(57)【要約】【課題】  安全性の高い天然物由来の物質を有効成分とし、紫外線（ＵＶ−Ｂ）吸収作用を有する紫外線吸収剤を提供する。【解決手段】  紫外線吸収剤に、下記式（Ｉ）で表されるグラブリジン配糖体を有効成分として含有せしめる。2007112765.tif 000007［式中、Ｒ１及びＲ２はともに糖残基を表す。］【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表されるグラブリジン配糖体を有効成分として含有することを特徴とする紫外線吸収剤。
【化１】
2007112765.tif 000006
［式中、Ｒ１及びＲ２はともに糖残基を表す。］
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、紫外線吸収剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
地表に到達する紫外線は化学作用が強く、皮膚に日焼け、シミ、そばかす等を生じさせることはよく知られている。いわゆる紫外線のなかでも波長２９０〜３２０ｎｍの中波長紫外線（ＵＶ−Ｂ）は、人体の皮膚にとって有害な作用が特に強いから、従来、これを防御する手段の研究が行われている。紫外線の防御手段としては、紫外線吸収剤の使用が最も一般的である。すなわち、紫外線領域に特に強い吸収作用を示す物質からなる紫外線吸収剤を化粧料、その他の基剤に配合し、それを皮膚に塗布して紫外線遮断膜を形成させることにより、皮膚に過度の紫外線が照射されるのを防止する。
【０００３】
従来、紫外線吸収作用を有する生薬としては、例えば、イチョウ抽出物（特許文献１参照）、金銀花、杜仲葉、パセリ葉、グァバ葉およびマテ茶の群から選ばれる一種又は数種のものの抽出物（特許文献２参照）等が知られている。
【特許文献１】特開平７−１１２３０号公報
【特許文献２】特開平８−１２０２５５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、安全性の高い天然物由来の物質を有効成分とし、紫外線（ＵＶ−Ｂ）吸収作用を有する紫外線吸収剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記目的を達成するために、本発明の紫外線吸収剤は、下記式（Ｉ）で表されるグラブリジン配糖体を有効成分として含有することを特徴とする。
【０００６】
【化１】
2007112765.tif 000002
［式中、Ｒ１及びＲ２はともに糖残基を表す。］
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、安全性が高く、紫外線（ＵＶ−Ｂ）吸収作用を有する紫外線吸収剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
以下、本発明について説明する。
本発明の紫外線吸収剤は、下記一般式（Ｉ）で表されるグラブリジン配糖体を有効成分として含有する。
【０００９】
【化２】
2007112765.tif 000003
［式中、Ｒ１及びＲ２はともに糖残基を表す。］
【００１０】
一般式（Ｉ）において、Ｒ１又はＲ２で表される糖残基としては、例えば、単糖残基、オリゴ糖残基等が挙げられる。単糖残基としては、例えば、Ｄ，Ｌ−グルコース、Ｄ，Ｌ−フルクトース、Ｄ，Ｌ−マンノース、Ｄ，Ｌ−ガラクトース、Ｄ，Ｌ−キシロース、Ｄ，Ｌ−アラビノース、Ｄ，Ｌ−フコース、Ｄ，Ｌ−ラムノース、Ｄ，Ｌ−リキソース、Ｄ，Ｌ−リボース、Ｄ，Ｌ−アロース、Ｄ，Ｌ−アルトロース、Ｄ，Ｌ−イドース、Ｄ，Ｌ−タロース、Ｄ，Ｌ−デオキシリボース、Ｄ，Ｌ−２−デオキシリボース、Ｄ，Ｌ−キノボース、Ｄ，Ｌ−アベクオース等の残基が挙げられる。オリゴ糖残基としては、上記単糖が２〜４個結合したオリゴ糖、例えば、マルトース、セロビオース、ゲンチオビオース、ルチノース、ラフィノース、キシロビオース、スクロース等が挙げられる。これらの糖残基のうち、好ましい糖残基としてはグルコース残基が挙げられ、特に好ましい糖残基としてはＤ−グルコース残基が挙げられる。
【００１１】
一般式（Ｉ）で表されるグラブリジン配糖体は、糖受容体であるグラブリジンと糖供与体とを活性剤の存在下で縮合反応させることにより得ることができる。グラブリジン（3-(2',4'-dihydroxyphenyl)-8-dimethylpyrano[8,7-e]chroman）は、下記式で表される化合物である。
【００１２】
【化３】
2007112765.tif 000004
【００１３】
グラブリジンは、天然には、甘草の一種であるヨウカンゾウ（学名：Glycyrrhiza glabra Linne var.，通称：ロシアカンゾウ）に含まれている。グラブリジンは、グラブラ（glabra）種に特有の成分であって、根部、根茎部等に含まれているが、グラブラ（glabra）種であっても、グラブリジンを含有しない場合があるので、甘草からグラブリジンを抽出する場合には原料甘草の選択に注意が必要である。
【００１４】
グラブリジンを甘草から抽出する場合、まず甘草の根部、根茎部又はそれらの水抽出残渣（例えば、グリチルリチンを抽出した残渣）を有機溶媒で抽出する。抽出溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール等の低級脂肪族アルコール；アセトン等の低級脂肪族ケトン；ジオキサン、エチルエーテル等のエーテル類；塩化メチレン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類；酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル等のエステル類；ヘキサン、ベンゼン等の炭化水素類；及びこれら有機溶媒の２種以上の混合物を使用することができる。なお、水や弱アルカリ性の水ではグラブリジンを抽出できないので注意が必要である。
【００１５】
抽出処理は、例えば、抽出原料である甘草の約５〜１５倍量の抽出溶媒に浸漬し、常温で静置するか還流下に加熱することによって行うことができる。抽出液から抽出溶媒を留去して得られる抽出物は、通常５〜１０％程度のグラブリジンを含有している。抽出物の精製は、例えば、順相シリカゲルクロマトグラフィー及び逆相クロマトグラフィーにより処理した後、アセトンから結晶化させる方法により行うことができ、この方法によれば、比較的容易にグラブリジンの純品を得ることができる。この他、合成吸着体によるカラムクロマトグラフィー、液−液向流抽出等の任意の有機化合物精製手段を採用することができる。
【００１６】
糖供与体は、縮合反応によりグラブリジンを配糖化し得る限り特に限定されるものではなく、例えば、アノマー位（１位）の水酸基に脱離基が導入され、他の水酸基に保護基が導入された糖誘導体が挙げられる。
【００１７】
アノマー位の水酸基に導入される脱離基としては、例えば、塩素原子、臭素原子、フッ素原子等のハロゲン原子、チオメチル基、チオエチル基、チオフェニル基、トリクロロアセトイミド基、ジフェニルホスフィンイミド基等が挙げられ、好ましい脱離基としては、トリクロロアセトイミド基が挙げられる。トリクロロアセトイミド基を使用する場合には、他の脱離基を使用する場合よりも、グリコシル化反応を効率よく進行させることができる。
【００１８】
アノマー位の水酸基以外の水酸基に導入される保護基としては、例えば、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、クロロアセチル基、レブリノイル基等のアシル系保護基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、アリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基、トリメチルシリル基、トリチル基等のエーテル系保護基が挙げられ、好ましい保護基としてはアセチル基が挙げられる。
【００１９】
アノマー位の水酸基に脱離基が導入され、他の水酸基に保護基が導入された糖誘導体は、糖の全ての水酸基に保護基を導入した後、アノマー位の水酸基に導入された保護基を脱離基に置換することにより調製することができる。
【００２０】
糖誘導体の具体的調製方法を以下に示す。
糖をピリジンに加えた後、無水酢酸を加えて溶解し、２０〜６０℃で１０〜１５時間攪拌する。次いで、水を添加して過剰の無水酢酸を除去し、すべての水酸基がアセチル基で保護された糖（以下「アセチル基導入糖」という。）を塩化メチレン、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼン、トルエン、エーテル等の有機溶媒で抽出する。抽出液を減圧下で濃縮することにより、アセチル基導入糖が得られる。
【００２１】
得られたアセチル基導入糖を塩化メチレン、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等に溶解させた後、ヒドラジンアセテート（アセチル基導入糖１質量部に対して０．１〜０．３質量部）を添加して、１０〜４０℃で２〜１５時間攪拌する。この反応液を塩化メチレン、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼン、トルエン、エーテル等の有機溶媒で抽出する。抽出液を減圧下で濃縮することにより、アノマー位の水酸基が脱保護され、他の水酸基がアセチル基で保護された糖誘導体が得られる。
【００２２】
得られた糖誘導体１ｇをジクロロメタンに溶解し、炭酸カリウムを加えた後、トリクロロアセトニトリル１０ｇを添加して１０〜４０℃で３０〜１２０分間攪拌する。この反応液を酢酸エチルで抽出し、抽出液を減圧下で濃縮することにより、アノマー位の水酸基にトリクロロアセトイミド基が導入され、他の水酸基にアセチル基が導入された糖誘導体が得られる。
【００２３】
活性化剤は、グリコシド結合の形成に先立って求核置換を受ける糖供与体を活性化できる限り特に限定されず、例えば、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル等の三フッ化ホウ素錯体、過塩素酸銀、トリフルオロメタンスルホン酸銀、臭化水銀、シアン化水銀、Ｎ−ヨードコハク酸イミド−トリフルオロメタンスルホン酸、ジメチルメチルチオスルホニウムトリフラート、ｐ−トルエンスルホン酸等が挙げられ、好ましい活性化剤としては、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体等の三フッ化ホウ素錯体が挙げられる。
【００２４】
活性化剤の使用量は、糖供与体１質量部に対して通常０．０５〜０．３質量部、好ましくは０．１〜０．２５質量部である。
【００２５】
縮合反応を行う際に使用する溶媒としては、グラブリジン及び糖供与体の両者を溶解し得る溶媒、例えば、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、ベンゼン、トルエン、アセトニトリル、プロピオニトリル、トリメチルアセトニトリル、ニトロメタン、ニトロエタン、ジエチルエーテル等の有機溶媒が挙げられ、好ましい溶媒としてはジクロロメタンが挙げられる。
【００２６】
縮合反応は無水条件下で行われる。無水条件は、無水硫酸ナトリウム、無水硫酸マグネシウム、無水硫酸カルシウム、無水塩化カルシウム、モレキュラーシーブ等の脱水剤を反応液中に添加することにより作り出すことができる。
【００２７】
縮合反応の際の反応温度は通常１０〜５０℃、好ましくは２０〜３０℃であり、反応時間は通常０．５〜１０時間、好ましくは１〜５時間である。
【００２８】
縮合反応の具体的態様を以下に示す。
グラブリジン及び糖供与体（グラブリジンに対する糖供与体のモル比は０．５〜５、好ましくは１〜３）をジクロロメタン等の有機溶媒に溶解し、５００〜１０００ｍｇのモレキュラーシーブ４Ａ及び１００〜２５０μＬの三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体を添加して、２０〜３０℃で０．５〜２時間撹拌する。反応液を水中に加え、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出した後、抽出液を無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤で乾燥させる。乾燥剤を濾別後、減圧下で溶媒を留去することにより、すべての水酸基がアセチル基で保護されたグラブリジン配糖体（以下「アセチル基導入グラブリジン配糖体」という。）が得られる。
【００２９】
水酸基の脱保護は、水酸化ナトリウム等を用いたアルカリ分解法、メタノール性塩酸等を用いた酸分解法、エステラーゼ等を用いた酵素分解法等の公知の方法を用いて行うことができる。アルカリ分解法においては、例えば、アセチル基導入グラブリジン配糖体を０．５〜２％ナトリウムメトキシドに溶解した後、２０〜３０℃で０．５〜２時間攪拌し、次いで、反応液を中和し、減圧下で溶媒を留去することにより、一般式（Ｉ）で表されるグラブリジン配糖体を得ることができる。
【００３０】
糖供与体として、アノマー位の水酸基にトリクロロアセトイミド基が導入され、他の水酸基にアセチル基等のアシル系保護基が導入された糖誘導体を使用し、活性化剤として、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体を使用する場合には、グラブリジンと前記糖残基との結合がβ−グリコシド結合であるグラブリジン配糖体を選択的に得ることができる。
【００３１】
グラブリジン配糖体は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー等の公知の精製方法を用いて精製することができる。
グラブリジン配糖体の製剤化は常法に従って行うことができる。製剤化する場合、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任意の助剤を添加して粉末状、顆粒状、錠剤状等、任意の剤形に製剤化することができる。
【実施例】
【００３２】
以下、製造例、試験例及び配合例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００３３】
〔製造例１〕グラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシドの製造
糖をピリジンに加えた後、無水酢酸を加えて溶解し、２５℃で１５時間攪拌した。次いで、水を添加して過剰の無水酢酸を除去し、すべての水酸基がアセチル基で保護された糖（以下「アセチル基導入糖」という。）を酢酸エチルで抽出した。抽出液を減圧下で濃縮することにより、アセチル基導入糖が得られた。得られたアセチル基導入糖を無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解させた後、アセチル基導入糖１ｇに対して０．２５ｇのヒドラジンアセテートを添加して、２５℃で１５時間攪拌し、この反応液を酢酸エチルで抽出した。抽出液を減圧下で濃縮することにより、アノマー位の水酸基が脱保護され、他の水酸基がアセチル基で保護された糖誘導体が得られた。得られた糖誘導体１ｇをジクロロメタンに溶解し、炭酸カリウムを加えた後、トリクロロアセトニトリル１０ｇを添加して室温で１時間攪拌した。この反応液を酢酸エチルで抽出し、抽出液を減圧下で濃縮することにより、アノマー位の水酸基にトリクロロアセトイミド基が導入され、他の水酸基にアセチル基が導入された糖誘導体が得られた。
【００３４】
１００ｍｇのグラブリジンを５ｍＬのジクロロメタンに溶解し、これに１００μＬの三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体及び１００ｍｇのモレキュラーシーブス４Ａを加え、室温で５分間撹拌した。次いで、アノマー位の水酸基にトリクロロアセトイミド基が導入され、他の水酸基にアセチル基が導入されたグルコース誘導体５００ｍｇを加え、室温で１時間撹拌した。
【００３５】
反応液を水中に加え、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル抽出液を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、減圧下で溶媒を留去し、固形物を得た。得られた固形物を０．１％ナトリウムメトキシドに溶解し、室温で１時間撹拌した。これに５００ｍｇのダウエックスＨＣＲＷ−２を加えて中和し、濾別後、減圧下で溶媒を留去し、粗生成物３００ｍｇを得た。この粗生成物をクロロホルム：メタノール：水＝７：３：１（容量比，下層）の混合溶液に溶解し、ＳｉＯ２（商品名：シリカゲル６０、富士シリシア化学株式会社製）を充填したガラス製のカラム上部より流入して、ＳｉＯ２に吸着させた。移動相としてクロロホルム：メタノール：水＝７：３：１（容量比，下層）を流し、その溶出液を集め、減圧下で溶媒を留去して、グラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシド濃縮物１５０ｍｇを得た。得られたグラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシド濃縮物を下記の条件で液体クロマトグラフィーを用いて分画した。
【００３６】
＜液体クロマトグラフィー条件＞
固定相：ＪＡＩＧＥＬ ＧＳ−３１０（日本分析工業製）
カラム径：２０ｍｍ
カラム長：２５０ｍｍ
移動相流量：９ｍＬ／ｍｉｎ
検出：ＲＩ
【００３７】
ここで、保持時間６０分〜７０分に流出する画分を、リサイクルにより精製し、グラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシドを単離した。この単離したグラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシドについて、ＥＳＩ−マススペクトル、１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲ分析を行った。結果を以下に示す。
【００３８】
＜ＥＳＩ−マススペクトル＞
m/z 671(M+Na)+
＜１Ｈ−ＮＭＲケミカルシフトδ（帰属水素）＞
1.36(3H，s，4''-H3)，1.37(3H，s，5''-H3)，2.74(1H，dd，J=4.4，15.8Hz)，2.86(1H，dd，J=10.5，15.8Hz)(4-H2)，4.83(1H，d，J=7.3Hz，Glc'-1-H)，4.87(1H，d，J=7.3Hz，Glc-1-H)，5.47(1H，d，J=9.8Hz，2''-H)，6.17(1H，d，J=8.1Hz，6-H)，6.50(1H，d，J=9.8Hz，1''-H)，6.62(1H，dd，J=2.4，8.6Hz，5'-H)，6.70(1H，d，J=8.1Hz，5-H)，6.88(1H，d，J=2.4Hz，3'-H)，6.97(1H，d，J=8.6Hz，6'-H)
【００３９】
＜１３Ｃ−ＮＭＲケミカルシフトδ（帰属炭素）＞
27.8(4''-C)，28.0(5''-C)，31.5(4-C)，32.6(3-C)，62.8(Glc-6-C)，62.8(Glc'-6-C)，71.3(2-C)，71.6(Glc'-4-C)，71.7(Glc-4-C)，74.8(Glc-2-C)，74.8(Glc'-2-C)，76.5(3''-C)，77.9(Glc'-3-C)，78.0(Glc-3-C)，78.1(Glc'-5-C)，78.3(Glc-5-C)，101.9(Glc'-1-H)，102.0(Glc-1-C)，104.8(3'-C)，109.5(6-C)，110.9(8-C)，111.6(5'-C)，115.8(10-C)，118.0(1''-C)，125.1(1'-C)，128.6(6'-C)，129.7(2''-C)，130.2(5-C)，150.9(9-C)，152.9(7-C)，157.1(2'-C)，158.5(4'-C)
【００４０】
ＥＳＩ−マススペクトル、１Ｈ−ＮＭＲ及び１３Ｃ−ＮＭＲ分析の結果から、単離された化合物が下記式で表されるグラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシドであることが確認された。
【００４１】
【化４】
2007112765.tif 000005
【００４２】
〔試験例１〕紫外線吸収作用試験
製造例１で得られたグラブリジン配糖体（グラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシド）について、下記のようにして紫外線吸収作用を試験した。
【００４３】
グラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシドをエタノールに溶解したグラブリジン配糖体のエタノール溶液（濃度：５０質量％）について、分光光度計により、５０質量％エタノールを対照液として、波長３００ｎｍ及び波長３５０ｎｍの吸光度を測定し、吸光係数Ｅ（液層厚さ：１ｃｍ，濃度：１質量％）を算出した。その結果を表１に示す。また、波長２００〜４００ｎｍの吸光度の測定結果を図１に示す。
【００４４】
［表１］
波長（ｎｍ）   吸光係数（Ｅ１％１ｃｍ）
３００              ３００
３５０                  ３
【００４５】
図１及び表１に示すように、グラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシドは、優れた紫外線（ＵＶ−Ｂ）吸収作用を有することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明の紫外線吸収剤は、紫外線の照射による皮膚の黒化、シミ、ソバカス等の予防に有用であり、皮膚化粧料等に配合して日焼け防止作用を付与するための紫外線吸収剤として極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】本発明の実施例に係るグラブリジン配糖体（グラブリジン−２’，４’−Ｏ−ジ−β−Ｄ−グルコピラノシド）の紫外線吸収曲線である。
【図１】
2007112765.tif 000008