(57)【要約】【課題】本発明は、検体の捕集効率を高めることを目的とするものである。【解決手段】そして、この目的を達成するために本発明は、基台１の上面には、複数の容器２を保持した容器保持体３が配置され、この容器保持体３の上方には、複数の外周ケース４を保持した外周ケース保持体５を配置し、さらに、この外周ケース保持体５の上方には、複数の磁石６を保持した磁石保持体７を配置している。前記容器２は、上面が開口した円筒状となっており、また、外周ケース４も上面が開口した円筒状となっており、さらに、磁石６は、円柱状となっている。すなわち、磁石６は、外周ケース４内に着脱自在に装着されるようになっており、また、外周ケース４は、容器２内に挿入する構成とした。【選択図】図１
2012132877.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体試料を採取する第１の工程と、
この第１の工程で採取した生体試料中の検体を、容器内の第１の溶液中に配置した磁気ビーズに、第１の抗体を介して結合させる第２の工程と、
この第２の工程の後に、前記容器の上面開口部から容器内の第１の溶液中に浸漬した磁気吸着体の外周面に前記磁気ビーズを吸着させる第３の工程と、
この第３の工程の後に、前記磁気吸着体を第１の溶液外に取り出す第４の工程と、
この第４の工程の後に、前記磁気吸着体を第２の溶液内に浸漬させる第５の工程を備え、
前記磁気吸着体は、外周ケースと、この外周ケース内に着脱自在に設けた磁石とにより構成し、前記第５の工程の後に、外周ケース内から磁石を抜き出す第６の工程を有する検体捕集方法。
【請求項２】
前記第４の工程と第５の工程を、交互に複数回繰り返し、最後の第５の工程の後に、第６の工程を実行する請求項１に記載の検体捕集方法。
【請求項３】
第１の溶液と第２の溶液は、同一種類を用いた請求項１または２に記載の検体捕集方法。
【請求項４】
前記第６の工程の後に、磁気ビーズに第１の抗体で結合された検体に第２の抗体を介して標識剤を結合させる第７の工程と、
この第７の工程の後に、前記磁気吸着体を第２の溶液外に取り出す第８の工程と、
この第８の工程の後に、前記磁気吸着体を第３の溶液内に浸漬させる第９の工程と、
この第９の工程の後に、外周ケース内から磁石を抜き出す第１０の工程を有する請求項１から３のいずれか一つに記載の検体捕集方法。
【請求項５】
第３の溶液は、第１の溶液、第２の溶液と同一種類を用いた請求項４に記載の検体捕集方法。
【請求項６】
請求項１から５のいずれか一つに記載の検体捕集方法を用いる検体捕集装置であって、
前記容器を保持する容器保持体と、この容器保持体の上方において、外周ケースを保持した外周ケース保持体と、
この外周ケース保持体の上方において、磁石を保持した磁石保持体とを備えた検体捕集装置。
【請求項７】
容器保持体は、複数の容器を保持する構成とし、
外周ケース保持体は、複数の外周ケースを保持する構成とし、
磁石保持体は、複数の磁石を保持する構成とした請求項６に記載の検体捕集装置。
【請求項８】
外周ケースは、上面が開口した筒状とし、磁石は、柱状とした請求項７に記載の検体捕集装置。
【請求項９】
外周ケースは、上面が開口した円筒状とし、磁石は、円柱状とした請求項８に記載の検体捕集装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体試料中から検体を捕集する検体捕集方法とそれを用いた検体捕集装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、生体試料中から検体を捕集する方法としては、まず、生体試料を採取し、次に、この生体試料を容器内の溶液中に溶解させるとともに、この生体試料中の検体を、溶液中に配置した磁気ビーズに抗体を介して結合させ、その後、容器外周面の一部に当接させた磁石に、前記磁気ビーズを吸着させることによって行われている（例えば、特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１０−１５１７３８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従来例における課題は、検体の捕集効率が低いということであった。
【０００５】
すなわち、従来例においては、容器外周面に設けた磁石に、容器内の磁気ビーズを吸着させるようにしているが、前記磁石は、容器外周面の一部にしか配置されていないので、この磁石から遠くはなれた容器内の磁気ビーズを吸着することができず、その結果として、検体の捕集効率が低くなるのであった。
【０００６】
そこで、本発明は、検体の捕集効率を高めることを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そして、この目的を達成するために本発明は、生体試料を採取する第１の工程と、この第１の工程で採取した生体試料中の検体を、容器内の第１の溶液中に配置した磁気ビーズに、第１の抗体を介して結合させる第２の工程と、この第２の工程の後に、前記容器の上面開口部から容器内の第１の溶液中に浸漬した磁気吸着体の外周面に前記磁気ビーズを吸着させる第３の工程と、この第３の工程の後に、前記磁気吸着体を第１の溶液外に取り出す第４の工程と、この第４の工程の後に、前記磁気吸着体を第２の溶液内に浸漬させる第５の工程とを備え、前記磁気吸着体は、外周ケースと、この外周ケース内に着脱自在に設けた磁石とにより構成し、前記第５の工程の後に、外周ケース内から磁石を抜き出す第６の工程を有するものとし、これにより所期の目的を達成するものである。
【発明の効果】
【０００８】
以上のように本発明は、生体試料を採取する第１の工程と、この第１の工程で採取した生体試料中の検体を、容器内の第１の溶液中に配置した磁気ビーズに、第１の抗体を介して結合させる第２の工程と、この第２の工程の後に、前記容器の上面開口部から容器内の第１の溶液中に浸漬した磁気吸着体の外周面に前記磁気ビーズを吸着させる第３の工程と、この第３の工程の後に、前記磁気吸着体を第１の溶液外に取り出す第４の工程と、この第４の工程の後に、前記磁気吸着体を第２の溶液内に浸漬させる第５の工程とを備え、前記磁気吸着体は、外周ケースと、この外周ケース内に着脱自在に設けた磁石とにより構成し、前記第５の工程の後に、外周ケース内から磁石を抜き出す第６の工程を有するものとしたので、検体の捕集効率を高めることができる。
【０００９】
すなわち、本発明は、容器の上面開口部から、この容器内の第１の溶液中に磁気吸着体を浸漬させることで、この磁気吸着体の外周面に前記磁気ビーズを吸着させるようにしたので、磁気ビーズと磁気吸着体の距離が短く、その結果として、多くの磁気ビーズを磁気吸着体で吸着することができ、これにより、検体の捕集効率を高めることができるのである。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明の一実施の形態を示す上方からの斜視図
【図２】同下方からの斜視図
【図３】同要部の断面図
【図４】同検体捕集方法を示す工程断面図
【図５】同検体捕集方法を示す工程図
【図６】同測定工程を示す図
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下に、本発明の一実施の形態を図面とともに詳細に説明する。
（実施の形態１）
図１、図２は、本発明の実施の形態１における検体捕集方法を実行するための検体捕集装置を示しており、基台１の上面には、複数の容器２を保持した容器保持体３が、配置されている。また、この容器保持体３の上方には、複数の外周ケース４を保持した外周ケース保持体５を配置している。さらに、この外周ケース保持体５の上方には、複数の磁石６を保持した磁石保持体７を配置している。
【００１２】
前記容器２は、図３にも示すように、上面が開口した円筒状となっており、また、外周ケース４も上面が開口した円筒状となっており、さらに、磁石６は、円柱状となっている。
【００１３】
すなわち、磁石６は、外周ケース４の上面開口部からその内に着脱自在に装着されるようになっており、また、外周ケース４は、容器２の上面開口部からその内に挿入されるようになっているのである。
【００１４】
以上の構成において、検体を捕集するためには、まず、生体試料を採取する。
【００１５】
そして、採取した生体試料を図４（ａ）に示すように、容器２内の溶液８中に溶解させる。この溶液８は、例えば、リン酸緩衝液（ＰＢＳ）であって、その中には、予め複数の磁気ビーズ９を浮遊状態で配置している。なお、磁気ビーズ９は、樹脂製球体の外周面に磁性体を被覆させたものであって、溶液８内の底部から液面に広く分散、浮遊した状態で、存在できるようにしている。
【００１６】
また、磁気ビーズ９は、図５（ｂ）のごとく、捕集する検体（図５（ａ）の１０）と結合する抗体１１がその外周面に付着させられている。
【００１７】
従って、図４（ａ）のごとく、容器２内の溶液８中に生体試料を溶解させた状態では、図５（ｂ）に示すごとく、生体試料中の検体１０が抗体１１に結合された状態となる。
【００１８】
次に、図４（ｂ）に示すごとく、容器２内の外周ケース４を溶液８中に浸漬し、続いて、外周ケース４内に磁石６を挿入する。すると、この図４（ｂ）に示すように、磁気ビーズ９は、磁石６の磁気吸引力によって、外周ケース４の外周面に吸着され、捕獲されることになる。
【００１９】
従って、次には、図４（ｃ）に示すように、外周ケース４を容器２外へと、引き上げることにより、捕獲した検体１０も、容器２外へと取り出すことができる。
【００２０】
次に、図４（ｄ）に示すように容器２内の溶液８を吸引除去し、その後、図４の（ｅ）から（ｉ）に示した洗浄工程を５回繰り返すことになる（図５（ｃ））。
【００２１】
この洗浄工程は、外周ケース４に吸着した磁気ビーズ９と検体１０を除く不要物を洗い流すものである。そのため、まず、図４（ｅ）のように、容器２の上面開口部から洗浄液１２、例えば、リン酸緩衝液（ＰＢＳＴ）を注入する。
【００２２】
次に、図４（ｆ）に示すように、外周ケース４を容器２内の洗浄液１２内に浸漬させ、その後、磁石６を抜き出し、外周ケース４から引き離す。すると、外周ケース４には磁気吸引力がなくなり、外周ケース４の外周面に吸着していた磁気ビーズ９が、洗浄液１２内へと放出される。このとき、容器２を攪拌することで、磁気ビーズ９とこの磁気ビーズ９と結合した検体１０（図５（ｂ）の１０）から、不要物を分離しやすくなる。また、検体１０がたんぱく質の場合、外周ケース４の外周面は、たんぱく質に対して低吸着性を示すフッ素で表面処理をしておくと洗浄の効率が向上する。
【００２３】
次に、図４（ｇ）に示すように、洗浄した磁気ビーズ９を不要物の混ざった洗浄液１２から分離するため、磁石６を外周ケース４に挿入する。すると、図４（ｂ）と同様に、磁気ビーズ９は、外周ケース４の外周面に磁気吸引力によって吸着され、捕獲される。
【００２４】
さらに、図４（ｈ）に示すように、外周ケース４を容器２外へと、引き上げる。すると、磁気ビーズ９と、この磁気ビーズ９に図５（ｂ）のように抗体１１を介して結合された検体１０は、容器２外へ引き上げられ、不要物の混ざった洗浄液１２から分離される。
【００２５】
従って、次には、図４（ｉ）に示すように、外周ケース４を容器２外に引き上げた状態で、不要物が混ざった洗浄液１２を容器２から吸引除去する。
【００２６】
このように、図４の（ｅ）から（ｉ）の洗浄工程を繰り返すことで、図４（ａ）の生体試料中から不要物を取り除くことができる。また、ここでは、洗浄工程を５回繰り返したが、磁気ビーズ９と検体１０、外周ケース４から不要物を取り除ける回数だけ、洗浄工程を繰り返せばよい。
【００２７】
次に、図４の（ｅ）から（ｉ）の洗浄工程の後、図４（ｊ）に示すように、検体１０を標識化するため、まず、容器２に標識剤（図５（ｄ）の１４）を混ぜた試薬１３を注入する。
【００２８】
この標識剤１４は、図５（ｄ）に示すように、検体１０と結合する二次抗体１５がつけられている。
【００２９】
次に、図４（ｊ）の状態から、磁気ビーズ９を吸着した状態の外周ケース４を、容器２内の試薬１３に浸漬させ、その後、外周ケース４内から磁石６を抜き出す。
【００３０】
すると、外周ケース４の外周面に捕獲されていた磁気ビーズ９は、試薬１３内に放出され、その結果、図５（ｄ）に示すように、磁気ビーズ９に抗体１１を介して検体１０が結合され、また、検体１０には、二次抗体１５を介して標識剤１４が結合された状態となる。なお、試薬１３に用いられる溶液は、例えば、リン酸緩衝液である。
【００３１】
その後、図５（ｅ）に示すように、洗浄を行う。なお、この洗浄については、図４（ｅ）から（ｉ）と同様な工程を、５回繰り返すようにしている。
【００３２】
そして、最終的には、図５（ｆ）に示すように、磁気ビーズ９に抗体１１を介して検体１０が結合され、また、検体１０には、二次抗体１５を介して標識剤１４が結合された状態のものを得る。
【００３３】
次に、図５（ｆ）に示す、検体１０に二次抗体１５を介して結合した標識剤１４を間接的に検出する。そのため、容器２に発色液（図示せず）を入れ、図４（ｊ）の場合と同様に、外周ケース４を発色液に浸漬させる。このとき、当然のことであるが、外周ケース４の外周面には、磁気ビーズ９に抗体１１を介して検体１０が結合され、また、検体１０には、二次抗体１５を介して標識剤１４が結合された状態となっている。
【００３４】
その後、外周ケース４内から磁石６を抜き出すと、発色液内に、磁気ビーズ９、抗体１１、検体１０、二次抗体１５、標識剤１４の結合体が放出されることになる。
【００３５】
この発色液は、例えば、テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）であって、標識剤１４と反応し、青色で発色する。
【００３６】
従って、前記磁気ビーズ９に、抗体１１、検体１０、二次抗体１５を介して結合した標識剤１４が、発色液に反応し、その結果として、発色液の色を変色させる。
【００３７】
一定時間、例えば、５分経過後、発色反応を停止させる停止液（一例として、硫酸）を入れ、発色液の発色反応を停止させる。
【００３８】
この状態における発色液は、特定の波長、例えば、４５０ｎｍの光を濃度に応じて吸収するようになる。そのため、この発色液に、４５０ｎｍの光を照射し、吸光度を測定すれば、発色液の色濃度がわかる。また、発色液の色濃度と標識剤１４の量は比例関係にあり、標識剤１４の量は、検体１０の量に対応するので、発色液の色濃度から検体１０を検出することができる。
【００３９】
そこで、図６に示すように、発色液の色濃度を測定するため、停止液を入れた状態の発色液１７の吸光度を測定する。具体的には、光源１６から波長４５０ｎｍの光を発色液１７に照射する。すると、発色液１７によって、光が吸収され、標識剤１４の量がわかる。そのため、この吸光度を光の光量減少分として検出部１８で検出すれば、どのくらい、検体１０があるのかが判明する。
【００４０】
つまり、図６において、光源１６からの光は、コリメート用レンズ１９を介して、発色液１７に照射される。この発色液１７を透過した光は、少なくとも底面が透明な容器２を透過し、集光用レンズ２０で集光され、検出部１８で、集光用レンズ２０を通過した光の光量が検出される。これより、発色液１７の吸光度がわかり、吸光度と発色液の濃度の検量線などから、発色液の濃度がわかる。そのため、検体１０の量がわかる。
【００４１】
以上のごとく、本実施形態によれば、従来と比べて、容器２の上面開口部からこの容器２内の溶液８中に外周ケース４を浸漬させるとともに、この外周ケース４内に磁石６を着脱自在に設けたので、外周ケース４の外周面に磁気ビーズ９を吸着させることができ、このようにすれば、磁気ビーズ９と磁石６の距離が短く、その結果として、多くの磁気ビーズ９を磁石６で吸着することができる。
【００４２】
これにより、検体１０の捕集効率を高めることができる。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
以上のように本発明は、生体試料を採取する第１の工程と、この第１の工程で採取した生体試料中の検体を、容器内の第１の溶液中に配置した磁気ビーズに、第１の抗体を介して結合させる第２の工程と、この第２の工程の後に、前記容器の上面開口部から容器内の第１の溶液中に浸漬した磁気吸着体の外周面に前記磁気ビーズを吸着させる第３の工程と、この第３の工程の後に、前記磁気吸着体を第１の溶液外に取り出す第４の工程と、この第４の工程の後に、前記磁気吸着体を第２の溶液内に浸漬させる第５の工程とを備え、前記磁気吸着体は、外周ケースと、この外周ケース内に着脱自在に設けた磁石とにより構成し、前記第５の工程の後に、外周ケース内から磁石を抜き出す第６の工程を有するものとしたので、検体の捕集効率を高めることができる。
【００４４】
すなわち、本発明は、容器の上面開口部からこの容器内の第１の溶液中に磁気吸着体を浸漬させることで、この磁気吸着体の外周面に前記磁気ビーズを吸着させるようにしたので、磁気ビーズと磁気吸着体の距離が短く、その結果として、多くの磁気ビーズを磁気吸着体で吸着することができ、これにより、検体の捕集効率を高めることができるのである。
【００４５】
したがって、検体の捕集用として極めて有用なものとなる。
【符号の説明】
【００４６】
１  基台
２  容器
３  容器保持体
４  外周ケース
５  外周ケース保持体
６  磁石
７  磁石保持体
８  溶液
９  磁気ビーズ
１０  検体
１１  抗体
１２  洗浄液
１３  試薬
１４  標識剤
１５  二次抗体
１６  光源
１７  発色液
１８  検出部
１９  コリメート用レンズ
２０  集光用レンズ
【図１】
2012132877.tif 000003
【図２】
2012132877.tif 000004
【図３】
2012132877.tif 000005
【図４】
2012132877.tif 000006
【図５】
2012132877.tif 000007
【図６】
2012132877.tif 000008