(57)【要約】      （修正有）【課題】結晶形態で投与する場合より有効で効率的な抗酸化剤として作用する、マイクロミセル形態のカロテノイド又はキサントフィルの提供。【解決手段】いかなる結晶形のカロテノイドも含有せず、脂質、リン脂質、脂肪酸、乳化剤、及び水分の存在下で、天然起源の植物性脂質マトリックス中でルテインジアセテート又はルテインジプロピオネートを溶融させた後にマイクロミセルとして得られ、２〜５０ｍｇの間の投薬量で摂取されて、結晶カロテノイドより少なくとも２０％高いカロテノイド可溶化物の吸収を与え、結晶ルテインの摂取によって得られる沈着より黄斑色素光学濃度で少なくとも１０％高い黄斑色素の沈着を与え、組織変性、皮膚及び網膜に対する紫外線障害を防ぐ。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
いかなる結晶形のカロテノイドも含有せず、脂質、リン脂質、脂肪酸、乳化剤、及び水分の存在下で、天然起源の植物性脂質マトリックス中でキサントフィルジアセテート又はキサントフィルジプロピオネートを溶融させた後に、マイクロミセルとして得られ、２〜５０ｍｇの投薬量であって、結晶カロテノイドより少なくとも２０％高いキサントフィル可溶化物の吸収を与えるマイクロミセルとして得られ、黄斑色素の沈着において結晶キサントフィルの摂取により得られるバイオアベイラビリティに比べ、黄斑色素光学濃度で少なくとも１０％高いバイオアベイラビリティの改善を与える、可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項２】
好ましい投薬量が、８〜１０ｍｇである、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項３】
最も好ましい投薬量が、２０ｍｇである、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項４】
ω−３脂肪酸及びω−６脂肪酸に富む油中に分散した、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項５】
可溶化物が、結晶形態よりも吸収性がよく、バイオアベイラビリティが高い、マイクロミセル形態のルテインの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項６】
可溶化物が、結晶形態よりも吸収性がよく、バイオアベイラビリティが高い、マイクロミセル形態の３’−エピルテインの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項７】
可溶化物が、マイクロミセル形態の３Ｒ，３’Ｒ−ゼアキサンチンの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項８】
可溶化物が、ω−３脂肪酸及びω−６脂肪酸に富む油中に分散した、３Ｒ，３’Ｒ−ゼアキサンチン短鎖ジエステルの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項９】
可溶化物が、マイクロミセル形態の３Ｒ，３’Ｓ−ゼアキサンチン（メソゼアキサンチン）の可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１０】
可溶化物が、ω−３脂肪酸及びω−６脂肪酸に富む油中に分散した、３Ｒ，３’Ｓ−ゼアキサンチン（メソゼアキサンチン）短鎖ジエステルの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１１】
可溶化物が、マイクロミセル形態のカプサンチンの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１２】
可溶化物が、マイクロミセル形態のカプソルビンの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１３】
可溶化物が、マイクロミセル形態のアスタキサンチンの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１４】
可溶化物が、ω−３脂肪酸及びω−６脂肪酸に富む油中に分散した、アスタキサンチン短鎖ジエステルの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１５】
可溶化物が、マイクロミセル形態のクリプトキサンチン短鎖モノエステルの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１６】
可溶化物が、液状製剤、水、若しくは他の食用液体の中で、又は食用油分散液として、又はマイクロカプセルとして製剤化されるか、或いは不活性担体中に分散されるマイクロミセル形態の、ルテイン、３’−エピルテイン、３Ｒ，３’Ｒ−ゼアキサンチン、３Ｒ，３’Ｓ−ゼアキサンチン（メソゼアキサンチン）、カプサンチン、カプソルビン、アスタキサンチン、及びクリプトキサンチンの可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１７】
可溶化物が、単独で、又は相乗効果を有する混合物を生成し、胃腸管中におけるカロテノイドの分解を回避するために、亜鉛、銅、セレン、及びマンガン、並びにビタミンＡ、ビタミンＣ、及びビタミンＥなどの他の成分と併せて、マイクロミセルとして調製された可溶化物である、請求項１に記載の可溶化物形態のキサントフィル。
【請求項１８】
黄斑症、ＡＭＤ、白内障などを予防又は治療するために、マイクロミセル調製物中の、可溶化物形態のルテイン、３Ｒ，３’Ｒ−ゼアキサンチン、３Ｒ，３’Ｓ−ゼアキサンチン（メソゼアキサンチン）、及びアスタキサンチンを、単独で又は併用して使用する方法であって、約２〜５０ｍｇのこのようなカロテノイドを人体に取り込ませて、組織変性、皮膚及び網膜に対する紫外線障害を防ぎ、一般に、結晶形態で投与する場合より有効で効率的な抗酸化剤として作用させることを含む方法。
【請求項１９】
マイクロミセル調製物中の、キサントフィル、３Ｒ，３’Ｒ−ゼアキサンチン、３Ｒ，３’Ｓ−ゼアキサンチン（メソゼアキサンチン）、カンタキサンチン、及びアスタキサンチンの可溶化物を、単独で又は併用して使用する方法であって、家禽類、海洋生物、及び甲殻類に約２〜５０ｍｇのこのようなカロテノイドを取り込ませることを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［発明の背景］
［Ａ  発明の分野］
本発明は、生体に容易に吸収されることを示し、それ故、結晶形態のカロテノイドよりバイオアベイラビリティが高い、マイクロミセル形態のカロテノイド又はキサントフィルに関する。このように改善された吸収性及びバイオアベイラビリティは、血流中のより高いカロテノイドレベルをもたらし、その結果として、このカロテノイドは、結晶カロテノイドより速い速度で且つより効率的に標的組織に沈着する。
【０００２】
［Ｂ  関連技術の説明］
カロテノイドの吸収性及びバイオアベイラビリティを改善することは多くの研究者の目的にされてきた。多くの緑の葉菜及び果物に含まれるキサントフィルはかなり安定であるが、十分なバイオアベイラビリティは示さない。これに対して、野菜が調理され、有色体組織が熱により破壊される場合には、カロテノイドは高いバイオアベイラビリティを示すが、その安定性は低下する。したがって、安定性とアベイラビリティの間の最良のバランスがまさに望まれている。ルテイン及びゼアキサンチンの安定性及びバイオアベイラビリティの顕著な例として、卵黄に見出されるそれらの特定の形態がある。ルテイン及びゼアキサンチンは、結晶形態ではなく、微視的なマイクロミセルとして卵黄に存在する。
【０００３】
カロテノイドのバイオアベイラビリティ及び吸収性を改善するために多くの試みがなされてきた。つい最近では、次のものがある。
【０００４】
Ｂａｕｅｒｎｆｅｉｎｄ及びＨｏｗａｒｄに交付された米国特許第２，８６１，８９１号は、植物油を加熱することによって過飽和カロテン溶液を得た後、それをゲル化可能なコロイド水溶液中に分散し、形成されたエマルジョンを乾燥した粒状形態に変換することにより、乾燥粉末を得る方法を記載している。このような方法は、カロテン、リコペン、ルテイン、ゼアキサンチン、クリプトキサンチン、ビキシン、及びメチルビキシンの溶解性を改善するために植物油中のカロテノイドを加熱すること、及びゲル化可能なコロイドを取り入れることによりカロテノイド結晶の沈殿を回避することを含む。次いで、コロイド水溶液中でさらなる乳化ステップが行われ、噴霧乾燥プロセス後に乾燥粉末を生成できるゲルが形成される。得られた生成物は、マーガリン、果物、及び野菜を着色するために使用される、食用油中の微結晶分散液であり、β−カロテンが親水性保護コロイド中にマイクロ分散液の形で存在する。
【０００５】
Ｇｒａｎｔに交付された米国特許第３，５２３，１３８号は、長鎖脂肪酸エステルからキサントフィルを遊離させるために鹸化反応を行った後に、家禽類においてカロテノイドのバイオアベイラビリティが改善することを記載している。
【０００６】
Ｈａｗｋｓに交付された米国特許第３，５３５，４２６号は、脂肪及びエトキシキノレイン（ｅｔｈｏｘｙｑｕｉｎｏｌｅｉｎ）と混合すると、キサントフィルの鹸化混合物がより安定になり、その結果として、バイオアベイラビリティが増大することを開示している。
【０００７】
Ｃａｔｈｒｅｉｎは、米国特許第５，３６４，５６３号において、油中の懸濁液を得て、それを過熱蒸気に接触させ、エマルジョンを生成して、それを噴霧乾燥させることによって、粉末のカロテノイド調製物を生成する方法を記載している。
【０００８】
Ｅｕｇｓｔｅｒらは、米国特許第５，４９６，８１３号及び第５，５３６，５０４号において、抗腫瘍活性を有する、キサントフィルエステルを含有する自然分散性濃縮物を形成する超マイクロエマルジョンを得ている。
【０００９】
Ｇｅｌｌｅｎｂｅｃｋは、米国特許第５，８２７，５３９号において、カロテノイドと油との微粉砕混合物、及び水分散性である噴霧乾燥してカプセル化した形態を得ている。
【００１０】
Ｌｕｄｄｅｃｋｅらは、米国特許第５，８６３，９５３号において、粒径１００ミクロンの二重分散系を調製するために用いられ、保護コロイド及び乳化剤によって安定化されたカロテノイドの油分散液を得たことを記載している。
【００１１】
Ｓａｎｄｅｒｓ及びＨｅｒｉｎｋは、国際公開第９９４７００１号において、イソレシチン及びレシチンを用いることによって、ヒト並びに家禽類におけるルテイン及びゼアキサンチンのバイオアベイラビリティが増大することを公表した。
【００１２】
Ｋｏｌｔｅｒらは、米国特許第５，８９１，９０７号において、カロテノイド及び水不溶性ビタミンが、非イオン性乳化剤の補助により粒径１００ｎｍ未満のミセルを生成する、カロテノイド及びビタミンの安定な水性可溶化物（ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｅ）を記載している。
【００１３】
Ｌｕｄｄｅｃｋｅらは、米国特許第５，８９５，６５９号において、カロテノイド又はレチノイドを、揮発性の水混和性有機溶媒中に高圧下で溶解させ、１０秒後直ちに該溶液を乳化剤含有水性媒体と混合することによって、細かく分散したカロテノイド懸濁液又はレチノイド懸濁液を調製することを記載している。
【００１４】
Ｓｃｈｗｅｉｋｅｒｔらは、米国特許第５，９２５，６８４号において、カロテノイドが室温で油中のカロテノイドの飽和溶解度を超える濃度で油相中に存在する、乳化剤によって非常に細かく分散した、水相及び油相からなる安定な水中油型エマルジョンを記載している。
【００１５】
Ａｕｗｅｔｅｒらは、米国特許第５，９６８，２５１号において、高温にて、揮発性の水混和性有機溶媒中で、乳化剤及び／若しくは食用油を用いて、又はそれらを用いずにカロテノイドの分子分散液を調製し、保護コロイドの水溶液を添加し（親水性溶媒が水相中に移動し、カロテノイドの疎水性相がナノ分散相となる）、ヒドロゾルを加熱することにより溶媒を除去し、それを水分散性乾燥粉末に変換することによって冷水分散性粉末を調製することを記載している。
【００１６】
Ｇｅｌｌｅｎｂｅｃｋは、米国特許第５，９７６，５７５号において、カロテノイドの粒径を減少させるためにカロテノイドと油との混合物を粉砕し、該混合物をカプセル化混合物を用いて乳化し、該エマルジョンを乾燥させることを記載している。
【００１７】
Ｈａｎｄｅｌｍａｎは、米国特許第６，０７５，０５８号において、コレステロール、オリーブオイル、卵黄リン脂質、α−トコフェロール、及び塩化ナトリウム水溶液を加えたルテイン及びゼアキサンチンの組成物を記載している。該混合物は、エタノール中に脂質成分を混合し、エタノールを蒸発させ、塩化ナトリウム溶液中にエマルジョンとして脂質を分散させることによって調製する。
【００１８】
Ｋｏｗａｌｓｋｉらは、米国特許第６，０９３，３４８号において、カロテノイド粉末を製造する方法を記載している。そこでは、カロテノイドの水性懸濁液を加熱して、高温高圧下（ＨＴＨＰプロセス）にて、界面活性剤及び保護コロイドの存在下でカロテノイドを溶融させる。次いで、該懸濁液を高圧下で均質化し、エマルジョンを形成させる。さらに、得られたエマルジョンを乾燥して、カロテノイド粉末を得る。
【００１９】
Ｓｃｈｌｉａｐａｌｉｕｓは、米国特許第６，１３２，７９０号において、油中のカロテノイド組成物、水分散性マトリックス及び安定剤の分散液、並びに非油性溶媒及び乳化剤、すべての天然源を記載している。
【００２０】
Ｋｏｇｕｃｈｉらは、米国特許第６，２６１，６２２号において、エマルジョン安定剤として大豆抽出物繊維を用いて、微粉化カロテノイド結晶を分散させることにより、低温でも分散安定性を保持すると共に、様々な水性組成物に添加することができる水分散性カロテノイド調製物を提供する方法を記載している。
【００２１】
Ｂｅｗｅｒｔらは、米国特許第６，３２８，９９５号において、熱水に不溶であり、１種又は複数の脂溶性のビタミン若しくはカロテノイドを含有し、タンパク質、糖、並びにリン酸カリウム及び／又はリン酸ナトリウムを含有する水性分散液中で形成される乾燥粉末を安定化させる手順を記載している。
【００２２】
Ｓｔｅｉｎらは、米国特許第６，４０６，７３５号において、微粉化したカロテノイド又はレチノイドの微粉状組成物を調製する方法を記載している。該方法は、抗酸化剤及び／又は油を含有する水不混和性有機溶媒中で有効成分の懸濁液を形成させるステップ、該懸濁液を熱交換器を介して供給し、滞留時間５秒で高温まで加熱するステップ、該溶液を水膨潤性コロイドと迅速に混合するステップ、及びさらに有機溶媒を除去して微粉状調製物を得るステップを含み、すべてのステップは順番に連続して処理される。
【００２３】
Ｇｕｅｒｒａ−Ｓａｎｔｏｓらは、米国特許第６，９３６，２７９号において、油性担体中で、微結晶形のカロテノイド、特にゼアキサンチンを得ることを記載している。「粗粒子状の」カロテノイドをテトラヒドロフランなどの適当な溶媒に溶解し、植物油及び乳化剤と混合する。該混合物を不活性ガスと共に真空チャンバー中に注入し、溶媒を瞬時に除去し、カロテノイド結晶が成長しないようにする。彼らは、油性担体中で微結晶懸濁液を得ている。
【００２４】
Ｅｉｄｅｎｂｅｒｇｅｒ，Ｔｈｏｍａｓは、国際公開第２００９／０６３３３３号において、カロテノイドと、アントシアニン又は少なくとも１つのＳＨ基を有する化合物又は両者の組合せのいずれかとを含む組成物を記載している。このような組成物を投与すると、得られるカロテノイドのバイオアベイラビリティは、アントシアニンを含まない、少なくとも１つのＳＨ基を有する化合物を含まない、又はアントシアニンと少なくとも１つのＳＨ基を有する化合物の両者の組合せを含まないカロテノイド組成物に比較して増大していると彼は主張する。
【００２５】
Ｍａｄｈａｖｉらは、米国特許第７，４４６，１０１号において、カロテノイド−シクロデキストリン複合体の製造及びヒト摂取用の該複合体の製剤のための改良された工業的方法を記載している。シクロデキストリン（α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、又はＨＰ−β−シクロデキストリン）と複合体を形成させると、カロテノイド（リコペン、ルテイン、又はゼアキサンチン）及びそれらの混合物のインビトロでの取り込みが顕著に改善される。インビボでは、ヒト研究において、レシチン−油又は油の中で製剤化したルテイン／γ−シクロデキストリン複合体は、遊離ルテイン−油製剤と比較して、ルテインの良好な吸収性を示した。
【００２６】
Ｄｏｎｅｙ，Ｊｏｈｎ，Ａｌｆｒｅｄは、国際公開第２００８／０８００３７号において、少なくとも１つの溶解性増強ポリマーを含有する、溶解性及びバイオアベイラビリティが増強したカロテノイド組成物を記載している。一実施形態では、カロテノイドはβ−カロテンなどのプロビタミンＡカロテノイドである。別の実施形態では、カロテノイドはリコペン又はルテインなどの非プロビタミンＡカロテノイドである。バイオ増強型生成物を生成するために記載された方法は、乾式混合及び溶媒噴霧乾燥を含む。該方法には、カロテノイド、溶解性増強ポリマー、及び溶媒を含む混合物を生成するステップが含まれる。溶媒を除去して、非晶形カロテノイドを生成する。該発明の組成物及び方法によって製造される製品には、ヒト及び動物のための医薬品、栄養補助食品、化粧品、及びパーソナルケア製品が含まれる。
【００２７】
Ｋａｎｎｅｒ  Ｊｏｓｅｐｈらは、米国特許出願公開第２００８１５３１４８号において、カロテノイドの少なくとも一部がエステル化脂肪酸である遊離カロテノイドの割合を増大させる方法を記載している。該方法は、脂肪酸エステル化カロテノイドを脱エステル化するために有効な条件下で有効量のエステラーゼとエステル化カロテノイドのソースとを接触させて、ソース中の遊離カロテノイドの割合を増大させることにより達成される。
【００２８】
本発明によれば、いかなる結晶形のカロテノイドも含有せず、脂質、リン脂質、脂肪酸、乳化剤、及び水分の存在下で、天然起源の植物性脂質マトリックス中でルテインジアセテート又はルテインジプロピオネートを溶融させた後にマイクロミセルとして得られ、２〜５０ｍｇの間で投薬され、結晶カロテノイドより少なくとも２０％高いルテイン可溶化物の吸収を与え、結晶ルテインの摂取によって得られる沈着より、黄斑色素光学濃度で少なくとも１０％高い黄斑色素の沈着を与え、したがって、組織変性、皮膚及び網膜に対する紫外線障害を防ぎ、一般に、結晶形態で投与する場合より有効で効率的な抗酸化剤として作用する、マイクロミセル形態のカロテノイド又はキサントフィルが提供される。
【００２９】
［Ｃ  発明の概要］
したがって、本発明の主な目的は、吸収性及びバイオアベイラビリティが改善された製剤及びカロテノイド含有化合物を調製することである。そのようなカロテノイドの中には、米国特許第７，４３５，８４６号に従ってマイクロミセルとして調製され、したがって、それらの吸収性及びバイオアベイラビリティは顕著に改善されているルテイン、３’−エピルテイン、ゼアキサンチン、メソゼアキサンチン、アスタキサンチン、カンタキサンチン、カプサンチン、カプソルビン、及びそれらの誘導体がある。本発明は、水酸基及び／又は酸素原子によって置換される水素原子対を含有するいかなるカロテノイドにも及ぶ。
【００３０】
本発明の目的はまた、結晶形態で投薬したカロテノイドと比較して、マイクロミセルとして製剤化した所与のカロテノイドの投薬量を減らして、所与の組織で望ましい濃度レベルを得ることである。
【００３１】
マイクロミセルとして調製したカロテノイドは、単独で、又は相乗効果を有する混合物を生成し、胃腸管中におけるカロテノイドの安定性を改善するために、亜鉛、銅、セレン、及びマンガン、並びにビタミンＡ、ビタミンＣ、及びビタミンＥなどの他の成分と併せて使用することができる。
【００３２】
本発明の目的はまた、ω−３脂肪酸及びω−６脂肪酸を含有する魚油又はオキアミ油と併せて、マイクロミセルカロテノイドを含有する特定の製剤を調製することである。
【００３３】
したがって、本発明のさらなる目的は、結晶カロテノイドを使用する場合に必要な投与量より低い投与量を用いて、血流中のカロテノイドの望ましい濃度レベルを得ることである。
【００３４】
本発明のさらなる目的はまた、腸壁を介するカロテノイドの吸収を改善して、その結果として、結晶カロテノイドを摂取した場合に得られるレベルと比較して、高い血流中カロテノイドレベルを達成することである。
【００３５】
マイクロミセルカロテノイドは、液状製剤、水、若しくは他の食用液体の中で、又は食用油分散液として、又はマイクロカプセルとして製剤化することができ、或いは不活性担体中に分散することができる。
【実施例】
【００３６】
いかなる結晶形のカロテノイドも含有せず、脂質、リン脂質、脂肪酸、乳化剤、及び水分の存在下で、天然起源の植物性脂質マトリックス中でルテインジアセテート又はルテインジプロピオネートを溶融させた後にマイクロミセルとして得られる、本明細書において非晶質形態のＭｉｃｒｏ−Ｍｉｃ（商標）ルテインと呼称される、可溶化物形態のルテインのバイオアベイラビリティを、市販の結晶ルテインと比較して決定するための評価（Ｒｉｃｈａｒｄ  Ａ．Ｂｏｎｅ及びＪｏｈｎ  Ｔ．Ｌａｎｄｒｕｍ、ＦＩＵ、２０１０）を実施した。この評価は３群の被験者を用いて２４週間実施し、被験者は下記のものを含有するゼラチンカプセルを毎日１カプセル摂取した。
第１群は、植物油中のＭｉｃｒｏ−Ｍｉｃ（商標）２０ｍｇの分散液を含有するカプセルを摂取した。
第２群は、植物油中に分散させた市販結晶ルテイン２０ｍｇの分散液を含有するゼラチンカプセルを摂取した。
第３群は、植物油のみを含有するゼラチンカプセル（プラセボ）を摂取した。
この３種のゼラチンカプセルはすべて同じ色（暗褐色）とした。
血液試料を毎週採取し、血清中のルテインをＨＰＬＣにより分析し、その濃度をルテイン（ｎｇ／μｌ）として報告した。
【００３７】
【表１】
2012131768.tif 000002
【００３８】
【表２】
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【００３９】
【表３】
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【００４０】
ベースラインデータ、第６週、第１２週、第１８週、及び第２４週について得られた結果を示す。各週における濃度間の比をベースライン濃度で除した。それらの比の平均を各カラムの下に示す。
【００４１】
【表４】
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【００４２】
まとめには、Ｍｉｃｒｏ−Ｍｉｃ（商標）が一貫して結晶ルテインより２５％〜３０％上回っているという、より関連性のある情報が含まれている。
【００４３】
【表５】
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【００４４】
血清の結果は、黄斑色素の結果よりもバイオアベイラビリティの優れた指標である。被験者の中には、血清では応答者であるが、黄斑色素では非応答者である者がいることはよく知られている。しかしながら、この評価では、Ｍｉｃｒｏ−Ｍｉｃ（商標）群の平均ＭＰＯＤ（黄斑色素光学濃度）は、結晶ルテイン群被験者の平均ＭＰＯＤを約１４％上回っている。
【外国語明細書】
2012131768000001.pdf