(57)【要約】      （修正有）【課題】無機物イオン受容体の１またはそれ以上の活性を調節することができる化合物、および無機物イオン受容体活性を調節することによる疾患または障害の治療方法を提供する。【解決手段】次式：2007204482.tif 000036［式中，Ｒ1は，水素またはハロゲンであり；Ｒ2は，水素，ハロゲン，アルキルまたはアルコキシであり；Ｒ3は，水素，ハロゲンまたはアルコキシであり；Ｒ4は，水素またはメチルである］の，またはその２−メトキシフェニル基が１−ナフチル基に置換された化合物またはその薬学的に許容しうるまたは複合体。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式：
【化１】
2007204482.tif 000031
または次式：
【化２】
2007204482.tif 000032
［式中，
Ｒ1は，水素およびハロゲンから選択され；
Ｒ2は，水素，ハロゲン，１−４個の炭素原子のアルキル，少なくとも１つのハロゲンで置換されている１−４個の炭素原子のアルキル，および少なくとも１つのハロゲンで置換されている１−４個の炭素原子のアルコキシから選択され；
Ｒ3は，水素，ハロゲンおよびアルコキシから選択され；
Ｒ4は，水素またはメチルである；
ただし，以下の化合物：
【化３】
2007204482.tif 000033
は除かれる］
の化合物またはその薬学的に許容しうるまたは複合体。
【請求項２】
Ｒ1，Ｒ2およびＲ3の少なくとも２つがフッ素である，請求項１記載の化合物。
【請求項３】
【化４】
2007204482.tif 000034
および
【化５】
2007204482.tif 000035
から選択される，請求項１記載の化合物。
【請求項４】
カルシウム受容体活性を調節するための組成物であって，請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうるまたは複合体を含む組成物。
【請求項５】
カルシウムイオンの異常なレベル、またはカルシウムイオンのレベルによりそのレベルが影響を受ける物質の異常なレベルにより特徴づけられる疾病を有する患者を治療するための組成物であって，請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうるまたは複合体を含む組成物。
【請求項６】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩または複合体を含む，一次および二次副甲状腺機能亢進症を治療するための医薬組成物。
【請求項７】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩または複合体を含む，パジェット病を治療するための医薬組成物。
【請求項８】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩または複合体を含む，高カルシウム血症を治療するための医薬組成物。
【請求項９】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩または複合体を含む，骨粗鬆症を治療するための医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうるまたは複合体を含む，高血圧症を治療するための医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩または複合体を含む，腎性骨形成異常症を治療するための医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩または複合体を含む，血中ＰＴＨレベルを低下させるための医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１−３のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容しうる塩または複合体を含む，血中Ｃａ2+レベルを低下させるための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一またはそれ以上の無機物イオン受容体活性を調節しうる化合物の設計、開発、組成および使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
体内のある種の細胞は、化学シグナルに応答するだけでなく、細胞外カルシウムイオン（Ｃａ2+）のようなイオンにも応答する。細胞外Ｃａ2+（本明細書にて「［Ｃａ2+］」と称する）の濃度の変化はこれらの細胞の機能的応答を変化させる。そのように限定される細胞の一が、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）を分泌する副甲状腺細胞である。ＰＴＨは血液および細胞外流体中のＣａ2+ホメオスタシスを調節する主たる内分泌因子である。
【０００３】
ＰＴＨは、骨および腎細胞で作用することにより、血中のＣａ2+の濃度を増加させる。その時のこの［Ｃａ2+］の増加は、ＰＴＨ分泌を抑制する、負のフィードバックシグナルとして作用する。［Ｃａ2+］とＰＴＨ分泌の間の相互の関係は、身体のＣａ2+ホメオスタシスを維持する不可欠な機構を形成する。
【０００４】
細胞外Ｃａ2+は、副甲状腺細胞に直接作用し、ＰＴＨ分泌を調節する。［Ｃａ2+］の変化を検出する副甲状腺細胞表面蛋白質の存在が確認されている。Ｂｒｏｗｎら、３６６  Ｎａｔｕｒｅ  ５７４、１９９３。副甲状腺細胞において、この蛋白質は細胞外Ｃａ2+に対する受容体（「カルシウム受容体」）として作用し、［Ｃａ2+］の変化を検出し、機能的細胞応答、ＰＴＨ分泌を生じさせる。
【０００５】
細胞外Ｃａ2+は、Ｎｅｍｅｔｈら、１１  Ｃｅｌｌ  Ｃａｌｃｉｕｍ  ３１９、１９９０に概説されているように、異なる細胞機能に対して効果を発揮しうる。傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）および副甲状腺細胞における細胞外Ｃａ2+の役割が、Ｎｅｍｅｔｈ、１１  Ｃｅｌｌ  Ｃａｌｃｉｕｍ  ３２３、１９９０に示されている。これらの細胞は同様のＣａ2+受容体を発現することがわかっている。Ｂｒｏｗｎら、３６６  Ｎａｔｕｒｅ  ５７４、１９９３；Ｍｉｔｈａｌら、９Ｓｕｐｐｌ．１  Ｊ．Ｂｏｎｅ  ａｎｄ  Ｍｉｎｅｒａｌ  Ｒｅｓ．ｓ２８２、１９９４；Ｒｏｇｅｒｓら、９Ｓｕｐｐｌ．Ｊ．Ｂｏｎｅ  ａｎｄ  Ｍｉｎｅｒａｌ  Ｒｅｓ．ｓ４０９、１９９４；Ｇａｒｒｅｔｔら、９Ｓｕｐｐｌ．Ｊ．Ｂｏｎｅ  ａｎｄ  Ｍｉｎｅｒａｌ  Ｒｅｓ．ｓ４０９、１９９４。細胞外Ｃａ2+の破骨細胞に対する役割は、Ｚａｉｄｉ、１０  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ４９３、１９９０に示されている。加えて、ケラチノサイト、糸球体近接細胞、トロホブラスト、膵ベータ細胞および脂肪細胞はすべて、おそらく、これらの細胞のカルシウム受容体の活性化を反映しているであろう細胞外カルシウムの増加に応答する。
【０００６】
種々の化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける細胞外Ｃａ2+の模倣能は、Ｎｅｍｅｔｈらが、（スペルミンおよびスペルミジン）について、"Ｃａｌｃｉｕｍ−Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ"１９８７、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．、３３−３５頁において；Ｂｒｏｗｎらが、（例えば、ネオマイシン）について１２８  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ３０４７、１９９１にて；Ｃｈｅｎらが、（ジルチアゼムおよびその類似体、ＴＡ−３０９０）について５  Ｊ．Ｂｏｎｅ  ａｎｄ  Ｍｉｎｅｒａｌ  Ｒｅｓ．５８１、１９９０にて；Ｚａｉｄｉらが、（ベラパミル）について１６７  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．８０７、１９９０にて示している。Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９およびＮｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９２／０７１７５、国際公開番号ＷＯ９３／０４３７３は、無機物イオン受容体を有する細胞における無機物イオンの作用を調節しうる種々の化合物を記載する。
【０００７】
発明の背景において付与した参考文献は先行文献であるとは認められない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、無機物イオン受容体の１またはそれ以上の活性を調節することができる化合物、および無機物イオン受容体活性を調節することによる疾患または障害の治療方法を提供する。好ましい化合物は、細胞表面のカルシウム受容体に対する細胞外カルシウムの作用を模倣または遮断できる。
【０００９】
無機物イオン受容体活性を調節することにより治療できる疾患または障害は、１またはそれ以上の次の型の疾患または障害：（１）異常な無機物イオンホメオスタシス、特にカルシウムホメオスタシスにより特徴付けられるもの；（２）産生が無機物イオン受容体活性、特にカルシウム受容体活性により影響され得る、異常量の細胞外または細胞内メッセンジャーにより特徴付けられるもの；（３）それ自体が無機物イオン受容体活性、特にカルシウム受容体活性により改良され得る細胞内または細胞外メッセンジャーの異常な効果（例えば、種類または程度の異なる効果）により特徴付けられるもの；および（４）無機物イオン受容体活性、好ましくはカルシウム受容体活性の調節が効果的な作用を発揮する他の疾患または障害、例えば、受容体活性により刺激される細胞内または細胞外メッセンジャーの産生が異常量の異なるメッセンジャーを補う疾患または障害を包含する。分泌および／または効果が無機物イオン受容体活性を調節することにより影響され得る細胞外メッセンジャーの例は、無機物イオン、ホルモン、神経伝達物質、成長因子およびケモカインを包含する。細胞内メッセンジャーの例は、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ＩＰ3およびジアシルグリセロールを包含する。
【００１０】
かくして、本発明の化合物は、好ましくは、カルシウム受容体活性を調節し、カルシウム受容体の１またはそれ以上の活性を調節することにより影響され得る疾患または障害の治療にて用いられる。カルシウム受容体蛋白質は、ある種の限定された細胞に、細胞外Ｃａ2+の濃度の変化に応答する能力を付与する。例えば、細胞外Ｃａ2+は、副甲状腺ホルモンが副甲状腺細胞より分泌することを阻害し、破骨細胞による骨吸収を阻害し、カルシトニンのＣ−細胞からの分泌を刺激する。
【００１１】
好ましい具体例において、該化合物は、異常な骨およびミネラルのホメオスタシス、さらに好ましくはカルシウムのホメオスタシスにより特徴付けられる疾患または障害の治療に用いられる。細胞外Ｃａ2+は厳重なホメオスタシスの調整下にあり、血液凝固、神経または筋肉興奮性、および適当な骨形成などの種々の工程を調整する。異常なカルシウムホメオスタシスは、次の１またはそれ以上の活性：（１）血清カルシウムの異常な増加または減少；（２）カルシウムの尿排泄物における異常な増加または減少；（３）例えば、骨ミネラル密度測定により検査される骨中カルシウム濃度の異常な増加または減少；（４）食物カルシウムの異常な吸収；（５）副甲状腺ホルモンおよびカルシトニンのような血清中カルシウム濃度に影響を及ぼすメッセンジャーの産生および／または放出の異常な増加または減少；および（６）血清中カルシウム濃度に影響を及ぼすメッセンジャーにより惹起される応答の異常な変化；により特徴付けられる。カルシウムホメオスタシスのこれらの異なる態様における異常な増加または減少は、一般母集団にて起こる増加または減少と関連しており、一般に疾患または障害に付随する。
【００１２】
異常なカルシウムホメオスタシスにより特徴付けられる疾患および障害は、不完全なカルシウム受容体活性、カルシウム受容体の不完全な数、またはカルシウム受容体により作用する不完全な細胞内蛋白質などの異なる細胞の欠損によるとすることができる。例えば、副甲状腺細胞中、カルシウム受容体は、順次、サイクリックＡＭＰ産生を阻害するＧi蛋白質に結合する。Ｇi蛋白質における欠損は、サイクリックＡＭＰ産生を阻害するその能力に影響を及ぼし得る。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
かくして、第１の態様にて、本発明は、式：
構造式I
【化１】
2007204482.tif 000002
［式中、Ａｒ1は、所望により、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、Ｎ（ＣＨ3）2、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ａｒ2は、所望により、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮおよびアセトキシからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
ｑは０、１、２または３であり；および
ＲはＨまたは低級アルキルのいずれかである］
で示される無機物イオン受容体調節化合物またはその医薬塩もしくは複合物を提供する。
【００１４】
本発明の化合物は好ましい立体化学構造を有する。構造式Ｉに示されるＣＨ3はキラル中心にあり、α−（Ｒ）−メチル構造を提供する。ＲがＣＨ3である場合、構造式Ｉに示されるＲもまたキラル中心にあり、（Ｒ）−メチル構造を提供する。かくして、ＲがＣＨ3である場合、構造式Ｉの化合物は（Ｒ，Ｒ）−立体化学構造を有する。
【００１５】
無機物イオン受容体活性は、無機物イオン受容体活性化の結果として得られるプロセスである。かかるプロセスは、細胞内または細胞外メッセンジャーとして作用しうる分子の産生を含む。
【００１６】
無機物イオン受容体調節化合物は、イオノミメティック（ｉｏｎｏｍｉｍｅｔｉｃ）、イオノライティック（ｉｏｎｏｌｙｔｉｃ）、カルシミメティック（ｃａｌｃｉｍｉｍｅｔｉｃ）およびカルシライティック（ｃａｌｃｉｌｙｔｉｃ）を包含する。イオノミメティックは、無機物イオン受容体に結合し、無機物イオン受容体で無機物イオンの作用を模倣する（すなわち、喚起または強化する）化合物である。好ましくは、該化合物は１またはそれ以上のカルシウム受容体活性に影響を及ぼす。カルシミメティックは、１またはそれ以上の受容体活性に影響を及ぼし、カルシウム受容体に結合するイオノミメティックてある。
【００１７】
イオノライティックは無機物イオン受容体に結合し、無機物イオン受容体で無機物イオンにより誘起される１またはそれ以上の活性を遮断する（すなわち、阻害または減らす）化合物である。好ましくは、該化合物は１またはそれ以上のカルシウム受容体活性に影響を及ぼす。カルシライティックは、細胞外カルシウムにより喚起される１またはそれ以上のカルシウム受容体活性を遮断し、カルシウム受容体に結合するイオノライティックである。
【００１８】
イオノミメティックとイオノライティックは、天然無機物イオンリガンドが結合するのと同じ受容体部位で結合してもよく、または異なる部位（例、アロステリック部位）で結合しうる。例えば、カルシウム受容体に結合するＮＰＳ  Ｒ−４６７はカルシウム受容体活性をもたらし、かくしてＮＰＳ  Ｒ−４６７はカルシミメティックと分類される。しかしながら、ＮＰＳ  Ｒ−４６７は細胞外カルシウムよりも異なる部位（すなわち、アロステリック部位）でカルシウム受容体に結合する。
【００１９】
化合物の効力の測定は、その化合物についてのＥＣ50またはＩＣ50を計算することにより測定できる。ＥＣ50は５０％の最大模倣作用を生じさせる化合物の濃度である。ＩＣ50は５０％の最小遮断作用を生じさせる化合物の濃度である。カルシウム受容体での化合物についてのＥＣ50およびＩＣ50は、カルシウム受容体での１またはそれ以上の細胞外カルシウムの活性を検定することにより測定することができる。ＥＣ50およびＩＣ50を測定するための検定法が、例えば、Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９およびＮｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９２／０７１７５、国際公開番号ＷＯ９３／０４３７３に記載されており、それらを出典明示により本明細書の一部とする。かかる検定法は卵母細胞発現検定法であって、カルシウム受容体活性による細胞内カルシウムイオン濃度（［Ｃａ2+］i）の増加を測定することからなる。好ましくは、かかる検定法は、カルシウム受容体の活性に付随する特定のホルモンの放出または阻害を測定する。
【００２０】
無機物イオン受容体を調節する化合物は、好ましくは、特定の細胞の無機物イオン受容体活性を選択的に標的とする。例えば、カルシウム受容体活性の選択的標的化は、所定の濃度の化合物について、別の細胞型よりも１の細胞型のカルシウム受容体活性に対してより大きな作用を発揮する化合物によって達成される。特異な効果は、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏで測定した場合に１０倍またはそれ以上であることが好ましい。その特異な効果をｉｎ  ｖｉｖｏにて測定することがより好ましく、化合物の濃度を血漿中濃度または細胞外流体濃度として測定し、測定された効果が血漿中カルシトニン、副甲状腺ホルモンまたは血漿中カルシウムなどの細胞外メッセンジャーの産生である。例えば、好ましい具体例において、化合物は、選択的にカルシトニン分泌物よりもＰＴＨ分泌物を標的とする。
【００２１】
好ましくは、本発明の化合物は、カルシウム受容体で、後記する一の検定法を用いて、５μＭ以下、さらにより好ましくは１μＭ、１００ｎＭ、１０ｎＭまたは１ｎＭ以下のＥＣ50またはＩＣ50を有するカルシミメティックまたはカルシライティックのいずれかである。該検定法がヒト副甲状腺カルシウム受容体を発現する核酸で形質転換され、フラ（ｆｕｒａ）−２を負荷したＨＥＫ２９３細胞にて細胞内Ｃａ2+を測定することがさらに好ましい。ＥＣ50またはＩＣ50が低いほど、低濃度の化合物をｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏにて用いることが可能であるため、それらは低いほど有利である。ＥＣ50およびＩＣ50の低い化合物の発見は、類似または改良された効能、効果および／または選択性を有するさらなる化合物の設計および合成を可能とする。
【００２２】
本発明の別の態様は、式：
構造式II
【化２】
2007204482.tif 000003
［式中、Ａｒ3は、所望により、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、Ｎ（ＣＨ3）2、アセチル、エチレンジオキシからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ａｒ4は、所望により、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮおよびアセトキシからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ｒ8 は水素またはフェニルのいずれかであり；
Ｒ9 は水素またはメチルのいずれかであり；および
Ｒ10は水素、メチルまたはフェニルのいずれかを意味する］
で示される無機物イオン受容体調節化合物またはその医薬上許容される塩および複合体を特徴とする。
【００２３】
本発明の別の態様は、式：
構造式III
【化３】
2007204482.tif 000004
［式中、Ａｒ5は、所望により、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシ、−ＣＨ＝ＣＨ−フェニルからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ａｒ6 は、所望により、アセチル、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、カルボメトキシ、ＯＣＨ2Ｃ（Ｏ）Ｃ2Ｈ5およびアセトキシからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ｒ11は水素またはメチルであり；および
Ｒ12は水素またはメチルを意味する］
で示される無機物イオン受容体調節化合物を特徴とする。
【００２４】
本発明の別の態様は、本明細書に記載の無機物イオン受容体調節化合物および生理学上許容される担体からなる医薬組成物を特徴とする。「医薬組成物」は哺乳動物、好ましくはヒトに投与するのに適する組成物をいう。好ましくは、医薬組成物は、十分な量のカルシウム受容体調節化合物を適当な医薬形態にて含有し、ヒトに治療効果を発揮する。
【００２５】
投与するのに適当な形態に関する重要性は、当該分野にて知られており、毒性作用、溶解性、投与経路および維持活性を包含する。例えば、血流中に注射される医薬組成物が適当である。
【００２６】
医薬組成物はまた、その医薬上許容される塩（例えば、酸付加塩）および複合体として処方することができる。かかる塩の調製は、生理学的作用の発揮を妨げることなく、その物理特性を変えることにより、化合物の薬理学的使用を容易にすることができる。
【００２７】
本発明の別の態様は、本明細書に記載の無機物イオン受容体調節化合物を用い、無機物イオン受容体活性を調節することによって患者を治療する方法を特徴とする。該方法は、治療学的に有効な量の無機物イオン受容体調節化合物を含有する医薬組成物を患者に投与することからなる。好ましい具体例において、疾患または障害が、治療学的に有効な量のカルシウム受容体調節化合物を患者に投与することでカルシウム受容体活性を調節することにより治療される。
【００２８】
無機物イオン受容体調節化合物および該化合物含有の組成物を用いて患者を治療することができる。「患者」は、無機物イオン受容体の調節が効果的な作用を有するであろう哺乳動物をいう。無機物イオン受容体の調節を含む治療の必要性のある患者は、医療業における者に公知の標準技法を用いて識別され得る。
【００２９】
好ましくは、患者は、１またはそれ以上の次の：（１）異常な無機物イオンホメオスタシス、さらに好ましくは、異常なカルシウムホメオスタシス；（２）その産生または分泌が無機物イオン受容体活性により影響を受ける、さらに好ましくはカルシウム受容体活性により影響を受けるメッセンジャーの異常なレベル；
および（３）その機能が無機物イオン受容体活性により影響を受ける、さらに好ましくはカルシウム受容体活性により影響を受けるメッセンジャーの異常なレベルまたは活性；により特徴付けられる疾患または障害を有するヒトである。
【００３０】
異常なカルシウムホメオスタシスにより特徴付けられる疾患は、副甲状腺機能亢進症、骨粗鬆症および他の骨およびミネラル関連障害など（例えば、"Ｈａｒｒｉｓｏｎ'ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ"のような標準的な医学書に記載されているような障害）を包含する。かかる疾患は、１またはそれ以上のカルシウム受容体における細胞外Ｃａ2+の効果を模倣または遮断し、それによって直接または間接的に患者の体内における蛋白質または他の化合物の濃度に影響を及ぼす、カルシウム受容体調節化合物を用いて治療される。
【００３１】
「治療学的に有効な量」とは、患者における疾患または障害の１またはそれ以上の徴候をある程度まで緩解する；または疾患もしくは障害に付随するまたは起因する１またはそれ以上の生理学的もしくは生化学的パラメーターを部分的または完全に正常に戻す、化合物の量を意味する。
【００３２】
好ましい具体例において、患者は、１またはそれ以上のカルシウム受容体調節成分のレベルが異常であることで特徴付けられる疾患または障害を有し、該化合物は、副甲状腺細胞、破骨細胞、傍糸球体腎細胞、近位細管腎細胞、遠位細管腎細胞、中枢神経系細胞、末梢神経系細胞、ヘレンわなの太い上行リムおよび／または収集管の細胞、表皮ケラチノサイト、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）、腸細胞、血小板、血管平滑筋細胞、心房細胞、ガストリン分泌細胞、グルカゴン分泌細胞、腎メサンギウム細胞、乳房細胞、ベータ細胞、脂肪細胞、免疫細胞、ＧＩ管細胞、皮膚細胞、副腎細胞、下垂体細胞、視床下部細胞および脳弓下（ｓｕｂｆｏｒｎｉｎａｌ）器官の細胞からなる群より選択される細胞のカルシウム受容体に対して活性である。
【００３３】
さらに好ましくは、細胞は、副甲状腺細胞、中枢神経系細胞、末梢神経系細胞、ヘレンわなの太い上行リムおよび／または腎収集管の細胞、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）、腸細胞、ＧＩ管細胞、下垂体細胞、視床下部細胞および脳弓下器官の細胞からなる群より選択される。
【００３４】
好ましい具体例において、該化合物は副甲状腺細胞のカルシウム受容体に対して作用するカルシミメティックであり、患者の血清中の副甲状腺ホルモンのレベルを減少させる。さらに好ましくは、該レベルは血漿中Ｃａ2+の減少を生じさせるのに十分な程度まで下げられる。最も好ましくは、副甲状腺ホルモンレベルを正常なヒトにあるレベルまで下げる。
【００３５】
別の好ましい具体例において、該化合物は副甲状腺細胞のカルシウム受容体に対して作用するカルシライティックであり、患者の血清中の副甲状腺ホルモンのレベルを増加させる。さらに好ましくは、該レベルは患者の骨ミネラル密度の増加を生じさせるのに十分な程度まで上げられる。
【００３６】
かかる治療を必要とする患者は、血液または尿分析のような標準的医療技術、例えば、その産生または分泌が無機物イオンの濃度の変化により影響を受ける蛋白質の不足を検出することにより、または無機物イオンホメオスタシスに影響する無機物イオンまたはホルモンの異常なレベルを検出することにより識別することができる。
【００３７】
いろんな例がこの出願を通して使用されている。これらの例示は何ら本願発明を限定するものではない。
【００３８】
本願発明の他の特徴および利点は、以下の図面、発明の詳細な記載、実施例および請求の範囲より明らかであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３９】
本発明は、１またはそれ以上の無機物イオン受容体活性を調節できる化合物、好ましくは無機物イオン受容体を有する細胞に対する細胞外イオンの作用を模倣または遮断する化合物を特徴とし、さらに好ましくは、細胞外イオンはＣａ2+であり、その作用はカルシウム受容体を有する細胞に対するものである。カルシウム活性、カルシウム受容体および／またはカルシウム受容体調節化合物に関連する刊行物は以下のものを包含する：Ｂｒｏｗｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３６：５７４、１９９３；Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９；Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９２／０７１７５、国際公開番号ＷＯ９３／０４３７３；ＳｈｏｂａｃｋおよびＣｈｅｎ、Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒａｌ  Ｒｅｓ．９：２９３（１９９４）；およびＲａｃｋｅら、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３３３：１３２、（１９９３）。これらの刊行物は本願発明の先行文献であるとは認められない。
【００４０】
Ｉ．カルシウム受容体
カルシウム受容体は種々の型の細胞にあり、種々の型の細胞にて異なる活性を有し得る。カルシウムに対する応答における、次の細胞の薬理学的効果は、カルシウム受容体の存在と一致する；副甲状腺細胞、破骨細胞、傍糸球体腎細胞、近位細管腎細胞、遠位細管腎細胞、中枢神経系細胞、末梢神経系細胞、ヘレンわなの太い上行リムおよび／または収集管の細胞、表皮ケラチノサイト、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）、腸細胞、血小板、血管平滑筋細胞、心房細胞、ガストリン分泌細胞、グルカゴン分泌細胞、腎メサンギウム細胞、乳房細胞、ベータ細胞、脂肪細胞、免疫細胞、ＧＩ管細胞、皮膚細胞、副腎細胞、下垂体細胞、視床下部細胞および脳弓下器官の細胞。加えて、副甲状腺細胞、中枢神経系細胞、末梢神経系細胞、ヘレンわなの太い上行リムおよび／または腎収集管の細胞、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）、腸細胞、ＧＩ管細胞、下垂体細胞、視床下部細胞および脳弓下器官の細胞上のカルシウム受容体の存在が物理データにより確認されている。
【００４１】
これらの異なる型の細胞上のカルシウム受容体は異なっていてもよい。１つの細胞が１つの型以上のカルシウム受容体を有することも可能である。カルシウム受容体の活性と異なる細胞由来のアミノ酸配列を比較することで、異なる型のカルシウム受容体が存在することがわかる。例えば、カルシウム受容体は種々の二価および三価のカチオンに応答しうる。副甲状腺カルシウム受容体はカルシウムおよびＧｄ3+に応答する。ところが一方、破骨細胞はカチオンなどの二価のカチオンに応答するが、Ｇｄ3+に応答しない。すなわち、副甲状腺カルシウム受容体は破骨細胞上のカルシウム受容体と薬理学的に異なる。
【００４２】
他方において、副甲状腺細胞およびＣ−細胞にあるカルシウム受容体をコードする核酸配列は、これらの受容体が非常に類似するアミノ酸配列を有することを示す。にもかかわらず，カルシミメティック化合物は薬理学的な違いを示し、副甲状腺細胞およびＣ−細胞にて異なる活性を調節する。かくして、カルシウム受容体の薬理特性は、たとえカルシウム受容体が類似または全く同一の構造を有しているとしても、その薬理特性を示す細胞の型または器官に応じて有意に変わっていてもよい。
【００４３】
カルシウム受容体は、通常、細胞外Ｃａ2+に対する親和性が小さい（通常、約０．５ｍＭよりも大きな見かけのＫd ）。カルシウム受容体は、Ｃｏｏｐｅｒ、ＢｌｏｏｍおよびＲｏｔｈ、"Ｔｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓｏｆ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ"、Ｃｈ．４により定義されているように、遊離または結合したエフェクター機構を有していてもよく、細胞内カルシウム受容体、例えば、カルモジュリンおよびトロパニンと異なる。
【００４４】
カルシウム受容体は細胞外カルシウムレベルの変化に応答する。正確な変化は、個々の受容体および受容体含有の細胞系統に依存する。例えば、副甲状腺細胞のカルシウム受容体に対するカルシウムのｉｎ  ｖｉｔｒｏ作用は、次の作用を包含する：
１．内部カルシウムの増加。その増加は外部カルシウムの流入および／または内部カルシウムの動態化によるものである。内部カルシウムの増加の特徴は、以下のことを包含する：
（ａ）１μＭ  Ｌａ3+または１μＭ  Ｇｄ3+による阻害に対して手に負えない迅速（ピークまでの時間、＜５秒）かつ一時的な［Ｃａ2+］iの増加が、（細胞外Ｃａ2+の不在下で）イオノマイシンで予め処理することにより排除される；
（ｂ）その増加がジヒドロピリジンで阻害されない；
（ｃ）一時的な増加が、１０ｍＭのフッ化ナトリウムで１０分間、予め処理することにより排除される；
（ｄ）一時的な増加が、蛋白質キナーゼＣ（ＰＫＣ）のアクチベーター、例えば、ミリスチン酸酢酸ホルボール（ＰＭＡ）、メゼレインまたは（−）−インドラクタムＶで予め処理することにより減少させられる。蛋白質キナーゼＣアクチベーターの全体の効果は、最大応答に影響を及ぼすことなく、カルシウムの濃度応答曲線を右側にシフトさせることである；
（ｅ）百日咳毒素での前処理（１００ｎｇ／ｍｌ、＞４時間）はその増加に影響を与えない。
【００４５】
２．イノシトール−１，４，５−トリホスフェートまたはジアシルグリセロールの形成の迅速な（＜３０秒）増加。百日咳毒素での前処理（１００ｎｇ／ｍｌ、＞４時間）はこの増加に影響しない。
【００４６】
３．ドーパミンおよびイソプロテレノール刺激のサイクリックＡＭＰ形成の阻害。この効果は百日咳毒素（１００ｎｇ／ｍｌ、＞４時間）での前刺激で遮断される。
【００４７】
４．ＰＴＨ分泌の阻害。百日咳毒素での前処理（１００ｎｇ／ｍｌ、＞４時間）ＰＴＨ分泌の阻害に影響を与えない。
【００４８】
当該分野にて知られている技法を用い、異なる細胞における他のカルシウム受容体に対するカルシウムの作用は容易に測定できる。このような効果は副甲状腺細胞にて観察される内部カルシウムの増加に関する効果と類似しているかもしれない。しかし、その効果は、副甲状腺ホルモン以外のホルモンの放出を惹起または阻害するなどの他の態様で異なると考えられる。
【００４９】
ＩＩ．無機物イオン受容体調節化合物
無機物イオン受容体調節化合物は、１またはそれ以上の無機物イオン受容体活性を調節する。好ましいカルシウム受容体調節化合物は、カルシミメティックおよびカルシライティックである。無機物イオン受容体調節化合物は、特定の活性を有することが証明された化合物（すなわち、リード化合物）の後に、試験される化合物をスクリーンに付すことにより同定できる。
【００５０】
カルシウム受容体活性を測定する好ましい方法は、［Ｃａ2+］iの変化を測定することである。［Ｃａ2+］iの変化は、ヒト副甲状腺カルシウム受容体を発現する核酸を用いて形質導入され、フラ−２を負荷したＨＥＫ２９３を用いることにより；およびカルシウム受容体をコードする核酸を注入したＸｅｎｏｐｕｓ卵母細胞におけるＣｌ- 流の増加を測定することによるなどの種々の方法を用いて測定することができる。（Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９を参照のこと）。例えば、ポリ（Ａ）+ｍＲＮＡは、副甲状腺細胞、破骨細胞、傍糸球体腎細胞、近位細管腎細胞、遠位細管腎細胞、ヘレンわなの太い上行リムおよび／または収集管の細胞、表皮ケラチノサイト、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）、腸細胞、中枢神経系細胞、末梢神経系細胞、血小板、血管平滑筋細胞、心房細胞、ガストリン分泌細胞、グルカゴン分泌細胞、腎メサンギウム細胞、乳房細胞、ベータ細胞、脂肪細胞、免疫細胞、およびＧＩ管細胞などのカルシウム受容体を発現する細胞から得ることができる。好ましくは、核酸は、副甲状腺細胞、Ｃ−細胞または破骨細胞に由来するものである。さらに好ましくは、核酸がカルシウム受容体をコードし、プラスミドまたはベクター上に存する。
【００５１】
好ましい具体例において、カルシウム受容体調節化合物は、破骨細胞によるｉｎ  ｖｉｖｏでの骨吸収を阻害し；破骨細胞でのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの骨吸収を阻害し；Ｃ−細胞からのｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏにおけるカルシトニン分泌を刺激し；ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける副甲状腺細胞からの副甲状腺ホルモン分泌を阻害し、かつｉｎ  ｖｉｖｏにおけるＰＴＨ分泌を減少させ；ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるカルシトニンレベルを上昇させ；またはｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける破骨細胞性骨吸収を遮断し、かつｉｎ  ｖｉｖｏにおける骨吸収を阻害する、カルシミメティックである。
【００５２】
別の好ましい具体例において、カルシウム受容体調節化合物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける副甲状腺細胞からの副甲状腺ホルモンの分泌を喚起し、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける副甲状腺ホルモンのレベルを上昇させるカルシライティックである。
【００５３】
該化合物は、特定の細胞における、好ましくは無機物イオン受容体活性を、さらに好ましくはカルシウム受容体活性を選択的に標的とする。「選択的に」とは、化合物が、所定濃度の化合物について別の型の細胞よりもある型の細胞にて無機物イオン受容体活性に関してより大きな作用を発揮することを意味する。好ましくは、その効果の違いは１０倍またはそれ以上である。好ましくは、濃度とは血漿中濃度をいい、その効果は、血漿カルシトニン、副甲状腺ホルモンまたは血漿カルシウムのような細胞外メッセンジャーの産生で測定される。例えば、好ましい具体例において、該化合物は、カルシトニン分泌よりもＰＴＨ分泌を選択的に標的とする。
【００５４】
他の好ましい具体例において、該化合物は、副甲状腺細胞、破骨細胞、傍糸球体腎細胞、近位細管腎細胞、遠位細管腎細胞、中枢神経系細胞、末梢神経系細胞、ヘレンわなの太い上行リムおよび／または収集管の細胞、表皮ケラチノサイト、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）、腸細胞、血小板、血管平滑筋細胞、心房細胞、ガストリン分泌細胞、グルカゴン分泌細胞、腎メサンギウム細胞、乳房細胞、ベータ細胞、脂肪細胞、免疫細胞、ＧＩ管細胞、皮膚細胞、副腎細胞、下垂体細胞、視床下部細胞および脳弓下器官の細胞からなる群より選択されるすべてではないが、１またはそれ以上の細胞で、５μＭより少ないまたは等しいＥＣ50またはＩＣ50を有する。さらに好ましくは、該細胞は、副甲状腺細胞、中枢神経系細胞、末梢神経系細胞、ヘレンわなの太い上行リムおよび／または腎収集管の細胞、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）、腸細胞、ＧＩ管細胞、下垂体細胞、視床下部細胞および脳弓下器官の細胞からなる群より選択される。この群の細胞におけるカルシウム受容体の存在は、ｉｎ  ｓｉｔｕでのハイブリダイゼーションおよび抗体染色のような物理データにより確認されている。
【００５５】
好ましくは、無機物イオン受容体調節化合物は、該化合物が治療目的を達成するように、無機物イオン受容体を有する細胞に対する細胞外イオンの作用を模倣または遮断する。無機物イオン受容体調節化合物は、異なる型の無機物イオン受容体形態を有する細胞（例えば、正常な無機物イオン受容体、正常な数の無機物イオン受容体、異常な無機物イオン受容体、および異常な数の無機物イオン受容体を有する細胞など）に対して、同じまたは異なる作用を有していてもよい。
【００５６】
カルシウム受容体調節化合物は、好ましくは、カルシウム受容体を有する細胞における細胞外イオンの効果をすべて模倣または遮断する。しかしながら、カルシミメティックが細胞外Ｃａ2+のすべての生物学的活性を有する必要はない。同様に、カルシライティックは細胞外カルシウムにより誘起されるすべての活性を遮断する必要はない。加えて、種々のカルシミメティックおよび種々のカルシライティックは、細胞外Ｃａ2+と同じカルシウム受容体上の部位に結合し、その作用を発揮する必要はない。
【００５７】
無機物調節化合物は、天然リガンドと同じ程度までまたは全く同じ方法にて無機物受容体活性に影響を及ぼす必要はない。例えば、カルシミメティックは、カルシウム受容体で作用するカルシウムと比較して、異なる程度の、異なる期間の、異なる結合部位に結合することにより、または異なる親和性を有することによってカルシウム受容体活性を発揮すればよい。
【００５８】
Ａ．カルシミメティック
１．構造式Ｉの化合物
カルシウム受容体活性を調節できる構造式Ｉの化合物は、以下の式：
【化４】
2007204482.tif 000005
［式中、  Ａｒ1は、所望により、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、Ｎ（ＣＨ3）2、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり、好ましくは、置換基の各々は、ＣＨ3、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ、メチレンジオキシ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3ＣＨ2Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＨ3ＣＨ2、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルおよびアセトキシからなる群より独立して選択される。さらに好ましくは、Ａｒ1は、イソプロピル、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＣＦ3Ｏ、Ｉ、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ3およびＣＨ3、より好ましくはＣＦ3Ｏ、Ｉ、Ｃｌ、ＦおよびＣＦ3からなる群より各々独立して選択される１〜５個の置換基を有するナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ａｒ2は、所望により、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮおよびアセトキシからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；好ましくは、置換基は、各々、ＣＨ3、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ、メチレンジオキシ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3ＣＨ2Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＨ3ＣＨ2、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルおよびアセトキシからなる群より独立して選択される。さらに好ましくは、Ａｒ2は、イソプロピル、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＣＦ3Ｏ、Ｉ、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ3およびＣＨ3、より好ましくはＣＦ3Ｏ、Ｉ、Ｃｌ、Ｆ、ＣＨ3ＯおよびＣＦ3からなる群より、各々、独立して選択される１〜５個の置換基を有するナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
ｑは０、１、２または３であり；および
ＲはＨまたはＣＨ3のいずれかを意味する］
で示される化合物またはその医薬塩もしくは複合物である。
【００５９】
「低級アルキル」は、直鎖または分枝鎖のいずれであってもよい、炭素数１〜４、好ましくは炭素数１〜３の飽和炭化水素をいう。
【００６０】
「低級アルコキシ」は、「Ｏ−低級アルキル」という。ここに、「Ｏ」は低級アルキルに結合している酸素である。
【００６１】
「低級チオアルキル」は、「Ｓ−低級アルキル」をいう。ここに、「Ｓ」は低級アルキルに結合している硫黄である。
【００６２】
「低級ハロアルキル」は、少なくとも１個のハロゲンで置換されている低級アルキルをいう。好ましくは、低級ハロアルキルの末端炭素だけがハロゲンで置換されており、１ないし３個のハロゲンが存在する。より好ましくは、低級ハロアルキルは１個の炭素原子を有する。好ましくは、ハロゲン置換は、ＣｌまたはＦのいずれかである。
【００６３】
「低級ハロアルコキシ」は、「Ｏ−低級ハロアルキル」をいう。ここに、「Ｏ」は低級ハロアルキルに結合した酸素である。
【００６４】
ａ．Ａｒ1およびＡｒ2は、共に、所望により置換されていてもよいフェニルである
好ましい具体例は、Ａｒ1およびＡｒ2が共に所望により置換されていてもよいフェニルであり、本発明の化合物は、以下の式：
【化５】
2007204482.tif 000006
［式中、Ｒは水素またはメチルであり；
ｍは、０、１、２、３、４または５であり；
Ｘは、各々、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、Ｎ（ＣＨ3）2、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシからなる群より独立して選択される。好ましくは、Ｘは、各々、ＣＨ3、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ、メチレンジオキシ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3ＣＨ2Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＨ3ＣＨ2、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルおよびアセトキシからなる群より独立して選択される。さらに好ましくは、Ｘは、各々、イソプロピル、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＣＦ3Ｏ、Ｉ、Ｃｌ、Ｆ、ＣＦ3およびＣＨ3、さらに好ましくはＣＦ3Ｏ、Ｉ、Ｃｌ、ＦおよびＣＦ3からなる群より独立して選択され；
Ｚは、各々、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮおよびアセトキシからなる群より独立して選択される。好ましくは、Ｚは、各々、ＣＨ3、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ、メチレンジオキシ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3ＣＨ2Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、ＣＨ3ＣＨ2、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルおよびアセトキシからなる群より独立して選択される。さらに好ましくは、Ｚは、各々、イソプロピル、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3、Ｉ、Ｃｌ、ＦおよびＣＨ3からなる群より独立して選択される］
で示される。
【００６５】
さらに好ましい具体例において、Ｚ置換基のうち少なくとも１つは、メタ位にある。さらに好ましくは、該化合物は、以下の構造式：
【化６】
2007204482.tif 000007
［式中、Ｒは水素またはメチルであり；
ｍは、０、１、２、３、４または５、好ましくは１または２であり；
Ｘは、各々、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、Ｎ（ＣＨ3）2、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシからなる群より独立して選択され、好ましくは、置換基は、各々、ＣＨ3、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ、メチレンジオキシ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3ＣＨ2Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＨ3ＣＨ2、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルおよびアセトキシからなる群より独立して選択され、さらに好ましくは、イソプロピル、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3、Ｉ、Ｃｌ、ＦおよびＣＨ3からなる群より独立して選択される］
で示される。
【００６６】
さらに好ましくは、該化合物は、式：
【化７】
2007204482.tif 000008
［式中、Ｒは水素またはメチルのいずれかであり；
Ｒ1はハロゲンまたは水素のいずれかであり、好ましくはＲ1はＦまたは水素のいずれかであり；
Ｒ2は水素、ハロゲン、低級アルキル、低級ハロアルキルまたは低級ハロアルコキシであり、好ましくはＲ2は水素、ＣＦ3、ＣＨ3、ＯＣＦ3またはＦのいずれかであり、および
Ｒ3は水素、ハロゲンまたはアルコキシ、好ましくは、Ｒ3はＣｌ、Ｆ、水素またはメトキシ、より好ましくはメトキシである］
で示される。
【００６７】
別のさらに好ましい化合物は；Ｒ1、Ｒ2およびＲ3のうち少なくとも２つがハロゲン、好ましくはＦであり、Ｒが水素またはＣＨ3であり；Ｒが水素またはＣＨ3であり、Ｒ2が低級ハロアルキルまたは低級ハロアルコキシ、好ましくはＯＣＦ3またはＣＦ3であり、Ｒ1およびＲ3が水素であり；およびＲがＣＨ3であり、Ｒ3がハロゲン、好ましくはＣｌであり、Ｒ1がハロゲンまたは水素のいずれか、好ましくはＦまたは水素であり、Ｒ2が水素、低級アルキル、低級ハロアルキルまたは低級ハロアルコキシ、好ましくは水素、ＣＦ3、ＣＨ3、ＯＣＦ3またはＦである。
【００６８】
ｂ．Ａｒ2がナフチルであり、ｑが０である
別の好ましい具体例において、Ａｒ2はナフチルであり、ｑは０であり、化合物は、式：
【化８】
2007204482.tif 000009
［式中、Ａｒ1は、所望により、各々、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、Ｎ（ＣＨ3）2、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシからなる群より独立して選択され、好ましくは、置換基は、各々、ＣＨ3、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ、メチレンジオキシ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3ＣＨ2Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＨ3ＣＨ2、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルおよびアセトキシからなる群より独立して選択される０ないし５個の置換基で置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかである。さらに好ましくは、Ａｒ1は、各々、イソプロピル、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＣＦ3、ＣＦ3Ｏ、Ｉ、Ｃｌ、ＦおよびＣＨ3からなる群より独立して選択される１〜５個の置換基を有するナフチルまたはフェニルのいずれかである。］
で示される。
【００６９】
さらに好ましくは、Ａｒ1は所望により置換されていてもよいフェニルであり、その化合物は、式：
【化９】
2007204482.tif 000010
［式中、Ｘnは前記した所望により置換されていてもよいフェニルについての任意の置換基を意味する（好ましい置換基および置換基の数は前記と同じ）］
で示される。
【００７０】
さらに好ましくは、該化合物は、式：
【化１０】
2007204482.tif 000011
［式中、ＲはＣＨ3または水素のいずれかであり；
Ｒ4は低級アルキル、ハロゲンまたはアルコキシ、好ましくはイソプロピル、塩素またはメトキシであり；および
Ｒ5は水素、低級アルキルまたはハロゲン、好ましくはメチル、ＣＨ3、ＢｒまたはＣｌである］
で示される。
【００７１】
ｃ．Ａｒ2がナフチルであり、ｑが２である
別の好ましい具体例において、Ａｒ1が置換フェニルであり、Ａｒ2がナフチルであり、ｑが２であり、該化合物は式：
【化１１】
2007204482.tif 000012
［式中、Ｒは水素またはＣＨ3のいずれかであり；
ｎは、０、１、２、３、４または５、好ましくは１または２であり；
Ｘは、各々、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、Ｎ（ＣＨ3）2、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシからなる群より独立して選択され、好ましくは、置換基は、各々、ＣＨ3、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ、メチレンジオキシ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3ＣＨ2Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、ＮＯ2、ＣＨ3ＣＨ2、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルおよびアセトキシからなる群より独立して選択され、さらに好ましくは、イソプロピル、ＣＨ3Ｏ、ＣＨ3Ｓ、ＣＦ3Ｏ、ＣＦ3、Ｉ、Ｃｌ、ＦおよびＣＨ3からなる群より独立して選択される］
で示される。
【００７２】
さらに好ましくは、該化合物は、式：
【化１２】
2007204482.tif 000013
［式中、Ｒ6は水素、低級ハロアルキルまたは低級ハロアルコキシのいずれか、好ましくは水素、ＯＣＦ3またはＣＦ3であり；
Ｒ7はハロゲンまたは水素のいずれかであり、好ましくは塩素または水素のいずれかである］
で示される。
【００７３】
他の具体例において、Ｒ、Ｒ6およびＲ7は、（前記した好ましい置換基に関する）記載と同じである；ただし、ＲおよびＲ6の両方が水素である場合、Ｒ7はＣｌ以外の基であり；ＲがＣＨ3である場合、Ｒ6およびＲ7は（前記した好ましい置換基に関する）記載と同じである。
【００７４】
２．構造式ＩＩの化合物
構造式ＩＩの化合物は、式：
【化１３】
2007204482.tif 000014
［式中、Ａｒ3は、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、Ｎ（ＣＨ3）2、アセチルおよびエチレンジオキシ、好ましくはＮ（ＣＨ3）2、低級アルコキシおよび低級アルキルからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で、所望により置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ａｒ4は、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮおよびアセトキシ、好ましくは低級アルコキシ、さらに好ましくはメトキシからなる群より、各々独立して選択される０ないし５個の置換基で、所望により置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ｒ8は水素またはフェニルのいずれか、好ましくは水素であり；
Ｒ9は水素またはメチルのいずれかであり；および
Ｒ10は水素、メチルまたはフェニルのいずれかであり、さらに好ましくは、Ｒ10がメチルである場合、それが結合しているキラル炭素で（Ｒ）立体異性体を形成する。
【００７５】
好ましくは、構造式ＩＩのα−メチルが（Ｒ）−α−メチルである。
【００７６】
３．構造式ＩＩＩの化合物
構造式ＩＩＩの化合物は、式：
【化１４】
2007204482.tif 000015
［式中、Ａｒ3は、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、アセトキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、α，α−ジメチルベンジル、ＮＯ2、ＣＨＯ、ＣＨ3ＣＨ（ＯＨ）、アセチル、エチレンジオキシおよび−ＣＨ＝ＣＨ−フェニル、好ましくは低級アルキル、フェノキシ、−ＣＨ＝ＣＨ−フェニル、ジメチルベンジル、メトキシ、メチレンまたはエチレンからなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で、所望により置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ａｒ6は、アセチル、低級アルキル、ハロゲン、低級アルコキシ、低級チオアルキル、メチレンジオキシ、低級ハロアルキル、低級ハロアルコキシ、ＯＨ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＮ、カルボメトキシ、ＯＣＨ2Ｃ（Ｏ）Ｃ2Ｈ5およびアセトキシ、好ましくはメトキシ、低級アルキル、フェニル、ハロゲン、ＣＦ3、ＣＮ、カルボメトキシまたはＯＣＨ2Ｃ（Ｏ）Ｃ2Ｈ5からなる群より、各々、独立して選択される０ないし５個の置換基で、所望により置換されていてもよいナフチルまたはフェニルのいずれかであり；
Ｒ11は水素またはメチルであり、好ましくはＲ11がメチルである場合、それが結合している炭素で（Ｒ）立体異性体を形成し；および
Ｒ12は水素またはメチルであり、好ましくはＲ12がメチルである場合、それが結合している炭素で（Ｒ）立体異性体を形成する。
【００７７】
４．カルシミメティック活性
カルシウム受容体でＣａ2+の活性を模倣する化合物の活性は、当該分野にて知られており、Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９に記載されている操作を用いて測定できる。例えば、カルシミメティックは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにて副甲状腺細胞について試験した場合に、１またはそれ以上の、好ましくはすべての以下の活性を有する：
１．該化合物は、１μＭ  Ｌａ3+または１μＭ  Ｇｄ3+による阻害に抗療性の細胞内カルシウム濃度の迅速（ピークまでに要する時間＜５秒）かつ一時的な増加を誘起する。［Ｃａ2+］iの増加は細胞外Ｃａ2+がないことを主張するが、イオノマイシンで前処理（細胞外Ｃａ2+の不在下）することで排除される；
２．該化合物は最大下濃度の細胞外Ｃａ2+により誘起される［Ｃａ2+］iの増加を強化する；
３．細胞外Ｃａ2+により誘起される［Ｃａ2+］iの増加はジヒドロピリジンにより阻害されない；
４．該化合物により引き起こされる［Ｃａ2+］iの一時的増加は、１０ｍＭフッ化ナトリウムで１０分間前処理することにより排除される；
５．該化合物で引き起こされる［Ｃａ2+］iの一時的増加は、ミリスチン酸酢酸ホルボール（ＰＭＡ）、メゼレインまたは（−）−インドラクタムＶなどの蛋白質キナーゼＣ（ＰＫＣ）のアクチベーターで前処理することにより減少される。蛋白質キナーゼＣアクチベーターの全作用は、最大応答に影響を与えることなく、化合物の濃度応答曲線を右側にシフトさせることである；
６．該化合物により、イノシトール−１，４，５−トリホスフェートおよび／またはジアシルグリセロールの形成が迅速（＜３０秒）に増加する；
７．該化合物は、ドーパミン−またはイソプロテレノール−刺激のサイクリックＡＭＰ形成を阻害する；
８．該化合物は、ＰＴＨ分泌を阻害する；
９．百日咳毒素（１００ｎｇ／ｍｌ、＞４時間）での前処理は、該化合物のサイクリックＡＭＰ形成に対する阻害効果を遮断するが、［Ｃａ2+］i、イノシトール−１，４，５−トリホスフェートまたはジアシルグリセロールを増加させず、ＰＴＨ分泌を減少させない；
１０．該化合物は、ウシまたはヒト副甲状腺細胞由来のポリ（Ａ）+に富むｍＲＮＡを注入したＸｅｎｏｐｕｓ卵母細胞におけるＣｌ- 流の増加を惹起するが、水または肝ｍＲＮＡを注入したＸｅｎｏｐｕｓ卵母細胞では効果がない；および
１１．同様に、副甲状腺細胞由来のクローン性カルシウム受容体を用いて、該化合物は、該受容体をコードする特異的ｃＤＮＡまたはｍＲＮＡを注入したＸｅｎｏｐｕｓ卵母細胞における応答を惹起する。
【００７８】
利用可能な技法を用いて、種々のカルシウム活性を測定できる。（Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９を参照のこと）。他のカルシウム応答細胞に対する、好ましくはカルシウム受容体でのＣａ2+活性を模倣する化合物の定義は、本明細書の実施例およびＮｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９から明らかである。
【００７９】
好ましくは、本明細書に記載のバイオアッセイにより、またはＮｅｍｅｔｈらのＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９により測定された化合物は、以下の活性のうち、１またはそれ以上の、好ましくはすべての活性を有する：（好ましくは、内部カルシウムを動態化することにより）持続期間が３０秒以下の、内部カルシウムの一時的増加を誘起する活性；３０秒以内に起こる、迅速な［Ｃａ2+］iの増加を誘起する活性；（好ましくは外部カルシウムの流入を生じさせることによる）［Ｃａ2+］iの持続的増加（３０秒以上）を誘起する活性；イノシトール−１，４，５−トリホスフェートまたはジアシルグリセロールレベルの増加を、好ましくは６０秒以内に誘起する活性；およびドーパミン−またはイソプロテレノール−刺激サイクリックＡＭＰ形成を阻害する活性。
【００８０】
［Ｃａ2+］iの一時的増加は、好ましくは、細胞を１０ｍＭフッ化ナトリウムで１０分間前処理することにより排除されるか、またはその一時的増加は、細胞を蛋白質キナーゼＣのアクチベーター、好ましくは、ミリスチン酸酢酸ホルボール（ＰＭＡ）、メゼレインまたは（−）−インドラクタムＶで簡単に前処理することで減少される。
【００８１】
Ｃ．カルシライティック
カルシウム受容体で細胞外カルシウムの活性を遮断する化合物の能力は、本願明細書の開示に基づく標準技法を用いて測定できる。（さらに、Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９を参照のこと）。例えば、副甲状腺細胞に関して用いた場合に、細胞外カルシウムの効果を遮断する化合物は、１またはそれ以上の、好ましくはすべての、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにて副甲状腺細胞で試験した場合における以下の特徴を有する：
１．化合物は、部分的または完全に、高濃度の細胞外Ｃａ2+の：
（ａ）［Ｃａ2+］iを増加させ、
（ｂ）細胞内Ｃａ2+を動態化させ、
（ｃ）イノシトール−１，４，５−トリホスフェートの形成を増加させ、
（ｄ）ドーパミン−またはイソプロテレノール−刺激サイクリックＡＭＰ形成を減少させ、および
（ｅ）ＰＨＴ分泌を阻害する能力を遮断する；
２．化合物は、細胞外Ｃａ2+またはカルシミメティック化合物により惹起されたウシまたはヒトの副甲状腺細胞由来のポリ（Ａ）+−ｍＲＮＡを注入したＸｅｎｏｐｕｓ卵母細胞におけるＣｌ- 流の増加を遮断するが、水または肝ｍＲＮＡを注入したＸｅｎｏｐｕｓ卵母細胞では遮断しない；
３．同様に、副甲状腺細胞からのクローン性カルシウム受容体を用いると、化合物は、細胞外Ｃａ2+またはカルシミメティック化合物により誘起されるカルシウム受容体をコードする特異的ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡまたはｃＲＮＡを注入したＸｅｎｏｐｕｓ卵母細胞における応答を遮断するであろう。
【００８２】
カルシウム応答細胞における、好ましくはカルシウム受容体でのＣａ2+活性を遮断する化合物の定義は、本明細書に記載の実施例およびＮｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９から明らかである。
【００８３】
ＩＩＩ．疾患または障害の治療
カルシウム受容体活性を調節することにより治療することのできる疾患または障害は当該分野において知られている。例えば、カルシウム受容体活性を調節することで治療できる疾患または障害は、カルシウム受容体活性により調節された細胞の機能応答に基づいて同定可能である。カルシウム受容体で調節される細胞の機能応答は、副甲状腺細胞によるＰＴＨ分泌、Ｃ−細胞によるカルシトニン分泌および破骨細胞による骨吸収を含め、当該分野において公知である。
【００８４】
そのような機能応答は、種々の疾患または障害に付随する。例えば、副甲状腺機能亢進症は高レベルの血漿中ＰＴＨをもたらす。ＰＴＨの血漿中レベルの低下は、副甲状腺機能亢進症を治療する有効な手段を付与する。同様に、カルシトニンの血漿中レベルの増加は骨吸収の阻害を伴う。骨吸収の阻害は骨粗鬆症の有効な治療法である。かくして、カルシウム受容体活性を調節して副甲状腺機能亢進症および骨粗鬆症のような障害を治療することができる。
【００８５】
それらの無機物イオン受容体活性、好ましくはカルシウム受容体活性を調節する化合物を用いて、種々の疾患または障害を患っている患者に効果的な作用を付与することができる。例えば、骨粗鬆症は、骨質量が喪失し、骨折の危険性の増加により特徴付けられる年齢関連障害である。化合物を用い、直接的に（例えば、破骨細胞イオノミティック化合物）または内因性カルシトニンレベルを上げることにより間接的に（例えば、Ｃ−細胞カルシミメティック）破骨細胞性骨吸収を遮断することができる。別法として、副甲状腺細胞のカルシウム受容体に対して活性なカルシライティックは、骨形成を刺激する、副甲状腺ホルモンの循環レベルを増加させるであろう。これら３種の解決法はすべて、骨粗鬆症を患っている患者に対して効果的な作用をもたらすであろう。
【００８６】
加えて、ＰＴＨを断続的に低用量で投与することが、骨質量と適当な改骨成の同化作用の効果をもたらすことが知られている。かくして、副甲状腺ホルモンの一時的な増加を誘起する化合物および投与方法（例えば、副甲状腺細胞イオノライティックを断続的に投与する方法）が、骨粗鬆症を患っている患者の骨質量を増加させることができる。
【００８７】
さらなる疾患および障害を、カルシウム受容体活性により調節される疾患または障害に伴うさらなる細胞機能応答を識別することにより同定することができる。他の無機物イオン受容体を調節することにより治療され得る疾患または障害は、類似する方法にて同定され得る。
【００８８】
本発明の無機物イオン受容体調節化合物は、治療効果を最終的に産生する１またはそれ以上の細胞効果を誘起する無機物イオン受容体で効果を発揮し得る。本発明のカルシウム受容体調節化合物は、治療効果を最終的に産生する１またはそれ以上の細胞効果を誘起するカルシウム受容体に対して効果を発揮し得る。種々の疾患が、カルシウム受容体を有する細胞を標的とすることにより、本発明によって治療され得る。
【００８９】
例えば、一次副甲状腺作用亢進症（ＨＰＴ）は、高カルシウム血症および循環ＰＴＨが異常に高いレベルであることで特徴付けられる。主たる型のＨＰＴに付随する欠損は、副甲状腺細胞の感受性が細胞外Ｃａ2+により負のフィードバック調節にまで減少することである。かくして、一次ＨＰＴを患っている患者の組織にて、ＰＴＨ分泌を抑制するのに、正常な濃度よりもより高い濃度の細胞外Ｃａ2+が必要とされるため、細胞外Ｃａ2+についての「セットポイント」は右側にシフトされる。さらにその上、一次ＨＰＴにおいて、高濃度の細胞外Ｃａ2+であっても、しばしば、ＰＴＨ分泌だけを部分的に抑制する。二次（尿毒症）ＨＰＴにおいて、たとえＣａ2+がＰＴＨ分泌を抑制する程度が正常であっても、細胞外Ｃａ2+に関するセットポイントにおいて同様の増加が観察される。ＰＴＨ分泌の変化は［Ｃａ2+］iの変化と平行であり；細胞外Ｃａ2+誘発の［Ｃａ2+］iの増加についてのセットポイントは右側にシフトされ、かかる増加量は押さえられる。
【００９０】
二次ＨＰＴを患っている患者はまた、腎骨異形成症でもある。カルシミメティックが、異常なＰＴＨ分泌およびかかる患者の骨異形成症を治療するのに有用であるのは明らかである。
【００９１】
細胞外Ｃａ2+の作用を模倣する化合物は、一次および二次ＨＰＴの長期管理にて効果的である。かかる化合物は、ＰＴＨ分泌を抑制するのに要求される起動力を付加し、高カルシウム血症だけは目的を達し得ないが、それは高カルシウム血症を緩解する手助けとなる。細胞外Ｃａ2+よりもより大きな効能を有する化合物は、副甲状腺の腺腫により引き起こされる一次ＨＰＴの主たる形態にて特にめんどうであるＰＴＨ分泌の明瞭な抑制できない成分を負かすかもしれない。別法としてまたは付加的に、かかる化合物は、慢性の高カルシウム血症がウシおよびヒトの腺腫副甲状腺組織にてｐｒｅｐｒｏＰＴＨ  ｍＲＮＡのレベルを抑制することが知られているため、ＰＴＨの合成を抑制することができる。慢性の高カルシウム血症もまた、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにて副甲状腺細胞の増殖を抑制する。それで、カルシミメティックはまた、二次ＨＰＴの副甲状腺細胞の増殖特性を制限するのに効果的とすることができる。
【００９２】
副甲状腺細胞以外の細胞は、細胞外Ｃａ2+濃度の生理学的変換に直接応答しうる。例えば、甲状腺の傍濾胞細胞（Ｃ−細胞）からのカルシトニン分泌が細胞外Ｃａ2+の濃度の変化により調節される。
【００９３】
単離された破骨細胞は、細胞内Ｃａ2+の動態化により一部生じる対応する［Ｃａ2+］iの増加と共に細胞外Ｃａ2+の濃度の増加に応答する。破骨細胞における［Ｃａ2+］iの増加は骨吸収の阻害に付随する。アルカリ性ホスファターゼの骨を形成する骨芽細胞からの放出がカルシウムにより直接刺激される。
【００９４】
ＰＴＨ分泌のように、腎臓の傍糸球体細胞からのレニン分泌が、細胞外Ｃａ2+の濃度増加により抑制される。細胞外Ｃａ2+はこれらの細胞における細胞内Ｃａ2+の動態化を引き起こす。他の腎細胞は以下のようにカルシウムに応答する：
Ｃａ2+の増加が近位細管細胞による１，２５（ＯＨ）2−ビタミンＤの形成を阻害し、遠位細管細胞におけるカルシウム結合蛋白質の産生を刺激し、Ｃａ2+およびＭｇ2+の管再吸収およびヘレンわなの太い上行リム（ＭＴＡＬ）上のバソプレシンの作用を阻害し、皮質収集管細胞におけるバソプレシン作用を減少させ、腎糸球体の血管における血管平滑筋細胞に影響を与える。
【００９５】
カルシウムはまた、腸杯状細胞、乳房細胞および皮膚細胞の分化を促進し；心房からの心房性ナトリウム排泄増加性ペプチド分泌を阻害し；ガストリンおよびグルカゴン分泌を変え；血管平滑筋細胞に作用し、血管作動性因子の細胞分泌を修飾し；および中枢神経系および末梢神経系の細胞に影響を及ぼす。
【００９６】
かくして、Ｃａ2+は、細胞内シグナルとしてのその遍在する役割に加えて、また細胞外シグナルとして機能し、ある種の限定された細胞の応答を調節する。本発明の化合物はまた、これらの細胞におけるＣａ2+応答の中断に伴う疾患または障害の治療に用いることができる。
【００９７】
感染細胞に基づき、治療または予防される疾患および障害はまた、発作、卒中、脳損傷、脊髄損傷、心拍停止または胎児仮死におけるような低酸素症誘発の神経系損傷、癲癇、アルツハイマー病、ハンチントン病およびパーキンソン病のような神経変性疾患、痴呆、筋肉張力、鬱病、不安、パニック症、強迫障害、外傷後ストレス障害、精神分裂症、神経弛緩性悪性症候群およびトウレット症候群；不適当なＡＤＨ分泌（ＳＩＡＤＨ）の症候群などの過剰量の水の再吸収、硬変、うっ血性心不全およびネフローゼを包含する疾患；高血圧症；カチオン性抗生物質（例えば、アミノグリコシド抗生物質）を妨げおよび／または減少させる腎毒性；下痢および痙攣性結腸などの腸運動性障害；ＧＩ潰瘍疾患；サルコイドーシスなどの過剰なカルシウム吸収を伴うＧＩ疾患；および自己免疫疾患および器官移植拒絶反応のような中枢神経系の疾患等を包含する。
【００９８】
本発明のカルシウム受容体調節化合物は、典型的には、ヒト患者を治療するのに用いられるが、他の霊長類などの温血動物種、例えば、ブタ、ウシおよび家禽類などの家畜動物、およびウマ、イヌおよびネコなどのスポーツ動物およびペットなどにおける類似するまたは同一の疾患に用いることもできる。
【００９９】
ＩＶ．投与法
本発明に係る種々の化合物を用い、無機物イオン受容体活性を、特にカルシウム受容体活性を調節することにより、種々の疾患または障害を治療することができる。本発明の化合物は、全身性および局所性投与を包含する。種々の投与方法のために処方することができる。技法および処方は、一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、ペンシルベニア州、イーストンに記載されている。イオノミメティックおよびイオノライティックの投与は、Ｎｅｍｅｔｈらにより、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９に記載されている。
【０１００】
適当な投与形は、いくぶん、用途または投与経路、例えば、経口的、経皮的または注射によるかに依存する。そのような投与形は、標的細胞が多細胞宿主にあるのかまたは媒体にあるかで、該化合物を標的とする細胞に到達させることを可能とするものでなければならない。例えば、血流中に注射される医薬化合物または組成物は可溶性でなければならない。当該分野にて他のファクターが公知であり、毒性および化合物または組成物がその効果を発揮することを遅らせる投与形などの事柄が挙げられる。
【０１０１】
化合物はまた、医薬上許容される塩（例えば、酸付加塩）およびその複合体として処方され得る。医薬上許容される塩は、その塩を投与する濃度で非毒性の塩である。かかる塩の調製は、その生理学的効果を発揮することを妨げることなく、化合物の物理的特徴を変えることで薬理学的使用を促進することができる。物理的特性を有用に変形することは、融点を下げて粘膜を介する投与を容易にすること、溶解性を上げて高濃度の薬の投与を容易にすることを包含する。
【０１０２】
医薬上許容される塩は、酸付加塩、例えば硫酸塩、塩酸塩、マレイン酸塩、リン酸塩、スルファミン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩およびキニン酸塩を含有するものを包含する。（例えば、出典明示により本明細書の一部とする、ＰＣＴ／ＵＳ９２／０３７３６を参照のこと）。医薬上許容される塩は、塩酸、マレイン酸、硫酸、リン酸、スルファミン酸、酢酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキシルスルファミン酸およびキニン酸のような酸から得ることができる。
【０１０３】
医薬上許容される塩は標準的技法により調製され得る。例えば、遊離塩基の形態の化合物を適当な溶媒、例えば適当な酸を含有する水性溶液または水性アルコール溶液に溶かし、その溶液を蒸発させることにより単離される。他に、例えば、遊離塩基を、有機溶媒中、酸と反応させることにより塩を調製する。
【０１０４】
さらに、担体または賦形剤を用いて化合物の投与を容易にすることができる。担体および賦形剤の例は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、ラクトース、グルコースまたはシュークロースなどの種々の糖類、または澱粉の型、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油、ポリエチレングリコールおよび生理学上融和される溶媒を包含する。組成物または医薬組成物は、静脈物、腹腔内、皮下および筋肉内、経口、局所または経粘膜を包含する種々の経路により投与できる。
【０１０５】
全身性投与の場合、経口投与が好ましい。別法として、例えば、筋肉内、静脈内、腹腔内および皮下注射を用いてもよい。注射では、本発明の化合物を液体溶液、好ましくは生理学上融和されるバッファー、例えばハンク（Ｈａｎｋ）溶液またはリンガー（Ｒｉｎｇｅｒ）溶液に処方する。加えて、該化合物を固体形に処方し、使用する直前に再び溶かすか、または懸濁させてもよい。凍結乾燥形もまた、製造することができる。
【０１０６】
全身性投与はまた、経粘膜または経皮的手段を介して行うか、または該化合物は経口投与することができる。経粘膜または経皮投与の場合、浸透させるバリアーに適当な浸透剤を処方に用いる。かかる浸透剤は、一般に、当該分野にて知られており、例えば、経粘膜投与では、胆汁塩およびフシジン酸誘導体を包含する。加えて、洗浄性のある薬剤を用いて透過を促進してもよい。経粘膜投与は、例えば、経鼻スプレーを介して、または坐剤を用いて行うことができる。経口投与の場合、化合物を、カプセル、錠剤および液体調製物のような通常の経口投与用の投与形に処方できる。
【０１０７】
局所投与の場合、本発明の化合物を、当該分野にて一般に知られている、軟膏、ゲルまたはクリームに処方できる。
【０１０８】
投与されるべき本発明の種々の化合物の量は、標準的操作により測定され得る。一般に、治療学上有効な量は、化合物のＥＣ50またはＩＣ50に、患者の年齢および大きさ、その患者に関連する疾患または障害に応じて、化合物が約１ナノモルと３マイクロモルの、好ましくは０．１ナノモルと１マイクロモルの間にある。一般に、その量は、治療されるべき動物の体重１ｋｇ当たり、約０．１と５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．０１と２０ｍｇ／ｋｇである。
【実施例】
【０１０９】
以下に実施例を挙げて、本発明の種々の態様および具体例を説明する。これらの例は請求項に記載した発明を限定するものではない。
【０１１０】
実施例１：ヒト副甲状腺腺腫腫瘍からのヒト副甲状腺カルシウム受容体のクローニング
本実施例は、ｐＢｏＰＣａＲ１をハイブリダイゼーション・プローブとして使用する（Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９）、ヒト副甲状腺腺腫腫瘍からのヒト副甲状腺カルシウム受容体のクローニングを記載する。このプローブは、低ストリンジェンシー（ｓｔｒｉｎｇｅｎｃｙ）での交差ハイブリダイゼーションにより、ヒト副甲状腺カルシウム受容体をコードする核酸を同定するために使用した。
【０１１１】
診断した３９歳の原発性副甲状腺亢進症の白人男性から摘出したヒト副甲状腺腺腫腫瘍からメッセンジャーＲＮＡを調製した。ハイブリダイゼーション・プローブとしてｐＢｏＰＣａＲ１を使用するこのｍＲＮＡのノーザンブロット分析が、約５ｋｂおよび約４ｋｂのカルシウム受容体トランススクリプト（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ）を同定した。該ｍＲＮＡからｃＤＮＡライブラリーを構築した。３ｋｂｐより大きな二本鎖ｃＤＮＡをアガロースゲル上でサイズ選択し、クローニングベクター、ラムダＺａｐＩＩと連結した。ハイブリダイゼーション・プローブであるｐＢｏＰＣａＲ１の５．２ｋｂｐ  ｃＤＮＡインサートにより、５０万の初代組み替えファージをスクリーニングした。該ｐＢｏＰＣａＲ１インサートを、１×１０9 ｃｐｍ／μｇの比活性に32Ｐ−ｄＣＴＰを用いるランダム感作（ｒａｎｄｏｍ−ｐｒｉｍｅｄ）合成によりラベルした。
【０１１２】
３８℃にてハイブリダイゼーション・ストリンジェンシー４００ｍＭ  Ｎａ+、５０％ホルムアルデヒドでライブラリー・スクリーニングを行った。プラーク・リフト・フィルターを５００，０００ｃｐｍ／ｍｌのプローブ濃度で２０時間ハイブリダイズさせた。ハイブリダイゼーションの後、フィルターを４０℃にて１×ＳＣＣで１時間洗浄した。
【０１１３】
一次スクリーニングにより、ｐＢｏＰＣａＲ１にハイブリダイズする約２５０の陽性クローンを同定した。二次および三次スクリーニングを経て、これらのクローンから７つのクローンを取り、ｐＢｏＰＣａＲ１プローブとハイブリダイズする単一のクローンを単離した。これら７つのクローンを、制限酵素マッピングおよびサザンブロット分析により分析した。これらのクローンのうちの３つが、該５ｋｂ  ｍＲＮＡに相当する完全長のクローンと思われる約５ｋｂｐのｃＤＮＡインサートを含んでいた。該クローンのうちの２つが該４ｋｂ  ｍＲＮＡに相当する完全長のクローンと思われる約４ｋｂｐのｃＤＮＡインサートを含んでいた。
【０１１４】
２つの異なるサイズのインサートの制限酵素マッピングは、それらの５'末端で同様な配列の領域を有するが、３'末端配列では異なることを示している。ＤＮＡ配列分析は、該小さい方のインサートが、該大きい方のインサートで用いたポリアデニレーション部位の上流の、別のポリアデニレーションから生じうることを示している。
【０１１５】
両方のクラスの代表的なｃＤＮＡインサートを、プラスミドベクターｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ  ＳＫにサブクローンした。線形化、ついでＴ７ＲＮＡポリメラーゼを用いるｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写によりｃＲＮＡトランススクリプトを製造した。ｃＲＮＡトランススクリプトを機能分析のため、アフリカツメガエル（Ｘｅｎｏｐｕｓ）卵母細胞に注入した（１５０ｎｇ／μｌ  ＲＮＡ；５０ｎｌ／卵母細胞）。２〜４日のインキュベーション期間の後、機能性カルシウム受容体の存在について卵母細胞を検定した。両方のクローンタイプ共、適宜なカルシウム受容体作用剤の添加によるカルシウム−活性化塩化物電流の刺激によって評価される機能性カルシウム受容体を生じた。ＮＰＳ、Ｒ−４６７およびＮＰＳ  Ｒ−４６７を包含する公知のカルシウム受容体作用剤（Ｎｅｍｅｔｈら、ＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２、国際公開ＷＯ９４／１８９５９参照）は、自然の副甲状腺細胞受容体に有効であると知られていると同様な濃度において、卵母細胞発現受容体を活性化した。かくして、両方のクローンは、機能性な、ヒト副甲状腺細胞カルシウム受容体をコードする。
【０１１６】
各々のサイズクラスのインサートをｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔにサブクローニングし、これによりｐＨｕＰＣａＲ５．２およびｐＨｕＰＣａＲ４．０を調製する。インサートの核酸配列およびアミノ酸配列を配列表のＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ．１−４に示す。
【０１１７】
２つのｃＤＮＡインサートの核酸配列の間には、幾つかの相違が見られた。２つのｃＲＮＡインサートの配列分析は、別々のポリアデニレーションから由来し得る３'非翻訳領域に少なくとも２つの配列の異なる変種が存在することを示している。さらに、インサートの５'末端に配列相違が存在する。これらの異なる配列は、非翻訳領域に相当し、異なる転写開始および／またはスプライシングにより生じ得る。
【０１１８】
ｃＤＮＡクローンｐＨｕＰＣａＲ５．２およびｐＨｕＰＣａＲ４．０のコード領域中に配列変形のさらなる３つの部位が見られ（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ．１−４参照）、これらのｃＤＮＡクローンが異なる蛋白をコードすることを示している。ヒトＣａＲ遺伝子の配列分析は、ｐＨｕＰＣａＲ４．０ｃＤＮＡクローンと比較して、ｃＤＮＡクローンｐＨｕＰＣａＲ５．２における、さらなるＤＮＡの３０塩基対が別のｍＲＮＡスプライシングから由来していることを示している。該別のｍＲＮＡスプライシングは、ｐＨｕＰＣａＲ４．０ｃＤＮＡによってコードされるポリペプチドのアミノ酸５３６およびアミノ酸５３７の間の部位に、ｐＨｕＰＣａＲ５．２ｃＤＮＡによってコードされるＣａＲポリペプチドへ１０個のさらなるアミノ酸を挿入することが予測される。加えて、ｐＨｕＰＣａＲ４．０はアミノ酸９２５にグルタミン（Ｇｌｎ）および９９０位のグリシン（Ｇｌｙ）をコードするが、ｐＨｕＰＣａＲ５．２は両方の同じ位置にアルギニン（Ａｒｇ）をコードする。ヒトＣａＲ遺伝子は、これらの位置に、各々、ＧｌｎおよびＡｒｇをコードする。ヒトＤＮＡと比較したｐＨｕＰＣａＲ４．０ｃＤＮＡの差は、ヒト集団内の真の配列多型性を表しており、一方、ｐＨｕＰＣａＲ５．２における１つの塩基の変化は、多分、クローニング中に起こった突然変異を反映しているものと思われる。両方のｃＤＮＡは、これらのｃＤＮＡクローンから調製されたｃＲＮＡを注入したアフリカツメガエル卵母細胞の、Ｃｌ- コンダクタンスによって確認される１０ｍＭ細胞外カルシウムに対する応答能力によって示される機能性カルシウム受容体をコードする。しかしながら、これらの２つの受容体イソフォーム（ｉｓｏｆｏｒｍ）は、機能的および／または薬理学的に異なっている。
【０１１９】
実施例２：カルシウム受容体を発現する安定な組み換え細胞の選択
２つのヒトおよびウシカルシウム受容体を安定に発現するクローン細胞株を単離した。カルシウム受容体ｃＤＮＡを、２つの異なる、商業的に入手可能な発現ベクター、ｐＭＳＧ（ファルマシアより入手）およびＣｅｐ４Ｂ（インビトロゲンより入手）中でサブクローンした。第１のベクターは、キサンチン−グアニジンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ｇｐｔ）に対する選択マーカー遺伝子を含み、安定にトランスフェクションした細胞が、２μｇ／ｍｌアミノプテリンおよび２５μｇ／ｍｌミコフェノール酸の添加により課したプリン生合成経路の遮断を克服できるようにしている。第２のベクターは、抗生物質ハイグロマイシン（ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ、２００μｇ／ｍｌで使用）に対して耐性を与える遺伝子をコードする。ＨｕＰＣａＲ５．２およびＨｕＰＣａＲ４．０ｃＤＮＡ（各々、ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ．１−４）を、ＮｏｔＩおよびＨｉｎｄＩＩＩ制限酵素で、親Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔプラスミドから離し、直接ＮｏｔＩ＋ＨｉｎｄＩＩＩ消化Ｃｅｐ４Ｂと連結するか、ＳｍａＩ消化ｐＭＳＧへ平滑末端連結する前にＤＮＡポリメラーゼのクレノウフラグメントで処理する。
【０１２０】
ＨｕＰＣａＲ５．２インサートを含むｐＭＳＧサブクローンを、上記したようにＣＨＯ細胞にトランスフェクションする。２０個の耐性クローンを選択し、特徴付けする。ＨｕＰＣａＲ５．２インサートを含むＣｅｐ４Ｂサブクローンを、以下に記載するごとく、ＨＥＫ２９３細胞にトランスフェクションした。ハイグロマイシンを用いる選択は安定なクローンのプールをもたらした。ＨｕＰＣａＲ４．０受容体イソフォームを発現するクローンを同様に調製した。
【０１２１】
ＨｕＰＣａＲ５．２インサートを含有するＣｅｐ４Ｂでトランスフェクションしたハイグロマイシン選択ＨＥＫ２９３細胞のプールから得られた細胞を、１２ウエル組織培養プレートの各ウエルに入れたコラーゲン被覆アクラー（Ａｋｌａｒ）スクエア上に塗布する。２〜６日後、培地を除き、細胞を平衡塩溶液および１μＭフラ２−ＡＭ、１ｍＭ  ＣａＣｌ2および０．１％ＢＳＡを含む緩衝液および１ｍＭ  ＣａＣｌ2で洗浄した。カルシウム受容体作用剤に応じた蛍光の測定を、３４０および５１０ｎｍの励起および発光波長を用いる分光蛍光法で、３７℃にて行った。シグナル較正のため、イオノマイシン（ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ、４０μＭ）添加後のＦｍａｘを測定し、０．３Ｍ  ＥＧＴＡ、２．５Ｍ  トリス−ＨＣｌ、ｐＨ１０添加により、見かけのＦｍｉｎを測定した。［Ｃａ2+］iの強い増加が、つぎのカルシウム受容体作用剤：Ｃａ2+（１０ｍＭ）、Ｍｇ2+（２０ｍＭ）およびＮＰＳ  Ｒ−４６７の添加に応じて観察された。機能性物質Ｋ受容体発現対照細胞は、これらの擬カルシウム化合物に応答しなかった。ｐＨｕＰＣａＲ４．０配列でトランスフェクションしたＨＥＫ２９３細胞のさらなるクローン単離物を得た。これらについて、上記と同様に、ただし、細胞を懸濁させて擬カルシウム化合物に対する応答をテストした。
【０１２２】
実施例３：フラ−２負荷副甲状腺細胞を使用するカルシウム受容体活性測定
本実施例は、ウシおよびヒトからの副甲状腺細胞の取得操作およびカルシウム受容体活性測定のための該副甲状腺細胞の使用を記載する。
【０１２３】
地元の屠殺場で屠殺し、ＮａＣｌ  １２６ｍＭ、ＫＣｌ  ４ｍＭ、ＭｇＣｌ2１ｍＭ、Ｎａ−ＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭ、ｐＨ７．４、グルコース５．６ｍＭおよび変動する量のＣａＣｌ2、例えば、１．２５ｍＭを含む氷冷副甲状腺細胞緩衝液（ＰＣＢ）中で実験室に運んだ新鮮なウシ（１２〜１５週令）から副甲状腺を得た。ヒト副甲状腺は、初発性または尿毒性上皮小体亢進（尿毒性ＨＰＴ）のため、副甲状腺組織を外科的に摘出した患者から得、ウシ組織と同様に取り扱った。
【０１２４】
副甲状腺から過剰の脂肪および結合組織を除き、鋭いハサミで一辺が約２〜３ｍｍのキューブ状に細刻した。コラゲナーゼ消化によりバラバラの副甲状腺細胞を調製し、パーコール緩衝液中で遠心分離して清浄にした。得られた副甲状腺細胞調製物を、位相差顕微鏡およびスーダンブラックＢ染色により確認して、赤血球、脂肪細胞および毛細血管組織が実質的になくした。バラバラにし、清浄にした副甲状腺細胞は５〜２０細胞を含む小さな房状で存在した。トリパンブルーまたは臭化エチジウムの排除によって指標される細胞生存率は日常的に９５％であった。
【０１２５】
細胞は、この時点で実験目的に使用できるが、生理的応答（例、ＰＴＨ分泌の抑制能および［Ｃａ2+］iの静止レベル）は、細胞を一夜培養した後、測定すべきである。初代培養も、イソシトールホスフェート代謝の測定を含む研究に必要なように、同位体平衡に近いアイソトープで細胞をラベルできる利点を有する。
【０１２６】
パーコールグラジエント上で清浄にした後、細胞を、５０μｇ／ｍｌストレプトマイシン、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、５μｇ／ｍｌゲンタマイシンおよびＩＴＳ+を補足したハムのＦ１２−ダルベッコ修正イーグル培地（ＧＩＢＣＯ）の１：１混合物中で数回洗浄した。ＩＴＳ+は、インシュリン、トランスフェリン、セレニウムおよびウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）−リノレン酸を含むプレミックス溶液である（Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）。ついで、細胞をプラスチック製フラスコ（７５または１５０ｃｍ2、Ｆａｌｃｏｎ）に移し、５％ＣＯ2の湿潤雰囲気中、３７℃にて一夜インキュベートした。血清の存在は、細胞をプラスチックに付着させ、増殖および脱分化させるので、これらの一夜培養には血清を添加しない。上記条件下で培養した細胞はデカンテーションによりフラスコから容易に離れ、新たに調製した細胞と同様な生存率を示す。
【０１２７】
清浄にした副甲状腺細胞を、１μＭフラ−２−アセトキシメチルエステルを含む１．２５ｍＭ  ＣａＣｌ2−２％ＢＳＡ−ＰＣＢに再懸濁し、３７℃で２０分間インキュベートした。ついで、細胞をペレット化し、該エステルを含まない同じ緩衝液に再懸濁し、３７℃で、さらに１５分間インキュベートした。細胞を、０．５ｍＭ  ＣａＣｌ2および０．５％ＢＳＡを含むＰＣＢで連続して２回洗浄し、室温（約２０℃）で保持した。使用直前に、細胞を予め加温した０．５ｍＭ  ＣａＣｌ2−ＰＣＢで５倍に希釈し、最終ＢＳＡ濃度を０．１％とした。蛍光記録に使用したキュベット中の細胞濃度は１〜２×１０6 ／ｍｌであった。
【０１２８】
指示薬負荷細胞の蛍光を、各々、３４０および５１０ｎｍの励起および発光波長を使用し、サーモスタット付きキュベットホルダーおよびマグネットスターラーを装備した分光蛍光光度計（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）にて３７℃で測定した。この蛍光は、細胞質ゾルＣａ2+のレベルを示す。蛍光シグナルを、ジギトニン（５０μｇ／ｍｌ、最終）を用いて較正し、最大蛍光（Ｆｍａｘ）を得、またＥＧＴＡ（１０ｍＭ、ｐＨ８．３、最終）を用いて、最小蛍光（Ｆｍｉｎ）および２２４ｎＭの解離定数を得た。染料の漏出は温度に依存し、大部分は、キュベット中で細胞を加温した後の最初の２分以内に起こる。その後、染料漏出は非常にゆっくりと増加する。染料漏出に対する較正を修正するため、細胞をキュベットに入れ、３７℃にて２〜３分間攪拌した。細胞懸濁液を取り出し、細胞をペレット化し、上澄液を清浄なキュベットに戻す。ついで、上澄液をジギトニンおよびＥＧＴＡで処理して、染料漏出を評価する。これは、典型的には、総Ｃａ2+−依存性蛍光シグナルの１０〜１５％である。この評価を見かけのＦｍｉｎから差し引いた。
【０１２９】
実施例４：フラ−２負荷ＨＥＫ２９３／ｐＨｕＰＣａＲ４．０細胞を使用するカルシウム受容体活性測定
本実施例は、フラ−２負荷ＨＥＫ２９３／ｐＨｕＰＣａＲ４．０細胞を使用するカルシウム受容体活性検定に使用する操作を記載する。ｐＨｕＰＣａＲ４．０をトランスフェクションしたＨＥＫ２９３細胞を、約５μＭフラー３／ＡＭを含有する２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳで緩衝したダルベッコ修飾イーグル培地中で室温にて１時間インキュベートすることにより、フラ−２を負荷した。ついで、１ｍＭ  ＣａＣｌ2および１ｍＭ  ＭｇＣｌ2を含む２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳで緩衝したハンクス平衡塩溶液で細胞をリンスした。ついで、テスト化合物を細胞に加え、蛍光を測定した（励起および発光波長、各々、３４０および５１０ｎｍ）。
【０１３０】
実施例５：化合物のカルシウム受容体活性調節能の測定
フラ−２負荷細胞を使用し、またはフラ−２負荷副甲状腺細胞を使用し、ｐＨｕＰＣａＲ４．０をコードする核酸でトランスフェクションしたＨＥＫ２９３細胞中の［Ｃａ2+］i増加を測定することにより、種々の化合物のカルシウム受容体調節能を検定した。種々の実験結果を表１．ａ、１．ｂ．１、１．ｂ．２、１．ｃおよび２に総括する。表１．ａ、１．ｂ．１、１．ｂ．２および１．ｃには、種々の濃度における化合物の、実施例４の記載に従って（すなわち、ｐＨｕＰＣａＲ４．０をコードする核酸でトランスフェクションされた、フラ−２を負荷されたＨＥＫ２９３細胞を使用）検定したカルシウム受容体活性に対する効果を総括する。
【０１３１】
表２は、種々の実験結果を総括するもので、ＥＣ50は、フラ−２を負荷した副甲状腺細胞またはＨＥＫ２９３／ｐＨｕＰＣａＲ４．０を計算したものである。細胞はフラ−２を負荷され、実施例２の記載（副甲状腺細胞について）または実施例３の記載（ＨＥＫ２９３／ｐＨｕＰＣａＲ４．０細胞について）に従って検定した。
【０１３２】
【表１】
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【０１３３】
【表２】
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【０１３４】
【表３】
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【０１３５】
【表４】
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【０１３６】
【表５】
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【０１３７】
【表６】
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【０１３８】
【表７】
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【０１３９】
【表８】
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【０１４０】
【表９】
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【０１４１】
【表１０】
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【０１４２】
【表１１】
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【０１４３】
【表１２】
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【０１４４】
【表１３】
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【０１４５】
【表１４】
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【０１４６】
実施例６−１７：化合物の合成
ＮｅｍｅｔｈらのＰＣＴ／ＵＳ９３／０１６４２（国際公開番号ＷＯ９４／１８９５９）により記載された方法のごとき標準的方法を用いて本明細書記載の化合物を合成することができる。本明細書に記載された代表的な化合物の合成を説明する実施例を以下に記載する。
【０１４７】
シアノ水素化ホウナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムの存在下で市販アルデヒドまたはケトンを第１級アミンで還元的アミノ化することにより化合物９Ｒ、１４Ｕおよび１７Ｐの合成を行った。化合物１１Ｙ、１２Ｈ、１２Ｋ、１２Ｍ、１４Ｓ、１４Ｔ、１６Ｌ−Ｏ、１７Ｅ、１７Ｇ、１７Ｊ、２４Ｘ、２４Ｙ、２５Ａ、２５Ｅ−２５Ｋおよび２５Ｏを同様の方法で調製した。
【０１４８】
これら３つの化合物（９Ｒ、１４Ｕおよび１６Ｐ）の合成に関して、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムが、シアノ水素化ホウナトリウムよりも高いジアステレオマー立体選択性を伴って所望のジアステレオマーを生じることがわかった。豊富化された混合物を、順相ＨＰＬＣまたは有機溶媒からの再結晶によりさらに精製して単一ジアステレオマーとした。
【０１４９】
チタニウム（ＩＶ）イソプロポキシドの存在下で第１級アミンをアルデヒドまたはケトンと縮合させることにより化合物８Ｊ、８Ｕ、１１Ｘ、１７Ｍおよび２５Ｙを調製した。次いで、得られた中間体イミンを、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムの作用によりｉｎ  ｓｉｔｕ還元した。化合物８Ｕの合成のための中間体エナミンを、炭素上の水酸化パラジウムを用いて触媒的に還元した。
【０１５０】
水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ−Ｈ）により媒介されるアミンとニトリルとの縮合により化合物１２Ｕ、１２Ｖおよび１２Ｚを調製した。得られた中間体イミンを、シアノ水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素ナトリウムの作用によりｉｎ  ｓｉｔｕ還元する。中間体アルケン（化合物１２Ｕおよび１２Ｖ）を、ＥｔＯＨ中で炭素上パラジウムを用いる触媒的水素化により還元した。対応塩酸塩に変換される化合物を、遊離塩基をエーテル性ＨＣｌで処理することにより白色固体塩酸塩に変換した。
【０１５１】
これらの合成におけるアミンをＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩまたはＣｅｌｇｅｎｅ  Ｃｏｒｐ．，Ｗａｒｒｅｎ，ＮＪから購入、あるいは標準的方法を用いて調製した。他のすべての試薬類はＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．から購入した。
【０１５２】
実施例６：化合物２５Ｙの合成
Ｎ−（３−（２−フェニル）プロピル）−１−（１−ナフチル）エチルアミン
３−フェニル−１−プロピルアミン（１３５ｍｇ，１ミリモル）、１'−アセトナフトン（１７０ｍｇ，１ミリモル）およびチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（３５５ｍｇ，１．３ミリモル）の混合物を室温で１時間攪拌した。反応物を１Ｍエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１ｍＬ）で処理し、室温で１６時間攪拌した。反応物をエーテルで希釈し、水（０．１ｍＬ）で処理した。反応物を遠心分離し、エーテル層を取り、濃縮して乳状油状物質を得た。ジクロロメタンから０．１％イソプロピルアミン含有ジクロロメタン中１０％メタノールまでのグラジエントを用いるＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，１．０×２５ｃｍ，５μｍシリカ）により、この物質の少量部分（１０ｍｇ）を精製した。これにより生成物（遊離塩基）を得ることができ、ＧＣ／ＥＩ−ＭＳ（Ｒt＝１０．４８分）により単一成分であることがわかった。ｍ／ｚ（相対強度）２８９（Ｍ+，１１）、２７４（６３）、１８４（５）、１６２（５）、１５５（１００）、１４１（１８）、１１５（８）、９１（４５）、７７（５）。
【０１５３】
実施例７：化合物８Ｊの合成
Ｎ−（３−フェニルプロピル）−１−（３−チオメチルフェニル）エチルアミン塩酸塩
３'−アミノアセトフェノン（２．７ｇ，２０ミリモル）を４ｍＬの濃塩酸、４ｇの氷および８ｍＬの水に溶解した。溶液を０℃まで冷却し、３−５ｍＬの水に溶解した亜硝酸ナトリウム（１．４５ｇ，２１ミリモル）を５分かけて添加し、その間温度を６℃以下に維持した。チオメトキシドナトリウム（１．７５ｇ，２５ミリモル）を５ｍＬの水に溶解し、０℃まで冷却した。ジアゾニウム塩を１０分かけてこの溶液に添加し、その間温度を１０℃以下に維持した。反応物をさらに１時間攪拌し、その間温度を周囲温度まで上昇させた。反応混合物をエーテルおよび水の間に分配させた。エーテル層を分離し、重炭酸ナトリウム、次いで、塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。エーテル蒸発させて収率７４％で３'−チオメチルアセトフェノンを得た。減圧蒸留により粗物質を精製した。
【０１５４】
３−フェニルプロピルアミン（０．１３ｇ，１ミリモル）、３'−チオメチルアセトフェノン（０．１７ｇ，１ミリモル）およびチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（０．３６ｇ，１．２５ミリモル）を混合し、４時間放置した。エタノール（１ｍＬ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（０．０６３ｇ，１ミリモル）を添加し、反応物を一晩攪拌した。４ｍＬのエーテルおよび２００μｌの水を添加することにより反応を仕上げた。混合物をボルテックス攪拌し、次いで、遠心分離して固体を分離した。エーテル層を沈殿から分離し、溶媒を減圧除去した。油状物質をジクロロメタンに再溶解し、３％メタノール／ジクロロメタンで溶離するシリカゲルによる調製用ＴＬＣにより化合物を精製して標記化合物を純粋な油状物質として得た：ＧＣ／ＥＩ−ＭＳ（Ｒt＝７．６４分）ｍ／ｚ（相対強度）２８５（Ｍ+，１８）、２７０（９０）、１８０（１７）、１５１（１００）、１３６（３２）、１０４（１７）、９１（５４）、７７（１３）。
【０１５５】
実施例８：化合物８Ｕの合成
Ｎ−３−（２−メトキシフェニル）−１−プロピル−（Ｒ）−３−メトキシ−α−メチルベンジルアミン塩酸塩
（Ｒ）−（＋）−３−メトキシ−α−メチルベンジルアミン（３．０２ｇ，２０ミリモル）、２−メトキシシンナムアルデヒド（３．２４ｇ，２０ミリモル）およびチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（８．５３ｇ，３０ミリモル，１．５当量）の混合物を室温で２時間攪拌し、１Ｍ（２０ｍＬ）エタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで処理した。反応物を一晩（１６時間）攪拌し、ジエチルエーテルで希釈し、水（１．４４ｍＬ，８０ミリモル，４当量）で処理した。１時間混合後、反応混合物を遠心分離し、エーテル層を取り、濃縮して油状物質とした。この物質を氷酢酸に溶解し、６０ｐ．ｓ．ｉ．の水素下で水酸化パラジウムとともに室温で２時間振盪して水素化した。濾過により触媒を除去し、得られた溶液を濃縮して粘性油状物質とした。この物質をジクロロメタンに溶解し、１Ｎ  ＮａＯＨで中和した。ジクロロメタン溶液を水相から分離し、無水炭酸カリウムで乾燥し、次いで、濃縮して油状物質を得た。この物質をエーテルに溶解し、ジエチルエーテル中１Ｍ  ＨＣｌで処理した。生じた沈殿（白色固体）を集め、ジエチルエーテルで洗浄し、次いで、風乾した。この物質（遊離塩基）のＧＣ／ＥＩ−ＭＳ（Ｒt＝９．６９分）は単一成分を示した：ｍ／ｚ（相対強度）２９９（Ｍ＋，２１）、２８４（１００）、１６４（１７）、１５０（８）、１３５（８１）、１２１（４０）、１０２（１７）、９１（４３）、７７（１８）。
【０１５６】
実施例９：化合物９Ｒの合成
（Ｒ）−Ｎ−（１−（２−ナフチル）エチル）−（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミン塩酸塩
（Ｒ）−（＋）−１−（１−ナフチル）エチルアミン（１０．０ｇ，５８ミリモル）、２'−アセトナフトン（９．４ｇ，５６ミリモル）、チタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（２０．７ｇ，７３．０ミリモル）およびＥｔＯＨ（無水）（１００ｍＬ）の混合物を６０℃で３時間加熱した。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＣＮＢＨ3）（３．６７ｇ，５８．４ミリモル）を添加した。反応混合物を室温で１８時間攪拌した。エーテル（１Ｌ）およびＨ2Ｏ（１０ｍＬ）を反応混合物に添加し、次いで、生じた沈殿を遠心分離により除去した。上清を減圧蒸発し、粗生成物をヘキサンから４回再結晶して１．５ｇの純粋な（９８＋％）ジアステレオマーを得た。遊離塩基をヘキサンに溶解し、濾過し、次いで、エーテル性ＨＣｌを添加して生成物を白色固体として沈殿させた（１．１ｇ，収率６％）、融点：２００−２０４℃で軟化（分解）。
【０１５７】
実施例１０：化合物１１Ｘの合成
Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミン塩酸塩
（Ｒ）−（＋）−１−（１−ナフチル）エチルアミン（１．０６ｇ，６．２ミリモル）、４−イソプロピルベンズアルデヒド（０．９２ｇ，６．２ミリモル）およびチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（２．２ｇ，７．７ミリモル）を１００℃にて５分間加熱して、次いで、室温で４時間攪拌した。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＣＮＢＨ3）（０．３９ｇ，６．２ミリモル）を添加し、その後ＥｔＯＨ（１ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温で１８時間攪拌した。エーテル（１００ｍＬ）およびＨ2Ｏ（１ｍＬ）を反応混合物に添加し、次いで、生じた沈殿を遠心分離により除去した。上清を減圧蒸発し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（１％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3で溶離）に供した。次いで、クロマトグラフィーされた物質をヘキサンに溶解し、エーテル性ＨＣｌを添加して生成物を白色固体として沈殿させた（０．６７ｇ，収率３５％）。融点２５７−２５９℃。
【０１５８】
実施例１１：化合物１２Ｕの合成
Ｎ−３−（２−メチルフェニル）−１−プロピル−（Ｒ）−３−メトキシ−α−メチルベンジルアミン塩酸塩
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中の２−メチルシンナモニトリル（１．４３ｇ，１０ミリモル）を０℃に冷却し、１Ｍ水素化ジイソブチルアルミニウム（１０ｍＬ、ジクロロメタン中）を滴下して処理した。反応物を０℃で１５分攪拌し、ジクロロメタン（１０ｍＬ）中の（Ｒ）−（＋）−３−メトキシ−α−メチルベンジルアミン（１．５１ｇ，１０ミリモル）の１Ｍ溶液を滴下して処理した。反応物を０℃で１時間攪拌し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１ｇ，１６ミリモル）含有エタノール溶液（１００ｍＬ）中に注いだ。反応混合物を室温で４８時間攪拌した。反応物をエーテルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨで中和した。エーテル層を取り、無水炭酸カリウムで乾燥し、濃縮して油状物質とした。この物質を、ジクロロメタンからジクロロメタン中の５％メタノールまでのグラジエントを用いるシリカゲルクロマトグラフィーに供して不飽和中間体を得た。ＧＣ／ＥＩ−ＭＳ（Ｒt＝１０．０６分）により単一成分であることがわかった。ｍ／ｚ（相対強度）２８１（Ｍ＋，１７）、２６６（５９）、１７６（１９）、１４６（６５）、１３５（７３）、１３１（１００）、９１（２１）、７７（１３）。
【０１５９】
炭素上パラジウム存在下でエタノール中の不飽和中間体を室温にて１６時間水素化（１ａｔｍ  Ｈ2）した。ジエチルエーテル中１Ｍ  ＨＣｌでの処理によりこの反応からの生成物を塩酸塩に変換した。この物質（遊離塩基）のＧＣ／ＥＩ−ＭＳ（Ｒt＝９．３１分）は単一成分を示した：ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ＋，２１）、２６８（１００）、１６４（１２）、１４８（８）、１３５（８５）、１２１（１２）、１０５（４９）、９１（２３）、７７（２１）。
【０１６０】
実施例１２：化合物１２Ｖの合成
Ｎ−３−（３−メチルフェニル）−１−プロピル−（Ｒ）−３−メトキシ−α−メチルベンジルアミン塩酸塩
２−メチルシンナモニトリルを用いる以外は実施例１１記載の手順に従って化合物を調製した。不飽和中間体はＧＣ／ＥＩ−ＭＳにより単一成分であった。
【０１６１】
ｍ／ｚ（相対強度）２８１（Ｍ＋，５７）、２６６（８６）、１４６（９８）、１３５（８８）、１３１（１００）、１１５（４３）、１０２（２６）、９１（４３）、７７（１８）。上記実施例１１記載の手順を用いてこの物質の還元および塩酸塩生成を行った。この物質（遊離塩基）のＧＣ／ＥＩ（Ｒt＝９．１８分）は単一成分であることを示した：ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ＋）、２６８（１００）、１６４（１１）、１４８（８）、１３５（７６）、１２１（１６）、１０５（４５）、９１（２３）、７７（２１）。
【０１６２】
実施例１３：化合物１２Ｚの合成
Ｎ−３−（２−クロロフェニル）−１−プロピル−（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミン塩酸塩
２−クロロヒドロシンナモニトリルおよび（Ｒ）−（＋）−１−（１−ナフチル）エチルアミンを１０ミリモルスケールで用いること以外は実施例１１記載の手順に従って化合物を調製した。ジクロロメタンからジクロロメタン中５％メタノールまでのグラジエントを用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより生成物を得て、ＴＬＣ分析（ジクロロメタン中５％メタノール）により単一化合物であることがわかった。ジエチルエーテル中１Ｍ  ＨＣｌで処理することにより塩酸塩を調製した。
【０１６３】
実施例１４：化合物１４Ｕの合成
（Ｒ）−Ｎ−（１−（４−メトキシフェニル）エチル）−（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミン塩酸塩
（Ｒ）−（＋）−１−（１−ナフチル）エチルアミン（１．１ｇ，６．２ミリモル）、４'−メトキシアセトフェノン（０．９３ｇ，６．２ミリモル）、チタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（２．２ｇ，７．７ミリモル）およびＥｔＯＨ（無水）（１ｍＬ）の混合物を６０℃で３時間加熱した。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＣＮＢＨ3）（０．３９ｇ、６．２ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で１８時間攪拌した。エーテル（２００ｍＬ）およびＨ2Ｏ（２ｍＬ）を反応混合物に添加し、次いで、生じた沈殿を遠心分離により除去した。上清を減圧蒸発し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｍｍ×２５ｃｍカラム）（１％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3で溶離）に供した。この物質の一部をＨＰＬＣクロマトグラフィーに供した［Ｓｅｌｅｃｔｏｓｉｌ，５μｍシリカゲル；２５ｃｍ×１０．０ｍｍ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）、１分間に４ｍＬ；紫外線検出２７５ｎｍ；１２％酢酸エチル−８８％ヘキサン（溶出時間１２．０分）］。次いで、ＨＰＬＣ精製されたジアステレオマーをヘキサンに溶解し、エーテル性ＨＣｌを添加して生成物を白色固体として沈殿させた（２０ｍｇ）。融点２０９−２１０℃（分解）。
【０１６４】
実施例１５：化合物１７Ｍの合成
Ｎ−（３−クロロ−４−メトキシベンジル）−（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミン塩酸塩
（Ｒ）−（＋）−１−（１−ナフチル）エチルアミン（６．６ｇ，３９ミリモル）およびチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（１３．８ｇ，４８．８ミリモル）およびＥｔＯＨ（無水）（３０ｍＬ）を８０℃で３０分加熱し、次いで、室温で３時間攪拌し、次いで、放冷した。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＣＮＢＨ3）（２．４５ｇ，３９ミリモル）を添加した。反応混合物を室温で１８時間攪拌した。エーテル（１００ｍＬ）およびＨ2Ｏ（２ｍＬ）を反応混合物に添加し、次いで、沈殿を遠心分離により除去した。上清を減圧蒸発し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０ｍｍ×３０ｃｍカラム）（ＣＨ2Ｃｌ2で溶離）に供した。次いで、クロマトグラフィーした物質をヘキサン（５００ｍＬ）に溶解し、ＮｏｒｉｔR（０．２μｍ）で濾過して脱色し、次いで、エーテル性ＨＣｌを添加して生成物を白色固体として沈殿させた（１０．２ｇ、収率５６％）、融点２４１−２４２℃（分解）。
【０１６５】
実施例１６：化合物１７Ｐの合成
４−メトキシ−３−メチルアセトフェノン［１７Ｐの前駆体］
４'−ヒドロキシ−３'−メチルアセトフェノン（５．０ｇ，３３．３ミリモル）、ヨードメタン（５．７ｇ，４０．０ミリモル）、Ｋ2ＣＯ3（顆粒、無水物）（２３．０ｇ，１６７ミリモル）およびアセトン（２５０ｍＬ）を３時間還流した。次いで、反応混合物を室温まで冷却し、濾過して無機塩類を除去し、減圧蒸発させた。相生成物をエーテル（１００ｍＬ）に溶解し、Ｈ2Ｏ（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、蒸発させて４．５ｇを得た（収率８２．４％）。ケトンをさらに精製せずに以下の反応に使用した。
【０１６６】
（Ｒ）−Ｎ−（１−（４−メトキシ−３−メチルフェニル）エチル）−（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミン塩酸塩［化合物１７Ｐ］
（Ｒ）−（＋）−１−（１−ナフチル）エチルアミン（４．２４ｇ，２４．８ミリモル）、４'−メトキシ−３'−メチルアセトフェノン（４．０６ｇ，２４．８ミリモル）およびチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（８．８ｇ，３０．９ミリモル）およびＥｔＯＨ（無水）（１ｍＬ）を１００℃にて２時間加熱した。イソプロパノール（４５ｍＬ）を添加し、次いで、反応物を氷浴中で１０℃まで冷却した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＨＢ（Ｏ2ＣＣＨ3）3）（１０．５ｇ，４９．５ミリモル）を１５分かけて少しずつ添加した。次いで、反応混合物を７０℃にて１８時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、エーテル（４００ｍＬ）中に注いだ。懸濁液を遠心分離し、上清を集め、ペレットをエーテル（４００ｍＬ）で洗浄した。一緒にした有機洗浄物を減圧蒸発した。残渣をエーテル（４００ｍＬ）に溶解し、１Ｎ  ＮａＯＨ（４×５０ｍＬ）、次いで、Ｈ2Ｏ（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、減圧蒸発した。ＥｔＯＨ（無水物を湿残渣に添加し、次いで、これをロータリーエバポレーターで完全に乾燥させて油状物質を得た。次いで、混合物をシリカゲルクロマトグラフィーに供した［１％  ＭｅＯＨ：１％  ＩＰＡ：ＣＨＣｌ3で溶離して４．８ｇの油状物質を得た］。
【０１６７】
所望のジアステレオマーをＨＰＬＣによりさらに精製した［ＳＵＰＥＬＣＯＳＩＬ(TM)ＰＬＣ−Ｓｉ，１８μｍシリカゲル；２５ｃｍ×２１．２ｍｍ（Ｓｕｐｅｌｃｏ，Ｉｎｃ．，Ｂｅｌｌｅｆｏｎｔｅ，ＰＡ）、１分間に７ｍＬ；紫外線検出２７５ｎｍ：２０％  ＥｔＯＡｃ−８０％ヘキサン（溶出時間９．５−１１．０分）］。混合物（溶離液中１００ｍｇ／ｍＬ溶液）の注入（８００μｌ）により６５ｍｇの所望異性体を得た。複数回のＨＰＬＣ注入により１．０ｇの精製物質を得た。ＨＰＬＣクロマトグラフィーされた物質をヘキサン（５０ｍＬ）に溶解し、エーテル性ＨＣｌで塩酸塩を沈殿させた。焼結ガラス上に塩を集め、ヘキサンで洗浄して１．０ｇの白色固体を得た。融点２０４−２０５℃。
【０１６８】
実施例１７：化合物１７Ｘの合成
３−クロロ−４−メトキシベンズアルデヒド
３−クロロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（２５ｇ，１６０ミリモル）、ヨードメタン（２７．２５ｇ，１９２ミリモル）、Ｋ2ＣＯ3（顆粒、無水物）（１１０．６ｇ，８００ミリモル）およびアセトン（３００ｍＬ）の混合物を３時間還流した。次いで、反応混合物を室温まで冷却した。ジエチルエーテル（５００ｍＬ）を添加し、混合物を濾紙で濾過して無機塩類を除去した。濾液を減圧蒸発し、ジエチルエーテル（８００ｍＬ）に溶解し、０．１Ｎ  ＮａＯＨ（３×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧蒸発して２４ｇ（収率９２％）の粗生成物を得た。シリカゲルクロマトグラフィーによりこの物質をさらに精製して１５．０２ｇ（収率５６％）の白色固体を得た：
ＴＬＣ（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ，５：１）Ｒf＝０．２４；ＧＣ  Ｒt＝４．７５分；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  １７０（Ｍ+）、１７２（Ｍ＋２）。
【０１６９】
１−メチル−（３'−クロロ−４'−メトキシベンジル）アルコール
３−クロロ−４−メトキシベンズアルデヒド（１３ｇ，７６．５ミリモル）、塩化メチルマグネシウム（５２ｇ，１５３ミリモル）およびＴＨＦ（３００ｍＬ）の混合物を３時間還流した。反応混合物を室温まで冷却した。ＮＨ4Ｃｌ（飽和溶液、６ｍＬ）を滴下し、次いで、ジエチルエーテル（５００ｍＬ）を添加し、混合物を濾紙で濾過して無機塩類を除去した。濾液を減圧蒸発し、得られた固体をジエチルエーテル（３００ｍＬ）に溶解し、水（４×２５ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧蒸発して１１．３ｇ（収率８０％）の粗生成物を得た。この物質をシリカゲルクロマトグラフィー（５０ｍｍ×３０ｃｍ）（ＣＨ2Ｃｌ2で溶離）によりさらに精製して１１．３ｇ、収率６３％の油状物質を得た。ＴＬＣ（ＣＨ2Ｃｌ2）Ｒf＝０．２５；ＧＣ  Ｒt＝５．３０分；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  １８６（Ｍ+）、１８８（Ｍ＋２）。
【０１７０】
３'−クロロ−４'−メトキシアセトフェノン
１−メチル−（３'−クロロ−４'−メトキシベンジル）アルコール（７．６ｇ，４１ミリモル）、クロロギ酸ピリジニウム（ＰＣＣ）（１３．１６ｇ，６１．５ミリモル）および塩化メチレン（３００ｍＬ）を室温で２時間攪拌した。ジエチルエーテル（１０００ｍＬ）を添加し、得られた混合物をシリカゲルクロマトグラフィーカラム（５０ｍｍ×３０ｃｍ）（ジエチルエーテルで溶離）に乗せて７．３ｇ（収率９７％）の粗固体生成物を得た。この物質のＧＣ分析により、純度９９％であることが示され、さらに精製せずに次の反応に使用した。ＴＬＣ（ジエチルエーテル）Ｒf＝１．０；ＧＣ  Ｒt＝５．３分；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ１８４（Ｍ+）、１８４（Ｍ＋２）。
【０１７１】
（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−（１−エチル−４'−メトキシ−３'−クロロフェニル）−１−（１−ナフチルエチル）アミン
３'−クロロ−４'−メトキシアセトフェノン（５．３ｇ，２９ミリモル）、（Ｒ）−（＋）−１−（１−ナフチル）エチルアミン（４．９８ｇ，２９ミリモル）、チタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（１０．２ｇ，３６ミリモル）およびイソプロパノール（２０ｍＬ）の混合物を１００℃にて３時間加熱した。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢ（Ｏ2ＣＣＨ3）3；１２．２９ｇ，５８ミリモル）を１０分かけて少しずつ添加した。反応混合物を加熱して３０分還流し、次いで、室温で１８時間攪拌した。次いで、混合物をジエチルエーテル（５００ｍＬ）中に注ぎ、Ｈ2Ｏ（２ｍＬ）を添加し、懸濁液を遠心分離してチタン塩の微細沈殿を除去した。上清を集め、ペレットをエーテル（５００ｍＬ）で洗浄した。一緒にした有機層を乾燥（Ｎａ2ＳＯ4）し、減圧蒸発して６．８１ｇ（収率７０％）の粗生成物を得た。
【０１７２】
シリカゲルクロマトグラフィー（５０ｍｍ×３０ｃｍ）（３％、ＭｅＯＨ−９７％塩化メチレンで溶離）によりこの物質をさらに精製して２．０１ｇの油状物質を得た。ジアステレオマーを再結晶によりさらに精製した。エーテル性ＨＣｌを用いて遊離塩基（１．９８ｇ）をそのＨＣｌ塩に変換した。この塩を熱イソプロパノール（６５ｍＬ）に溶解し、溶液を濾紙で濾過した。濾液を減圧蒸発し、得られた固体をイソプロパノール（３０ｍＬ）に溶解した。室温に１８時間放置した後、結晶固体を集め、冷イソプロパノール（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥して０．８７ｇ（遊離塩基基準で４０％）のジアステレオマー的に純粋な塩酸塩を得た：融点２３６−２３７  １／２℃（分解）；ＴＬＣ（ＭｅＯＨ−ＣＨ2Ｃｌ2［９９：１］）Ｒf＝０．２５；ＧＣ  Ｒt＝１１．０６分；ＦＴＩＲ（ＫＢｒペレット，ｃｍ-1）３４３３、２９５０、２９３１、２８５３、２８０３、２６５９、２６０８、２４９７、１６０４、１５９５、１５０４、１４６１、１４４４、１２６８、１２６０、１０６７、１０２１、８０２、７８１、７３３；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３９９（Ｍ+）、３４１（Ｍ＋２）。
【０１７３】
実施例１８：付加的な合成方法
２２Ｚおよび２３Ａの調製
水素化ナトリウム（２．１７３ｇ，油中６０％、５４．３２５ミリモル）のジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）中攪拌溶液を、ホスホノ酢酸トリエチル（１２．４７ｇ、５５．６５ミリモル）を用いて滴下処理し、室温で３０分間攪拌した。この期間の経過後、ｍ−トリフルオロメトキシベンズアルデヒド（１０．０ｇ、５２．６ミリモル）のジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）中溶液を滴下し、該溶液を室温で３０分間、そして１００℃で３０分間攪拌した。反応を水を添加することでクエンチし、ジエチルエーテル（５００ｍｌ）を用いて分離漏斗に移した。そのエーテル溶液を飽和塩化アンモニウム（４×５００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して油状物のｍ−トリフルオロメトキシケイ皮酸エチルを得た；ｍ／ｚ（相対強度）２６０（Ｍ+，１９）、２３２（１６）、２１５（１００）、１８７（２１）、１０１（２８）。
【０１７４】
そのエタノール（１００ｍｌ）中のエチルエーテルを、触媒量（１０重量％）の水酸化パラジウムを用いて水素（６０ｐ．ｓ．ｉ．）下で還元した。還元後（２時間、室温）、反応物を濾過し、濃縮して油状物のｍ−トリフルオロメトキシヒドロケイ皮酸エチルを得た；ｍ／ｚ（相対強度）２６２（Ｍ+，１６）、２１７（７）、１８８（１００）、１７５（２８）、１０３（３１）、９１（１８）、７７（２３）。
【０１７５】
飽和エチルエーテルを、エタノール性１０Ｍ水酸化ナトリウム（１：１）の溶液中で１６時間室温で加水分解した。この期間の経過後、溶液を酸性化し、生成物をジエチルエーテルに抽出した。そのエーテル溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して固体としてｍ−トリフルオロメトキシヒドロケイ皮酸を得た；
ｍ／ｚ（相対強度）２３４（Ｍ+，４６）、１８８（１００）、１７４（６５）、１０３（２７）、９１（１２）、７７（１７）。
【０１７６】
この酸を過剰な塩化チオニル中で４時間、室温で攪拌した。過剰量の塩化チオニルを減圧（１００℃）で蒸発させ、油状物として塩化ｍ−トリフルオロメトキシヒドロシンナミルを得た。該生成物をさらに精製することなく使用した。
【０１７７】
塩化ｍ−トリフルオロメトキシヒドロシンナミル（９．８ｇ、３９ミリモル）のテトラヒドロフラン中溶液を−７８℃に冷却し、臭化メチルマグネシウム（３９ミリモル）の溶液（１３ｍｌ、テトラヒドロフラン中３Ｍ）で滴下処理した。反応物を−７８℃で４時間、室温で８時間攪拌し、希塩酸でクエンチした。反応混合物をジエチルエーテルで抽出した。エーテルを無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、油状物にまで濃縮した。この物質をヘキサン→アセトンの勾配を用いるシリカを介するクロマトグラフィーに付し、油状物として４−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−２−ブタノンを得た；ｍ／ｚ（相対強度）２３２（Ｍ+，６８）、２１７（７）、１８９（５９）、１７５（３１）、１０３（２８）、４３（１００）。
【０１７８】
４−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−２−ブタノン（２．３２ｇ、１０ミリモル）、（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン（１．５１ｇ、１０ミリモル）およびチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（３．５５ｇ、１２．５ミリモル）の溶液を室温で４時間攪拌した。ついで、反応混合物を、エタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１０ミリモル）の溶液（１０ｍｌ、１Ｍ）で処理し、室温で１６時間攪拌した。反応物をジエチルエーテル（５０ｍｌ）で希釈し、水（０．７２ｍｌ、４０ミリモル）で処理した。完全に混合した後、該溶液を遠心分離に付し、エーテル層をデカントし、油状固体にまで濃縮した。該固体をジエチルエーテルに懸濁させ、０．４５μＭ  ＣＲ  ＰＴＦＥアクロディスク（Ａｃｒｏｄｉｓｃ）を介して濾過し、濃縮して清澄油を得た。クロロホルム中５％メタノールを用いる繰返し分取用薄層クロマトグラフィーに付し、２種のジアステレオマー、（Ｓ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−２−ブチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２２Ｚ［ｍ／ｚ（相対強度）３６７（Ｍ+，３）、３５２（２０）、２３２（４）、１７８（４７）、１３５（１００）、１０５（１４）、９１（１０）、７７（１１）］および（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−２−ブチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２３Ａ；ｍ／ｚ（相対強度）３６７（Ｍ+、３）、３５２（１９）、２３２（７）、１７８（４３）、１３５（１００）、１０５（１９）、９１（１０）、７７（１１）を得た。
【０１７９】
２２Ｘおよび２２Ｙの調製
同様の方法を用いて、等モル量の４−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−２−ブタノン、（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミンおよび１．２５当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。後処理を行い、クロロホルム中５％メタノールを用いる繰返し分取用薄層クロマトグラフィーに付し、（Ｓ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−２−ブチル］−１−（１−ナフチル）エチルアミン、２２Ｘ；ｍ／ｚ（相対強度）３８７（Ｍ+、３）、３７２（１５）、１９８（１５）、１７６（１２）、１５５（１００）、１２８（８）、１１５（６）、１０９（４）、１０３（５）、７７（８）および（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−２−ブチル］−１−（１−ナフチル）エチルアミン、２２Ｙ；ｍ／ｚ（相対強度）３８７（Ｍ+、２）、３７２（１２）、１９８（１６）、１７６（１１）、１５５（１００）、１２８（８）、１１５（６）、１０９（４）、１０３（５）、７７（８）を得た。
【０１８０】
４Ｔの調製
同様の方法を用いて、ｏ−クロロベンズアルデヒドより調製した等モル量の４−（２−クロロフェニル）−２−ブタノン、（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンおよび１．２５当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。後処理を行い、クロロホルム中５％メタノールを用いる繰返し分取用薄層クロマトグラフィーに付し、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−［４−（２−クロロフェニル）−２−ブチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、４Ｔ；ｍ／ｚ（相対強度）３１７（Ｍ+、３）、３０２（１６）、１７８（６２）、１７８（３２）、１３５（１００）、１２５（１５）、１０５（１０）、９１（６）、７７（８）を得た。
【０１８１】
２１Ｙの調製
同様の方法を用いて、ｍ−トリフルオロメチルベンズアルデヒドより調製した等モル量の４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−２−ブタノン、（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンおよび１．２５当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。後処理を行い、クロロホルム中５％メタノールを用いる繰返し分取用薄層クロマトグラフィーに付し、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−２−ブチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２１Ｙ［ｍ／ｚ（相対強度）３５１（Ｍ+、２）、３３６（１８）、２１６（４）、２０２（３）、１７８（４５）、１３５（１００）、１０５（１３）、９１（９）、７７（８）］および（Ｓ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−２−ブチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２１Ｘを得た。
【０１８２】
２５Ｃおよび２５Ｄの調製
同様の方法を用いて、等モル量の４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−２−ブタノン、（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミンおよび１．２５当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。後処理を行い、クロロホルム中５％メタノールを用いる繰返し分取用薄層クロマトグラフィーに付し、（Ｓ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−２−ブチル］−１−（１−ナフチル）エチルアミン、２５Ｃ［ｍ／ｚ（相対強度）３７１（Ｍ+、３）、３５６（１６）、１９８（１５）、１５５（１００）、１２９（８）、１１５（５）、１０９（３）、７７（２）］および（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−２−ブチル］−１−（１−ナフチル）エチルアミン、２５Ｄ；ｍ／ｚ（相対強度）３７１（Ｍ+、３）、３５６（１６）、１９８（１５）、１５５（１００）、１２９（８）、１１５（５）、１０９（３）、７７（２）を得た。
【０１８３】
２１Ｄの調製
同様の方法を用いて、等モル量の４−フェニル−２−ブタノン（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）、（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンおよび１．２５当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。後処理を行い、クロロホルム中５％メタノールを用いる繰返し分取用薄層クロマトグラフィーに付し、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−［４−フェニル−２−ブチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２１Ｄ［ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ+、４）、２６８（１３）、１７８（４５）、１３５（１００）、１０５（１５）、９１（４３）、７７（１１）］および（Ｓ，Ｒ）−Ｎ−［４−フェニル−２−ブチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２１Ｅを得た。
【０１８４】
２１Ｆの調製
同様の方法を用いて、等モル量の４−フェニル−２−ブタノン（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）、（Ｒ）−１−（１−ナフチル）エチルアミンおよび１．２５当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。後処理を行い、クロロホルム中５％メタノールを用いる繰返し分取用薄層クロマトグラフィーに付し、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−（４−フェニル−２−ブチル）−１−（１−ナフチル）エチルアミン、２１Ｆ；ｍ／ｚ（相対強度）３０３（Ｍ+、６）、２８８（１４）、１９８（２２）、１５５（１００）、１２９（８）、１１５（５）、９１（１９）、７７（４）を得た。
【０１８５】
１２Ｚの調製
２−クロロヒドロシンナモニトリル（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、１．６６ｇ、１０ミリモル）のジクロロメタン（１００ｍｌ）中攪拌溶液を−７８℃に冷却し、水素化ジイソブチルアルミニウム（１．４２ｇ、１０ミリモル）で滴下処理した。反応物を室温で１時間攪拌し、−７８℃に冷却し、１−（１−ナフチル）エチルアミン（１．７１ｇ、１０ミリモル）のジクロロメタン（２５ｍｌ）中溶液で処理した。反応物を氷浴中に移し、２時間攪拌した。この時間の経過後、反応物をエタノール性水素化ホウ素ナトリウムの攪拌溶液（５０ｍｌ、０．２Ｍ、１０ミリモル）中に直接注いだ。混合物を室温で３０分間攪拌し、１０％ＨＣｌを添加することにより過剰な水素化ホウ素ナトリウムをクエンチした。ついで、１０Ｎ  ＮａＯＨを添加することで該溶液を塩基性にし、ジエチルエーテル（３００ｍｌ）で洗浄しながら分離漏斗に移した。水性相を除去し、残りの有機層を１Ｎ水酸化ナトリウム（３×１００ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、油状物に濃縮した。この物質をクロロホルム→１０％メタノール／クロロホルムの勾配を用い、シリカゲルを介するクロマトグラフィーに付し、清澄な油状物として２．３４ｇ（７２％収率）の（Ｒ）−Ｎ−［３−（２−クロロフェニル）プロピル］−１−（１−ナフチル）エチルアミン、１２Ｚ；ｍ／ｚ（相対強度）３２３（Ｍ+、２）、３０８（６３）、２８８（７）、１９６（５）、１８４（５）、１５５（１００）、１２５（２４）、１１５（８）、１０３（４）、９１（３）、７７（７）を得た。
【０１８６】
１２Ｂの調製
同様の方法を用いて、４−メチルシンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−［３−（４−メチルフェニル）プロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１２Ｂ；ｍ／ｚ（相対強度）２８１（Ｍ+、６）、２６６（１５）、１７６（２７）、１４６（７５）、１３５（６３）、１３１（１００）、１１５（２５）、１０５（２１）、９１（２１）、７７（２１）を得た。
【０１８７】
１２Ｃの調製
同様の方法を用いて、２−メチルシンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−［３−（２−メチルフェニル）プロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１２Ｃ；ｍ／ｚ（相対強度）２８１（Ｍ+、４）、２６６（１５）、１７６（１８）、１４６（６２）、１３５（５８）、１３１（１００）、１１５（２３）、１０５（１９）、９１（３８）、７７（１７）を得た。
【０１８８】
１２Ｄの調製
同様の方法を用いて、２，４，６−トリメチルシンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−［３−（２，４，６−トリメチルフェニル）プロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１２Ｄ；ｍ／ｚ（相対強度）３０９（Ｍ+、８）、２９４（２５）、１７４（８２）、１５９（１００）、１３５（５２）、１２９（２９）、１０５（２１）、９１（１７）、７７（１４）を得た。
【０１８９】
１２Ｅの調製
同様の方法を用いて、４−イソプロピルシンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−［３−（４−イソプロピルフェニル）プロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１２Ｅ；ｍ／ｚ（相対強度）３０９（Ｍ+、９）、２９４（７）、１７４（９８）、１５９（２２）、１３５（８０）、１１７（１００）、１０５（３５）、９１（３７）、７７（１９）を得た。
【０１９０】
１２Ｆの調製
同様の方法を用いて、２，４−ジメチルシンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−［３−（２，４−ジメチルフェニル）プロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１２Ｆ；ｍ／ｚ（相対強度）２９８（Ｍ+、８）、２９４（１５）、１７４（２９）、１６０（７５）、１４５（１００）、１３５（６８）、１１７（２１）、１０５（３０）、９１（２６）、７７（１９）を得た。
【０１９１】
１２Ｇの調製
同様の方法を用いて、３−メチルシンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−［３−（３−メチルフェニル）プロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１２Ｇ；ｍ／ｚ（相対強度）２８１（Ｍ+、５）、２６６（９）、１７６（２４）、１４６（７１）、１３５（６２）、１３１（１００）、１１５（２３）、１０５（１９）、９１（４１）、７７（１８）を得た。
【０１９２】
２５Ｅの調製
同様の方法を用いて、シンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−［３−フェニルプロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２５Ｅ；ｍ／ｚ（相対強度）２６７（Ｍ+、３）、２５２（１４）、１７６（１７）、１３５（６２）、１１７（１００）、１０５（２８）、９１（５６）、７７（３３）を得た。
【０１９３】
２５Ｇの調製
同様の方法を用いて、α−メチルシンナモニトリルを水素化ジイソブチルアルミニウムで処理し、中間体のアルミニウム−イミン複合体を（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミンで処理した。中間体のイミンをエタノール性水素化ホウ素ナトリウムで処理した。後処理を行い、クロマトグラフィーに付して、清澄な無色油状物として（Ｒ）−Ｎ−（２−メチル−３−フェニルプロプ−２−エニル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２５Ｇ；ｍ／ｚ（相対強度）２８１（Ｍ+、５）、２６６（１８）、１９０（１２）、１４６（７８）、１３５（８２）、１３１（１００）、１１５（２１）、１０５（２１）、９１（６２）、７７（１９）を得た。
【０１９４】
６Ｘの調製
水素化ナトリウム（１．８ｇ、７５ミリモル）のジメチルホルムアミド（１５０ｍｌ）中攪拌溶液を、ホスホン酸ジエチルシアノメチル（１３．３ｇ、７５ミリモル）のジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）中溶液で処理した。反応物を室温で３０分間攪拌した。この時間の経過後、反応物を３−クロロベンズアルデヒド（１０．５４ｇ、７５ミリモル）で処理し、室温で１時間、６０℃で３０分間攪拌した。ついで、反応物を水（２００ｍｌ）を添加することでクエンチした。反応混合物をジエチルエーテル（３００ｍｌ）を用いて分離漏斗に移し，得られた有機相を水（５×３００ｍｌ）およびブラインで洗浄した。有機層を無水炭酸カリウム上で乾燥させ、濃縮して固体の３−クロロシンナモニトリル（１１．０６ｇ）を得た。該固体をテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）に溶かし、過剰量のジボランで処理し、室温で３０分間攪拌した。反応物を氷／１０％ＨＣｌ上に注いだ。酸性水相をジエチルエーテル（２×２００ｍｌ）で洗浄した。その水相を１０Ｎ水酸化ナトリウムを添加して塩基性にし、ジエチルエーテル（２００ｍｌ）で抽出した。エーテル抽出液を無水炭酸カリウムで乾燥させ、濃縮して油状物の３−（３−クロロフェニル）プロピルアミン（０．６ｇ、３．５４ミリモル）を得た。その３−（３−クロロフェニル）プロピルアミン（０．６ｇ、３．５４ミリモル）、３'−メトキシアセトフェノン（０．５３ｇ、３．５４ミリモル）および１．２５モル当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシド（１．２６ｇ、４．４３ミリモル）を室温で４時間混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５ｍｌ、１Ｍ、５ミリモル）で処理した。反応物を室温で１６時間攪拌し、ジエチルエーテル（５０ｍｌ）で希釈し、水（０．３２ｍｌ、１７．７ミリモル）で処理した。十分に混合した後、溶液を遠心分離に付し、エーテル層を乳白色固体にまて濃縮した。この物質をジエチルエーテルに懸濁させ、０．４５μＭのＣＲＰＴＦＥ  Ａｃｒｏｄｉｓｃを介して濾過した。そのエーテル洗液を油状物に濃縮した。３％メタノール−ジクロロメタン（０．１％イソプロピルアミン含有）を用いるクロマトグラフィー（シリカ、繰返し分取用薄層クロマトグラフィー）に付し、Ｎ−［３−（３−クロロフェニル）プロピル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、６Ｘ；ｍ／ｚ（相対強度）３０３（Ｍ+、３）、２８８（４０）、１９６（３）、１６４（８）、１３５（１００）、１２５（４６）、１０３（２６）、９１（２９）、７７（２９）を得た。
【０１９５】
６Ｖの調製
等モル量の３−（４−クロロフェニル）プロピルアミン（前記のように４−クロロベンズアルデヒドより同様の方法にて調製）、３'−メトキシアセトフェノンおよび１．２５モル当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを室温で４時間混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５ｍｌ、１Ｍ、５ミリモル）で処理した。後処理し、クロマトグラフィーに付して、油状物のＮ−［３−（４−クロロフェニル）プロピル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、６Ｖ；ｍ／ｚ（相対強度）３０３（Ｍ+、８）、２８８（９１）、１９６（４）、１６４（１０）、１３５（１００）、１２５（６１）、１０３（２１）、９１（２１）、７７（１８）を得た。
【０１９６】
２０Ａの調製
同様の方法にて、等モル量の１−（１−メトキシフェニル）エチルアミン、４−ｔ−ブチルアセトフェノンおよび１．２５モル当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを室温で４時間混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５ｍｌ、１Ｍ、５ミリモル）で処理した。後処理し、クロマトグラフィーに付して、油状物の（Ｒ）−Ｎ−［１−（４−ｔ−ブチルフェニル）エチル］−１−（１−ナフチル）エチルアミン、２０Ａ；ｍ／ｚ（相対強度）３３１（Ｍ+、１２）、３１６（２９）、１６１（７０）、１５５（１００）、１３１（１４）、１２７（１３）、１１５（１０）、１０５（６）、９１（１０）、７７（７）を得た。
【０１９７】
２５Ｈおよび２５Ｉの調製
同様の方法にて、等モル量の（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、トランス−４−フェニル−３−ブテン−２−オンおよび１．２５モル当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを室温で４時間混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５ｍｌ、１Ｍ、５ミリモル）で処理した。後処理し、クロマトグラフィーに付して、油状物の（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−（２−メチル−４−フェニルブト−３−エニル）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２５Ｈ；ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ+、４）、２６８（１３）、１７８（４０）、１３５（１００）、１０５（１５）、９１（４７）、７７（１３）および油状物の（Ｓ，Ｒ）−Ｎ−（２−メチル−４−フェニルブト−３−エニル）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、２５Ｉ；ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ+、４）、２６８（１３）、１７８（４０）、１３５（１００）、１０５（１５）、９１（４７）、７７（１３）を得た。
【０１９８】
１６Ｌおよび１６Ｍの調製
同様の方法にて、等モル量の（Ｒ）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、３−メトキシアセトフェノンおよび１．２５モル当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを室温で４時間混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５ｍｌ、１Ｍ、５ミリモル）で処理した。後処理し、クロマトグラフィーに付して、油状物の（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−［１−（４−メトキシフェニル）エチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１６Ｌ；ｍ／ｚ（相対強度）２８４（Ｍ−１、１）、２７０（８５）、１５０（８３）、１３５（１００）、１２０（１２）、１０５（２８）、９１（２５）、７７（２３）および油状物の（Ｓ，Ｒ）−Ｎ−［１−（４−メトキシフェニル）エチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１６Ｍ；ｍ／ｚ（相対強度）２８４（Ｍ−１、１）、２７０（５３）、１５０（９８）、１３５（１００）、１２０（１１）、１０５（３３）、９１（２５）、７７（２３）を得た。
【０１９９】
５Ｂ／５Ｃの調製
同様の方法にて、４−クロロアセトフェノンを用いて３−メチル−３−（４−クロロフェニル）シンナモニトリルを調製した。該ニトリルを接触還元（水酸化パラジウム、酢酸、６０ｐ．ｓ．ｉ．水素、２時間）に付し、３−メチル−３−（４−クロロフェニル）プロピルアミンを得た。等モル量の該アミン、３'−メトキシアセトフェノンおよび１．２５モル当量のチタン（ＩＶ）イソプロポキシドを室温で４時間混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５ｍｌ、１Ｍ、５ミリモル）で処理した。後処理し、クロマトグラフィーに付して、油状物のＮ−（３−メチル−３−（４−クロロフェニル）プロピル）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、５Ｂ／５Ｃ；ｍ／ｚ（相対強度）３１７（Ｍ+，１２）、３０２（７４）、２１０（２）、１８２（４）、１６４（１２）、１３５（１００）、１２１（２５）、１０３（４０）、９１（１９）、７７（２８）を得た。
【０２００】
４Ｚ／５Ａの調製
同様の方法にて、３−クロロアセトフェノンを用いて３−メチル−３−（３−クロロフェニル）シンナモニトリルを調製した。該ニトリルを接触還元（水酸化パラジウム、酢酸、６０ｐ．ｓ．ｉ．水素、２時間）に付し、３−メチル−３−（３−クロロフェニル）プロピルアミンを得た。等モル量の該アミン、３'−メトキシアセトフェノンおよび１．２５モル当量のチタン（IV）イソプロポキシドを室温で４時間混合し、中間体のイミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（５ｍｌ、１Ｍ、５ミリモル）で処理した。後処理し、クロマトグラフィーに付して、油状物のＮ−［３−メチル−３−（３−クロロフェニル）プロピル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、４Ｚ／５Ａ；ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ+，１７）、２６８（７１）、１６４（１３）、１３５（１００）、１２１（２１）１０５（２７）、９１（２６）、７７（１４）を得た。
【０２０１】
４Ｙの調製
同様の方法で、２−クロロアセトフェノンを用いて３−メチル−３−（２−クロロフェニル）シンナモニトリルを調製した。該ニトリルを接触還元（水酸化パラジウム、酢酸、６０ｐ．ｓ．ｉ．水素、２時間）して、３−メチル−３−（２−クロロフェニル）プロピルアミンを得た。等モル量の該アミン、３'−メトキシアセトフェノンおよび１．２５モル当量のチタニウム（IV）イソプロポキシドを室温で４時間混合し、中間体イミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１Ｍを５ｍｌ、５ミリモル）で処理した。後処理およびクロマトグラフィーを行ってＮ−［３−メチル−３−（２−クロロフェニル）プロピル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン（４Ｙ）を油状物質として得た。ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ+，１７）、２６８（７１）１６４（１３）、１３５（１００）、１２１（２１）、１０５（２７）、９１（２６）、７７（１４）。
【０２０２】
６Ｔの調製
−７８℃のジクロロメタン中のＮＰＳ  Ｒ−５６８（３０．３ｇ，１００ミリモル）の溶液を、三臭化ホウ素（５０ｇ，２００ミリモル）を滴下して処理した。反応物を室温で１時間加熱し、氷上に注いだ。クロロホルムを用いて臭化水素を水相から抽出した。次いで、クロロホルム可溶性物質を５０％ＨＣｌで洗浄（４×１００ｍｌ）した。クロロホルム洗浄物を無水硫酸マグネシウムで洗浄し、濃縮して（Ｒ）−Ｎ−［３−（２−クロロフェニル）プロピル］−１−（３−ヒドロキシフェニル）エチルアミン塩酸塩を固体として得た。ジメチルホルムアミド中の水素化ナトリウム（０．４８ｇ，２０ミリモル）の溶液を、（Ｒ）−Ｎ−［３−（２−クロロフェニル）プロピル］−１−（３−ヒドロキシフェニル）エチルアミン塩酸塩（３．２５ｇ，１０ミリモル）で処理し、反応物を室温で１時間撹拌した。反応物をヨードエタン（１．７１ｇ，１１ミリモル）で処理し、室温で１６時間撹拌した。仕上げおよびクロロホルム中３％メタノールを用いるシリカゲルクロマトグラフィーを行って、（Ｒ）−Ｎ−［３−（２−クロロフェニル）プロピル］−１−（３−エトキシフェニル）エチルアミン（６Ｔ）を油状物として得た。ｍ／ｚ（相対強度）３１６（Ｍ＋，１）、３０２（１００）２８２（１１）、１９６（５）、１７８（７）、１４９（７４）、１２１（３４）、１０３（２５）、９１（２８）、７７（２９）。
【０２０３】
６Ｒの調製
同様の方法でＮＰＳ  Ｒ−４６７を用いて（Ｒ）−Ｎ−（３−フェニルプロピル）−１−（３−エトキシフェニル）エチルアミン（６Ｒ）を油状物として得た。ｍ／ｚ（相対強度）２８３（Ｍ＋，１０）、２６８（７４）、１７８（１１）、１６２（８）、１４９（１００）、１２１（３０）、１０３（１６）、９１（８６）、７７（２９）。
【０２０４】
３Ｕの調製
３，３−ジフェニルプロピルアミン（２．１１ｇ，１０ミリモル）、１'−アセトナフトン８１．７０ｇ，１０ミリモル）および１．２５当量のチタニウム（IV）イソプロポキシド（３，５５ｇ，１２．５ミリモル）を室温で４時間撹拌した。次いで、反応混合物を１Ｍエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１２．５ｍｌ，１２．５ミリモル）で処理し、室温で１６時間撹拌した。反応物をジエチルエーテル（５０ｍｌ）で希釈し、水（０．７２ｍｌ，４０ミリモル）で処理した。完全に混合後、混合物を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションで取り、濃縮して乳状油状物質を得た。油状物質をジエチルエーテルに懸濁し、０．４５μｍ  ＣＲ  ＰＴＦＥ  Ａｃｒｏｄｉｓｃで濾過した。ジエチルエーテル濾液を濃縮してＮ−（３，３−ジフェニルプロピル）−１−（１−ナフチル）エチルアミン（３Ｕ）を無色透明油状物質として得た。ｍ／ｚ（相対強度）３６５（Ｍ＋，１７）、３５０（１９）、１８１（２３）、１５５（１００）、１４１（２５）、１１５（１１）、９１（１３）、７７（６）。
【０２０５】
６Ｆの調製
同様の方法で、等モル量の１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン（１．５１ｇ，１０ミリモル）、２'−アセトナフトン（１．７０ｇ，１０ミリモル）および１．２５当量のチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシド（３．５５ｇ、１２．５ミリモル）を上記のごとく処理した。仕上げによりＮ−［１−（２−ナフチル）エチル］−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン（６Ｆ）を無色透明油状物質として得た。ｍ／ｚ（相対強度）３０５（Ｍ＋，１）、２９０（３５）、１７０（４９）、１５５（１００）、１３５（５５）、１１５（８）、１０５（１０）、９１（９）、７７（１０）。
【０２０６】
４Ｇの調製
同様の方法で、等モル量の（Ｒ）−１−フェニルエチルアミン、１'−アセトナフトンおよび１．２５当量のチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、得られた中間体イミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。仕上げおよびクロマトグラフィーを行ってＮ−［１−（１−ナフチル）エチル）−１−フェニルエチルアミン（４Ｇ）を無色透明油状物質として得た。ｍ／ｚ（相対強度）２７５（Ｍ＋，１６）、２６０（７９）、１５５（１００）、１２７（２７）、１０５（７０）、７７（３２）。
【０２０７】
４Ｈの調製
同様の方法で、等モル量の（Ｒ）−１−フェニルエチルアミン、２'−アセトナフトンおよび１．２５当量のチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、得られた中間体イミンをエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。仕上げおよびクロマトグラフィーを行ってＮ−［１−（２−ナフチル）エチル）−１−フェニルエチルアミン（４Ｈ）を無色透明油状物質として得た。２７５（Ｍ＋，１）、２６０（６１）、１５５（１００）、１２７（３６）、１０５（５５）、７７（１５）。
【０２０８】
６Ｅの調製
同様の方法で、等モル量の１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン、１'−アセトナフトンおよび１．２５当量のチタニウム（ＩＶ）イソプロポキシドを混合し、得られた中間体をエタノール性シアノ水素化ホウ素ナトリウムで還元した。仕上げおよびクロマトグラフィーを行ってＮ−［１−（１−ナフチル）エチル）−１−（３−メトキシフェニル）エチルアミン（６Ｅ）を無色透明油状物質として得た。３０５（Ｍ＋，１０）、２９０（３０）、１７０（４３）、１５５（１００）、１３５（６９）、１１５（９）、１０５（１５）、９１（１４）、７７（１８）。
【０２０９】
実施例１９：医薬処方
カルシミメティックのヒト患者への投与に適する医薬処方の調製を表３に示す。
【０２１０】
【表１５】
2007204482.tif 000030
【０２１１】
他のＮＰＳ  （Ｒ）−５６８塩酸塩処方および剤型の例は、標準的方法を用いた除放性または放出持続性のものを包含する。
【０２１２】
標準的方法を用いて正しい投与を行うこともできる。例えば、１のセットの実験において、１０−４００ｍｇの経口用量のＮＰＳ  （Ｒ）−５６８塩酸塩はヒト対象において薬理学的活性を示した。ＮＰＳ  （Ｒ）−５６８塩酸塩の経口投与後、ＮＰＳ  （Ｒ）−５６８の主要代謝物である１７ＱのＯ−グルクロニド抱合体の有意なレベルがヒト血漿中に観察された。よって、１７Ｑのグルクロニド抱合体はある程度の有益な効果を発揮しうる。
【０２１３】
標準的方法を用いて、ＮＰＳ  （Ｒ）−５６８についての他の適当な用量範囲を決定することができる。
【０２１４】
また、当業者は、本願に示された教示に基づいて、本明細書記載の他の化合物についての適当な用量範囲、処方および投与形態を決定することができる。
【０２１５】
他の具体例も特許請求の範囲内にある。すなわち、幾つかの具体例を例示かつ記載するが、本発明の精神および範囲を逸脱することなく、種々の変形をなすことができる。
【図面の簡単な説明】
【０２１６】
【図１】図１は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図２】図２は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図３】図３は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図４】図４は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図５】図５は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図６】図６は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図７】図７は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図８】図８は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図９】図９は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１０】図１０は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１１】図１１は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１２】図１２は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１３】図１３は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１４】図１４は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１５】図１５は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１６】図１６は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１７】図１７は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１８】図１８は、種々の化合物の化学構造を示す。
【図１９】図１９は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図２０】図２０は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図２１】図２１は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２２】図２２は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２３】図２３は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２４】図２４は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２５】図２５は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２６】図２６は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２７】図２７は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２８】図２８は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図２９】図２９は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３０】図３０は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３１】図３１は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３２】図３２は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３３】図３３は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３４】図３４は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３５】図３５は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３６】図３６は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３７】図３７は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３８】図３８は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図３９】図３９は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４０】図４０は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４１】図４１は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４２】図４２は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４３】図４３は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４４】図４４は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４５】図４５は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４６】図４６は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４７】図４７は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４８】図４８は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図４９】図４９は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５０】図５０は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５１】図５１は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５２】図５２は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５３】図５３は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５４】図５４は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５５】図５５は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５６】図５６は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５７】図５７は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５８】図５８は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図５９】図５９は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６０】図６０は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６１】図６１は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６２】図６２は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６３】図６３は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６４】図６４は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６５】図６５は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６６】図６６は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６７】図６７は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６８】図６８は、本明細書に記載の代表的化合物のマススペクトル（電子衝撃、７０ｅＶ）を示す。縦軸は度数である。
【図６９】図６９は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７０】図７０は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７１】図７１は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７２】図７２は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７３】図７３は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７４】図７４は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７５】図７５は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７６】図７６は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７７】図７７は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７８】図７８は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図７９】図７９は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８０】図８０は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８１】図８１は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８２】図８２は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８３】図８３は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８４】図８４は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８５】図８５は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８６】図８６は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８７】図８７は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８８】図８８は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図８９】図８９は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９０】図９０は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９１】図９１は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９２】図９２は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９３】図９３は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９４】図９４は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９５】図９５は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９６】図９６は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９７】図９７は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９８】図９８は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図９９】図９９は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図１００】図１００は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図１０１】図１０１は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図１０２】図１０２は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図１０３】図１０３は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図１０４】図１０４は、本明細書に記載の代表的化合物についての物理データを提供する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2007204482.tif 000041
【図６】
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【図７】
2007204482.tif 000043
【図８】
2007204482.tif 000044
【図９】
2007204482.tif 000045
【図１０】
2007204482.tif 000046
【図１１】
2007204482.tif 000047
【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
2007204482.tif 000050
【図１５】
2007204482.tif 000051
【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
2007204482.tif 000068
【図３３】
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【図３４】
2007204482.tif 000070
【図３５】
2007204482.tif 000071
【図３６】
2007204482.tif 000072
【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
2007204482.tif 000075
【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
2007204482.tif 000086
【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
2007204482.tif 000091
【図５６】
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【図５７】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
2007204482.tif 000096
【図６１】
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【図６２】
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【図６３】
2007204482.tif 000099
【図６４】
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【図６５】
2007204482.tif 000101
【図６６】
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【図６７】
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【図６８】
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【図６９】
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【図７０】
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【図７１】
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【図７２】
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【図７３】
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【図７４】
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【図７５】
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【図７６】
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【図７７】
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【図７８】
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【図７９】
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【図８０】
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【図８１】
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【図８２】
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【図８３】
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【図８４】
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【図８５】
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【図８６】
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【図８７】
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【図８８】
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【図８９】
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【図９０】
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【図９１】
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【図９２】
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【図９３】
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【図９４】
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【図９５】
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【図９６】
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【図９７】
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【図９８】
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【図９９】
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【図１００】
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【図１０１】
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【図１０２】
2007204482.tif 000138
【図１０３】
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【図１０４】
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【配列表】
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