(57)【要約】【課題】糖尿病及び肥満を予防、治療及び／又は改善できるカロリー制限食品を提供すること。【解決手段】α−グルコシダーゼに対する阻害活性を有する阻害物質を有効成分とするカロリー制限食品である。阻害物質としては、拮抗阻害物質と非拮抗阻害物質とを含有する。また、拮抗阻害物質は、デチンムル科又はニシシギ科のサラシアレティキュラータの根及び／又は幹を溶媒にて抽出して得られるサラシア抽出物であることが好ましい。また、非拮抗阻害物質は、シソ科の植物であるコレウスフォルスコリの根を溶媒にて抽出して得られるコレウス抽出物であることが好ましい。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
α−グルコシダーゼに対する阻害活性を有する阻害物質を有効成分とするカロリー制限食品であって、
上記阻害物質としては、拮抗阻害物質と非拮抗阻害物質とを含有することを特徴とするカロリー制限食品。
【請求項２】
請求項１において、上記拮抗阻害物質としては、サラシノール及び／又はコタラノールを含有することを特徴とするカロリー制限食品。
【請求項３】
請求項１又は２において、上記拮抗阻害物質は、デチンムル科又はニシシギ科のサラシアレティキュラータの根及び／又は幹を溶媒にて抽出して得られるサラシア抽出物であることを特徴とするカロリー制限食品。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項において、上記非拮抗阻害物質は、シソ科の植物であるコレウスフォルスコリの根を溶媒にて抽出して得られるコレウス抽出物であることを特徴とするカロリー制限食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、α−グルコシダーゼに対する阻害活性を有する阻害物質を有効成分とするカロリー制限食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満は、虚血性心疾患、高血圧、糖尿病等の多くの疾患のリスクファクタであり、高血圧症、高脂血症、及び糖尿病の患者の内３〜６割については、肥満が原因であるということが推定されている。さらに、日本における肥満は、この３０年で２〜４倍に増加しており、国民の健康を脅かす大きな要因となっている。今後、高齢化が進むにつれ、生活習慣病はますます増加するものと考えられ、肥満防止は、健康面ばかりでなく社会的及び経済的側面からも克服すべき重要な課題となりつつある。
【０００３】
肥満の９割以上が単純性肥満と称する消費エネルギーに対する摂取エネルギーの過多に起因するものである。これを防止するには、（１）摂取エネルギーの抑制及び（２）エネルギー消費の促進がある。
【０００４】
（１）については、食事制限、食欲抑制剤の投与、消化管内での脂質等の吸着による吸収の抑制、難消化性食物繊維による満腹感の形成、及び消化酵素阻害剤の投与等の方法がある。
（２）については、運動療法、及びエネルギー代謝促進剤の投与等がある。
【０００５】
特に、α−グルコシダーゼ等の２糖類分解酵素を阻害することにより消化管内の炭水化物の消化吸収を阻害することは、カロリーの過剰摂取の防止に非常に有効である。カロリー制限を主眼とする糖尿病治療薬としてもグルコバイ（登録商標、一般名：アカルボース、バイエル薬品工業）、ベイスン（登録商標、武田薬品工業）等が使用されている。これらのα−グルコシダーゼの阻害剤は、その構造からα−グルコシダーゼの基質類似物質（アナログ）であると考えられる。
【０００６】
したがって、その作用形式は、酵素の基質との結合部位に上記アナログが結合することにより、本来の基質である２糖類の酵素への結合を阻害する拮抗阻害であると考えられる。一方、酵素の基質との結合部位以外の部位に結合することにより、例えば酵素の立体構造等を変化させ、酵素の基質との結合力を無くしたり、酵素の活性発現部位を不活性化したりする作用を有する物質を非拮抗阻害物質と称する。
【０００７】
天然の植物から得られる２糖類分解酵素阻害剤としては、例えば、デチンムル科又はニシシギ科のサラティアレティキュラータの溶媒抽出物がある（特許文献１参照）。このサラティアレティキュラータから得られる物質は、拮抗阻害物質であり、α−グルコシダーゼ阻害活性を有する。また、インド原産のシソ科の植物であるコレウスフォルスコリを水又はアルコールで抽出して得られるコレウスフォルスコリの抽出物がある（特許文献２参照）。このコレウスフォルスコリから得られる物質は、非拮抗阻害物質であり、α−グルコシダーゼ阻害活性を有する。
【０００８】
しかしながら、拮抗阻害物質による酵素の阻害は、基質の濃度に依存する。そのため、本来の基質の濃度が高くなると基質が阻害物質を押しのけて酵素と結合し、その結果、糖の分解反応が進行してしまうおそれがあった。
また、非拮抗阻害物質による酵素の阻害は、基質の濃度には依存しないが、一般的に、酵素との反応は１：１で起こるため、酵素と阻害物質とのそれぞれの存在数量が阻害効率に大きく影響する。したがって、非拮抗阻害物質の効力は、酵素の分泌量に大きく影響される。一方、酵素の分泌量は、個体差があり、また、例え同じ個体であっても変動幅が大きく、例えば膵液の分泌量は日変動で７００〜１５００ｍｌであることが知られている（非特許文献１参照）。したがって、分泌される酵素についても、例えば食習慣等により大きく異なってくる可能性があり、非拮抗阻害物質の効力についても同様に大きく異なるおそれがあった。
したがって、従来の拮抗阻害物質又は非拮抗阻害物質は、異なる体内環境に応じて摂取エネルギーを充分に抑制させることが困難であり、糖尿病及び肥満の予防等に必ずしも有効であるとは言えなかった。
【０００９】
【特許文献１】特開２００４−３２３４２０号公報
【特許文献２】特開２００１−２０６８９３号公報
【非特許文献１】白相光康著、「膵管ドレナージ法による膵外分泌機能の検討」、日本消化器病学会雑誌、１９７３年、第７０巻、第７号、ｐ．６５８−６７２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明はかかる従来の問題点に鑑みてなされたものであって、糖尿病及び肥満を予防、治療及び／又は改善できるカロリー制限食品を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、α−グルコシダーゼに対する阻害活性を有する阻害物質を有効成分とするカロリー制限食品であって、
上記阻害物質としては、拮抗阻害物質と非拮抗阻害物質とを含有することを特徴とするカロリー制限食品にある（請求項１）。
【００１２】
本発明のカロリー制限食品は、上記阻害物質として、上記拮抗阻害物質と上記非拮抗阻害物質とを含有する。
そのため、上記カロリー制限食品は、上記拮抗阻害物質と上記非拮抗阻害物質との相互作用によって、多様な基質濃度及び酵素濃度の環境下においてもα−グルコシダーゼを充分に阻害することとができる。それ故、上記カロリー制限食品は、個体の種類及び個体の体内環境にほとんど依存することなく、人体において、α−グルコシダーゼの活性を阻害し、二糖類が単糖に分解されて吸収されることを抑制することができる。また、上記カロリー制限食品は、該カロリー制限食品を摂取した人に対して、膨満感を生じさせることができる。
【００１３】
このように、上記カロリー制限食品は、α−グルコシダーゼの活性を阻害することができると共に、膨満感を生じさせることができる。したがって、摂取エネルギーの抑制を図ることができ、糖尿病及び肥満を予防、治療及び／又は改善することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
次に、本発明の好ましい実施の形態について説明する。
上記カロリー制限食品は、α−グルコシダーゼに対する上記阻害物質として、上記拮抗阻害物質と上記非拮抗阻害物質とを含有する。
上記拮抗阻害物質は、競争阻害物質とも呼ばれ、基質と競争しつつ、酵素（α−グルコシダーゼ）における基質との結合部位又はその近傍に結合することにより、基質と酵素との結合を阻害する物質をいう。例えばα―グルコシダーゼの基質との結合部位に結合するが代謝はされないという基質類似物質（アナログ）等がある。
【００１５】
また、上記非拮抗阻害物質は、反競争阻害物質とも呼ばれ、酵素（α−グルコシダーゼ）における基質との結合部位以外の部位に結合することにより、例えば酵素の立体構造等の変化を生じさせ、酵素の基質との結合力を無くしたり、酵素の活性発現部位を不活性化したりする作用を有する物質をいう。
【００１６】
また、上記拮抗阻害物質としては、サラシノール及び／又はコタラノールを含有することが好ましい（請求項２）。
この場合には、上記カロリー制限食品は、より優れたα−グルコシダーゼ阻害活性示すことができる。
なお、サラシノールの構造式を下記の「化１」に、コタラノールの構造式を下記の「化２」に示す。
【００１７】
【化１】
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【００１８】
【化２】
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【００１９】
また、上記拮抗阻害物質は、デチンムル科又はニシシギ科のサラシアレティキュラータの根及び／又は幹を溶媒にて抽出して得られるサラシア抽出物であることが好ましい（請求項３）。
また、上記非拮抗阻害物質は、シソ科の植物であるコレウスフォルスコリの根を溶媒にて抽出して得られるコレウス抽出物であることが好ましい（請求項４）。
これらの場合には、上記カロリー制限食品は、天然成分を有効成分とし、人体に対してより高い安全性を示すことができると共に、優れたα−グルコシダーゼ阻害活性を示すことができる。
【００２０】
上記サラシア抽出物及び上記コレウス抽出物を抽出するための上記溶媒としては、例えば、水、アルコール、これらの混合物等を用いることができる。アルコールとしては、具体的には、メタノール、エタノール、イソプロパノール等を用いることができる。
【実施例】
【００２１】
（実施例１）
次に、本発明のカロリー制限食品の実施例について、説明する。
本例においては、カロリー制限食品を作製し、その機能を評価する例である。
本例のカロリー制限食品は、α−グルコシダーゼに対する阻害活性を有する阻害物質を有効成分とする。また、カロリー制限食品は、阻害物質として、拮抗阻害物質と非拮抗阻害物質とを含有する。本例においては、特に、拮抗阻害物質としてサラシア抽出物を含有し、非拮抗阻害物質としてコレウス抽出物を含有するカロリー制限食品を作製する。
【００２２】
まず、以下のようにしてサラシア抽出を作製する。
具体的には、まず、サラシアレティキュラータの根の粉砕物１００ｇにエタノール０．５Ｌを加えて、室温にて３時間抽出を行った（還流）。次いで、濾過により抽出液（以下、抽出液Ａという）と、抽出残渣とに分離した。
次に、この抽出残渣に水０．５Ｌを加えて、室温にて３時間抽出を行い、その後濾過により抽出液（以下、抽出液Ｂという）を得た。
【００２３】
次に、抽出液Ａ及び抽出液Ｂをそれぞれ減圧下で濃縮乾燥させ、抽出物Ａ及び抽出物Ｂを得た。これらの抽出物Ａ及び抽出物Ｂを混合し、粉砕し、篩いにかけてサラシア抽出物（試料Ｃ１）を得た。
【００２４】
次に、以下のようにしてコレウス抽出物を作製する。
即ち、まず、粉末状のコレウスフォルスコリの根１００ｇにエタノールと水との混合溶媒（エタノール濃度：５０体積％）５００ｍＬを加えて、温度５０〜６０℃にて３時間抽出を行った。次いで、濾過により抽出液と、抽出残渣とに分離した。
【００２５】
次に、このコレウスの抽出液を減圧下で濃縮乾燥させ、粉砕し、篩いにかけてコレウス抽出物（試料Ｃ２）を得た。
【００２６】
次いで、上記のようにして得られたサラシア抽出物（試料Ｃ１）５０ｇとコレウス抽出物（試料Ｃ２）５０ｇとを混合し、本例のカロリー制限食品を作製した。これを試料Ｅとする。
【００２７】
次に、カロリー制限食品（試料Ｅ）のα―グルコシダーゼに対する阻害活性をボーゲル・アンド・ボーゲル（Ｖｏｇｅｌ＆Ｖｏｇｅｌ）の方法によって調べた。
具体的には、まず、酵素−基質反応を行う。即ち、ｐＨ７．０の燐酸緩衝液２５０μＬと、試料Ｅと、酵素液５０μＬとを混合した混合液を温度３７℃で３０分間インキュベイトした。酵素液としては、α−グルコシダーゼの１種であり、ショ糖（スクロース）に対する分解活性を有する和光純薬工業株式会社製のインベルターゼ（濃度４ｕｎｉｔ／ｍＬ）を１０倍希釈したものを用いた。
次いで、この混合液に基質溶液５００μＬを加え、温度３７℃で２０分間インキュベイトした。基質溶液としては３７ｍＭのスクロースを用いた。その後、沸騰水中に２分間浸すことにより反応を停止させ、次いで冷却した。次に、この反応液５０μＬを２５０μＬのグルコース試薬に加え、混和し、室温で１０分間インキュベイトした。これを試験試料Ｘ１とする。
【００２８】
次に、試料Ｅを用いずに上述の酵素−基質反応を行った。即ち、ｐＨ７．０の燐酸緩衝液２５０μＬと、酵素液（０．４ｕｎｉｔ／ｍＬのインベルターゼ）５０μＬとを混合した混合液を温度３７℃で３０分間インキュベイトした。次いで、上記試験試料Ｘ１の場合と同様にして、この混合液に基質溶液（３７ｍＭのスクロース）を加えてインキュベイトし、沸騰水中で反応を停止させて冷却した後、反応液をグルコース試薬に加えて混和し、インキュベイトした。これを試験試料Ｙ１とする。
【００２９】
次に、上記試験試料Ｘ１及び試験試料Ｙ１について波長５１０ｎｍの吸光度を測定した。試験試料Ｘ１の吸光度をＸ１、試験試料Ｙ１の吸光度をＹ１とすると、下記の式（１）に基づいて、％阻害活性（Ｉ）を算出した。なお、本例においては、試料Ｅの濃度を変えて上述の酵素−基質反応を行い、試料Ｅのスクロース分解酵素に対する％阻害活性を算出した。その結果を図１に示す。
Ｉ＝（Ｙ１−Ｘ１）／Ｙ１×１００・・・（１）
【００３０】
また、ポジティブコントロールとして、試料Ｅの代わりに、既にスクロース分解酵素に対する阻害活性を有することが明らかなアカルボースを用いて、酵素−基質反応を行い、アカルボースのスクロース分解酵素に対する阻害活性（％阻害活性）を上述の試料Ｅの場合と同様にして測定した。なお、本例においては、アカルボースの濃度を変えて上述の酵素−基質反応を行い、アカルボースのスクロース分解酵素に対する％阻害活性を算出した。その結果を図２に示す。
【００３１】
さらに、本例においては、基質溶液として、スクロースの代わりにマルトース（麦芽糖）を用いて酵素−基質反応を行い、試料Ｅの阻害活性を調べた。
即ち、ｐＨ７．０の燐酸緩衝液２５０μＬと、試料Ｅと、酵素液５０μＬとを混合した混合液を温度３７℃で３０分間インキュベイトした。酵素液としては、α−グルコシダーゼの１種であり、マルトースに対する分解活性を有するマルターゼ（濃度１ｕｎｉｔ／ｍＬ、和光純薬工業株式会社製のα−グルコシダーゼ）を用いた。次いで、この混合液に基質溶液５００μＬを加え、温度３７℃で２０分間インキュベイトした。基質溶液としては３７ｍＭのスクロースを用いた。その後、沸騰水中に２分間浸すことにより反応を停止させ、次いで冷却した。次に、この反応液１０μＬを２５０μＬのグルコース試薬に加え、混和し、室温で１０分間インキュベイトした。これを試験試料Ｘ２とする。
また、試料Ｅを用いずに上述の酵素−基質反応を行った。即ち、ｐＨ７．０の燐酸緩衝液２５０μＬと、酵素液（１ｕｎｉｔ／ｍＬのマルターゼ）５０μＬとを混合した混合液を温度３７℃で３０分間インキュベイトした。次いで、上記試験試料Ｘ１の場合と同様にして、この混合液に基質溶液（３７ｍＭのマルトース）を加えてインキュベイトし、沸騰水中で反応を停止させ、次いで冷却した後、反応液をグルコース試薬に加えて混和し、インキュベイトした。これを試験試料Ｙ２とする。
【００３２】
次に、上記試験試料Ｘ２及び試験試料Ｙ２についても、試験試料Ｘ１及びＹ１と同様に、波長５１０ｎｍの吸光度を測定し、下記の式（２）に基づいて、％阻害活性（Ｉ）を算出した。なお、本例においては、試料Ｅの濃度を変えて上述の酵素−基質反応を行い、試料Ｅのマルトース分解酵素に対する％阻害活性を算出した。その結果を図３に示す。
Ｉ＝（Ｙ２−Ｘ２）／Ｙ２×１００・・・（２）
【００３３】
また、ポジティブコントロールとして、試料Ｅの代わりにアカルボースを用いて、酵素−基質反応を行い、アカルボースのマルトース分解酵素に対する阻害活性（％阻害活性）を試料Ｅと同様にして測定した。なお、本例においては、アカルボースの濃度を変えて上述の酵素−基質反応を行い、アカルボースのマルトース分解酵素に対する％阻害活性を算出した。その結果を図４に示す。
なお、図１及び図２は、％阻害活性の測定を各濃度について、それぞれ２回ずつ測定した結果を示し、図３及び図４は、それぞれ３回ずつ測定した結果を示してある。
【００３４】
図１〜図４より知られるごとく、試料Ｅは、アカルボースと同様に、α−グルコシダーゼ（スクロース分解酵素及びマルトース分解酵素）に対する阻害活性を有することが分かる。また、試料Ｅのα−グルコシダーゼ分解酵素に対する阻害活性は、試料Ｅの濃度に依存して増大することがわかる。
【００３５】
（実施例２）
本例は、実施例１において作製したカロリー制限食品を実際にボランティアの被験者に摂取してもらい、その効果を調べる例である。
具体的には、カロリー制限食品（試料Ｅ）、その比較用としてのサラシア抽出物（試料Ｃ１）、コレウス抽出物（試料Ｃ２）、及びデキストリン（試料Ｃ３）をそれぞれ異なる７人の被験者グループに摂取してもらい、体重変化と膨満感を調べた。サラシア抽出物としては、実施例１の試料Ｃ１を用い、コレウス抽出物としては、実施例１の試料Ｃ２を用いた。デキストリンは、プラセボとして採用した。
【００３６】
体重変化は、各被験者グループ毎に、試料Ｅ、試料Ｃ１〜試料Ｃ３の各試料のいずれかを１週間摂取してもらい、試験開始前後における体重変化を測定することにより評価した。各試料は、これらを２５０ｍｇずつ封入したカプセルを朝食及び夕食前に２粒ずつ摂取させた。その結果を図５に示す。
また、摂取期間中の腹部膨満感を被験者に自己観察してもい、その結果を、４段階（「非常に強い」、「強い」、「変わらない」、「膨満感が無くなった」）で評価してもらった。その結果を表１に示す。
【００３７】
【表１】
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【００３８】
図５より知られるごとく、試料Ｅは、プラセボとしての試料Ｃ３に比べて若干体重を減少させる効果が確認できた。しかし、摂取期間が１週間という短期間であったこともあり、各試料（試料Ｅ、試料Ｃ１〜試料Ｃ３）の体重変化に対する効果の差異は、非常に小さいものであった。
【００３９】
また、表１より知られるごとく、試料Ｅを摂取した７人中１人を除く６人が膨満感に対する増強効果を感じていた。これに対し、試料Ｃ１及び試料Ｃ２については、膨満感の増強効果を感じた人は２人、試料Ｃ３については０人であった。
このことから、試料Ｅは、試料Ｃ１〜試料Ｃ３に比べて、優れた膨満感向上効果を有していることがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】実施例１にかかる、試料Ｅのスクロース分解酵素に対する％阻害活性を示す棒グラフを表す説明図。
【図２】実施例１にかかる、アカルボースのスクロース分解酵素に対する％阻害活性を示す棒グラフを表す説明図。
【図３】実施例１にかかる、試料Ｅのマルトース分解酵素に対する％阻害活性を示す棒グラフを表す説明図。
【図４】実施例１にかかる、アカルボースのスクロース分解酵素に対する％阻害活性を示す棒グラフを表す説明図。
【図５】実施例２にかかる、各試料（試料Ｅ、試料Ｃ１〜試料Ｃ３）を摂取した被験者についての体重変化の分布を示す説明図。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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