(57)【要約】【課題】  血糖を調節する医薬組成物と食品を提供する。【解決手段】  少なくとも40mg/kgの投与量のミラクルフルーツ抽出物を含むことを特徴とする血糖をコントロールする医薬組成物、および少なくとも40mg/kgの投与量のミラクルフルーツ抽出物と西洋人参粉を含むことを特徴とする血糖をコントロールする食品、を提供する。【選択図】  図２
2007290979.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも40mg/kgの投与量のミラクルフルーツ抽出物を含むことを特徴とする血糖をコントロールする医薬組成物。
【請求項２】
40mg/kgから120mg/kgまでの投与量のミラクルフルーツ抽出物をを含む請求項１に記載の血糖をコントロールする医薬組成物。
【請求項３】
少なくとも40mg/kgの投与量のミラクルフルーツ抽出物と西洋人参粉を含むことを特徴とする血糖をコントロールする食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特にミラクルフルーツ抽出物を含む、血糖をコントロールする医薬組成物及び食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は、現代人にとって十大死因の一つであるだけでなく、脳血管疾病や高血圧、心臓病にも深く係わっており、個人の生活などに様々な側面で深刻な影響をもたらしている。このことから、糖尿病の管理は極めて重大な問題である。
【０００３】
また、臨床的に糖尿病は１型である「インシュリン依存型」糖尿病（以下、１型糖尿病と称す）と２型である「インシュリン非依存型」糖尿病（以下、２型糖尿病と称す）との２種類に分けられ、該１型糖尿病の主な病因は、遺伝、ウイルス感染や毒性物による膵臓ベータ細胞の破壊、或いは自己免疫性抗体と細胞免疫作用による膵臓ベータ細胞の破壊により生ずるインシュリン分泌異常であり、一般的にはインシュリン注射により治療する。一方、２型糖尿病の病因は、未だ不明であるが、遺伝や飲食に関連していると考えられている。また、２型糖尿病の患者には通常、インシュリン抵抗性（insulin resistance）が表れ、それはベータ細胞からインシュリンを分泌し過ぎること（hyperinsulinamia）により、骨格筋や脂肪組織、肝臓など周辺組織のインシュリン感受性（insulin sensitivity）が弱められた結果、グルコースの利用効率が低下し、高血糖に至るものである。
【０００４】
血糖のコントロール、適度な運動及びバランスの取れた食事は、糖尿病治療の三大原則として知られているが、血糖降下薬としては主にスルホニル尿素（Sulfonylurea）とビグアナイド（Biguanides; BG）が用いられ、通常は、インシュリン注射と組み合わせることにより、患者の血糖をコントロールしている。なお、スルホニル尿素系の代表的なトルブタミド（tolbutamide）糖尿病薬は、体内のインシュリンの分泌を促進して、インシュリンとレセプターの結合を強めるものである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上記の従来の糖尿病のコントロール及び治療には、以下の問題点がある。
インシュリン注射や経口投与薬は、血糖をコントロールできるが、糖尿病患者の心臓、血管、眼球、腎臓などの神経系の病変に対しては未だ有効的に制御することができない。
故に、これからは患者に対して、より多種の薬品を選択・提供できるようにして、より血糖を有効的にコントロールし、病変の進行を防ぐために、新しい薬品や健康食品により臨床治療をサポートすることが必要である。
【０００６】
そこで、出願されたのが本発明であって、血糖をコントロールする医薬組成物及び食品を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本願の請求項１の発明は、少なくとも40mg/kgの投与量のミラクルフルーツ抽出物を含むことを特徴とする血糖をコントロールする医薬組成物。
本願の請求項２の発明は、40mg/kgから120mg/kgまでの投与量のミラクルフルーツ抽出物をを含む請求項１に記載の血糖をコントロールする医薬組成物。
本願の請求項３の発明は、少なくとも40mg/kgの投与量のミラクルフルーツ抽出物と西洋人参粉を含むことを特徴とする血糖をコントロールする食品。
【発明の効果】
【０００８】
本発明は上記の課題を解決するためのものであり、インシュリンを高めるミラクルフルーツ抽出物を含むことにより、血糖をコントロールできると共に、糖尿病患者に多種の薬品や食品を提供できることから、より血糖を有効的コントロールでき、病変の進行を阻止することができるので、臨床治療に寄与することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、添付図面を参照して本発明の実施例を詳細に説明する。
【００１０】
図１は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに１４日間連続投与した時の血糖降下作用を示したグラフであり、図２は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに投与した時のグルコース負荷試験への影響を示したグラフであり、図３は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに一回投与した時の血糖降下作用への影響を示したグラフであり、図４は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに一回投与した時のインシュリン分泌作用への影響を示したグラフであり、図５は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を１型糖尿病ラットに一回投与した時の血糖降下作用への影響を示したグラフであり、図６は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を１型糖尿病ラットに１４日間連続投与した時の体内血糖への影響を示したグラフであり、図７は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに連続投与した時の血糖降下作用を示したグラフであり、図８は本発明に係るミラクルフルーツ混合物とトルブタミドを２型糖尿病ラットに連続投与した時の血糖降下作用を示したグラフであり、図９は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに三日間連続投与した後の、グルコース負荷試験における血糖濃度の推移を示したグラフであり、図１０は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに三日間連続投与した後の、グルコース負荷試験におけるインシュリン濃度の推移を示したグラフであり、図１１は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに三日間連続投与した後、グルコース負荷試験をグルコース−インシュリン指数で示したグラフであり、図１２は本発明に係るミラクルフルーツ混合物を１型糖尿病ラットに三日間連続投与した時の血糖降下作用への影響を示したグラフである。
【００１１】
ミラクルフルーツ（Synsepalum dulcuficum (Schum.)Daniell, Sapotacfea）は、アカテツ科に属する西アフリカ原産の味覚修飾植物であって、酸味を甘味と認識させる味覚修飾効果を有する。
【００１２】
また、西洋人参（Panax quinquefolius）は、ウコギ科の多年生草であり、その乾燥させた根は補気類の漢方薬として古くから使われてきた。
【００１３】
本発明は、ミラクルフルーツを食品添加物として用いることにより、糖尿病患者のダイエットに寄与するものであり、また本発明はミラクルフルーツの抽出物と西洋人参を利用することにより、血糖のコントロールができ、更には、ミラクルフルーツの抽出物により血糖のコントロールが可能である医薬組成物を提供することもできる。
【００１４】
本発明では、ミラクルフルーツの抽出物と西洋人参とを1:9の割合で混合し、ミラクルフルーツ混合物（meila-ginseng mixture）として以下の各実施例に用いている。
【実施例１】
【００１５】
実施例１：血糖のコントロールに対するミラクル混合物の初期試験
１．１  実験動物の出所
台湾成功大学医学院動物センターにおいては、生後８週齢以上で、体重２００から２５０グラムまでのオスのWistarラットが用いられている。
前記のラットは同センターににおいて飼育されており、その飼育環境は、エアーコンディショニングにより室温が２５±１℃に保たれると共に、明暗時間は夫々１２時間に設定され、食物と水は自由に摂食できる環境にある。
【００１６】
１．２  インシュリン依存型（１型）糖尿病ラットへの誘導
一般的な方法を用いて、前記８週齢のラットに絶食させた後、30mg/kgのペントバルビタール(pentobarbital)を腹腔に注射してラットに麻酔をかけた後、60mg/kgのストレプトゾトシン（streptozotocin；STZ）を股静脈に注射する。前記STZをクエン酸ナトリウムを含有するpH4.5の塩水に溶解させる。そして一週間後、前記麻酔方法で麻酔されたラットの尾静脈から採血し、空腹時の血糖値を測定する。この時、前記ラットの血糖値が300mg/dL以上であり、且つ糖尿病特有の「多食、多飲、多尿」など症状が現れた場合、１型糖尿病ラットであるインシュリン依存型糖尿病（IDDM）ラットと見なし、STZ誘発糖尿病ラットと称する。
【００１７】
１．３  インシュリン非依存型（２型）糖尿病ラットへの誘導
前記８週齢のラットに高グルコース（60%）の飼料(Teklad, Medison, WI )を与えながら、食物と水を自由に摂食させる。そして三週間後、ラットが２型糖尿病に類似する症状を現した時、トルブタミドで膵臓を刺激してインシュリンを分泌させ、ラットのインシュリン抵抗性（resistance）を確認する。この時、もしトルブタミドを投与したラットの血糖降下効果が著しく低下または消失した場合、該ラットを２型糖尿病ラットであるインシュリン非依存型糖尿病（NIDDM）ラットと見なす。
【００１８】
１．４  投薬方法
初期評価では、ミラクルフルーツ混合物を40mg/kgの投与量で経口投与し、90分後、ラットの血糖を降下させることができるので、40mg/kgの投与量を常用量、即ち低投与量とする。また、台湾における健康食品安全及び効果評価方法により、投与量と作用との関係を示す場合には、次の三つの投与量、40mg/kg（低投与量）、60mg/kg（中投与量）、80mg/kg（高投与量）を選定して用いる。
初期評価においては、一晩絶食させたラットにミラクルフルーツ混合物を投与すると共に、30mg/kgのペントバルビタール(pentobarbital)のを腹腔注射することにより麻酔し、その後、0分、60分、90分及び120分にそれぞれ尾静脈から採血して、血糖値と血中グルコースを測定する。対照群（８匹で一群）には同じ方法で生理食塩水を投与する。
【００１９】
また、長期作用の評価においては、健康ラットに毎日三回ミラクルフルーツ混合物を投与し、それを二週間連続投与した後、投与開始前日の血糖値を基準として（第0日）、投与後第2日、第5日、第10日、第15日の同一時間（当日の第三回投与90分後）に採血を行い、該時点の血糖値を測定することにより、ミラクルフルーツ混合物の長期効果を評価する。
そして、ミラクルフルーツ混合物を長期投与した場合、健康ラットに対する影響を観察した結果、血糖降下作用があることが分かった。高投与量群（80mg/kg）を例とすると、図１及び表１に示すように、血糖降下率は第1日の24.25±1.6%から第15日の21.5±2.1%にわたって顕著な差は見られない。よって、ミラクルフルーツ混合物を長期投与した場合、健康ラットに持続的な効果を有しないことが確認された。
本明細書において、以下各図と各表に、同一時点で対照群の数値との差異：「*」でp＜0.05、「**」でp＜0.01、また「***」でp＜0.001を示す。
表１は、健康ラットにミラクルフルーツを長期投与した時、血糖値に対する作用を示した表である。
【表１】
2007290979.tif 000003
【００２０】
１．５  血糖及び血中インシュリンの測定方法
静脈から採取した血液を遠心し、グルコース試薬でグルコース酸化酵素法を用いて血糖の変化を測定する。グルコースがグルコース酸化酵素により触媒され、グルクロン酸と過酸化水素とに酸化され、赤い色を表す。標準品との比較により、その赤さの対応する血糖値が記録される。尚、血中インシュリンの測定は市販の試薬（米国Penisula Lab., Inc.）で行われる。
【００２１】
１．６  ラットの体重、摂食量及び飲用水量の記録
毎日定時的にラットの体重（g）、摂食量（g/day）及び飲用水量（g/day）を記録する。尚、摂食量と飲用水量は、前日の飼料の重量と飲用水の重量との差により得る。体重（g）は前日の体重と試験後の体重の差により得る。
【００２２】
１．７  グルコース負荷試験（glucose challenge test）
一晩絶食させた健康ラットを８匹１群とし、３群を有する実験群と１群を有する対照群とに分け、対照群のラットに生理食塩水を、実験群のラットにそれぞれ40、60、80mg/kgのミラクルフルーツ混合物を投与し、投与６０分後、ラットの腹腔に0.5g/kgのグルコースを注射し、この時点を０分として、5、10、20、30、60、90及び120分後の血液を採取することにより、血糖値の変化を測定する。
【００２３】
臨床的には、一般にグルコース負荷試験により、組織に対する糖分の利用率を評価することから、本発明の実施例においても該グルコース負荷試験を用い、それによりミラクルフルーツ混合物が組織に対する糖分の利用率を向上させていることを確認した。更に、高投与量群（80mg/kg）を例とすると、５分で血糖値が192.4±3.7mg/dLに達し、対照群（250±3.0mg/dL）と比べると、その血糖値の上昇は著しく少ないことが分かる。
また、図２及び表２に示すように、ミラクルフルーツ混合物は、外因性高血糖現象を急速に改善する効果を有すると共に、該効果を２時間ほど維持できるので、ミラクルフルーツ混合物には糖分利用率を向上させる効果を有することが分かる。
表２は、ミラクルフルーツ混合物を投与した時の、健康ラットに対する血糖負荷試験の結果を示した表である。
【表２】
2007290979.tif 000004
【００２４】
１．８  腹腔内グルコース負荷試験（intraperitoneal glucose tolerance test: IPGTT）
グルコース―インシュリン指数（glucose-insulin index）によりミラクルフルーツ混合物の、ラットのインシュリン抵抗に対する影響を評価する。
評価方法：
８匹のラットを１群（n=8）とし、毎日40mg/kg、60mg/kg、及び80mg/kgのミラクルフルーツ混合物を夫々３実験群の２型糖尿病ラットに一日3回、２週間連続投与すると共に、対照群のラット（同じくn=8）に同様の方法で等量の生理食塩水を投与し、実験最終日に全てのラットに自由摂食させてから、更に１日絶食させた後、グロコース耐性試験を行う。
【００２５】
前記グルコース耐性試験では、30mg/kgのペントバルビタール(pentobarbital)の腹腔注射によりラットに麻酔をかける時間を零時(０)とし、ラットの腹腔に1g/kgのグルコースを注射した後、30、60、90、及び120分後に血液を採取し、血糖値（mg/dL）とインシュリン濃度（pmol/L）を記録する。最後にグルコース耐性試験で測定したグルコースとインシュリン濃度の変化を薬物血中濃度―時間曲線下面積（area under curve, AUC）グラフに換算した後、該グラフによりグルコース―インシュリン指数を得る。尚、該指数は、その数値が小さいほどインシュリンの働き（インシュリン感受性）が良好であることを示している。
【００２６】
１．９  統計分析
実験結果はすべて「平均値±偏差値(mean±SE)」で表記され、血糖降下のパーセンテージは、ミラクルフルーツ混合物を与えたラットの血糖値と等量の溶媒（生理食塩水）を与えた対照群ラットとの血糖値の差を、対照群の血糖値で割ったものであり、パーセント（%）と表記される。尚、分析は一般的な分散分析法であるANOVA法で行い、両者の差はDunnett's post-hoc testで評価し、p＜0.05の場合、顕著な差があるとする。
【実施例２】
【００２７】
実施例２：健康ラットと糖尿病ラットに対する投薬試験
２．１  ミラクルフルーツ混合物の健康ラットに対する投薬試験
一晩絶食させた各ラットにそれぞれミラクルフルーツ混合物を40mg/kg、60 mg/kg、80 mg/kgの投与量で経口投与した後、ペントバルビタールで麻酔を施し採血する。
そして、図３及び表３に示すように、60分後、投与量40mg/kgの実験群の血糖値が108.4±2.0mg/dLから98.7±2.9mg/dLまで低下していることから、これは9.0±2.3%の血糖降下作用があったことを示すものであり、用量依存的な様式（dose-dependent manner）で作用していることが分かった。さらに、時間の進行により、ミラクルフルーツ混合物の血糖降下作用が増加する傾向であることも確認され、投与90分後に該効果が最大値に達することも確認された。
表３は、ミラクルフルーツ混合物を投与した時の、健康ラットの血糖降下作用の変化を示した表である。
【表３】
2007290979.tif 000005
【００２８】
次に、ミラクルフルーツ混合物の、健康ラットのインシュリン分泌作用に対する影響を解明するために、さらに最大血糖降下作用が現れた時点（投与90分後）で血中インシュリン濃度を測定する。その結果、図４及び表４に示すように、ミラクルフルーツ混合物が用量依存的な様式（dose-dependent manner）でインシュリン濃度を増加させることも分かった。
表４は、ミラクルフルーツ混合物を投与した時の、健康ラットの血中インシュリンの変化を示した表である。
【表４】
2007290979.tif 000006
【００２９】
２．２  ミラクルフルーツ混合物の短期及び長期の投与による１型糖尿病ラットの血糖に対する影響
一晩絶食させた各ラットにそれぞれミラクルフルーツ混合物を40mg/kg、60 mg/kg、及び80 mg/kgの投与量で経口投与した後、ペントバルビタールで麻酔を施して採血した結果、図５及び表５に示すように、120分後、80mg/kgの投与量でも、血糖降下作用は確認されなかった。よって、毎日３回１４日連続投与する方法により、ミラクルフルーツ混合物の、１型糖尿病ラットの血糖降下作用に対する変化を検討する。
表５は、ミラクルフルーツ混合物を短期及び長期投与した時の、STZ誘発の１型糖尿病ラットの血糖の変化を示した表である。
【表５】
2007290979.tif 000007
【００３０】
図６及び表６に示すように、ミラクルフルーツ混合物の長期投与により、１型糖尿病ラットの血糖降下作用を促進することが分かった。
表６は、ミラクルフルーツ混合物を長期投与した時の、ストレプトゾトシン（streptozotocin）誘發１型糖尿病ラットの血糖降下作用の変化を示した表である。
【表６】
2007290979.tif 000008
【００３１】
２．３  長期ミラクルフルーツ混合物の投与による２型糖尿病ラットの血糖に対する影響
試験前、２型糖尿病ラットの腹腔時において、10mg/kgのトルブタミドを注射して、トルブタミドの血糖降下効果がインシュリン抵抗性により低減または消失していることを確認した後、毎日３回１４日連続投与する方法で、ミラクルフルーツ混合物の、２型糖尿病ラットの血糖降下作用に対する影響を検討する。
その結果、図７及び表７に示すように、ミラクルフルーツ混合物の長期投与は、２型糖尿病ラットの血糖降下作用を促進することが分かった。
表７は、ミラクルフルーツ混合物を長期投与した時の、２型糖尿病（60%グルコース飼料で誘発）ラットの血糖降下作用に対する変化を示した表である。
【表７】
2007290979.tif 000009
【００３２】
また、図８に示すように、西洋人参は、トルブタミドによるの血糖降下作用を改善する効果を有することから、二週間連続で高投与量のミラクルフルーツ混合物（80mg/kg）を投与した結果、血糖降下パーセンテージが4.0±5.45%から22.9±4.35まで改善することが分かった。トルブタミドの血糖降下作用が不変である故、西洋人参は血糖降下作用の回復と２型糖尿病のインシュリン抵抗の改善に効果がある。
【００３３】
２．４  ミラクルフルーツ混合物の、ラットのインシュリン抵抗に対する影響
ミラクルフルーツ混合物の、ラットのインシュリン抵抗に対する影響を確認すべく、本発明においては、2週間連続でミラクルフルーツ混合物を投与した２型糖尿病ラットにグルコース耐性試験を行い、それにより得られた血糖とインシュリン濃度を、図９及び図１０に示すように薬物血中濃度―時間曲線下面積の棒グラフに表した。
それから見ると、健康ラットと比べれば、確かに２型糖尿病ラットの方が血糖とインシュリンが高い。しかしながら、ミラクルフルーツ混合物の投与により、高血糖が投与量によって低下し、過多のインシュリンも改善された。
図１１及び表８に示すように、インシュリン抵抗を表すグルコース―インシュリン指数がミラクルフルーツ混合物の投与量によって低下することから、ミラクルフルーツ混合物がインシュリン抵抗を改善することも確認された。
表８は、ミラクルフルーツ混合物が長期投与された２型糖尿病ラットに行われるグルコース耐性試験による血糖、インシュリンの薬物血中濃度―時間曲線下面積（AUC）を示す表である。
【表８】
2007290979.tif 000010
【００３４】
又、図１２に示すように、３日間連続で１型糖尿病ラットにミラクルフルーツ混合物（80mg/kg）を投与し、インシュリンを静脈に注射すると、インシュリンの血糖降下作用が増加することが分かった。即ち、ミラクルフルーツ混合物は、インシュリン抵抗を改善させることが確認された。
【００３５】
２．５  ラットの体重、摂食量及び飲用水量の推移
表９は、ミラクルフルーツ混合物を長期投与した時の、１型糖尿病ラットの体重の変化を示す表である。
【表９】
2007290979.tif 000011
【００３６】
表１０と表１１に示すように、ミラクルフルーツ混合物の長期投与が１型糖尿病ラットの体重、摂食量と飲用水量に影響していない。
表１０は、ミラクルフルーツ混合物を長期投与した時の、１型糖尿病ラットの摂食量の変化を示す表である。
【表１０】
2007290979.tif 000012
表１１は、ミラクルフルーツ混合物を長期投与した時の、１型糖尿病ラットの飲用水量(water intake)の変化を示す表である。
【表１１】
2007290979.tif 000013
【００３７】
体重の面において、２型糖尿病ラットは著しく１型糖尿病ラットより肥満状態にあるが、ミラクルフルーツ混合物の投与がその体重の変化や、摂食量及び飲用水量に影響を及ぼしているわけではない。
【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明は上記の課題を解決するためのものであり、インシュリンを高めるミラクルフルーツ抽出物を含むことにより、血糖をコントロールできると共に、糖尿病患者に多種の薬品や食品を提供できることから、より血糖を有効的コントロールでき、病変の進行を阻止することができるので、臨床治療に寄与することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに１４日間連続投与した時の血糖降下作用を示したグラフである。
【図２】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに投与した時のグルコース負荷試験への影響を示したグラフである。
【図３】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに一回投与した時の血糖降下作用への影響を示したグラフである。
【図４】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を健康なラットに一回投与した時のインシュリン分泌作用への影響を示したグラフである。
【図５】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を１型糖尿病ラットに一回投与した時の血糖降下作用への影響を示したグラフである。
【図６】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を１型糖尿病ラットに１４日間連続投与した時の体内血糖への影響を示したグラフである。
【図７】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに連続投与した時の血糖降下作用を示したグラフである。
【図８】本発明に係るミラクルフルーツ混合物とトルブタミドを２型糖尿病ラットに連続投与した時の血糖降下作用を示したグラフである。
【図９】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに三日間連続投与した後の、グルコース負荷試験における血糖濃度の推移を示したグラフである。
【図１０】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに三日間連続投与した後の、グルコース負荷試験におけるインシュリン濃度の推移を示したグラフである。
【図１１】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を２型糖尿病ラットに三日間連続投与した後、グルコース負荷試験をグルコース−インシュリン指数で示したグラフである。
【図１２】本発明に係るミラクルフルーツ混合物を１型糖尿病ラットに三日間連続投与した時の血糖降下作用への影響を示したグラフである。
【符号の説明】
【００４０】
なし
【図１】
2007290979.tif 000014
【図２】
2007290979.tif 000015
【図３】
2007290979.tif 000016
【図４】
2007290979.tif 000017
【図５】
2007290979.tif 000018
【図６】
2007290979.tif 000019
【図７】
2007290979.tif 000020
【図８】
2007290979.tif 000021
【図９】
2007290979.tif 000022
【図１０】
2007290979.tif 000023
【図１１】
2007290979.tif 000024
【図１２】
2007290979.tif 000025