(57)【要約】【課題】スフィンゴ脂質の細胞内での挙動を解明するために有用なスフィンゴシン類縁体を合成するために有用な原料を提供する。【解決手段】一般式（Ｉ）2007099709.tif 000023（式中、Ｑ１は水素原子またはアミノ基の保護基、Ｑ2は水素原子または水酸基の保護基であり、Ｑ３は水素原子またはチオール基の保護基または一般式（II）2007099709.tif 000024（式中、Ｒ１およびＲ２は置換基を有してもよいアルコキシ基である。）である。Ｑ１およびＱ２は一体となって環を形成していてもよい。）で表されるチオアミノアルコール類。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2007099709.tif 000021
（式中、Ｑ１は水素原子またはアミノ基の保護基、Ｑ2は水素原子または水酸基の保護基であり、Ｑ３は水素原子またはチオール基の保護基または一般式（II）
【化２】
2007099709.tif 000022
（式中、Ｒ１およびＲ２は置換基を有してもよいアルコキシ基である。）である。Ｑ１およびＱ２は一体となって環を形成していてもよい。）で表されるチオアミノアルコール類。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ドラックデリバリーシステム等に有用なスフィンゴシン類や化粧品用途に利用されるセラミド類に誘導することが可能な、新規のビニル基を有するチオアミノアルコール類に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
スフィンゴミエリンの代謝物であるスフィンゴ脂質は、細胞死、細胞分化、細胞増殖、プロテインキナーゼＣ阻害などの様々な生体内情報伝達に関与していることから大きな注目を集めている。そして、多くの研究者により、これら脂質の関係する現象の解明が積極的に行われている。
【０００３】
そのスフィンゴ脂質の１つであるスフィンゴシンは主に酵母細胞に存在するが、これは哺乳動物細胞においてシグナル分子として知られているスフィンゴシンに対応しており、多くの研究が行われている。しかしながら、スフィンゴシンの細胞内での存在場所や発現に至る経路、作用機序などの情報は充分に得られていない。
【０００４】
現在、この代謝機構を解明するものとして、Ｃ６−ＮＢＤフィトスフィンゴシンやＣ１２−ＮＢＤフィトスフィンゴシンという化合物が市販されているが、これは副鎖であるアシル基に蛍光標識基ユニットがあり、この部分は加水分解酵素により切断されるため、フィトスフィンゴシンが代謝されたフィトスフィンゴシン−１−リン酸の細胞内の局在場所や代謝物の挙動を解明するためには有用ではない。
【０００５】
このような問題を解決するために代謝をうけない主鎖に蛍光標識基を導入した化合物も開発されている。例えば、特許文献１には、スフィンゴシン類縁体のアルキル基末端に蛍光標識基を導入した化合物が記載されている。また、特許文献２には、フィトスフィンゴシン類縁体のアルキル基末端に蛍光標識基を導入した化合物が記載されている。さらに、チオアミノアルコール類としては、特許文献３にアルケニル基やアルキニル基を有するものが記載されている。
【特許文献１】特開２００３−２６１７９４号公報
【特許文献２】特開２００４−２６９３８１号公報
【特許文献３】特開２００４−１７５７３５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、特許文献１および２に記載されている化合物は細胞内でリン酸エステル部分が加水分解されるため、受容体との複合体の挙動観測が困難であるという問題を有している。また、特許文献３に記載されているアルケニル基を有する化合物では、内部オレフィン構造を有するため、スフィンゴシン類縁体を合成する際の反応として好適なメタセシス反応に対する反応性が悪いという問題がある。加えて、メタセシス反応によって副生するオレフィンが高沸点のオレフィン混合物となってしまうため、選択性も悪く、さらにオレフィンを系外に除去できず平衡を偏らせることが困難で、反応が完結できないという問題がある。
【０００７】
本発明は上記事情に鑑みなされたものであり、スフィンゴシンの細胞内での存在場所や代謝機構を解明するために有用な、リン酸エステル部分が加水分解されにくい蛍光標識基部位を有するスフィンゴシン類縁体を合成するために有用な原料を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明のチオアミノアルコール類は、一般式（Ｉ）
【化１】
2007099709.tif 000002
【０００９】
（式中、Ｑ１は水素原子またはアミノ基の保護基、Ｑ2は水素原子または水酸基の保護基であり、Ｑ３は水素原子またはチオール基の保護基または一般式（II）
【化２】
2007099709.tif 000003
【００１０】
（式中、Ｒ１およびＲ２は置換基を有してもよいアルコキシ基である。）である。Ｑ１およびＱ２は一体となって環を形成していてもよい。）で表されることを特徴とするものである。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のチオアミノアルコール類は、蛍光標識基部位を有し、かつリン酸エステル部分が加水分解されにくいスフィンゴシン類縁体である新しい蛍光標識化スフィンゴシン１−リン酸Sアナログ体を合成することが可能である。従って、スフィンゴシン−１−リン酸の細胞内の局在場所や代謝物の挙動を解明、スフィンゴシン−１−リン酸の受容体との複合体の挙動を解明するのに有用である。
【００１２】
また、本発明のチオアミノアルコール類は、スフィンゴシン類縁体を合成する際の反応として好適なメタセシス反応に対する反応性が良く、反応によって副生するオレフィンが気体であるエチレンであるため、これを系外に除去することが容易であり、反応の選択性も高いという利点を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明のチオアミノアルコール類は、一般式（Ｉ）
【化３】
2007099709.tif 000004
【００１４】
（式中、Ｑ１は水素原子またはアミノ基の保護基、Ｑ2は水素原子または水酸基の保護基であり、Ｑ３は水素原子またはチオール基の保護基または一般式（II）
【化４】
2007099709.tif 000005
【００１５】
（式中、Ｒ１およびＲ２は置換基を有してもよいアルコキシ基である。）である。Ｑ１およびＱ２は一体となって環を形成していてもよい。）で表されることを特徴とする。
【００１６】
本発明のアミノ基の保護基としては、公知のアミノ基の保護基はいずれも使用でき、たとえばメトキシカルボニル基、ｔ−ブトキシキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、ベンジル基等を挙げることができる。
【００１７】
本発明の水酸基の保護基としては、公知の水酸基の保護基はいずれも使用でき、たとえばトリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、メトキシメチル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロフラニル基、ｐ−メトキシベンジル基等を例示することができる。
【００１８】
本発明のチオール基の保護基としては、公知のチオール基の保護基はいずれも使用でき、たとえばベンジル基、メトキシメチル基、アセチル基、トリエチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基等を挙げることができる。
【００１９】
Ｑ１およびＱ２が一体となって環を形成している保護基の例としては、ジフェニルマレイミド環、フタルイミド環、ジチアコハク酸イミド環、テトラメチルジシラザシクロペンタン環、テトラメチルジシライソインドリン環等を例示することができる。
【００２０】
本発明のアルコキシ基としては、枝分かれを有していてもよい炭素数１から８のアルキルオキシ基であり、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔ−ブチルオキシ基、ペンチルオキシ基等を例示することができる。
【００２１】
アルコキシ基の置換基としては特に制限はないが、たとえば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子等のハロゲン原子、水酸基、低級アルコキシ基、アミノ基等を例示することができる。
【００２２】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物は、一般式（III）
【化５】
2007099709.tif 000006
【００２３】
（式中、Ｗは蛍光標識基であり、Ｘは炭素数１〜15のアルキレン基である。）
からたとえばメタセシス反応を利用し、下記反応式に示すように、水酸基やアミノ基を保護・脱保護・官能基変換することにより容易にスフィンゴシン１−リン酸Sアナログ体に誘導することができる。
【化６】
2007099709.tif 000007
【００２４】
蛍光標識基は、アミノ基と結合することが可能な蛍光標識ユニットであれば何ら限定されることはなく、たとえば、７−ニトロベンゾ−２−オキサ−１，３−ジアゾール基、７−ニトロベンゾ[１，２，５]オキサジアゾール基、アントラセニル基、ダンシル基等を例示することができる。
【００２５】
メタセシス反応には、既存の各種メタセシス触媒が好適に用いられるが、中でもルテニウムカルベン錯体が、反応効率の点で好ましい。
【００２６】
上記メタセシス反応は、反応に関与しない溶媒中で行うことが好ましく、ベンゼン、トルエン、キシレン、ヘキサン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン、ジオキサン等のエーテル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン等のハロゲン化溶媒等を例示することができる。
【００２７】
メタセシス反応温度は、0℃ないし150℃の温度範囲から適宜選択することができるが、反応速度ならびに経済的観点から室温ないし80℃の範囲が好ましい。  
以下、本発明を実施例および参考例によりさらに詳しく説明する。
【実施例】
【００２８】
（実施例１）
【化７】
2007099709.tif 000008
【００２９】
(2S)-N-メチル-N-メトキシ-3-ベンジルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ−プロピオンアミド（1）（3.00 g, 8.46 mmol）のTHF(32.55 ml)溶液に、室温でマグネシウムブロマイドの1.0M  THF溶液(33.85 ml, 33.85 mmol)を滴下した。30分攪拌した後、反応混合物を2N HCl と氷の混合物に滴下し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに9〜25％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S)-1-ベンジルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-4-ペンテン-3-オン（2）（2.11 g, 78%）を得た。(2S)-1-ベンジルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-4-ペンテン-3-オンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００３０】
IR( NaCl neat ) = 3376, 2982, 1682, 1510, 1277, 1163 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 7.28 ( m, 5H ), 6.44 ( dd, J= 17.3, 10.5 Hz, 1H ), 6.33 ( dd, J= 17.3, 1.2 Hz, 1H ), 5.84 ( dd, J= 10.2, 1.2 Hz, 1H ), 5.46-5.37 ( brm, 1H ), 4.75 ( m, 1H ), 3.73 ( s, 2H ), 2.89 ( dd, J= 13.7, 5.6 Hz, 1H ), 2.67 ( dd, J= 13.9, 6.1 Hz, 1H ), 1.46 ( s, 9H ) 
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 196.7, 155.0, 137.5, 132.7, 130.2, 128.8, 128.4, 127.0, 79.8, 56.3, 36.4, 32.6, 28.1
【００３１】
（実施例２）
【化８】
2007099709.tif 000009
【００３２】
(2S)-1-ベンジルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-4-ペンテン-3-オン（2）(8.38 g, 26.08 mmol)のエタノール(130.38 ml)とTHF（30.00 ml）の混合溶液に、-78 ℃でリチウムトリ−ｔ−ブトキシアルミニウムハイドライド(14.58 g, 57.37 mmol)を加え、同温にて15分攪拌した。反応混合物に2N HCl を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに9〜33％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R)-1-ベンジルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテン（3） (8.28 g, 98%)を得た。(2S,3R)-1-ベンジルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００３３】
IR( KBr disk ) = 3351, 2982, 1686, 1528, 1292, 1173, 1013 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 7.28 ( m, 5H ), 5.79 ( ddd, J= 17.3, 10.5, 5.6 Hz, 1H ), 5.30 ( ddd, J= 17.3, 1.5, 1.5 Hz, 1H ), 5.20 ( ddd, J= 10.5, 1.5, 1.5 Hz, 1H ),  4.90-4.77 ( brm, 1H ), 4.27 ( m, 1H ), 3.82 ( m, 1H ), 3.73 ( s, 2H ), 2.83-2.75 ( brm, 1H ), 2.63 ( dd, J= 13.9, 4.9 Hz, 1H ), 2.54 ( dd, J= 13.9, 7.8 Hz, 1H ), 1.46 ( s, 9H ) 
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 156.3, 137.9, 136.6, 128.9, 128.5, 127.1, 116.9, 79.9, 74.5, 54.0, 36.4, 31.6, 28.3
【００３４】
（実施例３）
【化９】
2007099709.tif 000010
【００３５】
リチウム(0.63 g, 90.37 mmol)の液体アンモニア(338.90 ml)溶液に、-78 ℃で(2S,3R)-1-ベンジルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテン（3）(7.31 g, 22.59 mmol)のTHF(112.97 ml)溶液を加え、3時間還流した。反応混合物に塩化アンモニウムを加え、室温にてアンモニアを濃縮した後水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに9〜33％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R)-1-メルカプト-2-t-ブトキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ-4-ペンテン（4）(5.22 g, 99%)を得た。(2S,3R)-1-メルカプト-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００３６】
IR( KBr disk ) = 3358, 2980, 1688, 1530, 1171 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 5.90 ( ddd, J= 17.3, 10.5, 5.6 Hz, 1H ), 5.37 ( ddd, J= 17.3, 1.5, 1.5 Hz, 1H ), 5.27 ( ddd, J= 10.5, 1.5, 1.5 Hz, 1H ),  4.99-4.88 ( brm, 1H ), 4.31 ( m, 1H ), 3.88 ( m, 1H ), 2.77 ( dd, J= 8.5, 6.6 Hz, 1H ), 2.75 ( dd, J= 8.8, 4.7 Hz, 1H ), 1.46 ( s, 9H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 156.0, 137.0, 117.1, 79.9, 73.9, 56.0, 28.3, 25.2
【００３７】
（実施例４）
【化１０】
2007099709.tif 000011
【００３８】
(2S,3R)-1-メルカプト-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテン（4）(1.00 g, 4.29 mmol)のDMF(21 ml)溶液に0 oCでジメチルアミノピリジン(0.52 g, 4.29 mmol)、トリエチルアミン(1.51ml, 10.72 mmol)、t-ブチルジメチルシリルクロライイド(1.62 g, 10.72 mmol)を順次加えた。そのままの温度で３時間攪拌した後、反応混合物に氷を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣のTHF(10.41 ml)溶液に-78 ℃でテトラブチルアンモニウムフルオリド(1.07 g, 4.07 mmol)のTHF溶液を加え、同温にて10分間攪拌した。反応混合物に塩化アンモニウムを加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣の水(21.53 ml)とアセトニトリル(85.72 ml)の混合溶媒に、室温にてトリブチルホスフィン(1.06 ml, 4.27 mmol)を加え１時間攪拌した。反応混合物に塩化アンモニウムを加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに1〜9％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R)-1-メルカプト-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテン（5） ( 0.77 g, 52%)を得た。
【化１１】
2007099709.tif 000012
【００３９】
次いで、得られた(2S,3R)-1-メルカプト-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテン（5）(0.10 g, 0.288 mmol)の塩化メチレン(5.76 ml)溶液に、0 oCで四臭化炭素(0.24g, 0.719 mmol)と亜リン酸エステル(0.085 ml, 0.719 mmol)、2,-6ルチジン(0.076 ml, 0.576 mmol)を順次加え、同温にて１時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに5〜33％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテン（6） ( 0.078 g, 59%)を得た。(2S,3R)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００４０】
IR( NaCl neat ) = 3324, 2955, 2259, 1713, 1254, 1024 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 5.80 ( ddd, J= 15.6, 10.5, 5.4 Hz, 1H ), 5.29 ( dd, J= 15.6, 1.2 Hz, 1H ), 5.19 ( dd, J= 10.5, 1.2 Hz, 1H ),  5.22-5.16 ( brm, 1H ), 4.34 ( m, 1H ), 3.80 ( d, J= 12.7 Hz, 3H  ), 3.78 ( d, J= 12.7 Hz, 3H ), 3.75 (m, 1H ), 3.03 ( ddd, J= 16.4, 13.7, 3.9 Hz, 1H ), 2.92 ( m, 1H ), 1.46 ( s, 9H ) 13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 155.3, 137.5, 116.4, 79.2, 74.6, 55.9, 53.8 ( Jc-p= 5.8 ), 53.7( Jc-p= 5.8 ), 30.0, 28.3, 25.7, 18.0, -4.6, -5.2
【００４１】
（実施例５）
【化１２】
2007099709.tif 000013
【００４２】
(2S,3R)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテン（6）(0.235 g, 0.516 mmol)のTHF(5.16 ml)溶液に、室温で2N HCl 水溶液(2.06 ml)を加え６時間攪拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウムを加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに12〜67％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテン（7） (0.176 g, 75%)を得た。(2S,3R)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００４３】
IR( NaCl neat ) = 3376, 2978, 1699, 1526, 1246, 1029 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 5.89 ( ddd, J= 16.9, 10.5, 5.5 Hz, 1H ), 5.36 ( d, J= 17.4  Hz, 1H ), 5.25 ( d, J= 10.6 Hz, 1H ),  5.27-5.22 ( brm, 1H ), 4.23 ( m, 1H ), 3.81 ( d, J= 11.9 Hz, 3H ), 3.79 ( d, J= 11.9 Hz, 3H ), 3.81 ( m, 1H ), 3.39 ( brm, 1H ), 3.19 ( m, 2H), 1.44 ( s, 9H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 156.0, 136.7, 117.2, 79.9, 73.9, 54.2 ( Jc-p= 5.8 ), 54.1 ( Jc-p= 5.8 ), 31.0, 28.3
【００４４】
（実施例６）
【化１３】
2007099709.tif 000014
【００４５】
四臭化炭素( 0.953 g, 2.87 mmol )のピリジン( 2.10 ml )溶液に0℃で、亜リン酸エステル( 0.43 ml, 2.87 mmol )を加え、続いて(2S,3R)-1-メルカプト-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテン（5）( 300 mg, 0.836 mmol )のピリジン( 2.09 ml )溶液を加えた後、同温にて３時間攪拌し、反応混合物を濾過し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに9〜25％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテン（10）( 332 mg, 72% )を得た。(2S,3R)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００４６】
IR( NaCl neat ) = 3327, 2957, 2857, 1711, 1522, 1254, 1017 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 5.79 ( ddd, J= 16.9, 10.5, 5.2 Hz, 1H ), 5.30 ( d, J= 17.2 Hz, 1H ), 5.20 ( d, J= 10.5 Hz, 1H ), 5.17-5.09 ( brm, 1H ), 4.43-4.27 ( m, 3H ), 3.82 ( d, J= 12.6 Hz, 3/2H ), 3.80 ( d, J= 12.6 Hz, 3/2H ), 3.76 ( m, 1H ), 3.54 ( t, J= 6.5 Hz, 2/2H ), 3.52 ( d, J= 5.5 Hz, 2/2H ), 3.071 ( ddd, J= 17.2, 13.7, 7.3 Hz, 1/2H ), 3.065 ( m, 1/2H ), 2.935 ( ddd, J= 16.2, 13.7, 10.1 Hz, 1/2H ), 2.935 ( ddd, J= 17.2, 13.7, 10.1 Hz, 1/2H ), 1.44 ( s, 9/2H ), 1.43 ( s, 9/2H ), 0.90 ( s, 9H ), 0.05 ( s, 3H ), 0.01 (s, 3H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 155.3, 137.4, 116.6, 79.4, 74.7 ( 1/2C ), 74.6 (1/2C ), 66.2 ( Jc-p= 4.5 Hz ), 44.8, 54.0 ( Jc-p= 5.4 Hz ), 30.3 (1/2C ), 30.1 ( 1/2C ), 20.1 ( m ), 28.3, 25,7, 18.0, -4.6, -5.2
【００４７】
（実施例７）
【化１４】
2007099709.tif 000015
【００４８】
(2S,3R)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-4-ペンテン（10）(0.326 g, 0.594 mmol)のメタノール(5.94 ml)溶液に、室温で2N HCl 水溶液(1.19 ml)を加え4時間攪拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウムを加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサンに9〜50％の酢酸エチルを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテン（12） (0.213 g, 83%)を得た。(2S,3R)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００４９】
IR( NaCl neat ) = 3403, 2978, 1701, 1524, 1248, 1171, 1017 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 5.89 ( ddd, J= 16.9, 10.6, 5.7 Hz, 1H ), 5.38 ( d, J= 17.2 Hz, 1H ), 5.27 ( d, J= 10.6 Hz, 1H ), 5.23-5.15 ( brm, 1H ), 3.13 ( m, 3H ), 4.26 ( m, 1H ), 3.87 ( m, 1H ), 3.85 ( d, J= 12.6 Hz, 3/2H ), 3.83 ( d, J= 12.6 Hz, 3/2H ), 3.87 ( m, 1H ), 3.563 ( t, J= 6.1 Hz, 2/2H ), 3.559 ( t, J= 6.1 Hz, 2/2H ), 3.21-3.04 ( m, 2H ), 1.451 ( s, 9/2 ), 1.447 ( s, 9/2 )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 155.8, 136.8, 116.9, 79.6, 73.8, 66.4 ( Jc-p= 5.8 Hz ), 55.2, 54.2 ( Jc-p= 5.8 Hz ), 31.1 ( 1/2C ), 31.0 ( 1/2C ), 29.1 ( m ), 28.2
【００５０】
（参考例１）
【化１５】
2007099709.tif 000016
【００５１】
(2S,3R)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテン（7）(30 mg, 0.879 mmol)の ジクロロメタン(1.76 ml)溶液に室温で11-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-1-ウンデセン（11）( 117 mg, 0.352 mmol )を加え、続いてトリシクロホスフィン[1,3-ビス(2,4,6-トリメチルフェニル)-4,5-ジヒドロイミダゾル-2-イリデン](ベンジリデン)ルテニウム（ＩＶ）ジクロリド( 2 mg, 0.00264 mmol )を加え、反応混合物を２時間還流した。反応混合物を減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサンに12〜67％の酢酸エチルを溶かしたもの）により分離・精製し、(2S,3R,4E)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（8） (48 mg, 85%)を得た。(2S,3R,4E)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００５２】
IR( KBr disk ) = 3407, 2928, 1701, 1586, 1530, 1300, 1022 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 8.49 ( d, J= 8.7 Hz, 1H ), 6..44-6.38 ( brm, 1H ), 6.17 ( d, J= 8.7 Hz, 1H ), 5.75 ( dt, J= 15.1, 7.3 Hz, 1H ), 5.48 ( dd, J= 15.1, 7.3 Hz, 1H ), 5.21-5.15 ( brm, 1H ), 4.13 ( m, 1H ), 3.83 ( d, J= 11.5 Hz, 3H ), 3.79 ( d, J= 11.5 Hz, 3H ), 3.81 (m, 1H ), 3.48 ( dt, J= 6.8, 6.4 Hz, 2H ), 3.14 ( m, 2H ), 2.04 ( dt, J= 7.3, 6.4 Hz, 2H ), 1.80 ( tt, J= 7.3, 7.3 Hz, 2H ), 1.59 ( s, 9H ), 1.48-1.22 ( m, 12H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 155.9, 144.23, 144.16, 143.9, 136.6, 134.4, 128.3, 123.1, 98.5, 79.7, 73.8, 55.6, 54.14( Jc-p= 5.8 ), 54.09 ( Jc-p= 5.8 ), 44.0, 32.1, 31.1, 29.2, 29.1, 29.0, 28.9, 28.8, 28.2, 26.8
【００５３】
（参考例２）
【化１６】
2007099709.tif 000017
【００５４】
(2S,3R,4E)-1-ジメチルホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（8）(108 mg, 0.167 mmol)のジクロロメタン(0.83 ml)溶液に室温でトリメチルシリルブロミド(0.22 ml, 1.67 mmol)を加え２時間攪拌し、反応混合物を減圧濃縮した。残渣にメタノール(0.83 ml)を加え室温にて１時間攪拌し、反応混合物を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (クロロホルムに9〜33％のメタノールを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R,4E)-1-ホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（9）(70 mg, 80%)を得た。(2S,3R,4E)-1-ホスホリルチオ-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００５５】
IR( KBr disk ) = 3414, 2924, 1586, 1499, 1300 cm-1
1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ: 8.44 ( d, J= 8.9 Hz, 1H ), 6.28 ( d, J= 8.9 Hz, 1H ), 5.83 ( dt, J= 15.6, 6.9 Hz, 1H ), 5.44 ( dd, J= 15.3, 6.6 Hz, 1H ), 4.28 ( dd, J= 5.7, 5.7 Hz, 1H ), 3.48 ( m, 2H ), 3.29 ( m, 1H ), 3.01 ( ddd, J= 15.9, 15.9, 3.9 Hz, 1H ), 2.85 ( ddd, J= 31.4, 16.2, 8.9 Hz, 1H ), 2.05 ( dt, J= 7.1, 6.9 Hz, 2H ), 1.73 ( tt, J= 7.1, 7.1 Hz, 2H ), 1.45-1.23 ( m, 12H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 146.6, 145.8, 145.4, 138.6, 137.0, 127.9, 122.7, 99.6, 72.2, 58.8, 44.9, 33.4, 30.54, 30.45, 30.35, 30.26, 30.08, 29.3, 29.0( Jc-p= 511.4 ), 28.0
【００５６】
（参考例３）
【化１７】
2007099709.tif 000018
【００５７】
(2S,3R)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-4-ペンテン（12）(207 mg, 0.477 mmol)の ジクロロメタン(4.77 ml)溶液に室温で11-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-1-ウンデセン（11）( 634  mg, 1.906 mmol )を加え、続いてトリシクロホスフィン[1,3-ビス(2,4,6-トリメチルフェニル)-4,5-ジヒドロイミダゾル-2-イリデン](ベンジリデン)ルテニウム(IV)ジクロリド( 12 mg, 0.0143 mmol )を加え、反応混合物を２時間還流した。反応混合物を減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサンに9〜50％の酢酸エチルを溶かしたもの）により分離・精製し、(2S,3R,4E)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（13） (315 mg, 90%)を得た。(2S,3R,4E)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００５８】
IR( NaCl neat ) = 3337, 2928, 1701, 1586, 1300, 1013 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 8.50 ( d, J= 8.7 Hz, 1H ), 6.42-6.33 ( brm, 1H ), 6.17 ( d, J= 8.7 Hz, 1H ), 5.75 ( dt, J= 15.4, 6.6 Hz, 1H ), 5.48 ( dd, J= 15.4, 6.6 Hz, 1H ), 5.19-5.09 ( brm, 1H ), 4.37 ( m, 2H ), 4.17 ( m, 1H ), 3.85 ( d, J= 12.6 Hz, 3/2H ), 3.827 ( d, J= 12.6 Hz, 3/2H ), 3.83 ( m, 1H ), 3.561 ( t, J= 6.4 Hz, 2/2H ), 3.556 ( t, J= 6.4 Hz, 2/2H ), 3.49 ( td, J= 7.1, 6.2 Hz, 1H ), 3.21-3.00 ( m, 2H ), 2.04 ( dt, J= 7.1, 6.8 Hz, 2H ), 1.81 ( tt, J= 7.3, 7.3 Hz, 2H ), 1.443 ( s, 9/2H ), 1.439 ( s, 9/2H ), 1.48-1.25 ( m, 12H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 155.9, 144.2, 143.9, 136.6, 134.5, 128.2, 123.3, 98.4, 79.7, 73.8, 66.5 ( Jc-p= 5.7 Hz ), 55.5, 54.3 ( Jc-p= 6.8 Hz ), 44.0, 31.3, 29.6, 29.2, 29.2-29.1 ( m ), 29.1, 29.0, 28.9, 28.8, 28.3, 26.8
【００５９】
（参考例４）
【化１８】
2007099709.tif 000019
【００６０】
(2S,3R,4E)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-t-ブトキシカルボニルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（13）(102 mg, 0.138 mmol)のジクロロメタン(1.38ml)溶液に0 ℃でトリフルオロ酢酸(0.28 ml)を同温にて加え、１．５時間攪拌した。反応混合物に１NNaOHを加えpH9とした後、同温にて塩化パルミトイル（76 mg, 0.0276 mmol）を加え20分攪拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮を行った。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (クロロホルムに0〜5％のメタノールを溶かしたもの) により精製し、(2S,3R,4E)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-ヘキサデカノイルアミン-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（14）( 92 mg, 76% )を得た。(2S,3R,4E)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-ヘキサデカノイルアミン-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００６１】
IR( NaCl neat ) = 3291, 2924, 2853, 1586, 1300, 1015 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 8.49 ( d, J= 8.4 Hz, 1H ), 6.56-6.54 ( brm, 1H ), 6.17 ( d, J= 8.7 Hz, 1H ), 5.74 ( dt, J= 15.3, 6.9 Hz, 1H ), 5.46 ( dd, J= 15.3, 6.6 Hz, 1H ), 4.35 ( m, 2H ), 4.18 ( m, 1H ), 3.83 ( d, J= 12.9 Hz, 3/2H ), 3.82 ( d, J= 12.9 Hz, 3/2H ), 3.55 ( t, J= 6.1 Hz, 2/2H ), 3.54 ( t, J= 6.1 Hz, 2/2H ), 3.49 ( td, J= 7.1, 6.4 Hz, 1H ), 3.12 ( m, 2H ), 2.23 ( m, 2H ), 2.03 ( dt, J= 6.6, 6.6 Hz, 2H ), 1.81 ( tt, J= 7.1, 7.1 Hz, 2H ), 1.62 ( tt, J= 7.3, 7.3 Hz, 2H ), 1.45 ( tt, J= 6.6, 6.6 Hz, 2H ), 1.40-1.17 ( m, 34H ), 0.87 ( t, J= 6.8 Hz, 3H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 174.4 ( 1/2 ), 144.2, 143.9, 136.6, 134.5, 128.2, 123.3, 98.4, 74.2 ( 1/2 ), 74.1 ( 1/2 ), 66.8 ( Jc-p= 5.8 Hz ), 54.9 ( m ), 54.5 ( Jc-p= 6.7 Hz ), 44.0, 36.6, 35.9, 32.1, 31.8, 30.6, 29.6, 29.5, 29.4, 29.33, 29.27, 29.2, 29.1, 29.0, 28.9, 28.8, 28.3, 26.8, 25.7, 25.5, 22.6, 14.0
【００６２】
（参考例５）
【化１９】
2007099709.tif 000020
【００６３】
(2S,3R,4E)-1-[(2-ブロモエチル)-メチルホスホリルチオ]-2-ヘキサデカノイルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（14）( 42mg, 0.0479 mmol )のメタノール( 1.00 ml )溶液にトリメチルアミン( 1.00 ml )を加え、室温にて一日攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (クロロホルムに13%のメタノールを溶かしたものからクロロホルムに4.3%の水と26.6%のメタノールを溶かしたものまで変化させて) により精製し、(2S,3R,4E)-1-ホスホリルコリン-2-ヘキサデカノイルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセン（15）( 28 mg, 70% )を得た。(2S,3R,4E)-1-ホスホリルコリン-2-ヘキサデカノイルアミノ-3-ヒドロキシ-14-(7-ニトロベンゾ[1,2,5]オキサジアゾール-4-イルアミノ)-4-テトラデセンのIR 、1H NMR、13C NMRデータを以下に示す。
【００６４】
IR( KBr neat ) = 3422, 2924, 2853, 1655, 1586, 1460, 1300, 1256, 1078 cm-1
1H NMR (CDCl3, 400MHz) δ: 8.50, ( d, J= 8.9 Hz, 1H ), 7.93 ( brd, J= 8.5 Hz, 1H ), 6.33 ( d, J= 9.0 Hz, 1H ), 5.68 ( dt, J= 15.3, 6.6 Hz, 1H ), 5.45 ( dd, J= 15.4, 7.1 Hz, 1H ), 4.30 ( m, 2H ), 4.02 ( ddd, J= 6.9, 6.9, 6.9 Hz, 1H ), 3.98 ( m, 1H ), 3.69 ( m, 2H ), 3.52 ( m, 2H ), 3.14 ( ddd, J= 13.8, 12.3, 3.7 Hz, 1H ), 2.84 ( ddd, J= 13.8, 8.7, 2.8 Hz, 1H ), 2.19 ( t, J= 7.6 Hz, 2H ), 2.01 ( dt, J= 6.9, 6.9 Hz, 2H ), 1.78 ( tt, J= 7.3, 7.3 Hz, 2H ), 1.59 ( tt, J= 7.3, 7.3 Hz, 2H ), 1.46-1.22 ( m, 36H ), 0.88 ( t, J= 6.6 Hz, 3H )
13C NMR (CDCl3, 100MHz) δ: 176.2, 146.7, 145.8, 145.6, 138.6, 134.8, 130.9, 122.8, 99.6, 75.1, 67.5, 60.5 ( Jc-p= 5.8 Hz ), 56.1 ( Jc-p= 2.9 Hz ), 54.8, 44.8, 37.4, 33.4, 33.1, 32.7, 30.79, 30.76, 30.68, 30.59, 30.58, 30.55, 30.54, 30.46, 30.43, 30.42, 30.31, 29.3, 28.1, 27.2, 23.7, 14.5