(57)【要約】【課題】放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法、該製造方法で製造された放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシを提供することを目的とする。【解決手段】ミドリムシが光合成を行うに適する光が照射される水槽２内に少なくとも放射性炭素同位体１４Ｃを含まない水を収容し、該水中に放射性炭素同位体１４Ｃを含まない二酸化炭素を供給し、ミドリムシを生育する炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法、及び該製造方法で製造された放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシにある。【選択図】図１
2012044969.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミドリムシが光合成を行うに適する光が照射される水槽内に少なくとも放射性炭素同位体１４Ｃを含まない水を収容し、該水中に放射性炭素同位体１４Ｃを含まない二酸化炭素を供給し、ミドリムシを生育することを特徴とする放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法。
【請求項２】
請求項１の放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法において、
前記水槽内の水にはミドリムシの生育に必要な放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミネラル成分が含まれていることを特徴とする放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法。
【請求項３】
請求項１又は２のミドリムシの製造方法で製造された放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシ。
【請求項４】
請求項３の放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシと、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない植物性飼料と、放射性炭素同位体１４Ｃを除去した水とを飼料として実験用動物を飼育することを特徴とする放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物の飼育方法。
【請求項５】
請求項４の実験用動物の飼育方法で飼育された放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ミドリムシを構成する主要元素である炭素同位体のうち、放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法、該製造方法で製造された放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシ、該放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシで飼育された放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物の飼育方法、及び該飼育方法で飼育された炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物に関するものである。なお、ここで放射性炭素同位体１４Ｃを含まないとは、放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロの場合と放射性炭素同位体１４Ｃの濃度が極度に低下した場合を含むものとする。
【背景技術】
【０００２】
医薬品や農薬（以下「医薬品等」という）などの被検体内での動きを調べることにより薬効を調べるなどの研究を行う際に、医薬品等を構成する炭素同位元素の多くを放射性炭素同位体１４Ｃに入れ替えることにより標識化し、このように標識化された医薬品等を実験用動物等の被検体に導入して追跡することで医薬品等の動きを調べるトレーサ実験が行われている。例えば、ラットやマウスなどの実験用動物の生体内に標識化された医薬品を導入し、一定時間経過後のラット等の臓器や組織中の１４Ｃ濃度を測定することにより、医薬品の体内での動き（吸収、分布、代謝、排泄の特徴や、薬効・毒性発現の予測などの状況）を追跡するトレーサ実験が医薬品研究において幅広く行われている。
【０００３】
現在地球上に生存する動植物の生体を構成する主要元素である炭素における安定炭素１２Ｃ，１３Ｃと放射性炭素同位体１４Ｃとの比（現代炭素同位体比）は、１２Ｃ：１３Ｃ：１４Ｃ＝０．９８９：０．０１１：１．２×１０−１２、即ち１４Ｃ／１２Ｃ≒１．２×１０−１２という略一定値に保たれている。そのため、放射性炭素同位体１４Ｃを用いたトレーサ実験において、組織内におけるトレーサ１４Ｃの動き、即ち組織における放射性炭素同位体比の変化を有効に検出するためには、トレーサである放射性炭素同位体比を少なくとも上記現代炭素同位体比の１００倍〜１０００倍にする必要がある。
【０００４】
しかしながら、医薬品の試験研究において、通常の放射線レベルに対して二桁以上高いレベルの放射性同位体を取り扱うということは、実験用医薬品の製造時のみならず、被検体である実験用動植物の飼育・栽培時の領域整備や被曝線量の管理、実験後の環境への放出や汚染の問題等、全ての面において放射線を取り扱う煩雑さが付随するという問題がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００１−１９０１５３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
そこで上記課題を解決する方法として、特許文献１に開示するように、被検体である実験用動植物の放射性炭素同位体１４Ｃの濃度を現代炭素同位体比より二桁以下の極度に低いレベルまで低下させることにより、組織における放射性炭素同位体比の変化を有効に検出することができると共に、実験用動植物の飼育・栽培時の領域整備や被曝線量の管理、実験後の環境への放出や汚染等の上記課題は解決できる。しかしながら、マウス等の実験用動物を生育するためには、植物以外に適当な量の動物性タンパク質や各種栄養素などをバランスよく含んだ飼料を作り、生育する実験用動物に摂取させる必要があるが、このように植物以外に適当な量の動物性タンパク質や各種栄養素などをバランスよく含んだ飼料を、その放射性炭素同位体１４Ｃの濃度を現代炭素同位体比より二桁以下と極度に下げることが極めて困難である。
【０００７】
本発明は上述の点に鑑みてなされたもので、ミドリムシが実験用動物を生育するのに必要な動物性タンパク質や各種栄養素などをバランスよく含んでいることに着目し、放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法、該製造方法で製造された放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシ、該ミドリムシを用いて飼育した炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物の飼育方法、該飼育方法で飼育された放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記の課題を解決するために本発明は、ミドリムシが光合成を行うに適する光が照射される水槽内に少なくとも放射性炭素同位体１４Ｃを含まない水を収容し、該水中に放射性炭素同位体１４Ｃを含まない二酸化炭素を供給し、ミドリムシを生育することを特徴とする放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法にある。
【０００９】
また、本発明は、上記ミドリムシの製造方法において、水槽内の水にはミドリムシの生育に必要な放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミネラル成分が含まれていることを特徴とする放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法にある。
【００１０】
また、本発明は、上記ミドリムシの製造方法で製造された放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシにある。
【００１１】
また、本発明は、上記放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシと、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない植物性飼料と、放射性炭素同位体１４Ｃを除去した水とを飼料として実験用動物を飼育することを特徴とする放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物の飼育方法にある。
【００１２】
また、本発明は、上記実験用動物の飼育方法で飼育された放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物にある。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、ミドリムシが光合成を行うに適する光（適切な波長と光量の光）が照射される水槽内に少なくとも放射性炭素同位体１４Ｃを含まない水を収容し、該水中に放射性炭素同位体１４Ｃを含まない二酸化炭素を供給し、ミドリムシを生育するので、生育したミドリムシは放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロ又は極度に低下したミドリムシとなる。
【００１４】
また、水槽内の水にはミドリムシの生育に必要な放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミネラル成分が含まれているので、生育したミドリムシは放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロ又は極度に低下し、且つ体内にミネラル成分を含んだミドリムシとなる。
【００１５】
また、本発明によれば、上記ミドリムシの製造方法で製造された放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシであるので、放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロ又は極度に低下しているだけではなく、ミドリムシは動物の生存に必要な栄養素を全て備えていることから、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物を飼育するのに栄養バランスの取れた好適な飼料となる。
【００１６】
また、本発明によれば、上記放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシと、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない植物性飼料と、放射性炭素同位体１４Ｃを除去した水とを飼料として実験用動物を飼育するので、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない栄養のバランスの取れた健康な実験用動物を飼育することができる。
【００１７】
また、本発明によれは、上記実験用動物の飼育方法で飼育された放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物であり、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない栄養のバランスの取れた健康な実験用動物であるから、医薬品等の動きを調べるトレーサ実験用の動物として好適であると共に、放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロ又は極度に低く、医薬品等にトレーサ用として放射性炭素同位体１４Ｃで標識化する必要はなく、また標識化してもその濃度は現代炭素同位体比を僅かに上回る程度でよいから、実験用医薬品の製造時のみならず、被検体である実験用動植物の飼育・栽培時の領域整備や被曝線量の管理、実験後の環境への放出や汚染の問題も起こらない。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】本発明に係る炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法を実施するためのミドリムシ製造（培養）システムの概略構成を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下、本発明の実施の形態について、詳細に説明する。現在の地球上の大気中に存在する二酸化炭素を構成する炭素原子は、安定同位元素である炭素同位体１２Ｃと炭素同位体１３Ｃ以外に放射性同位元素である炭素同位体１４Ｃをごく僅か含んでいる。地球上に存在する放射性炭素同位体１４Ｃの大部分は、宇宙線が地球上の大気に突入したときに発生する中性子が大気中の窒素に吸収されて核反応により生成されるが、放射性炭素同位体１４Ｃは半減期が５７３０年の放射性元素なので、生成と崩壊が釣り合っているときは、１４Ｃは１２Ｃに対して上記のように１．２×１０−１２、約１兆分の１という平衡状態の割合で存在する。
【００２０】
太古の昔に石油や石炭の元になった動植物等の体を構成した炭素中の放射性炭素同位体１４Ｃは数億年という長い時間の間に崩壊して無くなるので、現在の石油や石炭には放射性炭素同位体１４Ｃを殆ど含んでいない。この状態の炭素をデッドカーボン（ｄｅａｄ  ｃａｒｂｏｎ）という。従って、石油や石炭などの化石燃料を燃焼させた時に発生する二酸化炭素は、デッドカーボンの炭素で構成されている。また、珊瑚などの海洋生物の化石である石灰岩などに酸を反応すると発生する二酸化炭素もデッドカーボンの炭素で構成されている。
【００２１】
ミドリムシは、水中に含まれる二酸化炭素を使って光合成により体を作る動物と植物の中間的微生物であり、動物の生育するために必要な動物性タンパク質や各種栄養素を全て備えた完全栄養素といわれている。従って、ミドリムシの育成に適切な波長の光と光量が照射する場で、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない水中でデッドカーボンの二酸化炭素を与えてミドリムシを生育することにより、ミドリムシの体をデッドカーボン、即ち放射性炭素同位体１４Ｃを含まない炭素で作ることができる。
【００２２】
上記デッドカーボンで作られたミドリムシはマウス等の実験用動物の育成に必要な動物性タンパク質や各種栄養素を全て備えた完全栄養素であるから、例えば、このデッドカーボンで作られたミドリムシの乾燥体に、例えば特許文献１に開示されているような、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない植物で作られた乾燥飼料を混合した飼料と、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない水を与えて、マウス等の実験用動物を生育すると、この実験用動物は放射性炭素同位体１４Ｃを含まないか或いは炭素同位体１４Ｃの濃度が現代炭素同位体比より極度に低い（以下本実施形態ではこの状態を「放射性炭素同位体１４Ｃを含まない」という）の実験用動物となる。
【００２３】
以下、放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法を具体的に説明する。図１は、本発明に係る放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシの製造方法を実施するためのミドリムシ製造（培養）システムの概略構成を示す図である。図中１は密閉された作業室であり、該作業室１内にはミドリムシを培養する水槽２が設置されている。３はソーダライム等の二酸化炭素を吸収する物質が充填された二酸化炭素吸収器、４は大気導入ポンプであり、該二酸化炭素吸収器３及び大気導入ポンプ４は大気導入管１２に接続されている。
【００２４】
大気導入ポンプ４を運転することにより、大気導入管１２を通って導入された大気中の放射性炭素同位体１４Ｃを含む二酸化炭素は該二酸化炭素吸収器３内に充填されたソーダライム等の二酸化炭素を吸収する物質により除去され、二酸化炭素の除去された大気が作業室１内に導入される。ここで作業室１内の気圧を大気圧より僅かに高くすることにより、外部大気に含まれる通常の放射性炭素同位体１４Ｃを含む二酸化炭素が作業室１内に漏れ込むことを防ぐと共に、ミドリムシの生育に必要な酸素を作業室１内に供給することができる。
【００２５】
ミドリムシの生育に必要な二酸化炭素は、ガスボンベ等のデッドカーボンの二酸化炭素を充填した二酸化炭素充填容器５から流量制御弁１３を通して作業室１内に供給する。作業室１内の二酸化炭素濃度は二酸化炭素濃度計６により検出しながら、流量制御弁１３の開度を調整しながら制御する。これにより、作業室１内は放射性炭素同位体１４Ｃを含まない二酸化炭素を所定濃度で含む空気で満たされる。なお、上記大気導入ポンプ４、二酸化炭素除去器３及び大気導入管１２からなる空気導入装置に代え、約２０％の酸素と約８０％の窒素を混ぜた人工空気にデッドカーボンの二酸化炭素を混ぜる方法を採用してもよい。
【００２６】
作業室１に隣接して前室７が設けられており、作業室１内への作業員の出入は前室７を通って行い、前室７内の空気を入れ換えることにより、外気中の通常の放射性炭素同位体１４Ｃを含む二酸化炭素が作業室１内に入り込まないようにすることが望ましい。
【００２７】
例えば、作業室１内への作業員の入室に際しては前室７の扉７ａを開いて該前室７に入室し、該扉７ａを閉じて、該前室７内を作業室１内の同じ空気に入れ換える。そして前室７と作業室１の間に在る扉（図示せず）を開いて作業室１内に入る。作業室１から出るときは、前室７の扉７ａを閉じて前室７内を作業室１と同じ空気で満たした後、前室７と作業室１の間に在る扉を開いて前室７内に入室した後、前室７と作業室１の間の扉を閉じてから、前室７の扉７ａを開いて外部に出る。該前室７内を作業室１内と同じ空気に入れ換えるために、作業室１から前室７に空気を導くためのバルブ付き導入口（図示せず）と、前室７の空気を外部に逃がすための逆流防止弁付き導入口（図示せず）が取り付けられていて、バルブ付き導入口を開けることにより作業室１内の陽圧の空気が自動的に前室７内に流入して空気の入れ換えが行われる。
【００２８】
作業室１内の空気中の二酸化炭素を厳密にデッドカーボンにするためには、作業員の呼気に含まれる二酸化炭素を作業室１内に排出しないように注意する必要かある。例えば、ソーダライムなどを使って呼気中の二酸化炭素を吸着する機能を持つマスク等を装着することが望ましい。或いは、作業員の呼気に含まれる１４Ｃの影響を出来る限り少なくして植物などを育てるもう一つの方法は、植物やミドリムシなどの光合成機能が殆ど働かない状態即ち光量をできる限り少なくした薄暗い中で作業する、或いは光合成をあまり活発に行わないような波長の光の中で作業する等の方法が考えられ、場合によって選定する必要がある。
【００２９】
ミドリムシを培養するため水槽２に収容する水は、純水製造装置で製造した純水や脱気膜等を使って水中の通常の放射性炭素同位体１４Ｃを含む二酸化炭素を予め除去した水を使用する。ミドリムシの生育に必要なデッドカーボンの二酸化炭素と酸素は、作業室１内の空気をエアーポンプ８により二酸化炭素送気管１４を通して水槽２内の水中にバブリングすることにより供給する。二酸化炭素の濃度は上記のように作業室１内の空気の二酸化炭素濃度を二酸化炭素濃度計６で検知しながら、二酸化炭素充填容器５からのデッドカーボンの二酸化炭素の供給量を流量制御弁１３の開度を調整しながら制御する。
【００３０】
また、ミドリムシの生育にミネラル成分が必要であるから、水槽２の水中には放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミネラル成分が含まれていることが望ましい。水中にこのミネラル成分を供給する方法としては、ここではミネラル成分が水中に溶出しやすい麦飯石（花崗斑岩）を水槽２内に浸漬配置しておく。なお、放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミネラル成分を供給する方法としては、他のミネラル成分が水中に溶出しやすい岩石や鉱物等を浸漬する方法、或いはミネラル成分を直接水中に供給する方法もある。
【００３１】
ミドリムシを光合成により増殖させるために必要な光は、窓９より太陽光を取り入れることにより、略必要な光量を確保できるが、蛍光灯やＬＥＤ等の人工光源１０を作業室１内の水槽２を照射することができる所定箇所に設置し、人工光源１０からの光の波長や光量、点灯時間、点灯消灯の周期等が最適条件を満たすようにすることにより、ミドリムシの培養効率を向上させることが可能である。
【００３２】
また、作業室１内には冷暖房装置１１を設置し、室温をミドリムシの培養に適する温度に制御する。なお、作業室１内で使用される電力は全て作業室１外から電力供給ケーブル（図示せず）を通して供給する。
【００３３】
上記のようにして生育したミドリムシは放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロ又は極度に低下しているだけではなく、ミドリムシはマウス等の実験用動物に必要な栄養素を全て備えていることから、放射性炭素同位体１４Ｃを含まないマウス等の実験用動物を飼育するのに栄養バランスの取れた好適な飼料となる。この放射性炭素同位体１４Ｃを含まないミドリムシを乾燥させた飼料と、例えば特許文献１に開示されている生産方法で作られた放射性炭素同位体１４Ｃを含まない植物性の乾燥飼料と、放射性炭素同位体１４Ｃを除去した水との混合飼料で実験用動物を飼育することで、飼育された実験用動物は放射性炭素同位体１４Ｃを含まず、且つ栄養のバランスの取れた健康な実験用動物となる。
【００３４】
また、上記実験用動物は栄養のバランスの取れた、健康で且つ放射性炭素同位体１４Ｃがゼロ又は極度に低下した実験用動物であるから、医薬品等をトレーサ用として放射性炭素同位体１４Ｃにより標識化しなくともトレーサ実験が可能、又は放射性炭素同位体１４Ｃにより標識化してもその濃度は上記現代炭素同位体比を僅かに上回る程度でよいから、実験用医薬品の製造時のみならず、被検体である実験用動植物の飼育・栽培時の領域整備や被曝線量の管理、実験後の環境への放出や汚染の問題も起こらない。
【００３５】
また、ミドリムシ製造（培養）システムの作業室１は密閉型植物工場の一形態であり、デッドカーボンの実験動物を飼育するためにミドリムシの生育の他に、実験動物を飼育するためのデッドカーボンの植物飼料を該作業室内１で同時に栽培することもできる。
【００３６】
以上、本発明の実施形態例を説明したが、本発明は上記実施例に限定されるものではなく、特許請求の範囲、及び明細書と図面に記載された技術的思想の範囲内において種々の変形が可能である。なお、直接明細書及び図面に記載がない何れの形状や構造であっても、本願発明の作用効果を奏する以上、本願発明の技術範囲である。
【産業上の利用可能性】
【００３７】
本発明は、ミドリムシが光合成を行うに適する光（適切な波長と光量の光）が照射される水槽内に少なくとも放射性炭素同位体１４Ｃを含まない水を収容し、該水中に放射性炭素同位体１４Ｃを含まない二酸化炭素を供給し、ミドリムシを生育するので、生育したミドリムシは放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロ又は極度に低下したミドリムシとなる。また、ミドリムシは動物に必要な栄養素を全て備えていることから、放射性炭素同位体１４Ｃを含まない実験用動物を飼育するのに栄養バランスの取れた好適な飼料として利用できる。また、本発明に係る実験用動物の飼育方法で飼育した実験用動物は、放射性炭素同位体１４Ｃを含まないか又はその濃度が極度に低下した栄養のバランスの取れた健康な実験用動物であるから、医薬品等の動きを調べるトレーサ実験用の動物として好適であると共に、放射性炭素同位体１４Ｃの濃度がゼロ又は極度に低く、医薬品等を放射性炭素同位体１４Ｃにより標識化する必要がなく、又標識化しても、その濃度は現代炭素同位体比と同程度であるから、実験用医薬品の製造時のみならず、被検体である実験用動植物の飼育・栽培時の領域整備や被曝線量の管理、実験後の環境への放出や汚染の問題も起こらない実験用動物として利用することができる。
【符号の説明】
【００３８】
１  作業室
２  水槽
３  二酸化炭素吸収器
４  大気導入ポンプ
５  二酸化炭素充填容器
６  二酸化炭素濃度計
７  前室
８  エアーポンプ
９  窓
１０  人工光源
１１  冷暖房装置
１２  大気導入管
１３  流量制御弁
１４  二酸化炭素送気管
【図１】
2012044969.tif 000003