【事件の表示】
　特願２００８−１８４３７５「組織炎症及び発癌を治療するためのグアニル酸シクラーゼ受容体アゴニスト」拒絶査定不服審判事件〔平成２１年　１月　８日出願公開、特開２００９−　　１５８２〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
　
第１　手続の経緯
　
　この出願は，２００２年３月２８日（パリ条約による優先権主張 外国庁受理２００１年３月２９日 米国，２００１年３月２９日 米国，２００１年６月２７日 米国，２００１年７月１０日 米国，２００１年７月２５日 米国，２００２年１月１７日 米国）を国際出願日として出願した特願２００２−５７６９４９号の一部を平成２０年７月１６日に新たな特許出願としたものであって，以降の手続の経緯は以下のとおりのものである。
　
　平成２０年　８月１５日　　　手続補正書・上申書
　平成２３年　４月　４日付け　拒絶理由通知書
　平成２３年　８月２６日　　　意見書・手続補正書・手続補足書
　平成２３年１１月　１日付け　拒絶査定
　平成２４年　３月　８日　　　審判請求書・手続補正書
　平成２４年　４月２７日　　　手続補正書（方式）
　平成２６年　１月　７日付け　審尋
　平成２６年　７月１０日　　　回答書
　
第２　平成２４年３月８日付けの手続補正についての補正の却下の決定
　
[補正の却下の決定の結論]　
　平成２４年３月８日付けの手続補正を却下する。
　
[理由]
１　本件補正
　
　平成２４年３月８日付けの手続補正（以下「本件補正」という。）は，本件補正前の　
「【請求項１】
　アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２又は配列番号８のアミノ酸配列からなるペプチド。」を，　
　
「【請求項１】
　アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である
配列番号２
であって，グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し，かつ，（４，１２；７，１５）二環である，ペプチド
とする補正を含むものである。なお，下線は補正箇所を示す。
　
２　本件補正の適否
　
（１）補正の目的の適否
　
　本件補正は，請求項１に記載した発明を特定するために必要と認める事項である「ペプチド」の「アミノ酸配列」について，補正前の請求項１に記載されていた「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２又は配列番号８」を，「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２」に限定すると共に，上記「ペプチド」は，「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し，かつ，（４，１２；７，１５）二環である」ものに限定するものである。
　そして，その補正前の請求項１に記載された発明と補正後の請求項１に記載される発明の産業上の利用分野及び解決しようとする課題が同一であるから，平成１８年法律第５５号改正附則第３条第１項によりなお従前の例によるとされる同法による改正前の特許法（以下「平成１８年改正前特許法」という。）第１７条の２第４項第２号の特許請求の範囲の減縮を目的とするものに該当する。
　
（２）独立特許要件について
　
　そこで，本件補正後の前記請求項１に記載されている事項により特定される発明（以下「本願補正発明」という。）が，特許出願の際独立して特許を受けることができるものであるか（平成１８年改正前特許法第１７条の２第５項において準用する同法第１２６条第５項の規定に適合するか）否かについて，以下検討する。
　
ア　本願補正発明
　
　本願補正発明は，以下のとおりである。
　
「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチドであって，グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し，かつ，（４，１２；７，１５）二環である，ペプチド。」
　ここで，配列番号２に示されるアミノ酸配列は，次のとおりである。　
　
イ　特許法第３６条第６項第２号についての検討
　
（ア）補正後の特許請求の範囲の請求項１の「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し」についての判断
　
　本願明細書の記載を検討すると，「【０００２】本発明は，細胞内でのｃＧＭＰの生成を高めるための手段としての，グアニル酸シクラーゼ受容体のアゴニストの治療的使用に関する」，「【発明が解決しようとする課題】【００１１】本発明は，グアニル酸シクラーゼ受容体の新しいアゴニストの開発，及び天然に存在するアゴニストの新たな使用に基づくものである。これらのアゴニストはウログアニリンの類似体であり，これらの多くは低いｐＨでの受容体の活性化，安定性，活性が向上しており，あるいは悪影響が低下している点で，優れた性質を有している」ということが記載されている。さらに，実施例の【表４】（【００５７】）には，天然型ヒトウログアニリンを比較対照とし，設計されたペプチド類似体におけるｃＧＭＰの細胞内レベルを増大させる能力の評価結果が示されており，本願補正発明の発明特定事項の一つである「アミノ酸位置３がＧｌｕである配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチド」に含まれる，配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドが，天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させるものであることは示されている。　
　しかしながら，段落【０００２】及び【００１１】の上記記載を参酌しても，本願補正発明の「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し」が，細胞内でのｃＧＭＰの生成をどのレベルにまで高めることを意味するのか不明である。
　さらに，実施例の【表４】（【００５７】）に示されている配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドの評価結果は，本願補正発明の１つの態様にすぎないから，この実施例から「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し」の意味するところを理解することもできない。
　そして，補正後の特許請求の範囲の請求項１に記載された具体的な１６個（４箇所の位置に各２種のアミノ酸）のペプチドのうち，いずれが「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激」するといえるものであるかも不明である。
　したがって，補正後の特許請求の範囲の請求項１に記載された発明（本願補正発明）が明確であるとはいえない。
　
　仮に，「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し」との記載が，天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させるものを意味するとしても，天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させることを具体的に確認しなければ上述のようにどのペプチドが本願補正発明に該当するのか理解できないので，特許を受けようとする発明を特定することができず，明確とはいえない。
　
（イ）小括
　以上より，請求項１の特許を受けようとする発明が明確でないから，特許請求の範囲の記載は，特許法第３６条第６項第２号に適合するものではなく，この出願は，特許法第３６条第６項に規定する要件を満たしていない。
　
ウ　特許法第３６条第６項第１号についての検討
　
（ア）はじめに 
　特許法第３６条第６項は「・・特許請求の範囲の記載は，次の各号に適合するものでなければならない。」と規定し，その第１号において「特許を受けようとする発明が発明の詳細な説明に記載したものであること。」と規定している。同号に規定する要件（いわゆる「明細書のサポート要件」）に適合するか否かは，「特許請求の範囲の記載と発明の詳細な説明の記載とを対比し，特許請求の範囲に記載された発明が，発明の詳細な説明に記載された発明で，発明の詳細な説明の記載により当業者が当該発明の課題を解決できると認識できる範囲のものであるか否か，また，その記載や示唆がなくとも当業者が出願時の技術常識に照らし当該発明の課題を解決できると認識できる範囲のものであるか否かを検討して判断すべきもの」（知財高裁特別部平成１７年（行ケ）第１００４２号判決）である。
　以下，この観点に立って，検討する。
　
（イ）本願補正発明の課題について
　本願明細書の段落【００１１】及び【００１２】には，以下のように記載されている。
　
「【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
　本発明は，グアニル酸シクラーゼ受容体の新しいアゴニストの開発，及び天然に存在するアゴニストの新たな使用に基づくものである。これらのアゴニストはウログアニリンの類似体であり，これらの多くは低いｐＨでの受容体の活性化，安定性，活性が向上しており，あるいは悪影響が低下している点で，優れた性質を有している。これらのペプチドを使用して，増大したｃＧＭＰの細胞内レベルに応答する任意の状態を治療することができる。ｃＧＭＰの細胞内レベルは，細胞内でのｃＧＭＰの生成を増大させることによって，かつ／あるいはｃＧＭＰ特異的ホスホジエステラーゼによるその分解を阻害することによって増大させることができる。治療又は予防することができる特異的な状態には，炎症状態，癌，ポリープ，及び転移がある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
　その第１の態様において本発明は，配列番号２〜２１の任意の１つのアミノ酸配列から本質的になるペプチド，及びこれらのペプチドを含む治療用組成物を対象とする。」
　
　これらの記載からみて，本願明細書に記載された発明が解決しようとする課題は，グアニル酸シクラーゼ受容体の新しいアゴニストとして，ウログアニリンの類似体で，特定のアミノ酸配列から本質的になるペプチドを提供することであると認められる。
　そうすると，補正後の請求項１の記載によれば，本願補正発明の課題は，アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチドであって，「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し」，かつ，（４，１２；７，１５）二環であるペプチドを提供することであると認められる。
　
　ここで，「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し」については，前記イで述べたように，ペプチドがグアニル酸シクラーゼ受容体に結合してｃＧＭＰの生成をどの程度増大させれば「グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し」といえるのか明確でなく，それに伴い，アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチドのうち，どのペプチドが具体的に該当するか明確でないが，ここでは，仮に天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させることを意味するものとして検討する。
　
（ウ）発明の詳細な説明の記載について　
ａ　発明の詳細な説明には，グアニル酸シクラーゼ受容体のアゴニストとして分子設計した特定のアミノ酸配列から本質的になるペプチドとして，以下の事項が記載されている。
「【００２８】
　新規なグアニル酸シクラーゼ受容体のアゴニストの戦略及び設計
　　　　　　　　　　・・・・・
【００２９】
　以前の知られているウログアニリンペプチドと比較して，優れたｃＧＭＰ向上性及び／又は他の有益な特性（たとえば改善された温度安定性，向上したプロテアーゼ安定性，又は好ましいｐＨでの優れた活性）を生み出すいくつかのペプチドを含めた，ウログアニリンと類似しているがこれとは異なるペプチドを，以下に記載する。・・・記載したグアニル酸シクラーゼ受容体のアゴニストは，表２及び３に示すアミノ酸配列を有している。・・・」　
「【００４１】
　・・・低エネルギー立体配座をとることができる化合物を，表２に列挙する。化合物はすべて，［４，１２；７，１５］二環である。
【００４２】　　
【表２−２】（省略）
【００４３】
　表２に示したいくつかのペプチドは１６個のアミノ酸残基を含み，その中でシステイン残基は，Ｃｙｓ4とＣｙｓ12の間，及びＣｙｓ7とＣｙｓ15の間でそれぞれジスルフィド架橋を形成する。これらのペプチドは，ＷＯ０１／２５２６６中に記載されたペプチド配列とは異なり，ペプチドの立体配座及びエネルギー計算に基づいて設計される。
【００４４】
　さらに，表３に示す長さがアミノ酸１３〜１６個でさまざまであるペプチドを，エネルギー計算及び３次元構造に基づいて設計して，生物学的に活性がある配座異性体の安定化を促進し，生物学的に不活性である配座異性体への相互転換を最小限にするかあるいは失くす。これらのペプチドは，タンパク質分解及び高温に対する安定性を促進するためにも設計される。これらのペプチドの設計は，グルタミン酸及びアスパラギン酸などの，低いｐＨ値においてイオン電荷を含むアミノ酸残基の修飾を含む。
【００４５】　　
　」
　
　さらに，発明の詳細な説明において，上記のペプチドについて，具体的に，合成，精製し，ｃＧＭＰの細胞内レベルを増大させる能力の評価方法に基づく結果が記載されているのは，実施例として段落【００５４】ないし【００６０】に記載されている以下の事項のみである。
「【実施例】
【００５４】　
材料及び方法
　細胞培養：５２継代のヒトＴ８４結腸癌細胞を，Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得た。細胞は，１０％ウシ胎児血清，１００Ｕペニシリン／ｍｌ，及び１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補った，ハムのＦ−１２培地とダルベッコの改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）の１：１混合物中で増殖させた。細胞には３日に１度新鮮な培地を与え，約８０％の集合状態で分けた。
【００５５】
　ｃＧＭＰの細胞内レベルを決定するためのＴ８４細胞系アッセイ：ペプチド類似体を，Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｓａｎ　Ｄｉｅｇｏ，ＣＡによって，及びＰｒｉｎｃｅｔｏｎ　Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，Ｌａｎｇｈｏｒｎｅ，ＰＡによって注文合成した。合成ペプチドの生物活性を，前に報告したようにアッセイした（１５）。簡潔には，２４ウエルのプレート中の集合した単層のＴ８４細胞を，５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）を含む２５０μｌのＤＭＥＭで２回洗浄し，５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）及び１ｍＭのイソブチルメチルキサンチン（ＩＢＭＸ）を含む２５０μｌのＤＭＥＭと共に３７℃で１０分間前培養し，次にペプチド類似体（０．１ｎＭ〜１０μＭ）と共に３０分間培養した。この培地を吸引し，３％過塩素酸を加えることによって，反応を停止させた。遠心分離，０．１ＮのＮａＯＨを用いた中和の後に，ＥＬＩＳＡキット（Ｃａｙｍｅｎ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ａｎｎ　Ａｒｂｏｒ，ＭＩ．）を使用するｃＧＭＰの測定用に，上澄みを直接使用した。
【００５６】　
結果
　表４に示すペプチドは注文合成し，公開されている手順（３８）を使用して精製したものである（＞９５％純度）。ペプチド類似体をＴ８４細胞系アッセイにおいて，ｃＧＭＰの細胞内レベルを増大させるそれらの能力に関して評価した。表４に示すように，ＳＰ３０４（配列番号２０）は，試験したすべての類似体の中で，細胞内ｃＧＭＰの最大の増大をもたらした。ＳＰ３１６（配列番号２１）は有効性が２番目であり，それに対してＳＰ３０１，ＳＰ３０２及びＳＰ３０３の生物活性は，いずれも幾分弱かった。ペプチド類似体ＳＰ３０６及びＳＰ３１０は，このアッセイでは活性がなかった。これらの結果によってＳＰ３０４が，ｃＧＭＰを増大させることに関して最も強力なペプチドであることが示される。これらの結果は，位置７のシステイン残基を，［７，１５］ジスルフィド結合の成分としてのペニシラミンで置換することはできず，位置９のＡｓｎ残基をＧｌｎに変えることはできないことも示唆する。
【００５７】
【表４】　
【００５８】
　熱安定性を調べるために，ペプチド類似体の１０マイクロモル溶液を，９５℃で９０分まで加熱した。処理中の特定の時間に，Ｔ８４細胞系アッセイにおける生物活性に関してサンプルを試験した。ＳＰ３０１，ＳＰ３０２，ＳＰ３０３及びＳＰ３０４の生物活性が，加熱の６０分後に著しく変わることはなかった。９０分後，ＳＰ３０１，ＳＰ３０２及びＳＰ３０３の活性は，それらの元の値の約８０％に低下し，一方ＳＰ３０４の生物活性は変わらなかった。これによってＳＰ３０４は，試験した他のペプチドと比較して，熱変性に対してより安定性があることが示される。エネルギー計算及び３Ｄ構造に基づいて，配列番号１の位置３の側鎖の負に帯電したカルボキシル基は，受容体上の正に帯電した結合部位と特異的に相互作用すると，我々は予想した。この相互作用を増大させることができる場合は，ＳＰ３０４に関して見出されたのと同様に，Ａｓｐ３ではなくＧｌｕ３を含む類似体はさらに活性が強いはずである。同時に，この特定の相互作用の効率を確実なものにするために，リガンドと受容体の間の広範囲の静電的相互作用の全体系は，バランスが良くなければならない。Ｇｌｕ2側鎖はＡｓｐ2側鎖と比較して立体配座の可能性が高いので，このバランスはＳＰ３０４（Ａｓｐ3がＧｌｕ3に１つ置換されている）と比較して，ＳＰ３０２（ＡｓｐがＧｌｕに二重に置換されている）ではわずかに変わってよい。実際，ＳＰ３０４の生物活性は，評価した類似体の中では最高である。
【００５９】
　合成ペプチドＳＰ３０１，ＳＰ３０２，ＳＰ３０３及びＳＰ３０４を，Ｔ８４細胞系アッセイの異なるｐＨ値での，それらの活性に関しても試験した。これらのペプチドはすべて，５〜７の範囲のｐＨでｃＧＭＰの増大した細胞内生成を示したが，ＳＰ３０４は６．５と７の間の範囲で最大の増大を示した。大腸の生理学的ｐＨは類似の範囲内にあることを記すことは重要であり，したがってＳＰ３０４は，結腸癌の治療に非常に有効であることが予想されると思われる。
【００６０】
　我々は，Ｔ８４細胞系アッセイにおいて単独，あるいはｃＧＭＰ依存性ホスホジエステラーゼの阻害剤（たとえばザプリナスト又はスルジナックスルホン）と組み合わせて使用したペプチドも，ｃＧＭＰの細胞内レベルの増大に関して評価した。ｃＧＭＰ依存性ホスホジエステラーゼの阻害剤とＳＰ３０４の組合せによって，これらの実験におけるｃＧＭＰレベルの増大において劇的な効果が示された。合成ペプチドＳＰ３０４は，ザプリナスト又はスルジナックスルホンのみの存在下で達したレベルよりも，ｃＧＭＰレベルを大幅に増大させた。ザプリナスト又はスルジナックスルホンと組み合わせたＳＰ３０４でウエルを処理することによって，細胞内ｃＧＭＰレベルの相乗的増大がもたらされた。これらの増大は，ｐ値＜０．５で統計上有意であった。これらのデータは，グアニル酸シクラーゼ受容体のペプチドアゴニストと，１つ又は複数のｃＧＭＰ依存性ホスホジエステラーゼの阻害剤を組み合わせた処理によって，ｃＧＭＰ濃度の付加的ではなく大きな増大をもたらすことを示す。」
　
ｂ　ある活性を有するペプチドにつき，活性向上，安定化，悪影響減少等のより優れた性質を有する改変体を得る目的で，分子モデル化を適用して分子設計し，該ペプチドのアミノ酸配列の特定位置のアミノ酸を欠失させたり，特定の位置のアミノ酸を特定のアミノ酸で置換又は付加等させると，得られる改変体は理論的上目的とする活性を有するであろうと予測されるものの，実際に目的とする活性を有するか，その程度はどれ程かは，必ずしも予測どおりではなく，実際に試験等により目的とする活性の有無・程度を確認してみなければ分からないことは，よく知られていることである。
　
　本願補正発明で特定されている「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチド」は，Aaa２，Xxx１０，Yyy１１，Zzz１４の選択に基づく多種のペプチドの集合体である。その一つである，配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドが，グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させたこと（上記ａ【００５７】【表４】）は確認できる。
　しかし，発明の詳細な説明（上記ａ【００４２】【表２−１】，【００５７】【表４】）に，アニル酸シクラーゼ受容体のペプチドアゴニストとして分子設計されたものの一つである，配列番号４のアミノ酸配列（これは配列番号２のアミノ酸に４，７，１２，１５位のＣｙｓをＣｙｓ又はＰｅｎに改変する点が加わった配列）からなるペプチドが，ｃＧＭＰレベルはゼロすなわちｃＧＭＰ生成活性はないという評価結果が示されている。これは段落【００５６】の記載より７位のＣｙｓのＰｅｎへの置換に起因すると示唆されるが，配列番号４のアミノ酸配列からなるペプチドとして具体的にどのようなアミノ酸配列からなるものを用いて評価したのか不明である以上，配列番号２のアミノ酸に含まれる置換にも起因して活性が失われる可能性もある。
　それ故，本願補正発明で特定されている「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチド」に包含される任意のペプチドが，グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させ得るかは，予測することが困難であり，明細書に実際に，グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させたデータ又はそれと同視できる程度の記載をして裏付ける必要があるところ，本願補正発明で特定されている「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチド」に包含されるペプチドのうち，明細書に記載されている上記データ又は同視できる程度の記載は，上記ａの，実施例の【表４】で確認できる配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドのみである。　
　そうすると，発明の詳細な説明に，アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチドであって，グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して天然型ヒトウログアニリンと比較しｃＧＭＰの生成を増大させ，かつ，（４，１２；７，１５）二環であるペプチドにつき記載されているといえるものは，配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドであるといえる。
　
(エ)本願補正発明と発明の詳細な説明との対比・判断　
　本願補正発明には，発明の詳細な説明に記載されているということができない「配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチド」以外のペプチドを含む「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチドであって，グアニル酸シクラーゼ受容体に結合して環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の生成を刺激し，かつ，（４，１２；７，１５）二環である，ペプチド」が記載されており，出願時の技術常識に照らしても，本願補正発明の範囲まで，発明の詳細な説明に開示された内容を拡張ないし一般化できるとはいえないから，本願補正発明は，発明の詳細な説明に記載された発明であるとはいえない。 
 　 
(オ)小括
　したがって，本願補正発明は，発明の詳細な説明に記載したものであるということができないから，特許請求の範囲の記載は，特許法第３６条第６項第１号に適合するものではなく，この出願は，特許法第３６条第６項に規定する要件を満たしていない。 
 　
エ　独立特許要件についてのまとめ
　
　以上のとおり，補正後の請求項１の特許請求の範囲の記載は，特許法第３６条第６項第１，２号に適合するものではないから，補正後の本願は同法第３６条第６項の規定を満たすものではなく，本願補正発明は，特許出願の際独立して特許を受けることができるものではないから，請求項１についての補正は，平成１８年改正前特許法第１７条の２第５項において準用する同法第１２６条第５項の規定に適合しない。
　
３　補正の却下の決定のむすび
　
　以上のとおり，請求項１についての補正は，平成１８年改正前特許法第１２６条第５項の規定に適合しないものであるから，本件補正は，その余の点を検討するまでもなく，同法第１５９条第１項の規定において読み替えて準用する同法第５３条第１項の規定により却下すべきものである。
　よって，結論のとおり決定する。
　
第３　本願発明について
　
　平成２４年３月８日付けの手続補正は，上記第２に記載されたとおり却下されたので，この出願の発明は，平成２３年８月２６日付けの手続補正により補正された特許請求の範囲に記載された事項により特定されるとおりのものであるところ，その請求項１に係る発明（以下「本願発明」という。）は，次のとおりのものである。
　
「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２又は配列番号８のアミノ酸配列からなるペプチド。」
　ここで，配列番号２，８に示されるアミノ酸配列は，次のとおりである。
第４　原査定の拒絶の理由の概要
　
　本願発明についての原査定の拒絶の理由は，本願発明は，その出願前日本国内又は外国において頒布された下記の刊行物に記載された発明又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった発明に基いて，その出願前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない，というものである。　
　　　　　　　　　　　　　　　　記
　
刊行物１：Cancer Res., vol.60(2000)p.5151-5157（原査定の引用文献１）
刊行物２：Biochem.Biophys.Res.Commun.,vol.219(1996)p.644-648（原査定の引用文献２）
　
第５　当審の判断
　
１　刊行物
　
　刊行物１：上記第４に記載の刊行物１と同じ。
　刊行物２：上記第４に記載の刊行物２と同じ。
　刊行物Ａ：日本臨床，５６巻，９号（９，１９９８）ｐ．２１９−２２４
　
　刊行物Ａは，この出願の優先日における周知技術又は技術水準を示すために引用するものである。
　
２　刊行物に記載された事項
　
　この優先日前に頒布された刊行物である刊行物１，２及び刊行物Ａには，以下の事項がそれぞれ記載されている。
　
（１）刊行物１
　訳文で示す。
１ａ「ウログアニリン治療は，ApcMin/+マウスにおいてポリープ形成を抑制し，ヒト結腸腺癌細胞においてサイクリックGMP経由でアポトーシスを誘導する」（５１５１頁 標題）
　
１ｂ「要約
　腸内ペプチドであるグアニリン及びウログアニリンは，サイクリックGMP（cGMP）を産生し嚢胞性線維症膜貫通型調節分子依存性のCl-及びHCO3-分泌を刺激する分子をシグナル伝達する受容体型グアニル酸シクラーゼ（R-GC）の活性化によって腸で分泌されるローカルレギュレータである。」（５１５１頁 要約１〜６行）
　
１ｃ「合成ヒトウログアニリンは生物学的に活性である。ヒトウログアニリンを化学的に合成し，無傷のT84細胞でのcGMP蓄積バイオアッセイを用いて，合成ペプチドの相対的な効力を評価した。我々は類似の物理化学的性質を示したこのペプチドの複数のアイソフォームにおいて，生物学的活性を観察した。強力な生物学的活性を示す主要なペプチドのピークを，逆相HPLCによって９９％まで精製し，この研究のために使用した。」（５１５３頁左欄１〜８行）
　
（２）刊行物２
　訳文で示す。
２ａ「ヒトウログアニリン前駆体をコードするcDNAのクローニングと特徴付け」（６４４頁 標題）
　
２ｂ「　
図１　ヒトウログアニリンのcDNA。終止コドンは３連続アスタリスクでマークされている。ウログアニリン配列に二重下線がなされている。可能なシグナルペプチドに一重下線がなされいる。破線はポリアデニル化シグナルを示している。」（６４６頁 図１）
　
（３）刊行物Ａ
Ａ１「　はじめに
　cyclic GMPを細胞内情報伝達物質とする膜１回貫通型グアニル酸シクラーゼ(guanylate cyclase: GC)結合受容体にはGC-A, GC-B, GC-Cの３種類があり，前２者には心房性ナトリウム利尿ペプチド(atrial natriuretic polype-ptide: ANP)とその同族ペプチドであるBNP, CNPが結合し，水・Na+の再吸収抑制と排泄促進ならびに血管トーヌスや血管内皮細胞増殖の調節に関与している。GC-Cは毒素原性大腸菌，腸炎ビブリオ，エルシニア菌などの外毒素である耐熱性エンテロトキシンの受容体として1990年にクローニングされ，ヒトでは1,050アミノ酸残基，ラットでは1,053アミノ酸残基より成り，細胞外ドメイン，膜貫通部位および細胞内のプロテインキナーゼ様ドメインとグアニル酸シクラーゼドメインより構成される１）。          
　GC-C受容体は胃，腸，腎，気道などの上皮細胞やインスリノーマ細胞に存在する。以前から耐熱性エンテロトキシンが腸上皮細胞の管腔側に存在するGC-Cに作用し，クロールの分泌亢進とナトリウム・水の吸収障害の結果，分泌性下痢をおこすことが知られていた２）。外来性のエンテロトキシンがヒト腸管に受容体を有するのは，元来，構造の類似した内在性リガンドが存在しているという着想を基に，GC-Cを発現しているヒト大腸癌T-84細胞株を用いてcyclic GMP産生能を指標とし，グアニリン(guanylin)は1992年に腸抽出物から，ウログアニリン(uro-guanylin)は1993年に尿と腸抽出物から単離・同定された酸性ペプチドである３，４）。両ペプチドは一次構造の相同性や生理作用および受容体／細胞内情報伝達系の共通性から１つのペプチドファミリー（グアニリンファミリー）を形成している。グアニリンは主として十二指腸以下の消化管粘膜上皮に存在し，一方，ウログアニリンは胃，腸に加え，腎，膵臓，肺にも存在している。グアニリンペプチドファミリーは，水・NaCl代謝調節に関与している新たな生理活性ペプチドであり，体液調節の病態生理との関連が注目される。
　Ｉ．ペプチド構造とその生合成
　グアニリンファミリーペプチドとエンテロトキシンの構造を図１に示す。今までに同定されている哺乳類のグアニリンファミリーペプチドはいずれも１５アミノ酸残基より成るが，ヒトウログアニリンのみはＣ端にロイシンが付加された１６アミノ酸より成る（図１）。グアニリンとウログアニリンは４個のシステインを含め，８残基が一致している。予想されたように両ペプチドとエンテロトキシンとの一次構造の相同性は高く，大腸菌エンテロトキシンとヒトグアニリンとは７残基が，ヒトウログアニリンとは９残基が一致している。またグアニリンファミリーは４−１２位と７−１５位にそれらの生物活性に必要とされる２個のＳ−Ｓ結合を有しており，エンテロトキシンでも保存されている。
　　　　　　　　　　・・・・・
　グアニリンファミリーは２個の分子内Ｓ−Ｓ結合を有するために，立体構造上２種類の同位体(right-handed spiral formとleft-handed spi-ral formの２つのisomer)が存在し，１種類のみが生物活性がありcyclic GMP産生能を有する。」（２１９頁左欄１行〜２２０頁右欄４行，２２１頁左欄６〜１０行）
　
Ａ２「
　」（２２０頁 図１）
　
Ａ３「　文　献
1) Garbers D L, et al: Guanylyl cyclase recep-tors. J Biol Chem 269: 30741-30744, 1994.
2) Schulz S, et al: Guanylyl cyclase is a heat-stable enterotoxin receptor. Cell 63: 941-948, 1990.
3)　Currie M G, et al: Guanylin: An endogenous activator of intestinal guanylate cyclase. Proc Natl Acad Sci USA 89: 947-951, 1992.
4) Kita T, et al: Characterization of human uroguanylin: amember of the guanylin pe-ptide family. Am J Physiol 266: 342-348, 1994.」（２２４頁左欄８〜２０行）
　
３　刊行物１に記載された発明
　
　刊行物１は「ウログアニリン治療は，ApcMin/+マウスにおいてポリープ形成を抑制し，ヒト結腸腺癌細胞においてサイクリックGMP経由でアポトーシスを誘導する」（１ａ）ことに関し記載するものであって，この治療で用いたウログアニリンにつき，刊行物１には「ヒトウログアニリンを化学的に合成し・・生物学的活性を示す・・ペプチド・・を・・精製し・・使用した」（１ｃ）と記載されていることから，化学的に合成，精製された，生物学的活性を示すペプチドであるヒトウログアニリンが記載されているといえる。
　
　そうすると，刊行物１には，
「化学的に合成，精製された，生物学的活性を示すペプチドであるヒトウログアニリン。」
の発明（以下「引用発明」という。）が記載されていると認められる。
　
４　本願発明と引用発明との対比
　
　引用発明の「生物学的活性を示すペプチドであるヒトウログアニリン」は，アミノ酸配列が明らかでないことから，本願発明の「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２又は配列番号８のアミノ酸配列からなるペプチド」とは，ペプチドである点で共通する。
　
　したがって，両者は，「ペプチド」である点で一致し，以下の点で相違するといえる。
　
相違点：ペプチドが，本願発明では，アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２又は配列番号８のアミノ酸配列からなるものであるのに対し，引用発明では，そのようなアミノ酸配列からなるものであるのか明らかでない点
　
５　判断
　
　本願発明において「アミノ酸位置３がグルタミン酸（Ｇｌｕ）である配列番号２のアミノ酸配列からなるペプチド」に注目し，以下検討する。
　
（１）相違点について
ア　引用発明の「生物学的活性を示すペプチドであるヒトウログアニリン」のアミノ酸配列について　
　
　ヒトウログアニリンの天然型アミノ酸配列は，刊行物２の図１（２ｂ）や刊行物Ａの図１（Ａ２）に明示されているように，以下に示すアミノ酸配列であることは，本願優先日前，よく知られていた事項である。
　Asn1 Asp2 Asp3 Cys4 Glu5 Leu6 Cys7 Val8 Asn9 Val10 Ala11 Cys12 Thr13 Gly14 Cys15 Leu16　
　
　それ故，引用発明の「生物学的活性を示すペプチドであるヒトウログアニリン」は，Asn1 Asp2 Asp3 Cys4 Glu5 Leu6 Cys7 Val8 Asn9 Val10 Ala11 Cys12 Thr13 Gly14 Cys15 Leu16のアミノ酸配列からなるペプチドといえる。
　
　そうすると，本願発明と引用発明とは，引用発明のペプチドのアミノ酸配列において，２位のAsp が本願発明はAsp 又はGlu，３位のAspが本願発明はGlu，１０位のValが本願発明はVal又はPro，１１位のAlaが本願発明はAla又はAib，及び，１４位のGlyが本願発明はGly又はAlaである点で，実質的に相違するといえる。
　
イ　容易想到性について　
　刊行物１に記載され，刊行物Ａ，Ｂの記載からも明らかなように，ウログアニリンは，cGMPを細胞内情報伝達物質とするグアニル酸シクラーゼ結合受容体の内在性リガンドで，水，NaCl代謝調節に関与している生理活性ペプチドであり（１ｂ，Ａ１），治療に用いられていること（１ａ，Ｂ２）は，本願優先日前，周知事項である。
　そして，ヒトウログアニリンのみならず，哺乳類のグアニリンファミリーペプチド（ウログアニリン及びグアニリン）及び大腸菌エンテロトキシン（グアニリンファミリーペプチドと同様，cGMPを細胞内情報伝達物質とするグアニル酸シクラーゼ結合受容体のリガンド）のアミノ酸配列も，本願優先日前良く知られており（Ａ２），これらはアミノ酸配列の４位と１２位及び７位と１５位に活性に必要とされる２個の分子内Ｓ−Ｓ結合を有していること，このため立体構造上２種類のアイソマーが存在するがそのうちの１種類のみが生物活性を有すること，グアニリンファミリーペプチド間でアミノ酸配列が一致している領域等も，本願優先日前，周知の技術的事項である。
　
　一般に，生理活性ペプチド又は蛋白質において，活性や特性を向上させようとすることは，本願優先日前自明の技術的課題であり，その課題を解決すべく，ペプチドや蛋白質の立体構造やアミノ酸保存領域等を考慮し，活性や特性の向上に資するようなアミノ酸配列の位置や置換するアミノ酸の種類等を選択し，天然型アミノ酸配列を基にアミノ酸を置換すること，この際常套手段である保存的アミノ酸置換（類似の生化学的特性を持ったアミノ酸との置換）をすることは，本願優先日前，周知技術であった。
　
　このような本願優先日当時の技術水準の下，引用発明において，上記自明の技術的課題より，活性や特性の向上した改変体を得ようとして，上記周知技術を適用し，上記アのヒトウログアニリンのアミノ酸配列を基にアミノ酸を置換して改変すること，この際，上記周知の技術的事項を踏まえ，４位と１２位及び７位と１５位における活性に必要な２個の分子内Ｓ−Ｓ結合がなされ生物活性を有するアイソマーの立体構造を保持するよう，グアニリンファミリーペプチド間のアミノ酸保存領域も考慮しつつ，置換する位置やアミノ酸の種類を選択し改変体とすること，その際常套手段である保存的アミノ酸置換をすることは，当業者が容易になし得たことである。
　そして，そのようにして容易に得られたヒトウログアニリン改変体のアミノ酸置換部位及びアミノ酸の種類を特定することに，格別の困難性はない。
　
（２）本願発明の効果について
　本願明細書において，本願発明に含まれる改変体として，実際に製造されその活性や特性が向上していることを客観的に確認できるものは，配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドのみである（【００５６】ないし【００６０】）。それ以外の本願発明に含まれる改変体につき，その活性や特性がどうなのか具体的な記載はなされていない。
　
　効果が確認できる配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドは，天然型アミノ酸配列の３位のAspをGluに置換した以外に改変されていないものである。そこで，天然型アミノ酸配列の３位のAspをGluに置換した上に，更に改変された改変体の活性を確認すべく，本願明細書の【表４】（【００５７】）を検討すると，ヒトウログアニリンの３位Gluであるペプチド「ＳＰ３０２」すなわち配列番号６のアミノ酸配列からなるペプチドのcGMPレベルは225pmol/ウエルで，天然型ウログアニリンペプチド「ＳＰ３０１」のcGMPレベル205pmol/ウエルと同程度又は若干高い程度である。この程度は，活性や特性を向上させようと天然型アミノ酸配列のアミノ酸を置換した改変体であれば有することが予測される範囲内であり，格別顕著な効果とまではいえない。また，ヒトウログアニリンの３位Gluであるペプチド「ＳＰ３０６」すなわち配列番号１４のアミノ酸配列からなるペプチドに至っては，cGMPレベルはゼロpmol/ウエルで活性がなくなってしまっている。
　このように，天然型アミノ酸配列の３位のAspをGluに置換した上で，さらに改変されている改変体については，配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドと同様，当業者が予測し得ない顕著な効果を奏するとは到底いえない。
　
　本願発明は，配列番号２０のアミノ酸配列からなるペプチドのみならず，天然型アミノ酸配列の３位のAspがGluに置換されている上に更に特定部位のアミノ酸が特定のアミノ酸で置換された改変体を包含するものであって，その結果として，ヒトウログアニリンとしての活性の有無・程度を問わず，すべてのものが包含されるから，格別顕著な効果を奏さない改変体も包含されていることは明らかであり，本願発明がその全体として顕著な効果を奏するということはできない。
　
　したがって，本願発明の効果は，本願明細書の記載を参酌しても，刊行物１，２及び周知事項から予測される範囲内のものであり，格別顕著なものではない。
　
６　まとめ
　
　したがって，本願発明は，その優先日前に頒布された刊行物１，２に記載された発明及び本願優先日前の周知事項に基いて当業者が容易に発明をすることができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　
第６　むすび
　
　以上のとおり，本願発明は特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができないものであるから，その余について言及するまでもなく，この出願は，拒絶すべきものである。
　
　よって，結論のとおり審決する。