(57)【要約】【課題】ターンオーバー正常化や作用機序は様々であるが、皺やタルミ等の肌の老化を予防する皮膚外用剤を安全性の高い物質で得ることである。【解決手段】黒豆と温泉水（特に今田温泉水）を混合し、蛋白分解酵素で処理をすることを特徴とする組成物、さらには温泉水、グリコシルトレハロース、セラミド、リン脂質の１種以上を配合することによって得られる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
黒豆と温泉水を混合し、蛋白分解酵素で処理をすることを特徴とする組成物
【請求項２】
処理に用いた温泉水が今田温泉水である請求項１の組成物
【請求項３】
請求項１または２の組成物を配合したことを特徴とする皮膚外用剤
【請求項４】
請求項１または２の組成物を配合したことを特徴とするターンオーバー正常化剤
【請求項５】
請求項１または２の組成物を配合したことを特徴とする老化防止剤
【請求項６】
請求項１または２の組成物と温泉水、グリコシルトレハロース、セラミド、リン脂質、の１種以上を配合した皮膚外用剤または、ターンオーバー正常化剤または、老化防止剤
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は黒豆と温泉水を混合し、蛋白分解酵素で処理で得られる、皮膚外用剤等とくに老化防止やターンオーバー正常化に非常に有効な成分に関する。
【背景技術】
【０００２】  黒豆は外用保湿剤として公知されている。（特許文献１）黒豆はイソフラボン、アントシアニン等が含まれ粧品、医薬品、医薬部外品の原料として有効であることは知られている。またに温泉水の化粧品等への応用も公知されており、すでに利用されている。（特許文献２）
【特許文献１】特開２０００−０７２６１６
【特許文献２】特開昭５８−１５２８０５
【０００３】  また、皮膚は生体の最外層にあり、外界の温度、湿度、紫外線、種々の化学物質等から生体を守るバリアーとしての機能、また、組織からの水分や種々の生体成分の損失を防ぎ、体表面の水分蒸散や体温の恒常的維持の機能を有し、非常に重要な役割をになっている。さらには、人の美観を判断する要素の大きな１つである、「肌」の役割もあり、肌のキメが細かく鮮明で整っており、みずみずしいしっとりとした肌が好まれる。正常な皮膚は機能面だけではなく、人の美観に重要な因子であり、これを正常化することは非常に重要なことである。これらの異常はターンオーバーの異常として捕らえられる。ターンオーバーとは、表皮細胞の基底から角質層細胞にまで分化し、最後は垢となって生体から剥離することであり、通常は２８日間のサイクルである。上記のような「美しい肌」を保つ上でも、ターンオーバーが正常であることは必要不可決なものである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】  ターンオーバー正常化や作用機序は様々であるが、皺やタルミ等の肌の老化を予防する皮膚外用剤を得ることである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】  本発明者らが鋭意検討した結果、黒豆を処理するときの使用する水は今までは、水道水、精製水等が用いられていたが、これを温泉水に変える事によって予想を越える効果が得られることが分かった。
以下に具体的にその方法を記載する。
まず、黒豆を温泉水に浸漬する。浸漬時間は温度や豆の状態によって異なるが６〜２４時間程度とし、黒豆と温泉水の比率は容量比で黒豆１に対して温泉水を２〜１０加える。浸漬後、ミキサー等で粉砕混合し、所謂豆乳の状態とする。その後、必要に応じて加熱する。この工程は蛋白分解酵素で処理する場合、効率が上がるので、実施する場合が多い。
これに蛋白分解酵素を作用させる。
用いられる酵素としては、たとえばアクチナーゼ類、ペプシンなどのペプシン類、トリプシンなどのトリプシン類、パパイン、キモパパインなどのパパイン類、グリシルグリシンペプチターゼ、カルボキシペプチターゼ、アミノペプチターゼなどのペプチターゼ類およびブロメラインなどがあげられ、これらの１種以上が用いられる。これらのうち、アクチナーゼとペプシン、トリプシン、パパイン、グリシルグリシンペプチターゼ、カルボキシペプチターゼ、アミノペプチターゼ、ブロメライン、キモパパインおよびキモトリプシンなどの蛋白分解酵素の１種以上を用いることが好ましく、なかでもアクチナーゼ、ペプシン、トリプシンがとくに好ましい。【０００６】  蛋白分解酵素の量は、蛋白分解酵素の種類や処理時間によって異なるが、温泉水による黒豆豆乳１リッターに対して０．００１〜１ｇ好ましくは０．００５〜０．２ｇ程度が使用される。酵素作用温度は酵素によって選択し、酵素作用時間も酵素の種類や使用量等によって異なるが３０分〜６時間程度が好ましい。また、酵素の種類によってはｐＨの調整等も必要とする。
酵素処理終了後、加熱処理等をして酵素を失活させる。加熱の方法は酵素の失活温度，加熱の方法等によって選択されるが、７０〜１２０℃で１分〜２時間が好ましい。
これに固形分を除く工程を行なう。その方法は遠心分離、デカンテーション、濾過等を必要に応じて組み合わせて実施すればよい。【０００７】温泉水は各所の温泉水を用いて実験したが、すべての温泉水で効果があり、ナトリウム塩化物泉、特に今田温泉水が有効であった。
今田温泉水は篠山市今田町ある温泉の水で、１ｋｇ中の成分を示すと、陽イオンは、リチウムイオン１．７１ｍｇ、ナトリウムイオン５０２ｍｇ、カリウムイオン１．６７ｍｇ、カルシウムイオン３７３ｍｇ、マグネシウムイオン０．６４ｍｇ、ストロンチウムイオン６．９２ｍｇ、バリウムイオン０．５３ｍｇ、マンガンイオン０．２６ｍｇ、鉄イオン０．１３ｍｇ。陰イオンは、フッ素イオン３．９６ｍｇ、塩素イオン１４００ｍｇ、臭素イオン５．１１ｍｇ、硫酸イオン３０．４ｍｇ、硝酸イオン０．９９ｍｇ、炭酸水素イオン２４ｍｇ、炭酸イオン０．８３ｍｇ。遊離成分（非分解成分）はメタケイ酸２６．６ｍｇ、メタホウ酸４５．０ｍｇ。溶存ガス成分として遊離二酸化炭素０．０９ｍｇ。合計２．４２ｇである。
これに保存性等を考慮して必要に応じて、パラオキシ安息香酸エステル、フェノキシエタノール、エタノール、１，３ブチレングリコール等の防腐作用のある物質を添加する。【０００８】  これを皮膚外用剤、ターンオーバー正常化剤、老化防止剤として用いる。その場合、油分、高級アルコール、脂肪酸、紫外線吸収剤、粉体、顔料、界面活性剤、多価アルコール・糖、高分子、生理活性成分、溶媒、酸化防止剤、香料、防腐剤等の原料を加えることは当然行われる。
製剤を作成するときに精製水を用いるが、これの替わりに温泉水、特に今田温泉水を用いると、さらに本発明の有効性を高める。また、グリコシルトレハロース、セラミド、リン脂質等を併用することも本発明の趣旨を高めることを確認した。
セラミドとしては、例えば、Ｎ−（ω−アシルオキシ）アシルスフィンゴシン、Ｎ−アシルスフィンゴシン、Ｎ−アシルフィトスフィンゴシン、Ｎ−（α−ヒドロキシ）アシルスフィンゴシン（炭素数１８及び２０のスフィンゴシンと、炭素数２４〜２８のα−オキシ酸からなる）、Ｎ−（α−ヒドロキシ）アシルスフィンゴシン（炭素数１７及び１８のスフィンゴシンと、α−オキシパルミチン酸からなる）、Ｎ−［ω−（α−ヒドロキシ）アシルオキシ］アシルスフィンゴシン、Ｎ−（α−ヒドロキシ）アシルフィトスフィンゴシン等が挙げられる。これらはいずれも天然に存在する表皮細胞由来の公知脂質である。また、所謂、擬似セラミドを用いることもできる。
リン脂質は化粧料及び外用剤に使用できるリン脂質であれば特に限定されるものではない。例示すれば、大豆リン脂質、水酸化大豆リン脂質、水素添加大豆リン脂質、水素添加大豆リゾリン脂質、卵黄リン脂質、水酸化卵黄リン脂質、水素添加卵黄リン脂質が挙げられる。【０００９】  以上の原料を配合した皮膚外用剤、ターンオーバー正常化剤、老化防止剤は、乳液、入浴剤、クリーム、乳液、化粧水、パック、リップクリーム等の剤形がとりうる。
【発明の効果】
【００１０】  上記のように製造された温泉水を用いて作成した黒豆蛋白分解物は通常の精製水を用いた黒豆蛋白分解物に比較してターンオーバー正常化作用をはじめ、皺の軽減等、美しい肌を作ることがわかった。さらにアレルギー性も低く、有効性、安全性ともに良好であった。
【実施例】
【００１１】  以下に実施例及び実施処方例を記述するがなんらこれに限定されるものではない。
実施例１
今田温泉水を９リッターに黒豆を１リッターを加え、１２時間浸漬した。
これをミキサーで粉砕混合した。これを加熱し沸騰させた後、冷却した。これにタンパク分解酵素（天野エンザイム社製商品名ロテアーゼＡ「アマノ」Ｇと天野エンザイム社製商品名プロテアーゼＳ「アマノ」Ｇを１：１）を０．５ｇを入れ攪拌しながら３時間作用させた。（品温は３０℃）これを加熱し５分間沸騰させた後、冷却した。
これをフィルター３ミクロン、１．０ミクロン、０．８ミクロン、０．５ミクロンの孔径の順に通し、最後に０．２ミクロンのフィルターでろ過した。【００１２】実施処方例１  化粧水
実施例１を７．０重量部、グリチルリチン酸ジカリウムを０．２重量部、クエン酸を０．１重量部、クエン酸ナトリウムを０．３重量部、精製水を８２．９重量部、テトラオレイン酸ＰＯＥ（６０）ソルビトールを１．０重量部、モノオレイン酸ソルビタンを０．１重量部、
オリブ油を０．１重量部、ジプロピレングリコールを５．０重量部、エタノールを３．０重量部、パラオキシ安息香酸メチル０．３を重量部を常法に従い化粧水を作成した。【００１３】実施処方例２  乳液
実施例１を１．０重量部、ミリスチン酸デカグリセリルを２．０重量部、水素添加大豆リン脂質を０．６重量部、ステアリン酸を０．５重量部、ベヘニルアルコールを１．５重量部、パルミチン酸セチルを０．５重量部、２−エチルヘキサン酸セチルを１２．０重量部、トリ２−エチルヘキサン酸グリセリルを６．０重量部、カルボキシビニルポリマーを０．１重量部、水酸化ナトリウムを０．０４重量部、グリセリンを５．０重量部、パラオキシ安息香酸メチルを０．３重量部、今田温泉水を７０．４６重量部を常法に従い乳液を作成した。【００１４】実施処方例３  クリーム
実施例１を５．０重量部、スクワランを２５．０重量部、ホホバ油を５．０重量部、ミツロウを５．０重量部、セタノールを３．０重量部、セラミド３を０．２％、モノステアリン酸グリセリンを２．０重量部、ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノステアリン酸エステルを３．０重量部、基剤：グリセリンを７．０重量部、１，３ブチレングリコールを７．０重量部、パラオキシ安息香酸メチルを０．３重量部、精製水を３７．５重量部を常法に従いクリームを作成した。【００１５】実施処方例４  ゲル状クリーム
実施例１を０．５重量部、ポリエチレングリコール１５００を８．０重量部、ポリオキシエチレン６０モル）オレイルアルキルエーテルを１．０重量部、カルボキシビニルポリマーを０．４重量部、メチルセルロースを０．２重量部、水酸化ナトリウムを０．１重量部、ジプロピレングリコールを７．０重量部、グリコシルトレハロースを０．５％、パラオキシ安息香酸メチルを０．３重量部、今田温泉水を８２．０重量部を常法に従いゲル状クリームを作成した。【００１６】  以下の実験を行うために比較例、比較処方例を作成したので、その方法を以下に記す。
比較例１
今田温泉水の替わりに精製水を用いて他はまったく実施例１と同じ操作を実施したもの
比較処方例１
実施処方例１の実施例１を精製水に置き換え、他は実施処方例１と同一に作成した。
比較処方例２
実施処方例２の実施例１を精製水に置き換え、温泉水を精製水に置き換え、他は実施処方例２と同一に作成した。
比較処方例３
実施処方例３の実施例１を精製水に置き換え、セラミドを精製水に置き換え、他は実施処方例３と同一に作成した。
比較処方例４−１
実施処方例４の実施例１を精製水に置き換え、温泉水を精製水に置き換え、グリコシルトレハロースを精製水に置き換え、他は実施処方例４と同一に作成した。
比較処方例４−２
実施処方例４の温泉水を精製水に置き換え、グリコシルトレハロースを精製水に置き換え、他は実施処方例４と同一に作成した（なお、この比較処方例４−２は実施処方例の１つとなる）【００１７】以下に効果を確認する試験を行ったので記載する。
ターンオーバー正常化試験
人での有用性評価試験２１才から４０才の女性ボランティア１０名に右顔面に実施例１、左顔面に比較例２を１日３回左右同量使用してもらった。（特に量の規定はしなかった）３ヶ月後に肌の状態について以下の評価した。セロハンテープを皮膚に貼り、１０秒後、ゆっくり剥がし、これをヘマトキシン・エオシン染色を行い、以下の判定基準で評価し、各群の平均値を算出し、結果を表１に示す。【００１８】判定基凖
１．    均一性
１＝かなり不均一に角層が剥離している。
２＝やや不均一に角層が剥離している。
３＝極一部に不均一に角層が剥離している。
４＝均一に角層が剥離している。
２．    重層剥離度
１＝かなり重層剥離が見られる。
２＝やや重層剥離が見られる。
３＝ほとんど重層剥離が見られない。
３．    核残存性
１＝かなり核が残存している。
２＝やや核が残存している。
３＝核が残存していない【００１９】
【表１】
2007161699.tif 000002
【００２０】感作性試験（Ｍａｘｉｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｅｓｔ）
ハトレー系白色モルモット１５匹を用い、１０匹は感作処置用、５匹は誘発時の対照とする。
１、肩甲骨上皮膚を刈毛しＡ＝アジュバント（免疫増強剤）Ｂ＝検体、Ｃ＝検体＋アジュバントをそれぞれ左右２ケ所０．０５ｍｌずつ皮内注射する。
２、１週間後、同部位に１０％ラウリル硫酸ナトリム（ＳＬＳ）を塗布し、さらに２４時間後、検体０．２ｍｌを４８時閉塞貼布した。
３、２週間後、腹側部を刈毛し、検体０．２ｍｌを開塞貼布した。（２４時間経過）
４、２４時間後、貼付を除去した。
５、貼付除去後１、２４、４８、７２時間後それぞれ判定した。
判定基準は以下の基準に基づき、１０匹のｓｃｏｒｅを合計して平均値もって感作性の強さと結果を表２に示した。【００２１】判定基準
０＝肉眼的に変化なし
１＝軽度またはまばらな紅斑
２＝中等度の紅斑
３＝強度の紅斑および浮腫【００２２】
【表２】
2007161699.tif 000003
【００２３】透過度試験
実施例１と比較例１の透過度を６００ｎｍで測定した（セルの長さ１０ｍｍ）。結果は、実施例１では０．０９５、比較例１では０．５８７であった。（これは直接的ではないが蛋白分解酵素の働きが温泉水によって変化し、分子量の大きいアレルギーの起こりやすい物質を減少させたものと発明者らは考える）【００２３】官能試験
女性５０名をランダムに５群に分け、各群に表３のように右顔面には実施処方例、左顔面には比較処方例を１日２回、３ヶ月間使用してもらった。【００２４】
【表３】
2007161699.tif 000004
自覚的評価を以下の判定基準で、皺改善、タルミ改善、肌理改善について聞き取りした。結果を表４に示す。
判定基準
３＝使用前に比較して非常に改善した。
２＝使用前に比較して改善した。
１＝使用前に比較してやや改善した
０＝使用前と変化なし。
−１＝使用前に比較して悪化した。
−２＝使用前に比較して悪化した。
−３＝使用前に比較して非常に悪化した。【００２５】
【表４】
2007161699.tif 000005