(57)【要約】胃腸毒性を低減化し、バイオアベイラビリティを増進し、ビスホスホネートおよび両性イオンリン脂質を含む組成物および該組成物を用いる骨粗鬆症の治療方法を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種の両性イオン型のリン脂質および少なくとも１種の両性イオン型のビスホスホネートを含む骨粗鬆症を治療するための医薬組成物。
【請求項２】
両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、骨再吸収を低減化するのに十分な量である請求項１記載の組成物。
【請求項３】
両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、骨再吸収を低減化し、骨密度を増加し、および／または骨折を減少させるのに十分な量である請求項１記載の組成物。
【請求項４】
ビスホスホネートの量が、約０．１ｍｇ／用量〜約１０００ｍｇ／用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：０．１〜約１：１００である請求項３記載の組成物。
【請求項５】
ビスホスホネートの量が、約１ｍｇ／用量〜約５００ｍｇ／用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：０．５〜約１：５０である請求項３記載の組成物。
【請求項６】
ビスホスホネートの量が、約２ｍｇ／用量〜約５０ｍｇ／用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：１〜約１：１０である請求項３記載の組成物。
【請求項７】
ビスホスホネートの量が、約２ｍｇ／用量〜約２０ｍｇ／用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：１〜約１：５である請求項３記載の組成物。
【請求項８】
両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、骨再吸収を低減化し、骨密度を増加し、および／または骨折を減少させるのに十分な量である請求項１記載の組成物。
【請求項９】
ビスホスホネートの量が、約０．１ｍｇ／用量〜約１０００ｍｇ／用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：０．１〜約１：１００である請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
ビスホスホネートの量が、約１ｍｇ／用量〜約５００ｍｇ／用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：０．５〜約１：５０である請求項８記載の組成物。
【請求項１１】
ビスホスホネートの量が、約２ｍｇ／用量〜約５０ｍｇ／用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：１〜約１：１０である請求項８記載の組成物。
【請求項１２】
ビスホスホネートの量が、約２ｍｇ／用量〜約２０ｍｇ／
用量であり、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が、約１：１〜約１：５である請求項８記載の組成物。
【請求項１３】
両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを約２〜約２０倍増進する請求項１記載の組成物。
【請求項１４】
ビスホスホネートが、その両性イオン型であり、両性イオンリン脂質と会合複合体を形成する請求項１記載の組成物。
【請求項１５】
さらに、コロイド金属、金属複合体もしくはその混合物または組合せを含む請求項１記載の組成物。
【請求項１６】
ビスホスホネートが、一般式（Ｉ）：
【化１】
2004517800.tif 000005
［式中、Ｒ’は、Ｈ、ＯＨまたはＣｌ；および
Ｒは（ａ）必要に応じて、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはヘテロシクリルで置換された１〜６個の炭素原子を有するアルキル基（ここで、アルキル基はアルキルアミノおよびジアルキルアミノ置換基は、１〜５個の炭素原子を有し、ジアルキルアミノ置換アルキル基の場合、同一もしくは異なっている）；（ｂ）ハロゲン；（ｃ）アリールチオ、好ましくはクロロ置換；（ｄ）５〜７個の炭素原子を有するシクロアルキルアミノ；または（ｅ）１または２個のヘテロ原子を有する、飽和５員または６員の窒素含有複素環である］
で示される化合物である請求項１記載の組成物。
【請求項１７】
リン脂質が、一般式（ＩＩ）：
【化２】
2004517800.tif 000006
［式中、Ｒ１およびＲ２は、８〜３２個の炭素原子の範囲の飽和または不飽和置換基；
Ｒ３は、ＨまたはＣＨ３；
Ｘは、ＨまたはＣＯＯＨ；および
Ｒ４は、＝ＯまたはＨ２である］
で示される化合物である請求項１記載の組成物。
【請求項１８】
ビスホスホネートが、３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（パミドロネート）、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸（アレンドロネート）、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（ミルドロネート、オルパドロネート）、１−ヒドロキシ−３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）プロピリデン−１，（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（イバンドロネート）、１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジル）エチリデン−１，（３−ピリジル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（リセドロネート）、１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ビスホスホン酸（エチドロネート）、１−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジニル）プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸、１−ヒドロキシ−２−（１−イミダゾリル）エチリデン−１，１−ビスホスホン（１−イミダゾリル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ゾレドロネート）、１−ヒドロキシ−２−（イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ミノドロネート）、１−（４−クロロフェニルチオ）メチリデン−１，１−ビスホスホン酸（チルドロネート）、１−（シクロヘプチルアミノ）メチリデン−１，１−ビスホスホン酸（シマドロネート、インカドロネート）、６−アミノ−１−ヒドロキシヘキシリデン−１，１−ビスホスホン酸（ネリドロネート）およびその医薬的に許容しうる塩もしくはその混合物または組合せからなるグループから選ばれる請求項１記載の組成物。
【請求項１９】
ビスホスホネートが、リセドロネート、アレンドロネート、パミドロネートおよびその医薬的に許容しうる塩もしくはその混合物または組合せからなるグループから選ばれる請求項１記載の組成物。
【請求項２０】
両性イオンリン脂質が、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリンまたは他のセラミド、または種々の他の両性イオンリン脂質、大豆油から誘導されたレシチン油などのリン脂質含有油ならびにその混合物および組合せからなるグループから選ばれる請求項１記載の組成物。
【請求項２１】
両性イオンリン脂質が、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、他のジ飽和ホスファチジルコリン、レシチン油ならびにその混合物および組合せからなるグループから選ばれる請求項１記載の組成物。
【請求項２２】
骨再吸収を低減化するのに医薬的に有効な量のビスホスホネートおよびビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進するのに十分な量の両性イオンリン脂質を含む骨粗鬆症を治療するための医薬組成物。
【請求項２３】
ビスホスホネートの有効な量が、約０．１ｍｇ／用量〜約１０００ｍｇ／用量であり、両性イオンリン脂質の十分な量が、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が約１：０．１〜約１：１００という量である請求項２２記載の組成物。
【請求項２４】
さらに、コロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む請求項２２記載の組成物。
【請求項２５】
担体、骨再吸収を低減化するのに医薬的に有効な量のビスホスホネートおよびビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進するのに十分な量の両性イオンリン脂質を含む医薬組成物。
【請求項２６】
ビスホスホネートの有効な量が、約０．１ｍｇ／用量〜約１０００ｍｇ／用量であり、両性イオンリン脂質の十分な量が、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が約１：０．１〜約１：１００という量である請求項２５記載の組成物。
【請求項２７】
さらに、コロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む請求項２５記載の組成物。
【請求項２８】
薬剤が、経口摂取される請求項２５記載の組成物。
【請求項２９】
薬剤が、食物とともに経口摂取される請求項２５記載の組成物。
【請求項３０】
不活性担体、骨再吸収を低減化するのに医薬的に有効な量のビスホスホネートおよびビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進するのに十分な量の両性イオンリン脂質を含む固体を特徴とする骨粗鬆症を治療するための薬剤。
【請求項３１】
ビスホスホネートの有効な量が、約０．１ｍｇ／用量〜約１０００ｍｇ／用量であり、両性イオンリン脂質の十分な量が、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が約１：０．１〜約１：１００という量である請求項３０記載の組成物。
【請求項３２】
さらに、コロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む請求項３０記載の薬剤。
【請求項３３】
医薬的有効量のビスホスホネートおよびビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進するのに十分な量の両性イオンリン脂質を含む組成物を投与するステップを特徴とする骨粗鬆症の治療方法。
【請求項３４】
ビスホスホネートの有効な量が、約０．１ｍｇ／用量〜約１０００ｍｇ／用量であり、両性イオンリン脂質の十分な量が、ビスホスホネート：両性イオンリン脂質の比率が約１：０．１〜約１：１００という量である請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
さらに、コロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む請求項３３記載の方法。
【請求項３６】
ビスホスホネートの胃腸毒性が低減化され、バイオアベイラビリティが改善され、骨再吸収の低減化を引き起こす、胃腸毒性を低減化したビスホスホネート医薬組成物の製造方法であって、両性イオンリン脂質およびビスホスホネートを接触させるステップを含む方法。
【請求項３７】
接触が、リン脂質およびビスホスホネートが両性イオン型である条件下で行われる請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
条件が、両性イオンリン脂質および両性イオンビスホスホネートのイオン会合複合体の形成を促進するのに十分である請求項３６記載の方法。
【請求項３９】
さらに、組成物に不活性担体を混合するステップを含む請求項３６記載の方法。
【請求項４０】
さらに、両性イオンリン脂質およびビスホスホネートの分子間相互作用を促進するのに十分な時間および温度でステップを含む請求項３６記載の方法。
【請求項４１】
混合が音波処理であり、時間が約１分〜１時間であり、温度が組成物中のリン脂質の最高転移温度（Ｔｍ）以上である請求項４０記載の方法。
【請求項４２】
接触を、金属錯体、金属コロイドもしくはその混合物または組合せの存在下で行なう請求項３６記載の方法。
【請求項４３】
両性イオンリン脂質を有機溶媒に溶解し；
溶媒を除去して、両性イオンリン脂質の薄フィルムを形成し；
両性イオンリン脂質フィルムを、ビスホスホネートを含む溶液に接触させ［ここで、溶液は、低イオン強度およびビスホスホネートおよびリン脂質を両性イオン型に維持して組成物を形成するのに十分なｐＨである］；次いで
両性イオンリン脂質とビスホスホネートの分子間相互作用を促進するのに十分な時間および温度で組成物を混合する；
というステップを含む、ビスホスホネートの胃腸毒性が低減化され、バイオアベイラビリティが改善され、骨再吸収の低減化を引き起こす、胃腸毒性が低減化されたビスホスホネート医薬組成物の製造方法。
【請求項４４】
時間が約１分〜１時間であり、温度が組成物中のリン脂質の最高転移温度（Ｔｍ）以上である請求項４３記載の方法。
【請求項４５】
さらに、金属錯体、金属コロイドもしくはその混合物または組合せを含む請求項４３記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２０００年４月７日に出願された米国仮出願第６０／１９５５６２号に対して仮優先権を主張する。
【０００２】
（発明の背景）
１．技術分野
本発明は、ビスホスホネート医薬による胃腸毒性を低減化し、食物とともに摂取した後のビスホスホネート医薬のバイオアベイラビリティを増進したビスホスホネート医薬含有組成物に関する。また本発明は、骨粗鬆症を治療するための組成物、骨粗鬆症の治療方法および該組成物の製造方法に関する。
さらに詳しくは、本発明は、食事とともに摂取することができ、ビスホスホネートの胃腸毒性および／または副作用を低減化し、食物とともに摂取した後のビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進した、ビスホスホネートおよび両性イオンリン脂質含有組成物に関する。さらに本発明は、骨粗鬆症を治療するための組成物、骨粗鬆症の治療方法および該組成物の製造方法に関する。
【０００３】
２．関連技術の説明
ビスホスホネートは、骨粗鬆症、パジェット病および悪性疾患の高カルシウム血症などの骨再吸収が異常に促進されることに関連する多くの疾患の治療において非常に有望な治療上の有効性を示す薬物の種類である。Ｆｌｅｉｓｃｈ Ｈ．の Ａｎｎ Ｍｅｄ， ２９， ５５−６２ （１９９７） および Ｆｌｅｉｓｃｈ Ｈ．の Ｄｒｕｇｓ， ４２， ９１９−９４４ （１９９１）などを参照。増加する数のこれらの薬物が、これらの骨疾患を有する多数の個体の治療における臨床使用に対して利用可能になるにつれて、それらの長期にわたる使用が、下痢、腹痛および炎症（たとえば、食道炎および胃炎）、上部胃腸管のびらんおよび潰瘍化などの多くの胃腸副作用を伴うという証拠がでてきている。Ｍａｃｏｎｉ Ｇ， Ｂｉａｎｃｈｉ Ｐｏｒｒｏ Ｇ．の Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ， ９０， １８８９−１８９０ （１９９５） ； Ｌｕｆｋｉｎ ＥＧ， Ａｒｇｕｅｔａ Ｒ， Ｗｈｉｔａｋｅｒ ＭＤ， Ｃａｍｅｒｏｎ ＡＬ， Ｗｏｎｇ ＶＨ， Ｅｇａｎ ＫＳ， Ｏ’Ｆａｌｌｏｎ ＷＭ， Ｒｉｇｇｓ ＢＬの Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓ Ｉｎｔ， ４， ３２０−３２２ （１９９４） ； Ｄｅ Ｇｒｏｅｎ ＰＣ， Ｌｕｂｂｅ ＤＪ， Ｈｉｒｓｃｈ ＩＪ， Ｄａｉｆｏｔｉｓ Ａ， Ｓｔｅｐｈｅｎｓｏｎ Ｗ， Ｆｒｅｅｄｈｏｌｍ Ｄ， Ｐｒｙｏｒ−Ｔｉｌｌｏｔｓｏｎ Ｓ， Ｓｅｌｅｚｎｉｃｋ ＭＪ， Ｐｉｎｋａｓ Ｈ， Ｗａｎｇ ＫＫの Ｎ Ｅｎｇ Ｊ Ｍｅｄ， ３３５， １０１６−１０２１ （１９９６）などを参照。エストロゲン不足状態にある閉経の徴候後５年またはそれ以上の女性は、骨粗鬆症を特に発症しやすく、また、長期にわたるビスホスホネート療法を行った場合に胃腸副作用を発症する危険率が最も大きい。
【０００４】
８百万〜１千万人のアメリカ人が、骨粗鬆症に罹患し、さらに１７百万〜２千万人が、この疾患に対する危険にさらされている低骨量であると見積もられている。女性は、この“危険にある”集団の８０％以上を構成する。多くの場合、これらの個人は、関節炎の関節の痛みおよび炎症を軽減するために、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）も服用しており、胃腸合併症を発症する危険率をさらに大きくしている。これらの臨床的観察を確認するために、Ｇｒａｈａｍとその共同研究者は、パジェット病（４０ｍｇ）または骨粗鬆症（１０ｍｇ）の治療のために勧められている用量にて、２週間までの期間ビスホスホネートであるアレンドロネートを服用している健康な被験者において多くの内視鏡実験を行い、ボランティアの４０〜６０％に観察できる胃のびらんが生じ、一方、１０〜２０％に１つまたはそれ以上の胃潰瘍が発症することを報告した。Ｇｒａｈａｍ ＤＹ， Ｍａｌａｔｙ ＨＭ， Ｇｏｏｄｇａｍｅ Ｒの Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ， ９２， １３２２−１３２５ （１９９７） およびＧｒａｈａｍ ＤＹ， Ｍａｌａｔｙ ＨＭの Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ， １３， ５１５−５１９ （１９９９）などを参照。これらの関係の支持において、Ｌａｎｚａは、１０ｍｇおよび４０ｍｇの両方の用量で投与されたアレンドロネート（Ｆｏｓａｍａｘ）が、アスピリン誘発胃びらんの治癒速度を有意に遅らせることを報告した。Ｌａｎｚａ ＦＬの Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ， ９１， １９１６ （１９９６）などを参照。
【０００５】
ビスホスホネートによる胃腸ダメージの潜在的メカニズムをより制御された実験条件下で調査するために、多くの研究室がこの条件の動物モデルを開発している。Ｐｅｔｅｒらは、最近、ラットにおいて４週間にわたってアレンドロネート、リセドロネートおよびエチドロネートの用量を増加させてその長期にわたる影響を比較し、３つのビスホスホネートすべてが、胃本体の粘膜および胃腔において用量依存性の有害な影響を誘発することを報告した。用量依存性の有害な影響は、粘膜下組織の炎症の証拠に加えて、肉眼的および組織学的に観察された。Ｐｅｔｅｒ ＣＰ， Ｋｉｎｄｔ ＭＶ， Ｍａｊｋａ ＪＡのＤｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ， ４３， １００９−１０１５ （１９９８）などを参照。
【０００６】
Ｂｌａｎｋらは、ビスホスホネート単独またはＮＳＡＩＤであるインドメタシンと組合せて高用量を胃内へ投与されるラットにおいてビスホスホネート誘発胃傷害の急性モデルを開発した。Ｂｌａｎｋ ＭＡ， Ｅｍｓ ＢＬ， Ｇｉｂｓｏｎ ＧＷ， Ｍｙｅｒｓ ＷＲ， Ｂｅｒｍａｎ ＳＫ， Ｐｈｉｐｐｓ ＲＪ， Ｓｍｉｔｈ ＰＮの Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ， ４２， ２８１−２８８ （１９９７）などを参照。これらの実験において、彼らは、ビスホスホネートまたはＮＳＡＩＤは、４時間という実験期間ではわずかの肉眼的胃損傷を誘発するかまたは全く誘発しないが、２つの種類の薬物を同時に処置すると粘膜壊死および粘膜下組織の炎症性浸潤に加えて胃潰瘍が発症することを証明した。このモデルを用いて、彼らは、幾つかの化合物を比較し、Ｐｅｔｅｒらの所見に反して、一級アミノ基を有するビスホスホネート（パミドロネートおよびアレンドロネート）は、固定窒素を含む基を含有するもの（リセドロネートおよびＮＥ９７２２１）よりも胃の粘膜をより刺激するという結論を下した。
【０００７】
Ｅｌｌｉｏｔｔらも、このげっ歯動物モデルを用いて、インドメタシンと組合せて、胃内投与されたビスホスホネートのみが胃の傷害を誘発することを証明し、関連実験において、アレンドロネートが、ラットにおいて実験的に誘発された胃潰瘍の治癒を有意に遅らせることを証明した。Ｅｌｌｉｏｔｔ ＳＮ， ＭｃＫｎｉｇｈｔ Ｗ， Ｄａｖｉｅｓ ＮＭ， ＭａｃＮａｕｇｈｔｏｎ ＷＫ， Ｗａｌｌａｃｅ ＪＬの Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ， ６２， ７７−９１ （１９９８）などを参照。さらに、多くのビスホスホネートのバイオアベイラビリティが低いために、患者は、所望の利益をえるためには、高用量のビスホスホネートを日常的に摂取する必要があり、胃腸の悪性副作用の危険がともなう。
【０００８】
したがって、ビスホスホネートを食事とともに摂取されるようにし、それによって食物とともに摂取する場合のビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増加すると同時に、上部胃腸管におけるビスホスホネートの副作用を低減化するかまたは除去したビスホスホネート製剤を得ることが当業界の進歩である。
【０００９】
（発明の概要）
本発明は、両性イオン型のビスホスホネートおよび両性イオン型のリン脂質を含む混合物を提供する。
本発明は、両性イオン型のビスホスホネートおよび両性イオン型のリン脂質を含む混合物を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００１０】
本発明は、不活性担体ならびに両性イオン型のビスホスホネートおよび両性イオン型のリン脂質を含む混合物を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、特に組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００１１】
また本発明は、両性イオン型のビスホスホネートおよび両性イオン型のリン脂質を含むイオン会合複合体を提供する。
【００１２】
本発明は、両性イオン型のビスホスホネートおよび両性イオン型のリン脂質を含むイオン会合複合体を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００１３】
本発明は、不活性担体ならびに両性イオン型のビスホスホネートおよび両性イオン型のリン脂質を含むイオン会合複合体を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、特に組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００１４】
また本発明は、ビスホスホネート、リン脂質およびコロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む混合物を提供する。
【００１５】
本発明は、ビスホスホネート、リン脂質およびコロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む混合物を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、特に組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００１６】
本発明は、不活性担体ならびにビスホスホネート、リン脂質およびコロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む混合物を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、特に組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００１７】
また本発明は、両性イオン型のビスホスホネートおよび両性イオン型のリン脂質ならびにコロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含むイオン会合複合体を提供する。
【００１８】
本発明は、両性イオン型のビスホスホネート、両性イオン型のリン脂質およびコロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む混合物を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、特に組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００１９】
本発明は、不活性担体、両性イオン型のビスホスホネート、両性イオン型のリン脂質およびコロイド金属、金属錯体もしくはその混合物または組合せを含む混合物含む混合物を含む医薬組成物であって、リン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、特に組成物が食事とともに摂取される場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善するのに十分な量であり、ビスホスホネートが、特に組成物が食事とともに摂取される場合における、骨再吸収を低減化し、および／または骨密度を増加するのに十分な量である医薬組成物を提供する。
【００２０】
また本発明は、骨再吸収を低減化するのに医薬的に有効な量のビスホスホネートおよびビスホスホネートの胃腸毒性を低減化するのに十分な量の両性イオンリン脂質を含む骨粗鬆症を治療をするための組成物を提供する。
【００２１】
また本発明は、医薬的に有効な量のビスホスホネートおよび十分な量の両性イオンリン脂質を含む骨粗鬆症を治療をするための組成物であって、該組成物が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化して生存可能性を改善し、および特に組成物が食事とともに摂取される場合における、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善する組成物を提供する。
【００２２】
また本発明は、不活性担体ならびに医薬的有効量のビスホスホネートおよび両性イオンリン脂質を含む骨粗鬆症を治療をするための経口薬剤であって、両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化し、特に薬剤が食事とともに摂取される場合における、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進する薬剤を提供する。
【００２３】
また本発明は、不活性担体、両性イオンリン脂質および医薬的有効量のビスホスホネートを含む固体を含む骨粗鬆症を治療をするための経口薬剤であって、両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化するのに十分な量であり、特に薬剤が食事とともに摂取される場合における、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進する薬剤を提供する。
【００２４】
また本発明は、不活性担体、両性イオンリン脂質および医薬的有効量のビスホスホネートを含む液体を含む骨粗鬆症を治療をするための経口薬剤であって、両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化するのに十分な量であり、特に薬剤が食事とともに摂取される場合における、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進する薬剤を提供する。
【００２５】
本発明は、両性イオンリン脂質および医薬的有効量のビスホスホネート含む組成物を経口投与するステップを含む骨粗鬆症の治療方法であって、両性イオンリン脂質が、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化するのに十分な量であり、特に食物とともに投与される場合における、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進する方法を提供する。
【００２６】
また本発明は、ビスホスホネートおよび両性イオンリン脂質を接触させるステップを含む、胃腸毒性が低減化され、バイオアベイラビリティが増進されたビスホスホネート薬用組成物の製造方法を提供する。該方法はさらに、ビスホスホネート／両性イオンリン脂質を不活性担体と混合するステップを含む。
【００２７】
また本発明は、接触時間中の少なくとも一部の時間中、ビスホスホネートおよびリン脂質をその両性イオン型に維持するのに十分な条件下で、ビスホスホネートおよびリン脂質を接触させて、ビスホスホネートとリン脂質の分子会合を形成するステップを含む、胃腸毒性が低減化され、バイオアベイラビリティが増進されたビスホスホネート薬用組成物の製造方法を提供する。該方法はさらに、ビスホスホネート／リン脂質分子会合体を不活性担体と混合するステップを含む。
【００２８】
また本発明は、ビスホスホネート、リン脂質およびコロイド金属、金属錯体、金属（または多価カチオン）含有緩衝液もしくはその混合物または組合せを接触させて、ビスホスホネートとリン脂質の金属媒介性分子会合体を形成するステップを含む、胃腸毒性が低減化され、バイオアベイラビリティが増進されたビスホスホネート薬用組成物の製造方法を提供する。該方法はさらに、金属媒介性分子会合体を不活性担体と混合するステップを含む。
【００２９】
また本発明は、接触の少なくとも一部の時間中、ビスホスホネートおよびリン脂質をその両性イオン型に維持するのに十分な条件下で、ビスホスホネート、リン脂質およびコロイド金属、金属錯体、金属（または多価カチオン）含有緩衝液もしくはその混合物または組合せを接触させて、ビスホスホネートとリン脂質の金属媒介性分子会合体を形成するステップを含む、胃腸毒性が低減化され、バイオアベイラビリティが増進されたビスホスホネート薬用組成物の製造方法を提供する。該方法はさらに、金属媒介性分子会合体を不活性担体と混合するステップを含む。
【００３０】
また本発明は、当業界で公知の方法を用いて、錠剤、キャプレット、ゼラチンカプセル剤、液体充填ゼラチンカプセル剤などを製造することによる本出願の組成物の丸剤剤形の製造方法を提供する。
【００３１】
（定義）
他に特記しない限り、以下の用語は、以下の意味をもつ。
「液体（ｆｌｕｉｄ）」は、液体（ｌｉｑｕｉｄ）、および固体分散液、乳液、スラリー、ミクロ乳液、コロイド懸濁液、懸濁液など（これらに限定されるものではない）の流動可能であること、あるいは常温および常圧下で適当な流動性をもつことなどの液体の特性を有する液体と固体の混合物のいずれかを意味する。
「分子会合体」は、いずれかの公知の安定化原子または分子レベル相互作用またはその組合せのいずれかを介して会合した２つまたはそれ以上の分子化学種の組合せを意味し、ここで、相互作用として、共有結合、イオン結合、水素結合、配位結合またはいずれかの他の分子結合相互作用などの結合相互作用、静電相互作用、極性または疎水性相互作用、もしくはいずれかの他の古典的または量子力学的安定化原子または分子相互作用が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３２】
「動物」は、哺乳動物などの動物界におけるいずれかの種として定義する。
「哺乳動物」は、ヒトを含むいずれかの綱の温血高等脊椎動物として定義する。
「リン脂質」は、分子構造内に共有的に結合したリン酸基を有するいずれかの脂質または脂肪酸を意味する。
「両性イオンリン脂質」は、プロトン受容体を有するリン脂質を意味し、該プロトン受容体は分子内酸−塩基反応により正電荷であることができる。
「ビスホスホネート」は、骨再吸収を低減化し、骨粗鬆症を治療することにおいて有効な、炭素置換ピロリン酸類縁体である医薬化合物の種類を意味する。
【００３３】
「ヘテロシクリル」は、１個または２個の環およびＮ、ＯまたはＳから独立して選ばれる１〜３個のヘテロ原子をもつ飽和または不飽和５〜７員複素環基を意味する。
「アリール」は、置換または非置換フェニル、フリル、チエニルまたはピリジル基もしくはナフチルなどのこれらの基のいずれかの縮合環系を意味する。
「コロイド金属」は、コロイド懸濁液または分散液を形成しうるいずれかの金属または金属含有化合物を意味する。
「金属錯体」は、元素周期表においてなどで分類されるいずれかの金属の錯体を意味し、非アルカリ金属の錯体が好ましい。
「多価金属錯体」は、金属のいずれかの錯体を意味し、ここで、金属は、１よりも大きい正電荷、一般に２〜６の電荷を帯びることができる。
【００３４】
「両性イオン」は、正荷電した基と負荷電した基の両方を有する分子を意味する。
「両性イオン型」は、正荷電した基と負荷電した基を有する分子を意味する。一般に、反応条件は、分子内水素イオン転移が起こり得るように調節される。
「医薬的有効量」は、ビスホスホネートを摂取している患者において、骨再吸収における測定可能な低減化または骨密度における測定可能な増加または骨折の発生率における測定可能な減少を引き起こすのに必要なビスホスホネートの量を意味する。ビスホスホネートの投与による測定可能な影響を決定するのに用いた手順におけるさらなる情報は、”Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ Ｖｅｒｔｅｂｒａｌ ａｎｄ Ｎｏｎｖｅｒｔｅｂｒａｌ Ｆｒａｃｔｕｒｅｓ ｉｎ Ｗｏｍｅｎ ｗｉｔｈ Ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ： Ａ Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｔｒｉａｌ，” Ｊ． Ａｍ． Ｍｅｄ． Ａｓｓｎ．， ２８２， １３４４−１３５２ （１９９９） および”Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅ ｏｎ ｔｈｅ Ｒｉｓｋ ｏｆ Ｈｉｐ Ｆｒａｃｔｕｒｅ ｉｎ Ｅｌｄｅｒｌｙ Ｗｏｍｅｎ，” Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊ． Ｍｅｄ．， ３４４， ３３３−３４０ （２０００）に見出すことができ、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。
本発明は、後記詳細な記載ならびに添付の図面によってさらによく理解することができる。
【００３５】
（発明の詳細な記載）
本発明者は、骨粗鬆症の治療に用いる破骨細胞媒介性骨再吸収の確立された選択的インヒビターであるビスホスホネート化合物およびホスファチジルコリン（ＰＣ）などのリン脂質を含む独特の医薬製剤を製造することができ、それが、ビスホスホネート胃腸毒性および／または副作用を低減化し、食事とともに摂取された場合におけるバイオアベイラビリティを改善すると同時に、ビスホスホネートが骨粗鬆症に罹患している患者において骨密度の増加を引き起こすことを見出した。臨床および前臨床試験の両方において、ビスホスホネートが、上部胃腸管の粘膜の炎症、損傷および時折の潰瘍化を引き起こし、そのことがこれらの強力な骨再吸収インヒビター薬物の治療的有用性を制限することがかなり報告されている。さらに、多数の試験が、上部胃腸管の粘膜が、両性イオンリン脂質の惣菜に起因すると考えられる疎水性バリヤー特性をもつこと、およびビスホスホネートなどの多くのダメージング薬が、この保護的疎水性／リン脂質ライニングを妨害または攻撃することを明らかにしている。Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ， ＬＭ， Ｒｏｍｅｒｏ， ＪＪ， Ｇｉｂｓｏｎ， ＦＷ， Ｂｌａｎｋ ＭＡの Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ． ４５， １７９２−１８０１ （２０００）などを参照。本発明は、ビスホスホネートをリン脂質（ここで、リン脂質は、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化または排除するのに十分な量である）と組合せることによって、標準的ビスホスホネート製剤に関連する問題を克服する。さらに、臨床試験において、骨粗鬆症と戦う有効な治療薬としてのビスホスホネートの効能がいくつも報告されている。Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ Ｖｅｒｔｅｂｒａｌ ａｎｄ Ｎｏｎｖｅｒｔｅｂｒａｌ Ｆｒａｃｔｕｒｅｓ ｉｎ Ｗｏｍｅｎ ｗｉｔｈ Ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ： Ａ Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｔｒｉａｌ，” Ｊ． Ａｍ． Ｍｅｄ． Ａｓｓｎ．， ２８２， １３４４−１３５２ （１９９９） および”Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅ ｏｎ ｔｈｅ Ｒｉｓｋ ｏｆ Ｈｉｐ Ｆｒａｃｔｕｒｅ ｉｎ Ｅｌｄｅｒｌｙ Ｗｏｍｅｎ，”Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊ． Ｍｅｄ．， ３４４， ３３３−３４０ （２０００）などを参照、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。
【００３６】
したがって、本発明は、概して、一般式（Ｉ）：
【化３】
2004517800.tif 000002
で示されるビスホスホネートおよび一般式（ＩＩ）：
【化４】
2004517800.tif 000003
［上記式中、Ｒ’は、Ｈ、ＯＨまたはＣｌ；
およびＲは（ａ）必要に応じて、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはヘテロシクリルで置換された１〜６個の炭素原子を有するアルキル基（ここで、アルキル基はアルキルアミノおよびジアルキルアミノ置換基は、１〜５個の炭素原子を有し、ジアルキルアミノ置換アルキル基の場合、同一もしくは異なっている）；（ｂ）ハロゲン；（ｃ）アリールチオ、好ましくはクロロ置換；（ｄ）５〜７個の炭素原子を有するシクロアルキルアミノ；または（ｅ）１または２個のヘテロ原子を有する、飽和５員または６員の窒素含有複素環；
およびＲ１およびＲ２は、８〜３２個の炭素原子の範囲の飽和または不飽和置換基；
Ｒ３は、ＨまたはＣＨ３；
Ｘは、ＨまたはＣＯＯＨ；および
Ｒ４は、＝ＯまたはＨ２である］
で示されるリン脂質を含む薬用製剤に関する。該一般式の両性リン脂質の混合物または組合せおよびビスホスホネートの混合物または組合せも同様に用いることができる。
【００３７】
化合物（Ｉ）の例として、３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（パミドロネート）、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸（アレンドロネート）、Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（ミルドロネート、オルパドロネート）、１−ヒドロキシ−３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）プロピリデン−１，（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（イバンドロネート）、１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジル）エチリデン−１，（３−ピリジル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（リセドロネート）、１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ビスホスホン酸（エチドロネート）、１−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジニル）プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸、１−ヒドロキシ−２−（１−イミダゾリル）エチリデン−１，１−ビスホスホン（１−イミダゾリル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ゾレドロネート）、１−ヒドロキシ−２−（イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−イル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ミノドロネート）、１−（４−クロロフェニルチオ）メチリデン−１，１−ビスホスホン酸（チルドロネート）、１−（シクロヘプチルアミノ）メチリデン−１，１−ビスホスホン酸（シマドロネート、インカドロネート）、６−アミノ−１−ヒドロキシヘキシリデン−１，１−ビスホスホン酸（ネリドロネート）およびその医薬的に許容しうる塩もしくはその混合物または組合せが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
好ましい化合物（Ｉ）は、リセドロネート、アレンドロネート、パミドロネートおよびその医薬的に許容しうる塩もしくはその混合物または組合せである。
【００３８】
両性イオンリン脂質（ＩＩ）の例として、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、他のジ飽和ホスファチジルコリンなどのホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、スフィンゴミエリンまたは他のセラミド、または種々の他の両性イオンリン脂質、大豆油から誘導されたレシチン油などのリン脂質含有油もしくはその混合物または組合せが挙げられるが、これらに限定されるものではない。リン脂質（ＩＩ）はまた、種々の濃度で油中にみいだすことができ、このような油はまた、本発明組成物の製造に用いることができる。好ましい両性イオンリン脂質は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、他のジ飽和ホスファチジルコリン、ＰＣ含有レシチン油もしくはその混合物または組合せである。
【００３９】
一般に、ビスホスホネートの両性リン脂質に対する重量比は、約１：０．１〜約１：１００、好ましくは、約１：０．５〜１：５０、特に好ましくは、約１：１〜１：１０、さらに特に好ましくは、約１：１〜約１：５である。本発明組成物中で用いるためのビスホスホネートの有効量は、その成物中で用いるビスホスホネートおよびリン脂質によって、約０．１ｍｇ／用量〜約１０００ｍｇ／用量、好ましくは約１ｍｇ／用量〜約５００ｍｇ／用量、特に好ましくは約２ｍｇ／用量〜５０ｍｇ／用量、さらに特に好ましくは約２ｍｇ／用量〜２０ｍｇ／用量の範囲にわたる。リン脂質の十分量は、一般に、約０．０１ｍｇ／用量〜約５０００ｍｇ／用量、好ましくは約０．５ｍｇ／用量〜２５００ｍｇ／用量、特に好ましくは約２ｍｇ／用量〜約２５０ｍｇ／用量、さらに特に好ましくは約２ｍｇ／用量〜約１００ｍｇ／用量の範囲にわたる。
【００４０】
一般に、本発明組成物は、毎日食前、食中および食後に摂取するように製剤化する。しかし、該製剤はまた、患者および該製剤を処方しているヘルスケアプロバイダーによって、しばしば加減することもできる。本発明組成物のための好ましい経口投与プロトコルは、食中または食後に毎日服用することである。
本発明組成物は、散剤、顆粒剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、ゼラチン被覆錠剤または丸剤などの固形剤、ペースト剤などの半固形剤、懸濁液、分散液、乳液または溶液などのいずれの所望の剤形でもとりうるが、これらに限定されるものではない。分散液または懸濁液は、固形の本発明組成物を、溶解度がゼロまたは相対的に小さい、すなわち、溶解度が約１０重量％以下、好ましくは約５重量％以下、特に好ましくは約１重量％以下である適当な溶媒と混合することを意味する。乳液は、油または水溶液の本発明組成物を、水溶液または油中で乳化すること、すなわち、それぞれ水中油型乳液または油中水型乳液を意味する。さらに、乳液は、標準的乳液とするかもしくは、混合物のノズル通過によるかまたはミクロ乳液を生成する他の方法によりミクロ乳液とすることができる。溶液は、本発明組成物が、該組成物が可溶性であるか、溶解度が高い適当な溶媒中にあることを意味する。
【００４１】
本発明はまた、概して、継続的または断続的に本発明組成物を患者に投与することを含む骨再吸収の低減化方法に関する。本発明組成物は、経口（食物とともに、あるいは単独で）、循環系への直接注射（たとえば、静脈内、動脈内など）、軟部組織への直接注射（筋肉など）、骨髄注射、肺または気管のいずれかへの吸入、埋め込みなどのいずれかの公知の投与方法によって患者に投与することができる。本発明組成物を、経口投与用に設計するのが好ましく、食中経口投与用がさらに好ましい。
【００４２】
ＰＣなどのリン脂質およびアレンドロネート、パミドロネートまたはリセドロネートなどのビスホスホネートを組合せる本発明の製剤において、リン脂質は、ビスホスホネートの胃腸毒性を低減化および／または消去するように作用する。したがって、ビスホスホネートにリン脂質を補充する本発明製剤は、胃腸毒性を有意に低くし、骨粗鬆症によって衰弱した患者におけるビスホスホネートの有用性を厳しく制限する主たる傷害を除去する。本発明のビスホスホネート−リン脂質製剤は、胃腸毒性を減少するのみならず、食事とともに摂取する場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを増進する。ビスホスホネートを含む現行の製剤は、食物とともに摂取する場合、それらの治療有効性のすべてまたは大部分を失う。いずれの理論に拘束されることを意図するものではないが、一般に、ビスホスホネートが、それらが小腸での取り込みに対して利用不可能になるなやり方で食物成分と結合すると考えられる。したがって、本発明のリン脂質−ビスホスホネート製剤は、胃での食物消化中における食物中の成分とビスホスホネートとの相互作用を妨害して、ビスホスホネートをバイオアベイラブルな形体で胃を通過させることによって、ビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善すると考えられる。
【００４３】
たとえば、ビスホスホネート（市販のものを精製するかまたは合成したもの）を、異なる濃度の精製リン脂質または粗リン脂質のいずれかと組合せることができる。たとえば、ＰＣは、＞９０％のＰＣを含む精製体または約１５重量％〜約３５重量％のＰＣ濃度でＰＣを含む大豆からの粗抽出物において脱脂状態または含脂状態で、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｌｅｃｉｔｈｉｎ Ｃｏｍｐａｎｙから入手しうる。本発明製剤中のＰＣなどのリン脂質の存在は、げっ歯類動物モデルにいおて確立されたリン脂質によるＮＳＡＩＤが引き起こす胃腸副作用の低減化のメカニズムと類似の様式で、胃腸毒性を低下する。米国特許第５，９５５，４５１；５，７６３，４２２；５，２６０，２８７；５，２６０，２８４；５，１３４，１２９；５，０４３，３２９；５，０３２，４６４；４，９５０，６５８および４，９１８，０６３号などを参照、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。したがって、本発明組成物中のリン脂質の存在は、ビスホスホネート誘発胃傷害を予防、減少、好転または消滅させて、ビスホスホネートの胃腸毒性を増加することなく、ビスホスホネートの投与量を増加し、頻度を少なくすることができる（たとえば、１日１回投与〜１日数回投与など）。
【００４４】
両性リン脂質の添加により、日常ベースで患者が相対的に高用量のビスホスホネートを摂取することを必要とする約５％以下のバイオアベイラビリティをもつビスホスホネートのバイオアベイラビリティを有意に増進することもできる。両性イオンリン脂質は、特に食事とともに摂取する場合におけるビスホスホネートのバイオアベイラビリティを改善する。改善されたバイオアベイラビリティは、ビスホスホネート、両性イオンリン脂質およびこの２つの成分の割合を慎重に選ぶことによって、約２倍〜約２０倍以上増進することができる。
【００４５】
多くのビスホスホネートが市販されているが、公知の手順で合成することもできる。たとえば、米国特許第４，７０５，６５１および４，３２７，０３９号（これらは全体を参考文献として本発明に援用される）に、ビスホスホネート（ジホスホン酸および類縁体）の合成が報告されており、それらの基礎化学は、標準的教本に記載されている。Ｖａｎ Ｗａｚｅｒ Ｇ． Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ， Ｖｏｌ １， Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ｐｐ ２３９−２４０ （１９５８）などを参照。これらの引用文献において、ビスホスホネートの合成経路は類似しており、溶媒を使用し、あるいは使用することなく、オルソ亜燐酸をωアミノ酸（たとえば、４−アミノ酪酸またはβアラニン）で処理することが含まれる。この反応に続いて、ＰＣｌ３またはＰＣｌ５のいずれかで処理し、次いで、加水分解する。すべてのステップは、ワンポットで行うことができる。
【００４６】
リン脂質は、大豆から得られるレシチン油などの天然のものから抽出ことも、または精製体で購入することも可能である。類縁体は、公知の合成方法を用いて合成的に製造することができる。さらなる詳細については、米国特許第５，９５５，４５１；５，７６３，４２２；５，２６０，２８７；５，２６０，２８４；５，１３４，１２９；５，０４３，３２９；５，０３２，４６４；４，９５０，６５８および４，９１８，０６３号などを参照、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。
【００４７】
異なるビスホスホネートの比較毒性、関連する投与濃度および一級アミノ基の存在における傷害性作用の依存関係など、ビスホスホネートを含む薬物療法に関連した多くの発行物に関して、かなりの意見の相違があるけれども、臨床的、研究室的および組織学的証拠は、ビスホスホネートが、胃粘膜の局所刺激薬として作用することによって、胃損傷を引き起こすこと示している。
【００４８】
ビスホスホネートが上部胃腸管の粘膜を局所的に傷つける１つの可能性のあるメカニズムは、内腔酸に対する組織の疎水性バリヤーを減弱化することによるものである。この疎水特性は、イヌの胃粘膜の腔部表面に適用された場合に、水のマイクロリットル小滴が玉を成したことを証明することにより、本発明者および共同研究者によって独創的に説明された。Ｈｉｌｌｓ ＢＡ， Ｂｕｔｌｅｒ ＢＤ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ２４４， Ｇ５６１−Ｇ５６８ （１９８３）などを参照。この報告の後、多くの研究室によって、実験動物およびヒトにおいて、特定の胃腸組織の粘膜（たとえば、胃、遠位食道および結腸）が、顕著な疎水特性をもつことが証明されている。Ｈｉｌｌｓ ＢＡ， Ｂｕｔｌｅｒ ＢＤ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ２４４， Ｇ５６１−Ｇ５６８ （１９８３）， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ５７， ５６５−５８３ （１９９５）， Ｇｏｇｇｉｎ ＰＭ， Ｍａｒｒｅｒｏ ＪＭ， Ｓｐｙｃｈａｌ ＲＩ， Ｊａｃｋｓｏｎ ＰＡ， Ｃｏｒｂｉｓｈｌｅｙ ＣＭ， Ｎｏｒｔｈｆｉｅｌｄ ＴＣの Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ， １０３， １４８６−１４９０ （１９９２）および Ａｓａｎｔｅ Ｍ， Ａｈｍｅｄ Ｈ， Ｐａｔｅｌ Ｐ， Ｄａｖｉｓ Ｔ， Ｆｉｎｌａｙｓｏｎ Ｃ， Ｍｅｎｄａｌｌ Ｍ， Ｎｏｒｔｈｆｉｅｌｄの Ｇａｓｔｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ． １１３ ； ４４９−４５４ （１９９７）などを参照。
【００４９】
さらに、アスピリン、胆汁遠などのダメージング薬およびヘリコバクターピロリ感染、ストレスなどの種々の状態が、上部胃腸管の疎水特性における明確で迅速な減弱化に関連することが確立されている。Ｈｉｌｌｓ ＢＡ， Ｂｕｔｌｅｒ ＢＤ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ２４４， Ｇ５６１−Ｇ５６８ （１９８３）， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ５７， ５６５−５８３ （１９９５）， Ｇｏｇｇｉｎ ＰＭ， Ｍａｒｒｅｒｏ ＪＭ， Ｓｐｙｃｈａｌ ＲＩ， Ｊａｃｋｓｏｎ ＰＡ， Ｃｏｒｂｉｓｈｌｅｙ ＣＭ， Ｎｏｒｔｈｆｉｅｌｄ ＴＣの Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ， １０３， １４８６−１４９０ （１９９２）， Ａｓａｎｔｅ Ｍ， Ａｈｍｅｄ Ｈ， Ｐａｔｅｌ Ｐ， Ｄａｖｉｓ Ｔ， Ｆｉｎｌａｙｓｏｎ Ｃ， Ｍｅｎｄａｌｌ Ｍ， Ｎｏｒｔｈｆｉｅｌｄの Ｇａｓｔｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ． １１３ ； ４４９−４５４ （１９９７）， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭ， Ｄｉａｌ ＥＪ， Ｏｔｔｌｅｃｚ Ａ， Ｒｏｍｅｒｏ ＪＪ， Ｌｅｃｈａｇｏ Ｊ， Ｆｏｘ ＪＧの Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ， ４４， １０８−１１５ （１９９９）， Ｇｏｄｄａｒｄ ＰＪ， Ｈｉｌｌｓ ＢＡ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏ， ２５２， Ｇ４２１−Ｇ４３０ （１９８７）および Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭ， Ｗａｎｇ Ｚ−Ｍ， Ｒｏｍｅｒｏ ＪＪ， Ｕｌｌｏａ Ｃ， Ｐｅｒｅｚ ＪＣ， Ｇｉｒａｕｄ Ｍ−Ｎ， Ｂａｒｒｅｔｏ ＪＣの Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ， １， １５４−１５８ （１９９５）などを参照。薬物の吸収を強化するための添加物として用いられる多くの物質が、胃腸粘膜の公知の刺激薬またはダメージング薬であり、ビスホスホネートとともに用いるのは禁忌であることに留意すべきである。このような物質として、クエン酸、デカン酸、カプリル酸などの短鎖脂肪酸；オレイン酸などの長鎖不飽和脂肪酸；Ｂｒｉｊ、Ｔｗｅｅｎ−８０、デオキシコール酸ナトリウムなどの界面活性剤；およびＥＤＴＡ、ＥＧＴＡなどの多価金属カチオンのキレート化剤が挙げられる。
【００５０】
上部胃腸管の疎水性バリヤー特性の分子的根拠は、まだ解明されていないが、抗いがたい証拠が、両性イオンリン脂質、特に、ホスファチジルコリンが関与していることを示している。この証拠として、１）ＰＣおよび他の界面活性剤様極性脂質が、不活性界面および生物界面の両方に、疎水特性を付与することができるという十分に確立された事実（Ｈｉｌｌｓ ＢＡ， Ｂｕｔｌｅｒ ＢＤ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ２４４， Ｇ５６１−Ｇ５６８ （１９８３）およびＬｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ５７， ５６５−５８３ （１９９５）；２）表面胃粘膜細胞が、これらの分子を合成し、付着性の粘膜層へ分泌するという所見（Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ５７， ５６５−５８３ （１９９５）およびＫａｏ Ｙ−Ｃ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １０１， ７−２１ （１９９１））；３）合成または精製ＰＣが、ある潰瘍誘発性薬および／または状態から実験動物およびヒトを保護する能力をもつという実験室および臨床的所見（Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ５７， ５６５−５８３ （１９９５）， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭ， Ｇｒａｚｉａｎｉ ＬＡ， Ｄｉａｌ ＥＪ， Ｂｕｔｌｅｒ ＢＤ， Ｈｏｌｌｓ ＢＡの Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９ ； １３２７−１３２９ （１９８３）およびＡｎａｎｄ ＢＳ， Ｒｏｍｅｒｏ ＪＪ， Ｓａｎｄｕｊａ ＳＫ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ＬＭの Ａｍ ＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ， 印刷中 （１９９９））が挙げられる。
【００５１】
興味深いことに、ヘッドグループのＰＣおよび多くの他の胃保護的両性イオンリン脂質が、いくらかのビスホスホネートファミリーの化合物のメンバーの電荷と分子構造に類似した、短（２−炭素長さ）の炭化水素鎖で連結された一端の負荷電リン酸基および他端の正荷電窒素基を有している。両性イオン化合物のこれらの２つのファミリーの間のこれらの分子類似性を図１に示す。ビスホスホネートとリン脂質の間の１つの相異は、ビスホスホネートは、一般に、３つまたはそれ以上の炭素原子を含む炭化水素鎖によって窒素基から分離される２つのリン酸基をもつ（１つのリン酸基のみがＰＣのリン酸基と類似してイオン化される）が、リン脂質は、一般に、２つまたはそれ以上の炭素原子を含む炭化水素鎖によって窒素基から分離される単一のリン酸基のみをもつことであるということに留意すべきである。
【００５２】
これらの２つの化合物ファミリーの分子特性が類似しているので、表面粘膜ゲル層上の結合部位に対して、ヘッドグループの内在性両性リン脂質と競合させることによって、ビスホスホネートが胃粘膜を傷つけるかどうか、およびそのことによって、前述した組織の保護的疎水性バリヤー特徴を減少させるかどうかを決定する実験を行った。この実験は、Ｂｌａｎｋらの動物モデルを用い、表面疎水性および胃腔粘膜のリン脂質濃度における異なるビスホスホネートの効果を調査し（Ｂｌａｎｋ ＭＡ， Ｅｍｓ ＢＬ， Ｇｉｂｓｏｎ ＧＷ， Ｍｙｅｒｓ ＷＲ， Ｂｅｒｍａｎ ＳＫ， Ｐｈｉｐｐｓ ＲＪ， Ｓｍｉｔｈ ＰＮの Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ４２， ２８１−２８８ （１９９７）、これらの薬物の胃毒性に対するこれらの表面の変化の影響を比較した。
【００５３】
これらのげっ歯類研究において、本発明者は、胃腸副作用により、もはや経口投与にや投薬されないビスホスホネートであるパミドロネートに焦点を合わせ、インドメタシンと組合せて投与した場合に、ラットの胃腔部および胃本体の両方において４時間にわたってパミドロネートが損傷を誘発することを証明した。腔部損傷スコアを時間に対してプロットした図２参照。
【００５４】
さらに、パミドロネートとインドメタシンの組合せが、胃粘膜の疎水特性およおよび内在性リン脂質（ＰＣ）濃度の両方の減弱化において非常に有効であることもまた証明した。胃損傷の発症に類似して、図３Ａおよび３Ｂに示すように、胃の疎水性／リン脂質バリヤーにおけるこれらの低減化は迅速に（３０〜６０分）引き起こされ、ビスホスホネートまたはＮＳＡＩＤ単独のいずれかに応答して記録されたものよりもさらに顕著であることは注目に値する。
【００５５】
図４に示すように、パミドロネート、アレンドロネートおよびリセドロネートを比較した場合、それらの胃毒性の順序は、パミドロネート＞＞アレンドロネート＞リセドロネートであることが見出され、図５に示すように、その順序は、胃の疎水性リン脂質バリヤー特性を減弱化するビスホスホネートの能力において維持される。組織学的研究により、胃毒性の最も小さいビスホスホネートであるリセドロネートでさえも、胃粘膜に対して幾らかの表面傷害を誘発することが示された。さらに、回帰分析により、胃損傷を誘発するビスホスホネートの能力が、それらの胃の保護的疎水性特性を低下させる能力に有意に関連することが明らかになった（ｒ＝０．６、ｐ＜０．００１）。
【００５６】
このデータは、ビスホスホネートが、ビスホスホネートとＰＣなどのリン脂質の類似する両性イオン的性質により、粘膜ゲル層の表面から内在性表面リン脂質（ＰＣなど）および関連リン脂質と競合的に置換することによって表面傷害を誘発する、図６に示すビスホスホネートの胃腸毒性のモデルを支持する。しかし、リン脂質表面結合とは異なって、ビスホスホネートは、上部胃腸管の疎水性ライニングにおいて、親水性の水チャネルの形成または挿入を引き起こし、ＨＣｌおよび他の有害な水溶性化合物を内腔から組織へ逆放散せしめ、粘膜損傷および炎症を誘発する。
【００５７】
いずれの理論に拘束されることを意図するものではないが、上記モデルは、にビスホスホネート胃腸毒性に一致し、本発明のリン脂質／ビスホスホネート薬物療法の表面傷害ならびに得られる粘膜炎症を低減化および／または予防する能力に一致する。試験的前臨床試験において、Ｂｌａｎｋらのげっ歯類モデル（Ｂｌａｎｋ ＭＡ， Ｅｍｓ ＢＬ， Ｇｉｂｓｏｎ ＧＷ， Ｍｙｅｒｓ ＷＲ， Ｂｅｒｍａｎ ＳＫ， Ｐｈｉｐｐｓ ＲＪ， Ｓｍｉｔｈ ＰＮの Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ ４２， ２８１−２８８ （１９９７））を用いて、ビスホスホネート試験薬物をインドメタシンと同時に投与して、ビスホスホネート胃腸毒性を阻害するリン脂質の能力のモデルを調査した。実施例では、ビスホスホネート：ＰＣの重量比１．０：０．３にて、合成したジパルミトイル−ＰＣ（ＤＰＰＣ）または９０％ＰＣ（大豆レシチンから精製したもの）のいずれかとパミドロネートを組合せる製剤に対するパミドロネート単独の胃腸毒性を比較した。図７に示すように、ＰＣを補充すると、幾分低い比率で用いても、パミドロネートによって誘発される胃損傷スコアは、有意に減少した。精製大豆レシチン（９０〜９３％のＰＣを含む）もまた、パミドロネート／インドメタシン誘発胃傷害に対して、かなりの胃保護効力を示した。表１に示すように、重量比の１：１パミドロネート：ＰＣもまた、パミドロネートによって誘発されるものに比較して、胃損傷スコアにおいて有意な減少および胃出血において著しい減少を引き起こした。
【００５８】
表１
ＰＣ−パミドロネートまたはＰＣ単独を投与されたラットの胃損傷スコアおよび出血の比較
2004517800.tif 000004
【００５９】
次の実験は、増加量の９０〜９３％のＰＣ（大豆レシチンから精製したもの）を含む製剤としてビスホスホネートを投与すると、アレンドロネートおよびインドメタシンの組合せに応答した胃損傷が、完全に予防されることを証明した。図８に示すように、アレンドロネート：ＰＣの重量比１：１および１：４の場合、アレンドロネート誘発損傷スコアは、有意に減少し、１：４の比率では、１：１の比率よりもわずかに減少の程度が大きかった。
【００６０】
製造方法および実施例
ビスホスホネート／リン脂質組成物の製造方法
１つの好ましい種類の本発明組成物は、両性イオン型のビスホスホネートおよびリン脂質の分子会合を促進するための条件下でビスホスホネートおよびリン脂質を接触させることによって一般に製造される、ビスホスホネートおよびリン脂質を含む組成物である。このような条件は、代表的には、溶媒および／または緩衝液の使用、分子相互作用および会合を促進する混合物手順の使用ならびに所望の程度の分子間相互作用および会合を可能にするための制御された温度、圧力および時間を含む。これらの２つの種類の化学種は、極性溶媒中で両性イオンとして存在しうるので、これらの２つの種類の化合物間の分子間相互作用および会合は、溶媒を用いること、または低イオン強度の緩衝液、いわゆる低張緩衝液を用いることのいずれかによって促進することができる。幾つかの場合、ビスホスホネートを有機溶媒中のＰＣまたは脱脂レシチンに添加した後に、蒸発によってその除去を行う。
【００６１】
一般に、低張緩衝液は、約１ミリモル〜約１００ミリモルのモル濃度をもつ緩衝液を形成するための緩衝性化合物を添加された水である。これらの低イオン強度緩衝液は、ビスホスホネートと緩衝液ならびにリン脂質と緩衝液間の相互作用を低減化することによって、両性イオン型のビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用および／または会合を促進する。
【００６２】
接触はまた、混合、好ましくは、激しいあるいは活発な混合の存在のもとに行う。このような混合方法として、音波処理、または他の分子レベルの混合方法、ボルテックス混合または他の高性能せん断混合方法などが挙げられる。混合時間および温度は、両性イオン型のビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用を、分子自体に熱またはせん断損害を引き起こすことなく最大にするように設計されるべきである。一般に、混合時間は、約５分〜数時間の範囲であり、１０分〜１時間が好ましい。一般に、混合温度は、周囲温度〜混合されるビスホスホネートまたはリン脂質の最低の分解温度より少なくとも１０％低いか、または最低の沸騰溶媒の沸点よりも少なくとも１０％低いか、または緩衝液が分解またはその緩衝能を失うのを開始する温度の１０％低い温度の範囲である。温度は、周囲温度〜約７０℃が好ましい。
【００６３】
緩衝液のｐＨもまた、ビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用および／または会合の促進において役割を演じる。一般に、ｐＨは、ビスホスホネートとリン脂質が、それらの両性イオン型で存在するのを確実にするように制御されるべきである。一般に、ｐＨは、約３〜約１０、好ましくは約５〜８、特に好ましくは７近傍である。
【００６４】
本発明製剤の製造においては、ビスホスホネートは、精製された天然のリン脂質または合成リン脂質と混合することができるか、または種々のグレードのレシチン（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｌｅｃｉｔｈｉｎ Ｃｏから入手しうる大豆レシチンから抽出したもの）あるいはリン脂質の含量が高い他の天然の油と混合することができる。特に有用なレシチンは、約１５〜約９３重量％の範囲のＰＣというリン脂質濃度をもつ。さらに、該製剤は、脱脂および含脂レシチン製品のいずれかを用いることができる。
【００６５】
リン脂質の形体にかかわらず、一般に、ビスホスホネート：リン脂質の比率は、約１．０：０．１〜約１：１００、好ましくは約１．０：０．５〜約１：２５、さらに好ましくは約１．０：１．０〜約１．０：１０．０である。
脱脂レシチンを用いる製剤では、脱脂レシチンを最初にエタノールなどの有機溶媒に溶解し、凍結乾燥して有機溶媒を除去し、次いで、ビスホスホネート含有溶液に再懸濁し、次いで、ボルテキシングおよび／または音波処理混合を行う。レシチンを用いる製剤では、油脂レシチンをビスホスホネート化合物と単純に組合せ、必要であれば、ボルテキシングおよび／または音波処理によって混合する。
【００６６】
もう１つの好ましい本発明組成物の製造方法は、約１〜約１００ミリモル（ｍＭ）のモル濃度の低張水溶液または緩衝液にビスホスホネートを溶解することである。適当な溶液および／または緩衝液として、ＮａＣｌ溶液、トリス緩衝液、重炭酸塩緩衝液、ＨＥＰＥＳが緩衝液、ＭＯＰＳ緩衝液などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
音波処理または混合温度は、リン脂質の転移温度Ｔｍ（すなわち、当業界で公知のリン脂質が、液晶状態からゲル状態へと相転移を起こす温度）よりも高い温度で行うのが好ましい。ＰＣの場合、混合は、室温で行うことができるが、ＤＰＰＣの場合、混合は、４２℃以上で行う。
【００６７】
もう１つの好ましい本発明組成物の製造方法は、リン脂質およびビスホスホネートを極性溶媒に溶解することを含む。適当な溶媒として、クロロホルムなどのクロロカーボン、メタノール、エタノール、イソプロパノールなどの低級アルコール、またはリン脂質およびビスホスホネートがいくらかの溶解度をもち、追加条件として溶媒が蒸発などによって容易に除去しうるようないずれかの他の溶媒などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
金属錯体を用いる場合、錯体をリン脂質およびビスホスホネートの溶液に直接加えることができる。別法で好ましい方法は、本明細書に記載の予備形成したリン脂質フィルムを加える低張緩衝液中で錯体およびビスホスホネートを製造することができる。
【００６８】
実施例
以下の実施例は、記述を完全にするためのものであり、ビスホスホネートおよびリン脂質を含む本発明組成物の製造を説明するが、これらの実施例は、本明細書の記載の範囲または教示を制限するためのものではない。
【００６９】
実施例１
本実施例は、パミドロネートおよびジパルミトイル−ＰＣを含む組成物の製造を説明する。
６０ｍｇのホスホリポン９０Ｇ（９０〜９３％純度のＰＣ）をチューブ内でクロロホルムに溶解する。クロロホルムを用いるが、エタノールでも同様である。有機溶媒を窒素下で除去し、得られるＰＣ物質を減圧下に一夜置いて、チューブ内にＰＣフィルムを形成する。パミドロネートを生理食塩水に溶解し、得られる溶液のｐＨを７．０に調節する。次いで、溶液をチューブ内の乾燥ＰＣフィルムに加える。室温にて５分間、混合物を両型音波処理器で音波処理した後、絶食させたラットに投与する。本実施例の結果は、表１に示し、すでに説明した。リン脂質の薄層が、リン脂質とビスホスホネートの相互作用を増進すると考えられる。
【００７０】
実施例２
本実施例は、パミドロネートおよびジパルミトイル−ＰＣを含む組成物の製造を説明する。
２０ｍｇのジパルミトイルＰＣ（ＤＰＰＣ）およびホスホリポン９０Ｇ２０ｍｇを別々のチューブ内でクロロホルムに溶解し、実施例１と同様にして乾燥する。ｐＨ７に調節した、６０ｍｇ／ｍｌのパミドロネートの生理食塩水溶液を調製し、ＤＰＰＣフィルムおよびＰＣフィルムを含むそれぞれのチューブに加える。次いで、ＰＣ−パミドロネート混合物を室温で５分間音波処理し、ＤＰＰＣ−パミドロネート混合物を４２℃以上の温度、約４５℃で５分間音波処理する。本実施例の結果は、図７に示し、すでに説明した。
【００７１】
実施例２
本実施例は、パミドロネートおよびジパルミトイル−ＰＣを含む組成物の製造を説明する。
６０ｍｇおよび２４０ｍｇのホスホリポン９０Ｇを別々のチューブ内でクロロホルムに溶解し、実施例１と同様にして乾燥する。ｐＨ７に調節した、６０ｍｇ／ｍｌのアレンドロネートの生理食塩水溶液を調製し、乾燥ＰＣフィルムを含むチューブに加える。混合物を室温で５分間音波処理する。本実施例の結果は、図８に示し、すでに説明した。
【００７２】
金属媒介性ビスホスホネート／リン脂質組成物の製造方法
１つの好ましい種類の本発明組成物は、両性イオン型のビスホスホネートおよびリン脂質および金属錯体またはコロイド金属の２つの化合物の分子会合を促進するための条件下でビスホスホネート、リン脂質および金属錯体またはコロイド金属を接触させることによって一般に製造される、ビスホスホネート、リン脂質および金属錯体またはコロイド金属を含む組成物である。このような条件は、代表的には、溶媒および／または緩衝液の使用、分子相互作用および会合を促進する混合物手順の使用ならびに所望の程度の分子間相互作用および会合を可能にするための制御された温度、圧力および時間を含む。ビスホスホネートおよびリン脂質は、極性溶媒中で両性イオンとして存在しうるので、ビスホスホネートおよびリン脂質間の分子間相互作用および／または会合は、溶媒を用いること、または低イオン強度の緩衝液、いわゆる低張緩衝液を用いることのいずれかによって促進することができる。さらに、これらの条件下、金属錯体および／またはコロイド金属は、食物とともに摂取した後でさえも、腸壁を介した血流内への吸収に対してビスホスホネートを利用可能にすることができる、ビスホスホネートおよびリン脂質を含む組成物の形成を補助することができる。
【００７３】
一般に、これらの緩衝液は、約１ミリモル〜約１００ミリモルのモル濃度をもつ緩衝液を形成するための緩衝性化合物を添加された水である。これらの低イオン強度緩衝液は、ビスホスホネートと緩衝液ならびにリン脂質と緩衝液間の相互作用を低減化することによって、両性イオン型のビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用および／または会合を促進する。金属錯体を含む組成物にとって、緩衝液は、同じ金属を用いて作成することができる。
【００７４】
幾つかの場合、多価カチオンまたはコロイド金属は、有機溶媒（後に蒸発によって除去される）またはより適当な、２つの種類の両性イオン化合物の結合を促進するためにＰＣ含有液体フィルムに加えるビスホスホネートを含む水溶液のいずれかに加えられる。アルミニウム、金、ビスマスまたは他の多価金属などの多価金属にとって、金属が可溶性で活性があり、ビスホスホネートとリン脂質がそれらの両性イオン型であるのを確実にするようにｐＨを調節するのが好ましい。これらの多価金属錯体にとっての活性ｐＨ範囲は、約２．５〜５であり、この範囲が、ビスホスホネートとリン脂質がそれらの両性イオン型である範囲である。
【００７５】
接触はまた、混合、好ましくは、激しいあるいは活発な混合の存在のもとに行う。このような混合方法として、音波処理、ボルテックス混合または他の高性能せん断混合方法などが挙げられる。混合時間および温度は、両性イオン型のビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用を、分子自体に熱またはせん断損害を引き起こすことなく最大にするように設計されるべきである。一般に、混合時間は、約５分〜数時間の範囲であり、１０分〜１時間が好ましい。一般に、混合温度は、周囲温度〜混合されるビスホスホネートまたはリン脂質の最低の分解温度より少なくとも１０％低い温度の範囲である。温度は、周囲温度〜約７０℃が好ましい。
【００７６】
緩衝液のｐＨもまた、ビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用および／または会合の促進において役割を演じる。一般に、ｐＨは、ビスホスホネートとリン脂質が、それらの両性イオン型で存在するのを確実にするように制御されるべきである。一般に、ｐＨは、約２．５〜約１０が好ましく、約３〜８が、特に好ましい。
【００７７】
本発明製剤の製造においては、ビスホスホネートは、精製された天然のリン脂質または合成リン脂質と混合することができるか、または純度が約１５〜約９３重量％のＰＣ範囲である種々のグレードのレシチン（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｌｅｃｉｔｈｉｎ Ｃｏから入手しうる大豆レシチンから抽出したもの）と混合することができる。さらに、該製剤は、脱脂および含脂レシチン製品のいずれかを用いることができる。一般に、ビスホスホネート：リン脂質の比率は、約１．０：０．１〜約１：１００、好ましくは約１．０：０．５〜約１：５０、さらに好ましくは約１．０：１．０〜約１．０：１０．０、特にさらに好ましくは約１：１〜約１：５である。一般に、金属含有成分（錯体またはコロイド）は、ビスホスホネートおよびリン脂質の量の合計：金属含有成分の重量比が、約１．０：０．０１〜約１．０：５．０、好ましくは約１．０：０．１〜約１．０：２．０、さらに好ましくは約１．０：０．５〜約１．０：１．０で存在する。
【００７８】
脱脂レシチンを用いる製剤では、脱脂レシチンを最初にエタノールなどの有機溶媒に溶解し、凍結乾燥して有機溶媒を除去し、次いで、ビスホスホネート含有溶液に再懸濁し、次いで、ボルテキシングおよび／または音波処理混合を行う。レシチンを用いる製剤では、油脂レシチンをビスホスホネート化合物と単純に組合せ、必要であれば、ボルテキシングおよび／または音波処理によって混合する。
【００７９】
さらに、本発明の金属媒介性組成物は、ナトリウム源を添加するかまたは添加せずに、水酸化アルミニウム、水酸化マグネシウム、炭酸マグネシウム、ケイ酸マグネシウム（Ｍｇ２Ｓｉ３Ｏ８）、リン酸マグネシウム、炭酸カルシウム、シメチコンまたは他のシリコン含有剤、サブサリチル酸ビスマス、サブクエン酸ビスマス、ビスマス制酸薬類似物もしくはその混合物または組合せなどの制酸薬において通例用いられる金属錯体を用いて製造することができるが、これらに限定されるものではない。
適当な金属コロイドとして、金コロイド、銀コロイド、ビスマスコロイドおよびその混合物または組合せが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
適当な金属錯体として、アルミニウム、マグネシウム、カルシウム、ビスマス、バリウムの錯体などの非毒性金属錯体（ここで、錯体は、水酸化物、炭酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、サリチル酸塩または他の類似の生体適合性対イオンであることができる）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００８０】
支持されたビスホスホネート／リン脂質組成物の製造方法
もう１つの好ましい種類の本発明組成物は、両性イオン型のビスホスホネートおよびリン脂質の分子会合を促進するための条件下でビスホスホネートおよびリン脂質を接触させ、次いで、粒子体の酸化物またはゾル体の酸化物のいずれかを加えることによって一般に製造される、非毒性、生体適合性支持体上に置かれたビスホスホネート／リン脂質混合物を含む組成物である。ビスホスホネート−リン脂質混合物を形成するための条件は、前述のとおりであるが、金属酸化物またはゾルは、ビスホスホネートまたはリン脂質と同時に加えるか、またはビスホスホネート−リン脂質混合物の形成後に加えるかのいずれかであって、後者が好ましい。さらにまた、該プロセスは、代表的には、溶媒および／または緩衝液の使用、分子相互作用および会合を促進する混合物手順の使用ならびに所望の程度の分子間相互作用および会合を可能にするための制御された温度、圧力および時間を含む。これらの２つの種類の化学種は、極性溶媒中で両性イオンとして存在するので、これらの２つの種類の化合物間の分子間相互作用および会合は、溶媒を用いること、または低イオン強度の緩衝液、いわゆる低張緩衝液を用いることのいずれかによって促進することができる。
【００８１】
一般に、これらの緩衝液は、約１ミリモル〜約１００ミリモルのモル濃度をもつ緩衝液を形成するための緩衝性化合物を添加された水である。これらの低イオン強度緩衝液は、ビスホスホネートと緩衝液ならびにリン脂質と緩衝液間の相互作用を低減化することによって、両性イオン型のビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用および／または会合を促進する。
【００８２】
接触はまた、混合、好ましくは、激しい混合の存在のもとに行う。このような混合方法として、音波処理、ボルテックス混合または他の高性能せん断混合方法などが挙げられる。混合時間および温度は、両性イオン型のビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用を、分子自体に熱またはせん断損害を引き起こすことなく最大にするように設計されるべきである。一般に、混合時間は、約５分〜数時間の範囲であり、１０分〜１時間が好ましい。一般に、混合温度は、周囲温度〜混合されるビスホスホネートまたはリン脂質の最低の分解温度より少なくとも１０％低い温度の範囲である。温度は、周囲温度〜約７０℃が好ましい。
【００８３】
緩衝液のｐＨもまた、ビスホスホネートとリン脂質の間の分子間相互作用および／または会合の促進において役割を演じる。一般に、ｐＨは、ビスホスホネートとリン脂質が、それらの両性イオン型で存在するのを確実にするように制御されるべきである。一般に、ｐＨは、約２．５〜約１０が好ましく、約５〜８が、特に好ましい。さらにまた、アルミニウム、金、ビスマスまたは他の多価金属などの多価金属にとって、金属が可溶性で活性があり、ビスホスホネートとリン脂質がそれらの両性イオン型であるのを確実にするようにｐＨを調節するのが好ましい。これらの多価金属錯体にとっての活性ｐＨ範囲は、約２．５〜５であり、この範囲が、ビスホスホネートとリン脂質がそれらの両性イオン型である範囲である。
【００８４】
本発明製剤の製造においては、ビスホスホネートは、精製された天然のリン脂質または合成リン脂質と混合することができるか、または純度が約１５〜約９３重量％のＰＣ範囲である種々のグレードのレシチン（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｌｅｃｉｔｈｉｎ Ｃｏから入手しうる大豆レシチンから抽出したもの）と混合することができる。さらに、該製剤は、脱脂および含脂レシチン製品のいずれかを用いることができる。一般に、ビスホスホネート：リン脂質の比率は、約１．０：０．１〜約１：１００、好ましくは約１．０：０．５〜約１：５０、さらに好ましくは約１．０：１．０〜約１．０：１０．０、特にさらに好ましくは約１．０：１．０〜約１．０：５．０である。一般に、支持物質（酸化物またはゾル）は、ビスホスホネートおよびリン脂質の量の合計：支持物質の重量比が、約１．０：０．０１〜約１．０：５．０、好ましくは約１．０：０．１〜約１．０：２．０、さらに好ましくは約１．０：０．５〜約１．０：１．０で存在する。
【００８５】
脱脂レシチンを用いる製剤では、脱脂レシチンを最初にエタノールなどの有機溶媒に溶解し、凍結乾燥して有機溶媒を除去し、次いで、ビスホスホネート含有溶液に再懸濁し、次いで、ボルテキシングおよび／または音波処理混合を行う。レシチンを用いる製剤では、油脂レシチンをビスホスホネート化合物と単純に組合せ、必要であれば、ボルテキシングおよび／または音波処理によって混合する。
【００８６】
もう１つの支持されたビスホスホネート−リン酸組成物の製造方法は、ビスホスホネート−リン脂質混合物を形成し、該混合物を濃縮し、次いで、粒子体またはゾル体のいずれかの支持体を加える。濃縮混合物が、酸化物粒子の表面上で吸収されるか、または酸化物ゾルとともに適当な支持された組成物に成形されるように設計するのがより好ましい。
【００８７】
適当な酸化物として、シリカ、ケイ酸塩、アルミナ、アルミン酸塩、ケイ酸アルミン酸塩、アルミニウムケイ酸塩、ケイ酸マグネシウム、チタニア、マグネシア、混合酸化物もしくはその混合物または組合せが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
適当な酸化物ゾルとして、アルミナゾル、シリカゾル、マグネシアゾルなど、もしくはその混合物または組合せが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００８８】
本発明組成物の経口薬剤の調合方法
本発明組成物は、製剤化して、顆粒剤、丸剤、錠剤、ゼラチン被覆丸剤または錠剤、粉末または顆粒の本発明組成物を充填したゼラチンカプセル剤、液体の本発明組成物を充填したゼラチンカプセル剤、速溶性丸剤または錠剤、液体サプリメントなどの種々の剤形の経口投与剤にすることができるが、これらに限定されるものではない。丸剤または錠剤の製造におけるさらなる詳細については、米国特許第６，１４３，３２３；６，２００，６０２；４，６８４，６３２号を参照、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。
固体および／または液体のカプセル剤の製造におけるさらなる詳細については、米国特許第６，０２４，９８０；５，２９４，６１５；５，０７３，３８４；５，０７１，６４３；４，９３５，２４３；４，８９４，９７８；４，４８６，４１２；４，７７２，４７２；４，７０８，８３４号およびＷＯ９１／０７９５０を参照、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。速溶性錠剤または丸剤の製造におけるさらなる詳細については、米国特許第６，１８７，３３６；６，１８７，３３７号を参照、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。
本発明組成物はまた、米国特許第６，１１６，２３７号（これは全体を参考文献として本発明に援用される）に記載されているように、乾燥粉末吸入用の小さい粒子径に製剤化および／または成形することができる。本発明組成物はまた、鼻腔デリバリーシステム用に製剤することもできる。
【００８９】
添加物
本発明組成物はまた、トリグリセリド、ステロール、植物ステロールなど（これらに限定されるものではない）の佐剤（特に、リン脂質の移動性を高めるため）および丸剤または錠剤などを製造するための増量剤、結合剤、ｐＨをコントロールするための添加剤、安定化剤（これらに限定されるものではない）などの不活性添加物または賦形剤を含むこともできる。したがって、本発明組成物は、腸管などの膜表面へのリン脂質の移動を増進するための中性脂肪またはトリグリセリドを含むこともできる。さらなる詳細については、米国特許第５，９５５，４５１；５，７６３，４２２；５，２６０，２８７；５，２６０，２８４；５，１３４，１２９；５，０４３，３２９；５，０３２，４６４；４，９５０，６５８および４，９１８，０６３号を参照、これらは全体を参考文献として本発明に援用される。
本明細書に引用したすべての文献は、全体を参考文献として本発明に援用される。本発明は、十分かつ完全に説明されているが、付属の請求の範囲内において、特記したものと別のやり方で実行することができると理解すべきである。本発明をその好ましい態様に関して開示したが、特許請求の範囲に記載し上に説明した本発明の範囲と精神から逸脱しないで行なうことのできる改変および変更は、本明細書を読むことにより、当業者には理解されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【図１】ビスホスホネートと両性イオンリン脂質の間の類似性を説明する。
【図２】パミドロネートが、インドメタシンと組合せて投与した場合、４時間を通じてラットの胃の腔部および本体の両方において損傷を誘発したことを証明する。
【図３Ａおよび図３Ｂ】迅速に発生した（３０〜６０分）胃の疎水性／リン脂質バリヤーにおける低減化を示し、ビスホスホネートまたはＮＳＡＩＤのいずれか単独に応答して記録されたものよりも顕著であった。
【図４】３つの異なるビスホスホネートの胃毒性を示し、パミドロネート＞＞アレンドロネート＞リセンドロネートであった。
【図５】図４のビスホスホネートによって引き起こされた減弱された胃の疎水性リン脂質バリヤー特性を示す。
【図６】ビスホスホネートが、両方の種類の化合物の通例の両性イオン的性質により、粘膜ゲル層の表面からＰＣおよび関連するリン脂質を競合的に置換することによって、表面損傷を誘発するモデルを支持するデータを示す。
【図７】インドメタシンとパミドロネートの組合せによって誘発された胃損傷スコアは、ＰＣ補充によって有意に減少する。
【図８】ビスホスホネートが、アレンドロネート対ＰＣの重量比が１：１および１：４である増加量の９０〜９３％ＰＣ（大豆レシチンから精製した）を含む製剤として胃内投与された場合における、アレンドロネートとインドメタシンの組合せに対する胃損傷の予防を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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