(57)【要約】【課題】  メタボリックシンドロームの予防又は治療に用いることができる１１β−ＨＳＤ１発現抑制薬、それを用いた内臓脂肪型肥満を伴うメタボリックシンドロームの予防又は治療薬を提供する。【解決手段】  フィブラート系薬剤を有効成分とする内臓脂肪型肥満を伴うメタボリックシンドロームの予防又は治療薬、フィブラート系薬剤を有効成分とする１１β−ＨＳＤ１発現抑制薬、及びフィブラート系薬剤を有効成分とする肥満症の予防又は治療薬。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
フィブラート系薬剤を有効成分とする内臓脂肪型肥満を伴うメタボリックシンドロームの予防又は治療薬。
【請求項２】
フィブラート系薬剤を有効成分とする１型１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの発現抑制薬。
【請求項３】
フィブラート系薬剤を有効成分とする肥満症の予防又は治療薬。 
【請求項４】
フィブラート系薬剤が、ベザフィブラートであることを特徴とする請求項３記載の予防又は治療薬。 
【請求項５】
肥満症が、内臓脂肪型肥満であることを特徴とする請求項４記載の予防又は治療薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メタボリックシンドロームの予防又は治療薬に関するものである。さらに詳しく述べれば、本発明は、フィブラート系薬剤を有効成分として含有する１型１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼの過剰発現によるメタボリックシンドロームの予防又は治療薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
メタボリックシンドロームは、内臓脂肪蓄積を背景とした高トリグリセライド・低ＨＤＬ−コレステロール血症、糖代謝異常、高血圧等の危険因子を合併する病態である。それぞれが軽度でも、合併することにより動脈硬化性疾患を発症する危険性が高くなることから、動脈硬化性疾患のハイリスク群として注目されている。ＷＨＯは、２型糖尿病、耐糖能異常及びインスリン抵抗性のうち少なくとも１つの症状を示し、かつ高血圧、肥満症、脂質代謝異常（高トリグリセライド血症・低ＨＤＬ-コレステロール血症）及び微量アルブミン尿のうち少なくとも２つの症状を示す場合をメタボリックシンドロームと定義している。
【０００３】
また、NCEP ATP III（National Cholesterol Education Program: Adult Treatment Panel III,16,2001）では、下記基準の３項目以上当てはまる場合、メタボリックシンドロームと診断する。
【０００４】
【表１】
2007112720.tif 000002
【０００５】
メタボリックシンドロームの治療には、現在、個々の危険因子に対する薬物療法が試みられている。すなわち、高トリグリセライド・低ＨＤＬ−コレステロール血症にはフィブラート系又はスタチン系薬剤；糖代謝異常にはスルホニルウレア系薬剤、速効型インスリン分泌促進薬、α−グルコシダーゼ阻害薬又はインスリン抵抗性改善薬；高血圧にはアンギオテンシン変換酵素阻害薬又はアドレナリンα受容体拮抗薬等が用いられている。しかしながら、メタボリックシンドロームの背景疾患である内臓脂肪型肥満に対しては、運動療法や食事療法が主であり、薬物療法としては中枢性の食欲抑制剤が使用されているにすぎない。
【０００６】
従来、肥満とペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体（Peroxizome Proliferator Activated Receptor；以下「ＰＰＡＲ」という。）との関係が注目されてきた（非特許文献１参照）。ＰＰＡＲはリガンド応答性転写因子であり、グルココルチコイド、アンドロゲン、プロゲステロン、ミネラルコルチコイド、エストロゲン、活性化ビタミンＤ等をリガンドとする核内受容体ファミリーに属し、ＰＰＡＲα、γ及びδのサブタイプが存在する。
【０００７】
ＰＰＡＲαは、肝臓、心筋、消化管、血管内皮細胞、大動脈平滑細胞、マクロファージ及びリンパ球等で発現し、肝臓における脂肪酸β酸化亢進及びリポプロテインリパーゼ（ＬＰＬ）活性化等の脂質異化作用に関連している。
ＰＰＡＲγは、脂肪細胞等で発現し、脂肪組織における脂肪細胞分化及び脂肪合成促進等の脂質同化作用に関連している。
ＰＰＡＲδは、骨格筋等で発現し、脂肪酸酸化の活性化に関連している。
【０００８】
近年、メタボリックシンドロームを脂肪細胞機能異常症として捉えるアプローチの中から、脂肪細胞におけるグルココルチコイド作用の異常な活性化機構が明らかになってきた。細胞内でグルココルチコイドを活性化する変換酵素、１型１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（以下「１１β−ＨＳＤ１」という。）の脂肪細胞における活性は肥満度に応じて上昇し、インスリン抵抗性指標ともよく相関する。また、脂肪細胞の１１β−ＨＳＤ１酵素活性や遺伝子発現レベルは糖尿病治療薬のチアゾリジン誘導体等のインスリン感受性増強薬で代表されるＰＰＡＲγアゴニストによって、顕著に抑制されることから、脂肪細胞におけるＰＰＡＲγの標的分子として１１β−ＨＳＤ１の意義が注目されている（非特許文献１）。
【０００９】
１１β−ＨＳＤ１を過剰発現するトランスジェニックマウス（ａＰ２ＨＳＤ１マウス）は、肥満者に相当する酵素活性の上昇を示し、メタボリックシンドロームの主要な要素を有することは知られている。このマウスは遺伝性肥満ｏｂ／ｏｂマウス又は重症肥満者と同程度に１１β−ＨＳＤ１が上昇しており、普通食飼育下、対照マウスよりも約１５％の体重増加を認め、脂肪組織の中でも特に腸間膜脂肪組織重量の増加が顕著である（非特許文献２）。
【００１０】
一方、１１β−ＨＳＤ１ノックアウトマウスは、ストレス負荷や高脂肪食負荷に対する肝臓の糖新生酵素群の誘導が起こらず、糖尿病の発症に対して明らかな抵抗性を示し、脂肪異化に関与する分子群とこれらの発現を制御する転写因子の肝臓における発現が明らかに増加している。また、高脂肪食負荷及びｏｂ／ｏｂマウスとの交配によって誘導される内臓脂肪組織の蓄積及び代謝異常の発症が抑制され、メタボリックシンドロームになりにくいことが知られている（非特許文献３）。
【００１１】
したがって、１１β−ＨＳＤ１はメタボリックシンドロームの発症の主要な因子の一つであり、この作用を抑制する薬物はメタボリックシンドロームの予防又は治療薬として用いることができる。
【００１２】
ところで、フィブラート系薬剤の作用機序は多様であり、個々の医薬について固有の特性を有するが、いずれもＰＰＡＲαに対するリガンドとしての作用は共通している。しかしながら、フィブラート系薬剤の１１β−ＨＳＤ１に対する作用、特にフィブラート系薬剤の組織１１β−ＨＳＤ１に対する作用については知られていない。
【００１３】
最近、ベザフィブラートがメタボリックシンドローム患者における心筋梗塞発症を抑制することが報告された（非特許文献４参照）。しかしながら、この報告は複雑なメタボリックシンドロームのうちの一症状を抑制するという対症療法に関するものであり、背景疾患である内臓型肥満を治療することによりメタボリックシンドロームを根本的に治療するというものではない。
【非特許文献１】Masuzaki H.ら，Cureent Drug Targets-Immune, Endocrine & Metabolic Disorders，２００３年，第３巻，ｐ. ２５５−２６２
【非特許文献２】Masuzaki H.ら, Science，２００１年，第２９４巻，２１６６−２１７０頁
【非特許文献３】Morton N.M.ら，Diabetes ，２００４年，第５３巻，９３１−９３８頁
【非特許文献４】Alexander Tenenbaumら, Arch Intern Med.，２００５年，第１６５巻， １１５４−１１６０頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、メタボリックシンドロームの予防又は治療に用いることができる１１β−ＨＳＤ１発現抑制薬、それを用いた内臓脂肪型肥満を伴うメタボリックシンドロームの予防又は治療薬を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明者らは、上記課題について鋭意検討した結果、フィブラート系薬剤が優れた１１β−ＨＳＤ１の発現抑制活性を示すこと、特にフィブラート系薬剤のうちベザフィブラートが腸間膜脂肪組織において１１β−ＨＳＤ１の発現抑制効果を示すことを見出し、本発明を完成させた。
【００１６】
すなわち、本発明の要旨は、フィブラート系薬剤を有効成分とする内臓脂肪型肥満を伴うメタボリックシンドロームの予防又は治療薬、フィブラート系薬剤を有効成分とする１１β−ＨＳＤ１発現抑制薬、及びフィブラート系薬剤を有効成分とする肥満症の予防又は治療薬、に存する。
【発明の効果】
【００１７】
本発明に係る予防又は治療薬は、優れた１１β−ＨＳＤ１の発現抑制活性を有するので、内臓脂肪型肥満症を伴うメタボリックシンドローム等の疾患に用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
フィブラート系薬物としては、例えば、ベザフィブラート、ベクロブラート、ビニフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラート、クロフィブラートアルミニウム、クロフィブリン酸、エトフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、ニコフィブラート、ピリフィブラート、ロニフィブラート、シムフィブラート、テオフィブラート、ＡＨＬ−１５７等が挙げられる。
【００１９】
本発明に係る予防又は治療薬の剤形としては、例えば、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の経口投与剤が挙げられる。これらの経口投与剤は、例えば錠剤の場合、有効成分に必要な賦形剤、崩壊剤、滑沢剤等を加え、常法により打錠して製造することができる。また、有効成分の投与量は、患者の年齢、体重及び疾患の程度等により適宜決定することができる。ベザフィブラートでは、成人１日当たり、通常１００〜１０００ｍｇ、好ましくは４００〜６００ｍｇの範囲で投与する。
【実施例】
【００２０】
本発明の内容を以下の実施例及び試験例でさらに詳細に説明するが、本発明はその内容に限定されるものではない。
【００２１】
（実施例１）
２型糖尿病モデルマウスである遺伝的レプチン受容体欠損マウス（ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｔｄｂ／＋Ｌｅｐｔｄｂ／Ｊｃｌマウス；以下ｄｂ／ｄｂマウス）及びその正常対照マウス（ＢＫＳ．Ｃｇ−ｍ＋／＋Ｌｅｐｔｄｂ／Ｊｃｌマウス）に１％メチルセルロース溶液（病態コントロール群）、ベザフィブラート１００ｍｇ／ｋｇ又は３００ｍｇ／ｋｇ、フェノフィブラート３００ｍｇ／ｋｇを１日１回８週間経口反復投与した。反復投与開始８週間後に尾静脈より採血を行い、血液中のグルコヘモグロビン値、血漿中グルコース濃度、トリグリセライド濃度及びＨＤＬ−コレステロール濃度を測定した。
測定結果を図１に示す。
【００２２】
ベザフィブラート及びフェノフィブラートは、いずれも８週間後のグルコヘモグロビン値及び血漿中トリグリセライド濃度を病態コントロール群に比較して有意に低下させ、血漿中ＨＤＬ−コレステロール濃度を有意に増加させた。また、ベザフィブラートは、８週間後の血漿中グルコース濃度を病態コントロール群に比較して有意に低下させた。
したがって、ベザフィブラート及びフェノフィブラートはｄｂ／ｄｂマウスの糖尿病及び高脂血症を改善し、動脈硬化性疾患へのリスクを軽減することができる。
【００２３】
（実施例２）
投与開始から８週間後、２０％抱水クロラール（和光純薬工業株式会社）腹腔内投与による麻酔を施し、肝臓、骨格筋組織、腸間膜脂肪（内臓脂肪）組織及び皮下脂肪組織を摘出した。摘出した組織からＲＮＡ抽出試薬ＩＳＯＧＥＮ（株式会社ニッポンジーン）を用いてｔｏｔａｌ  ＲＮＡを抽出し、さらにＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｃｒｏ  Ｋｉｔ（株式会社キアゲン）を用いてｔｏｔａｌ  ＲＮＡを精製した。精製した肝臓、骨格筋組織、腸間膜脂肪組織又は皮下脂肪組織のｔｏｔａｌ  ＲＮＡを鋳型としたリアルタイムＲＴ−ＰＣＲにより、各組織における１１β−ＨＳＤ１のｍＲＮＡ発現量を定量した。反応はＧｅｎｅＡｍｐ  ５７００  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いた。
結果を図２に示す。
【００２４】
ベザフィブラート及びフェノフィブラートは、肝臓における１１β−ＨＳＤ１の発現を病態コントロール群に比較して有意に抑制した。
フェノフィブラートは、骨格筋における１１β−ＨＳＤ１の発現を病態コントロール群に比較して有意に抑制した。
ベザフィブラートは、腸間膜脂肪における１１β−ＨＳＤ１の発現を病態コントロール群に比較して有意に抑制した。よって、ベザフィブラートは、内臓脂肪におけるグルココルチコイド作用の異常な活性化を改善し、内臓脂肪型肥満の予防又は治療に用いることができる。
また、ベザフィブラート及びフェノフィブラートは、いずれも皮下脂肪における１１β−ＨＳＤ１の発現に対する抑制効果を示さなかった。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】ベザフィブラート及びフェノフィブラートによるｄｂ／ｄｂマウスの糖尿病及び高脂血症改善効果を示したグラフである。棒グラフは，左から正常対照群，病態コントロール群，ベザフィブラート１００ｍｇ／ｋｇ反復投与群、ベザフィブラート３００ｍｇ／ｋｇ反復投与群、フェノフィブラート３００ｍｇ／ｋｇ反復投与群の値の平均値及び標準誤差を示す。グラフ中の＃印は正常対照群と病態コントロール群間の統計的有意差（５％未満）を示す。＊印は病態コントロール群と統計的有意差（５％未満）があることを示す。（Ａ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後のグルコヘモグロビン値（％）を示したグラフである。（Ｂ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後の血漿中グルコース濃度（ｍｇ／ｄＬ）を示したグラフである。（Ｃ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後の血漿トリグリセライド濃度（ｍｇ／ｄＬ）を示したグラフである。（Ｄ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後の血漿中ＨＤＬ−コレステロール濃度（ｍｇ／ｄＬ）を示したグラフである。
【図２】ベザフィブラート及びフェノフィブラート反復投与後の各組織における１１β−ＨＳＤ１のｍＲＮＡ発現量を定量した結果を示したグラフである。棒グラフは，左から正常対照群、病態コントロール群、ベザフィブラート１００ｍｇ／ｋｇ反復投与群、ベザフィブラート３００ｍｇ／ｋｇ反復投与群、フェノフィブラート３００ｍｇ／ｋｇ反復投与群の１１β−ＨＳＤ１ｍＲＮＡ発現量を示す。縦軸は病態コントロール群のｍＲＮＡ発現量を１００％としたときの各群の発現量の平均値（％）及び標準誤差を示す。グラフ中の＃印は正常対照マウスと病態コントロール群間の統計的有意差（５％未満）を示す。＊印は病態コントロール群と統計的有意差（５％未満）があることを示す。（Ａ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後の肝臓における１１β−ＨＳＤ１の発現を示したグラフである。（Ｂ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後の骨格筋組織における１１β−ＨＳＤ１の発現を示したグラフである。（Ｃ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後の腸間膜脂肪組織における１１β−ＨＳＤ１の発現を示したグラフである。（Ｄ）ベザフィブラート又はフェノフィブラート８週間反復投与後の皮下脂肪組織における１１β−ＨＳＤ１の発現を示したグラフである。
【図１】
2007112720.tif 000003
【図２】
2007112720.tif 000004