(57)【要約】【課題】ステロ−ルグリコシドは天然に広く存在する。植物由来の食品中にもあり、食品成分として摂取されている。しかし、水にも油にも難溶であり、未利用の天然物質である。ステロールグリコシドは、植物ステロールと単糖類とのエステルで、その構造からその活用が期待されているが利用し難く、未利用である。【解決手段】ステロールグリコシドが水にも油にも難溶解性であるのは、油溶性のステロール構造と親水性の水酸基の両方が存在するためである。親水性の原因である水酸基を酢酸エステルとしてマスクすることにより、油性物質との親和性を改善し、他の油溶性医薬素材との配合性を高め、血中コレステロール濃度低減目的の調剤を可能にする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ステロールグリコシド酢酸エステルを含有し、血中コレステロール濃度を低減するための経口医薬組成物。
【請求項２】
請求項１のステロールグリコシド酢酸エステルが、ステロールグリコシドテトラ酢酸エステルである請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
請求項１のステロ−ルグリコシド酢酸エステルがシトステロールグルコシド酢酸エステルである  請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
請求項１のステロールグリコシド酢酸エステルが、シトステロールグルコシドテトラ酢酸エステルである請求項１記載の医薬組成物。
【請求項５】
請求項１のステロールグルコシドが植物油脂精製工程、植物油誘導製品製造工程またはその貯蔵中のいずれかで発生する副生物より得られるものである請求項１記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物界に広く存在し、食品にも含有されているステロールグリコシドを酢酸エステルとし、油溶解性を改善することにより、血中コレステロ−ル濃度を低減する効果を有する新規医薬配合素材を提供することを目的とするものである。
【背景技術】
【０００２】
植物性ステロール類であるシトステロールやスチグマステロールやその誘導体は、血中コレステロールを低下させ、前立腺肥大による排尿障害改善その他の効果があることが知られており、食品や医薬などに使用されている。
【０００３】
植物性ステロール類は遊離体以外に、脂肪酸エステル、糖類と結合したステロールグリコシドやその脂肪酸エステルとしても、穀類、豆類、野菜、果実などに広く存在し、食品として、摂取されている。これらのステロールやその誘導体は粗繊維とともに、植物性食品の健康効用に役立っている。
【０００４】
天然に存在するステロールグリコシドはステロール類と糖類が１分子づつエーテル結合したものである。
そのステロール成分はシトステロールやスチグマステロール等であり、糖類成分はグルコースやガラクトース等の単糖類である。両者の組合せにより多種存在するが、最も代表的なものはシトステロールグルコシドである。また、その脂肪酸エステルはオレイン酸等の高級脂肪酸モノエステルである。
【０００５】
これらのステロールグリコシドやその脂肪酸エステルはその構造から、植物ステロールと類似の生理活性が期待され、研究されてきているが、実用化には至ってない。油にも水にも溶解し難がたく、遊離ステロ−ルのような生理活性が発揮されないことによる。
ステロ−ル部は疎水性であり、糖部の残余水酸基が疎油性であることに起因していると考えられる。
【０００６】
Ｊａｎｔｚｅｎ らは、未精製大豆油からシトステロール−ｄ−グルコシドを単離し、その含有量は０．０３％、未精製大豆油から得られたリン脂質には３．０％含有するが、精製された大豆油には含まれてなかったと報告している。
近藤と森は大豆から同様に、シトステロール−ｄ−グルコシドを得ている。
【０００７】
Ｔｈｏｒｎｔｏｎらは未精製大豆油４５５０ｋｇをケイ酸アルミ系吸着剤３０ｋｇで処理し、２３５ｇのステロールグルコシドを得ている。このもの２ｇをアセチル化し、融点１６５−１６６℃のテトラ酢酸エステル１．８ｇを得ている。 
【０００８】
Ｔｈｏｒｎｔｏｎらは未精製綿実油３６Ｋｇから３ｇの粗製物を得て、酢酸エステルとして精製後、分解して、２４５−２５０℃で分解するステロールグルコシドを得ている。
そのテトラ酢酸エステル０．８Ｇの融点は１６４−１６５℃であった。
【０００９】
井上らによれば、ポリビニルピロリドン等の水溶性高分子の水溶液にステロールグルコシドを加熱溶解または分散させることにより、消化器官で吸収されやすい粗製物とする組成物が得られる。ＵＳＰ４，０８３,９６９
上野らは高純度のステロールグリコシドを得る方法として、テトラ酢酸エステルとし、クロマト分離することを提案している。
【００１０】
井上らはステロールグリコシドを含有する植物から単離する方法として、炭酸アルカリ金属塩等の存在下でアルカリ性低級アルカノールと高温で処理することを提案している。
上野らはステロール配糖体の精製法として、粗製物をアセチル化し、液体クロマトグラフィー法で分離後、塩基性条件で加水分解することを提案している。 
【００１１】
Ｖｅｒａ  Ｖａｎ  Ｈｏｅｄらはパーム油及び大豆油を原料とするバイオ燃料の各１Ｋｇ中にそれぞれ５５−２７５ｍｇと０−１５８ｍｇのベータシトステロールグルコシドが存在することを確認している。
【００１２】
無類井らは各種ステロールグリコシドをリパ−ゼの存在下で、糖分の１級水酸基のみを選択的に脂肪酸と反応させる方法を提案している。
【００１３】
ひまし油は水酸基を有するリシノール酸を主成分とするので、他の油脂よりはステロールグリコシドとの親和性があり、１００℃以上の搾油条件ではある程度のステロールグリコシドが圧搾原油中に溶出し、その後の工程のタンクや製品タンクの底部や壁面に析出する。ひまし油の誘導体、たとえばひまし油脂肪酸メチルエステルについても同じ理由で、その工程や製品タンク中でステロールグルコシドの析出がおこる。
【００１４】
ステロールグリコシドの有用性について研究されており、各種の生理活性が知られている。
Ｐｅｇｅｌらは各種のステロールグリコシドやその脂肪酸エステルを含有するものが消炎、痛風、前立腺肥大に効果があるとしている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特公昭５３−２０９８６
【特許文献２】特公昭５７−５８３５７
【特許文献３】特公昭６２−００９１２０
【特許文献４】特開平０８−０７０８８５
【特許文献５】特開２００２−２６５３４６
【特許文献６】Ｕ．Ｓ．Ｐ．４，０８３，９６９  日本新薬  井上
【特許文献７】Ｕ．Ｓ．Ｐ．４，１１２，２１８
【特許文献８】Ｕ．Ｓ．Ｐ．４，１８８，３７９
【特許文献９】ＵＳＰ  ４，２３５，９９２
【特許文献１０】Ｕ．Ｓ．Ｐ．４，２５４，１１１
【特許文献１１】Ｕ．Ｓ．Ｐ．４，４９６，４８９
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Ｊａｎｔｚｅｎら  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｚ．２７２，１６６（１９３４）
【非特許文献２】近藤、森  Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓ．Ｊａｐａｎ．５７，１１２８（１９３６）
【非特許文献３】Ｔｈｏｒｎｔｏｎら  Ｊ  Ａ．Ｃｈｅｍ．Ｓ．，６２，２００６                    （１９４０）
【非特許文献４】Ｔｈｏｒｎｔｏｎら  Ｊ．Ａ．Ｃｈｅｍ．Ｓ．，６３，２０７９                    （１９４１）
【非特許文献５】Ｐｅｒｌｍａｎら    Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ、２，６９１，０１１                    （１９５４）
【非特許文献６】Ａｙｌｗａｒｄら    Ｎａｔｕｒｅ、１８１，１０６４（１９５８）
【非特許文献７】Ａｙｌｗａｒｄら    Ｎａｔｕｒｅ、１８４，１３１９（１９５９）
【非特許文献８】Ｖａｎ  ＨｏｅｄらＪ．Ａ．Ｏ．Ｃ．Ｓ．２００８、８５，７０１
【非特許文献９】ＫＨ．Ｐｅｇｅｌ  Ｓｏｕｔｈ  Ａｆｒｉｃａｎ  Ｊ．ｏｆ                    Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｖｏｌ．９３  Ｊｕｎｅ（１９９７）
【非特許文献１０】Ｈｕａｌｉ  Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ    ＪＡＯＣＳ．Ｖｏｌ．                      ８７（２）２１５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
請求項１〜請求項４に記載した発明により課題を解決する。
ステルロールグリコシドの有用性が期待されながら、実用に至ってない理由は、水にも油性物質にも溶解しがたいことにある。このことはを解決し、その有用性を発揮できる方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明は以下のとおりである。
［請求項１］
ステロールグリコシド酢酸エステルを含有し、血中コレステロ−ル濃度を低減する作用を有する医薬品組成物。  
［請求項２］
ステロールグリコシド酢酸エステルがステロールグリコシドテトラ酢酸エステルである請求項１記載の医薬品組成物。
［請求項３］
ステロールグリコシド酢酸エステルが、シトステロールグルコシドである請求項１記載の医薬品組成物。
［請求項４］
ステロールグリコシド酢酸エステルが、シトステロールグルコシドテトラ酢酸エステルである請求項１記載の医薬組成物。
［請求項５］
請求項１のステロールグルコシドが植物油脂精製工程、植物油誘導製品製造工程またはその貯蔵中のいずれかで発生する副生物より得られるものである請求項１記載の医薬組成物。
【００１９】
ステロールグリコシドは親油性のステロール１分子に親水性の糖が１分子エーテル結合したものである。例えば、代表的なシトステロールグルコシドは分子量５５９で水酸基を４個有する。この構造が融点２００℃以上で水にも油にも難溶解性にしており、そのままではステロ−ルの有する生理活性を発揮できなくしている。
【００２０】
ステロールグルコシドの４個の水酸基を酢酸エステルすることにより、融点は１６０℃台になることは知られている。しかし、その技術は主としてステロールグルコシドの精製手段または構造確認の目的にのみ使用され、この化合物の生理活性、特にコレステロ−ル濃度を低減する作用に関しては未だ研究されずにきた。
【００２１】
ステロ−ルグルコシドの酢酸エステルやアシル化物に止血作用、血管補強作用、消炎作用があり、医薬原料として有用とする先行技術はあるが、コレステロ−ル低減作用についての先行技術はない。
【００２２】
本発明は、ステロールグリコシド酢酸エステルを、単独又は他の油性物質と併せ使用することにより、血中コレステロ−ル濃度を低減させる効果を医薬組成物に付与することを目的とするものである。本発明の医薬組成物は経口医薬として用いるものである。
【発明の効果】
【００２３】
ステロールグリコシドをテトラ酢酸エステルとすることにより、他の親油性医薬素材との親和性が得られ、配合が容易になるので、広範囲に利用することが可能になり、コレステロールの吸収低減の生理活性機能発揮が効果的になることが期待され、各種の医薬組成物として使用することが可能になる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
植物油脂製造時に副生するリン脂質、油かす、粗製品や製品タンクの析出物、脂肪酸メチルその他のエステル類は程度の差はあるが、全てステロールグリコシドを含有する。
生成工程や製品貯蔵中に析出することも多い。バイオ燃料である脂肪酸エステルからの析出物もその一例である。これらのステロールグリコシドを含有する物質は全て、本発明品の原料とすることができる。
まずこれらに混在する不要物を除去し、ステロールグリコシド含有量の高いものを得る。
【００２５】
大豆粕、その他の一般植物油粕や副生リン脂質は含水アルコールやアルコール等の極性溶媒を用いて、常温乃至６０℃以下で不要物を除去する。この場合、温度が高すぎると、目的とするグリコシドも部分的に溶出するので注意する。
【００２６】
次いで、高沸点アルコールやケトン類、セロソルブ類等の極性を有する溶剤やそれらの適当な混合物を使用して、目的物を抽出する。このステロールグリコシドの抽出は６０℃以上の温度で実施すると効率的である。
【００２７】
ひまし油搾油は通常１００℃前後で行われる。搾油直後に濾過された粗製ひまし油は、工程中ののタンクで、温度低下とともにステロ−ルグルコシドを析出させる。精製ひまし油もステロ−ルグルコシドを製品タンク貯蔵中のは温度低下で、時間とともにステロールグリコシドを析出させる。それらの析出物を集め、混在ひまし油を室温またはあまり高くない温度条件でアルコール等の溶剤で洗い去り、その残部を原料として使用する。
このひまし油タンクの析出物から油分を除去したものは、９０％以上の高含量である。
【００２８】
バイオ燃料からの抽出物も高純度で、原料として有利である。
【００２９】
酢酸エステル化は過剰の無水酢酸を用い、無水酢酸溶媒のリフラックス条件で反応させる。ピリジンを溶媒に用いると反応は促進される。最初は懸濁状態であるが、反応の進行とともに溶解性が増して、透明になり、冷却すると、ステロールグルコシド酢酸エステルの結晶が得られる。得られた粗製結晶をを適当な溶媒を用いて再結晶させ、融点１６０−１６８℃の酢酸エステルを得ることが出来る。
【００３０】
ステロールグリコシドは４個の水酸基を有しており、その全ての水酸基がエステル化されたテトラ酢酸エステルとすることが最も望ましい。しかし、トリ酢酸エステル以下の部分エステルが混在するものであっても、ある程度の親油性を有し、条件によっては使用可能である。
【００３１】
ひまし油タンクのステロールグリコシドはベータシトステロールグルコシドであり、高収率で融点１６４〜１６８℃のテトラ酢酸エステルが得られる。
【００３２】
ステロールグルコシドのテトラ酢酸エステルやトリ酢酸エステルが混在する酢酸エステルは油性物質に対する親和性があり、医薬への配合が容易である。
【００３３】
本発明の医薬組成物は、コレステロ−ル濃度を低減作用に使用できるだけでなく、体脂肪低減、糖尿病、心臓疾患等への効果も期待できる。
ステロールグリコシド酢酸エステルはステロールグリコシドに比し、親油性が増し、使用し易いが、ステロールと比較すると、親油性は小さく、分子は大きいので、消化器官からの吸収は少ないと予想される。このことからコレステロールの吸収低減効果が植物ステロールより顕著になると期待される。
【００３４】
実施例１
精製ひまし油タンクの底部のスラリー状の部分を採り、３−５倍量のメタノールを加えてかき混ぜ、混在するひまし油を溶解させ、ひまし油メタノール液を濾過した。残渣のメタノール洗浄をくり返し、淡褐色粉体を得た。この粉体１００ｇに無水酢酸５００ｇを加え、かき混ぜながら、無水酢酸の還流条件で反応させた。最初は殆ど溶けず、懸濁状態であったが、時間の経過とともに、次第に溶解し、３０時間後には完全に透明になった。透明になってから、更に５時間還流を継続後、過剰の無水酢酸と副生した酢酸を回収した。得られた結晶はステロ−ルグルコシド酢酸エステルである。この粗製結晶を酢酸エチルを溶媒として再結晶をくり返し、白色の精製結晶８０ｇを得た。この精製工程で、モノエステル、ジエステル、トリエステルその他の不純物が除去さる。この結晶の融点は１６５〜１６６℃で、分析により、ベータシトステロールテトラ酢酸エステルであることを確認した。
【００３５】
実施例２
粗製ひまし油タンク壁面に析出付着する褐色物を集め、実施例１と同様に実験を行い、同様に融点１６５〜１６６℃の結晶を得た。          
【００３６】
実施例３
大豆油リン脂質粗製物からも同様の実験を行い、融点１６５〜１６６℃の結晶を得た。例１の結晶と混合して融点測定し、同じ融点を示した。
【００３７】
実施例４
実施例１、実施例２及び実施例３で得た結晶をアルコール性アルカリ液で加水分解処理し、白色粉体を得た。これら３種の粉体を加熱すると２４０℃から着色分解し始めた。分析によりシトステロールグルコシドであることを確認した。
【００３８】
実施例５
実施例１−３で得られたステロールグルコシド酢酸エステル５ｇを大豆油１００ｇとともに１２０℃に加熱し、透明溶液を得た。
【００３９】
実施例６
実施例４で得られたシトステロールグルコシド１ｇを大豆油１００ｇとともに１２０℃に加熱したが、殆ど溶解せず、０．９５ｇが濾過回収された。    
【００４０】
実施例７
雄性Ｗｉｓｔａｒラットを下記飼料で２０日飼育し、血中コレステロール濃度を測定した。  
基本飼料配合：  カゼイン：２０  大豆油：１０  ミネラル：４  粗繊維：２  混合ビタミン：１  メチオニン：０．３  塩化コリン：０．１５  デンプン：６２．５５ コレステロ−ル：１
上記の基本配合を対象区とし、従来例として、大豆油にシトステロ−ルを１％添加した第一区と、本発明例として大豆油に実施例１で得られた結晶を１％添加した第二区を設けた。
【００４１】
実施例７の結果
従来例の第一区の対象区に対する血中コレステロ−ル濃度低減率は９５〜９０％であった。
これに対し、本発明の第二区の対象区に対する血中コレステロ−ル濃度低減率は９０〜８５％であった。この結果、本発明の医薬組成物のよる血中コレステロール濃度低減作用が優れていることが明らかである。