(57)【要約】Ａ、Ｑ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、Ｒ１ないしＲ４、ｍ及びｎがここで定義したものである式（Ｉ）の化合物を提供する。本発明の化合物は、α４インテグリンレセプターに結合し、よってα４インテグリンに対するリガンドの結合を阻害するもので、α４インテグリン又はそれらのリガンドに関連した疾患及び病状の治療的及び／又は予防的な処置のために有用である。
2004530632.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ｉ）：
2004530632.tif 000029
［上式中、
Ａは、Ｒ４及びオキソで置換されていてもよい５員又は６員で飽和又は不飽和の炭素環又は複素環であり；
Ｑは、ハロゲン、カルボキシル、アルキル又はアリールで置換されていてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ここで一又は複数の炭素原子はＯ、Ｎ、ＮＲ６、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｘは、−ＣＲ５−又は−Ｎ−であり；
Ｙは、Ｈ、−ＣＨＲ３−、−ＣＲ３＝又は結合であり；
Ｚは、Ｈ、−ＣＨＲ３−、＝ＣＲ３−、−ＮＲ３−、＝Ｎ−、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２又は結合であり、Ｙ及びＺの一方がＨである場合、他方もＨであり；
Ｗは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）−、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、−ＣＨ２−、−Ｃ−、−ＮＲ６ＳＯ２− 、−ＳＯ２ＮＲ６− 、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、又は−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−であり；
Ｒ１は、水素であるか、又はアルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択され、その各々は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、炭素環、又は複素環で置換されていてもよく；あるいは、Ｒ１は、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、アミノ又はニトロで置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｒ２は、アルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択され、その各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシル、カルボキサミド、アシル、アシルオキシ、アミジニル、グアニジニル、チオール、アルキルチオ、又はハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノもしくはカルボキシルで置換されていてもよい一又は複数の炭素環又は複素環で置換されていてもよく；あるいはＲ２は、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシル、アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル又はハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノもしくはカルボキシルで置換されていてもよい炭素環又は複素環で置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｒ３及びＲ４は独立して、Ｈ、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環からなる群から選択され、ここで該アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環基は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、オキソ及びカルボキシルからなる群から選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく、また該アルキル、アルケニル及びアルキニル基の一又は複数の炭素原子が、Ｎ、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｒ５は、ＣＯＯＲ１で置換されていてもよく、Ｏ、Ｎ又はＮＲ６に置き換えられた炭素原子を有していてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニル、又はＨであり；あるいはＲ５は、それが垂下している炭素原子と共に、Ｑの隣接する炭素又は窒素原子と二重結合を形成するか；あるいはＲ５は、Ｑの隣接しない炭素又は窒素原子と共に、炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ６は、水素、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；
ｍ及びｎは独立して１、２又は３である］
の化合物、及びそれらの塩、溶媒和化合物及び水和物。
【請求項２】
Ａがベンゼン環である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｑが１ないし３の炭素原子の長さのアルキル鎖で、Ｘに隣接するメチレン基が酸素に置き換えられていてもよい請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
メチレン鎖が２つの炭素原子の長さである請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘに隣接するメチレン基が酸素に置き換えられた請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１がＨである請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘが−ＣＲ５−であり、Ｒ５がＨである請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ＹとＺの両方が水素である請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ＹとＺが両方で１つの結合であって、Ｘと共に５員環を形成する請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｗが−ＮＲ６−であり、Ｒ６がＨ又はＣ１−４アルキルである請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ２が、α−アミノ基がアシル基であってもよいＬ−アミノ酸残基又はＤである請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
前記アミノ酸がチロシンである請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ２がＮ−アセチル−チロシン、Ｄ−チロシン、フェニルアラニン、ベンゾイル、イソニペコトイル、４−メトキシフェニルアセチル、１−フルオレニル−カルボニル、１−ナフトイル、２−ナフトイル、３−ヒドロキシ−フェニルアラニン、３−ヨード−チロシン、３−フルオロ−チロシン、３−クロロ−チロソン、４−（４−ヒドロキシフェニル）−ベンゾイル、２，３，５，６−テトラフルオロ−チロシン、６−ヒドロキシナフトイル、２−フェニル−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパノイル及びＮ−アセチル−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロリンである請求項１０に記載の化合物。
【請求項１４】
次の式（ＩＩ）：
2004530632.tif 000030
［上式中、
Ｑは、ハロゲン、カルボキシル、アルキル又はアリールで置換されていてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ここで一又は複数の炭素原子はＯ、Ｎ、ＮＲ６、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｒ１は、水素であるか、又はアルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択され、その各々は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、炭素環、又は複素環で置換されていてもよく；あるいは、Ｒ１は、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、アミノ又はニトロで置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｒ３及びＲ４は独立して、Ｈ、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環からなる群から選択され、ここで該アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環基は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、オキソ及びカルボキシルからなる群から選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく、また該アルキル、アルケニル及びアルキニル基の一又は複数の炭素原子が、Ｎ、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｒ６は、水素、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；
Ｒ７は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アルキル、アルコキシ又はハロゲン置換されたアルキルであり；
Ｒ８は、Ｈ、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；
Ｒ９はＨ又はＮＲ１１Ｒ１１’であり、ここでＲ１１及びＲ１１’は独立してＨ、アシル又は 及びアミノ酸残基であり；もしくはＲ１１及びＲ１１’の一方はＲ８と共同して複素環を形成し；
Ｒ１０はＯ又はＳであり；
ｍ及びｎは独立して１、２又は３であり；
ｐは１ないし５の整数である］
を有する請求項１に記載の化合物、及びそれらの塩、溶媒和化合物及び水和物。
【請求項１５】
Ｒ１１及びＲ１１’の一方がＲ８と共同して５員の複素環を形成する一方、Ｒ１１及びＲ１１’の他方がＨ又はＣ１−４アルカノイルである請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ５がパラ位においてＯＨである請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
次の式：
2004530632.tif 000031
2004530632.tif 000032
2004530632.tif 000033
2004530632.tif 000034
からなる群から選択される請求項１に記載の化合物、及びそれらの塩、溶媒和化合物及び水和物。
【請求項１８】
請求項１に記載の化合物の有効量を哺乳動物に投与することを含んでなる、哺乳動物におけるα４インテグリンレセプター又はα４インテグリンレセプターのリガンドにより媒介される疾患又は病状を処置する方法。
【請求項１９】
前記疾患又は病状が、関節リウマチ、喘息、乾癬、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患、嚢炎、及びクローン病、セリアック病、非熱帯性スプルー、移植片宿主反応、膵炎、インスリン依存性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管周囲炎、慢性副鼻腔炎、慢性気管支炎、肺炎、膠原病、湿疹、及び全身性エリテマトーデスからなる群から選択される請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
α４インテグリンのタンパク質リガンドへの結合を阻害する方法において、前記α４インテグリンを請求項１に記載の化合物に接触させることを含んでなる方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、インテグリンレセプター、特にα４インテグリンに対して結合親和性を有する、治療薬、予防薬又は診断薬として有用な新規化合物に関する。
【０００２】
（発明の背景）
インテグリンは細胞接着から遺伝子調節までの多くの細胞プロセスに関与するα／βヘテロ二量体細胞表面レセプターである（Ｈｙｎｅｓ， Ｃｅｌｌ １９９２， ６９， １１−２５；Ｈｅｍｌｅｒ， Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９０， ８， ３６５−３６８）。いくつかのインテグリンは疾病プロセスに関与しており、薬剤送達のための可能性のあるターゲットとして、広く興味が持たれている（Ｓｈａｒａｒら， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｅｍｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ １９９５， １６， ３５９−３７８）。免疫系において、インテグリンは炎症プロセス中における白血球の輸送、接着及び浸潤に関連している（Ｎａｋａｊｉｍａら， Ｊ． Ｅｘｐ． Ｍｅｄ． １９９４， １７９， １１４５−１１５４）。インテグリンの差次的発現により、細胞の接着特性が調節され、異なるインテグリンが異なる炎症反応に関与する（Ｂｕｔｃｈｅｒら， Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９６， ２７２， ６０−６６）。α４インテグリンのα４β１（ＶＬＡ−４）及びα４β７（ＬＰＡＭ）は、主として単球、リンパ球、好酸球、好塩基球及びマクロファージで発現するが、好中球では発現しない（Ｅｌｉｃｅｓら， Ｃｅｌｌ １９９０， ６０， ５７７−５８４）。α４インテグリンの主要なリガンド（ｐｒｉｍａｒｙ ｌｉｇａｎｄｓ）は、内皮表面タンパク質粘膜アドレシン細胞接着分子（ＭＡｄＣＡＭ）及び低親和性を有する血管細胞接着分子（ＶＣＡＭ）である（Ｍａｋａｒｅｍら， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． １９９４， ２６９， ４００５−４０１１）。高内皮小静脈の炎症部位に発現しているＭＡｄＣＡＭ及び／又はＶＣＡＭにα４β１及びα４β７が結合すると、白血球が内皮に強固に付着し、炎症組織内に管外遊出される（Ｃｈｕｌｕｙａｎら， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｅｍｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ １９９５， １６， ３９１−４０４）。α４β１、α４β７、ＭＡｄＣＡＭ又はＶＣＡＭに対するモノクローナル抗体は、喘息（Ｓｉｍｍｏｎｓら， Ｂｌｏｏｄ １９９２， ８０， ３８８−３９５）、慢性関節リウマチ（ＲＡ）（Ｊｕｌｉａｎｏら， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １９９３， ５， ８１２−８１８）、及び炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（Ｌａｂｅｒｇｅら， Ａｍ． Ｊ． Ｒｅｓｐｉｒ． Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ． １９９５， １５１， ８２２−８２９及びＢａｒｂａｄｉｌｌｏ， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｅｍｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ １９９５， １６）等の、慢性の炎症疾患を患っている動物モデルにおいて、有効なモジュレーターであることが示されている。抗体は効果があることが分かったが、非経口的に投与しなければならず、元来、生産が煩雑である。従って、α４インテグリンとリガンドであるＭＡｄＣＡＭ及び／又はＶＣＡＭとの間の相互作用を阻害し、関節炎、喘息、多発性硬化症、クローン病、潰瘍性大腸炎、及びＣ型肝炎等の慢性の炎症疾患の治療に有用な小分子化合物を提供することが望まれている。
【０００３】
（発明の要約）
本発明の一側面では、次の式（Ｉ）：
2004530632.tif 000003
［上式中、
Ａは、Ｒ４及びオキソで置換されていてもよい５員又は６員で飽和又は不飽和の炭素環又は複素環であり；
Ｑは、ハロゲン、カルボキシル、アルキル又はアリールで置換されていてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ここで一又は複数の炭素原子はＯ、Ｎ、ＮＲ６、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｘは、−ＣＲ５−又は−Ｎ−であり；
Ｙは、Ｈ、−ＣＨＲ３−、−ＣＲ３＝又は結合であり；
Ｚは、Ｈ、−ＣＨＲ３−、＝ＣＲ３−、−ＮＲ３−、＝Ｎ−、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２又は結合であり、Ｙ及びＺの一方がＨである場合、他方もＨであり；
Ｗは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）−、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、−ＣＨ２−、−Ｃ−、−ＮＲ６ＳＯ２− 、−ＳＯ２ＮＲ６− 、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、又は−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−であり；
Ｒ１は、水素であるか、又はアルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択され、その各々は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、炭素環、又は複素環で置換されていてもよく；あるいは、Ｒ１は、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、アミノ又はニトロで置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｒ２は、アルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択され、その各々は、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシル、カルボキサミド、アシル、アシルオキシ、アミジニル、グアニジニル、チオール、アルキルチオ、又はハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノもしくはカルボキシルで置換されていてもよい一又は複数の炭素環又は複素環で置換されていてもよく；あるいはＲ２は、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシル、アシル、アシルオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル又はハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、アルコキシ、アミノもしくはカルボキシルで置換されていてもよい炭素環又は複素環で置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｒ３及びＲ４は独立して、Ｈ、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環からなる群から選択され、ここで該アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環基は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、オキソ及びカルボキシルからなる群から選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく、また該アルキル、アルケニル及びアルキニル基の一又は複数の炭素原子が、Ｎ、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｒ５は、ＣＯＯＲ１で置換されていてもよく、Ｏ、Ｎ又はＮＲ６に置き換えられた炭素原子を有していてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニル、又はＨであり；又はＲ５は、それが垂下している炭素原子と共に、Ｑの隣接する炭素又は窒素原子と二重結合を形成し
するか；又はＲ５は、Ｑの隣接しない炭素又は窒素原子と共に、炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ６は、水素、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；
ｍ及びｎは独立して１、２又は３である］
の化合物、及びそれらの塩、溶媒和化合物及び水和物が提供される。
【０００４】
本発明の他の側面では、本発明の化合物と製薬的に許容可能な担体、賦形剤又はアジュバントを含有する製薬用組成物が提供される。
また本発明の他の側面では、α４インテグリンを本発明の化合物と接触させることを含む、α４インテグリンのタンパク質リガンドへの結合を阻害する方法が提供される。
さらに本発明の他の側面では、哺乳動物におけるα４インテグリンレセプター又はα４インテグリンレセプターのリガンドにより媒介される疾患又は病状を処置する方法において、有効量の本発明の化合物を該哺乳動物に投与することを含んでなる方法が提供される。
【０００５】
（本発明の詳細な記載）
α４インテグリンに対して結合親和性を有し、次の一般式（Ｉ）：
2004530632.tif 000004
［上式中、Ａ、Ｑ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、Ｒ１ないしＲ４、ｍ及びｎは、ここで定義したものと同一である］
を有する化合物が提供される。
【０００６】
環Ａは、Ｒ４及びオキソ（＝Ｏ）で置換されていてもよい５員又は６員で飽和又は不飽和の炭素環又は複素環である。ここで「炭素環」とは、飽和、部分的に不飽和又は芳香環を含む完全に不飽和な４−１６炭素原子骨格を有する単環、二環又は三環系であることを意味する。環Ａにおいて、適切な炭素環には、シクロアルキル、シクロアルケニル及びアリールが含まれる。好ましい実施態様では、環Ａは、シクロペンチル、シクロヘキシル及びベンゼンからなる群から選択される炭素環である。最も好ましい実施態様では、環Ａはベンゼンである。他の実施態様では、環Ａは複素環である。ここで「複素環」とは、飽和、部分的に不飽和又は芳香環を含む完全に不飽和な４−１６の炭素原子及びヘテロ原子（すなわちＮ、Ｏ及びＳ、並びにＳＯ及びＳＯ２）の組合せを有する単環、二環又は三環系であることを意味する。環Ａにおいて、好ましい複素環は５員及び６員の単環である。特に好ましい環Ａの複素環には、ピリジン、ピラン、ピリミジン、ピラジン、ピリダジン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール及びトリアゾールが含まれる。環Ａは、ヘテロ原子が、存在するならば中心環と共有され、及び／又はＸに隣接していてもよい複素環を包含すると認識される。
【０００７】
Ｑは、ハロゲン、カルボキシル、アルキル又はアリールで置換されていてもよい二価のアルキル、アルケニル又はアルキニル結合基であり、ここで一又は複数の炭素原子がＯ、Ｎ、ＮＲ６、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよい。好ましい実施態様では、Ｑは、１ないし３の炭素原子又は直鎖状のメチレン基のアルキル、より好ましくは２つのメチレン基の長さのアルキルである。他の好ましい実施態様では、Ｘ基に隣接するメチレン基は、窒素原子又はＮＲ６、より好ましくは酸素原子に置き換えられる。特に好ましい実施態様では、Ｑは−Ｏ−ＣＨ２−であり、ここで酸素原子はＸ基に隣接している。
【０００８】
ＸはＱが垂下する架橋基−ＣＲ５−又は−Ｎ−である。好ましい実施態様では、Ｘは−ＣＲ５−であり、ここでＲ５はＨである。他の実施態様では、Ｒ５は、炭素原子がＯ、Ｎ又はＮＲ６に置き換えられていてもよく、またＣＯＯＲ１で置換されていてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニルである。ここで「アルキル」、「アルケニル」及び「アルキニル」とは、１−１０の炭素原子、好ましくは１−６、より好ましくは１−４の炭素原子を有する直鎖状又は分枝状の脂肪族基を意味する。好ましいアルキル基は、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル及びｔ−ブチルである。好ましくは、Ｒ５は、１ないし３の炭素原子又は直鎖状のメチレン基を有するアルキル基であり、ＣＯＯＲ１で置換されている。より好ましくは、Ｒ５は−（ＣＨ２）２−ＣＯＯＲ１である。他の実施態様では、Ｒ５は、それが垂下している炭素原子と共に、Ｑの隣接する炭素又は窒素原子と二重結合を形成する。さらなる他の実施態様では、Ｒ５は、Ｑ基の隣接しない炭素又は窒素原子と共に、炭素環又は複素環を形成する。ここで、好ましい実施態様は、Ｘ基に対してβ位に位置するＱの炭素原子とＲ５が１，３−ジオキソラン環を形成する場合である。特に好ましい実施態様では、ジオキソラン基はＸにおいてスピロであり、２つの酸素原子はＸ基に対してα位にある。
【０００９】
Ｙは、Ｈ、−ＣＨＲ３−、−ＣＲ３＝又は結合であり、Ｚは、Ｈ、−ＣＨＲ３−、＝ＣＲ３−、−ＮＲ３−、＝Ｎ−、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２又は結合であり、Ｙ及びＺの一方がＨである場合、他方もＨである。好ましい実施態様では、Ｙ及びＺの一方が結合で、他方が−ＣＨＲ３−であり、よって式（Ｉ）のベンゼン環及び環Ａに縮合する６員環が形成されて、三環系となる。他の好ましい実施態様では、ＹとＺが双方とも−ＣＨＲ３−であり、７員環を形成する。より好ましい実施態様では、Ｙ及びＺの双方がＨであり、ここで式（Ｉ）のベンゼン環及び環Ａは、縮合した三環系を形成するよりはむしろＸ基を介して結合している。より好ましい実施態様では、Ｙ及びＺの双方が結合であり、よってベンゼン環及び環Ａに縮合する５員環が形成され、最も好ましい実施態様では、式（Ｉ）のベンゼン環及び環Ａと共に５員環がフルオレニル環を形成する。
【００１０】
Ｗは、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）−、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、−ＣＨ２−、−Ｃ−、−ＮＲ６ＳＯ２− 、−ＳＯ２ＮＲ６− 、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ６−、−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、又は−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）ＮＲ６−である。特定の実施態様では、Ｗは、窒素原子が式（Ｉ）のベンゼン環に隣接しているアミド基−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、又はカルボニルがベンゼン環に隣接している−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）−である。他の特定の実施態様では、Ｗは、硫黄原子がベンゼン環に隣接しているスルホンアミド基−ＮＲ６ＳＯ２− 、又は窒素原子がベンゼン環に隣接している−ＳＯ２ＮＲ６−である。Ｗがアミド又はスルホンアミドである場合、Ｒ６は好ましくはＨ又はＣ１−４アルキル、より好ましくはＨ又はメチルである。他の特定の実施態様では、ＷはＯである。特定の好ましい実施態様では、ＷはＮＲ６−であり、ここでＲ６はＨ又はＣ１−４アルキル、特にＨ又はメチルである。
【００１１】
Ｒ１は、水素であるか、又はアルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択され、その各々は、複素環、炭素環、カルボキシル、ニトロ、アミノ、ハロゲン、ヒドロキシルで置換されていてもよい。ここで「アミノ」とは、ここで提示されるようにして置換されていてもよい、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール又はアラルキルで置換された第１級、第２級又は第３級アミンを意味する。また、ここで「カルボキシル」とは、−ＣＯＯＨ並びにそのカルボキシエステル基、特にそのアルキルエステル類を意味する。また、Ｒ１は、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、アミノ又はニトロで置換されていてもよい炭素環又は複素環である。好ましい実施態様では、Ｒ１はＨ、又はインビボで遊離して遊離のカルボキシ基−Ｃ（Ｏ）Ｏ−を生じる基である。
【００１２】
Ｒ２は、それぞれカルボキシル、アミノ、アルコキシ、オキソ、ヒドロキシル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）で置換されていてもよい一又は複数の炭素環又は複素環、又はアルキルチオ、チオール、グアニジニル（−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ−）、アミジニル（−Ｃ（ＮＨ）ＮＨ−又は−ＮＨＣ（ＮＨ）−）、アシルオキシ、アシル、カルボキサミド、カルボキシル、ニトロ、アミノ、アルコキシ、オキソ（＝Ｏ）、ヒドロキシル、ハロゲンで置換されていてもよいアルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択される。ここで「アルコキシ」とは、−Ｏ−アルキル、−Ｏ−アルケニル及び−Ｏ−アルキニルを意味し、ここでアルキル、アルケニル及びアルキニルは先に定義したものである。ここで「アシル」とは、置換されたカルボニル（−Ｃ（Ｏ）−）であることを意味する。適切なアシル基には、アルカノイル、アロイル及びアラルカノイルが含まれる。適切なアシルオキシ基には、アルカノイルオキシ、アロイルオキシ及びアラルカノイルオキシが含まれる。特に好ましい実施態様では、Ｒ２は、そのα窒素又はαアミノ基がアシル化されていてもよい、天然に生じた、もしくは天然に生じたものではないＤ又はＬ−アミノ酸残基である。特に好ましい実施態様では、ＷはＮＲ６であり、Ｒ２はＮ−アセチル−チロシン、Ｄ−チロシン、フェニルアラニン、ベンゾイル、イソニペコトイル、４−メトキシフェニルアセチル、１−フルオレニル−カルボニル、１−ナフトイル、２−ナフトイル、３−ヒドロキシ−フェニルアラニン、３−ヨード−チロシン、３−フルオロ−チロシン、３−クロロ−チロソン、４−（４−ヒドロキシフェニル）−ベンゾイル、２，３，５，６−テトラフルオロ−チロシン、６−ヒドロキシナフトイル、２−フェニル−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパノイル及びＮ−アセチル−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロリンである。より好ましい実施態様では、Ｒ２はチロシンアミノ酸残基、より好ましくはチロシン残基であり、ここでα窒素はアセチルでアシル化されている（すなわちＮ−アセチルチロシン）。
【００１３】
他の実施態様では、Ｒ２は、カルボキシル、アミノ、アルコキシ、オキソ、ヒドロキシル、ハロゲンで置換されていてもよい炭素環又は複素環、又はアルキニル、アルケニル、アルキル、アシルオキシ、アシル、カルボキシル、ニトロ、アミノ、アルコキシ、オキソ、ヒドロキシル、ハロゲンの一又は複数で置換されていてもよい炭素環又は複素環である。特定の実施態様では、Ｒ２は、一又は複数のハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ又はカルボキシルで交互に置換されていてもよいフェニル基で置換された複素環である。特に好ましい実施態様では、複素環は、Ｗがアミド基−Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−又は−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｒ２とＷが共同してプロリンアミノ酸残基を形成するようなピロリジン環である。プロリン残基は、好ましくはβ炭素（すなわちピロリジン環の３位）において、ヒドロキシルでパラ置換（すなわち４位）されていてもよいフェニル基で置換され、よって拘束されたチロシン残基を形成する。フェニル基は、ハロゲン、特にヨード（Ｉ）、クロロ（Ｃｌ）又はフルオロ（Ｉ）で、２、３、５及び６位の一又は複数が置換されていてもよい。さらに、プロリン残基の窒素原子は、特にアセチル等のアルカノイル基でアシル化されていてもよい。
【００１４】
Ｒ３及びＲ４は独立して、Ｈ、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環からなる群から選択され、ここで該アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環基は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、オキソ及びカルボキシルからなる群から選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく、また該アルキル、アルケニル及びアルキニル基の一又は複数の炭素原子は、Ｎ、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよい。特定の実施態様では、Ｒ３及びＲ４はＨである。あるいは、Ｒ３及びＲ４の一方又は双方は、１−６のメチレン基の長さ、好ましくは１−３のメチレン基のアルキル鎖などの結合基を介して垂下して環に結合したカルボキシ基−ＣＯＯＲ１である。結合基は官能基、例えばＯ（アルコキシ）、ＮＲ６（アミノ）、アミド基又はスルホンアミド基により環に垂下していてもよい。好ましい実施態様では、「ｍ」及び「ｎ」の双方が整数１である。
【００１５】
Ｒ６は、水素、アルキル、アルケニル又はアルキニルである。好ましい実施態様では、Ｒ６はＣ１−４アルキル、より好ましくはメチルである。他のより好ましい実施態様では、Ｒ６はＨである。
【００１６】
好ましい実施態様では、本発明の化合物は一般式（ＩＩ）：
2004530632.tif 000005
［上式中、
Ｑは、ハロゲン、カルボキシル、アルキル又はアリールで置換されていてもよいアルキル、アルケニル又はアルキニルであり、ここで一又は複数の炭素原子はＯ、Ｎ、ＮＲ６、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｒ１は、水素であるか、又はアルキル、アルケニル及びアルキニルからなる群から選択され、その各々は複素環、炭素環、カルボキシル、ニトロ、アミノ、ハロゲン、ヒドロキシルで置換されていてもよい；あるいは、Ｒ１は、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、アミノ又はニトロで置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｒ３及びＲ４は独立して、Ｈ、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、ニトロ、カルボキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環からなる群から選択され、ここで該アルキル、アルケニル、アルキニル、炭素環及び複素環基は、ヒドロキシル、ハロゲン、アミノ、オキソ及びカルボキシルからなる群から選択される一又は複数の置換基で置換されていてもよく、また該アルキル、アルケニル及びアルキニル基の一又は複数の炭素原子が、Ｎ、ＮＲ６、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２に置き換えられていてもよく；
Ｒ６は、水素、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；
Ｒ７は、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、アルキル、アルコキシ又はハロゲン置換されたアルキルであり；
Ｒ８は、Ｈ、アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；
Ｒ９はＨ又はＮＲ１１Ｒ１１’であり、ここでＲ１１及びＲ１１’は独立してＨ、アシル又は 及びアミノ酸残基であり；もしくはＲ１１及びＲ１１’の一方はＲ８と共同して複素環を形成し；
Ｒ１０はＯ又はＳであり；
ｍ及びｎは独立して１、２又は３であり；
ｐは１ないし５の整数である］
を有するもの、及びそれらの塩、溶媒和化合物及び水和物である。
【００１７】
好ましい実施態様では、Ｒ７はフェニル基のパラ位（すなわち４位）においてヒドロキシルである。さらに「ｐ」が２、３、４又は５である場合に提供されるＲ７置換基には、３−ヨード、３−フルオロ、３−クロロ及び２，３，５，６−テトラフルオロが含まれる。
特定の実施態様では、Ｒ６及びＲ８はＨであり、Ｒ１０は酸素である。もしくはＲ６はメチルである。
好ましい実施態様では、Ｒ９はＮＲ１１Ｒ１１’であり、ここでＲ１１はＨであり、またＲ１１’はＨ又はアシルであるもの、特にアルカノイル、すなわちアセチルである。他の好ましい実施態様では、Ｒ９はＮＲ１１Ｒ１１’であり、ここでＲ１１及びＲ１１’の一方はＲ８と共同して５員の複素環を形成する一方、Ｒ１１及びＲ１１’の他方はＨ又はＣ１−４アルカノイルである。好ましくは、Ｒ１１とＲ８は共同してピロリジン環を形成し、Ｒ１１’はＨ又はアルカノイル、すなわちアセチルである。
【００１８】
本発明の特定の化合物には：
2004530632.tif 000006
2004530632.tif 000007
2004530632.tif 000008
のもの、それらの塩、溶媒和化合物及び水和物が含まれる。
【００１９】
本発明の化合物は不斉中心を有しており、よって幾何及び立体異性体として存在することが理解される。このような異性体の全てが考慮され、純粋な異性体形態であってもこのような異性体の混合物、並びにラセミ体であっても、本発明の範囲に入る。立体異性化合物はクロマトグラフィー等の当該分野おいて確立された技術、すなわちキラルＨＰＬＣ、又は結晶化法により分離できる。
【００２０】
「製薬的に許容可能な」塩には、酸及び塩基付加塩の双方が含まれる。製薬的に許容可能な酸付加塩とは、生物学的な効能及び遊離塩基の性質を保持し、生物学的に、あるいは他の点で望ましくないものではない、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸等の無機酸、及び脂肪族、脂環式、芳香族、アリール脂肪族（ａｒａｌｉｐｈａｔｉｃ）、複素環、カルボン酸及びスルホン酸クラスの有機酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、グルコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸（ｍａｌｏｎｅｉｃ ａｃｉｄ）、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボン酸（ｅｍｂｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸（ｓａｌｉｃｙｃｌｉｃ ａｃｉｄ）等から選択される有機酸と共に形成される塩を意味する。
【００２１】
製薬的に許容可能な塩基付加塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩等の無機塩基から誘導されたものが含まれる。特に好ましくは、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム及びマグネシウムの塩である。製薬的に許容可能な無毒性の有機塩基から誘導された塩には、第１級、第２級及び第３級アミン、天然に生じた置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペリジン（ｐｉｐｅｒｉｚｉｎｅ）、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂等の塩が含まれる。特に好ましい無毒性の有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン及びカフェインである。
【００２２】
本発明の化合物は、商業的に入手可能な出発物質及び試薬から、確立された有機合成法に従い調製することができる。一般的に、化合物は商業的に入手可能な中心環系から出発して調製できる。調製される特定の化合物に応じて中心環系が処理され、まずカルボキシラート部分−Ｑ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１をＸに付加し、次いでＲ２−Ｗ−部分をベンゼン環に付加するか、もしくはまずＲ２−Ｗ−部分を、次いで−Ｑ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１部分を付加する。
【００２３】
特定の実施態様では、ＸがＣであり、ＱがＸに隣接して酸素を包含する（すなわちエーテル）式（Ｉａ）の化合物が、一般スキーム１に従い調製される。
2004530632.tif 000009
スキーム１において、Ａ、Ｙ、Ｚ、Ｗ、Ｒ２−Ｒ４、ｍ及びｎが先に定義したものである出発化合物（ｉ）を、適切な還元剤、例えば水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４）又は等価な水素化物で還元して、アルコール（ｉｉ）にする。特定の置換基に応じて、出発化合物（ｉ）は商業的に入手してもよく、あるいはさもなければ商業的に入手可能な化合物から、確立された有機合成法に従い調製してもよい。本発明の最終的なエーテル化合物（Ｉａ）は、塩基、例えばＮａＨでアルコール（ｉｉ）を処理し、続いて求電子的中間介在物（ｉｉｉ）と反応させることにより得られ、ここでＬは適切な脱離基、例えばハロゲン、すなわちＢｒであり、Ｑ’は、環系に隣接する最初の炭素原子を除いてＱと同じ、すなわちカルボキシル置換されたアルキル、アルケニル又はアルキニル鎖である。化合物に存在する特定の置換基に応じて、当該分野において標準的な、適切な保護及び脱保護手順が必要であると認識されるであろう。多くの保護基が、Ｇｒｅｅｎｅ及びＷｕｔｓ， Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， 第２版， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， １９９１，に記載されており、また詳細な保護及び脱保護手順についても記載されている。例えば、適切なアミノ保護基には、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、フルオレニル−メチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、２−トリメチルシリル−エチオキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）、１−メチル−１−（４−ビフェニルイル）エトキシカルボニル（Ｂｐｏｃ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）及びベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）が含まれる。カルボキシル基は、フルオレニルメチル基として、ヒドロキシル基がトリチル、モノメトキシトリチル、ジメトキシトリチル及びトリメトキシトリチル基で保護されうる。
【００２４】
Ｘが炭素であり、Ｑがアルキル鎖である本発明の化合物の調製は、次のスキーム２に従い達成されうる。
2004530632.tif 000010
スキーム２において、出発化合物（ｉ）を非求核塩基、例えばＮａＨ、ＬＤＡ又はＴＢＡＦと反応させ、カルバニオン（ｉｉ）とし、続いて中間介在物（ｉｉｉ）と反応させることにより、本発明の式（Ｉｂ）の化合物が生成される。Ｑが、−ＣＯＯＲ１に対する置換されていてもよいＣ２アルキルリンカーである特定の実施態様では、中間介在物カルバニオン（ｉｉ）を、各Ｒが独立して水素、ハロゲン、アルキル、カルボキシル又はアリールであるα、β不飽和カルボキシラート（ｉｖ）と反応させることにより、本発明の化合物（Ｉｂ）が得られる。好ましいＲはハロゲン又はＣ１−４アルキル、すなわちメチルである。
【００２５】
他の実施態様では、ＸがＮである式（Ｉ）の化合物がスキーム３に従い調製される。
2004530632.tif 000011
スキーム３において、出発化合物（ｉ）を、Ｌが適切な脱離基、すなわちＢｒである中間介在物（ｉｉ）と、非求核塩基、例えばＣｓ２ＣＯ３又はＫＣＯ３の存在下で反応させることにより、本発明の最終化合物（Ｉｃ）が生成される。あるいは、出発化合物（ｉ）をスキーム２のようにしてα、β不飽和カルボキシラート（ｉｉｉ）と反応させて、本発明の化合物（Ｉｃ）にすることができる。
【００２６】
他の実施態様では、Ｗが−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−ＳＯ２ＮＨ−又は−ＮＨ−である式（Ｉ）の化合物が、スキーム４に従い調製される。
2004530632.tif 000012
スキーム４において、出発アミン化合物（ｉ）を、それぞれ（ｉｉ）Ｒ２−ＣＯ２Ｈの活性化エステル、（ｉｉｉ）Ｌがハロゲン等の脱離基であるＲ２−ＳＯ２−Ｌ、（ｉｖ）非求核塩基の存在下でＲ２−Ｌ、又はＮａＣＮＢＨ３の存在下でＲ２−Ｃ（Ｏ）Ｈ、（ｖ）Ｒ２−ＯＣ（Ｏ）−Ｌ、及び（ｖｉ）イソシアナートＲ２−Ｎ＝Ｃ＝Ｏといった中間介在物と反応させることにより、アミド（Ｉｄ）、スルホンアミド（Ｉｅ）、アミン（Ｉｆ）、カルバマート（Ｉｇ）及び尿素（Ｉｈ）を調製することができる。チオアミドは同様の方法で、Ｒ２−Ｃ（Ｓ）Ｈ又はＲ２−Ｃ（Ｓ）Ｏ−を使用することにより調製され；チオカルバマートはＲ２−Ｓ−Ｃ（Ｏ）−Ｌ又はＲ２−ＯＣ（Ｓ）−Ｌを使用することにより調製され；チオ尿素はイソチオシアナートＲ２−Ｎ＝Ｃ＝Ｓを使用することにより調製されうることが分かるであろう。
【００２７】
他の実施態様では、Ｗが−Ｏ−又は−Ｓ−である式（Ｉ）の化合物が、スキーム５ａ及び５ｂに従い調製される。
2004530632.tif 000013
2004530632.tif 000014
スキーム５ａ及び５ｂにおいて、出発ヒドロキシル又はチオール化合物を非求核塩基、例えばＮａＨと反応させて、プロトンを除去する。ついで、アニオンを、Ｌが適切な脱離基であるＲ２−Ｌと反応させることにより、本発明の化合物であるエーテル（Ｉｉ）及びチオエーテル（Ｉｊ）が生成される。
【００２８】
特定の実施態様では、Ｗがカルボニル−Ｃ（Ｏ）−である式（Ｉ）の化合物が、スキーム６に従い調製される。
2004530632.tif 000015
スキーム６において、出発化合物（ｉ）をＮａＣＮＢＨ３の存在下でアルデヒド中間介在物（ｉｉ）と反応させることにより、本発明の化合物（Ｉｋ）が得られる。
【００２９】
他の実施態様では、Ｗが−ＮＲ６ＳＯ２−である式（Ｉ）の化合物が、スキーム７に従い調製される。
2004530632.tif 000016
スキーム７において、出発化合物（ｉ）を硫酸、ついでＰＯＣｌ３と反応させて塩化スルホニル化合物（ｉｉｉ）にし、これをＲ２−ＮＨ２と反応させることにより、本発明の化合物（Ｉｌ）が得られる。
【００３０】
他の実施態様では、ＷがＣである式（Ｉ）の化合物が、スキーム８に従い調製される。
2004530632.tif 000017
スキーム８において、出発化合物（ｉ）をＰｄ°触媒、続いてＲ２−Ｂ（ＯＨ）２又はＲ２−Ｃ≡ＣＨと反応させることにより、それぞれ最終化合物（Ｉｍ）又は（Ｉｎ）が得られる。
【００３１】
他の実施態様では、Ｗがカルバマート−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏ−又はチオカルバマート−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）Ｏ−である式（Ｉ）の化合物が、スキーム９に従い調製される。
2004530632.tif 000018
スキーム９において、出発アルコール化合物を、Ｌが適切な脱離基、例えばＢｒである中間介在物Ｒ２−ＮＣ（Ｏ）−Ｌ又はＲ２−ＮＣ（Ｓ）−Ｌと反応させることにより、それぞれ本発明の最終化合物（Ｉｏ）又は（Ｉｐ）が得られる。特定の実施態様では、出発アルコールをモルホリン−Ｃ（Ｏ）−Ｃｌと反応させることで、本発明のモルホリノカルバマート化合物になる。
【００３２】
他の実施態様では、Ｗがチオカルバマート−ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｓ−又はチオカルバマート−ＮＲ６Ｃ（Ｓ）Ｓ−である式（Ｉ）の化合物が、スキーム１０に従い調製される。
2004530632.tif 000019
スキーム１０において、出発チオール化合物（ｉ）を、Ｌが適切な脱離基、例えばＢｒである中間介在物Ｒ２−ＮＣ（Ｏ）−Ｌ又はＲ２−ＮＣ（Ｓ）−Ｌと反応させることにより、それぞれ本発明の最終化合物（Ｉｑ）又は（Ｉｒ）が得られる。
【００３３】
本発明の一側面では、α４インテグリンのリガンドに対する結合を阻害する方法が提供され、該方法は、該α４インテグリンを式（Ｉ）の化合物と接触させることを含む。本方法は溶液ベース又は細胞ベースのアッセイとして行われ、ここで、本発明の化合物はインテグリンの推定又は既知のリガンドの存在下で、インテグリンに導入される。前記化合物は、インテグリンへのリガンドの結合又はその欠如の検出が容易になるように標識され、例えば放射性同位体標識される。よって本発明の化合物は、診断アッセイに有用である。
【００３４】
本発明の化合物は、阻害量の本発明の化合物と上皮細胞又は白血球を接触させることにより、細胞表面上のＶＣＡＭ−１及び／又はＭＡｄＣＡＭを担持する上皮細胞と、表面上のα４β１及び／又はα４β７を担持する白血球細胞との相互作用を防止するのに有用である。前記化合物は、α４β１及び／又はα４β７インテグリンのＶＣＡＭ−１リガンド及び／又はＭＡｄＣＡＭリガンドへの結合に拮抗する化合物の阻害効果を測定するアッセイにおいて有用である。阻害化合物は小分子、タンパク質、又はペプチド、又は抗体であってよい。インビトロアッセイでは、リガンド又はインテグリンを、例えば国際公開第９８２０１１０号、国際公開第９４１３３１２号、国際公開第９６２４６７３号、国際公開第９８０６２４８号、国際公開第９９３６３９３号及び国際公開第９９１０３１２号に記載されている既知の方法を使用し、マイクロタイタープレート等の表面に、直接又は間接的に結合させてもよい。ついで、結合対の他のメンバー、例えばインテグリン又はリガンドのそれぞれ（又は、その表面にそれを発現する細胞）を表面結合膜に添加し、試験分子の阻害効果を測定する。本発明の化合物の阻害活性は、このタイプのアッセイでも測定することができる。
【００３５】
それぞれのリガンドに対するインテグリンの結合は、ＶＣＡＭ−１又はＭＡｄＣＡＭを発現している上皮細胞がついている組織の白血球浸潤に関連した炎症状態に関与していることが知られている。このような組織には、消化管、皮膚、尿路、呼吸気道及び関節滑液組織が含まれる。本発明の化合物は、前記結合が疾患の原因又は疾患の徴候に関与している疾患を治療するのに有用である。所望されない疾患の徴候は、典型的には、内皮細胞表面上のＶＣＡＭ−１及び／又はＭＡｄＣＡＭの発現が増大又はアップレギュレーションされた場合に、炎症誘発性メディエータを放出する細胞接着及び／又は細胞活性化によって生じる。治療が可能で、本発明の化合物の投与により炎症徴候を低減できる様々な疾患状態には、関節リウマチ、喘息、乾癬、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患、嚢炎、及びクローン病、セリアック病、非熱帯性スプルー、移植片宿主反応、膵炎、インスリン依存性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管周囲炎、慢性副鼻腔炎、慢性気管支炎、肺炎、膠原病、湿疹、及び全身性エリテマトーデスが含まれる。本発明の化合物は、インテグリン／リガンドの結合を阻害することにより、これらの疾患及び病状を処置するのに有用である。
【００３６】
本発明の化合物は、α４インテグリンレセプター、すなわちα４β１及びα４β７、及び／又はそれらのリガンド、特にＶＣＡＭ−１及びＭＡｄＣＡＭ−１により媒介される疾患又は病状を、治療的及び／又は予防的に処置するのに有用である。従って、本発明の一側面では、本発明の化合物を有効量、ヒト等の哺乳動物に投与することを含む、該哺乳動物におけるα４インテグリンレセプター又はα４インテグリンレセプターのリガンドにより媒介される疾患又は病状を処置する方法が提供される。「有効量」とは、投与することで、インビボにおいてα４インテグリンに結合可能なリガンドの量を低減することができる化合物の量；又は投与することで、α４インテグリン又はそのリガンドにより媒介される疾患又は病状に関連した徴候の重症度を緩和又は低減することができる化合物の量を意味する。
【００３７】
投与される化合物の実際の量と投与経路は、特定の疾患又は病状並びに他の要因、例えば大きさ、年齢、性別及び処置される個人の種族的出身に依存し、常套的な分析により決定される。本発明の方法において、本化合物は、経口的（口腔内、舌下、吸入を含む）、経鼻的、経腸的、経膣的、静脈内、真皮下、皮下及び局所的に投与され得る。化合物は、製剤化技術において常套的なように、例えば適切な担体、希釈剤、増粘剤、アジュバント等と共に、投与に適切な組成物に製剤化されるであろう。従って、本発明の他の側面は、式（Ｉ）の化合物と製薬的に許容可能な担体、賦形剤又はアジュバントを含有する製薬用組成物を提供することにある。
【００３８】
また本発明の組成物は、付加的な活性成分をさらに含有してもよい。投与形態には、溶液、パウダー、錠剤、カプセル、ゲルカプセル、座薬、局所用軟膏及びクリーム、及び吸入用エアゾールが含まれる。非腸管外投与用の製剤には、バッファー、希釈剤、及び他の適切な添加剤を含み得る滅菌水溶液が含まれる。本発明の化合物と有害な反応をしない非腸管外投与に適した製薬的に許容可能な有機又は無機の担体物質を使用することができる。適切な製薬的に許容可能な担体には、限定されるものではないが、水、塩水、アルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が含まれる。製剤は、滅菌され、所望されるならば、本発明の化合物と有害な反応をしない助剤、例えば滑沢剤、保存料、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を及ぼす塩、バッファー、着色用フレーバー及び／又は芳香物質等と混合することもできる。水性懸濁液は、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び／又はデキストランを含む、懸濁液の濃度を増加させる物質を含んでもよい。場合によっては、懸濁液はさらに安定剤を含有してもよい。
【００３９】
好ましい実施態様では、本発明の化合物は経口送達によって投与される。経口投与用組成物には、パウダー又は顆粒、水性又は非水性媒体の溶液又は懸濁液、カプセル、袋（サシェ）、トローチ、錠剤又はＳＥＣ（ｓｏｆｔ ｅｌａｓｔｉｃ ｃａｐｓｕｌｅｓ（柔軟な弾性カプセル）又はキャプレット）が含まれる。増粘剤、香料添加剤、希釈剤、乳化剤、分散補助剤、担体物質又はバインダーを、このような製剤に望ましくは添加してもよい。このような製剤は、その粘膜に暴露するための消化管に化合物を送達するために使用される。従って、製剤は、胃の極度のｐＨから保護し、又は経時的に化合物を放出し、特定の粘膜部位へのその送達を最適化するために有効な物質からなる。耐酸性の錠剤、カプセル及びキャプレットのための腸溶コーティングは当該分野において公知であり、典型的にはアセタート、フタラート、プロピレングリコール及びソルビタン−モノレアートが含まれる。
【００４０】
食餌性送達のための製剤を生産する種々の方法が当該分野においてよく知られている。一般的には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， １８版， Ｇｅｎｎａｒｏ編， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．， Ｅａｓｔｏｎ， ＰＡ， １９９０を参照のこと。本発明の製剤は、公知の方法で不活性で無毒性の製薬的に適切な賦形剤又は溶媒を使用し、常套的な製剤、例えば錠剤、コーティング錠剤、丸薬、顆粒、エアゾール、シロップ、エマルション、懸濁液及び溶液に転換することができる。治療的に活性な化合物は、それぞれの場合、全混合物の重量に対して約０．５〜９９重量％の濃度、すなわち所望する用量範囲を達成するのに十分な量で存在すべきである。製剤は、適切ならば乳化剤及び／又は分散剤を使用して、例えば溶媒及び／又は賦形剤で活性化合物を拡大することにより調製され、例えば水が希釈剤として使用される場合では、適切ならば有機溶媒を補助溶媒として使用することができる。
【００４１】
また組成物は、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）；フィラー（例えば、ラクトース、マイクロクリスタリンセルロース又はリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）；分解剤（例えば、デンプン又はグリコール酸デンプンナトリウム）；又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）を用いて製剤化されてもよい。錠剤は当該分野においてよく知られている方法によりコーティングしてもよい。また製剤は、適切な香料添加剤、着色剤及び／又は甘味料をさらに含有していてもよい。
【００４２】
経口投与に適切な本発明の製剤は、それぞれ予め決定された量の活性成分を含有する個別単位として、例えばカプセル、カシェ剤（ｃａｃｈｅｔ）又は錠剤；パウダー又は顆粒；水性液体又は非水性液体の溶液又は懸濁液；又は水中油型エマルション又は油中水型エマルションとして提供されてもよい。錠剤は、場合によっては一又は複数の副成分と共に、圧密化又は鋳型成形により作製され得る。圧密化錠剤は適切な機械において、流動性形態の活性成分、例えばパウダー又は顆粒を圧密化し、場合によってはバインダー、滑沢剤、不活性希釈剤、保存料、界面活性剤又は分散剤と混合して、調製されうる。鋳型錠剤は、適切な機械において、不活性希釈剤で湿らされたパウダー化合物の混合物を鋳型成形することにより作製される。錠剤は、コーティングされても割線を入れてもよく、中の活性成分がゆっくりと又は制御されて放出されるように製剤され得る。
【００４３】
実施例１  化合物５の合成
2004530632.tif 000020
商業的に入手可能な２−アミノ−９−フルオレノン１（１０ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのメタノールに溶解し、０．３８ｇ（１０ｍｍｏｌ）の水素化ホウ素ナトリウムを添加した。混合物を２５℃で１時間攪拌し、真空下で所定の乾燥度になるまで濃縮した。残渣を１００ｍＬの飽和した水性ＮａＨＣＯ３−に懸濁し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル層を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル／ヘキサン（２：１）で結晶化し、１．４ｇの純粋な２−アミノ−９−ヒドロキシフルオレン２を生成した。
【００４４】
化合物２（０．３９ｇ；２ｍｍｏｌ）を５０ｍＬの無水ＤＭＦに溶解し、窒素下で０℃まで冷却した。リチウム−ビストリメチルシリルアミド（２ｍｍｏｌ；ＴＨＦに１Ｍ）を滴下し、３０分間攪拌し続けた。ヨード酢酸エチル（３ｍｍｏｌ）を滴下し、溶液を０℃で１２時間攪拌した。反応混合物を２００ｍＬの水に注ぎ、酢酸エチル（２００ｍＬ）で抽出した。抽出物を濃縮し、生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（２５％の酢酸エチル／ヘキサン）を介して精製し、０．３４ｇのフルオレニルエーテル３を生成した。
【００４５】
フルオレニルエーテル３（０．２８ｇ；１ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶解し、Ｎ−ＦＭＯＣ−Ｌ−チロシン（１ｍｍｏｌ）を、続いてＨＡＴＵ（１ｍｍｏｌ）及びＮ−メチルモルホリン（２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を２５℃で一晩攪拌し、５０ｍＬの水に注ぎ、酢酸エチルで生成物を抽出した。真空下で濃縮し、０．５ｇの原料４を生成し、これを、さらなる精製をすることなく次の工程で直接使用した。
化合物４（０．５ｇ）を１：１のＴＨＦ／水に溶解し、３ｍＬのＬｉＯＨ（水に１Ｍ）を添加した。反応物を２５℃で４時間攪拌し、真空下で濃縮して、ほとんどのＴＨＦを除去した。水溶液を凍結乾燥し、粗生成物を逆相ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水の勾配）で精製し、ＴＦＡ塩として９０ｍｇの純粋物５を生成した。
【００４６】
実施例２  ２−アミノカルバゾールの合成
2004530632.tif 000021
カルバゾール（１００．２４ｇ）を触媒の三フッ化ホウ素エーテル化合物（０．６５ｍＬ）と共に、無水酢酸（３００ｍＬ）に懸濁し、溶液を２５分間還流した後、０℃まで冷却し、固形物を収集し、ヘキサンで再結晶させたところ、８２．６５ｇの９−アセチル−カルバゾールが得られた。
９−アセチル−カルバゾール（４１．８５ｇ、０．２ｍｏｌ）を１Ｌの塩化メチレンに溶解し、２８．５ｍＬの塩化アセチル（０．４ｍｏｌ）と１２０ｇの塩化アルミニウム（０．９ｍｏｌ）を添加し、溶液を１．５時間還流した。溶液を−７８℃まで冷却し、６ＮのＨＣｌを攪拌しつつゆっくりと添加し、室温まで暖めた。塩化メチレンを添加して沈殿物を溶解し、溶液を抽出し、有機物をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、木炭で脱色し、濾過して濃縮した。ベンゼン／ヘキサンから再結晶させたところ、２７．９ｇの２，９−ジアセチルカルバゾールが得られた。
【００４７】
２，９−ジアセチルカルバゾール（２５．１ｇ、０．１ｍｏｌ）を１００ｍＬのピリジンに溶解した。ヒドロキシルアミンヒドロクロリド（１０．４２ｇ、０．１５ｍｏｌ）を添加し、溶液を２０分間還流した。混合物を冷却し、氷中の濃ＨＣｌ７０ｍＬに注いだ。沈殿物を濾過して収集し、多量の水で洗浄し、真空下でＫＯＨ上で乾燥させたところ、２４ｇの白色固体が生成した。５ｇのこの固体（１８．８ｍｍｏｌ）を１７ｍＬのＴＦＡに溶解し、０．３ｍＬの無水トリフルオロ酢酸（２．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２０分間還流し、ついで濃縮したところ、粗２，９−ジアセチルカルバゾールアミンが得られた。両方のアセチル基を１０％のＫＯＨ水溶液４００ｍＬに粗物質を懸濁し、１日還流することにより除去した。溶液を冷却し、酢酸エチルを添加して、生成物２−アミノカルバゾールを抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。
【００４８】
実施例３  化合物６の合成
2004530632.tif 000022
６ｍＬのＤＭＦに０．１ｇ（０．５５ｍｍｏｌ）の２−アミノカルバゾールが入ったものに、０．３７ｇ（１．６５ｍｍｏｌ）のＮ−Ａｃ−Ｌ−Ｔｙｒ、０．３７ｇ（１．６５ｍｍｏｌ）のＨＢＴＵ及び０．３ｍＬ（１．７ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを添加した。反応物を１時間攪拌し、酢酸エチルに注ぎ、続いて０．１ＮのＨ２ＳＯ４、ＮａＨＣＯ３水溶液及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（１０％のメタノール／塩化メチレン）により、０．１６ｇ（０．２６ｍｍｏｌ）のアセチル化アミンが得られた。これを、４ｍＬのＤＭＦに入れた炭酸セシウム（０．１８５ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）、ブロモ酢酸エチル（０．０４３ｍＬ、０．３９ｍｍｏｌ）と共に１時間攪拌し、ついで酢酸エチルに注ぎ、飽和したＮＨ４Ｃｌ及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。これを、精製することなく、５ｍＬのＴＨＦ及び５ｍＬの水に溶解し、０．０４３ｇ（１ｍｍｏｌ）のＬｉＯＨを添加した。エステルを＜３０分で開裂させ、ついで酢酸エチルで希釈し、続いて０．１ＮのＨ２ＳＯ４及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。生成物を凍結乾燥し、ＨＰＬＣで精製した。
【００４９】
実施例４  化合物７の合成
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２００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２に６．５７ｇ（３１．４４ｍｍｏｌ）の９−アセチルカルバゾールが入ったものに、１０．６８ｇの硝酸銀（６３ｍｍｏｌ）及び２５．１ｇの塩化アルミニウム（１８８．６ｍｍｏｌ）を添加した。これを室温で２時間攪拌し、塩化メチレンで希釈し、８２ｍＬの濃ＨＣｌを含有する氷に注いだ。有機層を分離し、水で３回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥して、暗褐色の固体になるま濃縮した。前記固体を２００ｍＬのメタノールに溶解し、４％のＫＯＨ水溶液を添加し、溶液を１時間還流した。溶液を冷却して濃縮し、ついで酢酸エチルに溶解し、続いて水と塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。９−ニトロカルバゾール（０．１ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＤＭＦに溶解し、０．１３ｍＬ（１．４２ｍｍｏｌ）のアクリル酸メチル及び０．６９ｇ（２．１２ｍｍｏｌ）のＣｓ２ＣＯ３を添加した。反応物を２時間攪拌し、酢酸エチルで希釈し、飽和したＮＨ４Ｃｌ及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（２５％の酢酸エチル／ヘキサン）により、０．０８１ｇのアルキル化９−ニトロカルバゾールが得られた。これを５ｍＬのメタノールに溶解し、Ｐｄ／ＣのスパチュラとＨ２のバルーンを使用し、ニトロカルバゾールをアミノカルバゾールに還元した。これを５ｍＬのＤＭＦに溶解し、０．１６７ｇ（０．７５ｍｍｏｌ）のＮ−Ａｃ−Ｌ−Ｔｙｒ、０．３９４ｇ（０．９６ｍｍｏｌ）のＨＢＴＵ及び０．１９ｍＬ（１．１２ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを添加した。これを１時間攪拌し、酢酸エチルで希釈し、続いて０．１ＮのＨ２ＳＯ４、ＮａＨＣＯ３水溶液及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。これを、精製することなく、５ｍＬのＴＨＦ及び５ｍＬの水に溶解し、０．０６３ｇ（１．４９ｍｍｏｌ）のＬｉＯＨを添加した。エステルを＜２０分で開裂させ、ついで酢酸エチルで希釈し、続いて０．１ＮのＨ２ＳＯ４及び塩水で洗浄した。これをＮａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮し、ついで凍結乾燥して、ＨＰＬＣで精製した。
【００５０】
実施例５  化合物８の合成
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６ｍＬのＤＭＦに０．３ｇ（１．６４ｍｍｏｌ）の２−アミノカルバゾールが入ったものに、１．２ｇ（６．５９ｍｍｏｌ）の拘束されたＮ−Ａｃ−Ｌ−Ｔｙｒ、２．３１ｇ（６．１ｍｍｏｌ）のＨＢＴＵ及び２ｍＬ（１１．５ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを添加した。反応物を２．５時間攪拌し、酢酸エチルに注ぎ、続いて０．１ＮのＨ２ＳＯ４、ＮａＨＣＯ３水溶液及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（１０％のメタノール／塩化メチレン）により、０．６０ｇのアセチル化アミンが得られた。０．２０ｇのこれを、５ｍＬのＤＭＦ中に入った炭酸セシウム（０．３４９ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）、ブロモ酢酸エチル（０．０８ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）と共に１時間攪拌し、これをついで酢酸エチルに注ぎ、飽和したＮＨ４Ｃｌ及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。これを、精製することなく、４ｍＬのＴＨＦ及び４ｍＬの水に溶解し、０．０８２ｇ（１．９５ｍｍｏｌ）のＬｉＯＨを添加した。エステルを＜３０分で開裂させ、ついで酢酸エチルで希釈し、続いて０．１ＮのＨ２ＳＯ４及び塩水で洗浄した。ついで、これをＮａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮し、ついで凍結乾燥して、ＨＰＬＣで精製した。
【００５１】
実施例６  化合物９の合成
2004530632.tif 000025
５ｍＬのＤＭＦ中に入れた拘束Ｔｙｒ（実施例５と同様）によりアシル化された２−アミノカルバゾール０．２ｇ（０．４８ｍｍｏｌ）に、炭酸セシウム（０．３４９ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）及びアクリル酸メチル（０．０４３ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）を添加した。これを１時間攪拌し、ついで酢酸エチルに注ぎ、飽和したＮＨ４Ｃｌ及び塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮した。これを、精製することなく、３ｍＬのＴＨＦ及び３ｍＬの水に溶解し、０．０８１ｇ（１．９２ｍｍｏｌ）のＬｉＯＨを添加した。エステルを＜２０分で開裂させ、ついで酢酸エチルで希釈し、続いて０．１ＮのＨ２ＳＯ４及び塩水で洗浄した。これをＮａ２ＳＯ４上で乾燥させて濃縮し、ついで凍結乾燥して、ＨＰＬＣで精製した。
【００５２】
実施例７  ３−アミノ−ジベンゾスベロールの合成
2004530632.tif 000026
ジベンゾスベロール（６．０ｇ、アルドリッチ社製）を、周囲温度で１００ｍｌの攪拌された濃硝酸に添加した。周期反応進行分析（ｔｌｃ、ＮＭＲ及びＩＲ）により、まずジベンゾスベロールがジベンゾスベロンに酸化され、ついで３位がニトロ化されたことが示された。２時間後、反応混合物を氷冷水に注ぎ、１：１のヘキサン：酢酸エチルで抽出した。粗生成物をシリカによるフラッシュクロマトグラフィー（９：１のｈｅｘ／ＥｔＯａｃ）で精製し、３．２２ｇ（４５％）の３−ニトロジベンゾスベロンを生成した。３−ニトロベンゾスベロン（３．２２ｇ）を、１：１のメタノール／ＴＨＦ（４０ｍｌ）、酢酸（２ｍｌ）及び１０％のＰｄ／Ｃ（．５ｇ）中で４０ｐｓｉの水素を用いて、１．５時間還元した。濾過及び濃縮により、３−アミノジベンゾスベロン１．３５ｇ（４８％）が得られた。
３−アミノジベンゾスベロン（１．３５ｇ）及び水素化ホウ素ナトリウム（３ｇ）を１００ｍｌのＴＨＦに溶解した。エタノール（３０ｍｌ）を、周囲温度で攪拌しながら、１時間以上かけて少しずつ添加した。１８時間後、１ＮのＨＣｌをｐＨが７になるまで滴下した。反応混合物を１：１のヘキサン／酢酸エチルと飽和した重炭酸ナトリウム水溶液の間に分配し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し濃縮したところ、１．０ｇの結晶性３−アミノジベンゾスベロール（７４％）が得られた。
【００５３】
実施例８  化合物１０の合成
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３−アミノジベンゾスベロール（０．９５ｇ）を乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）に溶解した。水素化ナトリウム（油中に６０％を０．２５ｇ）を添加し、反応混合物を、水素の放出が停止するまで攪拌した。ヨード酢酸エチル（１．３５ｇ）を添加し、反応混合物を周囲温度で３時間攪拌し、ついで酢酸エチルと水との間に分配し、塩水で洗浄し、乾燥して濃縮した。シリカによるフラッシュクロマトグラフィー（７５：２５のｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ）により、０．７９ｇの３−アミノ−５−（エチル−カルボキシメチル）ジベンゾスベラン（６０％）が得られた。
３−アミノ−５−（エチル−カルボキシメチル）ジベンゾスベラン（３９５ｍｇ）、Ｎ−アセチルチロシン（４２５ｍｇ）、ＨＢＴＵ（７２３ｍｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（４９１ｍｇ）及び５ｍｌの無水ＤＭＦを組合せ、周囲温度で一晩攪拌した。反応物を酢酸エチルと１０％のクエン酸水溶液との間に分配した。有機相を乾燥させ、濾過し、生成物をシリカ（９６：４の塩化メチレン：メタノール）により精製したところ、２９０ｍｇの２４０１５−９４が得られた。
上記生成物（２４０１５−９４、５０ｍｇ）を１：１のエタノール：水８ｍｌに溶解し、６．１ｍｇの水酸化リチウム一水和物を添加した。３時間後、加水分解が完了し、１ｍｌの酢酸を添加した。反応混合物を濃縮し、生成物をＨＰＬＣ（１インチ、Ｃ−１８、６０分で１０〜９０、２５４ｎｍ）で精製した。
【００５４】
実施例９  化合物１１の合成
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６８μＬのアクリル酸（０．２５ｍｍｏｌ、Ｒ＝Ｈ）、続いて１３５ｍｇのＨＯＢｔ（０．２５ｍｍｏｌ）及び１５７μＬのＤＩＰＣ（０．２５ｍｍｏｌ）を、４ｍＬのＤＣＭに添加した。２分間平衡させた後、この溶液を、２００ｍｇのワングポリスチレン樹脂（０．５ｍｍｏｌ／ｇ、０．１ｍｍｏｌ）と組み合わせ、４時間振盪した後、樹脂を濾過し、反復容量のＤＭＦ、ＴＨＦ、ＭｅＯＨ及びＤＣＭで十分に洗浄した。乾燥バイアルにおいて、２ｍＬのＴＨＦを、ＴＨＦに１．０ＭのＴＢＡＦが入った溶液（アルドリッチケミカル社）２ｍＬと組み合わせた。３６２．５ｍｇの２−アミノフルオレン（Ｘ＝Ｈ）をＴＢＡＦ溶液に添加し、先に記載した樹脂に添加する前に、１０分間振盪した。樹脂を１６時間攪拌し、先のようにして洗浄した。この時点で、ＤＭＦ中のアミノ酸、ＨＯＡｔ、ＨＡＴＵ及びＤＩＰＥＡの０．２５Ｍ溶液４ｍＬで１６時間、樹脂を処理することにより、アミノ酸チロシンをフルオレニル環上のアニリンにカップリングした。樹脂を洗浄後、ＮＭＰ中の２５％ピペリジン溶液４ｍＬと樹脂を１０−１５分間、混合することにより、ＦＭＯＣ保護基を除去した。繰り返し洗浄により樹脂からピペリジンを除去し、４ｍＬのＤＣＭ中にそれぞれ０．２５Ｍ濃度で入った無水アセチル及びＤＩＰＥＡの溶液を使用し、１時間、樹脂についてアシル化を行い、続いて洗浄工程を行った。４ｍＬの９０％ＴＦＡ、５％のＤＣＭ、２．５％の水、及び２．５％のトリエチルシランの混合物で樹脂を１時間処理することにより、樹脂から化合物を遊離させた。ＴＦＡ溶液を樹脂から濾過し、窒素ガス流下で蒸発させた。生成物をＣ−１８逆相ＨＰＬＣで精製したところ、３ｍｇの生成物（Ｒ、Ｒ’＝Ｈ）が生成され、質量分析により確認された。
【００５５】
アクリレートとの反応はまたＲがアルキル基である場合も実施できる。Ｒ’＝Ｂｒの場合は、ＦＭＯＣ−チロシンによるアシル化の前に、アリールボロン酸を使用するスズキカップリング法を実施した。典型的な手順は次の通りである。樹脂（１００ｍｇ）を、０．２５Ｍのボロン酸、０．２５ＭのＤＩＰＥＡ及び５０ｍｇのパラジウム触媒Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２を含有する２ｍＬのＮＭＰ中で膨張させ、６０℃で６時間加熱する。種々のアミン又は炭酸塩の塩基及びパラジウム触媒を使用し、この変換を実施することもできる。さらに、チロシン環上の窒素を、種々の条件下でアシル化又はスルホニル化することで、アセチル基以外の官能基を有する生成物を産出することができる。フルオレニル環の９位に付加されるさらなるアクリレートから生じる副生成物が、より多くの樹脂を用いると観察され、ある場合には有意な量で単離された。
【００５６】
実施例１０  生物学的活性アッセイ
本発明の化合物を、次のようにして、レセプターを有するプレートにサンプルの連続希釈物を添加することにより、α４β７／ＭＡｄＣＡＭ−１又はα４β１／ＶＣＡＭ−１の結合相互作用をブロックする能力についてアッセイすることができる。９６ウェルプレートをマウス抗−ヒトα４（３１４７０Ｄ、ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ、ＳａｎＤｉａｇｏ、ＣＡ）で被覆する。プレートをデカントし、０．５％のＢＳＡでブロックする。洗浄後、α４β１又はα４β７を添加し、２時間室温でインキュベートする。プレートを洗浄し、小分子アンタゴニストのサンプルを、室温で２時間、ＭＡｄＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰ又はＶＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰを有するプレートに添加する。さらなる洗浄後、結合したＭＡｄＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰ又はＶＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰをテトラメチルベンジジンの添加により検出し（ＴＭＢ、Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ ＆ Ｐｅｒｒｙ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｅｒｇ、ＭＤ）、続いて生成物の吸光度を検出する。
別法として、化合物を任意の公知のタンパク質−タンパク質又は細胞ベースアッセイ法、例えば国際公開第９９／１０３１２号（実施例１７９−１８０）及び国際公開第９９／３６３９３号（ＲＰＭＩ−ＣＳ−１細胞接着アッセイ）を使用してアッセイすることもできる。Ｃａｒｄａｒｅｌｌｉら， １９９４， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２６９：１８６６８−１８６７３を参照のこと。
【００５７】
例えば、９６ウェルＥＬＩＳＡプレートを、リン酸バッファー生理食塩水中の２μｇ／ｍｌの抗ヒトＣＤ４９ｄ（３１４７０Ｄ、ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）で４℃にて一晩被覆する。プレートをデカントし、ゆっくりと振盪しながら室温で１時間、アッセイ用バッファー（５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、０．０５％のトゥイーン２０及び０．５％のＢＳＡ）でブロックする。プレートを（５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１００ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、０．０５％のトゥイーン２０中で）３回洗浄し、アッセイバッファーに所望のインテグリンが入ったもの２μｇ／ｍｌを添加し、ゆっくりと振盪しながら室温で２時間インキュベートする。３回洗浄した後、小分子アンタゴニストのサンプル（１００％ＤＭＳＯに１０ｍＭのストックから連続希釈したもの）５０μｌを、アッセイ用バッファー中に入った１μｇ／ｍｌのＭＡｄＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰ又はＶＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰを５０μｌ有するプレートに添加する。プレートをゆっくりと振盪しながら、室温で２時間インキュベートし、続いて６回洗浄する。結合したＭＡｄＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰ又はＶＣＡＭ−１−Ｉｇ−ＨＲＰは、１０分間、ペルオキシダーゼ基質３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジンを添加し（ＴＭＢ、Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ ＆ Ｐｅｒｒｙ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｅｒｇ、ＭＤ）、１Ｍのリン酸を添加して反応を停止させることにより検出される。溶液の４５０ｎｍでの吸光度をプレートリーダーで読み取る。
【００５８】
適切な動物モデルは、本発明の化合物で処置可能な多くの疾患及び病状が存在しているものである。特定の疾患及び所望の用量におけるこれらの化合物の効能のさらなる確認は、これらの確立されたモデルを使用してアッセイすることができる。例えば、慢性的な炎症性疾患、例えば喘息（Ｌａｂｅｒｇｅ， Ｓら， Ａｍ． Ｊ． Ｒｅｓｐｉｒ． Ｃｒｉｔ． Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．， １９９５， １５１：８２２−８２９）、関節リウマチ（ＲＡ；Ｂａｒｂａｄｉｌｌｏ， Ｃ．ら， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｅｍｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．， １９９５， １６：３７５−３７９）及び感染性大腸炎（ＩＢＤ；Ｐｏｄａｌｓｋｉ， Ｄ．Ｋ．， Ｎ． Ｅｎｇ． Ｊ． Ｍｅｄ．， １９９１， ３２５：９２８−９３７；Ｐｏｗｒｉｅ， Ｆ．ら， Ｔｈｅｒ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １９９５， ２：１１５−１２３）は、本発明の化合物の活性を実証し、用量及び効能の研究を実施するのに使用することができる。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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