(57)【要約】【課題】分注までの時間が異なっても血球成分の濃度を正確に測定することが可能な自動分析装置およびその検体分注方法を提供すること。【解決手段】検体容器内に収容された血球成分を含む検体を分注装置２０によって所定量分注し、試薬と反応させて分析する自動分析装置およびその検体分注方法。自動分析装置１は、血球成分の経時的な濃度変化を記憶する記憶部１５ｂと、検体を自動分析装置に装着した後の経過時間を計時する計時部１５ａと、計時部が計時した経過時間をもとに、分注装置２０による分注の際の検体の鉛直方向における吸引位置を制御する位置制御部１５ｃとを備えている。【選択図】        図２
2007316013.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
検体容器内に収容された血球成分を含む検体を分注装置によって所定量分注し、試薬と反応させて分析する自動分析装置において、
前記血球成分の経時的な濃度変化を記憶する記憶手段と、
前記検体を当該自動分析装置に装着した後の経過時間を計時する計時手段と、
前記計時手段が計時した経過時間をもとに、前記分注装置による分注の際の前記検体の鉛直方向における吸引位置を制御する位置制御手段と、
を備えたことを特徴とする自動分析装置。
【請求項２】
さらに、前記血球成分の経時的な濃度変化を予め記憶する記憶手段を備え、
前記位置制御手段は、前記計時手段が計時した経過時間と、前記記憶手段が記憶した経時的な濃度変化とをもとに、前記吸引位置を制御することを特徴とする請求項１に記載の自動分析装置。
【請求項３】
前記検体の当該自動分析装置への装着を検出し、前記計時手段へ出力する第一の検出手段と、
前記検体の前記分注装置による分注位置への移動を検出し、前記計時手段へ出力する第二の検出手段と、
を備え、
前記計時手段は、前記第一及び第二の検出手段から入力される情報をもとに前記経過時間を計時することを特徴とする請求項１に記載の自動分析装置。
【請求項４】
検体容器内に収容された血球成分を含む検体を分注装置によって所定量分注し、試薬と反応させて分析する自動分析装置の検体分注方法であって、
前記血球成分の経時的な濃度変化を記憶する記憶工程と、
前記検体を当該自動分析装置に装着した後の経過時間を計時する計時工程と、
前記経過時間をもとに、前記分注装置による分注の際の前記検体の鉛直方向における吸引位置を制御する位置制御工程と、
を含むことを特徴とする自動分析装置の検体分注方法。
【請求項５】
さらに、前記血球成分の経時的な濃度変化を予め記憶する記憶工程を含み、
前記位置制御工程は、前記経過時間と前記経時的な濃度変化とをもとに、前記吸引位置を制御することを特徴とする請求項４に記載の自動分析装置の検体分注方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、自動分析装置およびその検体分注方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）は、糖尿病の診断マーカとして使用されており、自動分析装置においては、被験者から採取した血球成分を含む検体（血液）の一定量を分注し、試薬、例えば、前処理液を加えて血球成分を溶血させた溶血試料の吸光度から求めた総ヘモグロビン（Ｔ−Ｈｂ）の濃度及びヘモグロビンＡ１ｃの濃度から総ヘモグロビン（Ｔ−Ｈｂ）に対する割合（％）として測定している（例えば、特許文献１参照）。ここで、血球成分を含む検体は、採取後、放置しておくと血球成分が沈降し、血漿成分と血球成分とに分離する。このため、通常、血球成分を含む検体は、採取後反応容器へ分注するまでの間、転倒混和する等の処理を施すことによって血球成分の沈降を回避している。
【０００３】
【特許文献１】特開２０００−４６８４３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ところで、血球成分を含む検体（血液）を分析する自動分析装置は、検体を採取した採血管や、該採血管から血液を小分けした管からなる、いわゆる検体容器をラックに保持させ、これらのラックを搬送しながら検体を順次分析してゆく。このため、血球成分を含む検体は、ラックに保持してから分注位置へ搬送されて反応容器に分注されるまでに血球成分が沈降し、鉛直方向に濃度勾配が発生する。この結果、自動分析装置は、検体容器を保持したラックをセットした後、分注ノズルが検体を分注するまでの時間が異なると、検体を分注する位置が固定されているため、同一の検体であっても、血球成分の沈降に起因した前記濃度勾配のために血球成分の濃度を正確に測定することができなくなるという問題点があった。この場合、検体容器を振動させて血球成分の沈降を抑制することも考えられるが、自動分析装置は、振動装置を設けると装置の複雑化と大型化を招来して好ましくない。
【０００５】
本発明は、上記に鑑みてなされたものであって、分注までの時間が異なっても血球成分の濃度を正確に測定することが可能な自動分析装置およびその検体分注方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために、請求項１にかかる自動分析装置は、検体容器内に収容された血球成分を含む検体を分注装置によって所定量分注し、試薬と反応させて分析する自動分析装置において、前記血球成分の経時的な濃度変化を記憶する記憶手段と、前記検体を当該自動分析装置に装着した後の経過時間を計時する計時手段と、前記計時手段が計時した経過時間をもとに、前記分注装置による分注の際の前記検体の鉛直方向における吸引位置を制御する位置制御手段と、を備えたことを特徴とする。
【０００７】
また、請求項２にかかる自動分析装置は、上記の発明において、さらに、前記血球成分の経時的な濃度変化を予め記憶する記憶手段を備え、前記位置制御手段は、前記計時手段が計時した経過時間と、前記記憶手段が記憶した経時的な濃度変化とをもとに、前記吸引位置を制御することを特徴とする。
【０００８】
また、請求項３にかかる自動分析装置は、上記の発明において、前記検体の当該自動分析装置への装着を検出し、前記計時手段へ出力する第一の検出手段と、前記検体の前記分注装置による分注位置への移動を検出し、前記計時手段へ出力する第二の検出手段と、を備え、前記計時手段は、前記第一及び第二の検出手段から入力される情報をもとに前記経過時間を計時することを特徴とする。
【０００９】
また、上記目的を達成するために、請求項４にかかる自動分析装置の検体分注方法は、検体容器内に収容された血球成分を含む検体を分注装置によって所定量分注し、試薬と反応させて分析する自動分析装置の検体分注方法であって、前記血球成分の経時的な濃度変化を記憶する記憶工程と、前記検体を当該自動分析装置に装着した後の経過時間を計時する計時工程と、前記経過時間をもとに、前記分注装置による分注の際の前記検体の鉛直方向における吸引位置を制御する位置制御工程と、を含むことを特徴とする。
【００１０】
また、請求項５にかかる自動分析装置の検体分注方法は、上記の発明において、さらに、前記血球成分の経時的な濃度変化を予め記憶する記憶工程を含み、前記位置制御工程は、前記経過時間と前記経時的な濃度変化とをもとに、前記吸引位置を制御することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の自動分析装置は、計時手段が計時した経過時間をもとに、位置制御手段が、分注装置による分注の際の検体の鉛直方向における吸引位置を制御し、本発明の自動分析装置の分注方法は、位置制御工程において、経過時間をもとに、分注装置による分注の際の検体の鉛直方向における吸引位置を制御するので、分注までの時間が異なっても、血球成分の経時的な濃度変化に対応した所定の濃度の試料を分注し、血球成分の濃度を正確に測定することが可能な自動分析装置およびその検体分注方法を提供することできるという効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下に添付図面を参照して、本発明の自動分析装置およびその分注方法の好適な実施の形態を詳細に説明する。図１は、本発明の自動分析装置の概略構成図である。図２は、図１の自動分析装置で使用する検体分注装置の概略構成を示すブロック図である。
【００１３】
自動分析装置１は、血球成分を含む血液や尿等の検体を自動分析する装置であり、図１に示すように、試薬テーブル２，３、キュベットホイール４、検体容器移送機構８、分析光学系１１、洗浄機構１２、第一攪拌装置１３と第二攪拌装置１４、制御部１５及び検体分注装置２０を備えている。
【００１４】
試薬テーブル２，３は、図１に示すように、それぞれ第一試薬の試薬容器２ａと第二試薬の試薬容器３ａが周方向に複数配置され、駆動手段に回転されて試薬容器２ａ，３ａを周方向に搬送する。複数の試薬容器２ａ，３ａは、それぞれ検査項目に応じて血球成分を溶血させる前処理液を含む試薬が満たされ、外面には収容した試薬の種類，ロット及び有効期限等の情報を記録した情報記録媒体（図示せず）が付加されている。ここで、試薬テーブル２，３の外周には、試薬容器２ａ，３ａに付加した情報記録媒体に記録された試薬情報を読み取り、制御部１５へ出力する読取装置が設置されている。
【００１５】
キュベットホイール４は、図１に示すように、複数の反応容器５が周方向に沿って配列されており、試薬テーブル２，３を駆動する駆動手段とは異なる駆動手段によって矢印で示す方向に回転されて反応容器５を周方向に移動させる。キュベットホイール４は、光源１１ａと分光部１１ｂとの間に配置され、反応容器５を保持する保持部４ａと光源１１ａが出射した光束を分光部１１ｂへ導く円形の開口からなる光路４ｂとを有している。保持部４ａは、キュベットホイール４の外周に周方向に沿って所定間隔で配置され、保持部４ａの内周側に半径方向に延びる光路４ｂが形成されている。
【００１６】
反応容器５は、分析光学系１１から出射された分析光（３４０〜８００ｎｍ）に含まれる光の８０％以上を透過する光学的に透明な素材、例えば、耐熱ガラスを含むガラス，環状オレフィンやポリスチレン等によって四角筒状に成形されたキュベットと呼ばれる容器である。反応容器５は、近傍に設けた試薬分注装置６，７によって試薬テーブル２，３の試薬容器２ａ，３ａから試薬が分注される。ここで、試薬分注装置６，７は、それぞれ水平面内を回動すると共に、上下方向に昇降されるアーム６ａ，７ａに試薬を分注するノズル６ｂ，７ｂが設けられ、洗浄水によってノズル６ｂ，７ｂを洗浄する洗浄手段を有している。
【００１７】
検体容器移送機構８は、図１に示すように、配列された複数のラック９を矢印方向に沿って１つずつ歩進させながら移送する。ラック９は、検体を収容した複数の検体容器９ａを保持している。ここで、検体容器９ａは、収容した検体の情報を記録したバーコード等が貼付され、検体容器移送機構８によって移送されるラック９の歩進が停止するごとに、検体分注装置２０によって検体が各反応容器５へ分注される。
【００１８】
ここで、検体容器移送機構８には、図１に示すように、ラック９に保持して装着される検体容器９ａの自動分析装置１への装着と、検体分注装置２０への搬送をそれぞれ前記バーコード等から読み取り、制御部１５の計時部１５ａへ出力する第一および第二の検出手段としての読取装置１０Ａ，１０Ｂが設けられている。
【００１９】
分析光学系１１は、試薬と検体とが反応した反応容器５内の液体試料に分析光（３４０〜８００ｎｍ）を透過させて分析するための光学系であり、図１に示すように、光源１１ａ、分光部１１ｂ及び受光部１１ｃを有している。光源１１ａから出射された分析光は、反応容器５内の液体試料を透過し、分光部１１ｂと対向する位置に設けた受光部１１ｃによって受光される。受光部１１ｃは、制御部１５と接続されている。
【００２０】
洗浄機構１２は、ノズル１２ａによって反応容器５内の液体試料を吸引して排出した後、ノズル１２ａによって洗剤や洗浄水等の洗浄液等を繰り返し注入し、吸引することにより、分析光学系１１による分析が終了した反応容器５を洗浄する。
【００２１】
第一攪拌装置１３及び第二攪拌装置１４は、分注された検体と試薬とを攪拌棒１３ａ，１４ａによって攪拌し、反応させる。
【００２２】
制御部１５は、試薬テーブル２，３、試薬分注装置６，７、検体容器移送機構８、分析光学系１１、洗浄機構１２、攪拌装置１３，１４、入力部１６、表示部１７及び検体分注装置２０等と接続されてこれら各部の作動を制御し、マイクロコンピュータ等が使用される。制御部１５は、受光部１１ｃから入力される波長ごとの光量信号をもとに各反応容器５内の液体試料の波長ごとの吸光度を求め、検体の成分濃度等を分析する。また、制御部１５は、試薬容器２ａ，３ａに付加した情報記録媒体から読み取った情報に基づき、試薬のロットが異なる場合や有効期限外等の場合に分析作業を停止するように自動分析装置１を制御し、或いはオペレータに警報を発する。そして、制御部１５は、図２に示すように、計時部１５ａ、記憶部１５ｂ及び駆動機構制御部１５ｃを備えている。
【００２３】
計時部１５ａは、読取装置１０Ａ，１０Ｂから入力された情報から検体容器９ａが検体容器移送機構８に装着された後、検体分注装置２０へ搬送される迄の経過時間を計時し、検体容器９ａ毎の時間情報を記憶部１５ｂへ出力する。記憶部１５ｂは、血球成分の基準濃度Ｒ1の経時的な濃度変化（図４参照）を予め記憶すると共に、計時部１５ａから入力される時間情報と前記経時的な濃度変化とをもとに、検体容器９ａ毎に分注ノズル２０ｂによる検体の吸引位置を設定する。記憶部１５ｂは、このようにして設定した検体容器９ａ毎の検体の吸引位置に関する情報を駆動機構制御部１５ｃに出力する。この場合、図４に示す血球成分の基準濃度Ｒ1の経時的な濃度変化は、血球成分の測定対象毎に予め測定し、平均的なグラフとして記憶部１５ｂに入力しておく。駆動機構制御部１５ｃは、駆動機構２２によってアーム２０ａの昇降動作と回動動作を制御するが、記憶部１５ｂから入力される検体容器９ａ毎の検体の吸引位置に関する情報をもとにアーム２０ａの昇降動作を制御し、検体分注装置２０による検体を分注する際の分注ノズル２０ｂによる検体容器９ａに保持された検体の鉛直方向における吸引位置を制御する。
【００２４】
入力部１６は、制御部１５へ検査項目等を入力する操作を行う部分であり、例えば、キーボードやマウス等が使用される。表示部１７は、分析内容，分析結果或いは警報等を表示するもので、ディスプレイパネル等が使用される。
【００２５】
検体分注装置２０は、図２に示すように、駆動機構２２によって駆動されるアーム２０ａに検体を分注する分注ノズル２０ｂが設けられている。アーム２０ａは、駆動機構２２によって昇降駆動と回動駆動される支柱２１に支持されている。分注ノズル２０ｂは、液面検知部２４と接続された液面検知電極２３が取り付けられている。液面検知部２４は、液面検知電極２３が液面に触れて変化する電流により検体容器９ａに保持された検体Ｓの液面を電気的に検知する。
【００２６】
以上のように構成される自動分析装置１は、回転するキュベットホイール４によって周方向に沿って搬送されてくる複数の反応容器５に試薬分注装置６が試薬容器２ａから第一試薬を順次分注する。第一試薬が分注された反応容器５は、検体分注装置２０によってラック９に保持された複数の検体容器９ａから検体が順次分注される。検体が分注された反応容器５は、キュベットホイール４が停止する都度、第一攪拌装置１３によって攪拌されて第一試薬と検体が反応する。第一試薬と検体が攪拌された反応容器５は、試薬分注装置７によって試薬容器３ａから第二試薬が順次分注された後、キュベットホイール４の停止時に第二攪拌装置１４によって攪拌され、更なる反応が促進される。ここで、分析対象の検体によっては、必ずしも第一試薬と第二試薬の両方を分注せず、いずれか一方の場合もある。
【００２７】
次いで、キュベットホイール４が再び回転すると、キュベットホイール４は、反応容器５が光源１１ａに対して順次相対移動し、反応容器５が分析光学系１１を通過する。これにより、受光部１１ｃが制御部１５に光信号を出力する。制御部１５は、受光部１１ｃから入力される波長ごとの光量信号をもとに各反応容器５内の液体試料の波長ごとの吸光度を求め、検体の成分濃度等を分析する。このとき、制御部１５は、分析した検体の成分濃度等の分析結果を記憶し、分析結果を表示部１７に表示する。このようにして、分析が終了した反応容器５は、洗浄機構１２によって洗浄された後、再度検体の分析に使用される。
【００２８】
ここで、検体容器９ａに採取した検体（血液）は、時間経過に伴って血球成分が沈降してゆく。検体容器９ａに採取した検体Ｓの血球成分が沈降してゆく様子を図３に示す。検体Ｓは、血漿成分に対して血球成分の比重が大きいため、図３に示すように、採取時、血球成分が血漿中に均一に分布していても、時間経過に伴って血球成分が沈降し、検体Ｓの上層部は血球成分が薄く、検体Ｓの下層部は血球成分が濃くなってゆく。
【００２９】
図４は、反応容器におけるこのような血球成分の沈降に起因した血球成分の基準濃度Ｒ1（上限値Ｌu，下限値Ｌl）の時間変化を示す模式図である。検体（血液）は、図４に示すように、時間の経過に伴い血球成分が沈降する。このため、血球成分は、基準濃度Ｒ1より薄い濃度Ｒ0の領域が経時的に上層から下層に向かって拡大し、基準濃度Ｒ1より濃い濃度Ｒ2の領域は、下層から上層に拡大する。但し、検体Ｓは、経時的な沈降によって鉛直方向に血球成分の濃度勾配が生じても、上限値Ｌuと下限値Ｌlとの範囲内に基準濃度Ｒ1があれば、沈降の影響なく分注することができる。従って、自動分析装置１は、図４に示す血球成分の基準濃度Ｒ1の経時的な濃度変化を記憶部１５ｂに記憶させておけば、計時部１５ａで計時した経過時間と、予め記憶部１５ｂに記憶した血球成分の図４に示す経時的な濃度変化とをもとに、適切な深さに分注ノズル２０ｂを配置させて、常に基準濃度Ｒ1の検体Ｓを分注することができる。
【００３０】
このような血球成分の沈降と基準濃度との関係を前提として、自動分析装置１を使用し、被験者から採取した血液に含まれる血球成分のヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）を分析する際、制御部１５が駆動機構２２によってアーム２０ａの昇降動作を制御することにより、分注ノズル２０ｂによる検体の鉛直方向における吸引位置を制御する本発明の分注方法を以下に説明する。図５は、制御部１５の制御動作を示すフローチャートである。
【００３１】
先ず、制御部１５は、自動分析装置１のスイッチがオンされ、検体（血液）の分析モードに設定されると、分注ノズル２０ｂの先端を検体（血液）の液面から侵入させて分注する検体の吸引位置を初期設定する（ステップＳ１０１）。この場合、初期設定する検体の吸引位置は、検体容器移送機構８へラック９が装着された後、検体分注装置２０によって検体が分注されるまで平均的な時間をもとに、記憶部１５ｂが図４に示す経時的な濃度変化から設定する。
【００３２】
次に、検体容器移送機構８へラック９が装着されると、制御部１５は、検体容器９ａのバーコードを読み取った読取装置１０Ａから入力される情報によって計時部１５ａが検体容器９ａ毎の計時を開始する（ステップＳ１０２）。このとき、検体容器移送機構８へ装着されたラック９は、検体容器９ａのバーコードが読み取られた後、検体容器９ａを保持して検体分注装置２０側へ順次搬送される。
【００３３】
次いで、搬送されてくるラック９に保持された各検体容器９ａのバーコードを読み取った読取装置１０Ｂから入力される情報によって、制御部１５は、ラック９を介して各検体容器９ａが自動分析装置１に装着された後、読取装置１０Ｂによって読み取られるまでの経過時間を計時部１５ａによって計時する（ステップＳ１０３）。このとき、制御部１５は、検体分注装置２０が検体容器９ａの検体を反応容器５に分注する際の時刻を計時部１５ａによって計時することにより経過時間を計時してもよく、このように計時すると経過時間を一層精度よく計時することができる。
【００３４】
その後、制御部１５は、各検体容器９ａについて計時した経過時間から、記憶部１５ｂが図４に示す経時的な濃度変化をもとに分注ノズル２０ｂの先端を検体（血液）の液面から検体の吸引位置を読み出す（ステップＳ１０４）。このとき、読み出した検体の吸引位置が初期設定の位置と一致している場合、制御部１５は、この位置でに分注を実行させる。一方、記憶部１５ｂが読み出した検体の吸引位置が初期設定の位置と一致しない場合、制御部１５は、分注ノズル２０ｂの位置を修正する（ステップＳ１０５）。分注ノズル２０ｂの位置を修正する場合、初期設定した検体の吸引位置よりも上方に変更する場合と、初期設定した検体の吸引位置よりも下方に変更する場合とがある。
【００３５】
即ち、ラック９を介して検体容器９ａを検体容器移送機構８へ装着した後の経過時間が長い場合は、血球成分の沈降量が多いので、初期設定の位置では血球成分が基準濃度Ｒ1以下になっている。このため、制御部１５は、駆動機構部１５ｃによって分注ノズル２０ｂを記憶部１５ｂが読み出した検体の吸引位置まで下降させる。一方、経過時間が短い場合は、血球成分の沈降量が少ないので、初期設定の位置では血球成分が基準濃度Ｒ1以上になっている。このため、制御部１５は、駆動機構部１５ｃによって分注ノズル２０ｂを記憶部１５ｂが読み出した検体の吸引位置まで上昇させる。
【００３６】
そして、検体の吸引位置を修正した後、制御部１５は、修正した吸引位置で検体を分注し（ステップＳ１０６）、本発明の検体分注方法が終了する。
【００３７】
自動分析装置１の検体分注方法は、このように検体を検体容器移送機構８へ装着した後の経過時間をもとに、検体の鉛直方向における吸引位置を制御部１５によって制御する。このため、自動分析装置１は、検体を検体容器移送機構８へ装着した後の経過時間が異なっていても、血球成分の濃度勾配を考慮した基準濃度の検体を分注することができるので、血球成分の濃度を正確に測定することが可能になる。このため、自動分析装置１は、血球成分の測定精度が安定し、測定結果に対する信頼性を高めることができる。また、自動分析装置１は、血球成分の沈降が始まっていても、検体（血液）をオペレータが手作業で混和する必要がないので、多数の検体（血液）を連続的に分析することができる。
【００３８】
なお、分注ノズル２０ｂの位置を修正した新たな検体の吸引位置で検体の分注を行った場合、溶血試料の濃度Ｒが基準濃度Ｒ1を逸脱していたときには、制御部１５は、再度、上述の検体分注方法によって分注ノズル２０ｂの位置を修正して検体を分注し、溶血試料の濃度Ｒを改めて測定するようにしてもよい。
【００３９】
また、上述の実施の形態は、血球成分としてヘモグロビンＡ１ｃを測定する場合について説明したが、分注までの時間の相違に起因した沈降の影響を受ける血球成分の測定であれば、ヘモグロビンＡ１ｃ以外の測定にも適用可能であり、例えば、赤血球（ヘモグロビンＡ１ａ，Ａ１ｂを含む）、白血球或いは血小板の測定にも適用できる。
【００４０】
一方、本発明の自動分析装置は、試薬分注装置を２つ備えた場合について説明したが、試薬分注装置は１つであってもよい。また、本発明の自動分析装置は、自動分析装置１を１ユニットとして複数のユニットが組み合わされて構成されていてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】本発明の自動分析装置の概略構成図である。
【図２】図１の自動分析装置で使用する検体分注装置の概略構成を示すブロック図である。
【図３】検体容器に採取された検体（血液）に含まれる血球成分の沈降する様子を示す模式図である。
【図４】検体（血液）に含まれる血球成分の沈降に起因した基準濃度の時間変化を示す模式図である。
【図５】この発明の実施の形態にかかる分注動作の手順を示すフローチャートである。
【符号の説明】
【００４２】
１            自動分析装置
２，３        試薬テーブル
４            キュベットホイール
５            反応容器
６，７        試薬分注装置
８            検体容器移送機構
９            ラック
９ａ          検体容器
１０Ａ        読取装置
１０Ｂ        読取装置
１１          分析光学系
１２          洗浄機構
１３，１４    攪拌装置
１５          制御部
１５ａ        計時部
１５ｂ        記憶部
１５ｃ        駆動機構制御部
１６          入力部
１７          表示部
２０          検体分注装置
２１          支柱
２２          駆動機構
２３          液面検知電極
２４          液面検知部
【図１】
2007316013.tif 000003
【図２】
2007316013.tif 000004
【図３】
2007316013.tif 000005
【図４】
2007316013.tif 000006
【図５】
2007316013.tif 000007