(57)【要約】【課題】細胞懸濁液内の細胞を少ない回収液で効率よく回収する。【解決手段】細胞懸濁液Ａを流入させる流入口４と、該細胞懸濁液Ａ内の液体成分Ｃを排出させる排出口６とを有する容器２と、該容器２内の空間Ｄ，Ｅを流入口４側と排出口６側とに区画し、細胞Ｂより小さい多数の孔を有するメッシュフィルタ３と、流入口４を開閉するバルブ７と、流入口４側の空間Ｄのメッシュフィルタ３に対向する内面とメッシュフィルタ３とを近接させる近接手段とを備える細胞処理装置１を提供する。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞懸濁液を流入させる流入口と、該細胞懸濁液内の液体成分を排出させる排出口とを有する容器と、
該容器内の空間を前記流入口側と前記排出口側とに区画し、細胞より小さい多数の孔を有するメッシュフィルタと、
前記流入口を開閉するバルブと、
前記流入口側の空間の前記メッシュフィルタに対向する内面と前記メッシュフィルタとを近接させる近接手段とを備える細胞処理装置。
【請求項２】
前記近接手段が、前記メッシュフィルタを可撓性材料により立体的に形成することにより構成され、前記メッシュフィルタの少なくとも一部を前記流入口側の空間の前記内面に近接させるように変位させる請求項１に記載の細胞処理装置。
【請求項３】
前記メッシュフィルタの変位する部分の前記排出口側に錘が取り付けられている請求項２に記載の細胞処理装置。
【請求項４】
前記錘が、前記排出口側を下方に向けて配置したときに、前記メッシュフィルタから吊り下がるように、糸により取り付けられている請求項３に記載の細胞処理装置。
【請求項５】
前記近接手段が、前記メッシュフィルタに対向する前記内面を前記メッシュフィルタに近接する方向に移動可能に設けることにより構成されている請求項１から請求項４のいずれかに記載の細胞処理装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞処理装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、細胞懸濁液から細胞を分離する方法として、細胞懸濁液をフィルタに通過させることにより細胞をフィルタに捕捉させ、その後、逆洗によってフィルタから細胞を回収する方法が知られている（例えば、特許文献１参照。）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００５−３３６０８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、特許文献１の方法では、大量の細胞懸濁液を流通させると目詰まりするので、目詰まりを防止するために、フィルタの面積を増加させて細胞懸濁液の流通範囲を分散させると、フィルタに捕捉される細胞も分散するので、回収する際に逆洗に使用する回収液の量も増加し、回収される細胞懸濁液内の細胞の濃度が低下してしまうという不都合がある。
本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、細胞懸濁液内の細胞を少ない回収液で効率よく回収することができる細胞処理装置を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明は、細胞懸濁液を流入させる流入口と、該細胞懸濁液内の液体成分を排出させる排出口とを有する容器と、該容器内の空間を前記流入口側と前記排出口側とに区画し、細胞より小さい多数の孔を有するメッシュフィルタと、前記流入口を開閉するバルブと、前記流入口側の空間の前記メッシュフィルタに対向する内面と前記メッシュフィルタとを近接させる近接手段とを備える細胞処理装置を提供する。
【０００６】
本発明によれば、流入口から容器内の流入口側の空間に細胞懸濁液を流入させると、細胞懸濁液内の細胞はメッシュフィルタの孔を通過できずに捕捉され、細胞より小さい成分は、メッシュフィルタの孔を通過させられて排出口側の空間に流入させられ、排出口から排出させられる。この状態で、バルブによって流入口を閉鎖し、近接手段によってメッシュフィルタを流入口側の空間の内面に近接させた状態で回収液を供給することにより、メッシュフィルタに捕捉された細胞が回収液に浸漬されて、メッシュフィルタから剥がれて回収液内に再懸濁される。
【０００７】
この場合において、メッシュフィルタを流入口側の内面に近接させているので、細胞を浸漬させるための回収液量が少なくて済み、回収される細胞懸濁液内の細胞の濃度を向上することができる。
【０００８】
上記発明においては、前記近接手段が、前記メッシュフィルタを可撓性材料により立体的に形成することにより構成され、前記メッシュフィルタの少なくとも一部を前記流入口側の空間の前記内面に近接させるように変位させてもよい。
このようにすることで、細胞回収時には、可撓性材料からなるメッシュフィルタの少なくとも一部の細胞が捕捉されている部位を流入口側に変位させて、流入口側が下向きとなるように容器を配置することにより、流入口側の空間に溜まる少ない液量の回収液内に細胞が捕捉された部位のメッシュフィルタを浸漬させて、容易に、高濃度の細胞を回収することができる。
【０００９】
また、上記発明においては、前記メッシュフィルタの変位する部分の前記排出口側に錘が取り付けられていてもよい。
このようにすることで、細胞懸濁液内の細胞をメッシュフィルタに捕捉させる際には、排出口側が下向きとなるように容器を配置することで、流入口から容器内に供給した細胞懸濁液を上から下に流動させつつメッシュフィルタによって細胞を捕捉することができる。このとき、メッシュフィルタは錘によって排出口側に撓んでいる。そして、捕捉した細胞を回収する際には、流入口側が下向きになるように容器を反転させることで、メッシュフィルタを錘によって流入口側に撓ませて、流入口側の壁面に近接させることができる。これにより、少ない回収液によって細胞を効率的に回収することができる。
【００１０】
また、上記発明においては、前記錘が、前記排出口側を下方に向けて配置したときに、前記メッシュフィルタから吊り下がるように、糸により取り付けられていてもよい。
このようにすることで、排出口側を下方に向けて配置すると、錘がメッシュフィルタから離れるとともに、糸によってメッシュフィルタが下方に引かれて撓むので、細胞をメッシュフィルタにより捕捉させる際に、錘がメッシュフィルタの孔を塞いでしまう不都合を防止することができる。その一方で、メッシュフィルタに捕捉された細胞を回収する際には、流入口側が下向きになるように容器を反転させることで、錘によってメッシュフィルタを流入口側に撓ませることができ、少ない回収液によって細胞を効率的に回収することができる。
【００１１】
また、上記発明においては、前記近接手段が、前記メッシュフィルタに対向する前記内面を前記メッシュフィルタに近接する方向に移動可能に設けることにより構成されていてもよい。
このようにすることで、メッシュフィルタを撓ませることに代えて、容器の流入口側の空間の内面をメッシュフィルタに近接させて、メッシュフィルタを浸漬させるのに必要な回収液の量を低減し、高い濃度の細胞を回収することができる。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、細胞懸濁液内の細胞を少ない回収液で効率よく回収することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の一実施形態に係る細胞処理装置を示す縦断面図である。
【図２】図１の細胞処理装置に細胞懸濁液を供給して細胞を捕捉させる工程を説明する縦断面図である。
【図３】図１の細胞処理装置において、図２の状態から容器を反転させた状態を示す縦断面図である。
【図４】図１の細胞処理装置において、図２の工程により捕捉された細胞を回収する工程を説明する縦断面図である。
【図５】図１の細胞処理装置の変形例を示す縦断面図である。
【図６】図１の細胞処理装置の他の変形例を示す縦断面図である。
【図７】図１の細胞処理装置の他の変形例を示す縦断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の一実施形態に係る細胞処理装置１について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る細胞処理装置１は、図１に示されるように、容器２と、該容器２内に配置されたメッシュフィルタ３とを備えている。
【００１５】
容器２は、両端を閉塞された略円筒状に形成され、一方の端部に細胞懸濁液Ａを流入させる流入口４、回収した細胞Ｂを細胞懸濁液として回収するための回収口５とが設けられている。また、容器２の他方の端部には、細胞懸濁液Ａから細胞Ｂを除いた成分Ｃを排出させる排出口６が設けられている。
【００１６】
メッシュフィルタ３は、細胞Ｂより口径の小さい多数の孔を有するフィルタであって、容器２内を流入口４側の空間Ｄと排出口６側の空間Ｅとに区画するように配置されている。
本実施形態においては、メッシュフィルタ３は可撓性を有する材料により構成されている。
【００１７】
すなわち、図２に示されるように、排出口６側の空間Ｅを下側にして容器２を配置し、上方に配置された流入口４から細胞懸濁液Ａを供給すると、上から下に流れる細胞懸濁液Ａに対してメッシュフィルタ３が流れを遮るように配置され、細胞懸濁液Ａの勢いや捕捉した細胞の重量によって、メッシュフィルタ３の中央部が排出口６側に撓むようになっている。
【００１８】
また、メッシュフィルタ３によって細胞を捕捉した状態で、流入口４側の空間Ｄが下側になるように容器２を反転させると、図３に示されるように、細胞の重さによってメッシュフィルタ３の中央部が流入口４側に近接するように撓むようになっている。すなわち、メッシュフィルタ３を可撓性を有する材料により構成することで、メッシュフィルタ３を回収口５側の容器２の内面２ａに近接させる近接手段が構成されている。
容器２の流入口４、回収口５および排出口６には、これらを開閉するバルブ７〜９が設けられている。
【００１９】
このように構成された本実施形態に係る細胞処理装置１の作用について以下に説明する。
本実施形態に係る細胞処理装置１を用いて、細胞懸濁液Ａから細胞を分離回収するには、図１に示されるように、流入口４が上方７に、排出口６が下方になるように容器２を配置して、流入口４に細胞懸濁液Ａの供給源（図示略）を接続する。そして、図２に示されるように、流入口４のバルブを開放することにより、流入口４から細胞懸濁液Ａを容器２内に流入させる。
【００２０】
容器２内には、該容器２内の空間Ｄ，Ｅを上下に区画するようにメッシュフィルタ３が配置されているので、供給された細胞懸濁液Ａはメッシュフィルタ３によって上下の流通が遮られる。そして、メッシュフィルタ３の孔より大きな粒径の細胞Ｂがメッシュフィルタ３に捕捉される一方、それ以外の大きさの成分Ｃは、メッシュフィルタ３の孔を通過して下側の空間Ｅに流れ落ち、排出口６から排出される。
【００２１】
このとき、メッシュフィルタ３は、細胞懸濁液Ａの流れの勢いや捕捉した細胞Ｂの重さによって、図２に示されるように、中央部が下降するような形態に撓む。このため捕捉された細胞Ｂは中央部に集中することとなり、部分的に目詰まりを生ずるが、細胞懸濁液Ａは目詰まりを起こした領域の上方から順次メッシュフィルタ３を通過するので、大量の細胞懸濁液Ａを供給しても、目詰まりによって分離能力が大きく低下することはない。
【００２２】
そして、十分な細胞が捕捉された後には、流入口４および排出口６のバルブ７，９を閉じて、図３に示されるように容器２を反転させる。これにより、可撓性を有するメッシュフィルタ３は、排出口６側に撓んでいた形態を反転させて、流入口４側に撓み、流入口４側の対向する内面２ａに近接させられる。
【００２３】
その後、図４に示されるように、回収口５に回収液Ｆを充填したシリンジ１０を接続し、バルブ８を開いてシリンジ１０から容器２内に回収液Ｆを供給する。これにより、回収液Ｆがメッシュフィルタ３よりも流入口４側の空間Ｄに供給される。
【００２４】
メッシュフィルタ３の細胞Ｂが捕捉されている部分は、メッシュフィルタ３を撓ませることによって垂れ下がっているので、回収口５から供給する回収液Ｆの量が少なくても、メッシュフィルタ３に捕捉されている細胞Ｂが回収液Ｆに浸漬されるようになる。そして、例えば、シリンジ１０によりピペッティングを行うことにより、回収液Ｆを流動させ、メッシュフィルタ３に捕捉されている細胞Ｂを回収液Ｆ内に剥離させることができる。
【００２５】
メッシュフィルタ３から剥離された細胞は回収液Ｆ内に再懸濁されるので、これにより生成された細胞懸濁液Ｂをシリンジ１０によって吸引することにより、回収口５から漏れなくシリンジ１０内に回収することができる。
このように、本実施形態に係る細胞処理装置１によれば、大量の細胞懸濁液Ａを供給しても、目詰まりによる処理能力の低下が発生しないので、大量の細胞懸濁液Ａを処理することができる。また、少量の回収液Ｆを供給するだけでメッシュフィルタ３に捕捉された細胞Ｂを回収することができ、回収される細胞Ｂの濃度を向上することができるという利点がある。
【００２６】
なお、本実施形態においては、細胞Ｂの重さによってメッシュフィルタ３を重力方向に撓ませることとしたが、これに代えて、以下の手法を採用してもよい。
すなわち、メッシュフィルタ３をより積極的に撓ませるために、図５および図６に示されるように錘１１を取り付けておいてもよい。
【００２７】
この場合に、錘１１はメッシュフィルタ３の排出口６側の表面に固定することが好ましい。これにより、メッシュフィルタ３に細胞Ｂが捕捉される際に錘１１が邪魔にならずに済む。特に、図６に示されるように、錘１１をメッシュフィルタ３の排出口６側に糸１２によって固定することが好ましい。このようにすることで、細胞Ｂの捕捉時においては、錘１１によってメッシュフィルタ３の孔が閉塞されないので、メッシュフィルタ３の中央部分においても細胞Ｂの捕捉が阻害されないという利点がある。
【００２８】
また、メッシュフィルタ３を流入口６側に撓ませることで、回収される細胞Ｂの濃度を向上することとしたが、これに代えて、図７に示されるように、メッシュフィルタ３を硬質な材質により構成し、容器２の内面２ａを移動可能に構成し、細胞Ｂを捕捉した後に、内面２ａをメッシュフィルタ３に近接する位置まで移動させて少量の回収液Ｆによって細胞Ｂを回収することにしてもよい。
【符号の説明】
【００２９】
Ａ  細胞懸濁液
Ｂ  細胞
Ｄ，Ｅ  空間
１  細胞処理装置
２  容器
２ａ  内面
３  メッシュフィルタ
４  流入口
６  排出口
７〜９  バルブ
１１  錘（近接手段）
１２  糸
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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