(57)【要約】【課題】優れたオートインデューサー−２阻害活性を有し、感染症の予防及び治療に有効なオートインデューサー−２阻害剤を提供する。【解決手段】炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とするオートインデューサー−２阻害剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とするオートインデューサー−２阻害剤。
【請求項２】
炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とする歯周病の予防及び／又は治療剤。
【請求項３】
炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とする齲蝕病の予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
脂肪酸の炭素数が８〜２６である、請求項１〜３のいずれか１項記載の薬剤。
【請求項５】
有効成分の含有量が０．００１〜５質量％である、請求項１〜４のいずれか１項記載の薬剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項記載の薬剤を含有してなる、医薬組成物、食品組成物、口腔用組成物又は化粧料組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オートインデューサー−２阻害剤、並びに歯周病及び齲蝕病の予防及び／又は治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
自然界において、微生物は様々な環境下で生存しなければならない。貧栄養、低温度、高温、ｐＨ変化はもちろんのこと、生体内においては貪食細胞又は抗菌性液性因子（補体、抗体、リゾチーム等）が存在する環境での生存を余儀なくされる。このような状況下で、細菌は自らの存在環境の変化を敏感に感知する機構を獲得してきた。そのような機構の１つとして、微生物は特異的な情報伝達物質を介して環境における自らの濃度を感知し、その濃度に応じて自らの様々な生物活性を巧妙に制御していることが明らかとなっている。このような細胞間の情報伝達機構は、クオラムセンシングシステムと称される。
【０００３】
クオラムセンシングは、発光性海洋細菌であるビブリオ・フィシェリ及びビブリオ・ハーベイにおいて最初に報告された。しかし、最近では、多くの細菌における一般的な遺伝子調節機構であると認識されている。この現象により、細菌は、生物発光、スウォーミング、バイオフィルム形成、タンパク質分解酵素の産生、抗生物質の合成、遺伝子受容能の発達、プラスミド接合伝達、病原因子産生及び胞子形成などといった活動を一斉に行うことができる。
【０００４】
クオラムセンシングシステムを有する細菌は、オートインデューサーと呼ばれるシグナル伝達分子を合成し、放出し、そのシグナル伝達分子に応答して、遺伝子発現を細胞密度の関数として制御する。これまで、アシルホモセリンラクトンがオートインデューサー−１として、４，５−ジヒドロキシ−２，３−ペンタンジオンがオートインデューサー−２として同定されている。
【０００５】
ビブリオ属細菌、緑膿菌、セラチア、エンテロバクターなど臨床上重要な細菌がクオラムセンシングにオートインデューサー−１を利用することが報告されている。また、ビブリオ・ハーベイが、種内連絡には種特異性の高いオートインデューサー−１を利用し、種間連絡には種特異性の低いオートインデューサー−２を利用することが知られている。さらに最近の研究では、ある種の病原性細菌がオートインデューサー−２による種間でのクオラムセンシングにより、病原因子の産生を調節していることも示されている。このような病原性細菌としては、齲蝕原性菌であるストレプトコッカス・ミュータンス（Streptococcus mutans）、胃潰瘍及び胃ガンを惹起すると言われているヘリコバクター・ピロリ（Helicobacter pylori）、食中毒、ガス壊疽、出血性腸炎などの原因菌であるウェルシュ菌（Clostridium perfringens）等が挙げられる。従って、オートインデューサー−２を阻害する活性を有する物質が求められていた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、優れたオートインデューサー−２阻害活性を有し、感染症の予防及び治療に有効なオートインデューサー−２阻害剤の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は、上記課題に鑑み鋭意検討を行った。その結果、特定の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物が、優れたオートインデューサー−２阻害活性を有することを見い出した。本発明はこの知見に基づいて完成するに至ったものである。
【０００８】
本発明は、炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分として含有するオートインデューサー−２阻害剤に関する。
【０００９】
また、本発明は、炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とする歯周病の予防及び／又は治療剤に関する。
【００１０】
また、本発明は、炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とする齲蝕病の予防及び／又は治療剤に関する。
【００１１】
さらに、本発明は、前記の薬剤（Ａｇｅｎｔ）を含有してなる、医薬組成物、食品組成物、口腔用組成物又は化粧料組成物に関する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明のオートインデューサー−２阻害剤は、優れたオートインデューサー−２阻害活性を有する、特定の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とし、感染症の予防及び治療効果に優れる。
また、本発明の歯周病の予防及び／又は治療剤並びに齲蝕病の予防及び／又は治療剤は、優れたオートインデューサー−２阻害活性を有する、特定の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とし、歯周病及び齲蝕病の予防及び／又は治療効果に優れる。
また、本発明の医薬組成物、食品組成物、口腔用組成物及び化粧料組成物は、優れたオートインデューサー−２阻害活性を有する薬剤を含有する、医薬、食品、口腔用及び化粧料としての用途に適した組成物であり、各種の微生物感染症の予防及び治療に効果がある。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明に用いる炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物とは、炭素数８以上の脂肪酸が有するカルボキシル基と、グリセリンが有する３つのヒドロキシル基のいずれか１つとがエステル結合した構造を持つモノアシルグリセロールである。（以下、本発明に用いるモノアシルグリセロールと呼ぶことがある。）
【００１４】
前記の炭素数８以上の脂肪酸は、飽和脂肪酸であっても不飽和脂肪酸であってもよい。また、不飽和脂肪酸はシス体であってもトランス体であってもよい。
前記飽和脂肪酸に特に制限はなく、例えば、オクタン酸、デカン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ペンタデシル酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、ツベルクロステアリン酸、アラキジン酸、べヘン酸、セロチン酸等が挙げられる。また、前記不飽和脂肪酸に特に制限はなく、例えば、パルミトレイン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、リノレン酸、エレオステアリン酸、アラキドン酸、ネルボン酸等が挙げられる。
前記の炭素数８以上の脂肪酸は、炭素数が８〜２６であることが好ましく、８〜２２であることがより好ましく、８〜２０であることがさらに好ましく、８〜１８であることが特に好ましく、１０〜１８であることが殊更好ましい。
【００１５】
前記の炭素数８以上の脂肪酸は、グリセリンが有する３つのヒドロキシル基のいずれとエステル結合していてもよい。すなわち、本発明に用いるモノアシルグリセロールは１−モノアシルグリセロールであっても、２−モノアシルグリセロールであってもよい。
【００１６】
本発明のオートインデューサー−２阻害剤、歯周病の予防及び／又は治療剤、並びに齲蝕病の予防及び／又は治療剤は、有効成分として炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を少なくとも１種含有するものである。すなわち、本発明のオートインデューサー−２阻害剤、歯周病の予防及び／又は治療剤、並びに齲蝕病の予防及び／又は治療剤は、炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を２種以上含有してもよい。
【００１７】
本発明に用いるモノアシルグリセロールは、通常の方法で合成したものを用いることができる。また、市販のモノアシルグリセロール製剤を用いることもできる。さらに、食材等から直接分画したモノアシルグリセロール画分を用いてもよい。このような食材として、例えば、テンペ、豆ち、浜納豆、腐乳等のダイズ発酵食品が挙げられ、このダイズ発酵食品のヘキサン抽出物をカラムクロマトグラフィーにより分画することで、本発明に用いうるモノアシルグリセロール画分を調製することができる。
【００１８】
本発明におけるオートインデューサー−２（以下、「ＡＩ−２」ともいう）としては、細菌が産生するものでＡＩ−２活性を有するものであれば特に制限はない。
本発明におけるＡＩ−２の具体例としては、下記式で表される４，５−ジヒドロキシ−２，３−ペンタンジオン（本明細書において、ＤＰＤともいう）、及びＤＰＤが有するＡＩ−２活性と同等のＡＩ−２活性を有する化合物が包含される。
【００１９】
【化１】
2012116827.tif 000002
【００２０】
前記ＤＰＤは、細菌のＡＩ−２受容体と結合するときにボロンを取り込んで、フラノシルボレートジエステルに変換される。本発明におけるＡＩ−２の別の具体例としては、前記フラノシルボレートジエステルが挙げられる。また、ＤＰＤはリン酸化されてリン酸化ＤＰＤ（Phospho-DPD）となり、ＡＩ−２活性を発現することが知られている（例えば、Taga  M．et  al.，Mol．Microbiol.，42，p．777-793，2001参照）。本発明におけるＡＩ−２は、リン酸化ＤＰＤも包含する。
前記フラノシルボレートジエステル及びPhospho-DPDの具体例を以下に示す。しかし、本発明はこれらに制限されるものではない。
【００２１】
【化２】
2012116827.tif 000003
【００２２】
本発明においてＡＩ−２を阻害することは、ＡＩ−２がクオラムセンシングを介して細菌に及ぼす影響を阻害することを意味し、ＡＩ−２活性を阻害すること、ＡＩ−２分解すること、ＡＩ−２のＡＩ−２受容体への結合を阻害することなどが包含される。
【００２３】
本発明においてＡＩ−２活性は、ＡＩ−２がクオラムセンシングシステムを有する細菌に影響を及ぼす活性、すなわち、ＡＩ−２を介するクオラムセンシングによりもたらされる細菌の機能を促進する活性をさす。細菌は、ＡＩ−２を介するクオラムセンシングにより、発光、スウォーミング、バイオフィルム形成、タンパク質分解酵素の産生、抗生物質の合成、遺伝子受容能の発達、プラスミド接合伝達、病原因子産生及び胞子形成等を行うことが知られている。したがって、ＡＩ−２活性は、換言すれば、ＡＩ−２を認識する細菌、すなわちＡＩ−２受容体を有する細菌による生物発光、スウォーミング、バイオフィルム形成、タンパク質分解酵素の産生、抗生物質の合成、遺伝子受容能の発達、プラスミド接合伝達、病原因子産生及び／又は胞子形成の活性ということができる。本発明においてＡＩ−２活性は、特に、細菌の病原因子産生活性をさす。
【００２４】
前記病原因子としては、例えば、エンテロトキシン、アデニル酸シクラーゼ毒素、アドヘシン、アルカリプロテアーゼ、溶血毒、炭疽毒素、ＡＰＸ毒素、α毒素、β毒素、δ毒素、Ｃ２毒素、Ｃ３毒素、ボツリヌス毒素、束状線毛構造サブユニット、Ｃ５Ａペプチダーゼ、心臓毒、走化性、コレラ毒素、毛様体毒素、クロストリジウム細胞毒、クロストリジウム神経毒、コラーゲン接着因子、細胞溶解素、嘔吐毒素、内毒素、表皮剥脱毒素、外毒素、細胞外エラスターゼ、フィブリノゲン、フィブロネクチン結合タンパク質、線維状赤血球凝集素、フィンブリア、ゼラチナーゼ、赤血球凝集素、ロイコトキシン、リポタンパク質シグナルペプチダーゼ、リステリオリシンＯ、Ｍタンパク質、神経毒、非フィンブリアアドヘシン類、浮腫因子、透過酵素、百日咳毒素、ホスホリパーゼ、線毛、孔形成毒素、プロリンパーミアーゼ、セリンプロテアーゼ、志賀毒素、破傷風毒素、チオール活性化細胞溶解素、気管細胞溶解素、ウレアーゼなどが挙げられるが、本発明はこれらに制限されない。
【００２５】
本発明のＡＩ−２阻害剤の有効成分で影響を及ぼすことができる細菌、換言すれば、本発明のＡＩ−２阻害剤の有効成分で増殖・生育を抑制できる細菌は、ＡＩ−２によりその機能、例えば、生物発光、スウォーミング、バイオフィルム形成、タンパク質分解酵素の産生、抗生物質の合成、遺伝子受容能の発達、プラスミド接合伝達、病原因子産生及び胞子形成などが促進される細菌である。例えば、ＡＩ−２受容体を有する細菌、好ましくはＡＩ−２受容体を有し、ＡＩ−２を産生する細菌を対象とすることができる。
【００２６】
ＡＩ−２活性は、ＡＩ−２を認識することにより発光するレポーター細菌、好ましくはＡＩ−２受容体及びルシフェラーゼを有する細菌を用いるバイオアッセイにより測定することができる（例えば、Keersmaecker  S．C．J．et  al.，J．Biol．Chem.，280(20)，p．19563-19568，2005参照）。具体的には、ビブリオ・ハーベイ（Vibrio harveyi）ＢＢ１７０株をレポーター細菌とし、被検化合物の存在下で培養し、培養後の発光強度をケミルミネッセンス計などで測定することにより、ＡＩ−２活性を測定することができる。
【００２７】
ＡＩ−２を阻害することにより影響が及ぼされうる細菌、又は増殖・生育が抑制されうる細菌としては、例えば、ビブリオ（Vibrio）属細菌、シュードモナス（Pseudomonas）属細菌、ポルフィロモナス（Porphyromonas）属細菌、エルシニア（Yersinia）属細菌、エシェリキア（Escherichia）属細菌、サルモネラ（Salmonella）属細菌、ヘモフィルス（Haemophilus）属細菌、ヘリコバクター（Helicobacter）属細菌、バシルス（Bacillus）属細菌、ボレリア（Borrelia）属細菌、ナイセリア（Neisseria）属細菌、カンピロバクター（Campylobacter）属細菌、デイノコックス（Deinococcus）属細菌、ミコバクテリウム（Mycobacterium）属細菌、エンテロコッカス（Enterococcus）属細菌、ストレプトコッカス（Streptococcus）属細菌、シゲラ（Shigella）属細菌、エロモナス（Aeromonas）属細菌、エイケネラ（Eikenella）属細菌、クロストリジウム（Clostridium）属細菌、スタフィロコッカス（Staphylococcus）属細菌、ラクトバチルス（Lactobacillus）属細菌、アクチノバチルス（Actinobacillus）属細菌、アクチノマイセス（Actinomyces）属細菌、バクテロイデス（Bacteroides）属細菌、カプノサイトファガ（Capnocytophaga）属細菌、クレブシエラ（Klebsiella）属細菌、ハロバチルス（Halobacillus）属細菌、フゾバクテリウム（Fusobacterium）属細菌、エルウィニア（Erwinia）属細菌、エルベネラ（Elbenella）属細菌、ラクトバチルス（Lactobacillus）属細菌、リステリア（Listeria）属細菌、マンヘイミア（Mannheimia）属細菌、ペプトコッカス（Peptococcus）属細菌、プレボテラ（Prevotella）属細菌、プロテウス（Proteus）属細菌、セラチア（Serratia）属細菌及びベイロネラ（Veillonella）属細菌などが挙げられる。より具体的には、ビブリオ・ハーベイ（Vibrio harveyi）、ビブリオ・フィシェリ（Vibrio fischeri）、コレラ菌（Vibrio cholerae）、腸炎ビブリオ（Vibrio parahaemolyticus）、ビブリオ・アルギノリチカス（Vibrio alginolyticus）、シュードモナス・ホスホレウム（Pseudomonas phosphoreum）、ポリフィロモナス・ジンジバリス（Porphyromonas gingivalis）、エルシニア・エンテロコリチカ（Yersinia enterocolitica）、大腸菌（Escherichia coli）、ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium）、インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）、ヘリコバクター・ピロリ（Helicobacter pylori）、枯草菌（Bacillus subtilis）、ボレリア・ブルグドルフェリ（Borrelia burgfdorferi）、髄膜炎菌（Neisseria meningitidis）、淋菌（Neisseria gonorrhoeae）、ペスト菌（Yersinia pestis）、カンピロバクター・ジェジュニ（Campylobacter jejuni）、デイノコックス・ラジオデュランス（Deinococcus radiodurans）、結核菌（Mycobacterium tuberculosis）、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）、肺炎レンサ球菌（Streptococcus pneumoniae）、化膿レンサ球菌（Streptococcus pyogenes）、ストレプトコッカス・ミュータンス（Streptococcus mutans）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）、箕田赤痢菌（Shigella flexneri）、シゲラ・ボイデイ（Shigella boydii）、セレウス菌（Bacillus cereus）、バチルス・ズブチリス（Bacillus subtilis）、エロモナス・ハイドロフィラ（Aeromonas hydrophila）、チフス菌（Salmonella enterica）、エイケネラ・コロデンス（Eikenella corrodens）、ヘリコバクター・ヘパティカス（Helicobacter hepaticus）、ウェルシュ菌（Clostridium perfringens）、スタフィロコッカス・ハエモリティカス（Staphylococcus haemolyticus）、ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri）、ラク���バチルス  アシドフィラス（Lactobacillus acidophilus）、ラクトバチルス・ロイテリ（Lactobacillus reuteri）、ラクトバチルス・サリバリウス（Lactobacillus salivarius）、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ストレプトコッカス・サンギニス（Streptococcus sanguinis）、ストレプトコッカス・アンギノーサス（Streptococcus anginosus）、ストレプトコッカス・オラリス（Streptococcus oralis）、ストレプトコッカス・ボビス（Streptococcus bovis）、ストレプトコッカス・ゴルドニ（Streptococcus gordonii）、ストレプトコッカス・ミティス（Streptococcus mitis）、アクチノバチルス・アクチノマイセテムコミタンス（Actinobacillus actinomycetemcomitans）、ビブリオ・ブルニフィカス（Vivrio vulnificus）、ビブリオ・ミミクス（Vibrio mimicus）、ビブリオ・アングイラルム（Vibrio anguillarum）、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）、エルウィニア・アミロボラ（Erwinia amylovora）、エルウィニア・カロトバラ（Erwinia carotovara）、ハロバチルス・ハロフィラス（Halabacilus halophilus）、セラチア・ピムチカ（Serratia pymuthica）、セラチア・マルセセンス（Serratia marcescens）、バクテロイデス・フラジリス（Bacteroides fragilis）、バクテロイデス・ブルガタス（Bacteroides vulgatus）、バクテロイデス・ディスタソニス（Bacteroides distasonis）、リステリア・モノサイトジェネス（Listeria monocytogenes）、スタフィロコッカス・エピデルミディス（Staphylococcus epidermidis）、クロストリジウム・ディフィシル（Clostridium difficile）、アエロモナス・ハイドロフィリア（Aeromonas hydrophilia）、マンヘイミア・ハエモライティカ（Mannhemia haemolytica）、クレブシエラ・ニューモニアエ（Klebsiella pneumoniae）、バチルス・アンスラシス（Bacillus anthracis）、カンピロバクター・コリ（Campylobacter coli）、カンピロバクター・レクタス（Campylobacter rectus）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、アクチノマイセス・ナエスランディ（Actinomyces naeslundii）、ペプトコッカス・アナエロビウス（Peptococcus anaerobius）、フゾバクテリウム・ヌクレアタム（Fusobacterium nucleatum）、ベイロネラ・パルラ（Veillonella parvula）、カプノサイトファガ・スプティゲナ（Capnocytophaga sputigena）及びプレボテラ・インタメディア（Prevotella intermedia）などが挙げられる。
【００２８】
本発明のＡＩ−２阻害剤の有効成分は、ストレプトコッカス・ミュータンス、ポリフィロモナス・ジンジバリス、ストレプトコッカス・オラリス、ストレプトコッカス・ゴルドニ、ストレプトコッカス・サングイニス、ストレプトコッカス・ミティス、アクチノマイセス・ナエスランディ、ペプトコッカス・アナエロビウス、アクチノバチルス・アクチノマイセテムコミタンス、フゾバクテリウム・ヌクレアタム、ベイロネラ・パルラ、カプノサイトファガ・スプティゲナ、プレボテラ・インタメディア及びラクトバチルス・サリバリウスなどに対するＡＩ−２の阻害に対し、特に好ましく用いられる。
【００２９】
生体内において、ＡＩ−２量と歯周病や齲蝕病等の感染症の症状とに相関関係があるため、本発明のＡＩ−２阻害剤の有効成分を投与することにより歯周病や齲蝕病等の感染症の症状を低減できる。したがって、一実施形態において本発明は、炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とする、歯周病又は齲蝕病の予防及び／又は治療剤に関する。さらに、本発明のオートインデューサー−２阻害剤は、歯周病、齲蝕病等の感染症の予防及び／又は治療剤として用いることができる。さらには、本発明のオートインデューサー−２阻害剤は、歯周病、齲蝕病等の感染症の予防及び／又は治療剤などに含有させることができる。
【００３０】
本発明のＡＩ−２阻害剤を投与することにより予防及び／又は治療することができる感染症は、ＡＩ−２を阻害することにより予防及び／又は治療することができる感染症であり、換言すれば、ＡＩ−２を利用するクオラムセンシングシステムを有する細菌、具体的にはＡＩ−２を阻害することにより影響を及ぼすことができる上記のような細菌に関連する感染症である。
【００３１】
本発明のＡＩ−２阻害剤を投与することにより予防及び／又は治療することができる感染症の具体例として、口腔、皮膚、膣、消化（ＧＩ）管、食道及び気道等における感染症が挙げられる。より具体的には、ストレプトコッカス・ミュータンス等により引き起こされる齲蝕病；ポルフィロモナス・ジンジバリス等により引き起こされる歯周病（歯骨炎、歯肉炎を含む）；日和見生物により引き起こされる日和見感染症；肺炎レンサ球菌及びインフルエンザ菌等により引き起こされる急性中耳炎（ＡＯＭ）及び滲出性中耳炎（ＯＭＥ）；インフルエンザ菌により引き起こされるインフルエンザ；ヘリコバクター・ピロリにより引き起こされる十二指腸潰瘍、胃ガン及び胃潰瘍；コレラ菌により引き起こされるコレラ；ペスト菌により引き起こされるペスト；髄膜炎菌により引き起こされる髄膜炎；ネズミチフス菌などのサルモネラ属細菌により引き起こされるサルモネラ中毒；ウェルシュ菌により引き起こされる食中毒、ガス壊疽及び出血性腸炎；及び大腸菌等により引き起こされる下痢症などが挙げられる（後述の実施例、並びに特開２００９−１１４１２０号公報；Yoshida  A．et  al.,Appl．Environ．Microbiol.，71(5)，p．2372-2380，2005；Wen  Z．T．et  al.，J．Bacteriol.，189(9)，p．2682-2691，2004；Osaki  T.  et  al.，J．Med．Microbiol.，55(Pt11)，p．1477-1485，2006；及びOhtani  K．et  al.，Mol．Microbiol.，44(1)，p．171-179，2002等参照）。
【００３２】
本明細書において感染症の予防には、感染症の発症を抑えること及び遅延させることが含まれ、感染症になる前の予防だけではなく、治療後の感染症の再発に対する予防も含まれる。本明細書において感染症の治療には、感染症を治癒すること、症状を改善すること及び症状の進行を抑えることが包含される。
【００３３】
本発明のＡＩ−２阻害剤、並びに前記感染症の予防及び／又は治療剤の投与対象は、好ましくは哺乳動物である。本明細書において哺乳動物は、温血脊椎動物をさし、例えば、ヒト及びサルなどの霊長類、マウス、ラット及びウサギなどの齧歯類、イヌ及びネコなどの愛玩動物、並びにウシ、ウマ及びブタなどの家畜が挙げられる。本発明のＡＩ−２阻害剤、並びに前記感染症の予防及び／又は治療剤は、霊長類、特にヒトへの投与に好適である。感染症に罹患しているヒト、感染症と診断されているヒト、感染症に罹患する可能性があるヒト、感染症を予防する必要があるヒトに投与することが特に好ましい。
脂肪酸とグリセリンとのモノエステルは、その多くが食品添加物としても利用されており、人体に対する安全性の懸念は少ない。
【００３４】
本発明のＡＩ−２阻害剤、並びに前記感染症の予防及び／又は治療剤の形態は、特に制限されないが、例えば、医薬組成物、食品組成物、口腔用組成物及び化粧料組成物とするか、又はこれらに含有させることができる。
【００３５】
医薬組成物を調製する場合は、通常、前記有効成分と好ましくは薬学的に許容される担体を含む製剤として調製する。薬学的に許容される担体とは、一般的に、前記有効成分とは反応しない、不活性の、無毒の、固体又は液体の、増量剤、希釈剤又はカプセル化材料等をいい、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、適切なそれらの混合物、植物性油などの溶媒又は分散媒体などが挙げられる。
【００３６】
医薬組成物は、経口により、非経口により、例えば、皮膚に、皮下に、粘膜に、静脈内に、動脈内に、筋肉内に、腹腔内に、膣内に、肺に、脳内に、眼に、及び鼻腔内に投与される。経口投与製剤としては、錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤、チュアブル剤、ペレット剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤及び吸入剤などが挙げられる。非経口投与製剤としては、坐剤、保持型浣腸剤、点滴剤、点眼剤、点鼻剤、ペッサリー剤、注射剤、口腔洗浄剤並びに軟膏、クリーム剤、ゲル剤、制御放出パッチ剤及び貼付剤などの皮膚外用剤などが挙げられる。本発明の医薬組成物は、徐放性皮下インプラントの形態で、又は標的送達系（例えば、モノクローナル抗体、ベクター送達、イオン注入、ポリマーマトリックス、リポソーム及びミクロスフェア）の形態で、非経口で投与してもよい。
【００３７】
医薬組成物はさらに医薬分野において慣用の添加剤を含んでいてもよい。そのような添加剤には、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、抗酸化剤、着色剤、矯味剤などがあり、必要に応じて使用できる。長時間作用できるように徐放化するためには、既知の遅延剤等でコーティングすることもできる。賦形剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、寒天、軽質無水ケイ酸、ゼラチン、結晶セルロース、ソルビトール、タルク、デキストリン、デンプン、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニトール、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム、リン酸水素カルシウム等が使用できる。結合剤としては、例えば、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、エチルセルロース、カゼインナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、寒天、精製水、ゼラチン、デンプン、トラガント、乳糖、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、結晶セルロース、デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、硬化油、ショ糖脂肪酸エステル、ロウ類等が挙げられる。抗酸化剤としては、トコフェロール、没食子酸エステル、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、アスコルビン酸等が挙げられる。必要に応じてその他の添加剤や薬剤、例えば制酸剤（炭酸水素ナトリウム、炭酸マグネシウム、沈降炭酸カルシウム、合成ヒドロタルサイト等）、胃粘膜保護剤（合成ケイ酸アルミニウム、スクラルファート、銅クロロフィリンナトリウム等）を加えてもよい。
【００３８】
口腔用組成物には、前記有効成分のほか、その形態に応じて種々の成分を配合することができる。配合可能な成分として、例えば研磨剤、湿潤剤、粘結剤、歯質強化剤、殺菌剤、ｐＨ調整剤、酵素類、抗炎症剤・血行促進剤、甘味剤、防腐剤、着色剤・色素類、香料等を適宜使用することができる。
口腔用組成物に配合することができる成分としては、具体的に、第２リン酸カルシウム、第３リン酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム、リン酸マグネシウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、無水ケイ酸、水酸化アルミニウム、アルミナ、ハイドロキシアパタイト、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、硫酸カルシウム、ゼオライト、合成アルミノケイ酸塩、ベンガラ等の研磨剤；前記の研磨剤を結合剤を用いて造粒した顆粒状研磨剤；グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マルチトール等の湿潤剤；カルボキシメチルセルロース及びその塩類、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カラギーナン、ポリアクリル酸ナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロースナトリウム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸プロピレングリコールエステル、キサンタンガム、トラガカントガム、カラヤガム、アラビヤガム、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ビーガム、ラポナイト等の粘結剤；モノフルオルリン酸ナトリウム、フッ化スズ、フッ化ナトリウム等の歯質強化剤；クロルヘキシジン及びその塩類、トリクロサン、塩化セチルピリジニウム、チモール類、塩化ベンザルコニウム等の殺菌剤；リン酸ナトリウム等のｐＨ調整剤；デキストラナーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、リゾチーム、ムタナーゼ等の酵素類；塩化ナトリウム、ヒノキチオール、ε−アミノカプロン酸、トラネキサム酸、アラントイン類、トコフェロール類、オクチルフタリド、ニコチン酸エステル類、ジヒドロコレステロール、グリチルレチン酸、グリチルリチン酸及びその塩類、グリセロホスフェート、クロロフィル、水溶性無機リン酸化合物、アズレン類、カミツレ、センブリ、当帰、センキュウ、生薬類等の抗炎症剤・血行促進剤；サッカリンナトリウム、ステビオサイド、タウマチン、アスパラチルフェニルアラニンメチルエステル等の甘味剤；ｐ−ヒドロキシ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ブチル、安息香酸ナトリウム等の防腐剤；二酸化チタン等の着色剤・色素類；ペパーミント油、スペアミント油、メントール、カルボン、アネトール、オイゲノール、サリチル酸メチル、リモネン、オシメン、ｎ−デシルアルコール、シトロネロール、α−テルピネオール、メチルアセテート、シトロネリルアセテート、メチルオイゲノール、シネオール、リナロール、エチルリナロール、ワニリン、チモール、アニス油、レモン油、オレンジ油、セージ油、ローズマリー油、桂皮油、ピメント油、桂葉油、冬緑油、丁子油、ユーカリ油等の香料等が挙げられる。
【００３９】
口腔用組成物には、本発明の効果を実質的に損なわない限り、界面活性剤を配合することもできる。界面活性剤としては特に制限はないが、アニオン系界面活性剤及びノニオン系界面活性剤を好ましく用いることができる。アニオン系界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸エステル塩；ラウロイルサルコシンナトリウム等のＮ−アシルアミノ酸塩；ラウロイルメチルタウリンナトリウム等のアシルタウリン塩；ヤシ油脂肪酸エチルエステルスルホン酸ナトリウム塩等の脂肪酸エステルスルホン酸塩等が挙げられる。ノニオン系界面活性剤としては、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル等の脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンフィトステロール、ポリオキシエチレンフィトスタノール、ポリオキシエチレンラノリン、ポリオキシエチレンラノリンアルコール、ポリオキシエチレンアルキルアミン、ポリオキシエチレン脂肪酸アミド、ポリオキシエチレンアルキルフェニルホルムアルデヒド縮合物、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン共重合体、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エタノールアミドなどが挙げられる。
【００４０】
口腔用組成物は、前記有効成分を配合し、常法により製造することができる。口腔用組成物の形態は特に制限されず、粉歯磨、液状歯磨、練歯磨、潤製歯磨、口腔パスタ等のペースト状洗浄剤、洗口液、マウスウォッシュ等の液状洗浄剤、うがい用錠剤、歯肉マッサージクリーム、チューインガム、トローチ、キャンディ等の食品等の形態とすることができる。
【００４１】
食品組成物を調製する場合、その形態は特に制限されず、飲料も包含される。一般食品の他に、感染症（具体的には、歯肉炎や歯骨炎などの歯周病、齲蝕病等）の予防・改善等をコンセプトとしてその旨を表示した飲食品、すなわち、健康食品、機能性食品、病者用食品及び特定保健用食品なども包含される。健康食品、機能性食品、病者用食品及び特定保健用食品は、具体的には、細粒剤、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、シロップ剤、液剤、流動食等の各種製剤形態として使用することができ、これら製剤のために使用することができる。製剤形態の食品組成物は、医薬製剤と同様に製造することができ、前記有効成分と、食品として許容できる担体、例えば適当な賦形剤（例えば、でん粉、加工でん粉、乳糖、ブドウ糖、水等）等とを混合した後、慣用の手段を用いて製造することができる。さらに、食品組成物は、スープ類、ジュース類、乳飲料、茶飲料、コーヒー飲料、ココア飲料、ゼリー状飲料などの液状食品組成物、プリン、ヨーグルトなどの半固形食品組成物、パン類、うどんなどの麺類、クッキー、チョコレート、キャンディ、ガム、せんべいなどの菓子類、ふりかけ、バター、ジャムなどのスプレッド類等の形態もとりうる。また、食品には、飼料も含まれる。
【００４２】
食品組成物には、種々の食品添加物、例えば、酸化防止剤、香料、各種エステル類、有機酸類、有機酸塩類、無機酸類、無機酸塩類、無機塩類、色素類、乳化剤、保存料、調味料、甘味料、酸味料、果汁エキス類、野菜エキス類、花蜜エキス類、ｐＨ調整剤、品質安定剤などの添加剤を単独、あるいは併用して配合してもよい。
【００４３】
化粧料組成物を調製する場合、その形態は特に制限されず、溶液、乳液、粉末、水−油二層系、水−油−粉末三層系、ゲル、エアゾール、ミスト及びカプセル等任意の形態とすることができる。また、化粧料組成物の製品形態も任意であり、例えば、マッサージ剤及びフットスプレー等のボディー化粧料、化粧水、乳液、クリーム及びパック等のフェーシャル化粧料、ファンデーション、おしろい、頬紅、口紅、アイシャドー、アイライナー、マスカラ及びサンスクリーン等のメーキャップ化粧料、メーク落とし、洗顔料及びボディーシャンプー等の皮膚洗浄料、ヘアーリンス及びシャンプー等の毛髪化粧料、浴用剤、軟膏、医薬部外品、あぶら取り紙、芳香化粧料等が挙げられる。
【００４４】
化粧料組成物は、化粧品、医薬部外品及び医薬品等に慣用される他の成分、例えば、粉末成分、液体油脂、固体油脂、ロウ、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル、シリコーン、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン界面活性剤、保湿剤、水溶性高分子、増粘剤、皮膜剤、紫外線吸収剤、金属イオン封鎖剤、低級アルコール、多価アルコール、糖、アミノ酸、有機アミン、高分子エマルジョン、ｐＨ調整剤、皮膚栄養剤、ビタミン、酸化防止剤、酸化防止助剤、香料、水等を必要に応じて配合し、常法により製造することができる。
【００４５】
その他の化粧料組成物に配合可能な成分としては、例えば、防腐剤（エチルパラベン、ブチルパラベン等）、消炎剤（例えば、グリチルリチン酸誘導体、グリチルレチン酸誘導体、サリチル酸誘導体、ヒノキチオール、酸化亜鉛、アラントイン等）、美白剤（例えば、胎盤抽出物、ユキノシタ抽出物、アルブチン等）、各種抽出物（例えば、オウバク、オウレン、シコン、シャクヤク、センブリ、バーチ、セージ、ビワ、ニンジン、アロエ、ゼニアオイ、アイリス、ブドウ、ヨクイニン、ヘチマ、ユリ、サフラン、センキュウ、ショウキョウ、オトギリソウ、オノニス、ニンニク、トウガラシ、チンピ、トウキ、海藻等）、賦活剤（例えば、ローヤルゼリー、感光素、コレステロール誘導体等）、血行促進剤（例えば、ノニル酸ワレニルアミド、ニコチン酸ベンジルエステル、ニコチン酸β−ブトキシエチルエステル、カプサイシン、ジンゲロン、カンタリスチンキ、イクタモール、タンニン酸、α−ボルネオール、ニコチン酸トコフェロール、イノシトールヘキサニコチネート、シクランデレート、シンナリジン、トラゾリン、アセチルコリン、ベラパミル、セファランチン、γ−オリザノール等）、抗脂漏剤（例えば、硫黄、チアントール等）、抗炎症剤（例えば、トラネキサム酸、チオタウリン、ヒポタウリン等）等が挙げられる。
【００４６】
本発明のＡＩ−２阻害剤、並びに前記感染症の予防及び／又は治療剤の投与量は、ＡＩ−２を阻害しうる量、又は感染症を予防及び／又は治療しうる量であればよく、投与方法、年齢、症状等により適宜決定することができる。例えば、前記有効成分の質量に基づき、１日あたり、体重１ｋｇあたり、経口投与で通常０．００１〜１００ｍｇ、好ましくは０．０１〜１０ｍｇである。
【００４７】
本発明のＡＩ−２阻害剤、並びに前記感染症の予防及び／又は治療剤における前記有効成分の含有量は、上記投与量を達成するように適宜決定できる。例えば、通常０．００１〜５質量％、好ましくは０．０５〜１質量％の量で前記有効成分を含む。
【００４８】
前記有効成分を投与することにより、ＡＩ−２を阻害することができ、ひいては、感染症を予防及び／又は治療することができる。
【００４９】
従来の感染症の予防及び治療には抗生物質の投与が行われてきた。しかし細菌が薬剤耐性を獲得するため、抗生物質の効果が減弱してしまう。一方、ＡＩ−２を阻害すれば、細菌が本来持つシステムを使ってその病原性を制御することが可能となるため、薬剤耐性を持っている細菌にも効果が期待できる。
【実施例】
【００５０】
以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００５１】
参考例  ＡＩ−２阻害活性成分の同定
ＡＩ−２阻害活性成分を単離するための原料を選定するために、下記に示す各種食材の抽出物を調製し、そのＡＩ−２阻害活性を調べた。
【００５２】
［テンペのヘキサン抽出物の調製］
テンペ（Mariza、市販品を購入）４０ｇを細かく砕き、ヘキサン１００ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．５４ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００５３】
［テンペの水抽出物の調製］
テンペ（Mariza、市販品を購入）４０ｇを細かく砕き、水１００ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、２．９１ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００５４】
［テンペの５０％エタノール抽出物の調製］
テンペ（Mariza、市販品を購入）４０ｇを細かく砕き、５０％エタノール１００ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、１．６５ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００５５】
［豆ち醤のヘキサン抽出物の調製］
豆ち醤（味の素、市販品を購入）１０ｇを細かく砕き、ヘキサン２０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．１３ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００５６】
［豆ち醤の水抽出物の調製］
豆ち醤（味の素、市販品を購入）１０ｇを細かく砕き、水２０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、５．９６ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００５７】
［豆ち醤の５０％エタノール抽出物の調製］
豆ち醤（味の素、市販品を購入）１０ｇを細かく砕き、５０％エタノール２０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、３．３７ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００５８】
［浜納豆のヘキサン抽出物の調製］
浜納豆（鈴木醸造、市販品を購入）２０ｇを細かく砕き、ヘキサン４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．１２ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００５９】
［浜納豆の水抽出物の調製］
浜納豆（鈴木醸造、市販品を購入）２０ｇを細かく砕き、水４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、７．８９ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６０】
［浜納豆の５０％エタノール抽出物の調製］
浜納豆（鈴木醸造、市販品を購入）２０ｇを細かく砕き、５０％エタノール４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．９９ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６１】
［腐乳のヘキサン抽出物の調製］
腐乳（興南貿易、市販品を購入）２０ｇにヘキサン４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．１６ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６２】
［腐乳の水抽出物の調製］
腐乳（興南貿易、市販品を購入）２０ｇに水４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、５．４８ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６３】
［腐乳の５０％エタノール抽出物の調製］
腐乳（興南貿易、市販品を購入）２０ｇに５０％エタノール４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、３．１３ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６４】
［ダイズのヘキサン抽出物の調製］
蒸煮した大豆４０ｇにヘキサン１００ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．１０ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６５】
［ダイズの水抽出物の調製］
蒸煮した大豆４０ｇに水１００ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、２．５６ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６６】
［ダイズの５０％エタノール抽出物の調製］
蒸煮した大豆４０ｇに５０％エタノール１００ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、１．４５ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６７】
［碁石茶のヘキサン抽出物の調製］
碁石茶（丸一横山商店から購入）１０ｇを細かく砕き、ヘキサン４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターの方法により濃縮し、０．２８ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６８】
［碁石茶の水抽出物の調製］
碁石茶（丸一横山商店から購入）１０ｇを細かく砕き、水４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、２．１２ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００６９】
［碁石茶の５０％エタノール抽出物の調製］
碁石茶（丸一横山商店から購入）１０ｇを細かく砕き、５０％エタノール４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、２．０４ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７０】
［阿波番茶のヘキサン抽出物の調製］
阿波番茶（山田産業から購入）１０ｇを細かく砕き、ヘキサン４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．１７ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７１】
［阿波番茶の水抽出物の調製］
阿波番茶（山田産業から購入）１０ｇを細かく砕き、水４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、０．６９ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７２】
［阿波番茶の５０％エタノール抽出物の調製］
阿波番茶（山田産業から購入）１０ｇを細かく砕き、５０％エタノール４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、１．１２ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７３】
［ばたばた茶のヘキサン抽出物の調製］
ばたばた茶（朝日町商工会から購入）１０ｇを細かく砕き、ヘキサン４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．１３ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７４】
［ばたばた茶の水抽出物の調製］
ばたばた茶（朝日町商工会から購入）１０ｇを細かく砕き、水４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、０．３８ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７５】
［ばたばた茶の５０％エタノール抽出物の調製］
ばたばた茶（朝日町商工会から購入）１０ｇを細かく砕き、５０％エタノール４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．４１ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７６】
［緑茶のヘキサン抽出物の調製］
緑茶（東海薬草研究所から購入）１０ｇを細かく砕き、ヘキサン４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．０１ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７７】
［緑茶の水抽出物の調製］
緑茶（東海薬草研究所から購入）１０ｇを細かく砕き、水４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、２．９８ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７８】
［緑茶の５０％エタノール抽出物の調製］
緑茶（東海薬草研究所から購入）１０ｇを細かく砕き、５０％エタノール４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、３．６５ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００７９】
［紅茶のヘキサン抽出物の調製］
紅茶（東海薬草研究所から購入）１０ｇを細かく砕き、ヘキサン４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ヘキサン相を濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、０．０１ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００８０】
［紅茶の水抽出物の調製］
紅茶（東海薬草研究所から購入）１０ｇを細かく砕き、水４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液を凍結乾燥により濃縮し、１．５８ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００８１】
［紅茶の５０％エタノール抽出物の調製］
紅茶（東海薬草研究所から購入）１０ｇを細かく砕き、５０％エタノール４０ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌し、ろ液をロータリーエバポレーターにより濃縮し、２．５３ｇの抽出物を得た。
次いで、得られた抽出物を濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにエタノールに溶解した。
【００８２】
［ＡＩ−２活性の測定］
ＡＩ−２バイオアッセイ系のためのレポーター菌株としてのビブリオ・ハーベイＢＢ１７０株（ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１１７）をＭａｒｉｎｅ  Ａｇａｒ  ２２１６培地（商品名、Ｄｉｆｃｏ社製）で３０℃、好気条件下で培養した。このように培養したビブリオ・ハーベイＢＢ１７０株の一白金耳を、ＡＢ（Autoinducer  Bioassay）培地（０．３Ｍ  ＮａＣｌ，０．０５Ｍ  ＭｇＳＯ4，０．２％vitamine-free  casamino  acidsに１Ｍリン酸カリウム〔ｐＨ７．０〕（０．４２Ｍ  ＫＨ2ＰＯ4、０．５８Ｍ  Ｋ2ＨＰＯ4）１０ｍＬ、０．１Ｍ  Ｌ−アルギニン１０ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ  ｔｈｉａｍｉｎ・ＨＣｌ  １ｍＬ、１０μｇ/ｍＬ  リボフラビン１ｍＬ、グリセロール２０ｍＬを混合してフィルター滅菌したものをＡＢ培地１Ｌに対して４２ｍＬ加えたもの）培地３ｍＬに植菌し、好気条件下で１６時間、３０℃、２００ｒｐｍで振盪培養を行った。この菌液をＡＢ培地で５０００倍に希釈し、レポーター菌液とした。
【００８３】
前記レポーター菌液に、上記で調製した各抽出物のエタノール溶液をそれぞれ用いて、その終濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）になるように添加し、室温で１０分プレインキュベートした。次いで、ＤＰＤ（OMM  Scientific社に合成検討を依頼し、同社で合成したものを購入した）を終濃度が１０μＭとなるように添加し、３０℃にて好気振盪培養を行った。４時間後の発光強度をケミルミネッセンス計（ベルトールド社製、Mitharas  LB940（商品名））で測定した。各抽出物のＡＩ−２阻害活性は、各抽出物とＤＰＤの双方を添加したときの発光強度を、各抽出物を添加せずにＤＰＤのみを添加したときの発光強度に対する相対値（ＡＩ−２相対活性）として算出することで評価した。ＡＩ−２相対活性が低いほどＡＩ−２阻害活性が高いことを意味する。
さらに、ＡＩ−２阻害化合物として既知の化合物（４−ブロモ−５−（４−メトキシフェニル）−２（５Ｈ）−フラノン、Sigma社製）をポジティブコントロールに用い、同様にＡＩ−２相対活性を算出した。
その結果を表１に示す。
【００８４】
【表１】
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【００８５】
表１の結果から、ダイズ発酵食品であるテンペのヘキサン抽出物においてＡＩ−２相対活性が１９％となり、優れたＡＩ−２阻害活性を有することがわかった。なお、テンペはカビを用いてダイズを発酵させたダイス発酵食品である。
続いて、テンペのヘキサン抽出物からＡＩ−２阻害活性成分の精製を試みた。
［ＡＩ−２阻害活性成分の精製］
テンペ（Mariza、市販品を購入）１８５ｇを細かく砕き、ヘキサン３００ｍＬを加えて室温（２０℃）で２時間攪拌しヘキサン相を分取した。残渣にさらにヘキサン３００ｍＬを加え室温（２０℃）で２時間攪拌しヘキサン相を分取した。分取したヘキサン相を併せて濾過した後ロータリーエバポレーターにより濃縮し、ヘキサン抽出物１０ｇを得た。
得られた抽出物をヘキサンに溶解し、シリカゲルカラム（インジェクトカラムＭ、山善株式会社製）にアプライした。次いでヘキサンから酢酸エチルへのリニアグラジエントにより分画し、各画分のＡＩ−２阻害活性を測定したところ、ＡＩ−２阻害活性が際立って高い画分が得られた。
この画分をガスクロマトグラフィーにより分析したところ、約８０質量％が１−モノアシルグリセロールであることがわかった。
【００８６】
試験例１  モノアシルグリセロールのＡＩ−２阻害活性
上記参考例により、モノアシルグリセロールがＡＩ−２阻害活性を有することが強く示唆されたため、各種のモノアシルグリセロールについて、下記のようにＡＩ−２阻害活性を調べた。
【００８７】
各種のモノアシルグリセロール試薬を購入してエタノール溶解液を調製した。これを前記のレポーター菌液に終濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）になるように添加し、室温で１０分間プレインキュベートした。次いで、ＤＰＤ（OMM  Scientific社に合成検討を依頼し、同社で合成したものを購入した。）を終濃度が１０μＭとなるように添加し、３０℃にて好気振盪培養を行った。４時間後の発光強度をケミルミネッセンス計（ベルトールド社製、Mitharas  LB940（商品名））で測定した。各試薬を添加せずにＤＰＤのみ添加したものの発光強度をコントロール値とし、ＡＩ−２阻害率を下記式により算出した。
ＡＩ−２阻害率（％）
＝１００×{（コントロール値）−（各試薬とＤＰＤの双方を添加したときの発光強度）}／コントロール値
ＡＩ−２阻害率が高いほどＡＩ−２阻害活性が高いことになる。
さらに、ＡＩ−２阻害化合物として既知の化合物（４−ブロモ−５−（４−メトキシフェニル）−２（５Ｈ）−フラノン、Sigma社製）をポジティブコントロールに用い、同様にＡＩ−２阻害率を測定した。
結果を表２に示す。
【００８８】
【表２】
2012116827.tif 000005
【００８９】
表２の結果から、炭素数６の脂肪酸であるヘキサン酸を構成脂肪酸とするモノアシルグリセロールでは、ＡＩ−２阻害率が１１．５％と低く、ＡＩ−２阻害活性が実用可能なレベルではなかった。
これに対し、炭素数８〜１８の脂肪酸を構成脂肪酸とするモノアシルグリセロールでは、飽和・不飽和を問わず、いずれのモノアシルグリセロールもＡＩ−２阻害率が４０％以上と高かった。
また、構成脂肪酸がステアリン酸、オレイン酸及びリノール酸のいずれであっても高いＡＩ−２阻害活性を示すことから、構成脂肪酸の二重結合の数にかかわらずＡＩ−２阻害活性を示すこともわかる。
さらに、オレイン酸を構成脂肪酸とするモノアシルグリセロールについて、これが１−モノアシルグリセロールであっても、２−モノアシルグリセロールであっても高いＡＩ−２阻害活性が認められた。この結果は、脂肪酸がエステル結合しているグリセリンのヒドロキシル基の位置が、ＡＩ−２阻害活性に実質的に影響を与えないことを示している。
【００９０】
上記の結果から、炭素数８以上の脂肪酸を構成脂肪酸とするモノアシルグリセロールであれば、脂肪酸の飽和度、脂肪酸の結合位置にかかわらず高いＡＩ−２阻害活性を示すことがわかった。
【００９１】
試験例２  殺菌試験
試験例１と同様に調製したレポーター菌液と、下記表３に示すモノアシルグリセロール試薬のエタノール溶液を混合し（レポーター菌液中のモノアシルグリセロール試薬の終濃度が０．０１％（ｗ／ｖ））、３０℃で１０分間プレインキュベートした。次いで、ＡＢ培地で１０００倍に希釈し、Ｍａｒｉｎｅ  Ａｇａｒ培地（Ｄｉｆｃｏ社製）に播種し、３０℃で１日培養した。培養後、寒天培地に発生したコロニーをカウントし生菌数を算出した。いずれのモノアシルグリセロール試薬も添加していないときの生菌数をコントロールとした。
結果を下記表３に示す。
【００９２】
【表３】
2012116827.tif 000006
【００９３】
表３に示すように、試験例１で用いた濃度の１０倍もの濃度のモノアシルグリセロール試薬を加えても、殺菌作用は認められなかった。
【００９４】
以上の結果は、本発明のＡＩ−２阻害剤の有効成分は、歯周病、齲蝕病の原因菌等の病原性細菌に対する殺菌能を有するものではなく、病原性細菌の種間連絡に利用されるＡＩ−２の活性を阻害するものであることを示す。
【００９５】
試験例３  歯垢中ＡＩ−２量と齲蝕病との関係
ビブリオ・ハーベイＢＢ１５２株（ＡＴＣＣ  ＢＡＡ−１１１９）をＭａｒｉｎｅ  Ａｇａｒ２２１６培地で３０℃、好気条件下で培養した。このように培養したビブリオ・ハーベイＢＢ１５２株の一白金耳をＭａｒｉｎｅ  Ｂｒｏｔｈ２２１６培地に植菌し、好気条件下８時間、３０℃、２００ｒｐｍで振盪培養を行った。
上記菌液をＡＢ培地に植菌し、さらに好気条件下１６時間、３０℃、２００ｒｐｍで振盪培養を行った。遠心分離（８０００ｒｐｍ、１５分、４℃）後の上清を取り出し、カットオフ値１Ｋのスピンカラム（ポール社製）を用いて分子量１０００以下の画分を得、ＡＩ−２溶液とした（ＡＩ−２濃度：約０．１μＭ）。
【００９６】
齲蝕原性細菌であるストレプトコッカス・ミュータンスＪＣＭ５７０５株をＢＨＩ寒天培地（Difco社製）に播種・培養（嫌気条件下で３７℃、１日）した。このようにして培養したストレプトコッカス・ミュータンスＪＣＭ５７０５株の一白金耳をＢＨＩ液体培地（Difco社製）に植菌し、嫌気条件下で３７℃、１６時間培養した。ＰＢＳにて洗浄後、２×１０10個／ｍＬになるように菌液を調製した。
【００９７】
抗生物質水溶液（アンピシリン、カナマイシン各２ｍｇ／ｍＬ）をＳＤラット（雄性、３週齢）に５日間自由飲水させた後、ストレプトコッカス・ミュータンス菌液をラットの左右下顎臼歯部に各５０μＬ、１回／日で５日間滴下した。食餌は齲蝕誘導食であるＤｉｅｔ２０００（商品名、日本クレア社製）を与えた。その後、ＡＩ−２溶液又はＡＢ培地（コントロール）を２回／日、１回当たり２００μＬを臼歯部に１ヶ月間滴下した（各群N=5）。また、ストレプトコッカス・ミュータンス菌液を滴下しない群も設定した（N=5）。
【００９８】
各群のＳＤラットの齲蝕の程度を示す齲蝕スコアを、Keyes  P．H．et  al.，J．Dent．Res.，37，6，p．1958に記載の方法に準じて測定した。その結果を表４に示す。
【００９９】
【表４】
2012116827.tif 000007
【０１００】
表４の結果から、歯垢中ＡＩ−２量と齲蝕病とが相関関係を有すことがわかった。これにより、歯垢中のＡＩ−２が齲蝕亢進に関与し、ＡＩ−２活性の阻害が齲蝕病の予防・改善に有効であることが示された。
【０１０１】
（処方例）
炭素数８以上の脂肪酸とグリセリンとのモノエステル化合物を有効成分とする歯周病又は齲蝕病の予防及び／又は治療剤として、下記に示す組成のチューブ入り練歯磨、練歯磨、樹脂製容器入りマウスウォッシュを常法により各々調製した。
【０１０２】
処方例１  チューブ入り練歯磨の調製
ソルビトール                                                        ３５質量％
無水ケイ酸                                                          ２０質量％
濃グリセリン                                                          ５質量％
オレイン酸−１−ＭＡＧ                                                ５質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム                                  １質量％
歯磨き用香料                                                          １質量％
フッ化ナトリウム                                                  ０．２質量％
サッカリンナトリウム                                              ０．２質量％
塩化セチルピリジニウム                                          ０．０５質量％
精製水                                                                    残余
計１００質量％
【０１０３】
処方例２  チューブ入り練歯磨の調製
炭酸カルシウム                                                      ３０質量％
ソルビトール                                                        ２８質量％
無水ケイ酸                                                            ８質量％
濃グリセリン                                                          ５質量％
ラウリル硫酸ナトリウム                                            １．２質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム                                  １質量％
歯磨き用香料                                                          １質量％
オレイン酸−２−ＭＡＧ                                            ０．５質量％
酢酸ｄｌ−α−トコフェロール                                      ０．２質量％
フッ化ナトリウム                                                  ０．２質量％
サッカリンナトリウム                                              ０．２質量％
塩化セチルピリジニウム                                          ０．０５質量％
精製水                                                                    残余
計１００質量％
【０１０４】
処方例３  練歯磨の調製
ソルビトール                                                        ２５質量％
無水ケイ酸                                                          ２０質量％
プロピレングリコール                                                  ６質量％
ラクチトール                                                          ５質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム                                  １質量％
歯磨き用香料                                                          １質量％
オレイン酸−１−ＭＡＧ                                            ０．５質量％
フッ化ナトリウム                                                  ０．２質量％
サッカリンナトリウム                                              ０．２質量％
塩化セチルピリジニウム                                          ０．０５質量％
精製水                                                                    残余
計１００質量％
【０１０５】
処方例４  練歯磨の調製
ソルビトール                                                        ２８質量％
ポリオキシエチレン(２００)ポリオキシプロピレン(４０)共重合体        １６質量％
無水ケイ酸                                                          １２質量％
パラチニット                                                        １０質量％
濃グリセリン                                                          ８質量％
ラウリル硫酸ナトリウム                                            １．２質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム                              １．５質量％
歯磨き用香料                                                          １質量％
オレイン酸−２−ＭＡＧ                                            ０．８質量％
モノフルオロリン酸ナトリウム                                      ０．７質量％
サッカリンナトリウム                                              ０．２質量％
塩化セチルピリジニウム                                          ０．０５質量％
精製水                                                                    残余
計１００質量％
【０１０６】
処方例５  練歯磨の調製
ソルビトール                                                        ２８質量％
無水ケイ酸                                                          １５質量％
ポリエチレングリコール４００                                          ８質量％
エリスリトール                                                        ５質量％
ラウリル硫酸ナトリウム                                            １．２質量％
カルボキシメチルセルロースナトリウム                                  １質量％
歯磨き用香料                                                          １質量％
リノール酸−２−ＭＡＧ                                            ０．１質量％
酢酸ｄｌ−α−トコフェロール                                      ０．２質量％
フッ化ナトリウム                                                  ０．２質量％
サッカリンナトリウム                                              ０．２質量％
塩化セチルピリジニウム                                          ０．０５質量％
精製水                                                                    残余
計１００質量％
【０１０７】
処方例６  樹脂製容器入りマウスウォッシュの調製
エタノール                                                          １５質量％
エリスリトール                                                        ７質量％
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                                        ２質量％
サッカリンナトリウム                                              ０．５質量％
リノール酸−２−ＭＡＧ                                            ０．２質量％
洗口剤用香料                                                      ０．２質量％
安息香酸ナトリウム                                                ０．１質量％
酢酸ｄｌ−α−トコフェロール                                    ０．０５質量％
トリクロサン                                                    ０．０２質量％
精製水                                                                    残余
計１００質量％