(57)【要約】【課題】  本発明は、安全性の面で問題がなく、安価かつ安定した供給が可能な原料からコラーゲンおよびコラーゲン分解物を提供することを目的とする。【解決手段】［１］クラゲを６０〜１５０℃の温水により抽出して得られるクラゲ由来のコラーゲン。［２］酸、アルカリ及びプロテアーゼ活性を有する複数の酵素からなる群より選ばれるいずれか１つによりクラゲを処理して得られる、クラゲ由来のコラーゲン分解物。［３］上記［１］に記載のクラゲ由来のコラーゲンを処理して得られる、上記［２］に記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クラゲを６０〜１５０℃の温水により抽出して得られるクラゲ由来のコラーゲン。
【請求項２】
酸、アルカリ及びプロテアーゼ活性を有する複数の酵素からなる群より選ばれるいずれ
か１つによりクラゲを処理して得られる、クラゲ由来のコラーゲン分解物。
【請求項３】
請求項１に記載のクラゲ由来のコラーゲンを処理して得られる、請求項２に記載のクラ
ゲ由来のコラーゲン分解物。
【請求項４】
前記クラゲは、鉢虫綱根口クラゲ目に属するクラゲ又は鉢虫綱旗口クラゲ目に属するク
ラゲであることを特徴とする、請求項２〜３のいずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン
分解物。
【請求項５】
前記クラゲは、エチゼンクラゲ、ミズクラゲ、ホワイトタイプクラゲ、チャイナタイプ
クラゲ、セミチャイナタイプクラゲ、キャノンボールタイプクラゲ及びボールタイプクラ
ゲからなる群から選ばれるクラゲであることを特徴とする、請求項１に記載のクラゲ由来
のコラーゲン。
【請求項６】
前記クラゲは、エチゼンクラゲ、ミズクラゲ、ホワイトタイプクラゲ、チャイナタイプ
クラゲ、セミチャイナタイプクラゲ、キャノンボールタイプクラゲ及びボールタイプクラ
ゲからなる群から選ばれるクラゲであることを特徴とする、請求項２〜４のいずれかに記
載のクラゲ由来のコラーゲン分解物。
【請求項７】
前記複数の酵素は、少なくとも、エンドプロテアーゼ活性を有する酵素であって、至適
ｐＨ６〜８．５、至適温度４５〜７０℃であることを特徴とする、請求項２，３，４また
は６のいずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物。
【請求項８】
前記複数の酵素は、少なくとも、ロープ菌由来のエンドプロテアーゼと、種麹由来のエ
ンドプロテアーゼとを含むことを特徴とする、請求項２，３，４，６または７のいずれか
に記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物。
【請求項９】
前記複数の酵素による処理は、４０〜６０℃にて１２〜２４時間攪拌するものであるこ
とを特徴とする、請求項２，３，４，６，７または８のいずれかに記載のクラゲ由来のコ
ラーゲン分解物。
【請求項１０】
分子量が、７，０００〜９，０００であることを特徴とする、請求項２，３，４，６，
７，８または９のいずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物。
【請求項１１】
クラゲに当該クラゲの重量の４０〜６０重量％の水と、
所定量の酸、アルカリ及びエンドプロテアーゼ活性を有する複数の酵素からなる群から
選ばれるいずれか１つと、
を添加する分解物添加工程と、
４０〜７０℃で１２〜２４時間攪拌して抽出液を得る攪拌抽出工程と、
得られた抽出液を乾燥する乾燥工程と、
を備える、クラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法。
【請求項１２】
前記所定量の複数の酵素は、当該クラゲの重量の０．５〜２重量％のエンドプロテアー
ゼ活性を有する酵素と、１．５〜３．５重量％の少なくともエンドプロテアーゼ活性を有
する他の酵素とであることを特徴とする、請求項１１に記載のクラゲ由来のコラーゲン分
解物の製造方法。
【請求項１３】
前記複数の酵素の一方は、ロープ菌由来のエンドプロテアーゼ活性を有する酵素であり
、前記他の酵素は、種麹由来の少なくともエンドプロテアーゼ活性を有する酵素であって
、いずれのエンドプロテアーゼも至適ｐＨ６〜８．５、至適温度４５〜７０℃であること
を特徴とする、請求項１１に記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法。
【請求項１４】
前記乾燥工程は、スプレードライ法又は凍結乾燥法によって行われることを特徴とする
、請求項１１〜１３のいずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法。
【請求項１５】
クラゲに、当該クラゲの重量の５０重量％の水と、
当該クラゲの重量の１重量％のロープ菌由来のエンドプロテアーゼ活性を有する酵素と
、
当該クラゲの重量の２．５重量％の種麹由来の少なくともエンドプロテアーゼ活性を有
する他の酵素と、
を添加する酵素添加工程と、
５０℃で１７時間攪拌して抽出液を得る攪拌抽出工程と、
得られた抽出液を乾燥する乾燥工程と、
を備える、クラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クラゲ由来のコラーゲン及びその分解物に関し、特に、吸湿性の高いクラゲ
由来のコラーゲン及びその分解物に関する。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンは、高等動物中の全タンパクの１／３を占めるタンパクであり、動物の結合
組織を構成する主要タンパクである。動物の骨、皮膚、靭帯又は腱を酸又はアルカリで処
理することにより、粗コラーゲンが得られ、こうして得られた粗コラーゲンを加熱抽出し
て得られたコラーゲン抽出物、コラーゲン分解物等の変性コラーゲンは、医薬品や化粧品
に広く使用されてきた。すなわち、カプセルの材料、可塑性ゼラチンの基礎剤等として医
薬の分野において、また、ヒアルロン酸やコンドロイチン硫酸等のムコ多糖との相溶性、
及びエタノールとの相溶性に優れるため、化粧品の分野においても種々の化粧品に配合さ
れてきた。
【０００３】
従来、こうした変性コラーゲンの原料としては、食肉加工する際の副産物として安価に
入手できるため、牛や豚等の大動物の骨や皮膚が用いられてきた（以下、従来例１という
、非特許文献１参照）。
【０００４】
しかし、近年、牛においては狂牛病が、また、豚においては豚コレラやニパウイルスに
よる感染症の発生等が確認されており、コラーゲンの原料として用いる牛や豚がウイルス
に感染していないことが確認されない限り、安全性が保障されないというリスクがある。
そして、こうしたリスクは、こうした動物由来の変性コラーゲンにマイナスのイメージを
与えるものともなっている。
【０００５】
このため、最近では、コラーゲン及び変性コラーゲンの原料として牛や豚の骨や皮膚を
使用せず、鮭等の魚類の皮や鱗を原料として使用する技術が開発されている（以下、従来
例２という、特許文献１参照）。
【非特許文献１】新田ゼラチン株式会社ホームページ“３．ゼラチンの原料（コラーゲン）”、インターネット＜http://www.nitta-gelatin.co.jp/gelatin_labo/3.html＞
【特許文献１】特開２００１−２０００００号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述したように、牛や豚における感染症等の発生に起因して、コラーゲンの原料として
牛や豚の骨や皮膚等を使用した場合には、従来例１に示されるような方法を採用する限り
、製品の安全性をどのように保障していくかという問題がある。
【０００７】
また、鮭等の魚類の皮や鱗を使用するという従来例２は、こうした感染症の危険性を排
除するという観点からは優れた方法である。しかし、コラーゲンの原料の安定した確保と
いう面からは問題が残る。
【０００８】
したがって、安全性の面で問題がなく、安価かつ安定した供給が可能な原料からコラー
ゲンを調製することについての要望が大きくなってきている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の発明者らは、上記のような事情の下で鋭意研究を重ねた結果、クラゲ由来のコ
ラーゲンが本発明の目的に適うことを見出した。
さらに検討を続けた結果、クラゲ由来のコラーゲンに対して特定の処理を行うことによ
り、優れた物性を有するコラーゲン分解物が得られることを見出し、本発明を完成するに
至った。
【００１０】
すなわち本発明は、
［１］クラゲを６０〜１５０℃の温水により抽出して得られるクラゲ由来のコラーゲンを
提供するものであり、
［２］酸、アルカリ及びプロテアーゼ活性を有する複数の酵素からなる群より選ばれるい
ずれか１つによりクラゲを処理して得られる、クラゲ由来のコラーゲン分解物を提供する
ものであり、
［３］上記［１］に記載のクラゲ由来のコラーゲンを処理して得られる、上記［２］に記
載のクラゲ由来のコラーゲン分解物を提供するものであり、
［４］前記クラゲは、鉢虫綱根口クラゲ目に属するクラゲ又は鉢虫綱旗口クラゲ目に属す
るクラゲであることを特徴とする、上記［２］または［３］のいずれかに記載のクラゲ由
来のコラーゲン分解物を提供するものであり、
［５］前記クラゲは、エチゼンクラゲ、ミズクラゲ、ホワイトタイプクラゲ、チャイナタ
イプクラゲ、セミチャイナタイプクラゲ、キャノンボールタイプクラゲ及びボールタイプ
クラゲからなる群から選ばれるクラゲであることを特徴とする、上記［１］に記載のクラ
ゲ由来のコラーゲンを提供するものであり、
［６］前記クラゲは、エチゼンクラゲ、ミズクラゲ、ホワイトタイプクラゲ、チャイナタ
イプクラゲ、セミチャイナタイプクラゲ、キャノンボールタイプクラゲ及びボールタイプ
クラゲからなる群から選ばれるクラゲであることを特徴とする、上記［２］〜［４］のい
ずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物を提供するものであり、
［７］前記複数の酵素は、少なくとも、エンドプロテアーゼ活性を有する酵素であって、
至適ｐＨ６〜８．５、至適温度４５〜７０℃であることを特徴とする、上記［２］，［３
］，［４］または［６］のいずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物を提供するも
のであり、
［８］前記複数の酵素は、少なくとも、ロープ菌由来のエンドプロテアーゼと、種麹由来
のエンドプロテアーゼとを含むことを特徴とする、上記［２］，［３］，［４］，［６］
または［７］のいずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物を提供するものであり、
［９］前記複数の酵素による処理は、４０〜６０℃にて１２〜２４時間攪拌するものであ
ることを特徴とする、上記［２］，［３］，［４］，［６］，［７］または［８］のいず
れかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物を提供するものであり、
［１０］分子量が、７，０００〜９，０００であることを特徴とする、上記［２］，［３
］，［４］，［６］，［７］，［８］または［９］のいずれかに記載のクラゲ由来のコラ
ーゲン分解物を提供するものであり、
［１１］クラゲに当該クラゲの重量の４０〜６０重量％の水と、
所定量の酸、アルカリ及びエンドプロテアーゼ活性を有する複数の酵素からなる群から
選ばれるいずれか１つと、
を添加する分解物添加工程と、
４０〜７０℃で１２〜２４時間攪拌して抽出液を得る攪拌抽出工程と、
得られた抽出液を乾燥する乾燥工程と、
を備える、クラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法を提供するものであり、
［１２］前記所定量の複数の酵素は、当該クラゲの重量の０．５〜２重量％のエンドプロ
テアーゼ活性を有する酵素と、１．５〜３．５重量％の少なくともエンドプロテアーゼ活
性を有する他の酵素とであることを特徴とする、上記［１１］に記載のクラゲ由来のコラ
ーゲン分解物の製造方法を提供するものであり、
［１３］前記複数の酵素の一方は、ロープ菌由来のエンドプロテアーゼ活性を有する酵素
であり、前記他の酵素は、種麹由来の少なくともエンドプロテアーゼ活性を有する酵素で
あって、いずれのエンドプロテアーゼも至適ｐＨ６〜８．５、至適温度４５〜７０℃であ
ることを特徴とする、［１１］に記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法を提供
するものであり、
［１４］前記乾燥工程は、スプレードライ法又は凍結乾燥法によって行われることを特徴
とする、［１１］〜［１３］のいずれかに記載のクラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方
法を提供するものであり、
［１５］クラゲに、当該クラゲの重量の５０重量％の水と、
当該クラゲの重量の１重量％のロープ菌由来のエンドプロテアーゼ活性を有する酵素と
、
当該クラゲの重量の２．５重量％の種麹由来の少なくともエンドプロテアーゼ活性を有
する他の酵素と、
を添加する酵素添加工程と、
５０℃で１７時間攪拌して抽出液を得る攪拌抽出工程と、
得られた抽出液を乾燥する乾燥工程と、
を備える、クラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法を提供するものである。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、安全性の面で問題がなく、安価かつ安定した供給が可能なコラーゲン
を提供することができる。さらには吸湿性および保湿性の高いクラゲ由来のコラーゲン分
解物を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
まず本発明に使用するクラゲについて説明する。
本発明に使用するクラゲとしては、例えば、刺胞動物鉢虫綱（Scyphomedusae）根
口クラゲ目（Rhizostomeae）に属する食用のクラゲ、胞動物鉢虫綱（Scyphomedusae）旗
口クラゲ目（Semaeostomeae）に属する食用のクラゲ等を挙げることができる。
【００１３】
前記刺胞動物鉢虫綱根口クラゲ目に属する食用のクラゲは、口が口腕上にあり、傘縁に
触手がないことが特徴的である。
【００１４】
この目に属するクラゲのうち、通称、「ホワイトタイプ」、「チャイナタイプ」、「セ
ミチャイナタイプ」、「キャノンボールタイプ」及び「ボールタイプ」と総称されている
５種類を、原料入手の容易性から好適に使用することができる。
【００１５】
ここで、「ホワイトタイプ」と総称されるクラゲは、インドネシア、マレーシア、タイ
、ミャンマー、フィリピン、ベトナムの近海で水揚げされるものであり、東南アジアで水
揚げされるクラゲの大部分を占める。傘の形状が半球形で、透明に近い乳白色であること
から、このように総称される。このタイプのクラゲは、中国で水揚げされる葉腕海▲テツ
▼（Lobonema smithi）、擬葉腕海▲テツ▼（Lobonemoides gracilis）等と同種である。
【００１６】
「チャイナタイプ」と総称されるクラゲは、マレーシア、インドネシア等の近海で水揚
げされるものであり、形状、特徴及び品質が中国産クラゲに似ていることからこのように
呼ばれている。我国の備前クラゲ（Rhopilema esculetum）に類似している。
【００１７】
「セミチャイナタイプ」と総称されるクラゲは、マレーシア、インドネシア、ベトナム
等の近海で水揚げされるものであり、外観と形状とが上記のチャイナタイプに似ているこ
とからこのように呼ばれている。備前クラゲの一種である。
【００１８】
「キャノンボールタイプ」と総称されるクラゲは、メキシコの近海で水揚げされるもの
であり、傘の形はベレー帽であることからこのように呼ばれている。越前クラゲ（Stomol
ophus）の一種である。
【００１９】
「ボールタイプ」と総称されるクラゲは、インド、ミャンマー等の近海で水揚げされる
ものであり、深い半球状の形状を有することからこのように呼ばれている。
【００２０】
前記根口クラゲ目や前記旗口クラゲ目に属する食用のクラゲとしては、具体的には、タ
コクラゲ、エビクラゲ、ビゼンクラゲ、エチゼンクラゲ、サカサクラゲ、ミズクラゲ、ユ
ウレイクラゲ、アカクラゲ等を挙げることができる。
【００２１】
本発明に使用する前記クラゲは、エチゼンクラゲ、ミズクラゲ、ホワイトタイプクラゲ
、チャイナタイプクラゲ、セミチャイナタイプクラゲ、キャノンボールタイプクラゲ、ボ
ールタイプクラゲ等が好ましい。
前記クラゲは一種もしくは二種以上を使用することができる。
【００２２】
上述したクラゲは、海中から水揚げしたものをそのまま本発明の原料として使用するこ
ともできるし、水揚げ後、前記クラゲを食塩、ミョウバン、重炭酸ナトリウムを用いて処
理し、最終的に塩分濃度１６〜１７％の塩蔵品としたクラゲ等を本発明の原料として使用
するこもできる。
塩蔵品を使用する場合には、前記塩蔵品を水に漬けて塩抜きし、水切りを行い、この水
切り後のクラゲを使用することが好ましい。
【００２３】
まず前記クラゲから温水によりコラーゲンを抽出する方法について説明する。
前記温水によりコラーゲンを抽出する操作の前に、前記クラゲは細かく刻んでおくこと
が好ましい。
前記クラゲを細かく刻む方法としては、例えば、前記クラゲを裁断機、ミンチ機、サイ
レン、カッター等の一種もしくは二種以上の装置を用いて行う方法を挙げることができる
。
次に前記クラゲに対し、水切りした後の前記クラゲの重量を基準として、１／１０〜３
０倍、好ましくは１／３〜１倍の範囲の重量の温水により抽出する。
前記温水の温度範囲は、６０〜１５０℃が好ましく、７０〜１３０℃の範囲がより好ま
しく、９０〜１１０℃の範囲であればさらに好ましい。
１００℃以上の温水は、加圧釜等を用いて容器内部の圧力を１気圧以上に設定する等の
方法により得ることができる。
前記クラゲから温水によりコラーゲンを抽出する時間は、５分〜６時間の範囲であるこ
とが好ましく、３０分〜２時間の範囲であればさらに好ましい。
【００２４】
上記温水による抽出操作の後、不溶分を濾過により除いてから、得られた抽出液からス
プレードライによる方法、凍結乾燥による方法等により水分を除去することにより、本発
明のクラゲ由来のコラーゲンを得ることができる。
前記抽出液から水分を除去する際には、予め浸透膜等を利用した逆浸透操作、蒸留操作
等の方法により前記抽出液を濃縮する操作を実施することができる。
【００２５】
次に本発明のクラゲ由来のコラーゲン分解物について説明する。
本発明の「クラゲ由来のコラーゲン分解物」は、コラーゲンの立体構造である三重らせ
んが壊れた、いわゆるゼラチンのほか、グルタミンやアスパラギンのアミド基の−ＮＨ2
が失われているものや共有結合が切断されたもの、及び色素等をも含む変性コラーゲンを
意味する。本明細書中においては、「クラゲ由来のコラーゲン分解物」は、上記の意味で
使用するものとする。
【００２６】
クラゲ由来のコラーゲン分解物は、先に説明した温水により抽出して得られるクラゲ由
来のコラーゲンを使用して得ることもできるし、前記クラゲから得ることもできる。
前記温水により抽出して得られるクラゲ由来のコラーゲンを使用してコラーゲン分解物
を得る場合には、上述したクラゲ由来のコラーゲンに所定量の水と複数のプロテアーゼと
を加えて、所定の温度で所定の時間攪拌し、ここで得られた抽出物を乾燥することによっ
て得ることができる。
同様に前記クラゲからコラーゲン分解物を得る場合には、上述したクラゲを細かく刻み
、ここに所定量の水と複数のプロテアーゼとを加えて、所定の温度で所定の時間攪拌し、
ここで得られた抽出物を乾燥することによって得ることができる。
【００２７】
前記クラゲに対し添加する水の量は、細かく刻んだクラゲの重量の約４０〜６０重量％
であることが、抽出効率及び作業性の面から好ましい。水の量が約４０重量％未満では、
固形物の濃度が高くなりすぎて攪拌が困難となり、逆に６０重量％以上となると、固形物
の濃度が低くなりすぎて抽出効率が低下することによる。細切りしたクラゲの重量の約４
５〜５５重量％の水を添加することがさらに好ましく、約５０重量％の水を添加すること
が最も好ましい。
なお、前記温水により抽出して得られるクラゲ由来のコラーゲンを使用する場合には、
前記温水抽出前のクラゲの重量と得られたコラーゲンの重量との割合から算出された前記
温水抽出前のクラゲの重量の約４０〜６０重量％の水を使用すればよい。
【００２８】
また、添加するエンドプロテアーゼは、少なくとも基質特異性の異なる２種類とするこ
とが、分解効率、得られた分解物の保湿性、味及び製造コストの面から好ましい。
【００２９】
ここで、少なくとも２種類の酵素を使用する場合には、例えば、ロープ菌由来のエンド
プロテアーゼと、種麹由来のエンドプロテアーゼであって、至適ｐＨが６〜８．５、至適
温度が約４５〜約７０℃のものを組み合わせると、高い分解効率の下で保湿性に優れる分
解物を得られること、得られた分解物の味がよいことから応用範囲が広がること、及びコ
ストパフォーマンスがよいという利点がある。
【００３０】
上記のようなロープ菌由来のエンドプロテアーゼと、種麹由来のエンドプロテアーゼと
では、基質特異性が異なるために、これらを組み合わせることにより、クラゲから抽出さ
れた粗コラーゲンを効率よく分解して、コラーゲン分解物を得ることができるという利点
がある。
【００３１】
ロープ菌としては、Bacillus licheniformis等を挙げることができる。種麹としては、
Aspergillus oryzae、Aspergillus niger等を挙げることができる。
【００３２】
こうした菌をいずれもサブマージ醗酵によりそれぞれ増殖させ、その中から上記のよう
な特性を有する株を選択し、使用することができる。
【００３３】
上記のような２種類のエンドプロテアーゼに、さらに、種麹由来のエキソペプチドチダ
ーゼ活性を有する酵素であって、上記と同様の至適温度及び至適ｐＨを有数するものを組
み合わせることにより、所望の分子量のコラーゲン分解物を、容易に得ることが可能とな
る。
【００３４】
こうしたプロテアーゼとしては、具体的には、アルカリプロテアーゼであるAlcalase（
登録商標、Nobozymes社製）、呈味性を向上させるFlavourzyme（登録商標、Nobozymes社
製）等の市販品を使用してもよい。
【００３５】
例えば、上記のAlcalaseとFlavourzymeとを組み合わせて使用する場合には、上述した
クラゲの重量の約０．５〜約２重量％のAlcalaseと、約１．５〜約３．５重量％のFlavo
urzymeとを組み合わせて、所定の処理条件の下で処理することにより、所望の分子量のク
ラゲ由来のコラーゲン分解物を得ることができる。
【００３６】
ここで、Alcalaseの添加量を上述したクラゲの重量の約０．５〜約２重量％としたのは
、０．５重量％未満では苦味が出るため味覚の面から好ましくない。一方、２重量％を超
えても効果は２重量％以下の場合と相違がなく、コストのみが上昇するからである。Alca
laseの添加量は、分解効率と好ましい味の分解物を得られるかどうかとの関係から、約０
．７５〜１．５重量％とすることが好ましく、上述したクラゲ重量の約１重量％とするこ
とが最も好ましい。
【００３７】
また、Flavourzymeの添加量を上述したクラゲの重量の約１．５〜約３．５重量％とし
たのは、１．５重量％未満では所望の分解物が得られず、３．５重量％を超えても効果は
３．５重量％以下の場合と相違がなく、コストのみが上昇するだけだからである。Flavou
rzymeの添加量は、約２〜３重量％とすることが得られる分解物の量と保湿性とのバラン
スの関係からより好ましく、上述したクラゲ重量の約２．５重量％とすることが最も好ま
しい。
【００３８】
ここで例示したAlcalaseはエンドプロテアーゼであるが、Flavourzymeは、エンドプロ
テアーゼ活性とエキソペプチドチダーゼ活性という２つの酵素活性を有しており、酵素の
複合製剤である。このため、基質特異性が異なり、Alcakaseではプロリンやグルタミン酸
、Flavourzymeではアルギニンやスレオニンとなっている。このため、これらを併用する
と、後述するような分子量のコラーゲン分解物を得ることが可能となる。
【００３９】
Alcalase及びFlavourzymeは、至適温度が約４５℃〜約６０℃の範囲にあるが、酵素の
失活を防ぎつつ、効率良くクラゲ由来のコラーゲン分解物を得るために、約４７〜約５５
℃で処理を行うことが好ましく、約５０℃で処理を行うことが最も好ましい。
【００４０】
また、この処理は、約１２〜約２４時間、攪拌しながら行うことが好ましい。１２時間
未満では十分な量のクラゲ由来のコラーゲン分解物を得ることができず、また、２４時間
以上行ってもクラゲ由来のコラーゲン分解物の収量は増加しないことによる。より好まし
くは約１４〜約２０時間であり、約１７時間処理することが最も好ましい。
【００４１】
例えば、こうした処理は、HSIANGTAI社製のDC‐4Eに攪拌翼を取り付けて、攪拌速度を
１００回転／分として１７時間行うこととすると、分解効率の面から好適である。
【００４２】
そして、この攪拌によって得られた抽出液を乾燥することによって、本発明のクラゲ由
来のコラーゲン分解物を得ることができる。この乾燥は、例えば、スプレードライ法やフ
リーズドライ法等によって行うことができる。
【００４３】
以上のような処理を行うことによって、所望の分子量のクラゲ由来のコラーゲン分解物
を得ることができる。例えば、分子量７，０００Ｄａ〜９，０００Ｄａのコラーゲン分解
物を得ることができる。
【００４４】
なお、以上の説明においては、クラゲからコラーゲン分解物を得るに際して、水と酵素
とを使用したが、水に代えて、酸やアルカリを使用して、本発明のコラーゲン分解物を得
ることもできる。
【００４５】
こうした酸としては、例えば、４〜５０％の濃度の塩酸、硝酸、リン酸等の無機酸、酢
酸や乳酸等の有機酸を使用することができる。また、アルカリとしては、例えば、１〜１
５％濃度の水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カルシウム等を使
用することもできる。
【００４６】
また、クラゲからコラーゲン分解物を得るに際して、前記酵素を使用する前に、クラゲ
を６０〜１５０℃の温水で加熱した混合物、または湯切りをした加熱後のクラゲを使用す
ることができる。前記温度は８０〜１２０℃の範囲であることが好ましく、９０〜１１０
℃の範囲であればさらに好ましい。
前記温水によりクラゲを加熱する時間は、５分〜６時間の範囲であることが好ましく、
３０分〜２時間の範囲であればさらに好ましい。
なお、加圧容器を使用することにより１００℃を超える温水を得ることができる。
前記酵素を使用する際には、前記酵素が失活しない温度まで前記加熱後のクラゲを冷却
してからコラーゲン分解操作を行うことが好ましい。
【００４７】
以下に、実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は、これらの実施例
に何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００４８】
クラゲ由来のコラーゲンの製造
（１）原料
原料としては、瀬戸内海から水揚げされたミズクラゲを使用した。コラーゲン抽出に用
いる水は水道水を利用した。
（２）コラーゲンの抽出
上述した８００ｇのミズクラゲを、裁断機、ミンチ機又はサイレンとカッターを用いて
細かく刻み、ここに４００ｇの水を加えて、沸騰状態（約１００℃）にて１時間１００回
転／分で攪拌し、コラーゲンを含有する抽出液を得た。
【００４９】
攪拌は、HSIANGTAI社製のDC-4Eのシャフトに攪拌翼をつけて使用した。加熱には、恒温
槽（ASONE社製、TR-1A）を使用した。
【００５０】
ついで不溶物を濾過により除き、得られた濾過液を小型スプレードライ機Ｌ−８を用い
て、流量約１ｋｇ／時間、熱風入口温度を１８０℃、出口温度を１００℃に設定して、ス
プレードライ法により乾燥し、クラゲ由来のコラーゲンを得た。
得られた抽出液の乾燥には、小型スプレードライ機Ｌ−８（大川原化工機株式会社製）
を使用した。
【実施例２】
【００５１】
クラゲ由来のコラーゲン分解物の製造
（１）原料及び試薬等
原料としては、漂白加工前のホワイトタイプクラゲ（塩蔵品、マルトモ（株）製）を使
用した。
【００５２】
また、酵素とともに用いる水は、水道水を使用した。クラゲコラーゲンの分解に使用す
る酵素としては、Alcalase及びFlavourzyme（いずれもNobozyme社製）を購入し、使用し
た。Alcalase及びFlavourzymeの性質は下記の通りである。
【００５３】
Alcalaseは、Bacillus licheniformisから選択された株をサブマージ醗酵して得られた
タンパク質分解酵素である。この酵素は、主要なコンポーネントをズブチリシンＡ（また
は、Subtilisin Carisberg）とする、分子量２７，３００のエンドペプチドチダーゼであ
る。
【００５４】
至適温度は５５℃〜７０℃、至適ｐＨは６．５〜８．５であり、基質によって異なる。
触媒部位はセリンであり、インスリン３のβ鎖の酸化の際には、４−５、９−１０、１１
−１２、１５−１６、及び２６−２７の結合をアタックする。
【００５５】
Flavourzymeは、遺伝子組換のされていない種麹（Aspergillus oryzae）の株をサブマ
ージ醗酵して得られたプロテアーゼとペプチドチダーゼの複合産物であり、エンドプロテ
アーゼ活性とエキソペプチドチダーゼ活性の双方の活性を備えている。
【００５６】
Flavourzymeの至適ｐＨは５．０〜７．０であるが、エキソペプチドチダーゼ活性の至
適ｐＨ範囲は、ほぼ７．０である。至適温度は、約５０℃である。
【００５７】
攪拌は、HSIANGTAI社製のDC-4Eのシャフトに攪拌翼をつけて使用した。加熱には、恒温
槽（ASONE社製、TR-1A）を使用した。
【００５８】
得られた抽出液の乾燥には、小型スプレードライ機Ｌ−８（大川原化工機株式会社製）
を使用した。
【００５９】
また、得られたコラーゲン分解物の分子量測定には、ATTO ラピダス・ミニスラブ電気
泳動装置（AE-6350MCP）を使用した。
【００６０】
（２）コラーゲン分解物の抽出
上述した漂白加工前のホワイトタイプクラゲ８００ｇを、２，４００ｍｌの水に３０分
程度浸漬後笊切りし、これを２〜３度繰り返して塩抜きをした。塩抜き後のクラゲの重量
は８００ｇであった。
【００６１】
塩抜き後のクラゲを、裁断機、ミンチ機又はサイレンとカッターを用いて細かく刻み、
ここに４００ｇの水と、上記のAlcalase８．０ｇ及びFlavourzyme２０ｇを加えて、５０
℃にて１７時間、上記の装置を用いて、１００回転／分で攪拌し、コラーゲン分解物を含
有する抽出液を得た。
【００６２】
ついで、この抽出液の一部を得られたコラーゲン分解物の分子量測定用に取り分け、残
りを、上述した小型スプレードライ機Ｌ−８を用いて、流量約１ｋｇ／時間、熱風入口温
度を１８０℃、出口温度を１００℃に設定して、スプレードライ法により乾燥し、クラゲ
由来のコラーゲン分解物（サンプル１）を得た。
【実施例３】
【００６３】
クラゲ由来のコラーゲン分解物の物性の検討
（１）クラゲ由来のコラーゲン分解物の分子量の測定
分子量の測定は、ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）によって行っ
た。上述したＡＴＴＯ  ラピダス・ミニスラブ電気泳動装置を使用し、実施例２で得られ
たクラゲ由来のコラーゲン分解物（サンプル１）について下記の条件で測定を行った。
【００６４】
＜測定条件＞
変性      ９５℃  ５分間
ゲル濃度  １５％
定電圧    ３００Ｖ、４０ｍＡ
染色      銀染色
マーカーとしては、トリオースリン酸イソメラーゼ（２６,６２５Ｄａ）、ミオグロビ
ン（１６,９５０Ｄａ）、α−ラクトアルブミン（１４,４３７Ｄａ）及びアプロチニン（
６，５１２Ｄａ）を使用した。分子量の測定を行った結果を図１に示す。
【００６５】
図１に示すように、７，０００〜９，０００Ｄａ付近にメインバンドが検出され、得ら
れたコラーゲン分解物の分子量は約８，０００Ｄａと推定された。
【００６６】
なお、コラーゲン分解物のうち、右側のクロマトグラム２は上記のクロマトグラム１に
比較して１／３の量を吸着させた後に測定を実施したものであり、クロマトグラム１およ
び２は最初の吸着量に違いがあるだけで使用した内容は全く同じである。
【００６７】
（２）吸湿性および保湿性の比較検討
ついで、実施例２で得られたコラーゲン分解物の吸湿性について試験を行った。下記表
１〜３に記載されたクラゲコラーゲンは、実施例２で得られたクラゲ由来のコラーゲン分
解物を意味する。
各種の動物に由来するコラーゲン分解物の吸湿性と比較するために、分子量の比較的近
い下記の試料１〜５を使用した。また、ヒアルロン酸については、優れた吸湿性を有する
ため、クラゲ由来のコラーゲン分解物の吸湿性の判断指標とするために、対照試料として
使用した（試料番号６）。
【００６８】
【表１】
2007084528.tif 000002
【００６９】
各試料１〜５を約１ｇずつ秤量し（ｎ＝４）、直径８０ｍｍの耐熱灰化皿上に均一に広
げ、４０℃、湿度９０％の条件下で２４時間放置し、経時的な重量の変化を調べた。
【００７０】
重量の測定には、電子天秤（JP-160、Chyo Balance Corporation製）を使用した。測定
結果は、各資料１ｇ当たりの吸湿量（ｇ）に換算し、吸湿量で示した。結果を表２及び図
２に示す。
【００７１】
【表２】
2007084528.tif 000003
【００７２】
*：( )内は、試験開始後３時間のヒアルロン酸の吸湿量を１としたときの割合を表す。
【００７３】
表２及び図２に示されるように、試験開始後３時間におけるヒアルロン酸の吸湿量を１
とすると、試料Ｎｏ．１（クラゲ由来のコラーゲン分解物）を除いて、０．５〜０．７と
ヒアルロン酸よりも吸湿性が低いことが示された。一方、試料Ｎｏ．１（クラゲ由来のコ
ラーゲン分解物）は、３時間後の吸湿量が約３と高い値を示し、吸湿性の高いことが示さ
れた。
【００７４】
また、ヒアルロン酸の吸湿量は、２４時間後に１．２５まで増加していた。試料Ｎｏ．
１のその後の重量の変化を見ると、２４時間後で３．６３と吸湿量はさらに増加しており
、試料Ｎｏ．１の吸湿量は、ヒアルロン酸とほぼ同様であることが示された。
【００７５】
同様に、各サンプルを４０℃９０％ＲＨの湿度で吸湿させた後、２５℃３０ＲＨの湿度
にて２４時間静置した後の重量変化を測定した。この重量変化は各サンプルの保湿性に対
応するものである。結果を表３に示す。
【００７６】
【表３】
2007084528.tif 000004
【００７７】
以上より、クラゲ由来のコラーゲン分解物は、他の動物由来のコラーゲン分解物に比べ
て非常に高い吸湿性を有するとともに、保湿性にも優れるものであることが示された。
【実施例４】
【００７８】
酵素の配合比と分解率、吸湿性及び食味との関係の検討
（１）酵素の配合比と分解率との検討
各酵素の配合量をクラゲの重量に対して、下記表３に示すように変更した他は、実施例
２と同様にしてコラーゲンの分解率を検討した。
【００７９】
AlcalaseとFlavourzymeとの比を１．０：２．５としたときの値を１００として、各配
合割合における分解率（％）を示した。
【００８０】
【表４】
2007084528.tif 000005
【００８１】
表４に示されるように、Alcalaseの配合割合を１．０重量％とすると、Flavourzymeの
配合割合が５．０重量％までは、分解効率は配合割合の上昇に依存して上昇し、７．５重
量％となると低下が見られた。また、Flavourzymeの配合割合を２．５重量％とした場合
には、Alcalaseの配合割合が２．０重量％に達するまでは分解効率は上昇し、４．０重量
％では低下が見られた。
【００８２】
以上より、Alcalaseの配合割合を０．５重量％以上４．０重量％未満、Flavourzymeの
配合割合を１．２５重量％以上７．５重量％未満の範囲とすると、分解効率が高いことが
示された。
（２）酵素の配合比と吸湿性との検討
各酵素の配合量をクラゲの重量に対して、下記表４に示すように変更した他は、実施例
２と同様の処理を行い、得られた各分解物の吸湿量（ｇ）を、実施例２と同様にして測定
した。
【００８３】
【表５】
2007084528.tif 000006
【００８４】
表５に示されるように、吸湿量は、Alcalaseの配合割合を１．０重量％とすると、Flav
ourzymeの配合割合の上昇につれて増加することが示された。また、Flavourzymeの配合割
合を２．５重量％とすると、Alcalaseの配合割合の上昇につれて増加することが示された
。
【００８５】
（３）酵素の配合比と食味の変化の検討
各酵素の配合量をクラゲの重量に対して、下記表５に示すように変更した他は、実施例
１と同様に処理し、得られた分解物の食味を、６名のパネラーにより５段階で評価した。
数値が大きいほど、味がよいことを示す。
【００８６】
【表６】
2007084528.tif 000007
【００８７】
表６に示されるように、食味は、Alcalaseの配合割合が高くなると改善され、また、Fl
avourzymeの配合割合が２．５重量％のときに最も良い評価となった。
【実施例５】
【００８８】
上述した漂白加工前のホワイトタイプクラゲ（塩蔵品）を用いて、実施例２の場合と同
様の工程により塩抜きを実施した。
ついで塩抜きしたホワイトタイプクラゲを用いて、実施例１の場合と全く同様の工程に
よりクラゲ由来のコラーゲンを得た。これをサンプル２とする。
【実施例６】
【００８９】
実施例１により得られたクラゲ由来のコラーゲン（サンプル４とする。）を用いて、実
施例２の場合と同様の工程によりクラゲ由来のコラーゲン分解物を得た。これをサンプル
３とする。
【実施例７】
【００９０】
サンプル１（実施例２で得られたクラゲ由来のコラーゲン分解物）、サンプル２（実施
例５で得られたクラゲ由来のコラーゲン）、サンプル３（実施例６で得られたクラゲ由来
のコラーゲン分解物）およびサンプル４（実施例１で得られたクラゲ由来のコラーゲン）
を用いて、実施例３の表２の場合と全く同様に吸湿試験を行った。
前記サンプル１の３時間後の増加重量を１００とし、前記サンプル１と同じ重量を秤量
した場合の、前記サンプル１に対する各サンプルの重量割合の経時的変化を表７に示した
。
また、この結果を図３に示した。
【００９１】
【表７】
2007084528.tif 000008
【産業上の利用可能性】
【００９２】
本発明により得られたクラゲ由来のコラーゲンおよびクラゲ由来のコラーゲン分解物は
、安全性が高いとともに、保湿性に優れており、医薬品、または化粧品の分野において、
保湿剤や水分調節剤として有用である。さらに、本発明のクラゲ由来のコラーゲンの製造
方法および本発明のクラゲ由来のコラーゲン分解物の製造方法によれば、上記のような性
質を有するコラーゲンおよびコラーゲン分解物をそれぞれ効率よく製造することができる
。
【図面の簡単な説明】
【００９３】
【図１】クラゲ由来のコラーゲン分解物の分子量分布を示す、ゲル電気泳動の結果を表す図面代用写真である。
【図２】各試料１〜６の吸湿量の比率の経時変化を表す図である。
【図３】各サンプル１〜４の吸湿量の比率の経時変化を表す図である。
【図１】
2007084528.tif 000009
【図２】
2007084528.tif 000010
【図３】
2007084528.tif 000011