(57)【要約】【目的】本発明の目的は、長期投与において安全性が高く、高血糖およびインスリン抵抗性の治療が行える亜鉛含有の薬剤を提供することにある。【解決手段】上記目的を解決するにあたり、本発明では、ポルフィリン環を基本骨格とする種々の誘導体を配位子として含有する亜鉛有機錯体を合成し、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体が最も優れた血糖降下作用およびインスリン抵抗性改善作用を示すことを提案し、抗糖尿病薬剤の有効成分として使用する。【選択図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記（化１）〜（化６）で表されるポルフィリン誘導体またはプロトポルフィリン誘導体と、二価亜鉛源から合成される亜鉛錯体。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物を含有することを特徴とする、経口投与可能な抗糖尿病薬剤。
【請求項３】
二価亜鉛源が亜鉛の鉱産塩又は有機錯体である請求項２に記載の薬剤。
【請求項４】
ポルフィリン誘導体が、構造式（化１）、（化２）、（化３）、（化４）
、（化５）
【化１】
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【化２】
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【化３】
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【化４】
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【化５】
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（式中、Ｒは水素、アルキル基、カルボキシル基、フェニル基、ハロゲン基、水酸基、スルホニル基、メチルピリジニル基、スルホニルフェニル基、およびカルボキシフェニル基を示す。Ｒ１〜Ｒ８は、たとえば、アルキル基、アルケニル基、シクロアルキル基、フェニル基、ナフチル基等の、鎖状または環状の、飽和もしくは不飽和の炭化水素基；これら炭化水素基に置換していてもよい、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシル基、アミド基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルバメート基、ウレア基、スルホニル基、スルフェニル基、ホスフェニル基、ホスフィニル基、スルフィド基、チオエーテル基、チオエステル基等の各種の官能基；ピリジル基、ピペリジル基、アジン基、アゾール基、イミダゾール基、トリアジル基、フリル基、カルバゾール基等の複素環基；糖、シクロデキストリンあるいはポルフィリン環を持つ有機基等の任意のものであってよい。Ｒ’はアルキル基、水酸基、カルボキシル基、スルホニル基、アミノ基、ニトロ基を示す。Ｒ’’は水素、カルボキシル基、スルホニル基、リン酸基、メチルカルボニル基）で表される化合物。
【請求項５】
プロトポルフィリン誘導体が、構造式（化６）
【化６】
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で表される化合物
【請求項６】
ポルフィリン類が、（化１）〜（化６）であらわされる化合物及びそれらの混合物からなる請求項２に記載の薬剤。
【請求項７】
抗糖尿病薬剤が、経口投与で血糖降下作用、インスリン抵抗性改善作用を有する化合物である請求項１〜６のいずれか１項に記載の薬剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、経口投与により、血糖降下作用、インスリン抵抗性改善作用を示し、ポルフィリン環を基本骨格とする種々の誘導体からなる化合物を配位子として含有する亜鉛有機錯体を含む、２型糖尿病治療薬剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病はインスリンの絶対的、もしくは相対的不足が生じることで、慢性の高血糖状態となり、様々な合併症が引き起こされる疾患である。１型糖尿病や重症の２型糖尿病など、インスリン依存状態である場合には、ヒトインスリンの頻回皮下注射が有効な治療法である。インスリン依存型糖尿病、糖尿病性昏睡、および厳密な血糖管理が必要な糖尿病合併妊娠などにおいては、ヒトインスリンの皮下注射が治療法として必須である。
【０００３】
また、軽症の成人型糖尿病においては、食事療法、運動療法が主な治療法であるが、これらの治療法で有効な効果が得られない場合、日常生活における「生活の質：クオリティー オブ ライフ」の向上を目的として、経口血糖降下薬が用いられている。代表的な経口血糖降下薬として、インスリン分泌を刺激するスルホニル尿素系の薬剤、肝臓の糖新生を抑制するビグアナイド薬、および腸管からの糖の吸収を緩除するα−グルコシダーゼ阻害薬の存在が知られている（非特許文献１−２参照）。
【０００４】
スルホニル尿素薬は、膵β細胞のスルホニル尿素受容体に結合し、ＡＴＰ依存性Ｋチャネルを閉鎖することにより、β細胞を脱分極し、電位依存性カルシウムチャネルを開き、細胞内カルシウム濃度を上昇させ、内因性インスリン分泌を促進して血糖値を降下させる。ビグアイナイド薬は、肝臓における糖新生の抑制、小腸における糖吸収抑制、および筋肉、脂肪組織における糖取り込みの亢進作用により、血糖値を降下させる。またα−グルコシダーゼ阻害薬は、小腸において、二糖類を単糖類に分解する酵素であるα−グルコシダーゼの活性を減弱させることにより、糖質の分解、吸収を遅延させ、食直後の高血糖を是正し、糖尿病状態を改善する（非特許文献１−２参照）。
【０００５】
このような作用機構から、インスリンやスルホニル尿素薬、ビグアナイド薬、およびα−グルコシダーゼ阻害薬は、高血糖、糖尿、多尿、多飲、血管障害などの症状を呈する代謝疾患である糖尿病には有効であるが、低血糖により意識障害、脱力感、疲労感、動悸などの副作用も問題となっている（非特許文献３参照）。
【０００６】
一方、ポルフィリン類は、（化１）〜（化６）の構造を有する化合物であり、生体内の化学反応によってつくられる物質で、自分自身を触媒とすることができるため、「生きている有機化合物」と呼ばれることがある。さまざまなポルフィリンは生理的に重要なものが多く、たとえば、赤血球のヘモグロビン、ビタミンＢ１２、および葉緑素のクロロフィルなども、ポルフィリン環を有している。
（非特許文献４参照）。
【０００７】
現在ポルフィリン類は、光機能性材料、ＭＲＩ造影剤、およびＸ線造影剤などを目的として、日常生活の数多くの分野で使用されている（特許文献１−２参照）。さらに、金属ポルフィリン錯体は、感光体、電子材料、機能性物質として利用され、特に亜鉛ポルフィリン錯体は電子供与体としての利用が可能である（特許文献３−４）。しかし、亜鉛ポルフィリン錯体の経口糖尿病治療薬としての使用は報告されていない。
【０００８】
一方亜鉛は、インスリン様作用を持つことが報告されており、種々の亜鉛錯体が糖尿病モデル動物を用いた実験で、糖尿病治療薬としての可能性が示されているが（特許文献５および非特許文献５参照）、さらに、低毒性で活性の高い多様な錯体から、糖尿病発症の元凶であるインスリン抵抗性改善効果をもつ、抗糖尿病薬剤の開発が望まれており、本発明で用いた亜鉛錯体は、その可能性を有している。
【０００９】
【非特許文献１】佐倉宏，ホルモンと臨床，５３，（２００５）９．
【非特許文献２】Ｐｒｏｋｓ Ｐ．， Ｒｅｉｍａｎｎ Ｆ．， Ｇｒｅｅｎ Ｎ．， Ｇｒｉｂｂｌｅ Ｆ．， Ａｓｈｃｒｏｆｔ Ｆ．， Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５１，Ｓ（２００２）３６８．
【非特許文献３】Ｆａｎｅｌｌｉ Ｃ．Ｇ．， Ｐｏｒｃｅｌｌａｔｉ Ｆ．， Ｐａｍｐａｎｅｌｌｉ Ｓ．， Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ. Ｒｅｓ. Ｒｅｖ.,２０,（２００４）Ｓ３２．
【非特許文献４】Ｔａｋｅｔａｎｉ Ｓ．，生化学、６７（１９９５）２３３．
【非特許文献５】小嶋良種，吉川豊，ビタミン，７９，（２００５）１５５．
【特許文献１】ヨードポルフィリン誘導体，特開平９−１１０８７２
【特許文献２】車輪状マルチポルフィリンデンドリマー化合物，特開２００６−６９９１５
【特許文献３】金属ポルフィリン錯体，特開平５−２５５３３８
【特許文献４】Ｚｎ（ＩＩ）ポルフィリン錯体，特開２００５−３５０４７９
【特許文献５】亜鉛(II)有機錯体からなる血糖降下剤，ＰＣＴ：ＷＯ ０１／３９７６９ Ａ１
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、既存の糖尿病治療薬が有する低血糖障害などの副作用が少なく、低容量で高活性な糖尿病治療に有効な薬剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
そのような課題を克服するために、本発明では、亜鉛イオンよりも毒性が低く、ほど良い安定性と、ほど良い脂溶性をもつポルフィリン誘導体を配位子とする亜鉛錯体からなる糖尿病治療薬、インスリン抵抗性改善薬を提供することを試みた。血糖降下作用を有する亜鉛錯体は、申請者らにより数多く開発されてきたが、窒素を配位原子にもち、経口投与可能な亜鉛錯体は今までにあまり開発されてこなかった。さらに、ポルフィリン誘導体を亜鉛に配位させることで、亜鉛イオンより吸収率や安全性を高め、血糖降下作用だけでなくインスリン抵抗性改善作用ももたせることが可能となった。
【００１２】
この発明が解決しようとしている課題は、前記、亜鉛錯体を有効成分として含有する医薬組成物であり、糖尿病およびインスリン抵抗性を改善する為の医薬組成物に関する。本発明の医薬組成物は、前記した亜鉛錯体のほかに、さらに製薬上許容される単体及びそれらの混合物を含有してなる医薬組成物が好ましい。
【００１３】
本発明は、亜鉛と錯体を形成し得る有機化合物と亜鉛源とを含んでなる薬剤に関する。亜鉛と錯体を形成し得る有機化合物としては、例えば、（化１）〜（化６）の他に、脂肪族のアミン誘導体等が好ましいものとして挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１４】
本発明で用いられる亜鉛源としては、ヒトおよび／または他の動物への投与に好適な亜鉛源であればどのようなものでもよいが、例えば、亜鉛の鉱産塩や亜鉛有機錯体などが好ましいものとして挙げられる。亜鉛の鉱産塩としては、例えば、酢酸亜鉛、塩化亜鉛、硫酸亜鉛、硝酸亜鉛、水酸化亜鉛、グルコン酸亜鉛等が挙げられる。なお、亜鉛源として亜鉛の鉱産塩を使用した場合には、ｐＨ調整剤として、例えば、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム等の塩基性水溶液や、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液等の緩衝液を併用してもよい。本発明にかかる薬剤の形状は、粉末状、顆粒状、錠剤型、カプセル、液状、ゲル状、その他いずれのものでもよい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明に係る、亜鉛と錯体を形成し得る有機化合物と亜鉛源とを含んでなる薬剤は、亜鉛イオンよりも毒性が低く、ほど良い安定性と、ほど良い脂溶性をもち、かつ経口投与で血糖降下作用、インスリン抵抗性改善作用をもつ薬剤として大いに期待されるものである。さらに、糖尿病患者やその予備群などの健康状態をよくし、耐糖能障害、高脂質血症、アテロ−ム性動脈硬化症、心臓血管疾患、狭心症、高血圧、あるいは、味覚障害などの予防や治療に効果のある薬剤として大いに期待されるものである。
また、本発明の錯体は、長期間の摂取においても、実質的な副作用を伴わず、安全である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
以下の製造例および実施例は、この発明を説明するために示したものであり、本発明はこれらの実施例や試験例に限定されるものではない。
【００１７】
（実施例１）
本発明で用いた、亜鉛−ポルフィリン誘導体錯体は、Ａｄｌｅｒらの方法を参考に合成した。（非特許文献６）
【００１８】
【非特許文献６】Ａｄｌｅｒ Ａ．Ｄ． ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｎｏｒｇ． Ｎｕｃｌ． Ｃｈｅｍ．，３２,（１９７０）２４４３．
【００１９】
亜鉛（メソ−テトラキス（１−メチルピリジニウム−４−イル）ポルフィリン）錯体（Ｚｎ（ＴＰＰＳ））の合成は、ＤＭＦ溶液中（２５０ｍＬ）で硫酸亜鉛と配位子（ＴＰＰＳ）をモル比２：１で混合し、１６０℃で８時間還流した。還流終了後、反応溶液を５ｍＬまで濃縮し、アセトン溶液を加え、生じた沈殿を、セファデックスＬＨ−２０カラムを用いて精製し、目的物を得た。元素分析値：実験値、Ｃ：４２．９２、Ｈ：５．３７、Ｎ：８．６９％、ＺｎＣ４４Ｈ２８Ｎ４Ｏ１２Ｓ４・１７．５Ｈ２Ｏ・７．６Ｃ３Ｈ７ＮＯに対する計算値、Ｃ：４２．９２、Ｈ：６．２７、Ｎ：８．６９％
【００２０】
（実施例２）
亜鉛（メソ−テトラキス（４−スルホナトフェニル）ポルフィリン）錯体（Ｚｎ（ＴＣＣＰ））の合成は、ＤＭＦ溶液中（２５０ｍＬ）で塩化亜鉛と配位子（ＴＣＣＰ）をモル比５：１で混合し、１６０℃で８時間還流した。還流終了後、反応溶液を２ｍＬまで濃縮し、水を加え、沈殿を生成させることにより、目的物を得た。分析値：実験値、Ｃ：５６．２８、Ｈ：３．０１、Ｎ：６．１２％、ＺｎＣ４４Ｈ２８Ｎ４Ｏ８・Ｃ３Ｈ７ＮＯに対する計算値、Ｃ：５６．２３、Ｈ：４．９０、Ｎ：６．４３％
【００２１】
（薬理試験例１）
非特許文献７に記載の方法に従い、以下の実験を行った。すなわち、ラット脂肪細胞の分離は、体重２００ｇの雄性Ｗｉｓｔａｒラットをエーテル麻酔下で放血致死させ、副睾丸周辺の脂肪組織から脂肪細胞を分離した。脂肪細胞をはさみで切り、１ｍｌあたり２０ｍｇの牛血清アルブミン（ＢＳＡ）および０．４ｍｇコラナーゼを含むＫＲＢバッファー（ｐＨ＝７.４）中、３７℃で１時間消化した。脂肪細胞をナイロンメッシュを通して濾過することにより未消化組織より分離し、コラゲナーゼを含まない上記バッファーで３回洗浄し、１.５×１０６細胞／ｍｌに調整した。
【００２２】
ラット脂肪細胞に対する効果は、シリコン処理されたバイアル中、上記で分離された脂肪細胞（１.５×１０６細胞／ｍｌ）を、各種濃度（１０−４，５×１０−４，１０−３）のポジティブコントロールや被験物質と共に、ＫＲＢバッファー中で３７℃、０.５時間プレインキュベートし、ついで、１０−５ Ｍのエピネフリンを反応混合物に加え、得られた溶液を３７℃で３時間インキュベートする事により評価した。３時間インキュベート後、反応混合物を氷冷し、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。細胞外溶液について、遊離脂肪酸（ＦＦＡ）濃度をＮＥＦＡキットＷＡＫＯを用い、グルコース濃度はグルコースオキシダーゼ法（フジドライケム）を用いて測定し、ＩＣ５０値およびＥＣ５０値を測定した（表１）。
【００２３】
【非特許文献７】Ｎａｋａｉ Ｍ. ｅｔ.ａｌ．, Ｂｉｏｌ. Ｐｈａｒｍ. Ｂｕｌｌ., １８ (１９９５)７１９.
【００２４】
（薬理試験例２）    
経口投与における抗糖尿病作用の評価には、２型糖尿病モデル動物のＫＫ−Ａｙマウスを用いた。ＫＫ−Ａｙマウスに一日一回、２８日間、５ｍｇ〜２０ｍｇＺｎ／ｋｇ体重となるように、経口投与を行った。錯体投与時には、血糖値、体重、摂餌量、摂水量を同時にモニターした。２８日間投与終了後、１２時間絶食させ、体重１ｋｇあたり１ｇのグルコースを経口投与し、糖負荷試験を行った。
また、投与終了後にＨｂＡ１ｃ値、血清インスリン値、グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ値（ＧＯＴ）、グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ値（ＧＰＴ）、および尿素窒素値（ＵＮ）の測定を行った。
錯体投与群としてＺｎ（ＴＰＰＳ）を経口投与したときの血糖値の変化及び体重の増減をそれぞれ図１と２に示し、糖負荷試験の結果を図３に示す。さらにＨｂＡ１ｃ値、血清インスリン値、ＧＯＴ、ＧＰＴ、およびＵＮの測定結果を表２、および表３に示す。
【００２５】
（結果）
表１に示すように、本発明の亜鉛錯体は、ＺｎＳＯ４と比較してラット脂肪細胞からの脂肪酸の遊離を顕著に抑制することができた。さらに、糖の取り込みに関しても、対照として用いたＺｎＳＯ４と比較して有意に促進することが確認された。
【００２６】
（表１）
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*ｐ＜０.０５ vs. 錯体非投与群、**ｐ＜０.０１ vs. 錯体非投与群
【００２７】
図１に示すように、血糖値は錯体投与後低下し始め、２８日間の投与終了時には、投与前と比較してＺｎ（ＴＰＰＳ）投与群では約２５０ｍｇ／ｄＬ低下した。体重は、投与期間中に大きな変化はみられなかった（図２）。
２８日間の投与終了後に行った糖負荷試験では、図３に見られるように、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）投与群は、錯体非投与群と比較して有意に血糖値が低下しており、耐糖能の改善効果がみられた。
表２に見られるように、ＨｂＡ１ｃ値も、錯体非投与群と比較して有意に低下していた。これらの結果から、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体の血糖値の低下は一時的なものではなく、長期にわたって持続的であることが明らかとなった。さらに、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体は、血清インスリン濃度も低下させ、インスリン抵抗性状態を改善できることが示された。
【００２８】
（表２）
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＊＊ ｐ＜０．０１ vs. 錯体非投与群
【００２９】
表３の結果から、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体は、長期間の経口投与においても、肝毒性、腎毒性などは発現していないことが明らかとなった。
【００３０】
（表３）
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【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】本発明に係わるＺｎ（ＴＰＰＳ）錯体を一日一回経口投与したときの血糖値の推移を示したものである。錯体非投与群（●）、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体投与群（○）。＊ｐ＜０．０５ ｖｓ． 錯体非投与群
【図２】本発明に係わるＺｎ（ＴＰＰＳ）錯体を一日一回経口投与したときの体重の推移を示したものである。錯体非投与群（●）、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体投与群（○）。
【図３】２８日間、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体を投与後、糖負荷試験を行った時の血糖値の推移を示したものである。錯体非投与群（●）、Ｚｎ（ＴＰＰＳ）錯体投与群（○）。＊ｐ＜０．０５ ｖｓ． 錯体非投与群、＊＊ｐ＜０．０１ ｖｓ． 錯体非投与群
【図１】
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【図２】
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【図３】
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