(57)【要約】極性、非極性およびイオン性である様々な分析物の、官能化ポリマー媒体を使用する分離を開示する。ポリビニリデン化合物の高度に架橋したホモポリマーで予め形成した剛性粒子を、残留ビニル基を使用して官能化し、その上に重合によりモノビニル化合物が共有結合する。官能化は、液体クロマトグラフィーや固相抽出などの分離応用に望ましい表面特性を付与する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ポリビニリデンモノマーを重合させ、自己架橋したホモポリマーを形成すること；次いで
ｂ）官能性モノマーを重合させ、該ホモポリマーに共有結合させること、
により調製した、官能化ポリマービーズ。
【請求項２】
該ポリビニリデンモノマーが、ジビニルベンゼン、トリビニルベンゼン、ジビニルピリジン、ジビニルトルエン、ジビニルナフタレン、エチレングリコールジメチルアクリレートおよびＮ，Ｎ−メチレンジアクリルアミドからなる群から選択される、請求項１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項３】
該ポリビニリデンモノマーがジビニルベンゼンである、請求項２に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項４】
該ホモポリマーがポリ（ジビニルベンゼン）である、請求項１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項５】
該官能性モノマーがモノビニル化合物である、請求項１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項６】
該モノビニル化合物が極性部分またはイオン性部分を有する、請求項５に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項７】
該官能性モノマーが、Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド、アミノスチレン、メチルアクリレート、エチルアクリレート、ヒドロキシメチルエチルアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレートおよびヒドロキシエチルアクリレートからなる群から選択される、請求項１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項８】
該官能性モノマーが、Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドである、請求項７に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項９】
該ビーズが、官能化ポリマービーズ１ｇにつき０．５ないし３．０ミリモルのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドを含む、請求項８に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項１０】
該官能性モノマーが、Ｎ−（４−ビニルベンジル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン、塩化ビニルベンジルトリメチルアンモニウム、４−ビニル安息香酸、スチレンスルホン酸およびメタクリル酸からなる群から選択される、請求項１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項１１】
該官能性モノマーがグリシジルメタクリル酸塩である、請求項１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項１２】
エチレンジアミン、ジエチルアミン、ポリエチレンイミン、ヒドロキシプロピルスルホン酸、ヒドロキシルベンゼンスルホン酸またはヒドロキシ安息香酸とさらに反応する、請求項１１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項１３】
エチレンジアミンとさらに反応する、請求項１１に記載の官能化ポリマービーズ。
【請求項１４】
ａ）ポリビニリデンモノマーを重合させ、ホモポリマーを形成すること；次いで
ｂ）該ホモポリマーに共有結合する官能性モノマーを重合させること、
の工程を含む、官能化ポリマービーズの調製方法。
【請求項１５】
工程（ａ）に続き、残留ビニル基が該ホモポリマーに残存する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
該官能性モノマーが、該ホモポリマーに残留ビニル基を介して共有結合する官能性ポリマーを形成する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
該官能性モノマーが、ジビニルベンゼン、トリビニルベンゼン、ジビニルピリジン、ジビニルトルエン、ジビニルナフタレン、エチレングリコールジメチルアクリレートおよびＮ，Ｎ−メチレンジアクリルアミドからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
該官能性モノマーがジビニルベンゼンである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
該ポリビニリデンモノマーがジビニルベンゼンである、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
該官能性モノマーがモノビニル化合物である、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
該モノビニル化合物が極性部分またはイオン性部分を有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
該官能性モノマーが、Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド、アミノスチレン、メチルアクリレート、エチルアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレートおよびＮ−ビニルカプロラクタムからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】
該官能性モノマーが、Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドである、請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】
該官能化ポリマービーズが、官能化ポリマービーズ１ｇにつき０．５ないし３．０ミリモルのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドを含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
該官能性モノマーが、Ｎ−（４−ビニルベンジル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン、塩化ビニルベンジルトリメチルアンモニウム、４−ビニル安息香酸、スチレンスルホン酸およびメタクリル酸からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２６】
該官能性モノマーがグリシジルメタクリル酸塩である、請求項１４に記載の方法。
【請求項２７】
ｃ）工程（ｂ）で産生された官能化ポリマービーズを、エチレンジアミン、ジエチルアミン、ポリエチレンイミン、ヒドロキシプロピルスルホン酸、ヒドロキシルベンゼンスルホン酸またはヒドロキシ安息香酸と反応させること、
をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ｃ）工程（ｂ）で産生された官能化ポリマービーズを、エチレンジアミンと反応させること、
をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
工程（ｂ）が嫌気性条件下でフリーラジカルにより触媒される、請求項１４に記載の方法。
【請求項３０】
フリーラジカル触媒が利用され、該フリーラジカル触媒が、過酸化ベンゾイル、ｔｅｒｔ−ブチルベンゾアート、過酸化カプロイル、アゾジイソブチロニトリル、およびアゾジイソブチルアミドからなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
該フリーラジカル触媒がアゾジイソブチロニトリルである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
分析物と第一溶媒を含む溶液から分析物を分離する方法であって、該方法が該溶液を請求項１に記載の官能化ポリマービーズに接触させ、それにより該分析物が該官能化ポリマービーズに吸着されることを含む、方法。
【請求項３３】
該官能化ポリマービーズを該溶液に接触させた後、該官能化ポリマービーズを該第一溶媒で洗浄する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
該官能化ポリマービーズを第二溶媒で洗浄することにより、該分析物が該官能化ポリマービーズから放出される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
該第一溶媒が水性である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
該第二溶媒がメタノールである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
該分析物が、アセトアミノフェン、レゾルシナール（ｒｅｓｏｒｃｉｎａｌ）、ピンドロル、プロカインアミド、プリミドン、フェノバルビタール、ナイアシンアミドおよびブピバカインからなる群から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３８】
該官能化ポリマービーズがＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド官能基を含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３９】
混合物を請求項１に記載の官能化ポリマービーズのカラムに通過させることによる、該混合物中の分析物の分離方法。
【請求項４０】
水性緩衝液が移動相として使用される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
該方法が高速液体クロマトグラフィーを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
該分析物が有機酸である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
該分析物が相互に異性体である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
該官能化ポリマービーズがＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４５】
該官能化ポリマービーズが陰イオン交換剤を含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４６】
該官能化ポリマービーズが塩化ビニルベンジルトリメチルアンモニウムを含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
該分析物が該官能化ポリマービーズを一連の溶媒で洗浄することにより分離される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４８】
該一連の溶媒がメタノール、酸および酸性化メタノールを含む、請求項４７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、極性、非極性またはイオン性である様々な分析物の、官能化ポリマー媒体を使用する分離に関するものである。本明細書は、重合媒体の官能化およびその使用を開示する。ポリマー粒子の官能化を実行し、液体クロマトグラフィーや固相抽出などの分離応用に望ましい表面特性を付与する。
【０００２】
発明の背景
クロマトグラフィーおよび固相抽出による分析物の分離は、分析物溶液の混合物を、結合相／吸着剤としても知られる固体素材に接触させることにより実行される。結合相への分析物の吸着／脱着（分割）は、混合物の分離をもたらす。（Ｐｒａｃｔｉｃａｌ ＨＰＬＣ Ｍｅｔｈｏｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， Ｌ． Ｒ． Ｓｎｙｄｅｒ， Ｊ． Ｊ． Ｋｉｒｋｌａｎｄ， ａｎｄ Ｊ． Ｌ． Ｇｌａｊｃｈ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， １９９７； Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｓａｍｐｌｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ， Ｍ． Ｚｉｅｆ， ａｎｄ Ｒ． Ｋｉｓｅｌ， Ｊ． Ｔ． Ｂａｋｅｒ， Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ， ＮＪ， １９８８）。発明の背景を明らかにするために、あるいは実践に関して付加的な詳細を提供するために、本明細書で使用する刊行物および他の資料は、出典明示により本明細書の一部とし、そして添付の引用文献リストにおいて便宜上各々グループ化されている。支持体を改変して、逆相やイオン交換などの様々なメカニズムによる分離を可能にする特性を付与する。シリカ粒子を使用する逆相結合相の作成が知られている。酸性および塩基性条件における不安定性などの、シリカに付随するいくつかの欠点のために、ポリマーが考究されている。架橋コポリマー樹脂に伴う難点には、溶媒中での膨張および機械的強度の低下が含まれる（Ｆ． Ｎｅｖｅｊａｍ， ａｎｄ Ｍ． Ｖｅｒｚｅｌｅ， Ｊ ： Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ３５０ ： １４５ （１９８５））。従って、高度に架橋されているが多孔性のポリマー粒子であり、その中で吸着部位が分析物に接近可能であるポリマー粒子を採用することが、多くの場合必要である。非官能性ポリマー相に必要な選択性は、移動相を形成する溶媒を変化させることにより達成され、一方シリカベースの結合相は、望ましい選択性をもたらす極性と非極性の特徴の組合せで改変される。それ故に、望ましい選択性および分離能力をもたらせる適切な官能化重合素材、およびこれらの使用法が必要である。
【０００３】
モノビニリデンの架橋コポリマーやポリビニリデン単量体を使用して官能化ポリマーを産生することは、先行技術において周知である。例えば、そのようなポリマーのスルホン化によるイオン交換樹脂への変換が、米国特許第２，３６６，００７号に記載されている。これらの官能化の実施では、ポリマー骨格が反応するので、これらのビーズの特性を親水性に変化させ、これらを割れたり砕けたりしやすくする。さらに、バルクの反応におけるスルホン化などの官能化の制御は困難である。疎水性から親水性クロマトグラフィー媒体への変換は、米国特許第５，０３０，３５２号に開示されている。これらのクロマトグラフィー媒体は、疎水性ポリマー基板（例えば、ポリスチレン−ＤＶＢ）の表面に様々な薄い親水性被覆を適用することにより得られる。この工程には、疎水性と親水性のドメインを有する溶質が疎水性−疎水性相互作用により基板に吸着し、親水性ドメインが表面から外に向かって伸びることが含まれる。次いで、分子は適所に架橋される。これらの被覆素材は、さらに誘導されて分離に有用な様々な素材を産生し得る。そのような被覆は、疎水性支持体表面の薄皮に限られ、従って能力が限定される。また、支持体の疎水性が減少し、疎水性分析物を吸着するのに不充分になり得る。Ｍｅｉｔｚｎｅｒ と Ｏｌｉｎｅ は、米国特許第４，２９７，２２０号において、特定中空容量および表面領域を得るために、ある種の化合物の存在下でモノエチレン的に不飽和なモノマーとポリビニリデンモノマーの共重合により形成される、微小網状コポリマーを開示しており、それは有機物質を含有する流体混合物から有機物質を吸収するのに使用される。Ｂｏｕｖｉｅｒ らは、米国特許第５，８８２，５２１号において、１２−３０モルパーセントの親水性モノマーを有する、親水性および疎水性モノマーの水で湿潤可能なコポリマーを使用して、溶液から有機溶質を除去する方法を開示している。
【０００４】
発明の概要
本発明は、２個のモノビニリデンとポリビニリデンのモノマーの架橋共重合と、ポリマー骨格の官能化を含まない点で、先行技術と実質的に異なる。それは、官能化ビーズを産生するために別の官能性モノマーを使用して、予め形成された剛性粒子の表面を官能化するという新しいアプローチを使用する。さらに、開示する官能化法は、他のポリマー骨格官能化法と比較して、必要とされる反応の数および反応物と溶媒の消費を有意に減少させる。例えば、第四アミン官能性を有する強い陰イオン交換媒体を作成するためには、３段階の反応（臭素化または塩素化、続いてアミン化、続いて四級化）が必要である。従って、ポリビニリデンモノマーのホモポリマーである予め形成した剛性粒子を官能化することにより、ポリマー骨格の物理的特性は影響を受けないが、有用なクロマトグラフィーおよび固相抽出分離を可能にする重大な特性は表面に付与され、コポリマーに伴う不利益は排除される。開示する調製法を使用することにより、ポリビニリデンモノマーの重合により調製された、高度に架橋した予め形成された剛性粒子は、粒子の物理的特性（機械的強度や非膨張性など）を変更することなく官能化できる。本発明は、親水性、陽イオンおよび陰イオン交換特性を与える官能化を開示する。本発明によると、高度に架橋したポリビニリデン化合物のホモポリマーの、予め形成した剛性多孔性または非多孔性粒子は、残留ビニル基を使用して官能化され、そこに重合によりモノビニル化合物が共有結合する。従って、残留ビニル基を含有する予め形成した粒子は、親水性であるか、あるいは陰イオンまたは陽イオン交換剤として有用であるというような望ましい特性を有するモノビニル化合物の溶液に懸濁され、誘導体化される。このように、本発明は、高率の残留ビニル基を有する剛性粒子の表面で望ましいモノビニル化合物を長鎖重合することにより、高率の官能化を可能にする。
【０００５】
本発明に従って、有意な差異と興味深い分離特性が、官能化ポリマーに驚異的に見出された。これらの特性は、吸着およびイオン交換メカニズムによる、極性、非極性およびイオン性分析物の液体クロマトグラフィーおよび固相抽出分離を導く。
【０００６】
図面の簡単な説明
図１は、移動相として脱イオン水を５５分まで使用し、５５分で脱イオン水からメタノールに変えてメタノールで抽出したときの、非官能化ＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。アセトアミノフェンは水の実行の間に浸出し、メタノールではピークが抽出されず、従って乏しい／無保持を示す。
【０００７】
図２は、移動相として脱イオン水を５５分まで使用し、５５分で脱イオン水からメタノールに変えてメタノールで抽出したときの、０．５ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例３）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。いくらかのアセトアミノフェン（約３０％）が水の実行の間に３５分で浸出し、メタノールでピークが抽出されたので、非官能化ＤＶＢ上での保持と比較して、保持の改善を示す。
【０００８】
図３は、移動相として脱イオン水を５５分まで使用し、５５分で脱イオン水からメタノールに変えてメタノールで抽出したときの、１．２ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例４）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。いくらかのアセトアミノフェン（１５％）が水の実行の間に４５分でより遅く浸出し、メタノールでピークが抽出されたので、さらなる保持の改善を示す。
【０００９】
図４は、移動相として脱イオン水を５５分まで使用し、脱イオン水からメタノールに変えてメタノールで抽出したときの、１．３６ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例６）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。無視できる量のアセトアミノフェンが実行の間に浸出し、メタノールでピークが抽出されたので、さらなる保持の改善およびメタノール抽出による良好な回収を示す。
【００１０】
図５は、移動相として脱イオン水を５５分まで使用し、５５分で脱イオン水からメタノールに変えてメタノールで抽出したときの、１．５ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例５）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。無視できる量のアセトアミノフェンが水の実行の間に浸出し、メタノールでピークが抽出されたので、メタノール抽出による良好な保持および回収を示す。
【００１１】
図６は、移動相として脱イオン水を５５分まで使用し、５５分で脱イオン水からメタノールに変えてメタノールで抽出したときの、１．６ｍｍｏｌのアミノスチレン（実施例１）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。メタノールでピークが抽出され、非官能化ＤＶＢ上よりも実質的に高い保持を示す。
【００１２】
図７は、非官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、酒石酸、マロン酸およびコハク酸からなる有機酸混合物のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【００１３】
図８は、実施例５の官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、酒石酸、マロン酸およびコハク酸からなる有機酸混合物のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【００１４】
図９は、実施例５の官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、マレイン酸（シス１，２−エチレンジカルボン酸）とフマル酸（トランス１，２−エチレンジカルボン酸）のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【００１５】
図１０は、非官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、マレイン酸（シス１，２−エチレンジカルボン酸）とフマル酸（トランス１，２−エチレンジカルボン酸）のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【００１６】
発明の詳細な説明
本発明は、官能化ポリマー媒体を使用する、極性、非極性またはイオン性である様々な分析物の分離法を提供する。特に、本発明は、親水性、並びに陰イオンおよび陽イオン交換能力などの所望の特性を付与するために、予め形成した高度に架橋したポリマー粒子を官能化することに関するものである。さらに、本発明は、様々な分析物の液体クロマトグラフィーおよび固相抽出による分離に関連する。
【００１７】
官能化できる予め形成した剛性粒子には、懸濁重合などの従来の工程で調製した多孔性または非多孔性のポリマービーズが含まれる。高い機械的強度および非膨張性の特徴のため、ジビニルベンゼンやトリビニルベンゼンなどのポリビニリデン化合物を使用して調製した、高度に架橋したポリマービーズが好ましい。加えて、ジビニルベンゼンの重合およびその自己架橋は、表面上に十分な残留ビニル（二重）結合をもたらし、それはモノビニル化合物を使用する表面の官能化に使用される。このように、高程度の官能化を導けるので、多数の残留二重結合を有する予め形成したポリマービーズが好ましい。さらに、大きい表面積および官能性部分への接近のために、高率の官能化を提供できる微小多孔性粒子が好ましい。
【００１８】
残留ビニル基とモノエチレン的に不飽和な化合物（モノビニル化合物）の後重合（ｐｏｓｔｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）による官能化は、フリーラジカル開始により実行される。モノマーは、極性であるか、あるいは陽イオン交換剤または陰イオン交換剤であるような、活性部分を有する化合物のクラスから選択される。重合後、そのような活性部分を含有するポリマーの長鎖を表面に取付け、長いポリマー鎖をポリマービーズ表面から外側に向かって伸長させる。この配置は、機械的強度、膨張性、およびビーズ骨格の疎水性／親水性などの、物理的または化学的特性を変更しない。例えば、活性部分を含有するモノマーとの制御された後重合（官能化）により、長いポリマー鎖に沿って孔中に活性部位ポケットが創生されるが、ビーズのポリマー骨格の疎水性ポケットは保持される。実施例に記載のように、これらの特性は極性分析物の効率的な分離を導くことができると判明した。
【００１９】
後重合条件は、微小多孔性ビーズの高率の官能化が達成される一方で、孔を出入する分析物の拡散を可能にするように選択し、所望の分離および分析物の回収を達成する。
【００２０】
実施例に記載のように、微小多孔性ポリマービーズは、従来の懸濁重合を使用して調製できる。残留ビニル基または不飽和は、酢酸水銀滴定法（Ｄａｓ Ｍ． Ｎ．， ＡｎａＬ Ｃｈｅｍ． ２６： １０８６ （１９５４））により測定する。従って、官能化ポリマー粒子を産生するために、微小多孔性ポリ（ジビニルベンゼン）ビーズを調製し、使用する。ポリビニリデン化合物のホモ重合により調製した、十分な残留ビニル基を有するポリマービーズを使用できる。適するポリビニリデン化合物には、ジビニルベンゼン、トリビニルベンゼン、ジビニルピリジン、ジビニルトルエン、ジビニルナフタレン、エチレングリコールジメチルアクリレート、およびＮ，Ｎ−メチルレン−ジアクリルアミドが含まれる。高い機械的強度および残留ビニル基のために、ジビニルベンゼン由来ポリマービーズが好ましい。ポリマービーズは、３ないし約１００：ｍ、好ましくは約５−５０：ｍの範囲の直径、約６０Åないし１０００Å、好ましくは１００Å−３００Å（水銀細孔測定法により測定）の孔直径、そして約７０−１５０ｍ２／ｇの表面積（水銀細孔測定法により測定）および約１５０−８００ｍ２／ｇの表面積（窒素吸着により測定）を有し得る。
【００２１】
本発明のある実施態様は、様々な分析物の分離用の分離素材である。分離素材は、嫌気性条件下のフリーラジカル重合を使用する、残留ビニル基とモノビニル化合物の後重合によるポリマービーズの官能化により調製する。適するフリーラジカル触媒には、過酸化ベンゾイル、ｔｅｒｔ−ブチルベンゾアート、過酸化カプロイル、アゾジイソブチロニトリル、およびアゾジイソブチルアミドが含まれる。
【００２２】
ある実施態様では、分離素材はポリマービーズに極性特性を付与するように産生する。官能化に適するモノビニル化合物には、Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド、アミノスチレン、メチルアクリレート、エチルアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシメチルアクリレート、およびＮ−ビニルカプロラクタムが含まれる。好ましいモノビニル化合物は、Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドである。ポリマーを官能化して、官能化ポリマー１グラムにつき０．５−３ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドを成すことができる。極性化合物の良好な保持をもたらす好ましい官能化は、官能化ポリマー１グラムにつき１．０ないし２．０ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドである。実施例で例示説明するように、官能化を０．５ｍｍｏｌから１．５ｍｍｏｌに増加させると、極性分析物の保持および分離能力が増加する。
【００２３】
別の実施態様では、ビーズを分析物の陰イオンおよび陽イオン交換分離に利用できるように、ポリマービーズにイオン性特性を付与するために分離素材を産生する。官能化に適するモノビニル化合物には、Ｎ−（４−ビニルベンジル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン、塩化ビニルベンジルトリメチルアンモニウム、４−ビニル安息香酸、スチレンスルホン酸（Ｎ−ビニルベンゼンスルホン酸とも呼ばれる）、およびメタクリル酸が含まれる。加えて、グリシジルメタクリル酸塩を使用して残留ビニル基と後重合したポリマービーズは、さらにエチレンジアミン、ジエチルアミン、ポリエチレンイミン、ヒドロキシプロピルスルホン酸、ヒドロキシルベンゼンスルホン酸またはヒドロキシ安息香酸と反応して、後重合したポリマーの上にイオン性官能性部位を形成でき、官能性ポリマーが得られる。
【００２４】
本発明の他の態様では、官能化ポリマーを液体クロマトグラフィーおよび固相抽出による分析物の分離に使用する。官能化ポリマーは、実施例で例示説明するように、多方面で有用である。例えば、アセトアミノフェン、ナイアシンアミドおよびレゾルシナール（ｒｅｓｏｒｃｉｎａｌ）などの極性有機分析物の回収は、非官能化ＤＶＢポリマー上またはオクタデシル修飾シリカ（Ｃ１８−結合シリカ）上での回収よりも、極性基の存在のために官能化ポリマー上で実質的に高率である。また、官能化ポリマーは、高い吸着能力を有することが示される。実施例で示すように、非官能化ＤＶＢおよびＣ１８については、回収は、あまり濃くない溶液（０．０１ｍｇ／ｍＬ）よりも非常に濃いアセトアミノフェン溶液（０．１ｍｇ／ｍＬ）で少ないが、官能化ＤＶＢの回収は両濃度レベルで（量的に）高いままである。また、官能化ポリマーを液体クロマトグラフィーのカラムに詰めて分離に使用すると、有機酸並びに有機酸の異性体（シスおよびトランス）を、純粋な水性移動相を使用して分離できることが解明された。
【００２５】
さらに、イオン性特徴を有する官能化ポリマーを使用すると、分析物をイオン交換および逆相メカニズムの組合せにより分離できることが見出された。このように、イオン性および疎水性分析物のより良好な分離が達成できる。実施例で例示説明するように、カルボン酸基を有するスリンダクのような酸性分析物は、陰イオン性官能化ポリマー上並びに他のポリマー（非イオン性および非官能化）およびＣ１８の上に保持される。しかしながら、分析物は最初のメタノール洗浄で非イオン性素材から洗い流されるが、分析物は最初のメタノール洗浄でイオン性官能化ポリマーから洗い流されない。１Ｎの塩酸などの酸、続いてメタノール（酸性化）で洗浄した後、分析物は定量的に回収される。これにより、疎水性分析物から酸性分析物を分離する、非常に効果的な方法が提供される。
【００２６】
以下の実施例で本発明をさらに詳述する。これは、例示説明に供され、いかなる様式でも本発明を限定することを意図していない。当分野で周知の標準的技法または以下に特記する技法を利用する。
【００２７】
実施例
ポリ（ジビニルベンゼン）（ＤＶＢ）ビーズの調製
８０％ＤＶＢ、開始剤として過酸化ベンゾイル、そして孔形成剤としてトルエンを使用して、従来の懸濁重合により、ＤＶＢポリマービーズを調製した。ポリマーは、０．２ｍｅｑ／ｇの残留ビニル基を含有した。孔直径は１８０Åであり、水銀細孔測定法で測定した表面積は９５ｍ２／ｇであった。元素分析により、窒素が存在しないことが示された。
【００２８】
実施例１
清浄な乾いた１リットルの丸底フラスコに、３５０ｇの水、４ｇのポリビニルアルコール、および４ｇの塩化ナトリウムを添加した。ＤＶＢポリマー（１５ｇ）をフラスコに添加した。２５ｍＬのビーカーに、４ｇのアミノスチレン、０．３ｇのアゾジイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）および２０ｇのトルエンを添加した。反応混合物を撹拌し、試薬を溶解させた。モノマー混合物をフラスコに添加した。フラスコから全空気を一掃し、窒素を添加して不活性な空気を作成した。フラスコを一晩７５ＥＣで加熱した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物の元素分析により、窒素が２．４％と示された。次いでこのポリマー生成物を、トリエチルアミン（６ｇ）の存在下、４時間、室温で、１００ｍｌのテトラヒドロフラン中の塩化アセチル（１０ｇ）で処理した。ポリマーの元素分析により、窒素が２．３％と示された。これは最終生成物１グラムにつき１．６ｍｍｏｌのアミノスチレンと等価である。
【００２９】
実施例２
清浄な乾いた２５０ｍＬの丸底フラスコに、７５ｇのエタノールを添加した。ＤＶＢポリマー（１５ｇ）をフラスコに添加した。２５ｍＬのビーカーに、５ｇのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと０．２ｇのＡＩＢＮを添加し、１０ｍＬのエタノールを添加し、そして内容物を撹拌して試薬を溶解させた。モノマー混合物をフラスコに添加した。フラスコから全空気を一掃し、窒素を添加し、内容物を１００ｒｐｍで撹拌した。回転しているフラスコを一晩７５ＥＣで加熱した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（１５ｇ）の元素分析により、窒素が１．９％と示され、最終生成物１グラムにつき１．３６ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと等価であった。水銀細孔測定法で測定した表面積は１２６ｍ２／ｇであり、孔直径は１７３Åであった。
【００３０】
実施例３
清浄な３口丸底フラスコに、機械撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに２００ｇのエタノールと４０ｇのＤＶＢポリマーを添加した。撹拌を始め、３００ｒｐｍに設定した。５０ｍＬのビーカーに、１０．５ｇのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと０．６ｇのＡＩＢＮを２０ｍｌのエタノールと共に添加し、撹拌して溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。混合物を３００ｒｐｍ、７５ＥＣで１６時間撹拌した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（４２ｇ）の元素分析により、窒素が０．７％と示され、これは最終生成物１グラムにつき０．５ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと等価であった。
【００３１】
実施例４
清浄な３口丸底フラスコに、機械撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに２００ｇのエタノールと４５ｇのＤＶＢポリマーを添加した。撹拌を始め、３００ｒｐｍに設定した。５０ｍＬのビーカーに、２０ｇのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと０．６ｇのＡＩＢＮを２０ｍｌのエタノールと共に添加し、これらを撹拌して試薬を溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。混合物を３００ｒｐｍ、８０ＥＣで１６時間撹拌した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（４８ｇ）の元素分析により、窒素が１．８％と示され、これは最終生成物１グラムにつき１．２ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと等価であった。
【００３２】
実施例５
清浄な３口丸底フラスコに、機械撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに８００ｇのエタノールと２００ｇのＤＶＢポリマーを添加した。撹拌を始め、３００ｒｐｍに設定した。２５０ｍＬのビーカーに、８９ｇのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと２．６８ｇのＡＩＢＮを１００ｍｌのエタノールと共に添加し、これらを撹拌して溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。混合物を３００ｒｐｍ、８０ＥＣで１６時間撹拌した。生成物をダイネル布で濾過し、１Ｌの脱イオン水で２回、そして１Ｌのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物の元素分析により、窒素が２．１％と示され、最終生成物１グラムにつき１．５ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと等価であった。官能化の安定性を測定するために、このポリマーを酢酸エチルで一晩抽出した。元素分析における変化は全く観察されず、従ってＤＶＢへのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドの共有結合が示された。
【００３３】
実施例６
清浄な３口丸底フラスコに、機械撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに２００ｇのエタノールと４５ｇのＤＶＢポリマーを添加した。撹拌を始め、３００ｒｐｍに設定した。５０ｍＬのビーカーに、２０ｇのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと０．６ｇのＡＩＢＮを２５ｍｌのエタノールと共に添加し、これらを撹拌して試薬を溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。混合物を３００ｒｐｍ、８０ＥＣで１６時間撹拌した。生成物をダイネル布で濾過し、１Ｌの脱イオン水で２回、そして１Ｌのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（４８ｇ）の元素分析により、窒素が１．９％と示され、最終生成物１グラムにつき１．３６ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドと等価であった。
【００３４】
実施例７
清浄な３口丸底フラスコに、機械撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに１５０ｇのエタノールと３０ｇのＤＶＢポリマーを添加した。撹拌を始め、３００ｒｐｍに設定した。５０ｍＬのビーカーに、１３ｇのグリシジルメタクリル酸塩と０．４ｇのＡＩＢＮを２０ｍｌのエタノールと共に添加し、これらを撹拌して溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。混合物を３００ｒｐｍ、８０ＥＣで１６時間撹拌した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（３２ｇ）のＦＴ−ＩＲは、エポキシド環に典型的な１２５０ｃｍ−１のピークを示した。
【００３５】
実施例８
以下の反応により、第一および第二官能性アミンを有する弱い陰イオン交換媒体を産生した。清浄な３口丸底フラスコに、磁気撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに１５ｇの実施例７のポリマー、２５０ｍＬのＴＨＦおよび５０ｇのエチレンジアミンを添加した。混合物を８時間窒素下で還流した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（１６ｇ）の元素分析により、窒素が２．９％と示された。
【００３６】
実施例９
以下の反応により、第三アミン官能性を有する弱い陰イオン交換媒体を産生した。清浄な３口丸底フラスコに、磁気撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに１５ｇの実施例７の生成物、２５０ｍＬのＴＨＦおよび５０ｇのジエチルアミンを添加した。混合物を８時間窒素下で還流した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物の元素分析により、窒素が０．８％と示された。陰イオン交換能力は、０．１２ｍｅｑ／ｇであった。
【００３７】
実施例１０
以下の反応により、第三アミン官能性を有する弱い陰イオン交換媒体を産生した。清浄な３口丸底フラスコに、機械撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに３００ｇのエタノールと４５ｇのＤＶＢポリマーを添加した。撹拌を始め、３００ｒｐｍに設定した。５０ｍＬのビーカーに、２０ｇのＮ−（４−ビニルベンジル）−Ｎ−Ｎ−ジメチルアミンと０．６ｇのＡＩＢＮを２５ｍｌのエタノールと共に添加し、これらを撹拌して試薬を溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。混合物を３００ｒｐｍ、８０ＥＣで１６時間撹拌した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（４７ｇ）の元素分析により、窒素が０．８４％と示された。孔直径は１２５Åであった。
【００３８】
実施例１１
以下の反応により、第四アミン官能性を有する強い陰イオン交換媒体を産生した。清浄な３口丸底フラスコに、機械撹拌機、窒素バブラー、および還流冷却器を備え付けた。フラスコに３００ｇのエタノールと３０ｇのＤＶＢポリマーを添加した。撹拌を始め、３００ｒｐｍに設定した。５０ｍＬのビーカーに、１５ｇの塩化ビニルベンジルトリメチルアンモニウムと０．６ｇのＡＩＢＮを２０ｍｌのエタノールと共に添加し、これらを撹拌して溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。混合物を３００ｒｐｍ、８０ＥＣで１６時間撹拌した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（３１ｇ）の元素分析により、窒素が１．４％と示された。陰イオン交換能力は、０．６ｍｅｑ／ｇであった。
【００３９】
実施例１２
清浄な乾いた５００ｍＬの丸底フラスコに、３００ｇのエタノールと３０ｇのＤＶＢポリマーを添加した。５０ｍＬのビーカーに、２０ｇのスチレンスルホン酸と２５ｍＬのエタノールに溶解した０．６ｇのＡＩＢＮを添加し、内容物を撹拌して試薬を溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。フラスコから全空気を一掃し、窒素空気下に置き、１００ｒｐｍで撹拌した。フラスコを一晩８０ＥＣで加熱した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。ポリマー生成物（３４ｇ）の元素分析により、３．５％の硫黄が示された。陽イオン交換能力は０．６ｍｅｑ／ｇであった。
【００４０】
実施例１３
清浄な乾いた５００ｍＬの丸底フラスコに、３００ｇのエタノールと２０ｇのＤＶＢポリマーを添加した。５０ｍＬのビーカーに、２０ｇのメタクリル酸と２５ｍＬのエタノールに溶解した０．６ｇのＡＩＢＮを添加し、これらを撹拌して溶解させた。モノマー混合物を丸底フラスコに添加した。フラスコから全空気を一掃し、不活性な窒素空気下に置き、１００ｒｐｍで撹拌した。フラスコを一晩８０ＥＣで加熱した。生成物をダイネル布で濾過し、２００ｍＬの脱イオン水で２回、そして２００ｍＬのメタノールで１回洗浄した。生成物を一晩真空オーブン中で８０ＥＣで乾燥させた。陽イオン交換能力は０．９ｍｅｑ／ｇであった。ポリマー生成物のＦＴ−ＩＲは、１７５０ｃｍ−１で酸カルボニルのピークを示した。
【００４１】
実施例１４
極性水溶性分析物の保持効率を、約０．２５−０．３０ｇのＤＶＢまたは官能化ＤＶＢポリマーを詰めた小型ＨＰＬＣカラム（４．６Ｘ５０ｍｍ）を使用して測定した。最初にカラムを５ｍＬのメタノールで、続いて１０ｍＬの脱イオン水で洗浄した。次いで、２００：Ｌのアセトアミノフェン溶液（１．０ｍｇ／ｍＬ、水中）を注入し、水を使用して５５分間クロマトグラフィーを継続した。５５分に、移動相をメタノールに変えた。５５分の前（純水が行われているとき）と５５分の後（純粋なメタノールが抽出に使用されているとき）のピーク面積から、保持効率を測定した。結果を図１−６に示す。官能化ＤＶＢ（実施例５）は、水洗中にアセトアミノフェンが全く浸出しないが、５５分の後にエタノールで抽出されたので、高いアセトアミノフェン保持を示した。図１に示すように、非官能化ＤＶＢでは、アセトアミノフェンのほとんどが水に浸出し、保持の乏しさを示した。Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（％Ｎ０．７ないし２．０）の官能化レベルを上昇させることにより、アセトアミノフェンは保持され、定量的に回収された（図１−５）。同様の保持動態は、アミノスチレン官能化ポリマーで観察された（図６）。
【００４２】
実施例１５
官能化ポリマーを用いる固相抽出（ＳＰＥ）による分析物の回収は、２０ｍｇのＤＶＢまたは逆相メカニズムにより分析物を維持／吸収する官能化ＤＶＢ（実施例５より）を詰めたＳＰＥカラム（１ｍＬ）を使用して測定した。希釈溶液からの様々な分析物の抽出と回収に、これらのカラムを使用した。ＳＰＥカラムを正圧処理装置（加圧空気または窒素を使用して液体をカラムに通させる装置）に置いた。１ｍＬメタノール、続いて１ｍＬの脱イオン水を通過させてＳＰＥカラムを調整した。次いで、リン酸緩衝液（２０ｍＭ、ｐＨ５．０−８．０）中の分析物給送溶液（０．０１−０．１ｍｇ／ｍＬ）１ｍＬを、流速２−３ｍＬ／分でカラムを通過させた。１ｍＬの脱イオン水でカラムを洗浄した後、メタノール（５００：Ｌ）で分析物をカラムから抽出した。開始給送溶液中および抽出溶液中の分析物濃度を高速液体クロマトグラフィーで測定し、分析物回収率の算定に使用した。結果を表１にまとめる。結果は、官能化ＤＶＢは極性分析物の高い回収率を示したことを示す。また、アセトアミノフェン濃度を０．０１から０．１ｍｇ／ｍＬに上昇させてもアセトアミノフェンの減損は観察されず、高い吸着能力を示した。
【００４３】
【表１】
2004507594.tif 000002
【００４４】
実施例１６
有機酸の分離効率を、ＤＶＢおよび官能化ＤＶＢ（実施例５）を詰めたカラム（４．６Ｘ１５０ｍｍ）を使用するＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）により評価した。カラムに４５００ｐｓｉでスラリーを詰めた（２２ｍＬのクロロホルム−イソプロパノールの８５：１５混合物中、３．８ｇ）。リン酸カリウム、ｐＨ３．０緩衝液（２０ｍＭ）を移動相として使用した。酒石酸、マロン酸およびコハク酸の混合物６０：Ｌ（各々１０：ｇ、２５：ｇ、および３７５：ｇを含有）を注入し、クロマトグラフィーのピークを２１０ｎｍで記録した。個々の混合物成分について同様の注入を行い、各成分の保持時間を測定した。
【００４５】
図７に示すように、酒石酸、マロン酸およびコハク酸の保持時間は、各々１．８、２．６および１０．２分であった。結果は、非官能化ＤＶＢでは酒石酸とマロン酸の分離が乏しいことを示す。Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドによるポリマー表面の官能化は、３種全成分の分離効率が有意に改善されたので、分離媒体の改善に至った（図８）。また、３種全成分の保持時間は有意に延長された。分離は、極性表面から伸長している極性アミド部分を含有する長鎖Ｎ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミドの分枝に帰することができる。また、官能化ＤＶＢ（実施例５）は、シス−トランス酸を分離できる。２０ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ３．０緩衝液を移動相として使用して、１，２−エチレンジカルボン酸のシス形態（マレイン酸）と１，２−エチレンジカルボン酸のトランス形態（フマル酸）の混合物は、官能化ＤＶＢで分離されたが（図９）、両成分は非官能化ＤＶＢで共に抽出された（図１０）。
【００４６】
実施例１７
官能化ポリマーを用いる固相抽出（ＳＰＥ）による分析物の回収は、２０ｍｇのＤＶＢ、またはイオン性相互作用によって、また逆相メカニズムにもよって分析物を保持する強い陰イオン交換（第四（ｑｕａｔ））官能化ＤＶＢ（実施例１１より）を詰めたＳＰＥカラム（１ｍＬ）を使用して測定した。酸性分析物は、相互作用の混合により分離できることが証明された。ＳＰＥカラムを正圧処理装置に置いた。１ｍＬメタノール、続いて０．１ＮのＮａＯＨ、および１ｍＬの脱イオン水を通過させてＳＰＥカラムを調整した。０．０１ＮのＮａＯＨ中の酸性分析物給送溶液（０．０５ｍｇ／ｍＬ）１ｍＬを、流速２−３ｍＬ／分でカラムを通過させた。最初にカラムを１ｍＬのメタノールで洗浄して他の疎水性分析物を除去し、一方酸性分析物はカラムに保持された。次いでカラムを１ＮのＨＣｌで洗浄し、イオン性分析物を酸形態に変換し、かつイオン性相互作用を妨害し、そのことにより酸性分析物を逆相メカニズムにより保持した。最後に、酸性分析物を１ｍＬの酸性化メタノール（９０：１０、メタノール：１Ｎ ＨＣｌ）で抽出した。最初のメタノール洗浄液中および最後のメタノール抽出中の酸性分析物の濃度をＨＰＬＣにより測定し、回収率を算定した（表２）。表２に示すように、陰イオン交換部位を有する官能化ＤＶＢ（実施例１１）は、イオン性並びに逆相メカニズムにより酸性分析物を保持する。従って、分析物は最初のメタノール洗浄では洗い流されないが、イオン性相互作用が存在しない場合に最後の酸性化メタノールで抽出される。官能化ＤＶＢ（実施例５）、非官能化ＤＶＢおよびＣ１８では、分析物は最初のメタノール洗浄で洗い流され、酸性と疎水性の分析物の分離能力を示さない。同様に、サリチル酸はカラムに保持されないので、官能化ＤＶＢ（実施例５）、非官能化ＤＶＢおよびＣ１８によるサリチル酸の回収は非常に乏しい。
【００４７】
【表２】
2004507594.tif 000003
【００４８】
本特許出願で発明の好ましい実施態様の詳細を参照して発明を開示したが、発明の精神および添付の特許請求の範囲の内で、当業者にとって改変は容易に生じるので、開示は限定的意味よりもむしろ例示説明と意図していることを理解すべきである。
【００４９】
引用文献リスト
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米国特許第２，３６６，００７号
米国特許第４，２９７，２２０号
米国特許第５，０３０，３５２号
米国特許第５，８８２，５２１号
【図面の簡単な説明】
【図１】非官能化ＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。
【図２】０．５ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例３）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。
【図３】１．２ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例４）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。
【図４】１．３６ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例６）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。
【図５】１．５ｍｍｏｌのＮ−メチル−Ｎ−ビニルアセトアミド（実施例５）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。
【図６】１．６ｍｍｏｌのアミノスチレン（実施例１）で官能化したＤＶＢ上でのアセトアミノフェンの保持を示すグラフである。
【図７】非官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、酒石酸、マロン酸およびコハク酸からなる有機酸混合物のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【図８】実施例５の官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、酒石酸、マロン酸およびコハク酸からなる有機酸混合物のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【図９】実施例５の官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、マレイン酸（シス１，２−エチレンジカルボン酸）とフマル酸（トランス１，２−エチレンジカルボン酸）のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【図１０】非官能化ＤＶＢを詰めたカラムを使用した、マレイン酸（シス１，２−エチレンジカルボン酸）とフマル酸（トランス１，２−エチレンジカルボン酸）のクロマトグラフィー分離を示すグラフである。
【図１】
2004507594.tif 000004
【図２】
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【図３】
2004507594.tif 000006
【図４】
2004507594.tif 000007
【図５】
2004507594.tif 000008
【図６】
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【図７】
2004507594.tif 000010
【図８】
2004507594.tif 000011
【図９】
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【図１０】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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