(57)【要約】【課題】グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母及びその育種法の提供。【解決手段】アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子が宿主に導入された、グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母。酵母は、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属、クルベロミセス属、ピキア属、シゾサッカロミセス属又はキャンディダ属よりなる群から選ばれる属に属するものを使用する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母。
【請求項２】
アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子が宿主酵母に導入された、グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母。
【請求項３】
酵母が、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属、クルベロミセス属、ピキア属、シゾサッカロミセス属又はキャンディダ属に属するものである、請求項１又は２に記載の酵母。
【請求項４】
アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子が以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードするものである請求項２に記載の酵母。
(a) 配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるタンパク質
(b) 配列番号２で表されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ、アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質
【請求項５】
アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子が以下の(a)又は(b)のDNAを含むものである請求項２に記載の酵母。
(a) 配列番号１で表される塩基配列からなるDNA
(b) 配列番号１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNA
【請求項６】
受領番号がNITE AP-1052である請求項２に記載の酵母。
【請求項７】
アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子を宿主酵母に導入することを特徴とする、グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母の製造方法。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の酵母を用いてアルコール発酵を行うことを特徴とするアルコールの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母、及びその育種方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、加圧熱水処理によりバイオエタノールを生産するときには、リグノセルロースを加圧熱水処理した後、酵母を添加してバイオエタノールを生産していたが、この液には発酵阻害効果があった。本発明者は、最近、この発現阻害効果はグリコールアルデヒドによることを見出した（非特許文献１)。
他方、清酒酵母のアルコールデヒドロゲナーゼの遺伝子が高発現し、それに伴い酵素活性も増強して当該酵母のエチルアルコール生成能が改善したことが報告されている（非特許文献２）。
このような状況下、グリコールアルデヒドの作用を回避しつつアルコールを効率良く生産する手法の開発が望まれている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Lahiru N. J., et al., Biotechnol Lett. 2011 Feb;33(2):285-92
【非特許文献２】日本醸造協会誌：Vol.99 No.5, Page. 365-373 (2004)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、グリコールアルデヒドに耐性である酵母とその育種方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、上記課題を解決するため鋭意研究を行った結果、アルコールデヒドロゲナーゼをコードするADH1を破壊すると親株と比べてグリコールアルデヒドに感受性になることが判明した。そして、酵母でアルコールデヒドロゲナーゼをコードするADH1を高発現することにより、グリコールアルデヒドに耐性の酵母を作製することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下の通りである。
（１）グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母。
（２）アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子が宿主酵母に導入された、グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母。
（３）酵母が、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属、クルベロミセス属、ピキア属、シゾサッカロミセス属又はキャンディダ属に属するものである、（１）又は（２）に記載の酵母。
（４）アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子が以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードするものである（２）に記載の酵母。
(a) 配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるタンパク質
(b) 配列番号２で表されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ、アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質
（５）アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子が以下の(a)又は(b)のDNAを含むものである（２）に記載の酵母。
(a) 配列番号１で表される塩基配列からなるDNA
(b) 配列番号１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ、アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNA
（６）受領番号がNITE AP-1052である（２）に記載の酵母。
（７）アルコールデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子を宿主酵母に導入することを特徴とする、グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母の製造方法。
（８）前記（１）〜（６）のいずれか１項に記載の酵母を用いてアルコール発酵を行うことを特徴とするアルコールの製造方法。
【発明の効果】
【０００６】
本発明により、グリコールアルデヒドに耐性の酵母が提供される。本発明の酵母は、グリコールアルデヒド存在下でも耐性であり、効率良くアルコール発酵を行なうことができる。
従来、エチルアルコール生成能とアルコールデヒドロゲナーゼ遺伝子の高発現との関係を研究した報告はあるが（文献名：Overexpression of ADH1 and HXT1 genes in the yeast Saccharomyces cerevisiae improves the fermentative efficiency during tequila elaboration. Gutierrez-Lomeli M, Torres-Guzman JC, Gonzalez-Hernandez GA, Cira-Chavez LA, Pelayo-Ortiz C, Ramirez-Cordova Jde J. Antonie Van Leeuwenhoek. 2008 May;93(4):363-71.）、アルコールデヒドロゲナーゼ遺伝子の発現とグリコールアルデヒド耐性との関係を示唆するものは見出されず、アルコールデヒドロゲナーゼ遺伝子を高発現する酵母の選別の事例も見当たらない。本発明によれば、酵母がグリコールアルデヒドに耐性になり、エタノールを効率よく生産することができる。
従って、本発明の酵母は、バイオエタノールなどの生産に極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】本発明の酵母がグリコールアルデヒドに耐性であることを示す図である。
【図２】育種株のバイオエタノール生産特性を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明を詳細に説明する。
１．概要
本発明は、グリコールアルデヒドに耐性を示す酵母及びその育種方法である。本発明の酵母は、野生型酵母と比較してグリコールアルデヒドに耐性であり、効率良くアルコールを製造することができるものである。
本発明者は、以前の研究により、酵母におけるアルコールデヒドロゲナーゼ（ADH1)をコードする遺伝子（ADH1遺伝子）を破壊すると、その破壊された酵母は親株と比較してグリコールアルデヒドに感受性になることが示された。グリコールアルデヒド（GA）はアルコール発酵を阻害することから、GAに耐性の酵母を育種することにより、アルコール発酵を効率よく行なうことができると考えた。
そこで、野生型株（親株）をGAの存在下で培養し、GAに耐性の酵母を選抜することに成功した。この選抜された酵母はADH1遺伝子が高発現していた。また、遺伝子工学的手法を用いて、ADH1遺伝子を酵母宿主に導入して形質転換酵母を作製すると、当該酵母はADH1遺伝子を高発現するとともに、GAに耐性を示すようになった。
本発明は上記知見により完成されたものである。
【０００９】
２．野生型親株酵母からのグリコールアルデヒド耐性株の取得
本発明は、グリコールアルデヒド（GA)の存在下で親株酵母を培養し、当該GAに耐性の酵母を選抜することを特徴とする。このように分離選抜された酵母は、ADH1遺伝子を高発現するとともにGAに耐性であり、効率良くアルコール発酵を行なうことができる。
本発明において、親株として用いる酵母としては特に制限はなく、例えばサッカロミセス（Saccharomyces）属、ピキア(Pichia)属、キャンディダ(Candida)属、シゾサッカロミセス（Schizosaccharomyces）属又はクリベロミセス（Kluyveromyces）属に属する酵母が挙げられる。それぞれの属に属する酵母として、例えば以下の酵母が挙げられる。
【００１０】
サッカロミセス属：Saccharomyces cerevisiae、Saccharomyces bayanus、Saccharomyces fermentati、Saccharomyces oviformis、Saccharomyces rouxii、Saccharomyces chevalieri等
シゾサッカロミセス属：Schizosaccharomyces pombe等
クリベロミセス属：Kluyveromyces marxianus
ピキア(Pichia)属  Pichia pasteurianus
キャンディダ(Candida)属 Candida glabrata
本発明において使用する酵母は、サッカロマイセス属に属する酵母が好ましく、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）がより好ましい。
GAは、特に限定されるものではく、市販品（例えばシグマアルドリッチ社）を使用することができる。
【００１１】
本発明においては、GAの存在下で酵母を培養する。培養条件は特に限定されるものではなく、使用される酵母により適宜設定することができる。例えば、通常の酵母培養用培地にGAを添加してGA含有培地とし、この培地を用いて培養する。GAの濃度は、例えば0.1 mM〜50 mMであり、好ましくは 1 mM〜20 mMである。培養時間は、例えば１日〜２０日であり、好ましくは２日〜５日である。培養温度は、例えば１５℃〜５０℃であり、好ましくは２５℃〜４０℃である。
【００１２】
培養後、GAに耐性の株を選抜分離する。「耐性」とは、GAの存在下でも増殖できる性質を意味し、上記GA含有培地を用いて上記培養条件で培養した場合、生存して増殖可能な酵母を「耐性」であるという。耐性であると判断するための上記「増殖」の指標は、親株よりも増殖速度が１．２倍以上速いことである。そして、GA耐性株において、ADH1遺伝子を高発現する株を構築するためには、GAの存在下で培養後、生存した株について、real time PCR試験によりADH1遺伝子の発現量又はADH1の酵素活性を測定し、親株又は野生型酵母よりもADH1遺伝子の発現量又は酵素活性が高い株を最終的に目的の菌株として選択すればよい。
【００１３】
「高発現」又は「発現量が高い」とは、親株又は野生株と比較してADH1遺伝子の発現量が高いことを意味し、親株又は野生株と比較して120％以上、好ましくは300％以上のADH活性を有することを意味するものである。
【００１４】
３．遺伝子工学的手法による育種
本発明においては、ADH1遺伝子を親株（宿主酵母）に導入することにより、遺伝子工学的にGAに耐性の酵母を取得することができる。その詳細を以下に説明する。
（１）アルコールデヒドロゲナーゼ及びその遺伝子
ADH1遺伝子は、酵母からゲノムDNAを抽出し、ADH1遺伝子の塩基配列を基にプライマー又はプローブを作製し、目的のADH1遺伝子をスクリーニングすることができる。
【００１５】
本発明において使用されるADH1遺伝子は、以下の（ａ）又は（ｂ）のタンパク質をコードするものである。
(a) 配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるタンパク質
(b) 配列番号２で表されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつ、アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質
配列番号２で表されるアミノ酸配列において、１若しくは数個のアミノ酸が、欠失、置換、若しくは付加され、又はそれらの組合せにより変異されたアミノ酸配列としては、例えば、
(i) 配列番号２で表されるアミノ酸配列中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個）のアミノ酸が欠失したアミノ酸配列、
(ii) 配列番号２で表されるアミノ酸配列中の１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個）のアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列、
(iii) 配列番号２で表されるアミノ酸配列に１〜９個（例えば、１〜５個、好ましくは１〜３個、より好ましくは１〜２個）のアミノ酸が付加したアミノ酸配列、
(iv) 上記(i)〜(iii) の組合せにより変異されたアミノ酸配列
などが挙げられる。
【００１６】
ここで、「アルコールデヒドロゲナーゼ活性」とは、アルコールに特異的に作用し、アルデヒドを生成する触媒活性を意味する。当該酵素活性は、公知方法、例えばガスクロマトグラフィーによる活性測定法、分光光学法を用いた活性測定法、アルデヒドからアルコールへの変換活性を測定する方法により測定することができる。また、「アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有する」とは、配列番号2に示されるアミノ酸配列を有するタンパク質のアルコールデヒドロゲナーゼ酵素活性を100としたときと比較して、40％以上、50％以上、70%以上、80％以上、好ましくは90%以上、さらに好ましくは95％以上の活性を有することを意味する。
【００１７】
また、本発明において使用されるADH1遺伝子には、配列番号2で表されるアミノ酸配列と約90％以上、好ましくは約95％以上、より好ましくは約98％以上の相同性を有するアミノ酸配列を有し、かつアルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するもの（配列番号2で表されるアミノ酸配列と実質的に同等のアミノ酸配列）をコードする遺伝子も含まれる。
従って、本発明においては、さらに以下の(c)のタンパク質をコードする遺伝子を用いることもできる。
【００１８】
(c) 配列番号２で表されるアミノ酸配列と90%以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、かつ、アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質
相同性は、インターネットを利用したホモロジー検索サイト、例えば日本DNAデータバンク（DDBJ）において、FASTA、BLAST、PSI-BLAST等の相同性検索を利用できる。また、National Center for Biotechnology Information (NCBI) において、BLASTを用いた検索を行うこともできる。
【００１９】
ここで、配列番号２で表されるアミノ酸配列において１又は数個のアミノ酸に欠失、置換又は付加などの変異の生じたアミノ酸配列をコードするDNA（ポリヌクレオチド）は、「Molecular Cloning, A Laboratory Manual 3rd ed.」（Cold Spring Harbor Laboratory Press（2001））、「Current Protocols in Molecular Biology」（John Wiley & Sons（1987-1997））、Kunkel, Method. Enzymol. 85: 2763-6（1988）等に記載の部位特異的変異誘発法等の方法に従って調製することができる。
【００２０】
ADH1遺伝子に変異を導入するには、Kunkel法やGapped duplex法等の部位特異的突然変異誘発法を利用した変異導入用キット、例えばQuikChangeTM Site-Directed Mutagenesis Kit（ストラタジーン社製）、GeneTailorTM Site-Directed Mutagenesis System（インビトロジェン社製）、TaKaRa Site-Directed Mutagenesis System（Mutan-K、Mutan-Super Express Km等（タカラバイオ社製））等を用いて行うことができる。
【００２１】
また、本発明において使用されるADH1遺伝子には、配列番号１で表される塩基配列からなるもののほか、配列番号１で表される塩基配列に相補的な塩基配列からなるDNAとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするDNAであって、アルコールデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNAも含まれる。
【００２２】
このようなDNAは、上記部位特異的突然変異誘発法を利用して得ることができ、あるいは、配列番号１に示される塩基配列からなるポリヌクレオチド又はその断片をプローブとして、コロニーハイブリダイゼーション、プラークハイブリダイゼーション、サザンブロット等の公知のハイブリダイゼーション法によりcDNAライブラリー及びゲノムライブラリーから得ることもできる。ライブラリーの作製方法については、「Molecular Cloning, A Laboratory Manual 3rd ed.」（Cold Spring Harbor Laboratory Press（2001））等を参照することができる。また、市販のcDNAライブラリー及びゲノムライブラリーを用いてもよい。
【００２３】
「ストリンジェントな条件」は、プローブと結合する核酸の融解温度(Tm)に基づいて決定することができる。例えば、ハイブリダイズ後の洗浄条件（いわゆるこれが「ストリンジェントな条件」）として、6xSSC (1xSSCの組成：0.15 M NaCl, 0.015 M クエン酸ナトリウム、pH 7.0)、0.5% SDS、 5Xデンハート及び100 mg/mlニシン精子DNAを含む溶液に、プローブと共に65℃で8〜16時間インキュベートし、ハイブリダイズさせる条件が挙げられる（Molecular Cloning, A Loboratory Mannual, 3rd ed.）。
【００２４】
上記条件のほか、本発明においては、ハイブリダイゼーション後の洗浄条件として、例えば、「2×SSC、0.1％SDS、42℃」、「1×SSC、0.1％SDS、37℃」、よりストリンジェントな条件として、例えば、「1×SSC、0.1％SDS、65℃」、「0.5×SSC、0.1％SDS、50℃」等の条件を採用することもできる。
【００２５】
ハイブリダイゼーションは、公知の方法によって行うことができる。ハイブリダイゼーションの方法は、例えば、「Molecular Cloning, A Laboratory Manual 3rd ed.」（Cold Spring Harbor Laboratory Press（2001））、「Current Protocols in Molecular Biology」（John Wiley & Sons（1987-1997））等を参照することができる。
【００２６】
（２）形質転換酵母の作製
ADH1遺伝子を宿主酵母に導入するために、本発明においては、PCR産物などからADH1遺伝子をクローニングし、クローニングの際に用いたプラスミドを、制限酵素を用いて消化する。ADH1遺伝子の塩基配列中に適当な制限酵素切断部位があれば、それに対応した制限酵素を用いればよい。制限酵素消化後のDNA断片をアガロースゲル電気泳動等により精製し、精製されたDNA断片を、発現ベクターに公知の方法を用いて組み込み、ADH1遺伝子発現ベクターを得ることができる。この発現ベクターを宿主酵母に導入し、ADH1遺伝子を高発現する形質転換酵母を作製する。
【００２７】
宿主酵母は限定されるものではなく、例えば、サッカロミセス（Saccharomyces）属、ピキア(Pichia)属、キャンディダ(Candida)属、シゾサッカロミセス（Schizosaccharomyces）属又はクリベロミセス（Kluyveromyces）属に属する酵母を使用することができる。これらの酵母の種類は、前記「２．野生型親株酵母からのグリコールアルデヒド耐性株の取得」の項に記載したものと同様である。好ましい宿主酵母は、サッカロミセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)である。
発現ベクターとしては、例えばpRS、YEp13、YCp50、pAUR123等が挙げられる。プロモーターとしては、例えばgal1 プロモーター、gal10プロモーター、HSPプロモーター、MFα1プロモーター、PHO5プロモーター、PGKプロモーター、GAPプロモーター、ADHプロモーター、AOX1プロモーター、TDH3プロモーター等が挙げられる。
【００２８】
ADH1遺伝子を高発現させるために、本発明のベクターには、プロモーター、ADH1遺伝子のほか、所望によりエンハンサーなどのシスエレメント、スプライシングシグナル、ポリA付加シグナル、選択マーカー、リボソーム結合配列（SD配列）などを連結することができる。
酵母への組換えベクターの導入方法としては、例えばエレクトロポレーション法、スフェロプラスト法、酢酸リチウム法等が挙げられる。
このようにして作製された形質転換酵母は、ADH1遺伝子を高発現するとともに、GAに耐性を示す。形質転換酵母におけるアルコールデヒドロゲナーゼ活性は、本項の前記「（１）アルコールデヒドロゲナーゼ及びその遺伝子」の節に記載した手法により測定することができ、GA耐性の確認は、前記「２．野生型親株酵母からのグリコールアルデヒド耐性株の取得」の項に記載した手法と同様の手法を採用することができる。
【００２９】
本発明の酵母の一つは、「pRS426ADH1」と称し、2011年1月26日付で、独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（〒 292-0818 千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 ＮＩＴＥバイオテクノロジー本部  特許微生物寄託センター）に寄託した。その受領番号（受領書に記載）は、「NITE AP-1052」である。「NITE AP-1052」は、実施例１で樹立した株である。
【００３０】
４．アルコールの製造
本発明の酵母を用いてアルコール発酵を行うことにより、効率良くアルコール（酒類）を得ることができる。
アルコール発酵は常法に従って行うことができる。例えば、穀類（例えば米）と麹を混合し、アルコール存在下で糖化させる方法、あるいは麦芽を40-100℃の間の適温で糖化する方法などにより所望の糖化液を得る。ワインを製造する場合は、ぶどうの絞汁液を準備する。次に、上記糖化液又は絞汁液に対して本発明の酵母を添加して、4℃から40℃の間の適温において、4日から70日の適当な期間でアルコール発酵を行う。 蒸留酒を製造するときは、アルコール発酵後の発酵液（発酵醪）を蒸留すればよい。
酒類は特に限定されるものではなく、清酒、焼酎、ワイン、ビール、ウイスキー、ブランデーなどが挙げられる。
【００３１】
また、工業用のバイオエタノールを製造するには、Yeast nitrogen baseなどの窒素源、ミネラル源などと共にグルコースなどの糖源を１％〜３５％、好ましくは５−２５％含む培地で発酵させればよい。
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。但し、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００３２】
ADH1を高発現するGA耐性酵母の取得
本実施例では、親株酵母とADH1を高発現した酵母のグルコールアルデヒド存在下(GA)での増殖試験（前培養から独立した3連の実験）を行なった。
以下のプライマー及び酵母BY4743から抽出したゲノムDNAを用いてPCRを行った。
フォワードプライマー：CCCCTCGAGACTGTAGCCCTAGACTTGATA（配列番号３）
リバースプライマー： CCCGAATTCGGTAGAGGTGTGGTCAATAA（配列番号４）
PCRの条件はKOD+(Toyobo)を用いて、94℃２分の後、94℃１５秒、４７℃３０秒、６８℃１分のサイクルを３５回繰り返した。さらにこれをQiagenのPCR Qiaquickで精製した後、XhoIとEcoRIで切断した。切断断片を、同じ制限酵素で切断したpRS426（ATCC 77107）とともにToyobo ligation high中、15℃でovernightで反応させ、大腸菌DH5αに形質転換した。得られた形質転換体は、Ampicillinを含む培地に塗布し、３７℃で培養した。生えてきた大腸菌をminiprepしPCR断片の挿入されたプラスミドを選択し、それをQiagen miniprepで精製した。
酵母BY4743にこのプラスミドを形質転換し、-URA選択培地で増殖してくるものを選択した。
最少培地にグリコールアルデヒドを5mM加え、上記のようにして作製された形質転換酵母を静置培養で24時間培養した後、OD600を測定した。
結果を図１に示す。  
図１より、ADH1を高発現した株（「WT+pRS426ADH1(GA)」)ではグルコールアルデヒド存在下で増殖が５％危険率で有意に増加したことから、ADH1の高発現はグルコールアルデヒドに耐性を与えることが示された。
【実施例２】
【００３３】
アルコールの製造
２％ yeast extract, 1% bactopeptone, 10% glucoseの培地に、実施例１で作製した酵母を1x106cells/mlの濃度で接種し、静置培養を行った。培養物を経時的にサンプリングし、島津ガスクロマトグラフィーGC-17Aにて、１％アセトンを内部標準として、DB-WAXをカラムとして用いてクロマトグラフィーを行なった。初期温度５５℃で５分間保持し、その後１７０℃まで１分１０℃昇温してエタノール量を測定した。
結果を図２に示す。
図２より、ADH1を高発現した株ではグリコールアルデヒドの存在下でのバイオエタノールの生産が０．１％危険率で有意に増加していたことから、ADH1の高発現はグリコールアルデヒド存在下でのバイオエタノールの生産に有利であることが明らかになった。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明の酵母は、バイオエタノールの生産等に有用である。
【受託番号】
【００３５】
NITE AP-1052：2011年1月26日で、独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター（〒 292-0818 千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8 ＮＩＴＥバイオテクノロジー本部  特許微生物寄託センター）に寄託した。識別の表示：pRS426ADH1。
【配列表フリーテキスト】
【００３６】
配列番号３：合成DNA
配列番号４：合成DNA
【図１】
2012157270.tif 000002
【図２】
2012157270.tif 000003
【配列表】
2012157270000001.app