【事件の表示】
　平成　４年特許願第５１１７２８号「呼吸系ウイルスに対する有効な抗体力価用の血漿試料をスクリーニングする方法」拒絶査定に対する審判事件［平成４年１０月２９日国際公開、ＷＯ９２／１８６５２、平成６年１１月　２日国内公表、特表平６−５０９８６６］について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
１．手続の経緯・本願発明
　本願は、平成４年（１９９２年）４月１０日（パリ条約による優先権主張外国庁受理、１９９１年４月２２日、米国）を国際出願日とする国際出願であって、その請求項１ないし１０に係る発明は、平成１４年８月２３日付で補正された明細書及び図面の記載からみて、本願の特許請求の範囲の請求項１ないし１０に記載されたとおりのものと認められるところ、その請求項１に記載された発明（以下、「本願発明」という。）は次のとおりのものである。
「【請求項１】　呼吸系合胞体ウイルス（ＲＳＶ）により引き起こされる感染の治療あるいは予防のための有効な抗体力価をもつ免疫グロブリンを調合する一つの方法であって、
　前記呼吸系合胞体ウイルスにより引き起こされる感染の治療あるいは予防に有効な抗体力価をもつ免疫グロブリンを血漿から回収し、前記血漿は
　呼吸系合胞体ウイルスに対する抗体を含む血漿試料を呼吸系合胞体ウイルスに接触させ、
　試料と呼吸系合胞体ウイルスの混合体を細胞の集団に接触させ、
その混合体に残存する非中和性呼吸系合胞体ウイルスが細胞内で複製を行えるように定められた期間前記混合体を保温し、
　免疫検定により細胞内の呼吸系合胞体ウイルス抗原の量を測定し、また、
　あらかじめ選択された最小抗体力価で前記細胞内でのウイルス複製を妨げる血漿試料を選択する、
ことよりなることを特徴とする方法。」
　
２．引用刊行物の記載事項
１）引用刊行物
　当審で通知した拒絶の理由に引用した刊行物は、次のものである。
　　刊行物１：特開昭６２−２８１８２３号公報
　　刊行物２：アンダーソン他「Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．」第２２巻、第６号、１０５０〜１０５２頁（１９８５年１２月号）
  
２）刊行物１の記載事項
　呼吸器シンシチウムウイルス（respiratory　syncytial　virus）（ＲＳＶ）に対する抗体の力価の高い静脈内注射可能な免疫グロブリンとその製造方法に関する刊行物1には、次の事項が記載されている。
（イ）製造方法（特許請求の範囲第１項）
「１．エンザイム−リンクド・イムノソルベント・アッセイ測定により、約５重量％のグロブリン濃度において呼吸器シンシチウムウイルスに対する抗体の力価が少なくとも約１：２５０，０００である静脈内注射可能な免疫グロブリンを製造する方法において、下記段階、
（ａ）エンザイム−リンクド・イムノソルベント・アッセイにより測定して少なくとも約１：１１０，０００の呼吸器シンシチウムウイルスに対する抗体の力価を得るために提供者から取った血漿をスクリーニングし、
（ｂ）前記段階（ａ）に従って選ばれた提供者の血漿をプールし、
（ｃ）前記段階（ｂ）に従ってプールされた血漿から免疫グロブリンを製造し、そして
（ｄ）前記段階（ｃ）に従って得られた免疫グロブリンを静脈内に注射可能とする、
から成ることを特徴とする方法。」
（ロ）免疫グロブリンによる受け身免疫療法と抗体力価（２頁右下欄１０行〜３頁右上欄１行）
「ヘミング・・・は霊長目の動物モデルの気道に発生した呼吸器シンシチウムウイルス感染症に対して行った受け身免疫療法・・・についての研究結果を発表している。これから、ＲＳＶの感染したフクロウザル・・にヒト静脈内免疫グロブリン（human　intravenous　immune　globulin）（このウイルスに対する抗体価が標準的な範囲にある血漿から調製したもの）を注入すると鼻や気道から出てくるウイルスの量が顕著に減少することが示された。
　特定の抗体が欠乏しているかあるいは又これを必要としている患者を処置するのに、高度免疫グロブリン（hyperimmune　globulin）、の力価が標準よりも高い免疫グロブリンが治療学的に有用である。・・・標準的な集団において普通見られるよりも特定抗体の非常に高い力価を持つ選ばれた提供者から取った血漿又は血清から、高度免疫グロブリンを製造できることはよく知られている。・・・
　従って、ＲＳＶに対する抗体の力価が標準より高いＲＳＶ免疫グロブリン産物、殊に静脈内に投与可能な産物が必要となっている。」
（ハ）スクリーニング（３頁右上欄１行〜右下欄１１行）
「必ずしもＲＳＶワクチンを接種されているとは限らない標準提供者（normal　donor）から取った新鮮な標準血漿（normal　plasma）を、標準より高いＲＳＶに対する抗体の力価を得るために有効にスクリーニング（screen）できることを本発明者は見出だした。エンザイム−リンクド・イムノソルベントアッセイ（enzyme−linked　immunosorbent　assay）（エリザ（ＥＬＩＺＡ））測定により抗体価が約１：１１０，０００よりも高い血漿を、プール（pool）してから分別することによって、高度免疫グロブリンあるいは又特に、更に処理することによって静脈内に投与できるような高力価の抗呼吸器シンシチウム免疫グロブリンを得ることができる。・・・
　エリザ（ＥＬＩＳＡ）あるいは又他の等力価で同じ感度を示すスクリーニング法（screening　method）（例えばＲＩＡ）を使用するによって、提供者から取った血漿を天然に存在するＲＳＶに対する抗体について検査する。本発明に従う方法及び産物が有効となるためには、提供者から取った“選ばれた”血漿のＲＳＶに対する抗体の力価が“標準の”提供者に見られるＲＳＶに対する抗体の力価の約５倍はなくてはならない・・・。」
（ニ）検定法（５頁左下欄１行〜６頁右上欄９行）
「検定法
　  本エリザ法は・・・同じ方法である。この方法は先にミクロタイタープレート用に改造されていた・・・。
　ポリスチレン性ミクロタイタープレート中の丸底のウエルに・・・ＲＳＶ抗原の最適希釈液０．１ｍｌを添加することによってこれを感作し、・・洗浄した。５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）０．１ｍｌを各ウエルに加えた。このプレートを・・・乾燥した。抗血清希釈液を各ウエル（０．１ｍｌ）に加え、室温で一晩インキュベートした。前のようにウエルを３回洗浄し、アルカリホスファターゼ（・・・）に結合したヤギ抗ヒトＩｇＧ（・・）０．１ｍｌを各ウエルに加え室温で２時間インキュベートした。もう一度ウエルを洗浄した後、アジ化ナトリウム・・・緩衝液（ｐＨ８．０）中の酵素基質、ｐ−ニトロフェニルホスフェート（・・）の１．０％（ｗ・ｖ）溶液０．１mlを加えて室温にて３０分間インキュベートした。各ウエルに３Ｎ　ＮａＯＨを０．０５ｍｌ添加することによって反応を止めた。ダイナテック　モデル５８０ミクロエリザリーダー（・・）を用いて４０５ｎｍの吸光度を測った。吸光度≧０．０１０を有する最大希釈度を終点とした。」
　
３）刊行物２の記載事項
　「酵素免疫検定に基づくＲＳＶに対する微小中和試験」と題される論文である刊行物２には、次の事項が記載されている。
（ホ）要約部分（１０５０頁６〜９行）
「ウイルス伝染性およびＲＳＶに対する抗体中和力価が、マイクロタイタープレート中での細胞培養に置いて決定された。適当な培養期間後、細胞は固定され、そしてＥＬＩＳＡがウイルス検出用のマイクロタイタープレート内で直接行われた。結果は、自動的に読みとられ、そして記録することが出来た。それは、大量の試験を行う際に特に有用である。」
（ヘ）ＥＬＩＳＡで検出される微小中和試験（１０５０頁左欄１〜１１行）
「ＲＳＶ種の抗原性の特性づけには、多様なポリクローナル血清およびＲＳＶの代表的種に対して生成されたモノクローナル抗体を使った試験が必要である。ウイルス中和試験は、これらの研究の欠くことの出来ない部分である。そして、多数のアッセイがしばしば同時に実施されなければならない。我々は、その中でウイルス複製が酵素結合免疫溶媒アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によって検出される微小中和試験を開発した。この技術を使って、我々は、多数の中和試験を実行することができ、そして結果の読み取りと記録を自動化することができる。」
（ト）中和試験方法
（ト−ｉ）血清とＲＳＶとの接触（１０５０頁左欄２１〜３１行）
「中和試験は、平底の組織培養マイクロタイタープレート（カタログ番号・・）の９６−ウエルで実施された。血清、あるいは腹水、それは３０分間５６℃加熱で熱不活性化されている、の形でのモノクローナル抗体（ＭＡｂ）、が一対のウエルに添加された。そして連続的４倍希釈がマイクロタイタープレートで実施された。全ての希釈はＭＥＭ−２％ＦＢＳによるものであり、そして最終容積は各ウエル、７５μｌであった。次いで、ＭＥＭ−２％ＦＢＳ２５μｌ中のウイルスの５０％組織培養伝染性投与量６０が、各ウエルに添加され、そして混合物は４℃で２時間インキュベートされた。」
（ト−ii）血清とＲＳＶの混合体の細胞の集団との接触、ウイルス複製のための保温、免疫検定のための前処理（１０５０頁左欄３１〜４０行）
「１００μｌＭＥＭ−５％ＦＢＳ中の約１５０００ＨＥｐ−２細胞が各ウエルに添加された。そしてプレートはセロファンで覆って、湿潤ＣＯ２インキュベータ内で３５．５℃で３日間インキュベートした。プレートは、ウエルの中身を吸引し、０．５％Ｔｗｅｅｎ２０と共にｐＨ７．２の燐酸塩緩衝性塩水（ＰＢＳ）で３回洗浄し、アセトン−ＰＢＳ８０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）の７５μｌを添加し、そして４℃で１５分間インキュベートすることによって、固定した。インキュベーション期間後、内容物は吸引除去され、プレートは空気乾燥された。」
（ト−iii）免疫検定（１０５０頁左欄４１行〜右欄２６行））
「ＥＬＩＳＡは、固定と同じ日に実施された、あるいはプレートが４℃一晩貯蔵され、翌日ＥＬＩＳＡが実施された。ＥＬＩＳＡのために、ウエルは２００μｌのＰＢＳで０．５％ゼラチンと共にプレコートされ、内容物は吸引除去された。ウエルは、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）−０．５％Ｔｗｅｅｎで洗浄され、そしてＰＢＳ−０．５％ゼラチンさらに０．５％Ｔｗｅｅｎ２０で希釈されたウシ抗−ＲＳＶ血清（ＢａＲＳＶ）（・・）７５μｌと、２％正常ヤギ血清が加えられて、３５．５℃で１時間インキュベートされた。内容物は吸引除去され、ウエルは洗浄された。そして、ＰＢＳ−０．５％ゼラチン−０．５％Ｔｗｅｅｎ２０−正常ヤギ血清で希釈された、ペルオキシダーゼをコンジュゲートされたヤギ抗ウシ免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）（Ｋ・・社、・・）が７５μｌ添加され、３５．５℃で１時間インキュベートされた。ウエルの内容物は再び吸引除去され、０．１５Ｍクエン酸塩燐酸塩緩衝液（ｐＨ５．５）中の基質（ｍｌ当たり０．４ｍｇのｏ−フェニレンジアミン　ジハイドロクロライド、０．０１５％Ｈ２Ｏ２）１２５μｌが加えられ、室温で４０乃至４５分インキュベートされた。反応は３．５Ｍ　ＨＣｌで停止され、そしてＡ４９０がＭＲ５８０　Microelisa　Auto　Reader（Ｄ・・社、・・）で読みとられた。抗体の各希釈は二重的に行われ、各プレートには非感染細胞、バック（back）力価測定用、すなわちＭＥＭ−２％ＦＢＳ中のウイルス接種力価測定用、および免疫前のあるいは非中和抗体の力価測定用のコントロールウエルが含まれていた。１５コントロールウエルの平均に対する≧３の標準偏差の吸光度の読みは、ウイルス複製の証拠であると見なされた。この研究を通じて用いられたＢａＲＳＶ（１：１０００）およびヒツジ抗−ウシＩｇＧ（１：５０００）の希釈物は、始めにチェック用ボードの力価測定によって決定された。」
（ト−iv）プレートにおける細胞の存在（１０５０頁右欄２７行〜１０５１頁右欄２行）
「固定化方法は、プレート曇化度および核タンパク（Ｎ）、融合タンパクおよび大きな糖タンパクに対するＭＡｂｓが検出抗体である場合の非感染細胞における吸光度に対する感染細胞における吸光度の比を我々が評価したいくつかの方法から選択された。・・・使って、プレートを固定することを選択した。この方法を使うと、固定化工程も、プレートにおける細胞の存在もまた、吸光度の読みを変えなかった。基質なし、細胞なしで固定化なしのウエル９８個の吸光度の平均は、０．０１０であった。細胞を用い固定化したウエル９６個の平均吸光度は、０．０１３であった。１０回試験を経たものから６月を越える感染コントロール細胞の吸光度の中間値は、０．０３２から０．０７０の範囲で、０．０５９であった。」
（ト−ｖ）血清試料の抗体力価測定結果（１０５１頁右欄３〜２９行）
「４つのポリクローナル抗−ＲＳＶ血清と２つの前免疫血清が、３つの別々の日に試験された。６つの血清は、ウマ抗−ＲＳＶ血清（Ｆ−ＨａＲＳＶ）とフロー・ラボラトリーズ製の正常ウマ血清；疾病コントロールセンター、ジョージア州アトランタ、製のウマ抗−ＲＳＶ血清（Ｃ−ＨａＲＳＶ）；ＢａＲＳＶ（上述の）およびＢｕｒｒｏｕｇｈｓ　Ｗｅｌｌｃｏｍｅからの正常ウシ血清；そしてヒト回復期相血清である。ＲＳＶ（１）に対する４つの前述のＭＡｂｓもまた試験された。１つ目の１００−７ＧはＮに対するものであり、他の３つ、９２−１１Ｃ，１３１−２Ａ，そして１３３−１Ｈ、は融合タンパクに対するものであった。
　４つのポリクローナル血清は中和力価の変動範囲を有していた。Ｃ−ＨａＲＳＶおよびＢａＲＳＶは低い中和力価を、ＬＡ（１２／８４）は中程度の力価を、そしてＦ−ＨａＲＳＶは高い力価を有していた（表１および【図】）。同じ血清とウイルス接種材料に対して、試験したもの間の中和抗体力価における平均差は、１倍から１２８倍の変動範囲で、８倍であった。この差の多くは、ウイルスのバック力価の日々の変動によるものでありえた。与えられた血清に対する中和抗体力価は、ウイルスのバック力価と逆の相関関係にあった。相関係数は、Ｆ−ＨａＲＳＶについては−０．７９，Ｃ−ＨａＲＳＶについては−０．７９，ＢａＲＳＶについては−０．４６，そしてＬＡ（１２／８４）についてはー０．８２であった。ある一連の試験内では、同じウイルス接種材料についてのバック力価における平均差は、１．５倍であり、変動範囲は１．４倍から３．０倍の範囲であった。試験と試験との間では、同じウイルス接種材料についてのバック力価における平均差は、４．７倍であり、変動範囲は１．０倍から１６．０倍の範囲であった。」
（ト−vi）１０５１頁の図１、１０５２頁の表１
　そして、図１Ａには、「図１　中和抗体力価はＥＬＩＳＡに基づいた。中和試験は、マイクロタイタープレート内において行った。そして、ウイルスの複製はＥＬＩＳＡによって検出された。検出抗体はＢａＲＳＶであり、コンジュゲートはペルオキシターゼ−結合ヤギ−抗ウシＩｇＧ抗体であった。そして、基質は、ｏ−フェニ変動範囲アミン　ジハイドロクロライドであった。平均バックグラウンドの３倍標準偏差の吸光度の読みが、ウイルス複製の証拠と考えられた。（Ａ）試験された３つの血清は、正常ウマ血清（ＮＨＳ）と、フロー・ラボラトリーズ製のＦ−ＨａＲＳＶと、ジョージア州アトランタの疾病コントロールセンター製のウマ抗−ＲＳＶ血清のＣ−ＨａＲＳＶであった。ウイルスのバック−力価測定は１：６４で、平均バックグラウンドは０．０４４（連続線）で、平均以上の３標準偏差は０．１１８（点線）である。」という説明とともに、縦軸：４９０ｎｍでの吸光度、横軸：抗体希釈物の倍率とする図１のＡが記載され、ＮＨＳの場合、希釈倍率にかかわらず吸光度を有し、Ｃ−ＨａＲＳＶの場合、希釈倍率４０倍でも点線を超えた吸光度を示しているのに対し、Ｆ−ＨａＲＳＶの場合では、希釈倍率２５６０倍超えてはじめて点線を超える超えることが示されている。また、１０５２頁の表１には、組織培養ＥＬＩＳＡによるＲＳＶ血清中和力価の測定結果が、複数の希釈率においてウイルスのバック−力価、Ｆ−ＨａＲＳＶおよびＣ−ＨａＲＳＶについて示され、Ｃ−ＨａＲＳＶに比べてＦ−ＨａＲＳＶの力価が相当に高いことが示されている。
　
３．対比・検討
（１）本願発明と刊行物１記載の発明との対比
　刊行物１の「呼吸器シンシチウムウイルス（respiratory　syncytial　virus）（ＲＳＶ）」と本願発明の「呼吸系合胞体ウイルス（ＲＣＶ）」とは、同一のウイルスと認められるし、刊行物１における「血漿から免疫グロブリンを製造する」ことは、本願発明における血漿から「免疫グロブリンを調合する一つの方法であって、免疫グロブリンを血漿から回収する」ことに相当するから、本願発明と刊行物１記載の発明を対比すると、両者は次の点で一致するが、
（一致点）
「呼吸系合胞体ウイルス（ＲＳＶ）により引き起こされる感染の治療あるいは予防のための有効な抗体力価をもつ免疫グロブリンを調合する一つの方法であって、
　前記呼吸系合胞体ウイルスにより引き起こされる感染の治療あるいは予防に有効な抗体力価をもつ免疫グロブリンを血漿から回収し、前記血漿は
　免疫検定を利用し、あらかじめ選択された最小抗体力価で血漿試料を選択することよりなる方法。」、
次の点で相違する。
（相違点）
　血漿試料を選択するために必要な免疫検定の利用の仕方が、本願発明では、「呼吸系合胞体ウイルスに対する抗体を含む血漿試料を呼吸系合胞体ウイルスに接触させ、試料と呼吸系合胞体ウイルスの混合体を細胞の集団に接触させ、その混合体に残存する非中和性呼吸系合胞体ウイルスが細胞内で複製を行えるように定められた期間前記混合体を保温し、免疫検定により細胞内の呼吸系合胞体ウイルス抗原の量を測定し、また、あらかじめ選択された最小抗体力価で前記細胞内でのウイルス複製を妨げる血漿試料を選択する」ものであるのに対し、刊行物１記載の発明では、呼吸系合胞体ウイルスに対する抗体を含む血漿試料の呼吸系合胞体ウイルスに対する抗体の力価を、抗体によるウイルスの中和現象を利用することなく、対応する血清に含まれる該抗体の力価を測定する形で利用しているものである点。
　
（２）相違点についての検討
　しかしながら、ＲＳＶに対する抗体の力価を、抗体によるウイルスの中和現象を利用することなく免疫検定を利用して測定するのではなく、ポリクローナル抗体としての血清をＲＳＶに接触させ、試料と該ウイルスの混合体を細胞の集団に接触させ、その混合体に残存する非中和性該ウイルスが細胞内で複製を行えるように定められた期間混合体をを保温し、ＥＬＩＳＡにより細胞内の該ウイルス抗原の量を測定し、試料の抗体力価を測定することからなる、抗体によるウイルスの中和を利用しウイルス抗原量を免疫検定して試料の抗体力価を測定する微小中和検定法は、刊行物２に記載の如く、ＲＳＶに対する抗体の力価の測定法として公知の方法である。しかも、一般に、「スクリーニング」工程は多数のスクリーニング対象を試験、測定してその結果から所定の基準を満たしたものだけを選択しなければならない関係上、使用されるスクリーニング対象の試験、測定方法は多数の試験、測定が効率よく行われるものが要求されるところ、刊行物２に記載の方法は、上記記載（ホ）にも「多数の中和試験を実行することができ、そして結果の読み取りと記録を自動化することができる。」とあるように、「スクリーニング」における試験、測定方法として採用される動機づけのある方法である。
　また、刊行物２では、腹水の形で測定されるモノクローナル抗体と並んで、ポリクローナル抗体が血清の形でＲＳＶと混合されており、ＲＳＶと混合する抗ＲＳＶ抗体含有試料の形態が血清であって、血漿ではないが、実際の体内では血清には存在しないが血漿に存在する血液成分の存在する全血状態の血液内で、抗体はウイルス中和作用を行うものであるから、刊行物２記載の微小中和検定法のウイルスと接触させる抗体含有試料として、「血清試料」でなく、「血漿試料」を用いても、ＲＳＶとの接触によりＲＳＶの中和を行うのに何ら不都合がないことは、明らかである。
　しかも、測定結果に従って選択される血漿試料から調製され、実際に治療又は予防のために免疫グロブリンの形で体内に注入される免疫グロブリンは、血漿成分の存在下で作用しなければならないものである以上、ＲＳＶにより引き起こされる感染の治療あるいは予防のために有効な抗体力価をもつ免疫グロブリンを回収するための血漿を選択するための測定法として、血漿をわざわざ血清試料とすることなく、血漿の状態でそのままＲＳＶと接触させる工程から始める形で刊行物２記載の微小中和検定法を採用することが、むしろ血漿の抗体力価の測定法として、血清には含まれず血漿に含まれる成分の存在下で機能しなければならない免疫グロブリンの製造原料としての適性をスクリーニングするというその利用目的にかなったものと、当業者であれば容易に想到できることである。
　そして、本願発明の構成を採用したことによる効果も、格別のものとは認められない。
　
４．むすび
　したがって、本願発明は、刊行物１及び刊行物２に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるので、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　よって、結論のとおり審決する。