(57)【要約】【課題】  本発明は、安眠誘導に対して効果がより確実で、安全性の高い安眠誘導組成物を提供することを目的とするものである。【解決手段】  請求項１に係る本発明は、イリドイド構造を持つ化合物、又はイリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物を含有することを特徴とする安眠誘導組成物を提供するものである。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イリドイド構造を持つ化合物、又はイリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物を含有することを特徴とする安眠誘導組成物。
【請求項２】
イリドイド構造を持つ化合物が、バーベナリン、ハスタトサイド、ロガニン、アウクビン、ゲニポシド、ゲニポシド酸、カタルポール、ゲンチオピクロシド、スウェルチアマリン又はオレウロペインである請求項１記載の安眠誘導組成物。
【請求項３】
イリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物が、イリドイド構造を持つ化合物を、グルコシダーゼ、グルクロニダーゼ及びエステラーゼから選ばれた少なくとも１以上の酵素で処理したものである請求項１記載の安眠誘導組成物。
【請求項４】
イリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物が、下記の化学式（１）〜（５）[但し、式中ＲはＨ又はＯＨを示す。]で表される化合物のいずれかである請求項１記載の安眠誘導組成物。
【化１】
2007001972.tif 000020
【化２】
2007001972.tif 000021
【化３】
2007001972.tif 000022
【化４】
2007001972.tif 000023
【化５】
2007001972.tif 000024
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安眠誘導組成物に関し、さらに詳しくは飲食品由来の安全性の高い安眠誘導組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
睡眠はヒトなどの高等動物にとって重要な生理機能の一つであるが、ヒトの中には充分な睡眠がとれず、いわゆる不眠症などの睡眠障害に悩まされる場合が知られている。特に、近年の各種ストレスの増加・生活の夜型化などに伴い、睡眠に満足しているというヒトの割合が減少し、５人に１人が何らかの睡眠に関する不満を持っており、増加傾向にあるといわれている（例えば、非特許文献１、２参照）。
【０００３】
２００２年に、睡眠障害の対応と治療ガイドラインとして、１２の指針が示されたが（非特許文献３参照）、生活改善に関する内容がほとんどであり、多忙な生活を余儀なくされている人が多い現代社会では、非常に実施しにくい内容であると考えられる。その指針の中で、ベンゾジアゼピン系、バルビツレート系を含む睡眠薬の利用も提言されているが、これらの薬物は、医師の処方が必要であるという手間と、持ち越し効果や記憶障害、反跳性不眠、薬物の依存性などの副作用が見られることがあり、安全性についても問題があった。
また、睡眠に関するアンケート（非特許文献４参照）にもあるように、日本においては特に、睡眠薬の使用意向が非常に低いことと、手軽に入手できるアルコールで睡眠に対処する人が非常に多いことから、手軽に安全に安眠を誘導するものが望まれている。
【０００４】
これらの問題を解消するべく、安全性の高い植物由来の睡眠作用成分を配合した睡眠導入剤がいくつか開発されている。例えば、ビャクダン精油を有効成分として含有する経口睡眠剤（例えば、特許文献１参照）、植物由来の各種精油成分を用いた睡眠導入精油組成物（例えば、特許文献２参照）、バレリアーナ属植物抽出物を含む睡眠障害用組成物（例えば、特許文献３参照）などが知られている。さらに、伝統的にハーブ類などはハーブ茶として飲用に用いられており、鎮静効果、不眠改善に効果があるとして知られるものもある。
【０００５】
しかしながら、これらの物質は、睡眠誘導効果がさほど強いものではなく、または効果が不安定であり、上記問題を解決するのに充分であるとは言えず、より確実な効果が得られる安眠誘導組成物を開発することが求められていた。
【０００６】
【非特許文献１】平成１２年度保険福祉動向調査、厚生労働省、２００１年
【非特許文献２】平成８年健康づくりに関する意識調査、財団法人健康体力づくり事業財団、１９９７年
【非特許文献３】睡眠障害の対応と治療ガイドライン、じほう社、２００２年
【非特許文献４】睡眠に関するアンケート、サノフィサンテラボ社、２００２年
【特許文献１】特開平１０−２５２４５号公報
【特許文献２】特開２０００−３５５５４５号公報
【特許文献３】特開２００３−１８３１７４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
以上のように、安眠誘導に対して効果がより確実で、安全性の高い安眠誘導組成物の開発に成功した例は、未だ報告されていない。
そこで、本発明は、確実な安眠誘導効果が得られ、かつ、安全性の高い安眠誘導組成物を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、食品・薬草に含まれるイリドイド構造を持つ化合物と、その酵素処理物に強い安眠誘導効果を見出し、これらを含むことによって、安眠誘導組成物の提供が可能となることを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
【０００９】
即ち、請求項１に係る本発明は、イリドイド構造を持つ化合物、又はイリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物を含有することを特徴とする安眠誘導組成物を提供するものである。
請求項２に係る本発明は、イリドイド構造を持つ化合物が、バーベナリン、ハスタトサイド、ロガニン、アウクビン、ゲニポシド、ゲニポシド酸、カタルポール、ゲンチオピクロシド、スウェルチアマリン又はオレウロペインである請求項１記載の安眠誘導組成物を提供するものである。
請求項３に係る本発明は、イリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物が、イリドイド構造を持つ化合物を、グルコシダーゼ、グルクロニダーゼ及びエステラーゼから選ばれた少なくとも１以上の酵素で処理したものである請求項１記載の安眠誘導組成物を提供するものである。
請求項４に係る本発明は、イリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物が、下記の化学式（１）〜（５））[但し、式中ＲはＨ又はＯＨを示す。]で表される化合物のいずれかである請求項１記載の安眠誘導組成物を提供するものである。
【００１０】
【化１】
2007001972.tif 000002
【００１１】
【化２】
2007001972.tif 000003
【００１２】
【化３】
2007001972.tif 000004
【００１３】
【化４】
2007001972.tif 000005
【００１４】
【化５】
2007001972.tif 000006
【発明の効果】
【００１５】
本発明の安眠誘導組成物は、確実に安眠誘導効果が得られる。
即ち、本発明の安眠誘導組成物によれば、寝つきを良くし、さらに睡眠を深めて、睡眠中の目覚めを抑制し、目覚めの状態を良くすることができる。
しかも本発明の安眠誘導組成物は、従来から漢方薬などの一種として飲食されてきた植物の中に含有されているイリドイド構造を持つ化合物と、その酵素処理物を含有することを特徴とするものであることから、安全性が高いものである。
従って、本発明によれば、安全性が高く、しかも確実に安眠誘導効果が得られる安眠誘導組成物の提供が可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
請求項１に係る本発明は、安眠誘導組成物に関し、イリドイド構造を持つ化合物、又はイリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物を含有することを特徴とするものであり、イリドイド構造を持つ化合物、又はイリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物を有効成分とするものである。
【００１７】
ここでイリドイド構造とは、次の化学式（６）で表される。
【００１８】
【化６】
2007001972.tif 000007
【００１９】
上記化学式（６）で表されるイリドイド構造を持つ化合物としては、例えば請求項２に記載したように、バーベナリン、ハスタトサイド、ロガニン、アウクビン、ゲニポシド、ゲニポシド酸、カタルポール、ゲンチオピクロシド、スウェルチアマリン、オレウロペインが挙げられる。本発明に用いる化合物としては、イリドイド構造を有していれば特に限定はないが、これらの中でも、入手の容易さ、食経験などを考慮すると、バーベナリン、ハスタトサイト、アウクビン、スウェルチアマリンなどを好適に用いることができる。
本発明の効果物質であるイリドイド構造を持つ化合物は既知の物質であるが、優れた安眠誘導効果を有することはこれまで知られていない。
【００２０】
イリドイド構造を持つ化合物であるバーベナリン、ハスタトサイド、ロガニン、アウクビン、ゲニポシド、ゲニポシド酸、カタルポール、ゲンチオピクロシド、スウェルチアマリン、オレウロペインは、それぞれ順に次の化学式（７）〜（１６）で表される。
【００２１】
【化７】
2007001972.tif 000008
【００２２】
【化８】
2007001972.tif 000009
【００２３】
【化９】
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【００２４】
【化１０】
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【００２５】
【化１１】
2007001972.tif 000012
【００２６】
【化１２】
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【００２７】
【化１３】
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【００２８】
【化１４】
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【００２９】
【化１５】
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【００３０】
【化１６】
2007001972.tif 000017
【００３１】
イリドイド構造を持つ化合物は、これらを含む植物から公知の手法により精製することによって得ることができる。
例えば、イリドイド構造を持つ化合物の１つである、バーベナリン、ハスタトサイトを含む植物の根、茎、葉、花などを、有機溶媒や水を用いて抽出し、その抽出物をカラム等で分画することによって得ることができる。バーベナリン、ハスタトサイトを含む植物としては、クマツヅラ科のVerbena officinalis、Verbena hastata、Stachytarpheta cayennensisなどの植物が挙げられる。また、ゲニポシドを含む植物（クチナシなど）の実などを、有機溶媒や水を用いて抽出し、その抽出物をカラム等で分画することによって得ることができる。同様に、上記したイリドイド構造を持つ化合物を含む植物を、有機溶媒や水を用いて抽出し、その抽出物をカラム等で分画することによって、イリドイド構造を持つ化合物を得ることができる。ここで有機溶媒としては、エタノール等を用いることができる。
【００３２】
次に、イリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物とは、例えば、イリドイド構造を持つ化合物を、グルコシダーゼ、グルクロニダーゼ、エステラーゼ等の酵素で処理した生成物をさす。
イリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物としては、特に、請求項３に記載したように、イリドイド構造を持つ化合物を、グルコシダーゼ、グルクロニダーゼ及びエステラーゼから選ばれた少なくとも１以上の酵素で処理したものが好ましい。
【００３３】
酵素処理の条件は特に制限されないが、酵素処理の一例を挙げると、イリドイド構造を持つ化合物を、酢酸ナトリウム溶液に溶解し、用いる酵素の至適温度、例えば37℃前後の温度下において、数時間グルコースを反応させる。その後、加熱処理にて酵素を失活させることにより、グルコシダーゼ処理物が得られる。また、同様にリン酸カリウム溶液に溶解させたイリドイド構造を持つ化合物に、用いる酵素の至適温度、例えば37℃前後の温度下において、数時間エステラーゼを反応させ、その後、加熱処理にて酵素を失活させることにより、エステラーゼ処理物が得られる。
【００３４】
イリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物としては、請求項４に記載したように、前記の化学式（１）〜（５）で表される化合物を挙げることができる。なお、式中Ｒは、Ｈ又はＯＨを示している。
但し、酵素処理反応は、これらの化合物を作成する一手段にしか過ぎず、製造法はこれに限定しない。即ち、前記の化学式（１）〜（５）で表される化合物であれば、化学合成などの手法により製造した同様の化合物も本発明に使用することができる。従って、前記の化学式（１）〜（５）で表される化合物をそのまま用いることもできる。
【００３５】
本発明の安眠誘導組成物において、イリドイド構造を持つ化合物、並びにその酵素処理物としては、精製度を上げたものの他、凍結乾燥などで濃縮したエキスを用いても良い。
【００３６】
本発明の安眠誘導組成物は、上記した如きイリドイド構造を持つ化合物、又はイリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物を含有することを特徴とするものであって、イリドイド構造を持つ化合物、又はその酵素処理物を含有しているものであれば、特にどのような形態でもかまわず、従来から用いられてきた医薬品補助材などを配合して製剤化を行ったものでもよい。また、イリドイド構造を持つ化合物、又はその酵素処理物を食品に配合したものでも良く、液体状、固形状などの形状を限定しない。製剤としては、錠剤、液剤、カプセル剤などの形態を問わず、また、製剤化に際して、賦形剤、安定剤など常用の添加剤を配合することができる。
【００３７】
本発明者等は、イリドイド構造を持つ化合物、又はイリドイド構造を持つ化合物の酵素処理物が、睡眠の中でもノンレム睡眠（非急速眼球運動睡眠相、以下、NREM睡眠という）という深い睡眠の長さを増加させることができることを見出した。
睡眠のパターンは、ヒトにおいても、動物実験として頻繁に使われるげっ歯類のラットにおいても、脳波（EEG）を測定することにより分析することができ、何れも、徐波を示すNREM睡眠と、脳波が低振幅速波パターンで急速眼球運動を伴うレム睡眠（急速眼球運動睡眠相、以下、REM睡眠という）とに大別される。この2種類の睡眠相の中でも、REM睡眠の脳波パターンは覚醒状態に近いことから、NREM睡眠は、REM睡眠よりも深い睡眠に相当し、睡眠の中でも、NREM睡眠を確保することが、安眠をもたらすことを意味し、疲労回復、心身の活性化につながると考えられている（疲労と休養の科学Vol.6,No.1,p.3-4(1991)；麻酔43巻増刊S120-128,(1994)）。
不眠症治療薬としてのベンゾジアゼピン系睡眠薬の摂取により、ヒトにおいても、ラットにおいても、NREM睡眠が増加することが知られている（薬局、Vol.46.No.4,513-519 (1995)、およびPsychopharmacology,Vol.156,417-426(2001)）。これからも、ヒト、及びラットの間での睡眠機構は似ており、ラットを用いた実験結果をヒトにも応用できると考えられる。
【００３８】
なお、本発明の安眠誘導組成物の摂取量としては、ヒト一人当たり5000mg程度までであれば、その種類に応じて適宜用いればよい。例えば、バーベナリンの場合、ヒト一人当たり25〜5000mg、好ましくは500〜5000mgである。また、ハスタトサイドの場合、ヒト一人当り15〜3000mg、好ましくは300〜3000mgである。
次に、バーベナリンのグルコシダーゼ処理物の場合、ヒト一人当り25〜5000mg、好ましくは500〜5000mgである。
また、ハスタトサイドのグルコシダーゼ処理物の場合、ヒト一人当り15〜3000mg、好ましくは300〜3000mgである。
さらに、アウクビンの場合、ヒト一人当り22〜4450mg、好ましくは440〜4450mgである。
また、スウェルチアマリンの場合、ヒト一人当り24〜4820mg、好ましくは480〜4820mgである。
本発明の安眠誘導組成物は、一度の摂取における摂取量が該範囲内となる組成物であればよい。つまり、バーベナリンの場合を例にとると、１個の組成物が該範囲のバーベナリンを含有しているものの他、１個の組成物が該範囲のバーベナリンを含有していなくとも、それを一度に複数摂取することで、該範囲のバーベナリンを摂取できるような形態であっても構わない。
【実施例】
【００３９】
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれにより何ら制限されるものではない。
【００４０】
実施例１
（１）バーベナリン、ハスタトサイドの精製
Verbena officinalis 植物の地上部の乾燥物1.3kgを、ペトロール、クロロフォルム、メタノールで順次抽出し、そのメタノール抽出物を濃縮乾固させたエキスのうち、水に溶けるもののみを抽出し、ろ過した。得られたろ液をヘキサン、酢酸エチル、ブタノールで順次抽出した後、ブタノール抽出物をシリカカラムにより、バーベナリンとハスタトサイドを分画精製した。次いで、これをエタノールで析出させ、このものがバーベナリン、ハスタトサイドであることを確認した。
【００４１】
（２）ラットによる試験
睡眠実験を実施するために用いたラットは、350−450ｇの体重の大人のオスのSDラットであった。ラットを手術し、その脳波（EEG）、筋電図（EMG）を記録するための電極を頭部に埋め込み、さらに、投与物質が外部から胃に直接投与できるように、内径0.5mmのポリエチレン製のカニューレチューブを胃に接続し、その逆の端を外に出した。該システムは、動物を自由に動くことを許容するものであった。手術後、回復期として、1週間以上の期間を置き、試験を実施した。この睡眠実験を行う上で、ラットは、20:00に消灯、8:00に点灯でき、湿度60±6％、温度25±1℃にコントロールできるようなチャンバー内に置かれ、測定された。
【００４２】
上記（１）で得られたバーベナリンを6mlの水に1mg〜200mgの範囲で溶かしたものを本発明の投与サンプル１〜４とした。また、上記（１）で得られたハスタトサイドを6mlの水に0.75mg〜150mgの範囲で溶かしたものを本発明の投与サンプル５〜８とした。
一方、対照の投与サンプル１〜８として、6mlの水を投与することにした。
別々の日に、以下の表１、２に示したように、ラットへ水を投与し（水投与；対照）、また所定濃度のバーベナリン、ハスタトサイドを投与した（バーベナリン投与、ハスタトサイド投与；本発明）。それ故、各動物はそれ自身が対照となる。投与形態としては、各サンプル6mlを電灯の消えている20:00〜20:30の間に、12ml/1hrの速度でカニューレを通してラットの胃に直接投与した。各投与量の試験は、連続して行ったが、各試験の実施は3日間以上の期間をあけて行った。本試験において実施したラット1匹あたりのバーベナリン、ハスタトサイド投与量とラット体重1kgあたりのバーベナリン、ハスタトサイド投与量の関係は、以下の表１のとおりである。ラットの平均体重400gとして計算した。何れのサンプルもN=5で実施した。
【００４３】
【表１】
2007001972.tif 000018
【００４４】
【表２】
2007001972.tif 000019
【００４５】
脳波、筋電図記録を解析し、覚醒相、NREM相（低周波高振幅脳電図、及び非常に深い眠りを特徴付ける低筋電）、及びREM相（高周波低振幅脳電図、及び筋弛緩状態を示す、NREM相より低い筋電）の３段階により分類した。
図１、２に、電気の消えている暗期12時間（20:00-8:00）の間の総NREM量を、水投与（対照）とバーベナリン又はハスタトサイド投与（本発明）の間で比較したグラフをそれぞれ示した。図中、□で示したものが水投与（対照）の総ＮＲＥＭ量であり、■で示したものが図１ではバーベナリン投与（本発明）、図２ではハスタトサイド投与（本発明）の総ＮＲＥＭ量である。
【００４６】
図１、２より、水投与（対照）の総NREM量とバーベナリン、ハスタトサイド投与（本発明）のNREM量を比較すると、何れの投与量でもバーベナリン、ハスタトサイドを投与した場合に、総NREM量が増加していることが分かる。さらに、ラット1匹あたりの投与量が増加するにつれ、総NREM増加量は大きくなり、ラット1匹あたりの投与量がバーベナリンの場合には30mg/head以上、ハスタトサイドの場合には20mg/head以上であると、NREM量は有意に増加していることが分かる。
【００４７】
この結果は、ラット1匹あたり1〜200mgの範囲でバーベナリンを、0.75〜150mgの範囲でハスタトサイドをそれぞれ投与することが、総NREM量を増やすことにつながり、充分に安眠へと誘導することを示している。
これらのラットを用いた睡眠実験結果より、ラットとヒトの体重の違い、及び、消化器官での成分の吸収効率の違いを考慮すると、バーベナリンの場合には、ヒト一人当たり25〜5000mg、ハスタトサイドの場合には、ヒト一人当り15〜3000mgを摂取することに相当することから、ヒトが、この範囲のバーベナリン、ハスタトサイドを摂取することは、ヒトにとっても安眠を誘導することにつながると考えられる。
【００４８】
実施例２
（１）バーベナリン、ハスタトサイドのグルコシダーゼ処理
実施例1で記載した方法でバーベナリン、ハスタトサイドを精製し、その精製物を酢酸ナトリウム水溶液中で、それぞれグルコシダーゼ処理をした。反応は37度の恒温水槽で2時間行い、反応を停止させるため沸騰水中で10分加熱した。氷上で冷却した後、pHを中性領域に合わせた。
【００４９】
（２）ラットによる実験
実施例１と同様に、ラットを用いた脳波測定試験を実施した。上記（１）で得られたバーベナリンのグルコシダーゼ処理物及びハスタトサイドのグルコシダーゼ処理物を、基質のバーベナリン及びハスタトサイドがラット1匹あたり100mg含むように、それぞれ6mlの水溶液に調整した。これをそれぞれ本発明のサンプル９、１０とした。
一方、対照の投与サンプル９、１０として、6mlの水を投与することにした。
別々の日に、ラットへ水を投与し（水投与；対照）、また所定濃度のバーベナリンのグルコシダーゼ処理物、ハスタトサイドのグルコシダーゼ処理物を投与した（バーベナリンのグルコシダーゼ処理物投与、ハスタトサイドのグルコシダーゼ処理物投与；本発明）。投与形態としては、各サンプル6mlを電灯の消えている20:00〜20:30の間に、12ml/1hrの速度でカニューレを通してラットの胃に直接投与した。各投与量の試験は、連続して行ったが、各試験の実施は3日間以上の期間をあけて行った。
【００５０】
脳波、筋電図記録を解析し、覚醒相、NREM相（低周波高振幅脳電図、及び非常に深い眠りを特徴付ける低筋電）、及びREM相（高周波低振幅脳電図、及び筋弛緩状態を示す、NREM相より低い筋電）の３段階により分類した。
図３に、電気の消えている暗期12時間（20:00-8:00）の間の総NREM量を、水投与（対照）とバーベナリンのグルコシダーゼ処理物又はハスタトサイドのグルコシダーゼ処理物投与（本発明）の間で比較したグラフをそれぞれ示した。図中、□で示したものが水投与（対照）の総ＮＲＥＭ量であり、■で示したものがバーベナリンのグルコシダーゼ処理物投与（サンプル９；本発明）又はハスタトサイドのグルコシダーゼ処理物投与（サンプル１０；本発明）の総ＮＲＥＭ量である。
【００５１】
実施例３（アウクビン、スウェルチアマリンのラットによる投与）
実施例１と同様に、ラットを用いた脳波測定試験を実施した。市販のアウクビン、スウェルチアマリンを、それぞれバーベナリン100mgと等モル分、即ちアウクビンを89mg、スウェルチアマリンを96mg含むように6mlの水に溶解した。これをそれぞれ本発明のサンプル１１、１２とした。
一方、対照の投与サンプル１１、１２として、6mlの水を投与することにした。
別々の日に、ラットへ水を投与し（水投与；対照）、また所定濃度のアウクビン処理物、スウェルチアマリン処理物を投与した（アウクビン投与、スウェルチアマリン投与；本発明）。投与形態としては、各サンプル6mlを電灯の消えている20:00〜20:30の間に、12ml/1hrの速度でカニューレを通してラットの胃に直接投与した。各投与量の試験は、連続して行ったが、各試験の実施は3日間以上の期間をあけて行った。
【００５２】
脳波、筋電図記録を解析し、覚醒相、NREM相（低周波高振幅脳電図、及び非常に深い眠りを特徴付ける低筋電）、及びREM相（高周波低振幅脳電図、及び筋弛緩状態を示す、NREM相より低い筋電）の３段階により分類した。
図４に、電気の消えている暗期12時間（20:00-8:00）の間の総NREM量を、水投与（対照）とアウクビン投与（本発明）、スウェルチアマリン投与（本発明）の間で比較したグラフをそれぞれ示した。図中、□で示したものが水投与（対照）の総ＮＲＥＭ量であり、■で示したものがアウクビン投与（サンプル１１；本発明）又はスウェルチアマリン投与（サンプル１２；本発明）の総ＮＲＥＭ量である。
【００５３】
実施例４（オレウロペインのラットによる投与）
実施例１と同様に、ラットを用いた脳波測定試験を実施した。市販のオレウロペインをバーベナリン100mgと等モル分、即ちオレウロペインを139mg含むように6mlの水に溶解した。これを本発明のサンプル１３とした。
一方、対照の投与サンプル１３として、6mlの水を投与することにした。
別々の日に、ラットへ水を投与し（水投与；対照）、また所定濃度のオレウロペイン処理物を投与した（オレウロペイン投与；本発明）。投与形態としては、各サンプル6mlを電灯の消えている19:00〜19:30の間に、12ml/1hrの速度でカニューレを通してラットの胃に直接投与した。各投与量の試験は、連続して行ったが、各試験の実施は3日間以上の期間をあけて行った。
【００５４】
脳波、筋電図記録を解析し、覚醒相、NREM相（低周波高振幅脳電図、及び非常に深い眠りを特徴付ける低筋電）、及びREM相（高周波低振幅脳電図、及び筋弛緩状態を示す、NREM相より低い筋電）の３段階により分類した。
図５に、電気の消えている暗期12時間（19:00-7:00）の間の総NREM量を、水投与（対照）とオレウロペイン投与（本発明）の間で比較したグラフをそれぞれ示した。図中、□で示したものが水投与（対照）の総ＮＲＥＭ量であり、■で示したものがオレウロペイン投与（サンプル１３；本発明）の総ＮＲＥＭ量である。
【００５５】
実施例５
（１）バーベナリンのエステラーゼ処理
実施例1で記載した方法でバーベナリンを精製し、その精製物を50mM リン酸カリウム水溶液（pH7.4）中で、エステラーゼ処理をした。反応は37度の恒温水槽で２時間行い、反応を停止させるため沸騰水中で10分加熱した。氷上で冷却した後、pHを中性領域に合わせた。
【００５６】
（２）ラットによる実験
実施例１と同様に、ラットを用いた脳波測定試験を実施した。上記（１）で得られたバーベナリンのエステラーゼ処理物を、基質のバーベナリンがラット1匹あたり100mg含むように、6mlの水溶液に調整した。これを本発明のサンプル１４とした。
一方、対照の投与サンプル１４として、6mlの水を投与することにした。
別々の日に、ラットへ水を投与し（水投与；対照）、また所定濃度のバーベナリンのエステラーゼ処理物を投与した（バーベナリンのエステラーゼ処理物投与；本発明）。投与形態としては、各サンプル6mlを電灯の消えている19:00〜19:30の間に、12ml/1hrの速度でカニューレを通してラットの胃に直接投与した。各投与量の試験は、連続して行ったが、各試験の実施は3日間以上の期間をあけて行った。
【００５７】
脳波、筋電図記録を解析し、覚醒相、NREM相（低周波高振幅脳電図、及び非常に深い眠りを特徴付ける低筋電）、及びREM相（高周波低振幅脳電図、及び筋弛緩状態を示す、NREM相より低い筋電）の３段階により分類した。
図６に、電気の消えている暗期12時間（19:00-7:00）の間の総NREM量を、水投与（対照）とバーベナリンのエステラーゼ処理物投与（本発明）の間で比較したグラフをそれぞれ示した。図中、□で示したものが水投与（対照）の総ＮＲＥＭ量であり、■で示したものがバーベナリンのエステラーゼ処理物投与（サンプル１４；本発明）の総ＮＲＥＭ量である。
【００５８】
実施例６
（１）バーベナリン、ハスタトサイドのマイクロソーム処理
実施例1で記載した方法でバーベナリン、ハスタトサイドを精製し、その精製物を100mMリン酸カリウム水溶液（pH7.4）中で、それぞれマイクロソーム処理をした。反応は37度の恒温水槽で2時間行い、反応を停止させるため急速に冷却した。
【００５９】
（２）ラットによる実験
実施例１と同様に、ラットを用いた脳波測定試験を実施した。上記（１）で得られたバーベナリンのマイクロソーム処理物及びハスタトサイドのマイクロソーム処理物を、基質のバーベナリン及びハスタトサイドがラット1匹あたり100mg含むように、それぞれ6mlの水溶液に調整した。これをそれぞれ本発明のサンプル１５、１６とした。
一方、対照の投与サンプル１５、１６として、6mlの基質を入れていない酵素反応液のみを投与することにした。
別々の日に、ラットへ基質を入れていない酵素反応液を投与し（酵素反応液のみ投与；対照）、また所定濃度のバーベナリンのマイクロソーム処理物、ハスタトサイドのマイクロソーム処理物を投与した（バーベナリンのマイクロソーム処理物投与、ハスタトサイドのマイクロソーム処理物投与；本発明）。投与形態としては、各サンプル6mlを電灯の消えている19:00〜19:30の間に、12ml/1hrの速度でカニューレを通してラットの胃に直接投与した。各投与量の試験は、連続して行ったが、各試験の実施は3日間以上の期間をあけて行った。
【００６０】
脳波、筋電図記録を解析し、覚醒相、NREM相（低周波高振幅脳電図、及び非常に深い眠りを特徴付ける低筋電）、及びREM相（高周波低振幅脳電図、及び筋弛緩状態を示す、NREM相より低い筋電）の３段階により分類した。
図７に、電気の消えている暗期12時間（19:00-7:00）の間の総NREM量を、酵素反応液のみ投与（対照）とバーベナリンのマイクロソーム処理物又はハスタトサイドのマイクロソーム処理物投与（本発明）の間で比較したグラフをそれぞれ示した。図中、□で示したものが酵素反応液のみ投与（対照）の総ＮＲＥＭ量であり、■で示したものがバーベナリンのマイクロソーム処理物投与（サンプル１５；本発明）又はハスタトサイドのマイクロソーム処理物投与（サンプル１６；本発明）の総ＮＲＥＭ量である。
【産業上の利用可能性】
【００６１】
このように、伝統的に摂取されてきた植物由来の物質である、イリドイド構造を持つ化合物、又はその酵素処理物を含有していて、これを有効成分とする組成物を提供することにより、多くの睡眠障害をもつヒトに対して、確実に安眠を誘導することができるようになると考えられる。
従って、本発明は、食品産業分野などにおいて有効に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００６２】
【図１】実施例１におけるサンプル１〜４の暗期(20:00-8:00)12時間あたりの総NREM量を示したグラフである。
【図２】実施例１におけるサンプル５〜８の暗期(20:00-8:00)12時間あたりの総NREM量を示したグラフである。
【図３】実施例２におけるサンプル９、１０の暗期(20:00-8:00)12時間あたりの総NREM量を示したグラフである。
【図４】実施例３におけるサンプル１１、１２の暗期(20:00-8:00)12時間あたりの総NREM量を示したグラフである。
【図５】実施例４におけるサンプル１３の暗期(19:00-7:00)12時間あたりの総NREM量を示したグラフである。
【図６】実施例５におけるサンプル１４の暗期(19:00-7:00)12時間あたりの総NREM量を示したグラフである。
【図７】実施例６におけるサンプル１５、１６の暗期(19:00-7:00)12時間あたりの総NREM量を示したグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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