(57)【要約】【課題】優れた血圧降下作用を有する容器詰ミルクコーヒー飲料の提供。【解決手段】下記条件（Ａ）及び（Ｂ）：（Ａ）クロロゲン酸類    ０．０１〜１質量％、（Ｂ）ヒドロキシヒドロキノン    クロロゲン酸類量の０．１質量％未満を満たす乳成分を含有するコーヒー組成物を、殺菌温度１２３℃以上、殺菌時間２０分以内で加熱殺菌処理することを特徴とする、ヒドロキシヒドロキノン含有量が０〜０．００００８５質量％であり、ヒドロキシヒドロキノン量がクロロゲン酸類量の０．１質量％未満である容器詰ミルクコーヒー飲料の製造方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記条件（Ａ）及び（Ｂ）：
（Ａ）クロロゲン酸類    ０．０１〜１質量％、
（Ｂ）ヒドロキシヒドロキノン    クロロゲン酸類量の０．１質量％未満
を満たす乳成分を含有するコーヒー組成物を、殺菌温度１２３℃以上、殺菌時間２０分以内で加熱殺菌処理することを特徴とする、ヒドロキシヒドロキノン含有量が０〜０．００００８５質量％であり、ヒドロキシヒドロキノン量がクロロゲン酸類量の０．１質量％未満である容器詰ミルクコーヒー飲料の製造方法。
【請求項２】
容器の酸素透過度が５（ｃｃ・ｍｍ／ｍ2・ｄａｙ・ａｔｍ）以下である請求項１記載の容器詰ミルクコーヒー飲料の製造方法。
【請求項３】
ｐＨが５．５〜６．８である請求項１又は２項記載の容器詰ミルクコーヒー飲料の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血圧降下作用を有する容器詰ミルクコーヒー飲料の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
高血圧症の治療薬としては、神経因子による調節系に作用する各種神経遮断薬、液性因子に関わる調節系に作用するＡＣＥ阻害薬、ＡＴ受容体拮抗薬、血管内皮由来物質による調節系に関わるＣａ拮抗薬、腎臓での体液調節系に関わる降圧利尿薬などの医薬品が挙げられ、これらは主として医療機関において、重症の高血圧患者に使用される。しかし、現状において高血圧症対策の目的で使用される医薬品は、有効性に関しては満足できる反面少なからず存在する副作用のため患者にかかる負担は大きい。
【０００３】
このため食餌療法、運動療法、飲酒・喫煙の制限などの生活改善による一般療法が、軽症を含む正常高値高血圧症者から重症な高血圧症者に広く適用されている。一般療法の重要性の認識の高まりに伴い、特に食生活の改善が重要であるといわれ続けている。そして血圧降下作用を有する食品から食品由来の降圧素材の探索がさかんに行われ、その有効成分の分離・同定が数多く行われている。
【０００４】
このうち、コーヒー等の食品に含まれているクロロゲン酸、カフェ酸、フェルラ酸等が優れた血圧降下作用を示すことが報告されている（特許文献１〜３）。しかしながら、クロロゲン酸類を多量に含むことが知られているコーヒー飲料では、明確な血圧降下作用が認められず、逆に血圧を上昇させるという報告もある（非特許文献１）。
【特許文献１】特開２００２−３６３０７５号公報
【特許文献２】特開２００２−２２０６２号公報
【特許文献３】特開２００２−５３４６４号公報
【非特許文献１】Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．，５３（１１），８３１（１９９９）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、優れた高血圧改善作用を有し、通常摂取できる容器詰ミルクコーヒー飲料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、コーヒー飲料がクロロゲン酸を含んでいるにもかかわらず、十分な血圧降下作用を示さないことに着目し、血圧降下作用とコーヒー飲料成分との関係について種々検討した結果、コーヒー飲料に含まれているヒドロキシヒドロキノンがクロロゲン酸類の血圧降下作用を阻害していることを見出した。そして、クロロゲン酸類量を一定範囲に保持し、ヒドロキシヒドロキノン含量を通常含まれる量より十分少ない一定量以下に低下させれば、優れた血圧降下作用を有するコーヒー組成物が得られることを見出した。
【０００７】
しかし、このコーヒー組成物に乳成分を配合して容器詰ミルクコーヒー飲料とした場合、ヒドロキシヒドロキノン含量を低下させても、加熱殺菌処理工程でヒドロキシヒドロキノンが再生成してしまうことが判明した。そこで更に検討した結果、殺菌条件を限定することで、加熱殺菌処理によるヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制でき、優れた血圧降下作用を有する容器詰ミルクコーヒー飲料が得られることを見出した。
【０００８】
すなわち、本発明は、下記条件（Ａ）及び（Ｂ）：
（Ａ）クロロゲン酸類    ０．０１〜１質量％、
（Ｂ）ヒドロキシヒドロキノン    クロロゲン酸類量の０．１質量％未満
を満たす乳成分を含有するコーヒー組成物を、殺菌温度１２３℃以上、殺菌時間２０分以内で加熱殺菌処理することを特徴とする、ヒドロキシヒドロキノン含有量が０〜０．００００８５質量％であり、ヒドロキシヒドロキノン量がクロロゲン酸類量の０．１質量％未満である容器詰ミルクコーヒー飲料の製造方法を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、優れた高血圧改善作用、すなわち血圧降下作用又は血圧上昇抑制作用を有し、かつ長期摂取可能である容器詰ミルクコーヒー飲料を得ることができる。従って、本発明の容器詰ミルクコーヒー飲料は、高血圧改善用の医薬として、更には血圧降下のために、又は、血圧上昇抑制のために用いられる旨、又は血圧が高めの方にと表示された飲料として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、血圧降下作用、血圧上昇抑制作用、及び味の点で、（Ａ）クロロゲン酸類を０．０１〜１質量％含有するが、好ましくは０．０５〜０．８質量％、より好ましくは０．１〜０．６質量％、更に好ましくは０．１３〜０．５質量％、特に好ましくは０．１５〜０．４質量％含有する。（Ａ）当該クロロゲン酸類としては（Ａ1）モノカフェオイルキナ酸、（Ａ2）フェルラキナ酸、（Ａ3）ジカフェオイルキナ酸の三種を含有する。ここで（Ａ1）モノカフェオイルキナ酸としては３−カフェオイルキナ酸、４−カフェオイルキナ酸及び５−カフェオイルキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。また（Ａ2）フェルラキナ酸としては、３−フェルラキナ酸、４−フェルラキナ酸及び５−フェルラキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。（Ａ3）ジカフェオイルキナ酸としては３，４−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸及び４，５−ジカフェオイルキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。当該クロロゲン酸類の含有量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定することができる。ＨＰＬＣにおける検出手段としては、ＵＶ検出が一般的であるが、ＣＬ（化学発光）検出、ＥＣ（電気化学）検出、ＬＣ−Ｍａｓｓ検出等により更に高感度で検出することもできる。
【００１１】
また、本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、ヒドロキシヒドロキノン（Ｂ）の含量がクロロゲン酸類量に対して０．１質量％未満である。クロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が０．１質量％未満であれば、クロロゲン酸類の血圧降下作用が発揮される。好ましくは０．００１〜０．０８５質量％、より好ましくは０．００１〜０．０７質量％、更に好ましくは０．００２〜０．０５質量％、特に好ましくは０．００３〜０．０３質量％、最も好ましくは０．００４〜０．０２質量％である。クロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が０．０５質量％以下であればクロロゲン酸の血圧降下作用はさらに顕著となる。ここで、組成物中のヒドロキシヒドロキノン含量は０であってもよい。
【００１２】
当該ヒドロキシヒドロキノン含量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定することができる。ＨＰＬＣにおける検出手段としては、ＵＶ検出が一般的であるが、ＣＬ（化学発光）検出、ＥＣ（電気化学）検出、ＬＣ−Ｍａｓｓ検出等により更に高感度で検出でき、特にＥＣ（電気化学）検出が極微量のヒドロキシヒドロキノンを測定できる点で好ましい。なお、ＨＰＬＣによるヒドロキシヒドロキノン含量の測定にあたっては、容器詰ミルクコーヒー飲料又はコーヒー組成物を濃縮した後に測定することもできる。
【００１３】
更にヒドロキシヒドロキノン含量は、ＨＰＬＣで直接測定することもできるが、本発明により得られた容器詰ミルクコーヒー飲料又はコーヒー組成物から、各種クロマトグラフィーによりヒドロキシヒドロキノンを濃縮して、その濃縮画分の量を測定することによっても定量できる。なお、クロロゲン酸類量の測定にあたっては、容器詰ミルクコーヒー飲料を開封後直ちに、例えば５０ｍＭ酢酸、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する５％アセトニトリル溶液にて１０倍に希釈した溶液、又は、４０〜５０ｍＭ酢酸、９〜１０ｍＭ酢酸ナトリウム、０．０９〜０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する４〜５（Ｖ／Ｖ）％アセトニトリル溶液系で測定するのが好ましい。さらに、ヒドロキシヒドロキノンの測定にあたっては、容器詰ミルクコーヒー飲料を開封後直ちに、０．５（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．５ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液にて２倍に希釈した溶液、又は、０．２５〜０．５（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．２５〜０．５ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する２．５〜５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液系で測定するのが好ましい。
【００１４】
本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、ヒドロキシヒドロキノン含量を低減させる以外は、通常のコーヒー成分をそのまま含有しているのが好ましい。
【００１５】
また本発明の容器詰ミルクコーヒー飲料又はミルクコーヒー組成物は、Ｈ2Ｏ2（過酸化水素）の含有量が１ｐｐｍ以下、より好ましくは０．１ｐｐｍ以下、更に０．０５ｐｐｍ以下、特に０．０１ｐｐｍ以下であるのがコーヒー本来の風味の点で好ましい。過酸化水素の測定は通常用いられる過酸化水素計を用いて行うことができ、例えば、セントラル科学社製の高感度過酸化水素計スーパーオリテクターモデル５（ＳＵＰＥＲ  ＯＲＩＴＥＣＴＯＲ  ＭＯＤＥＬ５）等を用いることができる。特に、Ｈ2Ｏ2は開缶前は殺菌処理により失われているものの、開缶によって空気に触れると時間経過と共に徐々に増加する傾向があることから、特許文献３７３２７８２号、３７０６３３９号に記載の測定条件に則り、開缶後迅速かつ速やかに分析する。
【００１６】
本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、コーヒー豆からの抽出物、インスタントコーヒーの水溶液、液体コーヒーエキスなどから調製することができる。
本発明において、コーヒー組成物を得るのに用いるコーヒー豆の種類は、特に限定されないが、例えばブラジル、コロンビア、タンザニア、モカ、キリマンジェロ、マンデリン、ブルーマウンテン等が挙げられる。コーヒー豆種としては、アラビカ種、ロブスタ種などがある。コーヒー豆は１種でもよいし、複数種をブレンドして用いてもよい。コーヒー豆を焙煎により焙煎コーヒー豆とする方法については、特に制限はなく、焙煎温度、焙煎環境についても何ら制限はないが、好ましい焙煎温度は通常１００〜３００℃、更に好ましくは１５０〜２５０℃である。好ましい焙煎方法としては直火式又は熱風式、半熱風式があり、回転ドラムを有している形式が更に好ましい。また風味の観点より焙煎後１時間以内に０〜１００℃まで冷却することが好ましく、更に好ましくは１０〜６０℃である。焙煎コーヒー豆の焙煎度としては、ライト、シナモン、ミディアム、ハイ、シティ、フルシティ、フレンチ、イタリアンがあり、ライト、シナモン、ミディアム、ハイ、シティが好ましい。焙煎度を色差計で測定したＬ値としては、通常１０から３０、好ましくは１５から２５である。尚、焙煎度の違うコーヒー豆を混合しても良い。
【００１７】
コーヒー豆からの抽出方法についても何ら制限はなく、例えば焙煎コーヒー豆又はその粉砕物から水〜熱水（０〜１００℃）などの抽出溶媒を用いて１０秒〜３０分抽出する方法が挙げられる。粉砕度合いは、極細挽き（０．２５０−０．５００μｍ）、細挽き（０．３００−０．６５０μｍ）、中細挽き（０．５３０−１．０００μｍ）、中挽き（０．６５０−１．５００μｍ）、中粗挽き、粗挽き（０．８５０−２．１００μｍ）、極粗挽き（１．０００−２．５００μｍ）や平均粒径３ｍｍや同５ｍｍ、同１０ｍｍ程度のカット品が挙げられる。抽出方法は、ボイリング式、エスプレッソ式、サイホン式、ドリップ式（ペーパー、ネル等）等が挙げられる。
【００１８】
抽出溶媒としては、水、アルコール含有水、ミルク、炭酸水などが挙げられる。抽出溶媒のｐＨは通常４−１０であり、風味の観点からは５−７が好ましい。尚、抽出溶媒の中にｐＨ調整剤、例えば重炭酸水素ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アルコルビン酸Ｎａを含有させ、ｐＨを適宜調整しても良い。
【００１９】
抽出器としては、ペーパードリップ、不織布ドリップ、サイフォン、ネルドリップ、エスプレッソマシン、コーヒーマシン、パーコレーター、コーヒープレス、イブリック、ウォータードリップ、ボイリング、コーヒーカップへ実質的に懸架可能なペーパー又は不織布の袋状構造体、上部にスプレーノズル下部に実質的にコーヒー豆の固液分離可能な構造体（メッシュやパンチングメタルなど）を有するドリップ抽出器、上部及び下部に実質的にコーヒー豆の固液分離可能な構造体（メッシュやパンチングメタルなど）を有するカラム抽出器等が挙げられる。抽出器に加熱又は冷却可能な構造（例えば、電気ヒーター、温水や蒸気、冷水が通液可能なジャケット）を有していても良い。
【００２０】
抽出方法としてはバッチ式抽出法、半バッチ式抽出法、連続式抽出法が挙げられる。バッチ式抽出法又は半バッチ式抽出法の抽出時間は１０秒〜１２０分である。風味の観点より、３０秒から３０分が好ましい。
【００２１】
また、本発明方法に用いられるコーヒー組成物は乳成分を含有する。乳成分としては、例えば生乳、牛乳、全粉乳、脱脂粉乳、生クリーム、濃縮乳、脱脂乳、部分脱脂乳、練乳、植物油等が挙げられる。これらの乳成分は、合計でコーヒー飲料組成物中に乳固形分換算で０．１〜１０質量％、さらに０．５〜６質量％、特に１〜４質量％含有するのが好ましい。
【００２２】
本発明方法により製造される容器詰ミルクコーヒー飲料は、飲料１００ｇあたりコーヒー豆を生豆換算で１ｇ以上、好ましくはコーヒー豆を２．５ｇ以上、更に好ましくはコーヒー豆を５ｇ以上使用しているものである。
【００２３】
本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、コーヒー抽出液を含む液を吸着剤処理してヒドロキシヒドロキノン量を低減させる方法（吸着剤処理法）、コーヒー抽出液を含む液中の酵素処理によりヒドロキシヒドロキノン含量を低減させることにより得られる方法などによりヒドロキシヒドロキノン量を調整することができる。
吸着剤処理法に用いる吸着剤としては、活性炭、逆相クロマトグラフ担体、白土（活性白土、酸性白土）などが挙げられ、これら２種以上の混合物であってもよい。吸着剤の平均粒径は、通常１μｍ〜２０ｍｍが好ましく、さらに好ましくは５０μｍ〜５ｍｍである。吸着剤処理方法は、バッチ法であってもカラム通液方法であっても良い。
【００２４】
バッチ法としては、例えばコーヒー抽出液を含む液に吸着剤を加え−１０〜１００℃で０．５分〜５時間撹拌した後、吸着剤を除去すればよい。処理時の雰囲気としては、空気下、不活性ガス下（窒素ガス、アルゴンガス、ヘリウムガス、二酸化炭素、炭酸ガス）が挙げられるが、風味の観点より不活性ガス下が好ましい。
カラム通液法としては、例えば吸着カラム内に吸着剤を充填し、コーヒー抽出液を含む液をカラム下部又は上部から通液させ、他方から排出させる。吸着剤のカラム内への充填量は、通液前に吸着カラムに充填できる量であれば良い。吸着カラムの上段又は下段の少なくとも１つにメッシュ（網）又はパンチングメタルなど有し実質的に吸着剤が漏れ出さない分離構造体を有していれば良い。
【００２５】
吸着剤量は、コーヒー抽出液中のコーヒー豆由来可溶性固形分に対して、０．０１〜１００倍である。風味の観点より、活性炭の場合は、０．０２〜１．０倍、逆相クロマトグラフ担体の場合は２〜１００倍用いるのが好ましい。
【００２６】
活性炭としては、ミクロ孔領域における平均細孔半径が５オングストローム（Å）以下、更には、２〜５オングストロームの範囲であることが好ましく、特に３〜５オングストロームの範囲であることが好ましい。本発明におけるミクロ孔領域とは、１０オングストローム以下を示し、平均細孔半径は、ＭＰ法により測定して得た細孔分布曲線のピークト
ップを示す細孔半径の値とした。ＭＰ法とは、文献（Ｃｏｌｌｏｉｄ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６，４６（１９６８））に記載の細孔測定法であり、株式会社住化分析センター、株式会社東レリサーチセンター等にて採用されている方法である。
また、活性炭の種類としては、ヤシ殻活性炭が好ましく、更に水蒸気賦活化ヤシ殻活性炭が好ましい。活性炭の市販品としては、白鷺ＷＨ２Ｃ、ＷＨ２ＣＬ、Ｗ２ＣＬ、Ｗ２Ｃ、ＥＨ（日本エンバイロケミカルズ）、太閣ＣＷ（二村化学）、クラレコールＧＷ（クラレケミカル）等を用いることができる。
【００２７】
白土は、５％のサスペンジョンのｐＨが５〜１０である酸性白土が好ましい。酸性白土の市販品としては、ミズカエース等を用いることができる。
逆相クロマトグラフ担体としては、ＹＭＣ・ＯＤＳ−Ａ（ＹＭＣ）、Ｃ１８（ＧＬサイエンス）等が挙げられる。
【００２８】
これらの吸着剤処理法のうち、活性炭を用いた吸着剤処理法はクロロゲン酸類量を低下させることなく選択的にヒドロキシヒドロキノン含量を低減させることができるだけでなく、風味も良く工業的にも有利であり、更にカリウム含量を低下させない（質量比で１／５以上、特に１／２以上保持）方がコーヒー本来の風味の点からも好ましい。
尚、吸着剤処理工程は、コーヒー抽出液のみで処理をおこなうのが好適であるが、乳や乳製品、副原料を混合し処理をおこなっても良い。
【００２９】
本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、高速液体クロマトグラフィーによる分析における、没食子酸を標準物質とした場合の没食子酸に対する相対保持時間が０．５４〜０．６１の時間領域にヒドロキシヒドロキノンのピークを有しないことが好ましい。当該時間領域に実質的にピークを有しないことを確認するには、一般的なＨＰＬＣを使用することができ、例えば溶離液として０．０５Ｍ酢酸水溶液と０．０５Ｍ酢酸１００％アセトニトリル溶液のグラジエントを用い、ＯＤＳカラムを用いて、紫外線吸光光度計等により検出することで確認することができる。
【００３０】
本発明において没食子酸に対する相対保持時間が０．５４〜０．６１の時間領域に実質的にピークを有しないとは、没食子酸の１ｐｐｍ溶液を分析時の面積値をＳ１とし、同条件でコーヒー飲料組成物を分析した時の前記特定の領域に溶出する成分に由来するピーク面積の総和をＳ２としたとき、Ｓ２／Ｓ１＜０．０１であることを意味する。
【００３１】
本発明方法に用いられるコーヒー組成物には、所望により、ショ糖、グルコース、フルクトース、キシロース、果糖ブドウ糖液、糖アルコール等の糖分、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、乳化剤、香料等を添加することができる。コーヒー組成物のｐＨとしては、飲料の安定性の面から５〜７、更に５．４〜６．５、特に５．５〜６．２が好ましい。
【００３２】
本発明方法により製造される容器詰ミルクコーヒー飲料は、優れた血圧降下作用を有する。特に、参考例２に示すように雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）に総クロロゲン酸量として２００ｍｇ／ｋｇ経口投与した場合に１２時間後の血圧変化率が７％以上低下するものが好ましく、さらに好ましくは８．５％以上低下するものである。このためには加熱殺菌処理後、ヒドロキシヒドロキノン含有量が０〜０．００００８５質量％であり、且つクロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が０．１質量％未満であることが必要である。ヒドロキシヒドロキノン含有量が０〜０．００００８５質量％であり、且つクロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が０．１質量％未満であれば、クロロゲン酸類の血圧降下作用が発揮される。ヒドロキシヒドロキノン含有量は、好ましくは０〜０．００００８質量％、より好ましくは０〜０．００００６５質量％、更に好ましくは０〜０．００００４５質量％である。クロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が、好ましくは０．００１〜０．０８質量％、より好ましくは０．００２〜０．０７質量％、更に好ましくは０．００３〜０．０６質量％、特に好ましくは０．００４〜０．０５質量％である。ここで、組成物中のヒドロキシヒドロキノン含量は０であっても良い。
【００３３】
本発明方法により製造される容器詰ミルクコーヒー飲料は、コーヒー組成物と乳成分をＰＥＴボトル、缶（アルミニウム、スチール）、紙、レトルトパウチ、瓶（ガラス）等の容器に詰めて製造することができる。この場合、コーヒー組成物と乳成分を容器に詰めて５０〜２５００ｍＬの容器詰ミルクコーヒー飲料とすることができる。容器詰ミルクコーヒー飲料は、シングルストレングスであることが好ましい。ここでシングルストレングスとは、容器詰飲料を開封した後、常態として薄めずにそのまま飲めるものをいう。容器詰ミルクコーヒー飲料のｐＨとしては５〜７が好ましく、更に５．５〜６．８が好ましく、特に５．５〜６．５が好ましい。また、本発明により得られる容器詰ミルクコーヒー飲料中のモノカフェオイルキナ酸の構成比としては、４−カフェオイルキナ酸／３−カフェオイルキナ酸質量比が０．６〜１．２であり、５−カフェオイルキナ酸／３−カフェオイルキナ酸質量比が０．０１〜３であることが好ましい。
【００３４】
容器としては、コーヒー中の成分の変化を防止する観点から、酸素透過度の低い容器が好ましく、例えば、アルミニウムや、スチールなどの缶、ガラス製のビン等を用いるのが良い。缶やビンの場合、リキャップ可能な、リシール型のものも含まれる。ここで酸素透過性とは、容器・フィルム酸素透過率測定器で２０℃、相対湿度５０％の環境下で測定した酸素透過度（ｃｃ・ｍｍ／ｍ2・ｄａｙ・ａｔｍ）であり、酸素透過度が５以下が好ましく、更に３以下、特に１以下が好ましい。
【００３５】
本発明において、殺菌時間は、ヒドロキシヒドロキノンの再生成を効果的に抑制する点及び風味の点で、２０分以内であり、好ましくは１秒〜２０分、より好ましくは３秒〜１７分、さらに好ましくは１５秒〜１５分である。バッチ式殺菌機においての殺菌時間は、風味の観点より好ましくは２〜２０分、更に好ましくは３〜１５分である。連続式殺菌機においての殺菌時間は、風味の観点より好ましくは１０〜９０秒、更に好ましくは２０〜８０秒である。
【００３６】
また、殺菌温度は、微生物学的安定性の点で１２３℃以上であり、更に１２５〜１５０℃、特に１２６〜１４５℃が好ましい。バッチ式殺菌機においての殺菌温度は、風味の観点より１２３〜１３５℃が好ましく、比較的短時間で殺菌可能である連続式殺菌機においての殺菌温度は、風味の観点より１３０〜１５０℃が好ましい。
【００３７】
殺菌器はバッチ式殺菌機又は連続式殺菌機が使用可能である。バッチ式殺菌機としては、レトルト釜がある。連続式殺菌機としては、チューブ式殺菌機、プレート式殺菌機、ＨＴＳＴプレート式殺菌装置、ＵＨＴ殺菌機などがある（改訂版ソフトドリンクス、頁５４６−５５８、頁６３３−６３８、監修：全国清涼飲料工業会、発行：光琳）。風味の観点より、連続殺菌機が好ましく。特に、連続加熱殺菌後無菌下で充填する技術が好ましい。
【００３８】
また、殺菌時間及び殺菌温度はＦ０値を管理することにより行うのが好ましい。Ｆ０値は、微生物学的安定性、ヒドロキシヒドロキノンの再生成を効果的に抑制する点及び風味の点で、２５以上であり、好ましくは３０〜６０、より好ましくは３０〜５０、更に好ましくは３７〜４５である。ここで、Ｆ０値とは、容器詰ミルクコーヒー飲料を加熱殺菌した場合の加熱殺菌効果を評価する値で、基準温度（１２１．１℃）における加熱時間（分）を示す。Ｆ０値は、容器内温度に対する致死率（１２１．１℃で１）に、加熱時間（分）を乗じて算出される。致死率は致死率表（藤巻正生ら、「食品工業」、恒星社厚生閣、１９８５年、１０４９頁）から求めることができる。Ｆ０値を算出するには、一般的に用いられる面積計算法、公式法等を採用することができる（例えば谷川ら《缶詰製造学》頁２２０、厚生閣  参照）。
本発明において、Ｆ０値を所定の値になるよう設定するには、例えば、予め得た致死率曲線から、適当な加熱温度・加熱時間を決定すればよい。
【００３９】
当該加熱殺菌処理は、上記条件の他、金属缶のように容器に充填後、加熱殺菌できる場合にあっては食品衛生法に定められた殺菌条件で行われる。ＰＥＴボトルや紙容器のようにレトルト殺菌できないものについては、あらかじめ食品衛生法に定められた条件と同等の殺菌条件、例えばプレート式熱交換器で高温短時間殺菌後、一定の温度迄冷却して容器に充填する等の方法が採用される。また無菌下で加熱殺菌後、無菌下でｐＨを中性に戻すことや、中性下で加熱殺菌後、無菌下でｐＨを酸性に戻す等の操作も可能である。
【００４０】
かくして得られる容器詰ミルクコーヒー飲料は、高血圧改善作用を有するクロロゲン酸類を有効量含有しており、かつ加熱殺菌処理後もクロロゲン酸類の高血圧改善作用を阻害しているヒドロキシヒドロキノン量が低減されていることから、血圧降下用、又は血圧上昇抑制医薬組成物、血圧降下用飲料、血圧上昇抑制飲料として有用である。
【実施例】
【００４１】
クロロゲン酸類及びヒドロキシヒドロキノンの分析法は次の通りである。
クロロゲン酸類の分析方法
コーヒー組成物又は容器詰ミルクコーヒー飲料のクロロゲン酸類の分析法は次の通りである。分析機器はＨＰＬＣを使用した。装置の構成ユニットの型番は次の通り。ＵＶ−ＶＩＳ検出器：Ｌ−２４２０（（株）日立ハイテクノロジーズ）、カラムオーブン：Ｌ−２３００（（株）日立ハイテクノロジーズ）、ポンプ：Ｌ−２１３０（（株）日立ハイテクノロジーズ）、オートサンプラー：Ｌ−２２００（（株）日立ハイテクノロジーズ）、カラム：Ｃａｄｅｎｚａ  ＣＤ−Ｃ１８  内径４．６ｍｍ×長さ１５０ｍｍ、粒子径３μｍ（インタクト（株））。
分析条件は次の通りである。サンプル注入量：１０μＬ、流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、ＵＶ−ＶＩＳ検出器設定波長：３２５ｎｍ、カラムオーブン設定温度：３５℃、溶離液Ａ：０．０５Ｍ  酢酸、０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、１０ｍＭ  酢酸ナトリウム、５（Ｖ／Ｖ）％アセトニトリル溶液、溶離液Ｂ：アセトニトリル。
【００４２】
濃度勾配条件
時間        溶離液Ａ        溶離液Ｂ
０．０分        １００％            ０％
１０．０分        １００％            ０％
１５．０分          ９５％            ５％
２０．０分          ９５％            ５％
２２．０分          ９２％            ８％
５０．０分          ９２％            ８％
５２．０分          １０％          ９０％
６０．０分          １０％          ９０％
６０．１分        １００％            ０％
７０．０分        １００％            ０％
【００４３】
ＨＰＬＣでは、試料１ｇを精秤後、溶離液Ａにて１０ｍＬにメスアップし、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過後、分析に供した。
クロロゲン酸類の保持時間（単位：分）
（Ａ1）モノカフェオイルキナ酸：５．３、８．８、１１．６の計３点（Ａ2）フェルラキナ酸：１３．０、１９．９、２１．０の計３点（Ａ3）ジカフェオイルキナ酸：３６．６、３７．４、４４．２の計３点。ここで求めた９種のクロロゲン酸類の面積値から５−カフェオイルキナ酸を標準物質とし、質量％を求めた。
【００４４】
ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法
コーヒー飲料のヒドロキシヒドロキノンの分析法は次の通りである。分析機器はＨＰＬＣ−電気化学検出器（クーロメトリック型）であるクーロアレイシステム（モデル５６００Ａ、開発・製造：米国ＥＳＡ社、輸入・販売：エム・シー・メディカル（株））を使用した。装置の構成ユニットの名称・型番は次の通りである。
アナリティカルセル：モデル５０１０、クーロアレイオーガナイザー、クーロアレイエレクトロニクスモジュール・ソフトウエア：モデル５６００Ａ、溶媒送液モジュール：モデル５８２、グラジエントミキサー、オートサンプラー：モデル５４２、パルスダンパー、デガッサー：Ｄｅｇａｓｙｓ  Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＤＵ３００３、カラムオーブン：５０５、カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  Ｃ１８  ＡＱ  内径４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ  粒子径５μｍ（（株）資生堂）。
分析条件は次の通りである。
サンプル注入量：１０μＬ、流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、電気化学検出器の印加電圧：０ｍＶ、カラムオーブン設定温度：４０℃、溶離液Ａ：０．１（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液、溶離液Ｂ：０．１（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５０（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液。
【００４５】
溶離液Ａ及びＢの調製には、高速液体クロマトグラフィー用蒸留水（関東化学（株））、高速液体クロマトグラフィー用メタノール（関東化学（株））、リン酸（特級、和光純薬工業（株））、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（６０％水溶液、東京化成工業（株））を用いた。
【００４６】
濃度勾配条件
時間      溶離液Ａ        溶離液Ｂ
０．０分      １００％          ０％
１０．０分      １００％          ０％
１０．１分          ０％      １００％
２０．０分          ０％      １００％
２０．１分      １００％          ０％
５０．０分      １００％          ０％
【００４７】
分析試料の調製は、試料５ｇを精秤後、０．５（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．５ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液にて１０ｍＬにメスアップし、この溶液について遠心分離を行い上清を得た。この上清について、ボンドエルートＳＣＸ（固相充填量：５００ｍｇ、リザーバ容量：３ｍＬ、ジーエルサイエンス（株））に通液し、初通過液約０．５ｍＬを除いて通過液を得た。この通過液について、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過し、速やかに分析に供した。
【００４８】
ＨＰＬＣ−電気化学検出器の上記の条件における分析において、ヒドロキシヒドロキノンの保持時間は、６．３８分であった。得られたピークの面積値から、ヒドロキシヒドロキノン（和光純薬工業（株））を標準物質とし、質量％を求めた。
【００４９】
実施例１
中焙煎度のコーヒー豆に対して８倍量のイオン交換水（９５℃）で抽出し、コーヒー抽出液を得た。次に本コーヒー抽出液中のＢｒｉｘを測定し、Ｂｒｉｘに対して５０重量％の量の活性炭（白鷺ＷＨ２Ｃ）を充填したカラム（内径４５ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）を準備した。その後、活性炭を充填したカラムに温度２５℃、ＳＶ８［１／容量［ｍ3］／流量［ｍ3／ｈｒ］］の条件下でコーヒー抽出液を通液し、活性炭処理してヒドロキシヒドロキノンを除去したコーヒー組成物を得た。
こうして得られたヒドロキシヒドロキノンを除去したコーヒー組成物中のＣＧＡ量を測定し、イオン交換水で希釈し、牛乳を１１．５質量％になる様に配合し、加熱殺菌処理後のｐＨ値が表１に示す値になるよう重曹にてｐＨ調整を行った。加熱殺菌前のヒドロキシヒドロキノンは、検出限界以下であった（ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法）。次にこうして得られたコーヒー組成物を１９０ｇ缶に充填後、密封し、表１に示す殺菌条件に従いレトルト殺菌処理を施し、容器詰ミルクコーヒー飲料を得た。また加熱殺菌後のヒドロキシヒドロキノンは、ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法を用いた。
【００５０】
実施例２、３、及び比較例１、２
表１に示す殺菌条件（Ｆ０値、殺菌時間および殺菌温度）にそれぞれ制御した以外は、実施例１と同様に容器詰ミルクコーヒー飲料を製造した。
【００５１】
比較例３
中焙煎度のコーヒー豆に対して８倍量のイオン交換水（９５℃）で抽出し、コーヒー抽出液を得た。活性炭処理を実施しないこと以外は実施例１と同様の操作で、ｐＨ調整を行い、表１の示す殺菌条件に従い、容器詰ミルクコーヒー飲料を製造した。
【００５２】
実施例４
中焙煎度のコーヒーエキスのＢｒｉｘに対して、５０重量％の活性炭（白鷺ＷＨ２Ｃ）を充填したカラム（内径４５ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）に、温度２５℃、ＳＶ８［１／容量［ｍ3］／流量［ｍ3／ｈｒ］］の条件下で、前記コーヒーエキスを通液した。
予め乳化剤、カゼインＮａ、脱脂粉乳を溶解した溶液に、牛乳、砂糖水溶液、及び上記活性炭処理コーヒーエキスを混合し、重曹を溶解した水溶液を用いてｐＨ調整を行った後、クロロゲン酸類量が１７０ｍｇ／１００ｇとなるようにイオン交換水で希釈した。
得られたコーヒー組成物を１９０ｇ缶に充填後、密封し、１３５℃で１００秒間のレトルト殺菌処理を施し、容器詰ミルクコーヒー飲料を製造した。
【００５３】
実施例５
中焙煎度、及び低焙煎度のコーヒー混合エキスのＢｒｉｘに対して、５０重量％の活性炭（白鷺ＷＨ２Ｃ）を充填したカラム（内径４５ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）に、温度２５℃，ＳＶ８［１／容量［ｍ3］／流量［ｍ3／ｈｒ］］の条件下で、前記コーヒー混合エキスを通液した。
予め乳化剤、カゼインＮａ、脱脂粉乳を溶解した溶液に、牛乳、砂糖水溶液、及び上記活性炭処理コーヒーエキスを混合し、重曹を溶解した水溶液を用いてｐＨ調整を行った後、クロロゲン酸類量が３５０ｍｇ／１００ｇとなるようにイオン交換水で希釈した。
得られたコーヒー組成物を１９０ｇ缶に充填後、密封し、１３５℃で１００秒間のレトルト殺菌処理を施し、容器詰ミルクコーヒー飲料を製造した。
【００５４】
結果
表１及び表２に示したように、Ｆ０値を設定し、殺菌時間及び温度を制御することで加熱殺菌後のヒドロキシヒドロキノンの再生成が抑制されることが判った。
【００５５】
＜クロロゲン酸の測定前処理の具体例＞
容器詰ミルクコーヒーを開缶後、直ちに１ｇを精秤後、溶離液Ａ（５０ｍＭ酢酸、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、０．１ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する５（Ｖ／Ｖ）％アセトニトリル溶液）にて１０ｍＬにメスアップし、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過後、分析に供した。
【００５６】
＜ヒドロキシヒドロキノンの測定前処理の具体例＞
容器詰ミルクコーヒーを開缶後、直ちに５ｇを精秤後、０．５（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．５ｍＭ  １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液にて１０ｍＬにメスアップし、この溶液について遠心分離を行い上清を得た。この上清について、ボンドエルートＪＲ  ＳＣＸ（固相充填量：５００ｍｇ、ジーエルサイエンス（株））に通液し、初通過液約１．０ｍＬを除いて、通過液を得た。この通過液について、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過し、速やかに分析に供した。
【００５７】
＜過酸化水素の測定具体例＞
過酸化水素分析計ＳＵＰＥＲ  ＯＲＩＴＥＣＴＯＲ  ＭＯＤＥＬ  ５（セントラル科学（株））を使用し、標準校正液（過酸化水素１ｐｐｍ）で校正した後、分析計測定セル内に、０．５％臭素酸カリウム配合の０．２Ｍリン酸バッファー（ｐＨ７．０）を１ｍＬ入れる。窒素送付によりセル内の溶存酸素がゼロになった時点で３０℃恒温槽に静置しておいた市販缶コーヒーならびに試験サンプルを開缶し１ｍＬを速やかに抜き取り、測定セル内に加える。後は、装置の測定手順に従い、発生した酸素濃度をプリンターから読み取る。尚、外そうする場合には、以後、１５分毎に測定し、得られた１時間後までのデータを用いて最小二乗法で直線を引き、求める。ここでＭＯＤＥＬ５の検出限界は０．１ｍｇ／ｋｇであった。
【００５８】
【表１】
2007054064.tif 000002
【００５９】
【表２】
2007054064.tif 000003
【００６０】
参考例１
コーヒー組成物Ｑを次の方法で製造した。
活性炭処理コーヒーの製造
市販インスタントコーヒー（ネスカフェ（登録商標）ゴールドブレンド赤ラベル）２０ｇを、蒸留水１４００ｍＬに溶解したのち（このコーヒーをコーヒー組成物Ｐという）、活性炭白鷺ＷＨ２Ｃ  ２８／４２（日本エンバイロケミカルズ）を３０ｇ加え、１時間攪拌したのち、メンブレンフィルター（０．４５μｍ）を用いてろ過し、ろ液を得た（このコーヒーをコーヒー組成物Ｑという）。得られたろ液を、凍結乾燥し、褐色粉末１５．８ｇを得た。この褐色粉末を蒸留水に溶解し、ＨＰＬＣ分析により、クロロゲン酸類及びヒドロキシヒドロキノンの定量を行なったところ、クロロゲン酸類は４．１２質量％含まれ、ヒドロキシヒドロキノンは検出限界以下であった。また、ＩＣＰ発光分光分析法でカリウム含量を測定したところ、原料インスタントコーヒー及び活性炭処理コーヒーのいずれも約４．２質量％であった。
【００６１】
参考例２
参考例１で作製したコーヒー組成物Ｑの血圧降下評価
実験材料及び方法
（ａ）１３−１４週齢の雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）を予備的に５日間連続で市販のラット用非観血式血圧測定装置（ソフトロン社製）を用いて血圧測定することにより、ラットを血圧操作に十分慣れさせた後、評価試験を測定した。ラットはすべて温度２５±１℃、相対湿度５５±１０％、照明時間１２時間（午前７時〜午後７時）の条件下（ラット区域内飼育室）で飼育した。
（ｂ）投与方法及び投与量；試験群では参考例１で作製したコーヒー組成物Ｑ（活性炭処理コーヒー）を用いた。対照群は市販のインスタントコーヒーを使用した。活性炭処理コーヒーとインスタントコーヒーをそれぞれ生理食塩水に溶解し、総クロロゲン酸量として２００ｍｇ／ｋｇの投与量となるように作製した。投与方法は経口用ゾンデを用いて、経口投与を行った。投与量は５ｍＬ／ｋｇとした。
（ｃ）試験方法；ＳＨＲを１群４−６匹使用した。経口投与前と１２時間後の尾静脈の収縮期血圧を測定し、投与前血圧から１２時間後の血圧変化率を算出した。
（ｄ）統計学処理方法；得られた測定結果は、平均値及び標準誤差を表してＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔを行い、有意水準は５％とした。
結果；表３から明らかなように、コーヒー組成物Ｑを摂取することにより、通常のインスタントコーヒーを摂取した場合に比較して、著明な血圧降下を認めた。
【００６２】
【表３】
2007054064.tif 000004