(57)【要約】      （修正有）【課題】優れたヒアルロン酸産生促進作用を有する植物由来のヒアルロン酸産生促進剤の提供。【解決手段】トゲドコロの植物体又はその抽出物を含むヒアルロン酸産生促進剤。該ヒアルロン酸産生促進剤は優れたヒアルロン酸産生促進作用を有しており、ヒト皮膚の老化防止、特に皮膚のはりや弾力保持をはじめ、関節炎等の予防・治療、熱傷の初期の治療等に有効である。また、天然物由来の成分を用いていることから、人又は動物に対して内服しても安全なものであり、医薬品（例えば皮膚外用剤，内服薬），医薬部外品，および化粧料の材料として好適である。また、飲食品（例えばサプリメント，飲料）にも適用することができる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
トゲドコロの植物体又はその抽出物を含むことを特徴とするヒアルロン酸産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヒアルロン酸産生促進作用を有するヒアルロン酸産生促進剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、老化に関する研究が進められている。皮膚老化の原因は、マクロ的にみれば加齢が重要な因子であるが、それに加えて乾燥、酸化、太陽光（紫外線）等による影響も皮膚老化に関わる直接的な因子として挙げられる。皮膚老化の具体的な現象としては、ヒアルロン酸をはじめとするムコ多糖類の減少、コラーゲンの架橋反応、紫外線による細胞の損傷などが知られている。
【０００３】
なかでもヒアルロン酸は、細胞間隙への水分の保持、組織内にジェリー状のマトリックスを形成することに基づく細胞の保持、組織の潤滑性と柔軟性の保持、機械的障害等の外力に対する抵抗、および細菌感染の防止など、多くの機能を有している（非特許文献１参照）。例えば、皮膚のヒアルロン酸量は加齢とともに減少し、それに伴い、小じわやかさつき等の皮膚老化が現れるといわれている。そのため、このような老化した皮膚の改善剤として、ヒアルロン酸やコラーゲンを配合した化粧料が数多く提案されている。しかしながらこれら従来の化粧料は、皮膚表面における保湿効果を発揮するだけであり、本質的に老化肌を改善し得るものではない。また、皮膚細胞賦活剤として各種のビタミン類や生薬類を配合した化粧料が提案されているが、これらもやはり老化肌を改善、治療し得るまでには至っていないのが現状である。
【０００４】
さらに、関節液中に含まれるヒアルロン酸は、関節軟骨の表面を覆い、関節機能の円滑な作動に役立っている。正常人関節液中のヒアルロン酸濃度は約２．３ｍｇ／ｍｌであるが、慢性関節リウマチの場合、関節液中のヒアルロン酸濃度は約１．２ｍｇ／ｍｌと低下し、同時に関節液の粘度も著しく低下する（非特許文献２参照）。また、化膿性関節炎や痛風性関節炎などでも慢性関節リウマチの場合と同様、ヒアルロン酸含量の低下が起こることが知られている（非特許文献３参照）。上記疾患において、潤滑機能の改善、関節軟骨の被覆・保護、疼痛抑制および病的関節液の改善若しくは正常化のために、関節液中のヒアルロン酸量を増加させることが考えられる。例えば、慢性関節リウマチ患者にヒアルロン酸ナトリウムの関節注入療法を行うと上記の改善が認められることが報告されている（非特許文献４参照）。同様に、外傷性関節炎、骨関節炎や変形性関節炎においても、ヒアルロン酸の関節注入療法により上記の改善効果が報告されている。（非特許文献５参照）。
【０００５】
このように、皮膚にはヒアルロン酸を配合した化粧料を塗布したり、また関節には直接ヒアルロン酸を注入するなどの方法がとられているが、ヒアルロン酸を外から与えても根本的機能改善にはならず、充分な効果は期待できない。特に、ヒアルロン酸は、皮膚からはほとんど吸収されないという問題がある。
【０００６】
このため、単にヒアルロン酸そのものを外から補給するのではなく、本来ヒトが備え持っている生体の自己回復力を利用し、ヒトの皮膚線維芽細胞自身のヒアルロン酸産生能を促進させることによって、生体の機能を根本的に改善する物質の開発が期待されており、中でも、植物由来のヒアルロン酸産生促進剤が、その安全性や皮膚への刺激の穏やかさを期待して種々開発されている（例えば、特許文献１〜３参照）。
【０００７】
また、熱傷受傷後の治癒過程で、壊死組織の下方から増生してくる肉芽組織の初期から組織全体が肉芽組織に置き換えられるまでの期間では、肉芽中にヒアルロン酸が著しく増加することが知られており（非特許文献６参照）、熱傷の初期の治療薬としても、ヒアルロン酸産生促進剤は期待されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開平１１−２０９２６１号公報
【特許文献２】特開２００７−８４４４８号公報
【特許文献３】特開２００３−５５２４４号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】"Bio Industry"、vol.8、p.346(1991)
【非特許文献２】"Arthritis Rheumatism"、vol.10、p.357(1967)
【非特許文献３】「結合組成」（金原出版）、４８１頁、１９８４年
【非特許文献４】「炎症」（日本炎症学会）、１１巻、１６頁、１９９１年
【非特許文献５】「結合組織と疾患」（講談社）、２４６頁、１９８０年
【非特許文献６】「結合組織と疾患」（講談社）、１５３頁、１９８０年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
このように、ヒアルロン酸産生促進作用を有するものとして従来より植物由来の抽出物が、その安全性や皮膚への刺激の穏やかさを期待して種々開発されているが、今までに該効果を奏することが見出されていなかった新しい植物で新たなヒアルロン酸産生促進効果を奏する植物のさらなる開発が求められている。
本発明はこのような従来の事情に対処してなされたもので、新しい植物由来のヒアルロン酸産生促進剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者等は、このような現状に鑑み、鋭意研究を重ねた結果、特定の植物又はその抽出物に優れたヒアルロン酸産生促進作用がありヒアルロン酸産生促進剤として有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１２】
本発明は、トゲドコロの植物体又はその抽出物を含むことを特徴とするヒアルロン酸産生促進剤である。
【発明の効果】
【００１３】
本発明のヒアルロン酸産生促進剤は優れたヒアルロン酸産生促進作用を有しており、ヒト皮膚の老化防止、特に皮膚のはりや弾力保持をはじめ、関節炎等の予防・治療、熱傷の初期の治療等に有効に適用され得る。また、天然物由来の成分を用いていることから、人又は動物に対して内服しても安全なものである。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】トゲドコロのヒアルロン酸産生促進効果試験の結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明について詳述する。
本発明のヒアルロン酸産生促進剤は、優れたヒアルロン酸産生促進能を有している。よって、本発明のヒアルロン酸産生促進剤は、医薬品（例えば皮膚外用剤，内服薬），医薬部外品，および化粧料の材料として好適である。また、飲食品（例えばサプリメント，飲料）にも適用することができる。
【００１６】
本発明で用いられるトゲドコロ（学名：Dioscorea esculenta）は、ヤマノイモ科ヤマノイモ属の植物である。
トゲドコロは主に九州以南で栽培され、食用されているヤムイモの一種であり、滋養強壮作用を有するとされ、ジオスゲニンやその配糖体を含むものであることが知られている（特開２００７−２７４９８５）。また、ＡＤＡＭ（a disintegrin and metalloprotease）阻害作用を有し、抗しわ剤として用いられること（特開２００８−９４７３４）、およびＤｉｏｓｃｏｒｅａ属植物が皮膚の弾性の喪失や小皺を防止すること（特表２００４−５１５５２３）が知られている。
【００１７】
しかしながら、トゲドコロの植物体またはその抽出物にヒアルロン酸産生促進作用があるという報告はこれまでになく、本発明者らによって初めて見出されたものである。
【００１８】
本発明で用いられるトゲドコロはいずれの部位由来でもよく、特に限定はないが、例えば茎塊、根、茎、葉、又はこれらの混合物を使用することができ、特に好適には、茎塊を使用することができる。トゲドコロは特に限定はなく市販のものを使用することができ、市販品としては例えばトゲドコロの乾燥粉末である「トゲドコロ粉末」（タカラバイオ社製）が挙げられる。
【００１９】
本発明において、植物体とは特に限定はないが、例えば、原料のトゲドコロに対し何らかの加工を施したものであれば特に限定はなく、例えば磨砕物、乾燥粉末、抽出物、粉砕物、搾汁液、破砕物、化学処理物、酵素処理物をいい、特に好適には磨砕物、乾燥粉末が例示される。
【００２０】
本発明において磨砕物とは、トゲドコロの塊茎を摩り下ろしたもののことをいい、通常は種々の自動すり機を使用するか、もしくは手作業により摩り下ろして調製する。
【００２１】
また、本発明において、乾燥粉末としては、例えば、本発明に使用されるトゲドコロ由来の粉砕物（以下、本発明の粉砕物と称することがある。） が例示される。本発明の粉砕物の製造方法としては、例えばトゲドコロの塊茎を乾燥させ、粉砕機を使用して粉砕することで粉状のトゲドコロ由来の粉砕物を得る方法が挙げられる。また、凍結粉砕や、凍結乾燥後粉砕することにより粉砕物を得てもよい。
【００２２】
抽出物とは原料植物に対し抽出溶媒を用いて抽出操作を行う工程を経て得られる物質そのもののことをいう。抽出は、公知の抽出方法により以下のように行うことができる。例えば原料を粉砕もしくは細断した後、溶媒を用いてバッチ式もしくは連続式で行うことができる。抽出物を得る際の抽出溶媒としては、特に限定はないが、水、クロロホルム、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、酢酸メチル、酢酸エチル等の親水性もしくは親油性の溶媒を挙げることができ、所望により単独で、もしくは適宜混合液として用いることができる。混合液を抽出溶媒として用いる例としては、特に限定はないが、例えば各種水溶液を用いることができ、例えば１０〜９５％ 、好適には１５〜９０％ 、さらに好適には２０〜８５％のアルコール水溶液を使用することができる。抽出溶媒の量は適宜決定すればよいが、通常、原料植物に対し、使用時の原料植物の形態そのまま（ 例えば原料植物が生の植物であれば生の植物） の重量の、好ましくは２〜１００倍量の抽出溶媒を使用すれば良い。抽出温度も適宜、目的に応じて決定すれば良いが、水抽出の場合は通常、好ましくは４〜１３０℃、より好ましくは２５〜１００℃である。また、溶媒中にエタノールが含まれる場合は安全性の観点から４〜６０℃の範囲が好適である。抽出時間も、抽出効率を考慮し決定すればよいが、通常、好ましくは数秒〜数日間、より好ましくは５分〜２４時間の範囲となるように、原料、抽出溶媒、抽出温度を設定するのが好適である。抽出操作は、たとえば、攪拌しながら又は静置して行えばよく、また、必要に応じて数回繰り返してもよい。
【００２３】
以上の操作により、トゲドコロ抽出物を得ることができる。抽出物は必要に応じ、ろ過、遠心分離、濃縮、限外ろ過、分子ふるい等の処理を行うことで、ジオスゲニン配糖体が濃縮された抽出物を調製することができる。また、原料植物から異なった抽出法で得られた抽出物を２種以上含有させて使用することもできる。
【００２４】
本発明のヒアルロン酸産生促進剤はトゲドコロ植物体又はその抽出物からなるものであることが好ましいが、本発明の効果を損なわない範囲において他の種々の成分を含有することが出来る。
【００２５】
本発明のヒアルロン酸産生促進剤は、皮膚外用剤に配合してヒトおよび動物に用いることができる他、各種飲食品、飼料（ペットフード等）に配合して摂取させることができる。また医薬製剤としてヒトおよび動物に投与することができる。この際、皮膚外用剤、飲食品などの剤型・形態により乾燥、濃縮又は希釈などを任意に行い調整すれば良い。
【００２６】
本発明のヒアルロン酸産生促進剤を皮膚外用剤に配合する場合、その配合量（乾燥質量）は外用剤全量中、概ね０．０００１〜１０質量％が好ましい。
【００２７】
本発明を皮膚外用剤に適用する場合、上記成分に加えて、さらに必要により、本発明の効果を損なわない範囲内で、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば酸化防止剤、油分、紫外線防御剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、色材、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００２８】
さらに、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属イオン封鎖剤、メチルパラベン、エチルパラベン、ブチルパラベン等の防腐剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジン、カリンの果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩等の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸等の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類なども適宜配合することができる。
【００２９】
またこの皮膚外用剤は、外皮に適用される化粧料、医薬部外品等、特に好適には化粧料に広く適用することが可能であり、その剤型も、皮膚に適用できるものであればいずれでもよく、溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、水−油二層系、水−油−粉末三層系、軟膏、化粧水、ゲル、エアゾール等、任意の剤型が適用される。
【００３０】
使用形態も任意であり、例えば化粧水、乳液、クリーム、パック等のフェーシャル化粧料やファンデーション、口紅、アイシャドウ等のメーキャップ化粧料、芳香化粧料、浴用剤等に用いることができる。
【００３１】
また、メーキャップ化粧品であれば、ファンデーション等、トイレタリー製品としてはボディーソープ、石けん等の形態に広く適用可能である。さらに、医薬部外品であれば、各種の軟膏剤等の形態に広く適用が可能である。そして、これらの剤型および形態に、本発明のヒアルロン酸産生促進剤の採り得る形態が限定されるものではない。
【００３２】
本発明のヒアルロン酸産生促進剤を飲食品や飼料等に配合する場合、植物体またはその抽出物の配合量（乾燥質量）は、それらの種類、目的、形態、利用方法などに応じて、適宜決めることができ、例えば、飲食品全量中に錠剤やカプセル剤等の場合は１〜９０質量％が好ましく、その他の飲食品では０．００１〜５０質量％が好ましい。成人一日当たり植物またはその抽出物の摂取量が約１〜１，０００ｍｇ程度になるように調製することが好ましい。特に、保健用飲食品等として利用する場合には、本発明の有効成分を所定の効果が十分発揮されるような量で含有させることが好ましい。
【００３３】
飲食品や飼料の形態としては、例えば、顆粒状、粒状、ペースト状、ゲル状、固形状、または、液体状に任意に成形することができる。これらには、飲食品等に含有することが認められている公知の各種物質、例えば、結合剤、崩壊剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、矯味剤、緩衝剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調製剤などの賦形剤を適宜含有させることができる。
【００３４】
本発明のヒアルロン酸産生促進剤を医薬製剤として用いる場合、該製剤は経口的にあるいは非経口的（静脈投与、腹腔内投与、等）に適宜に使用される。剤型も任意で、例えば錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の経口用固形製剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤、または、注射剤などの非経口用液体製剤など、いずれの形態にも公知の方法により適宜調製することができる。これらの医薬製剤には、通常用いられる結合剤、崩壊剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、矯味剤、緩衝剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調整剤などの賦形剤を適宜使用してもよい。
【００３５】
本発明のヒアルロン酸産生促進剤を、皮膚外用剤、飲食品、医薬製剤等として用いる場合、優れたヒアルロン酸産生促進作用により、ヒト皮膚の老化防止、皮膚のはりや弾力保持、関節炎等の予防・治療、熱傷の初期の治療等に有効に用いられる。食品に添加した場合には、かかる食品を摂取することで、ヒアルロン酸産生促進効果を内から発揮することが期待される。
【００３６】
また上記症状や病態等の治療、予防、改善等の生理機能をコンセプトとして、その旨を表示した皮膚外用剤、機能性飲食品、特定保健用食品等に応用することができる。
【００３７】
尚、本発明のヒアルロン酸産生促進剤の皮膚外用剤又は飲食品などへの添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【実施例】
【００３８】
本発明について以下に実施例を挙げてさらに詳述するが、本発明はこれによりなんら限定されるものではない。配合量は特記しない限り質量％で示す。
本実施例において、トゲドコロとしては、「トゲドコロ粉末」（タカラバイオ社製）のＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）溶解物を用いた。まず、ヒアルロン酸産生促進効果に関する試験方法とその結果について説明する。
【００３９】
１．ヒアルロン酸産生促進効果試験方法
上記で得た試料のヒアルロン酸産生促進作用を評価した。すなわち、２４ウェルプレートに、５．０×１０4細胞／ウェルの濃度でヒト表皮角化細胞を播種し、コンフルエント状態にしたところで、各試料群（最終濃度１μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ）を含む５００μＬのEpiLife-KG2培養液を添加した。添加後、７２時間インキュベーションした後、ＥＬＩＳＡ法にてヒアルロン酸産生量を測定した。なお対照例（コントロール）としては、ＤＭＳＯ／ＰＢＳ溶液（試料添加なし）を用いた。
測定にはHyaluronan assay kit（生化学バイオビジネス社製）を用いた。測定値の単位はヒアルロナン（hyaluronan。ヒアルロン酸と同義）産生量（ｎｇ／ｍＬ）を示す。
【００４０】
2．結果
トゲドコロ含有培地で培養した細胞でのヒアルロン酸量が、対照群と比較して大幅に増加した。すなわちトゲドコロに極めて優れたヒアルロン酸産生促進効果があることが確認された。その結果を図１に示した。
【００４１】
図１から分かるように、本発明の植物は、優れたヒアルロン酸産生促進効果を有しており、ヒアルロン酸産生促進剤として有用である。
このため本発明のヒアルロン酸産生促進剤を配合することで、ヒアルロン酸産生促進効果を有する皮膚外用剤、経口用組成物（例えば機能剤、飲食品など）、医薬製剤等を提供することができ、種々の症状や疾病、病態等の予防、防止、改善、治療等に役立つ。
具体的適用例としては、皮膚のたるみ・しわ、ハリ・弾力の低下などの皮膚老化を予防、改善、治療したり、関節炎等の予防・治療、熱傷の初期の治療等が挙げられる。ただしこれら例示に適用が限定されるものでない。
【００４２】
以下に、種々の剤型の本発明によるヒアルロン酸産生促進剤の配合例を処方例として説明する。本発明はこの処方例によって何ら限定されるものではなく、特許請求の範囲によって特定されるものであることはいうまでもない。以下の処方例において、ヒアルロン酸産生促進剤としては、タカラバイオ社製の「トゲドコロ粉末」を用いた。
【００４３】
［配合処方例１：キャンディー］
砂糖                                  １８００ｍｇ
水飴                                  １９２６ｍｇ
ヒアルロン酸産生促進剤：  トゲドコロ粉末（乾燥質量）  ２００ｍｇ
コラーゲンペプチド                        ３０ｍｇ
ハトムギ抽出物（乾燥質量）                  ２ｍｇ
ハス胚芽抽出物（乾燥質量）                  ２ｍｇ
香料                                      ４０ｍｇ
（合計）  ４０００ｍｇ
【００４４】
［配合処方例２：錠剤］
ショ糖エステル                            ７０ｍｇ
結晶セルロース                            ７４ｍｇ
メチルセルロース                          ３６ｍｇ
グリセリン                                ２５ｍｇ
ヒアルロン酸産生促進剤：トゲドコロ粉末（乾燥質量）  １２０ｍｇ
コラーゲンペプチド                        ６０ｍｇ
ハトムギ抽出物（乾燥質量）                １０ｍｇ
Ｎ−アセチルグルコサミン                １８０ｍｇ
ヒアルロン酸                            １５０ｍｇ
ビタミンＥ                                ３０ｍｇ
ビタミンＢ６                              ２０ｍｇ
ビタミンＢ２                              １０ｍｇ
α−リポ酸                                ２０ｍｇ
コエンザイムＱ１０                        ４０ｍｇ
セラミド（コンニャク抽出物）              ５５ｍｇ
Ｌ−プロリン                            ３００ｍｇ
（合計）  １２００ｍｇ
【００４５】
［配合処方例３：ソフトカプセル］
食用大豆油                              ５２８ｍｇ
ヒアルロン酸産生促進剤：トゲドコロ粉末（乾燥質量）  ９０ｍｇ
コラーゲンペプチド                        ４５ｍｇ
ハトムギ抽出物（乾燥質量）                  ８ｍｇ
ハス胚芽抽出物（乾燥質量）                １６ｍｇ
ローヤルゼリー                            ７０ｍｇ
マカ                                      ６０ｍｇ
ＧＡＢＡ（＝γ−アミノ酪酸）              ３０ｍｇ
ミツロウ                                  ６０ｍｇ
ゼラチン                                ３７５ｍｇ
グリセリン                              １１３ｍｇ
グリセリン脂肪酸エステル                １０５ｍｇ
（合計）１５００ｍｇ
【００４６】
［配合処方例４：ソフトカプセル］
玄米胚芽油                              ６５０ｍｇ
ヒアルロン酸産生促進剤：トゲドコロ粉末（乾燥質量）  ３００ｍｇ
コラーゲンペプチド                      ２５５ｍｇ
ハトムギ抽出物（乾燥質量）                ５０ｍｇ
レスベラトロール                            ５ｍｇ
エラスチン                              １８０ｍｇ
ＤＮＡ                                    ３０ｍｇ
葉酸                                      ３０ｍｇ
（合計）１５００ｍｇ
【００４７】
［配合処方例５：顆粒］
ヒアルロン酸産生促進剤：トゲドコロ粉末（乾燥質量）  １４０ｍｇ
コラーゲンペプチド                        ７０ｍｇ
ハトムギ抽出物（乾燥質量）                ２０ｍｇ
ハス胚芽抽出物（乾燥質量）                ４０ｍｇ
ビタミンＣ                              １５０ｍｇ
大豆イソフラボン                        ２７０ｍｇ
還元乳糖                                ３６０ｍｇ
大豆オリゴ糖                              ３６ｍｇ
エリスリトール                            ３６ｍｇ
デキストリン                              ３０ｍｇ
香料                                      ２４ｍｇ
クエン酸                                  ２４ｍｇ
（合計）  １２００ｍｇ
【００４８】
［配合処方例６：ドリンク剤（５０ｍＬ中）］
ヒアルロン酸産生促進剤：トゲドコロ粉末（乾燥質量）  １００ｍｇ
コラーゲンペプチド                          ５ｍｇ
ハトムギ抽出物（乾燥質量）                  ２ｍｇ
還元麦芽糖水飴                            ２８ｍｇ
エリスリトール                              ８ｍｇ
クエン酸                                    ２ｍｇ
香料                                        １．３ｍｇ
Ｎ−アセチルグルコサミン                    １ｍｇ
ヒアルロン酸                                ０．５ｍｇ
ビタミンＥ                                  ０．３ｍｇ
α−リポ酸                                  ０．２ｍｇ
コエンザイムＱ１０                          １．２ｍｇ
セラミド（コンニャク抽出物）                ０．４ｍｇ
Ｌ−プロリン                                ２ｍｇ
水                                          残余
【図１】
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