(57)【要約】  高度にシアル酸付加されたＩｇＧ製剤を含む組成物、及びこのような製剤を使用して患者を治療するための方法が記載される。本出願は、ＩＶＩＧの有効用量の約１％〜１０％である、高度にシアル酸付加されたＩｇＧ（ｈｓｌｇＧ）製剤の用量が、ＩＶＩＧで治療される疾患を治療するのに有効であり得るという驚くべき発見に部分的に基づく。
2022502466.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
疾患を治療するための方法であって、前記疾患を治療するために、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％である用量で、対象にｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記疾患が炎症性疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記対象が、抗体欠損症に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記対象が、原発性抗体欠損症に罹患している、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記疾患が、自己抗体の存在と関連付けられる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ｈｓＩＶＩＧの用量が、前記ＩＶＩＧの有効用量と同程度に有効である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量と同じ頻度で投与される、請求項１又は７に記載の方法。
【請求項９】
前記疾患が、神経疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記神経疾患が、皮膚筋炎、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経障害（ＣＩＤＰ）、多巣性運動ニューロパチー（ＭＭＮ）、重症筋無力症及び全身硬直症候群からなる群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記疾患が、免疫性血球減少症、パルボウイルスＢ１９関連赤血球無形成、骨髄腫及び慢性リンパ性白血病に対する二次性低ガンマグロブリン血症並びに骨髄移植後からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記疾患が、血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、粘膜類天疱瘡及びブドウ膜炎からなる群から選択され、皮膚科学において、川崎症候群、皮膚筋炎、中毒性表皮壊死症、及び水疱症を治療するために最も一般的に使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記疾患が、ＩＶＩＧによる治療のためにＦＤＡに認可されているか、又はＩＶＩＧは、前記疾患の治療に適応がある、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記疾患に対する前記ＦＤＡ認可ＩＶＩＧの用量の１％〜１０％である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記疾患が、
心筋炎、
急性運動性軸索型ニューロパチー、
有痛脂肪症、
抗糸球体基底膜腎炎；グッドパスチャー症候群、
抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ、ＡＰＬＳ）、
抗合成酵素抗体症候群；筋炎、ＩＬＤ、
失調性ニューロパチー（急性及び慢性）、
自己免疫性腸症（ＡＩＥ）、
自己免疫性好中球減少症、
自己免疫性網膜症、
自己免疫性甲状腺炎、
自己免疫性蕁麻疹、
疱疹状皮膚炎、
後天性表皮水疱症、
本態性混合型クリオグロブリン血症、
多発血管炎性肉芽腫症（ＧＰＡ）、
混合性結合組織病（ＭＣＴＤ）、
神経性筋強直症、
視神経炎、
傍腫瘍性小脳変性症、
抗Ｎ−メチルＤ−アスパラギン酸塩（抗ＮＭＤＡ）受容体脳炎、
自己免疫性溶血性貧血、
自己免疫性血小板減少性紫斑病、
慢性炎症性脱髄性多発根神経炎、
皮膚筋炎、
妊娠性類天疱瘡、
グレーブス病、
ギラン・バレー症候群、
ＩｇＧ４関連疾患、
ランバート・イートン筋無力症候群、
ループス腎炎、
筋炎、
多巣性運動ニューロパチー、
重症筋無力症、
視神経脊髄炎、
尋常性天疱瘡、
多発筋炎、及び
全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）
からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記疾患が、
急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、
自己免疫性血管性浮腫（後天性血管性浮腫ＩＩ型）、
自己免疫性肝炎（Ｉ型及びＩＩ型）、
自己免疫性下垂体炎；リンパ球性下垂体炎、
自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、
エバンス症候群、
グレーブス眼症、
橋本脳症、
ＩｇＡ血管炎（ＩｇＡＶ）、
潜在性自己免疫性肝炎、
線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、
ループス血管炎、
膜様糸球体腎炎、
顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）、
モーレン潰瘍、
モルフェア、
オプソクローヌス・ミオクローヌス症候群、
オルド甲状腺炎、
回帰性リウマチ、
神経芽腫を有する傍腫瘍性オプソクローヌス・ミオクローヌス運動失調症、
小児自己免疫性溶連菌関連性精神神経障害（ＰＡＮＤＡＳ）、
心膜切開後症候群、
原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、
ラスムッセン脳炎、
リウマトイド血管炎、
シュニッツラー症候群、
シデナム舞踏病、
未分化結合組織病（ＵＣＴＤ）、及び
ミラー・フィッシャー症候群
からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記ｈｓＩｇＧ製剤中のＩｇＧ上のグリカンの６０％が、α１，３分岐及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
Ｆａｂドメイン上の分枝状グリカンの少なくとも６０％が、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結されるα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸を有し、Ｆｃドメイン上の分枝状グリカンの少なくとも６０％が、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結される前記α１，３アーム及び前記α１，６アームの両方にシアル酸を有する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ＣＩＤＰを有する対象においてＣＩＤＰを治療する方法であって、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満の有効用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項２０】
前記ＩＶＩＧの有効用量が、２００〜２０００ｍｇ／ｋｇである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満である有効用量で投与される、請求項１９又は２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１％の用量で投与される、請求項１９又は２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
ＩＴＰを有する対象においてＩＴＰを治療する方法であって、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満である有効用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項２５】
前記ＩＶＩＧの有効用量が、１０００〜２０００ｍｇ／ｋｇである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満である有効用量で投与される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１％〜５％の用量で投与される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
ｗＡＩＨＡを有する対象においてｗＡＩＨＡを治療する方法であって、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満である有効用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項３０】
前記ＩＶＩＧの有効用量が、１０００ｍｇ／ｋｇである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１０％未満の用量で投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１％〜５％の用量で投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、又は１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３４】
ギラン・バレー症候群を有する対象においてギラン・バレー症候群を治療する方法であって、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満の有効用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項３５】
前記ＩＶＩＧの有効用量が、１０００〜２０００ｍｇ／ｋｇである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１０％の用量で投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１％〜５％の用量で投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
ＰＩＤ（原発性体液性免疫不全疾患）を有する対象においてＰＩＤを治療する方法であって、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満である有効用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項４０】
前記ＩＶＩＧの有効用量が、２００〜８００ｍｇ／ｋｇである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１０％未満の用量で投与される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１％〜５％の用量で投与される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、又は８０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
川崎病を有する対象において川崎病を治療する方法であって、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満である有効用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項４５】
前記ＩＶＩＧの有効用量が、１０００〜２０００ｍｇ／ｋｇである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１０％未満の用量で投与される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、前記ＩＶＩＧの有効用量の１％〜５％の用量で投与される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
前記ｈｓＩｇＧ製剤が、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４９】
前記ｈｓＩｇＧ製剤の用量が、前記ＩＶＩＧの有効用量と同様の有効性を有する、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記ＩＶＩＧの有効用量に起因する少なくとも１つの副作用が、前記ｈｓＩｇＧ製剤を投与することによって緩和される、請求項１〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
１１０、９、８、７、６、５、４、３、２又は１ｍｇのｈｓＩｇＧ製剤を含む無菌組成物を含む容器を含む、製造物品。
【請求項５２】
前記ｈｓＩｇＧ製剤中のＩｇＧのＦａｂドメイン上の分枝状グリカンの少なくとも６０％が、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結されたα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸を有し、前記ｈｓＩｇＧ製剤中のＩｇＧのＦｃドメイン上の分枝状グリカンの少なくとも６０％が、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合によってα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸を有する、請求項５１に記載の製造物品。
【請求項５３】
前記容器が、バイアル、ボトル、又はバッグである、請求項５１に記載の製造物品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１８年１０月１１日に出願された米国仮出願第６２／７４４，５３６号及び２０１９年７月２９日に出願された米国仮出願第６２／８７９，９３０号の利益を主張する。前述の全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
静注用免疫グロブリン（ＩＶＩｇ又はＩＶＩＧ；ＣＡＳ番号：９００７−８３−４）は、主にヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）からなる市販の治療薬製品（例えば、Ｂｉｖｉｇａｍ（登録商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（登録商標）、Ｃｕｖｉｔｒｕ（登録商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（登録商標）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（登録商標）、ＧａｍａＳＴＡＮ（登録商標）、Ｇａｍｍａｋｅｄ（登録商標）、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（登録商標）、Ｇａｍｕｎｅｘ−Ｃ（登録商標）、Ｈｉｚｅｎｔｒａ（登録商標）、Ｈｙｑｖｉａ（登録商標）、Ｏｃｔａｇａｍ（登録商標）及びＰｒｉｖｉｇｅｎ（登録商標））である。ＩＶＩＧは、数千人の健康なドナーのプールされた血漿から調製され、したがって、ＩｇＧレパートリーの多様性が個々のドナーのものを超えることを確実にする。静注用免疫グロブリンは、多種多様な慢性自己免疫性及び全身性炎症状態を治療するために使用される。自己免疫性指標としては、特発性血小板減少性紫斑病（idiopathic thrombocytopenic purpura、ＩＴＰ）、川崎病、ギラン・バレー症候群及び他の自己免疫性神経障害、重症筋無力症、皮膚筋炎、並びにいくつかのまれな疾患が挙げられる。ＩＶＩｇの正確な作用機構は、十分に理解されていない。様々な研究が、自然免疫系及び適応免疫系（４、６）の構成要素を調節する一連の相互に排他的でない機構を文書化してきた。例えば、ＩＶＩＧは、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞、制御性Ｔ細胞、Ｂ細胞、及び単球／マクロファージ系に対するその作用によって、並びに炎症性サイトカイン、ケモカイン、及び病原性自己抗体などの可溶性因子の抑制又は中和によって、抗炎症応答を媒介することが示されてきた。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本出願は、ＩＶＩＧの有効用量の約１％〜１０％である、高度にシアル酸付加されたＩｇＧ（ｈｓＩｇＧ）製剤の用量が、ＩＶＩＧで治療される疾患を治療するのに有効であり得るという驚くべき発見に部分的に基づく。高度にシアル酸付加されたＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧから調製することができる。したがって、同様のＩＶＩＧは、ＩｇＧサブクラスの不均質な混合物、及びヒト血清中に存在することが予想される広範な抗体の配列を含む。ｈｓＩｇＧがＩＶＩＧから調製されるとき、多数のドナーは、Ｉｇレパートリーにおいて多様性を確保する。
【０００４】
高度にシアル酸付加されたＩｇＧ（ｈｓＩｇＧ）製剤は、ＩｇＧ抗体上の分枝状グリカンの少なくとも６０％が、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結されるアルファ１，３分岐及びアルファ１，６分岐の両方にシアル酸を有する（すなわち、シアル酸付加される）、ＩｇＧ製剤である。言い換えれば、分枝状グリカンの少なくとも６０％が、各分岐上にシアル酸を有し、このシアル酸はＮｅｕＡｃであり、α２，６結合によってＧａｌに結合される。ＩｇＧ抗体は、ＦｃドメインのＮ２９７位及び高度にシアル酸付加されたＩｇＧ製剤中のグリコシル化部位を有し、ＩｇＧ抗体のＦｃドメイン上の分枝状グリカンの少なくとも６０％は、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結されるα１，３及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する。ＩｇＧ抗体はまた、Ｆａｂ領域上に分枝状グリカンを有し得、これらの分枝状グリカンの少なくとも５０％は、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結されるアルファ１，３及びアルファ１，６分岐の両方にシアル酸を有する。
【０００５】
ｈｓＩｇＧ製剤はまた、ＩＶＩＧから調製される場合、高度にシアル酸付加されたＩＶＩＧ又は超シアル酸付加ＩＶＧ製剤（ｈｓＩＶＩＧ）とも称され得る。
【０００６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法で使用されるｈｓＩｇＧ製剤はＩｇＧを含み、ＩｇＧ上の分枝状グリカンの少なくとも６０％（７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、又は９５％）が、α１，３分岐及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ上のＦｃグリカンの少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％が、α１，３分岐及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ上のＦａｂ分枝状グリカンの少なくとも５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、又は８５％が、α１，３分岐及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する。場合によっては、ＩｇＧ上の分枝状グリカンの少なくとも８０％が、α１，３分岐及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ上のＦｃグリカンの少なくとも８５％が、α１，３分岐及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ上のＦａｂ分枝状グリカンの少なくとも６０％が、α１，３分岐及びα１，６分岐の両方にシアル酸を有する。
【０００７】
いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤中のタンパク質の少なくとも９０％、９２％、９３％、９４％又は９５％ｗ／ｗがＩｇＧである。
【０００８】
いくつかの実施形態では、本発明は、疾患を治療するための方法に関し、この方法は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％である用量で、対象にｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量は、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、又は２０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、９７５、又は１０００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、毎日、週１回、週２回、隔週、毎月、半月ごとに、隔月、３日ごとに、４日ごとに、５日ごとに、６日ごとに、７日ごとに、１４日に１回、２１日に１回、２８日に１回、２８日間周期で連続２日間につき１日１回、又はＦＤＡ認可ＩＶＩＧ用量と同じ投与頻度で投与される。場合によっては、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効頻度又は認可された投与頻度よりも少ない頻度で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、静脈内、皮下、又は筋肉内に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、単回用量で投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、複数用量で投与される。
【０００９】
いくつかの実施形態では、疾患は、炎症性疾患である。いくつかの実施形態では、対象は、抗体欠損症に罹患している。いくつかの実施形態では、対象は、原発性抗体欠損症に罹患している。いくつかの実施形態では、疾患は、自己抗体の存在に関連する。
【００１０】
いくつかの実施形態では、疾患は、神経疾患である。いくつかの実施形態では、神経疾患は、皮膚筋炎、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経障害（chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy、ＣＩＤＰ）、多巣性運動ニューロパチー（multifocal motor neuropathy、ＭＭＮ）、重症筋無力症及び全身硬直症候群からなる群から選択される。
【００１１】
いくつかの実施形態では、疾患は、免疫性血球減少症、パルボウイルスＢ１９関連赤血球無形成、骨髄腫及び慢性リンパ性白血病に対する二次性低ガンマグロブリン血症並びに骨髄移植後からなる群から選択される。
【００１２】
いくつかの実施形態では、疾患は、血管炎、全身性エリテマトーデス（systemic lupus erythematosis、ＳＬＥ）、粘膜類天疱瘡及びブドウ膜炎からなる群から選択され、皮膚科学において、川崎症候群、皮膚筋炎、中毒性表皮壊死症、及び水疱症を治療するために最も一般的に使用される。
【００１３】
いくつかの実施形態では、疾患は、ＩＶＩＧによる治療のためにＦＤＡに認可されている。いくつかの実施形態では、用量は、疾患に対するＦＤＡ認可ＩＶＩＧ用量の１％〜１０％（例えば、１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％、２〜１０％、２〜９％、２〜８％、２〜７％、２〜６％、２〜５％、２〜４％、２〜３％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、３〜７％、３〜６％、３〜５％、３〜４％、１〜２％、３％、２％又は１％）である。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧのＦＤＡ認可用量は、２００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、又は２０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、９７５、又は１０００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、毎日、週１回、週２回、隔週、毎月、半月ごとに、隔月、３日ごとに、４日ごとに、５日ごとに、６日ごとに、７日ごとに、１４日に１回、２１日に１回、２８日に１回、２８日間周期で連続２日間につき１日１回、又はＦＤＡ認可ＩＶＩＧ用量と同じ投与頻度で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、静脈内、皮下、又は筋肉内に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、単回用量で投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、複数用量で投与される。
【００１４】
いくつかの実施形態では、疾患は、以下からなる群から選択される：
心筋炎、
急性運動性軸索型ニューロパチー、
有痛脂肪症、
抗糸球体基底膜腎炎；グッドパスチャー症候群、
抗リン脂質抗体症候群（Antiphospholipid syndrome、ＡＰＳ、ＡＰＬＳ）、
抗合成酵素抗体症候群；筋炎、ＩＬＤ、
失調性ニューロパチー（急性及び慢性）、
自己免疫性腸症（Autoimmune enteropathy、ＡＩＥ）、
自己免疫性好中球減少症、
自己免疫性網膜症、
自己免疫性甲状腺炎、
自己免疫性蕁麻疹、
疱疹状皮膚炎、
後天性表皮水疱症、
本態性混合型クリオグロブリン血症、
多発血管炎性肉芽腫症（Granulomatosis with polyangiitis、ＧＰＡ）、
混合性結合組織病（Mixed connective tissue disease、ＭＣＴＤ）、
神経性筋強直症、
視神経炎、
傍腫瘍性小脳変性症、
抗Ｎ−メチルＤ−アスパラギン酸塩（Anti-N-Methyl-D-Aspartate、抗ＮＭＤＡ）受容体脳炎、
自己免疫性溶血性貧血、
自己免疫性血小板減少性紫斑病、
慢性炎症性脱髄性多発根神経炎、
皮膚筋炎、
妊娠性類天疱瘡、
グレーブス病、
ギラン・バレー症候群、
ＩｇＧ４関連疾患
ランバート・イートン筋無力症候群、
ループス腎炎、
筋炎、
多巣性運動ニューロパチー、
重症筋無力症、
視神経脊髄炎、
尋常性天疱瘡、
多発筋炎、及び
全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）。
【００１５】
いくつかの実施形態では、疾患は、以下からなる群から選択される：
急性播種性脳脊髄炎（Acute disseminated encephalomyelitis、ＡＤＥＭ）、
自己免疫性血管性浮腫（後天性血管性浮腫ＩＩ型）、
自己免疫性肝炎（Ｉ型及びＩＩ型）、
自己免疫性下垂体炎；リンパ球性下垂体炎、
自己免疫性内耳疾患（Autoimmune inner ear disease、ＡＩＥＤ）、
エバンス症候群、
グレーブス眼症、
橋本脳症、
ＩｇＡ血管炎（IgA vasculitis、ＩｇＡＶ）、
潜在性自己免疫性肝炎、
線状ＩｇＡ病（Linear IgA disease、ＬＡＤ）、
ループス血管炎、
膜様糸球体腎炎、
顕微鏡的多発血管炎（Microscopic polyangiitis、ＭＰＡ）、
モーレン潰瘍、
モルフェア、
オプソクローヌス・ミオクローヌス症候群、
オルド甲状腺炎、
回帰性リウマチ、
神経芽腫を有する傍腫瘍性オプソクローヌス・ミオクローヌス運動失調症、
小児自己免疫性溶連菌関連性精神神経障害（Pediatric Autoimmune Neuropsychiatric Disorder Associated with Streptococcus、ＰＡＮＤＡＳ）、
心膜切開後症候群、
原発性胆汁性肝硬変（Primary biliary cirrhosis、ＰＢＣ）、
ラスムッセン脳炎、
リウマトイド血管炎、
シュニッツラー症候群、
シデナム舞踏病、
未分化結合組織病（Undifferentiated connective tissue disease、ＵＣＴＤ）、及び
ミラー・フィッシャー症候群。
【００１６】
いくつかの実施形態では、組成物はｈｓＩｇＧ製剤を含み、Ｆａｂドメイン上の分枝状グリカンの少なくとも６０％が、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結されるα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸を有し、Ｆｃドメイン上の分枝状グリカンの少なくとも６０％が、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を介して連結されるα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸を有する。
【００１７】
ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満の用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することにより含む、ＣＩＤＰを有する対象においてＣＩＤＰを治療する方法が本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量は２００〜２０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１０％の投与量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％又は１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００１８】
ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満の用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、ＩＴＰを有する対象におけるＩＴＰの方法が本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量は１０００〜２０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１０％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％、２〜１０％、２〜９％、２〜８％、２〜７％、２〜６％、２〜５％、２〜４％、２〜３％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、３〜７％、３〜６％、３〜５％、３〜４％、１〜２％、２％又は１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００１９】
ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満の用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、ｗＡＩＨＡを有する対象におけるｗＡＩＨＡの方法が本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量は１０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％、２〜１０％、２〜９％、２〜８％、２〜７％、２〜６％、２〜５％、２〜４％、２〜３％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、３〜７％、３〜６％、３〜５％、３〜４％、１〜２％、２％又は１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００２０】
本明細書では、ＩＶＩＧの有効用量の１０％の用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、ギラン・バレー症候群を有する対象におけるギラン・バレー症候群の方法が開示される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量は１０００〜２０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１０％未満の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％、２〜１０％、２〜９％、２〜８％、２〜７％、２〜６％、２〜５％、２〜４％、２〜３％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、３〜７％、３〜６％、３〜５％、３〜４％、１〜２％、２％又は１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００２１】
本明細書では、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満の用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、ＰＩＤ（primary humoral immunodeficiency disease、原発性体液性免疫不全疾患）を有する対象におけるＰＩＤの方法が開示される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量は２００〜８００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％、２〜１０％、２〜９％、２〜８％、２〜７％、２〜６％、２〜５％、２〜４％、２〜３％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、３〜７％、３〜６％、３〜５％、３〜４％、１〜２％、２％又は１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００２２】
本明細書では、ＩＶＩＧの有効用量の１０％又は１０％未満の用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することを含む、川崎病を有する対象において川崎病を治療する方法の方法が開示される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量は１０００〜２０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％、２〜１０％、２〜９％、２〜８％、２〜７％、２〜６％、２〜５％、２〜４％、２〜３％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、３〜７％、３〜６％、３〜５％、３〜４％、１〜２％、２％又は１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧの有効用量の１％の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤は、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、又は２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％、１〜９％、１〜８％、１〜７％、１〜６％、１〜５％、１〜４％、１〜３％、１〜２％、２〜１０％、２〜９％、２〜８％、２〜７％、２〜６％、２〜５％、２〜４％、２〜３％、３〜１０％、３〜９％、３〜８％、３〜７％、３〜６％、３〜５％、３〜４％、１〜２％、２％又は１％である用量でｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物を投与することは、ＩＶＩＧの有効用量を含む組成物を投与することと同様の有効性を有する。
【００２４】
いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧの有効用量に起因する少なくとも１つの副作用は、ＩＶＩＧの有効用量の１％〜１０％である用量でｈｓＩｇＧ製剤を投与することによって緩和される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物の投与は、ＩＶＩＧの有効用量と比較して、次の副作用；腫脹、痛み、肢の変色、息切れ、頻拍／頻脈、身体の肢部又は片側のしびれ感又は筋力低下、茶色又は赤い尿、眼又は皮膚の黄変、１００°Ｆを超える熱、筋肉の痙攣、吐き気、嘔吐、筋肉痛、及び低血圧のうちの１つ又は２つ以上の重症度の低減又は時間の短縮をもたらす。
【００２５】
本明細書で使用するとき、「グリカン」は、糖であり、少なくとも３つの糖などの糖残基のモノマー又はポリマーであり得、直鎖状又は分枝状であり得る。「グリカン」は、天然糖残基（例えば、グルコース、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルノイラミン酸、ガラクトース、マンノース、フコース、ヘキソース、アラビノース、リボース、キシロースなど）及び／又は修飾糖（例えば、２’−フルオロリボース、２’−デオキシリボース、ホスホマンノース、６’スルホＮ−アセチルグルコサミンなど）を含み得る。用語「グリカン」は、糖残基のホモ及びヘテロポリマーを含む。用語「グリカン」はまた、複合糖質の（例えば、糖タンパク質、糖脂質、プロテオグリカンなどの）グリカン成分も包含する。この用語は、開裂された又はそうでなければ複合糖質から放出されたグリカンを含む遊離グリカンも包含する。
【００２６】
本明細書で使用するとき、用語「Ｆｃ領域」は、２つの「Ｆｃポリペプチド」のダイマーを指し、各「Ｆｃポリペプチド」は、第１の定常領域免疫グロブリンドメインを除く抗体の定常領域を含む。いくつかの実施形態では、「Ｆｃ領域」は、１つ又は２つ以上のジスルフィド結合、化学リンカー、又はペプチドリンカーによって結合された２つのＦｃポリペプチドを含む。「Ｆｃポリペプチド」は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＧの最後の２つの定常領域免疫グロブリンドメイン、並びにＩｇＥ及びＩｇＭの最後の３つの定常領域免疫グロブリンドメインを指し、これらのドメインに対する可撓性ヒンジＮ末端の一部又はすべてを含んでもよい。ＩｇＧの場合、「Ｆｃポリペプチド」は、免疫グロブリンドメインＣガンマ２（Ｃγ２）及びＣガンマ３（Ｃγ３）、並びにＣガンマ１（Ｃγ１）とＣγ２との間のヒンジの下部を含む。Ｆｃポリペプチドの境界は変化し得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃポリペプチドは、通常、Ｔ２２３又はＣ２２６又はＰ２３０から開始してそのカルボキシル末端までの残基を含むように規定され、この番号付けは、Ｋａｂａｔら（１９９１，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ９１−３２４２，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ，ＶＡ）におけるＥＵインデックスに従う。ＩｇＡの場合、Ｆｃポリペプチドでは、免疫グロブリンドメインＣアルファ２（Ｃα２）及びＣアルファ３（Ｃα３）、並びにＣアルファ１（Ｃα１）とＣα２との間のヒンジの下部を含む。Ｆｃ領域は、ＩＶＩＧなどの天然源から合成、組み換え、又は生成され得る。
【００２７】
本明細書で使用するとき、「Ｆｃ領域のＮ−グリコシル化部位」は、グリカンがＮ−結合されるＦｃ領域内のアミノ酸残基を指す。
【００２８】
任意の所与のパラメータについて、いくつかの実施形態では、「割合」は、製剤のグリカンの総モルに対する特定のグリカン（グリカンＸ）のモル数を指す。その割合は、場合によっては、ＰＮＧａｓｅ  Ｆ放出Ｆｃグリカンの総モルに対する、ＰＮＧａｓｅ  Ｆ放出ＦｃグリカンＸのモル数を決定することによって評価され得る。
【００２９】
「精製される」（又は「単離される」）は、天然環境に存在する他の成分から除去又は分離される核酸配列（例えば、ポリヌクレオチド）又はアミノ酸配列（例えば、ポリペプチド）を指す。例えば、単離ポリペプチドは、産生された細胞の他の成分（例えば、小胞体又は細胞質タンパク質及びＲＮＡ）から分離されたものである。単離されたポリヌクレオチドは、他の核成分（例えば、ヒストン）及び／又は上流若しくは下流核酸配列から分離されるものである。単離された核酸配列又はアミノ酸配列は、示される核酸配列又はアミノ酸配列の天然環境中に存在する他の成分を６０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％含まなくてもよい。
【００３０】
本明細書で使用するとき、用語「ＳＴ６シアリルトランスフェラーゼ」は、アミノ酸配列が、α２，６結合（例えば、ＳＴ６Ｇａｌ−Ｉ）を介したグリカンの末端ガラクトースへのシアル酸の移動に関与するタンパク質と少なくとも１００％、９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、９０％の同一性を有する少なくとも１つの特徴的配列を含み、それを示すポリペプチドを指す。多種多様なＳＴ６シアリルトランスフェラーゼ配列は、本明細書に記載されるものなど、当該技術分野において既知であり、いくつかの実施形態では、ＳＴ６シアリルトランスフェラーゼは、本明細書に記載されるＳＴ６シアリルトランスフェラーゼ（その各々は、「参照」ＳＴ６シアリルトランスフェラーゼとみなされる）のうちの１つと、少なくとも１つの特徴的配列を共有し、かつ／又は本明細書に記載されるＳＴ６シアリルトランスフェラーゼのうちの１つとの特定の程度の全体的な配列同一性を示す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＳＴ６シアリルトランスフェラーゼは、本明細書に記載される参照ＳＴ６シアリルトランスフェラーゼと少なくとも１つの生物活性を共有する。いくつかのこのような実施形態では、共有生物活性は、グリカンへのシアル酸の移動に関する。ｈｓＩｇＧを調製するための好適なＳＴ６シアリルトランスフェラーゼは、ＣＨＯ細胞で発現され得るヒトＳＴ６Ｇａｌである。
【００３１】
Ｎ−結合型グリコシル化
Ｎ−結合型オリゴ糖鎖は、小胞体の内腔内のタンパク質に添加される（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ，Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｉｎｃ．（Ａｌｂｅｒｔｓら、１９９４）を参照されたい）。具体的には、初期オリゴ糖（典型的には１４糖）を、Ａｓｎ  Ｘ  Ｓｅｒ／Ｔｈｒの標的コンセンサス配列内に含有されるアスパラギン残基の側鎖上のアミノ基に添加し、式中、Ｘはプロリン以外の任意のアミノ酸であってもよい。この初期オリゴ糖の構造は、殆どの真核生物に共通であり、３つのグルコース、９つのマンノース、及び２つのＮ−アセチルグルコサミン残基を含有する。この初期オリゴ糖鎖は、小胞体中の特定のグリコシダーゼ酵素によりトリミングすることができ、２つのＮ−アセチルグルコサミン及び３つのマンノース残基（図１に示され、アスパラギン残基に結合されている）からなる短い分枝状コアオリゴ糖を得ることができる。分岐のうちの１つは、図１に示されるように、当該技術分野において「α１，３アーム」と称され、第２の分岐は「α１，６アーム」と称される。
【００３２】
Ｎ−グリカンは、「高マンノース型」、「ハイブリッド型」、及び「複合型」と呼ばれる３つの別個の群に細分化することができ、共通の五糖コア（Ｍａｎ（アルファ１，６）−（Ｍａｎ（アルファ１，３））−Ｍａｎ（ベータ１，４）−ＧｌｃｐＮＡｃ（ベータ１，４）−ＧｌｃｐＮＡｃ（ベータ１，Ｎ）−Ａｓｎ）はすべての３つの群で生じる。
【００３３】
小胞体における初期プロセシングの後、糖タンパク質はゴルジに転移され、更なるプロセシングが起こり得る。グリカンが、コア五糖構造に完全にトリミングされる前にゴルジに移動されると、「高マンノースグリカン」が得られる。
【００３４】
追加的に又は代替的に、Ｎ−アセチルグルコサミンの１つ又は２つ以上の単糖単位をコアマンノースサブユニットに添加して、「複合グリカン」を形成してもよい。ガラクトースをＮ−アセチルグルコサミンサブユニットに添加して、かつ、ガラクトースサブユニットにシアル酸サブユニットを添加して、シアル酸、ガラクトース、又はＮ−アセチルグルコサミン残基のいずれかが末端となる鎖をもたらし得る。更に、フコース残基を、コアオリゴ糖のＮ−アセチルグルコサミン残基に添加してもよい。これらの添加の各々は、当該技術分野において既知の特定のグリコシルトランスフェラーゼにより触媒される。
【００３５】
シアル酸は、複素環構造を有する９−炭素単糖のファミリーである。これらは、環に結合したカルボン酸基を介した負電荷、並びにＮ−アセチル基及びＮ−グリコリル基を含む他の化学的装飾を有する。哺乳類発現系で産生される糖タンパク質に見出される２つの主な種類のシアル残基は、Ｎ−アセチル−ノイラミン酸（N-acetyl-neuraminic acid、ＮｅｕＡｃ）及びＮ−グリコリルノイラミン酸（N-glycolylneuraminic acid、ＮｅｕＧｃ）である。これらは、通常、Ｎ−及びＯ−結合グリカンの両方の非還元末端でガラクトース（Ｇａｌ）残基に結合した末端構造として生じる。これらのシアル基についてのグリコシド結合構成は、α２，３又はα２，６のいずれかであり得る。
【００３６】
「ハイブリッドグリカン」は、高マンノース及び複合グリカンの両方の特徴を含む。例えば、ハイブリッドグリカンの１つの分岐は、主に又は排他的にマンノース残基を含んでもよく、別の分岐は、Ｎ−アセチルグルコサミン、シアル酸、及び／又はガラクトース糖を含んでもよい。
【００３７】
ＩＶＩＧの有効用量の特定の割合を指すとき、指定された割合は、±５ｍｇ／ｋｇの範囲を指す。したがって、１，０００ｍｇ／ｋｇ用量の１０％は、１０００ｍｇ／ｋｇ±５％であり、１，０００ｍｇ／ｋｇ用量の５％は５０ｍｇ／ｋｇ±５％である。
【００３８】
抗体は、免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域内の保存されたＮ−結合型グリコシル化部位でグリコシル化される。例えば、ＩｇＧ抗体の各重鎖は、ＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７で単一のＮ−結合型グリコシル化部位を有する（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ８：２２６−２３４（２００９）を参照されたい）。ＩｇＡ抗体は、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメイン内にＮ−結合型グリコシル化部位を有し、ＩｇＥ抗体は、ＣＨ３ドメイン内にＮ−結合型グリコシル化部位を有し、ＩｇＭ抗体は、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４ドメイン内にＮ−結合型グリコシル化部位を有する（Ａｒｎｏｌｄら、Ｊ．Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２８０：２９０８０−２９０８７（２００５）、Ｍａｔｔｕら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３：２２６０−２２７２（１９９８）、Ｎｅｔｔｌｅｔｏｎら、Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０７：３２８−３２９（１９９５）を参照されたい））。
【００３９】
各抗体アイソタイプは、定常領域において異なる様々なＮ−結合型炭水化物構造を有する。例えば、ＩｇＧは、Ｆｃ領域の各ＦｃポリペプチドにおけるＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７における単一のＮ−結合型二分岐炭水化物を有し、Ｃ１ｑ及びＦｃγＲについての結合部位も含有する（Ｊｅｆｆｅｒｉｓら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．１６３：５９−７６（１９９８）及びＷｒｉｇｈｔら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １５：２６−３２（１９９７））を参照されたい）。ヒトＩｇＧの場合、コアオリゴ糖は、通常、異なる数の外側残基を有するＧｌｃＮＡｃ２Ｍａｎ３ＧｌｃＮＡｃからなる。個々のＩｇＧ間の変動は、末端ＧｌｃＮＡｃの一方若しくは両方におけるガラクトース及び／又はガラクトース−シアル酸の結合、又は第３のＧｌｃＮＡｃアーム（バイセクトＧｌｃＮＡｃ）の結合、及び／又はフコースの結合を介して生じ得る。
【００４０】
特に定義されない限り、本明細書で使用されているすべての技術的用語及び科学的用語は、本発明が属する分野の当業者に共通に理解されるものと同じ意味を有している。本発明で使用するための方法及び材料が本明細書に記載され、当該技術分野において既知の他の好適な方法及び材料を使用することもできる。材料、方法、及び実施例は、単に例示的なものであり、限定を意図したものではない。本明細書で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、及び他の参考文献は、参照することによりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。不一致である場合、定義を含め本明細書が適用される。
【００４１】
本発明の他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明及び特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合によってα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸付加された分枝状グリカンの一例の概略図である。
【図２】ｈｓＩｇＧの調製方法の概略図である。開始基質は、ＩＶＩＧ又はその画分であり得る。
【図３】ＳＴ６Ｇａｌ１による分岐状グリカンのシアル酸付加の概略図である。
【図４】ＣＭＰ−ＮＡＮＡ及びＳＴ６Ｇａｌ１の存在下での、ＩＶＩｇ  Ｆｃグリコフォーム比率の時間経過を示すグラフである。ガラクトシル化されたＩＶＩｇを、３７℃で２０ｍＭのＣＭＰ−ＮＡＮＡ及び０．３Ｕ／ｍｇのＳＴ６Ｇａｌ１と共にインキュベートした。アリコートを異なる時点で除去し、ＩＶＩｇグリコフォームの相対比率を、グリコペプチドＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析によって決定した。
【図５Ａ】マウスＩＴＰモデルにおけるＩＶＩＧ用量応答の分析の結果を示す（ｎｓ、有意性なし。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１）。
【図５Ｂ】マウスＩＴＰモデルにおけるＩＶＩＧ用量応答の分析の結果を示す（ｎｓ、有意性なし。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１）。
【図６】ＩＴＰのマウスモデルにおいて、０．１ｇ／ｋｇのｈｓＩｇＧと０．１及び１ｇ／ｋｇのＩＶＩＧとの治療用量の比較試験の結果を示す。
【図７】ＩＴＰを有するヒト患者におけるｈｓＩｇＧ及びＩＶＩＧの比較の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
本開示は、ｈｓＩｇＧ製剤を使用した処理方法に関する。ＨｓＩｇＧ製剤は、分枝状グリカンの少なくとも６０％が脱シアル酸付加された、すなわち、α１，３アーム（例えば、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を有する）上に及びα１，６アーム（例えば、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合を有する）上にシアル酸を有する、ＩｇＧ抗体（例えば、ＩＶＩＧから調製される）の混合物を含む製剤である。
【００４４】
本明細書に開示されるｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧで治療される疾患を治療するために使用され得る。重要なことに、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧよりもはるかに強力であり、はるかに低い用量及び／又はより低頻度の治療での有効な治療を可能にする。例えば、本明細書に示されるように、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧよりも１０〜１００倍強力であり得、有効な又は承認されたＩＶＩＧ用量の１％〜１０％である用量での治療を可能にする。
【００４５】
ＩＶＩＧを利用する現在の治療は、可変有効性、臨床的リスク、高コスト、及び有限供給を含むが、これらに限定されない明確な制限を有する。現在の最大用量レジメンでは、多くの場合、部分的及び不十分な持続的応答のみが得られている。加えて、大量のＩＶＩｇ治療に関連する長い注入時間（４〜６時間）（ＩＶＩＧは、一般に１，０００〜２，０００ｍｇ／ｋｇで投与される）は、注入センターにおいて多大なリソースを消費し、利便性及び生活の質などの患者に報告される結果に悪影響を及ぼしている。
【００４６】
ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧよりも非常に強力であるため、より短い注入時間、投与されるはるかに少ないタンパク質の量、場合によっては、低い頻度の投与を提供することができる。この理由のために、ｈｓＩｇＧ製剤は、ＩＶＩＧによる治療と比較して、非常に改善された患者の体験及びより高い生活品質を提供することができる。場合によっては、ＩＶＩＧの静脈内投与で治療されなければならない状態は、ｈｓＩｇＧの皮下投与（注射又は注入）によって、例えば、自宅での患者による投与を可能にする皮下ポンプにより治療することができる。加えて、ｈｓＩｇＧの有効用量は、ＩＶＩＧの有効用量に必要とされるよりもはるかに少ない量のＩＶＩＧから調製することができる。これは、ＩＶＩＧが限られた供給で高価であるため、重要な利点である。
【００４７】
シアル酸付加のレベルは、個々のＦｃ領域（例えば、Ｆｃ領域内の分枝状グリカンのシアル酸、α１，３アーム、α１，６アーム、又はその両方を有する分枝状グリカンの数）、又はグリコタンパク質の調製の全体的な組成（例えば、糖タンパク質の調製におけるＦｃ領域内の分枝状グリカンのα１，３アーム、α１，６アーム、又はその両方にシアル酸を有する分枝状グリカンの数又は割合）に関して測定され得る。
【００４８】
ＩｇＧ製剤をシアル酸付加する方法
Ｗａｓｈｂｕｒｎら（Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  １１２（１１）：Ｅ１２９７−３０６）に記載されているように、ＳＴ６ＧａｌＩシアリルトランスフェラーゼは、整然とした、シアル酸ドナー（例えば、シチジン５’−モノホスホ−Ｎ−アセチルノイラミン酸）から、α２，６結合を介して、グリカンの末端ガラクトース残基へのシアル酸の移動を触媒する。ＳＴ６シアリルトランスフェラーゼは、シアル酸を分枝状グリカンのα１，３アームに移動させ、それに続いて、第２のシアル酸をα１，６アームに移動させることができ（シアル酸付加された分枝状グリカンを生成する）、それに続いて、更にα１，３アームからシアル酸を除去することができる（α１，６アーム上にシアル酸を有する分枝状グリカンを生成する）。したがって、ＳＴ６シアリルトランスフェラーゼの活性（例えば、動態）を制御及び／又は調節することによって、特定のシアル酸付加パターンを有する糖タンパク質を産生することができる。
【００４９】
ｈｓＩｇＧの産生方法については、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＷａｓｈｂｕｒｎら及び米国特許出願公開第２０１６／０１０８４５０号に記載されている。ＳＴ６Ｇａｌ−１シアリルトランスフェラーゼ（Ｅｎｇｅｌら、ＢＭＣ  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ７（Ｓｕｐｐｌ  ６）：Ｐ１１０，２０１３）もまた、ｈｓＩｇＧを調製するために有用であり得る。
【００５０】
Ｆａｂシアル酸付加を有意に増加させない、異なるシアル酸付加方法について、Ｈｕａｎｇら（Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  １３４（２９）：１２３０８−１２３１８，２０１２）に記載されている。Ｆａｂシアル酸付加の欠如にもかかわらず、この方法によってシアル酸付加されたＩＶＩＧは有用であり得る。
【００５１】
ｈｓＩｇＧ製剤は、以下のように市販のＩＶＩＧから製造することができる。バルクＩＶＩＧ、１０％溶液（０．１ｇ／ｍＬ）をプールし、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（３−（Ｎ−ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏ）ｐｒｏｐａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ、ＭＯＰＳ）ｐＨ７．４緩衝液で希釈する。この溶液を、３０ｋＤａのタンジェンシャルフローフィルトレーション（tangential flow filtration、ＴＦＦ）膜（ポリエーテルスルホンからなる膜）を使用して、ＭＯＰＳ  ｐＨ７．４緩衝液の５ダイアボリューム（diavolume、ＤＶ）で透析濾過する（diafiltered、ＤＦ）。次いで、緩衝液交換されたＩＶＩＧ溶液を濃縮し、続いて０．２μｍの深層濾過を行い、最終的なＩＶＩＧ濃度が≧１５０ｍｇ／ｍＬとなる。シアル酸付加は、ＭＯＰＳ  ｐＨ７．４緩衝液に溶解された２つの糖ヌクレオチドを使用して、２つの酵素反応工程で達成される。最初に、ガラクトシル化は、ＭＯＰＳ  ｐＨ７．４緩衝液中でのβ−１，４ガラクトシルトランスフェラーゼ酵素（Ｂ４ＧａｌＴ）、ウリジン二リン酸ガラクトース（uridine diphosphate galactose、ＵＤＰ−Ｇａｌ）及び塩化マンガンとの反応によっておこる。ＭＯＰＳ緩衝液を添加することにより、反応溶液を約１３５ｍｇ／ｍＬに調整し、約３７℃で約４８時間維持する。ガラクトシル化に続いて、この材料を、ヒトα２，６−シアリルトランスフェラーゼ酵素（ＳＴ６−Ｇａｌ１）及びシチジン５’モノホスホ−Ｎ−アセチルノイラミン酸（cytidine 5’monophospho-N-acetyl neuraminic acid、ＣＭＰ−ＮＡＮＡ）を添加して約７２時間更にインキュベートし、ＭＯＰＳ緩衝液ｐＨ７．４で約１２０ｍｇ／ｍＬに調整する。ＣＭＰ−ＮＡＮＡを、約１２時間間隔での反応の過程にわたって、少量ずつ投入する。
【００５２】
グリカン評価
糖タンパク質のグリカンは、当該技術分野において既知の任意の方法を用いて評価することができる。例えば、グリカン組成物のシアル酸付加（例えば、α１，３アーム及び／又はα１，６アーム上のシアル酸を有する分枝状グリカンのレベル）は、例えば、Ｂａｒｂ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４８：９７０５−９７０７（２００９）、Ａｎｕｍｕｌａ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３８２：１６７−１７６（２０１２）；Ｇｉｌａｒら、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．４１７：８０−８８（２０１１）；Ｗｕｈｒｅｒら、Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ．８４９：１１５−１２８（２００７）に記載されている方法を使用して特徴付けることができる。いくつかの実施形態では、グリカンのシアル酸付加の評価に加えて、表１に記載される１つ又は２つ以上のパラメータが評価される。
【００５３】
いくつかの例では、本明細書に記載のグリカン構造及び組成物は、例えば、１つ又は２つ以上の、酵素、クロマトグラフィー、質量分析（mass spectrometry、ＭＳ）、ＭＳが続くクロマトグラフィー、電気泳動法、ＭＳが続く電気泳動法、核磁気共鳴（nuclear magnetic resonance、ＮＭＲ）法、及びこれらの組み合わせによって分析される。例示的な酵素方法には、１つ又は２つ以上のグリカン（例えば、１つ又は２つ以上の露出グリカン）を放出するのに十分な条件下及び時間で糖タンパク質製剤を１つ以上の酵素と接触させることが含まれる。いくつかの例では、１つ又は２つ以上の酵素には、ＰＮＧａｓｅ  Ｆが含まれる。例示的なクロマトグラフィー方法としては、パルスドアンペロメトリ検出を使用する強陰イオン交換クロマトグラフィー（Strong Anion Exchange chromatography using Pulsed Amperometric Detection、ＳＡＸ−ＰＡＤ）、液体クロマトグラフィー（liquid chromatography、ＬＣ）、高性能液体クロマトグラフィー（high performance liquid chromatography、ＨＰＬＣ）、超高性能液体クロマトグラフィー（ultra performance liquid chromatography、ＵＰＬＣ）、薄層クロマトグラフィー（thin layer chromatography、ＴＬＣ）、アミドカラムクロマトグラフィー、及びこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。例示的な質量分析法（ＭＳ）としては、タンデムＭＳ、ＬＣ−ＭＳ、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ、マトリックス支援型レーザー脱着イオン化質量分析法（matrix assisted laser desorption ionisation mass spectrometry、ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）、フーリエ変換質量分析法（Fourier transform mass spectrometry、ＦＴＭＳ）、質量分析によるイオンモビリティー分離（ion mobility separation with mass spectrometry、ＩＭＳ−ＭＳ）、電子移動解離（electron transfer dissociation、ＥＴＤ−ＭＳ）、及びこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。例示的な電気泳動法としては、キャピラリー電気泳動（capillary electrophoresis、ＣＥ）、ＣＥ−ＭＳ、ゲル電気泳動、アガロースゲル電気泳動、アクリルアミドゲル電気泳動、特定のグリカン構造を認識する抗体を使用するウエスタンブロッティングが続くＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）、及びこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。例示的な核磁気共鳴（ＮＭＲ）としては、一次元ＮＭＲ（one-dimensional NMR、１Ｄ−ＮＭＲ）、二次元ＮＭＲ（two-dimensional NMR、２Ｄ−ＮＭＲ）、相関分光磁気角度スピニングＮＭＲ（correlation spectroscopy magnetic-angle spinning NMR、ＣＯＳＹ−ＮＭＲ）、全相関分光ＮＭＲ（total correlated spectroscopy NMR、ＴＯＣＳＹ−ＮＭＲ）、異核種単一量子コヒーレンスＮＭＲ（heteronuclear single-quantum coherence NMR、ＨＳＱＣ−ＮＭＲ）、異核間多量子コヒーレンス（heteronuclear multiple quantum coherence、ＨＭＱＣ−ＮＭＲ）、回転核オーバーハウザー効果分光ＮＭＲ（rotational nuclear overhauser effect spectroscopy NMR、ＲＯＥＳＹ−ＮＭＲ）、核オーバーハウザー効果分光法（nuclear overhauser effect spectroscopy、ＮＯＥＳＹ−ＮＭＲ）、及びこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５４】
いくつかの例では、本明細書に記載される技術は、グリカン又は糖タンパク質の検出、分析、及び／又は単離のための１つ又は２つ以上の他の技術と組み合わされてもよい。例えば、特定の例では、グリカンは、１つ又は２つ以上の利用可能な方法を使用して、本開示に従って分析される（ただし、いくつかの例では、Ａｎｕｍｕｌａ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３５０（１）：１，２００６；Ｋｌｅｉｎら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１７９：１６２，１９８９、及び／又はＴｏｗｎｓｅｎｄ，Ｒ．Ｒ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ「Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  ａｎｄ  Ｃａｐｉｌｌａｒｙ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．，Ｅｄ．Ｚ．Ｅｌ  Ｒａｓｓｉ，ｐｐ１８１−２０９，１９９５、国際公開第２００８／１２８２１６号、同第２００８／１２８２２０号、同第２００８／１２８２１８号、同第２００８／１３０９２６号、同第２００８／１２８２２５号、同第２００８／１３０９２４号、同第２００８／１２８２２１号、同第２００８／１２８２２８号、同第２００８／１２８２２７号、同第２００８／１２８２３０号、同第２００８／１２８２１９号、同第２００８／１２８２２２号、同第２０１０／０７１８１７号、同第２０１０／０７１８２４号、同第２０１０／０８５２５１号、同第２０１１／０６９０５６号、及び同第２０１１／１２７３２２号を参照されたく、これらの各々は参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる）。例えば、いくつかの例では、グリカンは、クロマトグラフィー方法、電気泳動法、核磁気共鳴法、及びこれらの組み合わせのうちの１つ又は２つ以上を使用して特徴付けられる。いくつかの例では、例えば、糖タンパク質製剤における１つ又は２つ以上の標的タンパク質特異的パラメータを、例えば、本明細書に開示されるパラメータのうちの１つ又は２つ以上を評価するための方法は、以下の方法のうちの１つ以上によって実行され得る。
【００５５】
いくつかの例では、例えば、糖タンパク質製剤における１つ又は２つ以上の標的タンパク質特異的パラメータを、例えば、本明細書に開示されるパラメータのうちの１つ又は２つ以上を評価するための方法は、以下の方法のうちの１つ以上によって実行され得る。
【００５６】
【表１−１】
2022502466.tif 000003
【００５７】
【表１−２】
2022502466.tif 000004
【００５８】
上記の文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれるか、又は代替的に、それらが本明細書に記載されるパラメータを決定するための方法のうちの１つ又は２つ以上に関連する程度まで組み込まれる。
【００５９】
薬学的組成物及び投与
ｈｓＩｇＧは、薬学的組成物に組み込むことができる。ｈｓＩｇＧ製剤の静脈内投与のための薬学的組成物は、当業者に既知の方法によって製剤化することができる。例えば、薬学的組成物は、ｈｓＩｇＧ製剤を、滅菌水及び生理食塩水、植物油、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、香味賦形剤、希釈剤、ビヒクル、防腐剤、結合剤などの薬学的に許容されるビヒクル又は媒体と適切に組み合わせることによって製剤化し、続いて一般的に受け入れられている薬学的慣行に必要な単位用量形態で混合することができる。薬学的製剤に含まれる有効成分の量は、指定範囲内の好適な用量が提供されるようなものである。
【００６０】
注射用無菌組成物は、ビヒクルとしての注射のために蒸留水を使用して、従来の薬学的慣行に従って製剤化することができる。例えば、グルコース並びに、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンノース、Ｄ−マンニトール、及び塩化ナトリウムなどの他のサプリメントを含有する生理食塩水又は等張溶液を、注射のための水溶液として、任意選択的に、好適な可溶化剤、例えば、エタノールなどのアルコール、及びプロピレングリコール又はポリエチレングリコールなどのポリアルコール、及びポリソルベート８０（商標）、ＨＣＯ−５０などの非イオン性界面活性剤と組み合わせて、使用してもよい。
【００６１】
油性液体の非限定的な例としては、ゴマ油及び大豆油が挙げられ、可溶化剤としての安息香酸ベンジル又はベンジルアルコールと組み合わされてもよい。含まれ得る他のアイテムは、リン酸緩衝剤、又は酢酸ナトリウム緩衝剤などの緩衝剤、プロカイン塩酸塩などの無痛化薬、ベンジルアルコール又はフェノールなどの安定剤、及び酸化防止剤である。製剤化された注射剤は、好適なアンプルに入れることができる。
【００６２】
いくつかの実施形態では、用量は、ＦＤＡ認可（又は他の国内若しくは国際規制機関）ＩＶＩＧ用量又は疾患のための有効なＩＶＩＧ用量の１％〜１０％である。いくつかの実施形態では、ＦＤＡ（又は他の国内又は国際規制機関）認可用量又はＩＶＩＧの有効用量は、２００ｍｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、６００ｍｇ／ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、又は２０００ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、約４、５、６、１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、９７５、又は１０００ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ｈｓＩｇＧ製剤を含む組成物は、毎日、週１回、週２回、隔週、毎月、半月ごとに、隔月、３日ごとに、４日ごとに、５日ごとに、６日ごとに、７日ごとに、１４日に１回、２１日に１回、２８日に１回、２８日間周期で連続２日間につき１日１回、又はＦＤＡ認可ＩＶＩＧ用量と同じ投与頻度で投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、単回用量で投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、複数用量で投与される。用量及び投与方法は、患者の体重、年齢、状態などに応じて変化し、当業者が必要に応じて適宜選択することができる。
【００６３】
Ｗａｓｈｂｕｒｎらに記載されているように、ＳＴ６Ｇａｌ１によるシアル酸付加についての分析により、ＳＴ６Ｇａｌ１が、ＣＭＰ−ＮＡＮＡ糖ヌクレオチドからＦｃグリカンへのシアル酸の移動を触媒するだけでなく、シアル酸付加産生物からのシアル酸の除去を促進することもできることが明らかになった。これらの反応について、概略的に図３に示す。
【００６４】
Ｗａｓｈｂｕｒｎらは、特定の反応条件下で、二分岐グリカンのα１，３分枝のシアル酸付加（Ａ１Ｆ−１，３を形成する）は急速であり、３０分で本質的に完了したのに対し、二重シアル酸付加種（Ａ２Ｆ）は約１０倍の遅い速度で形成され、２４時間で蓄積が停止された。２４時間後、α１，６分岐（Ａ１Ｆ−１，６）上のシアル酸を有するモノシアリル化種が形成され始めて、蓄積が着実に継続して、６４時間でグリコシル化種の約３５％に達した。それに付随して、Ａ２Ｆは、２０時間で７１％から６４時間で４４％まで着実に低下を示し、Ａ１Ｆ−１，６グリコフォームが、脱シアル酸付加Ａ２Ｆのより多くの露出α１，３分岐上のシアル酸残基の除去から生成されたことを示唆している。更なるインキュベーションは、Ａ１Ｆ−１，６グリコフォーム中の１，６シアル酸の開裂につながり、シアル酸付加されたが完全にガラクトシル化及びフコシル化された種Ｇ２Ｆが生成された。反応開始時に微量で存在するＧ２Ｆは、４０時間で測定可能な量で現れ、増加し続け、Ａ２Ｆ及びＡ１Ｆ−１，６のレベルが低下するにつれて、６４時間で１５％に達した。
【００６５】
Ｗａｓｈｂｕｒｎらにおいて、これらの観察がＡ２Ｆ種の収率を最大化しつつ、Ａ１Ｆ−１，３、Ａ１Ｆ−１，６及びＧ２Ｆグリコフォームを最小限に抑えるために、パラメータを最適化することが重要であることが更に報告されている。
【００６６】
【数１】
2022502466.tif 000005
グリコフォーム分布の一過性状態に影響を及ぼすパラメータのマトリックスを評価することにより、反応の脱シアル酸付加成分
【００６７】
【数２】
2022502466.tif 000006
が反応におけるＣＭＰ−ＮＡＮＡの自発的分解によって促進されたことが見出された。Ｗａｓｂｕｒｎらにおいて、シアル酸付加反応においてＣＭＰ−ＮＡＮＡを補充することは、Ａ２Ｆ収率を最大化するのを補助し、相当なＡ１Ｆ−１，６又はＧ２Ｆ種を形成せずに２４時間後に、新しいＣＭＰ−ＮＡＮＡの周期的投与が、Ａ２Ｆグリカンのレベルを最大化すると結論付けられた。
【００６８】
ＩＶＩＧのガラクトシル化及びシアル酸付加
シアリルトランスフェラーゼＳＴ６によるＩＶＩＧのシアル酸付加を分析した。ＩＶＩＧを最初にガラクトシル化し、次いでシアル酸付加した。反応を順次実行した。ガラクトシル化反応とシアル酸付加反応との間に精製はなかった。グリコフォームの相対的存在量を、シアル酸付加反応後に分析した。
【００６９】
Ａ．ガラクトシル化
以下の成分を示す濃度で含有させた反応物を設定した。
【００７０】
【表２】
2022502466.tif 000007
【００７１】
反応物を３７℃で７２時間インキュベートした。
【００７２】
Ｂ．シアル酸付加
ガラクトシル化反応のアリコートに、ＣＭＰ−ＮＡＮＡ、ＭＯＰＳ緩衝液、及びＳＴ６Ｇａｌ１を添加した。最終容積は、反応中の成分の最終濃度が示されたとおりに調整された。
【００７３】
【表３】
2022502466.tif 000008
【００７４】
反応を、３７℃でインキュベートした。後の分析のために、アリコートを−２０℃で凍結した様々な時間に抽出した。
【００７５】
Ｃ．結果
図４は、ＣＭＰ−ＮＡＮＡ及びＳＴ６Ｇａｌ１の存在下で、本質的に上述したように実行されるシアル酸付加反応の過程におけるＩＶＩＧ  Ｆｃドメイングリコフォーム比率の時間経過を示す。簡潔に述べると、ガラクトシル化されたＩＶＩＧを、３７℃で２０ｍＭのＣＭＰ−ＮＡＮＡ及び０．３Ｕ／ｍｇのＳＴ６Ｇａｌ１と共にインキュベートした。アリコートを異なる時点で除去し、ＩＶＩＧグリコフォームの相対比率を、グリコペプチドＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析によって決定した。図４に示すように、主たるグリコフォームは、競合付加（正反応）工程及び除去（逆反応）工程による反応の過程で、Ｇ２Ｆ〜Ａ１Ｆ（１，３）からＡ２Ｆ〜Ａ１Ｆ（１，６）まで経時的に変化した。
【００７６】
ｈｓＩｇＧ製剤の分析
市販のＩＶＩＧから製造されたｈｓＩｇＧ製剤は、シアル酸付加反応中にＣＭＰ−ＮＡＮＡを定期的に添加しながら、本質的に上記のように調製した。出発ＩＶＩＧ材料及び得られたｈｓＩｇＧ製剤を、シアル酸付加前及び後に広範に分析した。Ｆｃドメインシアル酸付加に関して、ｈｓＩｇＧ製剤は、テトラシアリル化された（すなわち、各Ｆｃ鎖上の分枝状グリカンを両方の分岐上に実質的にシアル酸付加された。グリコシル化のより詳細な分析が、異なるＦｃアイソタイプとＦａｂグリコシル化を区別するためにアイソタイプ特異的方法及び部位特異的方法で実行した。Ｆｃグリコシル化は、ｈｓＩｇＧ製剤中の各ＩｇＧアイソタイプにおいて、主に出発材料ＩＶＩＧ材料のシアル酸付加種（例えば、Ｇ０Ｆ及びＧ１Ｆ）から９０％超の脱シアル酸付加種（例えば、Ａ２Ｆ、Ａ２、及びＡ２Ｆ＋ＢＧｌｃＮＡｃ）まで変化された。Ｆａｂグリカンの分析により、ＩＶＩＧ出発材料は、Ｆａｂ中にモノシアリル化（約３５％）及びジシアリル化（約３５％）グリカンの有意な分布を含有するが、この分布は、ｈｓＩｇＧ製剤中のより高いレベルのジシアリル化グリカン（約７５％）にシフトすることが更に明らかになった。
【００７７】
ｈｓＩｇＧは、ＩＴＰのマウスモデルにおける血小板破壊を防止する際、ＩＶＩＧよりも約１０倍強力である
Ｗａｓｈｂｕｒｎらは、マウス抗ＣＤ４１抗体により誘導された血小板減少症モデルにおけるＩＶＩＧに対してｈｓＩｇＧ製剤を比較した。簡潔に述べると、６Ａ６−ＩｇＧ２ａ抗体は、２９３Ｔ細胞の一過性トランスフェクション、続いて、製造業者が示唆するタンパク質Ｇビーズ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いた無血清細胞培養上清からの組み換え抗体の精製によって産生された。ＩＶＩＧ製剤を、実験のためにグリシン緩衝液（生理食塩水）で希釈した。慢性ＩＴＰは、０．１μｇ／ｇの６Ａ６−ＩｇＧ２ａ抗血小板抗体の毎日の注射によって誘導された。実験の終了までマウスは血小板減少となった（３日目）。血液系への１：４希釈ＰＢＳの毎日の抗体注射前及び４時間後に血小板数を求めた（Ａｄｖｉａ  １２０；Ｂａｙｅｒ  ＨｅａｌｔｈＣａｒｅ）。抗体注入前の血小板数を１００％に設定した。ＩＴＰモデルにおけるＩＶＩＧの用量−応答プロファイル（図５）。抗血小板抗体による最大血小板枯渇の後、マウスを０．１〜１ｇ／ｋｇのＩＶＩＧで処置し、ＩＶＩＧ処置の日（１日目）及び処置２日後（実験２日目及び３日目）に血小板レベルを求めた。明確な用量−応答がこの範囲内のこのモデルで観察された（図５）。ＩＶＩｇの完全な活性が、０．１ｇ／ｋｇで失われた。ｈｓＩｇＧ製剤をＩＴＰモデルにおけるＩＶＩＧと比較すると、明確な効果の向上が観察された。図６に示すように、０．１ｇ／ｋｇでｈｓＩｇＧを用いた治療処置により、２日目及び３日目における血小板レベルを、１ｇ／ｋｇでＩＶＩｇを用いて得られたものと同様のレベルまで戻された。
【００７８】
ヒト患者における試験
ＨｓＩｇＧ製剤（分枝状グリカンの少なくとも８０％を、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合によってα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸付加した）を、ＩＴＰのヒト患者におけるＩＶＩＧと比較した。１つの研究では、単回漸増用量を、正常で健康なボランティアに３．５ヶ月間にわたって投与した。この二重盲検プラセボ対照試験では、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、１２０ｍｇ／ｋｇ、及び２５０ｍｇ／ｋｇの順序で、１４日毎に単回用量のｈｓＩｇＧを患者に投与した。終了点測定には、安全性及び忍容性があった。
【００７９】
別個の試験では、ＩＴＰ患者に単回漸増用量を４ヶ月間にわたって投与した。ＩＴＰ患者に、６０ｍｇ／ｋｇ、１２０ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｋｇ、及び１０００ｍｇ／ｋｇの固定順序で単回用量のｈｓＩＶＩＧを投与した：。ｈｓＩｇＧ用量を投与し、２８日後、１０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧを同じ患者に投与した。血小板レベルを試験全体を通して測定した。終了点測定には、安全性及び忍容性があった。
【００８０】
無作為化試験では、ＩＴＰ患者においてｈｓＩｇＧ又はＩＶＩＧのいずれかで開始し、中間試験に切り替えた。１つのサブセクションでは、５人の患者を高ｈｓＩＶＩＧ用量で開始し、別の５人の患者を１，０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧで開始した。２ヶ月間の試験の途中で、高ｈｓＩＶＩＧ用量で開始した患者には、試験の残りに対して１，０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧを与え、１，０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧで開始した患者に、試験の残りに対して高ｈｓＩｇＧ用量を与えた。血小板応答を全体を通して測定した。別のサブセクションでは、５人の患者を低ｈｓＩｇＧ投与で開始し、別の５人の患者を１，０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧで開始した。２ヶ月間の試験の途中で、低ｈｓＩｇＧ用量で開始した患者には、１，０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧを試験の残りに対して投与し、１，０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧで開始した患者には、試験の残りに対して低ｈｓＩＧ用量を投与した。血小板応答を全体を通して測定した。ｈｓＩＶＩＧの効力を求めた。
【００８１】
ｈｓＩｇＧ製剤は、ヒトＩＴＰ患者においてＩＶＩＧよりも強力である
ｈｓＩｇＧ製剤を、ＩＴＰのヒト患者のＩＶＩＧと比較した。このｈｓＩｇＧ製剤においては、分枝状グリカンの少なくとも８０％を、ＮｅｕＡｃ−α２，６−Ｇａｌ末端結合によってα１，３アーム及びα１，６アームの両方にシアル酸付加した。患者に４３ｍｇ／ｋｇのｈｓＩＶＩＧを投与した。図７に示されるように、この患者は、４３ｍｇ／ｋｇでｈｓＩｇＧ製剤を投与したときに、１０００ｍｇ／ｋｇのＩＶＩＧ用量と同様の網赤血球数を有した。したがって、ｈｓＩｇＧ製剤は、この患者における血小板破壊を防止する際にＩＶＩＧよりも約２５倍強力であった。
【００８２】
他の実施形態
本発明はこの詳細な説明と関連して記載されてきたが、前述の説明は本発明の範囲を例示したものであって、発明の範囲を限定することを意図したものではなく、発明の範囲は添付の特許請求の範囲により定義されると理解される。他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲内である。
【図１】
2022502466.tif 000009
【図２】
2022502466.tif 000010
【図３】
2022502466.tif 000011
【図４】
2022502466.tif 000012
【図５Ａ】
2022502466.tif 000013
【図５Ｂ】
2022502466.tif 000014
【図６】
2022502466.tif 000015
【図７】
2022502466.tif 000016
【国際調査報告】
2022502466.tif 000017
2022502466.tif 000018