(57)【要約】      （修正有）【課題】生体液試料内の１つ以上の特定要素を計数するための方法および装置。【解決手段】ａ）部材は略均一な高さによって互いから分離される、透明である第１の平面部材と第２の平面部材との間に形成されるチェンバを提供するステップと、ｂ）前記チェンバ高さは、前記試料が前記第１および第２部材間に延在するようなサイズであって、前記チェンバ内に導入されると前記特定要素が前記試料内で不均一に分布するように、前記特定要素と相対的なサイズである、前記生体液試料を前記チェンバに導入するステップと、ｃ）前記チェンバ内の前記試料の実質的全体を検査して、前記特殊要素の少なくとも１つの全体を計数するステップと、ｄ）前記チェンバ内に含まれる試料の体積を決定するステップと、ｅ）単位体積ごとの前記特定要素の少なくとも１つの数を決定するステップと、を含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体液試料内の１つ以上の特定要素を計数するための方法であって、
互いに分離される、透明である第１の平面部材と第２の平面部材とを設けて、それらの間にチェンバを形成するステップであって、前記試料を前記チェンバ内に導入した際に前記特定要素の少なくとも１つが前記試料内で不均一に分布するような高さのチェンバを形成するステップと、
前記生体液試料を前記チェンバに導入して、前記試料を前記チェンバの少なくとも一部において前記第１および第２部材間に延在させるステップと、
前記チェンバ内の前記試料の実質的全体を検査し、前記不均一に分布する特定要素を含む前記特定要素の少なくとも１つの全体を計数するステップと、
前記チェンバ内に含まれる試料の体積を決定するステップと、
単位体積ごとの前記計数された特定要素の少なくとも１つの数を決定するステップと、
を含む方法。
【請求項２】
生体液試料内の１つ以上の特定要素を計数するための方法であって、
互いから分離される、透明である第１の平面部材と第２の平面部材とを設けて、それらの間に所定の体積を有するチェンバを形成するステップであって、前記試料が前記チェンバ内に導入された際に前記特定要素の少なくとも１つが前記試料内で不均一に分布するような高さのチェンバを形成するステップと、
前記生体液試料を前記チェンバに導入して、前記試料を実質的に前記チェンバの全範囲にわたって前記第１および第２部材間に延在させるステップと、
前記チェンバ内の前記試料の実質的全体を検査して、前記不均一に分布する特定要素を含む前記特定要素の少なくとも１つの全体を計数するステップと、
単位体積ごとの前記計数された特定要素の少なくとも１つの数を決定するステップと、
を含む方法。
【請求項３】
前記生体液試料は抗凝固処理全血液である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
検査する、体積を決定する、及び／又は数を決定する前記ステップは、デジタル画像分析を利用する、請求項１から３の何れか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記特定要素の前記計数された少なくとも１つは白血球を含む、１から４の何れか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記計数される特定要素の少なくとも１つは、識別可能となり別々に計数されるように選択的に染色される表面エピトープを有する、白血球の小集団である、請求項１から５の何れか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記試料内に不均一に分布される特定要素の全てを計数する、請求項１から６の何れか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記試料内に不均一に分布される特定要素が、複数種の特定要素を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記計数される特定要素の第一の要素の厚さが、第二の要素の厚さより大きい、請求項１から８の何れか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記チェンバの高さは、前記試料を前記チェンバ内に導入した際に、前記第二の要素が、第一の要素より遠くに離れて分散する高さである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記第一の要素は白血球であり、前記第二の要素は赤血球である、請求項９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記チェンバの高さは、２０μｍ以下である、請求項５、６又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記チェンバの高さは、前記試料を前記チェンバ内に導入した際に、前記第一の要素が前記チェンバの入り口付近に集まる高さである、請求項９から１２の何れか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記チェンバの高さは、前記計数される特定要素の少なくとも１つが前記第１および第２部材間で僅かに圧縮される高さである、請求項１から８の何れか１項に記載の方法。
【請求項１５】
生体液試料内の白血球を含む１つ以上の特定要素を計数するための装置であって、
透明である第１の平面部材と、
第２の平面部材とを備え、
前記第１及び第２の部材は、略均一である高さによって互いから分離されて、それらの間に２０μｍ以下の高さのチェンバが形成されており、前記チェンバが、前記試料が前記チェンバ内に導入された際に少なくとも前記白血球が前記試料内で不均一に分布するような高さを有する、装置。
【請求項１６】
前記チェンバの高さは、前記白血球が前記第１および第２部材間で僅かに圧縮される高さである、請求項１５に記載の装置。
【請求項１７】
前記計数される前記特定要素が、さらに赤血球を含む、請求項１５又は１６に記載の装置。
【請求項１８】
前記第１の平面部材と前記第２の平面部材との間に延在する１つ以上の側壁をさらに備える、請求項１５から１７の何れか１項に記載の装置。
【請求項１９】
前記１つ以上の側壁は結合材を含む、請求項１８に記載の装置。
【請求項２０】
前記側壁は、実質的または完全にチェンバ領域を取り囲む形状に形成される、請求項１８又は１９に記載の装置。
【請求項２１】
前記１つ以上の側壁は実質的に結合材から成る、請求項１９又は２０に記載の装置。
【請求項２２】
前記第１の平面部材に配置される吸気ポートをさらに備える、請求項１５から２１の何れか１項に記載の装置。
【請求項２３】
１つ以上の通気開口をさらに備える、請求項１５から２２の何れか１項に記載の装置。
【請求項２４】
さらにデジタル画像分析装置を含む、請求項１５から２３の何れか１項に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
出願者は、その開示は参照することによって本書に組み込まれる、２００５年１０月１９日に出願された米国暫定特許出願第６０／７２８，０５８号および２００５年１０月２５日に出願された米国特許出願第１１／２５７，７５７号の優先利益を、ここに請求する。
【０００２】
発明の背景
１．技術分野
本発明は、概して生体液を分析するためのチェンバに関し、特に生体液内の粒子状物質の計数を可能にするチェンバに関する。
【背景技術】
【０００３】
２．背景情報
完全血球算定（ＣＢＣ）は、全血に対する最も頻繁に行われる試験の一式であり、とりわけ白血球数（ＷＢＣ）、赤血球数（ＲＢＣ）、および血小板数などの多数の個別分析を含む。使用される方法は、一式の検体の完全性、機器の複雑性および費用、および試験ごとの費用によって異なる。米国特許第４，１５６，５７０号に説明されるＱＢＣ（登録商標）方法などの、最も複雑でない方法は資本費用が最も安く、実施しやすいが、典型的に試験ごとの費用がより高い。ＱＢＣ（登録商標）方法は、操作者の訓練が最小限であり、一日にわずかな試験しか行われない治療場面での状況に最も適している。反対に、病院または参照試験所で使用される大量血液分析器の資本費用は２０倍高いが、大量方式で使用すると比較的に低い試験ごとの費用となり得て、そのような設定ではより費用効率が高くなる。
【０００４】
細胞を数える最も簡単かつ古い方法の１つは、血球計算板の使用を伴う。血球計算板では、血液の正確な希釈が行われる。近似量のその希釈は後に、チェンバに流れ込むと、希釈試料が希釈試料内で見られるのと同じ細胞の均一性を維持するのに十分な高さを持つ、計数チェンバ内に入れられる。つまり、チェンバに流れ込み、その中を流れる試料のため、チェンバは、細胞またはその他の要素のいずれも選択的に濃縮または希釈してはならない。これは、チェンバの既知領域内の細胞の表示端数のみが数えられるためである。細胞の分布が歪められると、そのような計数は試料全体の計数を不正確に反映することとなる。
【０００５】
Ａｂｂｏｔ  Ｃｅｌｌ−Ｄｙｎ（登録商標）またはＢａｙｅｒ  Ａｄｖｉａ（登録商標）などの、大型の現代的システムは、フローサイトメータ（ＦＣ）のある変形に基づいており、多数のステップで正確な量の血液が正確に希釈され、試薬と混合される。流体弁は、希釈試料を複数の試験領域内へと送る。血球計算板と同様に、希釈試料の代表部分の計数が元の試料内の計数を表すことができるように、希釈剤内の細胞の分布は比較的一様のままでなければならない。この方法は、これらの機器の信頼性が比較的低くなる時点まで、かなりの機器の複雑性を必要とする。実際に、このような大型システムでは、予防的メンテナンスまたは修理が毎週、またはより頻繁に行われる必要があることは珍しくなく、これは特別に訓練された試験室科学技術者または保守技術員の技能を必要とし、その全ては運用費を大幅に増大させる。もう１つの隠れた運用費は、システムを適切に機能させるために必要とされる、水洗、清掃、および較正手順である。
【０００６】
ＱＢＣ（登録商標）システムでは、近似値の血液が毛細管に入れられ、遠心分離され、検査される。この方法は、正確な試料を必要としないものの、細胞がほとんど存在しないと、真の細胞計数を出さず、細胞数の正確な推定値を出すことができない。
【０００７】
中間システムは、米国特許第６，７２３，２９０号、第６，８６６，８２３号、第６，８６９，５７０号、および第６，９２９，９５３号に説明されており、血液は分析のために使い捨てディスポに入れられる。これらの特許は、上述のフローサイトメトリシステムと同じ分析的データの広さを提供することが可能である、信頼性があって低価格で使いやすい方法および機器を説明している。このシステムでは、近似値の未希釈試料が、その特徴が試料内の細胞の分布を略均一のままにすることができるディスポに入れられる。所与の画像化フィールド内の細胞が数えられ、そのフィールドの体積が決定され、そして体積ごとの細胞計数が計算される。このシステムでは、血球計算板と同様に、細胞の分布が略均一であるため、チェンバに加えられる試料の一部のみを数える必要がある。しかしこの方法は、少量試験にとっては有利であるが、大量試験を特に対象としない、使い捨てディスポを必要とする。
【０００８】
細胞計数および細胞形態学が試料から取得できるように、全血の未希釈試料内の要素を十分な厚さのチェンバ内で数えることができるシステム、および不均一な分布の影響を軽減することができるシステムを有することは、有利となるであろう。そのような分析システムは、流体操作および試料の正確な測定または希釈を軽減または除去し、そのような分析のための、より簡単かつより費用のかからない方法を結果としてもたらすであろう。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
簡単で正確かつ比較的低価格である、液状媒体内の要素を数えるための方法および装置を提供する。該方法および装置は特に、抗凝固処理全血液の試料内の血球計数（つまり、ＷＢＣ、ＲＢＣなど）を行うのに適している。本方法では、近似値の試料を、血液を数えるために、概して２０ミクロン未満、好ましくは約４ミクロンの非常に小さい高さのチェンバ内に入れる。チェンバに入れると、試料内のある種類の要素の分布が著しく変化する。試料内のある要素に対する分布の変化は、チェンバの高さに対して試料内の要素のサイズに起因する。血液の試料がチェンバ内に導入されると、例えば、試料内の赤血球がチェンバの周辺に集中し、試料内の白血球がチェンバの試料入口の付近に集中する。ＲＢＣはより小さく、典型的に高度可動性膜を持ち、狭い空間に適合することができる一方で、ＷＢＣはより大きく、ＲＢＣと比べて比較的固いため、ＲＢＣは典型的に、ＷＢＣよりも入口からより遠くに試料内で分散する。チェンバの比較的薄い高さは要素の容易な視覚化が可能にするが、試料内の要素の分布は、典型的に、試料全体を代表する試料の部分領域がなくなるようなものである。結果として、試料全体の正しい計数を出すように数えることができる試料全体を代表する部分領域がなくなる。本方法では、我々が承知のその他全ての計数方法と対照的に、チェンバに加えられる試料の全体が検査され、検査される特定種類の試料内の不均一に分布した細胞の全てが計数される。試料内の検査される不均一に分布した細胞種の総数が分かるとすぐに、試料の単位体積ごとの、その種類の不均一に分布した細胞の計数は、数えられた細胞の数を、チェンバ内に含まれる体積で割ることによって、計算することが可能である。小型チェンバ内の細胞分布の不均一性という現象は、細胞の計数の始まり以来よく知られており、正確な総計数を得るためにチェンバ内の全要素を手動で数えることはほぼ不可能であるため、極めて望ましくないとして常に回避されてきた。さらに、そのようなチェンバによって使用される微小な試料サイズは、試料の質の正確な初期測定、またはそのようなチェンバ内の不規則に広げられた試料の試料体積の後の計算を不可能にした。しかし、これらの計数を行うこと、およびチェンバ内試料の総面積を計算することを可能にする正確かつ高速のデジタル画像化システムの近年の出現により、今では薄膜チェンバを、血球またはその他の計数を取得するための簡単かつ正確な方法として有意に使用することが可能である。
【００１０】
いくつかの実施例では、生体液試料内の１つ以上の特定要素を計数するための本方法は、ａ）部材は略均一な高さによって互いから分離される、透明である第１の平面部材と第２の平面部材との間に形成されるチェンバを提供するステップと、ｂ）チェンバ高さは、試料が少なくともチェンバの一部分に対して第１および第２部材間に延在するようなサイズであって、チェンバ高さは、チェンバ内に導入されると１つ以上の特定要素が試料内で不均一に分布するように、１つ以上の特定要素と相対的なサイズである、生体液試料をチェンバに導入するステップと、ｃ）チェンバ内の試料の実質的全体を検査して、特殊要素の少なくとも１つの全体を計数するステップと、ｄ）チェンバ内に含まれる試料の体積を決定するステップと、ｅ）少なくとも１つの特定要素の単位体積ごと数を決定するステップと、を含む。
【００１１】
本発明は、我々が承知の全ての従来技術と対照的に、チェンバに加えられる試料の総体積を決定することが可能である、２つの比較的平面な基材によって画定されるチェンバ内に閉じ込められる薄膜内に存在する生体液試料（例えば、未希釈全血）の全体を検査する。試料の一部のみが検査されるその他全ての方法と対照的に、試料内の特定要素の少なくとも１つの全体が計数される。「特定要素の少なくとも１つの全体」という言い回しは、特定種類の特定要素の全てを意味することを目的としている。１つ以上の特定要素が例えば要素Ａ、Ｂ、およびＣを含む場合、「特定要素の少なくとも１つ」は要素Ａを参照し、そして「特定要素の少なくとも１つの全体」を計数するステップは、試料内の要素Ａの全てを計数するステップを意味する。
【００１２】
少なくとも１つの透明壁で形成される任意のチェンバを使用してもよい。チェンバは、マイクロマシニング、エッチング、基板蒸着などの技術によって製造することが可能である。分離器要素の層を使用してチェンバの均一な厚さをもたらす、同時係属の米国特許出願第０９／８８５，１９３号および第０９／３６６，８８１号に説明される技術は、容認可能な技術の例である。
【００１３】
本方法は、チェンバに導入される試料体積が実質的に正確に分かる、または決定可能であることを必要とする。「実質的に正確に」という用語は、手元の試験にとって適切である体積の精度として定義される。試料の体積決定は、１）コネチカット州ミドルフィールドのＺｙｇｏ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎなどの供給源より入手可能な光学技術を使用する干渉画像化によってまず蒸着されると、試料体積を計算するステップ、または２）試料膜の面積を測定し、これを試料膜の平均高さで乗算する膜形成（膜はチェンバ内に展開する試料によって形成される）後に試料体積を計算するステップ、または３）それ以上血液を収容することができなくなるまで、加えられる血液試料がチェンバに流れ込む、正確に知られた体積（つまり厚さおよび範囲）を有するチェンバを使用または加工するステップ（つまり、収容された血液の総体積が推測的に知られているため、計数された要素の総数をチェンバの既知の体積で割って、計数／体積を出す）を含むがそれに限定されない、多数の様々な技術を使用して実施することが可能である。
【００１４】
本発明の目的で、読み取り、または細胞計数機器は、同時係属の米国特許出願第０９／９８１，５８１号および第１０／０２３，４０５号に示されるものと機能が同様であってよい。
【００１５】
本発明のこのような、かつその他の目的、特徴、および利点は、下記に提供される発明の詳細な説明を踏まえて、および添付の図面に図示されるように、明白となるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】既知で比較的均一の空間によって分離される２つの透明な表面を有する、本発明の教示によるチェンバの図である。
【図２】多量の血液がチェンバに導入された後の、図１のチェンバの図の断面である。
【図３】満たされた、および満たされていないチェンバを示す、チェンバの線平面図である。
【図４】チェンバの中央領域の拡大線図である。
【図５】チェンバの周辺領域の拡大線図である。
【００１７】
本発明の原則は、下記の図を参照することによって、さらに明確にされる。
【００１８】
図１は、既知で比較的均一の空間によって分離される２つの透明な表面を有する、本発明の教示によるチェンバの図である。
【００１９】
図２は、多量の血液がチェンバに導入された後の、図１のチェンバの図の断面である。
【００２０】
図３は、満たされた、および満たされていないチェンバを示す、チェンバの線平面図である。
【００２１】
図４は、チェンバの中央領域の拡大線図である。
【００２２】
図５は、チェンバの周辺領域の拡大線図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
発明の詳細な説明
図１−５を参照して、生体液を分析するための本装置は、以下、チェンバ高さ１６と呼ばれる距離によって互いから分離される、第１の平面部材および第２の平面部材によって画定される１つ以上のチェンバ２を含む。第１の平面部材および第２の平面部材のうちの少なくとも１つは、チェンバ２内に配置される生体液試料を画像化することができるように、十分に透明である。本発明の説明を容易にするために、平面部材は、以下、「最上」平面部材４および「底」平面部材３と呼ばれる。以下、最上平面部材４はまた、透明であるとしても説明される。ほかの実施例では、底平面部材３は、最上平面部材４よりもむしろ、または最上平面部材４に加えて、透明であってもよい。
【００２４】
平面部材３、４は、異なる、または同一の性質を有する様々な材料から形成することが可能である。本出願と共有され、その全体において参照することによって本書に組み込まれる、特許協力条約特許出願第ＰＣＴ／２００５／０１１６０２号は、容認可能な平面部材３、４の例を開示している。さらなる例として、最上平面部材４は、それぞれ約２５μおよび１インチの厚さおよび幅を有するポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）テープから形成してもよい。底平面部材３は、約１２８μの暑さを有する、同様の幅のＰＥＴテープから同様に形成することが可能である。平面部材３、４が柔軟性である本発明の実施例は、チェンバ２がリール上で巻かれることを可能にする。
【００２５】
側壁はこの発明の実践に必要ではないが、いくつかの実施例では、チェンバ２は１つ以上の側壁７によってさらに画定される。好ましい実施例では、側壁７は、最上平面部材４と底平面部材３との間に延在する結合材から成る。側壁７は、異なるチェンバ構造を作成するように位置づけてもよい。例えば、いくつかの実施例では、１つ以上の側壁が、平面部材３、４の幅に実質的にわたって延在するように、結合材を適用してもよい。その他の実施例では、側壁７は、チェンバ２を実質的に、または完全に取り囲む形状に形成してもよい。例えば、図３に示される実施例は、結合材によって形成される楕円形状の側壁７の囲い込みを示す。側壁７は、結合材以外の材料で作られていてもよい。
【００２６】
結合材を使用する側壁７の実施例に対して、結合材は、チェンバ２内に試料を保持するのに適切な密封を十分に作り出すように、平面部材３、４に付着する、または平面部材３、４と相互作用する様々な異なる材料のいずれかから成ってもよい。好ましい実施例では、結合材は、平面部材３、４を互いに取り付ける接着力のある材料である。その多数の例は簡単に利用可能である、光硬化接着剤を含む結合材が特に有用である。
【００２７】
いくつかの実施例では、本発明は、チェンバ内に配置される１つ以上の分離器要素５を含む。容認可能な分離器要素５の例は、両方ともその全体を参照することによって本書に組み込まれる、同時係属の米国特許出願第０９／８８５，１９３号および第０９／３６６，８８１、およびＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／２００５／０１１６０２号に開示されている。容認可能な分離器要素５の例は、既知で正確に制御された直径のポリスチレン製の球形ビーズである。平面部材３、４が略剛体材料から形成される実施例では、チェンバの実際の構造によっては、分離器５の必要がなくてもよい。
【００２８】
いくつかの実施例では、最上平面部材４は、吸気ポート８および通気開口１０のうち１つ以上を含む。吸気ポート８は、生体試料用のチェンバへのアクセスを提供する。通気開口１０は、生体試料がチェンバ２に導入されると空気が通って出て行くことができる通路を提供する。チェンバ２の少なくとも一部が開いている実施例（例えば、チェンバ２の側壁が完全な囲い込みを形成しない）では、吸気ポート８および通気開口１０は省略してもよい。
【００２９】
本発明の装置の実用性を解説するために、該装置を使用するための方法の下記の例を提供する。しかし、本発明の方法及び装置は、これらの特定の例に限定されない
【００３０】
図２を参照して、未希釈抗凝固処理全血液の試料６が補充穴８を通して加えられた後のチェンバ２が示されている。いくつかの応用では、試料６がチェンバ２の全体を満たすことは必要ではない。最上平面部材４および底平面部材３の一方または両方が比較的柔軟性である実施例では、チェンバ２は完全に満たされず、小さな未補充領域９を残すことが好ましい。未補充領域からの毛管力が平面部材３、４に対して強い下向きの力をかけ、その力はチェンバ２の高さ１６を不均一に保つのに役立つため、未補充領域９はそのようなチェンバ２の実施例では有利である。
【００３１】
第二の実施例では、図３は互いに隣接する一対のチェンバ２’、２”を図示している。左に配置されるチェンバ２’は、側壁取り囲み７によって部分的に画定される、満たされていないチェンバを示す。チェンバ２’の最上平面部材４は、吸気ポート８および一対の通気開口１０を含む。生体液試料６（例えば血液）は、吸気ポート８を通して、右側に配置されるチェンバ２”に導入されている。試料６は吸気ポート８から広がってチェンバの大部分を満たし、通気開口１０に隣接して配置される小さい空隙９を残す。チェンバ高さ１６の相対的規模、および試料内に存在する１つ以上の特定要素（例えば、ＷＢＣ、ＲＢＣ）の平均的「厚さ」（例えば直径）のため、試料内の要素の分布は典型的に、極めて不均一となる。極めて不均一な分布は、要素の不均一な分布に頼って精度を確保する従来技術の方法と、強く対比する。
【００３２】
チェンバ２内の要素の不均一な分布の例は、吸気ポート付近の顕微鏡視野の図表示を示すことによって、図示される。この表示では、血漿１１はＲＢＣ１２よりもよく見られる。そのサイズのため、ＷＢＣ１３もこの領域内に集中している。またこの図で見られるのは、分離粒子５および血小板１４である。この例では、例えば、計数される特定要素は、ＷＢＣ１３またはＲＢＣ１２のうちの１つ以上となり得る。計数される要素は識別された要素の小集団、例えば、特定種類のＷＢＣ、または識別可能となり別々に計数されるように選択的に染色される表面エピトープを有するＷＢＣともなり得る。
【００３３】
対照的に、顕微鏡視野は、チェンバ側壁７の付近に配置されるチェンバ２の一部を描く図５に、図式的に図示されている。その視野内では、多数のＲＢＣ１２のが側壁７に隣接して配置され、視野の大部分を占める。
【００３４】
これらの例より、試料のわずかな部分のみを検討する従来技術の方法を使用した正確な計数は、事実上不可能であることが明らかである。本発明の方法および装置は、対照的に、計数される要素が不均一に分布していない応用における正確な計数を提供することが可能である。同時に、特定要素のうちのあるものに関する具体的情報を得ることができる（例えば、ＷＢＣの細胞形態学）。本方法を使用して正確な計数を得るためには、試料の全体がデジタルカメラを使用して画像化され、画像は、チェンバ内に配置される特異的に標的化された不均一に分散した要素の全てを検出して計数する分析の対象となる。試料の領域によっては、この分析は、試料の全域が画像化される時に一度に画像枠で行うことが可能であるか、または一連の画像を一緒に「縫い合わせ」て、一度に分析されるより大きい画像を作成することが可能である。これに対する適切な機器およびソフトウェアは、米国特許第６，８６６，８２３号、第６，８６９，５７０号、および第６，９２９，９５３号に説明されている。そして同じ画像分析が、チェンバ内の試料の実際の体積を決定する。計数が完了して体積が決定されるとすぐに、単位体積ごとの計数が計算される。
【００３５】
本発明は、蛍光またはその他のマーカーを細胞特異的なリガンドに加え、チェンバを検査して、どの細胞がその表面に結合するリガンドマーカーを有するかを計数することによって、フローサイトメータのほとんどの機能を実施することも可能であることを、十分に理解することができる。
【００３６】
本発明は、その詳細な実施例に関して示されて説明されているが、本発明の精神および範囲を逸脱しない範囲で、その形および詳細の様々な変更を行ってもよいことを、当業者であれば理解するであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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