(57)【要約】本発明は、タンパク質構成成分を含む臨床試料を分析するための、アルカリ性ｐＨを有する自由溶液におけるキャピラリー電気泳動法に関する。該方法は、緩衝液として、２５℃で８．８および１０．７の間のｐＫａを有する生物学的緩衝液を含む分析緩衝液および分析緩衝液のイオン強度を増加できる少なくとも１つの添加剤を含む、キャピラリーチューブに試料を導入する、少なくとも１つの工程を含むことを特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
緩衝液として、２５℃で８．８〜１０．７の範囲のｐＫａを有する生物学的緩衝液を含む緩衝系および緩衝系のイオン強度を増加できる少なくとも１つの添加剤を含む、キャピラリーチューブに試料を導入する、少なくとも１つの工程を含むことを特徴とする、タンパク質構成成分を含む臨床試料を分析するためのアルカリ性ｐＨの自由溶液のキャピラリー電気泳動法。
【請求項２】
さらに、泳動による構成成分の分離および該構成成分の検出を含むことを特徴とする、請求項１記載の方法。
【請求項３】
試料が、血清、血漿、溶血した血液、尿または脳脊髄液の試料である、請求項１または請求項２記載の方法。
【請求項４】
構成成分が、血液タンパク質であることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
構成成分が、アルブミンであり、画分が、α１、α２、βまたはβ１、β２、およびγグロブリンであることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
生物学的緩衝液が、ＡＭＰＤ、ＴＡＢＳ、ＡＭＰＳＯ、ＣＨＥＳ、ＣＡＰＳＯ、ＡＭＰ、ＣＡＰＳおよびＣＡＢＳから選択されることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】
生物学的緩衝液が、ＡＭＰＤ、ＴＡＢＳ、ＡＭＰＳＯ、ＣＡＰＳＯ、ＡＭＰ、ＣＡＰＳおよびＣＡＢＳから選択されることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
生物学的緩衝液が、ＣＡＰＳ、ＣＡＰＳＯおよびＣＡＢＳから選択されることを特徴とする、請求項１〜７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
生物学的緩衝液が、ＣＡＰＳであることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
緩衝系の生物学的緩衝液の濃度が、１０〜５００ｍＭの範囲であることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか１項記載の方法。
【請求項１１】
緩衝系の生物学的緩衝液の濃度が、２０ｍＭより高く２００ｍＭ未満であることを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
イオン強度を増加できる添加剤が、アルカリ金属クロリド、スルフェート、スルホネート、カルボキシレート、フルオライド、カーボネートおよびホスフェートおよびそれらの混合物から選択されることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
イオン強度を増加できる添加剤が、アルカリ金属クロリド、スルフェート、スルホネート、カルボキシレート、フルオライドおよびカーボネートおよびそれらの混合物から選択されることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
イオン強度を増加できる添加剤が、クロライド、スルフェートまたはスルホネートであることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
イオン強度を増加できる添加剤が、硫酸ナトリウムであることを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
緩衝系のイオン強度を増加できる添加剤の濃度が、１０〜５００ｍＭの範囲である、請求項１〜１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
電解質のイオン強度を増加できる添加剤の濃度が、５０より高く２００未満であることを特徴とする、請求項１〜１６のいずれか１項記載の方法。
【請求項１８】
緩衝系が、さらに、Ｃ６〜Ｃ２２モノ−、ジ−、またはトリ−カルボキシレート、Ｃ６〜Ｃ２２アルキル−モノ−、ジ−またはトリ−スルホネートおよびＣ６〜Ｃ２２アルキルカルボキシスルホネートから選択した少なくとも１つの緩衝成分を含むことを特徴とする、請求項１〜１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１９】
緩衝系が、さらに、Ｃ６〜Ｃ１０アルキルスルホネートを含むことを特徴とする、請求項１〜１８のいずれか１項記載の方法。
【請求項２０】
緩衝系が、さらに、オクタンスルホネートを含むことを特徴とする、請求項１〜１９のいずれか１項記載の方法。
【請求項２１】
アルキルスルホネートの濃度が、１〜４ｍＭの範囲であることを特徴とする、請求項１９または２０記載の方法。
【請求項２２】
該緩衝液のｐＨが、９〜１１の範囲であることを特徴とする、請求項１〜２１のいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】
該緩衝液のｐＨが、約１０であることを特徴とする、請求項１〜２２のいずれか１項記載の方法。
【請求項２４】
キャピラリーが、融合シリカから作製されることを特徴とする、請求項１〜２３のいずれか１項記載の方法。
【請求項２５】
緩衝系が、さらに、少なくとも１つのｐＨ調整物質を含むことを特徴とする、請求項１〜２４のいずれか１項記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、分離に使用するための添加剤を含む緩衝系組成物を使用して、キャピラリー電気泳動により、タンパク質およびペプチドを分離する方法に関する。
【０００２】
血液タンパク質は、特に診断目的で分析することが多い。モノクローナルタンパク質の検出により、初期の診断が可能となるか、または、特定の疾患を追跡する療法が可能となる。
【０００３】
タンパク質は、通常、電気泳動、従来のゲル電気泳動により、またはキャピラリー電気泳動（ＣＥ）により分離する。ＣＥの１つの利点は、分析に使用する試料量が非常に少ないことである。さらに、電気運動分離の実施のための、小さな内径を有するキャピラリーチューブの使用は、ジュール効果により生じた熱を極めて良好に分散する。キャピラリーチューブの高度な電気抵抗性に関連したこの非常に効率的な熱放散により、高い張力を適用でき、したがって、分離時間は非常に短くなる。分離媒体が単純な緩衝溶液である自由（フリー）溶液ＣＥが特に適用される。なぜなら、キャピラリーは、各分析間で新しい溶液で容易に再充填および充満できるからである。
【０００４】
ＣＥを使用して達成した分離を向上するために、１つの技術は、内表面を処理しておいたキャピラリーを使用することからなる。しかし、該コーティングはあまり安定ではなく、それは使用中に悪化し、したがって、多くの分析を実施する場合には再現性が低く、これにより通常の分析における技術の利点は制限される。
【０００５】
自由溶液ＣＥを使用して血液タンパク質を分析するために、９〜１１のオーダー、好ましくは約１０のｐＨをもつ緩衝系を使用することに利点がある。
【０００６】
アルカリ性緩衝系は、米国特許第Ａ−５１２０４１３号に記載のようなホウ酸緩衝液を含む。該緩衝液は、糖タンパク質と複合体を形成する。大半の血液タンパク質はグリコシル化されている。該複合体の形成が、糖タンパク質の電気泳動度を修飾する。ｐＨが約１０である該ホウ酸緩衝液を用いた場合、血液タンパク質は通常、６つの画分（γ、β−２、β−１、α−２、α−１、アルブミン）に分離される。いくつかのモノクローナルタンパク質が正常なタンパク質画分と共移動し、分析中、特定の正常タンパク質画分が特定のモノクローナルタンパク質を遮蔽し得る危険性がある。
【０００７】
一例として、モノクローナルタンパク質、特にＩｇＭカッパ型の特定のタンパク質を含む血清の分析により、対応するピークが、タンパク質画分の１つ（β−２画分）と共泳動することが示され、よって該ＩｇＭカッパが検出されない危険性が高くなる。
【０００８】
出願人は今回、迅速かつ効率的なタンパク質分離は、緩衝液として双性イオン生物学的緩衝液およびさらに緩衝系のイオン強度を増加できる少なくとも１つの添加剤を含む、緩衝系としてアルカリの、すなわちｐＨが９〜１１、より正確には約１０の緩衝液を使用した自由溶液ＣＥを使用して実施できることを実証した。
【０００９】
本発明は、タンパク質構成成分を含む臨床試料を分析するための、アルカリｐＨの自由溶液のキャピラリー電気泳動法を提供し、この方法は、緩衝液として、２５℃で８．８〜１０．７の範囲のｐＫａを有する生物学的緩衝液を含む緩衝系および緩衝系のイオン強度を増加できる少なくとも１つの添加剤を含む、キャピラリーチューブに試料を導入する、少なくとも１つの工程を含む。
【００１０】
出願人は、９〜１１のオーダー、より正確には約１０のアルカリｐＨをもつ双性イオン生物学的緩衝液と、電気泳動媒体のイオン強度を増加できる添加剤の組合せを選択することにより、分離の向上を達成できることを実証した。
【００１１】
分離は再現可能である。さらに、双性イオンは、約１０のｐＨで大半が負の荷電を有し、これは本発明の内容では有利であり得る。
【００１２】
最後に、実施例から明らかとなるように、特定のタンパク質が出現し、ホウ酸緩衝液を使用して達成した検出と比較した場合に、他の画分とより別個であるかまたはそれから明確に分離されている、ピークの形で検出できる。
【００１３】
これも実施例で明らかとなるように、本発明の緩衝液を使用して実施した分離は、他の技術、特にゲル電気泳動を用いて、より高い正確度、再現性および分解能をもって観察できるものと等価または同一である分離をもたらすことができる。
【００１４】
本発明の他の特徴および利点は、添付図面を参照して作成した以下の詳細な説明から明らかとなろう。
【００１５】
本発明により、緩衝系は、２５℃で８．８〜１０．７の範囲のｐＫａを有する生物学的緩衝液として知られる、すなわち、インビボでの適用に適合し、所望の分離に適応し、一般に電気泳動に、特にキャピラリー電気泳動に有用な、任意の通常の既知の緩衝液であり得る。好ましくは、ｐＨが約１０の高い緩衝力を有する生物学的緩衝液を選択する。
【００１６】
引用できる特に適した生物学的緩衝液は、ＡＭＰＤ（２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール）、ＴＡＢＳ（Ｎ−トリス〔ヒドロキシメチル〕メチル−４−アミノブタンスルホン酸）、ＡＭＰＳＯ（３−〔（１，１−ジメチル−２−ヒドロキシエチル〕アミノ）−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）、ＣＨＥＳ（２−（Ｎ−シクロヘキシルアミノ）エタンスルホン酸）、ＣＡＰＳＯ（３−〔シクロヘキシルアミノ〕−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホン酸）、ＡＭＰ（２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール）、ＣＡＰＳ（３−シクロヘキシルアミノ−１−プロパンスルホン酸）およびＣＡＢＳ（４−〔シクロヘキシルアミノ〕−１−ブタンスルホン酸）およびその混合物であるが、任意の他の双性イオン生物学的緩衝液も本発明に使用できる。
【００１７】
本発明により、ＡＭＰＤ、ＴＡＢＳ、ＡＭＰＳＯ、ＣＡＰＳＯ、ＡＭＰ、ＣＡＰＳおよびＣＡＢＳ緩衝液が好ましい。より好ましくは、ＣＡＰＳ、ＣＡＰＳＯまたはＣＡＢＳを使用する。より特に好ましくはＣＡＰＳを使用する。
【００１８】
電解質のイオン強度を増加できる、本発明で使用する緩衝液の添加剤として使用するのに引用できる化合物は、アルカリ金属クロリド、スルフェート、スルホネート、カーボネート、カルボキシレート、フルオライドおよびホスフェートおよびその混合物から選択する。これらの中で、アルカリ金属クロリド、スルフェートおよびスルホネートおよびその混合物が好ましい。
【００１９】
より好ましくは、スルフェートを使用する。
【００２０】
好ましくは、ナトリウムまたはカリウム塩を選択する。
【００２１】
前記に引用した添加剤の中で、硫酸ナトリウムが好ましい。
【００２２】
好ましくは、本発明により、ＣＡＰＳは硫酸ナトリウムと会合している。
【００２３】
これらの化合物は、それ自体既知であり、商業的に入手できる。
【００２４】
「本発明に記載の試料」なる語は、試料を、その緩衝液で充満したキャピラリーに導入することにより、緩衝系、すなわち電解質を用いて分析する、例えば適切な希釈溶液または緩衝系で希釈した、または純粋な、分析すべき生物学的試料を意味する。
【００２５】
ここで使用したような分析用の臨床試料および「臨床試料」なる語は、健康なヒトまたはヒト患者由来の任意の生物学的液体を意味する。ヒトの生物学的液体は、正常または疾患を有する血清でも、また溶血した血清、血漿、尿または脳脊髄液でもよい。
【００２６】
試料はまた、合成タンパク質でもよく、本発明の方法は、例えば製造対照を目的としてもよい。
【００２７】
本発明の方法は、特に、血清を分析するのに、そして血液タンパク質を分離するのに適用する。
【００２８】
血液試料では、分離すべき血液タンパク質は主にアルブミンおよびα１；α２；β（またはβ１およびβ２）；およびγグロブリン画分である。
【００２９】
本発明の緩衝液のｐＨ、すなわち添加剤を含む生物学的緩衝液のｐＨは、９および１１の間、特に好ましくは約１０であり得る。
【００３０】
本発明の緩衝系はまた、少なくとも１つのｐＨ調整成分を含むことができる。ＰＨ調整化合物は、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化ルビジウム、水酸化セシウム、水酸化フランシウム、または、アルキル部分に１〜８個の炭素原子を含むモノ−、ジ−、トリ−またはテトラ−アルキルアンモニウムハイドロオキサイドから選択した化合物であり得る。
【００３１】
本発明により、生物学的緩衝液は、通常の条件下で、１０〜５００ｍＭのオーダー、好ましくは２０より高く２００ｍＭ未満の緩衝系の濃度で使用する。
【００３２】
本発明に従って添加剤として使用する塩は、１０ｍＭ〜５００ｍＭ、好ましくは５０〜２００ｍＭ、より好ましくは約１５０ｍＭの緩衝系の濃度で使用する。
【００３３】
本発明の緩衝系はまた、９より高いｐＨの負に荷電したアニオン極、および疎水性部分、特にＣ６〜Ｃ１０アルキルスルホネートを含む、少なくとも１つの添加剤を含むことができる。好ましくは、１〜４ｍＭ、好ましくは２．５ｍＭの濃度のオクタンスルホネートを使用する。
【００３４】
本発明の緩衝組成物は、緩衝系組成物を調製する場合に普通の様式で、すなわち、液体形で、または希釈すべき固体として構成成分を、許容可能な支持体に添加することにより調製する。通常、支持体は、蒸留または脱ミネラル化した水である。
【００３５】
キャピラリーに使用する材料は、キャピラリー電気泳動に通常使用するものである。内径が５〜２００μｍの融合シリカキャピラリーを使用できる。好ましくは、１００μｍの、より好ましくは５０μｍ未満の内径のキャピラリーを使用する。好ましくは、処理していない内表面を有するキャピラリーを使用する。当業者は、キャピラリーの性質およびサイズを、分析必要条件に適応できる。
【００３６】
実施例
材料および方法
Ａ）キャピラリー電気泳動（方法Ａ）
キャピラリー電気泳動は、内径２５μの融合シリカキャピラリーを備えたＣＥ装置を使用して、臨床試料に実施した。検出は２００ｎｍで実施した。試料は装置の試料チェンジャーに入れ、水力学的注入（７秒間で５０ミリバール）により自動的に注入した。試料を、約４００Ｖ／ｃｍの電場を適用することにより１０分以内に分離した。キャピラリーは、各分析前に０．５Ｍの水酸化ナトリウムで洗浄し、その後、緩衝系で洗浄した。
【００３７】
緩衝系：
分析等級の化学物質を使用した。
【００３８】
本発明に記載の第一緩衝液は、１１．０７ｇのＣＡＰＳ（モル質量２２１．３ｇ／モル）および２１．３ｇの硫酸ナトリウム（モル質量１４２．０４ｇ／モル）を、１リットル（ｌ）の脱ミネラル化水に溶かすことにより調製した。最終濃度は５０ｍＭのＣＡＰＳおよび１５０ｍＭの硫酸ナトリウムであり、ｐＨは、水酸化ナトリウムペレット（モル質量：４０．０ｇ／モル）を添加することにより１０．０に調整した。
【００３９】
第二の好ましい緩衝系は、２．５ｍＭの濃度のオクタンスルホネートを添加して、上記のように調製した。
【００４０】
ＣＡＰＳ／硫酸ナトリウム緩衝液を用いて前記の方法Ａを使用して実施した電気泳動により、左から右に読んで、γ、β、α−２、α−１およびアルブミン画分の５つの画分を有するタンパク質プロファイルが得られた。
【００４１】
ホウ酸緩衝液は、９．３ｇのホウ酸（モル質量：６１．８３（ｇ／モル））を、１リットルの脱ミネラル化水、および５．１ｇの水酸化ナトリウム（モル質量：４０．０ｇ／モル）に溶かすことにより調製した。
【００４２】
ホウ酸緩衝液を用いて前記の方法Ａを使用して実施した電気泳動により、左から右に読んで、γ、β−２、β−１、α−２、α−１およびアルブミン画分の６つの画分を有するタンパク質プロファイルが得られた。
【００４３】
Ｂ）アガロースゲル電気泳動（方法Ｂ）
アガロースゲルを使用して、血液タンパク質の比較分析を実施した。１０μｌの血清を、欧州特許第Ａ−０４９３９９６号、米国特許第Ａ−５４６４５１５号および米国特許第Ａ−５４０５５１６号に記載のメンブラン・アプリケーターの各ウェルに添加した。その後、添加したアプリケーターを３０秒間アガロースゲルの表面に適用した。このゲルに適用した試料は、２０℃まで温度を調節できる装置を使用して、２０Ｗの電力で、約７．５分間、電気泳動により分離した。移動後、ゲルを乾燥し、アシドブラックで染色した。染色後、ゲルを脱色し、再度乾燥した。その後、ゲルを、濃度測定により分析し、タンパク質プロファイルを作成した。
【００４４】
正常な血清では、左から右に読んで、γ、β、α−２、α−１およびアルブミン画分の５つの画分をもつ、タンパク質プロファイルが得られた。
【００４５】
Ｃ）臨床試料：
ＣＥでは、ヒト血清を、緩衝系で１０分の１に希釈した。
【００４６】
実施例１
前記の第一および第二緩衝液を用いて、正常血清を分析した。
【００４７】
電気泳動を、前記の方法Ａを使用して実施した。
【００４８】
図１Ａおよび１Ｂから分かるように、得られた電気泳動図は、左から右に読んで、連続してγ、β、α２、α１グロブリンおよびアルブミンに帰する５つのピークを示した。
【００４９】
実施例２（比較）
タンパク質プロファイル（図１Ｃのゲルおよび図１Ｄのその濃度測定プロファイル）は、前記の方法Ｂを使用して前の実施例と同じ血清を分析することにより得た。これらの図から分かるように、得たタンパク質プロファイルは、左から右に読んで、γ、β、α２、α１およびアルブミンの５つの画分を示した。実施例１で得た結果と比較することにより、本発明の実施により、アガロースゲルを用いて得たものと同等な５つの画分をもつタンパク質プロファイルを作成できる。
【００５０】
実施例３
前記の第二の緩衝液を使用して、単クローングロブリン血症をもつ血清を分析した。
【００５１】
電気泳動は、実施例１に記載の通りに実施した。
【００５２】
図２Ａから分かるように、得た電気泳動図は、それぞれγ、β、α２、α１グロブリンおよびアルブミン画分に帰する５つの連続したピークを示す。分析した血清に存在するモノクローナルタンパク質に対応する、γ画分中の補充ピークの存在に注記する。
【００５３】
実施例４（比較）
タンパク質プロファイル（図２Ｂのゲルおよびその図２Ｃの濃度測定プロファイル）は、前記の方法Ｂを使用して前の実施例と同じ血清を分析することにより得た。実施例３で得た結果と比較することにより、本発明の実施により、アガロースゲルで得たのと等価な分解能を達成できることが示される。
【００５４】
実施例５
前記の第二緩衝液を使用して、複クローングロブリン血症を有する血清を分析した。
【００５５】
電気泳動は実施例１に記載の通り実施した。
【００５６】
図３Ａから分かるように、得た電気泳動図は、分析した血清に存在する２つのモノクローナルタンパク質に対応する、γ画分の２つの補充ピークを示した。
【００５７】
実施例６（比較）
タンパク質プロファイル（図３Ｂのゲルおよび図３Ｃのその濃度測定プロファイル）は、前記の方法Ｂを使用して前の実施例と同じ血清を分析することにより得た。実施例５で得た結果と比較することにより、本発明の実施により、アガロースゲルで得た分解能より高い分解能を達成できることが示される。アガロースゲルで、モノクローナルタンパク質の１つは、β画分と共泳動した。
【００５８】
実施例７
前記の第二緩衝液を使用して、弱い単クローングロブリン血症を有する血清を分析した。
【００５９】
電気泳動は、実施例１に記載の通りに実施した。
【００６０】
図４Ａから分かるように、得た電気泳動図は、分析した血清に存在するモノクローナルタンパク質に対応する、γ画分の小さな補充ピークを示した。
【００６１】
実施例８（比較）
タンパク質プロファイル（図４Ｂのゲルおよび図４Ｃのその濃度測定プロファイル）は、前記の方法Ｂを使用して前の実施例と同じ血清を分析することにより得た。実施例７で得た結果と比較することにより、本発明の実施により、アガロースゲルを用いて得られたのと実質的に同一な感度を達成できることが示される。
【００６２】
実施例９
前記の第二緩衝液を使用して、γおよびβ画分の限界まで泳動する、ＩｇＭカッパ型のモノクローナルタンパク質を有する血清を分析した。
【００６３】
図５Ａから分かるように、得た電気泳動図は、分析した血清に存在するモノクローナルタンパク質に対応する、γ画分の補充ピークを示した。
【００６４】
実施例１０（比較）
タンパク質プロファイル（図５Ｂのゲルおよび図５Ｃのその濃度測定プロファイル）は、前記の方法Ｂを使用して前の実施例と同じ血清を分析することにより得た。実施例９で得た結果と比較することにより、本発明の実施により、アガロースゲルで得たのと実質的に同一な検出を達成できることが示される。
【００６５】
実施例１１（比較）
実施例１の手順を追随し、使用した緩衝系は、前記で示したように調製した通常のホウ酸緩衝液である。
【００６６】
電気移動を、前記の方法Ａを使用して実施した。
【００６７】
図５Ｄから分かるように、得た電気泳動図は、左から右に読んで、γ、β２、β１、α２、α１グロブリンおよびアルブミン画分にそれぞれ帰する、６つの連続的なピークを示した。
【００６８】
タンパク質プロファイルのゆらぎは、ホウ酸緩衝液では観察されず、通常の数値より高いβ画分の比率の増加のみが、この血清中のモノクローナルタンパク質の存在を疑うものであり；実施例９で得た結果との比較により、本発明の実施により、特定のカッパＩｇＭ型モノクローナルタンパク質について通常のホウ酸緩衝液を使用してＣＥで得たものと比較してより高い分解能を達成できることが示される。
【００６９】
実施例１２
第二の好ましい緩衝液を使用して、１０個の連続的な解析を、前記の方法Ａを使用したキャピラリー電気泳動により同じ血清で実施し；図６から分かるように、プロファイルの再現性は素晴らしかった。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１Ａおよび１Ｂは、本発明の緩衝系を使用してキャピラリー電気泳動により得た電気泳動図を示す。
図１Ｃおよび１Ｄはそれぞれ、ゲル電気泳動を使用した、同じ血清のゲルおよび濃度測定プロファイルを示す。
【図２】
図２Ａは、本発明の緩衝系を使用してキャピラリー電気泳動により分析した、単クローングロブリン血症を有する血清の電気泳動図を示す。
図２Ｂおよび２Ｃはそれぞれ、ゲル電気泳動で得られた同じ血清のゲルおよび濃度測定プロファイルを示す。
【図３】
図３Ａは、本発明の緩衝液を使用してキャピラリー電気泳動により分析した、複クローングロブリン血症を有する血清の電気泳動図を示す。
図３Ｂおよび３Ｃはそれぞれ、ゲル電気泳動により実施した同じ血清のゲルおよび濃度測定プロファイルを示す。
【図４】
図４Ａは、本発明の緩衝液を使用してキャピラリー電気泳動により分析した、単クローングロブリン血症の少ない血清の電気泳動図を示す。
図４Ｂおよび４Ｃはそれぞれ、ゲル電気泳動により実施した同じ血清のゲルおよび濃度測定プロファイルを示す。
【図５】
図５Ａは、本発明の緩衝液を使用してキャピラリー電気泳動により分析した、γおよびβ画分の限界で移動するモノクローナルタンパク質を含む、血清の電気泳動図を示す。
図５Ｂおよび５Ｃはそれぞれ、ゲル電気泳動により実施した同じ血清のゲルおよび濃度測定プロファイルを示す。
図５Ｄは、通常のホウ酸緩衝液を使用してキャピラリー電気泳動により分析した同じ血清の電気泳動図を示す。
【図６】
図６は、本発明の緩衝液を使用してキャピラリー電気泳動を使用して１０個の連続した分析中に得られた、同じ血清の１〜１０番の１０個の電気泳動図を示す。
【図６】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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