(57)【要約】【課題】  鹿角霊芝の優れた機能を見出すことにより、鹿角霊芝の用途拡大を図るとともに、新規な免疫賦活剤を提供する。【解決手段】  鹿角霊芝処理物を有効成分とする免疫賦活剤もしくは、免疫賦活剤を含有する食品を提供する。この免疫賦活剤もしくは食品は、優れたマクロファージ貧食能をならびに種々のガン細胞増殖抑制作用を有するため、免疫機能の低下予防ならびに改善目的に使用することができる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
鹿角霊芝処理物を有効成分とする免疫賦活剤。
【請求項２】
請求項１に記載の免疫賦活剤を含有する、食品組成物もしくは医薬品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、鹿角霊芝処理物を有効成分とする免疫賦活剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
鹿角霊芝は、サルノコシカケ科のキノコである霊芝の一種であり、子実体の形状が鹿の角のように枝分かれしたものをいう。霊芝抽出物は苦味料として用いられているほか、他のキノコ類と同様に多糖類であるβ−グルカンを豊富に含むことで抗腫瘍作用などの免疫賦活作用を有することが明らかとなってきている（特許文献１および２）。
【特許文献１】特開２００５−３５８９８号公報
【特許文献２】特開２００２−５３４８１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかし、鹿角霊芝は、上記のような作用が明らかとなっている胞子形成を伴う傘を有する霊芝とは異なる作用を有することが明らかになりつつある状態ではあるが、鹿角霊芝の用途は狭小であるという問題点があった。
【０００４】
本発明は、上記問題点に鑑みてなされたものであって、その目的は優れた免疫賦活剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、鹿角霊芝の機能性を鋭意検討したところ、鹿角霊芝処理物は、優れたマクロファージ貧食能と種々のガン細胞増殖抑制作用を有することを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、鹿角霊芝処理物を有効成分とする免疫賦活剤に関する。
【０００７】
また、本発明は、前記の免疫賦活剤を含有する、食品組成物もしくは医薬品組成物に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の鹿角霊芝処理物を有効成分とする免疫賦活剤は、優れたマクロファージ貧食能向上作用とガン細胞増殖抑制作用を有する。
【０００９】
従って、鹿角霊芝の免疫賦活作用という従来の免疫賦活素材よりも優れた機能により、鹿角霊芝の用途を拡大することができるとともに、優れた免疫賦活剤も提供できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明の実施形態について説明する。鹿角霊芝処理物を有効成分とする、免疫賦活剤（以下、本発明の免疫賦活剤ということがある）に関する。また、本発明は免疫賦活剤を含有する、食品（以下、本発明の食品ということがある）に関する。なお、本発明は、下記の実施形態で制限されない。つまり、特許請求の範囲に記載されている内容の範囲内において、本発明は変更が可能である。
【００１１】
（本発明の免疫賦活剤）
本発明の免疫賦活剤は、鹿角霊芝処理物を用いている。以下、鹿角霊芝処理物について説明する。
【００１２】
（鹿角霊芝処理物）
本発明において、鹿角霊芝処理物とは、鹿角霊芝の乾燥粉末、鹿角霊芝のエキスおよびその乾燥粉末など、鹿角霊芝に何らかの処理を施したものをいう。
【００１３】
本発明の鹿角霊芝処理物の原料としては、霊芝のうち、子実体の形状が鹿の角のように枝分かれしたものをいい、枝の先端に若干の胞子形成を伴う傘が存在していてもよい。
【００１４】
鹿角霊芝乾燥物は、例えば鹿角霊芝を日干しや熱風乾燥などにより乾燥することにより得られる。乾燥は、好ましくは、水分含有量が１０質量％となるまで、またはそれ以下となるまで行われるのが良い。また、必要に応じて、鹿角霊芝乾燥物は、さらに粉砕されて、粉末としても良い。
【００１５】
鹿角霊芝乾燥物の粉末を得る場合において、その粉末化の方法としては、例えば、当業者が通常用いる方法、ボールミルやハンマーミル、ローラーミルなどにより、乾燥後の鹿角霊芝を粉砕・粉末化する方法が挙げられる。もちろん、乾燥前の鹿角霊芝をマスコロイダーやスライサー、コミトロールで予め粉砕しておき、この粉砕物を乾燥するといった方法でも良い。
【００１６】
鹿角霊芝抽出物は、鹿角霊芝に溶媒を添加して、必要に応じて加温しつつ、抽出により得ることができる。もちろん、遠心分離またはろ過により抽出液を回収して、抽出物を得てもよい。なお、抽出物を得る場合に用いる鹿角霊芝は、乾燥前の鹿角霊芝であってもよいが、乾燥後の鹿角霊芝（例えば鹿角霊芝乾燥粉末）であることが好ましい。
【００１７】
鹿角霊芝抽出物を得る場合において、用いることができる溶媒としては、例えば、水、有機溶媒、含水有機溶媒などが挙げられる。また、ここでいう有機溶媒としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、および１，１，２−トリクロロエテンなどが挙げられる。そのうち、鹿角霊芝の抽出液を得る場合において好ましい有機溶媒は、水、極性有機溶媒ならびに含水極性有機溶媒であり、より好ましくは水、エタノール、ｎ−ブタノール、メタノール、アセトン、プロピレングリコール、酢酸エチルならびにこれらの含水物であり、最も好ましくは水、エタノールならびに含水エタノールである。
【００１８】
加温して抽出する場合、その方法としては、例えば、加熱還流などの加温抽出法や超臨界抽出法などが挙げられ、場合によっては加圧して加温を行ってもよい。加温する場合、鹿角霊芝に添加した溶媒が揮発するのを防ぐ必要があるが、その加温における温度の下限値は、５０℃以上、好ましくは７０℃以上であり、その加温における温度の上限値は、１３０℃以下、好ましくは１００℃以下とするのがよい。
【００１９】
抽出にかかる時間は、鹿角霊芝から十分に可溶性成分が抽出される時間であればよく、好ましくは３０分〜４８時間である。なお、加温を行わない、すなわち５０℃未満で抽出を行う場合は、６時間〜４８時間浸漬することが好ましく、５０℃以上で加温する場合は、３０分〜２４時間加温すればよい。
【００２０】
また、例えば有機溶媒を除去するなど、必要に応じて、得られた抽出物（抽出液）を、減圧濃縮や凍結乾燥などによって、濃縮または乾燥してもよい。もちろん、そのような濃縮された抽出物や乾燥された抽出物を、本発明の鹿角霊芝処理物として利用してもよい。
【００２１】
（本発明の免疫賦活剤）
本発明の免疫賦活剤は、鹿角霊芝処理物を含有する。これらの成分を含有することにより、優れたマクロファージ貧食能向上作用とガン細胞増殖抑制作用を得られる。
【００２２】
これらの各成分の配合量には特に制限はない。しかし、鹿角霊芝乾燥物の配合量については、成人一日あたりにおける鹿角霊芝乾燥物の摂取量の下限値が、０．１ｇ以上となるように配合されるのが良い。また、成人一日あたりにおける鹿角霊芝乾燥物の摂取量の上限値が、５０ｇ以下、好ましくは３０ｇ以下となるように配合されるのが良い。
【００２３】
（本発明の食品）
本発明の食品は、免疫賦活剤を含有する。つまり、鹿角霊芝処理物を含有している。
【００２４】
鹿角霊芝処理物などの配合量は、その形態や剤形によって異なるため、適宜調整されればよい。例えば、鹿角霊芝乾燥物の場合、食品に対して、鹿角霊芝乾燥物の下限値は、０．００１質量％以上、好ましくは０．０１質量％以上とするのがよく、鹿角霊芝乾燥物の上限値は、８０質量％以下、好ましくは５０質量％以下とするのがよい。
【００２５】
なお、本発明の食品には、必要に応じて、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、他の食品原料、調味料、医薬品原料などを添加してもよい。さらに、本発明の肝中脂質蓄積抑制剤を含有する食品は、用途に応じて、顆粒、錠剤などの形態に成形されてもよい。また、本発明の成分を添加した食品の剤形については、必要に応じてハードカプセル、ソフトカプセルなどのカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤などに、あるいは粉末状、顆粒状、茶状、ティーバッグ状、もしくは飴状などの形態に成形したり、そのまま飲料として用いたりすることができる。これらの形状または好みに応じて、そのまま食してもよく、あるいは水、湯、牛乳などに溶いて飲んでも良い。また、粉末化してティーバッグ状などの場合、成分を浸出させてから飲んでも良い。
【００２６】
本発明の食品に添加可能な食品原料としては、例えば、ローヤルゼリー、プロポリス、ビタミン類（Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、葉酸、パントテン酸、ビオチン、これらの誘導体など）、ミネラル（鉄、マグネシウム、カルシウム、亜鉛など）、セレン、α−リポ酸、レシチン、ポリフェノール（フラボノイド類、これらの誘導体など）、カロテノイド（リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテインなど）、キサンチン誘導体（カフェインなど）、脂肪酸、タンパク質（コラーゲン、エラスチンなど）、ムコ多糖類（ヒアルロン酸など）、アミノ糖（グルコサミン、アセチルグルコサミン、ガラクトサミン、アセチルガラクトサミン、ノイラミン酸、アセチルノイラミン酸、ヘキソサミン、それらの塩など）、オリゴ糖（イソマルトオリゴ糖、環状オリゴ糖など）、スフィンゴ脂質やリン脂質及びその誘導体（フォスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、セラミドなど）、含硫化合物（アリイン、セパエン、タウリン、グルタチオン、メチルスルホニルメタンなど）、糖アルコール、リグナン類（セサミンなど）、これらを含有する動植物抽出物、根菜類（ウコン、ショウガなど）、麦若葉末などのイネ科植物の緑葉、ケールなどのアブラナ科植物の緑葉などが挙げられる。
【００２７】
とくに、近年健康のために飲食されている、麦若葉（例えば大麦若葉）、ケール、明日葉、桑葉などの緑葉を粉末化して、飲料として摂取する、いわゆる「青汁」として、鹿角霊芝処理物を利用すると、水との相乗効果で、他の青汁よりも嗜好性のよい青汁とすることができ、さらには、摂取しにくい他の青汁原料と共に配合することで、他の青汁原料を摂取しやすくすることも可能である。さらに、上記食品原料を含む飲料、例えば、植物発酵ジュース、野菜ジュース（例えば、人参ジュース）、植物抽出物、果汁などにも利用され得、鹿角霊芝処理物を含有させることにより、嗜好性を良くするだけでなく、機能性または栄養価の高い飲料とすることもできる。
【００２８】
もちろん、本発明の免疫賦活剤を含有する食品においては、糖液や糖アルコールまたは調味料などを加えて甘味を強くすることもできる。
【００２９】
また、本発明の免疫賦活剤を含有する食品の剤形については、必要に応じてハードカプセル、ソフトカプセルなどのカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤などに、あるいは粉末状、顆粒状、茶状、ティーバッグ状、もしくは飴状などの形態に成形したり、そのまま飲料として用いたりすることができる。これらの形状または好みに応じて、そのまま食してもよく、あるいは水、湯、牛乳などに溶いて飲んでも良い。また、粉末化してティーバッグ状などの場合、成分を浸出させてから飲んでも良い。
【実施例】
【００３０】
以下、実施例に基づいて本発明を説明する。なお、実施例の記載により、本発明を限定して解釈すべきではなく、特許請求の範囲における記載の範囲内において、本発明は種々の変更が可能である。
【００３１】
（実施例１：鹿角霊芝乾燥粉末の調製）
鹿角霊芝の子実体１００ｇを水分量が約１５質量％となるまで、乾燥機中７０℃にて２時間温風乾燥（一次乾燥）した。次いで、最終水分量が１０質量％となるように、８０℃にて４時間温風乾燥（二次乾燥）した。次いで、１５０℃の飽和水上気圧を用いて、３秒間加圧蒸気殺菌した。このとき、甘藷茎葉に含まれている水を乾燥した後、２００メッシュ区分を９０質量％が通過するようにハンマーミルを用いて微粉砕し、鹿角霊芝の乾燥粉末（８０ｇ）を得た。
【００３２】
（実施例２：マクロファージ貧食能向上作用の評価）
実施例１で調製した鹿角霊芝の乾燥粉末を用いて、以下の方法でマクロファージ貧食能向上作用の評価を行った。
【００３３】
体重が２５０〜３００ｇの雄性ＳＤ系ラット１匹から脾臓を摘出してホモジネートし、その後、遠心分離（４℃×１０００ｒｐｍ×３分間）により沈殿した細胞（脾臓マクロファージ）を回収した。この脾臓マクロファージを、９６ウェルプレートに１×１０６ｃｅｌｌｓ／ウェル播種し、０．１ｍＬの標準培地（ＲＰＭＩ培地；Ｓｉｇａｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）にて３７℃で１時間培養した。その後、上清を除去して５０μｇ／ｍＬの鹿角霊芝乾燥粉末を含む標準培地に置換し、３７℃で２時間培養した。
【００３４】
培養後、上清を除去し、貧食活性測定キット（ＶｙｂｒａｎｔＴＭ  Ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ社製）に付属している蛍光ラベル済み大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）溶液を１００μＬ加え、３７℃で１時間培養した。次いで、上清を除去した後に培養後の培地をＰＢＳで３回洗浄し、上記キットに付属しているトリパンブルー溶液を１００μＬ加え、室温で１分間静置した後に、再度上清を除去した。
【００３５】
最後にマイクロプレート中の蛍光ラベル済み大腸菌を貧食した細胞による蛍光量Ｆを、マイクロプレート蛍光分光・吸光分光測定装置（ＶａｒｉｏｓｋａｎＴＭ；励起波長：４８０ｎｍ、検出波長：５２０ｎｍ；サーモエレクトロン株式会社）にて測定した。
【００３６】
また、鹿角霊芝乾燥粉末を含まない標準培地に置換して上記操作をして得られた蛍光量をＦ（コントロール）とし、脾臓マクロファージを用いずに上記操作をして得られた蛍光量をＦ（ブランク）とした。マクロファージ貧食能を式Ｉに基づき算出した（試験群１とする）。結果を表１に示す。
【００３７】
試験群２は、１００μｇ／ｍＬの鹿角霊芝乾燥粉末を用いて上記操作を行い、マクロファージ貧食能を算出した。結果を表１に合わせて示す。
【００３８】
【数１】
2007099666.tif 000002
【００３９】
（比較例１）
鹿角霊芝乾燥粉末の代わりに、４００μｇ／ｍＬのアガリクス乾燥粉末（日本粉末薬品株式会社）を用いた以外は、実施例２と同様に操作してマクロファージ貧食能を算出した。結果を表１に合わせて示す。
【００４０】
【表１】
2007099666.tif 000003
【００４１】
表１の結果、鹿角霊芝乾燥粉末を含有する試験群１と試験群２は、マクロファージ貧食能が向上していることがわかる。さらに、試験群２と比較群を比較すると、鹿角霊芝乾燥粉末を含有する試験群２は、アガリクス乾燥粉末を含有する比較群よりも容量換算で４倍のマクロファージ貧食能を有することがわかる。従って、本発明の免疫賦活剤は、優れたマクロファージ貧食能を有することがわかる。
【００４２】
（実施例３：ガン細胞増殖抑制作用１）
実施例１で調製した鹿角霊芝の乾燥粉末を用いて、以下の方法でガン細胞増殖抑制作用の評価を行った。
【００４３】
ＹＡＣ−１細胞（マウス胸腺腫由来細胞；独立行政法人理化学研究所より入手）を、９６ウェルプレートに５×１０３ｃｅｌｌｓ／ウェル播種し、５０μｇ／ｍＬの鹿角霊芝乾燥粉末を含む標準培地（ＲＰＭＩ培地；Ｓｉｇａｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）５０μＬを添加した。添加２日後のミトコンドリア脱水素酵素（ＷＳＴ−１）量Ｗを測定キット（Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ；株式会社同仁化学）にて測定した。
【００４４】
また、鹿角霊芝乾燥粉末を含まない標準培地に置換して上記操作をして得られたＷＳＴ−１量をＷ（コントロール）とし、ＹＡＣ−１細胞を用いずに上記操作をして得られたＷＳＴ−１量をＷ（ブランク）とした。ガン細胞増殖抑制率を式ＩＩに基づき算出した（試験群３とする）。結果を表２に示す。
【００４５】
試験群４は、１００μｇ／ｍＬの鹿角霊芝乾燥粉末を用いて上記操作を行い、ガン細胞増殖抑制率を算出した。結果を表２に合わせて示す。
【００４６】
試験群５は、２００μｇ／ｍＬの鹿角霊芝乾燥粉末を用いて上記操作を行い、ガン細胞増殖抑制率を算出した。結果を表２に合わせて示す。
【００４７】
【数２】
2007099666.tif 000004
【００４８】
【表２】
2007099666.tif 000005
【００４９】
表２の結果、鹿角霊芝乾燥粉末を用いた試験群３〜試験群５は、ガン細胞増殖抑制作用を有することがわかる。特に、試験群３は、鹿角霊芝乾燥粉末の使用量が５０μｇ／ｍＬと少量であるのにも関わらず、ガン細胞増殖抑制作用を有することがわかる。従って、本発明の免疫賦活剤は、優れたガン細胞増殖抑制作用を有することがわかる。
【００５０】
（実施例４：ガン細胞増殖抑制作用２）
実施例１で調製した鹿角霊芝の乾燥粉末を用いて、以下の方法でガン細胞増殖抑制作用の評価を行った。
【００５１】
ＭＯＬＴ−４細胞（ヒト白血病由来細胞；独立行政法人理化学研究所より入手）を、９６ウェルプレートに５×１０３ｃｅｌｌｓ／ウェル播種し、１００μｇ／ｍＬの鹿角霊芝乾燥粉末を含む標準培地（ＲＰＭＩ培地；Ｓｉｇａｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）５０μＬを添加した。添加２日後のミトコンドリア脱水素酵素（ＷＳＴ−１）量Ｗを測定キット（Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ；株式会社同仁化学）にて測定した。
【００５２】
また、鹿角霊芝乾燥粉末を含まない標準培地に置換して上記操作をして得られたＷＳＴ−１量をＷ（コントロール）とし、ＭＯＬＴ−４細胞を用いずに上記操作をして得られたＷＳＴ−１量をＷ（ブランク）とした。ガン細胞増殖抑制率を実施例３の式ＩＩに基づき算出した（試験群６とする）。結果を表３に示す。
【００５３】
試験群７は、２００μｇ／ｍＬの鹿角霊芝乾燥粉末を用いて上記操作を行い、ガン細胞増殖抑制率を算出した。結果を表３に合わせて示す。
【００５４】
【表３】
2007099666.tif 000006
【００５５】
表３の結果、鹿角霊芝乾燥粉末を含有する試験群６と試験群７は、ガン細胞抑制作用を有することがわかり、特に鹿角霊芝乾燥粉末を２００μｇ／ｍＬ使用した試験群７では、非常に優れたガン細胞増殖抑制率を示した。従って、本発明の免疫賦活剤は、優れたガン細胞増殖抑制作用を有することがわかる。
【００５６】
さらに、実施例３と実施例４により、本発明の免疫賦活剤は、種々のガン細胞の増殖抑制作用を有することがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００５７】
本発明の鹿角霊芝処理物を有効成分とする免疫賦活剤は、優れたマクロファージ貧食能ならびに種々のガン細胞増殖抑制作用を有するため有用である。このため、本発明の免疫賦活剤を、免疫機能の低下予防ならびに改善目的に使用することができる。