(57)【要約】【課題】本発明は、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤におけるパンテチンおよび／またはＬ−システインの正確な定量方法を提供する。【解決手段】パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤におけるパンテチンおよび／またはＬ−システインを定量する際に、パンテチンおよびＬ−システインを溶液中で共存させるとき、該溶液のｐＨを１以上５未満に調整することにより、パンテチンおよびＬ−システインが安定化し、これらを正確に定量できることを新たに見出した。本発明により、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤におけるパンテチンおよび／またはＬ−システインの正確な定量方法を提供することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｐＨ調節剤を添加することを特徴とするパンテチン共存下におけるＬ−システインの定量方法。
【請求項２】
ｐＨ調節剤を添加し、ｐＨを１以上５未満に調整することを特徴とするパンテチン共存下におけるＬ−システインの定量方法。
【請求項３】
ｐＨ調節剤が、アスコルビン酸、クエン酸、塩酸、リン酸、メタリン酸またはそれらの塩から選ばれる１種または２種以上である請求項１または２に記載のパンテチン共存下におけるＬ−システインの定量方法。
【請求項４】
ｐＨ調節剤を添加することを特徴とするＬ−システイン共存下におけるパンテチンの定量方法。
【請求項５】
ｐＨ調節剤を添加し、ｐＨを１以上５未満に調整することを特徴とするＬ−システイン共存下におけるパンテチンの定量方法。
【請求項６】
ｐＨ調節剤が、アスコルビン酸、クエン酸、塩酸、リン酸、メタリン酸またはそれらの塩から選ばれる１種または２種以上である請求項４または５に記載のＬ−システイン共存下におけるパンテチンの定量方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤における、パンテチンおよび／またはＬ−システインの定量方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
パンテチンは、（１）パントテン酸欠乏症の予防および治療、（２）消耗性疾患、甲状腺機能亢進症、妊産婦、授乳婦などのパントテン酸の需要が増大し、食事からの摂取が不十分な際の補給、（３）高脂血症、弛緩性便秘、ストレプトマイシンおよびカナマイシンによる副作用の予防および治療、急・慢性湿疹、血液疾患の血小板数および出血傾向の改善のうち、パントテン酸の欠乏または代謝障害が関与すると推定される場合などに用いられる有用な薬物である。（例えば、非特許文献１参照）
【０００３】
一方、Ｌ−システインは、色素沈着症の予防・治療剤（美白剤）として知られている。（例えば、特許文献１参照）
【０００４】
また、パンテチンおよびＬ−システインもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有する組成物は、優れた美白効果を有することもすでに知られている。（例えば、特許文献２参照）
【非特許文献１】財団法人日本医薬情報センター編  ＪＡＰＩＣ  医療用医薬品集  ２００６  １７０８〜１７０９頁
【特許文献１】特開昭５９−１２８３２０号公報
【特許文献２】特開２００５−１９４２０３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤において、パンテチンおよび／またはＬ―システインの含有量を正確に測定することは、該製剤の安定性等を検討する際に必要である。本発明は、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤におけるパンテチンおよび／またはＬ−システインの正確な定量方法を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤におけるパンテチンおよび／またはＬ−システインを定量する際に、パンテチンおよびＬ−システインを溶液中で共存させると、パンテチンおよびＬ−システインの安定性が損なわれ、パンテチンの含有量およびＬ−システインの含有量が経時的に低下し、正確な定量ができないという問題点を見出した。かかる問題点を解決すべく、鋭意研究の結果、パンテチンおよびＬ−システインが溶液中に共存しているとき、該溶液中にｐＨ調節剤を添加して、該溶液のｐＨを調整すると、パンテチンおよびＬ−システインが安定化し、パンテチンおよび／またはＬ−システインを正確に定量できることを見出し、本発明を完成させた。
【０００７】
すなわち本発明は、
（１）ｐＨ調節剤を添加することを特徴とするパンテチン共存下におけるＬ−システインの定量方法、
（２）ｐＨ調節剤を添加し、ｐＨを１以上５未満に調整することを特徴とするパンテチン共存下におけるＬ−システインの定量方法、
（３）ｐＨ調節剤が、アスコルビン酸、クエン酸、塩酸、リン酸、メタリン酸またはそれらの塩から選ばれる１種または２種以上である（１）または（２）に記載のパンテチン共存下におけるＬ−システインの定量方法、
（４）ｐＨ調節剤を添加することを特徴とするＬ−システイン共存下におけるパンテチンの定量方法、
（５）ｐＨ調節剤を添加し、ｐＨを１以上５未満に調整することを特徴とするＬ−システイン共存下におけるパンテチンの定量方法、
（６）ｐＨ調節剤が、アスコルビン酸、クエン酸、塩酸、リン酸、メタリン酸またはそれらの塩から選ばれる１種または２種以上である（４）または（５）に記載のＬ−システイン共存下におけるパンテチンの定量方法、である。
【発明の効果】
【０００８】
後記実施例から明らかなように、パンテチンおよびＬ−システインが溶液中で共存しているパンテチンおよびＬ−システイン含有溶液に、ｐＨ調節剤を添加し、該溶液のｐＨを調整することにより、パンテチンおよびＬ−システインが溶液中で安定化し、パンテチンの定量および／またはＬ−システインの定量を正確に行なうことができた。本発明により、パンテチンまたはその塩およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤において、パンテチンおよび／またはＬ−システインの含有量を正確に定量する方法を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明は、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤において、パンテチンおよび／またはＬ−システインを定量する際に、該製剤を溶解した溶液にｐＨ調節剤を添加し、該溶液のｐＨを調整することを特徴とするパンテチンおよび／またはＬ−システインの定量方法である。
【００１０】
本発明にかかるパンテチンは、公知の化合物であり、市販のものを用いてもよく、公知の方法にて製造することもできる。
【００１１】
本発明にかかるＬ−システインは、公知の化合物であり、その入手方法としては、市販品を用いてもよく、または公知の方法に基づき製造することもできる。
【００１２】
また、本発明にかかるｐＨ調節剤は、有機酸、無機酸およびそれらの塩を挙げることができる。
【００１３】
有機酸としては、例えば、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、乳酸、グリコール酸等のオキシ酸；酢酸、アジピン酸、コハク酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸等のモノまたはジカルボン酸；アスコルビン酸、エリソルビン酸等を挙げることができる。これらの有機酸においては、それらの塩、例えば、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩等の塩を用いることができる。
【００１４】
一方、無機酸としては、例えば、塩酸、リン酸、メタリン酸、硫酸、硝酸等を挙げることができる。これらの無機酸においては、それらの塩、例えば、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩等の塩を用いることができる。
【００１５】
本発明にかかるｐＨ調節剤としては、前記に挙げたものに限定されないが、本発明においては、アスコルビン酸、クエン酸、塩酸、リン酸、メタリン酸またはそれらの塩が好ましい。
【００１６】
前記のｐＨ調節剤は、１種または２種以上を組み合わせて用いてもよい。さらに、前記に挙げたｐＨ調節剤は、いずれも公知の化合物であり、市販のものを用いてもよく、公知の方法にて製造することも可能である。
【００１７】
本発明の定量方法は、定量しようとするパンテチンおよびＬ−システインを含有する（すなわち、パンテチンとＬ−システインが共存する）溶液のｐＨを、好ましくはｐＨ１以上５未満、より好ましくはｐＨ１以上４以下の範囲に調整することを特徴としている。
【００１８】
本発明にかかるｐＨ調節剤の添加量は、定量しようとするパンテチンおよびＬ−システインを含有する溶液のｐＨを、好ましくはｐＨ１以上５未満、より好ましくはｐＨ１以上４以下の範囲に調整すればよく、特に制限されないが、ｐＨ調節剤として利用する有機酸または無機酸に換算して０．００１〜１０Ｗ／Ｗ％、好ましくは０．０５〜５Ｗ／Ｗ％を添加すればよい。これにより、パンテチンおよびＬ−システインが安定化し、これらを正確に定量することができるようになる。
【００１９】
また、本発明の定量方法を利用してパンテチンおよび／またはＬ−システインの含有量を定量しようとする製剤が、パンテチンおよびＬ−システインを含有する固形製剤または半固形製剤であって、該製剤中のパンテチンおよび／またはＬ−システインを定量する際には、これらの製剤を、適切な溶媒に溶解し、必要に応じて溶解剤や溶解補助剤を加え、本発明にかかるｐＨ調節剤を添加してｐＨを調整した上で、パンテチンおよび／またはＬ−システインを定量すればよい。
【００２０】
なお、該製剤中においては、パンテチンおよびＬ−システインは、それぞれ塩として存在していてもよい。また、パンテチンおよびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤は、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩のみからなる製剤でもよいが、用途や製剤の剤形等により、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩以外の薬効成分および製剤化に必要な添加物が配合されていることもある。
【００２１】
配合され得る薬効成分の例としては、その製剤の用途等により必要に応じて適宜選択されるため、特に制限はない。例えば、ビタミン剤、抗ヒスタミン剤、鎮咳薬、解熱鎮痛薬、交感神経興奮薬、中枢神経興奮薬、抗炎症薬、局所麻酔薬、殺菌剤、制酸剤、健胃剤、消化剤、胃粘膜修復剤、鎮痛鎮痙薬、便秘治療剤、向精神薬、潰瘍治療剤、生薬等を挙げることができるが、これらに限られるものではない。また、これらの薬効成分は、１種または２種以上を組み合わせて配合され得る。
【００２２】
また、配合され得る添加物の例としては、その製剤の用途や剤形等により必要に応じて適宜選択されるため、特に制限はないが、例えば、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、安定化剤、抗酸化剤、着色剤、界面活性剤、芳香剤・香料、乳化剤、可溶化剤、防腐剤、甘味剤、矯味剤、保存剤、清涼化剤、溶解補助剤、溶解剤、緩衝剤、懸濁剤、粘稠剤、苦味マスキング剤等を挙げることができる。これらの添加剤は、１種または２種以上を組み合わせて配合され得る。
【００２３】
パンテチンおよび／またはＬ−システインの溶液中の濃度を測定する方法は、公知の方法で行なえばよく、特に限定されないが、高速液体クロマトグラフィーを用いる液体クロマトグラフ法が、簡便で好ましい。液体クロマトグラフ法を用いるにあたっては、公知の試験条件、すわなち、検出器、カラム、カラム温度、移動相とその流量、および公知の内標準物質を用いて測定することができる。
【００２４】
以下に、実施例および試験例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるべきものではない。
【実施例】
【００２５】
（試験例１）
１．ｐＨ緩衝液の調製
１−１．ｐＨ１．０緩衝液の調製
０．２ｍｏｌ／Ｌ塩酸および０．２ｍｏｌ／Ｌ塩化カリウムを水に溶解して、ｐＨ１．０に調整した。
１−２．ｐＨ４．０、５．０、６．０、７．０緩衝液の調製
０．１ｍｏｌ／Ｌクエン酸溶液および０．５ｍｏｌ／Ｌリン酸水素二ナトリウム溶液を用いて、ｐＨ４．０、ｐＨ５．０、ｐＨ６．０、ｐＨ７．０に調整し、それぞれの緩衝液を調製した。
【００２６】
２．パンテチン試料液およびＬ−システイン試料液の調製
８０Ｗ／Ｗ％パンテチン液約３７５ｍｇを精密に量り、精製水を加えて溶かし、正確に５０ｍＬとしパンテチン試料液とした。
また、Ｌ−システイン約１０００ｍｇを精密に量り、精製水を加えて溶かし、正確に５０ｍＬとし、Ｌ−システイン試料液とした。
【００２７】
３．試験方法
ｐＨ１．０、ｐＨ４．０、ｐＨ５．０、ｐＨ６．０およびｐＨ７．０緩衝溶液をそれぞれ５０ｍＬ量り、４０℃の水浴中で保温し、パンテチン試料液２ｍＬおよびＬ−システイン試料液２ｍＬをそれぞれ正確に加えた。両試料液を加えた時点を０分とし、１５分後、３０分後、６０分後、９０分後、１２０分後に５ｍＬを正確にサンプリングして、直ちにメタリン酸水溶液（３→５０）を加えて正確に１０ｍＬとした。各々の時点におけるパンテチンおよびＬ−システインの残存量を、液体クロマトグラフ法を用いて以下の試験条件で測定した。結果を表１および表２に示す。
【００２８】
液体クロマトグラフィー測定の試験条件
検出器        ：紫外吸光光度計（測定波長：２１０ｎｍ）
カラム        ：  ＯＤＳ−３（ジーエルサイエンス株式会社）、１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ．
カラム温度    ：４０℃付近の一定温度
移動相        ：ｐＨ１．６のリン酸水溶液１０００ｍＬに１−デカンスルホン酸ナトリウム１．０ｇを溶解した溶液とメタノールを３：１で混合した溶液
流量          ：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
注入量        ：２０μＬ
【００２９】
４．パンテチンおよびＬ−システイン共存下における安定性（４０℃）
表１  ｐＨのパンテチン残存率への影響（対開始時％）
2007263591.tif 000002
【００３０】
表２  ｐＨのＬ−システイン残存率への影響（対開始時％）
2007263591.tif 000003
【００３１】
表１および表２の結果より、パンテチンおよびＬ−システインが溶液中に共存する場合に、パンテチンおよび／またはＬ−システインの含有量は、ｐＨを調整することにより、経時的に減少するのを防止することがわかった。
【００３２】
（試験例２）
１．ｐＨ調節剤の調製
試験例１で調製したｐＨ６．０緩衝液を用いてアスコルビン酸を溶解し、０．０１Ｍおよび０．１Ｍのアスコルビン酸溶液を調製し、ｐＨ調節剤とした。別に試験例１で調製したｐＨ６．０緩衝液を用いてメタリン酸を溶解し、メタリン酸溶液（１→５０）を調製し、ｐＨ調節剤とした。
【００３３】
２．パンテチン試料液およびＬ−システイン試料液の調製
試験例１と同様にパンテチン試料液およびＬ−システイン試料液を調製した。
【００３４】
３．試験方法
１で調製したメタリン酸溶液（１→５０）（実施例１）、０．０１Ｍアスコルビン酸溶液（比較例１）および０．１Ｍアスコルビン酸溶液（実施例２）のそれぞれ５０ｍＬを量り、４０℃の水浴中で保温し、パンテチン試料液２ｍＬおよびＬ−システイン試料液２ｍＬをそれぞれ正確に加えた。両試料液を加えた時点を０分とし、１５分後、３０分後、６０分後、９０分後、１２０分後に５ｍＬを正確にサンプリングして、直ちにメタリン酸水溶液（３→５０）を加えて正確に１０ｍＬとした。各々の時点におけるパンテチンおよびＬ−システインの残存量を試験例１と同様に液体クロマトグラフ法を用いて測定した。結果を表３および表４に示す。
【００３５】
なお、各ｐＨ調節剤とパンテチンおよびＬ−システインの両試料液を混合した際の溶液のｐＨは、以下のとおりであった。
メタリン酸溶液（１→５０）（実施例１）：ｐＨ３．３
０１Ｍアスコルビン酸溶液（比較例１）：ｐＨ５．９
１Ｍアスコルビン酸溶液（実施例２）：ｐＨ４．４
【００３６】
表３  パンテチンおよびＬ−システイン共存下におけるＬ−システインの安定性（４０℃）
2007263591.tif 000004
【００３７】
表４  パンテチンおよびＬ−システイン共存下におけるパンテチンの安定性（４０℃）
2007263591.tif 000005
【００３８】
表３および表４の結果から、ｐＨ３．３に調整した実施例１およびｐＨ４．４に調整した実施例２においては、パンテチンおよびＬ−システインともに、安定性を保つことがわかった。一方、ｐＨ５．９に調整した比較例１は、経時的にパンテチンおよびＬ−システインの含有量が低下することがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明により、パンテチンおよびＬ−システインの共存下において、パンテチンおよび／またはＬ−システインの正確な定量を行なうことができる。すなわち、パンテチンまたはその塩、およびＬ−システインまたはその塩を含有する製剤における、パンテチンおよび／またはＬ−システインの含有量の正確な測定方法を提供することができる。