(57)【要約】【課題】生体に無害の添加物を用いることで、長期にわたり析出、ゲル化することなく、ｐＨ５．５〜８．５並びに浸透圧比約１の範囲において物理化学的に安定なグリチルリチン酸又はその塩の提供。【解決手段】グリチルリチン酸又はその塩のたとえば５０ｍｇ／ｍＬ以上の高濃度水溶液を０．１〜５．０ｗ／ｖ％のアルギニン又はヒスチジンを含有させたものが、上記課題を解決した。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルギニン又はヒスチジンを含んでなるグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液。
【請求項２】
グリチルリチン酸塩がグリチルリチン酸モノアンモニウム塩である請求項１のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液。
【請求項３】
グリチルリチン酸又はその塩の濃度が５０ｍｇ／ｍＬ以上である請求項１又は２のいずれかに記載のグリチルリチン酸塩又はその塩の高濃度水溶液。
【請求項４】
アルギニン又はヒスチジンの含有量が、０．１〜５．０ｗ／ｖ％である請求項１〜３のいずれかに記載のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液。
【請求項５】
アルギニン又はヒスチジンは、Ｌ体、Ｄ体、ＤＬ体のいずれでもよく、また塩酸塩のように塩を形成するものも含み、請求項１〜４のいずれかに記載のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液。
【請求項６】
水溶液のｐＨが５．５〜８．５の範囲内にある請求項１〜５のいずれかに記載のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、慢性肝疾患などの治療に有効なグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液およびその調製法に関する。
【背景技術】
【０００２】
グリチルリチン酸モノアンモニウム塩は慢性肝疾患における肝機能異常の改善、湿疹・皮膚炎、蕁麻疹、皮膚掻痒症、薬疹・中毒疹、口内炎、小児ストロフルス、フリクテンに医療用医薬品として市販されている。慢性肝疾患の患者に対しては1日に４０〜１００ｍｇのグリチルリチン酸を必要とするが、その医薬品の水溶液中における濃度はグリチルリチン酸として２ｍｇ／ｍＬと低濃度である。高濃度溶液の調製を試みたとき、容易にゲルを形成し、注射剤として投与することができない。また経口投与など非注射剤として試みた場合、グリチルリチン酸はほとんど体内に吸収されない。
【０００３】
グリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液の調製法として、ポリエチレングリコールなどの高分子を用いる方法、エチルアルコールなどのアルコール類を添加する方法などが知られているが、安全性の面から問題である。
チョウジ油などの精油を１ｖ／ｖ％程度含有させた調製法（特許文献１）が報告されたが、少なくとも５時間以上の調製時間を要し、油成分を含有することで過剰の油を除去するために遠心分離機を用いた操作を必要とすること、また、たとえばチョウジ油成分の中には粘膜に有害とされるオイゲノールを含むことで安全性の面からまだ不十分であり、安全な処方とはいえない。
【特許文献１】特開２００５−１２６３６２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
もし生体に有害とされる物質を添加剤として一切使用せずにグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液を調製することができ、且つその高濃度水溶液が生理的条件であるｐＨ７．４付近、浸透圧比約１であれば、静脈内投与に変わる筋肉内あるいは皮下投与など投与ルートに多様性をもたらすことを可能とし、患者への苦痛などの負担を減らすことができる。また非注射剤の開発に対しても、添加物に有害な成分を全く含んでいない安全性の高い製剤として活用できる。
【０００５】
この高濃度水溶液を調製するにあたり、乳化、振とう、撹拌、分離などの特殊な操作を必要としないことで１０〜３０分間という短時間で迅速に調製ができる。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、前記課題を解決するために研究を重ねた結果、グリチルリチン酸又はその塩の水溶液に少量のアルギニン又はヒスチジンを加えることにより、長期に亘って安定な低粘度且つ生理的条件を維持した高濃度のグリチルリチン酸又はその塩の水溶液が得られることを突き止めた。そしてさらに検討を重ね、本発明を完成した。
即ち、本発明は、
（１）アルギニン又はヒスチジンを含んでなるグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液、
（２）グリチルリチン酸塩がグリチルリチン酸モノアンモニウム塩である（１）記載のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液、
（３）グリチルリチン酸塩又はその塩の濃度が５０ｍｇ／ｍＬ以上である（１）又は（２）のいずれかに記載のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液、
（４）アルギニン又はヒスチジンは、Ｌ体、Ｄ体、ＤＬ体のいずれでもよく、また塩酸塩のように塩を形成するものも含む（１）〜（３）のいずれかに記載のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液、
（５）水溶液のｐＨが５．５〜８．５の範囲内にある（１）〜（４）のいずれかに記載のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液、
（６）グリチルリチン酸又はその塩の量が５０ｍｇ／ｍＬ以上であり、アルギニン又はヒスチジンの添加量が０．１〜５．０ｗ／ｖ％であり、加温が３０〜８０℃であるグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液の製造法、
である。
【発明の効果】
【０００７】
本発明のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液は、たとえば冷蔵保存において白濁又はゲルを形成することなく、長期間の保存において安定した状態を維持できる。したがって、例えば１００ｍｇ／ｍＬのグリチルリチン酸水溶液を調製することによって、慢性肝疾患患者に対して静脈内への点滴投与ではなく、筋肉内あるいは皮下などに少量投与することで同等の効果を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
アルギニン又はヒスチジンは、アミノ酸である。これらのＬ体は生体成分であり、アミノ酸製剤などの医薬品として、又は食品として利用されている。Ｌ−アルギニンは安定化剤、緩衝剤などの製剤添加物としても用いられ、製剤添加物としての最大使用量は、医薬品添加物辞典２０００（薬事日報社）の記載において、静脈内注射で４５７．５ｍｇとされている。Ｌ−ヒスチジンは安定化剤として製剤添加物にも用いられ、製剤添加物としての最大使用量は、医薬品添加物辞典２０００（薬事日報社）の記載において、静脈内注射で６２４ｍｇとされている。本発明の高濃度水溶液中のグリチルリチン酸の濃度を１００ｍｇ／ｍＬ、アミノ酸の濃度を５．０ｗ／ｖ％として調製したとき、慢性肝疾患の患者にグリチルリチン酸として１日に２００ｍｇを投与する場合、これらアミノ酸の含量はわずか１００ｍｇとなる。したがって、添加したアミノ酸が大量に体内に投与されることはない。
【０００９】
本発明のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液は、０．１〜５．０ｗ／ｖ％好ましくは１．０〜４．５ｗ／ｖ％になるようにアルギニン又はヒスチジンを添加し、３０〜１００ｍＭのリン酸塩緩衝液を加えて、３０〜８０℃、好ましくは４０〜６０℃に加温して溶解し、室温に戻す。
【００１０】
ｐＨ調整剤は加えなくても差し支えないが、生理的条件であるｐＨ７．４に近づけるために局方アンモニア水などの適当な溶液を加えてもよい。
【実施例１】
【００１１】
（１）実施例１で用いた機器は、次の通りである。
恒温槽（ＤＳ−６１、ヤマト）
恒温水浴（ＤＸ−１０、タイテック）
冷却器（８０ＬＦ、タイテック）
ｐＨメーター（Ｄ−１４、堀場）
浸透圧計（ＯＭ−８０２Ｄ、ＶＯＧＥＬ）
高速液体クロマトグラフィー（６５５、日立）
【００１２】
（２）リン酸塩緩衝液の調製
リン酸水素二ナトリウム１．４２ｇを正確に量り、蒸留水を加えて溶解後、全量を１００ｍＬとした（１００ｍＭリン酸水素二ナトリウム溶液）。リン酸二水素カリウム１．３６ｇを正確に量り、蒸留水を加えて溶解後、全量を１００ｍＬとした（１００ｍＭリン酸二水素カリウム溶液）。１００ｍＭリン酸水素二ナトリウム溶液に１００ｍＭリン酸二水素カリウム溶液を徐々に加えて、ｐＨを７．４にあわせた。
リン酸塩緩衝液の濃度が１００ｍＭ以下のものについては調製した１００ｍＭリン酸塩緩衝液ｐＨ７．４の溶液に蒸留水を加えることで希釈して調製した。
【００１３】
（３）Ｌ−アルギニン又はＬ−ヒスチジンを各々１０，２０，５０，１００、２００、３００および５００ｍｇを正確にバイアル瓶に秤量した。これら各バイアル瓶に、グリチルリチン酸モノアンモニウム塩１ｇを正確に加えた。１００ｍＭリン酸塩緩衝液約９ｍＬを加え６０℃で溶解後、室温に戻して１００ｍＭリン酸塩緩衝液を加えて全量を１０ｍＬとした。
【００１４】
（４）ゲル化温度の測定
前記（３）の操作により調製した試料を３０℃に設定した水浴に移した。水浴の温度を１０分間に１℃の割合で低下させ、試料がゲル化し始める温度を検討した。各試料のゲル化した温度を表１に示した。
【００１５】
（５）前期（３）の操作により調製した試料の中で３℃においてゲルを形成しなかった試料のｐＨを測定した。各試料のｐＨ値を表１に示した。
【００１６】
（６）前期（３）の操作により調製した試料の中で３℃においてゲルを形成しなかった試料の浸透圧を測定した。各試料の浸透圧を表１に示した。
【００１７】
（７）前期（３）の操作により調製した試料の中で３℃においてゲルを形成しなかった試料中のグリチルリチン酸モノアンモニウム塩の濃度を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。各試料中のグリチルリチン酸モノアンモニウム塩の濃度を表１に示した。
【００１８】
【表１】
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【００１９】
（５）結果
１００ｍｇ／ｍＬのグリチルリチン酸モノアンモニウム塩水溶液にＬ−アルギニン又はＬ−ヒスチジンを加えることで、その添加量に比例してゲル化する温度が低下した。Ｌ−アルギニンおよびＬ−ヒスチジンともに濃度として１ｗ／ｖ％以上にすることで冷蔵保存においてもゲル形成しないことが明らかになった。
３℃でゲルを形成しなかった試料のｐＨ値は５．５〜８．０の範囲であった。
３℃でゲルを形成しなかった試料の浸透圧は３５７〜５７８ｍＯｓｍの範囲であった。
３℃でゲルを形成しなかった試料のグリチルリチン酸モノアンモニウム塩の濃度は９７．０ｍｇ／ｍＬ以上であった。
【実施例２】
【００２０】
（１）実施例２で用いた機器は、次の通りである。
恒温槽（ＤＳ−６１、ヤマト）
ｐＨメーター（Ｄ−１４、堀場）
浸透圧計（ＯＭ−８０２Ｄ、ＶＯＧＥＬ）
高速液体クロマトグラフィー（６５５、日立）
【００２１】
（２）生理的条件であるｐＨ７．４付近、浸透圧比約１を満たすグリチルリチン酸モノアンモニウム塩溶液の調製
実施例１の結果をもとにして、生理的条件であるｐＨ７．４付近、浸透圧比約１（３００ｍＯｓｍ）を満たすグリチルリチン酸モノアンモニウム塩溶液の調製を試みた。浸透圧の調整はリン酸塩緩衝液の濃度を変えることでおこなった。ここではｐＨ調整剤の添加はおこなわなかった。
【００２２】
（３）処方１
Ｌ−アルギニン２００ｍｇおよびグリチルリチン酸モノアンモニウム塩１ｇを正確にバイアル瓶に秤量し、７０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を９ｍＬ加え、６０℃の恒温槽に３０分間放置し溶解させた。室温に戻した後、７０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を加えて全量を１０ｍＬとした。
（４）処方２
Ｌ−アルギニン３００ｍｇおよびグリチルリチン酸モノアンモニウム塩１ｇを正確にバイアル瓶に秤量し、５０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を９ｍＬ加え、６０℃の恒温槽に３０分間放置し溶解させた。室温に戻した後、５０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を加えて全量を１０ｍＬとした。
（５）処方３
Ｌ−アルギニン４５０ｍｇおよびグリチルリチン酸モノアンモニウム塩１ｇを正確にバイアル瓶に秤量し、３０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を９ｍＬ加え、６０℃の恒温槽に３０分間放置し溶解させた。室温に戻した後、３０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を加えて全量を１０ｍＬとした。
（６）処方４
Ｌ−ヒスチジン１００ｍｇおよびグリチルリチン酸モノアンモニウム塩１ｇを正確にバイアル瓶に秤量し、８０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を９ｍＬ加え、６０℃の恒温槽に３０分間放置し溶解させた。室温に戻した後、８０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を加えて全量を１０ｍＬとした。
（７）処方５
Ｌ−ヒスチジン２００ｍｇおよびグリチルリチン酸モノアンモニウム塩１ｇを正確にバイアル瓶に秤量し、５０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を９ｍＬ加え、６０℃の恒温槽に３０分間放置し溶解させた。室温に戻した後、５０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を加えて全量を１０ｍＬとした。
（８）処方６
Ｌ−ヒスチジン３００ｍｇおよびグリチルリチン酸モノアンモニウム塩１ｇを正確にバイアル瓶に秤量し、２０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を９ｍＬ加え、６０℃の恒温槽に３０分間放置し溶解させた。室温に戻した後、２０ｍＭリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を加えて全量を１０ｍＬとした。
【００２３】
処方１〜処方６のｐＨおよび浸透圧を測定した。各試料のｐＨ値および浸透圧を表２に示した。
【００２４】
（９）グリチルリチン酸モノアンモニウム塩の安定性
処方１〜処方６の各試料を４℃、４０℃および６０℃に設定した恒温槽に保管し、２週間後のグリチルリチン酸モノアンモニウム塩の濃度を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定した。各処方調製直後のグリチルリチン酸モノアンモニウム塩の濃度を１００としたときの残存率（平均値±標準偏差）を表２に示した。
【００２５】
【表２】
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【００２６】
（１０）結果
処方２および処方３は限りなく生理的条件であるｐＨ７．４、浸透圧比約１に近かった。処方１、処方４〜６のｐＨ値は酸性側に偏ってはいるが、ｐＨ調整剤の添加によりｐＨ７．４付近に近づけることが可能である。安定性の検討より、６０℃、２週間の保存においても残存率が９８％以上であった。これらの結果は、Ｌ−アルギニンあるいはＬ−ヒスチジンを添加物として用いた場合、それらの共存下においてもグリチルリチン酸が安定に存在することを示す。
【産業上の利用可能性】
【００２７】
本発明のグリチルリチン酸又はその塩の高濃度水溶液は、安全性の面で支障のない添加物を用いることでその調製が可能になった。慢性肝疾患の患者に対してこれまで処方されてきた静脈内への大量投与に変わる製剤、例えば少量の静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与製剤として容易にしかも迅速に処方化が可能になる。