(57)【要約】    【課題】  長期にわたって安全且つ簡便に投与し得、高インスリン血症を改善する効果に優れる高インスリン血症改善剤の提供。    【解決手段】  ドナリエラ［Dunaliella salina (Dunal) Teodoresco］藻体の乾燥物を用いた、ドナリエラを含有してなる高インスリン血症改善剤。本発明の高インスリン血症改善剤を経口投与により、インスリンの感受性が良化してインスリンの分泌が抑えられ、インスリン抵抗性に伴う糖尿病、高血圧、脂質代謝異常及びこれらの疾患に伴う動脈硬化症など各種疾患が改善され又は予防される。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドナリエラを含有してなる高インスリン血症改善剤。
【請求項２】
インスリン抵抗性に伴う高インスリン血症を改善するものである請求項１記載の高インスリン血症改善剤。
【請求項３】
ドナリエラ藻体の乾燥物を用いたものである請求項１又は２記載の高インスリン血症改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高インスリン血症改善剤、特に、インスリン抵抗性に伴う高インスリン血症を改善する高インスリン血症改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
肥満は、現代社会において避けられない身体状態であり、糖尿病、高脂血症、痛風、動脈硬化性疾患、高血圧などにつながり得る。このような肥満或は肥満に伴う疾病の治療や予防のためには、長期にわたる食事療法や運動療法の実践および／または長期にわたる治療用薬物の投与の必要がある。
【０００３】
肥満に関連のある内分泌ホルモンであるインスリンは、血中グルコース濃度を低下させる作用がある。肥満者においては、ブドウ糖負荷試験を行うとインスリン分泌は充分あるにもかかわらず、耐糖能は低下を示す。インスリンを投与しても、正常体重者に比べて肥満者の血糖降下は弱い。このように、インスリンの血糖降下能力が低下したインスリン抵抗性を示す状態では、膵臓のＢ細胞はインスリン分泌が不足していると認識し、更にインスリン分泌を高めて高血糖状態を正常化しようとする。しかし、このような状態が長く続くと、やがてＢ細胞のインスリン分泌能力は低下して高血糖状態はさらに深刻となるため、薬物による治療が必須となる。
【０００４】
抗肥満剤や抗肥満食品としては、例えば、特許第３４０４２３５号公報（特許文献１）に、柿果実の酵母発酵物を有効成分とし、抗肥満作用がα−アミラーゼ阻害作用及び／又はリパーゼ阻害作用に基づくものである抗肥満剤が記載され、特許第３４８７０７９号公報（特許文献２）には、乾燥固形分中大豆蛋白（大豆蛋白が加水分解率３０〜８０％の大豆蛋白加水分解物を含む）が粗蛋白として３０〜６０重量％、グリセリド油脂が２〜１０重量％、炭水化物が２７〜６０％並びにビタミン類及びミネラル類を含む抗肥食品が記載され、特許第３５９１１６６号公報（特許文献３）には、金線蓮全草の水抽出物を有効成分とする抗肥満剤が記載され、特許第３３０２３４６号公報（特許文献４）には、ライ麦、大麦、バナバ、桑葉及びサラシア・レティキュラタの粉末物及び抽出物からなる群から選択される１種以上並びにギムネマ・シルベスタ、ギムネマ・イノドラム、タラ及びトンブリの粉末物及び抽出物、難消化性デキストリン、ガラクトマンナン及び可溶性アルギン酸ナトリウムからなる群から選択される１種以上を含む抗糖尿病、抗肥満及び／又は食後血糖上昇抑制食品が記載され、また、特許第３０２９９０７号公報（特許文献５）には、４−コレステン−３−オンを含有することを特徴とする抗肥満剤が記載されている。
【０００５】
また、インスリン抵抗性に関しては、例えば、特許第２５１３３６０号公報（特許文献６）に、縮合複素環化合物を有効成分として含有する、高脂血症、高血糖症、肥満症、耐糖能不全、高血圧症、骨粗鬆症、悪液質、脂肪肝、糖尿病合併症、動脈硬化症、白内障等の予防薬および／または治療薬、および上記疾病以外の妊娠糖尿病、多嚢胞卵巣症候群等のようなインスリン抵抗性に起因する疾病の予防薬および／または治療薬が記載され、特許第３３５７３７８号公報（特許文献７）には、インシュリン抵抗性症状においてインシュリンの作用を増加させることに関し、優れた作用を示す新規なアリールアルキル−またはアリールオキシアルキル−置換オキシランカルボン酸が記載されている。
【０００６】
このように抗肥満剤、抗肥満食品、インスリン抵抗性に関する治療薬等については、従来より種々提案されている。しかしながら、インスリン抵抗性を改善し得る薬剤や食品等についての要望は、今後ますます高まることと予想される。
【特許文献１】特許第３４０４２３５号公報
【特許文献２】特許第３４８７０７９号公報
【特許文献３】特許第３５９１１６６号公報
【特許文献４】特許第３３０２３４６号公報
【特許文献５】特許第３０２９９０７号公報
【特許文献６】特許第２５１３３６０号公報
【特許文献７】特許第３３５７３７８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、従来技術に存した上記のような課題に鑑み行われたものであって、その目的とするところは、長期にわたって安全且つ簡便に投与し得、高インスリン血症を改善する効果に優れる高インスリン血症改善剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成する本発明の高インスリン血症改善剤は、インスリン抵抗性に伴う高インスリン血症等の高インスリン血症を改善するものであって、ドナリエラを含有してなるものである。  本発明の高インスリン血症改善剤は、ドナリエラ藻体の乾燥物及び水、アルコールなどの各種溶媒抽出物、及びそれらの精製物を用いたものとすることができる。ドナリエラ藻体の乾燥物自体であってもよく、ドナリエラ藻体の乾燥物に一般的な処理を加えたものであってもよい。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の高インスリン血症改善剤は、長期に亙って安全且つ簡便に経口投与し得、インスリン抵抗性に伴う糖尿病、高血圧、脂質代謝異常及びこれらの疾患に伴う動脈硬化症など各種疾患の改善又は予防に効果がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明におけるドナリエラ（Dunaliella）は、緑藻類オオヒゲマワリ目に属し、例えば、Dunaliella parva、Dunaliella primolecta、Dunaliella salina (Dunal) Teodoresco、Dunaliella terti、Dunaliella tertiolecta、Dunaliella bardawil等を挙げることができる。本発明に最も適しているのは、Dunaliella salina (Dunal) Teodorescoである。
【００１１】
本発明の高インスリン血症改善剤は、例えば、ドナリエラ藻体の乾燥粉末等の乾燥物を、各種基準固体、半流動体、又は液体中に分散又は溶解させて用いることができる。
【００１２】
本発明の高インスリン血症改善剤の成人に対する投与量は、ドナリエラ藻体の乾燥物を基準とした場合、１日当り０．１乃至４０ｇ程度が適当である。
【００１３】
本発明の高インスリン血症改善剤における経口投与の形態に特に限定はないが、好ましくは、栄養食品、栄養補助食品、粉末、顆粒剤、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、又は飲料用液体の形態である。
【００１４】
また種々の形態を形成する上で、各種賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤、可塑剤等を適宜用いることができる。
【００１５】
賦形剤の例としては、糖類（乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニトール）、デンプン（バレイショ、コムギ、トウモロコシ）、無機物（炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム）、結晶セルロース、植物末（カンゾウ末、ゲンチアナ末）等を挙げることができる。
【００１６】
結合剤の例としては、デンプンのり液、アラビアゴム、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、メチ／レセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、カルポキシメチルセルロース（ＣＭＣ）等を挙げることができる。
【００１７】
崩壊剤の例としては、デンプン、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、ＣＭＣ・Ｎａ、ＣＭＣ・Ｃａ、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウム等を挙げることができる。
【００１８】
滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油等を挙げることができる。
【００１９】
コーティング剤の例としては、糖衣（白糖、ＨＰＣ、セラック）、膠衣（ゼラチン、グリセリン、ソルビトール）、フイルムコーティング〔ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ＥＣ、ＨＰＣ、ＰＶＰ〕、腸溶性コーティング〔ヒドロキシプロビルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）〕等を挙げることができる。
【００２０】
着色剤の例としては、水溶性食用色素、レーキ色素）等を挙げることができる。矯味剤の例としては、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニトール）等を挙げることができる。矯臭剤の例としては、芳香性精油類）、光線遮断剤（酸化チタン）等を挙げることができる。可塑剤の例としては、フタル酸エステル類、植物油、ポリエチレングリコール）等を挙げることができる。
【実施例】
【００２１】
高インスリン血症改善試験
【００２２】
１．被験物質
【００２３】
ドナリエラ［Dunaliella salina (Dunal) Teodoresco］の乾燥粉末を用いた
【００２４】
２．供試動物
【００２５】
４週齢のSlc:ddY (SPF)雄性マウスに、５週齢より１５週齢に至るまで高脂肪（下記餌組成表における対照群の組成による飼料）を負荷して飼育したマウスを対照群とドナリエラ投与群に分けて使用した。
【００２６】
３．餌組成表
【００２７】
【表１】
2007277099.tif 000002
単位：g
【００２８】
４．試験方法
【００２９】
対照群及びドナリエラ投与群に対し、それぞれ上記餌組成表に基づき調製した高脂肪食（対照群）及び被験物質を配合した高脂肪食（ドナリエラ投与群）、並びに水を、８週間にわたり自由に経口摂取させた。
【００３０】
１）血液生化学的検査
【００３１】
高脂肪食（対照群）及び被験物質を配合した高脂肪食（ドナリエラ投与群）を８週間投与した最終日よりマウスを１８時間以上摂水下で絶食させ、病理解剖学的検査（以下、「剖検」という。）に先立ちエーテル麻酔下で後大静脈よりヘパリンナトリウム（商品名：ノボヘパリン注1000、10000 U/10mL  アベンティスファーマ社）を０．０５ｍＬ入れたシリンジを用いて採血を実施した。採血した血液に対し４℃で１０分間にわたり３０００ｒｐｍで遠心分離処理を行なうことにより、血漿を分画した。得られた血漿について、次の項目（Glu：グルコース）を測定した。
【００３２】
【表２】
2007277099.tif 000003
【００３３】
２） 内分泌検査
【００３４】
前記血漿は、直ちに−８０℃以下で冷凍保存した。この冷凍検体について次の項目を測定した。
【００３５】
【表３】
2007277099.tif 000004
【００３６】
Insulin測定方法は次のとおりである。
【００３７】
冷凍検体を４℃に設定された冷蔵庫に移し、解凍してその温度に保持した。
【００３８】
また、濃縮洗浄液を蒸留水で１０倍に希釈すると共に、ビオチン結合抗インスリン抗体を検体希釈用緩衝液で４０００倍に希釈し、インスリン標準溶液を検体希釈用緩衝液で２倍から１２８倍に段階希釈した。
【００３９】
次いで、希釈した前記洗浄液でプレートを４回洗浄し、各ウェルにビオチン結合抗インスリン抗体を４５μＬ／ｗｅｌｌの割合で分注後、それぞれ撹拌した。その後、各ウェルに対し、検体又は段階希釈したインスリン標準溶液（検量線作製用）を５μＬ／ｗｅｌｌの割合で分注し、それぞれ撹拌した後、室温で２時間インキュベートした。
【００４０】
インキュベート終了の約１５分前に、ペルオキシダーゼアビジン結合物を検体希釈用緩衝液で５００倍に希釈した。
【００４１】
インキュベート終了後、前記洗浄液でプレートを４回洗浄し、ペルオキシダーゼアビジン結合物を各ウェルに対し５０μＬ／ｗｅｌｌの割合で分注後、それぞれ撹拌し、次いで、室温で３０分間インキュベートした。
【００４２】
インキュベート終了後、プレートを洗浄液で４回洗浄し、発色液（ＴＭＢ）を各ウェルに対し５０μＬ／ｗｅｌｌの割合で分注後、それぞれ撹拌し、次いで、室温で３０分間インキュベートした。
【００４３】
インキュベート終了後、洗浄せずに反応停止液を各ウェルに対し５０μＬ／ｗｅｌｌの割合で分注後、それぞれ撹拌し、直ちにマイクロプレートリーダーでそれぞれの吸光度を測定した。吸光度測定における測定波長は、主波長λ１＝４５０ｎｍ、副波長λ２＝６２０ｎｍに設定した。
【００４４】
４．試験結果
【００４５】
１）血液生化学的検査
【００４６】
血漿グルコース濃度は、対照群において１２７．８±８．１ｍｇ／ｄＬ、ドナリエラ投与群では１２３．９±７．６ｍｇ／ｄＬを示した。
【００４７】
２）内分泌検査
【００４８】
血漿インスリン濃度は、対照群において３．２９±０．６５ｎｇ／ｍＬ、ドナリエラ投与群では１．２６±０．２３ｎｇ／ｍＬを示した。ドナリエラ投与群における血漿インスリン濃度は、対照群と比較して６１．６３％の顕著な減少が認められた。
【００４９】
３）２３週齢のSlc:ddY雄性マウスを標準的な固形飼料（非高脂肪食）で飼育した場合、血漿グルコース濃度及び血漿インスリン濃度はそれぞれ１１０．５±６．５ｍｇ／ｄＬ及び０．２８±０．１９ｎｇ／ｍＬであった。
【００５０】
すなわち、本試験において高脂肪を負荷した対照群は、１８時間の絶食下で採血したにもかかわらず血漿グルコース濃度が高く、血漿インスリン濃度が非常に高いことがわかる。
【００５１】
従って、対照群の動物は、大量のインスリンが分泌されているにもかかわらず、血漿グルコース濃度を十分に低下させることができない状態にあり、この状態は、いわゆるインスリン抵抗性による高インスリン血症の状態であると認められた。
【００５２】
一方、ドナリエラ投与群における血漿インスリン濃度が対照群と比較して顕著に低下したことは、ドナリエラの投与によりインスリンの感受性が良化してインスリンの分泌が対照群より少量で抑さえられ、インスリン抵抗性に伴う高インスリン血症が改善されたものと認められた。