(57)【要約】      （修正有）【課題】無用に生体を傷つけることなく、簡易かつ確実に観察位置へ到達できる生体観察方法および生体観察装置を提供する。【解決手段】蛍光観察および反射光観察が可能な生体観察装置で生体内を観察する方法であって、反射光観察により基準位置を設定する工程Ｓ４と、反射光観察から蛍光観察に切り替える工程Ｓ５と、基準位置から観察位置へ移動する工程Ｓ８とを含む観察方法である。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
蛍光観察および反射光観察が可能な生体観察装置で生体内を観察する方法であって、
観察位置を設定するための基準位置を反射光観察により設定する工程と、
反射光観察から蛍光観察に切り替える工程と、
基準位置から観察位置へ移動する工程とを含む観察方法。
【請求項２】
基準位置を設定する工程が、焦点位置を自動的に検出する工程を含む請求項１に記載の観察方法。
【請求項３】
基準位置から観察位置へ移動する工程が、取得した画像から観察位置を自動的に検出する工程を含む請求項１に記載の観察方法。
【請求項４】
基準位置から観察位置へ移動する工程が、生体内情報に基づいて観察位置へ移動する工程を含む請求項１に記載の観察方法。
【請求項５】
姿勢変更機構と、
該姿勢変更機構の動作を制御する制御装置と、
反射光観察と蛍光観察とを切り替える切替装置と、
観察位置を設定するための基準位置を反射光観察により設定する基準位置設定部と、
観察位置を設定する観察位置設定部とを備える生体観察装置。
【請求項６】
前記姿勢変更機構が、焦準部または標本載置台を光軸方向に移動させる垂直方向駆動機構と、焦準部または標本載置台を光軸に直交する方向に移動させる水平方向駆動機構と、光軸を回転する回転方向駆動機構とを備え、
前記制御装置が、上記各駆動機構のうち少なくとも垂直方向駆動機構を制御する請求項５に記載の生体観察装置。
【請求項７】
焦点位置を自動検出する焦点位置自動検出機構を備える請求項５に記載の生体観察装置。
【請求項８】
取得した画像から観察位置を自動検出する観察位置検出機構を備える請求項５に記載の生体観察装置。
【請求項９】
前記制御装置が、生体内情報を保持する生体内情報保持部と、該生体内情報保持部に保持された生体内情報を読み出して、読み出された生体内情報に基づいて観察位置を設定する観察位置設定部とを備える請求項５に記載の生体観察装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内の組織を生きたままの状態（In-vivo)で観察するための生体観察方法および生体観察装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、生体内の組織の観察としては、生体を大きく切開して被観察部位を露出させた状態での観察や、組織の被観察部位を切除して取り出した状態での観察等が行われている。
特に、脳組織を観察する場合について、頭蓋骨を薄層にして多光子励起を利用し、脳組織を観察する装置および方法が知られている（例えば、特許文献１参照。）。
【０００３】
また、対物光学系の代わりに光ファイバを用いて、生きたまま生体の脳を蛍光観察する技術も知られている（例えば、特許文献２参照。）。
これらの観察に際し、例えば、中枢神経薬理や神経生理学等のマウス脳研究者は、図譜（アトラス）として整理されているマウス等の実験小動物の組織や骨格のデータを元に、実際の脳組織の位置を把握し、実験を行っている。
【特許文献１】特表２００４−５１８４８８号公報
【特許文献２】特開２０００−２６２４６０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、生体を大きく切開して観察する場合には、切開していない生体の状態と条件が変わってしまうという問題があり、組織を切除して取り出して観察する場合は、生きたままの状態で観察できないという問題がある。
特許文献１に開示されている方法を用いた観察では、脳の深部の組織を観察できないという問題がある。
【０００５】
また、特許文献２に開示されている方法では、蛍光色素で標識したある特定部位の蛍光画像を検出できたことで観察位置であると把握しているだけなので、大まかな位置は検出できるが、実際に観察したい位置であるか否かの特定が困難である。また、光ファイバを挿入する位置や方向によっては、本来観察したい位置に到達できない可能性があり、場合によっては、観察位置を通り過ぎて観察位置の組織を破壊してしまう可能性がある。
そこで、本発明は、無用に生体を傷つけることなく、簡易かつ確実に観察位置へ到達できる生体観察方法および生体観察装置を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明は、蛍光観察および反射光観察が可能な生体観察装置で生体内を観察する方法であって、反射光観察により基準位置を設定する工程と、反射光観察から蛍光観察に切り替える工程と、基準位置から観察位置へ移動する工程とを含む観察方法を提供する。
【０００７】
上記発明においては、焦点位置を自動的に検出する工程を含むこととしてもよい。
また、取得した画像から観察位置を自動的に検出する工程を含むこととしてもよく、生体内情報に基づいて観察位置へ移動する工程を含むこととしてもよい。
【０００８】
また、本発明は、姿勢変更機構と、該姿勢変更機構の動作を制御する制御装置と、反射光観察と蛍光観察とを切り替える切替装置と、基準位置を設定する基準位置設定部と、観察位置を設定する観察位置設定部とを備える生体観察装置を提供する。
【０００９】
上記発明においては、前記姿勢変更機構が、焦準部または標本載置台を光軸方向に移動させる垂直方向駆動機構と、焦準部または標本載置台を光軸に直交する方向に移動させる水平方向駆動機構と、光軸を回転する回転方向駆動機構とを備え、前記制御装置が、上記各駆動機構のうち少なくとも垂直方向駆動機構を制御することとしてもよい。
【００１０】
また、上記発明においては、焦点位置を自動検出する焦点位置自動検出機構を備えることとしてもよく、取得した画像から観察位置を自動検出する観察位置検出機構を備えることとしてもよい。
【００１１】
また、上記発明においては、前記制御装置が、生体内情報を保持する生体内情報保持部と、該生体内情報保持部に保持された生体内情報を読み出して、読み出された生体内情報に基づいて観察位置を設定する観察位置設定部とを備えることとしてもよい。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、無用に生体を傷つけることなく、簡易かつ確実に観察位置へ到達することができるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の第１の実施形態に係る生体観察装置１および生体観察方法について、図１〜図３を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る生体観察装置１は、図１に示されるように、レーザ走査型顕微鏡であって、観察対象である生体Ａを載置するステージ２と、該ステージ２に対向配置される測定ヘッド３と、レーザ光源４および光検出器５を備える光学ユニット６と、これら測定ヘッド３と光学ユニット６とを接続する光ファイバ７と、測定ヘッド３の姿勢を変更可能に支持する姿勢変更機構８と、該姿勢変更機構８の動作を制御する制御装置９とを備えている。
【００１４】
前記ステージ２は、観察対象である生体Ａを載置するための観察台であり、脳内を観察する際の観察位置を一定に保つために生体Ａの頭部を保持する頭部固定具１０を備えている。
【００１５】
前記測定ヘッド３は、ステージ２に対向する先端に配置された対物光学系１１と、該対物光学系１１を取り付ける筐体１２内に配置されたコリメート光学系１３，光走査部１４、瞳投影光学系１５および結像光学系１６とを備えている。
前記対物光学系１１は、例えば、マウス等の実験小動物の生体Ａ内を観察可能な細径の対物レンズである。前記コリメート光学系１３は、光ファイバ７により伝播されてきたレーザ光を略平行光に変換するようになっている。光走査部１４は、図中には模式的に示しているが、例えば、２枚のガルバノミラーを直交する２軸回りにそれぞれ揺動させることでコリメート光学系１３からの平行光を２次元的に走査させることができるようになっている。
【００１６】
前記瞳投影光学系１５は、光走査部１４により走査されたレーザ光を集光させて中間像を結像させるようになっている。また、前記結像光学系１６は、中間像を結像したレーザ光を集光させて略平行光に変換するようになっている。
また、前記対物光学系１１は、ステージ２に搭載された生体Ａに近接して配置され、結像光学系１６からの略平行光を集光して生体Ａの表面あるいは生体Ａの内部組織に設定した焦点位置に再結像させるようになっている。
【００１７】
前記光学ユニット６は、レーザ光源４から発せられたレーザ光を略平行光に変換するコリメートレンズ１７と、そのレーザ光を反射するとともに光学ユニット６に戻ってきた戻り光を透過させるダイクロイックミラー１８と、該ダイクロイックミラー１８によって反射されたレーザ光を光ファイバ７の端面７ａに集光させる集光レンズ１９と、ダイクロイックミラー１８を透過した戻り光のある特定波長域の光のみを選択的に透過させ、それ以外の光を遮断することができる、光路に挿脱可能なバリアフィルタ２０と、ダイクロイックミラー１８を透過した戻り光を光検出器５に集光する集光レンズ２１とを備えている。
【００１８】
前記光検出器５は、例えば、光電子増倍管である。光検出器５には、制御装置９内の図示しない画像処理装置を介してモニタ２２が接続され、撮像された画像がモニタ２２に表示されるようになっている。
前記バリアフィルタ２０は、ある特定波長域の光のみを透過することができ、バリアフィルタ２０を透過した蛍光のみが光検出器５に入射されるようになっている。
【００１９】
前記光ファイバ７は、前記光学ユニット６および測定ヘッド３に接続され、光学ユニット６から送られるレーザ光を伝播して測定ヘッド３内に入射させるとともに、測定ヘッド３から戻る戻り光を伝播して光学ユニット６内に入射させるようになっている。
【００２０】
前記姿勢変更機構８は、ベース２３と、該ベース２３に固定されモータ２４によって水平軸Ｃ２（θ軸）回りに回転可能なアーム２５と、該アーム２５に取り付けられた測定ヘッド３を光軸Ｃ１（Ｚ軸）およびそれに直交する方向Ｃ３，Ｃ４（Ｘ，Ｙ軸）の３軸方向に駆動可能な駆動機構２６とを備えている。なお、アーム２５はモータ２４を用いることなくハンドル等によって手動で回転させることとしてもよい。
【００２１】
前記駆動機構２６のＺ軸駆動機構は、例えば、図示しないリニアガイドに沿ってＺ軸方向に移動可能に支持されたスライダ２７と、該スライダ２７をＺ軸方向に駆動するモータ２８およびボールネジ２９とを備えている。スライダ２７は、測定ヘッド３に固定されている。したがって、モータ２８を作動させてボールネジ２９を回転させることにより、スライダ２７に固定された測定ヘッド３が光軸Ｃ１方向に移動させられるようになっている。
【００２２】
また、Ｘ，Ｙ軸駆動機構は、モータ３０，３１および図示しないボールネジと、図示しないスライダとを備えている。モータ３０を作動させることで、図示しないボールネジが回転し、図示しないスライダに固定された測定ヘッド３をＸ軸方向に移動させることができ、モータ３１を作動させることで図示しないボールネジが回転し、図示しないスライダに固定された測定ヘッド３をＹ軸方向に移動させることができるようになっている。
【００２３】
前記制御装置９は、前記姿勢変更機構８のモータ２４，２８，３０，３１に接続され、測定ヘッド３の位置を制御できるようになっている。
さらに制御装置９は、反射光観察と蛍光観察とを切り替えるためにバリアフィルタ２０の挿脱を指示する挿脱指示手段と、Ｚ軸の位置アドレスを記憶し、その位置を基準位置０に設定する基準位置設定手段とを備えている。各手段は、モニタ２２上に表示されるボタンおよび図示しない入力手段から作動指示を与えることができるようになっている。また、前記制御装置は、一般のパーソナルコンピュータ等の装置により実現されていてもよい。
【００２４】
次に、このように構成された本実施形態に係る生体観察装置１の作用について説明する。
測定ヘッド内において、光学ユニット６を作動させ、レーザ光源４からレーザ光を出射させると、出射されたレーザ光がコリメートレンズ１７，ダイクロイックミラー１８および集光レンズ１９を経て光ファイバ７の端面７ａに集光されて入射される。
【００２５】
光ファイバ７の端面７ａに入射されたレーザ光は、光ファイバ７内を伝播させられて測定ヘッド３に伝達され、測定ヘッド３内のコリメート光学系１３、光走査部１４、瞳投影光学系１５、結像光学系１６および対物光学系１１を経て、生体Ａ内に設定された焦点位置に結像される。レーザ光が照射されることにより、生体Ａの組織内の反応により発生した蛍光が、対物光学系１１，結像光学系１６，瞳投影光学系１５，光走査部１４およびコリメート光学系１３を介して光ファイバ７内を伝播して戻り、光学ユニット６の集光レンズ１９によって略平行光に変換された後に、ダイクロイックミラー１８を通過させられて集光レンズ１９により光検出器５に入射される。光検出器５における検出信号は、制御装置９に送られて画像処理され、画像としてモニタ２２に表示される。
【００２６】
続いて、駆動機構２６は、３軸（Ｘ，Ｙ，Ｚ軸）方向に測定ヘッド３を駆動可能であり、制御装置９により駆動距離を制御することができる。したがって、脳内の観察したい位置まで３次元的に駆動することができる。また、姿勢変更機構８は、アーム２５と３軸方向に駆動可能な駆動機構２６とから構成されているので、対物光学系１１の焦点位置を固定したままの状態で、アーム２５の回転面に平行な平面内において測定ヘッド３のθ軸の角度を、任意に調節することができる。このため、頭蓋等に挿入する際や、脳内の細胞等を観察する際に、的確な角度からアプローチすることができる。
【００２７】
次に、このように構成された本実施形態に係る生体観察装置１を用いた生体観察方法について、図３のフローチャートを参照して説明する。
例えば、マウス等の実験小動物のような生体Ａの脳内を観察する場合には、生体Ａが動いて観察したい位置が変化しないように生体Ａの頭部を頭部固定具１０により固定する。そして、頭部の表皮を切開して頭蓋骨を露出させ、頭蓋骨の観察したい位置にドリル等で孔をあける。
【００２８】
ここで、バリアフィルタ２０を光路から抜き出し、蛍光観察から、例えば、明視野観察のような反射光観察に切り替える（Ｓ１）。
続いて、アーム２５を回転させて測定ヘッド３のθ軸の角度を調節し、対物光学系１１を挿入する。そして、測定ヘッド３をＺ軸方向に移動させながら、反射光観察画像を確認する。
【００２９】
脳組織の表面位置まで移動したところで、Ｘ，Ｙ，Ｚ，θ軸方向の位置アドレスを記憶させ、このときの位置アドレスを基準位置０と設定する（Ｓ４）。
ここで、図示しない切替装置を駆動してバリアフィルタ２０を光路に挿入する。
これにより、反射光観察から蛍光観察に切り替わり、蛍光観察が可能となる（Ｓ５）。
【００３０】
続いて、脳内組織の観察したい位置へ、制御装置９によって測定ヘッド３をＺ軸方向に自動で移動させる。脳内組織を観察する場合は、一度対物光学系１１を挿入すると、脳内組織の形状が変わってしまうため、観察したい位置を通り過ぎないように、観察位置の手前で停止するように設定しておけばよい。
【００３１】
例えば、観察したい位置が脳表面から５．０ｍｍの位置にあるとき、制御装置９の図示しない入力装置によって距離（５．０ｍｍ）を入力すると、基準位置０から観察位置の手前である４．０ｍｍまで制御装置９によって自動で検出駆動する（Ｓ６，Ｓ７）。このとき、駆動機構２６の駆動速度は４．０ｍｍ位置で確実に停止できるような速度である。なお、制御装置９の図示しない入力手段によって、観察位置の手前で一度停止して駆動速度を変更する位置を予め指示しておく。
そして、４．０ｍｍから蛍光画像で観察対象を確認しながら、ゆっくり駆動する（Ｓ８）。観察対象を発見したところで、駆動を停止し、詳細観察する（Ｓ９）。
【００３２】
本実施形態においては、観察したい位置まで測定ヘッド３を移動する際（Ｓ８）に、駆動機構２６を制御装置９により自動で制御したが、これに代えて手動により駆動することとしてもよい。さらに、手動と自動の切替を制御装置９の入力手段によって任意に設定可能としてもよい。
【００３３】
また、本実施形態においては、駆動距離を計算する際（Ｓ７）に、マージンを見越して駆動距離を計算したが、確実に観察したい位置の距離がわかっている場合には、マージンをなくして駆動してもよい。また、マージンを制御装置９の入力手段によって任意に指示することを可能としてもよい。
【００３４】
次に、本発明の第２の実施形態に係る観察方法について、図４を参照して説明する。
この実施形態は、上述した第１の実施形態に係る生体観察装置１に自動で脳組織の表面位置を検出する手段を付加したものであり、観察装置の概略構成は、図１および図２と同様であるため、同図を引用して説明する
【００３５】
第１の実施形態に係る生体観察装置１において、制御装置９は図示しないオートフォーカス機構（ＡＦ）を有し、それ以外の構成は第１の実施形態と同様である。
本実施形態に係る観察方法について、図４のフローチャートを用いて説明する。基準位置設定（Ｓ４）以降の蛍光観察に切り替えて観察する方法（Ｓ５〜Ｓ９）は、図３と同様である。図３の反射光観察で脳組織の表面位置を検出する方法（Ｓ２，Ｓ３）について、図４を参照して説明する。
【００３６】
例えば、特開２００１−５９９３５号公報に開示されている自動焦点位置検出方法により、脳組織の表面位置を検出する。この公報は、本実施形態において説明した観察装置と同等の構成のレーザ走査型顕微鏡であって、レーザ走査型顕微鏡における反射光観察のＡＦの例が開示されている。
【００３７】
反射光観察によって観察し、制御装置９内の図示しない処理装置内において、観察画像の輝度値Ｉを取得し（Ｓ１０）、輝度値が最大ＩＭＡＸになる位置を合焦位置と判断する（Ｓ１１）。輝度値Ｉの変化を検出しながら、制御装置９によって測定ヘッド３を自動で移動させ（Ｓ１２）、輝度が最大ＩＭＡＸになったことで焦点を検出し（Ｓ１３）、その位置で測定ヘッド３を停止させる。
【００３８】
本実施形態においては、観察画像の輝度値の変化を検出してＡＦ動作を行う、いわゆるパッシブ型ＡＦを用いたが、赤外光レーザ等を標本に照射し、反射光の状況を検出してＡＦ動作を行う、いわゆるアクティブ型ＡＦ等、その他のＡＦ機構を用いても、その効果は同様である。
【００３９】
次に、本発明の第３の実施形態に係る観察方法について、図５を参照して説明する。
本実施形態は、上述した第１または第２の実施形態に係る生体観察装置１に、脳内組織の観察位置を検出する手段を付加した例であって、生体観察装置１の概略図は図１および図２と同様なので、同図を引用するものとする。
【００４０】
本実施形態に係る生体観察装置は、制御装置９内の図示しない処理装置が、撮像した蛍光画像によって画像の平均輝度値を測定する手段と、制御装置９の図示しない入力装置によって平均輝度値のしきい値を設定する手段とを有する点で第１の実施形態に係る生体観察装置１と相違している。それ以外の構成は第１の実施形態に係る生体観察装置１と同様である。
【００４１】
本実施形態に係る観察方法について、図５のフローチャートを参照して説明する。
反射光観察で脳組織の表面位置を基準位置に設定し、蛍光観察に切り替える手順（Ｓ１〜Ｓ５）までは図３に示される第１の実施形態と同様である。
【００４２】
本実施形態に係る観察方法においては、以下の手順によって観察位置を検出する。
まず、蛍光画像を取得することで、制御装置９内の図示しない処理装置内において、蛍光画像の平均輝度値Ｉを測定する（Ｓ１４）。焦点位置では輝度値が最大になるので、輝度値の変化を検出しながら（Ｓ１５）、制御装置９により自動的に測定ヘッド３を移動させ（Ｓ１６）、平均輝度値Ｉが予め設定されたしきい値Ｉｔｈ以上になった位置を観察位置と見なして、測定ヘッド３の移動を停止する（Ｓ１７）。
【００４３】
本実施形態においては、蛍光画像の平均輝度値Ｉを測定したが、蛍光画像のコントラストの変化によって検出する等の他の方法を用いて観察位置を検出してもよい。
また、本実施形態では、画像の輝度値から観察位置を検出したが、前回と同じ個体の同じ位置を繰り返し観察する場合には、蛍光画像をモニタ２２に表示する。そして、前回観察した蛍光画像の何点かを抽出して、形状が同じであるか否かを比較することで、観察位置を検出してもよい。
【００４４】
次に、本発明の第４の実施形態に係る生体観察装置および観察方法について、図６を参照して説明する。
本実施形態に係る生体観察装置は、第１の実施形態に係る生体観察装置１に、生体内情報を用いて観察位置を検出する手段を付加したもので、生体観察装置の概略は図１および図２と同様であるため、同図を引用することとする。
【００４５】
本実施形態に係る観察方法は、第１の実施形態に係る観察方法において、脳組織の表面位置を検出した後、観察したい位置まで駆動する際に脳組織のデータを使用する。
制御装置９に、マウス等の実験小動物の脳組織のデータ等の生体内情報が保持されており、生体内情報に基づいて、姿勢変更機構８を観察したい位置へ駆動することとしている。また、生体内情報は、例えば、アトラスのようなデータであって、制御装置９内で３次元の図として構築し、モニタ２２に表示することができる。
また、反射光観察で脳組織の表面位置を基準位置に設定し、蛍光観察に切り替える手順（Ｓ１〜Ｓ５）は図３と同様である。
【００４６】
本実施形態に係る観察方法は、まず、図３に示される第１の実施形態に係る観察方法と同様にして、基準位置を設定し、蛍光観察に切り替えた状態とする（Ｓ１〜Ｓ５）。次いで、図６に示されるように、モニタ２２に表示された制御装置９が保持しているマウス等の実験小動物の脳組織の３次元データの図上で、現在測定ヘッド３が観察している現在観察位置と、観察したい脳内組織の観察対象位置とを指示する（Ｓ１８）。制御装置９では、指示された現在観察位置と観察対象位置およびステップＳ４で設定された基準位置に基づいて基準位置から脳内組織の観察したい位置までのＸＹＺ軸の各駆動距離および方向を計算する（Ｓ１９）。
【００４７】
そして、観察したい位置までの計算された距離と方向とに基づいて、制御装置９において対物光学系１１の挿入角度を決定し、アーム２５を駆動し、駆動機構２６の作動により、脳内組織の観察したい位置まで測定ヘッド３を自動的に移動する（Ｓ２０）。制御装置９の図示しない入力手段によって予め指示しておいた観察したい位置付近、例えば、観察したい位置まで１ｍｍに近接したら駆動速度を遅くする（Ｓ２１，Ｓ２２）。そして、蛍光画像で観察対象を確認しながら（Ｓ２３）、制御装置９によって測定ヘッド３を自動的に移動し、指示した観察対象位置に到達した時点で駆動を停止し、詳細観察する（Ｓ２４，Ｓ９）。
【００４８】
なお、本実施形態においては、観察したい位置付近から駆動速度を遅くしたが、確実に駆動を停止することができ、観察位置も確実であれば、観察対象位置まで駆動速度を変えることなく駆動してもよい。
また、本実施形態においては、観察したい位置付近から測定ヘッド３を自動的に移動させたが、手動で駆動して観察位置を探すこととしてもよい。また、制御装置９の入力手段によって任意に変更可能でもよい。
【００４９】
さらに、本実施形態においては、脳内データは、制御装置９の保持しているアトラス等のデータを用いたが、例えば、ＣＴあるいはＭＲＩ等の生体内を検査するための装置によって事前に生体Ａ個体の脳組織のデータを取得しておき、その個体の脳内データを作成して使用してもよい。その個体自身の脳内データを使用することで、より正確なデータを用いることができる。
【００５０】
また、頭蓋の大きさや頭蓋上部のつなぎ目の位置は、週齢等に応じてほぼ同じであるので、頭蓋のつなぎ目の位置を基準として、観察したい位置を探し、姿勢変更機構８を観察位置まで駆動することとしてもよい。
【００５１】
また、本発明においては、対物光学系１１を測定ヘッド３の筐体１２に固定し、駆動機構２６によって測定ヘッド３ごと駆動させることとしたが、これに代えて、測定ヘッド３の筐体１２をベース２３に固定し、筐体１２に対して対物光学系１１を駆動させる新たな駆動機構を設けてもよい。また、対物光学系１１を駆動させることに代えて、ステージ２を駆動させる駆動機構を設けることにしてもよい。
【００５２】
また、本発明においては、生体の脳内組織を観察する方法について説明したが、これに限定されるものではなく、生体の他の部位の組織を観察する場合に適用することとしてもよい。
さらに、本発明においては、レーザ走査型顕微鏡装置１に適用した場合について説明したが、これに限定されるものではなく、他の任意の方式の顕微鏡装置および観察装置にも適用することができる。
また、本発明において説明したいずれの実施形態においても、その趣旨を逸脱しない範囲で種々の変形が可能であることは言うまでもない。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】本発明の第１の実施形態に係る生体観察装置の全体構成を示す正面図である。
【図２】図１の生体観察装置の全体構成を示す側面図である。
【図３】図１の生体観察装置を用いた本発明の一実施形態に係る生体観察方法を示すフローチャートである。
【図４】本発明の第２の実施形態に係る生体観察方法を示すフローチャートである。
【図５】本発明の第３の実施形態に係る生体観察方法を示すフローチャートである。
【図６】本発明の第４の実施形態に係る生体観察方法を示すフローチャートである。
【符号の説明】
【００５４】
Ａ  生体
Ｓ４  基準位置を設定する工程
Ｓ５  反射光観察から蛍光観察に切り替える工程
Ｓ８  基準位置から観察位置へ移動する工程
Ｓ１１  焦点位置を自動的に検出する工程
１  生体観察装置
８  姿勢変更機構
９  制御装置
２６  駆動機構（垂直方向駆動機構、水平方向駆動機構、回転方向駆動機構）
【図１】
2007225874.tif 000003
【図２】
2007225874.tif 000004
【図３】
2007225874.tif 000005
【図４】
2007225874.tif 000006
【図５】
2007225874.tif 000007
【図６】
2007225874.tif 000008