(57)【要約】【課題】現在有効な薬物療法手段が脂肪性肝疾患または脂肪性肝炎、たとえば、非アルコール性脂肪性肝疾患または非アルコール性脂肪性肝炎に対し、有効かつ安全な改善治療薬を提供する。【解決手段】カテキン含量が４６０〜２５００ｍｇ／５００ｍＬである高含量のカテキンを含有してなる改善治療薬が、脂肪性肝疾患または脂肪性肝炎、たとえば非アルコール性脂肪性肝疾患または非アルコール性脂肪性肝炎の改善治療薬として有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カテキン類を含有する脂肪性肝疾患または脂肪性肝炎の改善治療薬。
【請求項２】
対象疾患が非アルコール性脂肪性肝疾患または非アルコール性脂肪性肝炎である請求項１記載の改善治療薬。
【請求項３】
カテキン類含量が４６０〜２５００ｍｇ／５００ｍＬである請求項１または２記載の改善治療薬。
【請求項４】
飲料形態である請求項１〜３のいずれか１項記載の改善治療薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒトまたはその他の動物における脂肪性肝疾患の改善治療薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近、非アルコール性脂肪性肝疾患（ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｆａｔｔｙ  ｌｉｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ、以下、ＮＡＦＬＤと称する）は、我が国の疾患診療において最も頻繁に遭遇する肝疾患の一つであり、食生活の欧米化とともにその罹患率が増加しており、その治療薬の提供は重要な社会的課題である。ＮＡＦＬＤの原因としては、食生活の異常、肥満、アルコール過剰摂取、糖尿病や高脂血症などの生活習慣病への罹患が挙げられる。
【０００３】
また、非アルコール性脂肪性肝炎（ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ、以下、ＮＡＳＨと称する）という脂肪肝に肝の炎症、壊死と肝線維化を来す病態が認知されるようになった。この疾患は、肝硬変、肝細胞癌にまで進展することが明らかとなっている。
【０００４】
現在、ＮＡＦＬＤまたはＮＡＳＨを指摘された患者は食生活の改善や運動療法といった治療が主体となり、その他まだ、有効な治療法が確立されてはいない。これまで米国を中心にＮＡＳＨを含むＮＡＦＬＤの薬物療法に関して多くの臨床治験が報告されているにも関わらず、これらの疾患に対する有効な薬物療法は依然確立されていない。
【０００５】
一方、緑茶の主要成分であるカテキン類は、抗腫瘍作用や抗動脈硬化作用を有するとして近年注目されている。緑茶葉中には、豊富にカテキン類が存在していて、これまでに抗酸化作用、抗ウイルス作用、抗血栓形成作用、抗アレルギー作用、抗癌作用、血圧降下作用、血糖降下作用などが報告されている。また、動物実験においては、中性脂肪および総コレステロール低下作用、エネルギー消費亢進など脂質代謝に対する作用が認められている（非特許文献１)。
【０００６】
また、近年生活習慣病の罹患率を増加させる一因と言われている「肥満」の予防治療の研究が盛んに行われている（特許文献１）。
【特許文献１】特開2002-326932号
【非特許文献１】Vanessa Crespy and Gary Williamson,  2004  J. Nutr. 134: 3431S〜3440S
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、現在有効な薬物療法が知られていないＮＡＳＨおよびＮＡＦＬＤに対し、安全かつ有効な改善治療用医薬を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、緑茶に含有されるカテキン類が肝臓の炎症の指標として代表的なＧＰＴ値について有意な改善効果を有すること、脂肪肝患者体内の酸化的ストレス発生の指標である尿中イソプラスタン値を有意に減少させること、および腹部単純ＣＴ検査による肝臓脂肪含有率の変化に対し、有意な改善効果を有することから、カテキン類がＮＡＳＨおよびＮＡＦＬＤに対し、安全かつ有効な改善治療用医薬となり得ることを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
本発明は、以下のものを提供する：
[１]   カテキン類を含有する脂肪性肝疾患または脂肪性肝炎の改善治療薬。
[２]   対象疾患が非アルコール性脂肪性肝疾患または非アルコール性脂肪性肝炎である前記[１] 記載の改善治療薬。
[３]   カテキン類含量が４６０〜２５００ｍｇ／５００ｍＬである前記［１］または［２］記載の改善治療薬。
[４]   飲料形態である前記［１］〜［３］のいずれかに記載の改善治療薬。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、従来有効な薬物療法手段が存在していなかったＮＡＳＨまたはＮＡＦＬＤを改善治療することが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明においては、特許文献１（特開2002-326932号）に記載されたカテキン類を用いることが望ましく、これら特許の記載は参考資料として本明細書に引用する。
【００１２】
上記特許には、カテキン類を高濃度に含有させ、当該カテキン類の体脂肪低減効果等が開示されている。本発明の医薬を提供するにあたり、当該カテキン類高含有飲料を患者に投与したところ、ＮＡＳＨまたはＮＡＦＬＤを改善治療できる知見が得られたのである。
【００１３】
本発明においてカテキン類とは、カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート、ガロカテキンガレートなどの非エピカテキン類およびエピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレートなどのエピカテキン類の総称であり、本発明においては、これらから選ばれる単独の成分または二種以上の混合物として用いることができる。
【００１４】
本発明に用いられるカテキン類は、化学合成されるか、又は、混合物として上記参考特許に記載された方法にて得られる。すなわち、茶葉から製茶された煎茶、玉露、てん茶などの緑茶から水や熱水により抽出して得られる。抽出方法としては、攪拌抽出等の周知の方法が適用される。また、抽出用水または熱水にアスコルビン酸ナトリウムなどの有機酸またはその塩類を添加してもよい。また、煮沸脱気や窒素ガスなどの不活性ガスを通気して液中に溶存している酸素を除去するなどして非酸化的雰囲気下で抽出することも可能である。カテキン類は、緑茶に限定されず、半発酵茶（ウーロン茶ともいう）や発酵茶（紅茶ともいう）の茶葉からも上記方法にて得ることができる。これら抽出物をカラムクロマトグラフィー等の通常の方法により各成分または適当な成分が適切な組成比にある混合物を得ることができる。
【００１５】
本発明医薬としては、上記のようにして得た抽出物をろ過し、乾燥して、濃縮物とし、これを錠剤、散剤、カプセル剤等の経口製剤とすることができるが、液剤、形態が好ましい。
【００１６】
液剤としては、上記濃縮物、例えば緑茶抽出物の濃縮物またはその精製物を媒体に溶解して製造される。ここで用いられる媒体としては、水または通常濃度の茶葉抽出液が好ましい。当該液剤は、ｐＨを２５℃にて３〜７に調節するのが安定性等から好ましい。液剤は通常のプラスティック容器（いわゆる、ＰＥＴボトル）、金属缶、ガラス製瓶、アルミ箔やプラスティックフィルムで被覆された紙容器等の飲料用に汎用されている容器に詰められて提供される。プラスティック容器やガラス製瓶は透明容器、半透明容器および着色容器のいずれも使用できる。これらは、適宜プラスティック被膜にて覆ってもよい。これら液剤が詰められた容器は、所定の法令にしたがって滅菌するのがよく、通常は加熱して行われる。上記液剤には、その他酸化防止剤、色素類、保存剤、ｐＨ調整剤、乳化剤、品質安定剤等を加えることもできる。
【００１７】
本発明には、当該容器上に脂肪性肝疾患または脂肪性肝炎の改善治療に有効と表示されてなる緑茶カテキン高含有液剤も包含される。
【００１８】
液剤におけるカテキン類の含有量としては、非エピ体カテキン類とエピ体カテキン類の含有重量が総容量５００ｍＬあたり、４６０〜２５００ｍｇで、特に、５００〜２５００ｍｇ、更に好ましくは、８００〜２５００ｍｇのものが、生理機能能観点からが好ましい。
また、エピガロカテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピガロカテキンおよびガロカテキン（ガロ体）がカテキン類の含有重量のうち、３０〜９８重量％、好ましくは、４０〜９８重量％のものが、生理効果の観点からであるものが挙げられる。
【００１９】
患者への投与量は、症状、年齢、性別、体重、薬物への忍容性等を考慮して決められるが、通常上記した量を１日１回または２回以上投与摂取させることが好ましい。
【００２０】
本発明医薬は、ヒトの疾患に用いられるが、その他の哺乳動物（サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ウサギ、ハムスター等）の疾患の改善治療にも適用可能である。
【実施例】
【００２１】
以下、臨床例等により本発明をさらに説明するが、本発明はいかなる意味においてもこれらに限定されない。なお、臨床例においては、久留米大学倫理委員会の事前の承認を得、かつ被験者本人に治験の内容、被験者の権利を十分に説明し、被験者が内容を理解したことを確認したうえで、治験への参加について被験者自らの自由意志による同意を文書に捺印署名にて得た。
【００２２】
臨床例
目的：緑茶カテキン投与１２週終了時点におけるＮＡＦＬＤ患者の緑茶高濃度カテキン含有飲料の継続摂取による肝機能および肝脂肪沈着改善の有用性（有効性および安全性）の検証
【００２３】
対象：本治験では以下の定義に該当する患者を対象とする。なお、治験責任者または分担医師は被験者を選択するにあたり、下記に示す除外基準に抵触しないことを確認した。
【００２４】
１）疾患名：ＮＡＦＬＤ
以下の基準を全て満たし、次項の除外基準に該当しないこと
（１）２０歳から７５歳までで、他に慢性疾患を有していない患者。
（２）病歴、臨床検査データおよび画像でＮＡＦＬＤと診断される患者。
（３）主要な慢性肝疾患（ウイルス性肝炎、自己免疫性肝炎）の血清マーカーが陰性の患者。
【００２５】
２）除外基準：
本治験参加の除外基準は下記に示すものとする。
（１）血清アルブミン濃度が３．５ｍｇ／ｄｌ以下、血清総ビリルビン濃度が１．５ｍｇ／ｄｌ以上、血清ヒアルロン酸２００ｎｇ／ｍＬ以上、腹水貯留のいずれかを満たす肝硬変症。
（２）上部消化管の潰瘍または上部消化管出血が見られる場合。
（３）現在、経管栄養や空腸回腸バイパスがある。
（４）肝機能に影響を与える薬物を服用している患者およびそれらの薬剤服用の継続が必要とされる患者。
（５）後天性免疫不全ウイルスに感染。
（６）過去３ヶ月間のうちにＮＡＦＬＤまたはＮＡＳＨに対する薬物治療を受けたもの。
（７）妊娠または妊娠している可能性のある婦人および授乳婦
（８）常習飲酒者
（９）肝機能異常の主因として飲酒が疑われる者
（１０）ポリフェノールやカフェインなど茶に含まれる成分の摂取が不適当と判断される患者
（１１）その他主治医が不適当と判断された患者
【００２６】
治験方法：上記基準および同意を得た患者を無作為に以下の３群に割付け、定めた薬物投与を１２週間継続して行う。本治験にて用いた薬物は、茶カテキンの含有量が５４０ｍｇ／３５０ｍＬである液剤である。この液剤におけるカテキン類中のガロ体量は７８％であった。
【００２７】
Ａ群：茶カテキン５４０ｍｇ／３５０ｍＬを含有するカテキン高含有飲料を１日２回飲用する。
Ｂ群：茶カテキン１００ｍｇ／３５０ｍＬを含有するカテキン低含有飲料を１日１回２回飲用する。
Ｃ群：カフェイン量がＡおよびＢ群と同一（８０ｍｇ）で、お茶香料で香り付けをした水であり、茶カテキンをまったく含有しない飲料を飲用する。
【００２８】
治験期間中は、摂取カロリーおよび脂質の厳密な制限は行わず、通常の食事量および運動量を維持する。また、治験期間中の緑茶等のカテキン類およびポリフェノール類を多く含む食品の摂取は制限した。
【００２９】
検査・観察スケジュール：割付前には患者背景を記録し、あわせて服薬状況、身長体重（身長は初回、体重は検査時毎回。これに基づき、ＢＭＩ値を毎回算出する。）、体脂肪率、血液生化学データ（ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＬＤＨ、γＧＴＰ、総コレステロール値等）、酸化ストレスマーカー測定（脂肪性肝炎の患者は体内の酸化的ストレス発生の指標である尿中８−イソプラスタンの測定により高酸化的ストレス状態であることが示されることから、尿中８−イソプラスタン（ＥＩＡ）とクレアチニン濃度を同時に測定し、８−イソプラスタンのクレアチニン補正値を算出し、当該患者の生体内酸化ストレスの指標とする。）、および画像所見（治験前または治験終了時に腹部ＣＴおよび腹部エコーを施行し、肝臓形態変化の程度を判定し、記録する。）を観察または検査して記録し、投与期間中適宜問診、検査、観察および有害事象有無の把握を行い、投与１２週目には有害事象例も含めて全項目につき検査、診断を行った。また、投与後４週目（投与開始から１６週目）には身長体重、体脂肪率、血液生化学データ、酸化ストレスマーカーを測定した。今回の治験では、組織所見を行う事例はなかった。
【００３０】
評価：投与終了例数は１５症例であり、そのうち、Ａ群は７症例、Ｂ群は４症例、Ｃ群は４症例であった。本治験では、高濃度カテキン含有飲料の臨床上の有用性を判定するために、Ｂ群およびＣ群をあわせ、Ａ群と比較した。以下の結果の項においては、Ａ群を本発明群、Ｂ群およびＣ群を合わせた群を比較群と称する。
【００３１】
結果１：血液生化学データの推移
本発明群および比較群での血液生化学検査について、血中アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）濃度を測定することにより行った。結果は各症例の投与前のＡＬＴ値に対する投与後４週目、１２週目、および１６週目のＡＬＴ値をパーセンテージ（平均値±標準偏差）にて求めた。本発明群の投与４週目では、６９．８±１５．６％、１２週目では、６８．５±１８．９％、１６週目では、６６．３±６．６％であるのに対し、比較群では、それぞれ９２．８±１３．０％、９２．１±１６．０％、９７．５±２８．８％であった。本発明の高濃度茶カテキン含有飲料群では投与前に比べ、各週とも有意(ｐ＜０．０５)にＡＬＴ値の減少が観察された。それに対し、比較群では投与前のＡＬＴ値に比べ各週とも有意な差は観察されなかった。
【００３２】
また、血中の乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）値を測定し、各症例の投与前のＬＤＨ値に対する投与後４週目、１２週目、および１６週目のＬＤＨ値をパーセンテージ（平均値±標準偏差）にて求めた。本発明群の投与４週目では、９５．９±１２．８％、１２週目では、９４．２±９．１％、１６週目では、９３．５±７．１％であるのに対し、比較群では、それぞれ１０７．２±１１．１％、１１１．６±２０．７％、１０１．５±９．２％であった。本発明群では投与前に比べ、各週でＬＤＨ値の減少傾向は認められ、１６週にて有意(ｐ＜０．０５)なＬＤＨ値の減少が観察された。それに対し、比較群では投与前のＬＤＨ値に比べ各週とも有意な差は観察されなかった。
【００３３】
これらのことから、肝臓の炎症の指標として代表的なＡＬＴについて、本発明の高濃度カテキン含有飲料（カテキン１０８０ｍｇ／日投与）にて投与後に有意なデータの改善が認められた。
【００３４】
結果２：尿中酸化ストレス指標の推移
脂肪性肝炎の患者は体内の酸化的ストレス発生の指標である尿中８−イソプラスタンを測定することにより高酸化的ストレス状態であることが示される。そこで、尿中８−イソプラスタン（ＥＩＡ）とクレアチニンを同時に測定し、８−イソプラスタンのクレアチニン補正値を算出し、当該患者の生体内酸化ストレスの指標とする。各症例の投与前の８−イソプラスタン値に対する投与後の８−イソプラスタン値をパーセンテージで表すと、比較群では、１０２．４±２２．８％であるのに対し、本発明群では、７６．５±１６．４％であった。この数値は、投与前データを１００として、投与4週目の平均値±標準偏差を示す。これにより、高濃度カテキン含有飲料投与により体内の酸化的ストレス発生の指標である尿中８−イソプラスタン濃度は有意な(ｐ＜０．０５)低下が観察された。
【００３５】
結果３：脂肪沈着指標としての肝臓ＣＴ値の推移
６３歳の女性患者について、治験前の肝臓ＣＴ値（脾臓比）が８０．５７±３．０４であったのが、本発明群の治験薬を投与した場合９２．２６±５．１３を示し、約１４％の改善率(ｐ＜０．０００１)を示した。また、５５歳の男性患者については、投与前の肝臓ＣＴ値（脾臓比）が１０６．９８±３．８７であったのが、本発明群の治験薬を投与した場合では１２０．５０±３．６７を示し、約１２％の改善率(ｐ＜０．０００１)を示した。
【００３６】
一方、比較群の７０歳の女性患者においては、投与前の肝臓ＣＴ値（脾臓比）が１００．９１±２．３１であったのが、Ｂ群の治療薬を投与した場合９８．９０±２．９２を示し、有意差が得られなかった。また、Ｃ群の５５歳の男性患者においては、投与前の肝臓ＣＴ値（脾臓比）が１２４．１９±５．０４であったのが、投与後では１０２．９９±３．４２を示し、改善率は−１７％ (ｐ＜０．０００１)を示した。
【００３７】
ここで、ＣＴ値につき、説明する。ＣＴに使用するＸ線は物質を構成する分子の密度に応じて透過率が変化する。骨や金属のような密度の高いものほどＸ線は吸収され透過しにくくなり、空気のような密度が低いものはほとんど吸収されずに透過する。水（血液や体液）や内臓の固形臓器はその中間の性質を持つが、それぞれの性質によってほぼ決まったＸ線吸収を示す。それを測定し数値化したもの（ＣＴ値）をＨｏｕｎｓｆｉｅｌｄ  ｕｎｉｔ (ＨＵ と略す)で表す。ＣＴ値は、空気を−１０００ＨＵ、水を０ＨＵ、固い骨を＋１０００ ＨＵとして物質の密度、すなわちＸ線吸収値(ｄｅｎｓｉｔｙ )を２０００分割している。水が０ＨＵ、正常の肝臓は６０ＨＵ前後、脾臓は５０ＨＵ、脂肪組織は−１００ＨＵである。肝臓内の脂肪の量が増えるほどＣＴ値（ＨＵ）は低くなる。脾臓は肝臓のようにＣＴ値が変化する疾患がほとんどないので、脾臓のＣＴ値で補正する事で各症例の撮影条件の違いを補正することができる。この脾臓補正肝臓ＣＴ値が治験前に比べて治験後で高くなればそれだけ肝臓内の脂肪の割合が少なくなったつまり脂肪肝の程度が改善したということになる。
【００３８】
一般的に、肝脂肪含有割合が増えるにつれて、肝臓ＣＴ値は低下する。上記治験症例を含む本治験においては、本発明群において肝臓ＣＴ値の上昇が治療後に観察された。このことは、肝細胞の脂肪含有割合を低下させていることを反映していると考察され、本発明医薬は脂肪肝への改善作用を有することを示していると言える。
【００３９】
また、本発明群（７例）および比較群（８例）のＣＴ値の改善率の群間比較では、本発明群の改善率１１％に対し、比較群の改善率は−５％であった。両群間には、有意差（ｐ＜０．００５）が確認された。
Ａ群（１１．１％  ｎ＝６）、Ｂ群（−６．１％  ｎ＝４）、Ｃ群（−４．２％  ｎ＝４）の比較でも、有意差があった。
【００４０】
上記治験結果から、下記結論を導き出すことができる。
１）肝臓の炎症の指標として代表的なＡＬＴについては高濃度カテキン類含有飲料（カテキン類１０８０ｍｇ／日投与）で４週および１２週投与後において有意なデータの改善が認められた。さらに、投与終了後４週においても有意なデータの改善が認められた。
２）脂肪性肝炎の患者は体内の酸化的ストレス発生の指標である尿中８−イソプラスタンの測定により高酸化的ストレス状態であることが示され、高濃度カテキン含有飲料投与により体内の酸化的ストレス発生の指標である尿中８−イソプラスタンの有意な減少が観察された。
３）腹部単純ＣＴ検査による肝臓脂肪含有率の変化の測定では、高濃度カテキン含有飲料の１２週間の投与で全例のおいて有意な改善を示すデータが認められた。また、肝臓脂肪含有の改善率は本発明の高濃度カテキン含有飲料群と比較群との間に有意な差が認められた。
４）以上の結果より、高濃度カテキン含有飲料は継続的な摂取により、脂肪性肝炎患者において抗炎症作用と抗脂肪蓄積作用を有すると考えられる。また、高濃度カテキン含有飲料の継続的な摂取は、脂肪性肝炎の病態に深く関与している体内の酸化的ストレスを減少させることが実際の患者において臨床的に確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明によれば、カテキン類が従来有効な薬物療法手段がなかった非アルコール性肝疾患または非アルコール性肝炎に対し、臨床上有意な効果を示したことから、すぐれた改善治療剤が提供される。