(57)【要約】【課題】  ネギ類植物、特に青ネギから得られる、調味料や健康食品の原料として、さらには各種疾病の予防又は治療用の医薬として使用される可能性の高い、薬効性および／または加味性を有する組成物を提供する。【解決手段】  ネギ類植物、特に、青ネギあるいは廃棄処分対象のネギに対して高濃度酢酸浸漬処理を施し、かつ、希酢酸可溶性の成分を分取することにより、コレステロールの低下機能、脂肪肝の予防と治癒機能、赤血球変形改善機能などの機能を有する薬効性および／または加味性組成物を得る。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ネギ類植物からの抽出物であって、希酢酸可溶性であること
を特徴とする薬効性及び／又は加味性を有する組成物。
【請求項２】
高濃度酢酸による浸漬処理の施されたネギ類植物からの抽出物であって、希酢酸可溶性であること
を特徴とする薬効性及び／又は加味性を有する組成物。
【請求項３】
前記ネギ類植物が、
ネギであることを特徴とする請求項１又は２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物。
【請求項４】
前記希酢酸は、
その濃度が４〜５質量％であること
を特徴とする請求項１又は２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物。
【請求項５】
前記高濃度酢酸は、
その濃度が４０質量％以上であること
を特徴とする請求項２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物。
【請求項６】
前記抽出物は、
当該抽出物中に含まれる蛋白質の分子量を、蛋白質分解酵素を用いる加水分解により低分子化したものであること
を特徴とする請求項１又は２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物。
【請求項７】
細断したネギを高濃度酢酸水溶液に浸漬したのち、水を加えて希釈し、不溶解分を除くことにより得られた希酢酸水溶液中に存在する有効成分を、分離取得すること
を特徴とする薬効性及び／又は加味性を有する組成物の製造方法。
【請求項８】
前記有効成分は、
蛋白質分解酵素を添加して加水分解し、有効成分中の蛋白質を低分子量化すること
を特徴とする請求項７に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物の製造方法。
【請求項９】
前記蛋白質分解酵素は、
デナプシンであること
を特徴とする請求項８に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、ネギ類植物からの抽出によって得られる薬効性や加味性を有する組成物に関するもので、この組成物は健康食品や調味料の原料として、さらには各種疾病の予防又は治療用の医薬として使用される可能性の高いもので、それらの健康食品調製、調味料調製、さらには医薬調製技術に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ネギ類植物、特にネギは、耐寒性が強く、暑さや乾燥にも強い上、特有な匂いと辛味を有し、ビタミンＡ、Ｂ、Ｃなどを有するため、日本料理には欠かせない重要な野菜で、北海道から九州まで周年にわたり栽培されているもので、それぞれ特徴のある品種が開発されている。
【０００３】
このネギは、中国では、古くから漢方薬の原料として、芽、実、葉、根、芯などそれぞれに薬効を認め、例えば、高熱、骨節の疼痛、顔の浮腫みなどには葉を煎じて内服する、金属による創傷や虫蛇の咬傷には煎汁で洗浄する、足の浮腫には葉と茎を煮て磨り潰したものを塗布するなどの処置が取られ利用されてきている。
【０００４】
したがって、ネギが含有するそれら有効成分を、分離取得する試みは古くから行われている。最近でも、例えば、特開２００２−１８６４４９号公報（特許文献１）には、アルコール溶媒を用いて抽出したエキスは、フレッシュで自然な香味を保ちつつ、強い呈味性を示すもので、苦味を伴なうロースト感などは有せず、明るい色調を持つため、カレーやビーフシチュー等の濃い色調の食品のみならず、ホワイトソース等にも使用できる、極めて有用性の高い香味素材であることが示されている。
【０００５】
また、特開２００５−２６１３９６号公報（特許文献２）には、食品、とりわけ蛋白質を含む、例えば粉乳、乾燥卵、及び食肉の褐変を引き起こす、メイラード反応を阻害するモノスルフィド化合物が、水や有機溶剤で抽出して得られるネギ類植物の精油画分から取り出されることができ、安全性が高く、食品や医薬品など、ヒトに適用される製品の褐変防止のための処理剤として好適であることが示されている。
【０００６】
一方、本出願人は、先に、特許第３１０８０５９号公報（特許文献３）において、植物を原料とする、生理活性ペプチド含有物の製造法として、酢酸水溶液によるインキュベート処理と、この酢酸処理物をプロテアーゼ処理し、蛋白質を低分子化してペプチド含有物を得る方法を提案した。
【０００７】
この特許文献３においては、生理活性ペプチド含有物の製造方法により、精白ハトムギ粉末から、生理活性ペプチド含有物が得られ、この組成物は、アンジオテンシンＩ変換酵素（ＡＣＥ）阻害作用、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−α産生調節作用、活性酸素産生抑制作用、抗腫瘍作用等優れた生理作用を有する上に、天然物由来の組成物で、非常に安全性の高いものであることを開示した。
【０００８】
また、本出願人は、蛋白質を低分子化してペプチド含有物を得る方法は、各種の植物への適用が可能で、適用されるものに関して、以下のように開示した。
【０００９】
すなわち、植物種子、樹皮、実部、茎部、根部、葉部等植物全般、その各部又はその１部、もしくはこれらの処理物、これらから得られた食品又はその処理物を使用する。
植物種子としては、ハトムギ、米、大麦、小麦、カラス麦、裸麦、そば、大豆、エンドウ、ソラ豆、落花生、インゲン、トウモロコシ、コウリャン、ゴマ、アワ、ヒエ、ヒマワリ、麻の実、野菜の種子その他が挙げられる。
その処理物としては、植物種子を脱穀したもの、それを粉砕したもの、糠類、ヨクイニン、そのヘキサン等による脱脂物、その水抽出残渣、そのアルコール等有機溶媒抽出物、その他植物種子の各種処理物が挙げられる。
また、その処理物には、酒粕、オカラ、焼酎粕、醤油製造粕、澱粉製造粕、その他植物種子又はその処理物を加工、処理して飲食品を製造する際に副生するものも包含する。
【特許文献１】特開２００２−１８６４４９号公報（特許請求の範囲、発明の効果）
【特許文献２】特開２００５−２６１３９６号公報（特許請求の範囲、発明の効果）
【特許文献３】特許第３１０８０５９号公報（特許請求の範囲）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
発明者等は、先の提案の蛋白質を低分子化してペプチド含有物を得る方法の適用拡大について検討を行い、上記した漢方薬としても用いられるネギ類、特に、規格外として廃棄され、あるいは使用されずに廃棄されるネギの葉鞘などから有効成分が抽出されないか検討し、ネギを従来以上に有効利用できる方法を提案せんとするものである。
【００１１】
上記課題を達成すべく、発明者等は鋭意検討を行い、ネギ類を高濃度酢酸で処理し、水不溶性の蛋白質や組織構成成分を可溶化し、そのなかで希酢酸に可溶なものとして得られる組成物が、各種の生理活性、例えば、ＴＮＦ−αの産生、肝機能改善、善玉コレステロールの増加、酸化ストレスによる膵島の破壊予防などに優れ、また加味性にも優れるものであること、さらにはその組成物をプロテアーゼ処理し、含有する蛋白質を低分子化した組成物は、さらに加味性に優れていることを見出し、この発明を完成したのである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
すなわち、この発明の請求項１に記載の発明は、
ネギ類植物からの抽出物であって、希酢酸可溶性であること
を特徴とする薬効性及び／又は加味性を有する組成物である。
【００１３】
また、この発明の請求項２に記載の発明は、
高濃度酢酸による浸漬処理の施されたネギ類植物からの抽出物であって、希酢酸可溶性であること
を特徴とする薬効性及び／又は加味性を有する組成物である。
【００１４】
また、この発明の請求項３に記載の発明は、
請求項１又は２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物において、
前記ネギ類植物が、
ネギであることを特徴とするものである。
【００１５】
また、この発明の請求項４に記載の発明は、
請求項１又は２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物において、
前記希酢酸は、
その濃度が４〜５質量％であること
を特徴とするものである。
【００１６】
また、この発明の請求項５に記載の発明は、
請求項２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物において、
前記高濃度酢酸は、
その濃度が４０質量％以上であること
を特徴とするものである。
【００１７】
また、この発明の請求項６に記載の発明は、
請求項１又は２に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物において、
前記抽出物は、
当該抽出物中に含まれる蛋白質の分子量を、蛋白質分解酵素を用いる加水分解により低分子化したものであること
を特徴とするものである。
【００１８】
また、この発明の請求項７に記載の発明は、
細断したネギを高濃度酢酸水溶液に浸漬したのち、水を加えて希釈し、不溶解分を除くことにより得られた希酢酸水溶液中に存在する有効成分を、分離取得すること
を特徴とする薬効性及び／又は加味性を有する組成物の製造方法である。
【００１９】
また、この発明の請求項８に記載の発明は、
請求項７に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物の製造方法において、
前記有効成分は、
蛋白質分解酵素を添加して加水分解し、有効成分中の蛋白質を低分子量化すること
を特徴とするものである。
【００２０】
また、この発明の請求項９に記載の発明は、
請求項８に記載の薬効性及び／又は加味性を有する組成物の製造方法において、
前記蛋白質分解酵素は、
デナプシンであること
を特徴とするものである。
【発明の効果】
【００２１】
この発明の薬効性及び／又は加味性を有する組成物は、酢酸で抽出されているので、従来の溶媒、通常ノルマルヘキサンなどを用いたものに比べて、糖類が多く抽出され、加味性に優れるとともに残存有機溶媒による安全性への危惧がないうえに、以下のような特性を有するものである。
１）ネギ酵素（アリイナーゼ・酸化酵素）が不活性化され、旨み成分（アリイン）の安定化、味の変化が防止されている。
２）水不溶性成分が可溶化され多く抽出される。
３）高温処理による熱変性がない。
４）水溶性物質と脂溶性物質が共存する。
５）蛋白質の変性・可溶化によるプロテアーゼ消化性が増大する。
６）殺菌・酸化抑制効果を有する。
７）大量の長期貯蔵が可能である。
８）調製コストが低いものである。
したがって、この発明の組成物は、業務用調味料として、さらには各種の家庭用調味料の成分として幅広く用いられる可能性を有するものである。
【００２２】
さらに、この発明の薬効性及び／又は加味性を有する組成物は、上記のような特性に加えて、以下のような生体に対する優れた機能を奏するもので、健康食品の素材として、また医薬の原料として、有効に利用され得るものである。
１）善玉コレステロール増加機能
２）肝機能の改善
３）赤血球変形能の改善機能（いわゆる血液さらさら状態への改善）
４）血糖降下作用
５）酸化ストレスによる膵島の破壊予防
【００２３】
また、この発明の薬効性及び／又は加味性を有する組成物は、粉末状態でも、希酢酸水溶液としても使用することができるため、上記のような効果を発現させるために、健康食品や医薬として利用する際に、効率的に、また効果的に活用することを可能とするものである。
【００２４】
さらに、この発明の薬効性及び／又は加味性を有する組成物は、規格外ネギという市場価値の著しく低下したもの、さらには廃棄処分対象のネギをも、健康食品や医薬の原料として有効に利用できるという、ネギを最大限に有効活用することを可能とする、優れた効果を奏するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
この発明において、薬効性及び／又は加味性を有する組成物は、ネギ類植物から抽出されるもので、ネギ類植物としては、栽培種としてのネギ、リーキ、タマネギ、ニンニク、ニラ、ラッキョウ、ワケギ、シャロット、野生種としてのノビル、アサツキ、ギョウジャニンニクなどが用いられるが、特にネギが、品種ごとにその性能に多少の差異があるが、この発明にとり好ましいものである。
【００２６】
ネギとしては、青ネギ、白ネギのいずれの品種・系統も医学的機能の効果を示すが、両者の間では、青ネギに特に高い医学的機能性を有するものが存在する。また、ネギとしては、市場で規格外として放棄対象になっているものも、差別なく使用することができる。
また、ネギは、葉、花茎、葉鞘、花球からなるもので、その部位ごとにも多少の差異が医学的機能の面で認められるが、使用するうえで問題となる差異ではない。
【００２７】
抽出に際しては、これらネギ類植物が用いられ、葉、花茎、葉鞘、花球などの部位ごとでも、それらに分割せず、一体としての使用でも全く支障は生じない。
【００２８】
この発明の薬効性及び／又は加味性を有する組成物は、ネギ類植物から抽出されるものであるが、抽出に際しては、まず始めに、高濃度酢酸に、それらネギ類植物を浸漬し、高濃度酢酸に接触させることが必要である。ネギ類植物は水道水、脱イオン水等で洗浄し、包丁などで適宜細断したうえで浸漬処理される。
【００２９】
高濃度酢酸としては、合成酢酸や醸造酢を濃縮した濃厚酢酸など９０％濃度の酢酸、特に食品添加用の９０％酢酸が好ましい。酢酸の濃度は高いほうが好ましいが、処理のし易さから、高濃度酢酸添加後に水を加えて、倍に希釈した、すなわち、実質濃度４５％の酢酸を用いて、さらにはネギ類植物が含有する水分により、酢酸濃度が４０％程度まで、その濃度が低下しても、この発明において大きな問題が発生することはない。
【００３０】
酢酸浸漬処理に用いる酢酸の量は、浸漬処理の効果と抽出後の処理（除去）を考慮すると、ネギ類植物の表面を満遍なく浸すことのできる量が望ましく、具体的には、ネギ類植物の太さ、細断程度により異なるが、ネギ類植物の質量の、１０〜２０％の質量の高濃度酢酸が用いられる。
【００３１】
酢酸浸漬処理は加温して行う必要はなく、室温で行えばよい。さらには、ネギ類植物の変質・腐敗等を避けるために、冷温下、例えば冷蔵庫内において行うことでも良く、通常５〜５０℃の温度下に行われる。浸漬時間としては、浸漬温度にもよるが、１０時間〜１ヵ月程度とすればよく、その間静置しておくだけでも良く、時に、あるいは、一定時間ごと、さらには連続して緩やかに攪拌するのが望ましい。
【００３２】
酢酸浸漬処理の完了した酢酸とネギ類植物が共存する系には、必要に応じて水を添加して、ホモゲナイザーを用いて均一化し、得られた均一体に攪拌しながら、さらに水を添加し、系の酢酸濃度を最終的に４〜５質量％とした後、不溶解物と溶液に分離される。
【００３３】
この発明の薬効性及び／又は加味性を有する組成物は、上記の不溶解物を分離した溶液を濃縮、さらには凍結乾燥などの手段により、溶媒を除去することにより取得することができる。得られた組成物は８０％エタノールに可溶なものと不溶なものに分割でき、それらの特性に多少の差異が認められるが、この発明においては、両者をまとめてこの発明の組成物とする。
【００３４】
このようにして抽出されたものは、種々の成分からなる組成物であるが、希酢酸、特に４．５％濃度の希酢酸に溶解するものである。また、後述する種々の特性を有するものであって、調味料や健康食品の素材として、また医薬の原料として、有効に利用されるものである。
【００３５】
また、この発明の組成物には、蛋白質が含まれているので、それらを低分子化することにより、より加味性や薬効性に優れたものとなる。したがって、蛋白質分解酵素を加え、組成物中に存在する蛋白質を加水分解して低分子化することが好ましい。
【００３６】
使用される蛋白質分解酵素としては、ペプシン、パパイン、ビオプラーゼ（プロメライン）、サーモライシン、デナプシン等、動植物や微生物起源のプロテアーゼが市販品を含め各種使用可能である。それらは、単独であるいは複数を組合せて用いることができ、組合せて用いる場合には、同時に併用しても、順次に使用してもよい。この発明にとり、好ましいものは酸性プロテアーゼであるデナプシンである。
【００３７】
蛋白質の分解の際における、分解温度は、用いられる蛋白質分解酵素の活性化温度により定められる。例えば、プロテアーゼであれば、温度４５〜６０℃程度で、分解時間としては、用いられる蛋白質分解酵素の蛋白質分解能力、分解温度に応じて決められるが、通常１５〜３０時間程度である。
【００３８】
この発明の組成物は、上記したように、コレステロール低下機能、脂肪肝の予防と治癒機能、さらには、赤血球変形能の改善機能（いわゆる血液さらさら状態への改善）等の生理作用を有し、しかも天然の食品関連植物由来であって、安全性にも問題がない。したがって、通常の飲食品はもとより、特定保健用飲食品、健康食品、健康飲料、栄養食品などの飲食品に添加して用いることができる。また、調味料として、さらには各種の医薬品としての利用も可能なものである。
【００３９】
なお、その際、この組成物は、固体状（粉末、顆粒状その他）、濃縮物、ペースト状、液状ないし懸濁状のいずれでも使用可能である。また、調味料、健康食品あるいは医薬の製剤において用いられている賦形剤、結合剤などを利用することによって、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤などとして用いることができる。
【００４０】
この組成物は天然起源で、しかも、永年に亘って漢方薬や食品として使用されていたものを起源とするため、毒性は全くないか又は極めて低く、卓越した安全性を示すもので、その使用に格別の限定はなく、たとえ高齢者、乳児、病弱者であっても長期間摂取することができる。
【実施例】
【００４１】
＜組成物の調製１＞
筑前朝倉農業協同組合から供与された一本白ネギＣＡ（分岐型）と、一本ネギＦＳを水洗した後、それぞれ、葉、花茎、葉鞘、花球の部位毎に分別し抽出原料とした。
一本白ネギＣＡの葉を用いた、高濃度酢酸浸漬処理と抽出は、以下のように行った。
まず、一本白ネギＣＡの葉１２０６ｇ（水分含量９１．５％、乾燥重量１０３ｇ）を長さ５ｃｍ程度に細断したのち、食品添加用９０％酢酸２００ｍｌと水２００ｍｌを加え、時々かき混ぜながら、室温に一夜放置した。
一夜浸漬後の一本白ネギＣＡの葉を含む高濃度酢酸に水を加えながら、ホモゲナイザーでホモゲナイズし、最終的に総量４Ｌのホモジネートを得た。これを８０メッシュのナイロン濾過膜を設置した遠心分離機で遠心濾過（３０００ｒｐｍ×５分間）して得られた濾液と残渣を洗浄した洗液とを併せ、再度、遠心分離機で遠心濾過（８０００ｒｐｍ×１０分間）して上清を回収した。
上清のｐＨは３．０８で、酢酸濃度は４．５％であった。
この希酢酸酸性水溶液に８０％エタノール溶液を加えて攪拌したのち、析出した沈殿と溶液を分離し、溶液を１１０ｍｌまで減圧濃縮し、再度４倍容のエタノールを加えて、沈殿を析出させ、上清より減圧濃縮と凍結乾燥により粉末４２．４ｇを得た。
また、８０％エタノールで沈殿したものは１１．６ｇであった。この発明では、両者を合せて、発明組成物とした。
同様にして、一本白ネギＣＡと一本ネギＦＳの花茎、葉鞘それぞれについて、また、両者の花球の混合品について、同様に抽出した結果を、上記の結果と一緒に表１に示した。
なお、表１の「総収量の欄」のカッコ内の数値は、８０％エタノール溶液にも溶解するものの量を示すものである。
【００４２】
【表１】
2007119377.tif 000002
【００４３】
上記により一本白ネギＣＡの葉から得られた希酢酸・８０％エタノール可溶性の組成物粉末１００ｍｇを１％酢酸溶液に溶解し、遠心分離して得られた上清液を、予め１％酢酸溶液で洗浄したＢｉｏ−Ｇｅｌ  Ｐ−１０（２×３０ｃｍ）カラムに供し、１％酢酸溶液により溶出し、４０滴（約１．３ｍｌ）づつ、試験管にとり、２３０ｎｍと２８０ｎｍでの吸光度の測定によるゲル濾過法における溶出パターンを、図１に示す。
【００４４】
＜組成物の調製２＞
筑前朝倉農業協同組合から供与された白ネギ３種（一本白ネギＣＡ、一本ネギＦＳ及びその他１種）の混合品と、青ネギ２種（柔及び固）について、酢酸浸漬条件を、冷蔵庫で１５〜２５日間とした他は、上記調製１と同様にして、本発明の組成物を得た。その結果を表２に示す。また、ゲル濾過法における溶出パターンを、図２、図３に示す。
【００４５】
【表２】
2007119377.tif 000003
【００４６】
＜組成物の調製３＞
福岡県農業総合試験場から供された下記５種のネギについて、酢酸浸漬条件を、２０時間とした以外は、上記調製１と同様にして、本発明の組成物を得た。その結果を表３に示す。
ネギの種類１：ＦＤＨ（品種名、博多万能ネギの主流品種）
２：  ０４−１３３  （系統名、辛みが強い博多万能ネギタイプ）
３：  ０４−１７０  （系統名、辛みが殆んどない博多万能ネギタイプ）
４：    金長葱      （品種名、根深ネギ）
５：久留米市在来系統（系統名、中ネギ）
【００４７】
【表３】
2007119377.tif 000004
【００４８】
組成物の調製４
朝倉農協より供与された青ネギ廃棄品５２８０ｇと、９０％酢酸７９２ｍｌを用い、酢酸浸漬条件を冷蔵庫４日間とした他は、上記調製１と同様にして、本発明の組成物を１９８ｇ（収率３．７５％）得た。組成物の分析結果を表４に示す。
【００４９】
【表４】
2007119377.tif 000005
【００５０】
上記から明らかなように、この発明の組成物には蛋白質が含まれているので、その蛋白質を低分子化するために、蛋白質分解酵素により蛋白質を以下のように分解させた。
すなわち、上記調製４で得られた組成物３０ｇに脱イオン水１５０ｍｌ加え、希塩酸溶液でｐＨ４．０に調節したのち、酸性プロテアーゼであるデナプシン１０Ｐを０．６ｇ加え、温度５０℃で３時間インキュベートした。
分解液を減圧濃縮後、凍結乾燥してデナプシン分解物を得た。そのゲル濾過法における溶出パターンを図４に示す。この図から明らかなように、画分３，４，５が増加し蛋白質は低分子化しており、組成物の加味性が向上した。
【００５１】
＜組成物の抗酸化特性＞
上記により得られた一本白ネギＣＡの葉、花茎、葉鞘および花球から得られた希酢酸・８０％エタノール可溶性の組成物の抗酸化作用を、β−カロチン法、すなわち、各試料液０．１ｍｌを分注した分光光度計用試験管セルに、リノ−ル酸−β−カロチン溶液４．９ｍｌを加えて攪拌し、温度５０℃の恒温槽で一定時間インキュベ−トした場合のβ−カロチンの退色度を４７０ｎｍの吸光度によって求め、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）濃度に換算して酸化度を求め、その結果を、図５に示す。
【００５２】
＜組成物の免疫機能＞
上記により得られた一本白ネギＣＡの葉と、葉鞘から抽出された８０％エタノール可溶の組成物による免疫機能の活性化を判断するために、組成物のＴＮＦ（Ｔｕｍｏｒ  Ｎｅｃｒｏｓｉｓ  Ｆａｃｔｏｒ）−αの産生量を測定した。
図６に示される結果から明らかなように、組成物により免疫機能の活性化が図れることが認められる。なお、ＴＮＦ−αの産生量の測定は、以下のようにして行った。
【００５３】
＜ＴＮＦ−αの産生量測定方法＞
ヒト末梢血より分離した好中球の浮遊液（１．０×１０６細胞／ｍｌ）５００μｌに、希釈度の異なる組成物溶液１０μｌを加え、５％ＣＯ２を含むインキュベータ中、温度３７℃で、６時間インキュベート処理したのち、１５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、得られた上清液４００μｌ中のＴＮＦ−α量をＥＬＩＳＡ法により定量した。
【００５４】
＜生体での機能測定＞
この発明の薬効性組成物の生体に与える影響について、ラットを用いて検討した。
ラットとしては、９〜１０週齢雄Ｗｉｓｔａｒ系ＳＰＦラットで、糖尿病を誘発するＳＴＺ（ストレプトゾトシン）を投与したものについて検討した。
この発明の組成物としては、抽出源として下記４種のネギを用い、それらから抽出された組成物を５％添加した、オリエンタル酵母株式会社製の飼料ＭＦを３週間ラットに与えた。
【００５５】
＜抽出源＞
１．白ネギ：ＦＳ，ＣＡ（福岡園芸育成系統）
２．青ネギ：ＦＤＨ    （博多万能ネギ主流品種）
３．青ネギ：３０３９  （福岡園芸育成系統）
４．青ネギ：２０６    （久留米市在来系統）
【００５６】
また、検討項目は、以下のとおりである。
１．体重
２．血糖値（尾静脈：グルテストエースＲ（三和化学研究所）使用）
３．血液検査（腹大動脈から採血：血液一般、生化学検査（血漿）、赤血球変形能）
４．組織観察（顕微鏡）
【００５７】
なお、赤血球変形能は、従来の定量性と再現性に難点のある微細孔（ｎｕｃｌｅｉｐｏｒｅ）フィルターを用いた方法に代わるものとして、発明者が開発したニッケルメッシュ（ｎｉｃｋｅｌ  ｍｅｓｈ）フィルターを用いる、フィルター特性が顕著に改善された、以下の方法で測定した。
【００５８】
前記ニッケルメッシュは、フォトレジスト法と特殊メッキ法を組み合わせて作成されたニッケル薄膜フィルターで、微小孔の数、形状、分布が正確に一定であるばかりでなく、数秒間の超音波洗浄によって１００回以上の再使用が可能である。加えて、ニッケルメッシュの微小孔の辺縁は滑らかでテーパを持ち、これにより混入白血球が機械的影響を受けることはなく、微小孔には融合や分枝がまったくない。これらの特徴により、以下の方法は高い定量性と再現性を保持するものである。
【００５９】
＜赤血球変形能測定法（Ｎｉｃｋｅｌ ｍｅｓｈ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ法）＞
試験は、垂直に立てたガラス管（ｖｅｒｔｉｃａｌ ｔｕｂｅ）に、タイゴンチューブを介してニッケルメッシュホルダーを接続し、通常１５ｃｍの高さ（ｈｅｉｇｈｔ：ｈ）より、ＨＥＰＥＳバッファーで調整した生理食塩水で作成した赤血球浮遊液を濾過させて行う。
【００６０】
ガラス管の周囲は恒温水を還流させて、試料を定温に保っている。
ガラス管のゼロレベルに設置した圧力（ｐｒｅｓｓｕｒｅ：Ｐ）トランスデューサーで試料を濾過中の圧力降下を連続的に検出し、これを増幅器とＡＤ変換器を介してパソコンに取り込み、流量（ｆｌｏｗｒａｔｅ：Ｑ）を計算する。
流量は、圧力を高さに変換し（Ｐ＝ρｇｈ）、高さ‐時間（ｈ−ｔ）曲線の微分値（ｄｈ／ｄｔ）を取って、これにガラス管の断面積（ａ）を乗じて得られる（Ｑ＝ｄｈ／ｄｔ・ａ）。
血球を含まないコントロール溶液（ＨＥＰＥＳバッファー調整生食水：ニュートン流体）の圧‐流量曲線を対照として、赤血球浮遊液の圧‐流量曲線を検討し、ある一定圧（通常１００ｍｍ・Ｈ２Ｏ）での対照液の流量に対する赤血球浮遊液の流量(％)をもって赤血球変形能を評価する。
【００６１】
図７〜図１４は、ＳＴＺを投与し、糖尿病などの異常を起こさせたラットにおいて、この発明の組成物の影響を調べた結果で、有意性（０．０１％、０．０５％）を示したもののを示すもので、この発明の組成物の投与により、ＨＧＢ（図７）、ＨＤＬコレステロール（図８）、ＬＤＬコレステロール（図９）、ＡＳＴ（図１０）、ＡＬＴ（図１１）、尿素窒素（図１２）、尿酸（図１３）、赤血球変形能（図１４）の特性の改善に寄与していることが認められる。
【００６２】
顕微鏡による組織観察は、モデル動物の膵臓ランゲルハウス島（ラ氏島）について行い、この発明組成物の糖尿病の膵臓に及ぼす影響を調査した。
顕微鏡観察は、各動物はエーテル麻酔下で屠殺後、膵臓を摘出し、ブアン疫に３日間浸漬固定した。膵組織標本は７％蔗糖含０．１Ｍリン酸緩衝液にて充分に洗浄、凍結用の包理剤に浸漬、−２０℃にて凍結した。
厚さ１４μｍのクリオスタット標本を作製、クロムアラム・ゼラチンを塗布したスライドグラスに載せ、短時間冷風乾燥した。
標本は、一次抗体として、マウス抗インシュリンモノクローナル抗体（Ｌａｂ  Ｖｉｓｉｏｎ．、Ｃｏ．、ＣＡ、ＵＳＡ）、二次抗体としてウマ抗マウスＩｇＧ−ＦＩＴＣ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｓ、ＣＡ、ＵＳＡ）を用い膵臓ラ氏島のＢ細胞を免疫染色し、落射型蛍光顕微鏡（Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ、ドイツ）で行った。
【００６３】
図１５は、正常対照ラットの膵臓ラ氏島、図１６は、糖尿病モデルラットの膵臓ラ氏島のインシュリン抗体による免疫染色像を示し、図１７は、本発明組成物投与後の軽症糖尿病モデルラット膵臓ラ氏島のインシュリン抗体による免疫染色像をそれぞれ示す。
なお、それぞれのモデルラットとしては、血糖値が２００ｍｇ／ｄｌ未満の比較的軽症糖尿病ラットを選択して比較した。
【００６４】
これらの図から明らかなように、正常対照ラットの膵臓ラ氏島のＢ細胞は、膵臓ラ氏島内に均質に多数分散しており、比較的強い免疫発色を示しており、糖尿病モデルラットの膵臓ラ氏島のＢ細胞は、膵臓ラ氏島の周辺部に局在し、しかも、その細胞の多くは著しい変性のため免疫反応が微弱になっており、中央部にインシュリン陽性Ｂ細胞が残存している。
これに対して、本発明組成物投与後の軽症糖尿病モデルラットは、Ｂ細胞の免疫反応が弱あるいは微弱でやや変形したＢ細胞が膵臓ラ氏島周辺部に観察されるが、多くのＢ細胞は組成物の投与によって破壊・変性が抑制されている。
【００６５】
これらの結果から明らかなように、この発明の組成物は、コレステロールの低下機能、脂肪肝の予防と治癒機能、赤血球変形改善機能、いわゆる血液サラサラにする機能を有するものである。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
この発明の組成物は、上記のような優れた特性を有し、かつ粉末ないし水溶液としても供給可能なため、調味料関連産業、健康食品産業や医薬業界で広く利用される可能性の高いものである。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】この発明の一本白ネギＣＡの葉を原料として抽出された組成物（８０％エタノール可溶分）のゲル濾過法における溶出パターン図である。
【図２】この発明の白ネギを原料として抽出された組成物のゲル濾過法における溶出パターン図である。
【図３】この発明の青ネギ（固）を原料として抽出された組成物のゲル濾過法における溶出パターン図である。
【図４】この発明の青ネギを原料として抽出し、さらに含有蛋白質を低分子化した組成物のゲル濾過法における溶出パターン図である。
【図５】一本白ネギＣＡの葉、花茎、葉鞘および花球から得られた組成物（８０％エタノール可溶分）の抗酸化活性を示す図である。
【図６】この発明の一本白ネギＣＡの葉と葉鞘から抽出された組成物（８０％エタノール可溶分）の添加による、ＴＮＦ−αの産生量の変化を示した図である。
【図７】この発明の組成物の投与による、モデルラットの血液中のＨＧＢの変化を示す図である。
【図８】この発明の組成物の投与による、モデルラットの血液中のＨＤＬコレステロールの変化を示す図である。
【図９】この発明の組成物の投与による、モデルラットの血液中のＬＤＬコレステロールの変化を示す図である。
【図１０】この発明の組成物の投与による、モデルラットの血液中のＡＳＴの変化を示す図である。
【図１１】この発明の組成物の投与による、モデルラットの血液中のＡＬＴの変化を示す図である。
【図１２】この発明の組成物の投与による、モデルラットの血液中の尿素窒素の変化を示す図である。
【図１３】この発明の組成物の投与による、モデルラットの血液中の尿酸の変化を示す図である。
【図１４】この発明の組成物の投与による、モデルラットの赤血球変形能の変化を示す図である。
【図１５】正常対照ラットの膵臓ラ氏島のインシュリン抗体による免疫染色像を示す顕微鏡写真である。
【図１６】軽症糖尿病モデルラット膵臓ラ氏島のインシュリン抗体による免疫染色像を示す顕微鏡写真である。
【図１７】この発明の組成物投与後の、軽症糖尿病モデルラット膵臓ラ氏島のインシュリン抗体による免疫染色像を示す顕微鏡写真である。
【符号の説明】
【００６８】
なし
【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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