〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質と比較して、ＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、項目７９〜１０２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異が含む、項目７９〜１０３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  １０  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４１０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目７９〜１０４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０６）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目７９〜１０５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０７）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１０６に記載の方法。
（項目１０８）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の約２５個〜約２００個のＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１０６および１０７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下
【数５】
2009538133.tif 000005
【数６】
2009538133.tif 000006
からなる群より選択される、項目７９〜１０８のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下からなる群より選択される、項目１０９に記載の方法：野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−３１０５）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−２１７）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−１１０４）、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｌ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｏｐｈｉｌｉａ  １  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、およびＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ。
（項目１１１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、項目７９〜１１０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質であるか、またはヒトタンパク質由来である、項目１１１に記載の方法。
（項目１１３）
前記ヒトタンパク質がβ１であるか、またはβ１由来である、項目１１２に記載の方法。
（項目１１４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質であるか、または細菌タンパク質由来である、項目７９〜１１０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質であるか、またはＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質由来である、項目１１４に記載の方法。
（項目１１６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質を含む１つ以上のリポソームまたはナノ粒子を含む、項目７９〜１１５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目７９〜１１６のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目１１７に記載の方法。
（項目１１９）
ＮＯが、前記個体へのＨ−ＮＯＸタンパク質の投与の前に、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質に結合する、項目７９〜１１８のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２０）
ＮＯが、前記個体へのＨ−ＮＯＸタンパク質の投与の前に、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質に結合せず、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、個体中の１つの位置から個体中の別の位置にＮＯを輸送する、項目７９〜１１８のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、経口投与、直腸投与、または個体の血液に投与される、項目７９〜１２０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２２）
前記個体がヒトである、項目７９〜１２１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２３）
前記個体が、心臓血管の症状、高血圧、高血圧によって悪化した症状、またはＮＯ機能不全に罹患しているか、あるいはそれらの危険性がある、項目７９〜１２２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２４）
前記高血圧によって悪化した症状が、心不全、腎不全、または脳卒中である、項目１２３に記載の方法。
（項目１２５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が少なくとも２回個体に投与される、項目７９〜１２４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載の変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質である、項目７９〜１２５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２７）
個体へＮＯを送達する方法であって、前記方法は、前記送達を必要とする個体へ有効量のＮＯを送達するために十分な量のＨ−ＮＯＸタンパク質を前記個体へ投与する工程を含み、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、方法。
（項目１２８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目１２７に記載の方法。
（項目１２９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目１２８に記載の方法。
（項目１３０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目１２７〜１２９のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目１３０に記載の方法。
（項目１３２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１２７〜１３１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目１２７〜１３２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１２７〜１３３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１２７〜１３４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１２７〜１３５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１２７〜１３６のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１２７〜１３７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１２７〜１３８のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４０）
ヘムがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目１２７〜１３９のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が変異タンパク質である、項目１２７〜１４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目１４１に記載の方法。
（項目１４３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目１４１および１４２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、項目１２７〜１４３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較してＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、項目１２７〜１４４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目１２７〜１４５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  １０  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４１０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目１２７〜１４６のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４８）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１２７〜１４７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４９）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１４８に記載の方法。
（項目１５０）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の約２５個〜約２００個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１４８および１４９のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数７】
2009538133.tif 000007
【数８】
2009538133.tif 000008
からなる群より選択される、項目１２７〜１５０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下からなる群より選択される、項目１５１に記載の方法：野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−３１０５）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−２１７）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−１１０４）、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｌ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｏｐｈｉｌｉａ  １  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、およびＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ。
（項目１５３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、項目１２７〜１５２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質であるか、またはヒトタンパク質由来である、項目１５３に記載の方法。
（項目１５５）
前記ヒトタンパク質がβ１であるか、またはβ１由来である、項目１５４に記載の方法。
（項目１５６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質であるか、または細菌タンパク質由来である、項目１２７〜１５２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質であるか、またはＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質由来である、項目１５６に記載の方法。
（項目１５８）
１つ以上のリポソームまたはナノ粒子が前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質を含む、項目１２７〜１５７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１５９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目１２７〜１５８のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目１５９に記載の方法。
（項目１６１）
ＮＯが、前記個体へのＨ−ＮＯＸタンパク質の投与の前に、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質に結合する、項目１２７〜１６０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６２）
ＮＯが、前記個体へのＨ−ＮＯＸタンパク質の投与の前に、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質に結合せず、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、個体中の１つの位置から個体中の別の位置にＮＯを輸送する、項目１２７〜１６０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、経口投与、直腸投与、または個体の血液に投与される、項目１２７〜１６２のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６４）
前記個体がヒトである、項目１２７〜１６３のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６５）
前記個体が、心臓血管の症状、高血圧、高血圧によって悪化した症状、血管収縮の症状、脳卒中、またはＮＯ機能不全に罹患しているか、あるいはそれらの危険性がある、項目１２７〜１６４のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６６）
前記高血圧によって悪化した症状が、心不全、腎不全、または脳卒中である、項目１６５に記載の方法。
（項目１６７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が少なくとも２回個体に投与される、項目１２７〜１６６のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載の変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質である、項目１２７〜１６７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１６９）
（ｉ）薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数がヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性がヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満である薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、キット。
（項目１７０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．１倍〜１０倍の間である、項目１６９に記載のキット。
（項目１７１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．５倍〜２倍の間である、項目１７０に記載のキット。
（項目１７２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１００分の１未満である、項目１６９〜１７１のいずれか１項に記載のキット。
（項目１７３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１，０００分の１未満である、項目１７２に記載のキット。
（項目１７４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１６９〜１７３のいずれか１項に記載のキット。
（項目１７５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間である、項目１６９〜１７４のいずれか１項に記載のキット。
（項目１７６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目１７５に記載のキット。
（項目１７７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目１７６に記載のキット。
（項目１７８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目１６９〜１７７のいずれか１項に記載のキット。
（項目１７９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目１７８に記載のキット。
（項目１８０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目１７９に記載のキット。
（項目１８１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目１６９〜１８０のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１６９〜１８１のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１６９〜１８２のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１６９〜１８３のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１６９〜１８４のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目１６９〜１８５のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目１６９〜１８６のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８８）
ヘムがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目１６９〜１８７のいずれか１項に記載のキット。
（項目１８９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が変異タンパク質である、項目１６９〜１８８のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目１８９に記載のキット。
（項目１９１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目１８９および１９０のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、項目１６９〜１９１のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、項目１６９〜１９２のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目１６９〜１９３のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  ９  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４９に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目１６９〜１９４のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９６）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１６９〜１９５のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９７）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸、または約２５個〜約２００個のＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目１９６に記載のキット。
（項目１９８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数９】
2009538133.tif 000009
【数１０】
2009538133.tif 000010
からなる群より選択される、項目１６９〜１９７のいずれか１項に記載のキット。
（項目１９９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下からなる群より選択される、項目１９８に記載のキット：野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−３９５）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−２１７）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−１９４）、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｌ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｏｐｈｉｌｉａ  １  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、およびＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ。
（項目２００）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、項目１６９〜１９９のいずれか１項に記載のキット。
（項目２０１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質であるか、ヒトタンパク質由来であるか、ヒトβ１であるか、またはβ１由来である、項目２００に記載のキット。
（項目２０２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質であるか、または細菌タンパク質由来である、項目１６９〜１９９のいずれか１項に記載のキット。
（項目２０３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質であるか、またはＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質由来である、項目２０２に記載のキット。
（項目２０４）
ＮＯがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目１６９〜２０３のいずれか１項に記載のキット
（項目２０５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質を含む１つ以上のリポソームまたはナノ粒子を含む、項目１６９〜２０４のいずれか１項に記載のキット。
（項目２０６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目１６９〜２０５のいずれか１項に記載のキット。
（項目２０７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目２０６に記載のキット。
（項目２０８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載の変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質である、項目１６９〜２０７のいずれか１項に記載のキット。
（項目２０９）
（ｉ）Ｈ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであるＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）個体にＮＯを送達するためのキットの使用についての説明書を含む、キット。
（項目２１０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目２０９に記載のキット。
（項目２１１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目２１０に記載のキット。
（項目２１２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目２０９〜２１１のいずれか１項に記載のキット。
（項目２１３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目２１２に記載のキット。
（項目２１４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２０９〜２１３のいずれか１項に記載のキット。
（項目２１５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目２０９〜２１４のいずれか１項に記載のキット。
（項目２１６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２０９〜２１５のいずれか１項に記載のキット。
（項目２１７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２０９〜２１６のいずれか１項に記載のキット。
（項目２１８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２０９〜２１７のいずれか１項に記載のキット。
（項目２１９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２０９〜２１８のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２０）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２０９〜２１９のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２０９〜２２０のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２２）
ヘムがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目２０９〜２２１のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が変異タンパク質である、項目２０９〜２２２のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目２２３に記載のキット。
（項目２２５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目２２３および２２４のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、項目２０９〜２２５のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２７）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較してＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、項目２０９〜２２６のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する１つの残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目２０９〜２２７のいずれか１項に記載のキット。
（項目２２９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  ９  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４９に対応する１つの残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目２０９〜２２８のいずれか１項に記載のキット。
（項目２３０）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２０９〜２２９のいずれか１項に記載のキット。
（項目２３１）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２３０に記載のキット。
（項目２３２）
変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の約２５個〜約２００個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２３０および２３１のいずれか１項に記載のキット。
（項目２３３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数１１】
2009538133.tif 000011
【数１２】
2009538133.tif 000012
からなる群より選択される、項目２０９〜２３２のいずれか１項に記載のキット。
（項目２３４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下からなる群より選択される、項目２３３に記載のキット：野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−３９５）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−２１７）、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−１９４）、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｌ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｏｐｈｉｌｉａ  １  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、およびＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ。
（項目２３５）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、項目２０９〜２３４のいずれか１項に記載のキット。
（項目２３６）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質であるか、またはヒトタンパク質由来である、項目２３５に記載のキット。
（項目２３７）
前記ヒトタンパク質がβ１であるか、またはβ１由来である、項目２３６に記載のキット。
（項目２３８）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質であるか、または細菌タンパク質由来である、項目２０９〜２３４のいずれか１項に記載のキット。
（項目２３９）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質であるか、またはＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質由来である、項目２３８に記載のキット。
（項目２４０）
ＮＯがＨ−ＮＯＸタンパク質に結合している、項目２０９〜２３９のいずれか１項に記載のキット。
（項目２４１）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質を含む１つ以上のリポソームまたはナノ粒子を含む、項目２０９〜２４０のいずれか１項に記載のキット。
（項目２４２）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目２０９〜２４１のいずれか１項に記載のキット。
（項目２４３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目２４２に記載のキット。
（項目２４４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載の変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質である、項目２０９〜２４３のいずれか１項に記載のキット。
（項目２４５）
対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質と比較して、ＮＯ解離定数またはＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数は、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性は、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ４０Ｌ、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、またはＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙではない、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２４６）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ７８Ｙ／Ｙ１４０Ｌではない、項目２４５に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２４７）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下ではない、項目２４５および２４６のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質：野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ（１−３８５）、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  ＣＧ１４８８５−ＰＡ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ
ＧＣＹ−３５  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｎ．ｐｕｎｃｔｉｆｏｒｍｅ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｃｒｅｓｃｅｎｔｕｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｓ．ｏｎｅｉｄｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、または野生型Ｃ．ａｃｅｔｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ  Ｈ−ＮＯＸ。
（項目２４８）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下ではない、項目２４５〜２４７のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質：Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｗ９Ｆ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−３８５）Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｇ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｆ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｓ、またはＲ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｅ。
（項目２４９）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０ＨまたはＨ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｉ１４０Ｙではない、項目２４５〜２４８のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５０）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．１倍〜１０倍の間である、項目２４５〜２４９のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５１）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の０．５倍〜２倍の間である、項目２５０に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５２）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１００分の１未満である、項目２４５〜２５１のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５３）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１，０００分の１未満である、項目２５２に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５４）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２４５〜２５３のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５５）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間である、項目２４５〜２５４のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５６）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目２４５〜２５５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５７）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目２４５〜２５６のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５８）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目２４５〜２５７のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２５９）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目２４５〜２５８のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６０）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目２５９に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６１）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目２４５〜２６０のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６２）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２４５〜２６１のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６３）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２４５〜２６２のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６４）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２４５〜２６３のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６５）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２４５〜２６４のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６６）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２４５〜２６５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６７）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２４５〜２６６のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６８）
少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目２４５〜２６７のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２６９）
遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目２４５〜２６８のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７０）
Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目２４５〜２６９のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７１）
Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  ２  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４２に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目２４５〜２７０のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７２）
少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２４５〜２７１のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７３）
少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２７２に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７４）
約２５個〜約２００個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２７２および２７３のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７５）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質である、項目２４５〜２７４のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７６）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質である、項目２７５に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７７）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質がβ１である、項目２７６に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７８）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質である、項目２４５〜２７４のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２７９）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質である、項目２７８に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８０）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目２４５〜２７９のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８１）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目２８０に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８２）
対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質と比較して、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２を変化させるか、あるいはＯ２解離定数を変化させる少なくとも１つの変異を含む、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２は、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ４０Ｌ、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、またはＬ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙではない、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８３）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ７８Ｙ／Ｙ１４０Ｌではない、項目２８２に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８４）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下ではない、項目２８２および２８３のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質：野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ（１−３８５）、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  ＣＧ１４８８５−ＰＡ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ
ＧＣＹ−３５  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｎ．ｐｕｎｃｔｉｆｏｒｍｅ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｃｒｅｓｃｅｎｔｕｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｓ．ｏｎｅｉｄｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、または野生型Ｃ．ａｃｅｔｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ  Ｈ−ＮＯＸ。
（項目２８５）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下ではない、項目２８２〜２８４のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質：Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｗ９Ｆ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１（１−３８５）Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｇ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｆ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｓ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｅ、またはＨ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ（１−３８５）Ｉ１４５Ｙ。
（項目２８６）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０ＨまたはＨ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｉ１４０Ｙではない、項目２８２〜２８５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８７）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、項目２８２〜２８６のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８８）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０−３ｓ−１の間である、項目２８７に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２８９）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１０μＭである、項目２８２〜２８８のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９０）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約５０μＭである、項目２８９に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９１）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２８２〜２９０のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９２）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、項目２８２〜２９１のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９３）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２８２〜２９２のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９４）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２８２〜２９３のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９５）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２８２〜２９４のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９６）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２８２〜２９５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９７）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、項目２８２〜２９６のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９８）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、項目２８２〜２９７のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目２９９）
少なくとも１つの遠位ポケット変異を含む、項目２８２〜２９８のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３００）
遠位ポケット中にない少なくとも１つの変異を含む、項目２８２〜２９９のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０１）
Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸのＴｙｒ１４０に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目２８２〜３００のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０２）
Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ  ２  Ｈ−ＮＯＸのＰｈｅ１４２に対応する残基が任意の他のアミノ酸によって置き換えられる少なくとも１つの変異を含む、項目２８２〜３０１のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０３）
少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目２８２〜３０２のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０４）
少なくとも約５０個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目３０３に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０５）
約２５個〜約２００個の連続するＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、項目３０３および３０４のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０６）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質である、項目２８２〜３０５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０７）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質がヒトタンパク質である、項目３０６に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０８）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質がβ１である、項目３０７に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３０９）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質である、項目２８２〜３０５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３１０）
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質がＴ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓタンパク質である、項目３０９に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３１１）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、項目２８２〜３１０のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３１２）
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質がポリエチレングリコールに共有結合している、項目３１１に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３１３）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数が、Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓヘモグロビンαのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内である、項目２７９〜３９５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３１４）
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓヘモグロビンαのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満である、項目２７９〜３９６のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
（項目３１５）
項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載のＨ−ＮＯＸタンパク質をコードする組換え型核酸。
（項目３１６）
項目３１５に記載の核酸を含むベクター。
（項目３１７）
項目３１５に記載の核酸を含む細胞。
（項目３１８）
項目３１６に記載のベクターを含む細胞。
（項目３１９）
タンパク質の生産に適している条件下で、項目２４５〜３１４のいずれか１項に記載のＨ−ＮＯＸタンパク質をコードする核酸を含む細胞を培養する工程を含む、Ｈ−ＮＯＸタンパク質の生産方法。
（項目３２０）
Ｈ−ＮＯＸタンパク質を精製する工程をさらに含む、項目３１９に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ―ＮＯＸタンパク質は最小のＮＯ反応性でＮＯを結合および送達し、そして前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数がヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性がヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満である薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項２】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項１に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項３】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間である、請求項１または２に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項４】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約０．０１２ｓ−１の間である、請求項３に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項５】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項６】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項７】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項８】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項９】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が変異タンパク質である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１０】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１１】
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質中の少なくとも１つのＣ末端アミノ酸が、対応する野生型タンパク質と比較して除去されている、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１２】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数１】
2009538133.tif 000013
【数２】
2009538133.tif 000014
からなる群より選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１３】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１４】
前記哺乳動物タンパク質がヒトタンパク質であり、そして前記ヒトタンパク質がβ１であるか、またはβ１由来である、請求項１３に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１５】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が細菌タンパク質であるか、または細菌タンパク質由来である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１６】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１７】
（ｉ）薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ―ＮＯＸタンパク質は最小のＮＯ反応性でＮＯを結合および送達し、そして前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１８】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項１７に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項１９】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項１７または１８に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項２０】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、請求項１７〜１９のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項２１】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数３】
2009538133.tif 000015
【数４】
2009538133.tif 000016
からなる群より選択される、請求項１７〜２０のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項２２】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、請求項１７〜２１に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項２３】
前記哺乳動物タンパク質がヒトタンパク質であり、そして前記ヒトタンパク質がβ１であるか、またはβ１由来である、請求項２２に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項２４】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、請求項１７〜２３のいずれか１項に記載の薬学的血液ガスＮＯ担体組成物。
【請求項２５】
個体へＮＯを送達するための組成物であって、前記組成物は、前記個体へ有効量のＮＯを送達するために十分な量のＨ−ＮＯＸタンパク質を含み、そして前記個体に投与されることを特徴とし、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数はヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性はヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満である、組成物。
【請求項２６】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間である、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項２５または２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２９】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下
【数５】
2009538133.tif 000017
【数６】
2009538133.tif 000018
からなる群より選択される、請求項２５〜２８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３０】
個体へＮＯを送達するための組成物であって、前記組成物は、前記個体へ有効量のＮＯを送達するために十分な量のＨ−ＮＯＸタンパク質を含み、そして前記個体に投与されることを特徴とし、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭである、組成物。
【請求項３１】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項３０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が、対応する野生型タンパク質と比較して、ＮＯ解離定数、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ＮＯに対するｋ１、ＮＯに対するｋ２、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ヘム自動酸化速度、または上記の２つ以上の任意の組み合わせを変化させる、少なくとも１つの変異を含む、請求項３０または３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数７】
2009538133.tif 000019
【数８】
2009538133.tif 000020
からなる群より選択される、請求項３０〜３２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３４】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質であるか、または哺乳動物タンパク質由来である、請求項３０〜３３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が別の分子または部分に共有結合している、請求項３０〜３４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３６】
ＮＯが、前記個体へのＨ−ＮＯＸタンパク質の投与の前に、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質に結合せず、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、個体中の１つの位置から個体中の別の位置にＮＯを輸送する、請求項３０〜３５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３７】
前記個体が、心臓血管の症状、高血圧、高血圧によって悪化した症状、血管収縮の症状、脳卒中、またはＮＯ機能不全に罹患しているか、あるいはそれらの危険性がある、請求項３０〜３６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３８】
前記高血圧によって悪化した症状が、心不全、腎不全、または脳卒中である、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
（ｉ）薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ―ＮＯＸタンパク質は最小のＮＯ反応性でＮＯを結合および送達し、そして前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数がヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性がヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満である薬学的に許容される量のＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む、キット。
【請求項４０】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項３９に記載のキット。
【請求項４１】
（ｉ）Ｈ−ＮＯＸタンパク質であって、前記Ｈ―ＮＯＸタンパク質は最小のＮＯ反応性でＮＯを結合および送達し、そして前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１×１０ｓ−１の間であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであるＨ−ＮＯＸタンパク質と、（ｉｉ）個体にＮＯを送達するためのキットの使用についての説明書を含む、キット。
【請求項４２】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のヘム自動酸化速度が、３７℃で約１ｈ−１未満であり、前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項４１に記載のキット。
【請求項４３】
前記Ｈ−ＮＯＸタンパク質が以下：
【数１１】
2009538133.tif 000021
【数１２】
2009538133.tif 000022
からなる群より選択される、請求項４１または４２に記載のキット。
【請求項４４】
対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質と比較して、ＮＯ解離定数またはＮＯ反応性を変化させる少なくとも１つの変異を含む、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ解離定数は、ヘモグロビンのＮＯ解離定数の大きさの２桁以内であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性は、ヘモグロビンのＮＯ反応性の少なくとも１０分の１未満であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ４０Ｌ、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ７８Ｙ／Ｙ１４０Ｌ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、Ｒ．  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ（１−３８５）、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  ＣＧ１４８８５−ＰＡ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ  ＧＣＹ−３５  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｎ．ｐｕｎｃｔｉｆｏｒｍｅ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｃｒｅｓｃｅｎｔｕｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｓ．ｏｎｅｉｄｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ａｃｅｔｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｗ９Ｆ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ（１−３８５）Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｇ、Ｒ．  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｆ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｓ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｅ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０ＨまたはＨ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｉ１４０Ｙではない、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
【請求項４５】
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間である、請求項４４に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
【請求項４６】
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項４４または４５のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
【請求項４７】
対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質と比較して、ＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２を変化させるか、あるいはＯ２解離定数を変化させる少なくとも１つの変異を含む、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質であって、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２は、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ４０Ｌ、野生型Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ、Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ１４２Ｙ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｆ７８Ｙ／Ｙ１４０Ｌ、野生型Ｌ．ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ  ２  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、Ｒ．  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ（１−３８５）、野生型Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  β１  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｄ．ｍｅｌａｎｇａｓｔｅｒ  ＣＧ１４８８５−ＰＡ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ  ＧＣＹ−３５  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｎ．ｐｕｎｃｔｉｆｏｒｍｅ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ｃｒｅｓｃｅｎｔｕｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｓ．ｏｎｅｉｄｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ、野生型Ｃ．ａｃｅｔｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ  Ｈ−ＮＯＸ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｗ９Ｆ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｆ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  （１−３８５）Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｇ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｈ１０５Ｆ、Ｒ．  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｉ１４５Ｙ、Ｒ．  ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｓ、Ｒ．ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ  ｓＧＣ  β１  Ｈ−ＮＯＸ  Ｃ７８Ｅ、Ｔ．ｔｅｎｇｃｏｎｇｅｎｓｉｓ  Ｈ−ＮＯＸ  Ｙ１４０Ｈ、Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｈ−ＮＯＸ（１−３８５）Ｉ１４５ＹまたはＨ．ｓａｐｉｅｎｓ  β１  Ｉ１４０Ｙではない、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
【請求項４８】
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯに対するｋｏｆｆ、ｋ１、またはｋ２が、３７℃で約１×１０−４ｓ−１〜約１０ｓ−１の間であり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項４７に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
【請求項４９】
前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＯ２解離定数が、３７℃で少なくとも約１μＭであり、前記変異Ｈ−ＮＯＸタンパク質のＮＯ反応性が、約７００ｓ−１未満である、請求項４７または４８に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
【請求項５０】
前記対応する野生型Ｈ−ＮＯＸタンパク質が哺乳動物タンパク質である、請求項４７〜４９のいずれか１項に記載の単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質。
【請求項５１】
請求項４４〜５０のいずれか１項に記載のＨ−ＮＯＸタンパク質をコードする組換え型核酸。
【請求項５２】
請求項５１に記載の核酸を含む細胞。
【請求項５３】
タンパク質の生産に適している条件下で、請求項４４〜５０のいずれか１項に記載のＨ−ＮＯＸタンパク質をコードする核酸を含む細胞を培養する工程を含む、Ｈ−ＮＯＸタンパク質の生産方法。
【請求項５４】
細胞培地中でＮＯレベルを維持または増加させる工程を含む、該培地中で細胞成長を増進させる方法であって、該方法は、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質を該培地中に添加する工程を含み、ここで、該Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、少なくとも一つの変異を含み、そしてＨ−ＮＯＸ変異体タンパク質は、所望のＯ２会合定数、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ＮＯ反応性、自動酸化速度、半減期、またはそれらの任意の組み合わせに基づいて選択される、方法。
【請求項５５】
細胞培地中でＮＯレベルを維持または増加させる工程を含む、該培地中で細胞成長を増進させる方法であって、該方法は、該細胞をＨ−ＮＯＸを発現するように遺伝的に改変する工程を含み、ここで該Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、少なくとも一つの変異を含み、そしてＨ−ＮＯＸ変異体タンパク質は、所望のＯ２会合定数、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ＮＯ反応性、自動酸化速度、半減期、またはそれらの任意の組み合わせに基づいて選択される、方法。
【請求項５６】
細胞培地中でＮＯレベルを維持または減少させる工程を含む、該培地中で細胞成長を増進させる方法であって、該方法は、単離されたＨ−ＮＯＸタンパク質を該培地中に添加する工程を含み、ここで、該Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、少なくとも一つの変異を含み、そしてＨ−ＮＯＸ変異体タンパク質は、所望のＯ２会合定数、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ＮＯ反応性、自動酸化速度、半減期、またはそれらの任意の組み合わせに基づいて選択される、方法。
【請求項５７】
細胞培地中でＮＯレベルを維持または減少させる工程を含む、該培地中で細胞成長を増進させる方法であって、該方法は、該細胞をＨ−ＮＯＸを発現するように遺伝的に改変する工程を含み、ここで該Ｈ−ＮＯＸタンパク質は、少なくとも一つの変異を含み、そしてＨ−ＮＯＸ変異体タンパク質は、所望のＯ２会合定数、Ｏ２解離定数、ＮＯ安定性、ＮＯ反応性、自動酸化速度、半減期、またはそれらの任意の組み合わせに基づいて選択される、方法。