(57)【要約】【課題】  生体の免疫反応の異常によって誘発される疾患の予防・改善に有効な、食経験が豊富で安全性が高い酵母由来の免疫調節剤およびその製造方法を提供すること。【解決手段】  サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母より水溶性画分を除去して得られる免疫調節剤の製造方法であって、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母を、水存在下６０℃以上で処理し、その製造工程において、酸処理、アルカリ処理、アルコール処理及び酵素処理のいずれも実施しないことを特徴とする、免疫調節剤の製造方法。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母より水溶性画分を除去して得られる免疫調節剤の製造方法であって、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母を、水存在下６０℃以上で処理し、その製造工程において、酸処理、アルカリ処理、アルコール処理、または酵素処理のいずれも実施しないことを特徴とする、免疫調節剤の製造方法。
【請求項２】
サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母が、パン製造用のサッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）である、請求項１に記載の免疫調節剤の製造方法。
【請求項３】
次の工程からなる請求項１または２に記載の免疫調節剤の製造方法。
(a)酵母乾燥重量１部に対して、５〜１００重量部の水を添加し懸濁させ、８０〜１４０℃で５〜２００分間の加熱処理を行い、
(b)加熱処理後、濾過または遠心分離によって水不溶性画分と水溶性画分を分離して、水溶性画分を除去し、
(c)得られた水不溶性画分を水洗浄し、
(d)その後、スプレードライまたは凍結乾燥によって乾燥する。
【請求項４】
請求項１〜３いずれか１項記載の製造方法によって得られる免疫調節剤。
【請求項５】
Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスを適切な状態に是正する請求項４記載の免疫調節剤。
【請求項６】
インターロイキン４産生抑制作用を有し、かつインターロイキン１２産生促進作用を有する請求項４または５に記載の免疫調節剤。
【請求項７】
請求項４〜６いずれか１項記載の免疫調節剤を含有する飲食用組成物。
【請求項８】
請求項４〜６いずれか１項記載の免疫調節剤を含有する医療用または動物薬用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、免疫調節剤およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
生体の免疫系に何らかの異常が生じると、自己免疫疾患、免疫不全疾患、アレルギー反応といった症状が生じる。免疫系の働きは単に活発なだけでなく、感染または疾病に対する活性のバランスが適切でなくてはならない。
【０００３】
免疫系を担当する細胞のうちＣＤ４を発現するＴ細胞は一般にＴｈ（ヘルパーＴリンパ球）と呼ばれ、機能や、様々なサイトカインに対する応答性、サイトカインを分泌する能力によって、大きく２つの類型に分けられる。Ｔｈリンパ球はまずＩＬ-２を作る前駆体細胞として存在し、外部からの刺激により、これらの細胞はＴｈ０細胞となり、ＩＦＮ-γ、ＩＬ-２、ＩＬ-４、ＩＬ-５、ＩＬ-１０を含む数種のサイトカインを分泌するようになる。この状態のＴｈ０細胞に作用するサイトカインによって、Ｔｈ０細胞はＴｈ１細胞またはＴｈ２細胞のいずれかになるが、ＩＦＮ-γとＩＬ-１２はＴｈ１細胞へと、ＩＬ-４とＩＬ-１０はＴｈ２細胞へと分化を促進する。Ｔｈ１細胞とＴｈ２細胞では分泌するサイトカインの種類が異なり、Ｔｈ１細胞はＩＦＮ-γを、Ｔｈ２細胞はＩＬ-４を分泌する。一般的にＴｈ１細胞はウィルスや細胞内寄生細菌に対する感染防御反応、遅延型過敏症などの細胞性免疫に関与し、Ｔｈ２細胞はＢ細胞に抗体産生を促し、細胞外寄生細菌に対する感染防御反応などの液性免疫に関与する。生体は本来、Ｔｈ１／Ｔｈ２のバランスを保ち免疫系を維持しているが、生活環境、ストレス、食餌などの何らかの原因によってＴｈ１／Ｔｈ２バランスに不均衡が生じ、病態を呈することがある。すなわち、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスがＴｈ１に偏り、不適切なＴｈ１応答が生じると自己免疫疾患を発症、悪化させることがあり、逆に、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスがＴｈ２に偏り、過剰なＴｈ２応答が生じるとＩｇＥの分泌や１型アレルギーの原因となる。
【０００４】
免疫系の異常によって生じる自己免疫疾患、アレルギーなどの個々の症状に対する、酵母または酵母菌体構成成分に関する技術としては、酵母関連高分子からなる抗体産生細胞抑制剤およびこの抗体産生細胞抑制剤を含有する、自己免疫疾患用の食品や医薬品などの組成物（特許文献１）、酵母が菌体内及び／又は菌体外に生産するマンナンを有効成分として含有する免疫賦活剤及び抗腫瘍剤（特許文献２）、サッカロミセス酵母のマンナンを有効成分とするアレルギー体質改善剤（特許文献３）、酵母菌体又は酵母エキスの抽出残さを高圧ホモジナイザー処理し、アルカリ処理を行い水洗浄することにより得られる酵母細胞壁画分を有効成分とするアレルギー性疾患の予防改善剤（特許文献４）が知られている。
【特許文献１】特開平09-188626
【特許文献２】特開2005-60288
【特許文献３】特開2004-224772
【特許文献４】特開2005-120100
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の課題は、免疫系に作用し、過剰なＴｈ１、Ｔｈ２細胞活性は抑制し、不足状態にあるＴｈ１、Ｔｈ２細胞活性は活性化することによって、免疫反応の異常によって誘発される疾患の予防・改善に有効な、食経験が豊富で安全性が高い酵母由来の免疫調節剤およびその簡便で収率の高い製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
これまでに知られている酵母由来または酵母菌体構成成分由来の免疫調節剤に関する技術は、調製法が複雑であったり、収率が低いといった問題や、その効果が十分でなく、特に酵素処理、自己消化や強アルカリ処理においては得られる免疫調節剤に異味異臭があるという問題があった。また、Ｔｈ１細胞が優位になることで生じる自己免疫疾患に代表される症状と、Ｔｈ２細胞が優位になることで生じるアレルギーに代表される症状に関してＴｈ１/Ｔｈ２バランスが適切になるよう調節的に作用することの出来る免疫調節剤の工業的な調製方法は知られていなかった。
【０００７】
本発明者は、酵母菌体を水に懸濁して加熱したのち水溶性画分を除去するという、酸、アルカリ、有機溶媒、酵素を用いることのない製法で得られる細胞壁画分が、自己免疫疾患およびアレルギーに対し、その原因となる免疫系の異常な応答を是正する作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち本発明は、以下のとおりである。
（１）サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母より水溶性画分を除去して得られる免疫調節剤の製造方法であって、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母を、水存在下６０℃以上で処理し、その製造工程において、酸処理、アルカリ処理、アルコール処理、または酵素処理のいずれも実施しないことを特徴とする、免疫調節剤の製造方法。
（２）サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母が、パン製造用のサッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）である、（１）に記載の免疫調節剤の製造方法。
（３）次の工程からなる（１）または（２）に記載の免疫調節剤の製造方法。
(a)酵母乾燥重量１部に対して、５〜１００重量部の水を添加し懸濁させ、８０〜１４０℃で５〜２００分間の加熱処理を行い、
(b)加熱処理後、濾過または遠心分離によって水不溶性画分と水溶性画分を分離して、水溶性画分を除去し、
(c)得られた水不溶性画分を水洗浄し、
(d)その後、スプレードライまたは凍結乾燥によって乾燥する
（４）（１）〜（３）いずれか記載の製造方法によって得られる免疫調節剤。
（５）Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスを適切な状態に是正する（４）記載の免疫調節剤。
（６）インターロイキン４産生抑制作用を有し、かつインターロイキン１２産生促進作用を有する（４）または（５）に記載の免疫調節剤。
（７）（４）〜（６）いずれかに記載の免疫調節剤を含有する飲食用組成物。
（８）（４）〜（６）いずれかに記載の免疫調節剤を含有する医療用または動物薬用組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の製造方法によれば、食品として常用されているサッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母由来の、異味異臭がなく、かつ毒性のない安全な免疫調節剤を簡便に得ることができる。また、本発明の免疫調節剤は、アレルギーモデル動物に対しＴｈ１／Ｔｈ２バランスを適切な状態に是正するアレルギー改善効果を持っており、免疫調節剤として有用である。本発明の免疫調節剤の作用は、免疫系の細胞に作用するサイトカイン産生を調節することによるもので、自己免疫疾患、免疫不全による免疫活性低下による様々な疾病に対しても有効である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明の免疫調節剤の原料となる酵母としては、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母であれば特に限定されないが、パン酵母、ビール酵母、ワイン酵母等の食経験のある酵母を好ましい例として挙げることができ、より具体的には、サッカロマイセス属のサッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）、サッカロマイセス・ルーキシ（Saccharomyces rouxii）、サッカロマイセス・カールスバーゲンシス（Saccharomyces carlsbergensis）等である。より好ましくはパン製造用酵母であり、さらに好ましくは、株式会社カネカ製のレッドイースト、グリーンイースト、ＧＡイーストである。そして、これら酵母は、単独あるいは組み合わせて使用することができる。また、酵母としては生酵母を用いることが好ましいが、乾燥酵母等の生酵母以外の形態の酵母を用いる場合であっても、例えば水中等に懸濁して生酵母同様に処理することもできる。
【００１１】
本発明の免疫調節剤は、上記酵母菌体からタンパク質、糖質、アミノ酸、核酸、有機酸などの水に可溶性の菌体成分（水溶性画分）を適度に除去した、水不溶性の酵母細胞壁画分を主成分とするものである。本発明においては、菌体の水溶性画分の可溶化を水存在下熱処理で行うことを特徴とする。以下に本発明の免疫調節剤の具体的な製造方法を説明する。
【００１２】
まず、菌体水溶性画分の可溶化処理において、酵母菌体を水に懸濁するが、懸濁に用いる水の量は、酵母が水に懸濁することが出来れば特に限定されないが、好ましくは、酵母菌体の乾燥重量１部に対し水５〜１００重量部であり、懸濁液の流動性を高くし加熱処理を均一に行うためその下限値は７重量部以上がより好ましい。懸濁時の水の温度は、０〜９０℃の範囲であることが好ましい。酵母菌体から可溶性成分を可溶化・抽出するための加熱は、酵母菌体内の酵素を働かせることのない高温で、かつ、特段の細胞破壊処理をせずに可溶性成分を溶出させることができる温度であり、具体的には６０℃以上、好ましくは８０〜１４０℃の範囲内で行うことができる。また加熱処理時間としては５〜２００分間が好ましい。温度が８０℃未満または加熱時間が５分未満では、酵母菌体成分に対し酵母菌体内の酵素が作用して異味異臭の原因となったり、酵母菌体からの可溶性成分の溶出が不十分となる可能性がある。また、加熱処理時の温度が１４０℃を超えたり、加熱時間が２００分を超えたりすると、得られる酵母細胞壁画分の免疫調節作用が損なわれる可能性がある。
【００１３】
本発明において、上記加熱処理は、弱酸性から弱塩基性の範囲内で実施する必要がある。具体的には、懸濁時に使用する水は単なる水を使用し、加熱処理時に酸や塩基などを添加しないことで該条件は達成できる。好ましくは、弱酸性または中性条件である、ｐＨ３〜８の範囲であり、より好ましくは中性条件である、ｐＨ７付近である。
【００１４】
次に、可溶性成分を含む水溶性画分を除去するが、その方法としては、例えば、濾過または遠心分離が挙げられる。また、水溶性画分を分離除去して得られた水不溶性画分を必要に応じて１〜２０回の水洗浄を行なうことによって、免疫調節作用を有さない水溶性画分の除去率を高めることができる。水洗浄に用いる水の量は、洗浄の効率の点から、はじめの酵母菌体の乾燥重量１部に対し５〜５０重量部が挙げられる。得られた水不溶性画分は、乾燥させることによって、雑菌繁殖を防止でき、また、ハンドリング性を向上させることができるので乾燥させるのが好ましい。乾燥の方法としては、スプレードライまたは凍結乾燥を行うことができる。
【００１５】
従来、酵母菌体成分の調製に用いられている技術として、酸処理、アルカリ処理、アルコール処理、酵素処理が知られているが、これらの処理は、製造工程数が増すうえ酵母細胞壁画分の免疫調節作用を増強させる効果はないため、本発明においては実施しない。特にｐＨ１１以上のアルカリ処理や、プロテアーゼ、グルカナーゼによる酵素処理は免疫調節作用が損なわれるため、実施すべきでない。
【００１６】
また、本発明の免疫調節剤には、免疫調節作用を失わない範囲内で脱臭、精製などの操作や、バイオアベイラビリティを向上させる目的で１マイクロメートル以下の大きさに粉砕する処理を加えることができる。さらに、当該免疫調節剤は、飲食品や医薬品として不適当な不純物を含有しない限り、そのまま、又は精製物として飲食用、医療用、動物薬用に使用できる。
【００１７】
本発明の免疫調節剤は、これを含有する組成物とすることで、免疫系の異常とりわけ自己免疫疾患、アレルギーの予防及び／又は処置のための、医薬用または動物薬用および飲食用組成物として利用することができる。また、それらの形態は限定されず、例えば、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）、健康食品、栄養補助食品などの飲食品、あるいはＯＴＣなど容易に入手可能な医薬品又は医薬部外品、動物薬品などとして利用できる。
【００１８】
本発明の免疫調節剤や、これを含有する自己免疫疾患やアレルギーの予防及び／又は改善・処置用組成物は、そのまま直接摂取することもできるし、また、公知の担体や助剤などの添加剤を使用して、カプセル剤、錠剤、顆粒剤など服用しやすい形態に成型して摂取することもできる。また、栄養強化を目的として、ビタミンA、C、D、Eなどの各種ビタミン類を添加、併用して用いることもできる。これらの成型剤における本発明の免疫調節剤の含有量は、好ましくは０．０１〜１００重量％である。さらに、飲食物材料に混合して、チューインガム、チョコレート、キャンディー、ゼリー、ビスケット、クラッカーなどの菓子類；アイスクリーム、氷菓などの冷菓類；茶、清涼飲料、栄養ドリンク、美容ドリンクなどの飲料；うどん、中華麺、スパゲティー、即席麺などの麺類；蒲鉾、竹輪、はんぺんなどの練り製品；ドレッシング、マヨネーズ、ソースなどの調味料；マーガリン、バター、サラダ油などの油脂類；パン、ハム、スープ、レトルト食品、冷凍食品など、すべての飲食物に使用することができる。これら飲食用の、免疫調節剤を摂取する場合、その摂取量は当該免疫調節剤として成人一人一日当たり、好ましくは１〜１０００mg／kg体重、より好ましくは１０〜３００mg／kg体重である。
【００１９】
医薬品として用いる場合は、その剤形は特に限定されず、例えば、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、注射剤、座薬、貼付剤などが挙げられる。製剤化においては、薬剤学的に許容される他の製剤素材、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶解補助剤、安定化剤などを適宜添加して調製することができる。これら製剤の投与量としては、当該免疫調節剤換算で成人一人一日当たり、好ましくは１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは１０〜３００ｍｇ／ｋｇ体重を１回ないし数回に分けて投与する。
【００２０】
医薬部外品として用いる場合は、必要に応じて他の添加剤などを添加して、例えば、軟膏、リニメント剤、エアゾール剤、クリーム、石鹸、洗顔料、全身洗浄料、化粧水、ローション、入浴剤などに使用することができ、局所的に用いることができる。
【実施例】
【００２１】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２２】
（実施例１）
カネカレッドイースト（株式会社カネカ製）３０ｇを、温度２５℃の水７０ｍＬに懸濁し、温度１２１℃で２０分間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分を除去する水洗浄の工程をさらに３回繰り返し実施し水不溶性画分（酵母細胞壁画分）を得た。この酵母細胞壁画分を凍結乾燥機にて乾燥し、７．２３ｇの免疫調節剤１を得た。
【００２３】
（実施例２）
カネカグリーンイースト（株式会社カネカ製）３０ｇを、温度２５℃の水７０ｍＬに懸濁し、温度１２１℃で２０分間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分を除去する水洗浄の工程をさらに３回繰り返し実施し水不溶性画分（酵母細胞壁画分）を得た。この酵母細胞壁画分を凍結乾燥機にて乾燥し、６．６３ｇの免疫調節剤２を得た。
【００２４】
（実施例３）
カネカＧＡイースト（株式会社カネカ製）３０ｇを、温度２５℃の水７０ｍＬに懸濁し、温度１２１℃で２０分間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分を除去する水洗浄の工程をさらに３回繰り返し実施し水不溶性画分（酵母細胞壁画分）を得た。この酵母細胞壁画分を凍結乾燥機にて乾燥し、６．８０ｇの免疫調節剤３を得た。
【００２５】
（実施例４）
カネカレッドイースト（株式会社カネカ製）３０ｇを、温度２５℃の水５０ｍＬに懸濁し、温度９５℃で４５分間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分を除去する水洗浄の工程をさらに３回繰り返し実施し水不溶性画分（酵母細胞壁画分）を得た。この酵母細胞壁画分を凍結乾燥機にて乾燥し、７．５０ｇの免疫調節剤４を得た。
【００２６】
（比較例１）
カネカレッドイースト（株式会社カネカ製）３０ｇを、温度２５℃の水７０ｍＬに懸濁し、温度１２１℃で２０分間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿を１ｍｏｌ/Ｌ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍＬに懸濁し、温度７５度で３時間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分を除去する水洗浄の工程をさらに３回繰り返し実施した。水洗浄後の沈殿を凍結乾燥機にて乾燥し、１．７４ｇの免疫調節剤５を得た。
【００２７】
（比較例２）
カネカレッドイースト（株式会社カネカ製）３０ｇを、温度２５℃の水５０ｍＬに懸濁し、温度９５℃で１５分間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿をBacillus subtilis由来のプロテアーゼを主とする酵母細胞壁溶解酵素で処理した後、温度９５℃で３０分間の加熱を行った。これを１００００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と上清とに分離し、沈殿、上清をそれぞれ凍結乾燥機にて乾燥し、沈殿から５．５５ｇの免疫調節剤６を、上清から２．０５ｇの免疫調節剤７を得た。
【００２８】
（比較例３）
カネカレッドイースト（株式会社カネカ製）３０ｇを、温度２５℃の水５０ｍＬに懸濁し、温度９５℃で１５分間の加熱を行った後、これを１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離し、水溶性画分をデカンテーションによって除去した後、沈殿を１００ｍＬの蒸留水に懸濁し、１５００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と水溶性画分とに分離した。得られた沈殿をCellulosimicrobium由来のグルカナーゼとBacillus由来のプロテアーゼを主とする酵母細胞壁溶解酵素で処理した後、温度９５℃で３０分間の加熱を行った。これを１００００×ｇ、１０分間の遠心分離によって沈殿と上清とに分離し、沈殿、上清をそれぞれ凍結乾燥機にて乾燥し、沈殿から４．２０ｇの免疫調節剤８を、上清から４．５４ｇの免疫調節剤９を得た。
【００２９】
（実施例５）
免疫調節効果
ＢＡＬＢ/ｃマウス（雌、６週齢、日本チャールスリバー）に、オボアルブミン（シグマ製）と水酸化アルミニウムゲル（和光純薬製）混合した液を腹腔内投与した。この６日後に、同様の腹腔内投与を行った。こうしてＢＡＬＢ/ｃマウスの免疫のバランスを、Ｔｈ２細胞が優位であるアレルギー状態になるようにした。２回目の腹腔内投与の７日後にマウスから脾臓を摘出し、Ｔ細胞、Ｂ細胞、マクロファージといった免疫系の細胞よりなる脾細胞を調製した。調製した脾細胞は、１０％ウシ血清、５０μＭ２-メルカプトエタノール、２ｍＭＬ-グルタミン酸、５０ｕｎｉｔｓ/ｍＬペニシリンＧナトリウム、５０μｇ/ｍＬ硫酸ストレプトマイシン、０．２ｍｇ/ｍＬオボアルブミンを含むＲＰＭＩ１６４０培地に懸濁し、２×１０6ｃｅｌｌｓ/ｍＬとなるようにし、２４ウェルの細胞培養プレートに１ウェルあたり１ｍＬずつまきこんだ。細胞をまいたプレートのウェルに、何も添加しない群、実施例１〜４および比較例１〜３の免疫調節剤１〜９をそれぞれ終濃度１００μｇ/ｍＬとなるよう添加した群および免疫調節剤１を終濃度１μｇ/ｍＬ、１０μｇ/ｍＬとなるよう添加した群を設け、７日間培養した後、培養上清を回収し、培養上清中に含まれるＩＬ-４、ＩＬ-１２の濃度を、測定キット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いて測定した。その結果を表１、２に示す。
【００３０】
【表１】
2007291006.tif 000002
【００３１】
【表２】
2007291006.tif 000003
表１、２から明らかなように、免疫調節剤１〜４の添加により、Ｔｈ２細胞が優位になっている状態のＢＡＬＢ/ｃマウスの脾細胞に対し、Ｔｈ１細胞を活性化させるＩＬ-１２の産生が促進され、Ｔｈ２細胞を活性化させるＩＬ-４の産生が抑制されて、免疫バランスの不均衡が調節された。
【００３２】
（実施例６）カプセルの調製
実施例１で調製した免疫調節剤１を５０重量部、デキストリンを４０重量部、ビタミンＣを１０重量部の組成で混合、粉砕し、ゼラチン製カプセル（サイズ：０２号、カプスゲル・ジャパン株式会社）に充填して、抽出物を５０重量％含有する飲食用カプセル剤を調製した。