【誤訳訂正書】
【提出日】平成22年2月15日(2010.2.15)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのｍＲＮＡが導入された血液細胞を、薬学的に許容可能な補形剤および／または賦形剤と組み合わせて含む薬学的組成物であって、
上記ｍＲＮＡは、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つの領域を含み、
該血液細胞は、ほぼ純粋なまたは濃縮されたＰＢＭＣであり、５％以下の樹状細胞（ＤＣ）を含んでいる、薬学的組成物。
【請求項２】
上記血液細胞は、２％以下の樹状細胞（ＤＣ）を含んでいる請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
自家血液細胞を含む請求項１または２に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
上記ｍＲＮＡは、腫瘍または病原体由来の少なくとも１つの抗原をコードする領域を含んでいる請求項１〜３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
上記抗原は、腫瘍または病原体由来の抗原のポリエピトープである請求項４に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
上記ポリエピトープは、１つまたは複数のアミノ酸の欠失、付加および／または置換によって修飾されている請求項５に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
上記血液細胞は、腫瘍組織または病原体に感染された細胞のｃＤＮＡライブラリーまたはｃＤＮＡライブラリーの一部に対応する複数のｍＲＮＡが導入されている請求項４〜６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
上記ｃＤＮＡライブラリーの一部は、腫瘍特異抗原、または病原体の感染により発現誘導された遺伝子産物をコードする請求項７に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
上記腫瘍抗原は、
７０７−ＡＰ，ＡＦＰ，ＡＲＴ−４，ＢＡＧＥ，β−カテニン／ｍ，Ｂｃｒ−ａｂｌ，ＣＡＭＥＬ，ＣＡＰ−１，ＣＡＳＰ−８，ＣＤＣ２７／ｍ，ＣＤＫ４／ｍ，ＣＥＡ，ＣＴ，Ｃｙｐ−Ｂ，ＤＡＭ，ＥＬＦ２Ｍ，ＥＴＶ６−ＡＭＬ１，Ｇ２５０，ＧＡＧＥ，ＧｎＴ−Ｖ，Ｇｐ１００，ＨＡＧＥ，ＨＥＲ−２／ｎｅｕ，ＨＬＡ−Ａ＊０２０１−Ｒ１７０Ｉ，ＨＰＶ−Ｅ７，ＨＳＰ７０−２Ｍ，ＨＡＳＴ−２，ｈＴＥＲＴ（またはｈＴＲＴ），ｉＣＥ，ＫＩＡＡ０２０５，ＬＡＧＥ，ＬＤＬＲ／ＦＵＴ，ＭＡＧＥ，ＭＡＲＴ−１／ｍｅｌａｎ−Ａ，ＭＣ１Ｒ，ミオシン／ｍ，ＭＵＣ１，ＭＵＭ−１，−２，−３，ＮＡ８８−Ａ，ＮＹ−ＥＳＯ−１，ｐ１９０ｍｉｎｏｒｂｃｒ−ａｂｌ，ＰｍＩ／ＲＡＲa，ＰＲＡＭＥ，ＰＳＡ，ＰＳＭ，ＲＡＧＥ，ＲＵ１またはＲＵ２，ＳＡＧＥ，ＳＡＲＴ−１またはＳＡＲＴ−３，ＴＥＬ／ＡＭＬ１，ＴＰＩ／ｍ，ＴＲＰ−１，ＴＲＰ−２，ＴＲＰ−２／ＩＮＴ２およびＷＴ１からなる群より選択される請求項４〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
上記病原体は、ウイルス、バクテリアおよび原生動物からなる群より選択される請求項４〜８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
上記ウイルス、バクテリアまたは原生動物由来の抗原は、分泌タンパク質由来である請求項１０に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
抗原、および／または５’非翻訳領域、および／または３’非翻訳領域をコードする上記ｍＲＮＡの上記領域は、野生型ｍＲＮＡとは違って、不安定化配列エレメントが無いように変更されている請求項１〜１１のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
上記ｍＲＮＡは、翻訳効率を上げるために使用されるシーケンス領域を含んでいる請求項１〜１２のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
上記ｍＲＮＡは、さらに、
少なくとも１つのサイトカイン、および／または、
少なくとも１つの副刺激分子、および／または、
少なくとも１つの転写因子、および／または、
少なくとも１つのホーミング受容体、および／または、
少なくとも１つの自殺遺伝子をコードする請求項１〜１３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
上記ｍＲＮＡは、
５’キャップ構造、および／または、
少なくとも約２５個のヌクレオチドのポリ（Ａ＋）尾部、および／または、
少なくとも１つのＩＲＥＳ、および／または、
少なくとも１つの５’安定化配列、および／または、
少なくとも１つの３’安定化配列を有している請求項１〜１４のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
上記５’安定化配列および／または３’安定化配列は、α−グロビン遺伝子またはβ−グロビン遺伝子の非翻訳領域（ＵＴＲ）と、一般式（Ｃ／Ｕ）ＣＣＡＮＸＣＣＣ（Ｕ／Ａ）ＰｙＸＵＣ（Ｃ／Ｕ）ＣＣにて示される安定化配列とからなる群より選択される請求項１５に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
上記ｍＲＮＡは、自然発生的なヌクレオチドの少なくとも１つのアナログを有している請求項１〜１６のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
上記アナログは、ホスホロチオエート、ホスホラミデート、ペプチドヌクレオチド、メチルホスホン酸塩、７−デアザグアノシン、５−メチルシトシンおよびイノシンからなる群より選択される請求項１７に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
肉腫または感染症の治療および／または予防のための請求項１〜１８のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の薬学的組成物を作製する方法であって、
ほぼ純粋なまたは濃縮されたＰＢＭＣであり、５％以下の樹状細胞（ＤＣ）を含んでいる血液細胞、を採取する工程（ａ）と、
上記血液細胞に、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つの領域を含む少なくとも１つのｍＲＮＡをin vitroにて導入する工程（ｂ）と、を含む方法。
【請求項２１】
上記工程（ｂ）における導入直前の上記血液細胞は、２％以下の樹状細胞（ＤＣ）を含んでいる請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
上記工程（ａ）における血液細胞の採取と、上記工程（ｂ）における導入との間の時間は、１２時間未満である請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
上記時間は、６時間未満である請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
上記時間は、２時間未満である請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
上記血液細胞は、自家血液細胞である請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
上記ｍＲＮＡは、請求項４〜１９のいずれか１項に記載されたものである請求項２０〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
上記工程（ｂ）において導入に用いられるｍＲＮＡは、少なくとも１つのカチオン性物質またはポリカチオン性物質と共に複合体を形成するかまたは濃縮されている請求項２０〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
上記カチオン性物質またはポリカチオン性物質は、プロタミン、ポリ−Ｌ−リシン、ポリ−Ｌ−アルギニンおよびヒストンからなる群より選択される請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
上記ｍＲＮＡは、
ｃＤＮＡライブラリーまたはｃＤＮＡライブラリーの一部を、患者の腫瘍組織または病原体に感染された患者の細胞から作製する工程（１）と、
上記ｃＤＮＡライブラリーまたは上記ｃＤＮＡライブラリーの一部を用いて、ＲＮＡのin vitro転写のためのテンプレートを作製する工程（２）と、
上記テンプレートを用いてin vitro転写を行う工程（３）と、を含む方法によって作製される請求項２０〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
上記腫瘍組織の上記ｃＤＮＡライブラリーの一部は、腫瘍特異抗原、または病原体の感染によって発現誘導された遺伝子産物をコードする請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
上記腫瘍特異抗原の配列、または病原体の感染によって発現誘導された遺伝子産物の配列は、工程（１）の前に決定されている請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
上記腫瘍特異抗原の配列、または病原体の感染によって発現誘導された遺伝子産物の配列の決定は、健康な組織または感染していない細胞由来のｃＤＮＡライブラリーと照合する工程を含んでいる請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
上記腫瘍特異抗原の配列、または病原体の感染によって発現誘導された遺伝子産物の配列の決定は、マイクロアレイにより解析する工程を含んでいる請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
請求項２０〜３３のいずれか１項に記載の方法によって得られる薬学的組成物。
【請求項３５】
少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つの領域を含む少なくとも１つのｍＲＮＡが導入された血液細胞を、薬学的に許容可能な補形剤および／または賦形剤と任意に組み合わせ、上記ｍＲＮＡにコードされる抗原に対する免疫反応を活性化するための薬を作製するための血液細胞の使用方法であって、
該血液細胞は、ほぼ純粋なまたは濃縮されたＰＢＭＣであり、５％以下の樹状細胞（ＤＣ）を含んでいる方法。
【請求項３６】
上記血液細胞は、２％以下の樹状細胞（ＤＣ）を含んでいる請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
上記血液細胞は、自家血液細胞である請求項３５または３６に記載の方法。
【請求項３８】
上記ｍＲＮＡは、請求項４〜１９のいずれか１項に記載されたものである請求項３５〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
上記免疫反応を、肉腫または感染症の治療および／または予防のために使用する請求項３５〜３８のいずれか１項に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
本発明の薬学的組成物中の血液細胞（特に、血液細胞の上記部分集団）の特徴は、特に、上記血液細胞に含まれる好適に分化されたプロフェッショナルＡＰＣ（例えば、樹状細胞など）の割合が小さいことである。核酸が導入された細胞は、本発明の薬学的組成物中に含まれている場合は、好ましくは５％未満、特に好ましくは２％以下の樹状細胞を含んでいる。従って、本発明では「血液細胞」を、全血、血清、または他の源（例えば、脾臓またはリンパ節）から採取される赤血球、顆粒球、単核球（ＰＢＭＣ）および／または血小板の混合物またはほぼ純粋な集団となるまで濃縮されたものを意味していると解釈することが好ましい。なお、プロフェッショナルＡＰＣの割合はほんの少しである。従来技術とは対照的に、本発明の血液細胞は、新鮮な血液細胞であること、すなわち、血液細胞の採取（特に、採血）と核酸導入との間の時間は非常に短いことが好ましい。上記時間は、例えば１２時間未満であり、好ましくは６時間未満であり、特に好ましくは２時間未満であり、非常に好ましくは１時間未満である。