(57)【要約】【課題】カフェオイルホモセリンを安定に含有するコゴミ抽出液の製造方法を提供すること。【解決手段】工程１）〜工程４）を含むコゴミ抽出液の製造方法。工程１）９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液中でコゴミをホモジナイズする。工程２）ホモジナイズした液をろ過し、ろ液の溶媒を蒸発させ、固形物とする。工程３）得られた固形物を３０〜８０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液に溶解する。工程４）不溶物をろ過により除き、コゴミ抽出液を得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程を含むコゴミ抽出液の製造方法。
工程１）９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液中でコゴミをホモジナイズする。
工程２）ホモジナイズした液をろ過し、ろ液の溶媒を蒸発させ、固形物とする。
工程３）得られた固形物を３０〜８０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液に溶解する。
工程４）不溶物をろ過により除き、コゴミ抽出液を得る。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カフェオイルホモセリンを安定に含有するコゴミ抽出液の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
コゴミは多年草のシダの一種で春先に出た新芽を山菜として食用にしている。コゴミの有効性については抗ウイルス剤（特許文献１参照）、体臭の抑制（特許文献２参照）、アロマターゼ活性促進剤（特許文献３参照）、免疫細胞賦活剤（特許文献４参照）などの報告がなされており、またコゴミ中に含まれる有効成分について、抗酸化活性を持つカフェオイルホモセリンを含むことやその製造方法が報告され、ラジカル消去剤として食品や化粧品への使用方法が言及されている（特許文献５参照）。
一方、コゴミ抽出液など、各種の抽出液は溶液状態で倉庫に保管されることが多く、これらの倉庫では夏期の室内は４０℃前後まで達すると考えられ、コゴミ抽出液も保管中に４０℃前後まで暖められると考えられる。冷凍や冷蔵での保管も考えられるが抽出液の保管方法としてはコストの面から困難であり、夏期の倉庫での保管中もカフェオイルホモセリンを安定に含有するコゴミ抽出液が望まれていた。
しかしコゴミの有効性に関する報告（特許文献１〜４）やコゴミを使用した化粧料に関する報告（特許文献６参照）にはコゴミ抽出液の製造方法に関する記述は認められるもののカフェオイルホモセリンに関する記述は認められない。またカフェオイルホモセリンを含有することを見出した報告（特許文献５）にはカフェオイルホモセリンを含有するコゴミ抽出液の製造方法の記載が認められるが、この方法ではカフェオイルホモセリンは容易に分解を受けてしまい、カフェオイルホモセリンの安定性に焦点をあてたコゴミ抽出液の製造方法に関する報告は認められない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開平６−２５００３号公報
【特許文献２】特開２００２−８７９７３号公報
【特許文献３】特開２００８−８１４４０号公報
【特許文献４】特開２０１０−１５５８１１号公報
【特許文献５】特開２００３−１８８２８１号公報
【特許文献６】特開２００８−５０３３２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明が解決しようとする課題は、カフェオイルホモセリンを安定に含有するコゴミ抽出液の製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記の課題を解決するために、コゴミをエタノール水溶液中でホモジナイズしたのち乾固させ、１，３−ブチレングリコール水溶液に溶解する製造方法を確立し、本発明を完成するに至った。
すなわち本発明は、次である。
（１）以下の工程を含むコゴミ抽出液の製造方法。
工程１）９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液中でコゴミをホモジナイズする。
工程２）ホモジナイズした液をろ過し、ろ液の溶媒を蒸発させ、固形物とする。
工程３）得られた固形物を３０〜８０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液に溶解する。
工程４）不溶物をろ過により除き、コゴミ抽出液を得る。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、カフェオイルホモセリンを安定に含有するコゴミ抽出液が得られる。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
コゴミはクサソテツ（草蘇鉄）の若芽のことを言い、シダ類のオシダ科に属する多年草である。北半球の温帯地域に広く分布し、日本では北海道、本州、四国、九州の日当たりの良い原野の湿った場所に群生している。
コゴミは春先になるとゼンマイ状に巻いた新芽を出し、成長に伴いシダ状の成葉となる。抽出に用いるコゴミとしては若い芽の方が好ましく。全長２〜２０ｃｍ程度の芽を用いた場合にカフェオイルホモセリン濃度の高いコゴミ抽出液を得ることができる。
【０００８】
（工程１）
コゴミは収穫後から酵素（ポリフェノールオキシダーゼ）によるカフェオイルホモセリンの分解が進む。この分解は酵素反応であり温度に比例することから、収穫後のコゴミはできる限り低温での保管が望ましい。−２０℃以下での凍結保管が好ましく、より高温側で保管する場合はなるべく早くホモジナイズ操作を行う必要がある。収穫したコゴミの乾燥処理は凍結乾燥による乾燥は可能であるが、通常の高温による乾燥はカフェオイルホモセリンの分解が起こり好ましくない。
また、ホモジナイズ効率を上げるための細切によりカフェオイルホモセリンの急速な分解が起こるため、細切後は素早くホモジナイズ溶媒に浸漬しホモジナイズすることが好ましい。
カフェオイルホモセリンを安定に抽出するためには、本発明で示しているように、タンパク質変性作用が強い９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液でホモジナイズすることが必要である。
ホモジナイズに用いる溶媒量はタンパク質の変性作用が落ちない程度の最終的なエタノール濃度が必要であるため、コゴミ湿重量の４倍量以上の９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液が必要である。その後の溶媒の留去などを考えた場合にはコゴミ湿重量の４〜２０倍量程度が好ましい。
カフェオイルホモセリンの分解を抑制するためにはできる限り素早くエタノールと混合することが必要である。浸漬による静置抽出ではカフェオイルホモセリンの分解が進むため、細切後素早くエタノール中でホモジナイズすることが好ましい。凍結したコゴミを用いる場合には解凍操作により急速にカフェオイルホモセリンの分解が進むため、凍結した状態でエタノール中に浸漬しホモジナイズすることが好ましい。
【０００９】
（工程２）
ろ過は保留粒子径が１マイクロメートル以下のフィルターを用いる方法ならばどの方法でもよく、ろ過方法としては自然ろ過、減圧濾過、加圧ろ過などが考えられ、フィルターとしてはセルロース、ガラス繊維、メンブランフィルター、布などが考えられる。また場合によりろ過補助剤などを用いても良い。
蒸発乾固方法としては、減圧乾固、凍結乾燥、スプレードライなどが考えられるが、カフェオイルホモセリンの安定性を考えた場合、６０℃以下で溶媒を留去できる方法であればどの方法を用いても良い。
【００１０】
（工程３）
蒸発乾固した固形物の溶解は、１，３−ブチレングリコール水溶液を用いることが必要である。１，３−ブチレングリコールの濃度が３０％未満ではカフェオイルホモセリンの分解が進み、また８０重量％を超えると、工程４のろ過が著しく困難になるため、３０〜８０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液を用いることが必要である。溶解後の固形分の濃度としては蒸発残分が０．３〜１．５％程度になるように溶解するのが好ましい。
【００１１】
（工程４）
溶解後のろ過により不溶物が除去されるため、不溶物の量を勘案して溶解に用いる溶媒量を決定しろ過を行うことも可能であるが、予め３％程度の高濃度になるように溶解を行いろ過後、蒸発残分を溶解に用いた溶媒で調節して抽出液を製造してもよい。
【実施例】
【００１２】
次に実施例によって本発明を更に詳細に説明する。
カフェオイルホモセリンの安定性はカフェオイルホモセリンの定量試験により評価した。
【００１３】
＜カフェオイルホモセリンの定量試験＞
カフェオイルホモセリン濃度はコゴミ抽出液を精製水で４倍に希釈し、１２０００回転で１０分間遠心分離を行い、上清を採取し、下記のＨＰＬＣ条件にて測定した。カフェオイルホモセリンの標準曲線は化学合成品を用いて作成した。
カラム：Ｓｙｎｅｒｇｉ  4ｕ  Ｐｏｌａｒ−ＲＰ８０Ａ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製）
カラム長：１５０ｍｍ  ｘ  ２ｍｍ
流速：０．３ｍｌ／分
カラム温度：４５℃
検出波長：３００ｎｍ
溶媒のグラジエント条件：０．１容量％ＴＦＡ水溶液：１００％メタノール＝９８：２  〜  ０．１容量％ＴＦＡ水溶液：１００％メタノール＝９２：８への直線グラジエント
【００１４】
＜コゴミ抽出液の製造とカフェオイルホモセリンの保存安定性試験＞
（実施例１）
工程１）１５ｇのコゴミを採取し１３５ｍｌの９９．５重量％  エタノール中でホモジナイザー（ＩＫＡ社製）を用いてホモジナイズした。
工程２）Ｎｏ．５Ｃ（東洋濾紙株式会社製）のろ紙でろ過し、コゴミホモジナイズ液１３０ｍｌを得た。ロータリーエバポレーターによりエタノールを蒸発させ、固形物０．１３ｇを得た。
工程３）得られた固形物０．１３ｇを２０ｍｌの５０重量％  １，３−ブチレングリコール水溶液に溶解した。
工程４）Ｎｏ．５Ｃ（東洋濾紙株式会社製）のろ紙でろ過し、コゴミ抽出液１８ｍｌを得た。
【００１５】
（実施例２）
実施例１の工程１におけるコゴミのホモジナイズを９５重量％のエタノール水溶液で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１９ｍｌを得た。
（実施例３）
実施例１の工程３における固形物の溶解を８０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１７ｍｌを得た。
（実施例４）
実施例１の工程３における固形物の溶解を３０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１８ｍｌを得た。
【００１６】
（比較例１−１）
実施例１の工程１におけるコゴミのホモジナイズを精製水で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１９ｍｌを得た。
（比較例１−２）
実施例１の工程１におけるコゴミのホモジナイズを５０重量％のエタノール水溶液で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１９ｍｌを得た。
（比較例１−３）
実施例１の工程１におけるコゴミのホモジナイズを９０重量％のエタノール水溶液で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１９ｍｌを得た。
（比較例１−４）
実施例１の工程１におけるコゴミのホモジナイズを５０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液で行った以外は同様の操作を行った。しかし、工程２の蒸発乾固が困難でありコゴミ抽出液を製造することはできなかった。
【００１７】
（比較例２−１）
実施例１の工程３における固形物の溶解を精製水で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１８ｍｌを得た。
（比較例２−２）
実施例１の工程３における固形物の溶解を５０重量％のエタノール水溶液で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１８ｍｌを得た。
（比較例２−３）
実施例１の工程３における固形物の溶解を９９．５％のエタノールで行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１９ｍｌを得た。
（比較例２−４）
実施例１の工程３における固形物の溶解を２０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液で行った以外は同様の操作を行い、コゴミ抽出液１８ｍｌを得た。
（比較例２−５）
実施例１の工程３における固形物の溶解を９９％の１，３−ブチレングリコールで行った以外は同様の操作を行った。しかし、工程４のろ過が困難でありコゴミ抽出液を製造することはできなかった。
【００１８】
コゴミ抽出液の製造結果および抽出液中のカフェオイルホモセリン濃度を実施例１の製造直後の値を１００として、それぞれ製造直後および４０℃で３０日と９０日保存後の値を表１に示した。
【００１９】
表１のように本実施例１〜４では４０℃９０日保存後もカフェオイルホモセリンは分解せず９０％以上が残存しているのに対し、ホモジナイズ溶媒を９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液以外で行った比較例１−１〜１−３では、カフェオイルホモセリンはホモジナイズ中に分解を受けてしまうことがわかる。またホモジナイズ溶媒に１，３−ブチレングリコールを用いた場合（比較例１−４）には工程２の蒸発乾固が困難であり、コゴミ抽出液の製造はできなかった。これらの結果からコゴミのホモジナイズには９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液が必要であることがわかる。
【００２０】
次に工程２により得られた固形物の溶解溶媒について検討した。比較例２−１〜２−４ではコゴミのホモジナイズを本発明である９９．５％エタノールで行うことにより製造直後のカフェオイルホモセリン濃度は十分なものであったが、固形物の溶解を１，３−ブチレングリコール水溶液以外の溶媒を用いた場合（比較例２−１〜２−３）には４０℃での保存期間中に分解を受けてしまうことがわかった。また本発明と同様に１，３−ブチレングリコール水溶液を用いた場合でも、比較例２−４のように特許請求範囲外の濃度では分解を受けることや、比較例２−５のように抽出液の製造が困難であることがわかり、固形物の溶解は本発明である、３０〜８０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液が適しているのがわかる。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
ＥｔＯＨ：エタノール
ＢＧ：１，３−ブチレングリコール
×：コゴミ抽出液の製造はできなかった。
−：測定値無し
【００２３】
以上の結果から、コゴミを９５〜９９．５重量％のエタノール水溶液でホモジナイズし、ろ過後、ろ液を乾固させ、３０〜８０重量％の１，３−ブチレングリコール水溶液に溶解すれば、コゴミ中のカフェオイルホモセリンを安定に含有する抽出液の製造が可能である。