(57)【要約】【課題】角質層に内在する真菌、白癬菌などを検出する免疫クロマトグラフィー法の測定キットに好適に使用される検体採取用具を見出すこと。【解決手段】綿球に、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油、及び、レモングラス油からなる群より選ばれる１種以上を含有する溶液を含浸させたことを特徴とする、角質層内のケラチンを採取するための綿棒。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
綿球に、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油、及び、レモングラス油からなる群より選ばれる１種以上を含有する溶液を含浸させたことを特徴とする、角質層内のケラチンを採取するための綿棒。
【請求項２】
溶液がエタノールおよび精製水を含む、請求項１に記載の綿棒。
【請求項３】
真菌を検出するために用いられる、請求項１または２に記載の綿棒。
【請求項４】
白癬菌を検出するために用いられる、請求項１または２に記載の綿棒。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、角質層内のケラチンを採取するために用いられる綿棒に関する。より詳しくは、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油、又は、レモングラス油を含有する溶液を綿球に含浸させた綿棒に関する。
【背景技術】
【０００２】
綿棒とは、軸の一端部または両端部に綿繊維が巻着されて球状の繊維集合体（綿球）を形成したものである（例えば、特許文献１参照）。綿棒は様々な用途で用いられているが、大きく分けて医療衛生用と工業用とがある。医療衛生分野における綿棒の用途には、外耳・鼻腔・口腔内の清浄、臨床検査用体液の吸着採取、および、薬剤の塗布用途などが挙げられる（例えば、特許文献２参照）。
【０００３】
ところで、皮膚真菌症は、真菌が人体の角質表皮に感染して定着する病気であり、代表的な真菌症として、白癬菌による水虫・たむし・しらくも、及び、カンジダ菌による皮膚カンジダ等が挙げられる。皮膚科の診察では、患部の皮膚角質層を採取して顕微鏡検査により菌の有無を診断するが、菌種を同定するには面倒な培養が必要となる。
【０００４】
患者にとっては、水虫等の診断のためにわざわざ病院に足を運ぶのはおっくうであり、診断なしで市販薬にて治療するか、放置しているケースが多い。一方、医師にとっても、検体採取用器具と患部表皮を切除乃至削り取る手技、２０％ＫＯＨ溶液の準備と検体の溶解、顕微鏡による観察と真菌の判別等、手間と時間がかかるため、皮膚科医以外では敬遠され診断なしで抗真菌薬を処方する場合がある。
【０００５】
そこで、最近では、妊娠検査やインフルエンザ診断に用いられている迅速かつ簡便な検査方法である免疫クロマトグラフィー法を用いた、白癬菌の簡易診断法の開発がなされている（例えば、非特許文献１参照）。これは、採取した検体を溶液にして、抗白癬菌モノクロナール抗体と反応させ、反応量に応じた試験紙の発色によって抗原濃度を求める免疫測定法である。溶液中に菌がいれば、判定ラインの所に陽性線が出て、白癬菌が数分間で検出できる。この判定方法は、他の診断薬でも同じである（例えば、非特許文献１参照）。
【０００６】
しかし、現時点で検体の簡便な採取方法乃至採取器具が開発されていないため、トータルで簡易検査になっていない。また、当該免疫検査キットも未だ世に出ておらず開発段階であるというのが現状である。
【０００７】
一般的な真菌検体の採取方法は上述の患部表皮を切除乃至削り取る方法であるが、面倒であり医師でも慣れとコツが必要であると言われている。これまでに、簡便な採取方法乃至採取器具として、セロハン粘着テープを用いたテープストリッピング法が提案されている（例えば、非特許文献２参照）。
【０００８】
しかし、テープストリッピング法では、湿潤タイプ（いわゆるジュクジュクタイプ）の疾患には適用できないし、乾燥タイプの水虫でも剥離範囲が広いため侵襲も無視できないこと、更に、上記免疫クロマトグラフィー法で必要とする検体溶液の作成が容易でないこと等でテープストリッピング法を利用するには困難性が伴う。
【０００９】
一方、皮膚微生物の採取に、滅菌綿棒を皮膚表面上に強く押し付けて菌を拭き取るｓｗａｂ法（例えば、非特許文献３参照）が知られているが、本法では皮膚角質層内に生息する真菌まで採取することは難しい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開平１０−８５２５６１号公報
【特許文献２】特開２００６−２８０６０５号公報
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】産官学連携ジャーナル  Ｖｏ．２  Ｎｏ．４  ２００６  ｐ．２６−２７
【非特許文献２】真菌誌  Ｖｏ．４８  Ｎｏ．３  ２００７  ｐ．１３２−１３６
【非特許文献３】防菌防ばい  Ｖｏ．２２  Ｎｏ．４  １９９４  ｐ．１−６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
綿棒は一般的に、前述の通り、外耳、鼻腔、口腔内などの清浄、臨床検査用体液の吸着採取、薬剤の塗布などに使用される。例えば、外耳の清浄においては、空気中のほこり、皮膚の残骸などがたまったものと、外耳道の耳垢腺から出る分泌物が混ざったものを除去するために綿棒は使用される。つまり、綿棒を用いて表皮から剥がれ落ちたものを採取することは容易であると考えられる。しかし、皮膚の表皮に現に存在している角質層からケラチンを採取するために綿棒を使用することができるということは報告も示唆もされていない。
【００１３】
すなわち、本発明の課題は、角質層に内在する真菌、白癬菌などを検出する免疫クロマトグラフィー法の測定キットに好適に使用される検体採取用具を見出すことである。検体採取用具に求められる条件は、（１）免疫クロマトグラフィー法に供すのに充分量の検体の採取ができること、（２）湿潤タイプの患部からでも乾燥タイプの患部からでも検体を採取できること、（３）患部及び正常な皮膚のいずれにおいても侵襲や痛みがないこと、かつ（４）簡便に検体の採取が実施できることである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、かかる条件を満たす採取用具を開発するために鋭意研究を進めてきた。その結果、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油、及び、レモングラス油から選ばれる特定の精油を精製水に含浸させた綿棒を使用することにより、上記４条件を満たす検体採取手段を提供できることを突き止め、これにより、飛躍的にケラチンの採取量が増すことも見出し、本発明を完成させた。
【００１５】
すなわち、
（１）綿球に、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油、及び、レモングラス油からなる群より選ばれる１種以上を含有する溶液を含浸させたことを特徴とする、角質層内のケラチンを採取するための綿棒；
（２）溶液がエタノールおよび精製水を含む、（１）に記載の綿棒；
（３）真菌を検出するために用いられる、（１）または（２）に記載の綿棒；ならびに
（４）白癬菌を検出するために用いられる、（１）または（２）に記載の綿棒；
である。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の綿棒を用いることによって採取されたケラチンは、免疫クロマトグラフィー法に供するのに充分な量であり、患部及び正常な皮膚いずれも侵襲や痛みがなく、かつ特殊な手技を必要としないため患者自身でも簡便に角質層内のケラチンが採取できるという効果を奏する。また、本発明の綿棒を水虫の検査に適用する場合、患部が湿潤タイプでも乾燥タイプのいずれのタイプにも適用できるという効果を奏する。そして、角質層内に生息する真菌または白癬菌の採取を可能にするという効果を奏する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明の綿棒は、軸部と綿球からなり、その綿球に、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油、及び、レモングラス油からなる群より選ばれる特定の精油を含有する溶液を含浸させた綿棒であり、角質層内のケラチンを採取するために用いられる。本発明の綿棒の軸部の材質は特に限定されないが、綿球部に溶液を含浸させるため耐水性であることが望ましい。本発明の綿棒の綿球とは、綿繊維の集合体のことをいい、軸部の一端部または両端部に備えられているものをいう。
【００１８】
溶液としては、エタノールおよび精製水を含有する溶液が好ましい。
【００１９】
本発明の綿棒の綿球に、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油およびレモングラス油からなる群より選択される１種以上を含有する溶液を含浸させる場合、精油が０．００１〜１重量％となるように溶液を調製して、その溶液に綿球を含浸させて製造することができる。なお、上記精油は市販されており容易に入手できる。
【００２０】
本発明の綿棒は、ボルネオール、ヒノキチオール、チモール、ヒノキ油、レモン油、及び、レモングラス油からなる群より選ばれる特定の精油を溶液に含浸させた綿棒であり、また、検査目的から、１患部あたり１本の綿棒を使用することが望ましく、綿棒一つ一つを密封包装した形態が好適である。当該包装は密封保存できる包装形態であれば特に限定はないが、開封用切欠部を設けた防水ラミネート包装が例示される。また、綿棒の軸は、樹脂性であることが好ましい。
【００２１】
本発明の綿棒は、患部に軽く押し当てながら往復擦過を数回乃至数十回行うだけで、検体が採取できるため、これまでのような手技の違いによる検査結果への影響は出ないため、患部からの検体の採取は医師でなくとも、患者自身や家族が行うことができる。
【００２２】
本発明の綿棒を用いて、検体を採取した後、抽出液に約５分間浸し、攪拌すると、検体が抽出液中に溶出する。この液を免疫クロマトグラフィーに滴下すると、数分後に真菌陽性ならば判定（陽性）ラインが出現し測定が完了する。この場合に併せて、測定終了を示す終了ラインが出るようにする方が望ましい。
【実施例】
【００２３】
１．１  供試綿棒
実施例１：
０．１％エタノール含有精製水にボルネオール（高砂香料工業社製）を０．１％溶解させた溶液を、市販の俵形綿棒（ジョンソン・エンド・ジョンソン社製）に含浸させた後、余分な水分はよく振って、実施例１の綿棒とした。
実施例２：
０．１％エタノール含有精製水にヒノキチオール（和光純薬工業社製）を０．１％溶解させた溶液を、市販の俵形綿棒（ジョンソン・エンド・ジョンソン社製）に含浸させた後、余分な水分はよく振って、実施例２の綿棒とした。
実施例３：
０．１％エタノール含有精製水にチモール（高砂香料工業社製）を０．１％溶解させた溶液を、市販の俵形綿棒（ジョンソン・エンド・ジョンソン社製）に含浸させた後、余分な水分はよく振って、実施例３の綿棒とした。
実施例４：
０．１％エタノール含有精製水にヒノキ油（高砂香料工業社製）を０．１％溶解させた溶液を、市販の俵形綿棒（ジョンソン・エンド・ジョンソン社製）に含浸させた後、余分な水分はよく振って、実施例４の綿棒とした。
実施例５：
レモン油、ユーカリ油およびエタノールを含有した市販の綿棒（ピップフジモト社製、商品名：ぬれてる綿棒）を実施例５の綿棒とした。
実施例６：
０．１％エタノール含有精製水にレモングラス油（シグマ社製）を０．１％溶解させた溶液を、市販の俵形綿棒（ジョンソン・エンド・ジョンソン社製）に含浸させた後、余分な水分はよく振って、実施例６の綿棒とした。
比較例１：
０．１％エタノール含有精製水に、市販の俵形綿棒（ジョンソン・エンド・ジョンソン社製）に含浸させた後、余分な水分はよく振って、比較例２の綿棒とした。
比較例２：
０．１％エタノール含有精製水に、ユーカリ油（和光純薬工業社製）を０．１％溶解させた溶液を、市販の俵形綿棒（ジョンソン・エンド・ジョンソン社製）に含浸させた後、余分な水分はよく振って、比較例２の綿棒とした。
【００２４】
１．２  試験方法
社内ボランティア２名で試験した。まず、石鹸を使用して両手を充分に洗浄したのち、指と指の付け根の谷間領域（以下、趾間と称す）の前後約２ｃｍ間に、綿球を３０往復擦過して皮膚ケラチン検体を得た。両手の趾間計８箇所をそれぞれ検体とした。
【００２５】
該擦過後の綿棒を、抽出液（０．１％  ＩＧＥＰＡＬ  ＣＡ−６３０含有ＰＢＳ）１００μＬ中に５分間浸けて放置した後、取り出した。該抽出液を１０μＬ分取して、タンパク染色液（Ｑｕｉｃｋ  Ｓｔａｒｔ  Ｂｒａｄｆｏｒｄ  Ｄｙｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ，  １Ｘ、ＢＩＯ−ＲＡＤ社）１００μＬ中に分注し、１５分間放置した。
【００２６】
該タンパク染色液を吸光度測定により測定し、予め作成した検量線から、タンパク量を算出した。なお、同じ種類の綿棒が同じ部位の趾間に偏らないように割付を行った。
【００２７】
１．３  試験結果
０．１％エタノール含有精製水を含浸させた綿棒（比較例１）によって得られたケラチン量を１として、得られた試験結果を表１〜表２に示す（ｎ＝２）。
【００２８】
【表１】
2012112935.tif 000002
【００２９】
表１より、ボルネオール（実施例１）、ヒノキチオール（実施例２）、チモール（実施例３）又はヒノキ油（実施例４）を添加すると、皮膚ケラチン採取能は格段に向上することが判明した。
【００３０】
【表２】
2012112935.tif 000003
【００３１】
実施例５はレモン油とユーカリ油を含有する市販の綿棒の結果であるが、ユーカリ油のみの場合（比較例２）には皮膚ケラチン採取能は弱まることから、レモン油が採取能を高める効果を有すると言える。これと、レモングラス油（実施例６）の結果から、レモン油又はレモングラス油を添加すると、皮膚ケラチン採取能が格段に向上することも判明した。
【産業上の利用可能性】
【００３２】
本発明は、白癬菌の検出キットにおける検体採取用具として利用することができる。