(57)【要約】【課題】  天然抽出物を含有した血小板凝集抑制作用剤を提供する。【解決手段】  エンメイソウ、セキセツソウ、ワイルドタイム、タチジャコウソウ及びブッチャーズブルームを水、親水性有機溶媒またはそれらの混合物で抽出処理して得られる抽出物が血小板凝集抑制作用を有することを利用する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
エンメイソウ、セキセツソウ、ワイルドタイム、タチジャコウソウ及びブッチャーズブルームの抽出物を有効成分として少なくとも１種以上含有することを特徴とする血小板凝集抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血小板凝集抑制剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
炎症性の疾患、例えば、接触性皮膚炎（かぶれ）、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れに伴う各種皮膚疾患等の原因や発症機構は多種多様であるが、その原因として血小板凝集によるものが知られている。
【０００３】
血小板凝集は、アラキドン酸カスケードのホスホリパーゼＡ２ の活性化を招き、それによりロイコトリエンＢやプロスタグランジンＥ２ 等が放出されて起炎物質となる。そこで、血小板の凝集を阻害・抑制する物質を天然物から抽出して、アレルギー疾患性疾患や炎症性疾患を予防・治療することが試みられている。例えば、カナリウム属植物の抽出物（特許文献１参照）、コウサンフウ抽出物（特許文献２参照）、藤茶抽出物（特許文献３参照）、ツルゲンゲ抽出物（特許文献４参照）、ノゲイトウ抽出物（特許文献５参照）、ドバイモ抽出物（特許文献６参照）等が報告されている。
【０００４】
しかしながら、安全性、及び生産性に優れ、かつ安価でありながら、高い血小板凝集抑制作用を有する天然系の抗炎症剤に対する需要者の要望は極めて強く、未だ十分満足し得るものが提供されていないのが現状である。
【０００５】
【特許文献１】特開２００２−５３４７８号公報
【特許文献２】特開２００２−５３４７７号公報
【特許文献３】特開２００１−９７８７３号公報
【特許文献４】特開２００５−２２０１００号公報
【特許文献５】特開２００５−２２０１０１号公報
【特許文献６】特願２００４−２４３００１号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、 天然物の中から血小板凝集抑制作用を有するものを見出し、それを有効成分とする血小板凝集抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前記課題を解決するために本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、エンメイソウ、セキセツソウ、ワイルドタイム、タチジャコウソウ及びブッチャーズブルーム抽出物が血小板凝集抑制作用を有し、血小板凝集抑制作用剤として有効であることを知見した。
【発明の効果】
【０００８】
本発明により、血小板凝集抑制剤が提供される。本発明の血小板凝集抑制剤は皮膚の炎症を予防及び／又は改善するのに有用である。
【０００９】
また、本発明により、血小板凝集抑制作用を有する安全性に優れた皮膚化粧料及び飲食品が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明において、エンメイソウ（学名：Ｉｓｏｄｏｎ  ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）とは、シソ科に属し、日本に広く分布しており、容易に入手することができる。抽出原料として用いるエンメイソウの構成部位は、特に限定されるものではないが、中でも地上部を抽出原料として用いることが好ましい。
【００１１】
セキセツソウ（学名：Ｃｅｎｔｅｌｌａ  ａｓｉａｔｉｃａ）とは、セリ科に属し、本州西南部、四国、九州、沖縄、朝鮮半島、台湾、中国などに分布する多年草で、これらの地域から容易に入手可能である。抽出原料として用いるセキセツソウの構成部位は特に限定されるものではないが、中でも葉・茎を抽出原料として用いることが好ましい。
【００１２】
ワイルドタイム（学名：Ｔｈｙｍｕｓ  ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）とは、シソ科に属し、ヨーロッパ、北西アジアを原産とし、その他の地域にも導入され、帰化しており、これらの地域から容易に入手可能である。抽出原料として用いるワイルドタイムの構成部位は特に限定されるものではないが、中でも地上部を抽出原料として用いることが好ましい。
【００１３】
タチジャコウソウ（学名：Ｔｈｙｍｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ）とは、シソ科に属し、スペイン、フランス、ドイツ、地中海沿岸で自生または栽培されており、これらの地域から容易に入手可能である。抽出原料として用いるタチジャコウソウの構成部位は、特に限定されるものではないが、中でも地上部を抽出原料として用いることが好ましい。
【００１４】
ブッチャーズブルーム（学名：Ｒｕｓｃｕｓ  ａｃｕｌｅａｔｕｓ）とは、ユリ科に属し、ヨーロッパを原産とし、これらの地域から容易に入手可能である。抽出原料として用いるブッチャーズブルームの構成部位は特に限定されるものではないが、中でも根茎を抽出原料として用いることが好ましい。
【００１５】
抽出原料として使用する前記の植物は、乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用い粉砕して溶媒抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。各抽出原料は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、抽出原料の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１６】
抽出処理の際には、抽出溶媒として極性溶媒を使用するのが好ましい。抽出原料に含まれる血小板凝集抑制作用を示す成分は、極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって容易に抽出することができる。
【００１７】
好適な抽出溶媒の具体例としては、水、低級脂肪族アルコール、含水の低級脂肪族アルコール等を例示でき、これらを単独で、又はこれら２種以上の混合物として使用することができる。好適な低級脂肪族アルコールの具体例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール等を例示することができる。
【００１８】
抽出溶媒として使用し得る水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００１９】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比を９：１〜１：９（質量比）とすることができる。
【００２０】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に従って行うことができる。抽出処理の際には、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下において任意の装置を使用することができる。
【００２１】
例えば、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料を投入し、ときどき攪拌しながら可溶性成分を溶出させる。この際、抽出条件は抽出原料等に応じて適宜調整し得るが、抽出溶媒量は通常、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）で、抽出時間は通常１〜３時間、抽出温度は通常、常温〜９５℃である。
【００２２】
抽出処理により可溶性成分を溶出させた後、ろ過して抽出残渣を除くことによって、抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００２３】
得られた抽出液はそのままでも血小板凝集抑制剤として使用することができるが、濃縮液又はその乾燥物としたものの方が利用しやすい。また、抽出原料となる植物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、化粧料に添加する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００２４】
精製は、具体的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができる。
【００２５】
エンメイソウ、セキセツソウ、ワイルドタイム、タチジャコウソウ、ブッチャーズブルーム、レイシからの抽出物は、そのままでも血小板凝集抑制剤として使用することができるが、常法に従って製剤化して提供することもできる。製剤化する場合、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任意の助剤を添加することができる。
【００２６】
本発明の血小板凝集抑制剤は皮膚の炎症を予防及び／又は改善することができると共に、皮膚に適用した場合の安全性に優れているため、皮膚化粧料に配合するのに好適である。皮膚化粧料には、血小板凝集抑制剤のみを配合してもよいし、その他の有効素材を組み合わせて配合してもよい。
【００２７】
本発明の血小板凝集抑制剤を配合し得る皮膚化粧料は特に限定されないが、その具体例としては、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、入浴剤等を例示することができる。
【００２８】
本発明の血小板凝集抑制剤の配合量は、皮膚化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができるが、好適な配合率は標準的な抽出物に換算して約０．０１〜１０質量％である。
【００２９】
本発明の血小板凝集抑制剤を配合する皮膚化粧料には、血小板凝集抑制作用の妨げにならない限り、皮膚化粧料の製造に通常使用される各種主剤及び助剤、その他任意の助剤を配合することができ、皮膚の老化防止・改善に関し、本発明の血小板凝集抑制剤のみが主剤となるものに限られるわけではない。
【００３０】
本発明の血小板凝集抑制剤は皮膚の炎症を予防及び／又は改善することができると共に、安全性に優れているため、飲食品に配合するのに好適である。その場合の配合量は、添加対象飲食品の一般的な摂取量を考慮して成人１日当たりの抽出物摂取量が約１〜１０００ｍｇになるようにするのが適当である。
【００３１】
本発明の血小板凝集抑制剤を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、 清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物等が挙げられる。
【００３２】
以上説明した本発明の血小板凝集抑制剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【実施例】
【００３３】
以下、実施例を示して本発明を更に詳細に説明する。なお、本発明の範囲はこれらの実施例等に限定されるものではない。
【００３４】
〔製造例１〕
エンメイソウの地上部、セキセツソウの葉及び茎、ワイルドタイムの地上部、タチジャコウソウの地上部及びブッチャーズブルームの根それぞれ１００ｇに抽出溶媒として水、５０％エタノール又はエタノールを１０００ｍｌ加え、還流抽出器で８０℃にて２時間抽出し、濾過した。残渣について更に同様の抽出処理を行った。得られた抽出液を合わせて減圧下に濃縮を行い、乾燥して抽出物を得た。抽出物の収率は表１に示す。
【００３５】
［表１］抽出物の収率
原料         水（％） ５０％エタノール（％） エタノール（％）
エンメイソウ            １９．８            １６．２                １１．６
セキセツソウ              ７．８              ５．２                  ２．０
ワイルドタイム            ８．６              ５．５                  ３．２
タチジャコウソウ          ８．８              ５．２                  ２．９
ブッチャーズブルーム    ４４．２            ３８．０                ２４．６
【００３６】
〔試験例１〕血小板凝集抑制作用試験
日本種白色家兎の血液に７７ｍＭ ＥＤＴＡを血液量の１／１０容量添加し、１０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して沈殿物を除いた。 上清を２１００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、沈殿した血小板を採取した。得られた血小板を血小板洗浄液に浮遊させ、２１００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。沈殿した血小板を採取し、血小板数が３０万個／μＬになるように血小板浮遊液に浮遊させた。上述のようにして調製した洗浄血小板浮遊液２２３μＬに塩化カルシウム溶液１μＬを加え、３７℃に１分間インキュベーションした。そこに試料溶液１μＬを加えてさらに２分間インキュベーションした後、１分間攪拌した。次いで凝集惹起剤として１０ｐｐｍコラーゲン溶液２５μＬを添加し、３７℃で１０分間インキュベーションした後、血小板凝集測定装置 ＰＡＭ１２ＣＬ（メバニクス株式会社製）を用いて、凝集率Ａを測定した。別に、試料溶液の代わりに試料溶液の溶媒を添加し、上記と同様に操作し、凝集率Ｂを測定し、次式により血小板擬集抑制率を求めた。
血小板凝集抑制率（％）＝｛（Ｂ−Ａ）／Ｂ｝×１００
但し、Ａ：凝集惹起剤添加、試料溶液添加時の凝集率
Ｂ：凝集惹起剤添加、試料溶液無添加時の凝集率
試料溶液の濃度を段階的に減少させて上記血小板凝集率を測定し、抑制率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（ｐｐｍ）を内挿法により求めた（ＩＣ５０値が小さいほど凝集抑制作用が強い）。
【００３７】
［表２］ 血小板凝集抑制作用
被験試料                     ＩＣ５０（ｐｐｍ） 
エンメイソウ水抽出物                                      １９８
エンメイソウ５０％エタノール抽出物                        ２０３
エンメイソウエタノール抽出物                              ２５６
セキセツソウ水抽出物                                        ５８
セキセツソウ５０％エタノール抽出物                          ７０
セキセツソウエタノール抽出物                              １１４
ワイルドタイム水抽出物                                      ７６
ワイルドタイム５０％エタノール抽出物                        ９０
ワイルドタイムエタノール抽出物                            １３８
タチジャコウソウ水抽出物                                  １５６
タチジャコウソウ５０％エタノール抽出物                    ２０９
タチジャコウソウエタノール抽出物                          ２５５
ブッチャーズブルーム水抽出物                                ３７
ブッチャーズブルーム５０％エタノール抽出物                  ５０
ブッチャーズブルームエタノール抽出物                        ８９
【００３８】
表２に示すように、エンメイソウ、セキセツソウ、ワイルドタイム、タチジャコウソウ及びブッチャーズブルーム抽出物は濃度依存的に血小板凝集抑制作用を示すことが確認された。