(57)【要約】【課題】強力なＩＡＰ拮抗活性を示す複素環化合物を提供すること。【解決手段】式（Ｉ）：2012176934.tif 000019［式中、各記号は本明細書中で定義した通りである。］で表される化合物またはその塩。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2012176934.tif 000018
［式中、
Ｒ１およびＲ２は、同一または異なって、水素原子またはＣ１−６アルキルを；
Ｒ３は、Ｃ１-６アルキル、テトラヒドロピラニル、または１ないし３個のハロゲン原
子で置換されていてもよいＣ３-８シクロアルキルを；
Ｒ４は、ハロゲン原子およびＣ１−６アルコキシから選択される１ないし３個の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、ジヒドロクロメニルまたはジヒドロインデニルを；
Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、ハロゲン原子またはシアノを示す。］
で表される化合物またはその塩。
【請求項２】
請求項１記載の化合物またはその塩を含有してなる医薬。
【請求項３】
アポトーシス抑制蛋白質の拮抗薬である、請求項２記載の医薬。
【請求項４】
癌の予防または治療剤である、請求項２記載の医薬。
【請求項５】
アポトーシス抑制蛋白質の拮抗薬を製造するための、請求項１記載の化合物またはその塩の使用。
【請求項６】
癌の予防または治療剤を製造するための、請求項１記載の化合物またはその塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アポトーシス抑制蛋白質（Inhibitors of apoptosis protein）(本明細書中、ＩＡＰと略記することがある）拮抗活性を有し、癌の予防または治療等に有用な複素環化合物ならびにその用途に関する。
【０００２】
（発明の背景）
アポトーシス（細胞死）もしくは管理、調節された細胞死（プログラムされた細胞死）は、生体の発達、恒常性維持に重要な役割を担っており、アポトーシスシグナルの破綻は癌、自己免疫疾患、神経変性疾患および炎症性疾患等、種々の疾患と深く関与している（非特許文献１）。アポトーシスにおける重要な因子は、セリンプロテアーゼであるカスパーゼであり、アポトーシスの実行因子として種々の蛋白質分解に関与している。多くの癌では、種々のシグナル分子を介してカスパーゼの機能を抑制することによりアポトーシス抵抗性を獲得し、生存、増殖している。
アポトーシス抑制蛋白質（ＩＡＰ）は、カスパーゼと直接結合しその機能を抑制することによりアポトーシスを抑制している蛋白質群である。ＩＡＰは、共通構造としてＢＩＲドメインを有する蛋白質として同定され、ＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ−１、ｃＩＡＰ−２、ＭＬ−ＩＡＰ、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ等が報告されている（非特許文献２）。
ＩＡＰは、多くの癌で発現亢進しており、癌の悪性化、予後不良と正相関することが報告されている。近年、種々の細胞死シグナルによりミトコンドリアより放出され、アポトーシスを誘導する蛋白質である、Ｓｍａｃ（ＤＩＡＢＬＯ）が、ＸＩＡＰやｃＩＡＰ等のＩＡＰ蛋白質の結合部位に結合しカスパーゼの抑制を解除することにより、強力なアポトーシスを誘導することが明らかとなった。また、Ｓｍａｃが、ＸＩＡＰやｃＩＡＰ等のＩＡＰ蛋白質へ結合することにより、ＩＡＰ蛋白質の自己ユビキチン化を誘導し、ＩＡＰ蛋白質の自己消化を介したアポトーシス誘導作用も報告されている。これらのことから、ＩＡＰとの結合に重要なＳｍａｃペプチド部位を模倣した低分子化合物であるＩＡＰ拮抗薬は、アポトーシスを誘導する有望な癌治療薬となり得る。
【０００３】
また、ＩＡＰ拮抗剤として特許文献１〜３に報告されている化合物が知られているが、特許文献１〜３に報告されている化合物と本願化合物とは構造が異なる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００５／０９７７９１号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００６／０１７２９５号パンフレット
【特許文献３】国際公開第２００６／１２８４５５号パンフレット
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Science 267 (1995) 1456-1462
【非特許文献２】J. Clin. Invest.115 (2005) 2673-2678
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
薬効発現、薬物動態、溶解性、他の医薬品との相互作用、安全性（毒性）、安定性等の点で優れたＩＡＰ拮抗（阻害）薬は、治療上優れた効果を期待することができる。しかしながら、現状では、これらを十分に満足できるものが見いだされていない。従って、本発明の目的は、上記の点に優れた、医薬品として十分満足できる化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、下記の式で示される化合物が優れたＩＡＰ拮抗（阻害）活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下の通りである。
[１]  式（Ｉ）：
【０００８】
【化１】
2012176934.tif 000002
【０００９】
［式中、
Ｒ１およびＲ２は、同一または異なって、水素原子またはＣ１−６アルキルを；
Ｒ３は、Ｃ１-６アルキル、テトラヒドロピラニル、または１ないし３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ３-８シクロアルキルを；
Ｒ４は、ハロゲン原子およびＣ１−６アルコキシから選択される１ないし３個の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、ジヒドロクロメニルまたはジヒドロインデニルを；
Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、ハロゲン原子またはシアノを示す。］
で表される化合物またはその塩（本明細書中、化合物（Ｉ）と称する場合がある）。
［２］  ［１］記載の化合物またはその塩を含有してなる医薬。
［３］  アポトーシス抑制蛋白質の拮抗薬である、［２］記載の医薬。
［４］  癌の予防または治療剤である、［２］記載の医薬。
［５］  アポトーシス抑制蛋白質の拮抗薬を製造するための、［１］記載の化合物またはその塩の使用。
［６］  癌の予防または治療剤を製造するための、［１］記載の化合物またはその塩の使用。
【００１０】
また、本発明は以下に関する。
［７］  哺乳動物に対し、［１］記載の化合物またはその塩の有効量を投与することを特徴とする、該哺乳動物におけるアポトーシス抑制蛋白質の拮抗方法。
［８］  哺乳動物に対し、［１］記載の化合物またはその塩の有効量を投与することを特徴とする、該哺乳動物における癌の予防または治療方法。
【発明の効果】
【００１１】
本発明化合物は、ＩＡＰに対して優れた拮抗作用を示し、薬物動態、溶解性、他の医薬品との相互作用、安全性（毒性）、安定性の点でも優れているので、ＩＡＰ関連疾患の臨床上有用な予防または治療剤（例えば、癌の予防または治療剤、癌の増殖阻害剤、癌の転移抑制剤、アポトーシス促進剤）を提供することができる。
【００１２】
（発明の詳細な説明）
本明細書中、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子およびヨウ素原子を示す。
本明細書中、「Ｃ１−６アルキル」としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ１−６アルコキシ」としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ヘキソキシが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ３−８シクロアルキル」としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルが挙げられる。
【００１３】
本明細書中、「１ないし３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ３-８シクロアルキル」とは、１ないし３個の上記で定義した「ハロゲン原子」で置換されていてもよい、上記で定義した「Ｃ３-８シクロアルキル」を意味し、２ないし３個のハロゲン原子で置換されている場合、これらハロゲン原子は同一であっても異なっていてもよい。
本明細書中、「ハロゲン原子およびＣ１−６アルコキシから選択される１ないし３個の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、ジヒドロクロメニルまたはジヒドロインデニル」とは、上記で定義した「ハロゲン原子」および上記で定義した「Ｃ１-６アルコキシ」から選択される１ないし３個の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、ジヒドロクロメニルまたはジヒドロインデニルを意味し、２ないし３個の置換基で置換されている場合、これら置換基は同一であっても異なっていてもよい。
【００１４】
以下、化合物（Ｉ）について説明する。
【００１５】
Ｒ１およびＲ２は、同一または異なって、水素原子またはＣ１−６アルキルを示す。
Ｒ１は、好ましくはＣ１−６アルキルであり、より好ましくはメチルである。
Ｒ２は、好ましくはＣ１−６アルキルであり、より好ましくはメチルまたはエチルである。
【００１６】
Ｒ３は、Ｃ１-６アルキル、テトラヒドロピラニル、または１ないし３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ３-８シクロアルキルを示す。
Ｒ３は、好ましくは、Ｃ１-６アルキル（例、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル）、テトラヒドロピラニル、または１ないし３個のハロゲン原子（例、フッ素原子）で置換されていてもよいＣ３-８シクロアルキル（例、シクロペンチル、シクロヘキシル）である。
Ｒ３は、より好ましくは、ｔｅｒｔ−ブチル、テトラヒドロピラニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、またはジフルオロシクロヘキシルである。
【００１７】
Ｒ４は、ハロゲン原子およびＣ１−６アルコキシから選択される１ないし３個の置換基でそれぞれ置換されていてもよい、ジヒドロクロメニルまたはジヒドロインデニルを示す。
Ｒ４は、好ましくは、１ないし３個のハロゲン原子（例、フッ素原子）で置換されていてもよいジヒドロクロメニル、またはＣ１−６アルコキシ（例、エトキシ）で置換されていてもよいジヒドロインデニルである。
Ｒ４は、より好ましくは、ジヒドロクロメニル、ジフルオロ−ジヒドロクロメニル、またはエトキシ−ジヒドロインデニルである。
【００１８】
Ｒ５およびＲ６は、同一または異なって、水素原子、ハロゲン原子またはシアノ基を示す。
Ｒ５は、好ましくは、水素原子、またはハロゲン原子（例、塩素原子）である。
Ｒ５およびＲ６は、より好ましくは、（水素原子、水素原子）、（水素原子、塩素原子）、（塩素原子、塩素原子）、または（水素原子、シアノ）のいずれかの組合せである。
【００１９】
化合物（Ｉ）としては、好ましくは、
Ｒ１が、Ｃ１−６アルキル（好ましくは、メチル）であり；
Ｒ２が、Ｃ１−６アルキル（好ましくは、メチル、エチル）であり；
Ｒ３が、Ｃ１-６アルキル（好ましくは、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル）、テトラヒドロピラニル、または１ないし３個のハロゲン原子（好ましくは、フッ素原子）で置換されていてもよいＣ３-８シクロアルキル（好ましくは、シクロペンチル、シクロヘキシル）であり；
Ｒ４が、１ないし３個のハロゲン原子（好ましくは、フッ素原子）で置換されていてもよいジヒドロクロメニル、またはＣ１−６アルコキシ（好ましくは、エトキシ）で置換されていてもよいジヒドロインデニルであり；
Ｒ５およびＲ６が、同一または異なって、水素原子、ハロゲン原子（好ましくは、塩素原子）またはシアノである、
化合物である。
【００２０】
化合物（Ｉ）としては、より好ましくは、
Ｒ１が、メチルであり；
Ｒ２が、メチルまたはエチルであり；
Ｒ３が、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、テトラヒドロピラニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、またはジフルオロシクロヘキシルであり；
Ｒ４が、ジヒドロクロメニル、ジフルオロ−ジヒドロクロメニル、またはエトキシ−ジヒドロインデニルであり；
Ｒ５およびＲ６が、（水素原子、水素原子）、（水素原子、塩素原子）、（塩素原子、塩素原子）、または（水素原子、シアノ）のいずれかの組合せである、
化合物である。
【００２１】
化合物（Ｉ）が塩である場合、そのような塩としては、例えば、無機酸との塩、有機酸との塩、酸性アミノ酸との塩が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸との塩が挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸との塩が挙げられる。酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸との塩が挙げられる。
このうち、薬学的に許容し得る塩が好ましい。化合物（Ｉ）が塩基性官能基を有する場合には、例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩；および酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸との塩が好ましい。
【００２２】
次に、化合物（Ｉ）の製造方法について述べる。
化合物（Ｉ）は、自体公知の方法、例えば、以下に詳述する方法、あるいはこれに準ずる方法に従って製造することができる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられるアルコール類としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノールが挙げられる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられるエーテル類としては、例えば、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、エチレングリコール−ジメチルエーテルが挙げられる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられるエステル類としては、例えば、ギ酸エチル、酢酸エチル、酢酸ｎ−ブチルが挙げられる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられるハロゲン化炭化水素類としては、例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、トリクロロエチレンが挙げられる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられる炭化水素類としては、例えば、ｎ−ヘキサン、ベンゼン、トルエンが挙げられる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられるアミド類としては、例えば、ホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドが挙げられる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられるニトリル類としては、例えば、アセトニトリル、プロピオニトリルが挙げられる。
以下の反応において、反応溶媒として用いられるスルホキシド類としては、例えば、ジメチルスルホキシドが挙げられる。
【００２３】
以下の反応において、アルカリ金属としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウムが挙げられる。
以下の反応において、水酸化アルカリ金属としては、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウムが挙げられる。
以下の反応において、水酸化アルカリ土類金属としては、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウムが挙げられる。
【００２４】
以下の反応において、原料化合物や製造中間体は、塩であってもよい。このような塩としては、前述の化合物（Ｉ）における塩として例示された塩と同様のものが挙げられる。
また、各工程で得られた化合物は、反応液のままあるいは粗製物として次の反応に用いることもできるが、常法（例えば、再結晶、蒸留、クロマトグラフィー等の分離手段）に従って反応混合物から単離してもよい。
化合物（Ｉ）は、例えば、以下の反応式１で示される方法またはこれに準じた方法によって製造することができる。また、アミド化の順序を入れ替えた一般的な製造法も可能である。
【００２５】
(反応式１)
【００２６】
【化２】
2012176934.tif 000003
【００２７】
［式中、ＲａはＣ１−６アルキルを、ＰＧは同一または異なってアミノの保護基を示す。その他の各記号は前記と同意義を示す。］
ＰＧで示されるアミノの保護基としては、例えば、ホルミル、Ｃ１−６アルキル−カルボニル、Ｃ１−６アルコキシ−カルボニル、ベンゾイル、Ｃ７−１０アラルキル−カルボニル（例、ベンジルカルボニル）、Ｃ７−１４アラルキルオキシ−カルボニル（例、ベンジルオキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル）、ベンジル、トリチル、フタロイル、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン、置換シリル（例、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ジメチルフェニルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジエチルシリル）、Ｃ２−６アルケニル（例、１−アリル）などが挙げられる。これらの基は、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルコキシおよびニトロから選ばれる１ないし３個の置換基で置換されていてもよい。
【００２８】
化合物（１０）は、化合物（１１）のエステル基をカルボン酸に変換することにより製造することができる。
具体的には、化合物（１０）は、化合物（１１）に水酸化アルカリ金属または水酸化アルカリ土類金属を反応させることにより製造することができる。
水酸化アルカリ金属または水酸化アルカリ土類金属の使用量は、化合物（１１）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミド、水等が挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００２９】
なお、本反応において化合物（１１）と化合物（１０）のＰＧは同一であっても、異なっていてもよい。化合物（１１）と化合物（１０）のＰＧが異なる場合には、化合物（１１）のＰＧを自体公知の方法（例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法）で除去した後、所望のＰＧを自体公知の方法（例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法）で導入することができる。
【００３０】
化合物（８）は、化合物（１０）と化合物（９）とを反応させることにより製造することができる。化合物（９）の使用量は、化合物（１０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
【００３１】
該反応において、化合物（１０）を遊離酸の形または塩の形で使用する場合には、縮合剤の存在下に反応を行うことが望ましい。
該縮合剤としては、例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ’−モルホリノエチルカルボジイミド、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ’−（４−ジエチルアミノシクロヘキシル）カルボジイミド、Ｎ，Ｎ’−ジエチルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等のカルボジイミド；２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライドなどのトリアジン類；Ｎ，Ｎ’−カルボニルビス（２−メチルイミダゾ−ル）；亜リン酸トリアルキル；ポリリン酸エチル、ポリリン酸イソプロピル等のポリリン酸エステル；オキシ塩化リン；ジフェニルホスホリルアジド；塩化チオニル；塩化オキサリル；クロロギ酸エチル、クロロギ酸イソプロピル等のハロギ酸低級アルキル；トリフェニルホスフィン；１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ（４，５−ｂ）ピリジニウム  ３−オキシド  ヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）；Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル；１−（ｐ−クロロベンゼンスルホニルオキシ）−６−クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾ−ル；Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドと、塩化チオニル、ホスゲン、クロロギ酸トリクロロメチル、オキシ塩化リン等との反応によって調製した、いわゆるビルスマイヤ−試薬；等、あるいはこれらの組み合わせが挙げられる。
縮合剤の使用量は、化合物（１０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
【００３２】
本反応は、所望により塩基の存在下で行ってもよい。
該塩基としては、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ金属；水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム等の水酸化アルカリ土類金属；炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等の炭酸アルカリ金属；炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等の炭酸水素アルカリ金属；ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等のアルカリ金属Ｃ１−６アルコキシド；トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、ピコリン、Ｎ−メチルピロリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］−５−ノネン、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン、テトラメチルグアニジン等の有機塩基類；メチルリチウム、ｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機リチウム類；リチウムジイソプロピルアミド等のリチウムアミド類等が挙げられる。
塩基の使用量は、化合物（１０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
【００３３】
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミド等が挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００３４】
また、本反応では、化合物（１０）の混合酸無水物を用いてもよい。例えば、まず、化合物（１０）とクロロ炭酸アルキル（例、クロロ炭酸メチル、クロロ炭酸エチル、クロロ炭酸イソブチル）を塩基の存在下に反応させて混合酸無水物とした後、化合物（９）と反応させる。
クロロ炭酸アルキルの使用量は、化合物（１０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
塩基の使用量は、化合物（１０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミド等が挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００３５】
化合物（９）は市販のものを使用するか、または自体公知の方法（例えば、ＵＳ２００７／０２１９２３７；  ＵＳ２００４／０１５７７３９；  ＷＯ２００８／０３９６４０；  ＷＯ２００９／０４８４７４；  ＵＳ２００７／０１９１２９３などに記載の方法）によって合成することができる。
【００３６】
化合物（７）は、化合物（８）のＰＧを除去することにより製造することができる。
ＰＧで表される保護基の除去は、自体公知の方法、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法などに従って行うことができる。具体的には、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミドなど）などを使用する方法や還元法などを用いて保護基を除去することができる。
【００３７】
化合物（５）は、化合物（６）と化合物（７）とを反応させることにより製造することができる。
化合物（６）の使用量は、化合物（７）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
該反応は、化合物（８）の合成と同様の方法で、縮合剤の存在下に反応を行うことが望ましい。
縮合剤の使用量は、化合物（７）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、化合物（８）の合成と同様の方法で、所望により塩基の存在下で行ってもよい。
塩基の使用量は、化合物（７）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミドが挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００３８】
また、本反応では、化合物（６）の混合酸無水物を用いてもよい。例えば、まず、化合物（８）の合成と同様の方法で、化合物（６）とクロロ炭酸アルキルを塩基の存在下に反応させた後、化合物（７）と反応させる。
クロロ炭酸アルキルの使用量は、化合物（６）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
塩基の使用量は、化合物（６）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
化合物（６）は市販のものを使用するか、または自体公知の方法（例えば、Ｊ．  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．，  １９９１，  ２８，  １７１５−１７２０；  ＷＯ２００８／８５３０２；  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９９５，  １１７，  ９３７５−９３７６；  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９３，  ３６，  ２３００−２３１０；  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，  ２００１，  １２，  ２４２１−２４２５；  ＷＯ２００９／００５６７７；  ＷＯ２００６／０６９０６３；  ＵＳ２００３／０２１６３２５などに記載の方法；  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法による保護基の導入と除去）によって合成することができる。
【００３９】
化合物（４）は、化合物（５）のＰＧを除去することにより製造することができる。
ＰＧで表される保護基の除去は、自体公知の方法、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法などに従って行うことができる。具体的には、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミド）などを使用する方法や還元法を用いて保護基を除去することができる。
【００４０】
化合物（２）は、化合物（３）と化合物（４）とを反応させることにより製造することができる。
化合物（３）の使用量は、化合物（４）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
該反応は、化合物（８）の合成と同様の方法で、縮合剤の存在下に行うことが望ましい。
縮合剤の使用量は、化合物（４）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、化合物（８）の合成と同様の方法で、所望により塩基の存在下で行ってもよい。
塩基の使用量は、化合物（４）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミドが挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
本反応では、化合物（３）の混合酸無水物を用いてもよい。例えば、まず、化合物（８）の合成と同様の方法で、化合物（３）とクロロ炭酸アルキルを塩基の存在下に反応させた後、化合物（４）と反応させる。
クロロ炭酸アルキルの使用量は、化合物（３）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
塩基の使用量は、化合物（３）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００４１】
化合物（３）は市販のものを使用するか、または自体公知の方法（例えば、Ｊ．  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．，  １９９１，  ２８，  １７１５−１７２０；  ＷＯ２００８／８５３０２；  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９９５，  １１７，  ９３７５−９３７６；  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９３，  ３６，  ２３００−２３１０；  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，  ２００１，  １２，  ２４２１−２４２５；  ＷＯ２００９／００５６７７；  ＷＯ２００６／０６９０６３；  ＵＳ２００３／０２１６３２５などに記載の方法；  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法による保護基の導入と除去）によって合成することができる。
【００４２】
化合物（Ｉ）は、化合物（２）のＰＧを除去することにより製造することができる。
ＰＧで表される保護基の除去は、自体公知の方法、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法などに従って行うことができる。具体的には、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミド）を使用する方法や還元法などを用いて保護基を除去することができる。
【００４３】
反応式１における原料化合物である化合物（１１）は、例えば、以下の反応式２で示される方法またはこれに準じた方法によって製造することができる。
【００４４】
（反応式２）
【００４５】
【化３】
2012176934.tif 000004
【００４６】
［式中、ＰＧｂはアルコールの保護基を、Ｘは脱離基を示す。その他の各記号は前記と同意義を示す。］
ＰＧｂで示されるアルコールの保護基としては、前記ＰＧと同様のものが挙げられる。Ｘで示される脱離基としては、例えば、ハロゲン原子（例、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、式−Ｏ−Ｓ（Ｏ）ｋＲａａで表される基、または式−ＯＲａａで表される基［式中、ｋは０、１または２の整数を示し；Ｒａａは、Ｃ１−４アルキル（例、メチル、エチル、プロピル）、ベンジルまたはＣ６−１０アリール（例、フェニル、トリル）を示す。］が挙げられる。
【００４７】
化合物（１８）は、化合物（１９）を、自体公知の還元反応（例えば、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９９９）；ＥＰ１４２８８２４；ＥＰ１５５３０７４；ＵＳ２００３／７８２４９；ＵＳ５０７１８４４；ＵＳ４５３９４１１などに記載の方法）に付し、カルボン酸を１級アルコールに変換することによって製造することができる。
【００４８】
該還元反応は例えば還元剤を用いて行われ、還元剤としては、例えば、ボラン−ジメチルスルフィド錯体、ボラン−テトラヒドロフラン錯体、ボラン−エーテル錯体、ジボラン、水素化アルミニウムリチウムが挙げられる。
還元剤の使用量は、化合物（１９）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
【００４９】
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、エーテル類が挙げられる。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００５０】
化合物（１７）は、化合物（１８）に自体公知の反応（例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法）によって保護基ＰＧｂを導入することによって製造することができる。
【００５１】
化合物（１６）は、化合物（１７）のＰＧを除去することにより製造することができる。
ＰＧで表される保護基の除去は、自体公知の方法、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法に従って行うことができる。具体的には、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミド）などを使用する方法や還元法などを用いて保護基を除去することができる。
【００５２】
化合物（１３）は、化合物（１６）と化合物（１４）を自体公知の反応（例えば、Ｓｙｎｌｅｔｔ，  ２００８，  ５，  ７０２−７０６に記載の方法）に付すことによって製造することができる。
【００５３】
化合物（１４）の使用量は、化合物（１６）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
【００５４】
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミドが挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００５５】
化合物（１３）は、化合物（１６）と化合物（１５）を自体公知の反応（例えば、ＷＯ２００５／５８８７３；ＷＯ２００６／１３４３４１に記載の方法）に付すことによっても製造することができる。
【００５６】
化合物（１５）の使用量は、化合物（１６）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミドが挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００５７】
化合物（１４）および化合物（１５）は市販のものを使用するか、または自体公知の方法（例えば、Ｊ．  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．，  １９９１，  ２８，  １７１５−１７２０；  ＷＯ２００８／８５３０２；  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  １９９５，  １１７，  ９３７５−９３７６；  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９３，  ３６，  ２３００−２３１０；  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，  ２００１，  １２，  ２４２１−２４２５；  ＷＯ２００９／００５６７７；  ＷＯ２００６／０６９０６３；  ＵＳ２００３／０２１６３２５などに記載の方法；  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法による保護基の導入と除去）によって合成することができる。
【００５８】
化合物（１２）は、化合物（１３）のＰＧｂを除去することにより製造することができる。
ＰＧｂで表される保護基の除去は、自体公知の方法、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法に従って行うことができる。具体的には、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミド）を使用する方法や還元法などを用いて保護基を除去することができる。
【００５９】
化合物（１１）は、化合物（１２）を自体公知の反応（例えば、Ｓｙｎｌｅｔｔ，  ２００８，  ５，  ７０２−７０６；Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．，  ２００３，  １３，  ３２４３−３２４６に記載の方法）に付して、１級アルコールを脱離基として活性化し、分子内環化反応することによって製造することができる。
【００６０】
反応式１における製造中間体である化合物（２）は、例えば、以下の反応式３で示される方法またはこれに準じた方法によって製造することもできる。
【００６１】
（反応式３）
【００６２】
【化４】
2012176934.tif 000005
【００６３】
［式中の各記号は前記と同意義を示す。］
【００６４】
化合物（２４）は、化合物（１１）のＰＧを除去することにより製造することができる。
ＰＧで表される保護基の除去は、自体公知の方法、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法などに従って行うことができる。具体的には、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミド）などを使用する方法や還元法などを用いて保護基を除去することができる。
【００６５】
化合物（２３）は、化合物（６）と化合物（２４）とを反応させることにより製造することができる。
化合物（６）の使用量は、化合物（２４）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
該反応は、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、縮合剤の存在下に反応を行うことが望ましい。
縮合剤の使用量は、化合物（２４）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、所望により塩基の存在下で行ってもよい。
塩基の使用量は、化合物（２４）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミドが挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００６６】
また、本反応では、化合物（６）の混合酸無水物を用いてもよい。例えば、まず、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、化合物（６）とクロロ炭酸アルキルを塩基の存在下に反応させた後、化合物（２４）と反応させる。
クロロ炭酸アルキルの使用量は、化合物（６）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
塩基の使用量は、化合物（６）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００６７】
化合物（２２）は、化合物（２３）のＰＧを除去することにより製造することができる。
ＰＧで表される保護基の除去は、自体公知の方法、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ編  （１９８０）に記載の方法などに従って行うことができる。具体的には、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミド）などを使用する方法や還元法などを用いて保護基を除去することができる。
【００６８】
化合物（２１）は、化合物（３）と化合物（２２）とを反応させることにより製造することができる。
化合物（３）の使用量は、化合物（２２）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
該反応は、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、縮合剤の存在下に行うことが望ましい。
縮合剤の使用量は、化合物（２２）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、所望により塩基の存在下で行ってもよい。
塩基の使用量は、化合物（２２）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミドが挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
本反応では、化合物（３）の混合酸無水物を用いてもよい。例えば、まず、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、化合物（３）とクロロ炭酸アルキルを塩基の存在下に反応させた後、化合物（２２）と反応させる。
クロロ炭酸アルキルの使用量は、化合物（３）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
塩基の使用量は、化合物（３）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００６９】
化合物（２０）は化合物（２１）のエステル基をカルボン酸に変換することにより製造することができる。
具体的には、化合物（２０）は、化合物（２１）に水酸化アルカリ金属または水酸化アルカリ土類金属を反応させることにより製造することができる。
水酸化アルカリ金属または水酸化アルカリ土類金属の使用量は、化合物（２１）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミド、水が挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００７０】
化合物（２）は、化合物（２０）と化合物（９）とを反応させることにより製造することができる。化合物（９）の使用量は、化合物（２０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
該反応は、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、縮合剤の存在下に反応を行うことが望ましい。
縮合剤の使用量は、化合物（２０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、所望により塩基の存在下で行ってもよい。
塩基の使用量は、化合物（２０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中で行うことが好ましい。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、アルコール類、エーテル類、エステル類、ハロゲン化炭化水素類、炭化水素類、アミド類、ニトリル類、スルホキシド類、スルホラン、ヘキサメチルホスホルアミドが挙げられる。これらの溶媒は、２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００７１】
また、本反応では、化合物（２０）の混合酸無水物を用いてもよい。例えば、まず、反応式１における化合物（８）の合成と同様の方法で、化合物（２０）とクロロ炭酸アルキルを塩基の存在下に反応させた後、化合物（９）と反応させる。
クロロ炭酸アルキルの使用量は、化合物（２０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
塩基の使用量は、化合物（２０）１当量に対して、通常１〜１０００当量、好ましくは１〜２０当量である。
本反応の反応温度は、通常、−７８℃〜２００℃である。反応時間は、通常、０．５〜１００時間である。
【００７２】
化合物（Ｉ）は、結晶であってもよく、結晶形が単一であっても結晶形混合物であっても化合物（Ｉ）に包含される。結晶は、自体公知の結晶化法を適用して、結晶化することによって製造することができる。
また、化合物（Ｉ）は、薬学的に許容され得る共結晶または共結晶塩であってもよい。ここで、共結晶または共結晶塩とは、各々が異なる物理的性質（例えば、構造、融点、融解熱、吸湿性および安定性）を持つ、室温で二種またはそれ以上の独特な固体から構成される結晶性物質を意味する。共結晶または共結晶塩は、自体公知の共結晶化法に従い製造することができる。
化合物（Ｉ）は、水和物であっても、非水和物であっても、溶媒和物であっても、無溶媒和物であってもよい。
化合物（Ｉ）はまた、同位元素（例、３Ｈ，１４Ｃ，３５Ｓ，１２５Ｉ，１１Ｃ，１８Ｆ）等で標識された化合物であってもよい。
さらに、化合物（Ｉ）は、重水素変換体であってもよい。
【００７３】
化合物（Ｉ）は、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により化合物（Ｉ）に変換する化合物（本明細書中、「化合物（Ｉ）のプロドラッグ」と称する場合がある）、即ち酵素的に酸化、還元、加水分解等を起こして化合物（Ｉ）に変化する化合物、胃酸等により加水分解等を起こして化合物（Ｉ）に変化する化合物であってもよい。化合物（Ｉ）のプロドラッグの例としては、化合物（Ｉ）のアミノがアシル化、アルキル化、リン酸化された化合物（例、化合物（Ｉ）のアミノがエイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化、ｔｅｒｔ−ブチル化された化合物）；等が挙げられる。これらの化合物は自体公知の方法によって化合物（Ｉ）から製造することができる。
また、化合物（Ｉ）のプロドラッグは、広川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計１６３頁から１９８頁に記載されているような生理的条件で化合物（Ｉ）に変化するものであってもよい。
【００７４】
化合物（Ｉ）またはそのプロドラッグ（本明細書中、「本発明化合物」と略記することがある）は、ＩＡＰ拮抗（阻害）活性を有し、ＩＡＰの拮抗薬、癌の予防または治療剤、癌の増殖阻害剤、癌の転移抑制剤、アポトーシス誘導促進剤等として有用である。
また、本発明化合物は、哺乳動物において、後述するＩＡＰ関連疾患の予防または治療に用いることができる。
本発明化合物は膜透過性に優れており、生体内において、低投与量で薬効（癌の予防または治療効果、癌の増殖阻害、癌の転移抑制）を発揮する。
【００７５】
本発明化合物は、ＩＡＰ、特に、ＸＩＡＰ（X chromosome linked Inhibitor of Apoptosis Protein）、ｃＩＡＰ１（cellular Inhibitor of Apoptosis Protein １）、ｃＩＡＰ２（cellular Inhibitor of Apoptosis Protein 2）等に対し強い拮抗活性を示す。
本発明化合物は、式（Ｉ）中に示される４箇所の立体配置を有することにより、優れたＩＡＰ拮抗活性、優れたアポトーシス誘導活性、優れた癌治療効果を有する。
また、本発明化合物は、薬効発現、薬物動態（吸収性、分布、代謝、排泄等）、溶解性（水溶性等）、他の医薬品との相互作用、安全性（急性毒性、慢性毒性、遺伝毒性、生殖毒性、心臓毒性、癌原性等の毒性が低い）、安定性（化学的安定性、酵素に対する安定性等）等の点でも優れているので、医薬として有用である。
【００７６】
従って、本発明化合物は、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、サル、ヒト）に対して、安全に投与することができる。
本発明化合物は、ＩＡＰ関連疾患、例えば、癌［例えば、大腸癌（例、家族性大腸癌、遺伝性非ポリポーシス大腸癌、消化管間質腫瘍）、肺癌（例、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、悪性中皮腫）、中皮腫、膵臓癌（例、膵管癌）、胃癌（例、乳頭腺癌、粘液性腺癌、腺扁平上皮癌）、乳癌（例、浸潤性乳管癌、非浸潤性乳管癌、炎症性乳癌）、卵巣癌（例、上皮性卵巣癌、性腺外胚細胞腫瘍、卵巣性胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍）、前立腺癌（例、ホルモン依存性前立腺癌、ホルモン非依存性前立腺癌）、肝臓癌（例、原発性肝癌、肝外胆管癌）、甲状腺癌（例、甲状腺髄様癌）、腎臓癌（例、腎細胞癌、腎盂と尿管の移行上皮癌）、子宮癌、脳腫瘍（例、松果体星細胞腫瘍、毛様細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、退形成性星細胞腫）、黒色腫（例、メラノーマ）、肉腫、膀胱癌、血液癌（例、多発性骨髄腫）］の予防または治療剤；癌の増殖阻害剤；癌の転移抑制剤；アポトーシス促進剤；等の医薬として用いられる。
特に、本発明化合物は、乳癌、卵巣癌、膵臓癌、肺癌、血液癌等に対して有効である。
【００７７】
本発明化合物は、そのままあるいは薬理学的に許容される担体を配合し、医薬（本明細書中、「本発明の医薬」と称することがある）として、経口的または非経口的に投与することができる。
本発明化合物を経口投与する場合の本発明の医薬の剤形としては、例えば、錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング錠、舌下錠、バッカル錠、口腔内速崩錠を含む）、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤（ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤を含む）、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、フィルム剤（例、口腔粘膜貼付フィルム）が挙げられる。また、本発明化合物を非経口投与する場合の本発明の医薬の剤形としては、例えば、注射剤（静脈注射剤、皮下注射剤、皮内注射剤、筋肉注射剤、点滴注射剤を含む）、注入剤、点滴剤、坐剤、経皮剤（イオントフォレシス経皮剤を含む）が挙げられる。また、本発明化合物を適当な基剤（例、酪酸の重合体、グリコール酸の重合体、酪酸−グリコール酸の共重合体、酪酸の重合体とグリコール酸の重合体との混合物、ポリグリセロール脂肪酸エステル）と組み合わせて徐放性製剤とすることも有効である。
【００７８】
上記の各種剤形を製造する方法としては、製剤技術分野で一般的に用いられている公知の製造方法（例えば、日本薬局方に記載の方法）を適用することができる。また、上記の剤形を製造する場合には、必要に応じて、その剤形を製造する際に製剤分野において通常用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤等の添加剤を適宜、適量用いることができる。
例えば、錠剤を製造する場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を用いることができ、丸剤及び顆粒剤を製造する場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤等を用いることができる。また、散剤及びカプセル剤を製造する場合には賦形剤等を、シロップ剤を製造する場合には甘味剤等を、乳剤または懸濁剤を製造する場合には懸濁化剤、界面活性剤、乳化剤等を用いることができる。
【００７９】
賦形剤の例としては、乳糖、白糖、ブドウ糖、デンプン、蔗糖、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウムが挙げられる。
結合剤の例としては、５乃至１０重量％デンプンのり液、１０乃至２０重量％アラビアゴム液またはゼラチン液、１乃至５重量％トラガント液、カルボキシメチルセルロース液、アルギン酸ナトリウム液、グリセリンが挙げられる。
崩壊剤の例としては、デンプン、炭酸カルシウムが挙げられる。
滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、精製タルクが挙げられる。
甘味剤の例としては、ブドウ糖、果糖、転化糖、ソルビトール、キシリトール、グリセリン、単シロップが挙げられる。
界面活性剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ソルビタンモノ脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシル４０が挙げられる。
懸濁化剤の例としては、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ベントナイトが挙げられる。
乳化剤の例としては、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ポリソルベート８０が挙げられる。
【００８０】
更に、上記の剤形を製造する場合には、所望により、製剤技術分野において通常用いられる着色剤、保存剤、芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤等を適宜、適量用いることができる。
【００８１】
注射剤は、例えば、本発明化合物を無菌の水性液もしくは油性液に溶解、懸濁または乳化することによって調製される。ここで、水性液としては、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウム）等が挙げられ、適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例えば、エタノール）、ポリアルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０、ＨＣＯ−５０）と併用してもよい。油性液としては、ゴマ油、大豆油等が挙げられ、溶解補助剤として、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等と併用してもよい。また、緩衝剤（例えば、リン酸緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカイン）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコール）、保存剤（例えば、ベンジルアルコール、フェノール）等と配合してもよい。調製された注射液は、通常、アンプルに充填される。
【００８２】
本発明の医薬（具体的には前記した各種剤形）中の本発明化合物の含有量は、製剤の形態に応じて相違するが、通常、製剤全体に対して約０．０１乃至９９重量％、好ましくは約２乃至８５重量％、さらに好ましくは約５乃至７０重量％である。
【００８３】
本発明の医薬中の薬理学的に許容される担体（例えば、前記した添加剤）の含有量は、製剤の形態に応じて相違するが、通常、製剤全体に対して約１乃至９９．９重量％、好ましくは約１０乃至９０重量％である。
【００８４】
本発明化合物は、哺乳動物に対し投与する場合、その１日の投与量は患者の状態や体重、化合物の種類、投与経路等によって異なるが、例えば、本発明化合物を癌治療目的で患者に経口投与する場合には、成人（体重約６０ｋｇ）１日当りの投与量は、約１乃至１００００ｍｇ、好ましくは約３０乃至５０００ｍｇ、さらに好ましくは約１００乃至３０００ｍｇであり、この投与量を１回または２乃至３回に分けて投与することができる。
【００８５】
本発明化合物を癌目的で患者に非経口的に投与する場合は、通常、液剤（例えば、注射剤）の形で投与する。その１回投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法等によっても異なるが、例えば、注射剤の形にして、通常体重１ｋｇあたり約０．０１乃至約４０ｍｇ、好ましくは約０．０５乃至約２０ｍｇ、より好ましくは約０．１乃至約５ｍｇを静脈注射または点滴により投与するのが好都合である。
【００８６】
本発明化合物は、他の薬物と併用して用いることができる。具体的には、本発明化合物は、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤または細胞増殖因子ならびにその受容体の作用を阻害する薬剤等の薬物と併用して用いることができる。以下、本発明化合物と併用し得る薬物を「併用薬物」と略記する。
【００８７】
「ホルモン療法剤」としては、例えば、ホスフェストロール、ジエチルスチルベストロール、クロロトリアニセン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、ダナゾール、アリルエストレノール、ゲストリノン、メパルトリシン、ラロキシフェン、オルメロキシフェン、レボルメロキシフェン、抗エストロゲン（例、クエン酸タモキシフェン、クエン酸トレミフェン）、ピル製剤、メピチオスタン、テストロラクトン、アミノグルテチイミド、ＬＨ−ＲＨアゴニスト（例、酢酸ゴセレリン、ブセレリン、酢酸リュープロレリン）、ドロロキシフェン、エピチオスタノール、スルホン酸エチニルエストラジオール、アロマターゼ阻害薬（例、塩酸ファドロゾール、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、フォルメスタン）、抗アンドロゲン（例、フルタミド、ビカルタミド、ニルタミド）、５α−レダクターゼ阻害薬（例、フィナステリド、エプリステリド）、副腎皮質ホルモン系薬剤（例、デキサメタゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、トリアムシノロン）、アンドロゲン合成阻害薬（例、アビラテロン）、レチノイドおよびレチノイドの代謝を遅らせる薬剤（例、リアロゾール）、甲状腺ホルモン、およびそれらのＤＤＳ（Drug Delivery System）製剤が用いられる。
【００８８】
「化学療法剤」としては、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗癌性抗生物質、植物由来抗癌剤が用いられる。
【００８９】
「アルキル化剤」としては、例えば、ナイトロジェンマスタード、塩酸ナイトロジェンマスタード−Ｎ−オキシド、クロラムブチル、シクロフォスファミド、イホスファミド、チオテパ、カルボコン、トシル酸インプロスルファン、ブスルファン、塩酸ニムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ダカルバジン、ラニムスチン、リン酸エストラムスチンナトリウム、トリエチレンメラミン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、ピポブロマン、エトグルシド、カルボプラチン、シスプラチン、ミボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、アルトレタミン、アンバムスチン、塩酸ジブロスピジウム、フォテムスチン、プレドニムスチン、プミテパ、リボムスチン、テモゾロミド、トレオスルファン、トロフォスファミド、ジノスタチンスチマラマー、アドゼレシン、システムスチン、ビゼレシン、およびそれらのＤＤＳ（Drug Delivery System）製剤が用いられる。
【００９０】
「代謝拮抗剤」としては、例えば、メルカプトプリン、６−メルカプトプリンリボシド、チオイノシン、メトトレキサート、ペメトレキセド、エノシタビン、シタラビン、シタラビンオクフォスファート、塩酸アンシタビン、５−ＦＵ系薬剤（例、フルオロウラシル、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフール、カペシタビン）、アミノプテリン、ネルザラビン、ロイコボリンカルシウム、タブロイド、ブトシン、フォリネイトカルシウム、レボフォリネイトカルシウム、クラドリビン、エミテフール、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシカルバミド、ペントスタチン、ピリトレキシム、イドキシウリジン、ミトグアゾン、チアゾフリン、アンバムスチン、ベンダムスチン、およびそれらのＤＤＳ製剤が用いられる。
【００９１】
「抗癌性抗生物質」としては、例えば、アクチノマイシンＤ、アクチノマイシンＣ、マイトマイシンＣ、クロモマイシンＡ３、塩酸ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸エピルビシン、ネオカルチノスタチン、ミスラマイシン、ザルコマイシン、カルチノフィリン、ミトタン、塩酸ゾルビシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸イダルビシン、およびそれらのＤＤＳ製剤が用いられる。
【００９２】
「植物由来抗癌剤」としては、例えば、エトポシド、リン酸エトポシド、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、テニポシド、パクリタキセル、ドセタクセル、ビノレルビン、およびそれらのＤＤＳ製剤が用いられる。
【００９３】
「免疫療法剤」としては、例えば、ピシバニール、クレスチン、シゾフィラン、レンチナン、ウベニメクス、インターフェロン、インターロイキン、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポイエチン、リンホトキシン、ＢＣＧワクチン、コリネバクテリウムパルブム、レバミゾール、ポリサッカライドＫ、プロコダゾール、抗ＣＴＬＡ４抗体が用いられる。
【００９４】
「細胞増殖因子ならびにその受容体の作用を阻害する薬剤」としては、例えば、ＥＧＦ阻害剤、ＴＧＦα阻害剤、ハーレギュリン阻害剤、インシュリン阻害剤、ＩＧＦ阻害剤、ＦＧＦ阻害剤、ＫＧＦ阻害剤、ＣＳＦ阻害剤、ＥＰＯ阻害剤、ＩＬ−２阻害剤、ＮＧＦ阻害剤、ＰＤＧＦ阻害剤、ＴＧＦβ阻害剤、ＨＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、アンジオポエチン阻害剤、ＥＧＦ受容体阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤、ＨＥＲ４阻害剤、インシュリン受容体阻害剤、ＩＧＦ−１受容体阻害剤、ＩＧＦ−２受容体阻害剤、ＦＧＦ受容体−１阻害剤、ＦＧＦ受容体−２阻害剤、ＦＧＦ受容体−３阻害剤、ＦＧＦ受容体−４阻害剤、ＶＥＧＦ受容体阻害剤、Ｔｉｅ−２阻害剤、ＰＤＧＦ受容体阻害剤、Ａｂｌ阻害剤、Ｒａｆ阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ｃ−Ｋｉｔ阻害剤、Ｓｒｃ阻害剤、ＰＫＣ阻害剤、Ｔｒｋ阻害剤、Ｒｅｔ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、Ａｕｒｏｒａ阻害剤、ＰＬＫ阻害剤、ＭＥＫ（ＭＥＫ１／２）阻害剤、ＭＥＴ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤、Ａｋｔ阻害剤、ＥＲＫ阻害剤等が用いられる。このような薬剤としては、より具体的には、抗ＶＥＧＦ抗体（例、Bevacizumab）、抗ＨＥＲ２抗体（例、Trastuzumab、Pertuzumab）、抗ＥＧＦＲ抗体（例、Cetuximab、Panitumumab、Matuzumab、Nimotuzumab）、抗ＶＥＧＦＲ抗体、抗ＨＧＦ抗体、Imatinib mesylate、Erlotinib、Gefitinib、Sorafenib、Sunitinib、Dasatinib、Lapatinib、Vatalanib、4-(4-フルオロ-2-メチル-1H-インドール-5-イルオキシ)-6-メトキシ-7-[3-(1-ピロリジニル)プロポキシ]キナゾリン（AZD-2171）、Lestaurtinib、Pazopanib、Canertinib、Tandutinib、3-(4-ブロモ-2,6-ジフルオロベンジルオキシ)-5-[3-[4-(1-ピロリジニル)ブチル]ウレイド]イソチアゾール-4-カルボキサミド（CP-547632）、Axitinib、N-(3,3-ジメチル-2,3-ジヒドロ-1H-インドール-6-イル)-2-(ピリジン-4-イルメチルアミノ)ピリジン-3-カルボキサミド（AMG-706）、Nilotinib、6-[4-(4-エチルピペラジン-1-イルメチル)フェニル]-N-[1(R)-フェニルエチル]-7H-ピロロ[2,3-d]ピリミジン-4-アミン（AEE-788）、Vandetanib、Temsirolimus、Everolimus、Enzastaurin、N-[4-[4-(4-メチルピペラジン-1-イル)-6-(3-メチル-1H-ピラゾール-5-イルアミノ)ピリミジン-2-イルスルファニル]フェニル]シクロプロパンカルボキサミド（VX-680）、リン酸  2-[N-[3-[4-[5-[N-(3-フルオロフェニル)カルバモイルメチル]-1H-ピラゾール-3-イルアミノ]キナゾリン-7-イルオキシ]プロピル]-N-エチルアミノ]エチル  エステル（AZD-1152）、4-[9-クロロ-7-(2,6-ジフルオロフェニル)-5H-ピリミド[5,4-d][2]ベンズアゼピン-2-イルアミノ]安息香酸（MLN-8054）、N-[2-メトキシ-5-[(E)-2-(2,4,6-トリメトキシフェニル)ビニルスルホニルメチル]フェニル]グリシン  ナトリウム塩（ON-1910Na）、4-[8-シクロペンチル-7(R)-エチル-5-メチル-6-オキソ-5,6,7,8-テトラヒドロプテリジン-2-イルアミノ]-3-メトキシ-N-(1-メチルピペリジン-4-イル)ベンズアミド（BI-2536）、5-(4-ブロモ-2-クロロフェニルアミノ)-4-フルオロ-1-メチル-1H-ベンズイミダゾール-6-カルボヒドロキサム酸  2-ヒドロキシエチルエステル（AZD-6244）、N-[2(R),3-ジヒドロキシプロポキシ]-3,4-ジフルオロ-2-(2-フルオロ-4-ヨードフェニルアミノ)ベンズアミド（PD-0325901）、エベロリムス（RAD001）が用いられる。
【００９５】
上記の薬物の他に、Ｌ−アスパラギナーゼ、アセグラトン、塩酸プロカルバジン、プロトポルフィリン・コバルト錯塩、水銀ヘマトポルフィリン・ナトリウム、トポイソメラーゼＩ阻害薬（例、イリノテカン、トポテカン）、トポイソメラーゼＩＩ阻害薬（例、ソブゾキサン）、分化誘導剤（例、レチノイド、ビタミンＤ類）、他の血管新生阻害薬（例、フマギリン、さめ抽出物、ＣＯＸ−２阻害薬）、α−ブロッカー（例、塩酸タムスロシン）、ビスホスホン酸（例、パミドロネート、ゾレドロネート）、サリドマイド、５−アザシチジン、デシタビン、プロテアソーム阻害薬（例、ボルテゾミブ）、アポトーシス誘導剤（例、TRAIL受容体作動薬、抗TRAIL抗体、Bcl-2阻害薬）、抗腫瘍性抗体（例、抗ＣＤ２０抗体）、毒素標識抗体等も併用薬物として用いることができる。
【００９６】
本発明化合物と併用薬物とを組み合わせることにより、
(1) 本発明化合物または併用薬物を単独で投与する場合に比べて、その投与量を軽減することができる；
(2) 患者の症状（軽症、重症等）に応じて、本発明化合物と併用する薬物を選択することができる；
(3) 治療期間を長く設定することができる；
(4) 治療効果の持続を図ることができる；
(5) 本発明化合物と併用薬物とを併用することにより、相乗効果が得られる；等の優れた効果を得ることができる。
【００９７】
本発明化合物と併用薬物を併用する場合、本発明化合物と併用薬物の投与時期は限定されず、本発明化合物と併用薬物とを、投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。時間差をおいて投与する場合、時間差は投与する有効成分、剤形、投与方法により異なるが、例えば、併用薬物を先に投与する場合、併用薬物を投与した後１分ないし３日以内、好ましくは１０分ないし１日以内、より好ましくは１５分ないし１時間以内に本発明化合物を投与する方法が挙げられる。本発明化合物を先に投与する場合、本発明化合物を投与した後、１分ないし１日以内、好ましくは１０分ないし６時間以内、より好ましくは１５分から１時間以内に併用薬物を投与する方法が挙げられる。
【００９８】
本発明化合物と併用薬物を併用する場合の投与形態としては、
(1) 本発明化合物と併用薬物とを同時に製剤化して得られる単一の製剤の投与；
(2) 本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与；
(3) 本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与；
(4) 本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与；
(5) 本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与（例えば、本発明化合物、次いで併用薬物の順序での投与、あるいは逆の順序での投与）；
等が挙げられる。
併用薬物の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として投与対象、投与ルート、疾患、組み合わせ等により適宜選択することができる。また、本発明化合物と併用薬物との配合比は、投与対象、投与ルート、対象疾患、症状、組み合わせ等により適宜選択することができる。例えば、投与対象がヒトである場合、本発明化合物１重量部に対し、併用薬物を０．０１乃至１００重量部用いればよい。
【００９９】
さらに、本発明化合物は、非薬剤療法と併用して用いることができる。具体的には、本発明化合物は、例えば、（１）手術；（２）アンジオテンシンＩＩ等を用いる昇圧化学療法；（３）遺伝子療法；（４）温熱療法；（５）凍結療法；（６）レーザー焼灼法；（７）放射線療法；等の非薬剤療法と組み合わせることもできる。
【０１００】
例えば、本発明化合物を前記した非薬剤療法の前または後に使用することによって、耐性発現の阻止、無病期（Disease-Free Survival）の延長、癌転移あるいは再発の抑制、延命等の効果が得られる。
【０１０１】
また、本発明化合物による治療と、支持療法〔（i）各種感染病の併発に対する抗生物質（例、パンスポリン等のβ−ラクタム系、クラリスロマイシン等のマクロライド系）の投与；（ii）栄養障害改善のための高カロリー輸液、アミノ酸製剤、総合ビタミン剤の投与；（iii）疼痛緩和のためのモルヒネ投与；（iv）悪心、嘔吐、食欲不振、下痢、白血球減少、血小板減少、ヘモグロビン濃度低下、脱毛、肝障害、腎障害、ＤＩＣ、発熱等のような副作用を改善する薬剤の投与；および（v）癌の多剤耐性を抑制するための薬剤の投与；等〕を組み合わせることもできる。
【０１０２】
前記した非薬剤療法の前または後に、本発明化合物を経口投与（徐放性を含む）、静脈内投与（ボーラス(bolus)、輸液(infusion)、包接体を含む）、皮下投与および筋肉注射（ボーラス(bolus)、輸液(infusion)、徐放性を含む）、経皮投与、腫瘍内投与、近位投与等によって投与するのが好ましい。
【０１０３】
前記した非薬剤療法の前に本発明化合物を投与する場合、例えば、前記した非薬剤療法の約３０分乃至２４時間前に１回投与することもできるし、あるいは前記した非薬剤療法の約３ヶ月乃至６ヶ月前に１乃至３サイクルに分けて投与することもできる。このように、前記した非薬剤療法の前に本発明化合物または本発明の併用剤を投与することにより、例えば、癌組織を縮小させることができるので、前記した非薬剤療法がしやすくなる。
【０１０４】
前記した非薬剤療法の後に本発明化合物を投与する場合、前記した非薬剤療法の約３０分乃至２４時間後に、例えば、数週間乃至３ヶ月単位で反復投与することができる。このように、前記した非薬剤療法の後に本発明化合物を投与することにより、前記した非薬剤療法の効果を高めることができる。
【実施例】
【０１０５】
以下に、実施例、製剤例および試験例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらにより限定されるものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
以下の実施例中の「室温」は通常約１０℃ないし約３５℃を示す。混合溶媒において示した比は、特に断らない限り容量比を示す。％は、特に断らない限り重量％を示す。
混合溶媒の比は、特に断らない限り容量比を示す。
【０１０６】
本願明細書の配列表の配列番号は、以下の配列を示す。
（配列番号：１）試験例１で使用したプライマー
（配列番号：２）試験例１で使用したプライマー
（配列番号：３）開始コドン、His x 6 及びBam HI認識配列２を連結した塩基配列
（配列番号：４）試験例３で使用したSmac N末端ペプチド
【０１０７】
以下の実施例中の略号は、本技術分野で現在通常用いられている用例に従うものであり、例えば、次のような意味である。
ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴スペクトル
ＭＳ：マススペクトル
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
【０１０８】
１Ｈ  ＮＭＲはフーリエ変換型ＮＭＲで測定した。解析にはＡＣＤ／ＳｐｅｃＭａｎａｇｅｒ（商品名）等を用いた。水酸基やアミノ基等のプロトンが非常に緩やかなピークについては記載していない。
ＭＳは、ＬＣ／ＭＳにより測定した。イオン化法としては、ＥＳＩ法、または、ＡＰＣＩ法を用いた。データは実測値（ｆｏｕｎｄ）を記載した。通常、分子イオンピークが観測されるが、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基（−Ｂｏｃ）を有する化合物の場合、フラグメントイオンとして、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基あるいはｔｅｒｔ−ブチル基が脱離したピークが観測されることもある。また、水酸基（−ＯＨ）を有する化合物の場合、フラグメントイオンとして、Ｈ２Ｏが脱離したピークが観測されることもある。塩の場合は、通常、フリー体の分子イオンピークもしくはフラグメントイオンピークが観測される。
【０１０９】
実施例１
（３Ｓ，１０ａＳ）−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１１０】
Ａ）  （２Ｓ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメタノールの製造
【０１１１】
（２Ｓ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸（１９．５  ｇ）のテトラヒドロフラン（１５０  ｍＬ）溶液に氷冷下、ボラン−ジメチルスルフィド錯体の１０Ｍテトラヒドロフラン溶液（３５．９  ｍＬ）を滴下し、６０  ℃で１６時間撹拌した。反応混合物を０℃まで冷却した後、メタノール（５０  ｍＬ）、６Ｍ塩酸（５０  ｍＬ）を加え、５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣を８Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（５０  ｍＬ）で塩基性にした後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１２．８  ｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  １５０．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  １５０．１
【０１１２】
Ｂ）  （２Ｓ）−２−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドールの製造
【０１１３】
（２Ｓ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イルメタノール（１２．８  ｇ）、イミダゾール（６．４２  ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００  ｍＬ）溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジメチルシラン（１４．２２  ｇ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２０．６  ｇ）を無色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ２６４．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ２６４．２
【０１１４】
Ｃ）  メチル  Ｎ−ベンジル−３−［（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−１−イル］−Ｌ−アラニナートの製造
【０１１５】
（２Ｓ）−２−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール（２８．２  ｇ）、メチル  （４Ｓ）−３−ベンジル−１，２，３−オキサチアゾリジン−４−カルボキシラート  ２，２−ジオキシド（３４．８  ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（２８０  ｍＬ）溶液を室温で１８時間撹拌した。６Ｍ塩酸（５３．５  ｍＬ）を氷冷下、反応混合物に加え、室温で１．５時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）とシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１４．９  ｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３４１．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ３４１．３
【０１１６】
Ｄ）  メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−２−ベンジル−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキシラートの製造
【０１１７】
メチル  Ｎ−ベンジル−３−［（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール−１−イル］−Ｌ−アラニナート（１４．９  ｇ）、ヨウ素（１６．６  ｇ）、トリフェニルホスフィン（１７．２  ｇ）、トリエチルアミン（１５．２  ｍＬ）のトルエン／アセトニトリル（１：１）混合溶液（３００  ｍＬ）を８０℃で２時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１２．２  ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３２３．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ３２３．３
【０１１８】
Ｅ）  ２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラートの製造
【０１１９】
メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−２−ベンジル−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキシラート（９．００  ｇ）、２０％水酸化パラジウム−炭素（３．９２  ｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（９０  ｍＬ）の混合物を１気圧の水素雰囲気下、５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣と２０％水酸化パラジウム−炭素（３．９２  ｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（９０  ｍＬ）の混合物を１気圧の水素雰囲気下、５０  ℃で２時間撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製した。得られた残渣と２０％水酸化パラジウム−炭素（３．９２  ｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（９０  ｍＬ）の混合物を３気圧の水素雰囲気下、室温で２時間撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（９０  ｍＬ）、テトラヒドロフラン（９０  ｍＬ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（６．０９  ｇ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物にジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（０．６１  ｇ）を追加し、室温で３０分間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４．３７  ｇ）を無色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３３３．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ３３３．３
【０１２０】
Ｆ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０１２１】
２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（５８０  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（１８３  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（７．５  ｍＬ）を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を０  ℃に冷却した後に１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−アミン塩酸塩（４８５  ｍｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２５９  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（１．２２  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＮ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ’−エチルカルボジイミド（５４０  ｍｇ）を加え、１８時間撹拌した。反応混合物にさらに、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２３５  ｍｇ）、Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−Ｎ’−エチルカルボジイミド（４０５  ｍｇ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４２５  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４５０．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４５０．４
【０１２２】
Ｇ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１２３】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（４１０  ｍｇ）のメタノール（２  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（８．０  ｍＬ）を加え、２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液を、（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（シクロヘキシル）エタン酸（２３５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．７２４  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（６３０  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に氷冷下加え、室温で１５時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール（２．５  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（５．０  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣とＮ−エチルジイソプロピルアミン（１．４５  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液を、（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１９８  ｍｇ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（６３１  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４５２  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６８８．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６８８．４
【０１２４】
Ｈ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１２５】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマート（２６９  ｍｇ）の酢酸エチル（２．５  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（５．０  ｍＬ）を加え、２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（８９  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５８８．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５８８．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.48-1.74 (16H, m), 1.75-2.24 (7H, m), 2.64-3.55 (4H, m), 3.58-5.13 (8H, m), 6.42-7.28 (8H, m), 7.46-7.85 (1H, m), 8.30-8.92 (1H, m).
【０１２６】
実施例２
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１２７】
Ａ）  ２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラートの製造
【０１２８】
実施例１−Ｅ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（１．９２  ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０  ｍＬ）溶液に氷冷下、Ｎ−クロロスクシンイミド（７７１  ｍｇ）を加え、５０  ℃で１６時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（８００  ｍｇ）を淡黄色油状物質として、位置異性体である２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（５００  ｍｇ）を黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３６７．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ３６７．２
【０１２９】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０１３０】
２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（４５６  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（１３０  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（７．５  ｍＬ）を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−アミン塩酸塩（２００  ｍｇ）、のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．６２９  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（４７２  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４４５  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５２０．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５２０．２
【０１３１】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩の製造
【０１３２】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（４４５  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（４．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：３）混合溶液（４．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮して標題化合物（４１８  ｍｇ）を淡赤色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４２０．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４２０．２
【０１３３】
Ｄ）  ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマートの製造
【０１３４】
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（２２１  ｍｇ）、（２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸（１７６  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．３９１  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２０５  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２５５  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７２９．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７２９．３
【０１３５】
Ｅ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１３６】
ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマート（２５１  ｍｇ）、２０％水酸化パラジウム−炭素（５７  ｍｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（１６  ｍＬ）の混合物を１気圧の水素雰囲気下、２時間室温で撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（９０  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．３０  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１５７  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２７３  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７９４．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７９４．４
【０１３７】
Ｆ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１３８】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（２７３  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（８．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（５００  ｍｇ）を加え、室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標題化合物（１６１  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６９４．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６９４．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.62-1.50 (8H, m), 1.55-2.22 (12H, m), 2.63 -2.86 (1H, m), 2.97-3.29 (2H, m), 3.34-3.51 (1H, m), 3.60-4.41 (6H, m), 4.46-4.60 (1H, m), 4.82 (1H, t, J = 8.8 Hz), 4.91-5.06 (1H, m), 6.40-7.17 (5H, m), 7.69-7.89 (1H, m), 8.37-8.81 (1H, m).
【０１３９】
実施例３
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１４０】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバマートの製造
【０１４１】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ，２Ｓ）−２−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバマート（５．４５  ｇ）のテトラヒドロフラン（７０  ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（８７４  ｍｇ，  ６０％  Ｗｔ）を氷冷下で加え、１５分間撹拌した。この混合物にヨードエタン（１．７６２  ｍＬ）を氷冷下で加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２．６２  ｇ）を白色固体として得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.08-1.18 (3H, m), 1.43 (9H, s), 2.68 (1H, dd, J=15.8, 7.1 Hz), 3.20 (1H, dd, J=15.7, 7.2 Hz), 3.49-3.64 (2H, m), 4.07 (1H, q, J=7.1 Hz), 4.74-4.89 (1H, m), 7.05-7.13 (1H, m), 7.14-7.24 (3H, m), 7.35 (1H, d, J=8.7 Hz).
【０１４２】
Ｂ）  （１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−アミン塩酸塩の製造
【０１４３】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバマート（２．６２  ｇ）の酢酸エチル（１０  ｍＬ）溶液に４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（１０  ｍＬ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、生じた沈殿物をろ取し、減圧下で乾燥して、標題化合物（２．００  ｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  １７８．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  １７８．２
【０１４４】
Ｃ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０１４５】
実施例２−Ａ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（２１２  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（６０．６  ｍｇ）のテトラヒドロフラン（６  ｍＬ）／水（３  ｍＬ）の混合溶液を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物に１Ｍ塩酸（１．３  ｍＬ）を加え、減圧下濃縮した。残渣と（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−アミン塩酸塩（１３７  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３３１  ｍｇ）とＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．４０５  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２３８  ｍｇ）を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５１２．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５１２．３
【０１４６】
Ｄ）  ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマートの製造
【０１４７】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（２３０  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮して、（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（２１８  ｍｇ）を得た。得られた（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（１０９  ｍｇ）、（２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸（１１０  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１２８  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．１９６  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１６０  ｍｇ）を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７２１．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７２１．４
【０１４８】
Ｅ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１４９】
ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマート（１６０  ｍｇ）、２０％水酸化パラジウム−炭素（４０  ｍｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（１０  ｍＬ）の混合物を１気圧の水素雰囲気下、２時間室温で撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（７２．１  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１２６  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．１９３  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１４５  ｍｇ）を黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７８６．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７８６．４
【０１５０】
Ｆ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１５１】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（１４５  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（２００  ｍｇ）を加え室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標題化合物（６５  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６８６．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６８６．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.68-0.93 (5H, m), 1.12 (3H, t, J=6.9 Hz), 1.21-1.58 (6H, m), 1.59-2.21 (9H, m), 2.67-3.29 (5H, m), 3.41-3.72 (3H, m), 3.75-4.32 (3H, m), 4.32-5.19 (3H, m), 6.56-7.62 (7H, m), 7.71-7.94 (1H, m), 8.43-8.72 (1H, m).
【０１５２】
実施例４
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１５３】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１５４】
実施例３−Ｃ）で合成したｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（２３０  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮して、（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（２１８  ｍｇ）を得た。得られた（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（１０９  ｍｇ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（７８  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１２８  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．１９６  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をメタノール（１．２５  ｍＬ）に溶解し、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．５  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。得られた残渣、（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（５４．０  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．３９４  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１７２  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１２０  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７２４．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７２４．４
【０１５５】
Ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１５６】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（１２０  ｍｇ）のメタノール溶液（０．５  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（１．５  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１(商品名)（１  ｇ）を加えた。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから結晶化させて標題化合物（３９  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６２４．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６２４．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.75 (3H, t, J = 7.5 Hz), 0.95 (9H, s), 1.14 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.46 (2H, m), 1.85-2.09 (4H, m), 2.65-2.87 (2H, m), 3.04-3.45 (4H, m), 3.46-4.02 (5H, m), 4.09 (1H, q, J = 7.1 Hz), 4.24 (1H, d, J = 15.7 Hz), 4.51-4.76 (1H, m), 4.84-5.06 (1H, m), 5.11 (1H, dd, J = 8.5, 6.2 Hz), 6.63 (1H, d, J = 8.3 Hz), 6.81 (1H, d, J = 1.9 Hz), 6.90-7.32 (5H, m), 7.52-7.80 (1H, m), 8.34-8.74 (1H, m).
【０１５７】
実施例５
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１５８】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１５９】
実施例２−Ｃ）で合成した（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド  ２塩酸塩（１９５  ｍｇ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（１０１  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．６９１  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３０１  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１５時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール（２．５  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（５．０  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（９５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．６９８  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３０４  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１８２  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７３２．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７３２．４
【０１６０】
Ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１６１】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（１８０  ｍｇ）のメタノール溶液（１  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（１  ｇ）を加えた。混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから結晶化させて標題化合物（１０４  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６３２．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６３２．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.76 (3H, t, J = 7.5 Hz), 0.91 (9H, s), 1.45 (2H,m), 1.77-2.04 (6H, m), 2.67-2.81 (1H, m), 3.03-3.42 (3H, m), 3.62-3.81 (2H, m), 3.83-4.00 (1H, m), 4.02-4.25 (2H, m), 4.28-4.41 (1H, m), 4.55 (1H, s), 4.89 (1H, d, J = 9.8 Hz), 4.96-5.04 (1H, m), 6.47-6.68 (2H, m), 6.70-6.85 (2H, m), 6.88-7.10 (1H, m), 7.47-7.85 (1H, m), 8.50 (1H, d, J = 7.2 Hz).
【０１６２】
実施例６
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロペンチル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１６３】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロペンチル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１６４】
実施例３−Ｃ）で合成したｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（３２０  ｍｇ）のメタノール（２  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（６．０  ｍＬ）を加え、２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮し、（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド  ２塩酸塩（３２０ｍｇ）を得た。（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド  ２塩酸塩（１７０  ｍｇ）、（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（シクロペンチル）エタン酸（９４  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．３０６  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２６７  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１５時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール（１．２５  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．７５  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（８４  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．６１３  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２６７  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で３時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１３９  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７３６．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７３６．４
【０１６５】
Ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロペンチル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１６６】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロペンチル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマート（１３９  ｍｇ）のメタノール（２．５  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（５．０  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（１  ｇ）を加えた。混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、標題化合物（５０  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６３６．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６３６．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.66-1.78 (16H, m), 1.81-2.34 (5H, m), 2.63-3.40 (6H, m), 3.40-4.36 (7H, m), 4.39-4.98 (2H, m), 5.02-5.24 (1H, m), 6.50-6.79 (1H, m), 6.81-8.09 (7H, m), 8.28-8.80 (1H, m).
【０１６７】
実施例７
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１６８】
Ａ）  ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバマートの製造
【０１６９】
実施例３−Ｃ）で合成したｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（３２０  ｍｇ）のメタノール（２  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（６．０  ｍＬ）を加え、２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮し、（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド  ２塩酸塩（３２０ｍｇ）を得た。得られた（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド  ２塩酸塩（１５５  ｍｇ）、（２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エタン酸（１３３  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１７２  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２６３  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２００  ｍｇ）を黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６８７．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６８７．４
【０１７０】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１７１】
ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバマート（１７０  ｍｇ）をメタノール（３  ｍＬ）に溶解し、２０％水酸化パラジウム−炭素（５０  ｍｇ）と１０％塩化水素−メタノール溶液（１０  ｍＬ）の混合物に加えた後、１気圧の水素雰囲気下、２時間室温で撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（８８  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１５５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２３７  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２００  ｍｇ）を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７５２．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７５２．４
【０１７２】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１７３】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（２００  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（２００  ｍｇ）を加え室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標題化合物（１２５  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５２．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５２．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.53-0.67 (2H, m), 0.76-1.48 (8H, m), 1.48-1.97 (4H, m), 2.23-2.38 (3H, m), 2.62-3.04 (2H, m), 3.10-3.29 (4H, m), 3.37-3.76 (5H, m), 3.77-4.16 (4H, m), 4.16-5.18 (4H, m), 6.55-7.58 (8H, m), 8.12-8.68 (2H, m).
【０１７４】
実施例８
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１７５】
Ａ）  ２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−ブロモ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラートの製造
【０１７６】
実施例１−Ｅ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（１．０５  ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０  ｍＬ）溶液に氷冷下、Ｎ−ブロモスクシンイミド（５６２  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液を加え、室温で６５時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１．２２  ｇ）を無色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４１１．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４１１．１
【０１７７】
Ｂ）  ２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラートの製造
【０１７８】
２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−ブロモ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（１．２０  ｇ）、シアン化銅（Ｉ）（７８４  ｍｇ）、ヨウ化銅（１．６７  ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０  ｍＬ）溶液をマイクロウェーブ照射下、１８０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０  ｍＬ）、テトラヒドロフラン（１０  ｍＬ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（９５５  ｍｇ）を加え、室温で４時間撹拌した。反応混合物にジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（０．４８  ｇ）を追加し、室温で２時間撹拌した。反応混合物にジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（０．４８  ｇ）を追加し、室温で２時間撹拌した。反応混合物にジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（０．４８  ｇ）を追加し、室温で１７時間撹拌した。反応混合物に水と酢酸エチルを加え、セライトろ過し、ろ液を有機層と水層に分けた。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３０５  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３５８．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ３５８．２
【０１７９】
Ｃ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０１８０】
２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（２４０  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（８５  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（６．０  ｍＬ）を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−アミン塩酸塩（１７２  ｍｇ）、のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．５８５  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３０６  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１９時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３５７  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５０３．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５０３．３
【０１８１】
Ｄ）  メチル  （２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタノアートの製造
【０１８２】
（２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸（１．０  ｇ）、２０％水酸化パラジウム−炭素（０．２０  ｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（１０  ｍＬ）の混合物を水素雰囲気下、４時間室温で撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５．０  ｍＬ）、テトラヒドロフラン（５．０  ｍＬ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（７３３  ｍｇ）を加え、室温で１７時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３９３  ｍｇ）を無色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ−（Ｂｏｃ）］＋  ２０８．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ２０８．１
【０１８３】
Ｅ）  （２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸の製造
【０１８４】
メチル  （２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタノアート（３９３  ｍｇ）のテトラヒドロフラン（９．０  ｍＬ）溶液に水酸化リチウム１水和物（１０７  ｍｇ）の水（３．０  ｍＬ）溶液を加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物を１０％クエン酸水溶液で中和し、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮して標題化合物（３７５  ｍｇ）を白色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.21-1.52 (10H, m), 1.56-2.08 (8H, m), 3.91 (1H, dd, J = 8.6, 6.1 Hz), 7.09 (1H, d, J = 8.7 Hz), 12.58 (1H, brs).
【０１８５】
Ｆ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマートの製造
【０１８６】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（１７２  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸（１２０  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２３８  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１５６  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で６８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２２０  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６７８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６７８．４
【０１８７】
Ｇ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１８８】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマート（２２０  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（８５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２８３  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１４８  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１６時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２０６  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ−（Ｂｏｃ）］＋  ６７７．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６７７．４
【０１８９】
Ｈ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１９０】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（２０６  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（１０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（５００  ｍｇ）を加え、室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）とシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（４９  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６７７．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６７７．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.62-1.55 (12H, m), 1.59-2.23 (9H, m), 2.63-2.90 (2H, m), 3.05-3.28 (3H, m), 3.38-4.20 (7H, m), 4.26-4.93 (3H, m), 4.97-5.25 (1H, m), 6.44- 7.63 (7H, m), 7.72-7.99 (1H, m), 8.38-8.74 (1H, m).
【０１９１】
実施例９
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１９２】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバマートの製造
【０１９３】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（１７５  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（１２１  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１９９  ｍｇ）とＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．２４３  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で６８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１９１  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６１６．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６１６．４
【０１９４】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０１９５】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバマート  （１９１  ｍｇ）  、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１０１  ｍｇ）  のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１７７  ｍｇ）とＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．２１７  ｍＬ）を氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１８０  ｍｇ）を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７１５．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７１５．４
【０１９６】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０１９７】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（１８０  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（１０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（３００  ｍｇ）を加え、室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）とシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（１７  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６１５．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６１５．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.47-1.54 (18H, m), 1.82-2.31 (4H, m), 2.65-2.82 (2H, m), 3.09-3.29 (3H, m), 3.37-3.71 (3H, m), 3.78-4.16 (3H, m), 4.32 (1H, br. s.), 4.48-5.21 (3H, m), 6.73 (1H, d, J=8.3 Hz), 7.07-7.49 (6H, m), 7.63-8.66 (2H, m).
【０１９８】
実施例１０
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０１９９】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０２００】
２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（１１０  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（３９  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（４．５  ｍＬ）を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−アミン塩酸塩（７５  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．２６８  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１４０  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１３８  ｍｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５１１．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５１１．３
【０２０１】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２０２】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（１３５  ｍｇ）のメタノール溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（６６．８  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２２９  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２００  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で６４時間撹拌した。さらに反応混合物にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１００  ｍｇ）とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（６６．８  ｍｇ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール混合溶液（１．２５  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．５  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（６２．５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．４５７  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１９９  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（８７  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.72 (3H, t, J = 7.4 Hz), 0.90 (9H, s), 1.21-1.45 (11H, m), 1.44-1.66 (2H, m), 2.67-2.86 (3H, m), 2.96-3.50 (3H, m), 3.62-4.53 (7H, m), 4.59-4.70 (1H, m), 4.84 (1H, d, J = 9.4 Hz), 4.93-5.09 (1H, m), 6.45-6.90 (3H, m), 7.02-7.58 (3H, m), 8.48 (1H, d, J = 7.2 Hz).
【０２０３】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２０４】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（８７  ｍｇ）のメタノール溶液（１．２５  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（３  ｇ）を加え、室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）とシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（１１．５  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６２３．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６２３．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.75-1.03 (12H, m), 1.04-1.21 (1H, m), 1.37-1.82 (2H, m), 1.92-2.25 (4H, m), 2.27-2.89 (2H, m), 3.14-5.04 (11H, m), 5.19 (1H, s), 6.09-6.63 (3H, m), 6.82-9.20 (4H, m).
【０２０５】
実施例１１
（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２０６】
Ａ）  ２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラートの製造
【０２０７】
実施例１−Ｅ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（１．９２  ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０  ｍＬ）溶液に氷冷下、Ｎ−クロロスクシンイミド（７７１  ｍｇ）を加え、５０  ℃で１６時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（５００  ｍｇ）を黄色油状物質として、位置異性体である２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（８００  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３６７．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ３６７．１
【０２０８】
Ｂ）  ２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラートの製造
【０２０９】
実施例１１−Ａ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（４８９  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０  ｍＬ）溶液にＮ−クロロスクシンイミド（１７８  ｍｇ）を加え、５０  ℃で２時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４８４  ｍｇ）を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４０１．１
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４０１．１
【０２１０】
Ｃ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０２１１】
２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（３００  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（９４  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（７．５  ｍＬ）を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−アミン塩酸塩（１９２  ｍｇ）、のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．５２１  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３４１  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で６５時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３９５  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５４６．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５４６．２
【０２１２】
Ｄ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマートの製造
【０２１３】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（１９８  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸（１２８  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．３１６  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１６５  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２２４  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７２１．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７２１．３
【０２１４】
Ｅ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２１５】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバマート（２２４  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（８１  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２７０  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１４２  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１６時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１８８  ｍｇ）を無色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ８２０．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ８２０．３
【０２１６】
Ｆ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−２−［（２Ｓ）−２−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２１７】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（１８８  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（１０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（５００  ｍｇ）を加え、室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（５８  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７２０．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７２０．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.65-0.92 (3H, m), 0.99-1.56 (8H, m), 1.61-2.35 (10H, m), 2.62-2.93 (2H, m), 2.97-3.28 (3H, m), 3.42-4.18 (7H, m), 4.22-4.94 (3H, m), 4.98-5.24 (1H, m), 6.77-7.34 (6H, m), 7.49-8.15 (1H, m), 8.49-8.92 (1H, m).
【０２１８】
実施例１２
（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２１９】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバマートの製造
【０２２０】
実施例１１−Ｃ）で合成したｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（１４８  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（７５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２３６  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１２４  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。さらにＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（３８  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．１８８  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（６２  ｍｇ）を加え、室温で６４時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１７９  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５９．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５９．３
【０２２１】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２２２】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバマート（１７９  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（７１  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２３６  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１２４  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１６時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１６１  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ−（Ｂｏｃ）］＋  ７５８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７５８．４
【０２２３】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２２４】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（１６１  ｍｇ）のトルエン溶液（１．０  ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（１．０  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（１０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（５００  ｍｇ）を加え、室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標題化合物（８３  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５８．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.70-0.89 (4H, m), 0.90-1.23 (12H, m), 1.38-1.57 (2H, m), 2.04 (3H, s), 2.65-2.79 (1H, m), 2.80-2.92 (1H, m), 3.05-3.29 (3H, m), 3.40-3.78 (3H, m), 3.93-4.20 (4H, m), 4.28-4.49 (2H, m), 4.92 (1H, d, J=9.6 Hz), 5.00-5.17 (1H, m), 6.93 (1H, d, J=1.7 Hz), 7.04-7.28 (5H, m), 7.83 (1H, d, J=9.4 Hz), 8.71 (1H, d, J=8.7 Hz).
【０２２５】
実施例１３
（３Ｓ，１０ａＳ）−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２２６】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０２２７】
実施例１−Ｅ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（３００  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（１１４  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（４．５  ｍＬ）を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−アミン塩酸塩（２００  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．６２９  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（４１２  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３５１  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４８６．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４８６．３
【０２２８】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２２９】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（３４９  ｍｇ）のメタノール（１．５  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（４．５  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（２４６  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．９２９  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（５３９  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で６４時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール混合溶液（２．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（６．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１７０  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（１．２４０  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（５４０  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２９７  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６９８．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６９８．５
【０２３０】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛３−メチル−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２３１】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（２９５  ｍｇ）のメタノール混合溶液（１．５  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名）（３  ｇ）を加え、室温で１５分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、標題化合物（１６２  ｍｇ）を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５９８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５９８．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.68-0.81 (4H, m), 0.82-1.01 (9H, m), 1.25 (1H, brs), 1.34-1.55 (2H, m), 1.76-1.97 (4H, m), 2.64-2.81 (1H, m), 2.96-3.41 (3H, m), 3.59-3.96 (3H, m), 4.05-4.22 (2H, m), 4.26-4.42 (1H, m), 4.46-4.62 (1H, m), 4.80-4.94 (1H, m), 4.95-5.10 (1H, m), 6.42-6.68 (3H, m), 6.68-6.86 (2H, m), 6.87-7.09 (1H, m), 7.54-7.82 (1H, m), 8.40-8.67 (1H, m).
【０２３２】
実施例１４
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２３３】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０２３４】
実施例８−Ｂ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（２９０  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（８５  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（７．５  ｍＬ）を５０  ℃で１時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−アミン塩酸塩（１８１  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．５６８  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（６１８  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で３時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２８５  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４７５．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４７５．３
【０２３５】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２３６】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（２８０  ｍｇ）のメタノール（１．５  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（４．５  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（シクロヘキシル）エタン酸（１６７  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．５１５  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（４４９  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１５時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール混合溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１４１  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（１．０３  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（４４９  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２２５  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ−（Ｂｏｃ）］＋  ６１３．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６１３．４
【０２３７】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２３８】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマート（２２５  ｍｇ）のトルエン溶液（１．５  ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（１．５  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、標題化合物（２９．８  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６１３．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６１３．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.47-1.75 (16H, m), 1.77-2.09 (6H, m), 2.17 (1H, s), 2.65-2.89 (1H, m), 3.10-3.56 (3H, m), 3.71-4.82 (7H, m), 4.82-5.04 (1H, m), 6.47-7.01 (3H, m), 7.05-7.61 (4H, m), 7.62-7.82 (1H, m), 8.32-8.80 (1H, m).
【０２３９】
実施例１５
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２４０】
Ａ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド  ２塩酸塩の製造
【０２４１】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（１７５  ｍｇ）のメタノール（２．０  ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（６．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮して標題化合物（１．０９  ｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４０３．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４０３．５
【０２４２】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２４３】
（２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エタン酸（１００  ｍｇ）のメタノール（５  ｍＬ）溶液に、２０％水酸化パラジウム−炭素（２０  ｍｇ）を加え、混合物を水素雰囲気下、４時間室温で撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２．５  ｍＬ）、テトラヒドロフラン（２．５  ｍＬ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（７４．４  ｍｇ）を加え、室温で７２時間撹拌した。反応混合物に１０％クエン酸水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣と（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド  ２塩酸塩（１４７  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２７０  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２３５  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で３時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲル（１０  ｇ）を敷き詰めたパットに加え、パットを酢酸エチル／ヘキサン（４：１）混合溶媒（１００  ｍＬ）で洗浄し、溶出液を減圧下濃縮した。残渣のメタノール溶液（２．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（６９  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２５３  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２２１  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（９８  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ−（Ｂｏｃ）］＋  ６４３．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６４３．４
【０２４４】
Ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２４５】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（９２  ｍｇ）のトルエン溶液（２．０  ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（１．０  ｍＬ）を加え、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、標題化合物（２２．９  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６４３．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６４３．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.57-2.34 (16H, m), 2.66-3.00 (3H, m), 3.09-4.23 (14H, m), 4.23-4.94 (3H, m), 5.01-5.20 (1H, m), 6.52-6.90 (1H, m), 6.99-7.65 (6H, m), 7.68-8.03 (1H, m), 8.34-8.79 (1H, m).
【０２４６】
実施例１６
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２４７】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２−メチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２４８】
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（２５３  ｍｇ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリン（１２３  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．４４８  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３９０  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で４時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１２２  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．８９１  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３８８  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２８６  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７１８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７１８．４
【０２４９】
Ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−｛Ｎ−［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］−Ｌ−バリル｝−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２５０】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２−メチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（２７５  ｍｇ）のメタノール溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名；３．０  ｇ）を加えた。混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標題化合物（１４６  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６１８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６１８．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.42-1.06 (9H, m), 1.26-1.57 (2H, m), 1.68-2.34 (7H, m), 2.63-2.87 (1H, m), 3.32 (3H, s), 3.43-3.98 (3H, m), 4.00-4.83 (5H, m), 4.86-5.12 (1H, m), 6.53-6.71 (2H, m), 6.72-7.13 (3H, m), 7.58-7.94 (1H, m), 8.33-8.93 (1H, m).
【０２５１】
実施例１７
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２５２】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２５３】
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（２３８  ｍｇ）、（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（シクロヘキシル）エタン酸（１３７  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．４２２  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３６７  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で４時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣のメタノール溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１１５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．８３８  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３６５  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２７０  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７５８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７５８．４
【０２５４】
Ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２５５】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２−メチルプロピル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（２６５  ｍｇ）のメタノール溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名；３．０  ｇ）を加えた。混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、標題化合物（１６２  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５８．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５８．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.60-1.72 (17H, m), 1.73-2.07 (5H, m), 2.10-2.26 (1H, m), 2.60-4.85 (11H, m), 4.88-5.12 (1H, m), 6.46-7.20 (5H, m), 7.54-7.92 (1H, m), 8.21-9.06 (1H, m).
【０２５６】
実施例１８
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２５７】
Ａ）  ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバマートの製造
【０２５８】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（４３０  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（４．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（４．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エタン酸（２４３  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．７２０  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３７７  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３７６  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６９５．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６９５．３
【０２５９】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２６０】
ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバマート（１８８  ｍｇ）、２０％水酸化パラジウム−炭素（４０  ｍｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（５．０  ｍＬ）の混合物を１気圧の水素雰囲気下、１時間室温で撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（７１  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２３６  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１２３  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１７５  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７６０．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７６０．４
【０２６１】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２６２】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（１７５  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（８．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名；５００  ｍｇ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（７３  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６６０．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６６０．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.63-0.91 (3H, m), 0.94-1.57 (6H, m), 1.62-2.23 (7H, m), 2.60-3.42 (6H, m), 3.59-4.40 (8H, m), 4.45-4.61 (1H, m), 4.82 (1H, t, J= 8.6 Hz), 4.90-5.07 (1H, m), 6.45-7.19 (5H, m), 7.66-7.90 (1H, m), 8.38-8.82 (1H, m).
【０２６３】
実施例１９
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−［（２Ｓ）−２−［（Ｎ−メチル−Ｌ−アラニル）アミノ］−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２６４】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］アミノ｝−１−メチル−２−オキソエチル］メチルカルバマートの製造
【０２６５】
ベンジル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］カルバマート（１８８  ｍｇ）、２０％水酸化パラジウム−炭素（４０  ｍｇ）、１０％塩化水素−メタノール溶液（５．０  ｍＬ）の混合物を１気圧の水素雰囲気下、１時間室温で撹拌した。反応混合物をメンブレンフィルターでろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−アラニン（６６  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２３６  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１２３  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１４９  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７４６．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７４６．４
【０２６６】
Ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−［（２Ｓ）−２−［（Ｎ−メチル−Ｌ−アラニル）アミノ］−２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２６７】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］アミノ｝−１−メチル−２−オキソエチル］メチルカルバマート（１４９  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（８．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名；５００  ｍｇ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（８５  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６４６．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６４６．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.71-1.57 (7H, m), 1.62-2.30 (8H, m), 2.68-3.28 (5H, m), 3.56-4.41 (8H, m), 4.45-4.61 (1H, m), 4.79 (1H, t, J = 9.0 Hz), 4.90-5.06 (1H, m), 6.48-7.20 (5H, m), 7.62-7.85 (1H, m), 8.38-8.76 (1H, m).
【０２６８】
実施例２０
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２６９】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０２７０】
実施例２−Ｅ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（１４３  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（４９  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（４．５  ｍＬ）を５０  ℃で２時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−アミン塩酸塩（８７  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．２７２  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１７８  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１４９  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ４８４．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ４８４．２
【０２７１】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２７２】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（１４９  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（シクロヘキシル）エタン酸（９５  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２６８  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１４０  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。得られた残渣と４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（４．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：６）混合溶液（７．０  ｍＬ）を室温で３時間撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（８０  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２６８  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１４１  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１９８  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７２２．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７２２．４
【０２７３】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２７４】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマート（１９８  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（４．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：３）混合溶液（４．０  ｍＬ）を３時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（８．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名；５００  ｍｇ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標題化合物（７２  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６２２．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６２２．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.47-2.24 (22H, m), 2.60-2.88 (1H, m), 3.06-3.50 (3H, m), 3.63-3.96 (2H, m), 4.00-4.37 (4H, m), 4.43-4.62 (1H, m), 4.68-5.07 (2H, m), 6.51-7.59 (7H, m), 7.63-7.83 (1H, m), 8.39-8.82 (1H, m).
【０２７５】
実施例２１
（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２７６】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラートの製造
【０２７７】
実施例１１−Ｂ）で合成した２−ｔｅｒｔ−ブチル  ３−メチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２，３（１Ｈ）−ジカルボキシラート（３０５  ｍｇ）、水酸化リチウム１水和物（９６  ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（２：１）混合溶液（４．５  ｍＬ）を５０  ℃で２時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣と（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−アミン塩酸塩（１６９  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．５３０  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３４７  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１７時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３６７  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ５１８．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ５１８．２
【０２７８】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（１Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソエチル｝カルバマートの製造
【０２７９】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（３６７  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（４．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（４．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（シクロヘキシル）エタン酸（２１９  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．４９３  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２６９  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１７時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４４５  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５７．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５７．３
【０２８０】
Ｃ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２８１】
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（１Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソエチル｝カルバマート（４４５  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（４．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（４．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１７６  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．５８９  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２５７  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で５時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４７６  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７５６．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７５６．４
【０２８２】
Ｄ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２８３】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−６，８−ジクロロ−３−［（４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イルカルバモイル］−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマート（４７６  ｍｇ）、トリフルオロ酢酸（４．０  ｍＬ）のトルエン溶液（４．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（１２６  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５６．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５６．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.66-2.30 (23H, m), 2.69-3.29 (3H, m), 3.50-5.06 (9H, m), 6.59-7.23 (6H, m), 7.46-7.99 (1H, m), 8.47-8.94 (1H, m).
【０２８４】
実施例２２
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０２８５】
Ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバマートの製造
【０２８６】
ｔｅｒｔ−ブチル  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−カルボキシラート（２０８  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮した後、トルエン共沸を行った。残渣と（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（シクロヘキシル）エタン酸（１５７  ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５．０  ｍＬ）溶液にＮ−エチルジイソプロピルアミン（０．３５４  ｍＬ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２３２  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、水、飽和重曹水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２２０  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５１．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５１．４
【０２８７】
Ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマートの製造
【０２８８】
ｔｅｒｔ−ブチル  ｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバマート（２２０  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を室温で２時間撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（８８  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２３５  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（１５４  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２０１  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７５０．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７５０．４
【０２８９】
Ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−２−［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
【０２９０】
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−（｛（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）  −イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝カルバモイル）プロピル］メチルカルバマート（２０１  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−酢酸エチル溶液（２．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（２．０  ｍＬ）を２時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（８．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名；５００  ｍｇ）を加え、室温で１０分間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（５０  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６５０．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６５０．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.57-1.30 (13H, m), 1.34-1.89 (7H, m), 1.94-2.32 (4H, m), 2.66-2.89 (2H, m), 3.06-3.30 (3H, m), 3.38-4.36 (7H, m), 4.48-4.85 (2H, m), 4.99-5.22 (1H, m), 6.51-7.30 (7H, m), 7.50-7.88 (1H, m), 8.43-8.76 (1H, m).
【０２９１】
実施例１〜２２に記載された化合物の構造式を以下に示す。
【０２９２】
【表１−１】
2012176934.tif 000006
【０２９３】
【表１−２】
2012176934.tif 000007
【０２９４】
【表１−３】
2012176934.tif 000008
【０２９５】
【表１−４】
2012176934.tif 000009
【０２９６】
【表１−５】
2012176934.tif 000010
【０２９７】
【表１−６】
2012176934.tif 000011
【０２９８】
【表１−７】
2012176934.tif 000012
【０２９９】
【表１−８】
2012176934.tif 000013
【０３００】
参考例１  （２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸
【０３０１】
（ａ）  メチル  （２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４−オキソシクロヘキシル）エタノアートの製造
窒素気流下、メチル  （２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−８−イル）エタノアート（３．４０  ｇ）、酢酸（１６  ｍＬ）、テトラヒドロフラン（２．８  ｍＬ）、水（５．６  ｍＬ）の溶液にジクロロ酢酸（３．５７  ｇ）を加え、約３０℃で３時間撹拌した。氷冷下、２０℃以下で６Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（４０  ｍＬ）を滴下し、中和した（ｐＨ７〜８）。得られた溶液を酢酸エチル（１００  ｍＬ）で抽出し、分液した有機層を飽和食塩水（６０  ｍＬ）で洗浄した。得られた溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮し、表題化合物（２．９６  ｇ）を無色油状物として得た。メチル（２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカ−８−イル）エタノアート（６４．４  ｇ）を用いて同様の反応を行い、得られた表題化合物（６１．３  ｇ）と合わせて、シリカゲルカラム精製（６００  ｇ、富士シリシアＢＷ−８２０ＭＨ、ｎ−へキサン／酢酸エチル＝４／１→１／１）を行い、表題化合物（５４．２  ｇ）を無色油状物として得た。
ＬＣ−ＭＳ：３２０．１０（ＭＨ＋）
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) :δ 7.30-7.40 (5H, m), 5.37 (1H, d, J = 8.7 Hz), 5.11 (2H, s), 4.48 (1H, dd, J = 4.5 Hz, 8.7 Hz), 3.77 (3H, s), 2.39-2.47 (2H, m), 2.24-2.39 (3H, m), 2.02-2.10 (1H, m), 1.88-1.97(1H, m), 1.50-1.65 (2H, m).
【０３０２】
（ｂ）  メチル  （２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタノアートの製造
窒素気流下、メチル  （２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４−オキソシクロヘキシル）エタノアート（５４．２  ｇ）の脱水ジクロロメタン溶液（３１０  ｍＬ）へ、三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）（６３．０  ｇ）を氷冷下で滴下し、得られた溶液を室温で１時間撹拌した。得られた溶液に、メタノール／水（１／１、３５  ｍＬ）を氷冷下で加えた。水（２００  ｍＬ）を加え抽出・分液し、有機層を飽和重曹水（２５０  ｍＬ×２）、飽和食塩水（２５０  ｍＬ）で洗浄した。得られた溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮し、淡黄色油状物（５８．４  ｇ）を得た。得られた淡黄色油状物をアセトニトリル（１５０  ｍＬ）、水（１３０  ｍＬ）に溶解させ、塩化ルテニウム（１６６  ｍｇ）を加えた。得られた懸濁液に、氷冷下で過よう素酸ナトリウム（２５．５  ｇ）を加え、氷冷下で１０分間撹拌した。得られた溶液を室温で５時間撹拌後、酢酸エチルと水を加え抽出を行った。分液した有機層をチオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧濃縮した。得られた淡黄色油状物をシリカゲルカラム精製（７００  ｇ、富士シリシアＢＷ−８２０ＭＨ、ｎ−へキサン／酢酸エチル＝５／１）し、表題化合物（３６．１  ｇ）を白色固体として得た。
ＬＣ−ＭＳ：３４２．１５（ＭＨ＋）
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) :δ 7.31-7.40 (5H, m), 5.33 (1H, d, J = 8.5 Hz), 5.07-5.15 (2H, m), 4.40(1H, dd, J = 5.0 Hz, 8.5 Hz), 3.76 (3H, s), 2.07-2.17 (2H, m), 1.84-1.94 (1H, m), 1.60-1.81 (4H, m),1.37-1.51 (2H, m).
【０３０３】
（ｃ）  （２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタン酸の製造
窒素気流下、メチル  （２Ｓ）−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝（４，４−ジフルオロシクロヘキシル）エタノアート（３６．１  ｇ）をテトラヒドロフラン（５８８  ｍＬ）、水（２９５  ｍＬ）に溶解させ、氷冷下、水酸化リチウム一水和物（１７．８  ｇ）を加えた。得られた溶液を約５℃で１時間撹拌後、水酸化リチウム一水和物（２．９２  ｇ）を加えた。得られた溶液をさらに１時間撹拌後、１Ｍ塩酸（４０５  ｍＬ）を加えて中和（ｐＨ４）した。得られた反応液を濃縮し、得られた残渣に１Ｍ塩酸（１０５  ｍＬ）を加え（ｐＨ２）、析出した固体をろ取した。ろ取した固体を酢酸エチル（５００  ｍＬ）に溶解させ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。得られた白色固体（３８．１  ｇ）をｎ−へキサン／酢酸エチル（＝１００／５）混合溶液（３５０  ｍＬ）でスラリー洗浄し、表題化合物（３３．１  ｇ）を白色固体として得た。
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) :δ 12.78 (1H, brs), 7.65 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.29-7.40
(5H, m), 5.03 (2H,s), 3.99 (1H, dd, J = 6.0 Hz, 8.5Hz), 1.94-2.05 (2H, m), 1.57-1.93 (5H, m), 1.37-1.48 (1H, m), 1.23-1.35(1H, m).
【０３０４】
参考例２  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０３０５】
（ａ）  （２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（４−フルオロフェニル）エタン酸の製造
（２Ｓ）−アミノ（４−フルオロフェニル）エタン酸（３００  ｍｇ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート（３８７  ｍｇ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３．０  ｍＬ）のテトラヒドロフラン（３．０  ｍＬ）溶液を室温で６８時間撹拌した。反応混合物を２０％クエン酸水溶液で中和し、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮して標題化合物（４７０  ｍｇ）を無色油状物質として得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.38 (9H, s), 5.12 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.17 (2H, t, J = 8.9 Hz), 7.38-7.49 (2H, m), 7.62 (1H, d, J = 8.1 Hz), 12.79 (1H, brs).
【０３０６】
（ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソエチル］カルバマートの製造
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（２６０  ｍｇ）、（２Ｓ）−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］（４−フルオロフェニル）エタン酸（２１３  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２７６  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２４１  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１７時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３３０  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６７１．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６７１．３
【０３０７】
（ｃ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマートの製造
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソエチル］カルバマート（３３０  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）の酢酸エチル／メタノール（１：１）混合溶液（１．０  ｍＬ）を室温で３０分間撹拌後、減圧下濃縮した。残渣と（２Ｓ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ブタン酸（１２８  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．２５７  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０  ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（２２４  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（３００  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７７０．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７７０．３
【０３０８】
（ｄ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−２−｛［（２Ｓ）−２−（メチルアミノ）ブタノイル］アミノ｝アセチル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（１Ｓ）−２−［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］−１−（４−フルオロフェニル）−２−オキソエチル］カルバモイル｝プロピル］メチルカルバマート（３００  ｍｇ）、トリフルオロ酢酸（２．０  ｍＬ）のトルエン溶液（２．０  ｍＬ）を１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（１６０  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６７０．２
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６７０．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.53-0.91 (3H, m), 1.17-1.55 (2H, m), 1.79-2.21 (6H, m), 2.67-2.88 (1H, m), 2.98-3.77 (7H, m), 3.95-4.70 (4H, m), 4.91-5.30 (1H, m), 5.92-6.36 (1H, m), 6.55-7.61 (8H, m), 8.24-8.43 (1H, m), 8.46-8.94 (1H, m).
【０３０９】
参考例３  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−（Ｎ−メチル−Ｌ−セリル−３−メチル−Ｌ−バリル）−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０３１０】
（ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバマートの製造
（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド２塩酸塩（２５０  ｍｇ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｌ−バリン（１２９  ｍｇ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（０．４４３  ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５  ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（３８６  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で４時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２６０  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６３３．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６３３．３
【０３１１】
（ｂ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］アミノ｝−１−（ヒドロキシメチル）−２−オキソエチル］メチルカルバマートの製造
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバマート（２５５  ｍｇ）のメタノール溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−セリン（１０５  ｍｇ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．２２０  ｍＬ）のテトラヒドロフラン／２−プロパノール（１：１）混合溶液（４．０  ｍＬ）に、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム  クロリド（１４４  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（２６２  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７３４．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７３４．２
【０３１２】
（ｃ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−Ｎ−［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］−２−（Ｎ−メチル−Ｌ−セリル−３−メチル−Ｌ−バリル）−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−クロロ−３−｛［（４Ｒ）−５，７−ジフルオロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］アミノ｝−１−（ヒドロキシメチル）−２−オキソエチル］メチルカルバマート（２６０  ｍｇ）のメタノール溶液（１．０  ｍＬ）に、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（３．０  ｍＬ）を滴下し、１時間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣をメタノール（５．０  ｍＬ）に溶解し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  Ａ２１（商品名；３．０  ｇ）を加えた。混合物をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標題化合物（１５６  ｍｇ）を無色結晶として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６３４．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６３４．３
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.62-0.97 (9H, m), 1.78-2.37 (6H, m), 2.64-2.96 (1H, m), 3.04-3.40 (4H, m), 3.49-4.24 (6H, m), 4.27-4.43 (1H, m), 4.52-4.70 (1H, m), 4.76-4.92 (2H, m), 4.93-5.09 (1H, m), 6.52-6.68 (2H, m), 6.70-6.86 (2H, m), 6.89-7.12 (1H, m), 7.49-7.93 (1H, m), 8.36-8.76 (1H, m).
【０３１３】
参考例４  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−（Ｎ−メチル−Ｌ−セリル−３−メチル−Ｌ−バリル）−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミド
【０３１４】
（ａ）  ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］アミノ｝−１−（ヒドロキシメチル）−２−オキソエチル］メチルカルバマートの製造
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］カルバマート（４１７  ｍｇ）、４Ｍ塩化水素−シクロペンチルメチルエーテル溶液（６．０  ｍＬ）のメタノール溶液（２．０  ｍＬ）を３０分間室温で撹拌後、減圧下濃縮した。残渣とＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−セリン（１７８  ｍｇ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．２９８  ｍＬ）のテトラヒドロフラン／２−プロパノール（１：１）混合溶液（８．０  ｍＬ）に、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム  クロリド（２４４  ｍｇ）を氷冷下加え、室温で１８時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して標題化合物（４１５  ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ７１７．４
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ７１７．４
【０３１５】
（ｂ）  （３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］−２−（Ｎ−メチル−Ｌ−セリル−３−メチル−Ｌ−バリル）−１，２，３，４，１０，１０ａ−ヘキサヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−３−カルボキサミドの製造
ｔｅｒｔ−ブチル  ［（１Ｓ）−２−｛［（１Ｓ）−１−｛［（３Ｓ，１０ａＳ）−８−シアノ−３−｛［（１Ｓ，２Ｓ）−２−エトキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル］カルバモイル｝−３，４，１０，１０ａ−テトラヒドロピラジノ［１，２−ａ］インドール−２（１Ｈ）−イル］カルボニル｝−２，２−ジメチルプロピル］アミノ｝−１−（ヒドロキシメチル）−２−オキソエチル］メチルカルバマート（４１５  ｍｇ）、トリフルオロ酢酸（１．０  ｍＬ）のトルエン溶液（２．０  ｍＬ）を、３０分間室温で撹拌した。反応混合物にトリフルオロ酢酸（１．０  ｍＬ）を加え、さらに３０分間室温で撹拌した。反応混合物を飽和重曹水で中和し、酢酸エチルで２回抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後に減圧下濃縮した。残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／酢酸エチル）とシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／酢酸エチル）で精製し、酢酸エチル−ヘキサンから再沈殿して標題化合物（７６  ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６１７．３
ＭＳ（ＥＳＩ＋），  ｆｏｕｎｄ：  ６１７．４
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.54-0.99 (9H, m), 1.03-1.32 (3H, m), 1.86-2.29 (4H, m), 2.68-2.92 (2H, m), 3.07-3.68 (8H, m), 3.79-4.15 (4H, m), 4.24-4.40 (1H, m), 4.63-4.93 (3H, m), 4.99-5.16 (1H, m), 6.63-6.78 (1H, m), 7.05-7.50 (6H, m), 7.62-7.78 (1H, m), 8.47-8.66 (1H, m).
【０３１６】
製剤例１
本発明化合物を有効成分として含有する医薬は、例えば、次のような処方によって製造することができる。
１．カプセル剤
（１）実施例２で得られた化合物          ４０ｍｇ
（２）ラクトース                        ７０ｍｇ
（３）微結晶セルロース                    ９ｍｇ
（４）ステアリン酸マグネシウム            １ｍｇ
１カプセル                            １２０ｍｇ
（１）、（２）、（３）および（４）の１／２を混和した後、顆粒化する。これに残りの（４）を加えて全体をゼラチンカプセルに封入する。
【０３１７】
２．錠剤
（１）実施例２で得られた化合物          ４０ｍｇ
（２）ラクトース                        ５８ｍｇ
（３）コーンスターチ                    １８ｍｇ
（４）微結晶セルロース                ３．５ｍｇ
（５）ステアリン酸マグネシウム        ０．５ｍｇ
１錠                                  １２０ｍｇ
（１）、（２）、（３）、（４）の２／３および（５）の１／２を混和した後、顆粒化する。残りの（４）および（５）をこの顆粒に加えて錠剤に加圧成型する。
【０３１８】
製剤例２
日局注射用蒸留水５０ｍＬに実施例２で得られた化合物５０ｍｇを溶解した後、日局注射用蒸留水を加えて１００ｍＬとする。この溶液を滅菌条件下でろ過し、次にこの溶液１ｍＬずつを取り、滅菌条件下、注射用バイアルに充填し、凍結乾燥して密閉する。
【０３１９】
以下に記載の遺伝子操作法は、成書（Maniatisら、モレキュラー・クローニング、ColdSpring Harbor Laboratory、1989年）に記載されている方法もしくは試薬の添付プロトコールに記載されている方法に従った。
試験例１：ヒトcIAP1(250-350)発現ベクターの構築
His X 6と、ヒトcIAPの250番乃至350番アミノ酸からなる部分ペプチド（本明細書中、ヒトcIAP(250-350)またはhcIAP(250-350)と称することがある）とが結合した部分ペプチド（本明細書中、His-hcIAP1(250-350)と称することがある）をコードするHis-hcIAP1(250-350) 発現 Plasmid は以下のように構築した。まずヒト Brain cDNA Library（タカラバイオ）を鋳型として、GenBank accession No. NM_001166 に記載の塩基配列を参照して設計した2 種類の Primer（5’-TATTATGGATCCTTGGAAAATTCTCTAGAAACTCTGAGGTTT-3’（配列番号：１） 及び 5’-TATTATGCGGCCGCTTAAACTTGAATCTCATCAACAAACTCTTG-3’（配列番号：２））、ならびに Pyrobest DNA Polymerase（タカラバイオ）を用いて PCR を行なった。得られた DNA 断片を制限酵素 Bam HI 及び Not I（タカラバイオ）で切断し、pET21a（Novagen）の Nde I-Not I 部位に 開始コドン、His X 6 及び Bam HI 認識配列（CATATGCATCATCATCATCATCACGGATCC（配列番号：３））とともにその下流に挿入してクローニングし、His-hcIAP1 (250-350) 発現 Plasmid(本明細書中、pET21HH/His-hcIAP1(250-350)と称することがある) を構築した。
【０３２０】
試験例２：ヒトcIAP1(250-350)の発現および精製
pET21HH/His-hcIAP1 (250-350)を大腸菌BL21 (DE3)細胞（株式会社ニッポンジーン）に導入し、形質転換体を得た。該形質転換体を、50 mg/L ampicillin 入りLB培地(1 % trypton, 0.5 % yeast extract, 0.5 % NaCl)中で37℃条件下に培養した後、IPTGを添加（最終濃度1mM）して、さらに6時間培養することによりHis-hcIAP1(250-350)発現菌体を得た。His-hcIAP1(250-350)発現菌体を遠心操作(6000 rpm, 10 min.)で回収し、-80℃で凍結し、凍結菌体を得た。
凍結菌体を氷上で融解し、lysis buffer (50 mM Tris-HCl (pH 8), 300 mM NaCl, 10% Glycerol, 20 mM imidazole, 1mM DTT, Complete, EDTA-free (Roche Diagnostics))中で凍結菌体を懸濁して、懸濁液を得た。該懸濁液に1 mg/mLリゾチームを添加後、4℃、1時間静置した。得られた溶液に対し超音波処理（INSONATOR 201M (KUBOTA)を用いて出力170Wで30 秒ずつON、OFF を5回繰り返す）を行い、抽出液を得た。該抽出液を遠心操作（40000 rpm, 1hr, 4℃）に供した後、上清を回収した。得られた上清を0.22μmのフィルターでろ過して得られた溶液を、buffer A(50 mM Tris-HCl (pH 8), 300 mM NaCl, 10 % Glycerol, 20 mM imidazole, 1mM DTT)で平衡化したNi-NTA Superflow resin カラム(QIAGEN Inc.)にアプライした。上記溶液をアプライしたNi-NTA Superflow resinカラムをBuffer Aで洗浄後、Buffer B(50 mM Tris-HCl (pH 8), 300 mM NaCl, 10 % Glycerol, 200 mM imidazole, 1mM DTT)で溶出された画分を得た。該画分をAmicon Ultra 15 (3K MWCO, Millipore)により濃縮した濃縮液を、buffer C (50 mM Tris-HCl (pH 8), 300 mM NaCl, 10 % Glycerol, 1mM DTT)で平衡化したHiLoad 16/60 Superdex200pg (GE Healthcare)にアプライした。His-hcIAP1(250-350)を含む溶出画分を集めて濃縮し、-80℃で凍結保存した。
【０３２１】
試験例３：XIAPおよびcIAP1結合阻害活性の測定
ヒトXIAPおよびヒトcIAP1結合阻害活性は、市販のヒトXIAP_BIR3ドメイン精製蛋白質(R＆D)および試験例２で調製したHis-hcIAP1(250-350)をそれぞれ用い、常法によりC末端をビオチン化したSmac  N末端ペプチド(AVPIAQK（配列番号：４）)(以下「b-Smac」と称する；株式会社ペプチド研究所)をリガンドとして、HTRF法で測定した。
HTRF法について以下に詳述する。
ヒトXIAP_BIR3ドメイン精製蛋白質、またはHis-hcIAP1(250-350)を、それぞれ４０nM、８nMとなるように反応Buffer(100 mM NaCl、 0.1%脂肪酸不含BSA、0.1％ triton X-100 を含む25 mM HEPES Buffer、pH 7.5)で希釈してサンプル希釈液を得た後、該サンプル希釈液を384-well  白色浅底プレート(Greiner 784075)に5μL/wellで添加した。続いて、反応Bufferで希釈した被験化合物を5μL/wellで上記白色浅底プレートに添加した。反応BufferでXIAP結合阻害活性の測定には２０nMに、cIAP1結合阻害活性の測定には８０nMに希釈したb-Smacと、HTRF detection buffer(cisbio)で100倍に希釈したAnti-6HIS-Cryptate(Eu3+ Cryptate-conjugated mousemonoclonal antibody anti-6 Histidine；cisbio)、ならびにStreptavidin-XLent!(Highgrade XL665-conjugated streptavidin；cisbio)を2：1：1の容量で混合した溶液を10μL/wellで上記白色浅底プレートに添加した。
上記白色浅底プレートを1000 rpm で5分間遠心した後、該白色浅底プレートを暗所室温で4時間以上放置した。放置後の白色浅底プレートをEnVision（パーキンエルマー）による蛍光強度の測定（励起波長：３２０ｎｍ、蛍光波長：６６５ｎｍならびに６１５ｎｍ）に供した。
結合阻害率(%)は、被験化合物非存在下でのHTRF ratio (665nmの蛍光強度/615nmの蛍光強度)に対する被験化合物存在下のHTRF ratio から算出した。
被験化合物の濃度が３μＭであるときのＸＩＡＰ結合阻害率を表２に、被験化合物の濃度が３μＭであるときのｃＩＡＰ１結合阻害率を表３に示す。
【０３２２】
【表２】
2012176934.tif 000014
【０３２３】
【表３】
2012176934.tif 000015
【０３２４】
以上の結果により、本発明化合物は優れたＩＡＰ（例、ＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１）拮抗（結合阻害）活性を有することが示された。
【０３２５】
試験例４：MDA-MB-231細胞の増殖阻害活性の測定
ヒト乳癌細胞株であるMDA-MB-231細胞(アメリカン・テッシュ・カルチャー・コレクション)を、10%非働化ウシ胎児血清(モレゲートバイオテック)、100単位/mL ペニシリン及び100μg/mL ストレプトマイシン(インビトロジェン)を含むリーボリッツ培地（インビトロジェン）（本明細書中、培養培地と称することがある。）に懸濁し、3×103cells/100μL/ウェルで96ウェルプレート(コーニング)に播種し37℃のインキュベーターで培養した。培養24時間後の96ウェルプレートに培養培地で希釈した被験化合物を100μL/ウェルで添加した。細胞を68-72時間培養後、培地を除き、CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(プロメガ)を96ウェルプレートに50μL/ウェル添加し、1-2分静置後、残存ATP量に相当する化学発光量をEnVisionで測定した。MDA-MB-231の増殖阻害率(%)（本明細書中、ＭＢ２３１細胞増殖阻害率（％）と称することがある）は、細胞非存在下、化合物非存在下での化学発光量を100%、細胞存在下、化合物非存在下での化学発光量を0%として算出した。
被験化合物の濃度が１μＭであるときのＭＢ２３１細胞増殖阻害率（％）を表４に、被験化合物の濃度が０．１μＭであるときのＭＢ２３１細胞増殖阻害率（％）を表５に示す。
【０３２６】
【表４】
2012176934.tif 000016
【０３２７】
【表５】
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【０３２８】
以上の結果より、本発明化合物は、優れた癌（例、乳癌）の治療効果を有することが示された。
【産業上の利用可能性】
【０３２９】
本発明化合物は、ＩＡＰに対して優れた拮抗（結合阻害）作用を示すので、ＩＡＰ関連疾患（例、癌）の予防または治療剤として有用である。また、本発明化合物は、薬効発現、薬物動態、溶解性、他の医薬品との相互作用、安全性（毒性）、安定性の点でも優れているので、医薬として有用である。
【配列表】
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