(57)【要約】【課題】  遺伝的にヒスチジン脱炭酸酵素の機能が欠損し、肥満病態を呈しているノックアウト非ヒト哺乳動物を提供すること。【解決手段】  ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損し、かつ肥満病態を呈している、ノックアウト非ヒト哺乳動物。【選択図】    なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損し、かつ肥満病態を呈している、ノックアウト非ヒト哺乳動物。
【請求項２】
雌である、請求項１に記載のノックアウト非ヒト哺乳動物。
【請求項３】
非ヒト哺乳動物がマウスである、請求項１又は２に記載の非ヒト哺乳動物。
【請求項４】
野生型動物と比較して、体重が有意に増大し、腹腔内白色脂肪が有意に増大し、血中レプチン濃度が有意に増大し、血糖クリアランス能が有意に低下していることを特徴とする、請求項１から３の何れかに記載のノックアウト非ヒト哺乳動物。
【請求項５】
請求項１から４の何れかに記載のノックアウト非ヒト哺乳動物に候補物質を投与し、この動物の肥満を測定することを含む、当該候補物質の抗肥満活性を評価する方法。
【請求項６】
請求項１から４の何れかに記載のノックアウト非ヒト哺乳動物を用いる、肥満の発症機構を分析する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肥満モデル動物及びそれを用いた薬剤評価方法に関する。より詳細には、本発明は、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損している肥満モデル動物、及びそれを用いた抗肥満活性の評価方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満は、原発性肥満（単純性肥満）と二次性肥満（症候性肥満）とに分類される。原発性肥満の原因としては、エネルギーの過剰摂取（例えば、過食など）、エネルギーの利用不足（例えば、運動不足など）、及び放出熱量（基礎代謝）の低下などが挙げられる。臨床的に肥満と判定されるものの大部分は原発性肥満である。原発性肥満が発現し、その状態が持続すると、種々の健康障害を引き起こす原因となる。一方、二次性肥満は、何らかの基礎疾患が原因となって生じる肥満であり、例えば、内分泌性肥満、視床下部性肥満、遺伝性肥満、又は薬剤に基づく肥満などが挙げられる。
【０００３】
肥満は健康に対する危険因子であり、例えば、循環器系への負担増による疾患（高血圧症、冠状動脈疾患など）、代謝異常疾患（糖尿病、高トリグセリド血症など）、肝臓又は胆道系の異常（胆石症など）、呼吸機能の低下（低換気症候群など）、骨や関節系への過重による疾患（変形性関節疾患など）などの疾患の原因になったり、あるいは活動性の低下などの問題をもたらす。
【０００４】
一方、ヒスチジン脱炭酸酵素が欠損しているノックアウトマウスの作製と解析についてはこれまでに幾つかの報告がなされている（非特許文献１〜１０）。しかしながら、ヒスチジン脱炭酸酵素の欠損と肥満発症との関連についての報告はない。
【０００５】
【非特許文献１】Kazuharu Furutani他、The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, Vol.307, No.1, 331-338, 2003
【非特許文献２】Satoshi Tanaka他、Gastroenterology 2002:122:145-155
【非特許文献３】Hiroshi Ohtsu他、FEBS Letters 502(2001) 53-56
【非特許文献４】Takayuki Masaki他、DIABETES, Vol.50, 376, February 2001
【非特許文献５】Kazuhiro Takahashi他、The Journal of Clinical Investigation, Vol.110, Number 12, 1791, 2002
【非特許文献６】Andras K. Fulopo他、Endoorinology 144(10): 4306-4314, 2003
【非特許文献７】Ajoy Kumar Ghosh他、J.Exp.Med., Vol.195, No.8, 973-982, 2002
【非特許文献８】L.A.Fitzpatrick他、PNAS, Vol.100, No.10, 6027-6032, 2003
【非特許文献９】Carlos P.Fitzsimons他、FEBS Letters 508 (2001) 245-248
【非特許文献１０】Regis Parmentier他、The Journal of Neuroscienca 2002, 22(17):7695-7711
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ヒスタミン神経系は満腹中枢の視床下部腹内側核や室傍核に密に存在すること、種々のヒスタミン受容体の局在部位が一致していること、これらの受容体はエネルギー消費の調節系に関与することなどの報告から、肥満発症におけるヒスタミンの役割の解析が望まれている。しかしながら、ヒスチジン脱炭酸酵素の活性の欠損が動物個体の肥満に対してどのように作用するのかについての研究を可能とするモデル動物系は確立されていない。また、そのようなモデル動物は、ヒスチジン脱炭酸酵素活性の欠損によって生じる肥満の予防又は治療のための薬剤の開発にも極めて有効であることが期待される。
【０００７】
本発明は、上記課題を解決することを鑑みてなされたものであり、遺伝的にヒスチジン脱炭酸酵素の機能が欠損し、肥満病態を呈しているノックアウト非ヒト哺乳動物を提供することを目的としている。さらに本発明は、このノックアウト非ヒト哺乳動物を用いて、抗肥満剤の有効性を評価する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
即ち、本発明によれば、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損し、かつ肥満病態を呈している、ノックアウト非ヒト哺乳動物が提供される。
【０００９】
好ましくは、本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物は雌である。
好ましくは、本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物はマウスである。
好ましくは、本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物は、野生型動物と比較して、体重が有意に増大し、腹腔内白色脂肪が有意に増大し、血中レプチン濃度が有意に増大し、血糖クリアランス能が有意に低下していることを特徴とする。
【００１０】
本発明の別の側面によれば、上記した本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物に候補物質を投与し、この動物の肥満を測定することを含む、当該候補物質の抗肥満活性を評価する方法が提供される。
【００１１】
本発明のさらに別の側面によれば、上記した本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物を用いる、肥満の発症機構を分析する方法が提供される。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損し、この酵素の機能の欠損によって肥満状態を呈するノックアウト非ヒト哺乳動物が提供される。このノックアウト非ヒト哺乳動物を用いることによって、肥満の予防または治療のための薬剤の有効成分を動物個体レベルで試験することが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。
本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物は、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損し、かつ肥満病態を呈していることを特徴とする。
本発明において、「遺伝子の機能が欠損した」とは、該遺伝子の遺伝子産物であるヒスチジン脱炭酸酵素が正常に産生されないことをいい、ヒスチジン脱炭酸酵素自体が産生されないこと及び一部を欠損するなどして機能を発現し得ないヒスチジン脱炭酸酵素様タンパク質を産生することが含まれる。
【００１４】
本発明によるヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損した動物を得るためには、これらの遺伝子をクローニングし、インビトロで該遺伝子の機能を欠損させた後に、該欠損遺伝子を動物に戻して染色体上のヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子との間で相同組換えを起こさせ、染色体上のヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子を破壊し、その動物自体又はその子孫の該遺伝子の機能を欠損させるという方法が一般的に用いられる。
【００１５】
遺伝子の機能を欠損させる方法としては、遺伝子に人為的に変異を加えて該遺伝子を破壊する方法が挙げられ、例えばプロモーター領域及び／又はコード領域の少なくとも一部の欠失や、他の遺伝子を挿入又は置換することが挙げられる。
【００１６】
本発明で言う非ヒト哺乳動物は、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損したものであればよく、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子がヘテロに欠損している動物及びホモに欠損している動物のいずれもが含まれる。また、使用される動物は特に限定されず、ヒトを除く全ての動物が挙げられ、好ましくはモルモット、ハムスター、マウス、ラット、ウサギ、ブタ等の哺乳動物であり、病態モデルとしての扱いが容易で且つ生物サイクルが比較的短い齧歯動物、特にマウスが好ましい。
【００１７】
ヒスチジン脱炭酸酵素をコードする遺伝子は公知であり、例えば、公知のマウスヒスチジン脱炭酸酵素のcＤＮＡ配列（FEBS Lett. 276:214-218, 1990）に基づいて合成されたオリゴヌクレオチドプローブを用いてマウスゲノムＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることにより得られる。また、このマウスヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子のｃＤＮＡの一部または両端に相当する合成オリゴヌクレオチドをプライマーとするＰＣＲ法によっても目的とするゲノムＤＮＡを得ることができる。
【００１８】
本発明では、ヒスチジン脱炭酸酵素の遺伝子の１以上のエクソンを含む領域が薬剤耐性遺伝子によって置換された変異遺伝子を保有するターゲティングベクターを用いることができる。このようなターゲティングベクターは、公知の方法（例えば、Science 244:1288-1292, 1989）に準じて作製することができる。例えば、ヒスチジン脱炭酸酵素の遺伝子の一部を薬剤耐性遺伝子（例えば、細胞毒Ｇ４１８に対するネオマイシン耐性遺伝子）に置換することにより、もしくは薬剤耐性遺伝子をヒスチジン脱炭酸酵素の遺伝子の一部に挿入することで、ヒスチジン脱炭酸酵素のゲノム遺伝子ＤＮＡと相同な配列を両端に有する変異遺伝子を保有する組換えプラスミドＤＮＡ、すなわちターゲティングベクターを作製することができる。なお、薬剤耐性遺伝子には、その発現を制御するためのＰＧＫ１プロモーター等の配列およびＰＧＫ１ポリアデニレーションシグナル等を連結することもできる。
【００１９】
なお、このようなターゲティングベクターには他の薬剤耐性遺伝子や、細胞選択用遺伝子（例えば、ジフテリア毒素Ａ遺伝子やヘルペスウイルスのサイミジンキナーゼ遺伝子）、プロモーター、エンハンサー等の配列を適宜に組み合わせて使用することができる。
【００２０】
動物に遺伝子を導入してその動物の個体又は子孫にその遺伝子を発現させる手法としては、従来からトランスジェニック動物の作成に常用されている公知の手法を挙げることができ、例えば遺伝子DNAを受精卵の前核期胚に注入する方法、組換えレトロウイルスを初期胚に感染させる方法、相同組換えを起こさせた胚性幹細胞(ES細胞)を胚盤胞又は８細胞期胚に注入する方法等によって得られた宿主胚を動物に移植して産仔を得、これを他の個体と交配し、F1ヘテロ変異動物、更にはF2ホモ又はヘミ変異動物を作成する方法が挙げられる。このうち、ES細胞を用いる遺伝子導入の方法は、相同組換えにより遺伝子を破壊（ノックアウト）するのに適しており、ES細胞に遺伝子を導入する工程とキメラ動物を作出する工程とを分けて行えるという利点を有しているので好ましい。ES細胞を用いる遺伝子導入の方法は、公知の方法に準じて行えばよい。
【００２１】
以下、ES細胞を用いた遺伝子の導入の方法について、マウスを例にして具体的に説明する。マウスのヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子機能の欠損には、プロモーター領域及び／又はコード領域の少なくとも一部を欠失させるか、いずれかの部位に他の遺伝子を挿入すればよい。また、これらの遺伝子の機能を欠損させることができる限り、欠失又は他の遺伝子を挿入する部位は、イントロンであってもよい。そして、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子との間で相同組換えを行うにあたり、このように遺伝子を破壊するように構築したDNA配列を有するDNA（ターゲティングベクター）を作製する。
【００２２】
挿入する遺伝子としては、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の欠損を検出するためのマーカー遺伝子として機能する遺伝子を用いることが好ましく、そのような遺伝子としては、ポジティブ選別に用いるマーカー遺伝子として、例えばネオマイシン(neo)耐性遺伝子が、ネガティブ選別に用いるマーカー遺伝子として、例えばチミジンキナーゼ(tk)遺伝子やジフテリアトキシンＡフラグメント(DT-A)遺伝子等が用いられる。尚、ネオマイシン耐性遺伝子は、ネオマイシン類似体であるG418を用いることにより目的遺伝子の選別を可能になる。
【００２３】
好ましい遺伝子ターゲティングとしては、ターゲティングベクターとして、ポジティブ選別マーカーが標的遺伝子の上に置換されている置換型ベクターを用いる方法と、標的遺伝子の上流に選別マーカーを含むベクターのバックボーンにあたる非相同領域を挿入することによって、その遺伝子の発現を抑制する挿入型ベクターを用いる方法などが挙げられる。尚、これらの遺伝子の挿入は、インビトロで常用のDNA組換え技術により行うことができる。
【００２４】
次に、こうして得られたターゲティングベクターと、ES細胞中のヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子との間で相同組換えを行う。相同組換え用DNAのES細胞への導入は、例えば常用のエレクトロポレーションにより行うことができる。この相同組換えにおいては、ES細胞中のヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子のDNAと相同組換え用DNAの対応する領域との間で組換えが生じ、相同組換え用DNA中に挿入されていたマーカー遺伝子がES細胞のゲノムのヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子に挿入される。この結果、ES細胞は、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能を欠損し、同時にマーカー遺伝子を含むことになる。このマーカー遺伝子の選別機能に基づいて、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能を欠損したES細胞を選別することができる。
【００２５】
次に、このES細胞をマウスの胚盤胞等の宿主胚に注入し、得られた胚を偽妊娠マウスの子宮角に移植してキメラマウスを得る。このキメラマウスを適当な系統のマウスと交配することによりF1ヘテロ型の産仔を得る。キメラマウスの生殖細胞が相同組換え体、すなわちヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子が破壊されているES細胞に由来していれば、ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の機能が欠損したマウスを得ることができる。また、得られたヘテロ欠損動物同士を交配させ、その産仔の中からホモ欠損動物を得ることができる。
【００２６】
ヒスチジン脱炭酸酵素遺伝子の欠損や、該遺伝子がヘテロ又はホモに欠損したものであるかは、離乳に至った後に尾からDNAを注出後、サザンブロット又はPCRを行って、確認することができる。
【００２７】
尚、本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物の飼育方法は、特別な方法を用いる必要はなく、正常な動物と同様な方法により飼育することができる。
【００２８】
こうして作製されるヒスチジン脱炭酸酵素の機能が欠損した動物、特にヒスチジン脱炭酸酵素ヘテロ欠損動物は次のような性質を有する。
【００２９】
（１）野生型と比較して、雌において、体重が有意に増加している。
（２）野生型と比較して、腹腔内白色脂肪及び血中レプチン濃度がともに有意に増加している。
（３）野生型と比較して、血糖クリアランス能が低下している。
（４）野生型と比較して、１日当たりの摂食量及び通常血糖値に有意差は認められない。
（５）組織学的観察により、グリコーゲンの蓄積と考えられる肝細胞の淡明化が認められ、また、腹腔内白色脂肪組織において脂肪蓄積に伴う個々の細胞の巨大化が認められる。
【００３０】
上記で作製した本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物は、以下の通り、抗肥満剤の候補物質の試験方法に用いることができる。
本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物に抗肥満剤の候補物質を投与し、この動物の肥満の程度（体重、脂肪組織重量、血液中の中性脂肪など）を測定することによって、候補物質の個体内における抗肥満剤としての活性を評価することができる。すなわち、本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物は、ヒスチジン脱炭酸酵素をほとんど、または半分程度しか発現せず、体重増加などの肥満病態を呈する。そこで、抗肥満剤の候補物質を投与して、動物の肥満状態を測定することによって、候補物質の個体内活性を試験することができる。抗肥満剤の候補物質としては任意の物質を使用することができる。候補物質の種類は特に限定されず、個々の低分子合成化合物でもよいし、天然物抽出物中に存在する化合物でもよく、あるいは化合物ライブラリー、ファージディスプレーライブラリーもしくはコンビナトリアルライブラリーでもよい。候補物質は、好ましくは低分子化合物であり、低分子化合物の化合物ライブラリーが好ましい。化合物ライブラリーの構築は当業者に公知であり、また市販の化合物ライブラリーを使用することもできる。さらに、本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物は、肥満の発症機構の解明にも利用することができる。
【００３１】
また上記の試験方法においては、本発明のノックアウト非ヒト哺乳動物のホモ接合型（−／−）およびヘテロ接合型（＋／−）を適宜に使い分けることによって、ヒスチジン脱炭酸酵素の産生量に依存した各種肥満症状と、それに対する候補物質の効果を詳細に分析することが可能である。
以下の実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例によって限定されるものではない。
【実施例】
【００３２】
実施例１（ノックアウトマウスの作製）
ノックアウトマウスの作製は、既報（Hiroshi Ohtsu他、FEBS Letters 502(2001) 53-56）の通り行った。具体的には以下の通りである。
【００３３】
マウスcDNAライブラリーよりラットHDCcDNAの配列の一部をプローブとして、マウスHDCcDNAを得る。さらに、このHDCcDNA断片をプローブとして、マウスのゲノムDNAライブラリー(129/P1ファージミッドライブラリー)をスクリーニングし、翻訳開始コドンを含む約24KbのゲノムDNAを得る。得られたDNA断片のエキソン、イントロン境界部およびHDC翻訳開始コドンを含む複数の領域の塩基配列を解析し、HDC遺伝子のゲノム構造を決定する。
【００３４】
エキソン6にHDC蛋白の補酵素であるピリドキサール燐酸結合配列が存在するため、イントロン5よりエキソン9領域をネオマイシン耐性遺伝子で置き換えたターゲティングベクターを構築した。詳しく述べると、このターゲティングベクターは、ネオマイシン耐性遺伝子カセットの両側に相同領域として２ヶ所のHDCゲノムDNA断片（イントロン4からイントロン5までの約2Kb断片とエキソン9からイントロン11までの約8Kb断片）をネオマイシン耐性遺伝子カセットのそれぞれ3'側および5'側に有し、さらに相同組み換えを起こしたES細胞のみを選択するため、ヘルペスウイルスのthymidine kinase遺伝子がターゲティングベクター内に組み込まれている。
【００３５】
直線化されたターゲティングベクターを、129/Sv ES細胞(R1 cell)に電気穿孔法にて導入し、G418およびガンシクロビルを添加した培地にて遺伝子導入されたES細胞を選別し、単離する。単離した約300クローンの内、6クローンについて各ゲノムDNAを抽出し、サザンブロット解析を行い、目的の3クローンを得た。
【００３６】
こうして得た変異遺伝子を持つES細胞をCD1マウス由来の胚盤胞と融合させ、仮親の子宮に移植し、個体を発生させる。発生した動物にターゲティングベクターが含まれている事を確認して、野生型CD1マウスと交配させ、誕生するマウスの遺伝子解析によって、ヘテロ接合体マウスを得た。ヘテロ接合体マウス同士を交配させ誕生したマウスの遺伝子解析を行うことによって、HDC遺伝子ノックアウトマウスを得た。
【００３７】
実施例２（ノックアウトマウスの肥満の測定）
（方法）
実施例１で得たノックアウトマウス（雌雄性HDC-KOマウス）及びその野生型マウスを用いて、肥満の分析を行った。室温２３℃、照明１３時間（７：００〜２０：００）、自由摂食（野生型マウスは普通食ＣＥ−２、HDC-KOマウスは低ヒスタミン食）・自由飲水のもとで繁殖・飼育し、所定の時期における体重を測定した。結果を図１に示す。
【００３８】
生後１月、６月及び９月の時点で、非絶食下における子宮・膀胱付近の白色脂肪組織を採取し、重量を測定した。また、生後１月、６月及び９月の時点で、１ケージ当たり５匹のマウスを用いて５日間１０時に１日当たりの摂食量を測定した。結果を図２に示す。
【００３９】
生後１月、６月及び９月の時点で、血糖値及び血中レプチン濃度を測定した。非絶食下、１１：３０〜１４：００に血糖値測定は尾静脈から、レプチン測定は眼底から採血した。血糖値はグルコカードダイアメーター（Arkray）を用いて測定した。血中レプチン濃度はELISA-Kit（森永）を用いて測定した。結果を図３に示す。
【００４０】
１８時間絶食後、グルコース２ｇ／ｋｇを腹腔内投与した。投与前、投与１５、３０、６０、９０、１２０分後に尾静脈から採血し、グルコカードダイアメーター（Arkray）を用いて測定した。結果を図４に示す。
【００４１】
雌性HDC-KOマウスと野生型マウスの外観、及び解剖の様子を図５に示す。また、雌性HDC-KOマウスと野生型マウスの脂肪組織の細胞を観察した。その結果を図６に示す。
【００４２】
（結果）
野生型群と比較して、雌において、HDC-KOマウス群の体重は３ヶ月以降において経時的かつ有意に増加した。一方、雄においては同様の変化は認められなかった。雌における体重増加の機序解析を行ったところ、腹腔内白色脂肪、血中レプチン濃度はともに、１ヶ月以降からHDC-KOマウス群において野生型群と比較して、有意に増加した。また、耐糖能試験の結果、HDC-KOマウス群は、野生型群と比べ、血糖クリアランス能が低いことが認められた。しかしながら、１日当たりの摂食量、通常血糖値は両群間に差は認められなかった。組織学的検討の結果、９ヶ月齢の雌性HDC-KOマウスにおいて、心臓、肺、肝臓、膵臓、腎臓、脾臓、卵巣、子宮、副腎、大腿骨、大腿骨四頭筋に異常は認められなかったが、グリコーゲンの蓄積と考えられる肝細胞の淡明化が認められた。また、腹腔内白色脂肪組織において、脂肪蓄積に伴う個々の細胞の巨大化が認められた。
【００４３】
以上の結果から、本発明のノックアウト（遺伝子欠損）マウスは、肥満発症の機構を解明するためのモデル動物として有用であり、抗肥満剤をスクリーニングする系としても有効であることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
上記の結果から、本発明の雌性HDC-KOマウスは摂食行動に異常があるのではなく、エネルギー消費の調節系の異常に基づくものであることが示唆された。ヒトにおいて、女性に脂肪が蓄積しやすく、特に更年期以降、肥満になりやすいことが一般的に知られている。現在、代表的な肥満制御因子であるインシュリンやレプチン、及びその受容体の遺伝子改変マウスなどを用いて、過食に基づき男女両方に生じる肥満症のメカニズムの解析が行われているが、上記の肥満制御因子だけでは、本発明のHDC-KOマウスに見られる現象を説明することはできず、他の因子を介したメカニズムの関与が考えられる。本発明の知見は、既知の肥満モデルとは異なり、自然に雌において肥満を呈することから、女性の肥満に類似したものであると考えられる。本発明の肥満モデル動物は、特に抗肥満剤の開発に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】図１は、雌性HDC-KOマウスにおける体重の経時的変化を示す。
【図２】図２は、雌性HDC-KOマウスにおける腹腔内白色脂肪及び摂食量の経時的変化を示す。
【図３】図３は、雌性HDC-KOマウス血糖値及び血中レプチン濃度の経時的変化を示す。
【図４】図４は、雌性HDC-KOマウスにおける血糖クリアランス能を示す。
【図５】図５は、雌性HDC-KOマウスにおける肥満症の発症を示す。
【図６】図６は、雌性HDC-KOマウスと野生型マウスの脂肪組織の細胞を観察した結果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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