(57)【要約】  本発明は、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドを含む組成物及び／又は動物用飼料並びにその使用を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む組成物。
【請求項２】
ムラミダーゼ活性を有する前記ポリペプチドは、菌類のＧＨ２４ムラミダーゼ又はＧＨ２５ムラミダーゼである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記抗生物質は、バシトラシン、バンベリマイシン、カルバドックス、エンラマイシン、エンデュラシジン、ライドロマイシン、ラサロシド、リンコマイシン、モネンシン、ネオマイシン、ペニシリン、ロキサルソン、ロキサルソン、サリノマイシン、タイロシン及びバージニアマイシンのいずれか１つである、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
ムラミダーゼ活性を有する前記ポリペプチドは、
（ａ）配列番号１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｅ）配列番号５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｆ）配列番号６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｇ）配列番号７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｈ）配列番号８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｉ）配列番号９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｊ）配列番号１０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｋ）配列番号１１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｌ）配列番号１２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｍ）配列番号１３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｎ）配列番号１４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｏ）配列番号１５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｐ）配列番号１６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｑ）配列番号１７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｒ）配列番号１８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｓ）配列番号１９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｔ）配列番号２０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｕ）配列番号２１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｖ）配列番号２２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｗ）配列番号２３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｘ）配列番号２４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｙ）配列番号２５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｚ）配列番号２６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａａ）配列番号２７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｂ）配列番号２８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｃ）配列番号２９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｄ）配列番号３０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｅ）配列番号３１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｆ）配列番号３２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｇ）配列番号３３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｈ）配列番号３４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｉ）配列番号３５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｊ）配列番号３６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｋ）配列番号３７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｌ）配列番号３８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｍ）配列番号３９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｎ）配列番号４０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｏ）配列番号４１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｐ）配列番号４２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｑ）配列番号４３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｒ）配列番号４４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｓ）配列番号４５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｔ）配列番号４６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｕ）配列番号４７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｖ）配列番号４８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｗ）配列番号４９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｘ）配列番号５０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｙ）配列番号５１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｚ）配列番号５２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂａ）配列番号５３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｂ）配列番号５４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｃ）配列番号５５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｄ）配列番号５６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｅ）配列番号５７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｆ）配列番号５８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｇ）配列番号５９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｈ）配列番号６０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｉ）配列番号６１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｊ）配列番号６２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｋ）配列番号６３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｌ）配列番号６４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｍ）配列番号６５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｎ）配列番号６６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｏ）配列番号６７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｐ）配列番号６８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｑ）配列番号６９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｒ）配列番号７０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｓ）配列番号７１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｔ）１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の位置に１つ以上のアミノ酸置換（好ましくは保存的置換）、及び／若しくは１つ以上のアミノ酸欠失、及び／若しくは１つ以上のアミノ酸挿入又はその任意の組み合わせを含む、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０又は配列番号７１の変異体；
（ｂｕ）（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）、（ｊ）、（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）、（ｎ）、（ｏ）、（ｐ）、（ｑ）、（ｒ）、（ｓ）、（ｔ）、（ｕ）、（ｖ）、（ｗ）、（ｘ）、（ｙ）、（ｚ）、（ａａ）、（ａｂ）、（ａｃ）、（ａｄ）、（ａｅ）、（ａｆ）、（ａｇ）、（ａｈ）、（ａｉ）、（ａｊ）、（ａｋ）、（ａｌ）、（ａｍ）、（ａｎ）、（ａｏ）、（ａｐ）、（ａｑ）、（ａｒ）、（ａｓ）、（ａｔ）、（ａｕ）、（ａｖ）、（ａｗ）、（ａｘ）、（ａｙ）、（ａｚ）、（ｂａ）、（ｂｂ）、（ｂｃ）、（ｂｄ）、（ｂｅ）、（ｂｆ）、（ｂｇ）、（ｂｈ）、（ｂｉ）、（ｂｊ）、（ｂｋ）、（ｂｌ）、（ｂｍ）、（ｂｎ）、（ｂｏ）、（ｂｐ）、（ｂｑ）、（ｂｒ）、（ｂｓ）又は（ｂｔ）の前記ポリペプチド並びに１〜１０アミノ酸のＮ末端及び／又はＣ末端伸張を含むポリペプチド；及び
（ｂｖ）ムラミダーゼ活性を有し、且つ成熟ポリペプチドの長さの少なくとも９０％を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）、（ｊ）、（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）、（ｎ）、（ｏ）、（ｐ）、（ｑ）、（ｒ）、（ｓ）、（ｔ）、（ｕ）、（ｖ）、（ｗ）、（ｘ）、（ｙ）、（ｚ）、（ａａ）、（ａｂ）、（ａｃ）、（ａｄ）、（ａｅ）、（ａｆ）、（ａｇ）、（ａｈ）、（ａｉ）、（ａｊ）、（ａｋ）、（ａｌ）、（ａｍ）、（ａｎ）、（ａｏ）、（ａｐ）、（ａｑ）、（ａｒ）、（ａｓ）、（ａｔ）、（ａｕ）、（ａｖ）、（ａｗ）、（ａｘ）、（ａｙ）、（ａｚ）、（ｂａ）、（ｂｂ）、（ｂｃ）、（ｂｄ）、（ｂｅ）、（ｂｆ）、（ｂｇ）、（ｂｈ）、（ｂｉ）、（ｂｊ）、（ｂｋ）、（ｂｌ）、（ｂｍ）、（ｂｎ）、（ｂｏ）、（ｂｐ）、（ｂｑ）、（ｂｒ）、（ｂｓ）又は（ｂｔ）のポリペプチドの断片
からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記抗生物質は、エンラマイシン又はバシトラシンである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
配列番号１のムラミダーゼ及びエンラマイシン又はバシトラシンを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
動物用飼料添加剤、１つ以上のタンパク質源及び１つ以上のエネルギー源を含む動物用飼料において、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質をさらに含むことを特徴とする動物用飼料。
【請求項８】
前記タンパク質源は、ダイズ、ツルマメ、インゲン、ハウチワマメ、テパリービーン、ベニバナインゲン、スリムジムビーン、アオイマメ、サヤインゲン、空豆（ソラマメ）、ヒヨコマメ、レンズマメ、ピーナッツ、スペインピーナッツ、キャノーラ、ヒマワリ種、綿実、菜種（アブラナ）若しくはエンドウマメからなる群から選択されるか、又はダイズ粉、全脂肪ダイズ粕、ダイズタンパク濃縮物（ＳＰＣ）、発酵ダイズ粉（ＦＳＢＭ）、ヒマワリ粕、綿実粕、菜種粕、魚粉、骨粉、羽毛粉、ホエー若しくはその任意の組み合わせなどの加工形態である、請求項７に記載の動物用飼料。
【請求項９】
前記エネルギー源は、メイズ、トウモロコシ、ソルガム、オオムギ、コムギ、カラスムギ、イネ、ライコムギ、ライムギ、ビート、テンサイ、ホウレンソウ、ジャガイモ、カッサバ、キノア、キャベツ、スイッチグラス、キビ、トウジンヒエ、アワからなる群から選択されるか、又は製粉されたトウモロコシ、製粉されたメイズ、ジャガイモデンプン、カッサバデンプン、製粉されたソルガム、製粉されたスイッチグラス、製粉されたキビ、製粉されたアワ、製粉されたトウジンヒエ若しくはその任意の組み合わせなどの加工形態である、請求項７又は８に記載の動物用飼料。
【請求項１０】
動物における成長能力を改善する方法であって、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項７〜９のいずれか一項に記載の動物用飼料を前記動物に投与することを含む方法。
【請求項１１】
前記組成物又は前記動物用飼料は、前記抗生物質が、動物用飼料１ｋｇ当たり０．５ｍｇ〜９０ｍｇ、１ｍｇ〜８０ｍｇ、５ｍｇ〜７０ｍｇ、１０ｍｇ〜６０ｍｇ、１５ｍｇ〜５０ｍｇ若しくは２０ｍｇ〜４０ｍｇ又は前記区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜１００ｍｇのレベルであるように添加される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物又は前記動物用飼料は、ムラミダーゼ活性を有する前記ポリペプチドが、動物用飼料１ｋｇ当たり５０ｍｇ〜９００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、２００ｍｇ〜７００ｍｇ、３００ｍｇ〜６００ｍｇ若しくは４００ｍｇ〜５００ｍ又は前記区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり１０ｍｇ〜１０００ｍｇの酵素タンパク質のレベルであるように添加される、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記動物は、単胃動物、たとえば豚又はブタ（子ブタ、育成ブタ及び雌ブタを含むが、これらに限定されない）；家禽（家禽、シチメンチョウ、カモ、ウズラ、ホロホロチョウ、ガチョウ、ハト、ひなバト、鶏、ブロイラー、産卵鶏、若雌鶏及びヒヨコを含むが、これらに限定されない）；ネコ及びイヌなどの愛玩動物、魚（アンバージャック、ピラルク、バーブ、バス、アミキリ、ボカチコ、ブリーム、カジカ、コロソマ、コイ、ナマズ、カトラ、サバヒー、チャー、カワスズメ、スギ、タラ、クラッピー、へダイ、ニベ科の魚、ウナギ、ハゼ、キンギョ、グラミー、ハタ、グァポテ、ハリバット、ジャワ、ラベオ、ライ、ドジョウ、サバ、ミルクフィッシュ、サギ、ボウフィン、ボラ、パコ、パールスポット、ペヘレイ、パーチ、カワカマス、コバンアジ、ローチ、サケ、サンパ、ソーガー、ハタ科の魚、タイ、シャイナー、カワアナゴ科の魚、タイワンドジョウ、フエダイ、アカメ、シタビラメ、スパインフット、チョウザメ、マンボウ、アユ、テンチ、テラー、テラピア、マス、マグロ、ターボット、シロマス、ウォールアイ及びホワイトフィッシュ）；並びに甲殻類の動物（小エビ及び中エビを含むが、これらに限定されない）である、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
動物における成長能力を改善することにおける、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項７〜９のいずれか一項に記載の動物用飼料の使用。
【請求項１５】
動物において抗生物質の使用量を低下させる方法であって、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチドを前記動物に投与すること含む方法。
【請求項１６】
動物において抗生物質の使用量を低下させることにおける、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチドの使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［配列表の参照］
本出願は、コンピュータ可読形態の配列表を含有し、これは、本明細書において援用される。
【０００２】
［発明の背景］
［発明の分野］
本発明は、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドを含む組成物及び／又は動物用飼料並びにその使用に関する。
【０００３】
［関連技術の説明］
ムラミダーゼは、リゾチームとしても知られており、多くの生物によって細菌に対する防御メカニズムとして産生されるＯ−グリコシルヒドロラーゼである。酵素は、細菌の重要な構造分子であるペプチドグリカンのグリコシド結合を切断することによって細菌細胞壁の加水分解を引き起こす。細菌の細胞壁がムラミダーゼの作用によって弱められた後、細菌の細胞は、浸透圧不均衡の結果として溶解する。
【０００４】
ムラミダーゼは、ウイルス、植物、昆虫、鳥、爬虫類動物及び哺乳動物などの多くの生物において天然に存在する。ムラミダーゼは、５つの異なるグリコシドヒドロラーゼ（ＧＨ）ファミリーに分類された（ＣＡＺｙ、ｗｗｗ．ｃａｚｙ．ｏｒｇ）：ニワトリ卵白ムラミダーゼ（ＧＨ２２）、ガチョウ卵白ムラミダーゼ（ＧＨ２３）、バクテリオファージＴ４ムラミダーゼ（ＧＨ２４）、スフィンゴモナスべん毛タンパク質（ＧＨ７３）及びキャラロプシス（Ｃｈａｌａｒｏｐｓｉｓ）ムラミダーゼ（ＧＨ２５）。ＧＨ２３及びＧＨ２４ファミリー由来のムラミダーゼは、主としてバクテリオファージで知られており、菌類では最近同定されたばかりである。ムラミダーゼファミリーＧＨ２５は、他のムラミダーゼファミリーと構造的に関係しないことがわかった。
【０００５】
ムラミダーゼは、従来、それが天然に豊富に存在することから、ニワトリ卵白から抽出されており、かなり最近まで、ニワトリ卵白ムラミダーゼは、動物用飼料における使用について検討される唯一のムラミダーゼであった。ニワトリ卵白から抽出されるムラミダーゼは、市場で入手できる一次産品であるが、たとえば黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）の細胞壁におけるＮ，６−Ｏ−ジアセチルムラミン酸を切断せず、したがってとりわけこの重要なヒト病原体を溶解することができない（Ｍａｓｓｃｈａｌｃｋ  Ｂ，Ｄｅｃｋｅｒｓ  Ｄ，Ｍｉｃｈｉｅｌｓ  ＣＷ（２００２），“Ｌｙｔｉｃ  ａｎｄ  ｎｏｎｌｙｔｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇｒａｍ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ  ｂｙ  ｍｕｒａｍｉｄａｓｅ  ｕｎｄｅｒ  ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ  ａｎｄ  ｈｉｇｈ  ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ”，Ｊ  Ｆｏｏｄ  Ｐｒｏｔ．６５（１２）：１９１６−２３）。
【０００６】
国際公開第２０００／２１３８１号パンフレットは、少なくとも２つの殺菌酵素及び多価不飽和脂肪酸を含む組成物を開示し、殺菌酵素の１つは、鶏卵白由来のＧＨ２２ムラミダーゼであった。英国特許第２３７９１６６号明細書は、細菌のペプチドグリカン層を破壊する化合物及び細菌のリン脂質層を破壊する化合物を含む組成物を開示し、ペプチドグリカンを破壊する化合物は、鶏卵白由来のＧＨ２２ムラミダーゼであった。
【０００７】
国際公開第２００４／０２６３３４号パンフレットは、（ａ）細胞壁溶解物質又はその塩、（ｂ）殺菌物質、（ｃ）金属イオン遮閉剤、及び（ｄ）ランチビオティックを含む、家畜の消化管中の腸内病原体の成長を抑制するための殺菌組成物を開示し、細胞壁溶解物質又はその塩は、ニワトリ卵白由来のＧＨ２２ムラミダーゼである。
【０００８】
驚くべきことに、本発明の発明者らは、抗生物質と組み合わせたムラミダーゼが、動物の成長能力を改善することにおいて予想外の効果を提供することを発見した。
【０００９】
［発明の概要］
したがって、本発明は、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む組成物又は動物用飼料に関する。
【００１０】
本発明は、動物における成長能力を改善する方法であって、本発明の組成物又は動物用飼料を動物に投与することを含む方法にさらに関する。
【００１１】
本発明は、動物における成長能力を改善することにおける本発明の組成物又は動物用飼料の使用にさらに関する。
【００１２】
本発明は、動物において抗生物質の使用量を低下させる方法であって、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチドを動物に投与することを含む方法にさらに関する。
【００１３】
本発明は、動物において抗生物質の使用量を低下させることにおける、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチドの使用にさらに関する。
【００１４】
［配列表の概要］
配列番号１は、国際公開第２０１３／０７６２５３号パンフレットにおいて記載されるアクレモニウム・アルカロフィラム（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ  ａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号４）。
配列番号２は、国際公開第２０１３／０７６２５３号パンフレットにおいて記載されるアクレモニウム・アルカロフィラム（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ  ａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号８）。
配列番号３は、国際公開第２０１１／１０４３３９号パンフレットにおいて記載されるアスペルギルス・フミガーツス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３）。
配列番号４は、国際公開第２００９／１０２７５５号パンフレットにおいて記載されるトリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号４）。
配列番号５は、国際公開第２００５／０８０５５９号パンフレットにおいて記載されるシュタケ（Ｔｒａｍｅｔｅｓ  ｃｉｎｎａｂａｒｉｎａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２）。
配列番号６は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるスポロルミア・フィメタリア（Ｓｐｏｒｏｒｍｉａ  ｆｉｍｅｔａｒｉａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３）。
配列番号７は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるポロニア・プンクタタ（Ｐｏｒｏｎｉａ  ｐｕｎｃｔａｔａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号６）。
配列番号８は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるポロニア・プンクタタ（Ｐｏｒｏｎｉａ  ｐｕｎｃｔａｔａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号９）。
配列番号９は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるレカニシルリウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）種ＷＭＭ７４２由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１２）。
配列番号１０は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるレカニシルリウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）種ＷＭＭ７４２由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１５）。
配列番号１１は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるオニゲナ・エクイナ（Ｏｎｙｇｅｎａ  ｅｑｕｉｎａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１８）。
配列番号１２は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるプルプレオシルリウム・リラシナム（Ｐｕｒｐｕｒｅｏｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｉｌａｃｉｎｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２１）。
配列番号１３は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるトリコボルス・ツカリイ（Ｔｒｉｃｈｏｂｏｌｕｓ  ｚｕｋａｌｉｉ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２４）。
配列番号１４は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるペニシリウム・シトリナム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｉｔｒｉｎｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２７）。
配列番号１５は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるクラドルリナム・ブルビルロサム（Ｃｌａｄｏｒｒｈｉｎｕｍ  ｂｕｌｂｉｌｌｏｓｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３０）。
配列番号１６は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるウンベロプシス・ウエステアエ（Ｕｍｂｅｌｏｐｓｉｓ  ｗｅｓｔｅａｅ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３３）。
配列番号１７は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載される接合菌（Ｚｙｇｏｍｙｃｅｔｅｓ）種ＸＺ２６５５由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３６）。
配列番号１８は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるカエトミウム・クプレウム（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ  ｃｕｐｒｅｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３９）。
配列番号１９は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるコルディセプス・カルディナリス（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ  ｃａｒｄｉｎａｌｉｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号４２）。
配列番号２０は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）種「キイ（ｑｉｉ）」由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号４５）。
配列番号２１は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）種ｎｏｖ  ＸＺ２６０９由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号４８）。
配列番号２２は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるペシロマイセス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）種ＸＺ２６５８由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号５１）。
配列番号２３は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるペシロマイセス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）種ＸＺ２６５８由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号５４）。
配列番号２４は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるピクニジオフォラ（Ｐｙｃｎｉｄｉｏｐｈｏｒａ）ｃｆジスペラ（ｄｉｓｐｅｒａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号６０）。
配列番号２５は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるテルモムコル・インジカエ−セウダチカエ（Ｔｈｅｒｍｏｍｕｃｏｒ  ｉｎｄｉｃａｅ−ｓｅｕｄａｔｉｃａｅ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号６３）。
配列番号２６は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるコナサナギタケ（Ｉｓａｒｉａ  ｆａｒｉｎｏｓａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号６６）。
配列番号２７は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるレカニシルリウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）種ＷＭＭ７４２由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号６９）。
配列番号２８は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるゾフィエラ（Ｚｏｐｆｉｅｌｌａ）種ｔ１８０−６由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号７２）。
配列番号２９は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるマルブランケア・フラバ（Ｍａｌｂｒａｎｃｈｅａ  ｆｌａｖａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号７５）。
配列番号３０は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるヒフォロマ・ポリトリチ（Ｈｙｐｈｏｌｏｍａ  ｐｏｌｙｔｒｉｃｈｉ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号８０）。
配列番号３１は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるアスペルギルス・デフレクタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｄｅｆｌｅｃｔｕｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号８３）。
配列番号３２は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるアスコボラス・スチクトイデウス（Ａｓｃｏｂｏｌｕｓ  ｓｔｉｃｔｏｉｄｅｕｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号８６）。
配列番号３３は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるコニオカエタ（Ｃｏｎｉｏｃｈａｅｔａ）種由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号８９）。
配列番号３４は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるツボミタケ（Ｄａｌｄｉｎｉａ  ｆｉｓｓａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号９２）。
配列番号３５は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるロセルリニア（Ｒｏｓｅｌｌｉｎｉａ）種由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号９５）。
配列番号３６は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるアスコボラス（Ａｓｃｏｂｏｌｕｓ）種ＺＹ１７９由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号９８）。
配列番号３７は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるクレヤ（Ｃｕｒｒｅｙａ）種ＸＺ２６２３由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１０１）。
配列番号３８は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるコニオチリウム（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ）種由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１０４）。
配列番号３９は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるヒポキシロン（Ｈｙｐｏｘｙｌｏｎ）種由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１０７）。
配列番号４０は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるキシラリアセアエ（Ｘｙｌａｒｉａｃｅａｅ）種１６５３ｈ由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１１０）。
配列番号４１は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるヒポキシロン（Ｈｙｐｏｘｙｌｏｎ）種由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１１３）。
配列番号４２は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるユンナニア・ペニシラタ（Ｙｕｎｎａｎｉａ  ｐｅｎｉｃｉｌｌａｔａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１１６）。
配列番号４３は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるエンギオドンティウム・アルブム（Ｅｎｇｙｏｄｏｎｔｉｕｍ  ａｌｂｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１１９）。
配列番号４４は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるメタポコニア・ブルビローサ（Ｍｅｔａｐｏｃｈｏｎｉａ  ｂｕｌｂｉｌｌｏｓａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１２２）。
配列番号４５は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるハミゲラ・パラベラネア（Ｈａｍｉｇｅｒａ  ｐａｒａｖｅｌｌａｎｅａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１２５）。
配列番号４６は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるメタリジウム・イアジニ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ  ｉａｄｉｎｉ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１２８）。
配列番号４７は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるサーモアスカス・アウランティアクス（Ｔｈｅｒｍｏａｓｃｕｓ  ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１３１）。
配列番号４８は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるクロノスタキス・ロスマニアエ（Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｓｍａｎｉａｅ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１３４）。
配列番号４９は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるシンプリシルリウム・オブクラバタム（Ｓｉｍｐｌｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｏｂｃｌａｖａｔｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１３７）。
配列番号５０は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるアスペルギルス・インフラタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｉｎｆｌａｔｕｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１４０）。
配列番号５１は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるパラクレモニウム・インフラツム（Ｐａｒａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ  ｉｎｆｌａｔｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１４３）。
配列番号５２は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるウエステルディケラ（Ｗｅｓｔｅｒｄｙｋｅｌｌａ）種由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１４６）。
配列番号５３は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるキバフンタケ（Ｓｔｒｏｐｈａｒｉａ  ｓｅｍｉｇｌｏｂａｔａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１５５）。
配列番号５４は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるゲラシノスポラ・クラトフォラ（Ｇｅｌａｓｉｎｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｔｏｐｈｏｒａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１５８）。
配列番号５５は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるエノキタケ（Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａ  ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２２１）。
配列番号５６は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるトフンタケ（Ｄｅｃｏｎｉｃａ  ｃｏｐｒｏｐｈｉｌａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２２４）。
配列番号５７は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるリゾムコール・パシラス（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ  ｐｕｓｉｌｌｕｓ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２２７）。
配列番号５８は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるキバフンタケ（Ｓｔｒｏｐｈａｒｉａ  ｓｅｍｉｇｌｏｂａｔａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２３０）。
配列番号５９は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９７８号明細書において記載されるキバフンタケ（Ｓｔｒｏｐｈａｒｉａ  ｓｅｍｉｇｌｏｂａｔａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２３３）。
配列番号６０は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９６０号明細書において記載されるミセリオフトラ・フェルグシイ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｆｅｒｇｕｓｉｉ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３）。
配列番号６１は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９６０号明細書において記載されるモルティエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ  ａｌｐｉｎａ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号１５）。
配列番号６２は、ＰＣＴ／中国特許出願公開第２０１７／０７５９６０号明細書において記載されるペニシリウム・アトロベネツム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ａｔｒｏｖｅｎｅｔｕｍ）由来のＧＨ２５ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２７）。
配列番号６３は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるトリコファエア・サッカタ（Ｔｒｉｃｈｏｐｈａｅａ  ｓａｃｃａｔａ）由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２５７）。
配列番号６４は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるケトミウム・サーモフィラム（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２６４）。
配列番号６５は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるトリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２６７）。
配列番号６６は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるトリコファエア・ミヌタ（Ｔｒｉｃｈｏｐｈａｅａ  ｍｉｎｕｔａ）由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２９１）。
配列番号６７は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるケトミウム（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ）種ＺＹ２８７由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２９４）。
配列番号６８は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）種ＺＹ００２由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号２９７）。
配列番号６９は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるメタリジウム（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ）種ＸＺ２４３１由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３００）。
配列番号７０は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるゲオミセス・アウラタス（Ｇｅｏｍｙｃｅｓ  ａｕｒａｔｕｓ）由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３０３）。
配列番号７１は、国際公開第２０１７／０００９２２号パンフレットにおいて記載されるイリオネクトリア・ルファ（Ｉｌｙｏｎｅｃｔｒｉａ  ｒｕｆａ）由来のＧＨ２４ムラミダーゼの成熟アミノ酸配列である（配列番号３０６）。
【００１５】
定義
動物：「動物」という用語は、ヒトを除く任意の動物を指す。動物の例は、豚又はブタ（子ブタ、育成ブタ及び雌ブタを含むが、これらに限定されない）；シチメンチョウ、カモ、ウズラ、ホロホロチョウ、ガチョウ、ハト（ひなバトを含む）及び鶏（ブロイラー鶏（本明細書においてブロイルと呼ばれる）、ヒヨコ、産卵雌鶏（本明細書において産卵鶏と呼ばれる）を含むが、これらに限定されない）などの家禽；ネコ及びイヌなどの愛玩動物；ウマ（サラブレッド種、冷血種及び温血種を含むが、これらに限定されない）、甲殻類の動物（小エビ及び中エビを含むが、これらに限定されない）並びに魚（アンバージャック、ピラルク、バーブ、バス、アミキリ、ボカチコ、ブリーム、カジカ、コロソマ、コイ、ナマズ、カトラ、サバヒー（ｃｈａｎｏｓ）、チャー、カワスズメ、スギ、タラ、クラッピー、へダイ、ニベ科の魚、ウナギ、ハゼ、キンギョ、グラミー、ハタ、グァポテ、ハリバット、ジャワ、ラベオ（ｌａｂｅｏ）、ライ（ｌａｉ）、ドジョウ、サバ、ミルクフィッシュ、サギ、ボウフィン、ボラ、パコ（ｐａｃｏ）、パールスポット（ｐｅａｒｌｓｐｏｔ）、ペヘレイ、パーチ、カワカマス、コバンアジ、ローチ、サケ、サンパ（ｓａｍｐａ）、ソーガー、ハタ科の魚、タイ、シャイナー、カワアナゴ科の魚、タイワンドジョウ、フエダイ、アカメ、シタビラメ、スパインフット（ｓｐｉｎｅｆｏｏｔ）、チョウザメ、マンボウ、アユ、テンチ、テラー（ｔｅｒｒｏｒ）、テラピア、マス、マグロ、ターボット、シロマス、ウォールアイ及びホワイトフィッシュを含むが、これらに限定されない）を含むが、これらに限定されない単胃動物である。
【００１６】
動物用飼料：「動物用飼料」という用語は、動物による摂取に適した又はそれが意図される任意の化合物、調製物又は混合物を指す。単胃動物のための動物用飼料は、通常、濃縮物並びにビタミン、ミネラル、酵素、直接給与生菌、アミノ酸及び／又は他の飼料成分（プレミックス中になど）を含むのに対して、反芻動物のための動物用飼料は、一般に、まぐさ（粗飼料及びサイレージを含む）を含み、濃縮物並びにビタミン、ミネラル、酵素、直接給与生菌、アミノ酸及び／又は他の飼料成分（プレミックス中になど）をさらに含み得る。
【００１７】
濃縮物：「濃縮物」という用語は、タンパク質及びエネルギーの濃度が高い飼料、たとえば魚粉、糖蜜、オリゴ糖、ソルガム、種子及び穀粒（全部又はたとえばトウモロコシ、カラスムギ、ライムギ、オオムギ、コムギから粉砕、製粉などによって調製された）、油料種子の油かす（たとえば、綿実、ベニバナ、ヒマワリ、ダイズ（ダイズ粉など）、菜種／キャノーラ、ピーナッツ又は落花生由来の）、パーム核粕、酵母由来の原材料並びにジスチラーズグレイン（ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ  ｇｒａｉｎｓ）（ウェットジスチラーズグレイン（ｗｅｔ  ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ  ｇｒａｉｎｓ）（ＷＤＳ）及びドライドジスチラーズグレインソリュブル（ｄｒｉｅｄ  ｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓ  ｇｒａｉｎｓ  ｗｉｔｈ  ｓｏｌｕｂｌｅｓ）（ＤＤＧＳ）など）などを意味する。
【００１８】
まぐさ：本明細書において定義される「まぐさ」という用語は、粗飼料も含む。まぐさは、飼料植物、牧草及び他の飼料植物由来の干し草及びサイレージ、海草、発芽させた穀粒及びマメ科植物又はその任意の組み合わせなどの新鮮な植物原材料である。飼料植物の例は、アルファルファ（ムラサキウマゴヤシ）、ミヤコグサ、アブラナ（たとえば、ケール、菜種（キャノーラ）、カブハボタン（スウェーデンカブ）、カブラ）、クローバー（たとえば、タチクローバー、アカツメクサ、サブタレニアンクローバー、シロツメクサ）、牧草（たとえば、バミューダグラス、スズメノチャヒキ、偽エンバク（ｆａｌｓｅ  ｏａｔ  ｇｒａｓｓ）、ウシノケグサ、ヒースグラス（ｈｅａｔｈ  ｇｒａｓｓ）、イチゴツナギ、カモガヤ、ドクムギ、オオアワガエリ）、トウモロコシ（メイズ）、キビ、オオムギ、カラスムギ、ライムギ、ソルガム、ダイズ及びコムギ並びにビートなどの野菜である。まぐさは、子実生産由来の作物残渣（トウモロコシのわら；コムギ、オオムギ、カラスムギ、ライムギ及び他の穀粒由来の麦わらなど）；ビートトップのような野菜由来の残渣；ダイズ、菜種及び他のマメ科植物由来の茎及び葉のような油料種子生産由来の残渣；並びに動物若しくはヒトの消費のための穀粒の精製由来の又は燃料生産若しくは他の産業由来の画分をさらに含む。
【００１９】
断片：「断片」という用語は、成熟ポリペプチド又はドメインのアミノ末端及び／又はカルボキシル末端が欠けている、１つ以上の（たとえば、いくつかの）アミノ酸を有するポリペプチド又は触媒ドメインを意味し；断片は、ムラミダーゼ活性を有する。
【００２０】
一態様では、ＧＨ２４ムラミダーゼ（配列番号６３〜７１の１つなど）の断片は、少なくとも２３０アミノ酸、たとえば少なくとも２３５アミノ酸、少なくとも２４０アミノ酸又は少なくとも２４５アミノ酸などを含み、且つムラミダーゼ活性を有する。別の態様では、ＧＨ２４ムラミダーゼ（配列番号６３〜７１の１つなど）の断片は、成熟ポリペプチドの長さの少なくとも９０％、たとえば成熟ポリペプチドの長さの少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％などを含み、且つムラミダーゼ活性を有する。
【００２１】
一態様では、ＧＨ２５ムラミダーゼ（配列番号１〜７２の１つなど）の断片は、少なくとも１８０アミノ酸、たとえば少なくとも１８５アミノ酸、少なくとも１９０アミノ酸、少なくとも１９５アミノ酸、少なくとも２００アミノ酸、少なくとも２０５アミノ酸又は少なくとも２１０アミノ酸などを含み、且つムラミダーゼ活性を有する。別の態様では、ＧＨ２５ムラミダーゼ（配列番号１〜７２の１つなど）の断片は、成熟ポリペプチドの長さの少なくとも９０％、たとえば成熟ポリペプチドの長さの少なくとも９２％、少なくとも９４％、少なくとも９６％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％などを含み、且つムラミダーゼ活性を有する。
【００２２】
ムラミダーゼ活性：「ムラミダーゼ活性」という用語は、浸透圧による溶菌をもたらす、ペプチドグリカンにおけるＮ−アセチルムラミン酸残基及びＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン残基間又はキトデキストリンにおけるＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン残基間の１，４−ベータ−結合の酵素加水分解を意味する。ムラミダーゼは、酵素分類ＥＣ  ３．２．１．１７に属する。ムラミダーゼ活性は、通常、比濁法によって測定される。この方法は、ムラミダーゼの溶解作用によって誘発される、ミクロコッカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ）ＡＴＣＣ  ４６９８の懸濁液の濁り度の変化に基づく。適切な実験条件では、これらの変化は、培地のムラミダーゼの量と比例する（ＩＮＳ  １１０５  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｆｏｏｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ  Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＵＮ（ｗｗｗ．ｆａｏ．ｏｒｇ）を参照されたい）。本発明の目的上、ムラミダーゼ活性は、実施例１（「ムラミダーゼ活性の決定」）において記載される濁り度アッセイに従って決定され、ポリペプチドがミクロコッカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ）ＡＴＣＣ  ４６９８及び／又はエキシグオバクテリウム・ウンデア（Ｅｘｉｇｕｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｕｎｄｅａ）（ＤＳＭ１４４８１）などの１つ以上の細菌に対して活性を示す場合、ポリペプチドは、ムラミダーゼ活性を有する。一例として、本発明のＧＨ２５ムラミダーゼは、配列番号１のムラミダーゼ活性の少なくとも２０％、たとえば少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも１００％を有する。別の例として、本発明のＧＨ２４ムラミダーゼは、配列番号６３のムラミダーゼ活性の少なくとも２０％、たとえば少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも１００％を有する。
【００２３】
成熟ポリペプチド：「成熟ポリペプチド」という用語は、翻訳及びＮ末端プロセシング、Ｃ末端切断、グリコシル化、リン酸化などの任意の翻訳後修飾後のその最終形態のポリペプチドを意味する。
【００２４】
本発明において、成熟ポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸１〜２０８、配列番号２のアミノ酸１〜２１３、配列番号３のアミノ酸１〜２１８、配列番号４のアミノ酸１〜２０８、配列番号５のアミノ酸１〜２１５、配列番号６のアミノ酸１〜２０７、配列番号７のアミノ酸１〜２０１、配列番号８のアミノ酸１〜２０１、配列番号９のアミノ酸１〜２０３、配列番号１０のアミノ酸１〜２０８、配列番号１１のアミノ酸１〜２０７、配列番号１２のアミノ酸１〜２０８、配列番号１３のアミノ酸１〜２０７、配列番号１４のアミノ酸１〜２０７、配列番号１５のアミノ酸１〜２０７、配列番号１６のアミノ酸１〜２０８、配列番号１７のアミノ酸１〜２０８、配列番号１８のアミノ酸１〜２０６、配列番号１９のアミノ酸１〜２０７、配列番号２０のアミノ酸１〜２１６、配列番号２１のアミノ酸１〜２１８、配列番号２２のアミノ酸１〜２０４、配列番号２３のアミノ酸１〜２０３、配列番号２４のアミノ酸１〜２０８、配列番号２５のアミノ酸１〜２１０、配列番号２６のアミノ酸１〜２０７、配列番号２７のアミノ酸１〜２０７、配列番号２８のアミノ酸１〜２０８、配列番号２９のアミノ酸１〜２１７、配列番号３０のアミノ酸１〜２０８、配列番号３１のアミノ酸１〜２０１、配列番号３２のアミノ酸１〜２０２、配列番号３３のアミノ酸１〜２０７、配列番号３４のアミノ酸１〜２０２、配列番号３５のアミノ酸１〜２０１、配列番号３６のアミノ酸１〜２０２、配列番号３７のアミノ酸１〜２０６、配列番号３８のアミノ酸１〜２０２、配列番号３９のアミノ酸１〜２０２、配列番号４０のアミノ酸１〜２０２、配列番号４１のアミノ酸１〜２０２、配列番号４２のアミノ酸１〜２０６、配列番号４３のアミノ酸１〜２０７、配列番号４４のアミノ酸１〜２０８、配列番号４５のアミノ酸１〜２１５、配列番号４６のアミノ酸１〜２１７、配列番号４７のアミノ酸１〜２１４、配列番号４８のアミノ酸１〜２０８、配列番号４９のアミノ酸１〜２０３、配列番号５０のアミノ酸１〜２１６、配列番号５１のアミノ酸１〜２０７、配列番号５２のアミノ酸１〜２０８、配列番号５３のアミノ酸１〜２０７、配列番号５４のアミノ酸１〜２０８、配列番号５５のアミノ酸１〜２０７、配列番号５６のアミノ酸１〜２０７、配列番号５７のアミノ酸１〜２０８、配列番号５８のアミノ酸１〜２０７、配列番号５９のアミノ酸１〜２０７、配列番号６０のアミノ酸１〜２０７、配列番号６１のアミノ酸１〜２０４、配列番号６２のアミノ酸１〜２１６、配列番号６３のアミノ酸１〜２４５、配列番号６４のアミノ酸１〜２４９、配列番号６５のアミノ酸１〜２４８、配列番号６６のアミノ酸１〜２４５、配列番号６７のアミノ酸１〜２４９、配列番号６８のアミノ酸１〜２４５、配列番号６９のアミノ酸１〜２４７、配列番号７０のアミノ酸１〜２５０、配列番号７１のアミノ酸１〜２４０であり得る。
【００２５】
〜から得られるか又は入手可能である：「〜から得られるか又は入手可能である」という用語は、ポリペプチドが特定の分類階級の生物において見つけられ得ることを意味する。好ましくは、ポリペプチドは、菌界（Ｆｕｎｇｉ）から得られるか又は入手可能であり、ここで、界という用語は、分類階級のことである。より好ましくは、ポリペプチドは、子嚢菌（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）門から得られるか又は入手可能であり、ここで、門という用語は、分類階級のことである。より好ましくは、ポリペプチドは、チャワンタケ（Ｐｅｚｉｚｏｍｙｃｏｔｉｎａ）亜門から得られるか又は入手可能であり、ここで、亜門という用語は、分類階級のことである。より好ましくは、ポリペプチドは、ユーロチウム菌（Ｅｕｒｏｔｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱から得られるか又は入手可能であり、ここで、綱という用語は、分類階級のことである。
【００２６】
ポリペプチドの分類階級が知られていない場合、それは、ポリペプチドのＢＬＡＳＴＰ検索を実行し（たとえば、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＩＢ）ウェブサイト  ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／を使用して）、それを最も近いホモログと比較することにより、当業者によって容易に決定することができる。当業者は、提出される本出願の配列とその配列とを比較することもできる。知られているポリペプチドの断片である未知のポリペプチドは、同じ分類上の種のものであるとみなされる。置換、欠失及び／又は挿入を１０以下の位置に含む未知の天然ポリペプチド又は人工変異体は、知られているポリペプチドと同じ分類上の種に由来するとみなされる。
【００２７】
粗飼料：「粗飼料」という用語は、繊維、ふすま、種及び穀粒由来の殻並びに作物残渣（わら、コプラ、麦わら、もみ殻、テンサイの廃棄物など）など、繊維のレベルが高い乾燥植物原材料を意味する。
【００２８】
配列同一性：２つのアミノ酸配列間の又は２つのヌクレオチド配列間の関係性は、パラメーターである「配列同一性」によって説明される。
【００２９】
本発明の目的のために、２つのアミノ酸配列間の配列同一性は、ＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  Ｏｐｅｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｇｅｎｅｔ．１６：２７６−２７７）、好ましくは５．０．０又はそれ以降のバージョンのＮｅｅｄｌｅプログラムに実装されているＮｅｅｄｌｅｍａｎ−Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３）を使用して決定される。使用されるパラメーターは、１０のギャップオープンペナルティー、０．５のギャップエクステンションペナルティー及びＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＢＬＯＳＵＭ６２のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスである。Ｎｅｅｄｌｅが表示する「最長の同一性」（−ｎｏｂｒｉｅｆオプションを使用して得られる）の出力は、同一性パーセントとして使用され、以下のように算出される。
（同一残基×１００）／（アライメントの長さ−アライメント中のギャップの総数）
【００３０】
変異体：「変異体」という用語は、１つ以上の（たとえば、いくつかの）位置に１つ以上の（いくつかの）アミノ酸残基の改変、すなわち置換、挿入及び／又は欠失を含む、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドを意味する。置換は、ある位置を占めているアミノ酸を異なるアミノ酸と置き換えることを意味し；欠失は、ある位置を占めているアミノ酸の除去を意味し；挿入は、その位置を占めているアミノ酸の直後に隣接させて１、２又は３つのアミノ酸を追加することを意味する。
【００３１】
本発明において、ムラミダーゼ変異体は、１〜１０の改変、すなわち１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の改変を含み得、親ムラミダーゼ、たとえば配列番号１又は配列番号６３などのムラミダーゼ活性の少なくとも２０％、たとえば少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも１００％を有する。
【００３２】
抗生物質：１つ又は複数の「抗生物質」という用語は、動物の感染症の処置において、低い濃度で使用されることが最も多く、微生物の成長を予防又は阻害する合成又は天然由来有機化学物質を意味する。
【００３３】
［発明の詳細な説明］
［組成物］
驚くべきことに、ムラミダーゼ（好ましくは菌類のムラミダーゼ）及び抗生物質を含む組成物が動物において追加の能力上の利益を与えることがわかった。
【００３４】
したがって、第１の態様では、本発明は、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む組成物に関する。
【００３５】
本発明において、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドは、ＧＨ２４ムラミダーゼ、好ましくは菌類のＧＨ２４ムラミダーゼ、好ましくは子嚢菌門（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）から、より好ましくはユーロチウム菌綱（Ｅｕｒｏｔｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）から得られるか又は入手可能であるＧＨ２４ムラミダーゼであり得る。ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドは、ＧＨ２５ムラミダーゼ、好ましくは菌類のＧＨ２５ムラミダーゼ、好ましくは子嚢菌門（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）から、より好ましくはユーロチウム菌綱（Ｅｕｒｏｔｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）から得られるか又は入手可能であるＧＨ２５ムラミダーゼでもあり得る。
【００３６】
本発明において、抗生物質は、バシトラシン、バンベリマイシン、カルバドックス、エンラマイシン、エンデュラシジン、ライドロマイシン、ラサロシド、リンコマイシン、モネンシン、ネオマイシン、ペニシリン、ロキサルソン、ロキサルソン、サリノマイシン、タイロシン及びバージニアマイシンのいずれか１つであり得る。
【００３７】
好ましくは、本発明は、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む組成物に関し、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドは、
（ａ）配列番号１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｅ）配列番号５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｆ）配列番号６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｇ）配列番号７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｈ）配列番号８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｉ）配列番号９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｊ）配列番号１０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｋ）配列番号１１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｌ）配列番号１２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｍ）配列番号１３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｎ）配列番号１４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｏ）配列番号１５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｐ）配列番号１６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｑ）配列番号１７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｒ）配列番号１８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｓ）配列番号１９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｔ）配列番号２０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｕ）配列番号２１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｖ）配列番号２２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｗ）配列番号２３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｘ）配列番号２４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｙ）配列番号２５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｚ）配列番号２６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａａ）配列番号２７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｂ）配列番号２８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｃ）配列番号２９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｄ）配列番号３０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｅ）配列番号３１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｆ）配列番号３２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｇ）配列番号３３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｈ）配列番号３４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｉ）配列番号３５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｊ）配列番号３６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｋ）配列番号３７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｌ）配列番号３８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｍ）配列番号３９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｎ）配列番号４０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｏ）配列番号４１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｐ）配列番号４２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｑ）配列番号４３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｒ）配列番号４４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｓ）配列番号４５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｔ）配列番号４６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｕ）配列番号４７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｖ）配列番号４８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｗ）配列番号４９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｘ）配列番号５０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｙ）配列番号５１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ａｚ）配列番号５２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂａ）配列番号５３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｂ）配列番号５４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｃ）配列番号５５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｄ）配列番号５６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｅ）配列番号５７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｆ）配列番号５８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｇ）配列番号５９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｈ）配列番号６０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｉ）配列番号６１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｊ）配列番号６２に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｋ）配列番号６３に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｌ）配列番号６４に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｍ）配列番号６５に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｎ）配列番号６６に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｏ）配列番号６７に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｐ）配列番号６８に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｑ）配列番号６９に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｒ）配列番号７０に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｓ）配列番号７１に対して少なくとも８０％、たとえば少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は１００％の配列同一性を有するポリペプチド；
（ｂｔ）１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の位置に１つ以上のアミノ酸置換（好ましくは保存的置換）、及び／若しくは１つ以上のアミノ酸欠失、及び／若しくは１つ以上のアミノ酸挿入又はその任意の組み合わせを含む、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０又は配列番号７１の変異体；
（ｂｕ）（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）、（ｊ）、（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）、（ｎ）、（ｏ）、（ｐ）、（ｑ）、（ｒ）、（ｓ）、（ｔ）、（ｕ）、（ｖ）、（ｗ）、（ｘ）、（ｙ）、（ｚ）、（ａａ）、（ａｂ）、（ａｃ）、（ａｄ）、（ａｅ）、（ａｆ）、（ａｇ）、（ａｈ）、（ａｉ）、（ａｊ）、（ａｋ）、（ａｌ）、（ａｍ）、（ａｎ）、（ａｏ）、（ａｐ）、（ａｑ）、（ａｒ）、（ａｓ）、（ａｔ）、（ａｕ）、（ａｖ）、（ａｗ）、（ａｘ）、（ａｙ）、（ａｚ）、（ｂａ）、（ｂｂ）、（ｂｃ）、（ｂｄ）、（ｂｅ）、（ｂｆ）、（ｂｇ）、（ｂｈ）、（ｂｉ）、（ｂｊ）、（ｂｋ）、（ｂｌ）、（ｂｍ）、（ｂｎ）、（ｂｏ）、（ｂｐ）、（ｂｑ）、（ｂｒ）、（ｂｓ）又は（ｂｔ）のポリペプチド並びに１〜１０アミノ酸のＮ末端及び／又はＣ末端伸張を含むポリペプチド；及び
（ｂｖ）ムラミダーゼ活性を有し、且つ成熟ポリペプチドの長さの少なくとも９０％を有する、（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）、（ｊ）、（ｋ）、（ｌ）、（ｍ）、（ｎ）、（ｏ）、（ｐ）、（ｑ）、（ｒ）、（ｓ）、（ｔ）、（ｕ）、（ｖ）、（ｗ）、（ｘ）、（ｙ）、（ｚ）、（ａａ）、（ａｂ）、（ａｃ）、（ａｄ）、（ａｅ）、（ａｆ）、（ａｇ）、（ａｈ）、（ａｉ）、（ａｊ）、（ａｋ）、（ａｌ）、（ａｍ）、（ａｎ）、（ａｏ）、（ａｐ）、（ａｑ）、（ａｒ）、（ａｓ）、（ａｔ）、（ａｕ）、（ａｖ）、（ａｗ）、（ａｘ）、（ａｙ）、（ａｚ）、（ｂａ）、（ｂｂ）、（ｂｃ）、（ｂｄ）、（ｂｅ）、（ｂｆ）、（ｂｇ）、（ｂｈ）、（ｂｉ）、（ｂｊ）、（ｂｋ）、（ｂｌ）、（ｂｍ）、（ｂｎ）、（ｂｏ）、（ｂｐ）、（ｂｑ）、（ｂｒ）、（ｂｓ）又は（ｂｔ）のポリペプチドの断片
からなる群から選択される。
【００３８】
より好ましくは、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドは、配列番号１のアミノ酸１〜２０８、配列番号２のアミノ酸１〜２１３、配列番号３のアミノ酸１〜２１８、配列番号４のアミノ酸１〜２０８、配列番号５のアミノ酸１〜２１５、配列番号６のアミノ酸１〜２０７、配列番号７のアミノ酸１〜２０１、配列番号８のアミノ酸１〜２０１、配列番号９のアミノ酸１〜２０３、配列番号１０のアミノ酸１〜２０８、配列番号１１のアミノ酸１〜２０７、配列番号１２のアミノ酸１〜２０８、配列番号１３のアミノ酸１〜２０７、配列番号１４のアミノ酸１〜２０７、配列番号１５のアミノ酸１〜２０７、配列番号１６のアミノ酸１〜２０８、配列番号１７のアミノ酸１〜２０８、配列番号１８のアミノ酸１〜２０６、配列番号１９のアミノ酸１〜２０７、配列番号２０のアミノ酸１〜２１６、配列番号２１のアミノ酸１〜２１８、配列番号２２のアミノ酸１〜２０４、配列番号２３のアミノ酸１〜２０３、配列番号２４のアミノ酸１〜２０８、配列番号２５のアミノ酸１〜２１０、配列番号２６のアミノ酸１〜２０７、配列番号２７のアミノ酸１〜２０７、配列番号２８のアミノ酸１〜２０８、配列番号２９のアミノ酸１〜２１７、配列番号３０のアミノ酸１〜２０８、配列番号３１のアミノ酸１〜２０１、配列番号３２のアミノ酸１〜２０２、配列番号３３のアミノ酸１〜２０７、配列番号３４のアミノ酸１〜２０２、配列番号３５のアミノ酸１〜２０１、配列番号３６のアミノ酸１〜２０２、配列番号３７のアミノ酸１〜２０６、配列番号３８のアミノ酸１〜２０２、配列番号３９のアミノ酸１〜２０２、配列番号４０のアミノ酸１〜２０２、配列番号４１のアミノ酸１〜２０２、配列番号４２のアミノ酸１〜２０６、配列番号４３のアミノ酸１〜２０７、配列番号４４のアミノ酸１〜２０８、配列番号４５のアミノ酸１〜２１５、配列番号４６のアミノ酸１〜２１７、配列番号４７のアミノ酸１〜２１４、配列番号４８のアミノ酸１〜２０８、配列番号４９のアミノ酸１〜２０３、配列番号５０のアミノ酸１〜２１６、配列番号５１のアミノ酸１〜２０７、配列番号５２のアミノ酸１〜２０８、配列番号５３のアミノ酸１〜２０７、配列番号５４のアミノ酸１〜２０８、配列番号５５のアミノ酸１〜２０７、配列番号５６のアミノ酸１〜２０７、配列番号５７のアミノ酸１〜２０８、配列番号５８のアミノ酸１〜２０７、配列番号５９のアミノ酸１〜２０７、配列番号６０のアミノ酸１〜２０７、配列番号６１のアミノ酸１〜２０４、配列番号６２のアミノ酸１〜２１６、配列番号６３のアミノ酸１〜２４５、配列番号６４のアミノ酸１〜２４９、配列番号６５のアミノ酸１〜２４８、配列番号６６のアミノ酸１〜２４５、配列番号６７のアミノ酸１〜２４９、配列番号６８のアミノ酸１〜２４５、配列番号６９のアミノ酸１〜２４７、配列番号７０のアミノ酸１〜２５０又は配列番号７１のアミノ酸１〜２４０を含むか又はそれからなる。
【００３９】
より好ましくは、本発明の組成物は、配列番号１のムラミダーゼ及びエンラマイシン又はバシトラシンを含む。
【００４０】
本発明において、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドは、動物用飼料１ｋｇ当たり５０ｍｇ〜９００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、２００ｍｇ〜７００ｍｇ、３００ｍｇ〜６００ｍｇ若しくは４００ｍｇ〜５００ｍｇの酵素タンパク質又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり１０ｍｇ〜１０００ｍｇの酵素タンパク質で添加され得る。
【００４１】
好ましくは、抗生物質は、動物用飼料１ｋｇ当たり０．５ｍｇ〜９０ｍｇ、１ｍｇ〜８０ｍｇ、５ｍｇ〜７０ｍｇ、１０ｍｇ〜６０ｍｇ、１５ｍｇ〜５０ｍｇ若しくは２０ｍｇ〜４０ｍｇ又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜１００ｍｇで添加され得る。
【００４２】
本発明において、組成物のムラミダーゼ活性を有するポリペプチド及び／又は抗生物質は、固体配合物又は液体配合物として配合され得る。
【００４３】
本発明において、液体配合物は、グリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール（ＭＰＧ）、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、１，２−プロピレングリコール又は１，３−プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、約６００を下回る平均分子量を有するポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び約６００を下回る平均分子量を有するポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）からなる群から選択されるポリオールをさらに含み得る。
【００４４】
本発明において、液体配合物は、好ましくは、ソルビン酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム及び安息香酸カリウム又はその任意の組み合わせからなる群から選択される防腐剤をさらに含み得る。
【００４５】
本発明において、液体配合物は、１つ以上の配合剤（本明細書において記載されるものなど）、好ましくはグリセロール、エチレングリコール、１，２−プロピレングリコール又は１，３−プロピレングリコール、塩化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸マグネシウム、チオ硫酸ナトリウム、炭酸カルシウム、クエン酸ナトリウム、デキストリン、グルコース、スクロース、ソルビトール、ラクトース、デンプン、ＰＶＡ、酢酸及びリン酸からなるリストから選択される、好ましくは１，２−プロピレングリコール、１，３−プロピレングリコール、硫酸ナトリウム、デキストリン、セルロース、チオ硫酸ナトリウム、カオリン及び炭酸カルシウムからなるリストから選択される配合剤を含み得る。
【００４６】
本発明では、固体配合物は、たとえば、顆粒、噴霧乾燥粉末又は凝集体であり得る（たとえば、国際公開２００７／７００３４号パンフレットに開示されるように）。配合剤は、塩（有機又は無機亜鉛、ナトリウム、カリウム又はカルシウム塩、たとえば酢酸カルシウム、安息香酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、ソルビン酸カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸カリウム、安息香酸カリウム、炭酸カリウム、塩化カリウム、クエン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、硫酸カリウム、酢酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、酢酸亜鉛、安息香酸亜鉛、炭酸亜鉛、塩化亜鉛、クエン酸亜鉛、ソルビン酸亜鉛、硫酸亜鉛など）、デンプン又は糖又は糖誘導体（たとえば、スクロース、デキストリン、グルコース、ラクトース、ソルビトールなど）を含み得る。
【００４７】
好ましくは、固体配合物の配合剤は、塩化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸マグネシウム、チオ硫酸ナトリウム、炭酸カルシウム、クエン酸ナトリウム、デキストリン、グルコース、スクロース、ソルビトール、ラクトース、デンプン及びセルロースからなるリストから選択される。好ましくは、配合剤は、１つ以上の以下の化合物から選択される：硫酸ナトリウム、デキストリン、セルロース、チオ硫酸ナトリウム、硫酸マグネシウム及び炭酸カルシウム。
【００４８】
本発明において、組成物は、１つ以上のキャリアをさらに含み得る。キャリアは、水、グリセロール、エチレングリコール、１，２−プロピレングリコール若しくは１，３−プロピレングリコール、塩化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸マグネシウム、チオ硫酸ナトリウム、炭酸カルシウム、クエン酸ナトリウム、デキストリン、マルトデキストリン、グルコース、スクロース、ソルビトール、ラクトース、小麦粉、小麦ふすま、コーングルテンミール、デンプン、カオリン及びセルロース又はその任意の組み合わせからなる群から選択され得る。
【００４９】
［動物用飼料］
第２の態様において、本発明は、動物用飼料添加剤、１つ以上のタンパク質源及び１つ以上のエネルギー源を含む動物用飼料において、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質をさらに含むことを特徴とする動物用飼料に関する。
【００５０】
動物用飼料組成物又は動物用の餌は、タンパク質の含有量が比較的高い。家禽及びブタの餌は、国際公開第０１／０５８２７５号パンフレットの表Ｂ、２〜３列目に示されるような特徴をなすことができる。魚の餌は、この表Ｂの４列目に示されるような特徴をなすことができる。さらに、そのような魚の餌は、普通、２００〜３１０ｇ／ｋｇの粗脂肪含有量を有する。
【００５１】
本発明による動物用飼料組成物は、５０〜８００ｇ／ｋｇの粗タンパク質含有量を有する。タンパク質源は、植物性タンパク質源及び／又は動物性タンパク質であり得る。
【００５２】
植物性タンパク質は、植物性タンパク質源、たとえばマメ科植物及び穀物など、たとえばマメ科（Ｆａｂａｃｅａｅ）（レグミノサエ（Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ））、アブラナ科（Ｃｒｕｃｉｆｅｒａｃｅａｅ）、アカザ科（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉａｃｅａｅ）及びイネ科（Ｐｏａｃｅａｅ）の植物由来の原材料、たとえばダイズ粕、ハウチワマメ粕、菜種粕及びその組み合わせなどに由来し得る。植物性タンパク質のタンパク質含有量は、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０又は９０％（ｗ／ｗ）である。
【００５３】
好ましくは、植物性タンパク質源は、マメ科（Ｆａｂａｃｅａｅ）の１つ以上の植物、たとえばダイズ、ハウチワマメ、エンドウマメ又はインゲン由来の原材料であり得る。植物性タンパク質源は、アカザ科（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉａｃｅａｅ）の１つ以上の植物、たとえばビート、テンサイ、ホウレンソウ又はキノア由来の原材料でもあり得る。植物性タンパク質源の他の例は、菜種及びキャベツである。本発明において、ダイズは、好ましい植物性タンパク質源である。植物性タンパク質源の他の例は、オオムギ、コムギ、ライムギ、カラスムギ、メイズ（トウモロコシ）、イネ及びソルガムなどの穀物である。
【００５４】
上記に定義される植物性タンパク質の他に、本発明の動物用飼料は、通常、０〜２５％の量で肉骨粉、羽毛粉及び／又は魚粉などの動物性タンパク質も含有し得る。本発明の動物用飼料は、通常、０〜３０％の量でドライドジスチラーズグレインソリュブル（ＤＤＧＳ）も含み得る。
【００５５】
好ましくは、タンパク質源は、ダイズ、ツルマメ、インゲン、ハウチワマメ、テパリービーン、ベニバナインゲン、スリムジムビーン、アオイマメ、サヤインゲン、空豆（ソラマメ）、ヒヨコマメ、レンズマメ、ピーナッツ、スペインピーナッツ、キャノーラ、ヒマワリ種、綿実、菜種（アブラナ）若しくはエンドウマメからなる群から選択されるか、又はダイズ粉、全脂肪ダイズ粕、ダイズタンパク質濃縮物（ＳＰＣ）、発酵ダイズ粉（ＦＳＢＭ）、ヒマワリ粕、綿実粕、菜種粕、魚粉、骨粉、羽毛粉、ホエー若しくはその任意の組み合わせなどの加工形態である。
【００５６】
さらに又は（上記に示される粗タンパク質含有量の）代わりに、本発明の動物用飼料組成物は、１０〜３０ＭＪ／ｋｇの代謝エネルギー含有量を有し得る。本発明において、エネルギー源は、メイズ、トウモロコシ、ソルガム、オオムギ、コムギ、カラスムギ、イネ、ライコムギ、ライムギ、ビート、テンサイ、ホウレンソウ、ジャガイモ、カッサバ、キノア、キャベツ、スイッチグラス、キビ、トウジンヒエ、アワからなる群から選択され得るか、又は製粉されたトウモロコシ、製粉されたメイズ、ジャガイモデンプン、カッサバデンプン、製粉されたソルガム、製粉されたスイッチグラス、製粉されたキビ、製粉されたアワ、製粉されたトウジンヒエ若しくはその任意の組み合わせなどの加工形態であり得る。
【００５７】
さらに又は（上記に示される粗タンパク質含有量の）代わりに、本発明の動物用飼料組成物は、０．１〜２００ｇ／ｋｇのカルシウム含有量；及び／又は０．１〜２００ｇ／ｋｇの有効リン含有量；及び／又は０．１〜１００ｇ／ｋｇのメチオニン含有量；及び／又は０．１〜１５０ｇ／ｋｇのメチオニンプラスシステインの含有量；及び／又は０．５〜５０ｇ／ｋｇのリシン含有量を有し得る。
【００５８】
特に、代謝エネルギー、粗タンパク質、カルシウム、リン、メチオニン、メチオニンプラスシステイン及び／又はリシンの含有量は、国際公開第０１／０５８２７５号パンフレットの表Ｂの範囲２、３、４又は５（Ｒ．２〜５）のいずれか１つの範囲内であり得る。
【００５９】
粗タンパク質は、窒素（Ｎ）に係数６．２５を掛けて算出され、すなわち粗タンパク質（ｇ／ｋｇ）＝Ｎ（ｇ／ｋｇ）×６．２５である。窒素含有量は、ケルダール法によって決定される（Ａ．Ｏ．Ａ．Ｃ．，１９８４，Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  １４ｔｈ  ｅｄ．，Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  ＤＣ）。
【００６０】
代謝エネルギーは、ＮＲＣ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｕｔｒｉｅｎｔ  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｓｗｉｎｅ，ｎｉｎｔｈ  ｒｅｖｉｓｅｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ  １９８８，ｓｕｂｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  ｓｗｉｎｅ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  ａｎｉｍａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，ｂｏａｒｄ  ｏｆ  ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ｎａｔｉｏｎａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｃｏｕｎｃｉｌ．Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，ｐｐ．２−６及びｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｔａｂｌｅ  ｏｆ  Ｅｎｅｒｇｙ  Ｖａｌｕｅｓ  ｆｏｒ  Ｐｏｕｌｔｒｙ  Ｆｅｅｄ−ｓｔｕｆｆｓ，Ｓｐｅｌｄｅｒｈｏｌｔ  ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  ｐｏｕｌｔｒｙ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ，７３６１  ＤＡ  Ｂｅｅｋｂｅｒｇｅｎ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ．Ｇｒａｆｉｓｃｈ  ｂｅｄｒｉｊｆ  Ｐｏｎｓｅｎ＆ｌｏｏｉｊｅｎ  ｂｖ，Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ．ＩＳＢＮ  ９０−７１４６３−１２−５に基づいて算出することができる。
【００６１】
バランスの取れた動物用の餌のカルシウム、有効リン及びアミノ酸の食事含有量は、Ｖｅｅｖｏｅｄｅｒｔａｂｅｌ  １９９７，ｇｅｇｅｖｅｎｓ  ｏｖｅｒ  ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ  ｓａｍｅｎｓｔｅｌｌｉｎｇ，ｖｅｒｔｅｅｒｂａａｒｈｅｉｄ  ｅｎ  ｖｏｅｄｅｒｗａａｒｄｅ  ｖａｎ  ｖｏｅｄｅｒｍｉｄｄｅｌｅｎ，Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｖｅｅｖｏｅｄｅｒｂｕｒｅａｕ，Ｒｕｎｄｅｒｗｅｇ  ６，８２１９  ｐｋ  Ｌｅｌｙｓｔａｄ．ＩＳＢＮ  ９０−７２８３９−１３−７などの飼料表に基づいて算出される。
【００６２】
好ましくは、本発明の動物用飼料は、０〜８０％のメイズ；及び／又は０〜８０％のソルガム；及び／又は０〜７０％のコムギ；及び／又は０〜７０％のオオムギ；及び／又は０〜３０％のカラスムギ；及び／又は０〜４０％のダイズ粉；及び／又は０〜２５％の魚粉；及び／又は０〜２５％の肉骨粉；及び／又は０〜２０％のホエーを含有する。
【００６３】
飼料の最終的なムラミダーゼ濃度は、動物用飼料１ｋｇ当たり５０ｍｇ〜９００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、２００ｍｇ〜７００ｍｇ、３００ｍｇ〜６００ｍｇ若しくは４００ｍｇ〜５００ｍｇの酵素タンパク質又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり１０ｍｇ〜１０００ｍｇの酵素タンパク質の範囲内であり得る。
【００６４】
飼料中の最終的な抗生物質濃度は、動物用飼料１ｋｇ当たり０．５ｍｇ〜９０ｍｇ、１ｍｇ〜８０ｍｇ、５ｍｇ〜７０ｍｇ、１０ｍｇ〜６０ｍｇ、１５ｍｇ〜５０ｍｇ若しくは２０ｍｇ〜４０ｍｇ又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜１００ｍｇの範囲内である。
【００６５】
本発明において、動物用飼料は、下記に記載されるように、１つ以上の追加の酵素；１つ以上のユーバイオティクス；１つ以上のビタミン；１つ以上のミネラル、１つ以上のアミノ酸及び１つ以上の他の飼料成分をさらに含み得る。
【００６６】
［追加の酵素］
本発明において、本明細書において記載される組成物及び／又は動物用飼料は、１つ以上の酵素を任意選択で含み得る。酵素は、ハンドブックＥｎｚｙｍｅ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ｆｒｏｍ  ＮＣ−ＩＵＢＭＢ，１９９２）に基づいて分類することができ、インターネットのＥＮＺＹＭＥのサイト：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｘｐａｓｙ．ｃｈ／ｅｎｚｙｍｅ／も参照されたい。
【００６７】
あるグリコシドヒドロラーゼ酵素、たとえばエンドグルカナーゼ、ガラクタナーゼ（ｇａｌａｃｔａｎａｓｅ）、マンナナーゼ、デキストラナーゼ及びガラクトシダーゼなどの別の分類は、Ｈｅｎｒｉｓｓａｔ  ｅｔ  ａｌ，“Ｔｈｅ  ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−ａｃｔｉｖｅ  ｅｎｚｙｍｅｓ  ｄａｔａｂａｓｅ（ＣＡＺｙ）ｉｎ  ２０１３”，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．（１  Ｊａｎｕａｒｙ  ２０１４）４２（Ｄ１）：Ｄ４９０−Ｄ４９５において記載される；ｗｗｗ．ｃａｚｙ．ｏｒｇも参照されたい。
【００６８】
したがって、本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、アセチルキシランエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．２３）、アシルグリセロールリパーゼ（ＥＣ３．１．１．７２）、アルファ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）、ベータ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．２）、アラビノフラノシダーゼ（ＥＣ３．２．１．５５）、セロビオヒドロラーゼ（ＥＣ３．２．１．９１）、セルラーゼ（ＥＣ３．２．１．４）、フェルロイルエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．７３）、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）、アルファ−ガラクトシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２２）、ベータ−ガラクトシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２３）、ベータ−グルカナーゼ（ＥＣ３．２．１．６）、ベータ−グルコシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２１）、トリアシルグリセロールリパーゼ（ＥＣ３．１．１．３）、リゾホスホリパーゼ（ＥＣ３．１．１．５）、ムラミダーゼ（ＥＣ３．２．１．１７）、アルファ−マンノシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２４）、ベータ−マンノシダーゼ（マンナナーゼ）（ＥＣ３．２．１．２５）、フィターゼ（ＥＣ３．１．３．８、ＥＣ３．１．３．２６、ＥＣ３．１．３．７２）、ホスホリパーゼＡ１（ＥＣ３．１．１．３２）、ホスホリパーゼＡ２（ＥＣ３．１．１．４）、ホスホリパーゼＤ（ＥＣ３．１．４．４）、プロテアーゼ（ＥＣ３．４）、プルラナーゼ（ＥＣ３．２．１．４１）、ペクチンエステラーゼ（ＥＣ３．１．１．１１）、キシラナーゼ（ＥＣ３．２．１．８、ＥＣ３．２．１．１３６）、ベータ−キシロシダーゼ（ＥＣ３．２．１．３７）又はその任意の組み合わせを含む群から選択される少なくとも１つの他の酵素も含み得る。
【００６９】
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、ガラクタナーゼ（ＥＣ３．２．１．８９）及びベータ−ガラクトシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２３）も含み得る。
【００７０】
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、フィターゼ（ＥＣ３．１．３．８又は３．１．３．２６）も含み得る。市販で入手可能なフィターゼの例は、Ｂｉｏ−Ｆｅｅｄ（商標）フィターゼ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）Ｐ、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）ＮＰ及びＲｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）ＨｉＰｈｏｓ（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、Ｎａｔｕｐｈｏｓ（商標）（ＢＡＳＦ）、Ｎａｔｕｐｈｏｓ（商標）Ｅ（ＢＡＳＦ）、Ｆｉｎａｓｅ（登録商標）及びＱｕａｎｔｕｍ（登録商標）Ｂｌｕｅ（ＡＢ  Ｅｎｚｙｍｅｓ）、ＯｐｔｉＰｈｏｓ（登録商標）（Ｈｕｖｅｐｈａｒｍａ）、ＡｖｅＭｉｘ（登録商標）Ｐｈｙｔａｓｅ（Ａｖｅｖｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍ）、Ｐｈｙｚｙｍｅ（登録商標）ＸＰ（Ｖｅｒｅｎｉｕｍ／ＤｕＰｏｎｔ）及びＡｘｔｒａ（登録商標）ＰＨＹ（ＤｕＰｏｎｔ）を含む。他の好ましいフィターゼは、たとえば、国際公開第９８／２８４０８号パンフレット、国際公開第００／４３５０３号パンフレット及び国際公開第０３／０６６８４７号パンフレットにおいて記載されるものを含む。
【００７１】
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、キシラナーゼ（ＥＣ３．２．１．８）も含み得る。市販で入手可能なキシラナーゼの例は、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）ＷＸ（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、Ｅｃｏｎａｓｅ（登録商標）ＸＴ及びＢａｒｌｅｙ（ＡＢ  Ｖｉｓｔａ）、Ｘｙｌａｔｈｉｎ（登録商標）（Ｖｅｒｅｎｉｕｍ）、Ｈｏｓｔａｚｙｍ（登録商標）Ｘ（Ｈｕｖｅｐｈａｒｍａ）、Ａｘｔｒａ（登録商標）ＸＢ（キシラナーゼ／ベータ−グルカナーゼ、ＤｕＰｏｎｔ）及びＡｘｔｒａ（登録商標）ＸＡＰ（キシラナーゼ／アミラーゼ／プロテアーゼ、ＤｕＰｏｎｔ）、ＡｖｅＭｉｘ（登録商標）ＸＧ  １０（キシラナーゼ／グルカナーゼ）及びＡｖｅＭｉｘ（登録商標）０２  ＣＳ（キシラナーゼ／グルカナーゼ／ペクチナーゼ、Ａｖｅｖｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍ）並びにＮａｔｕｒｇｒａｉｎ（ＢＡＳＦ）を含む。
【００７２】
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、プロテアーゼ（ＥＣ３．４）も含み得る。市販で入手可能なプロテアーゼの例は、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）ＰｒｏＡｃｔ（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、Ｗｉｎｚｙｍｅ  Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓ（登録商標）（Ｓｕｎｔａｑ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）及びＣｉｂｅｎｚａ（登録商標）ＤＰ１００（Ｎｏｖｕｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）を含む。
【００７３】
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、アルファ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．１）も含み得る。市販で入手可能なアルファ−アミラーゼの例は、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）Ａ及びＲＯＮＯＺＹＭＥ（登録商標）ＲｕｍｉＳｔａｒ（商標）（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を含む。
【００７４】
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、ＦＲＡ（登録商標）Ｏｃｔａｚｙｍｅ（Ｆｒａｍｅｌｃｏ）、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）Ｇ２、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）ＶＰ及びＲｏｎｏｚｙｍｅ（登録商標）ＭｕｌｔｉＧｒａｉｎ（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、Ｒｏｖａｂｉｏ（登録商標）Ｅｘｃｅｌ又はＲｏｖａｂｉｏ（登録商標）Ａｄｖａｎｃｅ（Ａｄｉｓｓｅｏ）などの多成分酵素製品も含み得る。
【００７５】
［ユーバイオティクス］
本発明の組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、ユーバイオティクスを追加で含み得る。ユーバイオティクスは、胃腸管におけるミクロフローラの健康的なバランスをもたらすように設計されている化合物である。ユーバイオティクスは、より詳細に下記に記載されるプロバイオティクス、プレバイオティクス、フィトジェニクス（精油）及び有機酸などの多くの異なる飼料添加剤を包含する。
【００７６】
［プロバイオティクス］
本発明において、組成物、動物用飼料又は動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、１つ以上の追加のプロバイオティクスをさらに含み得る。特に、動物用飼料組成物又は動物用飼料は、１つ以上の以下の属由来の細菌をさらに含み得る：乳酸桿菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、桿菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ペジオコックス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、腸球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、カルノバクテリウム（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、プロピオン酸菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）及びメガスファエラ（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ）又はその任意の組み合わせ。
【００７７】
好ましくは、組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤は、１つ以上の以下の株由来の細菌をさらに含む：バチルス・スブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ）、バチルス・ポリミキサ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｏｌｙｍｙｘａ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バチルス・サーキュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ）、腸球菌種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ）及びペジオコックス種（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐｐ）、乳酸桿菌種（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ）、ビフィドバクテリウム種（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐｐ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ペジオコックス・アシディラクティシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、ラクトコッカス・ラクチス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｉｆｉｄｕｍ）、プロピオニバクテリウム・ソエニイ（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｈｏｅｎｉｉ）、ラクトバチルス・ファルシミナス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆａｒｃｉｍｉｎｕｓ）、ラクトバチルス・ラムノサス（ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、クロストリジウム・ブチリクム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、ビフィドバクテリウム・アニマーリス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｎｉｍａｌｉｓ）亜種アニマーリス（ａｎｉｍａｌｉｓ）、ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチルス・サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｉｉｖａｒｉｕｓ）亜種サリバリウス（ｓａｉｉｖａｒｉｕｓ）、メガスフェラ・エルスデニイ．（Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｓｄｅｎｉｉ）、プロピオン酸菌種（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉａ  ｓｐ）。
【００７８】
より好ましくは、本発明の組成物又は動物用飼料は、バチルス・スブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）の１つ以上の以下の株由来の細菌をさらに含む：３Ａ−Ｐ４（ＰＴＡ−６５０６）、１５Ａ−Ｐ４（ＰＴＡ−６５０７）、２２Ｃ−Ｐ１（ＰＴＡ−６５０８）、２０８４（ＮＲＲＬ  Ｂ−５００１３０）、ＬＳＳＡ０１（ＮＲＲＬ−Ｂ−５０１０４）、ＢＳ２７（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０１  ０５）、ＢＳ  １８（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６３３）、ＢＳ  ２７８（ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６３４）、ＤＳＭ  ２９８７０、ＤＳＭ  ２９８７１、ＤＳＭ  ３２３１５、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０１３６、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６０５、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６０６、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６２２及びＰＴＡ−７５４７。
【００７９】
より好ましくは、本発明の組成物又は動物用飼料は、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｕｍｉｌｕｓ）の１つ以上の以下の株由来の細菌をさらに含む：ＮＲＲＬ  Ｂ−５００１６、ＡＴＣＣ  ７００３８５、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０８８５又はＮＲＲＬ  Ｂ−５０８８６。
【００８０】
より好ましくは、本発明の組成物又は動物用飼料添加剤は、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の１つ以上の以下の株由来の細菌をさらに含む：ＮＲＲＬ  Ｂ  ５００１５、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６２１又はＮＲＲＬ  Ｂ−５０６２３。
【００８１】
より好ましくは、本発明の組成物又は動物用飼料は、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）の１つ以上の以下の株由来の細菌をさらに含む：ＤＳＭ  ２９８６９、ＤＳＭ  ２９８６９、ＮＲＲＬ  Ｂ  ５０６０７、ＰＴＡ−７５４３、ＰＴＡ−７５４９、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０３４９、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０６０６、ＮＲＲＬ  Ｂ−５００１３、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０１５１、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０１４１、ＮＲＲＬ  Ｂ−５０１４７又はＮＲＲＬ  Ｂ−５０８８８。
【００８２】
組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤中の細菌株のそれぞれの細菌数は、１×１０４〜１×１０１４ＣＦＵ／乾燥材料ｋｇ、好ましくは１×１０６〜１×１０１２ＣＦＵ／乾燥材料ｋｇ、より好ましくは１×１０７〜１×１０１１ＣＦＵ／乾燥材料ｋｇである。好ましくは、組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤中の細菌株のそれぞれの細菌数は、１×１０８〜１×１０１０ＣＦＵ／乾燥材料ｋｇである。
【００８３】
組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤中の細菌株のそれぞれの細菌数は、１×１０５〜１×１０１５ＣＦＵ／動物／日、好ましくは１×１０７〜１×１０１３ＣＦＵ／動物／日、より好ましくは１×１０８〜１×１０１２ＣＦＵ／動物／日である。好ましくは、組成物、動物用飼料又は動物用飼料添加剤の細菌株のそれぞれの細菌数は、１×１０９〜１×１０１１ＣＦＵ／動物／日である。より好ましくは、プロバイオティクスの量は、組成物又は動物用飼料又は動物用飼料添加剤の０．００１重量％〜１０重量％である。
【００８４】
本発明において、１つ以上の細菌株は、安定した胞子の形態で存在し得る。
【００８５】
市販の製品の例は、Ｃｙｌａｃｔｉｎ（登録商標）（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、Ａｌｔｅｒｉｏｎ（Ａｄｉｓｓｅｏ）、Ｅｎｖｉｖａ  ＰＲＯ（ＤｕＰｏｎｔ  Ａｎｉｍａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）、Ｓｙｎｃｒａ（登録商標）（ミックス酵素＋生菌、ＤｕＰｏｎｔ  Ａｎｉｍａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）、Ｅｃｏｂｉｏｌ（登録商標）及びＦｅｃｉｎｏｒ（登録商標）（Ｎｏｒｅｌ／Ｅｖｏｎｉｋ）並びにＧｕｔＣａｒｅ（登録商標）ＰＹ１（Ｅｖｏｎｉｋ）である。
【００８６】
［プレバイオティクス］
プレバイオティクスは、宿主の健康に寄与する微生物（たとえば、細菌及び菌類）の成長又は活性を誘発する物質である。プレバイオティクスは、通常、胃腸管の上部を消化されずに通過し、大腸に定着する好都合な細菌の成長又は活性を、細菌のためのベースとして作用することによって刺激する非消化性の繊維化合物である。一般に、プレバイオティクスは、ＧＩ管においてビフィズス菌及び乳酸菌の数又は活性を増加させる。
【００８７】
酵母誘導体（不活性化された全酵母又は酵母細胞壁）もプレバイオティクスとしてみなすことができる。それらは、多くの場合、マンナンオリゴ糖、酵母ベータグルカン又はタンパク質内容物を含み、一般に酵母、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）の細胞壁に由来する。
【００８８】
本発明において、プレバイオティクスの量は、組成物の０．００１重量％〜１０重量％であり得る。酵母製品の例は、Ｙａｎｇ（登録商標）及びＡｇｒｉｍｏｓ（Ｌａｌｌｅｍａｎｄ  Ａｎｉｍａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）である。
【００８９】
［フィトジェニクス］
フィトジェニクスは、飼料添加剤として使用され、ハーブ、スパイス又は他の植物に由来する天然の成長促進物質又は非抗生物質の成長促進物質の群である。フィトジェニクスは、精油／抽出物から調製される単一の物質、精油／抽出物、単一の植物及び植物の混合物（ハーブ製品）又は精油／抽出物／植物の混合物（特殊製品）とすることができる。
【００９０】
フィトジェニクスの例は、ローズマリー、セージ、オレガノ、タイム、クローブ及びレモングラスである。精油の例は、チモール、オイゲノール、メタクレゾール、バニリン、サリチラート、レゾルシン、グアイアコール、ギンゲロール、ラベンダー油、イオノン、イロン、ユーカリプトール、メントール、ハッカ油、アルファ−ピネン；リモネン、アネトール、リナロール、ジヒドロジャスモン酸メチル、カルバクロール、プロピオン酸／プロピオナート、酢酸／アセタート、酪酸／ブチラート、ローズマリー油、チョウジ油、ゲラニオール、テルピネオール、シトロネロール、サリチル酸アミル及び／又はサリチル酸ベンジル、シンナムアルデヒド、植物性ポリフェノール（タンニン）、ウコン並びにウコン抽出物である。
【００９１】
本発明において、フィトジェニクスの量は、組成物の０．００１重量％〜１０重量％であり得る。市販の製品の例は、Ｃｒｉｎａ（登録商標）（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）；Ｃｉｎｅｒｇｙ（商標）、Ｂｉａｃｉｄ（商標）、ＰｒｏＨａｃｉｄ（商標）Ｃｌａｓｓｉｃ及びＰｒｏＨａｃｉｄ（商標）Ａｄｖａｎｃｅ（商標）（すべてＰｒｏｍｉｖｉ／Ｃａｒｇｉｌｌ）並びにＥｎｖｉｖｏ  ＥＯ（ＤｕＰｏｎｔ  Ａｎｉｍａｌ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）である。
【００９２】
［有機酸］
有機酸（Ｃ１〜Ｃ７）は、植物又は動物組織の通常の構成成分として自然界に広く分布する。有機酸は、主に大腸において、炭水化物の微生物発酵を通しても形成される。有機酸が鶏における壊疽性腸炎及び若い豚における大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）感染症のような腸の問題に対して予防効果を有するため、有機酸は、多くの場合、抗生物質成長促進物質の代わりとしてブタ及び家禽の生産に使用される。有機酸は、１つの構成要素又は通常２つ若しくは３つの異なる有機酸の混合物として販売され得る。有機酸の例は、短鎖脂肪酸（たとえば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸）、中鎖脂肪酸（たとえば、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸）、ジ／トリカルボン酸（たとえば、フマル酸）、ヒドロキシ酸（たとえば、乳酸）、芳香族酸（たとえば、安息香酸）、クエン酸、ソルビン酸、リンゴ酸及び酒石酸又はそれらの塩（通常、二ギ酸カリウム若しくは酪酸ナトリウムなどのナトリウム塩若しくはカリウム塩）である。
【００９３】
本発明において、有機酸の量は、組成物の０．００１重量％〜１０重量％であり得る。市販の製品の例は、ＶｅｖｏＶｉｔａｌｌ（登録商標）（ＤＳＭ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、Ａｍａｓｉｌ（登録商標）、Ｌｕｐｒｉｓｉｌ（登録商標）、Ｌｕｐｒｏ−Ｇｒａｉｎ（登録商標）、Ｌｕｐｒｏ−Ｃｉｄ（登録商標）、Ｌｕｐｒｏ−Ｍｉｘ（登録商標）（ＢＡＳＦ）、ｎ−Ｂｕｔｙｒｉｃ  Ａｃｉｄ  ＡＦ（ＯＸＥＡ）及びＡｄｉｍｉｘ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ（Ｎｕｔｒｉａｄ）である。
【００９４】
［アミノ酸］
本発明の組成物又は動物用飼料は、１つ以上のアミノ酸をさらに含み得る。使用されるアミノ酸の例は、リシン、アラニン、ベータ−アラニン、スレオニン、メチオニン及びトリプトファンである。本発明において、アミノ酸の量は、組成物又は動物用飼料の０．００１重量％〜１０重量％であり得る。
【００９５】
［ビタミン及びミネラル］
本発明において、組成物又は動物用飼料は、１つ以上のビタミン、たとえば１つ以上の脂溶性ビタミン及び／又は１つ以上の水溶性ビタミンなどを含み得る。加えて、組成物又は動物用飼料は、任意選択で、１つ以上のミネラル、たとえば１つ以上の微量ミネラル及び／又は１つ以上のマクロミネラルなどを含み得る。
【００９６】
通常、脂溶性及び水溶性ビタミン並びに微量ミネラルは、飼料への追加が意図されるいわゆるプレミックスの一部を形成するのに対して、マクロミネラルは、普通、別々に飼料に追加される。
【００９７】
脂溶性ビタミンの非限定的な例は、ビタミンＡ、ビタミンＤ３、ビタミンＥ及びビタミンＫ、たとえばビタミンＫ３を含む。
【００９８】
水溶性ビタミンの非限定的な例は、ビタミンＣ、ビタミンＢ１２、ビオチン及びコリン、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ナイアシン、葉酸並びにパントテン酸塩、たとえばＤ−パントテン酸Ｃａを含む。
【００９９】
微量ミネラルの非限定的な例は、ホウ素、コバルト、塩化物、クロム、銅、フッ化物、ヨウ素、鉄、マンガン、モリブデン、ヨウ素、セレン及び亜鉛を含む。
【０１００】
マクロミネラルの非限定的な例は、カルシウム、マグネシウム、リン、カリウム及びナトリウムを含む。
【０１０１】
本発明において、ビタミンの量は、組成物又は動物用飼料の０．００１重量％〜１０重量％であり得る。好ましくは、ミネラルの量は、組成物又は動物用飼料の０．００１重量％〜１０重量％である。
【０１０２】
これらの構成成分の栄養必要量（家禽及び子ブタ／ブタにより例示される）は、国際公開第０１／５８２７５号パンフレットの表Ａに掲載される。栄養必要量は、これらの構成成分が、餌において、示される濃度で提供されなければならないことを意味する。
【０１０３】
代わりに、本発明の組成物又は動物用飼料は、国際公開第０１／５８２７５号パンフレットの表Ａにおいて指定される個々の構成成分の少なくとも１つを含む。少なくとも１つは、いずれか、１つ以上、１つ、若しくは２つ、若しくは３つ、若しくは４つなど、最大１３すべて又は最大１５すべての個々の構成成分を意味する。より詳細には、この少なくとも１つの個々の構成成分は、表Ａの４列目又は５列目又は６列目に示される範囲内の投入濃度を提供するような量で本発明の添加剤中に含まれる。
【０１０４】
好ましくは、本発明の組成物又は動物用飼料は、好ましくは、下記表１において指定される範囲内の投入濃度を提供するように、下記のビタミンの少なくとも１つを含む（それぞれ子ブタの餌及びブロイラーの餌について）。
【０１０５】
【表１】
2022500358.tif 000002
【０１０６】
［他の飼料成分］
本発明の組成物又は動物用飼料は、着色剤、安定剤、成長を改善する添加剤及び芳香化合物／香味料、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）；活性酸素生成種、酸化防止剤、殺菌性ペプチド、抗菌性ポリペプチド及びマイコトキシン管理化合物をさらに含み得る。
【０１０７】
着色剤の例は、ベータ−カロテン、アスタキサンチン及びルテインなどのカロテノイドである。
【０１０８】
芳香化合物／香味料の例は、クレオゾール、アネトール、デカ−、ウンデカ−及び／又はドデカ−ラクトン、イオノン、イロン、ギンゲロール、ピペリジン、プロピリデンファタリド、ブチリデンファタリド、カプサイシン並びにタンニンである。
【０１０９】
殺菌ペプチド（ＡＭＰ）の例は、国際公開第０３／０４４０４９号パンフレット及び国際公開第０３／０４８１４８号パンフレットにおいて開示される化合物及びポリペプチドを含め、ＣＡＰ１８、ロイコシンＡ（Ｌｅｕｃｏｃｉｎ  Ａ）、トリトルプチシン、プロテグリン−１、タナチン、デフェンシン、ラクトフェリン、ラクトフェリシン及びノビスピリン（Ｒｏｂｅｒｔ  Ｌｅｈｒｅｒ，２０００）などのオビスピリン、プレクタシン並びにスタチン並びに殺菌活性を保持する上記の変異体又は断片である。
【０１１０】
抗菌性ポリペプチド（ＡＦＰ）の例は、国際公開第９４／０１４５９号パンフレット及び国際公開第０２／０９０３８４号パンフレットにおいて開示されるように、アスペルギルス・ギガンテウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｇｉｇａｎｔｅｕｓ）及びアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）ペプチド並びに抗菌性の活性を保持するその変異体及び断片である。
【０１１１】
多価不飽和脂肪酸の例は、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸及びガンマ−リノール酸などのＣ１８、Ｃ２０及びＣ２２多価不飽和脂肪酸である。
【０１１２】
活性酸素生成種の例は、過ホウ酸塩、過硫酸塩又は過炭酸塩などの化学物質；及びオキシダーゼ、オキシゲナーゼ又はシンテターゼなどの酵素である。
【０１１３】
酸化防止剤は、活性酸素種のレベルが酸化防止剤と釣り合うように、生成され得る活性酸素種の数を制限するために使用することができる。
【０１１４】
デオキシニバレノール、アフラトキシン、ゼアラレノン及びフモニシンなどのマイコトキシンは、動物用飼料中に見つけることができ、動物の能力にとってマイナスとなり得るか又は病気をもたらし得る。マイコトキシンの失活を介して又はマイコトキシンの結合を介してなど、マイコトキシンのレベルを管理することができる化合物は、これらのマイナスの効果を改良するために飼料に追加することができる。マイコトキシン管理化合物の例は、Ｖｉｔａｆｉｘ（登録商標）、Ｖｉｔａｆｉｘ  Ｕｌｔｒａ（Ｎｕｓｃｉｅｎｃｅ）、Ｍｙｃｏｆｉｘ（登録商標）、Ｍｙｃｏｆｉｘ（登録商標）Ｓｅｃｕｒｅ、ＦＵＭｚｙｍｅ（登録商標）、Ｂｉｏｍｉｎ（登録商標）ＢＢＳＨ、Ｂｉｏｍｉｎ（登録商標）ＭＴＶ（Ｂｉｏｍｉｎ）、Ｍｏｌｄ−Ｎｉｌ（登録商標）、Ｔｏｘｙ−Ｎｉｌ（登録商標）及びＵｎｉｋｅ（登録商標）Ｐｌｕｓ（Ｎｕｔｒｉａｄ）である。
【０１１５】
［動物能力を改善し、且つ／又は抗生物質の使用量を低下させる方法］
第３の態様において、本発明は、動物における成長能力を改善する方法であって、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む組成物又は動物用飼料を動物に投与することを含む方法にさらに関する。
【０１１６】
第４の態様において、本発明は、動物における抗生物質の使用量を低下させる方法であって、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチドを動物に投与すること含む方法にさらに関する。
【０１１７】
特に、本発明は、動物の体重（ＢＷ）、体重増加（ＢＷＧ）、飼料要求率（ＦＣＲ）及びヨーロッパ生産効率指数（ＥＰＥＦ）を改善する方法であって、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む組成物又は動物用飼料を動物に投与することを含む方法に関する。
【０１１８】
本発明において、改善は、同じ飼料であるが、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチド若しくは抗生物質又はその両方が除かれた飼料と比較した、ＢＷ、ＢＷＧ若しくはＥＰＥＦの増加又はＦＣＲの減少を意味する。
【０１１９】
本発明において、ＢＷ、ＢＷＧ又はＥＰＥＦは、少なくとも１．５％、少なくとも２．０％、少なくとも２．５％、少なくとも３％、少なくとも３．５％、少なくとも４％又は少なくとも５％など、少なくとも１％増加し得る。
【０１２０】
本発明において、ＦＣＲは、少なくとも１．５％、少なくとも２．０％、少なくとも２．５％、少なくとも３％、少なくとも３．５％、少なくとも４％又は少なくとも５％など、少なくとも１％減少し得る。
【０１２１】
本発明において、動物における抗生物質の使用量は、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドが存在しないネガティブコントロールと比較して、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％又は少なくとも１００％など、少なくとも１０％低下する。
【０１２２】
本発明において、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドは、動物用飼料１ｋｇ当たり５０ｍｇ〜９００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、２００ｍｇ〜７００ｍｇ、３００ｍｇ〜６００ｍｇ若しくは４００ｍｇ〜５００ｍ又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり１０ｍｇ〜１０００ｍｇの酵素タンパク質のレベルで添加され得る。
【０１２３】
本発明において、抗生物質は、動物用飼料１ｋｇ当たり０．５ｍｇ〜９０ｍｇ、１ｍｇ〜８０ｍｇ、５ｍｇ〜７０ｍｇ、１０ｍｇ〜６０ｍｇ、１５ｍｇ〜５０ｍｇ若しくは２０ｍｇ〜４０ｍｇ又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜１００ｍｇのレベルで添加され得る。
【０１２４】
本発明において、動物は、単胃動物、たとえば豚又はブタ（子ブタ、育成ブタ及び雌ブタを含むが、これらに限定されない）；家禽（家禽、シチメンチョウ、カモ、ウズラ、ホロホロチョウ、ガチョウ、ハト、ひなバト、鶏、ブロイラー、産卵鶏、若雌鶏及びヒヨコを含むが、これらに限定されない）；ネコ及びイヌなどの愛玩動物、魚（アンバージャック、ピラルク、バーブ、バス、アミキリ、ボカチコ、ブリーム、カジカ、コロソマ、コイ、ナマズ、カトラ、サバヒー、チャー、カワスズメ、スギ、タラ、クラッピー、へダイ、ニベ科の魚、ウナギ、ハゼ、キンギョ、グラミー、ハタ、グァポテ、ハリバット、ジャワ、ラベオ、ライ、ドジョウ、サバ、ミルクフィッシュ、サギ、ボウフィン、ボラ、パコ、パールスポット、ペヘレイ、パーチ、カワカマス、コバンアジ、ローチ、サケ、サンパ、ソーガー、ハタ科の魚、タイ、シャイナー、カワアナゴ科の魚、タイワンドジョウ、フエダイ、アカメ、シタビラメ、スパインフット、チョウザメ、マンボウ、アユ、テンチ、テラー、テラピア、マス、マグロ、ターボット、シロマス、ウォールアイ及びホワイトフィッシュ）；並びに甲殻類の動物（小エビ及び中エビを含むが、これらに限定されない）である。さらに好ましい実施形態では、動物は、ブタ、家禽、甲殻類の動物及び魚からなる群から選択される。さらに好ましい実施形態では、動物は、ブタ、子ブタ、育成ブタ、雌ブタ、鶏、ブロイラー、産卵鶏、若雌鶏及びヒヨコからなる群から選択される。
【０１２５】
［動物能力を改善し、且つ／又は抗生物質の使用量を低下させることにおける使用］
第５の態様において、本発明は、動物における成長能力を改善し、且つ／又は抗生物質の使用量を低下させることにおける組成物又は動物用飼料の使用であって、組成物及び動物用飼料は、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む、使用にさらに関する。
【０１２６】
第６の態様において、本発明は、動物において抗生物質の使用量を低下させることにおける、ムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチドの使用にさらに関する。
【０１２７】
特に、本発明は、動物の体重（ＢＷ）、体重増加（ＢＷＧ）、飼料要求率（ＦＣＲ）及びヨーロッパ生産効率指数（ＥＰＥＦ）を改善することにおける、組成物又は動物用飼料の使用であって、組成物及び動物用飼料は、上記に定義されるムラミダーゼ活性を有する１つ以上のポリペプチド及び１つ以上の抗生物質を含む、使用に関する。
【０１２８】
本発明において、改善は、同じ飼料であるが、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチド若しくは抗生物質又はその両方が除かれた飼料と比較した、ＢＷ、ＢＷＧ若しくはＥＰＥＦの増加又はＦＣＲの減少を意味する。
【０１２９】
本発明において、ＢＷ、ＢＷＧ又はＥＰＥＦは、少なくとも１．５％、少なくとも２．０％、少なくとも２．５％、少なくとも３％、少なくとも３．５％、少なくとも４％又は少なくとも５％など、少なくとも１％増加し得る。
【０１３０】
本発明において、ＦＣＲは、少なくとも１．５％、少なくとも２．０％、少なくとも２．５％、少なくとも３％、少なくとも３．５％、少なくとも４％又は少なくとも５％など、少なくとも１％減少し得る。
【０１３１】
本発明において、動物における抗生物質の使用量は、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドが存在しないネガティブコントロールと比較して、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％又は少なくとも１００％など、少なくとも１０％低下する。
【０１３２】
本発明において、ムラミダーゼ活性を有するポリペプチドは、動物用飼料１ｋｇ当たり５０ｍｇ〜９００ｍｇ、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、２００ｍｇ〜７００ｍｇ、３００ｍｇ〜６００ｍｇ若しくは４００ｍｇ〜５００ｍ又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり１０ｍｇ〜１０００ｍｇの酵素タンパク質のレベルで添加され得る。
【０１３３】
本発明において、抗生物質は、動物用飼料１ｋｇ当たり０．５ｍｇ〜９０ｍｇ、１ｍｇ〜８０ｍｇ、５ｍｇ〜７０ｍｇ、１０ｍｇ〜６０ｍｇ、１５ｍｇ〜５０ｍｇ若しくは２０ｍｇ〜４０ｍｇ又はこれらの区間の任意の組み合わせなど、動物用飼料１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜１００ｍｇのレベルで添加され得る。
【０１３４】
本発明において、動物は、単胃動物、たとえば豚又はブタ（子ブタ、育成ブタ及び雌ブタを含むが、これらに限定されない）；家禽（家禽、シチメンチョウ、カモ、ウズラ、ホロホロチョウ、ガチョウ、ハト、ひなバト、鶏、ブロイラー、産卵鶏、若雌鶏及びヒヨコを含むが、これらに限定されない）；魚（アンバージャック、ピラルク、バーブ、バス、アミキリ、ボカチコ、ブリーム、カジカ、コロソマ、コイ、ナマズ、カトラ、サバヒー、チャー、カワスズメ、スギ、タラ、クラッピー、へダイ、ニベ科の魚、ウナギ、ハゼ、キンギョ、グラミー、ハタ、グァポテ、ハリバット、ジャワ、ラベオ、ライ、ドジョウ、サバ、ミルクフィッシュ、サギ、ボウフィン、ボラ、パコ、パールスポット、ペヘレイ、パーチ、カワカマス、コバンアジ、ローチ、サケ、サンパ、ソーガー、ハタ科の魚、タイ、シャイナー、カワアナゴ科の魚、タイワンドジョウ、フエダイ、アカメ、シタビラメ、スパインフット、チョウザメ、マンボウ、アユ、テンチ、テラー、テラピア、マス、マグロ、ターボット、シロマス、ウォールアイ及びホワイトフィッシュ）；並びに甲殻類の動物（小エビ及び中エビを含むが、これらに限定されない）である。さらに好ましい実施形態では、動物は、ブタ、家禽、甲殻類の動物及び魚からなる群から選択される。さらに好ましい実施形態では、動物は、ブタ、子ブタ、育成ブタ、雌ブタ、鶏、ブロイラー、産卵鶏、若雌鶏及びヒヨコからなる群から選択される。
【０１３５】
本発明を以下の実施例によってさらに例証する。
【０１３６】
［実施例］
［実施例１：ムラミダーゼ活性の決定］
ムラミダーゼの活性は、４５０ｎｍでマイクロプレートリーダー（Ｔｅｃａｎ  Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  Ｍ２００）において測定される、懸濁したミクロコッカス・リゾデイクティカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓ）ＡＴＴＣ  Ｎｏ．４６９８（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｍ３７７０）の溶液の吸光度／光学濃度の減少（降下）を測定することによって決定した。
【０１３７】
［ミクロコッカス・リゾデイクティカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓ）ベースの調製］
使用前に細胞を１０ｍｇ細胞／ｍＬの濃度まで脱イオン水中で懸濁し、４５０ｎｍでの吸光度／光学濃度（ＯＤ）を測定した。細胞懸濁液は、次いで、濁り度アッセイにおける細胞濃度（１８０μＬバッファー＋２０μＬサンプル＋２０μＬベース）がＯＤ４５０＝１．０に等しくなるように調整した。調整した細胞懸濁液は、次いで、使用前に周囲温度で保存した。懸濁した細胞は、３時間以内に使用した。
【０１３８】
［クエン酸−リン酸バッファーｐＨ４の調製］
６１．４５ｍＬ  ０．１Ｍクエン酸を３８．５５ｍＬ  ０．２Ｍリン酸水素二ナトリウムと混合し、ｐＨを塩酸又は水酸化ナトリウムによりｐＨ４に調整した。
【０１３９】
［濁り度アッセイにおけるムラミダーゼ殺菌活性の測定］
測定するムラミダーゼサンプルを脱イオン水中５０ｍｇ酵素タンパク質／Ｌの濃度まで希釈し、使用まで氷上で保った。９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｎｕｎｃ）において、１８０μＬクエン酸−リン酸バッファーｐＨ４及び２０μＬの希釈したムラミダーゼサンプルを追加し、低温で保った（５℃）。活性測定を開始するために、２０μＬのベース（ミクロコッカス・リゾデイクティカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓ））を各ウェルに追加し、４５０ｎｍでの吸光度の反応速度測定を始め、マイクロプレートリーダーにおいて３７℃で１時間行った。４５０ｎｍで測定した吸光度を各ウェルについてモニターし、ムラミダーゼがムラミダーゼ活性を有する場合、次第に吸光度の降下が見られた。
【０１４０】
インキュベーション後、ミクロコッカス・リゾデイクティカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｕｓ）に対するムラミダーゼ活性を１時間後の各ウェルの４５０ｎｍでのΔ吸光度（開始値−終了値）として決定した。有意性は、ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．のＪＭＰ（登録商標）バージョン１２．１．０統計ソフトウェアパッケージにおけるコントロールありのダネットの検定  ｐ値０．０５を使用して算出した。
【０１４１】
［実施例２：インビボにおけるブロイラー試験１］
［場所及び動物］
試験は、２０１７年８月１５日から２０１７年１０月３日まで、Ｐｏｕｌｔｒｚ  ｓｅｃｔｉｏｎ、ＩＮＴＡ−ＥＥＡ  Ｐｅｒｇａｍｉｎｏ、ブエノスアイレス（Ｂｕｅｎｏｓ  Ａｉｒｅｓ）、アルゼンチン（Ａｒｇｅｎｔｉｎａ）で実行した。生まれて１日の雄ブロイラー鶏（「Ｃｏｂｂ−５００」）は、民間ふ化場（Ｇｒａｎｊａ  Ｔｒｅｓ  Ａｒｒｏｙｏｓ、Ｔｒｅｓ  Ａｒｒｏｙｏｓ  ３７８、ブエノスアイレス、アルゼンチン）によって提供された。
【０１４２】
［収容場］
鳥は、一般的な納屋（カーテンありの網の片開）において、敷料としてチップを有する平飼い飼育室内に収容した。ガス暖房器、ファン及び噴霧器を、納屋の温度をコントロールするために使用した。
【０１４３】
すべての鳥を計量し、１ｇ単位で分け、均一なロットを形成するように分布させた。極端な体重の鳥は、除外した。
【０１４４】
飼料及び水は、適宜提供した。
【０１４５】
［実験計画］
無作為化完備型ブロック計画を使用し（因子の配列、２エンラマイシンレベル×２ムラミダーゼレベル）、それぞれ１４回反復する４つの処置を合わせて行った（１処置当たり２５２匹の鳥、表３）。
【０１４６】
【表２】
2022500358.tif 000003
【０１４７】
［実験用の餌］
実験用の餌（スターター、育成、仕上げ及び最後の週）は、主な成分として、トウモロコシ、ダイズ粉を主成分とした（表３）。フィターゼ（ＲＯＮＯＺＹＭＥ（登録商標）ＨｉＰｈｏｓ  ＧＴ、用量１０００ＦＹＴ／飼料ｋｇ、１００ｇ／飼料ｔｎ）をすべての処置において使用した。ＤＳＭのＲｏｖｉｍｉｘ（登録商標）ブロイラーをビタミン−ミネラルプレミックスとして使用し、マズラマイシンを抗コクシジウム剤として使用した。飼料の組成を表４として掲載した。
【０１４８】
【表３】
2022500358.tif 000004
【０１４９】
［負荷］
ブロイラーの能力に影響を与え、抗生物質又は代替物の有益な効果を実証することができる負荷を生じさせる管理手段：
−  ２１日齢まで５００ｍＬの水の追加（一日置き）を通して高水分を維持する再生敷料（２回の繁殖）
−  高密度、１２匹の鳥／ｍ２
−  ２８及び４２日齢時にのみ敷料の上層を除去。
【０１５０】
［実験パラメーター及び解析］
個々の体重及び飼育室の飼料摂取量を毎週決定した。
【０１５１】
この情報に基づいて飼料効率及び重量増加を算出し、各フェーズ及び全サイクルについて考察した。
【０１５２】
生体重／飼料要求率を使用した。これは、１飼育室当たりで使用する鳥の数が少ない場合、死亡率の影響を避けるために簡略化したものである（本実験では１８匹）。
【０１５３】
均一性（飼育室平均体重のμ１０％の体重の範囲に含まれる鳥の％）は、４８日齢時にそれぞれの飼育室で決定した。
【０１５４】
３０分毎に、温湿度を、データロガーを使用して登録した。
【０１５５】
［結果及び考察］
［体重］
エンラマイシン含有では、体重における増加が観察され（表５）、この差は、２１日目から有意であった（ｐ≦０．０５）。ムラミダーゼの含有でも、２１日齢から体重における増加が観察された（２１日目、ｐ≦０．０５及び４２日目、ｐ≦０．１０）。ムラミダーゼのみと比較して、ムラミダーゼ及びエンラマイシンの組み合わせは、重量増加をさらに増加させた。
【０１５６】
【表４】
2022500358.tif 000005
【０１５７】
［飼料要求率］
エンラマイシン含有では、飼料効率が改善され（表６）、差は、３５日目から有意であった（ｐ≦０．０５）。ムラミダーゼの含有では、飼料効率における改善は、すべての実験に沿って観察され、差は、７日目及び２１日目以降、有意であった（ｐ≦０．０５）。エンラマイシンのみと比較して、追加のムラミダーゼの含有は、期間全体でエンラマイシンのみをさらに上回って飼料効率をさらに減少させた。
【０１５８】
【表５】
2022500358.tif 000006
【０１５９】
［体重／飼料要求率］
エンラマイシン含有では、体重／飼料要求率が改善され（表７）、差は、３５日目以降、有意であり（ｐ≦０．０５）、傾向は、２１日目に観察された（ｐ≦０．１０）。ムラミダーゼ含有では、このパラメーターにおける改善は、エンラマイシンのみをさらに上回って観察された。この差は、２１、４２及び４８日時点（ｐ≦０．０５）並びに７及び２８日時点（ｐ≦０．１０）で有意であった。
【０１６０】
【表６】
2022500358.tif 000007
【０１６１】
［他の畜産学パラメーター］
エンラマイシンの含有では、屠殺体重（２８００ｇ）に達するのに１．１日に相当する低下が観察された（ｐ≦０．０５、表８）。ムラミダーゼでは、２８００ｇの体重に達するのに０．３日の低下が４８日齢時に観察され、処置間の均一性の差は、観察されなかった（ｐ＞０．０５）。
【０１６２】
【表７】
2022500358.tif 000008
【０１６３】
［結論］
本研究において得られた結果は、微生物ムラミダーゼのみの又は抗生物質（エンラマイシン）と一緒の含有がブロイラー鶏の成長能力を改善するのに有効であったことを示した。したがって、ブロイラー鶏のための抗生物質の使用量を低下させることが可能になる。
【０１６４】
［実施例３：インビボにおけるブロイラー試験２］
［研究の概要］
給餌試験を２４００匹のＣｏｂｂ  ４００Ｙヒヨコの雄の群れで３５日間行った。ヒヨコは、民間ふ化場から調達し、飼育室において敷料の上で研究期間の最初から最後まで育てた。６つの処置群への及び群内での飼育室（６．５×４フィート）へのヒヨコの配分を無作為化完備型ブロック計画に従って行った。それぞれの処置群は、１６の反復実験飼育室からなり、各飼育室のヒヨコは、２５匹とした（１処置当たりｎ＝４００、ヒヨコの総数は、２４００になる）。
【０１６５】
処置群は、以下のとおりとした。
【０１６６】
【表８】
2022500358.tif 000009
【０１６７】
［飼料］
飼料は、すべてマッシュ形態で与えた。３フェーズの給餌を実施した：プレスターター（１〜１４日／５００ｇ／鳥）、スターター（１５〜２８日／１５００ｇ／鳥）及び仕上げ（２９〜３５日／処分まで給餌）。同じロットの原料を餌の調製に使用し、すべてのステージの餌は、それぞれの給餌ステージの開始の直前に改めて調製した。すべての餌は、鳥の規格化された回腸消化性アミノ酸必要量を使用し、理想的なタンパク質比に従って配合した（表１０）。
【０１６８】
【表９】
2022500358.tif 000010
【０１６９】
［ワクチン接種］
ニューカッスル病（５日及び１２日）並びに伝染性ファブリキウス嚢病（２０日）の予防のために、眼内ルートを通して、標準的なワクチン接種手順に従って鳥にワクチン接種した。
【０１７０】
［測定するパラメーター］
１．能力特性（体重、平均１日体重増加量、平均１日飼料摂取量及び飼料要求率）を飼育室ごとに算出する。
２．反復実験によって算出するヨーロッパ生産効率指数（ＥＰＥＦ）。
ＥＰＥＦ＝ＡＤＧ（ｇ）／ＦＣＲ＊１０）×（１００−死亡率％）
【０１７１】
［統計的解析］
すべてのデータは、主要因として補足的ＢＭＤ（０及び５０ｐｐｍ）のレベル並びにムラミダーゼ（０、４５０及び８１０ｐｐｍ）のレベルを使用して、２×３要因配置実験に従って統計的に解析した。主効果及び交互作用を決定した。２つの別々の小屋への実験用の群れの配分が鳥の能力に対して何らかの効果を及ぼすかどうかを見るために、別の構成要素、すなわち小屋の効果も統計モデルに追加した。結果を平均及びプールした平均値の標準誤差として表わし、何らかの有意な変動（Ｐ＜０．０５）がある場合には必ず、平均分離をＴｕｋｅｙのＢ検定に従って行った。
【０１７２】
［結果］
体重増加量（ＢＷＧ）、飼料摂取量（ＦＩ）及び飼料要求率（ＦＣＲ）の観点からの能力を１日目から３５日目まで週一回の間隔で記録した。表１１に示すように、ＮＣにおいてムラミダーゼを補足すると、低い方の濃度（４５０ｐｐｍ）でさえ、補足しなかった群と比較してＢＷＧが有意に増加した。４５０ｍｇ／ｋｇから８１０ｍｇ／ｋｇにムラミダーゼの用量を増加させ、産物をＰＣに補足した場合、ＢＷＧは、それに伴って増加した。一定量の生体重増加をもたらすのに必要とされる飼料も４５０ｍｇ／餌ｋｇのムラミダーゼを含有させ、ＰＣ又はＮＣに産物を補足した場合に低下した。しかしながら、飼料効率は、ムラミダーゼをＰＣに補足した場合、ＮＣを給餌したものと比較して良好であった。
【０１７３】
【表１０】
2022500358.tif 000011
【０１７４】
抗生物質及びムラミダーゼの補足間の交互作用は、１〜３５日齢のブロイラー鶏においてＥＰＥＦに有意に影響を及ぼした（表１１）。テストした最も低い濃度（４５０ｍｇ／ｋｇ）でのＮＣ及びＰＣの両方へのムラミダーゼの補足は、補足しなかったコントロール群と比較してＥＰＥＦを有意に改善した。ＥＰＥＦは、ＰＣにムラミダーゼを補足したものでは、ムラミダーゼを含有するＮＣを給餌したものと比較して有意に高かった。
【０１７５】
［結論］
能力についてのデータに基づいて、ムラミダーゼのみの又は抗生物質と組み合わせた補足により、体重増加、飼料効率及びヨーロッパ能力効率指数（ＥＰＥＦ）が、負荷のかかる飼育条件下（餌中の骨肉粉及び堆積した敷料）で育てた市販ブロイラーにおいて、補足なしの群と比較して有意に改善したと結論付けることができた。
【０１７６】
本明細書において記載され、主張される本発明は、本明細書において開示される特定の態様によって範囲が限定されることはなく、それは、これらの態様がいくつかの本発明の態様の例証として意図されるからである。任意の均等な態様は、本発明の範囲内にあることが意図される。実際に、本発明の様々な修飾形態は、本明細書において示され且つ説明されるもの意外にも前述の説明から当業者に明らかになるであろう。そのような修飾形態も添付の請求項の範囲内にあることが意図される。矛盾する場合、定義を含め、本開示に従うものとする。
【配列表】
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【国際調査報告】
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2022500358.tif 000013
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