(57)【要約】【課題】            本発明は、優れた保湿作用、ＡＴＰ産生促進作用、美白作用、抗酸化作用、中性脂肪蓄積抑制作用、及びコラーゲン産生促進作用などを有する有効成分を見出し、皮膚外用剤や飲食品などの分野に幅広く応用が可能な保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤を提供することを目的とする。【解決手段】        ナンヨウスギ属植物の抽出物を保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤として用いる。また、ナンヨウスギ属植物の抽出物を皮膚外用剤や食品等の組成物に配合することにより、優れた保湿作用、ＡＴＰ産生促進作用、美白作用、抗酸化作用、中性脂肪蓄積抑制作用、及びコラーゲン産生促進作用を発揮する様々な組成物を提供することができる。【選択図】          なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする保湿剤。
【請求項２】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とするＡＴＰ産生促進剤。
【請求項３】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする美白剤。
【請求項４】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする抗酸化剤。
【請求項５】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする中性脂肪蓄積抑制剤。
【請求項６】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項７】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする美肌用皮膚外用剤。
【請求項８】
ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を有効成分とする美容用食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤に関する。さらに詳しくは、ナンヨウスギ属（Ａｒａｕｃａｒｉａ）植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物を含有する保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
加齢、紫外線、ストレスなどによるシワ、シミ、皮膚の弾性低下といった皮膚症状の要因として、乾燥、細胞機能低下、紫外線によるメラニン産生や色素沈着、真皮マトリックス成分の減少や変性、紫外線等による細胞の酸化傷害などが挙げられる。このような皮膚症状を防止・改善するために、様々な天然由来成分の検索及び配合検討が従来なされてきた。ＡＴＰ産生促進剤としては、酵母エキス（特許文献１参照）、美白剤としては、白鶴霊芝の水および／または有機溶媒抽出物（特許文献２参照）、抗酸化剤としては、サルオガセ科サルオガセ属植物の抽出物（特許文献３参照）、中性脂肪蓄積抑制剤としては、褐藻の酵素分解物（特許文献４参照）が知られている。
【０００３】
しかし、天然由来成分の中には未だその効果が知られていないものも数多く存在すると考えられ、より優れた作用を有する保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤などの開発が期待されている。
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−１０９４７号公報
【特許文献２】特開２００３−８９６３０号公報
【特許文献３】特開平１０−１８２４１３号公報
【特許文献３】特開平０７−２７８００５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
そこで、本発明者らは、皮膚外用剤や飲食品などの分野に幅広く応用が可能な保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤を見出すために、天然由来の種々の物質について検討を行った。その結果、ナンヨウスギ属植物より選ばれる１種又は２種以上の植物の抽出物に優れた保湿作用、ＡＴＰ産生促進作用、美白作用、抗酸化作用、中性脂肪蓄積抑制作用、及びコラーゲン産生促進作用を見出し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、皮膚外用剤や食品などの分野に幅広く応用が可能な保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤は、ナンヨウスギ属植物の１種または２種以上の植物の抽出物を有効成分とする。これらの保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤は、皮膚外用剤や食品（飲料を含む）など種々の組成物に配合することが可能であり、これにより美容や脂質代謝改善に優れた組成物を提供することができる。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、優れた効果を有する保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤を得ることができる。また、これらを皮膚外用剤や食品等に配合することにより、シワ、タルミ、肌のハリ、シミ、クスミといった種々の皮膚症状や脂質代謝改善に優れた効果を発揮する組成物を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
ナンヨウスギ属植物としては、ナンヨウスギ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｉｉ）、チリマツ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ａｒａｕｃａｎａ）、ヒロハナンヨウスギ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｂｉｄｗｉｌｌｉｉ）、シマナンヨウスギ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌｌａ）、アウカリア・コルムナリス（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｃｏｌｕｍｎａｒｉｓ）、アウカリア・フムボルドテンシス（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｈｕｍｂｏｌｄｔｅｎｓｉｓ）、アウカリア・モンタナ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｍｏｎｔａｎａ）、アウカリア・ムエレリ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｍｕｅｌｌｅｒｉ）、アウカリア・スコプロルム（Ａｒａｕｃａｒｉａ ｓｃｏｐｕｌｏｒｕｍ）などが知られている。本発明の原料として用いられる植物は、ナンヨウスギ属植物であれば特に限定されないが、入手が比較的容易であることや有効性などの理由から、ナンヨウスギ、ヒロハナンヨウスギ、シマナンヨウスギ、アウカリア・ムエレリ、アウカリア・コルムナリスを用いることが好ましい。
【００１０】
これらナンヨウスギ属植物を使用する際は、そのまま粉砕して使用することもできるが、抽出物を用いるとよい。ただし、本発明ではナンヨウスギ属植物の原体や乾燥物も抽出物に含まれる。抽出には、ナンヨウスギ属植物の幹、枝、葉、花、種子、樹皮、樹液、根、茎、芽などのいずれの部位を用いても構わないが、簡便に利用するには、葉、茎、種子を用いるとよく、有効性の点からは葉や茎を用いるとよい。抽出の際は、生のまま用いてもよいが、抽出効率を考えると、細切、乾燥、粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶媒に浸漬するか、超臨界流体や亜臨界流体を用いた抽出方法でも行うことができる。抽出効率を上げるため、撹拌や抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。
【００１１】
抽出溶媒としては、水の他、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等の低級アルコール、１、３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール、エチルエーテル、プロピルエーテル等のエーテル類、酢酸ブチル、酢酸エチル等のエステル類、アセトン、エチルメチルケトン等のケトン類などの溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以上を選択して用いる。また、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。さらに、水や二酸化炭素、エチレン、プロピレン、エタノール、メタノール、アンモニアなどの１種又は２種以上の超臨界流体や亜臨界流体を用いてもよい。
【００１２】
ナンヨウスギ属植物の上記溶媒による抽出物は、そのままでも使用することができるが、濃縮、乾固した物を水や極性溶媒に再度溶解して使用することもでき、これらの生理作用を損なわない範囲で脱色、脱臭、脱塩等の精製処理やカラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。ナンヨウスギ属植物の前記抽出物やその処理物及び分画物は、各処理及び分画後に凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。
【００１３】
ナンヨウスギ属植物の抽出物は、優れた保湿作用、ＡＴＰ産生促進作用、美白作用、抗酸化作用、中性脂肪蓄積抑制作用、及びコラーゲン産生促進作用を有し、保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤として利用することができる。また、ナンヨウスギ属植物の抽出物を有効成分とする保湿剤、ＡＴＰ産生促進剤、美白剤、抗酸化剤、中性脂肪蓄積抑制剤、及びコラーゲン産生促進剤は、皮膚に外用するだけではなく、毛髪に利用することや経口摂取も可能であり、食品（飲料を含む）、あるいは医薬品などにも応用することが可能である。
【００１４】
ナンヨウスギ属植物の抽出物を有効成分とする保湿剤は、皮膚や毛髪に対して優れた保湿作用を発揮し、特に皮膚に対する保湿効果が高い。
【００１５】
ナンヨウスギ属植物の抽出物を有効成分とするＡＴＰ産生促進剤は、種々の細胞に対して優れたＡＴＰ産生促進作用を発揮するが、特に真皮線維芽細胞と表皮細胞に対して優れた効果を発揮する。
【００１６】
ナンヨウスギ属植物の抽出物を有効成分とする美白剤は、シミ・ソバカスといった色素沈着症状の改善に効果を発揮し、特にチロシナーゼ活性の阻害やメラニンの産生抑制に対して優れた効果を発揮する。
【００１７】
ナンヨウスギ属植物の抽出物を有効成分とする抗酸化剤は、優れた抗酸化作用を発揮するが、特にフリーラジカル消去作用に優れた効果を発揮する。
【００１８】
ナンヨウスギ属植物の抽出物を有効成分とするコラーゲン産生促進剤は、優れたコラーゲン産生促進作用を発揮するが、特にタイプ３コラーゲンの産生促進作用に優れた効果を発揮する。３型コラーゲンは、ベビーコラーゲンとも呼ばれ、皮膚に柔軟性を付与するとともに肌のみずみずしさを保ち、細胞を再生し成長させる役割を果たしている。新生児の真皮では通常の１型コラーゲンと３型コラーゲンがほぼ等量存在するが、２５歳以降は３型コラーゲンが作られなくなり、３型コラーゲン量が減少する。３型コラーゲンの減少すると皮膚の柔軟性が無くなるため、３型コラーゲンの産生量を促進することにより皮膚の柔軟性を高めることができる。
【００１９】
また、ナンヨウスギ属植物の抽出物を皮膚外用剤に配合することにより、シワ、タルミ、肌のハリ、シミ、クスミ、乾燥、小じわ等の皮膚症状の防止・改善に優れた効果を発揮する美肌用の皮膚外用剤を得ることができ、保湿用皮膚外用剤、老化防止改善用皮膚外用剤、美白用皮膚外用剤、肌引き締め用皮膚外用剤としても用いることができる。さらに、ナンヨウスギ属植物の抽出物は、美容や健康維持を目的とするような食品にも用いることもでき、美容用食品や脂質代謝改善用食品を得ることができる。
【００２０】
ナンヨウスギ属植物の抽出物を皮膚外用剤や食品等の組成物に配合する際の配合量は、組成物の種類や使用目的等によって調整することができるが、効果や安定性などの点から、全量に対して０．０００１〜５０．０重量％が好ましく、より好ましくは、０．００１〜２５．０重量％である。
【００２１】
ナンヨウスギ属植物の抽出物を配合する組成物の剤型は任意であるが、皮膚外用剤の場合には、ローションなどの可溶化系、クリームや乳液などの乳化系、カラミンローション等の分散系、エアゾール、軟膏剤、粉末、顆粒などの種々の剤型で提供することもできる。また、組成物が経口用医薬品や食品の場合には、ドリンク剤・点滴剤などの液剤、ガム・飴のような固形剤、カプセル、粉末、顆粒、錠剤などの一般的な剤型とすることができる。
【００２２】
なお、ナンヨウスギ属植物の抽出物を配合する皮膚外用剤には、ナンヨウスギ属植物の抽出物の他に、必要に応じて、通常医薬品、医薬部外品、皮膚化粧料、毛髪用化粧料、洗浄料、及び食品に配合される油性成分、粉体、色素、乳化剤、可溶化剤、洗浄剤、紫外線吸収剤、増粘剤、薬剤、香料、樹脂、防菌防黴剤、アルコール類、調味料、賦形剤等を適宜配合することができる。また、本発明の効果を損なわない範囲において、他の保湿剤、美白剤、ＡＴＰ産生促進剤、中性脂肪蓄積抑制剤、あるいはコラーゲン産生促進剤等との併用も可能である。
【実施例】
【００２３】
以下に、ナンヨウスギ属植物の抽出物の製造例、各作用を評価するための試験、皮膚外用剤や食品としての処方例、使用試験についてさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれによってなんら限定されるものではない。
【００２４】
［製造例１］
ナンヨウスギ属植物の葉の乾燥粉砕物１ｋｇに５０重量％エタノール水溶液を４０Ｌ加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ナンヨウスギ属植物抽出物を得た。
【００２５】
［製造例２］
ナンヨウスギ属植物の葉の乾燥粉砕物１ｋｇに水を２０Ｌ加え、９０℃にて６時間還流して抽出した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ナンヨウスギ属植物抽出物を得た。
【００２６】
［製造例３］
ナンヨウスギ属植物の葉の乾燥粉砕物１ｋｇにメタノールを１０Ｌ加え、室温で７日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、ナンヨウスギ属植物抽出物を得た。
【００２７】
［製造例４］
超臨界抽出装置にナンヨウスギ属植物の葉を投入し、４０℃において２５ＭＰａの気圧下で二酸化炭素の超臨界流体を用いて抽出した。抽出物を回収し、ナンヨウスギ属植物抽出物を得た。
【００２８】
まず、ナンヨウスギ属植物抽出物のＡＴＰ産生促進作用について示す。試料には、シマナンヨウスギの葉より製造例１を用いて抽出したものを試料１として評価を行った。
【００２９】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞及び正常ヒト表皮細胞を１ウェル当たり２．０×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種した。播種培地には、市販のクラボウ社製Ｈｕｍｅｄｉａ−ＫＧ２を用いた。２４時間培養後、試料を添加した試験培地に交換し、さらに２４時間培養した。次いで９６穴マイクロプレートから培地を除去し、ＰＢＳで洗浄した後、５ｍＭ硫酸マグネシウム，１００μＭ  ＥＤＴＡ，２５ｍＭ  トリシン緩衝液，ｐＨ７．８を添加し、超音波処理にて細胞を破砕した。この細胞破砕液を蛍光評価用９６穴マイクロプレートに移し、更に０．５ｍＭ  ルシフェリン，１．２５μｇ／ｍｌ  ルシフェラーゼ，１ｍＭ  ＤＴＴ，５ｍＭ  硫酸マグネシウム，１００μＭ  ＥＤＴＡ，２５ｍＭ  トリシン緩衝液，ｐＨ７．８を添加して、生じた化学発光を発光スペクトル５６０ｎｍにて測定した。細胞内で生合成されたＡＴＰ量は、同時に測定した標準線より算出し、得られた評価結果を、試料無添加のブランクにおけるＡＴＰ産生量を１００とした相対値にて表１に示した。なお、表中の*及び**は、ｔ検定における有意確率Ｐ値に対し、有意確率５％未満（Ｐ＜０．０５）を*で、有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を**で表したものである。
【００３０】
【表１】
2007106741.tif 000002
【００３１】
表１より明らかなように、シマナンヨウスギを添加した場合に、未添加の場合と比較して、有意な表皮細胞のＡＴＰ産生促進作用が認められた。このことから、ナンヨウスギ属植物の抽出物は、優れた表皮細胞のＡＴＰ産生促進作用を有することが明らかとなった。
【００３２】
次に、ナンヨウスギ属植物抽出物のチロシナーゼ活性阻害作用の評価を示す。試料には、シマナンヨウスギの葉より製造例４を用いて抽出したものを試料２として評価を行った。
【００３３】
評価は以下の手順で行った。クラボウ社製正常ヒト表皮メラニン細胞を１ウェル当り３．０×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種した。播種培地にはクラボウ社製Ｍｅｄｉｕｍ１５４Ｓを用いた。２４時間後に各濃度の試料を添加した培地に交換し、さらに４８時間培養した。次に１重量％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ含有リン酸緩衝液７５μＬに交換し細胞を完全に溶解させ内５０μＬを粗酵素液として使用した。粗酵素液に基質となる５０μＬの０．０５重量％Ｌ−ドーパ含有リン酸緩衝液を加え、３７℃で２時間静置した。マイクロプレートリーダーにて基質添加直後と反応終了時の４０５ｎｍの吸光度を測定し、生成されたドーパメラニン量を算出した。試料のチロシナーゼ活性阻害率を、試料無添加のブランクにおけるチロシナーゼ活性阻害率を１００とした相対値にて表２に示した。
【００３４】
【表２】
2007106741.tif 000003
【００３５】
表２より明らかなように、シマナンヨウスギ抽出物を添加した培地を用いた場合には、メラニン生成率の低下が認められた。このことより、ナンヨウスギ属植物の抽出物は、優れたチロシナーゼ活性阻害作用を有することが明らかとなった。
【００３６】
次に、ナンヨウスギ属植物抽出物のメラニン産生抑制作用の評価を示す。試料には、シマナンヨウスギの葉より製造例１を用いて抽出したものを試料３として評価を行った。
【００３７】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト表皮メラニン細胞を１ディッシュ当り１．８×１０４個となるように播種し、２４時間後に各濃度に調整した試料添加培地に交換した。さらに７日間培養し、培養終了後にトリプシンにより細胞を剥離して回収した。回収した細胞を遠心し、上清除去した後、沈殿物にＳｏｌｕｅｎ−３５０を加えて煮沸し、分光光度計により５００ｎｍにおける吸光度を測定した。評価結果を、試料が無添加の場合のメラニン産生量を１００とした場合の相対値にて表３に示す。
【００３８】
【表３】
2007106741.tif 000004
【００３９】
表３より明らかなように、シマナンヨウスギ抽出物を添加した培地を用いた場合には、メラニン産生量の低下が認められた。このことより、ナンヨウスギ属植物の抽出物は、優れたメラニン産生抑制作用を有することが明らかとなった。
【００４０】
次に、ナンヨウスギ属植物抽出物の抗酸化作用について示す。試料には、シマナンヨウスギの葉より製造例１を用いて抽出したものを試料４として評価を行った。
【００４１】
評価は、以下の手順で行った。９６穴マイクロプレートに任意の濃度に希釈したナンヨウスギ抽出物溶液２５μＬと反応溶液７５μＬ（０．２５ｍＭ  ＮＢＴ，１ｍＭ  Ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ，０．１ｍＭ  ＥＤＴＡを含むＨａｎｋｓ（＋）液(ｐＨ７．４)）を添加し、キサンチンオキシダーゼ溶液２５μＬ（０．００７５Ｕｎｉｔｓ）を加え、３７℃で１５分間インキュベートした。その後、マイクロプレートリーダーで５４０ｎｍの吸光度を測定した。試料が無添加のブランクの吸光度を（Ａ）、試料を添加したときの吸光度を（Ｂ）としたとき、式（１）の値をラジカル消去率とした。評価結果を表４に示した。
式（１）  ｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００（％）
【００４２】
【表４】
2007106741.tif 000005
【００４３】
表４より明らかなように、シマナンヨウスギ抽出物は優れたスーパーオキサイドアニオンの消去作用が認められた。このことから、ナンヨウスギ属植物の抽出物は、優れた抗酸化作用を有することが明らかとなった。
【００４４】
次に、ナンヨウスギ属植物抽出物の脂肪細胞における中性脂肪蓄積抑制作用の評価について示す。試料には、シマナンヨウスギの葉より製造例１を用いて抽出したものを試料５として評価を行った。
【００４５】
評価は、以下の手順で行った。皮下脂肪由来正常ヒト前駆脂肪細胞Ｃｒｙｏ・ＨＰＲＡＤ−ＳＱ（三光純薬株式会社）を１ウェル当り１．０×１０４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはＰＧＭ培地（１０％ＦＢＳ，２ｍＭ Ｌ−ｇｌｕｔａｍｉｎｅ，１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎｅ，１００μｇ／ｍＬ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎｅ含有）を用いた。細胞が飽和状態になる直前に評価サンプルを添加したＰＧＭ−分化用培地（１０μｇ／ｍＬ インシュリン，１μｍ ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ，２００μＭ ｉｎｄｏｍｅｔｈａｃｉｎ，５００μＭ・Ｉｓｏｂｕｔｙｌ−ｍｅｔｈｙｌｘａｎｔｈｉｎｅ含有）に交換し、脂肪細胞への分化誘導を行った。分化誘導開始後、コントロール群が成熟して細胞内に多数の脂肪滴が蓄積されるまで、１０日〜１４日間培養した。細胞を回収後、１０％中性緩衝ホルムアルデヒド液を用いて細胞を固定した。ＰＢＳにて洗浄の後、０．５ｗ／ｖ％ オイルレッドＯ溶液を添加し、３７℃で２時間培養した。ＰＢＳにて洗浄の後、メタノールを添加し、色素を抽出した。抽出後、マイクロプレートリーダーにて５５０ｎｍの吸光度と６５０ｎｍの吸光度をそれぞれ測定し、両測定値の差を用いて中性脂肪蓄積量を測定した。それぞれの評価結果を試料無添加のブランクにおける中性脂肪蓄積量を１００とした相対値にて表５に示す。
【００４６】
【表５】
2007106741.tif 000006
【００４７】
表５より明らかなように、シマナンヨウスギ抽出物を添加した培地では、有意な中性脂肪蓄積抑制作用が認められた。このことから、ナンヨウスギ属植物の抽出物は、優れた中性脂肪蓄積抑制作用を有することが明らかとなった。
次に、ナンヨウスギ属植物抽出物のコラーゲン産生促進作用の評価について示す。試料には、シマナンヨウスギ、アウカリア・ムエレリ、アウカリア・コルムナリスの葉より製造例１を用いて抽出したものを試料６〜８として評価を行った。
【００４８】
評価は、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当り２×１０４個となるように９６穴マイクロプレートに播種した。播種培地には牛胎仔血清添加ダルベッコ修正基礎培地（ＤＭＥＭ）培地を用いた。２４時間後に各濃度の試料を添加し、さらに７２時間培養した後、細胞上清を回収した。得られた細胞上清をＥＬＩＳＡプレートに固定し、ＥＬＩＳＡ法により上清中に含まれるコラーゲン（タイプ３）量を測定した。同時に細胞を溶解してタンパク定量を行い、細胞当たりのコラーゲン産生量を算出して、試料を含有しないブランクの細胞当たりのコラーゲン産生量を１００とした相対値にて表６に示した。
【００４９】
【表６】
2007106741.tif 000007
【００５０】
表６より明らかなように、試料を添加したそれぞれの培地において、未添加の場合と比較して、有意なコラーゲン産生促進作用が認められた。このことから、ナンヨウスギ属植物の抽出物は、優れたコラーゲン産生促進作用を有することが明らかとなった。
【００５１】
続いて、本発明に係るナンヨウスギ属植物の抽出物を配合した組成物として、皮膚外用剤と食品の処方例を示す。
【００５２】
［処方例１］乳液
（１）スクワラン                                      １０．０（重量％）
（２）メチルフェニルポリシロキサン                      ４．０
（３）水素添加パーム核油                                ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質                              ０．１
（５）モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）    １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン                        １．０
（７）グリセリン                                        ４．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（９）カルボキシビニルポリマー                          ０．１５
（10）精製水                                          ５３．８５
（11）アルギニン（１重量％水溶液）                    ２０．０
（12）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ５．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（10）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却を開始し、（11）と（12）を順次加え、均一に混合する。
【００５３】
［処方例２］化粧水
（１）エタノール                                      １５．０（重量％）
（２）ポリオキシエチレン（４０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油    ０．３
（３）香料                                              ０．１
（４）精製水                                          ７８．３８
（５）クエン酸                                          ０．０２
（６）クエン酸ナトリウム                                ０．１
（７）グリセリン                                        １．０
（８）ヒドロキシエチルセルロース                        ０．１
（９）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例３］              ５．０
製法：（１）に（２）及び（３）を溶解する。溶解後、（４）〜（８）を順次添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合する。
【００５４】
［処方例３］クリーム
（１）スクワラン                                      １０．０（重量％）
（２）ステアリン酸                                      ２．０
（３）水素添加パーム核油                                ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質                              ０．１
（５）セタノール                                        ３．６
（６）親油型モノステアリン酸グリセリン                  ２．０
（７）グリセリン                                      １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（９）アルギニン（２０重量％水溶液）                  １５．０
（10）精製水                                          ３６．７
（11）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液）      １５．０
（12）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ５．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（10）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、（11）を加え、冷却を開始し、４０℃にて（12）を加え、均一に混合する。
【００５５】
［処方例４］美容液
（１）精製水                                          ２７．４５(重量％)
（２）グリセリン                                      １０．０
（３）ショ糖脂肪酸エステル                              １．３
（４）カルボキシビニルポリマー（１重量％水溶液）      １７．５
（５）アルギン酸ナトリウム(１重量％水溶液)            １５．０
（６）モノラウリン酸ポリグリセリル                      １．０
（７）マカデミアナッツ油脂肪酸フィトステリル            ３．０
（８）N-ラウロイル-L-グルタミン酸
ジ（フィトステリル−２−オクチルドデシル）          ２．０
（９）硬化パーム油                                      ２．０
（10）スクワラン（オリーブ由来）                        １．０
（11）ベヘニルアルコール                                ０．７５
（12）ミツロウ                                          １．０
（13）ホホバ油                                          １．０
（14）１、３−ブチレングリコール                      １０．０
（15）Ｌ−アルギニン（１０重量％水溶液）                ２．０
（16）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ５．０
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（14）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、５０℃にて（15）を加える。さらに４０℃まで冷却し、（16）を加え、均一に混合する。
【００５６】
［処方例５］水性ジェル
（１）カルボキシビニルポリマー                          ０．５（重量％）
（２）精製水                                          ７８．７
（３）水酸化ナトリウム（１０重量％水溶液）              ０．５
（４）エタノール                                      １０．０
（５）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（６）香料                                              ０．１
（７）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例４］            １０．０
（８）ポリオキシエチレン（６０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油    ０．１
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後、（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（８）を加え、均一に攪拌混合する。
【００５７】
［処方例６］クレンジング料
（１）スクワラン                                      ７７．０（重量％）
（２）イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル    １５．０
（３）精製水                                            ３．０
（４）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例４］              ５．０
製法：（１）と（２）を均一に溶解する。これに、（３）と（４）を順次加え、均一に混合する。
【００５８】
［処方例７］洗顔フォーム
（１）ステアリン酸                                    １６．０（重量％）
（２）ミリスチン酸                                    １６．０
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン                  ２．０
（４）グリセリン                                      ２０．０
（５）水酸化ナトリウム                                  ７．５
（６）ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン                １．０
（７）精製水                                          ３１．５
（８）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例３］              ６．０
製法：（１）〜（４）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（５）〜（７）の水相成分を８０℃にて加熱溶解し、油相成分と均一に混合撹拌する。冷却を開始し、４０℃にて（８）を加え、均一に混合する。
【００５９】
［処方例８］メイクアップベースクリーム
（１）スクワラン                                      １０．２(重量％)
（２）セタノール                                        ２．０
（３）グリセリントリ−２−エチルヘキサン酸エステル      ２．５
（４）親油型モノステアリン酸グリセリル                  １．０
（５）プロピレングリコール                            １１．０
（６）ショ糖脂肪酸エステル                              １．３
（７）精製水                                          ６５．４
（８）酸化チタン                                        １．０
（９）ベンガラ                                          ０．１
（10）黄酸化鉄                                          ０．４
（11）香料                                              ０．１
（12）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ５．０
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（５）〜（７）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（８）〜（10）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（11）と（12）の成分を加え、均一に混合する。
【００６０】
［処方例９］乳液状ファンデーション
（１）メチルポリシロキサン                              ２．０(重量％)
（２）スクワラン                                        ５．０
（３）ミリスチン酸オクチルドデシル                      ５．０
（４）セタノール                                        １．０
（５）ポリオキシエチレン(２０Ｅ．Ｏ．)
ソルビタンモノステアリン酸エステル              １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン                        ０．７
（７）１、３−ブチレングリコール                        ８．０
（８）キサンタンガム                                    ０．１
（９）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（10）精製水                                          ５３．４
（11）酸化チタン                                        ９．０
（12）タルク                                            ７．４
（13）ベンガラ                                          ０．５
（14）黄酸化鉄                                          １．１
（15）黒酸化鉄                                          ０．１
（16）香料                                              ０．１
（17）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例４］              ５．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（10）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（11）〜（15）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散する。油相成分を加え、乳化を行う。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（16）と（17）の成分を順次加え、均一に混合する。
【００６１】
［処方例１０］油中水型エモリエントクリーム
（１）流動パラフィン                                  ３０．０(重量％)
（２）マイクロクリスタリンワックス                      ２．０
（３）ワセリン                                          ５．０
（４）ジグリセリンオレイン酸エステル                    ５．０
（５）塩化ナトリウム                                    １．３
（６）塩化カリウム                                      ０．１
（７）プロピレングリコール                              ３．０
（８）１、３−ブチレングリコール                        ５．０
（９）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（10）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ５．０
（11）精製水                                          ４３．４
（12）香料                                              ０．１
製法：（５）と（６）を（11）の一部に溶解して５０℃とし、５０℃に加熱した（４）に撹拌しながら徐々に加える。これを混合した後、７０℃にて加熱溶解した（１）〜（３）に均一に分散する。これに（７）〜（10）を（11）の残部に７０℃にて加熱溶解したものを撹拌しながら加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（12）を加え、均一に混合する。
【００６２】
［処方例１１］パック
（１）精製水                                          ５８．９(重量％)
（２）ポリビニルアルコール                            １２．０
（３）エタノール                                      １７．０
（４）グリセリン                                        ５．０
（５）ポリエチレングリコール（平均分子量１０００）      ２．０
（６）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例２］              ５．０
（７）香料                                              ０．１
製法：（２）と（３）を混合し、８０℃に加温した後、８０℃に加温した（１）に溶解する。均一に溶解した後、（４）と（５）を加え、攪拌しながら冷却を開始する。４０℃まで冷却し、（６）と（７）を加え、均一に混合する。
【００６３】
［処方例１２］入浴剤
（１）香料                                              ０．３(重量％)
（２）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例４］              ５．０
（３）炭酸水素ナトリウム                              ４６．０
（４）硫酸ナトリウム                                  ４８．７
製法：（１）〜（４）を均一に混合する。
【００６４】
［処方例１３］ヘアーワックス
（１）ステアリン酸                                      ３．０(重量％)
（２）マイクロクリスタリンワックス                      ２．０
（３）セチルアルコール                                  ３．０
（４）高重合メチルポリシロキサン                        ２．０
（５）メチルポリシロキサン                              ５．０
（６）ポリ（オキシエチレン・オキシプロピレン）
メチルポリシロキサン共重合体              １．０
（７）パラオキシ安息香酸メチル                          ０．１
（８）１、３−ブチレングリコール                        ７．５
（９）アルギニン                                        ０．７
（10）精製水                                          ７０．６
（11）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ５．０
（12）香料                                              ０．１
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解後する。一方、（７）〜（10）の水相成分を７５℃にて加熱溶解し、前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。乳化終了後に冷却を開始し、４０℃にて（11）と（12）の成分を加え、均一に混合する。
【００６５】
［処方例１４］ヘアートニック
（１）エタノール                                      ４６．０(重量％)
（２）精製水                                          ４８．９
（３）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例３］              ５．０
（４）香料                                              ０．１
製法：（１）〜（４）の成分を混合、均一化する。
【００６６】
［処方例１５］飲料
（１）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ８．０(重量％)
（２）エリスリトール                                    １．０
（３）クエン酸                                          ０．１
（４）ステビア                                          ０．０１
（５）精製水                                          ９０．８９
製法：（１）〜（５）を均一に混合する。
【００６７】
［処方例１６］錠剤
（１）ナンヨウスギ属植物抽出物［製造例１］              ０．３０（重量部）
（２）還元麦芽糖水飴                                    ０．５３
（３）トウモロコシデンプン                              ０．１５
（４）グリセリン脂肪酸エステル                          ０．０２
製法：（１）〜（３）を篩過して混合し、さらに（４）を添加して混合した。打錠機にて打錠を行い、全量３００ｍｇの錠剤を得た。
【００６８】
次に、シマナンヨウスギ抽出物を配合した処方を用いて使用試験を行い、乾燥による肌荒れについて改善効果を評価した。その際、処方例１に示した乳液の処方に表７に記載するシマナンヨウスギ抽出物をそれぞれ配合し、実施例１〜３として使用試験を行った。また、シマナンヨウスギ抽出物を精製水に代替し、比較例１として同時に使用試験を行った。
【００６９】
【表７】
2007106741.tif 000008
【００７０】
各試料について、肌荒れ症状が顕著に認められる３０〜５０才代の乾燥肌の女性パネラー２０名をそれぞれ一群とし、ブラインドにて１週間使用させ、使用前後の皮膚状態の変化を観察して評価した。皮膚症状の指標として、乾燥による肌荒れについて、「改善」、「やや改善」、「変化なし」の三段階で評価し、表８に各評価を得たパネラー数にて示した。
【００７１】
【表８】
2007106741.tif 000009
【００７２】
表８より、シマナンヨウスギ抽出物を含有しない比較例使用群においては、６割以上のパネラーに改善は認められなかったが、シマナンヨウスギ抽出物を配合した実施例使用群においては、６割以上のパネラーに明確な肌荒れの改善が認められた。このことから、ナンヨウスギ属植物の抽出物は優れた保湿効果を有することが明らかとなった。