(57)【要約】【課題】廃棄物処理にも貢献でき、かつ、微生物の固体培養に小麦フスマの代替として好適に用いられる、酵母菌体残渣を利用した微生物固体培養用培地を提供する。【解決手段】酵母菌体、特にキャンディダ属酵母菌体、から熱水抽出等によりエキス分を抽出した残渣である酵母菌体残渣、又は該酵母菌体残差に細胞壁溶解酵素及び／又はプロテアーゼを作用させた処理物に、セルロースパウダー等の通気性助剤を添加し培地とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
酵母菌体残渣又は酵母菌体残渣の細胞壁溶解酵素及び／又はプロテアーゼ処理物、及び通気性助剤からなる微生物固体培養用培地。
【請求項２】
酵母がキャンディダ属酵母である、請求項１記載の微生物固体培養用培地。
【請求項３】
通気性助剤がセルロースパウダーである、請求項１乃至２記載の微生物固体培養用培地。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酵母菌体残渣を利用した、微生物の固体培養、特に工業用酵素、抗生物質等の有用物質を製造する際に用いられる、微生物の固体培養用培地に関する。
【背景技術】
【０００２】
酵母は、醸造、発酵工業、食品工業等、さまざまな産業に広く利用されており、その結果、酵母菌体あるいは酵母菌体残渣等の有機性廃棄物が多量に排出されている。これらは、一部は肥料あるいは飼料の原料として利用されているものの、ほとんどは利用されることなく、海洋投棄、埋め立て、焼却等、廃棄処分されてきた。
【０００３】
酵母菌体残渣は、酵母菌体から菌体中のエキス、例えば酵母エキス等を抽出した残渣であるが、なおタンパク質・繊維等が含まれていることから、これらを有効利用する方法も提案されてきた。例えば、酵母菌体残渣等を加熱・加圧して木質生分解材とする方法（特許文献１）、酵母菌体残渣等を炭化させてガス吸着材あるいは植物栽培用培地とする方法（特許文献２）、酵母菌体残渣に溶菌酵素を生産する特殊な菌を培養させて可溶化させたのち嫌気的処理する方法（特許文献３）、酵母菌体残渣に特殊な菌を作用させて高度不飽和脂肪酸を富化した動物飼料とする方法（特許文献４）等が報告されている。
しかしながらこれら方法は、処理が煩雑であったり、特殊な菌を作用させなければならいという欠点があり、更に有利な方法が求められていた。
【０００４】
一方、微生物を用いた固体培養法による有用物質の製造における培地としては、穀物カスが用いられてきた。中でも小麦フスマは、栄養価的特徴が優れていることから汎用されている。一般に、穀物カスは通気性に劣り、微生物の成育が低下し、ひいては目的物の生産性を低下させるという欠点がある。そこで、通気性を改善するものとして、小麦フスマをペレット状に成形したもの、あるいは造粒したものが提案されている（特許文献５）が、更に経済的で有用物質の生産性の優れたものが望まれている。
【特許文献１】特開平７−２８５１０８号公報、特開２００３−２３１１０８号公報
【特許文献２】特開２０００−２６４６１５号公報、同２００３−３２５０４４号公報
【特許文献３】特開平７−１８４６４０号公報
【特許文献４】特開２００４−２９８１２３号公報
【特許文献５】特開昭６３−１４８９８１号公報、特開平９−１７３０５２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、食品工業等から排出される酵母菌体残渣の有効利用を図るとともに、微生物の固体培養用培地、特に、小麦フスマの代替となる培地を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、酵母菌体残渣あるいはその酵素処理物と通気性助剤を用いることにより、上記課題を解決できることを見いだし、本発明に到達した。
すなわち本発明は、
（１）酵母菌体残渣又は酵母菌体残渣の細胞壁溶解酵素及び／又はプロテアーゼ処理物、及び通気性助剤からなる微生物固体培養用培地、
（２）酵母がキャンディダ属酵母である、上記（１）記載の微生物固体培養用培地、
（３）通気性助剤がセルロースパウダーである、上記（１）乃至（２）記載の微生物固体培養用培地、
を提供するものである。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によると、多量排出されている酵母菌体残渣を小麦フスマの代替として微生物固体培養用培地に活用でき、廃棄物処理にも貢献することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明で用いられる酵母菌体残渣とは、酵母菌体から抽出処理、例えば、熱水抽出等の簡単な処理により、酵母菌体中の有用物、例えば酵母エキス等を抽出した残渣であり、タンパク質とグルカン等の細胞壁成分を主とするものである。
用いられる酵母は、酵母エキス等を生産するための酵母であればいずれでもよく、例えば、サッカロミセス属酵母、キャンディダ属酵母等を例示することができるが、中でもキャンディダ属酵母が好ましい。
【０００９】
酵母菌体残渣の細胞壁溶解酵素あるいはプロテアーゼ処理物は、酵母菌体残渣を酵素処理することにより製造される。
用いられる細胞壁溶解酵素は、酵母細胞を分解するものであれば特に種類を問わないが、グルカナーゼが特に好ましい。また、プロテアーゼは、エンド型、エキソ型共に用いることができ、酸性、中性、アルカリ性も問わず、これらを併用することもできるが、特にアルカリ性のエンドプロテアーゼが好ましい。
酵素の使用量は、使用する酵素によっても異なるが、酵母菌体残渣（乾燥重量）に対して０．１〜５％、好ましくは０．５〜１．０％添加される。
【００１０】
反応（処理）条件は使用する酵素の種類、使用量等によって異なるが、ｐＨ３．０〜１１．０、好ましくはｐＨ６．０〜９．０の範囲が好ましく、反応温度は３０〜８０℃、望ましくは３５〜７０℃、反応時間は１〜１０時間程度で十分である。
反応終了後、処理物は、反応液を乾燥することにより、例えば、ドラムドライヤーで乾燥し次いで粉砕器で粉砕することにより、容易に粉末として取得することができる。
【００１１】
本発明において培地の通気性を改善するため、酵母菌体残渣あるいはその処理物に、セルロースパウダー等の飼化、分解しがたい通気性助剤が添加される。
これら通気性助剤の添加量は、酵母菌体残渣あるいはその処理物に対して、２０重量％から５００重量％、好ましくは５０重量％から２００重量％である。添加量が少ないと通気性の改善が十分ではない。
【００１２】
本発明において、培養する微生物によっては、更にミネラル群溶液（イオン水）を添加し、菌体量を増加させることもできる。
溶液中のミネラル群としては、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛を含んでいることが必要で、培養する微生物の種類に応じて、他のミネラルを添加することもできる。
ミネラル群溶液は、水にミネラルの塩、例えば塩化物、硫酸塩、等を添加溶解することにより得られるが、これらミネラルを含有していれば、天然のミネラル水を用いることもできる。
これらミネラルの濃度は、培養する微生物によっても異なるが、カルシウム、鉄については０．０１〜１％程度、マグネシウムについては０．１〜１０％程度、亜鉛は０．００１〜０．１％程度である。
ミネラル群溶液は、酵母菌体残渣あるいはその処理物に対して、その濃度によっても異なるが、５０〜３００重量部程度である。
【００１３】
本発明の培地での培養条件及び有用物質の単離は、培養する微生物の公知の条件が適用できる。
【実施例】
【００１４】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明する。
製造例１
キャンディダ・ユティリスＡＨＵ３０５３株を常法により培養し集菌することにより酵母菌体を得た。該菌体からエキス分を熱水抽出し、該熱水可溶性成分（エキス分）を分離・除去することにより、酵母菌体残渣を得た。
得られた酵母菌体残渣の組成を表１に示す。
【００１５】
【表１】
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【００１６】
製造例２
製造例１で得た酵母菌体残渣２２．５ｋｇ（乾燥重量）を水１２７．５Ｌに懸濁しｐＨを８．５に調製した。本懸濁液に、プロチンＡＣ１０Ｆ（大和化成製）２２５ｇを水に溶解した溶液を０．２２μｍのフィルターを通して添加した。添加終了後、６０〜７０℃で攪拌下４時間酵素反応を行った。
反応終了後、反応液をドラムドライヤーを用いて１５０℃で乾燥を行い、次いで粉砕器で粉砕し、酵母菌体残渣の処理物１８ｋｇを得た。
得られた処理物の組成を表２に示す。
【００１７】
製造例３
製造例１で得た酵母菌体残渣２２．５ｋｇ（乾燥重量）を水１２７．５Ｌに懸濁しｐＨを６．５に調製した。本懸濁液に、ツニカーゼ（大和化成製）２２５ｇを水に溶解した溶液を０．２２μｍのフィルターを通して添加した。添加終了後、３５〜４０℃で攪拌下４時間酵素反応を行った。
反応終了後、反応液をドラムドライヤーを用いて１５０℃で乾燥を行い、次いで粉砕器で粉砕し、酵母菌体残渣の処理物１８ｋｇを得た。
得られた処理物の組成を表２に示す。
【００１８】
【表２】
2007274910.tif 000003
【００１９】
実施例１〜３
製造例１〜３で得られた酵母菌体残渣、該酵母菌体残渣をプロチンＡＣ１０Ｆ処理及びツニカーゼ処理したもの、それぞれ１０ｇに、通気性助剤としてセルロースパウダーをそれぞれ１０ｇ添加し、本発明の微生物固体培養用培地１〜３を得た。
【００２０】
培養例１
微生物としてＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ  ＡＴＣＣ１１４９４株を用い、ポテトデキストロース寒天培地で胞子を形成させた後、スキムミルク１０％、グルタミン酸ナトリウム１％からなる保存液に胞子を懸濁させ、−８０℃で保存した胞子懸濁液を用いた。
１００ｍｌ三角フラスコに、実施例１及び実施例３で得られた微生物固体培養用培地をそれぞれ２０ｇずつとり、これに、撹拌しながら、蒸留水１４ｇあるいはミネラル水（塩化カルシウム５．３９ｇ／Ｌ、硫酸鉄２．１３ｇ／Ｌ、硫酸マグネシウム７５．４ｇ／Ｌ、塩化亜鉛０．３３ｇ／Ｌ）１４ｇを添加し、１２１℃、６０分間オートクレーブ殺菌を行った。
これに、胞子懸濁液０．２５ｍｌずつ接種した後、２７℃で７日間培養した。
対照として、小麦フスマ２０ｇに蒸留水１４ｇを添加したものを用い、同様に実施した。
結果を表３に示す。なお、表中の菌体量は、１００℃で１時間乾燥した後、粉砕し、麹菌量測定キット（キッコウマン製）で測定した。
【００２１】
【表３】
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【００２２】
培養例２
培養例１において、微生物としてＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ  ＡＴＣＣ１５２４０株を用いた以外は、培養例２と同様に実施した。
結果を表４に示す。なお、表中の菌体量は、１００℃で１時間乾燥した後、粉砕し、麹菌量測定キット（キッコウマン製）で測定した。
【００２３】
【表４】
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【産業上の利用可能性】
【００２４】
以上述べてきたように、本発明によると、多量排出されている酵母菌体残渣を小麦フスマ等の代替として微生物固体培養用培地に活用でき、かつ、廃棄物処理にも貢献することができる。