(57)【要約】      （修正有）【課題】線維芽細胞のコラーゲン、ヒアルロン酸量を増加させて優れたコラーゲン合成促進活性、ヒアルロン酸合成促進活性を有し、経時的安定性の高い抗しわ剤または抗老化性化粧料の提供。【解決手段】式（式中、Ｒ1、Ｒ２は、水素またはレチノイル、ユビキノールもしくはユビキノン残基からなる親油性残基である。ただし、Ｒ１＝Ｒ２＝水素（Ｈ）である場合を除く。）のＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルまたはその塩である。生体内でリン酸部分が加水分解され、Ｌ−アスコルビン酸および油溶性有効成分に分解され、コラーゲン合成促進効果、細胞賦活効果、ヒアルロン酸産生量を増加させる。2012001457.tif 000019【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の化１の式で表わされる親油性アスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分として含有し、前記親油性アスコルビン酸誘導体は、リン酸エステル部にレチノイル残基、ユビキノール残基またはユビキノン残基からなる親油性残基をエステル結合したＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルである抗しわ剤。
【化１】
2012001457.tif 000014
（式中、Ｒ1、Ｒ２は、水素（Ｈ）またはレチノイル残基、ユビキノール残基もしくはユビキノン残基からなる親油性残基である。ただし、Ｒ１＝Ｒ２＝水素（Ｈ）である場合を除く。）
【請求項２】
レチノイル残基が、３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエニルであり、ユビキノール残基が２,３−ジメトキシ−６−デカプレニル−ヒドロキシベンゾイルであり、ユビキノン残基が２−メトキシ−６−デカプレニル−１,４−ベンゾキノニルである請求項１に記載の抗しわ剤。
【請求項３】
親油性アスコルビン酸誘導体の塩が、親油性アスコルビン酸誘導体のナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩またはカルシウム塩である請求項１または２に記載の抗しわ剤。
【請求項４】
親油性アスコルビン酸誘導体を有効成分として０．０５〜８０質量％含有する請求項１〜３のいずれかに記載の抗しわ剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の抗しわ剤を含有する抗老化性化粧料。
【請求項６】
請求項５に記載された抗老化性化粧料からなり、ｐＨ４．０〜９．０に調整された抗老化性化粧料。
【請求項７】
下記の化２で示される親油性有機アルコールと、オキシ塩化リンとを反応させて、下記の化３の式で示されるジクロロフォスフェートまたは化４の式で示されるモノクロロフォスフェートを合成し、これを別途、Ｌ−アスコルビン酸とアセトンを反応させて得た５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸と反応させ、その後に酸加水分解することによって下記の化５の式で表わされる親油性アスコルビン酸誘導体を得て、この親油性アスコルビン酸誘導体を有効成分として配合する抗しわ剤の製造方法。
【化２】
2012001457.tif 000015
（式中、Ｒはレチノイル残基、ユビキノール残基またはユビキノン残基を示す。）
【化３】
2012001457.tif 000016
（式中、Ｒはレチノイル残基、ユビキノール残基またはユビキノン残基を示す。）
【化４】
2012001457.tif 000017
（式中、Ｒ1、Ｒ２は、水素（Ｈ）またはレチノイル残基、ユビキノール残基もしくはユビキノン残基を示す。ただし、Ｒ１＝Ｒ２＝水素（Ｈ）である場合を除く。）
【化５】
2012001457.tif 000018
（式中、Ｒ1、Ｒ２は、水素（Ｈ）またはレチノイル残基、ユビキノール残基またはユビキノン残基からなる親油性残基である。ただし、Ｒ１＝Ｒ２＝水素（Ｈ）である場合を除く。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、皮膚にしわの生成を予防し、またはしわの少ない皮膚に改善する抗しわ剤およびその製造方法並びに抗しわ剤を含有する抗老化性化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトの皮膚には、加齢によってしわ、タルミ（弛み）、くすみ、色素沈着などの老化現象が生じるが、しわやタルミといった皮膚の形態変化は、真皮マトリックスの９０％以上を占めるコラーゲンによる影響が大きいと考えられている。
【０００３】
すなわち、真皮のコラーゲンの量が加齢と共に減少すると、真皮構造の形成が不完全になり、また太陽光線に露出する機会の多い皮膚のコラーゲン量は、露出の少ない皮膚に比べて著しく少ない傾向があり、皮膚の老化と太陽光線に対する暴露がしわやタルミの大きな要因の一つとして考えられている。
【０００４】
皮膚の老化による形態変化を予防するための薬剤として、油溶性有効成分であるレチノ−ルやレチノイン酸誘導体が知られており、これを有効成分としてコラーゲンおよびヒアルロン酸合成を促進させるしわ防止化粧品が知られている。
しかし、レチノ−ルやレチノイン酸誘導体は、熱や酸化に対して不安定であり、使用する際には充分に機能できない場合があった。
【０００５】
また、ユビキノンおよびユビキノールはコエンザイムＱ１０とも称され、皮膚細胞中のＤＮＡ量およびヒアルロン酸生産量を増加させる作用が知られている。
これらのユビキノン、ユビキノール、レチノールは、水に難溶でかつ酸化され易いという性質を有する物質であるため、皮膚細胞に対する浸透性が低く、不安定であり製剤化が困難であり、リン酸基修飾する技術が知られている（特許文献１）。
【０００６】
また、同様にアスコルビン酸についても、コラーゲン合成促進効果のある薬剤として知られているが、熱に対して非常に不安定で酸化しやすく、そのため使用時までに不活性になって分解することがあるため、使用する際には充分に生理作用が得られない場合があった。
【０００７】
また、アスコルビン酸誘導体として、酸化されやすいＬ−アスコルビン酸のジオール部をリン酸エステル化した誘導体（特許文献２）が知られており（特許文献２）、また同部分をグルコシド化した誘導体が知られている（特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００８−１１５１７０号公報
【特許文献２】特公昭５２−１８１９１号公報
【特許文献３】特開平０３−１３９２８８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかし、Ｌ−アスコルビン酸誘導体や、レチノ−ル、レチノイン酸誘導体は、それぞれが熱や酸化に対して不安定であり、保存や流通に必要な経時的な安定性が不足しており、そのために使用する際にはそれぞれの安定性を高める工程が必要であり、それらの機能を高めるように複数成分を配合して製剤化するには、それぞれの安定化のための工程数が多く、コラーゲン合成促進機能やヒアルロン酸合成機能を高めて効率よく製剤化することは困難であった。
【００１０】
そこで、この発明の課題は、上記した問題を解決し、皮膚に処方された際には線維芽細胞のコラーゲンおよびヒアルロン酸量を増加させて優れたコラーゲン合成促進活性およびヒアルロン酸合成促進活性を有すると共に、保存のための経時的安定性の高い抗しわ剤または抗老化性化粧料であり、また上記優れたしわ改善効果を有する抗しわ剤を効率よく製造できるようにすることである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記の課題を解決するために、この発明においては、下記の化１の式で表わされる親油性アスコルビン酸誘導体を有効成分として含有し、前記親油性アスコルビン酸誘導体は、リン酸エステル部にレチノイル残基、ユビキノール残基またはユビキノン残基からなる親油性残基をエステル結合したＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルまたはその塩である抗しわ剤としたのである。
【００１２】
【化１】
2012001457.tif 000002
【００１３】
（式中、Ｒ1、Ｒ２は、水素（Ｈ）またはレチノイル残基、ユビキノール残基もしくはユビキノン残基からなる親油性残基である。ただし、Ｒ１＝Ｒ２＝水素（Ｈ）である場合を除く。）
【００１４】
このようにＬ−アスコルビン酸とレチノール、ユビキノール、ならびにユビキノンを始めとした油溶性有効成分とをリン酸エステルで結合させたＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルまたはその塩とすることによって、熱や酸化に不安定なＬ−アスコルビン酸や油溶性有効成分を安定化できるため、使用前の保存状態でＬ−アスコルビン酸や油溶性有効成分が分解されることを抑制できる。
【００１５】
更に、使用した際には親油性残基により適度な脂溶性があって細胞内に取り込まれやすいため、皮膚に速やかに浸透し、生体内に広く分布するフォスファターゼによって効率的にリン酸部分が加水分解され、Ｌ−アスコルビン酸および油溶性有効成分（レチノール、ユビキノール、またはユビキノン）などに分解され、Ｌ−アスコルビン酸は本来の優れたコラーゲン合成促進効果を有し、一方、油溶性有効成分（レチノール、ユビキノール、またはユビキノン）は細胞賦活効果、ヒアルロン酸およびコラーゲン産生量を増加させる効果を奏するので、抗しわ剤として極めて有効である。
【００１６】
また、Ｌ−アスコルビン酸および油溶性有効成分は、互いに組み合わせることによって
本来の健康に有用な生理活性を阻害することなく、熱や酸化に対する安定性を高めるため、それぞれの成分に対して安定化させるための処理工程を設けて配合される製剤よりも効率よく製造できる抗親油性アスコルビン酸誘導体および抗しわ剤となる。
また、この発明の抗しわ剤の油溶性有効成分（レチノール、ユビキノール、またはユビキノン）は、細胞賦活効果、ヒアルロン酸およびコラーゲン産生量を増加させる効果を有し、すなわち「しわ」、「タルミ」の防止効果などの抗老化効果を発揮できる。
【００１７】
上述のように好ましい作用のあるアスコルビン酸誘導体としては、レチノイル残基が、３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエニルであり、ユビキノール残基が２,３−ジメトキシ−６−デカプレニル−ヒドロキシベンゾイルであり、ユビキノン残基が２−メトキシ−６−デカプレニル−１,４−ベンゾキノニルがあり、そのような親油性アスコルビン酸誘導体を有効成分として含有させることにより、好ましい抗しわ剤が得られる。
【００１８】
同様に、上述の好ましい作用のある親油性アスコルビン酸誘導体の塩とするために、親油性アスコルビン酸誘導体は、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩またはカルシウム塩であることが好ましい。
【００１９】
親油性アスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分として配合するには、０．０５〜８０質量％含有する上記の抗しわ剤とすることが好ましい。
さらに、上記のような抗しわ剤を含有する抗老化性化粧料としては、しわを予防または改善して抗老化性を高める化粧料とすることができる。さらにこのような抗老化性化粧料をｐＨ４．０〜９．０に調整することにより、親油性アスコルビン酸誘導体の作用をより効率よく充分に発揮させることができる。
【００２０】
このよう優れた特性のある抗しわ剤を効率よく製造するためには、下記の化２で示される親油性有機アルコールと、オキシ塩化リンとを反応させて、下記の化１０の式で示されるジクロロフォスフェートまたは化１１の式で示されるモノクロロフォスフェートを合成し、これを別途、Ｌ−アスコルビン酸とアセトンを反応させて得た５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸と反応させ、その後に酸加水分解することによって下記の化１２の式で表わされる親油性アスコルビン酸誘導体を得て、この親油性アスコルビン酸誘導体を有効成分として配合する抗しわ剤の製造方法を採用することができる。
【００２１】
【化２】
2012001457.tif 000003
【００２２】
（式中、Ｒはレチノイル残基、ユビキノール残基またはユビキノン残基を示す。）
【００２３】
【化３】
2012001457.tif 000004
【００２４】
（式中、Ｒはレチノイル残基、ユビキノール残基またはユビキノン残基を示す。）
【００２５】
【化４】
2012001457.tif 000005
【００２６】
（式中、Ｒ1、Ｒ２は、水素（Ｈ）またはレチノイル残基、ユビキノール残基もしくはユビキノン残基を示す。ただし、Ｒ１＝Ｒ２＝水素（Ｈ）である場合を除く。）
【００２７】
【化５】
2012001457.tif 000006
【００２８】
（式中、Ｒ1、Ｒ２は、水素（Ｈ）またはレチノイル残基、ユビキノール残基もしくはユビキノン残基からなる親油性残基である。ただし、Ｒ１＝Ｒ２＝水素（Ｈ）である場合を除く。）
【００２９】
このような親油性アスコルビン酸誘導体は、リン酸アルキルエステル部以外には変性した部分を有しないものであり、皮膚内に浸透するとエステラーゼやリパーゼがなくても、ほぼ全ての生体内組織に分布しているフォスファターゼ他の酵素等によってリン酸部分からＬ−アスコルビン酸および油溶性有効成分（レチノール、ユビキノール、またはユビキノン）に加水分解され、抗しわ作用を皮膚に及ぼすものである。
【発明の効果】
【００３０】
この発明の抗しわ剤または抗老化性化粧料は、所定の化学構造を有する親油性アスコルビン酸誘導体またはその塩を有効成分として含有し、アスコルビン酸誘導体は、リン酸エステル部に所定の親油性残基を有するため、適度な脂溶性が付与されて細胞内に取り込まれやすく、しかもアスコルビン酸の不安定性の原因が排除されるので、使用前の保存状態で熱や酸化に対して安定化する。
【００３１】
そして、抗しわ剤または抗老化性化粧料は、油溶性有効成分により皮膚に速やかに浸透し、生体内に広く分布するフォスファターゼによって効率的にリン酸部分が加水分解され、Ｌ−アスコルビン酸および油溶性有効成分（レチノール、ユビキノール、またはユビキノン）のそれぞれのコラーゲン合成促進活性およびヒアルロン酸合成促進活性を奏される。
【００３２】
このようにこの発明の抗しわ剤または抗老化性化粧料は、皮膚に処方された際に、線維芽細胞のコラーゲンおよびヒアルロン酸量を増加させて優れたコラーゲン合成促進活性およびヒアルロン酸合成促進活性を有すると共に、抗しわ剤の保存のための経時的安定性に優れ、または抗老化性化粧料となる利点がある。
【００３３】
また、抗しわ剤の製造方法に係る発明は、Ｌ−アスコルビン酸および油溶性有効成分であるレチノール、ユビキノールまたはユビキノンを複合的に一体化することによって、それぞれに対して安定化させるための処理を行なう場合よりも効率よく前記有利な効果を奏する抗しわ剤を製造できるという利点がある。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
前記化１の式で示されるＬ−アスコルビン酸リン酸エステル、すなわちモノレチノイル（ユビキノール、またはユビキノン）フォスフェートは、以下の方法で製造できる。
【００３５】
先ず、トルエン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンなどから選ばれる非極性溶媒を用いて、トリメチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどから選ばれる塩基の存在下で、前記化２の式で示される親油性有機アルコールとオキシ塩化リンを−２０〜２０℃において反応させて、化３の式で示されるモノレチノイル（ユビキノール、またはユビキノン）ジクロロフォスフェートまたは化４の式で示されるジレチノイル（ユビキノール、またはユビキノン）モノクロロフォスフェートを製造する。
取り出しについては蒸留により単離するか、または上記の非極性溶媒の溶液として次工程へ進んでも良い。
【００３６】
そして、別途、Ｌ−アスコルビン酸とアセトンを反応させて得た５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸と反応させ、レチノイル（ユビキノール、またはユビキノン）リン酸エステル化後に該保護基を接触還元等により脱離し、定法により精製することで前記の化１の式で示されるＬ−アスコルビン酸リン酸エステルを製造できる。
【００３７】
前記化２の式で示される親油性有機アルコールの具体例としては、レチノイル類では３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン−１−オール、３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン−１−アルデヒド、ユビキノール類では２,３−ジメトキシ−５−メチル−６−デカプレニル−１,４−ジヒドロキシベンゼン、５−メチル−３−メトキシ−６−デカプレニル−１,２,４−トリヒドロキシベンゼン、５−メチル−４−メトキシ−６−デカプレニル−１,２,３−トリヒドロキシベンゼン、５−メチル−６−デカプレニル−１,２,３,４−テトラヒドロキシベンゼン、５−メチル−１,２−メトキシ−６−デカプレニル−３,４−ジヒドロキシベンゼン、５−メチル−１,３−メトキシ−６−デカプレニル−２,４−ジヒドロキシベンゼン、３−ヒドロキシ−５−メチル−２−メトキシ−６−デカプレニル−３,４−ジヒドロキシベンゼン、ユビキノン類では２−ヒドロキシ−３−メトキシ−５−メチル−６−デカプレニル−１,４−ベンゾキノン、３−ヒドロキシ−２−メトキシ−５−メチル−６−デカプレニル−１,４−ベンゾキノン、２,３−ジヒドロキシ−５−メチル−６−デカプレニル−１,４−ベンゾキノン、１−ヒドロキシ−２,３−ジメトキシ−５−メチル−６−デカプレニル−ベンゾセミキノン、４−ヒドロキシ−２,３−ジメトキシ−６−メチル−５−デカプレニル−ベンゾセミキノンなどが挙げられる。
【００３８】
５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸は、Ｌ−アスコルビン酸をアセチルクロライドもしくは発煙硫酸などの脱水剤の存在下で、−３０℃〜２０℃においてアセトンと反応させ、濾過などの方法により単離される。
【００３９】
上記で得られた５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸をトルエン、クロロベンゼン、ジクロロベンゼンなどから選ばれる非極性溶媒下に、トリメチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどから選ばれる塩基存在下、化３の式で示されるモノレチノイル（ユビキノール、またはユビキノン）ジクロロフォスフェートもしくは化４の式で示されるジレチノイル（ユビキノール、またはユビキノン）モノクロロフォスフェートと−２０℃〜２０℃において反応させた後、塩酸、硫酸、酢酸などから選ばれる酸によって−１０〜５０℃において加水分解する。
【００４０】
このとき、残存する塩基を除去するために塩酸、硫酸、酢酸などの酸や塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化アンモニウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウムなどの無機塩の水溶液により洗浄し、非極性溶媒を留去するが、より高品質を要求される場合にはカラムクロマトなどにより、前記化６の式で示されるＬ−アスコルビン酸リン酸エステルを単離する。またはエタノール、グリセロールなどの溶液で取り出しても良い。このように、この発明のアスコルビン酸誘導体の単離精製方法は、一般的方法に従えばよく、特に制限する必要はない。
【００４１】
前記化１の式で示されるこの発明のアスコルビン酸誘導体の具体的な化合物の例としては、Ｌ−アスコルビン酸レチノイルエステルとしては２−[９,１３−ジメチル−１５−（１７,１７,２１−トリメチルシクロヘキセ−７−イル）ノナ−８,１０,１２,１４−テトラエン]−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−[９,１３−ジメチル−１５−（１７,１７,２１−トリメチルシクロヘキセ−７−イル）ノナ−８,１０,１２,１４−テトラエンアルデヒド]−Ｌ−アスコルビルフォスフェートが挙げられ、Ｌ−アスコルビン酸ユビキノールエステルとしては２−（８,９−ジメトキシ−１０−メチル−１１−デカプレニル−ヒドロキシベンゼン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−（８−ヒドロキシ−１０−メチル−１１−デカプレニル−ジヒドロキシベンゼン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−（８,９−ジヒドロキシ−１０−メチル−１１−デカプレニル−ヒドロキシベンゼン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−（８−ヒドロキシ−１０−メチル−９−メトキシ−１１−デカプレニル−ヒドロキシベンゼン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−（９−ヒドロキシ−１０−メチル−８−メトキシ−１１−デカプレニル−ヒドロキシベンゼン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、Ｌ−アスコルビン酸ユビキノンエステルとしては２−（１２−メトキシ−９−メチル−１０−デカプレニル−８,１１−ベンゾキノン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−（１２−メトキシ−１０−メチル−９−デカプレニル−８,１１−ベンゾキノン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−（２,３−ジメトキシ−６−メチル−５−デカプレニル−ベンゾセミキノン基）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート、２−（２,３−ジメトキシ−５−メチル−６−デカプレニル−ベンゾセミキノン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェートなどが挙げられる。
【００４２】
また、この発明においては、これらアスコルビン酸誘導体の塩も使用可能であり、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アルギニン等の塩基性アミノ酸、トリエタノールアミン等の有機アミンを用いることができる。
【００４３】
この発明に係るアスコルビン酸誘導体は、有効成分として含有され抗老化剤として応用される他、皮膚外用剤に配合して、皮膚の線維芽細胞においてコラーゲンおよびヒアルロン酸合成促進作用を発揮して、コラーゲンおよびヒアルロン酸合成促進作用によるしわの改善効果等の抗老化作用などの機能を持つ、抗老化用皮膚外用剤などに調製することができる。
【００４４】
この発明に係るアスコルビン酸誘導体を配合して皮膚外用剤として使用する場合、これらの１種又は２種以上が配合され、その配合量は、皮膚外用剤全量中０．０５〜８０質量％、好ましくは、０．５〜５０質量％である。
【００４５】
この発明の美白化粧料のｐＨは、特に限定されるものではないが、化粧料の一般的な保存状態において安定性を高めるために、ｐＨ４．０〜９．０とすることが好ましく、その他のｐＨ領域ではエステルの加水分解が起こりやすく安定な製剤が得られないことがある。
【００４６】
この発明の皮膚外用剤は上記必須成分の他に、通常の化粧料、医薬部外品、医薬品等に用いられる各種成分、例えば油性成分、乳化剤、保湿剤、増粘剤、薬効成分、防腐剤、顔料、粉体、ｐＨ調整剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、香料等を適宜配合することができる。
【００４７】
前記した油性成分の具体例としては、流動パラフィン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン、ホホバ油、ミツロウ、カルナウバロウ、ラノリン、オリーブ油、ヤシ油、高級アルコール、脂肪酸、高級アルコールと脂肪酸のエステル、シリコーン油等が挙げられる。乳化剤としては、例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の非イオン界面活性剤、ステアロイル乳酸ナトリウム等のアニオン界面活性剤、大豆リン脂質等の両性界面活性剤、塩化アルキルトリメチルアンモニウム等のカチオン界面活性剤が挙げられる。保湿剤としては、例えばグリセリン、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオールなどが挙げられる。増粘剤としては、例えばカルボキシビニルポリマー、キサンタンガム、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ベントナイト等の粘土鉱物等が挙げられる。薬効成分としては、例えば各種ビタミンおよびその誘導体、アラントイン、グリチルリチン酸およびその誘導体、各種動植物抽出物等の老化防止剤、保湿剤、育毛剤、発毛剤、経皮吸収促進剤、紫外線吸収剤、細胞賦活剤、抗炎症剤、美白剤、防腐防カビ剤が挙げられる。
【００４８】
この発明の抗しわ剤である皮膚外用剤は、前記した所定のアスコルビン酸誘導体を有効成分として配合することの他に、特に限定されるものではなく、これを周知の化粧料の製造方法により製造することができ、また一般的な皮膚化粧料に限定されることなく、医薬部外品、外用医薬品等にも適用できる。また、それらの剤型は、目的に応じて選択的にクリーム状、乳液状、液状、ゲル状、軟膏状、パック状、スティック状、パウダー状等の形態を採用することができる。
【実施例】
【００４９】
[アスコルビン酸誘導体の製造例１]
レチノイル類では３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン−１−オールとオキシ塩化リンを反応させ、モノレチノイルジクロロフォスフェートである［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］ジクロロフォスフェートを合成した。
これを別途、Ｌ−アスコルビン酸をアセチルクロライドもしくは発煙硫酸などの脱水剤の存在下で、−３０℃〜２０℃においてアセトンを反応させて得た５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸と反応させ、生成したレチノイル−２−Ｏ−イソプロピリデンアスコルビルホスフェートを塩酸にて加水分解し、洗浄し単離精製して２−[９,１３−ジメチル−１５−（１７,１７,２１−トリメチルシクロヘキセ−７−イル）ノナ−８,１０,１２,１４−テトラエン]−Ｌ−アスコルビルフォスフェート（その化学構造は、化６に後述する13Ｃ−ＮＭＲにおけるピークの帰属番号を併記した。）を製造した。以下、合成工程毎に詳細に説明する。
【００５０】
【化６】
2012001457.tif 000007
【００５１】
(1)  ５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸の合成
窒素置換下、アセトン５５７．８ｇ（９．６モル）を−５℃に冷却し、２８％発煙硫酸５４．３ｇ（０．２モル）を滴下し、Ｌ−アスコルビン酸１７６．１ｇ（１．０モル）を仕込む。同温度で１７時間反応させ、濾過、冷アセトンにより洗浄し、２４９．５ｇの５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸（純度８６．７％）をｗｅｔケーキとして得た。
【００５２】
(2)  ［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］ジクロロフォスフェートの合成
窒素置換下、トルエン５４０ｍＬ及びオキシ塩化リン１３８．０ｇ（０．９モル）を仕込み、−１０℃に冷却する。そこに、３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン−１−オール２５７．８ｇ（０．９モル、１．０モル比）とトリエチルアミン９１．１ｇ（０．９モル）の溶液を滴下し、０℃で１２時間反応した。２５℃に昇温した後、濾過によりトリエチルアミンの塩酸塩を除去し、１００７．２ｇの［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］ジクロロフォスフェートのトルエン溶液（濃度３１．１％）を得た。
【００５３】
(3)   ２−［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］−Ｌ−アスコルビルホスフェートの合成
窒素置換下、トルエン２０００ｍＬに上記の５，６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸２４９．５ｇ（１．０モル）を仕込み、室温でトリエチルアミン２０２．４ｇを滴下し、１時間攪拌する。その後、−１０℃に冷却し、上記の［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］ジクロロフォスフェートのトルエン溶液１００６．４ｇ（０．９モル）を１時間かけて滴下し、同温度で１４時間攪拌する。得られた反応マスに６．７％の塩酸水溶液１２３１２ｇを加え、３５℃で４時間加水分解を行い、トルエン層を１０％塩酸／７．１％塩化ナトリウム水溶液１０００ｇで２回洗浄した後、更に２０％塩化ナトリウム水溶液で１回洗浄した。そして、トルエン層についてカラムクロマトを行い、分取したフラクションを減圧濃縮（３５℃、２Ｔｏｒｒ）によりトルエンを留去し、３３８．９ｇの２−［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］−Ｌ−アスコルビルホスフェート（純度９０．４％）を得た。収率は６２．１％（対Ｌ−アスコルビン酸）であった。
【００５４】
得られた２−［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］−Ｌ−アスコルビルホスフェートの分子構造を質量分析マス(ＭＳ)スペクトル、赤外線吸収（ＩＲ）スペクトルおよび核磁気構造(1Ｈ−ＮＭＲ)スペクトルによって同定し、ＭＳスペクトルにより５２５．５４２０ ([Ｍ+], Ｃ２６Ｈ３７Ｏ９Ｐ)となり、またそれ以外の結果(ピークの位置と対応する基または炭素原子)を表１、２にそれぞれまとめて示した。これにより得られた化合物が、所期した分子構造のアスコルビン酸誘導体である２−［３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエン］−Ｌ−アスコルビルホスフェートであることが確認できた。
【００５５】
【表１】
2012001457.tif 000008
【００５６】
【表２】
2012001457.tif 000009
【００５７】
[アスコルビン酸誘導体の製造例２]
製造例１において、３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエンの代わりにユビキノール類である２,３−ジメトキシ−５−メチル−６−デカプレニル−１,４−ジヒドロキシベンゼンを用いたこと以外は実施例１と全く同様の方法で化合物を得た。なお、得られた化合物の分子構造を下記の化７の式に示し、その分子構造を赤外線吸収スペクトル（ＩＲ）および核磁気構造スペクトル(1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ)によって同定し、所期した分子構造のアスコルビン酸誘導体である２−（８,９−ジメトキシ−１０−メチル−１１−デカプレニル−ヒドロキシベンゼン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェートであることを確認した。なお、ピークの位置と対応する基または炭素原子の結果による同定については、実施例１を代表例とし、その記載を省略した。
【００５８】
これにより得られた化合物が、所期した分子構造のアスコルビン酸誘導体である２−（８,９−ジメトキシ−１０−メチル−１１−デカプレニル−ヒドロキシベンゼン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート（純度８９．５％）であることが確認できた。その収率は５５．７％（対Ｌ−アスコルビン酸）であった。
【００５９】
【化７】
2012001457.tif 000010
【００６０】
[アスコルビン酸誘導体の製造例３]
２−（１２−メトキシ−９−メチル−１０−デカプレニル−８,１１−ベンゾキノン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェートのナトリウム塩を以下の方法で製造した。
３,７−ジメチル−９−（２,６,６−トリメチルシクロヘキセ−１−イル）ノナ−２,４,６,８−テトラエンの代わりにユビキノン類である２−ヒドロキシ−３−メトキシ−５−メチル−６−デカプレニル−１,４−ベンゾキノンを用いたこと以外は製造例１と全く同様の方法で、２−（１２−メトキシ−９−メチル−１０−デカプレニル−８,１１−ベンゾキノン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェートの反応マスを得て、その反応マスに６．７％の塩酸水溶液１２３１２ｇを加え、３５℃で４時間加水分解を行い、トルエン層を１０％塩酸／７．１％塩化ナトリウム水溶液１０００ｇで２回洗浄した後、更に２０％塩化ナトリウム水溶液で１回洗浄した。
【００６１】
そして、トルエン層に３０％ＮａＯＨ水溶液を加え、ｐＨを７に調整する。分液後の水層にエタノールを加え、減圧濃縮により水及びエタノールを留去し、析出した結晶を濾過、乾燥し、２−（１２−メトキシ−９−メチル−１０−デカプレニル−８,１１−ベンゾキノン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェートナトリウム塩（純度９６．１％）を得た。その収率は７５．７％（対Ｌ−アスコルビン酸）であった。
【００６２】
なお、得られた化合物の分子構造を下記の化８の式に示し、その分子構造を赤外線吸収スペクトル（ＩＲ）および核磁気構造スペクトル(1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ)によって同定し、所期した分子構造のヒドロキシフェノール誘導体である２−（１２−メトキシ−９−メチル−１０−デカプレニル−８,１１−ベンゾキノン）−Ｌ−アスコルビルフォスフェートナトリウム塩であることを確認した。なお、ピークの位置と対応する基または炭素原子の結果による同定については、実施例１を代表例とし、その記載を省略した。
【００６３】
【化８】
2012001457.tif 000011
【００６４】
［ヒト正常線維芽細胞によるコラーゲン合成能の評価］
ヒト正常線維芽細胞を５％子牛血清（ＦＢＳ）含有ＤＭＥＭを用いて９６穴マイクロプレートにほぼコンフルエントになるように播種し、播種２４時間後に１００μｇの濃度の試料（表３参照）を含有した０．５％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭと交換した。陽性コントロールとして１００μｇアスコルビン酸リン酸マグネシウムを用いた。７２時間、試料含有培地で培養したのち、培地を回収してＥＬＩＳＡに供した。細胞は０．１％ Triton Ｘ−１００溶液にて溶解したのち、Ｌｏｗｒｙ法を用いてタンパク量を定量した。コラーゲンのＥＬＩＳＡは、Procollagen  type  Ｉ  C-peptide（ＰＩＰ）  Ｋｉｔ (タカラバイオ株式会社)を用いて測定した。
【００６５】
培地中のコラーゲン含有量は、同じプレートで測定した検量線から算出した。Lowry法によって測定した全細胞のタンパク量で、ＥＬＩＳＡを用いて測定した培地中のコラーゲン含有量を除することによって、細胞の単位タンパク量あたりのコラーゲン産生量を算出した。
【００６６】
コラーゲン産生量（ｎｇ／ｍｇ protein）＝培地中のコラーゲン含有量（ｎｇ／ｗｅｌｌ）÷全タンパク量（ｍｇ／ｗｅｌｌ）
【００６７】
コラーゲン合成能は、試料を添加せずに培養した細胞（コントロール）のコラーゲン産生量を１００として、各濃度の試料で培養した時のコラーゲン産生量の割合（％）で表した。
【００６８】
（試験結果）
試験結果のコラーゲン産生率を表３に示した。表３の結果からも明らかなように、アスコルビン酸誘導体の製造例１〜３は、未添加の場合と比べて明らかにコラーゲン量が増大した。
【００６９】
【表３】
2012001457.tif 000012
【００７０】
［実施例１〜５、比較例１〜３：ヒトによるしわ改善効果の評価］
以下の表４に示す配合割合でアスコルビン酸誘導体の化粧料組成物(化粧水)を調製し、しわの悩みを持つ被験者を一群２０名とし、各化粧料を毎日、朝と夜、３ヶ月間塗布使用させ、３ヶ月後に累積塗布効果を以下の判定基準により自己判定させ、さらに判定結果を以下の基準で評価し、表４中に併記した。
【００７１】
【表４】
2012001457.tif 000013
【００７２】
著効：しわがほとんど目立たなくなった。
有効：しわが少し目立たなくなった。
やや有効：しわがやや目立たなくなった。
無効：変化なし。
【００７３】
[評価]
◎：被験者のうち著効、有効の示す割合（有効率）が80％以上。
○：被験者のうち著効、有効の示す割合（有効率）が60％以上80％未満。
△：被験者のうち著効、有効の示す割合（有効率）が40％以上60％未満。
×：被験者のうち著効、有効の示す割合（有効率）が40％未満。
【００７４】
このことから、アスコルビン酸誘導体は抗老化剤として有用であり、有効成分として含有され抗老化剤として応用される他、皮膚外用剤に配合して、皮膚の線維芽細胞において細胞賦活作用、コラーゲンおよびヒアルロン酸合成促進作用を発揮して、細胞賦活作用、コラーゲンおよびヒアルロン酸合成促進作用によるしわの改善効果等の抗老化作用の機能を持つ、抗老化用皮膚外用剤として有用であることが分かる。
【００７５】
以下に、所定のアスコルビン酸誘導体を有効成分とする実施例として、化粧料の代表的な処方例を示す。各行右端の数値は配合割合(質量％)である。
【００７６】
［処方例１］（化粧水）
２−（２−ヘキシルデシル）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート     5.0
グリセリン                                                     5.0
１，３−ブチレングリコール                                     5.0
ジプロピレングリコール ５．０％                                5.0
ヒアルロン酸ナトリウム１％水溶液                               5.0
ＰＯＥ（４０）硬化ヒマシ油                                     1.5
防腐剤                                                         適量
精製水                                                         残余
【００７７】
［処方例２］（ゲル状クリーム）
２−（２−ヘキシルデシル）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート     5.0
グリセリン                                                     5.0
エタノール                                                     5.0
水酸化ナトリウム                                               0.5
カルボキシビニルポリマー                                       0.8
香料                                                           適量
防腐剤                                                         適量
精製水                                                         残余
【００７８】
［処方例３］（乳液）
２−（２−ヘプチルウンデシル）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート 10.0
１，３−ブチレングリコール                                    10.0
カルボキシビニルポリマー                                       0.3
スクワラン                                                     5.0
セタノール                                                     0.6
Ｌ−アルギニン                                                 0.3
香料                                                           適量
防腐剤                                                         適量
精製水                                                         残余
【００７９】
［処方例４］（クリーム）
２−ビス（２−オクチルドデシル）−Ｌ−アスコルビルフォスフェート 10.0
１，３−ブチレングリコール                                     10.0
カルボキシビニルポリマー                                       0.4
スクワラン                                                     5.0
セタノール                                                     3.0
ミツロウ                                                       3.0
Ｌ−アルギニン                                                 0.3
香料                                                           適量
防腐剤                                                         適量
精製水                                                         残余