(57)【要約】【課題】角結膜障害若しくは涙腺機能障害の治療薬、改善薬または予防薬の新しいスクリーニング方法を提供すること。【解決手段】老化促進モデルマウスの一系統であるＳＡＭＰ１０を用いることで、角結膜障害または涙腺機能障害に対する評価対象薬物の効果を評価することができる。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＳＡＭＰ１０を用いた角結膜障害若しくは涙腺機能障害の治療薬、改善薬または予防薬のスクリーニング方法。
【請求項２】
角結膜障害が涙液異常に起因する角結膜障害である請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項３】
涙液異常に起因する角結膜障害がドライアイ、点状表層角膜症、角膜上皮欠損、角膜びらん、角膜潰瘍、結膜上皮欠損、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎、糸状角結膜炎、角膜炎または結膜炎である請求項２記載のスクリーニング方法。
【請求項４】
涙腺機能障害が慢性涙腺炎、急性化膿性涙腺炎または加齢による涙腺機能低下である請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項５】
ＳＡＭＰ１０への評価対象薬物の投与方法が経口投与または点眼投与である請求項３または４記載のスクリーニング方法。
【請求項６】
角結膜障害若しくは涙腺機能障害の治療薬、改善薬または予防薬のスクリーニングを行うためのＳＡＭＰ１０の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＳＡＭＰ１０を用いた角結膜障害若しくは涙腺機能障害の治療薬、改善薬または予防薬のスクリーニング方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
角結膜は、眼の表面に位置し、外界とも接していることから外部環境に大きく影響され、障害を受けやすい組織である。角結膜障害は、涙液成分、涙液分泌等の異常により引き起こされる角結膜組織の障害であり、ドライアイ、角膜潰瘍、角膜炎、結膜炎等が知られている。その中でも、ドライアイは、涙液の質的または量的な異常、涙腺機能障害等による涙液分泌異常等により引き起こされる角結膜障害であるが、近年、潜在的な患者を含めて患者数が増加する傾向にあり、特に注目を集めている。現在、ドライアイ等の角結膜障害を対象疾患とした種々の薬剤が上市されているが、角結膜障害、特にドライアイは今後も患者数が増加することが予想され、より効果的な薬剤の開発が望まれている。
【０００３】
新たな薬剤を開発するためには、その効果を動物モデルで確認する評価系が必要である。従来の角結膜障害モデル、特にドライアイモデルとしては、眼窩外涙腺摘出ラットモデル、ウサギ強制開瞼モデル等がある（非特許文献１、非特許文献２）。眼窩外涙腺摘出ラットモデルは、眼窩外涙腺を摘出することにより人工的に涙液量を減少させて角結膜障害を誘発させたモデルであり、また、ウサギ強制開瞼モデルは、ウサギの眼瞼を開瞼器で強制的に開瞼させることにより涙液層の破壊を促進させて角結膜障害を誘発させたモデルである。これらの動物モデルは、角結膜障害、特にドライアイの発症機序と共通する機序を有し、角結膜障害治療薬等の評価系として使用されている。しかし、これらの動物モデルは、その作製に熟練した技術を必要とし、また、外科的・物理的処置を施すために、モデル動物へ強いストレスがかかることから、自然発症型の動物モデルを用いた角結膜障害治療薬等の評価系が望まれている。
【非特許文献１】Invest Ophthalmol Vis Sci. 42: 96-100, 2001
【非特許文献２】J Ocul Pharmacol Ther. 11: 503-508, 1995
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従って、涙腺機能不全等の涙腺機能障害に伴う涙液分泌異常が生じ、角結膜障害を自然に発症する動物モデルを見出し、これを用いた新たな角結膜障害治療薬等のスクリーニング方法を探索することは重要な課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで、本発明者等は、新たなスクリーニング方法を探索すべく鋭意研究を行ったところ、老化促進モデルマウスであるＳＡＭＰ１０が、従来のモデル動物とは異なり、眼窩外涙腺摘出、強制開瞼等といった角結膜障害を誘発するための外科的・物理的処置を行う必要がなく、加齢に伴って角結膜障害を自然に発症することを見出した。すなわち、角結膜障害のモデル動物としてＳＡＭＰ１０を用いることにより、角結膜障害に対する評価対象薬物の効果を簡便に評価することができる。
【０００６】
また、従来のモデル動物では涙腺機能不全等の涙腺機能障害に伴う涙液分泌異常に対する評価対象薬物の効果を評価することができなかったが、ＳＡＭＰ１０は加齢に伴って涙液分泌異常といった涙腺機能障害を自然に発症することを見出した。すなわち、涙腺機能障害のモデル動物としてＳＡＭＰ１０を用いることにより、涙腺機能障害に対する評価対象薬物の効果を評価することができる。
【０００７】
さらに、ＳＡＭＰ１０で自然に発症する角結膜障害と涙液分泌異常に相関関係が認められたことから、ＳＡＭＰ１０の角結膜障害は、主に涙液分泌異常により発症したものと考えられる。よって、モデル動物としてＳＡＭＰ１０を用いた本発明のスクリーニング方法は、角結膜障害の中でも涙液異常に起因する角結膜障害の治療薬等を評価する方法として特に有用である。
【０００８】
すなわち、本発明は、
（１）ＳＡＭＰ１０を用いた角結膜障害若しくは涙腺機能障害の治療薬、改善薬または予防薬のスクリーニング方法、
（２）角結膜障害が涙液異常に起因する角結膜障害である前記（１）記載のスクリーニング方法、
（３）涙液異常に起因する角結膜障害がドライアイ、点状表層角膜症、角膜上皮欠損、角膜びらん、角膜潰瘍、結膜上皮欠損、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎、糸状角結膜炎、角膜炎または結膜炎である前記（２）記載のスクリーニング方法、
（４）涙腺機能障害が慢性涙腺炎、急性化膿性涙腺炎または加齢による涙腺機能低下である前記（１）記載のスクリーニング方法、
（５）ＳＡＭＰ１０への評価対象薬物の投与方法が経口投与または点眼投与である前記（３）または（４）記載のスクリーニング方法、
（６）角結膜障害の治療薬、改善薬または予防薬のスクリーニングを行うためのＳＡＭＰ１０の使用、
に関する。
【０００９】
本発明で用いるＳＡＭＰ１０は、老化促進モデルマウス(Senescence-Accelerated Mouse；略してＳＡＭともいう)の１系統である（日衛誌．51: 569-578, 1996）。老化促進モデルマウスは、老化に関連した種々の疾患の発症機構、発症の制御と治療法の開発、老化および老化の進行を制御する基本的な機構の研究に用いられており、促進した老化現象を示し寿命の短いＳＡＭＰ系マウス９系統（ＳＡＭＰ１、ＳＡＭＰ１０など）と、老化の進行が比較的遅く寿命の長いＳＡＭＲ系マウス３系統（ＳＡＭＲ１、ＳＡＭＲ２など）から成り、ＳＡＭＰ１０はＳＡＭＰ系マウス９系統の中の１系統である。ＳＡＭＰ系マウスの各系統に共通する老化過程として、外観や活動性の老化が５〜６ヶ月齢以降早く進行するが、成長・成熟過程は寿命の長いＳＡＭＲ系マウスと大きな差はなく、いわゆる老化促進を示す。さらにＳＡＭＰ系マウスでは比較的系統特異的に、多くのヒト老齢者で認められる老化に関連した病態が観察されることが知られている。ＳＡＭＰ１０は、例えば、加齢に伴う学習・記憶能と情動の障害、前脳部萎縮、老年性アミロイド症などの病態が観察されることが知られている。また、最近では、皮膚の形態学的変化について報告されている（Med. Electron Microsc. (2002) 35; 31-45）。
【００１０】
本発明で用いるＳＡＭＰ１０は、加齢に伴い角結膜障害を自然発症するので、角結膜障害を誘発させるための外科的処置は必要ない。また、どの週齢のＳＡＭＰ１０を用いるかは、評価対象薬物の評価したい効果に応じて選択すればよい。例えば、角結膜障害の治療薬または改善薬を評価する場合は、角結膜障害を発症したＳＡＭＰ１０を用いればよく、角結膜障害の予防薬を評価する場合は、角結膜障害を発症する前または発症すぐのＳＡＭＰ１０を用いればよい。なお、ＳＡＭＰ１０は、２０週齢に達すれば、大部分において角結膜障害および涙液異常が認められることから、角結膜障害の治療薬または改善薬を評価する場合は、２０週齢以上のＳＡＭＰ１０を用いることが好ましく、角結膜障害の予防薬を評価する場合は、２０週齢未満のＳＡＭＰ１０を用いることが好ましい。より好ましくは、治療薬または改善薬の場合、２０〜５０週齢のＳＡＭＰ１０であり、予防薬の場合、１６〜２０週齢未満のＳＡＭＰ１０である。
【００１１】
本発明で用いるＳＡＭＰ１０は、通常のＳＰＦ(Specific Pathogen Free)環境下で飼育すればよく、その環境下で一定の週齢に達すれば、本発明のスクリーニング方法に用いることができる。
【００１２】
本発明において、角結膜障害とは、涙液異常、代謝異常、外的傷害等といった種々の要因により角膜や結膜が障害を受けた状態であるものをいい、特に、涙液異常に起因する角結膜障害をいう。また、本発明において、涙腺機能障害とは、加齢、外的傷害、感染症等といった種々の要因により涙腺組織の機能が損なわれている状態をいい、特に、涙腺組織の涙液分泌機能が低下、後退等している状態をいい、具体的には、慢性涙腺炎、急性化膿性涙腺炎、加齢による涙腺機能低下等が挙げられる。涙腺機能障害は、涙液量の減少等といった涙液異常を招き、角結膜障害が生じる原因の一つとなっている。ここで、涙液異常とは、涙液の量的または質的な異常をいい、具体的には、涙液中のムチン層、水層、油層が異常である状態、涙液層が不安定化された状態等をいう。涙液異常に起因する角結膜障害とは、例えば、涙液量の減少により角結膜表面に発生する障害、涙液の蒸発亢進により角結膜表面に発生する障害等をいい、具体的には、ドライアイ、点状表層角膜症、角膜上皮欠損、角膜びらん、角膜潰瘍、結膜上皮欠損、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎、糸状角結膜炎、角膜炎、結膜炎等が挙げられる。また、本発明において、ドライアイとは、涙液減少症、眼乾燥症、乏涙症、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎、スティーブンス・ジョンソン症候群、涙腺機能不全、マイボーム腺機能不全、眼瞼炎、ＶＤＴ（Ｖｉｓｕａｌ  Ｄｉｓｐｌａｙ  Ｔｅｒｍｉｎａｌ）作業、手術、薬剤、外傷、コンタクトレンズ装用等に伴う角結膜障害、または当該角結膜障害を伴う症状をいう。
【００１３】
本発明のＳＡＭＰ１０を用いたスクリーニング方法の対象となる評価対象薬物は、特に制限はなく、角結膜障害若しくは涙腺機能障害に対する治療効果、改善効果または予防効果を評価する目的をもつものであればよい。
【００１４】
本発明のスクリーニング方法は、（ｉ）ＳＡＭＰ１０に評価対象薬物を投与する工程と(ii）角結膜障害または涙腺機能障害に対する評価対象薬物の効果を評価する工程からなる。角結膜障害または涙腺機能障害に対する評価対象薬物の効果を評価する工程は、目的の薬効を評価できる工程であればよく、例えば、ＳＡＭＰ１０の角結膜障害の程度を評価する工程、ＳＡＭＰ１０の涙液を量的または質的に評価する工程、ＳＡＭＰ１０の涙腺機能の異常を評価する工程等が挙げられる。
【００１５】
本発明において、「ＳＡＭＰ１０に評価対象薬物を投与する工程」とは、文字通り、評価対象薬物をＳＡＭＰ１０へ投与する工程をいい、評価対象薬物の投与形態は特に制限がなく、経口投与でも、非経口投与でもよい。好ましい投与形態は経口投与および点眼投与であり、より好ましい投与形態は経口投与である。また、非経口投与の例としては、点眼投与、経皮投与、軟膏を用いた点入投与、デバイス等を利用した挿入投与等が挙げられる。
【００１６】
本発明において、「ＳＡＭＰ１０の角結膜障害の程度を評価する工程」とは、ＳＡＭＰ１０の角結膜障害に対する評価対象薬物の効果を評価できる方法からなる工程をいう。その評価する方法として、例えば、眼球に染色（フルオレセイン、ローズベンガル、メチレンブルー、リサミングリーン等）を施して眼球表面損傷部位の面積を測定して評価する方法（Invest Ophthalmol Vis Sci. 44: 3810-3815, 2003）、損傷部位をスコア化して半定量化する方法（あたらしい眼科. 21: 87-90, 2004）等が挙げられる。
【００１７】
本発明において、「ＳＡＭＰ１０の涙液を量的または質的に評価する工程」とは、ＳＡＭＰ１０の涙液に対する評価対象薬物の効果を量的または質的に評価できる方法からなる工程をいう。その評価する方法として、例えば、シルマーテストにより判定する方法（Invest Ophthalmol Vis Sci. 42: 96-100, 2001）、綿糸法によって判定する方法（眼紀. 42: 719-727, 1991）、涙液メニスカスを観察する方法（Br J Ophthalmology. 83: 92-97, 1999）、涙液クリアランステスト（臨眼. 45: 1143-1147, 1991）、Ｔｅａｒ  ｆｉｌｍ  ｂｒｅａｋ  ｕｐ  ｔｉｍｅ（ＴＦＢＵＴ）を測定する方法（Cornea. 22: 25-32, 2003）、涙液油層観察法（Am J Ophthalmol. 122: 818-824, 1996）等が挙げられる。
【００１８】
本発明において、「ＳＡＭＰ１０の涙腺機能の異常を評価する工程」とは、ＳＡＭＰ１０の涙腺機能の異常に対する評価対象薬物の効果を評価できる方法からなる工程をいう。その評価する方法として、例えば、鼻刺激シルマーテスト（シルマーテストII法）により判定する方法（Am J Ophthalmol. 111: 106-108, 1991）、涙腺組織病理学的検査法、涙液蛋白の分析法（Invest Ophthalmol Vis Sci. 30: 1872-1878, 1989）等が挙げられる。
【００１９】
本発明の評価対象薬物は、経口でも、非経口でも投与することができる。投与剤型としては、点眼剤、眼軟膏、注射剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等が挙げられる。これらは汎用されている技術を用い、調製することができる。例えば、点眼剤は、塩化ナトリウム、濃グリセリン等の等張化剤、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム等の緩衝化剤、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレ−ト、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の界面活性剤、クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム等の安定化剤、塩化ベンザルコニウム、パラベン等の防腐剤等を必要に応じて用い、調製することができる。ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、４〜８の範囲が好ましい。
【００２０】
眼軟膏は、白色ワセリン、流動パラフィン等の汎用される基剤を用い、調製することができる。また、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等の経口剤は、乳糖、結晶セルロ−ス、デンプン、植物油等の増量剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、ヒドロキシプロピルセルロ−ス、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボキシメチルセルロ−ス  カルシウム、低置換ヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス等の崩壊剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス、マクロゴ−ル、シリコン樹脂等のコ−ティング剤、ゼラチン皮膜等の皮膜剤などを必要に応じて加え、調製することができる。
【００２１】
評価対象薬物の投与量は、薬剤の種類、剤型の種類等によって適宜選択できるが、点眼剤は０．０００００１〜１％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０００１〜０．１％（ｗ／ｖ）のものを１日１〜数回点眼すればよい。また、経口剤の場合は通常１日当り０．１〜５０００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇを１回または数回に分けて投与すればよい。
【発明の効果】
【００２２】
後述するように、ＳＡＭＰ１０は加齢に伴って角膜上皮障害を自然に発症することが認められた。すなわち、ＳＡＭＰ１０が角結膜障害の動物モデルとして有用であり、ＳＡＭＰ１０を用いたスクリーニング方法が、角結膜障害の治療薬、改善薬または予防薬を評価する方法として有用であることが認められた。また、ＳＡＭＰ１０は加齢に伴って涙液量の減少といった涙腺機能障害を自然に発症することが認められた。すなわち、ＳＡＭＰ１０が涙腺機能障害の動物モデルとして有用であり、ＳＡＭＰ１０を用いたスクリーニング方法が、涙腺機能障害の治療薬、改善薬または予防薬を評価する方法として有用であることが認められた。さらに、ＳＡＭＰ１０の角膜上皮障害は、涙液量の減少に伴って発症することが認められたことから、ＳＡＭＰ１０を用いたスクリーニング方法が、涙液異常に起因する角結膜障害の治療薬、改善薬または予防薬を評価する方法として特に有用であることが認められた。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
以下、実施例を挙げて、本発明をより具体的に説明するが、これらは本発明を限定するものではない。
【実施例】
【００２４】
１．薬理試験
ＳＡＭＰ系マウスであるＳＡＭＰ６、ＳＡＭＰ８およびＳＡＭＰ１０について結膜嚢内貯留涙液量測定（綿糸法）および角膜上皮障害検査（フルオレセイン染色法）を実施した。なお対照系統として正常老化を示すＳＡＭＲ系マウスであるＳＡＭＲ１を設定した。本試験で使用したマウスはすべて日本エスエルシー社より購入した。また、マウスはすべてＳＰＦ下の条件で飼育した。
【００２５】
（１）結膜嚢内貯留涙液量測定
雌性１６週齢のＳＡＭＲ１（４０眼；２０匹）、ＳＡＭＰ６（４０眼；２０匹）、ＳＡＭＰ８（４０眼；２０匹）およびＳＡＭＰ１０（３８眼；１９匹）における結膜嚢内貯留涙液量について、綿糸法を用いて測定した。同様に、雌性２４週齢のＳＡＭＲ１（３０眼；１５匹）、ＳＡＭＰ６（３２眼；１６匹）、ＳＡＭＰ８（３４眼；１７匹）およびＳＡＭＰ１０（３４眼；１７匹）の結膜嚢内貯留涙液量を測定した。
【００２６】
（測定方法）
１６週齢のＳＡＭＲ１、ＳＡＭＰ６、ＳＡＭＰ８およびＳＡＭＰ１０の下眼瞼にフェノールレッド糸を挿入し、１５秒間で濡れて赤変した部分の長さを測定することで結膜嚢内貯留涙液量を測定した（最小単位は０．５ｍｍとした）。同様に、２４週齢のＳＡＭＲ１、ＳＡＭＰ６、ＳＡＭＰ８およびＳＡＭＰ１０の結膜嚢内貯留涙液量を測定した。
【００２７】
（結果）
１６および２４週齢におけるＳＡＭＲ１、ＳＡＭＰ６、ＳＡＭＰ８およびＳＡＭＰ１０のフェノールレッド糸赤変長を表1に示す。なお、フェノールレッド糸赤変長は各系統における平均±標準誤差値である。統計学的有意性は、各週齢時のＳＡＭＲ１群を基準としたDunnettの多重比較検定により算出されたｐ値が０．０５以下の場合に、有意差あり（＊）と判断した。
【表１】
2007278819.tif 000002
【００２８】
（２）角膜上皮障害検査
雌性１６週齢のＳＡＭＲ１（４０眼；２０匹）、ＳＡＭＰ６（４０眼；２０匹）、ＳＡＭＰ８（４０眼；２０匹）およびＳＡＭＰ１０（４０眼；２０匹）における角膜障害について、村上らの方法（あたらしい眼科，21(1)，87-90（2004））を用いて判定した。同様に、雌性２４週齢のＳＡＭＲ１（３０眼；１５匹）、ＳＡＭＰ６（３２眼；１６匹）、ＳＡＭＰ８（３４眼；１７匹）およびＳＡＭＰ１０（３４眼；１７匹）の角膜障害を判定した。
【００２９】
（実験方法）
１６週齢のＳＡＭＲ１、ＳＡＭＰ６、ＳＡＭＰ８およびＳＡＭＰ１０の角膜障害部分をフルオレセインにて染色した。角膜の上部、中間および下部のそれぞれについて、フルオレセインによる染色の程度を下記の基準に従って点数化し、これを合計することで角膜上皮障害の程度をスコア化（合計９点満点）した。同様に、２４週齢のＳＡＭＲ１、ＳＡＭＰ６、ＳＡＭＰ８およびＳＡＭＰ１０の角膜上皮障害の程度をスコア化した。
【００３０】
（判定基準）
０：染色されていない
１：染色が疎であり、各点状の染色部分は離れている
２：染色が中程度であり、点状の染色部分の一部が隣接している
３：染色が密であり、各点状の染色部分は隣接している
なお、各スコア間に中間値として０．５を設けた。
【００３１】
（結果）
１６および２４週齢におけるＳＡＭＲ１、ＳＡＭＰ６、ＳＡＭＰ８およびＳＡＭＰ１０のフルオレセイン染色スコア値を表２に示す。なお、フルオレセイン染色スコア値は各系統におけるスコアの平均±標準誤差値である。統計学的有意性は、各週齢時のＳＡＭＲ１群を基準としたDunnettの多重比較検定により算出されたｐ値が０．０５以下の場合に、有意差あり（＊）と判断した。
【表２】
2007278819.tif 000003
【００３２】
（考察）
上記の検討の結果から明らかなように、２４週齢のＳＡＭＰ１０のみが、同週齢のＳＡＭＲ１に比べて結膜嚢内貯留涙液量が有意に少ないことが認められた。一方で、１６週齢のＳＡＭＰ１０では、同週齢のＳＡＭＲ１と比べて結膜嚢内貯留涙液量で有意な差は認められなかった。従って、ＳＡＭＰ１０は、加齢に伴って涙液量の減少といった涙腺機能障害を自然に発症することが認められた。すなわち、ＳＡＭＰ１０は、涙腺機能障害の動物モデルとして有用であり、ＳＡＭＰ１０を用いて涙腺機能障害に対する評価対象薬物の効果を評価することができる。
【００３３】
また、２４週齢のＳＡＭＰ１０のみが、同週齢のＳＡＭＲ１に比べて角膜上皮障害の程度が有意に少ないことが認められた。一方で、１６週齢のＳＡＭＰ１０では、同週齢のＳＡＭＲ１と比べて角膜上皮障害の程度で有意な差は認められなかった。従って、ＳＡＭＰ１０は、加齢に伴って角結膜障害を自然に発症することが認められた。すなわち、ＳＡＭＰ１０は、角結膜障害の動物モデルとして有用であり、ＳＡＭＰ１０を用いて角結膜障害に対する評価対象薬物の効果を評価することができる。
【００３４】
さらに、ＳＡＭＰ１０の角膜上皮障害は、結膜嚢内貯留涙液量の減少に伴って発症することが認められた。よって、ＳＡＭＰ１０は、涙液異常に起因する角結膜障害の動物モデルとして特に有用であり、ＳＡＭＰ１０を用いて涙液異常に起因する角結膜障害、特に加齢に伴うドライアイに対する評価対象薬物の効果を評価することができる。
【００３５】
２−１．角結膜障害治療薬、改善薬または予防薬のスクリーニング方法
任意の週齢の雌性ＳＡＭＰ１０を体重を基準に無作為化し、評価対象薬物を投与する群ならびに基剤を投与する群に分け、任意量の評価対象薬物または基剤を経口投与する。ここで、基剤は評価対象薬物を溶解、分散できる溶媒（例えば、生理食塩水等）であればよい。投与開始前および投与２週から８週後程度を目処に、ＳＡＭＰ１０の結膜嚢内貯留涙液量測定および角膜上皮障害検査を実施する。評価対象薬物を投与したＳＡＭＰ１０と基剤を投与したＳＡＭＰ１０の貯留涙液量および上皮障害スコアを比較することで、老化に伴って発症する角結膜障害に対する評価対象薬物の治療効果、改善効果または予防効果を評価することができる。
【００３６】
２−２．涙腺機能障害の治療薬、改善薬または予防薬のスクリーニング方法
任意の週齢の雌性ＳＡＭＰ１０を体重を基準に無作為化し、評価対象薬物を投与する群ならびに基剤を投与する群に分け、任意量の評価対象薬物または基剤を経口投与する。ここで、基剤は評価対象薬物を溶解、分散できる溶媒（例えば、生理食塩水等）であればよい。投与開始前および投与２週から８週後程度を目処に、ＳＡＭＰ１０の結膜嚢内貯留涙液量測定を実施する。評価対象薬物を投与したＳＡＭＰ１０と基剤を投与したＳＡＭＰ１０の貯留涙液量を比較することで、老化に伴って発症する涙腺機能障害に対する評価対象薬物の治療効果、改善効果または予防効果を評価することができる。また、評価対象薬物を投与したＳＡＭＰ１０と基剤を投与したＳＡＭＰ１０の涙腺組織病理学的検査を実施し、その結果を比較することでも評価することができる。
【手続補正書】
【提出日】平成18年5月12日(2006.5.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３３】
また、２４週齢のＳＡＭＰ１０のみが、同週齢のＳＡＭＲ１に比べて角膜上皮障害の程度が有意に高いことが認められた。一方で、１６週齢のＳＡＭＰ１０では、同週齢のＳＡＭＲ１と比べて角膜上皮障害の程度で有意な差は認められなかった。従って、ＳＡＭＰ１０は、加齢に伴って角結膜障害を自然に発症することが認められた。すなわち、ＳＡＭＰ１０は、角結膜障害の動物モデルとして有用であり、ＳＡＭＰ１０を用いて角結膜障害に対する評価対象薬物の効果を評価することができる。