【誤訳訂正書】
【提出日】平成22年4月22日(2010.4.22)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  サンプル中の環状ヌクレオチドホスフェートの濃度を測定するための競合的検定において；
捕獲抗体が提供された反応室中で、（１）前記環状ヌクレオチドホスフェートとアルカリ性ホスファターゼとの結合体、（２）前記捕獲抗体により結合を受け、その結合の際に前記環状ヌクレオチドホスフェートと結合する第一抗体、及び（３）前記サンプル、以上を混合すること、及びそれらを前記第一抗体と前記結合体とが結合するようインキュベートすること、
前記のインキュベートした反応混合物を洗浄し、未結合の結合体または抗体を除去すること、
前記の洗浄した反応混合物に、前記結合体中のアルカリ性ホスファターゼと接触して分解及び発光が誘発される、アルカリ性ホスファターゼ誘発性（triggered）１，２−ジオキセタンを加えること、及び、
前記反応混合物によって発せられた化学ルミネセンスシグナルを検出すること、以上を含む検定方法。
【請求項２】  前記捕獲抗体が、反応室の表面上に供給される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  前記反応室が、ミクロ滴定量用プレートのウェルである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】  前記ジオキセタンと共に高分子オニウム塩のエンハンサーを加えることで、誘発時の前記ジオキセタンによる発光量が、そのエンハンサー不在下での発光量と比べて高くなるようにする、請求項１に記載の方法。
【請求項５】  前記化学ルミネセンスシグナルをルミノメーターによって検出する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】  前記反応混合物を、前記１，２−ジオキセタンのインキュベーション期間中に少なくとも一回振盪する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】  前記捕獲抗体を供給していない、前記ミクロ滴定量用プレートの壁の部分が、反応混合物の成分と反応しないようにブロックされている、請求項３に記載の方法。
【請求項８】  前記環状ヌクレオチドホスフェートが、環状アデノシンモノホスフェート（ｃＡＭＰ）、環状グアノシンモノホスフェート（ｃＧＭＰ）、環状ウリジンモノホスフェート（ｃＵＭＰ）、または環状シチジンモノホスフェート（ｃＣＭＰ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】  前記環状ヌクレオチドホスフェートがｃＡＭＰである、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】  環状ヌクレオチドホスフェートの濃度を測定する競合的免疫学的検定を行うためのキットにおいて；
前記環状ヌクレオチドホスフェートとアルカリ性ホスファターゼとの結合体；
前記環状ヌクレオチドホスフェートと結合する抗体；
捕獲抗体で被覆されている反応室；及び、
アルカリ性ホスファターゼの存在下で分解し発光するアルカリ性ホスファターゼ誘発性１，２−ジオキセタン、
以上を含む前記キット。
【請求項１１】  前記キットが、そのキットを用いて行う検定において、前記ジオキセタンの分解による発光量を、高分子オニウム塩不在下での発光量と比べて高める、高分子オニウム塩をさらに含む、請求項１０に記載のキット。
【請求項１２】  前記検定を実行する際に試薬と接触する、前記反応室の捕獲抗体が供給されていない部分が、試薬と反応しないようブロックされている、請求項１０に記載のキット。
【請求項１３】  前記環状ヌクレオチドホスフェートと結合する前記抗体が、単クローン性抗体である、請求項１０に記載のキット。
【請求項１４】  前記環状ヌクレオチドホスフェートが、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ｃＵＭＰ、またはｃＣＭＰである、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】  前記環状ヌクレオチドホスフェートがｃＡＭＰである、請求項１４に記載のキット。
【請求項１６】  前記洗浄ステップが、ｐＨ８．０−１１．０の緩衝液を用いて行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】  前記洗浄ステップの緩衝液が、カーボネートビカーボネート及びトウィーン２０を含む、請求項１６に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００９】
式Ｉ中におけるＹ1、Ｙ2及びＸは、様々な電子−活性部位であり、その際、それらは電子を供与するか、または電子を吸引している。具体的な群には、ハロゲン、特に塩素、アルコキシ、特にメトキシ、アミン、アルキル等が含まれる。別法において、これらの群は水素である。Ｙ1、Ｙ2またはＸのいずれか一つ以上が水素以外であることは可能で、またはそれら全てが水素であってもよい。置換基Ｒは、アルキル、アラルキル、環状アルキル、Ｏ、Ｎ、ＰまたはＳの部位を含むヘテロアルキルであり、それらの炭素原子は一般に２０個未満である。Ｒはアルキルであるのが好ましい。Ｒは、反応性と同様に溶解性を高めるような基で置換が可能であり、それには、一個以上のフッ素原子のようなハロゲン置換基、カルボキシ（ＣＯＯ）置換基、スルホニル置換基等が含まれうる。溶解性を高める同一の置換基が、Ｙ1、Ｙ2またはＸ上に存在することも可能である。Ａｒとはアリール部位のことで、通常はフェニルまたはナフチルであり、フェニルが最も好ましい。Ｚは酵素によって開裂する結合を含む部位のことで、その開裂の際には、アリール部位に付いているＯまたはＮのいずれかが開裂する。この陰イオンがジオキセタンを不安定にし、その分解へと導く。分解の際、ジオキセタンは発光する。本発明の趣旨において、Ｚはホスフェート部位であり、リン酸二ナトリウムが好ましい。このタイプのジオキセタンは、米国特許４，９６２，１９２；４，９３１，５６９；５，１１２，９６０；５，１４５，７７２及び５，６５４，１５４に報告があり、同様に他にも多々報告がある。前記特許は全て、本文中に参考のため記載してある。例えば、米国特許５，１１２，９６０の中で報告されているように、３−（４−メトキシスピロ［１，２−ジオキセタン−３，２′−トリシクロ［３．３．１．１3.7］デカン−４−フェニルホスフェート及びその塩（ＡＭＰＰＤ）のような酵素誘発性ジオキセタンは、このタイプの高い有効性を持つレポーター分子である。この“置換されていない”１，２−ジオキセタンに、そのアダマンチル環上に塩素原子のような置換基を誘導することにより（ＣＳＰＤ）、その性能を劇的に向上させることが可能になる。同様に、酵素で開裂可能な置換基と隣り合わせのフェニル基上、特にその３位またはメタ位に置換基を導入すると、さらに収率が改善される。本来化学ルミネセンスであるこれらのレポーター分子を酵素誘発性ジオキセタンと呼ぶ。特許を請求する本発明において、その役割を果たす各酵素はアルカリ性ホスファターゼであり、従ってＺをホスフェート部位として選定する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１３】
本発明に従い、ｃＡＭＰとアルカリ性ホスファターゼとの結合体を調製し、これを、ｃＡＭＰ（または他の環状ヌクレオチド）に対する抗体及び検査しようとするサンプル（または標準物質）と共にウェルに入れる。この反応混合物をインキュベートして洗浄する。次に、ＣＳＰＤのようなアルカリ性ホスファターゼ誘発性（triggered）１，２−ジオキセタンを、好ましくはポリ（ビニルベンジルトリブチルアンモニウムクロリド）のようなエンハンサー、または他のエンハンスメント剤の存在下で加える。このジオキセタンをインキュベートし、好ましくはルミノメーターまたは他種の感光装置を用いて、反応室の化学ルミネセンスシグナルを検査する。そのシグナルが強ければ強いほど、サンプル中の環状ヌクレオチドの濃度は低い。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１５】
また本発明は、上記一般式Ｉにおいて、そのアダマンチル基が１個の塩素原子で置換され、Ｘが水素であり、Ｒがメチルであり、さらにＺがホスフェートであるＣＳＰＤを用いて例示される。一般式Ｉに対応する、他のアルカリ性ホスファターゼ誘発性１，２−ジオキセタンを適宜用いることもある。