(57)【要約】      （修正有）【課題】紫外線吸収性、紫外線散乱性、抗酸化性等に優れ、かつ、人体にも無害であるアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物及び当該化合物を含有した皮膚外用剤を提供する。【解決手段】下記式（Ｉ）で表される化合物。（式中、Ａ〜Ｅのうち少なくとも１つはアシル基であり、アシル基以外の位置には、水素原子、水酸基、アルキル基、アリール基、またはアルコキシル基が配置される。）2007230879.tif 000011【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）で表されることを特徴とするアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物。
【化１】
2007230879.tif 000008
（式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、及びＥのうち少なくとも１つはアシル基が配置され、アシル基を配置した以外の位置には、水素原子、水酸基、アルキル基、アリール基、またはアルコキシル基が配置される。）
【請求項２】
下記式（II）で表される３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【化２】
2007230879.tif 000009
【請求項３】
下記式（III）で表される３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドであることを特徴とする請求項１に記載の化合物。
【化３】
2007230879.tif 000010
【請求項４】
請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物を有効成分として含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物及び当該化合物を含有する皮膚外用剤に関する。更に詳しくは、皮膚に対する安全性に問題がなく、皮膚の日焼け、シミ、そばかす、肌荒れ等の防止及び改善効果に優れるアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物及び当該化合物を含有する皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の老化には紫外線、乾燥等の外的要因が大きく影響するということが知られており、また、皮膚の日焼け、シミ、そばかす、肌荒れ等の発生を防止するために紫外線吸収剤を配合した化粧品等の皮膚外用剤が広く用いられている。日焼けには、サンタン波長といわれる長波長紫外線（ＵＶ−Ａ／Ｕｌｔｒａ  Ｖｉｏｌｅｔ−Ａの略：約３２０〜４００ｎｍ）が影響するものと、サンバーン波長といわれる中波長紫外線（ＵＶ−Ｂ／Ｕｌｔｒａ  Ｖｉｏｌｅｔ−Ｂの略：約２８０〜３２０ｎｍ）が影響するものが知られており、その他には短波長紫外線（ＵＶ−Ｃ／Ｕｌｔｒａ  Ｖｉｏｌｅｔ−Ｃの略：２８０ｎｍ以下）が影響するものがある。
【０００３】
ここで、ＵＶ−ＡとＵＶ−Ｂが肌に与える影響はまったく異なるものである。すなわち、ＵＶ−Ａによる日焼けは、皮膚が褐色に色づいた状態で痛みがほとんどない日焼けのことであり、この褐色の肌はメラニン色素によって形成される。メラニン色素は、紫外線が皮膚の奥深く浸透するのを防ぐはたらきをする一方、かかるメラニン色素により皮膚が黒化してしまい、シミ、ソバカス等の発生や増加の因子となる。
【０００４】
一方、ＵＶ−Ｂによる日焼けは、皮膚が火傷をしたように痛みを伴う日焼けのことをいい、急に強い紫外線を浴びたために、皮膚表面の組織が炎症を起こした状態を指すものである。この日焼けは、火傷と同様に皮膚がはがれ落ちることにより治癒するが、皮膚の奥にある真皮に到達した紫外線は、この真皮の弾性繊維（肌に張りを持たせている繊維）を変質させて、肌の張りを失わせてしまうことになる。更には、結果として、シミやたるみの原因となるばかりか、ＵＶ−Ｂによる日焼けを何回も繰り返すことにより、皮膚ガンの原因にもなる。
【０００５】
紫外線吸収剤は、このような日焼け等による問題を防止・改善すべく、ＵＶ−Ａを主として吸収するＵＶ−Ａ吸収剤、ＵＶ−Ｂを主として吸収するＵＶ−Ｂ吸収剤が開発され、市場に提供されている。なお、ＵＶ−Ｃについては、そのほとんどがオゾン層で吸収され地上に達しないので従来あまり注目されていなかったが、近年、ＵＶ−Ｃに発癌作用があることや、フロンガスによるオゾン層破壊といった問題が判明したことと相俟って、ＵＶ−Ｃ吸収剤の開発も望まれている。
【０００６】
加えて、従来の紫外線吸収剤は紫外線吸収能を有する一方、紫外線エネルギーを吸収するため高エネルギー状態となり、その結果吸収剤自体として不安定となったり、生体に対して悪影響を及ぼす場合もあった。そこで、このような生体に対して悪影響を及ぼす紫外線を吸収しつつ、そのエネルギーを無害化して安全な可視光として散乱することができる、紫外線無害化効率が高い紫外線散乱剤の開発も併せて望まれている。
【０００７】
ここで、配糖体は、紫外線吸収剤等としての適用が期待されているが、かかる配糖体は、グルコースを脱離したものは吸収した紫外線により励起増感され、スーパーオキサイドの生成を促進するため光酸化物にする作用があるが、化合物は紫外線を吸収して無害な蛍光として発散する作用や、糖（グルコース）による抗酸化作用があるため、光による酸化作用を抑制することが確認されている。また、配糖体を皮膚外用剤に適用した例として、ヒト水晶体の水不溶性より抽出した配糖体（２−アミノ−３−ヒドロキシ−アセトフェノン−Ｏ−β−Ｄ−グルコシド／３’−アセチル−２’−アミノフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド）が優れたＵＶ−Ａ、ＵＶ−Ｃ吸収能、加えてＵＶ−Ａ、ＵＶ−Ｃを吸収して人体に無害な蛍光（４７０ｎｍ）として可視域に散乱させる作用があるため、皮膚外用剤の配合成分として有用であることが報告されている（例えば、特許文献１〜特許文献３等参照。）。
【０００８】
【特許文献１】特開平６−１５７５７９号公報
【特許文献２】特開平８−２０５２４号公報
【特許文献３】特開２００２−３６３１９５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、前記した化合物が備えるアミノ基は細胞毒性を有し人体に有害な場合もあり、皮膚外用剤として適用するには安全性が懸念されている。一方、皮膚外用剤における抗酸化能の更なる向上が期待されている。
【００１０】
本発明は前記の課題に鑑みてなされたものであり、紫外線吸収性、紫外線散乱性、抗酸化性等に優れ、かつ、人体にも無害であるため、紫外線吸収剤等の皮膚外用剤の配合成分として最適なアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物及び当該化合物を含有する皮膚外用剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
前記の目的を達成するために、本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物は、下記式（Ｉ）で表されることを特徴とする。
【００１２】
【化１】
2007230879.tif 000002
（式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、及びＥのうち少なくとも１つはアシル基が配置され、アシル基を配置した以外の位置には、水素原子、水酸基、アルキル基、アリール基、またはアルコキシル基が配置される。）
【００１３】
また、本発明の化合物は、下記式（II）で表される３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシド、あるいは下記式（III）で表される３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドであることが好ましい。
【００１４】
【化２】
2007230879.tif 000003
【００１５】
【化３】
2007230879.tif 000004
【００１６】
また、本発明の皮膚外用剤は、前記した本発明の化合物を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１７】
式（Ｉ）で表される本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物は、紫外線吸収部としてのアシルフェニル誘導体の存在により、紫外線吸収性、及び紫外線を無害化して発光する紫外線無害化効率が高く紫外線散乱性にも優れ、また、アミノ基を有しないアシルフェニル誘導体の採用により、人体にも無害であり、安全性も良好である。そして、糖部としてグルコースより抗酸化作用が高いマンノースを採用しているので、吸収した紫外線により励起増感されて生成するスーパーオキサイドを好適に吸収することができ、抗酸化性にも優れる配糖体となる。
【００１８】
また、アシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物として、式（II）で表される３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシド、あるいは式（III）で表される３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドを採用すれば、前記の効果を享受するとともに、紫外線吸収スペクトルとして３００ｎｍ付近に最大吸収ピークを有し、紫外線吸収性として、特にＵＶ−Ｂ吸収性に優れる化合物となる。また、これらの化合物は、２６０ｎｍ付近及び３２５ｎｍ付近の光を吸収し励起すると、人体に無害な４００ｎｍに蛍光を発するため、紫外線無害化効率が高く紫外線散乱性にも優れる。
【００１９】
また、前記した本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物を有効成分として含有する本発明の皮膚外用剤は、前記した当該化合物の奏する効果（紫外線吸収性、紫外線散乱性及び抗酸化性等）を好適に享受し、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤及び抗酸化剤等の皮膚外用剤として有利に使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物（以下、「本発明の化合物」とする場合もある。）は、下記式（Ｉ）で表される、糖部としてマンノース、紫外線吸収部としてアシルフェニル誘導体を有する配糖体である。
【００２１】
【化４】
2007230879.tif 000005
（式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、及びＥのうち少なくとも１つはアシル基が配置され、アシル基を配置した以外の位置には、水素原子、水酸基、アルキル基、アリール基、またはアルコキシル基が配置される。）
【００２２】
ここで、式（Ｉ）においてＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥのうち少なくとも１つに配置されるアシル基は、一般式として−ＣＯＲで表される基であるが、Ｒとしては、水素原子、あるいは、水酸基、アルキル基、アリール基、アルコキシル基等、アミノ基を含まない１価の基が挙げられる。
【００２３】
式（Ｉ）に示されるように、本発明の化合物は、糖部としてマンノース、紫外線吸収部としてアシルフェニル誘導体を有する配糖体であり、アシルフェニル誘導体に配置されるアシル基の位置を選択することにより、化合物における紫外線吸収スペクトルの最大吸収ピークを選択することができる。例えば、アシル基をオルト位に配置した場合、ＵＶ−Ａ、ＵＶ−Ｂ及びＵＶ−Ｃの吸収剤となり、アシル基をメタ位に配置した場合、ＵＶ−Ｂ、あるいはＵＶ−Ｂ及びＵＶ−Ｃの吸収剤となり、アシル基をパラ位に配置した場合、ＵＶ−Ｃの吸収剤となると考えられる。
【００２４】
また、この式（Ｉ）で表される化合物の具体例としては、例えば、３’−アセチルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド等が挙げられ、このうち、下記式（II）で表される３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシド（３’−アセチルフェニル−Ｄ−マンノピラノシドのβ体）、あるいは、下記式（III）で表される３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシド（３’−アセチルフェニル−Ｄ−マンノピラノシドのα体）とすることが好ましい。これらの３’−アセチルフェニル−Ｄ−マンノピラノシドは、紫外線吸収スペクトルとして３００ｎｍ付近に最大吸収ピークを有し、紫外線吸収性として、特にＵＶ−Ｂ吸収性に優れる化合物となる。また、２６０ｎｍ付近及び３２５ｎｍ付近の光を吸収し励起すると、人体に無害な４００ｎｍに蛍光を発するため、紫外線無害化効率が高く紫外線散乱性にも優れる化合物となる。
【００２５】
【化５】
2007230879.tif 000006
【００２６】
【化６】
2007230879.tif 000007
【００２７】
本発明の化合物を化学的に合成するにあたり、式（II）で表される３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドに代表されるβ体を合成するには、例えば、シクロヘキサノンジエチルアセタールにｐ−トルエンスルホン酸を加え、減圧加熱後、蒸留して生成した１−エトキシシクロヘキセンを、Ｄ−マンノース、ｐ−トルエンスルホン酸、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の混合物と混合し、減圧加熱して２，３：４，６−ジ−Ｏ−シクロヘキシリデン−β−Ｄ−マンノピラノースを得る。そして、この２，３：４，６−ジ−Ｏ−シクロヘキシリデン−β−Ｄ−マンノピラノースに、アルゴン雰囲気で、トリフェニルホスフィン、アゾジカルボン酸ジエチルトルエン溶液、３’−ヒドロキシアセトフェノンを加え、更に、酢酸及び水を加えて加熱することにより、３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドを得ることができる。
【００２８】
また、式（III）で表される３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドに代表されるα体を合成するには、例えば、ピリジンと無水酢酸の混合物にα−Ｄ−マンノースを作用して得られるペンタ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノースと３’−ヒドロキシアセトフェノンの混合物を加熱融解させた後、塩化亜鉛（II）の無水酢酸−酢酸溶液を加え、例えば１３０℃で１時間加熱する。加熱後の混合物を０℃まで冷却し、水−クロロホルムを加え反応を停止する。クロロホルム層を分離、乾燥後、減圧下溶媒を留出し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー等で精製し、３’−アセチルフェニル−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシドを得る。この３’−アセチルフェニル−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシドをメタノールに溶解させた後ナトリウムメトキシドメタノール溶液を加え反応を進行させ、中圧逆相カラムクロマトグラフィー等で単離精製させることにより、３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドを得ることができる。
【００２９】
なお、前記の合成にあっては、アシルフェニル誘導体として３’−ヒドロキシアセトフェノンを用いることにより、３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドあるいは３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドを得ているが、このように、合成中に用いるアシルフェニル誘導体の構成により、式（Ｉ）のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物におけるアシルフェニル誘導体の構成が決定される。よって、前記の合成において、３’−ヒドロキシアセトフェノンの代わりに、合成しようとするアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物を構成するアシルフェニル誘導体に対応するアシルフェニル誘導体を用いることにより、所望の構造の化合物を得ることができる。
【００３０】
本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物は、紫外線吸収部としてのアシルフェニル誘導体の存在により、紫外線吸収性に優れ、アシル基をアシルフェニル誘導体における任意の位置に配置させることにより、所望の紫外線吸収スペクトルの最大吸収ピークを選択することができ、ＵＶ−Ａ、ＵＶ−Ｂ及びＵＶ−Ｃの各領域に対応できる紫外線吸収剤を提供可能な化合物となる。また、吸収した紫外線エネルギーを、安全な可視光として散乱することができるため、紫外線無害化効率が高く紫外線散乱性にも優れる。更には、アシルフェニル誘導体はアミノ基を有さないため、人体にも無害な化合物であり、安全性も良好な化合物となる。そして、糖部としてグルコースより抗酸化作用が高いマンノースを備えているので、吸収した紫外線により励起増感されて生成するスーパーオキサイドを好適に吸収し、抗酸化性にも優れる化合物となる。
【００３１】
本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物は、前記した優れた効果を有するので、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤及び抗酸化剤等の皮膚外用剤に適用するほか、化粧品、医薬品、医薬部外品、洗浄料、インク、塗料、プラスチック、コーティング剤、化学繊維等の化学製品等に適宣配合して用いることもできる。
【００３２】
本発明の皮膚外用剤は、前記した本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物を有効成分として含有するものであり、前記した本発明の化合物を有効成分として含有するので、当該化合物の奏する効果を好適に享受し、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤及び抗酸化剤等の皮膚外用剤として有利に使用することができる。ここで、本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物を皮膚外用剤として用いる場合における当該化合物の含有量は、皮膚外用剤として求められる性能や、他の成分との関係で適宜決定すればよいが、皮膚外用剤全体に対して０．００１〜５０質量％とすることが好ましく、０．０１〜１０質量％とすることが更に好ましく、０．０１〜５質量％とすることが特に好ましいが、この数値範囲には特には限定されない。
【００３３】
本発明の皮膚外用剤にあって、必須成分である本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物に加えて、必要に応じて以下の水性成分、粉末成分、油成分等の成分を添加することができる。例えば、ワセリン、固体パラフィン、液状パラフィン、スクワラン、クリスタルオイル、セレシン、オゾケライト、モンランロウ等の炭化水素類、シリコン油類、オリーブ油、地ロウ、カルナウバロウ、ラノリン等の植物性もしくは動物性の油脂類やロウ類、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸等の高級脂肪酸類、ホホバ油、カルナバワックス、合成ゲイロウ、ミツロウ等のエステル類、オリーブ油、水添ヤシ油、ヒマシ油、牛脂等のトリグリセライド類、エタノール、イソプロピルアルコール等の低級アルコール類、セチルアルコール、オレイルアルコール、ベヘニルアルコール、パルミチルアルコール等の高級アルコール類、グリコール、グリセリン、１，３−ブタンジオール、ソルビトール等の多価アルコール類、ステアリン酸モノクリセライド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の非イオン性界面活性剤、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸エステル等のアニオン性界面活性剤、アルキルアミン塩酸等のカチオン性界面活性剤、アルキルベタイン等の両性界面活性剤、パラベン類やグルコン酸クロルヘキシジン等の防腐剤、ビタミンＥ、ブチルヒドロキシトルエン等の酸化防止剤、グアーガム、アラビアゴム、カルボキシビニルポリマー等の増粘剤、ポリエチレングリコール等の保湿剤、アルカリ、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩等のｐＨ調節剤、酸化チタン、ベンガラ、タルク、粘土鉱物、シリカゲル等の粉体類、更に、香料、色素、薬効成分、乳化安定剤、キレート剤、水溶性高分子、油溶性高分子等が挙げられる。
【００３４】
更に、紫外線吸収性の増強のために、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、ｐ−アミノ安息香酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、アラントイン、ビタミンＥアセテート、グリチルリチン等のその他の紫外線吸収剤を添加することもできる。
【００３５】
また、本発明の皮膚外用剤には、下記植物抽出物や薬剤も適宜配合することができる。例えば、トウガラシ、ヨウテイ、アロエ、クコ、ヨモギ、カラシ、イネ、マンケイシ、マンネンロウ、コッサイホ、エニシダ、リンドウ、タンジン、ヘチマ、キキョウ、マツ、クジン、ベニバナ、メギ、ビンロウジ、ユーカリ、カゴソウ、モクロウ、ゴジツ、サイコ、チャ、シンイ、ワザビ、ジョテイジ、オランダセンニチ、クチナシ、ウスバサイシン、ニンニク、ハッカ、ヨクイニン、キリンケツ、ヤシ、ゴボウ、カンゾウ、ホップ、キク、ラッキョウ、ニラ、ネギ、タマネギ、セネガ、アマチャヅル、マンネンタケ、ジオウ、グリチルリチン酸モノアンモニウム、グリチルレチン酸、グリチルリチン、ゴマ、センキュウ、カシュウ等が挙げられる。
【００３６】
本発明の皮膚外用剤の剤型には、特に限定されないが、例えば、化粧水等の水溶液、乳液状、クリーム状、スティック状等の任意の剤型とすることができ、アイカラー、チークカラー、ファンデーション等のメークアップ化粧品に配合してもよい。また、サンオイル、サンタンローション、サンスクリーン、日焼け止めリップクリーム、サンジェリー、日焼け止めクリーム、日焼け止めローション、ファンデーションローション、メイクアップベース、ヘアートニック等にも使用することができる。
【実施例】
【００３７】
以下、実施例を挙げて、本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら制約されるものではない。
【００３８】
［実施例１］
３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドの合成：
式（II）で表される、本発明の３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシド（以下、「化合物Ａ」とすることもある。）を下記（１）〜（４）の操作を行って合成した。
【００３９】
（１）シクロヘキサノンジエチルアセタールの合成：
シクロヘキサノン５０．０ｇ（５１０ｍｍｏｌ）とオルトギ酸トリエチル７５．０ｇ（５１０ｍｍｏｌ）を混合し、濃塩酸０．２ｍｌエタノール溶液３０ｍｌを滴下して混合物とした。この混合物を室温で１０時間撹拌後、０．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、ジクロロメタンで抽出した。抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥した後、溶媒を減圧下留去し、更に減圧下で蒸留精製して６５．９ｇのシクロヘキサノンジエチルアセタール（７５℃／１７ｍｍＨｇ）を得た（収率：７５％）。得られたシクロヘキサノンジエチルアセタールにおける１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図１に示す。
【００４０】
（２）１−エトキシシクロヘキセンの合成：
（１）で得たシクロヘキサノンジエチルアセタール６５．４ｇ（３８０ｍｍｏｌ）にｐ−トルエンスルホン酸２５０ｍｇ（２．３５ｍｍｏｌ）を加え１００ｍｍＨｇ減圧下１５０℃で２時間加熱した。減圧下蒸留精製し、３８．０ｇの１−エトキシシクロヘキセン（５５℃／１７ｍｍＨｇ）を得た（収率：７９．２％）。得られた１−エトキシシクロヘキセンにおける１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図２に示す。
【００４１】
（３）２，３：４，６−ジ−Ｏ−シクロヘキシリデン−β−Ｄ−マンノピラノースの合成：
Ｄ−マンノース８００ｍｇ（４．４ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸２４ｍｇ（０．２３ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１２ｍｌの混合物を４０℃で加熱し、（１）で得た１−エトキシシクロヘキセン２．３ｇ（１８．２ｍｍｏｌ）を１時間かけて滴下した後、同温、１７ｍｍＨｇ減圧下、更に１時間加熱した。加熱後の混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、エーテル１５ｍｌで抽出し、硫酸ナトリウム乾燥後、減圧下溶媒を除去して、ジクロロメタン−ヘキサンで２回再結晶を行い、６６２ｍｇの２，３：４，６−ジ−Ｏ−シクロヘキシリデン−β−Ｄ−マンノピラノースを得た（収率；４４．２％）。得られた２，３：４，６−ジ−Ｏ−シクロヘキシリデン−β−Ｄ−マンノピラノースにおける１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図３に示す。
【００４２】
（４）３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドの合成：
（３）で得られた２，３：４，６−ジ−Ｏ−シクロヘキシリデン−β−Ｄ−マンノピラノース５１２ｍｇ（１．５０ｍｍｏｌ）に、トリフェニルホスフィン７８４ｍｇ（２．９９ｍｍｏｌ）、３’−ヒドロキシアセトフェノン４０６ｍｇ（２．９８ｍｍｏｌ）のトルエン（２．０ｍｌ）溶液を加え、アルゴン雰囲気下でアゾジカルボン酸ジエチルトルエン溶液（１．０５×１０−３Ｍ）２．９２ｍｌを１５分かけて滴下した。滴下後、混合物を１時間撹拌し、減圧下溶媒を除去した。更に、酢酸４．０ｍｌ、水１．０ｍｌを加え１００℃で２時間加熱し、加熱後減圧下で酢酸を除去し、水で抽出した。そして、抽出物を減圧下で溶媒を除去し、エタノールで再結晶して、２４９ｍｇの３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシド（化合物Ａ）を得た（収率：５５．７％）。得られた化合物Ａにおける１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図４に、１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図５に、また、それぞれの帰属を図６に示す。
【００４３】
また、得られた本発明の化合物Ａについて、ＦＡＢ−ＭＳ（ＪＯＥＬ  ＪＭＳ−ＡＸ５０５ＨＡ）を使用して質量分析を行った。ここで、ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ＭＳのマトリックスとしては、Ｇｌｙｃｅｒｏｌ及びｍ−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌを混合させて用い、また、ｎｅｇａｔｉｖｅ−ＭＳのマトリックスとしては、２−ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ  ｄｉｓｕｌｆｉｄｅを用いてそれぞれ測定を行った。なお、補正にはｐｅｒｆｌｕｏｒｏａｌｋｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｚｌｎｅを使用した。ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ＭＳスペクトルの測定結果を図７に、ｎｅｇａｔｉｖｅ−ＭＳスペクトルの測定結果を図８に示す。
【００４４】
図７及び図８の結果より、合成した化合物Ａの分子量は２９８であり、ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ＭＳの結果（図７）では分子量２９９．１６にピークが見られ、またｎｅｇａｔｉｖｅ−ＭＳの結果（図８）では分子量２９７．０にピークが見られた。このように、ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ＭＳでは分子量プラス１のピークが、ｎｅｇａｔｉｖｅ−ＭＳでは分子量マイナス１のピークが検出されることが確認できた。以上より、図４〜図６の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル及び１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルの測定結果と併せて、合成されたものは３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドであることが確認できた。
【００４５】
［実施例２］
３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドの合成：
式（III）で表される３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシド（以下、「化合物Ｂ」とすることもある。）を下記（１）〜（３）の操作を行って合成した。
【００４６】
（１）ペンタ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノースの合成：
ピリジン１６ｍｌと無水酢酸１２．５ｍｌ（１３２ｍｍｏｌ）の混合物を０℃に冷却し、更にα−Ｄ−マンノース２．５０ｇ（１３．９ｍｍｏｌ）を加えて、同温で４８時間撹拌した。次に、この溶液状の混合物を氷水に注ぎ、ジエチルエーテルで抽出し、ピリジンを除去するため０．１Ｍ塩酸で洗浄し、続いて飽和炭酸水素ナトリウム、水の順で洗浄した。洗浄後の抽出物について硫酸ナトリウムを用いて乾燥した後、減圧下で溶媒を除去して１．０３ｇのペンタ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノースを得た（収率：１９．２％）。得られたペンタ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノースにおける１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図９に示す。
【００４７】
（２）３’−アセチルフェニル−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシドの合成：
３’−ヒドロキシアセトフェノン７１６ｍｇ（５．２６ｍｍｏｌ）と、（１）で得たペンタ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノース５１３ｍｇ（１．３２ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で加熱融解し、これに塩化亜鉛（II）の無水酢酸−酢酸（９５／５＝ｖ／ｖ）溶液（０．９２９M、１．５ｍｌ）を加えて１３０℃に昇温して加熱した。同温で１時間撹拌した後、室温に冷却し、クロロホルム２０ｍｌを加えた。この混合物を０．１Ｍ塩酸、１Ｍ冷水酸化ナトリウム、水で順次洗浄し、洗浄後、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下溶媒を除去した。そして、溶媒を除去した混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により精製し、２５２ｍｇの３’−アセチルフェニル−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシドを得た（収率：４０．８％）。得られた３’−アセチルフェニル−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシドにおける１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図１０に示す。
【００４８】
（３）３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドの合成：
（２）で得た３’−アセチルフェニル−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシド６３７ｍｇ（１．３７ｍｍｏｌ）をメタノール６ｍｌに溶解させ、その後ナトリウムメトキシドメタノール溶液（０．１Ｍ、０．０１０ｍｌ）を加えて４０分間撹拌した。反応を終了させるためＤｏｗｅ−Ｘ（５０Ｗ−Ｘ８、１００−２００Ｈ）を３ｇ加えて１時間激しく撹拌して、濾別し、その後、減圧下で溶媒を除去した。溶媒を除去した混合物を中圧逆相カラムクロマトグラフィー（水：メタノール＝２：３）で単離精製し、１２３ｇの３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシド（化合物Ｂ）を得た（収率：３０．１％）。化合物Ｂにおける１Ｈ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図１１に、１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルの測定結果を図１２に、また、それぞれの帰属を図１３に示した。図１１〜図１３の結果からも、合成されたものは、３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドであることが確認できた。
【００４９】
なお、３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシドの合成において、前記（２）におけるフラッシュカラムクロマトグラフィーでは、シリカゲル６０Ｎ(球状、中性)（関東化学（株）製）を、前記（３）における中圧逆相カラムクロマトグラフィーでは、コスモシール１４０Ｃ１８−ＯＰＮ（ナカライテスク（株）製）をそれぞれ用いた。
【００５０】
［試験例１］
紫外可視吸光分光光度計（ＵＶ−ｖｉｓ）による紫外線吸収測定：
実施例１で得られた化合物Ａ及び実施例２で得られた化合物Ｂを１０００μＭとして、
１ｃｍの石英セルを用いて、紫外可視吸光分光光度計（ＪＡＳＣＯ  Ｖ−５７０：日本分光(株)製）により紫外線吸収測定を行った。なお、開始波長は７００ｎｍ、終了波長は２００ｎｍとした。化合物Ａ及び化合物ＢについてのＵＶ−ｖｉｓスペクトルの測定結果を図１４に示す。
【００５１】
図１４の結果からわかるように、化合物Ａ及び化合物Ｂはいずれも３００ｎｍ付近（ＵＶ−Ｂの領域）に吸収ピークを有し、その強度も略同様なものであった。したがって、β体（化合物Ａ）とα体（化合物Ｂ）という構造の違いは吸収ピークに特段影響を与えず、これらの化合物はともに紫外線吸収剤、特にＵＶ−Ｂの吸収剤として有用であることが確認できた。
【００５２】
［試験例２］
円偏光二色性による３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシドの構造の確認：
１０００μＭの化合物Ａ、アセトフェノン及びマンノースについて、厚さが１ｍｍの石英セルを用いて、円二色性分散計(Ｊ−７２５：日本分光(株)製)により下記の条件で測定し、構造を確認した。化合物Ａ、アセトフェノン及びマンノースの円偏光二色性スペクトルの測定結果を順に図１５、図１６及び図１７に示す。
【００５３】
（測定条件）
開始波長      ：  ７００ｎｍ
終了波長      ：  ２００ｎｍ
データ間隔    ：  ０．５ｎｍ
走査速度      ：  ５０ｎｍ／分
積算          ：  １０回
レスポンス    ：  ２秒
バンド幅      ：  １．０ｎｍ
感度          ：  ５０ｍｄｅｇ
【００５４】
図１５、図１６及び図１７の結果より、アセトフェノン、マンノースはほとんどＣＤスペクトルが見られなかったのに対し、化合物Ａでは試験例のＵＶ−ｖｉｓ吸収スペクトルと類似した３００ｎｍ、２５０ｎｍ及び２００ｎｍ付近に誘起ＣＤスペクトルを確認することができた。この結果からも、化合物ＡがＵＶ−Ｂの吸収剤として有用であることが確認できた。
【００５５】
［試験例３］
蛍光測定による紫外線無害化効率の評価：
１０００μＭの化合物Ａについての蛍光測定を、分光蛍光光度計（Ｆ４５００：（株）日立製作所製)より、励起波長３２５ｎｍ、蛍光波長を４００ｎｍとして実施した。結果として、化合物Ａの励起スペクトル及び蛍光スペクトルを図１８に示す。
【００５６】
図１８の結果より、化合物Ａは２６０ｎｍ及び３２５ｎｍに最大吸収が得られ、また、３２５ｎｍの光で励起すると４００ｎｍに蛍光を生じることが確認できた。この結果より、化合物Ａは２６０ｎｍ及び３２５ｎｍ付近の光を吸収し励起すると、人体に無害な４００ｎｍに蛍光を発することができるため、紫外線無害化効率が高く、紫外線散乱剤として有用であることが分かった。
【００５７】
［試験例４］
トリプトファン残基の光酸化反応測定：
２８０ｎｍで励起し、３４０ｎｍで蛍光を発するというトリプトファンの特性を利用して、被検対象（化合物Ａとアセトフェノン）に近紫外光を照射して、３４０ｎｍにおける蛍光強度の減少を測定することにより蛋白質中のトリプトファン残基の光酸化反応の進行度を確認し、比較・評価した。
【００５８】
具体的な操作としては、化合物Ａ及びアセトフェノンそれぞれに対して２ｍｇ／ｍｌの
牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）を加えて撹拌し、３１０ｎｍの近紫外光を、強度を
０． ４ｍＷ／ｃｍ２として３時間照射し続け反応液とした。そして、０時間後（試験開始直後）、１時間後、２時間後、３時間後に採取した反応液１００μＭにバッファー（１０μＭトリス−塩酸：ｐＨ７．６、０．１Ｍ塩化カリウム）２９００μｌを加え、分光蛍光光度計（Ｆ４５００：（株）日立製作所製）により、励起波長２８０ｎｍ及び３４０ｎｍで蛍光度を測定した。
【００５９】
そして、この確認される蛍光度がトリプトファンの存在量となるので、試験開始直後の値に対する蛍光強度の減少を求め、光酸化反応の進行の程度を確認した。試験開始直後の値を１００％とした場合における、残存するトリプトファンの経時的変化を、ブランクとして水を測定した結果と併せて図１９に示す。
【００６０】
図１９の結果からわかるように、トリプトファンの光酸化は、化合物Ａ、アセトフェノ
ンの順で時間の経過に沿って進行していったが、アセトフェノンにおけるトリプトファン
の存在量が時間の経過に沿って減少していったことに対して、化合物Ａはトリプトファン
存在量の変化がほとんど見られなかった。
【００６１】
この結果は、アセトフェノンには吸収した紫外線により励起増感されスーパーオキサイド（Ｏ２）の生成を促進するためトリプトファン残基を光酸化産物にする作用がある一方、本発明の化合物Ａ（３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシド）にあっては、配糖体として紫外線を吸収し無害な蛍光として発する作用を有し、発生したスーパーオキサイドが化合物が備える糖部の抗酸化能によって、光によるトリプトファン残基の酸化反応を抑制するためであると考えられる。以上より、本発明の化合物Ａは、吸収した紫外線によって励起増感されて生成するスーパーオキサイドを好適に吸収するはたらきがあることがわかり、抗酸化性に優れる化合物であることが確認できた。
【産業上の利用可能性】
【００６２】
本発明のアシルフェニル−Ｄ−マンノピラノシド化合物は、皮膚に対して安全性が高く、皮膚の日焼け、シミ、そばかす、肌荒れ等の防止及び改善効果に優れるため、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤及び抗酸化剤等の皮膚外用剤にとして有利に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】シクロヘキサノンジエチルアセタールの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図２】１−エトキシシクロへキセンの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図３】２，３:４，６−ジ−Ｏ−シクロヘキシリデン−β−Ｄ−マンノピラノースの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図４】３’−アセチルフェニル−β−Ｄ−マンノピラノシド（化合物Ａ）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図５】化合物Ａの１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図６】化合物Ａの１Ｈ−ＮＭＲスペクトル及び１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルの帰属を示した図である。
【図７】化合物Ａのｐｏｓｉｔｉｖｅ−ＭＳスペクトルを示した図である。
【図８】化合物Ａのｎｅｇａｔｉｖｅ−ＭＳスペクトルを示した図である。
【図９】ペンタ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノースの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図１０】３’−アセチルフェニル−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−マンノピラノシドの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図１１】３’−アセチルフェニル−α−Ｄ−マンノピラノシド（化合物Ｂ）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図１２】化合物Ｂの１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示した図である。
【図１３】化合物Ｂの１Ｈ−ＮＭＲスペクトル及び１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルの帰属を示した図である。
【図１４】試験例１における、化合物Ａ及び化合物ＢのＵＶ−ｖｉｓスペクトルを示した図である。
【図１５】試験例２における、化合物Ａの円偏光二色性スペクトルを示した図である。
【図１６】試験例２における、アセトフェノンの円偏光二色性スペクトルを示した図である。
【図１７】試験例２における、マンノースの円偏光二色性スペクトルを示した図である。
【図１８】試験例３における、化合物Ａの励起スペクトル及び蛍光スペクトルを示した図である。
【図１９】試験例４における、残存するトリプトファン経時的変化を示した図である。
【図１】
2007230879.tif 000012
【図２】
2007230879.tif 000013
【図３】
2007230879.tif 000014
【図４】
2007230879.tif 000015
【図５】
2007230879.tif 000016
【図６】
2007230879.tif 000017
【図７】
2007230879.tif 000018
【図８】
2007230879.tif 000019
【図９】
2007230879.tif 000020
【図１０】
2007230879.tif 000021
【図１１】
2007230879.tif 000022
【図１２】
2007230879.tif 000023
【図１３】
2007230879.tif 000024
【図１４】
2007230879.tif 000025
【図１５】
2007230879.tif 000026
【図１６】
2007230879.tif 000027
【図１７】
2007230879.tif 000028
【図１８】
2007230879.tif 000029
【図１９】
2007230879.tif 000030