(57)【要約】【課題】   ヒトを含む動物における、ストレスの結果として生じる免疫能、とりわけ腸管免疫系の機能低下を改善する作用を有する組成物を提供する。【解決手段】  本発明は、ストレス負荷によって低下した腸管免疫の機能を回復させ、あるいはストレス負荷による腸管免疫能の低下を抑制し、しかも必要以上に腸管免疫能を高めないことによって、常に免疫システムを正常レベルに保つ効果を有する腸管免疫増強剤または腸管免疫増強食品、及びそれを含有する家畜飼料等のストレス性疾患予防用及び／又は治療用組成物に関する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
酒粕を有効成分として含有する腸管免疫増強用組成物。
【請求項２】
請求項１記載の前記組成物を含有する腸管免疫増強用食品。
【請求項３】
請求項１記載の前記組成物を含有する腸管免疫増強用動物用飼料。
【請求項４】
請求項１記載の前記組成物を含有する腸管免疫増強医薬品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酒粕由来の組成物を有効成分とする、副作用のない安全性が高く、優れた腸管免疫増強効果を有する食品、動物用飼料及び医薬品を提供するものである。
【０００２】
本発明は、酒粕由来の組成物からなる腸管免疫増強剤または腸管免疫増強食品に関する。詳しくは、本発明は、ストレス負荷によって低下した腸管免疫の機能を回復させ、あるいはストレス負荷による腸管免疫能の低下を抑制し、しかも必要以上に腸管免疫能を高めないことによって、常に免疫システムを正常レベルに保つ効果を有する腸管免疫増強剤または腸管免疫増強食品、及びそれを含有する家畜飼料等のストレス性疾患予防用及び／又は治療用の腸管免疫増強作用を有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
ヒトの体において、口腔、鼻腔、呼吸器官、消化管などの体の内側で外界に接している部分は、粘膜と呼ばれるバリアーで覆われ、その粘膜は、外部より持ち込まれた異物を排除する機能を有する。特に、消化管にある腸管粘膜は、生体が外界と接する面としてはもっとも広く、多くのウイルス、細菌、寄生虫、病原性抗原や食物抗原と接する部位である。同時に、腸管粘膜は、摂取した食物とも接する器官でもある。そのため、腸管粘膜は、生命維持に必要な水分・栄養成分あるいは腸内常在細菌叢に対しては異常な反応をせずに、消化・吸収あるいは共生できる器官であると同時に、異物・微生物・抗原等の「悪玉」に対しては生体を守るため免疫反応を起こして排除する巧妙な制御を行う器官でもある。このように、腸管粘膜には、高度な免疫応答システムが存在するといわれている。
【０００４】
腸管で誘導される主要な免疫応答の１つが、免疫グロブリンの一種であるＩｇＡ抗体の産生である。ＩｇＡ抗体は、病原菌の腸管粘膜からの侵入阻止、毒素の中和、アレルゲンの侵入阻止などに働き、その分泌増加は、腸管免疫の賦活化を促す。腸管におけるＩｇＡ抗体産生で重要な役割を果たす組織の１つがパイエル板であり、とりわけ、パイエル板内の白血球であるＢ細胞、Ｔ細胞および抗原提示細胞が大きく関わっている。Ｔ細胞および抗原提示細胞は、Ｂ細胞を活性化する作用を有している。活性化したＢ細胞の増加によって、ＩｇＡの産生量が亢進することはすでに知られている。
【０００５】
腸管免疫力を向上させる食品成分として、乳酸菌、麹カビあるいは酵母などの食用微生物やそれらの細胞壁成分、またはシイタケなど担子菌類の多糖類、特にβ−グルカン類などが知られている。これらの中で、近年プロバイオティックス、即ち、腸管フローラを改善することによって有益な作用をもたらす生きた微生物として、その整腸作用や免疫賦活作用が提案されている（特許文献１）。その他、植物由来の乳酸菌による免疫増強作用に注目した食品素材も数多く提案されている（特許文献２〜５）。
【０００６】
酒粕は、清酒もろみを圧搾して清酒を分離した残りであって、食用、漬物用、粕取り焼酎の原料等として利用されている。近年、栄養面だけでなく、酒粕の機能性を解明する研究が盛んに行われており、酒粕に含まれる食物繊維が血清や肝臓の総コレステロール値の上昇を抑制することが記載されており（非特許文献１）、酒粕によってナチュラルキラー細胞の活性が増強されることが言及されている（非特許文献２）。また、マウスへの酒粕投与によるＤ-ガラクトサミン誘発肝障害を抑制することなどが報告されている（非特許文献３）。酒粕等の米原料をタンパク質分解酵素処理して得られるペプチド混合物が疲労軽減剤として有効であることが提案されている（特許文献６）。さらには、酒粕等の米原料醸造物が、発酵処理によってγ−アミノ酪酸の含有量を増加させることができるため、免疫調節剤や抗アレルギー剤として有用であることが提案されている（特許文献７）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】再表２００６−８７９１３号公報
【特許文献２】特開２００４−３５７５３５号公報
【特許文献３】特開２００５−３３３９１９号公報
【特許文献４】特開２００７−３０８４１９号公報
【特許文献５】特開２００８−２０１７０８号公報
【特許文献６】特開２００９−２２１１３５号公報
【特許文献７】特開２００９−２９２７８５号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】農芸化学会誌 ７１,１３７-１４３,ｌ９９７
【非特許文献２】醸造協会誌９８，７５０-７６５,２００３
【非特許文献３】醸造協会誌１０１，８９３-２９９,２００６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、パイエル板を活性化し、ＩｇＡ抗体産生向上による腸管免疫力増強作用を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
項１．酒粕を有効成分として含有する腸管免疫増強用組成物 。
項２．項１記載の組成物を含有する腸管免疫増強用食品。
項３．項１記載の組成物を含有する腸管免疫増強用動物用飼料。
項４．項１記載の組成物を含有する腸管免疫増強医薬品。
【発明の効果】
【００１１】
日本酒は、原料米を蒸し、これに水、麹菌と酵母菌を加え、これらの微生物による原料米の発酵によって造られる。すなわち、原料米の澱粉質を麹菌の出す酵素で糖化し、この糖の酵母菌によるアルコール発酵によって製造する。この原料米と微生物が一体になったモロミを濾過した液が日本酒になり、そこで濾過物として副生されるのが酒粕である。したがって、上記酒粕は、麹菌による糖化作用によって生成するブドウ糖等の甘味成分、酵母菌によるアルコール発酵で生成するアルコール分、原料米由来あるいは麹菌や酵母菌由来のタンパク質、タンパク分解酵素の作用によって生成するペプチドもしくはアミノ酸、その他、ビタミン類、多糖類、ポリペプチドなどを含有し、更に麹菌、酵母菌の残渣物を含む組成物である。日本酒の醸造方法は、公知の方法で、吟醸酒、純米酒、本醸造酒等を醸造することができ、それらの日本酒の醸造後に得られる酒粕であれば、腸管免疫増強組成物とすることができる。また、本発明に用いられる酒粕は、事実上の日本酒の醸造にともなって得られる酒粕以外にも、日本酒の醸造とその原理を同じくする処理を上記原料に施すことによっても得ることができる。
【００１２】
本発明において用いられる酒粕処理物は、そのまま用いても良いし、凍結乾燥やスプレードライなどの処理を行って乾燥品として用いても良い。本発明の腸管免疫増強組成物において、上記酒粕を、その合算総重量の固形分換算で１質量％以上含むことが好ましく、５質量％以上含むことがより好ましい。また、本発明にかかる腸管免疫増強組成物は、前記酒粕処理物そのものからなるものでもよいし、当該処理物を有効成分とし、医・薬学上または食品衛生・栄養学上許容される他の成分を含んでなるものであってもよい。かかる成分の種類及び配合量は本発明の効果を損なわないことを限度として適宜設定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の実施例２の結果である。（Ａ）はパイエル板面積、（Ｂ）はパイエル板数を示す。
【図２】本発明の実施例２の結果である血中インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）濃度を示す。
【図３】本発明の実施例２の結果である血中インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）濃度を示す。
【図４】本発明の実施例２の結果であるＩＦＮ−γ対ＩＬ−１０比を示す。
【図５】本発明の実施例２の結果であるストレスによる胃潰瘍面積を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下に、実施例によって本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
【００１５】
酒粕の凍結乾燥物を表１記載のとおりの割合（質量％）で、実験区（第２群および第３群） には 酒粕凍結乾燥物を含有せしめた飼料を調製した。４適齢ＳＤｊｃｌ系雄性ラットを１群７匹使用して対照区の飼料で一週間飼育し、さらに、それぞれの飼料で２週間飼育した。その後、２０時間絶食状態とし、２％アンモニアを０．５ｍｌ／体重１００ｇ直接経口投与した。投与３０分後開腹し胃を摘出し、摘出した胃は生理食塩水にて洗浄後、２％ホルマリン１．５ｍｌで膨満させ２％ホルマリン中にて１時間浸潤固定した。そして、胃に発生している潰瘍を測定し、潰瘍指数を算出して、潰瘍生成抑制効果を比較した。
【００１６】
【表１】
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【００１７】
その結果は表２に記載のとおり、ラット７匹の平均値上標準誤差として示すと、第１群(対照区)では潰瘍面積(ｍｍ２)が１９５．７土６１．１であり、第２群(酒粕Ａ)では３４．７土２０．３、第３群(酒粕Ｂ) では６１．９土１４．６となり、酒粕凍結乾燥物を含む飼料を摂取させた群において、５質量％でありながら、潰瘍生成が抑制されていることが判った。
【００１８】
【表２】
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【実施例２】
【００１９】
６週齢Ｂａｌｂ／ｃ系雄性マウス１５匹に、酒粕（白鶴酒造）の凍結乾燥物を５％（質量％）混餌した飼料を２週間摂取させた。
上記の全てのマウスに、大腸菌由来リポポリサッカライド（ＬＰＳ）(シグマ社製) を生理食塩水５ｍＬで融解し、それを、用時、さらに滅菌生理食塩水で１００倍希釈し(１００μｇ/ｍＬ)、０．１ｍＬを腹腔内に投与(１０μｇ／匹)した。
ＬＰＳ腹腔内投与の２時間、４時間および２４時間後に各５匹のマウスを二酸化炭素麻酔下で下大静脈より採血し、室温に１時間放置後、１２０００ｒｐｍ、５分間遠心して得られた上澄みを血清として−８０℃に保存した。その後剖検し、各臓器・組織を保存した。
上記の各保存血清サンプルについて、ＩＮＦ−γ、ＩＬ−１０の各濃度を測定した。各臓器・組織については、パイエル板数及びパイエル板面積、肝臓重量を測定した。
【００２０】
以下、測定結果は図１から図５に示す。
図１は、実施例２の結果で、（Ａ）は、パイエル板面積、（Ｂ）はパイエル板数を示す。
リンパ小節の集合体であるパイエル板の数とその面積が、酒粕投与により両者とも共に有意に低下している。このことは、図２、図４および図５から推測されることであるが、Ｔｈ１細胞とＴｈ２細胞の分化のレベルが異なり、同時にＴｈ２細胞のアポトーシスが進行していると考えられる。
図２は、実施例２の結果である血中インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）濃度を示す。
Ｔｈ１細胞支配のＩＦＮ−γが酒粕の投与により有意に発現することにより、ＬＰＳ耐性が高くなることが示唆される。
図３は、実施例２の結果である血中インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）濃度を示す。図２でのＩＦＮ−γ発現レベルに比べＴｈ２支配のＩＬ−１０の発現は、酒粕投与によりそれほど高くはならない。
図４は、実施例２の結果であるＩＦＮ−γ対ＩＬ−１０比を示す。
Ｔｈ１細胞支配のＩＦＮ−γとＴｈ２支配のＩＬ−１０発現量比を見たところ、酒粕投与により、無投与（対照区）より有意に高く、明らかに免疫賦活が認められる。
図５は、実施例２の結果であるストレスによる胃潰瘍面積を示したものである。
無投与（対照区）に比べ、酒粕投与により胃潰瘍発症が著しく抑制されることが明らかとなり、ストレス緩和が認められることを示している。
【００２１】
本発明者らは、上記鋭意研究の結果、酒粕由来の組成物が、腸管免疫能を増強する効果を有することを見出し、本発明の完成に到った。酒粕由来の組成物を摂取することにより、免疫力が脆弱な幼児・小児や、高齢者あるいは病後の免疫力が低下している人に対して腸管免疫力を増強し、病原微生物に対する抵抗力を高めることが可能になる。本発明の腸管免疫力増強剤は、これまで長く広く食されてきた天然物由来の組成物であることから安全性に優れるものであり、有用性はきわめて高い。本発明は、パイエル板を活性化し、ＩｇＡ抗体産生向上による腸管免疫力増強作用を有する、安全な酒粕由来の組成物を有効成分として含有する腸管免疫力増強剤を提供するものである。
【００２２】
本発明によると、前記課題を解決でき、優れた腸管免疫増強効果と安全性を有する食品、動物飼料または医薬品を提供できる。本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究の結果、酒粕をそのまま、若しくは酒粕の乾燥処理物が、腸管免疫増強効果を有することを見出し、本発明を完成した。  
【００２３】
本発明の腸管免疫増強用組成物における、酒粕処理物の使用量は、配合割合は、使用目的、製品形態、使用者の体重、年齢、状態などによって適宣調整することができ、例えば、ドリンク剤の場合、組成物全体に対して酒粕処理物の乾燥重量％は０．１〜９０％程度、好ましくは１０〜５０％程度含有して使用することができる。また、腸管免疫増強用組成物を有効成分とする各種用途に適用する際において、慣用の種々の有機あるいは無機担体物質を併用することができ、例えば、固形形態の場合においては賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤を用いることができ、また、液状形態の場合においては溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、乳化剤、非水性賦形剤、保存剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などを用いることができる。また、必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの添加物を用いることもできる。
【００２４】
賦形剤の例としては、乳糖、白糖、Ｄ-マンニトール、Ｄ-ソルビトール、デンプン、α化デンプン、デキストリン、結晶セルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アラビアゴム、プルラン、軽質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、リン酸水素カルシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムなどが挙げられる。滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカなどが挙げられる。結合剤の例としては、α化デンプン、ショ糖、ゼラチン、アラビアゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、結晶セルロース、白糖、D-マンニトール、トレハロース、デキストリン、プルラン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。崩壊剤の例としては、乳糖、白糖、デンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、軽質無水ケイ酸、低置換度ヒドロキシプロピルセルロースなどが挙げられる。
【００２５】
懸濁化剤の例としては、ソルビトール、シロップ、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン水添加食用脂などが挙げられる。乳化剤の例としては、レシチン、ソルビタンモノオレエートまたはアラビアゴムなどが挙げられる。非水性賦形剤の例としては、アーモンド油、分画ココヤシ油のような油性エステル類、もしくはグリセリンのような多価アルコールなどが挙げられる。
【００２６】
保存剤の例としては、p-ヒドロキシ安息香酸メチルまたはp-ヒドロキシ安息香酸プロピルまたはソルビン酸などが挙げられる。甘味剤の例としては、サッカリンナトリウム、グリチルリチン酸二カリウム、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、ステビアなどが挙げられる。その他、必要に応じて香料などを添加しでもよい。
【００２７】
なお、前記成分や添加剤の含有量は、特に限定されないが、通常は、それぞれ組成物中０．０００１〜５０質量％の範囲とすることが好ましい。
【産業上の利用可能性】
【００２８】
腸管免疫増強組成物として、例えば、医薬、医薬部外品、健康食品、動物用飼料、動物用医薬品などに好適に利用することができる。
【００２９】
医薬品、医薬部外品、動物用医薬品としては、例えば、錠剤（舌下錠、口腔内崩壊錠を含む）、カプセル剤（ソフトカプセル、マイクロカプセルを含む）、顆粒剤、散剤、トローチ剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤などの経口剤、注射剤（例えば、皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤、点滴剤など）、外用剤（例えば、経皮製剤、軟膏剤など）、坐剤（例えば、直腸坐剤、膣座剤など）、ペレット、経鼻剤、経肺剤（吸入剤）、点眼剤などの非経口剤が挙げられる。健康食品としては、例えば、液体、半固形、固形の製品、具体的にはドリンク剤、ペースト剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの他、クッキー、せんべい、ゼリーなどの菓子類などの形態が挙げられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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