(57)【要約】【課題】従来のものに比べ高活性なエストロゲン様作用剤の提供。肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れ、かつ肌のなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感にも優れるとともに、経時安定性にも優れる皮膚外用剤の提供。【解決手段】エストロゲン様作用剤は、ツツジ科スノキ属のコケモモ（Vaccinium vitis-idaea ）の果実の抽出物を有効成分として含有する。皮膚外用剤は、上記コケモモの果実の抽出物を乾燥残留物として０．０００１〜５質量％含有する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ツツジ科スノキ属のコケモモ（Vaccinium vitis-idaea ）の果実の抽出物を有効成分として含有するエストロゲン様作用剤。
【請求項２】
請求項１記載のコケモモの果実の抽出物を乾燥残留物として０．０００１〜５質量％含有する皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の植物抽出物を含有する新規なエストロゲン様作用剤およびその抽出物を含有する皮膚外用剤に関する。さらに詳しくは、ツツジ科スノキ属のコケモモ（Vaccinium vitis-idaea ）の果実抽出物を有効成分として含有する高活性なエストロゲン様作用剤およびその抽出物を含有する皮膚外用剤に関する。本発明の皮膚外用剤は、肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れ、かつ肌へのなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感にも優れるとともに、経時安定性にも優れる。
【背景技術】
【０００２】
エストロゲンは、卵胞ホルモンまたは女性ホルモンとも呼ばれ、発情ホルモンに特有な生物学的作用をもつ天然物質あるいは合成物質の総称を表す用語として用いられている。一般には、エストロン、エストラジオール、エストリオールが知られている。特にエストラジオールは、哺乳類に普通にみられる卵胞ホルモンのうち最も有効なものであり、卵巣、胎盤、睾丸、副腎皮質などで生成される。
【０００３】
エストロゲンは、ステロイドホルモンの一種であり、その受容体を介して生理作用を示す。エストロゲンの受容体は、生殖器や乳腺のみならず、全身の細胞に存在し、その働きは多岐に渡っている。エストロゲンの作用については、一般的には、乳腺細胞の増殖促進、卵巣排卵制御、脂質代謝制御、インスリン作用、血液凝固作用、中枢神経（意識）女性化、ＬＤＬ（low density lipoprotein ）の減少とＶＬＤＬ（very low density lipoprotein）・ＨＤＬ（high density lipoprotein）の増加による動脈硬化抑制などが知られている。
【０００４】
皮膚においては、エストラジオールの投与によって皮膚中のヒアルロン酸含量が増加するにつれて皮膚水分量も増加するという報告（非特許文献１）、エストラジオールの欠乏により真皮中のゼラチナーゼが増加し皮膚の弾力性が低下するという報告（非特許文献２）、エストラジオール軟膏の大規模臨床試験から閉経後の女性の紫外線老化皮膚に対してエストラジオールが有効であったという報告（非特許文献３）がなされている。
【０００５】
しかしながら、エストロゲン投与によるホルモン療法には、副作用があることから投与の調整が非常に難しいという問題、また医師の管理化で行わなければならないという問題があった。
【０００６】
そこで近年、特許文献１，２に開示されているように、エストロゲン様作用を有する植物の抽出物を用いて女性ホルモンバランスを調整することにより、皮膚などの老化防止を試みる提案がなされている。しかしながら、これら特許文献に記載の抽出物においても安定して十分な効果を得られるものが無いのが現状であり、また、老化防止と肌質改善を実感するのは困難であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００７−１９１４５２号公報
【特許文献２】特開２００８−０３７８１９号公報
【特許文献３】特開２００４−１１５４６６号公報
【特許文献４】特開２００３−０７３２８７号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Acta Endocrinol., 85, 429-435, 1977
【非特許文献２】日本皮膚科学会雑誌, 111, 532, 2001
【非特許文献３】Photochem. Photobiol., 73, 525-531, 2001
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、従来のものに比べ高活性なエストロゲン様作用剤を提供すること、また、肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れ、かつ肌へのなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感にも優れるとともに、経時安定性にも優れる皮膚外用剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記課題を解決するために、エストロゲン様作用について、様々な植物抽出物を用いて鋭意研究を重ねてきた。その結果、コケモモ果実抽出物が高活性のエストロゲン様作用を有することを見出した。また、コケモモ果実抽出物を特定量含有させることによって、肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れ、かつ肌へのなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感にも優れるとともに、経時安定性にも優れることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【００１１】
すなわち、本発明は、ツツジ科スノキ属のコケモモ（Vaccinium vitis-idaea ）の果実抽出物を有効成分として含有するエストロゲン様作用剤であり、またコケモモ（Vaccinium vitis-idaea ）果実抽出物を乾燥残留物として０．０００１〜５質量％含有する皮膚外用剤である。
【００１２】
なお、コケモモ果実抽出物について、既に、抗菌・抗炎症作用（特許文献３）、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用（特許文献４）を有するとの報告がなされているが、コケモモ果実抽出物が高活性なエストロゲン様作用を有すること、また、コケモモ果実抽出物を皮膚外用剤に特定量含有させることによって、肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れ、かつ肌へのなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感にも優れるとともに、経時安定性にも優れることは、未だ報告されていない。
【発明の効果】
【００１３】
本発明のエストロゲン様作用剤は、従来のエストロゲン様作用剤に比べ高活性なエストロゲン様作用を有する。また、本発明の皮膚外用剤は、肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れ、かつ肌へのなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感にも優れるとともに、経時安定性にも優れたものである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の実施形態を説明する。本発明のエストロゲン様作用剤および皮膚外用剤は、いずれもコケモモ果実抽出物を含有する。まず、コケモモ果実抽出物について説明する。
【００１５】
〔コケモモ果実抽出物〕
本発明に用いられるコケモモは、ツツジ科スノキ属に属する植物であり、学名はVaccinium vitis-idaea である。別名リンゴンベリー、マウンテンクランベリー、カウベリーとも呼ばれる。常緑小低木であり、北半球の寒帯に広く分布し、日本でも北海道から九州までの高山帯に生える。高さは５〜２０ｃｍくらいで、地中の根茎を伸ばすことで株が拡大する。花期は初夏で、小鐘形の淡紅色を帯びた白花のあとに、紅色の径４〜７ｍｍくらいの房状球形果実をつける。
【００１６】
本発明に用いられるコケモモ果実抽出物は、コケモモの果実を、そのまま、もしくは圧搾や破砕した後、各種溶媒にて抽出したものであり、抽出液そのもの、もしくはその濃縮物をいう。抽出に用いられる溶媒としては、炭化水素、エステル、ケトン、エーテル、ハロゲン化炭化水素、水溶性のアルコール類及び水などがあげられる。中でも好ましくは、水、低級アルコール、多価アルコールの１種または２種以上を用いて得られる抽出物であり、更に好ましくは水、エタノール、1,3-ブチレングリコールの１種または２種以上を用いて得られる抽出物である。
【００１７】
抽出方法は、コケモモの果実を、そのまま、もしくは圧搾や破砕したものに、抽出溶媒を加えて１時間以上浸漬し、ろ過することで抽出液を得ることができる。抽出は、常圧または加圧下で、室温または加熱、冷却下で行うことができる。得られた抽出液は、そのまま用いてもよく、あるいは溶媒留去により濃縮したり、カラムクロマトグラフィーや溶媒分画等の処理により精製したりしてもよい。
【００１８】
〔エストロゲン様作用剤〕
本発明のエストロゲン様作用剤は、上記コケモモ果実抽出物を有効成分として含有するものであり、医薬品、医薬部外品、化粧品類（例えば、化粧水、乳液、クリーム、ジェル、美容液、パック、オイル、軟膏、スプレー、貼付剤など）として利用することができる。本発明のエストロゲン作用剤を医薬として適用する場合は、各種疾患又は症状を治療又は改善する目的、例えば、エストラジオールの欠乏による障害、乳汁分泌の阻止や停止、排卵抑制、乳癌や前立腺癌の回復を目的として用いることができる。本発明のエストロゲン様作用剤は、コケモモ果実抽出物に加え必要に応じ、本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬品、医薬部外品、化粧品類に添加され得る添加剤を含有していても良い。
【００１９】
〔皮膚外用剤〕
本発明の皮膚外用剤は、上記コケモモ果実抽出物を乾燥残留物として０．０００１〜５質量％含有するものである。本発明における乾燥残留物の質量は、実際に溶媒を除去して乾燥させた残留物の質量のみならず、残留物に含まれる溶媒量を算出し、その溶媒量を減じた残留物の質量も概念的に包含される。例えば、抽出溶媒が揮発性である場合は、抽出溶媒を１０５℃〜１２０℃で完全に留去させ、残存した固形分の質量であり、抽出溶媒が不揮発性である場合は、高速液体クロマトグラフィー等で溶媒量を定量し、それ以外の成分量が乾燥残留物の質量である。
【００２０】
コケモモ果実抽出物の配合量は、乾燥残留物として０．０００１〜５質量％であり、好ましくは０．０００５〜２．５質量％であり、更に好ましくは０．００１〜１質量％である。配合量が０．０００１％未満では肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果を発揮させることができず、５％質量を超えると製剤の安定性に問題が生じやすくなり好ましくない。
【００２１】
本発明の皮膚外用剤は、様々な剤形にて調製することができ、例えば、化粧水、乳液、クリーム、ジェル、美容液、パック、オイル、軟膏、スプレー、貼付剤などとして利用することができる。本発明においては、化粧料や医薬品等の皮膚外用剤に常用されている添加物を、本発明の効果を損なわない範囲で、適宜配合することも可能である。
【実施例】
【００２２】
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明は下記実施例に制限されるものではない。なお、特に断りのない限り、％は質量％を表す。
【００２３】
〔コケモモ果実抽出物の調製〕
コケモモ果実１０kgを圧搾してから、１０kgのエタノールと１０kgの水を加えて室温で１週間抽出し、ろ過することによりコケモモ果実の抽出液を得た。その抽出液をロータリーエバポレーターで減圧下、６０℃で乾燥濃縮し、コケモモ果実抽出物を５０ｇ得た。
【００２４】
〔実施例１、比較例１：エストロゲン様作用の評価試験〕
上記のコケモモ果実抽出物、及びエストロゲン様作用が知られているゲニステイン（東京化成工業社製）について、下記の方法によりエストロゲン様作用の評価試験を行った。そして、エストロゲン様作用活性率１１０％以上をエストロゲン様作用があると評価して表１中に「○」を記載し、エストロゲン様作用活性率１１０％未満をエストロゲン様作用が弱いと評価して表１中に「×」を記載した。
【００２５】
エストロゲン様作用活性を、エストロゲン依存性細胞の増殖に対する影響を調べる方法（Invitrocell. Dev. Biol. 28A, 595-602, 1992）で、測定した。すなわち、ヒト乳がん細胞由来ＭＣＦ−７細胞（理研細胞バンク、ＪＣＲＢ０１３４）を５％ＦＢＳ（チャコール・デキストラン処理）、１ｍＭピルビン酸ナトリウムを含有するEagle's MEM （フェノールレッド除去）を用いて、２．５×１０4個／ｍＬの細胞密度で浮遊させた細胞懸濁培地０．２ｍＬを９６穴培養プレートに播種し、２４時間培養後、表１に記載の各濃度に培地で調整した試料２０μＬを９６穴培養プレートに添加した。６日間培養後、ＭＴＴ還元法にて生細胞数の測定を行った。エストロゲン様作用活性率は、試料無添加で培養した生細胞数に対する試料添加で培養した生細胞数の割合（相対値％）で表わした。
【００２６】
【表１】
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【００２７】
表１より、コケモモ果実抽出物（実施例１）は、従来から女性ホルモン様作用が知られているゲニステイン（比較例１）と比較しても、非常に低濃度から高いエストロゲン様作用活性が確認された。また、ゲニステインは、２．７０μｇ／ｍＬ以上の濃度で、生細胞数が試料無添加のものよりも減少していることから細胞毒性が認められるのに対して、コケモモ果実抽出物は６．２５μｇ／ｍＬの濃度においても細胞毒性が認められていないことから、コケモモ果実抽出物は安全性の点でも優れていることが分かる。
【００２８】
〔実施例２、３、比較例２、３：官能評価〕
上記のコケモモ果実抽出物を使用し、表２に示す化粧水（皮膚外用剤）を調製し、下記６項目について下記評価基準により評価を行った。結果を表２に示す。
【００２９】
（評価項目及び評価基準）
（１）肌へのなじみ性
２０名の女性（２８才〜６１才）をパネラーとし、洗顔した後に皮膚外用剤を使用した時の感触について下記のように判定し、２０名の平均値を求めた。平均値１．５点以上を使用時の感触の良好な皮膚外用剤であると評価した。
２点：使用時に肌へのなじみが良いと感じた場合。
１点：使用時に肌へのなじみがやや悪いと感じた場合。
０点：使用時に肌へのなじみが明らかに悪いと感じた場合。
【００３０】
（２）使用後のべたつき
２０名の女性（２８才〜６１才）をパネラーとし、洗顔した後に皮膚外用剤を使用して１０分後の肌の感触について下記のように判定し、２０名の平均値を求めた。平均値１．５点以上を使用後のべたつきがない皮膚外用剤であると評価した。
２点：べたつきが無いと感じた場合。
１点：肌がややべたつくと感じた場合。
０点：肌が非常にべたつくと感じた場合。
【００３１】
（３）肌荒れ改善効果
肌荒れを生じている１０名の女性（３２才〜５０才）をパネラーとし、皮膚外用剤を一日２回ずつ連日２週間に渡って使用した時の肌の状態について官能検査し、下記のように判定した。１０名の平均値を求めて、平均値１．５点以上を肌荒れ改善効果のある皮膚外用剤であると評価した。
２点：肌荒れが明らかに治ってきたと感じた場合。
１点：肌荒れがやや治ってきたと感じた場合。
０点：肌荒れ改善効果が全く見られないと感じた場合。
【００３２】
（４）シワ防止・改善効果
２０名の女性（２８才〜６１才）をパネラーとし、皮膚外用剤を一日２回ずつ連日４週間に渡って使用した時の肌の状態について官能検査し、下記のように判定した。２０名の平均値を求めて、平均値１．５点以上をシワ防止・改善効果のある皮膚外用剤であると評価した。
２点：シワが明らかに少なくなったと感じた場合。
１点：シワがやや少なくなってきたと感じた場合。
０点：シワが減少しない、もしくは増えたと感じた場合。
【００３３】
（５）美肌効果
２０名の女性（２８才〜６１才）をパネラーとし、皮膚外用剤を一日２回ずつ連日２週間に渡って使用した時の肌の状態について官能検査し、下記のように判定した。２０名の平均値を求めて、平均値１．５点以上を、肌にハリと透明感を与える効果のある皮膚外用剤であると評価した。
２点：肌に明らかにハリがでて、肌が若々しくなったと感じた場合。
１点：肌にややハリがでて、肌がやや若々しくなったと感じた場合。
０点：肌のハリに変化がなく、美肌効果が弱いと感じた場合。
【００３４】
（６）経時安定性
化粧水を透明ガラス容器に密封して０℃、２５℃、４０℃でそれぞれ３ヶ月間保存し、その外観を観察して、下に示す３段階で評価した。
○：安定性良好（いずれの温度においても外観の変化がない。）
△：安定性やや不良（いずれかの温度において若干の澱（おり）、沈殿を生じるまたは若干変色を生じる。）
×：安定性不良（いずれかの温度において澱（おり）、沈殿を生じるまたは分離する。もしくは変色が著しい。）
【００３５】
【表２】
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【００３６】
実施例２，３と比較例２，３の対比より、コケモモ果実抽出物を用いた本発明に係る化粧水は、比較例２，３のものよりも肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れていることが分かる。また、実施例２，３の化粧水は、コケモモ果実抽出物を含有しない比較例２と、肌へのなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感、経時安定性が同等であることから、コケモモ果実抽出物がこれらの性能を損なわないことも分かる。すなわち、本発明に係る化粧水が、肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果に優れ、かつ肌へのなじみ性、使用後のべたつきが無い等の使用感にも優れるとともに、経時安定性にも優れることが分かる。
【００３７】
一方、比較例２，３では、十分な性能が得られていなかった。つまり、本発明に係るコケモモ果実抽出物に代えて、別の植物エキス（茶エキス）を含有する比較例３の化粧水では、肌荒れ改善効果、シワ防止・改善効果、美肌効果が弱くなっており、植物エキスを含有しない比較例２の化粧水と比較して、これらの効果は僅かであった。