(57)【要約】【課題】新規なプロスタサイクリン産生増加剤、血流促進剤、血行障害の予防・改善剤、血行障害に起因する疾患の予防・改善剤、又は皮膚改善剤、並びそれらを含有する、飲食品、医薬品または化粧品などを提供すること。【解決手段】エルダーベリー抽出物を有効成分とする、プロスタサイクリン産生増加剤、血流促進剤、血行障害の予防・改善剤、血行障害に起因する疾患の予防・改善剤、皮膚改善剤。エルダーベリー抽出物は、エルダーベーリーの果実を含水エタノール等の有機溶媒で抽出することにより得られる。上記剤は、飲食品、医薬品または化粧品に添加して使用することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エルダーベリー抽出物を有効成分とする、プロスタサイクリン産生増加剤。
【請求項２】
エルダーベリー抽出物を有効成分とする、血流促進剤。
【請求項３】
エルダーベリー抽出物を有効成分とする、血行障害または血行障害に起因する疾患の予防・改善剤。
【請求項４】
エルダーベリー抽出物を有効成分とする、皮膚改善剤。
【請求項５】
エルダーベリー抽出物が、エルダーベリー果実を有機溶媒で抽出して得られたものである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の剤。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の剤を含有する、飲食品、医薬品又は化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エルダーベリー抽出物を有効成分とする、プロスタサイクリン産生増加剤、血流促進剤、血行障害の予防・改善剤、血行障害に起因する疾患の予防・改善剤または皮膚改善剤に関する。また、本発明は上記の剤を含有する、飲食品、医薬品または化粧品に関する。
【背景技術】
【０００２】
エルダーベリー（elder berry  学名：Sambucus nigra L.）は、ヨーロッパを原産とするスイカズラ科の植物であり、別名西洋ニワトコとしても知られている。エルダーベリーの各組織は、医療用途及び健康促進作用、例えば、発汗作用、利尿作用、抗炎症作用や抗ウイルス作用を有する（例えば非特許文献１参照）。
血行障害は、組織の壊死、高血圧、肩こり、冷え性、皮膚のくすみ、目の下のくま等の疾患や症状を引き起こす。また、老化に伴う色素沈着のある皮膚や、乾燥した皮膚では、毛細血管の循環が不良であるために細胞に栄養が届かず、老廃物が円滑に除去されない状態にある。体内の血流を改善することにより、血行障害に起因する種々の疾患や症状の予防・改善が可能となる。また、血流改善により、皮膚の状態を改善し、健康な状態に保つことができる。
【０００３】
プロスタサイクリン（ＰＧＩ２）は、血小板凝集抑制作用及び血管平滑筋を弛緩させることによる血管拡張作用を有する。また、プロスタサイクリン誘導体は皮膚血流量低下を抑制するので、抹消血行障害治療に有用であることが知られている（例えば非特許文献２参照）。
体内の血流改善のためには、血管内皮細胞等におけるプロスタサイクリン産生を増加させることが有用である。プロスタサイクリン産生増加剤としては、ボタンボウフウ（Peucedanum japonicum）の抽出物が公知である（例えば特許文献１参照）。
各種の植物抽出物が血流改善作用を有することは公知である。カシス濃縮物（有効成分：アントシアニン）とアミノ酸および有機酸からなる群より少なくとも１種を含んでなる組成物は抹消血流改善、血管拡張作用により、血行障害である肩こりや冷え性などの症状を緩和する（例えば特許文献２参照）。レモングラス（Cymbopogon citratus）等の植物から抽出されるシトラールも血流改善効果を有する（例えば特許文献３参照）。また、松樹皮ポリフェノールにより血流が改善され、皮膚のくすみやくまが改善される（例えば非特許文献３，４，５参照）。
【０００４】
【特許文献１】特開２００５−３５０４３２号公報
【特許文献２】特開２００４−２６２８７８号公報
【特許文献３】特開２０００−０４４４６７号公報
【非特許文献１】Alter Med Rev: Vol.10(No.1) Page.51-55（2005）
【非特許文献２】Jpn J Pharmacol： Vol.59 (No.1) Page.57-63 (1992.05)
【非特許文献３】New Food Industry 2005 Vol.47 No.1 3-14
【非特許文献４】New Food Industry 2005 Vol.47 No.1 15-21
【非特許文献５】New Food Industry 2005 Vol.47 No.1 22-28
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の課題は、主として新規なプロスタサイクリン産生増加剤、血流促進剤、血行障害の予防・改善剤、血行障害に起因する疾患の予防・改善剤または皮膚改善剤の提供にある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、エルダーベリー抽出物のプロスタサイクリン産生増加活性及び血流促進活性を見出し、本発明を完成した。すなわち本発明は、以下に係るものである。
１．エルダーベリー抽出物を有効成分とする、プロスタサイクリン産生増加剤。
２．エルダーベリー抽出物を有効成分とする、血流促進剤。
３．エルダーベリー抽出物を有効成分とする、血行障害または血行障害に起因する疾患の予防・改善剤。
４．エルダーベリー抽出物を有効成分とする、皮膚改善剤。
５．エルダーベリー抽出物が、エルダーベリー果実を有機溶媒で抽出して得られたものである、上記１．〜４．のいずれかに記載の剤。
６．上記１．〜４．のいずれかに記載の剤を含有する、飲食品、医薬品または化粧品。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明で使用される「エルダーベリー抽出物」は、プロスタサイクリン産生増加活性、血流促進活性または皮膚改善活性を有する限り、どのような方法で抽出されたものであっても良い。エルダーベリー抽出物とは、例えば、エルダーベリー果実を圧搾して得られる果汁、エルダーベリーの果実全体または果実の皮・種子等の適当な部分から任意の抽出法により得られる抽出物等である。また、エルダーベリー果実の破砕物や乾燥物、エルダーベリー果実をジャム状に煮詰めたもの等も、本発明のエルダーベリー抽出物として使用できる。
【０００８】
抽出の出発材料であるエルダーベリーの植物体としては、果実等の部分を乾燥若しくはそれを粉砕したもの、または、生もしくは冷凍のもの等が使用できる。また、飲料製造等において発生する、エルダーベリー果実の圧搾して果汁を採取した後の残渣、すなわち搾汁粕を、抽出の出発材料としてもよい。
【０００９】
抽出の好適な一例は、水または有機溶媒等の溶媒を用いて適当な条件下で抽出することである。抽出は、加温しながら行うことが好ましい。有機溶媒とは例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等の水溶性アルコール類、アセトン、酢酸等である。水溶性有機溶媒は単独で用いてもよいが、任意の比で水と混合して用いてもよい。毒性が低い、沸点が比較的低いため抽出後の除去が容易、入手容易等の理由から、水溶性有機溶媒としてはエタノールが好ましい。抽出効率を高く、不純物の割合を少なくするためには、エタノール：水の混合比は１：４〜４：１（ｖ／ｖ）が好ましい。
【００１０】
エルダーベリー原料に対する溶媒の量は特に限定されないが、通常１〜１００倍量（ｖ／ｗ）、好ましくは２〜１０倍量である。必要により界面活性剤（例えばショ糖脂肪酸エステル等）や酸化防止剤（例えばアスコルビン酸等）などを加えてもよい。また不活ガス雰囲気下で抽出を行ってもよい。
【００１１】
エルダーベリーの抽出に際しては、２０〜１００℃程度に加温しながら抽出を行うことが好ましい。抽出時間は、溶媒量、溶媒の種類、温度等の抽出条件に左右されるが、通常１０分〜２４時間であり、好ましくは３０分〜４時間程度である。
【００１２】
エルダーベリーを有機溶媒などで抽出して得られる粗抽出物は、適宜、濃縮及び／または乾燥して使用することができる。
【００１３】
こうして調製される粗抽出物は、本発明の有効成分であるエルダーベリー抽出物として使用することができる。更に、粗抽出物を、セファデックス、ポリアミド、シリカゲル、ＯＤＳ等を用いたカラムクロマトグラフ、セルロース膜等を用いた膜分離、酢酸エチル−水等を用いた液液分離、酵母等の微生物の添加による不純物の分解など精製・分離・脱色操作を行うことにより、より高純度に有効成分を含有するエルダーベリー抽出物が得られる。実施例に示すように、エルダーベリー果実を５０％エタノールで抽出して得られる抽出物をＯＤＳカラムに供した後、エタノール濃度８０〜１００％で溶出することにより、強いプロスタサイクリン産生増加活性を示すエルダーベリー抽出物が得られる。なお、本発明のエルダーベリー抽出物としては、市販品を使用することもできる。
【００１４】
実施例に示す通り、エルダーベリー抽出物は、正常ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の系においてプロスタサイクリン産生増加作用を示す他、ラット下肢部における血流促進作用を示す。上記作用を利用することにより、エルダーベリー抽出物は、血行障害の予防・改善剤、血行障害に起因する疾患の予防・改善剤、または皮膚改善剤として使用できる。ここで、血行障害に起因する疾患とは、例えば組織の壊死、高血圧、肩こり、冷え性、皮膚のくすみ、目の下のくまを意味する。また、皮膚改善とは、プロスタサイクリン産生増加または血流促進に起因する、皮膚の諸症状（例えば、皮膚のくすみ、目の下のくま）の改善を意味する。
【００１５】
本発明のエルダーベリー抽出物は、飲食品、医薬品または化粧品に添加して使用することができる。飲食品、医薬品または化粧品の種類、形態、及びその他の含有成分等に特に制約はなく、当業者に公知の任意の各種方法で容易に調製することができる。
【００１６】
飲食品、医薬品または化粧品に有効成分として含まれるエルダーベリー抽出物の含有量は、本発明の作用、即ち、プロスタサイクリン産生増加、血流促進、血行障害の予防・改善、血行障害に起因する疾患の予防・改善、または皮膚改善が達成される限り特に制限はなく、適宜決めることができる。
なお、本発明の各種剤には、有効成分の作用に実質的な影響を及ぼさない限り、当業者に公知のその他の各種成分が含まれていても良い。
【００１７】
〔本発明の飲食品〕
本発明の飲食品の形態としては、例えば、顆粒状、粒状、ペースト状、ゲル状、固形状、または、液体状に任意に成形することができる。これらには、食品中に含有することが認められている当業者に公知の各種物質、例えば、結合剤、崩壊剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、矯味剤、緩衝剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調整剤などを適宜含有させることができる。飲食品に対するエルダーベリー抽出物の添加量は特に限定されないが、例えば、体重約６０Ｋｇの成人一日当たり約１０ｍｇ〜５ｇ、好ましくは５０ｍｇ〜２ｇ程度摂取できる量とすればよい。
特に、特定保健用食品、機能性食品、または健康志向食品等として利用する場合には、本発明の有効成分を所定の作用が十分発揮されるような量で含有させることが好ましい。
【００１８】
〔本発明の医薬品〕
本発明の医薬品は、例えば錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などの固形剤、または、注射剤などの液剤などいずれの形態にも公知の方法により適宜調製することができる。これらの医薬品には通常用いられる結合剤、崩壊剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、矯味剤、緩衝剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調整剤などを適宜使用してもよい。
本発明の医薬品は、経口的にあるいは非経口的に適宜に使用される。すなわち、経口、静脈、腹腔内の投与などによって所望の作用を表すものである。
医薬品における有効成分（エルダーベリー抽出物）の投与量は、その種類、その剤型、また患者の年令、体重、適応症状などによって適宜設定すればよい。例えば経口投与の場合は、体重約６０Ｋｇの成人に対し、一日１回または数回、一日当たり約１０ｍｇ〜５ｇ、好ましくは５０ｍｇ〜２ｇ程度投与すればよい。
【００１９】
〔本発明の化粧品〕
本発明の化粧品も、例えば、液体状、ペースト状、または、ゲル状の任意の形態とすることができる。これらの中にも、化粧品中に含有することが認められている、当業者に公知の各種物質を適宜含有させることができる。化粧品に対するエルダーベリー抽出物の添加量は特に限定されないが、例えば、成人一日当たり約１０ｍｇ〜５ｇ、好ましくは５０ｍｇ〜２ｇ程度化粧品として使用される量とすればよい。
【００２０】
以下、実施例に則して本発明を具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの記載によって制限されるものではない。
【実施例１】
【００２１】
エルダーベリー抽出物の調製：
ヨーロッパ産エルダーベリー果実を凍結乾燥し、粉砕し、果実粉末を得た。この果実粉末１０ｇを、１００ｍｌの５０％エタノールを用いて、５０℃で３時間抽出した。抽出液を濃縮後、凍結乾燥することによりエルダーベリー抽出物を得た。該抽出物に含まれる総ポリフェノール量は５．８％であった。
【実施例２】
【００２２】
プロスタサイクリン産生量測定試験：
各種のベリー抽出物を試料として、プロスタサイクリン産生増加活性を測定した。
１．試料
・エルダーベリー抽出物  （実施例１に記載）
・クランベリー抽出物（キッコーマン社製「クランベリー抽出物」）
・マルベリー抽出物（アイトワン社製「桑の実エキス」の５０％エタノール抽出物）
・アロニア抽出物（AGROPHRM S.A.社製「ANTHOCYANINS POWDER from ARONIA MELANOCARPA」）
・ブラックカラント抽出物（Pacific Coast Fruit Products Ltd社製「冷凍果実（カナダ産）」の５０％エタノール抽出物）
・アサイベリー抽出物（VDF社製「Acai pulp powder」の５０％エタノール抽出物）
・ハスカップ抽出物（北海道のかりんとう屋社製「果実凍結乾燥品」の５０％エタノール抽出物）
・ラズベリー抽出物（VDF社製「20% raspberry powder」の５０％エタノール抽出物）
２．測定方法
正常ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）（ＴａＫａＲａ社製）を２４穴プレート（ＦＡＬＣＯＮ社製）に５００μｌ（０．５×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）ずつ播種し、微小血管内皮細胞培地（ＥＧＭ−２）（５％  ＦＢＳ）にて３７℃、５％  ＣＯ２の条件でコンフルエントになるまで培養した。その後、各濃度の試料を加えた培地に交換し、更に１８時間培養した。培養プレートを１，２００ｒｐｍで１０分間遠心し、培養細胞上清を回収した。その上清中のプロスタサイクリン濃度を、プロスタサイクリンの安定な代謝物である6-keto Prostaglandin F１αの濃度（ｐｇ／ｍｌ）として測定した。該代謝物の濃度が高いほど、血管内皮細胞のプロスタサイクリン産生が増加していること、すなわち試料のプロスタサイクリン産生増加活性が高いことを意味する。
なお、6-keto Prostaglandin F１αの測定は、6-keto Prostaglandin F１α EIA Kit（Ｃａｙｍａｎ社製）を用いて行った。
３．測定結果
（１）各種ベリー類由来の試料のうち、エルダーベリー抽出物のみが、プロスタサイクリン産生増加活性を示した（図１）。図1の縦軸は6-keto Prostaglandin F１αの量を示す。ＬＰＳは、ポジティブコントロールとして使用したリポ多糖(lipopolysaccharide)を意味する。また、図１中の濃度は、実施例２において培地に添加した各試料の終濃度を意味する。
（２）エルダーベリー抽出物は、濃度依存的なプロスタサイクリン産生増加作用を示した（図２）。図２中の濃度は、２．において培地に添加したリポ多糖(lipopolysaccharide)及びエルダーベリー抽出物の終濃度を意味する。
（３）実施例１で調製したエルダーベリー抽出物をＯＤＳカラムに供し、エタノール濃度２０，４０，６０，８０及び１００％で溶出した画分を得た。実施例１で調製したエルダーベリー抽出物及び各画分の終濃度が５０μｇ／ｍｌとなるように培地に添加し、プロスタサイクリン産生増加活性を測定した。その結果、エタノール８０％溶出画分及びエタノール１００％溶出画分が強い活性を示した（図３）。
なお、８０％及び１００％エタノール溶出画分にはポリフェノールが含まれていないことを確認した (表１)。
【００２３】
【表１】
2007039445.tif 000002
【００２４】
本試験により、エルダーベリー抽出物がプロスタサイクリン産生増加作用を有することが示された。
【実施例３】
【００２５】
血流促進試験：
以下の試験により、エルダーベリー抽出物の血流促進活性を確認した。
１．血流測定方法
HOS:HR-1へアレスマウス、６週齢（雄）に、エルダーベリー抽出物（実施例１に記載）を4％の割合で混ぜた餌（ＭＦ粉末）を７日間自由摂取させ、摂取前後の背中皮膚の血流量をレーザー血流画像化装置（インテグラル社製）により測定した。Ｃｏｎｔｒｏｌ群（ＭＦ粉末摂取群）とエルダーベリー摂取群それぞれｎ＝８で試験を行った。なお、レーザー血流画像化装置は、レーザー光が赤血球等の運動している粒子に当たった際に起こるドップラー効果（光の周波数の変化）による電流の変化を測定して、血流量を解析する装置である。
【００２６】
２．測定結果
血流量の測定結果を図４に示す。図中、縦軸（Ｖ）の数値が大きい程、血流量が多いことを示す。
エルダーベリー群は、摂取後の血流量が摂取前に比べて有意に（p＜0.01）増加した。また、エルダーベリー群とコントロール群の摂取後の血流量と比較すると、エルダーベリー群のほうが有意に(p＜0.05)血流量が多かった。
エルダーベリー抽出物が血流促進活性、特に抹消血管における血流促進活性を有し、血流改善作用に基づく、血行障害の予防・改善、血行障害に起因する疾患の予防・改善、または皮膚改善のために利用可能であることが示された。
【実施例４】
【００２７】
実施例１で使用した、乾燥粉末状のエルダーベリー抽出物は、以下のようにして、飲食品、医薬品または化粧品とすることができる。
＜錠剤タイプの内服剤または機能性食品＞
エルダーベリー抽出物５０ｍｇ、乳糖８０ｍｇ、結晶セルロース６０ｍｇ、ショ脂肪酸エステル１０ｍｇ、以上を１錠分として常法により錠剤化する。この錠剤は、内服用の医薬品または機能性食品として使用できる。
＜乳化液剤タイプ内服剤または機能性食品＞
エルダーベリー抽出物１００ｍｇ、中鎖飽和脂肪酸トリグリセリド７０ｍｇ、ビタミンＥ１ｍｇ、オレンジ油２０ｍｇ、デカグリセリンモノステアレート３０ｍｇ、グリセリン７５０ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸１ｇ、アスコルビン酸５００ｍｇ、以上を水に加えて全量を１００ｍｌとし、常法により分散乳化処理して、乳化液剤とする。この液剤は、内服用の医薬品または機能性食品として使用できる。
＜散剤及び顆粒剤タイプの内服剤または機能性食品＞
エルダーベリー抽出物０．１ｇ、トウモロコシデンプン１．１ｇ、乳糖０．８ｇ、以上を一包分とする散剤または顆粒剤を常法に従い調製する。この散剤または顆粒剤は、内服剤または機能性食品として使用できる。
＜注射剤＞
エルダーベリー抽出物２％、界面活性剤８％、生理食塩水９０％、以上を重量比で含む混合液を加熱滅菌して注射剤とする。
＜キャンディータイプ機能性食品＞
エルダーベリー抽出物５ｇ、砂糖４３ｇ、水飴４２ｇ、水５ｇ、果汁２ｇ、増粘剤２ｇ、アスコルビン酸１ｇ、香料０．１ｇ、ビタミンＥ０．１ｇを常法に従い、５ｇ／個のキャンディーとする。
＜飲料タイプ機能性食品＞
エルダーベリー抽出物１５ｇ、クランベリージュース（果汁１００％）９８５ｇをミキサーにて混合して均一な飲料とする。
【産業上の利用可能性】
【００２８】
本発明の各種剤に有効成分として含まれるエルダーベリー抽出物は、プロスタサイクリン産生増加作用及び血流促進作用を示す。従って、それを使用することによって、血流改善、血行障害の予防・改善、血行障害に起因する疾患の予防・改善、または皮膚改善に対して優れた効果が期待される。また、この有効成分を含む各種剤、及び飲食品、医薬品または化粧品を安価に提供することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】各種ベリー抽出物のプロスタサイクリン産生増加活性を示すグラフである。
【図２】エルダーベリー抽出物（elder berry extract）の各種濃度におけるプロスタサイクリン産生増加活性を示すグラフである。
【図３】エルダーベリー抽出物の分画物のプロスタサイクリン産生増加活性を示すグラフである。
【図４】コントロール摂取群及びエルダーベリー摂取群の血流量の変化を示す図である。
【図１】
2007039445.tif 000003
【図２】
2007039445.tif 000004
【図３】
2007039445.tif 000005
【図４】
2007039445.tif 000006