(57)【要約】【課題】覚醒動物で脳の電気活動と、脳内生化学的分泌物量と、血圧と、呼吸を同時に計測できるようにすること。【解決手段】あらかじめ頭部固定補助具２６を装着した動物の頭部を固定するねじ１１および支柱１２を備え、呼吸測定装置本体モニター部２２の呼吸測定装置センサー部２１を動物の頸部に取り付けること、およびあらかじめ留置した動脈カテーテル２３からの観血式血圧測定により、覚醒動物の頭部が固定され血圧が測定されつつ同時に呼吸を測定することができるように準備しておき、頭部を固定した動物の脳に記録電極２８とマイクロダイアリシスプローブ２９を刺入することで、脳の電気活動と、脳内生化学的分泌物量と、血圧と、呼吸が同時に測定できる。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
小動物の脳活動と呼吸と血圧を測定するための装置であって、
頭部を固定する補助具を有し、
前記補助具を介して頭部を固定し
前記装置は、覚醒状態の動物の体を安静に固定でき
前記小動物に感覚刺激を提示し、
前記小動物の頭部から脳の電気活動を測定し、
前記小動物の頭部から脳の生化学的分泌物質量を測定し、
前記小動物の頸部の赤外線反射光から呼吸を測定し、
前記小動物の動脈から観血式に血圧を測定する
ことを特徴とする、覚醒状態の小動物の脳活動と血圧と呼吸を測定する装置。
【請求項２】
前記感覚刺激は、視覚、聴覚、洞毛を含む触覚、嗅覚、味覚、温度、痛み刺激である請求項１に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、覚醒小動物の脳活動と呼吸と血圧を測定する方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、覚醒時に被験動物（主にラット）の血圧を測定する簡便な方法は、非観血式血圧計を用い、尾にカフを巻きつけて測定した。そのとき、ストレスが少なく、安定して、連続的に血圧測定するために、被験動物の体と尾を何らかの方法で不動化することが必要である。そのために、図３（カ）に示すような体固定具３１を使う。血圧計本体３３は血圧測定用カフ３２と接続されている。動物は、体固定具３１の中に閉じ込められ、尾が外に出され、尾は尾部固定具３４に固定された状態で血圧測定用カフ３２が装着され、血圧が測定された。
【０００３】
呼吸をモニターする簡便な方法は、例えば図３（キ）に示すような、麻酔下の被験動物の体に呼吸測定用ひずみセンサー３５を巻きつけ、呼吸測定用ひずみセンサー３５は呼吸測定装置本体３６に接続され、その動きを検出する方法が知られている。この方法はもっぱら麻酔下の動物で行われ、覚醒の動物では、呼吸測定用ひずみセンサー３５を取り付けられることによって生じる動物の呼吸以外の動きによって測定できなかった。
【０００４】
覚醒時の被験動物の脳活動の測定法は、脳の電気活動を測定する方法と脳内の神経伝達物質や神経調節物質などの生化学的分泌物量を測定する方法が知られていた。脳の電気活動を測定するとき、あらかじめ被験動物の脳に慢性的に測定電極を取り付けておき、その後、自由行動下での記録電極周囲の神経細胞の活動を記録する。そのときに、多チャンネルの電極を使用したり、複数の電極を脳に刺入し、それぞれを独立して動かしたりして、効率よく複数の神経細胞の活動を記録しようと試みられていた。しかしながら、記録電極周囲の神経細胞が記録できていても自由行動ゆえに安定して長時間測定することが困難であったり、そもそも記録電極周囲の神経細胞が記録できなかったりすることが多かった。一方、生化学的分泌物量を測定するとき、図４に示すように、あらかじめ脳内にマイクロダイアリシスプローブ２９を刺入し取り付けておき、そのプローブに灌流液を流し、プローブの半透膜を介して生化学的分泌物を回収し、その回収液を高速液体クロマトグラフィーや質量分析器などの分析器を用いて量った。灌流液を回収するために入力用と出力用の2本のチューブが必要で、それらを備えた状態で動物に自由行動させることで、覚醒小動物の脳内の生化学的分泌物を測定することができた。それを実現するためには、自由行動中に二本のチューブが絡まないようにすることが必要で、二本のチューブ用のシーベル４１が使用された。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００３−１９０１９１号公報
【特許文献２】特開２００１−０７８６０８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
モデルとしての実験動物での生理現象を調べるとき、平常時の現象を観測できることが望ましい。
【０００７】
単純に上記背景技術に記した技術を組み合わせるだけでは、平常時の脳の電気活動、脳の生化学的分泌物量、呼吸、血圧を同時に計ることは困難である。その理由は、以下の通りである。
【０００８】
１．前記血圧測定法では体を固定保持する器具のため、露出している尾以外の部位に呼吸モニターのセンサーを取り付けることは困難で、かつ脳活動を記録するための記録電極を頭部に装着することも構造上難しい。
【０００９】
２．麻酔下の動物では測定可能な、従来技術で記載した呼吸モニター方法や、従来技術で記載した非観血式血圧計を用いた血圧測定法は、覚醒動物では不必要な刺激、ストレスとなり、平常時の脳活動を測定する阻害要因となるだけでなく、体の動きによるノイズのために脳の電気活動、呼吸、血圧の項目が精度良く測定できない。
【００１０】
３．例えば感覚刺激に応答する脳活動を記録するには非常に精度良く記録電極を脳に刺入して目的の応答を同定する必要があり、慢性記録電極による脳活動の計測では、覚醒下の動物を何らかの方法で固定して記録電極を操作しなければならず、自由に動き回る動物で、呼吸と血圧を測定しながら目的の応答をする神経活動を同定することは困難である。
【００１１】
４．自由行動下では、マイクロダイアリシス法単独ならば灌流液回収を行い、生化学物質量の分析が可能であるが、脳の電気活動の記録も併用することはできない。なぜなら、二本のチューブに対応するシーベルは存在し利用可能だが、三本目に電線を必要とする場合、二本のチューブと電線の合計三本を接続できるシーベルが存在しないからである。
【００１２】
本発明は、前記従来の課題を解決するもので、平常時の被験動物の脳の電気活動と生化学的分泌物量と血圧と呼吸の同時測定を実現することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
前記従来の課題を解決するために、本発明の小動物用脳活動血圧呼吸測定装置は、小動物の脳活動と血圧と呼吸を同時に測定するための装置であって、安定した精度の良い脳活動測定のため頭部を固定する頭部固定用ねじ１１、支柱１２、頭部固定補助具２６を有し、脳の電気活動の測定のための記録電極２８を脳に装着し、脳内の生化学的分泌物量を測定するためにマイクロダイアリシスプローブ２９を脳に装着し、前記ラットの呼吸数を測定する呼吸測定装置センサー部２１を背側頸部に装着し、大腿動脈または腹部大動脈から導出した動脈カテーテル２３に血圧測定する圧トランスデューサ２４を接続し、それを体外に設置するということにより、覚醒状態のラットの脳の電気活動と脳内の生化学的分泌物量と呼吸と血圧を同時に測定する装置である。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の小動物用脳活動呼吸血圧測定装置によれば、ラットをはじめとする小動物の覚醒状態の平常時の電気活動記録による局所的な脳活動と、生化学的分泌物量測定による広範囲の脳活動と、血圧と、呼吸を同時に測定することができる。さらに、生化学的分泌物量の分析結果から、活動している神経細胞の種類の推定ができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】（ア）本発明の実施の形態における小動物用脳活動呼吸血圧測定装置の頭部固定用の部分を正面から見た図  （イ）本発明の実施の形態における小動物用脳活動呼吸血圧測定装置の頭部固定用の部分を側面から見た図  （ウ）本発明の実施の形態における小動物用脳活動呼吸血圧測定装置の頭部固定用の部分を上面から見た図
【図２】（エ）本発明の実施の形態における赤外光検出式呼吸測定装置と観血式血圧測定装置と脳の電気活動記録のための記録電極とマイクロダイアリシスプローブを装着した側面図  （オ）本発明の実施の形態における赤外光検出式呼吸測定装置と観血式血圧測定装置と脳の電気活動記録のための記録電極とマイクロダイアリシスプローブを装着した正面図
【図３】従来の非観血式血圧測定法と歪みセンサーによる呼吸測定法の図
【図４】灌流液の流れる方向を示した矢印を表示したマイクロダイアリシスプローブ２９とカニューレシーベル４１を組み合わせた、従来の被験動物自由行動下での脳内マイクロダイアリシスの図
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下本発明の実施の形態について、図面を参照しながら説明する。
【００１７】
（実施の形態）
本発明の実施の形態について以下説明をする。
【００１８】
まず、あらかじめ頭部固定補助具２６を小動物（ラットなど）に装着し、その動物の頭部固定補助具２６を介して支柱１２に頭部固定用ネジ１１で固定する。小動物の頭部に頭部固定補助具２６を水平に保って装着しておけば、その小動物は以後毎回同じ方向で頭部を固定することができる。図２に小動物を固定具に取り付けたときの様子を模式的に示す。小動物を頭部固定具に取り付けることを数回繰り返すと、覚醒した動物でもスムーズに取り付けられるようになる。
【００１９】
呼吸測定装置センサー部２１を装着するとき、そのセンサーが皮膚に密着するように小動物の背側から腹側にかけて剃毛しておく。そしてセンサー部に、小動物の頸部の背側から腹側にわたる部分とセンサーの間を埋める程度のジェルを塗り、密着させる。呼吸測定装置センサー部２１の出力は、ケーブルを通じて、呼吸測定装置本体モニター部２２に送られる。呼吸測定装置センサー部２１は小動物の頸部をはさみこみ装着されるが、当然、頸部の動き、呼吸を妨げない。
【００２０】
血圧測定装置は、観血式のものである。あらかじめ小動物の大腿動脈に動脈カテーテル２３を留置しておき、皮下トンネルを通して背側部から体外に導出する。そのカテーテルの端は体外の圧トランスデューサ２４に接続される。圧トランスデューサ２４の出力は血圧計本体表示部２５に入力する。
【００２１】
脳活動の測定のため、あらかじめ当該動物の頭蓋骨に記録電極とマイクロダイアリシスプローブ２９が刺入できる必要最小限の穴を開けておき、マイクロダイアリシスプローブ２９を刺入するためのガイドチューブを装着固定しておく。
【００２２】
脳活動の測定のときは、小動物にマスク２７を装着し、通気しておき、ガイドチューブを通じてマイクロダイアリシスプローブ２９を刺入し、目的の部位に到達したら、灌流液を2時間流しておく。マイクロダイアリシスチューブ２９の矢印は灌流液の流れる方向を示している。2時間後から脳内を灌流した液は回収され、後の分析に供される。その後、あらかじめ開けておいた頭蓋骨の穴に記録電極２８を刺入する。記録電極２８から伸びる矢印は、測定される脳活動の信号の流れを示し、その先は記録装置へとつながる。マスク２７は動物の鼻を覆うように装着され、任意の気体を提示することができる。マスク２７を介してにおい刺激を小動物の鼻先に提示し、呼吸測定装置を介して呼吸が、血圧測定装置を介して血圧が測定され、脳の記録電極の位置を調節しながら、脳活動を記録する。
【００２３】
かかる構成要素によれば、動物の頭部を固定するだけで、頸部背側から呼吸センサーを、大腿動脈から導かれた動脈カテーテルに圧センサーを装着でき、誰もが、覚醒状態の動物でも脳活動と呼吸と血圧を同時に測定できる。
【００２４】
頭部固定補助具２６の支柱１２への固定は、ねじ止めのほかに、ピン止め、万力による固定でもよい。
【００２５】
小動物はラット、マウス、モルモット、ハムスター、スナネズミなど齧歯類の小形動物でもよい。
【００２６】
支柱１２一箇所につきねじ止めは1本または2本以上のねじでもよい。
【００２７】
呼吸測定装置は、パルスオキシメータでもよい。
【００２８】
呼吸測定装置は、脈波センサーでもよい。
【００２９】
動脈カテーテルは大腿動脈へ留置すると書いたが、腹部大動脈へ留置してもよい。
【００３０】
マスク２７を介するにおい刺激の代わりに、目に提示する視覚刺激、舌に提示する味覚刺激、耳に提示する聴覚刺激、洞毛を刺激する体性感覚刺激でもよい。
【産業上の利用可能性】
【００３１】
本発明の小動物用脳活動血圧呼吸測定装置によれば、覚醒下の小動物の脳活動と血圧と呼吸を同時に計測することによって、誰でもが簡便に、動物の平常時の脳活動と生理状態をとらえることができるので、実験動物に刺激や操作を加えたときの脳の電気的反応と、脳内の生化学的分泌物量と、血圧と、呼吸という生理反応を調べることができる。
【符号の説明】
【００３２】
１１  頭部固定用ねじ
１２  支柱
１３  基盤
２１  呼吸測定装置センサー部
２２  呼吸測定装置本体モニター部
２３  動脈カテーテル
２４  圧トランスデューサ
２５  血圧計本体表示部
２６  頭部固定補助具
２７  マスク
２８  記録電極
２９  マイクロダイアリシスプローブ
３１  体固定具
３２  血圧測定用カフ
３３  血圧測定装置本体
３４  尾部固定具
３５  呼吸測定用ひずみセンサー
３６  呼吸測定装置本体
４１  カニューレシーベル
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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