(57)【要約】【課題】タンパク質の濃度が低い低濃度条件のタンパク質溶液を用いてタンパク質を結晶化することを可能にして、結晶化条件を探索・スクリーニングすることができるようにする。【解決手段】タンパク質溶液の液滴からタンパク質結晶を生成するタンパク質結晶生成方法において、前記タンパク質溶液の液滴の蒸気拡散速度を速めることで結晶核を形成する工程（Ａ）を含むことを特徴とするタンパク質結晶生成方法であり、タンパク質溶液の液滴に含まれる溶媒の吸着剤を用いることで、前記蒸気拡散速度を速めるようにしたものである。【選択図】図２
2007230841.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質溶液の液滴からタンパク質結晶を生成するタンパク質結晶生成方法において、
前記タンパク質溶液の液滴の蒸気拡散速度を速めることで結晶核を形成する工程（Ａ）を含む
ことを特徴とするタンパク質結晶生成方法。
【請求項２】
請求項１に記載のタンパク質結晶生成方法において、
タンパク質溶液の液滴に含まれる溶媒の吸着剤を用いることで、前記蒸気拡散速度を速める
ことを特徴とするタンパク質結晶生成方法。
【請求項３】
請求項１または２のいずれか１項に記載のタンパク質結晶生成方法において、
前記工程（Ａ）に次いで、前記工程（Ａ）と比較して蒸気拡散速度を遅くすることによりタンパク質結晶を成長させる工程（Ｂ）をさらに含む
ことを特徴とするタンパク質結晶生成方法。
【請求項４】
請求項１、２または３のいずれか１項に記載のタンパク質結晶生成方法において、
前記タンパク質溶液の液滴の蒸気拡散速度の制御が、前記タンパク質溶液の濃度に応じて行われる
ことを特徴とするタンパク質結晶生成方法。
【請求項５】
請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載のタンパク質結晶生成方法において、
前記タンパク質溶液の初期濃度が２ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌである
ことを特徴とするタンパク質結晶生成方法。
【請求項６】
タンパク質溶液の液滴からのタンパク質結晶の生成を促進するタンパク質結晶化促進装置において、
タンパク質溶液の液滴を配置するための第１の隔室と、
前記タンパク質溶液中の溶媒を吸着する溶媒吸着物質を配置するための第２の隔室と、
前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通する第１の通路と、
前記第１の通路を開閉して、前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通状態と非連通状態とを維持する第１のバルブと
を有し、
前記第１のバルブを制御して、前記第１の通路の開閉を制御する
ことを特徴とするタンパク質結晶化促進装置。
【請求項７】
請求項６に記載のタンパク質結晶化促進装置の制御方法であって、
前記第１のバルブを開いて前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通状態に維持し、前記第１の隔室内の前記液滴の蒸気拡散速度を速めることで結晶核を形成する工程（Ａ）により、結晶の核を生成し、その後前記第１のバルブを閉じて前記第１の隔室と前記第２の隔室との通気を限定し、前記工程（Ａ）と比較して蒸気拡散速度を遅くすることによりタンパク質結晶を成長させる工程（Ｂ）により前記核を中心に結晶成長を行わせてタンパク質結晶を生成する
ことを特徴とするタンパク質結晶化促進装置の制御方法。
【請求項８】
請求項６に記載のタンパク質結晶化促進装置において、さらに、
水を貯留するための第３の隔室と、
前記第１の隔室と前記第３の隔室とを連通する第２の通路と、
前記第２の通路を開閉して、前記第１の隔室と前記第３の隔室とを連通状態と非連通状態とを維持する第２のバルブと
を有し、
前記第２のバルブを制御して、前記第２の通路の開閉を制御する
ことを特徴とするタンパク質結晶化促進装置。
【請求項９】
請求項８に記載のタンパク質結晶化促進装置の制御方法であって、
前記第１のバルブを開いて前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通状態に維持し、前記第１の隔室内の前記液滴の蒸気拡散速度を速めることで結晶核を形成する工程（Ａ）により、結晶の核を生成し、その後前記第１のバルブを閉じて前記第１の隔室と前記第２の隔室との通気を限定するとともに前記第２のバルブを開いて前記第１の隔室と前記第３の隔室とを連通状態に維持し、前記工程（Ａ）と比較して蒸気拡散速度を遅くすることによりタンパク質結晶を成長させる工程（Ｂ）により前記核を中心に結晶成長を行わせてタンパク質結晶を生成する
ことを特徴とするタンパク質結晶化促進装置の制御方法。
【請求項１０】
請求項６または８のいずれか１項に記載のタンパク質結晶化促進装置において、
前記第１の隔室が、複数配置された
ことを特徴とするタンパク質結晶化促進装置。
【請求項１１】
請求項６または８のいずれか１項に記載のタンパク質結晶化促進装置において、
前記第１の隔室は、スライドガラス上に多数の液滴を滴下可能な密閉容器よりなる
ことを特徴とするタンパク質結晶化促進装置。
【請求項１２】
請求項６に記載のタンパク質結晶化促進装置と、
ラマン分光法による前記液滴中のタンパク質濃度観察結果に基づいて前記第１のバルブの開閉制御を行うバルブ開閉制御装置と
を有することを特徴とするタンパク質結晶化促進システム。
【請求項１３】
請求項８に記載のタンパク質結晶化促進装置と、
前記ラマン分光法による前記液滴中のタンパク質濃度観察結果に基づいて前記第１のバルブおよび前記第２のバルブの開閉制御を行うバルブ開閉制御装置と
を有することを特徴とするタンパク質結晶化促進システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質結晶生成方法、タンパク質結晶化促進装置ならびにタンパク質結晶化促進システムに関し、さらに詳細には、スクリーニングに用いて好適なタンパク質結晶生成方法、タンパク質結晶化促進装置ならびにタンパク質結晶化促進システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、ヒトを含む多くの生物種のＤＮＡ塩基配列の解読が急速に進み、これら大量のゲノム配列情報から抽出される膨大な数の遺伝子について、個々の遺伝子にコードされるタンパク質の立体構造を明らかにして、機能との関係を解明することが重要な課題となってきている。
【０００３】
こうしたタンパク質の立体構造を明らかにする構造ゲノム科学における構造解析の対象となるタンパク質は、ヒトの遺伝子に関して言えば約１０万種類ほどにおよび、その数は極めて多い。
【０００４】
ここで、タンパク質の立体構造は、千種類から数千種類の基本構造単位の組み合わせから形成されており、その組み合わせによって機能の多様性が実現されていると考えられている。このため、これら基本構造単位を全て解明することにより、タンパク質の構造と機能の関係を明らかにすることを目標とした体系的・網羅的な構造解析の研究が鋭意進められている。
【０００５】
一般に、体系的・網羅的な構造解析の研究を効率的に進めていくためには、その構造解析における各工程を高速化・自動化することが要求される。
【０００６】
特に、タンパク質は、変性、分解あるいは吸着などにより失活あるいは損失するものであるため、目的とするタンパク質試料を調製するに際しては、これらの損失を避けながら、できるだけ短時間に効率良く一連の操作を行うことが望ましいものであり、構造解析における各工程の高速化・自動化は火急の課題となっている。
【０００７】
ところで、タンパク質の構造解析の手法の一つとしてＸ線法が知られているが、このＸ線法においては、目的とするタンパク質を精製・濃縮した後に結晶化し、その結晶化したタンパク質を測定用試料として用いるため、タンパク質の結晶化を短時間かつ高効率で行うことが要求されていた。
【０００８】
さらに、Ｘ線法による構造解析の対象となるタンパク質は貴重であり少量しか取れないため、タンパク質がより低い濃度でしか含まれていない溶液からタンパク質を結晶化させる手法の開発が望まれていた。
【０００９】
従来、Ｘ線法による構造解析の測定用試料として用いることのできるタンパク質結晶を調製する際に用いるタンパク質の結晶化の手法としては、蒸気平衡拡散法の一種であるハンギングドロップ法が一般に広く用いられている。
【００１０】
タンパク質の結晶化のためにこのハンギングドロップ法を実施するに際しては、市販の結晶化プレート容器を用いるのが一般的である。
【００１１】
こうした市販の結晶化プレート容器を用いたハンギングドロップ法の操作手順について説明すると、まず、容器内に緩衝液、塩および沈殿剤からなるリザーバ溶液（結晶化溶液）を入れる。次に、タンパク質溶液とリザーバ溶液とを等分に混合した液滴をカバーガラス面上に滴下した後に、あるいは、タンパク質溶液とリザーバ溶液とを各々等分にカバーガラスに滴下した後に、当該カバーグラスを液滴がぶら下がる状態に引っ繰り返して当該液滴が付着したカバーガラス面を容器に対向させ、当該カバーガラスをグリースなどで容器に封じ固定する。
【００１２】
こうしたハンギングドロップ法によれば、外部から封じられたカバーグラスに付着した液滴は、蒸気平衡拡散により自然拡散して結晶成長過程を取り、これにより目的とするタンパク質が結晶成長して、Ｘ線法による構造解析の測定用試料として用いることのできるタンパク質結晶を得ることができる。
【００１３】
なお、Ｘ線法による構造解析の測定用試料として用いることのできるタンパク質結晶を得る際に、上記したハンギングドロップ法以外によく用いられている手法としては、例えば、シッティングドロップ法などが知られている。
【００１４】
ところが、このような従来のハンギングドロップ法やシッティングドロップ法などの蒸気平衡拡散法によれば、タンパク質をＸ線法による構造解析に適した結晶にまで成長させるには長時間を要するとともに、結晶化の効率が劣りその歩留まりは非常に低いという問題点があった。
【００１５】
即ち、ハンギングドロップ法やシッティングドロップ法は、リザーバ溶液の濃度や分子量などとタンパク質の特性とが最適になった条件（結晶化条件）下においてのみ構造解析に適した結晶が析出されるものであり、かつ、析出までに数十時間から数週間（結晶化までには、通常では１〜４週間程度を要するのが一般的である。）と時間がかかるものであった。
【００１６】
さらに、ハンギングドロップ法やシッティングドロップ法により新規なタンパク質の結晶を得る場合には、図１に示すプロセスフローの一例に示すように、上記したようなタンパク質の結晶化条件を見出すまでに、一つのタンパク質に対して、例えば、約１００種類以上のリザーバ溶液などをトライアンドエラーで組み合わせた条件出し、即ち、スクリーニングを行うので、より一層作業時間を要するとともに、多量のタンパク質のサンプルとリザーバ溶液とを要し無駄が多いものであった。
【００１７】
また、結晶化に到達しても、真のタンパク質結晶か塩等の析出結晶かは、顕微鏡による外観観察では判別することができないというのが現状であった。
【００１８】
つまり、従来のタンパク質の結晶化の手法によれば、一つの新しいタンパク質分子を結晶化させるには、緩衝液、塩、沈殿剤からなるリザーバ溶液の条件を様々に振って、トライアンドエラーで試験を行う必要があるのが現状であり、このため、結晶化条件のスクリーニングに多量のサンプルが必要となっているとともに、さらに、結晶化の成否判定には通常ｌ〜４週間程度を要し、時間効率もよくないという問題点があった。
【００１９】
従って、タンパク質濃度が低い低濃度条件のタンパク質溶液を用いても当該タンパク質を結晶化することを可能にして、結晶化条件を探索・スクリーニングすることができるようにする手法の開発と、さらにタンパク質の結晶化の状態を迅速に判定することを可能にする手法の開発とは、タンパク構造解析研究において極めて緊急かつ重要な技術課題であるということが認識されており、これらの手法の開発に対する極めて強い要望があった。
【００２０】
なお、高分子化合物結晶を簡単に製造することを可能にするとともに、高分子の結晶化条件を簡単にスクリーニングすることを可能にする手法として、例えば、特許文献１として提示する特開２００４−３０７３３５号公報に開示された高分子結晶成長容器が提案されている。
【００２１】
しかしながら、この特開２００４−３０７３３５号公報に開示された高分子結晶成長容器によれば、タンパク質溶液濃度に応じて蒸気拡散速度を可変できないため、タンパク質溶液がドライアップする恐れがあり、また、塩等の析出物が生じる恐れがあるという問題点があった。
【特許文献１】特開２００４−３０７３３５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
本発明は、従来の技術の有する上記したような種々の要望や問題点に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、タンパク質の濃度が低い低濃度条件のタンパク質溶液を用いてタンパク質を結晶化することを可能にして、タンパク質の濃度が低い低濃度条件のタンパク質溶液を用いても結晶化条件を探索・スクリーニングすることができるようにしたタンパク質結晶生成方法およびタンパク質結晶化促進装置を提供しようとするものである。
【００２３】
また、本発明の目的とするところは、タンパク質溶液の蒸気拡散速度を任意に制御することが可能なタンパク質結晶生成方法およびタンパク質結晶化促進装置を提供しようとするものである。
【００２４】
さらに、本発明の目的とするところは、タンパク質の結晶化の状態を迅速に判定することが可能なタンパク質結晶化促進システムを提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
上記目的を達成するために、本発明によるタンパク質結晶生成方法およびタンパク質結晶化促進装置は、従来の受動的な蒸気平衡拡散法に代えて、能動的にタンパク質溶液の蒸気拡散速度を制御して、タンパク質溶液の濃縮を行うようにしたものである。
【００２６】
即ち、本発明によるタンパク質結晶生成方法およびタンパク質結晶化促進装置は、タンパク質溶液中のタンパク質の濃度を上げるために、タンパク質溶液中の溶媒を吸着する物質たる溶媒吸着物質（例えば、シリカゲルなどの吸水剤のような吸湿性固体である。）を用いて水分子などの溶媒分子を蒸発させてタンパク質溶液の体積を小さくし濃縮するものであり、この濃縮の際に溶媒分子の単純な蒸発ではタンパク質溶液が乾いてドライアップしてしまい、この蒸発プロセスの中でタンパク質結晶以外のさまざまの固形物が析出してくる恐れがあるため、タンパク質溶液の蒸気拡散速度を任意に制御するようにしている。
【００２７】
また、本発明によるタンパク質結晶化促進システムは、結晶化途中の状態をも検出しながら該蒸気拡散速度を任意に制御するために、ラマン分光法によりリアルタイムでタンパク質の液滴の濃度を観察できるようにしたものである。また、タンパク質結晶化においては擬結晶が生成されることがあるが、当該ラマン分光法により、リアルタイムで液滴中の結晶様のものが、タンパク質の結晶か否か判定を行うことができる。
【００２８】
即ち、本発明のうち請求項１に記載の発明は、タンパク質溶液の液滴からタンパク質結晶を生成するタンパク質結晶生成方法において、前記タンパク質溶液の液滴の蒸気拡散速度を速めることで結晶核を形成する工程（Ａ）を含むことを特徴とするタンパク質結晶生成方法である。ここで、「速める」とは、タンパク質結晶生成方法である一般的な蒸気拡散平衡法が行われる際の蒸気拡散速度と比較して速度を速くすることを指す。なお、前記タンパク質溶液の初期濃度が２ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌの場合など、低濃度の場合には、前記タンパク質溶液の濃度がある程度上昇するまでは前記工程（Ａ）と比較して遅い速度で蒸気拡散させることが好ましい。    
また、本発明のうち請求項２に記載の発明は、請求項１に記載のタンパク質結晶生成方法において、タンパク質溶液の液滴に含まれる溶媒の吸着剤を用いることで、前記蒸気拡散速度を速めることを特徴とするタンパク質結晶生成方法である。
【００２９】
また、本発明のうち請求項３に記載の発明は、請求項１または２のいずれか１項に記載のタンパク質結晶生成方法において、前記工程（Ａ）に次いで、前記工程（Ａ）と比較して蒸気拡散速度を遅くすることによりタンパク質結晶を成長させる工程（Ｂ）をさらに含むことを特徴とするタンパク質結晶生成方法である。
【００３０】
また、本発明のうち請求項４に記載の発明は、請求項１、２または３のいずれか１項に記載のタンパク質結晶生成方法において、前記タンパク質溶液の液滴の蒸気拡散速度の制御が、前記タンパク質溶液の濃度に応じて行われることを特徴とするタンパク質結晶生成方法である。
【００３１】
また、本発明のうち請求項５に記載の発明は、請求項１、２、３または４のいずれか１項に記載のタンパク質結晶生成方法において、前記タンパク質溶液の初期濃度が２ｍｇ／ｍｌから１０ｍｇ／ｍｌであることを特徴とするタンパク質結晶生成方法である。
【００３２】
また、本発明のうち請求項６に記載の発明は、タンパク質溶液の液滴からのタンパク質結晶の生成を促進するタンパク質結晶化促進装置において、タンパク質溶液の液滴を配置するための第１の隔室と、前記タンパク質溶液中の溶媒を吸着する溶媒吸着物質を配置するための第２の隔室と、前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通する第１の通路と、前記第１の通路を開閉して、前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通状態と非連通状態とを維持する第１のバルブとを有し、前記第１のバルブを制御して、前記第１の通路の開閉を制御することを特徴とするタンパク質結晶化促進装置である。
【００３３】
また、本発明のうち請求項７に記載の発明は、請求項６に記載のタンパク質結晶化促進装置の制御方法であって、前記第１のバルブを開いて前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通状態に維持し、前記第１の隔室内の前記液滴の蒸気拡散速度を速めることで結晶核を形成する工程（Ａ）により、結晶の核を生成し、その後前記第１のバルブを閉じて前記第１の隔室と前記第２の隔室との通気を限定し、前記工程（Ａ）と比較して蒸気拡散速度を遅くすることによりタンパク質結晶を成長させる工程（Ｂ）により前記核を中心に結晶成長を行わせてタンパク質結晶を生成することを特徴とするタンパク質結晶化促進装置の制御方法である。ここで、上記「通気を限定し」には、非連通状態にさせることも含み、また、上記「蒸気拡散速度を遅くすること」には、蒸気拡散を止めることも含む。
【００３４】
また、本発明のうち請求項８に記載の発明は、請求項６に記載のタンパク質結晶化促進装置において、さらに、水を貯留するための第３の隔室と、前記第１の隔室と前記第３の隔室とを連通する第２の通路と、前記第２の通路を開閉して、前記第１の隔室と前記第３の隔室とを連通状態と非連通状態とを維持する第２のバルブとを有し、前記第２のバルブを制御して、前記第２の通路の開閉を制御することを特徴とするタンパク質結晶化促進装置である。
【００３５】
また、本発明のうち請求項９に記載の発明は、請求項８に記載のタンパク質結晶化促進装置の制御方法であって、前記第１のバルブを開いて前記第１の隔室と前記第２の隔室とを連通状態に維持し、前記第１の隔室内の前記液滴の蒸気拡散速度を速めることで結晶核を形成する工程（Ａ）により、結晶の核を生成し、その後前記第１のバルブを閉じて前記第１の隔室と前記第２の隔室との通気を限定するとともに前記第２のバルブを開いて前記第１の隔室と前記第３の隔室とを連通状態に維持し、前記工程（Ａ）と比較して蒸気拡散速度を遅くすることによりタンパク質結晶を成長させる工程（Ｂ）により前記核を中心に結晶成長を行わせてタンパク質結晶を生成することを特徴とするタンパク質結晶化促進装置の制御方法である。
【００３６】
また、本発明のうち請求項１０に記載の発明は、請求項６または８のいずれか１項に記載のタンパク質結晶化促進装置において、前記第１の隔室は、複数配置されたことを特徴とするタンパク質結晶化促進装置である。
【００３７】
また、本発明のうち請求項１１に記載の発明は、請求項６または８のいずれか１項に記載のタンパク質結晶化促進装置において、前記第１の隔室は、スライドガラス上に多数の液滴を滴下可能な密閉容器よりなることを特徴とするタンパク質結晶化促進装置である。
【００３８】
また、本発明のうち請求項１２に記載の発明は、請求項６に載のタンパク質結晶化促進装置と、ラマン分光法による前記液滴中のタンパク質濃度観察結果に基づいて前記第１のバルブの開閉制御を行うバルブ開閉制御装置とを有することを特徴とするタンパク質結晶化促進システムである。
【００３９】
また、本発明のうち請求項１３に記載の発明は、請求項８に記載のタンパク質結晶化促進装置と、前記ラマン分光法による前記液滴中のタンパク質濃度観察結果に基づいて前記第１のバルブおよび前記第２のバルブの開閉制御を行うバルブ開閉制御装置とを有することを特徴とするタンパク質結晶化促進システムである。
【発明の効果】
【００４０】
本発明は、以上説明したように構成されているので、タンパク質の濃度が低い低濃度条件のタンパク質溶液を用いた場合においてもタンパク質を結晶化することが可能になり、結晶化条件を探索・スクリーニングすることができるようになるという優れた効果を奏する。
【００４１】
また、本発明は、容器中のリザーバ溶液は不要であるので、タンパク質溶液と混合するリサーバ溶液のみがあればよく、リザーバ溶液量を格段に抑えることができるという優れた効果を奏する。
【００４２】
また、本発明は、以上説明したように構成されているので、タンパク質溶液の蒸気拡散速度を任意に制御することができるようになるという優れた効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４３】
以下、添付の図面を参照しながら、本発明によるタンパク質結晶生成方法、タンパク質結晶化促進装置ならびにタンパク質結晶化促進システムの実施の形態の一例を詳細に説明するものとする。
【００４４】
図２には、本発明によるタンパク質晶化促進装置の実施の形態の一部端面概念構成説明図が示されている。
【００４５】
このタンパク質結晶化促進装置１０は、内部空間により形成される第１隔室１２ａ内にタンパク質溶液の液滴１４を保持することができるようになされた第１容器１２と、内部空間により形成される第２隔室１６ａ内にタンパク質溶液中の溶媒を吸着する溶媒吸着物質１８を収容することができるようになされた第２容器１６と、第１隔室１２ａと第２隔室１６ａとを連通する通路２０ａを形成するチューブ２０と、チューブ２０により形成される通路２０ａを開閉して通路２０ａを連通状態と非連通状態とを維持することが可能なバルブ２２とを有して構成されている。
【００４６】
また、これら第１隔室１２ａと通路２０ａと第２隔室１６ａとは、外部に対して密封状態に維持されるようになされている。
【００４７】
ここで、第１容器１２は、上部が開口した凹形状を備えた本体部１２ｂと、本体部１２ｂの開口部に密閉される蓋部１２ｃとを有して構成されている。なお、こうした第１容器１２としては、例えば、タンパク質の結晶化条件をスクリーニングするために広く普及しているハンギングドロップ法等に用いる市販の結晶化プレート容器を利用することができる。
【００４８】
また、第２容器１６も第１容器１２と同様に、上部が開口した凹形状を備えた本体部１６ｂと、本体部１６ｂの開口部に密閉される蓋部１６ｃとを有して構成されている。なお、こうした第２容器１６としては、例えば、密閉性の優れた種々の容器を適宜に用いることができる。
【００４９】
以上の構成において、タンパク質結晶化促進装置１０によりタンパク質結晶を生成するには、第１容器１２の蓋部１２ｃの一方の面上にタンパク質溶液の液滴１４を滴下した後に、液滴１４がぶら下がる状態に蓋部１２ｃを引っ繰り返し、液滴１４が付着した蓋部１２ｃを本体部１２ｂの開口部にグリースなどで封じ固定する（図２を参照する。）。
【００５０】
一方、第２容器１６に関しては、蓋部１６ｃを取り外して本体部１６ｂ内に溶媒吸着物質１８（例えば、シリカゲルなどの吸水剤のような吸湿性固体である。）を配置してから、蓋部１６ｃを本体部１６ｂの開口部にグリースなどで封じ固定する（図２を参照する。）。
【００５１】
上記したように、第１容器１２に液滴１４を配置するとともに第２容器１６に溶媒吸着物質１８を配置した状態において、バルブ２２を操作してチューブ２０により形成される通路２０ａを開閉し、通路２０ａを連通状態と非連通状態とに適宜に維持すると、該溶器間に湿度勾配が形成されて溶媒吸着物質１８への液滴１４の溶媒の吸着が適宜に制御され、液滴１４の溶媒の蒸発を制御しながら濃縮することができる。
【００５２】
即ち、第１容器１２の第１隔室１２ａと第２容器１６の第２隔室１６ａとの間をバルブ２２で仕切るようにしたため、バルブ２２の開閉調整により蒸発速度、即ち、蒸気拡散速度を調整することができる。
【００５３】
ここで、バルブ２２の操作により通路２０ａを開放（通路２０ａは連通状態）して蒸気拡散速度を速めると、液滴１４の溶媒が急速に蒸発することになるが、この急速な蒸発（以下、「蒸発ショック」と適宜に称する。）が液滴１４における結晶化のトリガーとなって結晶の核が生成されることになり、当該核を中心に結晶成長が行われてタンパク質結晶が得られると推定される。
【００５４】
なお、蒸発ショックにより液滴１４に結晶の核が生成されたならば、バルブ２２の操作により通路２０ａを閉鎖（通路２０ａは非連通状態）して蒸気拡散速度を遅めることが好ましい。
【００５５】
次に、図３には、従来の自然蒸気拡散法としてハンギングドロップ法による結晶成長と本発明によるタンパク質結晶生成方法（以下、「本発明結晶化法」と適宜に称する。）の蒸発ショックにより結晶の核を生成するようにした結晶成長とについて、タンパク質溶液としてリゾチーム（Ｌｙｓｏｚｙｍｅ）溶液を用いて行った結晶成長の実験結果のグラフが示されている。図３に示すグラフにおいて、縦軸は１５５７ｃｍ−１のラマンシフトにおけるリゾチームのスペクトル強度（これは、リゾチーム濃度（ｍｇ／ｍｌ）を示す。）であり、横軸は時間である。
【００５６】
この本願発明者による実験は、実験１、実験２および実験３よりなり、その詳細は以下の通りである。
【００５７】
実験１：従来の自然蒸気拡散法としてのハンギングドロップ法により、緩衝液（ＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．５）、塩（０．８Ｍ）および沈殿剤からなるリザーバ溶液を用いて、リゾチームの濃度が５０ｍｇ／ｍｌのリゾチーム溶液からリゾチーム結晶を生成した。
【００５８】
実験２：本発明結晶化法により、リザーバ溶液を用いることなしに、溶媒吸着物質１８としてシリカゲルを用いて、蒸発ショックによりリゾチームの濃度が５０ｍｇ／ｍｌのリゾチーム溶液からリゾチーム結晶を生成した。
【００５９】
実験３：本発明結晶化法により、リザーバ溶液を用いることなしに、溶媒吸着物質１８としてシリカゲルを用いて、蒸発ショックによりリゾチームの濃度が２０ｍｇ／ｍｌのリゾチーム溶液からリゾチーム結晶を生成した。
【００６０】
この実験１からは、従来の自然蒸気拡散法であるハンギングドロップ法によれば、リゾチーム溶液中のリゾチーム濃度は過飽和濃度（リゾチームの過飽和濃度は、３１０ｍｇ／ｍｌ（Ａｌｂｅｒｔ  Ｍ．  Ｓｃｈｗａｒｔｚ，  ａｎｄ  Ｋｒｉｓ  Ａ．  Ｂｅｒｇｌｕｎｄ：Ｊ．Ｃｒｙｓｔ．Ｇｒｏｗｔｈ．２１０（２０００）７５３．）である。）に到達するまでゆっくりと高くなっていき、過飽和濃度に到達するとリゾチーム結晶の存在が確認され、その後はゆっくりと濃度が低くなっていってリゾチーム結晶が成長していくものと考察される。
【００６１】
一方、実験２および実験３からは、本発明結晶化法によれば、蒸発ショックによりリゾチーム溶液中のリゾチーム濃度が急速に高まっていき、過飽和濃度に到達する前にリゾチーム結晶の存在が確認され、その後さらにリゾチーム濃度が急速に高まっていくが、過飽和濃度に到達する前に急速にリゾチーム濃度が低くなっていってリゾチーム結晶が成長していくことが判明した。
【００６２】
こうした図３に示す実験結果から、本発明結晶化法が、ハンギングドロップ法よりも６倍速い速度で濃縮が起こっていることがわかる。
【００６３】
ここで、図４乃至図６には、リゾチーム溶液のリゾチーム濃度を１０ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、４０ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ、６０ｍｇ／ｍｌ、７０ｍｇ／ｍｌ、８０ｍｇ／ｍｌ、９０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌと変化させたときのラマンスペクトラムの実験結果が示されている。なお、図５は図４の領域Ａの拡大図であり、図６は図４の領域Ｂの拡大図である。これら図４乃至図６より、図３に示すデータの確度は明らかである。
【００６４】
図７は、従来の自然蒸気拡散法としてのハンギングドロップ法による結晶成長と本発明結晶化法である蒸発ショックにより結晶の核を生成するようにした結晶成長とについて、上記した本願発明者による実験結果から得られた液滴中のタンパク質濃度と処理時間との関係を示す特性曲線を表したグラフである。図７に示すグラフにおいて、縦軸はタンパク質溶液のタンパク質濃度であり、横軸は時間である。
【００６５】
図７のグラフに示すように、従来の自然蒸気拡散法であるハンギングドロップ法によれば、タンパク質溶液中のタンパク質濃度は過飽和濃度に到達するまでゆっくりと高くなっていき、過飽和濃度に到達すると結晶の存在が確認され、その後はゆっくりと濃度が低くなっていって結晶が成長していく。
【００６６】
一方、本発明結晶化法によれば、蒸発ショックによりタンパク質溶液中のタンパク質濃度が急速に高まっていき結晶の核が生成され、その後さらにタンパク質濃度が急速に高まっていくが、過飽和濃度に到達する前に急速に濃度が低くなっていって核を中心にして結晶が成長していく。
【００６７】
本願発明者の実験によれば、本発明結晶化法によって、タンパク質溶液から高速にタンパク質を結晶化することができ、しかもタンパク質濃度が低濃度（例えば、２ｍｇ／ｍｌ程度である。なお、従来のハンギングドロップ法においては、一般的に１４ｍｇ／ｍｌ程度より濃い。）のタンパク質溶液での結晶化を実現することができた。
【００６８】
例えば、本発明結晶化法によれば、リゾチーム濃度が２ｍｇ／ｍｌのリゾチーム溶液を用いてリゾチーム結晶を生成することができ、また、リゾチーム濃度が５０ｍｇ／ｍｌのリゾチーム溶液を用いた場合には、従来のハンギングドロップ法では１日以上要した結晶化時間を約５分と激減させることができた。
【００６９】
さらに、本願発明者の実験によれば、キシラナーゼ濃度が３６ｍｇ／ｍｌのキシラナーゼ溶液からキシラナーゼ結晶を析出することができた。
【００７０】
また、本発明結晶化法によれば、従来の自然蒸気拡散法では結晶成長しない塩濃度０．１Ｍでも結晶析出することができた。
【００７１】
なお、タンパク質結晶化促進装置１０の蓋部１２ｃには、結晶化のために同種の複数個の液滴１４や複数種の液滴１４を配置することが可能であるので、従来の自然蒸気拡散法のように１個の結晶化プレート容器に１個の液滴を配置する場合に比べると、極めて効率よくタンパク質結晶を生成することができる。
【００７２】
以上において説明したように、本発明によるタンパク質結晶化促進装置１０ならびにタンパク質結晶生成方法によれば、タンパク質濃度が低濃度のタンパク質溶液、例えば、タンパク質濃度が１ｍｇ／ｍｌのタンパク質溶液からタンパク質結晶を生成することができる。即ち、従来自然蒸気拡散法では結晶析出が不可能であったタンパク質濃度領域のタンパク質溶液を用いても、結晶を析出することができるようになった。
【００７３】
なお、本発明によるタンパク質結晶化促進装置１０ならびにタンパク質結晶生成方法に用いるタンパク質溶液としては、タンパク質濃度が２ｍｇ／ｍｌ以上のタンパク質溶液を用いることが好ましい。
【００７４】
また、本発明によるタンパク質結晶化促進装置１０ならびにタンパク質結晶生成方法によれば、従来の自然蒸気拡散法では結晶生成に長時間（例えば、１〜４週間程度である。）要していたが、極めて短時間（例えば、５分間程度である。）で結晶析出することが可能となる。
【００７５】
このため、本発明によるタンパク質結晶化促進装置１０ならびにタンパク質結晶生成方法を用いると、少量のサンプルで、ハイスループットのスクリーニングを行うことが可能になる。
【００７６】
さらに、本発明によるタンパク質結晶化促進装置１０ならびにタンパク質結晶生成方法においては、容器中のリザーバ溶液が不要であり、装置構成も簡潔であるため、結晶を生成するためのコストを低減することができる。
【００７７】
次に、図８を参照しながら、本発明によるタンパク質結晶化促進システムについて説明する。
【００７８】
このタンパク質結晶化判定システム１００は、上記した本発明によるタンパク質結晶化促進装置１０と、液滴１４を中心とする領域を観察する画像観察顕微鏡１０２ａを備えるとともにラマン分光法により結晶が真の結晶であるか否かを判断するラマン分光結晶化判断装置１０２と、ラマン分光結晶化判断装置１０２の画像観察顕微鏡１０２ａによる観察結果に基づいてバルブ２２の開閉制御を行うバルブ開閉制御装置１０４とを有して構成されている。
【００７９】
ここで、タンパク質結晶化促進装置１０は、第１容器１２として、例えば、透明材料により構成された従来のハンギングドロップ法に用いる結晶化プレート容器などを用いることができる。
【００８０】
次に、ラマン分光結晶化判断装置１０２は、時間経過とともに液滴１４における結晶化の過程を観察可能な画像観察顕微鏡１０２ａを設けており、かつ、ラマン分光法により液滴１４から生成された結晶が真の結晶であるか否かを判断する装置であって、例えば、「Ｐ．Ｒ．Ｃａｒｅｙ  ａｎｄ  Ｊ．Ｄｏｎｇ：Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ４３（２００４）８８８５」に開示された構成ならびに作用を備えたものである。
【００８１】
また、バルブ開閉制御装置１０４は、バルブ２２を開閉制御する制御手段を備えており、ラマン分光結晶化判断装置１０２の画像観察顕微鏡１０２ａによる観察結果に基づいて制御手段によりバルブ２２を開閉制御する。
【００８２】
以上の構成において、タンパク質結晶化判定システム１００によれば、ラマン分光結晶化判断装置１０２は、時間経過とともに液滴１４における結晶化の過程を画像観察顕微鏡１０２ａで観察しながら、結晶化の過程に合わせてバルブ開閉制御装置１０４を制御する信号を出力する。例えば、バルブ開閉制御装置１０４は、ラマン分光結晶化判断装置１０２から出力された信号に基づいて、バルブ２２の開放度を最初１００％、次に５０％、２５％、０％などと調整して結晶化過程を調整する。
【００８３】
そして、結晶析出後においては、ラマン分光結晶化判断装置１０２を用いて、ラマンスペクトラムにより真の結晶か擬結晶かを判別する。
【００８４】
従って、このタンパク質結晶化判定システム１００によれば、タンパク質溶液の液滴１４の結晶化の過程をインシチューモニタリングすることができ、しかも直ちに真のタンパク質結晶か擬結晶かを判別することが可能となり、つまりオンサイトで即時に結晶化の判定を行うことができるようになる。
【００８５】
なお、タンパク質結晶化判定システム１００の各構成要素は、具体的には以下のように構成することができる。
【００８６】
即ち、タンパク質結晶化促進装置１０に関しては、第１容器１２としては、例えば、結晶化プレート容器を用いることができ、また、第２容器１６としては、例えば、遠心チューブを用いることができ、また、チューブ２０としては、例えば、ゴムチューブを用いることができ、また、バルブ２２としては、開放度可視化のためニードルバルブやＰＣ制御の電磁ソレノイドバルブなどを利用することができる。
【００８７】
次に、図９には、本発明によるタンパク質結晶化促進装置の他の実施の形態の一部端面概念構成説明図が示されている。なお、図２に示すタンパク質結晶化促進装置１０と同一または相当する構成には、タンパク質結晶化促進装置１０と同一の符号を付して示すことにより、その詳細な構成ならびに作用の説明は省略する。
【００８８】
この図９に示すタンパク質結晶化促進装置２００は、上記したタンパク質結晶化判定システム１００のタンパク質結晶化促進装置１０に代えて用いることができるものでもあることは勿論であるが、内部空間により形成される第３隔室２０２ａ内に水２０４を収容することができるようになされた第３容器２０２と、第１隔室１２ａと第３隔室２０２ａとを連通する通路２０６ａを形成するチューブ２０６と、チューブ２０６により形成される通路２０６ａを開閉して通路２０６ａを連通状態と非連通状態とを維持することが可能なバルブ２０８とを有している点において、タンパク質結晶化促進装置１０とは異なる。
【００８９】
また、これら第１隔室１２ａと通路２０６ａと第３隔室２０２ａとは、外部に対して密封状態に維持されるようになされている。
【００９０】
ここで、第３容器２０２は、上部が開口した凹形状を備えた本体部２０２ｂと、本体部２０２ｂの開口部に密閉される蓋部２０２ｃとを有して構成されている。なお、こうした第３容器２０２としては、例えば、密閉性の優れた種々の容器を適宜に用いることができる。
【００９１】
以上の構成において、タンパク質結晶化促進装置２００によれば、第３容器２０２の第３隔室２０２ａに水を入れておくと、第１隔室１２ａにバルブ２０８を介して水を入れた第３容器２０２が連結されることになるため、バルブ２０８を開いてチューブ２０６の通路２０６ａを開放状態にして通路２０６ａを連通状態とすると、第１隔室１２ａ内の湿度を上げることができる。
【００９２】
従って、バルブ２２とバルブ２０８との開閉操作を適宜に行うことにより、第１隔室１２ａにおける蒸気拡散速度をより精密に制御することが可能になり、より良質な結晶をより短時間で生成することが可能になる。
【００９３】
なお、タンパク質結晶化促進装置２００をタンパク質結晶化判定システム１００に用いた場合には、バルブ開閉制御装置１０４によって、バルブ２０６と同様にバルブ２２の開閉を制御するようにしてもよい。
【００９４】
また、収容した水の量が異なる複数の第３隔室２０２ａと当該複数の第３隔室２０２ａにそれぞれ対応するバルブ２０８を設けておき、バルブ２０８の開閉制御により、第１隔室１２ａをこれら複数の第３隔室２０２ａのいずれかと導通するようにしてもよい。
【００９５】
ここで、タンパク質結晶化促進装置２００を用いた本願発明者の実験結果について説明する。
【００９６】
なお、この実験においては、蒸気拡散速度の調整のため、水を入れてない第３隔室２０２ａと、水を１００μｌ入れた第３隔室２０２ａと、水を２００μｌ入れた第３隔室２０２ａと、水を５００μｌ入れた第３隔室２０２ａとを、それぞれに対応するバルブ２０８を介して第１隔室１２ａにそれぞれ接続し、これら４つの第３隔室２０２ａを第１隔室１２ａに選択的に導通可能に構成した。なお、いずれかの第３隔室２０２ａと第１隔室１２ａとを導通させた場合には、第１隔室１２ａと導通する第３隔室２０２ａに対応するバルブ２０８は全開の状態を維持し、その他の３つの第３隔室２０２ａに対応するバルブ２０８は全閉の状態を維持した。
【００９７】
本実験においては、タンパク質溶液としてリゾチーム濃度が２ｍｇ／ｍｌのリゾチーム溶液と、緩衝溶液（ＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ）、塩（０．８Ｍ）を用いた。
【００９８】
そして、この実験においては、第３隔室２０２ａをそれぞれ取り替えて本発明結晶化法によりリゾチーム結晶を生成する実験を行ったが、いずれの場合にも最初はバルブ２２を全開にしておき、リゾチーム結晶の核が生成されたらバルブ２２を全閉にした。図１２には、上記した実験によって生成されたリゾチーム結晶の写真が示されている。この図１２に示す写真は、第１隔室１２ａと水を５００μｌ入れた第３隔室２０２ａとを導通した場合のものである。
【００９９】
なお、本発明結晶化法を用いて低濃度タンパク質溶液で結晶をつくる場合、適度な蒸発速度が必要となる。しかしながら、初めから適度な蒸発速度を求めることは困難である。そこで、第３隔室２０２ａのなかに水を入れ、タンパク質溶液の液滴からの蒸発速度を抑えるようにした。
【０１００】
上記した実験においては、４つの第３隔室２０２ａのそれぞれに水を０μｌ、１００μｌ、２００μｌ、５００μｌだけ入れて結晶化実験を行ったものであるが、溶媒吸着物質１８による吸水速度が一定ならば、第３隔室２０２ａに入れた水の量が多ければそれだけ第３隔室２０２ａからの水の蒸発量は増え、一方、液滴からの蒸発速度は遅くなる。上記した実験においては、バルブ２０８は全開となっており、第３隔室２０２ａに入れた水の量により蒸発速度を制御した。
【０１０１】
なお、上記した実施の形態は、以下の（１）乃至（６）に示すように変形することができるものである。
【０１０２】
（１）上記した実施の形態においては、第２隔室１６ａに対してバルブ２２を介して第１隔室１２ａを１つ設けた場合について説明したが、これに限られるものではないことは勿論であり、第２隔室１６ａに対してバルブ２２を介して複数の第１隔室１２ａを設けるようにしてもよい。また、複数の第１隔室１２ａを設けた場合には、複数の第１隔室１２ａに対応してそれぞれバルブ２２を設けるようにして、各第１隔室１２ａに応じて蒸気拡散速度を制御するようにしてもよい。
【０１０３】
（２）上記した実施の形態においては、第３隔室２０２ａに対してバルブ２０８を介して第１隔室１２ａを１つ設けた場合について説明したが、これに限られるものではないことは勿論であり、第３隔室２０２ａに対してバルブ２０８を介して複数の第１隔室１２ａを設けるようにしてもよい。また、複数の第１隔室１２ａを設けた場合には、複数の第１隔室１２ａに対応してそれぞれバルブ２０８を設けるようにして、各第１隔室１２ａに応じて蒸気拡散速度を制御するようにしてもよい。
【０１０４】
（３）上記した実施の形態においては、結晶化プレート容器として、蒸気拡散法であるハンギングドロップ法によりタンパク質溶液の液滴がセットされるようにしたものを用いたが、これに限られるものではないことは勿論であり、シッティングドロップ法やサンドイッチドロップ法によりタンパク質溶液の液滴がセットされるようにした結晶化プレート容器を用いるようにしてもよい。
【０１０５】
（４）さらに、結晶化プレート容器の他の実施の形態として、複数個の液滴を市販のスライドガラスにセットした状態で該ガラスを収容する容器に入れ、密閉構造としたものなどを用いることができる。
【０１０６】
例えば、図９に示すタンパク質結晶化促進装置において、第１容器１２に代えて、結晶化マルチウェルプレート３０２またはスライドガラスに複数個の液滴をセットするようにした密閉容器３０３を用いてもよいし、あるいは、図１０に示すタンパク質結晶判定システム３００のように、第１容器１２として、結晶化マルチウェルプレート３０２またはスライドガラスに複数個の液滴をセットするようにした密閉容器３０３を用いてもよい。
【０１０７】
ここで、図９ならびに図１１（図１１には、タンパク質結晶化促進システム４００が示されている。）には、密閉容器３０３の概略構成断面説明図が示されているが、この密閉容器３０３は、上部が開口したＯリング付きの容器（この容器は、プラスチックあるいはガラスなどにより形成されている。なお、図９ならびに図１１においては、プラスチックにより形成されたプラスチック容器を用いた例が示されている。）と、該容器内に配置されるスライドガラスと、該容器の上面を密閉するプレートとを有して構成されている。なお、該容器は、チューブおよびバルブを介して第２容器１６や第３容器２０２と連通可能とされている。
【０１０８】
こうした密閉容器３０３においては、スライドガラスに多数の液滴１４をスポットした後に、そのスライドガラスをＯリング付きの該容器に入れ、該容器の上部をプレートで密閉する。
【０１０９】
このような密閉容器３０３を用いることにより、結晶生成の効率化を図ることができるようになる。
【０１１０】
なお、タンパク質結晶化判定システム３００においては、第２容器１６として遠心チューブ３０４を用い、溶媒吸着物質１８としてシリカゲル３０６を用い、チューブ２０としてシリコンゴムチューブ３０８を用い、バルブ２２としてバルブ開閉制御装置により制御される電磁ソレノイドバルブ３１０を用いている。また、バルブ２２としては、電磁ソレノイドバルブ３１０に代えて、開放度可視化のためニードルバルブを用いてもよい。
【０１１１】
ここで、実験手順の一例を示すと、遠心チューブ３０６にシリカゲル３０８を入れる１５ｍｌ入れる。なお、シリカゲル３０８は、遠心チューブ３０６に過剰量入れる。
【０１１２】
次に、遠心チューブ３０６と結晶化マルチウェルプレート３０２とを、電磁ソレノイドバルブ３１０を配設されたシリコンゴムチューブ３０８で繋ぐ。なお、電磁ソレノイドバルブ３１０は、完全に閉じておく。
【０１１３】
次に、リゾチーム溶液（５ｍｇ／ｍｌ，１０ｍｇ／ｍｌ，１５ｍｇ／ｍｌ）を調製するとともに、緩衝溶液（塩０．８Ｍ、ＨＥＰＥＳ  ０．１Ｍ、ｐＨ７．５）を調製する。
【０１１４】
それから、緩衝溶液２μｌをピペットマンに取り、カバーガラスの上に液滴を垂らして液滴のスポットを形成し、その液滴（ドロップ）に対して等量のリゾチーム溶液を添加してから、当該カバーガラスをマルチウェルプレートの上に乗せ封じる。また、ここで、液滴の多数スポットを形成するために、結晶化マルチウェルプレート３０２に代えて、図９および図１１に示すスライドガラスを用いた密閉容器３０３を使用するようにしてもよい。
【０１１５】
結晶化マルチウェルプレート３０２をラマン分光結晶化判断装置１０２にセットし、時間経過とともに結晶化過程をラマン分光結晶化判断装置１０２の画像観察顕微鏡１０２ａで観察する。このとき、電磁ソレノイドバルブ３１０の開放度を最初１００％，次に５０％、２５％、０％と調整し結晶化過程を調整する。
【０１１６】
そして、結晶析出後に、ラマン分光結晶化判断装置１０２により得られるラマンスペクトラムにより、タンパク質の結晶か擬結晶かを判別する。
【０１１７】
（５）上記した実施の形態において示した具体的な数値は、本発明の理解を容易にするために例示したに過ぎないものであり、本発明は上記した実施の形態に示した数値に限定されるものではない。
【０１１８】
（６）上記した実施の形態ならびに上記した（１）乃至（５）に示す変形例は、例えば、図８に記載の実施の形態と図９に記載の実施の形態を組み合わせた実施の形態の図１１に示されるように、適宜に組み合わせるようにしてもよい。
【産業上の利用可能性】
【０１１９】
本発明は、スクリーニングに利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１２０】
【図１】図１は、従来の自然蒸気拡散法のプロセスフローの一例を示す説明図である。
【図２】図２は、本発明によるタンパク質結晶化促進装置の実施の形態の一部端面概念構成説明図である。
【図３】図３は、従来の自然蒸気拡散法としてハンギングドロップ法による結晶成長と本発明結晶化法である蒸発ショックにより結晶の核を生成するようにした結晶成長とについて、タンパク質溶液としてリゾチーム溶液を用いて行った結晶成長の実験結果を示すグラフである。
【図４】図４は、リゾチーム溶液のリゾチーム濃度を１０ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、４０ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ、６０ｍｇ／ｍｌ、７０ｍｇ／ｍｌ、８０ｍｇ／ｍｌ、９０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌと変化させたときのラマンスペクトラムの実験結果を示すグラフである。
【図５】図５は、図４の領域Ａの拡大図である。
【図６】図６は、図４の領域Ｂの拡大図である。
【図７】図７は、従来の自然蒸気拡散法としてのハンギングドロップ法による結晶成長と本発明結晶化法である蒸発ショックにより結晶の核を生成するようにした結晶成長とについて、液滴中のタンパク質濃度と処理時間との関係を示す特性曲線を表したグラフである。
【図８】図８は、本発明によるタンパク質結晶化促進システムの実施の形態の一部端面概念構成説明図である。
【図９】図９は、本発明によるタンパク質結晶化促進装置の他の実施の形態の一部端面概念構成説明図である。
【図１０】図１０は、本発明によるタンパク質結晶化促進システムの他の実施の形態の一部端面概念構成説明図である。
【図１１】図１１は、本発明によるタンパク質結晶化促進システムの他の実施の形態の一部端面概念構成説明図である。
【図１２】図１２は、本願発明者による実験によって生成されたリゾチーム結晶の写真である。
【符号の説明】
【０１２１】
１０      タンパク質結晶化促進装置
１２      第１容器
１２ａ    第１隔室
１２ｂ    本体部
１２ｃ    蓋部
１４      液滴
１６      第２容器
１６ａ    第２隔室
１６ｂ    本体部
１６ｃ    蓋部
１８      溶媒吸着物質
２０      チューブ
２０ａ    通路
２２      バルブ
１００      タンパク質結晶化判定システム
１０２      タンパク質結晶化判断装置
１０２ａ    画像観察顕微鏡
１０４      バルブ開閉制御装置
２００      タンパク質結晶化促進装置
２０２      第３容器
２０２ａ    第３隔室
２０２ｂ    本体部
２０２ｃ    蓋部
２０４      水
２０６      チューブ
２０６ａ    通路
２０８      バルブ
３００      タンパク質結晶化判定システム
３０２      結晶化マルチウェルプレート
３０３      密閉容器
３０４      遠心チューブ
３０６      シリカゲル
３０８      シリコンゴムチューブ
３１０      電磁ソレノイドバルブ
４００      タンパク質結晶化促進システム
【図１】
2007230841.tif 000003
【図２】
2007230841.tif 000004
【図３】
2007230841.tif 000005
【図４】
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【図５】
2007230841.tif 000007
【図６】
2007230841.tif 000008
【図７】
2007230841.tif 000009
【図８】
2007230841.tif 000010
【図９】
2007230841.tif 000011
【図１０】
2007230841.tif 000012
【図１１】
2007230841.tif 000013
【図１２】
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