【事件の表示】
　特願２００７−５５３９６４「肝組織細胞機能の長期維持方法」拒絶査定不服審判事件〔平成１９年　７月１９日国際公開、ＷＯ２００７／０８０９９０〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯
　本願は、２００７年１月１２日（優先権主張２００６年１月１２日、日本国）を国際出願日とする出願であって、平成２５年１月８日付けで拒絶査定がなされたところ、同年４月１０日に拒絶査定不服審判の請求がされ、平成２６年７月２３日付け拒絶理由（以下、「拒絶理由」という）に応答して、同年９月２２日に意見書及び手続補正書が提出されたものである。
  　
第２　本願発明
　本願の請求項１〜１８に係る発明は、平成２６年９月２２日付け手続補正書により補正された特許請求の範囲の請求項１〜１８に記載された事項により特定されるものであるところ、その請求項１に係る発明は、以下のとおりのものと認められる。
「生体内の所定部位に移植することで肝機能を長期発現することのできる、肝臓組織から得られた肝実質細胞及び肝非実質細胞からなる肝組織細胞シートが複数枚積層化され、細胞培養支持体から剥離された移植用積層化肝組織細胞シート。」（以下、「本願発明」という。）
　
第３　特許法第２９条１項３号について
１．引用例の記載
　拒絶理由に引用例１として引用された、本願の優先日前に頒布された刊行物である、昭和医学会雑誌, 2005, Vol. 65, No. 5, p.462-467（以下、「引用例」という。）には、以下の事項が記載されている（下線は当審で付与した。）。
（ｉ）「それは２次元的な肝組織を培養皿で作製しまして、それを用いてtissue engineeringを行おうという試みであります。自分たちで肝細胞をマニピュレーションして２次元的な肝組織が作れないかという試みです。
　この研究におきましては、東京女子医大先端生命研究所の岡野教授が開発されました
温度応答性ポリマーを用いております。このポリマーの利点は、温度によって疎水性、親水性が変わり、培養皿に固定化することで、温度を変化させるだけで、細胞の脱着ができます。
つまり、細胞と細胞の接着はそのままで、２次元的なシート状組織として回収することが可能となります(図２)。そのシート状肝組織を病理学的に評価しましたが、予想どおり肝細胞同士の接着は保持したまま一層の肝細胞から構成される組織であります(図２)。
　さて、
このシート状肝組織を貼付することで皮下に肝組織を作製することにチャレンジしてみました。
結果は、１００日を超えて安定して生着しました。１２０日目に皮下組織を回収し、組織検索をいたしますと、筋層と脂肪織の間に一層につながった肝細胞からなる肝組織が観察されます。機能的にもＡ１ＡＴやアルブミンの発現におきましても十分発揮している組織であります。現在、この結果を基に、これらシート状組織を積層化することで３次元的な肝組織の作製を目指して研究をすすめているところであります。
（ｉｉ）「図２　温度応答性培養皿を用いた２次元的肝組織シートの作製と貼付の概要
Ａ：
温度応答性高分子をコートした培養皿に初代肝細胞を培養する。
Ｂ：コンフルエントに達した後に培養温度を３０度以下に下げることで、数回のピペッティングで
培養肝細胞が肝組織シートとして回収が可能となる
Ｄ：新たな部位に貼付しトランスファーメンブレンを剥がすことにより、シート状組織の移動が完了する。この手法を用いることにより生体へのシート状肝組織の移植が行うことができる。」（第４６６頁、図２脚注）
　　
２．引用発明
　１．（ｉ）及び（ｉｉ）の記載事項から、引用例には、温度応答性高分子をコートした培養皿で初代肝細胞を培養し、温度を３０度以下に下げることで一層の肝細胞から構成されるシート状肝組織を回収したこと、シート状肝組織を皮下へ移植すると、１００日を超えて生着し、１２０日目の組織がＡ１ＡＴやアルブミンを発現していたこと、及びシート状肝組織を積層化することが記載されている。
　また、初代肝細胞が肝臓組織から得られた細胞であることは自明であり、Ａ１ＡＴ、すなわちα−１アンチトリプシン及びアルブミンが、肝実質細胞により産生される肝特異的蛋白質で、肝機能発現の指標であることは技術常識である。さらに、積層とは複数の層を積み重ねることであることは明らかである。
　そうすると、引用例には、以下の発明が記載されていると認められる。
「生体内の皮下に移植することで１２０日目に肝機能の発現している、肝臓組織から得られた初代肝細胞からなるシート状肝組織が複数枚積層化され、温度応答性高分子をコートした培養皿から回収された移植用積層化シート状肝組織。」（以下、「引用発明」という。）
 　
３．対比 
　本願発明と、引用発明とを対比する。
　引用発明の「皮下」は本願発明の「所定部位」に包含される。また、本願発明の「長期発現」は、一義的に明確に理解することができず、明細書の記載を参酌すると、実施例１、３の記載からみて、移植後１２０日目においても発現が確認できるような長い期間の発現を含むと認められるから、引用発明の「１２０日目に肝機能の発現している」は、本願発明の「肝機能を長期発現することのできる」に相当する。さらに、引用発明の「シート状肝組織」は、本願発明の「肝組織細胞シート」に相当し、引用発明の「温度応答性高分子をコートした培養皿から回収された」は、本願発明の「細胞培養支持体から剥離された」に相当する。
　そうすると、両者は、
「生体内の所定部位に移植することで肝機能を長期発現することのできる、肝臓組織から得られた細胞からなる肝組織細胞シートが複数枚積層化され、細胞培養支持体から剥離された移植用積層化肝組織細胞シート。」で一致し、以下の点で一応相違する。
＜相違点＞
　本願発明の移植用積層化肝組織細胞シートは、「肝実質細胞及び肝非実質細胞からなる」のに対し、引用発明の移植用積層化肝組織細胞シートは、「初代肝細胞からなる」点。
　
４．当審の判断
　初代肝細胞とは、肝臓組織をコラゲナーゼ灌流して肝組織細胞を取得し、非実質細胞や細胞破砕物を低速遠心分離により除去する等の方法により、肝実質細胞を濃縮した細胞群である（参考資料１　組織培養の技術［第３版］基礎編, 1999, p.119-125）。そして、一般に遠心分離等の細胞分離手段では、目的とする細胞を、完全に純粋な一種類の細胞からなる細胞群として得ることは困難であるのが技術常識であるから、肝実質細胞群を意図して調製した初代肝細胞に、クッパー細胞、類洞内皮細胞、または星細胞等の肝非実質細胞が排除しきれず混入していることは、参考資料２（J Hepatol, 2003, Vol.38, No.6, p.736-44、第７３６頁Ａｂｓｔｒａｃｔ、第７３８頁右欄第１１行〜第７３９頁左欄第２行、Ｆｉｇ．２）、参考資料３（Am J Pathol, 1996, Vol.148, No.2, p.383-92、第３８３頁Ａｂｓｔｒａｃｔ）、及び参考資料４（特開２００４−２４０６９号公報、第８頁第４〜１２行）に記載のとおり周知である。
　そうすると、引用発明の「初代肝細胞」もまた、肝実質細胞の他に、クッパー細胞、類洞内皮細胞または星細胞等の肝非実質細胞が、分離過程で排除しきれず混入している蓋然性が高いから、実質的に「肝実質細胞及び肝非実質細胞」からなるものと認められる。
　なお、本願明細書段落【００１５】の「本発明に使用される肝組織細胞は肝臓組織より回収した細胞であり、その中に肝機能を発現する肝実質細胞が含まれていればよい」との記載を参酌すれば、本願実施例で用いられた「肝組織細胞」もまた、肝臓組織から肝実質細胞を含むように回収した結果、肝実質細胞と肝非実質細胞が完全に分離されずに混在しているにすぎないものと推認される。
　したがって、上記相違点は実質的な相違点ではない。
  　
５．審判請求人の主張に対し
　審判請求人は、平成２６年９月２２日付けの意見書（以下、「意見書」という。）において、以下のとおり主張する。
　「上述のとおり、補正後の本願発明の移植用積層化肝組織細胞シートは、肝臓組織内の肝実質細胞及び肝非実質細胞で構成されるものです。すなわち、本願発明で使用される「肝組織細胞」とは肝臓を酵素処理し、肝実質細胞と肝非実質細胞として得たものです。そして、それらの細胞を温度応答性培養皿上に再播種・培養して得られたのが、本願発明の「肝組織細胞シート」です。
　一方、引用例１のシート状肝組織は、一層の肝細胞から構成される（すなわち肝実質細胞のみで構成される）細胞シートです。
　したがって、本願発明の移植用積層化肝組織細胞シートは、細胞シートに含まれる細胞成分の構成が引用例１に記載の発明とは異なります。」
　しかし、引用例には、初代肝細胞のシートが実質細胞のみで構成されるとは記載されていない。また、引用例には、シート状肝組織が一層の肝細胞から構成されることが記載されているが、「一層」とは、肝細胞がひと重ねの層となっているという、シート状肝組織の形態についての記載であり、シート状肝組織を構成する細胞の種類についての記載ではない。そして、上記２．（４）で検討したとおり、本願優先日前の技術常識を参酌すれば、肝臓組織から分離された初代肝細胞は自ずと肝実質細胞及び肝非実質細胞からなると認められる。
　したがって、引用発明が、肝実質細胞のみで構成される移植用積層化肝組織細胞シートであるとの審判請求人の主張は失当であり、採用することができない。
  　
６．小括
　以上のとおり、本願発明は、引用例に記載された発明であるから、特許法第２９条第１項第３号に該当し、特許を受けることができない。
  　
第４　特許法第２９条第２項について
　上記相違点を仮に実質的な相違点とした場合について以下検討する。
   　
１．当審の判断
　本願優先日前、人工組織を作製する際に、そのつど生体から細胞を調製することは技術常識であった。また、肝臓組織を構成する様々な細胞のうち、代謝や解毒等の肝機能を担うのは肝実質細胞であることも周知であった。
　そうすると、引用発明の移植用積層化肝組織細胞シートを製造する際に、引用発明における「初代肝細胞」に代えて、新たに肝臓組織から肝実質細胞を含む細胞群を調製することは当業者が容易になし得たことであり、上記第３の４．で検討したとおり、目的とする細胞を、完全に純粋な一種類の細胞からなる細胞群として得ることは困難であるから、肝実質細胞を含むように新たに調製した細胞群は、自ずと「肝実質細胞及び肝非実質細胞からなる」ものとなると認められる。
　そして、本願明細書の実施例では、肝臓組織から肝実質細胞を含むように回収した、肝実質細胞と肝非実質細胞が完全に分離されずに混在していると推認される肝組織細胞が用いられているが、特に肝非実質細胞が混在することにより奏される効果の記載はない。
　したがって、本願発明が引用例の記載及び周知技術から、当業者が予測できない格別な効果を奏するとは認められない。
  　
２．審判請求人の主張に対し
　審判請求人は意見書において、以下のとおり主張している。
　「上述の通り、補正後の本願発明を構成する肝組織細胞シートは、肝臓組織から得られた肝実質細胞及び肝非実質細胞からなるものです。引用例１に記載の細胞シートは肝実質細胞のみを用いている点で、細胞成分の構成が本願発明とは異なります。引用文献１は、肝非実質細胞を含めることについて示唆するものではありません。したがって、当業者といえども引用文献１の記載に基づいて本願発明に想到することは困難です。」
　引用例には、肝非実質細胞を積極的に含めるとの記載はないが、第３の４．で検討したとおり、引用例に記載の初代肝細胞は、肝実質細胞及び肝非実質細胞からなるものである。そして、引用発明の移植用積層化肝組織細胞シートを作製しようとして、新たに肝臓組織から肝実質細胞を含むように細胞群を調製すると、同じく肝非実質細胞が排除しきれず混入し、自ずと肝実質細胞及び肝非実質細胞からなる細胞群が取得されると認められる。
　したがって、審判請求人の主張は採用することができない。
　
３．小括
　以上のとおり、本願発明は、引用例及び周知技術から当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
  　
第５　むすび
　以上のとおり、本願発明は、特許法第２９条第１項第３号に該当し特許を受けることができないか、または同条第２項の規定により特許を受けることができないから、本願は、その他の請求項については検討するまでもなく、拒絶すべきものである。
　よって、結論のとおり審決する。