(57)【要約】 【課題】  角結膜障害の治療に有効な薬物を探索すること。【解決手段】  （１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸またはその塩は、角膜障害モデルにおいて優れた改善効果を発揮するので、ドライアイ、角膜潰瘍、点状表層角膜症、角膜上皮欠損、結膜上皮欠損、角膜炎、結膜炎、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎、糸状角膜炎などの治療剤として有用である。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸またはその塩を有効成分として含有する角結膜障害治療剤。
【請求項２】
角結膜障害が、ドライアイ、角膜潰瘍、点状表層角膜症、角膜上皮欠損または結膜上皮欠損である請求項１記載の治療剤。
【請求項３】
角結膜障害が、角膜炎、結膜炎、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎または糸状角膜炎である請求項１記載の治療剤。
【請求項４】
剤型が、点眼剤または眼軟膏剤である請求項１記載の治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸（エトドラクのエナンチオマー）またはその塩を有効成分とするドライアイ、角膜潰瘍、点状表層角膜症、角膜上皮欠損、結膜上皮欠損、角膜炎、結膜炎、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎、糸状角膜炎などの角結膜障害の治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
角膜は、直径約１ｃｍ、厚さ約１ｍｍの透明な無血管の組織であり、また、結膜は、角膜縁より後方の眼球表面と眼瞼の裏面をおおっている粘膜であるが、角膜や結膜は、視機能に重要な影響を及ぼすことが知られている。角膜潰瘍、ドライアイ、角膜炎、結膜炎等の種々の疾患により引き起こされる角結膜障害は、何らかの理由で修復が遅延したり、あるいは修復が行われずに遷延化すれば、角膜と結膜は連なった組織であるため、上皮の正常な構築に悪影響を与え、さらには、角膜実質や内皮の構造や機能まで害されることがある。近年、細胞生物学の発展に伴い、細胞の分裂・移動・接着・伸展・分化等に関与する因子が解明されており、角膜障害の修復には、これらの因子が重要な役割を担っていることが報告されている（非特許文献１、非特許文献２）。
【０００３】
一方、特許文献１は、シクロオキシゲナーゼ−２を選択的に阻害する薬剤を有効成分とする眼炎症疾患の治療剤に関する発明を開示し、エトドラク（１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸）などのシクロオキシゲナーゼ−２を選択的に阻害する薬剤は白内障手術後等の前眼部炎症疾患に対して治療効果があり、従来の前眼部炎症剤よりも角膜上皮障害（副作用）の発生が少ないことが記載されている。また、特許文献２はインドメタシン、ジクロフェナク、エトドラクなどの非ステロイド系抗炎症剤を投与することによる羞明の治療方法に関する発明を開示し、結膜炎、ブドウ膜炎などの炎症性疾患が原因となって生じる羞明や眼科手術後の羞明の治療に有用であることが記載されている。
【０００４】
しかしながら、エトドラクあるいはそのエナンチオマーである（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸について角結膜障害に対する薬理作用を検討する報告はない。
【特許文献１】国際公開第９９／５９６３４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９５／１８６０４号パンフレット
【非特許文献１】臨眼，46, 738-743 (1992)
【非特許文献２】眼科手術，5, 719-727 (1992)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
眼疾患、特に角結膜障害に有効な薬物を探索することは興味深い課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者等は、角結膜障害に有効な薬物を探索すべく鋭意研究を行ったところ、角膜障害モデルを用いた角膜障害治癒試験において、エトドラクには角膜障害の改善効果が認められないのに対して、（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸  カリウムが角膜障害に対して優れた改善効果を発揮することを見出し、本発明に至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、
（１）（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸またはその塩を有効成分として含有する角結膜障害治療剤、
（２）角結膜障害が、ドライアイ、角膜潰瘍、点状表層角膜症、角膜上皮欠損または結膜上皮欠損である前（１）記載の治療剤、
（３）角結膜障害が、角膜炎、結膜炎、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎または糸状角膜炎である前（１）記載の治療剤、および
（４）剤型が、点眼剤または眼軟膏剤である前（１）記載の治療剤、に関する。
【０００８】
本発明において、（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸の塩としては、医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩をはじめ、塩酸、硝酸、硫酸等の無機酸との塩、酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸等の有機酸との塩などが挙げられ、第四級アンモニウム塩も本発明における塩に包含される。より好ましい塩は、ナトリウム塩およびカリウム塩である。なお、（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸は、水和物および溶媒和物の形態をとっていてもよい。
【０００９】
本発明において、角結膜障害とは、種々の要因により角膜や結膜が損傷を受けた状態にあるものをいい、例えばドライアイ、角膜潰瘍、点状表層角膜症、角膜上皮欠損、結膜上皮欠損、角膜炎、結膜炎、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎、糸状角膜炎などが挙げられる。
【００１０】
本発明の角結膜障害治療剤は、経口でも、非経口でも投与することができる。
【００１１】
投与剤型としては、点眼剤、眼軟膏剤、注射剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等が挙げられ、特に点眼剤が好ましい。これらは汎用されている技術を用いて調製することができる。例えば、点眼剤は、塩化ナトリウム、濃グリセリン等の等張化剤、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム等の緩衝化剤、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレ−ト、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の界面活性剤、クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム等の安定化剤、塩化ベンザルコニウム、パラベン等の防腐剤等を必要に応じて用い、調製することができる。ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、４〜８の範囲が好ましい。
【００１２】
眼軟膏剤は、白色ワセリン、流動パラフィン等の汎用される基剤を用い、調製することができる。また、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の経口剤は、乳糖、結晶セルロ−ス、デンプン、植物油等の増量剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、ヒドロキシプロピルセルロ−ス、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボキシメチルセルロ−ス  カルシウム、低置換ヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス等の崩壊剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス、マクロゴ−ル、シリコン樹脂等のコ−ティング剤、ゼラチン皮膜等の皮膜剤などを必要に応じて加え、調製することができる。
【００１３】
投与量は症状、年令、剤型等によって適宜選択できるが、点眼剤は０．０００１〜５％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．００１〜３％（ｗ／ｖ）のものを１日１〜数回点眼すればよい。また、経口剤は通常１日当り０．１〜５０００ｍｇ、好ましくは１〜１０００ｍｇを１回または数回に分けて投与すればよい。
【発明の効果】
【００１４】
後述するように、角膜障害の治癒効力試験を実施したところ、（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸  カリウムは、角膜障害モデルにおいて優れた改善効果を発揮するので、ドライアイ、角膜潰瘍、点状表層角膜症、角膜上皮欠損、結膜上皮欠損、角膜炎、結膜炎、乾性角結膜炎、上輪部角結膜炎、糸状角膜炎などの治療剤として有用である。なお、ラセミ体であるエトドラクには、有意な角膜障害の改善効果は認められなかった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下に、（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸  カリウムを用いた薬理試験および製剤例の結果を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００１６】
［薬理試験］
角膜障害の治癒効力試験
雄性ＳＤラットを用い、Fujiharaらの方法（Invest. Ophthalmol. Vis. Sci 42(1):96−100 (2001)）に準じ、角膜障害モデルを作製した。角膜障害モデル作成後、村上らの方法（あたらしい眼科  21(1)：87-90（2004））で、角膜障害の改善率を判定した。
【００１７】
（実験方法）
雄性ＳＤラットを用い、ネンブタ−ルを投与して全身麻酔を施した後、眼窩外涙腺を摘出し、２ヶ月かけて角膜障害を誘発させた。
【００１８】
つぎに、角膜障害を誘発させたラットに、（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸  カリウム（以下「本化合物」とする）および１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸（以下「比較化合物」とする）を以下のように投与した。
【００１９】
本化合物投与群：
本化合物（０．００２％）の生理的リン酸緩衝液（ＰＢＳ）溶液を両眼に１日６回、１４日間点眼した（一群４匹８眼）。
【００２０】
比較化合物投与群：
比較化合物（０．００２％）のＰＢＳ溶液を両眼に１日６回、１４日間点眼した（一群４匹８眼）。
【００２１】
コントロール群では、ＰＢＳを両眼に１日６回、１４日間点眼した（一群４匹８眼）。
【００２２】
点眼開始１４日後、角膜の障害部分をフルオレセインにて染色した。角膜の上部、中間部および下部のそれぞれについて、フルオレセインによる染色の程度を下記の基準に従ってスコア判定し、それらのスコアの合計の平均値を算出した。
【００２３】
さらに、正常眼についてもスコアの合計の平均値を求めた。
【００２４】
（判定基準）
０：染色されていない
１：染色が疎であり、各点状の染色部分は離れている
２：染色が中程度であり、点状の染色部分の一部が隣接している
３：染色が密であり、各点状の染色部分は隣接している
（結果）
コントロ−ル群（ＰＢＳ）におけるスコアの合計の平均値を基準（改善率：０％）にして、下記の計算式により本化合物投与群、比較化合物投与群の各改善率を算出した。また、コントロール群スコアに対する本化合物投与群スコア、比較化合物投与群スコアの差の統計学的検定結果（ｐ値）を算出した。これらの値を表１に示す。なお、スコア値は８例の平均±標準誤差値である。
【００２５】
改善率（％）＝｛（コントロ−ル）−（本化合物もしくは比較化合物）｝/ 障害度×１００
障害度＝｛（コントロ−ル）−（正常眼）｝
統計学的有意性はコントロール群を基準としたＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定により算出されたｐ値が０．０５以下の場合に有意差ありと判断し、表中に＊印で示した。
【表１】
2007077049.tif 000002
【００２６】
（考察）
上記のラットを用いた薬理試験の結果（表１、図１）から明らかなように、本化合物（（１Ｒ）−１，８−ジエチル−１，３，４，９−テトラヒドロピラノ［３，４−ｂ］インドール−１−酢酸  カリウム）は、角膜障害を顕著に改善することが明らかとなった。また、その効力はコントロール群に対する極めて低いｐ値を示す統計学的検定結果によって証明された。一方、ラセミ体である比較化合物には顕著な効果は見られず、コントロール群に対する統計学的な有意差も認められなかった。以上から本化合物はラセミ体である比較化合物には無い角膜障害改善効果を発揮することが明らかとなった。
【００２７】
［製剤例］
以下に本化合物を用いた代表的な製剤例を示す。
【００２８】
処方例１
１００ｍｌ中
本化合物                                             １０ｍｇ
塩化ナトリウム                                    ９００ｍｇ
滅菌精製水                                            適量
【００２９】
本化合物の添加量を変えることにより、濃度が０．００１％（ｗ／ｖ）、０．０３％（ｗ／ｖ）、０．１％（ｗ／ｖ）、０．３％（ｗ／ｖ）、１．０％（ｗ／ｖ）、３．０％（ｗ／ｖ）の点眼剤を調製できる。
【００３０】
処方例２
１００ｇ中
本化合物                                              ０．３ｇ
流動パラフィン                                     １０．０ｇ
白色ワセリン                                          適量
【００３１】
本化合物の添加量を変えることにより、濃度が１％（ｗ／ｗ）、３％（ｗ／ｗ）の眼軟膏剤を調製できる。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】図１は、正常眼スコア平均値を差し引いたコントロール群、本化合物投与群および比較化合物投与群のフルオレセイン染色スコアを示すグラフである。
【図１】
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