(57)【要約】【課題】柑橘類から果汁を生産する際、フィニッシャー工程、及び／又は、遠心分離工程の各工程で副産物として生ずるパルプを有効利用した、肝臓脂質蓄積抑制剤や、それを含む機能性飲食品又は飲食品素材を提供すること。【解決手段】柑橘類を搾汁機で搾汁を行い、果汁（Ｊ１）と搾汁粕に分離し、得られた果汁（Ｊ１）をフィニッシャーで篩別することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離したフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）や、果汁（Ｊ２）を遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離した遠心分離パルプ（ＣＰ）や、果汁（Ｊ２）を軽遠心分離し、果汁（Ｊ３−１）とパルプに分離し、得られた果汁（Ｊ３−１）をさらに重遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ３−２）から分離した二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）、あるいは、これらの処理物を有効成分とする肝臓脂質蓄積抑制剤を調製する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
柑橘類を搾汁機で搾汁を行い、果汁（Ｊ１）と搾汁粕に分離し、得られた果汁（Ｊ１）をフィニッシャーで篩別することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離したフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、及び／又は、前記果汁（Ｊ２）を遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離した遠心分離パルプ（ＣＰ）、あるいは、これらフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、及び／又は、遠心分離パルプ（ＣＰ）の処理物、を有効成分とすることを特徴とする肝臓脂質蓄積抑制剤。
【請求項２】
柑橘類を搾汁機で搾汁を行い、果汁（Ｊ１）と搾汁粕に分離し、得られた果汁（Ｊ１）をフィニッシャーで篩別することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離したフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、及び／又は、前記果汁（Ｊ２）を軽遠心分離し、果汁（Ｊ３−１）とパルプに分離し、得られた果汁（Ｊ３−１）をさらに重遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ３−２）から分離した二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）、あるいは、これらフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、及び／又は、二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）の処理物、を有効成分とすることを特徴とする肝臓脂質蓄積抑制剤。
【請求項３】
軽遠心分離操作の遠心強度が３，０００ｇ・分以下であり、重遠心分離操作の遠心強度が１，５００ｇ・分以上であり、軽遠心分離操作の遠心強度を重遠心分離操作の遠心強度よりも低く設定することを特徴とする請求項２記載の肝臓脂質蓄積抑制剤。
【請求項４】
フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、遠心分離パルプ（ＣＰ）の処理物、又は二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）の処理物が、それぞれの凍結乾燥物であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤。
【請求項５】
肝臓脂質が、肝臓総脂質、あるいは肝臓コレステロール及び／又は肝臓中性脂肪であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤。
【請求項６】
肝臓脂質蓄積抑制剤が、肥満系統のヒト用であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤を含有することを特徴とする肝臓脂質蓄積抑制作用を有する機能性飲食品又は飲食品素材。
【請求項８】
飲食品が、お茶、ヨーグルト、ドリンクヨーグルト、ジュース、牛乳、豆乳、酒類、コーヒー、スポーツ飲料であることを特徴とする請求項７記載の機能性飲食品又は飲食品素材。
【請求項９】
飲食品が、コレステロール高含有飲食品であることを特徴とする請求項７記載の機能性飲食品又は飲食品素材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肝臓脂質蓄積抑制剤、肝臓脂質蓄積抑制剤を含有する機能性飲食品又は飲食品素材に関し、さらに詳しくは、柑橘類果汁の製造時に副産物として生ずる、フィニッシャーパルプ及び／又は遠心分離パルプを有効成分とする肝臓脂質蓄積抑制剤、前記抑制剤を含有する肝臓脂質蓄積抑制作用を有する機能性飲食品又は飲食品素材に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、農産物の加工や食品加工の際生ずる副産物は廃棄するか、肥料・飼料に利用される程度であったが、このような副産物には栄養成分やミネラルはもとより医薬成分も有効量含まれている場合があり、近年、これら副産物をさらに処理して、飲食しやすくし、健康補助食品、機能性食品、医薬品などに利用しようとする試みがなされている。
【０００３】
例えば、小麦澱粉工業において排出される成分であって、有効利用のなかった赤粕から蛋白質及び澱粉質を除去して得られる食物繊維を有効成分とする脂質代謝改善剤（例えば、特許文献１参照）や、柑橘系果実、搾汁残渣、果皮、中果皮、じょうのう膜の少なくとも一つを含有する柑橘系原料を極性溶媒で抽出し、極性溶媒抽出液をｐＨ５．５〜８．５に調整した後の可溶画分又はその処理物を含有してなる組成物を、抗高トリグリセリド血症剤、抗内臓脂肪蓄積剤、抗肝機能低下剤の少なくとも一つに利用する医薬品タィプの組成物（例えば、特許文献２参照）や、哺乳動物におけるアシルＣｏＡ−コレステロール−Ｏ−アシルトランスフェラーゼ(ＡＣＡＴ)の活性を抑制するための柑橘類果皮抽出物又は柑橘類果皮粉末の使用（例えば、特許文献３参照）が知られている。
【０００４】
また、果実、好ましくは柑橘系果実、更に好ましくは柑橘系果実の中果皮及び／又はじょうのう膜から極性溶媒を用いてγ−アミノ酪酸を分離、回収する高濃度γ−アミノ酪酸含有食品素材を製造する方法（例えば、特許文献４参照）や、本出願人の出願による、柑橘類のじょうのう膜を原料とする脂肪分解作用及び膵リパーゼ阻害作用を有する抗肥満食品素材（例えば、特許文献５参照）や、柑橘類から搾汁により果汁を製造する際に副産物として生ずるフィニッシャーパルプ及び／又は遠心分離パルプを有効成分として含有する、α−アミラーゼ活性阻害作用及びα−グルコシダーゼ活性阻害作用を有する食後過血糖予防・改善用機能性食品素材（例えば、特許文献６参照）や、柑橘類の果皮を原料とし、アミノ酸として、メチオニン、リジン、ヒスチジンを含有し、且つビタミンＣを含有する血液におけるコレステロール値及び中性脂肪値を抑制する液状飲用物（例えば、特許文献７参照）が提案されている。
【０００５】
一方、近年、食の洋風化に伴い、高脂肪・高コレステロール摂取による肥満が増加している。このため、肥満による生活習慣病の増加が問題となっており、このような傾向は、インスタント食品、スナック菓子のとり過ぎから、成人ばかりでなく、未成年、小中学生まで拡大しており大きな社会問題となっている。前記生活習慣病には、高血圧症、高脂血症、糖尿病などがあり、そのもとになる内臓脂肪の蓄積は、動脈硬化のみならず、心臓や腎臓疾患など他の重篤な疾患の成因にもつながるという認識が高まっており、近い将来の高齢化社会においてはさらに患者数の増加が予想される。このような現状にあって、当業界においては、内臓脂肪蓄積の抑制や、肥満患者の肝臓脂質蓄積抑制作用を有する組成物、医薬品、食品の開発が望まれている。
【０００６】
ところで、前述の特許文献２，３，５に記載されているように、排出される柑橘類系果実の中果皮、じょうのう膜などから溶媒を用いて得られる抽出物に脂肪分解作用、コレステロール値及び中性脂肪値を抑制する作用、抗肥満作用があることが知られている。しかしながら、柑橘類果実から果汁を製造する際、搾汁粕を除いてさらに濾過工程で排出されるフィニッシャーパルプや次の遠心分離工程から排出される遠心分離沈降パルプに、肝臓脂肪の蓄積を有効に予防・改善するなど肝臓脂肪の蓄積抑制に関した技術は知られていなかった。
【０００７】
【特許文献１】特開平８−８１３９０号公報
【特許文献２】特開２００１−４６０１９号公報
【特許文献３】特表２００１−５２１００３号公報
【特許文献４】特開平１０−２１５８１２号公報
【特許文献５】特開２００５−４０１０７号公報
【特許文献６】特開２００５−２１８３９５号公報
【特許文献７】特開２００５−１９８６４２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の課題は、柑橘類から果汁を生産する際、フィニッシャー工程、及び／又は、遠心分離工程の各工程で副産物として生ずるパルプを有効利用した、肝臓脂質蓄積抑制剤や、それを含む機能性飲食品又は飲食品素材を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前述の特許文献２，３，５，６，７に記載されるように、柑橘類から果汁を製造する際に分離・排出されるパルプ、果皮等の副産物に医薬用途があることが知られているが、本発明者らは、さらに、果汁製造工程で分離・排出される副産物の有効利用を可能とする技術を開発することを目標として鋭意研究を進めるなかで、柑橘類から果汁を製造する工程で生ずる、フィニッシャーにより分離されたフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）や、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）を分離した後の果汁から遠心分離により分離された遠心分離パルプ（ＣＰ）、好ましくは二段階遠心分離により分離された二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）や、これらの混合物が、血中コレステロール濃度を変化させることはないが、肝臓における脂質代謝に影響し、余剰な肝臓脂質の蓄積の予防・改善効果などの肝臓脂質蓄積抑制効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち本発明は、［１］柑橘類を搾汁機で搾汁を行い、果汁（Ｊ１）と搾汁粕に分離し、得られた果汁（Ｊ１）をフィニッシャーで篩別することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離したフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、及び／又は、前記果汁（Ｊ２）を遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離した遠心分離パルプ（ＣＰ）、あるいは、これらフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、及び／又は、遠心分離パルプ（ＣＰ）の処理物、を有効成分とすることを特徴とする肝臓脂質蓄積抑制剤や、［２］柑橘類を搾汁機で搾汁を行い、果汁（Ｊ１）と搾汁粕に分離し、得られた果汁（Ｊ１）をフィニッシャーで篩別することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離したフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、及び／又は、前記果汁（Ｊ２）を軽遠心分離し、果汁（Ｊ３−１）とパルプに分離し、得られた果汁（Ｊ３−１）をさらに重遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ３−２）から分離した二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）、あるいは、これらフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、及び／又は、二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）の処理物、を有効成分とすることを特徴とする肝臓脂質蓄積抑制剤や、［３］軽遠心分離操作の遠心強度が３，０００ｇ・分以下であり、重遠心分離操作の遠心強度が１，５００ｇ・分以上であり、軽遠心分離操作の遠心強度を重遠心分離操作の遠心強度よりも低く設定することを特徴とする上記［２］記載の肝臓脂質蓄積抑制剤や、［４］フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、遠心分離パルプ（ＣＰ）の処理物又は二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）の処理物が、それぞれの凍結乾燥物であることを特徴とする上記［１］〜［３］のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤や、［５］肝臓脂質が、肝臓総脂質、あるいは肝臓コレステロール及び／又は肝臓中性脂肪であることを特徴とする上記［１］〜［４］のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤や、［６］肝臓脂質蓄積抑制剤が、肥満系統のヒト用であることを特徴とする上記［１］〜［５］のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤に関する。
【００１１】
また本発明は、［７］上記［１］〜［６］のいずれか記載の肝臓脂質蓄積抑制剤を含有することを特徴とする肝臓脂質蓄積抑制作用を有する機能性飲食品又は飲食品素材や、［８］飲食品が、お茶、ヨーグルト、ドリンクヨーグルト、ジュース、牛乳、豆乳、酒類、コーヒー、スポーツ飲料であることを特徴とする上記［７］記載の機能性飲食品又は飲食品素材や、［９］飲食品が、コレステロール高含有飲食品であることを特徴とする上記［７］記載の機能性飲食品又は飲食品素材に関する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤や、かかる肝臓脂質蓄積抑制剤を含有する飲食品を摂取することにより、肝臓脂質の蓄積を改善することができ、また、コレステロール高含有飲食品の摂取や、肥満症等に対しても、肝臓脂質の蓄積を予防することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤としては、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、及び／又は、前記果汁（Ｊ２）を遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離した遠心分離パルプ（ＣＰ）、あるいは、これらフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、及び／又は、遠心分離パルプ（ＣＰ）の処理物、を有効成分とする組成物や、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、及び／又は、二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）、あるいは、これらフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の処理物、及び／又は、二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）の処理物を有効成分とする組成物であれば特に制限されるものではないが、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）又はその処理物と、遠心分離パルプ（ＣＰ）又はその処理物と、二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）又はその処理物との混合組成物であってもよく、上記フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）とは、柑橘類を搾汁機で搾汁を行い、果汁（Ｊ１）と搾汁粕に分離し、得られた果汁（Ｊ１）をフィニッシャーで篩別することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離されたフィニッシャー処理後のパルプをいい、上記遠心分離パルプ（ＣＰ）とは、フィニッシャー処理により分離された前記果汁（Ｊ２）を遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ２）から分離した遠心分離パルプ後のパルプをいい、上記二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）とは、フィニッシャー処理により分離された前記果汁（Ｊ２）を軽遠心分離し、果汁（Ｊ３−１）とパルプに分離し、得られた果汁（Ｊ３−１）をさらに重遠心分離することにより得られる、果汁（Ｊ３−２）から分離された二段階遠心分離処理後のパルプをいう。また、本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤は、血中コレステロール濃度をほぼ変化させることなく、肝臓脂質の蓄積を予防及び／又は改善しうるものであり、肝臓脂質としては、具体的に肝臓総脂質、肝臓コレステロール、肝臓中性脂肪、肝臓コレステロール及び肝臓中性脂肪等を挙げることができる。
【００１４】
本発明において用いられる柑橘類としては特に制限はなく、例えば、温州みかん、オレンジ、グレープフルーツ、レモン、夏みかん、甘夏みかん、ダイダイ、ネーブル、ボンタン、ザボン、キンカン、ユズ、カボス、スダチ等を例示することができるが、中でも温州みかんが好ましい。柑橘類、例えば温州みかんの断面からみて、外層部は外果皮（outer peel）におおわれ、フラベド（flavedo）の部分には無数の油胞（oil sacs）があり、その内側はアルベド（albedo）で、白い海綿状の組織である。果肉部はじょうのうで、じょうのう膜により互いに接しており、その中に多くの砂のう（juice sacs）があり、その内部と周辺に果汁がある。かかる果汁を柑橘類から得る方法として、我が国では古くから使用されてきた剥皮搾汁方式のチョッパーパルパー搾汁機を用いる方法や、全果搾汁方式のインライン搾汁機を用いる方法などが知られているが、本発明における搾汁方法としては公知の方法を含め特に制限されるものではない。
【００１５】
剥皮搾汁方式のチョッパーパルパー搾汁機を用いて搾汁するには、例えば、洗浄した柑橘類を９０〜９５℃の湯のなかを通し（ブランチング）、外果皮を軟化させ、可動するロール式剥皮機（peeler）にかけて外果皮を剥き、次に内果を搾汁機のフィダーから連続的に投入し、投入された内果を最初にチョッパーによって細断し、パルパーに移送して、１．５ｍｍ目の無数の丸孔を有する円筒状のスクリーンと内部で回転する３枚のパドルの回転で磨砕し、同時に遠心力でスクリーンのふるい目を通じて強制濾過して果汁（Ｊ１）を得る。この搾汁方式は装置費が安く、搾汁の歩留まりがよい上に良質のパルプが取れる特色があるが、一方では高温度下で搾汁され、パドルの回転が果汁中に空気を包含させるので、果汁が酸化して風味が劣化するという欠点がある。
【００１６】
他方、インライン搾汁機を用いて搾汁するには、洗浄した生柑橘類をベルトコンベアーからフィダーホッパーに列になって転がり込ませ、転がり込んだ柑橘類をフィーダーフリッパーが１個ずつを拾って正確にロアーカップ内へ投入し、ロアーカップ内の柑橘類を、直ちにアッパーカップが下降して圧搾すると同時に、下部から果汁抽出のための丸い孔が開けられるため、必然的に果肉は丸い果皮片とともにロアーカップの下にあるストレーナーチューブのなかに押し込まれ、次にストレーナーチューブの中をオリフィスチューブが上昇し、チューブ内の果肉を下から圧搾し、果汁（Ｊ１）をストレーナーチューブの小孔から流出して集液管に集め、果皮片、じょうのう膜、種子などはオリフィスチューブの中心の空洞を通り、チューブの側面の孔から外部に排出される。このインライン搾汁機を用いると、果汁の品質は生果のままで、しかも密閉した機構のなかで搾汁されるので、香気がよく、果汁の酸化と微生物による汚染が少ない。
【００１７】
その他の搾汁機には米国アンダーソン搾汁機（Anderson juice extractor）をモデルとし、我が国の温州みかんに適合するように設計したというシトラスマスター（Citrus master）の外、バレンシアオレンジ等に好適なブラウン型ジュースエキストラクター（Brawn model juice extractor）、インデリカート社のシトラスジュース搾汁機（Indelicato automatic juice extractor）、ベルツーチ社のシトロプレス（Berutuzzi citropress）があるが、本発明に係る肝臓脂質蓄積抑制剤を得るために、搾汁機としてインライン搾汁機を用いることが好ましい。
【００１８】
搾汁工程後の果汁（Ｊ１）は果皮の小片、じょうのう膜、粗大パルプなどを含んでいるので、フィニッシャー（finisher）を通して篩別を行う。フィニッシャーのスクリーンの目の大きさとしては０．３ｍｍ〜０．５ｍｍ、特に０．５ｍｍが好ましく、０．５ｍｍ目のフィニッシャー処理により粗果汁中のパルプの３０〜５０％を除去することができる。フィニッシャーは円筒状のステンレス製のスクリーンと内部で回転するパドルからなり、投入された果汁（Ｊ１）はパドルの回転により遠心力で、強制的に篩別することにより、果汁（Ｊ２）と、スクリーン内部に残る残渣であるフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）に分離され、このフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）に肝臓脂質蓄積を抑制する有効成分が含まれる。
【００１９】
さらに、果汁（Ｊ２）は、遠心分離機による処理により、そのパルプが除かれる。遠心分離後の果汁は、味、色調などから、パルプ含量３〜５重量％が最適とされている。本発明においては通常の遠心分離、又は軽遠心分離（１回目）と重遠心分離（２回目）との二段階遠心分離を採用することができる。上記通常の遠心分離としては、具体的には、２，５００×ｇ・分以上の遠心強度、好ましくは４，５００×ｇ・分以下の遠心強度での遠心分離を好適に例示することができ、また、上記軽遠心分離と重遠心分離とは相対的な遠心強度を意味し、１回目の遠心分離よりも２回目の遠心分離の方が遠心強度が高く、２回目の遠心分離よりも１回目の遠心分離の方が遠心強度が低い遠心分離を意味し、具体的には、軽遠心分離としては、３，０００×ｇ・分以下の遠心強度、特に５００〜１，５００×ｇ・分の遠心強度での遠心分離を、重遠心分離としては、１，５００×ｇ・分以上の遠心強度、特に２，５００×ｇ・分以上、中でも４，５００×ｇ・分以下の遠心強度での遠心分離を好適に例示することができる。
【００２０】
果汁（Ｊ２）は、通常の遠心分離により、果汁（Ｊ３）とパルプ、すなわち遠心分離パルプ（ＣＰ）に分離される。あるいは、果汁（Ｊ２）は、軽遠心分離（１回目）により、果汁（Ｊ３−１）とパルプに分離され、果汁（Ｊ３−１）はさらに重遠心分離（２回目）により、果汁（Ｊ３−２）とパルプ、すなわち二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）に分離される。これら遠心分離パルプ（ＣＰ）や二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）に肝臓脂質蓄積を抑制する有効成分が含まれる。
【００２１】
果汁製造過程で得られるこれらのフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）や、遠心分離パルプ（ＣＰ）又は二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）は、通常、果汁をある程度含んだ湿潤状態で得られ、これらはかかる湿潤状態でも使用することができるが、肝臓脂質蓄積抑制作用を損なわない範囲で、種々の処理を行うことができる。これらの処理として、洗浄処理、乾燥処理、粉砕処理、均一化処理、摩砕処理や、これらの処理の複合処理を挙げることができる。例えば、果汁分が必要でない場合には、これらパルプに適当量の加水を行い、水で洗浄して果汁分を取り除くことができる。これらは、そのまま、或いは乾燥後に破砕して、肝臓脂質蓄積抑制剤あるいは食品素材として利用することができる。
【００２２】
湿潤状態で得られたフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）や、遠心分離パルプ（ＣＰ）又は二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）乾燥粉末とする場合は、従来の周知の方法を採用することができる。例えば、湿潤状態で得られたそれらのものを、温熱乾燥、真空乾燥、スプレー乾燥、凍結乾燥などの手段で乾燥、好ましくは凍結乾燥した後、カッターミル、ロールミルなどの手段で粉砕することもできる。フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）や、遠心分離パルプ（ＣＰ）又は二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）を、そのまま乾燥粉末とした場合に、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）は、黄橙色で、ほとんど香りがなく、遠心分離パルプ（ＣＰ）や二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）は、橙色で、ほとんど香りがないとともに、これらの乾燥粉末の味は、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、遠心分離パルプ（ＣＰ）、二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）のいずれも、果汁分由来の甘みと酸味がある。また、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、遠心分離パルプ（ＣＰ）、又は二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）を水で洗浄したものの乾燥粉末は、いずれも果汁分由来の甘みと酸味は薄まっている。
【００２３】
フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）又はその処理物や、遠心分離パルプ（ＣＰ）又はその処理物や、二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）又はその処理物はそれぞれ単独で用いて本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤とすることもできるが、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）又はその処理物と遠心分離パルプ（ＣＰ）又はその処理物、あるいは、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）又はその処理物と二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）又はその処理物を併用することが好ましい。その際、これら有効成分に加えて、難消化性デキストリンなどの難消化性多糖類、トレハロースなどの難消化性オリゴ糖、ミネラル類、ビタミン類などの栄養補助剤、他の植物成分及び／又は適宜の味、あるいは香りを付与する調味料、香料、香味料などを適宜配合することもできる。
【００２４】
本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤を医薬品として用いる場合は、薬学的に許容される通常の担体、結合剤、安定化剤、賦形剤、希釈剤、ｐＨ緩衝剤、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤などの各種調剤用配合成分を添加することができる。投与形態としては、粉末、顆粒、カプセル剤、シロップ剤、懸濁液等の剤型で経口的に投与する形態を好適に例示することができる。本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤の投与量は、肝臓における脂質蓄積量の程度、コレステロール含有食品の摂取の程度、患者の年齢、体重、投与方法等で異なるが、例えば、１日当たり大人１ｇ〜１５０ｇ、好ましくは１ｇ〜３０ｇ、より好ましくは１ｇ〜１０ｇ程度を例示することができる。
【００２５】
次に、本発明の肝臓脂質蓄積抑制作用を有する機能性飲食品又は飲食品素材としては、上記本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤を含有するものであれば特に制限されず、肝臓脂質蓄積抑制剤そのもの自体を機能性飲食品や飲食品素材として、あるいは、該肝臓脂質蓄積抑制剤を飲食品や飲食品素材に添加して、肝臓脂質蓄積抑制作用を有する飲食品や飲食品素材とすることもできる。また、本発明の肝臓脂質蓄積抑制作用を有する機能性飲食品又は飲食品素材は、肝臓脂質蓄積抑制作用を有することを特徴とすることから、通常、肝臓脂質蓄積の予防・改善や肝臓脂質蓄積の抑制のために用いられる旨の表示を付した飲食品として流通されることになる。
【００２６】
上記本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤が添加される飲食品や飲食品素材としては、お茶、ヨーグルト、ドリンクヨーグルト、ジュース、牛乳、豆乳、酒類、コーヒー、スポーツ飲料等の飲料類や、プリン、クラッカー、ビスケット、乾パン、クッキー、パン、ケーキ、ゼリー、煎餅などの焼き菓子、羊羹などの和菓子、冷菓、チューインガム等のパン・菓子類や、うどん、そば等の麺類や、かまぼこ、ハム、魚肉ソーセージ等の魚肉練り製品や、みそ、しょう油、ドレッシング、マヨネーズ、ソース、甘味料等の調味類や、チーズ、バター等の乳製品や、豆腐、こんにゃく、その他佃煮、餃子、コロッケ、サラダ等を例示することができるが、飲食品がコレステロール高含有飲食品であるとき、含有された本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤による肝臓脂質蓄積の予防効果や改善効果が有利に発揮されるので好ましい。
【００２７】
本発明の肝臓脂質蓄積抑制剤や、本発明の肝臓脂質蓄積抑制作用を有する機能性飲食品又は飲食品素材は、肝臓脂質量が多く蓄積しそれにより健康を損なっているとき、コレステロール高含有食品を摂取するとき、或いは肥満症に罹患しているとき等に有利に用いられるが、健康人であっても肝臓脂質蓄積の予防のため服用して差し支えない。
【００２８】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。なお、以下の実施例において「％」表記は、いずれも重量％を表す。
【実施例１】
【００２９】
（柑橘類パルプの調製）
原料果実として、温州みかんをインライン搾汁機（ＦＭＣ社製）で搾汁を行い、果汁（Ｊ１）と搾汁粕に分離した。得られた果汁（Ｊ１）を、０．５ｍｍスクリューを装着したフィニッシャー（精研舎社製）で篩別し、果汁（Ｊ２）とパルプ（ＦＰ；フィニッシャーパルプ）に分離した。次に、上記果汁（Ｊ２）を遠心分離機ＳＢ−６０型（ウエストファリアセパレータ社製）で、１，３００×ｇ・分の遠心分離処理を行い、果汁（Ｊ３−１）とパルプに分離した。次に、前記果汁（Ｊ３−１）を遠心分離機ＳＢ−６０型を用いて２，６００×ｇ・分の遠心分離処理を行い、果汁（Ｊ３−２）とパルプ（ＣＲＰ；二段階遠心分離パルプ）に分離した。このようにして得られた、温州みかんフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）、温州みかん二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）、及びこれらの混合物の各凍結乾燥物を、以下柑橘類パルプサンプルとして供試した。
【実施例２】
【００３０】
（１）コレステロール含有飼料の調製
ＡＩＮ（アメリカ国立栄養研究所）−９３Ｇの飼料をコントロール飼料とし、コントロール飼料に実施例１で調製した温州ミカンフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の凍結乾燥物、温州ミカン二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）の凍結乾燥物を、それぞれ１％、２．５％、５％を添加したもの、並びに、ＦＰ２．５％とＣＲＰ２．５％を同時に添加したものを用いた。なおそれぞれの飼料にコレステロールを０．５％添加した。これらコレステロール含有ラット用の供試飼料の組成をまとめて表１に示す。
【００３１】
【表１】
2007223979.tif 000002
【００３２】
（２）動物実験
実験動物としてＳＤ系の雄ラット４週齢（日本エスエルシー株式会社）を使用した。ラットは室温２３±１℃、１２時間の明暗サイクル（明期；３：３０〜１５：３０）に保った動物飼育室内の飼育ゲージで個々に飼育した。その際、飼料と水は自由摂取とした。飼育ゲージ内で、７日間市販の固形飼料（オリエンタル酵母社製）を与え、予備飼育をし、飼育環境に慣らした後、表１に示したコントロール飼料、ＦＰ凍結乾燥物又は／及びＣＲＰ凍結乾燥物を添加した飼料を与え、４週間飼育した。飼料摂取量、体重は毎日測定した。解剖前３日間、糞を採取した。実験飼育最終日の午後８時に解剖を行った。断頭採血により屠殺した。屠殺後すぐに開腹し肝臓、腎周囲脂肪組織および副睾丸周囲脂肪組織を摘出し、重量を測定し、肝臓は分析まで−５０℃で冷凍保存した。尚、腎周囲脂肪組織および副睾丸周囲脂肪組織の合計重量を脂肪重量とし、肥満などで体内に蓄積する脂肪の指標とした。また、血液は解剖後すぐに４℃、３，０００×ｇ、１５分間遠心分離し、血清を得た後、分析まで−５０℃で冷凍保存した。
【００３３】
（３）測定項目及び分析方法
血清総コレステロール濃度は、ＣＯＤ−ＰＯＤ（コレステロールオキシダーゼ−ペルオキシダーゼ）酵素法により測定した。具体的には、コレステロールエステラーゼにより、血清中のエステル型コレステロールを加水分解し、全てのコレステロールを遊離型コレステロールに変化させた。得られた遊離型コレステロールに、ＣＯＤ（コレステロールオキシダーゼ）とＰＯＤ（ペルオキシダーゼ）を作用させ、キノン色素を発色させた。この時の発色の吸光度を測定して、濃度換算を行った。
【００３４】
肝臓総脂質重量、肝臓コレステロール濃度の測定は、次のように行った。肝臓約１ｇを２０ｍＬのクロロホルム：メタノール＝２：１でホモジネートし、それを濾過した溶液に０．３７％ＫＣｌを加えて１日放置し、２層に分かれた下層を恒量したビーカーに入れ、クロロホルム、メタノールを蒸発させ、１０５℃で一日乾燥させて冷却後重量を測定し、肝臓総脂質含量を求めた。また、肝臓総コレステロールは、肝臓脂質抽出液５０μＬを遠心エバポレーターで蒸発乾固させ、それに１０％トリトンＸ１００含有２−プロパノール２００μＬを加えてよく撹拌した後、キット（コレステロールＥテストワコー：和光純薬）によって定量した。  
【００３５】
（４）結果
以上の実験操作、測定方法により得られた最終体重、飼料摂取量、肝臓重量、脂肪重量の測定結果を表２に示す。実験結果は各群の平均値±標準誤差で表した。各データの統計処理は、Studentのｔ−検定法により比較し、Ｐ＜０．０５をもって有意とした（以下同じ。）。表２に示す結果から明らかなように、ＳＤ系の雄ラットに前記の条件で温州ミカンパルプのＦＰ及びＣＲＰを添加した飼料を与えたが、体重、体重増加量、飼料摂取量、肝臓重量、脂肪重量（腎周囲脂肪組織と副睾丸周囲脂肪組織の合計重量）については、温州ミカンパルプ摂取の影響は認められなかった。
【００３６】
【表２】
2007223979.tif 000003
【００３７】
次に、血清総コレステロール濃度、肝臓総脂質重量、肝臓総コレステロール濃度についての結果を表３に示す。表３に示す結果から明らかなとおり、血清総コレステロール濃度については、温州ミカンパルプ摂取の影響は認められなかった。肝臓総脂質重量は、ＣＲＰ５％群及びＦＰ＋ＣＲＰ群でコントロール群と比較し有意に減少した。肝臓総コレステロール濃度は、ＦＰ２．５％群、ＦＰ５％群、ＣＲＰ２．５％群、ＣＲＰ５％群及びＦＰ＋ＣＲＰ群で有意に減少した。肝臓総脂質重量および肝臓総コレステロール濃度は、ＣＲＰ摂取量の増加に対して濃度依存的に減少する傾向が認められた。ＦＰ摂取区についてもＣＲＰ摂取区に比べ、摂取量の増加に対する減少割合は低かったが、減少傾向が認められた。食餌にＦＰ２．５％とＣＲＰ２．５％を混合し、同時に摂取させたラットにおいて、ＣＲＰを５％摂取させた場合とほぼ同等の肝臓脂質の減少効果が認められた。
【００３８】
【表３】
2007223979.tif 000004
【００３９】
以上の結果から、正常なラットを用いた高コレステロール食餌飼育による脂質代謝実験では、血清総コレステロール濃度に有意な差は認められなかった（表３）。一方、肝臓における肝臓総脂質重量、総コレステロール濃度は、高コレステロール食餌飼育にもかかわらず、コントロール群と比較し、ＦＰ及びＣＲＰ添加群で有意に低下した。また、ＦＰとＣＲＰの混合食餌飼育により、肝臓脂質がＣＲＰ５％飼育群と同等の低下が認められたことから、ＦＰとＣＲＰは混合することによりそれぞれ単独で摂取するよりは、肝臓脂肪蓄積を抑制させる相乗効果があることが明らかとなった（表３）。したがって、ＦＰ及びＣＲＰの摂取は、血中コレステロール濃度を殆ど変化させることなく、高コレステロール食摂取時での肝臓脂質の蓄積抑制効果があることが明らかとなった。
【実施例３】
【００４０】
（１）飼料の調製
ＡＩＮ−９３Ｇをコントロール飼料とし、コントロール飼料にそれぞれ実施例１で調製した温州ミカンフィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）の凍結乾燥物５％、温州ミカン二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）の凍結乾燥物５％、及びＦＰ２．５％とＣＲＰ２．５％との混合物を添加したものを用いた。これらコレステロール非含有ラット用の供試飼料の組成をまとめて表４に示す。
【００４１】
【表４】
2007223979.tif 000005
【００４２】
（２）動物実験
実験動物として遺伝的に肥満を発症するZucker（fa/fa）ラット（以下Obese）及び肥満を発症しないZucker（+/+）ラット（以下Lean）５週齢（日本エスエルシー株式会社）を使用した。実施例２と同様に飼育及び解剖を行った。
【００４３】
（３）結果
測定項目、分析方法及び統計処理は実施例２と同様に行った。得られた最終体重、飼料摂取量、肝臓重量、脂肪重量の測定結果を表５に示す。表５に示す結果から明らかなとおり、体重、体重増加量、飼料摂取量、肝臓重量ついては、温州ミカンパルプ摂取の影響は認められなかった。脂肪重量は、Lean飼育群のＦＰ＋ＣＲＰ群で有意に減少した。
【００４４】
【表５】
2007223979.tif 000006
【００４５】
血清総コレステロール濃度、肝臓総脂質重量、肝臓総コレステロール濃度についての結果を表６に示す。表６に示す結果から明らかなとおり、血清総コレステロール濃度は、Lean飼育群及びObese飼育群ともにパルプ摂取の影響は認められなかった。肝臓総脂質重量は、Lean飼育群及びObese飼育群ともにＦＰ５％群、ＣＲＰ５％群及びＦＰ＋ＣＲＰ群のすべての温州ミカンパルプ摂取群において、コントロール群に対し、有意に減少した。また、Obese飼育群では温州ミカンパルプ摂取群の全てにおいてコントロール群の半分以下の肝臓総脂質重量となった。肝臓総コレステロール濃度は、Lean飼育群では、有意差は認められなかったが、Obese飼育群では、すべての温州ミカンパルプ摂取群において、コントロール群に対して有意に減少した。
【００４６】
【表６】
2007223979.tif 000007
【００４７】
以上の実施例３の、通常の食餌による肥満を発症するラットと、肥満を発症しないラットを用いた脂質代謝実験では、肝臓における総脂質重量で、肥満を発症しないラットでも明らかに温州ミカンパルプ摂取による有意な減少が認められた。また、肥満を発症するラットの肝臓における総脂質重量、総コレステロール濃度は、すべての温州ミカンパルプ摂取群で有意に減少し、遺伝的肥満を発症するラットの肝臓脂質蓄積も抑制することが明らかとなった（表６）。
【００４８】
上記実施例２、３より、フィニッシャー処理後パルプ（ＦＰ）及び二段階遠心分離パルプ（ＣＲＰ）を摂取することで肝臓の脂質蓄積を抑制させる効果があることが示された。また、ＦＰ及びＣＲＰ、特にＦＰとＣＲＰを同時に摂取することで肝臓脂質蓄積及び脂肪肝、また長期の脂肪肝から肝硬変へ進行するのを防止することが可能であることが示唆された。本発明による温州ミカンパルプの肝臓脂質蓄積抑制効果は、高コレステロール食摂取時及び遺伝的肥満の条件下において、十分確認することができた。
【実施例４】
【００４９】
（柑橘類パルプを用いた飲料の製造）
実施例１において用いられたＦＰを５％、ＣＲＰを１％、Ｊ３−２を９４％を混合した後、ホモジナイザーで均質化処理した。次いでこの処理液を９８℃になるまで加熱し、加熱終了後に２００ｇ缶に１９５ｇずつ充填し巻締めた。巻締後缶を反転して２分間静置した後冷却した。