(57)【要約】【課題】口腔癌の易罹病性、又は再発のしやすい体質をより正確に捉えることによる発症前・治療後の予後診断が可能な口腔癌の検査方法を提供する。【解決手段】口腔癌の原因遺伝子であるＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰを用いることによって、口腔癌の易罹病性及び／又は悪性度を予測することが可能である。また、遺伝子レベルでの検討を加味して判断を行うことができるため、医療費や精神的な不安などの患者の負担を軽減でき、結果として、社会的にも適正な医療が行われることによる医療費の節減をもたらすことが可能である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰを用いて口腔癌の易罹病性及び／又は悪性度を予測することを特徴とする口腔癌の検査方法。
【請求項２】
前記ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰが、ＭＭＰ−１遺伝子のプロモーター領域における２Ｇアリルであることを特徴とする請求項１記載の口腔癌の検査方法。
【請求項３】
前記口腔癌が、口腔扁平上皮癌であることを特徴とする請求項１又は２に記載の口腔癌の検査方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、口腔癌の原因遺伝子のＳＮＰを用いた口腔癌の検査方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、ヒトゲノム配列が解明され、遺伝子に関する研究が急速に進歩し、病気と遺伝子に関する研究が進んで、これまで遺伝的な要因が原因であると思われていなかった種々の病気に対しても、遺伝的な要因が関与することが明らかとなってきた。そこで、従来の臨床検査とは異なって、健常なヒトでも将来病気になるリスクがどれくらいあるのかを判定でき、さらに病気の性質や治療薬の効きやすさなどの判定に使用できるものとして、ヒト遺伝子検査が注目されている。
【０００３】
例えば、特許文献１には、大腸癌の発症リスクを予測する診断ツールとして、ＭＭＰ−１遺伝子とＭＭＰ−３遺伝子のプロモーター領域に存在するＳＮＰを用いた、大腸癌の発症のリスクを予測する分子レベルでの検査方法が開示されている。また、特許文献２には、腎細胞癌の発症リスクを予測する診断ツールとして、非乳頭状腎細胞癌の感受性と相関するＭＭＰ−１遺伝子のプロモーター領域に存在するＳＮＰを用いた、腎細胞癌の発症リスクを予測する分子レベルでの検査方法が開示されている。ＭＭＰ−１遺伝子は、癌浸潤や転移に関与することが知られており、大腸癌や腎細胞癌以外にも、卵巣癌、子宮頸癌、悪性黒色腫、肺癌との関連が報告されている。
【０００４】
さて、口腔癌の危険因子として、喫煙と飲酒が最も緊密な関係を持っていることは従来から指摘されており、歯列不整、むし歯、不適合充填物などが誘因と推測される症例もみられるが口腔環境だけが癌発症の要因ではない。一部のヒトにとっては遺伝的な要因が癌を発症しやすい原因であると考えられている。
【特許文献１】特願２００３−２３５５７６号公報
【特許文献２】特願２００４−１１３１３６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、口腔癌の遺伝的な要因について十分には解明されていない。口腔癌において、現時点では癌治療後の再発の予測または前癌病変の悪性転化の予測は困難であり、効果的な検査法はなく臨床的な見地によって判断せざるを得ないのが現状である。また、定期的なＣＴ・レントゲン撮影による経過観察においては被爆・費用の面で患者の負担となるところが多いといった問題があった。
【０００６】
そこで、本発明は、口腔癌の易罹病性、又は再発のしやすい体質をより正確に捉えることによる発症前・治療後の予後診断が可能な口腔癌の検査方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題に鑑みて鋭意検討した結果、口腔癌の患者集団と健常群とを比較解析することにより、健常群よりも口腔癌の患者集団においてＭＭＰ−１遺伝子の２Ｇアリル頻度が高い傾向にあることを見出し、本発明に想到した。
【０００８】
本発明における請求項１の口腔癌の検査方法は、ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰを用いて口腔癌の易罹病性及び／又は悪性度を予測することを特徴とする。
【０００９】
本発明における請求項２の口腔癌の検査方法は、請求項１において、前記ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰが、ＭＭＰ−１遺伝子のプロモーター領域における２Ｇアリルであることを特徴とする。
【００１０】
本発明における請求項３の口腔癌の検査方法は、請求項１又は２において、前記口腔癌が、口腔扁平上皮癌であることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１１】
本発明における請求項１の口腔癌の検査方法によれば、ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰを用いて、易罹病性及び／又は悪性度を予測することができる。易罹病性の高いタイプであることが判断されれば、生活習慣を改善して、少しでも発病の要因を遠ざけ、定期的な検診を受けることで、口腔癌を早期に発見し、早い段階での治療を可能とする。また、遺伝子レベルでの検討を加味して検査を行うことができるため、医療費や精神的な不安などの患者の負担を軽減できる。結果として、社会的にも適正な医療が行われることによる医療費の節減をもたらすことが可能である。
【００１２】
本発明における請求項２の口腔癌の検査方法によれば、ＭＭＰ−１遺伝子のプロモーター領域における２Ｇアリルを用いて、簡便に易罹病性及び／又は悪性度を予測することができる。易罹病性の高いタイプであることが判断されれば、生活習慣を改善して、少しでも発病の要因を遠ざけ、定期的な検診を受けることで、口腔癌を早期に発見し、早い段階での治療を可能とする。また、遺伝子レベルでの検討を加味して検査を行うことができるため、医療費や精神的な不安などの患者の負担を軽減できる。結果として、社会的にも適正な医療が行われることによる医療費の節減をもたらすことが可能である。
【００１３】
本発明における請求項３の口腔癌の検査方法によれば、口腔扁平上皮癌の易罹病性及び／又は悪性度を予測することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明の口腔癌の検査方法は、ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰを用いて口腔癌の易罹病性及び／又は悪性度を予測できる検査方法である。また、ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰが、ＭＭＰ−１遺伝子のプロモーター領域における２Ｇアリルである。
【００１５】
ＭＭＰ（Matrix metalloproteinase）は、細胞外マトリックスの分解酵素であり、悪性腫瘍において発癌機序の活性化、腫瘍細胞の浸潤や転移に関与していることが知られている。ＭＭＰ−１遺伝子のプロモーター領域のＳＮＰは、−１６０７の位置におけるグアニン（Ｇ）の挿入又は欠失に起因しており、１個のグアニン（Ｇ）を有している１Ｇアリルと、２個のグアニン（Ｇ）を有している２Ｇアリルがある。
【００１６】
本発明の口腔癌の検査方法を実施するには、まず末梢の血液を採取し、これによりＤＮＡを抽出する。ＤＮＡの抽出には通常の方法であれば何れも使用可能であり、例えばフェノール・クロロホルム法等が挙げられる。次に、ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰの１Ｇまたは２Ｇアリルを、例えばＴａｑＭａｎプローブによるＰＣＲ法やマイクロアレイ法等によって検出する。
【００１７】
本発明の口腔癌の検査方法によれば、ＭＭＰ−１遺伝子のＳＮＰ型を検出し、２Ｇアリルを持つ患者は癌易罹病性が高いと予測でき、ＭＭＰ−１多型情報は口腔領域における前癌病変や術後再発などの予後の判定基準に用いることができる。癌易罹病性を予測することにより、易罹病性の高いタイプであることが判断されれば、生活習慣を改善して、少しでも発病の要因を遠ざけ、定期的な検診を受けることで、口腔癌を早期に発見し、早い段階での治療を可能とする。また、術後の経過観察期間や画像データによる評価を緊密に行うといった対応をとることにより患者の時間的、経済的負担を減らし、最良の医療サービスを行うことができる。
【００１８】
以下に本発明の実施例によって、本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら制限されるものではない。
【実施例１】
【００１９】
インフォームドコンセントの得られた口腔扁平上皮患者１２４名のＭＭＰ−１腫瘍群および腫瘍の既往のない健常者１６７名のコントロール群から、末梢血を４ｍｌ採取した。次に、フェノール・クロロホルム法によって、採取した末梢血からＤＮＡを抽出し、ＭＭＰ−１遺伝子プロモーター領域におけるＳＮＰを、１Ｇ、２Ｇアリルに対応する２種類の蛍光色素を持ったＴａｑＭａｎプローブを用いてＰＣＲ反応を行った。そのＰＣＲによる伸長反応でプローブが分解し、生じた蛍光を検出するＴａｑＭａｎ  ＰＣＲ分析を行うことによりＳＮＰを検索した。
【００２０】
結果を図１に示す。なお、図１の（Ａ）はＭＭＰ−１腫瘍群、（Ｂ）はコントロール群の結果を示し、それぞれ横軸はＭＭＰ−１遺伝子多型（１Ｇ／１Ｇ，１Ｇ／２Ｇ，２Ｇ／２Ｇ遺伝子型）を示し、縦軸は患者の年齢を示している。図１に示されるように、ＭＭＰ−１で高転写活性を有すると言われる２Ｇアリルを含む１Ｇ／２Ｇ或いは２Ｇ／２Ｇ型多型を保有する腫瘍群の頻度はコントロール群のそれより多い傾向（ｐ＝０．０６）が認められた。一方、高齢者を除外した６９歳以下での比較では、腫瘍群において２Ｇアリル保有頻度が７０．９％であったのに対し、コントロール群では６１．２％で有意差（ｐ＝０．０２）が認められた。さらに、５０歳以下の腫瘍群内では１Ｇ／１Ｇ型の頻度が３４症例中１例のみで顕著に低率であった。この結果により、ＭＭＰ−１遺伝子プロモーター領域内における２Ｇアリル保有が口腔扁平上皮癌の発症の一要因として関与することがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明の実施例１における遺伝子多型分析の結果を示すグラフである。
【図１】
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