(57)【要約】【課題】日常生活の中で自然に摂取することができるアレルギー体質改善組成物を提供する。【解決手段】ガラクトオリゴ糖を主成分として含有することを特徴とするアレルギー体質改善組成物、さらにそれを用いた飲食物。ガラクトオリゴ糖はすでに、特定保健用食品など健康を志向した食品に広く用いられており、安全性が十分に確立された素材であるため、日常生活の中で自然に、長期間摂取することが可能である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般式で表されるガラクトオリゴ糖を主成分とするアレルギー体質改善組成物。
Gal-(Gal)n-Glc (n=1〜3、β-1,4結合)
【請求項２】
請求項１記載のアレルギー体質改善組成物を含有する飲食物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アレルギー疾患の予防あるいは治療に有効な、アレルギー体質改善組成物に関するものである。詳細には、ガラクトオリゴ糖を主成分とするアレルギー体質改善組成物に関するものである。さらにそれを用いた飲食物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年我が国では、花粉症やアトピー性皮膚炎など様々なアレルギー疾患を患う患者が著しく増加し、国民的な問題となっている。アレルギー疾患の発生機序は複雑であり、未だ解明されていない部分も多いが、免疫調節系の乱れにその原因があることが徐々にわかってきている。免疫調節にはヘルパーT細胞が重要な働きをするが、このヘルパーT細胞にはTh1細胞とTh2細胞の2種類があり、それぞれがサイトカインの産生を通して細胞性免疫と液性免疫を制御している。Th1細胞とTh2細胞は、それぞれの生産するサイトカインによって互いの活性化を抑制し、バランスを保っているが(Th1/Th2バランス)、なんらかの原因でTh2細胞の誘導が強くなるとアレルギーを発症する。
Th2細胞の生産するIL-4やIL-13はB細胞を刺激し、IgEを生産させる。IgEがアレルゲンと結合しさらに高親和性IgEFcレセプターに結合してマスト細胞上で架橋すると、ヒスタミンなどのケミカルメディエーターが遊離する。また血中から組織に浸潤した好酸球もTh2細胞が作るサイトカインに活性化されて、各種メディエーターを分泌する。これらメディエーターが粘液分布亢進や平滑筋収縮などを起こし、アレルギー症状を誘導すると考えられている。
一般に、胎児期や新生児期の免疫系はTh2細胞に偏っており、生後の成長に伴ってTh1/Th2バランスが構築されていく。このバランスの正常な発達には、細菌感染や腸内フローラからの刺激が必須と考えられている。日本を初めとする先進国における近年のアレルギー疾患罹患率の増加は、衛生環境の改善による感染症の減少や、正常な腸内フローラの形成の遅れが影響しているのではないかとの仮説が提唱されている(衛生仮説)。
【０００３】
アレルギー疾患への対策としては、抗ヒスタミン薬、ステロイド剤などの薬剤投与や、少量のアレルゲンを長期間投与してに反応を徐々に弱める減感作療法、アレルゲンとの接触を避けるための食事療法、マスクの着用などがあるが、これらには副作用や長期に渡る治療の必要性、QOLの低下などの問題があるため、もっと手軽な方法として、摂取することで症状を改善することのできる食品、食品素材の開発も盛んに進められている。
【０００４】
アレルギー症状を改善する食品としては、β-グルカンを含む食品や特定の乳酸菌を含む食品などの開発が行われている。また、イソマルトオリゴ糖やラフィノース、メリビオースなど一部のオリゴ糖についても研究が進められている(特許文献１、２、３、非特許文献１、２)。しかしながら、これらとは構成糖や結合様式が異なり、生体内での分解様式や分解されて生じる糖も異なっているガラクトオリゴ糖については報告はなく、これがアレルギー症状を改善する効果を有するかどうかは全くわかっていない。
【０００５】
特許文献４には、ガラクトース残基を有するオリゴ糖の、免疫調節剤としての外用薬利用について述べられている。これはこのオリゴ糖が、エラスチンペプチドによる受容体を介したリンパ球の活性化および増殖を阻害する作用に基づいているが、この方法には、常にリンパ球の周囲に十分な量の当該オリゴ糖を存在させなければならないために投与法が制限されること、炎症反応を緩和するのみで過剰な免疫反応を根本的に防止、改善するものではないことなどの問題点がある。またこの特許文献では、外用薬としての非経口的な利用が述べられているだけで、本発明に示した経口摂取による利用については全く触れられていない。
【特許文献１】特開2001-288093
【特許文献２】特開2003-40779
【特許文献３】特開2005-281298
【特許文献４】特表2000-516591
【非特許文献１】第59回日本栄養・食糧学会大会講演要旨集  p113
【非特許文献２】British Journal of Nutrition (2002), 88, 421-426
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、日常生活の中で自然に摂取することができるアレルギー体質改善組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、こうした課題を解決すべく、アレルギーの発症において中心的な役割を担うIgEの産生を抑制する物質を鋭意探索した結果、ガラクトオリゴ糖にIgE産生抑制機能があることを見出した。
【０００８】
さらにガラクトオリゴ糖の免疫調節について検討を重ねたところ、ガラクトオリゴ糖がサイトカインIL-4の生産を低減させるという知見を得た。IL-4はTh2細胞が生産するサイトカインであり、ナイーブT細胞からTh2細胞自身への誘導を促進するとともに、B細胞を刺激してIgEの生産を促す作用をもっている。またガラクトオリゴ糖が、IgGのサブタイプの一つでありTh2側に制御されるIgG1の生産を低減させることも判明した。
【０００９】
こうした検討結果より、ガラクトオリゴ糖はTh2側に偏ったTh1/Th2バランスを改善することでIgEの産生を抑制し、アレルギーの発症を抑え、アレルギー体質を改善する機能を持つという重要な知見を得ることができ、発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち本発明は、ガラクトオリゴ糖を主成分として含有することを特徴とするアレルギー体質改善組成物、およびそれを用いた飲食物に関するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明で用いるガラクトオリゴ糖は、グルコースに複数のガラクトースが結合した構造のオリゴ糖であり、下記の一般式で表される。
Gal-(Gal)n-Glc  (n=1〜3、β-1,4結合)
【００１２】
こうしたガラクトオリゴ糖は、ラクトースにβ-ガラクトシダーゼを作用させることで生産することができ、実際に工業生産され、市販されている。ただし、本発明のガラクトオリゴ糖は生産方法を限定するものではなく、酵素法以外の方法で生産されたものでも用いることができる。
【００１３】
本発明で用いるガラクトオリゴ糖は必ずしも高純度の精製品である必要はなく、他の糖類との混合物なども用いることができる。例えばカップオリゴ(日新製糖(株))は、全体の70%程度を占めるガラクトオリゴ糖 (そのうち大部分が三糖であり、四糖、五糖も少量含まれる)に、原料ラクトースを初めとする二糖類とわずかな単糖類が混合した組成物であるが、本発明のアレルギー体質改善組成物として問題なく用いることができる。
【００１４】
本発明のガラクトオリゴ糖を主成分とするアレルギー体質改善組成物は、その形態に制限はなく、例えば塊状、粉状、液状など、使用者の必要に合わせた形態で用いることができる。また、それを用いた飲食物の具体的な例としては、甘味料、清涼飲料、乳酸菌飲料、ヨーグルト、パン、各種サプリメントなどをあげることができる。
【００１５】
本発明で用いるガラクトオリゴ糖の使用量は、年齢、体質、症状、体重、投与方法などによって影響を受けるが、通常成人では一日あたり0.1〜20gが望ましい。
【００１６】
ガラクトオリゴ糖には整腸作用、脂質代謝改善作用、ミネラル吸収作用が認められており、特定保健用食品を初めとする健康を志向した食品に広く用いられている。また免疫系に対する効果として、腸管免疫賦活効果が本発明者らによって見出されている(特願2005-119136)。さらにガラクトオリゴ糖はヒトの母乳中に含まれる成分でもあることから、その安全性は十分に確立されている。
【００１７】
次に、実施例を示して具体的に本発明を説明するが、本発明は実施例により限定されるものではない。
【実施例１】
【００１８】
ガラクトオリゴ糖によるアレルギー抑制効果
卵白アルブミンをマウスの腹腔内に投与することでアレルギー状態を誘導した。血清および脾臓細胞培養液中のIgE抗体、IgG1抗体、各種サイトカインを定量することで、飼料に混合して与えたガラクトオリゴ糖のアレルギー体質改善効果を評価した。
【００１９】
(実験材料および方法)
1. 実験動物の飼育  実験動物としては、6週齢の雌性BALB/cマウス(東京実験動物(株))を購入して用いた。ガラクトオリゴ糖としては、カップオリゴＰ(日新製糖(株)、ガラクトオリゴ糖分70%)を用いた。マウスは、コントロール飼料群とガラクトオリゴ糖摂取群(カップオリゴＰ5.0%添加飼料群)の２群(1群6匹)に分けた。表1に示した各群それぞれの飼料を与えて飼育した。飼料および飲水は自由摂取させた。
【００２０】
【表１】
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【００２１】
2. アレルギー状態の誘導  飼育開始３週間後に、卵白アルブミン(OVA)とImject Alum(PIERCE)の混合液200μl(OVA溶液：Imject Alum=３：１の割合で混合。混合液200μl中のOVA含有量20μg)をマウスに腹腔内投与し、アレルギー状態を誘導した。
【００２２】
3. 解剖、採血、脾臓細胞培養  OVA投与の2週間後にマウスをエーテル麻酔下で解剖し、後大静脈より採血した。得られた血液を遠心分離し、血清を調製した。脾臓細胞を物理的処理によって調製し、1E7 cell/mlに細胞数を合わせた後、48well培養プレートに480μl/wellずつ入れて培養を行った。すべてのwellに5mg/mlのOVA溶液を10μl添加した。培地にはRPMI1640培地を用いた。培養3日および7日で培養液を回収した。
【００２３】
4. 抗体およびサイトカインの定量  IgE抗体、IgG1抗体、各種サイトカインの定量は市販のキットを用いたELISA法によって行った。
【００２４】
5. 統計解析  実験データは平均値±標準偏差で表示した。結果の統計解析はStudent’s-tの方法によって行い、p≦0.05の場合に有意な差であると判定した。
【００２５】
(結果)
IgE量  図1に示したように、血清中の総IgE量はコントロール飼料群に比べガラクトオリゴ糖摂取群で有意に低くなった(p=0.024)。脾臓細胞の7日間培養液を分析した結果も、同様に有意な低下を示した(p=0.05、図2)。図3に示したように、血清中に含まれるOVAに特異的なIgEの量は、有意差は得られなかったものの、ガラクトオリゴ糖摂取群で低くなる傾向が見られた。
【００２６】
IgG1量  図4-6に示したように、IgGのサブタイプの一つでTh2側に制御されるIgG1の量を比較したところ、血清や脾臓細胞培養液中の総IgG1ではあまり明確な差がなかったが、脾臓細胞培養液に含まれるOVAに特異的なIgG1はガラクトオリゴ糖摂取群で有意に低下した(p=0.007)。
【００２７】
サイトカイン量  図7-9に示したように、脾臓細胞の3日間培養液に含まれる各種サイトカインを分析したところ、Th1側のIFN-γ、IL-12では群間に明瞭な差は認められなかったが、Th2側のIL-4はガラクトオリゴ糖摂取群で有意に低下した(p=0.03)。
【００２８】
以上の結果より、ガラクトオリゴ糖がTh2側に傾いたTh1/Th2バランスを改善し、IgE抗体産生量を低減することでアレルギー体質を改善する作用を持つことが明らかになった。
【実施例２】
【００２９】
カップオリゴＰ(日新製糖(株)、ガラクトオリゴ糖分70%)  100gと高甘味度甘味料アスパルテーム  0.35gをよく混合し、砂糖と同程度の甘味を有するテーブルタイプの甘味料100gを製造した。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの血清総IgEに与える影響を示したグラフである。
【図２】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの脾臓細胞培養液総IgEに与える影響を示したグラフである。
【図３】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの血清OVA特異的IgEに与える影響を示したグラフである。コントロール群中のある1匹のマウスの値を1000U/mlと定義し、これに基づいて他のマウスの値を換算して表した。
【図４】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの血清総IgG1に与える影響を示したグラフである。
【図５】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの脾臓細胞培養液総IgG1に与える影響を示したグラフである。
【図６】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの脾臓細胞培養液OVA特異的IgG1に与える影響を示したグラフである。コントロール群中のある1匹のマウスの値を1000U/mlと定義し、これに基づいて他のマウスの値を換算して表した。
【図７】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの脾臓細胞培養液IFN-γに与える影響を示したグラフである。
【図８】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの脾臓細胞培養液IL-12に与える影響を示したグラフである。
【図９】飼料に添加したガラクトオリゴ糖が、OVAを腹腔内投与したマウスの脾臓細胞培養液IL-4に与える影響を示したグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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