(57)【要約】【課題】実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患、たとえば、萎縮型加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害の予防または治療剤を提供すること。【解決手段】式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩は、マウス光障害モデルにおける、光受容体細胞死に対して抑制効果を有する。よって、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患、たとえば、萎縮型加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害の予防または治療剤として有用である。2012006919.tif 000014【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩の少なくとも一つを有効成分として含有する、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患の予防または治療剤。
【化１】
2012006919.tif 000011
【請求項２】
前記網脈絡膜変性疾患が、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、網膜中心動脈閉塞症、網膜中心静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離、中心性漿液性脈絡網膜症、ポリープ状脈絡膜血管症、多発性脈絡膜炎、ぶどう膜炎（ベーチェット病、原田病）およびそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１に記載の予防または治療剤。
【請求項３】
前記網脈絡膜変性疾患が、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症およびそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害からなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１記載の予防または治療剤。
【請求項４】
下記式（１）で表される化合物またはその塩。
【化２】
2012006919.tif 000012
【請求項５】
下記式（２）で表される化合物またはその塩。
【化３】
2012006919.tif 000013
（式中、Ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を示し、ＴＨＰは、テトラヒドロピラニル基を示す。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規インダゾール誘導体またはその塩、ならびにその製造中間体に関する。また本発明は、このインダゾール誘導体またはその医薬的に許容される塩の少なくとも一つを有効成分として含有する、実質的に血管新生を伴わない網脈絡膜変性疾患の予防または治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
後眼部組織における網脈絡膜変性疾患には難治性のものが多く、失明の原因となる重篤な症状を示すものが少なくない。その代表的なものとして加齢黄斑変性、網膜色素変性症などが挙げられ、特に、加齢黄斑変性は、日本、米国、欧州などの先進国での、壮年から老年期における失明の主要原因となっている。
【０００３】
加齢黄斑変性は黄斑部の加齢に起因する疾患であり、高齢化社会となった現在、その患者数は増加の一途をたどっている。加齢黄斑変性は、脈絡膜からの新生血管を伴う滲出型（ｗｅｔ  ｔｙｐｅ）と脈絡膜から発生する新生血管を伴わない萎縮型（ｄｒｙ  ｔｙｐｅ）に大別され、前者の滲出型には、レーザー光凝固術、新生血管抜去術、中心窩移動術などによる治療が行なわれているが、それらの治療には限界がある。また、最近、血管新生阻害剤であるベバシズマブ［ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ、商品名：Ａｖａｓｔｉｎ］、ラニビズマブ［ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ、商品名：Ｌｕｃｅｎｔｉｓ］などによる治療もなされている。しかし、後者の萎縮型には、現在のところ有効な治療方法はなく、新たな薬剤の開発が望まれている。
【０００４】
一方、欧州特許出願公開第１６７９３０８号明細書（特許文献１）には、下記式（１）で示される化合物を包含する一般式で表わされる化合物群が記載されている。また、特許文献１には、それらの化合物群がＲｈｏキナーゼ阻害作用を有し、緑内障などの治療剤として有用であることが開示されている。また欧州特許出願公開第１８７００９９号明細書（特許文献２）には、下記式（１）で示される化合物を包含する一般式で表わされる化合物群を有効成分とする網膜神経細胞保護剤が記載されている。
【０００５】
【化１】
2012006919.tif 000002
【０００６】
しかしながら、これら特許文献１、２には、上記式（１）で示される化合物自体の開示はなく、また、上記式（１）で示される化合物による、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害などの実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患に対する予防または治療効果も具体的に記載、示唆されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】欧州特許出願公開第１６７９３０８号明細書
【特許文献２】欧州特許出願公開第１８７００９９号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患、たとえば、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害に対し予防または治療効果を有する薬剤を見出すこと、また、それらの作用効果を有する新規化合物またはその塩、ならびにそれらの新規化合物の製造中間体を創製することは非常に興味深い課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患、たとえば、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害に対し予防または治療効果を有する薬剤を見出す為に鋭意研究を行なった結果、上記式（１）で表される新規インダゾール誘導体またはその塩の創製に成功し、それらの新規化合物が、マウス光障害モデルにおける光受容体細胞死に対して抑制効果を有すること、ならびに、スペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死に対して抑制効果を有することを見出した。すなわち、本発明は以下のとおりである。
【００１０】
本発明は、下記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩の少なくとも一つを有効成分として含有する、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患の予防または治療剤である。以下、下記式（１）で表される化合物またはその塩を「本発明化合物（１）」と呼称する。
【００１１】
【化２】
2012006919.tif 000003
【００１２】
本発明における前記網脈絡膜変性疾患は、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、網膜中心動脈閉塞症、網膜中心静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離、中心性漿液性脈絡網膜症、ポリープ状脈絡膜血管症、多発性脈絡膜炎、ぶどう膜炎（ベーチェット病、原田病）およびそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害からなる群より選択される少なくとも１種であることが好ましく、中でも、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症およびそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害からなる群より選択される少なくとも１種であることが特に好ましい。
【００１３】
本発明はまた、本発明化合物（１）自体についても提供する。
本発明はさらに、下記式（２）で表される化合物またはその塩についても提供する。以下、上記本発明化合物（１）の製造中間体である下記式（２）で表わされる化合物またはその塩を「本発明化合物（２）」と呼称し、また、本発明化合物（１）、本発明化合物（２）を「本発明化合物」と総称する。
【００１４】
【化３】
2012006919.tif 000004
【００１５】
（式中、Ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を示し、ＴＨＰは、テトラヒドロピラニル基を示す。）
【発明の効果】
【００１６】
本発明化合物（１）は、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患、たとえば、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、網膜中心動脈閉塞症、網膜中心静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離、中心性漿液性脈絡網膜症、ポリープ状脈絡膜血管症、多発性脈絡膜炎、ぶどう膜炎（ベーチェット病、原田病）、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害など（好ましくは、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症およびそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害、特に好ましくは、萎縮型加齢黄斑変性およびその疾患に伴う網脈絡膜障害）の予防または治療剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明化合物（１）は、下記式（１）で示されるインダゾール誘導体である、１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミンおよびその塩であり、本発明化合物（２）は、下記式（２）で示される本発明化合物（１）の製造中間体である１−｛６−［４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］ピリジン−３−イル｝−１−エチルプロピルカルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよびその塩である。
【００１８】
【化４】
2012006919.tif 000005
【００１９】
【化５】
2012006919.tif 000006
【００２０】
本発明化合物における「塩」とは、医薬的に許容される塩であることが好ましく、たとえば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などの無機酸との塩、酢酸、トリフルオロ酢酸、シュウ酸、マロン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸（Ｄ体、Ｌ体、メソ体）、アジピン酸、グルコン酸、グルコヘプト酸、グルクロン酸、安息香酸、フタル酸、テレフタル酸、乳酸、馬尿酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、１，２−エタンジスルホン酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸、オレイン酸、パモ酸、ポリガラクツロン酸、ステアリン酸、タンニン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸ラウリルエステル、硫酸メチル、ナフタレンスルホン酸、スルホサリチル酸などの有機酸との塩、リチウム、カリウムなどのアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属との塩、アンモニアなどの四級アンモニウムとの塩などが挙げられる。好ましくは、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸（Ｄ体、Ｌ体、メソ体）、メタンスルホン酸との塩が、特に好ましくは、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸（Ｌ体）、メタンスルホン酸が挙げられる。また、本発明化合物（１）は、無機酸、有機酸、アルカリ金属、または、アルカリ土類金属などと、任意の割合の塩を形成することができ、その各々、または、それらの混合物は、本発明に包含される。
【００２１】
なお、本発明化合物に水和物および／または溶媒和物が存在する場合は、それらの水和物および／または溶媒和物も本発明化合物の範囲に含まれる。
【００２２】
本発明化合物に結晶多形および結晶多形群（結晶多形システム）が存在する場合には、それらの結晶多形体および結晶多形群（結晶多形システム）も本発明化合物の範囲に含まれる。ここで、結晶多形群（結晶多形システム）とは、それら結晶の製造、晶出、保存などの条件および状態（なお、本状態には製剤化した状態も含む）により、結晶形が種々変化する場合の各段階における結晶形およびその過程全体を意味する。
【００２３】
本発明化合物の好ましい具体例として、以下の化合物またはその塩を挙げることができる。
【００２４】
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  塩酸塩（以下、「化合物Ａ」ともいう）、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  臭化水素酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  硫酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  リン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  フマル酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  マレイン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  コハク酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  Ｌ−酒石酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  メタンスルホン酸塩、
・１−｛６−［４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］ピリジン−３−イル｝−１−エチルプロピルカルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル。
【００２５】
本発明化合物のさらに好ましい具体例として、以下の化合物またはその塩を挙げることができる。
【００２６】
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １塩酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ２塩酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ３塩酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １臭化水素酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ２臭化水素酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ３臭化水素酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １硫酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １リン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ０．５フマル酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １フマル酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １．５フマル酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ０．５マレイン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １マレイン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １．５マレイン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ０．５コハク酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １コハク酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １．５コハク酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ０．５Ｌ−酒石酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １Ｌ−酒石酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １．５Ｌ−酒石酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  １メタンスルホン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ２メタンスルホン酸塩、
・１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  ３メタンスルホン酸塩、
・１−｛６−［４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］ピリジン−３−イル｝−１−エチルプロピルカルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル。
【００２７】
なお、本発明化合物の具体的な製造方法については、後述の実施例［製造例］の項で詳細に説明するが、代表的な製造方法としては、国際公開第２００７／１４２３２３号に記載の方法により、本発明化合物（２）を製造した後に、該化合物を汎用される方法で脱保護および／または、それと同時および／または引き続き塩とすることで、本発明化合物（１）を製造することができる。
【００２８】
本発明の予防または治療剤は、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患の予防または治療剤であって、上記式（１）で表される化合物（１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン）またはその医薬的に許容される塩の少なくとも一つを有効成分として含有することを特徴とする。その詳細については後述の［薬理試験］の項で説明するが、上記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩は、マウス光障害モデルにおいて、その光受容体細胞死を抑制した。また、スペルミジン誘発の網膜色素上皮細胞死についても抑制効果を示した。このように、上記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩は、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患の予防または治療剤として有用である。
【００２９】
本発明における「実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患」とは、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、網膜中心動脈閉塞症、網膜中心静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離、中心性漿液性脈絡網膜症、ポリープ状脈絡膜血管症、多発性脈絡膜炎、ぶどう膜炎（ベーチェット病、原田病）およびそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害などからなる群から選ばれる少なくとも１種が挙げられ、好ましくは、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症およびそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害からなる群から選ばれる少なくとも１種であり、特に好ましくは、初期加齢黄斑変性、萎縮型加齢黄斑変性およびその疾患に伴う網脈絡膜障害からなる群から選ばれる少なくとも１種である。
【００３０】
また、本発明の予防または治療剤は、必要に応じて、医薬的に許容される他の活性成分および／または添加剤を加えて、単独製剤および／または配合製剤として、汎用される技術を用いて製剤化することができる。
【００３１】
本発明の予防または治療剤は、患者に対して経口的または非経口的に投与することができ、投与形態としては、経口投与、眼への局所投与（点眼投与、結膜嚢内投与、硝子体内投与、結膜下投与、テノン嚢下投与など）、静脈内投与、経皮投与などが挙げられ、必要に応じて、医薬的に許容され得る添加剤と共に、投与に適した剤型に製剤化される。経口投与に適した剤型としては、たとえば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤などが挙げられ、非経口投与に適した剤型としては、たとえば、注射剤、点眼剤、眼軟膏、貼布剤、ゲル剤、挿入剤などが挙げられる。これらは当該分野で汎用されている通常の技術を用いて調製することができる。また、本発明の予防または治療剤は、これらの製剤の他に眼内インプラント用製剤やマイクロスフェアーなどのＤＤＳ（ドラッグデリバリーシステム）化された製剤にすることもできる。
【００３２】
たとえば、錠剤は、乳糖、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、無水リン酸水素カルシウム、デンプン、ショ糖などの賦形剤；カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポピドン、デンプン、部分アルファー化デンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロースなどの崩壊剤；ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、アラビアゴム、デンプン、部分アルファー化デンプン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコールなどの結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、含水二酸化ケイ素、硬化油などの滑沢剤；精製白糖、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ピロリドンなどのコーティング剤；クエン酸、アスパルテーム、アスコルビン酸、メントールなどの矯味剤などを適宜選択して用い、調製することができる。
【００３３】
注射剤は、塩化ナトリウムなどの等張化剤；リン酸ナトリウムなどの緩衝化剤；ポリオキシエチレンソルビタンモノオレートなどの界面活性剤；メチルセルロースなどの増粘剤などから必要に応じて選択して用い、調製することができる。
【００３４】
点眼剤は、塩化ナトリウム、濃グリセリンなどの等張化剤；リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどの緩衝化剤；ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などの界面活性剤；クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウムなどの安定化剤；塩化ベンザルコニウム、パラベンなどの防腐剤などから必要に応じて選択して用い、調製することができ、ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、通常４〜８の範囲内が好ましい。また、眼軟膏は、白色ワセリン、流動パラフィンなどの汎用される基剤を用い、調製することができる。
【００３５】
挿入剤は、生体分解性ポリマー、たとえばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸などの生体分解性ポリマーを有効成分とともに粉砕混合し、この粉末を圧縮成型することにより、調製することができ、必要に応じて、賦形剤、結合剤、安定化剤、ｐＨ調整剤を用いることができる。
【００３６】
眼内インプラント用製剤は、生体分解性ポリマー、たとえばポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体、ヒドロキシプロピルセルロースなどの生体分解性ポリマーを用い、調製することができる。
【００３７】
本発明の予防または治療剤の投与量は、剤型、投与すべき患者の症状の軽重、年令、体重、医師の判断などに応じて適宜変えるこができるが、経口投与の場合、一般には、成人に対し１日あたり０．０１〜５０００ｍｇ、好ましくは０．１〜２５００ｍｇ、より好ましくは０．５〜１０００ｍｇを１回または数回に分けて投与することができ、注射剤の場合、一般には、成人に対し０．０００１〜２０００ｍｇを１回または数回に分けて投与することができる。また、点眼剤または挿入剤の場合には、０．０００００１〜１０％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．００００１〜１％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．０００１〜０．１％（ｗ／ｖ）の有効成分濃度のものを１日１回または数回投与することができる。さらに、貼布剤の場合は、成人に対し０．０００１〜２０００ｍｇを含有する貼布剤を貼布することができ、眼内インプラント用製剤の場合は、成人に対し０．０００１〜２０００ｍｇ含有する眼内インプラント用製剤を眼内にインプラントすることができる。
【００３８】
以下に、製造例、薬理試験例および製剤例を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００３９】
［製造例］
＜実施例１：１−｛６−［４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］ピリジン−３−イル｝−１−エチルプロピルカルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステルの合成＞
４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラニル）−１Ｈ−インダゾール（１３０ｇ、３５３ｍｍｏｌ、国際公開第２００７／１４２３２３号参照）のトルエン（７２０ｇ）溶液に、アルゴン気流下、エタノール（１４０ｍｌ）、水（１４０ｍｌ）、リン酸カリウム２水和物（２３０ｇ、９３３ｍｍｏｌ）および２−ブロモ−５−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−エチルプロピル）ピリジン（１００ｇ、２９１ｍｍｏｌ、国際公開第２００５／０３５５０６号参照）を加えた。反応溶液中にアルゴンガスを１０分間通気した。次いで、アルゴン気流下、２０重量％トリシクロヘキシルホスフィン／トルエン溶液（１０ｍｌ、６．２２ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（７００ｍｇ、３．１１ｍｍｏｌ）を加え、７５℃で６時間加熱撹拌した。
【００４０】
反応終了後、反応溶液に水（２００ｍｌ）を加え分液した。有機層を飽和食塩水（３００ｍｌ）で洗浄し、セライト（商品名）（２０ｇ）に通した後、減圧濃縮した。得られた残渣にヘプタン（１０００ｍｌ）を加え、生成した固体を濾取し、ヘプタンで洗浄した。得られた固体を４８℃で減圧乾燥することにより、下記式で表わされる１−｛６−［４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］ピリジン−３−イル｝−１−エチルプロピルカルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例化合物１）（１０４ｇ）を白色粉末として得た。（収率６６％）
【００４１】
【化６】
2012006919.tif 000007
【００４２】
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：５０５（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ3）：δ ０．５０−０．５５（ｍ，２Ｈ），０．７５−０．８７（ｍ，８Ｈ），１．４０（ｂｒｓ，９Ｈ），１．６３−２．３７（ｍ，１０Ｈ），２．５３−２．６６（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．７９（ｍ，１Ｈ），４．０１−４．０７（ｍ，１Ｈ），４．８１（ｂｒｓ，１Ｈ），５．７２（ｄｄ，Ｊ＝９．３，２，７，１Ｈ），７．４７−７．５９（ｍ，３Ｈ），７．６８（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｓ，１Ｈ），８．６９（ｄｄ，Ｊ＝２．４，０．７Ｈｚ，１Ｈ）。
【００４３】
＜実施例２：１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  塩酸塩の合成＞
１−｛６−［４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］ピリジン−３−イル｝−１−エチルプロピルカルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例化合物１、１００ｇ、１９８ｍｍｏｌ）に、エタノール（２５０ｍｌ）、水（１１ｍｌ）および３８重量％塩化水素／エタノール溶液（１７９ｍｌ）を加え、アルゴン気流下、３０℃から４３℃で５時間撹拌した。
【００４４】
反応溶液を１２℃まで冷却し、同温度で０．３時間撹拌した。析出した固体を濾取した後、エタノール（１００ｍｌ）で洗浄した。得られた固体（９０ｇ）にエタノール（２７０ｍｌ）を加え、７５℃に加熱した。次いで、水（３５ｍｌ）を加え、０．５時間加熱撹拌した。１０℃に冷却し、生成した固体を濾取し、エタノール（２００ｍｌ）で洗浄後、４０℃で１０時間乾燥し、白色固体（７１ｇ）を得た。
【００４５】
得られた固体（７０ｇ）に、エタノール／水＝２／１（ｖ／ｖ）の混合溶液（２３４ｍｌ）を加え、アルゴン気流下、７０℃から７５℃で０．５時間加熱撹拌した。１０℃に冷却し、析出した固体を濾取後、エタノール９０ｍｌで洗浄した。５０℃で２時間乾燥することにより、１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  塩酸塩（実施例化合物２）（４６ｇ）を白色粉末として得た（収率６２％）。
融点：＞２５０℃（分解）。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：３２１（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ）：δ ０．４４−０．５０（ｍ，２Ｈ），０．９７−１．０４（ｍ，８Ｈ），２．１６−２．５４（ｍ，５Ｈ），７．５８−７．６９（ｍ，２Ｈ），８．３８−８．４１（ｍ，２Ｈ），８．７３（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．４Ｈｚ，１Ｈ），９．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．４，０．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【００４６】
＜実施例３：１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  臭化水素酸塩の合成＞
１−｛６−［４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］ピリジン−３−イル｝−１−エチルプロピルカルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例化合物１、２．１ｇ、４．２ｍｍｏｌ）に、エタノール（２０ｍｌ）および４８重量％臭化水素溶液（１０ｍｌ）を加え、４０℃で４時間加熱撹拌した。溶媒を減圧留去し、５０℃で残渣にエタノール（１０ｍｌ）および水（２ｍｌ）を加えた。氷水冷却後、析出した固体を濾取し、エタノールで洗浄することにより白色固体（８８３ｍｇ）を得た。
【００４７】
得られた白色固体（５３０ｍｇ）に、エタノール（５ｍｌ）および水（２００μｌ）加え、７０℃で０．５時間加熱撹拌した。室温まで冷却した後、析出した固体を濾取し、エタノールで洗浄後、６０℃で１．２５時間乾燥させることにより、１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  臭化水素酸塩（実施例化合物３）（２７３ｍｇ）を白色粉末として得た（収率２２％）。
融点：＞２２１−２２３℃（分解）。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：３２１（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ）：δ ０．４５−０．５０（ｍ，２Ｈ），０．９７−１．０４（ｍ，８Ｈ），２．１７−２．５３（ｍ，５Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６５−７．６９（ｍ，１Ｈ），８．３９−８．４２（ｍ，２Ｈ），８．７２（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ），９．０２（ｄｄ，Ｊ＝２．４，０．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【００４８】
＜実施例４：１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミンの合成＞
１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  塩酸塩（実施例化合物２、３０．０ｇ、７６．３ｍｍｏｌ）に、ｎ―ブタノール（３００ｍｌ）および４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（３７０ｍｌ）を加え、室温で１．５時間撹拌した。有機層を分離し、水（１５０ｍｌ）で洗浄後、有機層を濃縮し、固体（２２．６ｇ）を得た。
【００４９】
得られた固体（２２．６ｇ）に、メタノール（１６０ｍｌ）を加え、６０℃に昇温した。同温度で水（１６０ｍｌ）を加え、０．５時間撹拌後、１０℃から１５℃で１時間撹拌した。反応溶液を濾過した後、得られた固体を冷メタノール／水＝１／１（ｖ／ｖ）混合溶液（４６ｍｌ）で洗浄した。８０℃で１１時間減圧乾燥することにより、下記式で表わされる１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン（実施例化合物４）（２１．５ｇ）を白色粉末として得た（収率８８％）。
【００５０】
【化７】
2012006919.tif 000008
【００５１】
融点：２０８℃。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：３２１（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ）：δ ０．４１−０．４７（ｍ，２Ｈ），０．７９−０．８６（ｍ，８Ｈ），１．７５−２．０４（ｍ，４Ｈ），２．２８−２．３７（ｍ，１Ｈ），７．４２−７．４９（ｍ，２Ｈ），７．６２（ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｄ，Ｊ＝０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．６７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，０．７Ｈｚ，１Ｈ）。
【００５２】
＜実施例５：１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  Ｌ−酒石酸塩の合成＞
１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン（実施例化合物４、４．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）のエタノール（１６０ｍｌ）溶液に、Ｌ−酒石酸（２．８ｇ、１９ｍｍｏｌ）のエタノール（８５ｍｌ）溶液を室温で０．５時間かけて滴下し、同温度で０．６７時間撹拌した。反応溶液を１０℃に冷却し、析出した固体を濾取した。エタノール（４０ｍｌ）で洗浄後、４０℃で１時間減圧乾燥し、さらに６０℃に昇温して１１時間減圧乾燥させることにより、１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  Ｌ−酒石酸塩（実施例化合物５）（５．４ｇ）を白色固体として得た（収率９２％）。
融点：２１５−２１６℃。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：３２１（［Ｍ＋Ｈ］＋）。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ）：δ ０．４１−０．４６（ｍ，２Ｈ），０．８３−０．８９（ｍ，２Ｈ），０．９５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，６Ｈ），２．１０（ｄｑ，Ｊ＝１４．８，７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．２６（ｄｑ，Ｊ＝１４．８，７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．３４−２．４２（ｍ，１Ｈ），４．４０（ｓ，２Ｈ），７．４６−７．５２（ｍ，２Ｈ），７．８１（ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２７（ｄ，Ｊ＝０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．６６−８．６７（ｍ，１Ｈ）。
【００５３】
＜実施例６：１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  マレイン酸塩の合成＞
マレイン酸（１１ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１１０μｌ）溶液に、１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン（実施例化合物４、１０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（８００μｌ）溶液を加え、室温で６日間静置した。析出した固体を濾取し、５０℃で減圧乾燥することにより１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  マレイン酸塩（実施例化合物６）（１１ｍｇ）を白色固体として得た（収率７１％）。
融点：１７４−１７８℃。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ）：δ ０．４１−０．４６（ｍ，２Ｈ），０．８３−０．９０（ｍ，２Ｈ），０．９６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，６Ｈ），２．１０（ｄｑ，Ｊ＝１４．８，７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２１−２．４２（ｍ，３Ｈ），６．２７（ｓ，３Ｈ），７．４６−７．５３（ｍ，２Ｈ），７．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，０．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９４（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２７（ｓ，１Ｈ），８．６５−８．６６（ｍ，１Ｈ）。
【００５４】
＜実施例７：１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  フマル酸塩の合成＞
フマル酸（１１ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２７５μｌ）溶液に、１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン（実施例化合物４、１０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６６７μｌ）溶液を加え、室温で３日間静置した。析出した固体を濾取し、５０℃で減圧乾燥することにより１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  フマル酸塩（実施例化合物７）（８．８ｍｇ）を白色固体として得た（収率７５％）。
融点：２５７℃。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ）：δ ０．４１−０．４６（ｍ，２Ｈ），０．８２−０．９４（ｍ，８Ｈ），１．９４−２．０７（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｄｑ，Ｊ＝１４．８，７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．３１−２．４１（ｍ，１Ｈ），６．６８（ｓ，１Ｈ），７．４５−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９５（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２６（ｄ，Ｊ＝０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄｄ，Ｊ＝２．４，０．７Ｈｚ，１Ｈ）。
【００５５】
＜実施例８：１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  コハク酸塩の合成＞
コハク酸（１１ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２７５μｌ）溶液に、１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン（実施例化合物４、１０ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６６７μｌ）溶液を加え、室温で６日間静置した。析出した固体を濾取し、５０℃で減圧乾燥することにより１−［６−（４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール−５−イル）ピリジン−３−イル］−１−エチルプロピルアミン  コハク酸塩（実施例化合物８）（６．９ｍｇ）を白色固体として得た（収率５８％）。
融点：２１８℃。
1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤ3ＯＤ）：δ ０．４１−０．４６（ｍ，２Ｈ），０．８２−０．９０（ｍ，８Ｈ），１．９４（ｄｑ，Ｊ＝１４．６，７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．１１（ｄｑ，Ｊ＝１４．６，７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．３０−２．４０（ｍ，１Ｈ），２．５１（ｓ，２Ｈ），７．４４−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９４（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．６６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）。
【００５６】
［薬理試験例］
１．マウス光障害モデルを用いた試験
マウス光障害モデルを用いて、化合物Ａ（実施例化合物２）の薬理効果を評価した。なお、マウス光障害モデルは光照射により、網膜光受容細胞の細胞死を誘発させたモデル動物であり、実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患、たとえば、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症などのモデル動物として汎用されている（Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．，  ２００５；  ４６：  ９７９−９８７）。
【００５７】
（マウス光障害モデルの作製方法および評価方法）
化合物Ａ投与群および基剤投与群として、８週齢のＢＡＬＢ／ｃ雄性マウスを、暗室にて暗順応を２０時間施した後、白色蛍光灯で５０００ｌｕｘ、２時間光照射を実施して、光障害を誘発した。その後、暗室にて暗順応を２０時間施し、網膜電図（ｅｌｅｃｔｒｏｒｅｔｉｎｏｇｒａｍ、以下、「ＥＲＧ」ともいう）を測定した。得られた波形からａ波およびｂ波の振幅（μＶ）を算出した。また、暗室にて暗順応を２０時間施した後、光照射を行なわずにＥＲＧを測定した群を正常対照群とした。下記式１に従い、ａ波およびｂ波のそれぞれについて、振幅減弱抑制率（％）を算出した。なお、各群の例数は、３−４匹（６−８眼）である。
【００５８】
［式１］
振幅減弱抑制率（％）＝（（Ｖx−Ｖ0）／（Ｖn−Ｖ0））×１００
Ｖ0：基剤投与群の振幅（μＶ）
Ｖn：正常対照群の振幅（μＶ）
Ｖx：化合物Ａ投与群の振幅（μＶ）
（投与方法）
１）光照射前の単回投与時
・化合物Ａ投与群：１％（ｗ／ｖ）メチルセルロース水溶液に懸濁した化合物Ａ溶液を１０ｍｇ／ｋｇの用量で、光照射１時間前に１回、経口投与した。
【００５９】
・正常対照群および基剤投与群：１％（ｗ／ｖ）メチルセルロース水溶液を、光照射１時間前に１回、経口投与した。
【００６０】
（結果）
化合物Ａを使用した場合の試験結果を以下の表１に示す。表１から明らかなように化合物Ａは光照射によるＥＲＧのａ波およびｂ波の減弱に対して、顕著な抑制作用を示した。
【００６１】
【表１】
2012006919.tif 000009
【００６２】
（考察）
以上の結果から、化合物Ａに代表される上記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩は、光受容体細胞死を抑制することが分かった。よって、上記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩は実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患の予防または治療効果を有する。
【００６３】
２．スペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死に対する効果
スペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死に対する化合物Ａ（実施例化合物２）の効果および比較対照薬として、化合物Ａと同様の作用機序（Ｒｈｏキナーゼ阻害作用）を有するＹ−３９９８３を選択し、その効果についても評価した。スペルミジンはポリアミンの一種であり、網膜色素上皮細胞の細胞増殖を抑制する事が報告されている（Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉ．，  ２００７；  ４８：  ４５５−．４６３）。網膜色素上皮細胞死は萎縮型加齢黄斑変性、脳回転状萎縮などの主要な病態なので（Ｅｙｅ．，  １９８８；  ２：  ５５２−５７７、Ａｍ．  Ｊ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．，  １９９１；  １１１：  ２４−３３）、本モデルは萎縮型加齢黄斑変性、脳回転状萎縮などのモデルと考えられている。
【００６４】
（スペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死の作製方法および化合物の評価方法）
ヒト網膜色素上皮細胞（ＡＲＰＥ−１９）を１０％牛胎児血清（以下、「ＦＢＳ」ともいう）含有ダルベッコ変法イーグル培地（以下、「ＤＭＥＭ」ともいう）／Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２培地にて培養し、９６  ｗｅｌｌ プレートに１ｗｅｌｌあたり１００００ｃｅｌｌｓ／１００μＬ／ｗｅｌｌとなる様に播種した。薬物（化合物ＡまたはＹ−３９９８３）処置群について、３７℃、５％ＣＯ2／９５％  Ａｉｒの条件下で一晩培養後、１％ダルベッコリン酸緩衝液（以下、「ＤＰＢＳ」ともいう）と、化合物Ａ（１μＭ）またはＹ−３９９８３（１μＭ）とを含む１００μＬのスペルミジン（２５０μＭ）含有培地に交換した。また、化合物Ａ、Ｙ−３９９８３を含まない以外は同様の１００μＬのスペルミジン（２５０μＭ）含有培地に交換した群を溶媒処置群とした。なお、播種後、３７℃、５％ＣＯ2／９５％  Ａｉｒの条件下で一晩培養後、１％ＤＰＢＳを含む１００μＬの１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２培地に交換した群を正常対照群とした。培地交換の２４時間培養後に、ＭＴＳ法（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｏｍｍｕｎ．，  １９９１；  ３（７）：  ２０７−２１２、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ．，  １９８３；  ６５，  ５５−６３）により生細胞数を評価した。すなわち、培地に２０μＬのＭＴＳ試薬を加えて、２時間後に４９０ｎｍにおける吸光度（Ａｂｓ４９０）（リファレンス波長は６５５ｎｍ）を測定して、生細胞数の指標とした。下記式２に従い、細胞死抑制率（％）を算出した。なお、各群の例数は４である。
【００６５】
［式２］
細胞死抑制率（％）＝（（Ａｂｓx−Ａｂｓ0）／（Ａｂｓn−Ａｂｓ0））×１００
Ａｂｓ0：溶媒処置群の吸光度（Ａｂｓ４９０）
Ａｂｓn：正常対照群の吸光度（Ａｂｓ４９０）
Ａｂｓx：薬物処置群の吸光度（Ａｂｓ４９０）
（結果）
化合物Ａおよび比較対照薬であるＹ−３９９８３を使用した場合の試験結果を以下の表２に示す。表２から明らかなように、化合物Ａはスペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死に対して、顕著な抑制作用を示した。一方、Ｙ−３９９８３はスペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死を抑制しなかった。
【００６６】
【表２】
2012006919.tif 000010
【００６７】
（考察）
以上の結果から、化合物Ａに代表される上記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩は、スペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死を抑制する。よって、上記式（１）で表される化合物またはその医薬的に許容される塩は、萎縮型加齢黄斑変性、脳回転状萎縮などの実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患の予防または治療効果を有する。
【００６８】
［製剤例］
製剤例を挙げて本発明の薬剤をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの製剤例にのみ限定されるものではない。
【００６９】
（処方例１：錠剤）
１００ｍｇ中
化合物Ａ                                              １ｍｇ
乳糖                                            ６６．４ｍｇ
トウモロコシデンプン                                ２０ｍｇ
カルボキシメチルセルロースカルシウム                  ６ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース                          ６ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                          ０．６ｍｇ
化合物Ａ、乳糖を混合機中で混合し、その混合物にカルボキシメチルセルロースカルシウムおよびヒドロキシプロピルセルロースを加えて造粒し、得られた顆粒を乾燥後整粒し、その整粒顆粒にステアリン酸マグネシウムを加えて混合し、打錠機で打錠する。また、化合物Ａの添加量を変えることにより、１００ｍｇ中の含有量が０．１ｍｇ、１０ｍｇまたは５０ｍｇの錠剤を調製できる。
【００７０】
（処方例２：眼軟膏）
１００ｇ中
化合物Ａ                                            ０．３ｇ
流動パラフィン                                    １０．０ｇ
白色ワセリン                                            適量
均一に溶融した白色ワセリンおよび流動パラフィンに、化合物Ａを加え、これらを十分に混合して後に徐々に冷却することで眼軟膏を調製する。化合物Ａの添加量を変えることにより、濃度が０．０５％（ｗ／ｗ）、０．１％（ｗ／ｗ）、０．５％（ｗ／ｗ）または１％（ｗ／ｗ）の眼軟膏を調製できる。
【００７１】
（処方例３：注射剤）
１０ｍｌ中
化合物Ａ                                            １０ｍｇ
塩化ナトリウム                                      ９０ｍｇ
ポリソルベート８０                                      適量
滅菌精製水                                              適量
化合物Ａおよび塩化ナトリウムを滅菌精製水に加えて注射剤を調製する。化合物Ａの添加量を変えることにより、１０ｍｌ中の含有量が０．１ｍｇ、１０ｍｇまたは５０ｍｇの注射剤を調製できる。
【００７２】
（処方例４：点眼剤）
１００ｍｌ中
化合物Ａ                                            １０ｍｇ
塩化ナトリウム                                    ９００ｍｇ
ポリソルベート８０                                      適量
リン酸水素二ナトリウム                                  適量
リン酸二水素ナトリウム                                  適量
滅菌精製水                                              適量
滅菌精製水に化合物Ａおよびそれ以外の上記成分を加え、これらを十分に混合して点眼液を調製する。化合物Ａの添加量を変えることにより、濃度が０．０５％（ｗ／ｖ）、０．１％（ｗ／ｖ）、０．５％（ｗ／ｖ）または１％（ｗ／ｖ）の点眼剤を調製できる。
【産業上の利用可能性】
【００７３】
本発明化合物（１）は網膜光受容体細胞死およびスペルミジン誘発網膜色素上皮細胞死を抑制した。よって、本発明化合物（１）は実質的に新生血管を伴わない網脈絡膜変性疾患、たとえば、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、網膜中心動脈閉塞症、網膜中心静脈閉塞症、網膜色素上皮剥離、中心性漿液性脈絡網膜症、ポリープ状脈絡膜血管症、多発性脈絡膜炎、ぶどう膜炎（ベーチェット病、原田病）、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害など（好ましくは、萎縮型加齢黄斑変性、初期加齢黄斑変性、網膜色素変性症、脳回転状網膜脈絡膜萎縮症、さらにはそれらの疾患に伴う網脈絡膜障害、特に好ましくは、萎縮型加齢黄斑変性およびその疾患に伴う網脈絡膜障害）の予防または治療剤として有用である。