(57)【要約】【課題】抗原抗体反応を利用したラテラルフロー方式の分析装置の分析精度を向上する【解決手段】ポリカーボネート製の底板６に、第１多孔体１、第２多孔体２、反応部３ａ，３ｂ、吸収体４を配置する。磁気ビーズ標識化二次抗体Ａ＆Ｂ（１個の磁気粒子にアビジン／ビオチン結合を介して「ＰＥＧ−抗体Ａ」と「ＰＥＧ−抗体Ｂ」が結合されている粒子の集合体）を第２多孔体２に溶出可能に保持させる。一次抗体Ａ，Ｂを反応部３ａ，３ｂに円形に固定する。【選択図】図１
2007170840.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体を浸透しない材料からなる基材上に、特定成分と特異的に結合する物質が固定された反応部が形成され、液状試料を導入する試料導入部と、導入された液状試料を横方向に移動させて前記反応部へ向かわせる流路と、を備え、前記特定成分を検出するラテラルフロー方式の分析装置であって、
前記反応部を円形に形成したことを特徴とする分析装置。
【請求項２】
特定成分と特異的に結合する試薬が固定された磁気粒子からなる標識付き試薬が保持された多孔体が、液体を浸透しない材料からなる基材上に固定され、
この基材上の前記多孔体の下流側に、前記特定成分と特異的に結合する試薬が固定された反応部が形成され、
液状試料を前記多孔体に吸収させた後に前記反応部に移動させ、前記反応部の状態を磁気検出装置で検出することにより、前記液状試料中の特定成分を分析する分析装置において、
前記反応部を円形に形成したことを特徴とする分析装置。
【請求項３】
特異的に結合する特定成分が異なる複数の物質が、液状試料の流れる方向に沿って間隔を開けて固定されている請求項１または２記載の分析装置。
【請求項４】
前記基材はポリカーボネート製である請求項１〜３のいずれか１項に記載の分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、液体を浸透しない材料からなる基材上に、特定成分と特異的に結合する物質が固定された反応部が形成され、液状試料を導入する試料導入部と、導入された液状試料を横方向に移動させて前記反応部へ向かわせる流路と、を備え、前記特定成分を検出するラテラルフロー方式の分析装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
臨床検査、環境分析、食品分析等に好適に用いられる分析装置として、抗原抗体反応を利用した分析装置が提案されている。
特許文献１に記載された分析装置では、検体（抗原）に対して特異的に結合する試薬（抗体）が、標識が付いた状態で、多孔質キャリヤ（帯状の多孔質体）の第一区域に、湿潤状態になると移動可能に保持されている。また、同じ多孔質キャリヤの第一区域から空間的に区別される検出区域（反応部）に、検体に対して特異的に結合する試薬（抗体）が標識無しで固定されている。ここで、検出区域（反応部）に対して試薬（抗体）は、多孔質キャリヤ（帯状の多孔質体）の長さ方向に対して直角に、所定幅の線状に固定されている。
【０００３】
また、この分析装置は、適用された液状試料が標識付き試薬を吸収した後に検出区域に浸透するように構成され、標識付き試薬が検出区域に結合された程度を観察できる手段を有している。この分析装置において、多孔質キャリヤは、不透湿性固体材料からなる中空ケーシング（箱体）内に収容されている。さらに、特許文献１には、標識の例として、染色ゾル、金属ゾル、および着色ラテックス粒子が挙げられている。そして、特許文献１の第１２図に示された分析装置は、液状試料を横方向に移動させるラテラルフロー方式の装置である。
【０００４】
特許文献２に記載された分析装置では、標識として磁性微粒子（磁気粒子）を用い、磁性微粒子の凝集を磁気センサで測定することにより分析を行っている。
また、下記の特許文献３には、生化学分析装置の一例として、液状試料を毛細管現象により移動させて反応媒体と接触させるために、液体が浸透しない材料からなる溝状の流路を設けることが記載されている。この文献の図１では、楕円状の反応物（符号５）が長方形の反応媒体（符号４）上に形成されている。
【０００５】
この反応媒体は、シリコンウエハの表面にアミノアルキルポリジメチルシロキサンが被覆されたものを長方形に切り出したものであり、その上に抗体の溶液を滴下して乾燥することで前記反応物が形成されている。この反応媒体が両面テープで第１流路と第２流路の間に固定されている。
なお、特許文献４には、２種類以上の抗原または抗体がスライドグラス基板上に固定化された病態解析チップが記載されている。このチップの一例として、スライドグラス上に、ピッチ４００μｍで直径２００μｍの抗体が５０００個スポットされ、その上がブロッキングされたものが記載されている。
【０００６】
【特許文献１】特公平７−４６１０７号公報
【特許文献２】特開昭６３−３０２３６７号公報
【特許文献３】特開２００４−１２５５４５号公報
【特許文献４】特開２００４−１９１１２９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、液体を浸透しない材料からなる基材上に、特定成分と特異的に結合する物質が固定された反応部が形成され、液状試料を導入する試料導入部と、導入された液状試料を横方向に移動させて前記反応部へ向かわせる流路と、を備え、前記特定成分を検出するラテラルフロー方式の分析装置において、分析精度を向上することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題を解決するために、本発明は、液体を浸透しない材料からなる基材上に、特定成分と特異的に結合する物質が固定された反応部が形成され、液状試料を導入する試料導入部と、導入された液状試料を横方向に移動させて前記反応部へ向かわせる流路と、を備え、前記特定成分を検出するラテラルフロー方式の分析装置であって、前記反応部を円形に形成したことを特徴とする分析装置を提供する。
【０００９】
本発明は、また、特定成分と特異的に結合する試薬が固定された磁気粒子からなる標識付き試薬が保持された多孔体が、液体を浸透しない材料からなる基材上に固定され、この基材上の前記多孔体の下流側に、前記特定成分と特異的に結合する試薬が固定された反応部が形成され、液状試料を前記多孔体に吸収させた後に前記反応部に移動させ、前記反応部の状態を磁気検出装置で検出することにより、前記液状試料中の特定成分を分析する分析装置において、前記反応部を円形に形成したことを特徴とする分析装置を提供する。
【００１０】
本発明の分析装置において、特異的に結合する特定成分が異なる複数の物質が、液状試料の流れる方向に沿って間隔を開けて固定されていると、複数の異なる特定成分を分析することが可能となる。その場合には、前記標識付き試薬として、例えば、「複数種の抗原と特異的に結合する複数種の抗体が、一個の磁気粒子の表面に結合されている磁気粒子」の集合体からなるものを使用する。
【００１１】
本発明において、「特定成分」と「特定成分と特異的に結合する物質」の組み合わせとしては、抗原と抗体、リガンドとレセプター、相補的ＤＮＡ同士が挙げられる。
抗原と抗体の組み合わせとしては、例えば、インフルエンザＡウイルス（Ｈ３Ｎ２）と抗インフルエンザＡウイルス抗体（米国フィッツジェラルド社、Ａｎｔｉ−Ｍｏｕｓｅ
ＩｇＧ1）、インフルエンザＡウイルス（Ｈ１Ｎ１）と抗インフルエンザＡウイルス抗体（ハイテスト社、Ａｎｔｉ−Ｍｏｕｓｅ  ＩｇＧ1）、インフルエンザＢウイルスと抗インフルエンザＢウイルス抗体（米国フィッツジェラルド社、Ａｎｔｉ−Ｍｏｕｓｅ  ＩｇＧ1）が挙げられる。
【００１２】
本発明の分析装置において、前記基材の材質としては、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリメチルメタアクリレート、アクリロニトリル・ブタジエン・スチレン共重合体、塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、エポキシ樹脂、ユリア樹脂等のプラスチック、ガラス、石英等の無機素材、鉄、アルミ、ステンレス等の金属素材等が挙げられる。中でも、成形加工のし易さ、軽量性、強度及びコスト面からプラスチックが好ましく、強度、寸法精度の面からはポリカーボネート及びポリメチルメタアクリレートがより好ましい。
易加工性の面からは、ポリスチレン、アクリロニトリル・ブタジエン・スチレン共重合体、がより好ましい。また、目視を含めた光学的な検出を必要とする場合は、底板の透明性からポリスチレン、ポリカーボネート及びポリメチルメタアクリレート、がより好ましく、ポリカーボネートが特に好ましい。
【００１３】
本発明の分析装置において、前記反応部の形成方法としては、例えば、濃度が０．１μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌの抗体溶液を基材に滴下した後に、乾燥させる方法が挙げられる。この場合、抗体を溶解する溶液としては、いわゆる緩衝液であり、ｐＨ６−９の間に緩衝作用を持つＨＥＰＥＳ、ＭＥＳ、ＭＯＰＳＯ等のＧｏｏｄの緩衝液や燐酸緩衝液など種々の緩衝液が使用可能である。さらに、この溶液には、抗体の安定化剤としてシュークロース、トレハロースなどの糖類を添加することが好ましく、その添加濃度は０．０１％から５％の範囲とする。
【００１４】
この方法の例としては、いわゆるピペットマン（ギルソン社商標）などを用いて基材表面上の反応部形成位置に、マニュアルで一定量スポットする方法や、市販の自動スポッターを使って一定量スポットする方法が挙げられる。
円形の反応部の直径が大きいほど、目視確認や標識物質による信号検出には有利であるが、複数の反応部を形成する場合には、各反応部を独立して検出するために適当な間隔（例えば２ｍｍ以上）を開ける必要がある。円形の反応部の直径の例としては、０．５ｍｍ〜１０ｍｍまたは１ｍｍ〜３ｍｍが挙げられる。
【００１５】
本発明の分析装置において、反応部の上流側に配置した多孔体に保持させる標識付き試薬（標識化二次抗体）の標識としては、酵素標識、蛍光標識、発光標識、粒子標識などが挙げられるが、定量性を考慮した場合、反応部に単一層で特異結合可能な粒子標識が好ましく、特に磁気粒子であることが好ましい。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の分析装置によれば、反応部を円形に形成したことにより、所定幅の線状に形成した場合と比較して、分析精度を向上することができる。
したがって、本発明の分析装置は、医療診断や健康診断のために行われる臨床検査用の装置として好適である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
図１〜５を用いて、本発明の実施形態に相当する分析装置を説明する。
図１は、この分析装置を構成する本体を示す縦断面図である。図２は、この本体を構成する箱体の、組立前の状態を示す斜視図である。図３は、第１多孔体１、第２多孔体２、反応部３ａ，３ｂ、および吸収体４の、箱体内での配置を示す斜視図である。図４は、この分析装置を構成する磁気検出装置を示す概略構成図である。
【００１８】
〔本体について〕
図１および２に示すように、この箱体は、ポリカーボネート（液体を浸透しない性質の材料）製の底板６と、ポリスチレン（液体を浸透しない性質の材料）製の蓋部７とで構成されている。
底板６の内面には、周縁部の６カ所に、蓋部７との連結用のピン６７が固定されている。これらのピン６７を入れる筒状のピン受け７６が、蓋部７の内面に固定されている。蓋部７には、液状試料を入れるための試料導入口（試料導入部）７１と、反応部３ａ，３ｂの上部に流路３１を形成する流路形成部７２が形成されている。これらの底板６および蓋部７は、汎用の射出成形機を用い、通常の条件で成形することができる。
【００１９】
図２および３に示すように、底板６の内面に、第１多孔体（試料導入部）１、第２多孔体２、反応部３ａ，３ｂ、および吸収体４が配置されている。
底板６の内面は、反応部３ａ，３ｂを形成する部分（反応部形成面）３０が、第１多孔体１を固定する部分１０、第２多孔体２を固定する部分２０、および吸収体４を固定する部分４０よりも低く形成されている。符号５０は、底板６の内面で最も低い面を示す。また、第１多孔体１を固定する部分１０と第２多孔体２を固定する部分２０は同じ高さで、吸収体４を固定する部分４０は、これらの部分１０，２０よりも高くなっている。そのため、図２に示すように、底板６内面の吸収体４を固定する部分４０は、周縁部と同じ高さの面６Ａとして形成し、反応部形成面３０、第１多孔体１を固定する部分１０、および第２多孔体２を固定する部分２０は、この面６Ａに凹部１０Ａ，２０Ａ，３０Ａを設けることにより形成した。
【００２０】
底板６の内面の、第２多孔体２を固定する部分２０と反応部形成面３０の間は、斜面２３になっている。反応部形成面３０と吸収部４を固定する部分４０の間は、斜面３４になっている。これらの斜面２３，３４に、それぞれ複数の流路形成部材２３１，３４１を配置することで、溝状の流路２３２，３４２が形成される。流路形成部材２３１，３４１は、蓋部７の流路形成部７２の傾斜部に固定されている。また、第１多孔体１と第２多孔体２は接触状態で配置される。
【００２１】
第１多孔体１は、グラスファイバーの不織布を長方形に打ち抜くことで作製し、これを両面テープで底板６の凹部１０Ａに固定する。
第２多孔体２は、グラスファイバーの不織布に、下記の方法で得られた液体（濃度が０．０５％の磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａ分散液）を含浸した後に風乾することで得、これを両面テープで底板６の凹部２０Ａに固定する。
【００２２】
反応部３ａは一次抗体Ａが、反応部３ｂは一次抗体Ｂが、それぞれ固定された部分であって、下記の方法で底板６の凹部３０Ａに形成する。
吸収体４は、セルロースの不織布を長方形に打ち抜くことで作製し、これを両面テープで底板６の凹部３０Ａに隣接する面６Ａに固定する。
この状態の底板６の上に蓋部７を載せて、底板６のピン６７を蓋７のピン受け７６に入れることにより、図１に示すように分析装置の本体１０１が得られる。そして、この実施形態の分析装置は、本体１０１の反応部３ａ，３ｂの状態を、図４に示す磁気検出装置を用いて図１の矢印Ｂ方向から検出することで、試料導入口７１から導入された液状試料の特定成分（抗体Ａ，Ｂと特異的に結合する抗原）を分析する。
【００２３】
この実施形態の分析装置によれば、磁気ビーズ標識化二次抗体Ａ＆Ｂ（１個の磁気粒子にアビジン／ビオチン結合を介して「ＰＥＧ−抗体Ａ」と「ＰＥＧ−抗体Ｂ」が結合されている粒子の集合体）が第２多孔体２に保持され、一次抗体Ａ，Ｂが反応部３ａ，３ｂに固定されているため、Ａ，Ｂ二種類の抗体と特異的に結合する二種類の抗原（インフルエンザＡウイルスおよびインフルエンザＢウイルス）の分析に併用できる。
【００２４】
また、反応部３ａ，３ｂを底板６の内面の最も低い凹部３０Ａに形成することにより、図１に示すように、箱体の底板６の厚さを反応部３ａ，３ｂの位置で極めて薄くして、第１多孔体１、第２多孔体２、および吸収体４が固定されている部分の厚さを機械的強度が確保できる十分な厚さにすることができる。
そして、例えば、第１多孔体１および第２多孔体２を固定する部分の厚さを１．０ｍｍとし、反応部形成面３０の部分の厚さを０．２ｍｍとし、吸収体４を固定する部分の厚さを１．５ｍｍとすることで、磁気センサによる検出感度および検出精度を良好にしながら、底板６の機械的強度を確保することができる。
また、蓋部７の流路形成部７２により、反応部３ａ，３ｂの上部に流路３１を形成することで、反応部３ａ，３ｂの汚染が防止される。
【００２５】
〔第２多孔体に含浸させる液体（標識付き試薬を含有する液体）の作製方法〕
(1) 第１の抗体のＰＥＧを介したビオチン化工程（「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ａ」を得る工程）
Ｂｉｏｔｉｎ−ＰＥＧ−ＣＯ2−ＮＨＳ（米国シェアーウオーター社製、ＭＷ３４００）を９．１ｍｇ計量して、４００μｌの蒸留水に溶解することにより、濃度が６．６９ｍＭである水溶液を調製した。この水溶液１５．３μｌと、抗体Ａ（抗インフルエンザＡウイルス抗体、フィッツジェラルド社製、Mouse IgG ）をＰＢＳに脱塩・ｂｕｆｆｅｒ交換したもの（抗体濃度６．１１ｍｇ／ｍｌ）０．６２５ｍｌを混合して、室温で４時間反応させた。これにより、抗体ＡにＢｉｏｔｉｎ−ＰＥＧ鎖を結合した。
【００２６】
上記反応液を、遠心型限外ろ過装置（アミコン社、分子量３万カット）を用いて回転速度７５００ｒｐｍ、１０分間の条件で濃縮し、得られた濃縮液にＰＢＳを３ｍｌ添加して、同限外ろ過装置で同様の条件で再び濃縮した。さらに、得られた濃縮液にＰＢＳを３ｍｌ添加して、同限外ろ過装置で同様の条件で濃縮する操作を２回繰り返した。これにより、未反応のＢｉｏｔｉｎ−ＰＥＧ−ＣＯ2−ＮＨＳが除去された、精製ＰＥＧ−ｂｉｏｔｉｎ化抗体Ａ（「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ａ」）液を得た。
得られた「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ａ」の「抗体Ａ」１分子あたりのビオチン化率を「EZ-link Sulfo-NHS-Biotinylation  Kit試薬( 米国ピアース社製) 」中のbiotin定量試薬を用いて測定したところ、１．１分子（IgG 濃度は７．９７mg/ml ）であった。
【００２７】
(2) 第２の抗体のＰＥＧを介したビオチン化工程（「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂ」を得る工程）
抗体Ａに代えて抗体Ｂ（抗インフルエンザＢウイルス抗体、フィッツジェラルド社製、Mouse IgG ）を用いた以外は(1) の工程と同じ方法で、精製ＰＥＧ−ｂｉｏｔｉｎ化抗体Ｂ（「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂ」）液を得た。
得られた「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂ」の「抗体Ｂ」１分子あたりのビオチン化率を(1) と同じ方法で測定したところ、０．８分子（IgG 濃度は３．５３mg/ml ）であった。
【００２８】
(3) アビジン化された磁気粒子とビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂとの反応工程（第１の状態の磁気粒子：「磁気粒子−アビジン−ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂ」を得る工程）
Ｄｙｎａｂｅａｄｓ  ＭｙＯｎｅ  Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ（ノルウェー国Ｄｙｎａｌ社製の磁気ビーズ、直径１．０μｍ、超常磁性高分子ポリマービーズにストレプトアビジンを結合させたもの）を１％含有するＰＢＳ溶液を１００μｌ、エッペンドルフチューブに計量し、これに、(2) 工程で得られた精製ＰＥＧ−ｂｉｏｔｉｎ化抗体Ｂ（「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂ」）液を１７．８μｌ添加した。さらに、ＰＢＳを３２．２μｌ入れて、全液量を１５０μｌとした後、室温で４時間攪拌しながら反応を行った。これにより、磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ（「磁気粒子−アビジン−ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂ」）液を得た。
【００２９】
この磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ液から、ノルウェー国Ｄｙｎａｌ社製のＭＰＣ（磁石を用いた磁性粒子収集装置）を用いて、磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂのみを回収した。回収された磁気ビーズ標識化二次抗体ＢにＰＢＳを１ｍｌ添加して洗浄し、この液体から同じ方法で磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂのみを回収した。最終的に、この磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂに、１％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液を入れて、濃度が０．５％の磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ分散液を得た。
このようにして得られた磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ分散液を５０μｌ採取して、この分散液から、前記と同じ方法で磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂのみを回収した。回収された磁気ビーズ標識化二次抗体ＢにＰＢＳを２００μｌ添加して洗浄し、この液体から同じ方法で磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂのみを回収した。
【００３０】
(4) 「磁気粒子−アビジン−ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ｂ」と「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ａ」を反応させて、第２の状態の磁気粒子「第１の状態の磁気粒子−アビジン−ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ａ」を得る工程
(3) 工程で最終的に回収された磁気ビーズ標識化二次抗体ＢにＰＢＳを１００μｌ添加し、これに、(1) 工程で得られた精製ＰＥＧ−ｂｉｏｔｉｎ化抗体Ａ（「ビオチン−ＰＥＧ−抗体Ａ」）液を２６．３μｌ添加した。さらに、ＰＢＳを２３．７μｌ入れて、全液量を１５０μｌとした後、室温で４時間攪拌しながら反応を行った。これにより、図６に示す第２の状態の磁気粒子（磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａ）を含有する液を得た。
【００３１】
この磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａ液から、ノルウェー国Ｄｙｎａｌ社製のＭＰＣ（磁石を用いた磁性粒子収集装置）を用いて、磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａのみを回収した。回収された磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆ＡにＰＢＳを２００μｌ添加して洗浄し、この液体から同じ方法で磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａのみを回収した。最終的に、この磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａに、１％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液を入れて、濃度が０．０５％の磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａ分散液を得た。
この分散液に含まれている磁気ビーズ標識化二次抗体Ａ＆Ｂは、１個の磁気粒子にアビジン／ビオチン結合を介して「ＰＥＧ−抗体Ａ」と「ＰＥＧ−抗体Ｂ」が結合されている粒子の集合体であって、「ＰＥＧ−抗体Ａ」の結合比率が約７０％で「ＰＥＧ−抗体Ｂ」の結合比率が約３０％である。
【００３２】
〔反応部３ａ，３ｂの形成方法〕
前記と同じ抗体Ａを、０．１質量％のシュークロースを含有する０．１ｍｏｌｅ／ｌのＨＥＰＥＳ（ｐＨ８）緩衝液で、濃度が１０μｇ／ｍｌになるように希釈して希釈液Ａを得た。また、抗体Ａに代えて前記と同じ抗体Ｂを用い、同じ方法で、希釈液Ｂを得た。
次に、これらの希釈液Ａ，Ｂを、底板６の内面の凹部３０Ａ上に５μｌずつ、３ｍｍ開けて滴下した。この底板６を、直ぐに、予め４５℃に加温しておいた減圧インキュベーター（ＥＹＥＬ社製、型番ＶＯＳ−３０１ＳＤ）中に入れ、０．０８ＭＰａとなるまで減圧し、この圧力で正確に３０分間保持することで減圧乾燥処理を行った。これにより、底板６の内面の凹部３０Ａに、円形の反応部３ａ，３ｂを形成した。
【００３３】
〔図４の磁気検出装置の説明〕
この実施形態では、分析装置の本体１０１を保持する台１２にモータ１０２を接続し、このモータ１０２の駆動により、台１２に保持された本体１０１が、磁場中で図中の矢線Ａで示す方向に移動されるようにした。本体１０１の下面が露出されるように、台１２の底面は開口部１２ａとなっている。
【００３４】
磁気検出装置は、本体１０１の反応部に固定された磁性粒子によって出力される磁気的な変化を検出し、この変化をアナログ信号として出力する磁気センサ１０６と、磁気センサ１０６によって出力されたアナログ信号を増幅し、増幅されたアナログ信号をフィルタ処理するアナログ信号処理部１０８と、アナログ信号処理部１０８によってフィルタ処理されたアナログ信号をデジタル信号に変換するＡ／Ｄ変換素子１０９、Ａ／Ｄ変換素子１０９から出力されたデジタル信号に含まれるノイズを除去するデジタルフィルタ１１０と、ノイズが除去されたデジタル信号のプラス出力またはマイナス出力のいずれか一方を出力する信号出力部１１１と、を備えている。
【００３５】
磁気センサ１０６は、磁場の変化によって電気特性が変化する半導体薄膜を有するセンサ部１０３と、センサ部１０３および本体１０１の反応部に静磁場を印加する静磁場発生部１０４と、を備えている（印加される静磁場の磁力線をＢとして示す）。センサ部１０３と静磁場発生部１０４は、基体１０５にそれぞれ固定されてユニット化されている。
静磁場発生部１０４は、図中のＢで示す方向の磁力線で表される磁場を発生する。磁場は、本体１０１の少なくとも一部とセンサ部１０３を含む領域に形成される。磁場が形成された領域を本体１０１の反応部３ａ，３ｂが移動することによって、反応部３ａ，３ｂに固定された磁気粒子の量に応じて、形成された磁場に変化が生じる。
【００３６】
センサ部１０３は、磁場の変化によって、例えば電気抵抗が変化する半導体素子である。センサ部１０３から出力される信号は、磁場の変化の程度に応じて変化し、アナログ信号処理部１０８にアナログ信号ａとして出力される。アナログ信号処理部１０８によって処理されたアナログ信号ａは、アナログ信号処理部１０８からＡ／Ｄ変換素子１０９にアナログ信号ｂとして出力される。
【００３７】
Ａ／Ｄ変換素子１０９は、アナログ信号ｂを入力し、デジタル変換した後にデジタル信号ｃとしてデジタルフィルタ１１０に出力する。デジタル信号ｃは、Ａ／Ｄ変換素子１０９からデジタルフィルタ１１０へ出力される。
デジタルフィルタ１１０は、デジタル信号ｃのオフセットやオフセットドリフトなどを除去し、デジタル信号ｄとして出力する。また、信号出力部１１１は、デジタル信号ｄのプラス信号またはマイナス信号のいずれか一方だけを出力する。
【実施例】
【００３８】
実施形態の分析装置を用いて、実際の分析を行った例を以下に示す。
底板６の厚さは、第１多孔体１および第２多孔体２を固定する部分の厚さを１．０ｍｍとし、反応部形成面３０の部分の厚さを０．２ｍｍとし、吸収体４を固定する部分の厚さを１．５ｍｍとした。また、第１多孔体１の大きさは１２ｍｍ×８ｍｍ×厚さ２ｍｍ、第２多孔体２の大きさは１２ｍｍ×５ｍｍ×厚さ２ｍｍ、吸収体４の大きさは１２ｍｍ×１１ｍｍ×厚さ２ｍｍとした。反応部３ａ，３ｂの直径は共に２．５ｍｍとし、両者の間隔を３．５ｍｍとした。
【００３９】
第１のサンプルを以下の方法で調製した。インフルエンザＡウィルス（Ａ／北九州／１５９／９３、１０7.75ＴＣＩＤ50／ｍｌ）を生理食塩水により２０倍に希釈し、この希釈液１０μｌに、界面活性剤「Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００」を１．０％含有する生理食塩水を１９０μｌ添加した。
このようにして得られた２００μｌの液状試料（第１のサンプル）を、分析装置の本体１０１の試料導入口７１に滴下した。
【００４０】
滴下された液状試料は、第１多孔体１に吸収された後、毛細管現象で横方向に移動して第２多孔体２に入り、流路２３２を通って流路３１に入り、反応部３ａ，３ｂの両方に接触してから、流路３４２を通って吸収体４に吸収された。
ここで、第２多孔体２には、前述のように、磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａが湿潤状態で移動可能に保持されている。この磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａは、１個の磁気粒子にアビジン／ビオチン結合を介して「ＰＥＧ−抗体Ａ」と「ＰＥＧ−抗体Ｂ」が結合されている粒子の集合体であって、「ＰＥＧ−抗体Ａ」の結合比率が約７０％で「ＰＥＧ−抗体Ｂ」の結合比率が約３０％である。
【００４１】
よって、第２多孔体２で、液状試料に含まれているインフルエンザＡウィルス（抗原Ａ）と磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａの抗体Ａが結合する。次いで、この液状試料は第２多孔体２から流路２３２に移動し、この液状試料が反応部３ａ，３ｂの流路３１を移動する間に、この結合体のインフルエンザＡウィルス（抗原Ａ）が反応部３ａの抗体Ａと結合して、反応部３ａに磁気ビーズの凝集が生じる。
【００４２】
この装置の板材６はポリカーボネート製であるため、板材６から箱体内の状態を見ることができるが、図１のＢ方向からの目視で、この磁気ビーズの凝集が反応部３ａでは確認され、反応部３ｂでは確認されなかった。また、図４の磁気検出装置を用いて、反応部３ａ，３ｂに存在する磁気ビーズの量を示す出力信号を検出した。その結果、反応部３ａの出力信号値は３０４ｍＶであり、反応部３ｂの出力信号値は５９ｍＶであった。
【００４３】
第２のサンプルを以下の方法で調製した。インフルエンザＢウィルス（Ｂ／門真／５０６／９９、１０7.0ＴＣＩＤ50／ｍｌ）を生理食塩水により１００倍に希釈し、この希釈液１０μｌに、界面活性剤「Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００」を１．０％含有する生理食塩水を１９０μｌ添加した。
このようにして得られた２００μｌの液状試料（第２のサンプル）を、分析装置の本体１０１の試料導入口７１に滴下した。
【００４４】
滴下された液状試料は、第１多孔体１に吸収された後、毛細管現象で横方向に移動して第２多孔体２に入り、流路２３２を通って流路３１に入り、反応部３ａ，３ｂの両方に接触してから、流路３４２を通って吸収体４に吸収された。
ここで、第２多孔体２には、前述のように、磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａが湿潤状態で移動可能に保持されている。この磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａは、１個の磁気粒子にアビジン／ビオチン結合を介して「ＰＥＧ−抗体Ａ」と「ＰＥＧ−抗体Ｂ」が結合されている粒子の集合体であって、「ＰＥＧ−抗体Ａ」の結合比率が約７０％で「ＰＥＧ−抗体Ｂ」の結合比率が約３０％である。
【００４５】
よって、第２多孔体２で、液状試料に含まれているインフルエンザＢウィルス（抗原Ｂ）と磁気ビーズ標識化二次抗体Ｂ＆Ａの抗体Ｂが結合する。次いで、この液状試料は第２多孔体２から流路２３２に移動し、この液状試料が反応部３ａ，３ｂの流路３１を移動する間に、この結合体のインフルエンザＢウィルス（抗原Ｂ）が反応部３ｂの抗体Ｂと結合して、反応部３ｂに磁気ビーズの凝集が生じる。
【００４６】
この装置の板材６はポリカーボネート製であるため、板材６から箱体内の状態を見ることができるが、図１のＢ方向からの目視で、この磁気ビーズの凝集が反応部３ｂでは確認され、反応部３ａでは確認されなかった。また、図４の磁気検出装置を用いて、反応部３ａ，３ｂに存在する磁気ビーズの量を示す出力信号を検出した。その結果、反応部３ａの出力信号値は９９ｍＶであり、反応部３ｂの出力信号値は１６４ｍＶであった。
【００４７】
第３のサンプルとして生理食塩水を用意し、２００μｌの生理食塩水からなる液状試料（第３のサンプル）を、分析装置の本体１０１の試料導入口７１に滴下した。
滴下された液状試料は、第１多孔体１に吸収された後、毛細管現象で横方向に移動して第２多孔体２に入り、流路２３２を通って流路３１に入り、反応部３ａ，３ｂの両方に接触してから、流路３４２を通って吸収体４に吸収された。
【００４８】
しかし、この液状試料には抗原Ａ，Ｂのいずれもが含まれていないため、液状試料が磁気ビーズとともに第２多孔体２から流路２３２に出て反応部３ａ，３ｂの流路３１を移動する間に、前述の第１および第２のサンプルの場合のような結合が生じない。よって、図１のＢ方向からの目視で、磁気ビーズの凝集が反応部３ａ，３ｂの両方で確認されなかった。
また、図４の磁気検出装置を用いて、反応部３ａ，３ｂに存在する磁気ビーズの量を示す出力信号を検出した。その結果、反応部３ａの出力信号値は８０ｍＶであり、反応部３ｂの出力信号値は４５ｍＶであった。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】実施形態の分析装置を示す図であって、本体の縦断面図である。
【図２】図１の本体の組立前の状態を示す斜視図である。
【図３】第１多孔体、第２多孔体、反応部、および吸収体の、箱体内での配置を示す斜視図である。
【図４】実施形態で使用した磁気検出装置を示す概略構成図である。
【符号の説明】
【００５０】
１  第１多孔体
１０  第１多孔体を固定する部分
１０Ａ  凹部
２  第２多孔体
２０  第２多孔体を固定する部分
２０Ａ  凹部
２３１  流路形成部材
２３２  溝状の流路
３Ａ，３ｂ  反応部
３０  反応部を形成する部分（反応部形成面）
３０Ａ  凹部
３１  反応部上部の流路
３４１  流路形成部材
３４２  溝状の流路
４  吸収体
４０  吸収体を固定する部分
５０  底板の内面で最も低い面
６  箱体の底板
６７  ピン
７  箱体の蓋部
７１  試料導入口
７２  流路形成部
７６  ピン受け
６Ａ  底板内面の周縁部と同じ高さの面
１０１  本体
１２  台
１２ａ  開口部
１０２  モータ
１０３  センサ部
１０４  静磁場発生部
１０５  基体
１０６  磁気センサ
１０８  アナログ信号処理部
１０９  Ａ／Ｄ変換素子
１１０  デジタルフィルタ
１１１  信号出力部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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