(57)【要約】      （修正有）【課題】核酸抽出装置の、抽出カートリッジの加圧装置において、残留した加圧エアがエアノズルから勢い良く吹き出すことを防止する。【解決手段】エア供給ユニット３０Ａを、エアポンプ３１Ａ、チェックバルブ３２Ａ、及びエアノズル１５Ａから構成する。エアノズル１５Ａに抵抗用フィルタ９３を設ける。抽出カートリッジ２のフィルタが目詰まりしたときにはエアノズル１５Ａを一旦退避させなければならないが、このときに、チェックバルブ３２Ａの管路９１などに残留している加圧エアは抵抗用フィルタ９３を通り、加圧エアは流速が抑えられる。【選択図】図１１
2007252338.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
注入口から注入された液に含まれる特定物質をフィルタ部材に付着させる抽出カートリッジに加圧エアを供給する抽出カートリッジの加圧装置において、
前記抽出カートリッジの注入口に密着して加圧エアを供給するエアノズルと、
前記エアノズルが前記抽出カートリッジの注入口に密着する密着状態及び前記抽出カートリッジの注入口から離れる退避状態をとるように、前記エアノズルと前記抽出カートリッジとを相対的に変位させる変位手段と、
加圧エアを発生させるエアポンプと、
このエアポンプの加圧エアを前記エアノズルに送り込むエア流路と、
前記エア流路に設けられ加圧エアの流速を抑えるためのエア流路抵抗手段とを備えることを特徴とする抽出カートリッジの加圧装置。
【請求項２】
前記変位手段は、前記エアノズルを保持する加圧ヘッドと、
前記エアノズルが前記密着状態になるエア供給位置、及び前記エアノズルが前記退避状態になる退避位置の間で、前記加圧ヘッドを変位させるヘッド変位機構とを有することを特徴とする請求項１記載の抽出カートリッジの加圧装置。
【請求項３】
前記ヘッド変位機構は、前記加圧ヘッドを前記エア供給位置または前記退避位置に選択的に位置させるカムと、このカムを回動させる操作部とを有することを特徴とする請求項２記載の抽出カートリッジの加圧装置。
【請求項４】
前記エア流路抵抗手段は、前記エアノズルのエア流路に設けることを特徴とする請求項１ないし３いずれか１項記載の抽出カートリッジの加圧装置。
【請求項５】
前記エア流路抵抗手段は、抵抗用フィルタ部材であることを特徴とする請求項１ないし４いずれか１項記載の抽出カートリッジの加圧装置。
【請求項６】
前記抵抗用フィルタは、バイオフィルタであって、多数の微小な孔を有することを特徴とする請求項５記載の抽出カートリッジの加圧装置。
【請求項７】
前記特定物質が含まれる液は、核酸が含まれる試料液であることを特徴とする請求項１ないし６いずれか１項記載の抽出カートリッジの加圧装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フィルタ部材を有する抽出カートリッジに特定物質を含む液を注入し、加圧エアにより特定物質をフィルタ部材に付着させる抽出カートリッジの加圧装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
核酸を抽出する核酸抽出法としては、磁気ビーズを用いたもの、フィルタを用いたものなどが知られている。フィルタを用いた核酸抽出法は、磁気ビーズを用いた核酸抽出法に比べて、高純度、高収量で核酸を抽出することができるという利点を有している。
【０００３】
フィルタを用いた核酸抽出法は、核酸を含む試料液を注入してフィルタを通過させて核酸をフィルタに吸着させた後、回収液を注入してフィルタを通過させることで核酸とフィルタとを分離し、回収液とともに核酸を回収するものである。液に圧力をかけてフィルタを通過させる方式としては、遠心機を用いる方式、減圧を利用する方式、加圧を利用する方式などが知られている。
【０００４】
遠心機を用いた方式では、装置が非常に大きくなるとともに装置の操作が複雑になるという問題が生じる。また、減圧を利用する方式では、最大でも１気圧の圧力をかけられるだけであり、抽出処理に時間がかかるという問題が生じる。一方、加圧を利用する方式では、装置が上記した遠心機を用いた装置ほどは大きくならない上、任意の大きさの圧力をかけられることから抽出処理を比較的短時間で済ませることができる。このため、本出願人は、加圧を利用して液に圧力をかけてフィルタを通過させる核酸抽出法を提案している。なお、本出願人は、フィルタとして、従来のガラス繊維フィルタに比べて極めて薄く形成されるとともに高い核酸吸着性と容易な脱着性を有する多孔質メンブレンフィルタを用いることを提案している。
【０００５】
特許文献１には抽出カートリッジの加圧装置（核酸抽出装置）が記載されている。加圧装置は、抽出カートリッジに密着し加圧エアを供給するエアノズルと、このエアノズルを保持する加圧ヘッドと、この加圧ヘッドを昇降移動させるヘッド移動手段とを有している。加圧ヘッドが下降するとエアノズルが抽出カートリッジに密着し、このエアノズルから供給される加圧エアによって試料液がフィルタを通過し、試料液中の核酸がフィルタに付着する。加圧ヘッドが上昇するとエアノズルが抽出カートリッジから離れる。
【特許文献１】特開２００５−３２８７３０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このような加圧装置による加圧抽出処理において、試料液がフィルタを通過するときにフィルタに目詰まりが生じることがあり、この目詰まりによって試料液がフィルタを通過できなくなる場合があった。目詰まりが生じた場合には、加圧ヘッドを一旦上昇させてエアノズルを退避させ、この後に再び加圧ヘッドを下降させてエアノズルを密着させて加圧エアを供給する作業が一般的に行われている。しかしながら、加圧ヘッドを一旦上昇させてエアノズルを退避させるときに、エアノズルよりも上流側のエア流路に残留した加圧エアが勢い良く吹き出し、この加圧エアが試料液の液面に吹き付けられ、試料液が飛び散ることがあった。試料液が飛び散ってエアノズルなどに付着すると、これがコンタミネーションの原因となる。
【０００７】
特に、本出願人は、加圧ヘッドが手動で移動する安価な抽出カートリッジの加圧装置を開発しており、この加圧ヘッドは移動速度が操作者に応じて様々である。加圧ヘッドの移動速度が速い場合には、抽出カートリッジ内の圧力が急激に低下することから、加圧エアはより勢い良く吹き出すこととなり、試料液が飛び散りやすくなる。
【０００８】
本発明は、上記事情を考慮してなされたものであり、加圧エアがエアノズルから勢い良く吹き出すことを防止した抽出カートリッジの加圧装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、注入口から注入された液に含まれる特定物質をフィルタ部材に付着させる抽出カートリッジに加圧エアを供給する抽出カートリッジの加圧装置に関し、前記抽出カートリッジの注入口に密着して加圧エアを供給するエアノズルと、前記エアノズルが前記抽出カートリッジの注入口に密着する密着状態及び前記抽出カートリッジの注入口から離れる退避状態をとるように、前記エアノズルと前記抽出カートリッジとを相対的に変位させる変位手段と、加圧エアを発生させるエアポンプと、このエアポンプの加圧エアを前記エアノズルに送り込むエア流路と、前記エア流路に設けられ加圧エアの流速を弱めるためのエア流路抵抗手段とを備えることを特徴とする。前記特定物質が含まれる液が、核酸が含まれる試料液である場合に本発明は好適に用いられる。
【００１０】
前記変位手段は、前記エアノズルを保持する加圧ヘッドと、前記エアノズルが前記密着状態になるエア供給位置、及び前記エアノズルが前記退避状態になる退避位置の間で、前記加圧ヘッドを変位させるヘッド変位機構とを有することが好ましい。前記ヘッド変位機構は、前記加圧ヘッドを前記エア供給位置または前記退避位置に選択的に位置させるカムと、このカムを回動させる操作部とを有することが好ましい。
【００１１】
前記エア流路抵抗手段は、前記エアノズルのエア流路に設けることが好ましい。エア流路抵抗手段をできるだけ下流に設けることにより、エア流路抵抗手段の効果が大きくなる。前記エア流路抵抗手段は、抵抗用フィルタ部材であることが好ましい。この抵抗用フィルタは、バイオフィルタであって、多数の微小な孔を有することが好ましい。孔の孔径は、０．２２μｍ以下であることが好ましい。孔径が０．２２μｍ以下であれば、加圧エアの流速を効果的に抑えることができる。前記エア流路抵抗手段は、オリフィスであってもよい。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の抽出カートリッジの加圧装置によれば、残留した加圧エアによって試料液が飛び散ることを防ぐことができる。このため、加圧ヘッドを手動で変位させても問題が生じることがない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の抽出カートリッジの加圧装置を説明する前に核酸抽出処理について説明する。核酸抽出処理は図１（Ａ）〜（Ｇ）に示す手順で行われる。まず図１(Ａ)に示すように、抽出カートリッジ２に核酸を含む試料液Ｓを注入する。次に(Ｂ)に示すように、廃液容器３上の抽出カートリッジ２に加圧エアを導入して加圧し、フィルタ２ａを通して試料液Ｓを通過させ、このフィルタ２ａに核酸を吸着させる。フィルタ２ａを通過した液状成分は廃液容器３に排出される。
【００１４】
次に、(Ｃ)に示すように、抽出カートリッジ２に洗浄液Ｗを注入する。次いで、(Ｄ)に示すように、抽出カートリッジ２に加圧エアを導入して加圧し、フィルタ２ａに核酸を保持したままその他の不純物の洗浄除去を行う。フィルタ２ａを通過した洗浄液Ｗは廃液容器３に排出される。洗浄液注入動作及び洗浄動作は複数回繰り返してもよい。
【００１５】
次に、(Ｅ)に示すように、抽出カートリッジ２の下方の廃液容器３を回収容器４に交換する。次いで、(Ｆ)に示すように、抽出カートリッジ２に回収液Ｒを注入する。最後に、（Ｇ）に示すように、抽出カートリッジ２に加圧エアを導入して加圧し、フィルタ２ａと核酸の結合力を弱め、吸着されている核酸を離脱させて、核酸を含む回収液Ｒを回収容器４に回収する。
【００１６】
抽出カートリッジ２のフィルタ２ａは、基本的には核酸が通過可能な多孔性であり、その表面は試料液Ｓ中の核酸を化学的結合力で吸着する特性を有し、洗浄液Ｗによる洗浄時にはその吸着を保持し、回収液Ｒによる回収時に核酸の吸着力を弱めて離すように構成されている。その一例の具体的構成は、特開２００３−１２８６９１号の核酸の分離精製方法に詳述されているように、例えば、フィルタ２ａは表面に水酸基を有する有機高分子で構成されている。表面に水酸基を有する有機高分子としては、アセチルセルロースの表面鹸化物が好ましい。アセチルセルロースとしては、モノアセチルセルロース、ジアセチルセルロース、トリアセチルセルロースのいずれでもよいが、特にはトリアセチルセルロースが好ましい。
【００１７】
「核酸を含む試料液Ｓ」は、細胞またはウイルスを含む試料に前処理を施した状態のものである。前処理とは、試料を溶解処理することにより核酸を液中に分散させた溶液に水溶性有機溶媒を添加する処理のことである。例えば診断分野においては、試料として採取された全血、血漿、血清、尿、便、精液、唾液等の体液、あるいは植物（またはその一部）、動物（またはその一部）など、あるいはそれらの溶解物およびホモジネートなどの生物材料から調製された溶液が対象となる。「溶解処理」は、細胞膜および核膜を溶解して核酸を可溶化する試薬（例えば、グアニジン塩、界面活性剤又はタンパク質分解酵素）を含む水溶液で処理するもので、例えば、対象となる試料が全血の場合、フィルタ２ａへの非特異吸着および目詰まりを防ぐために赤血球および各種タンパク質を分解、低分子化し、抽出の対象である核酸を可溶化させるために白血球および核膜の溶解を行う。「水溶性有機溶媒」としてはエタノール、イソプロパノールまたはプロパノールなどが挙げられ、中でもエタノールが好ましい。水溶性有機溶媒の濃度は好ましくは５〜９０重量％であり、さらに好ましくは１５〜５０重量％である。エタノールの添加濃度は、凝集物を生じない程度でできるだけ高くすることが特に好ましい。
【００１８】
「洗浄液Ｗ」は、核酸と一緒にフィルタ２ａに付着した試料液Ｓ中の不純物を洗い流す機能、つまり核酸の吸着をそのままにして不純物を離脱させる機能を有し、主剤と緩衝剤、および必要に応じて界面活性剤を含む水溶液からなる。主剤としてはメタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−イソプロパノール、ブタノール、アセトン等の約１０〜１００重量％（好ましくは１０〜９０重量％、さらに好ましくは３０〜８０重量％）の水溶液が挙げられる。
【００１９】
「回収液Ｒ」は、塩濃度が低いことが好ましく、特には０．５Ｍ以下の塩濃度の溶液、例えば、精製蒸留水、ＴＥバッファ等が使用される。
【００２０】
図２に示すように、加圧装置１０は、基台１１と、この基台１１に対して取り外し可能な載置トレイ（ラック挿入台）１２と、基台１１の両側面に取り付けられた側板１３と、この側板１３に設けられた軸１４を中心に揺動自在であって８個のエアノズル１５Ａ〜１５Ｈを保持する加圧ヘッド１６と、手動で操作されて加圧ヘッド１６を変位させるヘッド変位機構１７とから構成される。この加圧装置１０には、抽出カートリッジ２、廃液容器３、及び回収容器４を保持するラック１８が着脱自在である。以下では、ＸＹＺ座標系を用いて説明を行うが、Ｘ軸方向、Ｙ軸方向、Ｚ軸方向の替わりに、それぞれ前後方向、横方向、上下方向を用いて説明を行う場合もある。
【００２１】
以下では、まず、抽出カートリッジ２について説明する。図３に示すように、抽出カートリッジ２は、筒状本体２ｂと、この筒状本体２ｂの底部に保持されたフィルタ２ａと、筒状本体２ｂの下端中心部に細管ノズル状に突出形成された吐出部２ｃと、筒状本体２ｂの側部に設けられた２つの突部２ｄとから構成される。筒状本体２ｂの上面には各液の注入口２ｅが形成され、吐出部２ｃの下面には排出口２ｆが形成されている。
【００２２】
次に、ラック１８について説明する。図４に示すように、ラック１８は、抽出カートリッジ２を保持するカートリッジホルダ１９と、廃液容器３及び回収容器４を保持する容器ホルダ２０とから構成される。
【００２３】
カートリッジホルダ１９は、プレート材を接合した２分割構造であって、柱状に形成され、Ｙ軸方向に延びている。カートリッジホルダ１９の両端部には、Ｚ軸マイナス方向に延びる２本の支持脚２５が設けられている。カートリッジホルダ１９の上面には、抽出カートリッジ２を保持するカートリッジ保持孔１９ａが、Ｙ軸方向に並べて形成されている。カートリッジ保持孔１９ａは、Ｚ軸方向に延びており、所定ピッチで８つ形成されている。カートリッジ保持孔１９ａには溝１９ｂが形成されており、この溝１９ｂに抽出カートリッジ２の突部２ｄを係合させて、抽出カートリッジ２が挿入される。
【００２４】
カートリッジホルダ１９の内部には、図示しない係止プレートがＹ軸方向に移動自在に設けられている。抽出カートリッジ２をカートリッジ保持孔１９ａに挿入すると、突部２ｄが係止プレートに引っ掛かり、抽出カートリッジ２が保持される。カートリッジホルダ１９の前面に設けられたボタン２２を押圧すると係止プレートがスライド移動し、係止プレートに形成された溝が溝１９ｂに重なり合うことにより、抽出カートリッジ２の保持が解除され抽出カートリッジ２は落下する。手を汚さずに、使用後のカートリッジを廃棄することができる。また、抽出カートリッジ２を上方に取り出すことなく落下させて廃棄することから、抽出カートリッジ２の先端部がカートリッジホルダ１９に接触することがないため、カートリッジホルダ１９が汚れることがなくコンタミネーションを防止することができる。
【００２５】
容器ホルダ２０は、直方体状に形成されており、前面に取っ手２１が設けられている。容器ホルダ２０の上面前部には、廃液容器３を保持する廃液容器保持溝２０ａがＹ軸方向に並べて形成されている。また、容器ホルダ２０の上面後部には、回収容器４を保持する回収容器保持溝２０ｂがＹ軸方向に並べて形成されている。廃液容器保持溝２０ａ及び回収容器保持溝２０ｂは、それぞれ所定ピッチで８つ形成されている。容器ホルダ２０の前面には、廃液容器保持溝２０ａまで貫通するスリット２０ｃが形成されている。廃液容器３は透明な樹脂により形成されており、スリット２０ｃを通して廃液容器３を目視することにより、廃液容器３がその時点で収容している収容量を確認することができる。
【００２６】
容器ホルダ２０のＹ軸方向における側面前部には、カートリッジホルダ１９の支持脚２５が載置される載置溝２８が形成されており、側面後部には載置溝２９が形成されている。カートリッジホルダ１９は、支持脚２５を載置溝２８に載置する第１取付位置と、支持脚２５を載置溝２９に載置する第２取付位置とのいずれかに選択的に取り付けることができる。カートリッジホルダ１９を第１取付位置に取り付けたとき、抽出カートリッジ２の吐出部２ｃが廃液容器３に挿入され、一方、カートリッジホルダ１９を第２取付位置に取り付けたとき、抽出カートリッジ２の吐出部２ｃが回収容器４に挿入される。
【００２７】
図２に示すように、カートリッジホルダ１９が取り付けられたラック１８は、載置トレイ（ラック挿入台）１２に一旦載置した後に、Ｘ軸マイナス方向にスライド移動させることにより、加圧装置１０に装着する。載置トレイ１２の載置部のＹ軸方向の幅は、ラック１８のＹ軸方向の幅とほぼ同じサイズである。加圧装置１０にはＹ軸方向に延びる突き当てブロック２６が設けられている。ラック１８をＸ軸マイナス方向にスライド移動させると、ラック１８の突き当て面２７が突き当てブロック２６に突き当たり、ラック１８が位置決めされる。ラック１８は、保持する複数の抽出カートリッジ２がそれぞれエアノズル１５Ａ〜１５Ｈの直下に位置するところに位置決めされる。
【００２８】
ここで、ラック１８の突き当て面２７はカートリッジホルダ１９の後面であることから、カートリッジホルダ１９が上述した第１取付位置と第２取付位置のいずれに取り付けられている場合であっても、保持する複数の抽出カートリッジ２を、それぞれエアノズル１５Ａ〜１５Ｈの直下に位置させることができる。載置トレイ１２と突き当てブロック２６とによってラック保持部が構成されている。また、載置トレイ１２の上面には、「ＷＡＳＨ」と印されている。核酸回収動作時において、カートリッジホルダ１９を第２取付位置に取り付けずに、誤って第１取付位置に取り付けたままラック１８を加圧装置１０に装着したときに、「ＷＡＳＨ」の文字を露呈させることにより、操作者に間違った操作が行われていることを気づかせることができる。載置トレイ１２の上面には、文字の替わりに図柄等を印してもよい。
【００２９】
詳細は後述するが、軸１４は、加圧ヘッド１６の揺動中心となる回転軸として用いられるのに加え、加圧ヘッド１６のエアポンプを駆動するための駆動軸としても用いられている。軸１４は断面が正８角形である。軸１４は、原則としてモータ８２（図９参照）によって回転するが、軸１４に着脱自在に接続される手動式のハンドル（操作部材）２３によって回転させることも可能である。ハンドル２３は、軸１４に嵌合する嵌合溝２３ａを有している。なお、ハンドル２３は、ギア等を介して軸１４に接続してもよい。モータ８２及びハンドル２３が、軸１４を回転させる駆動源になる。
【００３０】
以下では、加圧ヘッド１６及びヘッド変位機構１７について説明する。加圧ヘッド１６は、図５に示す８機のエア供給ユニット３０Ａ〜３０Ｈを有している。エア供給ユニット３０Ａ〜３０Ｈは、軸１４に沿って並べられており、互いには固定されておらず、軸１４を介して連結している。エア供給ユニット３０Ａ〜３０Ｈは、それぞれ、エアポンプ３１Ａ〜３１Ｈと、これらのエアポンプ３１Ａ〜３１Ｈの前部に接続されたチェックバルブ３２Ａ〜３２Ｈと、これらのチェックバルブ３２Ａ〜３２Ｈの下部に接続されたエアノズル１５Ａ〜１５Ｈとから構成される。
【００３１】
図６に示すように、加圧ヘッド１６は、エア供給ユニット３０Ａ〜３０Ｈ（図５参照）と、これらのエア供給ユニット３０Ａ〜３０Ｈを保持するヘッド基部６６と、軸１４とから構成される。図示していないが、ヘッド基部６６は、軸受けを介して軸１４に支持されており、この軸１４を中心にして回転自在である。
【００３２】
ヘッド変位機構１７は、引っ張りバネ６２と、加圧装置１０の側板１３（図２参照）に設けられた回転軸６３と、この回転軸６３に固定されたカム６４と、この回転軸６３の両端部に固定された把持部（操作部）６５（図２参照）とから構成される。
【００３３】
引っ張りバネ６２の上端部６２ａは側板１３に取り付けられており、下端部６２ｂは加圧ヘッド１６のヘッド基部６６に取り付けられている。この引っ張りバネ６２により、加圧ヘッド１６は軸１４を中心にして図６中時計回りに付勢され、カム６４に押し付けられる。
【００３４】
図２に示す把持部６５は操作者に把持され操作される部位であり、把持部６５を操作することにより、回転軸６３を介してカム６４が回転する。図６に示すように、カム６４は、第１接触面６４ａ及び第２接触面６４ｂを有する。カム６４は、第１接触面６４ａがヘッド基部６６の上面６６ａに接触する図中実線で示す第１位置と、第２接触面６４ｂが上面６６ａに接触する図中二点鎖線で示す第２位置との間で回動する。カム６４が第１位置にあるときの加圧ヘッド１６の位置を退避位置と称し、カム６４が第２位置にあるときの加圧ヘッド１６の位置をエア供給位置と称する。カム６４の回転によって、加圧ヘッド１６は軸１４を中心として揺動する。加圧ヘッド１６がエア供給位置に移動すると、エアノズル１５Ａ〜１５Ｈが抽出カートリッジ２に密着する密着状態となり、加圧ヘッド１６が退避位置に移動すると、エアノズル１５Ａ〜１５Ｈが抽出カートリッジ２から離れる退避状態となる。
【００３５】
以下では、エア供給ユニットの各部について詳細に説明する。エア供給ユニット３０Ａ〜３０Ｈの代表としてエア供給ユニット３０Ａを用いて説明するが、他のエア供給ユニット３０Ｂ〜３０Ｈも同様の構成である。ただし、後述するように、エアポンプ３１Ａ〜３１Ｈの位相はそれぞれ異なる。
【００３６】
エアポンプ３１Ａは、シリンダ３３と、このシリンダ３３内を摺動するピストン３４と、このピストン３４を保持するロッド３５と、このロッド３５を保持するロッド保持部３６と、軸１４に取り付けられた偏心カム３７とから構成される。
【００３７】
シリンダ３３の上部には吸気口３３ａが形成されており、この吸気口３３ａから新たなエアがシリンダ３３内に供給される。ピストン３４にはピストンパッキン３８が取り付けられている。ロッド保持部３６は、ＸＺ平面に沿う基板３６ａを有しており、この基板３６ａにはＸ軸方向に延びる開口であるガイド部３６ｂが形成されている。このガイド部３６ｂには、偏心カム３７の軸部３７ａが係合している。軸部３７ａは、偏心カム３７の端面からＹ軸方向に少しだけ突出しており、この突出した部位がガイド部３６ｂに係合している。軸部３７ａには、正８角形の貫通穴３７ｂが形成されている。また、基板３６ａには、Ｙ軸方向に延びる断面楕円の筒状部３６ｃが形成されており、この筒状部３６ｃの内面に偏心カム３７のカム面が接する。軸１４を介して偏心カム３７が回転すると、ピストン３４がＸ軸方向で往復運動する。エアポンプによって生成される加圧エアの圧力は特に限定されないが、好ましくは８０ｋＰａ〜２００ｋＰａの範囲内であり、さらに好ましくは１２０ｋＰａ〜１８０ｋＰａの範囲内である。
【００３８】
チェックバルブ３２Ａは、シリンダ３３の前面に取り付けられている。チェックバルブ３２Ａは、ボール３９と、このボール３９をシリンダ３３のエア流出口３３ｂに押し付けて塞ぐ圧縮バネ４０とを有している。ボール３９が接触する接触領域には、Ｏリングが取り付けられている。このチェックバルブ３２Ａによって、加圧エアの逆流を防ぐことができる。
【００３９】
チェックバルブ３２Ａの前部には、Ｚ軸プラス方向に突出する円柱状の第１突部４１と、Ｘ軸プラス方向に突出する角柱状の第２突部４２とが形成されている。ヘッド基部６６の上面には、Ｚ軸方向に貫通する第１ガイド孔４３が形成されており、この第１ガイド孔４３はＹ軸方向の幅が第１突部４１の径とほぼ同じでＸ方向の幅が第１突部４１の径よりも大きくなっている。また、ヘッド基部６６の前部に固定された前板４６には、Ｘ軸方向に貫通する第２ガイド孔４４が形成されており、この第２ガイド孔４４はＹ軸方向の幅が第２突部４２の幅とほぼ同じでＺ軸方向の幅が第２突部４２の幅よりも大きくなっている。
【００４０】
エア供給ユニット３０Ａをヘッド基部６６に組み付ける際には、第１突部４１を第１ガイド孔４３に挿入し、かつ第２突部４２を第２ガイド孔４４に挿入した状態にする。第１突部４１には、コイルバネ４５を巻き付け、このコイルバネ４５の上端部をヘッド基部６６の内面に固定し、コイルバネ４５の下端部をチェックバルブ３２Ａの上面に固定する。エア供給ユニット３０Ａは、ヘッド基部６６に対して前部が下方に付勢されるとともに、ヘッド基部６６に対して少しの移動が可能になる。
【００４１】
チェックバルブ３２Ａの下面にはエアノズル１５Ａが取り付けられている。エアノズル１５Ａは円筒状に形成されている。エアノズル１５Ａの外周面には、径方向に深さをもつように溝５０が形成されている。この溝５０にはＯリング５１が嵌め込まれている。溝５０は深くなるにしたがって溝幅（Ｚ軸方向における幅）が大きくなっている。これにより、加圧時にはＯリング５１に径の内方へ向かう力が働くため、Ｏリング５１の密閉性を高く保つことができる。エアノズル１５Ａの下端部は、この下端部の外径が抽出カートリッジ２の内径とほぼ同じになるように形成され、角部に面取りが施されている。
【００４２】
エアポンプ３１Ａによって生成される加圧エアは、順に、シリンダ３３内の空間８９、チェックバルブ３２Ａの空間９０、チェックバルブ３２Ａの管路９１、エアノズル１５Ａの管路９２を通って、エアノズル１５Ａのエア供給口から外部へ供給される。空間８９、空間９０、管路９１、管路９２によって、エア流路が構成されている。
【００４３】
エアノズル１５Ａの上面に溝を形成し、この溝に抵抗用フィルタ９３を嵌め込むことにより、エアノズル１５Ａの管路９２に抵抗用フィルタ９３を配置している。抵抗用フィルタ９３は、この抵抗用フィルタ９３よりも下流側で圧力が急激に下がったときに、抵抗用フィルタ９３よりも上流側に残留している加圧エアが急激な勢いでエアノズル１５Ａに送られるのを防止する。抵抗用フィルタ９３には多数の微小な孔が形成されている。この孔の孔径は０．２２μｍ以下であることが好ましい。抵抗用フィルタには、バイオフィルタやＰＴＦＥ（ポリテトラフルオロエチレン）製のフィルタを用いることが好ましいが、これらに限定されるものではない。
【００４４】
以下では、エアポンプの位相差（偏心カムの位相差）について説明する。エアポンプの位相の設定を行う場合には、エアポンプの位相を所定角度（本実施形態では「３６０度／エアポンプ数」の１倍に設定）刻みで分散させるとともに、列方向で隣り合うエアポンプ同士の位相差が所定角度の２以上の整数倍、つまり「３６０度／エアポンプ数」の２以上の整数倍になるようにして設定を行う。
【００４５】
図５に示す８機のエアポンプ３１Ａ〜３１Ｈにおいては、エアポンプの位相を４５度刻みで分散させるとともに、隣り合うエアポンプ同士の位相差が４５度の３倍、つまり１３５度になるようにして、各エアポンプの位相を設定する。図６に示すように、偏心カム３７の軸部３７ａを軸１４に嵌合させることにより偏心カム３７を組み付けることができるが、このときに各偏心カム３７のＹ軸回りでの姿勢を変えることにより、エアポンプ３１Ａ〜３１Ｈの位相を４５度刻みでずらすことができる。
【００４６】
図７に示すように、各エアポンプの位相を４５度刻みで分散させると、各エアポンプの位相は、それぞれ、０度、４５度、９０度、１３５度、１８０度、２２５度、２７０度、３１５度になる。エアポンプ３１Ａを基準の０度として、Ｙ軸プラス側に配置されたエアポンプの位相が１３５度ずつ進むように順に設定してゆく。以下では、「エアポンプ［位相］」という表現形式を用いて説明する。エアポンプ３１Ａ［０度］であるとき、エアポンプ３１Ｂ［１３５度］、エアポンプ３１Ｃ［２７０度］、エアポンプ３１Ｄ［４５度］、エアポンプ３１Ｅ［１８０度］、エアポンプ３１Ｆ［３１５度］、エアポンプ３１Ｇ［９０度］、エアポンプ３１Ｈ［２２５度］である。ここで、エアポンプの位相においては３６０度と０度とは同じ意であることから、算出の途中で３６０度（１周）を超えた場合には、算出した値から３６０度を差し引いて算出を継続する。図８は、エアポンプ３１Ｂの要部断面図であり、図中実線で示すエアポンプ３１Ｂの偏心カムは、図中２点鎖線で示すエアポンプ３１Ａの偏心カムに対して位相が１３５度進んでいる（図中反時計回りが正）。
【００４７】
エアポンプ３１Ａ〜３１Ｈの位相を上記のように設定することにより、セットされる抽出カートリッジ２が一部だけ（一般的に、抽出カートリッジ２はＹ軸マイナス側から順にセットされる）であっても、共通の軸１４を回転させるモータ８２にかかる負荷が時間的に分散される。例えば、Ｙ軸マイナス側から順に３個の抽出カートリッジ２がセットされている場合には、エアポンプ３１Ａ〜３１Ｃに負荷がかかり、一方、エアポンプ３１Ｄ〜３１Ｈにはほぼ負荷がかからない。しかし、このように連続した一部のエアポンプ３１Ａ〜３１Ｃだけに負荷がかかる場合であっても、負荷がかかるエアポンプ３１Ａ〜３１Ｃの位相は適当に分散されており（エアポンプ３１Ａを基準としたときに、エアポンプ３１Ｂは１３５度進み、エアポンプ３１Ｃは２７０度進んでいる）、モータ８２にかかる負荷は時間的に分散される。
【００４８】
図９は、加圧装置１０の電気的構成を示すブロック図であり、加圧装置１０にはシステム制御部８０が備えられている。システム制御部８０には、位置センサ（検出器）８１、モータ８２、及びタイマ８３が接続されており、システム制御部８０は各部を制御している。
【００４９】
位置センサ８１は、加圧ヘッド１６がエア供給位置にあるときにオン信号を、退避位置にあるときにオフ信号を出力する。位置センサ８１は例えばリミットスイッチであって、このリミットスイッチは、加圧ヘッド１６がエア供給位置に移動するのに伴って加圧ヘッド１６に接触してオン信号を出力する。システム制御部８０では、位置センサ８１の出力信号を監視しており、出力信号がオン信号に切り換わったときに、モータ８２の駆動を開始させるとともに、タイマ８３による計時を開始する。システム制御部８０では、タイマ８３による計時時間が設定時間を経過したときに、モータ８２の駆動を停止させる。この設定時間は加圧処理にかかる時間を考慮して設定される。なお、この設定時間は、抽出カートリッジ２に注入する液の種類や液量に基づいて、変更可能に構成しておくことが好ましい。
【００５０】
加圧装置１０には電源８４が接続されている。電源８４は、モータ８２及びシステム制御部８０に電力を供給している。電源８４には例えばＡＣアダプタを用いる。なお、電源は市販のバッテリでもよく、カーバッテリでもよい。
【００５１】
以下、上記構成による作用について、図１０のフローチャートの流れに沿って説明する。図２に示すように、複数の抽出カートリッジ２を保持したカートリッジホルダ１９を、複数の廃液容器３及び回収容器４を保持した容器ホルダ２０の第１取付位置に取り付ける。各抽出カートリッジ２の吐出部２ｃは各廃液容器３に挿入した状態になる。この後、各抽出カートリッジ２に、核酸を含んだ試料液Ｓを手動で注入する。
【００５２】
ラック１８を載置トレイ１２上に載置し、このラック１８をＸ軸マイナス方向にスライド移動させ、突き当て面２７が突き当てブロック２６に突き当たるところでラック１８を停止させることにより、ラック１８を加圧装置１０に装着することができる。加圧ヘッド１６は退避位置にあり、各抽出カートリッジ２は、それぞれエアノズル１５Ａ〜１５Ｈの直下に位置する。
【００５３】
把持部６５を把持して回転操作すると、この操作力が回転軸６３及びカム６４を介して加圧ヘッド１６に伝達され、図１１に示すように、加圧ヘッド１６がエア供給位置に移動する。エア供給ユニット３０Ａ〜３０Ｈは、個々に独立して軸１４回りに回転可能であるとともに、前部がコイルバネ４５によって下方に付勢されていることから、エアノズル１５Ａ〜１５Ｈは適度な力で抽出カートリッジ２にそれぞれ接触し抽出カートリッジ２を気密に塞ぐ。
【００５４】
加圧ヘッド１６がエア供給位置に移動すると、これを位置センサ８１が検出し、モータ８２が駆動を開始する。モータ８２が駆動すると、軸１４が回転し、エアポンプ３１Ａ〜３１Ｈが個々に駆動して加圧エアが生成される。生成された加圧エアは、それぞれ、チェックバルブ３２Ａ〜３２Ｈの空間９０及び管路９１を通り、抵抗用フィルタ９３を通り、エアノズル１５Ａ〜１５Ｈの管路９２を通って、対応する抽出カートリッジ２に同時に供給される。試料液Ｓはフィルタ２ａを通過し、フィルタ２ａに核酸が吸着される。その他の液状成分は廃液容器３に排出される。
【００５５】
モータ８２は設定時間を過ぎると駆動を停止し、エアポンプ３１Ａ〜３１Ｈによる加圧エアの供給は停止される。フィルタ２ａに目詰まりが生じて抽出カートリッジ２に試料液Ｓが残っている場合には、把持部６５を回転操作して加圧ヘッド１６を一旦退避位置に移動させてから、再び加圧ヘッド１６をエア供給位置に移動させて加圧エアの供給を行うことが必要である。
【００５６】
エア供給ユニット３０Ａに対応した抽出カートリッジ２に試料液Ｓが残っている場合を例に挙げて説明する。エアノズル１５Ａは抽出カートリッジ２に密着しており、加圧エアは、空間８９、空間９０、管路９１、管路９２、及び抽出カートリッジ２に残留している。加圧ヘッド１６が退避位置へ移動し始めると、エアノズル１５Ａが抽出カートリッジ２から離れ、管路９２及び抽出カートリッジ２に残留した加圧エアが外部に吹き出す。このとき、管路９２の圧力が急激に下がるため、空間８９、空間９０、及び管路９１に残留している加圧エアは管路９２に急激な勢いで流れ込もうとするが、抵抗用フィルタ９３を通るため、加圧エアは流速が抑えられる。このため、加圧エアが抽出カートリッジ２の試料液Ｓの液面に強い力で吹き付けることはなく、試料液Ｓは飛び散ることがない。加圧ヘッド１６を退避位置に移動した後に再びエア供給位置に移動させて、エアノズル１５Ａを試料液Ｓが残っている抽出カートリッジ２に密着させて加圧エアを供給する。
【００５７】
全ての抽出カートリッジ２から試料液Ｓが排出されたことが目視確認できた場合には、把持部６５を回転操作して加圧ヘッド１６を退避位置に移動させる。
【００５８】
次に、ラック１８を取り出して各抽出カートリッジ２に洗浄液Ｗを注入してから、このラック１８を加圧装置１０に装着する。洗浄液Ｗに対する加圧処理は、試料液Ｓに対する加圧処理と同様に行われる。フィルタ２ａを通過した洗浄液Ｗは、核酸以外の不純物と共に廃液容器３に排出される。
【００５９】
この後、ラック１８を取り出し、カートリッジホルダ１９を容器ホルダ２０の第２取付位置に取り付ける。各抽出カートリッジ２の吐出部２ｃは各回収容器４に挿入した状態になる。このラック１８を加圧装置１０に装着すると、各抽出カートリッジ２はそれぞれエアノズル１５Ａ〜１５Ｈの直下に位置する。回収液Ｒに対する加圧処理は、試料液Ｓに対する加圧処理と同様に行われる。回収液Ｒはフィルタ２ａを通過し、フィルタ２ａに吸着された核酸と共に、回収容器４に収容される。把持部６５を回転操作して加圧ヘッド１６を退避位置に移動させ、ラック１８を取り出して、全ての核酸抽出処理が完了する。
【００６０】
本加圧装置１０によれば、複数の抽出カートリッジ２に同時に処理を施すことができるから、短時間で加圧抽出処理を終えることができる。また、加圧装置１０の構成は非常に簡素であることから、加圧装置１０を安価に提供することができる。
【００６１】
上記実施形態では、加圧ヘッドが保持するエアノズルは８個でありエアポンプは８機であったが、これらの数は任意でよい。上記実施形態では、ピストン式エアポンプを用いて説明を行ったが、例えばベローズポンプなど、他のエアポンプを用いてもよい。
【００６２】
上記実施形態では、ラックの容器ホルダにスリットを設けることにより、廃液容器の収容量を確認できるようにしたが、この構成の替わりに、またはこの構成に加えて、加圧装置本体に装着したラックよりも後方に光源を配置し、この光源によって容器ホルダ及び廃液容器に照明を当ててもよい。この場合には、容器ホルダ及び廃液容器を透明な樹脂で形成する。
【００６３】
上記実施形態では、固定された抽出カートリッジに対してエアノズルが移動する構成であったが、固定されたエアノズルに対して抽出カートリッジが移動する構成にしてもよい。
【００６４】
上記実施形態では、洗浄液による洗浄処理を施しているが、フィルタ部材の透過能力によっては必ずしも必要とされるものではない。上記実施形態では、回収液を用いて回収動作を行っているが、例えば、フィルタ部材に特定物質を吸着させたまま分析を行う場合には、回収液は必ずしも必要ではない。
【００６５】
上記実施形態では、核酸を抽出するために用いる加圧装置について記載しているが、これに限定されるものではなく、種々の特定物質を抽出する場合にも本加圧装置を用いることができる。
【００６６】
上記実施形態では、エアノズルの管路に抵抗用フィルタを配したが、エアポンプのシリンダ内に抵抗用フィルタを配してもよい。例えば、図１２に示すように、エアポンプ３１Ａのエア流出口３３ｂを覆うようにして、抵抗用フィルタ１００を配する。また、チェックバルブの管路などに抵抗用フィルタを配してもよい。上記実施形態では、エア流路抵抗手段として抵抗用フィルタを用いたが、この替わりに、オリフィスを用いてもよい。
【００６７】
上記実施形態のエア流路抵抗手段の替わりに、またはこれに加えて、加圧ヘッドの移動速度を遅くするためのダンパを設けてもよい。図１３に示すように、下端部１０１ａが加圧ヘッド１６のヘッド基部６６に取り付けられ、上端部１０１ｂが側板１３（図２参照）に取り付けられたダンパ１０１を設ける。加圧ヘッド１６の移動速度が抑えられ、抽出カートリッジ２内の圧力は徐々に低下することから、加圧エアが勢い良く吹き出すことがなく、試料液が飛び散ることもない。また、このダンパに替えて、または加えて、ヘッド変位機構を構成するカムの形状を変えて、加圧ヘッドがエア供給位置から退避位置に変位するときに、その変位初期での変位量が小さくなるように構成してもよい。
【００６８】
上記実施形態のエア流路抵抗手段の替わりに、またはこれに加えて、加圧エアが勢い良く吹き出すことがないようにエアノズルの管路の形状を変えてもよい。図１４に示すように、エアノズル１０２の管路１０３は、エア供給口１０４に向かうにしたがって径が大きくなっている。これにより、加圧エアは流速が抑えられる。図１５に示すように、エアノズル１０５の先端部には突出部１０６が設けられており、この突出部１０６の側面にエア供給口１０７が形成されている。エアノズル１０５の管路１０８の下端部は試料液Ｓの液面に平行に延びている。これにより、加圧エアが試料液の液面に直接に吹き付けられることがなくなるとともに、加圧エアは流速が抑えられる。
【００６９】
上記実施形態で用いたエアノズルの替わりに、図１２に示すエアノズル３００を用いてもよい。エアノズル３００は、エアポンプ３１Ａの前面に取り付けられたノズル保持部３０１に着脱自在である。ノズル保持部３０１は、エアポンプ３１Ａが生成した加圧エアをエアノズル３００に送り込むエア流路３０１ａを有している。ノズル保持部３０１には、上記実施形態の第１突部４１及び第２突部４２に対応する第１突部３０２及び第２突部３０３が設けられている。
【００７０】
エアノズル３００は、ノズル本体３０４と、このノズル本体３０４の下面に取り付けられた接触部３０５とから構成される。ノズル本体３０４の上面の一部領域にはスペーサが設けられており、このスペーサ間を通って、ノズル本体３０４のエア流路３０４ａに加圧エアが流れ込む。接触部３０５にはエア流路３０５ａが形成されている。
【００７１】
エア流路３０４ａには、チェックバルブ３０６が配置されている。チェックバルブ３０６は、上記実施形態のチェックバルブ３２Ａの替わりに設けられるものであり、チェックバルブ３２Ａと同じ役割を果たす。チェックバルブ３０６はゴム製であり、着脱自在である。また、エア流路３０４ａとエア流路３０５ａにまたがって、抵抗用フィルタ３０７が配置されている。抵抗用フィルタ３０７には、多数の微小な孔が形成されており、この孔径は０．２２μｍ以下であることが好ましい。抵抗用フィルタ３０７には、バイオフィルタを用いることが好ましいが、加圧エアの流速を抑えることが可能であれば、ＰＴＦＥ（ポリテトラフルオロエチレン）製のものなど、他のフィルタを用いてもよい。抵抗用フィルタ３０７は、この抵抗用フィルタ３０７よりも下流側で圧力が急激に下がったときに、抵抗用フィルタ３０７よりも上流側に残留している加圧エアが急激な勢いでエアノズル３００から吹き出すことを防ぐ役割を果たし、抽出カートリッジ内の液が飛び散ることを防いでコンタミネーションを防ぐ。
【００７２】
接触部３０５は、略円筒状に形成されており、下面に溝３０５ｂが形成されている。この溝３０５ｂは、抽出カートリッジの上部が入り込むことができるサイズに形成されている。溝３０５ｂの奥には、抽出カートリッジの上面に接触するＯリング３０８が取り付けられている。
【００７３】
エアノズル３００には、ゴム製の滑り防止リング３０９が設けられている。エアノズル３００をノズル保持部３０１の保持溝３０１ｂに挿入すると、滑り防止リング３０９の働きにより、エアノズル３００がノズル保持部３０１に保持される。
【００７４】
ノズル本体３０４のエア流路３０４ａのチェックバルブ３０６よりも上流側の容積を変更することにより、加圧エアの圧力を変更することができる。容積を小さくすると加圧エアの圧力が高くなり、容積を大きくすると加圧エアの圧力が低くなる。エアノズル３００を他のものに交換するだけで、エアポンプ３１Ａを交換せずに、加圧エアの圧力を変更することが可能である。また、エアノズル３００が交換可能であることから、チェックバルブ３０６及び抵抗用フィルタ３０７を新しいものに交換する作業が簡単である。
【００７５】
なお、エアノズル３００を他のものに交換しなくても、エアノズル３００のノズル保持部３０１に対する位置を変更することにより、加圧エアの圧力を変更してもよい。この場合には、滑り防止リングに滑り防止効果の高いものを用いるか、もしくは、ノズル保持部３０１に対するエアノズル３００の位置を数段階に変更可能な構成にすることが好ましい。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
【図１】核酸抽出動作を順に示す説明図である。
【図２】加圧装置及びラックの外観斜視図である。
【図３】カートリッジの外観斜視図である。
【図４】ラックの分解斜視図である。
【図５】エア供給ユニットの外観斜視図である。
【図６】ＸＺ平面で切断したときの加圧ヘッドの断面図である。
【図７】エアポンプの位相差を説明する説明図である。
【図８】位相が１３５度進んでいるエアポンプの要部断面図である。
【図９】加圧装置の電気的構成を示すブロック図である。
【図１０】核酸抽出動作の流れを示すフローチャートである。
【図１１】エア供給位置に移動した加圧ヘッドの断面図である。
【図１２】抵抗用フィルタをエアポンプのシリンダ内に配置した実施形態を示すエア供給ユニットの要部断面図である。
【図１３】加圧ヘッドにダンパを取り付けた実施形態を示すヘッド変位機構の概略構成図である。
【図１４】エアノズルの管路の第１の変形例を示すエアノズルの断面図である。
【図１５】エアノズルの管路の第２の変形例を示すエアノズルの断面図である。
【図１６】チェックバルブ及び抵抗用フィルタを備えたエアノズルの断面図である。
【符号の説明】
【００７７】
Ｓ  試料液
Ｗ  洗浄液
Ｒ  回収液
２  カートリッジ
２ａ  フィルタ
１０  加圧装置
１４  軸
１５Ａ〜１５Ｈ、３００  エアノズル
１６  加圧ヘッド
１７  ヘッド変位機構
１８  ラック
１９  カートリッジホルダ
２０  容器ホルダ
３０Ａ〜３０Ｈ  エア供給ユニット
３１Ａ〜３１Ｈ  エアポンプ
３７  偏心カム
３７ｂ  嵌合部
９３、３０７  抵抗用フィルタ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
2007252338.tif 000015
【図１４】
2007252338.tif 000016
【図１５】
2007252338.tif 000017
【図１６】
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