(57)【要約】所望のマトリックス転移温度を有するように生物活性剤を含有してなる粒子が調製される。肺系を経由する粒子の送達により該粒子からの薬物放出の調節がもたらされる。互いに混和性であり、かつ高マトリックス転移温度を有するリン脂質の組合せを含有してなる粒子を形成することにより、薬物の持続放出および／または持続的薬理作用を得ることができる。
2004520409.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物活性剤を約１〜１５重量％、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）との組み合わせを少なくとも約６５重量％、およびロイシンを約１０〜２０重量％含有してなる、生物活性剤の肺送達用噴霧乾燥粒子。
【請求項２】
約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する請求項１記載の粒子。
【請求項３】
約０．２８ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項２記載の粒子。
【請求項４】
約０．２２ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項３記載の粒子。
【請求項５】
約０．１１ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項４記載の粒子。
【請求項６】
約０．０５ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項５記載の粒子。
【請求項７】
約５ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項１記載の粒子。
【請求項８】
約９ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項７記載の粒子。
【請求項９】
約１ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１記載の粒子。
【請求項１０】
約１ミクロン〜約３ミクロンの空気力学的直径を有する請求項９記載の粒子。
【請求項１１】
約３ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項９記載の粒子。
【請求項１２】
多糖類、糖類、アミノ酸、ポリマー、タンパク質、脂質、界面活性剤、コレステロール、脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその任意の組み合わせからなる群より選ばれる化合物をさらに含んでなる請求項１記載の粒子。
【請求項１３】
生物活性剤を約５〜１０重量％含有してなる請求項１記載の粒子。
【請求項１４】
生物活性剤を約７〜９重量％含有してなる請求項１３記載の粒子。
【請求項１５】
生物活性剤がアルブテロールである請求項１記載の粒子。
【請求項１６】
生物活性剤がサルメテロールである請求項１記載の粒子。
【請求項１７】
生物活性剤がエストロンである請求項１記載の粒子。
【請求項１８】
生物活性剤がタンパク質またはペプチドである請求項１記載の粒子。
【請求項１９】
生物活性剤が親水性である請求項１記載の粒子。
【請求項２０】
生物活性剤が疎水性である請求項１記載の粒子。
【請求項２１】
ＤＳＰＣとＤＰＰＣとの組み合わせを約７０〜８０重量％含有してなる請求項１記載の粒子。
【請求項２２】
ＤＳＰＣとＤＰＰＣとの組み合わせを約７６重量％含有してなる請求項２１記載の粒子。
【請求項２３】
ＤＳＰＣおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ３部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有してなる請求項１記載の粒子。
【請求項２４】
ＤＳＰＣおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＣ約３部の比で含有してなる請求項１記載の粒子。
【請求項２５】
ＤＳＰＣおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有してなる請求項１記載の粒子。
【請求項２６】
ロイシンを約１５〜２０重量％含有してなる請求項１記載の粒子。
【請求項２７】
ロイシンを約１６重量％含有してなる請求項２６記載の粒子。
【請求項２８】
ヒトまたは獣医学的被験体の生理学的温度より高いマトリックス転移温度を有する請求項１記載の粒子。
【請求項２９】
約１時間より長い粒子からの生物活性剤の放出の半減期を有する請求項１記載の粒子。
【請求項３０】
制御放出非ポリマー粒子である請求項１記載の粒子。
【請求項３１】
処置、予防または診断を必要とする患者の肺系を経由して請求項１記載の粒子の有効量を送達することを含む方法。
【請求項３２】
生物活性剤を約１〜１５重量％、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）との組み合わせを少なくとも約６５重量％、およびロイシンを約１０〜２０重量％含有してなる噴霧乾燥粒子の有効量を、処置、予防または診断を必要とする患者の気道に投与すること
を含む、肺系を経由する送達のための方法。
【請求項３３】
粒子が約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
粒子が約０．２８ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
粒子が約０．２２ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
粒子が約０．１１ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
粒子が約０．０５ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
粒子が約５ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項３２記載の方法。
【請求項３９】
粒子が約９ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項３８記載の方法。
【請求項４０】
粒子が約１ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項３２記載の方法。
【請求項４１】
粒子が約１ミクロン〜約３ミクロンの空気力学的直径を有する請求項４０記載の方法。
【請求項４２】
粒子が約３ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項４０記載の方法。
【請求項４３】
多糖類、糖類、アミノ酸、ポリマー、タンパク質、脂質、界面活性剤、コレステロール、脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその任意の組み合わせからなる群より選ばれる化合物をさらに含む請求項３２記載の方法。
【請求項４４】
粒子が生物活性剤を約５〜１０重量％含有する請求項３２記載の方法。
【請求項４５】
粒子が生物活性剤を約７〜９重量％含有する請求項４４記載の方法。
【請求項４６】
生物活性剤がアルブテロールである請求項３２記載の方法。
【請求項４７】
生物活性剤がサルメテロールである請求項３２記載の方法。
【請求項４８】
生物活性剤がエストロンである請求項３２記載の方法。
【請求項４９】
生物活性剤がタンパク質またはペプチドである請求項３２記載の方法。
【請求項５０】
生物活性剤が親水性である請求項３２記載の方法。
【請求項５１】
生物活性剤が疎水性である請求項３２記載の方法。
【請求項５２】
粒子がＤＳＰＣとＤＰＰＣとの組み合わせを約７０〜８０重量％含有する請求項３２記載の方法。
【請求項５３】
粒子がＤＳＰＣとＤＰＰＣとの組み合わせを約７６重量％含有する請求項５２記載の方法。
【請求項５４】
粒子が、ＤＳＰＣおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ３部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有する請求項３２記載の方法。
【請求項５５】
粒子が、ＤＳＰＣおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＣ約３部の比で含有する請求項３２記載の方法。
【請求項５６】
粒子が、ＤＳＰＣおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有する請求項３２記載の方法。
【請求項５７】
粒子がロイシンを約１５〜２０重量％含有する請求項３２記載の方法。
【請求項５８】
粒子がロイシンを約１６重量％含有する請求項５７記載の方法。
【請求項５９】
粒子が、ヒトまたは獣医学的被験体の生理学的温度より高いマトリックス転移温度を有する請求項３２記載の方法。
【請求項６０】
粒子が、約１時間より長い粒子からの生物活性剤の放出の半減期を有する請求項３２記載の方法。
【請求項６１】
粒子が制御放出非ポリマー粒子である請求項３２記載の方法。
【請求項６２】
送達が主に深肺に対して行われる請求項３２記載の方法。
【請求項６３】
送達が主に中央気道に対して行われる請求項３２記載の方法。
【請求項６４】
送達が主に小気道に対して行われる請求項３２記載の方法。
【請求項６５】
送達が主に上気道に対して行われる請求項３２記載の方法。
【請求項６６】
投与が乾燥粉体吸入器により行われる請求項３２記載の方法。
【請求項６７】
生物活性剤を約１〜１５重量％、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］（ＤＰＰＧ）との組み合わせを少なくとも約６５重量％、およびロイシンを約１０〜２０重量％含有してなる、生物活性剤の肺送達用粒子。
【請求項６８】
約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する請求項６７記載の粒子。
【請求項６９】
約０．２８ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項６８記載の粒子。
【請求項７０】
約０．２２ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項６９記載の粒子。
【請求項７１】
約０．１１ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項７０記載の粒子。
【請求項７２】
約０．０５ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項７１記載の粒子。
【請求項７３】
約５ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項６７記載の粒子。
【請求項７４】
約９ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項７３記載の粒子。
【請求項７５】
約１ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項６７記載の粒子。
【請求項７６】
約１ミクロン〜約３ミクロンの空気力学的直径を有する請求項７５記載の粒子。
【請求項７７】
約３ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項７５記載の粒子。
【請求項７８】
多糖類、糖類、アミノ酸、ポリマー、タンパク質、脂質、界面活性剤、コレステロール、脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその任意の組み合わせからなる群より選ばれる化合物をさらに含んでなる請求項６７記載の粒子。
【請求項７９】
生物活性剤を約５〜１０重量％含有してなる請求項６７記載の粒子。
【請求項８０】
生物活性剤を約７〜９重量％含有してなる請求項７９記載の粒子。
【請求項８１】
生物活性剤がアルブテロールである請求項６７記載の粒子。
【請求項８２】
生物活性剤がサルメテロールである請求項６７記載の粒子。
【請求項８３】
生物活性剤がエストロンである請求項６７記載の粒子。
【請求項８４】
生物活性剤がタンパク質またはペプチドである請求項６７記載の粒子。
【請求項８５】
生物活性剤が親水性である請求項６７記載の粒子。
【請求項８６】
生物活性剤が疎水性である請求項６７記載の粒子。
【請求項８７】
ＤＳＰＣとＤＰＰＧとの組み合わせを約７０〜８０重量％含有してなる請求項６７記載の粒子。
【請求項８８】
ＤＳＰＣとＤＰＰＧとの組み合わせを約７６重量％含有してなる請求項８７記載の粒子。
【請求項８９】
ＤＳＰＣおよびＤＰＰＧをＤＰＰＧ３部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有してなる請求項６７記載の粒子。
【請求項９０】
ＤＳＰＣおよびＤＰＰＧをＤＰＰＧ１部に対してＤＳＰＣ約３部の比で含有してなる請求項６７記載の粒子。
【請求項９１】
ＤＳＰＣおよびＤＰＰＧをＤＰＰＧ１部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有してなる請求項６７記載の粒子。
【請求項９２】
ロイシンを約１５〜２０重量％含有してなる請求項６７記載の粒子。
【請求項９３】
ロイシンを約１６重量％含有してなる請求項９２記載の粒子。
【請求項９４】
ヒトまたは獣医学的被験体の生理学的温度より高いマトリックス転移温度を有する請求項６７記載の粒子。
【請求項９５】
約１時間より長い粒子からの生物活性剤の放出の半減期を有する請求項６７記載の粒子。
【請求項９６】
制御放出非ポリマー粒子である請求項６７記載の粒子。
【請求項９７】
処置、予防または診断を必要とする患者の肺系を経由して請求項６７記載の粒子の有効量を送達することを含む方法。
【請求項９８】
生物活性剤を約１〜１５重量％、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］（ＤＰＰＧ）との組み合わせを少なくとも約６５重量％、およびロイシンを約１０〜２０重量％含有してなる噴霧乾燥粒子の有効量を、処置、予防または診断を必要とする患者の気道に投与すること
を含む、肺系を経由する送達のための方法。
【請求項９９】
粒子が約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する請求項９８記載の方法。
【請求項１００】
粒子が約０．２８ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項９９記載の方法。
【請求項１０１】
粒子が約０．２２ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１００記載の方法。
【請求項１０２】
粒子が約０．１１ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１０１記載の方法。
【請求項１０３】
粒子が約０．０５ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１０２記載の方法。
【請求項１０４】
粒子が約５ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項９８記載の方法。
【請求項１０５】
粒子が約９ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項１０４記載の方法。
【請求項１０６】
粒子が約１ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項９８記載の方法。
【請求項１０７】
粒子が約１ミクロン〜約３ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１０６記載の方法。
【請求項１０８】
粒子が約３ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１０６記載の方法。
【請求項１０９】
多糖類、糖類、アミノ酸、ポリマー、タンパク質、脂質、界面活性剤、コレステロール、脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその任意の組み合わせからなる群より選ばれる化合物をさらに含む請求項９８記載の方法。
【請求項１１０】
粒子が生物活性剤を約５〜１０重量％含有する請求項９８記載の方法。
【請求項１１１】
粒子が生物活性剤を約７〜９重量％含有する請求項１１０記載の方法。
【請求項１１２】
生物活性剤がアルブテロールである請求項９８記載の方法。
【請求項１１３】
生物活性剤がサルメテロールである請求項９８記載の方法。
【請求項１１４】
生物活性剤がエストロンである請求項９８記載の方法。
【請求項１１５】
生物活性剤がタンパク質またはペプチドである請求項９８記載の方法。
【請求項１１６】
生物活性剤が親水性である請求項９８記載の方法。
【請求項１１７】
生物活性剤が疎水性である請求項９８記載の方法。
【請求項１１８】
粒子が、ＤＳＰＣとＤＰＰＧとの組み合わせを約７０〜８０重量％含有する請求項９８記載の方法。
【請求項１１９】
粒子が、ＤＳＰＣとＤＰＰＧとの組み合わせを約７６重量％含有する請求項１１８記載の方法。
【請求項１２０】
粒子が、ＤＳＰＣおよびＤＰＰＧをＤＰＰＧ３部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有する請求項９８記載の方法。
【請求項１２１】
粒子が、ＤＳＰＣおよびＤＰＰＧをＤＰＰＧ１部に対してＤＳＰＣ約３部の比で含有する請求項９８記載の方法。
【請求項１２２】
粒子が、ＤＳＰＣおよびＤＰＰＧをＤＰＰＧ１部に対してＤＳＰＣ約１部の比で含有する請求項９８記載の方法。
【請求項１２３】
粒子がロイシンを約１５〜２０重量％含有する請求項９８記載の方法。
【請求項１２４】
粒子がロイシンを約１６重量％含有する請求項１２３記載の方法。
【請求項１２５】
粒子が、ヒトまたは獣医学的被験体の生理学的温度より高いマトリックス転移温度を有する請求項９８記載の方法。
【請求項１２６】
粒子が、約１時間より長い粒子からの生物活性剤の放出の半減期を有する請求項９８記載の方法。
【請求項１２７】
粒子が制御放出非ポリマー粒子である請求項９８記載の方法。
【請求項１２８】
送達が主に深肺に対して行われる請求項９８記載の方法。
【請求項１２９】
送達が主に中央気道に対して行われる請求項９８記載の方法。
【請求項１３０】
送達が主に小気道に対して行われる請求項９８記載の方法。
【請求項１３１】
送達が主に上気道に対して行われる請求項９８記載の方法。
【請求項１３２】
投与が乾燥粉体吸入器により行われる請求項９８記載の方法。
【請求項１３３】
生物活性剤を約１〜１５重量％、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］（ＤＳＰＧ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）との組み合わせを少なくとも約６５重量％、およびロイシンを約１０〜２０重量％含有してなる、生物活性剤の肺送達用粒子。
【請求項１３４】
約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する請求項１３３記載の粒子。
【請求項１３５】
約０．２８ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１３４記載の粒子。
【請求項１３６】
約０．２２ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１３５記載の粒子。
【請求項１３７】
約０．１１ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１３６記載の粒子。
【請求項１３８】
約０．０５ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１３７記載の粒子。
【請求項１３９】
約５ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項１３３記載の粒子。
【請求項１４０】
約９ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項１３９記載の粒子。
【請求項１４１】
約１ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１３３記載の粒子。
【請求項１４２】
約１ミクロン〜約３ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１４１記載の粒子。
【請求項１４３】
約３ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１４１記載の粒子。
【請求項１４４】
多糖類、糖類、アミノ酸、ポリマー、タンパク質、脂質、界面活性剤、コレステロール、脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその任意の組み合わせからなる群より選ばれる化合物をさらに含んでなる請求項１３３記載の粒子。
【請求項１４５】
生物活性剤を約５〜１０重量％含有してなる請求項１３３記載の粒子。
【請求項１４６】
生物活性剤を約７〜９重量％含有してなる請求項１４５記載の粒子。
【請求項１４７】
生物活性剤がアルブテロールである請求項１３３記載の粒子。
【請求項１４８】
生物活性剤がサルメテロールである請求項１３３記載の粒子。
【請求項１４９】
生物活性剤がエストロンである請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５０】
生物活性剤がタンパク質またはペプチドである請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５１】
生物活性剤が親水性である請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５２】
生物活性剤が疎水性である請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５３】
ＤＳＰＧとＤＰＰＣとの組み合わせを約７０〜８０重量％含有してなる請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５４】
粒子がＤＳＰＧとＤＰＰＣとの組み合わせを約７６重量％含有してなる請求項１５３記載の粒子。
【請求項１５５】
粒子が、ＤＳＰＧおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ３部に対してＤＳＰＧ約１部の比で含有してなる請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５６】
粒子が、ＤＳＰＧおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＧ約３部の比で含有してなる請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５７】
粒子が、ＤＳＰＧおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＧ約１部の比で含有してなる請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５８】
ロイシンを約１５〜２０重量％含有してなる請求項１３３記載の粒子。
【請求項１５９】
ロイシンを約１６重量％含有してなる請求項１５８記載の粒子。
【請求項１６０】
ヒトまたは獣医学的被験体の生理学的温度より高いマトリックス転移温度を有する請求項１３３記載の粒子。
【請求項１６１】
約１時間より長い粒子からの生物活性剤の放出の半減期を有する請求項１３３記載の粒子。
【請求項１６２】
制御放出非ポリマー粒子である請求項１３３記載の粒子。
【請求項１６３】
処置、予防または診断を必要とする患者の肺系を経由して請求項１３３記載の粒子の有効量を送達することを含む方法。
【請求項１６４】
生物活性剤を約１〜１５重量％、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］（ＤＳＰＧ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロール−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）との組み合わせを少なくとも約６５重量％、およびロイシンを約１０〜２０重量％含有してなる噴霧乾燥粒子の有効量を、処置、予防または診断を必要とする患者の気道に投与すること
を含む、肺系を経由する送達のための方法。
【請求項１６５】
粒子が約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する請求項１６４載の方法。
【請求項１６６】
粒子が約０．２８ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１６５記載の方法。
【請求項１６７】
粒子が約０．２２ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１６６記載の方法。
【請求項１６８】
粒子が約０．１１ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１６７記載の方法。
【請求項１６９】
粒子が約０．０５ｇ／ｃｍ3 以下のタップ密度を有する請求項１６８記載の方法。
【請求項１７０】
粒子が約５ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１７１】
粒子が約９ミクロン〜約３０ミクロンの平均幾何学的直径を有する請求項１７０記載の方法。
【請求項１７２】
粒子が約１ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１７３】
粒子が約１ミクロン〜約３ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１７２記載の方法。
【請求項１７４】
粒子が約３ミクロン〜約５ミクロンの空気力学的直径を有する請求項１７２記載の方法。
【請求項１７５】
多糖類、糖類、アミノ酸、ポリマー、タンパク質、脂質、界面活性剤、コレステロール、脂肪酸、脂肪酸エステルおよびその任意の組み合わせからなる群より選ばれる化合物をさらに含む請求項１６４記載の方法。
【請求項１７６】
粒子が生物活性剤を約５〜１０重量％含有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１７７】
粒子が生物活性剤を約７〜９重量％含有する請求項１７６記載の方法。
【請求項１７８】
生物活性剤がアルブテロールである請求項１６４記載の方法。
【請求項１７９】
生物活性剤がサルメテロールである請求項１６４記載の方法。
【請求項１８０】
生物活性剤がエストロンである請求項１６４記載の方法。
【請求項１８１】
生物活性剤がタンパク質またはペプチドである請求項１６４記載の方法。
【請求項１８２】
生物活性剤が親水性である請求項１６４記載の方法。
【請求項１８３】
生物活性剤が疎水性である請求項１６４記載の方法。
【請求項１８４】
粒子がＤＳＰＧとＤＰＰＣとの組み合わせを約７０〜８０重量％含有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１８５】
粒子がＤＳＰＧとＤＰＰＣとの組み合わせを約７６重量％含有する請求項１８４記載の方法。
【請求項１８６】
粒子が、ＤＳＰＧおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ３部に対してＤＳＰＧ約１部の比で含有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１８７】
粒子が、ＤＳＰＧおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＧ約３部の比で含有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１８８】
粒子が、ＤＳＰＧおよびＤＰＰＣをＤＰＰＣ１部に対してＤＳＰＧ約１部の比で含有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１８９】
粒子がロイシンを約１５〜２０重量％含有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１９０】
粒子がロイシンを約１６重量％含有する請求項１８９記載の方法。
【請求項１９１】
粒子が、ヒトまたは獣医学的被験体の生理学的温度より高いマトリックス転移温度を有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１９２】
粒子が、約１時間より長い粒子からの生物活性剤の放出の半減期を有する請求項１６４記載の方法。
【請求項１９３】
粒子が制御放出非ポリマー粒子である請求項１６４記載の方法。
【請求項１９４】
送達が主に深肺に対して行われる請求項１６４記載の方法。
【請求項１９５】
送達が主に中央気道に対して行われる請求項１６４記載の方法。
【請求項１９６】
送達が主に小気道に対して行われる請求項１６４記載の方法。
【請求項１９７】
送達が主に上気道に対して行われる請求項１６４記載の方法。
【請求項１９８】
投与が乾燥粉体吸入器により行われる請求項１６４記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願
本出願は、１９９９年８月２５日に出願された米国特許仮出願第６０／１５０，７４２号の恩典を主張する、２０００年８月２３日に出願された米国特許出願第０９／６４４，７３６号の一部継続出願である、２００１年２月２３日に出願された米国特許出願第０９／７９２，８６９号の継続出願である。上述の出願の全教示は参照により本明細書に取り込まれる。
【０００２】
発明の背景
肺系を経由する送達は、処置用、予防用および診断用の化合物の投与の好ましい様式である。すべてではないが、肺経路による送達の利点の一部としては、自己投与、痛みを伴う注射の緩和、胃腸合併症または不快な臭いもしくは味の回避が挙げられる。
【０００３】
吸入に好適ないくつかの組成物が、現在利用可能である。例えば、脂質含有リポソーム、プレリポソーム粉末および吸入用の脱水リポソームが報告されているが、これは、脂質を含み、かつ再度水和すると自発的にリポソームを形成するバルク粉末である。しかしながら、リポソーム製剤は、しばしば不安定である。さらに、リポソーム、脱水リポソームならびにプレリポソーム組成物は、一般に特別な製造手順または成分を必要とする。肺系を経由する送達に好適な、約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する粒子もまた報告されている。
【０００４】
局所循環系および／または全身循環系内への薬物の放出動態プロフィールは、処置上の重要事項である。当該技術分野において公知のように、一部の医学的症状は、薬物の持続放出を必要とする。吸入に好適であり、かつ制御放出特性をも有するいくつかの製剤が報告されている。一例において、制御放出特性および約０．４ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する粒子としては、生体適合性、好ましくは生分解性のポリマーが挙げられる。制御放出特性を有するリポソーム組成物もまた公知である。
【０００５】
肺系を経由する治療剤の送達は、全身処置プロトコルにおいて使用することができるが、ぜんそくまたは嚢胞性線維症などの局所肺障害の処置にも使用することができる。例えば硫酸アルブテロールは、喘息発作を防ぐために予防的に使用することができるβ2 拮抗薬である。ヒト患者での硫酸アルブテロールの使用における大量のデータおよび医療専門技術が蓄積されている。しかしながら、硫酸アルブテロールの半減期はわずか約４時間であり、長期ぜんそく管理において、より長期間持続するβ2 拮抗薬が現在推奨されている。
【０００６】
したがって、肺系に医薬を送達し得る組成物を開発する必要性が継続的に存在する。さらに、所望の放出速度で医薬を放出し得る組成物を開発する必要性が存在する。また、現在利用可能な組成物に関連する欠点または副作用を低減または排除する組成物を開発する必要性が存在する。例えば硫酸アルブテロールなどの薬物によりもたらされる防御を拡張する製剤もまた必要である。
【０００７】
発明の概要
本発明は、一般に、生物活性剤の肺送達に関する。特に、本発明は、肺系を経由して送達される生物活性剤の持続放出および／または持続作用を提供することに関する。
【０００８】
本発明は、肺系を経由する送達のための方法に関する。該方法は、生物活性剤およびリン脂質の組み合わせを含有してなる粒子を、処置、診断または予防を必要とする患者の気道に投与することを含む。該リン脂質は互いに混和性である。好ましい態様では、リン脂質は互いに高度にまたは完全に混和性である。粒子は特定の放出速度を有する。好ましくは、粒子からの薬物放出および／または粒子から得られる処置作用は、薬物単独または従来の製剤の場合と比べて持続性である。
【０００９】
本発明はまた、薬物放出を調節するための粒子に関する。該粒子は、生物活性剤、および互いに混和性であるリン脂質の組み合わせを含有してなる。好ましい態様では、粒子は互いに高度にまたは完全に混和性である。別の好ましい態様では、該粒子は、ヒトまたは獣医学的被験体の既知の生理学的温度範囲より高いマトリックス転移温度を有する。
【００１０】
リン脂質の好ましい組み合わせとしては、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）と１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）；１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）と１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］（ＤＰＰＧ）；および１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＰＰＣ）と１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−［ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）］（ＤＳＰＧ）が挙げられる。
【００１１】
さらなる持続放出の利点は、組み合わせにおけるリン脂質の比率を変えることにより得られ得る。
【００１２】
本発明の一態様において、粒子は約０．４ｇ／ｃｍ3 未満、好ましくは約０．１ｇ／ｃｍ3 未満のタップ密度を有する。粒子は、噴霧乾燥法により調製され得る。それらは、例えば乾燥粉体吸入器を用いて被験体の呼吸器系に投与される。
【００１３】
本発明は多くの利点を有する。例えば、所望の持続放出動態を有する粒子が調製され、肺系に送達され得る。該粒子は、肺に内在性である界面活性物質と同じまたは類似であり得、かつ肺系を経由して親水性および疎水性の医薬を送達するために使用され得る物質を含む。
【００１４】
さらに、本発明の粒子は、それ自体がリポソームではなく、その作用のためにそれ自体が肺内でリポソームを形成する必要もない。本発明の粒子はまた、リポソームまたはリポソーム形成性組成物を作製する際に一般に必要とされるもの以外の加工条件下で形成され得る。
【００１５】
発明の記載
本発明は、肺系による生物活性剤の送達に関する。特に、本発明は、生物活性剤を含有し、持続薬物放出動態および／または治療作用を有する粒子に関する。本発明のある態様では、粒子（本明細書中では粉体とも呼ばれる）は、吸入に適切な乾燥粉体の形態である。
【００１６】
本発明の好ましい態様では、生物活性剤は、硫酸アルブテロールである。他の治療剤、予防剤または診断剤（本明細書中では「生物活性剤」、「医薬」もしくは「薬物」とも呼ばれる）またはその組み合わせが使用されうる。親水性および疎水性の薬物が使用されうる。
【００１７】
適切な生物活性剤は、局所作用性および全身作用性の薬物の両方を含む。例としては、治療活性、予防活性または診断活性を有する、合成無機および有機化合物、タンパク質およびペプチド、多糖および他の糖、脂質、ならびにDNA およびRNA 核酸配列が挙げられるがこれらに限定されない。核酸配列としては、遺伝子、例えば、相補的DNA に結合して転写を阻害し得るアンチセンス分子、およびリボザイムが挙げられる。薬剤は、血管作動性薬剤、向神経活性薬剤、ホルモン、抗凝固剤、免疫調節剤、細胞毒性薬剤、予防剤、抗生物質、抗ウイルス剤、アンチセンス、抗原、抗悪性腫瘍薬および抗体等の種々の生物学的活性を有しうる。いくつかの場合、タンパク質は、適切な応答を惹起するために注射により投与されなければならない抗体または抗原でありうる。幅広い範囲、例えば、1 モル当たり100 〜500,000 ｇ以上の分子量を有する化合物が使用されうる。
【００１８】
タンパク質は、100 アミノ酸残基以上からなると規定される；ペプチドは100 アミノ酸よりも少ない。他に記載されない限り、タンパク質という用語は、タンパク質およびペプチドの両方をいう。例としては、インスリン、他のホルモンおよび抗体が挙げられる。ヘパリン等の多糖もまた投与されうる。
【００１９】
粒子は、喘息、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、肺気腫、または嚢胞性線維症の処置用薬剤等の肺内の局所送達あるいは全身治療のための生物活性剤を含みうる。例えば、嚢胞性線維症などの疾患の治療のための遺伝子を、喘息のためのβアゴニスト、ステロイド、抗コリン作用薬、およびロイコトリエン修飾因子のように投与しうる。他の特異的な治療剤としては、インスリン、カルシトニン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（またはゴナドトロピン- 放出ホルモン（「LHRH」））、顆粒球コロニー刺激因子（「G-CSF 」）、副甲状腺ホルモン- 関連ペプチド、ソマトスタチン、テストステロン、プロゲステロン、エストラジオール、ニコチン、フェンタニル、ノルエチステロン、クロニジン、スコポロミン、サリチレート、クロモリンナトリウム、サルメテロール、ホルメテロール、硫酸エストロン、およびジアゼパムが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
インスリンを含むほとんどのタンパク質などの荷電したこれらの治療剤は、荷電した治療剤と逆の電荷を有する分子との間の複合体として投与されうる。好ましくは、逆の電荷を有する分子は、荷電した脂質または逆の電荷を有するタンパク質である。
【００２１】
前記粒子は、患者への投与の後に薬剤を局所的または全身に送達する任意の種々の診断剤を含み得る。生体適合性または薬理学的に許容されるいずれのガスも、業者に公知のテクノロジーを用いて粒子に取り込まれるかまたは粒子の孔に捕獲されうる。ガスという用語は、画像化が実施される温度で、ガスであるかまたはガスを形成することができる任意の化合物をいう。１つの態様において、粒子のまわりにガス不透過性バリアを形成することによって粒子中のガスの貯留を改善する。かかるバリアは当業者には周知である。
【００２２】
利用されうる他の画像化剤としては、陽電子射出断層撮影法（PET ）、コンピュータ連動断層撮影法（CAT ）、シングルフォトンエミッションコンピュータ断層撮影法、Ｘ線、透視および磁気共鳴画像法（MRI ）において使用される市販の薬剤が挙げられる。
【００２３】
MRI における造影剤として使用するための適切な物質の例としては、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（DTPA）およびガドペントテートジメグルミン(gadopentotate  dimeglumine)などの容易に入手可能なガドリニウムキレート、ならびに鉄、マグネシウム、マンガン、銅、クロム、テクネチウム、ユウロピウム、および他の放射性画像化剤が挙げられる。
【００２４】
CAT およびＸ線のために有用な物質の例としては、ジアトリゾエートおよびイオタラメートに代表されるイオン性モノマー、イオパミドール、イソヘキソール(isohexol)およびイオベルソルのような非イオン性モノマー、イオトロールおよびイオジキサノールのような非イオン性ダイマー、ならびにイオン性ダイマー（例えばイオキサグレート（ioxagalte ））などの、静脈内投与のためのヨウ素ベースの物質が挙げられる。
【００２５】
診断剤は、当該分野で利用可能な標準的な技術および市販の装置を用いて検出されうる。
【００２６】
粒子中の治療剤、予防剤または診断剤の量は、約0.1 重量％〜約95重量％の範囲でありうる。生物活性剤の組み合わせもまた使用されうる。薬物が粒子全体に分配された粒子が好ましい。
【００２７】
本発明の粒子は、特定の薬物放出特性を有する。薬物放出速度は、製剤からの生物活性剤の放出の半減期の点から記載されうる。本明細書中で使用される場合、用語「半減期」は、粒子に含まれる初期薬物荷重の50％を放出するのに必要とする時間をいう。初期薬物放出速度は、一般に、30分未満であり、約１分〜約60分の範囲である。制御放出速度は、一般に、２時間よりも長く、約１時間〜約数日の範囲でありうる。
【００２８】
薬物放出速度はまた、放出定数の点から記載されうる。一次放出定数は、以下の等式の１つを用いて表されうる：
【００２９】
【数１】
2004520409.tif 000003
【００３０】
式中、ｋは一次放出定数である。M ( ∞ )は、薬物送達系、例えば、乾燥粉体中の薬物の全質量であり、M pw(t) は、時間t での乾燥粉体中に残存している薬物質量である。M (t) は、時間ｔでの乾燥粉体から放出された薬物質量の量である。前記関係は以下のように表されうる：
【００３１】
【数２】
2004520409.tif 000004
【００３２】
等式（１）、（２）および（３）は、放出される薬物の量（すなわち、質量）または放出媒体の特定の容積に放出される薬物の濃度のいずれかで表されうる。
【００３３】
例えば、式（２）は、以下のように表されうる：
【００３４】
【数３】
2004520409.tif 000005
【００３５】
式中、ｋは一次放出定数である。C ( ∞ )は、放出媒体中の薬物の最大理論濃度であり、C (t) は、時間ｔでの乾燥粉体から放出媒体に放出された薬物の濃度である。
【００３６】
一次放出動態に関する「半減期」またはt50%は、周知の等式により得られる。
【００３７】
【数４】
2004520409.tif 000006
【００３８】
一次放出定数に関する薬物放出速度およびt50%は、以下の式を用いて計算されうる：
【００３９】
【数５】
2004520409.tif 000007
【００４０】
好ましい態様では、本発明の粒子は、静脈内ルート等による単独または従来の製剤で投与された薬物の薬物動態学的／薬力学的なプロフィールと比べて延長された薬物放出特性を有する。
【００４１】
本発明の粒子は、そのマトリックス転移温度によって特徴づけられる。本明細書中で使用される用語「マトリックス転移温度」は、粒子が、分子運動性をほとんど有さないガラス状または強固な相からより無定形な、弾性のあるまたは融解した状態あるいは液体様相に変換される温度をいう。本明細書中で使用される「マトリックス転移温度」は、粒子の構造的完全性が粒子からの薬物のより速い放出を付与する様式で減少する温度である。マトリックス転移温度より上では、粒子構造は、薬物分子の移動性が増大するように変化し、より速い放出を生じる。対照的に、マトリックス転移温度よりも下では、薬物粒子の移動性は制限され、より緩徐な放出を生じる。「マトリックス転移温度」は、固体内の状態（order ）および／または分子移動性の変化を示す異なる相転移温度、例えば、融解温度（T m ）、結晶化温度（T c ）およびガラス転移温度（T g ）に関する。本明細書中で使用される用語「マトリックス転移温度」は、薬物の放出が下よりも速い上の粒子マトリックスの複合または主要な転移温度をいう。
【００４２】
マトリックス転移温度は、2000年８月23日に出願された国際出願第PCT/US00/23048号に考察されており、その内容は参考としてその全体が本明細書中に援用される。
【００４３】
実験的に、マトリックス転移温度は、当該分野で公知の方法、特に、示差走査熱量測定（DSC ）または他の熱量測定により測定されうる。粒子または乾燥粉体のマトリックス転移挙動を特徴づける他の技術としては、シンクロトロンＸ線回折、凍結割断電子顕微鏡検査、およびホットステージ顕微鏡検査が挙げられる。
【００４４】
マトリックス転移温度は、所望の薬物放出動態を有する粒子を作製するため、および所望の薬物放出速度について粒子製剤を最適化するために使用されうる。特定のマトリックス転移温度を有する粒子が調製され、インビトロまたはインビボ放出アッセイ、薬物動態学的研究および当該分野で公知の他の技術により薬物放出特性について試験されうる。一旦、マトリックス転移温度と薬物放出速度との間の関係が確立されると、所望または標的の放出速度は、対応するマトリックス転移温度を有する粒子を形成および送達することにより得られうる。薬物放出速度は、投与される粒子のマトリックス転移温度を調整することにより変更または最適化されうる。
【００４５】
本発明の粒子は、所望または標的薬物放出速度を生じるマトリックス転移温度を促進または粒子に付与する物質を含む。適切な物質の特性および例は、さらに以下に記載される。薬物の持続放出を得るために、組み合わされた場合に、高マトリックス転移温度を生じる物質が好ましい。本明細書中で使用される「高転移温度」は、被検体の生理的温度よりも高いマトリックス転移温度を有する粒子をいう。本明細書中で使用される、生理的温度は、一般に、ヒト被検体の正常な体温、例えば、約37℃をいう。
【００４６】
対照的に、薬物の迅速な放出は、組み合わされた場合に、低マトリックス転移温度を生じる物質で観察される。本明細書中に使用される「低転移温度」は、被検体の生理的温度よりも低いかまたはおおよそ同じであるマトリックス転移温度を有する粒子をいう。作用の機構のいかなる特定の解釈にも束縛されることを望まないが、高マトリックス転移温度を有する粒子について、粒子マトリックスの構造完全性が体温および高い湿度でより長い期間維持され、より低い粒子融解、溶解または浸食、より低い分子移動性、および粒子からのより緩徐な薬物放出ならびに長期の続く薬物取り込みおよび／または作用を生じる。対照的に、低マトリックス転移温度を有する粒子については、粒子マトリックスの完全性は、体温（典型的には約37℃）および高い湿度（肺で100 ％に接近する）に曝された場合に、短期間内で転移をうけ、これらの粒子の成分は、薬物が急速に放出され、取り込みに利用可能となり得る高分子移動性を有する傾向がある。低転移温度を有する粒子は、制限された構造完全性を有し、より無定形であり、弾性があり、溶解状態であるか、または液体様である傾向がある。
【００４７】
粒子はまた、発熱を患う患者に投与された場合、発熱を患う患者の体温よりも高いマトリックス転移温度の粒子を生じる物質を選択することにより持続放出を提供するように作製されうる。
【００４８】
所望の転移温度を有する粒子を作製するために適切な量の物質を合わせることは、例えば、種々の比率の所望の物質を有する粒子を形成し、混合物のマトリックス転移温度を測定し（例えば、DSC により）、所望のマトリックス転移温度を有する組み合わせを選択し、任意に、さらに使用される物質の比率を最適化することにより実験的に決定されうる。
【００４９】
本発明の粒子は、リン脂質の組み合わせを含む。２つまたはそれより多くのリン脂質が使用されうる。ヒト被検体への肺送達に適切なリン脂質が好ましい。適切なリン脂質は、肺に対して内因性または非内因性でありうる。
【００５０】
リン脂質の例としては、ホスファチジン酸、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトールまたはその組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。修飾リン脂質、例えば、頭部修飾（例えば、アルキル化またはポリエチレングリコール（PEG ）- 修飾）を有するリン脂質もまた使用されうる。組み合わせた１つまたはそれより多くのリン脂質が荷電されうる。荷電リン脂質の例は、2000年12月29日に出願された「Particlesfor Inhalation Having Sustained Release Properties 」のタイトルの米国特許出願第09/752,106号および2000年12月29日に出願されたParticlesofr Inhalation Having Sustained Release Properties のタイトルの米国特許出願第09/752,109号に記載されており、これら両方の出願の全体の内容が参考として本明細書中に援用される。
【００５１】
リン脂質は、約１〜約99重量％の範囲の量で粒子に存在しうる。好ましくは、それらは、約10〜約80重量の範囲の量で粒子に存在しうる。
【００５２】
リン脂質を含む粒子を調製し、投与する適切な方法は、Hanes らの1999年１月５日に発行された米国特許第5,855,913 号、Edwards らの1999年11月16日に発行された米国特許第5,985,309 号に記載される。両方の教示はその全体が参考として本明細書に援用される。
【００５３】
リン脂質は、融解温度（T m ）、結晶化温度（T c ）およびガラス転移温度（T g ）により規定される特徴的な相転移温度を有する。T m 、T c およびT g は当該分野で公知な用語である。例えば、これらの用語は、Phospholipid Handbook （Gregor Cevc 編、1993）Marcel-Dekker, Inc. に考察されている。
【００５４】
リン脂質またはその組み合わせの相転移温度は、文献から得られうる。リン脂質の相転移温度を列挙した出典は、例えば、Avanti（登録商標）Polar Lipids（Alabaster, AL ）カタログまたはPhospholid Handbook （GregorCevc編、1993）Marce-Dekker, Inc.である。ある出典と他のものとの列挙された転移温度値における小さな変動は、水分含量または他の測定技術等の実験条件の結果でありうる。
【００５５】
実験的に、相転移温度は、当該分野で公知の方法、特に示差走査熱量測定または他の熱量測定法によって測定されうる。リン脂質またはその組み合わせの相挙動を特徴付ける他の技術としては、シンクロトロンＸ線回折、凍結割断顕微鏡検査、およびホットステージ顕微鏡検査が挙げられる。
【００５６】
患者の生理的温度よりも低いかおおよそ同じ転移温度を有するリン脂質の例を表１に列挙する。これらのリン脂質は、本明細書中では、低転移温度を有すると言われる。患者の生理的温度よりも高い転移温度を有するリン脂質の例は、表２に示される。これらのリン脂質は、本明細書中では、高転移温度を有すると言われる。表１および２に示される転移温度の値は、Avanti（登録商標）Polar Lipids（Alabaster, AL ）カタログから得られた。
【００５７】
【表１】
2004520409.tif 000008
【００５８】
【表２】
2004520409.tif 000009
【００５９】
所望の相転移温度を有する組み合わせを形成するために２つまたはそれより多くのリン脂質の適切な量を合わせることが、例えば、Phospholid Handbook (Gregor Cevc、編、1993) Marcell-Dekker, Inc.に記載されている。
【００６０】
所望または標的のマトリックス転移温度を有する粒子を形成するために使用されるリン脂質の量は、例えば、種々の比率で目的のリン脂質の混合物を形成し、各混合物の転移温度を測定し、標的転移温度を有する混合物を選択することにより実験的に決定されうる。
【００６１】
本発明の粒子は、リン脂質の組み合わせを含む。２つまたはそれより多くのリン脂質が組み合わせ中に存在しうる。組み合わせ中の少なくとも２つのリン脂質は互いに混和性である。
【００６２】
リン脂質の混和性は、当該分野で公知である特性である。本明細書中で使用される場合、混和性が完全であると、理想的な混合を生じ、混合物における相転移の広幅化を生じない。本明細書中で使用される場合、混和性がまた高いと、理想的またはそれに非常に近い混合、および純粋な成分の相転移よりも広範な相転移を生じる。本明細書中で使用される場合、混和性がまた中程度であると、混合の際に組成物のいかなる有意な範囲をもこえて平らにならないない相ダイアグラムで固相線を生じる。二元混合物における多くのリン脂質の混和性は、文献、例えば、Avanti（登録商標）Polar Lipids（Alabaster, AL ）カタログにおいて利用可能である。また、Thermotropic Phase Transitions of Pure Lipids in Model Membranes and Their Modifications by Membrane Proteins, Dr.J.R. Silvus, Lipid-Protein Interactions, John Wiley & Sons, Inc., New  York, 1982 も参照。リン脂質の混和性はまた、当該分野で公知であるように、実験的に決定されうる。
【００６３】
リン脂質混合物のマトリックス転移温度へのリン脂質混和性の影響は、第１のリン脂質とは異なる混和性を有する他のリン脂質と第１のリン脂質とを合わせて、組み合わせの転移温度を測定することにより決定されうる。
【００６４】
本発明のいかなる特定の解釈にも束縛されることを望まないが、互いに高度にまたは完全に混和性である物質は、中間的な総合マトリックス転移温度を生じ、他のものは全て等しい傾向があると考えられている。他方で、互いに非混和性である物質は、ある成分により優先的に支配されるか、または二相性放出特性を生じうる総合マトリックス転移温度を生じる傾向がある。
【００６５】
リン脂質の好ましい組み合わせとしては、1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3- ホスホコリン（DPPC）および1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3- ホスホコリン(DSPC)；1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3- ホスホコリン(DSPC)および1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-[ホスホロ-rac-(1-グリセロール)](DPPG); および1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3- ホスホコリン(DPPC)および1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-[ホスホ-rac-(1-グリセロール)](DSPG)が挙げられる。
【００６６】
所望の薬物放出動態を生じる本発明の粒子を形成することに使用される、リン脂質量の適切な比は、実施例でさらに考察されるように、実験的に決定されうる。
【００６７】
粒子は、１つまたはそれより多くのさらなる物質を含みうる。任意に、１つまたはそれより多くのさらなる物質のうち少なくとも１つはまた、上記で考察されたリン脂質とそれの組み合わせが標的または所望の薬物放出速度を生じるマトリックス転移温度を有する粒子を生じるような様式で選択される。
【００６８】
本発明の１つの態様では、粒子はさらにポリマーを含む。生体適合性または生分解性ポリマーが好ましい。かかるポリマーは、例えば、1999年２月23日に発行されたEdwards ら、米国特許第5,874,064 号に記載されており、その教示はその全体が参考として本明細書中に援用される。
【００６９】
別の態様では、粒子は１つの上記リン脂質以外に界面活性剤を含む。本明細書で使用する「界面活性剤」という用語は、水と有機系ポリマー溶液間の界面、水／空気界面または有機系溶剤／空気界面などの２つの非混和性相間の界面に優先的に吸収される任意の薬剤をいう。界面活性剤は、一般に、ミクロ粒子に吸収されると、同様にコートされた粒子を引き付けない部分を外部環境に対して提示する傾向にあるような親水性部分および親油性部分を有し、それにより粒子の凝集が低減される。界面活性剤はまた、治療剤または診断剤の吸収を促進し得、該薬剤のバイオアベイラビリティーを増加し得る。
【００７０】
本発明の粒子を作製するのに使用されうる好適な界面活性剤としては、限定されないが、ヘキサデカノール；脂肪アルコール；ポリエチレングリコール（PEG ）；ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル；パルミチン酸またはオレイン酸などの界面活性脂肪酸；グリココール酸塩；サーファクチン(surfactin) ；ポロキサマー(poloxamer) ；トリオレイン酸ソルビタン（Span85）などのソルビタン脂肪酸エステル；Tween 80; およびチロキサポールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７１】
前記界面活性剤は、約０〜約60重量％の範囲の量で粒子内に存在し得る。好ましくは、約5 〜約50重量％の範囲の量で粒子中に存在し得る。
【００７２】
本発明のさらに別の態様では、前記粒子はまたアミノ酸を含む。適切なアミノ酸としては、天然に存在する疎水性アミノ酸および天然に存在しない疎水性アミノ酸が挙げられる。いくつかの適切な天然に存在する疎水性アミノ酸としては、ロイシン、イソロイシン、アラニン、バリン、フェニルアラニン、グリシンおよびトリプトファンが挙げられるが、これらに限定されない。疎水性アミノ酸の組み合わせもまた使用されうる。天然に存在しないアミノ酸としては、例えば、β−アミノ酸が挙げられる。疎水性アミノ酸のＤ、Ｌ立体配置ならびにラセミ混合物の両方が使用され得る。また、適切な疎水性アミノ酸としては、アミノ酸誘導体またはアナログも挙げることができる。本明細書で使用するとき、アミノ酸アナログとしては、下記式：-NH-CHR-CO- 、［式中、Ｒは、脂肪族基、置換脂肪族基、ベンジル基、置換ベンジル基、芳香族基または置換芳香族基であり、Ｒは、天然に存在するアミノ酸の側鎖に対応しない］を有するＤまたはＬ立体配置のアミノ酸が挙げられる。本明細書で使用するとき、脂肪族基としては、完全に飽和しており、窒素、酸素または硫黄などの１個または２個のヘテロ原子を含み、および／または１個以上の不飽和単位を含む、直鎖、分枝または環状C1−C8炭化水素が挙げられる。芳香族基としては、フェニルおよびナフチルなどの炭素環式芳香族基、並びにイミダゾリル、インドリル、チエニル、フラニル、ピリジル、ピラニル、オキサゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、キノリニル、イソキノリニルおよびアクリジンチルなどの複素環式芳香族基が挙げられる。
【００７３】
脂肪族、芳香族またはベンジル基上の適切な置換基としては、-OH 、ハロゲン（-Br 、-Cl 、-Iおよび-F）、-O（脂肪族基、置換脂肪族基、ベンジル基、置換ベンジル基、アリール基または置換アリール基）、-CN 、-NO2、-COOH 、-NH2、-NH （脂肪族基、置換脂肪族基、ベンジル基、置換ベンジル基、アリール基または置換アリール基）、-N（脂肪族基、置換脂肪族基、ベンジル基、置換ベンジル基、アリール基または置換アリール基）2 、-COO（脂肪族基、置換脂肪族基、ベンジル基、置換ベンジル基、アリール基または置換アリール基）、-CONH2、-CONH （脂肪族基、置換脂肪族基、ベンジル基、置換ベンジル基、アリール基または置換アリール基）、-SH 、-S（脂肪族基、置換脂肪族基、ベンジル基、置換ベンジル基、芳香族基または置換芳香族基）および-NH-C(=NH)-NH2が挙げられる。また、置換ベンジル基または芳香族基は、脂肪族または置換脂肪族基を置換基として有し得る。また、置換脂肪族基は、ベンジル基、置換ベンジル基、アリール基または置換アリール基を置換基として有し得る。置換脂肪族基、置換芳香族基または置換ベンジル基は、１個またはそれ以上の置換基を有し得る。アミノ酸置換基を修飾することは、例えば、親水性である天然アミノ酸の脂質親和性または疎水性を高めることができる。
【００７４】
多くの適切なアミノ酸、アミノ酸アナログおよびその塩が商業的に入手され得る。その他のものは、当該技術分野において公知の方法によって合成され得る。合成技術は、例えば、Green とWuts、「有機合成における保護基（Protecting Groups in Organic Synthesis）」、JohnWiley and Sons，第５および７章、1991に述べられている。
【００７５】
疎水性は、一般に、非極性溶媒と水との間でのアミノ酸の分配に関して定義される。疎水性アミノ酸は、非極性溶媒に選択性を示すアミノ酸である。アミノ酸の相対的疎水性は、疎水性スケールで表わすことができ、グリシンは、0.5 の値を有する。かかるスケールでは、水に選択性を有するアミノ酸は、0.5 より低い値を有し、非極性溶媒に選択性を有するアミノ酸は、0.5 より大きい値を有する。本明細書で使用するとき、疎水性アミノ酸の語は、疎水性スケールで0.5 以上の値を有する、すなわち、少なくともグリシンに等しい、非極性酸中に分配する傾向を有するアミノ酸を指す。
【００７６】
使用されうるアミノ酸の例としては、グリシン、プロリン、アラニン、システイン、メチオニン、バリン、ロイシン、チロシン、イソロイシン、フェニルアラニン、トリプトファンが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい疎水性アミノ酸としては、ロイシン、イソロイシン、アラニン、バリン、フェニルアラニン、グリシンおよびトリプトファンが挙げられる。疎水性アミノ酸の組合せも使用され得る。さらに、疎水性と親水性（好ましくは、水に分配する）アミノ酸の組合せも、全体としての組合せが疎水性である場合には、使用され得る。１以上のアミノ酸および１以上のリン脂質または界面活性剤の組合せも用いられ得る。
【００７７】
アミノ酸は、少なくとも60重量％の量で本発明の粒子中に存在し得る。好ましくは、アミノ酸は、約５〜約30重量％の範囲の量で粒子中に存在し得る。疎水性アミノ酸の塩は、少なくとも60重量％の量で本発明の粒子中に存在し得る。好ましくは、アミノ酸の塩は、約５〜約30重量％の範囲の量で粒子中に存在する。アミノ酸を含む粒子の形成および送達方法は、噴霧乾燥の間における多孔性粒子の形成のための単純アミノ酸の使用なる表題の1999年８月25日に提出された米国特許出願第09/382,959号および多孔性粒子の形成のための単純アミノ酸の使用なる表題の2000年８月23日に提出された米国特許出願第09/644,320号に記載されており、両方の教示は、参照により、その全体が本明細書に取り込まれる。
【００７８】
本発明のさらなる態様では、粒子はまた、カルボキシレート部分および多価金属塩を含む。かかる組成物は、噴霧乾燥多孔性大粒子の製剤化なる表題の1999年８月25日に提出された米国特許仮出願第60/150,662号および噴霧乾燥多孔性大粒子の製剤化なる表題の2000年８月23日に提出された米国特許出願第09/644,105号に記載されており、両方の教示は、参照により、その全体が本明細書に取り込まれる。ある態様では、粒子はクエン酸ナトリウムおよび塩化カルシウムを含む。
【００７９】
粒子はまた、例えば、緩衝液塩、デキストラン、多糖類、ラクトース、トレハロース、シクロデキストリン、タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、脂肪酸、脂肪酸エステル、無機化合物、リン酸塩、脂質、スフィンゴ脂質、コレステロール、界面活性剤、ポリアミノ酸、多糖類、タンパク質、塩などの物質をも含み得、他のものも使用されうる。
【００８０】
好ましい態様では、本発明の粒子は、約0.4g/cm3未満のタップ密度を有する。約0.4g/cm3未満のタップ密度を有する粒子は、本明細書において、「空気力学的に軽い粒子」と称される。約0.1g/cm3未満のタップ密度を有する粒子がより好ましい。タップ密度は、デュアルプラットホームマイクロプロセッサ制御タップ密度テスター（Dual Platform Microprocessor Controlled Tap Density Tester）（Vankel,NC ）またはGeoPycTM装置（Micrometrics Instrument Corp.,Norcross,GA 30093 ）などの当業者に公知の装置を用いて測定され得る。タップ密度は、エンベロープ質量密度の標準測定値である。タップ密度は、「ＵＳＰかさ密度およびタップ密度」、米国薬局方協約、Rockville,MD, 第10版補遺、4950〜4951、1999の方法を用いて測定できる。低タップ密度に寄与し得る特徴としては、不規則な表面テクスチャーと多孔性構造が挙げられる。
【００８１】
等方性粒子のエンベロープ質量密度は、それを内部に包み込むことができる最小球体エンベロープ体積で割った粒子の質量と定義される。本発明の１つの態様では、前記粒子は、約0.4g/cm3未満のエンベロープ質量密度を有する。
【００８２】
空気力学的に軽い粒子は、好ましいサイズ、例えば、少なくとも約５ミクロン（ｍｍ）の体積メジアン幾何学的直径（VMGD）を有する。１つの態様では、VMGDは、約５μｍ〜約30ｍｍである。本発明の他の態様では、前記粒子は、約９μｍ〜約30μｍの範囲のVMGDを有する。他の態様では、前記粒子は、少なくとも５ｍｍ、例えば、約５ｍｍ〜約30ｍｍのメジアン直径、質量メジアン直径（MMD ）、質量メジアンエンベロープ直径（MMED）または質量メジアン幾何学的直径（MMGD）を有する。
【００８３】
粒子の直径、例えば、VMGDは、マルチサイザー（Multisizer IIe（Coulter Electronic,Luton,Beds,England ）のような電気的ゾーンセンシング装置またはレーザー回折装置（例えばSympatec,Princeton,NJ によって製造されているHelos ）を用いて測定できる。粒子直径を測定するための他の装置は当該技術分野において周知である。サンプル中の粒子の直径は、粒子組成物および合成の方法などの因子に依存する範囲である。サンプル中の粒子のサイズ分布は、気道内の標的部位における至適沈着を可能にするように選択できる。
【００８４】
空気力学的に軽い粒子は、好ましくは約１ｍｍ〜約５ｍｍの、本明細書では「空気力学的直径」とも称される「質量メジアン空気力学的直径」（MMAD）を有し、MMADは、約１ｍｍ〜約３ｍｍである。別の態様では、MMADは約３ｍｍ〜約５ｍｍである。
【００８５】
実験的には、空気力学的直径は、重力沈降法を用いて測定することができ、かかる方法により、粒子全体が一定の距離を沈降するのに要する時間を使用して、直接粒子の空気力学的直径を推定する。質量メジアン空気力学的直径（MMAD）を測定するための間接的方法は、多段液体インピンジャー（MSLI）である。
【００８６】
空気力学的直径、ｄaer は、等式：
【００８７】
【数６】
2004520409.tif 000010
【００８８】
（式中、ｄg は、幾何学的直径、例えば、MMGDであり、ρtap は、粉体タップ密度である）から算出され得る。
【００８９】
約0.4g/cm3未満のタップ密度、少なくとも約５ｍｍのメジアン直径、および約１ｍｍ〜約５ｍｍ、好ましくは約１ｍｍ〜約３ｍｍの空気力学的直径を有する粒子は、口腔咽頭領域における慣性および重力沈着をより多く免れることができ、気道または深肺に標的される。より大きな、より多孔性の粒子は、吸入治療のために現在使用されているようなより小さく密なエーロゾル粒子よりも効率的にエーロゾル化することができるので、それらの使用は好都合である。
【００９０】
より小さな粒子に比べて、好ましくは、少なくとも約５ｍｍのVMGDを有するより大きな空気力学的に軽い粒子はまた、食細胞の細胞質ゾル空隙からの粒子のサイズ排除により、潜在的に肺胞マクロファージによる食作用吸収と肺からのクリアランスをより成功裡に回避することができる。肺胞マクロファージによる粒子の食作用は、粒子直径が約３ｍｍを超えて増加すると急激に低下する。Kawaguchi,H.ら、Biomaterials 7:61 〜66(1986);Krenis,L.J.とStrauss,B.,Proc.Soc.Exp.Med.,107:748〜750(1961);およびRudt,S. とMuller,R.H.,.J.Contr.Rel.,22:263〜272(1992) 。粗表面を有する球体のような統計的に等方性の形態の粒子に関しては、粒子エンベロープ体積は、完全な粒子食作用のためにマクロファージ内で必要とされる細胞質ゾル空隙の体積とほぼ等しい。
【００９１】
粒子は、深肺小気道または上気道または中央気道のような気道の選択された領域への局所送達のために、適切な物質、表面粗度、直径およびタップ密度で作製され得る。例えば、上気道送達のためにはより高密度またはより大きな粒子が使用され得るか、あるいは同じまたは異なる治療剤である場合、サンプル中における異なるサイズの粒子の混合物が１回の投与で肺の異なる領域を標的とするように投与され得る。約３〜約５ｍｍの範囲の空気力学的直径を有する粒子が中央気道および上気道への送達にとって好ましい。深肺への送達のためには約１〜約３ｍｍの範囲の空気力学的直径を有する粒子が好ましい。
【００９２】
エーロゾルの慣性嵌入と重力沈降が通常の呼吸条件での気道および肺細葉における主要な沈着機序である。Edwards,D.A.,J.Aerosol Sci.,26:293〜317(1995) 。両方の沈着機序の重要性は、粒子（またはエンベロープ）体積ではなくエーロゾルの質量に比例して上昇する。肺におけるエーロゾル沈着部位はエーロゾルの質量によって決定されるので（少なくとも平均空気力学的直径が約１ｍｍをこえる粒子については）、粒子表面の不規則性と粒子の多孔性を高めることによってタップ密度を低下させることは、他の物理的パラメータがすべて等しければ、より大きな粒子エンベロープ体積を肺に送達することができる。
【００９３】
タップ密度が低い粒子は、実際のエンベロープ球体直径に比べて小さな空気力学的直径を有する。空気力学的直径、ｄaer は、式：
【００９４】
【数７】
2004520409.tif 000011
【００９５】
（式中、エンベロープ質量ρは、g/cm3 の単位である）によってエンベロープ球体直径、ｄに関係づけられる(Gonda,I. 「エーロゾル送達における物理−化学的原理(Physico-chemical principles in aerosol delivery) 」Topics inPharmaceutical Sciences 1991 より(D.J.A.Crommeli とK.K.Midha 編集) 、p.95〜117,Stuttgart:MedpharmScientific Publishers,1992) 。ヒト肺の肺胞領域における単分散エーロゾル粒子の最大沈着（約60％）は、約ｄaer ＝３mmの空気力学的直径について起こる。Heyder,J. ら、J. Aerosol Sci., 17:811 〜825(1986) 。その小さなエンベロープ質量密度により、最大深肺沈着を示す単分散吸入粉末を含む空気力学的に軽い粒子の実際の直径ｄは：
【００９６】
【数８】
2004520409.tif 000012
【００９７】
（式中、ｄは常に３μｍより大きい）である。例えば、エンベロープ質量密度、ρ＝0.1g/cm3を示す空気力学的に軽い粒子は、9.5mm の大きさのエンベロープ直径を有する粒子について最大沈着を示す。粒子サイズが大きくなると粒子間接着力が低下する。Visser,J., PowderTechnology, 58:1 〜10。従って、大きな粒子サイズは、より低い食作用損失に寄与することに加えて、エンベロープ質量密度の低い粒子に関して深肺へのエーロゾル適用の効率を高める。
【００９８】
空気力学的直径は、肺内での最大沈着を提供するように算出され得る。以前、これは、直径約５ミクロン未満、好ましくは約１〜約３ミクロンの非常に小さな粒子の使用によって達成されており、当該粒子は次いで食作用に供される。より大きな直径を有するが十分に軽い（すなわち「空気力学的に軽い」特徴の）粒子を選択することは、肺への等しい送達をもたらすが、より大きなサイズの粒子は食作用を受けない。滑面を有するものに比べて、粗面または不均質面を有する粒子を使用することによって改良された送達が得られ得る。
【００９９】
本発明の別の態様では、前記粒子は、約0.4g/cm3未満の「質量密度」としても本明細書中で称されるエンベロープ質量密度を有する。また、約５μｍ〜約30μｍの平均直径を有する粒子が好ましい。質量密度、ならびに質量密度と平均直径と空気力学的直径との間の関係は、その全体が参照により本明細書に援用される、2000年５月11日に出願された米国出願第09/569,153号の中で論じられている。好ましい態様では、約0.4g/cm3未満の質量密度と約５μｍ〜約30μｍの間の平均直径を有する粒子の空気力学的直径は、約１mm〜約５mmである。
【０１００】
適切な粒子は、予め選択されたサイズ分布を有する粒子サンプルを提供するために、例えば、濾過または遠心分離により作製または分離され得る。例えば、サンプル中の約30％、50％、70％または80％を超える粒子は、少なくとも約５mmの選択範囲内の直径を有し得る。特定の割合の粒子が含まれるべき選択範囲は、例えば、約５〜約30mm、または最適には、約５〜約15 mm であってもよい。１つの好ましい態様では、前記粒子の少なくとも一部が、約９〜約11 mm の直径を有する。また、任意に、少なくとも約90％、または任意に、約95％もしくは約99％が選択範囲内の直径を有するものである粒子サンプルが、作製され得る。前記粒子サンプル中におけるより高い割合での空気力学的に軽く、かつより大きな直径の粒子の存在は、該粒子中に取り込まれた治療薬または診断薬の深肺への送達を増強する。大きな直径の粒子とは、一般的に、少なくとも約５mmのメジアン幾何学的直径を有する粒子を意味する。
【０１０１】
好ましい態様において、粒子は、噴霧乾燥により調製される。例えば、所望のまたは標的放出速度を与えるために選択された、生物活性薬剤および１つ以上のリン脂質を含む、本明細書において「フィード溶液（feed solution ）」または「フィード混合物（feed mixture）」といわれる噴霧乾燥混合物はまた、噴霧乾燥機にフィードされる。
【０１０２】
噴霧乾燥されている混合物に存在し得る適切な有機溶媒としては、アルコール、例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールなどが挙げられるが、それらに限定されない。他の有機溶媒としては、ペルフルオロカーボン、ジクロロメタン、クロロホルム、エーテル、酢酸エチル、メチルtert- ブチルエーテルなどが挙げられるが、それらに限定されない。フィード混合物に存在し得る水性溶媒としては、水および緩衝溶液が挙げられる。有機溶媒および水性溶媒共に、噴霧乾燥機にフィードされる噴霧乾燥混合物に存在し得る。１つの態様において、約50：50〜約90：10の範囲のエタノール：水の比を有するエタノール水溶媒が好ましい。混合物は、中性、酸性またはアルカリ性のpHを有し得る。任意に、pH緩衝液が含まれ得る。好ましくは、pHは、約３〜約10の範囲であり得る。
【０１０３】
噴霧乾燥されている混合物に使用される溶媒または溶液の合計量は、一般的に99重量％より多い。噴霧乾燥されている混合物に存在する固体（薬物、リン脂質および他の成分）の量は、約1.0 重量％未満である。好ましくは、噴霧乾燥されている混合物における固体の量は、約0.05重量％〜約0.5 重量％の範囲である。
【０１０４】
噴霧乾燥工程において有機溶媒および水性溶媒を含む混合物を使用することにより、粒子中の親水性と疎水性成分の組合わせの可溶化を容易にするためのリポソームまたは他の構造または複合体の形成を必要とせずに、親水性と疎水性（すなわちリン脂質）成分の組合わせを可能にする。
【０１０５】
適切な噴霧乾燥技術が、例えば、K.Masters による「噴霧乾燥ハンドブック(Spray Drying Handbook) 」,John Wiley & Sons,New York,1984に記載されている。一般に、噴霧乾燥の間に、加熱空気または加熱窒素などの熱ガス由来の熱を使用して、連続液体フィードを噴霧することにより形成された液滴由来の溶媒をエバポレートする。他の噴霧乾燥技術は、当業者に周知である。好ましい態様において、ロータリーアトマイザーが使用される。回転噴霧を使用する適切な噴霧乾燥機の例としては、Niro,Denmarkにより製造されたMobile Minor噴霧乾燥機が挙げられる。熱ガスは、例えば、空気、窒素またはアルゴンであり得る。
【０１０６】
好ましくは、本発明の粒子は、約100 ℃〜約400 ℃の間の入口温度および約50℃〜約130 ℃の間の出口温度を使用する噴霧乾燥により得られる。
【０１０７】
粗面テクスチャーを有する噴霧乾燥粒子は、粒子凝集を低減し、粉末の流動性を改善するために作製され得る。乾燥粉末吸入デバイスを介してエーロゾル化を増強する特性を有する噴霧乾燥粒子が、作製され得、口、喉および吸入デバイスへのより低い沈着をもたらす。
【０１０８】
本発明の粒子は、肺系への薬物送達に適切な組成物中で使用され得る。例えば、かかる組成物は、患者への投与、好ましくは吸入による投与のための粒子および薬学上許容され得るキャリアを含み得る。粒子は、治療剤を含まないより大きなキャリア粒子と共に同時送達され得、後者は、例えば約50mm〜約100mm の範囲の質量メジアン直径を有する。粒子は、呼吸系への投与のために、それのみで、または液体（例えば生理食塩水）もしくは粉末などの任意の適切な薬学上許容され得るキャリア中で投与され得る。
【０１０９】
医薬、例えば上記の薬物のうち１つ以上を含む粒子は、処置、予防または診断の必要な患者の気道に投与される。呼吸系への粒子の投与は、当該分野で公知の手段により行われ得る。例えば、粒子は、吸入デバイスから送達される。好ましい態様において、粒子は、乾燥粉末吸入器(DPI) を介して投与される。メーター用量吸入器(MDI) 、ネブライザーまたは点滴注入技術もまた使用され得る。
【０１１０】
患者の気道に粒子を投与するために使用され得る種々の適切なデバイスおよび方法は、当該分野で公知である。例えば、適切な吸入器が、1976年8 月5 日にValentini らに発行された米国特許第4,069,819 号明細書、1991年2 月26日にValentini らに発行された米国特許第4,995,385 号明細書、および1999年12月7 日にPattonらに発行された米国特許第5,997,848 号明細書に記載されている。患者の気道に粒子を投与するために使用され得る種々の適切なデバイスおよび方法は、当該分野で公知である。例えば、適切な吸入器が、Valentini らに発行された米国特許第4,995,385 号明細書および米国特許第4,069,819 号明細書、Pattonらに発行された米国特許第5,997,848 号明細書に記載されている。他の例としては、限定されないが、Spinhaler （登録商標）(Fisons,Loughborough,U.K.)、Rotahaler （登録商標）(Glaxo-Wellcome,Research Triangle Technology Park,North Carolina) 、Flow Caps （登録商標）(Hovione,Loures,Portugal) 、Inhalator （登録商標） (Boeringer-Ingelheim,Germany)、およびAerolizer （登録商標）(Novartis,Switzerland)、Diskhaler(Glaxo-Wellcome,RTP,NC)および当業者に公知の他のものが挙げられる。好ましくは、粒子は、乾燥粉末吸入器を介して乾燥粉末として投与される。
【０１１１】
気道に投与された粒子は、上気道（中咽頭および喉頭）、その後に気管支および細気管支への分岐部に続く気管を含む下気道を通過し、その後、最終的な呼吸領域である肺胞または深肺へと至る呼吸細気管支に順番に分かれる末端細気管支を通過して運ばれる。本発明の好ましい態様において、粒子の質量のほとんどは、深肺または肺胞に沈着する。本発明の別の態様において、送達は主に中心気道に対してである。さらなる態様において、送達は、小気道（small airway）に対してである。上気道への送達も得られ得る。
【０１１２】
本発明の１つの態様において、粒子の肺系への送達は、2000年6 月9 日に提出された米国特許出願「大きな治療用質量エーロゾルの非常に有効な送達」、米国出願第09/591,307号（本明細書にその全体が参考として援用される）に記載されている単回の呼吸作動性ステップである。本発明の別の態様において、吸入器容器に保管された粒子の質量の少なくとも50％が、被験体の呼吸系に単回の呼吸活性化ステップで送達される。さらなる態様において、医薬の少なくとも５ミリグラム、好ましくは少なくとも10ミリグラムが、単回呼吸で、容器に封入された粒子を被験体の気道に投与することにより送達される。15、20、25、30、35、40および50ミリグラム程の高量が送達され得る。
【０１１３】
本明細書で使用される場合、用語「有効量」は、所望の治療または診断効果あるいは効力を達成するのに必要な量を意味する。薬物の実際の有効量は、利用される具体的な薬物またはその組合せ、特に処方される組成物、投与の形態、患者の年齢、体重、状態、ならびに治療される症状または状態の発現の重篤度により変化し得る。特定の患者に対する用量は、従来の考察を用いて（例えば、適切な従来の薬理学的プロトコルによる）当業者により決定され得る。例えば、硫酸アルブテロールの有効量は、約100 マイクログラム( μg)〜約10ミリグラム(mg)の範囲である。
【０１１４】
エーロゾル用量、処方および送達系はまた、例えば、Gonda,I.「気道への治療剤および診断剤の送達のためのエーロゾル」Critical Reviewsin Therapeutic Drug Carrier Systems,6:273-313,1990; およびMoren 「エーロゾル用量型および処方」Aerosolsin Medicine,Principles,Diagnosis and Therapy,Morenら編、Esevier,Amsterdam,1985に記載されているような、粒子治療適用に対して選択され得る。
【０１１５】
本発明のメカニズムになんら特定の解釈に拘束することを望まないが、肺への薬物の送達の予定である大きな多孔性粒子（本明細書において、空気力学的に軽い粒子ともいう）は、生涯にいくつもの異なる環境条件（すなわち、温度および湿度）に遭遇すると考えられる。一旦噴霧乾燥されると、これらの粒子は、一般的に室温にて梱包および貯蔵される。ヒトへの送達の際、粒子は、肺の深部の途中で種々の条件に遭遇する。気管支を介する移動中に、粒子は、体温まですぐに温まり、かつ水を用いて飽和された吸気（37℃で約100 ％湿度）中で運ばれる。一旦肺胞領域に入ると、粒子は、(a) 水の薄い層（１ミクロン未満）を有する領域および(b) 水のより深いプール（ミクロン深さより深い）を有する領域（両者は肺界面活性剤で覆われている）に遭遇し得る。肺胞領域はまた、外来粒子を包み込み除去しようとするマクロファージを含む。粒子の徐放のための粒子完全性および潜在性は、粒子がこれらの環境条件の変化に遭遇した際にインタクトなままでいる能力に一部依存する。
【０１１６】
使用される脂質の性質は、粒子の物理的完全性に重要な役割を果たすと考えられている。例えば、バルク水和状態において、DPPCは、約41℃の転移温度（T c ）を有する。この温度より低いと、バルク水和DPPC分子は、結晶形態または硬質ゲル形態のいずれかで存在し、炭化水素鎖は規則正しい状態で近接して詰め込まれる。この温度より高いと、DPPCの炭化水素鎖が伸長し、不規則となり、より崩壊しやすくなる。飽和ホスファチジルコリンの炭化水素鎖長をそれぞれ、２単位だけ増やすと、この転移温度は増加する。例えば、ジステアロイルホスファチジルコリン（DSPC）は、DPPCの転移温度と比較して14℃増加した約55℃のT c を有する。さらに、異なるヘッド基を有する他の型のリン脂質は、同じ炭化水素鎖長のホスファチジルコリンよりも高い転移温度を有し得る。例えば、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（DPPE）は、DPPCの転移温度と比較して22℃増加した約63℃のT c を有する。これらのようなリン脂質は、所定の温度で、バルク状態においてDPPCと比較してより硬質形態で存在する傾向がある。
【０１１７】
本発明は、以下の非限定的な実施例を参考にしてさらに理解される。
【実施例】
【０１１８】
幾何学的サイズ分布を、Coulter Multisizer II を使用して測定した。約５〜10mgの粉末を、粒子の一致が５〜８％になるまで50mLイソトン（isoton）II溶液に添加した。500,000 個より多い粒子を各バッチで計数した。
【０１１９】
空気力学的サイズ分布を、Aerosizer/Aerodispenser （AmherstProcess Instruments, Amherst, Massachusetts）を使用して測定した。約2mg の粉末を、Aerodisperser に導入し、空気力学的サイズを飛行時間の測定により測定した。
【０１２０】
実施例１Ａ：
薬物放出の粒子マトリクスの転移温度への依存性を試験するため、リン脂質および低親水性薬物硫酸ブタノールを含む粉末を噴霧乾燥した。70％無水エタノールおよび30％蒸留水を使用した。表３は、粒子の組成を示す：
【０１２１】
【表３】
2004520409.tif 000013
【０１２２】
インビトロ放出実験を、溶解媒体としてリン酸緩衝化生理食塩水（PBS ；10mM、pH7.4 ）を用いて実施した。硫酸アルブテロール（USP 、Spectrum Quality Products Inc.から受領した結晶性粉末）または硫酸アルブテロール乾燥粉末製剤をフィルターホルダーを使用して60L/分で減圧ポンプを操作してフィルター膜に沈着させた。ポリフッ化ビニルジエン（PVDF）膜フィルター（0.45μm 孔）を本研究に使用した。全ての溶解実験を、溶解器具を通るフローを使用して37℃にて実施した。本器具を使用して、溶解媒体を蠕動ポンプにより10ml/ 分のフィルター通過流速で循環させた。試料を、予め決めた時点で溶解媒体リザーバから回収した。回収試料体積を、等しい体積の新鮮緩衝液を媒体リザーバに添加することで補充した。試料を、280nm でのUV吸収をモニターすることで分析した。溶解した累積の硫酸アルブテロールを、フィルターに沈着した初期の全硫酸アルブテロールのパーセンテージとして表し、時間に対してプロットした。溶解プロフィールを一次放出方程式：
【０１２３】
【数９】
2004520409.tif 000014
【０１２４】
（式中、ｋは一次放出定数であり、Ｃ(t) はｔ時間（分）での硫酸アルブテロールの濃度であり、Ｃ(inf) は溶解媒体中の最大の理論的硫酸アルブテロール濃度である）
に当てはめた。
【０１２５】
図１は、３つの異なる製剤（Ａ、ＢおよびＣ）についての一次放出定数を示す。放出速度は、より高い転移温度を有するリン脂質（DSPC；55℃で理論上転移）を含む乾燥粉末製剤Ｃで最も低く、より低い転移温度を有するリン脂質（DPPC；41℃で理論上転移）を含む乾燥粉末製剤Ａで最も高かった。DPPCおよびDSPCの組合わせを含む乾燥粉末製剤Ｂは、中間の放出速度を示した。
【０１２６】
製剤Ａ、ＢおよびＣの示差走査熱量測定法（DSC ）測定（1 ℃/ 分の加熱速度）を実施した。温度記録を図２に示す。これらの実験の結果は、最も高いマトリクス転移温度を有する製剤が最も遅い放出速度の原因であり、また逆も同じである示した。マトリクス転移温度と一次放出定数との間の反比例の関係を図３に示す。
【０１２７】
実施例１Ｂ：
タンパク質が高い転移温度および低い転移温度を有する賦形剤を用いて製剤化できるかどうかを試験するため、リン脂質とモデルタンパク質、ヒト血清アルブミン（HSA ）を含む粉末を、70％の無水エタノールおよび30％蒸留水溶媒を用いて噴霧乾燥した。粒子の組成を表４に示す。
【０１２８】
【表４】
2004520409.tif 000015
【０１２９】
DSC 実験の温度記録を図４に示す。DPPCを用いて製剤化した粒子（製剤Ｉ）のマトリクス転移温度は、DSPCを用いて製剤化した粒子（製剤II）よりも低かった。この結果は、粒子のマトリクス転移温度も適切な成分を選択することにより高分子（例えば、ヒト血清アルブミン）を含む粒子に対して制御できることを示した。これらの結果はまた、低分子およびペプチド／タンパク質を異なるマトリクス転移温度を有する粒子において使用し得ることを示した。
【０１３０】
実施例２：
硫酸アルブテロールを含む粒子を、すでに上記したように調製した。噴霧乾燥パラメータは、入口温度143 ℃、フィード速度100ml/分、噴霧速度47000RPM、およびプロセス空気92kg/ 時であった。
【０１３１】
表５は、いくつかのバッチの粒子の組成、タップ密度、質量メジアン幾何学的直径（MMGD）および質量メジアン空気力学的直径（MMAD）を示す。
【０１３２】
結果は、粒子が肺系、特に深肺への送達に適切であることを示す。
【０１３３】
【表５】
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【０１３４】
実施例３
硫酸アルブテロールを含む粒子を上記のように調製した。製剤（76％リン脂質、20％ロイシンおよび４％硫酸アルブテロール）を70/30 （v/v ）エタノール/ 水溶媒から噴霧乾燥した。インビトロ放出およびDSC を上記のように実施した。種々の製剤の組成および結果を表６に示す。図５は、種々の硫酸アルブテロール乾燥粉末製剤についての一次放出定数およびマトリクス転移温度の間の相関を示すプロットである。
【０１３５】
【表６】
2004520409.tif 000017
【０１３６】
実施例４
本研究の目的は、完全に水和した条件下での、粒子の物理的完全性に対する、粒子を作製するのに用いた材料の転移温度の影響を測定することである。大きな多孔性ブランク粒子（例えば、インビトロ環境条件下では生物活性剤を含まない粒子）の完全性を評価するための研究を設計した。バルク水環境における粒子の完全性を測定するための研究を実施した。Coulter Multisizerを、25℃および37℃の両方での生理食塩水溶液中における、時間の関数として粒子の幾何学的サイズの変化をモニターするために使用した。光学顕微鏡を使用して、CoulterMultisizer 測定と共に粒子の形態を時間の関数として試験した。
【０１３７】
ヘッド基またはアシル鎖のいずれかによってDPPCより高い鎖融解転移温度を有するリン脂質を使用することのバルク水環境における粒子の完全性への影響を試験するために使用した製剤を、表７に示す。
【０１３８】
【表７】
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【０１３９】
バルク水の添加の際の粒子の形態における変化を光学顕微鏡によって試験した。まず、粒子を乾燥顕微鏡スライドに分散し、続いて乾燥状態を投影した。次に25℃の水滴をスライド上におき、水滴中に懸濁された粒子の形態を記録した。水滴が完全に蒸発する（約10分の期間後に典型的に生じる）まで画像を撮った。
【０１４０】
粒子製剤のサイズおよび形態を、以下の手順によって25℃および37℃での時間の関数としてモニターした：
【０１４１】
ｉ．約2mg の粒子を25℃または37℃のいずれかで維持した15mlのイソトン（濾過緩衝化生理食塩水からなる生理的ベースの媒体）中に配置し、緩やかに攪拌した。
【０１４２】
ｉｉ．選択した時点で、工程(i) 由来の200 マイクロリットルの懸濁液を20mlのイソトンに配置し、CoulterMultisizer を使用して粒子サイズ含量について分析した。
【０１４３】
ｉｉｉ．この工程(ii)で、工程(i) 由来の溶液の液滴を顕微鏡スライドに配置し、液滴内に懸濁した粒子を光学顕微鏡を用いて投影した。
【０１４４】
結果は、DPPCを含む粒子が25℃のバルク水においてその物理的完全性を維持した（表８）が、37℃にて相対的に大きな粒子幾何学的直径を失い始めた（表８）ことを示す。対照的に、DSPCおよびDPPEなどのリン脂質を含む粒子は、37℃のバルク水においてその物理的完全性を維持するようであった（表９）。これらの結果は、DSPCおよびDPPEを含む製剤が完全な水和条件下でその物理的完全性を維持するようであり、従って肺へ送達される際に薬物分子の徐放に使用するための潜在性を有していることを示した。
【０１４５】
得られた結果は、バルク水条件下でブランク粒子の脂質組成が大いに影響し、粒子の物理的完全性および溶解速度を制御するために使用できることを示した。
【０１４６】
【表８】
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【０１４７】
【表９】
2004520409.tif 000020
【０１４８】
実施例５
76％DSPC、20％ロイシンおよび4 ％硫酸アルブテロールの組成（製剤Ａ）または60％DPPC、36％ロイシンおよび4 ％硫酸アルブテロールの組成（製剤Ｂ）を有する硫酸アルブテロールを含む粒子を上記のように調製した。その物性を表10に示す。
【０１４９】
【表１０】
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【０１５０】
雄性Hartley モルモットをHilltop Lab Animals （Scottsdale,PA ）から得た。使用時には、動物は、389 〜703gの間の体重であり、約60〜90日齢であった。動物は、到着時は良い健康状態であり、使用までそれを維持した；病気の臨床兆候はいつも観察されなかった。動物を小部屋の中に配置した標準的なプラスチックケージに１動物１ケージで収容した：各ケージは２５ケージまでの収容能力を有し得る。少なくとも１匹のセントリー（sentry）モルモットを各小部屋で管理した。ケージ内に使用した敷き藁は、Alphachip 加熱処理マツ軟木研究用敷き藁（Northeastern Products Corp., Warrensburg, NY）であった。動物を、使用前少なくとも1 週間、周囲に順応化させた。動物を使用前１ヶ月以内収容した。明/ 暗サイクルは12/12 時間であった。動物室の温度は約70°F の周囲室温であった。動物は自由に食糧および水にアクセス可能であった。食糧はLabDiet-Guinea Pig番号5025（PMI Nutrition International, Inc., Brentwood, MO）であった。水は清潔な水道水由来であった。
【０１５１】
5mg の粉末の用量（200 μg の硫酸アルブテロールを送達するのに必要な粉末量）を、強制吸入により投与した。各用量を100mL のピペットチップにいれて重量測定した。簡単には、ピペットチップの尖った端をパラフィルムを用いてシールし、適切な量の粉末をピペットチップに配置して重量測定した。適切な量の粉末をピペットチップに含んだ後、ピペットチップの広い端をパラフィルムを用いてシールした。用量をシンチレーションバイアルに垂直（小さな先端を下）に貯蔵し、次いで乾燥剤（dessicant ）入りのプラスチック箱に配置し、室温で貯蔵した。重量測定の前に、バルク粉末を、温度および湿度を制御した乾燥室に貯蔵した。用量は％w/w に基づいた。全ての研究に使用した薬物の用量は200 μg の硫酸アルブテロールであった。使用した各粉末は4 ％w/w 硫酸アルブテロールであるので、用量あたりに投与される粉末の合計重量は5mg であった。重量に基づく用量の加減はなかった。動物を60mg/kg のケタミンおよび2mg/kgのキシラジンを用いてi.p.で麻酔し、次いでモルモットを小さな硬い先端のカニューレを用いて気管切開した。粉末を人工呼吸器を介して4ml 空気容量、60呼吸/ 分の頻度で送達した。粉末送達の後、モルモット咽喉を創傷クリップを用いて閉鎖した。次いで、モルモットを、肺抵抗を評価するまでケージに戻した。強制吸入操作のより詳細については、Ben-JebriaA ら、Pharm Res 1999 16(4):555-61 を参照のこと。用量を各動物につき１回のみ投与した。
【０１５２】
本研究の終点は、カルバコールまたはメタコリン誘導気管支拘束に対する保護を提供することである。硫酸アルブテロールを、公知の気管支収縮剤、カルバコールでのチャレンジ前の所定の時間に投与した。肺抵抗の測定に使用した器具は、Buxco Electronics 製である。Buxco システムは、プレチスモグラフ内の圧力およびフローにおける変化を使用して、空気流に対する肺抵抗を測定する。ベースライン抵抗における変動を補正するため、肺抵抗における変化（ΔRL）を報告する。したがって、肺抵抗における変化が増加すると、動物はだんだん気管支収縮を受ける。
【０１５３】
各モルモットを、60mg/kg のケタミンおよび2mg/kgのキシラジンをi.p.送達して麻酔した。気管カニューレを気管に挿入し、縫合糸を使用して所定の箇所に堅く結んだ。次いで、動物を、プレチスモグラフに配置し、気管カニューレをトランスデューサーに接続したポートに取り付けた。i.p.注射したスクシニルコリン（5mg/kg）を投与して、自発呼吸を排除した。一旦、自発呼吸を停止すると、実験に必要な間、動物に肺換気（4ml 、60呼吸/ 分）を行った。次いで、Buxco プログラムを開始した。安定化７分後、プレチスモグラフ（plythesmograph）を開放し、カルバコール（130 μg/kg）をi.p.投与した。次いで、データ収集期間を、合計60分間行った。平均肺抵抗（RL）を、0 〜2 、10〜15、30〜35および55〜60分に測定した。RLにおける変化は、最も高い平均RL（通常、55〜60分で）から最も低い平均RL（通常0 〜2 分より早いか、または10〜15分で）を引くことにより測定した。さらなる情報については、Ben-JebriaA ら、Pharm Res 1999 16(4):555-61 を参照のこと。
【０１５４】
動物を3 処置群：製剤Ａ、製剤Ｂおよびプラセボのうちの１群に割り振った。各群15〜16時間のデータを全て収集した後、次いで、動物に投薬し、以下の時点：投薬後24時間、30〜60分および20〜21時間でこの順にデータを収集した。
【０１５５】
強制吸入を使用した製剤Ａの気管内投与は、カルバコールが肺抵抗の増加を誘発する能力を減少する。製剤Ａの保護的効果は、30〜60分までに明らかであり、20〜21時間まで続いた（図７）。さらに、比較のため、投薬後15〜16時間の製剤ＡおよびＢの薬力学効果を図11に示す。これらのデータは、低いマトリクス転移を有する粒子（例えば、DPPC；製剤Ｂ）と比較すると、高いマトリクス転移を有する粒子がカルバコールに対して長期の保護を提供するので、硫酸アルブテロール製剤の薬力学効果の持続時間が賦形剤に依存することを示した。
【０１５６】
【表１１】
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【０１５７】
実施例６
リン脂質の組み合わせを含む粒子を、上記のように本質的に調製した。具体的な製剤およびその物性を表12に示す。表12に示すように、粒子は、肺送達に適切な空気力学的特性を有していた。
【０１５８】
【表１２】
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【０１５９】
実施例７
モルモットにおける肺機能を評価するために全身プレチスモグラフィ方法を使用した。麻酔をかけた動物に、気管内吸入によって試験製剤を投与した。この系は、個々のモルモットに霧状化によって得られるメタコリンを用いて経時的に繰り返しチャレンジすることを可能にした。フローパラメータに基づく気道抵抗の計算した測定値、PenH（休止増強（enhanced pause））を、メタコリン誘導性気管支収縮からの保護のマーカーとして特異的に使用した。
【０１６０】
詳細には、使用した系は、BUXCO XA肺機能ソフトウェアを備えるBUXCO 全身無制限プレチスモグラフシステム（BUXCO Electronics, Inc., Sharon, CT ）であった。このプロトコールは、SilbaughおよびMauderly（「Noninvasive Detection of Airway Constriction in Awake Guinea Pigs 」American Physiological Society, 84:1666-1669, 1984）ならびにChong ら（「Measurements of BronchoconstrictionUsing Whole-Body Plethysmograph: Comparison of Freely Moving Versus Restrained Guinea Pigs 」Journal of Pharmacological and Toxicological Methods, Vol.39(3):163-168,1998）に記載される。ベースライン肺機能（気道過剰反応）値を、いずれの実験処理の前にも測定した。次いで、気道過剰反応を、硫酸アルブテロール製剤の投与後の種々の時点（2 〜3 、16、24および42時間）での生理食塩水およびメタコリンへの応答において評価した。平均PenHを、生理食塩水またはメタコリンを用いたチャレンジ後の４分〜９分の間に収集したデータから計算した。各時点でのベースラインPenHのパーセントを、各実験動物について計算した。その後、同じ製剤を受けた動物からの値を、平均して、各時点での平均群応答（±標準誤差）を測定した。硫酸アルブテロールの名目上の用量は50μg である。
【０１６１】
雄性Hartley モルモットを、ElmHill Breeding Labs （Chelmsford, MA）から入手した。粉末量を、吸入器試料チャンバ（モルモット用の吸入器デバイス、PennCentury (Philadelphia, PA)）へ移した。吸入器器の送達チューブを、口を介して気管へ挿入し、チューブの先端がカリナ（最初の分岐）から約1cm まで進めた。吸入器試料チャンバから粉末を送達するために使用した空気体積は3mL であった（10mL注射器から送達される）。モルモットへの粉末送達を最大にするため、この注射器を、１粉末用量あたり合計で３回の空気排出のためにもう２回再充填および排出した。メタコリンチャレンジを、粉体投与後2 〜3 、16および24時間の時点で実行した。
【０１６２】
結果を図８に示す。図８に示すように、DPPCおよびDSPCの組み合わせを含む粒子は、DPPCまたはDSPCのみを含む製剤と比較して、硫酸アルブテロールの遅い放出を提供した。
【０１６３】
実施例８
モルモットに、本質的に実施例７に記載されるようにして硫酸アルブテロールを含む粒子を与えた。３つの異なるDSPC/DPPC 比を使用した。結果を図９に示す。図９に示すように、1 ：1 〜1 ：3 の比のDSPC：DPPCは、3 ：1 の比のDSPC：DPPCと比較して硫酸アルブテロールの長期作用を与えた。
【０１６４】
本発明は、その好ましい態様を参照して、詳細に示され、そして記載されているが、形態および詳細における種々の変化が、添付の特許請求の範囲によって包含される本発明の範囲から逸脱せずに、その中でなされ得ることは、当業者によって理解される。
【図面の簡単な説明】
【０１６５】
【図１】図１は、硫酸アルブテロール製剤および非製剤化硫酸アルブテロールを含む、本発明の粒子の一次放出定数を示すプロットである。
【図２】図２は、硫酸アルブテロールの３つの製剤の示差走査熱分析（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【図３】図３は、異なる硫酸アルブテロール製剤の一次定数とマトリックス転移温度との相関関係を示すプロットである。
【図４】図４は、ヒト血清アルブミンの２つの製剤の示差走査熱分析（ＤＳＣ）サーモグラムを示す。
【図５】図５は、異なる硫酸アルブテロール製剤の一次放出定数とマトリックス転移温度との相関関係を示す。
【図６】図６は、摂氏約３７℃より低いマトリックス転移温度を有する粒子、および約３７℃より高いマトリックス転移温度を有する粒子の粒子挙動の概略図である。
【図７】図７は、モルモットにおけるカルバコール誘導性肺耐性に対する２つの硫酸アルブテロール製剤の効果を示すプロットである。
【図８】図８は、３つの異なる硫酸アルブテロール製剤を受けたモルモットに関する、時間の関数としてのベースラインｐｅｎＨの割合を示すプロットである。
【図９】図９は、異なるＤＳＰＣ：ＤＰＰＣ比の硫酸アルブテロール製剤を受けたモルモットに関する、時間の関数としてのベースラインｐｅｎＨの割合を示すプロットである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際公開パンフレット】
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2004520409.tif 000098
2004520409.tif 000099
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004520409.tif 000100
2004520409.tif 000101
【国際調査報告】
2004520409.tif 000102
2004520409.tif 000103
2004520409.tif 000104