(57)【要約】本明細書では、サイトカインまたはその機能的断片であって、一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片の１つまたは複数の受容体結合部位（複数可）がマスキング部分によってマスクされるように操作されている、該サイトカインまたはその機能的断片が提供される。一部の実施形態では、サイトカインは、タンパク分解性に切断可能なリンカーを含めることにより、腫瘍微小環境等において、標的部位にてプロテアーゼによって活性化可能であるように操作されている。一部の実施形態では、タンパク分解性に切断可能なリンカーは、サイトカインをマスキング部分に連結し、サイトカインを半減期延長ドメインに連結し、及び／またはマスキング部分を半減期延長ドメインに連結する。マスキング部分は、サイトカインの活性またはサイトカインによるその同系の受容体もしくはタンパク質への結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）。切断可能なリンカーが標的部位にてタンパク分解性に切断されると、サイトカインは活性化され、それにより該サイトカインは、増加した親和性でその同系の受容体またはタンパク質に結合できるようになる。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
マスクされたサイトカインであって、
ａ）マスキング部分と、
ｂ）サイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記マスキング部分が、第１のリンカーを介して前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されている、前記マスクされたサイトカイン。
【請求項２】
マスクされたサイトカインであって、
ａ）第１のマスキング部分と、
ｂ）サイトカインまたはその機能的断片と、
ｃ）第２のマスキング部分と、を含み、
前記第１のマスキング部分が、第１のリンカーを介して前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、
前記第２のマスキング部分が、第２のリンカーを介して前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されている、前記マスクされたサイトカイン。
【請求項３】
マスクされたサイトカインであって、
ａ）第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインと、
ｂ）マスキング部分と、
ｃ）サイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記マスキング部分が、前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、
前記サイトカインまたはその機能的断片が、前記第２の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインが、前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する、前記マスクされたサイトカイン。
【請求項４】
マスクされたサイトカインであって、
ａ）第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインと、
ｂ）第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分と、
ｃ）サイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記第１のマスキング部分が、前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第２のマスキング部分が、前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、
前記第２のマスキング部分かまたは前記サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、前記第２の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインが、前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する、前記マスクされたサイトカイン。
【請求項５】
前記マスキング部分かまたは前記サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインをさらに含む、請求項１に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項６】
前記第１のマスキング部分かまたは前記第２のマスキング部分かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインをさらに含む、請求項２に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項７】
前記マスキング部分が、第１のリンカーを介して前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または前記サイトカインもしくはその機能的断片が、第２のリンカーを介して前記第２の半減期延長ドメインに連結されている、請求項３に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項８】
ａ）前記第１のマスキング部分が、第１のリンカーを介して前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または
ｂ）前記第２のマスキング部分かまたは前記サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、第２のリンカーを介して前記第２の半減期延長ドメインに連結されている、請求項４に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項９】
前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片である、請求項１〜８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１０】
前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、
ａ）配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列、または
ｂ）配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｋ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、Ｌ７２Ｇ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、Ｉ９２Ｆ、及びＣ１２５Ｓのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列、を含む、請求項９に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１１】
前記マスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１、３、５、７、９、及び１０のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１２】
前記第１のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第１のマスキング部分及び前記第２のマスキング部分の前記アミノ酸配列が異なる、請求項２、４、６、及び８〜１０のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１３】
前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片である、請求項１〜８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１４】
前記ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１５】
前記マスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２３２〜２３４、２６１、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１、３、５、７、１３、及び１４のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１６】
ａ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または
ｄ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、請求項２、４、６、８、１３、及び１４のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１７】
前記半減期延長ドメインが、抗体またはその断片である、請求項５、６、及び９〜１６のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１８】
前記抗体またはその断片が、結晶化可能断片ドメイン（Ｆｃドメイン）またはその断片である、請求項１７に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項１９】
前記Ｆｃドメインまたはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む、請求項１８に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２０】
前記第１の半減期延長ドメインが、第１の抗体またはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２の抗体またはその断片である、請求項３、４、及び７〜１９のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２１】
前記第１の抗体またはその断片が、第１のＦｃドメインまたはその断片であり、第２の抗体またはその断片が、第２のＦｃドメインまたはその断片である、請求項２０に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２２】
ａ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むか、
ｄ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｅ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むか、
ｆ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含むか、
ｇ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｈ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含むか、
ｉ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むか、
ｊ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むか、
ｋ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｌ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含むか、
ｍ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｎ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むか、
ｏ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｐ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含むか、
ｑ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｒ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むか、
ｓ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｔ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、
ｕ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｖ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｗ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、または
ｘ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含む、請求項２１に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２３】
前記第１のリンカーが、第１の切断可能なペプチドを含む、請求項１、５、及び９〜２２のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２４】
前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２３に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２５】
前記第１のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１、５、及び９〜２４のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２６】
前記第１のリンカーが、第１の切断可能なペプチドを含み、及び／または前記第２のリンカーが、第２の切断可能なペプチドを含む、請求項２及び７〜２２のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２７】
前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２６に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２８】
前記第１のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２、７〜２２、２６、及び２７のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン。
【請求項２９】
請求項１〜２８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカインをコードする核酸。
【請求項３０】
請求項２９に記載の核酸を含むベクター。
【請求項３１】
請求項２９に記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項３２】
マスクされたサイトカインを産生させる方法であって、前記マスクされたサイトカインを産生させる条件下で請求項３１に記載の宿主細胞を培養することを含む、前記方法。
【請求項３３】
請求項１〜２８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカインを含む組成物。
【請求項３４】
請求項１〜２８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカインと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【請求項３５】
請求項１〜２８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン、または請求項３３に記載の組成物、または請求項３４に記載の薬学的組成物を含む、キット。
【請求項３６】
対象において腫瘍性疾患を治療するかまたは予防する方法であって、有効量の請求項１〜２８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン、または請求項３３に記載の組成物、または請求項３４に記載の薬学的組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項３７】
対象において炎症性疾患または自己免疫疾患を治療するかまたは予防する方法であって、有効量の請求項１〜２８のいずれか１項に記載のマスクされたサイトカイン、または請求項３３に記載の組成物、または請求項３４に記載の薬学的組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１８年９月２７日に出願された米国仮出願第６２／７３７，８０３号、２０１９年８月１６日に出願された米国仮出願第６２／８８８，２７６号、及び２０１９年８月２３日に出願された米国仮出願第６２／８９１，１９９号に対する優先権を主張する。上記に列挙された出願の内容は、この参照によりそれらの全体が全目的で本明細書に援用される。
【０００２】
配列表の参照による援用
本出願は、配列表とともに電子形式で出願されている。配列表は、２０１９年９月２６日に作成された、１，０２４．１１１ＫＢのサイズである７３７７６２０００９４０ＳｅｑＬｉｓｔと題されるファイルとして提供される。この配列表の電子形式の情報は、参照によりその全体が本明細書に援用される。
【０００３】
本発明は、マスクされたサイトカインならびにその使用及び製造に関連する方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
がんは、米国において２番目に多い死因であり、それに次ぐ５つの主因（慢性呼吸器疾患、脳卒中、事故、アルツハイマー病、及び糖尿病）よりも多くの死亡数を占めている。とりわけ標的療法により、大きな進歩が遂げられてきたが、この分野において多くの課題が未だ残っている。免疫療法及びこの分野の一部門であるがん免疫療法は、悪性腫瘍の治療に対する実行可能で期待が持てる治療選択肢を創出している。具体的に述べると、がんの１つの顕著な特徴は免疫回避であることが今では認識されており、著しい努力により標的が特定され、免疫系を再活性化してがんを認識及び治療するようにこれらの標的に対する療法が開発されてきた。
【０００５】
サイトカイン療法は、免疫系を刺激して抗腫瘍細胞傷害作用を誘発するために有効な戦略である。例えば、インターロイキン−２（ＩＬ−２）の組換え形態であるアルデスロイキンは、転移性腎細胞癌及び黒色腫の治療に対してＦＤＡによって承認されている。残念ながら、患者に投与されるサイトカインは概して非常に短い半減期を有し、そのため、頻繁な投薬が必要とされる。例えば、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎの商標名で販売されているアルデスロイキンの製品ラベルは、この薬物が、５分間の静脈内（ＩＶ）注入を受けた患者において８５分間の半減期を有することが示されたと述べている。加えて、高用量のサイトカインの投与は、全身性の免疫活性化により、血管漏出等の健康に対する有害な結果を引き起こす可能性がある。これらの知見は、全身性の免疫活性化に関連する副作用を伴わずに腫瘍を効果的に標的とするサイトカイン治療薬を開発する必要性を例示する。本明細書では、この必要性に対処するための、マスクされたサイトカイン、その組成物、及びその使用方法が提供される。
【０００６】
特許出願、特許公報、及び科学文献を含む、本明細書で引用される全ての参考文献は、あたかも個々の参考文献の各々が参照により具体的かつ個々に援用されることが示されているかのように、参照によりそれらの全体が本明細書に援用される。
【発明の概要】
【０００７】
開示される本発明は、サイトカインまたはその機能的断片であって、一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片の１つまたは複数の受容体結合部位（複数可）がマスキング部分によってマスクされるように操作されている、該マスクされたサイトカインまたはその機能的断片の操作及び使用に関する。一部の実施形態では、サイトカインは、タンパク分解性に切断可能なリンカーを含めることにより、腫瘍微小環境等において、標的部位にてプロテアーゼによって活性化可能であるように操作されている。一部の実施形態では、タンパク分解性に切断可能なリンカーは、サイトカインをマスキング部分に連結し、サイトカインを半減期延長ドメインに連結し、及び／またはマスキング部分を半減期延長ドメインに連結する。マスキング部分は、サイトカインの活性またはサイトカインによるその同系の受容体もしくはタンパク質への結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）。切断可能なリンカーが標的部位にてタンパク分解性に切断されると、サイトカインは活性化され、それにより該サイトカインは、増加した親和性でその同系の受容体またはタンパク質に結合できるようになる。
【０００８】
一実施形態は、マスキング部分と、サイトカインまたはその機能的断片とを含む、マスクされたサイトカインを含み、該マスキング部分は、リンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一態様では、該マスクされたサイトカインは、該マスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインをさらに含む。
【０００９】
一実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）マスキング部分、ｂ）第１のリンカー、ｃ）サイトカインまたはその機能的断片、及びｄ）半減期延長ドメインを含む。別の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）マスキング部分、ｂ）第１のリンカー、ｃ）サイトカインまたはその機能的断片、ｄ）第２のリンカー、及びｅ）半減期延長ドメインを含む。別の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）サイトカインまたはその機能的断片、ｂ）第１のリンカー、ｃ）マスキング部分、及びｄ）半減期延長ドメインを含む。
【００１０】
別の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）サイトカインまたはその機能的断片、ｂ）第１のリンカー、ｃ）マスキング部分、ｄ）第２のリンカー、及びｅ）半減期延長ドメインを含む。
【００１１】
一実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片またはＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片である。
【００１２】
一実施形態では、該マスクされたサイトカイン、ＩＬ−２もしくはＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ酸配列への１つまたは複数のアミノ酸置換。一実施形態では、該アミノ酸置換は、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＣＤ２５（ＩＬ−２Ｒα）に対する親和性を低減する。
【００１３】
一実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ酸配列にＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【００１４】
一実施形態では、該半減期延長ドメインは、抗体またはその断片であり、一部の実施形態では、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換である。
【００１５】
一実施形態では、該抗体またはその断片は、結晶化可能断片ドメイン（Ｆｃドメイン）またはその断片である。
【００１６】
一実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＰＡＳポリペプチドまたはＸＴＥＮポリペプチド等のポリアミノ酸配列である。
【００１７】
一実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第２のマスキング部分を含み、該第２のマスキング部分は、第２のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。
【００１８】
一実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）第１のマスキング部分、ｂ）第１のリンカー、ｃ）サイトカインまたはその機能的断片、ｄ）第２のリンカー、ｅ）第２のマスキング部分、及びｆ）半減期延長ドメインを含む。
【００１９】
一実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）第１のマスキング部分、ｂ）第１のリンカー、ｃ）サイトカインまたはその機能的断片、ｄ）第２のリンカー、ｅ）第２のマスキング部分、ｆ）第３のリンカー、及びｇ）半減期延長ドメインを含む。
【００２０】
一実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）第２のマスキング部分、ｂ）第２のリンカー、ｃ）サイトカインまたはその機能的断片、ｄ）第１のリンカー、ｅ）第１のマスキング部分、及びｆ）半減期延長ドメインを含む。
【００２１】
一実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端またはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）第２のマスキング部分、ｂ）第２のリンカー、ｃ）サイトカインまたはその機能的断片、ｄ）第１のリンカー、ｅ）第１のマスキング部分、ｆ）第３のリンカー、及びｇ）半減期延長ドメインを含む。
【００２２】
一実施形態では、該半減期延長ドメインは、アルブミンポリペプチドまたはその機能的断片である。
【００２３】
一実施形態では、該切断可能なペプチドは、ＡＢＨＤ１２、ＡＤＡＭ１２、ＡＢＨＤ１２Ｂ、ＡＢＨＤ１３、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＡＤＡＭ８、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ１０、ＡＤＡＭＴＳ１２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＡＤＡＭＴＳ１４、ＡＤＡＭＴＳ１５、ＡＤＡＭＴＳ１６、ＡＤＡＭＴＳ１７、ＡＤＡＭＴＳ１８、ＡＤＡＭＴＳ１９、ＡＤＡＭＴＳ２、ＡＤＡＭＴＳ２０、ＡＤＡＭＴＳ３、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＢＨＤ１７Ｂ、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＤＡＭＴＳ６、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＤＡＭＴＳ８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＤＡＭＴＳＬ１、ＡＤＡＭＴＳＬ２、ＡＤＡＭＴＳＬ３、ＡＢＨＤ１７Ｃ、ＡＤＡＭＴＳＬ５、ＡＳＴＬ、ＢＭＰ１、ＣＥＬＡ１、ＣＥＬＡ２Ａ、ＣＥＬＡ２Ｂ、ＣＥＬＡ３Ａ、ＣＥＬＡ３Ｂ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ４、ＣＴＳＥ、ＣＴＳＦ、ＡＤＡＭＴＳＬ４、ＣＭＡ１、ＣＴＲＢ１、ＣＴＲＣ、ＣＴＳＯ、ＣＴＲｌ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＷ、ＣＴＳＢ、ＣＴＳＣ、ＣＴＳＤ、ＥＳＰ１、ＣＴＳＧ、ＣＴＳＨ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＧＺＭＨ、ＣＴＳＫ、ＧＺＭＭ、ＣＴＳＬ、ＣＴＳＳ、ＣＴＳＶ、ＣＴＳＺ、ＨＴＲＡ４、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ２、ＫＬＫ４、ＤＰＰ４、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫＢ１、ＥＣＥ１、ＥＣＥ２、ＥＣＥＬ１、ＭＡＳＰ２、ＭＥＰ１Ａ、ＭＥＰ１Ｂ、ＥＬＡＮＥ、ＦＡＰ、ＧＺＭＡ、ＭＭＰ１１、ＧＺＭＫ、ＨＧＦＡＣ、ＨＰＮ、ＨＴＲＡ１、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１９、ＨＴＲＡ２、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＨＴＲＡ３、ＨＴＲＡ４、ＫＥＬ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、ＫＬＫ５、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＬＧＭＮ、ＬＮＰＥＰ、ＭＡＳＰ１、ＰＡＰＰＡ、ＰＡＰＰＡ２、ＰＣＳＫ１、ＮＡＰＳＡ、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＭＭＥ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ１０、ＰＬＡＴ、ＰＬＡＵ、ＰＬＧ、ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ１２、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ２１、ＰＲＳＳ３、ＰＲＳＳ３３、ＰＲＳＳ４、ＰＲＳＳ５５、ＰＲＳＳ５７、ＭＭＰ１２、ＰＲＳＳ８、ＰＲＳＳ９、ＰＲＴＮ３、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＳＴ１４、ＴＭＰＲＳＳ１０、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｆ、ＴＭＰＲＳＳ１２、ＴＭＰＲＳＳ１３、ＭＭＰ１５、ＴＭＰＲＳＳ１５、ＭＭＰ２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５、ＴＭＰＲＳＳ６、ＴＭＰＲＳＳ７、ＴＭＰＲＳＳ９、ＮＲＤＣ、ＯＶＣＨ１、ＰＡＭＲ１、ＰＣＳＫ３、ＰＨＥＸ、ＴＩＮＡＧ、ＴＰＳＡＢ１、ＴＰＳＤ１、及びＴＰＳＧ１からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。
【００２４】
一実施形態では、該半減期延長ドメインは、チューブリン重合の阻害剤、ＤＮＡ損傷剤、またはＤＮＡ合成阻害剤、マイタンシノイド、アウリスタチン、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、インド−リノベンゾジアゼピン二量体、またはエキサテカン誘導体Ｄｘｄ等の薬剤にコンジュゲートされている。
【００２５】
一実施形態では、該半減期延長ドメインは、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）アゴニスト、例えば、環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）、例えば、ｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃＡＩＭＰ、ｃ−ジ−ＩＭＰ、もしくは４−（２−クロロ−６−フルオロベンジル）−Ｎ−（フラン−２−イルメチル）−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン−６−カルボキサミド、またはトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、例えば、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、もしくはＴＬＲ１０等の免疫刺激薬にコンジュゲートされている。
【００２６】
一実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含み、該マスキング部分は、該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第２の半減期延長ドメインに連結されている。
【００２７】
一実施形態では、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。
【００２８】
一実施形態は、本明細書に記載のマスクされたサイトカインをコードする核酸を含む。別の実施形態は、該核酸を含むベクターを包含する。別の実施形態では、該核酸を含む宿主細胞。別の実施形態は、本明細書に記載のマスクされたサイトカインをコードする１つまたは複数の核酸を含む。別の実施形態は、該１つまたは複数の核酸を含むベクターを包含する。別の実施形態は、該１つまたは複数の核酸を含む１つまたは複数のベクターを包含する。
【００２９】
別の実施形態は、マスクされたサイトカインを産生させる方法であって、該マスクされたサイトカインを産生させる条件下で該宿主細胞を培養することを含む、該方法が提供される。一実施形態では、該宿主細胞によって産生された該マスクされたサイトカインが回収される。一実施形態は、開示される方法によって産生されたマスクされたサイトカインを包含する。
【００３０】
一実施形態では、開示されるマスクされたサイトカインを含む組成物が提供される。別の実施形態では、該組成物は、抗炎症剤または抗がん剤、例えば、ＰＤ−１阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、ＣＴＬＡ−４阻害剤、ＢＴＬＡ阻害剤、Ｂ７Ｈ４阻害剤、Ｂ７Ｈ３阻害剤、ＣＳＦＩＲ阻害剤、ＨＶＥＭ阻害剤、ＣＤ２７阻害剤、ＫＩＲ阻害剤、ＮＫＧ２Ａ阻害剤、ＮＫＧ２Ｄアゴニスト、ＴＷＥＡＫ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＣＤ５２標的化抗体、ＣＣＲ４標的化抗体、ＰＤ−Ｌ１阻害剤、ＫＩＴ阻害剤、ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＢＡＦＦ阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＶＥＧＦリガンド阻害剤、ＣＤ１９標的化分子、ＦＯＬＲ１標的化分子、ＤＬＬ３標的化分子、ＤＫＫ１標的化分子、ＭＵＣ１標的化分子、ＭＵＣ１６標的化分子、ＰＳＭＡ標的化分子、ＭＳＬＮ標的化分子、ＮＹ−ＥＳ０−１標的化分子、Ｂ７Ｈ３標的化分子、Ｂ７Ｈ４標的化分子、ＢＣＭＡ標的化分子、ＣＤ２９標的化分子、ＣＤ１５１標的化分子、ＣＤ１２３標的化分子、ＣＤ３３標的化分子、ＣＤ３７標的化分子、ＣＤＨ１９標的化分子、ＣＥＡ標的化分子、クローディン１８．２標的化分子、ＣＬＥＣ１２Ａ標的化分子、ＥＧＦＲＶＩＩＩ標的化分子、ＥＰＣＡＭ標的化分子、ＥＰＨＡ２標的化分子、ＦＣＲＨ５標的化分子、ＦＬＴ３標的化分子、ＧＤ２標的化分子、グリピカン３標的化分子、ｇｐＡ３３標的化分子、ＧＰＲＣ５Ｄ標的化分子、ＩＬ−２３Ｒ標的化分子、ＩＬ−１ＲＡＰ標的化分子、ＭＣＳＰ標的化分子、ＲＯＮ標的化分子、ＲＯＲ１標的化分子、ＳＴＥＡＰ２標的化分子、ＴｆＲ標的化分子、ＣＤ１６６標的化分子、ＴＰＢＧ標的化分子、ＴＲＯＰ２標的化分子、プロテアソーム阻害剤、ＡＢＬ阻害剤、ＣＤ３０阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ＭＥＴ阻害剤、ＲＥＴ阻害剤、ＩＬ−１β阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＲＯＳ１阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤、ＣＤ３８阻害剤、ＲＡＮＫＬ阻害剤、Ｂ４ＧＡＬＮＴ１阻害剤、ＳＬＡＭＦ７阻害剤、ＩＤＨ２阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、ＣＤ２０標的化抗体、ＢＴＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、ＣＤＫ４阻害剤、ＣＤＫ６阻害剤、ＦＧＦＲ阻害剤、ＲＡＦ阻害剤、ＪＡＫ１阻害剤、ＪＡＫ２阻害剤、ＪＡＫ３阻害剤、ＩＬ−６阻害剤、ＩＬ−１７阻害剤、スムーズンド阻害剤、ＩＬ−６Ｒ阻害剤、ＢＣＬ２阻害剤、ＰＴＣＨ阻害剤、ＰＩＧＦ阻害剤、ＴＧＦＢ阻害剤、ＣＤ２８アゴニスト、ＣＤ３アゴニスト、ＣＤ４０アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＶＩＳＴＡアゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＬＡＧ３阻害剤、ＴＩＭ３阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、またはＩＬ−２Ｒ阻害剤をさらに含む。
【００３１】
一実施形態では、抗炎症剤は、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）阻害剤、例えば、ＣＯＸ−１及び／またはＣＯＸ−２阻害剤、例えば、ＳＣ−５６０、ＦＲ１２２０４７、Ｐ６、モフェゾラク、ＴＦＡＰ、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブ、メロキシカム、ピロキシカム、デラコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ、エトリコキシブ、クロメン誘導体、クロマン誘導体、Ｎ−（２−シクロヘキシルオキシニトロフェニル）メタンスルホンアミド、パレコキシブ、ルミラコキシブ、ＲＳ５７０６７、Ｔ−６１４、ＢＭＳ−３４７０７０、ＪＴＥ−５２２、Ｓ−２４７４、ＳＶＴ−２０１６、ＣＴ−３、ＡＢＴ−９６３、ＳＣ−５８１２５、ニメスリド、フロスリド（ｆｌｏｓｕｌｉｄｅ）、ＮＳ−３９８、Ｌ−７４５３３７、ＲＷＪ−６３５５６、Ｌ−７８４５１２、ダルブフェロン、ＣＳ−５０２、ＬＡＳ−３４４７５、ＬＡＳ−３４５５５、Ｓ−３３５１６、ジクロフェナク、メフェナム酸、ＳＤ−８３８１、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトロラック、インドメタシン、アスピリン、ナプロキセン、トルメチン、ピロキシカム、またはメクロフェナム酸である。
【００３２】
一実施形態では、抗炎症剤は、ＮＦ−κＢ阻害剤、例えば、ＩＫＫ複合体阻害剤、ＩκＢ分解阻害剤、ＮＦ−κＢ核移行阻害剤、ｐ６５アセチル化阻害剤、ＮＦ−κＢ  ＤＮＡ結合阻害剤、ＮＦ−κＢトランス活性化阻害剤、またはｐ５３誘導阻害剤である。
【００３３】
一実施形態では、ＮＦ−κＢ阻害剤は、ＴＰＣＡ−１、ＮＦ−κＢ活性化阻害剤ＶＩ（ＢＯＴ−６４）、ＢＭＳ−３４５５４１、アンレキサノクス、ＳＣ−５１４（ＧＫ−０１１４０）、ＩＭＤ−０３５４、ＩＫＫ−１６、ＢＡＹ−１１−７０８２、ＭＧ−１１５、ＭＧ−１３２、ラクタシスチン、エポキソミシン、パルテノライド、カーフィルゾミブ、ＭＬＮ−４９２４（ペボネジスタット）、ＪＳＨ−２３ロリプラム、没食子酸、アナカルジン酸、ＧＹＹ−４１３７、ｐ−ＸＳＣ、ＣＶ−３９８８、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、ＬＹ−２９４００２、ウォルトマンニン、メサラミン、キナクリン、またはフラボピリドールである。
【００３４】
一実施形態は、開示されるマスクされたサイトカインと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物を包含する。
【００３５】
別の実施形態は、開示されるマスクされたサイトカインを含むキットを包含する。
【００３６】
別の実施形態は、対象において腫瘍性疾患を治療するかまたは予防する方法を含み、該方法は、腫瘍性疾患、例えばがん等の疾患または病態の治療のために、有効量の開示されるマスクされたサイトカイン組成物を該対象に投与することを含む。一実施形態では、がんは、白血病、リンパ腫、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、膵臓癌、黒色腫、乳癌、神経芽細胞腫、肺癌、卵巣癌、骨癌（例えば、骨肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫）、膀胱癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、皮膚癌、精巣癌、副腎癌、腺様嚢胞癌、肛門癌、脳癌、腺管癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、口腔癌、甲状腺癌、網膜芽細胞腫、副甲状腺癌、下垂体癌、胆管癌、または子宮癌である。一部の実施形態では、がんは、リンパ腫、肉腫、膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、子宮頸癌、結腸癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、腎臓癌、骨髄腫、甲状腺癌、白血病、前立腺癌、乳癌（例えば、トリプルネガティブ、ＥＲ陽性、ＥＲ陰性、化学療法耐性、ハーセプチン耐性、ＨＥＲ２陽性、ドキソルビシン耐性、タモキシフェン耐性、腺管癌、小葉癌、原発性、転移性）、卵巣癌、膵臓癌、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、非小細胞肺癌、肺扁平上皮癌、腺癌、大細胞肺癌、小細胞肺癌、カルチノイド、肉腫）、多形性膠芽腫、神経膠腫、黒色腫、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、膠芽腫、卵巣癌、肺癌、扁平上皮細胞癌（例えば、頭部、頸部、または食道）、結腸直腸癌、白血病、急性骨髄性白血病、リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、または多発性骨髄腫からなる群から選択される。追加の例としては、甲状腺癌、内分泌系癌、脳癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌、頭頸部癌、食道癌、肝臓癌、腎臓癌、肺癌、非小細胞肺癌、黒色腫、中皮腫、卵巣癌、肉腫、胃癌、子宮癌もしくは髄芽細胞腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、多形性膠芽腫、卵巣癌、横紋筋肉腫、原発性血小板血症、原発性マクログロブリン血症、原発性脳腫瘍、がん、悪性膵インスリノーマ、悪性カルチノイド、膀胱癌、前悪性皮膚病変、精巣癌、リンパ腫、甲状腺癌、神経芽細胞腫、食道癌、泌尿生殖器癌、悪性高カルシウム血症、子宮内膜癌、副腎皮質癌、膵内分泌部もしくは膵外分泌部の新生物、甲状腺髄様癌、甲状腺髄様癌、黒色腫、結腸直腸癌、甲状腺乳頭癌、肝細胞癌、乳頭パジェット病、葉状腫瘍、小葉癌、腺管癌、膵星細胞癌、肝星細胞癌、または前立腺癌が挙げられる。
【００３７】
別の実施形態は、対象において炎症性疾患または自己免疫疾患を治療するかまたは予防する方法を含み、該方法は、有効量の開示されるマスクされたサイトカイン組成物を該対象に投与することを含み、該炎症性疾患または自己免疫疾患は、アテローム性動脈硬化症、肥満、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、関節リウマチ、アレルギー性脳炎、乾癬、アトピー性皮膚疾患、骨粗鬆症、腹膜炎、肝炎、ループス、セリアック病、シェーグレン症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性硬化症（ＭＳ）、強直性脊椎炎、真性１型糖尿病、円形脱毛症、血管炎、及び側頭動脈炎、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、喘息、ＣＯＰＤ、傍腫瘍性自己免疫疾患、軟骨炎症、若年性関節炎、若年性関節リウマチ、少関節型若年性関節リウマチ、多関節型若年性関節リウマチ、全身型若年性関節リウマチ、若年性強直性脊椎炎、若年性腸炎性関節炎、若年性反応性関節炎、若年性ライター症候群、ＳＥＡ症候群（血清陰性、腱付着部症、関節症症候群）、若年性皮膚筋炎、若年性乾癬性関節炎、若年性強皮症、若年性全身性エリテマトーデス、若年性血管炎、少関節型関節リウマチ、全身型関節リウマチ、腸炎性関節炎、反応性関節炎、ライター症候群、皮膚筋炎、乾癬性関節炎、強皮症、血管炎、筋炎（ｍｙｏｌｉｔｉｓ）、多発性筋炎（ｐｏｌｙｍｙｏｌｉｔｉｓ）、皮膚筋炎（ｄｅｒｍａｔｏｍｙｏｌｉｔｉｓ）、結節性多発動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、動脈炎、リウマチ性多発筋痛症（ｐｌｏｙｍｙａｌｇｉａ  ｒｈｅｕｍａｔｉｃａ）、サルコイドーシス、硬化症、原発性胆汁性硬化症（ｐｒｉｍａｒｙ  ｂｉｌｉａｒｙ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、硬化性胆管炎、乾癬、尋常性乾癬、滴状乾癬、逆乾癬、膿疱性乾癬、乾癬性紅皮症、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、アテローム性動脈硬化症、スティル病、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、重症筋無力症、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、副鼻腔炎、鼻茸を伴う副鼻腔炎、好酸球性食道炎、好酸球性気管支炎、ギラン・バレー疾患、甲状腺炎（例えば、グレーブス病）、アジソン病、レイノー現象、自己免疫性肝炎、移植拒絶反応、腎障害、Ｃ型肝炎誘発性血管炎、または自然流産からなる群から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】Ａ及びＢは、マスキング部分と、サイトカインまたはその機能的断片（「サイトカイン」）と、半減期延長ドメインと、第１の切断可能なペプチド（「１ＣＰ」）、第１のＮ末端スペーサードメイン（「１ＮＳＤ」）、及び第１のＣ末端スペーサードメイン（「１ＣＳＤ」）を含む第１のリンカーとを含む、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。これらの代表的な実施形態はまた、第２の切断可能なペプチド（「２ＣＰ」）、第２のＮ末端スペーサードメイン（「２ＮＳＤ」）、及び第２のＣ末端スペーサードメイン（「２ＣＳＤ」）を含む第２のリンカーも含む。矢印によって示されるように、この代表的な実施形態は、第１のリンカーに連結されたマスキング部分を示し、サイトカインまたはその機能的断片は、第１のリンカー及び第２のリンカーに連結されているが、マスキング部分及びサイトカインまたはその機能的断片は、サイトカインまたはその機能的断片が第１のリンカーに連結され、マスキング部分が第１のリンカー及び第２のリンカーに連結されるように相互交換されることが可能である。Ａは、単量体としてのマスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。Ｂは、ジスルフィド結合によって形成されたホモ二量体としてのマスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。
【図２】Ａ及びＢは、第１のマスキング部分（「マスク１」）と、サイトカインまたはその機能的断片（「サイトカイン」）と、第２のマスキング部分（「マスク２」）と、半減期延長ドメインと、第１の切断可能なペプチド（「１ＣＰ」）、第１のＮ末端スペーサードメイン（「１ＮＳＤ」）、及び第１のＣ末端スペーサードメイン（「１ＣＳＤ」）を含む第１のリンカーと、第２の切断可能なペプチド（「２ＣＰ」）、第２のＮ末端スペーサードメイン（「２ＮＳＤ」）、及び第２のＣ末端スペーサードメイン（「２ＣＳＤ」）を含む第２のリンカーとを含む、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。これらの代表的な実施形態はまた、第３の切断可能なペプチド（「３ＣＰ」）、第３のＮ末端スペーサードメイン（「３ＮＳＤ」）、及び第３のＣ末端スペーサードメイン（「３ＣＳＤ」）を含む第３のリンカーも含む。Ａは、単量体としてのマスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。Ｂは、ジスルフィド結合によって形成されたホモ二量体としてのマスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。
【図３】Ａは、マスキング部分と、サイトカインまたはその機能的断片（「サイトカイン」）と、第１の半減期延長ドメインと、第２の半減期延長ドメインとを含む、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。Ａに示される代表的な実施形態はまた、第１の切断可能なペプチド（「１ＣＰ」）、第１のＮ末端スペーサードメイン（「１ＮＳＤ」）、及び第１のＣ末端スペーサードメイン（「１ＣＳＤ」）を含む第１のリンカーと、第２の切断可能なペプチド（「２ＣＰ」）、第２のＮ末端スペーサードメイン（「２ＮＳＤ」）、及び第２のＣ末端スペーサードメイン（「２ＣＳＤ」）を含む第２のリンカーと、も含む。代表的な第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、第１の半減期延長ドメインにおける「ホール」及び第２の半減期延長ドメインにおける「ノブ」によって示されるように、第１の半減期延長ドメインと第２の半減期延長ドメインとの会合を促進する「ノブ・イントゥ・ホール（ｋｎｏｂｓ  ｉｎｔｏ  ｈｏｌｅｓ）」修飾を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインはまた、ジスルフィド結合の形成に起因して、少なくとも部分的に会合しつつあるように示される。「ホール」は、第１の半減期延長ドメイン（マスキング部分に連結されている）の一部として図示され、「ノブ」は、第２の半減期延長ドメイン（サイトカインに連結されている）の一部として図示されているが、「ホール」及び「ノブ」は代替として、「ホール」が第２の半減期延長ドメイン（サイトカインに連結されている）の一部であり、「ノブ」が第１の半減期延長ドメイン（マスキング部分に連結されている）の一部であるように、それぞれ第２の半減期延長ドメイン及び第１の半減期延長ドメインに含まれることが可能であることを理解されたい。Ｂは、マスキング部分と、サイトカインまたはその機能的断片（「サイトカイン」）と、第１の半減期延長ドメインと、第２の半減期延長ドメインと、第３のＮ末端スペーサードメイン（「３ＮＳＤ」）及び第３のＣ末端スペーサードメイン（「３ＣＳＤ」）を含む第３のリンカーとを含む、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。第３のリンカーは、第１の半減期延長ドメインを第２の半減期延長ドメインに連結する。Ｂに示される代表的な実施形態はまた、第１の切断可能なペプチド（「１ＣＰ」）、第１のＮ末端スペーサードメイン（「１ＮＳＤ」）、及び第１のＣ末端スペーサードメイン（「１ＣＳＤ」）を含む第１のリンカーと、第２の切断可能なペプチド（「２ＣＰ」）、第２のＮ末端スペーサードメイン（「２ＮＳＤ」）、及び第２のＣ末端スペーサードメイン（「２ＣＳＤ」）を含む第２のリンカーと、も含む。
【図４】ジスルフィド結合によって形成された、図３のＡに示される代表的なマスクされたサイトカインの二量体を示す。
【図５】Ａは、第１のマスキング部分（「マスク１」）と、第１の半減期延長ドメインと、第２のマスキング部分（「マスク２」）と、サイトカインまたはその機能的断片（「サイトカイン」）と、第２の半減期延長ドメインとを含む、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。Ａに示される代表的な実施形態はまた、第１の切断可能なペプチド（「１ＣＰ」）、第１のＮ末端スペーサードメイン（「１ＮＳＤ」）、及び第１のＣ末端スペーサードメイン（「１ＣＳＤ」）を含む第１のリンカーと、第２の切断可能なペプチド（「２ＣＰ」）、第２のＮ末端スペーサードメイン（「２ＮＳＤ」）、及び第２のＣ末端スペーサードメイン（「２ＣＳＤ」）を含む第２のリンカーと、第３の切断可能なペプチド（「３ＣＰ」）、第３のＮ末端スペーサードメイン（「３ＮＳＤ」）、及び第３のＣ末端スペーサードメイン（「３ＣＳＤ」）を含む第３のリンカーと、も含む。「ホール」は、第１の半減期延長ドメイン（マスキング部分に連結されている）の一部として図示され、「ノブ」は、第２の半減期延長ドメイン（サイトカインに連結されている）の一部として図示されているが、「ホール」及び「ノブ」は代替として、「ホール」が第２の半減期延長ドメイン（サイトカインに連結されている）の一部であり、「ノブ」が第１の半減期延長ドメイン（マスキング部分に連結されている）の一部であるように、それぞれ第２の半減期延長ドメイン及び第１の半減期延長ドメインに含まれることが可能であることを理解されたい。Ｂは、第１のマスキング部分（「マスク１」）と、第１の半減期延長ドメインと、第２のマスキング部分（「マスク２」）と、サイトカインまたはその機能的断片（「サイトカイン」）と、第２の半減期延長ドメインと、第４のＮ末端スペーサードメイン（「４ＮＳＤ」）及び第４のＣ末端スペーサードメイン（「４ＣＳＤ」）を含む第４のリンカーとを含む、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態の構造を示す。第４のリンカーは、第１の半減期延長ドメインを第２の半減期延長ドメインに連結する。Ｂに示される代表的な実施形態はまた、第１の切断可能なペプチド（「１ＣＰ」）、第１のＮ末端スペーサードメイン（「１ＮＳＤ」）、及び第１のＣ末端スペーサードメイン（「１ＣＳＤ」）を含む第１のリンカーと、第２の切断可能なペプチド（「２ＣＰ」）、第２のＮ末端スペーサードメイン（「２ＮＳＤ」）、及び第２のＣ末端スペーサードメイン（「２ＣＳＤ」）を含む第２のリンカーと、第３の切断可能なペプチド（「３ＣＰ」）、第３のＮ末端スペーサードメイン（「３ＮＳＤ」）、及び第３のＣ末端スペーサードメイン（「３ＣＳＤ」）を含む第３のリンカーと、も含む。図５のＡ及びＢにおいて矢印によって示されるように、この代表的な実施形態は、第３のリンカーに連結された第２のマスキング部分を示し、サイトカインまたはその機能的断片は、第３のリンカー及び第２のリンカーに連結されているが、第１のマスキング部分及びサイトカインまたはその機能的断片は、サイトカインまたはその機能的断片が第３のリンカーに連結され、第１のマスキング部分が第３のリンカー及び第２のリンカーに連結されるように相互交換されることが可能である。
【図６】ジスルフィド結合によって形成された、図５のＡに示される代表的なマスクされたサイトカインの二量体を示す。
【図７Ａ】腫瘍微小環境等でのプロテアーゼによる切断前（左）及び後（右）の、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態を示す。マスクされたＩＬ−２サイトカインの代表的な実施形態を示す。プロテアーゼによる切断は、マスキング部分（例えば、ＩＬ−２Ｒβ）を放出させる。
【図７Ｂ】腫瘍微小環境等でのプロテアーゼによる切断前（左）及び後（右）の、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態を示す。マスクされたＩＬ−２サイトカインの代表的な実施形態を示す。プロテアーゼによる切断は、マスキング部分（例えば、ＩＬ−２Ｒβ）を放出させる。
【図７Ｃ】腫瘍微小環境等でのプロテアーゼによる切断前（左）及び後（右）の、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態を示す。マスクされたＩＬ−２サイトカインの代表的な実施形態を示す。プロテアーゼによる切断は、ＩＬ−２を放出させる。
【図７Ｄ】腫瘍微小環境等でのプロテアーゼによる切断前（左）及び後（右）の、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態を示す。マスクされたＩＬ−２サイトカインの代表的な実施形態を示す。プロテアーゼによる切断は、マスキング部分（例えば、ＩＬ−２Ｒβ）を放出させる。
【図７Ｅ】腫瘍微小環境等でのプロテアーゼによる切断前（左）及び後（右）の、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態を示す。マスクされたＩＬ−１５サイトカインの代表的な実施形態を示す。プロテアーゼによる切断は、ＩＬ−１５を放出させる。
【図８】代表的な構築物（ＡＫ３０４、ＡＫ３０５、ＡＫ３０７、ＡＫ３０８、ＡＫ３０９、ＡＫ３１０、ＡＫ３１１、ＡＫ３１２、ＡＫ３１３、ＡＫ３１４、及びＡＫ３１５）の産生及び精製後の、素通り画分（ＦＴ）試料（すなわち、プロテインＡカラムに結合しなかったタンパク質）及び溶出した（Ｅ）試料（すなわち、プロテインＡカラムに結合し、そこから溶出したタンパク質）に対するＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を示す。
【図９】Ａ〜Ｄは、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物（ＡＫ２１５及びＡＫ２１６）、またはｒｈＩＬ２対照のＣＤ２５−Ｆｃへの結合を試験したＳＰＲ分析からの結果を示す。Ａは、ＡＫ２１５とＣＤ２５−Ｆｃとの間の相互作用を示し、Ｂは、ＡＫ２１６とＣＤ２５−Ｆｃとの間の相互作用を示し、Ｃは、組換えヒトＩＬ２（ｒｈＩＬ２）対照とＣＤ２５−Ｆｃとの間の相互作用を示す。Ｄは、各相互作用についての会合定数（ｋａ）、解離定数（ｋｄ）、平衡解離定数（ＫＤ）、ならびにＣｈｉ２値及びＵ値に関して得られたデータを要約する表を提供する。
【図１０】Ａ〜Ｄは、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物（ＡＫ２１６及びＡＫ２１８）、またはｒｈＩＬ２対照のＣＤ１２２−Ｆｃへの結合を試験したＳＰＲ分析からの結果を示す。Ａは、ＡＫ２１６とＣＤ１２２−Ｆｃとの間の相互作用を示し、Ｂは、ＡＫ２１８とＣＤ１２２−Ｆｃとの間の相互作用を示し、Ｃは、組換えヒトＩＬ２（ｒｈＩＬ２）対照とＣＤ１２２−Ｆｃとの間の相互作用を示す。Ｄは、各相互作用についての会合定数（ｋａ）、解離定数（ｋｄ）、平衡解離定数（ＫＤ）、ならびにＣｈｉ２値及びＵ値に関して得られたデータを要約する表を提供する。
【図１１】Ａは、腫瘍微小環境等でのプロテアーゼによる切断前（左）及び後（右）の、マスクされたサイトカインの代表的な実施形態を示す。Ｂは、Ｆｃ部分からのＩＬ−２の放出を実証する、ＭＭＰ１０プロテアーゼの不在（左列）または存在（右列）下でインキュベートされた代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物のＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を示す。
【図１２Ａ】対照としてのｒｈＩＬ−２で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。ｒｈＩＬ−２とのインキュベーション後に決定したときの、ＮＫ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞（Ｔｅｆｆ）、及び制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）についてのＳＴＡＴ５活性化のレベル（％）が示される。
【図１２Ｂ】構築物ＡＫ０３２で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。構築物ＡＫ０３２とのインキュベーション後に決定したときの、ＮＫ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞（Ｔｅｆｆ）、及び制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）についてのＳＴＡＴ５活性化のレベル（％）が示される。
【図１２Ｃ】ＡＫ０３５で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。構築物ＡＫ０３５とのインキュベーション後に決定したときの、ＮＫ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞（Ｔｅｆｆ）、及び制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）についてのＳＴＡＴ５活性化のレベル（％）が示される。
【図１２Ｄ】構築物ＡＫ０４１で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。ＡＫ０４１とのインキュベーション後に決定したときの、ＮＫ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞（Ｔｅｆｆ）、及び制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）についてのＳＴＡＴ５活性化のレベル（％）が示される。
【図１３】Ａ〜Ｃは、構築物ＡＫ０８１またはＡＫ０３２で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。ＭＭＰ１０への事前曝露を伴う及び伴わないＡＫ０８１構築物を試験した。アイソタイプ対照ならびにＩＬ−２なしの陰性対照もまた試験した。ＮＫ細胞（Ａ）、ＣＤ８＋  Ｔ細胞（Ｃ）、及びＣＤ４＋  Ｔ細胞（Ｂ）についてのＳＴＡＴ５活性化のレベル（％）が示される。
【図１４Ａ】構築物ＡＫ０８１及びＡＫ１１１、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。無処理の対照もまた試験した。ｒｈＩＬ−２、ＡＫ０８１、及びＡＫ１１１処理についてはＥＣ５０（ｐＭ）もまた示される。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋ＣＤ２５＋細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１４Ｂ】構築物ＡＫ０８１及びＡＫ１１１、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。無処理の対照もまた試験した。ｒｈＩＬ−２、ＡＫ０８１、及びＡＫ１１１処理についてはＥＣ５０（ｐＭ）もまた示される。ＣＤ８＋細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１４Ｃ】構築物ＡＫ０８１及びＡＫ１１１、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。無処理の対照もまた試験した。ｒｈＩＬ−２、ＡＫ０８１、及びＡＫ１１１処理についてはＥＣ５０（ｐＭ）もまた示される。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−ＣＤ２５−細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１４Ｄ】構築物ＡＫ０８１及びＡＫ１１１、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＡＫ０８１、ＡＫ１１１構築物、ならびにｒｈＩＬ−２対照についてのＥＣ５０（ｐＭ）及び倍率変化のデータを提供する。
【図１５Ａ】構築物ＡＫ１６７及びＡＫ１６８、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。無処理の対照もまた試験した。ｒｈＩＬ−２、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８処理についてはＥＣ５０（ｐＭ）もまた示される。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋ＣＤ２５＋細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１５Ｂ】構築物ＡＫ１６７及びＡＫ１６８、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。無処理の対照もまた試験した。ｒｈＩＬ−２、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８処理についてはＥＣ５０（ｐＭ）もまた示される。ＣＤ８＋細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１５Ｃ】構築物ＡＫ１６７及びＡＫ１６８、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。無処理の対照もまた試験した。ｒｈＩＬ−２、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８処理についてはＥＣ５０（ｐＭ）もまた示される。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−ＣＤ２５−細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１５Ｄ】構築物ＡＫ１６７及びＡＫ１６８、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＡＫ１６７及びＡＫ１６８構築物、ならびにｒｈＩＬ−２対照についてのＥＣ５０（ｐＭ）及び倍率変化のデータを提供する。
【図１６Ａ】（＋ＭＭＰ１０）であったか、またはＭＭＰ１０プロテアーゼに事前に曝露されなかった、構築物ＡＫ１６５またはＡＫ１６６、またはアイソタイプ対照もしくはＩＬ−２−Ｆｃ対照で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。図１６Ａに示されるような記号解はまた、図１６Ｂにも適用される。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１６Ｂ】（＋ＭＭＰ１０）であったか、またはＭＭＰ１０プロテアーゼに事前に曝露されなかった、構築物ＡＫ１６５またはＡＫ１６６、またはアイソタイプ対照もしくはＩＬ−２−Ｆｃ対照で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。図１６Ａに示されるような記号解はまた、図１６Ｂにも適用される。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−ヘルパーＴ細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１６Ｃ】（＋ＭＭＰ１０）であったか、またはＭＭＰ１０プロテアーゼに事前に曝露されなかった、構築物ＡＫ１６５またはＡＫ１６６、またはアイソタイプ対照もしくはＩＬ−２−Ｆｃ対照で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。図１６Ｃに示されるような記号解はまた、図１６Ｄにも適用される。ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１６Ｄ】（＋ＭＭＰ１０）であったか、またはＭＭＰ１０プロテアーゼに事前に曝露されなかった、構築物ＡＫ１６５またはＡＫ１６６、またはアイソタイプ対照もしくはＩＬ−２−Ｆｃ対照で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。図１６Ｃに示されるような記号解はまた、図１６Ｄにも適用される。ＣＤ５６＋  ＮＫ細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１７】Ａ〜Ｃは、（＋ＭＭＰ１０）であったか、またはＭＭＰ１０プロテアーゼに事前に曝露されなかった、構築物ＡＫ１０９またはＡＫ１１０、またはアイソタイプ対照もしくはＩＬ−２−Ｆｃ対照で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。Ｂに示されるような記号解はまた、Ａにも適用される。ＮＫ細胞（Ａ）、ＣＤ８細胞（Ｂ）、及びＣＤ４細胞（Ｃ）についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１８Ａ】構築物ＡＫ２１１、ＡＫ２３５、ＡＫ２５３、ＡＫ３０６、ＡＫ３１０、ＡＫ３１４、及びＡＫ３１６、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１８Ｂ】構築物ＡＫ２１１、ＡＫ２３５、ＡＫ２５３、ＡＫ３０６、ＡＫ３１０、ＡＫ３１４、及びＡＫ３１６、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＣＤ３＋ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１８Ｃ】構築物ＡＫ２１１、ＡＫ２３５、ＡＫ２５３、ＡＫ３０６、ＡＫ３１０、ＡＫ３１４、及びＡＫ３１６、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＣＤ３＋ＣＤ８＋細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１８Ｄ】構築物ＡＫ２１１、ＡＫ２３５、ＡＫ２５３、ＡＫ３０６、ＡＫ３１０、ＡＫ３１４、及びＡＫ３１６、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。試験された構築物ならびにｒｈＩＬ−２対照の各々についてのＥＣ５０のデータを提供する。
【図１９Ａ】プロテアーゼによって活性化された構築物ＡＫ０８１、ＡＫ１６７、ＡＫ２１６、ＡＫ２１８、ＡＫ２１９、ＡＫ２２０、及びＡＫ２２３、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１９Ｂ】プロテアーゼによって活性化された構築物ＡＫ０８１、ＡＫ１６７、ＡＫ２１６、ＡＫ２１８、ＡＫ２１９、ＡＫ２２０、及びＡＫ２２３、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３−ＣＤ２５−細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１９Ｃ】プロテアーゼによって活性化された構築物ＡＫ０８１、ＡＫ１６７、ＡＫ２１６、ＡＫ２１８、ＡＫ２１９、ＡＫ２２０、及びＡＫ２２３、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。ＣＤ８＋細胞についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図１９Ｄ】プロテアーゼによって活性化された構築物ＡＫ０８１、ＡＫ１６７、ＡＫ２１６、ＡＫ２１８、ＡＫ２１９、ＡＫ２２０、及びＡＫ２２３、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を示す。試験された構築物ならびにｒｈＩＬ−２対照の各々についてのＥＣ５０のデータを提供する。
【図２０】Ａ〜Ｃは、構築物ＡＫ０８１、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１０、または抗ＲＳＶ対照で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。Ａに示されるような記号解はまた、Ｂ及びＣにも適用される。制御性Ｔ細胞（Ａ）、ＣＤ４ヘルパーＴ細胞（Ｂ）、及びＣＤ８細胞（Ｃ）についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図２１】Ａ〜Ｃは、構築物ＡＫ１６７、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、もしくはＡＫ１９３、または抗ＲＳＶ対照で処理されたＰＢＭＣにおけるＳＴＡＴ５活性化（％）を示す。Ａに示されるような記号解はまた、Ｂ及びＣにも適用される。制御性Ｔ細胞（Ａ）、ＣＤ４ヘルパーＴ細胞（Ｂ）、及びＣＤ８細胞（Ｃ）についてのＳＴＡＴ５活性化（％）が示される。
【図２２】Ａ及びＢは、活性化プロテアーゼへの事前曝露を伴う（＋ＭＭＰ）または伴わない代表的なマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物ＡＫ２４８、または対照としてのｒｈＩＬ−１５に対するレポーターバイオアッセイからの結果を示す。Ａは、ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ＩＬ２レポーター細胞株を用いたレポーターバイオアッセイからの結果を示し、Ｂは、マウスＣＴＬＬ２細胞株でのＩＬ−１５バイオアッセイを用いたレポーターバイオアッセイからの結果を示す。
【図２３】Ａ〜Ｄは、構築物ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８、または抗ＲＳＶ対照を用いて腫瘍担持マウスにおいて実施した薬物動態研究からの結果を示す。Ａは、試験された構築物の各々の構造をごく単純化した表現を提供する。Ｂは、ヒトＩｇＧの検出による血漿中のＦｃレベル（μｇ／ｍＬ）を示す。Ｃは、ヒトＣＤ１２２の検出による血漿中のＦｃ−ＣＤ１２２レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。Ｄは、ヒトＩＬ−２の検出による血漿中のＦｃ−ＩＬ２レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。検出ステップの前に、抗ヒトＩＧを捕捉抗体として使用した。
【図２４Ａ】構築物ＡＫ１６７、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１、または抗ＲＳＶ対照を用いて腫瘍担持マウスにおいて実施した薬物動態研究からの結果を示す。試験された構築物の各々の構造をごく単純化した表現を提供する。
【図２４Ｂ】構築物ＡＫ１６７、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１、または抗ＲＳＶ対照を用いて腫瘍担持マウスにおいて実施した薬物動態研究からの結果を示す。ヒトＩｇＧの検出による血漿中のＦｃレベル（μｇ／ｍＬ）を示す。検出ステップの前に、抗ヒトＩＧを捕捉抗体として使用した。
【図２４Ｃ】構築物ＡＫ１６７、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１、または抗ＲＳＶ対照を用いて腫瘍担持マウスにおいて実施した薬物動態研究からの結果を示す。ヒトＩＬ−２の検出による血漿中のＦｃ−ＩＬ２レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。検出ステップの前に、抗ヒトＩＧを捕捉抗体として使用した。
【図２４Ｄ】構築物ＡＫ１６７、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１、または抗ＲＳＶ対照を用いて腫瘍担持マウスにおいて実施した薬物動態研究からの結果を示す。ヒトＣＤ１２２の検出による血漿中のＦｃ−ＣＤ１２２レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。検出ステップの前に、抗ヒトＩＧを捕捉抗体として使用した。
【図２５Ａ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２５Ｂ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２５Ｃ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２５Ｄ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２５Ｅ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２５Ｆ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２５Ｇ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２５Ｈ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２５Ｉ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２５Ｊ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２５Ｋ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２５Ｌ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２６Ａ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２６Ｂ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２６Ｃ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２６Ｄ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２６Ｅ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２６Ｆ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２６Ｇ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２６Ｈ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２６Ｉ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２６Ｊ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２６Ｋ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２６Ｌ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２７Ａ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２７Ｂ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２７Ｃ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２７Ｄ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、脾臓中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。脾臓組織について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２７Ｅ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２７Ｆ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２７Ｇ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２７Ｈ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、血液中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。血液について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２７Ｉ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＣＤ８のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ８細胞％が示される。
【図２７Ｊ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＣＤ４のパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３細胞のうちのＣＤ４％が示される。
【図２７Ｋ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＮＫのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ３−細胞のうちのＮＫ細胞％が示される。
【図２７Ｌ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、もしくはＡＫ２１１構築物、または抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いた、腫瘍中のＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果を示す。腫瘍組織について、ＣＤ４細胞のうちのＦｏｘＰ３％が示される。
【図２８Ａ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、脾臓中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化は、脾臓中のＣＤ８＋  Ｔ細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｂ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、脾臓中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を脾臓中のＣＤ４＋  Ｔ細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｃ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、脾臓中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を脾臓中のＦｏｘｐ３＋細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｄ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、血液中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を血液中のＣＤ８＋  Ｔ細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｅ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、血液中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を血液中のＣＤ４＋  Ｔ細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｆ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、血液中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を血液中のＦｏｘｐ３＋細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｇ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、腫瘍中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を腫瘍中のＣＤ８＋  Ｔ細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｈ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、腫瘍中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を腫瘍中のＣＤ４＋  Ｔ細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を行った。
【図２８Ｉ】ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、またはＡＫ２１１構築物を用いた、腫瘍中のインビボＴ細胞活性化からの結果を示す。Ｔ細胞活性化を腫瘍中のＦｏｘｐ３＋細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を実施した。
【図２９Ａ】代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１６８（切断可能なペプチド配列：ＭＰＹＤＬＹＨＰ、配列番号９６）及びＡＫ２０９（切断可能なペプチド配列：ＶＰＬＳＬＹ、配列番号１３５）のインビボ切断を試験する研究からの結果を示す。
【図２９Ｂ】代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１６８（切断可能なペプチド配列：ＭＰＹＤＬＹＨＰ、配列番号９６）及びＡＫ２０９（切断可能なペプチド配列：ＶＰＬＳＬＹ、配列番号１３５）のインビボ切断を試験する研究からの結果を示す。
【図２９Ｃ】代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１６８（切断可能なペプチド配列：ＭＰＹＤＬＹＨＰ、配列番号９６）及びＡＫ２０９（切断可能なペプチド配列：ＶＰＬＳＬＹ、配列番号１３５）のインビボ切断を試験する研究からの結果を示す。
【図２９Ｄ】代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１６８（切断可能なペプチド配列：ＭＰＹＤＬＹＨＰ、配列番号９６）及びＡＫ２０９（切断可能なペプチド配列：ＶＰＬＳＬＹ、配列番号１３５）のインビボ切断を試験する研究からの結果を示す。
【図２９Ｅ】ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、及びＡＫ２０９構築物の総レベル、ならびに各構築物の非切断形態のレベルについての、血漿中総ＩｇＧ濃度（μｇ／ｍＬ）の薬物動態研究からの結果を示す。
【図３０】Ａ〜Ｄは、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１１１もしくはＡＫ１６８、またはマスクされていないＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ０８１もしくはＡＫ１６７、または抗ＲＳＶ対照を用いて血管漏出を評価したインビボ研究からの結果を示す。Ａは、体重減少のパーセンテージ（％）を示し、Ｂ、Ｃ、及びＤは、各々についての、それぞれ肝臓、肺、及び脾臓の重量をグラム単位で示す。
【図３１】Ａ及びＢは、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ対照の投与後の肝臓及び肺組織中への色素漏出の程度を測定することによって示されるような血管漏出を評価したインビボ研究からの結果を示す。肝臓（Ａ）及び肺（Ｂ）への色素漏出の程度を６５０ｎｍでの吸光度に基づいて測定した。
【図３２】Ａ及びＢは、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ対照の投与後の肝臓及び肺組織中への血管周囲性の単核細胞浸潤の程度を測定することによって示されるような血管漏出を評価したインビボ研究からの結果を示す。肝臓中の単核細胞の平均数（Ａ）及び肺中の単核細胞の平均数（Ｂ）が各々に関して図示される。
【図３３Ａ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ対照での処置過程にわたって腫瘍体積を評価した同系腫瘍モデル研究からの結果を示す。処置過程にわたる腫瘍体積に関するデータを示す。
【図３３Ｂ】ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８構築物、または抗ＲＳＶ対照での処置過程にわたって体重を評価した同系腫瘍モデル研究からの結果を示す。処置過程にわたる体重の変化パーセンテージ（％）に関するデータを示す。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本明細書では、サイトカインまたはその機能的断片であって、一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片の１つまたは複数の受容体結合部位（複数可）がマスキング部分によってマスクされるように操作されている、該サイトカインまたはその機能的断片が提供される。一部の実施形態では、サイトカインは、タンパク分解性に切断可能なリンカーを含めることにより、腫瘍微小環境等において、標的部位にてプロテアーゼによって活性化可能であるように操作されている。一部の実施形態では、タンパク分解性に切断可能なリンカーは、サイトカインをマスキング部分に連結し、サイトカインを半減期延長ドメインに連結し、及び／またはマスキング部分を半減期延長ドメインに連結する。マスキング部分は、サイトカインの活性またはサイトカインによるその同系の受容体もしくはタンパク質への結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）。切断可能なリンカーが標的部位にてタンパク分解性に切断されると、サイトカインは活性化され、それにより該サイトカインは、増加した親和性でその同系の受容体またはタンパク質に結合できるようになる。
【００４０】
マスキング部分を使用することにより、投与されたサイトカインの全身性の副作用が、サイトカインの結合能を妨害することによって低減され得る。例えば、高用量組換えＩＬ−２（アルデスロイキン）は、転移性腎細胞癌及び黒色腫の治療のためにＦＤＡによって承認されているが、重度の心血管系、肝臓、肺、胃腸、神経系、及び血液学的副作用に関連付けられている。前臨床研究により、例えば、ＩＬ−２と肺内皮細胞上のＩＬ−２受容体（ＩＬ−２Ｒ）のＩＬ−２Ｒα（ＣＤ２５）サブユニットとの間の相互作用によってＩＬ−２誘発性肺浮腫が引き起こされること、及びＩＬ−２のＩＬ−２Ｒαへの結合能を妨害することによってこのＩＬ−２媒介性肺浮腫が抑止され得ることが示された。Ｋｒｉｅｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）ＰＮＡＳ，１０７（２６）：１１９０６−１１９１１を参照されたい。故に、サイトカインまたはその機能的断片がＩＬ−２ポリペプチドである、一部の実施形態では、ＩＬ−２サイトカインの活性またはＩＬ−２サイトカインによるＩＬ−２Ｒαへの結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）、マスキング部分が採用される。マスクされたＩＬ−２ポリペプチドの全身作用をさらに低減するために、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、ＩＬ−２サイトカインの活性またはＩＬ−２サイトカインによるＩＬ−２ＲのＩＬ−２Ｒβ及び／またはＩＬ−２Ｒγサブユニットへの結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）、マスキング部分をさらに含むことができる。他のサイトカインについても、有害な全身性の副作用を引き起こすことに関連付けられるある特定のタンパク質（例えば、受容体サブユニット（複数可））へのそれらの結合能を妨害することによって、類似の戦略が同様に採用される。その上、切断可能なペプチドを含むリンカーを用いてサイトカインをマスクすることによって、マスキング部分を用いることにより妨害される結合能は、腫瘍微小環境での切断可能なペプチドの切断によって回復し得る。故に、一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、がんの顕著な特徴のうちの１つである、活性プロテアーゼの高い局所濃度を利用することによって、薬理活性を腫瘍微小環境に的確に標的指向化するように操作される。腫瘍微小環境のこの特徴を用いて、全身的に不活性な分子を局所的に活性なサイトカインへと変換させる。腫瘍微小環境でのサイトカインの活性化は、活性形態で対象に投与される薬物に関連付けられ得る全身毒性を著しく低減する。
【００４１】
本出願で参照される、特許文献、科学論文、及びデータベースを含む全ての刊行物は、あたかも個々の刊行物の各々が参照により個々に援用されるのと同じ範囲まで、それらの全体があらゆる目的で参照により援用される。本明細書に記載される定義が、参照により本明細書に援用される特許、出願、公開出願、及び他の刊行物に記載される定義と矛盾するかまたはその他の点で不一致である場合、本明細書に記載される定義が、参照により本明細書に援用される定義に優先する。
【００４２】
本明細書で使用される節の見出しは、構成目的のものにすぎず、記載される主題を限定するものと解釈されるべきではない。
【００４３】
Ｉ．マスクされたサイトカイン
本明細書では、一部の実施形態で、（ａ）マスキング部分、及び（ｂ）サイトカインまたはその機能的断片を含む、マスクされたサイトカインが提供され、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、該マスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、第２のリンカーを介して該マスキング部分かまたはＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片かのどちらかに連結されている。
【００４４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該マスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、及び（ｄ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｃ末端からＮ末端方向に、（ａ）該マスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、及び（ｄ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該マスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｄ）該第２のリンカー、及び（ｅ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｃ末端からＮ末端方向に、（ａ）該マスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｄ）該第２のリンカー、及び（ｅ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該マスキング部分、及び（ｄ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｃ末端からＮ末端方向に、（ａ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該マスキング部分、及び（ｄ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該マスキング部分、（ｄ）該第２のリンカー、及び（ｅ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｃ末端からＮ末端方向に、（ａ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該マスキング部分、（ｄ）該第２のリンカー、及び（ｅ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該半減期延長ドメイン、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該マスキング部分、（ｄ）該第２のリンカー、及び（ｅ）該サイトカインまたはその機能的断片を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該半減期延長ドメイン、（ｂ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｃ）該第１のリンカー、及び（ｄ）該マスキング部分を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号５８５〜５９７、６０２、６１０〜６１４、６２７〜６３６、６４２、及び６４３からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号５８５〜５９７、６０２、６１０〜６１４、６２７〜６３６、６４２、及び６４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、表４もしくは表５に記載される代表的な構築物のうちのいずれかであるか、または、表４もしくは表５に記載される代表的な構築物のうちのいずれかを、本明細書の教示に従って該構築物の構造に対して１つもしくは複数の追加の構成要素を組み込むことによって等で、修飾することによって作出されるバリアントである。
【００４５】
本明細書ではまた、一部の実施形態で、（ａ）第１のマスキング部分、（ｂ）サイトカインまたはその機能的断片、及び（ｃ）第２のマスキング部分を含む、マスクされたサイトカインが提供され、該第１のマスキング部分は、第１のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、該第２のマスキング部分は、第２のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、第３のリンカーを介して該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかに連結されている。
【００４６】
本明細書ではまた、一部の実施形態で、（ａ）第１のマスキング部分、（ｂ）サイトカインまたはその機能的断片、及び（ｃ）第２のマスキング部分を含む、マスクされたサイトカインが提供され、該第１のマスキング部分は、第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第２のマスキング部分は、該第１のマスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、第２のリンカーを介して該第１のマスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、第３のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、切断可能なペプチドを含む。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、切断可能なペプチドを含む。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、切断可能なペプチドを含む。
【００４７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該第１のマスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｄ）第２のリンカー、（ｅ）第２のマスキング部分、及び（ｆ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｃ末端からＮ末端方向に、（ａ）該第１のマスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｄ）第２のリンカー、（ｅ）第２のマスキング部分、及び（ｆ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該第１のマスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｄ）第２のリンカー、（ｅ）第２のマスキング部分、（ｆ）該第３のリンカー、及び（ｇ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｃ末端からＮ末端方向に、（ａ）該第１のマスキング部分、（ｂ）該第１のリンカー、（ｃ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｄ）第２のリンカー、（ｅ）第２のマスキング部分、（ｆ）該第３のリンカー、及び（ｇ）該半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、Ｎ末端からＣ末端方向に、（ａ）該半減期延長ドメイン、（ｂ）第１のリンカー、（ｃ）該第１のマスキング部分、（ｄ）第２のリンカー、（ｅ）該サイトカインまたはその機能的断片、（ｆ）第３のリンカー、及び（ｇ）該第２のマスキング部分を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号５６７及び５９８〜６０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号５６７及び５９８〜６０１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、表６もしくは表７に記載される代表的な構築物のうちのいずれかであるか、または、表６もしくは表７に記載される代表的な構築物のうちのいずれかを、本明細書の教示に従って該構築物の構造に対して１つもしくは複数の追加の構成要素を組み込むことによって等で、修飾することによって作出されるバリアントである。
【００４８】
本明細書ではまた、一部の実施形態で、（ａ）第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）マスキング部分、ならびに（ｃ）サイトカインまたはその機能的断片を含む、マスクされたサイトカインが提供され、該マスキング部分は、該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。一部の実施形態では、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または該サイトカインもしくはその機能的断片は、第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、任意選択で第３のリンカーによって、該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、配列番号８１１のアミノ酸配列を含む第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号２６０のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、配列番号２６２のアミノ酸配列を含む第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００４９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、配列番号８０７のアミノ酸配列を含む第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、配列番号８０７のアミノ酸配列を含む第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７９及び２６７のアミノ酸配列を含む。
【００５０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該第１のリンカー及び／または該第２のリンカーは、切断可能なペプチドを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該第１のリンカー及び／または該第２のリンカーは、切断可能なペプチドを含む。
【００５１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号１のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、配列番号８１２のアミノ酸配列を含む第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号１のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、配列番号８１２のアミノ酸配列を含む第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８９及び２６７のアミノ酸配列を含む。
【００５２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号１のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該第１のリンカー及び／または該第２のリンカーは、切断可能なペプチドを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、（ａ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分、ならびに（ｃ）配列番号１のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片を含み、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有し、該第１のリンカー及び／または該第２のリンカーは、切断可能なペプチドを含む。
【００５３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号５６２及び５６３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号５６２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号５６３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００５４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０８及び６０３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６０３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００５５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０４及び６０３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６０３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００５６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０５及び６０３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６０３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００５７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０６及び６０３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６０３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００５８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６１５及び６１７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６１５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６１７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００５９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６１８及び６２０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６１８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６２０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６２１及び６２３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６２１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６２３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６２４及び６２６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６２４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６２６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６０８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６３及び６６４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６６４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６５及び６６６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６６６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６７及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６６９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７０及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７２及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００６９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７４及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７５及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７７及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８０及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８１及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８２及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００７９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８４及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８５及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８７及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６８９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９０及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９２及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００８９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９４及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９５及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９７及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６９９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７００及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７００のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０１及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０２及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【００９９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１００】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０４及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０５及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０７及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７０９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１０及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１１及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１２及び６６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１０９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１４及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１６及び６９９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６９９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１７及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２０及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２２及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３０及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３１及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３２及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３４及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３５及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３７及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１２９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３８及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３９及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７３９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４０及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４１及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４２及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４３及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４４及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４５及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４６及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７４及び８２８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号８２８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１３９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７４及び８２９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号６７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号８２９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２６及び８３０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号８３０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２６及び８２９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７２６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号８２９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４７及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１５及び２６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１５及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７１５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４８及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４９及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７４９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４７】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５０及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５１及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１４９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５２及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５０】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５３及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５１】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５４及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５８及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５９及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７６０及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７６０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５５】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７６１及び６７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７６１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号６７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、表８〜１１のうちのいずれかに記載されるような代表的なマスクされたサイトカイン構築物であるか、または、表８〜１１に記載される代表的な構築物のうちのいずれかを、本明細書の教示に従って該構築物の構造に対して１つもしくは複数の追加の構成要素を組み込むことによって等で、修飾することによって作出されるバリアントである。
【０１５７】
本明細書ではまた、一部の実施形態で、（ａ）第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメイン、（ｂ）第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分、ならびに（ｃ）サイトカインまたはその機能的断片を含む、マスクされたサイトカインが提供され、該第１のマスキング部分は、該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該第２のマスキング部分は、該サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されており、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、第３のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、任意選択で第４のリンカーによって、該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５５及び６１６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５６及び６１６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５７及び６１６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列、及び配列番号６１６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列、及び配列番号６１６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号７５７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列、及び配列番号６１６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１５８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６５〜２６７、５５６〜７２０、７２２、７２３、７２６、７２８〜７６１、及び８２８〜８３０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、配列番号２６５〜２６７、５５６〜７２０、７２２、７２３、７２６、７２８〜７６１、及び８２８〜８３０からなる群から選択される２つの異なるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、表４〜１１に記載されるような代表的な構築物のうちのいずれかに関連するアミノ酸配列を含む。
【０１５９】
本明細書に提供されるマスクされたサイトカインの各構成要素が、下記でより詳細に考察される。
【０１６０】
Ａ．サイトカイン
本明細書では、サイトカインまたはその機能的断片が提供される。該サイトカインまたはその機能的断片は、任意のサイトカイン、任意のサイトカインの任意の機能的断片、または任意のサイトカインの任意の天然もしくは非天然バリアントであり得る。サイトカインは、特に免疫系の細胞における細胞シグナル伝達において役割を果たす、低分子ポリペプチドである。サイトカインの例としては、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、リンホカイン、及び腫瘍壊死因子が挙げられ得る。
【０１６１】
サイトカインは、それらの３次元構造に基づいて等、様々な方式で分類され得る。例としては、β−三葉フォールドクラス、短鎖４−ヘリックスバンドルクラス、及び長鎖４−ヘリックスバンドルクラスが挙げられる。
【０１６２】
β−三葉フォールドクラスは、バレルのヘアピンキャップとともにバレル構造を形成するβββ−ループ−βの３個のユニット（総計１２個のβストランド）を特徴とするサイトカインを含む。β−三葉フォールドクラス内のサイトカインの例としては、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１受容体アンタゴニスト（ＩＬ−１ＲＡ）、ＩＬ−１８、ＩＬ−３３、ＩＬ−３６α、ＩＬ−３６β、ＩＬ−３６γ、ＩＬ−３６受容体アンタゴニスト（ＩＬ−３６ＲＡ）、ＩＬ−３７、及びＩＬ−３８が挙げられる。
【０１６３】
短鎖及び長鎖４−ヘリックスバンドルクラスは、固有のアップ−アップ−ダウン−ダウン（ｕｐ−ｕｐ−ｄｏｗｎ−ｄｏｗｎ）トポロジーで配向された４本の両親媒性ヘリックスを有する単量体ヘリックス状バンドルを特徴とする。短鎖４−ヘリックスバンドルクラスは、１０〜２０アミノ酸残基長のヘリックスといった、より短いヘリックスを特徴とする一方で、長鎖４−ヘリックスバンドルクラスは、２０〜３０アミノ酸残基長のヘリックスといった、より長いヘリックスを特徴とする。短鎖４−ヘリックスバンドルクラス内のサイトカインの例としては、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、及びマクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）が挙げられる。長鎖４−ヘリックスバンドルクラス内のサイトカインの例としては、ＩＬ−６、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、成長ホルモン（ＧＨ）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、プロラクチン（ＰＲＬ）、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、オンコスタチン（ＯＳＭ）、及びトロンボポエチン（ＴＰＯ）が挙げられる。
【０１６４】
単量体である短鎖及び長鎖４−ヘリックスバンドルクラスとは対照的に、一部のサイトカインは、ホモ二量体である。二量体サイトカインの例としては、ＩＬ−１０及びＩＦＮ−γ（ガンマ）が挙げられる。
【０１６５】
一部のサイトカインは、ヘテロ二量体であるとして分類される。ヘテロ二量体サイトカインの例としては、ＩＬ−１２及びＩＬ−２３が挙げられる。
【０１６６】
ＩＬ−１５等の一部のサイトカインはまた、膜結合型サイトカイン受容体に結合し、それにより提示されることによって機能する。
【０１６７】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−２であるか、またはＩＬ−２の機能的断片もしくはバリアントである。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−１５であるか、またはＩＬ−１５の機能的断片もしくはバリアントである。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−２、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、インターフェロン（ＩＦＮ）−α（アルファ）、ＩＦＮ−β（ベータ）、及びＩＦＮ−γ（ガンマ）からなる群から選択される。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−２、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、ＩＦＮ−α（アルファ）、ＩＦＮ−β（ベータ）、またはＩＦＮ−γ（ガンマ）の機能的断片またはバリアントである。
【０１６８】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−１α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１受容体アンタゴニスト（ＩＬ−１ＲＡ）、ＩＬ−１８、ＩＬ−３３、ＩＬ−３６α、ＩＬ−３６β、ＩＬ−３６γ、ＩＬ−３６受容体アンタゴニスト（ＩＬ−３６ＲＡ）、ＩＬ−３７、及びＩＬ−３８からなる群から選択される。
【０１６９】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、ＩＬ−６、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、成長ホルモン（ＧＨ）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、プロラクチン（ＰＲＬ）、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、オンコスタチン（ＯＳＭ）、及びトロンボポエチン（ＴＰＯ）からなる群から選択される。
【０１７０】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、ＣＣＬ１ｅ、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ３Ｌ１、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９／１０、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＣＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、ＣＣＬ２８、ＣＸ３ＣＬ１、ＸＣＬ１、及びＸＣＬ２からなる群から選択される。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、ＣＣＬ１ｅ、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ３Ｌ１、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９／１０、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＣＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、ＣＣＬ２８、ＣＸ３ＣＬ１、ＸＣＬ１、またはＸＣＬ２の機能的断片またはバリアントである。
【０１７１】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＦＮ−α（アルファ）、ＩＦＮ−β（ベータ）、ＩＦＮ−γ（ガンマ）、ＩＦＮ−ε（イプシロン）、ＩＦＮ−κ（カッパ）、ＩＦＮ−ω（オメガ）、ＩＦＮ−τ（タウ）、ＩＦＮ−ζ（ゼータ）、ＩＦＮ−δ（デルタ）、及びＩＦＮ−λ（ラムダ）からなる群から選択される。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＦＮ−α（アルファ）、ＩＦＮ−β（ベータ）、ＩＦＮ−γ（ガンマ）、ＩＦＮ−ε（イプシロン）、ＩＦＮ−κ（カッパ）、ＩＦＮ−ω（オメガ）、ＩＦＮ−τ（タウ）、ＩＦＮ−ζ（ゼータ）、ＩＦＮ−δ（デルタ）、またはＩＦＮ−λ（ラムダ）の機能的断片またはバリアントである。
【０１７２】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８Ｂ、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、及びＩＬ−３７からなる群から選択される。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｃ、ＩＬ−１７Ｄ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１７Ａ／Ｆ、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８Ｂ、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、またはＩＬ−３７の機能的断片またはバリアントである。
【０１７３】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）、ＩＦＮ−γ（ガンマ）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、及びＩＬ−１２からなる群から選択される。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）、ＩＦＮ−γ（ガンマ）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、またはＩＬ−１２の機能的断片またはバリアントである。
【０１７４】
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＴＮＦ−α（アルファ）、ＴＮＦ−β（ベータ）、ＴＮＦ−γ（ガンマ）、ＣＤ２５２、ＣＤ１５４、ＣＤ１７８、ＣＤ７０、ＣＤ１５３、４−１ＢＢ−Ｌ、ＴＲＡＩＬ、ＲＡＮＫＬ、ＡＰＯ３Ｌ、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＴＬ１、ＡＩＴＲＬ、及びＥＤＡ１からなる群から選択される。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＴＮＦ−α（アルファ）、ＴＮＦ−β（ベータ）、ＴＮＦ−γ（ガンマ）、ＣＤ２５２、ＣＤ１５４、ＣＤ１７８、ＣＤ７０、ＣＤ１５３、４−１ＢＢ−Ｌ、ＴＲＡＩＬ、ＲＡＮＫＬ、ＡＰＯ３Ｌ、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＴＬ１、ＡＩＴＲＬ、及びＥＤＡ１の機能的断片またはバリアントである。
【０１７５】
該サイトカインまたはその機能的断片は、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーの切断可能なペプチドが、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーのＮ末端スペーサードメインまたはＣ末端スペーサードメインが、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０１７６】
ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片、及びＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片の形態にある、該サイトカインまたはその機能的断片の代表的な実施形態が下記に詳細に提供される。
【０１７７】
１．ＩＬ−２ポリペプチド
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片である。真核細胞において、ＩＬ−２は、１５３アミノ酸の前駆体ポリペプチドとして合成され、次いでこれが、アミノ酸残基１〜２０の除去によって成熟ＩＬ−２へとプロセシングされる。これは、成熟した活性形態で分泌される１３３アミノ酸（アミノ酸残基２１〜１５３）からなるＩＬ−２の成熟形態をもたらす。
【０１７８】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、インターロイキン−２受容体（ＩＬ−２Ｒ）またはその構成要素（例えば、ＩＬ−２Ｒα鎖）に結合可能であるか、または他の様態でそれに対して親和性を表す、任意の天然に存在するインターロイキン−２（ＩＬ−２）タンパク質またはその修飾バリアントである。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１５９のアミノ酸残基２１〜１５３からなるＩＬ−２の成熟形態である。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８及び２６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号２６０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号２３０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号２３０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１７９】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対する少なくとも１つのアミノ酸修飾によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。該少なくとも１つのアミノ酸修飾の各々は、置換、挿入、または欠失等の任意のアミノ酸修飾であることができる。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、または少なくとも１０個のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、アミノ酸残基１２５にセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）残基を含む、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、アミノ酸残基３にアラニン（Ａ）残基を含む、アミノ酸配列を含む。例えば、一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８及び１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列に対してＴ３Ａアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、配列番号２４３〜２５１及び２６０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、配列番号７７５〜７９２及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０１８０】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、野生型ＩＬ−２のアミノ酸配列と比較して、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２Ｒα（ＣＤ２５）に対する親和性を低減する１つまたは複数のアミノ酸置換を有する、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８、４２、４５、及び６２のうちの１つまたは複数がアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８、４２、４５、及び６２がアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８、４２、４５、及び６２がアラニン（Ａ）であり、かつアミノ酸残基１２５がセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８及び４２がアラニン（Ａ）であり、かつアミノ酸残基１２５がセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６０または２５１のアミノ酸配列においてアミノ酸残基Ｒ３８、Ｆ４２、Ｙ４５、及びＥ６２をアラニンで置換することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６０または２５１のアミノ酸配列においてアミノ酸残基Ｒ３８、Ｆ４２、Ｙ４５、及びＥ６２をアラニン（Ａ）で置換すること、かつアミノ酸残基Ｃ１２５をセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）で置換することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４２がリジン（Ｋ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか���つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４２がリジン（Ｋ）であり、かつアミノ酸残基１２５がセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４２及び４５がアラニン（Ａ）であり、かつアミノ酸残基７２がグリシン（Ｇ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４２及び４５がアラニン（Ａ）であり、アミノ酸残基７２がグリシン（Ｇ）であり、かつアミノ酸残基１２５がセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基６２がアルギニン（Ｒ）またはセリン（Ｓ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４２がグルタミン酸（Ｅ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４３がアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４５がアスパラギン（Ｎ）、アルギニン（Ｒ）、またはアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４５がアラニン（Ａ）であり、かつアミノ酸残基６２がセリン（Ｓ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、���４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４２がセリン（Ｓ）であり、アミノ酸残基６２がセリン（Ｓ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８がグリシン（Ｇ）であり、アミノ酸残基４５がアラニン（Ａ）であり、かつアミノ酸残基６２がセリン（Ｓ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１８１】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４２Ｋ、Ｋ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、Ｌ７２Ｇ、Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ｇ、及びＣ１２５Ａのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１８２】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、野生型ＩＬ−２のアミノ酸配列と比較して、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２Ｒβ（ＣＤ１２２）に対する親和性を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を有する、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基８０がフェニルアラニン（Ｆ）であるか、アミノ酸残基８１がアスパラギン酸（Ｄ）であるか、アミノ酸残基８５がバリン（Ｖ）であるか、アミノ酸残基８６がバリン（Ｖ）であるか、もしくはアミノ酸残基９２がフェニルアラニン（Ｆ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基８０がフェニルアラニン（Ｆ）であるか、アミノ酸残基８１がアスパラギン酸（Ｄ）であるか、アミノ酸残基８５がバリン（Ｖ）であるか、アミノ酸残基８６がバリン（Ｖ）であるか、もしくはアミノ酸残基９２がフェニルアラニン（Ｆ）であるか、またはそれらの組み合わせであり、かつアミノ酸残基１２５がセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基８０がフェニルアラニン（Ｆ）であり、アミノ酸残基８１がアスパラギン酸（Ｄ）であり、アミノ酸残基８５がバリン（Ｖ）であり、アミノ酸残基８６がバリン（Ｖ）であり、かつアミノ酸残基９２がフェニルアラニン（Ｆ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基８０がフェニルアラニン（Ｆ）であり、アミノ酸残基８１がアスパラギン酸（Ｄ）であり、アミノ酸残基８５がバリン（Ｖ）であり、アミノ酸残基８６がバリン（Ｖ）であり、アミノ酸残基９２がフェニルアラニン（Ｆ）であり、かつアミノ酸残基１２５がセリン（Ｓ）、グリシン（Ｇ）、またはアラニン（Ａ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基１８がシステイン（Ｃ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらさ���る、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基２０がアラニン（Ａ）、ロイシン（Ｌ）、またはフェニルアラニン（Ｆ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基１６がイソロイシンであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基２９がロイシン（Ｌ）であるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１８３】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｈ１６Ｉ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、Ｉ９２Ｆ、Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ｇ、及びＣ１２５Ａのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１８４】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、野生型ＩＬ−２のアミノ酸配列と比較して、ＩＬ−２ペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２Ｒα（ＣＤ２５）に対する親和性を低減する１つまたは複数のアミノ酸置換を有するアミノ酸配列、及び野生型ＩＬ−２のアミノ酸配列と比較して、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２Ｒβ（ＣＤ１２２）に対する親和性を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８、４２、４５、及び６２のうちの１つまたは複数がアラニン（Ａ）であるか、アミノ酸残基４２がリジン（Ｋ）であるか、アミノ酸残基７２がグリシン（Ｇ）であるか、アミノ酸残基８０がフェニルアラニン（Ｆ）であるか、アミノ酸残基８１がアスパラギン酸（Ｄ）であるか、アミノ酸残基８５がバリン（Ｖ）であるか、アミノ酸残基８６がバリン（Ｖ）であるか、もしくはアミノ酸残基９２がフェニルアラニン（Ｆ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。かくして、一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、野生型ＩＬ−２の成熟形態と比較して、以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｎ２９Ｌ、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４２Ｋ、Ｋ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、Ｌ７２Ｇ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、Ｉ９２Ｆ、Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ｇ、及びＣ１２５Ａのうちの１つまたは複数を含む、アミノ酸配列を含む。
【０１８５】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８がグリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、もしくはトリプトファン（Ｗ）であるか、アミノ酸残基４２がアラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、もしくはイソロイシン（Ｉ）であるか、アミノ酸残基４５がアラニン（Ａ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、アミノ酸残基６２がアラニン（Ａ）もしくはロイシン（Ｌ）であるか、もしくはアミノ酸残基６８がバリン（Ｖ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８がリジン（Ｋ）であるか、アミノ酸残基４２がグルタミン（Ｑ）であるか、アミノ酸残基４５がグルタミン酸（Ｅ）であるか、もしくはアミノ酸残基６８がバリン（Ｖ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８がアラニン（Ａ）であるか、アミノ酸残基４２がイソロイシン（Ｉ）であるか、アミノ酸残基４５がアスパラギン（Ｎ）であるか、アミノ酸残基６２がロイシン（Ｌ）であるか、もしくはアミノ酸残基６８がバリン（Ｖ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８がリジン（Ｋ）であるか、アミノ酸残基４２がリジン（Ｋ）であるか、アミノ酸残基４５がアルギニン（Ｒ）であるか、アミノ酸残基６２がロイシン（Ｌ）であるか、もしくはアミノ酸残基６８がバリン（Ｖ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基３８がアラニン（Ａ）またはリジン（Ｋ）であるか、アミノ酸残基４２がアラニン（Ａ）であるか、アミノ酸残基４５がアラニン（Ａ）であるか、もしくはアミノ酸残基６２がアラニン（Ａ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列における、アミノ酸残基４２がイソロイシン（Ｉ）であるか、アミノ酸残基４５がグルタミン酸（Ｅ）であるか、もしくはアミノ酸残基６８がバリン（Ｖ）であるか、またはそれらの組み合わせであるような１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１８６】
一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、本明細書に記載のＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片に対するアミノ酸配列のうちのいずれか１つにＣ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ｇ、またはＣ１２５Ａ置換を導入するか、またはそれをさらに導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１８７】
一部の実施形態では、Ｏ−グリコシル化部位を除去する目的で、１つまたは複数のアミノ酸残基が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ酸配列から除去される。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、本明細書に開示されるＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のうちのいずれかのアミノ酸配列の最初の３アミノ酸残基（残基１〜３）を欠失させることによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｏ−グリコシル化部位を除去する目的で、１つまたは複数のアミノ酸残基が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ酸配列の中に置換される。一部の実施形態では、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、本明細書に開示されるＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のうちのいずれかのアミノ酸配列の最初の３アミノ酸残基（残基１〜３）のうちの１つまたは複数にアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１８８】
ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーの切断可能なペプチドが、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーのＮ末端スペーサードメインまたはＣ末端スペーサードメインが、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０１８９】
２．ＩＬ−１５ポリペプチド
一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片である。真核細胞において、ＩＬ−１５は、１６２アミノ酸の前駆体ポリペプチドとして合成され、次いでこれが、アミノ酸残基１〜４８の除去によって成熟ＩＬ−１５へとプロセシングされる。これは、成熟した活性形態で分泌される１１４アミノ酸（アミノ酸残基４９〜１６２）からなるＩＬ−１５の成熟形態をもたらす（配列番号１６７を参照されたい）。
【０１９０】
一部の実施形態では、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、インターロイキン−１５受容体（ＩＬ−１５Ｒ）またはその構成要素（例えば、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、及び／またはＩＬ−２Ｒγ鎖）に結合可能であるか、または他の様態でそれに対して親和性を表す、任意の天然に存在するインターロイキン−１５（ＩＬ−１５）タンパク質またはその修飾バリアントである。一部の実施形態では、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６６のアミノ酸残基４９〜１６２からなるＩＬ−１５の成熟形態である。一部の実施形態では、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６６または１６７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１９１】
一部の実施形態では、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６７のアミノ酸配列に対する少なくとも１つのアミノ酸修飾によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。該少なくとも１つのアミノ酸修飾の各々は、置換、挿入、または欠失等の任意のアミノ酸修飾であることができる。一部の実施形態では、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、配列番号１６７のアミノ酸配列における少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、または少なくとも１０個のアミノ酸置換によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０１９２】
ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーの切断可能なペプチドが、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、リンカーのＮ末端スペーサードメインまたはＣ末端スペーサードメインが、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０１９３】
Ｂ．マスキング部分
本明細書に提供されるようなマスキング部分は、サイトカインまたはその機能的断片に結合可能であるか、または他の様態でそれに対して親和性を示し、それにより、一部の実施形態では、その結合が該サイトカインまたはその機能的断片のその同系の受容体またはタンパク質に対する親和性を減少させる、部分を指す。例えば、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片に対するマスキング部分は、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片に結合可能であるか、または他の様態でそれに対して親和性を示し、それにより、一部の実施形態では、その結合が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のその同系の受容体またはタンパク質（例えば、ＩＬ−２Ｒ、またはＩＬ−２Ｒα及び／またはＩＬ−２Ｒβ鎖等のその構成要素）に対する親和性を減少させる。該サイトカインまたはその機能的断片に結合しているとき、該マスキング部分は、該サイトカインもしくはその機能的断片の活性または該サイトカインもしくはその機能的断片によるその同系の受容体もしくはタンパク質への結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該マスキング部分のうちの一方（例えば、該第１のマスキング部分）の存在は、該サイトカインもしくはその機能的断片の活性または該サイトカインもしくはその機能的断片によるその同系の受容体もしくはタンパク質への結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）一方で、他方のマスキング部分（例えば、該第２のマスキング部分）は、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分の切断後に該サイトカインまたはその機能的断片に会合されたままであり得、第１のマスキング部分が結合していた部位で該サイトカインまたはその機能的断片によるその同系の受容体またはタンパク質への結合を依然として許容し得るか、またはことによるとそれを促進さえし得る。例えば、図７Ｂを参照されたい。タンパク質（例えば、サイトカイン）による同系のタンパク質（例えば、サイトカイン受容体）への結合の程度を決定する方法は、当該技術分野で周知である。
【０１９４】
本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、マスキング部分を含む。該マスキング部分は、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、単一のマスキング部分を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、１つよりも多くのマスキング部分を含み、これらの各々が、本明細書に記載のマスキング部分のうちのいずれかであり得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む。例えば、「マスキング部分」または「該マスキング部分」への言及は、単一のマスキング部分を含むマスクされたサイトカインにおける該マスキング部分を指すことができるか、またはそれは、第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含むマスクされたサイトカインにおける該第１のマスキング部分を指すことができるか、またはそれは、第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含むマスクされたサイトカインにおける該第２のマスキング部分を指すことができるか、またはそれは、第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含むマスクされたサイトカインにおける該第１のマスキング部分及び該第２のマスキング部分を指すことができることが理解される。
【０１９５】
一部の実施形態では、該マスキング部分は、該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、該マスキング部分に連結されている半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第２のリンカーを介して該マスキング部分に連結されている半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、該サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、かつ該半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、該マスキングペプチドのアミノ末端に連結されており、該半減期延長ドメインは、該マスキングペプチドのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、該マスキングペプチドのカルボキシ末端に連結されており、該半減期延長ドメインは、該マスキングペプチドのアミノ末端に連結されている。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該マスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、該マスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該マスキング部分は、該第１のリンカーに連結されており  かつ該第２のリンカーに連結されている。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、該マスキングペプチドのアミノ末端に連結されており、該第２のリンカーは、該マスキングペプチドのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、該マスキングペプチドのカルボキシ末端に連結されており、該第２のリンカーは、該マスキングペプチドのアミノ末端に連結されている。
【０１９６】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、該第２のマスキング部分は、該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、第１のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、該第２のマスキング部分は、第２のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第３のリンカーを介して該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、該第１のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該第１のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、該第１のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０１９７】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該第２のマスキング部分は、該第１のマスキング部分に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第２の半減期延長ドメインに連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該第２のマスキング部分は、第２のリンカーを介して該第１のマスキング部分に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、第３のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、該第１の半減期延長ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２の半減期延長ドメインは、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、該第１のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、該第２の半減期延長ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０１９８】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該第１のマスキング部分は、該第２のマスキング部分に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第２の半減期延長ドメインに連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該第１のマスキング部分は、第２のリンカーを介して該第２のマスキング部分に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、第３のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、該第１の半減期延長ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、該第１のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２の半減期延長ドメインは、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、該第２の半減期延長ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、該サイトカインまたはその機能的断片のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０１９９】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該マスキング部分は、該第１の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、該マスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該マスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、該マスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０２００】
第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該第１の半減期延長ドメインに連結されており、該第２のマスキング部分は、該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該第２の半減期延長ドメインにさらに連結されている。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、第１のリンカーを介して該第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、第２のリンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、第３のリンカーを介して該サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。
【０２０１】
一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、該第１のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第１のリンカーは、該第１のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第３のリンカーは、該第２のマスキング部分のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、該第２のマスキング部分のアミノ末端に連結されており、該第３のリンカーは、該第２のマスキング部分のカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該第２のリンカーは、該第２のマスキング部分のカルボキシ末端に連結されており、該第３のリンカーは、該第２のマスキング部分のアミノ末端に連結されている。
【０２０２】
一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０４】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０５】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１８７〜２１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１８７〜２１８からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１８７〜２１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１８７〜２１８からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０６】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９または２３１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０７】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０のアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号１０または２６１に対する以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｃ１２２Ｓ、Ｃ１６８Ｓ、Ｒ４２Ａ、Ｋ７１Ａ、Ｔ７３Ａ、Ｔ７４Ａ、Ｖ７５Ａ、Ｈ１３３Ａ、Ｙ１３４Ａ、Ｒ１３７Ｄ、Ｑ１６２Ｗ、Ｅ１７０Ａ、及びＱ１８８Ａのうちの１つまたは複数によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸置換によってもたらされるアミノ酸配列を含む該マスキング部分は、配列番号８２６のアミノ酸配列を含む。
【０２０８】
一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２３２〜２３４、２６１、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２３２〜２３４、２６１、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号２６１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号８２６もしくは８２７のアミノ酸配列を含むか、または、配列番号８２６もしくは８２７のアミノ酸配列に対して約もしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１０】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号８２６または８２７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号８２６または８２７のアミノ酸配列を含む。
【０２１１】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１２】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号２２７〜２２９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１３】
一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２１９及び２２０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２１９及び２２０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、配列番号２１９及び２２０からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第２のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、配列番号２１９及び２２０からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該第１のマスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１４】
一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する該アミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってさらに修飾されている。
【０２１５】
一部の実施形態では、該マスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒα（ＣＤ２５とも称される）またはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、ＩＬ−２Ｒα（ＣＤ２５とも称される）またはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、ＩＬ−２及び／またはＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒβ（ＣＤ１２２とも称される）またはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、ＩＬ−２Ｒβ（ＣＤ１２２とも称される）またはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、配列番号１０、１６１〜１６５、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、ＩＬ−２及び／またはＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒγ（ＣＤ１３２とも称される）またはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−１５Ｒα（ＣＤ２１５とも称される）またはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、ＩＬ−１５Ｒα（ＣＤ２１５とも称される）またはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、抗体またはその断片の抗原結合ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、抗ＩＬ−２抗体またはその断片の抗原結合ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスキング部分は、抗ＩＬ−１５抗体またはその断片の抗原結合ドメインを含む。
【０２１６】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒβまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒβまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒγまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒγまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、抗ＩＬ−２抗体またはその断片の抗原結合ドメインを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、抗ＩＬ−２抗体またはその断片の抗原結合ドメインを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−２に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。
【０２１７】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−１５Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒβまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒβまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−１５Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−１５Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒγまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−２Ｒγまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−１５Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−１５Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含み、該第２のマスキング部分は、抗ＩＬ−１５抗体またはその断片の抗原結合ドメインを含む。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、抗ＩＬ−１５抗体またはその断片の抗原結合ドメインを含み、該第２のマスキング部分は、ＩＬ−１５に対する親和性を保持するか、または他の様態でそれに対して親和性を示す、ＩＬ−１５Ｒαまたはその断片、部分、もしくはバリアントを含む。
【０２１８】
Ｃ．リンカー
本明細書に提供されるようなリンカーは、本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかの２つの構成要素等の２つの構成要素を一緒に連結するために使用される、２つのさらなるアミノ酸のペプチドを指す。一部の実施形態では、該リンカーは、切断可能なペプチドを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、アミノ末端スペーサードメイン（Ｎ末端スペーサードメイン）及び／またはカルボキシ末端スペーサードメイン（Ｃ末端スペーサードメイン）を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン、切断可能なペプチド、及び／またはＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメインからなる。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｃ末端スペーサードメインからなる。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン及びＣ末端スペーサードメインからなる。一部の実施形態では、該リンカーは、切断可能なペプチドからなる。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン、切断可能なペプチド、及びＣ末端スペーサードメインからなる。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン及び切断可能なペプチドからなる。一部の実施形態では、該リンカーは、切断可能なペプチド及びＣ末端スペーサードメインからなる。一部の実施形態では、該リンカーは、切断可能なペプチドからなる。
【０２１９】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、リンカーを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、単一のリンカーを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、１つよりも多くのリンカーを含み、これらの各々が、本明細書に記載のリンカーのうちのいずれかであり得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１のリンカー及び第２のリンカーを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１のリンカー、第２のリンカー、及び第３のリンカーを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１のリンカー、第２のリンカー、第３のリンカー、及び第４のリンカーを含む。例えば、「リンカー」または「該リンカー」への言及は、単一のリンカーを含むマスクされたサイトカインにおける該リンカーを指すことができるか、またはそれは、第１のリンカー及び第２のリンカーを含むマスクされたサイトカインにおける該第１のリンカーを指すことができるか、またはそれは、第１のリンカー及び第２のリンカーを含むマスクされたサイトカインにおける該第２のリンカーを指すことができるか、またはそれは、第１のリンカー及び第２のリンカーを含むマスクされたサイトカインにおける該第１のリンカー及び該第２のリンカーを指すことができるか、またはそれは、第１のリンカー、第２のリンカー、及び第３のリンカーを含むマスクされたサイトカインにおける該第１のリンカー、該第２のリンカー、及び／または該第３のリンカーを指すことができるか、またはそれは、第１のリンカー、第２のリンカー、第３のリンカー、及び第４のリンカーを含むマスクされたサイトカインにおける該第１のリンカー、該第２のリンカー、該第３のリンカー、及び／または該第４のリンカーを指すことができる。
【０２２０】
以下の用語の各々が、本明細書に記載されるような「リンカー」と見なされることが理解される：リンカー、第１のリンカー、第２のリンカー、第３のリンカー、及び第４のリンカー、ならびに任意の他の番号付けされたリンカー（例えば、第５のリンカー、第６のリンカー等）。かくして、一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、リンカー、第１のリンカー、第２のリンカー、第３のリンカー、及び／または第４のリンカーを含んでもよく、これらの各々が、本明細書に記載されるような「リンカー」と見なされ、本明細書に記載のリンカーのうちのいずれかが、本明細書に記載されるようなリンカー、第１のリンカー、第２のリンカー、第３のリンカー、及び／または第４のリンカーであり得る。
【０２２１】
一緒に「連結された」２つの構成要素は、該２つの構成要素が一緒に直接連結されている実施形態、ならびに該２つの構成要素が、本明細書に記載されるようなリンカーを介して一緒に連結されている実施形態を含むこともまた理解される。例えば、「該マスキング部分に連結された半減期延長ドメイン」は、該半減期延長ドメインのアミノ酸配列が、該マスキング部分のアミノ酸配列に直接連結されていること、または該半減期延長ドメインのアミノ酸配列が、本明細書に記載のリンカーのうちのいずれか等のリンカーを介して該マスキング部分のアミノ酸配列に連結されていること、のいずれかを意味するように解釈される。
【０２２２】
該リンカーは、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。一部の実施形態では、マスキング部分が、該リンカーのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該リンカーのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該リンカーのアミノ末端に連結されており、マスキング部分が、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、マスキング部分が、該リンカーのアミノ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該リンカーのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該リンカーのアミノ末端に連結されており、マスキング部分が、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、マスキング部分が、該リンカーのアミノ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該リンカーのアミノ末端に連結されており、サイトカインまたはその機能的断片が、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、サイトカインまたはその機能的断片が、該リンカーのアミノ末端に連結されている。
【０２２３】
各々サイトカインまたはその機能的断片に連結された第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分または該第２のマスキング部分は、リンカーのアミノ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。各々サイトカインまたはその機能的断片に連結された第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分または該第２のマスキング部分は、リンカーのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該リンカーのアミノ末端に連結されている。
【０２２４】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、マスキング部分が、リンカーのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、マスキング部分が、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該リンカーのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該リンカーのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該リンカーのアミノ末端に連結されている。
【０２２５】
第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該リンカーのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインは、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインは、該リンカーのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該リンカーのアミノ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該リンカーのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該リンカーのアミノ末端に連結されており、該第２の半減期延長ドメインは、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、該第２の半減期延長ドメインは、該リンカーのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、該リンカーのアミノ末端に連結されており、該第２の半減期延長ドメインは、該リンカーのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、サイトカインまたはその機能的断片に連結された第２のマスキング部分を含み、かつ該第２のマスキング部分かまたは該サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、該第２の半減期延長ドメインに連結されている、一部の実施形態では、該サイトカインまたはその機能的断片は、該リンカーのカルボキシ末端に連結されており、該第２の半減期延長ドメインは、該リンカーのアミノ末端に連結されている。
【０２２６】
第１のリンカーを介して第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、第２のリンカーを介して該第１のマスキング部分に連結された第２のマスキング部分、及び第３のリンカーを介して第２の半減期延長ドメインに連結されたサイトカインまたはその機能的断片を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該第１のリンカーのカルボキシ末端に連結されているとともに、該第１の半減期延長ドメインは、該第１のリンカーのアミノ末端に連結されており、該第２のマスキング部分は、該第２のリンカーのカルボキシ末端に連結されているとともに、該第１のマスキング部分は、該第２のリンカーのアミノ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第３のリンカーのカルボキシ末端に連結されているとともに、該第２の半減期延長ドメインは、該第３のリンカーのアミノ末端に連結されている。
【０２２７】
第１のリンカーを介して第１の半減期延長ドメインに連結された第１のマスキング部分、第２のリンカーを介して該第１のマスキング部分に連結された第２のマスキング部分、及び第３のリンカーを介して第２の半減期延長ドメインに連結されたサイトカインまたはその機能的断片を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該第１のリンカーのアミノ末端に連結されているとともに、該第１の半減期延長ドメインは、該第１のリンカーのカルボキシ末端に連結されており、該第２のマスキング部分は、該第２のリンカーのアミノ末端に連結されているとともに、該第１のマスキング部分は、該第２のリンカーのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第３のリンカーのアミノ末端に連結されているとともに、該第２の半減期延長ドメインは、該第３のリンカーのカルボキシ末端に連結されている。
【０２２８】
第１のリンカーを介して第１の半減期延長ドメインに連結された第２のマスキング部分、第２のリンカーを介して該第２のマスキング部分に連結された第１のマスキング部分、及び第３のリンカーを介して第２の半減期延長ドメインに連結されたサイトカインまたはその機能的断片を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該第１のリンカーのカルボキシ末端に連結されているとともに、該第１の半減期延長ドメインは、該第１のリンカーのアミノ末端に連結されており、該第１のマスキング部分は、該第２のリンカーのカルボキシ末端に連結されているとともに、該第２のマスキング部分は、該第２のリンカーのアミノ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第３のリンカーのカルボキシ末端に連結されているとともに、該第２の半減期延長ドメインは、該第３のリンカーのアミノ末端に連結されている。
【０２２９】
第１のリンカーを介して第１の半減期延長ドメインに連結された第２のマスキング部分、第２のリンカーを介して該第２のマスキング部分に連結された第１のマスキング部分、及び第３のリンカーを介して第２の半減期延長ドメインに連結されたサイトカインまたはその機能的断片を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該第１のリンカーのアミノ末端に連結されているとともに、該第１の半減期延長ドメインは、該第１のリンカーのカルボキシ末端に連結されており、該第１のマスキング部分は、該第２のリンカーのアミノ末端に連結されているとともに、該第２のマスキング部分は、該第２のリンカーのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該第３のリンカーのアミノ末端に連結されているとともに、該第２の半減期延長ドメインは、該第３のリンカーのカルボキシ末端に連結されている。
【０２３０】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、該第２の半減期延長ドメインに連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、リンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。
【０２３１】
一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２０〜１５３、２３５〜２４２、２６４、２６８〜３１７、３２３〜３３８、３４０〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、５３８〜５５５、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号１１〜１９、２６２、２６３、３１８〜３２０、３４８〜３５４、４１６〜４１９、４９２、４９３、５０２、５０３、５３６、５３７、６６８、６９１、７２４、７２５、７６２〜７７１、７９７、７９８、及び８００〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６２のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２０〜３３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号３４〜４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号４５〜９５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２３５のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６３、３１８〜３２２、３３９、３４８〜３５５、４１６〜４１９、４９２、４９３、５０２、５０３、５３６、５３７、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、７９５、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２３２】
一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号７９４、７９５、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２３３】
一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号１１〜１９、２６２、２６３、３１８〜３２０、３４８〜３５４、４１６〜４１９、４９２、４９３、５０２、５０３、５３６、５３７、６６８、６９１、７２４、７２５、７６２〜７７１、７９７、７９８、及び８００〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２０〜３３からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号３４〜４４からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号４５〜９５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２３５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６３、３１８〜３２０、３４８〜３５４、４１６〜４１９、４９２、４９３、５０２、５０３、５３６、５３７、６６８、６９１、７２４、７２５、７６２〜７７１、７９７、７９８、及び８００〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号３１８〜３２０からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号３４８〜３５４からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号４１６〜４１９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号４９２、４９３、５０２、５０３、５３６、５３７からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号６６８、６９１、７２４、７２５、７６２〜７７１、７９７、７９８、及び８００〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号７６２〜７７１、７９７、７９８、及び８００〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号７６２〜７７１からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号７９７、７９８、及び８００〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号８００〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２３４】
該リンカーの一部の実施形態の切断可能なペプチド及びスペーサードメインが、下記にさらに詳述される。
【０２３５】
１．切断可能なペプチド
一部の実施形態では、該リンカーは、切断可能なペプチドを含む。切断可能なペプチドを含む１つよりも多くのリンカーを有する、一部の実施形態では、切断可能なペプチドは、第１の切断可能なペプチド、第２の切断可能なペプチド、または第３の切断可能なペプチドと称され得、これらの各々が「切断可能なペプチド」と見なされ、本明細書に記載の切断可能なペプチドのうちのいずれかであり得る。例えば、「切断可能なペプチド」または「該切断可能なペプチド」への言及は、単一の切断可能なペプチドを含むマスクされたサイトカインにおける該切断可能なペプチドを指すことができるか、またはそれは、第１の切断可能なペプチド及び第２の切断可能なペプチドを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の切断可能なペプチドを指すことができるか、またはそれは、第１の切断可能なペプチド及び第２の切断可能なペプチドを含むマスクされたサイトカインにおける該第２の切断可能なペプチドを指すことができるか、またはそれは、第１の切断可能なペプチド及び第２の切断可能なペプチドを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の切断可能なペプチド及び該第２の切断可能なペプチドを指すことができるか、またはそれは、第１の切断可能なペプチド、第２の切断可能なペプチド、及び第３の切断可能なペプチドを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の切断可能なペプチド、該第２の切断可能なペプチド、及び／または該第３の切断可能なペプチドを指すことができる。一部の実施形態では、本明細書の教示に従って、３つよりも多くの切断可能なペプチドが存在し得ることが考えられる。
【０２３６】
切断可能なペプチドは、プロテアーゼ切断部位等の切断部位を含むポリペプチドである。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、１つよりも多くの切断部位を含む。本明細書で使用される「切断部位」は、本明細書に記載の切断可能なペプチドを含むリンカーのうちのいずれかに見出される切断可能なペプチドの一部分の切断のために認識可能な部位を指す。故に、切断部位は、本明細書に記載されるような切断可能なペプチドの配列に見出され得る。一部の実施形態では、該切断部位は、切断剤によって認識され、切断されるアミノ酸配列である。代表的な切断剤には、タンパク質、酵素、ＤＮＡザイム、ＲＮＡザイム、金属、酸、及び塩基が含まれる。
【０２３７】
一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、プロテアーゼ切断部位を含む。一部の実施形態では、プロテアーゼ切断部位は、腫瘍関連プロテアーゼ切断部位である。本明細書に提供されるような「腫瘍関連プロテアーゼ切断部位」は、発現が腫瘍細胞またはその腫瘍細胞環境で特異的であるかまたは上方制御されるプロテアーゼによって認識される、アミノ酸配列である。一部の実施形態では、プロテアーゼ切断部位は、ＡＢＨＤ１２、ＡＤＡＭ１２、ＡＢＨＤ１２Ｂ、ＡＢＨＤ１３、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＡＤＡＭ８、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ１０、ＡＤＡＭＴＳ１２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＡＤＡＭＴＳ１４、ＡＤＡＭＴＳ１５、ＡＤＡＭＴＳ１６、ＡＤＡＭＴＳ１７、ＡＤＡＭＴＳ１８、ＡＤＡＭＴＳ１９、ＡＤＡＭＴＳ２、ＡＤＡＭＴＳ２０、ＡＤＡＭＴＳ３、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＢＨＤ１７Ｂ、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＤＡＭＴＳ６、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＤＡＭＴＳ８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＤＡＭＴＳＬ１、ＡＤＡＭＴＳＬ２、ＡＤＡＭＴＳＬ３、ＡＢＨＤ１７Ｃ、ＡＤＡＭＴＳＬ５、ＡＳＴＬ、ＢＭＰ１、ＣＥＬＡ１、ＣＥＬＡ２Ａ、ＣＥＬＡ２Ｂ、ＣＥＬＡ３Ａ、ＣＥＬＡ３Ｂ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ４、ＣＴＳＥ、ＣＴＳＦ、ＡＤＡＭＴＳＬ４、ＣＭＡ１、ＣＴＲＢ１、ＣＴＲＣ、ＣＴＳＯ、ＣＴＲｌ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＷ、ＣＴＳＢ、ＣＴＳＣ、ＣＴＳＤ、ＥＳＰ１、ＣＴＳＧ、ＣＴＳＨ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＧＺＭＨ、ＣＴＳＫ、ＧＺＭＭ、ＣＴＳＬ、ＣＴＳＳ、ＣＴＳＶ、ＣＴＳＺ、ＨＴＲＡ４、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ２、ＫＬＫ４、ＤＰＰ４、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫＢ１、ＥＣＥ１、ＥＣＥ２、ＥＣＥＬ１、ＭＡＳＰ２、ＭＥＰ１Ａ、ＭＥＰ１Ｂ、ＥＬＡＮＥ、ＦＡＰ、ＧＺＭＡ、ＭＭＰ１１、ＧＺＭＫ、ＨＧＦＡＣ、ＨＰＮ、ＨＴＲＡ１、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１９、ＨＴＲＡ２、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＨＴＲＡ３、ＨＴＲＡ４、ＫＥＬ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、ＫＬＫ５、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＬＧＭＮ、ＬＮＰＥＰ、ＭＡＳＰ１、ＰＡＰＰＡ、ＰＡＰＰＡ２、ＰＣＳＫ１、ＮＡＰＳＡ、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＭＭＥ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ１０、ＰＬＡＴ、ＰＬＡＵ、ＰＬＧ、ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ１２、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ２１、ＰＲＳＳ３、ＰＲＳＳ３３、ＰＲＳＳ４、ＰＲＳＳ５５、ＰＲＳＳ５７、ＭＭＰ１２、ＰＲＳＳ８、ＰＲＳＳ９、ＰＲＴＮ３、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＳＴ１４、ＴＭＰＲＳＳ１０、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｆ、ＴＭＰＲＳＳ１２、ＴＭＰＲＳＳ１３、ＭＭＰ１５、ＴＭＰＲＳＳ１５、ＭＭＰ２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５、ＴＭＰＲＳＳ６、ＴＭＰＲＳＳ７、ＴＭＰＲＳＳ９、ＮＲＤＣ、ＯＶＣＨ１、ＰＡＭＲ１、ＰＣＳＫ３、ＰＨＥＸ、ＴＩＮＡＧ、ＴＰＳＡＢ１、ＴＰＳＤ１、及びＴＰＳＧ１からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって認識される切断部位である。一部の実施形態では、プロテアーゼ切断部位は、ＡＤＡＭ１７、ＨＴＲＡ１、ＰＲＳＳ１、ＦＡＰ、ＧＺＭＫ、ＮＡＰＳＡ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１０、ＭＭＰ７、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ２８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＨＧＦＡＣ、及びＨＴＲＡ３からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって認識される切断部位である。
【０２３８】
複数の実施形態では、プロテアーゼ切断部位は、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）切断部位、ディスインテグリン及びメタロプロテアーゼドメイン含有（ＡＤＡＭ）メタロプロテアーゼ切断部位、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）プロテアーゼ切断部位、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ）プロテアーゼ切断部位、膜型セリンプロテアーゼ１（ＭＴ−ＳＰ１）プロテアーゼ切断部位、マトリプターゼプロテアーゼ切断部位（ＳＴ１４）、またはレグマインプロテアーゼ切断部位である。複数の実施形態では、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）切断部位は、ＭＭＰ９切断部位、ＭＭＰ１３切断部位、またはＭＭＰ２切断部位である。複数の実施形態では、ディスインテグリン及びメタロプロテアーゼドメイン含有（ＡＤＡＭ）メタロプロテアーゼ切断部位は、ＡＤＡＭ９メタロプロテアーゼ切断部位、ＡＤＡＭ１０メタロプロテアーゼ切断部位、またはＡＤＡＭ１７メタロプロテアーゼ切断部位である。プロテアーゼ切断部位は、特定のアミノ酸配列によって指定され得る。
【０２３９】
一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、ＡＢＨＤ１２、ＡＤＡＭ１２、ＡＢＨＤ１２Ｂ、ＡＢＨＤ１３、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＡＤＡＭ８、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ１０、ＡＤＡＭＴＳ１２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＡＤＡＭＴＳ１４、ＡＤＡＭＴＳ１５、ＡＤＡＭＴＳ１６、ＡＤＡＭＴＳ１７、ＡＤＡＭＴＳ１８、ＡＤＡＭＴＳ１９、ＡＤＡＭＴＳ２、ＡＤＡＭＴＳ２０、ＡＤＡＭＴＳ３、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＢＨＤ１７Ｂ、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＤＡＭＴＳ６、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＤＡＭＴＳ８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＤＡＭＴＳＬ１、ＡＤＡＭＴＳＬ２、ＡＤＡＭＴＳＬ３、ＡＢＨＤ１７Ｃ、ＡＤＡＭＴＳＬ５、ＡＳＴＬ、ＢＭＰ１、ＣＥＬＡ１、ＣＥＬＡ２Ａ、ＣＥＬＡ２Ｂ、ＣＥＬＡ３Ａ、ＣＥＬＡ３Ｂ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ４、ＣＴＳＥ、ＣＴＳＦ、ＡＤＡＭＴＳＬ４、ＣＭＡ１、ＣＴＲＢ１、ＣＴＲＣ、ＣＴＳＯ、ＣＴＲｌ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＷ、ＣＴＳＢ、ＣＴＳＣ、ＣＴＳＤ、ＥＳＰ１、ＣＴＳＧ、ＣＴＳＨ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＧＺＭＨ、ＣＴＳＫ、ＧＺＭＭ、ＣＴＳＬ、ＣＴＳＳ、ＣＴＳＶ、ＣＴＳＺ、ＨＴＲＡ４、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ２、ＫＬＫ４、ＤＰＰ４、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫＢ１、ＥＣＥ１、ＥＣＥ２、ＥＣＥＬ１、ＭＡＳＰ２、ＭＥＰ１Ａ、ＭＥＰ１Ｂ、ＥＬＡＮＥ、ＦＡＰ、ＧＺＭＡ、ＭＭＰ１１、ＧＺＭＫ、ＨＧＦＡＣ、ＨＰＮ、ＨＴＲＡ１、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１９、ＨＴＲＡ２、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＨＴＲＡ３、ＨＴＲＡ４、ＫＥＬ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、ＫＬＫ５、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＬＧＭＮ、ＬＮＰＥＰ、ＭＡＳＰ１、ＰＡＰＰＡ、ＰＡＰＰＡ２、ＰＣＳＫ１、ＮＡＰＳＡ、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＭＭＥ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ１０、ＰＬＡＴ、ＰＬＡＵ、ＰＬＧ、ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ１２、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ２１、ＰＲＳＳ３、ＰＲＳＳ３３、ＰＲＳＳ４、ＰＲＳＳ５５、ＰＲＳＳ５７、ＭＭＰ１２、ＰＲＳＳ８、ＰＲＳＳ９、ＰＲＴＮ３、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＳＴ１４、ＴＭＰＲＳＳ１０、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｆ、ＴＭＰＲＳＳ１２、ＴＭＰＲＳＳ１３、ＭＭＰ１５、ＴＭＰＲＳＳ１５、ＭＭＰ２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５、ＴＭＰＲＳＳ６、ＴＭＰＲＳＳ７、ＴＭＰＲＳＳ９、ＮＲＤＣ、ＯＶＣＨ１、ＰＡＭＲ１、ＰＣＳＫ３、ＰＨＥＸ、ＴＩＮＡＧ、ＴＰＳＡＢ１、ＴＰＳＤ１、及びＴＰＳＧ１からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、ＡＤＡＭ１７、ＨＴＲＡ１、ＰＲＳＳ１、ＦＡＰ、ＧＺＭＫ、ＮＡＰＳＡ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１０、ＭＭＰ７、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ２８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＨＧＦＡＣ、及びＨＴＲＡ３からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、ｕＰＡ及びＭＭＰ１４からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、マトリプターゼ及びＭＭＰ１４からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、レグマイン及びＭＭＰ１４からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、マトリプターゼ及びｕＰＡからなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、ｕＰＡ及びレグマインからなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、マトリプターゼ及びレグマインからなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、ｕＰＡ、マトリプターゼ、及びＭＭＰ１４からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、ｕＰＡ、レグマイン、及びＭＭＰ１４からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、マトリプターゼ、レグマイン、及びＭＭＰ１４からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、マトリプターゼ、レグマイン、及びｕＰＡからなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される。
【０２４０】
一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、サイトカイン受容体を発現している領域または組織に共局在するプロテアーゼのための基質である。サイトカイン受容体は、任意のサイトカイン受容体であり得る。一部の実施形態では、サイトカイン受容体は、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ１１、ＸＣＲ１、ＣＸ３ＣＲ１、ＩＬ−１ＲＡＰ、ＩＬ−１ＲＡＰＬ１、ＩＬ−１ＲＡＰＬ２、ＩＬ−１ＲＬ１、ＩＬ−１ＲＬ２、ＩＬ−１Ｒ１、ＩＬ−１Ｒ２、ＩＬ−２Ｒ、ＩＬ−２Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、ＩＬ−２Ｒγ、ＩＬ−３Ｒα、ＩＬ−４Ｒ、ＩＬ−５Ｒα、ＩＬ−６Ｒ、ＩＬ−６ＳＴ、ＩＬ−７Ｒ、ＩＬ−９Ｒ、ＩＬ−１０Ｒα、ＩＬ−１０Ｒβ、ＩＬ−１１Ｒα、ＩＬ−１２Ｒβ１、ＩＬ−１２Ｒβ２、ＩＬ−１３Ｒα１、ＩＬ−１３Ｒα２、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−１７ＲＡ、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＣ、ＩＬ−１７ＲＤ、ＩＬ−１７ＲＥ、ＩＬ−１８ＲＡＰ、ＩＬ−１８Ｒ１、ＩＬ−２０Ｒα、ＩＬ−２０Ｒβ、ＩＬ−２１Ｒ、ＩＬ−２２Ｒα１、ＩＬ−２２Ｒα２、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２７Ｒα、ＩＬ−２８Ｒα、ＩＬ−３１ＲＡ、ＩＦＮＡＲ１、ＩＦＮＡＲ２、ＩＦＮＧＲ１、ＩＦＮＧＲ２、ＩＦＮＬＲ１、ＧＭＲα（ＣＤ１１６）、ＣＤ１３１、ＧＨＲ、ＰＲＬＲ、ＥＰＯＲ、ＬＩＦＲ（ＣＤ１１８）、ＯＳＭＲβ、ＴＰＯ−Ｒ（ＣＤ１１０）、ＣＳＦ−１Ｒ、ＥＤＡＲ、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＬＴＢＲ、ＴＮＦＲＳＦ４、ＣＤ４０、ＦＡＳ、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＣＤ２７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＮＧＦＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＲＥＬＴ、ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、及びＥＤＡ２Ｒからなる群から選択される。
【０２４１】
一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、５−ｍｅｒ（すなわち５アミノ酸長のペプチド）、６−ｍｅｒ（すなわち６アミノ酸長のペプチド）、７−ｍｅｒ（すなわち７アミノ酸長のペプチド）、８−ｍｅｒ（すなわち８アミノ酸長のペプチド）、９−ｍｅｒ（すなわち９アミノ酸長のペプチド）、１０−ｍｅｒ（すなわち１０アミノ酸長のペプチド）、１１−ｍｅｒ（すなわち１１アミノ酸長のペプチド）、１２−ｍｅｒ（すなわち１２アミノ酸長のペプチド）、１３−ｍｅｒ（すなわち１３アミノ酸長のペプチド）、１４−ｍｅｒ（すなわち１４アミノ酸長のペプチド）、１５−ｍｅｒ（すなわち１５アミノ酸長のペプチド）、１６−ｍｅｒ（すなわち１６アミノ酸長のペプチド）、１７−ｍｅｒ（すなわち１７アミノ酸長のペプチド）、または１８−ｍｅｒ（すなわち１８アミノ酸長のペプチド）である。代表的な切断可能なペプチド配列が表１に示される。
2022502088.tif 000003
2022502088.tif 000004
2022502088.tif 000005
2022502088.tif 000006
【０２４２】
一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号２８１、２９３、２９７、３９９〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号９６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号２６４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号９６〜１３１、及び２６４からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、配列番号９６〜１３１からなる群から選択されるアミノ酸配列、及び配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。該切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、複数の実施形態では、該２つのアミノ酸配列は、いずれの順序で連結されてもよい。例えば、該切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、複数の実施形態では、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される該アミノ酸配列は、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される該アミノ酸配列は、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される該アミノ酸配列のＮ末端またはＣ末端に連結されている。該切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１３１、及び２６４からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、一部の実施形態では、配列番号９６〜１３１、及び２６４からなる群から選択される該アミノ酸配列は、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される該アミノ酸配列は、配列番号９６〜１３１、及び２６４からなる群から選択される該アミノ酸配列のＮ末端またはＣ末端に連結されている。
【０２４３】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加のアミノ酸が、該切断可能なペプチドのアミノ酸配列への付加によって組み込まれる。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドのアミノ酸配列への付加によって組み込まれる該１つまたは複数のアミノ酸は、親水性アミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、疎水性アミノ酸（例えば、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、グリシン、またはプロリン）、極性アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、システイン、アスパラギン、グルタミン、またはチロシン）、非極性アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、プロリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、脂肪族側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシン）、ヒドロキシル含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、セリンまたはトレオニン）、硫黄含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、システインまたはメチオニン）、荷電アミノ酸（例えば、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸）、非荷電アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、芳香族アミノ酸（例えば、チロシン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、環状アミノ酸（例えば、プロリン）、酸性アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、またはグルタミン）、塩基性アミノ酸（例えば、ヒスチジン、リジン、またはアルギニン）、及びかさ高いアミノ酸（例えば、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファン）からなる群から選択される。一部の実施形態では、グリシン（Ｇ）が、該切断可能なペプチドのアミノ酸配列のＮ末端及び／またはＣ末端への付加によって組み込まれる。一部の実施形態では、グリシン（Ｇ）及びプロリン（Ｐ）が、アミノ酸配列ＧＰまたはＰＧを該切断可能なペプチドのアミノ酸配列のＮ末端及び／またはＣ末端に組み込むことによって等、該切断可能なペプチドのアミノ酸配列のＮ末端及び／またはＣ末端への付加によって組み込まれる。
【０２４４】
該切断可能なペプチドは、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドは、Ｎ末端スペーサードメイン及び／またはＣ末端スペーサードメインに連結されている。一部の実施形態では、Ｎ末端スペーサードメインが、該切断可能なペプチドのアミノ末端に連結されている。一部の実施形態では、Ｃ末端スペーサードメインが、該切断可能なペプチドのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、Ｎ末端スペーサードメインが、該切断可能なペプチドのアミノ末端に連結されており、Ｃ末端スペーサードメインが、該切断可能なペプチドのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、Ｎ末端スペーサードメインが、該切断可能なペプチドのアミノ末端に連結されており、Ｃ末端スペーサードメインが、該切断可能なペプチドのカルボキシ末端に連結されている。
【０２４５】
一部の実施形態では、該切断可能なペプチドのアミノ末端は、Ｎ末端スペーサードメイン以外の構成要素に連結されている。一部の実施形態では、該切断可能なペプチドのカルボキシ末端は、Ｃ末端スペーサードメイン以外の構成要素に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、該切断可能なペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該切断可能なペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該切断可能なペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、第１の半減期延長ドメインが、該切断可能なペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、第２の半減期延長ドメインが、該切断可能なペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０２４６】
２．スペーサードメイン
一部の実施形態では、該リンカーは、スペーサードメインを含む。本明細書で使用されるとき、「スペーサードメイン」は、一部の実施形態では、Ｎ末端スペーサードメイン及び／またはＣ末端スペーサードメインを指し得る。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン及び／またはＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｃ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン及びＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン及び切断可能なペプチドを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、切断可能なペプチド及びＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン、切断可能なペプチド、及びＣ末端スペーサードメインを含む。
【０２４７】
１つよりも多くのＮ末端スペーサードメインを有する一部の実施形態等の、一部の実施形態では、Ｎ末端スペーサードメインは、第１のＮ末端スペーサードメイン、第２のＮ末端スペーサードメイン、または第３のＮ末端スペーサードメインと称され得、これらの各々が「Ｎ末端スペーサードメイン」と見なされ、本明細書に記載のＮ末端スペーサードメインのうちのいずれかであり得る。同様に、１つよりも多くのＣ末端スペーサードメインを有する一部の実施形態等の、一部の実施形態では、Ｃ末端スペーサードメインは、第１のＣ末端スペーサードメイン、第２のＣ末端スペーサードメイン、または第３のＣ末端スペーサードメインと称され得、これらの各々が「Ｃ末端スペーサードメイン」と見なされ、本明細書に記載のＣ末端スペーサードメインのうちのいずれかであり得る。例えば、「Ｎ末端スペーサードメイン」または「該Ｎ末端スペーサードメイン」への言及は、単一のＮ末端スペーサードメインを含むマスクされたサイトカインにおける該Ｎ末端スペーサードメインを指すことができるか、またはそれは、第１のＮ末端スペーサードメイン及び第２のＮ末端スペーサードメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１のＮ末端スペーサードメインを指すことができるか、またはそれは、第１のＮ末端スペーサードメイン及び第２のＮ末端スペーサードメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第２のＮ末端スペーサードメインを指すことができるか、またはそれは、第１のＮ末端スペーサードメイン及び第２のＮ末端スペーサードメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１のＮ末端スペーサードメイン及び該第２のＮ末端スペーサードメインを指すことができるか、またはそれは、第１のＮ末端スペーサードメイン、第２のＮ末端スペーサードメイン、及び第３のＮ末端スペーサードメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１のＮ末端スペーサードメイン、該第２のＮ末端スペーサードメイン、及び／または該第３のＮ末端スペーサードメインを指すことができる。
【０２４８】
該Ｎ末端スペーサードメイン及び該Ｃ末端スペーサードメインは各々、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、第１の半減期延長ドメインが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、第２の半減期延長ドメインが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０２４９】
一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、半減期延長ドメインが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、第１の半減期延長ドメインが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、第２の半減期延長ドメインが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０２５０】
一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５１】
一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、半減期延長ドメインが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５２】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分または該第２のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分または該第２のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５３】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分または該第２のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分または該第２のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５４】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第２のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第２のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５５】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５６】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第２のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第２のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５７】
第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１のマスキング部分かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５８】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２５９】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、マスキング部分が、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２６０】
第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインは、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインは、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインは、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第１のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該第１の半減期延長ドメインは、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２６１】
第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２のマスキング部分は、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインまたはその機能的断片は、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２６２】
第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２の半減期延長ドメインは、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該サイトカインもしくはその機能的断片かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２の半減期延長ドメインは、該Ｎ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインもしくはその機能的断片かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｎ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２の半減期延長ドメインは、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されており、該サイトカインもしくはその機能的断片かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されている。第１の半減期延長ドメイン、第２の半減期延長ドメイン、第１のマスキング部分、及び第２のマスキング部分を含む、一部の実施形態では、該第２の半減期延長ドメインは、該Ｃ末端スペーサードメインのカルボキシ末端に連結されており、該サイトカインもしくはその機能的断片かまたは該第２のマスキング部分かのどちらかが、該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ末端に連結されている。
【０２６３】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、リンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインを連結する該リンカーは、Ｎ末端スペーサードメイン及び／またはＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインを連結する該リンカーは、切断可能なペプチドならびにＮ末端スペーサードメイン及び／またはＣ末端スペーサードメインを含む。リンカーを介して一緒に連結されている第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該リンカーは、アミノ末端及びカルボキシ末端を含み、該第１の半減期延長ドメインは、該リンカーの該アミノ末端に連結されており、該第２の半減期延長ドメインは、該リンカーの該カルボキシ末端に連結されている。リンカーを介して一緒に連結されている第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該リンカーは、アミノ末端及びカルボキシ末端を含み、該第１の半減期延長ドメインは、該リンカーの該カルボキシ末端に連結されており、該第２の半減期延長ドメインは、該リンカーの該アミノ末端に連結されている。
【０２６４】
一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２６５】
一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＮ末端スペーサードメイン、ならびに配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６８のアミノ酸配列を含むＮ末端スペーサードメイン、及び配列番号２６９のアミノ酸配列を含むＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６８のアミノ酸配列を含むＮ末端スペーサードメイン、配列番号２６４のアミノ酸配列を含む切断可能なペプチド、及び配列番号２６９のアミノ酸配列を含むＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６９のアミノ酸配列を含むＮ末端スペーサードメイン、及び配列番号２６８のアミノ酸配列を含むＣ末端スペーサードメインを含む。一部の実施形態では、該リンカーは、配列番号２６９のアミノ酸配列を含むＮ末端スペーサードメイン、配列番号２６４のアミノ酸配列を含む切断可能なペプチド、及び配列番号２６８のアミノ酸配列を含むＣ末端スペーサードメインを含む。
【０２６６】
一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、及び２６９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２６８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２６９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２６８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、該切断可能なペプチドは、配列番号２６４のアミノ酸配列を含み、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２６９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。代表的なスペーサードメイン（例えば、Ｎ末端スペーサードメイン及び／またはＣ末端スペーサードメイン）が表２に示される。
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2022502088.tif 000008
【０２６７】
一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、本明細書に記載のＮ末端スペーサードメインのうちのいずれかのアミノ酸配列を修飾することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を修飾することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｃ末端スペーサードメインは、本明細書に記載のＣ末端スペーサードメインのうちのいずれかのアミノ酸配列を修飾することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を修飾することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を修飾することによってもたらされる、アミノ酸配列を含み、該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を修飾することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインは、配列番号２８のアミノ酸配列を含む。
【０２６８】
一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインは、１つまたは複数のアミノ酸からなる。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインの該１つまたは複数のアミノ酸は、親水性アミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、疎水性アミノ酸（例えば、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、グリシン、またはプロリン）、極性アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、システイン、アスパラギン、グルタミン、またはチロシン）、非極性アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、プロリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、脂肪族側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシン）、ヒドロキシル含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、セリンまたはトレオニン）、硫黄含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、システインまたはメチオニン）、荷電アミノ酸（例えば、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸）、非荷電アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、芳香族アミノ酸（例えば、チロシン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、環状アミノ酸（例えば、プロリン）、酸性アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、またはグルタミン）、塩基性アミノ酸（例えば、ヒスチジン、リジン、またはアルギニン）、及びかさ高いアミノ酸（例えば、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファン）からなる群から選択される。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインは、グリシン（Ｇ）からなる。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインは、グリシン（Ｇ）及びプロリン（Ｐ）からなり、ＧＰまたはＰＧのアミノ酸配列を有する。
【０２６９】
一部の実施形態に記載されるような「スペーサードメイン」に対する修飾は、本明細書に記載のスペーサードメインのうちのいずれか１つまたは複数（例えば、本明細書に記載の任意のＮ末端スペーサードメイン及び／または任意のＣ末端スペーサードメイン）に対する修飾を指すことができることが理解される。例えば、スペーサードメインに対する修飾は、（ａ）本明細書に記載の任意のＮ末端スペーサードメインに対する修飾、（ｂ）本明細書に記載の任意のＣ末端スペーサードメインに対する修飾、または（ｃ）本明細書に記載の任意のＮ末端スペーサードメイン及び任意のＣ末端スペーサードメインに対する修飾を指すことができる。かくして、Ｎ末端スペーサードメインを含む本明細書に記載のリンカーのうちのいずれかは、該Ｎ末端スペーサードメインが本明細書に記載の修飾に従って修飾される実施形態を含み、Ｃ末端スペーサードメインを含む本明細書に記載のリンカーのうちのいずれかは、該Ｃ末端スペーサードメインが本明細書に記載の修飾に従って修飾される実施形態を含み、Ｎ末端スペーサードメイン及びＣ末端スペーサードメインを含む本明細書に記載のリンカーのうちのいずれかは、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインが本明細書に記載の修飾に従って修飾される実施形態を含む。
【０２７０】
該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインの配列に対する修飾は、任意の追加のアミノ酸の該配列への組み込み、任意のアミノ酸の異なるアミノ酸との置換、及び／または該配列からの任意のアミノ酸の除去を含めた、該スペーサードメインのアミノ酸配列に対する任意の修飾であることができる。
【０２７１】
一部の実施形態では、１つまたは複数の追加のアミノ酸が、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ酸配列への付加によって組み込まれる。一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ酸配列への付加によって組み込まれる該１つまたは複数のアミノ酸は、親水性アミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、疎水性アミノ酸（例えば、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、グリシン、またはプロリン）、極性アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、システイン、アスパラギン、グルタミン、またはチロシン）、非極性アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、プロリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、脂肪族側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシン）、ヒドロキシル含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、セリンまたはトレオニン）、硫黄含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、システインまたはメチオニン）、荷電アミノ酸（例えば、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸）、非荷電アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、芳香族アミノ酸（例えば、チロシン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、環状アミノ酸（例えば、プロリン）、酸性アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、またはグルタミン）、塩基性アミノ酸（例えば、ヒスチジン、リジン、またはアルギニン）、及びかさ高いアミノ酸（例えば、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファン）からなる群から選択される。
【０２７２】
一部の実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸が、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ酸配列の中に置換される。一部の実施形態では、該スペーサードメインのアミノ酸配列の中に置換される該１つまたは複数のアミノ酸は、親水性アミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、疎水性アミノ酸（例えば、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、グリシン、またはプロリン）、極性アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、システイン、アスパラギン、グルタミン、またはチロシン）、非極性アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、プロリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、脂肪族側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシン）、ヒドロキシル含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、セリンまたはトレオニン）、硫黄含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、システインまたはメチオニン）、荷電アミノ酸（例えば、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸）、非荷電アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、芳香族アミノ酸（例えば、チロシン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、環状アミノ酸（例えば、プロリン）、酸性アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、またはグルタミン）、塩基性アミノ酸（例えば、ヒスチジン、リジン、またはアルギニン）、及びかさ高いアミノ酸（例えば、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファン）からなる群から選択される。
【０２７３】
一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ酸配列に対する修飾には、少なくとも１つの親水性アミノ酸の疎水性アミノ酸との置換、少なくとも１つの疎水性アミノ酸の親水性アミノ酸との置換、少なくとも１つの極性アミノ酸の非極性アミノ酸との置換、少なくとも１つの非極性アミノ酸の極性アミノ酸との置換、少なくとも１つの荷電アミノ酸の非荷電アミノ酸との置換、少なくとも１つの非荷電アミノ酸の荷電アミノ酸との置換、少なくとも１つの酸性アミノ酸の塩基性アミノ酸との置換、少なくとも１つの塩基性アミノ酸の酸性アミノ酸との置換、少なくとも１つのかさ高でないアミノ酸のかさ高いアミノ酸との置換、少なくとも１つのかさ高いアミノ酸のかさ高でないアミノ酸との置換、ヒドロキシル含有側鎖もしくは硫黄含有側鎖を有する少なくとも１つのアミノ酸の脂肪族アミノ酸との置換、ヒドロキシル含有側鎖もしくは硫黄含有側鎖を有する少なくとも１つのアミノ酸の芳香族アミノ酸との置換、または少なくとも１つの芳香族アミノ酸のヒドロキシル含有側鎖もしくは硫黄含有側鎖を有するアミノ酸との置換が含まれる。
【０２７４】
一部の実施形態では、該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインのアミノ酸配列から除去される該１つまたは複数のアミノ酸は、親水性アミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、疎水性アミノ酸（例えば、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、グリシン、またはプロリン）、極性アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、システイン、アスパラギン、グルタミン、またはチロシン）、非極性アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、プロリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、脂肪族側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシン）、ヒドロキシル含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、セリンまたはトレオニン）、硫黄含有側鎖を有するアミノ酸（例えば、システインまたはメチオニン）、荷電アミノ酸（例えば、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、またはグルタミン酸）、非荷電アミノ酸（例えば、セリン、トレオニン、アスパラギン、またはグルタミン）、芳香族アミノ酸（例えば、チロシン、トリプトファン、またはフェニルアラニン）、環状アミノ酸（例えば、プロリン）、酸性アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、またはグルタミン）、塩基性アミノ酸（例えば、ヒスチジン、リジン、またはアルギニン）、及びかさ高いアミノ酸（例えば、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファン）からなる群から選択される。
【０２７５】
本明細書に記載のスペーサードメイン（例えば、任意のＮ末端スペーサードメイン及び／または任意のＣ末端スペーサードメイン）に対する修飾のうちのいずれかは、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９のうちのいずれか１つを含む、本明細書に記載のＮ末端スペーサードメイン及び／またはＣ末端スペーサードメインのうちのいずれかのアミノ酸配列に対して行われる修飾であることができる。本明細書に記載のスペーサードメインに対する修飾のうちのいずれも、任意の目的で行われる修飾であることができる。例えば、切断可能なペプチドを含むリンカーの該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインに対する修飾は、該切断可能なペプチドの切断の効率が改変されるように、該リンカーの立体構造を改変する目的で行うことができる。切断可能なペプチドを含むリンカーの該Ｎ末端スペーサードメイン及び／または該Ｃ末端スペーサードメインに対する修飾はまた、該切断可能なペプチドの切断効率がある特定のｐＨ条件下で改変されるように、切断可能なペプチドを含むリンカーの構造を改変する目的で行うこともできる。
【０２７６】
Ｄ．半減期延長ドメイン
インビボでの長い半減期は、治療用タンパク質に重要である。残念ながら、対象に投与されるサイトカインは概して、それらが腎臓によるクリアランス及びエンドサイトーシス分解を含む機構によって通常は対象から迅速に排除されるため、短い半減期を有する。故に、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインの一部の実施形態では、該サイトカインのインビボでの半減期を延長する目的で、半減期延長ドメインが、該マスクされたサイトカインに連結されている。
【０２７７】
一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、抗体及びその断片、アルブミン、アルブミン結合タンパク質、ＩｇＧ結合タンパク質、及びポリアミノ酸配列からなる群から選択される半減期延長ドメインを含む。当該技術分野で利用可能な、該マスクされたサイトカインの半減期を延長するための他の機構がまた採用されてもよいことが企図される。該半減期延長ドメインは、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。
【０２７８】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、単一の半減期延長ドメインを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、１つよりも多くの半減期延長ドメインを含み、これらの各々が、本明細書に記載の半減期延長ドメインのうちのいずれかであり得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む。「半減期延長ドメイン」または「該半減期延長ドメイン」への言及は、単一の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該半減期延長ドメインを指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインを指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第２の半減期延長ドメインを指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインを指すことができることが理解される。
【０２７９】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、該第２の半減期延長ドメインに連結されている。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、リンカーを介して該第２の半減期延長ドメインに連結されている。連結されている該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインは、一部の実施形態では、各々、本明細書に記載の任意の半減期延長ドメインであり得る。例えば、一部の実施形態では、該連結された第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインの該第１の半減期延長ドメイン及び／または該第２の半減期延長ドメインは、Ｆｃドメインまたはその断片である。一部の実施形態では、該連結された第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインの該第１の半減期延長ドメイン及び／または該第２の半減期延長ドメインは、抗体、またはその断片、バリアント、もしくは誘導体である。
【０２８０】
１．抗体及びその断片
マスクされたサイトカインを、ＦｃＲｎ媒介性リサイクリングが可能な抗体またはその断片に連結することによって、該マスクされたサイトカインの対象からのクリアランスが低減され得るかまたは他の様態で遅延され得、それによって、投与されたマスクされたサイトカインの半減期が長期化される。
【０２８１】
該マスクされたサイトカインの一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、抗体またはその断片を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、１つよりも多くの抗体またはその断片を含み、これらの各々が、本明細書に記載の抗体またはその断片のうちのいずれかであり得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含み、これらの各々が、抗体またはその断片を含む。「抗体またはその断片」または「該抗体またはその断片」への言及は、単一の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該半減期延長ドメインの該抗体もしくはその断片を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該抗体もしくはその断片を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第２の半減期延長ドメインの該抗体もしくはその断片を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該抗体もしくはその断片及び該第２の半減期延長ドメインの該抗体もしくはその断片を指すことができることが理解される。
【０２８２】
該抗体またはその断片は、任意の抗体またはその断片であり得る。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、ＦｃＲｎ媒介性リサイクリングが可能な任意の重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）等の、ＦｃＲｎ媒介性リサイクリングが可能な任意の抗体またはその断片である。しかしながら、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、マスクされたサイトカインの一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインかまたは該第２の半減期延長ドメインかのどちらかが、軽鎖ポリペプチド等の、ＦｃＲｎ受容体に結合しない抗体またはその断片を含んでもよい。例えば、該マスクされたサイトカインの一部の実施形態では、第１の半減期延長ドメインは、ＦｃＲｎ受容体と直接相互作用しない軽鎖ポリペプチドまたはその一部分を含む、抗体またはその断片を含むが、それにもかかわらず、該マスクされたサイトカインは、重鎖ポリペプチドを含むことによって等で、ＦｃＲｎ受容体と相互作用することができる第２の半減期延長ドメインを含むことに起因して、延長された半減期を有する。ＦｃＲｎ媒介性リサイクリングは、ＦｃＲｎ受容体による該抗体またはその断片のＦｃ領域への結合を必要とすることが当該技術分野で認識されている。例えば、残基Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｈ４３５、及びＹ４３６（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付けシステムによる番号付け）が、ヒトＦｃ領域とヒトＦｃＲｎ複合体との間の相互作用に重要であることが研究により示されている。例えば、Ｆｉｒａｎ，Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３（２００１）９９３−１００２、Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２００１）６５９１−６６０４）を参照されたい。残基２４８〜２５９、３０１〜３１７、３７６〜３８２、及び４２４〜４３７の種々の変異体（Ｋａｂａｔ  ＥＵインデックス番号付けシステムによる番号付け）もまた調査され、報告されている（Ｙｅｕｎｇ，Ｙ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８２（２００９）７６６７−７６７１）。
【０２８３】
一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、重鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドのいずれかを含む。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、重鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドのいずれかの一部分を含む。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、ＣＨ２及びＣＨ３ドメインまたはその断片を含む。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、重鎖ポリペプチドの定常ドメインを含む。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、軽鎖ポリペプチドの定常ドメインを含む。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、重鎖ポリペプチドまたはその断片（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含む。一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、軽鎖ポリペプチドを含む。
【０２８４】
一部の実施形態では、重鎖ポリペプチドは、配列番号１５８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、軽鎖ポリペプチドは、配列番号１５７のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、重鎖ポリペプチドは、配列番号１５８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、重鎖ポリペプチドは、配列番号１６８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、重鎖ポリペプチドは、配列番号１６８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、重鎖ポリペプチドは、配列番号１６９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、重鎖ポリペプチドは、配列番号１６９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２８５】
一部の実施形態では、軽鎖ポリペプチドは、配列番号１５７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、軽鎖ポリペプチドは、配列番号１７０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、軽鎖ポリペプチドは、配列番号１７０のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２８６】
一部の実施形態では、その断片の抗体は、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。一部の実施形態では、その断片の抗体は、Ｆｃドメインまたはその断片である。
【０２８７】
一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５５のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５６のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号２６５のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号２６５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５５のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むか、または、配列番号７７２のアミノ酸配列に対して約もしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むか、または、配列番号７７３のアミノ酸配列に対して約もしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むか、または、配列番号７７４のアミノ酸配列に対して約もしくは少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２８８】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５４〜１５６、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５４〜１５６、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５４〜１５６、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５４〜１５６、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、表４〜１１に列挙される該第１の半減期延長ドメインのうちのいずれかアミノ酸配列を含み、該第２の半減期延長ドメインは、表４〜１１に列挙される該第１の半減期延長ドメインのうちのいずれかアミノ酸配列を含む。
【０２８９】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９０】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６１６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６１６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６１６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６１６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９１】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号２６５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号２６５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９２】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９３】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６１９のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６１９のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６１９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６１９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９４】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９５】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６２２のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６２２のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６２２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６２２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９６】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９７】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号６２５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号６２５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９８】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０２９９】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７３のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０３００】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７９６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０３０１】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０３０２】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号７７２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号７２１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０３０３】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０３０４】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５８のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５８のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５７のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。
【０３０５】
一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１６８のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１６８のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１６９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、Ｆｃドメインまたはその断片は、配列番号１６９のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０３０６】
一部の実施形態では、半減期延長ドメインは、配列番号１５４〜１５８、１６８〜１７０、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列または本明細書に記載の半減期延長ドメインのうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して１つまたは複数のアミノ酸置換、付加、または欠失を導入することによって等、該半減期延長ドメインのアミノ酸配列に対する１つまたは複数の修飾を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。該１つまたは複数の修飾は、一部の実施形態では、ポリペプチド鎖のヘテロ二量体化を促進する及び／またはポリペプチド鎖のホモ二量体化を抑制する、エフェクター機能を改変する、またはエフェクター機能を強化する、本明細書に開示される任意の修飾または改変を含めた、本明細書に記載の任意の修飾または改変であることができる。
【０３０７】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む重鎖ポリペプチドを含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ；Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ；Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ；Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ；Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ；Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ；Ｄ２６５Ａ；及び／またはＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、Ｎ２９７Ｑ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｐ２３８Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ、Ｓ２６７Ｅ、Ｌ３２８Ｆ、Ｄ２６５Ａ、及びＰ３２９Ｇ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）からなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ２重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ；Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ；またはＶ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、及びＡ３３０Ｓ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ２重鎖ポリペプチドであり、Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、Ａ３３１Ｓ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、及びＶ３０９Ｌ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）からなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ４重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ；Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ；Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ；及び／またはＳ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ２重鎖ポリペプチドであり、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｅ３１８Ａ、Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）からなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。
【０３０８】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む重鎖ポリペプチドを含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ；Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ；Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ；Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか；Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ；Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ；Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ；Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ；Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ；Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ；Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ；Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ；Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ；Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ；Ｋ３３４Ｖ；Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ；Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ；Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ；Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ；Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ；Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか；Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか；Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか；Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ；Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、Ｖ２６４Ｉ；Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ；Ｌ３２８Ｍ；Ｉ３３２Ｅ；Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｅ；Ａ３３０Ｙ；Ｉ３３２Ｄ；Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ；Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｔ；Ｖ２４０Ｉ；Ｖ２６６Ｉ；Ｓ２３９Ｄ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ；Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ；Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ；Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ；Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ；Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ；Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ；Ｓ２３９Ｔ；Ｖ２４０Ｍ；Ｖ２６４Ｙ；Ａ３３０Ｉ；Ｎ３２５Ｔ；Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ；Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか；Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ；Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか；Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか；Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか；Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ；Ｐ２３０Ａ；Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ；Ｅ２７２Ｙ；Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ；Ｆ２７５Ｗ；Ｎ２７６Ｌ；Ｙ２７８Ｔ；Ｖ３０２Ｉ；Ｅ３１８Ｒ；Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４ＩもしくはＳ３２４Ｖ；Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ；Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ；Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ；及び／またはＳ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、Ｌ２３４Ｉ、Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、Ｌ２３５Ｉ、Ｓ２３９Ｄ、Ｓ２３９Ｅ、Ｓ２３９Ｎ、Ｓ２３９Ｑ、Ｓ２３９Ｔ、Ｖ２４０Ｉ、Ｖ２４０Ｍ、Ｆ２４３Ｌ、Ｖ２６４Ｉ、Ｖ２６４Ｔ、Ｖ２６４Ｙ、Ｖ２６６Ｉ、Ｅ２７２Ｙ、Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、Ｋ２７４Ｙ、Ｆ２７５Ｗ、Ｎ２７６Ｌ、Ｙ２７８Ｔ、Ｖ３０２Ｉ、Ｅ３１８Ｒ、Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、Ｓ３２４Ｖ、Ｎ３２５Ｔ、Ｋ３２６Ｉ、Ｋ３２６Ｔ、Ｌ３２８Ｍ、Ｌ３２８Ｉ、Ｌ３２８Ｑ、Ｌ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、Ａ３３０Ｙ、Ａ３３０Ｌ、Ａ３３０Ｉ、Ｉ３３２Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｉ３３２Ｎ、Ｉ３３２Ｑ、Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、及びＴ３３５Ｙからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換（複数可）を含む。
【０３０９】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ；Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ；Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ；Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ；Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ；Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ；Ｄ２６５Ａ；及び／またはＬ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、Ｎ２９７Ｑ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｐ２３８Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ、Ｓ２６７Ｅ、Ｌ３２８Ｆ、Ｄ２６５Ａ、及びＰ３２９Ｇ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）からなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ２  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ；Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ；及び／またはＶ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、及びＡ３３０Ｓ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ２  Ｆｃドメインまたはその断片であり、Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、Ａ３３１Ｓ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、及びＶ３０９Ｌ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）からなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ４  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ；Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ；Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ；及び／またはＳ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ２  Ｆｃドメインまたはその断片であり、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｅ３１８Ａ、Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）からなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。
【０３１０】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、Ｆｃドメインまたはその断片を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ；Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ；Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ；Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか；Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ；Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ；Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ；Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ；Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ；Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ；Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ；Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ；Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ；Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ；Ｋ３３４Ｖ；Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ；Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ；Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ；Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ；Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ；Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか；Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか；Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか；Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ；Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、Ｖ２６４Ｉ；Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ；Ｌ３２８Ｍ；Ｉ３３２Ｅ；Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｅ；Ａ３３０Ｙ；Ｉ３３２Ｄ；Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ；Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｔ；Ｖ２４０Ｉ；Ｖ２６６Ｉ；Ｓ２３９Ｄ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ；Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ；Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ；Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ；Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ；Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ；Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ；Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ；Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ；Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ；Ｓ２３９Ｔ；Ｖ２４０Ｍ；Ｖ２６４Ｙ；Ａ３３０Ｉ；Ｎ３２５Ｔ；Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ；Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか；Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ；Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか；Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎの���ずれか；Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか；Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ；Ｐ２３０Ａ；Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ；Ｅ２７２Ｙ；Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ；Ｆ２７５Ｗ；Ｎ２７６Ｌ；Ｙ２７８Ｔ；Ｖ３０２Ｉ；Ｅ３１８Ｒ；Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４ＩもしくはＳ３２４Ｖ；Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ；Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ；Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ；Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ；及び／またはＳ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、Ｌ２３４Ｉ、Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、Ｌ２３５Ｉ、Ｓ２３９Ｄ、Ｓ２３９Ｅ、Ｓ２３９Ｎ、Ｓ２３９Ｑ、Ｓ２３９Ｔ、Ｖ２４０Ｉ、Ｖ２４０Ｍ、Ｆ２４３Ｌ、Ｖ２６４Ｉ、Ｖ２６４Ｔ、Ｖ２６４Ｙ、Ｖ２６６Ｉ、Ｅ２７２Ｙ、Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、Ｋ２７４Ｙ、Ｆ２７５Ｗ、Ｎ２７６Ｌ、Ｙ２７８Ｔ、Ｖ３０２Ｉ、Ｅ３１８Ｒ、Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、Ｓ３２４Ｖ、Ｎ３２５Ｔ、Ｋ３２６Ｉ、Ｋ３２６Ｔ、Ｌ３２８Ｍ、Ｌ３２８Ｉ、Ｌ３２８Ｑ、Ｌ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、Ａ３３０Ｙ、Ａ３３０Ｌ、Ａ３３０Ｉ、Ｉ３３２Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｉ３３２Ｎ、Ｉ３３２Ｑ、Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、及びＴ３３５Ｙからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換（複数可）を含む。
【０３１１】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、該半減期延長ドメインのＦｃＲｎへの結合を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換（複数可）を含む。一部の実施形態では、該１つまたは複数のアミノ酸置換（複数可）は、酸性ｐＨでＦｃ含有ポリペプチド（例えば、重鎖ポリペプチドまたはＦｃドメインもしくはその断片）のＦｃＲｎに対する結合親和性を増加させる。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、Ｍ４２８Ｌ；Ｔ２５０Ｑ及びＭ４２８Ｌ；Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ；Ｐ２５７Ｉ及びＮ４３４Ｈ；Ｄ３７６Ｖ及びＮ４３４Ｈ；Ｐ２５７Ｉ及びＱ３１１１；Ｎ４３４Ａ；Ｎ４３４Ｗ；Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ；Ｖ２５９Ｉ及びＶ３０８Ｆ；Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ；Ｖ２５９Ｉ、Ｖ３０８Ｆ、及びＭ４２８Ｌ；Ｔ３０７Ｑ及びＮ４３４Ａ；Ｔ３０７Ｑ及びＮ４３４Ｓ；Ｔ３０７Ｑ、Ｅ３８０Ａ、及びＮ４３４Ａ；Ｖ３０８Ｐ及びＮ４３４Ａ；Ｎ４３４Ｈ；ならびにＶ３０８Ｐからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸置換（複数可）を含む。
【０３１２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、該マスクされたサイトカインの１つのコピーの該半減期延長ドメインが該マスクされたサイトカインの第２のコピーの対応する半減期延長ドメインとジスルフィド結合を形成することによって形成される、二量体である。
【０３１３】
２．アルブミン
アルブミン（本明細書でヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）とも称される）は、そのサイズ、及び細胞内分解を阻止するＦｃＲｎ媒介性リサイクリングに対するその感受性に起因して、およそ３週間という延長された血清半減期を有する天然の担体タンパク質である。故に、マスクされたサイトカインをアルブミンに連結することにより、該マスクされたサイトカインの半減期が大幅に延長され得る。この手法は、治療上有益なタンパク質の血漿半減期を延長するために採用されてきた。例えば、ＷＯ２００１／０７９２７１Ａ１及びＷＯ２００３／５９９３４Ａ２を参照されたく、これらの内容は参照により本明細書に援用される。その成熟形態でのＨＳＡは、配列番号１７１に示されるような５８５アミノ酸のポリペプチドである。
【０３１４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、アルブミンポリペプチドまたはその断片もしくはバリアント（これ以降、「アルブミン」または「アルブミンポリペプチド」と称される）を含む半減期延長ドメインを含む。本明細書で使用されるとき、「アルブミン」及び「アルブミンポリペプチド」という用語は、アルブミンの断片ならびにアルブミンのバリアントを含む。該アルブミンポリペプチドは、アミノ末端及びカルボキシ末端を含む。該アルブミンポリペプチドは、その任意の断片またはバリアントを含めた、任意のアルブミンポリペプチド、例えば、ＷＯ２００１／０７９２７１Ａ１、ＷＯ２００３／５９９３４Ａ２、ＵＳ２０１６０１５２６８６Ａ１、ＷＯ２０１２／０５９４８６、ＷＯ２０１１／１２４７１８、ＵＳ２００７００４８２８２（これらの内容は参照により本明細書に援用される）に記載される任意のアルブミンポリペプチドであり得る。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、ＨＳＡである。
【０３１５】
該マスクされたサイトカインの一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、アルブミンポリペプチドを含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、１つよりも多くのアルブミンポリペプチドを含み、これらの各々が、本明細書に記載のアルブミンポリペプチドのうちのいずれかであり得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含み、これらの各々がアルブミンポリペプチドを含む。「アルブミンポリペプチド」または「該アルブミンポリペプチド」への言及は、単一の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該半減期延長ドメインの該アルブミンポリペプチドを指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該アルブミンポリペプチドを指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第２の半減期延長ドメインの該アルブミンポリペプチドを指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該アルブミンポリペプチド及び該第２の半減期延長ドメインの該アルブミンポリペプチドを指すことができることが理解される。
【０３１６】
一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、マスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、該アルブミンポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、リンカーを介してマスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、該アルブミンポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該リンカーのＮ末端スペーサードメインまたはＣ末端スペーサードメインが、該アルブミンポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該リンカーの切断可能なペプチドが、該アルブミンポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該アルブミンポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、リンカーを介してサイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、該アルブミンポリペプチドのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０３１７】
一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０３１８】
一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、ＨＳＡの断片（任意選択で１つまたは複数のアミノ酸修飾を有する）からなるアルブミンのバリアントである。一部の実施形態では、該ＨＳＡの断片は、野生型ＨＳＡの断片である。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、ＨＳＡドメイン１（配列番号１７１のアミノ酸残基１〜１９４）、ＨＳＡドメイン２（配列番号１７１のアミノ酸残基１９５〜３８７）、ＨＳＡドメイン３（アミノ酸残基３８８〜５８５）、ＨＳＡドメイン１及び２、ＨＳＡドメイン２及び３、ＨＳＡドメイン１及び３、またはＨＳＡドメイン３の２つのコピーを含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、ＨＳＡドメイン１（配列番号１７１のアミノ酸残基１〜１９４）、ＨＳＡドメイン２（配列番号１７１のアミノ酸残基１９５〜３８７）、ＨＳＡドメイン３（アミノ酸残基３８８〜５８５）、ＨＳＡドメイン１及び２、ＨＳＡドメイン２及び３、ＨＳＡドメイン１及び３、またはＨＳＡドメイン３の２つのコピーからなる。
【０３１９】
一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１〜１９４を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１９５〜３８７を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基３８８〜５８５を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１〜３８７を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１９５〜５８５を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１〜１０５を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１２０〜１９４を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１９５〜２９１を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基３１６〜３８７を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基３８８〜４９１を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基５１２〜５８５を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基１〜１９４及び３８８〜５８５を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸残基３８８〜５８５の２つのコピーを含む。
【０３２０】
一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、本明細書に記載のアルブミンポリペプチドの実施形態のうちのいずれかのアミノ酸配列に対する１つまたは複数のアミノ酸修飾によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、血清中の該アルブミンポリペプチドの半減期を増加させる１つまたは複数のアミノ酸修飾を含む、アミノ酸配列を含む。血清中の該アルブミンポリペプチドの半減期を増加させる代表的なアミノ酸修飾には、ＨＳＡのＥ４９２、Ｎ５０３、Ｄ５５０、及び／またはＫ５７３に対して行われるアミノ酸置換が含まれる。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、該アルブミンポリペプチドのＦｃＲｎ受容体に対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸修飾を含む。該アルブミンポリペプチドのＦｃＲｎ受容体に対する親和性を増加させる代表的なアミノ酸修飾には、Ｖ４１８Ｍ、Ｔ４２０Ａ、Ｅ５０５Ｇ、及びＶ５４７Ａが含まれる。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸配列に対する１つまたは複数のアミノ酸修飾によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該アルブミンポリペプチドは、配列番号１７１のアミノ酸配列に対する１つまたは複数のアミノ酸修飾によってもたらされる、アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本明細書に記載のアルブミンポリペプチドのうちのいずれかのアミノ酸配列に対する該１つまたは複数のアミノ酸修飾は、Ｑ４１７Ａ、Ｈ４４０Ｑ、Ｈ４６４Ｑ、Ａ４９０Ｄ、Ｅ４９２Ｇ／Ｔ／Ｐ／Ｈ、Ｖ４９３Ｐ／Ｌ、Ｄ４９４Ｎ／Ｑ／Ａ／Ｅ／Ｐ、Ｅ４９５Ｑ／Ａ、Ｔ４９６Ａ、Ｐ４９９Ａ、Ｋ５００Ｅ／Ｇ／Ｄ／Ａ／Ｓ／Ｃ／Ｐ／Ｈ／Ｆ／Ｎ／Ｗ／Ｔ／Ｍ／Ｙ／Ｖ／Ｑ／Ｌ／Ｉ／Ｒ、Ｅ５０１Ａ／Ｐ／Ｑ、Ｎ５０３Ｋ／Ｄ／Ｈ、Ａ５０４Ｅ、Ｅ５０５Ｋ／Ｄ、Ｔ５０６Ｆ／Ｓ、Ｈ５１０Ｑ、Ｈ５３５Ｑ、Ｋ５３６Ａ、Ｐ５３７Ａ、Ｋ５３８Ａ／Ｈ、Ｔ５４０Ｓ、Ｋ５４１Ａ／Ｄ／Ｇ／Ｎ／Ｅ、Ｅ５４２Ｐ／Ｄ、Ｄ５５０Ｎ、Ｋ５７３Ｙ／Ｗ／Ｐ／Ｈ／Ｆ／Ｖ／Ｉ／Ｔ／Ｎ／Ｓ／Ｇ／Ｍ／Ｃ／Ａ／Ｅ／Ｑ／Ｒ／Ｌ／Ｄ、Ｋ５７４Ｎ、Ｑ５８０Ｋ、Ｌ５７５Ｆ、Ａ５７７Ｔ／Ｅ、Ａ５７８Ｒ／Ｓ、Ｓ５７９Ｃ／Ｔ、Ｑ５８０Ｋ、Ａ５８１Ｄ、Ａ５８２Ｔ、及びＧ５８４Ａからなる群から選択される。一部の実施形態では、本明細書に記載のアルブミンポリペプチドのうちのいずれかのアミノ酸配列に対する該１つまたは複数のアミノ酸修飾は、Ｖ４１８Ｍ、Ｔ４２０Ａ、Ｅ５０５Ｇ、及びＶ５４７Ａからなる群から選択される。
【０３２１】
３．結合タンパク質
血清中のマスクされたサイトカインの半減期を延長するための追加の戦略には、該マスクされたサイトカインを、アルブミン結合タンパク質またはＩｇＧ結合タンパク質等のある特定の結合タンパク質に連結することが含まれる。該結合タンパク質は、アルブミンまたはＩｇＧ等の長期化された半減期を有する血清タンパク質に結合する、任意のタンパク質であり得る。アルブミン及びＩｇＧは、血清中で長い半減期を有することが知られているポリペプチドである。アルブミン結合タンパク質は、血清中のアルブミンに結合するか、または他の様態でそれと会合するため、アルブミン結合タンパク質に連結されているマスクされたサイトカインは、血清中で延長された半減期を表し得る。同様に、ＩｇＧ結合タンパク質は、血清中のＩｇＧに結合するか、または他の様態でそれと会合するため、ＩｇＧ結合タンパク質に連結されているマスクされたサイトカインは、血清中で延長された半減期を表し得る。
【０３２２】
アルブミン結合タンパク質及びそれらを目的とするタンパク質に連結する方法は、例えば、ＷＯ１９９１／０１７４３、ＷＯ２００１／４５７４６、ＷＯ２００２／０７６４８９、ＷＯ２００４／０４１８６５、またはＵＳ２００７０２６９４２２Ａ１に記載され、これらの内容は参照により本明細書に援用される。
【０３２３】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、アルブミン結合タンパク質を含む。該アルブミン結合タンパク質は、例えば、ＷＯ１９９１／０１７４３、ＷＯ２００１／４５７４６、ＷＯ２００２／０７６４８９、ＷＯ２００４／０４１８６５、ＵＳ２００７０２６９４２２Ａ１、ＵＳ２０１６０１５２６８６Ａ１、Ｄｅｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００２），ＪＢＣ  ２７７（３８）：３５０３５−３５０４３に記載されるアルブミン結合タンパク質のうちのいずれかであり得る。
【０３２４】
該マスクされたサイトカインの一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、アルブミン結合タンパク質を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、１つよりも多くのアルブミン結合タンパク質を含み、これらの各々が、本明細書に記載のアルブミン結合タンパク質のうちのいずれかであり得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含み、これらの各々がアルブミン結合タンパク質を含む。「アルブミン結合タンパク質」または「該アルブミン結合タンパク質」への言及は、単一の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該半減期延長ドメインの該アルブミン結合タンパク質を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該アルブミン結合タンパク質を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第２の半減期延長ドメインの該アルブミン結合タンパク質を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該アルブミン結合タンパク質及び該第２の半減期延長ドメインの該アルブミン結合タンパク質を指すことができることが理解される。
【０３２５】
一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、レンサ球菌プロテインＧ（ＳＰＧ）のアルブミン結合ドメイン（ＡＢＤ）を含む。例えば、Ｎｙｇｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎ．（１９８８）１（２）：６９−７４を参照されたい。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、ＳＰＧ株Ｇ１４８のＡＢＤを含む。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、ＳＰＧ株Ｇ１４８のＣ末端アルブミン結合ドメイン３（ＡＢＤ３）を含む。例えば、Ｎｉｌｖｅｂｒａｎｔ  ａｎｄ  Ｈｏｂｅｒ（２０１３），Ｃｏｍｐｕｔ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｏｌ．Ｊ．，６：ｅ２０１３０３００９を参照されたい。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、配列番号１７２のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、配列番号１７２のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０３２６】
一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、天然または合成ペプチドを含む。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、配列番号１７３または１７４のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、配列番号１７３または１７４のアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０３２７】
一部の実施形態では、アルブミン結合ドメインは、配列番号１７２〜１７４のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して１つまたは複数のアミノ酸置換、付加、または欠失を導入することによって等、該アルブミン結合ドメインのアミノ酸配列に対する１つまたは複数の修飾を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０３２８】
一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、アルブミンに結合するかまたは他の様態でそれと会合する、単一ドメイン抗体またはその断片、例えば、ナノボディである。例えば、ＷＯ２００４０４１８６５Ａ２及びＵＳ２００７０２６９４２２Ａ１を参照されたく、これらの内容は参照により本明細書に援用される。一部の実施形態では、単一ドメイン抗体またはその断片は、配列番号２５２〜２５９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、単一ドメイン抗体またはその断片は、配列番号２５２〜２５９からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０３２９】
一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、マスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、該アルブミン結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、リンカーを介してマスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、該アルブミン結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該リンカーのＮ末端スペーサードメインまたはＣ末端スペーサードメインが、該アルブミン結合ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該リンカーの切断可能なペプチドが、該アルブミン結合ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該アルブミン結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該アルブミン結合タンパク質は、リンカーを介してサイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、該アルブミン結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０３３０】
結合タンパク質の別の例は、ＩｇＧ結合タンパク質である。ＩｇＧ結合タンパク質は報告されている。特定のＩｇＧ結合タンパク質及びそれらの用途を含めた、ＩｇＧ結合タンパク質の概説については、例えば、Ｃｈｏｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１６）Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ９（１２）：９９４を参照されたく、これらの内容は参照により本明細書に援用される。
【０３３１】
該マスクされたサイトカインの一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ結合タンパク質を含む。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、１つよりも多くのＩｇＧ結合タンパク質を含み、これらの各々が、本明細書に記載のＩｇＧ結合タンパク質のうちのいずれかであり得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含み、これらの各々がＩｇＧ結合タンパク質を含む。「ＩｇＧ結合タンパク質」または「該ＩｇＧ結合タンパク質」への言及は、単一の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該半減期延長ドメインの該ＩｇＧ結合タンパク質を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該ＩｇＧ結合タンパク質を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第２の半減期延長ドメインの該ＩｇＧ結合タンパク質を指すことができるか、またはそれは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含むマスクされたサイトカインにおける該第１の半減期延長ドメインの該ＩｇＧ結合タンパク質及び該第２の半減期延長ドメインの該ＩｇＧ結合タンパク質を指すことができることが理解される。
【０３３２】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ＩｇＧ結合タンパク質を含む。該ＩｇＧ結合タンパク質は、任意のＩｇＧ結合タンパク質であり得る。該ＩｇＧ結合タンパク質は、例えば、Ｃｈｏｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１６）Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ９（１２）：９９４、ＵＳ２０１４００４６０３７Ａ１に記載される、任意のＩｇＧ結合タンパク質であり得る。例えば、プロテインＡ、Ｇ、Ｌ、及びＺ、ならびにプロテインＬＧ及びＬＡの融合タンパク質を含めた、様々な細菌タンパク質が、哺乳類ＩｇＧに結合することが示されている。例えば、Ｃｈｏｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１６）Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ９（１２）：９９４を参照されたい。一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合タンパク質は、細菌である黄色ブドウ球菌由来のブドウ球菌プロテインＡ（ＳｐＡ）タンパク質、またはその断片もしくはバリアントである。一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合ドメインは、ＳｐＡのＩｇＧ結合ドメイン、またはその断片もしくはバリアントである。一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合ドメインは、ＳｐＡ  ＩｇＧ結合ドメインＥ、Ｄ、Ａ、Ｂ、Ｃ、及びＺ、またはそれらの断片もしくはバリアントのうちの１つまたは複数である。
【０３３３】
一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合ドメインは、配列番号１７５〜１８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合タンパク質は、配列番号１７５〜１８６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して約または少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０３３４】
一部の実施形態では、ＩｇＧ結合ドメインは、配列番号１７５〜１８６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して１つまたは複数のアミノ酸置換、付加、または欠失を導入することによって等、該ＩｇＧ結合ドメインのアミノ酸配列に対する１つまたは複数の修飾を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む。
【０３３５】
一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合タンパク質は、マスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、マスキング部分が、該ＩｇＧ結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合タンパク質は、リンカーを介してマスキング部分に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、該ＩｇＧ結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該リンカーのＮ末端スペーサードメインまたはＣ末端スペーサードメインが、該ＩｇＧ結合ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該リンカーの切断可能なペプチドが、該ＩｇＧ結合ドメインのアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合タンパク質は、サイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、サイトカインまたはその機能的断片が、該ＩｇＧ結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。一部の実施形態では、該ＩｇＧ結合タンパク質は、リンカーを介してサイトカインまたはその機能的断片に連結されている。一部の実施形態では、リンカーが、該ＩｇＧ結合タンパク質のアミノ末端またはカルボキシ末端に連結されている。
【０３３６】
４．抗体誘導体
本明細書に記載のマスクされたサイトカインは代替として、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｃ、二重可変ドメイン（ｄｕａｌ−ｖａｒｉａｂｌｅ  ｄｏｍａｉｎ）（ＤＶＤ）、及びＣｒｏｓｓＭａｂ手法に基づく抗体誘導体を含むがこれらに限定されない、種々の抗体誘導体に連結されてもよい。例えば、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２），ＭＡｂｓ，４（６）：６５３−６６３、ＵＳ２００７００７１６７５Ａ１を参照されたい。該抗体誘導体には、二重特異性抗体またはその断片として操作された抗体誘導体が含まれる。かくして、一部の実施形態では、半減期延長ドメインは、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｃ、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）、ＣｒｏｓｓＭａｂ手法に基づく抗体誘導体、及び二重特異性抗体またはその断片を含むがこれらに限定されない、任意の抗体誘導体、バリアント、またはその融合産物を含むことができる。
【０３３７】
５．ポリアミノ酸配列
血清中のマスクされたサイトカインの半減期を延長するための追加の戦略は、該マスクされたサイトカインをポリアミノ酸配列に連結することによるものである。かくして、一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、ポリアミノ酸配列を含む。ポリアミノ酸配列は、それが該マスクされたサイトカインに連結されている場合に血清中の該マスクされたサイトカインの半減期を延長することができる、任意のポリアミノ酸配列であり得る。ポリアミノ酸配列の例としては、ＰＡＳポリペプチド及びＸＴＥＮポリペプチドが挙げられる。
【０３３８】
一部の実施形態では、ポリアミノ酸配列は、小さなアミノ酸残基プロリン、アラニン、及び任意選択でセリンを含む、ポリペプチド鎖である（ＰＡＳポリペプチド）。ＰＡＳ配列は、治療用タンパク質のインビボでの半減期を延長するための戦略として治療用タンパク質に一般的に連結されるポリエチレングリコール（ＰＥＧ）に類似した生物物理学的性質を有する、親水性かつ非荷電性のポリマーである。例えば、Ｓｃｈｌａｐｓｃｈｙ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２６（８）：４８９−５０１、ＷＯ２００８１５５１３４Ａ１、ＷＯ２０１１１４４７５６Ａ１、ＷＯ２０１６１３０４５１Ａ１を参照されたく、これらの内容は参照により本明細書に援用される。ＰＡＳポリペプチドの治療用タンパク質への付着は、ＰＡＳポリペプチドが付着されていないその本来の状態にある治療用タンパク質と比較して、インビボ及び／またはインビトロでの安定性を増加させることが観察されている。一部の実施形態では、ＰＡＳポリペプチドは、ランダムコイル立体構造を呈する。一部の実施形態では、ＰＡＳポリペプチドは、ランダムコイル立体構造ドメインを形成する。
【０３３９】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、アミノ酸残基プロリン及びアラニンを含むＰＡＳポリペプチドを含む。一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、アミノ酸残基プロリン、アラニン、及びセリンを含むＰＡＳポリペプチドを含む。一部の実施形態では、ＰＡＳポリペプチドは、少なくとも２５アミノ酸残基、少なくとも５０アミノ酸残基、少なくとも１００アミノ酸残基、少なくとも１５０アミノ酸残基、少なくとも２００アミノ酸残基、少なくとも２５０アミノ酸残基、少なくとも３００アミノ酸残基、少なくとも４００アミノ酸残基、少なくとも５００アミノ酸残基、少なくとも６００アミノ酸残基、少なくとも７００アミノ酸残基、少なくとも８００アミノ酸残基、少なくとも９００アミノ酸残基、少なくとも１０００アミノ酸残基、少なくとも１１００アミノ酸残基、少なくとも１２００アミノ酸残基、少なくとも１３００アミノ酸残基、少なくとも１５００アミノ酸残基、少なくとも２０００アミノ酸残基、少なくとも２５００アミノ酸残基、または少なくとも３０００アミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、ＰＡＳポリペプチドは、少なくとも２５アミノ酸残基、少なくとも５０アミノ酸残基、少なくとも１００アミノ酸残基、少なくとも１５０アミノ酸残基、少なくとも２００アミノ酸残基、少なくとも２５０アミノ酸残基、少なくとも３００アミノ酸残基、少なくとも４００アミノ酸残基、少なくとも５００アミノ酸残基、少なくとも６００アミノ酸残基、少なくとも７００アミノ酸残基、少なくとも８００アミノ酸残基、少なくとも９００アミノ酸残基、少なくとも１０００アミノ酸残基、少なくとも１１００アミノ酸残基、少なくとも１２００アミノ酸残基、少なくとも１３００アミノ酸残基、少なくとも１５００アミノ酸残基、少なくとも２０００アミノ酸残基、少なくとも２５００アミノ酸残基、または少なくとも３０００アミノ酸残基を含み、各アミノ酸残基が、プロリンまたはアラニンのいずれかである。一部の実施形態では、ＰＡＳポリペプチドは、少なくとも２５アミノ酸残基、少なくとも５０アミノ酸残基、少なくとも１００アミノ酸残基、少なくとも１５０アミノ酸残基、少なくとも２００アミノ酸残基、少なくとも２５０アミノ酸残基、少なくとも３００アミノ酸残基、少なくとも４００アミノ酸残基、少なくとも５００アミノ酸残基、少なくとも６００アミノ酸残基、少なくとも７００アミノ酸残基、少なくとも８００アミノ酸残基、少なくとも９００アミノ酸残基、少なくとも１０００アミノ酸残基、少なくとも１１００アミノ酸残基、少なくとも１２００アミノ酸残基、少なくとも１３００アミノ酸残基、少なくとも１５００アミノ酸残基、少なくとも２０００アミノ酸残基、少なくとも２５００アミノ酸残基、または少なくとも３０００アミノ酸残基を含み、各アミノ酸残基が、プロリン、アラニン、及びセリンからなる群から選択されるアミノ酸である。
【０３４０】
一部の実施形態では、ポリアミノ酸配列は、延長組換えポリペプチド（ＸＴＥＮポリペプチド）である。ＸＴＥＮポリペプチドは、生理的条件下で二次または三次構造の度合いが低いかまたはそれを何ら有しない、天然に存在しない実質的に非反復的な配列を有するポリペプチドである。ＸＴＥＮポリペプチドは、典型的には、約３６〜約３０００アミノ酸残基を有し、このうちの大部分または全体が、小さな親水性アミノ酸（例えば、アルギニン、リジン、トレオニン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、及びグリシン）である。ＸＴＥＮポリペプチドの物理化学的性質、ならびに非構造化特性は、部分的には、４〜６種類の親水性アミノ酸に偏って限定される全体的なアミノ酸組成、非反復的な設計でのアミノ酸の連結、及びＸＴＥＮポリペプチドの長さからもたらされる。ＸＴＥＮポリペプチドの治療用タンパク質への付着は、治療用タンパク質の溶解性及び安定性を改善すること、ならびにその半減期を強化することが観察されている。例えば、Ｐｏｄｕｓｔ  ｅｔ  ａｌ．（２０１６）Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，２４０：５２−６６、ＷＯ２０１３１３０６８３Ａ２を参照されたく、これらの内容は参照により本明細書に援用される。
【０３４１】
一部の実施形態では、該半減期延長ドメインは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン酸（Ｅ）、及びプロリン（Ｐ）からなる群から選択される４、５、または６種類のアミノ酸残基から成り立つアミノ酸配列を含む、ＸＴＥＮポリペプチドを含む。
【０３４２】
一部の実施形態では、ＸＴＥＮポリペプチドは、約２５〜約５００アミノ酸残基、約２００〜約１０００アミノ酸残基、約５００〜約１５００アミノ酸残基、約１０００〜約２０００アミノ酸残基、または約１５００〜約３０００アミノ酸残基のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、該アミノ酸配列の少なくとも約７０％、７５％、８０％、または８５％は、重複しない配列モチーフからなる。一部の実施形態では、該モチーフの各々は、５〜１００アミノ酸残基、５〜５０アミノ酸残基、または９〜３６アミノ酸残基を有し、該モチーフの各々の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％が、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン酸（Ｅ）、及びプロリン（Ｐ）からなる群から選択される４、５、または６種類のアミノ酸残基からなる。一部の実施形態では、該完全長ＸＴＥＮポリペプチドにおけるいずれの１つのアミノ酸の種類の含有量も、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約１５％、約１０％、または約８％を超えない。
【０３４３】
一部の実施形態では、ＸＴＥＮポリペプチドは、約２５〜約５００アミノ酸残基、約２００〜約１０００アミノ酸残基、約５００〜約１５００アミノ酸残基、約１０００〜約２０００アミノ酸残基、または約１５００〜約３０００アミノ酸残基のアミノ酸配列を含み、該アミノ酸配列の少なくとも約８０％が、重複しない配列モチーフからなり、該モチーフの各々が、９〜３６アミノ酸残基を有し、該モチーフの各々の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％が、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン酸（Ｅ）、及びプロリン（Ｐ）からなる群から選択される４、５、または６種類のアミノ酸残基からなり、該完全長ＸＴＥＮポリペプチドにおけるいずれの１つのアミノ酸の種類の含有量も、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約１５％、約１０％、または約８％を超えない。
【０３４４】
６．ＰＥＧ化及びグリコシル化
本明細書に提供されるマスクされたサイトカインの半減期を延長するための追加の戦略には、ＰＥＧ化、及び追加のグリコシル化部位の操作が含まれる。これらの戦略の各々が、下記でさらに詳細に考察される。
【０３４５】
「ＰＥＧ化」は、分子及びマクロ構造、例えば、薬物、治療用タンパク質、ポリペプチド、抗体、抗体断片、抗体誘導体への、または本明細書に提供されるマスクされたサイトカインもしくはその構成要素（例えば、マスクされたサイトカインの該半減期延長ドメイン及び／または該マスクされたサイトカインの該サイトカインもしくはその機能的断片）のうちのいずれかへの、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ポリマー鎖の共有結合性または非共有結合性の付着または融合のプロセスを指す。ＰＥＧ化の便益には、例えば、（１）該ポリマーにより分子の見かけのサイズが糸球体濾過の限度を上回って増加した結果としての腎クリアランスの回避、及び／または細胞クリアランス機構の回避によるもののいずれかに起因する、インビボでの循環半減期の顕著な改善、（２）ＰＥＧが付着した分子の抗原性及び免疫原性の低減、（３）薬物動態の改善、（４）溶解性の改善、（５）製剤化及び投薬選択肢の改善、（６）皮下注射部位での損失低減による生物学的利用能の改善、（７）ＰＥＧ化分子の熱及び機械的安定性の改善が含まれる。
【０３４６】
種々の分子及びマクロ構造をペグ化するための方法は、当該技術分野で周知である。例えば、ＵＳ２０１４０２５６６３６Ａ１、Ｆｅｅ  ａｎｄ  Ｄａｍｏｄａｒａｎ（２０１０）Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ，１５（１）：１８−２６、Ｃｈａｐｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１７：７８０−７８３、Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００３），Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．，１６（１０）：７６１−７７０、Ｃｈａｐｍａｎ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ．Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．（２００２），５４（４）：５３１−５４５を参照されたく、これらの内容は参照により本明細書に援用される。
【０３４７】
一部の実施形態では、本明細書の実施形態のうちのいずれかのマスクされたサイトカインは、ＰＥＧ化される。例えば、一部の実施形態では、これは、ＰＥＧの該タンパク質（例えば、半減期延長ドメイン、またはサイトカインもしくはその機能的断片）へのコンジュゲーションが、アミノ、カルボキシル、スルフヒドリル、またはグアニジン基等の該タンパク質の特定の側鎖基に標的指向化され得るように、ＰＥＧを基特異的な試薬で官能化することによって達成される。一部の実施形態では、システイン（Ｃ）残基が、部位特異的様態での該タンパク質（例えば、半減期延長ドメイン、またはサイトカインもしくはその機能的断片）の中へのアミノ酸置換によって導入される。次いで、新たに導入されたシステイン残基のチオール基が、マレイミド（ｍａｌｅｍｉｄｅ）の化学反応に基づくＰＥＧ試薬を用いてＰＥＧ化の標的とされ得る。セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）のシステインとの置き換えは、修飾されたタンパク質の正味電荷がＰＥＧ化の結果として変化することがないという点で利点を有する。かくして、一部の実施形態では、該サイトカインもしくはその機能的断片のうちのいずれか及び／または該半減期延長ドメインのうちのいずれか等の、該マスクされたサイトカインの構成要素が、ＰＥＧ化のためのシステイン残基を導入することによって修飾され得るか、またはさらに修飾され得る。
【０３４８】
「グリコシル化」は、糖またはグリコシル基のポリペプチドへの付加を指す。ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には、Ｎ結合型またはＯ結合型のいずれかである。Ｎ結合型は、炭水化物部分の、アスパラギン残基の側鎖への付着を指す。トリペプチド配列であるアスパラギン−Ｘ−セリン（Ｎ−Ｘ−Ｓ）及びアスパラギン−Ｘ−トレオニン（Ｎ−Ｘ−Ｔ）（ここで、Ｘは、プロリン（Ｐ）を除く任意のアミノ酸である）は、炭水化物部分のアスパラギン側鎖への酵素的付着のための認識配列である。故に、ポリペプチドにおけるこれらのトリペプチド配列のいずれかの存在は、潜在的なグリコシル化部位を作出する。Ｏ結合型グリコシル化は、糖（例えば、Ｎ−アセチルガラクトサミン（ａｃｅｙｌｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ）、ガラクトース、またはキシロース）のうちの１つの、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはトレオニンへの付着を指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンもまた使用され得る。
【０３４９】
天然に存在するグリコシル化は、タンパク質の分子安定性を増加させることが示されている。例えば、Ｓｏｌａ  ｅｔ  ａｌ．（２００７），Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．，６４（１６）：２１３３−２１５２を参照されたい。追加のグリコシル化部位の操作が、ほとんどの主要な物理化学的不安定性に対して様々なタンパク質治療薬を安定化し得ることもまた示されている。例えば、Ｓｏｌａ  ａｎｄ  Ｇｒｉｅｂｅｎｏｗ（２００９），Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，９８（４）：１２２３−１２４５を参照されたい。グリコシル化によって改善されることが示されている、薬学的に関連性のあるタンパク質の不安定性の中には、例えば、酸化；架橋；ｐＨにより、化学的に、熱的に、及び凍結により誘発される変性／アンフォールディング；沈殿；動態学的活性化；ならびに凝集がある（同文献より）。
【０３５０】
該マスクされたサイトカインへのグリコシル化部位の付加は、該マスクされたサイトカインのアミノ酸配列において（例えば、該半減期延長ドメイン及び／または該サイトカインもしくはその機能的断片のアミノ酸配列において）上述のトリペプチド配列（Ｎ結合型グリコシル化部位のため）のうちの１つまたは複数が作出されるように該アミノ酸配列を改変することによって、好都合に遂行される。改変はまた、該マスクされたサイトカインのアミノ酸配列における（例えば、該半減期延長ドメイン及び／または該サイトカインもしくはその機能的断片のアミノ酸配列における）１つまたは複数のセリンまたはトレオニン残基への付加、またはその置換（Ｏ結合型グリコシル化部位のため）によって行われてもよい。
【０３５１】
一部の実施形態では、本明細書の実施形態のうちのいずれかのマスクされたサイトカインは、該マスクされたサイトカインまたはその構成要素のアミノ酸配列に１つまたは複数の追加のＮ−Ｘ−Ｓ及び／またはＮ−Ｘ−Ｔトリペプチド配列（複数可）が導入されるように（１つまたは複数のＮ結合型グリコシル化部位の付加のため）、該マスクされたサイトカインのアミノ酸配列（例えば、該半減期延長ドメイン及び／または該サイトカインもしくはその機能的断片のアミノ酸配列）を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている。一部の実施形態では、本明細書の実施形態のうちのいずれかのマスクされたサイトカインは、該マスクされたサイトカインまたはその構成要素のアミノ酸配列に１つまたは複数の追加のセリンまたはトレオニン残基が導入されるように（１つまたは複数のＯ結合型グリコシル化部位の付加のため）、該マスクされたサイトカインまたはその構成要素のアミノ酸配列（例えば、該半減期延長ドメイン及び／または該サイトカインもしくはその機能的断片のアミノ酸配列）を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている。一部の実施形態では、１つもしくは複数のＮ結合型グリコシル化部位の付加のため及び／または１つもしくは複数のＯ結合型グリコシル化部位の付加のためのアミノ酸配列の改変は、該マスクされたサイトカインまたはその構成要素のアミノ酸配列への１つまたは複数のアミノ酸の付加によって遂行される。一部の実施形態では、１つもしくは複数のＮ結合型グリコシル化部位の付加のため及び／または１つもしくは複数のＯ結合型グリコシル化部位の付加のためのアミノ酸配列の改変は、該マスクされたサイトカインまたはその構成要素のアミノ酸配列における１つまたは複数のアミノ酸の置換によって遂行される。一部の実施形態では、１つもしくは複数のＮ結合型グリコシル化部位の付加のため及び／または１つもしくは複数のＯ結合型グリコシル化部位の付加のためのアミノ酸配列の改変は、該マスクされたサイトカインまたはその構成要素のアミノ酸配列への１つまたは複数のアミノ酸の付加によって、及び該マスクされたサイトカインまたはその構成要素のアミノ酸配列における１つまたは複数のアミノ酸の置換によって遂行される。
【０３５２】
７．ヘテロ二量体化修飾
本明細書に記載の半減期延長ドメインは、２つの異なる半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を促進する１つまたは複数の修飾を含んでもよい。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、その正しいヘテロ二量体形態にある該マスクされたサイトカインの産生が効率的に産生されるように、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を促進することが望ましい。かくして、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２），ＭＡｂｓ，４（６）：６５３−６６３に記載されるような任意の戦略を含めた、当該技術分野で利用可能な任意の戦略を用いて、該第１の半減期延長ドメインに対して１つまたは複数のアミノ酸修飾を行うことができ、また該第２の半減期延長ドメインに対して１つまたは複数のアミノ酸修飾を行うことができる。代表的な戦略及び修飾が、下記に詳述される。
【０３５３】
ａ．ノブ・イントゥ・ホール手法
２つの異なる半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を促進するための１つの戦略は、「ノブ・イントゥ・ホール」と呼ばれる手法である。
【０３５４】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含み、これらの各々がＣＨ３ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＨ３ドメインを含む該半減期延長ドメインは、重鎖ポリペプチドまたはその断片（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）である。該２つの半減期延長ドメインのＣＨ３ドメインは、「ノブ・イントゥ・ホール」技術によって改変することができ、この技術は、例えば、ＷＯ１９９６／０２７０１１、Ｒｉｄｇｗａｙ，Ｊ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．（１９９６）９（７）：６１７−６２１、Ｍｅｒｃｈａｎｔ，Ａ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（１９９８）１６（７）：６７７−６８１にいくつかの例とともに詳述される。また、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２），ＭＡｂｓ，４（６）：６５３−６６３も参照されたい。ノブ・イントゥ・ホール法を用いて、該２つのＣＨ３ドメインの相互作用表面が、該２つの改変されたＣＨ３ドメインを含有する該２つの半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を増加させるように改変される。これは、「ノブ」として作用する、かさ高い残基を該半減期延長ドメインのうちの一方のＣＨ３ドメインに導入することによって生じる。次いで、かさ高い残基を受け入れるために、他方の半減期延長ドメインに、ノブを受け入れることができる「ホール」が形成される。改変されたＣＨ３ドメインのうちのどちらかが「ノブ」であり得る一方で、他方が「ホール」であり得る。ジスルフィド架橋の導入は、ヘテロ二量体をさらに安定化すると同時に（Ｍｅｒｃｈａｎｔ，Ａ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（１９９８）１６（７）、Ａｔｗｅｌｌ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９９７）２７０（１）：２６−３５）、収率を増加させる。
【０３５５】
重鎖においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入して「ノブ」を作出し、かつ重鎖においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入して「ホール」を作出することによって、ヘテロ二量体化の９７％超の収率が達成され得ることが報告されている（残基の番号付けはＫａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムによる）。Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１），Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２４８：７−１５、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２），ＭＡｂｓ，４（６）：６５３−６６３。
【０３５６】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、「ノブ」を作出する１つまたは複数のアミノ酸変異を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含み、該第２の半減期延長ドメインは、「ホール」を作出する１つまたは複数のアミノ酸変異を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、「ホール」を作出する１つまたは複数のアミノ酸変異を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含み、該第２の半減期延長ドメインは、「ノブ」を作出する１つまたは複数のアミノ酸変異を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含む。重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）においてホールまたはノブを導入するための方法は、当該技術分野において既知であり、例えば、ＷＯ１９９６／０２７０１１、Ｒｉｄｇｗａｙ，Ｊ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．（１９９６）９（７）：６１７−６２１、Ｍｅｒｃｈａｎｔ，Ａ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（１９９８）１６（７）：６７７−６８１、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２），ＭＡｂｓ，４（６）：６５３−６６３にある。
【０３５７】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、アミノ酸変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含み、該第２の半減期延長ドメインは、アミノ酸変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、アミノ酸変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含み、該第２の半減期延長ドメインは、アミノ酸変異Ｓ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含み、該第２の半減期延長ドメインは、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＦｃドメインまたはその断片を含む。
【０３５８】
ノブ及びホールを形成させるために行うことができる置換の追加の例としては、ＵＳ２０１４０３０２０３７Ａ１に記載されるものが挙げられ、この内容は参照により本明細書に援用される。例えば、一部の実施形態では、各々Ｆｃドメインを含有する第１の半減期延長ドメイン（「第１のドメイン」）及び対合される第２の半減期延長ドメイン（「第２のドメイン」）に対して以下のアミノ酸置換のうちのいずれかを行うことができる：（ａ）第１のドメインにおけるＹ４０７Ｔ及び第２のドメインにおけるＴ３６６Ｙ、（ｂ）第１のドメインにおけるＹ４０７Ａ及び第２のドメインにおけるＴ３６６Ｗ、（ｃ）第１のドメインにおけるＦ４０５Ａ及び第２のドメインにおけるＴ３９４Ｗ、（ｄ）第１のドメインにおけるＦ４０５Ｗ及び第２のドメインにおけるＴ３９４Ｓ、（ｅ）第１のドメインにおけるＹ４０７Ｔ及び第２のドメインにおけるＴ３６６Ｙ、（ｆ）第１のドメインにおけるＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａならびに第２のドメインにおけるＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ、（ｇ）第１のドメインにおけるＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗならびに第２のドメインにおけるＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ、（ｈ）第１のドメインにおけるＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａならびに第２のドメインにおけるＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ、または（ｉ）第１のドメインにおけるＴ３６６Ｗならびに第２のドメインにおけるＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。
【０３５９】
一部の実施形態では、各々Ｆｃドメインを含有する第１の半減期延長ドメイン（「第１のドメイン」）及び対合される第２の半減期延長ドメイン（「第２のドメイン」）に対して以下のアミノ酸置換のうちのいずれかを行うことができる：（ａ）第２のドメインにおけるＹ４０７Ｔ及び第１のドメインにおけるＴ３６６Ｙ、（ｂ）第２のドメインにおけるＹ４０７Ａ及び第１のドメインにおけるＴ３６６Ｗ、（ｃ）第２のドメインにおけるＦ４０５Ａ及び第１のドメインにおけるＴ３９４Ｗ、（ｄ）第２のドメインにおけるＦ４０５Ｗ及び第１のドメインにおけるＴ３９４Ｓ、（ｅ）第２のドメインにおけるＹ４０７Ｔ及び第１のドメインにおけるＴ３６６Ｙ、（ｆ）第２のドメインにおけるＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａならびに第１のドメインにおけるＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ、（ｇ）第２のドメインにおけるＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗならびに第１のドメインにおけるＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ、（ｈ）第２のドメインにおけるＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａならびに第１のドメインにおけるＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ、ｏｒ（ｉ）第２のドメインにおけるＴ３６６Ｗならびに第１のドメインにおけるＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。
【０３６０】
各々Ｆｃドメインを含む第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、複数の実施形態では、本明細書に記載のヘテロ二量体を形成させる改変のうちのいずれかをＦｃドメインにおいて用いて、本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかのヘテロ二量体化を促進することができる。例えば、本明細書に記載のヘテロ二量体を形成させる改変のうちのいずれか（それらの組み合わせを含む）を用いて、配列番号１５４〜１５６、１５８、１６８、１６９、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を改変することができる。
【０３６１】
ｂ．イオン／静電相互作用
２つの異なる半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を促進するための別の戦略は、荷電残基を改変することによりヘテロ二量体化に有利となるようイオン相互作用を安定化することによるものである。
【０３６２】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含み、これらの各々がＣＨ３ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＨ３ドメインを含む該半減期延長ドメインは、重鎖ポリペプチドまたはその断片（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）である。２つの異なるＦｃドメイン間の電荷極性を改変することにより、ホモ二量体化を抑制する一方でヘテロ二量体化に有利となるようなイオン相互作用がもたらされ得ることが観察されている。例えば、ＷＯ２００６／１０６９０５Ａ１、Ｇｕｎａｓｅｋａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）２８５（２５）：１９６３７−１９６４６を参照されたい。例えば、あるＦｃドメインの負に荷電したＥ３５６対は、別のＦｃドメインの正に荷電したＫ４３９と対合し、第１のＦｃドメインの負に荷電したＥ３５７、Ｅ３５７、及びＤ３９９は、第２のＦｃドメインの正に荷電したＫ４３９、Ｋ３７０、及びＫ４０９とそれぞれ対合することが観察された。ＷＯ２００６／１０６９０５Ａ１、Ｇｕｎａｓｅｋａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）２８５（２５）：１９６３７−１９６４６を参照されたい。かくして、第１のＦｃドメインにおけるＥ３５６Ｋ、Ｅ３５７Ｋ、及びＤ３９９Ｋの変異、ならびに第２のＦｃドメイン内の変異Ｋ３７０Ｅ、Ｋ４０９Ｄ、及びＫ４３９Ｅのうちの少なくとも２つを導入することによって、ホモ二量体形成を抑制しながら効率的なヘテロ二量体化が達成され得る（同文献より）。第１のＦｃ鎖においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ第２のＦｃ鎖においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入することによって、効率的なヘテロ二量体化が達成された。Ｇｕｎａｓｅｋａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１０）２８５（２５）：１９６３７−１９６４６。
【０３６３】
荷電したアミノ酸対に対して行うことができる置換の追加の例としては、ＵＳ２０１４０３０２０３７Ａ１に記載されるものが挙げられ、この内容は参照により本明細書に援用される。例えば、一部の実施形態では、各々Ｆｃドメインを含有する第１の半減期延長ドメイン（「第１のドメイン」）及び対合される第２の半減期延長ドメイン（「第２のドメイン」）に対して以下のアミノ酸置換のうちのいずれかを行うことができる：（ａ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｅ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｂ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｅ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｃ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｄ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｅ）第１のドメインにおけるＫ３９２Ｅ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｆ）第１のドメインにおけるＫ３９２Ｅ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｇ）第１のドメインにおけるＫ３９２Ｄ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｈ）第１のドメインにおけるＫ３９２Ｄ及び第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｉ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ、（ｊ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ、（ｋ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ、（ｌ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｍ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ、（ｎ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ、（ｏ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＤ３５７Ｋ、（ｐ）第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋならびに第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ、及び／または（ｑ）第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄならびに第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。
【０３６４】
一部の実施形態では、各々Ｆｃドメインを含有する第１の半減期延長ドメイン（「第１のドメイン」）及び対合される第２の半減期延長ドメイン（「第２のドメイン」）に対して以下のアミノ酸置換のうちのいずれかを行うことができる：（ａ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｅ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｂ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｅ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｃ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｄ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｅ）第２のドメインにおけるＫ３９２Ｅ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｆ）第２のドメインにおけるＫ３９２Ｅ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｇ）第２のドメインにおけるＫ３９２Ｄ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｒ、（ｈ）第２のドメインにおけるＫ３９２Ｄ及び第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｉ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ、（ｊ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ、（ｋ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ、（ｌ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ、（ｍ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ、（ｎ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ、（ｏ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＤ３５７Ｋ、（ｐ）第２のドメインにおけるＤ３９９Ｋならびに第１のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ、及び／または（ｑ）第２のドメインにおけるＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄならびに第１のドメインにおけるＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。
【０３６５】
一部の実施形態では、各々Ｆｃドメインを含有する第１の半減期延長ドメイン（「第１のドメイン」）及び対合される第２の半減期延長ドメイン（「第２のドメイン」）に対して以下のアミノ酸置換のうちのいずれかを行うことができる：（ａ）第１のドメインにおけるＫ４０９ＤもしくはＫ４０９Ｅ及び第２のドメインにおけるＤ３９９ＫもしくはＤ３９９Ｒ、（ｂ）第１のドメインにおけるＫ３９２ＤもしくはＫ３９２Ｅ及び第２のドメインにおけるＤ３９９ＫもしくはＤ３９９Ｒ、（ｃ）第１のドメインにおけるＫ４３９ＤもしくはＫ４３９Ｅ及び第２のドメインにおけるＥ３５６ＫもしくはＥ３５６Ｒ、及び／または（ｄ）第１のドメインにおけるＫ３７０ＤもしくはＫ３７０Ｅ及び第２のドメインにおけるＥ３５７ＫもしくはＥ３５７Ｒ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。
【０３６６】
一部の実施形態では、各々Ｆｃドメインを含有する第１の半減期延長ドメイン（「第１のドメイン」）及び対合される第２の半減期延長ドメイン（「第２のドメイン」）に対して以下のアミノ酸置換のうちのいずれかを行うことができる：（ａ）第２のドメインにおけるＫ４０９ＤもしくはＫ４０９Ｅ及び第１のドメインにおけるＤ３９９ＫもしくはＤ３９９Ｒ、（ｂ）第２のドメインにおけるＫ３９２ＤもしくはＫ３９２Ｅ及び第１のドメインにおけるＤ３９９ＫもしくはＤ３９９Ｒ、（ｃ）第２のドメインにおけるＫ４３９ＤもしくはＫ４３９Ｅ及び第１のドメインにおけるＥ３５６ＫもしくはＥ３５６Ｒ、及び／または（ｄ）第２のドメインにおけるＫ３７０ＤもしくはＫ３７０Ｅ及び第１のドメインにおけるＥ３５７ＫもしくはＥ３５７Ｒ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。
【０３６７】
各々Ｆｃドメインを含む第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、ヘテロ二量体を安定化するために、該第１の半減期延長ドメイン及び該第２の半減期延長ドメインの両方において以下の置換のうちの１つまたは複数がさらに含まれてもよい：Ｒ３５５Ｄ、Ｒ３５５Ｅ、Ｋ３６０Ｄ、及びＫ３６０Ｒ。
【０３６８】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、ホモ二量体化を抑制しながら該第２の半減期延長ドメインとの相互作用の安定化を促進する１つまたは複数の変異を含む、重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含み、該第２の半減期延長ドメインは、ホモ二量体化を抑制しながら該第１の半減期延長ドメインとの相互作用の安定化を促進する１つまたは複数の変異を含む。
【０３６９】
第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、アミノ酸変異Ｋ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含み、該第２の半減期延長ドメインは、アミノ酸変異Ｄ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）を含む重鎖ポリペプチドまたはその一部分（例えば、Ｆｃドメインまたはその断片）を含む。
【０３７０】
各々Ｆｃドメインを含む第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、複数の実施形態では、本明細書に記載のヘテロ二量体を形成させる改変のうちのいずれかをＦｃドメインにおいて用いて、本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかのヘテロ二量体化を促進することができる。例えば、本明細書に記載のヘテロ二量体を形成させる改変のうちのいずれか（それらの組み合わせを含む）を用いて、配列番号１５４〜１５６、１５８、１６８、１６９、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を改変することができる。
【０３７１】
ｃ．構造及び配列に基づく手法
２つの異なる半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を促進するための別の戦略は、構造及び配列に基づく手法を用いて、ヘテロ二量体化を促進し得る及び／またはホモ二量体化を抑制し得る改変を特定することによるものである。
【０３７２】
ヘテロ二量体化を促進する改変を特定する方法の中には、ＣＨ３−ＣＨ３二量体の界面にわたって相互作用する残基のために、構造計算を実施して、対合されたバリアントの組み合わせのエネルギーを決定することによるものがあり、Ｍｏｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）３（６）：５４６−５５７（この内容は参照により本明細書に援用される）において採用される手法も同様であった。Ｍｏｏｒｅらは、さらなる分析のための開始点として、ホモ二量体の形態と比べてヘテロ二量体の形態でより低いエネルギーを有することが予測される対を特定した。第１のＦｃドメインにおいてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ第２のＦｃドメインにおいてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入することによって、ヘテロ二量体化の８９％の収率が達成され得ることが観察された（同文献より）。
【０３７３】
各々Ｆｃドメインを含む第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第１の半減期延長ドメインは、Ｓ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａのアミノ酸変異を含み、該第２の半減期延長ドメインは、Ｙ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆのアミノ酸変異を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。各々Ｆｃドメインを含む第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、一部の実施形態では、該第２の半減期延長ドメインは、Ｓ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａのアミノ酸変異を含み、該第１の半減期延長ドメインは、Ｙ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆのアミノ酸変異を含む（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）。
【０３７４】
各々Ｆｃドメインを含む第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインを含む、複数の実施形態では、本明細書に記載のヘテロ二量体を形成させる改変のうちのいずれかをＦｃドメインにおいて用いて、本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかのヘテロ二量体化を促進することができる。例えば、本明細書に記載のヘテロ二量体を形成させる改変のうちのいずれか（それらの組み合わせを含む）を用いて、配列番号１５４〜１５６、１５８、１６８、１６９、２６５、６１６、６１９、６２２、６２５、７２１、７７２〜７７４、７９３、及び７９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を改変することができる。
【０３７５】
Ｅ．結合アッセイ
例えば、サイトカインまたはその機能的断片と、該サイトカインまたはその機能的断片が特異性をもつ結合パートナー（例えば、サイトカイン受容体等の標的タンパク質）との間の免疫学的結合相互作用の強度、またはその親和性は、相互作用の解離定数（Ｋｄ）の点から表すことができ、ここで、より小さいＫｄは、より大きい親和性を表す。例えば、ＩＬ−２サイトカインのＩＬ−２Ｒサイトカイン受容体（例えば、ＩＬ−２Ｒまたは、ＩＬ−２Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、ＩＬ−２Ｒγもしくはそれらの組み合わせ等のその構成要素）への結合は、Ｋｄの点から表すことができる。一部の実施形態では、免疫学的結合相互作用は、（プロテアーゼの存在または不在下での）マスクされたサイトカインとサイトカイン受容体等の標的タンパク質との間のものである。ＩＬ−２サイトカイン結合の関連において、標的タンパク質は、ＩＬ−２Ｒ（ＩＬ−２Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、及びＩＬ−２Ｒγ鎖を含む）、ＩＬ−２Ｒα鎖、ＩＬ−２Ｒβ鎖、またはＩＬ−２Ｒα／β二量体複合体であり得る。タンパク質の免疫学的結合性質は、当該技術分野で周知の方法を用いて定量することができる。例えば、１つの方法は、サイトカイン受容体（例えば、ＩＬ−２Ｒ）／サイトカイン（例えば、ＩＬ−２）の複合体形成及び解離の速度を測定することを含み、ここで、それらの速度は、複合体パートナーの濃度、相互作用の親和性、及び両方向の速度に等しく影響を及ぼす幾何学的パラメータに依存する。「オン速度定数」（Ｋｏｎ）及び「オフ速度定数」（Ｋｏｆｆ）のいずれも、濃度ならびに会合及び解離の実際の速度の計算によって決定することができる。Ｋｏｆｆ／Ｋｏｎの比は、親和性に関連しない全てのパラメータの解除を可能にし、解離定数Ｋｄに等しい。Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎｕａｌ  Ｒｅｖ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．５９：４３９−４７３，（１９９０）を参照されたい。
【０３７６】
一部の態様では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、プロテアーゼにより切断されると、マスキング部分を含むが切断可能なペプチドは含まない親サイトカインと比較したときに、およそ同じまたはより高い親和性で標的タンパク質に結合する。標的タンパク質は、任意のサイトカイン受容体であり得る。一部の実施形態では、標的タンパク質は、ＩＬ−２Ｒ（ＩＬ−２Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、及びＩＬ−２Ｒγ鎖を含む）である。一部の実施形態では、標的タンパク質は、ＩＬ−２Ｒαである。一部の実施形態では、標的タンパク質は、ＩＬ−２Ｒβである。一部の実施形態では、標的タンパク質は、ＩＬ−２Ｒα／β二量体複合体である。一部の実施形態では、標的タンパク質は、ＩＬ−１５Ｒ（ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、及びＩＬ−２Ｒγ鎖を含む）であるか、または、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、もしくはＩＬ−２Ｒγまたはそれらの組み合わせ等のその構成要素である。
【０３７７】
一部の実施形態では、リンカーにおいて切断可能なペプチドを含まない、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、標的タンパク質に対して≦１μＭ、≦１５０ｎＭ、≦１００ｎＭ、≦５０ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば、１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。一部の実施形態では、リンカーにおいて切断可能なペプチドを含む、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、プロテアーゼにより切断可能な前に、標的タンパク質に対して≦１μＭ、≦１５０ｎＭ、≦１００ｎＭ、≦５０ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば、１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。一部の実施形態では、リンカーにおいて切断可能なペプチドを含む、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、プロテアーゼにより切断されると、標的タンパク質に対して≦１μＭ、≦１５０ｎＭ、≦１００ｎＭ、≦５０ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば、１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインのサイトカインまたはその機能的断片は、該マスクされたサイトカインのマスキング部分に対して≧５００μＭ、≧２５０μＭ、≧２００μＭ、≧１５０μＭ、≧１００μＭ、≧５０μＭ、≧１０μＭ、≧１μＭ、≧５００ｎＭ、≧２５０ｎＭ、≧１５０ｎＭ、≧１００ｎＭ、≧５０ｎＭ、≧１０ｎＭ、≧１ｎＭ、≧０．１ｎＭ、≧０．０１ｎＭ、または≧０．００１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を有する。一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインのサイトカインまたはその機能的断片は、約２００μＭ〜約５０ｎＭの間、例えば、約もしくは少なくとも約１７５μＭ、約もしくは少なくとも約１５０μＭ、約もしくは少なくとも約１２５μＭ、約もしくは少なくとも約１００μＭ、約もしくは少なくとも約７５μＭ、約もしくは少なくとも約５０μＭ、約もしくは少なくとも約２５μＭ、約もしくは少なくとも約５μＭ、約もしくは少なくとも約１μＭ、約もしくは少なくとも約７５０ｎＭ、約もしくは少なくとも約５００ｎＭ、約もしくは少なくとも約２５０ｎＭ、約もしくは少なくとも約１５０ｎＭ、約もしくは少なくとも約１００ｎＭ、約もしくは少なくとも約７５ｎＭ、または約もしくは少なくとも約５０ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を有する。結合親和性を評価するためのアッセイは、当該技術分野で周知である。
【０３７８】
一部の態様では、所望の閉塞率を表すマスクされたサイトカインが提供される。本明細書で使用される「閉塞率」という用語は、（ａ）第１の条件の組の下でのあるパラメータの最大検出レベルの、（ｂ）第２の条件の組の下でのそのパラメータの最小検出値に対する比を指す。例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドの関連において、閉塞率は、（ａ）マスクされたＩＬ−２ポリペプチドの切断可能なペプチドを切断することができる少なくとも１つのプロテアーゼの存在下での、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドへの標的タンパク質（例えば、ＩＬ−２Ｒタンパク質）の結合の最大検出レベルの、（ｂ）該プロテアーゼの不在下での、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドへの標的タンパク質（例えば、ＩＬ−２Ｒタンパク質）の結合の最小検出レベルに対する比を指す。故に、マスクされたサイトカインについての閉塞率は、切断前のマスクされたサイトカインのＥＣ５０を切断後のマスクされたサイトカインのＥＣ５０で除することによって計算することができる。マスクされたサイトカインの閉塞率はまた、プロテアーゼによる切断前のマスクされたサイトカインの解離定数の、プロテアーゼによる切断後のマスクされたサイトカインの解離定数に対する比として計算することもできる。一部の実施形態では、マスクされたサイトカインについての閉塞率がより高いことは、マスクされたサイトカインが結合した標的タンパク質が、マスクされたサイトカインの切断可能なペプチドを切断することができるプロテアーゼの存在下で、プロテアーゼの不在下でよりも高い程度に存在する（例えば、優勢的に存在する）ことを示す。
【０３７９】
一部の実施形態では、最適な閉塞率を有するマスクされたサイトカインが本明細書に提供される。一部の実施形態では、マスクされたサイトカインの閉塞率が最適であることは、マスクされたサイトカインが、本明細書で企図される方法または組成物に有用な望ましい性質を有することを示す。一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、約２〜約１０，０００、例えば、約８０〜約１００の最適な閉塞率を表す。本明細書に提供されるマスクされたサイトカインのうちのいずれかのさらなる実施形態では、閉塞率は、約２〜約７，５００、約２〜約５，０００、約２〜約２，５００、約２〜約２，０００、約２〜約１，０００、約２〜約９００、約２〜約８００、約２〜約７００、約２〜約６００、約２〜約５００、約２〜約４００、約２〜約３００、約２〜約２００、約２〜約１００、約２〜約５０、約２〜約２５、約２〜約１５、約２〜約１０、約５〜約１０、約５〜約１５、約５〜約２０、約１０〜約１００、約２０〜約１００、約３０〜約１００、約４０〜約１００、約５０〜約１００、約６０〜約１００、約７０〜約１００、約８０〜約１００、または約１００〜約１，０００である。一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、約２〜約１，０００の最適な閉塞率を表す。プロテアーゼによる切断前及び／または切断後の、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドの標的タンパク質への結合は、ＥＬＩＳＡによって等、当該技術分野で周知の技法を用いて決定することができる。
【０３８０】
一部の実施形態では、本明細書に記載のマスキング部分は、本明細書に記載されるようなサイトカインまたはその機能的断片と標的タンパク質（例えば、サイトカイン受容体）との間の親和性よりも低い親和性で、該サイトカインまたはその機能的断片に結合する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供されるマスキング部分は、≧５００μＭ、≧２５０μＭ、≧２００μＭ、≧１５０μＭ、≧１００μＭ、≧５０μＭ、≧１０μＭ、≧１μＭ、≧５００ｎＭ、≧２５０ｎＭ、≧１５０ｎＭ、≧１００ｎＭ、≧５０ｎＭ、≧１０ｎＭ、≧１ｎＭ、≧０．１ｎＭ、≧０．０１ｎＭ、または≧０．００１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）で、本明細書に記載されるようなサイトカインまたはその機能的断片に結合する。
【０３８１】
ＩＩ．マスクされたサイトカインの産生
本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、当該技術分野で利用可能な技法を用いて調製され、これらのうちの代表的な方法が記載される。
【０３８２】
Ａ．抗体産生
該マスクされたサイトカインの一部の実施形態は、抗体またはその断片を含む。以下の節は、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインの一部の実施形態で使用され得る、抗体及び抗体断片、そのバリアント及び誘導体の産生に関するさらなる詳細を提供する。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、ジスルフィド結合を介して会合しているマスクされたサイトカインの２つのコピーによってもたらされる、二量体の形態にある。
【０３８３】
１．抗体断片
本発明は、一部の実施形態では、抗体断片を包含する。抗体断片は、数ある断片の中でもＦｃドメイン、重鎖の一部分、軽鎖の一部分、Ｆａｂ、Ｆｖ、またはｓｃＦｖ等の任意の抗体断片であり得る。抗体断片は、酵素的消化等の慣習的な手段によって、または組換え技法によって生成されてもよい。ある特定の状況では、全抗体ではなく抗体断片を本明細書に記載のマスクされたサイトカインに連結することの利点がある。ある特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４を参照されたい。
【０３８４】
抗体断片の産生のために種々の技法が開発されてきた。慣習的には、これらの断片は、インタクトな抗体のタンパク質分解消化を介して得られた（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７−１１７（１９９２）、及びＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照されたい）。しかしながら、これらの断片は今では、組換え宿主細胞によって直接産生させることができる。Ｆａｂ、Ｆｖ、及びＳｃＦｖ抗体断片は全て、Ｅ．ｃｏｌｉならびにＨＥＫ２９３及びＣＨＯ細胞等の他の細胞種において発現させ、それから分泌させることができ、故に、これらの断片の容易な大量産生が可能となる。代替として、Ｆａｂ’−ＳＨ断片を培養基から直接回収し、化学的にカップリングして、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成させることができる（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７（１９９２））。別の手法によると、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組換え宿主細胞培養物から直接単離することができる。ＦｃＲＮ／サルベージ受容体結合エピトープ残基を含む、インビボ半減期が増加したＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片が、米国特許第５，８６９，０４６号に記載される。マスクされたサイトカインに使用するための抗体断片を産生させるための他の技法は、当業者に明らかであろう。ある特定の実施形態では、マスクされたサイトカインは、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）を含む。ＷＯ９３／１６１８５、米国特許第５，５７１，８９４号、及び同第５，５８７，４５８号を参照されたい。ｓｃＦｖ融合タンパク質は、ｓｃＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかでエフェクタータンパク質の融合を生み出すように構築され得る。Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｅｄ．Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ（上記）を参照されたい。また、一部の実施形態では、ポリペプチドリンカーを介して連結された２つのｓｃＦｖを含むｂｉ−ｓｃＦｖが、マスクされたサイトカインとともに使用され得る。
【０３８５】
本発明は、一部の実施形態では、直鎖状抗体（例えば、米国特許第５，６４１，８７０号に記載されるようなもの）、または適切なリンカーを介して連結された抗体の重鎖及び軽鎖配列を含む一本鎖免疫グロブリンを含む。かかる直鎖状抗体または免疫グロブリンは、単一特異性または二重特異性であり得る。かかる一本鎖免疫グロブリンを二量体化させて、それによって、元々は四量体である抗体の構造及び活性に類似した構造及び活性を維持させることができる。また、一部の実施形態では、該抗体またはその断片は、単一の重鎖可変領域を有し、かつ軽鎖配列は何ら有しない抗体であってもよい。かかる抗体は、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）またはナノボディと呼ばれる。これらの抗体もまた、本発明による抗体の機能的断片の意味に包含される。抗体断片は、本明細書に提供される手引きに従って、本明細書に記載のマスクされたサイトカインに連結され得る。
【０３８６】
２．ヒト化抗体
本発明は、一部の実施形態では、ヒト化抗体またはその抗体断片を包含する。一部の実施形態では、ヒト化抗体は、任意の抗体断片を含めた任意の抗体であり得る。非ヒト抗体をヒト化するための種々の方法は、当該技術分野で既知である。例えば、ヒト化抗体は、非ヒトである供給源からそれに導入された１つまたは複数のアミノ酸残基を有し得る。これらの非ヒトアミノ酸残基は、「インポート」残基と称される場合が多く、これらの残基は、典型的には、「インポート」可変ドメインから得られる。ヒト化は、本質的に、Ｗｉｎｔｅｒの方法（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６）に従って、超可変領域の配列でヒト抗体の対応する配列を置換することによって実施することができる。したがって、かかる「ヒト化」抗体は、キメラ抗体において、インタクトなヒト可変ドメインよりも相当に小さい部分が、非ヒト種由来の対応する配列によって置換されたものである（米国特許第４，８１６，５６７号）。実際には、ヒト化抗体は、典型的には、ヒト抗体において、いくつかの超可変領域の残基、及び場合によってはいくつかのＦＲ残基が、齧歯類抗体における類似の部位からの残基によって置換されているものである。ヒト化抗体は、本明細書に提供される手引きに従って、本明細書に記載のマスクされたサイトカインに連結され得る。
【０３８７】
３．ヒト抗体
本発明の一部の実施形態のヒト抗体は、ヒト由来のファージディスプレイライブラリから選択されたＦｖクローン可変ドメイン配列（複数可）を既知のヒト定常ドメイン配列（複数可）と組み合わせることによって構築することができる。代替として、本発明の一部の実施形態のヒトモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法によって、例えば、マウス、ラット、ウシ（例えば、カウ）、またはウサギ細胞を用いて、例えば、ヒトモノクローナル抗体を産生させることによって、作製することができる。一部の実施形態では、ヒト抗体及びヒトモノクローナル抗体は、任意の抗原に結合する抗体であり得る。一部の実施形態では、本発明のヒトモノクローナル抗体は、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を含む非ヒト動物を標的抗原で免疫化し、抗体を免疫化された動物または免疫化された動物に由来する細胞から単離することによって作製することができる。好適な非ヒト動物の例としては、ＨｕＭＡｂマウス（登録商標）（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．）、ＫＭマウス（登録商標）「ＴＣマウス」、及びＸｅｎｏｍｏｕｓｅ（商標）等の、トランスジェニックまたはトランスクロモソミック（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍｉｃ）動物が挙げられる。例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６−８５９、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４：８４５−８５１、ＷＯ２００２／４３４７８、米国特許第５，９３９，５９８号、同第６，０７５，１８１号、同第６，１１４，５９８号、同第６，１５０，５８４号、同第６，１６２，９６３号、及びＴｏｍｉｚｕｋａ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：７２２−７２７を参照されたい。
【０３８８】
ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒト異種骨髄腫（ｈｅｔｅｒｏｍｙｅｌｏｍａ）細胞株が、例えば、Ｋｏｚｂｏｒ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）によって記載された。ヒト抗体は、本明細書に提供される手引きに従って、本明細書に記載のマスクされたサイトカインに連結され得る。
【０３８９】
４．二重特異性抗体
二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる抗原に対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、ヒトまたはヒト化抗体である。一部の実施形態では、この結合特異性のうちの一方は、第１の抗原に対するものであり、他方の結合特異性は、第２の抗原に対するものであり、これらの抗原は、同じ標的タンパク質上の２つの異なるエピトープか、または２つの異なる標的タンパク質上の２つの異なるエピトープかのどちらであってもよい。二重特異性抗体はまた、細胞傷害性薬剤を、第１の抗原及び／または第２の抗原を発現する細胞に局在させるためにも使用され得る。二重特異性抗体はまた、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞等の細胞を動員して、ある特定の細胞、例えばがん細胞を殺傷するためにも使用され得る。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片（例えば、Ｆ（ａｂ’）２二重特異性抗体）として調製され得る。二重特異性抗体は、本明細書に提供される手引きに従って、本明細書に記載のマスクされたサイトカインに連結され得る。
【０３９０】
二重特異性抗体を作製するための方法は、当該技術分野で既知である。Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ，３０５：５３７（１９８３）、１９９３年５月１３日に公開されたＷＯ  ９３／０８８２９、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１０：３６５５（１９９１）、Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ，Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ，２０（７）：８３８−８４７を参照されたい。二重特異性抗体の生成のさらなる詳細については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１２１：２１０（１９８６）を参照されたい。二重特異性抗体には、架橋抗体または「ヘテロコンジュゲート」抗体が含まれる。例えば、ヘテロコンジュゲートにおける抗体のうちの一方をアビジンにカップリングし、他方をビオチンにカップリングすることができる。ヘテロコンジュゲート抗体は、任意の好都合な架橋方法を用いて作製され得る。好適な架橋剤は、当該技術分野で周知であり、いくつかの架橋技法とともに、米国特許第４，６７６，９８０号に開示される。
【０３９１】
５．単一ドメイン抗体
一部の実施形態では、単一ドメイン抗体が、本明細書に提供される手引きに従って、マスクされたサイトカインに連結される。単一ドメイン抗体は、任意の抗体であり得る。単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部分または軽鎖可変ドメインの全てもしくは一部分を含む、単一のポリペプチド鎖である。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍａｓｓ．、例えば、米国特許第６，２４８，５１６Ｂ１号を参照されたい）。一部の実施形態では、単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てまたは一部分からなる。一部の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ラクダ科動物を標的抗原で免疫化することによって得られるラクダ科動物由来抗体である。一部の実施形態では、単一ドメイン抗体は、サメを標的抗原で免疫化することによって得られるサメ由来抗体である。一部の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ナノボディである（例えば、ＷＯ２００４０４１８６５Ａ２及びＵＳ２００７０２６９４２２Ａ１を参照されたい）。
【０３９２】
６．抗体バリアント
一部の実施形態では、本明細書に記載の抗体またはその断片のアミノ酸配列の修飾（複数可）が企図される。例えば、抗体のＦｃＲｎ結合親和性及び／またはｐＨ依存性ＦｃＲｎ結合親和性を改善することが望ましい場合がある。ある特定のアミノ酸修飾を導入することによって抗体重鎖のヘテロ二量体化を促進することもまた望ましい場合がある。ヘテロ二量体化を容易にするために行うことができるある特定の修飾を含めた、抗体鎖のヘテロ二量体化を促進するための方法が、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２），ＭＡｂｓ，４（６）：６５３−６６３によって記載される。
【０３９３】
抗体のアミノ酸配列バリアントは、抗体をコードするヌクレオチド配列に適切な変化を導入することによって、またはペプチド合成によって調製され得る。かかる修飾には、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／またはそれへの挿入及び／またはその置換が含まれる。最終構築物が所望の特性を有する限り、欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせを行って、最終構築物に到達することができる。対象となる抗体の配列が作製された時点で、アミノ酸改変がその抗体のアミノ酸配列に導入されてもよい。
【０３９４】
変異誘発に好ましい箇所である、抗体のある特定の残基または領域の特定に有用な方法は、「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれ、これはＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５に記載されるようなものである。この方法では、標的残基のうちのある残基または標的残基の群が特定され（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕ等の荷電残基）、中性または負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）と置き換えて、当該アミノ酸と抗原との相互作用に影響を及ぼすようにする。次いで、置換に対して機能的感受性を示すアミノ酸の箇所が、その置換部位における、またはその置換部位の代わりとなる、さらなるまたは他のバリアントを導入することによって精査される。故に、アミノ酸配列の変化を導入するための部位は既定であるが、変異の性質はそれ自体、既定である必要はない。例えば、所与の部位での変異の性能を分析するために、ａｌａスキャニングまたはランダム変異誘発が標的コドンまたは領域で実施され、発現された免疫グロブリンが所望の活性に関してスクリーニングされる。
【０３９５】
アミノ酸配列挿入には、１個の残基から１００個以上の残基を含有するポリペプチドの範囲の長さであるアミノ末端及び／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内（ｉｎｔｒａｓｅｑｕｅｎｃｅ）挿入が含まれる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入バリアントには、抗体の血清半減期を増加させる酵素またはポリペプチドの、抗体のＮ末端またはＣ末端への融合が含まれる。
【０３９６】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、ヒンジ領域の近傍でのプロテアーゼ切断を排除するか、低減するか、または他の様態で妨げるように修飾されている。ＩｇＧの「ヒンジ領域」は一般に、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスによるヒトＩｇＧ１のＥ２１６を含みかつＰ２３０で終結するように定義されるが、機能的には、鎖の柔軟な部分は、Ｅ２１６〜Ｇ２３７等、上部ヒンジ領域及び下部ヒンジ領域と呼ばれる追加の残基を含むと見なされ得（Ｒｏｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６１：４０８３）、下部ヒンジは、ＦｃγＲ結合に概して関与するとされたＦｃ領域の残基２３３〜２３９として言及されている。本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかに対する修飾は、例えば、ＵＳ２０１５０１３９９８４Ａ１（同文献は参照により本明細書に援用される）に記載される方法に従って、ならびに、同文献に記載の修飾のうちのいずれかを組み込むことによって実施することができる。
【０３９７】
一部の実施形態では、薬物動態を改善するＦｃＲｎ変異には、Ｍ４２８Ｌ、Ｔ２５０Ｑ／Ｍ４２８Ｌ、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ、Ｐ２５７Ｉ／Ｎ４３４Ｈ、Ｄ３７６Ｖ／Ｎ４３４Ｈ、Ｐ２５７Ｉ／Ｑ３１１１、Ｎ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｗ、Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ、Ｖ２５９Ｉ／Ｖ３０８Ｆ、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ、Ｖ２５９Ｉ／Ｖ３０８Ｆ／Ｍ４２８Ｌ、Ｔ３０７Ｑ／Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ｑ／Ｎ４３４Ｓ、Ｔ３０７Ｑ／Ｅ３８０Ａ／Ｎ４３４Ａ、Ｖ３０８Ｐ／Ｎ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｈ、Ｖ３０８Ｐが含まれるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、かかる変異は、低ｐＨでＦｃＲｎへの抗体結合を強化するが、中性ｐＨでは抗体の親和性を変化させない。
【０３９８】
ある特定の実施形態では、抗体またはその断片は、抗体がグリコシル化される程度を増加させるかまたは減少させるように改変される。ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には、Ｎ結合型またはＯ結合型のいずれかである。Ｎ結合型は、炭水化物部分の、アスパラギン残基の側鎖への付着を指す。トリペプチド配列であるアスパラギン−Ｘ−セリン及びアスパラギン−Ｘ−トレオニン（ここで、Ｘは、プロリンを除く任意のアミノ酸である）は、炭水化物部分のアスパラギン側鎖への酵素的付着のための認識配列である。故に、ポリペプチドにおけるこれらのトリペプチド配列のいずれかの存在は、潜在的なグリコシル化部位を作出する。Ｏ結合型グリコシル化は、糖であるＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つの、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはトレオニンへの付着を指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンもまた使用され得る。
【０３９９】
マスクされたサイトカインへのグリコシル化部位の付加または欠失は、上述のトリペプチド配列（Ｎ結合型グリコシル化部位のため）のうちの１つまたは複数が作出されるかまたは除去されるようにアミノ酸配列を改変することによって、好都合に遂行される。改変はまた、元の抗体の配列への１つまたは複数のセリンまたはトレオニン残基の付加、欠失、または置換（Ｏ結合型グリコシル化部位のため）によって行われてもよい。
【０４００】
抗体またはその断片がＦｃ領域を含む場合、それに付着した炭水化物が改変されてもよい。例えば、フコースを欠いている成熟炭水化物構造がＦｃ領域に付着した抗体が、米国特許出願第ＵＳ２００３／０１５７１０８（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）号に記載される。また、ＵＳ２００４／００９３６２１（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）も参照されたい。抗体のＦｃ領域に付着した炭水化物において分岐Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）を有する抗体が、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔら）及び米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａら）で参照される。抗体のＦｃ領域に付着したオリゴ糖において少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体が、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌら）で報告される。また、改変された炭水化物が抗体のＦｃ領域に付着した抗体に関する、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）及びＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）も参照されたい。また、修飾されたグリコシル化を有する抗原結合分子に関して、ＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａら）も参照されたい。
【０４０１】
ある特定の実施形態では、グリコシル化バリアントは、Ｆｃ領域に付着した炭水化物構造がフコースを欠いているかまたは低化したフコースを有する、Ｆｃ領域を含む。かかるバリアントは、改善されたＡＤＣＣ機能を有する。任意選択で、Ｆｃ領域は、ＡＤＣＣをさらに改善する１つまたは複数のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８位、３３３位、及び／または３３４位の置換（Ｅｕによる残基の番号付け）をその中にさらに含む。「脱フコシル化」または「フコース欠損」抗体に関する刊行物の例としては、ＵＳ２００３／０１５７１０８、ＷＯ２０００／６１７３９、ＷＯ２００１／２９２４６、ＵＳ２００３／０１１５６１４、ＵＳ２００２／０１６４３２８、ＵＳ２００４／００９３６２１、ＵＳ２００４／０１３２１４０、ＵＳ２００４／０１１０７０４、ＵＳ２００４／０１１０２８２、ＵＳ２００４／０１０９８６５、ＷＯ２００３／０８５１１９、ＷＯ２００３／０８４５７０、ＷＯ２００５／０３５５８６、ＷＯ２００５／０３５７７８、ＷＯ２００５／０５３７４２、Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９−１２４９（２００４）、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生する細胞株の例としては、タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３−５４５（１９８６）、米国特許出願第ＵＳ２００３／０１５７１０８  Ａ１号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ）、及びＷＯ２００４／０５６３１２  Ａ１（Ａｄａｍｓら）、特に実施例１１）、及びアルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子ＦＵＴ８ノックアウトＣＨＯ細胞等のノックアウト細胞株（Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４））、ならびにβ１，４−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴ−ＩＩＩ）及びゴルジμ−マンノシダーゼＩＩ（ＭａｎＩＩ）を過剰発現している細胞が挙げられる。
【０４０２】
本明細書の実施形態のうちのいずれかでは、該マスクされたサイトカインは、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性を改善するように操作され得る。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、アルファ１，６−フコシルトランスフェラーゼ（Ｆｕｔ８）ノックアウトを有する細胞株において産生されてもよい。一部の実施形態では、当該宿主細胞は、低減された内因性のアルファ１，６−フコシル化活性を有するように修飾されている。哺乳類宿主細胞においてフコシル化経路を修飾するための方法の例は、例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ａｎｄ  Ｓａｔｏｈ，ＭＡｂｓ，１（３）：２３０−２３６（２００９）に見出すことができ、この内容は参照により本明細書に援用される。ＦＵＴ８遺伝子の発現を部分的にまたは完全に不活性化するための方法及び組成物の例は、例えば、米国公開第２０１６０１９４６６５Ａ１号、ＷＯ２００６１３３１４８Ａ２に見出すことができ、これらの内容は参照により本明細書に援用される。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、ＣＨＯ細胞のＬｅｃ１３バリアント（例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７７（３０）：２６７３３−４０（２００２）を参照されたい）、または低減されたＦＵＴ８活性を有するＹＢ２／０細胞株において産生される（例えば、Ｓｈｉｎｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７８（５）：３４６６−７３（２００３）を参照されたい）。一部の実施形態では、アルファ１，６−フコシル化に関連する遺伝子に対する低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を導入することができる（例えば、Ｍｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．８８（７）：９０１−９０８（２００４）、Ｉｍａｉ−Ｎｉｓｈｉｙａ  ｅｔ  ａｌ．，ＢＭＣ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７：８４（２００７）、Ｏｍａｓａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｅｎｇ．，１０６（２）：１６８−１７３（２００８）を参照されたい）。一部のさらなる実施形態では、該マスクされたサイトカインは、β１，４−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴ−ＩＩＩ）を過剰発現している細胞株において産生されてもよい。さらなる実施形態では、この細胞株は追加として、ゴルジμ−マンノシダーゼＩＩ（ＭａｎＩＩ）を過剰発現する。本明細書の実施形態のうちのいくつかでは、該マスクされたサイトカインは、Ｆｃ領域に、ＡＤＣＣ活性を改善する少なくとも１つのアミノ酸置換を含んでもよい。
【０４０３】
一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、その血清半減期を改善するように改変される。サイトカインの血清半減期を増加させるために、例えば、米国特許第５，７３９，２７７号に記載されるように、ＦｃＲＮ／サルベージ受容体結合エピトープを連結された抗体（特に抗体断片）に組み込んでもよい。本明細書で使用されるとき、「サルベージ受容体結合エピトープ」という用語は、ＩｇＧ分子のインビボ血清半減期を増加させることを担う、ＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）のＦｃ領域のエピトープを指す（ＵＳ２００３／０１９０３１１、米国特許第６，８２１，５０５号、米国特許第６，１６５，７４５号、米国特許第５，６２４，８２１号、米国特許第５，６４８，２６０号、米国特許第６，１６５，７４５号、米国特許第５，８３４，５９７号）。
【０４０４】
別の種類のバリアントは、アミノ酸置換バリアントである。これらのバリアントは、抗体分子において少なくとも１つのアミノ酸残基が異なる残基と置き換えられている。置換変異誘発の関心対象となる部位には、超可変領域が含まれるが、ＦＲ改変もまた企図される。保存的置換が、表３において「好ましい置換」という見出しの下に示される。かかる置換が生物学的活性の望ましい変化をもたらす場合、表３において「代表的な置換」と称される、またはアミノ酸のクラスを参照して下記にさらに記載されるようなより実質的な変化が導入され、生成物がスクリーニングされてもよい。
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【０４０５】
抗体の生物学的性質における実質的な修飾は、（ａ）例えば、シートもしくはヘリックス状の立体構造としての、置換の領域におけるポリペプチド骨格の構造、（ｂ）標的部位での分子の電荷もしくは疎水性度、または（ｃ）側鎖のかさ、を維持することに対するそれらの効果が著しく異なる置換を選択することによって遂行される。アミノ酸は、それらの側鎖の性質の類似性に従って下記のように群分けされ得る（Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄ．，ｐｐ．７３−７５，Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９７５））。
（１）非極性：Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｒｐ（Ｗ）、Ｍｅｔ（Ｍ）
（２）非荷電極性：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｔｈｒ（Ｔ）、Ｃｙｓ（Ｃ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ｇｌｎ（Ｑ）
（３）酸性：Ａｓｐ（Ｄ）、Ｇｌｕ（Ｅ）
（４）塩基性：Ｌｙｓ（Ｋ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｈｉｓ（Ｈ）
【０４０６】
代替として、天然に存在する残基は、共通の側鎖の性質に基づいて下記のように群に分類され得る。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ
【０４０７】
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つに属する成員を別のクラスと交換することを伴う。そのように置換された残基がまた、保存的置換部位に、または残りの（保存されていない）部位に導入されてもよい。
【０４０８】
別の種類の置換バリアントは、天然に存在するアミノ酸残基の、天然に存在しないアミノ酸残基との置換を伴う。天然に存在しないアミノ酸残基は、例えば、ｔＲＮＡリコーディング（ｒｅｃｏｄｉｎｇ）により、または、例えば、ＷＯ２０１６１５４６７５Ａ１（同文献は参照により本明細書に援用される）に記載されるような方法のうちのいずれかにより、導入することができる。
【０４０９】
１つの種類の置換バリアントは、親抗体（例えば、ヒト化またはヒト抗体）の１つまたは複数の超可変領域残基を置換することを伴う。一般に、さらなる開発のために選択される、結果として生じるバリアント（複数可）は、それらが生成される元となる親抗体と比べて修飾された（例えば、改善された）生物学的性質を有することになる。かかる置換バリアントを生成するための好都合な方法は、ファージディスプレイ、酵母ディスプレイ、または哺乳類ディスプレイを用いた親和性成熟を伴う。簡潔に述べると、いくつかの超可変領域部位（例えば、６〜７つの部位）が、各部位での全ての可能なアミノ酸置換を生成するように変異させられる。そのようにして生成された抗体は、繊維状ファージ粒子から、各粒子内にパッケージングされたファージコートタンパク質（例えば、Ｍ１３の遺伝子ＩＩＩ産物）の少なくとも一部との融合体として提示される。次いで、ファージディスプレイされたバリアントは、それらの生物学的活性（例えば、結合親和性）に関してスクリーニングされる。修飾の候補となる超可変領域部位を特定するために、スキャニング変異誘発（例えば、アラニンスキャニング）を実施して、抗原結合に著しく寄与する超可変領域残基を特定することができる。代替として、または追加として、抗原−抗体複合体の結晶構造を分析して、抗体と抗原との間の接触点を特定することが有益であり得る。かかる接触残基及び隣接残基は、本明細書に詳述される技法を含めた当該技術分野で既知の技法に従った置換の候補である。ひとたびかかるバリアントが生成されると、バリアントのパネルが、本明細書に記載の技法を含めた当該技術分野で既知の技法を用いたスクリーニングに供され、１つまたは複数の関連性のあるアッセイにおいて優れた性質を有する抗体が、さらなる開発のために選択され得る。
【０４１０】
マスクされたサイトカインのアミノ酸配列バリアントをコードする核酸分子は、当該技術分野で既知の様々な方法によって調製される。これらの方法は、例えば、天然源からの単離（天然に存在するアミノ酸配列バリアントの場合）またはオリゴヌクレオチド媒介性（または部位特異的）変異誘発による調製、ＰＣＲ変異誘発、及び抗体の事前に調製されたバリアントまたは非バリアントバージョンのカセット変異誘発が含まれるが、これらに限定されない。
【０４１１】
本発明の抗体のＦｃ領域において１つまたは複数のアミノ酸修飾を導入し、それによって、Ｆｃ領域バリアントを生成することが望ましい場合がある。このＦｃ領域バリアントは、ヒンジシステインのアミノ酸位置を含む１つまたは複数のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含む、ヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域）を含んでもよい。
【０４１２】
一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、強化されたエフェクター機能を有するＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプを有する抗体またはその断片を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、強化されたエフェクター機能を有するＩｇＧ１アイソタイプを有する抗体またはその断片を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカイン（例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片）は、強化されたエフェクター機能を有するＩｇＧ１アイソタイプを有する。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、脱フコシル化されている。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、増加したレベルのマンノース部分を有する。一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインは、増加したレベルの分岐グリカン部分を有する。一部の実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸変異を含む。
【０４１３】
一部の実施形態では、本明細書に提供されるマスクされたサイトカインは、ＩｇＧ１アイソタイプ（例えば、ヒトＩｇＧ１アイソタイプ）を有する抗体を含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ１は、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤまたはＡ３３９Ｑを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓを、Ｓ２９８ＤまたはＳ２９８Ｖとともにまたはそれなしで含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａを、Ｋ３２６Ｅとともにまたはそれなしで含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａを、Ｋ３２６Ｅとともにまたはそれなしで含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３３４Ｖを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、またはＳ２９８Ｔを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、またはＡ３３０Ｆを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭまたはＡ３３０Ｆのいずれかを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭまたはＡ３３０Ｆのいずれかを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭまたはＳ２９８Ｔのいずれかを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、またはＥ２９４Ｌを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹまたはＫ２９０Ｙのいずれかを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。
【０４１４】
一部の実施形態では、ＩｇＧ１は、エフェクター機能を減少させるかまたは阻害する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、またはＮ２９７Ｑを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｌ２３４ＡまたはＬ２３５Ａを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。一実施形態では、ＩｇＧ１は、アミノ酸置換Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆを含み、ここで、アミノ酸残基は、ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックスにより番号付けされる。
【０４１５】
この明細書及び当該技術分野の教示に従って、一部の実施形態では、該マスクされたサイトカインの抗体またはその断片が、例えばＦｃ領域において、野生型の対応抗体と比較したときに１つまたは複数の改変を含み得ることが企図される。例えば、例えばＷＯ９９／５１６４２に記載されるような、改変された（すなわち、改善または減弱のいずれか）Ｃ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）をもたらすであろう、ある特定の改変をＦｃ領域において行うことができると考えられる。また、Ｆｃ領域バリアントの他の例に関して、Ｄｕｎｃａｎ  ＆  Ｗｉｎｔｅｒ  Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：７３８−４０（１９８８）、米国特許第５，６４８，２６０号、米国特許第５，６２４，８２１号、及びＷＯ９４／２９３５１も参照されたい。ＷＯ００／４２０７２（Ｐｒｅｓｔａ）及びＷＯ２００４／０５６３１２（Ｌｏｗｍａｎ）は、ＦｃＲへの結合が改善または減弱した抗体バリアントについて記載している。これらの特許公報の内容は、参照により本明細書に明確に援用される。また、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６６０４（２００１）も参照されたい。半減期が増加し、かつ母体ＩｇＧの胎児への移行を担う胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善した抗体（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））が、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎら）に記載される。これらの抗体は、Ｆｃ領域のＦｃＲｎへの結合を改善する１つまたは複数の置換を中に有するＦｃ領域を含む。改変されたＦｃ領域のアミノ酸配列及び増加または減少したＣ１ｑ結合能を有するポリペプチドバリアントが、米国特許第６，１９４，５５１Ｂ１号、ＷＯ９９／５１６４２に記載される。それらの特許公報の内容は、参照により本明細書に明確に援用される。また、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４（２０００）も参照されたい。
【０４１６】
Ｂ．マスクされたサイトカイン−薬物コンジュゲート
本発明はまた、１つまたは複数の薬剤にコンジュゲートされた本明細書に提供されるマスクされたサイトカイン（これは本明細書に開示される任意のマスクされたサイトカインであり得る）を含む、マスクされたサイトカイン−薬物コンジュゲート（ＭＣＤＣ）も提供する。一部の実施形態では、１つまたは複数の薬剤は、化学療法剤もしくは化学療法薬、成長阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、もしくは動物起源の酵素的に活性な毒素、またはその断片）、または放射性同位体等の細胞傷害性薬剤である。一部の実施形態では、１つまたは複数の薬剤は、免疫刺激薬である。
【０４１７】
一部の実施形態では、マスクされたサイトカインにコンジュゲートされる１つまたは複数の薬物には、マイタンシノイド（米国特許第５，２０８，０２０号、同第５，４１６，０６４号、及び欧州特許ＥＰ０４２５２３５Ｂ１を参照されたい）、アウリスタチン、例えば、モノメチルアウリスタチン薬物部分ＤＥ及びＤＦ（ＭＭＡＥ及びＭＭＡＦ）（米国特許第５，６３５，４８３号及び同第５，７８０，５８８号、及び同第７，４９８，２９８を参照されたい）、ドラスタチン、カリケアマイシンまたはその誘導体（米国特許第５，７１２，３７４号、同第５，７１４，５８６号、同第５，７３９，１１６号、同第５，７６７，２８５号、同第５，７７０，７０１号、同第５，７７０，７１０号、同第５，７７３，００１号、及び同第５，８７７，２９６号、Ｈｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５３：３３３６−３３４２（１９９３）、ならびにＬｏｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：２９２５−２９２８（１９９８）を参照されたい）、アントラサイクリン、例えば、ダウノマイシンまたはドキソルビシン（Ｋｒａｔｚ  ｅｔ  ａｌ．、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１３：４７７−５２３（２００６）、Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ  １６：３５８−３６２（２００６）、Ｔｏｒｇｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１６：７１７−７２１（２００５）、Ｎａｇｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：８２９−８３４（２０００）、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．＆  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ  １２：１５２９−１５３２（２００２）、Ｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：４３３６−４３４３（２００２）、及び米国特許第６，６３０，５７９号を参照されたい）、メトトレキサート、ビンデシン、タキサン、例えば、ドセタキセル、パクリタキセル、ラロタキセル、テセタキセル、及びオルタタキセル、トリコテセン、ならびにＣＣ１０６５が含まれるが、これらに限定されない。
【０４１８】
別の実施形態では、マスクされたサイトカインにコンジュゲートされる１つまたは複数の薬物には、チューブリン重合の阻害剤（例えば、マイタンシノイド及びアウリスタチン）、ＤＮＡ損傷剤（例えば、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、及びインド−リノベンゾジアゼピン二量体）、及びＤＮＡ合成阻害剤（例えば、エキサテカン誘導体Ｄｘｄ）が含まれるが、これらに限定されない。
【０４１９】
別の実施形態では、マスクされたサイトカイン−薬物コンジュゲートは、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ−サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンシンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ−Ｓ）、ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ阻害剤、クルシン、クロチン、ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、及びトリコテセンを含むがこれらに限定されない酵素的に活性な毒素またはその断片にコンジュゲートされた、本明細書に記載されるようなマスクされたサイトカインを含む。
【０４２０】
別の実施形態では、マスクされたサイトカイン−薬物コンジュゲートは、ラジオコンジュゲート（ｒａｄｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）を形成するように放射性原子にコンジュゲートされた、本明細書に記載されるようなマスクされたサイトカインを含む。様々な放射性同位体が、ラジオコンジュゲートの作成に利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位体が挙げられる。ラジオコンジュゲートを検出のために使用する場合、それは、シンチグラフィー研究のための放射性原子、例えば、ｔｃ９９ｍもしくはＩ１２３、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）画像法（別名、磁気共鳴画像法、ＭＲＩ）のためのスピン標識、例えば、再びヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガン、もしくは鉄を含んでもよい。
【０４２１】
一部の実施形態では、マスクされたサイトカイン−薬物コンジュゲートは、１つまたは複数の免疫刺激薬にコンジュゲートされた、本明細書に記載されるようなマスクされたサイトカインを含む。一部の実施形態では、免疫刺激薬は、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）アゴニストまたはトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである。
【０４２２】
ＳＴＩＮＧアゴニストは、ＳＴＩＮＧの任意のアゴニストであり得る。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）である。ＣＤＮは、任意のＣＤＮまたはその誘導体もしくはバリアントであり得る。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、ｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃＡＩＭＰ、及びｃ−ジ−ＩＭＰからなる群から選択されるＣＤＮである。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、ｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃＡＩＭＰ、及びｃ−ジ−ＩＭＰからなる群から選択されるＣＤＮの誘導体またはバリアントである。一部の実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、４−（２−クロロ−６−フルオロベンジル）−Ｎ−（フラン−２−イルメチル）−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン−６−カルボキサミド、またはその誘導体もしくはバリアントである。例えば、Ｓａｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）ＰｌｏＳ  Ｐａｔｈｏｇ．，１１（１２）：ｅ１００５３２４を参照されたい。
【０４２３】
ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、またはＴＬＲ１０等の、任意のＴＬＲのアゴニストであり得る。一部の実施形態では、ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、またはＴＬＲ５等の、細胞表面上に発現しているＴＬＲのアゴニストである。一部の実施形態では、ＴＬＲアゴニストは、ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、またはＴＬＲ１０等の、細胞内で発現しているＴＬＲのアゴニストである。
【０４２４】
マスクされたサイトカイン及び細胞傷害性薬剤のコンジュゲートは、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（例えば、アジプイミド酸ジメチルＨＣｌ）、活性エステル（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド（例えば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（例えば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビス−ジアゾニウム誘導体（例えば、ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えば、トルエン２，６−ジイソシアネート）、及びビス−活性フッ素化合物（例えば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）等の様々な二官能性タンパク質カップリング剤を用いて作製され得る。例えば、リシン免疫毒素を、Ｖｉｔｅｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３８：１０９８（１９８７）に記載されるように調製することができる。炭素−１４標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、抗体への放射性ヌクレオチドのコンジュゲーションのための代表的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照されたい。リンカーは、細胞内での細胞傷害性薬物の放出を容易にする「切断可能なリンカー」であってもよい。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカー、またはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５２：１２７−１３１（１９９２）、米国特許第５，２０８，０２０号）が使用され得る。
【０４２５】
本明細書のＭＣＤＣは、市販されている（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ．，Ｕ．Ｓ．Ａから）ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＣＣ、及びスルホ−ＳＭＰＢ、ならびにＳＶＳＢ（スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン）ベンゾエート）を含むがこれらに限定されない、架橋剤試薬で調製されたかかるコンジュゲートを明示的に企図するが、これらに限定されない。
【０４２６】
Ｃ．ベクター、宿主細胞、及び組換え法
本発明のマスクされたサイトカインの組換え産生のために、それをコードする１つまたは複数の核酸が単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）または発現のために複製可能なベクターに挿入される。マスクされたサイトカインを（その構成要素を含めて）コードするＤＮＡは、従来の手順を用いて容易に単離され、配列決定される。多くのベクターが利用可能である。ベクターの選定は、部分的には、使用される宿主細胞に依存する。一般に、宿主細胞は、原核生物起源または真核生物（一般に、哺乳類）起源のいずれかのものである。該当する場合、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥ定常領域を含めた、抗体またはその断片の任意のアイソタイプの定常領域をこの目的に使用することができ、かかる定常領域を任意のヒトまたは動物種から得ることができることが理解されよう。一部の実施形態では、１つのベクターが、マスクされたサイトカインをコードさせるために使用される。一部の実施形態では、１つよりも多くのベクターが、マスクされたサイトカインをコードさせるために使用される。
【０４２７】
１．原核生物宿主細胞を用いたマスクされたサイトカインの生成
ａ．ベクター構築
本発明のマスクされたサイトカインのポリペプチド構成要素をコードするポリヌクレオチド配列は、標準的な組換え技法を用いて得ることができる。抗体またはその抗体断片の所望のポリヌクレオチド配列は、ハイブリドーマ細胞等の抗体産生細胞から単離され、配列決定され得る。代替として、ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド合成装置もしくはＰＣＲ技法を用いて合成することができるか、または他の供給源から得ることができる。ひとたび得られると、マスクされたサイトカインの構成要素をコードする配列は、原核生物宿主において異種ポリヌクレオチドを複製及び発現することができる組換えベクターに挿入される。当該技術分野で利用可能で既知である多くのベクターが、本発明の目的に使用され得る。適切なベクターの選択は、主として、ベクターに挿入される核酸のサイズ及びベクターで形質転換される特定の宿主細胞に依存する。各ベクターは、その機能（異種ポリヌクレオチドの増幅もしくは発現、またはこれらの両方）及びそれが常在する特定の宿主細胞とのその適合性に応じて、種々の構成要素を含有する。ベクターの構成要素には一般に、複製起点、選択マーカー遺伝子、プロモーター、リボソーム結合部位（ＲＢＳ）、シグナル配列、異種核酸挿入物、及び転写終結配列が含まれるが、これらに限定されない。
【０４２８】
一般に、宿主細胞と適合性のある種に由来するレプリコン及び制御配列を含有するプラスミドベクターが、これらの宿主に関連して使用される。このベクターは通常、複製部位、ならびに形質転換された細胞において表現型の選択を提供することができるマーキング配列を担持する。例えば、Ｅ．ｃｏｌｉは、典型的には、Ｅ．ｃｏｌｉ種に由来するプラスミドであるｐＢＲ３２２を用いて形質転換される。ｐＢＲ３２２は、アンピシリン（Ａｍｐ）及びテトラサイクリン（Ｔｅｔ）耐性をコードする遺伝子を含有し、故に、形質転換された細胞を特定するための簡便な手段を提供する。ｐＢＲ３２２、その誘導体、または他の微生物プラスミドもしくはバクテリオファージはまた、内因性タンパク質の発現のために当該微生物によって使用され得るプロモーターを含有してもよいか、またはそれを含有するように修飾されてもよい。特定の抗体の発現に使用されるｐＢＲ３２２誘導体の例は、Ｃａｒｔｅｒらの米国特許第５，６４８，２３７号に詳述される。
【０４２９】
加えて、宿主微生物と適合性のあるレプリコン及び制御配列を含有するファージベクターが、これらの宿主に関連して形質転換ベクターとして使用され得る。例えば、λＧＥＭ．ＴＭ．−１１等のバクテリオファージを組換えベクターの作製に利用してもよく、この組換えベクターを用いて、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＬＥ３９２等の感受性宿主細胞を形質転換することができる。
【０４３０】
本発明の発現ベクターは、ポリペプチド構成要素の各々をコードする、２つ以上のプロモーター−シストロン対を含んでもよい。プロモーターは、その発現を調節するシストロンの上流（５’）に位置する非翻訳制御配列である。原核生物プロモーターは、典型的には、誘導性プロモーター及び構成的プロモーターの２つのクラスに分けられる。誘導性プロモーターは、培養条件の変化、例えば、栄養素の存在もしくは不在、または温度の変化に応答して、その制御下で増加したレベルのシストロンの転写を開始するプロモーターである。
【０４３１】
様々な潜在的な宿主細胞によって認識される多数のプロモーターが周知である。選択されたプロモーターは、制限酵素消化を介して供給源ＤＮＡからプロモーターを取り出し、単離されたプロモーター配列を本発明のベクターに挿入することによって、マスクされたサイトカインのどちらかの鎖をコードするシストロンＤＮＡに作動可能に連結することができる。ネイティブプロモーター配列及び多くの異種プロモーターのいずれも、標的遺伝子の増幅及び／または発現を導くために使用され得る。一部の実施形態では、異種プロモーターが一般に、ネイティブ標的ポリペプチドプロモーターと比較して、発現された標的遺伝子のより大きい転写及びより高い収率を可能にすることから、異種プロモーターが利用される。
【０４３２】
原核生物宿主との使用に好適なプロモーターには、ＰｈｏＡプロモーター、β−ガラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、ならびにハイブリッドプロモーター、例えば、ｔａｃまたはｔｒｃプロモーターが含まれる。しかしながら、細菌において機能的な他のプロモーター（例えば、他の既知の細菌またはファージプロモーター）もまた好適である。それらのヌクレオチド配列は公開されており、それによって、当業者は、任意の必要とされる制限部位を供給するために、リンカーまたはアダプターを用いて、例えば、軽鎖及び重鎖を含むマスクされたサイトカインのための標的軽鎖及び重鎖をコードするシストロンにそれらを作動可能にライゲーションすることが可能となる（Ｓｉｅｂｅｎｌｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９８０）Ｃｅｌｌ  ２０：２６９）。
【０４３３】
本発明の一態様では、組換えベクター内の各シストロンは、発現されたポリペプチドの膜を通過する移行を導く分泌シグナル配列構成要素を含む。一般に、シグナル配列は、ベクターの構成要素であり得るか、またはそれは、ベクターに挿入される標的ポリペプチドＤＮＡの一部であり得る。本発明の目的において選択されるシグナル配列は、宿主細胞によって認識され、プロセシングされる（すなわち、シグナルペプチダーゼによって切断される）ものであるべきである。異種ポリペプチドにネイティブなシグナル配列を認識してプロセシングすることのない原核生物宿主細胞の場合、シグナル配列は、例えば、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、Ｉｐｐ、または熱安定性エンテロトキシンＩＩ（ＳＴＩＩ）リーダー、ＬａｍＢ、ＰｈｏＥ、ＰｅｌＢ、ＯｍｐＡ、及びＭＢＰからなる群から選択される、原核生物シグナル配列によって置換される。本発明の一実施形態では、発現系の両シストロンにおいて使用されるシグナル配列は、ＳＴＩＩシグナル配列またはそのバリアントである。
【０４３４】
別の態様では、本発明によるポリペプチド構成要素の産生は、宿主細胞の細胞質で生じ得、したがって、各シストロン内に分泌シグナル配列の存在を必要としない。この点で、例えば、免疫グロブリン軽鎖及び重鎖を含む実施形態について、軽鎖及び重鎖は、細胞質内で、マスキング部分のための配列、リンカー配列等とともにまたはそれなしで発現され、折り畳まれ、集合して、機能的な免疫グロブリンを形成する。ある特定の宿主株（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ  ｔｒｘＢ−株）は、ジスルフィド結合形成に有利な細胞質条件を提供し、それによって、発現されたタンパク質サブユニットの適切な折り畳み及び集合を可能にする。Ｐｒｏｂａ  ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  Ｇｅｎｅ，１５９：２０３（１９９５）。
【０４３５】
本発明のマスクされたサイトカインはまた、分泌され、適切に集合した本発明の抗体の収率を最大化するために、発現されたポリペプチド構成要素の定量比が調節され得る発現系を用いることによって産生させることもできる。かかる調節は、少なくとも部分的には、ポリペプチド構成要素のための翻訳強度を同時に調節することによって遂行される。
【０４３６】
本発明のマスクされたサイトカインを発現させるのに好適な原核生物宿主細胞には、古細菌及び真正細菌、例えば、グラム陰性またはグラム陽性生物が含まれる。有用な細菌の例としては、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｂａｃｉｌｌｉ（例えば、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、腸内細菌、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種（例えば、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｅｒｒａｔｉａ  ｍａｒｃｅｓｃａｎｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ、Ｒｈｉｚｏｂｉａ、Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ、またはＰａｒａｃｏｃｃｕｓが挙げられる。一実施形態では、グラム陰性細胞が使用される。一実施形態では、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞が本発明における宿主として使用される。Ｅ．ｃｏｌｉ株の例としては、株Ｗ３１１０（Ｂａｃｈｍａｎｎ，Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．：Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８７），ｐｐ．１１９０−１２１９、ＡＴＣＣ寄託番号２７，３２５）及びその誘導体（遺伝型Ｗ３１１０  ΔｆｈｕＡ（ΔｔｏｎＡ）ｐｔｒ３  ｌａｃ  Ｉｑ  ｌａｃＬ８  ΔｏｍｐＴΔ（ｎｍｐｃ−ｆｅｐＥ）ｄｅｇＰ４１  ｋａｎＲを有する株３３Ｄ３を含む）（米国特許第５，６３９，６３５号）が挙げられる。Ｅ．ｃｏｌｉ  ２９４（ＡＴＣＣ３１，４４６）、Ｅ．ｃｏｌｉ  Ｂ、Ｅ．ｃｏｌｉλ  １７７６（ＡＴＣＣ３１，５３７）、及びＥ．ｃｏｌｉ  ＲＶ３０８（ＡＴＣＣ３１，６０８）等の他の株及びそれらの誘導体もまた好適である。これらの例は、限定するものではなく例示するものである。定義された遺伝型を有する、上述の細菌のうちのいずれかの誘導体を構築するための方法は、当該技術分野で既知であり、例えば、Ｂａｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，８：３０９−３１４（１９９０）に記載される。一般に、細菌の細胞におけるレプリコンの複製可能性を考慮して適切な細菌を選択することが必要である。例えば、ｐＢＲ３２２、ｐＢＲ３２５、ｐＡＣＹＣ１７７、またはｐＫＮ４１０等の周知のプラスミドを使用してレプリコンを供給する場合、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ種が宿主として好適に使用され得る。典型的には、宿主細胞が分泌するタンパク質分解酵素は最小量であるべきで、望ましくは、追加のプロテアーゼ阻害剤が細胞培養物に組み込まれ得る。
【０４３７】
ｂ．マスクされたサイトカインの産生
宿主細胞は、上述の発現ベクターで形質転換され、プロモーターの誘導、形質転換体の選択、または所望の配列をコードする遺伝子の増幅のために適宜改変された従来の栄養培地で培養される。
【０４３８】
形質転換とは、ＤＮＡが染色体外エレメントとして、または染色体組み込み体によってのいずれかで複製可能になるように、ＤＮＡを原核生物宿主に導入することを意味する。使用される宿主細胞に応じて、かかる細胞に適切な標準的技法を用いて形質転換が行われる。塩化カルシウムを採用するカルシウム処理が、実質的な細胞壁障壁を含有する細菌細胞に一般に使用される。形質転換のための別の方法は、ポリエチレングリコール／ＤＭＳＯを採用する。使用されるなおも別の技法は、エレクトロポレーションである。
【０４３９】
本発明のマスクされたサイトカインを産生させるために使用される原核生物細胞は、当該技術分野で既知の、かつ選択された宿主細胞の培養に好適な培地で成長させられる。好適な培地の例としては、必要な栄養補助剤を加えたルリアブロス（ＬＢ）が挙げられる。一部の実施形態では、培地はまた、発現ベクターを含有する原核生物細胞の成長を選択的に許容するために、発現ベクターの構造に基づいて選定された選択剤も含有する。例えば、アンピシリンが、アンピシリン耐性遺伝子を発現している細胞の成長のために培地に添加される。
【０４４０】
炭素、窒素、及び無機リン酸塩源の他に、任意の必要な補助剤もまた、単独で、または複合窒素源等の別の補助剤もしくは培地との混合物として導入される、適切な濃度で含まれてもよい。任意選択で、培養基は、グルタチオン、システイン、シスタミン、チオグリコレート、ジチオエリトリトール、及びジチオスレイトールからなる群から選択される１種または複数の還元剤を含有してもよい。
【０４４１】
原核生物宿主細胞は、好適な温度で培養される。ある特定の実施形態では、Ｅ．ｃｏｌｉの成長の場合、成長温度は、約２０℃〜約３９℃、約２５℃〜約３７℃、または約３０℃の範囲である。培地のｐＨは、主として宿主生物に応じて、約５〜約９の範囲の任意のｐＨであってもよい。ある特定の実施形態では、Ｅ．ｃｏｌｉの場合、ｐＨは、約６．８〜約７．４、または約７．０である。
【０４４２】
本発明の発現ベクターにおいて誘導性プロモーターが使用される場合、プロモーターの活性化に好適な条件下でタンパク質発現が誘導される。本発明の一態様では、ポリペプチドの転写を制御するためにＰｈｏＡプロモーターが使用される。したがって、形質転換された宿主細胞は、誘導のためにリン酸塩制限培地で培養される。ある特定の実施形態では、リン酸塩制限培地は、Ｃ．Ｒ．Ａ．Ｐ．培地（例えば、Ｓｉｍｍｏｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ（２００２），２６３：１３３−１４７を参照されたい）。当該技術分野で既知であるように、様々な他の誘導剤が、採用されるベクター構築物に従って使用され得る。
【０４４３】
一実施形態では、本発明の発現されたマスクされたサイトカインは、宿主細胞のペリプラズムに分泌され、それから回収される。タンパク質回収は、典型的には、一般に浸透圧ショック、超音波処理、または溶解等の手段による、微生物の破壊を伴う。ひとたび細胞が破壊されると、細胞残屑または全細胞が遠心分離または濾過によって除去され得る。このタンパク質は、例えば、親和性樹脂クロマトグラフィーによって、さらに精製され得る。代替として、タンパク質は、培養基に輸送され、その中で単離され得る。細胞が培養物から除去され得、培養上清が、産生されたタンパク質のさらなる精製のために濾過及び濃縮される。発現されたポリペプチドは、ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）及びウェスタンブロットアッセイ等の一般的に既知の方法を用いてさらに単離及び特定され得る。
【０４４４】
本発明の一態様では、マスクされたサイトカインの産生は、発酵プロセスによって大量で実施される。種々の大規模な流加発酵手順が、組換えタンパク質の産生に利用可能である。大規模発酵は、少なくとも１０００リットルの容積、ある特定の実施形態では、約１，０００〜１００，０００リットルの容積を有する。これらの発酵槽は、酸素及び栄養素、特にグルコースを分布させるために撹拌機インペラを使用する。小規模発酵とは、一般に、容積がおよそ１００リットル以下であり、約１リットル〜約１００リットルの範囲であり得る発酵槽での発酵を指す。
【０４４５】
発酵プロセスにおいて、タンパク質発現の誘導は、典型的には、細胞が所望の密度、例えば、約１８０〜２２０のＯＤ５５０になるまで好適な条件下で成長させた後に開始され、その段階で、細胞は、初期静止期にある。当該技術分野で既知であり上述されるように、様々な誘導剤が、採用されるベクター構築物に従って使用され得る。細胞は、誘導前により短い期間成長させてもよい。細胞は通常、約１２〜５０時間誘導されるが、より長いまたはより短い誘導時間もまた使用され得る。
【０４４６】
本発明のポリペプチドの産生収率及び品質を改善するために、種々の発酵条件を改変することができる。例えば、分泌抗体ポリペプチドの、例えば、適切な集合及び折り畳みを改善するために、シャペロンタンパク質、例えば、Ｄｓｂタンパク質（ＤｓｂＡ、ＤｓｂＢ、ＤｓｂＣ、ＤｓｂＤ、及びまたはＤｓｂＧ）またはＦｋｐＡ（シャペロン活性を有するペプチジルプロリルシストランスイソメラーゼ）を過剰発現している追加のベクターを用いて、宿主原核細胞を共形質転換することができる。シャペロンタンパク質は、細菌宿主細胞において産生される異種タンパク質の適切な折り畳み及び溶解性を容易にすることが実証されている。Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：１９６０１−１９６０５、Ｇｅｏｒｇｉｏｕらの米国特許第６，０８３，７１５号、Ｇｅｏｒｇｉｏｕらの米国特許第６，０２７，８８８号、Ｂｏｔｈｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５：１７１００−１７１０５、Ｒａｍｍ  ａｎｄ  Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５：１７１０６−１７１１３、Ａｒｉｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．３９：１９９−２１０。
【０４４７】
発現された異種タンパク質（特にタンパク質分解に感受性があるもの）のタンパク質分解を最小限に抑えるために、タンパク質分解酵素が欠損したある特定の宿主株が本発明に使用され得る。例えば、宿主細胞株は、既知の細菌プロテアーゼ、例えば、プロテアーゼＩＩＩ、ＯｍｐＴ、ＤｅｇＰ、Ｔｓｐ、プロテアーゼＩ、プロテアーゼＭｉ、プロテアーゼＶ、プロテアーゼＶＩ、及びそれらの組み合わせをコードする遺伝子において遺伝子変異（複数可）をもたらすように修飾され得る。いくつかのＥ．ｃｏｌｉプロテアーゼ欠損株が利用可能であり、例えば、Ｊｏｌｙ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）（上記）、Ｇｅｏｒｇｉｏｕらの米国特許第５，２６４，３６５号、Ｇｅｏｒｇｉｏｕらの米国特許第５，５０８，１９２号、Ｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，２：６３−７２（１９９６）に記載される。
【０４４８】
一部の実施形態では、タンパク質分解酵素が欠損し、かつ１つまたは複数のシャペロンタンパク質を過剰発現しているプラスミドで形質転換されたＥ．ｃｏｌｉ株が、本発明の発現系において宿主細胞として使用される。
【０４４９】
ｃ．マスクされたサイトカインの精製
一部の実施形態では、本明細書で産生されるマスクされたサイトカインは、さらなるアッセイ及び使用のために、実質的に均一である調製物を得るようにさらに精製される。当該技術分野で既知の標準的なタンパク質精製方法が採用され得る。以下の手順は、好適な精製手順を代表するものである：免疫親和性またはイオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカまたはＤＥＡＥ等の陽イオン交換樹脂でのクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、硫酸アンモニウム沈殿、及び例えばＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−７５を用いたゲル濾過。
【０４５０】
一部の実施形態では、固相に固定化されたプロテインＡが、本発明のマスクされたサイトカインの免疫親和性精製に使用される。プロテインＡは、高親和性で抗体のＦｃ領域に結合するＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅａｓ由来の４１ｋＤの細胞壁タンパク質である。Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ（１９８３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．６２：１−１３。プロテインＡが固定化される固相は、ガラスもしくはシリカ表面を含むカラム、または細孔制御（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｐｏｒｅ）ガラスカラムもしくはケイ酸カラムであり得る。一部の用途では、カラムは、混入物質の非特異的付着をできる限り阻止するためにグリセロール等の試薬でコーティングされている。
【０４５１】
第１の精製ステップとして、上述したように細胞培養物から得られた調製物をプロテインＡ固定化固相に適用して、目的とするマスクされたサイトカインをプロテインＡに特異的に結合させることができる。次いで、固相を洗浄して、固相に非特異的に結合した混入物質を除去する。最後に、目的とするマスクされたサイトカインが溶出により固相から回収される。
【０４５２】
マスクされたサイトカインの構成要素への高親和性結合を提供する他の精製方法が、当該技術分野で既知の標準的なタンパク質精製方法に従って採用され得る。
【０４５３】
２．真核生物宿主細胞を用いたマスクされたサイトカインの生成
真核生物宿主細胞において使用するためのベクターは一般に、以下の非限定的な構成要素、すなわち、シグナル配列、複製起点、１つまたは複数のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、及び転写終結配列のうちの１つまたは複数を含む。
【０４５４】
ａ．シグナル配列構成要素
真核生物宿主細胞において使用するためのベクターはまた、目的とする成熟タンパク質またはポリペプチドのＮ末端に特異的切断部位を有するシグナル配列または他のポリペプチドを含有してもよい。選択される異種シグナル配列は、宿主細胞によって認識され、プロセシングされる（すなわち、シグナルペプチダーゼによって切断される）ものであり得る。哺乳類細胞における発現では、哺乳類シグナル配列ならびにウイルス分泌リーダー、例えば、単純ヘルペスｇＤシグナルが利用可能である。かかる前駆体領域のＤＮＡは、マスクされたサイトカインをコードするＤＮＡにリーディングフレーム内でライゲーションされる。
【０４５５】
ｂ．複製起点
一般に、複製起点構成要素は、哺乳類発現ベクターには必要とされない。例えば、ＳＶ４０起点は、それが初期プロモーターを含有するというだけの理由で典型的に使用され得る。
【０４５６】
ｃ．選択遺伝子構成要素
発現及びクローニングベクターは、選択可能マーカーとも呼ばれる選択遺伝子を含有してもよい。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質もしくは他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、もしくはテトラサイクリンへの耐性を与えるか、（ｂ）栄養要求性欠損を補完するか（関連性のある場合）、または（ｃ）複合培地から利用不可能な必須の栄養素を供給する、タンパク質をコードする。
【０４５７】
選択スキームの一例は、宿主細胞の成長を停止する薬物を利用する。異種遺伝子で成功裏に形質転換される細胞は、薬物耐性を与え、故に選択レジメンで生き残るタンパク質を産生する。かかる優性選択の例は、薬物ネオマイシン、ミコフェノール酸、及びハイグロマイシンを使用する。
【０４５８】
哺乳類細胞に好適な選択可能マーカーの別の例は、ＤＨＦＲ、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉ及び−ＩＩ、霊長類メタロチオネイン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼ等の、マスクされたサイトカインをコードする核酸の取り込みにコンピテントな細胞の特定を可能にするものである。
【０４５９】
例えば、一部の実施形態では、ＤＨＦＲ選択遺伝子で形質転換された細胞は、最初に、ＤＨＦＲの競合アンタゴニストであるメトトレキサート（Ｍｔｘ）を含有する培養基で形質転換体の全てを培養することによって特定される。一部の実施形態では、野生型ＤＨＦＲが採用される場合に適切な宿主細胞は、ＤＨＦＲ活性が欠損したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株（例えば、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−９０９６）である。
【０４６０】
代替として、マスクされたサイトカイン、野生型ＤＨＦＲタンパク質、及び別の選択可能マーカー、例えば、アミノグリコシド３’−ホスホトランスフェラーゼ（ＡＰＨ）をコードするＤＮＡ配列で形質転換または共形質転換された宿主細胞（特に、内因性ＤＨＦＲを含有する野生型宿主）が、選択可能マーカーに対する選択剤、例えば、アミノグリコシド抗生物質、例えば、カナマイシン、ネオマイシン、またはＧ４１８を含有する培地での細胞成長によって選択され得る。米国特許第４，９６５，１９９号を参照されたい。宿主細胞は、グルタミンシンテターゼ（ＧＳ）が欠損した細胞株を含む、ＮＳ０を含んでもよい。ＧＳを哺乳類細胞のための選択可能マーカーとして使用するための方法が、米国特許第５，１２２，４６４号及び米国特許第５，８９１，６９３号に記載される。
【０４６１】
ｄ．プロモーター構成要素
発現及びクローニングベクターは通常、宿主生物によって認識され、かつ目的とするマスクされたサイトカイン（これは本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインであり得る）をコードする核酸に作動可能に連結されているプロモーターを含有する。真核生物のためのプロモーター配列は既知である。例えば、事実上全ての真核生物遺伝子が、転写が開始する部位からおよそ２５〜３０塩基上流に位置するＡＴリッチ領域を有する。多くの遺伝子の転写開始部から７０〜８０塩基上流に見出される別の配列は、ＣＮＣＡＡＴ領域であり、ここで、Ｎは、任意のヌクレオチドであり得る。ほとんどの真核生物遺伝子の３’末端には、コード配列の３’末端へのポリＡ尾部の付加のためのシグナルであり得るＡＡＴＡＡＡ配列がある。ある特定の実施形態では、これらの配列のうちのいずれかまたは全てが、真核生物発現ベクターに好適に挿入され得る。
【０４６２】
哺乳類宿主細胞におけるベクターからの転写は、例えば、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（例えば、アデノウイルス２）、ウシ乳頭腫ウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、及びシミアンウイルス４０（ＳＶ４０）等のウイルスのゲノムから、異種哺乳類プロモーター、例えば、アクチンプロモーターまたは免疫グロブリンプロモーターから、熱ショックプロモーターから得られるプロモーターによって制御されるが、但し、かかるプロモーターが宿主細胞系と適合性であることを条件とする。
【０４６３】
ＳＶ４０ウイルスの初期及び後期プロモーターは、ＳＶ４０ウイルス複製起点も含有するＳＶ４０制限断片として好都合に得られる。ヒトサイトメガロウイルスの最初期プロモーターは、ＨｉｎｄＩＩＩ  Ｅ制限断片として好都合に得られる。ウシ乳頭腫ウイルスをベクターとして用いて哺乳類宿主においてＤＮＡを発現させるための系が、米国特許第４，４１９，４４６号に開示される。この系の改変が、米国特許第４，６０１，９７８号に記載される。また、単純ヘルペスウイルス由来のチミジンキナーゼプロモーターの制御下でのマウス細胞におけるヒトβ−インターフェロンｃＤＮＡの発現について記載している、Ｒｅｙｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ２９７：５９８−６０１（１９８２）も参照されたい。代替として、ラウス肉腫ウイルスの長い末端反復配列がプロモーターとして使用され得る。
【０４６４】
ｅ．エンハンサーエレメント構成要素
高等真核生物による本発明のマスクされたサイトカインをコードするＤＮＡの転写は、多くの場合、エンハンサー配列をベクターに挿入することによって増加させられる。哺乳類遺伝子（グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテイン、及びインスリン）由来の多くのエンハンサー配列が今では知られている。しかしながら、典型的には、真核細胞ウイルス由来のエンハンサーが使用されるであろう。例としては、複製起点の後半側（塩基対１００〜２７０）にあるＳＶ４０エンハンサー、ヒトサイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、マウスサイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後半側にあるポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。また、Ｙａｎｉｖ，Ｎａｔｕｒｅ  ２９７：１７−１８（１９８２）（真核生物プロモーターの活性化のためのエンハンサーエレメントについて記載している）も参照されたい。エンハンサーは、マスクされたサイトカインをコードする配列の５’側または３’側の位置でベクターの中につなぎ合わされてもよいが、一般には、プロモーターから５’側の部位に位置する。
【０４６５】
ｆ．転写終結構成要素
真核生物宿主細胞において使用される発現ベクターはまた、転写の終結及びｍＲＮＡの安定化に必要な配列を含有してもよい。かかる配列は、一般的に、真核生物またはウイルスＤＮＡまたはｃＤＮＡの５’非翻訳領域、及び時には３’非翻訳領域から、入手可能である。これらの領域は、マスクされたサイトカインをコードするｍＲＮＡの非翻訳部分においてポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含有する。１つの有用な転写終結構成要素は、ウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。ＷＯ９４／１１０２６及びその中で開示される発現ベクターを参照されたい。
【０４６６】
ｇ．宿主細胞の選択及び形質転換
本明細書のベクター中のＤＮＡのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞には、脊椎動物宿主細胞を含めた、本明細書に記載の高等真核生物細胞が含まれる。培養物（組織培養物）中での脊椎動物細胞の調製は、通例の手順となっている。有用な哺乳類宿主細胞株の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ１６５１）によって形質転換されるサル腎臓ＣＶ１細胞株、ヒト胎児腎臓細胞株（２９３細胞または懸濁培養で成長させるためにサブクローニングされた２９３細胞、Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７））、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ１０）、チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ（ＣＨＯ，Ｕｒｌａｕｂ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６（１９８０））、マウスセルトリ細胞（ＴＭ４，Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３−２５１（１９８０））、サル腎臓細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ７０）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）、ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ２）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ３４）、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ１４４２）、ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ７５）、ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ８０６５）、マウス乳癌（ＭＭＴ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）、ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４−６８（１９８２））、ＭＲＣ５細胞、ＦＳ４細胞、及びヒト肝細胞癌細胞株（Ｈｅｐ  Ｇ２）である。
【０４６７】
宿主細胞は、マスクされたサイトカインの産生のために上述の発現またはクローニングベクターで形質転換され、プロモーターの誘導、形質転換体の選択、または所望の配列をコードする遺伝子の増幅のために適宜改変された従来の栄養素培地で培養される。
【０４６８】
ｈ．宿主細胞の培養
本発明のマスクされたサイトカインを産生させるために使用される宿主細胞は、多様な培地で培養され得る。Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１０（Ｓｉｇｍａ）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、Ｓｉｇｍａ）、ＲＰＭＩ−１６４０（Ｓｉｇｍａ）、及びダルベッコ改変イーグル培地（（ＤＭＥＭ）、Ｓｉｇｍａ）等の市販の培地が、宿主細胞の培養に好適である。加えて、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚ．５８：４４（１９７９）、Ｂａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０２：２５５（１９８０）、米国特許第４，７６７，７０４号、同第４，６５７，８６６号、同第４，９２７，７６２号、同第４，５６０，６５５号、もしくは同第５，１２２，４６９号、ＷＯ９０／０３４３０、ＷＯ８７／００１９５、または米国特許再発行第３０，９８５号に記載される培地のうちのいずれかが、宿主細胞のための培養基として使用され得る。これらの培地のうちのいずれにも、必要に応じて、ホルモン及び／または他の成長因子（例えば、インスリン、トランスフェリン、または上皮成長因子）、塩（例えば、塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸塩）、緩衝液（例えば、ＨＥＰＥＳ）、ヌクレオチド（例えば、アデノシン及びチミジン）、抗生物質（例えば、ＧＥＮＴＡＭＹＣＩＮ（商標）薬）、微量元素（マイクロモル濃度範囲の最終濃度で通常存在する無機化合物と定義される）、ならびにグルコースまたは同等のエネルギー源が補充され得る。任意の他の補助剤もまた、当業者に既知であろう適切な濃度で含まれ得る。温度、ｐＨ等の培養条件は、発現のために選択される宿主細胞とともにこれまでに使用されているものであり、当業者には明らかであろう。
【０４６９】
ｉ．マスクされたサイトカインの精製
組換え技法を使用する場合、マスクされたサイトカインは、細胞内で産生され得るか、または培地に直接分泌され得る。マスクされたサイトカインが細胞内で産生される場合、第１のステップとして、微粒子残屑（宿主細胞または溶解断片のいずれか）が、例えば、遠心分離または限外濾過により除去され得る。マスクされたサイトカインが培地に分泌される場合、かかる発現系の上清は、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過ユニットを用いて最初に濃縮され得る。タンパク質分解を阻害するためにＰＭＳＦ等のプロテアーゼ阻害剤が前述のステップのうちのいずれかに含まれ得、外来性混入物質の成長を阻止するために抗生物質が含まれ得る。
【０４７０】
細胞から調製されたマスクされたサイトカイン組成物は、例えば、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、及び親和性クロマトグラフィーを用いて精製され得、このうち親和性クロマトグラフィーが好都合な精製技法である。親和性リガンドとしてのプロテインＡの好適性は、該当する場合、マスクされたサイトカインに存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに依存する。プロテインＡは、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、またはＩｇＧ４重鎖に基づく抗体の精製に使用され得る（Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６２：１−１３（１９８３））。全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ３に対してはプロテインＧが推奨される（Ｇｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．５：１５６７１５７５（１９８６））。親和性リガンドを付着させるマトリックスは、アガロースであり得るが、他のマトリックスも利用可能である。細孔制御ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼン等の機械的に安定なマトリックスは、アガロースで達成可能なものよりも速い流速及び短い処理時間を可能にする。マスクされたサイトカインがＣＨ３ドメインを含む場合、Ｂａｋｅｒｂｏｎｄ  ＡＢＸ（商標）樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，Ｎ．Ｊ．）が精製に有用である。回収されるべきマスクされたサイトカインに応じて、イオン交換カラムでの分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカでのクロマトグラフィー、ヘパリンＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標）でのクロマトグラフィー、陰イオンまたは陽イオン交換樹脂（例えば、ポリアスパラギン酸カラム）でのクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈殿等の、タンパク質精製のための他の技法もまた利用可能である。
【０４７１】
任意の予備精製ステップ（複数可）の後、目的とするマスクされたサイトカイン及び混入物質を含む混合物が、低塩濃度（例えば、約０〜０．２５Ｍの塩）で実施される、例えば、約２．５〜４．５のｐＨの溶出緩衝液を用いた低ｐＨ疎水性相互作用クロマトグラフィーによるさらなる精製に供され得る。
【０４７２】
一般に、上述の手法と一致した及び／または当業者により目的とする特定のマスクされたサイトカインに適切であると見なされるような、研究、試験、及び臨床用途に使用するためのマスクされたサイトカインを調製するための種々の手法が、当該技術分野で定着している。
【０４７３】
ＩＩＩ．組成物
一部の態様では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかを含む組成物がまた本明細書に提供される。一部の実施形態では、該組成物は、本明細書に記載のマスクされたサイトカインの代表的な実施形態のうちのいずれかを含む。一部の実施形態では、該組成物は、本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかの二量体を含む。一部の実施形態では、該組成物は、薬学的組成物である。一部の実施形態では、該組成物は、マスクされたサイトカインを含み、かつ下記に詳述されるような構成要素のうちの１つまたは複数をさらに含む。例えば、一部の実施形態では、該組成物は、１つまたは複数の薬学的に許容される担体、賦形剤、安定剤、緩衝液、防腐剤、等張化剤、非イオン性界面活性剤もしくは洗剤、または他の治療剤もしくは活性化合物、またはそれらの組み合わせを含む。該組成物の種々の実施形態は、本明細書で製剤と称されることがある。
【０４７４】
治療用製剤は、所望の純度を有する活性成分と、任意選択的な薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤とを混合することによって貯蔵用に調製される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｋｌｉｎｓ，Ｐｕｂ．，Ｇｅｎｎａｒｏ  Ｅｄ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．２０００）。許容される担体、賦形剤、または安定剤は、採用される投薬量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり、これには、緩衝液、酸化防止剤（アスコルビン酸、メチオニン、ビタミンＥ、メタ重亜硫酸ナトリウムを含む）；防腐剤、等張化剤、安定剤、金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；ＥＤＴＡ等のキレート剤及び／または非イオン性界面活性剤が含まれる。
【０４７５】
とりわけ安定性がｐＨ依存性である場合、治療有効性を最適化する範囲にｐＨを制御するために緩衝液が使用され得る。緩衝液は、約５０ｍＭ〜約２５０ｍＭの範囲の濃度で存在し得る。本発明での使用に好適な緩衝剤には、有機酸及び無機酸の両方ならびにそれらの塩が含まれる。例えば、クエン酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、酢酸塩。追加として、緩衝液は、ヒスチジン、及びトリス等のトリメチルアミン塩から構成され得る。
【０４７６】
微生物の成長を阻止するために防腐剤が添加され得、これは、典型的には、約０．２％〜１．０％（ｗ／ｖ）の範囲で存在する。治療薬とともに一般的に使用される好適な防腐剤の例としては、オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム；ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムハロゲン化物（例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物）、塩化ベンゼトニウム；チメロサール、フェノール、ブチル、またはベンジルアルコール；メチルパラベンまたはプロピルパラベン等のアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール、３−ペンタノール、ｍ−クレゾール、ｏ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、２−フェノキシエタノール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル、２−フェニルエタノール、エタノール、クロロブタノール、チメロサール、ブロノポール、安息香酸、イミド尿素（ｉｍｉｄｕｒｅａ）、クロロヘキシジン、デヒドロ酢酸ナトリウム、クロロクレゾール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、及びクロルフェネシン（３ｐ−クロルフェノキシプロパン（ｃｈｌｏｒｐｈｅｎｏｘｙｐｒｏｐａｎｅ）−１，２−ジオール）が挙げられる。
【０４７７】
組成物中の液体の等張性を調整または維持するために、「安定剤」として知られることもある等張化剤が存在し得る。タンパク質及び抗体等の大きい荷電した生体分子とともに使用される場合、それらは「安定剤」と称される場合が多く、これは、それらがアミノ酸側鎖の荷電基と相互作用し、それによって分子間及び分子内相互作用の可能性を低減し得るためである。等張化剤は、他の成分の相対量を考慮に入れて、約０．１重量％〜約２５重量％の間、または約１〜約５重量％の間の任意の量で存在し得る。一部の実施形態では、等張化剤には、多価糖アルコール、三価以上の糖アルコール、例えば、グリセリン、エリトリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール、及びマンニトールが含まれる。
【０４７８】
追加の賦形剤には、以下のうちの１つまたは複数、すなわち、（１）増量剤、（２）溶解度向上剤、（３）安定剤、及び（４）変性または容器の壁への付着を阻止する薬剤、としての役目を果たし得る薬剤が含まれる。かかる賦形剤には、多価糖アルコール（上記に列挙される）；アミノ酸、例えば、アラニン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、オルニチン、ロイシン、２−フェニルアラニン、グルタミン酸、トレオニン等；有機糖または糖アルコール、例えば、スクロース、ラクトース、ラクチトール、トレハロース、スタキオース、マンノース、ソルボース、キシロース、リボース、リビトール、ミオイニシトース（ｍｙｏｉｎｉｓｉｔｏｓｅ）、ミオイニシトール（ｍｙｏｉｎｉｓｉｔｏｌ）、ガラクトース、ガラクチトール、グリセロール、シクリトール（例えば、イノシトール）、ポリエチレングリコール；硫黄含有還元剤、例えば、尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、α−モノチオグリセロール、及びチオ硫酸ナトリウム；低分子量タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ゼラチン、または他の免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；単糖（例えば、キシロース、マンノース、フルクトース、グルコース；二糖（例えば、ラクトース、マルトース、スクロース）；三糖、例えば、ラフィノース；ならびに多糖、例えば、デキストリンまたはデキストランが含まれる。
【０４７９】
非イオン性界面活性剤または洗剤（別名、「湿潤剤」）が、治療剤の可溶化を助けると同時に、撹拌により誘発される凝集から治療用タンパク質を保護するために存在し得、これはまた、活性な治療用タンパク質または抗体の変性を引き起こすことなく製剤を表面せん断応力に曝すことも可能にする。非イオン性界面活性剤は、約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約１．０ｍｇ／ｍｌまたは約０．０７ｍｇ／ｍｌ〜約０．２ｍｇ／ｍｌの範囲で存在する。一部の実施形態では、非イオン性界面活性剤は、約０．００１％〜約０．１％（ｗ／ｖ）、または約０．０１％〜約０．１％（ｗ／ｖ）、または約０．０１％〜約０．０２５％（ｗ／ｖ）の範囲で存在する。
【０４８０】
好適な非イオン性界面活性剤には、ポリソルベート（２０、４０、６０、６５、８０等）、ポリオキサマー（ｐｏｌｙｏｘａｍｅｒ）（１８４、１８８等）、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリオール、ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）、ポリオキシエチレンソルビタンモノエーテル（ＴＷＥＥＮ（登録商標）−２０、ＴＷＥＥＮ（登録商標）−８０等）、ラウロマクロゴール４００、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、５０、及び６０、モノステアリン酸グリセロール、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロース、ならびにカルボキシメチルセルロースが含まれる。使用され得る陰イオン性洗剤には、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、及びジオクチルスルホン酸ナトリウムが含まれる。陽イオン性洗剤には、塩化ベンザルコニウムまたは塩化ベンゼトニウムが含まれる。
【０４８１】
製剤がインビボ投与に使用されるためには、それらは滅菌されていなければならない。製剤は、滅菌濾過膜に通す濾過によって滅菌され得る。本明細書の治療用組成物は、一般に、滅菌アクセスポートを有する容器、例えば、静注液バッグ、または皮下注射針によって穿刺可能な栓を有するバイアルに入れられる。
【０４８２】
投与経路は、好適な様態での長期間にわたる単回もしくは複数回ボーラスまたは注入、例えば、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、病巣内、もしくは関節内経路による注射もしくは注入、局所投与、吸入によって、または持続放出もしくは徐放手段によって等、既知の受け入れられている方法に従う。
【０４８３】
本明細書に記載のマスクされたサイトカインのうちのいずれかは、本明細書に記載の方法にあるように、単独でまたは他の治療剤と組み合わせて使用され得る。「と組み合わせて」という用語は、同じまたは別個の製剤に含まれる２つ以上の治療剤（例えば、マスクされたサイトカイン及び治療剤）を包含する。一部の実施形態では、「と組み合わせて」は、「同時の」投与を指し、この場合、本発明のマスクされたサイトカインの投与は、１つまたは複数の追加の治療剤の投与と同時に起こる（例えば、同じ時間に、またはマスクされたサイトカインの投与（複数可）と１つまたは複数の追加の治療剤の投与との間が１時間以内）。一部の実施形態では、「と組み合わせて」は、順次の投与を指し、この場合、本発明のマスクされたサイトカインの投与は、１つまたは複数の追加の治療剤の投与の前及び／または後に起こる（例えば、マスクされたサイトカインの投与（複数可）と１つまたは複数の追加の治療剤の投与との間が１時間超）。本明細書で企図される薬剤には、細胞傷害性薬剤、サイトカイン、免疫チェックポイント分子を標的とする薬剤、免疫刺激分子を標的とする薬剤、成長阻害剤、免疫刺激剤、抗炎症剤、または抗がん剤が含まれるが、これらに限定されない。
【０４８４】
本明細書の製剤はまた、治療されている特定の適応症に対する必要に応じて、１つよりも多くの活性化合物、好ましくは互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有する化合物を含有してもよい。代替として、または追加として、該組成物は、細胞傷害性薬剤、サイトカイン、免疫チェックポイント分子もしくは刺激分子を標的とする薬剤、成長阻害剤、免疫刺激剤、抗炎症剤、または抗がん剤を含んでもよい。かかる分子は、意図される目的に有効である量で組み合わされて好適に存在する。
【０４８５】
製剤は、液体製剤、固体状態の（凍結乾燥）製剤、または凍結した製剤等の任意の好適な状態で提示され得る。治療的使用に向けてこれらの種類の製剤の各々を調製するための手法は、当該技術分野で周知である。
【０４８６】
ＩＶ．治療方法
本明細書では、有効量の本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたはその組成物を対象に投与することを含む、対象において疾患を治療するかまたは予防するための方法が提供される。一部の実施形態では、有効量のマスクされたサイトカインを対象に投与することを含む、対象において疾患を治療するかまたは予防するための方法が提供される。一部の実施形態では、有効量の本明細書に記載のマスクされたサイトカインの任意の実施形態を対象に投与することを含む、対象において疾患を治療するかまたは予防するための方法が提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載の任意の組成物を対象に投与することを含む、対象において疾患を治療するかまたは予防するための方法が提供される。一部の実施形態では、対象（例えば、ヒト患者）は、腫瘍性障害（例えば、がん）であると診断されているか、または、かかる障害を発症するリスクがある。
【０４８７】
疾患の予防または治療に関して、活性薬剤の適切な投薬量は、本明細書で定義されるような治療すべき疾患の種類、疾患の重症度及び経過、薬剤が予防目的で投与されるか治療目的で投与されるか、以前の療法、対象の病歴及び薬剤への応答、ならびに主治医の裁量に依存するであろう。薬剤は、１回で、または一連の治療にわたって対象に好適に投与される。
【０４８８】
本明細書に記載の方法の一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインの投与間の間隔は、約１週間以上である。本明細書に記載の方法の一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインの投与間の間隔は、約２日以上、約３日以上、約４日以上、約５日以上、または約６日以上である。本明細書に記載の方法の一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインの投与間の間隔は、約１週間以上、約２週間以上、約３週間以上、または約４週間以上である。本明細書に記載の方法の一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインの投与間の間隔は、約１ヶ月以上、約２ヶ月以上、または約３ヶ月以上である。本明細書で使用されるとき、投与間の間隔とは、マスクされたサイトカインの１回の投与とマスクされたサイトカインの次の投与との間の期間を指す。本明細書で使用されるとき、約１ヶ月の間隔は、４週間を含む。一部の実施形態では、治療は、マスクされたサイトカインの複数回投与を含み、ここで、投与間の間隔は様々であり得る。例えば、一部の実施形態では、１回目の投与と２回目の投与との間の間隔は、約１週間であり、後続の投与間の間隔は、約２週間である。一部の実施形態では、１回目の投与と２回目の投与との間の間隔は、約２日間、３日間、４日間、または５日間、または６日間であり、後続の投与間の間隔は、約１週間である。
【０４８９】
一部の実施形態では、マスクされたサイトカインは、一定期間にわたって複数の機会に投与される。複数の機会に対象に投与される投薬量は、一部の実施形態では、各投与について同じ投薬量であり得るか、または、一部の実施形態では、マスクされたサイトカインは、２つ以上の異なる投薬量で対象に投与され得る。例えば、一部の実施形態では、マスクされたサイトカインは、最初は、１つまたは複数の機会に１つの投薬量で投与され、後に、より後の時点で開始する１つまたは複数の機会に第２の投薬量で投与される。
【０４９０】
一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、固定用量で投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、１用量当たり約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、マスクされたサイトカインは、１用量当たり約２５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約７５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約２７５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約３２５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約３７５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約４２５ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約４７５ｍｇ、または約４７５ｍｇ〜約５００ｍｇの投薬量で対象に投与される。
【０４９１】
一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、対象の体重または体表面積（ＢＳＡ）に基づく投薬量で対象に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ）のマスクされたサイトカインが、例えば、１回または複数回の別個の投与によってか、または持続注入によってかに関わらず、患者に投与するための候補となる最初の投薬量である。１つの典型的な１日投薬量は、上述の要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。数日以上にわたる反復投与の場合、病態に応じて、治療は一般に、疾患の症状の所望の抑制が起こるまで持続させられるであろう。マスクされたサイトカインの１つの代表的な投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲であろう。故に、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇ（またはそれらの任意の組み合わせ）のうちの１つまたは複数の用量が患者に投与され得る。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇまたは約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、または１０．０ｍｇ／ｋｇのうちのおよそいずれかの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、約もしくは少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１０．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１５．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７０ｍｇ／ｋ��、約もしくは少なくとも約８０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９０ｍｇ／ｋｇ、または約もしくは少なくとも約１００ｍｇ／ｋｇの投薬量で対象に投与される。上述の投薬頻度のうちのいずれかが使用され得る。
【０４９２】
一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、固定用量で投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、１用量当たり約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、１用量当たり約２５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約７５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約２７５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約３２５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約３７５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約４２５ｍｔ〜約４５０ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約４７５ｍｇ、または約４７５ｍｇ〜約５００ｍｇの投薬量で対象に投与される。
【０４９３】
一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、対象の体重または体表面積（ＢＳＡ）に基づく投薬量で対象に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ）のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドが、例えば、１回または複数回の別個の投与によってか、または持続注入によってかに関わらず、患者に投与するための候補となる最初の投薬量である。１つの典型的な１日投薬量は、上述の要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。数日以上にわたる反復投与の場合、病態に応じて、治療は一般に、疾患の症状の所望の抑制が起こるまで持続させられるであろう。マスクされたＩＬ−２ポリペプチドの１つの代表的な投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲であろう。故に、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇ（またはそれらの任意の組み合わせ）のうちの１つまたは複数の用量が患者に投与され得る。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇまたは約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、または１０．０ｍｇ／ｋｇのうちのおよそいずれかの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドは、約もしくは少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１０．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１５．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６��ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９０ｍｇ／ｋｇ、または約もしくは少なくとも約１００ｍｇ／ｋｇの投薬量で対象に投与される。上述の投薬頻度のうちのいずれかが使用され得る。
【０４９４】
一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、固定用量で投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、１用量当たり約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、１用量当たり約２５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約７５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１７５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約２７５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約３２５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約３７５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約４２５ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約４７５ｍｇ、または約４７５ｍｇ〜約５００ｍｇの投薬量で対象に投与される。
【０４９５】
一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、対象の体重または体表面積（ＢＳＡ）に基づく投薬量で対象に投与される。疾患の種類及び重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ）のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドが、例えば、１回または複数回の別個の投与によってか、または持続注入によってかに関わらず、患者に投与するための候補となる最初の投薬量である。１つの典型的な１日投薬量は、上述の要因に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。数日以上にわたる反復投与の場合、病態に応じて、治療は一般に、疾患の症状の所望の抑制が起こるまで持続させられるであろう。故に、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、または１０ｍｇ／ｋｇ（またはそれらの任意の組み合わせ）のうちの１つまたは複数の用量が患者に投与され得る。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、１用量当たり約２５ｍｇ〜約５００ｍｇの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇまたは約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、６．０ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７．０ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、８．０ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、９．０ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、または１０．０ｍｇ／ｋｇのうちのおよそいずれかの投薬量で対象に投与される。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドは、約もしくは少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９．５ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１０．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約１５．０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約４０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約５０��ｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約６０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約７０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約８０ｍｇ／ｋｇ、約もしくは少なくとも約９０ｍｇ／ｋｇ、または約もしくは少なくとも約１００ｍｇ／ｋｇの投薬量で対象に投与される。上述の投薬頻度のうちのいずれかが使用され得る。
【０４９６】
本明細書で企図される治療方法は、本明細書に記載のマスクされたサイトカインまたは組成物のうちのいずれかを用いた障害または疾患の治療である。一部の実施形態では、該治療方法は、本明細書に記載の任意のマスクされたＩＬ−２ポリペプチド、または本明細書に記載の任意のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド、または本明細書に記載のマスクされたサイトカインを含む組成物のうちのいずれかを使用する。本発明の製剤で治療可能な障害または疾患には、白血病、リンパ腫、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、膵臓癌、黒色腫、乳癌、神経芽細胞腫、肺癌、卵巣癌、骨肉腫、膀胱癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、皮膚癌（例えば、メルケル細胞癌）、または精巣癌が含まれる。
【０４９７】
一部の実施形態では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、がんの治療方法または予防方法が本明細書に提供される。一部の実施形態では、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド、またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド、または本明細書に記載のマスクされたサイトカインを含む組成物のうちのいずれかの投与による、がんの治療方法または予防方法が本明細書に提供される。本明細書で使用されるとき、「がん」という用語は、白血病、リンパ腫、黒色腫、神経内分泌腫瘍、癌腫、及び肉腫を含めた、哺乳動物で見られる全ての種類のがん、新生物、または悪性腫瘍を指す。本明細書に提供されるマスクされたサイトカイン、薬学的組成物、または方法で治療され得る代表的ながんには、リンパ腫、肉腫、膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、子宮頸癌、結腸癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、腎臓癌、骨髄腫、甲状腺癌、白血病、前立腺癌、乳癌（例えば、トリプルネガティブ、ＥＲ陽性、ＥＲ陰性、化学療法耐性、ハーセプチン耐性、ＨＥＲ２陽性、ドキソルビシン耐性、タモキシフェン耐性、腺管癌、小葉癌、原発性、転移性）、卵巣癌、膵臓癌、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、非小細胞肺癌、肺扁平上皮癌、腺癌、大細胞肺癌、小細胞肺癌、カルチノイド、肉腫）、多形性膠芽腫、神経膠腫、黒色腫、前立腺癌、去勢抵抗性前立腺癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、膠芽腫、卵巣癌、肺癌、扁平上皮細胞癌（例えば、頭部、頸部、または食道）、結腸直腸癌、白血病、急性骨髄性白血病、リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、または多発性骨髄腫が含まれる。追加の例としては、甲状腺癌、内分泌系癌、脳癌、乳癌、子宮頸癌、結腸癌、頭頸部癌、食道癌、肝臓癌、腎臓癌、肺癌、非小細胞肺癌、黒色腫、中皮腫、卵巣癌、肉腫、胃癌、子宮癌もしくは髄芽細胞腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、多形性膠芽腫、卵巣癌、横紋筋肉腫、原発性血小板血症、原発性マクログロブリン血症、原発性脳腫瘍、がん、悪性膵インスリノーマ、悪性カルチノイド、膀胱癌、前悪性皮膚病変、精巣癌、リンパ腫、甲状腺癌、神経芽細胞腫、食道癌、泌尿生殖器癌、悪性高カルシウム血症、子宮内膜癌、副腎皮質癌、膵内分泌部もしくは膵外分泌部の新生物、甲状腺髄様癌、甲状腺髄様癌、黒色腫、結腸直腸癌、甲状腺乳頭癌、肝細胞癌、乳頭パジェット病、葉状腫瘍、小葉癌、腺管癌、膵星細胞癌、肝星細胞癌、または前立腺癌が挙げられる。
【０４９８】
一部の実施形態では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、白血病の治療方法または予防方法が本明細書に提供される。「白血病」という用語は、造血器官の進行性の悪性疾患を広く指し、一般に、血中及び骨髄中の白血球及びそれらの前駆体の歪んだ増殖及び発達を特徴とする。白血病は、一般に、（１）疾患の持続期間及び特徴、すなわち急性か慢性か、（２）影響を受ける細胞の種類、すなわち骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）（骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ））か、リンパ性（ｌｙｍｐｈｏｉｄ）（リンパ性（ｌｙｍｐｈｏｇｅｎｏｕｓ））か、または単球性か、ならびに（３）血中の異常細胞数の増加または非増加、すなわち白血性か無白血性（亜白血性）か、に基づいて臨床的に分類される。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法で治療され得る代表的な白血病には、例えば、急性非リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、急性顆粒球性白血病、慢性顆粒球性白血病、急性前骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞性白血病、無白血性白血病、白血球血症性（ｌｅｕｋｏｃｙｔｈｅｍｉｃ）白血病、好塩基球性白血病、芽球性白血病、牛白血病、慢性骨髄球性白血病、皮膚白血病、胎生細胞性白血病、好酸球性白血病、グロス白血病、有毛細胞白血病、赤芽球性（ｈｅｍｏｂｌａｓｔｉｃ）白血病、血球芽細胞性（ｈｅｍｏｃｙｔｏｂｌａｓｔｉｃ）白血病、組織球性白血病、幹細胞性白血病、急性単球性白血病、白血球減少性白血病、リンパ性（ｌｙｍｐｈａｔｉｃ）白血病、リンパ芽球性白血病、リンパ性白血病、リンパ行性（ｌｙｍｐｈｏｇｅｎｏｕｓ）白血病、リンパ性（ｌｙｍｐｈｏｉｄ）白血病、リンパ肉腫細胞性白血病、肥満細胞性白血病、巨核芽球性白血病、小骨髄芽球性白血病、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、骨髄性白血病、骨髄性顆粒球性（ｍｙｅｌｏｉｄ  ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｉｃ）白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ白血病、形質細胞性（ｐｌａｓｍａ  ｃｅｌｌ）白血病、多発性骨髄腫、形質細胞性（ｐｌａｓｍａｃｙｔｉｃ）白血病、前骨髄球性白血病、リーダー（Ｒｉｅｄｅｒ）細胞白血病、シリング白血病、幹細胞性白血病、亜白血性白血病、または未分化細胞白血病が含まれる。
【０４９９】
一部の実施形態では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、肉腫の治療方法または予防方法が本明細書に提供される。「肉腫」という用語は一般に、胚性結合組織のような物質から成り立ち、一般に、細線維または均一物質に埋め込まれた密に詰まった細胞から構成される腫瘍を指す。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法で治療され得る肉腫には、軟骨肉腫、線維肉腫、リンパ肉腫、黒色肉腫、粘液肉腫、骨肉腫、アベメシー肉腫（Ａｂｅｍｅｔｈｙ’ｓ  ｓａｒｃｏｍａ）、脂肪肉腫（ａｄｉｐｏｓｅ  ｓａｒｃｏｍａ）、脂肪肉腫（ｌｉｐｏｓａｒｃｏｍａ）、胞状軟部肉腫、エナメル上皮肉腫、ブドウ状肉腫、緑色腫肉腫（ｃｈｌｏｒｏｍａ  ｓａｒｃｏｍａ）、絨毛癌、胎児性肉腫、ウィルムス腫瘍、子宮内膜肉腫、間質性肉腫、ユーイング肉腫、筋膜肉腫、線維芽細胞肉腫、巨細胞肉腫、顆粒球性肉腫、ホジキン肉腫、特発性多発性色素性出血性肉腫、Ｂ細胞の免疫芽球性肉腫、リンパ腫、Ｔ細胞の免疫芽球性肉腫、イエンセン肉腫、カポジ肉腫、クッパー細胞肉腫、血管肉腫、白血肉腫、悪性間葉腫肉腫、傍骨性肉腫、細網肉腫、ラウス肉腫、漿液嚢胞性肉腫、滑膜肉腫、または毛細血管拡張性肉腫（ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔａｌｔｉｃ  ｓａｒｃｏｍａ）が含まれる。
【０５００】
一部の実施形態では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、黒色腫の治療方法または予防方法が本明細書に提供される。「黒色腫」という用語は、皮膚及び他の臓器のメラニン細胞系から発生する腫瘍を意味するように解釈される。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法で治療され得る黒色腫には、例えば、末端性黒子性黒色腫（ａｃｒａｌ−ｌｅｎｔｉｇｉｎｏｕｓ  ｍｅｌａｎｏｍａ）、無色素性黒色腫、良性若年性黒色腫、クラウドマン黒色腫、Ｓ９１黒色腫、ハーディング・パッセー黒色腫、若年性黒色腫、悪性黒子型黒色腫、悪性黒色腫、結節型黒色腫、爪下黒色腫、または表在拡大型黒色腫が含まれる。
【０５０１】
一部の実施形態では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、癌腫の治療方法または予防方法が本明細書に提供される。「癌腫」という用語は、周辺組織に浸潤して転移を生じさせる傾向がある上皮細胞から成り立つ悪性の新たな成長を指す。本明細書に提供される化合物、薬学的組成物、または方法で治療され得る代表的な癌腫には、例えば、甲状腺髄様癌、家族性甲状腺髄様癌、腺房癌、小葉癌、腺様嚢胞癌（ａｄｅｎｏｃｙｓｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、腺様嚢胞癌（ａｄｅｎｏｉｄ  ｃｙｓｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、腺腫様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ａｄｅｎｏｍａｔｏｓｕｍ）、肺胞上皮癌、肺胞上皮細胞癌、基底細胞癌（ｂａｓａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、基底細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｂａｓｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、類基底細胞癌、基底扁平上皮細胞癌、細気管支肺胞上皮癌、細気管支癌腫、気管支原性癌、脳状癌（ｃｅｒｅｂｒｉｆｏｒｍ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、胆管細胞癌、絨毛癌、膠様癌、面疱癌、体癌、篩状癌、鎧状癌、皮膚癌、円柱状癌、円柱細胞癌、管癌、腺管癌、硬性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｄｕｒｕｍ）、胎生期癌、脳様癌、類表皮癌、咽頭扁桃上皮癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｅ  ａｄｅｎｏｉｄｅｓ）、外向発育癌、潰瘍癌、線維性癌、ゼラチン性癌、ゼラチン状癌、巨細胞癌（ｇｉａｎｔ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、巨細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｇｉｇａｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、腺癌、顆粒膜細胞癌、毛母癌、血様癌（ｈｅｍａｔｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、肝細胞癌、ヒュルトレ細胞癌、硝子状癌、副腎様癌（ｈｙｐｅｍｅｐｈｒｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、幼児型胎生期癌、上皮内癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｉｎ  ｓｉｔｕ）、表皮内癌、上皮内癌、クロムペッヘル癌（Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ’ｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クルチツキー細胞癌（Ｋｕｌｃｈｉｔｚｋｙ−ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、大細胞癌、レンズ状癌（ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、レンズ状癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｌｅｎｔｉｃｕｌａｒｅ）、脂肪腫性癌、小葉癌、リンパ上皮癌、髄様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｅｄｕｌｌａｒｅ）、髄様癌（ｍｅｄｕｌｌａｒｙ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色癌、軟性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｏｌｌｅ）、粘液性癌（ｍｕｃｉｎｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｕｃｉｐａｒｕｍ）、粘液細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｕｃｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、粘表皮癌、粘液癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｕｃｏｓｕｍ）、粘液癌（ｍｕｃｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、粘液腫様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｍｙｘｏｍａｔｏｄｅｓ）、鼻咽頭癌、燕麦細胞癌、骨化性癌、類骨癌、乳頭状癌、門脈周囲癌、前浸潤癌、有棘細胞癌、髄質様癌、腎臓の腎細胞癌、予備細胞癌、肉腫様癌、シュナイダー癌、硬癌、陰嚢癌、印環細胞癌、単純癌、小細胞癌、ソラノイド癌（ｓｏｌａｎｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、球状細胞癌、紡錘細胞癌、海綿様癌、扁平上皮癌、扁平上皮細胞癌、紐癌（ｓｔｒｉｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、毛細血管拡張性癌、毛細血管拡張様癌、移行上皮癌、結節癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｔｕｂｅｒ���ｓｕｍ）、管状癌、結節癌（ｔｕｂｅｒｏｕｓ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、疣状癌、および絨毛癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｖｉｆｌｏｓｕｍ）が含まれる。
【０５０２】
一部の実施形態では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、転移性がんの治療方法または予防方法が本明細書に提供される。本明細書で使用されるとき、「転移」、「転移性」、及び「転移性がん」という用語は、互換的に使用され得、腫瘍性疾患または障害、例えばがんが、１つの臓器または別の非隣接臓器もしくは身体部分から広がることを指す。がんは、発生部位、例えば乳房で生じ、この部位は、原発性腫瘍、例えば原発性乳癌と称される。原発性腫瘍または発生部位における一部のがん細胞は、その局部における周辺の正常組織を透過してそれに浸潤する能力、及び／またはその系を循環しているリンパ系もしくは血管系の壁を透過して、体内の他の部位及び組織に至る能力を獲得する。原発性腫瘍のがん細胞から形成される臨床的に検出可能な第２の腫瘍は、転移性腫瘍または続発性腫瘍と称される。がん細胞が転移するとき、転移性腫瘍及びその細胞は、元の腫瘍のものに類似していると推定される。故に、肺癌が乳房に転移する場合、乳房のその部位での続発性腫瘍は、異常肺細胞からなり、異常乳房細胞からなるのではない。その乳房の続発性腫瘍は、転移性肺癌と称される。故に、転移性がんという語句は、対象が原発性腫瘍を有するかまたはそれを有していたとともに、１つまたは複数の続発性腫瘍を有する、疾患を指す。非転移性がんまたは転移性でないがんを有する対象という語句は、対象が原発性腫瘍を有するが、１つまたは複数の続発性腫瘍は有しない、疾患を指す。例えば、転移性肺癌とは、原発性肺腫瘍を有するかまたはその病歴を有するとともに、第２の箇所または複数の箇所、例えば乳房において、１つまたは複数の続発性腫瘍を有する対象における、疾患を指す。
【０５０３】
一部の実施形態では、抗がん剤と組み合わせた、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、がんの治療方法または予防方法が本明細書に提供される。抗がん剤は、がんの成長を低減するか、がん細胞の複製を妨害するか、がん細胞を直接もしくは間接的に殺傷するか、転移を低減するか、腫瘍への血液供給を低減するか、または細胞の生存を低減することができる任意の薬剤であり得る。一部の実施形態では、抗がん剤は、ＰＤ−１阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、ＣＴＬＡ−４阻害剤、ＢＴＬＡ阻害剤、Ｂ７Ｈ４阻害剤、Ｂ７Ｈ３阻害剤、ＣＳＦＩＲ阻害剤、ＨＶＥＭ阻害剤、ＣＤ２７阻害剤、ＫＩＲ阻害剤、ＮＫＧ２Ａ阻害剤、ＮＫＧ２Ｄアゴニスト、ＴＷＥＡＫ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＣＤ５２標的化抗体、ＣＣＲ４標的化抗体、ＰＤ−Ｌ１阻害剤、ＫＩＴ阻害剤、ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＢＡＦＦ阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＶＥＧＦリガンド阻害剤、ＣＤ１９標的化分子、ＦＯＬＲ１標的化分子、ＤＬＬ３標的化分子、ＤＫＫ１標的化分子、ＭＵＣ１標的化分子、ＭＵＣ１６標的化分子、ＰＳＭＡ標的化分子、ＭＳＬＮ標的化分子、ＮＹ−ＥＳ０−１標的化分子、Ｂ７Ｈ３標的化分子、Ｂ７Ｈ４標的化分子、ＢＣＭＡ標的化分子、ＣＤ２９標的化分子、ＣＤ１５１標的化分子、ＣＤ１２３標的化分子、ＣＤ３３標的化分子、ＣＤ３７標的化分子、ＣＤＨ１９標的化分子、ＣＥＡ標的化分子、クローディン１８．２標的化分子、ＣＬＥＣ１２Ａ標的化分子、ＥＧＦＲＶＩＩＩ標的化分子、ＥＰＣＡＭ標的化分子、ＥＰＨＡ２標的化分子、ＦＣＲＨ５標的化分子、ＦＬＴ３標的化分子、ＧＤ２標的化分子、グリピカン３標的化分子、ｇｐＡ３３標的化分子、ＧＰＲＣ５Ｄ標的化分子、ＩＬ−２３Ｒ標的化分子、ＩＬ−１ＲＡＰ標的化分子、ＭＣＳＰ標的化分子、ＲＯＮ標的化分子、ＲＯＲ１標的化分子、ＳＴＥＡＰ２標的化分子、ＴｆＲ標的化分子、ＣＤ１６６標的化分子、ＴＰＢＧ標的化分子、ＴＲＯＰ２標的化分子、プロテアソーム阻害剤、ＡＢＬ阻害剤、ＣＤ３０阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ＭＥＴ阻害剤、ＲＥＴ阻害剤、ＩＬ−１β阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＲＯＳ１阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤、ＣＤ３８阻害剤、ＲＡＮＫＬ阻害剤、Ｂ４ＧＡＬＮＴ１阻害剤、ＳＬＡＭＦ７阻害剤、ＩＤＨ２阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、ＣＤ２０標的化抗体、ＢＴＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、ＣＤＫ４阻害剤、ＣＤＫ６阻害剤、ＦＧＦＲ阻害剤、ＲＡＦ阻害剤、ＪＡＫ１阻害剤、ＪＡＫ２阻害剤、ＪＡＫ３阻害剤、ＩＬ−６阻害剤、ＩＬ−１７阻害剤、スムーズンド阻害剤、ＩＬ−６Ｒ阻害剤、ＢＣＬ２阻害剤、ＰＴＣＨ阻害剤、ＰＩＧＦ阻害剤、ＴＧＦＢ阻害剤、ＣＤ２８アゴニスト、ＣＤ３アゴニスト、ＣＤ４０アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＶＩＳＴＡアゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＬＡＧ３阻害剤、ＴＩＭ３阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、及びＩＬ−２Ｒ阻害剤からなる群から選択される。
【０５０４】
一部の実施形態では、抗炎症剤と組み合わせた、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインの投与による、がんの治療方法または予防方法が本明細書に提供される。抗炎症剤は、炎症を予防するか、それに対抗するか、それを阻害するか、または他の様態で低減することができる任意の薬剤であり得る。
【０５０５】
一部の実施形態では、抗炎症剤は、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）阻害剤である。ＣＯＸ阻害剤は、ＣＯＸ−１及び／またはＣＯＸ−２の活性を阻害する任意の薬剤であり得る。一部の実施形態では、ＣＯＸ阻害剤は、ＣＯＸ−１を選択的に阻害する（すなわち、ＣＯＸ阻害剤は、それがＣＯＸ−２の活性を阻害するよりも大きくＣＯＸ−１の活性を阻害する）。一部の実施形態では、ＣＯＸ阻害剤は、ＣＯＸ−２を選択的に阻害する（すなわち、ＣＯＸ阻害剤は、それがＣＯＸ−１の活性を阻害するよりも大きくＣＯＸ−２の活性を阻害する）。一部の実施形態では、ＣＯＸ阻害剤は、ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２の両方を阻害する。
【０５０６】
一部の実施形態では、ＣＯＸ阻害剤は、選択的ＣＯＸ−１阻害剤であり、ＳＣ−５６０、ＦＲ１２２０４７、Ｐ６、モフェゾラク、ＴＦＡＰ、フルルビプロフェン、及びケトプロフェンからなる群から選択される。一部の実施形態では、ＣＯＸ阻害剤は、選択的ＣＯＸ−２阻害剤であり、セレコキシブ、ロフェコキシブ、メロキシカム、ピロキシカム、デラコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ、エトリコキシブ、クロメン誘導体、クロマン誘導体、Ｎ−（２−シクロヘキシルオキシニトロフェニル）メタンスルホンアミド、パレコキシブ、ルミラコキシブ、ＲＳ５７０６７、Ｔ−６１４、ＢＭＳ−３４７０７０、ＪＴＥ−５２２、Ｓ−２４７４、ＳＶＴ−２０１６、ＣＴ−３、ＡＢＴ−９６３、ＳＣ−５８１２５、ニメスリド、フロスリド、ＮＳ−３９８、Ｌ−７４５３３７、ＲＷＪ−６３５５６、Ｌ−７８４５１２、ダルブフェロン、ＣＳ−５０２、ＬＡＳ−３４４７５、ＬＡＳ−３４５５５、Ｓ−３３５１６、ジクロフェナク、メフェナム酸、及びＳＤ−８３８１からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＣＯＸ阻害剤は、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトロラック、インドメタシン、アスピリン、ナプロキセン、トルメチン、ピロキシカム、及びメクロフェナム酸からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＣＯＸ阻害剤は、ＳＣ−５６０、ＦＲ１２２０４７、Ｐ６、モフェゾラク、ＴＦＡＰ、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブ、メロキシカム、ピロキシカム、デラコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ、エトリコキシブ、クロメン誘導体、クロマン誘導体、Ｎ−（２−シクロヘキシルオキシニトロフェニル）メタンスルホンアミド、パレコキシブ、ルミラコキシブ、ＲＳ５７０６７、Ｔ−６１４、ＢＭＳ−３４７０７０、ＪＴＥ−５２２、Ｓ−２４７４、ＳＶＴ−２０１６、ＣＴ−３、ＡＢＴ−９６３、ＳＣ−５８１２５、ニメスリド、フロスリド、ＮＳ−３９８、Ｌ−７４５３３７、ＲＷＪ−６３５５６、Ｌ−７８４５１２、ダルブフェロン、ＣＳ−５０２、ＬＡＳ−３４４７５、ＬＡＳ−３４５５５、Ｓ−３３５１６、ジクロフェナク、メフェナム酸、ＳＤ−８３８１、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトロラック、インドメタシン、アスピリン、ナプロキセン、トルメチン、ピロキシカム、及びメクロフェナム酸からなる群から選択される。
【０５０７】
一部の実施形態では、抗炎症剤は、ＮＦ−κＢ阻害剤である。ＮＦ−κＢ阻害剤は、ＮＦ−κＢ経路の活性を阻害する任意の薬剤であり得る。一部の実施形態では、ＮＦ−κＢ阻害剤は、ＩＫＫ複合体阻害剤、ＩκＢ分解阻害剤、ＮＦ−κＢ核移行阻害剤、ｐ６５アセチル化阻害剤、ＮＦ−κＢ  ＤＮＡ結合阻害剤、ＮＦ−κＢトランス活性化阻害剤、及びｐ５３誘導阻害剤からなる群から選択される。
【０５０８】
一部の実施形態では、ＩＫＫ複合体阻害剤は、ＴＰＣＡ−１、ＮＦ−κＢ活性化阻害剤ＶＩ（ＢＯＴ−６４）、ＢＭＳ−３４５５４１、アンレキサノクス、ＳＣ−５１４（ＧＫ−０１１４０）、ＩＭＤ−０３５４、及びＩＫＫ−１６からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＩκＢ分解阻害剤は、ＢＡＹ−１１−７０８２、ＭＧ−１１５、ＭＧ−１３２、ラクタシスチン、エポキソミシン、パルテノライド、カーフィルゾミブ、及びＭＬＮ−４９２４（ペボネジスタット）からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＮＦ−κＢ核移行阻害剤は、ＪＳＨ−２３及びロリプラムからなる群から選択される。一部の実施形態では、ｐ６５アセチル化阻害剤は、没食子酸及びアナカルジン酸からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＮＦ−κＢ  ＤＮＡ結合阻害剤は、ＧＹＹ−４１３７、ｐ−ＸＳＣ、ＣＶ−３９８８、及びプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）からなる群から選択される。一部の実施形態では、ＮＦ−κＢトランス活性化阻害剤は、ＬＹ−２９４００２、ウォルトマンニン、及びメサラミンからなる群から選択される。一部の実施形態では、ｐ５３誘導阻害剤は、キナクリン及びフラボピリドールからなる群から選択される。一部の実施形態では、ＮＦ−κＢ阻害剤は、ＴＰＣＡ−１、ＮＦ−κＢ活性化阻害剤ＶＩ（ＢＯＴ−６４）、ＢＭＳ−３４５５４１、アンレキサノクス、ＳＣ−５１４（ＧＫ−０１１４０）、ＩＭＤ−０３５４、ＩＫＫ−１６、ＢＡＹ−１１−７０８２、ＭＧ−１１５、ＭＧ−１３２、ラクタシスチン、エポキソミシン、パルテノライド、カーフィルゾミブ、ＭＬＮ−４９２４（ペボネジスタット）、ＪＳＨ−２３ロリプラム、没食子酸、アナカルジン酸、ＧＹＹ−４１３７、ｐ−ＸＳＣ、ＣＶ−３９８８、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、ＬＹ−２９４００２、ウォルトマンニン、メサラミン、キナクリン、及びフラボピリドールからなる群から選択される。
【０５０９】
一部の実施形態では、抗がん治療用タンパク質と組み合わせた、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、がんの治療方法または予防方法が本明細書に提供される。抗がん治療用タンパク質は、がんの成長を低減するか、がん細胞の複製を妨害するか、がん細胞を直接もしくは間接的に殺傷するか、転移を低減するか、腫瘍への血液供給を低減するか、または細胞の生存を低減することができる任意の治療用タンパク質であり得る。代表的な抗がん治療用タンパク質は、抗体またはその断片、抗体誘導体、二重特異性抗体、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞、融合タンパク質、または二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）の形態で存在し得る。
【０５１０】
一部の実施形態では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインまたは組成物の投与による、炎症性疾患または自己免疫疾患の治療方法または予防方法が本明細書に提供される。「炎症性疾患」という用語は、炎症によって引き起こされるか、それからもたらされるか、またはそれをもたらす疾患を指す。「自己免疫疾患」という用語は、対象自身の免疫系がそれ自身の細胞または組織を攻撃する疾患を指す。
【０５１１】
一部の実施形態では、炎症性疾患または自己免疫疾患は、アテローム性動脈硬化症、肥満、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、関節リウマチ、アレルギー性脳炎、乾癬、アトピー性皮膚疾患、骨粗鬆症、腹膜炎、肝炎、ループス、セリアック病、シェーグレン症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性硬化症（ＭＳ）、強直性脊椎炎、真性１型糖尿病、円形脱毛症、血管炎、及び側頭動脈炎、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、喘息、ＣＯＰＤ、傍腫瘍性自己免疫疾患、軟骨炎症、若年性関節炎、若年性関節リウマチ、少関節型若年性関節リウマチ、多関節型若年性関節リウマチ、全身型若年性関節リウマチ、若年性強直性脊椎炎、若年性腸炎性関節炎、若年性反応性関節炎、若年性ライター症候群、ＳＥＡ症候群（血清陰性、腱付着部症、関節症症候群）、若年性皮膚筋炎、若年性乾癬性関節炎、若年性強皮症、若年性全身性エリテマトーデス、若年性血管炎、少関節型関節リウマチ、全身型関節リウマチ、腸炎性関節炎、反応性関節炎、ライター症候群、皮膚筋炎、乾癬性関節炎、強皮症、血管炎、筋炎（ｍｙｏｌｉｔｉｓ）、多発性筋炎（ｐｏｌｙｍｙｏｌｉｔｉｓ）、皮膚筋炎（ｄｅｒｍａｔｏｍｙｏｌｉｔｉｓ）、結節性多発動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、動脈炎、リウマチ性多発筋痛症（ｐｌｏｙｍｙａｌｇｉａ  ｒｈｅｕｍａｔｉｃａ）、サルコイドーシス、硬化症、原発性胆汁性硬化症（ｐｒｉｍａｒｙ  ｂｉｌｉａｒｙ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、硬化性胆管炎、乾癬、尋常性乾癬、滴状乾癬、逆乾癬、膿疱性乾癬、乾癬性紅皮症、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、アテローム性動脈硬化症、スティル病、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、重症筋無力症、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、副鼻腔炎、鼻茸を伴う副鼻腔炎、好酸球性食道炎、好酸球性気管支炎、ギラン・バレー疾患、甲状腺炎（例えば、グレーブス病）、アジソン病、レイノー現象、自己免疫性肝炎、移植拒絶反応、腎障害、Ｃ型肝炎誘発性血管炎、及び自然流産からなる群から選択される。
【０５１２】
Ｖ．製品またはキット
別の態様では、本明細書に記載の任意のマスクされたサイトカインを含む製品またはキットが提供される。製品またはキットは、本発明の方法におけるサイトカインの使用説明書をさらに含んでもよい。故に、ある特定の実施形態では、製品またはキットは、有効量のマスクされたサイトカインを個体に投与することを含む、個体において障害（例えば、がん）を治療するかまたは予防するための方法における、マスクされたサイトカインの使用説明書を含む。例えば、ある特定の実施形態では、製品またはキットは、有効量のマスクされたＩＬ−２ポリペプチドを個体に投与することを含む、個体において障害（例えば、がん）を治療するかまたは予防するための方法における、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドの使用説明書を含む。ある特定の実施形態では、個体は、ヒトである。一部の実施形態では、個体は、白血病、リンパ腫、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、膵臓癌、黒色腫、乳癌、神経芽細胞腫、肺癌、卵巣癌、骨肉腫、膀胱癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、皮膚癌、または精巣癌からなる群から選択される疾患を有する。
【０５１３】
製品またはキットは、容器をさらに含んでもよい。好適な容器には、例えば、ボトル、バイアル（例えば、デュアルチャンバーバイアル）、シリンジ（例えば、シングルまたはデュアルチャンバーシリンジ）、試験管、及び静脈内（ＩＶ）バッグが含まれる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な材料から形成され得る。容器は、製剤を保持する。一部の実施形態では、製剤は、凍結乾燥製剤である。一部の実施形態では、製剤は、凍結した製剤である。一部の実施形態では、製剤は、液体製剤である。
【０５１４】
製品またはキットは、容器に付いているかまたはそれと関連付けられているラベルまたは添付文書をさらに含んでもよく、製剤の再構成及び／または使用のための指示を示し得る。ラベルまたは添付文書はさらに、製剤が、個体において障害（例えば、がん）を治療するかまたは予防するために、皮下投与、静脈内投与、または他の投与様式に有用であるかまたはそれを意図していることを示し得る。製剤を保持している容器は、単回使用バイアル、または再構成された製剤の反復投与を可能にする複数回使用バイアルであり得る。製品またはキットは、好適な希釈剤を含む第２の容器をさらに含んでもよい。製品またはキットは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、シリンジ、及び使用説明書を有する添付文書を含めた、商業的観点、治療的観点、及び使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【０５１５】
具体的な実施形態では、本発明は、単回用量の投与単位のためのキットを提供する。かかるキットは、シングルチャンバープレフィルドシリンジまたはマルチチャンバープレフィルドシリンジの両方を含む、治療用サイトカインの水性製剤の容器を含む。代表的なプレフィルドシリンジは、Ｖｅｔｔｅｒ  ＧｍｂＨ（Ｒａｖｅｎｓｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）から入手可能である。
【０５１６】
本明細書の製品またはキットは、任意選択で、第２の医薬を含む容器をさらに含み、この場合、マスクされたサイトカインが第１の医薬であり、当該品またはキットは、ラベルまたは添付文書において、対象を有効量の第２の医薬で治療するための説明書をさらに含む。
【０５１７】
別の実施形態では、自動注入デバイスでの投与に向けた、本明細書に記載の製剤を含む製品またはキットが本明細書に提供される。自動注入装置は、作動されると、患者または投与提供者による追加の必要な行為を伴わずにその内容物を送達する、注射デバイスとして説明され得る。それらは、送達速度が一定でなければならず、かつ送達時間が少しの間を超える場合の治療用製剤の自己投薬に特に適している。
【０５１８】
ＶＩ．定義
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての専門用語、表記、ならびに他の技術用語及び科学用語または術語は、特許請求される発明の主題が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有することを意図する。場合によっては、一般的に理解される意味を有する用語が、明確にするために及び／または参照を容易にするために本明細書で定義され、かかる定義の本明細書への組み込みは、必ずしも、当該技術分野で一般に理解される意味に対する実質的な相違を表すように解釈されるべきではない。
【０５１９】
本発明は特定の組成物または生物系に限定されず、これらは当然ながら様々であり得ることを理解されたい。本明細書で使用される術語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としており、限定することは意図していないことも理解されたい。本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、内容が別途明確に指示しない限り、複数形の指示対象を含む。故に、例えば、「（ａｎ）ＩＬ−２ポリペプチド」への言及は、任意選択で、２つ以上のかかるポリペプチドの組み合わせを含み、その他も同様である。
【０５２０】
本明細書で使用される「約」という用語は、当業者には容易に分かる、それぞれの値の通常の誤差範囲を指す。本明細書における「約」値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータ自体を対象とする実施形態を含む（かつ説明する）。
【０５２１】
本明細書に記載の本発明の態様及び実施形態は、態様及び実施形態「を含むこと」、それら「からなること」、及びそれら「から本質的になること」を含むことが理解される。
【０５２２】
本明細書で使用されるとき、「及び／または」という用語は、この用語が関連付けられる単位体のうちのいずれか１つ、単位体の任意の組み合わせ、または単位体の全てを指す。例えば、「Ａ、Ｂ、及び／またはＣ」という語句は、以下の実施形態、すなわち、Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＢ；ＡまたはＣ；ＢまたはＣ；Ａ及びＢ；Ａ及びＣ；Ｂ及びＣ；Ａ及びＢまたはＣ；Ｂ及びＡまたはＣ；Ｃ及びＡまたはＢ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；ならびにＣ（単独）の各々を包含することを意図する。
【０５２３】
「抗体」という用語は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体（免疫グロブリンＦｃ領域を有する完全長抗体を含む）、ポリエピトープ（ｐｏｌｙｅｐｉｔｏｐｉｃ）特異性を有する抗体組成物、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体、ダイアボディ、及び一本鎖分子、ならびに抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ）を含む。「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、本明細書で「抗体」と互換的に使用される。
【０５２４】
「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片を指し、これらの断片は、同じポリペプチド鎖内に軽鎖可変（ＶＬ）ドメインとつなげられた重鎖可変（ＶＨ）ドメインを含む（ＶＨ−ＶＬ）。
【０５２５】
基本的な４本鎖抗体ユニットは、２本の同一の軽（Ｌ）鎖及び２本の同一の重（Ｈ）鎖から構成されるヘテロ四量体糖タンパク質である。ＩｇＭ抗体は、５つの基本的なヘテロ四量体ユニットに加えてＪ鎖と呼ばれる追加のポリペプチドからなり、１０個の抗原結合部位を含有する一方で、ＩｇＡ抗体は、２〜５つの基本的な４本鎖ユニットを含み、これらはＪ鎖と組み合わさって重合して多価集合体を形成し得る。ＩｇＧの場合、４本鎖ユニットは一般に、約１５０，０００ダルトンである。各Ｌ鎖は、１つの共有結合性のジスルフィド結合によってＨ鎖に連結されている一方で、２本のＨ鎖は、Ｈ鎖アイソタイプに応じて１つまたは複数のジスルフィド結合によって互いに連結されている。各Ｈ鎖及びＬ鎖はまた、一定間隔で離間した鎖間ジスルフィド架橋も有する。各Ｈ鎖は、Ｎ末端に可変ドメイン（ＶＨ）、続いてα鎖及びγ鎖の各々については３つの定常ドメイン（ＣＨ）、μ及びεアイソタイプについては４つのＣＨドメインを有する。各Ｌ鎖は、Ｎ末端に可変ドメイン（ＶＬ）、続いてその他方の端部に定常ドメインを有する。ＶＬは、ＶＨと整列しており、ＣＬは、重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）と整列している。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。ＶＨとＶＬとが一緒に対合することにより、単一の抗原結合部位が形成される。異なるクラスの抗体の構造及び性質については、例えば、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｄａｎｉｅｌ  Ｐ．Ｓｔｉｅｓ，Ａｂｂａ  Ｉ．Ｔｅｒｒ  ａｎｄ  Ｔｒｉｓｔｒａｍ  Ｇ．Ｐａｒｓｏｌｗ（ｅｄｓ），Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４の７１ページ及び第６章を参照されたい。
【０５２６】
任意の脊椎動物種由来のＬ鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ及びラムダと呼ばれる２つの明確に異なる種類のうちの１つに割り当てることができる。それらの重鎖の定常ドメイン（ＣＨ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスまたはアイソタイプに割り当てることができる。ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭの５つのクラスの免疫グロブリンが存在し、それぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと表記される重鎖を有する。γ及びαクラスは、ＣＨ配列及び機能における比較的わずかな相違に基づいてサブクラスにさらに分類され、例えば、ヒトは、以下のサブクラス、すなわち、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を発現する。ＩｇＧ１抗体は、アロタイプと呼ばれる複数の多型バリアントで存在し得（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ａｎｄ  Ｌｅｆｒａｎｃ  ２００９ｍＡｂｓ  Ｖｏｌ  １  Ｉｓｓｕｅ  ４  １−７に概説される）、これらのうちのいずれも本発明で使用するのに好適である。ヒト集団における一般的なアロタイプバリアントは、文字ａ、ｆ、ｎ、ｚにより表記されるものである。
【０５２７】
「単離された」抗体とは、その産生環境（例えば、天然または組換え）の成分から特定され、分離され、及び／または回収された抗体である。一部の実施形態では、単離されたポリペプチドは、その産生環境からの全ての他の成分と会合していない。組換えトランスフェクション細胞からもたらされる成分等のその産生環境の混入成分は、抗体の研究、診断的、または治療的使用を典型的に妨害するであろう材料であり、これには、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性もしくは非タンパク質性の溶質が含まれ得る。一部の実施形態では、ポリペプチドは、（１）例えばローリー法によって決定したときに、抗体が９５重量％超になるまで、一部の実施形態では、９９重量％超になるまで、（１）スピニングカップシークエネーターの使用により、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度まで、または（３）クマシーブルーもしくは銀染色を用いて、非還元もしくは還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均一になるまで、精製される。単離された抗体には、組み換え細胞内にあるインサイチュの抗体が含まれるが、これは、抗体の天然環境の少なくとも１つの構成成分が存在しないためである。しかしながら、通常は、単離されたポリペプチドまたは抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。
【０５２８】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団に含まれる個々の抗体は、微量で存在し得る、考えられる自然発生変異及び／または翻訳後修飾（例えば、異性化、アミド化）を除いて同一である。一部の実施形態では、モノクローナル抗体は、重鎖及び／または軽鎖にＣ末端切断を有する。例えば、１、２、３、４、または５つのアミノ酸残基が重鎖及び／または軽鎖のＣ末端で切断される。一部の実施形態では、Ｃ末端切断は、重鎖からＣ末端リジンを除去する。一部の実施形態では、モノクローナル抗体は、重鎖及び／または軽鎖にＮ末端切断を有する。例えば、１、２、３、４、または５つのアミノ酸残基が重鎖及び／または軽鎖のＮ末端で切断される。一部の実施形態では、短縮型のモノクローナル抗体が組換え技法によって作製され得る。一部の実施形態では、モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられている。一部の実施形態では、モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、複数の抗原部位に対して向けられている（例えば、二重特異性抗体または多重特異性抗体）。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体集団から得られるような抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするように解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法、組換えＤＮＡ法、ファージディスプレイ技術、及びヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一部または全部を有する動物においてヒト抗体またはヒト様抗体を産生させるための技術を含めた、様々な技法によって作製され得る。
【０５２９】
「完全長抗体」、「インタクトな抗体」、または「全抗体」という用語は、抗体断片とは対照的に、その実質的にインタクトな形態にある抗体を指して互換的に使用される。具体的に述べると、全抗体は、Ｆｃ領域を含む重鎖及び軽鎖を有するものを含む。定常ドメインは、ネイティブ配列の定常ドメイン（例えば、ヒトネイティブ配列の定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列バリアントであり得る。場合によっては、インタクトな抗体は、１つまたは複数のエフェクター機能を有し得る。
【０５３０】
「抗体断片」は、インタクトな抗体の抗原結合領域及び／または可変領域、及び／またはインタクトな抗体の定常領域等の、インタクトな抗体の一部分を含む。抗体断片の例としては、抗体のＦｃ領域、Ｆｃ領域の一部分、またはＦｃ領域を含む抗体の一部分が挙げられる。抗原結合抗体断片の例としては、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片；ダイアボディ；直鎖状抗体（米国特許第５，６４１，８７０号、実施例２、Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７−１０６２  ［１９９５］を参照されたい）；一本鎖抗体分子、ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられる。単重鎖抗体または単軽鎖抗体が操作され得るか、または重鎖の場合、ラクダ科動物、サメ、ライブラリ、または単重鎖分子を産生するように操作されたマウスから単離することができる。
【０５３１】
抗体のパパイン消化により、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片、及び容易に結晶化する能力を反映しての表記である、残りの「Ｆｃ」断片がもたらされた。Ｆａｂ断片は、Ｌ鎖全体に加えて、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（ＶＨ）、及び一方の重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）からなる。各Ｆａｂ断片は、抗原結合に関して一価であり、すなわち、それは単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、単一の大きなＦ（ａｂ’）２断片を生み出し、これは、異なる抗原結合活性を有する２つのジスルフィド結合されたＦａｂ断片にほぼ対応し、依然として抗原を架橋することができる。Ｆａｂ’断片は、ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端において抗体のヒンジ領域からの１つまたは複数のシステインを含む少数の追加の残基を有することにより、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基をもつＦａｂ’に対する、本明細書における表記である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元々、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として産生された。抗体断片の他の化学的カップリングもまた既知である。Ｆｃ断片は、ジスルフィドによって一緒に結び付けられた両Ｈ鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクター機能は、ある特定の種類の細胞上に見出されるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される領域でもあるＦｃ領域における配列及びグリカンによって決定される。
【０５３２】
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義して使用され、ネイティブ配列のＦｃ領域及びバリアントＦｃ領域が含まれる。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位のアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端まで伸びると定義される。本発明の抗体において使用するのに好適なネイティブ配列のＦｃ領域には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４が含まれる。
【０５３３】
「サイトカイン」という用語は、細胞、特に免疫系の細胞の活性を調節する、分泌型ポリペプチドまたはその活性断片もしくは変異体を指す。サイトカインの例としては、例えば、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、リンホカイン、及び腫瘍壊死因子が挙げられる。この用語は、任意のサイトカインタンパク質、またはその機能的断片もしくはバリアントを包含する。別途指示されない限り、この用語は、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯類（例えば、ラット及びマウス）等の哺乳動物を含めた任意の脊椎動物源由来の任意のネイティブサイトカインを包含する。この用語は、プロセシングされていない形態のサイトカインならびに細胞におけるプロセシングからもたらされる任意の形態のサイトカインを包含する。この用語はまた、天然に存在するサイトカインのバリアントも包含する。この用語はまた、短縮、欠失、サイトカインが別の分子に連結されている形態、及びアミノ酸配列に対する少なくとも１つのアミノ酸の変化によって（例えば、置換、付加、または欠失によって）引き起こされるバリアント等の、天然に存在しないサイトカインのバリアントも包含する。一部の態様では、バリアントまたはホモログは、天然に存在するサイトカインポリペプチドと比較して、全配列または配列の一部分（例えば、５０、１００、１２５、もしくは１５０個またはそれよりも多くの連続アミノ酸の部分）にわたって少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有する。
【０５３４】
本明細書で使用される「ＩＬ−２」または「ＩＬ−２ポリペプチド」という用語は、任意のインターロイキン−２（ＩＬ−２）タンパク質、またはその機能的断片もしくはバリアントを指す。別途指示されない限り、この用語は、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯類（例えば、ラット及びマウス）等の哺乳動物を含めた任意の脊椎動物源由来の任意のネイティブＩＬ−２を包含する。この用語は、プロセシングされていないＩＬ−２（例えば、アミノ酸残基１〜１５３からなる完全長の前駆体形態のＩＬ−２）ならびに細胞におけるプロセシングからもたらされる任意の形態のＩＬ−２（例えば、アミノ酸残基２１〜１５３からなる成熟形態のＩＬ−２）を包含する。かくして、この用語は、配列番号１６０のアミノ酸配列によってコードされるタンパク質、ならびにその配列バリアントを包含する。この用語はまた、天然に存在するＩＬ−２のバリアントも包含する。この用語はまた、短縮、欠失、ＩＬ−２が別の分子に連結されている形態、及びアミノ酸配列に対する少なくとも１つのアミノ酸の変化によって（例えば、置換、付加、または欠失によって）引き起こされるバリアント等の、天然に存在しないＩＬ−２のバリアントも包含する。一部の態様では、バリアントまたはホモログは、配列番号１５９または１６０のアミノ酸配列によってコードされるＩＬ−２ポリペプチド等の天然に存在するＩＬ−２ポリペプチドと比較して、全配列または配列の一部分（例えば、５０、１００、または１３３個の連続アミノ酸の部分）にわたって少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有する。かくして、「ＩＬ−２」または「ＩＬ−２ポリペプチド」という用語は、配列番号１〜８、１５９、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＩＬ−２タンパク質を含み、これには配列番号１〜８、１５９、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対する１つまたは複数のアミノ酸置換によって作出されるバリアント等のそのバリアントが含まれる。
【０５３５】
本明細書で使用される「ＩＬ−１５」または「ＩＬ−１５ポリペプチド」という用語は、任意のインターロイキン−１５（ＩＬ−１５）タンパク質、またはその機能的断片もしくはバリアントを指す。別途指示されない限り、この用語は、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯類（例えば、ラット及びマウス）等の哺乳動物を含めた任意の脊椎動物源由来の任意のネイティブＩＬ−１５を包含する。この用語は、プロセシングされていないＩＬ−１５（例えば、アミノ酸残基１〜１６２からなる完全長の前駆体形態のＩＬ−１５）ならびに細胞におけるプロセシングからもたらされる任意の形態のＩＬ−１５（例えば、アミノ酸残基４９〜１６２からなる成熟形態のＩＬ−１５）を包含する。かくして、この用語は、配列番号１６７のアミノ酸配列によってコードされるタンパク質、ならびにその配列バリアントを包含する。この用語はまた、天然に存在するＩＬ−１５のバリアントも包含する。この用語はまた、短縮、欠失、ＩＬ−１５が別の分子に連結されている形態、及びアミノ酸配列に対する少なくとも１つのアミノ酸の変化によって（例えば、置換、付加、または欠失によって）引き起こされるバリアント等の、天然に存在しないＩＬ−１５のバリアントも包含する。一部の態様では、バリアントまたはホモログは、配列番号１６６または１６７のアミノ酸配列によってコードされるＩＬ−１５ポリペプチド等の天然に存在するＩＬ−１５ポリペプチドと比較して、全配列または配列の一部分（例えば、５０、１００、または１１４個の連続アミノ酸の部分）にわたって少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有する。かくして、「ＩＬ−１５」または「ＩＬ−１５ポリペプチド」という用語は、配列番号１６６または１６７のアミノ酸配列を含むＩＬ−１５タンパク質を含み、これには配列番号１６６または１６７のアミノ酸配列に対する１つまたは複数のアミノ酸置換によって作出されるバリアント等のそのバリアントが含まれる。
【０５３６】
サイトカインの「機能的断片」は、サイトカイン受容体結合能を保持するか、または修飾されたサイトカイン受容体結合能（例えば、完全長サイトカインタンパク質と比較して少なくとも５０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％以内の活性）を有する、完全長サイトカインタンパク質の一部分を含む。完全長サイトカインタンパク質は、野生型サイトカインタンパク質の完全長サイトカインタンパク質であり得るか、またはそれは、１つもしくは複数のアミノ酸置換によって修飾された完全長サイトカイン等の、サイトカインタンパク質の修飾バリアントの完全長サイトカインタンパク質であり得る。サイトカイン受容体結合能は、例えば、サイトカインが、サイトカインの同系の受容体またはその構成要素（例えば、ヘテロ三量体受容体複合体の１本または複数の鎖（複数可））に結合する能力によって示され得る。本明細書で使用されるとき、「完全長」は、そのプロセシングされていない（すなわち、前駆体）形態またはそのプロセシングされた（すなわち、成熟）形態にあるサイトカインの完全長を指すことができる。この用語はまた、サイトカイン受容体結合能を保持するか、または修飾されたサイトカイン受容体結合能（例えば、完全長サイトカインタンパク質と比較して少なくとも５０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％以内の活性）を有し、かつ１つもしくは複数のアミノ酸欠失、付加、もしくは置換等のアミノ酸配列に対する１つもしくは複数の修飾を含むようにさらに修飾された、完全長タンパク質の一部分も包含する。故に、サイトカインの機能的断片は、完全長サイトカインタンパク質の一部分を包含するだけでなく、完全長サイトカインタンパク質の一部分のバリアントもまた包含する。例えば、ＩＬ−２ポリペプチドの機能的断片は、ＩＬ−２Ｒ結合能を保持するか、または修飾されたＩＬ−２Ｒ結合能（例えば、完全長野生型ＩＬ−２と比較して少なくとも５０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％以内の活性）を有する、完全長ＩＬ−２タンパク質の一部分を含む。ＩＬ−２Ｒ結合能は、例えば、ＩＬ−２ＲのＩＬ−２Ｒα鎖、ＩＬ−２Ｒβ鎖、及び／またはＩＬ−２Ｒγ鎖に、個々にまたは互いと組み合わせてのいずれかで結合する能力によって示され得る。ＩＬ−２の機能的断片には、例えば、配列番号１５９の完全長ＩＬ−２配列のアミノ酸残基２１〜１５３を含むＩＬ−２タンパク質、ならびに当該アミノ酸配列に対して１つまたは複数の置換を含むバリアント等のそのバリアントが含まれる。かくして、ＩＬ−２の機能的断片は、例えば、配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むＩＬ−２タンパク質を含む。ＩＬ−１５の機能的断片は、例えば、配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＩＬ−１５タンパク質を含む。
【０５３７】
任意のサイトカインまたはその機能的断片を説明するために本明細書で使用される「活性化可能」という用語は、サイトカインまたはその機能的断片が、好ましい環境でのサイトカインまたはその機能的断片の活性化を可能にする、マスキング部分、及び一部の実施形態では他の構成要素を含むように修飾されていることを意味する。例えば、好ましい環境での活性化のためにマスキング部分を含むように修飾されたサイトカインまたはその機能的断片は、本明細書で「活性化可能サイトカイン」、または「マスクされたサイトカイン」、または「活性化可能なマスクされたサイトカイン」と称され得る。かくして、「マスクされたサイトカイン」という用語は、好ましい環境でのサイトカインまたはその機能的断片の活性化を可能にする、マスキング部分、及び一部の実施形態では切断可能なペプチド等の他の構成要素を含むように修飾された、任意のサイトカインまたはその機能的断片を含む。
【０５３８】
本明細書で使用される「マスキング部分」という用語は、マスキング部分が、サイトカインもしくはその機能的断片の活性またはサイトカインもしくはその機能的断片によるその同系の受容体もしくはタンパク質への結合を遮断するか、閉塞するか、阻害するか（例えば、減少させる）、または他の様態で阻止する（例えば、マスクする）ように、サイトカインまたはその機能的断片に結合可能であるか、または他の様態でそれに対して親和性を表すペプチドを指す。一部の実施形態では、マスキング部分は、サイトカイン受容体、またはそのサブユニットもしくは機能的断片である。
【０５３９】
本明細書で使用される「サイトカイン受容体」という用語は、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８Ｂ、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３４、ＩＬ−３５、ＩＬ−３６、ＩＬ−３７、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）、ＩＦＮ−γ（ガンマ）、ＣＤ２５２、ＣＤ１５４、ＣＤ１７８、ＣＤ７０、ＣＤ１５３、４−１ＢＢ−Ｌ、ＴＲＡＩＬ、ＲＡＮＫＬ、ＡＰＯ３Ｌ、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＴＬ１、ＡＩＴＲＬ、ＥＤＡ１、インターフェロン（ＩＦＮ）−α（アルファ）、ＩＦＮ−β（ベータ）、ＩＦＮ−γ（ガンマ）、成長ホルモン（ＧＨ）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、プロラクチン（ＰＲＬ）、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、オンコスタチン（ＯＳＭ）、及びトロンボポエチン（ＴＰＯ）の受容体を含むがこれらに限定されない、１つまたは複数のサイトカイン（複数可）に結合する当該技術分野の範囲内の任意の受容体を指す。一部のサイトカイン受容体は、全体的または部分的に、１つよりも多くのサブユニットのヘテロマー複合体、またはホモマー複合体として機能する。この用語はまた、個々にまたは１つもしくは複数の他のサイトカイン受容体サブユニットと複合体を形成した際（例えば、ヘテロマーまたはホモマー複合体として）のいずれかで、１つまたは複数のサイトカイン（複数可）に結合可能である、サイトカイン受容体のサブユニットも包含する。かくして、例えば、３つのサブユニットのヘテロマー複合体である「サイトカイン受容体」への言及は、３つ全てのサブユニットを含むヘテロマー複合体、ならびに個々のまたは互いに様々に組み合わさった各サブユニットへの言及を含む。サイトカイン受容体の非限定的な例としては、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ１１、ＸＣＲ１、ＣＸ３ＣＲ１、ＩＬ−１ＲＡＰ、ＩＬ−１ＲＡＰＬ１、ＩＬ−１ＲＡＰＬ２、ＩＬ−１ＲＬ１、ＩＬ−１ＲＬ２、ＩＬ−１Ｒ１、ＩＬ−１Ｒ２、ＩＬ−２Ｒ、ＩＬ−２Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、ＩＬ−２Ｒγ、ＩＬ−３Ｒα、ＩＬ−４Ｒ、ＩＬ−５Ｒα、ＩＬ−６Ｒ、ＩＬ−６ＳＴ、ＩＬ−７Ｒ、ＩＬ−９Ｒ、ＩＬ−１０Ｒα、ＩＬ−１０Ｒβ、ＩＬ−１１Ｒα、ＩＬ−１２Ｒβ１、ＩＬ−１２Ｒβ２、ＩＬ−１３Ｒα１、ＩＬ−１３Ｒα２、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−１７ＲＡ、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＣ、ＩＬ−１７ＲＤ、ＩＬ−１７ＲＥ、ＩＬ−１８ＲＡＰ、ＩＬ−１８Ｒ１、ＩＬ−２０Ｒα、ＩＬ−２０Ｒβ、ＩＬ−２１Ｒ、ＩＬ−２２Ｒα１、ＩＬ−２２Ｒα２、ＩＬ−２３Ｒ、ＩＬ−２７Ｒα、ＩＬ−２８Ｒα、ＩＬ−３１ＲＡ、ＩＦＮＡＲ１、ＩＦＮＡＲ２、ＩＦＮＧＲ１、ＩＦＮＧＲ２、ＩＦＮＬＲ１、ＧＭＲα（ＣＤ１１６）、ＣＤ１３１、ＧＨＲ、ＰＲＬＲ、ＥＰＯＲ、ＬＩＦＲ（ＣＤ１１８）、ＯＳＭＲβ、ＴＰＯ−Ｒ（ＣＤ１１０）、ＣＳＦ−１Ｒ、ＥＤＡＲ、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＬＴＢＲ、ＴＮＦＲＳＦ４、ＣＤ４０、ＦＡＳ、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＣＤ２７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＮＧＦＲ、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＲＥＬＴ、ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、及びＥＤＡ２Ｒが挙げられる。
【０５４０】
本明細書で使用される「ＩＬ−２Ｒ」または「ＩＬ−２受容体」または「ＩＬ−２サイトカイン受容体」という用語は、３つの別個の非共有結合性で連結された鎖であるＩＬ−２Ｒα鎖（ＣＤ２５とも称される）、ＩＬ−２Ｒβ鎖（ＣＤ１２２とも称される）、及びＩＬ−２Ｒγ鎖（ＣＤ１３２とも称される）を含む、高親和性ＩＬ−２受容体複合体を指す。ＩＬ−２は、ＩＬ−２Ｒα鎖に結合可能である。ＩＬ−２はまた、ＩＬ−２Ｒβ鎖と組み合わさったＩＬ−２Ｒα鎖にも結合可能である。ＩＬ−２はまた、ＩＬ−２Ｒβ及びＩＬ−２Ｒγ鎖と組み合わさったＩＬ−２Ｒα鎖にも最も高い親和性で結合可能である。場合によっては、この用語はまた、ＩＬ−２Ｒα鎖、ＩＬ−２Ｒβ鎖、もしくはＩＬ−２Ｒγ鎖、またはそれらの組み合わせも包含する。
【０５４１】
本明細書で使用される「ＩＬ−１５Ｒ」または「ＩＬ−１５受容体」または「ＩＬ−１５サイトカイン受容体」という用語は、３つの別個の非共有結合性で連結された鎖であるＩＬ−１５Ｒα鎖、ＩＬ−２Ｒβ鎖、及びＩＬ−２Ｒγ鎖を含む、高親和性ＩＬ−１５受容体複合体を指す。ＩＬ−１５は、ＩＬ−１５Ｒα鎖、ＩＬ−２Ｒβ鎖及びＩＬ−２Ｒγ鎖のヘテロ二量体、ならびにＩＬ−２Ｒβ鎖及びＩＬ−２Ｒγ鎖と組み合わさったＩＬ−１５Ｒα鎖に結合可能である。場合によっては、この用語はまた、ＩＬ−１５Ｒα鎖、ＩＬ−２Ｒβ鎖、もしくはＩＬ−２Ｒγ鎖、またはそれらの組み合わせも包含する。
【０５４２】
「半減期延長ドメイン」という用語は、血清中の標的構成要素の半減期を延長する目的で標的構成要素（例えば、サイトカインもしくはその機能的断片、またはマスキング部分）に連結されているドメインを指す。「半減期延長ドメイン」という用語は、例えば、抗体、抗体断片、二重特異性抗体、アルブミン、結合タンパク質（例えば、アルブミン結合タンパク質及びＩｇＧ結合タンパク質）、ポリアミノ酸配列、及び抗体誘導体（例えば、ｓｃＦｖｓ、ｓｃＦｃｓ、二重可変ドメイン、及びＣｒｏｓｓＭａｂ手法に基づく抗体誘導体）を包含する。
【０５４３】
参照ポリペプチド配列に対する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」は、配列をアライメントし、必要であればギャップを導入して最大の配列同一性パーセントを達成した後に、いずれの保存的置換も配列同一性の一部として考慮せずに、参照ポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的でのアライメントは、当業者の技能の範囲内である種々の方式で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア等の公衆に利用可能なコンピュータソフトウェアを用いて達成することができる。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含めた、配列をアライメントするために適切なパラメータを決定することができる。例えば、所与のアミノ酸配列Ａの、所与のアミノ酸配列Ｂに対する、それとの、またはそれと対比したアミノ酸配列同一性％（これは代替として、所与のアミノ酸配列Ｂに対して、それと、またはそれと対比してある特定のアミノ酸配列同一性％を有するかまたはそれを含む、所与のアミノ酸配列Ａと表現され得る）は、以下のように計算され、
１００×分数Ｘ／Ｙ
式中、Ｘは、そのプログラムのＡとＢとのアライメントにおいて配列に基づき完全な一致としてスコア化されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂにおけるアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡのＢに対するアミノ酸配列同一性％は、ＢのＡに対するアミノ酸配列同一性％とは等しくならないことが理解されよう。
【０５４４】
抗体「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（ネイティブ配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列バリアントＦｃ領域）に帰すことができる生物学的活性を指し、抗体アイソタイプにより様々である。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害性、Ｆｃ受容体結合、抗原依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御、ならびにＢ細胞活性化が挙げられる。
【０５４５】
本明細書で使用される「結合親和性」は、ある分子（例えば、サイトカイン）の単一の結合部位とその結合パートナー（例えば、サイトカイン受容体）との間の非共有結合性の相互作用の強度を指す。一部の実施形態では、結合タンパク質（例えば、サイトカイン）の親和性は一般に、解離定数（Ｋｄ）によって表され得る。親和性は、本明細書に記載の方法を含めた、当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定され得る。
【０５４６】
本明細書に記載のサイトカインポリペプチドをコードする「単離された」核酸分子は、それが産生された環境において通常は会合している少なくとも１つの混入核酸分子から特定され、分離されている核酸分子である。一部の実施形態では、単離された核酸は、その産生環境に関連する全ての構成成分と会合していない。本明細書のポリペプチド及びサイトカインポリペプチドをコードする単離された核酸分子は、それが自然界で見出される形態または設定以外の形態である。したがって、単離された核酸分子は、細胞中に天然に存在している本明細書のポリペプチド及びサイトカインポリペプチドをコードする核酸とは区別される。
【０５４７】
「薬学的製剤」という用語は、活性成分の生物学的活性が有効となることを可能にするような形態であり、かつ製剤が投与される対象に対して許容できないほどの毒性を示す追加の成分を何ら含有しない調製物を指す。かかる製剤は滅菌されている。
【０５４８】
本明細書で使用される「担体」には、採用される投与量及び濃度でそれに曝露されている細胞または哺乳動物にとって無毒である、薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤が含まれる。多くの場合、生理的に許容される担体は、ｐＨ緩衝水溶液である。生理的に許容される担体の例としては、リン酸、クエン酸、及び他の有機酸等の緩衝液；アスコルビン酸を含む酸化防止剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、もしくはリジン等のアミノ酸；単糖、二糖、及びグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；マンニトールもしくはソルビトール等の糖アルコール；ナトリウム等の塩形成対イオン；及び／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）等の非イオン性界面活性剤が挙げられる。
【０５４９】
本明細書で使用されるとき、「治療」という用語は、臨床病理の経過中に治療されている個体または細胞の自然経過を変化させるように設計された臨床的介入を指す。望ましい治療効果には、疾患進行速度の減少、病状の回復または緩和、及び寛解または予後の改善が含まれる。例えば、障害（例えば、腫瘍性疾患）に関連する１つまたは複数の症状が軽減されるか、または排除される場合、個体は成功裏に「治療される」。例えば、治療が、疾患を患う個体の生活の質の増加、疾患の治療に必要とされる他の薬の用量の減少、疾患の再発頻度の低減、疾患の重症度の低下、疾患の発症もしくは進行の遅延、及び／または個体の生存期間の長期化をもたらす場合、個体は成功裏に「治療される」。
【０５５０】
本明細書で使用されるとき、「と併せて」または「と組み合わせて」は、１つの治療法に加えた別の治療法の施行を指す。かくして、「と併せて」または「と組み合わせて」は、個体への１つの治療法の、他方の治療法の施行前、施行中、または施行後の施行を指す。
【０５５１】
本明細書で使用されるとき、「予防」という用語は、個体における疾患の発生または再発に関して予防法を提供することを含む。個体は、障害の素因があり得るか、障害に感受性があり得るか、または障害を発症するリスクがあり得るが、その障害であると未だに診断されていない。一部の実施形態では、本明細書に記載のマスクされたサイトカインは、障害の発症を遅延させるために使用される。
【０５５２】
本明細書で使用されるとき、障害を発症する「リスクがある」個体は、検出可能な疾患または疾患の症状を有する場合もあれば、有しない場合もあり、本明細書に記載の治療方法の前に検出可能な疾患または疾患の症状を呈している場合もあれば、呈していない場合もある。「リスクがある」は、個体が１つまたは複数のリスク因子を有することを表し、当該技術分野で既知のように、これらのリスク因子は、疾患の発症と相関がある測定可能なパラメータである。これらのリスク因子のうちの１つまたは複数を有する個体は、これらのリスク因子のうちの１つまたは複数を有しない個体よりも、障害を発症する可能性が高い。
【０５５３】
「有効量」は、治療的結果または予防的結果を含めた所望のまたは指示される効果を達成するために必要な投薬量及び期間で少なくとも有効な量を指す。有効量は、１回または複数回の投与で提供され得る。「治療上有効量」は、特定の障害の測定可能な改善をもたらすために必要とされる少なくとも最低濃度である。本明細書の治療上有効量は、患者の病状、年齢、性別、及び体重、ならびに抗体が個体において所望の応答を引き出す能力等の因子に応じて様々であり得る。治療上有効量はまた、治療上有益な効果がマスクされたサイトカインのいずれの毒性作用または有害作用にも勝る量であり得る。「予防上有効量」は、所望の予防的結果を達成するために必要な投薬量及び期間で有効な量を指す。必ずしもそうではないが典型的には、予防的用量は、対象において疾患の早期段階より前または早期段階で使用されるため、予防上有効量は治療上有効量よりも少ない可能性がある。
【０５５４】
「慢性」投与は、最初の治療効果（活性）を長期間維持するような、急性様式とは対照的に継続的な医薬（複数可）の投与を指す。「間欠的」投与は、中断なく連続して行われるのではなく、本質的に周期的な治療である。
【０５５５】
本明細書で使用されるとき、「個体」または「対象」は、哺乳動物である。治療目的における「哺乳動物」には、飼育動物及び家畜動物、ならびに動物園の動物、競技用動物、または愛玩動物、例えば、イヌ、ウマ、ウサギ、ウシ、ブタ、ハムスター、アレチネズミ、マウス、フェレット、ラット、ネコ等が含まれる。一部の実施形態では、個体または対象は、ヒトである。
【０５５６】
ＶＩＩ．代表的な実施形態
提供される実施形態の中には下記がある。
１．マスクされたサイトカインであって、
ａ）マスキング部分と、
ｂ）サイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記マスキング部分が、第１のリンカーを介して前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されている、前記マスクされたサイトカイン。
【０５５７】
２．前記マスキング部分かまたは前記サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインをさらに含む、実施形態１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５５８】
３．前記半減期延長ドメインが、第２のリンカーを介して前記マスキング部分かまたは前記サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかに連結されている、実施形態２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５５９】
４．
ｉ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記マスキング部分、ｂ）前記第１のリンカー、ｃ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、及びｄ）前記半減期延長ドメインを含むか、
ｉｉ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記マスキング部分、ｂ）前記第１のリンカー、ｃ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、ｄ）前記第２のリンカー、及びｅ）前記半減期延長ドメインを含むか、
ｉｉｉ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、ｂ）前記第１のリンカー、ｃ）前記マスキング部分、及びｄ）前記半減期延長ドメインを含むか、または
ｉｖ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、ｂ）前記第１のリンカー、ｃ）前記マスキング部分、ｄ）前記第２のリンカー、及びｅ）前記半減期延長ドメインを含む、実施形態２または実施形態３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６０】
５．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態１〜４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６１】
６．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６２】
７．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＣＤ２５（ＩＬ−２Ｒα）に対する親和性を低減する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６３】
８．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｋ、Ｆ４２Ｅ、Ｋ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、及びＬ７２Ｇのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６４】
９．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６５】
１０．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６６】
１１．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態７または実施形態８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６７】
１２．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆからなる群から選択される、実施形態１１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６８】
１３．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５６９】
１４．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、及びＣ１２５Ｇのうちの１つを導入することによってもたらされる、実施形態１３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７０】
１５．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態７〜１２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７１】
１６．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、アミノ酸置換Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、またはＣ１２５Ｇである、実施形態１５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７２】
１７．前記マスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態５〜１６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７３】
１８．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態１〜４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７４】
１９．前記ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む、実施形態１８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７５】
２０．前記マスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２３２〜２３４、２６１、及び８２３〜８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１８または実施形態１９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７６】
２１．前記マスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態１８または実施形態１９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７７】
２２．前記半減期延長ドメインが、抗体またはその断片である、実施形態２〜２１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７８】
２３．前記抗体またはその断片が、重鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドのいずれかを含む、実施形態２２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５７９】
２４．前記重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８０】
２５．前記重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態２３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８１】
２６．前記重鎖ポリペプチドが、
ａ）ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８２】
２７．前記重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態２５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８３】
２８．前記重鎖ポリペプチドが、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８４】
２９．前記軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含む、実施形態２３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８５】
３０．前記抗体またはその断片が、結晶化可能断片ドメイン（Ｆｃドメイン）またはその断片である、実施形態２２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８６】
３１．前記Ｆｃドメインまたはその断片が、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態３０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８７】
３２．前記Ｆｃドメインまたはその機能的断片が、
ａ）ＩｇＧ１  Ｆｃドメインもしくはその機能的断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２  Ｆｃドメインもしくはその機能的断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４  Ｆｃドメインもしくはその機能的断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８８】
３３．前記Ｆｃドメインまたはその機能的断片が、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態３１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５８９】
３４．前記Ｆｃドメインまたはその機能的断片が、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその機能的断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９０】
３５．前記Ｆｃドメインまたはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む、実施形態３０〜３２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９１】
３６．前記半減期延長ドメインが、アルブミンポリペプチドまたはその断片である、実施形態２〜２１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９２】
３７．前記アルブミンポリペプチドまたはその断片が、配列番号１７１のアミノ酸配列を含む、実施形態３６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９３】
３８．前記半減期延長ドメインが、アルブミン結合タンパク質またはその断片である、実施形態２〜２１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９４】
３９．前記アルブミン結合タンパク質またはその断片が、配列番号１７２〜１７４及び２５２〜２５９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９５】
４０．前記半減期延長ドメインが、ＩｇＧ結合タンパク質またはその断片である、実施形態２〜２１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９６】
４１．前記ＩｇＧ結合タンパク質またはその機能的断片が、配列番号１７５〜１８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態４０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９７】
４２．前記半減期延長ドメインが、ポリアミノ酸配列である、実施形態２〜２１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９８】
４３．前記ポリアミノ酸配列が、ＰＡＳポリペプチドまたはＸＴＥＮポリペプチドである、実施形態４２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０５９９】
４４．前記ＰＡＳポリペプチドが、少なくとも２５、少なくとも５０、少なくとも１００、少なくとも１５０、少なくとも２００、少なくとも２５０、少なくとも３００、少なくとも４００、少なくとも５００、少なくとも６００、少なくとも７００、少なくとも８００、少なくとも９００、少なくとも１０００、少なくとも１１００、少なくとも１２００、少なくとも１３００、少なくとも１５００、少なくとも２０００、少なくとも２５００、または少なくとも３０００アミノ酸残基を含み、各アミノ酸残基が、プロリン残基またはアラニン残基のいずれかである、実施形態４３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６００】
４５．前記ＰＡＳポリペプチドが、少なくとも２５、少なくとも５０、少なくとも１００、少なくとも１５０、少なくとも２００、少なくとも２５０、少なくとも３００、少なくとも４００、少なくとも５００、少なくとも６００、少なくとも７００、少なくとも８００、少なくとも９００、少なくとも１０００、少なくとも１１００、少なくとも１２００、少なくとも１３００、少なくとも１５００、少なくとも２０００、少なくとも２５００、または少なくとも３０００アミノ酸残基を含み、各アミノ酸残基が、プロリン、アラニン、及びセリン残基からなる群から選択される、実施形態４３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０１】
４６．前記ＸＴＥＮポリペプチドが、約２５〜約５００、約２００〜約１０００、約５００〜約１５００、約１０００〜約２０００、または約１５００〜約３０００アミノ酸残基のアミノ酸配列を含み、前記アミノ酸配列の少なくとも約７０％、７５％、８０％、または８５％が、重複しない配列モチーフからなり、前記モチーフの各々が、５〜１００アミノ酸残基、５〜５０アミノ酸残基、または９〜３６アミノ酸残基を有し、前記モチーフの各々の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％が、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン酸（Ｅ）、及びプロリン（Ｐ）からなる群から選択される４、５、または６種類のアミノ酸残基からなり、前記完全長ＸＴＥＮポリペプチドにおけるいずれの１つのアミノ酸の種類の含有量も、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約１５％、約１０％、または約８％を超えない、実施形態４３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０２】
４７．前記マスクされたサイトカインが、前記マスクされたサイトカインに付着した１つまたは複数のＰＥＧポリマー鎖をさらに含む、実施形態１〜４６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０３】
４８．前記１つまたは複数のＰＥＧポリマー鎖が、前記サイトカインもしくはその機能的断片及び／または前記半減期延長ドメインに付着している、実施形態４７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０４】
４９．前記マスクされたサイトカインが、１つまたは複数の追加のＮ結合型及び／またはＯ結合型グリコシル化部位が作出されるように、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている、実施形態１〜４８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０５】
５０．前記マスクされたサイトカインが、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列に１つまたは複数の追加のアスパラギン−Ｘ−セリン（Ｎ−Ｘ−Ｓ）及び／またはアスパラギン−Ｘ−トレオニン（Ｎ−Ｘ−Ｔ）トリペプチド配列（複数可）が導入されるように（ここで、Ｘは、プロリンを除く任意のアミノ酸である）、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている、実施形態４９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０６】
５１．前記マスクされたサイトカインが、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列に１つまたは複数の追加のセリンまたはトレオニン残基が導入されるように、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている、実施形態４９または実施形態５０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０７】
５２．前記第１のリンカーが、第１の切断可能なペプチドを含む、実施形態１〜５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０８】
５３．前記第１のリンカーが、第１のＮ末端スペーサードメイン及び／または第１のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態１〜５２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６０９】
５４．前記第１のリンカーが、
ａ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、前記第１の切断可能なペプチド、及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第１の切断可能なペプチド及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第１のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態５３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１０】
５５．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態５３または実施形態５４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１１】
５６．前記第１のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態５３〜５５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１２】
５７．前記第１のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態５３〜５５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１３】
５８．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態５３または実施形態５４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１４】
５９．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態５８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１５】
６０．前記第１のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１〜５９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１６】
６１．前記第２のリンカーが、第２の切断可能なペプチドを含む、実施形態３〜６０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１７】
６２．前記第２のリンカーが、第２のＮ末端スペーサードメイン及び／または第２のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態３〜６１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１８】
６３．前記第２のリンカーが、
ａ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、前記第２の切断可能なペプチド、及び第２の第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第２の切断可能なペプチド及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第２のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態６２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６１９】
６４．前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態６１〜６３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２０】
６５．前記第２のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態６２〜６４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２１】
６６．前記第２のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態６２〜６５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２２】
６７．前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態６２または実施形態６３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２３】
６８．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態６７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２４】
６９．前記第２のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３〜６８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２５】
７０．マスクされたサイトカインであって、
ａ）第１のマスキング部分と、
ｂ）サイトカインまたはその機能的断片と、
ｃ）第２のマスキング部分と、を含み、
前記第１のマスキング部分が、第１のリンカーを介して前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、
前記第２のマスキング部分が、第２のリンカーを介して前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されている、前記マスクされたサイトカイン。
【０６２６】
７１．前記第１のマスキング部分かまたは前記第２のマスキング部分かのどちらかに連結されている半減期延長ドメインをさらに含む、実施形態７０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２７】
７２．前記半減期延長ドメインが、第３のリンカーを介して前記第１のマスキング部分かまたは前記第２のマスキング部分かのどちらかに連結されている、実施形態７１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２８】
７３．ｉ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記第１のマスキング部分、ｂ）前記第１のリンカー、ｃ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、ｄ）前記第２のリンカー、ｅ）前記第２のマスキング部分、及びｆ）前記半減期延長ドメインを含むか、
ｉｉ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記第１のマスキング部分、ｂ）前記第１のリンカー、ｃ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、ｄ）前記第２のリンカー、ｅ）前記第２のマスキング部分、ｆ）前記第３のリンカー、及びｇ）前記半減期延長ドメインを含むか、
ｉｉｉ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記第２のマスキング部分、ｂ）前記第２のリンカー、ｃ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、ｄ）前記第１のリンカー、ｅ）前記第１のマスキング部分、及びｆ）前記半減期延長ドメインを含むか、または
ｉｖ）前記マスクされたサイトカインが、Ｎ末端からＣ末端もしくはＣ末端からＮ末端方向に、ａ）前記第２のマスキング部分、ｂ）前記第２のリンカー、ｃ）前記サイトカインもしくはその機能的断片、ｄ）前記第１のリンカー、ｅ）前記第１のマスキング部分、ｆ）前記第３のリンカー、及びｇ）前記半減期延長ドメインを含む、実施形態７１または実施形態７２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６２９】
７４．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態７０〜７３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３０】
７５．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、
ａ）配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列、または
ｂ）配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｋ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、Ｌ７２Ｇ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、Ｉ９２Ｆ、及びＣ１２５Ｓのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列、を含む、実施形態７４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３１】
７６．前記第１のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第１のマスキング部分及び前記第２のマスキング部分の前記アミノ酸配列が異なる、実施形態７４または実施形態７５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３２】
７７．ａ）前記第１のマスキング部分が、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または
ｂ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２６、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号９または２３１のアミノ酸配列を含む、実施形態７４〜７６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３３】
７８．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態７０〜７３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３４】
７９．前記ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む、実施形態７８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３５】
８０．ａ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または
ｄ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、及び２６１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態７８または実施形態７９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３６】
８１．前記半減期延長ドメインが、抗体またはその断片である、実施形態７１〜８０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３７】
８２．前記抗体またはその断片が、重鎖ポリペプチドまたは軽鎖ポリペプチドのいずれかを含む、実施形態８１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３８】
８３．前記重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態８２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６３９】
８４．前記重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態８２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４０】
８５．前記重鎖ポリペプチドが、
ａ）ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態８４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４１】
８６．前記重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態８４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４２】
８７．前記重鎖ポリペプチドが、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態８６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４３】
８８．前記軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含む、実施形態８２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４４】
８９．前記抗体またはその断片が、結晶化可能断片ドメイン（Ｆｃドメイン）またはその断片である、実施形態８１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４５】
９０．前記Ｆｃドメインまたはその断片が、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態８９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４６】
９１．前記Ｆｃドメインまたはその断片が、
ａ）ＩｇＧ１  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態９０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４７】
９２．前記Ｆｃドメインまたはその断片が、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態９０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４８】
９３．前記Ｆｃドメインまたはその断片が、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態９２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６４９】
９４．前記Ｆｃドメインまたはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含む、実施形態８９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５０】
９５．前記半減期延長ドメインが、アルブミンポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態７１〜７７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５１】
９６．前記アルブミンポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１７１のアミノ酸配列を含む、実施形態９５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５２】
９７．前記半減期延長ドメインが、アルブミン結合タンパク質またはその機能的断片である、実施形態７１〜７７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５３】
９８．前記アルブミン結合タンパク質またはその機能的断片が、配列番号１７２〜１７４及び２５２〜２５９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態９７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５４】
９９．前記半減期延長ドメインが、ＩｇＧ結合タンパク質またはその機能的断片である、実施形態７１〜７７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５５】
１００．前記ＩｇＧ結合タンパク質またはその機能的断片が、配列番号１７５〜１８６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態９９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５６】
１０１．前記半減期延長ドメインが、ポリアミノ酸配列である、実施形態７１〜７７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５７】
１０２．前記ポリアミノ酸配列が、ＰＡＳポリペプチドまたはＸＴＥＮポリペプチドである、実施形態１０１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５８】
１０３．前記ＰＡＳポリペプチドが、少なくとも２５、少なくとも５０、少なくとも１００、少なくとも１５０、少なくとも２００、少なくとも２５０、少なくとも３００、少なくとも４００、少なくとも５００、少なくとも６００、少なくとも７００、少なくとも８００、少なくとも９００、少なくとも１０００、少なくとも１１００、少なくとも１２００、少なくとも１３００、少なくとも１５００、少なくとも２０００、少なくとも２５００、または少なくとも３０００アミノ酸残基を含み、各アミノ酸残基が、プロリン残基またはアラニン残基のいずれかである、実施形態１０２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６５９】
１０４．前記ＰＡＳポリペプチドが、少なくとも２５、少なくとも５０、少なくとも１００、少なくとも１５０、少なくとも２００、少なくとも２５０、少なくとも３００、少なくとも４００、少なくとも５００、少なくとも６００、少なくとも７００、少なくとも８００、少なくとも９００、少なくとも１０００、少なくとも１１００、少なくとも１２００、少なくとも１３００、少なくとも１５００、少なくとも２０００、少なくとも２５００、または少なくとも３０００アミノ酸残基を含み、各アミノ酸残基が、プロリン、アラニン、及びセリン残基からなる群から選択される、実施形態１０２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６０】
１０５．前記ＸＴＥＮポリペプチドが、約２５〜約５００、約２００〜約１０００、約５００〜約１５００、約１０００〜約２０００、または約１５００〜約３０００アミノ酸残基のアミノ酸配列を含み、前記アミノ酸配列の少なくとも約７０％、７５％、８０％、または８５％が、重複しない配列モチーフからなり、前記モチーフの各々が、５〜１００アミノ酸残基、５〜５０アミノ酸残基、または９〜３６アミノ酸残基を有し、前記モチーフの各々の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％が、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン酸（Ｅ）、及びプロリン（Ｐ）からなる群から選択される４、５、または６種類のアミノ酸残基からなり、前記完全長ＸＴＥＮポリペプチドにおけるいずれの１つのアミノ酸の種類の含有量も、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約１５％、約１０％、または約８％を超えない、実施形態１０２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６１】
１０６．前記マスクされたサイトカインが、前記マスクされたサイトカインに付着した１つまたは複数のＰＥＧポリマー鎖をさらに含む、実施形態７０〜１０５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６２】
１０７．前記１つまたは複数のＰＥＧポリマー鎖が、前記サイトカインもしくはその機能的断片及び／または前記半減期延長ドメインに付着している、実施形態１０６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６３】
１０８．前記マスクされたサイトカインが、１つまたは複数の追加のＮ結合型及び／またはＯ結合型グリコシル化部位が作出されるように、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている、実施形態７０〜１０７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６４】
１０９．前記マスクされたサイトカインが、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列に１つまたは複数の追加のアスパラギン−Ｘ−セリン（Ｎ−Ｘ−Ｓ）及び／またはアスパラギン−Ｘ−トレオニン（Ｎ−Ｘ−Ｔ）トリペプチド配列（複数可）が導入されるように（ここで、Ｘは、プロリンを除く任意のアミノ酸である）、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている、実施形態１０８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６５】
１１０．前記マスクされたサイトカインが、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列に１つまたは複数の追加のセリンまたはトレオニン残基が導入されるように、前記マスクされたサイトカインの前記アミノ酸配列を改変することによって、修飾されているか、またはさらに修飾されている、実施形態１０８または実施形態１０９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６６】
１１１．前記第１のリンカーが、第１の切断可能なペプチドを含む、実施形態７０〜１１０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６７】
１１２．前記第１のリンカーが、第１のＮ末端スペーサードメイン及び／または第１のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態７０〜１１１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６８】
１１３．前記第１のリンカーが、
ａ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、前記第１の切断可能なペプチド、及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第１の切断可能なペプチド及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第１のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態１１２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６６９】
１１４．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１１１〜１１３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７０】
１１５．前記第１のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１１２〜１１４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７１】
１１６．前記第１のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１１２〜１１５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７２】
１１７．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１１１〜１１３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７３】
１１８．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態１１７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７４】
１１９．前記第１のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態７０〜１１８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７５】
１２０．前記第２のリンカーが、第２の切断可能なペプチドを含む、実施形態７０〜１１９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７６】
１２１．前記第２のリンカーが、第２のＮ末端スペーサードメイン及び／または第２のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態７０〜１２０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７７】
１２２．前記第２のリンカーが、
ａ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、前記第２の切断可能なペプチド、及び第２の第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第２の切断可能なペプチド及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第２のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態１２１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７８】
１２３．前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１２０〜１２２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６７９】
１２４．前記第２のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１２１〜１２３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８０】
１２５．前記第２のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１２１〜１２４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８１】
１２６．前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１２０〜１２２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８２】
１２７．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態１２６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８３】
１２８．前記第２のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態７０〜１２７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８４】
１２９．前記第３のリンカーが、第３の切断可能なペプチドを含む、実施形態７２〜１２８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８５】
１３０．前記第３のリンカーが、第３のＮ末端スペーサードメイン及び／または第３のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態７２〜１２９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８６】
１３１．前記第３のリンカーが、
ａ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン、前記第３の切断可能なペプチド、及び第３の第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン及び前記第３の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第３の切断可能なペプチド及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第３のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態１３０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８７】
１３２．前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１２９〜１３１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８８】
１３３．前記第３のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１３０〜１３２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６８９】
１３４．前記第３のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１３０〜１３３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９０】
１３５．前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１２９〜１３１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９１】
１３６．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態１３５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９２】
１３７．前記第３のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態７２〜１３６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９３】
１３８．前記第１の切断可能なペプチド、前記第２の切断可能なペプチド、及び／または前記第３の切断可能なペプチドが、サイトカイン受容体を発現している領域または組織に共局在するプロテアーゼのための基質である、実施形態５２〜１３７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９４】
１３９．前記サイトカイン受容体が、ＩＬ−２サイトカイン受容体またはＩＬ−１５サイトカイン受容体である、実施形態１３８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９５】
１４０．前記第１の切断可能なペプチド、前記第２の切断可能なペプチド、及び前記第３の切断可能なペプチドのうちの１つまたは複数が、ＡＢＨＤ１２、ＡＤＡＭ１２、ＡＢＨＤ１２Ｂ、ＡＢＨＤ１３、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＡＤＡＭ８、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ１０、ＡＤＡＭＴＳ１２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＡＤＡＭＴＳ１４、ＡＤＡＭＴＳ１５、ＡＤＡＭＴＳ１６、ＡＤＡＭＴＳ１７、ＡＤＡＭＴＳ１８、ＡＤＡＭＴＳ１９、ＡＤＡＭＴＳ２、ＡＤＡＭＴＳ２０、ＡＤＡＭＴＳ３、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＢＨＤ１７Ｂ、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＤＡＭＴＳ６、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＤＡＭＴＳ８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＤＡＭＴＳＬ１、ＡＤＡＭＴＳＬ２、ＡＤＡＭＴＳＬ３、ＡＢＨＤ１７Ｃ、ＡＤＡＭＴＳＬ５、ＡＳＴＬ、ＢＭＰ１、ＣＥＬＡ１、ＣＥＬＡ２Ａ、ＣＥＬＡ２Ｂ、ＣＥＬＡ３Ａ、ＣＥＬＡ３Ｂ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ４、ＣＴＳＥ、ＣＴＳＦ、ＡＤＡＭＴＳＬ４、ＣＭＡ１、ＣＴＲＢ１、ＣＴＲＣ、ＣＴＳＯ、ＣＴＲｌ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＷ、ＣＴＳＢ、ＣＴＳＣ、ＣＴＳＤ、ＥＳＰ１、ＣＴＳＧ、ＣＴＳＨ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＧＺＭＨ、ＣＴＳＫ、ＧＺＭＭ、ＣＴＳＬ、ＣＴＳＳ、ＣＴＳＶ、ＣＴＳＺ、ＨＴＲＡ４、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ２、ＫＬＫ４、ＤＰＰ４、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫＢ１、ＥＣＥ１、ＥＣＥ２、ＥＣＥＬ１、ＭＡＳＰ２、ＭＥＰ１Ａ、ＭＥＰ１Ｂ、ＥＬＡＮＥ、ＦＡＰ、ＧＺＭＡ、ＭＭＰ１１、ＧＺＭＫ、ＨＧＦＡＣ、ＨＰＮ、ＨＴＲＡ１、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１９、ＨＴＲＡ２、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＨＴＲＡ３、ＨＴＲＡ４、ＫＥＬ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、ＫＬＫ５、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＬＧＭＮ、ＬＮＰＥＰ、ＭＡＳＰ１、ＰＡＰＰＡ、ＰＡＰＰＡ２、ＰＣＳＫ１、ＮＡＰＳＡ、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＭＭＥ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ１０、ＰＬＡＴ、ＰＬＡＵ、ＰＬＧ、ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ１２、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ２１、ＰＲＳＳ３、ＰＲＳＳ３３、ＰＲＳＳ４、ＰＲＳＳ５５、ＰＲＳＳ５７、ＭＭＰ１２、ＰＲＳＳ８、ＰＲＳＳ９、ＰＲＴＮ３、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＳＴ１４、ＴＭＰＲＳＳ１０、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｆ、ＴＭＰＲＳＳ１２、ＴＭＰＲＳＳ１３、ＭＭＰ１５、ＴＭＰＲＳＳ１５、ＭＭＰ２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５、ＴＭＰＲＳＳ６、ＴＭＰＲＳＳ７、ＴＭＰＲＳＳ９、ＮＲＤＣ、ＯＶＣＨ１、ＰＡＭＲ１、ＰＣＳＫ３、ＰＨＥＸ、ＴＩＮＡＧ、ＴＰＳＡＢ１、ＴＰＳＤ１、及びＴＰＳＧ１からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される、実施形態１〜１３９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９６】
１４１．前記半減期延長ドメインが、薬剤にコンジュゲートされている、実施形態２〜６９及び７１〜１４０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９７】
１４２．前記薬剤が、チューブリン重合の阻害剤、ＤＮＡ損傷剤、またはＤＮＡ合成阻害剤である、実施形態１４１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９８】
１４３．前記薬剤が、マイタンシノイド、アウリスタチン、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、インド−リノベンゾジアゼピン二量体、またはエキサテカン誘導体Ｄｘｄである、実施形態１４２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０６９９】
１４４．前記薬剤が、免疫刺激薬である、実施形態１４１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７００】
１４５．前記免疫刺激薬が、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）アゴニストまたはトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである、実施形態１４４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０１】
１４６．前記ＳＴＩＮＧアゴニストが、環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）である、実施形態１４５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０２】
１４７．前記ＣＤＮが、ｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃＡＩＭＰ、ｃ−ジ−ＩＭＰ、４−（２−クロロ−６−フルオロベンジル）−Ｎ−（フラン−２−イルメチル）−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン−６−カルボキサミドからなる群から選択される、実施形態１４６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０３】
１４８．前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、及びＴＬＲ１０からなる群から選択されるＴＬＲのアゴニストである、実施形態１４５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０４】
１４９．マスクされたサイトカインであって、
ａ）第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインと、
ｂ）マスキング部分と、
ｃ）サイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記マスキング部分が、前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、
前記サイトカインまたはその機能的断片が、前記第２の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインが、前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する、前記マスクされたサイトカイン。
【０７０５】
１５０．前記マスキング部分が、第１のリンカーを介して前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または前記サイトカインもしくはその機能的断片が、第２のリンカーを介して前記第２の半減期延長ドメインに連結されている、実施形態１４９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０６】
１５１．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態１４９または実施形態１５０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０７】
１５２．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１〜８、１６０、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１５１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０８】
１５３．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＣＤ２５（ＩＬ−２Ｒα）に対する親和性を低減する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態１５１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７０９】
１５４．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｋ、Ｆ４２Ｅ、Ｋ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、及びＬ７２Ｇのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態１５３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１０】
１５５．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態１５１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１１】
１５６．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態１５５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１２】
１５７．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態１５３または実施形態１５４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１３】
１５８．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆからなる群から選択される、実施形態１５７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１４】
１５９．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態１５１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１５】
１６０．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、及びＣ１２５Ｇのうちの１つを導入することによってもたらされる、実施形態１５９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１６】
１６１．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態１５３〜１５８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１７】
１６２．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、アミノ酸置換Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、またはＣ１２５Ｇである、実施形態１６１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１８】
１６３．前記マスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１５１〜１６２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７１９】
１６４．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態１４９または実施形態１５０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２０】
１６５．前記ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む、実施形態１６４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２１】
１６６．前記マスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２３２〜２３４、２６１、及び８２３〜８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１６４または実施形態１６５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２２】
１６７．前記マスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態１６４または実施形態１６５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２３】
１６８．前記第１の半減期延長ドメインが、第１の抗体またはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２の抗体またはその断片である、実施形態１４９〜１６７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２４】
１６９．ａ）前記第１の抗体もしくはその断片が、第１の重鎖ポリペプチドを含み、前記第２の抗体もしくはその断片が、第２の軽鎖ポリペプチドを含むか、または
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片が、第１の軽鎖ポリペプチドを含み、前記第２の抗体もしくはその断片が、第２の重鎖ポリペプチドを含む、実施形態１６８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２５】
１７０．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態１６９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２６】
１７１．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、
ａ）ＩｇＧ１アイソタイプであり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２アイソタイプであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４アイソタイプであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態１７０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２７】
１７２．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態１７０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２８】
１７３．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態１７２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７２９】
１７４．前記第１の重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２の重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１６９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３０】
１７５．前記第１の軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含む、実施形態１６９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３１】
１７６．前記第１の抗体またはその断片が、第１の結晶化可能断片ドメイン（Ｆｃドメイン）またはその断片であり、前記第２の抗体またはその断片が、第２のＦｃドメインまたはその断片である、実施形態１６８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３２】
１７７．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態１７６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３３】
１７８．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、
ａ）ＩｇＧ１  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態１７７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３４】
１７９．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態１７７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３５】
１８０．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態１７９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３６】
１８１．ａ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むか、
ｄ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｅ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むか、
ｆ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含むか、
ｇ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｈ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含むか、
ｉ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むか、
ｊ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むか、
ｋ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｌ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含むか、
ｍ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｎ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むか、
ｏ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｐ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含むか、
ｑ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｒ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むか、
ｓ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｔ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、
ｕ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｖ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｗ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、または
ｘ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含む、実施形態１７６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３７】
１８２．前記第１の半減期延長ドメインが、第１のｓｃＦｖまたはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２のｓｃＦｖまたはその断片である、実施形態１４９〜１６７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３８】
１８３．前記第１の半減期延長ドメインが、第１のＦｃドメインまたはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２のＦｃドメインまたはその断片であり、前記第１のＦｃドメインまたはその断片が、前記第２のＦｃドメインまたはその断片に連結されている、実施形態１４９〜１６７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７３９】
１８４．前記第１のＦｃドメインまたはその断片が、第３のリンカーを介して前記第２のＦｃドメインまたはその断片に連結されている、実施形態１８３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４０】
１８５．ａ）前記第１の半減期延長ドメインが、ｓｃＦｖもしくはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、抗体もしくはその断片であるか、または
ｂ）前記第１の半減期延長ドメインが、抗体もしくはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、ｓｃＦｖもしくはその断片である、実施形態１４９〜１６７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４１】
１８６．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｆ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態１６８〜１８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４２】
１８７．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態１６８〜１８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４３】
１８８．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｒ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態１６８〜１８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４４】
１８９．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４または１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｒ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態１６８〜１８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４５】
１９０．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｒ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｓ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｔ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｕ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｖ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｗ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｘ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｙ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｚ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａａ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｂ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｃ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｄ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｅ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｆ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｇ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ａｈ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態１６８〜１８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４６】
１９１．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｒ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｓ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｔ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｕ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｖ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｗ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｘ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｙ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｚ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｄ）配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ａｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態１６８〜１８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４７】
１９２．前記第１のリンカーが、第１の切断可能なペプチドを含み、及び／または前記第２のリンカーが、第２の切断可能なペプチドを含む、実施形態１５０〜１９１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４８】
１９３．前記第１のリンカーが、第１のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第１のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態１５０〜１９２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７４９】
１９４．前記第１のリンカーが、
ａ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、前記第１の切断可能なペプチド、及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第１の切断可能なペプチド及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第１のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態１９３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５０】
１９５．前記第２のリンカーが、第２のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第２のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態１５０〜１９４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５１】
１９６．前記第２のリンカーが、
ａ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、前記第２の切断可能なペプチド、及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第２の切断可能なペプチド及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第２のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態１９５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５２】
１９７．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１９２〜１９６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５３】
１９８．前記第１のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５  ２３５、２６３、２６８、２６９、７２７、７９４、７９９、及び８５７〜８７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第１のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１９３〜１９７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５４】
１９９．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１９２〜１９６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５５】
２００．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態１９９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５６】
２０１．前記第２のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１９５〜２００のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５７】
２０２．前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１９２〜２０１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５８】
２０３．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態２０２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７５９】
２０４．前記第１のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１５０〜２０３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６０】
２０５．前記第３のリンカーが、第３のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第３のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態１８４〜２０４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６１】
２０６．前記第３のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第３のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２０５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６２】
２０７．前記第１の切断可能なペプチド及び／または前記第２の切断可能なペプチドが、サイトカイン受容体を発現している領域または組織に共局在するプロテアーゼのための基質である、実施形態１９２〜２０６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６３】
２０８．前記サイトカイン受容体が、ＩＬ−２サイトカイン受容体またはＩＬ−１５サイトカイン受容体である、実施形態２０７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６４】
２０９．前記第１の切断可能なペプチド及び／または前記第２の切断可能なペプチドが、ＡＢＨＤ１２、ＡＤＡＭ１２、ＡＢＨＤ１２Ｂ、ＡＢＨＤ１３、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＡＤＡＭ８、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ１０、ＡＤＡＭＴＳ１２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＡＤＡＭＴＳ１４、ＡＤＡＭＴＳ１５、ＡＤＡＭＴＳ１６、ＡＤＡＭＴＳ１７、ＡＤＡＭＴＳ１８、ＡＤＡＭＴＳ１９、ＡＤＡＭＴＳ２、ＡＤＡＭＴＳ２０、ＡＤＡＭＴＳ３、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＢＨＤ１７Ｂ、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＤＡＭＴＳ６、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＤＡＭＴＳ８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＤＡＭＴＳＬ１、ＡＤＡＭＴＳＬ２、ＡＤＡＭＴＳＬ３、ＡＢＨＤ１７Ｃ、ＡＤＡＭＴＳＬ５、ＡＳＴＬ、ＢＭＰ１、ＣＥＬＡ１、ＣＥＬＡ２Ａ、ＣＥＬＡ２Ｂ、ＣＥＬＡ３Ａ、ＣＥＬＡ３Ｂ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ４、ＣＴＳＥ、ＣＴＳＦ、ＡＤＡＭＴＳＬ４、ＣＭＡ１、ＣＴＲＢ１、ＣＴＲＣ、ＣＴＳＯ、ＣＴＲｌ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＷ、ＣＴＳＢ、ＣＴＳＣ、ＣＴＳＤ、ＥＳＰ１、ＣＴＳＧ、ＣＴＳＨ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＧＺＭＨ、ＣＴＳＫ、ＧＺＭＭ、ＣＴＳＬ、ＣＴＳＳ、ＣＴＳＶ、ＣＴＳＺ、ＨＴＲＡ４、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ２、ＫＬＫ４、ＤＰＰ４、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫＢ１、ＥＣＥ１、ＥＣＥ２、ＥＣＥＬ１、ＭＡＳＰ２、ＭＥＰ１Ａ、ＭＥＰ１Ｂ、ＥＬＡＮＥ、ＦＡＰ、ＧＺＭＡ、ＭＭＰ１１、ＧＺＭＫ、ＨＧＦＡＣ、ＨＰＮ、ＨＴＲＡ１、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１９、ＨＴＲＡ２、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＨＴＲＡ３、ＨＴＲＡ４、ＫＥＬ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、ＫＬＫ５、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＬＧＭＮ、ＬＮＰＥＰ、ＭＡＳＰ１、ＰＡＰＰＡ、ＰＡＰＰＡ２、ＰＣＳＫ１、ＮＡＰＳＡ、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＭＭＥ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ１０、ＰＬＡＴ、ＰＬＡＵ、ＰＬＧ、ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ１２、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ２１、ＰＲＳＳ３、ＰＲＳＳ３３、ＰＲＳＳ４、ＰＲＳＳ５５、ＰＲＳＳ５７、ＭＭＰ１２、ＰＲＳＳ８、ＰＲＳＳ９、ＰＲＴＮ３、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＳＴ１４、ＴＭＰＲＳＳ１０、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｆ、ＴＭＰＲＳＳ１２、ＴＭＰＲＳＳ１３、ＭＭＰ１５、ＴＭＰＲＳＳ１５、ＭＭＰ２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５、ＴＭＰＲＳＳ６、ＴＭＰＲＳＳ７、ＴＭＰＲＳＳ９、ＮＲＤＣ、ＯＶＣＨ１、ＰＡＭＲ１、ＰＣＳＫ３、ＰＨＥＸ、ＴＩＮＡＧ、ＴＰＳＡＢ１、ＴＰＳＤ１、及びＴＰＳＧ１からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される、実施形態１８４〜２０８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６５】
２１０．前記第１の半減期延長ドメイン及び／または前記第２の半減期延長ドメインが、薬剤にコンジュゲートされている、実施形態１４９〜２０９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６６】
２１１．前記薬剤が、チューブリン重合の阻害剤、ＤＮＡ損傷剤、またはＤＮＡ合成阻害剤である、実施形態２１０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６７】
２１２．前記薬剤が、マイタンシノイド、アウリスタチン、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、インド−リノベンゾジアゼピン二量体、またはエキサテカン誘導体Ｄｘｄである、実施形態２１１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６８】
２１３．前記薬剤が、免疫刺激薬である、実施形態２１０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７６９】
２１４．前記免疫刺激薬が、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）アゴニストまたはトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである、実施形態２１３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７０】
２１５．前記ＳＴＩＮＧアゴニストが、環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）である、実施形態２１４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７１】
２１６．前記ＣＤＮが、ｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃＡＩＭＰ、ｃ−ジ−ＩＭＰ、４−（２−クロロ−６−フルオロベンジル）−Ｎ−（フラン−２−イルメチル）−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン−６−カルボキサミドからなる群から選択される、実施形態２１５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７２】
２１７．前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、及びＴＬＲ１０からなる群から選択されるＴＬＲのアゴニストである、実施形態２１４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７３】
２１８．マスクされたサイトカインであって、
ａ）第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインと、
ｂ）第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分と、
ｃ）サイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記第１のマスキング部分が、前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第２のマスキング部分が、前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されており、
前記第２のマスキング部分かまたは前記サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、前記第２の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインが、前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する、前記マスクされたサイトカイン。
【０７７４】
２１９．ａ）前記第１のマスキング部分が、第１のリンカーを介して前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または
ｂ）前記第２のマスキング部分かまたは前記サイトカインもしくはその機能的断片かのどちらかが、第２のリンカーを介して前記第２の半減期延長ドメインに連結されている、実施形態２１８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７５】
２２０．前記第２のマスキング部分が、第３のリンカーを介して前記サイトカインまたはその機能的断片に連結されている、実施形態２１８または実施形態２１９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７６】
２２１．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態２１８〜２２０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７７】
２２２．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２２１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７８】
２２３．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＣＤ２５（ＩＬ−２Ｒα）に対する親和性を低減する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態２２１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７７９】
２２４．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｋ、Ｆ４２Ｅ、Ｋ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、及びＬ７２Ｇのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態２２３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８０】
２２５．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態２２１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８１】
２２６．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態２２５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８２】
２２７．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態２２３または実施形態２２４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８３】
２２８．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆからなる群から選択される、実施形態２２７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８４】
２２９．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態２２１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８５】
２３０．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、及びＣ１２５Ｇのうちの１つを導入することによってもたらされる、実施形態２２９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８６】
２３１．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態２２３〜２２８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８７】
２３２．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、アミノ酸置換Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、またはＣ１２５Ｇである、実施形態２３１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８８】
２３３．前記第１のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第１のマスキング部分及び前記第２のマスキング部分の前記アミノ酸配列が異なる、実施形態２２１〜２３２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７８９】
２３４．ａ）前記第１のマスキング部分が、配列番号９もしくは２３１のアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または
ｂ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号９もしくは２３１のアミノ酸配列を含む、実施形態２２１〜２３３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９０】
２３５．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態２１８〜２２０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９１】
２３６．前記ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む、実施形態２３５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９２】
２３７．ａ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または
ｄ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態２３５または実施形態２３６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９３】
２３８．前記第１の半減期延長ドメインが、第１の抗体またはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２の抗体またはその断片である、実施形態２１８〜２３７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９４】
２３９．ａ）前記第１の抗体もしくはその断片が、第１の重鎖ポリペプチドを含み、前記第２の抗体もしくはその断片が、第２の軽鎖ポリペプチドを含むか、または
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片が、第１の軽鎖ポリペプチドを含み、前記第２の抗体もしくはその断片が、第２の重鎖ポリペプチドを含む、実施形態２３８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９５】
２４０．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態２３９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９６】
２４１．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、
ａ）ＩｇＧ１アイソタイプであり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２アイソタイプであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４アイソタイプであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２４０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９７】
２４２．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態２４０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９８】
２４３．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２４２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０７９９】
２４４．前記第１の重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２の重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２３９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８００】
２４５．前記第１の軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含む、実施形態２３９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０１】
２４６．前記第１の抗体またはその断片が、第１の結晶化可能断片ドメイン（Ｆｃドメイン）またはその断片であり、前記第２の抗体またはその断片が、第２のＦｃドメインまたはその断片である、実施形態２３８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０２】
２４７．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態２４６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０３】
２４８．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、
ａ）ＩｇＧ１  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２４７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０４】
２４９．第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態２４７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０５】
２５０．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２４９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０６】
２５１．ａ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むか、
ｄ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｅ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むか、
ｆ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含むか、
ｇ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｈ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含むか、
ｉ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むか、
ｊ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むか、
ｋ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｌ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含むか、
ｍ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｎ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むか、
ｏ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｐ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含むか、
ｑ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｒ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むか、
ｓ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｔ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、
ｕ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｖ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｗ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、または
ｘ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含む、実施形態２４６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０７】
２５２．前記第１の半減期延長ドメインが、第１のｓｃＦｖまたはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２のｓｃＦｖまたはその断片である、実施形態２１８〜２３７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０８】
２５３．前記第１の半減期延長ドメインが、第１のＦｃドメインまたはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２のＦｃドメインまたはその断片であり、前記第１のＦｃドメインまたはその断片が、前記第２のＦｃドメインまたはその断片に連結されている、実施形態２１８〜２３７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８０９】
２５４．前記第１のＦｃドメインまたはその断片が、第４のリンカーを介して前記第２のＦｃドメインまたはその断片に連結されている、実施形態２５３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１０】
２５５．ａ）前記第１の半減期延長ドメインが、ｓｃＦｖもしくはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、抗体もしくはその断片であるか、または
ａ）前記第１の半減期延長ドメインが、抗体もしくはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、ｓｃＦｖもしくはその断片である、実施形態２１８〜２３７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１１】
２５６．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｆ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２３８〜２５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１２】
２５７．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態２３８〜２５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１３】
２５８．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｒ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２３８〜２５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１４】
２５９．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｒ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態２３８〜２５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１５】
２６０．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｒ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｓ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｔ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｕ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｖ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｗ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｘ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｙ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｚ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａａ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｂ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｃ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｄ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｅ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｆ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｇ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ａｈ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態２３８〜２５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１６】
２６１．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｒ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｓ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｔ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｕ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｖ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｗ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｘ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｙ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｚ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｄ）配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ａｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態２３８〜２５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１７】
２６２．前記第１のリンカーが、第１の切断可能なペプチドを含み、及び／または前記第２のリンカーが、第２の切断可能なペプチドを含む、実施形態２１９〜２６１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１８】
２６３．前記第１のリンカーが、第１のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第１のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態２１９〜２６２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８１９】
２６４．前記第１のリンカーが、
ａ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、前記第１の切断可能なペプチド、及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第１の切断可能なペプチド及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第１のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態２６３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２０】
２６５．前記第２のリンカーが、第２のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第２のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態２１９〜２６４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２１】
２６６．前記第２のリンカーが、
ａ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、前記第２の切断可能なペプチド、及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第２の切断可能なペプチド及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第２のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態２６５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２２】
２６７．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２６２〜２６６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２３】
２６８．前記第１のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第１のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２６３〜２６７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２４】
２６９．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２６２〜２６６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２５】
２７０．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態２６９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２６】
２７１．前記第２のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２６５〜２７０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２７】
２７２．前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２６２〜２７１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２８】
２７３．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態２７２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８２９】
２７４．前記第１のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２１８〜２７３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３０】
２７５．前記第３のリンカーが、切断可能なペプチドを含む、実施形態２１９〜２７４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３１】
２７６．前記第３のリンカーが、第３のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第３のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態２１９〜２７５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３２】
２７７．前記第３のリンカーが、
ａ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン、前記第３の切断可能なペプチド、及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン及び前記第３の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第３の切断可能なペプチド及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第３のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態２７６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３３】
２７８．前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２７５〜２７７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３４】
２７９．前記第３のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第３のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２７６〜２７８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３５】
２８０．前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２７５〜２７９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３６】
２８１．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態２８０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３７】
２８２．前記第３のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第３のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２１９〜２８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３８】
２８３．前記第４のリンカーが、第４のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第４のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態２５４〜２８２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８３９】
２８４．前記第４のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第４のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態２８３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４０】
２８５．前記第１の切断可能なペプチド、前記第２の切断可能なペプチド、及び／または前記第３の切断可能なペプチドが、サイトカイン受容体を発現している領域または組織に共局在するプロテアーゼのための基質である、実施形態２６２〜２８４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４１】
２８６．前記サイトカイン受容体が、ＩＬ−２サイトカイン受容体またはＩＬ−１５サイトカイン受容体である、実施形態２８５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４２】
２８７．前記第１の切断可能なペプチド、前記第２の切断可能なペプチド、及び／または前記第３の切断可能なペプチドが、ＡＢＨＤ１２、ＡＤＡＭ１２、ＡＢＨＤ１２Ｂ、ＡＢＨＤ１３、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＡＤＡＭ８、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ１０、ＡＤＡＭＴＳ１２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＡＤＡＭＴＳ１４、ＡＤＡＭＴＳ１５、ＡＤＡＭＴＳ１６、ＡＤＡＭＴＳ１７、ＡＤＡＭＴＳ１８、ＡＤＡＭＴＳ１９、ＡＤＡＭＴＳ２、ＡＤＡＭＴＳ２０、ＡＤＡＭＴＳ３、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＢＨＤ１７Ｂ、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＤＡＭＴＳ６、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＤＡＭＴＳ８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＤＡＭＴＳＬ１、ＡＤＡＭＴＳＬ２、ＡＤＡＭＴＳＬ３、ＡＢＨＤ１７Ｃ、ＡＤＡＭＴＳＬ５、ＡＳＴＬ、ＢＭＰ１、ＣＥＬＡ１、ＣＥＬＡ２Ａ、ＣＥＬＡ２Ｂ、ＣＥＬＡ３Ａ、ＣＥＬＡ３Ｂ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ４、ＣＴＳＥ、ＣＴＳＦ、ＡＤＡＭＴＳＬ４、ＣＭＡ１、ＣＴＲＢ１、ＣＴＲＣ、ＣＴＳＯ、ＣＴＲｌ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＷ、ＣＴＳＢ、ＣＴＳＣ、ＣＴＳＤ、ＥＳＰ１、ＣＴＳＧ、ＣＴＳＨ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＧＺＭＨ、ＣＴＳＫ、ＧＺＭＭ、ＣＴＳＬ、ＣＴＳＳ、ＣＴＳＶ、ＣＴＳＺ、ＨＴＲＡ４、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ２、ＫＬＫ４、ＤＰＰ４、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫＢ１、ＥＣＥ１、ＥＣＥ２、ＥＣＥＬ１、ＭＡＳＰ２、ＭＥＰ１Ａ、ＭＥＰ１Ｂ、ＥＬＡＮＥ、ＦＡＰ、ＧＺＭＡ、ＭＭＰ１１、ＧＺＭＫ、ＨＧＦＡＣ、ＨＰＮ、ＨＴＲＡ１、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１９、ＨＴＲＡ２、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＨＴＲＡ３、ＨＴＲＡ４、ＫＥＬ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、ＫＬＫ５、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＬＧＭＮ、ＬＮＰＥＰ、ＭＡＳＰ１、ＰＡＰＰＡ、ＰＡＰＰＡ２、ＰＣＳＫ１、ＮＡＰＳＡ、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＭＭＥ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ１０、ＰＬＡＴ、ＰＬＡＵ、ＰＬＧ、ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ１２、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ２１、ＰＲＳＳ３、ＰＲＳＳ３３、ＰＲＳＳ４、ＰＲＳＳ５５、ＰＲＳＳ５７、ＭＭＰ１２、ＰＲＳＳ８、ＰＲＳＳ９、ＰＲＴＮ３、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＳＴ１４、ＴＭＰＲＳＳ１０、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｆ、ＴＭＰＲＳＳ１２、ＴＭＰＲＳＳ１３、ＭＭＰ１５、ＴＭＰＲＳＳ１５、ＭＭＰ２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５、ＴＭＰＲＳＳ６、ＴＭＰＲＳＳ７、ＴＭＰＲＳＳ９、ＮＲＤＣ、ＯＶＣＨ１、ＰＡＭＲ１、ＰＣＳＫ３、ＰＨＥＸ、ＴＩＮＡＧ、ＴＰＳＡＢ１、ＴＰＳＤ１、及びＴＰＳＧ１からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される、実施形態２６２〜２８６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４３】
２８８．前記第１の半減期延長ドメイン及び／または前記第２の半減期延長ドメインが、薬剤にコンジュゲートされている、実施形態２１８〜２８７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４４】
２８９．前記薬剤が、チューブリン重合の阻害剤、ＤＮＡ損傷剤、またはＤＮＡ合成阻害剤である、実施形態２８８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４５】
２９０．前記薬剤が、マイタンシノイド、アウリスタチン、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、インド−リノベンゾジアゼピン二量体、またはエキサテカン誘導体Ｄｘｄである、実施形態２８９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４６】
２９１．前記薬剤が、免疫刺激薬である、実施形態２８８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４７】
２９２．前記免疫刺激薬が、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）アゴニストまたはトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、実施形態２９１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４８】
２９３．前記ＳＴＩＮＧアゴニストが、環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）である、実施形態２９２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８４９】
２９４．前記ＣＤＮが、ｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃＡＩＭＰ、ｃ−ジ−ＩＭＰ、４−（２−クロロ−６−フルオロベンジル）−Ｎ−（フラン−２−イルメチル）−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン−６−カルボキサミドからなる群から選択される、実施形態２９３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８５０】
２９５．前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、及びＴＬＲ１０からなる群から選択されるＴＬＲのアゴニストである、実施形態２９２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８５１】
２９６．実施形態１〜２９５及び３２０〜４０９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカインをコードする核酸。
【０８５２】
２９７．実施形態２９６に記載の核酸を含むベクター。
【０８５３】
２９８．発現ベクターである、実施形態２９７に記載のベクター。
【０８５４】
２９９．実施形態２９６に記載の核酸を含む宿主細胞。
【０８５５】
３００．マスクされたサイトカインを産生させる方法であって、前記マスクされたサイトカインを産生させる条件下で実施形態２９９に記載の宿主細胞を培養することを含む、前記方法。
【０８５６】
３０１．前記宿主細胞によって産生された前記マスクされたサイトカインを回収することをさらに含む、実施形態３００に記載の方法。
【０８５７】
３０２．実施形態３００または実施形態３０１に記載の方法によって産生される、マスクされたサイトカイン。
【０８５８】
３０３．実施形態１〜２９５及び３２０〜４０９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカインを含む組成物。
【０８５９】
３０４．実施形態３０２に記載のマスクされたサイトカインを含む組成物。
【０８６０】
３０５．抗炎症剤または抗がん剤をさらに含む、実施形態３０３または実施形態３０４に記載の組成物。
【０８６１】
３０６．前記抗がん剤が、ＰＤ−１阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤、ＶＥＧＦＲ阻害剤、ＣＴＬＡ−４阻害剤、ＢＴＬＡ阻害剤、Ｂ７Ｈ４阻害剤、Ｂ７Ｈ３阻害剤、ＣＳＦＩＲ阻害剤、ＨＶＥＭ阻害剤、ＣＤ２７阻害剤、ＫＩＲ阻害剤、ＮＫＧ２Ａ阻害剤、ＮＫＧ２Ｄアゴニスト、ＴＷＥＡＫ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＣＤ５２標的化抗体、ＣＣＲ４標的化抗体、ＰＤ−Ｌ１阻害剤、ＫＩＴ阻害剤、ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＢＡＦＦ阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＶＥＧＦリガンド阻害剤、ＣＤ１９標的化分子、ＦＯＬＲ１標的化分子、ＤＬＬ３標的化分子、ＤＫＫ１標的化分子、ＭＵＣ１標的化分子、ＭＵＣ１６標的化分子、ＰＳＭＡ標的化分子、ＭＳＬＮ標的化分子、ＮＹ−ＥＳ０−１標的化分子、Ｂ７Ｈ３標的化分子、Ｂ７Ｈ４標的化分子、ＢＣＭＡ標的化分子、ＣＤ２９標的化分子、ＣＤ１５１標的化分子、ＣＤ１２３標的化分子、ＣＤ３３標的化分子、ＣＤ３７標的化分子、ＣＤＨ１９標的化分子、ＣＥＡ標的化分子、クローディン１８．２標的化分子、ＣＬＥＣ１２Ａ標的化分子、ＥＧＦＲＶＩＩＩ標的化分子、ＥＰＣＡＭ標的化分子、ＥＰＨＡ２標的化分子、ＦＣＲＨ５標的化分子、ＦＬＴ３標的化分子、ＧＤ２標的化分子、グリピカン３標的化分子、ｇｐＡ３３標的化分子、ＧＰＲＣ５Ｄ標的化分子、ＩＬ−２３Ｒ標的化分子、ＩＬ−１ＲＡＰ標的化分子、ＭＣＳＰ標的化分子、ＲＯＮ標的化分子、ＲＯＲ１標的化分子、ＳＴＥＡＰ２標的化分子、ＴｆＲ標的化分子、ＣＤ１６６標的化分子、ＴＰＢＧ標的化分子、ＴＲＯＰ２標的化分子、プロテアソーム阻害剤、ＡＢＬ阻害剤、ＣＤ３０阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ＭＥＴ阻害剤、ＲＥＴ阻害剤、ＩＬ−１β阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ＲＯＳ１阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤、ＣＤ３８阻害剤、ＲＡＮＫＬ阻害剤、Ｂ４ＧＡＬＮＴ１阻害剤、ＳＬＡＭＦ７阻害剤、ＩＤＨ２阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、ＣＤ２０標的化抗体、ＢＴＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、ＣＤＫ４阻害剤、ＣＤＫ６阻害剤、ＦＧＦＲ阻害剤、ＲＡＦ阻害剤、ＪＡＫ１阻害剤、ＪＡＫ２阻害剤、ＪＡＫ３阻害剤、ＩＬ−６阻害剤、ＩＬ−１７阻害剤、スムーズンド阻害剤、ＩＬ−６Ｒ阻害剤、ＢＣＬ２阻害剤、ＰＴＣＨ阻害剤、ＰＩＧＦ阻害剤、ＴＧＦＢ阻害剤、ＣＤ２８アゴニスト、ＣＤ３アゴニスト、ＣＤ４０アゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＶＩＳＴＡアゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＬＡＧ３阻害剤、ＴＩＭ３阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、及びＩＬ−２Ｒ阻害剤からなる群から選択される、実施形態３０５に記載の組成物。
【０８６２】
３０７．前記抗炎症剤が、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）阻害剤またはＮＦ−κＢ阻害剤である、実施形態３０５に記載の組成物。
【０８６３】
３０８．前記ＣＯＸ阻害剤が、ＣＯＸ−１及び／またはＣＯＸ−２阻害剤である、実施形態３０７に記載の組成物。
【０８６４】
３０９．前記ＣＯＸ阻害剤が、ＳＣ−５６０、ＦＲ１２２０４７、Ｐ６、モフェゾラク、ＴＦＡＰ、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブ、メロキシカム、ピロキシカム、デラコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ、エトリコキシブ、クロメン誘導体、クロマン誘導体、Ｎ−（２−シクロヘキシルオキシニトロフェニル）メタンスルホンアミド、パレコキシブ、ルミラコキシブ、ＲＳ５７０６７、Ｔ−６１４、ＢＭＳ−３４７０７０、ＪＴＥ−５２２、Ｓ−２４７４、ＳＶＴ−２０１６、ＣＴ−３、ＡＢＴ−９６３、ＳＣ−５８１２５、ニメスリド、フロスリド、ＮＳ−３９８、Ｌ−７４５３３７、ＲＷＪ−６３５５６、Ｌ−７８４５１２、ダルブフェロン、ＣＳ−５０２、ＬＡＳ−３４４７５、ＬＡＳ−３４５５５、Ｓ−３３５１６、ジクロフェナク、メフェナム酸、ＳＤ−８３８１、イブプロフェン、ナプロキセン、ケトロラック、インドメタシン、アスピリン、ナプロキセン、トルメチン、ピロキシカム、及びメクロフェナム酸からなる群から選択される、実施形態３０７または実施形態３０８に記載の組成物。
【０８６５】
３１０．前記ＮＦ−κＢ阻害剤が、ＩＫＫ複合体阻害剤、ＩκＢ分解阻害剤、ＮＦ−κＢ核移行阻害剤、ｐ６５アセチル化阻害剤、ＮＦ−κＢ  ＤＮＡ結合阻害剤、ＮＦ−κＢトランス活性化阻害剤、及びｐ５３誘導阻害剤からなる群から選択される、実施形態３０７に記載の組成物。
【０８６６】
３１１．前記ＮＦ−κＢ阻害剤が、ＴＰＣＡ−１、ＮＦ−κＢ活性化阻害剤ＶＩ（ＢＯＴ−６４）、ＢＭＳ−３４５５４１、アンレキサノクス、ＳＣ−５１４（ＧＫ−０１１４０）、ＩＭＤ−０３５４、ＩＫＫ−１６、ＢＡＹ−１１−７０８２、ＭＧ−１１５、ＭＧ−１３２、ラクタシスチン、エポキソミシン、パルテノライド、カーフィルゾミブ、ＭＬＮ−４９２４（ペボネジスタット）、ＪＳＨ−２３ロリプラム、没食子酸、アナカルジン酸、ＧＹＹ−４１３７、ｐ−ＸＳＣ、ＣＶ−３９８８、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、ＬＹ−２９４００２、ウォルトマンニン、メサラミン、キナクリン、及びフラボピリドールからなる群から選択される、実施形態３０７または実施形態３０８に記載の組成物。
【０８６７】
３１２．実施形態１〜２９５及び３２０〜４０９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカインと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【０８６８】
３１３．実施形態３０２に記載のマスクされたサイトカインと、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【０８６９】
３１４．実施形態１〜２９５及び３２０〜４０９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン、または実施形態３０３〜３１１のうちのいずれか１つに記載の組成物、または実施形態３１２もしくは３１３に記載の薬学的組成物を含む、キット。
【０８７０】
３１５．対象において腫瘍性疾患を治療するかまたは予防する方法であって、有効量の実施形態１〜２９５及び３２０〜４０９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン、または実施形態３０３〜３１１のうちのいずれか１つに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【０８７１】
３１６．前記腫瘍性疾患が、がんである、実施形態３１５に記載の方法。
【０８７２】
３１７．前記がんが、白血病、リンパ腫、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、膵臓癌、黒色腫、乳癌、神経芽細胞腫、肺癌、卵巣癌、骨肉腫、膀胱癌、子宮頸癌、肝臓癌、腎臓癌、皮膚癌、または精巣癌である、実施形態３１６に記載の方法。
【０８７３】
３１８．対象において炎症性疾患または自己免疫疾患を治療するかまたは予防する方法であって、有効量の実施形態１〜２９５及び３２０〜４０９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン、または実施形態３０３〜３１１のうちのいずれか１つに記載の組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
【０８７４】
３１９．前記炎症性疾患または自己免疫疾患が、アテローム性動脈硬化症、肥満、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、関節リウマチ、アレルギー性脳炎、乾癬、アトピー性皮膚疾患、骨粗鬆症、腹膜炎、肝炎、ループス、セリアック病、シェーグレン症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性硬化症（ＭＳ）、強直性脊椎炎、真性１型糖尿病、円形脱毛症、血管炎、及び側頭動脈炎、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、喘息、ＣＯＰＤ、傍腫瘍性自己免疫疾患、軟骨炎症、若年性関節炎、若年性関節リウマチ、少関節型若年性関節リウマチ、多関節型若年性関節リウマチ、全身型若年性関節リウマチ、若年性強直性脊椎炎、若年性腸炎性関節炎、若年性反応性関節炎、若年性ライター症候群、ＳＥＡ症候群（血清陰性、腱付着部症、関節症症候群）、若年性皮膚筋炎、若年性乾癬性関節炎、若年性強皮症、若年性全身性エリテマトーデス、若年性血管炎、少関節型関節リウマチ、全身型関節リウマチ、腸炎性関節炎、反応性関節炎、ライター症候群、皮膚筋炎、乾癬性関節炎、強皮症、血管炎、筋炎（ｍｙｏｌｉｔｉｓ）、多発性筋炎（ｐｏｌｙｍｙｏｌｉｔｉｓ）、皮膚筋炎（ｄｅｒｍａｔｏｍｙｏｌｉｔｉｓ）、結節性多発動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、動脈炎、リウマチ性多発筋痛症（ｐｌｏｙｍｙａｌｇｉａ  ｒｈｅｕｍａｔｉｃａ）、サルコイドーシス、硬化症、原発性胆汁性硬化症（ｐｒｉｍａｒｙ  ｂｉｌｉａｒｙ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、硬化性胆管炎、乾癬、尋常性乾癬、滴状乾癬、逆乾癬、膿疱性乾癬、乾癬性紅皮症、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、アテローム性動脈硬化症、スティル病、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、重症筋無力症、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、副鼻腔炎、鼻茸を伴う副鼻腔炎、好酸球性食道炎、好酸球性気管支炎、ギラン・バレー疾患、甲状腺炎（例えば、グレーブス病）、アジソン病、レイノー現象、自己免疫性肝炎、移植拒絶反応、腎障害、Ｃ型肝炎誘発性血管炎、及び自然流産からなる群から選択される、実施形態３１８に記載の方法。
【０８７５】
３２０．マスクされたサイトカインであって、
ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含む第１の半減期延長ドメイン及び配列番号１５６のアミノ酸配列を含む第２の半減期延長ドメインと、
ｂ）配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分と、
ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むサイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記マスキング部分が、前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、
前記サイトカインまたはその機能的断片が、前記第２の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインが、前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する、前記マスクされたサイトカイン。
【０８７６】
３２１．前記マスキング部分が、第１のリンカーを介して前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、前記サイトカインまたはその機能的断片が、第２のリンカーを介して前記第２の半減期延長ドメインに連結されている、実施形態３２０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８７７】
３２２．前記第１のリンカーが、配列番号２８のアミノ酸配列を含む、実施形態３２１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８７８】
３２３．前記第２のリンカーが、配列番号２６４のアミノ酸配列を含む切断可能なペプチドを含む、実施形態３２１または実施形態３２２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８７９】
３２４．前記第２のリンカーが、配列番号８１１のアミノ酸配列を含む、実施形態３２１〜３２３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８０】
３２５．前記マスクされたサイトカインが、配列番号２６６のアミノ酸配列を含む、実施形態３２０〜３２４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８１】
３２６．前記マスクされたサイトカインが、配列番号２６７のアミノ酸配列を含む、実施形態３２０〜３２５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８２】
３２７．前記マスクされたサイトカインが、配列番号２６６及び２６７のアミノ酸配列を含む、実施形態３２０〜３２６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８３】
３２８．前記マスクされたサイトカインが、配列番号５８５〜５９７、６０２、６１０〜６１４、６２７〜６３６、６４２、及び６４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８４】
３２９．前記マスクされたサイトカインが、配列番号５６７及び５９８〜６０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態７０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８５】
３３０．前記マスクされたサイトカインが、配列番号５６２及び５６３、または配列番号６０８及び６０３、または配列番号６０４及び６０３、または配列番号６０５及び６０３、または配列番号６０６及び６０３、または配列番号６１５及び６１７、または配列番号２６６及び２６７、または配列番号６１８及び６２０、または配列番号６２１及び６２３、または配列番号６２４及び６２６、または配列番号６０８及び２６７、または配列番号６６３及び６６４、または配列番号６６５及び６６６、または配列番号６６７及び２６７、または配列番号６６９及び２６７、または配列番号６７０及び６７１、または配列番号６７０及び６７１、または配列番号６７２及び２６７、または配列番号６７３及び２６７、または配列番号６７４及び２６７、または配列番号６７５及び２６７、または配列番号６７６及び２６７、または配列番号６７７及び２６７、または配列番号６７８及び２６７、または配列番号６７９及び２６７、または配列番号６８０及び２６７、または配列番号６８１及び２６７、または配列番号６８２及び２６７、または配列番号６８３及び２６７、または配列番号６８４及び２６７、または配列番号６８５及び２６７、または配列番号６８６及び２６７、配列番号６８７及び２６７、または配列番号６８８及び２６７、または配列番号６８９及び２６７、または配列番号６９０及び２６７、または配列番号６９２及び２６７、または配列番号６９３及び２６７、または配列番号６９４及び２６７、または配列番号６９５及び２６７、または配列番号６９６及び２６７、または配列番号６９７及び２６７、または配列番号６９８及び２６７、または配列番号６９９及び２６７、または配列番号７００及び２６７、または配列番号７０１及び２６７、または配列番号７０２及び２６７、または配列番号７０３及び２６７、または配列番号７０４及び２６７、または配列番号７０５及び２６７、または配列番号７０６及び２６７、または配列番号７０７及び２６７、または配列番号７０８及び２６７、または配列番号７０９及び２６７、または配列番号７１０及び２６７、または配列番号７１１及び２６７、または配列番号７１２及び６６７、または配列番号７１３及び２６７、または配列番号７１４及び２６７、または配列番号７１６及び６９９、または配列番号７１７及び２６７、または配列番号７１８及び２６７、または配列番号７１９及び２６７、または配列番号７２０及び２６７、または配列番号７２２及び２６７、または配列番号７２３及び２６７、または配列番号７２０及び２６７、または配列番号７２８及び２６７、または配列番号７２９及び２６７、または配列番号７３０及び２６７、または配列番号７３１及び２６７、または配列番号７３２及び２６７、または配列番号７３３及び２６７、または配列番号７３４及び２６７、または配列番号７３５及び２６７、または配列番号７３６及び２６７、または配列番号７３７及び２６７、または配列番号７３８及び２６７、または配列番号７３９及び２６７、または配列番号７４０及び２６７、または配列番号７４１及び２６７、または配列番号７４２及び２６７、または配列番号７４３及び２６７、または配列番号７４４及び２６７、または配列番号７４５及び２６７、または配列番号７４６及び２６７、または配列番号６７４及び８２８、または配列番号６７４及び８２９、または配列番号７２６及び８３０、または配列番号７２６及び８２９、または配列番号７４７及び６７１、または配列番号７１５及び２６７、または配列番号７１５及び６７１、または配列番号７４８及び６７１、または配列番号７４９及び６７１、または配列番号７５０及び６７１、または配列番号７５１及び６７１、または配列番号７５２及び６７１、または配列番号７５３及び６７１、または配列番号７５４及び６７１、または配列番号７５８及び６７１、または配列番号７５９及び６７１、または配列番号７６０及び６７１、または配列番号７６１及び６７１のアミノ酸配列を含む、実施形態１４９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８６】
３３１．前記マスクされたサイトカインが、配列番号７５５及び６１６、または配列番号７５６及び６１６、または配列番号７５７及び６１６のアミノ酸配列を含む、実施形態２１８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８７】
３３２．マスクされたサイトカインであって、
ａ）第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインと、
ｂ）第１のマスキング部分及び第２のマスキング部分と、
ｃ）サイトカインまたはその機能的断片と、を含み、
前記第１のマスキング部分が、前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第２のマスキング部分が、前記第１のマスキング部分に連結されており、
前記サイトカインまたはその機能的断片が、前記第２の半減期延長ドメインに連結されており、
前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインが、前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する、前記マスクされたサイトカイン。
【０８８８】
３３３．ａ）前記第１のマスキング部分が、第１のリンカーを介して前記第１の半減期延長ドメインに連結されており、及び／または
ｂ）前記第２のマスキング部分が、第２のリンカーを介して前記第１のマスキング部分に連結されている、実施形態３３２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８８９】
３３４．前記サイトカインまたはその機能的断片が、第３のリンカーを介して前記第２の半減期延長ドメインに連結されている、実施形態３３２または３３３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９０】
３３５．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態３３２〜３３４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９１】
３３６．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２３０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３３５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９２】
３３７．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＣＤ２５（ＩＬ−２Ｒα）に対する親和性を低減する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態３３５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９３】
３３８．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｋ、Ｆ４２Ｅ、Ｋ４３Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｒ、Ｅ６２Ａ、Ｅ６２Ｒ、Ｅ６２Ｓ、及びＬ７２Ｇのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態３３７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９４】
３３９．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態３３５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９５】
３４０．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆのうちの１つまたは複数を導入することによってもたらされる、実施形態３３９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９６】
３４１．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態３３７または実施形態３３８に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９７】
３４２．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片のＩＬ−２ＲβまたはＩＬ−２Ｒγに対する親和性を増加させる前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、Ｈ１６Ｉ、Ｌ１８Ｃ、Ｄ２０Ａ、Ｄ２０Ｌ、Ｄ２０Ｆ、Ｎ２９Ｌ、Ｌ８０Ｆ、Ｒ８１Ｄ、Ｌ８５Ｖ、Ｉ８６Ｖ、及びＩ９２Ｆからなる群から選択される、実施形態３４１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９８】
３４３．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片の前記アミノ酸配列に前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態３３５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０８９９】
３４４．前記アミノ酸配列が、配列番号１〜８、１６０、２４３〜２５１、２６０、７７５〜７９２、及び８１３〜８２２のうちのいずれか１つに以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、及びＣ１２５Ｇのうちの１つを導入することによってもたらされる、実施形態３４３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９００】
３４５．前記アミノ酸配列が、前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する１つまたは複数のアミノ酸置換をさらに導入することによってもたらされる、実施形態３３７〜３４２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０１】
３４６．前記ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を安定化する前記１つまたは複数のアミノ酸置換が、アミノ酸置換Ｃ１２５Ｓ、Ｃ１２５Ａ、またはＣ１２５Ｇである、実施形態３４５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０２】
３４７．前記第１のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号９、１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２９、２３１、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第１のマスキング部分及び前記第２のマスキング部分の前記アミノ酸配列が異なる、実施形態３３５〜３４６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０３】
３４８．ａ）前記第１のマスキング部分が、配列番号９もしくは２３１のアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または
ｂ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、１８７〜２１８、２２１〜２２６、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号９もしくは２３１のアミノ酸配列を含む、実施形態３３５〜３４７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０４】
３４９．前記サイトカインまたはその機能的断片が、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片である、実施形態３３２〜３３４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０５】
３５０．前記ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片が、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む、実施形態３４９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０６】
３５１．ａ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または
ｄ）前記第１のマスキング部分が、配列番号１０、１６１〜１６５、２１９〜２２９、２６１、８２６、及び８２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２のマスキング部分が、配列番号２３２〜２３４、及び８２３〜８２５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に以下のアミノ酸置換、すなわち、Ｒ２４Ａ、Ｒ２６Ａ、Ｋ３４Ａ、Ｓ４０Ａ、Ｌ４２Ａ、及びＰ６７Ａのうちの１つもしくは複数を導入することによってもたらされる、アミノ酸配列を含む、実施形態３４９または実施形態３５０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０７】
３５２．前記第１の半減期延長ドメインが、第１の抗体またはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２の抗体またはその断片である、実施形態３３２〜３５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０８】
３５３．ａ）前記第１の抗体もしくはその断片が、第１の重鎖ポリペプチドを含み、前記第２の抗体もしくはその断片が、第２の軽鎖ポリペプチドを含むか、または
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片が、第１の軽鎖ポリペプチドを含み、前記第２の抗体もしくはその断片が、第２の重鎖ポリペプチドを含む、実施形態３５２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９０９】
３５４．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態３５３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１０】
３５５．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、
ａ）ＩｇＧ１アイソタイプであり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２アイソタイプであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４アイソタイプであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３５４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１１】
３５６．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態３５３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１２】
３５７．前記第１の重鎖ポリペプチドまたは前記第２の重鎖ポリペプチドが、ＩｇＧ１重鎖ポリペプチドであり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３５６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１３】
３５８．前記第１の重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記第２の重鎖ポリペプチドが、配列番号１５８、１６８、及び１６９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３５３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１４】
３５９．前記第１の軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含み、前記第２の軽鎖ポリペプチドが、配列番号１５７または１７０のアミノ酸配列を含む、実施形態３５３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１５】
３６０．前記第１の抗体またはその断片が、第１の結晶化可能断片ドメイン（Ｆｃドメイン）またはその断片であり、前記第２の抗体またはその断片が、第２のＦｃドメインまたはその断片である、実施形態３５２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１６】
３６１．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、エフェクター機能を改変する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態３６０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１７】
３６２．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、
ａ）ＩｇＧ１  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｎ２９７Ａ、Ｎ２９７Ｇ、もしくはＮ２９７Ｑ、
ｉｉ）Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、及びＰ２３８Ｓ、
ｉｖ）Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、及びＬ２３５Ａ、
ｖ）Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及びＰ３３１Ｓ、
ｖｉ）Ｓ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ、
ｖｉｉ）Ｄ２６５Ａ、
ｖｉｉｉ）Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ、を含むか、
ｂ）ＩｇＧ２  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｖ２３４Ａ及びＧ２３７Ａ、
ｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＡ３３１Ｓ、もしくは
ｉｉｉ）Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、を含むか、または
ｅ）ＩｇＧ４  Ｆｃドメインもしくはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ｉ）Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、及びＥ３１８Ａ、
ｉｉ）Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３４Ａ、及びＬ２３５Ａ、
ｉｉｉ）Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ、もしくは
ｉｖ）Ｓ２２８Ｐ及びＬ２３５Ａ（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３６１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１８】
３６３．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、エフェクター機能を強化する１つまたは複数のアミノ酸置換を含む、実施形態３６１に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９１９】
３６４．前記第１のＦｃドメインもしくはその断片及び／または前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、ＩｇＧ１  Ｆｃドメインまたはその断片であり、下記のアミノ酸置換（複数可）、すなわち、
ａ）Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、及びＫ３３４Ａ、
ｂ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｅ、
ｃ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｄ）Ｐ２４７Ｉ及びＡ３３９ＤもしくはＡ３３９Ｑ、
ｅ）Ｄ２８０Ｈ及びＫ２９０Ｓ、
ｆ）Ｄ２８０Ｈ、Ｋ２９０Ｓ、及びＳ２９８ＤもしくはＳ２９８Ｖのいずれか、
ｇ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、及びＹ３００Ｌ、
ｈ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、及びＰ３９６Ｌ、
ｉ）Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｉ、及びＰ３９６Ｌ、
ｊ）Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｋ）Ｋ３２６Ａ及びＥ３３３Ａ、
ｌ）Ｋ３２６Ｗ及びＥ３３３Ｓ、
ｍ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｎ）Ｋ２９０Ｅ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｏ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、及びＴ２９９Ａ、
ｐ）Ｋ２９０Ｎ、Ｓ２９８Ｇ、Ｔ２９９Ａ、及びＫ３２６Ｅ、
ｑ）Ｋ３３４Ｖ、
ｒ）Ｌ２３５Ｓ、Ｓ２３９Ｄ、及びＫ３３４Ｖ、
ｓ）Ｋ３３４Ｖ及びＱ３３１Ｍ、Ｓ２３９Ｄ、Ｆ２４３Ｖ、Ｅ２９４Ｌ、もしくはＳ２９８Ｔ、
ｔ）Ｅ２３３Ｌ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｕ）Ｌ２３４Ｉ、Ｑ３１１Ｍ、及びＫ３３４Ｖ、
ｖ）Ｋ３３４Ｖ及びＳ２９８Ｔ、Ａ３３０Ｍ、もしくはＡ３３０Ｆ、
ｗ）Ｋ３３４Ｖ、Ｑ３１１Ｍ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｘ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２９８Ｔ、及びＡ３３０ＭもしくはＡ３３０Ｆのいずれか、
ｙ）Ｋ３３４Ｖ、Ｓ２３９Ｄ、及びＡ３３０ＭもしくはＳ２９８Ｔのいずれか、
ｚ）Ｌ２３４Ｙ、Ｙ２９６Ｗ、及びＫ２９０Ｙ、Ｆ２４３Ｖ、もしくはＥ２９４Ｌ、
ａａ）Ｙ２９６Ｗ及びＬ２３４ＹもしくはＫ２９０Ｙのいずれか、
ａｂ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｓ、及びＩ３３２Ｅ、
ａｃ）Ｖ２６４Ｉ、
ａｄ）Ｆ２４３Ｌ及びＶ２６４Ｉ、
ａｅ）Ｌ３２８Ｍ、
ａｆ）Ｉ３３２Ｅ、
ａｇ）Ｌ３２８Ｍ及びＩ３３２Ｅ、
ａｈ）Ｖ２６４Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｉ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｅ、
ａｊ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｋ）Ｓ２３９Ｅ、
ａｌ）Ａ３３０Ｙ、
ａｍ）Ｉ３３２Ｄ、
ａｎ）Ｌ３２８Ｉ及びＩ３３２Ｅ、
ａｏ）Ｌ３２８Ｑ及びＩ３３２Ｅ、
ａｐ）Ｖ２６４Ｔ、
ａｑ）Ｖ２４０Ｉ、
ａｒ）Ｖ２６６Ｉ、
ａｓ）Ｓ２３９Ｄ、
ａｔ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｄ、
ａｕ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｎ、
ａｖ）Ｓ２３９Ｄ及びＩ３３２Ｑ、
ａｗ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｄ、
ａｘ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｎ、
ａｙ）Ｓ２３９Ｅ及びＩ３３２Ｑ、
ａｚ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｄ、
ｂａ）Ｓ２３９Ｎ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｂ）Ｓ２３９Ｑ及びＩ３３２Ｄ、
ｂｃ）Ａ３３０Ｙ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｄ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｅ）Ａ３３０Ｌ及びＩ３３２Ｅ、
ｂｆ）Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｇ）Ｌ２３４Ｅ、Ｌ２３４Ｙ、もしくはＬ２３４Ｉ、
ｂｈ）Ｌ２３５Ｄ、Ｌ２３５Ｓ、Ｌ２３５Ｙ、もしくはＬ２３５Ｉ、
ｂｉ）Ｓ２３９Ｔ、
ｂｊ）Ｖ２４０Ｍ、
ｂｋ）Ｖ２６４Ｙ、
ｂｌ）Ａ３３０Ｉ、
ｂｍ）Ｎ３２５Ｔ、
ｂｎ）Ｉ３３２Ｅ及びＬ３２８Ｄ、Ｌ３２８Ｖ、Ｌ３２８Ｔ、もしくはＬ３２８Ｉ、
ｂｏ）Ｖ２６４Ｉ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＥもしくはＳ２３９Ｑのいずれか、
ｂｐ）Ｓ２３９Ｅ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｙ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｑ）Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｒ）Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｓ）Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｔ）Ｓ２９８Ａ、Ｉ３３２Ｅ、及びＳ２３９ＤもしくはＳ２３９Ｎのいずれか、
ｂｕ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｖ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ｓ２９８Ａ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｗ）Ｓ２３９Ｄ、Ｖ２６４Ｉ、Ａ３３０Ｌ、及びＩ３３２Ｅ、
ｂｘ）Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、及びＡ３３０Ｉ、
ｂｙ）Ｐ２３０Ａ、
ｂｚ）Ｐ２３０Ａ、Ｅ２３３Ｄ、及びＩ３３２Ｅ、
ｃａ）Ｅ２７２Ｙ、
ｃｂ）Ｋ２７４Ｔ、Ｋ２７４Ｅ、Ｋ２７４Ｒ、Ｋ２７４Ｌ、もしくはＫ２７４Ｙ、
ｃｄ）Ｆ２７５Ｗ、
ｃｅ）Ｎ２７６Ｌ、
ｃｆ）Ｙ２７８Ｔ、
ｃｇ）Ｖ３０２Ｉ、
ｃｈ）Ｅ３１８Ｒ、
ｃｉ）Ｓ３２４Ｄ、Ｓ３２４Ｉ、もしくはＳ３２４Ｖ、
ｃｊ）Ｋ３２６ＩもしくはＫ３２６Ｔ、
ｃｋ）Ｔ３３５Ｄ、Ｔ３３５Ｒ、もしくはＴ３３５Ｙ、
ｃｌ）Ｖ２４０Ｉ及びＶ２６６Ｉ、
ｃｍ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３４Ｉ、
ｃｎ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＬ２３５Ｄ、
ｃｏ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２４０Ｉ、
ｃｐ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＶ２６４Ｔ、または
ｃｑ）Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｙ、Ｉ３３２Ｅ、及びＫ３２６ＥもしくはＫ３２６Ｔのいずれか（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３６３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２０】
３６５．ａ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｂ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｃ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５４のアミノ酸配列を含むか、
ｄ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｅ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号２６５のアミノ酸配列を含むか、
ｆ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含むか、
ｇ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５５のアミノ酸配列を含むか、
ｈ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含むか、
ｉ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含むか、
ｊ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含むか、
ｋ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７４のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｌ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含むか、
ｍ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６１９のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｎ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含むか、
ｏ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７２１のアミノ酸配列を含むか、
ｐ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含むか、
ｑ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２２のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｒ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含むか、
ｓ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７７３のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９３のアミノ酸配列を含むか、
ｔ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、
ｕ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含むか、
ｖ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含むか、
ｗ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含むか、または
ｘ）前記第１のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号６２５のアミノ酸配列を含み、前記第２のＦｃドメインもしくはその断片が、配列番号７９６のアミノ酸配列を含む、実施形態３６０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２１】
３６６．前記第１の半減期延長ドメインが、第１のｓｃＦｖまたはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２のｓｃＦｖまたはその断片である、実施形態３３２〜３５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２２】
３６７．前記第１の半減期延長ドメインが、第１のＦｃドメインまたはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、第２のＦｃドメインまたはその断片であり、前記第１のＦｃドメインまたはその断片が、前記第２のＦｃドメインまたはその断片に連結されている、実施形態３３２〜３５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２３】
３６８．前記第１のＦｃドメインまたはその断片が、第４のリンカーを介して前記第２のＦｃドメインまたはその断片に連結されている、実施形態３６７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２４】
３６９．ａ）前記第１の半減期延長ドメインが、ｓｃＦｖもしくはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、抗体もしくはその断片であるか、または
ａ）前記第１の半減期延長ドメインが、抗体またはその断片であり、前記第２の半減期延長ドメインが、ｓｃＦｖまたはその断片である、実施形態２３２〜３５１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２５】
３７０．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｆ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３５２〜３６５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２６】
３７１．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３５４Ｃ及びＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ及びＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＳ３６４Ｈ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ３４９Ｔ及びＴ３９４Ｆ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態３５２〜３６５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２７】
３７２．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｒ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３５２〜３６５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２８】
３７３．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＹ４０７Ｔ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｙ及びＦ４０５Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｗ及びＹ４０７Ｔ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＦ４０５Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３９４Ｓ及びＹ４０７Ａ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＦ４０５Ｗ及びＹ４０７Ａ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ及びＴ３９４Ｓ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ｒ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｗ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態３５２〜３６５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９２９】
３７４．前記第１の半減期延長ドメイン及び前記第２の半減期延長ドメインの前記会合を促進する前記修飾が、
ａ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｒ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｓ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｔ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｕ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｖ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｗ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｘ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｙ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｚ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａａ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｂ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｃ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｄ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｅ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｆ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｇ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ａｈ）前記第２の抗体もしくはその断片においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ前記第１の抗体もしくはその断片においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、を含む、実施形態３５２〜３６５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３０】
３７５．前記第１の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列及び前記第２の抗体またはその断片の前記アミノ酸配列が、
ａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｄ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｉ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｊ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｋ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｌ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｍ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｎ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｏ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｐ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｑ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｒ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｓ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｔ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｕ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｖ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｗ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｅ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｘ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｒ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｙ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ｚ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａａ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｂ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ、Ｅ３５６Ｋ、及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｃ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｄ）配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｅ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３９２Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｆ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３７０Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５７Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、
ａｇ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ３６０Ｄ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、または
ａｈ）それぞれ、配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＫ４０９Ｄ及びＫ４３９Ｄ変異を導入し、かつ配列番号１５４もしくは１６９のアミノ酸配列においてＤ３９９Ｋ及びＥ３５６Ｋ変異を導入すること（Ｋａｂａｔ  ＥＵ番号付けシステムにより番号付けされる）、によってもたらされる、実施形態３５２〜３６５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３１】
３７６．前記第１のリンカーが、第１の切断可能なペプチドを含み、及び／または前記第２のリンカーが、第２の切断可能なペプチドを含む、実施形態３３３〜３７５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３２】
３７７．前記第１のリンカーが、第１のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第１のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態３３３〜３７６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３３】
３７８．前記第１のリンカーが、
ａ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、前記第１の切断可能なペプチド、及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第１の切断可能なペプチド及び前記第１のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第１のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第１のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態３７７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３４】
３７９．前記第２のリンカーが、第２のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第２のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態３３３〜３７８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３５】
３８０．前記第２のリンカーが、
ａ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、前記第２の切断可能なペプチド、及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第２の切断可能なペプチド及び前記第２のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第２のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第２のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態３７９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３６】
３８１．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３７６〜３８０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３７】
３８２．前記第１のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第１のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３７７〜３８１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３８】
３８３．前記第１の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３７６〜３８０のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９３９】
３８４．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態３８３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４０】
３８５．前記第２のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３７９〜３８４のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４１】
３８６．前記第２の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３７６〜３８５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４２】
３８７．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態３８６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４３】
３８８．前記第１のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第２のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３３３〜３８７のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４４】
３８９．前記第３のリンカーが、第３の切断可能なペプチドを含む、実施形態３３４〜３８８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４５】
３９０．前記第３のリンカーが、第３のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第３のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態３３４〜３８９のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４６】
３９１．前記第３のリンカーが、
ａ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン、前記第３の切断可能なペプチド、及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｂ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン及び前記第３の切断可能なペプチド、
ｃ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｄ）前記第３の切断可能なペプチド及び前記第３のＣ末端スペーサードメイン、
ｅ）前記第３のＮ末端スペーサードメイン、または
ｆ）前記第３のＣ末端スペーサードメイン、を含む、実施形態３９０に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４７】
３９２．前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２３６〜２４２、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３８９〜３９１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４８】
３９３．前記第３のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第３のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３９０〜３９２のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９４９】
３９４．前記第３の切断可能なペプチドが、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択されるアミノ酸配列、ならびに配列番号２３６〜２４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３８９〜３９３のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５０】
３９５．配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、Ｎ末端及びＣ末端を含み、配列番号２３６〜２４２からなる群から選択される前記アミノ酸配列が、配列番号９６〜１５３、２６４、２７０〜３０２、３０６〜３１７、３４２〜３４７、３５６〜４１５、４２０〜４９１、４９４〜５０１、５０４〜５３５、及び５３８〜５５５からなる群から選択される前記アミノ酸配列の前記Ｎ末端または前記Ｃ末端に連結されている、実施形態３９４に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５１】
３９６．前記第３のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第３のリンカーが、配列番号１１〜１５３、２３５〜２４２、２６２〜２６４、２６８〜３２０、３２３〜３３８、３４０〜３５４、３５６〜５５５、６６８、６９１、７２４、７２５、７２７、７６２〜７７１、７９４、及び７９７〜８１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３３４〜３９５のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５２】
３９７．前記第４のリンカーが、第４のＮ末端スペーサードメイン、及び／または第４のＣ末端スペーサードメインを含む、実施形態３６８〜３９６のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５３】
３９８．前記第４のＮ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／または前記第４のＣ末端スペーサードメインが、配列番号２０〜９５、２３５、２６８、２６９、３０３〜３０５、３２３〜３３８、３４０、３４１、７２７、７９４、及び７９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態３９７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５４】
３９９．前記第１の切断可能なペプチド、前記第２の切断可能なペプチド、及び／または前記第３の切断可能なペプチドが、サイトカイン受容体を発現している領域または組織に共局在するプロテアーゼのための基質である、実施形態３７６〜３９８のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５５】
４００．前記サイトカイン受容体が、ＩＬ−２サイトカイン受容体またはＩＬ−１５サイトカイン受容体である、実施形態３９９に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５６】
４０１．前記第１の切断可能なペプチド、前記第２の切断可能なペプチド、及び／または前記第３の切断可能なペプチドが、ＡＢＨＤ１２、ＡＤＡＭ１２、ＡＢＨＤ１２Ｂ、ＡＢＨＤ１３、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＡＤＡＭ８、ＡＢＨＤ１７Ａ、ＡＤＡＭＤＥＣ１、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＤＡＭＴＳ１０、ＡＤＡＭＴＳ１２、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＡＤＡＭＴＳ１４、ＡＤＡＭＴＳ１５、ＡＤＡＭＴＳ１６、ＡＤＡＭＴＳ１７、ＡＤＡＭＴＳ１８、ＡＤＡＭＴＳ１９、ＡＤＡＭＴＳ２、ＡＤＡＭＴＳ２０、ＡＤＡＭＴＳ３、ＡＤＡＭＴＳ４、ＡＢＨＤ１７Ｂ、ＡＤＡＭＴＳ５、ＡＤＡＭＴＳ６、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＤＡＭＴＳ８、ＡＤＡＭＴＳ９、ＡＤＡＭＴＳＬ１、ＡＤＡＭＴＳＬ２、ＡＤＡＭＴＳＬ３、ＡＢＨＤ１７Ｃ、ＡＤＡＭＴＳＬ５、ＡＳＴＬ、ＢＭＰ１、ＣＥＬＡ１、ＣＥＬＡ２Ａ、ＣＥＬＡ２Ｂ、ＣＥＬＡ３Ａ、ＣＥＬＡ３Ｂ、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭＴＳ４、ＣＴＳＥ、ＣＴＳＦ、ＡＤＡＭＴＳＬ４、ＣＭＡ１、ＣＴＲＢ１、ＣＴＲＣ、ＣＴＳＯ、ＣＴＲｌ、ＣＴＳＡ、ＣＴＳＷ、ＣＴＳＢ、ＣＴＳＣ、ＣＴＳＤ、ＥＳＰ１、ＣＴＳＧ、ＣＴＳＨ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＧＺＭＨ、ＣＴＳＫ、ＧＺＭＭ、ＣＴＳＬ、ＣＴＳＳ、ＣＴＳＶ、ＣＴＳＺ、ＨＴＲＡ４、ＫＬＫ１０、ＫＬＫ１１、ＫＬＫ１３、ＫＬＫ１４、ＫＬＫ２、ＫＬＫ４、ＤＰＰ４、ＫＬＫ６、ＫＬＫ７、ＫＬＫＢ１、ＥＣＥ１、ＥＣＥ２、ＥＣＥＬ１、ＭＡＳＰ２、ＭＥＰ１Ａ、ＭＥＰ１Ｂ、ＥＬＡＮＥ、ＦＡＰ、ＧＺＭＡ、ＭＭＰ１１、ＧＺＭＫ、ＨＧＦＡＣ、ＨＰＮ、ＨＴＲＡ１、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１９、ＨＴＲＡ２、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＨＴＲＡ３、ＨＴＲＡ４、ＫＥＬ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、ＫＬＫ５、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＬＧＭＮ、ＬＮＰＥＰ、ＭＡＳＰ１、ＰＡＰＰＡ、ＰＡＰＰＡ２、ＰＣＳＫ１、ＮＡＰＳＡ、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＭＭＥ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ１０、ＰＬＡＴ、ＰＬＡＵ、ＰＬＧ、ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ１２、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ２１、ＰＲＳＳ３、ＰＲＳＳ３３、ＰＲＳＳ４、ＰＲＳＳ５５、ＰＲＳＳ５７、ＭＭＰ１２、ＰＲＳＳ８、ＰＲＳＳ９、ＰＲＴＮ３、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＳＴ１４、ＴＭＰＲＳＳ１０、ＴＭＰＲＳＳ１１Ａ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｅ、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｆ、ＴＭＰＲＳＳ１２、ＴＭＰＲＳＳ１３、ＭＭＰ１５、ＴＭＰＲＳＳ１５、ＭＭＰ２、ＴＭＰＲＳＳ２、ＴＭＰＲＳＳ３、ＴＭＰＲＳＳ４、ＴＭＰＲＳＳ５、ＴＭＰＲＳＳ６、ＴＭＰＲＳＳ７、ＴＭＰＲＳＳ９、ＮＲＤＣ、ＯＶＣＨ１、ＰＡＭＲ１、ＰＣＳＫ３、ＰＨＥＸ、ＴＩＮＡＧ、ＴＰＳＡＢ１、ＴＰＳＤ１、及びＴＰＳＧ１からなる群から選択される１つまたは複数の酵素によって切断される、実施形態３７６〜４００のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５７】
４０２．前記第１の半減期延長ドメイン及び／または前記第２の半減期延長ドメインが、薬剤にコンジュゲートされている、実施形態３３２〜４０１のいずれか１つに記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５８】
４０３．前記薬剤が、チューブリン重合の阻害剤、ＤＮＡ損傷剤、またはＤＮＡ合成阻害剤である、実施形態４０２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９５９】
４０４．前記薬剤が、マイタンシノイド、アウリスタチン、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）二量体、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、インド−リノベンゾジアゼピン二量体、またはエキサテカン誘導体Ｄｘｄである、実施形態４０３に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９６０】
４０５．前記薬剤が、免疫刺激薬である、実施形態４０２に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９６１】
４０６．前記免疫刺激薬が、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）アゴニストまたはトール様受容体（ＴＬＲ）アゴニストである、実施形態４０５に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９６２】
４０７．前記ＳＴＩＮＧアゴニストが、環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）である、実施形態４０６に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９６３】
４０８．前記ＣＤＮが、ｃＧＡＭＰ、ｃ−ジ−ＡＭＰ、ｃ−ジ−ＧＭＰ、ｃＡＩＭＰ、ｃ−ジ−ＩＭＰ、４−（２−クロロ−６−フルオロベンジル）−Ｎ−（フラン−２−イルメチル）−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン−６−カルボキサミドからなる群から選択される、実施形態４０７に記載のマスクされたサイトカイン。
【０９６４】
４０９．前記ＴＬＲアゴニストが、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、及びＴＬＲ１０からなる群から選択されるＴＬＲのアゴニストである、実施形態４０６に記載のマスクされたサイトカイン。
【実施例】
【０９６５】
本発明は、以下の実施例を参照することによってより完全に理解される。しかしながら、それらは、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書に記載の実施例及び実施形態が例示目的のものにすぎず、それを考慮した種々の修正または変更が当業者に示唆され、本出願の趣旨及び範囲ならびに添付の特許請求の範囲内に含まれるべきであることが理解される。
【０９６６】
いくつかの実施例は、ＩＬ−２ポリペプチド構築物またはＩＬ−１５ポリペプチド構築物の「マスクされた」バージョンの操作、産生、及び／または試験について記載しているが、いくつかの実施例はまた、比較のため等でＩＬ−２ポリペプチド構築物もしくはＩＬ−１５ポリペプチド構築物の「マスクされていない」親バージョン、または比較のための対照として試験される本明細書に記載の構成要素のうちの１つもしくは複数を含む他の構築物も採用する。したがって、例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物に対して行われた試験についての説明は、必ずしも、この構築物のマスクされていないバージョンが同様に試験されなかったことを意味するものではない。
【０９６７】
実施例１：マスクされたＩＬ−２ポリペプチド及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチドの操作
マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物を本明細書の教示に従って生成する。後続の実施例において、一部の実験は、単量体形態のマスクされたＩＬ−２及びＩＬ−１５ポリペプチド構築物の使用を伴い、一部の実験は、同じマスクされたポリペプチド構築物の２つのコピーをジスルフィド結合により連結することによって形成される二量体（ホモ二量体）、または２つの異なるポリペプチドによって形成されるヘテロ二量体（例えば、表８〜１１を参照されたい）等の、二量体形態のマスクされたＩＬ−２及びＩＬ−１５ポリペプチド構築物の使用を伴う。
【０９６８】
ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片、マスキング部分、及び半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物を生成する。マスキング部分もまた含むことなく半減期延長ドメインに連結されたＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を含む、いくつかのＩＬ−２ポリペプチド構築物もまた生成する。当該構築物のうちのいくつかはまた、切断可能なペプチドを含むとともにマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片に連結するリンカーも含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物をもたらす。当該構築物のうちのいくつかはまた、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を半減期延長ドメインに連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかはまた、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片をマスキング部分に連結するリンカーも含む。ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片をマスキング部分に連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−２ポリペプチド構築物とも称される。代表的なＩＬ−２ポリペプチド構築物の構造及び組成が表４に提供される。
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【０９６９】
ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片、マスキング部分、及び半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物を生成する。マスキング部分もまた含むことなく半減期延長ドメインに連結されたＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片を含む、いくつかのＩＬ−１５ポリペプチド構築物もまた生成する。当該構築物のうちのいくつかはまた、切断可能なペプチドを含むとともにマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片に連結するリンカーも含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物をもたらす。当該構築物のうちのいくつかはまた、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片を半減期延長ドメインに連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかはまた、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片をマスキング部分に連結するリンカーも含む。ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片をマスキング部分に連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−１５ポリペプチド構築物とも称される。配列番号２６１のアミノ酸配列を含むマスキング部分を含む、いくつかのＩＬ−１５ポリペプチド構築物もまた生成する。代表的なＩＬ−１５ポリペプチド構築物の構造及び組成が表５に提供される。
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【０９７０】
また、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片、第１のマスキング部分、第２のマスキング部分、及び半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物も生成する。当該構築物のうちのいくつかはまた、第１のマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片に連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかはまた、第２のマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片に連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかは、第１のマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカー及び／または第２のマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物をもたらす。これらの当該構築物のうちのいくつかはまた、第２のマスキング部分を半減期延長ドメインに連結するリンカーも含む。ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を第１のマスキング部分または第２のマスキング部分に連結するリンカーのどちらにも切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−２ポリペプチド構築物とも称される。代表的なＩＬ−２ポリペプチド構築物の構造及び組成が表６に提供される。
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【０９７１】
また、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片、第１のマスキング部分、第２のマスキング部分、及び半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物も生成する。当該構築物のうちのいくつかはまた、第１のマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片に連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかはまた、第２のマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片に連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかは、第１のマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカー及び／または第２のマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物をもたらす。これらの当該構築物のうちのいくつかはまた、第２のマスキング部分を半減期延長ドメインに連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかはまた、第１の半減期延長ドメインと会合する第２の半減期延長ドメインも含む。ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片を第１のマスキング部分または第２のマスキング部分に連結するリンカーのどちらにも切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−２ポリペプチド構築物とも称される。代表的なＩＬ−１５ポリペプチド構築物の構造及び組成が表７に提供される。
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【０９７２】
また、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片、マスキング部分、第１の半減期延長ドメイン、及び第２の半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物も生成する。マスキング部分は、第１の半減期延長ドメインに連結されており、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、第２の半減期延長ドメインに連結されており、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。代表的な一実施形態では、マスキング部分は、第１の半減期延長ドメインに連結されており、配列番号２６７のアミノ酸配列を含み、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、第２の半減期延長ドメインに連結されており、配列番号２６６のアミノ酸配列を含み、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。マスクされていないＩＬ−２ポリペプチド構築物の代表的な一実施形態では、当該実施形態は、第１の半減期延長ドメインに連結されたＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片を含み、かつ第２の半減期延長ドメインを含み、ここで、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片は、第１の半減期延長ドメインに連結されており、配列番号２６６のアミノ酸配列を含み、第２の半減期延長ドメインは、配列番号２６５のアミノ酸配列を含む。当該構築物のうちのいくつかはまた、マスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカー、及び／またはＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片を第２の半減期延長ドメインに連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインもまた連結されている。一部の構築物において、当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、リンカーによって連結されている。当該構築物のうちのいくつかは、マスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカー及び／またはＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片を第２の半減期延長ドメインに連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物をもたらす。ＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片を第２の半減期延長ドメインに連結するリンカーまたはマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカーのどちらにも切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−２ポリペプチド構築物とも称される。代表的なＩＬ−２ポリペプチド構築物の構造及び組成が表８に提供される。
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【０９７３】
また、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片、マスキング部分、第１の半減期延長ドメイン、及び第２の半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物も生成する。マスキング部分は、第１の半減期延長ドメインに連結されており、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片は、第２の半減期延長ドメインに連結されており、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。当該構築物のうちのいくつかはまた、マスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカー、及び／またはＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片を第２の半減期延長ドメインに連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインもまた連結されている。一部の構築物において、当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、リンカーによって連結されている。当該構築物のうちのいくつかは、マスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカー及び／またはＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片を第２の半減期延長ドメインに連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物をもたらす。ＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片を第２の半減期延長ドメインに連結するリンカーまたはマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカーのどちらにも切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−１５ポリペプチド構築物とも称される。代表的なＩＬ−１５ポリペプチド構築物の構造及び組成が表９に提供される。
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【０９７４】
また、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片、第１のマスキング部分、第２のマスキング部分、第１の半減期延長ドメイン、及び第２の半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物も生成する。第１のマスキング部分は、第１の半減期延長ドメインに連結されており、第２のマスキング部分は、ＩＬ−２ポリペプチドまたはその機能的断片に連結されており、第２のマスキング部分かまたはＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片かのどちらかが、第２の半減期延長ドメインに連結されており、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。当該構築物のうちのいくつかはまた、第１のマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカー、及び／または第２のマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインもまた連結されている。一部の構築物において、当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、リンカーによって連結されている。当該構築物のうちのいくつかは、第１のマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、及び／または第２のマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物をもたらす。第１のマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカーまたは第２のマスキング部分をＩＬ−２ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーのどちらにも切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−２ポリペプチド構築物とも称される。代表的なＩＬ−２ポリペプチド構築物の構造及び組成が表１０に提供される。
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【０９７５】
また、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片、第１のマスキング部分、第２のマスキング部分、第１の半減期延長ドメイン、及び第２の半減期延長ドメイン、例えば、アルブミン、抗体もしくはその断片（例えば、Ｆｃ領域、重鎖、及び／または軽鎖）、アルブミン結合ペプチド、ＩｇＧ結合ペプチド、またはポリアミノ酸配列を含む、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物も生成する。第１のマスキング部分は、第１の半減期延長ドメインに連結されており、第２のマスキング部分は、ＩＬ−１５ポリペプチドまたはその機能的断片に連結されており、第２のマスキング部分かまたはＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片かのどちらかが、第２の半減期延長ドメインに連結されており、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインの会合を促進する修飾を含有する。当該構築物のうちのいくつかはまた、第１のマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカー、及び／または第２のマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーも含む。当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインもまた連結されている。一部の構築物において、当該構築物のうちのいくつかの第１の半減期延長ドメイン及び第２の半減期延長ドメインは、リンカーによって連結されている。当該構築物のうちのいくつかは、第１のマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、及び／または第２のマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーにおいて切断可能なペプチドを含み、それによって、活性化可能なマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物をもたらす。第１のマスキング部分を第１の半減期延長ドメインに連結するリンカーまたは第２のマスキング部分をＩＬ−１５ポリペプチドもしくはその機能的断片に連結するリンカーのどちらにも切断可能なペプチドを含まない、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物は、それらが切断可能なペプチドを含まないことから、活性化可能でないマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物または活性化可能でないＩＬ−１５ポリペプチド構築物とも称される。代表的なＩＬ−２ポリペプチド構築物の構造及び組成が表１１に提供される。
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【０９７６】
実施例２：マスクされたＩＬ−２及びＩＬ−１５ポリペプチドのインビトロ特性解析
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物を、インビトロでいくつかの細胞アッセイ及び機能的アッセイを用いて特性解析する。
【０９７７】
産生
構築物（例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物）をコードするプラスミドをＥｘｐｉ２９３細胞（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ａ１４５２７）またはＨＥＫ２９３−６Ｅ細胞（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｕｎｃｉｌ、ＮＲＣ）のいずれかにトランスフェクトした。トランスフェクションを、１ｍｇの総ＤＮＡを用いて、総ＤＮＡと１：１の比でＰＥＩｐｒｏ（Ｐｏｌｙｐｌｕｓ  Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ、１１５−１００）を用いて実施した。ＤＮＡ及びＰＥＩを各々、５０ｍＬのＯｐｔｉＭｅｍ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ３１９８５０８８）培地に添加し、滅菌濾過した。ＤＮＡ及びＰＥＩを１０分間合わせ、それぞれｅｘｐｉ２９３細胞またはＨＥＫ２９３細胞について、１．８〜２．８×１０６細胞／ｍＬまたは０．８５〜１．２０×１０６細胞／ｍの細胞密度、及び少なくとも９５％の生存率で、Ｅｘｐｉ２９３細胞に添加した。Ｅｘｐｉ２９３トランスフェクションに使用した同じプロトコルに従って、ＨＥＫ２９３−６Ｅのトランスフェクションを少なくとも９５％の細胞密度及び生存率で実施した。５〜７日後、細胞を３０００×ｇでの遠心分離によってペレット状にし、上清を０．２μｍ膜に通して濾過した。プロテインＡ樹脂（ＣａｐｔｉｖＡ、Ｒｅｐｌｉｇｅｎ  ＣＡ−ＰＲＩ−０００５）を濾過した上清に添加し、振とうしながら４℃で少なくとも２時間インキュベートした。樹脂をカラムに充填し、１５カラム体積分の２０ｍＭのクエン酸塩（ｐＨ６．５）で洗浄し、次いで１５カラム体積分の２０ｍＭのクエン酸塩、５００ｍＭの塩化ナトリウム（ｐＨ６．５）で洗浄した。結合したタンパク質を２０ｍＭのクエン酸塩、１００ｍＭのＮａＣｌ（ｐＨ２．９）によりカラムから溶出した。
【０９７８】
親（例えば、マスクされていない）構築物及びマスクされた構築物を含めた、産生された代表的な構築物のタイター（ｍｇ／Ｌ）が下記の表１２に提供される。
2022502088.tif 000047
【０９７９】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析
ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析のために、４倍Ｌａｅｍｍｌｉ試料緩衝液（ＢｉｏＲａｄカタログ番号１６１０７４７）とともにタンパク質試料を作製した。還元された試料のために、０．１ＭのＢｏｎｄ  Ｂｒｅａｋｅｒ  ＴＣＥＰ溶液（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ７７７２０）を添加し、試料を６５℃で５分間加熱した。タンパク質を１２ウェルのＮｕＰａｇｅ  ４〜１２％ビス−トリスタンパク質ゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＮＰ０３２２ＢＯＸ）に、１ウェル当たり４μｇのタンパク質のローディングによりロードした。ＳｉｍｐｌｙＢｌｕｅ  ＳａｆｅＳｔａｉｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＬＣ６０６５）を用いてゲルを染色した。
【０９８０】
図８に図示されるように、代表的な構築物（ＡＫ３０４、ＡＫ３０５、ＡＫ３０７、ＡＫ３０８、ＡＫ３０９、ＡＫ３１０、ＡＫ３１１、ＡＫ３１２、ＡＫ３１３、ＡＫ３１４、及びＡＫ３１５）の産生及び精製後に、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を素通り画分（ＦＴ）試料（すなわち、プロテインＡカラムに結合しなかったタンパク質）及び溶出した（Ｅ）試料（すなわち、プロテインＡカラムに結合し、そこから溶出したタンパク質）に対して実施した。この代表的なデータは、本明細書に記載されるような構築物が成功裏に産生され、精製され得ることを実証する。
【０９８１】
レポーターバイオアッセイ
ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路等の下流経路の活性化を監視するために、レポーターバイオアッセイを、マスクされていない親構築物または他の対照とともに、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物に対して実施する。
【０９８２】
一部の研究では、ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ＩＬ−２レポーター細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を用いて、以下の方法に従ってＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路の活性化を試験した。第６継代（ｐ６）のＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ＩＬ−２細胞（９７％生存）をアッセイ培地（ＤＭＥＭ＋熱失活させた１０％ＦＢＳ）で２回洗浄し、１５０ｕＬのアッセイ培地中、５ｅ４細胞／ウェルでプレートして３通りにプレートし（ｐｌａｔｅｄ  ｉｎ  ３）、アッセイ培地中で約２時間静置して、プレートに接着させた。試験される各構築物をアッセイ培地中で３００ｐＭに希釈し、次いでプレートにおいて１：２希釈した。５０ｕＬの各希釈物を添加して７５ｐＭの最終出発濃度を得た。２４時間後、ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ＩＬ−２細胞上清を採取し、Ｑｕａｎｔｉｂｌｕｅ（１８０ｕＬ＋上清２０ｕＬ）＋３ウェル／プレートのアッセイ培地とともに、３７℃で１時間インキュベートした。Ｂｉｏｔｅｋ  Ｎｅｏ２を用いて６２５ｎｍで吸光度を読み取った。１つの研究では、このプロトコルに従って、陽性対照としての組換えヒトＩＬ−１５（ｒｈＩＬ−１５）とともに、ＭＭＰ１０プロテアーゼへの事前曝露を伴うまたは伴わない代表的なマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物ＡＫ２４８を試験した。図２２のＡ及びＢに示されるように、マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物ＡＫ２４８（プロテアーゼ切断を伴わない）を用いたときに、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路の検出可能な活性化は何ら存在しなかったが、活性化プロテアーゼによる切断後には、ＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路の強力なレベルの活性化が観察された。これは、代表的なＩＬ−１５ポリペプチドが効果的にマスクされ、かつプロテアーゼ切断により活性化されることも可能であることを実証する。
【０９８３】
一部の研究では、以下の方法に従って、ＣＴＬＬ２細胞を用いてＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路の活性化を試験した。ＣＴＬＬ２細胞を、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ中、１ウェル当たり４０，０００細胞でプレートした。目的とする構築物（例えば、ＭＭＰプロテアーゼへの事前曝露を伴うもしくは伴わないマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物ＡＫ２４８、またはｒｈＩＬ−１５等の陽性対照）の希釈物を添加し、３７度でインキュベートした。６時間後、Ｂｉｏ−Ｇｌｏ試薬を添加し、発光をＢｉｏＴｅｋ  Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｎｅｏ２プレートリーダーで測定した。
【０９８４】
受容体結合
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の結合を評価する。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物について、一部の実験では、ＥＬＩＳＡプレートをＩＬ−２Ｒα（ＣＤ２５とも称される）、ＩＬ−２Ｒβ（ＣＤ１２２とも称される）、もしくはＩＬ−２Ｒγ（ＣＤ１３２とも称される）、またはそれらの組み合わせ等の受容体サブユニットでコーティングする。マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物について、一部の実験では、ＥＬＩＳＡプレートをＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ（ＣＤ１２２とも称される）、もしくはＩＬ−２Ｒγ（ＣＤ１３２とも称される）、またはそれらの組み合わせ等の受容体サブユニットでコーティングする。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の希釈物を、受容体サブユニット（複数可）に結合させ、抗ｈｕＦｃ−ＨＲＰ検出抗体を用いて検出する。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の結合を、プロテアーゼ切断を伴う及び伴わない条件下で決定する。
【０９８５】
オンセル（Ｏｎ−Ｃｅｌｌ）受容体結合
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物のオンセル受容体結合を評価する。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはＩＬ−１５ポリペプチド構築物の希釈物を、末梢血リンパ球またはＣＴＬＬ２細胞等の組織培養細胞に結合させ、抗ｈｕＦｃ−ＦＩＴＣまたは抗アルブミン−ＦＩＴＣ検出抗体を用いて蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）によって検出する。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びＩＬ−１５ポリペプチド構築物の結合を、プロテアーゼ切断を伴う及び伴わない条件下で決定する。
【０９８６】
受容体結合親和性
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の結合親和性を評価する。例えば、表面プラズモン共鳴法（ＳＰＲ）を室温及び／または３７℃で実施する。ＩＬ−２受容体（例えば、ＩＬ−２Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、もしくはＩＬ−２Ｒγ、またはそれらの組み合わせ）を、ＥＤＣ／ＮＨＳ化学反応を介してＣＭ５チップ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）にカップリングする。ＩＬ−１５受容体（例えば、ＩＬ−１５Ｒα、ＩＬ−２Ｒβ、もしくはＩＬ−２Ｒγ、またはそれらの組み合わせ）を、ＥＤＣ／ＮＨＳ化学反応を介してＣＭ５チップ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）にカップリングする。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物を様々な濃度でチップ上に流して、オン速度及びオフ速度について解離定数を得る。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びＩＬ−１５ポリペプチド構築物の結合親和性を、プロテアーゼ切断を伴う及び伴わない条件下で決定する。
【０９８７】
マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされていないＩＬ−２ポリペプチド構築物の結合を試験する一部のＳＰＲ研究については、Ｒｅｉｃｈｅｒｔカルボキシメチルデキストランハイドロゲル表面センサチップに、目的とする構築物（例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされていないＩＬ−２ポリペプチド構築物）を、ＥＤＣ及びＮＨＳ中で１：１希釈した１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ５．０）中、３０ｕｇ／ｍｌでコーティング及び固定化した。ＰＢＳ中のＣＤ２５−ＦｃまたはＦｃ−ＣＤ１２２の希釈物（ＣＤ２５：１６ｎＭ、８ｎＭ、４ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、及びＣＤ１２２：５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１２５ｎＭ、６２．５ｎＭ、３１．２５ｎＭ）を調製した。Ｒｅｉｃｈｅｒｔ  ４チャネルＳＰＲを用いて、ＣＤ２５またはＣＤ１２２の希釈物を、固定化された構築物を有するチップ上に流して、２５℃でオン速度を決定した。平衡状態で（およそ３〜４分）、フロー緩衝液をＰＢＳに変更して、１分間にわたってオフ速度を決定した。各送液の間で、チップを１０ｍＭのグリシン（ｐＨ２．０）で再生した。類似の手法を採用して、本明細書の教示及び実施例に従って、適切な濃度でのマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物及びマスクされていないＩＬ−１５ポリペプチド構築物の適切な結合パートナーへの結合を試験する。
【０９８８】
図９のＡ〜Ｄは、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物（ＡＫ２１５及びＡＫ２１６）のＣＤ２５−Ｆｃへの結合を試験したＳＰＲ分析からの結果を図示する。Ａは、ＡＫ２１５とＣＤ２５−Ｆｃとの間の相互作用を図示し、Ｂは、ＡＫ２１６とＣＤ２５−Ｆｃとの間の相互作用を図示し、Ｃは、組換えヒトＩＬ２（ｒｈＩＬ２）対照とＣＤ２５−Ｆｃとの間の相互作用を図示する。Ｄは、各相互作用についての会合定数（ｋａ）、解離定数（ｋｄ）、平衡解離定数（ＫＤ）、ならびにＣｈｉ２値及びＵ値に関して得られたデータを要約する表を提供する。これらの結果は、これらの代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物が、ＣＤ２５−Ｆｃへの検出可能な結合を示さなかった一方で、ｒｈＩＬ２対照が、検出可能な結合を示したことを実証する。
【０９８９】
図１０のＡ〜Ｄは、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物（ＡＫ２１６及びＡＫ２１８）のＣＤ１２２−Ｆｃへの結合を試験したＳＰＲ分析からの結果を図示する。Ａは、ＡＫ２１６とＣＤ１２２−Ｆｃとの間の相互作用を図示し、Ｂは、ＡＫ２１８とＣＤ１２２−Ｆｃとの間の相互作用を図示し、Ｃは、組換えヒトＩＬ２（ｒｈＩＬ２）対照とＣＤ１２２−Ｆｃとの間の相互作用を図示する。Ｄは、各相互作用についての会合定数（ｋａ）、解離定数（ｋｄ）、平衡解離定数（ＫＤ）、ならびにＣｈｉ２値及びＵ値に関して得られたデータを要約する表を提供する。これらの結果は、これらの代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物が、ＣＤ１２２−Ｆｃへの検出可能な結合を示さなかった一方で、ｒｈＩＬ２対照が、検出可能な結合を示したことを実証する。マスクされた構築物及びマスクされていない構築物を含めた、試験された種々の構築物についての追加の代表的なＳＰＲデータが表１３で下記に提供される。一部の構造物については、該当する場合、プロテアーゼによって事前に切断されたまたはされていない構築物についてＫＤを決定した。
2022502088.tif 000048
【０９９０】
切断
マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物の切断速度は、プロテアーゼの存在または不在下で、またプロテアーゼが存在する場合、ＥＤＴＡの添加によって等で種々の時点で不活性化させながら、マスクされたＩＬ−２ペプチド構築物をインキュベートした後に、上述したような受容体結合アッセイを行うことによって評価される。マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の切断速度は、プロテアーゼの存在または不在下で、またプロテアーゼが存在する場合、ＥＤＴＡの添加によって等で種々の時点で不活性化させながら、マスクされたＩＬ−１５ペプチド構築物をインキュベートした後に、上述したような受容体結合アッセイを行うことによって評価される。切断速度はまた、還元及び非還元ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）を用いて、ならびに全質量の質量分析及びペプチドマップ分析によっても評価される。切断速度はまた、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物をヒト、マウス、もしくはカニクイザル末梢血リンパ球、または正常ヒト組織もしくはヒト腫瘍組織に曝露する、エクスビボアッセイを用いても評価される。
【０９９１】
一部のプロテアーゼ活性化研究については、ＭＭＰ１０をＭＭＰ切断緩衝液中で５０ｎｇ／ｕＬに希釈し、１ｍＭのＡＰＭＡにより３７℃で２時間活性化させた。活性化したプロテアーゼのうち５μＬのプロテアーゼ（総計２５０ｎｇ）を１ｕＭのマスクされたサイトカイン構築物（例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物）とともにインキュベートし、３７度で２時間インキュベートした。切断を、ＡｎｙｋＤ（商標）Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ（商標）ＴＧＸ  Ｓｔａｉｎ−Ｆｒｅｅ（商標）プロテインゲルを用いてＳＤＳ−ＰＡＧＥによって評価した。類似の手法を採用して、他のプロテアーゼによる切断を試験する。
【０９９２】
図１１のＡは、腫瘍環境に関連するプロテアーゼ等のプロテアーゼによる切断前（左）及び後（右）の、マスクされたＩＬ−２ポリペプチドの代表的な構造を図示する。図１１のＢは、ＭＭＰ１０プロテアーゼの不在（左列）または存在（右列）下でインキュベートされた代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物のＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を図示する。
【０９９３】
増殖
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物での処理後の、ＣＴＬＬ２、ＹＴ、ＴＦ１Ｂ、ＬＧＬ、ＨＨ、及びＣＴ６等のＩＬ−２及びＩＬ−１５応答性組織培養細胞株の増殖を評価する。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物を伴う実験については、細胞を、ＩＬ−２を欠いている培地中で９６ウェル組織培養プレートにプレートして２〜４時間置き、次いで種々の濃度のマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物で処理する。マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物を伴う実験については、細胞を、ＩＬ−１５を欠いている培地中で９６ウェル組織培養プレートにプレートして２〜４時間置き、次いで種々の濃度のマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物で処理する。３７度で２４〜４８時間インキュベートした後、ＭＴＳ、アラマーブルー、ルシフェラーゼ、または類似の代謝検出試薬の添加によって細胞数を決定し、比色、蛍光、またはルシフェラーゼ読取り値をプレート分光光度計リーダーによって検出する。
【０９９４】
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物での処理後の免疫細胞の増殖もまた評価する。ヒト、マウス、またはカニクイザル末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を種々の濃度の構築物で処理し、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、及び／またはＴｒｅｇ細胞等の細胞種の増殖を、特定の細胞種の染色及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）を介した分析によって決定する。一部の実験では、一部のＰＢＭＣは、比較のために対照で処理される。一部の実験では、一部のＰＢＭＣは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処理に対する対照としてアルデスロイキンで処理される。一部の実験では、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物は、プロテアーゼ切断（例えば、活性化）を伴う及び伴わない条件下で試験される。一部の実験では、ＮＫ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３−ＣＤ５６＋として染色され、ＣＤ８＋  Ｔ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３＋  ＣＤ８＋として染色され、ＣＤ４＋  Ｔ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３＋  ＣＤ４＋  ＣＤ２５−として染色され、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３＋  ＣＤ４＋  ＣＤ２５＋  ＦＯＸＰ３＋として染色される。一部の実験では、ＰＢＭＣは５日間の期間処理される。一部の実験では、ＰＢＭＣはまた、細胞増殖のマーカーであるＫｉ６７で染色される。一部の実験では、ＰＢＭＣは処理前にＣＦＳＥ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）で標識され、ＣＦＳＥ希釈の程度を決定することによって増殖が測定される。一部の実験では、各構築物、ならびにアルデスロイキン及び／または他の対照は、０．０００１ｎＭ〜５００ｎＭの範囲の１つまたは複数の濃度等の、１つまたは複数の濃度で適用される。
【０９９５】
ＳＴＡＴ５活性化
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物での処理後の、シグナル伝達兼転写活性化因子５（ＳＴＡＴ５）の活性化もまた評価する。ＰＢＭＣを構築物で指定期間処理し、次いで、ＳＴＡＴ５等のタンパク質のリン酸化状態を保存するために直ちに固定する。一部の実験では、一部のＰＢＭＣは、比較のために対照で処理される。一部の実験では、一部のＰＢＭＣは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処理に対する対照としてアルデスロイキンで処理される。一部の実験では、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物は、プロテアーゼ切断（例えば、活性化）を伴う及び伴わない条件下で試験される。一部の実験では、ＰＢＭＣは、１０分間、１５分間、２０分間、または２５分間処理される。一部の実験では、各構築物、ならびにアルデスロイキン及び／または他の対照は、０．０００１ｎＭ〜５００ｎＭの範囲の１つまたは複数の濃度等の、１つまたは複数の濃度で適用される。一部の実験では、固定され、透過処理されたＰＢＭＣは次いで、リン酸化ＳＴＡＴ５（ホスホ−ＳＴＡＴ５）に特異的な抗体で染色され、フローサイトメトリーによって分析される。一部の実験では、ＳＴＡＴ５の総レベル及びリン酸化レベルが測定される。ＮＫ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、及び／またはＴｒｅｇ細胞等のある特定の細胞種のホスホ−ＳＴＡＴ５状態を、特定の細胞種の染色によって決定する。一部の実験では、ＮＫ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３−ＣＤ５６＋として染色され、ＣＤ８＋  Ｔ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３＋  ＣＤ８＋として染色され、ＣＤ４＋  Ｔ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３＋  ＣＤ４＋  ＣＤ２５−として染色され、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ４５＋  ＣＤ３＋  ＣＤ４＋  ＣＤ２５＋  ＦＯＸＰ３＋として染色される。
【０９９６】
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物での処理後の、ＣＴＬＬ−２細胞等のマウス細胞株におけるＳＴＡＴ５の活性化もまた評価する。一部の実験では、一部のＣＴＬＬ−２細胞は、比較のために対照で処理される。一部の実験では、一部のＣＴＬＬ−２細胞は、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処理に対する対照としてアルデスロイキンで処理される。一部の実験では、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物は、プロテアーゼ切断（例えば、活性化）を伴う及び伴わない条件下で試験される。一部の実験では、ＣＴＬＬ−２細胞は、１０分間、１５分間、２０分間、または２５分間処理され、次いでＳＴＡＴ５等のタンパク質のリン酸化状態を保存するために固定される。一部の実験では、各構築物、ならびにアルデスロイキン及び／または他の対照は、１つまたは複数の濃度で適用される。一部の実験では、ＳＴＡＴ５の総レベル及びリン酸化レベルが測定される。
【０９９７】
一部の研究では、ＩＬ−２によって誘導された細胞内ＳＴＡＴ５活性化（ｐＳＴＡＴ５シグナル）のレベルを以下の方法によって決定した。凍結したヒトＰＢＭＣを水浴中で解凍し、３９ｍＬの事前に温めた培地（ＲＰＭＩ１６４０培地＋１０％ＦＢＳ、１％Ｐ／Ｓ、１％ＮＥＡ）に添加し、スピンし、培地中、１０Ｅ６細胞／ｍＬで再構成した。細胞を１ウェル当たり５Ｅ５細胞で９６ウェルプレートにプレートした。培地中で希釈したＩＬ−２（例えば、ｒｈＩＬ−２または代表的なＩＬ−２含有ポリペプチド構築物）を各ウェルに添加し、３７℃で２０分間インキュベートした。次いで、細胞を２００ｕｌ／ウェルの固定緩衝液（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）により４℃で一晩固定した。遠心分離後、固定された細胞を２００ｕｌの冷ＢＤ  Ｐｈｏｓｆｌｏｗ緩衝液に再懸濁し、４℃で３０分間インキュベートした。細胞を２回洗浄した後、それらをＢｉｏｌｅｇｅｎｄ  Ｈｕｍａｎ  ＴｒｕＳｔａｉｎ  ＦｃＸ（染色緩衝液中の１試料当たり総計５０ｕＬ中２．５ｕＬ）により氷上で５分間処理した。染色用抗体である、５ｕｌのｐＳＴＡＴ５−ＡＰＣ（ｐＹ６９４、ＢＤ）、１０ｕｌのＣＤ５６−ＢＶ４２１（５．１Ｈ１１、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、１０ｕｌのＣＤ４−ＰｅｒＣＰ／Ｃｙ５．５（Ａ１６１Ａ１、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、及び１０ｕｌのＣＤ３−ＦＩＴＣ（ＵＣＨＴ１、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）を添加し、光から保護しながら氷上で３０分間インキュベートした。細胞を２回洗浄し、再懸濁し、フローサイトメトリーによって分析した。
【０９９８】
図１２Ａ〜１２Ｄは、代表的な構築物ＡＫ０３２、ＡＫ０３５、ＡＫ０４１、または対照としてのｒｈＩＬ−２を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。ＮＫ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞（Ｔｅｆｆ）、及び制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）についてのＳＴＡＴ５活性化のレベル（％）が示される。ＡＫ０３２及びＡＫ０３５構築物は、Ｆｃドメインに連結されたＩＬ−２ポリペプチドを含み、ＡＫ０４１構築物は、ＣＤ２５ドメイン及びＣＤ１２２ドメインに連結されたＩＬ−２ポリペプチドを含む。示されるように、操作されたＩＬ−２ポリペプチド構築物は、一部の実施形態では、ＣＤ８＋  Ｔ細胞及びＮＫ細胞の活性化を保持または強化しながら、Ｔｒｅｇ細胞の活性化を低減することができる。
【０９９９】
図１３のＡ〜Ｃは、代表的な構築物ＡＫ０８１及びＡＫ０３２を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。ＭＭＰ１０への事前曝露を伴う及び伴わないＡＫ０８１構築物を試験した。アイソタイプ対照ならびにＩＬ−２なしの陰性対照もまた試験した。ＮＫ細胞、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、及びＣＤ４＋  Ｔ細胞についてのＳＴＡＴ５活性化のレベル（％）が示される。ＡＫ０３２及びＡＫ０８１構築物は、Ｆｃドメインに連結されたＩＬ−２ポリペプチドを含み、ＡＫ０８１構築物は、ＩＬ−２ポリペプチドをＦｃドメインにつなげるリンカーにおいて切断可能なペプチドを含む。示されるように、マスクされていない単量体ＡＫ０８１のＩＬ−２ポリペプチド構築物は、マスクされていない二量体ＡＫ０３２のＩＬ−２ポリペプチド構築物と類似するように、プロテアーゼ活性化を伴っても伴わなくてもＰＢＭＣのＳＴＡＴ５活性化を刺激する。
【１０００】
図１４Ａ〜１４Ｄは、代表的な構築物ＡＫ０８１及びＡＫ１１１、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。無処理の対照もまた試験した。ＡＫ１１１構築物は、野生型形態（Ｃ１２５Ａ変異を除いて）のＩＬ−２ポリペプチドを含む、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。図１４Ａ〜１４Ｃに示されるように、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１１１は、マスクされていないＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ０８１と比較したときに、低減されたＳＴＡＴ５活性化を示した。図１４Ｄは、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１構築物、ならびにｒｈＩＬ−２対照についてのＥＣ５０（ｐＭ）及び倍率変化のデータを提供する。
【１００１】
図１５Ａ〜１５Ｄは、代表的な構築物ＡＫ１６７及びＡＫ１６８、ならびにｒｈＩＬ−２及び抗ＲＳＶ抗体を含めた対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。無処理の対照もまた試験した。ＡＫ１６８構築物は、ＣＤ２５結合を排除するかまたは低減する変異体形態のＩＬ−２ポリペプチドを含む、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。ＡＫ１６７構築物は、同じ変異体ＩＬ−２ポリペプチドを含む、ＡＫ１６８構築物のマスクされていない親形態である。図１５Ａ〜１５Ｃに示されるように、マスクされていないＡＫ１６７構築物は、ｒｈＩＬ−２対照と比較したときに、低減されたＳＴＡＴ５活性化を示し、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１６８は、検出可能なＳＴＡＴ５活性化を誘導しなかった。図１５Ｄは、ＡＫ１６７、ＡＫ１６８構築物、ならびにｒｈＩＬ−２対照についてのＥＣ５０（ｐＭ）及び倍率変化のデータを提供する。ＡＫ１６８構築物のＥＣ５０は検出不可能（不検出）であった。
【１００２】
図１６Ａ〜１６Ｄは、（＋ＭＭＰ１０）であったか、またはＭＭＰ１０プロテアーゼに事前に曝露されなかった、代表的な構築物ＡＫ１６５及びＡＫ１６６、ならびにアイソタイプ対照及びＩＬ−２−Ｆｃ対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。ＡＫ１６６構築物は、野生型形態（Ｃ１２５Ａ変異を除いて）のＩＬ−２ポリペプチドを含む、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。ＡＫ１６５構築物は、同じ変異体ＩＬ−２ポリペプチドを含む、ＡＫ１６６構築物のマスクされていない親形態である。図１６Ａに示されるような記号解はまた、図１６Ｂにも適用され、図１６Ｃに示されるような記号解はまた、図１６Ｄにも適用される。図１６Ａ〜１６Ｄに示されるように、マスクされたＡＫ１６６構築物（プロテアーゼ切断なし）について、ＳＴＡＴ５活性化は大幅に減弱したが、活性化プロテアーゼＭＭＰ１０への曝露後にはＩＬ２−Ｆｃ対照に類似するレベルまで回復した。
【１００３】
図１７のＡ〜Ｃは、（＋ＭＭＰ１０）であったか、またはＭＭＰ１０プロテアーゼに事前に曝露されなかった、代表的な構築物ＡＫ１０９及びＡＫ１１０、ならびにアイソタイプ対照及びＩＬ−２−Ｆｃ対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。ＡＫ１０９及びＡＫ１１０構築物は、異なるヘテロ二量体化変異を有する半減期延長ドメインを含む、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。Ｂに示されるような記号解はまた、Ａにも適用される。図１７のＡ〜Ｃに示されるように、マスクされたＡＫ１０９及びＡＫ１１０構築物（プロテアーゼ切断なし）について、ＳＴＡＴ５活性化は大幅に減弱したが、活性化プロテアーゼＭＭＰ１０への曝露後にはＩＬ２−Ｆｃ対照に近づくレベルまで大幅に増加した。
【１００４】
図１８Ａ〜１８Ｄは、構築物ＡＫ２１１、ＡＫ２３５、ＡＫ２５３、ＡＫ３０６、ＡＫ３１０、ＡＫ３１４、及びＡＫ３１６、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。これは、ＣＤ２５結合を調節する種々の変異を含む、マスクされていない親構築物（ＡＫ２３５、ＡＫ２５３、ＡＫ３０６、ＡＫ３１０、ＡＫ３１４）である構築物を含む。図１８Ｄは、試験された構築物ならびにｒｈＩＬ−２対照の各々についてのＥＣ５０のデータを提供する。
【１００５】
図１９Ａ〜１９Ｄは、プロテアーゼによって活性化された構築物ＡＫ０８１、ＡＫ１６７、ＡＫ２１６、ＡＫ２１８、ＡＫ２１９、ＡＫ２２０、及びＡＫ２２３、ならびにｒｈＩＬ−２対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。無処理の対照もまた試験した。これは、ＣＤ２５結合を調節する種々の変異を含む、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物（ＡＫ２１６、ＡＫ２１８、ＡＫ２１９、ＡＫ２２０、及びＡＫ２２３）を含む。構築物は、それらがＳＴＡＴ５を活性化する能力を試験する前に、活性化プロテアーゼに事前に曝露された。図１９Ｄは、試験された構築物ならびにｒｈＩＬ−２対照の各々についてのＥＣ５０のデータを提供する。
【１００６】
図２０のＡ〜Ｃは、構築物ＡＫ０８１、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、及びＡＫ２１０、ならびに抗ＲＳＶ対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。これは、Ｃ１２５Ａ変異を有するＩＬ−２ポリペプチドを含み、かつプロテアーゼ切断配列のＮ末端上のアミノ酸残基の相違に起因して異なるリンカー配列を有することを除いて同じ切断可能なペプチド配列（ＲＡＡＡＶＫＳＰ、配列番号１２１）を含む、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物（ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、ＡＫ２１０）を含む。Ａに示されるような記号解はまた、Ｂ及びＣにも適用される。
【１００７】
図２１Ａ〜２１Ｃは、構築物ＡＫ１６７、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、及びＡＫ１９３、ならびに抗ＲＳＶ対照を用いた、上述したようなＳＴＡＴ５活性化研究からの結果を図示する。これは、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、Ｅ６２Ａ、及びＣ１２５Ａ変異を有するＩＬ−２ポリペプチドを含み、かつプロテアーゼ切断配列のＮ末端上のアミノ酸残基の相違に起因して異なるリンカー配列を有することを除いて同じ切断可能なペプチド配列（ＲＡＡＡＶＫＳＰ、配列番号１２１）を含む、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物（ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、ＡＫ２１０）を含む。Ａに示されるような記号解はまた、Ｂ及びＣにも適用される。
【１００８】
実施例３：マスクされたＩＬ−２及びＩＬ−１５ポリペプチドのインビボ特性解析
薬物動態
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の薬物動態を、マウスモデルを用いてインビボで評価する。
【１００９】
マウスを静脈内または皮下から構築物で処置し、血漿中の構築物の濃度を経時的に測定する。一部の実験では、一部のマウスは、比較のために対照で処置される。一部の実験では、一部のマウスは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処置に対する対照としてアルデスロイキンで処置される。一部の実験では、処置されるマウスは、腫瘍を有する。一部の実験では、処置されるマウスは、腫瘍を有しない。一部の実験では、マウスを構築物で処置し、処置過程にわたる種々の時間で血液を採取する。これは、処置の開始前に血液を採取し、それを処理して血漿を得ることを含み得る。一部の実験では、２週間、３週間、もしくは４週間、またはそれよりも長い処置過程にわたる種々の時点で血液を採取する。一部の実験では、投与された構築物、ならびにアルデスロイキン及び／または他の対照の平均血漿中濃度が測定される。マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物を、ＰＢＳ  Ｔｗｅｅｎ中に希釈した後の血漿試料中で、ＩＬ−２特異的及びヒトＦｃ特異的ＥＬＩＳＡにより検出し、各構築物について生成した検量線を用いて定量する。マスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物を、ＰＢＳ  Ｔｗｅｅｎ中に希釈した後の血漿試料中で、ＩＬ−１５特異的及びヒトＦｃ特異的ＥＬＩＳＡにより検出し、各構築物について生成した検量線を用いて定量する。完全長及び切断構築物のパーセンテージを、抗ｈｕＦｃ−ＨＲＰ及び抗ｈｕＩＬ−２−ＨＲＰを用いたウェスタンブロットによって、ならびに全質量及びペプチド質量分析によって決定する。
【１０１０】
腫瘍中のマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の薬物動態もまた、マウスモデルを用いてインビボで評価する。腫瘍を有するマウスを静脈内または皮下から構築物で処置し、マウスの腫瘍中の構築物の濃度を評価する。一部の実験では、一部のマウスは、比較のために対照で処置される。一部の実験では、一部のマウスは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処置に対する対照としてアルデスロイキンで処置される。構築物の存在ならびに特定のプロテアーゼの存在に関して腫瘍を分析する。一部の実験では、腫瘍は、完全長及び切断構築物の存在及びパーセンテージに関して分析される。
【１０１１】
一部の薬物動態研究は、以下の方法に従って実施した。Ｃ５７ＢＬ／６雌性マウスをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。これらのマウスは研究の開始時に８〜１０週齢であった。ＭＣ３８腫瘍細胞（マウス１匹当たり５×１０５細胞）を各マウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍が約１００ｍｍ３のサイズに達すると（０日目）、マウスに、ＰＢＳ中の目的とする構築物（例えば、マスクされていない親ＩＬ−２ポリペプチド構築物、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物、または切断可能でないマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物）２ｍｇ／ｋｇの単回静脈内投与を与えた。試験された構築物には、例えば、ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、及びＡＫ２１１が含まれる。投薬後５分、１、２、及び５日目で血漿を収集した。捕捉抗体としての抗ヒトＩｇＧ（クローンＭ１３１０Ｇ０５、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）及び種々の検出抗体を利用したＥＬＩＳＡを用いて、薬物レベルを決定した。ヒトＩｇＧ（ａｂ９７２２５、Ａｂｃａｍ）またはＣＤ１２２（クローン９Ａ２、Ａｎｃｅｌｌ）及びＩＬ−２（Ｐｏｌｙ５１７６、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）に対するＨＲＰまたはビオチンコンジュゲート検出抗体を利用して、それぞれ総薬物レベル及び非切断薬物レベルを検出した。
【１０１２】
図２３のＡ〜Ｄは、構築物ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８、ならびに抗ＲＳＶ対照を用いて腫瘍担持マウスにおいて上述したように実施した、薬物動態研究からの結果を記載する。Ａは、試験された構築物の各々の構造をごく単純化した表現を提供する。示されるように、ＡＫ１１１及びＡＫ１６８は、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。ＡＫ１６７及びＡＫ１６８構築物は、ＣＤ２５への結合を排除するかまたは低減する変異（Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、及びＥ６２Ａ）を含む。Ｂは、ヒトＩｇＧの検出による血漿中のＦｃレベル（μｇ／ｍＬ）を示す。Ｃは、ヒトＣＤ１２２の検出による血漿中のＦｃ−ＣＤ１２２レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。Ｄは、ヒトＩＬ−２の検出による血漿中のＦｃ−ＩＬ２レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。
【１０１３】
図２４Ａ〜２４Ｄは、構築物ＡＫ１６７、ＡＫ１９１  ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、及びＡＫ２１１、ならびに抗ＲＳＶ対照を用いて腫瘍担持マウスにおいて上述したように実施した、薬物動態研究からの結果を記載する。図２４Ａは、試験された構築物の各々の構造をごく単純化した表現を提供する。示されるように、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、及びＡＫ２０９は、ＩＬ−２ポリペプチドを半減期延長ドメインにつなげるリンカーにおいて各々異なる切断可能なペプチド配列を含む、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。図２４Ｂは、ヒトＩｇＧの検出による血漿中のＦｃレベル（μｇ／ｍＬ）を示し、図２４Ｃは、ヒトＩＬ−２の検出による血漿中のＦｃ−ＩＬ２レベル（μｇ／ｍＬ）を示し、図２４Ｄは、ヒトＣＤ１２２の検出による血漿中のＦｃ−ＣＤ１２２レベル（μｇ／ｍＬ）を示す。図２４Ｂ、２４Ｃ、及び２４Ｄに示されるように、血漿中のＦｃレベル、Ｆｃ−ＩＬ２レベル、及びＦｃ−ＣＤ１２２レベルは、試験されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物の間で類似している。
【１０１４】
マウスにおける生物活性
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物のインビボ生物活性を、Ｃ５７ＢＬ／６マウス等のマウスモデルを用いてインビボで評価する。マウスを構築物で処置し、インビボ生物活性を評価する。一部の実験では、一部のマウスは、比較のために対照で処置される。一部の実験では、一部のマウスは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処置に対する対照としてアルデスロイキンで処置される。一部の実験では、処置されるマウスは、腫瘍を有する。一部の実験では、処置されるマウスは、腫瘍を有しない。一部の実験では、免疫細胞の用量依存的拡大がマウスにおいて評価される。一部の実験では、マウスは、種々の用量の構築物、アルデスロイキン、または他の対照で処置される。一部の実験では、マウスは、２週間の過程にわたって処置される。血液を種々の時点でマウスから収集し、次いで、目的とする免疫細胞マーカーに対する抗体を用いて染色する。一部の実験では、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＮＫ細胞、及びＴｒｅｇ細胞等のある特定の循環細胞種の増殖及び拡大の縦断的動態（ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ  ｋｉｎｅｔｉｃｓ）、ならびにＣＤ８＋  Ｔ細胞及びＮＫ細胞対ＣＤ４＋  ＣＤ２５＋  ＦｏｘＰ３＋  Ｔｒｅｇ細胞の比もまた決定される。一部の実験では、マウスは、臓器の湿重量及び組織学的検査によって決定されるような、肺及び肝臓のようなある特定の臓器における浮腫及びリンパ球浸潤に関して評価することによって等で、血管漏出に関して評価される。
【１０１５】
一部の研究では、ＩＬ−２に基づく療法によって媒介される潜在的な毒性関連作用を評価するために、以下の方法を実施することによって血管漏出を評価した。反復投与毒性研究を、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した、研究の開始時に８〜１０週齢、体重１８〜２２グラムであったＣ５７ＢＬ／６雌性マウスを用いて行った。５匹のマウスからなる群に、ＰＢＳ中のマスクされたＩＬ−２構築物及びマスクされていないＩＬ−２構築物の毎日の腹腔内注射を４日間または５日間毎日与えた。試験された構築物には、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８が含まれた。対照抗体もまた対照として投与した。最後の投与から２時間後、全てのマウスにＰＢＳ中の１％Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｅ２１２９）０．１ｍｌの静脈内注射を与えた。Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅ投与から２時間後、マウスを安楽死させ、ＰＢＳ中１０Ｕ／ｍｌのヘパリンで灌流した。脾臓、肺、及び肝臓を採取し、３ｍｌの４％ＰＦＡ中で、４℃で２日間固定してから、Ｅｖａｎｓ  ｂｌｕｅの血管漏出の指標としてＮａｎｏＤｒｏｐ  ＯｎｅＣ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）により上清の６５０ｎｍでの吸光度を測定した。固定された臓器をパラフィン包埋し、薄片化し、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した。組織病理学的研究及び定量は、標準的な手順に従ってＮｏｖｏＶｉｔａ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＬＬＣ（Ａｌｌｓｔｏｎ，ＭＡ）により実施された。図３０のＡ〜Ｄは、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１１１及びＡＫ１６８、ならびにマスクされていないＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ０８１及びＡＫ１６７、ならびに抗ＲＳＶ対照を用いた、血管漏出を評価するための上述したようなインビボ研究からの結果を図示する。Ａは、体重減少のパーセンテージ（％）を示し、Ｂ、Ｃ、及びＤは、各々についての、それぞれ肝臓、肺、及び脾臓の重量をグラム単位で示す。
【１０１６】
組織中への色素漏出の程度を測定することによって示されるような血管漏出もまた、抗ＲＳＶ対照とともにＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８構築物について評価し、結果が、それぞれ肝臓及び肺に関して図３１のＡ及びＢに示される。色素漏出の程度は、６５０ｎｍでの吸光度に基づいて測定した。
【１０１７】
肝臓及び肺中への血管周囲性の単核細胞浸潤の程度を測定することによって示されるような血管漏出もまた、抗ＲＳＶ対照とともにＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８構築物について評価し、結果が、それぞれ肝臓及び肺に関して図３２のＡ及びＢに示される。肝臓中の単核細胞の平均数（Ａ）及び肺中の単核細胞の平均数（Ｂ）が各々に関して図示される。図３２のＢに示されるように、例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１１１及びＡＫ１６８は、マスクされていない構築物ＡＫ０８１及びＡＫ１６７とは異なり、肺中で検出可能な数の単核細胞をもたらさなかった。
【１０１８】
浸潤性の免疫細胞表現型
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物で処置されたマウスモデルにおいて、インビボで腫瘍に浸潤する免疫細胞の表現型を評価する。マウスを構築物で処置し、腫瘍浸潤免疫細胞の表現型を評価する。一部の実験では、一部のマウスは、比較のために対照で処置される。一部の実験では、一部のマウスは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処置に対する対照としてアルデスロイキンで処置される。腫瘍を担持するマウスを構築物、アルデスロイキン、または別の対照で処置し、初回投与から５日、７日、または１０日後等の初回投与後の種々の時点で、腫瘍、肝臓、肺、及び脾臓等の組織、ならびに血液を収集する。一部の実験では、免疫細胞は、腫瘍、組織、及び血液から単離され、フローサイトメトリーを用いて表現型の評価に供される。一部の実験では、単離された免疫細胞は、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、メモリーＣＤ８＋  Ｔ細胞、活性化ＮＫ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、及びＣＤ４＋  Ｔｒｅｇ細胞に対するマーカー等の目的とするマーカーを用いて評価される。
【１０１９】
一部の研究では、以下の方法を用いて、インビボで腫瘍に浸潤する免疫細胞の表現型を評価した。Ｃ５７ＢＬ／６雌性マウスをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。これらのマウスは研究の開始時に８〜１０週齢であった。ＭＣ３８腫瘍細胞（マウス１匹当たり５×１０５細胞）を各マウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍が約１００ｍｍ３のサイズに達すると（０日目）、マウスに、ＰＢＳ中の目的とする構築物（例えば、マスクされていない親ＩＬ−２ポリペプチド構築物、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物、または切断可能でないマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物）２ｍｇ／ｋｇの単回静脈内投与を与えた。５日目、マウスをＣＯ２での窒息によって安楽死させ、腫瘍、肝臓、脾臓、及び血液を採取した。機械的破壊によって脾臓から細胞懸濁液を調製し、４０μｍ細胞ストレーナーに通した。Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｔｕｍｏｒ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ試薬（Ｍｉｌｔｅｎｙｉカタログ番号１３０−０９６−７３０）を用いて腫瘍組織を酵素的に消化し、機械的分離ステップにはｇｅｎｔｌｅＭＡＣＳ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｏｒ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）を使用した。脾臓及び腫瘍細胞懸濁液ならびに血液中の赤血球を、ＡＣＫ緩衝液（Ｇｉｂｃｏカタログ番号Ａ１０４９２）を用いて溶解させた。細胞懸濁液を以下の抗体、すなわち、ＣＤ４５（クローン３０−Ｆ１１、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、ＣＤ３（クローン２Ｃ１１、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、ＣＤ８（クローン５３−６．７、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＣＤ４（クローンＲＭ−４５、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＦＯＸＰ３（ＭＦ−１４、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、ＣＤ２５（３Ｃ７、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、ＣＤ４４（クローンＩＭ７、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、及びＮＫｐ４６（２９Ａ１．４、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で染色した。ＭＡＣＳＱｕａｎｔ  Ａｎａｌｙｚｅｒフローサイトメーター（Ｍｉｌｅｎｙｉ）でデータ獲得を実施し、ＦｌｏｗＪｏを用いてデータを分析した。
【１０２０】
ＡＫ０３２、ＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、及びＡＫ１６８構築物、ならびに抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いて、上述したように実施した、脾臓、血液、及び腫瘍中のＣＤ４、ＣＤ８、ＮＫ、及びＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果が図２５Ａ〜２５Ｌに示される。ＡＫ１１１及びＡＫ１６８は、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。
【１０２１】
ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、ＡＫ２０９、及びＡＫ２１１構築物、ならびに抗ＲＳＶ  ＩｇＧ対照を用いて、上述したように実施した、脾臓、血液、及び腫瘍中のＣＤ４、ＣＤ８、ＮＫ、及びＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果が図２６Ａ〜２６Ｌに示される。ＡＫ１６８、ＡＫ１９１、ＡＫ１９７、ＡＫ２０３、及びＡＫ２０９は、ＩＬ−２ポリペプチドを半減期延長ドメインにつなげるリンカーにおいて各々異なる切断可能なペプチド配列を含む、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を実施した。
【１０２２】
ＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、及びＡＫ２１１構築物を用いて、上述したように実施した、脾臓、血液、及び腫瘍中のＣＤ４、ＣＤ８、ＮＫ、及びＴｒｅｇのパーセンテージのインビボ応答を試験する研究からの結果が図２７Ａ〜２７Ｌに示される。ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、及びＡＫ１９０は、ＩＬ−２ポリペプチドを半減期延長ドメインにつなげるリンカーにおいて各々切断可能なペプチド配列を含む、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物である。利用されるリンカー配列に応じて、リンカー配列もまたこれらの構築物の間で異なる。ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、及びＡＫ２１０は、Ｃ１２５Ａ変異を有するＩＬ−２ポリペプチドを含み、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、及びＡＫ１９３は、Ｃ１２５Ａ、Ｒ３８Ａ、Ｆ４２Ａ、Ｙ４５Ａ、及びＥ６２Ａ変異を有するＩＬ−２ポリペプチドを含む。ＡＫ２３５構築物は、マスクされていない構築物であり、ＡＫ２１１構築物は、切断可能でないリンカー配列を含む。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を実施した。
【１０２３】
上述したようにＡＫ２３５、ＡＫ１９１、ＡＫ１９２、ＡＫ１９３、ＡＫ２１０、ＡＫ１８９、ＡＫ１９０、及びＡＫ２１１構築物を用いて、上述したように実施した、脾臓、血液、及び腫瘍中のインビボでのＴ細胞活性化を試験する研究からの結果が図２８Ａ〜２８Ｉに示される。Ｔ細胞活性化は、脾臓中のＣＤ８＋  Ｔ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、またはＦｏｘｐ３＋細胞におけるＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）として測定した。切断可能でないＡＫ２１１構築物と比較した一元配置分散分析を用いて統計分析を実施した。
【１０２４】
インビボ切断
マスクされたサイトカイン構築物（例えば、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物）のインビボ切断を評価する。一部の研究では、比較のために対照抗体が投与される。一部の研究では、インビボ切断は、マウスにおいて目的とする構築物を投与し、ある特定の期間後、ヒトＩｇＧを捕捉し、次いで、例えば、ヒトＩｇＧ、ＣＤ１２２、及びＩＬ−２またはＩＬ−１５のレベルを測定することによって評価される。
【１０２５】
マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物のインビボ切断を試験する一部の研究では、捕捉抗体としての抗ヒトＩｇＧ（クローンＭ１３１０Ｇ０５、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）及び種々の検出抗体を利用したＥＬＩＳＡを用いて、薬物レベル（すなわち、切断副産物を含む、投与された構築物のレベル）を決定した。ヒトＩｇＧ（ａｂ９７２２５、Ａｂｃａｍ）またはＣＤ１２２（クローン９Ａ２、Ａｎｃｅｌｌ）及びＩＬ−２（Ｐｏｌｙ５１７６、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）に対するＨＲＰまたはビオチンコンジュゲート検出抗体を利用して、それぞれ総薬物レベル及び非切断薬物レベルを検出した。切断され、放出されたＩＬ−２の濃度は、総薬物濃度から非切断（すなわち、インタクトな）薬物濃度を減算することによって計算する。図２９Ａ〜２９Ｄは、代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物ＡＫ１６８（切断可能なペプチド配列：ＭＰＹＤＬＹＨＰ、配列番号９６）及びＡＫ２０９（切断可能なペプチド配列：ＶＰＬＳＬＹ、配列番号１３５）のインビボ切断を試験する研究からの結果を図示する。ＡＫ１６７構築物は、マスクされたＡＫ１６８構築物と同じＩＬ−２ポリペプチドを含む、切断可能なマスクされていないＩＬ−２ポリペプチド構築物である。図２９Ｂ〜２９Ｄに示されるように、マスクされた（ＡＫ１６８及びＡＫ２０９）構築物及びマスクされていない（ＡＫ１６７）構築物の両方が効果的に切断され、両方の切断可能なペプチド配列が切断された。図２９Ｅは、ＡＫ１６７、ＡＫ１６８、及びＡＫ２０９構築物の総レベル、ならびに各構築物の非切断形態のレベルについての、血漿中総ＩｇＧ濃度（μｇ／ｍＬ）の薬物動態研究からの結果を図示する。
【１０２６】
腫瘍根絶及び転移の阻害
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物が腫瘍根絶を促進し、また転移を阻害する能力を、同系ＭＣ３８、ＣＴ２６、及びＢ１６Ｆ１０腫瘍モデル等のマウスモデルを用いてインビボで評価する。
【１０２７】
マウスに腫瘍細胞を皮下移植し、腫瘍を触知できるサイズまで成長させる。腫瘍担持マウスをマスクされたＩＬ−２構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物で処置し、腫瘍体積を処置過程にわたって測定する。一部の実験では、一部のマウスは、比較のために対照で処置される。一部の実験では、一部のマウスは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処置に対する対照としてアルデスロイキンで処置される。腫瘍体積を、処置過程にわたって周期的に測定する。一部の実験では、体重もまた処置過程にわたって測定される。一部の実験では、血漿試料は、処置過程にわたって作成され、薬物動態、薬力学、切断、ならびにＣＤ８＋  Ｔ細胞、メモリーＣＤ８＋  Ｔ細胞、活性化ＮＫ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、及びＣＤ４＋  Ｔｒｅｇ細胞に対するマーカー等の血液マーカーに関して分析される。
【１０２８】
マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物が転移を阻害する能力もまた、肺転移を評価するための同系ＣＴ２６腫瘍モデル等の、転移研究に好適なマウスモデルを用いてインビボで評価する。マウスに腫瘍細胞を皮下移植する。一部の実験では、処置前に腫瘍を触知できるサイズまで成長させる。一部の実験では、処置は、腫瘍が触知できるサイズまで成長する前に開始する。腫瘍担持マウスをマスクされたＩＬ−２構築物またはマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物で処置し、肺、肝臓、及びリンパ節等の組織中への腫瘍細胞転移に関して評価する。
【１０２９】
一部の研究では、同系腫瘍モデルを用いて、以下の方法に従って、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物が腫瘍体積を縮小する能力を評価した。Ｃ５７ＢＬ／６雌性マウスをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。これらのマウスは研究の開始時に８〜１０週齢であった。ＭＣ３８腫瘍細胞（マウス１匹当たり５×１０５細胞）を各マウスの右脇腹に皮下注射した。腫瘍が約１２５ｍｍ３のサイズに達すると（０日目）、マウスを、ＰＢＳ中のＡＫ０８１、ＡＫ１１１、ＡＫ１６７、もしくはＡＫ１６８、または対照としての抗ＲＳＶ抗体２ｍｇ／ｋｇの用量を与えるように無作為化した。マウスには、週３回、６回投与として腹腔内投与した。週２回、ダイヤルキャリパーを用いて腫瘍体積を計算し（長さ×（幅＾２）／２）、体重を記録した。図３３Ａ及び３３Ｂは、処置過程にわたって腫瘍体積及び体重を評価した同系腫瘍モデル研究からの結果を示す。図３３Ａに示されるように、マスクされた構築物ＡＫ１１１及びＡＫ１６８を含めた代表的なＩＬ−２ポリペプチド構築物を用いた処置は、抗ＲＳＶ対照と比較したときに、経時的に腫瘍成長の阻害をもたらした。図３３Ｂに示されるように、マウスをマスクされた構築物ＡＫ１１１及びＡＫ１６８で処置した場合、概して体重減少の欠如が観察された。
【１０３０】
カニクイザルにおける生物活性
実施例１で生成されたマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物のインビボ生物活性を、カニクイザルにおいてインビボで評価する。カニクイザルを構築物で処置し、インビボ生物活性、薬物動態、及び切断を評価する。一部の実験では、一部のサルは、比較のために対照で処置される。一部の実験では、一部のサルは、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド処置に対する対照としてアルデスロイキンで処置される。一部の実験では、サルは、種々の用量の構築物、アルデスロイキン（ａｌｄｅｓｌｕｅｋｉｎ）、または他の対照で処置される。血液を種々の時点でサルから収集し、次いで、ＣＤ８＋  Ｔ細胞、メモリーＣＤ８＋  Ｔ細胞、活性化ＮＫ細胞、ＣＤ４＋  Ｔ細胞、及びＣＤ４＋  Ｔｒｅｇ細胞等のある特定の細胞種に関して、及び／または、総リンパ球、Ｋｉ６７＋、及び可溶性ＣＤ２５の用量応答に関して等、目的とするマーカーに関して評価する。一部の実験では、ある特定の循環Ｔ細胞及びＮＫ細胞種の増殖及び拡大の縦断的動態が評価される。一部の実験では、マスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物及びマスクされたＩＬ−１５ポリペプチド構築物の薬物動態及び切断が、ＥＬＩＳＡ、ＰＡＧＥ、及び質量分析によって決定される。
【１０３１】
非ヒト霊長類における代表的なマスクされたＩＬ−２ポリペプチド構築物の安全性プロファイルを試験するために、以下の方法に従って、用量範囲探索研究（ｄｏｓｅ  ｒａｎｇｉｎｇ  ｓｔｕｄｙ）を実施する。３匹の健常な雄性カニクイザルサル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）からなる群を、１００ｍＭのクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．５）中１０、３０、及び１００ｎｍｏｌ／ｋｇの活性化可能な（すなわち、切断可能な）マスクされたＩＬ−２ポリペプチドタンパク質または切断可能でないマスクされたＩＬ−２ポリペプチドタンパク質２ｍＬ／ｋｇの単回静脈内ボーラス投与を与えるように無作為割付けする。第３の群には、陽性対照として３、１０、及び３０ｎｍｏｌ／ｋｇのマスクされていない切断可能な親タンパク質を与える。この第３の群には、マスクされていない親分子のより高い効力を考慮に入れるために、より低い範囲で投与する。用量は、分子量の差を考慮に入れるために、モル濃度単位で計算される。投薬前ならびに投薬後１、２４、４８、７２、９６、１６８、２６４、及び３３６時間で血液試料を収集する。自動血液分析装置を用いて、リンパ球サブセット及び血清化学の変化を監視する。上述したようなカスタムＥＬＩＳＡを用いて、血漿から総薬物レベル及びインタクトな（すなわち、非切断）薬物レベルを測定する。免疫刺激を監視するために、可溶性ＣＤ２５レベルをＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ、カタログ番号ＤＲ２Ａ００）により測定する。カスタムマルチプレックス電気化学発光アッセイ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）を用いて、炎症性サイトカインの血漿中レベルを定量する。血管漏出症候群の指標として血圧を監視する。ＩＬ−２を捕捉してヒトＦｃを検出するＥＬＩＳＡを用いて、ならびにヒトＦｃを捕捉してヒトＦｃを検出するＥＬＩＳＡによって、ＰＫを分析する。
【１０３２】
本発明は、例えば、本発明の種々の態様を例示するために提供される、特定の開示された実施形態に範囲が限定されることは意図していない。記載される組成物及び方法に対する種々の修正が、本明細書の説明及び教示から明らかとなろう。かかる変形形態は、本開示の真の範囲及び趣旨から逸脱することなく実施され得、本開示の範囲内に該当することを意図する。
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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