(57)【要約】【課題】ウエルプレートのウエルに被検体を播種する等の被検体処理を容易かつ確実に行えるようにする。【解決手段】基板に表裏貫通する貫通孔を形成し、前記基板に厚さ５０〜２００μｍの透明な薄板を接着して前記貫通孔を閉塞し、前記薄板の前記貫通孔内側の上面に複数のウエルを形成する。ウエルが厚さ５０〜２００μｍの薄板表面に形成されているので、ウエル内の被検体を倒立顕微鏡でウエルプレートの裏側から観察することが可能となり、顕微鏡の対物レンズに邪魔されることなく、被検体の播種等の被検体処理を容易かつ確実に行える。【選択図】      図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
基板に表裏貫通する貫通孔を形成し、前記基板に厚さ５０〜２００μｍの透明な薄板を接着して前記貫通孔を閉塞し、前記薄板の前記貫通孔内側の上面に複数のウエルを形成したことを特徴とするウエルプレート。
【請求項２】
透明な基板に厚さ５０〜２００μｍの薄肉部を形成し、該薄肉部上面に複数のウエルを形成したことを特徴とするウエルプレート。
【請求項３】
請求項１又は２のウエルプレートにおいて、前記複数のウエルの周囲に、前記ウエルが形成されている表面よりも高いカバープレート載置面を形成し、該載置面の上に、前記複数のウエルを覆ってカバープレートを載置可能としたことを特徴とするウエルプレート。
【請求項４】
請求項３のウエルプレートにおいて、前記載置面が前記ウエルの形成されている表面よりも０．１〜０．５ｍｍ高いことを特徴とするウエルプレート。
【請求項５】
請求項３又は４のウエルプレートにおいて、前記基板又は薄板の表面に、穴を有するシリコーン製のシートを付着させて該シートの表面を前記載置面とし、前記穴の中に前記複数のウエルが位置するようにしたことを特徴とするウエルプレート。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかのウエルプレートにおいて、前記ウエル内面の少なくとも底面に金被膜を形成したことを特徴とするウエルプレート。
【請求項７】
請求項６のウエルプレートにおいて、前記金被膜の上に更にアルカンチオール被膜を形成したことを特徴とするウエルプレート。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかのウエルプレートにおいて、前記複数のウエルの周囲に溝を形成したことを特徴とするウエルプレート。
【請求項９】
請求項８のウエルプレートにおいて、前記溝の底のレベルと、前記ウエルの底のレベルが等しいことを特徴とするウエルプレート。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれかのウエルプレートを倒立顕微鏡で観察しながら被検体の播種、取り出しなどの被検体処理を行うことを特徴とする、ウエルプレートを用いた検査方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、微生物（細菌、原生動物など）、細胞などの被検体の各種検査に用いて好適なウエルプレート、及びウエルプレートを用いた検査方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
多数のウエル（穴）を有するウエルプレートの各ウエルに細胞などの被検体を入れ、さらに薬液などをウエル内に注入して被検体がどのような挙動を示すかを検査することが行われている。このような用途に供するウエルプレートとしては、例えば下記特許文献１に開示されている。これは、１８ｃｍ×１２ｃｍ程度のプレートに、直径７．５ｍｍ程度のウエルを９６個程度設けたものである。このウエルには機械的操作で細胞などの被検体を入れ、さらに機械的操作で薬液などを注入する。
【０００３】
また、近年、一度にたくさんの被検体を検査したい、高価な薬液の使用をなるべく少なくしたいという要請が強まり、なるべく小さい径のウエルをなるべく多く形成したウエルプレートが求められている。このような小径のウエルを多数形成したウエルプレートは、例えば下記特許文献２に開示されている。
【特許文献１】特開平１０−２２１２４３号公報
【特許文献２】特開２００５−１２７７９５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
小径のウエルに被検体を播種したり、薬液を注入したり、被検体を取り出す作業は顕微鏡下で行われることが多い。このような場合、ウエルを顕微鏡で覗きながら、顕微鏡の対物レンズの脇から適宜な治具をウエル部分に差し入れて行うが、対物レンズとウエルの間の距離が狭いため、非常に煩雑な作業となっていた。本発明は、小径のウエルに被検体を播種したり、薬液を注入したり、被検体を取り出す作業を簡単に行えるウエルプレート、及びウエルプレートを用いた検査方法を開発することを課題とする。
【０００５】
また、ウエル内に細胞などの被検体を入れて検査・培養などを行う場合、ウエル内の培養液や被検体が乾燥してしまうおそれがある。本発明は、検査・培養などに際して、容易に培養液や被検体の乾燥を防ぐことのできるウエルプレートを開発することをも課題とする。
【０００６】
さらに、比較的小さいウエル（ウエルの径が約５００μｍ以下）で、ウエルの個数が非常に多い場合（目安として１０００個以上）の場合になると、一つ一つのウエルに機械的な操作で細胞などの被検体や薬液を入れることは非常に困難となる。本発明は、ウエルの径をきわめて小さくし、ウエルの個数をきわめて多くしても、細胞などの被検体や薬液を個々のウエルに容易に入れることのできるウエルプレートを開発することをも課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（請求項１）
本発明は、基板に表裏貫通する貫通孔を形成し、前記基板に厚さ５０〜２００μｍの透明な薄板を接着して前記貫通孔を閉塞し、前記薄板の前記貫通孔内側の上面に複数のウエルを形成したことを特徴とするウエルプレートである。
【０００８】
（請求項２）
また本発明は、透明な基板に厚さ５０〜２００μｍの薄肉部を形成し、該薄肉部上面に複数のウエルを形成したことを特徴とするウエルプレートである。
【０００９】
（請求項３）
また本発明は、請求項１又は２のウエルプレートにおいて、前記複数のウエルの周囲に、前記ウエルが形成されている表面よりも高いカバープレート載置面を形成し、該載置面の上に、前記複数のウエルを覆ってカバープレートを載置可能としたことを特徴とするウエルプレートである。
【００１０】
（請求項４）
また本発明は、請求項３のウエルプレートにおいて、前記載置面が前記ウエルの形成されている表面よりも０．１〜０．５ｍｍ高いことを特徴とするウエルプレートである。
【００１１】
カバープレート載置面の高さは、０．１よりも低いとカバープレートが基板と接触してしまう可能性があり、０．５ｍｍを超える高さとすると顕微鏡観察に支障をきたす可能性がある。
【００１２】
（請求項５）
また本発明は、請求項３又は４のウエルプレートにおいて、前記基板又は薄板の表面に、穴を有するシリコーン製のシートを付着させて該シートの表面を前記載置面とし、前記穴の中に前記複数のウエルが位置するようにしたことを特徴とするウエルプレートである。
【００１３】
（請求項６）
また本発明は、請求項１〜５のいずれかのウエルプレートにおいて、前記ウエル内面の少なくとも底面に金被膜を形成したことを特徴とするウエルプレートである。
【００１４】
金被膜の厚みは、１０〜７０ｎｍが適当である。１０ｎｍ未満であれば、金属の被膜強度が弱く剥離するおそれがあり、７０ｎｍを超えると光の透過性が著しく悪くなり、顕微鏡観察に支障をきたす。金被膜は他の金属被膜（コンタクト・メタル：例えばクロム、ニッケル、チタンなど）を形成した後、その上に形成しても良い。その場合、金属被膜の厚さ（コンタクト・メタルの厚さ＋金被膜の厚さ）は１０〜７０ｎｍが適当である。コンタクト・メタルを用いることにより、金被膜が基板から剥離しにくくなる。
【００１５】
（請求項７）
また本発明は、請求項６のウエルプレートにおいて、前記金被膜の上に更にアルカンチオール被膜を形成したことを特徴とするウエルプレートである。
【００１６】
アルカンチオールとは、末端にSH基をもち、間にＣＨ２基が続き、他方の末端にＯＨ、ＣＨ３、ＮＨ２、ＣＯＯＨなどの様々な官能基をもつ化合物のことであり、一般式、ＨＳ−（ＣＨ２)ｎ−Ｘで示されるものである（Ｘは官能基）。アルカンチオールをエタノールに溶解したものを金被膜に塗布し、又はウエルプレートを浸漬するだけで、金被膜表面にアルカンチオールが自己組織化し、アルカンチオール被膜が形成される。アルカンチオールのSH基が金被膜に結合し、官能基が被検体（細胞）と結合するので、被検体（細胞）がアルカンチオール被膜を介して金被膜に付着する。
【００１７】
（請求項８）
また本発明は、請求項１〜７のいずれかのウエルプレートにおいて、前記複数のウエルの周囲に溝を形成したことを特徴とするウエルプレートである。
【００１８】
ウエルの集団の周囲に溝を設けると、ウエル内に被検体を入れるときに溝の中にも被検体を入れ、溝の中で補助的に被検体を培養することができる。したがって、ウエル内の被検体に不都合が生じた場合、これを溝内の好ましい被検体と交換し、検査効率を高めることができる。
【００１９】
（請求項９）
また本発明は、請求項８のウエルプレートにおいて、前記溝の底のレベルと、前記ウエルの底のレベルが等しいことを特徴とするウエルプレートである。
【００２０】
溝の底のレベルとウエルの底のレベルとを等しくすると、ウエルと溝を観察する場合の顕微鏡の焦点が等しくなり、作業がしやすくなる。なお、溝の底のレベルとウエルの底のレベルとを完全に等しくするのは技術的に困難であり、１μｍまでの誤差は、実用上問題ないので、本発明に含まれる。
【００２１】
（請求項１０）
また本発明は、請求項１〜９のいずれかのウエルプレートを倒立顕微鏡で観察しながら被検体の播種、取り出しなどの被検体処理を行うことを特徴とする、ウエルプレートを用いた検査方法である。
【発明の効果】
【００２２】
本発明のウエルプレートは、ウエルが厚さ５０〜２００μｍの薄板表面又は薄肉部に形成されているので、ウエル内の被検体を倒立顕微鏡でウエルプレートの裏側から観察することが可能となる。倒立顕微鏡を用いることにより、ウエルプレートの上方がオープンスペースとなり、顕微鏡の対物レンズに邪魔されることなく、被検体の播種若しくは取り出作業、ウエル内に薬液を注入する作業、又はウエル内の被検体に遺伝子を注入する作業等、被検体処理を容易かつ確実に行うことができる。
【００２３】
複数のウエルの周囲にカバープレート載置面を設け、その上にカバープレート（透明な薄いカバーガラスなど）を載せ、蓋をすることで、被検体や薬液の乾燥を防ぐことができる。
【００２４】
ウエルの少なくとも底面に金被膜を形成し、また金被膜の上に更にアルカンチオール被膜を形成すると、微小なウエル内に細胞などの被検体を効率よく入れることができる。
【００２５】
複数のウエルの周囲に溝を設けると、ウエル内の被検体に不都合が生じた場合、これを溝内の好ましい被検体と交換し、検査効率を高めることができる。その際、溝の底のレベルとウエルの底のレベルとを等しくしておくと、顕微鏡の焦点が等しくなり、作業がしやすくなる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
基板に貫通孔を形成し、薄板でこれを閉塞してウエルプレートを形成する場合、基板の材質は薄板を接着できるものであれば特に制限はなく、例えばガラス、樹脂などを用いることができる。基板の厚さは、必要な強度及び剛性を維持できる厚さであればよく、通常は０．８〜２ｍｍ程度が好適である。基板の大きさは、顕微鏡観察に適した大きさがよく、例えば、従来のスライドガラスと同じ大きさ（２６ｍｍ×７６ｍｍ）とすることができる。貫通孔の大きさは、内側にウエルを形成できる大きさであればよく、貫通孔の形状は自由である。薄板の材質は透明性、加工性、安全性などを考慮して自由に選択することができるが、例えばポリカーボネート樹脂などとすることができる。薄板の厚さは５０〜２００μｍがよい。５０μｍ未満ではウエルを安定して形成するのが困難となり、また薄肉部に撓みを生じやすくなったり、強度が不十分になって破損しやすくなる。２００μｍを越えると、倒立顕微鏡を用いて通常の倍率（４００倍程度）の観察を行った場合、顕微鏡の焦点が合わずに鮮明な観察ができない。薄板の形状は自由である。基板と薄板とは、接着剤で接着してもよいし、融着により接着するなどしてもよい。例えば、基板を黒色の樹脂製とし、薄板を透明な樹脂製とすると、レーザ融着により基板と薄板を接着できる。
【００２７】
透明な基板に薄肉部を一体成形する場合は、基板の材質は透明性、加工性、安全性などを考慮して自由に選択することができるが、例えばポリカーボネート樹脂などとすることができる。基板の厚さは、必要な強度及び剛性を維持できる厚さであればよく、通常は０．８〜２ｍｍ程度が好適である。基板の大きさは、顕微鏡観察に適した大きさがよく、例えば、従来のスライドガラスと同じ大きさ（２６ｍｍ×７６ｍｍ）とすることができる。薄肉部の厚さは５０〜２００μｍがよい。５０μｍ未満ではウエルを安定して形成するのが困難となり、また薄肉部に撓みを生じやすくなったり、強度が不十分になって破損しやすくなる。２００μｍを越えると、倒立顕微鏡を用いて通常の倍率（４００倍程度）の観察を行った場合、顕微鏡の焦点が合わずに鮮明な観察ができない。薄肉部の大きさは、ウエルを形成できる大きさであればよく、薄肉部の形状は自由である。
【００２８】
ウエルの平面形状は円形、正方形など自由である。ウエルの大きさは自由であるが、径（ウエルの平面形状の重心を通る全てのさしわたし線分のうちの最小のものの長さ）が１〜５００μｍであることが望ましい。ウエルの径は、１μｍ未満では安定したウエルの形成が困難となる。５００μｍを超える大きさは不必要であり、検査効率が悪くなる。ウエルの深さは１μｍ〜薄板又は薄肉部の厚さの半分程度が望ましい。１μｍ未満ではウエル内に被検物を安定して残存させることができず、またこのようなきわめて浅いウエルを安定して形成することも困難である。薄板又は薄肉部の厚さの半分よりも深くなると、ウエルを形成した部分の強度が著しく低下すると共に、ウエルを安定して形成できない可能性がある。
【００２９】
ウエルをガラスに形成する場合、いわゆるエッチングの手法で形成することができる。また、樹脂に形成する場合はエキシマレーザを用いるのが好ましい。エキシマレーザはＸｅ、Ｋｒ、Ａｒ、Ｎｅなどの希ガスとＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉなどのハロゲンの組み合わせを励起状態とし、非常に高い発振効率と大出力のレーザ発振を得るもので、熱硬化性樹脂層にエキシマレーザ光を照射すると、樹脂が瞬時に蒸発しシャープで所望の形状のウエルが形成される。ウエルの形成に用いるレーザ照射装置は、レーザ光が複数の透過孔を有するマスク、集光レンズを順次通過するように構成されたものが好ましい。マスクを通過したレーザ光を集光レンズで絞り込むので、非常に小さな径のウエルを高精度に形成することができる。
【００３０】
複数のウエルの周囲に形成するカバープレート載置面は、穴を有するシリコーン製のシートを基板表面に付着して形成するのが便利である。シリコーンのシートは細胞に対して毒性がなく、また、基板の上に重ねるだけで、通常の作業では容易に離脱しない程度に付着する。カバープレートも上に載せるだけで通常の作業では容易に離脱しない程度に付着する。また、カバープレートやシートの取り外しも簡単で便利である。その他、カバープレート載置面は例えばリング状をした種々の樹脂を接着したり、基板を成形する際に一体成形することで形成することができる。カバープレートは、顕微鏡検査に用いるいわゆるカバーガラスのような、２０ｍｍ×２０ｍｍ×０．１ｍｍ程度の透明なプレートとすると、カバープレートをしたまま顕微鏡検査を行えるので便利である。
【実施例】
【００３１】
図１は実施例のウエルプレートの平面図、図２は図１におけるＡ−Ａ線断面図である。このウエルプレートは、７６ｍｍ×２６ｍｍ、厚さ１ｍｍの無色透明ポリカーボネート製基板１の中央部に、表裏貫通する円形の貫通孔２を形成し、基板１の表面側に厚さ１００μｍのポリカーボネート製の透明な円形薄板を接着剤で接着し、貫通孔２を閉塞している。薄板３表面の貫通孔２の内側（貫通孔２の中央部）に多数のウエルが密集したウエルの集団４が形成されている。ウエルの集団４は、直径１５μｍ、深さ８μｍの円筒形ウエル５を３０μｍ間隔で縦横に１００個×１００個、合計１００００個設けたものである。図３は、そのウエルの集団４の平面図で、縦（Ｙ方向）横（Ｘ方向）共に中央部分を省略して表している。ウエルの集団４の下辺にはＸ方向の番地１、１０、２０、…８０、９０、１００を、左辺にはＹ方向の番地１、１０、２０、…８０、９０、１００を刻印している。このようにすることで、各ウエルに入れた被検体を個別に管理しやすくなる。図４はＢ部分、すなわちＸ＝１、Ｙ＝８０付近の拡大図、図５はＣ部分、すなわちＸ＝２０、Ｙ＝１付近の拡大図である。このウエルプレートは、顕微鏡観察にごく普通に使用される、いわゆるスライドガラスと同じ大きさであるので、このまま顕微鏡観察を行うのに便利である。ウエルの形成パターンは、この実施例に限らず、種々のパターンを採用できる。
【００３２】
ウエルの形成はレーザ照射装置によって行われる。図６に示すように、レーザ照射装置はエキシマレーザ発振器６、マスク８、集光レンズ９、加工台１０を有する。エキシマレーザ発振器６のレーザ光照射部より照射されたレーザ光７はマスク８、集光レンズ９を経てワーク（薄板を接着した基板１）に照射される。エキシマレーザ発振器６としては、例えばフッ化クリプトン（ＫｒＦ）レーザ（主波長２４８ｎｍ）、フッ化アルゴン（ＡｒＦ）レーザ（主波長１９３ｎｍ）を用いることができる。マスク８としては、例えば厚さ約５０μｍのステンレス板、厚さ数ｍｍの石英ガラスにクロムを数百ｎｍの厚さに成膜したものを用いることができる。マスクにはレーザ光が透過できる個所とできない個所がある。すなわち、ステンレスのマスクでは所定の透過孔（貫通孔）が所定間隔で開けられ、石英ガラスのマスクではクロム膜に所定の透過孔（貫通孔）が所定間隔で開けられている。これらの透過孔の大きさと集光レンズの倍率により、形成されるウエルの径が定まり、透過孔の形状によりウエルの形状が定まる。直径１５μｍのウエルを形成する場合、マスクの透過孔の直径は６０〜１５０μｍ程度とするのがよい。
【００３３】
ウエルプレートを加工台１０の上にセットする。加工台１０は、ワークを所定量Ｘ及びＹ方向に移動させることができる。直径１５μｍのウエルを３０μｍ間隔で１００×１００個、合計１００００個形成する場合、例えば、直径７５μｍの透過孔を１５０μｍ間隔で２０×２０個、合計４００個設けたマスクを用い、集光レンズの倍率を５倍とし、エキシマレーザ光を例えば１秒間照射して４００個のウエルを形成する。ワーク（基板１）を９００μｍＸ方向又はＹ方向に移動し、エキシマレーザ光を照射して更に４００個のウエルを形成する。このような動作を合計２５回繰り返して１００個×１００個、合計１００００個のウエルを形成することができる。番地の刻印も、このようなレーザ照射装置により行うことができる。
【００３４】
ウエルプレートのウエルの集団４をマスク１１で覆い（図７）、スパッタリングマシンで金を蒸着した。マスク１１はステンレスの薄板（厚さ約５０μｍ程度）で、ウエルの集団４と同じパターンで直径１５μｍの円形の孔１２が３０μｍ間隔で１００００個開けられている。顕微鏡下で各孔１２が各ウエル５の位置になるように位置合わせを行った。金は孔１２の部分にあるウエル内面のみに蒸着され、ウエル５の内面に金被膜１７が形成された（図８）。金被膜は、必ずしもウエルの内面全体に形成する必要はなく、少なくとも底面に形成することで、十分な効果を得ることができる。
【００３５】
金被膜の上にアルカンチオール被膜を形成するには、アルカンチオール溶液（アルカンチオールをエタノールに溶解したもの）を金被膜に塗布し、又は基板をアルカンチオール溶液に浸漬し、その後乾燥させて（自然乾燥、強制乾燥を問わない）アルカンチオールを金被膜の上に自己組織化させる。その後、アルコールなどで洗浄すると、金被膜以外の部分に付着しているアルカンチオールは洗い落とされ、金被膜の上にアルカンチオール被膜が残る。
【００３６】
上記のウエルプレートは、倒立顕微鏡で観察しながら、機械的手段などにより細胞などの被検体を播種（ウエル内に入れること）したり、ウエルから取り出したり、ウエル内に薬液を注入したり、ウエル内の被検体に遺伝子を注入するなど、種々の被検体処理を行うことができる。この場合、倒立顕微鏡を用いることにより、ウエルプレートの上部が開放された空間（オープンスペース）となり、種々の被検体処理を容易かつ確実に行うことができる。
【００３７】
被検体をウエル内に入れるには、例えば図９に示すようにすることもできる。すなわち、被検体を純水などの液体で希釈した被検体希釈液１３を、スポイトなどでウエルの集団４の上に滴下し、その後、スクレープ手段１４を薄板３に押し付けながら矢印方向に移動し、余剰の被検体希釈液１３を拭うようにすることで、被検体がウエル内に入り込む。被検体希釈液の希釈具合は、希釈度Ａ６００で０．０５〜０．０７程度が適当である。希釈度Ａ６００とは、例えば被検体として酵母を用いるとき、１ｍｌの菌体懸濁液に何個の酵母が存在するかを吸光度計で検出する波長が６００ｎｍであることを示し、希釈度Ａ６００で１の場合、酵母は約３×１０７個存在する。スクレープ手段は、底面が平滑な面となっているものであれば何でも良いが、例えばカバーガラスが大きさ及び厚さが手軽なため、好適である。直径２０μｍ、深さ７．５μｍのウエルを１００個×１００個で一万個形成したウエルプレートに、被検体（酵母細胞）を純水に分散させて希釈度Ａ６００＝０．０５とした被検体希釈液を図９に示すようにウエル集団４の上に滴下し、スクレープ手段１４（カバーガラス）を指で基板に押し付けながら矢印方向に移動し、余剰の被検体希釈液を拭い取った結果、約７０％の数のウエル内に１個又は２個の被検体を入れることができた。
【００３８】
このような作業を行う場合、図１０に示すバックアップ治具１５を用いることが望ましい。バックアップ治具１５は、基板１の貫通孔２と同じ形でやや小さい平面形状に形成され、厚さが基板の厚さとほぼ等しい板状体（この場合は円板状）である。ウエルプレートを、その貫通孔２の中にバックアップ治具１５を入れた状態で作業台１６の上に置き、上記の作業等を行う。このようにすることで、薄板３の撓み変形が防止され、作業を円滑に行うことができる。バックアップ治具の素材は金属、樹脂など、薄板（又は薄肉部）の撓み変形を実質的に防止できる程度の硬度を有するものであればよい。
【００３９】
図１１は、カバープレート載置面１８ａを形成したウエルプレートの平面図、図１２は図１１におけるＤ−Ｄ線断面図である。このウエルプレートは、図１、２のウエルプレートと同様に、無色透明ポリカーボネート製基板１の中央部に、表裏貫通する貫通孔２を形成し、基板１の表面側に厚さ１００μｍのポリカーボネート製透明薄板を接着剤で接着し、貫通孔２を閉塞したものである。薄板３表面の貫通孔２の内側（貫通孔２の中央部）に多数のウエルが密集したウエルの集団４が形成されている。さらに、薄板３の表面にリング状の樹脂シート１８（厚さ０．１〜０．５ｍｍ）を接着し、ウエルの集団の周囲にカバープレート載置面１８ａ（樹脂シート１７の上面）を形成している。図１２に示すように、カバープレート載置面１８にカバープレート１９（大きさ２ｃｍ×２ｃｍ、厚さ０．１ｍｍの透明な、いわゆるカバーガラス）を載せることで、被検体及び検査液などの乾燥を防ぐことができ、このままの状態で顕微鏡観察することもでき、便利である。実例として、酵母表面の蛍光確認も可能であり、バイオ試料にも適用できる。
【００４０】
図１３は、図１１のウエルプレートのウエルの集団４の一部を拡大した平面図、図１４は図１３におけるＥ−Ｅ線端面図である。ウエルの集団４の周囲には溝２０が形成されている。ウエルが形成されている面は、基板１の表面よりも若干低いレベルとなっている。溝底面２０ａとウエル底面５ａのレベル（高さ）は同じである。ウエル内に被検体を入れるときに溝２０の中にも被検体を入れ、溝の中で補助的に被検体を培養することができる。したがって、ウエル内の被検体に不都合が生じた場合、これを溝内の好ましい被検体と交換し、検査効率を高めることができる。その際、溝の底のレベルとウエルの底のレベルとが等しいので、顕微鏡の焦点が等しくなり、作業がしやすい。
【００４１】
図１５は、他の実施例のウエルプレートの平面図、図１６は図１５におけるＦ−Ｆ線断面図である。このウエルプレートは、７６ｍｍ×２６ｍｍ、厚さ１ｍｍの無色透明ポリカーボネート製基板２１の中央部に、背面を切欠した薄肉部２２を形成し、薄肉部２２の表面中央にウエルの集団４を形成したものである。薄肉部の厚さは１００μｍである。薄肉部を有する基板はインジェクション成形により一体成形され、ウエルの集団は前記のエキシマレーザを用いた方法で形成されている。
【００４２】
図１７は、ウエルの集団４を形成した基板２１の表面にシリコーン製の厚さ０．１〜０．５ｍｍのシート２３を付着してカバープレート載置面（シート２３の上面）を形成し、該載置面にカバープレート２３（大きさ２ｃｍ×２ｃｍ、厚さ０．１ｍｍの透明な、いわゆるカバーガラス）を付着する場合を示している。シート２３は、ウエルの集団４に対応する位置に、ウエルの集団４よりも若干大きな穴２４を有する。シート２３を付着することにより、ウエルが形成されている表面よりもシート２３の厚み分だけ高いカバープレート載置面が形成される。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】ウエルプレートの平面図である。
【図２】図１におけるＡ−Ａ線断面図である。
【図３】ウエルの集団３の略平面図である。
【図４】図２におけるＢ部拡大図である。
【図５】図２におけるＣ部拡大図である。
【図６】ウエル形成方法を模式的に示す説明図である。
【図７】ウエルの集団をマスクで覆った状態を示す断面図である。
【図８】金被膜を形成したウエルの断面図である。
【図９】被検体をウエル内に入れる方法の説明図である。
【図１０】バックアップ治具を装着したウエルプレートの断面図である。
【図１１】ウエルプレートの平面図である。
【図１２】図１１におけるＤ−Ｄ線断面図である。
【図１３】図１１におけるウエルの集団の部分拡大平面図である。
【図１４】図１３におけるＥ−Ｅ線端面図である。
【図１５】ウエルプレートの平面図である。
【図１６】図１５におけるＦ−Ｆ線断面図である。
【図１７】カバープレートを載置したウエルプレートの分解斜視図である。
【符号の説明】
【００４４】
１  基板
２  貫通孔
３  薄板
４  ウエルの集団
５  ウエル
６  エキシマレーザ発振器
７  レーザ光
８  マスク
９  集光レンズ
１０  加工台
１１  マスク
１２  孔
１３  被検体希釈液
１４  スクレープ手段
１５  バックアップ治具
１６  作業台
１７  金被膜
１８  シート
１８ａ  カバープレート載置面
１９  カバープレート
２０  溝
２１  基板
２２  薄肉部
２３  シート
２４  穴
【図１】
2007212344.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2007212344.tif 000007
【図６】
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【図７】
2007212344.tif 000009
【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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