(57)【要約】  【課題】ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂を、生物学的手段を利用して効率よく分解する手段を提供すること。    【解決手段】ウレタン結合及び／又はウレア結合を切断する能力を有する、アルタナリア属に属する微生物の培養上清物及びウレア結合を切断する能力を有する微生物。並びにそれらを利用した樹脂の分解方法。  【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を切断する能力を有する、アルタナリア属に属
する微生物の培養上清物。
【請求項２】
前記微生物が、アルタナリア アルタネート（Alternaria alternate）（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株（ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５）である、請求項１に記載の培養上清物。
【請求項３】
請求項１に記載の培養上清物を有効成分として含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解用組成物。
【請求項４】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂に、請求項１に記載の培養上清物又は請求項３に記載の組成物を接触させる工程を含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解方法。
【請求項５】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂並びに基材を含んで構成される複合材の樹脂部分に、請求項１に記載の培養上清物又は請求項３に記載の組成物を接触させる工程を含む、前記樹脂と基材との分離方法。
【請求項６】
（１）ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂に、請求項１に記載の培養上清物又は請求項３に記載の組成物を接触させて、該樹脂を分解する工程、及び、（２）工程（１）で得られる分解物を回収する工程を含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂のリサイクル方法。
【請求項７】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂が、エーテル型の樹脂である請求項４〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
ウレア結合を有する樹脂に、アルタナリア属に属し、ウレア結合を切断する能力を有する微生物を接触させる工程を含む、ウレア結合を有する樹脂の分解方法。
【請求項９】
前記微生物が、アルタナリア アルタネート（Alternaria alternate）（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株（ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５）である、請求項８に記載の分解方法。
【請求項１０】
ウレア結合を有する樹脂が、エーテル型の樹脂である、請求項８又は９に記載の分解方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生物学的手段を利用して、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂を分解する方法に主に関する。更に、該方法を利用して、該樹脂と基材とを分離する方法、並びに該樹脂を効率良くリサイクルする方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂としては、ポリウレタン、ポリウレア及びポリウレタンウレアが良く知られている。
【０００３】
これらの樹脂は、腐敗又は変質しにくいため、それぞれの特性に応じて、家電製品や家具、建材など、幅広い用途に使用されている。
【０００４】
しかし、それらの使用量の増加に伴い、それらを利用した製品や複合材の廃棄に伴う環境問題が生じてきている。そのため、それらの効率のよい分解方法又は回収方法が強く求められている。
【０００５】
従来、樹脂の分解方法又は回収方法としては、主にマテリアルリサイクルやケミカルリサイクルが用いられてきた（非特許文献１〜２参照）。
【０００６】
マテリアルリサイクルは、廃棄物を製品の原材料として回収し、再利用する方法である。しかし、樹脂と基材との複合材の再利用は、樹脂と基材の分離に手間がかかり、さらに、回収が不充分になるおそれがあった。
【０００７】
また、ケミカルリサイクルは、化学反応によって樹脂をモノマーおよびオリゴマーに分解して、原料として再利用する方法である。しかし、高温で処理を行う必要があり、また触媒や副生成物の処理に複雑な工程を要し、能率的に不十分であった。
【０００８】
これに対し、微生物を利用する方法が着目されてきている。微生物を利用する方法は、常温での処理が可能であり、効率も良く、低エネルギーで、環境への負荷も少ない。
【０００９】
これまで、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の微生物を利用した分解方法としては、ポリオール部分のエステル結合を分解する方法が報告されている。
【００１０】
しかし、エステル結合を持たないエーテル型の樹脂は、微生物により分解しにくく（非特許文献３〜１８等参照）、微生物によりエーテル型ポリウレタンの分解を可能にする公知の技術としては、特許文献１に開示の方法が挙げられる程度であった。
【非特許文献１】島健太郎, 株式会社シーエムシー, プラスチックリサイクル技術, 2000,7-27.
【非特許文献２】島健太郎, 株式会社シーエムシー, ポリウレタン応用技術, 1999, 229-239.
【非特許文献３】Huang, S. J., C. Macri, M. Roby, C. Benedict, and J. A. Cameron. 1981. Biodegradation of polyurethanes derived from polycaprolactonediols. Am. Chem. Soc. Symp. Ser. 172:471-487.
【非特許文献４】Seal, K. J., and L. H. G. Morton. 1986. Chemical Materials. In Biotechnology 8, ed. H. J. Rehm, and G. Reed. VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany. 584-605.
【非特許文献５】Morton, L. H. G., and S. B. Surman. 1994. Biofilms in biodeterioration - a review. Int. Biodeterior. Biodegrad. 32:203-221.
【非特許文献６】Nakajima-Kambe, T., F. Onuma, N. Kimpara, and T. Nakahara. 1995. Isolation and characterization of bacterium which utilizes polyester polyurethane as a sole carbon and nitrogen source. FEMS. Microbiol. Lett. 129:39-42.
【非特許文献７】Akutsu, Y., T. Nakajima-Kambe, N. Nomura, and T, Nakahara. 1998. Purification and properties of polyester polyurethane degradation enzyme from Comamonas acidvorans TB-35. Appl. Environ. Microbiol. 64:62-67.
【非特許文献８】Crabbe, J. R., J. R. Campbell, L. Thompson, S. L. Walz, and W. W. Schultz. 1994. Biodegradation of colloidal ester-based polyurethane by soil fungi. Int. Biodeterior. Biodegrad. 33:103-113.
【非特許文献９】Jansen, B., F. Schumacher-Perdreau, G. Peteers, and G. Pulverer. 1991. Evidence for degradation of synthetic polyurethanes by Staphylococcus epidermidis. Zentralbl. Bakteriol. 276:36-45.
【非特許文献１０】Ossefort, Z. T., and F. B. Testroet. 1966. Hydrolytic stability of urethane elastomers. Rubber Chemistry and Technology. 39:1308-1327.
【非特許文献１１】Darby, R. T., and A. M. Kaplan. 1968. Fungal susceptibility of polyurethanes. Applied microbiology. 16:900-905.
【非特許文献１２】Potts, J. E., R. A. Clendinning, and W. B. Ackart. 1973. The effect of chemical structure on the biodegradability of plastics. In Degradability of polymers and Plastics. Institute of Electrical Engineers and the Plastics Institute. London. 12/1-12/9.
【非特許文献１３】Filip, Z. 1978. Decomposition of polyurethanes in a garbage landfill leakage water and by soil micro-organisms. European Journal of Applied Microbiology and Biotechnology. 5:225-231.
【非特許文献１４】Martens, R. and K. H. Domsch. 1981. Microbial degradation of polyurethane foams and isocyanate based polyureas in different media. Water, Air and Soil Pollution. 15:503-509.
【非特許文献１５】Pathirana, R. A. and K. J. Seal. 1985. Studies on polyurethane deteriorating fungi. Part3: Physico-mechanical and weight changes during fungal deterioration. International Biodeterioration. 21:123-125.
【非特許文献１６】Seal, K. J., and M. Pantke. 1986. An interlaboratory investigation into the biodeterioration testing of plastics, with special reference to polyurethanes. Part1: Petri dish test. Material und Organismen. 21:151-164.
【非特許文献１７】Claus Jurgen Simon. 2005. Plastics Business Data and Charts. Plastics Europe Deutschland Arbeisausschuss Statistik und Marktforschung Working Group Statistics and Market Research.
【非特許文献１８】CAMPBELL C J. 1996. The Status of World Oil Depletion at the end of 1995. Energy Explor Exploit. 14: 63-81.
【特許文献１】特開２００５−４６００９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂を、生物学的手段を利用して、効率よく分解する方法、該方法を利用して、該樹脂と基材とを分離する方法、更に該樹脂を有効に再利用する方法を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者は、上記課題を解決することを主な目的として鋭意検討を重ねた結果、特定の微生物の培養上清物がウレタン結合及びウレア結合を切断する能力を有すること、並びに、特定の微生物がウレア結合を切断する能力を有することを見出し、更に鋭意検討を重ねて本発明を完成するに至った。
【００１３】
即ち、本発明は、下記の技術に関する。
【００１４】
項１：ウレタン結合及び／又はウレア結合を切断する能力を有する、アルタナリア属に属する微生物の培養上清物。
【００１５】
具体的態様の例には、ウレタン結合を切断する能力を有する微生物の培養上清物、ウレア結合を切断する能力を有する微生物の培養上清物、ウレタン結合及びウレア結合を切断する能力を有する微生物の培養上清物が含まれる。
【００１６】
項２：前記微生物が、アルタナリア アルタネート（Alternaria alternate）（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株（ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５）である、項１に記載の培養上清物。
【００１７】
換言すると、ウレタン結合及び／又はウレア結合を切断する能力を有する、アルタナリア アルタネート（Alternaria alternate）（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株（ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５）の培養上清物である。
【００１８】
項３：項１又は２に記載の培養上清物を有効成分として含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解用組成物。
【００１９】
好ましい態様の例には、ポリウレタン分解用組成物、ポリウレア分解用組成物、及びポリウレタンウレア分解用組成物が含まれる。
【００２０】
項４：ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂に、項１又は２に記載の培養上清物あるいは項３に記載の組成物を接触させる工程を含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解方法。
【００２１】
項５：ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂並びに基材を含んで構成される複合材の樹脂部分に、項１又は２記載の培養上清物あるいは項３に記載の組成物を接触させる工程を含む、前記樹脂と基材との分離方法。
【００２２】
項６：（１）ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂に、項１又は２に記載の培養上清物あるいは項３に記載の組成物を接触させて、該樹脂を分解する工程、及び、（２）工程（１）で得られる分解物を回収する工程を含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂のリサイクル方法。
【００２３】
項７：ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂が、エーテル型の樹脂である項４〜６のいずれかに記載の方法。
【００２４】
好ましくは、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂が、エーテル型ポリウレタン、エーテル型ポリウレア又はエーテル型ポリタンウレアである項４〜６のいずれかに記載の方法である。
【００２５】
項８：ウレア結合を有する樹脂に、アルタナリア属に属し、ウレア結合を切断する能力を有する微生物を接触させる工程を含む、ウレア結合を有する樹脂の分解方法。
【００２６】
項９：前記微生物が、アルタナリア アルタネート（Alternaria alternate）（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株（ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５）である、項８に記載の分解方法。
【００２７】
換言すると、ウレア結合を有する樹脂に、ウレア結合を切断する能力を有するアルタナリア アルタネート（Alternaria alternate）（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株（ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５）を接触させる工程を含む、ウレア結合を有する樹脂の分解方法。
【００２８】
項１０：ウレア結合を有する樹脂が、エーテル型の樹脂である、項８又は９に記載の分解方法。
【００２９】
好ましくは、ウレア結合を有する樹脂が、エーテル型ポリウレア又はエーテル型ポリウレタンウレアである項８又は９に記載の方法である。
【００３０】
更に、本発明は、以下の事項も含まれる。
【００３１】
項１１：ウレア結合を有する樹脂並びに基材を含んで構成される複合材の樹脂部分に、項８又は９に記載の微生物を接触させる工程を含む、前記樹脂と基材との分離方法。
【００３２】
項１２：（１）ウレア結合を有する樹脂に、項８又は９に記載の微生物を接触させて、該樹脂を分解する工程、及び、（２）工程（１）で得られる分解物を回収する工程を含む、ウレア結合を有する樹脂のリサイクル方法。
【００３３】
項１３：ウレタン結合及び／又はウレア結合切断の活性を有する酵素。
【００３４】
項１４：アルタナリア属に属する微生物由来である項１３に記載の酵素。
【００３５】
項１５：アルタナリア アルタネート（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株（ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５）由来である、項１３又は１４に記載の酵素。
【００３６】
項１６：項１３〜１５のいずれかに記載の酵素を有効成分として含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解用組成物。
【００３７】
項１７：ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂に、項１３〜１５のいずれかに記載の酵素又は項１６に記載の組成物を接触させる工程を含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解方法。
【００３８】
項１８：ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂並びに基材を含んで構成される複合材の樹脂部分に、項１３〜１５のいずれかに記載の酵素又は項１６に記載の組成物を接触させる工程を含む、前記樹脂と基材との分離方法。
【００３９】
項１９：（１）ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂に、項１３〜１５のいずれか記載の酵素又は項１６に記載の組成物を接触させて、該樹脂を分解する工程、及び、（２）工程（１）で得られる分解物を回収する工程を含む、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂のリサイクル方法。
【００４０】
項２０：ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂が、エーテル型の樹脂である項１７〜１９のいずれかに記載の方法。
【００４１】
以下、本発明について、更に詳細に説明する。
Ｉ．ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂
Ｉ−１．結合
本明細書において、ウレタン結合とは、下記式１で示される構造をいう。
【００４２】
【数１】
2007135401.tif 000002
【００４３】
本明細書において、ウレタン結合の切断とは、ウレタン結合における窒素−炭素結合の切断をいう。
【００４４】
また、本明細書において、ウレア結合とは、下記式２で示される構造をいう。
【００４５】
【数２】
2007135401.tif 000003
【００４６】
本明細書において、ウレア結合の切断とは、ウレア結合における窒素−炭素結合の切断をいう。
【００４７】
Ｉ−２．樹脂
本明細書において、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂は、ポリイソシアネート化合物と、活性水素を有する化合物との反応物を基本骨格として有する。活性水素化合物には、ポリオール化合物、ポリアミン化合物及び水等が含まれる。
【００４８】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を含有する樹脂は、ポリイソシアネート化合物及び活性水素を有する化合物を主原料として得られるものであれば、他の原料を加えて得られるものでもよい。他の原料としては、例えば、架橋剤、鎖延長剤、上記以外の活性水素含有化合物等が挙げられる。
【００４９】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の製造方法も特に限定されず、適当なプレポリマーを合成してから製造されるものであってもよい。例えば、ポリマージオールとジイソシアネートから両末端イソシアネートのプレポリマーを合成し、次いでこのプレポリマーをジアミン化合物で連結し、高分子量化して得られるものでもよい。
【００５０】
また、原料となるポリイソシアネート化合物とポリオール化合物及び／又はポリアミン化合物との量比も特に限定されない。例えば、イソシアネート基のモル数と、水酸基とアミノ基のモル数の和との比が１であってもよく、１より大きい又は小さいものであってもよく、末端に反応基が残存している樹脂であってもよい。
【００５１】
本明細書において、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂というときは、（ｉ）ウレタン結合を有する樹脂、（ｉｉ）ウレア結合を有する樹脂、並びに、（ｉｉｉ）ウレタン結合及びウレア結合を有する樹脂が含まれる。
【００５２】
ウレタン結合を有する樹脂は、ポリイソシアネート化合物とポリオール化合物とを主原料として、反応させることにより、得られる樹脂の総称であり、例えば、ポリウレタンやポリウレタンウレア等が含まれる。
【００５３】
ウレア結合を有する樹脂は、ポリイソシアネート化合物とポリアミン化合物とを主原料として反応させることにより、得られる樹脂の総称であり、例えば、ポリウレアやポリウレタンウレアが含まれる。
【００５４】
また、ウレタン結合及びウレア結合を有する樹脂は、ポリイソシアネート化合物と、ポリオール化合物、ポリアミン化合物及び水を主原料として反応させることにより得られる樹脂の総称であり、例えば、ポリウレタンウレアが含まれる。該樹脂におけるウレタン結合とウレア結合との比率は、特に限定されない。
【００５５】
樹脂とは、熱可塑性樹脂でもよく、熱硬化性樹脂でもよい。また、エラストマーでもよい。また、樹脂は、非発泡体であってよく、発泡体（フォーム）であってもよい。また、樹脂は直鎖状または分岐状であってもよく、架橋されたものであってもよい。
【００５６】
本発明の実施態様の一例において、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂は、エーテル型の樹脂である。
【００５７】
エーテル型の樹脂とは、ポリエーテルの重付加物、換言すると、原料となるポリオール化合物及び／又はポリアミン化合物等が、ポリエーテルである樹脂を意味する。
【００５８】
エーテル型の、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂には、エーテル型ポリウレタン、エーテル型ポリウレア、及び、エーテル型ポリウレタンウレアが含まれる。
【００５９】
ＩＩ．微生物の培養上清物を利用したウレタン結合及び／又はウレア結合の切断
ＩＩ−１．培養上清物
本発明によれば、アルタナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属に属する微生物の培養上清物であり、ウレタン結合及び／又はウレア結合を切断する能力を有する培養上清物が提供される。  
【００６０】
アルタナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属に属する微生物としては、アルタナリア アルタネート（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株が好ましく用いられる。なお、ＰＵＲＤＫ２株は、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５として、寄託されている(寄託日２００３年７月２４日）。
【００６１】
培養上清物は、アルタナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属に属する微生物を培養して得られ、微生物の菌体外分泌物又は酵素を含むものである。好ましくは、ウレタン結合及び／又はウレア結合の切断活性を有する酵素を含むものである。
【００６２】
例えば、糖質を含有する培地に、アルタナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属に属する微生物を、適当な時間培養し、生育させた後、培養液を遠心し、菌体部分を分離して、上清を回収することにより得ることができる。より具体的には、糖質を含有した培地、例えばＬＢ＋グルコース培地（ポリペプトン10g/L、yeast extract 5g/L、NaCl 5g/L、及びグルコース10g/L）に菌体を生育させ（PURDK2株をLBグルコース培地で生育させる場合は24時間）、培養液を4℃、7,000gで10分間遠心することにより、菌体部分を分離して得ることができる。
【００６３】
或いは、微生物を、培地を含有する液体に懸濁させた後、適当な温度で放置して、生育させることにより上清として得られる。
【００６４】
また、ウレタン結合及び／又はウレア結合の切断活性を有する酵素は、上記微生物の培養上清物から常法に従って単離することにより得ることができる。
【００６５】
ＩＩ−２．組成物
本発明によれば、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解用組成物が提供される。該組成物は、上記培養上清物を有効成分として含む。または、培養上清物から得られる酵素を含むものであってもよい。
【００６６】
本発明の組成物は、培養上清物によるウレタン結合及び／又はウレア結合の切断作用を奏し、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解に好適に用いられる。
【００６７】
本発明の組成物は、培養上清物そのものからなるものであってもよいし、それを有効成分として、添加物等の他の成分が配合されているものであってもよい。更に、本発明の効果を奏する範囲内であれば、他の分解助剤や分解酵素を配合することもできる。
【００６８】
かかる他の成分の配合量は、本発明の効果を損なわないことを限度として、適宜選択調整することができる。
【００６９】
組成物の製造方法も特に限定されず、上記培養上清物に、必要に応じて添加剤等の他の成分を混合し、公知の方法に従って適宜調製することにより、得ることができる。
【００７０】
組成物の形態についても特に制限されず、適用される製品等の種類、使用態様等に応じて、任意に調製することができる。例えば、懸濁液の状態に調製することができる。
【００７１】
ＩＩ−３．樹脂の分解方法
本発明によれば、培養上清物を利用した、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の分解方法が提供される。
【００７２】
実施態様の一例は、ポリウレタンに、ウレタン結合を切断する能力を有する、アルタナリア属に属する微生物の培養上清物を接触させる工程を含むポリウレタンの分解方法である。
【００７３】
他の一例は、ポリウレアに、ウレア結合を切断する能力を有する、アルタナリア属に属する微生物の培養上清物を接触させる工程を含むポリウレアの分解方法である。
【００７４】
また他の一例は、ポリウレタンウレアに、ウレタン結合及びウレア結合を切断する能力を有する、アルタナリア属に属する微生物を接触させる工程を含むポリウレタンウレアの分解方法である。
【００７５】
アルタナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属に属する微生物としては、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５として寄託されている、アルタナリア アルタネート（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株が、好ましく用いられる。
【００７６】
培養上清物を、樹脂に接触させる方法は、本発明の効果を奏する範囲内で適宜設定することができる。
【００７７】
例えば、適切な液体培地で培養した微生物の培養物から沈殿物を分離して調製した培養上清物又はそれを含む組成物を、樹脂表面に散布又は樹脂内部に注入してもよい。
【００７８】
また、微生物を含有する液体培地を樹脂表面に散布又は樹脂内部に注入し、散布又は注入部位で生育させて得られる培養上清物で樹脂との接触を行ってもよい。
【００７９】
例えば、微生物を樹脂表面に適切な間隔で塗布した後、該塗布部位にさらに液体培地（例えば、ＬＢ＋グルコース培地など）を塗布し、その微生物の生育に最適な温度で放置することにより、樹脂上で微生物を培養し、生育される微生物が産生する分泌物又は酵素を含む上清物により、樹脂を分解（溶解）することができる。
【００８０】
また、微生物を樹脂内に注入した後、該注入部位にさらに液体培地（例えば、ＬＢ＋グルコース培地など）を注入し、その微生物の生育に最適な温度で放置することにより、樹脂中で微生物を培養し、生育した微生物が産生する分泌物又は酵素を含む上清物により、樹脂を分解（溶解）することができる。
【００８１】
樹脂の分解条件は、ウレタン結合及び／又はウレア結合が切断される条件内で、適宜選択して設定することができる。好ましくは、適温に加温した条件とすることで、分解反応を促進することができる。
【００８２】
ＩＩ−４．再利用（リサイクル）方法
（ＩＩ−４ａ）樹脂と基材の分離方法
本発明によれば、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂並びに基材を含んで構成される複合材において、微生物の培養上清物を用いて、該樹脂と基材とを効率よく分離する方法が提供される。本発明の分離方法には、樹脂及び／又は基材が、回収及び／又は再利用可能な形態で分離される方法を含む。再利用可能な形態とは、回収された樹脂又は基材自体がそのままリサイクルされる場合、および、少し手を加えれば再利用（リサイクル）できるような場合を包含する。
【００８３】
本明細書において、基材とは、上記培養上清物で分解されない材料（例えば、スチール、木材、硬質プラスチックなど）を用いて製造された家電製品や家具を構成する部分をいうが、これに制限されない。
【００８４】
ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂と基材を含んで構成される複合材には、例えば、ポリウレタン、ポリウレア又はポリウレタンウレアと基材とを含んで構成される複合材が含まれる。
【００８５】
複合材の構成は、本発明の効果が奏される範囲内であれば、特に制限はない。例えば、スチール、木材、硬質プラスチックなどの材料で構成された基材に、リベット、接着剤などで、該樹脂を固定、結合あるいは接着してなる複合材が例示される。また、配管や壁などの基材に、該樹脂を吹き付けたり、被覆させたりして得られる複合材が例示される。また、型枠などの基材に、該樹脂を注入成形して得られる複合材が例示される。
【００８６】
本発明の分離方法においては、（１）微生物を生育培地と共に複合材料に接触させ、接触場所で微生物を培養し、培養した微生物が産生する分泌物又は酵素を含む上清により、樹脂を分解する方法、及び、（２）微生物の培養上清物を予め調製し、該調製した培養上清物を複合材料に接触させて、樹脂を分解する方法のどちらも適用し得る。
【００８７】
例えば、ポリウレタンは、熱可塑性樹脂、ウレタンフォーム（発泡ポリウレタン）、エラストマー等として、家電製品の断熱材、家具の弾性体などに利用されている。より具体的に、ウレタンフォームは、断熱材として、冷蔵庫の外壁と内壁との間に充填されている。この外壁あるいは内壁を構成する基材は、硬質プラスチックで形成されている場合が多い。この外壁あるいは内壁のいずれか一方または両方にウレタンフォームがリベットであるいは接着剤で貼り合わされ（固定され）、複合材とされる。この複合材を組立てることによって、外壁と内壁との間にウレタンフォームが充填された形の冷蔵庫が製造される。この冷蔵庫を廃棄するに際し、冷蔵庫を分解することによって、基材とウレタンフォームとを貼り合わせてなる複合材が生じる。この複合材に、ウレタン結合を切断する上記培養上清物を作用させることにより、実質的に再利用可能な状態で、基材が回収できる。
【００８８】
基材とウレタンフォームとを貼り合わせてなる複合材から、ウレタンフォームを分解（溶解）する方法としては、複合材を微生物を含有する液体培地、又は微生物が産生する培養液上清に浸漬し、適切な温度で放置する方法、複合材のウレタンフォーム部分に微生物を含有する液体培地を散布する方法、あるいは、本発明の培養上清物又は培養上清物を含む組成物を直接ポリウレタンフォーム上に塗布する方法などが採用される。これらの方法により、ウレタンフォームを分解し、基材を回収することができる。
【００８９】
また、ポリウレアは、耐水性や耐候性等に優れ、塗膜等として利用される。被塗物を構成する基材には、硬質プラスチックやコンクリート等が挙げられる。このような基材にポリウレアが塗布されてなる複合材に、ウレア結合を切断する能力を有する上記培養上清物を作用させることにより、実質的に再利用可能な状態で、基材が回収できる。
【００９０】
基材とポリウレアを含んで成る複合材から、ポリウレアを分解して分離する方法としては、複合材を、該微生物を含有する液体培地に浸漬し、適切な温度で放置する方法、複合材のポリウレア部分に該微生物を含有する液体培地を散布する方法、あるいは、該微生物を直接ポリウレア上に塗布する方法などが採用される。これらの方法により、ポリウレアが分解（溶解）され、基材が回収される。
【００９１】
またポリウレタンウレアは、再剥離性、成形性等に優れ、バインダーや弾性糸等として利用される。各種基材にポリウレタンウレアが接着及び積層、交編されてなる複合材に、ウレタン結合及び／又はウレア結合を切断する能力を有する上記培養上清物を作用させて、ポリウレタンウレアを分解することにより、実質的に再利用可能な状態で、基材が回収できる。基材の回収に際して、ポリウレタンウレアは分解してもよく、分解産物を回収して、再利用してもよい。また分解物を粉砕後、バインダーを添加して成型してもよい。
【００９２】
基材とポリウレタンウレアを含んで成る複合材から、ポリウレタンウレアを分解して分離する方法としては、複合材を、該微生物を含有する液体培地に浸漬し、適切な温度で放置する方法、複合材のポリウレタンウレア部分に該微生物を含有する液体培地を散布する方法、あるいは、該微生物を直接ポリウレタンウレア上に塗布する方法などが採用される。これらの方法により、ポリウレタンウレアが分解（溶解）され、基材が回収される。
【００９３】
（ＩＩ−４ｂ）樹脂及び／又は基材の再利用方法
上記（ＩＩ−４ａ）の方法により複合材から分離された基材は、そのまま、或いは、適当な加工を行って、再利用することができる。
【００９４】
また分解された樹脂も、そのまま或いは適当な加工を行って、再利用することができる。例えば、分解された樹脂を、必要に応じて粉砕した後、バインダーを添加して成型することにより、製品として利用することができる。
【００９５】
基材の回収と同時に樹脂を回収して、基材および樹脂の両方が再利用できるようにする場合は、例えば、基材と樹脂との接着部分に、本発明の微生物の培養上清物を接触させるか、あるいは微生物を生育培地を含む液体に懸濁したものを注入し、適切な温度で放置（培養）する。
【００９６】
この方法により、基材と樹脂との貼り合わせ部位において、培養上清又は培養後の微生物の上清物に含まれる菌体外分泌物又は酵素が反応し、貼り合わせ部分の樹脂を分解（溶解）することにより、基材と樹脂とを容易に剥離することができる。
【００９７】
また、微生物を樹脂の表面に適切な間隔で線状に塗布するか、或いは樹脂内に注入した後、該塗布又は注入部位にさらに液体培地（例えば、ＬＢ＋グルコース培地など）を塗布あるいは注入し、その微生物の生育に最適な温度で放置することにより、樹脂上あるいは樹脂中の所望の位置で微生物を培養し、培養上清に含まれる微生物の分泌物又は酵素により、樹脂を分解（溶解）して、所望の大きさの樹脂を回収することができる。
【００９８】
（ＩＩ−４ｃ）樹脂の分解物の利用方法
上記方法により、樹脂を分解して得られる分解産物を、回収して、再利用することもできる。例えば、該樹脂の分解により生成される低分子化合物を、適宜精製し、樹脂や他の製品の原料として再利用することができる。
【００９９】
分解により生成される化合物には、末端にアミノ基を有する化合物や末端に水酸基を含む化合物等が含まれ得る。
【０１００】
実施態様としては、例えば、ウレタン結合及び／ウレア結合を有する樹脂に、本発明の培養上清物を接触させて分解し、分解により生成する化合物を回収・精製し、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂の原料として用いる方法等があげられる。
【０１０１】
ＩＩＩ．微生物を利用したウレア結合の切断
ＩＩＩ−１．ウレア結合を有する樹脂の分解方法
本発明によれば、微生物のウレア結合を切断する能力を利用して、ウレア結合を有する樹脂を分解する方法が提供される。
【０１０２】
ウレア結合を有する樹脂には、ポリウレア及びポリウレタンウレアが含まれる。例えば、ポリイソシアネート化合物と、ポリオール化合物、ポリアミン化合物及び水を主原料として反応させることにより得られるポリウレタンウレアが含まれる。
【０１０３】
また、ウレア結合を有する樹脂は、エーテル型の樹脂であってもよく、例えば、エーテル型ポリウレア及びエーテル型ポリウレタンウレアも含まれる。
【０１０４】
分解方法の実施態様の一例としては、ポリウレアに、アルタナリア属に属し、ウレア結合を切断する能力を有する微生物を接触させる工程を含む、ポリウレアの分解方法が挙げられる。具体的態様において、ポリウレアはエーテル型ポリウレアである。
【０１０５】
また、他の一例として、ポリウレタンウレアに、アルタナリア属に属し、ウレア結合を切断する能力を有する微生物を接触させる工程を含む、ポリウレタンウレアの分解方法が挙げられる。具体的態様において、ポリウレタンウレアはエーテル型ポリウレタンウレアである。
【０１０６】
ウレア結合を切断する能力を有する微生物は、アルタナリア属に属する微生物が用いられる。中でも、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに受託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９４４５として寄託されているアルタナリア アルタネート（Ｆｒ．）カイスラー ＰＵＲＤＫ２株が、好適に用いられる。
【０１０７】
微生物を、樹脂に接触させる方法は、本発明の効果を奏する範囲内で適宜設定することができる。例えば、適切な液体培地で培養した微生物を、ポリウレア又はポリウレタンウレアの表面に散布してもよく、ポリウレア又はポリウレタンウレアの内部に注入してもよい。
【０１０８】
分解条件は、ウレア結合が切断される条件の範囲内で、適宜設定することができる。特に、適温に加温することは、反応が促進される点で好ましい。
【０１０９】
ＩＩＩ−２．再利用（リサイクル）方法
上記ウレア結合を有する樹脂の分解方法は、ウレア結合を有する樹脂と基材を含んで成る複合材から該樹脂と基材とを分離する方法、並びに、樹脂を分解、回収し、再利用する方法に適用し得る。樹脂と基材とを分離する方法において、基材は再利用可能な形態で回収し得る。再利用可能な形態とは、回収された基材自体がそのままリサイクルされる場合、および、少し手を加えれば再利用（リサイクル）できるような状態を包含する。
【０１１０】
ウレア結合を有する樹脂と基材を含んで構成される複合材には、例えば、ポリウレア又はポリウレタンウレアと基材とを含んで構成される複合材が含まれる。
【０１１１】
本発明の分離方法は、例えば、微生物を、複合材における樹脂と基材との接合部分に接触させたり、樹脂中に注入させたりすることにより、実施することができる。
【０１１２】
例えば、ポリウレアと基材を含んでなる複合材に、ウレア結合を切断する能力を有する微生物を作用させることにより、実質的に再利用可能な状態で、基材が回収できる。
【０１１３】
基材とポリウレアを含んで成る複合材から、ポリウレアを分解して基材と分離する方法としては、複合材を、該微生物を含有する液体培地に浸漬し、適切な温度で放置する方法、複合材のポリウレア部分に該微生物を含有する液体培地を散布する方法、あるいは、該微生物を直接ポリウレア上に塗布する方法などが採用される。これらの方法により、ポリウレアが分解（溶解）され、基材が回収される。
【０１１４】
また、ポリウレタンウレアと基材とを含んでなる複合材に、ウレア結合を切断する能力を有する微生物を作用させて、ポリウレタンウレアを分解することにより、実質的に再利用可能な状態で、基材を回収することができる。回収できる。基材とポリウレタンウレアを含んで成る複合材から、ポリウレタンウレアを分解して分離する方法としては、複合材を、該微生物を含有する液体培地に浸漬し、適切な温度で放置する方法、複合材のポリウレタンウレア部分に該微生物を含有する液体培地を散布する方法、あるいは、該微生物を直接ポリウレタンウレア上に塗布する方法などが採用される。これらの方法により、ポリウレタンウレアが分解され、基材が回収される。
【０１１５】
また、上記の方法により複合材から分離された基材は、そのまま、或いは、適当な加工を行って、再利用することができる。
【０１１６】
また分解された樹脂も、そのまま或いは適当な加工を行って、再利用することができる。例えば、分解された樹脂を、必要に応じて粉砕した後、バインダーを添加して成型することにより、製品として利用することができる。
【０１１７】
基材の回収と同時に樹脂を回収して、基材および樹脂の両方が再利用できるようにする場合は、例えば、基材と樹脂との接着部分に、本発明の微生物を接触させるか、あるいは微生物を注入し、適切な温度で放置（培養）する。
【０１１８】
この方法により、基材と樹脂との貼り合わせ部位において、微生物が樹脂を分解（溶解）することにより、基材と樹脂とを容易に剥離することができる。
【０１１９】
また、微生物を樹脂の表面に適切な間隔で線状に塗布するか、或いは樹脂内に注入することにより、樹脂上あるいは樹脂中の所望の位置で樹脂を分解（溶解）して、所望の大きさの樹脂を回収することができる。
【０１２０】
また、上記方法により、ウレア結合を有する樹脂を分解して得られる分解産物を、回収して、再利用することもできる。例えば、該樹脂の分解により生成される低分子化合物を、適宜精製し、樹脂や他の製品の原料として再利用することができる。
【０１２１】
分解により生成される化合物には、末端にアミノ基を有する化合物や末端に水酸基を有する化合物等が含まれる。
【０１２２】
実施態様としては、例えば、ウレア結合を有する樹脂に、上記微生物を接触させて分解し、分解により生成する化合物を回収・精製し、ウレア結合を有する樹脂の原料として用いる方法があげられる。
【発明の効果】
【０１２３】
本発明によれば、ウレタン結合及び／又はウレア結合を切断する能力を有する培養上清物が提供される。更に該培養上清物を有効成分とするウレタン結合及び／ウレア結合を有する樹脂の分解用組成物が提供される。該培養上清物により、ウレタン結合及び／ウレア結合を有する樹脂を効率よく分解することが可能となる。また微生物を用いる場合に比べて、扱いが容易となり、利便性が向上する。
【０１２４】
また、本発明によれば、ウレア結合を切断する能力を有する微生物が提供される。これにより、ウレア結合を有する樹脂を効率よく分解することが可能となる。
【０１２５】
本発明によれば、これらの生物学的手段を利用することにより、ウレタン結合及び／又はウレア結合を有する樹脂を効率良く分解する方法が提供される。
【０１２６】
特に、本発明によれば、樹脂のウレタン結合及び／又はウレア結合を切断することにより、エステル型の樹脂だけでなく、エーテル型のポリウレタン、ポリウレア及びポリウレタンウレアについても、効率良く分解する方法が提供される。
【０１２７】
また、本発明によれば、上記分解方法を利用して、ポリウレタン、ポリウレア、又はポリウレタンウレア等の樹脂を材料に用いた家電製品、家具、自動車又は建材などから、基材を容易に回収できる方法が提供される。更に基材と共に、それらの樹脂又はその分解物を回収し、有効にリサイクルする方法が提供される。
本発明の方法は、分解効率に優れ、穏やかな条件で実施可能であり、低エネルギーで、環境への負荷も小さい。
【０１２８】
このような特徴を有する本発明は資源の有効利用と環境への負荷軽減に大きく寄与するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１２９】
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に制限されることはない。
【０１３０】
尚、以下の実施例においては、アルタナリア属に属する微生物として、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに寄託されている、アルタナリア アルタネート（Alternaria alternate）（Fr．）カイスラー PURDK2株（FERM P-19445)を用いた。
【０１３１】
実施例１：PURDK2株によるウレタン結合の分解
PURDK2株によるウレタン結合の切断を解析するため、ウレタン結合を有する樹脂のモデル化合物Diphenylmethane-4,4’-diethylcarbamate (E-MDI)（図１参照）を基質として分解様式を解析した。
【０１３２】
1.1方法
Diphenylmethane-4,4’-diethylcarbamate (E-MDI) 0.01 gを添加したLB+グルコース培地（ポリペプトン10g/L、イーストエキス5g/L、NaCl 5g/L、及びグルコース10g/L）100 mLに24時間前培養を行ったPURDK2株を10 ％植菌し、30 ℃、100 rpmにて0、12、24、36時間培養を行った。培養後、クロロホルム・メタノール（3: 1）溶液30 mLを添加し、十分に撹拌した。4,000 gで30分間遠心し、得られたクロロホルム層を回収した。更に、回収したクロロホルム層を10,000 gで10分間遠心した後、得られたクロロホルム層1μLをガスクロマトグラフィー（GC）で解析した。また、得られた分解産物についてGC/MSにより同定を行った。また、未植菌の系をコントロールとし、同様に解析を行った。
【０１３３】
1.2解析結果
E-MDIのGC解析により、4本のピークが検出され、そのうちピークIIIがE-MDIであり、ピークＩ、II、IVは未反応物であった（図2参照）。
【０１３４】
PURDK2株によるE-MDI分解物についてGCにより解析したところ、培養24時間でE-MDIは45 %減少した。これから、PURDK2株はE-MDIを分解することが示唆された。また、中間代謝産物と考えられる新たなピークが検出された（図3参照）。
【０１３５】
PURDK2株培養24時間における分解物（中間代謝産物）で検出されたピークEP1で示される化合物について、GC/MS解析により、構造の同定を行った（図4参照）。
【０１３６】
その結果、EP1はdiphenylmethane-4-amin-4’-ethylcarbamate (図5)と同定された。
【０１３７】
EP1は、E-MDIが有するウレタン結合の切断により得られる化合物であると考えられる（図6参照）。このことから、PURDK2株がE-MDIのウレタン結合を切断することが明らかとなった。
【０１３８】
実施例2．PURDK2株培養上清によるウレタン結合の分解
PURDK2株の培養上清によりE-MDIが分解されるのか確認するため、E-MDIを用いて分解解析を行った。
【０１３９】
2.1方法
エーテル型ポリウレタンウレア片 (1 cm3) 5つを添加したLB＋グルコース培地100 mLにPURDK2株前培養液を3 %植菌し、30 ℃、100 rpmにて24時間培養を行った。得られた培養液を4 ℃、7,000 gで10分間遠心し、上清と菌体を分離した。これを2回繰り返した。
【０１４０】
20 mMリン酸緩衝溶液(pH 7.0)にE-MDI 0.01 gを添加し、これに培養上清をそれぞれ1 mL、5 mL、10 mL加え全量100 mLとした。混合後、30 ℃、100 rpmにて1時間振盪を行った。振盪後、クロロホルム・メタノール抽出し、得られたクロロホルム層1μLをGCで解析した。また、得られた分解物についてGC/MSにより同定を行った。培養上清を沸騰水中で10分間加熱し、酵素を失活させた上清10 mLについても同様に解析を行った。
【０１４１】
2.2解析結果
PURDK2株培養上清によるE-MDI分解のGC解析結果を図7に示す。
【０１４２】
培養上清10 mLを添加した系では反応1時間でE-MDIは98 ％減少し、中間代謝産物と考えられる新たなピークが検出された（図7.D参照）。また、添加上清量を5 mL（１/2）、1 mL（1/10）とした系では、それぞれ51.4 %、8.9 %のE-MDI分解率を示した（図7.B,C参照）。
【０１４３】
更に、培養上清によるE-MDIの分解が酵素によるものか確認するため培養上清を加熱することで酵素を失活させた系について解析を行ったところ(図7.E参照)、上清の添加を行わなかった系（図7.A参照）とピークエリアに差がほとんど無かったことから、E-MDIは分解されていないことが確認された。このことから、PURDK2株培養上清にはE-MDIを分解するタンパク質（酵素）が含まれることが確認された。
【０１４４】
次いで、PURDK2株培養上清による分解物（中間代謝産物）の解析で検出されたピークEP2で示される化合物について、GC/MS解析により、構造の同定を行った（図8参照）。
【０１４５】
その結果、EP2はdiphenylmethane-4-amin-4’-ethylcarbamate (図9参照)と同定された。
【０１４６】
EP2は、E-MDIが有するウレタン結合の切断により得られる化合物であると考えられる（図10参照）。このことから、培養上清物が、E-MDIのウレタン結合を切断することが明らかとなり、PURDK2株はE-MDIのウレタン結合を切断する酵素を菌体外に産生することが考えられた。
【０１４７】
3．PURDK2株によるウレア結合の分解
PURDK2株がウレア結合を切断するか解析するため、ウレア結合を有する樹脂のモデル化合物Diphenylmethane-4,4’-dibuthylurea (D-MDI)（図11参照）を基質として分解様式を解析した。
【０１４８】
3.1方法
D-MDI 0.01 gを添加したLB+グルコース培地100 mLにPURDK2株前培養を10 ％植菌し、30℃、100 rpmにて0、12、24、36時間培養を行った。培養後、クロロホルム・メタノール抽出し、GC解析した。また、得られた分解物についてGC/MSにより同定を行った。未植菌の系をコントロールとし、同様に解析を行った。
【０１４９】
3.2解析結果
D-MDIのGC解析により2本のピークが検出され、ピークIがD-MDIであり、ピークIIは未反応物であった (図12参照)。
【０１５０】
PURDK2株によるD-MDI分解物についてGCにより解析したところ、培養24時間でD-MDIは27 %減少し、PURDK2株はD-MDIを分解することが示唆された。また、中間代謝産物と考えられる新たなピークが検出された（図13参照）。
【０１５１】
PURDK2株培養24時間における分解物（中間代謝産物）で検出されたピークDP1で示される化合物について、GC/MS解析により、構造の同定を行った（図14参照）。
【０１５２】
その結果、DP1はdibutylamin(図15参照)と同定された。
【０１５３】
DP1は、D-MDIが有するウレア結合の切断により得られる化合物であると考えられる（図16参照）。このことから、PURDK2株が、D-MDIのウレア結合を切断することが明らかとなった。
【０１５４】
4．PURDK2株培養上清によるウレア結合の分解
PURDK2株の培養上清によりウレア結合を有する樹脂が分解されるのか確認するため、D-MDIを用いて解析を行った。
【０１５５】
4.1方法
エーテル型ポリウレタンウレア片 (1 cm3) 5つを添加したLB＋グルコース培地100 mLにPURDK2株前培養液を3 %植菌し、30 ℃、100 rpmにて24時間培養を行った。得られた培養液を4 ℃、7,000 gで10分間遠心し、上清と菌体を分離した。これを2回繰り返した。20 mMリン酸緩衝溶液(pH 7.0)にDiphenylmethane-4,4’-dibuthylurea （D-MDI）0.01 gを添加し、これに培養上清をそれぞれ1 mL、5 mL、10 mL加え全量100 mLとした。混合後、30 ℃、100 rpmにて1時間振盪を行った。振盪後、クロロホルム・メタノール抽出し、得られたクロロホルム層1μLをGCで解析した。また、得られた分解物についてGC/MSにより同定を行った。培養上清を沸騰水中で10分間加熱し、酵素を失活させた上清10 mLについても同様に解析を行った。
【０１５６】
4.2結果及び考察
PURDK2株培養上清によるD-MDI分解のGC解析結果を図17に示す。
【０１５７】
培養上清10 mLを添加した系では反応1時間でD-MDIは54.5 ％減少し、中間代謝産物と考えられる新たなピークが検出された（図17.D）。また、添加上清量を5 mL（１/2）、1 mL（1/10）とした系では、それぞれ25.1 %、7.3 %のD-MDI分解率を示した（図17.B,C）。
【０１５８】
更に、培養上清によるD-MDIの分解が酵素によるものか確認するため培養上清を加熱することで酵素を失活させた系について解析を行ったところ(図17.E)、上清の添加を行わなかった系（図17.A）とピークエリアに差がほとんど無かったことから、D-MDIは分解されていないことが確認された。このことから、PURDK2株培養上清にはD-MDIを分解するタンパク質（酵素）が含まれることが確認された。
【０１５９】
次いで、PURDK2株培養上清による分解物（中間代謝産物）の解析で検出されたピークDP2で示される化合物について、GC/MS解析により、構造の同定を行った（図18参照）。
【０１６０】
その結果、DP2はdibutylamin(図19)と同定された。
【０１６１】
DP2は、D-MDIが有するウレア結合の切断により得られる化合物であると考えられる（図20参照）。このことから、PURDK2株の培養上清が、D-MDIのウレア結合を切断することが明らかとなった。
【図面の簡単な説明】
【０１６２】
【図１】ウレタン結合を有する樹脂のモデル化合物Diphenylmethane-4,4’-diethylcarbamate (E-MDI)の構造を示した図面である。□は該化合物が有するウレタン結合を示す。
【図２】E-MDIのGC解析結果を示す図面である。
【図３】PURDK2株による培養24時間におけるE-MDI分解物をGCで調べた結果を示す図面である。Aは未植菌の場合を示す。BはPURDK2株培養24時間後における分解物のGC解析結果を示す。
【図４】EP1のマススペクトルを示す図面である。
【図５】EP1について同定した構造を示す図面である。
【図６】PURDK2株によるE-MDIの切断部位を解析した結果を図示した図面である。↓はPURDK2株によるウレタン結合切断部位を示す。
【図７】PURDK2株培養上清によるE-MDI分解のGC解析結果を示した図面である。Aは上清添加なしの場合、Bは培養上清1 mLを添加した場合、Cは培養上清5 mLを添加した場合、Dは培養上清10mLを添加した場合、Eは失活させた培養上清10 mLを添加した場合の結果を示す。
【図８】EP2のマススペクトルを示す図面である。
【図９】EP2について同定した構造を示す図面である。
【図１０】PURDK2株の培養上清によるE-MDIの切断部位を解析した結果を図示した図面である。↓はPURDK2株培養上清によるウレタン結合切断部位を示す。
【図１１】ウレア結合を有する樹脂のモデル化合物diphenylmethane-4,4’-dibuthylurea (D-MDI)の構造を示した図面である。□は該化合物が有するウレア結合を示す。
【図１２】D-MDIのGC解析結果を示す図面である。
【図１３】PURDK2株による培養24時間におけるD-MDI分解をGCで調べた結果を示す。Aは未植菌の場合を示す。BはPURDK2株培養24時間後における分解物のGC解析結果を示す。
【図１４】PURDK2株によるD-MDI分解産物のマススペクトルを示す図面である。
【図１５】DP1の分子構造を示す図面である。
【図１６】PURDK2株によるD-MDIの切断部位を解析した結果を図示した図面である。↓はPURDK2株によるウレア結合切断部位を示す。
【図１７】PURDK2株培養上清によるD-MDI分解のGC解析結果を示した図面である。Aは上清添加なしの場合、Bは培養上清1 mLを添加した場合、Cは培養上清5 mLを添加した場合、Dは培養上清10 mLを添加した場合、Eは失活させた培養上清10 mLを添加した場合の結果を示す。
【図１８】PURDK2株培養上清によるD-MDI分解産物のマススペクトルを示す図面である。
【図１９】DP2の分子構造を示す図面である。
【図２０】PURDK2株の培養上清によるD-MDIの切断部位を解析した結果を図示した図面である。↓はPURDK2株の培養上清によるウレア結合切断部位を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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