(57)【要約】【課題】本願発明は、透光板上の生体試料を撮像する手段を有し、かつ該手段に  おいて生体試料中の有形成分に焦点を自動的に合わせる自動合焦機能が装備されること  を特徴とする有形成分分類装置において、粒子に染色液中の色素を均一に結合させるよ  うにすることで、実際の血球成分と同様な撮像画像が得られ、それにより分類装置のプ  ログラムを何ら改変することなく、精度管理し、キャリブレーションを行なう試薬を提  供する。【解決手段】透光板上もしくはフローセル中の生体試料を撮像する手段を有し、か  つ該手段において生体試料中の有形成分に焦点を自動的に合わせる自動合焦機能が装備  されることを特徴とする有形成分分類装置に使用する、粒子を含む標準試薬。【特許請求の範囲】
【請求項１】
透光板中の生体試料を撮像する手段を有し、かつ該手段において生体試料中の有形成分に焦点を自動的に合わせる自動合焦機能が装備される有形成分分類装置に使用する、粒子を含む標準試薬。
【請求項２】
該粒子が、ポリスチレン、メラミン、ポリメタクリル酸、ガラスのうちから少なくとも１つ以上が選ばれる、請求項１記載の標準試薬。
【請求項３】
さらに色素親和剤を含む、請求項２記載の標準試薬。
【請求項４】
色素親和剤が、非イオン性界面活性剤から少なくとも１つ以上が選ばれる請求項３記載の標準試薬。
【請求項５】
非イオン系界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル系界面活性剤、ポリエチレングリコール系界面活性剤、ソルビタン脂肪酸エステル系界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル系界面活性剤から少なくとも１つ以上が選ばれる請求項４記載の標準試薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願発明は、生体試料中の有形成分を分類し、個数計測する自動合焦機能が装備されることを特徴とする有形成分分類装置の精度管理あるいはキャリブレーションに使用する粒子標準試薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来から、生体試料中、特に尿中の有形成分の分析には、フローサイトメーターを用いて検体の塗布標本を作製せず生体試料に染色液を混和した後、懸濁させたままフローセルに流し、物理統計的方法や光学的方法などによって自動分析する装置があるのは公知であり、また、この装置が測定に適切な状態であるか精度管理したり、キャリブレーションを行なうことを目的とする粒子懸濁液は公知である（例えば、特許文献１）。
【特許文献１】特開２００４−１５０８３２号公報
【特許文献２】特開２００１−２５５２６０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかし、上記のフローサイトメーター法により自動分析する装置では、有形成分は常に流れているためそれぞれ焦点を合わせることは極めて困難であり、焦点は一定の位置に固定されている。また、フローセルはある程度厚みがある。これらのことより、上記のフローサイトメーター法では焦点が合わされた位置に流れてきた有形成分しか正確に測定できず、更には該位置から少し離れたところに有形成分が位置した場合は焦点がずれた分だけぼやけてしまい、合焦時とは異なった画像計測結果が得られ、誤った判断結果が得られることがある。
【０００４】
フローサイトメーター法の欠点を解決するために、生体試料を撮像する工程を有し、生体試料中の有形成分を撮像する際、焦点を自動で合わせる機能を装備することで焦点の合った鮮明な画像が得られることを特徴とする分析装置（例えば、特許文献２）が知られているが、鮮明な画像として得られるが故に、この分類装置を精度管理し、キャリブレーションを行なうための粒子はフローサイトメーター法に使用する粒子と比較して、形態学的に有形成分とより相同性があるものでなければならなく、これまで存在しなかった。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
発明者は、鋭意検討した結果、粒子を非イオン性界面活性剤と共存させることで、粒子に染色液中の色素を均一に結合させるようにすることで、実際の血球成分と同様な撮像画像が得られ、それにより分類装置のプログラムを何ら改変することなく、精度管理し、キャリブレーションを行なうことが可能な本願発明を完成した。
【０００６】
すなわち本願発明の要旨は、以下の通りである。
［項１］透光板上の生体試料を撮像する手段を有し、かつ該手段において生体試料中の有形成分に焦点を自動的に合わせる自動合焦機能が装備される有形成分分類装置に使用する、粒子を含む標準試薬。
［項２］ 該粒子が、ポリスチレン、メラミン、ポリメタクリル酸、ガラスのうちから少なくとも１つ以上が選ばれる、項１記載の標準試薬。
［項３］さらに色素親和剤を含む、項２記載の標準試薬。
［項４］色素親和剤が、非イオン性界面活性剤から少なくとも１つ以上が選ばれる項３記載の標準試薬。
［項５］非イオン系界面活性剤が、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル系界面活性剤、ポリエチレングリコール系界面活性剤、ソルビタン脂肪酸エステル系界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル系界面活性剤から少なくとも１つ以上が選ばれる項４記載の標準試薬。
【発明の効果】
【０００７】
本願発明は、透光板上の生体試料を撮像する手段を有し、かつ該手段において生体試料中の有形成分に焦点を自動的に合わせる自動合焦機能が装備されることを特徴とする有形成分分類装置において、粒子に染色液中の色素を均一に結合させるようにすることで、実際の血球成分と同様な撮像画像が得られ、それにより分類装置のプログラムを何ら改変することなく、精度管理し、キャリブレーションを行なう試薬を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本願発明は、生体試料中の有形成分を分類する装置において、分類装置のプログラムを何ら改変することなく、精度管理し、キャリブレーションを行なう試薬に関する。本願発明における生体試料とは、全血液、脊髄液、前立腺液、尿、腹水、関節液、涙液、唾液、血清、血漿など生体流体が含まれる。また、非生物学的性質の他の流体試料を分析することも可能である。
【０００９】
本願発明における有形成分とは、赤血球、白血球などの血球、扁平上皮、移行上皮、尿細管上皮などの上皮細胞、硝子円柱、顆粒円柱、ろう様円柱などの円柱、細菌などが含まれる。
【００１０】
本願発明における粒子は、染色液中の色素との親和性が実在の有形成分とほぼ同程度になれば材質、形状、色、粒子径、濃度など何ら限定されない。材質は好ましくは、ポリスチレン、メラミン、ポリメタクリル酸、ガラスのうちから少なくとも１つ以上が選ばれ、より好ましくは単一のポリマーで形成されたものである。形状は好ましくは、球状粒子であり、より好ましくは、表面が円滑な球状粒子である。色は好ましくは、粒子全面が単一の色であり、より好ましくは白色である。粒子径は好ましくは、有形成分の平均的な大きさである直径５．０μｍ〜１５．０μｍであり、より好ましくは、直径６．０μｍ〜１２．０μｍの粒子径が均一な粒子である。濃度は、粒子同士が接触することがない濃度ならば限定されないが、好ましくは１００個／μｌ〜１０００個／μｌである。
【００１１】
本願発明において、染色液中の色素との親和性が実在の有形成分とほぼ同程度か否かの判断は、透光板中の生体試料を撮像する手段を有し、かつ該手段において生体試料中の有形成分に焦点を自動的に合わせる自動合焦機能が装備されることを特徴とする該有形成分分類装置が取得した撮影画像から判断される。具体的には、染色液中の色素により染色された粒子表面の色調、輝度、明度などが、該有形成分分類装置が実際の有形成分と認識する範囲にあれば染色液中の色素との親和性が実在の有形成分とほぼ同程度の粒子と判断する。この特徴を有し、かつ粒子径が目的の有形成分と同程度の粒子を形態学的に有形成分とより相同性がある粒子と定義する。
【００１２】
本願発明における色素親和剤とは、粒子を造粒した際に粒子表面に付着した粒子の原料や有機溶媒などで形成された油膜層を親水化し、水中の色素が粒子表面に吸着できるようにする物質のことで、非イオン性界面活性剤が使用される。この非イオン性界面活性剤により、疎水性である粒子表面の界面張力を低下させ、染色液中の色素がより吸着できるようになり、実際の血球と同程度の均一かつ色彩の染色像を得ることが可能となる。濃度として好ましくは、０．０１ｗ／ｖ％〜０．５ｗ／ｖ％であり、この濃度範囲ならば、ミセル形成が起こらず、粒子同士の凝集および粒子と保存容器との吸着を防止する波及的効果が得られる。
【実施例】
【００１３】
［実施例］
（１）（粒子試薬の作製）
５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に０．５ｗ／ｖ％になるようにＴｒｉｔｏｎ  （登録商標）  Ｘ−１００を添加し、１００個〜２００個／５０視野（３００個〜７０  ０個／μｌに相当）になるように平均粒子径１０μｍのポリメタクリル酸粒子を懸濁し  た。
（２）（粒子試薬の測定）
尿中有形成分分析装置「Ｕ−ＳＣＡＮＮＥＲ（登録商標）」にて粒子を５０視野撮像し、同分析装置の解析プログラムによる自動計測を実施した。
【００１４】
［比較例］
実施例の（２）の工程で、尿中有形成分分析装置「Ｕ−ＳＣＡＮＮＥＲ（登録商標）」にて粒子を５０視野撮像し、その画像を目視で計測した以外は実施例と同様に測定を実施した。
【００１５】
５重測定を実施した結果を表１に示す。
【００１６】
【表１】
2007178315.tif 000002
【００１７】
認識率（目視での計測数に対する自動計測数の割合）は、９５〜１００％と高く、ほぼ全てを見落とすことなく認識できた。
【産業上の利用可能性】
【００１８】
本願発明は、透光板上もしくはフローセル中の生体試料を撮像する手段を有し、かつ該手段において生体試料中の有形成分に焦点を自動的に合わせる自動合焦機能が装備されることを特徴とする有形成分分類装置において、粒子に染色液中の色素を均一に結合させるようにすることで、実際の血球成分と同様な撮像画像が得られ、それにより分類装置のプログラムを何ら改変することなく、精度管理し、キャリブレーションを行なう試薬を提供できるため、体外診断用医薬品などの各種分析用途に利用することができ、産業界に寄与することが大である。