(57)【要約】【課題】眼精疲労改善効果を有する化合物を有効成分として含有する眼精疲労改善剤および眼精疲労の予防または回復のために用いられる飲食品を提供する。【解決手段】式2007031426.tif 000016で表されるクロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする眼精疲労改善剤および飲食品。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2007031426.tif 000013
で表されるクロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする眼精疲労改善剤。
【請求項２】
式
【化２】
2007031426.tif 000014
で表されるクロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、眼精疲労の予防または回復のために用いられるものである旨の表示を付した、飲食品。
【請求項３】
眼精疲労の予防または回復を目的とする飲食品を製造するための、
式
【化３】
2007031426.tif 000015
で表されるクロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩を有効成分とする眼精疲労改善剤および飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
眼精疲労とは、目が疲れる、目が痛い、物が見えにくい、めまいがする、頭が痛いなどの種々の自覚症状が、休息によっても解消しない状態を指している。眼精疲労を起こす原因として、読書、注視作業、観察作業などによる目の酷使や精神的緊張が挙げられるが、近年ＶＤＴ（Ｖｉｓｕａｌ  Ｄｉｓｐｌａｙ  Ｔｅｒｍｉｎａｌ）作業に伴って起こる眼精疲労が非常に多くなっている。眼精疲労の発生機序については未だ不明な点が多いが、眼精疲労の多くは、調節異常などに起因する調節性眼精疲労である。調節性眼精疲労は、長時間の注視作業などにより毛様体筋が過度の緊張状態に陥り、目の調節機能が低下することが要因となって起こることが指摘されている。
【０００３】
従来、このような眼精疲労に対しては、ビタミンＢ１、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２などを含有した点眼剤が汎用されている。また、日常手軽に摂取でき、目の疲れに効果的な機能性飲食品としては、例えば桑実より抽出したアントシアニンを有効成分とする眼精疲労回復剤（特許文献１参照）、野菊花に含まれる新規化合物、それを含む野菊花抽出エキスを含む眼精疲労改善機能性食品（特許文献２参照）、カシスアントシアニンを含有する機能性飲食品（特許文献３参照）、アスタキサンチン及び／又はそのエステルからなる眼の調節機能障害に対する改善作用を有する飲食品（特許文献４参照）などが提案されている。
【０００４】
一方、クロセチンについては、ウサギの網膜の血流を増加させ、網膜の機能回復を手助けすること（非特許文献１参照）やＰＧＥ２により誘発されたウサギの目の炎症を濃度依存的に抑制すること（非特許文献２参照）などが報告されている。しかし、クロセチンの眼精疲労改善効果については明らかとなっていなかった。
【特許文献１】特開２００１−１７８４０８号公報、請求項３
【特許文献２】特開平１１−２４６４５５号公報、請求項７および９
【特許文献３】国際公開第０１／００１７９８号明細書
【特許文献４】国際公開第０２／０９４２５３号明細書
【非特許文献１】Ｘｕａｎ  Ｂ，外４名，「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｃｒｏｃｉｎ  ａｎａｌｏｇｓ  ｏｎ  ｏｃｕｌａｒ  ｂｌｏｏｄ  ｆｌｏｗ  ａｎｄ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１９９９，ｖｏｌ．１５，ｐ．１４３−１５２
【非特許文献２】Ｎａｇａｋｉ  Ｙ，外５名，「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｏｒａｌ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｇａｒｄｅｎｉａｅ  Ｆｒｕｃｔｕｓ  ｅｘｔｒａｃｔ  ａｎｄ  ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｒｏｃｅｔｉｎ  ｏｎ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ  Ｅ２−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｅｌｅｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｑｕｅｏｕｓ  ｆｌａｒｅ  ｉｎ  ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ  ｒａｂｂｉｔｓ」，Ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００３，ｖｏｌ．３１，ｐ．７２９−７３８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、眼精疲労改善効果を有する化合物を有効成分として含有する眼精疲労改善剤および眼精疲労の予防または回復のために用いられる飲食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、カロテノイド色素の一種であるクロセチンが眼精疲労改善効果を有することを見いだし、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
【０００７】
即ち、本発明は、
（１）
式
【化１】
2007031426.tif 000002
で表されるクロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とする眼精疲労改善剤、
（２）
式
【化２】
2007031426.tif 000003
で表されるクロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩を有効成分として含有し、眼精疲労の予防または回復のために用いられるものである旨の表示を付した、飲食品、および
（３）眼精疲労の予防または回復を目的とする飲食品を製造するための、
式
【化３】
2007031426.tif 000004
で表されるクロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩の使用、
からなっている。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の眼精疲労改善剤および飲食品は眼精疲労の諸症状（例えば、１）眼が疲れている、２）眼が痛い、３）眼がかすむ、４）肩がこる、５）頭が痛いなど）の軽減に優れた効果がある。
本発明の眼精疲労改善剤または飲食品を、眼精疲労を誘発する原因となる作業の前、作業中または作業後に摂取することにより、眼精疲労を予防しまたは回復することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明で用いられるクロセチンは、式
【化４】
2007031426.tif 000005
で表される化合物である。このクロセチンは、通常、カロテノイド系の黄色色素であるクロシン（クロセチンのジゲンチオビオースエステル）を加水分解することにより得られる。クロシンは、アカネ科クチナシ（Ｇａｒｄｅｎｉａ  ａｕｇｕｓｔａ  ＭＥＲＲＩＬ  ｖａｒ．  ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ  ＨＯＲＴ．，Ｇａｒｄｅｎｉａ  ｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓ  ＥＬＬＩＳ）の果実、サフランの柱頭の乾燥物などに含まれるが、クロシンを得るための工業的原料としてはクチナシの果実が好ましく用いられる。
【００１０】
本発明において、上記植物基原からクロシンを抽出する方法に制限はなく、該抽出方法として、例えば、粉砕されたクチナシの乾燥果実から水またはアルコール（例えば、メタノール、エタノールなど）、あるいはそれらの混合液を用いて抽出するなどの公知の方法が用いられる。このときの抽出条件は、例えば水とアルコールの混合液を用いる場合、室温（約０〜３０℃）〜５０℃で約１〜１８時間が好ましく、約３０〜４０℃で約２〜４時間がより好ましい。抽出操作は通常複数回繰り返される。得られたクロシンを含む抽出液、該抽出液の濃縮液、または濃縮乾固物を適当な溶媒（例えば、水またはエタノールなど）に溶解した溶液は、次に加水分解工程に付される。
【００１１】
クロシンの加水分解は、定法に従って行われてよく、通常、酸、アルカリまたは適当な加水分解酵素の存在下で行われる。ここで酸としては、例えば塩酸、硫酸およびリン酸などが挙げられ、アルカリとしては例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウムなどが挙げられる。また加水分解酵素としては、β−グルコシダーゼなどが挙げられる。酸、アルカリまたは酵素は、適当な溶媒（例えば、水またはエタノールなど）に溶解または分散させてクロシンを含む溶液に添加されるのが好ましい。
【００１２】
工業的には、クロシンの加水分解は、アルカリの存在下で行われるのが好ましい。
上記加水分解の条件は特に限定されるものではないが、攪拌下、好ましくは約２０〜７０℃で約１〜２４時間、特に好ましくは約４０〜６０℃で約３〜５時間が適当である。
【００１３】
クロシンの加水分解がアルカリによる加水分解である場合、通常、加水分解終了後、反応液に塩酸、硫酸またはリン酸などの無機酸、もしくはクエン酸などの有機酸の水溶液を適量加え、液性をｐＨ約４．０以下、好ましくはｐＨ約１．０〜３．０にするか、または反応液を塩酸、硫酸またはリン酸などの無機酸、もしくはクエン酸などの有機酸の水溶液に加え、液性をｐＨ約４．０以下、好ましくはｐＨ約１．０〜３．０にすることで、クロセチンを析出させることができる。その後、クロセチンを析出させた混合液を、遠心分離するかあるいはろ紙もしくはろ布に通してろ過することにより、クロセチンをペースト状の固形物として回収できる。
【００１４】
また、クロシンの加水分解が酸による加水分解である場合、生成するクロセチンは水に不溶の遊離型で析出するため、反応液は懸濁液として得られる。反応終了後、得られた懸濁液を、遠心分離するかあるいはろ紙もしくはろ布に通してろ過することにより、クロセチンをペースト状の固形物として回収できる。
【００１５】
上記のようにして得られたクロセチン（ペースト状の固形物）には、通常、酸、中和塩および原料由来の不純物が固形物表面に付着しているため、該不純物を除去する目的で、洗浄処理が行われる。該処理は、例えば、上記ペースト状の固形物を十分量の水を用いて水洗するなど、公知の方法を用いて行ってよい。次に、例えば棚式の通風乾燥機または真空乾燥機などを用いて、好ましくは窒素ガスの雰囲気下約５０℃を越えない温度で、例えば水洗した固形物を乾燥し、固形物に残留する水を除去することが好ましい。
【００１６】
しかしながら、このようにして得られたクロセチンでさえも、クロセチン以外の物質、例えば脂質およびその分解物、クロロゲン酸などのポリフェノール類、および加水分解により生成し、洗浄で完全に除去されなかったグルコース、ゲンチオビオースなどの糖類を含んでいることがあるため、該クロセチンを更に精製するのが好ましい。ここで、該クロセチンを精製する方法に制限は無く、例えばカラムクロマトグラフィー、再結晶などの公知の方法が用いられる。
【００１７】
本発明で用いられるクロセチンは、純度約７０質量％以上のクロセチンであるのが好ましく、純度約９０質量％以上のクロセチンであるのがより好ましく、純度約９５質量％以上のものであるのが最も好ましい。尚、ここでクロセチンの純度は、純品のクロセチンの色価を基準として算出される。色価は、後記実施例に記載の［色価測定方法］で測定される値である。
【００１８】
本発明において、クロセチンの薬理学的に許容しうる塩としては、例えば、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウムなどのアルカリ土類金属塩、ピリジン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミンなどの医薬的に許容される有機アミノ化合物の塩などが挙げられる。
【００１９】
本発明にかかるクロセチンは、眼精疲労改善効果を有するため、該クロセチンまたはその薬理学的に許容しうる塩を有効成分とする眼精疲労改善剤として、あるいは眼精疲労予防または回復を目的とする飲食品として有用である。
【００２０】
本発明の眼精疲労改善剤および眼精疲労の予防または回復のために用いられる飲食品は、上記クロセチンもしくはその薬理学的に許容しうる塩をそのまま、あるいはそれに製薬学的に許容される添加物、食品素材、食品原料、さらに必要に応じて食品添加物などを適宜混合し、常法に従い例えば液剤、散剤、顆粒剤、錠剤、マイクロカプセル、ソフトカプセルまたはハードカプセルなどの製剤および飲食品として製造される。また、クロセチンもしくはその薬理学的に許容しうる塩を主成分とする油脂組成物、Ｏ／Ｗ型乳化液、Ｗ／Ｏ型乳化液または可溶化液などのクロセチン含有組成物を常法に従い製造し、このクロセチン含有組成物を飲食品に添加して本発明の飲食品を製造してもよい。
【００２１】
上記飲食品は、固形食品、クリーム状またはジャム様の半固形食品、ゲル状食品、飲料などあらゆる食品形態をとることが可能である。飲食品の例としては、清涼飲料、ドロップ、キャンディ、チューインガム、チョコレート、グミ、ヨーグルト、アイスクリーム、プリン、ゼリー菓子、クッキー、マーガリン、ショートニング、マヨネーズおよびドレッシングなどが挙げられる。上記飲食品は、眼精疲労の予防または回復のために用いられるものである旨の表示を付した特定保健用食品、あるいは眼精疲労の蓄積およびそれに付随して発生する諸症状を予防しまたは回復することを目的とする健康食品として有用である。
【００２２】
上記製剤および飲食品の製造に用いられる添加物、食品素材、食品原料および食品添加物としては、例えば賦形剤（乳糖、デキストリン、コーンスターチ、結晶セルロースなど）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステルなど）、崩壊剤（カルボキシメチルセルロースカルシウム、無水リン酸水素カルシウム、炭酸カルシウムなど）、結合剤（デンプン糊液、ヒドロキシプロピルセルロース液、アラビアガム液など）、溶解補助剤（アラビアガム、ポリソルベート８０など）、甘味料（砂糖、果糖、ブドウ糖液糖、ハチミツ、アスパルテームなど）、着色料（β−カロテン、食用タール色素、リボフラビンなど）、保存料（ソルビン酸、パラオキシ安息香酸メチル、亜硫酸ナトリウムなど）、増粘剤（アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウムなど）、酸化防止剤（ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ブチルヒドロオキシアニソール（ＢＨＡ）、アスコルビン酸、トコフェロールなど）、香料（ハッカ、ストロベリー香料など）、酸味料（クエン酸、乳糖、ＤＬ−リンゴ酸など）、調味料（ＤＬ−アラニン、５´−イノシン酸ナトリウム、Ｌ−グルタミン酸ナトリウムなど）、乳化剤（グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルなど）、ｐＨ調整剤（クエン酸、クエン酸三ナトリウムなど）、ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸類などが挙げられる。
【００２３】
上記製剤の場合、クロセチンもしくはその薬理学的に許容しうる塩の含有量は、眼精疲労の症状、その目的、用途などにより異なり一様ではないが、製剤の全質量に対して、純度１００質量％のクロセチンに換算して、通常約０．０００１〜５０質量％、好ましくは約０．００１〜２０質量％、より好ましくは約０．０１〜１０質量％である。
【００２４】
また、上記飲食品の場合、クロセチンもしくはその薬理学的に許容しうる塩の含有量は、飲食品の全質量に対して、純度１００質量％のクロセチンに換算して、通常約０．００００３〜１０質量％、好ましくは約０．０１〜５質量％である。
【００２５】
上記製剤および飲食品を経口的に摂取する場合、クロセチンもしくはその薬理学的に許容しうる塩の成人（約６０ｋｇとして）１日当たりの用量は、純度１００質量％のクロセチンに換算して、通常、約０．１〜５００ｍｇ、好ましくは約１〜２００ｍｇ、さらに好ましくは約２〜５０ｍｇの範囲である。この用量を、１回でまたは数回に分けて摂取するとよい。但し、実際の用量は、目的や摂取者の状況（眼精疲労の程度、性別、年齢、健康状態など）を考慮して決められるべきである。
【００２６】
また、注射剤または輸液剤などの非経口剤の場合は、成人（約６０ｋｇとして）１日あたり、純度１００質量％のクロセチンに換算して、クロセチンもしくはその薬理学的に許容しうる塩を約０．０１ｇ〜１００ｍｇ、好ましくは約０．１〜５０ｍｇ、さらに好ましくは約０．１〜１５ｍｇの投与量となるように設定するのが望ましい。
【００２７】
また、本発明の眼精疲労改善剤は、他の眼精疲労回復を目的とする薬剤やサプリメントと併用することもできる。このような薬剤やサプリメントとしては、例えば、ビタミン類（例えば、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ニコチン酸アミド、パントテン酸など）、アミノ酸類（例えば、タウリン、アスパラギン酸またはその塩など）、アントシアニン類（例えば、イチゴ濃縮果汁、クランベリー濃縮果汁、ブラックチョークベリー濃縮果汁、ブルーベリー濃縮果汁、プラム濃縮果汁など）、カフェインなどが挙げられる。
【実施例】
【００２８】
以下に本発明を実施例に基づいてより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２９】
［クロセチンの調製］
（１）粉砕したクチナシの乾燥果実３００ｇにメタノール・水混合液（１：１）（Ｖ／Ｖ）６００ｍＬを加え、室温で３時間攪拌した後吸引ろ過した。ろ過後、抽出残にメタノール・水混合液（１：１）（Ｖ／Ｖ）６００ｍＬを加え、室温で３０分間攪拌した後吸引ろ過する操作を２回繰り返し、ろ液として計約１８００ｍＬの抽出液を得た。この抽出液を、ロータリーエバポレーターを用いて約６０℃、約４ｋＰａの条件で濃縮し、クロシンを含む濃縮物（色価＝約５７３）約１００ｇを得た。
（２）上記（１）で得られた濃縮物と４０質量％水酸化ナトリウム水溶液３４ｇとを混合し、撹拌下５０℃で約３．５時間加水分解反応を行った。反応終了後、反応液を４質量％リン酸水溶液８４０ｍＬに加えて酸性とした後、そのまま約３時間室温で放置した。
（３）上記（２）の操作によって該溶液から析出した沈殿を遠心分離（１０，０００×ｇ、１０分間）により回収し、更に水２００ｍＬで洗浄し、遠心分離する操作を２回繰り返し、得られたペースト状の固形物を５０℃で約８時間真空乾燥した。
（４）上記（１）〜（３）の操作を５回繰り返して実施し、得られた結晶を集めて一つとし、粗クロセチン約１２ｇを得た。このものの色価は約１２，５００であった。
【００３０】
［精製クロセチンの調製］
前記で得られた粗クロセチン約１０ｇにジメチルホルムアミド１８０ｍＬを加え、８０℃で溶解した。不溶物を定量ろ紙（Ｎｏ．５Ｃ，アドバンテック東洋社製）でろ過し、ろ液を１０℃で３日間放置した。次に生成したクロセチンの結晶を含む母液をガラスろ過器（商品名：３Ｇ３；柴田科学社製、ポアサイズ４０−１００μｍ）でろ過し、メタノール２００ｍＬで洗浄後、結晶を５０℃で真空乾燥し、精製クロセチン（試作品）約１．６ｇを得た。このものの色価は３４，２００であった。
【００３１】
［クロセチンの純度］
精製クロセチン（試作品）約０．５ｇを更にジメチルホルムアミドで再結晶を行い、得られたクロセチンの結晶（色価３５，７００）を、「純品のクロセチン」とし、以下の式にて、クロセチンの純度を算出した。
【００３２】
【数１】
2007031426.tif 000006
【００３３】
上式に基づいて算出された精製クロセチン（試作品）の純度は９５．８％であった。
尚、色価（Ｅ１０％１ｃｍ）は『化学的合成品以外の食品添加物  自主規格（第二版）』、日本食品添加物協会編、「クチナシ黄色素」を参考にして、以下の方法で測定した。
【００３４】
［色価測定方法］
測定する吸光度が０．３〜０．７の範囲になるように、試料を精密に量り、Ｋｏｌｔｈｏｆｆ氏緩衝液（５０ｍＭ  Ｎａ２ＣＯ３−５０ｍＭ  Ｎａ２Ｂ４Ｏ７，ｐＨ１０．０）に溶かして正確に５００ｍｌとする。溶解しにくい場合は、超音波処理により溶解する。その１０ｍｌを正確に量り、Ｋｏｌｔｈｏｆｆ氏緩衝液（５０ｍＭ  Ｎａ２ＣＯ３−５０ｍＭ  Ｎａ２Ｂ４Ｏ７，ｐＨ１０．０）を加えて５０ｍｌとし、試験溶液とする。Ｋｏｌｔｈｏｆｆ氏緩衝液（５０ｍＭ  Ｎａ２ＣＯ３−５０ｍＭ  Ｎａ２Ｂ４Ｏ７，ｐＨ１０．０）を対照とし、液層の長さ１ｃｍで４２０ｎｍ付近の極大吸収部における吸光度Ａを測定し、次式により色価を求めた。
【００３５】
【数２】
2007031426.tif 000007
【００３６】
［試験例１］
眼精疲労に対するクロセチンの改善効果を評価するため、表１に示した配合からなる内容物を充填した二種類のカプセル（２５０ｍｇ／１カプセル）を作製し、ＶＤＴ作業に従事しており、作業中および作業後に目の疲れなどの眼精疲労症状を自覚する健常な成人男性（３０〜４０歳）を対象にして、被験者を被検薬群（ｎ＝１０）と対照薬（プラセボ）群（ｎ＝１０）とに無作為に割り付ける二重盲検試験を行った。
【００３７】
【表１】
2007031426.tif 000008
【００３８】
＜試験方法＞
被験者２０名に３時間継続的にＶＤＴ作業させた後、被験者の眼精疲労に伴う自覚症状の程度を、１）眼が疲れている、２）眼が痛い、３）眼がかすむ、４）肩がこる、５）頭が痛い、の５項目について、ビジュアルアナログスケール法を用いて、０（感じない）から１０（極度に感じる）までを意味する１０ｃｍの線分上に線で記入させた。
次に、被験者に被検薬あるいは対照薬（プラセボ）を１カプセル服用させ、服用から１時間後に、被験者の眼精疲労に伴う自覚症状の程度を再び記入させた。
各被験者毎に、作業終了時の５項目の評価点の平均値と服用から１時間後の５項目の評価点の平均値を算出し、以下の式に基づいて症状の改善度を求めた。
【００３９】
【数３】
2007031426.tif 000009
【００４０】
＜結果＞
被検薬群と対照薬（プラセボ）群毎に改善度の数値を集計し、各群の被験者１０名の改善度の平均値を算出した。結果を表２に示した。集計結果について、Ｄｕｎｎｅｔ法により対照薬（プラセボ）群と被検薬群との母平均の差の検定を行った結果、その差は統計的に有意（危険率５％）であった。
本結果は、本発明の眼精疲労改善剤が眼精疲労の回復に有効であることを示すものである。
【００４１】
【表２】
2007031426.tif 000010
【００４２】
［試験例２］
眼精疲労に対するクロセチンの改善効果を評価するため、表３に示した配合からなる内容物を充填した二種類のカプセル（１８０ｍｇ／１カプセル）を作製し、目の疲れなどの眼精疲労症状を自覚する健常な成人男性および女性（２５〜４０歳）を対象にして、二重盲検法によるクロスオーバー比較試験を行った。
【００４３】
【表３】
2007031426.tif 000011
【００４４】
〈試験方法〉
被験者１３名をＡ群（ｎ＝７）とＢ群（ｎ＝６）とに無作為に割り付け、Ａ群を被検薬投与群、Ｂ群を対照薬投与群とした。各被験者を１時間継続的にＶＤＴ作業させた後、毛様体筋の調節緊張の程度を調節機能解析装置（ＡＡ−１；ニデック社製）を用いて測定し、得られた測定値から調節微動高周波成分の出現頻度（ＨＦＣ）を算出した。２０分間安静にして休息した後再度測定し、得られた測定値からＨＦＣを算出し、休息前後のＨＦＣ値の差から各群の摂取前のＨＦＣ変化量を求めた。その後、Ａ群には被検薬を、Ｂ群には対照薬を１日１カプセル、朝食後に服用させ、４週間後に上記試験を実施し、各群の摂取後のＨＦＣ変化量を求めた。
６週間ウオッシュアウト期間を取った後、Ａ群を対照薬投与群、Ｂ群を被検薬投与群として同様の試験を実施し、各群の摂取前のＨＦＣ変化量と摂取後のＨＦＣ変化量を求めた。
【００４５】
〈結果〉
被検薬投与群と対照薬（プラセボ）投与群毎に摂取前のＨＦＣ変化量と摂取後のＨＦＣ変化量を集計し、各群の被験者１３名のＨＦＣ変化量の平均値を算出した。結果を表４に示した。
集計された各群のデータに基づき、対応のあるｔ検定（ｐａｉｒｅｄ  ｔ−ｔｅｓｔ）を行った結果、以下の２群の対比に有意差が認められた。
被検薬投与群（摂取前）ｖｓ被検薬投与群（摂取後）  ：  危険率５％
被検薬投与群（摂取後）ｖｓ対照薬投与群（摂取後）  ：  危険率１％
この結果は、本発明の眼精疲労改善剤が眼精疲労の回復に有効であることを示すものである。
【００４６】
【表４】
2007031426.tif 000012