(57)【要約】【課題】拡散係数が非常に小さい化合物についても、一層、高い分離能で光学分割することができ、しかも液体クロマトグラフに用いられても、移動相の送液に際して圧力損失の低いシリカゲル担体を提供する。【解決手段】０．５〜４μｍのスルーポア及び２〜５０ｎｍのメソポアからなる二重細孔構造を有するシリカゲル表面に、光学活性有機化合物の被覆層を有するシリカゲル担体であって、該光学活性有機化合物は、分子内に少なくとも１つの不斉炭素原子を含み、該不斉炭素原子の２つの結合部位は、置換基を有していてもよいカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノ基、水酸基又はチオール基と結合しており、該不斉炭素原子の他の２つの結合部位は水素原子又は炭素原子と結合している光学活性有機化合物であることを特徴とするシリカゲル担体。【選択図】なし。【特許請求の範囲】
【請求項１】
０．５〜４μｍのスルーポア及び２〜５０ｎｍのメソポアからなる二重細孔構造を有するシリカゲル表面に、光学活性有機化合物の被覆層を有するシリカゲル担体であって、該光学活性有機化合物は、分子内に少なくとも１つの不斉炭素原子を含み、該不斉炭素原子の２つの結合部位は、置換基を有していてもよいカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノ基、水酸基又はチオール基と結合しており、該不斉炭素原子の他の２つの結合部位は水素原子又は炭素原子と結合している光学活性有機化合物であることを特徴とするシリカゲル担体。
【請求項２】
シリカゲル担体が、シリカゲル表面と光学活性有機化合物の被覆層との間に、オクタデシルシリル化剤による化学修飾層を有するシリカゲル担体であることを特徴とする請求項１に記載のシリカゲル担体。
【請求項３】
光学活性有機化合物の分子量が２０００以下であることを特徴とする請求項１又は２に記載のシリカゲル担体。
【請求項４】
光学活性有機化合物の光学純度が９０％ｅｅ以上であることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のシリカゲル担体。
【請求項５】
光学活性有機化合物が、下記（１）〜（４）からなる群から選ばれる少なくとも１種の化合物又は該化合物の鏡像異性体であることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載のシリカゲル担体。
2007033436.tif 000019
（式（１）中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に炭化水素基を表す。Ｒ１及びＲ２は連結して２価の炭化水素基であってもよい。Ｒ３は水素原子又は炭化水素基を表す。Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の合計炭素数は８以上である。
式（２）中、Ｒ１１及びＲ１２はヒドロキシ基が結合していてもよい炭化水素基又はヒドロキシ基が結合していてもよいＮ−アルキルカルバモイル基を表し、Ｒ１１及びＲ１２は互いに異なる基である。Ｒ１３は水素原子又は炭化水素基を表す。Ｒ１２及びＲ１３は連結して２価の炭化水素基であってもよい。
Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３の合計炭素数は８以上である。
式（３）中、Ｒ２１、Ｒ２２及びＲ２３はそれぞれ独立に、アルキル基、アルコキシ基、ヒドロキシ基またはハロゲン原子を表す。Ｒ２１、Ｒ２２及びＲ２３の少なくとも１つはアルコキシ基又はハロゲン原子である。Ｒ２４はアルキレン基を表し、Ｒ２５は光学活性アミノ酸からアミノ基とカルボキシル基を除いた残基又は光学活性イミノ酸からアミノ基とカルボキシル基を除いた残基を表す。Ｒ２６は水素またはアルキル基を表す。Ｒ２５とＲ２６とが連結した２価の炭化水素基であってもよく、該炭化水素基に含まれるメチレン基は、カルボニル基、アミド基で置換されていてもよい。
式（４）中、Ｒ３１はアルキル基、単環性アリールアルキル基、低級アルコキシ置換単環性アリールアルキル基またはシクロアルキルアルキル基を表わす。Ｒ３２は置換基としてアルコキシ基または単環性アリールアルコキシ基を有する単環性アリール基を表す。Ｘ１およびＸ２はそれぞれ独立に水素原子もしくはハロゲン原子を表わす、または一緒になって基−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−を表す。）
【請求項６】
請求項１〜５に記載のシリカゲル担体が充填されたカラムを有する液体クロマトグラフィ装置を用いることを特徴とする光学分割方法。
【請求項７】
シリカゲル担体が充填されたカラムを複数用いることを特徴とする請求項６に記載の光学分割方法。
【請求項８】
カラムの移動相に金属塩を含有することを特徴とする請求項６又は７に記載の光学分割方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
医薬品、食品、農薬、香料、光学材料などに用いられる光学活性アミノ酸、光学活性ヒドロキシカルボン酸などの不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の光学分割に好適なシリカゲル担体に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミノ酸、カルボン酸などの不斉炭素原子を有するカルボニル化合物は医薬品、食品、農薬、香料、光学材料などに用いられる有用な化合物である。不斉炭素原子を有するカルボニル化合物は沸点、融点などの物理的性質や化学的性質が全く同じであるが、実像と鏡像の関係を有する光学異性体を有する。人体の必須アミノ酸は全てＬ体であるように、不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の光学異性体の相違によって、薬効、毒性などの生理活性が異なる場合があり、不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の光学異性体を高分離能で光学分割することのできる光学分割剤や該光学分割剤を用いる光学異性体間の分離方法が求められている。
ところで、アミノ酸、カルボン酸のようなカルボニル化合物を液体クロマトグラフの高流速下にて分析する方法は知られていたが、カルボニル化合物の拡散係数が非常に小さいので分離能が低いという問題があった。分離能を高めるためにはシリカゲル粒子の粒子径を小さくして拡散距離を短くすればよいが、シリカゲル粒子の粒子径を小さくするとシリカゲル粒子間の空隙も小さくなり、液体クロマトグラフにおいて高圧で移動相を送液しなければならないという問題があった。
かかる問題に対し、細孔径０．５〜４μｍのスルーポア及び細孔径２〜５０ｎｍのメソポアからなる二重細孔構造を有するシリカゲル表面にシリル化剤で化学修飾してなるシリカゲル担体を用いると、移動相の送液の際に高圧としなくとも高分離能でアミノ酸を分析できることが報告されている（特許文献１）。しかしながら、特許文献１には、光学分割剤及び光学異性体の光学分割方法については何ら開示されていない。
最近、かかるシリカゲル担体に多糖又はその誘導体を担持させた光学異性体分離剤が特許文献２に提案され、光学異性体分離剤の具体的な製造方法としては、セルロースに、３，５−ジメチルフェニルイソシアネートを反応させて得られるセルロース  トリス（３，５−ジメチルフェニルカーバメート）を調製し、二重細孔構造を有するシリカゲル表面にセルロース誘導体を含む溶液を９０〜１００ｂａｒの圧力をかけながら担持させる方法などが開示されている。
【０００３】
【特許文献１】特開平１１−１３３０１４号公報（請求項１）、［００２３］（発明の効果）
【特許文献２】特開２００５−１７２６８号公報（実施例１）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従来のシリカゲル粒子と比較して、特許文献２の光学異性体分離剤は、高流速下に移動相を送液しても圧力損失が低いものの、不斉識別能力は同等にとどまることが明らかになっている（特許文献２、[００５５]）。
本発明の目的は、拡散係数が非常に小さい化合物についても、一層、高い分離能で光学分割することができ、しかも液体クロマトグラフに用いられても、移動相の送液に際して圧力損失の低いシリカゲル担体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、０．５〜４μｍのスルーポア及び２〜５０ｎｍのメソポアからなる二重細孔構造を有するシリカゲル表面に、光学活性有機化合物の被覆層を有するシリカゲル担体であって、該光学活性有機化合物は、分子内に少なくとも１つの不斉炭素原子を含み、該不斉炭素原子の２つの結合部位は、置換基を有していてもよいカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノ基、水酸基又はチオール基と結合しており、該不斉炭素原子の他の２つの結合部位は水素原子又は炭素原子と結合している光学活性有機化合物であることを特徴とするシリカゲル担体である。
【発明の効果】
【０００６】
本発明のシリカゲル担体は、拡散係数が非常に小さい化合物、特に、不斉炭素原子を有するカルボニル化合物、とりわけカルボン酸を高い分離能で光学分割することができる。また、本発明のシリカゲル担体は高い理論段数にすることにより、光学分割能が一層、向上し、そのことによって、本発明のシリカゲル担体を用いる液体クロマトグラフにおいて、移動相の送液に際して圧力損失を低く抑えることができる。
中でも、シリカゲル表面と光学活性有機化合物の被覆層との間に、オクタデシルシリル化剤による化学修飾層を有するシリカゲル担体は、多くの不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の光学分割に際して高い分離能を示し、光学活性有機化合物が式（１）で表されるペニシラミン誘導体又はその鏡像異性体であるシリカゲル担体は、とりわけ、高い分離能を示す。
【０００７】
2007033436.tif 000002
（式（１）中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に炭化水素基を表す。Ｒ１及びＲ２は連結して２価の炭化水素基であってもよい。Ｒ３は水素原子又は炭化水素基を表す。Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の合計炭素数は８以上である。）
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のシリカゲル担体は、０．５〜４μｍ、好ましくは０．８〜３μｍのスルーポアと、２〜５０ｎｍ、好ましくは８〜３０ｎｍのメソポアとの二重細孔構造を有するシリカゲル表面を有する担体を用いる。
スルーポアが４μｍ以下であると不斉炭素原子を有するカルボニル化合物を光学分割する際の分離能が向上する傾向があることから好ましく、０．５μｍ以上であると、液体クロマトグラフのカラム充填材として用いる際にカラムにかかる圧力が低減される傾向があることから好ましい。
メソポアが、２ｎｍ以上であるとメソポアにおける不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の拡散が容易になることから好ましく、５０ｎｍ以下であるとシリカゲル表面が増大してカルボニル化合物を光学分割する際の分離能が向上する傾向があることから好ましい。
【０００９】
かかる二重細孔構造を有するシリカゲル表面を有する担体の製造方法としては、例えば、ケイ素アルコキシドを加水分解・重縮合するゾル・ゲル法によって作製する方法などが挙げられる。加水分解・重縮合は、例えば、ポリスチレンスルホン酸のナトリウムまたはカリウム塩、ポリアクリル酸、ポリアリルアミン、ポリエチレンイミン、ポリエチレンオキシド、ポリビニルピロリドン等の有機高分子の酸性溶液中において行う。有機高分子の代わりに、グリセリンなどの多価アルコールとホルムアルデヒドとの混合物を用いてもよい。酸性溶液としては、例えば、酢酸、塩酸等の水溶液、好ましくは酢酸水溶液が挙げられる。酸性溶液の濃度は、通常、０．００１mol/l 〜１mol/lである。
【００１０】
スルーポアの細孔径は、加水分解・重縮合におけるケイ素アルコキシドの組成、加水分解・重縮合の反応温度、加水分解・重縮合におけるｐＨ、有機高分子の分子量等の各種条件によって変わり、これら条件を調節することによって、所望の細孔径を有するスルーポアを得ることができる。
【００１１】
ケイ素アルコキシドとしては、例えば、テトラメトキシシラン、テトラエトキシシラン、メチルトリメトキシシラン、エチルトリメトキシシラン、ビニルトリメトキシシランなどが挙げられる。また、ケイ素アルコキシドを加水分解・重縮合して反応溶液のゲル化を行った後、アンモニア水溶液に浸漬する（溶媒置換）方法は、得られるシリカゲルのメソポアの細孔径を制御しやすい傾向があることから好ましい。
【００１２】
シリカゲル表面が０．５〜４μｍのスルーポアと２〜５０ｎｍのメソポアとの二重細孔構造を有するものは、カラム管に充填された形で、Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  （ＭＥＲＣＫ社の登録商標）として市販されており、そのまま、用いることもできる。
【００１３】
本発明は、かかる二重細孔構造を有するシリカゲル表面に、光学活性有機化合物の被覆層を有するシリカゲル担体である。被覆層については後述するが、本発明の好適なシリカゲル担体としては、シリカゲル表面と光学活性有機化合物の被覆層との間に、オクタデシルシリル化剤による化学修飾層を有するシリカゲル担体が、後述する被覆層を形成する光学活性有機化合物をシリカゲル表面に強く吸着させ、本シリカゲル担体を光学分割能を長期間、保持する傾向があることから好ましい。また、オクタデシルシリル化剤を用いることにより、他のシリル化剤と比較して不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の光学分割能に優れる傾向があることから好ましい。
【００１４】
化学修飾層の形成方法について説明すると、二重細孔構造を有するシリカゲルの表面をオクタデシルジメチル−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノシランなどのオクタデシルシリル化剤で化学修飾させる方法などが例示される。具体的には、例えば、ベンゼン、トルエン等の有機溶剤に１〜ほぼ１００容量％、好ましくは、１０〜５０容量％のオクタデシルシリル化剤を含む溶液中に前記シリカゲル担体を浸漬する方法、該シリカゲル担体を液体クロマトグラフ用カラムに充填し、前記と同様の濃度のオクタデシルシリル化剤を含む溶液を液体クロマトグラフによって該カラムに通液する方法などが挙げられる。
シリカゲルとオクタデシルシリル化剤との反応後、残存しているシラノール量を最小にするため1,1,1,3,3,3-ヘキサメチルジシラザンなどのシリル化剤で二次シリル化する方法が推奨される。
【００１５】
シリカゲル表面が、０．５〜４μｍのスルーポアと２〜５０ｎｍのメソポアとの二重細孔構造のシリカゲル表面にオクタデシルシリル化剤による化学修飾層を有するものは、カラム管に充填された形で、Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ＯＤＳ（ＭＥＲＣＫ社の登録商標）として市販されており、そのまま、用いることができる。
【００１６】
被覆層に含まれる光学活性有機化合物は、分子内に少なくとも１つの不斉炭素原子を含み、該不斉炭素原子の２つの結合部位は、置換基を有していてもよいカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノ基、水酸基又はチオール基と結合しており、該不斉炭素原子の他の２つの結合部位は水素原子又は炭素原子と結合している光学活性有機化合物である。
不斉炭素原子は相異なる４つの置換基と結合している。
【００１７】
不斉炭素原子に２つのカルボニル基が結合していてよいが、その場合には、不斉炭素原子と結合していないカルボニル基の結合部位は、互いに異なる置換基と結合している。アミノ基が互いに異なる置換基を含むアミノ基であれば不斉炭素原子に２つのアミノ基が結合していてもよい。
他の２つの置換基は、水素原子と炭素原子が不斉炭素原子に結合していてもよいし、置換基として異なっていれば炭素原子と炭素原子が不斉炭素原子に結合していてもよい。
【００１８】
光学活性有機化合物の鏡像体過剰率（％ee）は、通常、９０％ee以上であり、好ましくは９８％ee以上、とりわけ好ましくは、１００％eeである。
高い鏡像体過剰率を有する光学活性有機化合物としては、光学活性酒石酸、光学活性ペニシラミンなどの天然物質から誘導される化合物などが挙げられる。
【００１９】
光学活性有機化合物の具体例としては、下記（１）で表される化合物またはその鏡像異性体が、挙げられる。多くの不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の光学分割に際して高い分離能を示し、とりわけ、プロリンなどの環状アミノ酸の光学分割に際して高い分離能を示すことから好ましい。
2007033436.tif 000003
【００２０】
式（１）中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に炭素数１〜２０、好ましくは１〜１２の炭化水素基を表す。Ｒ１及びＲ２は連結して２価の炭化水素基であってもよい。Ｒ３は水素原子又は炭素数１〜２０、好ましくは１〜１２の炭化水素基を表す。Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の合計炭素数は８以上である。
上記炭化水素基としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、イソヘプチル、２−エチルヘキシル、オクチル、イソオクチル、ノニル、２,４,５−トリメチルヘキシル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、３−メチル−４−エチルウンデシル、ヘンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル、イコサニルなどのアルキル基、例えば、アリル、ブテニル、７−オクテニル、３,５−デカジエニル、６−ドデシニルなどのアルケニル基、例えば、ベンジル、フェニル、ナフチル、フェネチル、スチリル、２−フェニルプロピルなどの芳香族炭化水素基などが挙げられる。
Ｒ１及びＲ２を連結する２価の炭化水素基としては、例えば、メチレン、エチレン、トリメチレン、メチルエチレン、エチリデン、プロピリデン、イソプロピリデン、ブチリデン、ペンチリデン、ヘキシリデン等が挙げられる。
【００２１】
化合物（１）としては、例えば、Ｎ,Ｓ−ジオクチル−Ｄ−ペニシラミン、Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｓ−ドデシル−Ｄ−ペニシラミン、Ｎ,Ｎ,Ｓ−トリペンチル−Ｄ−ペニシラミン、Ｎ,Ｎ−ジオクチル−ジ−Ｄ−ペニシラミン、２,２,５,５−テトラメチル−３−オクチルチアゾリジン−４−カルボン酸などが挙げられる。
【００２２】
化合物（１）は、例えばペニシラミンに２個(Ｒ１およびＲ２)または３個(Ｒ１、Ｒ２およびＲ３)のアルキル基を、段階的(２段階または３段階)または一挙に導入するか、またはＲ１とＲ２がアルカンジイル基を形成した化合物を得るためにアルデヒドもしくはケトンを反応させるか、または−Ｓ−Ｓ−結合を介した２量体を形成させるために対応する−ＳＨ化合物を酸化することにより製造される。
【００２３】
アルキル基の導入反応は、ＳおよびＮ原子のアルキル化に用いられている通常の方法によって行なわれる。代表的な方法は、ペニシラミンに、好ましくは塩基の存在下、式:Ｒ−Ｘ(ここでＲはＲ１、Ｒ２またはＲ３(水素以外)のアルキル基等、Ｘは無機酸または有機酸の反応性エステル基である)で示される化合物を反応させる方法である。上式中、反応性エステル基としては、ハライド(例えばクロリド、ブロモミド)、スルホン酸(例えばメタンスルホン酸、トルエンスルホン酸)エステル、酒石酸エステル等が含まれる。塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのような無機塩基およびトリアルキルアミン、ジメチルアニリン等の有機塩基が用いられる。この反応は、よう化物(例えばよう化カリウム)のような促進剤の存在下に行なうのが好ましい。反応は、加熱により促進される。別の方法として、還元条件下（例えば白金、パラジウム等の接触還元用金属触媒と水素ガス、亜鉛等の金属と酸）にアルデヒドＲ'−ＣＨＯ（ここで、Ｒ'は前記Ｒより炭素原子数が１個少ないアルキル基または水素原子）を反応させる方法も可能である。アルカンジイル基の導入反応は、グリコールの環状アセタール化と同様に行なわれる。代表的な方法は、酸触媒(塩酸、トルエンスルホン酸、塩化亜鉛等)の存在下にアルデヒドまたはケトンを反応させる方法である。−Ｓ−Ｓ−結合の形成反応は、ジスルフィドの製造に一般に用いられる方法により行なわれる。代表的な方法は、例えば鉄、銅等の金属イオン触媒を用いる空気酸化または酸化剤(例えば過酸化水素、ハロゲン、次亜ハロゲン酸、酸化マンガン等)による酸化である。反応生成物は、溶媒抽出、再結晶、クロマトグラフィー等の慣用される分離手段により分離精製することができる。
【００２４】
光学活性有機化合物の異なる例示としては、式（２）で表される化合物又はその鏡像異性体が挙げられる。
2007033436.tif 000004
【００２５】
式（２）中、Ｒ１１及びＲ１２はヒドロキシ基が結合していてもよい炭化水素基又はＮ−アルキルカルバモイル基を表し、Ｒ１１及びＲ１２は互いに異なる基である。Ｒ１３は水素原子又は炭化水素基を表す。Ｒ１２及びＲ１３は連結して２価の炭化水素基であってもよい。
Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３の合計炭素数は８以上、好ましくは８〜２５、とりわけ好ましくは１０〜２０である。
ここで、炭化水素基としては化合物（１）で例示された１価の炭化水素基が例示される。Ｒ１２及びＲ１３が連結した２価の炭化水素基としては、通常、炭素数２〜１０程度であり、好ましくは、３〜５である。Ｒ１２及びＲ１３が連結した２価の炭化水素基としては、例えば、エチレン、トリメチレン、メチルエチレン、エチリデン、プロピリデン、イソプロピリデン、ブチリデン、ペンチリデン、ヘキシリデン等が挙げられる。
【００２６】
Ｎ−アルキルカルバモイル基とは、窒素原子上に上記のような炭化水素基、例えば、炭素数４〜１８、好ましくは６〜１５、最も好ましくは８〜１４の直鎖または分枝状のアルキル基を有するカルバモイル基である。
【００２７】
化合物（２）としては、例えば、(Ｒ,Ｒ)−酒石酸−モノ−１−(Ｒ)−(α−ナフチル)エチルアミド、（Ｒ，Ｒ）酒石酸−モノ−１−（Ｒ）−（Ｎ−ドデシルカルバモイル）イソブチルアミド、（Ｒ，Ｒ）酒石酸−モノ−α−（Ｒ）−（Ｎ−ドデシルカルバモイル）ベンジルアミド、（Ｒ，Ｒ）酒石酸−モノ−２−（Ｒ）−（Ｎ−ドデシルカルバモイル）ピロリジンアミド、（Ｒ，Ｒ）酒石酸−モノ−１−（Ｒ）−ベンジル−２−ヒドロキシ−エチルアミド、（Ｒ，Ｒ）酒石酸−モノ−α−（Ｒ）−（４−メチル）ベンジル−ベンジルアミド、及びこれらの鏡像異性体などが挙げられる。
【００２８】
化合物（２）は、例えばヒドロキシ基を保護した酒石酸またはそのカルボキシ基における反応性誘導体に、
Ｒ１１−ＣＨ（Ｒ１２）−ＮＨ（Ｒ１３）［式中、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１３は前記の意味］
で表される化合物またはその塩を反応させた後、保護基の脱離反応に付すことにより製造することができる。ヒドロキシ保護基およびその脱離法の例は、新実験化学講座第１４巻第２４９７〜２５１６頁に記載されている。代表的な例はアセチルである。その他に例えば、酒石酸とアセトンを酸の存在下室温にて反応させ、イソプロピリデンアセタールを生成させる。脱離は酢酸の存在下室温または加熱して行う。酒石酸のカルボキシル基における反応性誘導体としては、酸ハライド、酸無水物、活性エステルおよび活性アミドが含まれる。そのうち酸ハライドとしては、酸クロライドが汎用される。酸無水物としては、対称無水物および混合酸無水物が含まれ、後者には例えばジアルキル燐酸混合無水物、ジアルキル亜燐酸混合無水物、アルキル炭酸混合無水物、脂肪族カルボン酸(例えばピバリン酸、トリクロロ酢酸)混合無水物等が含まれる。活性エステルとしては、メチルエステル、エチルエステル、シアノメチルエステル、p−ニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドとのエステル等が用いられる。活性アミドとしては、イミダゾール、ジメチルイミダゾール、トリアゾールとのアミドが用いられる。これらのうち、対称無水物が好ましい。対称無水物以外のものは、反応に使用しないカルボキシ基を保護することができる。このような保護基および脱離法の例は、例えば新実験化学講座第１４巻第２５３５〜２５４４頁に記載されている。代表的な例は無水酢酸である。反応に使用するカルボキシ基を遊離酸または塩のまま用いる場合には、反応縮合剤の存在下に行なうのが有利である。縮合剤としては、ＳＯＣｌ２、ＳＯ２Ｃｌ２、ＰＣｌ３、ＰＣｌ５、ＰＯＣｌ３、ＰＢr３等のハロゲン化剤、またはＮ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド(ＤＣＣ)、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ'−モルホリノエチルカルボジイミド、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド、ＣｌＣＯ２ＣＨ３、ＣｌＣＯ２Ｃ２Ｈ５、ＢrＣＯ２ＣＨ３、 (ＣＨ3ＣＯ)２Ｏ、Ｎ−エチルベンズイソキサゾリウム塩、２−クロロ−１−メチルピリジウム塩、Ｎ,Ｎ'−カルボニルジイミダゾール(ＣＤＩ)等が用いられる。この反応は通常不活性溶媒中で行なわれる。不活性溶媒としては、ジオキサン、メチレンクロライド、クロロホルム、エーテル、テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)、アセトン、ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)、ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)、ピリジン、アセトニトリル、ベンゼン、トルエン、キシレン等が用いられる。反応は常温で充分進行するが、加温すると促進される。
【００２９】
化合物（２）は、例えば酒石酸を無水酢酸と反応させることにより得られるＯ,Ｏ'−ジアセチル酒石酸無水物を、不斉炭素に直結した１級アミノ基または２級アミノ基を有する化合物に反応させたのち、塩基等の存在化でジアセチル基を加水分解して製造することができる。塩基としては、水酸化ナトリウムや水酸化カリウムのような無機塩基が用いられる。反応生成物は、溶媒抽出、再結晶、クロマトグラフィー等の慣用される分離手段により、分離精製することができる。
【００３０】
光学活性有機化合物の異なる例示としては、式（３）で表される化合物が挙げられる。
2007033436.tif 000005
【００３１】
式（３）中、Ｒ２１、Ｒ２２及びＲ２３はそれぞれ独立に、アルキル基、アルコキシ基、ヒドロキシ基またはハロゲン原子を表し、少なくとも１つはアルコキシ基又はハロゲン原子である。ここで、アルキル基としては、炭素数１〜１２、好ましくは１〜４であり、炭素数１〜１２で式（１）で例示されたアルキル基と同じ基が例示される。アルコキシ基としては、炭素数１〜１２、好ましくは１〜４であり、アルキル基に酸素原子が結合して生じる基である。ハロゲン原子としては、塩素、臭素、ヨウ素などが例示される。
Ｒ２４は、例えば、メチレン、エチレン、トリメチレン、メチルエチレン等の炭素数１〜６のアルキレン基を表す。
Ｒ２５は、例えば、アスパラギン、アスパラギン酸、アミノ酪酸、アラニン、β−アラニン、アルギニン、イソロイシン、オルニチン、グルタミン、グルタミン酸、セリン、チロシン、トリプトファン、トレオニン、ノルロイシン、バリン、ヒスチジン、フェニルグリシン、フェニルアラニン、メチオニン、リジン、ロイシン等の光学活性アミノ酸からアミノ基とカルボキシル基を除いた残基であるか、又は、プロリン、ヒドロキシプロリン、ヒスチジン等の光学活性イミノ酸からアミノ基とカルボキシル基を除いた残基である。
Ｒ２６は水素または炭素数１〜６のアルキル基を表す。Ｒ２５とＲ２６とが連結した２価の炭化水素基であってもよく、該炭化水素基に含まれるメチレン基は、カルボニル基、アミド基で置換されていてもよい。
【００３２】
化合物（３）は、通常、シリル化剤で化学修飾されていないシリカゲル担体のヒドロキシル基に、アミノアルキルシランを反応させて、無機担体の表面にアミノアルキルシリル残基を導入し、これに光学活性なアミノ酸もしくはイミノ酸および酒石酸(官能基は適宜保護してよい)を反応させ、脱水縮合させて製造することができる。
具体的には、シリル化剤で化学修飾されていないシリカゲル担体のヒドロキシル基に、式（３−１）
2007033436.tif 000006
（式（３−１）中、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ２３及びＲ２４は前記と同じ意味を表す。）
で示されるアミノアルキルシランを反応させて、無機担体の表面にアミノアルキルシリル残基を導入し、次いでこれに式（３−２）
【００３３】
2007033436.tif 000007
で示されるカルボン酸またはそのカルボキシ基における反応性誘導体および式（３−３）
2007033436.tif 000008
で示されるカルボン酸またはそのカルボキシ基における反応性誘導体を順次反応させ、脱水縮合させることにより目的とする充填剤が得られる。上式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３およびＰ４は、アミノ基、ヒドロキシ基またはカルボキシ基の保護基である。
【００３４】
尚、アミノ基の保護基については、例えば「新実験化学講座」第１４巻第２５５５−２５６９頁に記載されており、カルボキシル基の保護基については、例えば「新実験化学講座」第１４巻第２５３５〜２５４４頁に記載されている。
【００３５】
光学活性有機化合物の異なる例示としては、式（４）で表される化合物が挙げられる。
2007033436.tif 000009
（式中、Ｒ３１は低級アルキル基、単環性アリール低級アルキル基、低級アルコキシ置換単環性アリール低級アルキル基または低級シクロアルキル低級アルキル基を表わす。Ｒ３２は置換基として低級アルコキシまたは単環性アリール低級アルコキシを有する単環性アリール基を表わす。Ｘ１およびＸ２はそれぞれ水素原子またはハロゲン原子を表わすか、または一緒になって基−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−を表す。）
【００３６】
ここで、「低級」とは、炭素数１〜８、好ましくは１〜６を表し、アルキル及びアルコキシは、前記と同じ意味を表す。「単環性アリール」は、非置換または低級アルキルで置換されたフェニルを含む。「アリール」は、上記単環性アリールに加えて、ナフチル、ビフェニリル等の２環性アリールを含む。「低級シクロアルキル」としては、炭素原子数３−６のシクロアルキル、例えばシクロペンチル、シクロヘキシル等が含まれる。「ハロゲン」は、ふっ素、塩素、臭素およびよう素を含む。Ｘ１とＸ２が一緒になって基−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−を表わす場合、この基は、Ｘ１とＸ２が結合するベンゼン環と一緒になってナフタレン環を形成する。
【００３７】
Ｒ３２としては、２−位に置換基を有するフェニル基が好適であり、具体的には例えば、２−メトキシフェニル、２−イソプロポキシフェニル、２−ベンジルオキシフェニル、２−メトキシ−５−メチルフェニル、２−イソプロポキシ−５−メチルフェニルおよび２−ベンジルオキシ−５−メチルフェニルなどが挙げられる。
【００３８】
化合物（４）の製造方法としては、例えば、式（４−１）及び式（４−２）で表される化合物に、酢酸銅などの銅のシッフ塩基を反応させ、アルカリで処理すると得ることができる。
2007033436.tif 000010
（式中、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｘ１及びＸ２は前記と同じ意味を表す。）
【００３９】
式（４−１）としては、例えば、２−アミノ−１,１−ジ(２−メトキシフェニル)−３−フェニルプロパノール、２−アミノ−１,１−ジ(２−メトキシ−５−メチルフェニル)−３−フェニルプロパノール、２−アミノ−１,１−ジ(２−エトキシフェニル)−３−フェニルプロパノール、２−アミノ−１,１−ジ(２−イソプロポキシフェニル)−３−フェニルプロパノール、２−アミノ−１,１−ジ(２−ブトキシフェニル)−３−フェニルプロパノール、２−アミノ−１,１−ジ(２−ベンジルオキシフェニル)−３−フェニルプロパノール、２−アミノ−１,１−ジ(２−ブトキシ−５−t−ブチルフェニル)−３−フェニルプロパノールなどが挙げられ、式（４−２）としては、例えば、サリチルアルデヒド、３,５−ジブロムサリチルアルデヒド、５−クロルサリチルアルデヒド、２−ヒドロキシ−１−ナフトアルデヒドなどが挙げられる。
【００４０】
本発明のシリカゲル担体は、前記に示した特定のシリカゲル表面に、前記に示した特定の光学活性有機化合物の被覆層を有することに特徴があり、このことにより、高い光学分割能と低い圧力損失を実現しているのである。
光学活性有機化合物の被覆層の形成方法としては、（I）前記の化学修飾されたシリカゲル担体に、前記の光学活性有機化合物を溶解した水溶液を直接導入し、被覆する方法、（II）前記の光学活性有機化合物を溶解した水溶液中に前記の化学修飾されたシリカゲル担体を浸漬する方法、（III）化学修飾されていない前記シリカゲル担体に光学活性有機化合物を化学修飾する方法などが挙げられる。
本発明のシリカゲル担体は、取扱いが容易ではないイソシアネート化合物、シランカップリング剤、三弗化硼素などを使用してシリカゲル表面に化学反応させたり、９０〜１００ｂａｒの高圧で担持させなくとも、製造することができる。
【００４１】
上記水溶液や後述する液体クロマトグラフィの移動相に用いられる水溶液は、不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の保持容量を低減するために、水溶液には親水有機溶媒を０〜３０重量％程度含有していることが好ましく、親水有機溶媒としては、メタノール、エタノール、イソプロパノールなどのアルコール、アセトニトリルなどが挙げられる。
また、上記水溶液を移動相として用いる場合、得られるクロマトグラフの再現性を向上させるために、ｐＨが一定となるように緩衝液が含まれる移動相であることが好ましい。
さらに、上記水溶液には、Ｃu2+、Ｎi2+、Ｚn2+、Ｃd2+、Ｈg2+、Ｃo2+などの金属イオンを含有する塩、好ましくは、硫酸塩又は酢酸塩を０.１〜１０mＭ程度溶解している溶液が好ましい。金属塩が該溶液に含有していると、光学活性有機化合物に含まれるカルボニル基、アミノ基、水酸基又はチオール基と錯塩を形成し、光学分割能を向上する傾向があることから好ましい。
【００４２】
本発明の光学分割方法は、本発明のシリカゲル担体が充填されたカラムを具備する液体クロマトグラフィを用いることを特徴とする光学分割方法である。前記（I）及び（II）の方法で得られた光学分割剤はそのまま光学分割することができ、前記（II）の方法で得られた光学分割剤は、ガラス、ステンレス、またはチタン等から作られた容器に充填してカラムとして用いることができる。
具体的には、液体クロマトグラフィは、前記シリカゲル担体が充填されたカラムの入口側に送液ポンプおよび試料注入器と、また出口側に紫外検出器あるいは旋光度検出器等の検出器および必要に応じてフラクションコレクターを接続したものなどが挙げられる。分割方法は、例えば、不斉炭素原子を有するカルボニル化合物のラセミ体を試料注入器から注入後、送液ポンプにより、上記に例示された移動相を送液して注入したラセミ体をカラム中で展開し、分割し、カラムから溶出した溶出液は、紫外検出器等の検出器に導入され、分割された各鏡像体を例えば２５４nmにおける吸光度により検出し、記録計でそのクロマトグラムを記録して、溶出液を分離する方法などが挙げられる。
【００４３】
本発明のシリカゲル担体をカラムなどの密閉容器に充填して液体クロマトグラフとして使用される。この際、密閉容器が高圧にならない。このことにより、理論段数を多くしても光学分割することができることから、従来、光学分割することができなかったカルボニル化合物についても光学分割でき、光学分割できたカルボニル化合物についてもその分離能が優れる。さらに、分離能が優れることから、大量のカルボニル化合物を光学分割することができる。
【００４４】
本発明の光学分割方法は不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の光学分割に好適である。不斉炭素原子を有するカルボニル化合物とは、不斉炭素原子及びカルボキシル基を有する化合物であり、具体的な不斉炭素原子を有するカルボニル化合物としては、例えば、チロシン、ヒスチジン、フェニルグリシン、バリン、ロイシン、アスパラギン酸、メチオニン、ノルバリン、イソロイシン、ｔｅｒｔ−ロイシン、フェニルアラニン、バクロフェン、２−アミノ−４−フォスフォノ酪酸、アラニン、セリン、リジン、グルタミン、アルギニン、２−アミノ−ｎ−酪酸、オルニチン、トリプトファン、ｔｈｒｅｏ−３−フェニルセリン、グルタミン酸、３−ヒドロキシチロシンなどのアミノ酸、例えば、プロリン、ピペコリン酸、３−アミノ−ε−カプロラクタム、モノカルボン酸であるα−メトキシフェニル酢酸、２−フェノキシプロピオン酸、２−ブロムプロピオン酸、テトラヒドロ−３−フランカルボン酸、テトラヒドロ−２−フランカルボン酸などの環状アミノ酸、例えば、マンデル酸、乳酸、２−ヒドロキシイソカプロン酸、グリセリン酸などのヒドロキシカルボン酸、例えば、Ｎ−アセチルバリン、Ｎ−アセチルロイシン、Ｎ−アセチルメチオニン、Ｎ−ホルミルバリン、Ｎ−ホルミルメチオニン、Ｎ−アセチルアラニンなどのＮ原子に置換期を有する保護アミノ酸、例えば、グリシルアラニン、アラニルグリシン、アラニルグリシルグリシン、グリシルバリン、ロイシルグリシルグリシン、ロイシン酸などのペプチド、アミノリン酸である１−アミノエチルリン酸、などが挙げられる。
中でも、酒石酸、リンゴ酸等のジカルボン酸については一層、光学分割が容易になり、テトラヒドロ−２−フランカルボン酸、プロリンなどの環状カルボン酸等、従来、光学分割が困難であったカルボン酸についても、理論段数を大きくしても圧力が高くならないことから、高い分離能を示すことから好適に用いられる。
【実施例】
【００４５】
以下、本発明を実施例により説明するが、実施例はこの発明を限定するものではない。
（Ｎ,Ｓ−ジ−n−オクチル−Ｄ−ペニシラミン、（１−１））の調製
Ｄ−ペニシラミン３.０g(２０.１ミリモル)、よう化カリウム３.３g(２０.１ミリモル)およびトリエチルアミン１０.２g(１００.５ミリモル)にクロロホルム２５５mlおよびメタノール４５mlの混液を加えたのち、室温で１２時間撹拌して溶解させた。これに、１−ブロモオクタン２３.３g(１２０.６ミリモル)を加えたのち、浴温７０〜８０℃で加熱し、８時間還流した。この時反応液の温度は５５℃であった。反応後、室温に冷却し、析出した沈澱物を濾別した。濾液を減圧濃縮したのち、残留物に酢酸エチル４００mlおよび１Ｎ−塩酸３００mlを加えてよく振り混ぜ、静置、分液した。酢酸エチル層に無水硫酸マグネシウム５０gを加えて脱水し、濾過したのち、濾液を減圧濃縮した。残留物に酢酸エチル５０mlを加えて溶かし、５℃に冷却して一夜静置した。析出した結晶を濾取し、減圧乾燥して、Ｎ,Ｓ−ジ−n−オクチル−Ｄ−ペニシラミンの微黄色結晶１.７gを得た（融点:１２３〜１２４℃）。
この微黄色結晶の赤外吸収スペクトル(臭化カリウム混合法および流動パラフィン混合法)において、３４００cm-1付近にＮ−Ｈ伸縮振動に基づく吸収、２８５０〜２９５０cm-1に直鎖状アルキル基のＣ−Ｈ伸縮振動に基づく強い吸収、および１５９０cm-1にカルボキシル基に基づく吸収が観測され、また、ＦＤマススペクトルにおいて分子イオン＋１に基づく質量数３７４のスペクトルが観測された。これらから微黄色結晶はＮ,Ｓ−ジ−n−オクチル−Ｄ−ペニシラミンであることが確認された。
【００４６】
2007033436.tif 000011
【００４７】
（カラムに充填されたシリカゲル担体の調製）
０．５〜４μｍのスルーポアと２〜５０ｎｍのメソポアとの二重細孔構造のシリカゲル表面にオクタデシルシリル化剤を化学修飾されたシリカゲル担体が充填されたＣｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ＯＤＳのカラム（内径４．６mm、長さ１５０mm、ＭＥＲＣＫ社製）に、まず、メタノール５０容量％と水５０容量％とからなる混合液を通液した。ついで、前記Ｎ,Ｓ−ジ−n−オクチル−Ｄ−ペニシラミンの微黄色結晶の０.０６％メタノール４０容量％と水６０容量％の混合溶液５００mlを、毎分０.８mlの速度でカラムに通液したのち、水２０mlを毎分０.８mlの速度でカラムに通液した。続いて１ミリモル／lの硫酸銅水溶液５００mlを毎分１.０mlの速度で通液して、カラムに充填された本発明のシリカゲル担体を得た。
【００４８】
（実施例１〜４９）
前記シリカゲル担体を含むカラムを具備し、検出器として紫外線吸収計（波長:２５４nm）を接続した液体クロマトグラフィに移動相として表１に記載の硫酸銅溶液を用い、流速１.０ml／分で送液した。表１に記載のラセミ体を０.０２重量％含有する水溶液５μlを注入し、ラセミ体を展開し、結果を表１に記載した。
カルボン酸の光学分割性能は分離係数αで表１に表した。αが大きいほど光学分割の性能に優れることを表す。
ここで、分離係数αとは
α＝（ｔ2−ｔ0）／（ｔ1−ｔ0）
（式中、ｔ1はより弱く吸着される鏡像体の保持時間（分）を示し、ｔ2はより強く吸着される鏡像体の保持時間（分）を示す。ｔ0はカラムに全く吸着されない物質の保持時間を示す。）
【００４９】
【表１】
2007033436.tif 000012
【００５０】
（移動相）
（１）２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液と２−プロパノールの混合液（容量比９５：５）
（２）２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液と２−プロパノールの混合液（容量比８５：１５）
（３）２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液と２−プロパノールの混合液（容量比８０：２０）
（４）２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液とメタノールの混合液（容量比９５：５）
【００５１】
【表２】
2007033436.tif 000013
【００５２】
（移動相）
（５）２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液とメタノールの混合液（容量比８５：１５）
（６）２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液
（７）２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液とメタノールの混合液（容量比７０：３０）
【００５３】
（実施例５０）
実施例７と同様のカラム（内径４．６mm、長さ１５０mm）を２本または３本の直列に接続し、０.０２重量％のアスパラギン酸水溶液（Ｌ−アスパラギン酸：Ｄ−アスパラギン酸を１：２の重量比で含有）を５μlを注入し、２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液と２−プロパノールを体積比９５：５で混合した溶液を移動相として、１．０ml／分の流速で送液した。このようにしてアスパラギン酸の光学異性体を分割した結果の比較を表３に示す。カラム２本を直列に接続した上記のクロマトグラムを図１に示す。
【００５４】
【表３】
2007033436.tif 000014
【００５５】
（実施例５１）
実施例１と同様のシリカゲル担体を具備した液体クロマトグラフィに、０.０２重量％のロイシン酸水溶液（Ｌ−ロイシン酸：Ｄ−ロイシン酸を１：１の重量比で含有）を２μlを注入し、２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液とメタノールを体積比７０：３０で混合した溶液を移動相として、１．０ml／分から３．０ml／分の流速で送液した。このようにして３種類の流速でロイシンの光学異性体を分割した結果の比較を表４に示す。３．０ml／分の流速における上記のクロマトグラムを図２に示す。
【００５６】
【表４】
2007033436.tif 000015
【００５７】
（実施例５２）
実施例１と同様のシリカゲル担体を具備した液体クロマトグラフィに、０.０２重量％のフェノキシプロピオン酸水溶液（Ｌ−フェノキシプロピオン酸：Ｄ−フェノキシプロピオン酸を１：１の重量比で含有）を５μlを注入し、２mmol／Ｌの硫酸銅水溶液と２−プロパノールを体積比８０：２０で混合した溶液を移動相として、１．０ml／分から３．０ml／分の流速で送液した。このようにして３種類の流速でフェノキシプロピオン酸の光学異性体を分割した結果の比較を表５に示す。３．０ml／分の流速における上記のクロマトグラムを図３に示す。
【００５８】
【表５】
2007033436.tif 000016
【００５９】
（実施例５３）
０．５〜４μｍのスルーポアと２〜５０ｎｍのメソポアとの二重細孔構造のシリカゲル表面にオクタデシルシリル化剤を化学修飾されたシリカゲル担体が充填されたＣｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ＯＤＳのカラム（内径４．６mm、長さ５０mm、ＭＥＲＣＫ社製）に、まず、メタノール５０容量％と水５０容量％とからなる混合液を通液した。ついで、前記Ｎ,Ｓ−ジ−n−オクチル−Ｄ−ペニシラミンの微黄色結晶の０.０６％メタノール４０容量％と水６０容量％の混合溶液５００mlを、毎分０.８mlの速度でカラムに通液したのち、水２０mlを毎分０.８mlの速度でカラムに通液した。続いて１mmol／lの硫酸銅水溶液５００mlを毎分１.０mlの速度で通液して、カラムに充填された本発明のシリカゲル担体を得た。
前記カラムを具備し、検出器として紫外線吸収計（波長:２５４nm）を接続した液体クロマトグラフィに、０.０２重量％の酒石酸水溶液（Ｌ−酒石酸：Ｄ−酒石酸を１：１の重量比で含有）を５μlを注入し、１mmol／Ｌの酢酸銅水溶液に０．１ミリモル／Ｌの酢酸アンモニウム水溶液を適量加えてｐＨを４．５に調製した水溶液と２−プロパノールを体積比８５：１５で混合した溶液を移動相として、２．０ml／分の流速で送液した。この際のカラム圧力は約４．３ＭＰａに達した。このようにして酒石酸の光学異性体を分割したクロマトグラムを図４に示す。
【００６０】
（実施例５４）
光学活性有機化合物が（Ｒ，Ｒ）−酒石酸−モノ−Ｌ−バリン−１−（Ｒ）−(α−ナフチル)エチルアミド（２−１）である場合のシリカゲル担体の調製
（Ｒ，Ｒ）−酒石酸−モノ−Ｌ−バリン−１−（Ｒ）−(α−ナフチル)エチルアミドの微黄褐色結晶を、Ｎ．Ｏｉ， Ｈ．Ｋｉｔａｈａｒａ ａｎｄ Ｆ．Ａｏｋｉ， Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ａ．，６６６，４５７（１９９４）及びＮ．Ｏｉ， Ｈ．Ｋｉｔａｈａｒａ ａｎｄ Ｆ．Ａｏｋｉ， Ｊ．Ｌｉｑ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，１６，８９３（１９９３）の記載に基づいて調製した。
【００６１】
2007033436.tif 000017
【００６２】
別途、０．５〜４μｍのスルーポアと２〜５０ｎｍのメソポアとの二重細孔構造のシリカゲル表面にオクタデシルシリル化剤を化学修飾されたシリカゲル担体が充填されたＣｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ＯＤＳのカラム（内径４．６mm、長さ５０mm、ＭＥＲＣＫ社製）に、まず、メタノール５０容量％と水５０容量％とからなる混合液を流した。ついで、上記微黄褐色結晶を０.０７％含有し、メタノール４０容量％と水６０容量％からなる混合溶液５００mｌを、毎分０.８mｌの速度でカラムに通液したのち、水２０mｌを毎分０.８mｌの速度でカラムに通液した。続いて１mmol／ｌの硫酸銅水溶液５００mｌを毎分１.０mｌの速度で通液し、カラムに充填されたシリカゲル担体を得た。
前記カラムを具備し、検出器として紫外線吸収計（波長:２５４nm）を接続した液体クロマトグラフィに、０.０２重量％のアラニン水溶液（Ｌ−アラニン：Ｄ−アラニンを１：１の重量比で含有）を５μl注入し、２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液とメタノールを体積比９５：５で混合した溶液を移動相として、１．０ml／分の流速で送液した。この際のカラム圧力は約３．２ＭＰａに達した。このようにしてアラニンの光学異性体を分割した結果のクロマトグラムを図５に示す。
【００６３】
（比較例１）
オクタデシルシランによって表面処理された平均粒径５μmを有する多孔質シリカゲル１.５gを充填したステンレス製カラム(内径４.６mm、長さ５０mm)に、まず、メタノール５０容量％と水５０容量％とからなる混合液を通液した。ついで、前記Ｎ,Ｓ−ジ−n−オクチル−Ｄ−ペニシラミンの微黄色結晶を０.０６％含有し、メタノール４０容量％と水６０容量％からなる混合溶液５００mlを、毎分０.８mlの速度でカラムに通液したのち、水２０mlを毎分０.８mlの速度でカラムに通液した。続いて１mmol／lの硫酸銅水溶液５００mlを毎分１.０mlの速度で通液し、カラムの充填されたシリカゲル担体を得た。
前記カラムを具備し、検出器として紫外線吸収計（波長:２５４nm）を接続した液体クロマトグラフィに、０.０２重量％の酒石酸水溶液（Ｌ−酒石酸：Ｄ−酒石酸を１：１の重量比で含有）を５μl注入し、１ミリモル／Ｌの酢酸銅水溶液に０．１ミリモル／Ｌの酢酸アンモニウム水溶液を適量加えてｐＨを４．５に調製した水溶液と２−プロパノールを体積比８５：１５で混合した溶液を移動相として、１．０ml／分の流速で送液した。この際のカラム圧力は約３．７ＭＰａに達した。このようにして酒石酸の光学異性体を分割した結果を実施例５３とともに表６に示す。上記のクロマトグラムを図６に示す。クロマトグラフからも明らかなように、実施例は比較例に比べてピークがシャープで保持時間が短く、分離係数が示すように光学分割能に優れることがわかる。
【００６４】
【表６】
2007033436.tif 000018
【００６５】
（比較例２）
オクタデシルシランによって表面処理された平均粒径５μmを有する多孔質シリカゲル１.５gを充填したステンレス製カラム(内径４.６mm、長さ１５０mm)に、まず、メタノール５０容量％と水５０容量％とからなる混合液を流した。ついで、（Ｒ，Ｒ）−酒石酸−モノ−Ｌ−バリン−１−（Ｒ）−(α−ナフチル)エチルアミドの微黄褐色結晶の０.０７％含有し、メタノール４０容量％と水６０容量％からなる混合溶液５００mｌを、毎分０.８mｌの速度でカラムに通液したのち、水２０mｌを毎分０.８mｌの速度でカラムに通液した。続いて１mmol／ｌの硫酸銅水溶液５００mｌを毎分１.０mｌの速度で通液し、カラムに充填されたシリカゲル担体を得た。
前記カラムを具備し、検出器として紫外線吸収計（波長:２５４nm）を接続した液体クロマトグラフィに、０.０２重量％のアラニン水溶液（Ｌ−アラニン：Ｄ−アラニンを１：１の重量比で含有）を５μl注入し、２ミリモル／Ｌの硫酸銅水溶液とメタノールを体積比９５：５で混合した溶液を移動相として、１．０ml／分の流速で送液した。この際のカラム圧力は約５．８ＭＰａに達した。このようにしてアラニンの光学異性体を分割し、このクロマトグラムを図７に示す。クロマトグラフからも明らかなように、保持時間が、Ｌ−アラニン＝３．１分、Ｄ−アラニン＝４．７分であり、前述した実施例５４のように、Ｌ−アラニン＝３．４分、Ｄ−アラニン＝４．３分であり、実施例は比較例に比べてピークがシャープで保持時間が短く、光学分割能に優れることがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明の光学分割剤は、不斉炭素原子を有するカルボニル化合物の有機合成に際し、光学分割が必要な場合に用いられたり、カルボニル化合物の鏡像異性体過剰率の測定に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】本発明のシリカゲル担体でアスパラギン酸の光学異性体を分割した液体クロマトグラフ（実施例７）。保持時間１３．５１７分のピークは、Ｌ−アスパラギン酸である。保持時間１７．１１７分のピークは、Ｄ−アスパラギン酸である。
【図２】本発明のシリカゲル担体でロイシンの光学異性体を分割した液体クロマトグラフ（実施例５１）
【図３】本発明のシリカゲル担体でフェノキシプロピオン酸の光学異性体を分割した液体クロマトグラフ（実施例５２）
【図４】酒石酸の光学異性体を分割した液体クロマトグラフであって、本発明のシリカゲル担体（実施例５３）を（ａ）。従来のシリカゲル担体（比較例１）を（ｂ）
【図５】アラニンの光学異性体を分割した液体クロマトグラフであって、本発明のシリカゲル担体（実施例５４）を（ａ）。従来のシリカゲル担体（比較例２）を（ｂ）
【図１】
2007033436.tif 000020
【図２】
2007033436.tif 000021
【図３】
2007033436.tif 000022
【図４】
2007033436.tif 000023
【図５】
2007033436.tif 000024