(57)【要約】【課題】 生体内で生成したアクロレインがタンパク質と付加体を形成する反応を抑えることによるアクロレイン不加体形成抑制剤を含有する皮膚抗老化外用剤および抗老化飲食品であり、皮膚抗老化外用剤に関してはシワ、タルミ等の発生を抑制することを図り、抗老化飲食品に関しては生体中の動脈硬化を抑制することを課題とする。【解決手段】パッションフラワー、サンシュユ、竜珠果、MAKJONG、ローズヒップ、オオウメガサソウ、キンミズヒキ、桂皮花の抽出物の少なくとも一種を含有することを特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
パッションフラワー（Passiflora
incatnata L（Passifloraceae））の全草、サンシュユ（Cornus officinalis（Cornaceae））の果実、竜珠果（Euphorbia aggregata（Euphorbiaceae））、MAKJONG（Sterculia lychnophora）の果実、ローズヒップ（Rosa canina（Rosaceae））、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata L.（Pyrolaceae））、キンミズヒキ（Agrimonia
pilosa var. japonica(Rosaceae)）の全草、桂皮花（Cinnamomum cassia(Lauraceae)）の抽出物の少なくとも一種を含有することを特徴とするアクロレイン付加体形成阻害剤。
【請求項２】
請求項１記載のアクロレイン付加体形成阻害剤の少なくとも１種又は２種以上を有効成分として含有することを特徴とする皮膚抗老化外用剤。
【請求項３】
請求項１記載のアクロレイン付加体形成阻害剤の少なくとも１種又は２種以上を有効成分として含有することを特徴とする抗老化用飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アクロレインのアミノ酸やタンパク質との付加体形成阻害剤であり、その付加体形成阻害剤を含有する皮膚抗老化外用剤や抗老化用飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、老化を抑制する抗老化剤としては、種々のものが開発されている。このような生体の老化は、２つの生物学的要因により起こることが知られている
【０００３】
１つは生理的老化で、他の１つは紫外線等の暴露部に生じる光老化皮膚と呼ばれるものである。生理的老化は、生体内で生成した活性酸素が影響し、血管や皮膚の主な構成因子であるコラーゲン線維の変性や生理機能に係わりの深い酵素の変質による活性の低下などに関わる。光老化に感しては、紫外線の暴露が原因であるため皮膚に限られる。
【０００４】
生理的老化において、活性酸素種を除去することが主に検討され、スーパーオキサイドアニオン、ヒドロキシラジカル、一重項酸素、パーオキシナイトライト等に対する除去剤が提示されている。近年、活性酸素以外の老化因子としてアクロレインの関与が注目されている。
【０００５】
アクロレインはα,β-不飽和アルデヒドで反応性が高く、タンパク質（酵素やコラーゲン）の変性や細胞毒性に関わり、その細胞毒性は類縁のアルデヒドであるアセトアルデヒド、ホルムアルデヒド、アクロレインを比較するとアクロレインが最も強く、ホルムアルデヒドそしてアセトアルデヒドである。アクロレインの細胞毒性は、活性酸素の要因となりうる過酸化水素に比べても強いことが報告されている（Kenneth Ramos、etal、Toxicology and Applied Pharmacology、Vol.95、61-71 (1988)）。
【０００６】
アクロレインは、生体内ではポリアミンから生成したり（Gunnar Houen、etal、Acta Chemia Scandinavica、Vol.48、52-60 (1994)）、脂質の過酸化反応の過程で生成する（内田浩二、日本油化学会誌、Vol.47、No.11、29-37（1998））ことがわかっている。また、アクロレインはプラスティックの燃焼、たばこ煙、排気ガスや油脂の加熱によって生成される環境汚染物質の一つである。このように、アクロレインの発生過程は、活性酸素の発生過程とよくオーバーラップしており、今まで老化の原因が活性酸素というのが一般的となっているが、実はアクロレインが関与しているのではないのかとも考えられる。また、アクロレインから生体を守る検討では、ポリアミンにポリアミンオキシダーゼが作用しアクロレインを生成することから、ポリアミンオキシダーゼを阻害する特許(特開２００２−２８１９９９)とリポキシゲナーゼによる酸化過程でアクロレインが生成することからリポキシゲナーゼを阻害する特許(特開２００２−１３８０１３)が提示されている。しかし、これらによってアクロレインの生成が完全に抑えられるものではない。
【特許文献１】特開２００２−２８１９９９
【特許文献２】特開２００２−１３８０１３
【非特許文献１】J.Biol.Chem.、Vol.273、No.26、Issue of June26、16058-16066(1998)
【非特許文献２】Kenneth Ramos、etal、Toxicology and Applied Pharmacology、Vol.95、61-71 (1988)
【非特許文献３】Gunnar Houen、etal、Acta Chemia Scandinavica、Vol.48、52-60 (1994)
【非特許文献４】内田浩二、日本油化学会誌、Vol.47、No.11、29-37（1998）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
アクロレインから生体を守る検討では、ポリアミンにポリアミンオキシダーゼが作用しアクロレインを生成することから、ポリアミンオキシダーゼを阻害する特許(特開２００２−２８１９９９)とリポキシゲナーゼによる酸化過程でアクロレインが生成することからリポキシゲナーゼを阻害する特許(特開２００２-１３８０１３)が提示されている。しかし、これらによってアクロレインの生成が完全に抑えられるものではなく、生成したアクロレインを直接捕捉する作用を持つ成分が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者等は、このような課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、ポリアミンにポリアミンオキシダーゼが作用することによって生成したり、生体内の脂質の過酸化反応により生じた脂質過酸化生成物であるアクロレインが、生体内のタンパク質との付加体形成を阻害することで本発明を完成するに至った。そして、これらを配合する皮膚外用剤に関しては、皮膚のシワ・タルミなどの皮膚老化を、飲食品に関しては動脈硬化などを改善することが期待できる。
【０００９】
本発明におけるアクロレインを直接捕捉する方法は、内田らのアセチルリジンとアクロレインの付加生成物をHPLCで測定する方法（J.Biol.Chem.、Vol.273、No.26、Issue of June26、16058-16066(1998)）を改変して行った。
【００１０】
すなわち、0.1Mリン酸緩衝液（pH7.4）に100mMのN-アセチルリジンを溶解し、同様に0.1Mリン酸緩衝液（pH7.4）に10mMのアクロレインを溶解し、それぞれ450μLずつ取り、37℃で24時間反応させる。そこに被検試料を100μL加えて、反応液をHPLCで分析し、アクロレインとN-アセチルリジンの付加生成物を分析し、その生成量から抑制率を算出する。
【００１１】
本発明における被検試料は、アクロレインがタンパク質との付加体を生成する過程を抑制するアクロレイン付加体生成抑制剤であり、パッションフラワー（Passiflora incatnata L（Passifloraceae））の全草、サンシュユ（Cornus
officinalis（Cornaceae））の果実、竜珠果（Euphorbia aggregata（Euphorbiaceae））、MAKJONG（Sterculia
lychnophora）の果実、ローズヒップ（Rosa canina（Rosaceae））、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata L.（Pyrolaceae））、キンミズヒキ（Agrimonia
pilosa var. japonica(Rosaceae)）の全草、桂皮花（Cinnamomum cassia(Lauraceae)）の抽出物の少なくとも一種を含有させたことを特徴とする。
【００１２】
また、本発明は、このようなパッションフラワー（Passiflora incatnata L（Passifloraceae））の全草、サンシュユ（Cornus
officinalis（Cornaceae））の果実、竜珠果（Euphorbia aggregata（Euphorbiaceae））、MAKJONG（Sterculia
lychnophora）の果実、ローズヒップ（Rosa canina（Rosaceae））、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata L.（Pyrolaceae））、キンミズヒキ（Agrimonia
pilosa var. japonica(Rosaceae)）の全草、桂皮花（Cinnamomum cassia(Lauraceae)）の抽出物の少なくとも一種または二種以上を含有させた皮膚抗老化外用剤および抗老化用飲食品である。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、パッションフラワー（Passiflora incatnata L（Passifloraceae））の全草、サンシュユ（Cornus
officinalis（Cornaceae））の果実、竜珠果（Euphorbia aggregata（Euphorbiaceae））、MAKJONG（Sterculia
lychnophora）の果実、ローズヒップ（Rosa canina（Rosaceae））、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata L.（Pyrolaceae））、キンミズヒキ（Agrimonia
pilosa var. japonica(Rosaceae)）の全草、桂皮花（Cinnamomum cassia(Lauraceae)）の抽出物を含有した安全であり、生体内で生成したアクロレインがタンパク質と付加体を形成する反応を抑えることによるアクロレイン不加体形成抑制剤を含有する皮膚抗老化外用剤および抗老化用飲食品であり、皮膚抗老化外用剤に関してはシワ、タルミ等の発生を抑制することを図り、抗老化用飲食品に関しては生体中の動脈硬化を抑制することが可能となる。
【発明実施の最良の形態】
【００１４】
本発明に使用する「パッションフラワー」は、薬草として利用されるのは主にincarnata種（チャボトケイソウ）、edulis種（クダモノトケイソウ）の葉、蔓、幹の部分で、主な成分として、多糖体とアルカノイド類を含むフラボノイドに分けられる。研究の結果、このどちらかの成分を単独に使用した場合には鎮静効果は発揮せず、両成分が組み合わさった状態にのみ鎮静効果が確認されたということが報告されている。また、子供に対しても安全に利用できることから、興奮状態の子供を落ち着けるのにも利用されている。
【００１５】
本発明に使用する「竜珠果」は、Euphorbisは乳液を薬用に用いたと言われている。乳白色の樹液（乳液）は有毒で、刺激性の皮膚炎を起こすことがある。乳液は乳細胞から分泌されるが、乳細胞は乳管という組織を作っている。
【００１６】
本発明に使用する「MAKJONG」は、Ｍａｌｖａ  ｎｕｔｓとも呼ばれ、東南アジアで果実は食用とされる。コレステロールを抑え、ダイエットなどの作用があるとされる。
【００１７】
本発明に使用する「ローズヒップ」は、ヨーロッパの野ばらの実である。このローズヒップには、レモンの２０倍といわれるビタミンＣをはじめ、Ａ、Ｂ、Ｅ、リコピンなども含まれている。
【００１８】
本発明に使用する「オオウメガサソウ」とは、北アメリカのケベック州からジョウジア州とヨーロッパ、日本では茨城県以北の太平洋側、北海道に分布し、アメリカインディアンの間に広く愛用され膀胱結石の薬用に供されている。
【００１９】
本発明に使用する「キンミズヒキ」とは、バラ科ミズヒキ属で、夏に黄花の小花を細長く穂のように咲かせる姿から「金色の水引」に見たてこの名前がついた。全草のエキスは、血小板増加による血液凝固促進と止血作用がありますので、強壮収斂（しゅうれん）止血剤とされていて、喀血（かっけつ）、血便、子宮出血などの止血に用いる。また、抗菌、消炎、鎮痛作用もあり、健胃、下痢止めにも応用される。
【００２０】
本発明に使用する「桂皮花」とは、桂皮で知られるクスノキ科の肉桂の花である。肉桂香辛料や漢方に使用され、薬理作用は鎮静、血圧下降、末梢血管拡張、心臓収縮力増強、ストレス性胃びらん予防効果、胆汁分泌促進、また抗アレルギー、抗炎症、活性酸素産生の抑制などがある。しかし、その花の利用はあまり知られていない。
【００２１】
即ち、本発明に係る抽出物は、抽出溶媒としては、各種極性有機溶媒及びそれらの混液を用いることができる。抽出物の生成は、様々な方法が用いられるが、各種活性炭、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤（ＨＰ−２０：三菱化成社製）やオクタデシルシラン処理シリカ（Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ  ＯＤＳ：富士シリシア化学製）により吸着させ、適当な溶媒で溶出する方法が簡便でかつ実用的である。
【００２２】
また、本発明に係る抽出物の各種皮膚外用剤に対する配合量は、皮膚外用剤の実施態様、皮膚外用剤の使用形態等に応じて変動させることができるので特に限定されない。原則的には、有効量存在すれば良いことになるが、一般的には組成物中、乾燥重量に換算して０．０００１〜１００質量％が利用でき、好ましくは０．０１〜１０質量％、更に好ましくは０．１〜５．０質量％である。特に、用時調製のパウダー状の製剤等は、この本願発明に係る抽出物が１００質量％を含めた高配合率で利用されることが想定できる。
【００２３】
本発明に係る皮膚外用剤の適用範囲は、特に限定されない。つまり、この発明の有効成分が有する作用効果に応じて各作用効果を利用できる全ての皮膚外用剤に適用できる。
【００２４】
例えば、本発明に係る有効成分を各種皮膚外用剤基剤等に配合して、クリーム、乳液、化粧水、パック剤、洗顔料等に対して適用できる。また、前記各種皮膚外用剤の実施態様は、ローション、エマルジョン、軟膏、ゾル、ゲル、パウダー、スプレー、固形等の各種態様で適用できる。
【００２５】
また、本発明に係る抗老化用飲食品は、ドリンク剤、ジェル状、粉末製剤、錠剤等の剤型にすることが可能である。
【００２６】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例１】
【００２７】
本実施例は、本発明のアクロレインのタンパク質との付加体形成阻害剤について、具体的な抽出例を示したものである。
【００２８】
被検体としては、パッションフラワー（Passiflora incatnata L（Passifloraceae））の全草、サンシュユ（Cornus
officinalis（Cornaceae））の果実、竜珠果（Euphorbia aggregata（Euphorbiaceae））、MAKJONG（Sterculia
lychnophora）の果実、ローズヒップ（Rosa canina（Rosaceae））、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata L.（Pyrolaceae））、キンミズヒキ（Agrimonia
pilosa var. japonica(Rosaceae)）の全草、桂皮花（Cinnamomum cassia(Lauraceae)）を用いた。
【００２９】
上記、抽出物の抽出法は、水であれば、60℃で数時間抽出し得ることができる。エタノール抽出であれば、ソックスレー抽出を行うことによって得ることができる。
【実施例２】
【００３０】
本実施例は、本発明のアクロレインのタンパク質との付加体形成阻害剤について、抑制率を試験したものである。
【００３１】
〔実験例３〕アクロレインとN-アセチルリジンの付加体形成阻害率の測定
（１）実験方法
50mM N-アセチルリジン450μL(50mMPBS(pH7.4))、10mMアクロレイン450μL(50mMPBS(pH7.4))、試料100μLを混合し、37℃で24時間放置後、HPLCで分析を行った。陽性対照として、類似の反応と思われる糖とアミノ酸やタンパク質と起こるメイラード反応の阻害剤としてとして知られるアミノグアニジンを用いて比較を行った。試料濃度は1％の溶液を用いて行った。
【００３２】
（２）HPLC条件
カラム：DAISOPAK-SP120
ODS-BP(150mm×6mm)
温度：室温
移動相：5%MeOH in 0.1%TFA
検出：UV227nm
注入量：5μL
流量：1.5mL/min
【００３３】
水抽出物のアクロレイン付加体形成阻害作用を表１に、エタノール抽出物のアクロレイン付加体形成阻害作用を表２に示す。
【００３４】
【表１】
2007261996.tif 000002
【００３５】
【表２】
2007261996.tif 000003
【００３６】
表１の結果より、パッションフラワー（Passiflora
incatnata L（Passifloraceae））の全草、サンシュユ（Cornus officinalis（Cornaceae））の果実、竜珠果（Euphorbia aggregata（Euphorbiaceae））、MAKJONG（Sterculia lychnophora）の果実、ローズヒップ（Rosa canina（Rosaceae））、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata L.（Pyrolaceae））、キンミズヒキ（Agrimonia
pilosa var. japonica(Rosaceae)）の全草、桂皮花（Cinnamomum cassia(Lauraceae)）の抽出物にアクロレインとN-アセチルリジンとの付加体の形成を阻害する作用が強いことを確認した。
【００３７】
以下に本発明の処方例を挙げる。
【００３８】
＜処方例１＞化粧水
（成分名）                                                （質量％）
パッションフラワー水抽出物                                  ０．０００１
グリセリン                                                  ５．０
ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（２０Ｅ．０）    １．５
エタノール                                                  ８．０
クエン酸トリエチル                                          ２．０
防腐剤・酸化防止剤                                          適量 
精製水                                                      残部
【００３９】
＜処方例２＞化粧用クリーム
（成分名）                                              （質量％）
サンシュユエタノール抽出物                                  １．０
ミツロウ                                                    ２．０
ステアリルアルコール                                        ５．０
ステアリン酸                                                ８．０
スクワラン                                                １０．０
自己乳化型グリセリルモノステアレート                        ３．０
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０）              １．０
グリセリン                                                  ５．０
水酸化カリウム                                              ０．３
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００４０】
＜処方例３＞乳液
（成分名）                                                （質量％）
竜珠果水抽出物                                              ５．０
スクワラン                                                  ８．０
ワセリン                                                    ２．０
ミツロウ                                                    ０．５
ソルビタンセスキオレエート                                  ０．８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０Ｅ．０）            １．２
カルボキシビニルポリマー                                    ０．２
グリセリン                                                  １．５
水酸化カリウム                                              ０．１
エタノール                                                  ７．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００４１】
＜処方例４＞パック剤
（成分名）                                                （質量％）
ローズヒップ水抽出物                                        ０．００１
酢酸ビニル樹脂エマルジョン                                １５．０
ポリビニルアルコール                                      １０．０
ホホバ油                                                    ３．０
グリセリン                                                  ５．０
酸化チタン                                                  ８．０
カオリン                                                    ７．０
エタノール                                                  ５．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００４２】
＜処方例５＞軟膏
（成分名）                                                （質量％）
ローズヒップエタノール抽出物                                ０．０１
酢酸トコフェロール                                          ０．５
パラジメチルアミノ安息香酸オクチル                          ４．０
ブチルメトキシベンゾイルメタン                              ４．０
ステアリルアルコール                                      １８．０
モクロウ                                                  ２０．０
グリセリンモノステアリン酸エステル                          ０．３
ワセリン                                                  ３３．０
香料                                                        適量
防腐剤・酸化防止剤                                          適量
精製水                                                      残部
【００４３】
＜処方例６＞ドリンク剤
サンシュユ水抽出物                                        １０．０
クエン酸                                                    ０．１
ビタミンC                                                  適量
精製水                                                      残部
【００４４】
＜処方例７＞粉末製剤
桂皮花水抽出物                                            ８０．０
卵殻カルシウム                                            １０．０
乳糖                                                        ５．０
セルロース                                             
残部
【００４５】
＜処方例８＞錠剤
キンミズヒキ水抽出物                                      １０．０
卵殻カルシウム                                            １０．０
乳糖                                                      ２０．０
澱粉                                                        ７．０
デキストリン                                                ８．０
硬化油                                                      ５．０
セルロース                                             
残部
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明によれば、パッションフラワー（Passiflora
incatnata L（Passifloraceae））の全草、サンシュユ（Cornus officinalis（Cornaceae））の果実、竜珠果（Euphorbia aggregata（Euphorbiaceae））、MAKJONG（Sterculia lychnophora）の果実、ローズヒップ（Rosa canina（Rosaceae））、オオウメガサソウ（Chimaphila umbellata L.（Pyrolaceae））、キンミズヒキ（Agrimonia
pilosa var. japonica(Rosaceae)）の全草、桂皮花（Cinnamomum cassia(Lauraceae)）の抽出物を含有した安全であり、生体内で生成したアクロレインがタンパク質と付加体を形成する反応を抑えることによるアクロレイン不加体形成抑制剤を含有する皮膚抗老化外用剤および抗老化用飲食品であり、皮膚抗老化外用剤に関してはシワ、タルミ等の発生を抑制することを図り、抗老化用飲食品に関しては生体中の動脈硬化を抑制することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】アクロレインとN-アセチルリジンの付加体形成阻害率を測定したHPLCチャート
【図１】
2007261996.tif 000004