(57)【要約】【課題】  日焼け後の皮膚の黒化・しみ・そばかすなど色素沈着の予防および／または改善に極めて有効で、優れた美白効果を有するとともに、乾燥や肌荒れを予防および／または改善する効果をも併せ持ち、皮膚に総合的な美粧効果を付与し得る皮膚外用剤を提供する。【解決手段】  Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される１種または２種以上と、加水分解シルク蛋白質とを含有し、ｐHが５〜８であることを特徴とする皮膚外用剤。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される１種または２種以上と、加水分解シルク蛋白質とを含有し、ｐＨが５〜８であることを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項２】
加水分解シルク蛋白質が加水分解セリシンであることを特徴とする、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項３】
加水分解セリシンの平均分子量が５，０００〜１００，０００であり、かつ、加水分解セリシンがアミノ酸組成としてセリンを２０〜４０モル％含有することを特徴とする、請求項２に記載の皮膚外用剤。
【請求項４】
加水分解シルク蛋白質の含有量が皮膚外用剤全量に対し０．０００１〜２０重量％であることを特徴とする、請求項１〜３いずれか一項に記載の皮膚外用剤。
【請求項５】
Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１種が、Ｌ−アスコルビン酸誘導体またはそれらの塩であることを特徴とする、請求項１〜４いずれか一項に記載の皮膚外用剤。
【請求項６】
Ｌ−アスコルビン酸誘導体またはそれらの塩が、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドまたはその塩であることを特徴とする、請求項５に記載の皮膚外用剤。
【請求項７】
Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される１種または２種以上の含有量が、皮膚外用剤全量に対し０．００１〜２０重量％であることを特徴とする、請求項１〜６いずれか一項に記載の皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は皮膚外用剤に関する。詳しくは、色素沈着や乾燥、肌荒れなどを予防および／または改善する効果に優れ、皮膚に総合的な美粧効果を付与し得る皮膚外用剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
日焼け後の皮膚の黒化や、しみ、そばかすなどの色素沈着は、ホルモンの異常や紫外線の刺激がきっかけとなって、表皮色素細胞内でのメラニン生成が亢進し、メラニンが表皮に過剰に沈着するため生ずる現象と考えられている。また、加齢によって皮膚の新陳代謝機能が低下して、ターンオーバー速度が遅くなり、メラニンを過剰に含む角層細胞が表皮に長くとどまることが、色素沈着を顕著化させる原因と考えられている。
【０００３】
このような皮膚の色素沈着を予防および／または改善するため、種々の美白剤、例えば、メラニンの生成を抑制する物質や、生成したメラニンを還元する物質、生成したメラニンの排泄を促進する物質、などがスクリーニングされ、化粧品などの皮膚外用剤に配合されてきた。具体的には、アスコルビン酸、システイン、ハイドロキノン、胎盤抽出物、２−ヒドロキシ酸およびこれらの誘導体、植物および藻類からの抽出物などが利用されている。中でも、アスコルビン酸は、優れたメラニン生成抑制作用や生成メラニンに対する還元作用を示し、かつ安全性に優れることから、有効な美白剤と考えられ、皮膚外用剤の配合成分として汎用されてきた（非特許文献１）。
【０００４】
しかしながら、すでに報告されているこれらのものの多くは、安定性、安全性、匂いなどの面において問題があり、また期待できる効果は弱く、未だ満足のいくものではなかった。
【０００５】
また、化粧品などの皮膚外用剤には、美白効果のみならず、乾燥や肌荒れを予防および／または改善する効果を併せ持ち、皮膚の全体的な健全化・健常化に寄与するものが求められている。生理的機能の乱れにより発生する乾燥や肌荒れは、加齢とともに顕著化する。これは、加齢により天然保湿因子（ＮＭＦ：ｎａｔｕｒａｌ  ｍｏｉｓｔｕｒｉｚｉｎｇ  ｆａｃｔｏｒ）が減少し角層水分量が低下する結果、保湿機能が低下することに加え、加齢によりターンオーバー速度が遅くなり角質層が厚くなることが原因と考えられている。かかる問題に対し、従来の皮膚外用剤では十分に対応できていない。
【０００６】
本出願人は、これまで、加水分解シルク蛋白質の皮膚への作用として、抗酸化作用（特許文献１）、皮膚炎症防止作用（特許文献２）、チロシナーゼ活性阻害作用（特許文献３）、界面活性能（特許文献４）、コラーゲン産生促進作用（特許文献５）、単糖類および／またはオリゴ糖類との併用による保湿性向上（特許文献６）、紫外線照射後の細胞保護作用、紅斑抑制作用、色素沈着抑制作用、しわ形成抑制作用および皮膚障害に対する治療作用（特許文献７）などを見出し、特許出願している。また、加水分解シルク蛋白質を細胞賦活剤として皮膚外用剤に含有させる試みも報告されている（特許文献８）。加水分解シルク蛋白質を含有する皮膚外用剤は、色素沈着や乾燥、肌荒れなどの症状に対し一応の効果を発揮するものの、より優れた皮膚外用剤が求められているのが現状である。
【０００７】
【特許文献１】特開平１０−１４０１５４号公報
【特許文献２】特開平１０―２４５３４５号公報
【特許文献３】特開平１０―２６５４０３号公報
【特許文献４】特開平１１―２７６８７６号公報
【特許文献５】特開平１０―２２６６５３号公報
【特許文献６】特開２００１―６４１４８号公報
【特許文献７】特開２００３−２５２７４４号公報
【特許文献８】特開２００３−３３５６１９号公報
【非特許文献１】武田克之ら監修「化粧品の有用性」薬事日報社２００１年３月３１日発行
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明はこのような現状に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、日焼け後の皮膚の黒化・しみ・そばかすなど色素沈着の予防および／または改善に極めて有効で、優れた美白効果を有するとともに、乾燥や肌荒れを予防および／または改善する効果をも併せ持ち、皮膚に総合的な美粧効果を付与し得る皮膚外用剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、公知特定の美白剤と加水分解シルク蛋白質を併用して皮膚外用剤に配合させ、かつｐＨを５〜８の範囲に設定することにより、それぞれを単独で用いた場合に比べて美白効果が相乗的に増強されるとともに、乾燥や肌荒れを予防および／または改善する効果を併せ持ち、しかも安定で、皮膚刺激性、皮膚感作性といった安全性上の問題もない皮膚外用剤が得られることを見出し、この知見に基づいて本発明を完成させたものである。
【００１０】
すなわち本発明は、第１に、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される１種または２種以上と、加水分解シルク蛋白質とを含有し、ｐＨが５〜８であることを特徴とする皮膚外用剤である。
本発明は、第２に、加水分解シルク蛋白質が加水分解セリシンであることを特徴とする、上記の皮膚外用剤である。
本発明は、第３に、加水分解セリシンの平均分子量が５，０００〜１００，０００であり、かつ、加水分解セリシンがアミノ酸組成としてセリンを２０〜４０モル％含有することを特徴とする、上記の皮膚外用剤である。
本発明は、第４に、加水分解シルク蛋白質の含有量が皮膚外用剤全量に対し０．０００１〜２０重量％であることを特徴とする、上記の皮膚外用剤である。
本発明は、第５に、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１種が、Ｌ−アスコルビン酸誘導体またはそれらの塩であることを特徴とする、上記の皮膚外用剤である。
本発明は、第６に、Ｌ−アスコルビン酸誘導体またはそれらの塩が、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドまたはその塩であることを特徴とする、上記の皮膚外用剤である。
本発明は、第７に、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される１種または２種以上の含有量が、皮膚外用剤全量に対し０．００１〜２０重量％であることを特徴とする、上記の皮膚外用剤である。
【００１１】
Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩は、日焼け後の皮膚の黒化・しみ・そばかすなど色素沈着を予防および／または改善するため、古くから皮膚外用剤に配合されているが、加水分解シルク蛋白質と併用することにより得られる本発明の効果は、これまで知られていない。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、優れた美白効果と、乾燥や肌荒れを予防および／または改善する効果を併せ持ち、しかも安定性や安全性上の問題がなく、皮膚に総合的な美粧効果を付与し得る皮膚外用剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明において用いられるＬ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩は、化粧品、医薬部外品または医薬品分野において皮膚外用剤の成分として用いられているものであれば特に限定されない。
【００１４】
Ｌ−アスコルビン酸は、一般にビタミンＣといわれ、チロシンからメラニンを生成するチロシナーゼ反応において、メラニンの中間体のドーパキノンを還元してメラニン生成を抑制する作用と、濃色の酸化型メラニンを還元して、淡色の還元型メラニンにする作用の２つの作用を持っている。
【００１５】
Ｌ−アスコルビン酸誘導体としては、例えば、Ｌ−アスコルビン酸モノステアレ−ト、Ｌ−アスコルビン酸モノパルミテート、Ｌ−アスコルビン酸モノオレート、Ｌ−アスコルビン酸ジステアレ−ト、Ｌ−アスコルビン酸ジパルミテート、Ｌ−アスコルビン酸ジオレート、Ｌ−アスコルビン酸トリステアレ−ト、Ｌ−アスコルビン酸トリパルミテート、Ｌ−アスコルビン酸トリオレートなどのＬ−アスコルビン酸アルキルエステル誘導体；Ｌ−アスコルビン酸モノリン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸ジリン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸トリリン酸エステルなどのＬ−アスコルビン酸リン酸エステル誘導体；Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルなどのＬ−アスコルビン酸硫酸エステル誘導体；Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドなどのＬ−アスコルビン酸グルコシド誘導体などを挙げることができる。
【００１６】
Ｌ−アスコルビン酸およびＬ−アスコルビン酸誘導体の塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；マグネシウム塩、カルシウム塩などのアルカリ土類金属塩；アンモニウム塩、トリシクロヘキシルアンモニウム塩などのアンモニウム塩；トリエタノールアミン塩、トリエチルアミン塩などの有機アミン塩；アルギニン塩、リジン塩などの塩基性アミノ酸塩などを挙げることができる。
【００１７】
上記Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩のうち、安定性の点でＬ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩が好ましく、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドおよびその塩が特に好ましい。Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドおよびその塩は、直接還元性を示さないため安定性に優れ、さらに生体内で生成、代謝されるため安全性に優れている。Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドおよびその塩は、表皮および真皮内でα−グルコシダーゼにより徐々にＬ−アスコルビン酸とグルコースに加水分解され、Ｌ−アスコルビン酸の効力を発揮することから、長時間にわたる効果の持続性が期待される。
【００１８】
本発明において用いられるＬ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩は、主として公知の合成的手法により得られるものであるが、もちろん、その他の方法により得られたものでも使用可能であり、市販のものが使用可能である。
【００１９】
本発明において、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩は、１種を単独で、もしくは２種以上を組み合わせて用いることができる。また、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される１種または２種以上の含有量は特に限定されないが、皮膚外用剤全量に対して０．００１〜２０重量％であることが好ましい。含有量が０．００１重量％未満であると皮膚外用剤の美白効果が乏しくなる傾向にあり、逆に、２０重量％を越えて含有させても効果の増加は実質上望めず、皮膚外用剤への配合も難しくなる傾向にある。より好ましい含有量は０．０１〜１０重量％であり、さらに好ましくは０．１〜７重量％である。
【００２０】
本発明において用いられる加水分解シルク蛋白質は、シルク蛋白質を酸またはアルカリ、もしくは酵素処理により、加水分解して得られるものである。シルク蛋白質は、フィブロイン、セリシンを主成分とする蛋白質の混合物であり、本発明においては、フィブロイン、セリシンを単独もしくは混合物の状態で加水分解したものを用いることができるが、チロシナーゼ活性阻害作用や細胞賦活作用、抗酸化作用、保湿作用が高く、乾燥や肌荒れを予防および／または改善する効果の点から、セリシンを加水分解したものを用いることが好ましい。
【００２１】
セリシンのアミノ酸組成は、皮膚角質層の水分調整に関わる天然保湿因子のアミノ酸組成に類似しており、特に親水性に富むセリンを多く含んでいる。保湿剤として使用されているフィブロインやコラーゲンなどの天然蛋白質に比べてもセリンを多く含むセリシンは、親水性が高く、保湿剤として優位である。また、放湿性に優れるため、べたつきを生じることもない。さらに、抗酸化作用、皮膚炎症防止作用、チロシナーゼ活性阻害作用、界面活性能、コラーゲン産生促進作用、紫外線障害防御作用（細胞保護作用、紅斑抑制作用、色素沈着抑制作用、しわ形成抑制作用および皮膚障害に対する治療作用）、細胞賦活作用など、数々の優れた作用を有することは上記した通りである。しかも、接着性、皮膜形成作用に優れるため、長時間にわたってその効力が発揮され、皮膚に対する作用効果は極めて顕著なものとなる。
【００２２】
かかるセリシンは、蚕繭または生糸より、加水分解物として容易に入手可能である。すなわち、本発明において用いられる加水分解セリシンは、蚕繭または生糸に含まれるセリシンを、酸またはアルカリ水溶液中、もしくは酵素処理により部分加水分解して溶出させることができる。また、この溶出液を有機酸あるいは無機酸によってｐＨ３〜５に調整、もしくはメタノール、エタノール、ジオキサンなどの水溶性有機溶媒を混合して、加水分解セリシンを析出させ、濾過後乾燥し粉体化したものを用いることもできる。
【００２３】
こうして得られる加水分解セリシンの分子量は、通常、５００〜２００，０００の範囲に分布しており、そのいずれも使用可能であるが、好ましくは平均分子量５，０００〜１００，０００の加水分解セリシンである。平均分子量が５，０００未満であると、セリシンの有する様々な作用効果が低下する傾向にある。平均分子量が１００，０００を越えると、皮膚に対するなじみが悪くなる傾向にある。
【００２４】
加水分解セリシンは、アミノ酸組成としてセリンを２０〜４０モル％含有することが好ましい。セリン含有量が２０モル％未満であると、セリシンの有する様々な作用効果、特に保湿性が低下する傾向にある。また、加水分解セリシンが、天然蛋白質セリシン（セリン含有量３２モル％前後）に由来するものであることから、セリン含有量は最大でも４０モル％である。
【００２５】
本発明において用いられる加水分解セリシンは、易水溶性であり、通常の皮膚外用剤成分との混和性に優れ、また、水溶液として安定な性状を維持し、皮膚に対する刺激性や感作性がなく安全性に優れている。
【００２６】
本発明における加水分解シルク蛋白質の含有量は特に限定されず、皮膚外用剤の剤型や目的などによって調整することができるが、好ましくは皮膚外用剤全量に対して０．０００１〜２０重量％である。含有量が０．０００１重量％未満であると、皮膚の美粧効果が乏しくなる傾向にある。含有量が２０重量％を越えて含有されても効果の増加は実質上望めず、不経済である。より好ましい含有量は、０．００１〜１０重量％であり、さらに好ましくは０．０１〜１０重量％である。
【００２７】
本発明の皮膚外用剤は、以上に説明した、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩からなる群から選択される１種または２種以上と、加水分解シルク蛋白質とを必須成分として含有するものであるが、さらに任意成分として、通常、化粧品や医薬部外品、医薬品などの皮膚外用剤に用いられる他の成分、例えば、油分、湿潤剤、酸化防止剤、界面活性剤、防腐剤、保湿剤、顔料、紫外線吸収剤、抗酸化剤、香料、防菌防黴剤水、アルコール、増粘剤などを必要に応じて適宜配合することができる。
【００２８】
本発明の皮膚外用剤のｐＨは５〜８であることが好ましい。ｐＨが５未満あるいは８を越えると、安定性が劣るとともに、効果の持続性が低くなる。また、皮膚に刺激を与えるおそれがある。本発明においてｐＨの調整は、一般に使用されるｐＨ調整剤を用いて行うことができ、例えば、酸として、塩酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、及びこれらの塩等、塩基として水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化カリウム、トリエタノールアミン、アミノメチルプロパノ−ル等が例示され、こられから１種を単独で、若しくは２種以上を併用して用いる。
【００２９】
本発明の皮膚外用剤の剤型は任意であり、例えば、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤、粉末剤、顆粒剤など、種々の剤型で提供することができる。
【００３０】
本発明の皮膚外用剤とは、化粧品、医薬部外品、医薬品として、外皮に適用される外用剤を指し、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、エッセンス、ゼリー、ジェル、パック、マスク、浴用剤などとして利用される。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものでない。
【００３２】
まず、皮膚外用剤の使用試験方法について説明する。
［使用試験］
しみ、そばかすなどの色素沈着、乾燥、肌荒れなど、皮膚老化症状が認められる３０〜６０歳の女性パネラー２０名を一群とし、各群に１つの試料をそれぞれブラインドにて１日２回、２ヶ月間連続して使用させた。皮膚の色素沈着状態（美白効果）、水分量（保湿効果）、ターンオーバーの改善状況を、以下の方法により評価、判定した。
【００３３】
美白効果
使用試験開始前および終了後の皮膚の色素沈着状態を肉眼観察し、以下の基準にしたがって評価、判定した。
（評価基準）
改    善：色素沈着がほとんど目立たなくなった
やや改善：色素沈着がやや薄くなった
変化なし：ほとんど変化なし
（判定基準）
◎：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が１５名以上の場合
○：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が１０〜１４名の場合
△：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が５〜９名の場合
×：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が４名以下の場合
【００３４】
保湿効果
使用試験開始前および終了後の皮膚の水分量を、皮膚水分測定器（ＳＫＩＣＯＮ−２００、ＩＢＳ社製）を用いて、室温２３℃、湿度５５％の恒温恒湿室内にて測定し、以下の式により変化率を求めた。さらに、以下の基準にしたがって評価、判定した。
水分量の変化率（％）＝（使用試験終了後の水分量−使用試験開始前の水分量）／使用試験開始前の水分量×１００
（評価基準）
改    善：水分量の変化率が８０％以上の場合
やや改善：水分量の変化率が４０％以上８０％未満の場合
変化なし：水分量の変化率が４０％未満の場合
（判定基準）
◎：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が１５名以上の場合
○：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が１０〜１４名の場合
△：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が５〜９名の場合
×：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が４名以下の場合
【００３５】
ターンオーバー
ターンオーバーは角層細胞面積により推定した。使用試験開始前および終了後の皮膚から、テープストリッピング法により角層を採取し、染色して顕微鏡で観察することにより、角層細胞面積を測定し、以下の式により変化率を求めた。さらに、以下の基準にしたがって評価、判定した。
角層細胞面積の変化率（％）＝試用試験開始前と試験終了後の角質細胞面積の差／使用試験開始前の角質細胞面積×１００
（評価基準）
改    善：角層細胞面積の変化率が５０％以上の場合
やや改善：角層細胞面積の変化率が２０％以上５０％未満の場合
変化なし：角層細胞面積の変化率が２０％未満の場合
（判定基準）
◎：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が１５名以上の場合
○：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が１０〜１４名の場合
△：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が５〜９名の場合
×：改善、やや改善と評価されたパネラーの数が４名以下の場合
【００３６】
次に、本発明の皮膚外用剤に含有される加水分解シルク蛋白質水溶液の調製方法について説明する。
【００３７】
［加水分解シルク蛋白質水溶液１（平均分子量１２，０００）］
生糸からなる絹織物を、０．３％炭酸ナトリウム（ｐＨ１１〜１２）で９５℃にて２時間処理し、加水分解セリシンを抽出した。得られた抽出液を平均孔径０．２μｍのフィルターで濾過し、凝集物を除去した後、濾液を逆浸透膜により脱塩し、濃度０．２％の無色透明の加水分解セリシン抽出液を得た。この抽出液をエバポレーターを用いて濃度約２％まで濃縮した後、凍結乾燥し、加水分解セリシンを主成分とする加水分解シルク蛋白質の粉末を得た。この加水分解シルク蛋白質の分子量分布は５００〜５０，０００、平均分子量は１２，０００で、アミノ酸組成としてセリンを３５モル％含有していた。
加水分解シルク蛋白質の粉末５ｇを精製水９５ｇに溶解させ、加水分解シルク蛋白質水溶液とした。
【００３８】
［加水分解シルク蛋白質水溶液２（平均分子量３０，０００）］
生糸からなる絹織物を、０．２％炭酸ナトリウム（ｐＨ１１〜１２）で９５℃にて２時間処理し、加水分解セリシンを抽出した。得られた抽出液を平均孔径０．２μｍのフィルターで濾過し、凝集物を除去した後、濾液を逆浸透膜により脱塩し、濃度０．２％の無色透明の加水分解セリシン抽出液を得た。この抽出液をエバポレーターを用いて濃度約２％まで濃縮した後、凍結乾燥し、加水分解セリシンを主成分とする加水分解シルク蛋白質の粉末を得た。この加水分解シルク蛋白質の分子量分布は３，０００〜７０，０００、平均分子量は３０，０００で、アミノ酸組成としてセリンを３５モル％含有していた。
加水分解シルク蛋白質の粉末５ｇを精製水９５ｇに溶解させ、加水分解シルク蛋白質水溶液とした。
【００３９】
［加水分解シルク蛋白質水溶液３（平均分子量５０，０００）］
生糸からなる絹織物を、０．１％炭酸ナトリウム（ｐＨ１１〜１２）で９５℃にて２時間処理し、加水分解セリシンを抽出した。得られた抽出液を平均孔径０．２μｍのフィルターで濾過し、凝集物を除去した後、濾液を逆浸透膜により脱塩し、濃度０．２％の無色透明の加水分解セリシン抽出液を得た。この抽出液をエバポレーターを用いて濃度約２％まで濃縮した後、凍結乾燥し、加水分解セリシンを主成分とする加水分解シルク蛋白質の粉末を得た。この加水分解シルク蛋白質の分子量分布は５，０００〜１００，０００、平均分子量は５０，０００で、アミノ酸組成としてセリンを３５モル％含有していた。
加水分解シルク蛋白質の粉末５ｇを精製水９５ｇに溶解させ、加水分解シルク蛋白質水溶液とした。
【００４０】
なお、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸誘導体およびそれらの塩、ならびにその他の成分については、医薬品、医薬部外品または化粧品用として市販されているものを用いた。
【００４１】
［実施例１〜５、比較例１〜４］
表１に示した処方にて、本発明の実施例１〜５にかかる皮膚用ローションを調製した。また、同時に、加水分解シルク蛋白質またはＬ−アスコルビン酸誘導体を含有しない比較例１〜４を表２に示した処方にて調製した。なお、皮膚用ローションは、精製水に全ての成分を順次添加して、混合、均一化することにより調製した。
【００４２】
【表１】
2007277119.tif 000002
【００４３】
【表２】
2007277119.tif 000003
【００４４】
実施例１〜５および比較例１〜４の皮膚用ローションについて使用試験を行い、本発明の効果を確認した。結果を表３に示す。
【００４５】
【表３】
2007277119.tif 000004
【００４６】
表３より明らかなように、Ｌ−アスコルビン酸誘導体と加水分解シルク蛋白質の双方を含有する本発明の実施例１〜５においては、色素沈着状態、水分量、ターンオーバーのいずれの項目においても改善が認められた。特に、色素沈着状態の改善効果は相乗的に増強されている。これに対し、Ｌ−アスコルビン酸誘導体または加水分解シルク蛋白質のみを含有する比較例１〜３においては、改善傾向はみられるものの、その程度は実施例１〜５よりも低かった。
【００４７】
本発明の他の実施例を示す。
【００４８】
［実施例６］ローション
（１）１，３−ブチレングリコール                                ８（重量％）
（２）濃グリセリン                                              ６
（３）エタノール                                                ３
（４）Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                        ２
（５）加水分解シルク蛋白質水溶液２（平均分子量３０，０００）    ２
（６）アロエエキス                                              ０．２
（７）クロレラエキス                                            ０．２
（８）カッコンエキス                                            ０．０１
（９）酵母エキス                                                ０．２
（１０）水酸化ナトリウム                                        適量
（１１）クエン酸ナトリウム                                      適量
（１２）クエン酸                                                適量
（１３）パラオキシ安息香酸エステル                              適量
（１４）精製水                                                  残量
ｐＨ：６．７
製法：精製水に全ての成分を順次添加して、混合、均一化する。
【００４９】
［実施例７］美容液
（１）１，３−ブチレングリコール                              １２（重量％）
（２）エタノール                                                ５
（３）Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                        ２
（４）加水分解シルク蛋白質水溶液２（平均分子量３０，０００）    ２
（５）水素添加大豆リン脂質                                      ０．５
（６）アロエエキス                                              ０．２
（７）クロレラエキス                                            ０．２
（８）カッコンエキス                                            ０．０１
（９）クワエキス                                                ０．１
（１０）マロニエエキス                                          ０．１
（１１）ワレモコウエキス                                        ０．１
（１２）酵母エキス                                              ０．２
（１３）カンゾウ抽出末                                          ０．１
（１４）アルギン酸ナトリウム                                    適量
（１５）カラギーナン                                            適量
（１６）クエン酸ナトリウム                                      適量
（１７）水酸化ナトリウム                                        適量
（１８）クエン酸                                                適量
（１９）パラオキシ安息香酸エステル                              適量
（２０）精製水                                                  残量
ｐＨ：７．３
製法：成分をそれぞれ混合均一化して８０℃に加熱し、撹拌しながら冷却する。
【００５０】
［実施例８］ミルク
（１）濃グリセリン                                            １０（重量％）
（２）エタノール                                                ８
（３）トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル                        ６
（４）１，３−ブチレングリコール                                ５
（５）ジステアリン酸ポリグリセリル                              ２
（６）バチルアルコール                                          ２
（７）Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                        ２
（８）加水分解シルク蛋白質水溶液３（平均分子量５０，０００）    ２
（９）水素添加大豆リン脂質                                      ０．５
（１０）アロエエキス                                            ０．２
（１１）クロレラエキス                                          ０．２
（１２）カッコンエキス                                          ０．０１
（１３）酵母エキス                                              ０．２
（１４）カンゾウ抽出末                                          ０．１
（１５）ｄ−δ−トコフェロール                                  ０．１
（１６）ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム                  適量
（１７）カルボキシビニルポリマー                                適量
（１８）ヒドロキシエチルセルロース                              適量
（１９）クエン酸ナトリウム                                      適量
（２０）水酸化ナトリウム                                        適量
（２１）パラオキシ安息香酸エステル                              適量
（２２）精製水                                                  残量
ｐＨ：７．０
製法：油性成分、及び水性成分をそれぞれ混合均一化して８０℃に加熱する。水性成分に油性成分を添加して乳化し、撹拌しながら冷却する。
【００５１】
［実施例９］クリーム
（１）濃グリセリン                                            １５（重量％）
（２）１，３−ブチレングリコール                              １０
（３）スクワラン                                              １０
（４）硬化油                                                    ５
（５）バチルアルコール                                          ５
（６）エタノール                                                ５
（７）ベヘニルアルコール                                        ２
（８）パルミチン酸セチル                                        ２
（９）親油型モノステアリン酸グリセリン                          ２
（１０）イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル            １
（１１）メチルポリシロキサン                                    １
（１２）Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                      ２
（１３）加水分解シルク蛋白質水溶液３（平均分子量５０，０００）  ２
（１４）アロエエキス                                            ０．２
（１５）クロレラエキス                                          ０．２
（１６）カッコンエキス                                          ０．０１
（１７）クワエキス                                              ０．１
（１８）マロニエエキス                                          ０．１
（１９）ワレモコウエキス                                        ０．１
（２０）酵母エキス                                              ０．２
（２１）ツボクサエキス                                          ０．１
（２２）テルミナリアエキス                                      ０．０１
（２３）カンゾウ抽出末                                          ０．１
（２４）バチルアルコール                                        ０．１
（２５）ジエチレントリアミン五酢酸五ナトリウム                  適量
（２６）ヒドロキシエチルセルロース                              適量
（２７）クエン酸ナトリウム                                      適量
（２８）水酸化ナトリウム                                        適量
（２９）パラオキシ安息香酸エステル                              適量
（３０）精製水                                                  残量
ｐＨ：６．５
製法：油性成分、及び水性成分をそれぞれ混合均一化して８０℃に加熱する。水性成分に油性成分を添加して乳化し、撹拌しながら冷却する。
【００５２】
実施例６〜９の皮膚外用剤について使用試験を行い、本発明の効果を確認した。その際、実施例６〜９においてそれぞれ含有させた加水分解シルク蛋白質水溶液を精製水に代替して比較例５〜８とし、同時に評価した。結果を表４に示す。
【００５３】
【表４】
2007277119.tif 000005
【００５４】
表４より明らかなように、Ｌ−アスコルビン酸誘導体と加水分解シルク蛋白質の双方を含有する本発明の実施例６〜９においては、色素沈着状態、水分量、ターンオーバーのいずれの項目においても改善が認められた。特に、色素沈着状態の改善効果は相乗的に増強されている。これに対し、Ｌ−アスコルビン酸誘導体のみを含有する比較例５〜８においては、改善傾向はみられるものの、その程度は実施例６〜９よりも低かった。
【００５５】
なお、実施例１〜９については、上記使用試験期間中に皮膚刺激性を訴えたパネラーはいなかった。また、分離や凝集などの状態変化は見られず、安全性、安定性が良いことが示された。