(57)【要約】      （修正有）【課題】活性酸素を消去する優れた抗酸化能を有する天然物由来の新規抗酸化剤を提供すること。【解決手段】一般式（１）で表される化合物。また該化合物を有効成分とする抗酸化剤、活性酸素消去剤またはそれらが配合された香料組成物、皮膚老化防止用化粧料などの化粧品、飲食品。2007284435.tif 000015【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）：
【化１】
2007284435.tif 000013
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される新規Phloroglucinol誘導体。
【請求項２】
下記一般式（２）：
【化２】
2007284435.tif 000014
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される新規Phloroglucinol誘導体。
【請求項３】
請求項１記載のPhloroglucinol誘導体より選ばれる１種以上の化合物を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項４】
請求項２記載のPhloroglucinol誘導体より選ばれる１種以上の化合物を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項５】
請求項３または請求項４記載の抗酸化剤が配合された香料組成物。
【請求項６】
請求項３または請求項４記載の抗酸化剤が配合された化粧料。
【請求項７】
請求項５記載の香料組成物が配合された化粧料。
【請求項８】
請求項３または請求項４記載の抗酸化剤が配合された飲食品。
【請求項９】
請求項５記載の香料組成物が配合された飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れた活性酸素消去能を有する天然物由来の新規化合物、抗酸化剤、活性酸素消去剤およびそれらが配合された香料組成物、皮膚老化防止用化粧料などの化粧品、飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
老化した皮膚では過酸化脂質が増大し、柔軟性、弾力性を失い、皮膚のしわが増大し、乾燥して滑らかさのない荒れ肌症状が認められている。これらの皮膚症状が現れる原因物質の一つとして、大気中の酸素が紫外線や酵素等の影響を受けて生成するいわゆる活性酸素が考えられている。この活性酸素は、呼吸によって体内に入る酸素によっても、さらには喫煙、ストレス、怒り、不安、恐怖などの激しい感情、暴飲・暴食などでも発生すると言われている。
【０００３】
活性酸素には、フリーラジカルであるスーパーオキシドやヒドロキシラジカルといったものと、非ラジカルである一重項酸素や過酸化水素といったものがある。この活性酸素は必要以上に体内外に存在すると、正常な細胞、細胞膜そしてＤＮＡにも作用し、破壊する。また脂質をも酸化するため、過酸化脂質を生成する。これにより、アトピー症状の悪化、白内障、中風、心筋梗塞、発ガンなど様々な疾病をも誘発する。生体に対しては、コラーゲン線維の架橋、ヒアルロン酸の断片化、ＤＮＡ螺旋の部分開裂、連鎖的ラジカルの発生による組織の損傷等の悪影響を及ぼし、その結果として、皮膚のしわや弾力消失、脱毛といった生体の老化を促進するといわれている。
【０００４】
したがって、活性酸素の生成を抑制することは、皮膚の老化を改善あるいは予防する点で皮膚にとって、あるいは生体内の組織等を正常に保つためにも、非常に重要なことである。これは、老化防止皮膚化粧料や健康食品等の飲食品に求められる重要な要素である。
そのため、従来、生体内に発生した活性酸素を消去する作用のある物質の探索が広く行われてきた。
【０００５】
この様な作用を有する物質として、従来用いられてきたものとしては、天然由来のものでは、脂溶性のトコフェロール（ビタミンＥ）、水溶性のアスコルビン酸（ビタミンＣ）、合成化合物では、ＢＨＴ（ブチルヒドロキシトルエン）、ＢＨＡ（ブチルヒドロキシアニソール）等が挙げられる。また、植物抽出物の中にも抗酸化効果を有するものがあり、化粧料や飲食品に配合して、皮膚の老化を防止しようとする試みがなされてきた。（例えば、特許文献１〜４参照。）
【特許文献１】特開２００３−１２８５６９号公報
【特許文献２】特開２００２−９７１５１号公報
【特許文献３】特開２００２−２０５９３３号公報
【特許文献４】特開２００３−３２１３３７号公報
【特許文献５】ドイツ特開１９８９−３９０７５４３号公報
【非特許文献１】Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，６２（６），５２１（１９９１）
【非特許文献２】Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ２９（４），１０９３（１９９０）
【非特許文献３】Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ２８（６），１６１３（１９８９）
【０００６】
しかしながら、各種の植物抽出物は安全性の面において懸念されるものもあり、また活性酸素消去能が十分ではなかったり、化粧品等の皮膚外用剤の基剤中に配合した場合、有
効な効果を得るにはかなりの高濃度を配合しなければならず、製剤に好ましくない臭いを付与してしまったりする場合があるなど、作用効果や安定性の面ですべてを満足できるものが少ないのが現状であった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上記事情において、安全性が高く、生体内に発生する活性酸素を消去する作用を十分に有し、皮膚等へあるいは飲食品等への適用性の良好な新規抗酸化剤、活性酸素消去剤が求められていた。
【０００８】
そこで、本発明の目的とするところは、抗酸化効果または活性酸素消去効果に優れた新規抗酸化剤または新規活性酸素消去剤、あるいはそれらが配合された香料組成物、皮膚老化防止用化粧料などの化粧品、飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
そこで、本発明者等は上記事情に鑑み鋭意研究した結果、下記一般式（１）または下記一般式（２）で表される新規Phloroglucinol誘導体および該化合物が優れた抗酸化効果を有することを見出し、本発明を完成したものである。
【００１０】
即ち、本発明は、下記一般式（１）
【化１】
2007284435.tif 000002
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される新規Phloroglucino誘導体である。
【００１１】
また、本発明は、下記一般式（２）
【化２】
2007284435.tif 000003
（式中、Ｒはメチル基またはエチル基であることを示す）で表される新規Phloroglucinol誘導体である。
【００１２】
また本発明は、前記のPhloroglucinol誘導体、即ち一般式（１）で表される化合物または一般式（２）で表される化合物より選ばれる１種以上の化合物を有効成分とする抗酸化剤または活性酸素消去剤である。
また本発明は、前記の抗酸化剤または活性酸素消去剤が配合された香料組成物である。
また本発明は、前記の抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物が配合された皮膚老化防止用化粧料などの化粧品、飲食品である。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の化合物は新規な化合物であり、優れた抗酸化効果、活性酸素消去効果を有する。本発明の抗酸化剤または活性酸素消去剤は、植物抽出物であり安全性が高く、非常に優れた抗酸化効果、活性酸素消去効果を発揮する。従って、酸化や活性酸素が関与する生体の各種問題を予防または低減するのに有用である。また、前記抗酸化剤または活性酸素消去剤を配合した本発明の香料組成物は、安全性や抗酸化効果、活性酸素消去効果などに加え、バラエティの広い魅力的な香りを発現できる優れたものである。
更に、前記抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物を配合した本発明の皮膚老化防止用化粧料などの化粧品は、従来の抗酸化剤の使用量を大幅に削減できる。また各種原料の酸化を防止して品質の劣化を抑制すると共に、優れた活性酸素消去効果を有し、かつ過酸化脂質生成を抑制する。従って、肌に適用した場合には、肌荒れを防止し、肌のつや、はり、明るさを保ち、しわを改善する等、皮膚老化防止効果に優れている。また、同様に本発明の飲食品においても、抗酸化剤の使用量の削減、品質劣化の抑制と共に、生体内における活性酸素の消去効果が期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明の化合物は、ヘリクリサム（Ｈｅｌｉｃｈｒｙｓｕｍ）属植物のＨ．ｓｔｏｅｃｈａｓ抽出物から分離・精製することにより単離することができる。
一般式（１）で表される化合物、および一般式（２）で表される化合物は新規である。一般式（１）で表される化合物の幾何異性体、即ち鎖状側鎖がゲラニル基（二重結合がトランス体（E））の化合物は公知であり、抗菌活性を有することが報告されている（特許文献５および非特許文献１〜３）。
【００１５】
本発明の化合物の抽出方法は、例えばＨ．ｓｔｏｅｃｈａｓを各種の溶媒、即ち液化ガス（液体炭酸、液化プロパン、液化ブタン等）、水、炭素数１〜５の低級アルコール類（メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコール等）、含水低級アルコール類、炭素数１〜５の低級アルコールと炭素数１〜５の脂肪酸とのエステル類（酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸ブチル等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、前記エステル類およびケトン類の含水物、ハロゲン化炭化水素類（クロロホルム、ジクロロメタン、ジクロロエタン、トリクロロエタン等）、エーテル類（メチルエーテル、エチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等）、炭化水素類（石油エーテル、ヘキサン等）あるいは前記溶媒の混合物で抽出して得た抽出液を、酸、アルカリ処理、カラムクロマトグラフィー、蒸留、濃縮等により得ることができる。
【００１６】
本発明の化合物は、不純物を全く含まない純品では香りを有しない優れた特徴を有する。本発明の化合物を含有するＨ．ｓｔｏｅｃｈａｓは、カレープラントと俗称されるように、その抽出物は独特の強いカレー様臭気を有する。そのため、Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓ抽出物等の使用に際しては、そのカレー臭が原因となり、最終製品に好ましくない臭気特徴を与え、本発明の化合物の有効濃度を最終製品に配合する事は困難であった。それに対し、本発明の化合物は香りを有しないため、上記問題を全く生じない。
【００１７】
本発明の化合物を産業上利用するためには、必ずしも不純物が全く含まれない状態に精製する必要はなく、本発明の抗酸化剤中または活性酸素消去剤中において本発明の化合物を０．０００００００１質量％（以下、％ともいう）以上含有されていればよい。
また、本発明の化合物を得るには上記ヘリクリサム属植物にこだわらず、当該化合物が０．０００００００１％以上含有されるものが得られる植物を原料としてもよいし、合成で得てもよい。
【００１８】
本発明の香料組成物中への抗酸化剤または活性酸素消去剤の配合量は、香料組成物の使用目的、種類などにより異なるが、本発明の化合物の含有量として香料組成物中に０．０００００００１〜２０％が好ましく、更には０．００００００１〜５％が、特には０．００１〜２％が好ましい。また有効な抗酸化効果を得るのに高濃度を配合しても好ましくない臭いを付与してしまうことはない優れたものである。
【００１９】
本発明のPhloroglucinol誘導体としては、一般式（１）でＲがメチル基である化合物と一般式（１）でＲがエチル基である化合物との任意の割合の混合物でもよく、また、一般式（２）でＲがメチル基である化合物と一般式（２）でＲがエチル基である化合物との任意の割合の混合物でもよい。
また、上記４種類の化合物（即ち、一般式（１）でＲがメチル基である化合物、一般式（１）でＲがエチル基である化合物、一般式（２）でＲがメチル基である化合物、一般式（２）でＲがエチル基である化合物）の任意の割合の混合物でもよい。
【００２０】
本発明の香料組成物中へは、本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤以外に、公知の香料素材や溶剤が用いられる。例えばリモネン、カリオフィレン、ピネンなどの各種炭化水素類；アセトアルデヒド、α−シンナミックアルデヒド、シトラールなどの各種アルデヒド類；マルトール、ベンジルアセトン、ダマセノンなどの各種ケトン類；ブタノール、ベンジルアルコール、リナロールなどの各種アルコール類；ゲラニル  エチル  エーテル、ローズオキサイド、フルフラールなどの各種エーテル・オキサイド類；エチル  アセテート、ベンジル  アセテート、リナリル  アセテートなどの各種エステル類；γ−デカラクトン、クマリン、スクラレオライドなどの各種ラクトン類；インドール、２−イソプロピル−４−メチルチアゾール、フェニルアセトニトリルなどの各種ヘテロ化合物類；ジャスミンアブソリュート、シダーウッドオイル、オリスコンクリートなどの各種天然素材類が挙げられる。使用する溶剤としては、例えばエタノール、ジプロピレングリコール（ＤＰＧともいう）、ベンジル  ベンゾエート、水、トリアセチン、トリエチル  シトレートなどが挙げられる。
本発明の香料組成物は、有効な抗酸化効果を有すると共に、バラエティの広い魅力的な香りを発現することが可能である。
【００２１】
また、本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物の化粧品への配合量は、化粧品の使用目的、種類などにより異なるが、本発明の化合物の含有量として０．０００００００１〜２０％が好ましく、更には０．００００００１〜５％が、特には０．００１〜２％が好ましい。
【００２２】
本発明の化粧品には、油脂、ロウ類、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル類、その他の油性原料、グリセリン等の多価アルコール、界面活性剤、増粘剤等の通常用いられている成分が使用され、これら公知の化粧品用素材と本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物を用いて通常の製造法で得ることが出来る。また、必要に応じて公知の酸化防止剤（ビタミンＣ、ビタミンＥ等）、活性酸素消去剤等を併用してもよい。また化粧品の剤型も任意であり、例えば溶液系、可溶化系、乳化系、エアゾール等がある。更に、化粧品の用途も任意であり、例えば化粧水、乳液、クリーム、パック等のフェイシャル化粧料やファンデーション、口紅、アイシャドウ等のメイクアップ化粧料、芳香化粧料、シャンプー等の洗髪用化粧料、毛髪仕上げ用化粧料、ボディー化粧料、口腔用化粧料、入浴化粧料等がある。本発明の化粧品は抗酸化性が高いので、従来の化粧品に添加されていた抗酸化剤の添加を大幅に削減することが出来る。従って、敏感肌の一部の化粧品使用者における合成抗酸化剤の配合に起因する刺激感の低減も可能である。また、本発明のスキンローションや入浴剤は、肌荒れを防止し、肌のつや、はり、明るさを保ち、しわを改善する効果に優れるので、皮膚老化防止用の化粧料や入浴剤として有用である。
【００２３】
また、本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物の飲食品への配合量は、飲食品の使用目的、種類などにより異なるが、本発明の化合物の含有量として０．０００００００１〜１％が好ましく、更には０．００００００１〜０．１％が、特には０．０００１〜０．０１％が好ましい。本発明の飲食品には、例えば、瓶類、缶類、紙カートン容器、ＰＥＴボトル、レトルト用ラミネート袋、プラスチックカップ等に充填される無果汁飲料、果汁入り飲料、炭酸飲料、乳酸菌飲料、茶類飲料、コーヒー飲料、豆乳飲料、アルコール飲料、スープ類等の飲料類；アイスクリーム、シャーベット、みぞれ等の冷菓類；プリン、ババロア、ゼリー、ヨーグルト等の如きデザート食品類；チョコレート、キャンデイー、チューインガム等の菓子類；カレー、ハヤシライス、シチュー等のレトルト食品；乳製品；調味料；水畜産加工品；スナック食品及びその他のインスタント食品などを挙げることができる。
【００２４】
本発明の飲食品は、公知の飲食品用素材と本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物を用いて通常の製造法で得ることが出来る。また、必要に応じて公知の酸化防止剤（ビタミンＣ、ビタミンＥ等）、活性酸素消去剤等を併用してもよい。
【実施例】
【００２５】
以下、本発明を試験例および実施例に基づいて説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２６】
実施例１Ａ  （ヘリクリサム属植物からの抽出）
Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓの乾燥した花１キログラムをヘキサン１０リットルに室温で浸漬して花香成分および抗酸化成分を移行させた後、花を除いた。次に、溶媒を留去してコンクリート２５０グラムを得た。次にコンクリート２５０グラムをエチルアルコール２．５リットルに加温溶解して再抽出し、溶液を−１５℃〜−２５℃に冷却してワックスなどの不溶解物を除いた後、減圧下でエチルアルコールを留去し赤褐色、粘着状のアブソリュート１９０グラムを得た。強いカレー臭を有していた。これをヘキサンに一定量を溶解させた。次に、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離させた後水層部分を除き、この操作を５回以上行った。この操作の最後に、水を加え、同じ操作を行い、有機層を残した。次に、有機層に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムを加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離させた後、水層部分を除き、この操作を５回以上行った。この操作の最後に、水を加え、同じ操作を行い、有機層を残した。ｐＨ試験紙でｐＨ７になっていることを確認した後、乾燥硫酸マグネシウム又は乾燥塩化カルシウムを加え、数時間攪拌、放置した。その後、濾紙等を用いて有機層を濾過し、溶媒を除去して、ヘリクリサム属植物の抽出物の中性画分を得た。
【００２７】
次に上記中性画分８０グラムを、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）〜酢酸エチル／メタノール＝１：１（ｖ／ｖ）の移動相を用いて常法に従いシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、当該Phloroglucinol誘導体群のうち、Ｒがメチル基およびエチル基である化合物を主成分とする２つの画分を、それぞれ４．９グラム（Ｒがメチル基である化合物の純度７２％、以下Ｒがメチル基である粗精製品−１ともいう）、３．２グラム（Ｒがエチル基である化合物の純度７０％、以下Ｒがエチル基である粗精製品−２ともいう）得た。これら粗精製品の臭いは無かった。尚、後記の実施例では上記粗精製品−１および粗精製品−２以外に、同様な方法でスケールを上げた方法で得た粗精製品−１および粗精製品−２も用いた。
【００２８】
さらに、それぞれの画分について、前記した溶剤でシリカゲルカラムクロマトグラフィーを繰り返し、一般式（１）で表される化合物のＲがメチル基およびエチル基である化合物を、それぞれ０．８グラムおよび０．５グラム得た（これらをそれぞれ、精製品−１および精製品−２ともいう）。
【００２９】
各精製品のＩＲ、ＵＶ、ＥＩ−ＭＳならびにプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルデータを以下に示した。
【００３０】
（精製品−１）
【００３１】
IR(KBr)(cm−１):982，1074, 1128, 1171, 1267, 1366, 1437, 1568, 1618, 1664, 2926
【００３２】
UV(λmax, MeOH)(nm):206, 232(sh), 292, 352(sh)
【００３３】
EI-MS(m/z):456(M+), 368, 333, 304, 292, 247, 235, 219, 181, 163, 109, 69
【００３４】
１H-NMR (400MHz,CD３OD;ppm) δ:1.62(3H,s), 1.64(3H,s), 1.67(3H,s), 1.92(3H,s), 2.09(2H), 2.21(3H,s), 2.21(2H), 2.66(3H,s), 3.27(2H,d), 3.54(2H,s), 5.15(2H,dd)
【００３５】
１３C-NMR (100MHz,CD３OD;ppm) δ:10.1, 17.2, 17.8, 18.9, 22.4, 23.7, 26.0, 27.6, 32.9, 33.1, 102.7, 106.9, 107.1, 109.6, 111.1, 124.4, 125.7, 132.1, 136.2, 158.0, 159.5, 161.4, 161.6, 170.6, 171.6, 205.5
【００３６】
精製品−１のHMBCスペクトルなどの２次元ＮＭＲスペクトルデータを解析した結果、以下のカーボンＮＭＲスペクトル測定値群が側鎖のネリル基に基づくものであると考えられた。
【００３７】
１３C-NMR（100MHz、CD３OD；ppm）  δ：17.8, 22.3, 23.7, 26.0, 27.6, 32.9, 124.4, 125.7, 132.1, 136.2
【００３８】
そして, 市販のネロールの重メタノールにおけるカーボンＮＭＲスペクトルを測定し、得られたデータを以下に示す。アルコール部分を示す５９．２ｐｐｍ以外は先のデータとよく一致した。
【００３９】
１３C-NMR（100MHz、CD３OD；ppm）  δ：17.7, 23.7, 25.9, 27.8, 33.0, 59.2, 125.0, 125.7, 132.7, 139.6
【００４０】
プロトンＮＭＲスペクトルデータのうち、オレフィン水素である５．１４ｐｐｍに対しＮＯＥ実験を行うと、オレフィンメチルの１．６４ｐｐｍおよび１．６７ｐｐｍにＮＯＥによるシグナルの増加が認められた。また、芳香族環と側鎖二重結合に挟まれたメチレン水素シグナルである３．２７ｐｐｍに対して同様の実験を行うと、オレフィンの隣であるメチレン水素の２．２１ｐｐｍにＮＯＥが認められた。これらの結果から、二重結合に隣接する２つのメチレンおよびオレフィン水素とオレフィンメチル基とが、二重結合に対してそれぞれ同じ側にあることがわかり、本発明の化合物における鎖状側鎖がネリル基（二重結合がシス体（Z））であることが判明した。
【００４１】
（精製品−２）
【００４２】
IR(KBr)(cm−１): 982, 1074, 1128, 1171, 1267, 1366, 1437, 1568, 1618, 1664, 2926
【００４３】
UV(λmax,MeOH)(nm): 206, 232(sh), 292, 352(sh)
【００４４】
EI-MS(m/z):470(M+), 401, 385, 347, 334, 304, 303, 235, 219, 181, 155, 69
【００４５】
１H-NMR (400MHz,CD３OD;ppm)   δ:1.19(3H,t), 1.62(3H,s), 1.65(3H,s), 1.66(3H,s), 1.97(3H,s), 2.10(2H), 2.21(2H), 2.59(2H,q), 2.66(3H,s), 3.30(2H,d),  3.59(2H,s),  5.14(2H,dd)
【００４６】
１３C-NMR(100MHz,CD３OD;ppm)  δ：9.6, 11.8, 17.8, 18.6, 22.4, 23.7, 25.1, 26.0, 27.6, 32.9, 33.1, 103.2, 106.5, 107.0, 109.5, 109.9, 124.0, 125.6, 132.2, 136.8, 159.4, 160.9, 161.3, 162.9, 168.9, 170.7, 205.7
【００４７】
精製品−２も、精製品−１と同様にして、ＮＭＲスペクトルデータから鎖状側鎖がネリル基（二重結合がシス体（Z））であることが判明した。
【００４８】
実施例１Ｂ
Ｈ．ｓｔｏｅｃｈａｓの乾燥した花１ｋｇを、ヘキサン１０Ｌに浸漬させ、室温で１週間静置後、花を除いた。次に、溶媒を留去してコンクリート２５０ｇを得た。次にコンクリート２５０ｇをエチルアルコール２．５Ｌに加温溶解して再抽出し、溶液を−１５℃〜−２５℃に冷却してワックスなどの不溶解物を除いた後、減圧下でエチルアルコールを留去し赤褐色、粘稠なアブソリュート１９０ｇを得た。
【００４９】
上記アブソリュート１００ｇを、酢酸エチル０．５Ｌに溶解させた。次に、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を１５０ｍｌ加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離したら水層部分を除いた。この操作を５回行った。水を加え同様の操作を行い、有機層を残した。
次に、有機層に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液を加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離したら、水層部分を除き、この操作を５回行った。水を加え同様の操作を行い、有機層を残した。
ｐＨ試験紙でｐＨが７になっていることを確認した後、無水硫酸マグネシウムを加えた。濾紙等を用いて有機層を濾過し、溶媒を除去して、ヘリクリサム属植物の抽出物の中性画分を８０ｇ得た。
【００５０】
上記中性画分８０ｇを、ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）、酢酸エチル、酢酸エチル／メタノール＝１：１（ｖ／ｖ）の移動相を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行った。
【００５１】
酢酸エチル／メタノール＝１：１（ｖ／ｖ）留出画分２７ｇを、６０％メタノール水溶液、７０％メタノール水溶液、およびメタノールによる逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィーを行った。６０％メタノール水溶液画分２１ｇを、酢酸エチルおよび酢酸エチル／メタノール＝９：１（ｖ／ｖ）を移動相とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーを繰り返し、一般式（１）（Ｒはメチル基）で表される化合物（純度９８％）を０．５ｇを得て、ＩＲ、ＵＶ、ＥＩ−ＭＳならびにプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルデータが、実施例１Ａに記載の精製品―１のデータと一致することを確認した。また、同時に一般式（２）（Ｒはメチル基）で表される化合物（純度９７％）を３．８ｇ（以下、実施例１Ｂの化合物１ともいう）得た。
【００５２】
さらに、酢酸エチル留出画分２２ｇを、６０％メタノール水溶液、７０％メタノール水溶液、およびメタノールによる逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィーを行った。６０％メタノール水溶液留出画分より、一般式（２）で表される化合物（Ｒがエチル基で表される化合物を５１％、Ｒがメチル基で表される化合物を４５％含有する混合物）を１２ｇ得た。このものを、酢酸エチルを移動相とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーを繰返して精製し、一般式（２）（Ｒはエチル基）で表される化合物（純度９０％）を０．３ｇ得た（以下、実施例１Ｂの化合物２ともいう）。
また、７０％メタノール水溶液留出画分３．５ｇを、酢酸エチルおよび酢酸エチル／メタノール＝９：１（ｖ／ｖ）を移動相とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーを繰り返し、一般式（１）（Ｒはエチル基）で表される化合物（純度８７％）を０．４ｇ得て、ＩＲ、ＵＶ、ＥＩ−ＭＳならびにプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルデータが、実施例１Ａに記載の精製品−２のデータと一致することを確認した。
【００５３】
上記で単離した化合物のプロトンおよびカーボン１３−ＮＭＲスペクトル、ならびにＥＩ−ＭＳスペクトルを測定して、それぞれの構造を確認した。
【００５４】
一般式（２）（Ｒはメチル基）で表される化合物（純度９７％）、即ち実施例１Ｂの化合物１のスペクトルデータを以下に示す。
【００５５】
IR(KBr)(cm−１):802, 985, 1080, 1118, 1134, 1176, 1267, 1290, 1363, 1376, 1429, 1500, 1618, 1660, 2929
【００５６】
１H-NMR(400MHz, CD３OD; ppm)  δ:1.62(6H,s), 1.67(3H,s), 1.87(3H,s), 2.08(2H), 2.18(3H,s), 2.20(2H), 2.66(3H,s), 3.22(2H,d), 3.51(2H,br), 5.17(1H,dd), 5.22(1H,dd)
【００５７】
１３C-NMR (100MHz, CD３OD; ppm)  δ: 10.5, 17.3, 17.7, 20.0, 22.4, 23.7, 25.9, 27.8, 32.9, 33.2, 101.3, 106.5, 108.8, 109.4, 114.4, 125.6, 125.9, 131.8, 134.7, 156.0, 159.7, 162.6, 163.0, 170.9, 180.2, 205.1
【００５８】
一般式（２）（Ｒがエチル基）で表される化合物（純度９０％）、即ち実施例１Ｂの化合物２のスペクトルデータを以下に示す。
【００５９】
IR(KBr)(cm−１):802, 988, 1084, 1117, 1173, 1267, 1290, 1367, 1431, 1501, 1616, 1655, 2876
【００６０】
１H-NMR (400MHz, CD３OD; ppm)  δ: 1.17(3H, t), 1.63(6H, s), 1.67(3H, s), 1.88(3H, s), 2.09(2H, dd), 2.20(2H, dd), 2.52(2H, dd), 2.66(3H, s), 3.21(2H, d), 3.51(2H), 5.17(1H, dd), 5.22(1H, dd)
【００６１】
１３C-NMR (100MHz, CD３OD; ppm)  δ: 10.1, 12.2, 17.8, 20.0, 22.4, 23.7, 25.3, 26.0, 27.8, 32.9, 33.2, 101.3, 106.5, 108.8, 109.3, 113.6, 125.6, 125.9, 131.9, 134.7,  160.6, 162.7, 171.0, 180.4, 205.2
【００６２】
上記Phloroglucinol誘導体の純度を測定した高速液体クロマトグラフィーの分析した、ピーク面積比から算出した結果である。
カラム：ＯＤＳ−５−Ａ（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）（ＹＭＣ社製）
検出器：２０５ｎｍ（ＵＶ）
移動相：アセトニトリル：３０ｍ  ｍｏｌ／Ｌギ酸アンモニウム水溶液＝６２．５：３７．５
【００６３】
実施例１Ｃ
実施例１Ｂで製造したアブソリュート９０ｇを、酢酸エチル０．５Ｌに溶解させた。有機層に１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液を加え良く攪拌した後、水層部分を除いた。この操作を５回行った。水を加え、同様の操作を行い有機層を残した。
次に、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え良く攪拌した後、静止させ２層に分離したら水層部分を除いた。この操作を５回行った。水を加え同様の操作を行い有機層を残した。
ｐＨ試験紙でｐＨが７になっていることを確認した後、無水硫酸マグネシウムを加え、放置した。その後、濾紙等を用いて有機層を濾過し、溶媒を除去して、ヘリクリサム属植物の抽出物の中性画分（以下、実施例１Ｃ中性画分という）を７２ｇ得た。
【００６４】
実施例１Ｃ中性画分のプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルを重メタノールにて測定した。
主に観測されたスペクトルデータは、一般式（１）（Ｒがメチル基およびエチル基）で表される化合物に基づくプロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルデータであった。従って、実施例１Ｃ中性画分に含まれる主なPhloroglucinol誘導体は、一般式（１）（Ｒはメチル基またはエチル基）で表される構造と確認した。
【００６５】
試験例１  活性酸素消去効果試験（ＮＢＴ法）
活性酸素を消去する効果を測定する方法は各種あるが、今回は活性酸素の一つであるスーパーオキシド（Ｏ２−）の消去効果を測定した。方法は以下に示す通りである。すなわち、キサンチン−キサンチンオキシダーゼ系により活性酸素の一つであるスーパーオキシド（Ｏ２−）を発生させ、試料溶液による消去率を求めた。スーパーオキシド（Ｏ２−）はニトロブルーテトラゾリウムと反応させて、ジホルマゾンとし、５６０ｎｍの吸光度により測定した（ＮＢＴ法）。
【００６６】
０．０５ｍｏｌ／Ｌ炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ１０．２）２．４ｍｌ、３．０ｍ  ｍｏｌ／Ｌキサンチン０．１ｍｌ、３．０ｍ  ｍｏｌ／Ｌエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム０．１ｍｌ、０．１５％牛血清アルブミン０．１ｍｌ、及び０．７５ｍ  ｍｏｌ／Ｌニトロブルーテトラゾリウム０．１ｍｌを含む発色試液２．９ｍｌに対し、試料溶液０．１ｍｌを加え、２５℃、１０分加温する。そこにバターミルク由来の２５０倍希釈キサンチンオキシダーゼ０．１ｍｌを加えて攪拌した後、２５℃にて２０分間放置した。６．０ｍ  ｍｏｌ／Ｌ塩化第二銅を含む反応停止液０．１ｍｌを加えて分光光度計にて５６０ｎｍの吸光度を測定し、その値をＳとした。試薬ブランクは酵素液の代わりにリン酸緩衝液０．１ｍｌを加え、コントロールは試料溶液の代わりに希釈溶液０．１ｍｌを加え、コントロールの試薬ブランクは試料溶液の代わりに希釈溶液０．１ｍｌを用い、酵素液の代わりに炭酸ナトリウム緩衝液０．１ｍｌを加えて同様に測定した。尚、これらの値をそれぞれＳ’、Ｃ、Ｃ’とした。各試料溶液濃度におけるスーパーオキシド消去率を下記式により計算して求めた。尚、各試料溶液はエタノールで希釈した。
【００６７】
［式］
スーパーオキシド消去率（％）＝１００×［１−（Ｓ−Ｓ’）／（Ｃ−Ｃ’）］
【００６８】
得られた結果を下記に示す。
【表１】
2007284435.tif 000004
【００６９】
上記の結果から、本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤は、汎用されている天然系抗酸化剤であるα−トコフェロールや合成抗酸化剤であるＢＨＴよりも高い活性酸素消去能を有し、また香料の中でも高い抗酸化性を有すると言われているローズマリーオイルやオイゲノールよりも、はるかに優れた抗酸化能を有することがわかる。
【００７０】
試験例２  活性酸素消去効果試験（ＤＰＰＨ法）
一般式（２）で表される化合物の抗酸化活性を試験するために、有機ラジカルである1、1-ジフェニル-2-ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）消去活性を調べた。以下に試験方法を示す。
即ち、９６ウェルマイクロプレートに１００ｍ  ｍｏｌ／Ｌトリス緩衝液（ｐＨ７．５、和光純薬）を８０μｌ、９９．５％エタノール（純正化学）にて濃度調製した各試料溶液を２０μｌ、９９．５％エタノール（純正化学）にて濃度調製した０．５ｍ  ｍｏｌ／Ｌ  ＤＰＰＨ(１,１−Ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２−ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ、和光純薬)を１００μｌ加えた後攪拌し、遮光の状態で室温で２０分間インキュベートした。その後、分光光度計（Ｍｕｌｔｉ−Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｔｏｍｅｔｅｒ  Ｖｉｅｎｔ  ＸＳ / 大日本住友ファーマ）にて５１７ｎｍの吸光度Ａを測定した。
一方、ＤＰＰＨを加えないもの（ブランク）とサンプルを加えないもの（コントロール）で同様の操作を行い、得られた吸光度（それぞれＢとＣ）を測定し、活性酸素消去率（％）を得た。
【００７１】
（ＩＣ５０計算式）
活性酸素消去率（％）＝｛１−（Ａ−Ｂ）/Ｃ｝×１００
（但し、Ａ：サンプルの吸光度、Ｂ：ブランクの吸光度、Ｃ：コントロールの吸光度）
同様に表１に示す各試料を用い試験を行った。横軸に濃度、縦軸に活性酸素消去率をプロットしたグラフを作成し、このグラフから活性酸素を５０％抑制する濃度(以後、ＩＣ５０と表す。)を求めた。
【００７２】
結果を表１に示す。
【００７３】
活性酸素消去効果試験（ＤＰＰＨ法）とＩＣ５０の結果
【表２】
2007284435.tif 000005
上記の結果から、実施例１Ｂの化合物１及び２はＤＰＰＨラジカル消去能が極めて高いことが判明した。
【００７４】
実施例２（香料処方例１、香料比較例１）
本発明の抗酸化剤（活性酸素消去剤でもある）を配合して、下記処方のハーブ系調合香料を作製した。
【００７５】
【表３】
2007284435.tif 000006
【００７６】
得られた香料組成物である香料処方例1は、本発明の抗酸化剤を添加しても香りのバラ
ンスを崩すことなく、従来のハーブ系調合香料組成物である香料比較例1と同様に優れた
匂い特性を有している。
【００７７】
実施例３（香料処方例２、香料比較例２）
本発明の抗酸化剤（活性酸素消去剤でもある）を配合して、下記処方のフローラル系調合香料を作製した。
【００７８】
【表４】
2007284435.tif 000007
【００７９】
得られた香料組成物である香料処方例２は、抗酸化剤を添加しても香りのバランスを崩
すことなく、従来のフローラル系調合香料組成物である香料比較例２と同様に優れた匂い特性を有している。
【００８０】
実施例４〜７及び比較例１〜３  （スキンローション）
表４記載の組成のスキンローションを、下記方法に従い調製した。
【００８１】
【表５】
2007284435.tif 000008
【００８２】
スキンローションの調製法
水相、アルコール相を各々均一に溶解し、そして水相とアルコール相とを混合攪拌分散し可溶化を行い、次いで容器に充填する。使用時には内容物を均一に振盪分散して使用す
る。
【００８３】
上記で調製したスキンローションを用いて使用試験を行い、皮膚老化防止効果を調べた。試験方法は下記に示す通りである。
【００８４】
試験方法
８０名の女性被験者の顔面を左右に分け、一方に上記の実施例４〜７、他方に実施例４〜５に対しては比較例１のスキンローション、実施例６に対しては比較例２のスキンローション、そして実施例７に対しては比較例３のスキンローションを毎日２回以上塗布してもらい、２ヵ月後それぞれの比較例を基準として下記の判定基準により各評価項目について評点を出してもらい、評点の合計値により評価した。
被験者を１群２０名にわけて４群とし、実施例４〜７の各スキンローション４種について試験を行った。その結果を表６に示す。
【００８５】
（判定基準）
＋３：比較例１〜３よりも非常によい
＋２：比較例１〜３よりもかなりよい
＋１：比較例１〜３よりもややよい
０：差がない
−１：比較例１〜３の方がややよい
−２：比較例１〜３の方がかなりよい
−３：比較例１〜３の方が非常によい
【００８６】
【表６】
2007284435.tif 000009
【００８７】
表６より明らかなように、本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物を有効成分として含有するスキンローションは、肌荒れを防止し、肌のつや、はり、明るさを保ち、しわを改善する効果に優れ、皮膚老化防止用化粧料として用いることができる。
【００８８】
実施例８〜１１及び比較例４  （入浴剤）
下記組成の入浴剤を、常法に従い調製した。尚、この入浴剤は使用時に約３０００倍に希釈される。
【００８９】
【表７】
2007284435.tif 000010
【００９０】
上記入浴剤を８０名の被験者を１群２０名にわけて４群とし、三週間毎日の入浴時に比較例４の入浴剤を使用させた。その後、続けて実施例８〜１１の各入浴剤を使用させた。そして、比較例４を基準として下記の判定基準により各評価項目について評点を出してもらい、評点の合計値により評価した。
【００９１】
（判定基準）
＋３：比較例４よりも改善され非常によい
＋２：比較例４よりもかなり改善された
＋１：比較例４よりもやや改善された
０：差がない
−１：比較例４の方がややよい
−２：比較例４の方がかなりよい
−３：比較例４の方が非常によい
【００９２】
【表８】
2007284435.tif 000011
【００９３】
表８より明らかなように、本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤または香料組成物を有効成分として含有する入浴剤は、肌荒れを防止し、肌のつや、はり、明るさを保ち、しわを改善する効果に優れ、皮膚老化防止用入浴剤として用いることができる。
【００９４】
尚、前記実施例に係るスキンローション及び入浴剤による発赤や乾燥等の異常は認めら
れなかった。
【００９５】
実施例１２  （無果汁レモン炭酸健康飲料）
下記表９に示す処方に従って無果汁レモン炭酸健康飲料（Brix 7.4、pH 3.2）を調製した。尚、Ｒがメチル基である粗精製品−１は、その１０（Ｗ／Ｗ）％アルコール溶液を３０ｐｐｍの濃度になるように添加・配合した。
【００９６】
【表９】
2007284435.tif 000012
【産業上の利用可能性】
【００９７】
本発明の化合物は抗酸化剤、活性酸素消去剤の有効成分として有用である。また本発明の抗酸化剤、活性酸素消去剤は、植物抽出物であり安全性が高く、非常に優れた抗酸化効果、活性酸素消去効果を発揮する。従って、酸化や活性酸素が関与するあらゆる分野、例えば皮膚老化防止用化粧料などの化粧品、飲食品、健康食品に好適に用いることが出来る。また、本発明の香料組成物は、安全性や抗酸化効果、活性酸素消去効果などに加え、バラエティの広い魅力的な香りを発現するような優れたものであるので、化粧品、飲食品、健康食品に好適に用いることが出来る。