(57)【要約】【課題】数μＬ〜数百μＬの採血が容易な小動物用採血管及び小動物用採血装置を提供すること。【解決手段】長さ３０〜１００ｍｍの採血針と合成樹脂の管本体からなる採血管であって、該採血針が穿刺可能な先端部を有し、該管本体が該採血針との接合部から他端に向かって拡径された貯留部と、該他端にピペットとの接続部とを有することを特徴とする小動物用採血管である。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
長さ３０〜１００ｍｍの採血針と合成樹脂の管本体からなる採血管であって、該採血針が穿刺可能な先端部を有し、該管本体が該採血針との接合部から他端に向かって拡径された貯留部と、該他端にピペットとの接続部とを有することを特徴とする小動物用採血管。
【請求項２】
前記採血針と前記管本体が合成樹脂により一体成形されてなる請求項1記載の小動物用採血管。
【請求項３】
前記採血針と前記管本体とが別材質で構成され、採血針の一部が管本体の接合部に嵌挿接続されてなる請求項1記載の小動物用採血管。
【請求項４】
前記採血針がガラス管又は合成樹脂管である請求項１又は３に記載の小動物用採血管。
【請求項５】
前記採血針と前記管本体がインサート成形されてなる請求項３又は４に記載の小動物用採血管。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の小動物用採血管と自動ピペットを備えてなることを特徴とする小動物用採血装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、小動物の血液等の体液を微量採取可能な小動物用採血管及びそれを用いてなる採血装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、医薬品の薬効薬理試験又は副作用、毒性試験では、マウス、ラット、モルモット等の小動物を用いて薬物のスクリーニングを行い、次いでウサギ、ネコ、イヌ等の中型動物に移行し、十分な有効性、安全性が確認された後に、臨床治験が通常行われている。
薬物の有効性を確認し判定する方法としては、目的に応じて種々の検査法が確立されている。薬物の副作用や毒性を判定する方法としては、生殖、発生毒性試験、癌原性試験、皮膚、眼粘膜、血管等の刺激性試験、光感作性試験、抗原性試験等がある。また、動物の体液の基本構成成分については、ヘマトクリット値の測定が普及している。
【０００３】
近年、小動物の血中の主要構成蛋白であるアルブミン、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、補体等の成分の測定等も提案されている（特許文献１参照）。
特許文献１では、薬物の有効性と副作用及び毒性を確認する動物実験の段階において、これらの血清蛋白の変動を知ることは重要であり、例えばアルブミンの増減はその主要産生臓器である肝臓の機能の把握に有効であり、又ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭの測定は免疫機能に与える影響を知るうえで有効であるとして、従来の、マウス、ラットの血清を用いての一元免疫拡散法（ＳＲＩＤ）に換わる測定方法及び微量採血管を提案している。
【０００４】
この、特許文献１に記載の微量採血管は、両端を開口した内径１ｍｍφ前後の耐熱性細管の一端側に目盛を設け、他端側に該細管よりも若干太径で少なくとも検体等の採取・添加容量以上の内容量を有し、かつ手指の押圧力により容易に変形可能な熱収縮性の可撓性チューブを嵌装し、該可撓性チューブの他端を開放し、開放端側を圧縮により封じ且つ手指で挟むことにより内容物を放出することができる長さを有するものである。
しかし、この微量採血管は、一端が開放された可撓性チューブを、手指で挟んで採取や放出操作をするので、手元がふらつく等操作が不安定になる問題があった。また、採血針のみの容量では、３０μＬ程度の採取が限度であって、試験目的によって数百μＬの採血量が必要な場合に対応できないという問題があった。
【０００５】
【特許文献１】特開平１０−２２１３３４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、このような問題に鑑みなされたものであって、数μＬ〜数百μＬの採血が容易な小動物用採血管及び小動物用採血装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、前記目的を達成するために、長さ３０〜１００ｍｍの採血針と合成樹脂の管本体からなる採血管であって、該採血針が穿刺可能な先端部を有し、該管本体が該採血針との接合部から他端に向かって拡径された貯留部と、該他端にピペットとの接続部とを有することを特徴とする小動物用採血管とすることにより、前記目的を達成し得ることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、
（１）長さ３０〜１００ｍｍの採血針と合成樹脂の管本体からなる採血管であって、該採血針が穿刺可能な先端部を有し、該管本体が該採血針との接合部から他端に向かって拡径された貯留部と、該他端にピペットとの接続部とを有することを特徴とする小動物用採血管、及び
（２）前記（１）に記載の小動物用採血管と自動ピペットを備えた小動物用採血装置
を提供するものである。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の小動物用採血管によれば、採血管の先端部を小動物の眼底静脈叢に穿刺して採血する場合や、尾静脈切断法、耳静脈切傷法により出血させた血液を採取するのが容易である。また、心臓穿刺法、頸動脈採血法、断頭採血法、腹部大動脈切断法、腋窩動脈切断法、股動脈切断法等で採血した血液を自動ピペット等で一定量採取することもできる。
本発明の小動物用採血装置によれば、小動物から容易に体液の採取ができ、ピペットによる所定量の採血、排出が容易かつ、衛生上安全に行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明の小動物用採血管は、長さ３０〜１００ｍｍの採血針と合成樹脂の管本体からなる採血管であって、該採血針が穿刺可能な先端部を有し、該管本体が該採血針との接合部から他端に向かって拡径された貯留部と、該他端にピペットとの接続部とを有することを特徴とする。
採血針の径は、その先端から少なくとも５〜１０ｍｍ程度の長さまでは、小動物の採血部位、例えば、マウスの眼底静脈叢へ穿刺可能な１ｍｍ前後の外径を有し、血液が毛細管現象で上昇できる内径が０．３〜０．８ｍｍ程度とすることが好ましい。
また、採血針と管本体の貯留部との接合部は、管本体の貯留部先端側に挿入して接合されるに十分な長さとして、概ね３〜２０ｍｍ程度が好ましい。もっとも、一体成形した場合等は、採血針が管本体に挿入されている箇所がないものの、採血針の部分と貯留部分との境目を接合部とするものである。
採血針の長さは、操作性、衛生面の安全性の観点から、３０〜１００ｍｍが好ましく、４０〜８０ｍｍがより好ましい。
【００１０】
採血針は、細管に加工し易い材質であって、採血状況を視認できる程度の透明性と、穿刺や抜去に適した機械的物性を備えたものであり、ガラス管や、熱可塑性樹脂管、熱硬化性樹脂管等の合成樹脂管によるものから選択して使用できる。
これらの中で、ガラス管は、穿刺しやすいこと、採取した血液への溶出成分が少ないこと、剛性に優れること、目盛加工がし易いこと等から、好ましい材料として推奨できる。
ガラス管は、硬質ガラスが、耐熱性、機械的物性、取扱い性等の観点から好ましい。ガラス管の外径が、０．７〜１．２ｍｍ、内径が０．５〜０．８ｍｍのものが好適に使用できる。
具体的なガラス管の種類としては、通常の理化学ガラスが好適であり、この種のガラスは、ＪＩＳ規格  ほうけい酸ガラス−１、ＪＩＳ規格  ほうけい酸ガラス−２、又はソーダ石灰ガラスに分類されている。
これらの理化学ガラスとしては、HARIO−32、DURAN、DUROBAX、PYREX（登録商標）−7740等の商品名で市販されているものを使用できる。
また、合成樹脂管では、透明性、耐熱性、機械的強度（剛性）、紫外線照射やガンマ線照射による滅菌・減菌処理耐性等の点から、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリカーボネート（ＰＣ）等からなるものが推奨される。
採血に際しての穿刺性の観点から、採血針は、後述する測定法による曲げ剛性が、６０ｋｇｆ・ｍｍ2（６．１Ｎ・ｍｍ2）以上であることが望ましい。
【００１１】
採血針には、採血操作等に必要な剛性を確保するため、剛性向上処理を施すことができる。処理手段としては、採血針がガラス管である場合は、先端の穿刺部と上端の貯留部との接合部以外を合成樹脂膜で鞘状に被覆するか、外周にプラスチックテープ等を螺旋状に巻回する方法等を挙げることができる。この場合において、被覆する合成樹脂膜やテープは透明なものであることが、採血操作の視認性の観点から好ましい。
【００１２】
貯留部は、採血した血液を所定量貯めることができる内容積を有しており、動物実験の目的に応じた採血量、例えば、１０μＬ、２０μＬ、５０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、３００μＬ、５００μＬ等の容量とすることができる。
前記接続部の内径、深さ等の寸法、形状は、マイクロリッターピペットのノズル部の形状に対応するものが、接続のための別個のアダプター等を要せず利便性に優れる。
貯留部と接続部は、別個の材質のものを接合してもよいが、接合の精度、工数を考慮すると、合成樹脂の射出成形等により一体に成形されていることが好ましい。
【００１３】
また、接続部の開放側端縁は、マイクロリッターピペットのノズル部との緊密な嵌合を図るため、テーパー（挿入角度）を有するノズルが挿入されるに従って、接続部の内周側から拡径する方向の力が働くので、嵌めやすさと緊密性の観点から、ある程度の肉厚にしておくことが好ましい。しかし、接続部の全体を肉厚とすると、材料の重量が増して、経済的でない場合は、リブ構造を採用することもできる。
一体成形された管本体としては、例えば、マイクロリッターピペットのノズル部に嵌合されるチップとして市販されているもの、あるいは市販のマイクロリッターピペットに接続可能な寸法形状で、耐熱性、剛性等の要求性能に応じた合成樹脂からなるもの等から選択して用いることもできる。
【００１４】
採血針と管本体とが別個に構成されている場合、採血針の接合部端と貯留部の接合部との接合手段としては、接着剤による接着、管本体の接合部側の熱収縮による緊合、接着テープでの巻回等が挙げられる。接合部は、貯留部の下端側内径部に、採血針の上端側を挿通し、５ｍｍ程度以上の長さの挿通部分を設け、この部分で、前記の手段で採血針を接合することが望ましい。
熱収縮による接合方法としては、貯留部の下端側内径部（接合部）の熱収縮を利用して固定するか、採血針の上端部を加熱し、貯留部の下端側内径部に挿入し、熱収縮させてもよい。
【００１５】
また、本発明の小動物用採血管は、採血針と管本体を合成樹脂により一体成形した構成とすることもできる。
より具体的には、マイクロリッターピペット用チップの先端部に採血針を備えたものを合成樹脂の射出成形により製造することができる。
合成樹脂には、前述のものを用い、採血針の剛性が不足する場合は、採血針の外周に複数のリブを延設することができる。
【００１６】
また、採血針と管本体の材質が異なるもので構成するときは、採血針を金型に配置した状態で射出成形する、インサート成形により得ることができる。
この場合、加熱された金型の所定の位置に採血針を配置し、管本体を構成する溶融状の樹脂と接触させることから、ガラス管または耐熱性の合成樹脂管を採血針とするのが好ましい。
【００１７】
また、本発明の小動物用採血管を、自動ピペットに接続することによって小動物用採血装置とすることができる。
本発明に使用できる自動ピペットとしては、ギルソン社の「ピペットマン（商品名）」、エッペンドルフ社、グライナー社、ニチリョウ社等から市販されているマイクロリッターピペットを挙げることができる。これらは「エアーディスプレイスメント方式」であり、ナールドリングにより必要量の液体を吸入・排出できるようにセットし、プッシュボタンで液体の吸入・排出を操作するものである。
マイクロリッターピペットの先端には、マイクロリッターチップが嵌合されるノズルが備えられているので、該ノズルに本発明の小動物用採血管を接続して、小動物から所定量を採血した後、マイクロピペットで排出操作を行って、保存瓶等に移し保存し、種々の試験に供することができる。
なお、本発明において、小動物とは、代表的にはマウス、ラット、ハムスター、モルモット等を意味するが、採血量との関係で、場合によっては、ウサギ、ネコ、イヌ等も含まれる。
【実施例】
【００１８】
以下、本発明について実施例により詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例によって何ら限定されるものではない。
実施例１
実施例１では、図１（ｂ）に示す縦断面形状と図１（ａ）に示す平面形状を有する小動物用採血管１を製造した。
外径０．９１ｍｍ、内径０．５４ｍｍ、長さ６５ｍｍの理化学ガラス管（Drummond社、MICROCCAPS（登録商標）２０  microliters）を採血針２として準備した。一方、貯留部３及び接続部４を有する管本体５として、ポリプロピレン製の２０μＬのマイクロリッターチップ（Quality Scientific Plastics社製、１−２００μＬ  Neｗ Pipet Tip Yellow）の吸・排口側（下部）の内径０．９５ｍｍに相当する部分をカットして、採血針２が挿通可能な状態の管本体５を得た。前記ピペットのノズル部（図示省略）を挿入して接続される接続部４には、図１（ａ）において点線で示すように、幅１ｍｍ、長さ３ｍｍ、高さ０．５ｍｍのリブ４ａが円周面上に８個配置してあり、接続部の補強とピペットノズルへの着脱操作をしやすい構造としたものである。
貯留部３の下部の内径０．９５ｍｍの部分の切断部から約５ｍｍの部分まで、採血針２を挿入して接合部６とし、採血針２及び接合部６の外周に厚み０．１ｍｍの透明接着テープ（American National Can社製、PARAMAFILM）を巻回して、接着テープ層７を形成し、小動物用採血管１を作製した。
【００１９】
得られた小動物用採血管１は、全長１００ｍｍとなるため、これを整列・配置・収納ができるようにしたピペットチップの専用トレイを作製した。
自動マイクロリッターピペットとして、ギルソン社製の商品名「ピペットマン」Ｐ−２０を用い、そのノズル部を採血管１の接続部４に挿入し、ピペットと採血管１を接続し、ピペットのナールドリングを１５μＬにセットして、マウスの眼底静脈叢採血の準備をした。
３週齢のマウスを左手に把持して頭部を固定し、右手にピペットを把持し、採血管１の採血針先端の穿刺部位をマウスの眼球の後面部に沿って挿入し、眼底を破るように突いた後、ピペットのプッシュボタンを押して、血液１５μＬを採取し、採血管１を引き抜いた。
ついで、採血した血液を、ピペットの排出操作により、試料管中に排出して保存した。
採血操作において、採血針２のガラス管は、外径が０．９ｍｍと細いにも拘らず、撓みが少なく、穿刺、抜去を円滑に行うことができた。
【００２０】
なお、本実施例に用いたガラス管について、曲げ剛性及び曲げ弾性率を三点曲げ試験法により求めた。
（曲げ試験）
先端曲率１．５ｍｍの２つの支点の支点間距離を３０ｍｍに設定して、その上に長さ６４ｍｍの採血針（ガラス管）を載置し、支点の中央部から、先端角が４５°の三角形のプローブ（荷重子）を１ｍｍ／ｓの速度で下方に移動させ、得られた荷重―歪み（撓み）曲線から、曲げ弾性率及び曲げ剛性を次式（１）、（２）から計算した。最大荷重は３４４ｇ、そのときの撓みは１．１４ｍｍであり、荷重―歪み（撓み）曲線は、ほぼ直線状であった。
曲げ弾性率＝４ＰＬ3／３π（Ｄ4−ｄ4）δ  （ｋｇｆ／ｍｍ2）        （１）
式（１）及び次式（２）において、Ｐは荷重（ｋｇ）、Ｌは支点間距離（ｍｍ）、δは荷重Ｐにおける撓み量（ｍｍ）、Ｄはガラス管の外径（ｍｍ）、ｄはガラス管の内径（ｍｍ）を示す。
曲げ剛性＝ＰＬ3／４８δ  （ｋｇf・ｍｍ2）        （２）
式（１）に、ガラス管外径Ｄ＝０．９１７ｍｍ、内径ｄ＝０．６５３ｍｍとして数値を入れて計算すると、ガラス管の曲げ弾性率は、６５８９ｋｇｆ／ｍｍ2（６７.２ＧＰａ）であった。また、曲げ剛性は、式（２）から１７０ｋｇｆ・ｍｍ2（１７．３Ｎ・ｍｍ2）であった。
【産業上の利用可能性】
【００２１】
本発明の小動物用採血管によれば、採血管の先端部を小動物の眼底静脈叢に穿刺して採血する場合や、尾静脈切断法、耳静脈切傷法により出血させた血液を採取するのが容易であり、薬物の有効性と副作用及び毒性を確認する動物実験等に有効に利用できる。
また、心臓穿刺法、頸動脈採血法、断頭採血法、腹部大動脈切断法、腋窩動脈切断法、股動脈切断法等で採血した血液を、自動ピペット等で一定量採取する際のピペットチップとして利用することもできる。
さらに、本発明の小動物用採血装置は、小動物用採血管と自動ピペットを備えており、小動物から容易に体液の採取ができ、ピペットによる所定量の採血、排出が容易かつ、衛生上安全に行うことができ、薬物の有効性と副作用及び毒性を確認する動物実験等に有効に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】本発明の実施例１による小動物用採血管の縦断面図（ｂ）及び平面図（ａ）である。
【符号の説明】
【００２３】
１    小動物用採血管
２    採血針
３    貯留部
４    接続部
４ａ  リブ
５    管本体
６    接合部
７    接着テープ層
【図１】
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