(57)【要約】【課題】簡便な操作で反応性物質を分析部に封入でき、検出レベルが安定した分析を行えるバイオアッセイ用マイクロチップを提供する。【解決手段】測定物質を含んだ液体試料が流下する流体流路１０と、流体流路１０に液体試料を分析する分析部２０とを設けたマイクロチップ本体Ａを有するバイオアッセイ用マイクロチップＸであって、マイクロチップ本体Ａに挿入可能であり、測定物質と反応する反応性物質を分析部２０に封入するプラグ部材３０を備える。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
測定物質を含んだ液体試料が流下する流体流路と、前記流体流路に前記液体試料を分析する分析部とを設けたマイクロチップ本体を有するバイオアッセイ用マイクロチップであって、
前記マイクロチップ本体に挿入可能であり、前記測定物質と反応する反応性物質を前記分析部に封入するプラグ部材を備えたバイオアッセイ用マイクロチップ。
【請求項２】
前記プラグ部材に前記反応物質を固定してある請求項１に記載のバイオアッセイ用マイクロチップ。
【請求項３】
前記分析部に対する前記プラグ部材の挿入程度を設定自在に構成してある請求項１又は２に記載のバイオアッセイ用マイクロチップ。
【請求項４】
前記プラグ部材における前記分析部への挿入方向に垂直な断面積は、当該挿入方向側の先端が当該挿入方向に対する末端より小さく構成してある請求項１〜３の何れか一項に記載のバイオアッセイ用マイクロチップ。
【請求項５】
前記分析部に隣接する上流および下流の少なくとも何れか一方の前記流体流路に、前記流体流路の流路方向に平行な複数の溝を設けた請求項１〜４の何れか一項に記載のバイオアッセイ用マイクロチップ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体試料に含まれる測定物質を検出するためのバイオアッセイ用マイクロチップに関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、測定物質として核酸・タンパク質・菌体などの生体物質を含有する液体試料を分析する分析装置が知られている。分析装置に設けてある分析部では、例えば抗原抗体反応による免疫学的手法や、核酸等のハイブリダイゼーションによる生化学的手法を用いて液体試料中に含まれる測定物質を検出する。そのため、分析部には、当該測定物質と結合して特異的複合体を形成する結合性物質を担持したビーズ等の固定化物質が配置してある。
当該結合性物質は、測定物質と反応する反応性物質の一例である。
【０００３】
特許文献１には、結合性物質であるエストロゲン受容体を固定化物質の表面に固定し、分析装置の分析部に積層することが記載してある。反応性物質を固定した固定化物質は懸濁液に含まれた状態で分析部まで移送される。
【０００４】
また、近年、半導体等の微細加工技術（ＭＥＭＳ）を応用して製造されたマイクロチップが、生化学・医療等の分野において汎用されている。
マイクロチップは縦横数センチ程度の二枚の基板を重ねて構成してある。そして、これら基板中に、サンプル注入孔やサンプル排出孔、微小な毛細管状の流体流路、或いは、この流路と接続する分析領域としてのチャンバ・電気泳動カラム・膜分離機構等の分析部が形成される。
【０００５】
マイクロチップの一方の基板の分析部に該当する部位に反応性物質を担持した固定化物質を収容し、他方の基板を重ねることで、固定化物質を分析部へ封入することができる。
一方、固定化物質を分析部に封入する他の手法として、特許文献２には、反応性物質である核酸を担持した固定化物質を、分析部の端部で堰きとめられるまでゲルによって移送することが記載してある。
【０００６】
【特許文献１】特許第３４８３２４６号
【特許文献２】特開２００５−１２７７７１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
分析部には、反応性物質を固定した固定化物質を例えば数百程度封入する。例えば、微量の測定物質を検出する際に、マイクロチップのロットが異なると、分析部に封入される当該固定化物質の数によっては、測定物質の検出レベルが変動する。
【０００８】
また、固定化物質の表面に反応性物質を固定するとき、積層された固定化物質同士の接触状態等によって、固定化物質の表面における反応性物質の固定密度が不均一となる。さらに、反応性物質を固定した固定化物質を分析部まで溶液やゲルによって移送するとき、固定化物質同士の接触等によって、固定してある反応性物質が固定化物質の表面から脱落する虞がある。
これらの場合も、測定物質の検出レベルが変動する原因となる。
【０００９】
従って、本発明の目的は、簡便な操作で反応性物質を分析部に封入でき、検出レベルが安定した分析を行えるバイオアッセイ用マイクロチップを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記目的を達成するための本発明に係るバイオアッセイ用マイクロチップは、測定物質を含んだ液体試料が流下する流体流路と、前記流体流路に前記液体試料を分析する分析部とを設けたマイクロチップ本体を有するバイオアッセイ用マイクロチップであって、その第一特徴構成は、前記マイクロチップ本体に挿入可能であり、前記測定物質と反応する反応性物質を前記分析部に封入するプラグ部材を備えた点にある。
【００１１】
上記第一特徴構成によれば、プラグ部材によって反応性物質を分析部に直接的に封入することができる。このため、従来のマイクロチップのように、反応性物質を固定した固定化物質を分析部まで溶液やゲルによって移送する必要がなく、反応性物質の分析部への封入操作が簡便である。
また、従来のマイクロチップのように、反応性物質はその一部を失った状態で分析部に封入されることがなく、所望量の反応性物質を確実に封入することができ、測定物質の検出レベルが安定する。
【００１２】
本発明に係るバイオアッセイ用マイクロチップの第二特徴構成は、前記プラグ部材に前記反応物質を固定した点にある。
【００１３】
上記第二特徴構成によれば、反応性物質を固定してあるプラグ部材のみをマイクロチップ本体に挿入するという極めて簡便な操作で、反応性物質を分析部に封入できる。
【００１４】
また、通常、１つのマイクロチップ本体に対して１つのプラグ部材によって反応性物質を分析部に封入できるため、取り扱い性が向上する。
【００１５】
本発明に係るバイオアッセイ用マイクロチップの第三特徴構成は、前記分析部に対する前記プラグ部材の挿入程度を設定自在に構成した点にある。
【００１６】
上記第三特徴構成によれば、プラグ部材の押し込み程度に応じて、プラグ部材の挿入深度を適宜設定できるため、分析部の容積を適宜設定するのが容易となる。そのため、多種類のプラグ部材を製造しておく必要がない。そのため、プラグ部材の製造コストを低下させることができる。
【００１７】
本発明に係るバイオアッセイ用マイクロチップの第四特徴構成は、前記プラグ部材における前記分析部への挿入方向に垂直な断面積を、当該挿入方向側の先端が当該挿入方向に対する末端より小さく構成した点にある。
【００１８】
上記第四特徴構成によれば、プラグ部材のマイクロチップ本体への挿入程度を、プラグ部材の形状によって規定することができるため、プラグ部材の押込み操作が容易であり、プラグ部材の挿入操作の完了を容易に認識することができる。
【００１９】
本発明に係るバイオアッセイ用マイクロチップの第五特徴構成は、前記分析部に隣接する上流および下流の少なくとも何れか一方の前記流体流路が、前記流体流路の流路方向に平行な複数の溝を有する点にある。
【００２０】
上記第五特徴構成によれば、分析部に隣接する上流に複数の溝を設けた場合、液体試料が各溝部の間を通過して分析部に流入するため、液体試料は分析部の上方および下方を均一に流下し易い。例えば、測定物質と反応する反応性物質を担持した固定化物質を分析部に封入したとき、当該固定化物質と液体試料とが効率よく接触する。
一方、分析部に対する下流に複数の溝を設けた場合、液体試料は複数の溝の間を通過して液体試料を澱みなく分析部から流出させることができる。よって、前記固定化物質を封入してある場合には、略全ての固定化物質について上方および下方に液体試料を流通させることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
以下、本発明の実施例を図面に基づいて説明する。
本発明は、液体試料に含まれる測定物質を検出するためのバイオアッセイ用マイクロチップ（以下、マイクロチップと称する）である。
マイクロチップは、所謂バイオチップの一種である。
マイクロチップは、例えば、基板中に、液体試料等の液体を注入する注入部や、当該液体を排出する排出部、当該液体が流下する微小な毛細管状の流体流路、当該流体流路と接続する分析領域としてのチャンバ・電気泳動カラム・膜分離機構等の分析部が形成される。このようなマイクロチップは、主にＤＮＡ分析デバイス・微小電気泳動デバイス・微小クロマトグラフィーデバイス・微小センサー等のように、液体試料に含まれる測定物質を検出する用途で使用される。
【００２２】
図１〜４に本実施形態のマイクロチップＸを示す。
本実施形態におけるマイクロチップＸは、測定物質を含んだ液体試料が流下する流体流路１０と、流体流路１０に液体試料を分析する分析部２０とを設けたマイクロチップ本体Ａを備え、さらに、マイクロチップ本体Ａに挿入可能であり、測定物質と反応する反応性物質を分析部２０に封入するプラグ部材３０を備える。
【００２３】
（マイクロチップ本体）
マイクロチップ本体Ａは、例えば、安価に入手でき、耐薬品性に優れているガラスプレートを構成材料として利用する。また、ガラスの他に、石英板、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）等のシリコン樹脂・アクリル樹脂等がマイクロチップ本体Ａの構成材料として利用できる。本実施形態では、アクリル樹脂基板を構成材料としたマイクロチップ本体Ａを例示する。
【００２４】
マイクロチップ本体Ａは、二枚の基板を重ねて構成する。凹部や溝を微細加工した一方の基板３に、平坦な基板４を当接させることにより、流体流路や分析部等の構造を形成することができる。
直接的に基板に微細加工を施す方法として、微細加工用ドリル等を用いての機械的切削加工法、フォトリソグラフィー等の電離放射線リソグラフィーまたはＡＦＭリソグラフィー、物理的・化学的エッチングによる方法等が例示される。
一方、間接的に基板に微細加工を施す方法として、所望の構造に対応する鋳型を用いて微細構造を転写する方法を用いることが可能である。
【００２５】
図１に示したように、マイクロチップ本体Ａには、注入部１・排出部２・流体流路１０・分析部２０が備えてある。
【００２６】
本実施形態の注入部１および排出部２は、それぞれパイプ部材１ａ，２ａを、基板３に挿入して構成してある。例えばパイプ部材１ａをシリコンチューブと接続させることで、当該シリコンチューブ経由で液体試料をマイクロチップ本体Ａに供給することができる。
しかし、このような構成に限らず、基板４に注入部１および排出部２となる孔をそれぞれ形成してもよい。
流体流路１０および分析部２０は、基板３，４で囲まれた空間である。
【００２７】
本実施形態における分析部２０は、結合対アッセイとして抗原抗体反応による免疫学的手法を用いた分析手段を例示する。ただし、これに限られるものではなく、公知の核酸等のハイブリダイゼーションによる生化学的手法を用いた分析手段等も適用できる。
免疫学的手法を用いた分析部２０の場合、当該分析部２０は、液体試料中に含まれる測定物質と結合して特異的複合体を形成する結合性物質を封入する構成とする。  尚、本実施形態では、測定物質を検出する際に利用する物質として、測定物質を捕捉する結合性物質について説明する。ただし、これに限らず、例えば測定物質と反応する反応性物質であって、測定物質の検出・定量ができるものであればよい。
【００２８】
分析部２０を形成する部材表面に結合性物質を固定する、或いは、当該結合性物質を固定化物質の表面に担持させた状態で当該固定化物質を分析部２０の中に封入することにより、結合性物質を分析部２０に配置することができる。
本発明では、以下に説明するプラグ部材３０により結合性物質を分析部２０に配置している。
マイクロチップ本体Ａにおいて、分析部２０に該当する箇所には、プラグ部材３０を挿入するプラグ挿入部５が設けてある。本実施形態ではプラグ挿入部５は基板３に設ける。当該プラグ挿入部５は、プラグ部材３０の挿入方向の形状に対応した形状を有する孔であり、プラグ部材３０が未挿入の状態では、分析部２０が露出した状態となる。
【００２９】
（プラグ部材）
プラグ部材３０は、マイクロチップ本体Ａに挿入可能であり、測定物質と反応する結合性物質（反応性物質）を分析部２０に封入する。これにより、プラグ部材３０によって結合性物質を分析部２０に直接的に封入することができる。このため、従来のマイクロチップのように、結合性物質を固定した固定化物質を分析部まで溶液やゲルによって移送する必要がなく、結合性物質の分析部への封入操作が簡便である。
また、従来のマイクロチップのように、結合性物質はその一部を失った状態で分析部２０に封入されることがなく、所望量の結合性物質を確実に封入することができ、測定物質の検出レベルが安定する。
【００３０】
プラグ部材３０をプラグ挿入部５へ挿入することにより、分析部２０が封止される。このため、プラグ部材３０が分析部２０に対面する先端面３１は、分析部２０を形成する部材の一部となる。
プラグ部材３０は、マイクロチップ本体Ａに対して、上方から又は下方から、の何れの方向から挿入してもよい。本実施形態では、基板３にプラグ挿入部５を設けてあるため、下方からプラグ部材３０をプラグ挿入部５に挿入する場合を例示する。上方からプラグ部材３０をプラグ挿入部５に挿入する場合は、基板４にプラグ挿入部５を設けるとよい。
【００３１】
プラグ部材３０は、その表面に結合性物質を固定してある。
このとき、結合性物質を固定してあるプラグ部材３０をマイクロチップ本体Ａに挿入するという極めて簡便な操作で、結合性物質を分析部２０に封入できる。本実施形態では、１つのマイクロチップ本体Ａに対して１つのプラグ部材３０によって結合性物質を分析部に封入できるため、取り扱い性が向上する。
【００３２】
プラグ部材３０は、結合性物質を固定できる水不溶性の物質であれば適用できる。例えば、ラテックス・ポリエチレン・ポリスチレン・ポリプロピレン等の高分子からなる担体、ケイ酸無機担体（ガラス・シリカゲル等）、有機担体（プラスチック・ニトロセルロース・デキストラン等）等を挙げることができる。
【００３３】
特に、プラグ部材３０とマイクロチップ本体Ａとを弾性が異なる材料となるようにそれぞれ材料を選択すると、プラグ部材３０をマイクロチップ本体Ａに挿入したとき、これら２つのうち何れか一方の部材が他方の部材より弾性変形し易くなる。そのため、各部材の密着度が増して、水密性が向上する。
【００３４】
プラグ部材３０を図２に示すように小径部３０ａと大径部３０ｂとを有する構成とした場合、小径部３０ａと大径部３０ｂとをそれぞれ弾性が異なる材料となるように構成してもよい。このとき、小径部３０ａと大径部３０ｂとにおいて、マイクロチップ本体Ａに対する密着度がそれぞれ異なったものとなる。そのため、小径部３０ａおよび大径部３０ｂの何れか一方において、マイクロチップ本体Ａと確実に密着するように構成できるため、プラグ部材３０とマイクロチップ本体Ａとの水密性を確保しやすくなる。
【００３５】
結合性物質を固定化物質に固定する方法は、公知の手法により行うことができるが、例えば、プラグ部材３０に抗体（結合性物質）を物理吸着する方法、プラグ部材３０の表面に設けた官能基に「結合性物質」のもつアミノ基などを共有結合する方法がある。結合の後、担体の表面及び表面の未反応官能基を適当なタンパク質・界面活性剤などでブロッキング処理し、非特異反応を抑制することが可能である。
【００３６】
例えば、ポリスチレン担体製のプラグ部材３０に抗体を物理吸着させる場合、抗体が溶解した溶液にプラグ部材３０を浸漬させ、オーバーナイトで好ましくは穏やかに振盪させることで、当該プラグ部材３０の表面全体に抗体を固定させる。このとき、１〜数個程度の少数のプラグ部材を扱うため、多数のビーズを取り扱う場合と比べて取り扱いが簡便である。
また、取り扱いが少数であるため、プラグ部３０材同士の積層により、表面に固定化される結合性物質の固定密度が不均一になるのを防止し易くなる。そのため、測定物質の検出レベルが変動し難くなる。
【００３７】
尚、プラグ部材３０をマイクロチップ本体Ａに挿入したとき、先端面３１のみが分析部２０に対向する場合は、当該先端面３１のみに抗体を吸着させてもよい。
【００３８】
分析部２０に対するプラグ部材３０の挿入程度を設定自在に構成してある。
具体的には、図３に示すように、プラグ部材３０を円柱状に形成する。このとき、プラグ部材３０の外径は、プラグ挿入部５に挿入したとき、プラグ部材３０とプラグ挿入部５とが密着するように設定する。そのため、プラグ部材３０はプラグ挿入部５に対して確実に挿着される。
このとき、プラグ部材３０は円柱状であるため、当該プラグ部材３０の押し込み程度によって、プラグ部材３０をプラグ挿入部５に挿入する距離を適宜変更でき、これにより、プラグ部材３０の挿入程度を設定できる。
【００３９】
例えば、プラグ部材３０をマイクロチップ本体Ａに挿入したとき、プラグ部材３０の先端面３１の高さを、流体流路１０の底面に略一致させることができる。これら部材間のレベルが略一致した状態であると、液体試料が澱みなく分析部２０を流下できる。
また、プラグ部材３０をマイクロチップ本体Ａに挿入したとき、プラグ部材３０の先端面３１の高さを、流体流路１０の底面に対して低く設定することができる。これにより、分析部２０に凹部を持たせるようにできるため、この凹部にビーズ等の担体を配置させることができる。
従って、プラグ部材３０の押し込み程度に応じて、プラグ部材３０の挿入深度を適宜設定できるため、分析部２０の容積を適宜設定するのが容易となる。そのため、多種類のプラグ部材を製造しておく必要がない。また、分析部２０の形状・体積を適宜変更することができるため、分析部２０での分析条件を幅広く設定できる。
【００４０】
プラグ部材３０における分析部２０への挿入方向に垂直な断面積を、当該挿入方向側の先端３２が当該挿入方向に対する末端３３より小さくなるように構成することが可能である。
例えば、図２に示すプラグ部材３０は、小径部３０ａおよび大径部３０ｂから成る。このとき、プラグ部材３０は、外側面が段差を有する形状となり、大径部３０ｂが基板３のプラグ挿入部５に当接することで、プラグ部材３０はマイクロチップ本体Ａへの挿入を停止する。
また、図４に示すプラグ部材３０は、側面がテーパ部３０ｃとなっている。このとき、当該テーパ部３０ｃがプラグ挿入部５に当接することで、プラグ部材３０はマイクロチップ本体Ａへの挿入を停止する。
このように、プラグ部材３０のマイクロチップ本体Ａへの挿入程度を、プラグ部材３０の形状によって規定することができるため、プラグ部材３０の押込み操作が容易であり、プラグ部材３０の挿入操作の完了を容易に認識することができる。
【００４１】
ここで、例えば大径部３０ｂが確実にプラグ挿入部５に保持される場合、小径部３０ａは、プラグ挿入部５と当接しないように構成してもよい。このとき、小径部３０ａとプラグ挿入部５との間には隙間が形成される。この隙間を分析部２０の一部として利用することができる。即ち、プラグ部材３０の先端面３１および小径部３０の外表面に抗体を固定させれば、微量の測定物質であっても高感度に検出することができる。
【００４２】
（液体試料とその分析方法の詳細）
上述した「液体試料」とは、分析を行なうべき対象となる測定物質を含む、或いは、含む可能性のある液体のサンプルのことを指す。液体試料はどのような起源由来のものであってもよい。例えば、環境試料・細胞・培養物・組織・体液・尿・血清および生検試料等から得ることができる。
環境試料としては、工場跡地等から採取した土壌や、河川から採取した水等が例示される。そして、環境中より採取された試料は、マイクロチップに形成された流路中を流下できる程度の粘性を有する液体試料となるよう調整する。
【００４３】
液体試料に含まれる「測定物質」は、この測定物質と特異的結合体を形成しうる結合性物質（後述）との結合により捕捉される。特異的複合体は、結合対アッセイを行った結果生じるものであり、後述するように、抗原抗体反応の結果生じる免疫化学的複合体や、相補的な核酸同士のハイブリダイゼーションの結果生じる複合体等が好適に例示される。
尚、本実施形態では、測定物質を検出する際に利用する物質として、測定物質を捕捉する結合性物質について説明するが、これに限らず、例えば測定物質と反応する反応性物質であって、測定物質の検出・定量ができるものであればよい。
【００４４】
測定物質は、化学物質・タンパク質等の高分子・ＤＮＡ断片・微生物又はウィルスおよびその断片・ホルモン等、あらゆる物質が対象となりうる。本発明のマイクロチップに適用できる測定物質としては、例えば、土壌中に含まれる毒性物質（ＰＣＢ，ダイオキシン）や、油性物質（重油）等の環境汚染の要因となりうる物質、或いは、河川の水に含まれる病原性大腸菌の菌体等が好適に例示される。
【００４５】
「結合性物質」は、測定物質を認識し得る物質、つまり、結合性物質と親和性を有する測定物質を選択的に検出し得る分子認識能を有する物質を意味する。具体的には、抗原・抗体・ＤＮＡ断片・オリゴヌクレオチド・ポリヌクレオチド・ペプチド核酸等の核酸・タンパク質・ペプチド・糖・細胞・微生物等が好ましく例示されるが、これらに限定されるものではない。
分子識別能を有する事例としては、例えば、抗体・抗体フラグメント−抗原間、核酸間でのハイブリダイゼーション（相補的結合）能、または、調節因子・受容体−ホルモン・サイトカイン・神経伝達物質・レクチン等間、または、酵素−基質・補酵素等間の生体応答能が好ましく例示される。
例えば、測定物質としてのＰＣＢ、ダイオキシンに対する結合性物質は、それぞれ抗ＰＣＢ抗体、抗ダイオキシン抗体である。
【００４６】
「免疫化学的手法」としては、例えば、固相法によるイムノアッセイの手法を適用することにより液体試料中の測定物質の存在を検出、或いは、定量的測定ができる。イムノアッセイとして公知の所謂「サンドイッチ法」では、例えば抗原のような標的となる測定物質を、標識化抗体と固定化物質表面に固定化された抗体（結合性物質）との間に挟むことにより、分析部２０において特異的複合体を形成させ、測定物質を捕捉することができる。
【００４７】
このように、特異的複合体を形成する抗体等を標識化しておくことで、測定物質の存在を検出、或いは、定量的測定ができる。尚、測定物質或いは結合性物質の何れかを標識化してもよい。
このようにして、液体試料中の測定物質を高感度に検出することができる。
【００４８】
抗原抗体反応により形成された特異的複合体の検出は、以下のように行う。
例えば、抗体を蛍光（発光）物質により標識化し、その蛍光（発光）強度を直接検出する、もしくは、抗体に酵素を結合し、化学発光基質を用いて酵素反応を行なうことにより光学的変化を検出する。
【００４９】
蛍光標識した抗体を使用した場合における反応の結果、生成する特異的複合体中に、「測定物質」の量に応じて標識物質が存在することになる。洗浄用バッファーなどを注入部１より導入して流体流路１０を流下させ、未反応物を除去した後、標識物質の量を測定することで、「測定物質」を定量することができる。標識物質の定量は、標識物質の種類と共に種々の方法をとりうる。例えば、蛍光測定装置により蛍光物質の蛍光強度を測定する。測定された標識強度を、既知量の「測定物質」を測定した場合の標識強度と比較することにより、液体試料中の測定物質量を決定できる。
【００５０】
〔別実施の形態〕
上述した実施形態では、プラグ部材３０に結合性物質を固定させた場合について説明した。
しかし、これに限らず、微小なビーズ等の固定化物質に結合性物質を固定し、プラグ部材３０を、その表面に結合性物質を担持したビーズ４０を分析部２０に封入する部材として使用することができる（図５）。
【００５１】
本実施形態のようにビーズ４０を分析部２０に配置する場合、ビーズ４０を収容する凹部６を設ける。例えば上述した円柱形のプラグ部材３０の場合（図３）、当該プラグ部材３０のプラグ挿入部５への挿入を途中で停止することにより、凹部６を形成できる。
【００５２】
このように凹部６を設けると、ビーズ４０を確実に分析部２０に保持することができる。しかし、フラットな分析部２０と比べて、当該凹部６で構成される分析部２０は液体の澱みが発生しやすい。従って、分析部２０の内部に洗浄用バッファー等を流下させたとき、十分な洗浄が行えない虞がある。
そのため、分析部２０に隣接する上流および下流の少なくとも何れか一方の流体流路１０に、流体流路１０の流路方向に平行な複数の溝を設ける。
【００５３】
例えば、凹部６の上流に複数の溝１１ａを備える溝部１１を設ける。
液体試料の一部は複数の溝１１ａの間を通過するため、液体試料は分析部２０の凹部６の上方および下方を均一に流下し易い。従って、結合性物質を担持したビーズ４０と液体試料とが効率よく接触する。
【００５４】
凹部６の下流も同様に複数の溝１２ａを備える溝部１２を設ける。これにより、液体試料は複数の溝１２ａの間を通過して液体試料を澱みなく分析部２０から流出させることができる。このとき、略全てのビーズ４０について上方および下方に液体試料を流通させることができる。
複数の溝１２ａの間隔は、液体試料が流体流路１０を流下するときに、ビーズ４０が各溝部１２ａの間を通過して分析部２０の下流に流出しないサイズを適宜選択する。
【００５５】
結合性物質を担持したビーズ４０を分析部２０に封入するには、当該ビーズ４０を分析部２０に配置し、その後、プラグ部材３０をプラグ挿入部５に挿入すればよい。
本構成では、結合性物質を分析部２０に封入するとき、結合性物質を担持したビーズ４０が流体流路１０を流下することはないため、ビーズ４０の表面に固定してある結合性物質がビーズ４０の表面から剥がれる虞はない。そのため、測定物質の検出レベルが安定する。
【００５６】
前記固定化物質は、ビーズ状の粒子の他に、シート状・チューブ状など種々の形態をとりうる。好ましい例としては、粒径０．１〜１０００μｍ程度、好ましくは１〜１００μｍ程度、特に好ましくは１〜５０μｍ程度のビーズ状である。
一方、ナイロン・ニトロセルロース・酢酸セルロース・ガラス繊維および多孔性ポリマー等の多孔性物質が固定化物質として利用可能である。
【００５７】
「固定化物質」としては、その表面に結合性物質を担持できる水不溶性の物質であれば適用できる。例えば、ラテックス・ポリエチレン・ポリスチレン・ポリプロピレン等の高分子からなる担体、ケイ酸無機担体（ガラス・シリカゲル等）、有機担体（プラスチック・ニトロセルロース・デキストラン等）、活性炭等の炭素系材料、金属粒子・マグネタイト等の磁性体等を挙げることができる。
【００５８】
本発明は、液体試料に含まれる測定物質を検出するためのマイクロチップに利用できる。
【図面の簡単な説明】
【００５９】
【図１】本発明のバイオアッセイ用マイクロチップの概略図
【図２】分析部に挿入するプラグ部材の概略図
【図３】分析部に挿入するプラグ部材の別態様の概略図
【図４】分析部に挿入するプラグ部材の別態様の概略図
【図５】別実施形態の分析部周縁の概略図
【符号の説明】
【００６０】
Ｘ                  マイクロチップ
Ａ                  マイクロチップ本体
１０                流体流路
１１ａ，１２ａ      溝
２０                分析部
３０                プラグ部材
【図１】
2007263706.tif 000003
【図２】
2007263706.tif 000004
【図３】
2007263706.tif 000005
【図４】
2007263706.tif 000006
【図５】
2007263706.tif 000007