(57)【要約】【課題】優れたリパーゼ活性阻害作用を有し、肥満の解消・抑制・予防に有用なリパーゼ活性阻害用飲食品及び阻害剤の提供。【解決手段】マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）、ナンバンアカアズキ（Adenanthera pavonina）、コブミカン（Citrus hystrix）、ギンコウボク（Michelia alba）、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）及びローレルカズラ（Thunbergia laurifolia）から選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を含有するリパーゼ活性阻害用飲食品；及び前記植物の抽出物を有効成分とするリパーゼ活性阻害剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）、ナンバンアカアズキ（Adenanthera pavonina）、コブミカン（Citrus hystrix）、ギンコウボク（Michelia alba）、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）及びローレルカズラ（Thunbergia laurifolia）から選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を含有することを特徴とするリパーゼ活性阻害用飲食品。
【請求項２】
前記植物の抽出物が、植物の葉又は樹皮を極性溶媒により抽出して得られる抽出物である請求項１記載のリパーゼ活性阻害用飲食品。
【請求項３】
マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の樹皮を極性溶媒により抽出して得られる抽出物を含有することを特徴とする血中トリグリセリド低下用飲食品。
【請求項４】
マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）、ナンバンアカアズキ（Adenanthera pavonina）、コブミカン（Citrus hystrix）、ギンコウボク（Michelia alba）、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）及びローレルカズラ（Thunbergia laurifolia）から選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とすることを特徴とするリパーゼ活性阻害剤。
【請求項５】
前記植物の抽出物が、植物の葉又は樹皮を極性溶媒により抽出して得られる抽出物である請求項４記載のリパーゼ活性阻害剤。
【請求項６】
極性溶媒がエタノールである請求項５記載のリパーゼ活性阻害剤。
【請求項７】
マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の樹皮を極性溶媒により抽出して得られる抽出物を有効成分とすることを特徴とする血中トリグリセリド低下剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内で脂質の消化吸収を担うリパーゼの活性を有効に阻害し、肥満の解消・抑制・予防に有用なリパーゼ活性阻害用飲食品及び阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、我が国では食事の欧米化や運動不足による単純性肥満症が増加しつつある。肥満は、高血圧、糖尿病及び高脂血症などの各種生活習慣病の発症や、動脈硬化症による様々な疾病の重大な要因となっている。
食事由来の脂質は、脂質のほとんどを占めるトリアシルグリセロールが膵液中のリパーゼによりモノアシルグリセロールと遊離脂肪酸とに分解されて小腸に吸収される。そこで、このリパーゼ活性を阻害することにより、食事由来の脂質の吸収を抑制し、肥満を解消・抑制・予防することができると考えられている。
【０００３】
また、トリアシルグリセロールは、血中において大部分がリポタンパク質の構成成分として全身に運ばれ、主に筋肉や脂肪組織で生合成されて血管内壁に存在するリポタンパク質リパーゼの作用で加水分解される。すなわち、リポタンパク質リパーゼは血中のトリアシルグリセロールの分解に極めて重要であり、本酵素を活性化することは血液の清澄化に繋がると考えられている。
従って、リパーゼ活性を阻害すると共に、血中のリポタンパク質代謝を促進できれば、脂質の吸収を抑え、かつ血液中の脂質の代謝も高めることができるため、肥満症だけでなく、高脂血症も改善できると期待される。
【０００４】
このような観点から、リパーゼ活性阻害作用を有する天然由来成分の検索が精力的に行われている。これまでに、バナバ茶、ヤーコン茶、ギムネマ、ローヤルゼリー、にがうり等がリパーゼ活性阻害作用を有するものとして報告されている（特許文献１、２参照）。また、リポタンパク質リパーゼ活性を高める成分としては、デキストラン硫酸等が報告されている。
しかしながら、未だ十分な肥満の解消・抑制・予防効果は得られていないのが実状であった。
【特許文献１】特開２００１−２９９２７２号公報
【特許文献２】特開２００１−２２６２７４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、斯かる実状に鑑みてなされたもので、優れたリパーゼ活性阻害作用を有し、肥満の解消・抑制・予防に有用なリパーゼ活性阻害用飲食品及び阻害剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、上記課題を解決すべく、天然物中にリパーゼ活性阻害作用を有する物質を鋭意探索したところ、特定の植物から抽出される抽出物が優れたリパーゼ活性阻害作用を有することを見出した。そして、更に検討したところ、当該特定の植物のうち、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の樹皮から抽出される抽出物が、リパーゼ活性を阻害すると共に、リポタンパク質リパーゼ活性を高め、血中のリポタンパク質代謝を促進することを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）、ナンバンアカアズキ（Adenanthera pavonina）、コブミカン（Citrus hystrix）、ギンコウボク（Michelia alba）、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）及びローレルカズラ（Thunbergia laurifolia）から選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を含有することを特徴とするリパーゼ活性阻害用飲食品により上記課題を解決したものである。
【０００８】
また、本発明は、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の樹皮を極性溶媒により抽出して得られる抽出物を含有することを特徴とする血中トリグリセリド低下用飲食品により上記課題を解決したものである。
【０００９】
また、本発明は、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）、ナンバンアカアズキ（Adenanthera pavonina）、コブミカン（Citrus hystrix）、ギンコウボク（Michelia alba）、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）及びローレルカズラ（Thunbergia laurifolia）から選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とすることを特徴とするリパーゼ活性阻害剤により上記課題を解決したものである。
【００１０】
さらに、本発明は、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の樹皮を極性溶媒により抽出して得られる抽出物を有効成分とすることを特徴とする血中トリグリセリド低下剤により上記課題を解決したものである。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のリパーゼ活性阻害用飲食品及びリパーゼ活性阻害剤によれば、脂質の体内への吸収を抑制することができ、従ってまた、肥満症やそれから派生する各種生活習慣病等の発症を阻止することができる。また、本発明に用いられる特定の植物は、天然由来であるため、安全性が高く、飲食品中に配合して継続的な摂取もできる。特に、特定の植物のうちマドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の樹皮由来の抽出物は、リパーゼ活性を阻害すると共に、リポタンパク質リパーゼを活性化し、リポタンパク質代謝を促進するため、本発明によれば、さらに血中のトリグリセリドを低下させる飲食品及び医薬品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明で用いられる植物は、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）、ナンバンアカアズキ（Adenanthera pavonina）、コブミカン（Citrus hystrix）、ギンコウボク（Michelia alba）、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）、ローレルカズラ（Thunbergia laurifolia）である。これらの植物は、主としてタイ王国に生息する熱帯植物の一種である。
本発明の抽出物は、上記植物をそのまま、あるいは必要に応じて乾燥、切断、粉砕、粉末化等の前処理を行った後、極性溶媒で抽出したものである。抽出に際し、上記植物は何れの部位も使用することができるが、その植物の樹皮又は葉を用いるのが好ましい。特に
マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）は樹皮を用いるのが好ましく、その他の植物は葉を用いるのが好ましい。これらの植物は１種を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができる。
【００１３】
本発明において、抽出処理に用いられる極性溶媒としては、水系溶媒又は親水性有機溶媒が挙げられる。ここに水系溶媒としては、水、熱水、生理食塩水等が挙げられる。また、親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の低級アルコール；酢酸エチル等のエステル；エチレングリコール、ブチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレンアルコール、グリセリン等の多価アルコール類；ジエチルエーテル、石油エーテル等のエーテル類；アセトン、酢酸等を挙げることができる。これらのうち、低級アルコールが好ましく、特にエタノールが好ましい。これらの溶媒は１種を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができる。
【００１４】
抽出方法としては、一般的な方法を使用することができ、例えば、抽出溶媒に上記植物を浸漬する方法や、更に加熱還流する方法等を挙げることができる。得られた抽出物は、必要に応じて濾過又は遠心分離によって固形物を除いた後、そのまま又は当該抽出物を濃縮若しくは乾燥して用いられる。
また、得られた抽出物は、更に精製して用いることができる。精製は、一般的な方法を使用することができ、例えば、活性炭、シリカゲル、ポリマー系担体等を用いた吸脱着、カラムクロマトグラフィー、液−液抽出、分別沈殿などの方法を挙げることができる。
【００１５】
リパーゼ活性阻害剤又は血中トリグリセリド低下剤とするには、適宜、薬学的に許容される担体、例えば賦形剤、滑沢剤、希釈剤、結合剤、崩壊剤、乳化剤、安定剤、嬌味嬌臭剤等を使用して錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等の経口投与製剤；注射剤、坐剤等の非経口投与製剤とするのが好ましい。
本発明の抽出物の有効投与量は、５００ｍｇ〜４，０００ｍｇ／日（成人）とするのが好ましい。
【００１６】
本発明の抽出物は、飲食品中に配合してもよく、特に健康増進を図る健康食品とするのが好ましい。飲食品に配合すれば、容易に摂取でき、肥満の解消・抑制・予防のために、また血中のトリグリセリドを低下させるために利用することができる。
本発明において、食品の形態は特に制限されず、ドリンク剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、ペースト剤等の形態が挙げられる。また、かまぼこ、ちくわ等の練り製品；パン等の発酵食品；粉乳、発酵乳等の乳製品；バター等の油脂製品；水、果汁、牛乳、清涼飲料、スープ等の飲料；菓子等の食品に添加して使用することもできる。このような食品には、保存料、着色料、甘味料、酸化防止剤、増粘安定剤、乳化剤、調味料、防腐剤等の食品添加物、天然物等を用いることができる。
本発明の抽出物は、１〜９５質量％、特に５〜９０質量％の割合で飲食品に含有させることが好ましい。
【実施例】
【００１７】
以下、本発明について実施例をあげて具体的に説明するが、本発明はこれらによって何等限定されるものではない。
【００１８】
実施例１〜６
表１記載の植物の各葉の乾燥粉砕物各１０ｇにエタノール７０ｍＬをそれぞれ加え、２時間還流後、ろ過して抽出物を得た。次いで、得られた残渣にエタノール６０ｍＬをそれぞれ加え、抽出する操作を２回繰り返した。１回目の操作で得られた抽出物と２回目の操作で得られた抽出物をそれぞれ合わせて、再度ろ過した後、溶媒を除去して抽出物各１〜１．８ｇを得た。
【００１９】
実施例７
マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の樹皮の乾燥粉砕物１０ｇから、実施例１と同様の操作で抽出物０．８ｇを得た。
【００２０】
試験例１
実施例１〜７で得た各抽出物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解したものを用いてリパーゼ活性阻害作用確認試験を行った。
リパーゼ活性阻害作用の測定は、ブタ膵リパーゼ（（株）ナカライテクス社製）を用い、これを１．５Ｕ／３０ｍＭ Ｔｒｉｓ緩衝液で溶解調製して各試験に供した。基質はイントラリポス（１．２％卵黄レシチン、２．５％グリセロール、１０％大豆油を含有；（株）三菱ウェルファーマ製）を用いた。
基質２５μＬ、３０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ８．５）１５０μＬ、３００ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ８．５）５０μＬ、１％コール酸５０μＬ、１ｍＭ ＣａＣｌ2２５μＬを含む混合溶液に、上記実施例１〜７で得られた植物抽出物２μＬをそれぞれ添加し、３７℃で３０分間予熱した。次いで、酵素溶液２００μＬを加え、更に３７℃で３０分間反応させた後、銅試薬（０．４５Ｍトリエタノールアミン、０．０５Ｍ酢酸、３．４％  硫酸銅五水和物、２０％塩化ナトリウム）１ｍＬを添加し、反応を停止させた。これに、クロロホルム：ｎ−ヘプタン（４：６）３ｍＬを加え遠心分離（３０００ｒｐｍ、７分間）した後、上清に発色剤（０．１％バソクプロイン、０．０５％ブチルヒドロキシアニソ−ル／クロロホルム：ｎ−ヘプタン（４：６））２ｍＬを加えて、それぞれのサンプルの吸光度を波長４８０ｎｍで測定し、生成した遊離脂肪酸を定量した。なお、ナンバンアカアズキ（Adenanthera pavonina）、コブミカン（Citrus hystrix）、ギンコウボク（Michelia alba）、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）及びローレルカズラ（Thunbergia laurifolia）の抽出物は、最終濃度として２５μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬの濃度で添加し、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）の抽出物は、最終濃度として１０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬの濃度で添加した。コントロールには、植物抽出物の代わりにＤＭＳＯを添加した。ブランクには酵素の代わりに３０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液を添加した。
結果を表１及び図１に示す。リパーゼ活性阻害値は、コントロールにおける遊離脂肪酸量を１００％として各サンプルの遊離脂肪酸量を相対値で示した。
【００２１】
【表１】
2007246429.tif 000002
【００２２】
表１及び図１から明らかなように、すべての植物抽出物は、濃度依存的に膵リパーゼ活性を阻害した。特に、ブワスワン（Gustavia gracillima）、チエルマイ（Phyllanthus acidus）、マドルライラック（Glirichidia sepium(Jacq.)Walp）においては、終濃度１００μｇ／ｍＬ共存下、コントロールの約４０％以下まで膵リパーゼ活性を抑制し、著しい抑制効果を示した。
【００２３】
試験例２
（１）リポタンパク質リパーゼの調製
Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（６〜７週齢）から副睾丸脂肪組織を摘出し、３０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ８．５）１ｍＬ／１００ｇ脂肪組織を加え、氷中、ヒスコトロンで破砕後、遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ、４℃）して脂肪層を除去後、上清をリポタンパク質リパーゼの粗酵素標品とした。
（２）リポタンパク質リパーゼ活性の測定
リポタンパク質リパーゼの測定は、基質にイントラリポス（１．２％卵黄レシチン、２．５％グリセロール、１０％大豆油を含有；（株）三菱ウェルファーマ製）を用いた。
基質２５μＬと同容量の絶食したラットの非働化血清（６０℃、１０分間加熱処理）を混和し、３７℃で３０分間温置し、活性化基質とした。この活性化基質に２％牛血清アルブミンを含む３０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液１５０μＬを加え、更に上記実施例７で得られた抽出物２μＬを加えた後、粗酵素液２００μＬを添加して３７℃で３０分間反応させた。生成した遊離脂肪酸をＤｕｎｃｏｍｂｅの方法を用い、比色法で定量した。植物抽出物は、最終濃度として１００μｇ／ｍＬの濃度で添加した。コントロールには、植物抽出物の代わりにＤＭＳＯを添加した。なお、リポタンパク質リパーゼ（ＬＰＬ）活性が１Ｍ Ｎａｃｌでほぼ完全に阻害されることから、ＬＰＬ以外のリパーゼ活性を補正した。
その結果を表２に示す。
【００２４】
【表２】
2007246429.tif 000003
【００２５】
表２から明らかなように、本発明の植物抽出物には、高いリポタンパク質リパーゼ活性が認められた。従って、当該抽出物を投与することにより、血中のトリグリセリド濃度を低下させることができ、上記膵リパーゼに対する強い抑制作用も考え合わせると、肥満症と共に、高脂血症の改善効果も期待できる。
【００２６】
［飲食品の製造］
製造例１  サプリメント（錠剤タイプ）
下記の処方で各種成分を混合・打錠して、３種類のサプリメント（１日当たりの重量；４粒を１日３回食する）を得た。なお、エキス（１）として、上記実施例２、５及び７と同様の方法により得た抽出物をそれぞれ用いた。
【００２７】
エキス（１）            ２，４００ｍｇ
ビタミンＢ２                    ３ｍｇ
ビタミンＢ６                    ３ｍｇ
賦形剤                  １，１９４ｍｇ
合計                    ３，６００ｍｇ
【００２８】
製造例２  飲料
下記の処方で各種成分を混合して、３種類の飲料を得た。なお、エキス（１）として、上記実施例２、５及び７と同様の方法により得た抽出物をそれぞれ用いた。
【００２９】
エキス（１）            １，０００ｍｇ
オリゴ糖                      ８０ｍｇ
アスパルテーム                １０ｍｇ
果糖                    １，７００ｍｇ
ビタミンＣ                    ２０ｍｇ
クエン酸                      適量（ｐＨ３．０〜３．５に調整）
精製水                        適量    
合計                        １００ｍＬ
【００３０】
製造例３  スープ
市販のスープ類に、実施例１〜７と同様にして得た抽出物をそれぞれ５００〜１，５００ｍｇ加え、７種類のスープを得た。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】図１は、植物抽出物のリパーゼ活性阻害作用測定の結果を示した図である。
【図１】
2007246429.tif 000004