(57)【要約】【課題】  歯周病の治療および予防に関連し歯周病菌の退縮後、歯周細胞の増殖による歯周組織の再生が必要であるが、これらの歯周細胞の増殖剤および食品を作成する。【解決手段】  コエンザイムＱ１０を水溶化したもの、または包接体で加えて各種製剤、食品を作成する。コエンザイムＱ１０は歯周細胞の増殖効果を示し、これらを配合した製剤、食品は歯周病の改善に有効であった。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
コエンザイムＱ１０或いはそれを含む包接体、乳剤または配合物を成分として含有してなることを特徴とする歯周細胞の増殖剤および食品。
【請求項２】
口腔内に留まり、徐々に口中に溶解していくことを特徴とする請求項１記載の歯周細胞の増殖剤および食品。
【請求項３】
前記包接体が、シクロデキストリン包接体である請求項１または２記載の歯周細胞の増殖剤および食品。
【請求項４】
（１）チアブルタイプの製剤および食品、
（２）フィルム状の製剤および食品、および
（３）チューインガム
である請求項１〜３のいずれか１項記載の歯周細胞の増殖剤および食品。
【請求項５】
洗口液である請求項１記載の歯周細胞の増殖剤および食品。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項記載の歯周細胞の増殖剤および食品を使用する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、歯周細胞の増殖を目的とする歯周細胞増殖剤および食品に関するものであり、医療、製薬と機能性食品技術に関わるものである。
【背景技術】
【０００２】
歯周病は歯を支持している歯周組織が侵される疾患であり最終的に歯の喪失にいたる極めて重要な疾患である。しかしながら従来歯周炎の治療法としてはブラッシングおよびスケーリングなどによるプラーク除去の方法が用いられてきた。また、近年これらのことをふまえて様々の治療薬が提案されている。
【０００３】
歯周病はその原因菌であるＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓあるいはＡｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｒｅｍｃｏｍｉｔａｎｓによって引き起こされるがこれらの増殖を抑制または死滅させるには抗生物質などが用いられる。しかしながらこれらの療法では病巣を無くし歯周炎の進行は阻止されるが破壊された歯周組織の再生や修復は困難である。
【０００４】
これらの歯周組織の再生治癒および再付着を進める上で各種の治療薬が提案されている。血管新生を誘導する塩基性線維芽細胞増殖因子（ペプチド）を配合したもの（特許文献１）や血管内皮細胞増殖因子／血管透過性因子に対する抗体を含む製剤（特許文献２）などが提案されている。
【０００５】
特許文献３には、活性酸素が歯肉組織の炎症を悪化させ、歯周病につながるものとし、抗酸化剤の有用性を記載している。抗酸化剤とモノリン酸アデノシンの併用系での効果としてコエンザイムＱ１０の記載は無く抗酸化剤一般が記載されている。あくまで抗酸化機能による歯周病の改善に主眼がおかれている。
【０００６】
特許文献４には、ビタミンＣとＣｏＱ１０の併用もしくは単体での使用で口腔吸収歯科調剤が記載されている。ホメオパシー生体組織塩などの併用系で歯周病の免疫応答増強、歯肉コラーゲン濃度増加、歯茎の出血、バクテリア毒素の上皮細胞壁透過抑制などの効果を記載している。あくまで免疫機能を主眼においた歯周病の改善をうたっているにすぎない。
【０００７】
特許文献５には、リン酸誘導体とユビキノン還元体等の併用系で基本的に皮膚障害の抑制について記載されているが皮膚の延長として歯肉炎への局所投与する治療法を請求範囲に含んでいる。この場合リン酸誘導体を含むことが第一義であり、またユビキノン還元体に特定されていることから酸化型のコエンザイムＱ１０は対象からはずれるものと判断される。
【０００８】
特許文献６には、コエンザイムＱ１０を主成分とする口腔内塗布剤が開示されているが、剤形として基本的にジェルが考えられている。さらに基本的な歯周病の予防、改善の機作としてはフリーラジカルによる口腔内の酸化ダメージの抑制にあるとしている。
【０００９】
特許文献７は抗酸化性生薬とＣｏＱ１０の併用系が主体であるがフリーラジカルによる酸化ストレスの抑制により口腔内への酸化的ダメージを与えることを抑制することに特徴を見出している。剤形としてジェルおよびチュアブル錠の記載があるが、基本的に歯周細胞の増殖まで立ち入っていないことから本発明については機能面で全く異なっているものである。
【００１０】
特許文献８はコエンザイムＱ１０を口腔粘膜から吸収しやすくするために寒天カプセルにし、これをペーストまたはゲル状の食品として口腔内でカプセルを破壊して口腔から直接吸収させることを目的としている。この場合、これを作るプロセスに主眼をおく形となっており、機能面の記載は無い。消化管の吸収ではなく口腔内、舌下吸収が目的であり、歯周病に対しては目的としていない。
【特許文献１】特開平７−１７８７６号公報
【特許文献２】特開２００２−９７１５７号公報
【特許文献３】特開平１１−１２４３２２号公報
【特許文献４】特表２００４−５３２８３１号公報
【特許文献５】特表２００４−５３８３０８号公報
【特許文献６】特開２００４−２３１６０３号公報
【特許文献７】特開２００４−２３１６０２号公報
【特許文献８】特開２００５−１４３３６５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は歯周細胞の増殖に有効な製剤および食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、前述のような従来の治療薬、食品が歯周組織の酸化に対するダメージの低減、免疫機能の修復、再生のみに言及し、歯周病の内因的な問題について検討していないことから歯周病患者において歯周組織中のコエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）が欠乏することに着目し、本発明を完成させた。
【００１３】
即ち、本発明者らは歯周病患者が他の疾患に対しても罹患しやすいことに着目し、また歯周組織にかかわらず歯周病患者のコエンザイムＱ１０の血中濃度が低下することに着目し、コエンザイムＱ１０の経口摂取を検討した。しかしながらこれらの血中での濃度上昇は他の疾患部位や欠乏部位への取り込みがあり顕著な効果を認められなかった。
【００１４】
本発明者らは、歯周病患者の疾患部位に直接的に作用可能な状態でコエンザイムＱ１０を歯周細胞に供給し、コエンザイムＱ１０が直接的に歯周細胞の増殖作用を促進させることを確認した。さらにコエンザイムＱ１０を歯周組織に長時間接触させることにより歯周組織細胞の修復、再生が可能であるという結論に思い至たった。
【００１５】
これらをより効果的に実施する方法としてチアブル製剤、フィルム製剤、チューインガム等の形態で、歯周組織とコエンザイムＱ１０が長時間接触可能な剤形を使用することによってより有効な歯周細胞増殖剤および食品が供給可能である。
【００１６】
コエンザイムＱ１０の口腔内での歯周細胞への直接的な接触でもっとも効果的な治療が可能であるが、これをより一層効果的にするために通常の健康食品によるコエンザイムＱ１０の摂取も可能である。これらはソフトカプセル、打錠タブレット、ハードカプセルの形状で入手可能である。
【発明の効果】
【００１７】
本発明では、歯周病の治療において歯周細胞の再生、修復をする上で対症療法を行うのみならず、歯周病に影響する全身的な観点から欠乏するコエンザイムＱ１０を補足するばかりでなく局部的に歯周組織に供給することによって歯周組織細胞の再生、修復を可能にする歯周細胞の増殖剤、食品を提供し得る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下本発明をさらに詳細に説明する。
本発明で言うコエンザイムＱ１０は心臓病の治療に使われてきた医薬用成分であり、通常、ユビキノンと呼ばれている、２，３−ジメトキシ‐５‐デカプレニル‐６‐メチル‐ベンゾキノンを言う。近年、コエンザイムＱ１０は、日本国内においても食品として認められタブレット、ソフトカプセルやキャンディー、チューインガム、飲料など様々の形態で利用されている。
【００１９】
本発明で言う歯周病とは、歯肉炎および歯周炎を含む。歯肉炎は炎症が歯肉局所に限定されるのに対し歯周炎は歯根膜および歯槽骨まで及ぶものを言う。歯周病は感染症でありＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓあるいはＡｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｒｅｍｃｏｍｉｔａｎｓによって引き起こされる。歯周病は歯牙の喪失につながる主要な原因となるにもかかわらず、これまで薬物治療が十分に確立されていない。
【００２０】
歯周組織は、歯根と歯肉が歯根膜を介し線維性の強固な結合により付着しているが、従来、歯根膜が再生する前に歯肉表面の上皮細胞が歯周ポケット表面を被覆するため、上皮細胞と歯根の間に正常な結合組織が再生出来ず、歯周ポケットが再形成され歯周炎の再発と歯肉の退縮がおこる。
【００２１】
これに対し正常な線維性結合を再生させる方法として、
（１）クエン酸による歯根面の処理
（２）生体適合性の遮断膜による上皮へのダウングロースの抑制
（３）局所への細胞増殖誘導
などが提案されている。しかしながら、現状では良好な結果は得られていない。
【００２２】
これらのことに鑑み、また歯周病の全身での疾患との関係から、歯周病疾患部位に直接的にコエンザイムＱ１０を接触させ歯周細胞への直接的な供給をすることによる治療法を発案したものである。
【００２３】
コエンザイムＱ１０の粘膜からの吸収については、十分な資料は無いが、通常化粧品用に用いられている。皮膚からの吸収性による、しわ、シミの予防効果が期待され、表皮細胞による直接的な吸収について予測させる。
【００２４】
製剤、食品の形態としては口腔内細胞に長期間接触させることが可能なものであり、通常のタブレットやソフトカプセル類、飲料ではすぐに飲み込まれてしまい口腔内に留まらない。また塗布剤やスプレータイプも一時的に留まるだけでそれほど長期の歯周細胞との接触は期待できない。従って、本発明では、チアブルタイプの大型のタブレット、トローチ、キャンディー、フィルム食品、チューインガムなどが形状として好適である。特に、フィルム食品は歯周組織に直接接触させて溶解していくので好適であると考えられる。
【００２５】
配合材料としては、ＣｏＱ１０を除き、通常の経口医薬用素材、食品素材を用いることができる。すなわち賦形剤として用いられる澱粉、デキストリン、シクロデキストリン、キシリトール、還元麦芽糖等の糖質、結晶セルロース、各種ペプチド、ポリフェノール類、グッタペルカ、ポリ酢酸ビニル、各種合成ポリマー、香料など一般的に医薬用賦形剤、食品基材に用いられるもので有れば使用可能である。
【００２６】
コエンザイムＱ１０の配合量は、医薬用の目安である１日３０ｍｇを基本に設計される。即ち、できる限り長期間、口腔内にコエンザイムＱ１０が存在することが好ましいが、各種製剤、食品で数時間口腔内に滞留するものはない。従って、数回に分けて摂取できるように、各種製剤、食品には、１回分に、好ましくは０．０１〜１００ｍｇ、より好ましくは０．３ｍｇ〜１０ｍｇのコエンザイムＱ１０を配合することが良好な結果を得る。これらの配合は製剤、食品の形態によるが、本発明の配合を制限するものではない。
【００２７】
コエンザイムＱ１０は、そのままの原体を使うことも可能であるが、シクロデキストリン包接体にしても良い。特にこれらの包接体は、すぐに分解されることなく、また歯周細胞への吸収性も良いと判断される。シクロデキストリンとしてはα、β、γの３種が食品として利用可能であるが、β体、γ体の包接物が利用可能である。
【００２８】
コエンザイムＱ１０の包接体の作製方法は、通常用いられる包接体の作製方法であってよく特に限定されない。例えば、コエンザイムＱ１０をシクロデキストリン水溶液に添加して均一に混合することによって不溶性のコエンザイムＱ１０のシクロデキストリン溶液を作製し、上記混合には、通常このような用途に用いられる方法および装置を用いることができ、特に限定されない。混合時間は、そのような方法および装置に依存して変化するが、通常、１〜１２０分、好ましくは５〜３０分である。更に混合を十分に行うため、上記シクロデキストリン溶液は、要すれば、加熱溶解（例えば３０〜６０℃）や超音波処理を行ってもよい。上記溶液から水を除去するが、上記水の除去には通常、このような用途に用いられる方法および装置を用いることができ、特に限定されないが、例えば、ロータリーエバポレーターを用いて得られた固形物を粉砕する方法や、スプレードライ製法により粉末とすることが好ましい。勿論、用途によっては、固形物や粉末とせず、溶液の状態で使用することも可能である。
【００２９】
上記包接体中のコエンザイムＱ１０の含有量は、コエンザイムＱ１０包接体の重量に対して、１〜２０重量％、好ましくは５〜１５重量％、より好ましくは１０〜１５重量％であることが望ましい。上記コエンザイムＱ１０の含有量が１重量％未満では配合製品の効果を期待することができない、２０重量％を超えると２０％を越えるコエンザイムＱ１０は包接体を形成することがない。
【００３０】
コエンザイムＱ１０の乳剤の作製方法は、通常用いられる乳剤の作製方法であってよく特に限定されないが、例えばシュガーエステルやポリグリセリンエステル等の非イオン系の界面活性剤（５〜４０部）、大豆レシチン（５〜２０部）、グリセリン（２０〜７０部）とコエンザイムＱ１０を配合して撹拌混合して均一化して作製する。なお、上記乳剤中のコエンザイムＱ１０の含有量は、上記包接体中のコエンザイムＱ１０の含有量と同様である。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００３２】
（実施例１）
コエンザイムＱ１０によるヒト歯周細胞再生促進作用を試験した。
ヒト歯根膜細胞（以下ＰＤＬと略記する）の増殖性に対する作用を以下のように実施、測定した。９６ウェルプレートの各ウェルに１．０×１０３個のＰＤＬを播種し、１０，１００ｎｇ／ｍＬおよび１μｇ／ｍＬのコエンザイムＱ１０を添加し、３７℃で４８時間の培養を行った。培養後、細胞増殖試薬ＷＳＴ‐１試薬（Ｒｏｃｈｅ社製）を各ウェルに１０μＬずつ添加し、５％ＣＯ２、３７℃条件下で６０分間培養を行った。その後、マイクロプレートリーダーＭＰＲＡ４（ＴＯＳＯＨ社製）を用いて細胞増殖活性の測定を行った。対象としてコエンザイムＱ１０を加えずに同様の試験を行った。
各試験濃度で増殖した細胞数を、対象を１とした時の数字で表１に示す。
【００３３】
【表１】
2007077023.tif 000002
【００３４】
（実施例２）
コエンザイムＱ１０によるヒト歯周細胞再生促進作用を試験した。
ヒト歯周組織由来歯肉線維芽細胞（ｈｕｍａｎ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｇｉｎｇｉｖａｌ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ：以下ＨＧＦと略記する）の増殖性に対する作用を以下のように実施、測定した。９６ウェルプレートの各ウェルに１．０×１０３個のＨＧＦを播種し、１０ｎｇ／ｍＬ、１００ｎｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬおよび１０μｇ／ｍＬのコエンザイムＱ１０を添加し、３７℃で４８時間の培養を行った。培養後、細胞増殖試薬ＷＳＴ‐１試薬（Ｒｏｃｈｅ社製）を各ウェルに１０μＬずつ添加し、５％ＣＯ２、３７℃条件下で６０分間培養を行った。その後マイクロプレートリーダーＭＰＲＡ４（ＴＯＳＯＨ社製）を用いて細胞増殖活性の測定を行った。対象としてコエンザイムＱ１０を加えずに同様の試験を行った。
各試験濃度で増殖した細胞数を、対象を１とした時の数字で表２に示す。
【００３５】
【表２】
2007077023.tif 000003
【００３６】
以上のことより、コエンザイムＱ１０が歯周病における歯周細胞の増殖に有効であることが明らかである。
【００３７】
（コエンザイムＱ１０-βＣＤ包接体の作製）
βＣＤ１５ｇを７０℃の熱水１００ｇに溶解し、コエンザイムＱ１０を２．１ｇ添加後、ＴＫホモミキサー（特殊機化工業製）を用い、３０００ｒｐｍで６０分撹拌混合する。得られた混合物を凍結乾燥後、粉砕して粉末を得た。
【００３８】
（コエンザイムＱ１０含有乳化物の作製）
グリセリン６１．５ｇ、デカグリセリンモノオレエート６ｇ、大豆レシチン６ｇに１０ｇのコエンザイムＱ１０を大豆油４．５ｇに溶解したものを加え、水１２ｇを加えて撹拌混合した後ＴＫホモミキサーで５０００ｒｐｍを用いて１０分間乳化した。
【００３９】
（実施例３）
チュアブルタブレットについては下記の処方で作成した。
【００４０】
【表３】
2007077023.tif 000004
【００４１】
上記配合物をよく混合し、回転式打錠機をもちいて１０ｍｍ径１４Ｒの杵で１．４ｔ／ｃｍ２で打錠した。これをサンプルＡとした。
【００４２】
（実施例４）
フィルム食品については下記の処方で作成した。
【表４】
2007077023.tif 000005
【００４３】
６０℃で上記配合成分を溶解した溶液を、公知の通り１００℃〜１８０℃に加熱した回転ドラム面に塗布し、塗布面の溶液上にも熱風を吹き付けて乾燥し、ドラム面に押し当てたブレードから乾燥膜を剥離し、支持ロールを通る間に冷却し、その後、支持体フィルムにのせて巻き取りローラーに巻き込みロール状とする。フィルムを任意の幅に切断し、乾燥し、これをサンプルＢとした。
【００４４】
（実施例５）
チューインガムについては下記の処方で作成した。
【表５】
2007077023.tif 000006
【００４５】
３０分間６０℃に加温したガムベースに、キシリトール、エリスリトールを加え、２分間練合し、再び６０℃で１０分加温した後、その他の成分を加えて２分間練合した後、再び６０℃で１０分加温した。その後、同操作（２分間練合、１０分間加温）を４回繰り返し十分に練合した。得られた練合物を放冷し、分割圧延して１ｍｍの板状に成形した。これをサンプルＣとした。
【００４６】
（実施例６）
洗口液については下記の処方で作成した。
【表６】
2007077023.tif 000007
これらを十分に攪拌混合しこれをサンプルＤとした。
【００４７】
（実施例７）
シュガーレスキャンディについては下記の処方で作成した。
【表７】
2007077023.tif 000008
これをサンプルＥとした。
【００４８】
（実施例８）
グミキャンディーについては次の処方で作成した。
【表８】
2007077023.tif 000009
これをサンプルＦとした。
【００４９】
（実施例９）
塗布剤については下記の処方で作成した。
【表９】
2007077023.tif 000010
これをサンプルＧとした。
【００５０】
（比較例１）
飲料については下記の処方で作成した。
【表１０】
2007077023.tif 000011
これをサンプルＨとした。
【００５１】
（比較例２）
コエンザイムＱ１０‐βＣＤ包接体の代わりにβＣＤを５．００％加えた以外は実施例３と同じ処方で、チュアブルタブレットを作成した。
これをサンプルＩとした。
【００５２】
（各種製剤、食品を使ったときの効果）
各種食品を、通常の摂取条件下で、それぞれ摂食した時の効果について以下の表１１に示す。評価条件としては、各サンプルについてはそれぞれ通常の摂食条件、使用条件で３０日間使用し歯周病の経緯を確認した。摂食量はサンプルＩを除きコエンザイムＱ１０の１日摂取量が３０ｍｇになるように調整した。
【００５３】
【表１１】
2007077023.tif 000012
【００５４】
上記の結果から明らかなように、本発明の実施例３〜９において、長期口腔内に滞留する食品、医薬製剤の効果が認められた。