(57)【要約】【課題】緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤として有用な４−｛３−［６−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−シクロプロピルカルバモイル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−プロピニル｝−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステルと他の眼圧下降剤との組み合わせを見出すこと。【解決手段】４−｛３−［６−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−シクロプロピルカルバモイル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−プロピニル｝−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステルとＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせることで、眼圧下降作用をお互いに補完および／または増強する。投与の形態としては、併用投与しても、合剤として投与してもよい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−｛３−［６−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−シクロプロピルカルバモイル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−プロピニル｝−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステルとＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤。
【請求項２】
４−｛３−［６−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−シクロプロピルカルバモイル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−プロピニル｝−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステルとＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせることで、お互いにその作用を補完および／または増強することを特徴とする緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤。
【請求項３】
４−｛３−［６−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−シクロプロピルカルバモイル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−プロピニル｝−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステルとＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた眼圧下降剤。
【請求項４】
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤が（Ｒ）−トランス−Ｎ−（ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）シクロヘキサンカルボキサミド、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド、１−（５−イソキノリンスルホニル）ホモピペラジンまたは１−（５−イソキノリンスルホニル）−２−メチルピペラジンである請求項１または２に記載の緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤。
【請求項５】
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤が（Ｒ）−トランス−Ｎ−（ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）シクロヘキサンカルボキサミド、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド、１−（５−イソキノリンスルホニル）ホモピペラジンまたは１−（５−イソキノリンスルホニル）−２−メチルピペラジンである請求項３に記載の眼圧下降剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は４−｛３−［６−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−シクロプロピルカルバモイル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−プロピニル｝−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル（以下、「本化合物」ともいう）とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
緑内障は、種々の病因により眼圧が上昇し、眼球の内部組織（網膜、視神経など）が障害を受けることで失明に至る危険性のある難治性の眼疾患である。緑内障の治療方法としては、眼圧下降療法が一般的であり、その代表的なものとして薬物療法、レーザー治療法、手術療法などがある。
【０００３】
薬物療法には、交感神経刺激薬（エピネフリンなどの非選択性刺激薬、アプラクロニジンなどのα２受容体刺激薬）、交感神経遮断薬（チモロール、ベフノロール、カルテオロール、ニプラジロール、ベタキソロール、レボブノロール、メチプラノロール（Ｍｅｔｉｐｒａｎｏｌｏｌ）などのβ受容体遮断薬、塩酸ブナゾシンなどのα１受容体遮断薬）、副交感神経作動薬（ピロカルピンなど）、炭酸脱水酵素阻害薬（アセタゾラミドなど）、プロスタグランジン類（イソプロピルウノプロストン、ラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロストなど）などの薬物が使用されている。また、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤（ＳＮＪ−１６５６など）、アデノシン作動薬（ＩＮＯ−８８７５など）、セロトニン遮断薬（ＢＶＴ−２８９４９）などが新たな薬物として開発中である。
【０００４】
一方で、最近、新たな作用機序に基づく緑内障治療薬としてＲｈｏキナーゼ阻害剤が見出された（国際公開第００／０９１６２号（特許文献１）を参照）。Ｒｈｏキナーゼ阻害剤は、線維柱帯流出経路からの房水流出を促進することで眼圧を下降させることが、ＩＯＶＳ，４２（１），１３７−１４４（２００１）（非特許文献１）に開示されており、さらにその作用機序は線維柱帯細胞における細胞骨格の再構築であることが、上記非特許文献１、ＩＯＶＳ，４２（５），１０２９−１０３７（２００１）（非特許文献２）に示唆されている。
【０００５】
また、本化合物は、優れた眼圧下降作用を発揮し、緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療薬として有用であることが米国特許出願公開第２０１０／００９３７７０号明細書（特許文献２）に報告されている。
【０００６】
ところで、緑内障を治療する目的で眼圧下降作用を有する薬剤を組み合わせて使用することに関していくつかの報告がある。例えば、特許第２７２６６７２号公報（特許文献３）には、交感神経遮断薬とプロスタグランジン類の組み合わせの投与が報告されている。また、国際公開第２００２／３８１５８号（特許文献４）には、眼圧下降作用を有する薬剤をいくつか組み合わせて眼に投与することによる緑内障の治療方法が開示されている。さらに、国際公開第２００４／０１９９５１号（特許文献５）には、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤とプロスタグランジン類の組み合わせの投与が、国際公開第２００４／０４５６４４号（特許文献６）にはＲｈｏキナーゼ阻害剤およびβ受容体遮断薬の組み合わせの投与が報告されている。
【０００７】
しかしながら、いずれの報告にも本化合物と他の眼圧下降剤との組み合わせに関する記載は全くなされておらず、当然、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤との組み合わせ効果に関する記載もない。
【０００８】
上述したように、これまで本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせたときの緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療効果に関する報告は全くなされていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第００／０９１６２号
【特許文献２】米国特許出願公開第２０１０／００９３７７０号明細書
【特許文献３】特許第２７２６６７２号公報
【特許文献４】国際公開第２００２／３８１５８号
【特許文献５】国際公開第２００４／０１９９５１号
【特許文献６】国際公開第２００４／０４５６４４号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】ＩＯＶＳ，４２（１），１３７−１４４（２００１）
【非特許文献２】ＩＯＶＳ，４２（５），１０２９−１０３７（２００１）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤として有用な本化合物と他の眼圧下降剤との組み合わせを見出すことは非常に興味のある課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、本化合物と他の眼圧下降剤との組み合わせによる効果を鋭意研究した結果、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせることで各薬剤の単独使用時と比較して眼圧下降作用が増強および／またはその作用の持続性が向上することを見出し、本発明を完成させた。詳細な試験方法およびその結果は後述の薬理試験の項で説明するが、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせることにより、眼圧下降作用の顕著な増強および／またはその作用の持続性の顕著な向上が見られた。
【００１３】
すなわち、本発明は、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤、である。
【００１４】
また、本発明の他の態様は、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせることで、お互いにその作用を補完および／または増強することを特徴とする緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤、である。
【００１５】
また、本発明の他の態様は、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた眼圧下降剤、である。
【００１６】
また、本発明の他の態様は、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤であって、該Ｒｈｏキナーゼ阻害剤が（Ｒ）−トランス−Ｎ−（ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）シクロヘキサンカルボキサミド、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド、１−（５−イソキノリンスルホニル）ホモピペラジンまたは１−（５−イソキノリンスルホニル）−２−メチルピペラジンである緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤、である。
【００１７】
また、本発明の他の態様は、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせることで、お互いにその作用を補完および／または増強することを特徴とする緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤であって、該Ｒｈｏキナーゼ阻害剤が（Ｒ）−トランス−Ｎ−（ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）シクロヘキサンカルボキサミド、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド、１−（５−イソキノリンスルホニル）ホモピペラジンまたは１−（５−イソキノリンスルホニル）−２−メチルピペラジンである緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤、である。
【００１８】
また本発明の他の態様は、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた眼圧下降剤であって、該Ｒｈｏキナーゼ阻害剤が（Ｒ）−トランス−Ｎ−（ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）シクロヘキサンカルボキサミド、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド、１−（５−イソキノリンスルホニル）ホモピペラジンまたは１−（５−イソキノリンスルホニル）−２−メチルピペラジンである緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤、である。
【発明の効果】
【００１９】
本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせて、眼に投与することで眼圧下降作用の増強および／またはその作用の持続性が向上する。したがって、本発明は緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤、眼圧下降剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明は、下記式（１）で示される４−｛３−［６−アミノ−９−（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−５−シクロプロピルカルバモイル−３，４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２−イル］−２−プロピニル｝−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル（本化合物）とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせた緑内障若しくは高眼圧症の予防または治療剤、眼圧下降剤であり、お互いにその作用を補完および／または増強するものである。
【００２１】
【化１】
2012250952.tif 000002
【００２２】
本発明における本化合物は、国際公開第２００３／０２９２６４号、国際公開第２００６／０１５３５７号、国際公開第２００７／１３６８１７号などに記載された方法により合成することができる。
【００２３】
本発明におけるＲｈｏキナーゼ阻害剤とは、Ｒｈｏの活性化に伴い活性化されるセリン／スレオニンキナーゼを阻害する化合物を意味する。例えば、ＲＯＫα（ＲＯＣＫ−ＩＩ）、ｐ１６０ＲＯＣＫ（ＲＯＫβ、ＲＯＣＫ−Ｉ）およびその他のセリン／スレオニンキナーゼ活性を有するタンパク質を阻害する化合物が挙げられる。Ｒｈｏキナーゼ阻害剤の具体例としては、国際公開第９８／０６４３３号、国際公開第００／０９１６２号に開示されている（Ｒ）−トランス−Ｎ−（ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）シクロヘキサンカルボキサミド、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミドなどのＲｈｏキナーゼ阻害剤や国際公開第９７／２３２２２号、Ｎａｔｕｒｅ，３８９，９９０−９９４（１９９７）に開示されている１−（５−イソキノリンスルホニル）ホモピペラジン、１−（５−イソキノリンスルホニル）−２−メチルピペラジンなどのＲｈｏキナーゼ阻害剤が、国際公開第０１／５６９８８号に開示されている（１−ベンジルピロリジン−３−イル）−（１Ｈ−インダゾール−５−イル）アミンなどのＲｈｏキナーゼ阻害剤が、国際公開第０２／１００８３３に号開示されている（１−ベンジルピペリジン−４−イル）−（１Ｈ−インダゾール−５−イル）アミンなどのＲｈｏキナーゼ阻害剤が、国際公開第０２／０７６９７６号に開示されているＮ−［２−（４−フルオロフェニル）−６，７−ジメトキシ−４−キナゾリニル］−Ｎ−（１Ｈ−インダゾール−５−イル）アミンなどのＲｈｏキナーゼ阻害剤、国際公開第０２／０７６９７７号に開示されているＮ−４−（１Ｈ−インダゾール−５−イル）−６，７−ジメトキシ−Ｎ−２−ピリジン−４−イル−キナゾリン−２，４−ジアミンなどのＲｈｏキナーゼ阻害剤が、国際公開第９９／６４０１１号に開示されている４−メチル−５−（２−メチル−［１，４］ジアゼパン−１−スルホニル）イソキノリンなどのＲｈｏキナーゼ阻害剤が例示される。中でも特に、（Ｒ）−トランス−Ｎ−（ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）シクロヘキサンカルボキサミド、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド、１−（５−イソキノリンスルホニル）ホモピペラジンまたは１−（５−イソキノリンスルホニル）−２−メチルピペラジンが好ましい。
【００２４】
本発明における本化合物およびＲｈｏキナーゼ阻害剤は塩の形態も包含する。それらは医薬として許容される塩であれば特に制限はない。塩の具体例としては、本化合物および／またはＲｈｏキナーゼ阻害剤がアミノ基などの塩基性基を含む場合には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などの無機酸との塩、シュウ酸、酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸、アジピン酸、グルコン酸、グルコヘプト酸、グルクロン酸、テレフタル酸、メタンスルホン酸、乳酸、馬尿酸、１，２−エタンジスルホン酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸、オレイン酸、パモ酸、ポリガラクツロン酸、ステアリン酸、タンニン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸ラウリルエステル、硫酸メチル、ナフタレンスルホン酸、スルホサリチル酸などの有機酸との塩が例示される。また、本化合物および／またはＲｈｏキナーゼ阻害剤がカルボキシル基などの酸性基を含む場合には、リチウム、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属との塩、アンモニアとの塩、トリエチレンジアミン、２−アミノエタノール、２，２−イミノビス（エタノール）、１−デオキシ−１−（メチルアミノ）−２−Ｄ−ソルビトール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、プロカイン、Ｎ，Ｎ−ビス（フェニルメチル）−１，２−エタンジアミンなどの有機アミンとの塩が例示される。
【００２５】
また、本発明における本化合物およびＲｈｏキナーゼ阻害剤は、エステル、アミドなどの誘導体も包含する。エステルの具体例としては、本化合物および／またはＲｈｏキナーゼ阻害剤中のヒドロキシル基と酢酸、プロピオン酸、イソプロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、ピバル酸などのカルボン酸が縮合したエステル、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤中のカルボキシル基とメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコールなどのアルコールが縮合したエステルが例示される。アミドの具体例としては、本化合物および／またはＲｈｏキナーゼ阻害剤中のアミノ基と酢酸、プロピオン酸、イソプロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、ピバル酸などのカルボン酸が縮合したアミド、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤中のカルボキシル基とメチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、イソプロピルアミンなどのアミンが縮合したアミドが例示される。
【００２６】
さらに、本発明における本化合物およびＲｈｏキナーゼ阻害剤は、水和物または溶媒和物の形態をとってもよい。
【００２７】
本発明は、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを組み合わせて緑内障若しくは高眼圧症を予防または治療するところに特徴がある。本発明における緑内障としては、原発性開放隅角緑内障、正常眼圧緑内障、房水産生過多緑内障、高眼圧症、急性閉塞隅角緑内障、慢性閉塞隅角緑内障、混合型緑内障、ステロイド緑内障、アミロイド緑内障、血管新生緑内障、悪性緑内障、水晶体の嚢性緑内障、ｐｌａｔｅａｕ  ｉｒｉｓ  ｓｙｎｄｒｏｍｅなどが例示される。
【００２８】
投与形態としては、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを別々に処方した２つの製剤とした形態で投与（併用投与）してもよく、また、それぞれの成分を配合した１つの製剤とした形態（合剤）で投与してもよい。
【００２９】
本発明の製剤は経口でも非経口でも投与することができ、これらの製剤化には特別な技術は必要なく、汎用される技術を用いて製剤化をすることができる。投与剤型としては、点眼剤、眼軟膏、注射剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤などが挙げられ、点眼剤または眼軟膏が好ましい。
【００３０】
本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを別々に製剤化する場合は、それぞれ公知の方法に準じて製剤を調製することができる。たとえば、本化合物の製剤は、米国特許出願公開第２０１０／００９３７７０号明細書（特許文献２）に記載の製剤例を参考にして調製することができる。Ｒｈｏキナーゼ阻害剤の製剤は、上述した国際公開第００／０９１６２号、国際公開第９７／２３２２２号などに記載された製剤例を参考にして調製することができる。また、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを配合した１つの製剤を調製する場合も、公知の方法に準じて調製することができる。
【００３１】
点眼剤とする場合、たとえば、塩化ナトリウム、濃グリセリンなどの等張化剤、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどの緩衝剤、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などの界面活性剤、クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウムなどの安定化剤、塩化ベンザルコニウム、パラベンなどの防腐剤などの公知の添加剤を必要に応じて添加して、調製することができる。
【００３２】
点眼剤とする場合、ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよく、ｐＨ４〜８の範囲が好ましい。生理食塩水に対する浸透圧比も眼科製剤に許容される範囲内にあればよく、０より大きく４以下の範囲が好ましく、０より大きく２以下の範囲がより好ましく、０より大きく１以下の範囲がさらに好ましく、０より大きく０．５以下の範囲が最も好ましい。
【００３３】
眼軟膏とする場合、白色ワセリン、流動パラフィンなどの汎用される基剤を用いて調製することができる。また、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤などの経口剤は、乳糖、結晶セルロース、デンプン、植物油などの増量剤、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの滑沢剤、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの崩壊剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコン樹脂などのコーティング剤、ゼラチン皮膜などの皮膜剤などを必要に応じて加え、調製することができる。
【００３４】
参考までにその製剤例の一部を後述の実施例の項に記載するが、その製剤例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００３５】
本化合物およびＲｈｏキナーゼ阻害剤の投与量は、患者の症状、年齢、剤型、投与経路などに応じて定めることができる。点眼投与の場合を例にとり以下に簡単に説明する。
【００３６】
本化合物の投与量は、通常１日の投与量は０．００５〜７５００μｇ、好ましくは０．０５〜１５００μｇ、より好ましくは１．５〜４５０μｇの範囲で、１日に１回または数回に分けて投与することができ、それらの用量は患者の年齢、症状などにより適宜増減できる。点眼剤中の本化合物の濃度に特に制限はないが、０．００００１〜５ｗ／ｖ％の範囲内、好ましくは０．０００１〜１ｗ／ｖ％の範囲内、より好ましくは０．００３〜０．３ｗ／ｖ％の範囲内の濃度の点眼剤を１日１回または数回点眼することができる。なお、点眼剤中の化合物の濃度は、化合物のフリー体およびその塩のいずれの重さを基準として計算されたものであってもよい（以下、同じ）。
【００３７】
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤の投与量は薬物の種類によって異なるが、通常１日の投与量は０．０２５〜１００００μｇの範囲で、１日に１回または数回に分けて投与することができ、それらの用量は患者の年齢、症状等により適宜増減できる。点眼液中のＲｈｏキナーゼ阻害剤の濃度に特に制限はないが、０．０１〜１ｗ／ｖ％の範囲内の濃度の点眼剤を１日１回または数回点眼することができる。
【００３８】
これらの投与量は本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを併用投与するときに適用されるが、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを配合した製剤を投与する場合には、１日の投与量が上記の各成分の量またはそれ以下になるように、配合割合を適宜選択した製剤を調製して、その配合製剤を１日１回または数回に分けて投与できる。
【００３９】
以下に製剤例および薬理試験を示すが、これらは本発明をより良く理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００４０】
［製剤例］
本発明における本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを配合した点眼剤の具体的な製剤例を以下に示す。
【００４１】
［製剤例１］
点眼剤（１００ｍＬ中）
本化合物                    ０．０１ｇ
（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド
０．０１ｇ
リン酸二水素ナトリウム      ０．１５ｇ
グリセリン                  ０．５４ｇ
塩化ベンザルコニウム      ０．００５ｇ
希塩酸                            適量
水酸化ナトリウム                  適量
精製水                            適量
［製剤例２］
点眼剤（１００ｍＬ中）
本化合物                    ０．０１ｇ
（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド
０．３ｇ
リン酸二水素ナトリウム      ０．１５ｇ
グリセリン                  ０．５４ｇ
塩化ベンザルコニウム      ０．００５ｇ
希塩酸                            適量
水酸化ナトリウム                  適量
精製水                            適量
［製剤例３］
点眼剤（１００ｍＬ中）
本化合物                      ０．１ｇ
（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド
０．０１ｇ
リン酸二水素ナトリウム      ０．１５ｇ
グリセリン                  ０．５４ｇ
塩化ベンザルコニウム      ０．００５ｇ
希塩酸                            適量
水酸化ナトリウム                  適量
精製水                            適量
［製剤例４］
点眼剤（１００ｍＬ中）
本化合物                      ０．１ｇ
（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド
０．３ｇ
リン酸二水素ナトリウム      ０．１５ｇ
グリセリン                  ０．５４ｇ
塩化ベンザルコニウム      ０．００５ｇ
希塩酸                            適量
水酸化ナトリウム                  適量
精製水                            適量
［製剤例５］
眼軟膏（１００ｇ中）
本化合物                    ０．０３ｇ
（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド
０．１ｇ
流動パラフィン              １０．０ｇ
白色ワセリン                      適量
上記処方において、本化合物ならびにＲｈｏキナーゼ阻害剤の種類および量を変えて、また、添加剤の量を適宜変化させることで、所望の組み合わせおよび所望の濃度の点眼剤を調整することができる。
【００４２】
［薬理試験］
本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤との組み合わせの有用性を調べるため、実験動物に本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤を併用投与したときの眼圧下降効果を検討した。Ｒｈｏキナーゼ阻害剤としては（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド二塩酸塩を使用した。
【００４３】
（被験化合物溶液の調製）
（１）基剤の調製
濃グリセリン４．７ｇに精製水９００ｍＬを加え溶解した。溶解後、リン酸二水素ナトリウム１．５ｇを加え溶解させた。さらに、０．１ｗ／ｖ％塩化ベンザルコニウム溶液５０ｍＬを加え攪拌し、水酸化ナトリウム溶液を適量加え、製剤のｐＨを６．０付近とした後、精製水を適量加えて全量を１０００ｍＬとした。
【００４４】
（２）本化合物溶液の調製（浸透圧比：０．２５）
濃グリセリン０．９４ｇに精製水１８０ｍＬを加え溶解した。溶解後、リン酸二水素ナトリウム０．３ｇ、本化合物０．２ｇを加え溶解させた。さらに、０．１ｗ／ｖ％塩化ベンザルコニウム溶液１０ｍＬを加え攪拌し、水酸化ナトリウム溶液を適量加え、製剤のｐＨを６．０付近とした後、精製水を適量加えて全量を２００ｍＬとした。そのうち１ｍＬを基剤で１００ｍＬに希釈して０．００１ｗ／ｖ％の本化合物溶液を調製した。
【００４５】
（３）生理食塩液の調製
市販の生理食塩液（商品名：大塚生食注、株式会社大塚製薬工場より入手）をそのまま使用した。
【００４６】
（４）Ｒｈｏキナーゼ阻害剤溶液の調製
（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド０．００３２２ｇを生理食塩水に溶解した後、水酸化ナトリウムを加えて溶液を中和（ｐＨ６．０〜７．０）した後、生理食塩水を加えて全量を３．２２ｍＬとし、０．１ｗ／ｖ％のＲｈｏキナーゼ阻害剤溶液を調製した。
【００４７】
（試験方法）
本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤とを併用投与したときの眼圧下降効果を検討した。比較対照として、本化合物を単独投与またはＲｈｏキナーゼ阻害剤を単独投与したときの眼圧下降効果についても検討した。コントロールには基剤および生理食塩水を投与した。
【００４８】
（試験に使用した薬剤および動物）
本化合物溶液：０．００１ｗ／ｖ％  本化合物溶液（点眼量：５０μＬ）
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤溶液：０．１ｗ／ｖ％  （Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド二塩酸塩溶液（点眼量：５０μＬ）
実験動物：日本白色ウサギ（系統：ＪＷ、性別：雄性、一群５匹）
（投与方法および測定方法）
〔１〕本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤との併用投与
（１）０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液（商品名：ベノキシール０．４％液）を実験動物の両眼に一滴点眼し局所麻酔をした。
（２）被験化合物溶液投与直前に眼圧を測定し、初期眼圧とした。
（３）Ｒｈｏキナーゼ阻害剤溶液を実験動物の片眼に点眼した（対側眼は無処置）。同時に本化合物溶液を点眼するのは不可能なので、少し時間をおいて本化合物溶液を同一眼に点眼した。
（４）本化合物溶液点眼後２時間、４時間および６時間に０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液を一滴ずつ眼圧測定眼に点眼し局所麻酔後、眼圧を測定した。また、眼圧は各３回測定し、その平均値を結果に示す。
【００４９】
〔２〕本化合物の単独投与
Ｒｈｏキナーゼ阻害剤溶液を生理食塩水に代え、他は上記併用投与試験と同じ方法で試験をした。
【００５０】
〔３〕Ｒｈｏキナーゼ阻害剤の単独投与
本化合物溶液を基剤に代え、他は上記併用投与試験と同じ方法で試験をした。
【００５１】
〔４〕コントロール
本化合物溶液を基剤に、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤溶液を生理食塩水に代え、他は上記併用投与試験と同じ方法で試験をした。
【００５２】
（結果および考察）
各投与群の最大眼圧下降幅（対コントロール群平均値）を表１に示す。最大眼圧下降幅（対コントロール群平均値）は、コントロール群の初期眼圧値からの眼圧値変動幅（ΔＩＯＰ）の平均値と各個体のΔＩＯＰの差が最大となった値で示す。なお、各群ともに５匹の平均値を示す。
【００５３】
【表１】
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【００５４】
表１より、本化合物と（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミドの併用投与群は、薬剤単独投与群、すなわち、本化合物投与群および（Ｒ）−（＋）−Ｎ−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−４−（１−アミノエチル）ベンズアミド投与群よりも優れた眼圧下降作用を示した。
【００５５】
以上から、本化合物とＲｈｏキナーゼ阻害剤を組み合わせることにより、より強い眼圧下降効果が得られることが分かった。