(57)【要約】【課題】  不適切な食生活又は運動不足に起因する生活習慣病を予防又は改善する作用を有する食品素材の提供【解決手段】  水溶性ポテトペプチドを含む、生活習慣病の予防食品又は生活習慣病の改善食品【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶性ポテトペプチドを含む、生活習慣病の予防食品又は生活習慣病の改善食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、水溶性ポテトペプチドの機能性食品としての利用に関する。
【背景技術】
【０００２】
生活習慣病には、さまざまな病気や症状があり、どんな病気が発症するか、また発症後にどのような速さで進行するかは、個人の体質や生活習慣によって異なる。生活習慣病の恐ろしい点は、その多くが長い期間にわたって自覚症状がほとんどなく、知らず知らずのうちに症状が進行していくことであり、たとえば、「高脂血症」「高血圧」「糖尿病」を挙げることができる。これらの病気は、そのまま放置しておくと、たとえば「動脈硬化」という血管の不調を引き起こし、やがて心臓病や脳卒中などの生命に関わる重大な病気につながる危険性が高まる。また、この３つの病気は単独で発症することもあるが、それぞれが原因とも結果ともなることで合併症を誘発することもあり、そうなると治療は困難の度合いを増し、いわゆる「生活の質（ＱＯＬ）」を極端に引き下げることになる。
【０００３】
したがって、高血糖、高インスリン血症、高脂血症等の生活習慣病発症のリスクファクターを改善するような生理機能性を有する食品成分の開発が広く待ち望まれている。
【０００４】
ダイズタンパク質は、血中のコレステロールやトリグリセリド濃度を低下させる脂質代謝調節作用を有することが古くから知られている。また、ジャガイモ由来のペプチド混合物（ポテトペプチド）がアンジオテンシン変換酵素阻害活性を有することも知られている（特許文献１）。しかし、ポテトペプチドの別の生理機能は知られていなかった。
【特許文献１】特開２０００−４７９９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
不適切な食生活又は運動不足に起因する生活習慣病を予防又は改善する作用を有する食品素材を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、上記課題を解決するために鋭意努力した結果、水溶性ポテトペプチドが、生活習慣病を予防又は改善する作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、水溶性ポテトペプチドを含む、生活習慣病の予防食品又は生活習慣病の改善食品に関する。
【０００７】
すなわち、本発明の水溶性ポテトペプチドは、ジャガイモ由来タンパク質をタンパク質分解酵素で消化して得ることができる。本発明の水溶性ポテトペプチドの分子量は、最大１０ｋＤａである。
【０００８】
本発明の水溶性ポテトペプチドの製造原料であるポテトプロテインとしては、馬鈴薯でん粉製造時に副成するポテトプロテインなど、従来公知のポテトプロテインであればどのようなものでも使用することができる。
【０００９】
本発明の水溶性ポテトペプチドは、ポテトプロテインを、タンパク質分解酵素で処理することによって得ることができる。タンパク質分解酵素は、任意の従来公知のタンパク質分解酵素を用いることができるが、好ましくは、「アルカラーゼ２．４Ｌ」（登録商標）や「フレーバーザイム」（登録商標）（ノボノルディスクインダストリー）を用いることができる。
【００１０】
本発明におけるポテトプロテインを原料に用いた水溶性ペプチドの製造においては、まずポテトプロテインの５〜１５重量％の水懸濁液にアルカリ剤、好ましくは、水酸化ナトリウムを加えてｐＨを６．０〜１２．０、好ましくは７．５〜８．０に調節する。
【００１１】
ｐＨを調節後８０〜９０℃に加熱することが、雑菌の混入防止及びポテトペプチドの変性による酵素反応促進の面から望ましい。
【００１２】
「アルカラーゼ２．４Ｌ」（登録商標）は、４０〜６０℃、好ましくは５０〜５５℃で作用させる。ｐＨが７付近まで低下した時点で、「フレーバーザイム」（登録商標）を添加して、これらの酵素を継続的に作用させる。
【００１３】
アルカリを加えてｐＨ７．５〜８．０に調節した１０重量％のポテトペプチドの水懸濁液を酵素処理する場合、まず８０〜９０℃に加熱後液温を５０℃まで冷却し、「アルカラーゼ２．４Ｌ」をポテトプロテイン１ｋｇあたり、１０アンソン単位以上添加して５０℃で１〜５時間反応させｐＨが７付近まで低下させ、続いて「フレーバザイムＬ」をポテトプロテイン１ｋｇあたり１５００ｕ（ユニット）以上添加し、さらに５０℃で１５時間以上反応させることにより、本発明の水溶性ポテトペプチドを得ることができる。
【００１４】
酵素処理後の反応液を８０℃以上に加熱し、反応液中の酵素を失活させた後、反応液中の不溶分を濾過によって除去する。得られた濾液中にはポテトペプチド中に混在する馬鈴薯特有のポリフェノールが含まれているため、濾液は緑がかった暗色を呈しており、このままでは外観上多様な用途に好ましく適用することができないことから、さらに精製することが望ましい。混在するポリフェノールは、微量金属、特に鉄と反応して呈色している場合が多く、活性炭による吸着脱色はほとんど効果がない。
【００１５】
そこで、イオン交換樹脂を利用すると、緑がかった暗色が除かれて、淡褐色の液が得られ、この液に少量の活性炭を加えて濾過すると、ほとんど無色に精製することができる。
【００１６】
このようにして得られた精製液を噴霧乾燥することにより、白〜淡黄色の粉末状の本発明の水溶性ポテトペプチドが高収率で得られる。得られた水溶性ポテトペプチドの分子量分布は、分子量１００〜５００のペプチドが約２０〜３０％、分子量５００〜３０００のペプチドが約７０〜８０％である。また、この水溶性ポテトペプチドをゲル濾過剤を用いて分画処理することにより所望の画分を得ることができる。
【００１７】
本発明の食品素材は、上記本発明に係るペプチド混合物を含むものであり、不適切な食生活または運動不足に起因する生活習慣病を予防および改善する作用を有する。上記生活習慣病としては、肥満、高脂血症、高血圧症または糖尿病の少なくともいずれかであればよい。
【００１８】
本発明の機能性食品は、上記本発明に係るポテトペプチドを含むものであればよい。したがって、当該ポテトペプチドのみからなる食品でもよく、当該ポテトペプチド以外の成分を含む食品でもよい。本発明のポテトペプチド以外の成分としては、脂質代謝調節作用を阻害しないものであれば特に限定されるものではない。具体的には、例えば、当該ポテトペプチド以外のジャガイモ成分、植物および動物性タンパク質、炭水化物、食物線維、脂質、各種ビタミン、ミネラル類等を挙げることができる。食品の形状についても特に限定されるものではなく、固体状、液体状、粉末状、ペースト状等様々な形状とすることができる。
【００１９】
本発明の機能性食品素材は、上記ポテトペプチドを含むものであるため、脂質代謝改善効果を有している食品である。したがって、当該食品は、不適切な食生活または運動不足に起因する生活習慣病を予防および改善する作用を有する。上記不適切な食生活または運動不足に起因する生活習慣病としては、肥満、高脂血症、高血圧症、糖尿病を挙げることができ、本発明の食品は肥満、高脂血症、高血圧症または糖尿病の少なくともいずれかを予防および改善する作用を有する。また、この生活習慣病予防改善効果は、具体的には
血中ＨＤＬコレステロール濃度の上昇、血中ＬＤＬコレステロール濃度の減少、血中中性脂肪濃度の低下の少なくともいずれかの作用、すなわち脂質代謝調節作用により得られる効果である。
【００２０】
本発明に係る食品の具体例としては、例えば、いわゆる栄養補助食品（サプリメント）として本発明に係る食品素材を含む錠剤、顆粒剤、散剤、ドリンク剤等を挙げることができる。これ以外に、当該食品素材を含む調味料、菓子、パン、惣菜、飲料水等を挙げることができる。
【００２１】
本発明に係る食品素材および食品、並びに医薬品はヒトを対象とするものであることはいうまでもないが、ヒトに限定されるものではなく、広く動物全般を対象とすることができる。特に、不適切な食生活や運動不足に陥っているイヌやネコ等の愛玩動物は対象として好適である。
【００２２】
また、本発明は、本発明に係るペプチド混合物を含み、肥満、高脂血症、高血圧症または糖尿病の少なくともいずれかを予防および改善する作用を有する医薬品にも関する。当該ペプチド混合物以外に含まれる成分としては、特に限定されるものではない。本発明の医薬品は経口的に投与できる剤形であることが好ましい。具体的には、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、ドリンク剤、シロップ剤等を挙げることができる。
【実施例】
【００２３】
以下本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
【００２４】
実施例１（ポテトペプチドの製造）
ポテトプロテイン４５０ｋｇに水４５００Ｌ及び水酸化ナトリウム２ｋｇを加え、５０℃で１０分間攪拌して懸濁させた。この懸濁液を１０分間放置し、上清約３０００Ｌを廃棄し、新たに水約３０００Ｌを加え、５０℃で１０分間攪拌して懸濁させ、この懸濁液を１０分間放置した。この懸濁液を１０分間放置し、上清約３０００Ｌを廃棄し、新たに水約３０００Ｌを加えた。この懸濁液を９０〜９５℃で１５分間加熱することによって、懸濁液を殺菌した。次いで、水２０００Ｌを加えた。
【００２５】
これに「アルカラーゼ２．４Ｌ」３ｇを加えて、攪拌しながら５０〜５２℃で４時間反応させたところ、反応液のｐＨは６．９であった。この反応液に、「フレーバザイム１０００Ｌ」）０．７５ｇを加え、攪拌しながら５０〜５２℃で、１６時間反応させた。反応終了後、９０〜９５℃に加熱し１５分間保持して酵素を失活させて１８時間静置放冷した。放冷後の反応液は、上澄部分が約１／３で、残余は軽質のコロイド様の不溶分であり、またそのｐＨは６．８であった。
【００２６】
上記放冷後の反応液に濾過助剤としてケイソウ土１０５ｋｇを加えて１５分間攪拌した後吸引濾過して、残渣を水洗し、黒ずんだ灰褐色の濾液７００ｍｌを得た。濾液を攪拌しながら酢酸１．２ｍｌを加えてｐＨ５．５に調整し、活性炭２０ｇを加えて１５分間攪拌した後吸引濾過し、残渣を水洗して濾液７４０ｍｌが得られたが、濾過途中から清澄だったものが徐々に黒ずんだ灰色に変わり、かつ、わずかに濁りを生じていた。この濾液を２００ｍｌになるまで減圧濃縮した後、凍結乾燥して灰色の乾燥物１１３ｋｇを得た。この乾燥物は水分０．８３重量％、強熱残分４．３重量％、全窒素１２．３重量％であった。
【００２７】
実施例２（ラットへの影響）
使用動物：７週齢のＦ３４４／ＤｕＣｒｊ雄ラット１５匹を日本チャールズリバー株式会社から購入した。飼育条件は、室温２３±１℃、湿度６０±５％、明暗周期１２時間（明０７：００、暗１９：００）とした。ラットはプラスチックケージ内で個別に飼育した。ラットは、Guide of the Care and Use of Laboratory Animalsに従って飼育した。
【００２８】
順化及び投与：ＡＩＮ９３Ｇを基本とし，試験食は２０％ポテトペプチド投与群、１０％ポテトペプチド＋１０％カゼインタンパク質投与群、２０％大豆ペプチド投与群、１０％大豆ペプチド＋１０％カゼインタンパク質投与群及び１０％ポテトタンパク質＋１０％カゼインタンパク質投与群について４週間経口投与した。対照群では２０％カゼインタンパク質を経口投与した。投与期間終了後、ラットをネンブタール麻酔により殺して，迅速に心臓採血し、肝臓及び盲腸を摘出した。摘出した肝臓及び盲腸を冷生理食塩水で洗浄し、乾燥した濾紙で水分を除去して重量を測定した後、−８０℃で凍結保存した。
【００２９】
【表１】
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【００３０】
血清脂質（測定方法及び結果）
血漿総コレステロール、ＨＤＬ−コレステロール、ＬＤＬ−コレステロール、ＶＬＤＬ−コレステロール、中性脂肪を測定した。血漿総コレステロール、ＨＤＬ−コレステロール、ＬＤＬ−コレステロールおよびＶＬＤＬ−コレステロールは酵素法（コレステロールオキシダーゼ・ＤＡＯＤ法）で、中性脂肪は酵素法（クリニメイトＴＧ−２試薬キット、第一化学薬品）により測定した。ＶＬＤＬ＋ＩＤＬ＋ＬＤＬコレステロール濃度を総コレステロール濃度とＨＤＬコレステロール濃度の差から求めた。それぞれのデータは平均値±標準偏差で表した。データ間の有意差検定はダンカンの多重検定で行った。
【００３１】
盲腸重量及び糞便脂質（測定方法及び結果）
糞便中の中性ステロール、胆汁酸、および肝臓コレステロールをGrundyらの方法で測定した。
【００３２】
結果
１）体重、摂食量、肝臓重量及び盲腸重量
表１に投与期間中のラットの体重増加量、摂食量、肝臓重量及び盲腸重量を示した。体重増加量は、２０％ポテトペプチド投与群において対照群と比較して有意に少ない値を示した。しかし、その他の投与群では対照群との比較で有意な差は見られなかった。また、摂食量に関しても、２０％ポテトペプチド投与群では、対照群と比較して有意に少なく、１０％ポテトペプチド投与群でも少ない値を示す傾向が見られた。その他の投与群においては対照群と比較して有意な差は見られなかった。食餌効率では２０％ポテトペプチド投与群で対照群と比べて値が低い傾向が見られたが、その他の投与群では有意な差は見られないか、増加傾向もしくは有意な増加が見られた。肝臓重量は各投与群間で有意な差は見られなかったが、盲腸重量においては２０％ポテトペプチド投与群及び１０％ポテトタンパク質投与群で有意に増加しており、１０％ポテトペプチド投与群及び１０％大豆ペプチド投与群でも増加する傾向が見られた。
【００３３】
【表２】
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【００３４】
２）血清脂質濃度の変動
図１に血清脂質濃度の変動を示した。血清総コレステロール濃度では２０％ポテトペプチド投与群では対照群と比較して、投与２週目から低い値を示す傾向が見られた。２０％大豆ペプチド投与群では投与期間後半で有意に低下した。しかしながら、１０％ポテトペプチド投与群、１０％大豆ペプチド投与群及び１０％ポテトタンパク質投与群では対照群と同様な挙動を示していた。
【００３５】
血清ＨＤＬ−コレステロール濃度では２０％ポテトペプチド投与群では投与期間を通して常に他の投与群と比較して有意に増加しており、１０％ポテトペプチド投与群でも２週目から対照群と比較して増加する傾向が見られ、４週目では有意に増加していた。しかし、２０％及び１０％大豆ペプチド投与群及び１０％ポテトタンパク質投与群では対照群との有意な差はみられなかった。
【００３６】
血清ＶＬＤＬ＋ＩＤＬ＋ＬＤＬ−コレステロール濃度では２０％ポテトペプチド投与群では対照群と比較して、投与期間を通して常に有意に低い値を示した。また２０％大豆ペプチド投与群でも、２０％ポテトペプチド投与群ほどではないが同じような傾向で低い値を示した。１０％大豆ペプチド投与群、１０％ポテトタンパク質投与群及び１０％ポテトペプチド投与群では対照群と比較して有意な差はみられなかった。
【００３７】
血清中性脂肪濃度では２０％ポテトペプチド投与群では２週目から対照群と比較して有意に低い値を示した。また、１０％ポテトタンパク質投与群でも２週目から対照群と比較して減少する傾向が見られ、４週目では有意に低い値を示した。しかし、２０％及び１０％大豆ペプチド投与群では対照群と比較して有意な差はみられなかった。
【００３８】
３）各組織における脂質濃度
表２に投与最終日の各組織における脂質濃度を示した。肝臓ではコレステロール濃度は各投与群において有意な差は見られなかった。しかし、全脂質濃度は２０％及び１０％大豆ペプチド投与群、１０％ポテトタンパク質投与群において対照群と比較して有意に低下していた。また、２０％及び１０％ポテトペプチド投与群では対照群と比較して有意な差は認められなかった。
【００３９】
【表３】
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【００４０】
糞便中の全脂質排泄量では対照群に比べて２０％大豆ペプチド投与群及び２０％ポテトペプチド投与群で有意に排泄を増加しており、特に２０％ポテトペプチド投与群では最も排泄を増加させていた。また、中性ステロール排泄では、コプロスタノール排泄が２０％ポテトペプチド投与群及び１０％ポテトタンパク質投与群において対照群と比較して有意に増加していた。コレステロール排泄はいずれの投与群においても有意な差はみられなかった。
【００４１】
糞便中への胆汁酸排泄量では、２０％大豆ペプチド投与群で他の投与群に比べ有意に排泄を増加させていた。その他の投与群間では差はみられなかった。
【００４２】
今回我々が用いたポテトペプチドはアミノ酸配列を決定していないが、大豆ペプチドと比較してアミノ酸組成が非常に類似していた（表３）。そのため、大豆ペプチドと同様な効果が期待できた。事実、糞便中への脂質排泄が増加することによって血清のＶＬＤＬ＋ＩＤＬ＋ＬＤＬ−コレステロール濃度及び中性脂肪濃度をカゼインタンパク質投与より有意に低下させる結果となった。さらにポテトペプチドでは大豆ペプチドと異なる作用として、血清ＨＤＬ−コレステロール濃度の有意な上昇作用がみられた。ラットの場合、血液内の主要なコレステロール輸送体はＨＤＬであるため、ＬＤＬが低下したことによりＨＤＬが相対的に増加した可能性が考えられる。
【００４３】
【表４】
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【産業上の利用可能性】
【００４４】
得られたポテトペプチドは水溶性であることから、加工し易く、オリゴアミノ酸であることから、呈味性が強く、お菓子、タレ等の味の強化剤として利用することができる。また、機能性を生かした健康食品用素材として利用することができ、食素材として幅広い用途を有する。
【００４５】
本発明の食品は、不適切な食生活又は運動不足に起因する生活習慣病を予防又は改善のために有用である。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】水溶性ポテトペプチド投与ラットの血清脂質への影響
【図１】
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