【事件の表示】
　特願２００９−５３８３３１「ＧＲＡＳ微生物から発現される食品安全型好熱性のアラビノース異性化酵素及びそれを用いたタガトースの製造方法」拒絶査定不服審判事件〔平成２０年　６月　５日国際公開、ＷＯ２００８／０６６２８０、平成２２年　４月　８日国内公表、特表２０１０−５１０７７６〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯
　本願は，平成１９年１１月２２日(パリ条約による優先件主張　平成１８年１１月２７日　韓国(KR))を国際出願日とする出願であって，平成２５年５月２２日付けで拒絶査定がなされたところ，これに対して，同年９月２７日に拒絶査定不服審判の請求がなされ，その後平成２６年９月３日付けで当審より拒絶理由が通知され，平成２７年３月９日付けで意見書及び手続補正書が提出されたものである。
　
第２　本願発明
　本願請求項１〜５に係る発明は，平成２７年３月９日付け手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１〜５に記載された事項により特定されるとおりのものと認める。
　そのうち，請求項２に係る発明(以下，「本願発明」という。)は，次のとおりである。
「【請求項２】
大腸菌−バチルスシャトルベクター pHT01 (PBS001)にジオバチルスステアロサーモフィルスDSM22(Geobacillus stearothermophilus DSM22)から由来されたアラビノース異性化酵素をコードする遺伝子を含む組み換えベクターを製造すること，及び前記組み換え発現ベクターで形質転換された枯草菌(Bacillus)から好熱性のアラビノース異性化酵素を生産すること，
を含む食品安全型好熱性のアラビノース異性化酵素の生産方法。」
　
第３　引用刊行物記載の事項
　当審の拒絶理由で引用され，本願優先日前に頒布された刊行物である
刊行物１：Dong-Woo Lee et al., Archives of Biochemistry and Biophysics,vol.434,2005, pp.333−343 
刊行物２：「フナコシ試薬ニュース　2006年6月1日号」，［online］，2006年6月1日，[検索日2014.08.29]，インターネット＜URL　 
 http://www.funakoshi.co.jp/news/060601spdf/060601s_p08.pdf　　＞ 
刊行物６：特表平１０−５１３０４７号公報 
刊行物７：米国特許公開第２００３／００６８７９１号明細書 
刊行物８：WESTERS, L. et al.，BIOCHIM. BIOPHYS. ACTA，2004年11月11日，Vol.1694, No.1-3，p.299−310 
刊行物９：特開２００４−４３４８４号公報
には，次の事項が記載されている。
　なお，下線は当審が付記したものである。また，外国語の刊行物についての翻訳は，当審が行ったものである。
　
１　刊行物１記載の事項
(刊１−１)「要約
　
L-アラビノースイソメラーゼ(AI)は
好熱性Geobacillus stearothermophilusからのAIをコードするaraA遺伝子は，クローニングされ
大腸菌で過剰発現
組換え酵素が均一になるまで精製された
　
(刊１−２)「
熱安定性AI
食品産業に重要である
　 
(刊１−３)「プラスミドpGEM-T easyベクターは，
クローニング
のために
pET-22b(+)ベクターは，発現のために使用された
　
(刊１−４)「菌株及び培養条件
　Bacillus halodurans (DSM 497)と
G. stearothermophilus (DSM 22)
 　 
(刊１−５)「各PCR産物をpGEM-T easyベクターにクローニングし，大腸菌 DH5α株中にトランスフォームされた。・・・Bacillus haloduransおよび
G. stearothermophilusのaraA遺伝子は
pET-GSAIを作るためにpET-22b(+)ベクター中に連結され
その産物は大腸菌BL21株中にトランスフォームされた
　
２　刊行物２記載の事項
(刊２−１)「Bacillus subtilis Expression Vector 
　
E. coli / B. subtilisシャトルベクター(pMTLBS72)をベースとした組換え体タンパク質高発現ベクターです
B. subtilis細胞内発現用のpHT01
があります
　
B. subtilis(枯草菌)は非病原性で，コドン使用頻度に偏りがなく，活性のあるタンパク質を分泌させて発現させることもできるため，組換え体タンパク質発現の宿主として有用です
　
３　刊行物６記載の事項
(刊６−１)「好ましい実施態様の説明
細胞内的にその親生物体により通常は生産される非グリコシル化酵素のホスト生物体として特に好ましいのは，バシラス サブチリス (枯草菌，Bacillus subtilis)の胞子形成株である。
B.サブチリスは
非病原性のGRAS(通常，安全と認められる)生物体である
　
４　刊行物７記載の事項
(刊７−１)「[0123]本発明を実施することができる宿主の範囲は，細菌および真菌を含む。菌類は，好ましくは酵母である。特に，酵母サッカロミセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)又はグラム陽性菌，
枯草菌などのGRASステータスの微生物種
本発明の宿主として適切である
 　 
５　刊行物８記載の事項
(刊８−１)「医薬タンパク質のための
細胞工場として枯草菌
　
(刊８−２)「よく知られているグラム陰性菌の大腸菌とは対照的に，グラム陽性菌の
B. subtilisisは，GRAS生物(一般に安全と認められる)として考えられている。
食品の製造のためのB. subtilisisの使用は，大腸菌を使用するより非常に都合が良い
　
６　刊行物９記載の事項
(刊９−１)「【０００２】
　微生物における不凍ペプチドの生産に関する初期研究は酵母と大腸菌におけるI型AFPの発現に集中していた(Warrenら，1993，McKownら，1991)。
大腸菌は毒素を生産する能力があるので，この細菌は一般に安全とみなす(GRAS)ことができず，食品産業用AFPの製造に使用するには問題がある
　
第４　刊行物１記載の発明
(刊１−１)，(刊１−３)〜(刊１−５)に付した下線を整理すると，刊行物１には，次の発明(以下，「引用発明」という。)が記載されていると認められる。
「G. stearothermophilus (DSM 22)由来の好熱性のL-アラビノースイソメラーゼをコードするaraA遺伝子を，発現用のpET-22b(+)ベクター中に連結した組換えベクターpET-GSAIを作成し，
　該pET-GSAIを大腸菌BL21株中に導入し，
　大腸菌BL21株で過剰発現させ，
　好熱性の組換えL-アラビノースイソメラーゼを生産する方法。」
　
第５　対比
　本願発明と引用発明を対比する。
１　引用発明の「G. stearothermophilus (DSM 22)由来の好熱性のL-アラビノースイソメラーゼをコードするaraA遺伝子」は，本願発明の「ジオバチルスステアロサーモフィルスDSM22(Geobacillus stearothermophilus DSM22)から由来されたアラビノース異性化酵素をコードする遺伝子」に相当する。
　
２　引用発明の「好熱性のL-アラビノースイソメラーゼ」は，本願発明の「好熱性のアラビノース異性化酵素」に相当する。
　
３　引用発明の「発現用のpET-22b(+)ベクター」は，大腸菌-バチルスシャトルベクターではない。よって，引用発明の「pET-22b(+)ベクター中」に「G. stearothermophilus (DSM 22)からのL-アラビノースイソメラーゼをコードする」「araA遺伝子を連結した組換えベクターpET-GSAIを作成」することと，本願発明の「大腸菌−バチルスシャトルベクター pHT01 (PBS001)にジオバチルスステアロサーモフィルスDSM22(Geobacillus stearothermophilus DSM22)から由来されたアラビノース異性化酵素をコードする遺伝子を含む組み換えベクターを製造すること」こととは，「発現ベクターにジオバチルスステアロサーモフィルスDSM22(Geobacillus stearothermophilus DSM22)から由来するアラビノース異性化酵素をコードする遺伝子を含む組み換えベクターを製造する」点で共通する。
　
４　本願発明の「食品安全型」に関して，本願明細書には次のような記載がある。
「しかし，このような
組換え大腸菌を用いたタガトースの生物工学的生産は食品安全性の側面から
不適合である
産業的大量生産に適したGRAS微生物宿主で発現されたアラビノース異性化酵素
その大量生産が不可欠である
「最近，タガトースは低カロリー天然糖であり，
米国FDAからGRAS(Generally Recognized As Safe)として認められ
「微生物酵素を用いた生物工学的食品素材の生産は製造工程中に使用される添加物の食品安全性が必須であり，本発明で完成された技術を通じて
ゲオバチルス属由来のアラビノース異性化酵素を食品安全型に発現
　これらの記載からすると，組換え大腸菌を用いたタガトースの生物工学的生産は食品安全性の側面から不適合であり，本願発明の「食品安全型」の酵素とは，GRAS(Generally Recognized As Safe)と認められたような微生物宿主で産生された酵素であると解される。
　
　以上のことから，両発明の間には，次の(一致点)及び(相違点)がある。
(一致点)
「発現ベクターにジオバチルスステアロサーモフィルスDSM22(Geobacillus stearothermophilus DSM22)から由来されたアラビノース異性化酵素をコードする遺伝子を含む組み換えベクターを製造すること，及び組み換え発現ベクターで形質転換された細菌から好熱性のアラビノース異性化酵素を生産すること，
を含む好熱性のアラビノース異性化酵素の生産方法。」
　
(相違点)
　本願発明では，アラビノース異性化酵素を生産する「細菌」が「枯草菌(Bacillus)」であり，「発現ベクター」が，「大腸菌−バチルスシャトルベクター pHT01 (PBS001)」であり，その結果得られた「好熱性のアラビノース異性化酵素」が，「食品安全型」であるのに対して，引用発明では，アラビノース異性化酵素を生産する「細菌」は，大腸菌であり，「ベクター」は，シャトルベクターではない発現ベクターであり，その結果得られた「好熱性のアラビノース異性化酵素」は，大腸菌から産生されたため安全型とはいえない点。
　
第６　検討
１　相違点についての検討
(１)　大腸菌は，例えば刊行物９に「大腸菌は毒素を生産する能力があるので，この細菌は一般に安全とみなす(GRAS)ことができ」(刊９−１)ないと記載されているように，安全上問題があったことは本願優先日前からの技術常識である。
　他方，枯草菌(Bacillus subtilis)は，GRASとされている安全な細菌であることは刊行物６〜８に記載されているように本願優先日前からの技術常識であって，また，遺伝子工学においてGRASである宿主として使用することも刊行物７及び刊行物８に記載されているように本願優先日前から慣用されているところである。
　加えて，枯草菌は，遺伝子工学で使用する上で「B. subtilis(枯草菌)は非病原性で，コドン使用頻度に偏りがなく，活性のあるタンパク質を分泌させて発現させることもできるため，組換え体タンパク質発現の宿主として有用」(刊２−１)と刊行物２に記載されているように，活性のあるタンパク質を産生できる有用な組換え宿主であることも本願優先日前の技術常識となっていた。
　
(２)　通例，大腸菌内のベクター上にクローニングされている遺伝子を大腸菌とは異なる別の細菌宿主に移すときには，該細菌宿主に適当したベクターに遺伝子を移した上で該細菌宿主に導入する必要がある。
　このような手間を省くため，大腸菌と別の細菌宿主間で行き来できる(下記刊行物Ａの(刊Ａ−１)参照)シャトルベクターは，大腸菌から別の細菌宿主へと遺伝子を移す際の常套手段として使用されているものである。
　そして，大腸菌と枯草菌間の発現用シャトルベクターである刊行物２記載の「B. subtilis細胞内発現用のpHT01」(刊２−１)は，「組換え体タンパク質高発現」(刊２−１)シャトルベクターとして，本願優先日前に市販され慣用されていたものである。
　
(３)引用発明の「L-アラビノースイソメラーゼ」は，「食品産業に重要である」(刊１−２)とされているから，上記「(１)」に記したように安全性問題のある「大腸菌」による生産に代えて，GRASである枯草菌を使用する強い動機があるものといえる。
　
　そうすると上記(１)及び(２)に記した本願優先日前の技術常識の下，当業者であれば，引用発明において，「L-アラビノースイソメラーゼ」を発現させる宿主である「大腸菌」に代えて，GRASであり，遺伝子工学上有用な宿主である周知の枯草菌を用いると共に，その際，「E. coli / B. subtilisシャトルベクター」(刊２−１)であって，かつ，「組換え体タンパク質高発現ベクター」(刊２−１)という有利な機能を有する周知の「pHT01」(刊２−１)を使用することは，当業者が容易になし得ることである。
　
　そして，その結果，「L-アラビノースイソメラーゼ」は，GRASである枯草菌から生産されることとなるから，必然的に「食品安全型」となるものである。
　
刊行物Ａ：日経バイオ最新用語辞典　第５版，日経BP出版センター，第5版，2002年9月17日，385頁「シャトル・ベクター」の項
(刊Ａ−１)「[shuttle vector] 2種の細胞で複製可能なクローニング・ベクターの総称。遺伝子の単離(クローン化)に使用される。
2種の細胞を行き来できる
　
２　本願発明の効果について
　本願明細書の記載の効果は，刊行物１及び刊行物２記載の事項並びに上記本願優先日前の技術常識から予測し得るものであって，格別顕著なものとはいえない。
　
　また，請求人は，平成２７年３月９日付け意見書3頁において[追加実験例]を示し，「pHT01は，pBE1より目的遺伝子の発現率が高いことを確認できました。」(意見書4頁1〜2行)との効果を主張する。
　しかしながら，刊行物２記載の「B. subtilis細胞内発現用のpHT01」(刊２−１)は，「組換え体タンパク質
高発現
　
第７　むすび
　以上のとおり，請求項２に係る発明は，刊行物１及び刊行物２に記載された発明並びに本願優先日前からの技術常識に基づいて，当業者が容易に発明をすることができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものであって，他の請求項に係る発明について検討するまでもなく，本願は拒絶すべきものである。
　よって，結論のとおり審決する。