(57)【要約】【課題】本願発明に係る１つの態様によれば、簡便な構成でサンプル液およびシース液を脈動なく一定の流量でフローチャンバに供給することができる。【解決手段】本願発明の１つの態様に係るシステムは、フローチャンバからフローセルに流れる液体フローに含まれる生物学的粒子を分別するものであって、シース液を収容するシースタンクと、前記シースタンクからシース液を汲み上げる流体ポンプと、シース液からバブルを除去するバッファリザーバと、バブル除去されたシース液を前記フローチャンバに一定の流量で供給する液体マスフローコントローラとを備えたことを特徴とするものである。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
フローチャンバからフローセルに流れる液体フローに含まれる生物学的粒子を分別するシステムであって、
シース液を収容するシースタンクと、
前記シースタンクからシース液を汲み上げる流体ポンプと、
シース液からバブルを除去するバッファリザーバと、
バブル除去されたシース液を前記フローチャンバに一定の流量で供給する液体マスフローコントローラとを備えたことを特徴とするシステム。
【請求項２】
バッファリザーバは、シース液からバブルを除去するとともに、シース液の温度を一定に維持する機能を有することを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
ポンプにより汲み上げられたシース液の脈動を取り除くための圧力調整バルブをさらに有することを特徴とする請求項１または２に記載のシステム。
【請求項４】
マスフローコントローラは、フローチャンバに隣接して配置されることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１に記載のシステム。
【請求項５】
フローチャンバからフローセルに流れる液体フローに含まれる生物学的粒子を分析するシステムであって、
エアコンプレッサと、
前記エアコンプレッサで加圧された空気の圧力を一定に調節するエアレギュレータと、
前記エアレギュレータからの一定圧力の空気が気密封止された陽圧リザーバと、
前記陽圧リザーバ内に交換可能に配置された、サンプル液を収容するサンプル液リザーバと、
前記サンプル液リザーバから前記フローチャンバに延びるサンプル液導管とを備え、
前記陽圧リザーバは、前記サンプル液リザーバ内に収容されたサンプル液が一定の温度に維持されるように、該サンプル液リザーバの周りに流体を収容したことを特徴とするシステム。
【請求項６】
サンプル液リザーバは、フローチャンバの直上に配置されることを特徴とする請求項５に記載のシステム。
【請求項７】
フローチャンバはサンプル液導管を液密に受容するサンプル外挿管を有し、
サンプル液リザーバとサンプル外挿管との間に配置され、これらと流体連通する三方バルブをさらに有し、
前記サンプル外挿管から前記フローチャンバ内のシース液を逆流させて、前記サンプル外挿管に付着した細胞粒子を取り除くように構成されたことを特徴とする請求項５または６に記載のシステム。
【請求項８】
サンプル液リザーバは、下方に向かって先細るように構成された底部を有することを特徴とする請求項５〜７のいずれか１に記載のシステム。
【請求項９】
サンプル液リザーバは、弾性部材からなる底部を有し、
サンプル液導管は、廃棄処分可能な金属針で構成された先端部を有し、
前記サンプル液導管の前記先端部を前記サンプル液リザーバの前記底部に突き刺すことにより、前記サンプル液リザーバが前記フローチャンバに流体連通されることを特徴とする請求項５〜８に記載のシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願発明は、フローサイトメータおよびセルソータなどのフローセルに流れる液体フローに含まれる生物学的粒子を分析するシステムに関し、とりわけこれらのフローチャンバにシース液およびサンプル液を供給するシステムに関する。
【背景技術】
【０００２】
バイオテクノロジの革新的な発展に伴い、医学や生物学を含むさまざま分野で多数の細胞などを自動的に分析するフローサイトメータおよびセルソータの需要がますます増大している。
フローサイトメータは、概略、生体（血液など）から採取された数多くの細胞粒子を蛍光標識試薬などで染色し、これらの細胞粒子を含むサンプル液をシース液で取り囲むシースフローを形成し、フローセル内で一列に配列した個々の細胞粒子にレーザ光を照射して、細胞粒子から生じる散乱光（前方散乱光および側方散乱光）と蛍光標識試薬に依存するさまざまな多色蛍光を測定することにより、細胞を分析するものである。
またフローサイトメータは、個々の細胞粒子から収集された散乱光および蛍光を細胞粒子に固有の識別情報として収集・分析し、サンプルから採取された大量の細胞粒子について統計的に評価することにより、生体の細胞レベルで認知される病変などを診断することを可能にするものである。
さらにセルソータは、個々の細胞粒子からの散乱光と蛍光（固有の識別情報）に基づいて、フローセルから噴出される個々の細胞粒子を含む液滴に選択的に電荷を与え、この液滴が落下する経路上に直流電場を形成することにより、特定の細胞粒子を分取・分別することを可能にするものである。
【０００３】
フローサイトメータおよびセルソータにおいて、個々の細胞粒子に固有の識別情報を正確に収集し、適当なタイミングで液滴に電荷を与えるためには、レーザ光が照射されるフローセルに流れる個々の細胞粒子を一定の間隔で一列に（直線的に）配列させることが極めて重要である。すなわち、フローセルに連通するフローチャンバに供給されるサンプル液およびシース液を所定の混合比および流量を極めて精緻に制御する必要がある。
【０００４】
しかしながら、サンプル液およびシース液を供給する際の流量は、微小（数ピコリットル／秒）であり、それらの温度や粘性などにより影響を受けやすく、これらを供給するポンプが流体に与える脈動によっても、ばらつきが生じるので好ましくない。換言すると、サンプル液およびシース液が供給される流量を、ばらつきなく一定に制御することにより、シースフローおよびジェットフローに含まれる細胞粒子の速度ならびにジェットフローの長さおよび液滴間隔を一定に制御することができ、セルソータの細胞粒子の分別回収率および純度を安定させることができる。
【０００５】
そこで従来の液体供給装置１０１は、図５に示すように、サンプル液およびシース液が脈動なく一定の流量でフローチャンバに供給されるサンプル液供給機構１１０およびシース液供給機構１２０を提案している。
【０００６】
サンプル液供給機構１１０は、サンプル液を収容する気密封止されたサンプル液プレナムチャンバ１１２と、これに加圧された空気を供給するエアコンプレッサ１１４と、サンプル液プレナムチャンバ１１２内の空気の圧力（陽圧）を検知するサンプル圧力検知部１１６とを有する。
エアコンプレッサ１１４を作動させて、陽圧の空気をサンプル液プレナムチャンバ１１２内に導入すると、収容されたサンプル液は陽圧により押圧され、サンプル管１１６を介してフローチャンバ１３０に供給される。このとき、このサンプル液供給機構１１０は、圧力検知部１１６がサンプル液プレナムチャンバ１１２内の陽圧をモニタし、常に一定の圧力が維持されるようにエアコンプレッサ１１４にフィードバッグすることにより、脈動なく一定の流量でサンプル液をフローチャンバ１３０に供給しようとするものである。
【０００７】
一方、たとえば特許文献１に記載のシース液供給機構１２０は、図５に示すように、大量のシース液を貯蔵するシースタンク１２２と、シースタンク１２２からシース液を汲み上げる流体ポンプ１２４と、流体ポンプ１２４からシース液の脈動を減衰させる脈動減衰チャンバ１２６と、シース液プレナムチャンバ１２８とを有する。一般に、流体ポンプ１２４はダイアフラムポンプが用いられ、汲み上げられたシース液は多くの脈動を含む。多くの脈動を含むシース液は一旦脈動減衰チャンバ１２６内に収容され、同様に気密封止された脈動減衰チャンバ１２６内の気圧が上昇することにより、シース液はシース液プレナムチャンバ１２８に送出される。シース液プレナムチャンバ１２８は、その内部の気圧（陽圧）を検知するシース圧力検知部１２５およびサンプル液の液面レベルを検知する液面レベル検知部１２７を有し、その気圧と液面レベルを一定に維持することにより、より脈動の少ないシース液を一定の流量でフローチャンバ１３０に供給しようとするものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００４−７７４８４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、特許文献１に記載のシース液供給機構１３２は、上述のように数多くの部品（とりわけシース圧力検知部１２５および液面レベル検知部１２７など）を用いて複雑に構成されているので、大型化し、製造コストが嵩む。また異なるシース液等を利用したい場合等、すなわち脈動減衰チャンバ１２６およびシース液プレナムチャンバ１２８を置換する必要があるとき、組み立て作業およびフィードバック機構の調節が極めて煩雑である。さらに、特許文献１に記載のシース液供給機構１３２は、基本的には、シース液プレナムチャンバ１２８内の圧力を調整することにより、シース液を一定の流量でフローチャンバ１３０に供給するように構成されているので、シース液の温度が変動すると、その粘性が変化し、フローチャンバ１３０に供給されるシース液の流量に影響を与える。
【００１０】
そこで本願発明は、上記問題点を解決するためになされたもので、簡便な構成でサンプル液およびシース液を脈動なく一定の流量でフローチャンバに供給することができるサンプル液供給機構およびシース液供給機構を提供しようとするものである。また本願発明は、異なるサンプル液およびシース液に容易に交換できるサンプル液供給機構およびシース液供給機構を実現しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本願発明の１つの態様に係るシステムは、フローチャンバからフローセルに流れる液体フローに含まれる生物学的粒子を分別するものであって、シース液を収容するシースタンクと、前記シースタンクからシース液を汲み上げる流体ポンプと、シース液からバブルを除去するバッファリザーバと、バブル除去されたシース液を前記フローチャンバに一定の流量で供給する液体マスフローコントローラとを備えたことを特徴とするものである。
【００１２】
好適には、バッファリザーバは、シース液からバブルを除去するとともに、シース液の温度を一定に維持する機能を有する。さらに好適には、ポンプにより汲み上げられたシース液の脈動を取り除くための圧力調整バルブをさらに有する。このときマスフローコントローラは、フローチャンバに隣接して配置されることが好ましい。
【００１３】
本願発明の別の態様に係るシステムは、フローチャンバからフローセルに流れる液体フローに含まれる生物学的粒子を分析するものであって、エアコンプレッサと、前記エアコンプレッサで加圧された空気の圧力を一定に調節するエアレギュレータと、前記エアレギュレータからの一定圧力の空気が気密封止された陽圧リザーバと、前記陽圧リザーバ内に交換可能に配置された、サンプル液を収容するサンプル液リザーバと、前記サンプル液リザーバから前記フローチャンバに延びるサンプル液導管とを備え、前記陽圧リザーバは、前記サンプル液リザーバ内に収容されたサンプル液が一定の温度に維持されるように、該サンプル液リザーバの周りに流体を収容したことを特徴とするものである。
【００１４】
好適には、サンプル液リザーバは、フローチャンバの直上に配置される。より好適には、フローチャンバはサンプル液導管を液密に受容するサンプル外挿管を有し、サンプル液リザーバとサンプル外挿管との間に配置され、これらと流体連通する三方バルブをさらに有し、サンプル外挿管からフローチャンバ内のシース液を逆流させて、サンプル外挿管に付着した細胞粒子を取り除くように構成される。さらに、サンプル液リザーバは、下方に向かって先細るように構成された底部を有することが好ましい。
【発明の効果】
【００１５】
本願発明に係る１つの態様によれば、簡便な構成でサンプル液およびシース液を脈動なく一定の流量でフローチャンバに供給することができる。本願発明に係る別の態様によれば、異なるサンプル液およびシース液に容易に交換することができる。本願発明に係るさらに別の態様によれば、サンプル液およびシース液を適正温度に維持した状態でフローチャンバに供給することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本願発明の実施形態１に係るセルソータの全体的構成を示す概略図である。
【図２】サンプル外挿管に挿入されたサンプル液導管の拡大断面図である。
【図３】実施形態１に係るサンプル液リザーバ、陽圧チャンバ、およびフローチャンバの一部を示す拡大概略図である。
【図４】変形例によるサンプル液リザーバおよび上流側のサンプル液導管の一部を示す拡大概略図である。
【図５】従来技術によるセルソータの全体的構成を示す概略図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、添付図面を参照して本願発明に係るセルソータなどの、液体フローに含まれる生物学的粒子を分析するシステムの実施形態を説明する。本願発明は、理解を容易にするために、セルソータについて例示的に説明するが、フローサイトメータにも同等に適用することができる。また方向を表す用語（例えば、「上方」および「下方」など）を適宜用いるが、これらの用語は説明のためのものであって、本願発明を限定するものでない。
【００１８】
［実施形態１］
図１および図２を参照しながら、本願発明に係るセルソータの実施形態１について以下詳細に説明する。図１は本願発明に係るセルソータ１の全体的構成を示す概略図である。セルソータ１は、概略、サンプル液供給機構１０と、シース液供給機構２０と、流体フロー機構３０と、光学的機構（図示せず）と、ソータ機構４０とを有する。
【００１９】
流体フロー機構３０は、蛍光標識された細胞粒子を含むサンプル液の周囲にシース液が包囲するシースフローを形成し、フローセル３１において細胞粒子を一列に配列するとともに、ピエゾ素子等の圧電素子３２を用いて振動することにより、ジェットフローＪＦの先端から細胞粒子を含む複数の液滴Ｄを形成するものである。
光学的機構は、フローセル３１において一列に配列された細胞粒子に波長の異なる複数のレーザ光を照射し、個々の細胞粒子に固有の散乱光および蛍光を受光するものである。
ソータ機構４０は、こうした個々の細胞粒子に固有の信号情報を解析し、荷電電極３３を介して、所定のタイミングでそれぞれの細胞粒子に電荷を与え、一対の偏向板４２に所定の電圧差を与えることにより、個々の細胞粒子を分別するためのものである。
【００２０】
上記の光学的機構およびソータ機構４０は、これまで提案された任意のものを採用することができるので、さらなる説明を省略し、本願発明に係るサンプル液供給機構１０およびシース液供給機構２０を中心に以下詳細に説明する。
【００２１】
＜サンプル液供給機構＞
本願発明に係るサンプル液供給機構１０は、概略、周辺空気を加圧するエアコンプレッサ１１と、加圧された空気を収容して脈動を取り除くバッファタンク１２と、バッファタンク１２内の加圧空気を一定の圧力（約１０ｐｓｉ〜１００ｐｓｉ）に調節するエアレギュレータ１３と、一定圧力で調節された加圧空気で充填された陽圧チャンバ１４とを有する。
【００２２】
陽圧チャンバ１４の内部には、サンプル液を収容するサンプル液リザーバ１５が陽圧環境下に配置されている。サンプル液リザーバ１５は気密封止されていないので、陽圧チャンバ１４内の陽圧がサンプル液リザーバ１５内のサンプル液を直接的に押圧し、サンプル液は、上流側および下流側のサンプル液導管１６ａ，１６ｂならびにサンプル液クランプ１７を介して、フローチャンバ３５へ送出される。このとき陽圧チャンバ１４内の陽圧空気は、バッファタンク１２により脈動が除去され、エアレギュレータ１３により一定圧力に調節されているので、フローチャンバに供給されるサンプル液の脈動が抑制され、一定の流量となるように制御することができる。
【００２３】
またサンプル液リザーバ１５は、陽圧チャンバ１４内に容易に置換可能に配置されているので、サンプル液を交換したい場合には、サンプル液クランプ１７を閉じ、陽圧チャンバ１４から元のサンプル液リザーバ１５を取り出し、別のサンプル液リザーバ１５を陽圧チャンバ１４内に配設するだけでよく、サンプル液を交換に伴う交換作業を極めて容易に行うことができる。サンプル液は、当然に、上流側および下流側のサンプル液導管１６ａ，１６ｂならびにサンプル液クランプ１７の内部に残留しているので、これらも同時に新しいものと交換するか、洗浄する必要がある。
【００２４】
さらに陽圧チャンバ１４内には、水等の比熱の大きい流体（保温水）がサンプル液リザーバ１５の周囲を当接するように収容され、保温水は、外部に配設された保温器１８との間で循環するように構成されている。こうしてサンプル液内の細胞粒子は、所定の温度（たとえば約４℃〜４２℃）に維持しておくことにより、「生きた」状態に維持することができるので、ソータ機構４０を用いて、より高い精度で分別することができる。
【００２５】
なお陽圧チャンバ１４は、サンプル液を撹拌するためのアジテータ（撹拌器）１９を有し、サンプル液リザーバ１５内のサンプル液を均一な温度で維持し、サンプル液内細胞粒子の凝集を防止することが好ましい。
【００２６】
また陽圧チャンバ１４は、確実に気密封止するために、上流側のサンプル液導管１６ａが導出される部分に第１のシールコネクタ１４ａを設けることが好ましい。
同様に、下流側のサンプル液導管１６ｂをサンプル外挿管３６に液密に接続するための第２のシールコネクタ３５ａ、およびサンプル外挿管３６をフローチャンバ３５に液密に接続するための第３のシールコネクタ３５ｂを設けることが好ましい。
【００２７】
上流側および下流側のサンプル液導管１６ａ，１６ｂは、たとえばＰＥＥＫ樹脂、テフロン（登録商標）樹脂、シリコーンゴムまたはタイゴン（登録商標）等の構成材料からなる可撓性チューブであってもよく、約２００〜４００μｍの内径を有するものであってもよい。一方、サンプル外挿管３６は、金属またはガラス等の構成材料からなる比較的に硬いものであってもよい。
【００２８】
本願発明に係るサンプル外挿管３６は、フローセル３１の中心に精度よく位置合わせされており、下流側のサンプル液導管１６ｂがサンプル外挿管３６の中に着脱可能に挿入されるように構成されている。したがって、サンプル液リザーバ１５とともにサンプル液導管１６を交換する必要がある場合、サンプル液導管１６ｂがサンプル外挿管３６により適正な位置に案内されて、サンプル液導管１６ｂをフローセル３１の中心に正確に配列することができる。その結果、サンプル外挿管３６自体を交換して、再び位置合わせを行っていた場合に比して、サンプル液導管１６の位置合わせに係る煩雑な作業が不要となり、極めて簡便にサンプル液導管１６ｂを交換することができる。
【００２９】
このように、サンプル液を交換する際に、サンプル液リザーバ１５はもとより、サンプル液導管１６ａ，１６ｂおよびサンプル液クランプ１７をすべて容易に交換することにより、交換前のサンプル液がサンプル液導管１６ａ，１６ｂ等内に残留して（キャリーオーバーして）、交換後の細胞粒子の検定または分別に悪影響が生じる可能性を排除することができる。
【００３０】
なお、下流側のサンプル液導管１６ｂをサンプル外挿管３６に挿入する際、フローセル３１の中心に配置するために、図２（ａ）および（ｂ）に示すように、サンプル外挿管３６の下端部３６ｂに狭窄部３７を設けてもよい。また図２（ｃ）に示すように、下流側のサンプル液導管１６ｂの先端部の内径を大きくすることにより、サンプル液導管１６の先端部から放出される細胞粒子の速度を半径方向の位置によらず一定にすることができる。
【００３１】
＜シース液供給機構＞
本願発明に係るシース液供給機構２０は、概略、図１に示すように、大量のシース液を貯蔵するシースタンク２１と、シースタンク２１と流体連通する流体ポンプ２２と、液体用圧力調整バルブ２３と、シース液からバブルを除去するバッファリザーバ２４と、バブル除去されたシース液をフローチャンバ３５に一定の流量で供給する液体マスフローコントローラ２５とを有する。
【００３２】
流体ポンプ２２は、シースタンク２１からシース液を汲み上げるものであれば任意のポンプを採用することができ、ダイアフラムポンプ等であってもよい。液体用圧力調整バルブ２３は、ダイアフラムポンプ等によりシースタンク２１から汲み上げられたシース液に生じる脈動を減衰させるものであり、たとえば流体ポンプ２２とバッファリザーバ２４の間の導管に介在するオリフィスであってもよい。またバッファリザーバ２４は、シース液からバブルを除去するものであり、バッファリザーバ２４にシース液を供給する導管２４ａの下端がシース液を送出する導管２４ｂの下端より上方にあって、両方の下端がバッファリザーバ２４に収容されたシース液の液面下に配置されるように構成されている。
【００３３】
本願発明に係る液体マスフローコントローラ２５は、シース液が流れる毛細管の上流側および下流側の２箇所に発熱抵抗線を捲回し、これらの発熱抵抗線に電流を流して加熱すると、所定の流量でシース液を流したとき、シース液の流量に依存して発熱抵抗線に温度差が生じることを利用して、シース液の流量を測定し、測定された流量に基づいて毛細管が連通するアクチュエータバルブの開閉をフィードバックすることにより一定の質量流量でシース液を供給するものである。こうした液体マスフローコントローラ２５として、たとえば株式会社堀場製作所から市販されたマスフローコントローラ（ＬＶ−Ｆシリーズ）を用いてもよい。
【００３４】
したがって前掲特許文献１に記載のシース液供給機構１２０によれば、シース液を一定の流量でフローチャンバ１３０に供給するために、シース液プレナムチャンバ１２８の内部の陽圧を検知するシース圧力検知部１２５およびサンプル液の液面レベルを検知する液面レベル検知部１２７が必要であり、構成が複雑で、大型化が避けられなかったところ、本願発明によれば、液体マスフローコントローラ２５を用いることにより、極めて簡便で小型の構成で精緻に質量流量を制御することができる。また、特許文献１のシース液供給機構１２０によれば、シース液を交換したい場合には、シース圧力検知部１２５および液面レベル検知部１２７からの情報が適正に流体ポンプにフィードバックされるように調節するという煩雑な作業が必要であったところ、本願発明によれば、液体マスフローコントローラ２５を用いてシース液の質量流量を直接的に測定しているので、上記のような煩雑な調節作業を省略することができる。さらに液体マスフローコントローラ２５を用いて、質量流量を一定に制御するため、フローチャンバ３５に供給されるシース液における脈動を極限まで押さえ込むことができる。さらに、液体マスフローコントローラ２５の動作原理から明らかなように、シース液の温度が変動して、その変性が変動しても、シース液の質量流量は影響を受けず、より安定的にシース液をフローチャンバ３５に供給できる。
【００３５】
さらに、バッファリザーバ２４は、上述のように、シース液からバブルを除去するために配置されたものであるが、図示しない保温器を用いて、バッファリザーバ２４内に収容されたシース液の温度を一定（たとえば約４〜４２℃）に維持するようにしてもよい。またシース液およびサンプル液を同じ温度に維持されるように制御してもよい。
先に説明したように、シース液の温度は、シースフローおよびジェットフローに含まれる細胞粒子の速度、ならびにジェットフローの長さおよび液滴間隔に実質的な影響を与えるので、シース液の温度を一定に維持することにより、セルソータの細胞粒子の分別回収率および純度を格段に安定させることができる。
【００３６】
また保温器１８から送出されるシース液がフローチャンバ３５に達するまでに室温と同程度の温度になることをできるだけ避けるために、バッファリザーバ２４と液体マスフローコントローラ２５とを連通する導管２４ｂ、および液体マスフローコントローラ２５とフローチャンバ３５とを連通する導管２５ａは、極力短くなるように構成することが好ましい。より好適には、バッファリザーバ２４および液体マスフローコントローラ２５は、フローチャンバ３５に隣接して配置され、さらに好適には、バッファリザーバ２４および液体マスフローコントローラ２５が、フローチャンバ３５と実質的に同じ温度に維持されたスペース（図示せず）内に配置される。こうして、シース液の温度が一定となるように制御して、セルソータの細胞粒子の分別回収率および純度を向上させることができる。
【００３７】
［実施形態２］
図３および図４を参照しながら、本願発明に係るセルソータの実施形態２について以下詳細に説明する。実施の形態２のセルソータ１は、サンプル液リザーバ１５を含む陽圧チャンバ１４がフローチャンバ３５のほぼ真上に配置されている点を除き、実施形態１のセルソータ１と同様の構成を有するので、重複する点については説明を省略する。
【００３８】
図３は、サンプル液リザーバ１５を含む陽圧チャンバ１４およびフローチャンバ３５を拡大して示すセルソータの部分概略図である。図３の陽圧チャンバ１４は、上述のように、フローチャンバ３５のほぼ真上に配置されており、上流側のサンプル液導管１６ａがサンプル液リザーバ１５の下端部から下方に向かって延びている。
【００３９】
陽圧チャンバ１４の内部の空気は、エアレギュレータ１３により一定圧力に加圧され、サンプル液リザーバ１５内のサンプル液は、陽圧チャンバ１４内の陽圧と重力の作用により直接的にフローチャンバ３５に向かって送出される。
このとき実施形態１と同様、陽圧チャンバ１４に収容された保温水は、保温器１８との間で循環するように構成され、サンプル液リザーバ１５の温度を一定に維持することができる。また、陽圧チャンバ１４にはサンプル液を撹拌するためのアジテータ１９を有し、サンプル液リザーバ１５内のサンプル液を均一な温度で維持し、サンプル液内細胞粒子の生存率を向上させることが好ましい。
【００４０】
また任意ではあるが、クランプ１７の上流側にあるサンプル液導管１６ａに三方バルブ３８を配置して、シース液を上方向に向かって逆流させることにより、サンプル液導管１６を洗浄できるように構成してもよい。
一方、図４に示すように、サンプル液リザーバ１５に弾性部材からなる底部（ゴム栓）３９を設け、上流側のサンプル液導管１６ａの先端部に廃棄処分可能で（ディスポーザブルで）鋭利な金属針を配置して、サンプル液導管１６ａの先端部をサンプル液リザーバ１５の底部に突き刺すことにより、サンプル液リザーバ１５に対する上流側のサンプル液導管１６ａの取り付けを容易にすることができる。またサンプル液リザーバ１５の底部４１を下方に向かって先細るように構成することにより、サンプル液がサンプル液リザーバ１５に残留することなく、サンプル液を使い切ることを支援することができる。
こうして、サンプル液リザーバ１５を容易に交換することが可能であり、空のサンプル液リザーバ１５に鋭利な金属針を有するサンプル液導管１６を取り付けて、三方バルブ３８からシース液を上方向に向かって逆流させることにより、サンプル液導管１６を洗浄することも可能である。具体的には、三方バルブは、サンプル液導管１６ｂ（サンプル液リザーバ１５）に流体連通する第１の端部と、サンプル外挿管３６に流体連通する第２の端部と、図示しない逆流用ポンプに流体連通する第３の端部とを有し、サンプル液を別の異なるものに交換したいとき、逆流用ポンプを作動させることにより、フローチャンバ３５内のシース液を、下流側のサンプル液導管１６ｂおよびクランプ１７を経由して、三方バルブ３８の第３の端部から逆流させることにより、シース液でサンプル液導管１６ｂおよびクランプ１７に付着する細胞粒子を簡便に洗い流すことができ、いわゆる細胞粒子のキャリーオーバを排除することができる。
【００４１】
実施形態２のセルソータ１によれば、陽圧チャンバ１４に格納されたサンプル液リザーバ１５がフローチャンバ３５のほぼ真上に配置されているため、上流側および下流側のサンプル液導管１６ａ，１６ｂを極力短くすることができる。これにより、サンプル液がサンプル液導管１６ａ，１６ｂを通過している間に室温に影響を受けて温度変化することを抑制し、サンプル液の温度を一定に維持することができる。このとき、実施形態１で説明したように、シース液についても同様に、バッファリザーバ２４および液体マスフローコントローラ２５をフローチャンバ３５に隣接して配置して、フローチャンバ３５に至るシース液が室温に影響を受けて温度変化することを抑制することが好ましい。こうしてサンプル液およびシース液が室温に影響されることなく、所定の温度に維持された状態で、フローチャンバ３５に供給することにより、セルソータの細胞粒子の分別回収率および純度をいっそう向上させることができる。
【符号の説明】
【００４２】
１：セルソータ、
１０：サンプル液供給機構、１１：エアコンプレッサ、１２：バッファタンク、１３：エアレギュレータ、１４：陽圧チャンバ、１４ａ：第１のシールコネクタ、１５：サンプル液リザーバ、１６：サンプル液導管、１７：サンプル液クランプ、１８：保温器、１９：アジテータ（撹拌器）、
２０：シース液供給機構、２１：シースタンク、２２：流体ポンプ、２３：液体用圧力調整バルブ、２４：バッファリザーバ、２５：液体マスフローコントローラ、
３０：流体フロー機構、３１：フローセル、３２：圧電素子、３３：荷電電極、３５：フローチャンバ、３５ａ：第２のシールコネクタ、３５ｂ：第３のシールコネクタ、３６：サンプル外挿管、３７：狭窄部、３８：三方バルブ、
４０：ソータ機構、４２：偏向板、ＪＦ：ジェットフロー、Ｄ：液滴。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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