(57)【要約】【課題】酵素活性及び洗浄力が高く、取り扱い容易なコンタクトレンズの洗浄及び保存のための液剤を提供する。【解決手段】蛋白質分解酵素を含有する第１液と、陰イオン性界面活性剤、金属キレート剤、ホウ酸及び／又はホウ砂を含む第２液からなり、これら第１液及び第２液は、混合した後、コンタクトレンズの洗浄及び／又は保存に分割使用されるものである、コンタクトレンズ用液剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
蛋白質分解酵素を含有する第１液と、陰イオン性界面活性剤、金属キレート剤、ホウ酸及び／又はホウ砂を含む第２液からなり、これら第１液及び第２液は、混合した後、コンタクトレンズの洗浄及び／又は保存に分割使用されるものである、コンタクトレンズ用液剤。
【請求項２】
第１液又は第２液の少なくとも一方が、非イオン性界面活性剤を含有している請求項１記載の液剤。
【請求項３】
第１液が、蛋白質分解酵素とホウ酸及び／又はホウ砂を含有するものである請求項１又は２記載の液剤。
【請求項４】
第１液又は第２液の少なくとも一方が多価アルコールを含有している請求項１〜３のいずれかに記載の液剤。
【請求項５】
第２液が、混合後の陰イオン性界面活性剤の濃度が０.０１〜１０％（ｗ／ｖ）となるよう、陰イオン性界面活性剤を含有している請求項１〜４のいずれかに記載の液剤。
【請求項６】
第１液又は第２液の少なくとも一方が、混合後の非イオン性界面活性剤の濃度が０.０１〜１０％（ｗ／ｖ）となるよう、非イオン性界面活性剤を含有している請求項２〜５のいずれかに記載の液剤。
【請求項７】
第１液及び／又は第２液が、混合後の多価アルコールの濃度が０.５〜４.０％（ｗ／ｖ）となるよう、多価アルコールを含有している請求項４〜６のいずれかに記載の液剤。
【請求項８】
第１液及び第２液が、混合後のホウ酸及びホウ砂の合計量が多価アルコールに対して２から２０倍となるよう、ホウ酸及び／又はホウ砂を含有している請求項４〜７のいずれかに記載の液剤。
【請求項９】
蛋白質分解酵素が、バチルス由来セリンプロテアーゼである請求項１〜８のいずれかに記載の液剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蛋白質分解酵素を含有するコンタクトレンズの洗浄及び／又は保存に有用な液剤に関し、さらに詳しくは、酵素活性と洗浄力とを共に高く維持したハードコンタクトレンズの洗浄及び／又は保存のための液剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
コンタクトレンズは直接目に挿入する医療用具であるため、装用中に付着する涙液や眼脂に起因する蛋白質や脂質、無機質の人体内部より生じる汚れや化粧品、空気中の塵等の人体外部より生じる汚染は避けられない。また、日常、レンズを手で取り扱うことにより、化粧品、ハンドクリーム、ヘアスプレー等の付着によっても汚染される。これらの汚染の結果、レンズの寿命が短縮したり、レンズが曇って装用感を悪化させるのみならず、酸素透過性の低下や、感染症による眼の障害を招く恐れもあるため、定期的に洗浄する必要がある。
近年、酸素透過性の良いハードコンタクトレンズが開発されているが、これらのレンズは素材の成分であるシロキサニル系ポリマーの特性から特に汚れが付着しやすく、上記の問題がより深刻である。付着した蛋白質汚れの除去には、蛋白質分解酵素が有効であるが、蛋白質分解酵素は水に対して不安定である。そこで、酵素安定化のために種々の工夫が施されている。例えば、特許文献１や特許文献２には水に混和性の有機液体を配合することにより、酵素を安定化する方法が開示されている。また、特許文献３には界面活性剤を配合して蛋白質分解酵素を安定化する方法、特許文献４にはホウ酸やホウ砂を配合することによって酵素を安定化する方法が開示されている。さらに、グリセリンとホウ酸やホウ砂とを同時に配合する方法が特許文献５に開示されている。
【０００３】
一方、酵素含有洗浄剤の洗浄効果を高めるために、コンタクトレンズに付着する涙液に由来すると考えられる無機塩類の汚れを除去する目的で金属キレート剤がしばしば添加されている。しかしながら、金属キレート剤は、蛋白質分解酵素、例えば、セリンプロテアーゼの安定性を著しく低下させることが知られている。そのような弊害を回避するために、特許文献６では、ホウ酸及び／又はホウ砂を配合し、浸透圧値を200〜600mOsm／kg水に調製する方法を開示している。
しかし、これら従来の方法では、酵素の安定化には有効であっても十分な洗浄力を得ることは、非常に困難であった。そこで、十分な洗浄力を得るために、安定化された酵素液を適宜希釈して用いる２液タイプの液剤が提供されている。しかしながら、蛋白分解酵素は希釈された水溶液中で極めて不安定であり、酵素活性の急速な低下を示すことから、使用者は洗浄の度に濃縮酵素液を希釈液で希釈するという作業を行わねばならなかった。
この繁雑さを避けるために１液タイプの洗浄液も供給されているが、その場合には十分な洗浄力を得ようとすると酵素の安定化が不十分であるという問題点があった。
【特許文献１】特開平１―１８０５１５号公報
【特許文献２】特開平２−１６８２２４号公報
【特許文献３】特開平７−７６７００号公報
【特許文献４】特開昭６０−１２１４１７号公報
【特許文献５】特開平６−２８１８９４号公報
【特許文献６】特開平６−１９４６１０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上記のごとく、１液タイプの蛋白分解酵素含有液剤では、酵素の安定化に重点を置かざるを得ないことから十分な洗浄力が得られず、用時希釈して用いる２液タイプの液剤では、混合液中で酵素活性が短期間で低下するために、洗浄の度に濃縮酵素液を希釈液で希釈するという繁雑さに加えて、一定の希釈率が確保されておらずコンタクトレンズの物性への影響や洗浄効果のばらつきがあった。さらには、その繁雑さから適切なケアを怠り、コンタクトレンズの汚染がさらに進行する例も多く見られた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、蛋白質分解酵素を含有する第１液と、陰イオン性界面活性剤、金属キレート剤、ホウ酸及び／又はホウ砂を含む第２液からなり、これら第１液及び第２液は、混合した後、コンタクトレンズの洗浄及び／又は保存に分割使用されるものである、コンタクトレンズ用液剤を提供するものである。
本発明の１つの実施態様においては、第１液又は第２液の少なくとも一方が、非イオン性界面活性剤を含有している。
【発明の効果】
【０００６】
さらに、他の実施態様においては、第１液は、蛋白質分解酵素とホウ酸及び／又はホウ砂を含有している。
さらにまた、他の実施態様においては、第１液又は第２液の少なくとも一方が多価アルコールを含有している。
本発明の液剤は、初回使用時に第１液と第２液とを混合することにより、以後、長期間分割して使用可能なコンタクトレンズの洗浄及び／又は保存液（以下、洗浄保存液と称する）を調製するよう構成されている。後述の試験例に示すように、得られた洗浄保存液は、一定の酵素濃度に調製されており、安定した高い酵素活性と、優れた洗浄効果を有するものである。
【０００７】
後述の表４〜６から明らかなように、本発明の液剤は、酵素活性が極めて安定であり、洗浄力が長期間維持されている。このように、初回使用時のみに混合し、以後は分割して使用することができることから、コンタクトレンズの洗浄及び保存を適切かつ効果的に行うことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の液剤を使用するには、蛋白分解酵素を含有する第１液を第２液で希釈し、得られた混合液を分注してコンタクトレンズの洗浄、保存に用いる。従って、本発明によれば、従来の１液タイプ又は２液タイプのコンタクトレンズ洗浄液とは異なり、使用期間を通して酵素の濃度が一定であり、高い酵素活性及び洗浄効果を維持されているので、コンタクトレンズの洗浄及び／保存を適切に行うことができる。
本発明の液剤は、該液剤によってコンタクトレンズの品質（形状、大きさなど）が変化しないことを条件として、任意のタイプのコンタクトレンズの処理に用いることができるが、浸透圧等の関係から、通常は、ハードコンタクトレンズの処理に適する。
【０００９】
本発明の液剤に含有させることができる酵素としては、眼科的に許容される任意の蛋白質分解酵素が使用可能である。そのような酵素は、活性部位によって、セリンプロテアーゼ、金属プロテアーゼ、チオールプロテアーゼ、カルボキシルプロテアーゼの４種類に大別される。本発明には、バチルス属が生産するセリンプロテアーゼが最も効果的に用いられる。具体的には「クリアレンズプロ」、「アルカラーゼ」、「エスペラーゼ」、「サビナーゼ」、「ズブチリシンＡ」（ノボ・ノルディスクバイオインダストリー・ジャパン株式会社製）、「ビオプラーゼ」（ナガセ生化学工業株式会社製）、「アルカリプロテアーゼ」、「オプティマーゼ」（協和ソルザイム社製）、「プロテアーゼＮ アマノ」（天野製薬株式会社製）、「アクチナーゼＡＳ」（科研製薬株式会社製）等があり、それらの中から適宜選択して使用することができるが、それらに限定されない。
その配合量は、期待される洗浄効果が得られる範囲で適宜決定されるが、第１液中で０.０１〜３０％（ｗ／ｖ）、好ましくは、０.１〜１０％（ｗ／ｖ）とする。
【００１０】
金属キレート剤も、当業者既知のものから選択することができる。金属キレート剤は、コンタクトレンズに付着する涙液に由来すると考えられる無機塩類の汚れを除去する目的で配合される。高濃度の金属キレート剤は酵素の安定性を阻害することから、通常、一定量以上は配合することができない。本発明においては、以下に示すように、ホウ酸及び／又はホウ砂と陰イオン性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤とを適切に配合することによって、高濃度で金属キレート剤を配合した場合においても、酵素安定性を高く維持し、著しい洗浄効果を達成することが可能となった。金属キレート剤の具体例としては、エデト酸、エデト酸塩（エデト酸二ナトリウム、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、エデト酸四ナトリウム）、ニトリロ三酢酸及びその塩、トリヒドロキシメチルアミノメタン、ヘキサメタリン酸ソーダ、クエン酸等を挙げることができ、その含有量は、最終的な混合液（洗浄保存液）中で０.０１〜１％（ｗ／ｖ）、特に好ましくは、０.０５〜０.５％（ｗ／ｖ）とする。
【００１１】
陰イオン性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤も当該技術分野で用いられる眼科的に許容される任意の界面活性剤から選択することができる。陰イオン性界面活性剤の具体例としては、ＰＯＥ(10)ラウリルエーテルリン酸ナトリウム等のＰＯＥアルキルエーテルリン酸及びその塩、ラウロイルメチルアラニンナトリウム等のＮ-アシルアミノ酸塩、アルキルエーテルカルボン酸塩、Ｎ-ラウロイルメチルタウリンナトリウム等のＮ-アシルタウリン塩、テトラデセンスルホン酸ナトリウム等のスルホン酸塩、ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩、ＰＯＥ(3)ラウリルエーテル硫酸ナトリウム等のＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩等が挙げられ、非イオン性界面活性剤の具体例としては、ＰＯＥ・ＰＯＰブロックコポリマー、モノオレイン酸ＰＯＥ(20)ソルビタン等のＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類、ＰＯＥ(60)硬化ヒマシ油等のＰＯ Ｅ硬化ヒマシ油、ＰＯＥ(9)ラウリルエーテル等のＰＯＥアルキルエーテル類、ＰＯＥ(20)ＰＯＰ(4)セチルエーテル等のＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類、ＰＯＥ(10)ノニルフェニルエーテル等のＰＯＥアルキルフェニルエーテル類等が挙げられるが、これに限定されない。（以上、ＰＯＥはポリオキシエチレン、ＰＯＰはポリオキシプロピレンの略である。）
界面活性剤は、その混合液中の濃度が低すぎると、期待される酵素安定化効果や洗浄力が得られず、濃度が高すぎると、皮膚障害を生じる危険性がある。混合液中の好適な濃度範囲は、いずれの界面活性剤に関しても、０.０１〜１０％（ｗ／ｖ）であり、０.１〜５％（ｗ／ｖ）であることがより好ましい。
【００１２】
混合液液中に上記の界面活性剤のいずれか１種類が存在する場合でも本発明の目的を達成しうるが、陰イオン界面活性剤と非イオン性界面活性剤が同時に存在すると、酵素の安定化効果がより高くなると同時に、洗浄効果が増強されうるので好ましい。そのような場合、混合液中における両界面活性剤の濃度は上で規定した範囲であってよい。界面活性剤の組み合わせとしては、Ｎ−ラウロイルメチルタウリンナトリウムとＰＯＥ（９）ラウリルエーテル、α−オレフィンスルホン酸ナトリウムとポリソルベート８０の組み合わせが効果的である。
【００１３】
ホウ酸及び／又はホウ砂は、酵素安定化剤として配合され、その含有量は、最終的に得られる混合液中で０.０５〜１０％（ｗ／ｖ）が好ましく、特に好ましくは、１〜５％（ｗ／ｖ）となるようにする。
また、酵素保存液及び液剤の少なくとも一方が多価アルコールを含有していることが好ましい。そのような場合、混合液中の多価アルコールの濃度は０.５〜４.０％（ｗ／ｖ）、好ましくは、０.５〜３.０％（ｗ／ｖ）となるように含有させる。多価アルコールの濃度が０.５％未満になると酵素安定化効果が得られず、４.０％より高くなると、洗浄効果が低下したり、コンタクトレンズの物性を変化させる恐れがある。多価アルコールの具体例として、グリセリン、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール等を挙げることができるが、これらに限定されない。
【００１４】
ホウ酸及び／又はホウ砂と多価アルコールとの関係は、最終混合液中に、ホウ酸及び／又はホウ砂が多価アルコールの２〜２０倍、好ましくは２〜１０倍、より好ましくは２〜５倍となるように配合することができる。ホウ酸及び／又はホウ砂の濃度が低すぎると、酵素安定化効果が得られず、濃度が高すぎると、溶解しないので、上記の好ましい配合量の範囲で適宜設定する。
本発明により安定化されるコンタクトレンズ用洗浄保存剤は、ｐＨが４〜９であることが好ましく、特に好ましいｐＨは６〜９である。
本発明に関して、その安定性を損なわない限り、通常用いられる保存剤や増粘剤並びに他の酵素剤、例えば、脂肪分解酵素等が配合されても何ら差し支えない。
【００１５】
さらに、種々のコンタクトレンズに対して影響がなく、製剤的に許容される様々な物質を添加することができる。例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸カリウム、ホウ酸、ホウ砂、クエン酸、クエン酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、アスパラギン酸カリウム、アスパラギン酸マグネシウム・カリウム、イプシロン−アミノカプロン酸、アミノエチルスルホン酸、グルタミン酸ナトリウム、塩酸、水酸化ナトリウム、酢酸、グリセリン、ブドウ糖、マンニトール等をｐＨ調製剤、緩衝剤、等張化剤として用いることができ、また、安定化剤としてエデト酸、エデト酸塩（エデト酸二ナトリウム、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、エデト酸四ナトリウム）、防腐剤としてソルビン酸、ソルビン酸カリウム、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸ブチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸メチル、グルコン酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、アルキルポリアミノエチルグリシン、クロロブタノール、ポリヘキサメチレンビグアニド、ポリクアド、さらに、溶解補助剤として、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、尿素、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、モノエタノールアミン、ポリオキシエチレンオキシステアリン酸トリグリセライドが使用できる。また、界面活性剤として、前記の陰イオン性界面活性剤及び非イオン性界面活性  剤以外に、アルキルポリアミノエチルグリシン等のグリシン型両性界面活性剤、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン等の酢酸ベタイン型両性界面活性剤、イミダゾリン型両性界面活性剤等の両性界面活性剤も配合することができる。
【００１６】
なお、本発明の液剤は、それらを混合したとき、上記のコンタクトレンズの洗浄及び保存液が得られるよう、予め決定された構成成分からなる第１液及び第２液を含むキットとすることができる。そのようなキットは、一定量の第１液と第２液が収納している別々の容器、及びそれらの混合液を保存するための容器からなる。この保存のための容器は、第１又は第２の液剤が収納されている容器で兼用することができる。
以下に実施例を示して本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００１７】
実施例１−８
表１及び表２に、実施例１〜８における本発明のコンタクトレンズの洗浄及び保存のための液剤の処方例を示す。
【００１８】
【表１】
2007256969.tif 000002
【００１９】
【表２】
2007256969.tif 000003
【００２０】
比較例１−５
表３に、比較例１〜５における液剤の処方例を示す。
【００２１】
【表３】
2007256969.tif 000004
【００２２】
試験例１  液剤中の酵素活性の安定性
実施例１及び比較例１から５の処方の第１液及び第２液を調製し、第１液と第２液を１：２４の割合で混合した混合液について、酵素活性Ａ（スタート）を測定した。各サンプルを２５℃で１ヶ月間保存した後、再び酵素活性Ａ（１ケ月後）を測定し、調製直後の酵素活性に対する酵素活性残存率を求めた。
酵素活性の測定は以下の方法で行った。上記処方で得た混合液を、低濃度の塩類を溶解させた蒸留水でさらに２５倍希釈したものを試料液とした。２％カゼイン溶液（０.０８Ｍリン酸水素二ナトリウム水溶液）１ｍｌに、各試料液を１ｍｌずつ加え、３７℃で２０分間酵素反応を行った。０.４Ｍトリクロロ酢酸を添加して反応を停止した後、濾過した濾液について、２７５ｎｍにおける吸光度Ａを測定し、下式により酵素活性残存率を算出した。
【００２３】
【数１】
2007256969.tif 000005
結果を以下の表４に示す。
【００２４】
試験例２  液剤の洗浄力
実施例１の液剤と、比較例１から４の液剤の、混合してから１ヶ月経過後の洗浄力を比較検討した。
洗浄力試験には、市販のハードコンタクトレンズ（商品名「シード  Ｈｉ−Ｏ２」）を用い、以下の方法で行った。
まず、汚れを付着させていないきれいなコンタクトレンズの表面を、ＣＣＤカメラを用いて画像として取り込み、画像解析処理を行い輝度ＡＢを測定して、ブランクとした。
（１）蛋白、脂質汚れの洗浄効果
コンタクトレンズに人工的に蛋白（アルブミン、リゾチーム、ムチン）及び脂質（ラード、オリーブ油）の汚れを付着させた。レンズケースに汚れ付着レンズとサンプルを入れ、８時間浸漬洗浄した。洗浄前及び洗浄後の洗浄力をブランクと同様に輝度Ａを測定し、下記の式により洗浄率（％）を算出した。
【００２５】
【数２】
2007256969.tif 000006
【００２６】
（２）塩類汚れの洗浄効果
コンタクトレンズにリン酸カルシウムを付着させ、レンズケースに汚れ付着レンズとサンプルを入れ、８時間浸漬洗浄した。レンズを取り出し、水道水で軽くすすいだ後、ドライヤーの冷風で軽く乾かした。洗浄前及び洗浄後の洗浄力を、偏光レンズを付けた実体顕微鏡で結晶付着状態を観察して評価した。結果を表４に示す。
【００２７】
【表４】
2007256969.tif 000007
【００２８】
表４から、以下の点が明らかである。
酵素安定性については、実施例１及び比較例３の液剤で１ヶ月間非常に安定であった。しかしながら洗浄効果については、比較例３の液剤では塩類汚れがほとんど残った。また、比較例２及び４の液剤については、調製直後は非常に高い洗浄効果が得られるが、１ヶ月保存後は蛋白・脂質汚れの落ちが非常に悪くなってしまう。比較例１の液剤においても、調製直後から蛋白・脂質汚れがやや残った。以上より、本発明の液剤は、調製直後から１ケ月後まで高い酵素安定性と洗浄効果を維持できることがわかった。
【００２９】
また、実施例１における液剤の、多価アルコールに対するホウ酸及びホウ砂の合計量の比率を変えた比較例２及び５の液剤酵素安定性の比較を表５に示す。
【００３０】
【表５】
2007256969.tif 000008
表５から、ホウ酸、ホウ砂の比率が低いほど酵素の安定性は悪くなるが、本発明の範囲である実施例１の液剤の場合には１ヶ月保存後も残存活性率９４％の高い安定性が得られることが分かる。
【００３１】
試験例３  従来の安定化酵素液との洗浄力の比較
実施例２の液剤と高濃度のグリセリンで酵素が安定化された液剤である下記の組成の比較例６の液剤との洗浄力の比較を行った。ハードコンタクトレンズ（商品名「シード  Ｈｉ−Ｏ２」）を用いて試験例２の（１）と同様に洗浄までの操作を行い、コンタクトレンズの汚れを目視で観察した。洗浄力評価の記載は＋−とする。
比較例６（１００ｍｌ中）
酵素「アルカリプロテアーゼ」      ０.２％
ホウ砂                            ３.０％
グリセリン                      ３５.０％
結果を表６に示す。表６に示すように、実施例２の液剤ではコンタクトレンズの汚れがほぼ完全に落ちたが、比較例６の液剤ではコンタクトレンズが曇っていた。
【表６】
2007256969.tif 000009
【手続補正書】
【提出日】平成19年5月11日(2007.5.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
【表３】
2007256969.tif 000010