(57)【要約】一般式で示される４−アリールピリミジン化合物およびその塩：【化１】2004514712.tif 000067（式中、ＸはＣＨまたはＮ；Ｒ１は水素、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、など；Ｒ２は水素、ハロゲン、など；Ｒ３は水素、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、など、Ｒ４はヒドロキシ、アミノ、カルボキシ、など、またＲ３とＲ４は共に環形成可能である。；Ｒ５は水素、カルバモイル、シアノ、カルボキシ、Ｃ１−１６アルコキシカルボニル、など、Ｒ６はアミノまたはＣ１−１６アルカノイルアミノである。またＲ５とＲ６は共に環形成可能である。）。化合物（Ｉ）またはその塩は優れた抗炎症作用を有し、ＩＫＫ−βの阻害剤として作用し、ニュクレオファクターκＢ（ＮＦ−κＢ）を阻害する。
2004514712.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の４−アリールピリジン誘導体：
【化１】
2004514712.tif 000066
（式中、ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、ニトロ、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、フェニルスルホニルアミノ、−ＮＨＲ１１、または
−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ１２
但し、Ｒ１１はフェニル置換Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、またはＣ１−６アルキルスルホニルであり、
ｎは０−６の整数を意味し、
Ｒ１２はＣ２−６アルケニル、ベンゾイル、モノもしくはジフェニル、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、またはヒドロキシ、ニトロ、シアノ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルカノイルアミノ、カルバモイル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、またはフェニルで置換されていることもあるＳ、ＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−１０員の飽和または不飽和環を意味する。；
Ｒ２は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ３１Ｒ３２、またはＲ３３で置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−６員の飽和環を意味し、
但し、Ｒ３１は水素原子またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３２は水素原子、Ｃ１−６アルカノイル、またはヒドロキシもしくはフェニルで置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３３はニトロ、シアノ、ヒドロキシもしくはアミノで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ、アミノ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルカノイル、カルバモイル、または−ＮＲ３３ａＲ３３ｂであり、
但し、Ｒ３３ａは水素原子またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３３ｂは水素原子、ヒドロキシもしくはフェニルで置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、またはトリフルオロアセチルであり；
Ｒ４は水素原子、ヒドロキシ、カルボキシ、−ＣＯ−ＮＨＲ４１、アミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ、−ＮＨ−ＣＯＲ４１、Ｒ４２で置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｒ４３Ｃ１−６アルコキシ、
但し、Ｒ４１はＲ４１ａで置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、オキソテトラヒドロフリル、オキソピロリジニル、−ＣＨ（ＯＨ）Ｒ４１ｂ、−ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ４１ｃ、−ＮＨＲ４１ｃ、またはＲ４１ｄで置換されていることもあるピペラジノであり、
但し、Ｒ４１ａはカルボキシ、Ｃ１−６アルコキシ、−ＣＨ（ＣＨ２）カルボキシ、−ＮＲ４１ａ−１Ｒ４１ａ−２、またはカルボキシ、ヒドロキシもしくはベンゾジオキサンで置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−６アルカノイル、カルボキシ、ベンジル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、またはフロイルで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−１０員の飽和環を意味し、
但し、Ｒ４１ａ−１は水素原子、またはヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキルもしくはピペリジノで置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
Ｒ４１ａ−２は水素原子、またはヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシもしくはＣ３−６シクロアルキルで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、またはカルボキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルもしくはＣ１−６アルコキシで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−６員の飽和環を意味し、
Ｒ４１ｂはカルボキシもしくはＣ１−６アルコキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシまたはＣ１−６アルコキシカルボニルであり、
Ｒ４１ｃはカルボキシ、カルボキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、またはＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−６員の飽和環を意味し、
Ｒ４１ｄはカルボキシもしくはＣ１−６アルコキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシであり、
Ｒ４２はＣ１−６アルコキシ、カルボキシ、アミノ、−ＣＨ（ＮＨ２）−カルボキシ、またはヒドロキシ、ニトロ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノまたはカルバモイルで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する５−７員の飽和または不飽和環を意味し、
Ｒ４３はカルボキシ、アミノ、−ＣＨ（ＮＨ２）−カルボキシ、またはヒドロキシ、ニトロ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノまたはカルバモイルで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する５−７員の飽和または不飽和環を意味し；
Ｒ３とＲ４は、ベンゼン環中の炭素原子と共に、ヒドロキシ、ニトロ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、オキソ、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノおよびカルバモイルから選択される１個以上の置換基で置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する４−６員の飽和環を意味し；
Ｒ５は水素原子、シアノ、カルボキシ、カルバモイル、またはヒドロキシもしくはカルバモイルで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシカルボニルであり；そして
Ｒ６は−ＮＲ６１Ｒ６２を意味し、
但し、Ｒ６１は水素原子またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ６２は水素原子、Ｃ１−６アルキル、フェニル、ベンジル、Ｃ１−６アルカノイル、または
−ＮＲ６１Ｒ６２はそれらが結合するＮ原子と共に、隣接するＮ原子以外の他のヘテロ原子としてＮＨまたはＯ原子を含んでいてもよい飽和５−６員環を形成してもよく；または
Ｒ５とＲ６は、ピリジン環中の炭素原子と共に、Ｏ、ＳおよびＮから選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する５−７員の飽和または不飽和環を形成してもよく、該環は、ハロゲン、ニトロ、シアノ、オキソ、チオオキソ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、フェニル、Ｃ１−６アルカノイル、アミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、Ｃ１−６アルカノイルアミノ、カルバモイル、Ｃ３−８シクロアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノカルボニル、ベンゾイルアミノ、フェニルスルホニル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノカルボニル、ヒドロインデニルアミノカルボニル、ジフェニルメチルアミノカルボニル、ピロリジノカルボニル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキルアミノカルボニル、モルホリノカルボニル、ピペラジノカルボニル、フェニルＣ１−６アルキルアミノカルボニル、カルボキシＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルＣ１−６アルキルアミノカルボニル、ヒドロキシＣ１−６アルキルアミノカルボニルおよびメチルスルホニルアミノカルボニルからなる群から選ばれる置換基を有していてもよい。）
またはその塩。
【請求項２】
請求項１で請求された化合物またはその塩、但し
ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル置換Ｃ１−６アルコキシであり；
Ｒ２は水素原子またはハロゲンであり；
Ｒ３は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル置換Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルカノイルアミノ、Ｃ１−６アルキル（ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキル（ベンジル）アミノ、モルホリノ、ピペリジノ、またはＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノもしくはトリフルオロアセチルアミノで置換されていることもあるピロリジノであり；
Ｒ４は水素原子、ヒドロキシ、カルボキシ、またはピペラジノ、Ｃ１−６アルコキシ、ピペリジノ置換Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ、ピペリジノＣ１−６アルキルアミノカルボニル、もしくは−ＮＨ−ＣＯＲ５１で置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
但し、Ｒ４１はＲ４１ａで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシ置換−Ｃ１−６アルキル、オキソテトラヒドロフリル、オキソピロリジニル、−ＣＨ（ＯＨ）Ｒ４１ｂ、−ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ４１ｃ、または−ＮＨＲ４１ｃを意味し、
但し、Ｒ４１ａはＣ１−６アルコキシ、カルボキシ、−ＮＨＲ４１ａ−１（但し、Ｒ４１ａ−１は水素原子、またはヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキルもしくはピペリジノで置換されていてもよいＣ１−６アルキルである。）、−ＣＨ（ＮＨ２）−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）Ｒ４１ａ−２（但し、Ｒ４１ａ−２はＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキル置換ピロリジニルである。）、ピロリジニル、カルボキシもしくはＣ１−６アルコキシカルボニルで置換されていることもあるピペリジノ、Ｃ３−６シクロアルキルと融合していてもよいピペリジノ、またはＣ１−６アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル、ベンゾジオキサン置換Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジルまたはフロイルで置換されていることもあるピペラジノであり、
Ｒ４１ｂはカルボキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシカルボニルであり、
Ｒ４１ｃはカルボキシもしくはピペリジノで置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３とＲ４は、ベンゼン環中の炭素原子と共に、Ｃ１−６アルキルもしくはオキソで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−２個のヘテロ原子を有する５員の飽和環を形成していてもよく；
Ｒ５は水素原子、カルバモイル、シアノ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、またはヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ６はアミノまたはＣ１−６アルカノイルアミノであり；または
Ｒ５とＲ６は、ピリジン環中の炭素原子と共に、Ｏ、ＳおよびＮから選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する６員の飽和または不飽和環を形成してもよく、該環は、ハロゲン、ニトロ、シアノ、オキソ、チオオキソ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、フェニル、Ｃ１−６アルカノイル、アミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、Ｃ１−６アルカノイルアミノ、カルバモイル、Ｃ３−８シクロアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、およびジ（Ｃ１−６アルキル）アミノカルボニルからなる群から選ばれる置換基を有していてもよい。
【請求項３】
請求項１で請求された化合物またはその塩、但し
ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、シクロプロピルメトキシであり；
Ｒ２は水素原子であり；
Ｒ３は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、アセタミド、Ｃ１−６アルコキシ、シクロプロピルメトキシ、Ｃ１−６アルキル（ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキル（ベンジル）アミノ、モルホリノ、ピペリジノ、またはＣ１−６アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、もしくはトリフルオロアセチルアミノで置換されていることもあるピロリジノであり；
Ｒ４は水素原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ、ピペラジノ、Ｃ１−６アルキル置換ピペラジノ、ピペリジノ置換Ｃ１−６アルコキシ、ピペリジノＣ１−６アルキル−アミノカルボニル、または−ＮＨ−ＣＯＲ４１であり、
但し、Ｒ４１はＲ４１ａで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、オキソテトラヒドロフリル、オキソピロリジニル、−ＣＨ（ＯＨ）Ｒ４１ｂ、または−ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ４１ｃを意味し、
但し、Ｒ４１ａはＣ１−６アルコキシ、カルボキシ、−ＣＨ（ＮＨ２）−カルボキシ、−ＮＨＲ４１ａ−１（但し、Ｒ４１ａ−１は水素原子、またはヒドロキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−６アルコキシもしくはピペリジノで置換されていてもよいＣ１−６アルキルであり。）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）Ｒ４１ａ−２（但し、Ｒ４１ａ−２はＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキル置換ピロリジニルであり。）、ピロリジニル、カルボキシもしくはＣ１−６アルコキシカルボニルで置換されていることもあるピペリジノ、シクロヘキサンと融合したピペリジノ、またはＣ１−６アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル、ベンゾジオキサン置換Ｃ１−６アルキル、ベンジル、Ｃ１−６アルカノイル、シクロヘキシル、またはフロイルで置換されていることもあるピペラジノであり、
Ｒ４１ｂはカルボキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシカルボニルであり、
Ｒ４１ｃはカルボキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３とＲ４は、−ＮＲ４０１−ＣＯＯ−（但し、Ｒ４０１は水素原子またはＣ１−６アルキルを意味し。）を形成してもよく；
Ｒ５は水素原子、カルバモイル、シアノ、カルボキシ、またはヒドロキシメチルであり；
Ｒ６はアミノまたはアセタミドであり；または
Ｒ５とＲ６は、−Ｒ５０−ＣＨ２−ＮＨ−、Ｒ５０−ＣＯ−ＮＨ−、−Ｒ５０−ＳＯ２−ＮＨ−または−Ｒ５０−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−であり、
但し、Ｒ５０は−ＣＨＲ５０１−Ｏ−、−ＣＨ２−ＮＲ５０１−、−ＣＯ−ＮＲ５０１−（但し、Ｒ５０１は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノカルボニルまたはフェニルである。）。
【請求項４】
以下の化合物からなる群から選択される請求項１で請求された化合物：
５−（｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボキサミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝メタンスルホナミド；
Ｎ４−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｌ−アスパラギン；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｌ−アスパラギン；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
５−（｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト；
４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）エチル］ベンズアミド；
４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］安息香酸；
５−（｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−２−［４−（２−フロイル）−１−ピペラジニル］アセタミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（４−エチル−１−ピペラジニル）プロパンアミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−オクタヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニルプロパンアミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−シクロペンチルグリシナミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシナミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−プロピルグリシナミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−（３−ヒドロキシプロピル）グリシナミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ３−（シクロプロピルメチル）−β−アラニンアミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグリシナミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−２−（１−ピロリジニル）アセタミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−［２−（メチルオキシ）エチル］グリシナミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（３−アミノ−１−ピロリジニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（１−ピペリジニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（１−ピロリジニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［エチル（２−ヒドロキシエチル）アミノ］フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（４−モルホリニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−４−クロロフェニル｝−３−（１−ピぺリジニル）プロパンアミド；
２−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］安息香酸；
２−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）エチル］ベンズアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−Ｎ２−（２−メトキシエチル）グリシンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−β−アラニンアミド；
２−アミノ−４−（４−アミノ−３−ヒドロキシフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチノニトリル；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド；
Ｎ−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
Ｎ−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−１−ピロリジニル］フェニル｝−Ｌ−ロイシンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［（３Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−１−ピロリジニル］フェニル｝−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−Ｌ−ロイシンアミド；
Ｎ−（５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
Ｎ１−（５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−Ｎ２−（２−メトキシエチル）グリシンアミド；
Ｎ１−（５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−ヒドロキシフェニル）ニコチノニトリル；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝アセタミド；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−（ヒドロキシメチル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド；
２−［６−アミノ−４−［４−（エチルアミノ）−３−ヒドロキシフェニル］−５−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジニル］−３−（シクロプロピルメトキシ）フェノール；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−６−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−ヒドロキシフェニル］−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド；
７−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−ヒドロキシフェニル］−５−（３−エチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１，３−ベンズオキサゾール−６−イル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２−オン。
【請求項５】
請求項１記載の化合物またはその塩を活性成分として含有する医薬組成物。
【請求項６】
請求項１記載の化合物またはその塩と一種以上の薬学的に許容される賦形薬からなる医薬組成物。
【請求項７】
請求項１記載の化合物またはその塩を活性成分として含有するＩκＢキナーゼβ阻害剤。
【請求項８】
請求項１記載の化合物またはその塩を活性成分として含有する抗炎症剤。
【請求項９】
喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、結膜炎、春季カタル、慢性関節リウマチ、全身性エリトマトーデス、乾癬、潰瘍性大腸炎、全身性炎症反応シンドローム（ＳＩＲＳ）、敗血症、多発性筋炎、皮膚筋炎（ＤＭ）、結節性多発関節炎（ＰＮ）、混合結合組織症（ＭＣＴＤ）、シェーグレン症候群、および痛風からなる群から選択される病気の予防・治療に使用される請求項６の抗炎症剤。
【請求項１０】
請求項１記載の化合物またはその塩を活性成分とする免疫抑制剤。
【請求項１１】
請求項１記載の化合物またはその塩を活性成分とする虚血症治療剤。
【請求項１２】
請求項１記載の化合物またはその塩を活性成分とする抗腫瘍剤。
【請求項１３】
医薬の製造のための請求項１−４のいずれかに従う一般式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１４】
医薬が炎症疾患の制御のための請求項１３に従う使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、新規な４−アリールピリジン誘導体、その誘導体の製造方法、およびその誘導体を含有する薬学的製剤に関する。本発明の４−アリールピリジン誘導体は、ＩκＢキナーゼβ（ＩＫＫ−β、またはＩＫＫ−ベータ）活性を阻害することにより、ニュクレオファクターκＢ（ＮＦ−κＢ）活性を阻害する。その結果、ＮＦ−κＢ活性に関連する疾患の予防と治療、特に炎症性疾患の治療に使用し得る。
【０００２】
（背景技術）
ニュクレオファクターκＢ（ＮＦ−κＢ）は、Ｒｅｌ／ＮＦ−κＢファミリーのポリペプチドの多様な組み合わせにより構成される、密接に関連するホモダイマーまたはヘテロダイマーの転写因子複合体のファミリーに属する。ＮＦ−κＢおよび関連するファミリーメンバーは、免疫反応および炎症反応に関する５０以上の遺伝子の調節に関与する（Ｂａｒｎｅｓ ＰＪ，Ｋａｒｉｎ Ｍ （１９９７） Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ． ３３６， １０６６−１０７１）および（Ｂａｅｕｅｒｌｅ ＰＡ， Ｂａｉｃｈｗａｌ ＶＲ （１９９７） Ａｄｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ６５， １１１−１３７）。ほとんどの細胞では、ＮＦ−κＢは、５０ｋＤａおよび６５ｋＤａのサブユニットを含むヘテロダイマー（ｐ５０／ＲｅｌＡ）として存在する。このヘテロダイマーは、ＮＦ−κＢ（ＩκＢ）ファミリーのタンパク質の阻害剤と結びついて細胞質内に留められ、不活性型になっている。ＩκＢファミリーのタンパク質は、ＮＦ−κＢの核移行シグナルを遮断している。細胞が、様々なサイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１）、ＣＤ４０リガンド、リポ多糖（ＬＰＳ）、酸化体、マイトジェン（例えばホルボールエステル）、ウイルス、あるいは多くの他のもので刺激されると、ＩκＢタンパクは、特定のセリン残基でリン酸化され、ポリユビキチン化され、プロテアソーム依存経路を介して分解される。ＩκＢから遊離して、活性型ＮＦ−κＢは、核移行できるようになり、核において特定の遺伝子特異的エンハンサー配列に選択的に結合する。ＮＦ−κＢで調節される遺伝子のなかで、多くは、前炎症性メディエーター、サイトカイン、細胞接着分子および急性期タンパク質をコードしている。これらのサイトカインおよびメディエーターのいくつかの交互の発現は、オートクラインとパラクラインメカニスムを介して、さらにＮＦ−κＢを活性化に導くことができる。
【０００３】
喘息および気道炎症を含む多くの炎症反応でのＮＦ−κＢの中心的役割を示唆する広汎な証拠がある（（Ｙａｎｇ Ｌら、 Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ １８８ （１９９８）， １７３９−１７５０）、（Ｈａｒｔ ＬＡら　Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １５８ （１９９８）， １５８５−１５９２）、（Ｓｔａｃｅｙ ＭＡらＢｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２３６ （１９９７）， ５２２−５２６）、（Ｂａｒｎｅｓ Ｐ およびＡｄｃｏｃｋ ＩＭ， Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ １８ （１９９７）， ４６−５０））。
さらに、現在喘息の治療にもっとも有効とされるグルココルチコイドは、転写因子ＮＦ−κＢおよび活性化ペプチド−１（ＡＰ−１）と直接相互作用し、その活性を阻害することによって、気道炎症を抑制することが示されている（（Ｂａｒｎｅｓ Ｐ（１９７７） Ｐｕｌｍｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔ １０， ３−１９） および（Ｄｕｍｏｎｔ Ａ ら（１９９８） Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｃｉ ２３，２３３−２３５））。
一般的にＮＦ−κＢ活性化の阻止により、ステロイド剤と同等またはそれより優れた強い抗炎症作用が得られ、従ってＮＦ−κＢ阻害は、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、結膜炎、春季カタル、慢性関節リウマチ、全身性エリトマトーデス、乾癬、潰瘍性大腸炎、全身性炎症反応シンドローム、敗血症、多発性筋炎、皮膚筋炎、結節性多発関節炎、混合結合組織症、シェーグレン症候群、痛風などで代表される炎症の症状を改善する。
【０００４】
さらに、ＮＦ−κＢが、新生物（悪性）形質転換に必須の役割を果たしていることが、いくつかの研究により示されている。例えば、ＮＦ−κＢは、過剰発現、遺伝子増幅、遺伝子組換え、あるいは転座の結果、インビトロおよびインビボで細胞の形質転換に関与している（Ｍｅｒｃｕｒｉｏ， Ｆ．および Ｍａｎｎｉｎｇ， Ａ．Ｍ． （１９９９）， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ， １８：６１６３−６１７１）。特定のヒトのリンパ様腫瘍細胞では、ＮＦ−κＢファミリーメンバーの遺伝子が組み換えられ、増幅されている。腫瘍病理において可能な関与がＭａｙｏ， Ｍ．Ｗ．， Ｂａｌｄｗｉｎ Ａ．Ｓ． （２００） Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ １４７０ Ｍ５５−Ｍ６２に開示されている。Ｍａｙｏ Ｍ．Ｗ．らはＮＦ−κＢ阻害がある腫瘍、特に結腸直腸癌のイニシエーションおよび／または進行を阻止する結果となることを開示している。
ＮＦ−κＢは神経細胞壊死の調節にまた、関与しているかもしれない。ＮＦ−κＢはｆｏｃａｌ 脳虚血における細胞壊死を活性化および促進することになることが示された（Ｎａｔｕｒｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｖｏｌ．５， Ｎｏ．５， Ｍａｙ １９９９）。
過去数年間の精力的研究の結果、シグナル−誘導ＩκＢリン酸化に関与しているＩκＢキナーゼ（ＩＫＫ）コンプレックスを同定するに至った（Ｈａｔａｄａ， Ｅ．Ｎ．ら （２０００） Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， １２−５２−５８）。このコンプレックスはＮＦ−κＢ活性に導く全ての異なる刺激の最も可能性のある増強部位である。ＩＫＫコンプレックス（分子量７００−９００ｋＤａ）は、ＩＫＫ−αおよびＩＫＫ−βという、ＩκＢキナーゼの２つのホモログ、ＮＦ−κＢを誘導する上流のキナーゼＮＩＫ、これらの３つのキナーゼを繋ぐスカホールドタンパク質ＩＫＡＰ、およびＩＫＫ−βと特異的に相互作用する調節サブユニットＩＫＫ−γを含む様々なタンパク質からなる。
【０００５】
ＩＫＫ−βは、７５６個のアミノ酸からなるセリン−トレオニンキナーゼであり、ＩＫＫ−αと５２％の相同性を有し、同じドメイン構造を有している（（Ｍｅｒｃｕｒｉｏ Ｆ ら （１９９７） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７８， ８６０−８６６．）， （Ｗｏｒｏｎｉｃｚ ＪＤ ら （１９９７） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７８， ８６６−８６９．） （Ｚａｎｄｉ Ｅ ら（１９９７） Ｃｅｌｌ ９１， ２４３−２５２．））。ＩＫＫ−βは、インビトロおよび細胞内で、それぞれＩＫＫ−αとホモダイマーとヘテロダイマーを形成する。ＩＫＫ−βはまた、ＩＫＫ−γ、ＩＫＡＰ、ＮＩＫおよびＩκＢαと相互作用する。組換え体ＩＫＫ−βは、ＩκＢαおよびＩκＢβの特定のセリン残基を同じ効率でリン酸化する（Ｌｉ Ｊ ら （１９９８） Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７３， ３０７３６−３０７４１）。ＩＫＫ−βは、ＩＫＫ−αと比較すると、より高い構成的なキナーゼ活性を有する。このことは、ＩＫＫ−βの過剰発現により、ＮＦ−κＢ依存性リポーター遺伝子の転写が、ＩＫＫ−αと比較してより高く活性化されることと一致している。ＩＫＫ−βは、様々な刺激に反応して、多様な細胞系あるいは新鮮なヒト細胞中で活性化されていることが示されている。これらの刺激とは、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＬＰＳ、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８刺激、プロテインキナーゼＣ、およびカルシニューリン、Ｂ細胞レセプター／ＣＤ４０リガンド刺激、およびバナジウム酸塩などである。ＩＫＫ−βは、リウマチ性関節炎あるいは骨関節炎の患者の滑膜から単離された線維芽細胞様滑膜細胞（ＦＬＳ）中で活性化されている（Ｋｅｍｐｉａｋ ＳＪ ら （１９９９） Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２， ３１７６−３１８７．）。さらに、ＩＫＫ−βは、構造的に関連している上流のキナーゼのＭＥＫＫ−１およびＮＩＫにより、可能性の高いＴ−ループ（活性化ループ）中の特定のセリン残基リン酸化を通じて、そして所定のプロテインキナーゼＣアイソフォームにより活性化され得る（Ｌａｌｌｅｎａ ＭＪ ら （１９９９） Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ １９， ２１８０−２１８８．）。触媒的に不活性なＩＫＫ−βの変異体は、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＬＰＳ、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８刺激により、ＮＦ−κＢの活性化を阻害することが示されている（Ｗｏｒｏｎｉｃｚ ＪＤ ら （１９９７） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７８， ８６６−８６９）。同じ効果がＭＥＫＫ１およびＮＩＫの過剰発現により、観察される。さらに、活性化ループにあるＩＫＫ−β変異は、ＩＬ−１およびＴＮＦ−αのシグナルを阻害する（Ｄｅｌｈａｓｅ Ｍ ら （１９９９） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８４， ３０９−３１３．）。上述の実験結果に基づき、ＮＦ−κＢ活性化へ導く種々の経路中でのＩＫＫ−βの中心的関与の明白な証拠がある。
要約すれば、ＩＫＫ−βの特異的阻害により、喘息および他の疾患の原因を改善しうるインビボでの強い抗炎症と免疫調節効果を結果として発揮する。更に、ＩＫＫ−β阻害による抗腫瘍、抗虚血効果が期待される。
【０００６】
Ｍａｎｎａ らは下記の一般式等で表される４，６−ジ置換３−シアノ−２−アミノピリジンを一般的な抗炎症、鎮痛、解熱剤として開示している（Ｅｕｒ Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ３４， ２４５−２５４ （１９９９））。
【化２】
2004514712.tif 000003
（式中、Ｒ’とＲ’’はＯＣＨ３とＯＣＨ３、ＣｌとＣｌ、ＨとＣｌ、ＨとＢｒ、ＨとＣＨ３、ＨとＯＣＨ３、ＨとＮＯ２、またはＨとＮ（ＣＨ３）２を意味する。）、および
【化３】
2004514712.tif 000004
【０００７】
しかしながら、ＮＦ−κＢに対する特異的、選択的阻害活性に基づく抗炎症作用を有する新規化合物の開発がなお望まれている。
【０００８】
発明の要約
本発明者らはピリジン誘導体の化学的修飾について鋭意研究の結果、本発明に係る新規化学構造の化合物がＩＫＫ−β阻害とサイトカイン阻害に基づく予期せぬ程の優れたＮＦ−κＢ阻害活性を有することを見出し、これらの知見に基づき本発明を完成した。
【０００９】
本発明は下記式（Ｉ）で示される新規４−アリールピリジン誘導体およびその塩を提供することにある；
【化４】
2004514712.tif 000005
（式中、ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、ニトロ、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、フェニルスルホニルアミノ、−ＮＨＲ１１、または
−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ１２
但し、Ｒ１１はフェニル置換Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、またはＣ１−６アルキルスルホニルであり、
ｎは０−６の整数を意味し、
Ｒ１２はＣ２−６アルケニル、ベンゾイル、モノもしくはジフェニル、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、またはヒドロキシ、ニトロ、シアノ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルカノイルアミノ、カルバモイル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、またはフェニルで置換されていることもあるＳ、ＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−１０員の飽和または不飽和環を意味する。；
【００１０】
Ｒ２は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル置換Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＲ３１Ｒ３２、またはＲ３３で置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−６員の飽和環を意味し、
但し、Ｒ３１は水素原子またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３２は水素原子、Ｃ１−６アルカノイル、またはヒドロキシもしくはフェニルで置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３３はニトロ、シアノ、ヒドロキシもしくはアミノで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルコキシ、アミノ置換Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルカノイル、カルバモイル、または−ＮＲ３３ａＲ３３ｂであり、
但し、Ｒ３３ａは水素原子またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３３ｂは水素原子、ヒドロキシもしくはフェニルで置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、またはトリフルオロアセチルであり；
【００１１】
Ｒ４は水素原子、ヒドロキシ、カルボキシ、−ＣＯ−ＮＨＲ４１、アミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ、−ＮＨ−ＣＯＲ４１、Ｒ４２で置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｒ４３Ｃ１−６アルコキシ、
但し、Ｒ４１はＲ４１ａで置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、オキソテトラヒドロフリル、オキソピロリジニル、−ＣＨ（ＯＨ）Ｒ４１ｂ、−ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ４１ｃ、−ＮＨＲ４１ｃ、またはＲ４１ｄで置換されていることもあるピペラジノであり、
但し、Ｒ４１ａはカルボキシ、Ｃ１−６アルコキシ、−ＣＨ（ＣＨ２）カルボキシ、−ＮＲ４１ａ−１Ｒ４１ａ−２、またはカルボキシ、ヒドロキシもしくはベンゾジオキサンで置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−６アルカノイル、カルボキシ、ベンジル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、またはフロイルで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−１０員の飽和環を意味し、
但し、Ｒ４１ａ−１は水素原子、またはヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−８シクロアルキルもしくはピペリジノで置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
Ｒ４１ａ−２は水素原子、またはヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシもしくはＣ３−６シクロアルキルで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、またはカルボキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルもしくはＣ１−６アルコキシで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−６員の飽和環を意味し、
Ｒ４１ｂはカルボキシもしくはＣ１−６アルコキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシまたはＣ１−６アルコキシカルボニルであり、
Ｒ４１ｃはカルボキシ、カルボキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、またはＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する３−６員の飽和環を意味し、
Ｒ４１ｄはカルボキシもしくはＣ１−６アルコキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシであり、
Ｒ４２はＣ１−６アルコキシ、カルボキシ、アミノ、−ＣＨ（ＮＨ２）−カルボキシ、またはヒドロキシ、ニトロ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノまたはカルバモイルで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する５−７員の飽和または不飽和環を意味し、
Ｒ４３はカルボキシ、アミノ、−ＣＨ（ＮＨ２）−カルボキシ、またはヒドロキシ、ニトロ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノまたはカルバモイルで置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する５−７員の飽和または不飽和環を意味し；
【００１２】
Ｒ３とＲ４は、ベンゼン環中の炭素原子と共に、ヒドロキシ、ニトロ、モノもしくはジハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキル、オキソ、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノおよびカルバモイルから選択される１個以上の置換基で置換されていることもあるＯおよびＮ原子から選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する４−６員の飽和環を意味し；
Ｒ５は水素原子、シアノ、カルボキシ、カルバモイル、またはヒドロキシもしくはカルバモイルで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシカルボニルであり；そして
Ｒ６は−ＮＲ６１Ｒ６２を意味し、
但し、Ｒ６１は水素原子またはＣ１−６アルキルであり、
Ｒ６２は水素原子、Ｃ１−６アルキル、フェニル、ベンジル、Ｃ１−６アルカノイル、または
−ＮＲ６１Ｒ６２はそれらが結合するＮ原子と共に、隣接するＮ原子以外の他のヘテロ原子としてＮＨまたはＯ原子を含んでいてもよいもよい飽和５−６員環を形成してもよく；または
Ｒ５とＲ６は、ピリジン環中の炭素原子と共に、Ｏ、ＳおよびＮから選ばれる０−３個のヘテロ原子を有する５−７員の飽和または不飽和環を形成してもよく、該環は、ハロゲン、ニトロ、シアノ、オキソ、チオオキソ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、フェニル、Ｃ１−６アルカノイル、アミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、Ｃ１−６アルカノイルアミノ、カルバモイル、Ｃ３−８シクロアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ハロゲン置換Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノカルボニル、ベンゾイルアミノ、フェニルスルホニル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノカルボニル、ヒドロインデニルアミノカルボニル、ジフェニルメチルアミノカルボニル、ピロリジノカルボニル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキルアミノカルボニル、モルホリノカルボニル、ピペラジノカルボニル、フェニルＣ１−６アルキルアミノカルボニル、カルボキシＣ１−６アルキルアミノカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルＣ１−６アルキルアミノカルボニル、ヒドロキシＣ１−６アルキルアミノカルボニルおよびメチルスルホニルアミノカルボニルからなる群から選ばれる置換基を有していてもよい。）。
本発明の化合物は、驚くべきことに優れたＩＫＫ−βキナーゼ阻害活性とサイトカイン阻害活性を示す。従って、これらの化合物は、殊にＮＦ−κＢ阻害剤として、そして、特にＮＦ−κＢに依存する疾病の治療に有用な医薬、あるいは医薬組成物の製造に適している。
【００１３】
さらに具体的には、本発明の４−アリールピリジン誘導体は優れたＩＫＫ−βキナーゼ活性を阻害するので、それらはＮＦ−κＢ活性が関与する病気、例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、結膜炎、春季カタル、慢性関節リウマチ、全身性エリトマトーデス、乾癬、潰瘍性大腸炎、全身性炎症反応シンドローム（ＳＩＲＳ）、敗血症、多発性筋炎、皮膚筋炎（ＤＭ）、結節性多発関節炎（ＰＮ）、混合結合組織症（ＭＣＴＤ）、シェーグレン症候群、痛風などを含む炎症性症候群の治療および予防に有用である。
【００１４】
本発明の化合物は、また虚血や腫瘍のような病気の予防と治療に有用である。何故ならばこれらの病気もＩＫＫ−βキナーゼおよびＮＦ−κＢ活性に関連しているからである。
【００１５】
式（Ｉ）の好ましい化合物は、
ＸはＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は水素原子、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、シクロプロピルメトキシであり；
Ｒ２は水素原子であり；
Ｒ３は水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、モノもしくはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、アセタミド、Ｃ１−６アルコキシ、シクロプロピルメトキシ、Ｃ１−６アルキル（ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキル（ベンジル）アミノ、モルホリノ、ピペリジノ、またはＣ１−６アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル、アミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、もしくはトリフルオロアセチルアミノで置換されていることもあるピロリジノであり；
【００１６】
Ｒ４は水素原子、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ、ピペラジノ、Ｃ１−６アルキル置換ピペラジノ、ピペリジノ置換Ｃ１−６アルコキシ、ピペリジノＣ１−６アルキル−アミノカルボニル、または−ＮＨ−ＣＯＲ４１であり、
但し、Ｒ４１はＲ４１ａで置換されていることもあるＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、オキソテトラヒドロフリル、オキソピロリジニル、−ＣＨ（ＯＨ）Ｒ４１ｂ、または−ＣＨ（ＮＨ２）Ｒ４１ｃを意味し、
但し、Ｒ４１ａはＣ１−６アルコキシ、カルボキシ、−ＣＨ（ＮＨ２）−カルボキシ、−ＮＨＲ４１ａ−１（但し、Ｒ４１ａ−１は水素原子、またはヒドロキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−６アルコキシもしくはピペリジノで置換されていてもよいＣ１−６アルキルであり。）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）Ｒ４１ａ−２（但し、Ｒ４１ａ−２はＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキル置換ピロリジニルであり。）、ピロリジニル、カルボキシもしくはＣ１−６アルコキシカルボニルで置換されていることもあるピペリジノ、シクロヘキサンと融合したピペリジノ、またはＣ１−６アルキル、ヒドロキシ置換Ｃ１−６アルキル、ベンゾジオキサン置換Ｃ１−６アルキル、ベンジル、Ｃ１−６アルカノイル、シクロヘキシル、またはフロイルで置換されていることもあるピペラジノであり、
Ｒ４１ｂはカルボキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルコキシカルボニルであり、
Ｒ４１ｃはカルボキシで置換されていることもあるＣ１−６アルキルであり、
Ｒ３とＲ４は、−ＮＲ４０１−ＣＯＯ−（但し、Ｒ４０１は水素原子またはＣ１−６アルキルを意味し。）を形成してもよく；
Ｒ５は水素原子、カルバモイル、シアノ、カルボキシ、またはヒドロキシメチルであり；
【００１７】
Ｒ６はアミノまたはアセタミドであり；または
Ｒ５とＲ６は、−Ｒ５０−ＣＨ２−ＮＨ−、Ｒ５０−ＣＯ−ＮＨ−、−Ｒ５０−ＳＯ２−ＮＨ−または−Ｒ５０−Ｃ（＝Ｓ）−ＮＨ−であり、
但し、Ｒ５０は−ＣＨＲ５０１−Ｏ−、−ＣＨ２−ＮＲ５０１−、−ＣＯ−ＮＲ５０１−（但し、Ｒ５０１は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、カルバモイル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノカルボニル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノカルボニルまたはフェニルである。）、またはその塩である。
【００１８】
本発明の文脈において、特に断らない限り置換基は一般的に以下の意味を有する：
Ｃ１−６アルキルとは一般的に、直鎖あるいは分枝鎖状の炭素数１−６の炭化水素基を意味する。非限定的に、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシルを含む。
Ｃ１−６アルコキシとは一般的に、Ｏ原子を介して結合する直鎖あるいは分枝鎖状の炭素数１−６の炭化水素基を意味する。非限定的に、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ヘキソキシ、イソヘキソキシを含む。
Ｃ３−８シクロアルキルとは一般的に、炭素数３−８の環状炭化水素基を意味する。シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが好ましい。非限定的に、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含む。
Ｃ２−６アルケニルとは１個以上の二重結合を有する直鎖あるいは分枝鎖状残基、例えばビニルやアリルを表す。
【００１９】
本発明の好ましい化合物は以下の化合物である；
５−（｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボキサミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝メタンスルホナミド；
Ｎ４−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｌ−アスパラギン；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｌ−アスパラギン；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
５−（｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト；
【００２０】
４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）エチル］ベンズアミド；
４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］安息香酸；
５−（｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−２−［４−（２−フロイル）−１−ピペラジニル］アセタミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（４−エチル−１−ピペラジニル）プロパンアミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−オクタヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニルプロパンアミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−シクロペンチルグリシナミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシナミド；
【００２１】
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−プロピルグリシナミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−（３−ヒドロキシプロピル）グリシナミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ３−（シクロプロピルメチル）−β−アラニンアミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルグリシナミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−２−（１−ピロリジニル）アセタミド；
Ｎ１−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−Ｎ２−［２−（メチルオキシ）エチル］グリシナミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（３−アミノ−１−ピロリジニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（１−ピペリジニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
【００２２】
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（１−ピロリジニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［エチル（２−ヒドロキシエチル）アミノ］フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（４−モルホリニル）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−β−アラニンアミド；
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−４−クロロフェニル｝−３−（１−ピぺリジニル）プロパンアミド；
２−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］安息香酸；
２−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）エチル］ベンズアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−Ｎ２−（２−メトキシエチル）グリシンアミド；
【００２３】
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−β−アラニンアミド；
２−アミノ−４−（４−アミノ−３−ヒドロキシフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチノニトリル；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド；
Ｎ−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−クロロフェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
Ｎ−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−１−ピロリジニル］フェニル｝−Ｌ−ロイシンアミド；
Ｎ１−｛５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［（３Ｓ）−３−（ジメチルアミノ）−１−ピロリジニル］フェニル｝−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
Ｎ１−（５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−Ｌ−ロイシンアミド；
Ｎ−（５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド；
【００２４】
Ｎ１−（５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−Ｎ２−（２−メトキシエチル）グリシンアミド；
Ｎ１−（５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−｛３−［（トリフルオロアセチル）アミノ］−１−ピロリジニル｝フェニル）−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシンアミド；
２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−ヒドロキシフェニル）ニコチノニトリル；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝アセタミド；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−（ヒドロキシメチル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド；
２−［６−アミノ−４−［４−（エチルアミノ）−３−ヒドロキシフェニル］−５−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジニル］−３−（シクロプロピルメトキシ）フェノール；
Ｎ−｛４−［２−アミノ−６−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−ヒドロキシフェニル］−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド；
７−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−ヒドロキシフェニル］−５−（３−エチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１，３−ベンズオキサゾール−６−イル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２−オン、
およびその薬学的に許容される塩。
【００２５】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、限定されることなく、種々の公知の方法を組み合わせることによって製造し得る。
いくつかの例においては、原料や中間体として使用される化合物の、アミノ基、カルボン酸基、水酸基のような１つ以上の置換基は当業者に公知の保護基で有利に保護される。その保護基の例は、ＧｒｅｅｎｅとＷｕｔｓ著Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（２ｎｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）の「保護基」の章で記載されている。
【００２６】
本発明の化合物（Ｉ）の代表的製法につき、以下に説明する。
（１）下記式（Ｉ−ａ）の化合物：
【化５】
2004514712.tif 000006
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は前掲に同じ。Ｒ４ａはＣ１−６アルキルスルホニルまたは−ＣＯＲ４１であり、Ｒ４１は前掲に同じ。）
は、例えば以下の反応Ａで製造できる。
【化６】
2004514712.tif 000007
【００２７】
ステップ１において、式（ＩＩ）の化合物：
【化７】
2004514712.tif 000008
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＸは前掲に同じ。）
は、式（ＩＩＩ）のアルデヒド：
【化８】
2004514712.tif 000009
（式中、Ｒ３は前掲に同じ。）、
マロノニトリル、および酢酸アンモニアと反応させられ、化合物（ＩＶ）を与える。
ステップ２では、ニトロ基が還元され、アミノ基に変換される。
ステップ３では、アミノ基がさらに修飾され、所望の基（ＮＨＲ４ａ）の化合物を与える。
【００２８】
化合物（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の置換基は、必要に応じ、ベンジル、シリルのような適切な保護基で保護して反応に付され、後で脱保護される。
ステップ１は無溶媒、あるいはジオキサン、テトラヒドロフランのようなエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類、アセトニトリルのようなニトリル類、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセタミドのようなアミド類、ジメチルスルホキサイドのようなスルホキサイド類等の溶媒中で行うことができる。
反応温度は反応に供される化合物に基づき適当に決められるが、通常、約５０−２００℃である。反応時間は通常、３０分から４８時間で、好ましくは１時間から２４時間である。
【００２９】
式（ＩＩ）と（ＩＩＩ）の化合物は市販品として入手し得るか、あるいは公知の方法で製造しうる。
ステップ２は還元剤と水素供与体の存在下約室温から１２０℃で行われる。ステップ２での反応時間と溶媒はステップ１と同様である。
ステップ３は当業者が通常採用する条件下行われ、アミド体（ＮＨＲ４ａ）を製造する。
【００３０】
（２）別法として、式（Ｉ−ｂ）の化合物：
【化９】
2004514712.tif 000010
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４１は前掲に同じ。）
は、例えば次の反応Ｂで得ることができる。
【化１０】
2004514712.tif 000011
【００３１】
化合物（ＩＩ）は、式（ＩＩＩ’）のアルデヒド：
【化１１】
2004514712.tif 000012
（式中、Ｒ３は前掲に同じ。Ｒ４ｂはアミノまたはアルコキシである。）、
マロノニトリル、および酢酸アンモニアと反応させられ、化合物（ＩＶ’）を与える。Ｒ４ｂはさらに修飾され、所望の基（ＯＨまたはＮＨ４１）に変換される。
【００３２】
化合物（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の置換基は、反応中、必要に応じ、適当な保護基（ベンジル、シリルなど）で保護され、該保護基は後で脱離される。
反応Ｂのステップ１は反応Ａと同様な条件下行われる。
反応Ｂのステップ２は加水分解反応で、当業者が通常採用する条件下行われる。
反応Ｂのステップ３は当業者が通常採用する条件下行われ、アミド体（ＣＯＮＨＲ４１）を与える。
【００３３】
（３）別法として、式（Ｉ−ｃ）の化合物：
【化１２】
2004514712.tif 000013
（式中、Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は前掲に同じ。Ｒ５ａはカルボキシ、カルバモイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルバモイル、またはＣ１−６アルキルである。）
は、例えば以下の反応Ｃで製造される。
【化１３】
2004514712.tif 000014
【００３４】
化合物（ＩＩ）は、式（ＩＩＩ’’）のアルデヒド：
【化１４】
2004514712.tif 000015
（式中、Ｒ３とＲ４は前掲に同じ。）、
式ｔ−Ｂｕ−ＯＣＯ−ＣＨ２ＣＮのニトリル、および酢酸アンモニアと反応させられ、化合物（ＩＶ’’）が製造される。ついで生じた化合物（ＩＶ”）のＣＯＯｔＢｕを修飾し、所望の化合物（Ｒ５ａ）を与える。
【００３５】
化合物（ＩＩ）または（ＩＩＩ’’）の置換基は、必要に応じ、反応中適当な保護基（ベンジル、シリルなど）で保護され、該保護基は後で脱離される。
反応Ｃのステップ１は反応Ａと同様な条件下行われる。
反応Ｃのステップ２は、例えば加水分解反応、脱炭酸、還元反応、アミド合成等である。ステップ２の条件は当業者が通常採用するのと同じである。
【００３６】
化合物（Ｉ−ａ）、（Ｉ−ｂ）および（Ｉ−ｃ）のピリジン環の２位のアミノ基は、必要に応じ、常法に従い修飾され、アルキルアミノ、アルカノイルアミノ等の他の基に変換される。
式（Ｉ）においてＲ５とＲ６がピリジン環の炭素原子と一緒になり形成される飽和、不飽和異項環化合物の代表的製法は以下の通りである。
出発化合物はＩ−ｄ（式中Ｘ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は前掲に同じ。）である。
【化１５】
2004514712.tif 000016
【００３７】
反応Ｄのステップ１において、式Ｉ−ｄの出発物質は適当な有機塩基と適当な溶媒中、トリホスゲンと公知の方法で処理され、所望の式Ｉ−Ｄの化合物を得ることができる。
反応Ｅのステップ１において、式Ｉ−ｄの出発物質は適当な溶媒中、二酸化マンガン、硝酸、ピリジニウムクロロクロメイト（ＰＣＣ）のような酸化剤で処理され、式Ｉ−ｄ’−１の化合物を得ることができる。
反応Ｅのステップ２において、式Ｉ−ｄ’−１はジエチルマロネートと適当な塩基で処理され、所望の式Ｉ−Ｅの化合物を得ることができる。
【００３８】
反応Ｆのステップ１において、式Ｉ−ｄの出発物質は適当な溶媒中、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）のようなリン酸エステル化剤と適当な塩基で処理され、式Ｉ−ｄ’−２の化合物を得ることができる。
反応Ｆのステップ２において、式Ｉ−ｄ’−２の化合物は炭素担持白金（Ｐｄ／Ｃ）のような金属触媒の存在下、水素で処理され、式Ｉ−ｄ’−３の化合物を得ることができる。
反応Ｆのステップ３において、式Ｉ−ｄ’−３の化合物は適当な溶媒中、１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）と処理され、所望の式Ｉ−Ｆ−１の化合物を得ることができる。
反応Ｆのステップ４において、式Ｉ−ｄ’−３の化合物はスルファミドと適当な塩基で処理され、所望の式Ｉ−Ｆ−２の化合物を得ることができる。
反応ＤからＦにおける個々の反応ステップ用の適切な溶媒は、特に限定されないが、エーテル類（例えばジオキサン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ），グリコールジメチルエーテル）、アルコール類（例えば、プロパノール、ブタノール、イソプロパノール、エタノールジイソプロピルエーテル）、エステル類（例えば、酢酸エチル、酢酸ブチル）、芳香族炭化水素類（例えば、ベンゼン、トルエン、キシレン、ヘキサン）、ニトリル類（例えば、アセトニトリル）、アミド類（例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセタミド）、スルホキサイド類（例えば、ジメチルスルホキサイド）、ハロゲン化炭化水素類（例えば、ジクロロメタン、トリクロロメタン）およびその他からなる群から選ばれる。適切な溶媒のいくつかの例が挙げられているが、それらは例示であって、制限的ではない。各ステップでの適切な溶媒は当業者で選択され得る。
【００３９】
反応ＤからＦにおける個々のステップのための適切な無機または有機塩基は、特に限定されないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニア、ナトリウムメトキサイド、ナトリウムエトキサイド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキサイド、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、酢酸カルシウム、酢酸アンモニア、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸アンモニア、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどの、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物、アルコキサイド、酢酸塩、炭酸塩、重炭酸塩；トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、エチル−ジイソプロピルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルベンジルアミン、ピリジン、ピコリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、ジアザビシクロオクタン（ＤＡＢＣＯ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）のようない三級アミンからなる群から選ばれる。適切な無機および有機塩基のいくらかの例が挙げられているが、これらの例は例示であって、限定的ではない。各ステップでの適切な塩基は当業者で選択され得る。
反応温度は、反応させられる化合物に依拠して適当に決められる。反応温度は通常約０℃〜１５０℃である。反応は通常３０分〜４８時間、好ましくは１〜２４時間である。
式（Ｉ）の化合物またはその塩が幾何異性、および／または配座異性体を有するときは、その分離された各異性体および混合物も本発明の範囲に含まれる。
【００４０】
式（Ｉ）の化合物またはその塩がその構造中に不斉炭素を有するときは、その光学異性体およびラセミ体混合物も本発明の範囲に含まれる。
式（Ｉ）の化合物の代表的塩は、本発明の化合物と鉱酸または有機酸、あるいは有機塩基または無機塩基との反応で形成される塩であり、そのような塩は酸付加塩および塩基付加塩としてそれぞれ知られている。
【００４１】
酸付加塩を形成する酸は、特に限定されないが、硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、沃化水素酸などの無機酸および、特に限定されないが、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、蓚酸、ｐ−ブロムベンゼンスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸などの有機酸である。
【００４２】
塩基付加塩は、特に限定されないが、水酸化アンモニア、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類金属水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩などの無機塩基、あるいは特に限定されないが、エタノールアミン、トリエチルアミン、トリ（ヒドロキシメチル）アミノメタンなどの有機塩基から誘導されるものである。無機塩基の例は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、重炭酸カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウムなどである。
【００４３】
そのような塩の例は、式（Ｉ）の化合物の、硫酸塩、ピロ硫酸塩、硫酸水素塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩酸塩、臭化水素塩、沃化水素塩、酢酸塩、プロピオネート、デカノエート、カプリレート、アクリレート、ホルメート、イソブチレート、カプロエート、ヘプタノエート、プロピオレート、オキザレート、マロネート、サクシネート、スベレート、セバケート、フマレート、マレエート、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，６−ジオエート、ベンゾエート、クロロベンゾエート、メトキシベンゾエート、フタレート、スルホネート、キシレンスルホネート、フェニルアセテート、フェニルプロピオネート、フェニルブチレート、シトレート、ラクテート、γ−ヒドロキシブチレート、グリコレート、タータレート、メタンスルホネート、プロパンスルホネート、ナフタレン−１−スルホネート、ナフタレン−２−スルホネート、マンデレートなどである。
【００４４】
好ましい酸付加塩は、特に限定されないが、塩酸、臭化水素酸のような鉱酸と形成される塩、および、特に限定されないが、マレイン酸、メタンスルホン酸のような有機酸と形成される塩である。ナトリウム塩およびカリウム塩の形は、特に好ましい塩基付加塩である。
本発明の化合物は、特に限定されないが、通常の錠剤、腸溶錠、カプセル剤、ピル、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンク剤、液剤、懸濁剤、シロップ、固体あるいは液状のエアロゾル剤および乳濁剤のような経口剤形で投与してよい。
本発明の化合物は、特に限定されないが、薬学の分野の当業者に良く知られている、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内などの投与剤形で非経口的に投与してもよい。
【００４５】
本発明の化合物は適切な経鼻用佐薬の局所使用を介する経鼻投与形態で、あるいは当業者に公知の経皮投与システムを使用して、経皮的に投与されうる。
本発明の化合物の投与計画は、特に限定されないが、年齢、体重、性別、患者の医学的コンディション、患者の病状、投与経路、患者の代謝・排泄機能のレベル、採用される投与形態、投与される特定の化合物および塩を含む種々の要素の観点から、当業者によって選定される。
【００４６】
本発明の化合物は投薬前に、一種またはそれ以上の薬学的に許容される賦形剤と共に製剤（処方）されるのが好ましい。賦形剤は、限定されないが、キャリアー、希釈剤、芳香剤、甘味剤、滑沢剤、溶解剤、懸濁剤、結合剤、錠剤崩壊剤、カプセル用材のような不活性物質である。
【００４７】
本発明の他の態様は、本発明の化合物と、製剤に際して他の成分と相容性があり、被投薬者に有害でない一種またはそれ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的製剤である。本発明の薬学的製剤は治療的有効量の本発明の化合物と一種またはそれ以上の薬学的に許容される賦形剤を混合することによって製造される。本発明の組成物を製造するに際して、活性成分を希釈剤と混合してもよく、あるいはカプセル、サッチェ、ペイパー、または包装剤の形でもよいキャリアーに包み込んでもよい。そのキャリアーは希釈剤を兼ねてもよく、ビヒクルとして機能する固体、半固体または液状物でもよく、あるいは錠剤、ピル、散剤、ローゼンジ、エリキシル剤、懸濁剤、乳化剤、液剤、シロップ剤、エアロゾル剤、例えば活性成分の１０重量％までを含む軟膏剤、軟・硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、殺菌注射用液剤および殺菌包装散剤の形にできる。
【００４８】
経口投与用に、活性成分は、特に限定されないが、乳糖、デンプン、蔗糖、ブドウ糖、炭酸ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、メチルセルロースなどの非毒性の薬学的に許容されるキャリアーと混合してもよい。さらに必要に応じて、特に限定されないがトウモロコシ、デンプン、メチルセルロース、カンテン、ベントナイト、キサンタンガム、アルギン酸などの崩壊剤、さらに必要に応じて、特に限定されないがゼラチン、アラビアゴム、天然の糖、β−ラクトーズ、トウモロコシ甘味剤、天然ガム、合成ガム、トラガント、アルギン酸ナトリウム、ＣＭＣ、ポリエチレングリコール、ワックスなどの結合剤、更に必要に応じて、特に限定されないがステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、タルクなどの滑沢剤を共に加えてもよい。
【００４９】
散剤に関しては、キャリアーを細かく砕き、細かく砕いた活性成分と混合してもよい。
活性成分は、適切な量の結合性を有するキャリアーと混合し、所望の形と大きさに圧縮し、錠剤を作製する。
散剤および錠剤は好ましくは、本発明の新規組成物である活性成分を約１−９９重量％含有する。適切な固形キャリアーはマグネシウムカルボキシメチルセルロース、低融点ワックスおよびココアバターである。
【００５０】
殺菌液剤には懸濁剤、乳化剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。活性成分は、殺菌水、殺菌有機溶媒、またはそれらの混合液のような薬学的に許容されるキャリアーに溶解、あるいは懸濁される。
活性成分は、またポリエチレングリコール水溶液のような適切な有機溶媒にも溶解することができる。他の組成物は細かく砕いた活性成分をデンプンまたはＣＭＣナトリウム水溶液、あるいは適切なオイルに分散させて作製できる。
【００５１】
剤形は、ヒトあるいは他の哺乳類に投与するに適した、単位量を含む物理的に分離した単位投与剤型でよい。単位投与剤型はカプセル、錠剤あるいは多数のカプセル、錠剤である。「単位量」は、所望の治療効果を、生み出すよう計算された本発明の活性成分の予め決められた賦形剤を含めた量である。単位量における活性成分の量は関与する特定の処置に応じて、約０．１から１０００ｍｇまたはそれ以上に変更、調節してよい。
【００５２】
示された効果のために使用されるときの、本発明の典型的経口用量は、約０．０１から約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１から３０ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは０．５から１０ｍｇ／ｋｇ／日である。非経口投与の場合には、約０．００１から約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１から１ｍｇ／ｋｇ／日の量を投与することが有利であると一般的に証明されている。本発明の化合物は１日単回投与でもよく、１日量を数回に分割して投与してもよい。経皮投与の場合には、勿論投与は継続的に行われる。
【００５３】
本発明の化合物の効果は以下のアッセイおよび薬理試験で確認された。
【００５４】
ＩＫＫ−βキナーゼ阻害アッセイ
（１）ＩＫＫ−βキナーゼタンパクの調製
ヒトＩＫＫ−βのオープンリーディングフレームをコードするｃＤＮＡフラグメントを、刊行物に記載されている配列（Ｗｏｒｏｎｉｃｚ ＪＤら （１９９７） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７８， ８６６−８６９）から設計された対のプライマーを使用して、ＰＣＲにより作成した。鋳型は、Ｅｌｏｎｇａｓｅ（商標名）Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｋｉｔ（ライフテクノロジー）を用い、クイッククローンｃＤＮＡ（クローンテック）から入手した。ＰＣＲで得られたＤＮＡフラグメントをゲル精製し、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔにサブクローニングした。ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中にクローニングされたｃＤＮＡフラグメントを、ｐｃＤＮＡ３．１／Ｈｉｓ Ｃ ＫｐｎＩ／ＮｏｔＩ中に挿入し、それをｐＶＬ１３９３ＳｍａＩ／ＸｂａＩ（ファーミンゲン）に移して、バキュロウイルストランスファーベクターを構築した。次に、このベクターを、リニアーのバキュロウイルス（商標名バキュロゴールド、ファーミンゲン）と共に使用して、Ｓｆ２１細胞（インビトロゲン、サンディエゴ、カルフォルニア）にトランスフェクトした。
【００５５】
得られた組換えバキュロウイルスをＳｆ２１細胞中でクローニングし増幅させ、ＴＮＭ−ＦＨ昆虫細胞培地（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ）中で浮遊培養した（１Ｌ三角 フラスコ、２７℃、１３０ｒｐｍ）。この培地には、１０％ＦＣＳ、５０ｇ／ｍｌゲンタマイシン、０．１％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ）を補充してあった。この増幅した高力価のウイルスを、感染多重度５で、標準の手順（Ｃｒｏｓｓｅｎ Ｒ，Ｇｒｕｅｎｗａｌｄ Ｓ（１９９７） バキュロウイルス発現ベクターシステムインストラクションマニュアル、ファーミンゲン コーポレーション）に従い、Ｓｆ２１細胞に感染させて、４８時間後に回収した。細胞を溶解させ、ヒスチジンと融合させたＩＫＫ−βのキメラタンパク（Ｈｉｓ 標識 ＩＫＫ−β）を調製した。
【００５６】
（２）精製ＧＳＴ−ＩκＢα融合タンパクの調製
ＩＰＴＧ誘導性プロモーターのコントロール下に、ＧＳＴ（グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ）とＩκＢαのアミノ酸残基１から５４との融合タンパク質をコードする塩基配列を含む発現ベクターを構築した。この発現ベクターを大腸菌に導入し、形質転換体を培養し溶解させて、ＧＳＴ−ＩκＢα融合タンパク質を得た。得られたＧＳＴ−ＩκＢα融合タンパク質を、キナーゼアッセイの為に精製し、ビオチン化した。
【００５７】
（３）ＩＫＫ−βキナーゼ活性の測定
ＩＫＫ−βの９６穴フォーマットキナーゼアッセイを、本発明の化合物の阻害活性をテストするのに用いた。まず、５μｌの試験化合物を、２．５％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の存在下、Ｕ字型底９６穴プレート（ファルコン）のそれぞれのウエルに加えた。バックグラウンド（ＢＧ）および全リン酸化（ＴＰ）のコントロールウエルには、５μｌの２．５％ＤＭＳＯを入れた。組換えＩＫＫ−β（最終濃度０．６μｇ／ｍｌ）およびビオチン−ＧＳＴ−ＩκＢα（１−５４）（最終濃度０．２μＭ）を、２ｘキナーゼバッファβ（４０ｍＭ トリス−ＨＣｌ（ｐＨ７．６）、４０ｍＭ ＭｇＣｌ２、４０ｍＭ β−グリセロフォスフェート、４０ｍＭ ｐ−ニトロフェニルフォスフェート、２ｍＭ ＥＤＴＡ、４０ｍＭ クリアチンフォスフェート、２ｍＭ ＤＴＴ、２ｍＭ Ｎａ３ＶＯ４、０．２ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ、および０．８ｍＭフェニルメチルスルホニル フルオライド）２５μｌで希釈し、９６穴プレートに移した。ビオチン−ＧＳＴ−ＩκＢα（１−５４）を、ＩＫＫ−β非存在下で２５μｌの２ｘキナーゼバッファβに入れ、ＢＧウエルに移した。次に、この混合液に、２０μＭの１２．５μＭのＡＴＰ、６２．５μＣｉ／ｍｌ［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ（アマーシャム ファルマシア バイオテク）を加えて、得られた混合液を室温にて２時間インキュベートした。
【００５８】
キナーゼ反応を１５０μｌのターミネーションバッファ（１００ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ、０．２ｍｇＮａＮ３）を加えることによって止めた。１５０μｌのサンプルを、ストレプトアビジンでコートしたホワイトＭＴＰ（Ｓｔｅｆｆｅｎｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｃｈｅ Ａｎａｌｙｓｅｎ ＧｍｂＨ ＃０８１１４Ｅ１４．ＦＷＤ）に移し、ビオチン化基質を捕捉した。１時間のインキュベートの後、ＭＷ−９６プレートウォッシャー（ＢｉｏＴｅｃ）を使用して、０．１％（ｗ／ｖ）ツイーン２０と０．９％ＮａＣｌとを含む３００μｌの洗浄バッファで、ウエルを５回洗浄することによって、結合していない放射能を除去した。結合した放射能は、１７０μｌＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ−ＰＳシンチレーションカクテル（Ｐａｃｋａｒｄ）を加えて、ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターを使用して測定した。
【００５９】
選択性を調べる為のＳｙｋチロシンキナーゼ阻害アッセイ
（１）Ｓｙｋタンパクの調製
ヒトＳｙｋのオープンリーディングフレームをコードするｃＤＮＡフラグメントを、ヒトＢｕｒｋｉｔｔ’ｓ リンパ腫Ｂ細胞系Ｒａｊｉ（アメリカン タイプカルチャー コレクション）の全ＲＮＡから、ＲＴ−ＰＣＲ法を利用してクローニングした。このｃＤＮＡフラグメントを、ｐＡｃＧ２Ｔ（ファーミンゲン、サンディエゴ、カルフォルニア）に挿入して、バキュロウイルス トランスファー ベクターを構築した。次に、このベクターを、リニアーのバキュロウイルス（商標名バキュロゴールド、ファーミンゲン）と共に使用して、Ｓｆ２１細胞（インビトロゲン、サンディエゴ、カルフォルニア）にトランスフェクトした。
【００６０】
得られた組換えバキュロウイルスをＳｆ２１細胞中でクローニングし増幅させた。この増幅した高力価のウイルスをＳｆ２１細胞に感染させて、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）と融合させたＳｙｋキナーゼのキメラタンパクを調製した。
得られたＧＳＴ−Ｓｙｋを、グルタチオンカラム（アマシャム ファルマシア バイオテックＡＢ、アップサラ、スウエーデン）を使用して、製造元の指示に従って、精製した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより、タンパク質の純度が９０％以上であることを確認した。
【００６１】
（２）ペプチドの合成
次に、２つのチロシン残基を含む３０残基のペプチドフラグメント、ＫＩＳＤＦＧＬＳＫＡＬＲＡＤＥＮＹＹＫＡＱＴＨＧＫＷＰＶＫＷをペプチド合成機で合成した。次にこのフラグメントのＮ末端をビオチン化し、ビオチン化活性ループペプチド（ＡＬ）を得た。
【００６２】
（３）Ｓｙｋチロシンキナーゼ活性の測定
全ての試薬は、Ｓｙｋキナーゼアッセイバッファ（５０ｍＭ トリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．１ｍＭ Ｎａ３ＶＯ４、０．１％ＢＳＡ、１ｍＭ ＤＴＴ）で希釈した。まず、３．２μｇＧＳＴ−Ｓｙｋおよび０．５μｇのＡＬを含む混合液（３５μｌ）を、９６穴プレート中の各ウエルに入れた。次に、２．５％ジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）の存在下の試験化合物（５μｌ）をそれぞれのウエルに加えた。この混合液に、３００μＭのＡＴＰ（１０μｌ）を加えて、キナーゼの反応を開始させた。最終的な反応混合液（５０μｌ）は、０．６５ｎＭ ＧＳＴ−Ｓｙｋ、３μＭ ＡＬ、３０μＭ ＡＴＰ、試験化合物、０．２５％ＤＭＳＯおよびＳｙｋキナーゼアッセイバッファからなる。
【００６３】
混合液を室温にて１時間インキュベートし、反応を１２０μｌのターミネーションバッファ（５０ｍＭ トリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、５００ ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％ＢＳＡ）を加えることによって止めた。反応混合液を、ストレプトアビジンでコートしたプレートに移し、室温で３０分間インキュベートし、ビオチン−ＡＬをプレートに結合させた。プレートを、０．０５％ツイーン２０を含むトリスバッファ生理食塩水（ＴＢＳ）（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１３８ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ）で３回洗浄した後、１００μｌの抗体溶液を加え、室温で６０分間インキュベートした。抗体溶液は、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１３８ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ、１％ＢＳＡ、予めアマシャム ファルマシアのキットを使用してユーロピウムでラベルしておいた、６０ｎｇ／ｍｌ抗ホスホチロシンモノクローナル抗体４Ｇ１０（アップステート バイオテクノロジー）からなる。洗浄後、１００μｌのエンハンスメント溶液（アマシャム ファルマシア バイオテック）を加え、次に時間分解蛍光度をマルチラベルカウンターＡＲＶＯ（Ｗａｌｌａｃ Ｏｙ， フィンランド）で、励起３４０ｎｍおよび放出６１５ｎｍで、４００ｍｓｅｃのディレイ および４００ｍｓｅｃのウインドウで測定した。
【００６４】
ＴＮＦ−αに応答してＡ５４９細胞から産生されるＲＡＮＴＥＳの測定
（１）Ａ５４９細胞の調製
Ａ５４９ヒト肺上皮細胞系（ＡＴＣＣ＃ＣＣＬ−８８５）を、１０％ＦＣＳ（ギブコ）、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン、および２ｍＭグルタミン（培養培地）を添加したダルベッコ改良イーグル培地（Ｄ−ＭＥＭ、ニッケン バイオメディカル インステチュート）中で保持した。４万個（４×１０４）の細胞（８０μｌ／ウエル）を９６穴平底組織培養プレート（ファルコン＃３０７２）のそれぞれのウエルに植えた。プレートを２時間放置し、細胞をそれぞれのウエルの底に接着させた。それぞれのウエルに、１０μｌの溶媒（１％ＤＭＳＯ）、１％ＤＭＳＯ中における試験化合物の連続希釈、またはレファレンスとして５ｎＭデキサメサゾン（１％ＤＭＳＯ中）を加えた。混合液（９０μｌ／ウエル）を３７℃にて１時間インキュベートした。１時間後、１μｇ／ｍｌＴＮＦ−α（培地中１０μｌ）を混合液に加え、１００μｌの反応混合液を得た。反応混合液を２４時間培養し、１００ｎｇ／ｍｌＴＮＦ−αで細胞を刺激した。ＴＮＦ−αの刺激なしの溶媒のみの細胞も同様に調製した。
【００６５】
（２）エンザイムイムノアッセイ
次に、各ウエルの上清中に細胞から放出されるＲＡＮＴＥＳの濃度を定量的サンドイッチ エンザイム イムノアッセイ法により決定した。まず、２μｇ／ｍｌマウス抗ヒトＲＡＮＴＥＳモノクローナル抗体（Ｒ＆Ｄシステムズ、＃ｍＡｂ６７８）（ＰＢＳバッファ、ｐＨ７．４，１００μｌ中）を９６穴ＮＵＮＣフルオロプレート（Ｎａｌｇｅ Ｎｕｎｃ，ニューヨーク，ＵＳＡ）（最終２００ｎｇ／ウエル）の各ウエルに入れ、プレートを１晩４℃にて放置し、その抗体でプレートを被覆した。プレートのそれぞれのウエルを、３５０μｌの洗浄バッファ（０．０５％ツイーン２０、０．８５％ ＮａＣｌ、および２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ、ｐＨ７．４）で３回洗浄した。被覆した抗体を安定化させる為、１％ＢＳＡ（シグマ、９９％純度、１００ｇ）、５％ショ糖（ナカライテスク、９９％純度、５００ｇ）、０．０２％アジド（ナカライテスク、１００％純度、５００ｇ）をそれぞれのウエルに入れ（２００μｌ）、プレートを４時間放置した。
【００６６】
次に、上記（１）で調製した細胞培養液の上清５０μｌを、抗体で被覆された９６穴ＮＵＮＣフルオロプレートの各ウエルに入れた。組換えヒトＲＡＮＴＥＳ（ペプロテック、インコーポレーテッド ＃３００−０６）をＲＡＮＴＥＳ産生量を決める標準として使用した（１から１０ｎｇ／ｍｌのリニア レンジ）。ユウロピウムラベルしたマウス抗ヒトＲＡＮＴＥＳモノクローナル抗体（６０ｎｇ／ｍｌＲ＆Ｄシステムズ＃ｍＡｂ２７８）を、１％ＢＳＡおよび０．０５％ツイーン２０を補充したＰＢＳに入れ、それをそれぞれのウエルに入れた（５０μｌ）。反応混合液を、４時間室温にてインキュベートした。洗浄バッファ（０．０５％ツイーン２０、０．８５％ ＮａＣｌ、および２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、３５０μｌ／ウエル）で、セラウォッシャー（Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈ，＃ＭＷ−９６Ｒ）を使用して５回洗浄した後、エンハンスメント溶液（ＤＥＬＦＩＡ，＃１２４４−４０５，１００μｌ／ウエル）をそれぞれのウエルに入れた。このプレートを穏やかな振盪で室温で１０分間インキュベートした。蛍光強度をＤＥＬＦＩＡフルオリメータ（Ｗａｌｌａｃ）を使用して、測定した。励起３４０ｎｍおよび放出６１５ｎｍで測定した。
【００６７】
抗体刺激に応答してＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞から産生されるＩＬ−２の測定
抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体刺激に応答してＪｕｒｋａｔ Ｔ細胞（Ｅ６−１クローン、ＡＴＣＣ＃ＴＩＢ−１５２）から産生されるＩＬ−２産生を測定した。
【００６８】
（１）固定化抗体の調製
最初に、抗ＣＤ３抗体（４００ｎｇ／ウエル ニチレイ、１００μｌダルベッコＰＢＳ中ＮＵ−Ｔ３、４μｇ／ｍｌ）を９６穴プレート（ファルコン＃３０７２）の各ウエルに入れ、プレートを２時間室温にて放置し、その抗体でコートした。プレート中のそれぞれのウエルを、２５０μｌのＰＢＳで３回洗浄した。
【００６９】
（２）Ｊｕｒｋａｔ細胞培養の調製
Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞を、１０％熱不活性化胎児ウシ血清、２ｍＭＬ−グルタミン、１００Ｕ／ｍｌペニシリンＧ、および１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ１６４０培地（培養培地）で培養した。２０万個（２×１０５）の細胞（１９０μｌ／ウエル）を９６穴Ｕ底組織培養プレート（ファルコン＃３０７７）のそれぞれのウエルに植えた。それぞれのウエルに、１０μｌの溶媒（０．２％ＤＭＳＯ）、０．２％ＤＭＳＯ中における試験化合物の連続希釈、またはレファレンスとして２５ｎＭシクロスポリンＡ（０．２％ＤＭＳＯ中）を加えた。混合液（２００μｌ）を３７℃にて１時間、加湿された５％炭酸ガス雰囲気下でインキュベートした。
【００７０】
（３）該細胞の刺激
上記（２）で得られた反応混合液（１００μｌ）を、上記（１）で調製した抗体を固定化した各ウエルに入れた。このウエルに、抗ＣＤ２８抗体（ニチレイ、ＫＯＬＴ−２、細胞培養培地中６μｇ／ｍｌ、５０μｌ／ウエル）および２．５μｇ／ｍｌヤギ抗マウスκ鎖抗体（Ｂｅｔｈｙｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，（Ｃａｔ＃Ａ９０−１１９Ａ）、培養培地中、１０μｇ／ｍｌ、５０μｌ／ウエル）を加えた。それぞれのウエル中の反応混合液を３７℃で２４時間インキュベートし、固定化した抗ＣＤ３抗体（４００ｎｇ／ウエル）および抗ＣＤ２８抗体（１．５μｇ／ｍｌ）で細胞を刺激し、次に細胞上のレセプターを抗マウスκ鎖抗体（２．５μｇ／ｍｌ）で架橋した。
【００７１】
（４）ＩＬ−２産生の測定
次に反応混合液の上清を回収した。上清中のＩＬ−２濃度をＤｕｏＳｅｔ（商標名） ＥＬＩＳＡディベロップメント キット（Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｔｅｃｈｎｅ，ミネアポリス、ＵＳＡ）で、製造元の指示に従って決定した。まず、２μｇ／ｍｌのマウス抗ヒトＩＬ−２抗体（ＰＢＳバッファ中、１００μｌ）を、９６穴プレート（ＮＵＮＣ， Ｍａｘｉｓｏｒｐ（商標名））の各ウエルに入れ、そしてプレートを４℃にて１晩放置し、その抗体でコートした。プレートの各ウエルを、３５０μｌの洗浄バッファ（ＰＢＳ，０．０５％ツイーン２０（ナカライテック）を含む）で、セラウォッシャー（Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈ，＃ＭＷ−９６Ｒ）を使用して５回洗浄した。それぞれのウエルに、１％ＢＳＡ（シグマ）を含むＰＢＳ、０．０５％ツイーン２０（希釈バッファ）２５０μｌを加えた。室温での２時間のインキュベーションの後、バッファを捨て、５０μｌの培養培地を加えた。次に上記（３）で調製した刺激を受けた細胞培養液の上清５０μｌを、マウス抗ヒトＩＬ−２抗体で被覆した９６穴プレートの各ウエルに入れた。
【００７２】
組換えヒトＩＬ−２（Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｔｅｃｈｎｅ）をＩＬ−２産生量を定量する標準として使用した（２００から５，４００ｐｇ／ｍｌのリニア　レンジ）。反応混合液を室温にて１時間インキュベートした。５回の洗浄の後、１００μｌのビオチン化ラビット抗ヒトＩＬ−２抗体（Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｔｅｃｈｎｅ，１．２５μ／ｍｌ希釈バッファ中）をそれぞれのウエルに入れ、１時間室温でインキュベートした。５回の洗浄の後、１００μｌのストレプトアビジン結合ホースラディッシュ ペルオキシダーゼ（Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｔｅｃｈｎｅ，希釈バッファ液中１／１０００）をそれぞれのウエルに入れた。２０分後、プレートのそれぞれのウエルを洗浄バッファ（３５０μｌ／ウエル）で５回洗浄した。基質とＨ２Ｏ２（ＴＭＢＺペルオキシダーゼ検出キット、ＳＵＭＩＬＯＮ＃ＭＬ−１１２０Ｔ）を混合液に加え、そして混合液を室温で放置した。反応は、１０分後に２ＮのＨ２ＳＯ４を加えることにより停止させた。４５０ｎｍの光学濃度を、マイクロプレート リーダー（ラボシステムズ、マルチスキャンマルチソフト）を使用して測定した。各サンプルのＩＬ−２産生の定量は、それぞれのサンプルと標準曲線との光学濃度を比較することで行った。
【００７３】
マウスＬＰＳ−誘導ＴＮＦ−αの産生
８週齢雌性ＢＡＬＢ／ｃマウスを、コントロール グループと処置グループとの２つのグループに分けた。０．９％の生理食塩中に２００μｇ／マウスのＬＰＳを含む溶液をコントロールのマウスに腹腔内投与した。処置グループのマウスでは、ＬＰＳ投与の３０分前に、本発明の化合物を腹腔内投与した。ペントバルビタール（８０ｍｇ／ｋｇ，腹腔内）で麻酔下、ＬＰＳ投与の９０分後に処置グループのマウスおよびコントロール グループのマウスの下大静脈から採血し、２％ＥＤＴＡ溶液を含む９６穴プレートに回収した。血漿を、４℃１０分間１８００ｒｐｍの遠心で分離し、次に１％ＢＳＡを含むリン酸バッファ生理食塩水（ｐＨ７．４）で４倍に希釈した。サンプル中のＴＮＦ−α濃度は、ＥＬＩＳＡキット（ファーミンゲン、サンディエゴ、 カリフォルニア）を用いて定量した。
【００７４】
それぞれのグループからの５匹のマウスのＴＮＦ−αの平均値を求め、ＴＮＦ−αの抑制率を計算した。処置したマウスでは、コントロールマウスと比較して、ＴＮＦ−αレベルの有為な減少が見られた。この結果から、本発明の化合物は、ＬＰＳ誘導サイトカイン活性を抑制し得ることが示される。
インビトロの試験結果および細胞アッセイ（Ａ５４９およびＪｕｒｋａｔ）の結果を以下の実施例および表に示す。データは、固相合成で得られ約４０％から９０％の純度の化合物に対応している。実際的な理由から、化合物を以下の４つの活性のクラスに分類する。
インビトロＩＣ５０＝Ａ ０．５μＭ＜Ｂ ２μＭ＜Ｃ １０μＭ＜Ｄ
細胞ＩＣ５０＝Ａ １μＭ＜Ｂ １０μＭ＜Ｃ
【００７５】
本発明の化合物はまた、優れた選択性を示し、そして、インビボでのアッセイで強い活性を示す。
【００７６】
【実施例】
実施例
本発明は以下に実施例の形で詳細に説明するが、これらは本発明の範囲を定義するものとして、解釈されるべきでない。
下記の実施例において、全ての量的値は、特に断らない限り、重量％である。１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、ＣＤＣｌ３中いずれかのＢｒｕｋｅｒ ＤＲＸ−３００（３００ＭＨｚ ｆｏｒ １Ｈ）スペクトロメーターを使用して記録した。ケミカルシフトは内部標準を０ ｐｐｍとして、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）でもってｐｐｍで報告した。カップリングコンスタント（Ｊ）はヘルツで示され、記号ｓ， ｄ， ｔ， ｑ， ｍ および ｂｒ は、シングレット、ダブレット、トリプレット、クオターレット、マルチプレトおよびブロードをそれぞれ意味する。Ｍａｓｓの測定はＭＡＴ９５（Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＭＡＴ）で行った。
【００７７】
出発物質の製法
出発物質１Ａ：２−ベンジルオキシアセトフェノン
【化１６】
2004514712.tif 000017
アセトン（１．００Ｌ）中の２’−ヒドロキシアセトフェノン（６８．１ｇ、０．５００ｍｏｌ）、ベンジルブロマイド（６５．４ｍｌ、９４．１ｇ、０．５５０ｍｏｌ）および炭酸カリウム（１０３ｇ、０．７５０ｍｏｌ）の混合物を１晩撹拌下加熱還流した。生じた混合物を減圧下濃縮し、残渣を得た。得られた残渣を酢酸エチルと水の混合液に溶解し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を食塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮し、粗生成物を得た。これを減圧下蒸留精製して、無色油状物の出発物質１Ａ（１００ｇ、収率８８％）を得た。
【００７８】
出発物質１Ａ’：１−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝エタノン
【化１７】
2004514712.tif 000018
アセトン（１０００ｍＬ）中の１−（２，６−ジヒドロフェニル）エタノン（５０．０ｇ、３２８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、炭酸カリウム（２２７ｇ、１６４３ｍｍｏｌ）と（ブロモメチル）シクロプロパン（３５．１ｍＬ、３６１ｍｍｏｌ）を加えた。混液を５０℃で２日間撹拌した。反応混液をセライトで濾過、濾液を減圧下濃縮し、残渣を水で希釈した。ついで、これを酢酸エチルで抽出した。分離した有機層を水、食塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下濃縮し、残渣をヘキサンに懸濁した。この懸濁液を８０℃で３０分間撹拌し、溶液を濾過し、濾液を室温に放置し、冷却した。生じた白色固体を濾取し、ヘキサンで洗浄し、減圧下乾燥して、１−｛２−［（シクロプロピルメチル）オキシ］−６−ヒドロキシフェニル｝エタノンを淡黄色固体（５６．３ｇ、収率８３％）を得た。
【００７９】
アセトン（１０００ｍＬ）中の１−｛２−［（シクロプロピルメチル）オキシ］−６−ヒドロキシフェニル｝エタノン（５６．３ｇ、２７２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、炭酸カリウム（１８８ｇ、１３６４ｍｍｏｌ）、４−メトキシベンジルクロライド（４０．９ｍＬ、３００ｍｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムアイオダイド（２０．２ｇ、５４．６ｍｍｏｌ）を加えた。混液を１晩還流下撹拌した。反応混液を室温に放置冷却し、セライトで濾過、濾液を減圧下濃縮し、残渣を水で希釈した。これを酢酸エチルで抽出した。分離した有機層を食塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下濃縮した。生じた白色固体をエタノールから再結晶、これを濾取し、エタノールで洗浄し、減圧下乾燥して、出発化合物１Ａ’を白色固体として得た（７９．２ｇ、収率８９％）。
【００８０】
出発物質１Ｂ：２’−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシアセトフェノン
【化１８】
2004514712.tif 000019
２’−ヒドロキシアセトフェノン（１０．００ｇ、７３．４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５０ｍｌ）溶液にイミダゾール（６．００ｇ、８８．１４ｍｍｏｌ）とｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（１２．１８ｇ、８０．７９ｍｍｏｌ）を加えた。混液を室温で６０時間撹拌し、ついでジエチルエーテルで希釈した。生じた有機相を水、硫酸水素カリウム水溶液、ついで食塩水で洗浄した。ついで洗浄した有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、９：１−４：１）で精製して、無色油状物の出発物質１Ｂ（１９．８３ｇ、収率９２％）を得た。
【００８１】
出発物質１Ｃ：３−ベンジルオキシピコリノニトリル
【化１９】
2004514712.tif 000020
Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ３１６ （１９８３） およびＪ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ４８， １３７５ （１９８３） に従って製造した３−ヒドロキシピコリノニトリル（３．００ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５．４０ｇ、３９．１ｍｍｏｌ）およびベンジルブロマイド（５．１０ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）のアセトン懸濁液（１５０ｍｌ）を室温で２０時間撹拌した。反応混液をろ過し、ろ液を蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：３から１：２）で精製し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４から再結晶し、無色粉末の出発物質１Ｃ（４．３５４ｇ、収率８３％）を得た。
【００８２】
出発物質１Ｄ：２−アセチル−３−ベンジルオキシピリジン
【化２０】
2004514712.tif 000021
３−ベンジルオキシピコリノニトリル（２．５０ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１００ｍｌ）の冷却（０℃）溶液に、０．９２Ｍ臭化メチルマグネシウムのテトラヒドロフラン（１５０ｍｌ、１３８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で３０分間、ついで室温で４時間撹拌した。この反応混液を水（２Ｌ）に注ぎ、１０％硫酸（５００ｍｌ）で酸性にした。３０分間撹拌後、反応混液を炭酸水素ナトリウム（１００ｇ）にゆっくり加え、酢酸エチルで抽出した。生じた有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：３）で精製し、無色油状の出発物質１Ｄ（２．４９ｇ、収率９２％）を得た。
【００８３】
出発物質２：２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）−シリル］オキシ｝フェニル）ニコチノニトリル
【化２１】
2004514712.tif 000022
２’−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシアセトフェノン（出発物質１Ｂ、２０．０ｇ、７９．９ｍｍｏｌ）、３−ニトロベンズアルデヒド（１２．１ｇ、７９．９ｍｍｏｌ）、マロノニトリル（５．３ｇ、７９．９ｍｍｏｌ）、酢酸アンモニア（９．２ｇ、１１９．８ｍｍｏｌ）およびトルエン（２５ｍｌ）の混合物を３時間撹拌し、還流した。反応混液を酢酸エチルと水で抽出した。分離した有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝９：１−４：１）で精製し、白色固体の２−アミノ−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−４−（３−ニトロフェニル）ニコチノニトリル（６．５ｇ、１８％）を得た。
２−アミノ−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−４−（３−ニトロフェニル）ニコチノニトリル（３．２ｇ、７．２ｍｍｏｌ）、１０％Ｐｄ−Ｃ（０．２５ｇ）および酢酸エチル（１Ｌ）の混合物を１２時間室温で、水素雰囲気下（２．５気圧）撹拌した。反応混液をセライトパッドでろ過し、ろ液を減圧下濃縮し、出発物質２（２．６ｇ、収率８７％）を得、さらに精製することなく次工程に使用した。
【００８４】
出発物質３：２−アミノ−４−［３−アミノ−４−（１−ピロリジニル）フェニル）−６−（２−ベンジルオキシフェニル）ニコチノニトリル
【化２２】
2004514712.tif 000023
２−ベンジルオキシアセトフェノン（５．００ｇ、２２．１０ｍｍｏｌ）、４’−クロロ−３’−ニトロベンズアルデヒド（８．２０ｇ、４４．１９ｍｍｏｌ）、マロノニトリル（２．９２ｇ、４４．１９ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニア（８．５２ｇ、１１０．４８ｍｍｏｌ）をトルエン（２５ｍｌ）に混合し、これを３時間１３０℃で撹拌した。室温に冷却し、混液を酢酸エチルとＴＨＦで希釈した。有機層を水で二度洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をエタノールに懸濁した。沈殿をろ取し、酢酸エチルで洗浄し、減圧で乾燥し、白色固体の２−アミノ−６−（２−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−クロロ−３−ニトロフェニル）ニコチノニトリル（６．４０ｇ、収率６３％）を得た。
【００８５】
２−アミノ−６−（２−ベンジルオキシフェニル）−４−（４−クロロ−３−ニトロフェニル）ニコチノニトリル（１．０００ｇ、２．１８９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）の冷却溶液（０℃）にピロリジン（０．７７８ｇ、１０．９４３ｍｍｏｌ）を加えた。混液を室温で２時間撹拌し、ついで６０℃で２時間撹拌した。反応混液を酢酸エチルと水で分配した。分離した有機層を食塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をエタノールに懸濁し、沈殿をろ取し、酢酸エチルで洗浄し、減圧で乾燥して、黄色固体の２−アミノ−６−（２−ベンジルオキシフェニル）−４−［３−ニトロ−４−（１−ピロリジニル）フェニル］ニコチノニトリル（０．９９０ｇ、収率９２％）を得た。
２−アミノ−６−（２−ベンジルオキシフェニル）−４−［３−ニトロ−４−（１−ピロリジニル）フェニル］ニコチノニトリル（１．０００ｇ、２．０３４ｍｍｏｌ）と鉄紛（３．０００ｇ）のエタノール（１８０ｍｌ）懸濁液に水（１０ｍｌ）、ついで塩化アンモニア（１．０００ｇ）を加えた。混液を３時間撹拌、還流した。混液をセライトパッドでろ過し、ろ液を減圧下濃縮し、残渣をエタノールに懸濁した。沈殿物をろ取し、酢酸エチルで洗浄し、減圧下乾燥して、白色固体の出発物質３（０．７００ｇ、収率７５％）を得た。
【００８６】
出発物質４：２−アミノ−４−［３−アミノ−４−（ジメチルアミノ）フェニル］−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル
【化２３】
2004514712.tif 000024
２−（４−メトキシベンジルオキシ）アセトフェノン（５．６６３ｇ、２２．０９７ｍｍｏｌ）、４’−クロロ−３’−ニトロベンズアルデヒド（８．２０１ｇ、４４．１９３ｍｍｏｌ）、マロノニトリル（２．９２０ｇ、４４．１９３ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニア（８．５１６ｇ、１１０．４８６ｍｍｏｌ）をトルエン（１５ｍｌ）に混合し、これを４時間１３０℃で撹拌した。反応混液を酢酸エチルと水で分配した。分離した有機層を食塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をエタノールに懸濁した。生じた固体をろ取し、エタノール、酢酸エチル、ジエチルエーテルで洗浄し、減圧で乾燥して、白色固体の２−アミノ−４−（４−クロロ−３−ニトロフェニル）−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル（５．５６０ｇ、収率５２％）を得た。
【００８７】
２−アミノ−４−（４−クロロ−３−ニトロフェニル）−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル（０．８５０ｇ、１．７４６ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン（１．２ｍｌ）を含有するＤＭＦ（５ｍｌ）溶液を撹拌し、これにジメチルアミン塩酸塩（０．９９６ｇ、１２．２２０ｍｍｏｌ）を加えた。これを７０℃で３時間撹拌した。反応を水で停止せしめ、酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をエタノールに懸濁した。生じた固体をろ取し、エタノールで洗浄し、減圧で乾燥して、黄色油状の２−アミノ−４−［４−（ジメチルアミノ）−３−ニトロフェニル］−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル（０．８２０ｇ、収率９５％）を得た。
２−アミノ−４−［４−（ジメチルアミノ）−３−ニトロフェニル］−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル（０．８１５ｇ、１．６５４ｍｍｏｌ）のエタノール（１５０ｍｌ）懸濁液を撹拌し、これに鉄紛（５．０００ｇ）、水（２０ｍｌ）および塩化アンモニア（１．０００ｇ）を加えた。混液を１２時間撹拌、還流した。反応混液を室温に冷却し、セライトパッドでろ過した。ろ液を減圧下濃縮し、残渣をエタノールに懸濁した。生じた固体をろ取し、エタノールと水で洗浄し、減圧下乾燥して、黄色固体の出発物質４（０．５００ｇ、収率６５％）を得た。
【００８８】
出発物質５：３−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシフェニル｝−４−ピリジニル）安息香酸
【化２４】
2004514712.tif 000025
２−｛（４−メトキシベンジル）オキシ｝アセトフェノン（０．２６ｇ、１．００ｍｍｏｌ）、メチル３−ホルムベンゾエイト（０．１６ｇ、１．００ｍｍｏｌ）、マロノニトリル（０．０７ｇ、１．００ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニア（０．２３ｇ、３．００ｍｍｏｌ）をキシレン（１０ｍｌ）に混合し、これを１２０℃（浴温）で１晩加熱した。生じた混液を減圧下濃縮し、残渣を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。分離した有機層を食塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝７０：３０）で精製し、２−アミノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−（３−メトキシカルボニルフェニル）ニコチノニトリル（０．２００ｇ、４３％）を得た。
【００８９】
２−アミノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−（３−メトキシカルボニルフェニル）ニコチノニトリル（０．２０ｇ、４３ｍｍｏｌ）、４Ｎ水酸化ナトリウム溶液（１．０ｍｌ）およびＴＨＦ（５ｍｌ）の混合物を室温で１晩撹拌した。反応混液を水に注ぎ、酢酸エチルで二回抽出した。分離した水層に酸性になるまで、１Ｎ　ＫＨＳＯ４溶液を加えた。生じた沈殿をろ取し、減圧下乾燥して、出発物質５（０．１６ｇ、収率８１％）を灰色粉末として得た。
【００９０】
出発物質６：ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチネイト
【化２５】
2004514712.tif 000026
２’−ベンジルオキシアセトフェノン（３．００ｇ、１３．２５ｍｍｏｌ）、３’−ニトロベンズアルデヒド（２．００ｇ、１３．２５ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルシアノアセテイト（１．８７ｇ、１３．２５ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニア（３．０７ｇ、３９．７７ｍｍｏｌ）をｐ−キシレン（１０ｍｌ）に混合し、これを１２０℃で２時間撹拌した。室温に冷却し、反応混液を酢酸エチルと水で分配した。分離した有機層を食塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１−２：１）で精製し、黄色油状のｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−６−［２−（ベンジルオキシ）フェニル］−４−（３−ニトロフェニル）ニコチネイト（２．５１ｇ、３８％）を得た。
【００９１】
ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−６−［２−（ベンジルオキシ）フェニル］−４−（３−ニトロフェニル）ニコチネイト（２．５０ｇ、５．０２ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ−Ｃ（０．２０ｇ）を酢酸エチル（２０ｍｌ）に混合し、これを５時間水素雰囲気下（２気圧）撹拌した。混合物をセライトパッドでろ過し、Ｐｄ−Ｃを除去し、酢酸エチルで洗浄し、ろ液を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１−３：２）で精製し、黄色油状の出発物質６（１．０５ｇ、収率５６％）を得た。
【００９２】
実施例１−１
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボキサミド
【化２６】
2004514712.tif 000027
ピリジン（０．２０ｍｌ、２．４２４ｍｍｏｌ）、２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）ニコチノニトリル（出発物質２： １．０１０ｇ、２．４２４ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１０ｍｌ）およびＴＨＦ（２ｍｌ）の冷却（０℃）混液に５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボニルクロライド（０．３６０ｇ、２．４２４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（４ｍｌ）溶液を滴下した。混液を２時間撹拌し、室温で放置し、加温し、１時間撹拌し、そして酢酸エチルと水で抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝７：３−５：５）で精製し、白色固体のＮ−｛３−［２−アミノ−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−３−シアノ−４−ピリジニル］フェニル｝−５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボキサミド（０．９８２ｇ、収率７７％）を得た。
【００９３】
Ｎ−｛３−［２−アミノ−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−３−シアノ−４−ピリジニル］フェニル｝−５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボキサミド（０．４００ｇ、０．７５７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）冷却（０℃）溶液に、ｎ−テトラブチルアンモニウムフルオライドのＴＨＦ溶液（１Ｍ、２ｍｌ）を滴下した。３０分撹拌後、水（５ｍｌ）を加えて反応を停止させた。生じた沈殿をろ取し、水、エタノールで洗浄し、減圧で乾燥して、Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボキサミド（０．２９３ｇ、収率９３％）を白色固体として得た。
分子量：４１４．４２４
マススペクトル：４１５
融点：１５５℃（分解）
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｂ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：２．２３−２．３８（２Ｈ，ｍ），２．５５−２．５９（２Ｈ，ｍ），５．０８−５．１２（１Ｈ，ｍ），６．８７−６．９３（２Ｈ，ｍ），７．３２−７．４７（４Ｈ，ｍ），７．５０−７．５６（２Ｈ，ｍ）、７．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．９１（１Ｈ，ｓ），８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），１０．４７（１Ｈ，ｓ）．
【００９４】
実施例１−２
ナトリウム　５−（｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト
【化２７】
2004514712.tif 000028
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボキサミド（０．２５０ｇ、０．６０３ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）懸濁液に２Ｎ　ＮａＯＨ溶液（０．３ｍｌ）を滴下した。１０分間撹拌後、不溶物をろ去し、ろ液を減圧下濃縮し、残渣をメタノールとエチルエーテルから結晶化し、生じた固体をアルゴン雰囲気下ろ取し、エチルエーテルで洗浄し、減圧下乾燥して、淡黄色固体のナトリウム　５−（｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト（０．１６５ｇ、収率６０％）を得た。
分子量：４５４．４２１
マススペクトル：４３３
融点：１９９℃（分解）
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｃ
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： １．７２ − １．９８ （２Ｈ， ｍ）， ２．１８ − ２．２５ （２Ｈ， ｍ）， ４．０１ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ ３．２， ７．５ Ｈｚ）， ６．６０ − ６．８５ （２Ｈ， ｍ）， ７．０９ − ７．３０ （３Ｈ， ｍ）， ７．３２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ７．４６ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ７．６７ （１Ｈ， ｂｒ）， ７．９３ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ）， ８．０１ − ８．０５ （２Ｈ， ｍ）， ９．９１ （１Ｈ， ｓ）， １０．３８ （１Ｈ， ｂｒｓ）．
【００９５】
実施例１−０３〜１−２３
上記実施例１−０１、あるいは実施例１−０２に記載の方法に準じて、表１に示す実施例１−０３〜１−２３の化合物を合成した。
【表１−１】
表１
2004514712.tif 000029
【表１−２】
2004514712.tif 000030
【表１−３】
2004514712.tif 000031
【表１−４】
2004514712.tif 000032
【表１−５】
2004514712.tif 000033
【００９６】
実施例２−１
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド塩酸塩
【化２８】
2004514712.tif 000034
３−（１−ピペリジニル）プロピオン酸（０．６７６ｇ、３．６０１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン冷却（０℃）溶液にシュウ酸クロライド（０．４７１ｍｌ、５．４０１ｍｍｏｌ）を加え、１２時間室温で撹拌した。混合物を減圧下濃縮した。残渣を２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）ニコチノニトリル（出発物質２、１．５００ｇ、３．６０１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３ｍｌ）溶液に加え、生じた混液を１時間０℃で撹拌した。反応混液を酢酸エチルと水で抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製し、白色固体のＮ−｛３−［２−アミノ−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−３−シアノ−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（ピペリジニル）プロパンアミド（０．８６０ｇ、収率４５％）を得た。
【００９７】
Ｎ−｛３−［２−アミノ−６−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−３−シアノ−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド（０．１５０ｇ、０．２７０ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（５ｍｌ）溶液を撹拌下、４Ｎ塩酸のジオキサン溶液（２ｍｌ）を加えた。混合物を１２時間室温で撹拌し、生じた沈殿をろ取し、エタノールで洗浄し、減圧下乾燥して、Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド塩酸塩（０．０１１ｇ、収率９％）を得た。
分子量：４７７．９９８
マススペクトル：４４２
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｂ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： １．３８ − １．５０ （１Ｈ， ｍ）， １．７１ − １．８４ （５Ｈ， ｍ）， ２．７６ − ３．０４ （４Ｈ， ｍ）， ３．３５ − ３．５１ （４Ｈ， ｍ）， ６．９０ − ６．９８ （２Ｈ， ｍ）， ７．３８ − ７．４１ （３Ｈ， ｍ）， ７．５４ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ７．８３ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ）， ７．９５ （１Ｈ， ｓ）， ８．０６ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．３， ８．２ Ｈｚ）， １０．４２ （１Ｈ， ｂｒｓ）， １０．６４ （１Ｈ， ｂｒｓ）．
【００９８】
実施例２−０２〜２−１９
上記実施例２−０１に記載の方法に準じて、表２に示す実施例２−０２〜２−１９の化合物を合成した。
【表２−１】
表２
2004514712.tif 000035
【表２−２】
2004514712.tif 000036
【表２−３】
2004514712.tif 000037
【表２−４】
2004514712.tif 000038
【００９９】
実施例３−１
Ｎ−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（１−ピロリジニル）フェニル］−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド 塩酸塩
【化２９】
2004514712.tif 000039
２−アミノ−４−［３−アミノ−４−（１−ピロリジニル）フェニル］−６−［２−（ベンジルオキシフェニル）］ニコチノニトリル（出発物質３、０．１６６ｇ、０．３６０ｍｍｏｌ）のピリジン（３ｍｌ）溶液を撹拌し、これに３−（１−ピペリジニル）プロパノイルクロライド 塩酸塩（０．１５３ｇ、０．７１９ｍｍｏｌ）を室温で加え、３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルと水で抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルとエタノールに懸濁し、沈殿をろ取し、エタノールで洗浄し、減圧で乾燥して、白色固体のＮ−［５−［２−アミノ−６−（２−ベンジルオキシフェニル）−３−シアノ−４−ピリジニル］−２−（１−ピロリジニル）フェニル］−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド（０．０７０ｇ、収率３２％）を得た。
【０１００】
Ｎ−［５−［２−アミノ−６−（２−ベンジルオキシフェニル）−３−シアノ−４−ピリジニル］−２−（１−ピロリジニル）フェニル］−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド（０．１４０ｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）、１０％Ｐｄ−Ｃ（０．１５０ｇ）、酢酸エチルおよび酢酸（２．０００ｍｌ）の混合物を１２時間水素雰囲気下室温で撹拌した。反応混合物をセライトパッドでろ過し、ろ液を減圧下濃縮し、残渣をＴＨＦ（３ｍｌ）に溶解し、４Ｎ塩酸の１，４−ジオキサン（０．５ｍｌ）溶液を加えた。生じた黄色固体をろ取し、ＴＨＦで洗浄し、減圧で乾燥して、Ｎ−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（１−ピロリジニル）フェニル］−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド 塩酸塩（０．１１０ｇ、収率８６％）を得た。
分子量：５４７．１０５
マススペクトル：５１１
融点：１５２℃
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｂ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： １．３５ − １．４０ （１Ｈ， ｍ）， １．６７ − １．８０ （６Ｈ， ｍ）， １．９２ （４Ｈ， ｓ）， ２．８９ − ２．９８ （４Ｈ， ｍ）， ３．２９ − ３．５７ （８Ｈ， ｍ）， ３．５８ − ３．６０ （１Ｈ， ｍ）， ６．８７ − ６．９５ （２Ｈ， ｍ）， ７．０２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ７．３０ − ７．３７ （３Ｈ， ｍ）， ７．５３ − ７．５６ （２Ｈ， ｍ）， ７．９８ （２Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ）， ９．８５ （１Ｈ， ｓ）， １０．４５ （１Ｈ， ｂｒｓ）．
【０１０１】
実施例３−０２〜３−１７
上記実施例３−０１に記載の方法に準じて、表３に示す実施例３−０２〜３−１７の化合物を合成した。
【表３−１】
表３
2004514712.tif 000040
【表３−２】
2004514712.tif 000041
【表３−３】
2004514712.tif 000042
【表３−４】
2004514712.tif 000043
【０１０２】
実施例４−１
Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシナミド 塩酸塩
【化３０】
2004514712.tif 000044
２−アミノ−４−［３−アミノ−４−（ジメチルアミノ）フェニル］−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル（出発物質４、０．５００ｇ、１．７２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍｌ）冷却溶液（０℃）を撹拌し、これに、アルゴン雰囲気下クロロアセチルクロライド（０．１２１ｇ、１．０７４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌した。ついで酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で分配した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルとエタノールに懸濁し、生じた固体をろ取し、エタノールで洗浄し、減圧で乾燥して、黄色固体のＮ−［５−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−２−クロロアセタミド（０．４１０ｇ、収率７０％）を得た。
Ｎ−［５−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−２−クロロアセタミド（０．４００ｇ、０．７３８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液を撹拌下アミノメチルシクロプロパン（０．１９２ｍｌ、２．２１４ｍｍｏｌ）を加えた。混液を２時間６０℃で撹拌した。室温に冷却後、混液を酢酸エチルと水で抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール＝１００：２、ヘキサン：酢酸エチル＝１：２−１：３−１：５， ２回）で精製し、黄色油状のＮ１−［５−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシナミド（０．１３０ｇ、収率３０％）を得た。
【０１０３】
Ｎ１−［５−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシナミド（０．１３０ｇ、０．４４８ｍｍｏｌ）のアニソール（１ｍｌ）と水（１ｍｌ）の懸濁液にトリフルオロ酢酸（５ｍｌ）を加えた。混液を２０時間室温で撹拌した。反応混液をトルエンで希釈し、減圧下濃縮した。残渣をヘキサンに懸濁し、沈殿をろ取、得られた固体をＴＨＦに溶解し、これに４Ｎ塩酸の１，４−ジオキサン溶液を加えた。生じた固体をろ取し、ＴＨＦおよび１，４−ジオキサンで洗浄し、減圧下乾燥して、Ｎ１−［５−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−（ジメチルアミノ）フェニル］−Ｎ２−（シクロプロピルメチル）グリシナミド 塩酸塩（０．０８５ｇ、収率７７％）を黄色固体として得た。
分子量：４９３．０１３
マススペクトル：４５７
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｂ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： ０．３５ − ０．４０ （２Ｈ， ｍ）， ０．５７ − ０．６３ （２Ｈ， ｍ）， １．０５ − １．０８ （１Ｈ， ｍ）， ２．８０ （６Ｈ， ｓ）， ２．８７ − ２．９１ （２Ｈ， ｍ）， ４．６６ − ４．６８ （２Ｈ， ｍ）， ６．８７ − ６．９４ （２Ｈ， ｍ）， ７．３３ − ７．４０ （４Ｈ， ｍ）， ７．５２ − ７．５５ （１Ｈ， ｍ）， ７．９８ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ）， ８．０９ （１Ｈ， ｓ）， ９．１２ （１Ｈ， ｂｒｓ）， １０．０７ （１Ｈ， ｂｒｓ）．
【０１０４】
実施例４−０２〜４−３９
上記実施例４−０１に記載の方法に準じて、表４に示す実施例４−０２〜４−３９の化合物を合成した。
【表４−１】
表４
2004514712.tif 000045
【表４−２】
2004514712.tif 000046
【表４−３】
2004514712.tif 000047
【表４−４】
2004514712.tif 000048
【表４−５】
2004514712.tif 000049
【表４−６】
2004514712.tif 000050
【表４−７】
2004514712.tif 000051
【表４−８】
2004514712.tif 000052
【０１０５】
実施例５−１
ナトリウム３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］ベンゾエイト
【化３１】
2004514712.tif 000053
３−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）安息香酸（出発物質５、 ０．１６ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（３．０ｍｌ）、アニソール（０．５０ｍｌ）と水（０．５０ｍｌ）の混合液を１晩室温で撹拌した。反応混液をトルエンで希釈、減圧下濃縮した。残渣をＴＨＦに溶解し、ヘキサンで結晶化した。生じた沈殿をろ取し、ヘキサンで洗浄し、減圧下乾燥して、２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−ヒドロキシカルボニルフェニル）ニコチノニトリル（０．１２ｇ、収率７４％）を得た。
２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−ヒドロキシカルボニルフェニル）ニコチノニトリル（０．０２ｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）を４Ｎ　ＮａＯＨ溶液（２ｍｌ）に溶かし、生じた溶液をＨＰＬＣ（ＯＤＳ逆相　カラム、１０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）で精製して淡黄色粉末のナトリウム３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］ベンゾエイト（０．０１５ｇ、収率９５％）を得た。
分子量：３５３．３１６
マススペクトル：３３２
融点：＞２７０℃
インビトロ活性度：Ｃ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｃ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： ６．８５ − ６．９３ （２Ｈ， ｍ）， ７．３１ − ７．５６ （５Ｈ， ｍ）， ７．５８ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ３．０ Ｈｚ）， ７．９９ − ８．０６ （２Ｈ， ｍ）， ８．１０ （１Ｈ， ｓ）， １３．４０ （１Ｈ， ｂｒ ｓ）．
【０１０６】
実施例５−０２〜５−０５
上記実施例５−０１に記載の方法に準じて、表５に示す実施例５−０２〜５−０５の化合物を合成した。
【表５】
表５
2004514712.tif 000054
【０１０７】
実施例６−１
３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−Ｎ−［２−（ピペリジニル）エチル］ベンズアミド　トリフルオロ酢酸塩
【化３２】
2004514712.tif 000055
３−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）安息香酸（出発物質５、１．３５ｇ、３．００ｍｍｏｌ）、Ｎ−（２−アミノエチル）ピペリジン（０．４２０ｇ、３．３０ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．４９０ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）の冷却（０℃）混合物に１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド 塩酸塩（０．６９ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）を撹拌下加えた。混合物を放置し、室温まで加温し、１晩撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解し、酢酸エチルと水で分配した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた固体をエチルエーテルで砕き、減圧下乾燥して、２−（１−ピペリジニル）エチル　３−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル］ベンゾエイト（０．９８ｇ、収率５８％）を得た。
２−（１−ピペリジニル）エチル　３−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）ベンゾエイト（０．１４ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（３．０ｍｌ）、アニソール（０．５０ｍｌ）と水（０．５０ｍｌ）の混合液を１晩室温で撹拌した。反応混液をトルエンで希釈し、減圧下濃縮した。残渣をＨＰＬＣ（ＯＤＳ逆相カラム、１０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）で精製して淡黄色固体の３−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−Ｎ−［２−（１−ピペリジニル）エチル］ベンズアミド　トリフルオロ酢酸塩（０．０６１ｇ、収率４４％）を得た。
分子量：５５５．５６２
マススペクトル：４４２
融点：１３１℃（分解）
インビトロ活性度：Ｃ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｂ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： １．３６ − １．８６ （６Ｈ， ｍ）， ２．９５ （２Ｈ， ｑ， Ｊ ＝ １０．５ Ｈｚ）， ３．２６ − ３．２８ （２Ｈ， ｍ）， ３．５６ （２Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ １２．４ Ｈｚ）， ３．６６ （２Ｈ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ）， ６．８８ − ６．９５ （２Ｈ， ｍ）， ７．０１ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．９１ Ｈｚ）， ７．４５ （１Ｈ， ｓ）， ７．５３ （２Ｈ， ｓ）， ７．７０ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ７．８８ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．５４ Ｈｚ）， ８．０５ （２Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ）， ８．１２ （１Ｈ， ｓ）， ８．８４ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ）， ９．０２ （１Ｈ， ｂｒ＿ｓ）， １３．３１ （１Ｈ， ｓ）．
【０１０８】
実施例６−０２〜６−０３
上記実施例６−０１に記載の方法に準じて、表６に示す実施例６−０２〜６−０３の化合物を合成した。
【表６】
表６
2004514712.tif 000056
【０１０９】
実施例７−１
ナトリウム２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチネイト
【化３３】
2004514712.tif 000057
ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチネイト（出発化合物６、０．０２５ｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）とトリフルオロ酢酸（１ｍｌ）の混合液を２時間室温で撹拌した。混液を減圧下濃縮し、残渣をアセトニトリル（０．５ｍｌ）に溶解し、ついで飽和ＮａＨＣＯ３溶液（０．７ｍｌ）で処理した。生じた混液をＨＰＬＣ（ＯＤＳ逆相カラム、１０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）で精製し、淡黄色固体のナトリウム２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチネイト（０．０２０ｇ、収率８８％）を得た。
分子量：３４３．３２０
マススペクトル：３２２
融点：１４０℃（分解）
インビトロ活性度：Ｃ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｄ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： ４．９４ （２Ｈ， ｓ）， ６．５０ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．１， ７．９ Ｈｚ）， ６．６３ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ）， ６．６８ （１Ｈ， ｂｒ）， ６．７３ （２Ｈ， ｓ）， ６．７７ − ６．８３ （２Ｈ， ｍ）， ６．９５ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ６．９８ （１Ｈ， ｓ）， ７．１９ （１Ｈ， ｄｔ， Ｊ ＝ １．５， ８．３ Ｈｚ）， ７．８１ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．１， ７．９ Ｈｚ）， １４．６４ （１Ｈ， ｓ）．
【０１１０】
実施例７−２
ナトリウム５−（｛３−［２−アミノ−３−（アミノカルボニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト
【化３４】
2004514712.tif 000058
ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチネイト（出発化合物６、０．６２６ｇ、１．６５９ｍｍｏｌ）のピリジン（０．１４８ｍｌ、１．８２４ｍｍｏｌ）含有ＴＨＦ（７ｍｌ）溶液を０℃に冷却し、これに５−オキソテトラヒドロ−２−フランカルボニルクロライド（０．２７１ｇ、１．８２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍｌ）溶液を加えた。１時間後、混合物を室温に放置、加温し、２時間撹拌した。混液を酢酸エチルと水で分配し、分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝１：４−１：１９）で精製し、淡黄色泡状のｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−｛［（５−オキソテトラヒドロ−２−フラニル）カルボニル］アミノ｝フェニル）ニコチネイト（０．６７７ｇ、収率８３％）を得た。
【０１１１】
ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−｛［（５−オキソテトラヒドロ−２−フラニル）カルボニル］アミノ｝フェニル）−ニコチネイト（０．０２５ｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）とトリフルオロ酢酸（１ｍｌ）の混合物を室温で２時間撹拌した。混液を減圧下濃縮し、残渣をアセトニトリル（０．６ｍｌ）に溶解し、ついで飽和ＮａＨＣＯ３溶液（０．２ｍｌ）で処理した。生じた混液をＨＰＬＣ（ＯＤＳ逆相カラム、１０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）で精製して淡黄色固体のナトリウム２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−｛［（５−オキソテトラヒドロ−２−フラニル）カルボニル］アミノ｝フェニル）ニコチネイト（０．００９ｇ、収率３９％）を得た。
２−アミノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（３−｛［（５−オキソテトラヒドロ−２−フラニル）カルボニル］アミノ｝フェニル）ニコチン酸（０．０７０ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、塩化アンモニア（０．０１６ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．０３２ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍｌ）冷却（０℃）混液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．０３４ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ついでトリエチルアミン（０．０４２ｍｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、混合物を放置し、室温に加温し、撹拌を１晩続けた。生じた混液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をＨＰＬＣ（ＯＤＳ逆相カラム、５０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）で精製して、出発物質のカルボキサミド アナログを得た。この物質をアセトニトリル（０．７ｍｌ）に溶解し、ついで１Ｎ　ＮａＯＨ溶液（０．６ｍｌ）で処理した。生じた混合物をＨＰＬＣ（ＯＤＳ逆相カラム、１０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ−９０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ）で精製し、黄色固体のナトリウム５−（｛３−［２−アミノ−３−（アミノカルボニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝アミノ）−４−ヒドロキシ−５−オキソペンタノエイト（０．００５ｇ、収率７％）を得た。
分子量：４７２．４３７
マススペクトル：４５１
融点：＞２６０℃
インビトロ活性度：Ｃ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｃ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： １．７２ − １．９６ （２Ｈ， ｍ）， ２．１１ − ２．２０ （２Ｈ， ｍ）， ３．９９ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ）， ６．４６ （２Ｈ， ｂｒ）， ６．８２ （２Ｈ， ｂｒ）， ７．１７ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ）， ７．１８ （４Ｈ， ｂｒ）， ７．３４ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ）， ７．８４ （１Ｈ， ｓ）， ７．８７ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ）， ７．９５ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．３， ８．０ Ｈｚ）， ９．７５ （１Ｈ， ｓ）， １０．６５ （１Ｈ， ｓ）， １３．９１ （１Ｈ， ｓ）．
【０１１２】
実施例７−３
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−（ヒドロキシメチル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド
【化３５】
2004514712.tif 000059
リチウムアルミニウムハイドライド（０．０７７ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍｌ）冷却（０℃）懸濁液に、アルゴン雰囲気下ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）ニコチネイト（０．３５３ｇ、０．９３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍｌ）溶液を撹拌下滴下した。３０分後、混液を放置し、室温に加温し、室温で２時間撹拌を続け、そして５０℃で１晩撹拌した。室温に冷却し、反応を水で停止させ、酢酸エチルで抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をメタノールから再結晶して、２−［６−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−５−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジニル］フェノール（０．１３３ｇ、収率４５％）を淡黄色固体として得た。
【０１１３】
２−［６−アミノ−４−（３−アミノフェニル）−５−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジニル］フェノール（０．１００ｇ、０．３２５ｍｍｏｌ）のピリジン（０．２８ｍｌ、０．３４ｍｍｏｌ）含有ＴＨＦ（３ｍｌ）の冷却（０℃）溶液に、３−クロロプロピオニルクロライド（０．０４３ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を加えた。３０分間撹拌後、混液を放置し、室温に加温し、２時間撹拌を続けた。生じた混液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をエチルエーテルで結晶化させた。生じた固体をろ取し、エチルエーテルで洗浄し、減圧で乾燥して、淡黄色固体のＮ−｛３−［２−アミノ−３−（ヒドロキシメチル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−クロロプロパンアミド（０．０７２ｇ、収率５６％）を得た。
Ｎ−｛３−［２−アミノ−３−（ヒドロキシメチル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−クロロプロパンアミド（０．０６５ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）とヨウ化ナトリウム（０．００７ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５ｍｌ）溶液に、ピペリジン（０．１６ｍｌ、１．６３ｍｍｏｌ）を加え、混液を７５℃で１晩撹拌した。室温に冷却し、生じた混液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール＝８５：１５）で精製し、白色泡状のＮ−｛３−［２−アミノ−３−（ヒドロキシメチル）−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］フェニル｝−３−（１−ピペリジニル）プロパンアミド（０．０５５ｇ、収率７５％）を得た。
分子量：４４６．５５４
マススペクトル：４４７
融点：１３３℃（分解）
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｂ
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： １．３６ − １．５５ （６Ｈ， ｍ）， ２．３９ − ２．６５ （８Ｈ， ｍ）， ４．３４ （２Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ）， ５．０８ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ）， ６．４９ （２Ｈ， ｓ）， ６．７８ （１Ｈ， ｄｔ， Ｊ ＝ １．１， ８．３ Ｈｚ）， ６．８５ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．５， ８．６７ Ｈｚ）， ７．１０ （１Ｈ， ｓ）， ７．１４ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ７．２３ （１Ｈ， ｄｔ， Ｊ ＝ １．５， ８．７ Ｈｚ）， ７．４０ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．９ Ｈｚ）， ７．６１ （１Ｈ， ｓ）， ７．６６ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．３ Ｈｚ）， ７．８６ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．５， ８．３ Ｈｚ）， １０．２８ （１Ｈ， ｓ）， １４．２２ （１Ｈ， ｓ）．
【０１１４】
実施例８−１
２−［６−アミノ−４−［４−（エチルアミノ）−３−ヒドロキシフェニル］−５−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジニル］−３−（シクロプロピルメトキシ）フェノール塩酸塩
【化３６】
2004514712.tif 000060
１−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝エタノン（出発物質１−Ａ’２．００ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）、３−ヒドロキシ−４−ニトロベンズアルデヒド（２．０５ｇ、１２．２６ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルシアノアセテート（１．７３ｇ、１２．２６ｍｍｏｌ）、アンモニウムアセテート（１．４２ｇ、１８．３８ｍｍｏｌ）および１，２−ジメトキシエタン（２．０ｍＬ）の混合物を封管に入れ、１００℃で８時間撹拌した。混液を室温に冷却後、減圧下濃縮し、残渣をエチル酢酸と水に分配した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン：エチル酢酸＝１：１）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）ニコチネイト（２．３２ｇ、６２％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝６１４、Ｍ＋１）
【０１１５】
ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）ニコチネイト（２．３２ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）のエチル酢酸（１５．０ｍＬ）とＴＨＦ（１５．０ｍＬ）の溶液を炭素担持白金（１０％、０．１０ｇ）の存在下１気圧で１晩還元した。反応混合物をセライトで濾過し、エチル酢酸とＴＨＦで洗浄した。濾液を合し、減圧下濃縮し、ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−４−（４−アミノ−３−ヒドロキシフェニル）−６−［２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］−６−（２−メチルブトキシ）フェニル］ニコチネイト（２．２１ｇ、１００％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝５８４、Ｍ＋１）
【０１１６】
ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノ−４−（４−アミノ−３−ヒドロキシフェニル）−６−［２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］−６−（２−メチルブトキシ）フェニル］ニコチネイト（２．４６ｇ、４．２１ｍｍｏｌ）の溶液に、無水酢酸（０．４４ｍＬ、４．６３ｍｍｏｌ）を加えた。混液を室温で１晩撹拌し、酢酸エチルで希釈し、飽和重曹水と食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮し、ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（アセチルアミノ）−３−ヒドロキシフェニル］−２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチネイト（２．６５ｇ、収率１００％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝６２６、Ｍ＋１）
ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（アセチルアミノ）−３−ヒドロキシフェニル］−２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチネイト（１．００ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）の冷（０℃）ＴＨＦ（１５．０ｍＬ）溶液にアルゴン雰囲気下、ナトリウム　ビス（メトキシエトキシ）アルミニウムハイドライド（トルエン中３．７Ｎ、１．２５ｍＬ、６．３９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍｌ）溶液を滴下した。５時間撹拌後、ナトリウム　ビス（メトキシエトキシ）アルミニウムハイドライド（トルエン中３．７Ｎ、０．８３３ｍＬ、４．２６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍｌ）溶液を０℃で混液に加え、混液を放置し、室温に加温し、１晩撹拌を続けた。混液を酢酸エチルで反応を停止し、飽和ナトリウムカリウム酒石酸塩水溶液に注いだ。抽出した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮し、５−［２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−（エチルアミノ）フェノールを得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝５４２、Ｍ＋１）
【０１１７】
５−［２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−（エチルアミノ）フェノール（０．０１３ｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）溶液に１，４−ジオキサンに溶かした塩酸（４Ｎ、１．０ｍｌ）溶液を加えた。１晩撹拌後、混液をジエチルエーテルで希釈し、生じた沈殿をアルゴン雰囲気下濾取し、エチルエーテルで洗浄し、減圧下乾燥して、２−［６−アミノ−４−［４−（エチルアミノ）−３−ヒドロキシフェニル］−５−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジニル］−３−（シクロプロピルメトキシ）フェノール（０．００８ｇ、７６％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝４２２、Ｍ＋１）
分子量：４５７．９６１
マススペクトル：４２２
融点：２３２℃（分解）
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： ０．２６ （２Ｈ， ｍ）， ０．４７ （２Ｈ，ｍ）， １．１３ （１Ｈ， ｍ）， １．２０ （３Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ）， ３．１９ （２Ｈ， ｍ）， ３．５７ （１Ｈ， ｓ）， ３．８６ （２Ｈ， ｍ）， ４．５１ （２Ｈ， ｓ）， ６．６４ （２Ｈ， ｍ）， ６．８２ （１Ｈ， ｓ）， ６．９４ （２Ｈ， ｍ）， ７．２８ （２Ｈ， ｍ）， １０．３ （１Ｈ， ｂｒ）， １３．３ （１Ｈ， ｂｒ）．
【０１１８】
実施例８−２
７−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−ヒドロキシフェニル−５−（３−エチルー２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１，３−ベンゾオキサゾール−６−イル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２−オン塩酸塩
【化３７】
2004514712.tif 000061
５−［２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−（エチルアミノ）フェノール（０．１５０ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン（０．１２ｍＬ、０．８３ｍｍｏｌ）を含有する冷（０℃）ＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液にトリホスゲン（０．０９９ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。３０分間撹拌後、混液を室温で放置加温し、１晩撹拌した。生じた反応液を水で停止し、エチル酢酸で抽出した。分離した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝９：１）で精製し、７−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−５−（３−エチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１，３−ベンゾオキサゾール−６−イル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２−オン（０．０４９ｇ、３０％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝５９４、Ｍ＋１）
【０１１９】
７−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−５−（３−エチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１，３−ベンゾオキサゾール−６−イル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２−オン（０．０３６ｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１．０ｍＬ）溶液に１，４−ジオキサンに溶かした塩酸（４Ｎ、１．０ｍｌ）溶液を加えた。１晩撹拌後、混液をジエチルエーテルで希釈し、生じた沈殿をアルゴン雰囲気下濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、減圧下乾燥して、７−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−（ヒドロキシ）フェニル−５−（３−エチルー２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１，３−ベンゾオキサゾール−６−イル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］［１，３］オキサジン−２−オン（０．０２５ｇ、８０％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝４３６、Ｍ＋１）
分子量：５０９．９５１
マススペクトル：４７４
融点：１５１℃
インビトロ活性度：Ｃ
細胞活性度：（Ａ９５４）−
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： ０．２９ （２Ｈ， ｍ）， ０．４９ （２Ｈ， ｍ）， １．２０ （１Ｈ， ｍ）， １．３０ （３Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ）， ３．８７ （２Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ）， ３．９２ （２Ｈ， ｍ）， ５．４３ （２Ｈ， ｓ）， ６．５５ （２Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ）， ６．９２ （０．５ Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ）， ７．１９ （１Ｈ， ｔ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ）， ７．３３ （２Ｈ， ｍ）， ７．４９ （２Ｈ， ｍ）， ７．９７ （１Ｈ， ｓ）．
【０１２０】
実施例８−３
Ｎ−｛４−［２−アミノ−６−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−ヒドロキシフェニル］−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド塩酸塩
【化３８】
2004514712.tif 000062
ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（アセチルアミノ）−３−ヒドロキシフェニル］−２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチネイト（１．６５ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５．０ｍＬ）溶液にアルゴン雰囲気下、ナトリウム　ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムハイドライド（トルエン中３．７Ｎ、４．１２ｍＬ、２１．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍｌ）溶液を滴下した。３０分間撹拌後、混液を酢酸エチルで反応を停止し、飽和ナトリウムカリウム酒石酸塩水溶液に注いだ。抽出した有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ジクロロメタン：メタノール＝１９：１−９：１）で精製し、Ｎ−｛４−［２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド（０．４８ｇ、３３％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝５５６、Ｍ＋１）
【０１２１】
Ｎ−｛４−［２−アミノ−６−｛２−（シクロプロピルメトキシ）−６−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド）（０．０１３ｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）溶液に１，４−ジオキサンに溶かした塩酸（４Ｎ、１．０ｍｌ）溶液を加えた。１晩撹拌後、混液をジエチルエーテルで希釈し、生じた沈殿をアルゴン雰囲気下濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、減圧下乾燥して、Ｎ−｛４−［２−アミノ−６−［２−（シクロプロピルメトキシ）−６−ヒドロキシフェニル］−３−（ヒドロキシメチル）−４−ピリジニル］−２−ヒドロキシフェニル｝アセタミド
（０．０２５ｇ、８０％）を得た。
ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ＝４３６、Ｍ＋１）
分子量：４７１．９４５
マススペクトル：４３６
融点：２７０℃（分解）
インビトロ活性度：Ａ
細胞活性度：（Ａ９５４）−
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： ０．２７ （２Ｈ， ｍ）， ０．４７ （２Ｈ， ｍ）， １．１４ （１Ｈ， ｍ）， ２．１４ （３Ｈ， ｓ）， ３．８６ （２Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ）， ４．４７ （２Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ １１ Ｈｚ）， ６．６４ （２Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ ８．２， ２５ Ｈｚ）， ６．８４ （１Ｈ， ｍ）， ６．９４ （１Ｈ， ｍ）， ７．０３ （１Ｈ， ｓ）， ７．２８ （１Ｈ， ｍ）， ７．５６ （１Ｈ， ｂｒ）， ７．９４ （１Ｈ， ｂｒ）， ９．４６ （１Ｈ， ｓ）， １０．２ （１Ｈ， ｂｒ）， １３．５ （１Ｈ， ｂｒ）．
【０１２２】
実施例８−０４〜８−０５
上記実施例８−０１〜８−０３に記載の方法に準じて、表８に示す実施例８−０４〜８−０５の化合物を合成した。
【表７】
表８
2004514712.tif 000063
【０１２３】
実施例９
Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝アセタミド　ジトリフルオロ酢酸塩
【化３９】
2004514712.tif 000064
２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］アセトフェノン、３−ヒドロキシー４−ニトロベンズアルデヒド、マロノニトリル、酢酸アンモニアおよびトルエンの混合物を３時間撹拌還流させた。通常の操作とカラムクロマトグラフィにより、２−アミノ−４−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリルを得た。
２−アミノ−４−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル）−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル、炭酸セシウム、ヨウ化カリウムおよびＤＭＦの混合物を８０℃で１晩撹拌した。通常の操作とカラムクロマトグラフィにより、２−アミノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−｛４−ニトロ−３−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝ニコチノニトリルを得た。
２−アミノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−｛４−ニトロ−３−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝ニコチノニトリル、ＳｎＣｌ２およびＤＭＦの混合物を室温で１晩撹拌した。通常の操作とカラムクロマトグラフィにより、２−アミノ−４−｛４−アミノ−３−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリルを得た。
【０１２４】
２−アミノ−４−｛４−アミノ−３−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝ニコチノニトリル、アセチルクロライド、ピリジンおよびＣＨ２Ｃｌ２の混合物を０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。通常の操作とカラムクロマトグラフィにより、Ｎ−｛４−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）−２−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝アセタミドを得た。
Ｎ−｛４−（２−アミノ−３−シアノ−６−｛２−［（４−メトキシベンジル）オキシ］フェニル｝−４−ピリジニル）−２−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝アセタミドとトリフルオロ酢酸の混合物を室温で３時間撹拌し、トリフルオロ酢酸を留去して、Ｎ−｛４−［２−アミノ−３−シアノ−６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジニル］−２−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル｝アセタミド　ジトリフルオロ酢酸塩を得た。
分子量：６９９．６１２
Ｍａｓｓスペクトル：４７２
インビトロ活性度：Ｂ
細胞活性度：（Ａ９５４）−Ｂ
【０１２５】
比較例
【化４０】
2004514712.tif 000065
Ｍａｎｎｎａら（Ｅｕｒ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ３４（１９９９）， ２４５−２５４）に開示の６−（２−ヒドロキシフェニル）−４−（Ｒ”−フェニル）−３−シアノ−２−アミノピリジン（Ｒ”はニトロまたはジメチルアミノである。）を該文献記載の方法に従って合成した。この合成化合物の効果をここに開示のインビトロアッセイおよび細胞アッセイ法で試験した。しかし、これらの化合物はなんらのＩＫＫ−β阻害活性やサイトカイン阻害活性を示さなかった。
【国際公開パンフレット】
2004514712.tif 000068
2004514712.tif 000069
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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