(57)【要約】【化１】2004522779.tif 000043ＸがＨであり、Ｙが脱離基であり、Ｒ1が好ましくは芳香族ＤＮＡ結合サブユニットである一般式（Ｉ）または（ＩＡ）の化合物は、デュオカルマイシンのプロドラッグアナログである。この化合物は、腫瘍において高レベルで発現するシトクロムＰ４５０によって（特に、ＣＹＰ１Ｂ１によって）、Ｘが結合される炭素原子においてヒドロキシル化されることが予測される。このプロドラッグは、細胞分裂を抑制するＤＮＡアルキル化剤として働くであろう腫瘍細胞において優先的に活性化されることが予測される。
2004522779.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物の治療による処置の方法において使用するための組成物の製造における一般式ＩまたはＩＡの化合物あるいはその塩の使用：
【化１】
2004522779.tif 000021
（ここで、ＸはＨであり；
Ｙは、脱離基であり
Ｒ1は、−Ａｒ、−ＮＨ2、Ｒ7または−ＯＲ7であり；
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4  Ｒ5およびＲ6は、各々独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＮＨＲ16、−ＮＲ162、−Ｎ+Ｒ163；−ＮＨＣＯＲ8、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ9、−ＮＨＣＯＯＲ9および−ＣＯＯＲ9から選択され；
Ｒ7、Ｒ8およびＲ9は、独立して、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
Ａｒは、
【化２】
2004522779.tif 000022
から選択され（ここで、Ｂは、ＮまたはＣＲ10であり；
Ｒ10は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ14、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ15、−ＮＨＣＯＯＲ15、−ＣＯＯＲ15およびＨから選択され；
Ｚは、Ｏ、Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−またはＮＨであり；
各Ｒ11は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＮＨＲ16、−ＮＲ162、−Ｎ+Ｒ163、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ14、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ15、−ＮＨＣＯＯＲ15およびＣＯＯＲ15から選択され；
ｎは、０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ12は、Ｈ、−ＣＯＡｒ1、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＲ15または−ＣＯＯＲ15であり；
各Ｒ13は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＮＨＲ16、−ＮＲ162、−Ｎ+Ｒ163、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ14、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ15、−ＮＨＣＯＯＲ15および−ＣＯＯＲ15から選択され；
ｍは、０、１または２であり；
Ｒ14は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、必要に応じて置換されたヘテロアリール、Ｃ7-12アラルキル、Ａｒ1およびリガンドから選択され；
Ｒ15は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
各Ｒ16は、独立して、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択され；そして
Ａｒ1は、Ａｒと同じ基から選択される（但し、任意の１つの環における多くとも１つの基Ｒ11またはＲ13が基Ａｒ1を含む）））
【請求項２】
動物がヒトである、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
処置が腫瘍の処置である、請求項１または請求項２に記載の使用。
【請求項４】
Ｙが、−ＯＣＯＯＲ17、−ＯＣＯＮＨＲ18、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉおよび−ＯＳＯＯＲ19（ここで、Ｒ17、Ｒ18およびＲ19は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリール；好ましくはＣｌから選択される）から選択される、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
Ａｒ1が
【化３】
2004522779.tif 000023
である、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
Ｒ1がＡｒである、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項７】
Ａｒが基
【化４】
2004522779.tif 000024
である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
ｎが少なくとも１であり且つＡｒ基の基Ｒ11の１つが−ＮＨＣＯＡｒ1である、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
Ａｒ1が基
【化５】
2004522779.tif 000025
である、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
Ａｒ1において、ｎが少なくとも１であり且つＲ11が−ＮＨＣＯＡｒ1以外であるか、またはｎが０である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
Ａｒが基
【化６】
2004522779.tif 000026
である、請求項６に記載の使用。
【請求項１２】
Ｒ12が−ＣＯＡｒ1である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
Ａｒ1が基
【化７】
2004522779.tif 000027
である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
Ａｒ1において、Ｒ12が−ＣＯＡｒ1以外である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
Ｒ2がＨである、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項１６】
Ｒ3がＨである、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項１７】
Ｒ4がＨである、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項１８】
Ｒ5が、Ｈ、Ｃ1-4アルコキシまたは−ＣＮ、好ましくはＭｅＯ−またはＨである、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項１９】
Ｒ6がＨである、先の請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項２０】
治療による動物の処置における使用のための請求項１および４〜１９のいずれかにおいて定義されるような一般式Ｉの化合物。
【請求項２１】
請求項１および４〜１９のいずれかに定義されるような一般式Ｉの化合物ならびに薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物。
【請求項２２】
一般式ＩＩまたはＩＩＡの化合物あるいはその塩
【化８】
2004522779.tif 000028
（ここで、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5およびＲ6は、上記に定義されるとおりであり；
Ｘ1は、Ｈであり；
Ｙ1は、脱離基であり；
Ｒ20は、Ｒ7、−ＯＲ7、ＮＨ2またはＡｒ2であり；
Ｒ7は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
Ａｒ2は、
【化９】
2004522779.tif 000029
から選択され（ここで、Ｂ1は、ＮまたはＣＲ22であり；
Ｚ1は、Ｏ、Ｓ、−ＣＨ＝ＣＨ−、またはＮＲ21であり；
Ｒ21は、アミン保護基であり；
各Ｒ22は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ  Ｃ1-4アルキル、ＮＯ2、−ＮＨＲ21、−ＮＨＲ26、−ＮＲ262、−Ｎ+Ｒ263、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ25、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ7および−ＣＯＯＲ7から選択され；
ｐは、０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ23は、Ｈ、ＣＯＡｒ3、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨまたは−ＣＯＲ7であるか、あるいはアミン保護基であり；
各Ｒ24は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ  Ｃ1-4アルキル、ＮＯ2、−ＮＨＲ21、−ＮＨＲ26、−ＮＲ262、−Ｎ+Ｒ263、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ25、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ7、および−ＣＯＯＲ7から選択され；
ｑは０、１または２であり；
Ｒ25は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、必要に応じて置換されたヘテロアルキル、Ｃ7-12−アラルキル、Ａｒ3およびリガンドから選択され；
Ｒ26は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択される
Ａｒ3は、Ａｒ2と同じ基から選択される（但し、任意の１つの環における多くとも１つの基Ｒ22またはＲ24が基Ａｒ3を含む。）））
【請求項２３】
Ｙ1が、−ＯＣＯＯＲ17、−ＯＣＯＮＨＲ18、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉおよび−ＯＳＯＯＲ19（ここで、Ｒ17、Ｒ18およびＲ19は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、および必要に応じて置換されたヘテロアリール；好ましくはＣｌから選択される）から選択される、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
Ａｒ3が
【化１０】
2004522779.tif 000030
である、請求項２２または請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ20がＡｒ2である、請求項２２〜２３のいずれかに記載の化合物。
【請求項２６】
Ａｒ2が基
【化１１】
2004522779.tif 000031
である、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
ｐが少なくとも１であり且つ基Ｒ20の基Ｒ22の１つが基−ＮＨＣＯＡｒ3である、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
Ａｒ3が
【化１２】
2004522779.tif 000032
である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
Ａｒ3において、ｐが少なくとも１であり且つＲ22が−ＮＨＣＯＡｒ3以外であるか、またはｐが０である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
Ａｒ2が基
【化１３】
2004522779.tif 000033
である、請求項２５に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ23がＣＯＡｒ3である、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
Ａｒ3が
【化１４】
2004522779.tif 000034
である、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ａｒ3において、Ｒ23が−ＣＯＡｒ3以外である、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｒ20がＡｒ2以外である、請求項２２または請求項２３に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ1がＨである、請求項２２〜３４のいずれかに記載の化合物。
【請求項３６】
Ｒ3がＨである、請求項２２〜３５のいずれかに記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ4がＨである、請求項２２〜３６のいずれかに記載の化合物。
【請求項３８】
Ｒ5が、Ｈ、Ｃ1-4アルコキシおよび−ＣＮ、好ましくはＭｅＯ−から選択される、請求項２２〜３７のいずれかに記載の化合物。
【請求項３９】
Ｒ6がＨである、請求項２２〜３７のいずれかに記載の化合物。
【請求項４０】
以下から選択される、請求項２２に記載の化合物：
３−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンズ［ｅ］インドール；
１−（クロロメチル）−３−［（５−メトキシインドール−２−イル）カルボニル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈベンズ［ｅ］インドール；
４−クロロ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−５，６−ベンゾキノリン；および
４−クロロ−１−（（５メトキシインドール−２−イル）カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−５，６−ベンゾキノリン。
【請求項４１】
治療による動物の処置における使用のための請求項２２〜４０のいずれかに記載の化合物。
【請求項４２】
請求項２２〜４０のいずれかに記載の化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む、薬学的組成物。
【請求項４３】
式ＩＩＩまたはＩＩＩＡの化合物
【化１５】
2004522779.tif 000035
（ここで、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は請求項１に定義されるとおりであり；
Ｘ2は、Ｈであり；そして
Ｙ2は、脱離基あるいはヒドロキシルまたは保護ヒドロキシル基である）
が一般式Ｖ
Ｒ27ＣＯＹ3            ＩＶ
（ここで、Ｒ27は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびＡｒ4から選択され；
Ａｒ4は
【化１６】
2004522779.tif 000036
から選択され（ここで、Ｂ2は、ＮまたはＣＲ32であり；
Ｚ2はＯ、Ｓ、−ＣＨ＝ＣＨ−またはＮＲ33であり；
各Ｒ28は、Ｃ1-4−アルコキシ、Ｃ1-4−アルキル、ＮＯ2、ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＮＨＲ33、−ＮＨＲ35、−ＮＲ352、−Ｎ+Ｒ353−、−ＮＨＣＯＲ34、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ36および−ＣＯＯＲ36から選択され；
ｒは０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ29は、アミン保護基であり；
Ｒ30は、アミン保護基、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＲ36または−ＣＯＡｒ5であり；
各Ｒ31は、Ｃ1-4−アルコキシ、Ｃ1-4−アルキル、ＮＯ2、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＮＨＲ33、−ＮＨＲ35、−ＮＲ352、−Ｎ+Ｒ353、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ34、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ36、および−ＣＯＯＲ35から選択され；
ｓは、０、１または２であり；
Ｒ32は、Ｈ  Ｃ1-4−アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、ＮＯ2、ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＲ33、−ＮＨＲ35、−ＮＲ352、−Ｎ+Ｒ353、−ＮＨＣＯＲ34、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ36およびＣＯＯＲ36から選択され；
Ｒ33は、アミン保護基であり；
Ｒ34は、Ａｒ5、Ｃ1-4−アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
Ｒ35は、Ｃ1-4−アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択され；
Ｒ36は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
Ａｒ5は、Ａｒ4と同じ基から選択され、そして
Ｙ3は脱離基である（但し、任意の１つの環における多くとも１つのＲ28またはＲ31がＮＨＣＯＡｒ5である。）））
の化合物と反応される、合成方法。
【請求項４４】
アミドカップリング剤の存在下において行われる請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
生成物が、引き続き、任意または全ての基Ｒ29（もしあるならば）および／または任意または全ての基Ｒ33（もしあるならば）がＨにより置換されるアミン脱保護工程にかけられる、請求項４３または４４に記載の方法。
【請求項４６】
Ｙ2が、−ＯＣＯＯＲ17、−ＯＣＯＮＨＲ18、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉおよび−ＯＳＯＯＲ19（ここで、Ｒ17、Ｒ18およびＲ19は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、および必要に応じて置換されたヘテロアリール；好ましくはＣｌから選択される）から選択される、請求項４３〜４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
Ａｒ5が
【化１７】
2004522779.tif 000037
から選択される、請求項４３〜４６のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
Ｒ27がＡｒ4である、請求項４３〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項４９】
Ａｒ4が基
【化１８】
2004522779.tif 000038
である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
Ｒ27において、ｒが少なくとも１であり且つ基Ｒ28の１つが−ＮＨＣＯＡｒ5である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
Ａｒ5が
【化１９】
2004522779.tif 000039
である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
Ａｒ4が基
【化２０】
2004522779.tif 000040
である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５３】
Ｒ30が−ＣＯＡｒ5である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
Ｒ27において、Ａｒ5が基
【化２１】
2004522779.tif 000041
である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
一般式ＶＩ
【化２２】
2004522779.tif 000042
の化合物（ここで、Ｒ38〜Ｒ42、Ｘ2およびＹ2は、式ＩＩＩの化合物における場合と同じであり；
Ｒ47は、アミン保護基であり；
Ｚ1およびＺ2のうち一方がＹ5であり且つ他方がＨであり；
Ｙ5は、Ｙ2と異なるまたは同じである脱離基であり；そして
Ｙ4がラジカル脱離基である）
が触媒の存在下においてアリールラジカル−アルケン環化工程を経て環化される環化工程を含む一連の予備工程において、式ＩＩＩまたはＩＩＩＡの化合物が生産される、請求項４３〜５４のいずれかに記載の方法。
【請求項５６】
Ｚ1がＹ2であり、且つ環化工程がフリーラジカルの存在下において行われ、ジヒドロピロール環が形成される、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
フリーラジカルがアゾイソブチロニトリルから生成されるか、または２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシフリーラジカルである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
触媒がトリブチルスズハイドライドである、請求項５６または５７に記載の方法。
【請求項５９】
Ｚ2がＹ5であり、Ｙ5がトリアルキルスズラジカルであり、且つ環化工程がパラジウム錯体の存在下において行われ、テトラハイドロキノリン（これが酸化され、エポキシドを形成し、次いでこのエポキシドが還元され、アルコール化合物を形成する）を形成し、Ｙ2がヒドロキシル以外であるならば、そのヒドロキシル基が引き続きＹ2へ転換される（ｃｏｎｖｅｉｔｅｄ）、請求項５５に記載の方法。
【請求項６０】
Ｙ4がハロゲンであり、好ましくはＩまたはＢｒである、請求項５５〜５９のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、芳香族酸化／ヒドロキシル化活性化プロドラッグに関し、特に、抗−腫瘍プロドラッグ、および酵素であるシトクロムＰ４５０ファミリーの酸化／ヒドロキシル化活性によって特異的に活性化されるものに関する。
【背景技術】
【０００２】
治療目的のために使用され得る多くの従来の細胞障害薬（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ｄｒｕｇｓ）が知られている。しかしながら、それらは典型的に、一般的に細胞毒性であり、それゆえ破壊されることが要求される細胞以外の細胞に影響を及ぼすかもしれないという問題を抱えている。これは、標的化された（ｔａｒｇｅｔｅｄ）ドラッグデリバリーシステム（例えば、腫瘍組織の部位への直接的な注射、または例えば、ガン細胞表面上にのみ提示される抗原を特異的に認識する抗体へ細胞障害剤を結合させること）の使用によって幾分か解消され得る。あるいは、電磁照射を使用し、所望される部位において薬剤に細胞毒性になるよう化学変化を引き起こさせることができる。しかしながら、これらの技術は全て、多かれ少なかれ、いくらかの限界および欠点を有する。
【０００３】
化合物（＋）−ＣＣ−１０６５およびデュオカルマイシン（ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎｓ）は、ＤＮＡアルキル化剤のクラスの天然に存在する代表的なものである。この天然に存在する化合物は、ＤＮＡ結合能を付与するピロロ［３，２−ｅ］インドールコア（１つまたは２つのサブユニットを有する）に基づくＤＮＡアルキル化ユニットからなる。ＣＣ−１０６５およびデュオカルマイシンＡは、ＤＮＡアルキル化特性の原因となるスピロ環状（ｓｐｉｒｏｃｙｃｌｉｃ）シクロプロパン基を含む。デュオカルマイシンＢ2、Ｃ2およびＤ2は、シクロプロパン活性体（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ  ａｃｔｉｖｅｓ）に対する前駆体であり、またジヒドロピロール環上の８位において（脱離基により）置換されるメチル基を含んでいると考えられている。ＣＣ−１０６５は、様々な経路によって合成されてきた（Ｂｏｇｅｒらにより、Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９７，９７，７８７−８２８中で要約される）。
【０００４】
ＵＳ−Ａ−４４１３１３２において、ＣＣ−１０６５の左手サブユニットの最初の合成が記載される。その合成は、シクロプロパン環が導入されるＷｉｎｓｔｅｉｎ  Ａｒ−３’アルキル化に基づく。以前の工程において、Ｇａｓｓｍａｎ’ｓ  Ｏｘｉｎｄｏｌ合成に基づく化学を使用して、α−チオメチルエステルとアニリンの反応によって、（インドールコアの）Ａ環が、導入される。アニリンは、最終生成物においてされるＤＮＡアルキル化のために重要であると考えられているＮＨ2基に対してオルト位（ｏｒｔｈｏ）にある保護フェノールヒドロキシル基を有する。ＣＣ−１０６５は、広い抗腫瘍活性を有するが、正常細胞に対する毒性が強すぎて、臨床的に有用でない。
【０００５】
Ｂｏｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ（１９９７）ｏｐ．ｃｉｔはまた、ＤＮＡ−アルキル化サブユニットの様々な根深い構造改変（ｄｅｅｐ−ｓｅａｔｅｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）（ここで、ピロロ‘Ａ’環は、他の芳香環構造によって置換されている）を記載する。アナログの１つのクラスにおいて、この置換環は、ベンゼン環である。
【０００６】
ＤＮＡ結合サブユニットを介して薬物をポリマー、または特異的結合剤（抗体またはＵＳ  ５，８４３，９３７に記載されるビオチンのような）へ複合体化させることによりＣＣ−１０６５およびアナログの送達を標的化するために、試みがなされてきた。Ｂｏｇｅｒらは、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９９９  ＳＩ，  １５０５−１５０９中において、１，２，９，９ａ−テトラヒドロシクロプロパ（ｃ）  ベンズ  ［ｅ］  インドール−４−オンのプロドラッグ（ここで、化合物のシクロプロパン開環型（ｒｉｎｇ−ｏｐｅｎｅｄ  ｖｅｒｓｉｏｎ）がフェノール基の反応によって誘導され、エステルおよびカルバメートを形成する）を記載する。
【０００７】
Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔｓ．（１９９８）３９，２２２７−２２３０において  Ｂｏｇｅｒらは、アルキル化サブユニットの根深い構造改変（ｄｅｅｐ−ｓｅａｔｅｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）を有するデュオカルマイシンおよびＣＣ−１０６５アナログのアルキル化サブユニットに対する各種前駆体の合成を記載する。合成された化合物の１つは、ベンゾジヒドロインドール誘導体である：
【０００８】
【化１】
2004522779.tif 000003
【０００９】
Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２０００），６５／１３，４１０１−４１１１において、そのベンゾジヒドロインドール誘導体から得られる対応する環閉鎖（ｒｉｎｇ  ｃｌｏｓｅｄ）インドリン化合物（ＣＢＩ誘導体）は、ＣＣ−１０６５のＤＮＡ−結合サブユニットへ結合され、ＤＮＡアルキル化活性を有することが示された。ベンズ部分がメトキシまたはシアノで置換されるアルキル化サブユニット前駆体のアナログがまた、合成された。同様の化合物が、ＷＯ−Ａ−９７４５４１１およびＷＯ−Ａ−９７３２８５０において記載される。‘４１１において、ベンズ部分は、７−位にてシアノによって置換されるか、またはシクロプロパン基がジフルオロ置換され得る。‘８５０において７−メトキシＣＢＩ化合物が記載される。
【００１０】
ＷＯ−Ａ−９８１１１０１において、ＣＢＩ型化合物のＢ環におけるフェノール性ヒドロキシル基は、アミノ、ニトロまたはチオール−ベースの基によって置換される。
【００１１】
Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９１），１１３，３９８０−３９８３においてＢｏｇｅｒ  ｅｔ  ａｌは、ＤＮＡアルキル化の選択性に寄与するＣＣ−１０６５アナログの特徴を同定するための研究を記載する。ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて試験された化合物は、２，３−ジヒドロインドールに基づくアルキル化サブユニットを有し、また６−デスヒドロキシアナログを含んでいた。これらは、６−ヒドロキシ化合物のものよりも１０4倍高い濃度であるけれども、少しの（ｓｏｍｅ）ＤＮＡアルキル化特性を有することが示された。
【００１２】
本発明は、アナログＣＣ−１０６５（これは、アルキル化サブユニットのＢ環中にヒドロキシル基を有さず、それゆえそれら自体ではＤＮＡアルキル化剤として実質的に不活性である）の前駆体に関する。
【００１３】
酵素ＣＹＰ１Ｂ１（生体異物代謝酵素であるシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）ファミリーのメンバー）が広範囲なヒトガン（乳房、結腸、肺、食道、皮膚、リンパ節、脳および精巣のガンを含む）において高頻度に発現すること、そしてそれが正常組織においては検出できなかったことが報告された（Ｍｕｒｒａｙ，Ｇ．Ｉ．ｅｔ  ａｌ．，１５  Ｊｕｌｙ  １９９７，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５７ｍ  ３０２６−３０３１およびＷＯ−Ａ−９７１２２４６）。これは、腫瘍細胞におけるシトクロムＰ４５０アイソフォームの発現が、腫瘍細胞におけるＣＹＰ酵素によって選択的に活性化され得る新規の抗腫瘍薬の開発のための分子標的を提供するという結論を導いたものの、薬物の例は与えられなかった。多くの他のＣＹＰアイソフォームは、種々の腫瘍において発現することが示された。腫瘍において発現されるＣＰＹの多くは、Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ，  ＬＨ  ｅｔ  ａｌ，（１９９９）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．１４（６），４７３−４８６において言及される。
【００１４】
ＷＯ−Ａ−９９／４００５６において、スチレン−およびカルコン−誘導体のプロドラッグが記載される。このプロドラッグのｉｎ  ｓｉｔｕにおいて形成される各々のヒドロキシル化型は、強力なチロシンキナーゼ（ＴＫ）阻害剤である。ＴＫ活性の阻害は、腫瘍阻害および細胞破壊に寄与する。このプロドラッグは、ＣＹＰ１Ｂ１酵素を発現するミクロソーム調製物によって活性化され、また同酵素を発現する細胞系に対して細胞毒性活性を有する一方、この酵素を発現しない細胞系に対して非常に低い細胞毒性活性を有することが示された。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、ＣＹＰ酵素（特に、腫瘍において高レベルで発現する酵素）により、ｉｎ  ｓｉｔｕにおいてヒドロキシル化されることが予測されるプロドラッグの新規なクラスに関する。特に、このプロドラッグは、ＣＹＰ１Ｂ１酵素によって代謝可能であると考えられている。その化合物のいくつかは新規である。本発明は、広範囲な化合物の最初の治療的使用、およびそこで使用されるそれらの合成物ならびに中間体に関する。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の第１の局面に従って、動物の治療による処置の方法において使用するための組成物の製造における一般式ＩまたはＩＡの化合物あるいはその塩の新規な使用を提供する：
【００１７】
【化２】
2004522779.tif 000004
【００１８】
（ここで、ＸはＨであり；
Ｙは、脱離基であり
Ｒ1は、−Ａｒ、−ＮＨ2、ＯＲ7またはＲ7であり；
Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は、各々独立して、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＮＨＲ16、−ＮＲ162、−Ｎ+Ｒ163；−ＮＨＣＯＲ8、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ9、−ＮＨＣＯＯＲ9および−ＣＯＯＲ9から選択され；
Ｒ7、Ｒ8およびＲ9は、独立して、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
Ａｒは、
【００１９】
【化３】
2004522779.tif 000005
【００２０】
から選択され（ここで、Ｂは、ＮまたはＣＲ10であり；
Ｒ10は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ14、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ15、−ＮＨＣＯＯＲ15および−ＣＯＯＲ15およびＨから選択され；
Ｚは、Ｏ、Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、またはＮＨであり；
各Ｒ11は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＮＨＲ16、−ＮＲ162、−Ｎ+Ｒ163、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ14、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ15、−ＮＨＣＯＯＲ15およびＣＯＯＲ15から選択され；
ｎは、０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ12は、Ｈ、−ＣＯＡｒ1、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲ15または−ＣＯＲ15であり；
各Ｒ13は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、−ＮＯ2、−ＮＨ2、−ＮＨＲ16、−ＮＲ162、−Ｎ+Ｒ163、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ14、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ15、−ＮＨＣＯＯＲ15および−ＣＯＯＲ15から選択され；
ｍは、０、１または２であり；
Ｒ14は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、必要に応じて置換されたヘテロアリール、Ｃ7-12アラルキル、Ａｒ1およびリガンドから選択され；
Ｒ15は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
各Ｒ16は、独立して、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択され；そして
Ａｒ1は、Ａｒと同じ基から選択される（但し、任意の１つの環における多くとも１つの基Ｒ11またはＲ13が基Ａｒ1を含む。）））
Ａｒ1は、好ましくは、
【００２１】
【化４】
2004522779.tif 000006
【００２２】
である。
【００２３】
この化合物は獣医学的（ｖｅｔｅｒｎａｒｙ）用途も有するかも知れないが、処置される動物は、概して、ヒトである。処置される適応症（ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ）は、概して、ガン（腺癌、白血病、リンパ腫、黒色腫、骨髄腫、肉腫、奇形癌、および特に、副腎、膀胱、骨、骨髄、脳、乳房、頚部（ｃｅｒｖｉｘ）、胆嚢、ガングリア（ｇａｎｇｌｉａ）、胃腸管、心臓、腎臓、肝臓、肺、筋肉、卵巣、膵臓、副甲状腺（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ）、陰茎、前立腺、唾液腺、皮膚、脾臓、精巣、胸腺、甲状腺（ｔｈｙｒｏｉｄ）および子宮のガンを含む）である。
【００２４】
腫瘍は、例えば、高レベルのＣＹＰ１Ｂ１を発現する腫瘍として定義され得る。
【００２５】
本発明において、脱離基Ｙは、例えば、求核置換反応における有用性を有する基の中にある。脱離基の好適な例は、−ＯＣＯＯＲ17、−ＯＣＯＮＨＲ18、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは−ＯＳＯＯＲ19（ここで、Ｒ17、Ｒ18およびＲ19は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択される）である。最も好ましくは、脱離基はハロゲン原子、好ましくは塩素である。
【００２６】
フェニル、アラルキルおよびヘテロアリール基における任意の置換基は、Ｃ1-4−アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ1-4−アルコキシ、−ＮＨ2、−ＮＨＲ16、−ＮＲ162、−Ｎ+Ｒ163、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＣＯＲ14、−ＣＯＮＨＲ15、−ＮＨＣＯＯＲ15、ＣＯＯＲ15などである。
【００２７】
本発明において、用語リガンドは、特異的標的化特性（例えば、酵素または遺伝子−指向型（ａｎｔｉｂｏｄｙ  ａｎｄ  ｇｅｎｅ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ）酵素プロドラッグ型環境において有用である）を有する基を含む。リガンドは、オリゴペプチド、ビオチン、アビジン、またはストレプトアビジン、ポリマー基、オリゴヌクレオチドまたはタンパク質であり得る。好ましくは、それは、抗体またはフラグメント、抗原、センスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはアビジン、ストレプトアビジンおよびビオチンのうちの１つ（すなわち、それは、特異的結合対の１つの構成成分である）のように特異的結合特性を有する。あるいは、それは、受動標的化のためにデザインされる基（ポリマー基のような）、または安定性を持続するまたは免疫原性を減少させるようデザインされる基（親水性基のような）であり得る。ＵＳ−Ａ−５８４３９３７は、これらの型の活性物（ａｃｔｉｖｅｓ）へ複合体化させる好適なリガンドおよびその複合体化を実行するための方法を開示する。
【００２８】
薬学的に活性な化合物において、Ｒ1はＯＲ7以外である。
【００２９】
一般的に、最適化されたＤＮＡ結合能のために、一般式Ｉの化合物において、基Ｒ1は基Ａｒである。しばしば、この化合物は、互いに連結する２つの芳香族基を含み得る。このような化合物において、Ａｒ基の基Ｒ11の１つ、または基Ｒ12は、場合により、基Ａｒ1である。いくつかの化合物について、３つ以上のこのような芳香族基が連結されることが所望され得る一方、１つの基Ａｒ及び１つの基Ａｒ1が存在することが好ましい。従って、ピロロ−ジヒドロインドール型の基である基Ａｒ1において、基Ｒ12は基−ＣＯＡｒ1以外であるべきである。他の型の基の１つである基Ａｒ1において、好ましくは、置換基Ｒ11またはＲ13が存在しないべきであるか、場合により、あるいは何らかの置換基が存在する場合、このような置換基は基Ａｒ1を含むべきではない。
【００３０】
本発明の１つの実施形態に従って、置換基Ａｒは、基
【００３１】
【化５】
2004522779.tif 000007
【００３２】
である。
【００３３】
このような基Ａｒにおいて、Ｂは、好ましくはＣＲ10である。Ｒ10は、好ましくはＨである。フラン（Ｚ＝Ｏ）およびチオフェン（Ｚ＝Ｓ）アナログは、ＤＮＡアルキル化ユニットへの複合体化のために生成され、且つ有用なＤＮＡ結合特性を有し得るけれども、Ｚの定義は、好ましくはＮＨである。同様に基Ａｒ1において、基ＢおよびＺは、同様の好ましい基の中から選択される。好ましくは、ｎが少なくとも１であり且つ基Ｒ11の１つが−ＮＨＣＯＡｒ1である。この実施形態においてＡｒ1は、好ましくは、基
【００３４】
【化６】
2004522779.tif 000008
【００３５】
（ここで、ＢおよびＺはＡｒにおける場合と同じ）である。
【００３６】
別の実施形態において、置換基Ａｒは、基
【００３７】
【化７】
2004522779.tif 000009
【００３８】
である。
【００３９】
ＡｒにおけるＲ12は、好ましくは、−ＣＯＯＲ15以外であり、より好ましくは、基−ＣＯＡｒ1（ここで−Ａｒ1は、好ましくは、同じ型の基である）である。
【００４０】
基ＡｒおよびＡｒ1の両方の基において、インドール型基におけるｍは、好ましくはゼロである。
【００４１】
ＡｒおよびＡｒ1において、いくつかの置換基Ｒ11が存在してもよい。最も好ましくは、このような置換基は、Ｃ1-4−アルコキシ基の中から選択される。
【００４２】
式Ｉの化合物において、ＤＮＡアルキル化サブユニットのコアインドール環は、好ましくはベンゼン環（Ｒ2は水素である）において非置換であり、一方、ベンズ環は、非置換であり（Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は、全て水素原子であり）得るか、またはＲ3〜Ｒ6の１つ以上は、シアノ基、アルコキシ基、基−ＣＯＯＲ10、またはＣ1-4−アルキル基（好ましくはメチル）を表す。
【００４３】
１つの好ましい実施形態においてＲ5は、アルコキシ、好ましくはメトキシであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ6は、全てＨである。
【００４４】
別の実施形態において、Ｒ5はシアノであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ6はＨである。
【００４５】
式Ｉの化合物において、ＸはＨである。化合物のヒドロキシル化は、Ｘが結合する（ａｔｔａｃｈｅｄ）炭素原子においてｉｎ  ｓｉｔｕで起こり、それによりＤＮＡアルキル化剤として作用することを可能にする化合物が活性化されると信じられている。
【００４６】
一般式Ｉの化合物およびその塩の多くは、新規の化合物であると考えられる。本発明のさらなる局面に従って、一般式ＩＩの新規化合物またはその塩が提供され、
【００４７】
【化８】
2004522779.tif 000010
【００４８】
（ここで、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5およびＲ6は、上記に定義されるとおりであり；
Ｘ1は、Ｈであり；
Ｙ1は、脱離基であり；
Ｒ20は、−Ｒ7、−ＯＲ7、ＮＨ2またはＡｒ2であり；
Ｒ7は、上記に定義されるとおりであり；
Ａｒ2は、
【００４９】
【化９】
2004522779.tif 000011
【００５０】
から選択され（ここで、Ｂ1は、ＮまたはＣＲ22であり；
Ｚ1は、Ｏ、Ｓ、−ＣＨ＝ＣＨ−、またはＮＲ21であり；
Ｒ21は、アミン保護基であり；
各（ｔｈｅ  ｏｒ  ｅａｃｈ）Ｒ22は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ  Ｃ1-4アルキル、ＮＯ2、−ＮＨＲ21、−ＮＨＲ26、−ＮＲ262、−Ｎ+Ｒ263、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ25、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ7および−ＣＯＯＲ25から選択され；
ｐは、０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ23は、Ｈ、ＣＯＡｒ3、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ7または−ＣＯＲ7であるか、あるいはアミン保護基であり；
各（ｔｈｅ  ｏｒ  ｅａｃｈ）Ｒ24は、ＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ  Ｃ1-4アルキル、−ＮＯ2、−ＮＨＲ21、−ＮＨＲ26、−ＮＲ262、−Ｎ+Ｒ263、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＣＯＲ25、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ7、および−ＣＯＯＲ7から選択され；
ｑは０、１または２であり；
Ｒ25は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、必要に応じて置換されたヘテロアルキル、Ｃ7-12−アラルキル  Ａｒ3およびリガンドから選択され；
Ｒ26は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択され；そして
Ａｒ3は、Ａｒ2と同じ基から選択される（但し、任意の１つの環における多くとも１つの基Ｒ22またはＲ24が基Ａｒ3を含む）））。
【００５１】
Ａｒ3は、好ましくは、
【００５２】
【化１０】
2004522779.tif 000012
【００５３】
である。
【００５４】
式ＩＩまたはＩＩＡの化合物（ここで、第一級または第二級アミン窒素原子は保護される）は、一般的に、薬学的組成物において使用される前に脱保護される。アミン保護基Ｒ21またはＲ23の例は、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、第３級ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、フルオレニル−Ｎ−メトキシ−カルボニル（ＦＭＯＣ）および２−［ビフェニリル−（４）］−プロピル−２−オキシカルボニルである。この分子において、１を超えるアミン基が保護される場合、その保護基は、同一であってもよいし、異なってもよい。特に一般式ＩＩおよびＩＩＡの有用な一連の化合物において、Ｒ20はＯＲ7であり、Ｒ7はＲ1ＣＯと異なるアミン保護基である。別の好ましいシリーズにおいて、Ｒ20はＯＲ7以外である。
【００５５】
一般式ＩＩおよびＩＩＡの化合物において、Ｒ20は、好ましくはＡｒ2であり、および／またはＹ1は好ましくは、−ＯＣＯＯＲ17、−ＯＣＯＮＨＲ18、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは−ＯＳＯＯＲ19（ここでＲ17、Ｒ18、およびＲ19は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、および必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択される）から選択される。最も好ましくは、脱離基はハロゲン原子、好ましくは塩素である。
【００５６】
本発明は、さらに、式ＩまたはＩＡの化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。薬学的組成物は、筋肉内、腹腔内、肺内、経口または、もっとも好ましくは、静脈内投与に適しているかも知れない。この組成物は、例えば制御または遅延した放出のために、好適なマトリックスを含む。この組成物は、溶液、固体（例えば、粉末）、タブレットまたはインプラントの形態をとってもよいし、固体または溶解形態で式Ｉの化合物を含んでもよい。この化合物は、例えば液体処方物において、微粒子のドラッグデリバリーシステムに組み込まれ得る。好適な賦形剤の具体例としては、ラクトース、スクロース、マンニトール、およびソルビトール；トウモロコシ、コムギ、コメ、ジャガイモ、または他の植物に由来するスターチ；セルロース（メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、またはカルボキシメチルセルロースナトリウムのような）；ガム類（アラビアおよびトラガントを含む）；およびタンパク質（ゼラチンおよびコラーゲンのような）が挙げられる。所望されるならば、崩壊剤または可溶化剤（架橋結合されたポリビニルピロリドン、寒天、およびアルギン酸またはその塩（アルギン酸ナトリウムのような）のような）が添加されてもよい。固体組成物は、粉末およびゲルの形態をとってもよいが、より便利に、例えばタブレット、カシェ剤またはカプセル（スパンスルを含む）のような成形型（ｆｏｒｍｅｄ  ｔｙｐｅ）をとる。あるいは、リポソーム、ナノソーム、およびナノ粒子を含むより特殊化された型の処方物である。
【００５７】
式Ｉの化合物は、Ｂｏｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１９９７，ｏｐ．ｃｉｔによって要約されるものに類似する技術を用いて、合成され得る。一連の工程においてＤＮＡアルキル化サブユニットを形成し、そしてジヒドロ−ピロールまたはテトラハイドロキノリン（Ｃ）環の窒素原子を介して、分子の残りにこれを結合させるのが便利である。ＤＮＡアルキル化サブユニットは、Ｂｏｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１９９７ｏｐ．ｃｉｔ．に記載のように合成されたＤＮＡ結合サブユニット（例えば、その文献に記載されるＰＤＥ−ＩおよびＰＤＥ−ＩＩサブユニット）へ複合体化され得る。ＤＮＡ結合サブユニットは、基ＡｒおよびＡｒ1を含むものである。
【００５８】
本発明のさらなる局面に従って、
式ＩＩＩまたはＩＩＩＡの化合物
【００５９】
【化１１】
2004522779.tif 000013
【００６０】
（ここで、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は上記に定義されるとおりであり；
Ｘ2は、Ｈであり；そして
Ｙ2は、脱離基あるいはヒドロキシルまたは保護ヒドロキシル基である）
が、一般式ＩＶ
Ｒ27ＣＯＹ3            ＩＶ
（ここで、Ｒ27は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびＡｒ4から選択され；
Ａｒ4は
【００６１】
【化１２】
2004522779.tif 000014
【００６２】
から選択され（ここで、Ｂ2は、ＮまたはＣＲ32であり；
Ｚ2はＯ、Ｓ、−ＣＨ＝ＣＨ−またはＮＲ33であり；
各（ｔｈｅ  ｏｒ  ｅａｃｈ）Ｒ28は、Ｃ1-4−アルコキシ、Ｃ1-4−アルキル、ＮＯ2、ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＲ33、−ＮＨＲ35、−ＮＲ352、−Ｎ+Ｒ353−、−ＮＨＣＯＲ34、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ36および−ＣＯＯＲ36から選択され；
ｒは０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ29は、アミン保護基であり；
Ｒ30は、アミン保護基、−ＣＯＮＨ2、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＲ36または−ＣＯＡｒ5であり；
各（ｔｈｅ  ｏｒ  ｅａｃｈ）Ｒ31は、Ｃ1-4−アルコキシ、Ｃ1-4−アルキル、ＮＯ2、ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＲ33、−ＮＨＲ35、−ＮＲ352、−Ｎ+Ｒ353−、−ＮＨＣＯＲ34、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ36および−ＣＯＯＲ36から選択され；
ｓは０、１または２であり；
Ｒ32は、Ｈ、Ｃ1-4−アルコキシ、Ｃ1-4アルキル、ＮＯ2、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＨＲ53、−ＮＨＲ35、−ＮＨＲ352、−ＮTＲ353、−ＮＨＣＯＲ34、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ36およびＣＯＯＲ36から選択され；
Ｒ33は、アミン保護基であり；
Ｒ34は、Ａｒ5、Ｃ1-4−アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
Ｒ35は、Ｃ1-4−アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキルおよび必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択され；
Ｒ36は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
Ａｒ5はＡｒ4と同じ基から選択され
Ｙ3は脱離基である（但し、任意の１つの環における多くとも１つのＲ28またはＲ31がＡｒ5を含む））の化合物と反応される、新規な合成方法が提供される。
【００６３】
Ａ5は、好ましくは、
【００６４】
【化１３】
2004522779.tif 000015
【００６５】
である。
【００６６】
Ｙ3は、例えば、Ｙについて上記に挙げた好ましい脱離基の中から選択される。最も好適には、Ｙ3の定義は、Ｃｌである。あるいは、基Ｙ3はＯＨであり得る。この場合、カップリング反応を補助するカップリング剤を含むことが必要であり得る。
【００６７】
一般式ＩＩＩまたはＩＩＩＡの化合物とカルボン酸または一般式ＩＶの誘導体の間の反応は、このようなカップリングを起こさせる条件下において、行われる。このような条件は、ペプチド結合の形成のために一般的に使用される（例えば、ペプチド合成方法において使用されるような）条件に似ている。
【００６８】
Ｙ2は、ヒドロキシまたは保護ヒドロキシ基あるいは脱離基（これは、Ｙと同じであり得るか、または続く工程においてＹへ転換され得る）である。
【００６９】
カップリングプロセスの後、１つ以上の保護アミン基を脱保護することが所望され得る。任意のこのようなアミン基を介して、例えば他の誘導体化剤（ｄｅｒｉｖａｔｉｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）（グリコシル化合物、ペプチド、ポリマーなど）を用いて、更なる反応が所望される場合、続く反応が起こるもののみを脱保護し、一方他のアミン基を保護形態に保持することが所望される。保護および脱保護のプロトコル並びに適切なアミン保護基の選択ならびにの選択は、ペプチド化学において一般的に利用される技術を用いてなされる。
【００７０】
一般式ＩＩＩまたはＩＩＩＡの中間体のいくつかが新規の化合物であり得ると考えられる。新規の化合物は、一般式ＶまたはＶＡ
【００７１】
【化１４】
2004522779.tif 000016
【００７２】
（ここで、Ｒ38、Ｒ39、Ｒ40、Ｒ41およびＲ42は、Ｈ、Ｃ1-4−アルキル、−ＯＨ、Ｃ1-4−アルコキシ、−ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ2、ＮＨＲ43、−ＮＨＣＯＲ44、−ＮＲ452、−Ｎ+Ｒ453−、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨＲ46および−ＣＯＯＲ46から選択され、
Ｘ2は、Ｈであり；
Ｙ2は、脱離基あるいはヒドロキシルもしくは保護ヒドロキシル基であり；
Ｒ37は、Ｈまたはアミン保護基であり；
Ｒ43は、Ｈ、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、および必要に応じて置換されたヘテロアリール、アミン保護基から選択され；
Ｒ44は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択され；
各Ｒ45は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、および必要に応じて置換されたヘテロアリールから選択され；そして
Ｒ46は、Ｃ1-4アルキル、必要に応じて置換されたフェニル、Ｃ7-12−アラルキル、必要に応じて置換されたヘテロアリールおよびリガンドから選択される）
を有し得る。
【００７３】
一般式ＩＩＩの化合物において、カルボン酸誘導体と反応する準備のできた化合物（例えば一般式ＩＶ）において、Ｒ24はＨである。このような化合物についての前駆体は、保護形態における環窒素原子を有し、すなわちここで、Ｒ37は保護基を表す。
【００７４】
式Ｖの化合物において、基Ｙ2は、脱離基Ｙについて上記に定義されたものの中から選択され得る。基Ｙ2の性質は、式ＩＩＩ／Ｖの化合物が次の工程において、例えば、一般式ＩＶの化合物と反応するはずである試薬の性質を考慮して、基Ｙ2が不活性化されず且つ式ＩＩＩまたはＶの化合物のダイマーを形成しないように、選択されるべきである。脱離基Ｙ2の好適な例は、ＣｌおよびＢｒである。
【００７５】
式ＩＩＩまたはＩＩＩＡおよびＶまたはＶＡの化合物は、アミン基の置換基に対してオルト位の炭素原子における脱離基置換基Ｙ4、および基−ＣＨ2ＣＨ＝ＣＨＹ5（ここで、アニリン誘導体は、環化条件下において反応される）であるＮ−置換基を有するアニリン化合物を出発物質として使用して、触媒の存在下で、環化工程を含む予備工程において、調製され得、ジヒドロピロールあるいはジ−またはテトラヒドロキノリン環が形成される。このような反応のための出発化合物は、一般式ＶＩ
【００７６】
【化１５】
2004522779.tif 000017
【００７７】
（ここで、Ｒ38〜Ｒ42およびＸ2は、式ＩＶの化合物における場合と同じものであり；
Ｒ47は、アミン保護基であり、
Ｚ1およびＺ2のうち一方がＹ5であり且つ他方がＨであり；
Ｙ5は、Ｙ2と異なるか、または同じ脱離基であり；そして
Ｙ4は、ラジカル脱離基である）
によって表され得る。
【００７８】
ジヒドロピロール環を形成するための環化について、基Ｚ1はＹ5であり、そしてＹ5はＨまたは脱離基（好ましくは、Ｙ2と同じ基）であり、ここで基Ｙ5は、合成のこの工程において脱離基として有効でない。この反応は、適切な触媒の存在下において、必要に応じてフリーラジカル捕捉剤（ｆｒｅｅ  ｒａｄｉｃａｌｔｒａｐ）の存在下で、行われる。基Ｙ4は、ラジカル脱離基（ハロゲン（好ましくは、ＩまたはＢｒ）のような）であるべきである。Ｙ5がＨである化合物ＶＩを用いる環化反応を実行するのに適するラジカルは、２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）のようなニトロキシ化合物である。Ｙ5が脱離基である場合、環化は、アゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）から誘導されるラジカルの存在下において行われ得る。このようなラジカル環化工程に好適な触媒は、トリブチルスズハイドライドのようなスズハイドライド化合物である。このような合成経路は、実施例１および３において図示される。
【００７９】
６員環を形成するための環化について、Ｚ2がＹ5であり且つＹ5が脱離基（好ましくは、トリアルキルスタンニル基）である化合物ＶＩを使用すること、および適切な触媒パラジウム錯体（テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライドまたはパラジウム（ＩＩ）アセテートのような）の存在下において反応を行うことが好ましい。このジヒドロキノリン中間体は、例えばペルオキシド試薬を用いて、酸化され、エポキシドであるさらなる中間体を形成する。このエポキシド中間体は、好適な選択的還元剤（ジアルキルアルミニウムハイドライドのような）を用いて還元され、対応するテトラヒドロキノリンアルコール（これは、例えば、カーボンテトラクロライド／トリフェニルホスフィンを用いて、引き続きハロゲン化される）を生産する。この反応は、実施例２において説明される。
【００８０】
一般式ＶＩの化合物は、１，３−ジハロプロペン化合物を用いる対応するアニリン誘導体のナトリウム塩のアルキル化によって、生成され得る。
【００８１】
一般式Ｖのカルボン酸誘導体は、Ｂｏｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１９９７  ｏｐ．ｃｉｔにおいて一般的に記載される方法を用いて合成され得、例えば、ＰＤＥ−ＩおよびＰＤＥ−ＩＩは、Ｕｍｅｚａｗａ合成、Ｒｅｅｓ−Ｍｏｏｄｙ合成、Ｍａｇｎｕｓ合成、Ｃａｖａ−Ｒａｗａｌ合成、Ｂｏｇｅｒ−Ｃｏｌｅｍａｎ合成、Ｓｕｎｄｂｅｒｇ合成、Ｍａｒｔｉｎ合成、Ｔｏｊｏ合成を用いて合成され得る。インドール−２−カルボン酸は、市販されている。デュオカルマイシンのＤＮＡ結合サブユニットの他のアナログ、およびその反応性カルボン酸誘導体は、Ｂｏｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，ｏｐ．ｃｉｔ．およびＵＳ−Ａ−５８４３９３７によって記載される。
【００８２】
本発明は、正常な状態の場合に細胞毒性効果をほとんどまたは全く有さないけれども、ＣＹＰ酵素による酸化またはヒドロキシル化によって活性化されるときに高度に細胞毒性である（すなわち、相当増強された細胞毒性を有する）広範囲なプロドラッグの創作に関する。これは、セルフ−ターゲッティングドラッグデリバリーシステム（ｓｅｌｆ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍ）（ここで、非毒性（または無視してもよい毒性）化合物が患者へ投与（例えば、全身的な方法において）され得、その後その化合物は、腫瘍細胞の部位において活性化され（腫瘍内活性化）、腫瘍細胞を殺すよう働く高度に細胞毒性を示す化合物を形成する）を提供する。ＣＹＰアイソフォームが正常な細胞によって発現されないという事実は、この化合物の活性化が腫瘍細胞の部位においてのみ起こり、それにより腫瘍細胞のみが影響を受け、それゆえセルフ−ターゲッティングシステムが提供されることを意味する。
【００８３】
本発明のプロドラッグは、体内のどの部位においても腫瘍の処置において有用であるという明らかな利点を有し、このことは、転移を受けた腫瘍（これは、普通、部位特異的な治療に影響されにくい）でさえも処置され得ることを意味している。
【００８４】
このプロドラッグは、抗腫瘍プロドラッグであり得る。腫瘍の例としては、ガン（悪性新生物）および他の新生物（例えば、良性腫瘍）が挙げられる。このプロドラッグは、シトクロムＰ４５０のアイソフォームによるヒドロキシル化によって活性化され得る。
【００８５】
プロドラッグの選択的ヒドロキシル化およびそれによる活性化をもたらすための腫瘍細胞内のＣＹＰ発現に頼る様々な通常の手順において、腫瘍組織と正常組織との間の選択性は、２つの部分手順において高められる。従って、（ａ）シトクロムＰ４５０遺伝子およびシトクロムＰ４５０リダクターゼ遺伝子を有するウイルスベクターで腫瘍細胞を感染させること（ここで、腫瘍細胞によるシトクロムＰ４５０遺伝子およびシトクロムＰ４５０リダクターゼ遺伝子の発現は、腫瘍内において、化学療法剤のその細胞毒性型への酵素的変換を可能にし、これによって、腫瘍細胞は、プロドラッグ化学療法剤に対して選択的に感受性を示す（ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｄ）ようになる）（ｂ）腫瘍細胞をプロドラッグ化学療法剤と接触させ、それにより腫瘍細胞を選択的に殺すこと。
【００８６】
これらのプロドラッグは、ベンズ（ｅ）ジヒドロインドールまたはベンズ−テトラヒドロキノリン誘導体である。それらの抗腫瘍プロドラッグとしての具体的な使用は、今までに、示唆も開示もされておらず、それらが活性化されヒドロキシル化された形態を有するプロドラッグであるという示唆も全くなされていない。式（Ｉ）の化合物が既に同定および製造されていた場合でも、それらは、その低い（または無視してもよい）細胞毒性ゆえに、抗腫瘍剤として認められていなかった。従って、本発明のプロドラッグの腫瘍内ヒドロキシル化は、驚くべき予測不可能な有効性をそれらに与える。
【００８７】
ヒドロキシル化形態のプロドラッグはＤＮＡの副溝（ｍｉｎｏｒ  ｇｒｏｏｖｅ）において結合し且つＮ３位でプリン塩基をアルキル化する強力なＤＮＡアルキル化剤である。それ自体では、それらは、作用の正確な生物学的メカニズムが知られていないが、テンプレートおよびＤＮＡの他の機能の崩壊（ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ）を伴う強力な細胞毒性剤である。ＤＮＡのテンプレート機能の一般的な阻害は、体内の全ての分裂する細胞に対して影響し、全体的に毒性を示し、そして治療設定（ｓｅｔｔｉｎｇ）において受け入れ難い副作用を導くであろう。しかしながら、特定のアイソフォームのシトクロムＰ４５０を過剰発現する腫瘍細胞におけるヒドロキシル化型の標的化された生産は、それらの細胞においてのみ特異的な細胞毒性効果を導くであろう。非−ヒドロキシル化形態は、実質的に、全ての細胞に対して非−毒性である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００８８】
以下の実施例は、本発明を説明する。
実施例１
【００８９】
【化１６】
2004522779.tif 000018
【００９０】
１．１    Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）ナフチルアミン（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）ｎａｐｔｈｙｌａｍｉｎｅ）
２−ナフトエ酸（２−ｎａｐｔｈｏｉｃ  ａｃｉｄ）（１００ｍｇ、０．５８１ｍｍｏｌ）のｔ−ＢｕＯＨ（３３ｍＬ）溶液をＥｔ3Ｎ（９６μＬ、０．７ｍｍｏｌ）および４Åモレキュラーシーブ（１ｇ）で処理した。ジフェニルホスフォリルアジド（０．１５ｍｌ、０．７ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応混合物を加温し、１４ｈの間還流した。この混合物を２５℃まで冷却し、そしてその溶媒を真空下において取り除いた。残渣をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中に溶解し、そして有機相を１０％水性ＨＣｌ（３×１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、ヘキサン中の１０％  ＥｔＯＡｃ）による精製によって、２（０．１０８ｍｇ、７７％）を淡黄色固体として得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）２４３（［Ｍ+ Ｈ］+ 予測２４３）２６９（［Ｍ+Ｎａ］+予測２６９）。
【００９１】
１．２    ２−ナフチルアミン（２−Ｎａｐｔｈｙｌａｍｉｎｅ）
化合物１．１（１．５ｇ、６．１７ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中に溶解し、これにＥｔＯＡｃ中の２．５Ｍ  ＨＣｌが添加された。この反応混合物を３０分間攪拌した。次いで、生じる溶液をｓａｔ’ｄ  ａｑ．ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、そして濃縮した。この残渣をヘキサン中の２０％ＥｔＯＡｃから結晶化し、３．３（０．７４ｇ、８４％）を淡褐色結晶として得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ  ７．１２−７．３２（ｍ，３Ｈ），６．９６（ｔ，１Ｈ），６．８０（ｔ，１Ｈ），６．５６（ｓ，１Ｈ），６．５２（ｄｄ，１Ｈ），３．４６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）；  ＦＡＢ  ＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）１４３（［Ｍ＋Ｈ］+予測１４３），１６５（［Ｍ＋Ｎａ］+予測１６５）。
【００９２】
１．３      １−ブロモ−２−ナフチルアミン（１−Ｂｒｏｍｏ−２−ｎａｐｔｈｙｌａｍｉｎｅ）
１．２（１００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、ＴｓＯＨ（４８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６ｍＬ）溶液を攪拌し、０℃に冷却した。生じた混合物へＮＩＳ（１２５ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）を添加し、この溶液を２５℃まで温めた。３ｈ後、さらなるＮＩＳ（３１ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。１ｈ後、この混合物を１０％水性ＮａＨＣＯ3（１０ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ3（３×１０ｍＬ）を用いて抽出した。有機層を合わせ（ｃｏｍｂｉｎｅｄ）、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、次いで濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、ヘキサン中の３０％  ＥｔＯＡｃ）によって精製し、１．３（１１０ｍｇ、５９％）を茶−黄色（ｂｒｏｗｎ−ｙｅｌｌｏｗ）オイルとして得た：1Ｈ  ＮＭＲ（２５０  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ  ８．０４（ｄ，１Ｈ），７．６８（ｄ，１  Ｈ），７．６２（ｄ，１Ｈ），７．５０（ｔ，１Ｈ），７．２８（ｔ，１Ｈ），７．００（ｄ，１Ｈ），４．４０（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）；ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）：２２１（［Ｍ＋Ｈ］+予測２２１），２４３（［Ｍ＋Ｎａ］+予測２４３）。
【００９３】
１．４      Ｎ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−１−ブロモ−２−ナフチルアミン（Ｎ−Ｄｉ  （ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−１−ｂｒｏｍｏ−２−ｎａｐｔｈｙｌａｍｉｎｅ）
１．３  （１００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）溶液をＢｏｃ−ジカーボネート（２１９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ3Ｎ（６２μｌ、０．４５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．５ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を５０℃にて、２４ｈ還流した。生じた混合物をＨ2Ｏ（２×１０ｍＬ）、５％ＨＣｌ（１０ｍＬ）および最後に再びＨ2Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を合わせ、乾燥し（ＭｇＳＯ4）、そして濃縮した。反応物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2  ＣＨ2Ｃｌ2／ヘキサン１：１）によって精製し、１．４（１２５ｍｇ、７２％）を無色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δｐｐｍ  ８．３２（ｄ，１Ｈ），７．８６（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｄ，１Ｈ），７．５２−７．６８（ｍ，２Ｈ），７．３２（ｄ，１Ｈ），１．５０  （ｓ，１８Ｈ）；ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）４２２（［Ｍ＋Ｈ］+予測４２２），４４６（［Ｍ＋Ｎａ］+予測４４６）。
【００９４】
１．５      Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−１−ブロモ−２−ナフチルアミン  （Ｎ−（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−１−ｂｒｏｍｏ−２−ｎａｐｔｈｙｌａｍｉｎｅ）
化合物１．４（５０ｍｇ、０．１０７ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（１６μＬ、０．２１３ｍｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）溶液で処理し、４５ｍｉｎ攪拌した。この混合物を濃縮し、そしてヘキサンから結晶化し、１．５（１３ｍｇ、３４％）を白色結晶として得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）３２３（［Ｍ＋Ｈ］+予測３２３），３４６（［Ｍ＋Ｎａ］+予測３４６）。
【００９５】
１．６      Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｎ−（３−クロロ−２−プロペン−１−イル）−１−ブロモ−２−ナフチルアミン（Ｎ−（ｔｅｒｔ−Ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）−Ｎ−（３−ｃｈｌｏｒｏ−２−ｐｒｏｐｅｎ−１−ｙｌ）−１−ｂｒｏｍｏ−２−ｎａｐｔｈｙｌａｍｉｎｅ）
１．５（５０  ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（５ｍＬ）の溶液を０℃に冷却し、ＮａＨ（９．８ｍｇ、０．４０８ｍｍｏｌ）を添加した。生じた混合物を１５ｍｉｎ攪拌し、そして１，３ジクロロプロペン（３８μＬ、０．４１ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を２５℃まで温め、９０ｍｉｎ攪拌した。この混合物を濃縮し、その残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、ヘキサン中の１０％ＥｔＯＡｃ）によって精製し、１．６（５６ｍｇ、９３％）を透明フィルムとして得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）３９６（［Ｍ＋Ｈ］+予測３９６），４１８（［Ｍ＋Ｎａ］+ 予測４１８）。
【００９６】
１．７      ３−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−１−（クロロメチル）−１
，  ２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンズ［ｅ］インドール
１．６（５５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＡＩＢＮ（８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）
の無水トルエン（５ｍＬ）溶液を１５ｍｉｎの間、Ｎ2を用いて脱気し（ｄｅｇａｓｓｅ
ｄ）、次いで９０℃まで加熱した。Ｂｕ3ＳｎＨ（６５μｌ、０．２５ｍｍｏｌ）を、４分割し、１ｈかけて添加し、生じた混合物を１ｈ攪拌した。次いで、この溶液を濃縮し、
フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、ヘキサン中の１０％ＥｔＯＡｃ）によって精製し、不純物を含む（ｉｍｐｕｒｅ）３．８．を得た。次いで、この固体を、ＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）中に溶解し、これにＥｔＯＡｃ（１ｍＬ）中の１Ｍ  ＫＦ溶液（１ｍｌ）を添加した。この溶液を４５ｍｉｎ攪拌し、その後、不溶性沈殿物を濾過し、残った溶液を濃縮し、精製１．７（３４ｍｇ、８７％）を淡黄色オイル状フィルムとして得た。ＦＡＢＭ
Ｓ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）３１７（［Ｍ＋Ｈ］+予測３１７）。
【００９７】
１．８    １−（クロロメチル）−３−［（５−メトキシインドール−２−イル）カルボニル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンズ［ｅ］インドール
化合物１．７（１０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１００μＬ）中の２．５  Ｍ  ＨＣｌで処理し、そしてこの溶液を３０ｍｉｎ間攪拌した。窒素の流れ（ｓｔｒｅａｍ）の下において溶媒を取り除き、灰色残渣をＤＭＦ（１ｍＬ）中に溶解した。５−メトキシインドール−２−カルボン酸（１７ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（１７ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１６ｈ攪拌した。溶媒を真空下において取り除き、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：１）にかけ、生成物を赤色オイル（１１ｍｇ、９４％）として得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）３９１（Ｍ＋Ｈ+予測３９１）。
【００９８】
実施例２
【００９９】
【化１７】
2004522779.tif 000019
【０１００】
２．１    ２−［Ｎ−（３−（トリブチルスタンニル）−２−プロペン−１−イル）−Ｎ−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）アミノ−１−ナフタレン（２−  ［Ｎ−  （３−  （ｔｒｉｂｕｔｙｌｓｔａｎｎｙｌ）−２−ｐｒｏｐｅｎ−Ｉ−ｙｌ）−Ｎ−（（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌ）］  ａｍｉｎｏ−１−ｎａｐｔｈａｌｅｎｅ）
１−ベンゾイル−５−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ−４−ヨードインドール（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）中で攪拌し、ナトリウムハイドライド（２６ｍｇ、０．６６  ｍｍｏｌ、オイル中の６０％ディスパージョン、３当量）を添加した。１５ｍｉｎ後、この懸濁液をＥ／Ｚ−１−トリブチルスタンニル−３−ブロモプロペン  （２７０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ、３当量）で処理し、生じた溶液をＲＴにて、１６ｈ攪拌した。この溶液を濃縮し、水（１０ｍＬ）を添加した。この水溶液を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、乾燥し、次いで濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ2、１０％酢酸エチル／ヘキサン）によって生成物（１２０ｍｇ、７８％）を黄色固体として得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）：６９９（Ｍ＋Ｈ+予測６９９）。
【０１０１】
２．２    １，２−ジヒドロ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−５，６−ベンゾキノリン
１−ベンゾイル−５−［Ｎ−（３−（トリブチルスタンニル）−２−プロペン−１−イル）−Ｎ−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）］アミノ−４−ヨードインドール（１００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３２ｍｇ、０．２当量）をトルエン（２ｍＬ）中で、５０℃にて、Ｎ2下において、４ｈ攪拌した。次いで、溶媒を真空下において取り除いた。クロマトグラフィー（ＳｉＯ2、１０％酢酸エチル／ヘキサン）によって、生成物を赤色オイル（３８ｍｇ、９９％）として得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）：２８２（Ｍ＋Ｈ+予測２８２）。
【０１０２】
２．３    ３，４−エポキシ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−５，６−ベンゾキノリン
１，２−ジヒドロ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−５，６−ベンゾキノリン（１００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびＭＣＰＢＡ（９１ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ、１．５当量）をＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）中で−３０℃にて、Ｎ2下において、６ｈ攪拌した。次いで、溶媒を真空下において取り除いた。クロマトグラフィー（ＳｉＯ2、１０％  酢酸エチル／ヘキサン）によって、生成物（１０１ｍｇ、９５％）を得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）：２９８（Ｍ＋Ｈ+予測２９８）。
【０１０３】
２．４    ４−ヒドロキシ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−５，６−ベンゾキノリン
３，４−エポキシ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−５，６−ベンゾキノリン（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２  ｍＬ）中のＤｉｂａｌ−Ｈ（９１ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ、１．５当量）で、−７８℃〜−３０℃にて、Ｎ2下において、処理した。１ｈ後、水（２ｍＬ）の添加によって、この反応液をクエンチし、そして生じた溶液を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、乾燥し、濃縮した。溶媒を真空下において取り除いた。クロマトグラフィー（ＳｉＯ2、１０％酢酸エチル／ヘキサン）によって生成物（５５ｍｇ、５４％）を無色固体として得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）：３００（Ｍ＋Ｈ+予測３００），３２２（Ｍ＋Ｎａ+ 予測３２２）。
【０１０４】
２．５    ４−クロロ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−５，６−ベンゾキノリン
ＲＴにて、ＰＰｈ3（１７５ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ、２当量）およびＣＣｌ4（２００μＬ）のＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）調製溶液を用いて、ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）中の４−ヒドロキシ−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ）カルボニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−５，６−ベンゾキノリン（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を処理した。４ｈ後、この溶媒を真空中において取り除いた。クロマトグラフィー（シリカゲル、２×１５ｃｍ、１０％  酢酸エチル／ヘキサン）によって、該クロライドをオイル（６５ｍｇ、６３％）として得た。ＦＡＢＭＳ（ＮＢＡ／Ｎａｌ）：３１８（Ｍ＋Ｈ+予測３１８），３４０（Ｍ＋Ｎａ+ 予測３４０）。続いて、この生成物を脱保護し、さらに実施例１．８に類似するプロセス工程によって５−メトキシインドール−２−カルボン酸のようなＤＮＡ−結合サブユニットへ複合体化させてもよい。
【０１０５】
実施例３  化合物１．８の生物学的試験
材料および方法
【０１０６】
３．１    試験化合物とミクロソームのインキュベーション混合物
ＮＡＤＰＨ補充した（ＮＡＤＰＨ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ）ラット肝ミクロソームを用いて、ＣＹＰ酵素による試験化合物活性化を行った。インキュベーション混合物は、ミクロソームタンパク質（１ｍｇ／ｍｌ）、還元−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰＨ、１０ｍＭ）およびリン酸緩衝液（ｐＨ７．４、１００ｍＭ）を含んでいた。ＤＭＳＯ（２０μｌ）中の試験化合物（０．０１−１００μＭ  最終濃度）を、ミクロソームインキュベーション混合物（０．５ｍｌ）へ添加し、そして６０分間、３７Ｃにてインキュベートした。コントロールのインキュベート物は試験化合物を含み、ミクロソームインキュベーション混合物は０時間にて終了させた。全てのインキュベーション物は、等量の氷冷アセトニトリルの添加により終了され、次いで３分間微量遠心された（ｍｉｃｒｏｆｕｇｅｄ）。この上清のアリコートを培養中の細胞へ添加し、次いで細胞毒性を以下に記載のように測定した。
【０１０７】
３．２  細胞培養物に基づく細胞毒性測定
１０％透析ＦＢＳおよびＧ４１８（４００μｇ／ｍｌ）を補充したＭＥＭ中で、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を増殖させた。全ての細胞を、９６ウェルプレート中において、１０００細胞／ウェルの開始密度にてシーディングし（ｓｅｅｄｅｄ）し、３７℃にて、２４時間インキュベートした。次いで、試験化合物／ミクロソーム／アセトニトリル上清のアリコート（０．１ｍｌ）をＣＨＯ細胞へ添加した。次いで、細胞を２４時間、３７℃、５％ＣＯ2にてインキュベートした。この時間の後に、ＭＴＴ（５０μｌ；  ２ｍｇ／ｍｌ  ストック溶液）を各ウェルへ添加し、細胞をさらに４時間インキュベートした。この間、生存能のある細胞（ｖｉａｂｌｅ  ｃｅｌｌｓ）のミトコンドリアデヒドロゲナーゼによって、ＭＴＴ、水素アクセプターテトラゾリウム塩、をホルマザン色素に還元した。培地を細胞からアスピレーションし（ａｓｐｉｒａｔｅｄ）、ＤＭＳＯ（１００μｌ／ウェル）を添加し、着色したホルマザン色素を可溶化した。次いで、９６−ウェルプレート中のホルマザン色素の吸光度を５５０ｎｍにて測定した。ＣＨＯ細胞増殖の休止（ａｒｒｅｓｔ）に及ぼす試験化合物によるミクロソーム活性化の影響は、ミクロソームインキュベーションを伴うまたは伴わないＩＣ50（細胞増殖を５０％だけ阻害する濃度）を比較することによって測定され得た。
【０１０８】
【表１】
2004522779.tif 000020
【０１０９】
培養中のチャイニーズハムスター卵巣細胞の生存に及ぼす化合物３．９およびその代謝（活性化）産物の影響。細胞は、化合物３．９とＮＡＤＰＨ補強されたラット肝ミクロソームとの反応混合物からの上清と共に、２４時間インキュベートされた。ＩＣ50は、細胞増殖を５０％だけ阻害するために必要とされる薬物の濃度を表す。値は、３回の実験についての平均＋ｓｄとして表される。代謝の全詳細についての方法を参照のこと。
ＡＦ＝活性ファクター（すなわち、＋化合物１．８活性化について得られるＩＣ50細胞毒性値の比）
＊は、ｐ＞０．０５における有意性（ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ）を表す。
【国際公開パンフレット】
2004522779.tif 000044
2004522779.tif 000045
2004522779.tif 000046
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2004522779.tif 000051
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【国際調査報告】
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