(57)【要約】【課題】マツタケ（Tricholoma matsutake）を利用して、安全で、長期間投与・摂取可能な、抗癌剤副作用（抗癌剤投与に伴うＱＯＬ低下や正常細胞に与える不都合な反応、等）の軽減剤および食品を提供する。【解決手段】マツタケ（Tricholoma matsutake）、特にはマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株、の菌糸体、培養物（Broth）または子実体（胞子を含む）のいずれかをそのまま、あるいはその乾燥物、あるいはそれらの抽出物（例えば熱水抽出液、アルカリ溶液抽出液）を含有する、抗癌剤副作用軽減剤および食品。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
マツタケ（Tricholoma matsutake）またはその抽出物を含む、抗癌剤副作用の軽減剤。
【請求項２】
マツタケ（T. matsutake）が菌糸体、培養物（Broth）または子実体（胞子を含む）である、請求項１記載の抗癌剤副作用の軽減剤。
【請求項３】
マツタケ（T. matsutake）がＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株である、請求項１または２記載の抗癌剤副作用の軽減剤。
【請求項４】
マツタケ（T. matsutake）がＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体の乾燥粉末である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗癌剤副作用の軽減剤。
【請求項５】
マツタケ抽出物が、ＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体の熱水抽出液またはアルカリ溶液抽出液、である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗癌剤副作用の軽減剤。
【請求項６】
マツタケ（Tricholoma matsutake）またはその抽出物を含む、抗癌剤副作用の軽減のための食品。
【請求項７】
マツタケ（T. matsutake）が菌糸体、培養物（Broth）または子実体（胞子を含む）である、請求項６記載の食品。
【請求項８】
マツタケ（T. matsutake）がＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株である、請求項６または７記載の食品。
【請求項９】
マツタケ（T. matsutake）がＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体の乾燥粉末である、請求項６〜８のいずれか１項に記載の食品。
【請求項１０】
マツタケ抽出物が、ＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体の熱水抽出液またはアルカリ溶液抽出液、である、請求項６〜９のいずれか１項に記載の食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物やヒトにおける抗癌剤副作用の軽減のための薬剤および食品に関する。本発明の薬剤および食品は、医薬品として投与することができるだけでなく、種々の形態、例えば、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）やいわゆる健康食品（いずれも飲料を含む）、または飼料として飲食物の形で与えることも可能である。さらには、口中に一時的に含むものの、そのほとんどを口中より吐き出す形態、例えば、歯磨き剤、洗口剤、チューインガム、うがい剤などの形で与えることも、あるいは鼻から吸引させる吸入剤の形で与えることも可能である。
【背景技術】
【０００２】
癌診断技術や治療法は年々進歩しているのにもかかわらず、日本人の死亡原因の第一位は依然として癌であり、死因別死亡数の中で約３０％を占めている。高齢社会に突入した日本では、５０歳以上の発症例が多く、今後さらに増加が見込まれている。部位別で患者数増加が顕著なのは、男性では前立腺癌や肺癌など、女性では乳癌や子宮癌などである。
【０００３】
癌治療法には、外科手術療法、放射線療法、化学療法、免疫療法、およびそれらの組み合わせがある。これらのうち、化学療法は抗腫瘍性薬物あるいは物質（化学療法剤）を用いる治療法であり、主として、外科手術や放射線照射だけでは治せない場合に用いられる。化学療法剤は、その作用メカニズムから、（i）シクロホスファミドのような「アルキル化剤」、（ii）フルオロウラシルのような「代謝拮抗剤」、（iii）塩酸ドキソルビシンのような「抗腫瘍性抗生物質」、（iv）塩酸イリノテカンのような「抗腫瘍性植物成分」、（v）白金錯体化合物のような「その他」に分類され、様々な癌種や病期の患者に対して臨床適応されている。しかし、化学療法剤が効きやすい癌種は、精巣腫瘍や急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、悪性リンパ腫など限られており、その他の癌では完治は難しく、メカニズムの異なる化学療法剤同士の組み合わせ等により対処しているが、多くの場合、薬剤耐性癌の出現等を許して患者は不幸な転帰をたどる。そのため、分子標的治療薬など、新しい作用メカニズムをもつ薬剤が求められている。２００４年の癌関連用剤の市場は約５，０００億円と推定されており、今後、さらなる拡大が予測されている。
【０００４】
化学療法剤は癌細胞の増殖を抑制するだけでなく、正常な細胞、特に、増殖力の高い毛嚢細胞や胃・腸管細胞、生殖細胞、骨髄細胞などの機能・増殖に大きな影響を及ぼす。すなわち、化学療法剤の最大の問題点は、癌細胞選択性が低いことである。強力な化学療法を施した癌患者では、脱毛、口内炎、嚥下困難、吐き気、嘔吐、便秘、下痢、貧血、出血傾向、疲労感などの副作用症状が現れ、体力の低下などを引き起こす。これら副作用は、感染症や敗血症を引き起こし、患者の命を奪う原因ともなる。また、ある種の化学療法剤は免疫機能低下を惹起するために、生体防御機能の低下を引き起こし、癌転移などのリスクが高まる。化学療法剤の副作用を緩和することは、治療遂行の面からだけでなく、患者ＱＯＬ（quality of life；生活の質）維持からも重要である。
【０００５】
化学療法剤誘発副作用の軽減のため、癌治療補助剤が使用されている。血球減少防止のための顆粒球コロニー刺激因子、悪心・嘔吐など消化器症状改善のための塩酸アザセトロンや塩酸グラニセトロン、癌性疼痛改善のための塩酸ブプレノルフィンや複方オキシコトン製剤、育毛促進のための育毛プロテイン・クリームなどが用いられているものの、適用範囲は狭く、効果は十分でない。それゆえ、新規薬剤や機能性食品が求められている。
【０００６】
ところで、きのこ類は多用な生物活性を有することから、古くから日本人の健康に寄与してきた。例えばマツタケ〔Tricholoma matsutake（S. Ito & Imai）Sing.〕については、特公昭５７−１２３０号公報（特許文献１）に、マツタケ菌糸体の液体培養物を熱水または希アルカリ溶液で抽出して得られる抽出液から分離精製されたエミタニン−５−Ａ、エミタニン−５−Ｂ、エミタニン−５−Ｃ、およびエミタニン−５−Ｄに、サルコーマ１８０細胞の増殖阻止作用があることが開示され、特許第２７６７５２１号公報（特許文献２）には、マツタケ子実体の水抽出物から分離精製された分子量２０〜２１万のタンパク質（サブユニットの分子量１０〜１１万）が抗腫瘍活性を有することが開示されている。
【０００７】
さらに、本発明者らにより、マツタケ熱水抽出液、マツタケアルカリ溶液抽出液、あるいはこれら抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分が免疫増強活性を有することが見出されている（国際公開第０１／４９３０８号パンフレット（特許文献３））。本発明者らはまた、マツタケの特定の菌糸体由来の部分精製画分にストレス負荷回復促進作用があることも見出した（特開２００３−０５０２２７号公報（特許文献４））。
【０００８】
【特許文献１】特公昭５７−１２３０号公報
【特許文献２】特許第２７６７５２１号公報
【特許文献３】国際公開第０１／４９３０８号パンフレット
【特許文献４】特開２００３−０５０２２７号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上述のようにマツタケには抗腫瘍活性、免疫増強活性、ストレス負荷回復促進作用などの種々の生理活性が含まれることが見出されている。しかしながら、本発明者の知る限りにおいて、マツタケが抗癌剤副作用に対して優れた軽減効果を有するということについては、これまで報告がされていない。
【００１０】
本発明者は、マツタケが抗癌剤副作用に対し優れた軽減効果を有することを新たに見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
すなわち本発明の課題は、マツタケを利用した抗癌剤副作用の軽減剤および食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、マツタケ（Tricholoma matsutake）またはその抽出物を含む、抗癌剤副作用の軽減剤および食品に関する。
【００１３】
また本発明は、マツタケ（T. matsutake）が菌糸体、培養物（Broth）または子実体（胞子を含む）である、上記抗癌剤副作用の軽減剤および食品に関する。
【００１４】
また本発明は、マツタケ（T. matsutake）がＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株である、上記抗癌剤副作用の軽減剤および食品に関する。
【００１５】
また本発明は、マツタケ（T. matsutake）がＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体の乾燥粉末である、上記抗癌剤副作用の軽減剤および食品に関する。
【００１６】
また本発明は、マツタケ抽出物が、ＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体の熱水抽出液またはアルカリ溶液抽出液である、上記抗癌剤副作用の軽減剤および食品に関する。
【発明の効果】
【００１７】
本発明により、安全で、安定的に大量供給が可能な、抗癌剤副作用の軽減のための薬剤および食品が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品に用いられるマツタケ〔Tricholoma matsutake（S. Ito & Imai）Sing.〕は、菌糸体、培養物（Broth）、子実体のいずれの形態のものも用いることができ、生でも乾燥したものでもよい。本発明では子実体は胞子も含むものとする。これら菌糸体、培養物（Broth）、子実体の各抽出物も用いることができる。
【００１９】
本発明では特にマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株が好ましく用いられる。
【００２０】
マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株は、本出願人によって新規菌株として従前に出願され（国際公開第０２／３０４４０号パンフレット）、独立行政法人産業技術総合研究所（（旧）工業技術院生命工学研究所）に平成１２年９月１４日に寄託されている。このマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株は、京都府亀岡市で採取したマツタケＣＭ６２７１株から子実体組織を切り出し、試験管内で培養することにより菌糸体継代株を得たものであり、株式会社クレハ  生物医学研究所で維持している。
【００２１】
マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の子実体の形態は、「原色日本新菌類図鑑（１）」（今関六也・本郷次雄編、保育社、昭和３２年発行）プレート（plate）９頁および２６頁に記載のマツタケ子実体に合致するものであった。
【００２２】
マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の継代は、エビオス寒天斜面培地で実施することができる。マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体をエビオス寒天平板培地に接種すると、白色の菌糸が放射状に密に生育し、大きなコロニーを形成する。走査型電子顕微鏡で観察すると、太さ１〜２μｍの枝状の菌糸体が無数に存在し、菌糸体側部に数μｍ程度の突起物が時々みられる。該菌株の菌糸体を大量培養する場合は、液体培地に接種し、静置培養、振盪培養、タンク培養等により行うことができる。
【００２３】
なお、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株は、もっぱら菌糸体の形状で継代維持または培養することが可能であるが、子実体の形状となることもある。
【００２４】
マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌学的性質は以下のとおりである。
【００２５】
（１）麦芽エキス寒天培地における培養的・形態的性質
白色の菌糸が放射状に密に生育してコロニーを形成する。接種３０日目のコロニー径は約４ｃｍである。
【００２６】
（２）ツアペック寒天培地、オートミール寒天培地、合成ムコール寒天培地、およびフェノールオキシダーゼ反応検定用培地における培養的・形態的性質
上記いずれの培地においても、接種後１ヶ月経過しても菌糸の発育はほとんどみられない。
【００２７】
（３）ＹｐＳｓ寒天培地における培養的・形態的性質
白色の光沢を有し、マット状に生育する。接種３０日目の生育距離は約５ｍｍである。
【００２８】
（４）グルコース・ドライイースト寒天培地における培養的・形態的性質
白色の光沢を有し、マット状に生育する。接種３０日目の生育距離は約２ｍｍである。
【００２９】
（５）最適生育温度および生育範囲
滅菌処理した液体培地（３％グルコース、０．３％酵母エキス、ｐＨ７．０）１０ｍＬの入った１００ｍＬ容三角フラスコに、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の種菌約２ｍｇを接種し、５〜３５℃の種々の温度でそれぞれ培養し、２８日目にフラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定した。その結果、菌体質量は５〜１５℃の範囲で直線的に増加し、１５〜２５℃の範囲で緩やかに増加した。２７．５℃以上ではほとんど増殖しなかった。最適生育温度は１５〜２５℃である。
【００３０】
（６）最適生育ｐＨおよび生育範囲
液体培地（３％グルコース、０．３％酵母エキス）のｐＨを１モル／Ｌ塩酸または１モル／Ｌ水酸化カリウムで調整し、ｐＨ３．０〜８．０の種々の培地を調製して菌体の生育ｐＨを調べた。すなわち各培地をフィルター滅菌し、培地１０ｍＬを滅菌済１００ｍＬ容三角フラスコに分注した。マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の種菌約２ｍｇを接種後、２２℃で培養し、フラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定した。その結果、菌体の生育限界はｐＨ３．０〜７．０、最適生育ｐＨは４．０〜６．０であった。
【００３１】
（７）対峙培養による帯線形成の有無
エビオス寒天平板培地に、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株のブロック（約３ｍｍ×３ｍｍ×３ｍｍ）と、公知の１３種類のマツタケ株（例えば、ＩＦＯ  ６９１５株；（財）発酵研究所）の各ブロック（約３ｍｍ×３ｍｍ×３ｍｍ）とを、約２ｃｍ間隔に対峙して植菌し、２２℃で３週間培養した後、両コロニー境界部に帯線が生じるか否かを判定した。
【００３２】
その結果、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株は、公知のマツタケ株（１３種類）のいずれの株に対しても明確な帯線を形成しなかった。なお、マツタケでは異株間対峙培養で帯線は生じないとされており、公知のマツタケ株（１３種類）間についても、明確な帯線を形成した組み合わせはなかった。
【００３３】
（８）栄養要求性
滅菌処理した菌根菌用合成培地（「太田培地」。Ohtaら、"Trans. Mycol. Soc. Jpn.", 31, 323-334, 1990)１０ｍＬの入った１００ｍＬ容三角フラスコに、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の種菌約２ｍｇを接種し、２２℃で培養し、４２日目にフラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定したところ、菌体４４１ｍｇが得られた。
【００３４】
上記菌根菌用合成培地中の炭素（Ｃ）源であるグルコースの代わりに、２８種類の糖質関連物質のいずれか１つを加えた各培地に、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株を接種して培養し、培養終了後、菌体質量を測定した。その結果、菌体質量が多かった糖質関連物質から菌体質量が少なかった糖質関連物質を順に示せば、以下のとおりである。
【００３５】
小麦デンプン＞トウモロコシデンプン＞デキストリン＞メチルβグルコシド＞セロビオース＞マンノース＞フラクトース＞アラビノース＞ソルビトール＞グルコース＞ラクトース＞グリコーゲン＞マンニトール＞リボース＞マルトース＞トレハロース＞ガラクトース＞ラフィノース＞メリビオース＞Ｎ−アセチルグルコサミン。
【００３６】
なお、セルロース、ダルチトール、シュークロース、キシロース、メチルαグルコシド、イヌリン、イノシトール、およびソルボースでは、菌の発育はほとんどみられなかった。
【００３７】
次に、上記菌根菌用合成培地中の窒素（Ｎ）源である酒石酸アンモニウムの代わりに、１５種類の窒素関連物質のいずれか１つを加えた各培地に、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株を接種して培養し、培養終了後、菌体質量を測定した。
【００３８】
その結果、菌体質量が多かった窒素関連物質から菌体質量が少なかった窒素関連物質を順に示せば、以下のとおりである。
【００３９】
コーンスティープリカー＞大豆ペプトン＞ミルクペプトン＞硝酸アンモニウム＞硫酸アンモニウム＞酒石酸アンモニウム＞炭酸アンモニウム＞アスパラギン＞リン酸アンモニウム＞塩化アンモニウム＞硝酸ナトリウム＞肉エキス＞酵母エキス＞カザミノ酸＞クロレラ＞トリプトーン＞硝酸カリウム。
【００４０】
さらに、上記合成培地中のミネラルおよびビタミン類のうち、特定の１成分を除去した培地に、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株を接種して培養し、培養終了後、菌体質量を測定した。
【００４１】
その結果、塩化カルシウム・二水和物、硫酸マンガン（II）・五水和物、硫酸亜鉛・七水和物、硫酸コバルト・七水和物、硫酸銅・五水和物、硫酸ニッケル・六水和物、塩酸アミン、ニコチン酸、葉酸、ビオチン、塩酸ピリドキシン、塩化カーチニン、アデニン硫酸・二水和物、または塩酸コリンのいずれか１つを培地から除いても、菌体質量にほとんど影響がなかった。
【００４２】
一方、硫酸マグネシウム・七水和物、塩化鉄（II）、またはリン酸二水素カリウムのいずれか１つを培地から除くと、菌体質量は顕著に減少した。すなわち、マグネシウム、鉄、リン、およびカリウムは、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の増殖に必須と考えられる。
【００４３】
（９）ＤＮＡ塩基組成（ＧＣ含量）
ＧＣ含量は４９．９％である。
【００４４】
（１０）ＲＡＰＤ法により生成するＤＮＡパターン
６種類の異なるＰＣＲ（Polymerase Chain Reaction)用プライマー（１０ｍｅｒ）をそれぞれ単独で用いるＲＡＰＤ（Random Amplified Polymorphic DNA）法により生成するＤＮＡパターンについて、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株と、公知の４４種類のマツタケ株（例えば、ＩＦＯ  ６９１５株；（財）発酵研究所）とを比較したところ、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株は、公知のマツタケ株（４４種類）のいずれとも異なるＤＮＡパターンを示した。
【００４５】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品は、有効成分として、（i）マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株（例えば、当該株の菌糸体、培養物（Broth）または子実体）の生のものをそのまま、あるいはこれを乾燥粉末としたもの、（ii）マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の熱水抽出液（例えば、当該株の菌糸体、培養物（Broth）または子実体の、熱水抽出液）、（iii）マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株のアルカリ溶液抽出液（例えば、当該株の菌糸体、培養物（Broth）または子実体の、アルカリ溶液抽出液）などを含む態様が好ましく例示されるが、これら例示に限定されるものではない。
【００４６】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体としては、例えば、培養により得られる菌糸体（すなわち培養菌糸体）と培地との混合物から適当な除去手段（例えば、濾過）により培地を除去しただけの状態で使用することもできるし、あるいは、培地を除去した後の菌糸体から適当な除去手段（例えば、凍結乾燥）により水分を除去した菌糸体乾燥物の状態で使用することもでき、さらには前記菌糸体乾燥物を粉砕した菌糸体乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
【００４７】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の培養物（Broth）としては、例えば、培養により得られる菌糸体（すなわち培養菌糸体）と培地との混合物の状態で使用することもできるし、あるいは、前記混合物から適当な除去手段（例えば、凍結乾燥）により水分を除去した培養物（Broth）乾燥物の状態で使用することもでき、さらには前記培養物（Broth）乾燥物を粉砕した培養物（Broth）乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
【００４８】
上記培養工程は、特に限定されるものでなく、一般にマツタケ菌を培養する方法を任意に用いることができるが、例えば、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株（「マツタケ菌I」）を固形培地または液体培地で培養または保存してマツタケ菌IIを得る工程、前記マツタケ菌IIを静置液体培養してマツタケ菌IIIを得る工程、前記マツタケ菌IIIを振盪培養してマツタケ菌IVを得る工程、前記マツタケ菌IVを１００Ｌ未満の小型培養装置を用いて、培養液中に通気を行わない攪拌培養してマツタケ菌Vを得る工程、前記マツタケ菌Vを１００Ｌ以上の中型・大型培養装置を用いて深部攪拌培養してマツタケ菌VIを得る工程、前記マツタケ菌VIを１００Ｌ以上の中型・大型培養装置を用いて深部攪拌培養してマツタケ菌VIIを得る工程、および前記マツタケ菌VIIを１００Ｌ以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養してマツタケ菌VIIIを得る工程、からなる培養方法（国際公開第２００４／０３８００９号パンフレット）が、マツタケ菌の生理活性を損うことなく大量生産できるという点から好適に用いられる。
【００４９】
〈マツタケ菌Iを培養または保存してマツタケ菌IIを得る工程〉
用いる培地としては、一般にマツタケ菌を培養する栄養源基質を有する培地であれば特に制限なく使用することができる。例えば、太田培地（Ohtaら、"Trans. Mycol. Soc. Jpn.", 31, 323-334, 1990）、ＭＭＮ培地（Marx, D. H., "Phytopathology", 59:153-163, 1969）、浜田培地（浜田、"マツタケ", 97-100, 1964）等が挙げられるが、これら例示に限定されるものでない。
【００５０】
固形培地用の固形化剤としては、カラギーナン、マンナン、ペクチン、寒天、カードラン、デンプン、アルギン酸等が好適例として挙げられる。これらのうち寒天が好ましい。
【００５１】
使用可能な培地の栄養源基質には、炭素源、窒素源、無機元素源などが挙げられる。
【００５２】
上記炭素源としては、米デンプン、小麦粉デンプン、バレイショデンプン、サツマイモデンプン等のデンプン類；デキストリン、アミロペクシン等の多糖類；マルトース、シュクロース等の少糖類；フラクトース、グルコース等の単糖類などが挙げられる。さらに麦芽エキスを挙げることができる。マツタケ菌の生長速度から、グルコースなどの単糖類が好ましい時期と、デンプン類が好ましい時期とがあるので、時期に応じた炭素源を選択し、必要に応じて組合せて使用する。
【００５３】
上記窒素源としては、酵母エキス、乾燥酵母、コーンスティーブリカー、大豆粉、大豆ペプトンなどの天然由来物質や、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、尿素などが挙げられる。これらは単独で、あるいは組合せて用いることができる。一般に生長速度を考慮すると、天然由来物質、特に酵母エキスが好ましい。
【００５４】
上記無機元素源は、リン酸および微量元素を供給するために使用される。例を挙げると、リン酸塩のほか、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、マンガン、銅、鉄などの金属イオンの無機塩（例えば、硫酸塩、塩酸塩、硝酸塩、リン酸塩、等）があり、必要量を培地中に溶解する。
【００５５】
また、培地にビタミンＢ1などのビタミン類、アミノ酸類を添加することもできる。
【００５６】
さらに、使用するマツタケ菌の性質に応じて、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質などを添加することができる。植物抽出物としては、果菜類、根菜類、葉菜類などの抽出物が例示される。有機酸としては、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、乳酸などが例示される。核酸関連物質としては、市販の核酸、核酸抽出物、酵母、酵母エキスなどが例示される。
【００５７】
固形培地を調製する場合、炭素源の使用量は、好ましくは１０〜１００ｇ／Ｌ、より好ましくは１０〜５０ｇ／Ｌ、特に好ましくは２０〜３０ｇ／Ｌである。
【００５８】
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で０．００５〜０．１モル／Ｌが好ましく、より好ましくは０．００７〜０．０７モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０５モル／Ｌである。
【００５９】
リン酸塩の使用量は、リン元素相当量で０．００１〜０．０５モル／Ｌが好ましく、より好ましくは０．００５〜０．０３モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０２モル／Ｌである。さらに他の無機塩、ビタミン類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜添加することができる。また、調製した栄養源基質溶液のｐＨを、好ましくは４〜７、より好ましくは４．５〜６．０、特に好ましくは５．０〜５．５とする。
【００６０】
〈静置液体培養〉
次に、マツタケ菌II（マツタケ菌Iを固形培地または液体培地で培養または保存したマツタケ菌）を静置液体培養してマツタケ菌IIIを製造する方法について記載する。
【００６１】
通常、１００ｍＬ〜２Ｌ容の三角フラスコを用いて行う。
【００６２】
この静置液体培養は、液体培地にマツタケ菌IIを接種することにより開始する。
【００６３】
接種したマツタケ菌IIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌IIを含有する培養液との体積比（「接種時拡大倍率」）が好ましくは２〜５０倍、より好ましくは３〜３０倍となる量の液体培地を使用する。
【００６４】
接種したマツタケ菌IIを含有する培養液中のマツタケ菌IIの乾燥菌糸体質量と、接種したマツタケ菌IIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物の体積比（「初発菌糸体濃度」）を、好ましくは０．０５〜３ｇ／Ｌ、より好ましくは０．１〜２ｇ／Ｌとなるように、液体培地にマツタケ菌IIを含有する培養液を接種する。
【００６５】
該静置液体培養での培養温度は１５〜３０℃が好ましく、より好ましくは２０〜２５℃であり、培養期間は３０〜４００日間が好ましく、より好ましくは１２０〜２４０日間である。培養期間が３０日未満、あるいは４００日超では、大量培養に適した生育能を有するマツタケ菌IIIを得ることが困難となる。
【００６６】
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量（単位：ｇ／Ｌ）を初発菌糸体濃度との比（「菌糸体増加率」）が、２〜２５倍となるように培養することが、生育能の点から好ましい。
【００６７】
静置液体培養に使用する液体培地は、その浸透圧を、好ましくは０．０１〜０．８ＭＰａ、より好ましくは０．０２〜０．７ＭＰａ、特に好ましくは０．０３〜０．５ＭＰａとなるように、栄養源基質を使用する。
【００６８】
静置液体培養に用いる栄養源基質として、マツタケ菌Iを培養する固形培地と同じ炭素源、窒素源、無機元素源、ビタミンＢ1などのビタミン類、アミノ酸類等を使用することができる。
【００６９】
炭素源の使用量は、好ましくは１０〜１００ｇ／Ｌ、より好ましくは２０〜６０ｇ／Ｌ、特に好ましくは２５〜４５ｇ／Ｌである。通常、グルコース等の単糖類を使用する。
【００７０】
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で０．００５〜０．１モル／Ｌが好ましく、より好ましくは０．００７〜０．０７モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０５モル／Ｌである。
【００７１】
リン酸塩を使用する場合は、リン元素相当量で０．００１〜０．０５モル／Ｌが好ましく、より好ましくは０．００５〜０．０３モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０２モル／Ｌになるようにする。
【００７２】
さらに、他の無機塩、ビタミン類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜添加することができる。
【００７３】
調製した栄養源基質溶液のｐＨを、好ましくは４〜７、より好ましくは４．５〜６．５、特に好ましくは５．０〜６．０とする。
【００７４】
マツタケ菌IIIを含有する静置液体培養による培養液の一部若しくは全部を、マツタケ菌IIを含有する培養液（若しくは培養物）と同様に静置液体培養の接種源として、再度、静置液体培養工程で使用することもできる。
【００７５】
〈振盪培養〉
次いで、マツタケ菌III（マツタケ菌IIを静置液体培養して得られたマツタケ菌）を振盪培養して、マツタケ菌IVを製造する方法について記載する。
通常、３００ｍＬ〜５Ｌ容の三角フラスコを用いて行う。
【００７６】
この振盪培養は、液体培地にマツタケ菌IIIを接種することにより開始する。
【００７７】
接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液との体積比（「接種時拡大倍率」）が、好ましくは２〜５０倍、より好ましくは３〜３０倍、特に好ましくは５〜１０倍となる量の液体培地を使用する。
【００７８】
なお、接種時拡大倍率に見合う培養液の量を確保するために、静置液体培養を複数の培養装置を用いて製造することもできる。
【００７９】
接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液中のマツタケ菌IIIの乾燥菌糸体質量と、接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物の体積比（「初発菌糸体濃度」）を、好ましくは０．０５〜３ｇ／Ｌ、より好ましくは０．１〜２ｇ／Ｌとなるように、液体培地にマツタケ菌IIIを含有する培養液を接種する。
【００８０】
振盪培養では、培養温度は１５〜３０℃が好ましく、より好ましくは２０〜２５℃であり、培養期間は７〜５０日間が好ましく、より好ましくは１４〜２８日間である。
【００８１】
振盪培養に要する動力として、通常、三角フラスコ内の培養液単位体積あたりの攪拌所要動力０．０５〜０．４ｋＷ／ｍ3を用いる。
【００８２】
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量（単位：ｇ／Ｌ）と初発菌糸体濃度との比（「菌糸体増加倍率」）が２〜２５倍となるように培養することが、生育能の点で好ましい。
【００８３】
振盪培養に使用する液体培地は、その浸透圧を、好ましくは０．０１〜０．８ＭＰａ、より好ましくは０．０２〜０．７ＭＰａ、特に好ましくは０．０３〜０．５ＭＰａとなるように、栄養源基質を使用する。
【００８４】
振盪培養に用いられる栄養源基質として、マツタケ菌IIを培養する液体培地と同じ炭素源、窒素源、無機元素源、ビタミンＢ1などのビタミン類、アミノ酸類を使用することができる。
【００８５】
炭素源の使用量は、好ましくは１０〜１００ｇ／Ｌ、より好ましくは２０〜６０ｇ／Ｌ、特に好ましくは２５〜４５ｇ／Ｌである。通常、グルコース等の単糖類を使用する。
【００８６】
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で０．００５〜０．１モル／Ｌが好ましく、より好ましくは０．００７〜０．０７モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０５モル／Ｌである。
【００８７】
リン酸塩の使用量は、リン元素相当量で０．００１〜０．０５モル／Ｌが好ましく、より好ましくは０．００５〜０．０３モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０２モル／Ｌになるようにする。
【００８８】
さらに、他の無機塩、ビタミン類、アミノ酸類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜添加することができる。
【００８９】
調製した栄養源基質溶液のｐＨを、好ましくは４〜７、より好ましくは４．５〜６．５、特に好ましくは５．０〜６．０とする。
【００９０】
〈攪拌培養〉
次に、攪拌培養により、マツタケ菌V、マツタケ菌VI、マツタケ菌VII、マツタケ菌VIIIを製造する方法について記載する。
【００９１】
この攪拌培養は、液体培地にマツタケ菌（IV〜VII）を接種することにより開始する。以下の説明において、マツタケ菌IVは、マツタケ菌IIIを振盪培養して得られるマツタケ菌をいい；マツタケ菌Vは、マツタケ菌IVを１００Ｌ未満の小型培養装置を用いて培養液中に通気を行わない撹拌培養を行って得られたマツタケ菌をいい；マツタケ菌VIは、マツタケ菌Vを１００Ｌ以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養して得られたマツタケ菌をいい；マツタケ菌VIIは、マツタケ菌VIを１００Ｌ以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養して得られたマツタケ菌をいい；マツタケ菌VIIIは、マツタケ菌VIIを１００Ｌ以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養して得られたマツタケ菌をいう。
【００９２】
攪拌培養で用いる液体培地は、次のようにして調製することができる。
【００９３】
栄養源基質は、振盪培養で使用する、炭素源、窒素源、無機元素源、ビタミンＢ1などのビタミン類、アミノ酸類と同じものを使用することができる。
【００９４】
炭素源の使用量は、好ましくは１０〜１００ｇ／Ｌ、より好ましくは２０〜６０ｇ／Ｌ、特に好ましくは２５〜４５ｇ／Ｌである。デンプン類を好ましく使用できる。
【００９５】
攪拌を行う培養液中の浸透圧に影響するグルコースなどの単糖類を併用する場合、その使用量は、好ましくは０．１〜６０ｇ／Ｌ、より好ましくは０．５〜４０ｇ／Ｌ、特に好ましくは０．７〜２０ｇ／Ｌである。
【００９６】
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で０．００５〜０．１モル／Ｌが唖好ましく、より好ましくは０．００７〜０．０７モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０５モル／Ｌである。
【００９７】
リン酸塩の使用量は、リン元素相当量で０．００１〜０．０５モル／Ｌが好ましく、より好ましくは０．００５〜０．０３モル／Ｌ、特に好ましくは０．０１〜０．０５モル／Ｌである。
【００９８】
さらに、他の無機塩、ビタミン類、アミノ酸類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜、添加することができる。
【００９９】
調製した栄養源基質溶液のｐＨを、好ましくは４〜７、より好ましくは４．５〜６．５、特に好ましくは５．０〜６．０とする。
【０１００】
攪拌培養に使用する液体培地は、その浸透圧を、好ましくは０．０１〜０．８ＭＰａ、より好ましくは０．０２〜０．７ＭＰａ、特に好ましくは０．０３〜０．５ＭＰａとなるように、栄養源基質を使用する。
【０１０１】
攪拌培養の培養温度は、１５〜３０℃、好ましくは２０〜２５℃とする。
【０１０２】
接種したマツタケ菌（IV〜VII）を含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌（IV〜VII）を含有する培養液との体積比（「接種時拡大倍率」）が、好ましくは２〜５０倍、より好ましくは３〜３０倍、特に好ましくは５〜１０倍となる量の液体培地を使用する。
【０１０３】
接種したマツタケ菌（IV〜VII）を含有する培養液中のマツタケ菌（IV〜VII）の乾燥菌糸体質量と、接種したマツタケ菌（IV〜VII）を含有する培養液と液体培地とを合せた混合物の体積比（「初発菌糸体濃度」）を、好ましくは０．０１〜５ｇ／Ｌ、より好ましくは０．０５〜３ｇ／Ｌ、特に好ましくは０．１〜２ｇ／Ｌとなるように、液体培地にマツタケ菌（IV〜VII）を含有する培養液を接種する。
【０１０４】
攪拌培養で得られるマツタケ菌（V〜VII）を、さらに攪拌培養の母菌として用いる場合の培養日数は、３〜２０日間が好ましく、特には５〜１４日間である。
【０１０５】
これらの培養日数後に、マツタケ菌（V〜VII）の乾燥菌糸体含有量が、好ましくは０．５〜１０ｇ／Ｌ、より好ましくは１〜８ｇ／Ｌ、特に好ましくは１〜６ｇ／Ｌになっている培養液は、攪拌培養に適した生育能を有するマツタケ菌（V〜VII）を含有している。
【０１０６】
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量（単位：ｇ／Ｌ）と初発菌糸体濃度との比（「菌糸体増加率」）が２〜２５倍となるように培養することが、生育能の点で好ましい。
【０１０７】
他方、攪拌培養で得られるマツタケ菌（V〜VIII）を、マツタケ菌糸体として分離する場合の培養日数は５〜３０日間であり、好ましくは７〜２０日間、特に好ましくは１０〜１５日間である。
【０１０８】
これらの培養日数から、炭素源の資化速度が著しく低下した時を培養終了とするのが好ましいが、適宜、製造サイクル、製造コスト等の製造形態に合せて決定することができる。
【０１０９】
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量（単位：ｇ／Ｌ）と初発菌糸体濃度との比（「菌糸体増加倍率」）が３５〜１００倍となるように培養することが、工業的な生産の点で好ましい。
【０１１０】
マツタケ菌IVを含有する振盪培養で製造した培養液を、１００Ｌ以上の中型、および大型培養槽などの培養装置による攪拌培養工程で使用することもできる。
【０１１１】
攪拌培養に使用する培養装置は、通気攪拌ができ、無菌性が確保できれば特に制限なく使用することが可能で、必要に応じて通気することができ、または通気装置を装着できるものを使用する。したがって、通常の、小型、中型および大型の培養槽、またはジャーファーメンターを使用することができる。
【０１１２】
１００Ｌ未満のジャーファーメンターまたは小型培養槽を用いて、マツタケ菌IVの培養を行いマツタケ菌Vを製造する場合、液体培地中に通気せずに、攪拌培養を行うのが好ましい。１００Ｌ未満のジャーファーメンターまたは小型培養槽で通気を行って培養すると、菌糸が凝集し、成長点が欠失して母菌としての生育能が損われる場合があるからである。
【０１１３】
また、１００Ｌ以上の中型、および大型培養槽などの培養装置により工業スケールで深部攪拌培養を行う場合、必要に応じて通気を行う。この場合の通気量は０．０５〜１．０ｖｖｍ、特には０．２〜０．５ｖｖｍとするのが好ましい。
【０１１４】
攪拌培養における攪拌は、培養初期では培養液単位体積あたりの所要攪拌動力で制御する。通常、０．０１〜２ｋＷ／ｍ3、好ましくは０．０５〜１ｋＷ／ｍ3の範囲で攪拌を行うことにより、マツタケ菌糸体が良好に生育する。培養初期を過ぎれば菌が生育を始め、酸素供給量が不足し、さらに、生育した菌糸体の分散が不十分になるので、適宜、攪拌の強度を大きくすることが必要になる。当該深部攪拌では、培養初期には低通気、低撹拌速度で培養し、培養後期には高通気、高攪拌速度で培養するのが好ましい。
【０１１５】
深部攪拌培養から得られたマツタケ菌糸体の分離・回収は、常法によって行うことができる。例えば、フィルタープレスなどによる濾過、遠心分離などである。
【０１１６】
得られた菌糸体は、例えば蒸留水により充分に洗浄してから、次の熱水抽出工程を実施するのが好ましい。また抽出効率が向上するように、破砕物または粉体の状態に加工するのが好ましい。
【０１１７】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の子実体としては、例えば、子実体をそのままで、または子実体を破砕した状態で使用することもできるし、あるいは、子実体から適当な除去手段（例えば、凍結乾燥）により水分を除去した子実体乾燥物の状態で使用することもでき、さらには、前記子実体乾燥物を粉砕した子実体乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
【０１１８】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の熱水抽出液は、例えば培養により得られるマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の菌糸体（すなわち培養菌糸体）、培養物（Broth）、または子実体を熱水で抽出することにより得ることができる。
【０１１９】
熱水抽出に用いる熱水の温度は、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株に含有される抗癌剤副作用の軽減効果を示す成分が、熱水抽出液中に充分に抽出される温度である限り特に限定されるものではないが、６０〜１００℃程度が好ましく、８０〜９８℃程度がより好ましい。
【０１２０】
菌糸体または子実体を熱水抽出に用いる場合には、抽出効率が向上するように、破砕物または粉体の状態に加工することが好ましい。
【０１２１】
また抽出の際には、抽出効率が向上するように、攪拌または振盪しながら実施するのが好ましい。抽出時間は、例えば、菌糸体の状態（例えば、破砕物または粉体の状態に加工した場合にはその加工状態）、熱水の温度、または攪拌若しくは振盪の有無若しくは条件に応じて、適宜決定することができるが、通常１〜６時間程度であり、２〜３時間程度が好ましい。
【０１２２】
得られた熱水抽出液は、不要物が混在する状態で、そのまま、本発明の抗癌剤副作用の軽減剤の有効成分として用いることもできるし、あるいは不溶物を除去してから、さらにはそこから抽出液中の低分子画分（好ましくは分子量３５００以下の画分）を除去してから、本発明の抗癌剤副作用の軽減剤の有効成分として用いることもできる。
【０１２３】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株のアルカリ抽出液は、例えば、上述したマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株の熱水抽出液の製造方法において、熱水の代わりにアルカリ溶液を用いること以外は、上記熱水抽出液の製造方法に準じた方法により得ることができる。
【０１２４】
アルカリ溶液抽出に用いるアルカリ溶液としては、特に限定されるものではないが、例えば、アルカリ金属（ナトリウム、カリウムなど）の水酸化物、特には水酸化ナトリウムの水溶液を用いることができる。アルカリ溶液のｐＨは８〜１３が好ましく、９〜１２がより好ましい。アルカリ溶液抽出は０〜３０℃程度で実施するのが好ましく、０〜２５℃程度がより好ましい。抽出時間は、例えば、菌糸体残渣の状態（例えば、破砕物または粉体の状態に加工した場合にはその加工状態）、アルカリ溶液のｐＨ若しくは温度、または攪拌若しくは振盪の有無若しくは条件に応じて、適宜決定することができるが、通常３０分間〜５時間程度であり、１〜３時間程度が好ましい。得られたアルカリ溶液抽出液は、そのまま、あるいは所望により中和処理を実施してから、本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品に用いる。
【０１２５】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品は、有効成分であるマツタケ、特にはマツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株、あるいはその抽出物を、単独で、あるいは所望により薬剤学的に許容し得る担体とともに、ヒトや動物に投与することができる。
【０１２６】
本発明において「抗癌剤副作用の軽減」とは、動物やヒトなどにおいて、抗癌剤投与に伴うＱＯＬ低下など、生体の正常細胞に与える不都合な反応を軽減させることを意味する。したがって、本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品の投与・摂取時期は、特に限定されるものではないが、抗癌剤投与前、投与中または投与後、日常的に継続投与・摂取するのが好ましい。
【０１２７】
本発明における抗癌剤副作用の軽減効果は、抗癌剤副作用のタイプを問うものでなく、いずれのタイプの抗癌剤副作用に対しても奏功し得る。
【０１２８】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品の投与・摂取剤型としては特に限定されるものでなく、例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、若しくは丸剤等の経口剤、または注射剤、外用液剤、軟膏剤、座剤、局所投与のクリーム、点眼薬などの非経口剤を挙げることができる。
【０１２９】
経口剤は、例えば、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、澱粉、コーンスターチ、白糖、乳糖、ぶどう糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ポリビニルピロリドン、結晶セルロース、大豆レシチン、ショ糖、脂肪酸エステル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ケイ酸マグネシウム、無水ケイ酸、または合成ケイ酸アルミニウムなどの賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色剤、香料、矯味剤、安定化剤、保湿剤、防腐剤、または酸化防止剤等を用いて、常法により製造することができる。
【０１３０】
非経口投与方法としては、注射（皮下、静脈内など）等が例示される。なかでも注射剤が最も好適に用いられる。
【０１３１】
例えば、注射剤の調製においては、有効成分の他に生理食塩水若しくはリンゲル液等の水溶性溶剤、植物油若しくは脂肪酸エステル等の非水溶性溶剤、ブドウ糖若しくは塩化ナトリウム等の等張化剤、溶解補助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、または乳化剤などを任意に用いることができる。
【０１３２】
また、本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品は、徐放性ポリマーなどを用いた徐放性製剤の手法を用いて投与してもよい。例えば、本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品をエチレンビニル酢酸ポリマーのペレットに取り込ませて、このペレットを治療すべき組織中に外科的に移植することができる。
【０１３３】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品は、これに限定されるものではないが、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株あるいはその抽出物等の有効成分を０．０１〜９９質量％、好ましくは０．１〜８０質量％の量で含有することができる。
【０１３４】
本発明の抗癌剤副作用の軽減剤および食品を用いる場合の投与・摂取量は、被投与者の年齢、性別、体重、または投与・摂取方法などに応じて適宜決定することができ、経口的にまた非経口的に投与・摂取することが可能である。
【０１３５】
また、投与・摂取形態も医薬品に限定されるものではなく、種々の形態、例えば、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）やいわゆる健康食品（いずれも飲料を含む）、または飼料として飲食物の形で与えることも可能である。さらには、口中に一時的に含むものの、そのほとんどを口中より吐き出す形態、例えば、歯磨き剤、洗口剤、チューインガム、うがい剤などの形で与えることも、あるいは鼻から吸引させる吸入剤の形で与えることも可能である。例えば、マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株あるいはその抽出物等の有効成分を、添加剤（食品添加剤など）として、所望の食品（飲料を含む）、飼料、歯磨剤、洗口剤、チューインガム、またはうがい剤等に添加することができる。
【０１３６】
なお、上記において、特定保健用食品は、その食品が持つ健康機能の表示が認められる食品（食品ごとに厚生労働省の許可を必要とする）をいい、栄養機能食品は栄養成分の機能を明記できる食品（厚生労働省が作成した規格基準を満たす必要あり）をいい、いわゆる健康食品とは上記保健機能食品以外の食品一般を広く意味するもので、健康補助食品等を含むものである。
【実施例】
【０１３７】
次に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの実施例によってなんら限定されるものでない。
【０１３８】
（実施例１）
［マツタケ菌糸体抽出物の調製］
株式会社クレハ  生物医学研究所で樹立および維持しているマツタケＣＭ６２７１株（マツタケＦＥＲＭ  ＢＰ−７３０４株）の菌糸体を、滅菌済み培地（３％グルコース、０．３％酵母エキス、ｐＨ６．０）１００ｍＬの入った５００ｍＬ容三角フラスコ２０本に接種し、２２℃で２５０ｒｐｍの振盪培養機で４週間培養を行った。培養終了後、培養物（Broth）をホモゲナイザー中で磨砕した後、攪拌して９３℃〜９８℃のウォーターバス中で３時間抽出した。抽出終了後、室温まで冷却し、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、２０分間、４℃）によって上清を回収し、抽出残渣に純水１Ｌを加え、再び同様の処理を行った。この操作を３回行い、各操作で得られた上清を混合した後、分子量３５００分画の透析膜（Spectra/Por 3 Membrane; Spectrum）に入れ、水道水の流水中で３日間透析した。そして、該透析膜内液を濃縮した後、凍結乾燥を行い、白色粉末（以下、単に「ＣＭ６２７１」とも記す）７．８ｇを得た。
【０１３９】
（実施例２）
［アルキル化剤誘発副作用に対する作用検討］
シクロホスファミド（ＣＹ）は、注射または経口により、多発性骨髄腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、乳癌、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、真性多血症、子宮頸癌、子宮体癌、卵巣癌、神経芽腫、網膜芽腫、骨腫瘍、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、咽頭癌、胃癌、膵癌、肝臓癌、結腸癌、睾丸腫瘍、絨毛性疾患、横紋筋肉腫、悪性黒色腫の治療に用いられているアルキル化剤である。
【０１４０】
本剤の代表的な副作用症状として、吐き気や嘔吐、食欲不振に加えて、白血球・血小板・赤血球減少、発熱、寒気、戦慄、咳、のどの痛み、軟便、下痢、腹痛、排尿時の痛み、血尿、頻尿、残尿感、肛門痛、皮歯肉痛、発汗、紫斑、内出血、歯磨きによる出血、鼻血、血便、血尿が報告されている。さらに、手足が冷たい、爪の色が白い、顔色が悪い、頭痛、耳鳴りがする、脈拍が増える、動悸がする、息切れしやすい、食欲不振、便秘、めまいがする、疲労感・倦怠感などの症状も起きる。
【０１４１】
そこで、マウスを用いて、ＣＹ誘発の体重および末梢血細胞減少に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響を調べるとともに、ＣＹの抗腫瘍効果に及ぼす影響を評価した。
【０１４２】
（i）試験動物
日本チャールスリバー（株）から雄性Ｃ５７ＢＬ／６ＮＣｒｊ（Ｃ５７ＢＬ／６）マウスを購入し、予備飼育の後、８週齢で試験に供した。マウスの飼育は、温度２２±５℃、湿度５０±１０％、１２時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
【０１４３】
（ii）試薬（アルキル化剤）
ＣＹは塩野義製薬（株）製「注射用エンドキサン」（商品名）１００ｍｇを用いた。
【０１４４】
（iii）ＣＭ６２７１の投与
ＣＭ６２７１は、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（信越化学工業（株）製）溶液に懸濁したものをマウスに経口投与した。
【０１４５】
（iv）試験群構成および試験方法
<ＣＹ処置マウスの体重に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響>
上記雄性Ｃ５７ＢＬ／６マウスを無作為に下記のようにＡ〜Ｄ群の４群（各群：ｎ＝８）に分け、ＣＭ６２７１投与群（Ｂ群、Ｄ群）とＣＭ６２７１非投与群（対照群。Ａ群、Ｃ群）に、ＣＹ投与腹腔内投与処置あるいは生理的食塩水腹腔内投与処置を施した後、８日間にわたって経時で体重を測定した。結果を表１に示す。
【０１４６】
Ａ群［生理的食塩水処置・対照群］：  生理食塩水処置１０日前から、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、同経口投与を継続しながら、投与開始後１０日目に生理的食塩水を１回腹腔内投与（０．２ｍＬ）し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を８日間連日経口投与し、経日で体重を測定した。
【０１４７】
Ｂ群［生理的食塩水処置・ＣＭ６２７１投与群］：  生理食塩水処置１０日前から、ＣＭ６２７１（上記（iii））を１ｇ／ｋｇ／日の量で連日経口投与し、同経口投与を継続しながら、投与開始後１０日目に生理的食塩水を１回腹腔内投与（０．２ｍＬ）し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で８日間連日経口投与し、経日で体重を測定した。
【０１４８】
Ｃ群［ＣＹ処置・対照群］：  ＣＹ処置１０日前から、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、同経口投与を継続しながら、投与開始後１０日目にＣＹを１回腹腔内投与（１００ｍｇ／ｋｇ）し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を８日間連日経口投与し、経日で体重を測定した。
【０１４９】
Ｄ群［ＣＹ処置・ＣＭ６２７１投与群］：  ＣＹ処置１０日前から、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で連日経口投与し、同経口投与を継続しながら、投与開始後１０日目にＣＹを１回腹腔内投与（１００ｍｇ／ｋｇ）し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で８日間連日経口投与し、経日で体重を測定した。
【０１５０】
【表１】
2007269702.tif 000003
【０１５１】
表１に示す結果から明らかなように、ＣＹ処置によりマウス体重は減少し、投与４日目以降、徐々に回復した（Ｃ群、Ｄ群）。ＣＹ処置の１０日前からＣＭ６２７１  １ｇ／ｋｇを経口投与させたマウスでは、ＣＹ処置後の体重減少が有意に抑制された（Ｄ群）。
【０１５２】
なお、生理食塩水処置・対照群と生理食塩水処置・ＣＭ６２７１群の対比において、両群の平均体重はほとんど変わりなく、ＣＭ６２７１はＣＹ非処置マウスの体重に殆ど影響を与えないことが示唆された。
【０１５３】
<ＣＹ処置マウスの抹消白血球数に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響>
上記Ａ〜Ｄ群のマウスにつき、処置（ＣＹ投与腹腔内投与処置あるいは生理的食塩水腹腔内投与処置）後、４〜８日後のマウスの眼窩静脈叢をガラス毛細管で軽く傷つけることにより採血し、多項目自動血球計数装置Sysmex KX-21（シスメックス（株）製）を用いて白血球数を測定した。結果を表２に示す。
【０１５４】
【表２】
2007269702.tif 000004
【０１５５】
表２に示すように、Ｃ群（ＣＹ処置・対照群）の白血球数はＣＹ処置により有意に減少し、その後徐々に回復し、処置後７日目以降、リバウンド的に増加した。一方、Ｄ群（ＣＹ処置・ＣＭ６２７１投与群）では、ＣＹ処置後４〜５日目の減少は対照群と同様であったが、ＣＹ処置後７日目以降のリバウンド的増加は有意に抑制された。なお、生理食塩水処置・対照群と生理食塩水処置・ＣＭ６２７１群の対比において、両群の平均白血球数は殆ど変わりなく、ＣＭ６２７１はＣＹ非処置マウスの白血球数に殆ど影響を与えないことが示唆された。
【０１５６】
<肺癌細胞ＬＬＣ移植マウスの生存期間に及ぼすＣＹ処置およびＣＭ６２７１の影響>
ＣＹは、おもに肝代謝酵素ＣＹＰ２Ｂ６で代謝されて活性化物質に変換する。ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ａ６もＣＹの代謝に関与していることが報告されている。マツタケ菌糸体がこれら薬物代謝酵素に作用して、ＣＹの活性化を阻害している可能性は否定できない。
【０１５７】
そこで、ＣＹの抗腫瘍効果発現に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響を調べた。すなわち、（株）クレハ  生物医学研究所で継代維持しているルイス肺癌細胞（ＬＬＣ）１×１０6ｃｅｌｌｓ／匹を、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（上記（i））の皮下に移植して担癌マウスとした。この担癌マウス（ＬＬＣ移植マウス）を無作為に下記のようにＥ群〜Ｈ群の４群（各群：ｎ＝１０）に分けた。なお下記において「対照群」とは「ＣＭ６２７１非投与群」を意味する。
【０１５８】
Ｅ群［生理的食塩水処置・対照群］：  腫瘍移植１０日前から０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植翌日から生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を週２回、合計４回腹腔内投与し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間をモニターした。
【０１５９】
Ｆ群［生理的食塩水処置・ＣＭ６２７１投与群］：  腫瘍移植１０日前からＣＭ６２７１（上記（iii））を１ｇ／ｋｇの量で経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植翌日から生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を週２回、合計４回腹腔内投与し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量を２０日間連日経口投与した。
【０１６０】
Ｇ群［ＣＹ処置・対照群］：  腫瘍移植１０日前から０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を経口投与し、同経口投与を継続しながら、瘍移植翌日からＣＹ８０ｍｇ／ｋｇを週２回、合計４回腹腔内投与し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間をモニターした。
【０１６１】
Ｈ群［ＣＹ処置・ＣＭ６２７１投与群］：  腫瘍移植１０日前からＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇの量で経口投与し、同経口投与を継続しながら、瘍移植翌日からＣＹ８０ｍｇ／ｋｇを週２回、合計４回腹腔内投与し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間をモニターした。
【０１６２】
結果を図１に示す。同図から明らかなように、担癌マウスはＣＹ投与により生存期間が延長され、ＣＭ６２７１の併用投与によりさらに延長されたことが確認された。すなわちＣＭ６２７１は、ＣＹの抗腫瘍効果を損なうことなく、むしろ増強することが示唆される。なお同図中、「Ｔ／Ｃ％」はテスト群（Ｆ、ＧまたはＨ）の平均生存日数／Ｅ群の平均生存日数％を意味する。
【０１６３】
（実施例３）
［代謝拮抗剤誘発副作用に対する作用検討］
テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム配合剤（以下、「ＴＳ−１」と記す。商品名「ティーエスワン」（大鵬薬品（株）製））は、経口投与により、胃癌、結腸・直腸癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌の治療に用いられている代謝拮抗剤である。
【０１６４】
本剤の代表的な副作用症状として、白血球・好中球・ヘモグロビン・血小板減少、食欲不振、悪心・嘔吐、下痢、口内炎、色素沈着、発疹が挙げられる。肝障害、脱水症状、間質性肺炎、消化管潰瘍、消化管出血、消化管穿孔、急性腎不全などの症状も報告されている。そこで、ＴＳ−１処置マウスの体重に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響を調べるとともに、ＴＳ−１の抗腫瘍効果に及ぼす影響を評価した。
【０１６５】
（i）試験動物
日本チャールスリバー（株）から雄性BALB/c AnNCrlCrlj（ＢＡＬＢ／ｃ）マウスを購入し、予備飼育の後、８週齢で試験に供した。マウスの飼育は、温度２２±５℃、湿度５０±１０％、１２時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
【０１６６】
（ii）試薬（代謝拮抗剤）
ＴＳ−１は、テガフール：ギメラシル：オテラシルカリウムをモル比で１：０．４：１の割合で混合し、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースに懸濁させて２０ｍｇ／ｋｇ量をマウスに５日間連日経口投与した。投与後、経時的に体重を測定するとともに、部分採血して白血球数を測定した。
【０１６７】
（iii）ＣＭ６２７１の投与
ＣＭ６２７１は、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（信越化学工業（株）製）溶液に懸濁したものをマウスに経口投与した。
【０１６８】
（iv）試験群構成および試験方法
<ＴＳ−１処置マウスの体重に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響〉
上記雄性ＢＡＬＢ／ｃマウスを無作為に下記のようにＩ〜Ｌ群の４群（各群：ｎ＝８）に分け、ＣＭ６２７１投与群（Ｊ群、Ｌ群）とＣＭ６２７１非投与群（対照群。Ｉ群、Ｋ群）に、ＴＳ−１経口投与処置（５日間連続）あるいは生理的食塩水経口投与処置（５日間連続）を施し、処置開始日以降、経時的に体重を測定した。結果を表３に示す。
【０１６９】
Ｉ群［生理的食塩水処置・対照群］：  ０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（０．２ｍＬ／匹／日）を１０日間連続投与後、生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を５日間連続して経口投与する処置を行い、経時で体重を測定した。なお、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースは、ＴＳ−１投与期間中および投与後１１日目まで連日経口投与した。
【０１７０】
Ｊ群［生理的食塩水処置・ＣＭ６２７１投与群］：  ＣＭ６２７１（上記（iii））を１ｇ／ｋｇ／日の量で１０日間連続投与後、生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を５日間連続して経口投与する処置を行い、経時で体重を測定した。なお、ＣＭ６２７１は、ＴＳ−１投与期間中および投与後１１日目まで連日経口投与した。
【０１７１】
Ｋ群［ＴＳ−１処置・対照群］：  ０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（０．２ｍＬ／匹／日）を１０日間連続投与後、ＴＳ−１（上記（ii）に示す試薬）を５日間連続して経口投与する処置を行い、経時で体重を測定した。なお、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースは、ＴＳ−１投与期間中および投与後１１日目まで連日経口投与した。
【０１７２】
Ｌ群［ＴＳ−１処置・ＣＭ６２７１投与群］：  ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で１０日間連続投与後、ＴＳ−１を５日間連続して経口投与する処置を行い、経時で体重を測定した。なお、ＣＭ６２７１は、ＴＳ−１投与期間中および投与後１１日目まで連日経口投与した。
【０１７３】
【表３】
2007269702.tif 000005
【０１７４】
表３に示す結果から明らかなように、ＴＳ−１処置を行ったがＣＭ６２７１を投与しなかったＫ群（ＴＳ−１処置・対照群）では、ＴＳ−１処置開始５日目を過ぎた後、体重は有意に低下した。一方、ＴＳ−１処置の１０日前からＣＭ６２７１を投与したＬ群（ＴＳ−１処置・ＣＭ６２７１投与群）では、ＴＳ−１処置による体重減少が有意に防止された。
【０１７５】
<ＴＳ−１処置マウスの白血球数に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響〉
上記Ｉ〜Ｋ群のマウスにつき、処置（ＴＳ−１経口投与処置あるいは生理的食塩水経口投与処置）開始７日目および１４日目のマウスの眼窩静脈叢をガラス毛細管で軽く傷つけることにより採血し、多項目自動血球計数装置Sysmex KX-21（シスメックス（株）製）を用いて白血球数を測定した。結果を表４に示す。
【０１７６】
【表４】
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【０１７７】
表４に示すように、Ｋ群（ＴＳ−１処置・対照群）とＬ群（ＴＳ−１処置・ＣＭ６２７１投与群）との対比から明らかなように、マウスの白血球数はＴＳ−１処置により有意に減少したが、ＣＭ６２７１投与により白血球数減少は優位に抑制された。なお、Ｉ群とＪ群の対比において、両群の平均白血球数は殆ど変わりなく、ＣＭ６２７１はＴＳ−１非処置マウスの白血球数に殆ど影響を与えないことが示唆された。
【０１７８】
<ＴＳ−１の抗腫瘍効果発現に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響>
次に、ＴＳ−１の抗腫瘍効果発現に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響を調べた。すなわち、株式会社クレハ  生物医学研究所で継代維持しているｃｏｌｏｎ２６大腸癌細胞１×１０6ｃｅｌｌｓ／匹を雄性ＢＡＬＢ／ｃマウス（上記（i））の皮下に移植して担癌マウスとした。
【０１７９】
この担癌マウス（ｃｏｌｏｎ２６腫瘍移植マウス）を無作為に下記のようにＭ群〜Ｐ群の４群（各群：ｎ＝８）に分けた。なお下記において「対照群」とは「ＣＭ６２７１非投与群」を意味する。
【０１８０】
Ｍ群［生理的食塩水処置・対照群］：  腫瘍移植１０日前から０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（０．２ｍＬ／匹／日）を経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植翌日から生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を７日間連続で経口投与し、その後、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間をモニターした。
【０１８１】
Ｎ群［生理的食塩水処置・ＣＭ６２７１投与群］：  腫瘍移植１０日前からＣＭ６２７１（上記（iii））を１ｇ／ｋｇの量で経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植翌日から生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を７日間連続で経口投与し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇの量で連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間をモニターした。
【０１８２】
Ｏ群［ＴＳ−１処置・対照群］：  腫瘍移植１０日前から０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（０．２ｍＬ／匹／日）を経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植翌日からＴＳ−１（上記（ii）に示す薬剤試薬）１２．５ｍｇ／ｋｇを連日７日間経口投与し、その後、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間をモニターした。
【０１８３】
Ｐ群［ＴＳ−１処置・ＣＭ６２７１投与群］：  腫瘍移植１０日前からＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇの量で経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植翌日からＴＳ−１  １２．５ｍｇ／ｋｇを連日７日間経口投与し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間をモニターした。
【０１８４】
結果を図２に示す。同図から明らかなように、生理食塩水処置群（Ｍ群、Ｎ群）では、ＣＭ６２７１の投与は腫瘍増殖にほとんど影響を及ぼさなかったが、ＴＳ−１処置群（Ｏ群、Ｐ群）では、腫瘍増殖は抑制され、ＣＭ６２７１の併用によりさらに増強された。
【０１８５】
（実施例４）
［抗腫瘍性抗生物質誘発副作用に対する作用検討］
塩酸ドキソルビシン（ＡＤＭ）は、注射により、悪性リンパ腫（細網肉腫、リンパ肉腫、ホジキン病）、肺癌、消化器癌（胃癌、胆のう・胆管癌、膵臓癌、肝癌、結腸癌、直腸癌等）、乳癌、膀胱腫瘍、骨肉腫の自覚的および他覚的症状の緩解のために用いられる代表的な抗腫瘍性抗生物質である。また、尿路上皮癌に対しては多剤と併用される。
【０１８６】
本剤の代表的な副作用は脱毛、白血球減、悪心・嘔吐、食欲不振、口内炎、下痢、血小板減少、貧血・赤血球減少、心電図異常、頻脈、頻尿、排尿痛、膀胱炎、血尿、発熱、不整脈、胸痛、肝障害、蛋白尿、色素沈着、倦怠感、頭痛、残尿感、発疹、鼻出血である。そこで、ＡＤＭ処置マウスの体重に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響を調べるとともに、ＡＤＭの抗腫瘍効果に及ぼす影響を評価した。
【０１８７】
（i）試験動物
日本チャールスリバー（株）から雄性CD2F1/Crlj（ＣＤＦ１）マウスを購入し、予備飼育の後、８週齢で試験に供した。マウスの飼育は、温度２２±５℃、湿度５０±１０％、１２時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
【０１８８】
（ii）試薬（抗腫瘍性抗生物質）および投与方法
ＡＤＭは協和発酵（株）のものを用いた（商品名「アドリアシン注」）。ＡＤＭは５ｍｇ／ｋｇ量を１回腹腔内投与した。投与後、経時的に体重を測定するとともに、部分採血して白血球数を測定した。
【０１８９】
（iii）ＣＭ６２７１の投与
ＣＭ６２７１は、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（信越化学工業（株）製）溶液に懸濁したものをマウスに経口投与した。
【０１９０】
（iv）試験群構成および試験方法
<ＡＤＭ処置マウスの体重に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響〉
上記ＣＤＦ１マウスを無作為に下記のようにＱ〜Ｔ群の４群（各群：ｎ＝８）に分け、ＣＭ６２７１投与群（Ｒ群、Ｔ群）とＣＭ６２７１非投与群（対照群。Ｑ群、Ｓ群）に、ＡＤＭ５ｍｇ／ｋｇ量を１回腹腔投与し、当該処置後、経時的に体重を測定した。結果を表５に示す。
【０１９１】
Ｑ群［生理的食塩水処置・対照群］：  ０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を１０日間経口投与し、同経口投与を継続しながら、処置日に生理的食塩水を１回腹腔内投与（５ｍｇ／ｋｇ）し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連続して経口投与し、経時で体重を測定した。
【０１９２】
Ｒ群［生理的食塩水処置・ＣＭ６２７１投与群］：  ＣＭ６２７１（上記（iii））を１ｇ／ｋｇ／日の量で１０日間経口投与し、同経口投与を継続しながら、処置日に生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を１回腹腔内投与（５ｍｇ／ｋｇ）し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で連続して経口投与し、経時で体重を測定した。
【０１９３】
Ｓ群［ＡＤＭ処置・対照群］：  ０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を１０日間連経口投与し、同経口投与を継続しながら、処置日にＡＤＭ（上記（ii）に示す試薬）を１回腹腔内投与し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連続して経口投与し、経時で体重を測定した。
【０１９４】
Ｔ群［ＡＤＭ処置・ＣＭ６２７１投与群］：  ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で１０日間経口投与し、同経口投与を継続しながら、処置日にＡＤＭを１回腹腔内投与し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量を連続して経口投与し、経時で体重を測定した。
【０１９５】
【表５】
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【０１９６】
表５に示す結果から明らかなように、ＡＤＭ処置・対照群（Ｓ群）では、ＡＤＭ処置開始５日目以降、体重は有意に低下した。ＡＤＭ処置の１０日前からＣＭ６２７１を経口投与させたマウス群（Ｒ群）では、体重減少が有意に防止された。
【０１９７】
<ＡＤＭ処置マウスの末消白血球数に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響>
上記Ｑ〜Ｔ群のマウスにつき、処置（ＡＤＭ腹腔内投与処置あるいは生理的食塩水腹腔内投与処置）後、７日後のマウスの眼窩静脈叢をガラス毛細管で軽く傷つけることにより採血し、多項目自動血球計数装置Sysmex KX-21（シスメックス（株）製）を用いて白血球数を測定した。結果を表６に示す。
【０１９８】
【表６】
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【０１９９】
表６に示すように、ＡＤＭ処置・対照群（Ｓ群）の白血球数は有意に減少したが、ＣＭ６２７１投与により、防止された（Ｔ群）。
【０２００】
<ＡＤＭの抗腫瘍効果発現に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響>
次に、ＡＤＭの抗腫瘍効果発現に及ぼすＣＭ６２７１投与の影響を調べた。すなわち、株式会社クレハ  生物医学研究所で継代維持しているＬ１２１０白血病細胞１×１０5ｃｅｌｌｓ／匹を雄性ＣＤＦ１マウス（上記（i））の腹腔内に移植して担癌マウスとした。
【０２０１】
この担癌マウス（Ｌ１２１０白血病細胞移植マウス）を無作為に下記のようにＵ群〜Ｘ群の４群（各群：ｎ＝１０）に分けた。なお下記において「対照群」とは「ＣＭ６２７１非投与群」を意味する。
【０２０２】
Ｕ群［生理的食塩水処置・対照群］：  腫瘍移植１０日前から０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植４日目に生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を１回腹腔内投与し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間を２０日間モニターした。
【０２０３】
Ｖ群［生理的食塩水処置・ＣＭ６２７１投与群］：  腫瘍移植１０日前からＣＭ６２７１（上記（iii））を１ｇ／ｋｇの量で経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植４日目に生理的食塩水（０．２ｍＬ／匹／日）を１回腹腔内投与し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇの量で連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間を２０日間モニターした。
【０２０４】
Ｗ群［ＡＤＭ処置・対照群］：  腫瘍移植１０日前から０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植４日目にＡＤＭ（上記（ii）に示す試薬）５ｍｇ／ｋｇを１回内腹腔投与し、その後、０．５％メチルセルロース４００ＣＰ（０．２ｍＬ／匹／日）を連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間を２０日間モニターした。
【０２０５】
Ｘ群［ＡＤＭ処置・ＣＭ６２７１投与群］：  腫瘍移植１０日前からＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇの量で経口投与し、同経口投与を継続しながら、腫瘍移植４日目にＡＤＭ（上記（ii）に示す試薬）５ｍｇ／ｋｇを１回内腹腔投与し、その後、ＣＭ６２７１を１ｇ／ｋｇ／日の量で連日経口投与し、腫瘍増殖と生存期間を２０日間モニターした。
【０２０６】
結果を図３に示す。同図から明らかなように、生理食塩水処置・対照群（Ｕ群）の平均生存日数１３．２日に比し、ＡＤＭ処置・対照群（Ｗ群）のそれは１６．３日に延長され、さらにＡＤＭ処置・ＣＭ６２７１投与群（Ｘ群）では１８．１日に達した。なお、生理食塩水処置・ＣＭ６２７１投与群（Ｖ群）の平均生存日数１３．４日であった。なお同図中「Ｔ／Ｃ％」はテスト群（Ｖ、ＷまたはＸ）の平均生存日数／Ｕ群の平均生存日数％を意味する。
【０２０７】
（まとめ）
ＣＭ６２７１の経口投与は、抗癌剤ＣＹ、ＴＳ−１およびＡＤＭ処置マウスの体重や末梢白血球数減少を減少させた。さらに、ＣＭ６２７１は、肺癌細胞や大腸癌細胞、白血病細胞を移植したマウスの生存日数を延長させ、腫瘍増殖を抑制した。これらの成績は、ＣＭ６２７１が抗癌剤誘発の副作用を軽減し、抗癌作用を増強することを示唆している。
【図面の簡単な説明】
【０２０８】
【図１】実施例３における、肺癌細胞ＬＬＣ移植マウスの生存期間に及ぼすＣＹ処置およびＣＭ６２７１投与の影響を示すグラフである。
【図２】実施例３における、ｃｏｌｏｎ２６細胞腫瘍移植マウスの腫瘍増殖に及ぼすＴＳ−１処置およびＣＭ６２７１投与の影響を示すグラフである。
【図３】実施例４における、白血病細胞Ｌ１２１０移植マウスの生存期間に及ぼすＣＹ処置およびＣＭ６２７１投与の影響を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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