(57)【要約】クレアチンおよびクレアチニンを含む、人間が消費するための組成物が開示され、クレアチニンは、水性溶媒中のクレアチンを実質的に安定にするのに十分な量である。さらにこの組成物の製造方法もまた開示される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
人間が消費するための組成物であって、クレアチンと、水性溶媒中で提供される際に中のクレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分な量のクレアチニンとを含む、組成物。
【請求項２】
クレアチニン対クレアチンの比（モル：モル比）が１：１０以上かつ１０：１以下である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
クレアチニン対クレアチンの比（モル：モル比）が１：８以上かつ５：１以下である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
ｐＨが２．５〜８．５の範囲である、請求項１から請求項３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
ｐＨが３．０〜７．０の範囲である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
ｐＨが４．０〜６．５の範囲である、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
ｐＨが４．５〜５．５の範囲である、請求項４に記載の組成物。
【請求項８】
ビタミン、脂質、タンパク質、炭水化物、ポリオール、アミノ酸、微量元素、色素、調味料、人工甘味料、天然の健康および機能向上物質、酸化防止剤、安定剤、保存料、ならびに緩衝剤からなる群から選択された、１つ以上の追加的な成分を含む、請求項１から請求項７のいずれかに記載の組成物。
【請求項９】
アロエベラ抽出物を含む、請求項１から請求項８のいずれかに記載の組成物。
【請求項１０】
可食支持基質内に懸濁されたクレアチンを含む、請求項１から請求項９のいずれかに記載の組成物。
【請求項１１】
前記可食支持基質は、蜂蜜、シロップ、廃糖蜜、糖蜜、グリセロール、アロエベラゲル、植物性多糖、ガラクトマンナン、デキストラン、グアールガム、イナゴマメガムおよびキサンタンガムからなる群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
水溶液として提供される、請求項１から請求項１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物は人間が消費するのに好適な飲料である、請求項１から請求項１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
少なくとも０．１５ｇ／１００ｍｌのクレアチン濃度を含む、請求項１から請求項１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
少なくとも０．３ｇ／１００ｍｌのクレアチン濃度を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
少なくとも０．４ｇ／１００ｍｌのクレアチン濃度を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
少なくとも０．５ｇ／１００ｍｌのクレアチン濃度を含む、請求項１４に記載の組成物
。
【請求項１８】
固形物であり、水の添加により飲料とされ得る、請求項１から請求項１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１９】
クレアチンは、クレアチン一水和物またはクレアチンリン酸塩の形で存在する、請求項１から請求項１８のいずれかに記載の組成物。
【請求項２０】
前記組成物の通常の１杯分が、生理学的に効果的なクレアチン用量をもたらす、請求項１から請求項１９のいずれかに記載の組成物。
【請求項２１】
前記クレアチンは、少なくとも２５℃の温度で少なくとも７日間、（クレアチニンへの変換に関して）実質的に安定である、請求項１から請求項２０のいずれかに記載の組成物。
【請求項２２】
前記クレアチンは、少なくとも２５℃の温度で少なくとも３０日間、（クレアチニンへの変換に関して）実質的に安定である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記クレアチンは、少なくとも２５℃の温度で少なくとも６０日間、（クレアチニンへの変換に関して）実質的に安定である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
前記クレアチンは、少なくとも２５℃の温度で少なくとも９０日間、（クレアチンへの変換に関して）実質的に安定である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２５】
前記クレアチンは、少なくとも２５℃の温度で少なくとも１２０日間、（クレアチニンへの変換に関して）実質的に安定である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２６】
前記クレアチンは、少なくとも４０°の温度で少なくとも３０日間、（クレアチンからクレアチニンへの変換に関して）実質的に安定である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２７】
クレアチンが実質的に安定（ここに定義の通り）である、人間が消費するためのクレアチン含有の組成物を調製する方法であって、前記方法は、同じ組成物内に、クレアチンと、前記組成物を水性溶媒と混合した際にクレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンとをもたらす工程を含む、方法。
【請求項２８】
水性溶媒を、クレアチンおよびクレアチニンと混合する工程を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
クレアチンの溶液を生成する工程と、少なくとも部分的にクレアチンをクレアチニンに変換するのに好適な条件下にクレアチンの溶液を置く工程とを含み、こうして、結果として得られる組成物内のクレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンを形成する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
好適な条件下にクレアチンの溶液を置く前記工程は、前記溶液を室温よりも高温に加熱する工程を含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記クレアチンの溶液は、少なくとも９０℃に少なくとも３０分間加熱される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
クレアチンの溶液を生成する工程と、クレアチニンの溶液を生成する工程と、結果とし
て、クレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンがある組成物を形成するように、溶液を混合する工程とを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
クレアチニンの溶液のｐＨは、結果としての、クレアチンを含む組成物の溶液のｐＨよりも低い、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
クレアチニンの溶液のｐＨは２．５から３．５の範囲であり、結果としての、クレアチンを含む組成物の溶液のｐＨは４．０から６．５の範囲である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
固形のクレアチンを生成する工程と、固形のクレアチニンを生成する工程と、結果として、水溶液中に溶解させると、クレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンがある組成物をもたらす組成物を生成するように、２つの固形物を混合する工程とを含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
可食支持基質を加える工程をさらに含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項３７】
結果として得られる組成物は酸性である、請求項２７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［発明の分野］
この発明は、クレアチンおよびクレアチニンを含む、人間が消費するための組成物と、安定したクレアチン含有の組成物を生成する方法とに関する。
【背景技術】
【０００２】
［発明の背景］
近年運動選手の間で、骨格筋内で豊富に生じるクレアチンに対する関心が高まっている。クレアチンは骨格筋エネルギ代謝の調節および恒常性に極めて重要な役割を果たし、今や、筋力の連続的な生成のためにはクレアチンリン酸を利用できるように維持することが重要であると一般に認められている。クレアチンはまた、タンパク質合成と、トレーニングでの筋繊維の肥大とに関する他のプロセスに関わることもある。クレアチンの合成は肝臓、腎臓および膵臓で行なわれるが、最近になって、クレアチンの経口摂取により全体的な人体のクレアチンプールが増加することが知られるようになっており、数日間、１日につき２０ｇ〜３０ｇのクレアチン一水和物（Ｃｒ．Ｈ2Ｏ）を摂取することで、人骨格筋の総クレアチン含有量の増加が２０％を上回ることもあると示されている。そこで国際公開（ＷＯ）第９４／０２１２７号では、筋肉強度増大のために、少なくとも２日間にわたる、１日につき少なくとも１５ｇ（または０．２〜０．４ｇ／体重ｋｇ）の量のクレアチン一水和物の投与が開示されている。
【０００３】
この後実際に、組織貯蔵量の最初の上昇を達成するためにクレアチン一水和物を数日間補給（１日当り２０ｇ）した後、この新たに上昇した濃度を維持するには１日当り２〜３ｇしか必要ではないことがわかった。生物学的に利用可能なあらゆるクレアチン源を適当な用量で補給（すなわちクレアチン補給）すれば、急激な運動を伴う競技に関わる運動選手にとって向上をもたらすことができるが、これらの競技には、数秒から数分続くすべての競技（たとえば短距離競争、水泳、重量挙げなど）が含まれる。約３０分よりも長く続く競技での耐久性成績はクレアチン補給にそれほど影響されないように見えるが、ただし、特に局所筋炭水化物貯蔵が枯渇してしまった時など、短期間の増大したエネルギ出力を伴う場合は例外である。クレアチンは通常の食品成分であって薬物ではなく、その使用は公の規制に反するものではない。クレアチン補給の最大の利益は、老人、菜食主義者、または肉や魚を全く食べない人々によって享受されると考えられるが、それはこれらの人々の筋クレアチン含有量が低い傾向にあるからである。
【０００４】
アロエベラ（Aloe Barbadensis）はユリ科の一員であり、暖かい、霜のない風土帯に生育するサボテンに似た多肉植物である。中央アメリカのメキシコ・インディアンはアロエベラを何世紀もの間火傷の際の水疱を防ぐために用いており、また消化性潰瘍や十二指腸潰瘍およびあらゆる種類の胃腸障害、腎臓感染症、局所潰瘍や胃潰瘍の治療、さらには長命の促進に用いてきた。今日アロエベラは極めて人気が高く、その利益は科学的に認められている。
【０００５】
過去におけるアロエベラの主な用途は、炎症特に皮膚の炎症、とりわけ火傷の際のそれを防ぐことであったが、その他にも多くの用途がある。アロエベラ汁を服用した後には、消化酵素の産出、および腸の細菌個体数が増大することが実験と研究によって示されている。このため、人々がアロエベラの薬効性に親しむにつれて、その抽出物を薬物として経口摂取することへの関心が高まっている。
【０００６】
これを提供するいくつかの方法の中で、果物の味付けをした清涼飲料に入ったアロエベラ抽出物を用いることが多くなっており、これらの飲料は極めて美味である。アロエベラ抽出物飲料は、補われていない通常の果汁飲料よりもはるかに健康に有益であろうことから、クレアチンを清涼飲料に含めることは極めて望ましいことであろう。
【０００７】
アロエベラ汁は酸性（一般に約ｐＨ３）である。クレアチン分子は酸性または中性のｐＨの水溶液中で不安定であり、関連化合物であるクレアチニンへ変換される。これは極めて重大なことであるが、それはクレアチニンが全く筋能力増大効果を有さず、人体から尿中で老廃物として排出されてしまうからである。以上のことから、欧州特許（ＥＰ）第０  ６６９  ０８３号では、人間が消費するためのクレアチンを含む水溶性飲料は、クレアチンからクレアチニンへの変換を制限するために弱アルカリ性でなければならないことが教示されており、これは一般に受入れられた考えとなっている。
【０００８】
さらにクレアチンおよびその誘導体は過去において、肉味または塩味の製品の調製のみに用いられてきた。たとえばトンズビーク（Tonsbeek）（米国特許第３，６１５，６００号）は人工調味を開示およびこれに関し、食品に肉味を与える混合物を記載している。同様に、ディ・ロージ（de Rooji）（米国特許第４，４６４，４０９号）も肉味の味付けに関する。ヤマザキ（Yamazaki）（特開昭５９−０３５６６３号）では、ｐＨ５．０〜７．０のクレアチンを含む混合物を、８０〜１３０℃の温度下で３０〜１２０分間加熱して肉味を調製する。これらの条件下では、ほとんどのクレアチンはクレアチニンに変換されてしまう。
【０００９】
発明者は、肉味または塩味以外の味（特に果物味）を有することを意図した組成物にクレアチニン（これまで肉味または塩味の調味料に用いられてきた）を添加することには、当業者は思い至らないであろうと考える。当業者は、クレアチニンを添加すると、その結果として美味でない果物味と肉味との組合せが生じるのではないかと考えるであろうが、これに対して発明者は、実は結果として生じる組合せは望ましくない肉味を与えるものではないことを発見した。
【００１０】
国際公開第９７／４５０２６号は、クレアチンおよびその誘導体を含む、人間が消費するための酸性組成物であって、乾燥粉末として、または液体もしくは半流動体の形で提供される組成物を開示している。ここに開示された組成物は、冷蔵温度（４℃）では長期間にわたって安定であるが、室温下で安定であるのは比較的短い期間（たとえば最大７日）にすぎない。
【００１１】
国際公開第００／７４５００号では、アロエベラのゲル中で懸濁したクレアチンおよびその誘導体を含む組成物が開示されており、この組成物は室温下で２週間以上安定（クレアチンからクレアチニンへの変換に関して）であるが、組成物内のクレアチンの初期濃度に依存するものであった。
【００１２】
国際公開第９７／４５０２６号および国際公開第００／７４５００号のいずれも、クレアチンからクレアチニンへの変換を防ぐことが望ましいと強調しているが、いずれの文献も、人間が消費することを意図したクレアチン含有組成物へのクレアチニンの意図的な添加を示唆してはいない。
【００１３】
人間が消費するための組成物であって、その中のクレアチンが酸性ｐＨおよび室温下でも実質的に安定である組成物を提示することは大きな利益であろう。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
［発明の概要］
この発明は、クレアチンおよびその誘導体を含む、人間が消費するための組成物、特に水性溶媒中で提供される組成物に関し、より特定的には、クレアチンが水溶液中で提供される、またはクレアチンが可食支持基質内に懸濁される組成物（たとえば飲料）を生成することに関する。
【００１５】
ここで用いられる「クレアチン」という用語は、クレアチンのあらゆる生物学的利用可能な誘導体、たとえばクレアチン一水和物、クレアチンリン酸、およびその他のクレアチン塩などを包含することを意図する。クレアチン一水和物が特に好ましい。したがって「クレアチン」という用語は、文脈が許す限り広く解釈されるべきである。
【００１６】
先に説明したように、水溶液中のクレアチン分子は、特に酸性ｐＨ（すなわちｐＨ７未満）で不安定であり、クレアチニンへ変換されることが周知である（エドガーおよびシバー、１９２５年米国化学協会報第４７号、１１７９〜１１８８頁；カナンおよびショアー、１９２８年生化学報第２２号、９２０〜９２９頁（Edgar & Shiver, 1925 J. Am. Chem. Soc., 47, p.1179-1188; Cannan & Shore 1928 Biochem. J. 22, p.920-929））。このことは、生理学的に有用な量のクレアチンを含有する飲料またはその他の組成物を生成しようとする際に問題を引起こすが、それは特に、飲料が通常７未満のｐＨを有するように調合されるからである。
【００１７】
エドガーおよびシバーは、水溶液中のクレアチンとクレアチニンとの間に存在する平衡、特にｐＨの異なる緩衝剤を使用することによる平衡位置への影響について、いくつかの研究を行なった。しかし残念ながらエドガーおよびシバーの研究は、飲料およびその他の栄養組成物の調合業者にとって何ら有用な実際的手引きも提供してはいないが、それはいくつかの理由による。第１に、エドガーおよびシバーによる刊行物は極めて古く、かつ純粋に学術的関心によるものであるため、飲料調合業者に参考にされるとは考えられず、飲料調合と直接の関係を有さない。第２に、および最も重要なことには、エドガーおよびシバーは極めて希釈したクレアチン／クレアチニン溶液（０．００１Ｍ、０．０１４９ｇクレアチン／１００ｍｌと等価、分子量が１４９のクレアチン一水和物）を用いて実験を行なっている。これらは純粋に分析的な考察には適当であるが、高濃度のクレアチン（０．１５ｇクレアチン一水和物またはそれと均等物／１００ｍｌを上回るもの）を含み、飲料中で生理学的に有用なクレアチン量をもたらすことを意図した系に対しては何ら関連性を有さない。第３に、エドガーおよびシバーは、クレアチンからクレアチニンへの変換およびその逆の際に生じるｐＨの変化を勘案することを怠っている。このような変化は、エドガーおよびシバーが用いた極めて希釈したクレアチン／クレアチニン混合物を使用すればおそらく無視できるであるが、この発明者が発見したように、飲料に望ましいような高濃度では重大な影響を有するであろう。カナンおよびショアーによる等しく古い刊行物にもほぼ同様の評価が当てはまる。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
クレアチンの不安定性に対するすぐに考え付く解決法は、単に組成物中のクレアチンの初期濃度を増加させて、生理学的に有用なクレアチン量が長期間にわたり組成物中に存在するようにすることであろう。しかしこの手法は、クレアチンからクレアチニンへの変換の防止または抑制と全く無関係である。さらに、クレアチンがクレアチニンへ大量に変換するとおそらく組成物のｐＨが増加することになるが、それはこの反応が水素イオンの除去を伴うからである。これは美味性を変化させ得るため、消費者にとって望ましいことではないであろう。さらにクレアチンは、（特に通常飲料を貯蔵する低い温度、たとえば３〜５℃で）水溶性があまり高くなく、したがって超過してはならない有限の最大初期クレアチン濃度が存在する。加えて、飲料調合物内に溶解していないクレアチンがあることは消費者にとって魅力的ではないため、過度のクレアチンを含めることは望ましくない。クレアチンの溶液から始めると、結果として飲料の溶液中の最大クレアチン量はより少なくなるが、それはクレアチンのうちいくらかがクレアチニンに変換されるためである。発明者は以下に説明する代替的な手法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
第１の局面でこの発明は、人間が消費するための組成物であって、クレアチンと、その中のクレアチンを水性溶媒内で実質的に安定（以下に定義する通り）にするのに十分な量のクレアチニンとを含む、組成物を提供する。
【００２０】
組成物のクレアチニン内容物は、クレアチンからクレアチニンへの変換の結果として組成物の貯蔵中に生じるのではなく、最初から（すなわち最終組成物の形成時から）存在する。後に記載の教示から、少なくともいくつかの実施例で、組成物の生成（すなわち最終組成物の形成に先立つ処理）は、クレアチンからクレアチニンへの意図的な変換を伴い得ることが明らかであろう。最初からあるクレアチンが安定であることは商業的に望ましいが、それは、これにより組成物のクレアチン含有量の正確な特徴付け（たとえば包装などに表示され得るもの）が可能となり、さらに消費者が消費クレアチンの正確な用量を計算できるからである。
【００２１】
この組成物は、液体、半流動体、可食基質、または後に水で溶かすための固形物として生成され得る。クレアチンは液体をもたらすために水で溶解され得る。
【００２２】
半流動体または支持基質内でクレアチンが懸濁される組成物について、組成物のクレアチン内容物は、半流動体またはその他の支持基質内への混和に先立って微粉化プロセス（たとえば破砕、粉砕、粉末化など）を受けて、結果としての組成物の舌触りが受入れられないほどざらつくのを防ぐことが好ましい。
【００２３】
支持基質は、もしこれがある場合、認定された食材であり、こうしてこの発明に従う組成物は、固形クレアチンが食材内に懸濁するようにクレアチンおよびクレアチニンを補った、他では従来の食材の形をとることが好都合である。この発明の組成物に好適な支持基質を表わし得る食材の例には、延ばして塗ることができる固形物、たとえば乳塗布食品またはチーズ塗布食品、マーガリン、キャビア（主にダンゴウオキャビア）塗布食品、およびその他の練り魚肉、肉塗布食品などが含まれる。その他の好都合な支持基質としては、糖質またはその他の炭水化物を含む支持基質、たとえば液体もしくは固形の蜂蜜、廃糖蜜、シロップ（たとえばコーンシロップ、ブドウ糖シロップ）、糖蜜、グリセロールまたは「マキシム・エナジー・ジェル（Maxim Energy Gel）」（Ｒ）などがある。
【００２４】
所望であれば、溶液および／または組成物全体の粘度は、増粘剤、ゲル化剤などを添加して増大され得る。このような成分は食品業界では周知であり、これにはたとえば植物性多糖やガムなど、たとえばガラクトマンナン、デキストラン、グアールガム、イナゴマメガム、キサンタンガムなどが含まれる。
【００２５】
このような増粘剤やゲルなどは、所望であれば支持基質の形をとり得る。１つの好ましい可食基質は、濃縮したアロエベラ抽出物から調製したゲルを含む。すなわち、５ｇｍのクレアチンを、(たとえば）６０ｍｌの濃縮アロエベラゲル（たとえばアロエ・コモディティーズ・インターナショナル・インコーポレイテッド、農家部門（Aloe Commodities Int. Inc., Farmers Branch）、ＴＸ７５２３４から入手可能なものなど）と混合させることで、滑らかなクリーム状のペースト（練り出すことのできるチューブ内の包装に好適）を調製できる。加えて支持基質は、半流動体の食材、たとえばヨーグルトまたはその他の半流動体の食材などを含み得る。
【００２６】
以前に発明者は、水溶液中のクレアチンからクレアチニンへの変換はクレアチニン自体によって著しく抑制可能であり、すなわちクレアチンとクレアチニンとの混合物はすぐに平衡に達することができ、クレアチンは実質的に安定することを発見した。何らかの特定の理論に束縛されることを望んではいないが、発明者がこの所見の説明として考えるのは、クレアチンからクレアチニンへの変換が可逆反応であることである。今や発明者は、溶液中のクレアチンと、適当な量のクレアチニンとを与えることで、クレアチンからクレアチニンへの変換は（酸性組成物でも）、室温（すなわち２〜３９℃）でも、または長期間（３０〜９５日以上）でも大幅に抑制、あるいは実質的に防止され得ることを発見した。したがっていくつかの実施例で、全体としての組成物は、組成物のクレアチン内容物の安定性に大きな悪影響を与えずに、酸性（すなわちｐＨが７．０未満）あるいはアルカリ性（たとえば７．０〜８．５）であるように都合よく選択可能である。特に組成物のｐＨは２．５〜８．５、好ましくは３．０〜７．０、最も好ましくは４．５〜６．５であることが望ましい。典型的に組成物のｐＨは４．５〜５．５の範囲であり、これは人の味覚にとってすっきりとした酸味を有し、かつ酸味が強すぎることもない。
【００２７】
この発明に従う組成物は実質的に安定であるため、クレアチンは、室温で長期間貯蔵した後、生理学的に有用な量で、当該技術の教示に反して酸性調合物中でも提供され得る。生理学的に効果的なクレアチン量は、初期基準線レベルに対して、組成物の反復的な消費後に主体の組織のクレアチン含有量を測定可能に増加させるのに十分な量である。主体の組織のクレアチン含有量の測定方法は公知である（たとえばハリス、ハルトマンおよびノーデスジョ（Harris, Hultman & Nordesjo)（１９７４年）「休息中の人大腿四頭筋の生検標本におけるグリコーゲン、糖分解中間物および高エネルギリン酸塩  方法および値の分散（Glycogen, glycolytic intermediates and high energy phosphates in biopsy samples of musculus quadriceps femoris of man at rest. Methods and variance of values）」スカンジナビア臨床実験研究報（Scand. J. Clin. Lab. Invest.）第３３号、１０９〜１２０頁；ダネット、ハリスおよびオーム（Dunnett, Harris & Orme）（１９９１年）「馬の筋肉におけるクレアチンリン酸、クレアチンおよびクレアチニンの逆相イオン対の高性能液体クロマトグラフィ（Reverse phase ion-pairing high performance liquid chromatography of phosphocreatine, creatine and creatinine in equine muscle）」スカンジナビア臨床実験研究報第５１号、１３７〜１４１頁）。
【００２８】
ここで「実質的に安定」という用語は、クレアチン／クレアチニン組成物であって、最終生成物の調合直後の組成物におけるクレアチンの少なくとも７５％（好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも８５％）が、少なくとも７日間の（好ましくはそれより長い）貯蔵期間変化せず、したがってクレアチニンに変換されない、クレアチン／クレアチニン組成物を指すものとして定義される。クレアチンの安定性はｐＨに依存し、ｐＨは温度の上昇とともに減少する。（「最終生成物」とは、すべての処理および生成工程が完了した後に生成された組成物である。）
【００２９】
発明者は、２０℃の温度上昇によってｐＨが０．３単位も減少し得ることを発見した。組成物がさらされることになる温度範囲（たとえば冷蔵庫または倉庫内）は典型的に２〜５０℃である。組成物は、２〜５０℃の温度範囲で、貯蔵中少なくとも３０日、より好ましくは６０日、最も好ましくは少なくとも１２０日の期間を経ても７５％のクレアチンが残るのに十分に安定であることが望ましい。安定性を特定するには、ｐＨであって、そこで安定性が必要とされるｐＨ（これは溶液の貯蔵温度で測定されることになる）を特定する必要がある。緩衝液の加熱または冷却でｐＨは変わり、溶液が貯蔵され得る温度範囲にわたってクレアチン：クレアチニンの平衡比は大きく変動し得る。しかし組成物が５０℃で安定であれば、そのクレアチン含有量はより低い温度で貯蔵しても減少しないであろう。
【００３０】
先に言及したように、クレアチンの安定性を達成するためのクレアチニン対クレアチンのモル：モル比は溶液のｐＨに依存するとわかっており、ｐＨ７の場合の１：２からｐＨ４．２５の場合の３．８：１の範囲にある。クレアチニン対クレアチンのモル：モル比は１０：１以下が好ましい。５：１以下の比がより好ましい。（クレアチンは不活性成分であるため）クレアチニン対クレアチンの比はあまり高くないのが最も好ましく、最も好ましいｐＨは５〜７であり、ここでクレアチニン対クレアチンのモル：モル比は約１．２：１〜１：２の範囲である。
【００３１】
この発明の目的のためには、クレアチニンをクレアチンに純粋な物質として添加しても、または、好ましくは低いｐＨ、たとえばｐＨ２〜３で溶液中のクレアチンを加熱してクレアチニンを現場で（in situ）製造してもよい。溶液は少なくとも３０分間、９０℃以上に加熱またはここに保つことが最も好都合であるが、それは、これらの条件が商業販売用の液体の滅菌に最もよく用いられるものであるからである。（代替的に、より高い温度へより短い期間加熱、またはその逆によって、等価の滅菌「熱供給」を与えることもできる。）他の実施例では、クレアチン溶液をｐＨ２〜３で数時間加熱してから、これをより高いｐＨ（たとえばｐＨ７）のクレアチン溶液に添加し、最終混合物を所望のｐＨ（たとえばｐＨ５）に調節することによって、クレアチニンを調製することもできる。必要であれば、次に溶液を上述の条件下で再滅菌してもよい。この調製方法によって、クレアチンからクレアチニンへのさらなる変換はほとんどまたは全くなくなるであろうし、これら２つの溶液の混合直後から安定性が確実となる。この方法には利点があるが、それは、クレアチンは冷蔵庫内で冷やされると水に対して溶解度があまり高くないのに対して、クレアチニンははるかに溶解度が高いからである。この方法で安定なクレアチン溶液をもたらすことにより、他で達成し得るよりも比較的大量の安定なクレアチンを含有する飲料を調合することが可能である。したがってこの手段により、最大１．２ｇクレアチン／１００ｍｌ（または１．４ｇクレアチン一水和物）を含有する、冷蔵に好適な飲料、または最大１．５ｇクレアチン／１００ｍｌ（または１．７ｇクレアチン一水和物／１００ｍｌ）を含有する、１８〜２５℃の室温下での貯蔵に好適な飲料を生成することが可能である。
【００３２】
この発明のさらなる利点は、（ｐＨおよび温度についての妥当な条件下で）利用可能な最大溶解クレアチン濃度を含む組成物を、最少限の必要クレアチン量の使用で、安定した調合物内に生成することが可能となり、このため過剰なクレアチンを使用する必要がないことである。
【００３３】
この発明の好ましい実施例は、特に酸性ｐＨ（すなわちｐＨ７未満）の水溶性飲料であって、特にｐＨが４〜６．５、とりわけ４．５〜５．５の範囲であり、１００ｍｌ当り少なくとも０．１５ｇのクレアチン（またはクレアチン一水和物など）を含む水溶性飲料である。好ましくは、飲料は１００ｍｌ当り少なくとも０．３ｇのクレアチン（またはクレアチン一水和物など）、より好ましくは１００ｍｌ当り少なくとも０．４ｇ、最も好ましくは１００ｍｌ当り少なくとも０．５ｇを含む。
【００３４】
組成物は、追加の成分（たとえば調味料）のない水中のクレアチンおよびクレアチニン溶液、たとえば、当業者には周知のプロセスを用いた鉱水または炭酸水などの水中の溶液を含み得る。
【００３５】
しかし組成物は、美味、安定性、風味または栄養品質を向上させるための１つ以上のさらなる成分を含むことが好ましい。これらのさらなる成分は電解質を含むことができ、または、ビタミン、脂質、タンパク質、炭水化物、ポリオール（たとえばエチレングリコール、グリセロール、ソルビトールなど）、アミノ酸、微量元素、色素、調味料、人工甘味料、天然の健康および機能向上物質、酸化防止剤、安定剤、保存料、ならびに緩衝剤からなる群から選択され得る。
【００３６】
ビタミンをこの発明の組成物に含めることは有利である。ビタミンは、その１日所要量（ＲＤＡ）のうち２０〜１００％の範囲の量で添加され得る。以下は有用なビタミンのうち典型的なものである。すなわちビタミンＥ、ビタミンＣ、チアミン、リボフラビン、ナイアシン、ビタミンＢ６、フォラシン、ビタミンＢ１２、ビオチン、およびパントテン酸である。
【００３７】
場合によっては、脂質成分が望ましいこともある。タンパク質内容物は（もしあるとすれば）大豆タンパク質または乳タンパク質（たとえば乳清またはカゼイン）として存在し得る。炭水化物内容物（もしあるとすれば）または組成物は、澱粉（特に可溶性澱粉）および／または糖質として存在し得る。組成物に存在し得る糖質には、ブドウ糖、果糖、ショ糖、乳糖および麦芽糖が含まれる。
【００３８】
使用できる人工甘味料には、アスパルテーム、アセスルファムＫ、サッカリンおよびシクラメートが含まれる。ほとんどあらゆる所望の調味料が添加可能であり、最も好ましくは果物味、たとえば液果、レモン、オレンジ、パパイヤおよびグレープフルーツなどが添加可能である。しかしながら、より低い酸性ｐＨ（たとえば５．０を上回るもの）ではその他の味、たとえばチョコレート、麦芽、キャラメル、およびその他「乳状」飲料に好適な味を用いてもよい。酸味料としてクエン酸、ならびに緩衝剤としてクエン酸塩およびリン酸塩（たとえばクエン酸ナトリウムまたはリン酸ナトリウム）もまた使用可能である。飲料の酸性を調整するためにその他の緩衝剤を用いてもよい。また、生理学的に活性の量で他の天然の健康向上物質を加えてもよい。以下は有用な物質のうち典型的なものである。すなわちパウダルコ・ティー、人参、スマ・ティー、イチョウ、蜂花粉、没薬、酪酸ヒドロキシメチル、グルタミン、グルタミン含有のジ、トリ、ポリペプチド、リボース、カフェイン、およびリポ酸である。
【００３９】
保存料は、典型的に安息香酸カリウムおよび／またはソルビン酸カリウムでもたらされ得る。
【００４０】
色素は、典型的に冷水可溶の着色料、たとえばβカロチンを用いてもたらされ得る。その他の好適な色素が当業者には明らかであろう。
【００４１】
所望であれば、組成物の外観を向上させるために組成物内に混濁剤を含めてもよい。
鉱物および微量元素もまた、人間が消費するのに好適なあらゆる種類または形で添加可能である。グルコン酸塩、リン酸塩または水素リン酸塩の形でのカルシウムおよびカリウム、酸化物または炭酸塩としてのマグネシウム、ピコリン酸クロムとしてのクロム、亜セレン酸ナトリウムまたはセレン酸塩としてのセレン、ならびにグルコン酸亜鉛としての亜鉛を与えることが好都合である。典型的な量は、ナトリウムが４００ｍｇ／リットル、カルシウムが１００ｍｇ／リットル、塩化物が６００ｍｇ／リットル、カリウムが２００ｍｇ／リットル、マグネシウムが７５ｍｇ／リットル、ならびにリン５０ｍｇ／リットル、クロム１２５μｇ／リットル、セレン１２５μｇ／リットル、および亜鉛１５ｍｇ／リットルである。
【００４２】
クレアチンが完全に溶解できる液体飲料については、調製された組成物のリットル当りまたはｋｇ当りのクレアチン量（これからの一水和物として計算）は１．５ｇから２４ｇの範囲であり得るが、好ましい含有量はリットル当り約１２ｇである。通常の１杯分のサイズは２００〜７５０ｍｌの範囲であり、約２〜７ｇ、好ましくは約５ｇのクレアチンをもたらす。クレアチン補給の最初の４日間は、目標消費量は１日当り約２．０リットルであり、これを１日につき４回または５回に分けてクレアチン飽和を達成する。この後、約２〜３ｇのクレアチンを含有する、１日につき２５０〜７５０ｍｌの１杯分を与え、飽和維持に十分なレベルのクレアチンを与える。
【００４３】
半流動体またはその他の可食支持基質内のクレアチン懸濁物については、１００ｇ当りのクレアチン量は１〜８０ｇ（ここからのクレアチン一水和物として計算）の範囲であり得る。好ましい１回分のサイズは５〜１００ｇの範囲であり、２〜１０ｇ（好ましくは５ｇ）のクレアチンをもたらす。クレアチン補給の最初の４日間の目標消費量は、１日当り１０〜２５ｇを含有する懸濁物であり、これを１日に４回または５回に分けて組織内の最大クレアチン上昇を達成する。しかしより長い期間にわたり、より少ない量（たとえば４週間にわたり毎日３ｇ）を服用しても同じ効果が得られる。この後、３〜５ｇのクレアチンを含有する懸濁物の一杯分を毎日与え、維持レベルのクレアチンをもたらす。
【００４４】
この発明はまた、上に定義した組成物の製造方法にも関する。これに従い第２の局面で、この発明は人間が消費するための組成物の製造方法を提供し、この方法は、同じ組成物内に、クレアチンと、組成物を水性溶媒と混合した際にクレアチニンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンとをもたらす工程を含む。水性溶媒は水または水溶液であることが好ましい。この発明は通常さらに、水または水溶液を、好ましくは組成物内の実質的にすべてのクレアチンおよびクレアチニンを溶解するのに十分な量で与える工程を含むことになる。
【００４５】
当業者には、組成物への成分の添加順序は一般に重要でなく、この発明の目的を達成するどのような工程の順番でもよいことが明らかであろう。したがって、たとえば水または水性溶媒に固形のクレアチンおよび固形のクレアチニンを、（同時にまたは別々に）添加でき、あるいは水または水性溶媒を固形のクレアチンおよび／またはクレアチニンに加えてもよい。
【００４６】
したがって、一実施例でこの発明の第２の局面は、人間が消費するためのクレアチン含有の組成物であって、クレアチンが実質的に安定（ここに定義の通り）である組成物の調製方法を提供することであり、この方法は、クレアチンの溶液を生成する工程と、部分的にクレアチンをクレアチニンへ変換するのに好適な条件下にクレアチン溶液を置く工程とを含み、こうして、結果として得られる組成物内のクレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンを形成する。この方法は典型的に、好適な容器、たとえばガラスまたはプラスチックのビン、箔袋、アルミニウム缶などの中に、この組成物を包装する工程をさらに含む。
【００４７】
好ましくはこの方法では、クレアチン溶液を好適な条件下に置く工程は、溶液を平均室温よりも高温に加熱する工程を含む。好ましい一方法では、溶液を９０℃に３０分間加熱する。
【００４８】
第３の局面でこの発明は、人間が消費するためのクレアチン含有の組成物であって、クレアチンが実質的に安定（ここに定義の通り）である組成物の調製方法を提供し、この方法は、クレアチン溶液を生成する工程と、クレアチニン溶液を生成する工程と、これら溶液を混合して、結果として、クレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンがある組成物を形成する工程とを含む。
【００４９】
この方法では、クレアチニン溶液のｐＨはクレアチン溶液のｐＨよりも低いことが好ましい。クレアチニン溶液のｐＨは２〜３の範囲であることが望ましく、クレアチン溶液のｐＨは４．５〜７の範囲であることが好ましく、必要であれば最終ｐＨを所望のレベルへと調節する。
【００５０】
第４の局面でこの発明は、人間が消費するためのクレアチン含有の組成物であって、クレアチンが実質的に安定（ここに定義の通り）である組成物の調製方法を提供し、この方法は、固形のクレアチンを生成する工程と、固形のクレアチニンを生成する工程と、これら２つの固形物を混合して、その結果、固形組成物であって、水溶液中に溶解すると、クレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分なクレアチニンがある組成物をもたらす固形組成物を生成する工程とを含む。典型的にこの方法はさらに、結果としての固形組成物を実質的に溶解するのに十分な水または水溶液を加える工程を含む。所望であれば、水または水溶液を熱処理および／またはろ過によって予め滅菌してもよい。
【００５１】
第５の局面でこの発明は、人間が消費するためのクレアチン含有の組成物であって、クレアチンが実質的に安定（ここに定義の通り）である組成物の調製方法を提供し、この方法は、固形のクレアチンと固形のクレアチニンまたはクレアチニン水溶液とを生成する工程を含み、クレアチニンはクレアチンを実質的に安定（ここに定義の通り）にするのに十分な量であり、この方法はさらに、固形のクレアチニンまたはクレアチニン水溶液と固形のクレアチンとを混合する工程と、この混合物に可食支持基質を加える工程とを含む。
【００５２】
有利なことには、第２、第３、第４または第５の局面の方法を実行すれば、先に定義した第１の局面に従う組成物が得られるだろう。
【００５３】
［実施例］
実施例１
この実施例は、溶液内のクレアチン濃度を求めるのに便利な生体外検定方法に関する。
【００５４】
１．各溶液のｐＨをｐＨ計で求めた。
２．混合物を、実験室で室温（約２２℃）の暗室内に貯蔵した。
【００５５】
３．０〜１２４日の期間の後、２〜３ｍｌの溶液を標本抽出し、直後または１〜２日以内に分析するまで−３０℃で冷凍貯蔵した。
【００５６】
４．解凍した標本を蒸留水内で溶解して好適な希釈物をもたらし、各々についてのクレアチン濃度をハリス他による方法（スカンジナビア臨床実験研究報第３３号、１９７４年、１０９〜１２０頁）で求めた。簡単には、（最終濃度で）１００ｍＭトリエタノールアミン緩衝液ｐＨ８．５、１０ｍＭ酢酸マグネシウム、１ｍＭのＥＤＴＡ、３０ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭホスホエノールピルビン酸塩、２ｍＭアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、０．１８ｍＭニコチンアミド−アデニン−ジヌクレオチドの還元型（ＮＡＤＨ）、クレアチンキナーゼ（ＣＫ）、ピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）、および乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の存在の下で検定を行なった。クレアチン濃度は、３４０ｎｍで測光法的に測定したＮＡＤＨの酸化から求めた。
【００５７】
ＣＫ：Ｃｒ＋ＡＴＰ→ＰＣｒ＋ＡＤＰ
ＰＫ：ＡＤＰ＋ＰＥＰ→ＡＴＰ＋ピルビン酸塩
ＬＤＨ：ピルビン酸塩＋ＮＡＤＨ→乳酸塩＋ＮＡＤ
【００５８】
実施例２
この試験の目的は、クレアチンを異なるｐＨにおいて９０℃で加熱して、溶液を最大１２４日間室温で放置した際の、クレアチンの安定性を判定することであった。９０℃では、クレアチンからクレアチニンへの変換は一般に極めて急速に起こる。
【００５９】
ｐＨ３，４，５，６，７の１００ｍｌ、０．１Ｍクエン酸−０．１Ｍリン酸カリウムの緩衝剤における２ｇのクレアチン一水和物の水中の溶液を、９０℃で３０分間加熱した。溶液を急速に冷却し、（変化している）ｐＨを再び測定してから、実施例１に記載のように室温に放置した。７，１５，２９，４３，５７，８９，１２４日後に部分標本を取り、
これらを−３０℃で貯蔵してからクレアチンについて分析した。各標本のｐＨを測定した。クレアチニンの濃度を、開始レベル（２ｇクレアチン一水和物）とクレアチンの測定レベル（一水和物から計算）との差から算出した。
【００６０】
結果
図１および図２に示すように、３０分の加熱後にはクレアチンからクレアチニンへの急速な変換があった。しかし変換の程度は溶液のｐＨに依存し、ｐＨの低下につれて漸進的に大きくなった。３０日間貯蔵すると、クレアチン濃度にはさらなる減少が起こった。３０日目と１２４日目との間では、クレアチンのレベルはすべてのｐＨで安定性を達成した。図３は、異なるｐＨでの１２４日目（１７．７週）でのクレアチニン対クレアチンのモル：モル比を示し、ここから、クレアチンを最大限に安定にするのに必要なクレアチニンの量を推定することが可能であった。
【００６１】
結論
クレアチンを含みクレアチニンを含まない組成物から始まって、２２℃で保温した溶液が安定性を達成するには４週間以上かかる。安定性を達成するのにかかる時間はｐＨが下がるにつれて増加するが、それはより多くのクレアチンがクレアチニンへ変換されなければならないからである。クレアチン溶液を安定にするのに必要なクレアチニンの量は溶液のｐＨに依存する。一般に、必要なクレアチニンの量はｐＨの減少につれて増加する。しかし各々のｐＨについて、最大限の安定性を達成するであろうクレアチニン対クレアチンの比を予測することは可能である。
【００６２】
実施例３
この試験の目的は、９０℃で３０分間混合物を加熱した後、異なるｐＨでのクレアチンの安定性に対する、クレアチン一水和物と１：１（ｗ／ｗ）の割合にあるクレアチニンの影響を判定することであった。
【００６３】
ｐＨ３，４，５，６，７での０．２Ｍクエン酸塩−０．２Ｍリン酸カリウムの緩衝剤１００ｍｌ内に、量にして１．５ｇのクレアチン一水和物と１．５ｇのクレアチニンとを溶解した。溶液を９０℃で３０分間加熱してから冷却し、ｐＨを再び測定し、室温（２２℃）で最大９５日間放置した。
【００６４】
結果
図４および図５に示すように、ｐＨ６および７で加熱期間中クレアチンの損失はなかった。ｐＨ５，４，３では、時間とともに小さな、しかし漸進的に大きくなる損失が生じた。
【００６５】
すべてのｐＨでクレアチンの安定性が生じた。ｐＨ５，６，７では、クレアチン濃度が増加する傾向すら見られた。
【００６６】
結論
十分な量のクレアチン（すなわちｐＨ５，６，７の場合は、重量比クレアチニン：クレアチン一水和物１：１以下）の存在の下では、クレアチンは、９０℃で３０分間加熱しても極めて安定である。クレアチニンの量が十分でない場合（ｐＨ３および４の標本の場合）９０℃で３０分間加熱した結果、残るクレアチンをこの後少なくとも９５日間安定にするのに十分なクレアチニンがやはり生成された。
【００６７】
実施例４
この実施例は、クレアチン溶液を加熱してクレアチニンを形成し、クレアチンを含有する味付けした飲料に加えることで、実質的に安定な濃度をもたらす方法を例示する。同時に、残るクレアチンの濃度がその最大可溶度に近く、これが冷蔵庫内で３℃で沈殿しないようにすることが望ましい。これはほとんどの飲料についての要件であるが、それは、飲料は消費前に冷蔵庫内で冷やされるであろうからである。
【００６８】
工程１  ５ｇのクレアチン一水和物を１００ｍｌの０．１Ｍクエン酸（ｐＨ３）内に溶解し、９０℃で２時間加熱した。これによってほとんどのクレアチンがクレアチニンに変換した。溶液を室温まで冷却した。
【００６９】
工程２  加熱せずに、室温でｐＨ５の６５０ｍｌの０．１Ｍクエン酸緩衝剤内で５ｇのクレアチン一水和物を含有する溶液を調製した。さらに、溶液は１５％のアロエベラ汁、調味料および甘味用デキストロースを含有した。
【００７０】
工程３  次に工程１および工程２からの溶液を混合し、９０℃で３０分間加熱して混合物を滅菌し、次にガラスまたはプラスチックのビンに入れて２２℃で貯蔵した。工程２で添加された５ｇクレアチン一水和物は、最終生成物の調合後、実質的に安定であり続けた。
【００７１】
上述の飲料を３℃の冷蔵庫内に入れてもクレアチンは沈殿しなかった。クレアチニンの存在の下では、３℃の冷蔵庫内のクレアチンの最大溶解度は約１．２ｇ／１００ｍｌ（約１．４ｇのクレアチン一水和物と等価）であるとわかった。
【００７２】
実施例５
当業者には、緩衝溶液を加熱するとｐＨが減少することは周知である。したがって、２０℃でｐＨが４．７５である０．１〜０．２Ｍクエン酸リン酸緩衝剤は、４０℃まで加熱するとｐＨ４．５に変わる。逆に、緩衝溶液を冷却するとｐＨは上昇する。これらのｐＨの変化は、図３で図示した関係に従う安定性を達成するのに必要なクレアチン：クレアチニンのモル：モル比に影響する。したがってこの比はｐＨ４．７５での約１．７：１からｐＨ４．５での２．５：１に変わる。したがって、２０℃で安定な組成物は、４０℃で貯蔵されると新たな安定の組成物に変わることになる。この実施例の目的は、３．８〜８．２５を含むｐＨ範囲にわたり、２℃、２２℃および３９℃で安定性に必要な比を確立および比較することである。
【００７３】
実験手順
１．ｐＨ３．８およびｐＨ８．２５での、０．２Ｍクエン酸−０．２Ｍリン酸カリウムの緩衝剤を調製した。
【００７４】
２．上記１の溶液を用いて、以下の溶液を室温で調製した。
ａ）  ｐＨ３．８での緩衝剤内の６７．０６ｍＭクレアチン一水和物（１００ｍｌ中１ｇ）
ｂ）  ｐＨ３．８での緩衝剤内の６７．０６ｍＭクレアチニン（１００ｍｌ中０．７５８ｇ）
ｃ）  ｐＨ８．２５での緩衝剤内の６７．０６ｍＭクレアチン一水和物（１００ｍｌ中１ｇ）
ｄ）  ｐＨ８．２５での緩衝剤内の６７．０６ｍＭクレアチニン（１００ｍｌ中０．７５８ｇ）
【００７５】
３．溶液２ａおよび２ｃをさまざまな割合で混合し、以下のｐＨ値を有する６７．０６ｍＭクレアチン一水和物の溶液を得た。
３．８，４．０，４．２，４．４，４．６，４．８，５．０，５．２，５．４，５．６，５．８，６．０，６．２５，６．５，６．７５，７．０，７．２５，７．５，７．７５，８．０，８．２５
【００７６】
４．同様に溶液２ｂおよび２ｄをさまざまな割合で混合し、上記３で特定したのと同じｐＨ値での６７．０６ｍＭクレアチニンの溶液を得た。
【００７７】
５．工程３からのクレアチン一水和物溶液と、工程４からのクレアチニン溶液とを混合し、ねじ蓋ガラス管内の１０ｍｌの最終体積で、表１に示すクレアチニン対クレアチンのモル：モル比（最初に図３から導き出したもの）をもたらすのに必要な正しいｐＨ値の溶液を形成した。三部の標本を準備した。
【００７８】
６．標本に蓋をし、９０℃で３０分間加熱滅菌した。
７．１組の標本を２℃、別の組を２２℃、そして最後の組を３９℃で貯蔵した。
【００７９】
８．５週後および６週後に、ｐＨ測定と、実施例１に記載の酵素方法によるクレアチン分析とのための部分標本を取り、６週目にはアルカリピクリン酸法によるクレアチニンについての標本を取った（これには、英国ドーセット、プールのシグマ−オールドリッチ・カンパニー・リミテッド（Sigma-Aldrich Company Limited, Poole, Dorset, UK）により提供されたキットである「クレアチニン診断キット（Creatinine Diagnostic Kit）」終点法を用いた）。クレアチンとクレアチニンとの化学的な類似性にもかかわらず、クレアチンはアルカリピクリン酸法でいかなる反応も示さない。
【００８０】
表１  実施例５で最初に加えられるクレアチニン対クレアチンのモル：モル比（すべての場合においてクレアチニン＋クレアチンの最終濃度合計は６７．０６ｍＭである。）
【００８１】
【表１】
2004520060.tif 000003
【００８２】
結果
３９℃で保温した溶液からの標本のクレアチン含有量の分析では、５週目と６週目との間でいかなる有意の変化も示されなかった。濃度変化の平均は＋０．７６（ＳＤ１．３）ｍｍｏｌ／ｌであり、これはリットル当りのクレアチン一水和物のわずか０．１１３ｇの上昇に対応する。これら標本における５週目から６週目での百分率の変化は３．１（３．８）％であり、これはこの方法の分析誤差と同じオーダである。
【００８３】
図６に示すように、３９℃でのクレアチニン対クレアチンの比は、最終ｐＨが４．６（約２．１：１）から３．７（約１０．０：１）である標本で急速に増加している。ｐＨ５．２からｐＨ８．８では、比は１．０以下である。６．０を上回るｐＨでは、比はほぼ線形に０．９から、ｐＨ８．８での０．６の比へ減少する。
【００８４】
同じｐＨから、およびクレアチンとクレアチニンとの等しい濃度から始まっているにもかかわらず、２，２２，３９℃での６週間の保温後では、ｐＨの明らかな違いがあった（表２）。すべての場合において、３９℃で保温された溶液は最も低いｐＨ、および２℃での溶液は最も高いｐＨを有していた。達成された最終ｐＨは以下のａ）およびｂ）の直接の結果である。
【００８５】
ａ）  溶液の水素イオン活動に対する温度の直接の影響。なぜなら温度の上昇はｐＨの減少を引起すからである。
【００８６】
ｂ）  水素イオンを取除きｐＨを上昇させるプロセスであるクレアチンからクレアチニンへの変換、または水素イオンを放出しｐＨの減少を引起すクレアチニンからクレアチンへの変換の影響。これはクレアチンとクレアチニンとの濃度の平衡に達するまで生じる。あらゆる変化の程度は、クレアチンおよびクレアチニンの初期濃度がどれだけ平衡にあるものからであるかに依存し、クレアチンまたはクレアチニンのいずれかのみから開始した場合（たとえば実施例２）に最大となる。これは遅いプロセスであることがあり、図２に示すように、最初はクレアチンのみからなる低いｐＨの溶液で最大８週かかることがある。（実施例２の保温温度は２２℃であるため、３９℃では平衡に達するまでわずかに短い時間が予想される。）クレアチンからクレアチニンへの相互変換が引起すｐＨの変化の大きさは、クレアチンおよびクレアチニンの絶対濃度と、使用する溶媒の緩衝能とに依存する。しかしこれらの要因を知ることによって、既知の最終組成物ならびにｐＨを有するクレアチンおよびクレアチニンの溶液の調製が可能となる。
【００８７】
表２  平衡に達することを可能にするための６週間の保温後における０．２Ｍクエン酸リン酸カリウム緩衝剤中で生成したクレアチンおよびクレアチニンの６７ｍｍｏｌ／ｌ（組合された濃度）の溶液のｐＨに対する温度の効果。
【００８８】
【表２】
2004520060.tif 000004
【００８９】
（開始ｐＨ値は実質的に、２２℃で保温した標本について示したものと同じであった）。
【００９０】
同じ初期ｐＨで調製された溶液のクレアチニン対クレアチンの最終モル：モル比は、３組の保温で同一ではなかった。しかし図７に示すように、３つの温度についてのクレアチニン対クレアチンのモル：モル比は、これらが各溶液の最終ｐＨと比較された場合には互いに極めて近かった。したがって異なったｐＨのクレアチンとクレアチニンとの溶液の平衡のモル：モル比は主にｐＨにより影響を受け、温度からの影響は受けない。
【００９１】
図８は、２２℃で６週間保温した後における異なるｐＨでの溶液のクレアチニン対クレアチンのモル：モル比と、このデータに最もよく一致する７次多項式曲線（回帰係数ｒ＝１．００）とを示す。この線で予想される比は、２２℃で１７．７週間保温した後に得た図３に示すものと同一であるが、ここでは溶液は最初クレアチンのみからなり、クレアチニンはなかった。これはこの実施例でのデータを裏付ける。
【００９２】
議論および結論
図３におけるのに近いモル：モル比のクレアチン対クレアチニンからなる溶液から始まってこれを平衡にすると、２℃から３９℃で保温した際には６週以内に安定性に達し、３９℃で保温した場合には５週目までに安定性に達した。３つの温度すべてにおいて、平衡にはもっと早く達していたと十分考えられる。図６から図８に示す結果は、互いに安定な平衡にある際のクレアチンおよびクレアチニンに関するものであり、これを用いて、３．８から８．８のどのｐＨについても、クレアチニン対クレアチンのモル：モル比であって混合後すぐに安定な平衡になるものを形成することができる。
【００９３】
室温（２２℃）で最終ｐＨが４．６の場合、クレアチニン対クレアチンの比は２．１：１であった。これはクレアチン含有の安定した飲料にとって実際的であると考えられる上限である。最終ｐＨ４．６未満では、クレアチンの安定性を維持するためのクレアチニン量は余りにも材料の無駄であり、実際的ではない。最終ｐＨが５．２での比は、約１．０：１と実際的なレベルであり、酸性ｐＨを有する美味な飲料をもたらす。比が１．０：１未満のｐＨを有する組成物もまた実際的であり、材料の経済性という利点を有するが、酸味がそれほどなく、美味で劣るという不利な点がある。
【００９４】
冷蔵（たとえば２℃）した場合、飲料に有用であると勧められる組成物は、室温での上述のものと類似する。３９℃（高い室温の極値と考えられる）では、クレアチニン対クレアチンのモル：モル比１．０：１を支持する最低ｐＨは５．２〜５．５であり、飲料にとって組成物の実際的な範囲の最低ｐＨを定める。
【００９５】
平衡のクレアチン対クレアチニンの比に影響を与える最も重要な要因はｐＨである。クレアチンとクレアチニンとを、特定のｐＨでこれらが平衡になる割合で混合すると、これら組成物、さらにはｐＨもまたすぐに安定となる。初期組成物が平衡状態の一辺に片寄っていれば、各々についての濃度は平衡での濃度に向かって動く。これがクレアチニンの生成を伴う場合、組成物のｐＨは上昇し、一方でこれがクレアチンの生成を伴えばｐＨは減少する。ｐＨが変わる程度は、平衡に達するために生じなければならないクレアチンまたはクレアチニンの絶対的変化と、溶媒の緩衝能とに依存することになる。平衡に達するのにかかる時間は、初期モル：モル比がどれだけ平衡での比と異なるかによって決定される。
【００９６】
加熱または冷却からのｐＨへの直接の影響は、逆にされなければ、クレアチン／クレアチニン相互変換を新たな平衡状態へと駆り立てることになる。既に平衡にある溶液に冷却（たとえば２℃での冷蔵）を行なうと、その影響として、クレアチニンを犠牲にしてクレアチン含有量が増加する。これにより、冷却に伴う初期（直後）のｐＨ増加が或る程度引戻され、この後なお初期値よりも高い値で落ち着き、クレアチニン対クレアチンのより低いモル：モル比を支持する。新たな平衡に達するのにかかる時間は、低いｐＨで最大となる。加熱では逆のことが起こり、ここでｐＨの初期減少は、クレアチンおよびクレアチニンの組成物が最初に平衡にあれば、初期ｐＨに向かって或る程度引戻される。最終的にｐＨは加熱前よりも低いｐＨで落ち着き、組成物のクレアチニン対クレアチンのモル：モル比はより高くなる。温度を上昇させることでｐＨを減少させることは常に、温度を減少させることでｐＨを（同じ大きさで）増加させるよりも、クレアチニン対クレアチンのモル：モル比でより大きな変化を引起こす。しかし平衡の達成は一般に、溶液が冷却されるよりも加熱される際に最も速い。低いｐＨの溶液の場合、新たな平衡に達するための時間はかなり長くなることがある。
【００９７】
クレアチンおよびクレアチニンの濃度が平衡からかなり離れた組成物を調製し、かつこれら溶液を次に長期間にわたり加熱または冷却する場合、上述の要因の両方が当てはまるであろう。しかしこれらの場合すべてにおいて、基礎液（すなわち添加したクレアチンおよびクレアチニンがない溶液）の加熱または冷却の、ｐＨに対する直接の影響を知っていれば、かつ組成物の調製の際に図６から図８に記載のクレアチニン対クレアチンのモル：モル比を適用することによって、変化の程度を最小限にできる。
【００９８】
上で得られたデータに基づき、表３は、平衡にある異なるｐＨの溶液のクレアチニン対クレアチンのモル：モル比と、５００ｍｌ飲料中のクレアチン（一水和物として計算）およびクレアチニンの対応する濃度とを示す。便宜上、クレアチン自体の濃度をすべての場合において５ｇクレアチン一水和物に固定し、クレアチニンの濃度をこれに従って変動させた。
【００９９】
表３  ２２℃で６週以上貯蔵した、異なるｐＨの５００ｍｌ飲料のクレアチンおよびクレアチニンの推定含有量
【０１００】
【表３】
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【０１０１】
実施例６
この実施例は、この発明に従う酸性組成物の詳細な調合を説明する。
【０１０２】
組成物は乾燥粉末の形をとり、これを水に添加して、クレアチン、クレアチニンおよびアロエベラを含む食材であって、クレアチンが実質的に安定であるものを形成する。
【０１０３】
材料
デキストロース一水和物  ３００ｇ
クエン酸（一水和物）  ５０ｇ
ペクチン（安定剤）  ６．０ｇ
塩  ５．０ｇ
クエン酸三ナトリウム（二水和物）  １３０ｇ
ベータカロチン粉末  ３．０ｇ
塩化カリウム  ２．９ｇ
グレープフルーツ調味料  ２．９ｇ
リン酸三カルシウム  ２．１ｇ
重炭酸マグネシウム  ２．１ｇ
予混合ビタミン  １．８ｇ
レモン調味料  １．４ｇ
オレンジ調味料  １．４ｇ
アスパルテーム  １．０ｇ
クレアチン一水和物  １４９ｇ
クレアチニン  １１３ｇ
凍結乾燥アロエベラ抽出物  ４４ｇ
合計８１５．６ｇ
上記混合物約７５ｇは、１リットルの基質に懸濁、または１リットルの水に溶解すると、１杯分３３０ｍｌにつき、約４．４ｇのクレアチン、８．５ｇの炭水化物、１．２５ｇのアロエベラ抽出物（２５０ｍｌ汁と等価）、エネルギ３４ｋｃａｌ（支持基質のカロリー含有量を０と仮定して）、カルシウム、カリウム、マグネシウムおよびビタミン（ビタミンＥ３．４ｍｇ、ビタミンＣ１６．２ｍｇ、チアミン０．３ｍｇ、リボフラビン０．４ｍｇ、ナイアシン５ｍｇ、ビタミンＢ６  ０．４ｍｇ、フォラシン８５μｇ、ビタミンＢ１２  ０．９μｇ、ビオチン０．０８ｍｇ、およびパントテン酸２．２ｍｇ）ならびに微量のタンパク質、脂肪および繊維質をもたらす。溶液は約５．０のｐＨを有する。
【０１０４】
クレアチンは室温で少なくとも７日間実質的に安定である。
実施例７
この実施例では、可食支持基質内に、クレアチンと、室温でクレアチンを実質的に安定にするのに十分な量のクレアチニンとの懸濁物の生成方法を例示する。
【０１０５】
１００ｍｌの０．１Ｍクエン酸（２．５〜３のｐＨをもたらす）の中に、クレアチン一水和物（１．７ｇ）を溶解し、溶液を９０℃で５時間加熱する。これによりクレアチンのうち７５〜１００％がクレアチニンに変換され、次に、１００ｍｌの０．１Ｍリン酸カリウム溶液を加えてｐＨを５．０まで上昇させる。次にキサンタンガム４ｇを添加し、ガムが溶解するまで加熱を続ける。次に混合物を４０℃に冷却する。２０ｍｌの水中の微粉化したクレアチン２２ｇのスラリーを添加し、混合物を３分間、ボルテックスミキサを用いてよくかき混ぜ、微粉化したクレアチンが均一に懸濁したゲルをもたらす。この後、混合物全体を急速に室温まで冷却し、この時点で懸濁物は１００ｍｌにつき１０ｇのクレアチン含有量を有する固形または半流動体のゲルを形成し、これは２２℃で少なくとも３０日間実質的に安定である。
【図面の簡単な説明】
【０１０６】
【図１】（実施例２に記載のように）異なるｐＨの溶液中のクレアチン濃度（１００ｍｌ当りのｇとして）の、時間に対するグラフである。
【図２】（実施例２に記載のように）異なるｐＨの溶液中のクレアチン濃度（初期濃度の百分率として）の、時間に対するグラフである。
【図３】（実施例２に記載のように）１２４日の保温後における異なるｐＨの溶液中のクレアチニン（Ｃｎ）対クレアチン（Ｃｒ）のモル：モル比のグラフである。
【図４】（実施例３に記載のように）クレアチン濃度（１００ｍｌ当りのｇとして）の、時間に対するグラフであって、異なるｐＨの溶液中のクレアチンとクレアチニンとの混合物が最大９５日間保温されたものを示す図である。
【図５】（実施例３に記載のように）クレアチン濃度（初期濃度の百分率として）の、時間に対するグラフであって、異なるｐＨの溶液中のクレアチンとクレアチニンとの混合物が最大９５日間保温されたものを示す図である。
【図６】（実施例５に記載のように）３９℃で６週間保温した後に安定である溶液についての、クレアチニン対クレアチンのモル：モル比の、ｐＨに対するグラフである。
【図７】（実施例５に記載のように）２℃，２２℃，３９℃で６週間保温した後に安定である溶液についての、クレアチニン対クレアチンのモル：モル比の、ｐＨに対するグラフである。
【図８】（実施例５に記載のように）２２℃で６週間保温した後に安定である溶液についての、クレアチニン対クレアチンのモル：モル比の、ｐＨに対するグラフと、最適の７次多項式曲線  ｙ＝−０．００１ｘ7＋０．０７７ｘ6−１．６９３ｘ5＋２０．５９４ｘ4−１４９．６１５ｘ3＋６４９．３９７ｘ2−１５６０．３４３ｘ＋１６０３．２３６  ｒ＝１．０００とを示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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