(57)【要約】【課題】新規の抗腫瘍剤を提供する。【解決手段】前記抗腫瘍剤は、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質を有効成分として含有する。前記阻害物質としては、例えば、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の活性を阻害する物質、又はＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の発現を阻害する物質を使用することができ、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する抗体が好ましく、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対するポリクローナル抗体がより好ましい。本発明の抗腫瘍剤は、癌の治療又は予防に有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質を有効成分として含有する、抗腫瘍剤。
【請求項２】
前記阻害物質が、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の活性を阻害する物質である、請求項１に記載の抗腫瘍剤。
【請求項３】
前記阻害物質が、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する抗体である、請求項２に記載の抗腫瘍剤。
【請求項４】
前記阻害物質が、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の発現を阻害する物質である、請求項１に記載の抗腫瘍剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規抗腫瘍剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＡＤＡＭＴＳ−１（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs）タンパク質は、ジスインテグリンドメイン１個と、レプロリシン（reprolysin）タイプのマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）ドメイン１個と、トロンボスポンジン（ＴＳＰ）タイプ１モチーフ３個とを有し、ＡＤＡＭＴＳファミリーに属するタンパク質である。マウスＡＤＡＭＴＳ−１遺伝子は、癌悪疫質をイン・ビボ（in vivo）で引き起こす大腸癌株ｃｏｌｏｎ２６から単離され（非特許文献１及び２）、ヒトＡＤＡＭＴＳ−１遺伝子及びヒトＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質は、特許文献１に開示されている。ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の生理活性としては、白血球減少活性、血小板減少活性、及び赤血球増加活性（特許文献１）、並びにアグリカナーゼ活性（特許文献２）が公知である。
【０００３】
【非特許文献１】「ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Journal of Biological Chemistry）」，（米国），1997年，272巻，p. 556-562
【非特許文献２】「ジェノミクス（Genomics）」，（米国），1997年，46巻，p. 466-471
【特許文献１】特開平１１−４６７８１号公報
【特許文献２】特開２００１−３０２５３６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明者は、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の新規用途を鋭意探求したところ、驚くべきことに、マウスＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の阻害活性を有する中和抗体（抗マウスＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質ポリクローナル抗体）が、抗腫瘍作用を有することを新たに見出した。
本発明の課題は、新規の抗腫瘍剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
前記課題は、本発明による、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質を有効成分として含有する、抗腫瘍剤によって解決することができる。
【０００６】
本発明の抗腫瘍剤の好ましい態様によれば、前記阻害物質が、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の活性を阻害する物質（より好ましくは、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する抗体）であるか、あるいは、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の発現を阻害する物質である。
【０００７】
本発明は、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質と、薬剤学的又は獣医学的に許容することのできる担体又は希釈剤とを含有する、癌の治療又は予防用の医薬組成物に関する。
本発明は、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質を、癌の治療又は予防の必要な対象に、有効量で投与することを含む、癌の治療又は予防方法に関する。
本発明は、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質の、抗腫瘍剤又は癌の治療若しくは予防用の医薬組成物を製造するための使用に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明における有効成分である、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質を用いることにより、新規の抗腫瘍剤を提供することができる。また、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質は、癌の治療又は予防に、あるいは、抗腫瘍剤の製造に使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の抗腫瘍剤は、有効成分として、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質を含有する。
【００１０】
本明細書において「ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質」とは、特開平１１−４６７８１号公報（前記特許文献１）に開示されているヒトＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質、若しくはこのヒトＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に相当する種々の動物におけるタンパク質、例えば、マウスＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７２，５５６−５６２，１９９７）、又はそれらの天然のアレル体若しくは人為的改変体を意味する。例えば、前記ヒトＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質はアミノ酸残基７２７個からなり、そのアミノ酸配列は前記特開平１１−４６７８１号公報に開示されている。ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質は、種々の生理活性、例えば、造血機能に影響を与える活性（特には、白血球及び血小板の数を低下させ、同時に、赤血球の数を増加させる活性）（特開平１１−４６７８１号公報）、アグリカナーゼ活性（特開２００１−３０２５３６号公報）を有する。
【００１１】
本発明における有効成分である、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質に対する阻害物質（以下、ＡＤＡＭＴＳ−１阻害剤と称することがある）には、例えば、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の活性を阻害する物質（以下、ＡＤＡＭＴＳ−１活性阻害物質と称する）と、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質の発現を阻害する物質（以下、ＡＤＡＭＴＳ−１発現阻害物質と称する）とが含まれる。なお、本明細書における用語「阻害」とは、阻害対象（例えば、活性又は発現）を完全に、あるいは、部分的に抑制又は減少させることを意味する。
【００１２】
本発明で用いることのできるＡＤＡＭＴＳ−１活性阻害物質としては、例えば、中和抗体（抗ＡＤＡＭＴＳ−１ポリクローナル抗体又は抗ＡＤＡＭＴＳ−１モノクローナル抗体を含む）、基質との結合を阻害する物質、活性中心に結合する低分子物質などを挙げることができ、抗ＡＤＡＭＴＳ−１ポリクローナル抗体が好ましく、抗ＡＤＡＭＴＳ−１モノクローナル抗体がより好ましい。また、ＡＤＡＭＴＳ−１活性阻害物質は、常法に従って、ＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質を用いるスクリーニングにより、容易に、選択、同定、又は確認することができる。例えば、被検物質の存在下及び不在下における各ＡＤＡＭＴＳ−１活性を測定し、被検物質の存在によりＡＤＡＭＴＳ−１活性が抑制又は低下した場合、前記被検物質がＡＤＡＭＴＳ−１活性阻害物質であると決定することができる。
【００１３】
本発明で用いることのできるＡＤＡＭＴＳ−１発現阻害物質としては、例えば、ＡＤＡＭＴＳ−１の発現を特異的に阻害可能な小分子量干渉ＲＮＡ（small interfering RNA; siRNA）若しくはアンチセンス核酸、ＡＤＡＭＴＳ−１ｍＲＮＡを特異的に切断可能なリボザイムなどを挙げることができる。ＡＤＡＭＴＳ−１発現阻害物質は、常法に従って、ＡＤＡＭＴＳ−１遺伝子を用いるスクリーニングにより、容易に、選択、同定、又は確認することができる。例えば、ＡＤＡＭＴＳ−１コード領域及びその上流領域を含むＡＤＡＭＴＳ−１遺伝子［所望により、コード領域をレポーター遺伝子（例えば、ルシフェラーゼ遺伝子）に置換することが可能である］を含む宿主細胞を用いて、被検物質の存在下及び不在下における遺伝子発現量を測定し、被検物質の存在により遺伝子発現量が抑制又は低下した場合、前記被検物質がＡＤＡＭＴＳ−１発現阻害物質であると決定することができる。
【００１４】
本発明の抗腫瘍剤は、ＡＤＡＭＴＳ−１阻害剤を、それ単独で、あるいは、所望により薬剤学的若しくは獣医学的に許容することのできる通常の担体と共に、癌の治療又は予防の必要な対象［例えば、動物、好ましくは哺乳動物（特にはヒト）］に投与することができる。
【００１５】
本発明の抗腫瘍剤による治療又は予防の対象となる癌としては、例えば、皮膚癌、腎臓癌、肺癌、胃癌、肝臓癌、結腸・直腸癌、膵臓癌、食道癌、乳癌、子宮癌、前立腺癌、口腔癌、脳腫瘍、肉腫、メラノーマ、又は白血病などを挙げることができる。
【００１６】
投与剤型としては、特に限定がなく、例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、若しくは丸剤等の経口剤、又は注射剤、外用液剤、軟膏剤、坐剤、局所投与のクリーム、若しくは点眼薬などの非経口剤を挙げることができる。
【００１７】
これらの経口剤は、例えば、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、澱粉、コーンスターチ、白糖、乳糖、ぶどう糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ポリビニルピロリドン、結晶セルロース、大豆レシチン、ショ糖、脂肪酸エステル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ケイ酸マグネシウム、無水ケイ酸、又は合成ケイ酸アルミニウムなどの賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色剤、香料、矯味剤、安定化剤、保湿剤、防腐剤、又は酸化防止剤等を用いて、常法に従って製造することができる。
【００１８】
非経口投与方法としては、注射（局所、皮下、静脈内等）、又は直腸投与等が例示される。これらのなかで、注射剤が最も好適に用いられる。
例えば、注射剤の調製においては、有効成分としてのＡＤＡＭＴＳ−１阻害剤の他に、例えば、生理食塩水若しくはリンゲル液等の水溶性溶剤、植物油若しくは脂肪酸エステル等の非水溶性溶剤、ブドウ糖若しくは塩化ナトリウム等の等張化剤、溶解補助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、又は乳化剤などを任意に用いることができる。
また、本発明の抗腫瘍剤は、徐放性ポリマーなどを用いた徐放性製剤の手法を用いて投与してもよい。例えば、本発明の抗腫瘍剤をエチレンビニル酢酸ポリマーのペレットに取り込ませて、このペレットを治療又は予防すべき組織中に外科的に移植することができる。
【００１９】
本発明の抗腫瘍剤は、これに限定されるものではないが、ＡＤＡＭＴＳ−１阻害剤を、０．０１〜９９重量％、好ましくは０．１〜８０重量％の量で含有することができる。
本発明の抗腫瘍剤を用いる場合の投与量は、病気の種類、患者の年齢、性別、体重、症状の程度、又は投与方法などに応じて適宜決定することができ、経口的に又は非経口的に投与することが可能である。
更に、形態も医薬品に限定されるものではなく、種々の形態、例えば、機能性食品や健康食品、又は飼料として飲食物の形で与えることも可能である。
【実施例】
【００２０】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
【００２１】
《実施例１：ルイス肺癌細胞株を用いた抗マウスＡＤＡＭＴＳ−１ポリクローナル抗体の抗腫瘍効果の評価》
（１）移植癌細胞液の調製
ルイス肺癌細胞株（ＬＬＣ；ATCC CRL-1642）は、ＲＰＭＩ−１６４０［２０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）及び２ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼを含む］培地５０ｍＬで３７℃にて１時間処理した。処理後、上清を回収し、４℃で３分間遠心（１２００ｒ．ｐ．ｍ．）後、上清を吸引除去した。ＲＰＭＩ−１６４０（ＦＣＳ不含）で３回洗浄した後、５×１０６個／ｍＬになるように癌細胞液を調製した。
【００２２】
（２）癌細胞移植と抗体投与
前記癌細胞液０．２ｍＬを６週齢Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ雄マウスの腋下部に皮下移植した。その翌日から抗体投与を開始し、１匹当たり抗体２００μｇを週２回の頻度で２．５週間（合計５回）静脈内投与を行った。なお、前記抗体としては、マウスＡＤＡＭＴＳ−１タンパク質をウサギに免疫して得られた抗血清から精製したＩｇＧ画分を、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）に溶解したもの（以下、抗マウスＡＤＡＭＴＳ−１ポリクローナル抗体と称する）を使用した。
【００２３】
対照として、ＰＢＳ（希釈溶媒）と、対照抗体（抗マウスＡＤＡＭＴＳ−１ポリクローナル抗体の作製に使用した正常ウサギから精製したＩｇＧ画分）とを、それぞれ使用した。
【００２４】
（３）結果
移植してから１６日後にマウスを屠殺し、屠殺後の腫瘍重量を表１に示す。
表１に示す腫瘍重量に関する差の検定（Ｔ−検定）によれば、抗マウスＡＤＡＭＴＳ−１ポリクローナル抗体投与群は、ＰＢＳ投与群及び対照抗体投与群と比較すると、それぞれ、ｐ＝０．００６、ｐ＝０．０４であり、有意に腫瘍増殖抑制作用が認められた。
【００２５】
《表１》
腫瘍重量［平均±Ｓ．Ｄ．（ｇ）］
ＰＢＳ                    ４．６±０．５０
対照抗体                  ４．４±０．９７
抗ADAMTS-1抗体              ３．６±１．１０          
【産業上の利用可能性】
【００２６】
本発明の抗腫瘍剤は、癌の治療又は予防の用途に適用することができる。