(57)【要約】【課題】  微生物の回収を高い回収率かつ容易に行う。【解決手段】  本回収方法は、軸方向の両端部に開口を有した筒状構造体と、当該筒状構造体の筒部内に設けられて筒部内を第１の空間と第２の空間とに区切るメンブレンフィルターと、第１の空間側の端部に着脱可能な回収部と、を備える回収容器を用意する用意工程（Ｓ０１）と、第１の空間に回収の対象である微生物を含む液体を注入する第１の注入工程（Ｓ０２）と、液体を遠心分離する第１の遠心分離工程（Ｓ０３）と、メンブレンフィルターを通って移動した液体を排出する排出工程（Ｓ０４）と、第１の空間側の端部に回収部を装着する装着工程（Ｓ０５）と、第２の空間に微生物を回収するための回収用液体を注入する第２の注入工程（Ｓ０６）と、回収用液体を遠心分離して回収部に微生物を含んだ回収用液体を回収する第２の遠心分離工程（Ｓ０７）とを有する。【選択図】  図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
軸方向の両端部に開口を有した筒状構造体と、当該筒状構造体の筒部内に設けられて、当該筒部内を第１の空間と第２の空間とに軸方向に区切るメンブレンフィルターと、前記筒状構造体の少なくとも第１の空間側の端部に着脱可能な回収部と、を備える微生物の回収容器を用意する用意工程と、
前記筒状構造体の第１の空間に、回収の対象である微生物を含む液体を注入する第１の注入工程と、
前記第１の空間から前記第２の空間に向かう方向に遠心力がかかるように、前記注入工程において第１の空間に注入された液体を遠心分離する第１の遠心分離工程と、
前記第１の遠心分離工程において、前記第１の空間から前記メンブレンフィルターを通って前記第２の空間に移動した液体を排出する排出工程と、
前記筒状構造体の第１の空間側の端部に回収部を装着する装着工程と、
前記排出工程において液体が排出された第２の空間に、前記微生物を回収するための回収用液体を注入する第２の注入工程と、
前記第２の空間から前記第１の空間に向かう方向に遠心力がかかるように、前記注入工程において第２の空間に注入された回収用液体を遠心分離して、前記装着工程により装着された回収部に微生物を含んだ回収用液体を回収する第２の遠心分離工程と、
を有する微生物の回収方法。
【請求項２】
軸方向の両端部に開口を有した筒状構造体と、
当該筒状構造体の筒部内に設けられて当該筒部内を第１の空間と第２の空間とに軸方向に区切るメンブレンフィルターと、
前記筒状構造体の少なくとも第１の空間側の端部に着脱可能な回収部と、
を備える微生物の回収容器。
【請求項３】
前記メンブレンフィルターは、前記筒部の軸方向の両側から支持部材により固定されることを特徴とする請求項２に記載の微生物の回収容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、微生物の回収方法及び回収容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、細菌等の微生物に発光又は蛍光物質を結合させて微生物を同定・定量することが行われている（例えば、下記の特許文献１（発光輝点計測法）参照）。特許文献１に記載の方法では、微生物をメンブレンフィルター等により一旦捕集し、捕集した微生物を検出するため、他の微粒子等を取り除いた状態で回収する必要がある。
【特許文献１】特許第２５９４６２２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
上記の微生物の回収は、通常例えば、微生物を捕集したメンブレンフィルターを洗浄することにより行われる。しかし、洗浄では、メンブレンフィルターにめり込んだ微生物や相互作用でメンブレンフィルターに吸着した微生物を十分に回収することができず、微生物の回収率が低いという問題がある。特に、検出する微生物の量が少量である場合には、回収率により検出精度が大きく異なるので、より高い回収率で微生物を回収する方法が求められていた。また、洗浄では、処理に手間がかかるという問題もあった。
【０００４】
本発明は、以上の問題点を解決するためになされたものであり、微生物の回収を高い回収率かつ容易に行うことのできる微生物の回収方法及び回収容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明に係る微生物の回収方法は、軸方向の両端部に開口を有した筒状構造体と、当該筒状構造体の筒部内に設けられて、当該筒部内を第１の空間と第２の空間とに軸方向に区切るメンブレンフィルターと、筒状構造体の少なくとも第１の空間側の端部に着脱可能な回収部と、を備える微生物の回収容器を用意する用意工程と、筒状構造体の第１の空間に、回収の対象である微生物を含む液体を注入する第１の注入工程と、第１の空間から第２の空間に向かう方向に遠心力がかかるように、注入工程において第１の空間に注入された液体を遠心分離する第１の遠心分離工程と、第１の遠心分離工程において、第１の空間からメンブレンフィルターを通って第２の空間に移動した液体を排出する排出工程と、筒状構造体の第１の空間側の端部に回収部を装着する装着工程と、排出工程において液体が排出された第２の空間に、微生物を回収するための回収用液体を注入する第２の注入工程と、第２の空間から第１の空間に向かう方向に遠心力がかかるように、注入工程において第２の空間に注入された回収用液体を遠心分離して、装着工程により装着された回収部に微生物を含んだ回収用液体を回収する第２の遠心分離工程と、を有することを特徴とする。
【０００６】
本発明に係る微生物の回収方法では、まず、第１の遠心分離工程においてメンブレンフィルターの第１の空間側の面により液体に含まれていた微生物が捕集される。続いて、第２の遠心分離工程において捕集された微生物が、回収用液体の圧力及び遠心分離の遠心力によりメンブレンフィルターから外され回収される。このように回収されることにより、メンブレンフィルターにめり込んだ微生物や相互作用でメンブレンフィルターに吸着した微生物を十分に回収することができる。よって、本発明に係る微生物の回収方法によれば、微生物の回収を高い回収率で行うことができる。また、本発明に係る微生物の回収方法は、実質的には遠心力がかかる方向を変えて２度の遠心分離を行うだけで実現できるので、簡易な回収を実現することができる。
【０００７】
本発明に係る微生物の回収容器は、軸方向の両端部に開口を有した筒状構造体と、当該筒状構造体の筒部内に設けられて当該筒部内を第１の空間と第２の空間とに軸方向に区切るメンブレンフィルターと、筒状構造体の少なくとも第１の空間側の端部に着脱可能な回収部と、を備えることを特徴とする。本発明に係る回収容器を用いることにより、本発明に係る回収方法を実現することができる。
【０００８】
本発明に係る回収容器は、メンブレンフィルターは、筒部の軸方向の両側から支持部材により固定されるのが好ましい。この構成にすれば、軸方向における両側からの遠心分離に耐えうる構成をより簡易に実現することができる。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、メンブレンフィルターにめり込んだ微生物や相互作用でメンブレンフィルターに吸着した微生物を十分に回収することができ、微生物の回収を高い回収率で行うことができる。また、本発明は、実質的には遠心力がかかる方向を変えて２度の遠心分離を行うだけで実現できるので、簡易な回収を実現することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、図面とともに本発明に係る微生物の回収方法及び回収容器の好適な実施形態について詳細に説明する。なお、図面の説明においては同一要素には同一符号を付し、重複する説明を省略する。また、図面の寸法比率は、説明のものと必ずしも一致していない。まず、回収方法が実行される回収容器を説明し、その後、回収方法を説明する。なお、本実施形態における微生物には、細菌を含む。また、微生物とは、微生物を含む微粒子であってもよい。
【００１１】
図１に、本実施形態の回収容器１を示す。回収容器１は、筒状構造体（メンブレンフィルター容器部）１０と、遠心管本体２０とを備えて構成されている。遠心管本体２０は、試験管状をした筒状の容器である。筒状構造体１０は、図１に示すように、遠心管本体２０に対して互いに軸が一致するように装着可能になっている。また、筒状構造体１０の遠心管本体２０への装着は、軸方向のいずれの方向からでも行うことができる。ここで図２に、回収容器１における筒状構造体１０のみを示す。図３に、回収容器１の軸方向の断面を示す。
【００１２】
図１及び図２に示すように、筒状構造体１０は、軸方向の両端部に開口を有した筒部１１と、筒部１１内に設けられたメンブレンフィルター１２と備えて構成されている。図２に示すように、メンブレンフィルター１２は、筒部１１内のほぼ中央に固定されて設けられ、筒部１１内を第１の空間１３と第２の空間１４とに軸方向に区切っている。遠心分離の際には、第１の空間１３及び第２の空間１４の何れか一方に液体が注入され、液体がメンブレンフィルター１２を通りもう一方の空間に抜けていく。なお、通常の状態（室温、大気圧状態）では、メンブレンフィルター１２は、液体を通過させない性質を有している。
【００１３】
メンブレンフィルター１２は、微生物との相互作用がなるべく発生しないように、水の透過を妨げない程度の疎水性を有している材質のものであることが好ましい。メンブレンフィルター１２は微小な孔を有しており、その孔径は、遠心分離の際に微生物を捕集できるように、０．５μｍ程度以下であることが好ましい。なお、孔径は回収対象の微生物の種類等、用途に応じて適切な値とするのが好ましい。メンブレンフィルター１２は複数の支持部材１５により筒部１１内に固定されるが、図３に示すように、軸方向の両側から固定されることが好ましい。本実施形態の回収方法では、筒状構造体１０は、軸方向の両方の向きに遠心分離が行われるため、両側からの遠心分離の圧力に耐えうるためにするためである。また、その際、両側の支持部材１５はメンブレンフィルター１２の対応した位置にそれぞれ配置されることが好ましい。なるべく、支持部材１５が遠心分離の際の妨げにならないようにするためである。
【００１４】
遠心管本体２０は、遠心分離により筒状構造体１０のメンブレンフィルター１２を通過した液体を回収及び保持することができる。つまり、遠心管本体２０は、回収容器１における回収部である。遠心管本体２０の内径は、図１及び図３に示すように、筒状構造体１０を装着させることができるように、筒状構造体１０の筒部１１の外径よりもわずかに大きくなっている。遠心管本体２０には、筒状構造体１０を位置決めして固定できるように、保持部２２が内側に設けられていることが好ましい。保持部２２は、図１及び図３に示すように、遠心管本体２０の内側の開口から軸方向に筒状構造体１０の軸方向の長さの位置に、環状の凸部として設けられる。筒状構造体１０の位置決めは、保持部２２がストッパーの役割をすることにより行われる。なお、遠心管本体２０の形状自体で筒状構造体１０の位置決めをできる場合は、保持部２２を必ずしも設ける必要はない。例えば、遠心管本体２０の先細りとなる部分が、ストッパーの役割を果たす場合等には、保持部２２を必ずしも設ける必要はない。
【００１５】
遠心管本体２０は、具体的には例えば、エッペンドルフチューブ等を用いることができる。筒状構造体１０の筒部１１及び遠心管本体２０は、通常、遠心分離に用いられる容器程度の大きさで構成される。また、筒状構造体１０及び遠心管本体２０は、遠心分離に用いられる容器を構成する材料、例えばプラスチックで構成される。
【００１６】
引き続いて、図４のフローチャート及び図５の模式図を用いて、本実施形態の微生物の回収方法を説明する。本実施形態では、上述した微生物の同定・定量における、微生物の捕集及び回収を例として説明する。
【００１７】
まず、捕集及び回収すべき微生物を含んだサンプルと、上述した回収容器１とを用意する（Ｓ０１、用意工程）。サンプルの生成は、具体的には例えば特許第２５９４６２２号公報に記載されているように、次のように行われる。同定・定量対象となっている微生物を、その微生物の表面抗原と特異的に結合する抗体（ラベル）を含んだ液体に浸漬させる。浸漬させると液体中では、微生物と抗体とが結合する（ラベリング）。この液体が、本実施形態におけるサンプルとなる。なお、その抗体には、例えば発光試薬と反応した場合等、所定の条件で発光反応を触媒する酵素を予め結合させておく。また、回収容器１に関しては、筒状構造体１０に対して、第１の空間１３が遠心管本体２０の開口側にくるように、遠心管本体２０を装着しておく。
【００１８】
続いて、図５（ａ）に示すように、微生物３１が含んだサンプル３０を、回収容器１における筒状構造体１０の第１の空間１３に注入する（Ｓ０２、第１の注入工程）。
【００１９】
続いて、図５（ｂ）に示すように、第１の空間１３から第２の空間１４に向かう方向（図５（ｂ）における方向Ｇ）に遠心力がかかるように、サンプル３０を遠心分離する（Ｓ０３、第１の遠心分離工程）。遠心分離は、通常、遠心分離に用いられる遠心分離機を用いて行えばよい。この遠心分離により、微生物３１はメンブレンフィルター１２の第１の空間１３側の面により捕集される。その一方、捕集される微生物３１以外のサンプル３０は、メンブレンフィルター１２を通過して、遠心管本体２０により回収及び保持される。このとき、回収容器１は、図５（ｃ）に示すような状態となる。
【００２０】
続いて、遠心管本体２０から筒状構造体１０を取り外し、遠心分離されたサンプル３０の残りの液体を排出する（Ｓ０４、排出工程）。なお、本実施形態では、第１の遠心分離工程の際、筒状構造体１０に遠心管本体２０を装着しているため、遠心管本体２０にサンプル３０の残りの液体（ろ液）が溜まる。しかしながら、遠心管本体２０を装着しないで第１の遠心分離工程を行うことも可能であり、その場合、遠心管本体２０から液体を排出する必要はない。しかし、通常は遠心分離機が汚れてしまうこと等を考慮すると、遠心管本体２０を装着して、第１の遠心分離工程を行うことが好ましい。
【００２１】
続いて、上記のように取り外された筒状構造体１０に対して、第２の空間１４が遠心管本体２０の開口側にくるように（Ｓ０１における向きとは逆に）遠心管本体２０を装着する。即ち、図５（ｄ）に示すように、遠心管本体２０により、遠心分離によりメンブレンフィルター１２を通過して第１の空間側から落ちる液体を回収できるようにする（Ｓ０５、装着工程）。ここで、新たに装着される遠心管本体２０は、Ｓ０１〜Ｓ０４で用いられたものでもよいし、新たなものでもよい。
【００２２】
続いて、図５（ｄ）に示すように、微生物３１を回収するための回収用液体４０を、回収容器１における筒状構造体１０の第２の空間１４に注入する（Ｓ０６、第２の注入工程）。ここで、回収用液体４０は、上記のサンプル３０と同じ液体でもよいし、別の液体でもよい。
【００２３】
続いて、図５（ｅ）に示すように、第２の空間１４から第１の空間１３に向かう方向（図５（ｅ）における方向Ｇ）に遠心力がかかるように、回収用液体４０を遠心分離する（Ｓ０７、第２の遠心分離工程）。遠心分離は、上記の第１の遠心分離工程と同様に行えばよいが、第１の遠心分離工程の際よりも遠心力を強くしたり、遠心を行う回数を増やしたりしてもよい。この遠心分離によって、メンブレンフィルター１２の第１の空間１３側の面により捕集された微生物３１が、回収用液体４０の圧力及び遠心分離の遠心力によりメンブレンフィルター１２から外され遠心管本体２０により回収及び保持される。このとき、遠心管本体２０は、図５（ｆ）に示すように、微生物３１を含んだ回収用液体４０を保持した状態となる。
【００２４】
続いて、図５（ｇ）に示すように、回収容器１から筒状構造体１０を外すことにより、微生物３１を含んだ回収用液体４０が利用可能となる。本実施形態では、以下のように、微生物の同定・定量を行う。同定・定量は、例えば、図６に示すフォトンカウンティング装置５０により微生物３１を計数することにより行われる（Ｓ０８）。
【００２５】
まず、回収用液体４０に含まれる微生物３１を、計数用のメンブレンフィルター５１により補足する。図６に示すように、そのメンブレンフィルター５１を、フォトンカウンティング装置５０に、計数が行えるように配置する（なお、この際、微生物３１が下記のフォトンカウンティングカメラ５６の方に向くように配置する）。フォトンカウンティング装置５０には、発光試薬が浸されたろ紙５２が配置されており、このろ紙５２からメンブレンフィルター５１に対して発光試薬が供給される。供給試薬が供給されたメンブレンフィルター５１では、微生物３１に抗体を介して結合された酵素が発光反応を触媒し、結果として、微生物３１が存在する部分から発光が起こる。発光した光は、フォトンカウンティング装置５０において、テーパー型イメージガイド５３、ファイバプレート５４を通って、光電陰極５５に入射して光電子を発生させる。光電陰極５５が発生した光電子をフォトンカウンティングカメラ５６が撮影して、計数することにより、微生物３１の計数を行う。なお、テーパー型イメージガイド５３に外光が入射しないように予めキャップ５７をしておく。
【００２６】
上述したように本実施形態の回収方法では、回収用液体４０の圧力及び遠心分離の遠心力によりメンブレンフィルター１２から微生物３１を外すので、メンブレンフィルター１２にめり込んだ微生物３１や相互作用でメンブレンフィルター１２に吸着した微生物３１を十分に回収することができる。よって、本実施形態の回収方法によれば、微生物の回収を高い回収率でおこなうことができる。また、本実施形態の回収方法は、実質的に遠心力がかかる方向を変えて２度の遠心分離を行うだけで、実現できるので、簡易かつ迅速な回収を実現することができる。また、容易に実現が可能なことから、結果として安価に本実施形態を実施することができる。
【００２７】
また、本実施形態の回収容器１ように、筒状構造体１０のメンブレンフィルター１２を、軸方向の両側から支持部材１５により固定されることとすれば、軸方向における両側からの遠心分離に耐えうる構成をより簡易に実現することができる。
【００２８】
なお、本実施形態では、回収容器１において、回収部である遠心管本体２０は、筒状構造体１０の周囲を覆う形状をしているが、必ずしもそのような形状（二重管タイプ）でなくてもよい。例えば、図７に示すように軸方向の両端部に直接、着脱することができる回収部となる凹状のキャップ２５のようなものでもよい。
【００２９】
また、本発明に係る回収方法は、上記の実施形態のような使用方法に限られず、例えば、微生物を含む液体を濃縮する場合等に用いられてもよい。
【実施例】
【００３０】
以下、実施例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００３１】
（実施例１）
以下に説明する実施例１は、微生物の捕集及び回収のみに関しての例である。本実施例では、メンブレンフィルター１２として、ミリポアフィルター製疎水性ＰＴＦＥメンブレンフィルター（孔径０．２２μｍ）を用いた。回収対象の微生物としては、大腸菌Escherichia coli ATCC 12740を用いた。Masuko, M., Hosoi, S. & Hayakawa, T. “Rapid Detection andcounting of single bacteria in a wide field using a photon-counting TV camera.”FEMS Microbiol Lett 83, 231-238 (1992).（非特許文献１）の方法に従い、好気培養した菌体を遠心分離で集め、０．８５％ＮａＣｌで一度洗浄し、遠心分離後、菌体をアセトンに懸濁、殺菌し、すぐに０．１Ｍリン酸緩衝液（phosphate buffer）（ｐＨ７．０）で希釈し、この懸濁液を出発材料とした。
【００３２】
この菌体懸濁液に０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を添加し、菌体濁度（６６０ｎｍの吸光度値）を０．２に調整した。このうち４．０ｍｌを本実施形態におけるサンプル３０とし、４℃下、約５０００×Ｇで１０分遠心分離した（第１の遠心分離工程）。ろ液を排出し、回収用液体４０を３．０ｍｌの０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）として、微生物回収のための遠心分離を行った（第２の遠心分離工程）。ろ液を回収して、同緩衝液を添加して、全量を４．０ｍｌにした。
【００３３】
この液体の濁度を測定し、以下の式により微生物の回収率を測定したところ９２％であった。
回収率＝（回収後の菌体懸濁液の濁度）／（出発材料の菌体懸濁液の濁度）×１００
一方、対照実験として、上記第１の遠心分離後、１．０ｍｌ×３回、同緩衝液をメンブレンフィルター１２上に添加し、ピペッティングによって洗浄し、回収した液を４．０ｍｌにした場合には、回収率は最大でも７５％であった。この結果は、本発明が容易に高い回収率で微生物を回収できることを示している。
【００３４】
（実施例２）
以下に説明する実施例２は、微生物を捕集及び回収し、更に本実施形態のように微生物の同定・定量を行った例である。また、以下の実施例中の実験の多くは、上記非特許文献１及びMasuko, M. et al. “A Photon counting TV Camera Equipped with anImage Guide for Rapid Detection and Counting of Single Bacteria in a widefield.” Photochem Photobiol 56, 107-111 (1992).（非特許文献２）（何れも発明者が著者に含まれている）によった。
【００３５】
同定・定量の対象の微生物としては、大腸菌Escherichia coli ATCC 12740を用いた。上記非特許文献１の方法に従い、好気培養した菌体を遠心分離で集め、０．８５％ＮａＣｌで一度洗浄し、遠心分離後、菌体をアセトンに懸濁、殺菌し、すぐに０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）で希釈し、この懸濁液を出発材料とした。
【００３６】
大腸菌のラベリングに用いた試薬は、大腸菌Ｏ抗原Ｏ１２７ａに対する抗体（ウサギ由来）（デンカ生研社製、以下、第１抗体と呼ぶ）溶液及びウサギＩｇＧに対する抗体をコンジュゲートした西洋ワサビペルオキシダーゼ（以下、第２抗体−ペルオキシダーゼと呼ぶ）溶液である。
【００３７】
菌体濃度を決定する場合には、細菌計算盤（サンリード硝子）を用い、位相差顕微鏡下、直接計数を行った。
【００３８】
出発材料となる菌体懸濁液濃度を２００cells／ｍｌ程度にする。この懸濁液を４ｍｌ用いる。この菌体懸濁液に第１抗体溶液を添加し、最終濃度２μｇ／ｍｌにする。３０分室温に放置し、これを回収容器１における筒状構造体１０の第１の空間１３に注入し、４℃下、約５０００×Ｇで１０分遠心分離した（第１の遠心分離工程）。ろ液を捨て、第１の空間１３に第２抗体−ペルオキシダーゼ溶液（アマシャム・バイオサイエンス製市販品５０μｌを０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）により４．０ｍｌに希釈したもの）を添加し、室温下で３０分放置した。この操作によって、大腸菌表面には、ペルオキシダーゼがラベルされたことになる。そして、第２抗体−ペルオキシターゼ溶液を遠心分離によって除去した。次に４ｍｌの０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を第１の空間１３に注入し、遠心分離してメンブレンフィルター１２及び大腸菌を洗浄した。
【００３９】
この状態のメンブレンフィルター１２を材料にして、上述した計数方法（Ｓ０８）による計数を行うと、（大腸菌に特異的に結合したものでなく）メンブレンフィルター１２自身に非特異的に吸着されたペルオキシダーゼが発光し、擬似信号を与える。そこで、このメンブレンフィルター１２からラベルされた大腸菌のみを回収する。回収用液体４０を３．０ｍｌの０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）として、微生物（ラベルされた大腸菌）回収のための遠心分離を行った（第２の遠心分離工程）。ろ液を回収して、同緩衝液を添加して、全量を４．０ｍｌにした。
【００４０】
本実施形態の回収方法により回収されて、十分に懸濁した上記の菌体懸濁液０．５ｍｌを１０倍量の０．１Ｍリン酸緩衝液に懸濁し、市販のろ過器を用いてろ過した。ろ液から黒色ニトロセルロースメンブレンフィルター（孔径０．４５μｍ、直径２５ｍｍ）上に大腸菌を補足した。このメンブレンフィルターを材料として、計数方法（Ｓ０８）による計数を行った。撮影時間は室温下で１分間である。なお、計測の詳細は非特許文献２を参照のこと。
【００４１】
その結果、以下の式により回収率を計算したところ、回収率は９１％であった。
回収率＝（大腸菌発光を計数した菌体濃度）／（落射顕微鏡で直接計数した菌体濃度）×１００
この結果は、微生物のラベル化処理を行う際、メンブレンフィルター１２上で行い、試薬で汚染されたメンブレンフィルターからその微生物のみを回収して、別の（汚染されていない）メンブレンフィルター上で計数を行っても、出発材料の菌体懸濁液の濃度がほぼ維持できることを示している。つまり、本発明が容易に高い回収率で微生物を回収でき、上記のような細菌計数法にも有効に利用できることを示している。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】本発明の実施形態に係る微生物の回収容器の斜視図である。
【図２】回収容器の筒状構造体の斜視図である。
【図３】回収容器の軸方向の断面図である。
【図４】本発明の実施形態に係る微生物の回収方法のフローチャートである。
【図５】本発明の実施形態に係る微生物の回収方法の模式図である。
【図６】実施形態において微生物の同定・定量を行う装置を示した図である。
【図７】回収容器の別の例を示した図である。
【符号の説明】
【００４３】
１…回収容器、１０…筒状構造体、１１…筒部、１２…メンブレンフィルター、１３…第１の空間、１４…第２の空間、１５…支持部材、２０…遠心管本体、２２…保持部、２５…キャップ、３０…サンプル、３１…微生物、４０…回収用液体、５０…フォトンカウンティング装置、５１…メンブレンフィルター、５２…ろ紙、５３…テーパー型イメージガイド、５４…ファイバプレート、５５…光電陰極、５６…フォトンカウンティングカメラ、５７…キャップ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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