(57)【要約】      （修正有）【課題】膜面積が小さな血漿分離膜でも血漿分離が容易であり、また従来の血液採取手段よりもはるかに血漿の分離効率が良く、血液検査を直ちに開始できる血漿採集キットを提供すること。【解決手段】ハウジング（２）の略中腹部ないし略下部に血漿分離膜（３）を配置し、当該血漿分離膜（３）より下部に、血液流入口（４）と血液流出口（５）を配置した血漿採集キット（１）。血液が血液流入口（４）からハウジング（２）へ流入する角度（θ）を、略０°から略９０°に形成した。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハウジング（２、１２）の略中腹部ないし略下部に血漿分離膜（３、１３）を配置し、当該血漿分離膜（３、１３）より下部に、血液流入口（４、１４）と血液流出口（５、１５）を配置したことを特徴とする血漿採集キット（１、１１）。
【請求項２】
血液が血液流入口（４、１４）からハウジング（２、１２）へ流入する角度（θ）を、略０°から略９０°に形成したことを特徴とする請求項１に記載の血漿採集キット（１、１１）。
【請求項３】
ハウジング（２、１２）に疎水性通気膜（７、１７）を装着したことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の血漿採集キット（１、１１）。
【請求項４】
ハウジング（２、１２）に血漿の採集口（８、１８）を装着したことを特徴とする請求項１から請求項３のいずれかの１の請求項に記載の血漿採集キット（１、１１）。
【請求項５】
前記血液流入口４と血液流出口５にそれぞれ連結チューブ（６１、６１）を介して、コネクタ（６２、６２）を装着したことを特徴とする請求項１から請求項４のいずれかの１の請求項に記載の血漿採集キット（１）。
【請求項６】
前記ハウジング（１２）の下部に管状部材（１２Ｂ）を装着し、当該管状部材（１２Ｂ）の内部に隔壁（１２Ｃ）を配置して、当該管状部材（１２Ｂ）に血液流入口（１４）と血液流出口（１５）を形成したことを特徴とする請求項１から請求項４のいずれかの１の請求項に記載の血漿採集キット（１１）。
【請求項７】
請求項１から請求項６のいずれかの１の請求項に記載の血漿採集キット（１、１１）を装着した体外循環回路（６０、８０）。
【請求項８】
体外循環回路（６０、８０）内を循環している血液を、疎水性通気膜（７、１７）を介して大気開放状態のハウジング（２、１２）に、血液流入口（４、１４）より導入し、血漿分離膜（３、１３）の表面に接触させながら、血漿成分を本体（２、１２）の血漿採集スペース（６、１６）内に採取することを特徴とする請求項１から請求項６のいずれかの１の請求項に記載の血漿採集キット（１、１１）を用いて血液から血漿成分を分離する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、小さい膜面積でも確実に血液から血漿成分を分離できる血漿採集キット、
血漿採集キット付き体外循環回路及び血液から血漿成分を分離する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液透析中に、血液透析の状況（例えば、ターゲットの血液中の有害成分が、着実に除去されているか等）を確認するために、体外循環回路から血液（全血）を採取して、さらに血液（全血）から血漿成分を分離して、血液検査を実施している。
血液採集の手段として、体外循環回路の血液採集ポートに、シリンジを接続して血液を採取しているが、しかしこれらの血液採集の手段では、血液を採取した後、さらに遠心分離して、血漿成分と血球成分を分離しなければならないので、血液検査までに時間がかかる。
また特許文献１から３のように、細長い筒状のハウジングの途中ないし下部に血漿分離膜を配置して、血液を血漿分離膜の上流から下流に通過させて、血漿成分をハウジングの底部に採取する発明が記載されている。
しかしながら特許文献１の発明は、血液を血漿分離膜の上流から自然流下させるものであるから分離に時間がかかる。
また特許文献２、３の発明は、真空採血管であり、血液を事前に採取したシリンジまたは患者に穿刺した（採血器具の）針を蓋部に刺して、血液を真空採血管内に導入しなければならない。
【０００３】
【特許文献１】特開平１１−１９４１２６号公報
【特許文献２】特開２００１−３２１３６６号公報
【特許文献３】特開２００１−３２１３６６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明が解決しようとする問題点は、体外循環回路の血液採集ポートに、シリンジを接続して血液を採取する手段では、血液を採取した後、さらに遠心分離して、血漿成分分離しなければならないので血液検査までに手間と時間がかかる点である。また特許文献１の発明は、血液の分離に時間がかかり、特許文献２、３の発明は、採取する血液を、血液を事前に採取したシリンジまたは患者に穿刺した（採血器具の）針を介して真空採血管内に導入しなければならないので血液検査までに手間と時間がかかる点である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで本発明者は以上の課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、以下の発明に到達した。
［１］本発明は、ハウジング（２、１２）の略中腹部ないし略下部に血漿分離膜（３、１３）を配置し、当該血漿分離膜（３、１３）より下部に、血液流入口（４、１４）と血液流出口（５、１５）を配置した血漿採集キット（１、１１）を提供する。
［２］本発明は、血液が血液流入口（４、１４）からハウジング（２、１２）へ流入する角度（θ）を、略０°から略９０°に形成した［１］に記載の血漿採集キット（１、１１）を提供する。
［３］本発明は、ハウジング（２、１２）に疎水性通気膜（７、１７）を装着した［１］または［２］に記載の血漿採集キット（１、１１）を提供する。
［４］本発明は、ハウジング（２、１２）に血漿の採集口（８、１８）を装着した［１］から［３］のいずれか１に記載の血漿採集キット（１、１１）を提供する。
［５］本発明は、前記血液流入口４と血液流出口５にそれぞれ連結チューブ（６１、６１）を介して、コネクタ（６２、６２）を装着した［１］から［４］のいずれか１に記載の血漿採集キット（１）を提供する。
［６］本発明は、前記ハウジング（１２）の下部に管状部材（１２Ｂ）を装着し、当該管状部材（１２Ｂ）の内部に隔壁（１２Ｃ）を配置して、当該管状部材（１２Ｂ）に血液流入口（１４）と血液流出口（１５）を形成した［１］から［４］のいずれか１に記載の血漿採集キット（１１）を提供する。
［７］本発明は、［１］から［６］のいずれか１に記載の血漿採集キット（１、１１）を装着した体外循環回路（６０、８０）を提供する。
［８］本発明は、体外循環回路（６０、８０）内を循環している血液を、疎水性通気膜（７、１７）を介して大気開放状態のハウジング（２、１２）に、血液流入口（４、１４）より導入し、血漿分離膜（３、１３）の表面に接触させながら、血漿成分を本体（２、１２）の血漿採集スペース（６、１６）内に採取する［１］から［６］のいずれか１に記載の血漿採集キット（１、１１）を用いて血液から血漿成分を分離する方法を提供する。
【発明の効果】
【０００６】
本発明は、（１）ハウジング２、１２の下部に血漿分離膜３、１３を配置し、当該血漿分離膜３、１３より下部に、血液流入口４、１４と血液流出口５、１５を配置した血漿採集キット１、１１により、体外循環回路６０、８０内を循環している血液を、大気開放状態のハウジング２、１２に、血液流入口４、１４より導入し、血漿分離膜３、１３の表面に接触させるので、血漿分離膜３、１３の表面が常に流動しており境膜抵抗が小さいため、膜面積が小さな血漿分離膜３、１３でも血漿分離が容易である。
（２）血液を体外循環しながら血漿成分を短時間に分離して、血液検査に必要な量を採集できるので、従来の血液採取手段よりもはるかに血漿の分離効率が良く、血液検査を直ちに開始できる。
（３）ハウジング１２の下部に、内部に隔壁１２Ｃを配置して、血液流入口１４と血液流出口１５を形成した管状部材１２Ｂを装着することにより、簡単に体外循環回路のポート（スリット付栓体）に装着できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
図１、図２、図３は本発明の血漿採集キットの概略図、図４は本発明の血漿採集キット１を組み込んだ体外循環回路８０の概略図である。
［血漿採集キット１、１１］
本発明の血漿採集キット１、１１は、図１、図２に例示するように、筒状のハウジング２、１２の略中腹部ないし略下部に血漿分離膜３、１３を配置し、当該血漿分離膜３、１３より下部に、血液流入口４、１４と血液流出口５、１５を配置している。
［血漿分離膜３、１３］
血漿分離膜３、１３は、血漿を分離できる公知の膜（平膜）であれば何でも良い。
血漿分離膜３は、公知の手段によりハウジング２、１２に装着する。
例えば直接ハウジング２、１２の内壁面に熱溶着等により装置（固定）しても良いし、または図１に例示するようにハウジング２と別部品で形成した固定枠２Ａに装着（固定）し、当該固定枠２Ａをハウジング２下部に装着するようにしても良い。
【０００８】
［血液流入口４、１４と血液流出口５、１５］
血液流入口４、１４の角度θ（血液が血液流入口４、１４からハウジング２、１２へ流入する角度θ）は、図１の例示では実質的に略０°になっているが、図２及び図３に例示するように略９０°にしても良い。
「血液流入口４、１４の角度θ」は、図１に例示するように血漿分離膜３の水平線Ｌと血液流入口４の中心線Ｃの延長線が交差する角度を意味する。
図１の例示では、水平線Ｌの中心線Ｃが実質的に平行になっているので、角度θは略０°であるが、中心線Ｃが左上に傾くように血液流入口４を配置すると、水平線Ｌと中心線Ｃの延長線は交差し、交差角度が大きくなるにつれて角度θは略９０°に近づく。なお略９０°を超え１８０°未満は、略９０°から略０°と対称であるから、略０°から略９０°に含まれるものと解釈する。
当該角度θは、図１に例示するように略０°に近くなると血液が血漿分離膜３の表面に接触する面積が大きくなり、境膜抵抗が小さいので、分離効率が良くなる。
本発明では、略０°から略９０°の範囲であれば良い。
なお血液流出口５、１５の配置は、図１に例示するようにハウジング２の長さ方向と平行になっても良いし、図２、図３に例示するように、ハウジング２、１２の長さ方向と略９０°となるように配置しても良い。
血液流入口４、１４と血液流出口５、１５は公知の手段によりハウジング２、１２に装着する。
例えば図１に例示するように、血液流入口４と血液流出口５は、ハウジング２と別部品で形成した蓋部２Ｂに形成して、当該蓋部２Ｂを、ハウジング２下部または前記固定枠２Ａ下部に装着するようにしても良い。
また図２に例示するように、ハウジング１２の下部に管状部材１２Ｂを別部品または一体成形等により装着し、当該管状部材１２Ｂの内部に隔壁１２Ｃを配置して、当該管状部材１２Ｂに血液流入口１４と血液流出口１５を形成するようにしても良い。
図２に例示した血漿採集キット１１は、管状部材１２Ｂを体外循環回路のポート（スリット付栓）にワンタッチで装着できる。
【０００９】
［疎水性通気膜７、１７］
図１、図２に例示するように、ハウジング２、１２に疎水性通気膜７、１７を装着している。これにより採血時（血漿採取時）にハウジング２、１２内に採集された血漿が、直接外気に触れるのを防ぐことができる。
疎水性通気膜７、１７は、ハウジング２、１２の血漿採集スペース６、１６が外部と通気でき、外部の雑菌等を透過しないものまたは除菌性の素材で形成されているものであれば何でも良い。
疎水性通気膜７、１７のハウジング２、１２への取り付け位置は、図１、図２に例示するように、ハウジング２、１２の天面が好ましいが、ハウジング２、１２の側部でも良い。
疎水性通気膜７、１７は、血漿の必要量がハウジング２、１２内に確保できた時点でハウジング２、１２にシール（密封）できるようにするのが良い。例えば前記血漿分離膜３の場合と同様に、ハウジング２と別部品で形成した蓋部に装着（固定）して、当該蓋部をハウジング２上部に装着するようにしても良い。蓋部とハウジング２上部は相互に螺合できる構造にし、緩めたり（血漿採取時）またはシール（密封）（血漿採取完了時）できるようにしても良い。
［採集口８、１８］
図１、図２に例示するように、ハウジング２、１２に採集した血漿を、シリンジ等で採取できるように、採集口８、１８を装着しても良い。採集口８、１８は、例えばメスコネクタまたはオスコネクタのどちらでも良い。採集口８、１８のハウジング２、１２への取り付け位置は、図１、図２に例示するように、ハウジング２、１２の側部が好ましい。側部であればハウジング２、１２の略上部から略下部の間のどこでも良い。
【００１０】
図１の血漿採集キット１は、図３に例示するように、さらに体外循環回路６０の途中に配置されたポート１５に装着できるように、前記血液流入口４と血液流出口５にそれぞれ連結チューブ６１、６１を介して、コネクタ（アダプタともいう）６２、１６２を装着することができる。
コネクタ（アダプタともいう）６２は、図３例示するように、少なくともポート６５の注入口６３と係合部６４を有するものであれば形状・構造はなんでも良い。
ポート６５は、少なくとも前記注入口６３が挿入可能なスリットを形成した栓体と、前記コネクタ６２を係合可能な部分（キャップ６６等）を有するものであれば形状・構造はなんでも良い。
図１の血漿採集キット１を装着する体外循環回路６０は、静脈側回路または動脈側回路の途中に、少なくともポート６５が二箇所配置されておれば良い。さらに好ましくは必要に応じて、当該二つのポート６５、６５の間に、血液流路の遮断と開放をできるクランプ６７が配置できれば良い。
なお図２に例示した血漿採集キット１１は、管状部材１２Ｂを体外循環回路のポート（スリット付栓）にワンタッチで装着できるので、これを装着する体外循環回路６０は、少なくともポート６５が一箇所配置されておれば良い。
［血液から血漿成分を分離する方法］
本発明の血漿採集キット１、１１は、以下のように血液から血漿成分を分離することができる。体外循環回路６１内を循環している血液を、大気開放状態のハウジング２、１２に、血液流入口４、１４より導入し、血漿分離膜３、１３の表面に接触させながら、血漿成分をハウジング２、１２の血漿採集スペース６、１６内に採取することができる。
すなわち血漿採集キット１は、体外循環回路を循環している血液を、大気開放状態のハウジング２の下方側部の血液流入口４より略０°の角度で導入する。血液はその流体圧、体外循環回路の内圧等により、血漿分離膜３の表面に常に流動状態で接触するので、血漿成分をハウジング２の血漿採集スペース６内に採取することができる。
血漿採集キット１１は、体外循環回路内を循環している血液を、大気開放状態のハウジング１２に、下方側部の血液流入口１４より略０°の角度で導入する。血液はその流体圧、体外循環回路の内圧等により、血漿分離膜１３の表面に常に流動状態で接触するので、血漿成分をハウジング１２の血漿採集スペース１６内に採取することができる。
【実施例】
【００１１】
牛血液を使用して、本発明の血漿採集キット１を組み込んだ体外循環回路８０により血漿を採集した実施例と比較例について説明する。
［血漿採集キット１］
筒状のハウジング２は市販のディスポシリンジによりを作成した。血液流入口４と血液流出口５付の蓋部２Ｂは川澄化学製血液回路の構成部品を流用した。血漿分離膜３は固定枠２Ａに固定したものを使用した。
ハウジング２の下部に固定枠２Ａを装着し、固定枠２Ａの下部に蓋部２Ｂを装着して図１の血漿採集キット１を作製した。
血漿分離膜３は、日本ポール社製の（親水化処理）したポリスルフォン膜（BTS-SP300
GF；ポアサイズ2.2μm、膜厚330μm、膜面積約6cm2）を使用した。
［体外循環回路］
体外循環回路８０は図４のように川澄化学製血液回路『カーミライン』の動脈側回路８２と静脈側回路８３を接続し、静脈側チャンバー８４の上流に図１の血漿採集キット１を配置して組みたてた。
体外循環回路８０は上流から下流に向けて、ボンプチューブ８６（血液ポンプ８７に装着）、血漿採集キット１、静脈側チャンバー８４（マノメータ８５に接続）、ピンチコック９０を配置し、動脈側回路８２の上流と静脈側回路８３の下流は、牛血液入り容器３８（恒温槽８９に漬浸）と接続した。
［牛血液の調製方法］
牛血液採取の際の抗凝固剤として、ACD-A液を牛血1L当たり150mL添加した。牛血のヘマトクリット値を測定して、生理食塩水を加えて、ヘマトクリット値が30％になるように調整した。
［牛血液の循環試験］
（実施例：大気開放状態での血漿採取）
図４の体外循環回路８０に、牛血液１Lを流量200mL/minで循環させた。静脈側チャンバー８４の下流をピンチコック９０で絞って、圧力が約50mmHgになるように調整した。ハウジング２を大気開放し、血漿分離膜３を通して血漿がしみ出てくる様子を観察した。
（比較例１：シリンジ操作による血漿採取）
図４の体外循環回路８０のハウジング２に（シリンジに使用する）押し子（図示せず）を付けた状態で、実施例と同様に血液を循環させ、押し子を引っ張ることにより、血漿分離ができるかどうか確認した。
（比較例２：圧力のみによる血漿採取；血液循環なし）
図４の体外循環回路８０のハウジング２の上流と静脈側チャンバー８４の下流を金属製鉗子（図示せず）でクランプして、シリンジ（図示せず）で静脈側チャンバー８４内に空気を入れて、圧力をかけ、そのまま放置して血漿を分離できるかどうか確認した。
【００１２】
［試験結果］
（実施例：大気開放状態での血漿採取）
循環開始より、血漿分離膜３を通して血漿がじわじわとしみだしてくるのが、観察された。分離された血漿量は以下の表１のとおりであり、10分間に約3mLの血漿が分離された。
【表１】
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（比較例１：シリンジ操作による血漿採取）
シリンジの押し子を引っ張っても、血漿は分離できず、最終的には血漿分離膜３が破れてしまった。
（比較例２：圧力のみによる血漿採取；血液循環なし）
約50mmHgの圧力をかけて30分間放置したが、血漿分離膜３が若干濡れた程度の血漿しか得られなかった。70mmHg、100mmHgと圧力を高くしていったが、充分な血漿は得られず、100mmHg付近で試験部品の血漿分離膜の接合部からリークしてしまった。
［考察］
（実施例：大気開放状態での血漿採取）は、10分間で約3mLの血漿が得られ、循環を継続しても血漿分離膜の目詰まりは特に観察されなかった。
（比較例１：シリンジ操作による血漿採取）や（比較例２：圧力のみによる血漿採取；血液循環なし）では、得られた血漿量は1mL未満であった。本実施例、比較例１、２に使用した血漿分離膜３は膜面積が約6cm2と小さいので、充分量の血漿が分離できなかったと考えられる。（実施例：大気開放状態での血漿採取）は、血液ポンプ１６の拍動による影響や、血漿分離膜３の表面が常に流動しており境膜抵抗が小さいため、膜面積が約6cm2の血漿分離膜３でも血漿分離が可能になったと考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の血漿採集キットの概略図
【図２】本発明の血漿採集キットの概略図
【図３】本発明の血漿採集キットの概略図
【図４】血漿採集キット付き体外循環回路の概略図
【符号の説明】
【００１４】
１、１１  血漿採集キット
２、１２  ハウジング
２Ａ  固定枠
２Ｂ  蓋部
３、１３  血漿分離膜
４、１４  血液入口
５、１５  血液出口
６、１６  血漿採集スペース
７、１７  疎水性通気膜
１２Ｂ  管状部材
１２Ｃ  隔壁
８、１８  採集口
６０、８０  体外循環回路
６１  連結チューブ
６２  コネクタ
６３  注入口
６４  係合部
６５  ポート
６６  キャップ
６７  クランプ
８２  動脈側回路
８３  静脈側回路
８４  静脈側チャンバ
８５  マノメータ
８６  ポンプチューブ
８７  血液ポンプ
８８  牛血液入り容器
８９  恒温槽
９０  ピンチコック
【図１】
2007259995.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
2007259995.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成18年6月26日(2006.6.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
【特許文献１】特開平１１−１９４１２６号公報
【特許文献２】特開２００１−３２１３６６号公報
【特許文献３】特開２００６−３３４０号公報