(57)【要約】一連の新規ステロイド誘導体について説明する。ステロイド誘導体は抗菌剤である。ステロイド誘導体はまた、エリスロマイシンおよびノボビオシンを含む他の抗生物質に対して細菌を感作するように作用する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩：
【化１】
2004506645.tif 000129
式中、
融合環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは独立して飽和または完全もしくは部分的に不飽和である；ならびに
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが独立して、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシから選択されるという条件で、
Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、およびＲ１７はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、オキソ、第二のステロイドに結合した連結基、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である；ならびに
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１３、およびＲ１４はそれぞれ独立して
融合環Ａ、Ｂ、ＣもしくはＤのうち一つが不飽和である場合に、該部位の炭素原子の原子価を完全にするために欠失される、または
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換もしくは非置換アリール、Ｃ１−Ｃ１０ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、第二のステロイドに結合した連結基、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である。
【請求項２】
Ｒ５とＲ９、Ｒ８とＲ１０、およびＲ１３とＲ１４の対のうち少なくとも一つが欠失しており、欠失位置における環炭素原子の原子価が二重結合によって完結される（ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ）、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも三つが独立して、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１〜Ｒ１４のうち三つが独立して、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシからなる群より選択される、請求項３記載の化合物。
【請求項５】
第二のステロイドが式Ｉの化合物である、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
連結基が（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル−オキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１３、およびＲ１４のいずれも欠失していない、請求項１記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ３、Ｒ７、およびＲ１２のそれぞれが独立して、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルカルボキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である、請求項１記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、およびＲ１６が水素である、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１７が−ＣＲ１８Ｒ１９Ｒ２０であり、式中、Ｒ１８、Ｒ１９、およびＲ２０のそれぞれが独立して、水素、ヒドロキシル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アリール、（Ｃ１−Ｃ１０）ハロアルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル、オキソ、および第二のステロイドに結合した連結基からなる群より選択される、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ３、Ｒ７、およびＲ１２のそれぞれが独立して、ｎが１〜３である−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２、−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ２、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ３、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＮ、および、Ｑ５が任意のアミノ酸の側鎖である−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＨＣ（Ｑ５）−ＮＨ２からなる群より選択される、請求項８記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ３、Ｒ７およびＲ１２のそれぞれが−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２であり、ｎが１〜４である、請求項８記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１７が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２であり、ｎが１〜７である、請求項１２記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１７が−ＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ１Ｒ２であり、式中、ｎが０〜２であり、Ｒ１およびＲ２が独立して（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、またはアラルキルである、請求項１２記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１７が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２）ｎ１−ＣＯ−ＯＲ３であり、式中、Ｒ３が−（ＣＨ２）ｎ２Ｎ＋（ＣＨ３）３から選択され、ｎ１およびｎ２が独立して１〜４である、請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ３、Ｒ７およびＲ１２が−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ−ＮＨ２であり、ｎが１〜５である、請求項１５記載の化合物。
【請求項１７】
下記式を有する請求項１記載の化合物：
【化２】
2004506645.tif 000130
式中、ｎは１〜３であり、Ｂｎはベンジル基である。
【請求項１８】
下記式を有する請求項１記載の化合物：
【化３】
2004506645.tif 000131
式中、ｎは１〜３であり、Ｒは、ｎ−オクチルおよびトリメチルエチルアンモニオから選択される。
【請求項１９】
式
【化４】
2004506645.tif 000132
を有する請求項１記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つがヒドロキシルであって、融合環Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ上の残りの部分が式Ｉで定義される、式ＩＶの化合物
【化５】
2004506645.tif 000133
を求電子試薬に接触させ、Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシである式ＩＶのアルキルエーテル化合物を作製する段階；
アルキルエーテル化合物を、Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが独立して（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシおよび（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシからなる群より選択されるアミノ前駆体化合物に変換する段階；ならびに
アミノ前駆体化合物を還元して式Ｉの化合物を形成する段階
を含む、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を調製する方法：
【化６】
2004506645.tif 000134
式中、
融合環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは独立して飽和または完全もしくは部分的に不飽和である；ならびに
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが独立して、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシから選択されるという条件で、
Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、およびＲ１７はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、オキソ、第二のステロイドに結合した連結基、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である；ならびに
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１３、およびＲ１４はそれぞれ独立して
融合環Ａ、Ｂ、ＣもしくはＤのうち一つが不飽和である場合に、該部位の炭素原子の原子価を完全にするために欠失される、または
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換もしくは非置換アリール、Ｃ１−Ｃ１０ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、第二のステロイドに結合した連結基、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である。
【請求項２１】
求電子試薬が臭化アリルである、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つがヒドロキシルであり、融合環Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ上の残りの部分が式Ｉで定義される、式ＩＶの化合物
【化７】
2004506645.tif 000135
を求電子試薬に接触させ、Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシである式ＩＶのアルキルエーテル化合物を作製する段階；
アルキルエーテル化合物を、Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシおよび（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシからなる群より独立して選択されるアミノ前駆体化合物に変換する段階；
アミノ前駆体化合物を還元し、Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシであるアミノアルキルエーテル化合物を作製する段階；ならびに　アミノアルキルエーテル化合物をグアニジノ産生求電子試薬に接触させ、式Ｉの化合物を形成する段階
を含む、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を作製する方法：
【化８】
2004506645.tif 000136
式中、
融合環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは独立して飽和または完全もしくは部分的に不飽和である；ならびに
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが独立して、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシから選択されるという条件で、
Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、およびＲ１７はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、オキソ、第二のステロイドに結合した連結基、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である；ならびに
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１３、およびＲ１４はそれぞれ独立して
融合環Ａ、Ｂ、ＣもしくはＤのうち一つが不飽和である場合に、該部位の炭素原子の原子価を完全にするために欠失される、または
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換もしくは非置換アリール、Ｃ１−Ｃ１０ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、第二のステロイドに結合した連結基、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である。
【請求項２３】
グアニジノ産生求電子試薬がＨＳＯ３−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ２である、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
請求項１記載の化合物の有効量を含む、薬学的組成物。
【請求項２５】
組成物がさらなる抗生物質を含む、請求項２４記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
請求項１記載の化合物を含む有効量の抗菌組成物を宿主に投与することによって、宿主の微生物感染症を治療する方法。
【請求項２７】
宿主がヒトである、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
抗菌組成物が、微生物細胞に送達される第二の抗菌物質をさらに含む、請求項２６記載の方法。
【請求項２９】
第二の抗菌物質が抗生物質である、請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
感染症が細菌感染症である、請求項２６記載の方法。
【請求項３１】
感染症がグラム陰性菌感染症である、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
細菌感染症が、リピドＡが大幅な割合で含まれている外膜を特徴とする細菌による感染症である、請求項３０記載の方法。
【請求項３３】
透過性を増強する量の請求項１記載の化合物を細胞に投与することによって、細胞透過性を増強する方法。
【請求項３４】
細胞に導入される物質を細胞に投与する段階をさらに含む、請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
細胞が細菌である、請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
細菌がグラム陰性菌である、請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
細胞が精子細胞であり、化合物が殺精子組成物の一部である、請求項３４記載の方法。
【請求項３８】
候補化合物および請求項１記載の化合物を微生物に投与する段階、ならびに候補化合物が微生物に対して静的（ｓｔａｔｉｃ）作用または毒性作用を有するか否かを決定する段階を含む、微生物に対して有効な化合物を同定する方法。
【請求項３９】
微生物がグラム陰性菌である、請求項３８記載の方法。
【請求項４０】
請求項１記載の化合物を含む有効量の抗微生物組成物を微生物に接触させる段階を含む、微生物の増殖を制御する方法。
【請求項４１】
細胞に導入される抗微生物物質と併用して請求項１記載の化合物を含む物質の組成物。
【請求項４２】
化合物が環系の同じ面に結合した三つの鎖を含み、鎖のそれぞれが複数の窒素含有基を含み、複数の窒素含有基が少なくとも一つの原子によって環系から分離されており、かつ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ（Ｃ１−Ｃ１）アルキルアミノ基、または（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ（Ｃ１−Ｃ１）アルキルアミノ（Ｃ１−Ｃ１）アルキルアミノ基である、それぞれの環が原子５個〜７個を有し、環系が二つの面を有する、少なくとも四つの融合環の環系を含む化合物。
【請求項４３】
複数の窒素含有基のそれぞれが、少なくとも２つの原子によってステロイド骨格から分離されている、請求項４２記載の化合物。
【請求項４４】
複数の窒素含有基のそれぞれが、少なくとも三つの原子によってステロイド骨格から分離されている、請求項４３記載の化合物。
【請求項４５】
複数の窒素含有基のそれぞれが、少なくとも四つの原子によってステロイド骨格から分離されている、請求項４４記載の化合物。
【請求項４６】
化合物がステロイド骨格に結合した疎水基をさらに含む、請求項４２記載の化合物。
【請求項４７】
疎水基が、置換（Ｃ３−Ｃ１０）アミノアルキル基、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ（Ｃ３−Ｃ１０）アルキル基、および（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ（Ｃ３−Ｃ１０）アルキル基からなる群より選択される、請求項４２記載の化合物。
【請求項４８】
請求項４２記載の化合物の有効量を含む、薬学的組成物。
【請求項４９】
透過性を増強する量の請求項４２記載の化合物を細胞に投与することによって、細胞透過性を増強する方法。
【請求項５０】
下記式を有する請求項１記載の化合物：
【化９】
2004506645.tif 000137
式中、Ｒ１は水素または（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノから選択され、Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノまたは（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノから選択され、かつｎは１〜３である。
【請求項５１】
Ｒ１が水素であり、Ｒ２が（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノである、請求項１記載の化合物。
【請求項５２】
Ｒ１が（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノで、Ｒ２が（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノである、請求項１記載の化合物。
【請求項５３】
下記式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩：
【化１０】
2004506645.tif 000138
式中、
融合環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは独立して飽和または完全もしくは部分的に不飽和である；ならびに
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが独立して、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシから選択されるという条件で、
Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、およびＲ１６はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、オキソ、第二のステロイドに結合した連結基、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である；
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１３、およびＲ１４はそれぞれ独立して
融合環Ａ、Ｂ、ＣもしくはＤのうち一つが不飽和である場合に、該部位の炭素原子の原子価を完全にするために欠失される、または
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換もしくは非置換アリール、Ｃ１−Ｃ１０ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、第二のステロイドに結合した連結基、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である；かつ
Ｒ１７は、置換または非置換アルキルカルボキシアルキルおよび保護または脱保護ポリ（アミノアルキル）からなる群より選択される。
【請求項５４】
下記式を有する化合物：
【化１１】
2004506645.tif 000139
式中、ｎは１〜３である。
【請求項５５】
下記式を有する化合物：
【化１２】
2004506645.tif 000140
式中、ｎは１〜３である。
【請求項５６】
式
【化１３】
2004506645.tif 000141
を有する化合物。
【請求項５７】
式
【化１４】
2004506645.tif 000142
を有する化合物。
【請求項５８】
式
【化１５】
2004506645.tif 000143
を有する化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、１９９８年３月６日付けで出願されたＰＣＴ／ＵＳ ９８／０４４８９の一部継続出願である、１９９９年１月１９日付けで出願された米国特許出願第０９／２３４，００８号の一部継続出願であり、これらはその全文が参照として本明細書に組み入れられる。
【０００２】
政府の権利宣言
本発明は国立衛生研究所の支援によりなされたものである（ＧＭ５４６１９）。政府は本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
発明の背景
本発明は、新規ステロイド誘導体、ならびにこれら化合物を調製するための過程および中間体に関する。
【０００４】
グラム陰性菌の外膜に強く会合する幾つかの化合物は、外膜を破壊して、透過性を増加させることが知られている。透過性の増加は、グラム陰性菌の他の抗生物質に対する感受性を増加させうる。このタイプの化合物で最も研究が進んでいるのがポリミキシン抗生物質である。グラム陰性菌の外膜の主要な構成成分（リピドＡ）に対するポリミキシンＢの結合を調べる試験の例は、Ｄ．Ｃ．モリソン＆ヤコブス（Ｄ．Ｃ． Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ａｎｄ Ｄ． Ｍ． Ｊａｃｏｂｓ）、「細菌のリポ多糖類の一部である脂質に対するポリミキシンＢの結合（Ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ Ｐｏｌｙｍｉｘｉｎ Ｂ ｔｏ Ｔｈｅ Ｌｉｐｉｄ ａ Ｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ）」、Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９７６、１３巻、８１３〜８１９を参照のこと。グラム陰性菌に対するポリミキシン誘導体の結合を含む試験の例に関しては、Ｍ． バアラ＆Ｐ． ビルヤネン（Ｍ． Ｖａａｒａ ａｎｄ Ｐ． Ｖｉｌｊａｎｅｎ）、「グラム陰性菌に対するポリミキシンＢノナペプチドの結合（Ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ Ｎｏｎａｐｅｐｔｉｄｅ ｔｏ Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ Ｂａｃｔｅｒｉａ）」、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、１９８５、２７巻、５４８〜５５４を参照のこと。
【０００５】
グラム陰性菌の膜は、細菌細胞内の標的に対する抗生物質および宿主防御分子のアクセスを制限する半透過性の分子「ふるい」である。このように、外膜の透過性バリアと相互作用してそれを分解することができる陽イオンおよびポリ陽イオンは、抗生物質および宿主防御分子に対するグラム陰性病原菌の感受性を増加させることができる。ハンコック＆ワン（Ｈａｎｃｏｃｋ ａｎｄ Ｗｏｎｇ）は、広範囲のペプチドが透過性バリアを透過することができることを証明し、それらを記述するために「透過剤」という名称を作り出した（ハンコック＆ワン（Ｈａｎｃｏｃｋ ａｎｄ Ｗｏｎｇ）、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． ２６：４８、１９８４）。
【０００６】
発明の概要
本発明は式Ｉの化合物を特徴とする。
【化１６】
2004506645.tif 000002
式中、
融合環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは独立して飽和または完全もしくは部分的に不飽和である；ならびに
Ｒ１〜Ｒ１４のうち少なくとも２つが独立して、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシから選択されるという条件で、
Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、およびＲ１７はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、オキソ、第二のステロイドに結合した連結基、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖（グリシンの側鎖、例えばＨを含む）であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である；ならびに
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１３、およびＲ１４はそれぞれ独立して
融合環Ａ、Ｂ、ＣもしくはＤのうち一つが不飽和である場合に、該部位の炭素原子の原子価を完全にするために欠失される、または
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換もしくは非置換アリール、Ｃ１−Ｃ１０ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、第二のステロイドに結合した連結基、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である。
【０００７】
本明細書において用いられる「縮合環」という用語は、好ましくは複素環、または炭素環となりうる。
【０００８】
本明細書において用いる「飽和」という用語は、縮合環におけるそれぞれの原子がそれぞれの原子の原子価が満たされるように、水素であるか、または置換されている式Ｉの縮合環を指す。
【０００９】
本明細書において用いられる「不飽和」という用語は、縮合環のそれぞれの原子の原子価が水素または他の置換基で満たされていない式Ｉの縮合環を指す。例えば、縮合環において隣接する炭素原子は、互いに二重結合することができる。不飽和はまた、以下の対の少なくとも１つを欠失すること、および環状炭素原子の原子価をこれらの欠失位で二重結合によって完全にすることを含むことができる；Ｒ５とＲ９；Ｒ８とＲ１０；およびＲ１３とＲ１４など。
【００１０】
本明細書において用いられる「非置換」という用語は、それぞれの原子の原子価が満たされているようにそれぞれの原子が水素化されている部分を指す。
【００１１】
本明細書において用いられる「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素のようなハロゲン原子を指す。
【００１２】
アミノ酸側鎖の例には、Ｈ（グリシン）、メチル（アラニン）、−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２（アスパラギン）、−ＣＨ２−ＳＨ（システイン）、および−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３（トレオニン）が含まれるがこれらに限定しない。
【００１３】
アルキル基は、置換または非置換であってもよい分岐または非分岐炭化水素である。分岐アルキル基の例には、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、イソヘキシルが含まれる。置換アルキル基は１、２、３またはそれ以上の置換基を有してもよく、それらは同じまたは異なっていてもよく、それぞれが水素原子を置換する。置換基はハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ）、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、アミノ、保護されたアミノ、カルボキシ、保護されたカルボキシ、シアノ、メチルスルホニルアミノ、アルコキシ、アシルオキシ、ニトロ、および低級ハロアルキルである。
【００１４】
本明細書において用いられる「置換」という用語は、同じまたは異なっていてもよくそれぞれが水素原子を置換する、１、２、３個またはそれ以上の置換基を有する部分を指す。置換基の例には、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ）、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、アミノ、保護されたアミノ、カルボキシ、保護されたカルボキシ、シアノ、メチルスルホニルアミノ、アルコキシ、アルキル、アリール、アラルキル、アシルオキシ、ニトロ、および低級ハロアルキルが含まれるがこれらに限定しない。
【００１５】
アリール基は、環が炭素原子（例えば、Ｃ６−１４、Ｃ６−１０アリール基）で構成される、Ｃ６−２０芳香環である。ハロアルキルの例には、フルオロメチル、ジクロロメチル、トリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル、および２，２−ジブロモエチルが含まれる。
【００１６】
アラルキル基は、少なくとも一つのアリール環、およびその環に結合した少なくとも一つのアルキルまたはアルキレン鎖を有する、６〜２０個の炭素原子を含む基である。アラルキル基の一例は、ベンジル基である。
【００１７】
結合基はもう一つのステロイド、例えば式Ｉの第二の化合物と式の化合物とを結合させるために用いられる二価部分である。結合基の例は（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルである。
【００１８】
数多くのアミノ保護基が当技術分野で周知である。一般的に、保護基の種類は、それが化合物のその他の位置で何らかのその後の反応条件に対して安定であって、分子の残りに対して有害な影響を及ぼすことなく適当な時点で取り除くことができる限り、重要ではない。さらに、保護基は、実質的な合成的変換が終了した後に別の基に置換してもよい。明らかに、ある化合物が、開示の化合物の１つまたはそれ以上の保護基が異なる保護基に置換されている、という点に限って開示の化合物と異なる場合、その化合物は本発明に含まれる。さらなる実施例および条件は、Ｔ． Ｗ． グリーン（Ｔ． Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ）、「有機化学における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」、（第１版、１９８１、第二版１９９１）に示される。
【００１９】
本発明はまた、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つが、独立して置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシからなる群より選択される場合、式Ｉの化合物を合成する方法を含む。本方法は、式ＩＶの化合物を接触させる段階を含む：
【化１７】
2004506645.tif 000003
式中、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つはヒドロキシルであり、縮合環Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ上の残りの部分は式Ｉに定義し、求電子剤は式ＩＶのアルキルエーテル化合物を生じ、式中Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つは（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシである。アルキルエーテル化合物は、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つが独立して（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシおよび（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシからなる群より選択されるアミノ前駆化合物に変換され、アミノ前駆化合物が還元されて式Ｉの化合物を形成する。
【００２０】
本方法において用いた求電子剤には、２−（２−ブロモエチル）−１，３−ジオキソラン、２−ヨードアセトアミド、２−クロロアセトアミド、Ｎ−（２−ブロモエチル）フタルイミド、Ｎ−（３−ブロモプロピル）フタルイミド、およびアリルブロミドが含まれるがこれらに限定しない。好ましい求電子剤はアリルブロミドである。
【００２１】
本発明はまた、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）グアニドアルキルオキシである、式Ｉの化合物を製造する方法を含む。本方法は、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つがヒドロキシルである、式ＩＶの化合物を、求電子剤に接触させて、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシである式ＩＶのアルキルエーテル化合物を生じることを含む。アリルエーテル化合物は、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシおよび（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシからなる群より独立して選択される、アミノ前駆化合物に変換される。アミノ前駆化合物は還元されて、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つが（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシである、アミノアルキルエーテル化合物を生じる。アミノアルキルエーテル化合物をグアニジノ生成求電子剤と接触させると、式Ｉの化合物を生成する。
【００２２】
本明細書において用いられる「グアニジノ生成求電子剤」という用語は、式Ｉのグアニジノ化合物を生成するために用いられる求電子剤を指す。グアニジノ生成求電子剤の例はＨＳＯ３−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ２である。
【００２３】
本発明はまた、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つがＨ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−であり、Ｑ５が任意のアミノ酸の側鎖である式Ｉの化合物を製造する方法を含む。方法は、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つがヒドロキシルである式ＩＶの化合物を、保護されたアミノ酸と接触させて、Ｒ１〜Ｒ１４の少なくとも２つがＰ． Ｇ． −ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ− であり、Ｑ５が任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ． Ｇ． がアミノ保護基である、式ＩＶの保護されたアミノ酸化合物を生じる段階を含む。保護されたアミノ酸化合物の保護基が外れると、式Ｉの化合物を生じる。
【００２４】
本発明はまた、抗菌剤、他の抗生物質に対する細菌の感作剤および細菌膜の破壊剤として有用な重要な薬学的組成物を含む。薬学的組成物は細菌感染症を有するヒトおよび動物を治療するために用いることができる。薬学的組成物はステロイド誘導体の有効量を単独または他の抗菌剤と組み合わせて含むことができる。
【００２５】
本発明はさらに、（ａ）５β−コラン酸３，７，１２−トリオンメチルエステルを塩酸ヒドロキシルアミンおよび酢酸ナトリウムと接触させて、トリオキシム（Ｂ）を形成し：
【化１８】
2004506645.tif 000004
および
（ｂ）トリオキシム（Ｂ）をＮａＢＨ４およびＴｉＣｌ４と接触させて化合物（Ａ）を製造することにより、化合物（Ａ）を製造する方法を含む：
【化１９】
2004506645.tif 000005
【００２６】
本発明はまた、少なくとも４つの縮合環の環系を有し、この各環が５〜７原子を有する化合物を含む。環系は二つの面を持ち、同じ面に結合した三つの鎖を含む。各鎖は少なくとも一つの原子によって環系から分離された含窒素基を含み、この含窒素基は、例えば一級アミノ基またはグアニジノ基などの、アミノ基である。好ましくは、化合物は、ステロイド骨格に結合した、置換（Ｃ３−１０）アミノアルキル基、（Ｃ１−１０）アルキルオキシ（Ｃ３−１０）アルキル基、または（Ｃ１−１０）アルキルアミノ（Ｃ３−１０）アルキル基などの疎水基を有する。
【００２７】
例えば、化合物は式Ｖを有し、式中、含窒素基を含む三つの鎖はそれぞれ独立に、下に定義するＲ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、およびＲ１８から選択される。
【化２０】
2004506645.tif 000006
式中、
環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤが環系を形成し、Ａ、Ｂ、ＣおよびＤのうち少なくとも２つが飽和であるという条件で、融合環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤはそれぞれ独立して飽和または完全もしくは部分的に不飽和である；
ｍ、ｎ、ｐおよびｑはそれぞれ独立して０または１である；
Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、およびＲ１８のうち少なくとも３つが環系の同じ面に配置され、独立して置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシから選択されるという条件で、
Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、およびＲ１８はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルカルボキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルアミノ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換アリールアミノ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、オキソ、第二のステロイドに結合した連結基、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、置換または非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキサミド、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）四級アンモニウムアルキルカルボキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である；ならびに
Ｒ５、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１３、およびＲ１４はそれぞれ独立して
融合環Ａ、Ｂ、ＣもしくはＤのうち一つが不飽和である場合に、該部位の炭素原子の原子価を完全にするために欠失される、または
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）ヒドロキシアルキル、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキルオキシ−（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキル、置換もしくは非置換アリール、Ｃ１−Ｃ１０ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、第二のステロイドに結合した連結基、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルオキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルカルボキシ、置換もしくは非置換（Ｃ１−Ｃ１０）アミノアルキルアミノカルボニル、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、Ｈ２Ｎ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−、（Ｃ１−Ｃ１０）アジドアルキルオキシ、（Ｃ１−Ｃ１０）シアノアルキルオキシ、Ｐ．Ｇ．−ＨＮ−ＨＣ（Ｑ５）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルオキシ、および（Ｃ１−Ｃ１０）グアニジノアルキルカルボキシからなる群より選択され、Ｑ５は任意のアミノ酸の側鎖であり、Ｐ．Ｇ．はアミノ保護基である。好ましくは、ｍ、ｎ、ｐおよびｑのうち少なくとも２つ、または少なくとも３つは１である。
【００２８】
特定の理論に束縛されるわけではないが、本明細書に記載のステロイド誘導体は、細菌細胞の外膜に結合することによって、静菌剤および殺菌剤として作用する。ステロイド誘導体と細菌膜の相互作用によって細胞膜の整合性は破壊され、その結果細菌細胞の死が起こる。さらに、本発明の化合物はまた、その他の抗生物質に対して細菌を感作するように作用する。対応する最小静菌濃度以下のステロイド誘導体の濃度では、誘導体は、細菌外膜の透過性を増加させることによって他の抗生物質に対して細菌をより感受性にする。細菌に及ぼすステロイド誘導体の作用を定量するために用いられる測定には：最小生育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定、最小殺菌濃度（ＭＢＣ）の測定、およびステロイド誘導体が他の抗生物質、例えば、エリスロマイシンおよびノボビオシンのＭＩＣを引き下げる能力が含まれる。
【００２９】
当業者は、本明細書に記述の化合物が、ステロイドにおいて認められる特定の立体化学および電子的特徴を保持していることを理解すると思われる。本明細書において用いられる「同一の立体配置」という用語は、同じ立体化学的方向性を有する縮合ステロイド上の置換基を指す。例えば、置換基Ｒ３、Ｒ７、およびＲ１２は全てβ置換またはα置換されている。Ｃ３、Ｃ７、およびＣ１２で置換した部分Ｒ３、Ｒ７、およびＲ１３の立体配置は細胞膜との相互作用にとって重要となる可能性がある。
【００３０】
もう一つの局面において、本発明は上記化合物を用いた幾つかの方法を特徴とする。例えば、微生物感染症を治療するために、そのような化合物を含む抗菌組成物の有効量を宿主（ヒト宿主を含む）に投与する。化合物そのものが抗微生物作用を提供してもよく、その場合、投与される化合物の量は抗微生物作用を示すために十分である。または、微生物細胞に輸送すべきさらなる抗微生物性物質（例えば抗生物質）を抗微生物性組成物に含める。標的細胞への輸送を容易にすることによって、化合物はさらなる抗微生物性物質の有効性を増強することができる。場合によっては、増強は実質的であってもよい。特に重要な標的微生物は、細菌（例えば、グラム陰性細菌全般または外膜において実質的な量（＞４０％）のリピドＡまたはリピドＡ様物質を有する細菌）である。真菌、ウイルス、および酵母を含む他の微生物もまた、標的生物であってよい。
【００３１】
本化合物はまた、細胞、特に上記の細菌細胞に異なる多くの種類の物質を導入するために細胞の透過性を増強させるという他の意味において投与することができる。抗微生物性物質を導入することのほかに、本発明は巨大分子（例えば、ベクターを持たないＤＮＡ）のような他の物質を導入するために用いてもよい。
【００３２】
本発明はまた、上記化合物の１つを含む抗微生物性組成物（例えば、消毒剤、抗敗血症剤、抗生物質等）を製造するために用いることができる。これらの組成物は、医薬品に限定されず、それらは微生物（特に細菌）の増殖を制御するために局所的に、または非治療的な意味において用いてもよい。例えば、それらは、接触時に微生物を殺すまたは制御する応用において用いてもよい。
【００３３】
さらにもう一つの局面において、本発明は一般的に、候補化合物および本発明の化合物を投与することによって微生物に対して有効な化合物を同定し、候補化合物が微生物に対して静菌的または毒性作用（例えば抗敗血症、殺菌作用、消毒作用、または抗生物質作用）を有するか否かを決定する方法を特徴とする。この場合も、上記のような細菌が好ましい。本発明の局面によって、幾つかの意味において抗微生物作用を有することが知られているが、上記の細菌のような微生物の特定のクラスに対して何らかの作用を有することが示されていない、極めて広い範囲の候補抗微生物剤を有用に試験することが可能となる。下記に詳細に記述するように、本発明のこの局面により、現在、グラム陰性菌またはリピドＡ様含有細菌に対して無効であると考えられてきた広範囲の抗生物質の試験が可能となる。
【００３４】
さらにもう一つの局面において、本発明は、先により詳細に記述した抗菌物質のような、細胞に導入すべき物質と上記化合物の一つとを組合わせて含む組成物を特徴とする。化合物およびさらなる物質を薬学的に許容される担体と混合してもよい。
【００３５】
本発明のその他の特徴または利点は、幾つかの態様に関する以下の詳細な説明、ならびに添付の特許請求の範囲から明らかとなると思われる。
【００３６】
本発明は、本明細書に記述の合成経路によって作製することができるステロイド誘導体、および本明細書に開示の化合物を含む薬学的組成物の有効量を被験者に投与することによって細菌感染症によって媒介される疾患を有する被験者を治療する方法を含む。
【００３７】
詳細な説明
一般的に、本発明は、上記の式Ｉの化合物を提供する。式Ｉの化合物の調製方法ならびにＭＩＣおよびＭＢＣについて記述する。細胞膜透過性もまた、測定して記述する。下記に示すように本発明において有用な化合物は、静菌、殺菌、および細菌感作特性を示す新規ステロイド誘導体を含む。当業者は、本発明が添付の特許請求の範囲に記載の式に含まれ、記載の特徴を有するその他の化合物にも及ぶことを理解すると思われる。これらの特徴は、下記の、および文献に記載されているアッセイ法を用いてそれぞれの試験化合物に関して決定することができる。
【００３８】
本発明に従って用いられる既知の化合物および本発明の新規化合物の前駆体は例えば、シグマケミカル社、セントルイス；アルドリッチ社、ミルウォーキー；ステロイズ＆リサーチプラス社から購入することができる。本発明のその他の化合物は、一般に入手可能な前駆体を用いて既知の方法および下記の方法に従って合成することができる。
【００３９】
本発明の化合物は、ステロイド骨格に共有結合したアミンまたはグアニジン基を有する化合物、例えばコール酸を含むがこれらに限定されない。他の環系、例えば５員縮合環も用いることができる。５員環と６員環とを組合せた骨格を有する化合物もまた本発明に含まれる。アミンまたはグアニジン基は、少なくとも原子１個により骨格から離れており、好ましくは少なくとも原子２個、３個、または４個により離れている。骨格は、ステロイドのある面、すなわち平面にアミンまたはグアニジン基を方向づけるために用いることができる。例えば、骨格のある面、すなわち平面に一級アミノ基を有する化合物を示す略図を下記に示す。
2004506645.tif 000007
【００４０】
化合物の生物活性は、それによって所定の期間吸光度（ＯＤ）に変化が認められない最低濃度がＭＩＣとして記録される、本実施例に記載の「最小生育阻止濃度（ＭＩＣ）」アッセイ法のような、当業者に既知の標準的な方法によって決定することができる。化合物単体を、化合物を欠損する対照に対して試験すると、化合物単体での抗微生物作用が決定される。
【００４１】
または「分画阻止濃度（ＦＩＣ）」はまた、本発明の化合物間または化合物を既知の抗生物質と組み合わせた場合の相乗作用を決定するためにも有用である。ＦＩＣはマイクロタイタープレートの一つの次元において化合物のチェッカーボード力価測定を行い、もう一つの次元において抗生物質のチェッカーボード力価測定を行うことによって決定することができる。ＦＩＣは、もう一方のＭＩＣに及ぼす一つの抗生物質の影響およびその逆を調べることによって計算される。ＦＩＣが１であれば化合物の影響が付加的であることを示し、そしてＦＩＣが１未満であれば相乗作用を示す。好ましくは、相乗作用について０．５未満のＦＩＣが得られる。本明細書において用いられるように、ＦＩＣは以下のように決定することができる：
【式１】
2004506645.tif 000008
【００４２】
本法によって、化合物の他の化合物との相乗作用を決定することができる。例えば、一般的に安全な用量で特定の細菌に対して十分に有効ではない物質は、本発明の化合物によってより有効にすることができ、このように物質を新規部類の感染症に対して用いることができるようにする。特に、既存の多くの抗生物質は幾つかのグラム陽性細菌に対して有効であるが、現在グラム陰性細菌感染症の治療には適応されていない。幾つかの場合において、抗生物質は、それが細胞に入ることができないために、グラム陰性菌に対して無効となる可能性がある。本発明の化合物は、抗生物質がグラム陰性菌に対して有効となるように透過性を増加させる可能性がある。
【００４３】
さらに、分画阻止濃度はまた、本発明の化合物と未知の抗菌活性を有する他の化合物と併用して、またはその他の化合物、例えば試験して抗菌活性を示す化合物と併用した場合の相乗作用を決定するために有用である。例えば、本発明の化合物は、抗細菌活性を欠損する化合物を菌に対して有効にするために透過性を増加させる可能性がある。ＦＩＣはまた、本発明の透過性増強化合物によって細胞に導入される、これまで認識されていない物質の他のタイプの活性について調べるために用いることができる。
【００４４】
特定の理論に束縛されるわけではなく、そのような理論は本発明の実践に必須ではないが、一つの作用機構は、生理的条件下で陽性荷電である、例えばグアニジノまたはアミノ部分である、多数（通常３つ）の部分のリピドＡ相互作用である。これらの部分は分子の残りの一般的平面から離れて伸び、このようにポリミキシン構造の特定の局面を模倣する。この点において、本発明の化合物は、一般的にポリミキシンが有用であるように有用となる。例えば、ポリミキシンＢ（ＰＭＢ）およびポリミキシンＢノナペプチド（ＰＭＢＮ）は、細菌の膜を透過化するために有用である。その上、全身投与に関しては、当業者は、微生物の透過性を増強する用量で毒性を示さない化合物を選択することができる、適当な毒性スクリーニングを理解すると思われる。
【００４５】
記載のように、本発明はまた、その中で化合物が治療すべき表面と接触する、局所のみならず非治療的（抗敗血症、殺菌または消毒）施用も含む。「接触する」という用語は、好ましくは、化合物が細菌を有効に阻害、殺菌する、または溶解することができるように、エンドトキシン（ＬＰＳ）を結合することができるように、またはグラム陰性細菌外膜を透過性にすることができるように、細菌を化合物に暴露することを指す。接触は、化合物に対する細菌の感受性を試験するために、例えば化合物を培養細菌に加えることによってインビトロで行ってもよい。接触はまた、インビボ、例えば敗血症ショックのような細菌障害を有する被験者に化合物を投与することであってもよい。「阻害」または「有効量を阻害する」とは、静菌または殺菌作用を生じるために必要な化合物の量を指す。阻害される可能性がある細菌の例には、大腸菌、緑膿菌（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、エンテロバクター・クロアカエ（Ｅ． ｃｌｏａｃａｅ）、ネズミチフス菌（Ｓ． ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、ヒト結核菌（Ｍ． Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、および黄色ブドウ球菌（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）が含まれる。加えて、本発明の化合物は、微生物の抗生物質抵抗性株を阻害するために使用され得る。
【００４６】
細菌の増殖を阻害する方法は、併用または相乗的療法のために抗生物質の添加をさらに含んでもよい。投与される適当な抗生物質は典型的に、細菌がグラム陰性またはグラム陽性であるか否かのような、細菌の感受性に依存し、当業者によって容易に識別されると思われる。本発明の化合物（上記のように）との相乗的療法に関して試験される抗生物質の特定のクラスの例には、アミノグリコシド（例えば、トブラマイシン）、ペニシリン（例えば、ピペラシリン）、セファロスポリン（例えば、セフタジジム）、フルオロキノロン（例えば、シプロフロキサシン）、カルバペネム（例えば、イミペネム）、テトラサイクリンおよびマクロライド（例えば、エリスロマイシンおよびクラリスロマイシン）が含まれる。細菌の増殖を阻害する方法はさらに、併用または相乗的療法のために抗生物質を加えることを含んでもよい。投与される適当な抗生物質は、典型的に細菌がグラム陰性であるかまたはグラム陽性であるか否かのような、細菌の感受性に依存し、当業者によって容易に識別されると思われる。上記の抗生物質のほかに、典型的な抗生物質には、例えば、アミノグリコシド系（アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネチルミシン、トブラマイシン、ストレプトマイシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン、エリスロマイシン・エストレート／エチルスクシネート、グルセプテート／ラクトバイオネート／ステアレート）、ペニシリン類のようなβ−ラクタム系（例えば、ペニシリンＧ、ペニシリンＶ、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、アンピシリン、アモキシシリン、チカルシリン、カルベニシリン、メズロシリン、アズロシリン、およびピペラシリン）、またはセファロスポリン系（例えば、セファロチン、セファゾリン、セファクロル、セファマンドール、セフォキシチン、セフロキシム、セフォニシド、セフメタゾール、セフォテタン、セフプロジル、ロラカルベフ、セフェタメット、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セフタジジム、セフェピム、セフィキシム、セフポドキシム、およびセフスロジン）が含まれる。抗生物質のその他のクラスには、例えば、カルバペネム系（例えば、イミペネム）、モノバクタム系（例えば、アズトレオナム）、キノロン系（例えば、フレロキサシン、ナリジクス酸、ノフルロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、エノキサシン、ロメフロキサシン、およびシノキサシン）、テトラサイクリン系（例えば、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、テトラサイクリン）、およびグリコペプチド系（例えば、バンコマイシン、テイコプラニン）が含まれる。その他の抗生物質には、クロラムフェニコール、クリンダマイシン、トリメトプリム、スルファメトキサゾール、ニトロフラントイン、リファンピン、およびムピロシン、ならびにＰＭＢのようなポリミキシン類が含まれる。
【００４７】
投与
化合物は、ヒトまたはヒト以外の動物を含む任意の宿主に、細菌の増殖のみならず、ウイルスまたは真菌の増殖を阻害する有効量を投与してもよい。これらの化合物は、抗微生物剤、抗ウイルス剤、および抗真菌剤として有用である。化合物は、ヒトまたはヒト以外の動物を含む任意の宿主に、細菌の増殖のみならず、ウイルスまたは真菌の増殖を阻害する有効量を投与してもよい。これらの化合物は、抗微生物剤、抗ウイルス剤、および抗真菌剤として有用である。
【００４８】
本発明の化合物は、注射または時間をかけた持続的注入によって非経口的に投与することができる。化合物は局所、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内、または経皮的に投与することができる。化合物の好ましい輸送法には、ミクロスフェアへまたはプロテノイドの封入による経口投与、肺へのエアロゾル輸送、イオントフォレーシスまたは経皮的電気穿孔による経皮的投与が含まれる。その他の投与法は当業者に周知である。
【００４９】
本発明の化合物の非経口投与の調製物には、滅菌の水性または非水性溶液、懸濁液、および乳液が含まれる。非水性溶媒の例はプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、オレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルが含まれる。水性担体には、生理食塩液および緩衝培地を含む、水、アルコール／水性溶液、乳液または懸濁液が含まれる。 非経口溶媒には塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロース塩化ナトリウム、乳酸付加（ｌａｃｔａｔｅｄ）リンゲル溶液、または固定油が含まれる。静脈内溶媒には、液体および栄養補助剤、電解質補助剤（リンゲルデキストロースに基づく溶液のような）等が含まれる。例えば、抗微生物剤、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガス等のような保存剤およびその他の添加剤もまた、存在してもよい。
【００５０】
本発明は、敗血症の症状を示す、または敗血症を発症するリスクを有する被験者に、本発明の化合物の治療的有効量を投与することを含む、エンドトキシン血症、敗血症ショック（敗血症）関連障害、または敗血症の１つまたは複数の症状を治療または緩和する方法を提供する。「緩和する」という用語は治療すべき障害の症状を減少させる、または軽減することを指す。緩和されるそのような症状には、発熱、血圧低下、好中球減少症、白血球減少症、血小板減少症、播種性血管内凝固症、成人呼吸窮迫症候群、ショックおよび多臓器不全のような、ＴＮＦの血中濃度の一過性の増加に関連した症状が含まれる。そのような治療を必要とする患者には、例えば、グラム陰性細菌感染症が原因で起こるエンドトキシン血症のような毒血症、ヘビ毒中毒、または肝不全のリスクを有する、またはそれらに罹患している患者が含まれる。さらに、グラム陽性細菌、ウイルスまたは真菌感染症を有する患者は、敗血症の症状を示す可能性があり、本明細書に記述の治療方法によって恩典が得られる可能性がある。本発明の方法によって特により恩典が得られる患者は、大腸菌、Ｂ型インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ Ｂ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、連鎖球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、または肺炎球菌（ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ）による感染症に罹患している患者である。敗血症のリスクがある患者には、銃損傷、腎または肝不全、外傷、火傷、免疫無防備状態（ＨＩＶ）、造血新生物、多発性骨髄腫、カストルマン病、または心粘液腫を有する患者が含まれる。
【００５１】
さらに、化合物は持続的な放出を可能にする生体分解性のポリマーに組み入れてもよく、ポリマーを、輸送されることが望ましい場所の近傍、例えば細菌感染部位に埋め込んでもよい。生体分解性ポリマーおよびその使用は、ブレム（Ｂｒｅｍ）ら、Ｊ． Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ． ７４：４４１〜４４６（１９９１）に詳細に記述されている。
【００５２】
上記のように、本発明は、細菌感染症を有する患者を治療するために式Ｉの化合物の有効量を有する薬学的製剤を提供する。本明細書において用いられるように、化合物の有効量は、患者に投与した場合に、細菌の増殖を阻害し、細菌細胞を殺菌する、その他の抗生物質に対して細菌を感作する、または治療した患者において完全に細菌感染症を消失させる、化合物の量として定義される。組成物の用量は、治療すべき疾患、用いる特定の誘導体、ならびに患者の体重および疾患、ならびに化合物の投与経路のようなその他の臨床的要因に依存すると考えられる。しかし、ヒトへの経口投与の場合、０．０１〜１００ ｍｇ／ｋｇ／日の用量、好ましくは０．０１〜１ ｍｇ／ｋｇ／日で一般的に十分である。有効な用量はまた、当業者によって認識されるように、投与経路、賦形剤の使用、およびその他の抗菌剤を含む他の治療的治療の併用の可能性に応じて変化すると考えられる。
【００５３】
例えば、本明細書においてエンドトキシン血症の治療のために用いられる「治療的有効量」という用語は、被験者のＬＰＳに対する反応を減少させ、敗血症の症状を減少させるために十分な量である。したがって、「治療的有効」という用語は、ＴＮＦの血漿濃度の臨床的に有意な増加を予防する、好ましくは少なくとも５０％減少させる、より好ましくは９０％減少させるために十分な量を含む。化合物を投与する場合の用量範囲は、所望の作用を生じるために十分に大きい量である。一般的に用量は、年齢、状態、性別、および患者における細菌または上記のその他の物質による感染症の程度によって変化し、当業者によって決定されるであろう。用量は、何らかの禁忌があった場合には個々の医師が調節することができる。いずれの事象においても、治療の有効性は、患者におけるＬＰＳとＴＮＦのレベルをモニターすることによって決定することができる。ＬＰＳおよびＴＮＦの血清濃度の減少は、患者の回復と相関するはずである。
【００５４】
さらに、敗血症のリスクがある、またはその症状を示す患者は、化合物の治療的投与と、ＴＮＦの阻害剤、抗生物質、またはその双方を実質的に同時に投与することをさらに含む、上記の方法によって、治療することができる。例えば、抗ＴＮＦ抗体および／またはＴＮＦ拮抗剤を使用することによって、直接または間接的に、敗血症におけるＴＮＦの役割に介入すれば、敗血症の症状を予防または緩和することができる。特に好ましいのは、トラセイ（Ｔｒａｃｅｙ）ら（Ｎａｔｕｒｅ ３３０：６６２、１９８７）によって記述されるように、ＴＮＦ特異性を有するモノクローナル抗体のような抗ＴＮＦ抗体を活性成分として使用することである。
【００５５】
敗血症の症状を示す患者は、化合物による治療のほかに抗生物質で治療してもよい。典型的な抗生物質には、ゲンタマイシンのようなアミノグリコシド、またはペニシリンのようなβ−ラクタム、またはセファロスポリン、またはこれまで記載した抗生物質が含まれる。したがって、本発明の好ましい治療方法は、陽イオン化合物の治療的有効量を抗生物質の殺菌量の投与と実質的に同時に投与することを含む。好ましくは、化合物の投与は約４８時間以内に起こり、好ましくは約２〜８時間以内、最も好ましくは抗生物質の投与と実質的に同時に起こる。
【００５６】
本明細書において「殺菌量」という用語は、治療を受ける患者において殺細菌血中濃度に達するために十分な量を指す。ヒトに投与して一般に安全であると認識される抗生物質の殺菌量は、当技術分野で周知であり、当技術分野で既知であるように、特異的抗生物質および治療される細菌感染症のタイプに応じて変化する。
【００５７】
化合物の抗生物質、抗菌剤、および抗ウイルス特性のために、それらはまた、微生物またはウイルス汚染を受けやすい材料の保存剤または滅菌剤として用いてもよい。本発明の化合物は、様々な特異的施用に対して向けられる広域スペクトルの抗菌剤として利用することができる。そのような施用は、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、エルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）、シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）を含む微生物に対して単体またはライソザイムのような抗菌食品添加物と併用して有効であると確認された場合に、加工食品における保存剤として；局所剤として（シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ））および異臭生成微生物（ミクロコッカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｉ））を殺菌するために化合物を使用することができる。記述した施用に関する本発明の化合物の相対的有効性は、化合物の一つに対する微生物の感受性を決定することによって当業者によって容易に決定することができる。
【００５８】
本発明は、その外嚢（ｏｕｔｅｒ ｃａｐｓｕｌｅ）が実質的な量のリピドＡを含む古典的なグラム陰性染色細菌を主に標的としているが、疎水性の外嚢を有するその他の微生物に対しても有効となる可能性がある。例えば、マイコバクテリウム（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属は、ロウ状の保護的な外側のコーティングを有し、本発明の化合物を抗生物質と併用すると、結核を含むマイコバクテリウム（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）感染症に対して有効性が増強される可能性がある。その場合、化合物は幾つかの既知の技術のいずれかによって鼻孔に投与することができる（吸引）。
【００５９】
抗微生物作用とは別に、化合物によって提供される透過性によって、非常に多様な物質の微生物への導入が増強される可能性がある。例えば、化合物はＤＮＡまたはＲＮＡのような巨大分子の微生物、特にグラム陰性菌への導入を増強するために用いてもよい。その場合、微生物をトランスフェクトする場合に核酸をパッケージングするために従来のベクター（例えば、ファージ）を用いる必要がない可能性がある。本発明の化合物を用いてそのような巨大分子を微生物に微生物に導入する条件および技術は、ほとんどの場合ルーチンであると思われる。
【００６０】
製剤には経口、直腸、鼻孔、局所（経頬、および舌下）、膣内、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、眼内、気管内、および硬膜内）投与のために適した製剤が含まれる。製剤は、簡便に単位投与剤形であってもよく、従来の薬学的技術によって調製してもよい。そのような技術は、活性成分と薬学的担体または賦形剤とを会合させる段階を含む。一般的に、製剤は、活性成分を均一および十分に液体担体または微粉固体担体またはその双方と会合させ、次に必要であれば製品に成型することによって調製する。
【００６１】
経口投与に適した本発明の製剤は、それぞれが既定量の活性成分を含むカプセル剤、トローチ剤もしくは錠剤のような個別単位；粉剤もしくは顆粒剤；水性液体もしくは非水性液体中での溶液もしくは懸濁液；または水中油型液体乳液、または油中水型乳液およびボーラス等であってもよい。
【００６２】
錠剤は、選択的に１つまたは複数の補助成分と共に圧縮または成型によって作製してもよい。圧縮錠剤は、適した機械において、粉末または顆粒剤のような自由流動型の活性成分を、選択的に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、保存剤、表面活性または分散剤と混合して、圧縮することによって調製してもよい。成型錠剤は、適した機械において不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を成型することによって作製してもよい。錠剤は選択的にコーティングまたは刻み目をいれてもよく、活性成分の遅いまたは持続的な放出が得られるように製剤化してもよい。
【００６３】
口内での局所投与に適した製剤には、芳香基剤、通常蔗糖およびアカシアまたはトラガカント中に成分を含むトローチ剤；ゼラチンおよびグリセリンのような不活性基剤、または蔗糖およびアカシア中に活性成分を含む香錠；および適した液体担体中で投与される成分を含む口内洗浄液が含まれる。
【００６４】
皮膚への局所投与に適した製剤は、薬学的に許容される担体において投与される成分を含む、軟膏、クリーム、ゲル、およびペーストであってもよい。好ましい局所輸送システムは、投与すべき成分を含む経皮パッチである。
【００６５】
直腸投与のための製剤は例えば、ココアバターまたはサリチル酸塩を含む、適した基剤による坐剤として示してもよい。
【００６６】
担体が固体である鼻腔内投与に適した製剤には、粒子径が例えば２０〜５００ミクロンの範囲である粗粉末が含まれ、これをその中で鼻吸入が行われるように、すなわち鼻の近くに保持した粉末容器から鼻孔を通じて迅速に吸入されるように投与する。担体が、例えば鼻スプレー、または点鼻液として投与するための液体である、適した製剤には、活性成分の水溶液または油性溶液が含まれる。
【００６７】
膣内投与に適した製剤は、活性成分に加えて当技術分野で適当であることが知られている担体のような含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー製剤であってもよい。
【００６８】
非経口投与に適した製剤には、予定しているレシピエントの血液と製剤を等張にする抗酸化剤、緩衝剤、またはその他の静菌剤および溶質を含んでもよい水性および非水性滅菌注射液；ならびに懸濁化剤および濃厚剤を含んでもよい水性および非水性滅菌懸濁液を含む。製剤は単位用量、または多用量容器、例えば密封したアンプルおよびバイアルの形であってもよく、使用直前に注射のために液体担体、例えば水を加えるのみであるフリーズドライ（凍結乾燥した）状態で保存してもよい。即時調合注射剤溶液および懸濁液は、先に記述した種類の滅菌粉末、顆粒剤および錠剤から調製してもよい。
【００６９】
好ましい単位投与製剤は、本明細書において先に引用した、投与した成分の１日量または単位、１日分割用量、またはその適当な分画を含む製剤である。
【００７０】
成分、特に上記の成分に加えて、本発明の製剤は、製剤のタイプに関して、当技術分野で慣例的なその他の物質を含んでもよく、例えば、経口投与に適した製剤は着香料を含んでもよい。
【００７１】
薬学的組成物における担体は、製剤の活性成分と適合性である（そして好ましくは、それを安定化することができる）という意味において「許容可能」でなければならず、治療すべき被験者に対して有害でないものでなければならない。
【００７２】
さらなる努力を行うことなく、先の説明は、本発明を適切に可能にすると考えられる。したがって、以下の特定の態様は単なる説明であって、本開示の残りをいずれにせよ制限すると解釈されない。本明細書に引用した、特許を含む全ての刊行物は、参照として本明細書に組み入れられる。
【００７３】
実施例１〜１４は、化合物１〜３４３の典型的な合成を示し、そのいくつかをスキーム１〜１６に示す。実施例１４は、酸性、中性、及び塩基性の条件下での化合物３５２〜３５４の安定性を示す。実施例１５は、既知の開始材料および本明細書に記述と類似の反応スキームを用いて合成することができる式Ｉの他の化合物を表す。例えば、コール酸のヒドロキシル基は、シー（Ｈｓｉｅｈ）らの「胆汁酸に由来するＣ３−、Ｃ１２−、およびＣ２４−置換アミノステロイドの合成とＤＮＡ結合特性（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ＤＮＡ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｃ３−， Ｃ１２−， ａｎｄ Ｃ２４− ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ Ａｍｉｎｏ−Ｓｔｅｒｏｉｄｓ Ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ Ｂｉｌｅ Ａｃｉｄｓ）」、Ｂｉｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９９５、６巻、８２３〜８３８に記載の方法によってアミン基に変換することができる。実施例１６はＭＩＣおよびＭＣＢ試験を表し、実施例１７は式Ｉの化合物が他の抗生物質のＭＩＣを低下させることができることを表す。
【００７４】
スキーム１．　化合物１、２、４および５の調製
【化２１】
2004506645.tif 000009
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） ＬｉＡｌＨ４（９８％）。ｂ） トリチルクロライド、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ（７０％）。ｃ） 臭化アリル、ＮａＨ、ＴＨＦ（９６％）。ｄ） Ｏ３、ＣＨ２Ｃｌ２、ＭｅＯＨ：Ｍｅ２Ｓ：ＮａＢＨ４（９５％）。ｅ） ９−ＢＢＮ、ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ２、ＮａＯＨ（８０％）。ｆ） ＭｓＣｌ、ＣＨ２Ｃｌ２、Ｅｔ３Ｎ（７８％、８２％）。ｇ） ＮａＮ３、ＤＭＳＯ（２０に関して６６％、１９は直接２３に運ばれる）。ｈ） ＴｓＯＨ、ＭｅＯＨ（９４％、１９から全体で９４％）。ｉ） ＭｓＣｌ、ＣＨ２Ｃｌ２、Ｅｔ３Ｎ（９９％、９７％）。ｊ） Ｎ−ベンジルメチルアミン（９５％、９６％）。ｋ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（９５％、９９％）。ｌ） ＮＨ２（ＣＨ）ＳＯ３、ＭｅＯＨ（９１％、８９％）。
【００７５】
スキーム２．　化合物３の調製
【化２２】
2004506645.tif 000010
試薬（反応収率は括弧内に示す）：ａ） ＫＣＮ、ＤＭＳＯ；ＭｅＯＨ、ＴｓＯＨ（９２％）。（ｂ）ＭｓＣｌ、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２；ＢｎＭｅＮＨ（８８％）。ｃ） ＬｉＡｌＨ４、ＡｌＣｌ３、ＴＨＦ（５０％）。
【００７６】
スキーム３．　６および７の調製
【化２３】
2004506645.tif 000011
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシニミド、メチルフェニルアミン、ＣＨ２Ｃｌ２、ＭｅＯＨ（８５％）。ｂ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（８２％）。ｃ） ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジメチルアミノピリジン、Ｂｏｃ−グリシン、ＣＨ２Ｃｌ２（６８％）。ｄ） ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジメチルアミノピリジン、Ｂｏｃ−βアラニン、ＣＨ２Ｃｌ２（７２％）。ｅ） ＨＣｌ、ジオキサン（〜１００％、〜１００％）。
【００７７】
スキーム４．　化合物８の合成
【化２４】
2004506645.tif 000012
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） ＤＩＡＤ、Ｐｈ３Ｐ、ｐ−ニトロ安息香酸、ＴＨＦ（８５％）；ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ（８５％）。ｂ） 臭化アリル、ＮａＨ、ＴＨＦ（７９％）。ｃ） Ｏ３、ＣＨ２Ｃｌ２、ＭｅＯＨ；Ｍｅ２Ｓ：ＮａＢＨ４（６５％）。ｄ） ＭｓＣｌ、ＣＨ２Ｃｌ２、Ｅｔ３Ｎ（８６％）。ｅ） ＮａＮ３、ＤＭＳＯ（８０％）。ｆ） ＴｓＯＨ、ＭｅＯＨ（９４％）。ｇ） ＭｓＣｌ２、ＣＨ２Ｃｌ２、Ｅｔ３Ｎ：Ｎ−ベンジルメチルアミン（９３％）。ｇ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（９４％）。
【００７８】
スキーム５．　化合物９および１０の合成
【化２５】
2004506645.tif 000013
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） ＮａＨ、臭化オクリル、ＤＭＦ（８０％）；ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（６０％）。ｂ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（６０％）。
【００７９】
スキーム６．　化合物１１の合成
【化２６】
2004506645.tif 000014
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） エチレングリコール、ＴｓＯＨ、ベンゼン（〜１００％）。ｂ） ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ（９６％）。ｃ） 臭化アリル、ＮａＨ、ＴＨＦ（９０％）。ｄ） ９−ＢＢＮ、ＴＨＦ；Ｈ２Ｏ２、ＮａＯＨ（５５％）。ｅ） ＰＰＴＳ、アセトン、Ｈ２Ｏ（９８％）。ｆ） ＭｓＣｌ、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２；ＮａＮ３、ＤＭＳＯ（８８％）。ｇ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（６９％）。
【００８０】
スキーム７．　化合物１２の合成
【化２７】
2004506645.tif 000015
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） 塩化メタンスルホニル、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２；ＮａＢｒ、ＤＭＦ（９７％）。ｂ） ２３、ＮａＨ、ＤＭＦ（５２％）。ｃ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（７６％）。
【００８１】
スキーム８．　化合物１１１〜１１４の調製
【化２８】
2004506645.tif 000016
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） ＮａＨ、ＤＭＦ、ＣＨ３Ｉ、ＣＨ３（ＣＨ２）２Ｂｒ、ＣＨ３（ＣＨ２）４Ｂｒ、またはＣＨ３（ＣＨ２）７Ｂｒ（８５−９０％）。ｂ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（５５−７０％）。
【００８２】
スキーム９．　化合物１０６の調製
【化２９】
2004506645.tif 000017
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） 尿素−過酸化水素複合体、トリフルオロ酢酸無水物、ＣＨ２Ｃｌ２（５５％）。ｂ） ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ；ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（４３％）。
【００８３】
スキーム１０．　化合物１０８および１０９の調製
【化３０】
2004506645.tif 000018
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） Ｏ３、ＣＨ２Ｃｌ２、ＭｅＯＨ；Ｍｅ２Ｓ；ＮａＢＨ４ （７６％）。ｂ） ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ；ＴｒＣｌ、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＡＰ、ＤＭＦ；臭化アリル、ＮａＨ、ＴＨＦ （６４％）。ｃ） ９−ＢＢＮ、ＴＨＦ；Ｈ２Ｏ２、ＮａＯＨ （９３％）。ｄ） ＭｓＣｌ、Ｅｔ３Ｎ、ＣＨ２Ｃｌ２；ＮａＮ３、ＤＭＳＯ；ＴｓＯＨ、ＭｅＯＨ、ＣＨ２Ｃｌ２ （９４％）。ｅ） ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（７１％）。ｆ） ｏ−ＮＯ２Ｃ６Ｈ４ＳｅＣＮ、Ｂｕ２Ｐ、ＴＨＦ；Ｈ２Ｏ２ （３６％）。ｇ） Ｏ３、ＣＨ２Ｃｌ２、ＭｅＯＨ；Ｍｅ２Ｓ；ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ（６８％）。
【００８４】
スキーム１１．　化合物２０２および２０３の調製
【化３１】
2004506645.tif 000019
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） ＢＯＣ−グリシンまたはＢＯＣ−アラニン、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２ （６０％、９４％）。ｂ） ジオキサン中 ４Ｍ ＨＣｌ （７４％、７１％）。
【化３２】
2004506645.tif 000020
【化３３】
2004506645.tif 000021
【００８５】
スキーム１２．　化合物２０９ａ〜２０９ｃの調製
【化３４】
2004506645.tif 000022
試薬（反応収率を括弧内に示す）：ａ） ＢＯＣ−グリシン、ＢＯＣ−アラニン、またはビスＢＯＣリジン、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２。ｂ） ＬｉＯＨ、ＴＨＦ、ＭｅＯＨ （２段階で７１−８５％）。ｃ） ジオキサン中 ４Ｍ ＨＣｌ （〜１００％）。
【化３５】
2004506645.tif 000023
【００８６】
スキーム１３．　化合物２０６の調製
【化３６】
2004506645.tif 000024
試薬：ａ） ＮＨ２ＯＨ−ＨＣｌ、ＡｃＯＮａ、ＥｔＯＨ （９７％）。ｂ） ＮａＢＨ４、ＴｉＣｌ４、グリム （３３％）。
【００８７】
スキーム１４
【化３７】
2004506645.tif 000025
ａ） ベンジルアルコール、ＴｓＯＨ（８１％）。ｂ） Ｂｏｃ−βアラニンまたはＢｏｃ−γアミノブチル酸、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２（６８−７８％）。ｃ） Ｈ２、Ｐｄ／Ｃ（９７−９９％）。ｄ） （ＣＨ３）２Ｎ（ＣＨ２）２ＯＨ、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２またはＴＨＦ（６２−８２％）。ｅ） ＭｅＩ、ＣＨ２Ｃｌ２。ｆ） ＨＣｌ、ジオキサン（２段階で８３−９０％）。
【００８８】
スキーム１５
【化３８】
2004506645.tif 000026
ａ） オクタノール、ＴｓＯＨ（７３％）。ｂ） Ｂｏｃ−グリシン、Ｂｏｃ−βアラニンまたはＢｏｃ−γアミノブチル酸、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２（９１−９５％）。ｃ） ＨＣｌ、ジオキサン（８４−９９％）。
【００８９】
スキーム１６
【化３９】
2004506645.tif 000027
試薬：ａ） ＭｓＣｌ、ＭＥｔ３、ＣＨ２Ｃｌ２ （８６％）。ｂ） ＮＨ２（ＣＨ２）３ＮＨＢｏｃ、ＴＮＦ （９７％）。ｃ） ＰＰｈ３、ＴＮＦ／Ｈ２Ｏ（８６％）。ｄ） ＨＣｌ、エチルエーテル中２Ｍ（８９％）。
【化４０】
2004506645.tif 000028
試薬：ａ） ＭｓＣｌ、ＭＥｔ３、ＣＨ２Ｃｌ２ （８６％）。ｂ） ＮＨ２（ＣＨ２）３ＯＨ、ＴＮＦその後段階ａ （２段階で６３％）。ｃ） ＮＨ２（ＣＨ２）３ＮＨＢｏｃ、ＴＮＦ（８３％）。ｄ） ＰＰｈ３、ＴＮＦ／Ｈ２Ｏ（９０％）。ｅ） ＨＣｌ、エチルエーテル中２Ｍ（９４％）。
【００９０】
実施例
本実施例において、本明細書に記載された方法において有用ないくつかの特定の化合物の、特定の合成を説明する。例えば、化合物１〜３４３のうちのいくつかの代表的な合成を以下に示す。
１Ｈおよび１３Ｃ ＮＭＲスペクトルをバリアンジェミニ２０００（２００ ＭＨｚ）、バリアンユニティ３００（３００ ＭＨｚ）、またはバリアンＶＸＲ ５００（５００ ＭＨｚ）分光光度計上で記録し、ＴＭＳ、残留ＣＨＣｌ３（１Ｈ）、ＣＤＣｌ３（１３Ｃ）、または残留ＣＨＤ２ＯＤ（１Ｈ）、もしくはＣＤ３ＯＤ（１３Ｃ）を基準とした。ＩＲスペクトルをパーキンエルマー１６００ ＦＴＩＲ機器で記録した。マススペクトルデータはＪＯＥＬ ＳＸ １０２Ａ分光光度計上で得た。使用前にＴＨＦをＮａ／ベンゾフェノン上で乾燥させ、ＣＨ２Ｃｌ２をＣａＨ２上で乾燥させた。その他の試薬および溶媒は購入して原液のまま使用した。
【００９１】
実施例１： 化合物１、２、４、５、１３〜２０、および２２〜２７
化合物１３：
１リットルの丸底フラスコに、無水ＴＨＦ（６００ｍＬ）を溶媒とするコール酸メチル（３０．６７ｇ、７２．７ｍｍｏｌ）およびＬｉＡｌＨ４（４．１３ｇ、１０９ｍｍｏｌ）を添加した。４８時間還流した後、Ｎａ２ＳＯ４の飽和水溶液（１００ｍＬ）をゆっくり注入し、得られた沈殿をろ過し、熱ＴＨＦ及びＭｅＯＨで洗浄した。ＭｅＯＨで再結晶し、無色の結晶１３（２８．０ｇ、収率９８％）を得た。
2004506645.tif 000029
【００９２】
化合物１４：
丸底フラスコに、ＤＭＦ（３００ｍＬ）を溶媒とする化合物１３（２８．２ｇ、７１．７ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（２０ｍＬ、１４３．４ｍｍｏｌ）、塩化トリチル（２５．９８ｇ、９３．２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．１３ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をＮ２下５０℃で３０時間攪拌し、引き続き水（１０００ｍＬ）を注入し、ＥｔＯＡｃで抽出した（５×２００ｍＬ）。一緒にした抽出液を、水およびブラインで洗浄し、その後ＭｇＳＯ４上で乾燥した。溶媒を減圧下で除去した後、残渣をＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いて精製し（溶離液：ＣＨ２Ｃｌ２、Ｅｔ２ＯおよびＭｅＯＨ）、淡黄色固形物１４を得た（３１．９ｇ、収率７０％）。
2004506645.tif 000030
【００９３】
化合物１５：
丸底フラスコに、無水ＴＨＦ（６００ｍＬ）を溶媒とする化合物１４（２０．０ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）およびＮａＨ（鉱油中６０％、６．３ｇ、１５７．２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物をＮ２下で３０分間還流し、引き続き臭化アリル（２７ｍＬ、３１４ｍｍｏｌ）を添加した。６０時間還流した後、ＮａＨ（３当量）および臭化アリル（４当量）を添加した。引き続き更に５０時間還流し、水（２０ｍＬ）をゆっくり注入し、引き続き１％ＨＣｌを水相が中性になるまで添加した。その後この混合物を、エーテルで抽出し（３×１００ｍＬ）、一緒にした抽出液を、水（１００ｍＬ）およびブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄した。このエーテル溶液を、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、溶媒を除去した後、残渣をＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いて精製し（溶離液：ヘキサンおよびＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：８）、淡黄色ガラス状化合物１５を得た（２２．７６ｇ、収率９６％）。ＩＲ（ニート）２９３０、１４４８、１０８７ｃｍ−１；
2004506645.tif 000031
【００９４】
化合物１６：
三首丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）を溶媒とする化合物１５（３．３４ｇ、４．４ｍｍｏｌ）およびメタノール（１００ｍＬ）を添加した。冷した溶液（−７８℃）オゾンを通して、青色が持続するようになるまで泡立てた。過剰量のオゾンを酸素フローにより除去した。この混合物を、ドライアイス−アセトン浴中に１時間静置した。硫化メチル（２．４ｍＬ）を添加し、かつ１５分後、この混合物を５％ＮａＯＨ水溶液（１０ｍＬ）／メタノール（１０ｍＬ）を溶媒とするＮａＢＨ４（１．２１ｇ、３２ｍｍｏｌ）で処理し、室温まで温めた。この混合物を、ブラインで洗浄し（３×５０ｍＬ）、かつ一緒にしたブライン洗浄液を、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（２×５０ｍＬ）。この有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中ＭｅＯＨ（５％））の後、油状の化合物１６を単離した（３．３０ｇ、収率９５％）。
2004506645.tif 000032
【００９５】
化合物１７：
丸底フラスコに、氷浴中Ｎ２下で無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）を溶媒とする化合物１６（１．１７ｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を添加し、引き続き９−ＢＢＮ／ＴＨＦ溶液（０．５Ｍ、１０．２ｍＬ、５．５１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１２時間攪拌した。ＮａＯＨ水溶液（２０％）（２ｍＬ）および過酸化水素水（３０％）（２ｍＬ）を順次添加した。この混合物を１時間還流した後、ブライン（６０ｍＬ）を添加し、かつＥｔＯＡｃで抽出した（４×３０ｍＬ）。一緒にした抽出物を、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中の５％ＭｅＯＨ）の後、無色の油状物として生成物を得た（１．０１ｇ、収率８０％）。
2004506645.tif 000033
【００９６】
化合物１８：
丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）を溶媒とする化合物１６（３．３０ｇ、４．２９ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（２．０９ｍＬ、１５．０１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、氷浴中Ｎ２下に置き、引き続き塩化メシル（１．０１ｍＬ、１４．１６ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、水（３０ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２相を、ブラインで洗浄し（２×５０ｍＬ）、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。一緒にした水性混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出した（３×１００ｍＬ）。一緒にした抽出液を、ブラインで洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：１）の後、所望の生成物を淡黄色油状物として単離した（３．３５ｇ、収率７８％）。
2004506645.tif 000034
【００９７】
化合物１９：
丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）を溶媒とする化合物１７（１．０１ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（０．６０８ｍＬ、４．３６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、氷浴中Ｎ２下に置き、引き続き塩化メシル（０．３１８ｍＬ、４．１１ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、水（１０ｍＬ）を、その後ブライン（８０ｍＬ）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２相を、ブラインで洗浄し（２×２０ｍＬ）、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。一緒にした水性混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出した（３×４０ｍＬ）。一緒にした抽出液を、ブラインで洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：１）の後、所望の生成物を淡黄色油状物として単離した（１．０７ｇ、収率８２％）。
2004506645.tif 000035
【００９８】
化合物２０：
丸底フラスコに、無水ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）を溶媒とする化合物１８（１．５０ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）およびＮａＮ３（０．９７６ｇ、１５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、８０℃に加熱し、Ｎ２下で一晩攪拌し、その後水（１００ｍＬ）で希釈した。得られた水性混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出し（３×５０ｍＬ）、一緒にした抽出液を、ブラインで洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：５）の後、所望の生成物を透明なガラス状物として単離した（０．８３ｇ、収率６６％）。
2004506645.tif 000036
【００９９】
化合物２２：
丸底フラスコに、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）を溶媒とする化合物２０（８３０ｍｇ、０．９８４ｍｍｏｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）およびｐ−トルエンスルホン酸（９．３５ｍｇ、０．０４９２ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を、室温で２．５時間攪拌し、その後ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（１０ｍＬ）を注入した。ブライン（３０ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した（４×２０ｍＬ）。一緒にした抽出液を、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：２）の後、所望の生成物を淡黄色油状物として単離した（０．５６４ｇ、収率９５％）。
2004506645.tif 000037
【０１００】
化合物２３：
丸底フラスコに、化合物１９（１．０７ｇ、１．０２５ｍｍｏｌ）およびＮａＮ３（０．６６６ｇ、１０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、その後無水ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）を注入した。この混合物を、Ｎ２下で一晩最高８０℃で加熱した。Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）添加後、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（４×４０ｍＬ）、かつ一緒にした抽出液を、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去した後、残渣をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中溶解し、引き続き触媒量のｐ−トルエンスルホン酸（９．７５ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を室温で２．５時間攪拌し、その後飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１５ｍＬ）を添加した。ブライン（６０ｍＬ）を添加した後、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した（５×３０ｍＬ）。一緒にした抽出液にブライン（１５０ｍＬ）を添加し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：２）の後、所望の生成物を黄色がかった油状物として得た（０．６１７ｇ、２段階で収率９４％）。
2004506645.tif 000038
【０１０１】
化合物２４：
丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）を溶媒とする化合物２２（０．５６４ｇ、０．９３８ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（０．２０ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、Ｎ２下で氷浴に入れ、引き続き塩化メシル（０．０８７ｍＬ、１．１３ｍＬ）を添加した。３０分後、水（２０ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２相を、ブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。一緒にした水性混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出した（３×３０ｍＬ）。一緒にした抽出液を、ブラインで洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：２）の後、所望の生成物を黄色がかった油状物として得た（０．６３４ｇ、収率９９％）。
2004506645.tif 000039
【０１０２】
化合物２５：
丸底フラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中に化合物２３（０．６１７ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ３（０．２０ｍＬ、１．４４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、Ｎ２下で氷浴に入れ、引き続き塩化メシル（０．０８９ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、水（２０ｍＬ）およびブライン（１２０ｍＬ）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２相を、ブラインで洗浄し（２×２０ｍＬ）、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。一緒にした水性混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出した（３×３０ｍＬ）。一緒にした抽出液を、ブラインで洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去した後、所望の生成物を淡黄色がかった油状物として得た（０．６７６ｇ、収率９７％）。
2004506645.tif 000040
【０１０３】
化合物２６：
５０ｍＬの丸底フラスコに、化合物２４（０．６３４ｇ、０．９３６ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルメチルアミン（２ｍＬ）を添加した。この混合物を、Ｎ２下で一晩８０℃で加熱した。過剰なＮ−ベンジルメチルアミンを減圧下で除去し、および残渣を、ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：２）にかけた。所望の生成物を淡黄色油状物として単離した（０．６２３６ｇ、収率９５％）。
2004506645.tif 000041
【０１０４】
化合物２７：
５０ｍＬの丸底フラスコに、化合物２５（０．６７６ｇ、０．９３７ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルメチルアミン（２ｍＬ）を添加した。この混合物を、Ｎ２下一晩８０℃で加熱した。過剰なＮ−ベンジルメチルアミンを減圧下で除去し、および残渣を、ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：２）にかけた。所望の生成物を淡黄色油状物として単離した（０．６７２ｇ、収率９６％）。
2004506645.tif 000042
【０１０５】
化合物１：
丸底フラスコに、無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）を溶媒とする化合物２６（０．６８４ｇ、０．９７１ｍｍｏｌ）およびＬｉＡｌＨ４（１１３．７ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下で添加した。この混合物を、室温で１２時間攪拌し、その後Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏ粉末（１０ｇ）を、ゆっくり添加した。灰色が消失した後、この混合物をセライトを通してろ過し、かつ無水ＴＨＦで洗浄した。生成物を無色のガラス状物として得た（０．５８１ｇ、収率９５％）。
2004506645.tif 000043
【０１０６】
化合物１のＨＣｌ塩：
化合物１を、最低量のＣＨ２Ｃｌ２中に溶解し、エーテルを溶媒とするＨＣｌ過剰量を添加した。溶媒および過剰量のＨＣｌを、減圧下で除去し、非晶質の白色粉末を得た。
2004506645.tif 000044
【０１０７】
化合物２：
丸底フラスコに、無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）を溶媒とする化合物２７（０．８２ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）およびＬｉＡｌＨ４（１２５ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下で添加した。この混合物を、室温で１２時間攪拌し、その後Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏ粉末（１０ｇ）を、ゆっくり添加した。灰色が消失した後、この混合物を綿栓を通してろ過し、かつ無水ＴＨＦで洗浄した。ＴＨＦを減圧下で除去し、かつ残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中に溶解した。ろ過後、無色ガラス状の所望の生成物を得た（０．７３ｇ、収率９９％）。
2004506645.tif 000045
【０１０８】
化合物２のＨＣｌ塩：
化合物２を、最低量のＣＨ２Ｃｌ２中に溶解し、エーテルを溶媒とするＨＣｌ過剰量を添加した。溶媒および過剰量のＨＣｌを除去し、非晶質の白色粉末を得た。
2004506645.tif 000046
【０１０９】
化合物４：
メタノールおよびクロロホルムを溶媒とする化合物１（７９．１ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）およびアミノイミノメタンスルホン酸（５０．１５ｍｇ、０．４０４ｍｍｏｌ）の懸濁液を、室温で２４時間攪拌したところ、懸濁液が透明になった。ＨＣｌ（１Ｍ、１ｍＬ）のエーテル溶液を添加し、引き続き溶媒をＮ２フローにより除去した。残渣を、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、その後２０％ＮａＯＨ水溶液（０．５ｍＬ）を添加した。得られた曇った混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（４×５ｍＬ）。一緒にした抽出液を、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去し、所望の生成物を白色粉末として得た（９０ｍｇ、収率９５％）。ｍ．ｐ．１１１〜１１２℃。
2004506645.tif 000047
【０１１０】
化合物４のＨＣｌ塩：
化合物４を、最小量のＣＨ２Ｃｌ２およびＭｅＯＨ中に溶解し、引き続きエーテルを溶媒とするＨＣｌ過剰量を添加した。溶媒をＮ２フローにより除去し、残渣を、一晩高減圧状態に置いた。非晶質白色粉末として、所望の生成物を得た。
2004506645.tif 000048
【０１１１】
化合物５：
メタノールおよびクロロホルムを溶媒とする化合物２（１１３ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）およびアミノイミノメタンスルホン酸（６７．１ｍｇ、０．５４１ｍｍｏｌ）の懸濁液を、室温で２４時間攪拌した。エーテルを溶媒とするＨＣｌ（１Ｍ、１ｍＬ）を添加し、引き続きＮ２フローにより溶媒を除去した。残渣を、一晩高減圧状態に置き、かつＨ２Ｏ（５ｍＬ）に溶解し、その後２０％ＮａＯＨ水溶液（１．０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（５×５ｍＬ）。一緒にした抽出液を、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去し、所望の生成物を白色固形物として得た（９０ｍｇ、収率９５％）。ｍ．ｐ．１０２〜１０４℃。
2004506645.tif 000049
【０１１２】
化合物５のＨＣｌ塩：
化合物５を、最小量のＣＨ２Ｃｌ２およびＭｅＯＨ中に溶解し、引き続きエーテルを溶媒とするＨＣｌ過剰量を添加した。溶媒および過剰なＨＣｌをＮ２フローにより除去し、残渣を、一晩高減圧状態に置いた。非晶質白色粉末として、所望の生成物を得た。
2004506645.tif 000050
【０１１３】
実施例２： 化合物３、２８および２９の合成
化合物２８：
無水ＤＭＳＯ（５ｍＬ）を溶媒とする化合物１９（０．６４１ｇ、０．６１４ｍｍｏｌ）およびＫＣＮ（０．４０ｇ、６．１４ｍｍｏｌ）の懸濁液を、８０℃でＮ２下で一晩攪拌した後、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加した。水性混合物は、ＥｔＯＡｃで抽出した（４×２０ｍＬ）。一緒にした抽出液をブラインで一回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、かつ減圧下で濃縮した。残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）に溶解し、ＭｅＯＨ（３ｍＬ）および触媒量のｐ−トルエンスルホン酸（５．８４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を室温で３時間攪拌し、その後ＮａＨＣＯ３飽和溶液（１０ｍＬ）を注入した。ブライン（６０ｍＬ）を添加した後、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した（４×３０ｍＬ）。一緒にした抽出液をブラインで一回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、かつ濃縮した。残渣は、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２：１）の後、所望の生成物を、淡黄色がかった油状物として得た（０．３４２ｇ、収率９２％）。
2004506645.tif 000051
【０１１４】
化合物２９：
無水ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）を溶媒とする化合物２８（０．３４ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）溶液に０℃Ｎ２下で、ＮＥｔ３（１１９．５μＬ、０．８５７ｍｍｏｌ）を添加し、引き続き、塩化メシル（５３．１μＬ、０．６８６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、０℃で３０分間攪拌し、その後Ｈ２Ｏ（６ｍＬ）を添加した。ブライン（６０ｍＬ）を注入した後、水性混合物をＥｔＯＡｃで抽出した（４×２０ｍＬ）。一緒にした抽出液をブラインで一回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、かつ濃縮した。残渣に、Ｎ−ベンジルメチルアミン（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を８０℃Ｎ２下で一晩攪拌した。過剰なＮ−ベンジルメチルアミンを減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィーにかけ（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２：１、次にＥｔＯＡｃ）の後、生成物を淡黄色油状物として得た（０．３５ｇ、収率８８％）。
2004506645.tif 000052
【０１１５】
化合物３：
無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）を溶媒とする化合物２９（０．０７４ｇ、０．１０６ｍｍｏｌ）溶液を、無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）を溶媒とするＡｌＣｌ３（０．１４１４ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）およびＬｉＡｌＨ４（０．０４１ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）の混合物に滴下した。この懸濁液を２４時間攪拌し、その後２０％ＮａＯＨ水溶液（２ｍＬ）を氷浴温度で添加した。この水性スラリーに、無水Ｎａ２ＳＯ４を添加した。溶液をろ過し、沈殿をＴＨＦで２回洗浄した。溶媒を除去した後、残渣をカラムクロマトグラフィーにかけ（シリカゲル、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、１：１、次にＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２／ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、４：４：１）、所望の生成物を、透明な油状物として得た（０．０３８ｇ、収率５０％）。
2004506645.tif 000053
【０１１６】
実施例３： 化合物６、７および３０〜３３の合成
化合物３０：
コール酸（３．０ｇ、７．３ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）およびメタノール（５ｍＬ）中に溶解した。ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（１．８ｇ、８．８ｍｍｏｌ）を添加し、その後Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（〜１００ｍｇ）およびベンジルメチルアミン（１．１ｇ、８．８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を２時間攪拌し、その後ろ過した。ろ液を濃縮し、かつクロマトグラフィーにかけ（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２を溶媒とする３％ＭｅＯＨ）、白色固形物３．０ｇを得た（収率８１％）。
2004506645.tif 000054
【０１１７】
化合物３１：
化合物３０（２．４ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）を溶媒とするＬｉＡｌＨ４（０．１８ｇ、４．７ｍｍｏｌ）懸濁液に添加した。この混合物を２４時間還流し、その後０℃に冷却した。Ｎａ２ＳＯ４水溶液を、混合物の灰色が消えるまで、慎重に添加した。得られた塩をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、白色固形物２．１ｇ（８８％）を得た。この生成物は、以後の反応に十分な純度を有することが証明された。
2004506645.tif 000055
【０１１８】
化合物３２：
化合物３１（０．３６ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）に溶解し、かつＢｏｃ−グリシン（０．５１ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（０．６７ｇ、３．２４ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（〜１００ｍｇ）を添加した。この混合物を、Ｎ２下で４時間攪拌し、その後ろ過した。濃縮およびクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２を溶媒とする５％ＭｅＯＨ）後、透明なガラス状の生成物０．４７ｇを得た（６８％）。
2004506645.tif 000056
【０１１９】
化合物３３：
化合物３１（０．３９ｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）に溶解し、かつＢｏｃ−β−アラニン（０．６０ｇ、３．１７ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（０．７３ｇ、３．５６ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（〜１００ｍｇ）を添加した。この混合物を、Ｎ２下で６時間攪拌し、その後ろ過した。濃縮およびクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２を溶媒とする５％ＭｅＯＨ）後、透明なガラス状の生成物０．５８ｇを得た（７２％）。
2004506645.tif 000057
【０１２０】
化合物６：
化合物３２（０．１５ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中の４Ｎ ＨＣｌの過剰量と共に４０分間攪拌した。ジオキサンおよびＨＣｌを減圧下で除去したところ、透明なガラス状の生成物０．１２ｇが残留した（〜１００％）。
2004506645.tif 000058
【０１２１】
化合物７：
化合物３３（０．２０ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中の４Ｎ ＨＣｌの過剰量と共に４０分間攪拌した。ジオキサンおよびＨＣｌを減圧下で除去したところ、透明なガラス状の生成物０．１２ｇが残留した（〜１００％）。
2004506645.tif 000059
【０１２２】
実施例４： 化合物８〜１０および３４〜３０の合成
化合物３４：
ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）（１．２０ｍＬ、６．０８ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１００ｍＬ）を溶媒とするトリフェニルホスフィン（１．６０ｇ、６．０８ｍｍｏｌ）に０℃で添加し、かつ３０分間攪拌し、その間に黄色溶液はペースト状となった。化合物１４（２．５８ｇ、４．０６ｍｍｏｌ）およびｐ−ニトロ安息香酸（０．８１ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶解し、ペーストに添加した。得られた混合物を周囲温度で一晩攪拌した。水（１００ｍＬ）を添加し、この混合物を、ＮａＨＣＯ３溶液を添加することによってわずかに塩基性とし、その後ＥｔＯＡｃで抽出した（３×５０ｍＬ）。一緒にした抽出液を、ブラインで一回洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（Ｅｔ２Ｏ／ヘキサン、１：２）後、白色粉末として所望の生成物を得た（２．７２ｇ、収率８５％）。
2004506645.tif 000060
ニトロ安息香酸（２．７５ｇ、３．５ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中に溶解し、かつＭｅＯＨ（２０ｍＬ）および２０％ＮａＯＨ水溶液（５ｍＬ）を添加した。混合物を最高６０℃で２４時間加熱した。水（１００ｍＬ）を注入し、かつＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした抽出液を、ブラインで洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（溶離液ＣＨ２Ｃｌ２を溶媒とする３％ＭｅＯＨ）の後、白色固形物の所望の生成物を得た（１．８９ｇ、収率８５％）。
2004506645.tif 000061
【０１２３】
化合物３５：
丸底フラスコに化合物３４（２．０ｇ、３．１４ｍｍｏｌ）、ＮａＨ（鉱油中６０％、３．８ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１５０ｍＬ）を添加した。この懸濁液を２時間還流し、その後臭化アリル（２．７２ｍＬ、３１．４ｍｍｏｌ）を添加した。２８時間還流した後、更に１０当量のＮａＨおよび臭化アリルを添加した。７２時間後、更に１０当量のＮａＨおよび臭化アリルを添加した。１１５時間後、ＴＬＣの結果は、出発材料および中間体がほとんど存在しないことを示した。この懸濁液に、水（１００ｍＬ）を慎重に添加し、引き続きＥｔＯＡｃで抽出した（５×５０ｍＬ）。一緒にした抽出液を、ブラインで洗浄し、かつ無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）の後、黄色がかったガラス状の所望の生成物を得た（１．８１ｇ、収率７９％）。
2004506645.tif 000062
【０１２４】
化合物３６：
ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に３５（０．５５１ｇ、０．７２９ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、−７８℃でその溶液が深い青色に変わるまでオゾンを気泡注入した。過剰量のオゾンは酸素とともに吹き飛んだ。メチルスルファイド（１ｍＬ）を添加し、続いて５％のＮａＯＨ溶液とメタノールに入れたＮａＢＨ４（０．２２ｇ、５．８０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合液を室温で一晩攪拌し、塩水で洗浄した。次にその塩水をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。目的の生成物（０．３６ｇ、収率６５％）がＳｉＯ２ クロマトグラフィー（５％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）を行った後で無色のガラス質として得られた。
2004506645.tif 000063
【０１２５】
化合物３７：
ＮＥｔ３（０．２３ｍＬ、１．６６ｍｍｏｌ）を３６（０．３６４ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）溶液に０℃でＮ２気流下で添加し、続いてメシルクロライド（０．１２ｍＬ、１．５６ｍｍｏｌ）を導入した。この混合液を１０分間攪拌し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えてその反応を止めてからＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を塩水で洗浄し、無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン　１：１）を行って目的の生成物（０．４１１ｇ、収率８６％）が白色のガラス質として得られた。
2004506645.tif 000064
【０１２６】
化合物３８：
乾燥ＤＭＳＯ（５ｍＬ）中に３７（０．２２７ｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）とＮａＮ３（０．１４７ｇ、２．２７ｍｍｏｌ）を入れた懸濁液を一晩８０℃で攪拌し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈してからＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出した。その抽出物を塩水で洗浄し、無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン　１：８）を行って目的の生成物（０．１５３ｇ、収率８０％）が黄色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000065
【０１２７】
化合物３９：
ｐ−トルエンスルホン酸（１．７２ｍｇ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）とＭｅＯＨ（５ｍＬ）に３８（０．１５３ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を入れた溶液に添加し、その混合液を２．５時間攪拌した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５ｍＬ）を導入してから塩水（３０ｍＬ）を注入した。その水性混合液をＥｔＯＡｃを用いて抽出し、合わせた抽出物を塩水で洗浄してからＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン　１：３）を行って、目的の生成物（０．１０ｇ、収率９２％）が淡黄色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000066
【０１２８】
化合物４０：
３９（０．１０ｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（８ｍＬ）溶液に０℃でＮ２気流下、ＮＥｔ３（３４．８μＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてメシルクロライド（１５．５μＬ、０．１９９ｍｍｏｌ）を導入した。この混合液を１５分間攪拌した。Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）と塩水（２０ｍＬ）を加え、それからＥｔＯＡｃ（４×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を塩水で一度洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去してからその残渣をＮ−ベンジルメチルアミン（０．５ｍＬ）と混合し、Ｎ２気流下一晩８０℃で加熱した。過剰のＮ−ベンジルメチルアミンを減圧下で除去し、その残渣をＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン　１：４）にかけることによって生成物（０．１０９ｇ、収率９３％）が黄色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000067
【０１２９】
化合物８：
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に４０（０．１０９ｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）とＬｉＡｌＨ４（２３．５ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を入れた懸濁液を、Ｎ２気流下で一晩攪拌した。Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏを注意深く添加し、灰色がなくなるのが持続するまで攪拌した。無水Ｎａ２ＳＯ４を添加して白色沈殿物を濾過し乾燥ＴＨＦですすいだ。溶媒を除去してからその残渣を最小量のＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、濾過した。溶媒を除去すると、目的の生成物（０．０９１ｇ、収率９４％）が無色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000068
【０１３０】
化合物９：
２３（０．１８ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（４ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（０．２２４ｇ、ミネラルオイル中６０％、５．６０ｍｍｏｌ）と１−ブロモオクタン（０．４８ｍＬ、２．８０ｍｍｏｌ）を添加した。この懸濁液をＮ２気流下６５℃で一晩攪拌し、続いてＨ２Ｏ（６０ｍＬ）を導入してエーテル（４×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ヘキサンと５％のＥｔＯＡｃを含むヘキサン）を行って目的の生成物（０．１６９ｇ、収率８０％）が淡い黄色がかったオイルとして得られた。
2004506645.tif 000069
７７８．５６８３。トリアジド（０．１６９ｇ、０．２２４ｍｍｏｌ）とＬｉＡｌＨ４（０．０２５ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を無水のＴＨＦ（１０ｍＬ）に懸濁し、Ｎ２気流下、室温で一晩攪拌してからＮａ２ＳＯ４水和物を注意深く添加した。灰色がなくなった後、無水のＮａ２ＳＯ４を添加して攪拌した。白色の沈澱物を濾過して除去し、ＴＨＦで洗浄した。溶媒を除去してからその残渣を１Ｍの塩酸に溶解し、その水性溶液をエーテル（５ｍＬ）を用いて１回抽出した。続いてその水性溶液を２０％の水性ＮａＯＨ溶液を添加することによって塩基性にし、Ｅｔ２Ｏ（４×５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を洗浄し、乾燥を行って濃縮した。それから残渣をＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２　（１：１）、続いてＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２／ＮＨ３・Ｈ２Ｏ （４：４：１））にかけて目的の生成物（０．０９１ｇ、収率６０％）を無色のオイルとして得た。
2004506645.tif 000070
【０１３１】
化合物１０：
ＴＨＦ（４０ｍＬ）中に２３（０．１２６ｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）とＬｉＡｌＨ４（０．０３７ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）を入れた懸濁液をＮ２気流下で一晩、室温にて攪拌し、続いてＮａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏを注意深く添加した。その懸濁液の灰色が消失した後で無水のＮａ２ＳＯ４を添加して有機層が透明になるまで攪拌した。白色沈澱物を濾過して除去してからＴＨＦを用いて２回洗浄した。ＴＨＦを減圧下で除去し、残渣をＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２／ＮＨ３・Ｈ２Ｏ （４：４：１））にかけて目的の生成物（０．０６６ｇ、収率６０％）を無色のオイルとして得た。
2004506645.tif 000071
【０１３２】
実施例５： 化合物１１および４３〜４７の合成
化合物４３：
化合物４１は、Ｄ． Ｈ． Ｒ． Ｂａｒｔｏｎ、Ｊ． Ｗｏｚｎｉａｋ、Ｓ． Ｚ． Ｚａｒｄ、Ａ Ｓｈｏｒｔ Ａｎｄ Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ Ｄｅｇｒｅｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｈｅ Ｂｉｌｅ Ａｃｉｄ Ｓｉｄｅ Ｃｈａｉｎ． Ｓｏｍｅ Ｎｏｖｅｌ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｓｕｌｐｈｉｎｅｓ Ａｎｄ Ａ−ｋｅｔｏｅｓｔｅｒｓ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９８９、ｖｏｌ．４５、３７４１−３７５４によって報告された方法に従って調製した。４１（１．００ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、エチレングリコール（３．５２ｍＬ、６３ｍｍｏｌ）及びｐ−ＴｓＯＨ（２０ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２気流下で１６時間、ベンゼン中で還流した。この反応の間に形成される水はディーン−スターク（Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ）水分トラップによって除去した。冷却した混合物をＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ、２×３０ｍＬ）を用いて抽出した。合わせた抽出物を塩水で洗浄し、無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去すると生成物（１．０９ｇ、１００％）が白色のガラス質として得られた。
2004506645.tif 000072
このトリアセテート（１．０９ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解した。ＮａＯＨ（０．８４ｇ、２１ｍｍｏｌ）をその溶液に添加した。この懸濁液を続いてＮ２気流下で２４時間還流した。次にＭｅＯＨを減圧して除去し、残渣をＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）に溶解してからＨ２０、塩水で洗浄した後で無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去すると目的の生成物（０．８０ｇ、収率９６％）が白色固体として得られた。
2004506645.tif 000073
【０１３３】
化合物４４：
丸底フラスコに４３（０．８０ｇ、２．０３ｍｍｏｌ）と乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）を添加してからＮａＨ（ミネラルオイル中６０％、０．８１ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）を添加した。この懸濁液をＮ２気流下で３０分間還流し、アリルブロマイド（１．７５ｍＬ、２０．３ｍｍｏｌ）を添加した。４８時間還流した後、さらに１０当量のＮａＨとアリルブロマイドを添加した。さらに４８時間たった後、ＴＬＣは何も中間体が形成されていないことを示した。冷却水（５０ｍＬ）をその冷却懸濁液に添加した。得られた混合液をＥｔ２Ｏ（６０ｍＬ、２×３０ｍＬ）を用いて抽出した。合わせた抽出物を塩水で洗浄し、無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中６％のＥｔＯＡｃ）を行うと、目的とする生成物（０．９４ｇ、収率９０％）が淡い黄色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000074
【０１３４】
化合物４５：
乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）中に４４（０．９４ｇ、１．８３ｍｍｏｌ）を入れた溶液に９−ＢＢＮ（０．５ＭのＴＨＦ溶液、１４．７ｍＬ、７．３４ｍｍｏｌ）を添加し、その混合液をＮ２気流下室温にて１２時間攪拌し、２０％のＮａＯＨ溶液（４ｍＬ）と３０％のＨ２Ｏ２溶液（４ｍＬ）を添加した。次に得られた混合液を１時間還流し、続いて塩水（１００ｍＬ）を添加してからＥｔＯＡｃ（４×３０ｍＬ）を用いて抽出した。合わせた抽出物を無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去してからその残渣をＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ、その後ＣＨ２Ｃｌ２中１０％のＭｅＯＨ）で精製することによって、生成物（０．５５９ｇ、収率５４％）が無色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000075
【０１３５】
化合物４６：
アセトン（４０ｍＬ）と水（４ｍＬ）中に４５（０．５５９ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）を入れた溶液にＰＰＴＳ（０．１２４ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を加え、その溶液をＮ２気流下１６時間還流した。溶媒を減圧下で除去した。続いて水（４０ｍＬ）をその残渣に加え、その混合液をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ、２×２０ｍＬ）を用いて抽出した。合わせた抽出物を塩水で洗浄、乾燥してからエバポレートして乾燥した。その残渣をＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中８％のＭｅＯＨ）を行うと、目的とする生成物（０．５０９ｇ、収率９８％）が透明なオイルとして得られた。
2004506645.tif 000076
【０１３６】
化合物４７：
４６（０．１８ｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液に、０℃でＥｔ３Ｎ（０．１６８ｍＬ、１．２０ｍｍｏｌ）を添加し、続いてメシルクロライド（０．０８８ｍＬ、１．１３ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後、Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）と塩水（３０ｍＬ）を加えた。この混合液をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ、２×１０ｍＬ）で抽出し、その抽出物を塩水で洗浄、次に無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を除去してからその残渣をＤＭＳＯ（５ｍＬ）とＮａＮ３（０．２３３ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）に溶解した。その懸濁液をＮ２気流下で１２時間、５０℃まで加熱した。Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）をその冷却した懸濁液に添加し、得られる混合液をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ、２×１０ｍＬ）を用いて抽出してからその抽出物を塩水で洗浄、無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２カラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン　１：５）にかけることによって生成物（０．１９１ｇ、二工程の収率８８％）が淡い黄色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000077
【０１３７】
化合物１１：
化合物４７（０．１９１ｇ、０．３１９ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、続いてＬｉＡｌＨ４（６０．４ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）を添加した。灰色の懸濁液を、Ｎ２気流下、室温にて１２時間攪拌した。Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏ粉末を注意深く添加した。その懸濁液の灰色が消失してから無水のＮａ２ＳＯ４を添加し、沈澱物を濾過して取り除いた。溶媒を除去してからその残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２／２８％ＮＨ３・Ｈ２０　３：３：１）によって精製した。集めたフラクションからほどんどの溶媒を除去した後、５％のＨＣｌ溶液（２ｍＬ）を添加してその乳状の残渣を溶解した。得られた透明な溶液を続いてＥｔ２Ｏ（２×１０ｍＬ）を用いて抽出した。次に２０％のＮａＯＨ溶液を、その溶液が強い塩基性になるまで添加した。ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ、２×１０ｍＬ）を用いてその塩基性の溶液を抽出した。合わせた抽出物を無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、溶媒を除去すると、目的とする生成物（０．１１５ｇ、収率６９％）が無色のオイルとして得られた。１Ｈ ＮＭＲよりこの化合物が、Ｃ２０で約９：１の混合比率の二つの立体異性体からなる混合物であることが明らかである。これらの立体異性体は分離しなかったが、再収して用いた。量の多い方の異性体のスペクトルは、以下のようである。
2004506645.tif 000078
【０１３８】
実施例６： 化合物１２、４８および４９の合成
化合物４８：
２３（０．１５ｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）溶液に、０℃でＥｔ３Ｎ（４８．８μＬ、０．３５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＣＨ３ＳＯ２Ｃｌ（２１．７μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合液を１５分間攪拌し、Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）を加えた。次に飽和ＮａＣｌ溶液（２０ｍＬ）を添加し、その混合液をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ、２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を塩水で洗浄し、無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒をエバポレート除去してからその残渣にＮａＢｒ（０．１２ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）とＤＭＦ（１０ｍＬ）を加えた。この懸濁液をＮ２気流下で２時間、８０℃まで加熱した。ＤＭＦを減圧して除去してからその残渣をシリカ上でクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン　１：１０）にかけることによって目的とする生成物（０．１９１ｇ、収率９７％）が淡い黄色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000079
【０１３９】
化合物４９：
化合物４８（０．１９１ｇ、０．２６９ｍｍｏｌ）と２３（０．２９５ｇ、０．４５９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍＬ、使用する前に６ｍｍＨｇにてＢａＯ上で蒸留した）に溶解し、続いてＮａＨ（０．０５４ｇ、ミネラルオイル中６０％）を添加した。その懸濁液を、Ｎ２気流下、室温にて２４時間攪拌した。Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加して過剰のＮａＨをクエンチし、次にその混合液をＥｔ２Ｏ（４０ｍＬ、３×２０ｍＬ）を用いて抽出を行ってから合わせた抽出物を塩水で洗浄し、無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥した。ＳｉＯ２上でクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン　１：６、続いて１：２）にかけることによって目的とする生成物（０．１７７ｇ、化合物２３に基づく収率５２％）が淡黄色のオイルとして得られた。
2004506645.tif 000080
【０１４０】
化合物１２：
化合物４９（０．２１９ｇ、０．１７３ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、続いてＬｉＡｌＨ４（６５ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）を添加した。灰色の懸濁液を、Ｎ２気流下、室温にて１２時間攪拌した。Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏ粉末を注意深く添加した。その懸濁液の灰色が消失してから無水のＮａ２ＳＯ４を添加し、沈澱物を濾過して取り除いた。溶媒を除去してからその残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２／２８％ＮＨ３・Ｈ２０　２．５：２．５：１）によって精製した。集めたフラクションからほどんどの溶媒をロートベーター除去（ｒｏｔａｖａｐｐｅｄ ｏｆｆ）した後、５％のＨＣｌ溶液（２ｍＬ）を添加してその乳状の残渣を溶解した。得られた透明な溶液を続いてＥｔ２Ｏ（２×１０ｍＬ）を用いて抽出した。次に２０％のＮａＯＨ溶液を、その溶液が強い塩基性になるまで添加した。ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ、２×１０ｍＬ）を用いてその塩基性の溶液を抽出した。合わせた抽出物を無水のＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、溶媒を除去すると、目的とする生成物（０．１４７ｇ、収率７６％）が白色のガラス質として得られた。
2004506645.tif 000081
【０１４１】
実施例７： 化合物１１１〜１１３および１１６ａ〜ｄの合成
化合物１１６ａ〜ｄ：
代表的な手順：１１６ｂの調製。ＮａＨ（０．０６ ｇ、６０％鉱油溶液、１．４９ ｍｍｏｌ）および臭化プロピル（０．１３６ ｍｌ、１．４９ ｍｍｏｌ）を化合物２３のＤＭＦ溶液に加えた（リ（Ｌｉ）ら、Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９９８、１２０、２９６１に記載）（０．０９６ ｇ、０．１４９ ｍｍｏｌ）。懸濁液をＮ２下で２４時間攪拌した。Ｈ２Ｏ（２０ ｍｌ）を加えて、混合液をヘキサンによって抽出した（１０ ｍｌを３回）。合わせた抽出液をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）によって所望の産物が淡黄色の油として得られた（９２ ｍｇ、収率９０％）。
2004506645.tif 000082
【０１４２】
化合物１１１〜１１３：
代表的な手順：１１２の調製。化合物１１６ｂ（０．０９２ ｇ、０．１３４ ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ ｍｌ）に溶解した後、ＬｉＡｌＨ４（０．０３１ ｇ、０．８１ ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＮ２下で１２時間攪拌した。Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏ（〜１ ｇ）を注意深く加えた。懸濁液の灰色が消失した後、無水Ｎａ２ＳＯ４を加え、沈殿物を濾過によって除去した。濃縮してシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／２８％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、１２：６：１、次に１０：５：１）を行うと、ガラスが得られ、これを１ Ｍ ＨＣｌ（２ ｍｌ）に溶解した。得られた透明な溶液をＥｔ２Ｏ（１０ ｍｌで２回）によって洗浄した。溶液が強塩基性になるまで２０％ＮａＯＨ溶液を水相に加えた。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ ｍｌを３回）を用いて塩基性溶液を抽出した。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて真空で濃縮すると所望の産物が白色のガラス（０．０４５ ｇ、収率５５％）として得られた。１１２：
2004506645.tif 000083
2004506645.tif 000084
【０１４３】
実施例８： 化合物１０６および１２４の合成
化合物１２４：
化合物４７（０．２５６ ｇ、０．４８９ ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１０ ｍｌ）に溶解して０℃に冷却した後、Ｎａ２ＨＰＯ４（０．６９ ｇ、４．８９ ｍｍｏｌ）と尿素・過酸化水素複合体（ＵＨＰ）（０．０６９ ｇ、０．７３３ ｍｍｏｌ）を加えた。無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡＡ）（０．１３８ ｍｌ、０．９７７ ｍｍｏｌ）を滴下した。懸濁液を１２時間攪拌して、さらにＵＨＰ（２３ ｍｇ、０．２５ ｍｍｏｌ）およびＴＦＡＡ（０．０６９ ｍｌ、０．４９ ｍｍｏｌ）を加えた。さらに１２時間後、Ｈ２Ｏ（３０ ｍｌ）を加えて、得られた混合液をＥｔＯＡｃ（２０ ｍｌで３回）抽出した。合わせた抽出液を塩水（５０ ｍｌ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空で濃縮した。ＳｉＯ２クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：５）を行うと、所望の産物が無色の油として得られた（０．１４５ ｇ、収率５５％）。
2004506645.tif 000085
【０１４４】
化合物１０６：
化合物１２４（０．１４５ ｇ、０．２３６ ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ ｍｌ）およびＭｅＯＨ（１ ｍｌ）に溶解した。２０％ＮａＯＨ溶液（０．２ ｍｌ）を加えた。混合液を１２時間攪拌して、無水Ｎａ２ＳＯ４を加えて水分を除去した。真空で濃縮後、残査をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：３）によって精製すると、所望の産物が無色の油として得られた（０．１２４ ｇ、収率９２％）。
2004506645.tif 000086
アルコール（０．１２４ ｇ、０．２１６ ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２０ ｍｌ）に溶解した後、ＬｉＡｌＨ４（３３ ｍｇ、０．８６６ ｍｍｏｌ）を加えた。灰色の懸濁液をＮ２下で１２時間攪拌した。Ｎａ２ＳＯ４・１０ Ｈ２Ｏ（〜２ｇ）を注意深く加えた。懸濁液の灰色が消失した後、無水Ｎａ２ＳＯ４を加えて、沈殿物を濾過して除去した。溶媒を除去した後、残査をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２／２８％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、２．５：２．５：１）によって精製した。適切な分画を濃縮した後、１Ｍ ＨＣｌ（２ ｍｌ）を加えて乳状の残査を溶解した。得られた透明な溶液をＥｔ２Ｏ（１０ ｍｌを２回）によって洗浄した。水相に、溶液が強塩基性になるまで２０％ＮａＯＨ溶液を加えた。ＣＨ２Ｃｌ２（２０ ｍｌ、１０ ｍｌを２回）を用いて塩基性溶液を抽出した。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、溶媒を除去すると所望の産物が無色の油として得られた（０．０５０ ｇ、収率４７％）。
2004506645.tif 000087
【０１４５】
実施例９： 化合物１０９および１２６〜１２９の合成
化合物１２６：
化合物１２５（２．３０ ｇ、３．５２ ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５０ ｍｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１００ ｍｌ）に溶解した。少量のＥｔ３Ｎを加えて、溶液を−７８℃に冷却した。青い色が消えずに残るまでオゾンを溶液に通気した。Ｍｅ２Ｓ（４ ｍｌ）を加えた後、ＮａＢＨ４（０．２６６ ｇ、０．７０３ ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ ｍｌ）溶液を加えた。得られた溶液を加温して一晩攪拌した。溶液を真空で濃縮して、塩水（６０ ｍｌ）を加えた。混合液をＥｔＯＡｃ（４０ ｍｌ、３０ ｍｌを２回）によって抽出し、合わせた抽出液を塩水で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）を行うと、産物が白色固体として得られた（１．２４ ｇ、収率７６％）。ｍ．ｐ．２１９〜２２０℃。
2004506645.tif 000088
【０１４６】
化合物１２７：
化合物１２６（１．２４ ｇ、２．６７ ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（３０ ｍｌ）に溶解してＮａＯＨ（０．５４ ｇ、１３．４ ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＮ２下で２４時間還流した。ＭｅＯＨを真空で除去した後Ｈ２Ｏを加えた（５０ ｍｌ）。沈殿物を濾過して、Ｈ２Ｏで洗浄した後真空下で乾燥させると白色固体（１．０２ ｇ）が得られた。この固体をＤＭＦ（４０ ｍｌ）に溶解した後、ＮＥｔ３（１．１２ ｍｌ、８．０２ ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１６．３ ｍｇ、０．１３ ｍｍｏｌ）および塩化トリチル（１．４９ ｇ、５．３４ ｍｍｏｌ）を連続的に加えた。懸濁液をＮ２下で１２時間攪拌した後、５０℃まで２４時間加熱した。冷却した懸濁液にＨ２Ｏ（１００ ｍｌ）を加えて、混合液をＥｔＯＡｃ（５０ ｍｌを３回）によって抽出した。合わせた抽出液を塩水（１００ ｍｌ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、真空で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）を行うと、産物が淡黄色のガラスとして得られた（１．２０ ｇ、収率７２％）。このガラスに無水ＴＨＦ（８０ ｍｌ）およびＮａＨ（６０％鉱油溶液、０．７７ ｇ、１９．３ ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＮ２下で半時間還流してから、臭化アリル（１．６７ ｍｌ、１９．３ ｍｍｏｌ）を加えた。４８時間還流した後、さらにＮａＨおよび臭化アリル１０等量を加えた。さらに４８時間後、反応混合液を冷却して、Ｈ２Ｏ（１００ ｍｌ）を徐々に加えた。得られた混合液をヘキサン（５０ ｍｌで３回）によって抽出して、合わせた抽出液を塩水（１００ ｍｌ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィー（５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液）を行うと、産物が透明なガラスとして得られた（１．２７ ｇ、３段階全ての収率６４％）。
2004506645.tif 000089
【０１４７】
化合物１２８：
１２７（１．２７ ｇ、１．７１ ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ ｍｌ）溶液に９−ＢＢＮ（０．５ Ｍ ＴＨＦ溶液、１７．１ ｍｌ）を加えた。混合液を１２時間攪拌してからＮａＯＨ（２０ ％溶液、１０ ｍｌ）およびＨ２Ｏ２（３０％溶液、１０ ｍｌ）を加えた。得られた混合液を１時間還流した後、塩水（１００ ｍｌ）を加えて、ＥｔＯＡｃ（３０ ｍｌで４回）によって抽出した。合わせた抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液）を行うと、産物が透明なガラスとして得られた（１．２６ ｇ、収率９３％）。
2004506645.tif 000090
【０１４８】
化合物１２９：
化合物１２８（１．２６ ｇ、１．５８ ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ ｍｌ）溶液に、０℃でＥｔ３Ｎ（０．９２ ｍｌ、６．６０ ｍｍｏｌ）を加えた後に、塩化メシル（０．４７ ｍｌ、６．０５ ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、Ｈ２Ｏ（１０ ｍｌ）を加えた後に塩水（８０ ｍｌ）を加えた。混合液をＥｔＯＡｃ（６０ ｍｌ、３０ ｍｌを２回）によって抽出して、合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。真空で溶媒を除去した後、残査をＤＭＳＯ（１０ ｍｌ）に溶解してＮａＮ３（１．１９２ ｇ、１８．３ ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＮ２下で６０℃まで一晩加熱した。Ｈ２Ｏ（１００ ｍｌ）を加え、混合液をＥｔＯＡｃ（４０ ｍｌを３回）によって抽出した。合わせた抽出液を塩水によって洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。真空で溶媒を除去すると淡黄色の油が得られた。油をＭｅＯＨ（１０ ｍｌ）に溶解して、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ ｍｌ）およびＴｓＯＨ（１７．４ ｍｇ、０．０９２ ｍｍｏｌ）を加えた。１２時間後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ ｍｌ）および塩水（５０ ｍｌ）を加えて、混合液をＥｔＯＡｃ（４０ ｍｌを３回）によって抽出した。合わせた抽出液を塩水（５０ ｍｌ）によって洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：３）を行うと、所望の産物が淡黄色の油として得られた（０．９３４、９４％）。
2004506645.tif 000091
【０１４９】
化合物１０９：
化合物１２９（０．２４５ ｇ、０．３９１ ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ ｍｌ）に溶解した後、ＬｉＡｌＨ４（５９ ｍｇ、１．５６ ｍｍｏｌ）を加えた。灰色の懸濁液をＮ２下で１２時間攪拌した。Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏ粉末（〜１ ｇ）を注意深く加えた。懸濁液の灰色が消失した後、無水Ｎａ２ＳＯ４を加えて沈殿物を濾過によって除去した。溶媒を除去した後、残査をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／２８％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、１０：５：１、次に１０：５：１．５）によって精製した。適切な分画から溶媒を除去して、１Ｍ ＨＣｌ（４ ｍｌ）を加えて残査を溶解した。得られた透明な溶液をＥｔ２Ｏ（１０ ｍｌを３回）によって抽出した。溶液が強塩基性になるまで２０％ＮａＯＨ溶液を加えた。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ ｍｌを４回）を用いて塩基性溶液を抽出した。合わせた抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を真空で除去すると、所望の産物が無色の油として得られた（０．１５ ｇ、収率７１％）。
2004506645.tif 000092
【０１５０】
実施例１０： 化合物１０８および１３０の合成
化合物１３０：
ｏ−ＮＯ２Ｃ６Ｈ４ＳｅＣＮ（０．０９４ ｇ、０．２１ ｍｍｏｌ）およびＢｕ３Ｐ（０．０９５ ｍｌ、０．３８ ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（５ ｍｌ）中で０℃で半時間攪拌した後、化合物１２９（０．１０ ｇ、０．１５９ ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２ ｍｌ）を加えた。懸濁液を１時間攪拌した後、Ｈ２Ｏ２（３０％水溶液、２ ｍｌ）を加えた。混合液を１２時間攪拌した後、ヘキサン（１０ ｍｌを４回）によって抽出した。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を行うと、所望の産物が淡黄色の油として得られた（０．０３５ ｇ、収率３６％）。
2004506645.tif 000093
【０１５１】
化合物１０８：
化合物１３０（０．１０５ ｇ、０．１７２ ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ ｍｌ）およびＭｅＯＨ（５ ｍｌ）に−７８℃で溶解した。溶液にＯ３を約２０分間通気した。Ｍｅ２Ｓ（１ ｍｌ）を加え、溶媒を真空で除去した。残査をＴＨＦ（１５ ｍｌ）に溶解して、ＬｉＡｌＨ４（０．０３３ ｇ、０．８６ ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を１２時間攪拌した。Ｎａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏ（〜２ ｇ）を注意深く加えた。懸濁液の灰色が消失した後、無水Ｎａ２ＳＯ４を加えて、沈殿物を濾過によって除去した。濃縮してシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／２８％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、１０：５：１．５、次に９：６：１．８）を行うと、白色のガラスが得られた。この材料に１ Ｍ ＨＣｌ（４ ｍｌ）を加えた。得られた透明な溶液をＥｔ２Ｏ（１０ ｍｌを３回）によって洗浄した。溶液が強塩基性になるまで２０％ＮａＯＨ溶液を水相に加えた。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ ｍｌを４回）を用いて塩基性溶液を抽出した。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を除去すると、所望の産物が無色の油として得られた（０．０６３ ｇ、収率６８％）。
2004506645.tif 000094
【０１５２】
実施例１１： 化合物１３２〜１３５の合成
化合物１３２：
化合物１１５（０．１１８ ｇ、０．１８３ ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（１０ ｍｌ）に溶解して、ＳＯ３・ピリジン複合体（０．０３５ ｇ、０．２２ ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を１２時間攪拌した。溶媒を真空で除去すると白色粉末が得られた。白色粉末に１ Ｍ ＨＣｌ（１０ ｍｌ）を加えて、得られた混合液をＣＨ２Ｃｌ２（１０ ｍｌを４回）によって抽出した。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液）を行うと、所望の産物が淡黄色の油として得られた（０．１１ ｇ、８４％）。
2004506645.tif 000095
トリアジド（０．１１ ｇ、０．１５ ｍｍｏｌ）をＰｈ３Ｐ（０．２０ ｇ、０．７７ ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ ｍｌ）およびＨ２Ｏ（１ ｍｌ）溶液で処置することによってアジドを還元した。混合液を３日間攪拌した。溶媒を真空で除去して、残査をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／２８％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、１２：６：１、次に、１０：５：１．５）によって精製すると、所望の産物がガラスとして得られた（０．０７７ ｇ、収率７８％）。ＨＣｌのＥｔ２Ｏ（１ Ｍ、０．５ ｍｌ）溶液をガラスに加えると、対応するＨＣｌ塩が得られた。
2004506645.tif 000096
【０１５３】
化合物１３３：
２３に由来するメシレート（０．１９ ｇ、０．２６４ ｍｍｏｌ）を過剰量のオクチルアミン（２ ｍｌ）と共に８０℃で１２時間攪拌した。真空でオクチルアミンを除去した後、残査のクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：４に２％Ｅｔ３Ｎを加える）を行うと、所望の産物が淡黄色の油（０．１９ ｇ、収率９５％）として得られた。
2004506645.tif 000097
トリアジド（０．１８ ｇ、０．２３９ ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ ｍｌ）およびＥｔＯＨ（１０ ｍｌ）に溶解した。リンドラー触媒（４４ ｍｇ）を加えて、懸濁液をＨ２（５０ ｐｓｉ）下で１２時間振とうした。溶媒を真空で除去した後、残査をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／２８％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、１０：５：１、次に１０：５：１．５）によって精製した。この産物に１ Ｍ ＨＣｌ（２ ｍｌ）を加えて、得られた透明な溶液をＥｔ２Ｏ（１０ ｍｌを２回）によって抽出した。溶液が強塩基性になるまで２０％ＮａＯＨ溶液を加えた。ＣＨ２Ｃｌ２（２０ ｍｌ、１０ ｍｌを２回）を用いて、塩基性溶液を抽出した。合わせた抽出液をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させて、真空で溶媒を除去すると、所望の産物が透明な油として得られた（０．１１４ ｇ、収率６８％）。
2004506645.tif 000098
【０１５４】
化合物１３４：
化合物１３３（０．０８ ｇ、０．１２ ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３（５ ｍｌ）およびＭｅＯＨ（５ ｍｌ）に溶解して、アミノイミノスルホン酸（０．０４５ ｇ、０．３６ ｍｍｏｌ）を加えて、懸濁液を１２時間攪拌した。溶媒を真空で除去し、残査を１ Ｍ ＨＣｌ（６ ｍｌ）およびＨ２Ｏ（１０ ｍｌ）に溶解した。溶液をＥｔ２Ｏ（５ ｍｌを３回）によって洗浄し、溶液が強塩基性になるまで２０％ＮａＯＨ溶液を滴下した。塩基性混合液をＣＨ２Ｃｌ２（５ ｍｌを４回）によって抽出した。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、真空下で濃縮すると所望の産物が白色ガラスとして得られた（０．０８７ ｇ、収率９１％）。
2004506645.tif 000099
【０１５５】
化合物１３５：
２３（０．０９２ ｇ、０．１２８ ｍｍｏｌ）に由来するメシレートをＤＭＳＯ（２ ｍｌ）に溶解した後、ＮａＮ３（０．０１６７ ｇ、０．２５６ ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を７０℃で１２時間加熱した。冷却した懸濁液にＨ２Ｏ（２０ ｍｌ）を加えて、混合液をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１）（２０ ｍｌ、１０ ｍｌを３回）によって抽出した。合わせた抽出液を塩水（３０ ｍｌ）によって洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空で濃縮すると、産物が淡黄色の油として得られた（０．０８１ ｇ、収率９５％）。
2004506645.tif 000100
テトラアジド（０．０８１ ｇ、０．１２ ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ ｍｌ）およびＥｔＯＨ（１０ ｍｌ）に溶解した。リンドラー触媒（３０ ｍｇ）を加えて、懸濁液をＨ２下（５０ ｐｓｉ）で１２時間振とうした。溶媒を真空で除去した後、残査をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／２８％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ、５：３：１、次に２：２：１）により精製した。この産物に１ Ｍ ＨＣｌ（２ ｍｌ）を加えて、得られた溶液をＥｔ２Ｏ（１０ ｍｌを２回）によって洗浄した。溶液が強塩基性になるまで２０％ＮａＯＨ溶液を水相に加えた。ＣＨ２Ｃｌ２（１０ ｍｌ、５ｍｌを２回）を用いて塩基性溶液を抽出した。合わせた抽出液を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、真空で濃縮すると所望の産物が無色の油として得られた（０．０４４ ｇ、収率６４％）。
2004506645.tif 000101
【０１５６】
実施例１２： 化合物２０３ａ〜ｂ、２０７ａ〜ｃ、２０８ａ〜ｃ、２０９ａ〜ｃおよび２１０ａ〜ｂの合成
化合物２０３ａ−ｂ、２０７ａ−ｃ、２０８ａ−ｃ、２０９ａ−ｃ、および２１０ａ−ｂ：
ＢＯＣ−グリシンをＤＣＣ、ＤＭＡＰ、およびコール酸誘導体２０１と反応させると（スキーム１１）、トリエステル２０２ａが良好な収率で得られた。ＢＯＣ−βアラニンを組み入れる類似の反応も同様に成功し、２０２ｂを得た。２０２ａと２０２ｂをＨＣｌのジオキサン溶液によって脱保護して精製すると（ＣＨ２Ｃｌ２ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ溶出剤によるＳｉＯ２クロマトグラフィー）、トリエステル２０３ａおよび２０３ｂが良好な収率で得られた。
【０１５７】
グリシンおよびβアラニン（それぞれ、２０７ａおよび２０７ｂ）のトリアミドは同じ反応条件を用いて形成した（スキーム１２）。α分岐アミノ酸によるトリアミドも同様に形成することができる。例えば、記述した条件において、ビスＢＯＣ−リジン側鎖を有するトリアミドが形成された（化合物２０７ｃ）。２０７ａ−ｃのＣ２４エステルをＬｉＯＨのＴＨＦ溶液とメタノールによって加水分解すると、アルコール２０８ａ−ｃが得られた。ＨＣｌのジオキサン溶液を用いて脱保護（２０８ａ−ｃ）すると、トリアミド２０９ａ−ｃが良好な収率で得られた。加えて、アルコール２０８ａおよび２０８ｂをメシル化し、ベンジルメチルアミンと反応させた。得られた化合物のＨＣｌのジオキサン溶液による脱保護によってトリアミド２１０ａと２１０ｂ（スキーム１２）が得られた。これらの化合物の抗細菌特性を表１４に要約する。
【０１５８】
実施例１３： 化合物３０２、３１２〜３２１、３２４〜３２６、３２８〜３３１および３４１〜３４３の合成
化合物３０２：
化合物３０８（５β−コラン酸、３，７，１２−トリオンメチルエステル）をコール酸メチルから調製して、二クロム酸ピリジニウムはコール酸メチルからほぼ定量的に生成された。化合物３０８も、ペアソン（Ｐｅａｒｓｏｎ）ら（Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｐｅｒｋｉｎｓ Ｔｒａｎｓ． １、１９８５、２６７）；ミトラ（Ｍｉｔｒａ）ら（Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９６８、３３、１７５）；およびタケダ（Ｔａｋｅｄａ）ら（Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． （Ｔｏｋｙｏ）１９５９、４６、１３１３）に記載のように調製することができる。化合物３０８を塩酸ヒドロキシルアミンと酢酸ナトリウムによって還流するエタノール中で１２時間処理して（Ｈｓｉｅｈら、Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９９５、３、８２３）、３０９を収率９７％で得た。
【０１５９】
２５０ ｍｌの三頚フラスコにグリム（１００ ｍｌ）を加え、これに３０９（１．００ ｇ、２．１６ ｍｍｏｌ）およびホウ化水素ナトリウム（２．１１ ｇ、５５．７ ｍｍｏｌ）を加えた。ＴｉＣｌ４（４．０ ｍｌ、３６．４ ｍｍｏｌ）を窒素下で０℃で混合物にゆっくりと加えた。得られた緑色の混合液を室温で２４時間攪拌した後さらに１２時間還流した。フラスコを氷浴中で冷却して、水酸化アンモニウム（１００ ｍｌ）を加えた。得られた混合液を室温で６時間攪拌した。濃ＨＣｌ（６０ ｍｌ）をゆっくりと加えて、酸性混合液を８時間攪拌した。固体ＫＯＨを加えて得られた懸濁液をアルカリ性にした。懸濁液を濾過して、固体をＭｅＯＨによって洗浄した。合わせた濾液および洗浄液を合わせて、真空で濃縮した。得られた固体を６％ＫＯＨ水溶液（１００ ｍｌ）に懸濁してＣＨ２Ｃｌ２（７５ ｍｌを４回）によって抽出した。合わせた抽出液をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を真空下で除去すると、白色固体が１．１４ ｇ得られた。混合液をシリカゲル（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ、１２：６：１）上でクロマトグラフィーを行うと、３０２（０．２８２ ｇ、収率３３％）、３（０．０６６ ｇ、収率８％）、４（０．１１８ ｇ、収率１４％）が得られた。
2004506645.tif 000102
【０１６０】
オクタニルコレート（３２８）：
コール酸（３．１４ ｇ、７．４３ ｍｍｏｌ）および１０−カンフルスルホン酸（ｃａｍｐｈｏｒｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）（０．５２ ｇ、２．２３ ｍｍｏｌ）をオクタノール（３．５ ｍｌ、２３．４４ ｍｍｏｌ）に溶解した。溶液を油浴中で真空下で４０℃〜５０℃まで加熱した（〜１３ ｍｍ／Ｈｇ）。１４時間後、残存オクタノールを高真空下で蒸発させた。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカゲル、５％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液）によって精製し、所望の産物（２．８１ ｇ、収率７３％）を白色粉末として得た。
2004506645.tif 000103
【０１６１】
化合物３２９〜３３１の代表的な合成：
オクタニルコレート（３２８）（０．２２６ ｇ、０．５１１ ｍｍｏｌ）、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−グリシン（０．４０３ ｇ、２．２９８ ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（０．４７４ ｇ、２．２９８ ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（０．０６２４ ｇ、０．０５１ ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１５ ｍｌ）中で３時間混合した。得られた白色沈殿物を濾過によって除去した。濾液を濃縮して、産物をクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン１：２）によって精製し、所望の産物（０．４８１ ｇ、収率９５％）を白色粉末として得た。
2004506645.tif 000104
【０１６２】
化合物３４１〜３４３の代表的な合成：
化合物３２９（０．４６３ ｇ、０．４６７ ｍｍｏｌ）をＨＣｌのジオキサン溶液（０．３ ｍｌ、４．０ Ｍ）に加えた。混合物を３０分間攪拌した後、過剰量のＨＣｌおよび溶媒を真空で除去した。産物は、クロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ３・Ｈ２Ｏ １０：１．２：０．１）後に淡色の油（０．２７１ ｇ、８４％）として単離された。ＨＣｌのジオキサン溶液を加えて、過剰量のＨＣｌおよびジオキサンを真空下で蒸発させ、３４１の三塩酸塩を白色産物として調製した。
2004506645.tif 000105
【０１６３】
ベンジルコレート（３１２）：
コール酸（４．３３ ｇ、１０．６２ ｍｍｏｌ）および１０−カンフルスルホン酸（０．４９３ ｇ、２．２１ ｍｍｏｌ）をベンジルアルコール（１．９７ ｍｌ、１９．３ ｍｍｏｌ）に溶解した。懸濁液を油浴中で５０℃まで加熱して、真空下（〜１３ ｍｍ／Ｈｇ）で１６時間攪拌した。過剰量のベンジルアルコールを真空下で除去して、粗生成物をクロマトグラフィー（シリカゲル、５％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液）に供し、所望の産物を白色粉末として得た（４．２３ｇ、収率８１％）。
2004506645.tif 000106
【０１６４】
化合物３１３〜３１５の代表的な合成：
ベンジルコレート（３１２）（０．２４８ ｇ、０．４９９ ｍｍｏｌ）、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−グリシン（０．４０４ ｇ、２．３０ ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（０．３３８ ｇ、１．４９ ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０５１ ｇ、０．３９９ ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１５ ｍｌ）に加えて、懸濁液を１６時間攪拌した。得られた白色沈殿物を濾過によって除去して、濾液を濃縮した。産物を、クロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡＣ／ヘキサン０．６：１）後に白色粉末（０．３２９ ｇ、６８％）として得た。
2004506645.tif 000107
【０１６５】
化合物３１６〜３１８の代表的な合成：
化合物３１３（０．５０５ ｇ、０．５２０ ｍｍｏｌ）およびＰｄ（活性炭素上で５重量％、０．１１１ ｇ、０．０５２１ ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５ｍｌ）に加えた。懸濁液をＨ２下（５０ ｐｓｉ）で２０時間攪拌した。固体を濾過によって除去して濾液を濃縮した。産物をクロマトグラフィー（シリカゲル、５％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液）によって精製し、白色粉末（０．４５０ ｇ、収率９８％）を得た。
2004506645.tif 000108
【０１６６】
化合物３１９〜３２１の代表的な合成：
化合物３１６（０．３７５ ｇ、０．４２７ ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（０．１０５ ｇ、０．５１２ ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（０．０６２ ｇ、０．５１２ ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン（０．０９ ｍｌ、０．８９６ ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１５ ｍｌ）に加えた。１６時間混合して、溶媒および過剰量のＮ，Ｎ−ジメチルエタノールアミンを真空で除去した。産物をクロマトグラフィー（シリカゲルＥｔＯＡｃ／ヘキサン／Ｅｔ３Ｎ、１２：１０：０．６）によって精製し、白色粉末（０．３３０ ｇ、収率８２％）を得た。
2004506645.tif 000109
上述の反応由来の白色固体（０．６８０ ｇ、０．７１４ ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ（１ＭのＣＨ２Ｃｌ２溶液、１．５ ｍｌ）を共に２時間攪拌した。溶媒および過剰量のＭｅＩを真空で除去して白色固体（０．８１２ ｇ、〜１００％）を得た。産物をさらなる精製なしで用いた。
【０１６７】
化合物３２４〜３２６の代表的な合成：
化合物３１９（０．８１２ ｇ、０．７１４ ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）に溶解して、トリフルオロ酢酸（０．５ ｍｌ）を加えた。混合物を１６分間攪拌した。溶媒および過剰量の酸を真空で除去して、得られた油をクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ３・Ｈ２Ｏ ４：４：１）に供し、所望の産物を淡色のガラスとして得た（０．４３７ ｇ、収率９０％）。ＨＣｌ（２Ｍエチルエーテル溶液、２．５ ｍｌ）を加え、三塩酸塩３２４を淡黄色粉末として得た。
2004506645.tif 000110
化合物３２５および３２６は、３２４の精製のために用いた塩基性溶出液を用いるクロマトグラフィーに供するには不安定すぎることが判明した。そのため、３２５および３２６を、ＨＣｌ（２Ｍのジエチルエーテル溶液）を用いた３２０および３２１の脱保護により調製し、続いて酢酸エチルにより滴定した。その後、化合物をさらなる精製なしで用いた。１Ｈ ＮＭＲ分光法によって、化合物３２５および３２６の純度が＞９５％であることが示された。
2004506645.tif 000111
【０１６８】
実施例１４：化合物３５２〜３５４の安定性試験
化合物３５２〜３５４を、５０ ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ ２．０、７．０または１２．０）に約１０ ｍＭ濃度で溶解した。化合物３５２〜３５４の構造を図９に示す。化合物の分解はＨＰＬＣ（シアノシリカカラム、０．１５％ＴＦＡ水−アセトニトリル勾配溶出液）によって観察した。表１５は、室温、ｐＨ ２．０、ｐＨ ７．０、およびｐＨ １２．０におけるリン酸緩衝液中の化合物３５２〜３５４の安定性（半減期）を示す。これらの化合物は、用いたＨＰＬＣ装置において一般的な吸収法による分解のモニタリングを容易にする発色団を含むため、これらを用いた。
【０１６９】
低いｐＨでは、アミンはプロトン化されると予想され、化合物は比較的安定性を示した。より高いｐＨでは、アミンはそれほど強くプロトン化されず、エステル加水分解を伴うようになった。γ−アミノ酪酸由来の化合物は特に加水分解を受けやすく、おそらくピロリドンを生じた。本化合物は一般に、加水分解されて、特定の化合物に応じてコール酸、コリンまたはオクタノール、およびグリシン、β−アラニン、またはピロリドンを生じると考えられる。
【０１７０】
エステル加水分解を介した分解によって、より極性が低く、開始化合物から容易に分離されうる化合物が生じた。当初、一つのベンゼン含有分解産物みが観察されたが、より長い反応時間では、連続的なエステル加水分解に対応すると考えられる他の二つの分解産物が観察された。
【０１７１】
実施例１５：式Ｉの化合物のさらなる合成
式Ｉの化合物を、以下のスキームに示すように調製することができる。
2004506645.tif 000112
上記のステロイド開始材料の説明は、「ステロイド辞典（Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｓｔｅｒｏｉｄｓ）」、ヒル（Ｈｉｌｌ）， Ｒ．Ａ．、カーク（Ｋｉｒｋ）， Ｄ．Ｎ．、メイキン（Ｍａｋｉｎ）， Ｈ．Ｌ．Ｊ．、マーフィー（Ｍｕｒｐｈｙ）， Ｇ．Ｍ．編、チャプマン＆ホール（Ｃｈａｐｍａｎ ａｎｄ Ｈａｌｌ）、１９９１に見出されうる。
【０１７２】
実施例１６： グラム陰性菌を用いた化合物の試験
ＭＩＣおよびＭＢＣ測定
全般：
微生物：
基準株をアメリカンタイプカルチャーコレクション（ロックビル、メリーランド州）またはディフコラボラトリーズ（デトロイト、ミシガン州）のバクトロールディスクから購入した。以下の特異的ＡＴＣＣ株を用いた。１０７９８大腸菌、２５９２２大腸菌、１３８８３クレブシエラ肺炎杆菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、２７８５３緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、１４０２８ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、２９２１２エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、２５９２３黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、１９６１５化膿連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、および９００２８カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）。細菌株はミュラー・ヒントン寒天プレート上で維持して、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）はサブロー・デキストロース寒天プレート上で維持した。
【０１７３】
トリプシン分解大豆汁（ＴＢＳ）は、１リットルの脱イオン水にデキストロース非含有トリプシン分解大豆汁（ＤＩＦＣＯ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を２７．５グラム溶解し、１５分間１２１℃で滅菌処理して作成した。固形寒天（ＴＳＡ）プレートは、６．４グラムのトリプシン分解大豆汁と１２グラムの寒天（精製したグレードのもの、Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を８００ｍＬの脱イオン水に溶解し、１２１℃で２０分間滅菌処置して作成した。次にその均質溶液のアリコート（２０ｍＬ）を、滅菌済みプラスチック製ペトリ皿（１００×１５ｍｍ、Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に注入した。化合物の溶液は、それぞれのＨＣｌ塩を適当な量の脱イオン化した滅菌水に溶解し限外濾過して作成した。
【０１７４】
ＭＩＣとＭＢＣ値を測定する代表的方法：
ＴＳＢ中３７℃で２４時間インキュベートした培養物から、〜１０６ＣＦＵ（コロニー形成ユニット）／ｍＬの大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）を含む懸濁液を調製した。この懸濁液のアリコート１ｍＬを、１ｍＬのＴＳＢと段々増加するように濃度を変えたコール酸誘導体、および／またはエリスロマイシンもしくはノボビオシンを含む試験管に添加した。この感受性実験では、エリスロマイシンまたはノボビオシンは、コール酸誘導体より１５分後に添加した。このサンプルを３７℃で２４時間、静止培養を行った。サンプルの濁度を７６０ｎｍでの吸光度を測定（ＨＰ ８４５３ ＵＶ−Ｖｉｓｉｂｌｅ Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ、Ｈｅｗｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄ）することによって決定した。さらに測定できるほどの濁度のない各サンプルから得られるアリコートは、ＴＳＡプレート上で二次培養した（アリコートは３００ＣＦＵ以下になるように希釈された）。一晩インキュベートした後、二次培養物で増殖したコロニーを計数し、サンプルに含まれるＣＦＵ／ｍＬの数を算出した。算出した値は最初の接種物のＣＦＵ／ｍＬの数と比較した。ＭＩＣ値は、２４時間インキュベートした後でＣＦＵ／ｍＬの数が一定のままかまたは減少したかをその調べた化合物の濃度として決定した。ＭＢＣ値は、調べた化合物の、当初の細菌懸濁液の０．１％以下しか生存できない最も低い濃度として決定した。
【０１７５】
実施例１７： コール酸誘導体の膜不通過性の証明
Ｊ． Ｍ． Ｓｈｕｐｐ、Ｓ． Ｅ． Ｔｒａｖｉｓ、Ｌ． Ｂ． Ｐｒｉｃｅ、Ｒ． Ｆ． Ｓｈａｎｄ、Ｐ． Ｋｅｉｍ、Ｒａｐｉｄ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ Ｕｓｅｆｕｌ Ｆｏｒ Ｅｎｚｙｍｅ Ａｓｓａｙｓ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、１９９５、ｖｏｌ． １９、１８−２０に記載された手法を用いて本発明者らは、コール酸誘導体がグラム陰性細菌の外膜の透過性を増大させることを明らかにした。最大発光の半分の値（ルシフェリンが細胞に入るのを許容する外膜の透過性を示す）は、２については７μｇ／ｍＬ、１０については３３μｇ／ｍＬである。これらの値は、２及び１０について測定したＭＩＣに対応する。
【０１７６】
ＰＭＢは膜透過性と殺細菌特性を有することが知られている。ＰＭＢは、疎水性アシル基と、Ｄアミノ酸と４個のジアミノ酪酸（ＤＡＢ）残基を含む大環状ヘプタペプチドとを有する。ＤＡＢ側鎖の一つは、巨大環の形成に関与し、他の３つの側鎖は遊離のアミンのままである。このように、ＰＭＢは疎水性の足場構造の片側のある面、すなわち平面に向けられたアミンの列を有する。巨大環の主な役割は、ＬＰＳのリピドＡ部分に結合するために必要な特異的配置にアミン基を向けることであることが示唆されている。これらの一級アミン基の相対的空間的方向性は、コール酸誘導体においてもＰＭＢの場合と同じである。
【０１７７】
ステロイド骨格の立体化学の違いによって、コール酸誘導体の活性の違い（２及び８、表１、２、６及び７を比較されたい）が生じる。ステロイドに結合したグアニジン基を有する化合物は、アミン基を含む化合物よりもＭＩＣ値が低くなる（１、２、４及び５を比較、表１−８を比較されたい）。アミン基またはグアニジン基とステロイド骨格の間の鎖の長さも活性に影響を与える（１〜３、表１、２、６及び７を比較されたい）。アミン基とステロイド骨格との間のエステルの鎖は、エーテルの鎖を含む対応する化合物よりも高いＭＩＣ値を有する（１、２、６及び７、表１及び２を比較されたい）。
【０１７８】
骨格のＣ−２０またはＣ−２４に結合した基もコール酸誘導体の活性に影響を与える。Ｃ−２４でエーテル結合を介してステロイドに長い炭素鎖が結合していると、Ｃ−２４に水酸基を結合している化合物に比較してその化合物のＭＩＣは小さくなる（２、９及び１０、表１、２、６及び７を比較されたい）。Ｃ−２０に炭素または酸素の短い鎖が結合していると、コール酸誘導体のＭＩＣ値が小さくなる（１０及び１１、表１及び２を比較されたい）。共有結合しているコール酸誘導体はその化合物の活性を増加させる（１０及び１２、表１及び２を比較されたい）。
【０１７９】
外膜を透過化させる能力：
化合物１１、１０６、１０８〜１１４（図１）の抗生物質活性について調べた。それらは、外膜を通過できない疎水性抗生物質に対する感作を引き起こす、グラム陰性菌の外膜を透過性にする能力についても試験した。外膜の透過化はエリスロマイシンおよびノボビオシンを用いて測定した。これらの抗生物質はグラム陽性菌に対して活性であるが、グラム陰性菌の外膜によって形成された障壁のために、グラム陰性菌に対しては不活性である。
【０１８０】
ほとんどの実験は大腸菌Ｋ−１２株ＡＴＣＣ １０７９８を用いて実施した；しかし、コール酸誘導体の活性が種特異的でないことを証明するために、選択した化合物の活性を緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（ＡＴＣＣ ２７８５３）についても測定した。大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）に対するエリスロマイシンおよびノボビオシンのＭＩＣを７０および＞５００ μｇ／ｍｌで測定した。透過化に関する閾値測定値は、エリスロマイシンまたはノボビオシンのいずれかのＭＩＣを１μｇ／ｍｌに低下させるために必要なコール酸誘導体の濃度であった。
【０１８１】
ＭＩＣ、ＭＢＣおよび透過化（エリスロマイシンによる）測定の結果を図２（図２では、化合物ＡはポリミキシンＢノナペプチドである）に示す。図２に示すように、化合物のＭＩＣおよびＭＢＣ値は、Ｃ−１７から伸長する側鎖の長さが増加するにつれて劇的に低下した。疎水性ステロイド側鎖の明白な役割は、グラム陰性菌の外膜との初回会合後に、膜への付着と自己推進輸送を促進することである（図３に示すように）。外膜の透過化は、膜の外側の小葉上のリピドＡとの会合の結果として起こる。外膜の透過化のみでは細胞死を引き起こさず、このことは、化合物が細菌を殺すためには外膜を通過しなければならないことを示唆している。外膜の通過能、それによる細胞質膜の破壊能は、化合物が致死的活性を有するために必要である。
【０１８２】
認められるように、疎水性側鎖を有しない化合物は殺菌作用が弱い。これらの化合物は、外膜を透過性にすることができる（すなわち、膜の外側の小葉上のリピドＡと会合する）が、外膜を通過することができないという仮説が立てられる。
【０１８３】
化合物の分画阻害濃度（ＦＩＣ）値は、二次化合物としてエリスロマイシンとノボビオシンとを用いて計算した。１１４を例外として、化合物はエリスロマイシンに関してＦＩＣ値０．５未満を示し、中には０．０５に近い値もあった（表９）。
【０１８４】
ノボビオシンを用いた試験の詳細も同様に表９に示す。エリスロマイシンおよびノボビオシンによる結果は同等であったという事実は、コール酸誘導体の活性が抗生物質依存的でないことを示している。類似の傾向は、大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）および緑膿菌（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（ＡＴＣＣ ２７８５３）についても認められたが、予想されたように、緑膿菌（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）は大腸菌より抵抗性であった。これらの結果は、調べた化合物の活性が種依存的でないことを示唆している。
【０１８５】
疎水性のアルキルアミノアルキル側鎖を有する化合物を調製した（化合物１３３および１３４、図４）。他の化合物について認められたように、グアニジン基を組み入れると（１３４）、一級アミンを含む化合物と比較してコール酸誘導体の活性は増加した。対照として、疎水性側鎖を有しない１３５（図４）を調製した。対照（１３５）のＭＩＣは、ＭＢＣと同様に予想通り比較的高かった（図５）。対照的に、１３３および１３４のＭＩＣは非常に低かった、実際にそれらの活性はＰＭＢに匹敵した。特に、１３３、１３４、およびＰＭＢのＭＢＣはＭＩＣと非常に類似していた。すなわち閾値濃度において、これらの化合物は溶液中の細菌を全て殺した。
【０１８６】
コール酸誘導体１３３および１３４の膜破壊能を証明するさらなる手段として、ルシフェリン／ルシフェラーゼに基づく細胞溶解アッセイを用いた（ウィラードソン（Ｗｉｌｌａｒｄｓｏｎ）ら、Ａｐｐｌ． Ｅｎｖｉｒｏｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． １９９８、６４、１００６およびシャップ（Ｓｃｈｕｐｐ）ら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １９９５、１９、１８に記載の通り）。このアッセイにおいて、誘導型ルシフェラーゼをコードするプラスミドを含む大腸菌を誘導物質（トルエン）と共にインキュベートした後、ＰＭＢまたはコール酸誘導体の１つのいずれかとトライトンＸ−１００とを含む溶解緩衝液によって処理した。次に、ルシフェリンおよびＡＴＰを加えた。細胞溶解によって発光が起こった。膜破壊物質（ＰＭＢおよびコール酸誘導体）の濃度を変化させて、得られた発光を測定した。膜破壊物質が存在しない場合、発光は認められなかった。
【０１８７】
１３３、１３４およびＰＭＢのＭＩＣならびに半最大発光に必要な濃度を図６に示す。ＭＩＣ値の場合と同様に、化合物１３３および１３４の活性は、発光アッセイにおいてＰＭＢの活性に匹敵する。
【０１８８】
スルフェート基の作用：
コール酸誘導体におけるＣ−２４でのスルフェート基の存在が、化合物の活性を増加させるか否かを観察するために、１３２（図７に示す）を調べた。大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）による１３２のＭＩＣは６０ μｇ／ｍｌであった。エリスロマイシンのＭＩＣを１μｇ／ｍｌに低下させるために必要な濃度は、同じ株について４．０ μｇ／ｍｌであった。１３２の抗生物質活性および透過化活性は、親化合物であるアルコール１１０（図１に示す）の活性より低かった。
【０１８９】
追加実験：
化合物１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４を用いて追加実験を行った。グラム陰性およびグラム陽性生物の代表的な株について、これらの化合物のＭＩＣおよびＭＢＣデータを表１０に示す。比較目的のために、様々な生物によるＰＭＢのＭＩＣも測定し、表１０に示す。
【０１９０】
ＰＭＢの他に、化合物１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４は他のステロイド抗生物質と何らかの特徴を共有する。例えば、スクアラミンは、ステロイド核およびポリアミン側鎖を含む（ムーア（Ｍｏｏｒｅ）ら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． １９９３、９０、１３５４〜１３５８）。スクアラミンは脂質二重層に組み入れられ、そして細菌膜を破壊すると提唱されている。スクアラミンにおいて、極性のポリアミン官能性は分子の遠位末端に存在し、疎水性コアを残す。１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４において、アミンはステロイドの片側に存在し、表面的に両親媒性の化合物を与える。１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４に関連する別の一連の化合物は、Ｃ−２４位にアミンを有するコール酸誘導体を含む（例えば、図７の１４０）。１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４とは対照的に、これらの化合物はグラム陽性菌に対する抗菌活性がごく弱く、グラム陰性菌に対しては活性を示さないことが示されている。
【０１９１】
コール酸誘導体１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４は、活性の幅を示し、中にはマイクログラム／ｍｌ以下のＭＩＣを示すものもある。多くの生物に対して、ＭＩＣおよびＭＢＣ値は、特に最も活性の高い化合物では非常に類似している。化合物のいくつかは、おそらく細胞質膜の破壊による、致死的な活性を示す。その他は外膜の透過化によって亜致死活性を有するに過ぎない。
【０１９２】
疎水性鎖を欠損する化合物（例えば、１０６および１０）は、高いＭＩＣ値を有するが、グラム陰性菌の外膜の有効な透過剤である。これらの化合物は疎水性鎖を欠損するため、それらは、これらの細菌に対して亜致死的であって致死的ではない活性を有する。疎水性鎖を有する化合物（例えば、１３３および１３４）は、致死的活性を有する。
【０１９３】
コール酸誘導体１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４の溶血作用は、それらが膜破壊物質として作用しうること、そしてそれらの抗菌活性はおそらく膜の破壊を伴うことを示唆している。グラム陰性菌に関して、不活性の標的は、細胞質膜であると予想される。１０６および１０のような化合物は、外膜を有効に通過することができず、致死的活性を示さない。１３３および１３４における疎水性鎖は、外膜を通っての自己推進輸送を促進する可能性があり、それによって細胞質膜を破壊する可能性がある。
【０１９４】
表１０に示す結果は、疎水性鎖の存在がグラム陽性菌に対する致死的活性にとってあまり重要でないことを示している。外膜を通過する要件を満たしていなくとも、Ｃ−１７から伸長する疎水性鎖を欠損する化合物は、グラム陽性菌を有効に殺すことができる。
【０１９５】
様々な結合の長さを調べて、ステロイドからアミンまたはグアニジン基の最適な間隔を決定した。炭素結合３個は、炭素結合２個の化合物より有効である化合物を生じることが判明した（例えば、１のＭＩＣと２のＭＩＣとを比較する）。グアニジン基をアミンに置換した場合に得られる抗生物質活性の増加は、アミン／グアニジンリン酸相互作用の中心的な役割を示唆している。
【０１９６】
Ｃ−１７でステロイド骨格に結合した基の特性は、グラム陰性菌に対する化合物の活性に大きく影響を及ぼした。例えば、１０６、１０、および１１２に関するＭＩＣおよびＭＢＣ値の差は顕著であった。この傾向は、１３３および１３４の値と比較して２および５のＭＩＣおよびＭＣＢ値においても認められた（この比較において、２および５のベンジル基は、１３３および１３４において認められるオクチル鎖より疎水性が低いと予想される）。Ｃ−１７でステロイドに結合した基の影響は、グラム陽性菌ではあまり顕著ではなく、例えば、５および１３４は黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）に対して類似のＭＩＣ値を有する。
【０１９７】
透過化を測定するために、エリスロマイシン、ノボビオシン、およびリファンピシンによる化合物１、２、５、１０６、１０、１１２、１３３および１３４のＦＩＣ値を決定した。これらの抗生物質の０．５、１．０、または３．０ μｇ／ｍｌの濃度を用い、グラム陰性菌の細菌生育を阻止するために必要なコール酸誘導体の濃度を決定した。細菌生育阻止に必要な濃度およびＦＩＣ値を表１１〜１３に示す。興味深いことに、化合物のＭＩＣ値は、外膜の透過化能に直接相関しない。例えば、化合物１０６および１０は比較的高いＭＩＣ値を有するが、強力な透過化剤である。化合物のほぼ全てが、ＦＩＣ値０．５未満を示し、中には０．０３未満の化合物もあった。比較的高いＦＩＣ値を生じるコール酸誘導体（すなわち、５、１３３、および１３４）はそれ自身、強力な抗生物質である。
【０１９８】
エステルおよびアミド側鎖：
さらなる化合物、例えば、アミドおよびエステル側鎖を有する化合物を調べた。化合物２０３ｂ、６、および２１０ａ（スキーム１２）は、エリスロマイシンおよびノボビオシンとの強力な相乗作用を示した（表１４）。一連のトリエステルにおいて（２０３ａ、２０３ｂ、６および７）、βアラニン由来化合物は、グリシンに由来する化合物より活性が高い。Ｃ２４での置換は、これらの化合物の活性にほとんど影響を及ぼさなかった（２０３ｂおよび７と比較）。
【０１９９】
トリアミド２０９ａ−ｃ（スキーム１２）は、アミド結合によって与えられた構造的拘束のためであろうか、エステルより活性が低かった。トリアミドに関して、Ｃ２４で置換すると、化合物の活性に有意な影響を及ぼした（２０９ａおよび２１０ａと比較して、表１４）。このシリーズにおいて、グリシン誘導体は対応するβアラニン誘導体より活性が高かった。
【０２００】
リジン誘導体によって示された相乗作用の相対的欠如は、側鎖の長さに帰因する可能性がある。対照として、化合物２１１（図８）、α−アミノ基を欠損する２０９ｃの誘導体を調製した。この化合物は透過化剤として２０９ｃより活性が弱かった。化合物２０６はまた、透過化剤として有効でないことが証明された。これらの結果から、ステロイドとアミン官能基とのあいだの結合の最適な長さはゼロから原子６個の間であることが示唆される。
【０２０１】
さらなる化合物３４１〜３４３および３２４〜３２７を同様に調べた。化合物３４１〜３４３および３２４〜３２７の構造を図１１に示す。黄色ブドウ球菌（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）（ＡＴＣＣ ２５９２３）に対するこれらの化合物のＭＩＣを表６にＭＩＣａとして示し、大腸菌（ＡＴＣＣ ２５９２２）に対するこれらの化合物のＭＩＣを表１６においてＭＩＣｂとして示し、大腸菌に対するエリスロマイシンのＭＩＣを３０μｇ／ｍｌから１μｇ／ｍｌに低下させるために必要な化合物の濃度を表１６においてｃとして示し、化合物の最小溶血濃度を表１６においてＭＨＣｄとして示す。最小阻止濃度（ＭＩＣ）および最小溶血濃度（ＭＨＣ）は、リー（Ｌｉ）ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． １９９９、４３、１３４７に記載されるように測定した。２４位の炭素に疎水性鎖を含む表１６の化合物（３４１〜３４３）は、グラム陰性菌に対して最も活性であった。２４位の炭素がコリンである化合物（３２４〜３２６）はグラム陰性菌に対して単独の活性は非常に低かったが、グラム陽性菌の増殖阻害能を保持していた。この違いは、化合物３２４〜３２６が本明細書記載のグラム陰性菌の外膜を通過できないことに起因しうる。化合物３２７は不活性であった。化合物３４１〜３４３は非常に低いＭＨＣを示したが、化合物３２４〜３２６は、おそらく２４位の炭素がさらなる陽性荷電を有するために、非溶血性と考えられる。化合物３５６〜３５８の構造を図１２に示す。化合物３５６〜３５７の合成の概要をスキーム１６に示す。
【０２０２】
【表１】大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）を用いた１−１２のＭＩＣ及びＭＢＣの値の測定
2004506645.tif 000113
ａ値は未測定。
【０２０３】
【表２】大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）を用いて７０μｇ／ｍＬから１μｇ／ｍＬのエリスロマイシンのＭＩＣを低めるのに必要とされる１−１２の濃度の測定
2004506645.tif 000114
ａ値は未測定。
【０２０４】
【表３】大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）を用いて＞５００μｇ／ｍＬから１μｇ／ｍＬのノボビオシンのＭＩＣを低めるのに必要とされる１、２、４及び５の濃度の測定
2004506645.tif 000115
ａ値は未測定。
【０２０５】
【表４】大腸菌（ＡＴＣＣ ２５９２２）を用いて１、２、４及び５のＭＩＣ及びＭＢＣの値の測定
2004506645.tif 000116
【０２０６】
【表５】大腸菌（ＡＴＣＣ ２５９２２）を用いて６０μｇ／ｍＬから１μｇ／ｍＬのエリスロマイシンのＭＩＣを低めるのに必要とされる１、２、４及び５の濃度の測定
2004506645.tif 000117
【０２０７】
【表６】Ｐ． ａｕｒｅｇｉｎｏｓａ（ＡＴＣＣ ２７８５３）を用いて１−５、８−１２のＭＩＣ及びＭＢＣの値の測定
2004506645.tif 000118
ａ値は未測定。
【０２０８】
【表７】Ｐ． ａｕｒｅｇｉｎｏｓａ（ＡＴＣＣ ２７８５３）を用いて２４０μｇ／ｍＬから５μｇ／ｍＬのエリスロマイシンのＭＩＣを低めるのに必要とされる１−５、８−１２の濃度の測定
2004506645.tif 000119
ａ値は未測定。
【０２０９】
【表８】Ｐ． ａｕｒｅｇｉｎｏｓａ（ＡＴＣＣ ２７８５３）を用いて＞５００μｇ／ｍＬから１μｇ／ｍＬのノボビオシンのＭＩＣを低めるのに必要とされる１、２、４及び５の濃度の測定
2004506645.tif 000120
【０２１０】
【表９】
2004506645.tif 000121
大腸菌（ＡＴＣＣ １０７９８）のＭＩＣ、ＭＢＣ、透過化、およびＦＩＣデータ。（ａ）エリスロマイシンのＭＩＣを７０から１ μｇ／ｍＬに低下させるために必要な濃度。（ｂ）１ μｇ／ｍＬエリスロマイシンのＭＢＣ。（ｃ）エリスロマイシンのＦＩＣ値。（ｄ）ノボビオシンのＭＩＣを＞５００から１ μｇ／ｍＬに低下させるために必要な濃度。（ｅ）ノボビオシンのＦＩＣ値。
【０２１１】
【表１０】
2004506645.tif 000122
【０２１２】
【表１１】
2004506645.tif 000123
【０２１３】
【表１２】
2004506645.tif 000124
【０２１４】
【表１３】
2004506645.tif 000125
【０２１５】
【表１４】
2004506645.tif 000126
ａ： エリスロマイシンのＭＩＣを１ μｇ／ＭＬに減少させるために必要なコール酸誘導体の濃度。
ｂ： ノボビオシンのＭＩＣを１ μｇ／ＭＬに減少させるために必要なコール酸誘導体の濃度。
【０２１６】
【表１５】
2004506645.tif 000127
【０２１７】
【表１６】
2004506645.tif 000128
【０２１８】
他の態様
本明細書に開示した全ての特徴は、任意の組み合せに組み合わせることができる。本明細書で開示したそれぞれの特徴は、同一、等価物、または類似の目的を果たす別の特徴と置き換えてもよい。このように特に別記して述べない限り、開示されたそれぞれの特徴は、一般的な一連の等価な特徴または類似の特徴のなかのほんの一例である。
【０２１９】
上記の説明から当業者は、本発明の本質的な特徴を容易に確認でき、そしてその精神及び範囲を逸脱することなく種々の使用法及び条件に本発明が適合するように本発明の種々の変形及び修飾を行うことが可能である。例えば本明細書に開示した新規なステロイド化合物の塩、エステル、エーテル及びアミドが本発明の範囲に含まれる。このように他の態様も添付の特許請求の範囲に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の化合物を示す図である。
【図２】エリスロマイシンのＭＩＣを１μｇ／ｍｌに低下させるために必要な本発明の化合物の濃度と共に、各化合物のＭＩＣおよびＭＢＣ値を示すグラフである。
【図３】コール酸誘導体について提案される作用機構を示す略図である。
【図４】本発明の化合物を示す図である。
【図５】本発明の化合物のＭＩＣおよびＭＢＣ値を示すグラフである。
【図６】本発明の化合物のＭＩＣ値を示すグラフである。
【図７】化合物１３２を示す図である。
【図８】化合物２１１を示す図である。
【図９】化合物３５２〜３５４を示す図である。
【図１０】化合物３５５を示す図である。
【図１１】化合物３４１〜３４３および化合物３２４〜３２７を示す図である。
【図１２】化合物３５６〜３５８を示す図である。
【図１】
2004506645.tif 000144
【図２】
2004506645.tif 000145
【図３】
2004506645.tif 000146
【図４】
2004506645.tif 000147
【図５】
2004506645.tif 000148
【図６】
2004506645.tif 000149
【図７】
2004506645.tif 000150
【図８】
2004506645.tif 000151
【図９】
2004506645.tif 000152
【図１０】
2004506645.tif 000153
【図１１】
2004506645.tif 000154
【図１２】
2004506645.tif 000155
【国際公開パンフレット】
2004506645.tif 000156
2004506645.tif 000157
2004506645.tif 000158
2004506645.tif 000159
2004506645.tif 000160
2004506645.tif 000161
2004506645.tif 000162
2004506645.tif 000163
2004506645.tif 000164
2004506645.tif 000165
2004506645.tif 000166
2004506645.tif 000167
2004506645.tif 000168
2004506645.tif 000169
2004506645.tif 000170
2004506645.tif 000171
2004506645.tif 000172
2004506645.tif 000173
2004506645.tif 000174
2004506645.tif 000175
2004506645.tif 000176
2004506645.tif 000177
2004506645.tif 000178
2004506645.tif 000179
2004506645.tif 000180
2004506645.tif 000181
2004506645.tif 000182
2004506645.tif 000183
2004506645.tif 000184
2004506645.tif 000185
2004506645.tif 000186
2004506645.tif 000187
2004506645.tif 000188
2004506645.tif 000189
2004506645.tif 000190
2004506645.tif 000191
2004506645.tif 000192
2004506645.tif 000193
2004506645.tif 000194
2004506645.tif 000195
2004506645.tif 000196
2004506645.tif 000197
2004506645.tif 000198
2004506645.tif 000199
2004506645.tif 000200
2004506645.tif 000201
2004506645.tif 000202
2004506645.tif 000203
2004506645.tif 000204
2004506645.tif 000205
2004506645.tif 000206
2004506645.tif 000207
2004506645.tif 000208
2004506645.tif 000209
2004506645.tif 000210
2004506645.tif 000211
2004506645.tif 000212
2004506645.tif 000213
2004506645.tif 000214
2004506645.tif 000215
2004506645.tif 000216
2004506645.tif 000217
2004506645.tif 000218
2004506645.tif 000219
2004506645.tif 000220
2004506645.tif 000221
2004506645.tif 000222
2004506645.tif 000223
2004506645.tif 000224
2004506645.tif 000225
2004506645.tif 000226
2004506645.tif 000227
2004506645.tif 000228
2004506645.tif 000229
2004506645.tif 000230
2004506645.tif 000231
2004506645.tif 000232
2004506645.tif 000233
2004506645.tif 000234
2004506645.tif 000235
2004506645.tif 000236
2004506645.tif 000237
2004506645.tif 000238
2004506645.tif 000239
2004506645.tif 000240
2004506645.tif 000241
2004506645.tif 000242
2004506645.tif 000243
2004506645.tif 000244
2004506645.tif 000245
2004506645.tif 000246
2004506645.tif 000247
2004506645.tif 000248
2004506645.tif 000249
2004506645.tif 000250
2004506645.tif 000251
2004506645.tif 000252
2004506645.tif 000253
2004506645.tif 000254
2004506645.tif 000255
2004506645.tif 000256
2004506645.tif 000257
2004506645.tif 000258
2004506645.tif 000259
2004506645.tif 000260
2004506645.tif 000261
2004506645.tif 000262
2004506645.tif 000263
2004506645.tif 000264
2004506645.tif 000265
2004506645.tif 000266
2004506645.tif 000267
2004506645.tif 000268
2004506645.tif 000269
2004506645.tif 000270
2004506645.tif 000271
2004506645.tif 000272
2004506645.tif 000273
2004506645.tif 000274
2004506645.tif 000275
2004506645.tif 000276
2004506645.tif 000277
2004506645.tif 000278
2004506645.tif 000279
2004506645.tif 000280
【国際調査報告】
2004506645.tif 000281