(57)【要約】本発明はある種のステロイド性サポゲニンおよびその誘導体、非認識的な神経変性、非認識的な神経筋変性、および認識的な神経および神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失などの認識障害の治療におけるステロイド性サポゲニンおよびその誘導体の使用を開示する。また、合成方法、治療、および薬剤組成物が開示されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式ＩＩで表される化合物の使用であって、
【化１】
2004525945.tif 000007
一般式ＩＩにおいて、Ｒは水素原子、アルキルカルボニル基、アルコキシカルボニル基から選択され、いずれのアルキル基も任意に、アリール基、アミノ基、モノまたはジアルキルアミノ基、カルボン酸残基（−ＣＯＯＨ）、あるいはこれらの組み合わせで置換され、
前記化合物には、すべての立体異性体および光学異性体、ならびにこれらの薬剤学的に許容しうる塩が含まれ、
ヒトおよびヒト以外の動物についての、（i）非認識的な神経変性、（ii）非認識的な神経筋変性、または（iii）認識的な神経および神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失の治療または予防あるいは治療または予防のための組成物の調製における使用であって、前記ヒトおよび前記ヒト以外の動物は前記（i）、 (ii)、または（iii）に罹患しているかまたは罹患しやすい、使用。
【請求項２】
請求項１において、
一般式ＩＩで表される前記化合物は、
サルササポゲニン、
サルササポゲニンのカチル酸塩、
サルササポゲニンの酢酸塩、
サルササポゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニン、
エピサルササポゲニンのカチル酸塩、
エピサルササポゲニンの酢酸塩、
エピサルササポゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニン、
スミラゲニンのカチル酸塩、
スミラゲニンの酢酸塩、
スミラゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニン、
エピスミラゲニンのカチル酸塩、
エピスミラゲニンの酢酸塩、および
エピスミラゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩
から選ばれる、使用。
【請求項３】
請求項１において、
一般式ＩＩで表される前記化合物は、
サルササポゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、および
エピスミラゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩
から選ばれる、使用。
【請求項４】
請求項１で定義される一般式ＩＩで表される化合物の使用であって、
一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではなく、
上記条件を満たしたうえで、前記化合物には、すべての立体異性体および光学異性体、ならびにこれらの薬剤学的に許容しうる塩が含まれ、
認識障害に罹患しているまたは罹患しやすいヒトおよびヒト以外の動物についての認識障害の治療または予防あるいは治療または予防のための組成物の調製における使用である、使用。
【請求項５】
請求項４において、
一般式ＩＩで表される前記化合物は、
サルササポゲニンのカチル酸塩、
エピサルササポゲニン、
エピサルササポゲニンのカチル酸塩、
エピサルササポゲニンの酢酸塩、
エピサルササポゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンのカチル酸塩、
サルササポゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、および
エピスミラゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩
から選ばれる、使用。
【請求項６】
請求項１ないし５のいずれかにおいて、
活性物質が、Ｃ２５位にメチル基をＲ配置で有する、使用。
【請求項７】
請求項１ないし５のいずれかにおいて、
活性物質が、Ｃ２５位にメチル基をＳ配置で有する、使用。
【請求項８】
請求項１にて定義される一般式ＩＩで表される化合物であって、Ｒはアルキルカルボニル基、アルコキシカルボニル基から選択され、いずれのアルキル基が任意に、アリール基、アミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、モノ−アルキル−アミノ基、ジ−アルキル−アミノ基、Ｎ−アルキル基、Ｎ−アルコキシカルボニル−アミノ基、カルボン酸残基（−ＣＯＯＨ）、あるいはこれらの組み合わせで置換され、
Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは無置換のアセチル基であり、
Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、
Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではなく、
Ｃ２５位の立体化学がＲであり、かつＣ３位の立体化学がＳ（β）である場合、Ｒはプロピオニル基、ブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、カプロイル基、イソカプロイル基、ジエチルアセチル基、オクタノイル基、デカノイル基、ラウリル基、ミリスチル基、パルミトイル基、ステアリル基、ベンゾイル基、フェニルアセチル基、フェニルプロピオネート基、シンナメート基、ｐ−ニトロベンゾエート基、３，５−ジニトロベンゾエート基、ｐ−クロロベンゾエート基、２，４−ジクロロベンゾイル基、ｐ−ブロモベンゾイル基、ｍ−ブロモベンゾイル基、ｐ−メトキシベンゾイル基、フロイル基、およびフタルイル基ではなく、
上記条件を満たしたうえで、すべての立体異性体および光学異性体、ならびにこれらの薬剤学的に許容しうる塩を含む、化合物。
【請求項９】
請求項１にて定義される一般式ＩＩで表される化合物であって、Ｒが低級アルキルカルボニル基および低級アルコキシカルボニル基から選択され、末端カルボン酸（−ＣＯＯＨ）残基が任意に置換されている、化合物。
【請求項１０】
請求項８または９において、
Ｃ２５位のメチル基がＲ配置である、化合物。
【請求項１１】
請求項８または９において、
Ｃ２５位のメチル基がＳ配置である、化合物。
【請求項１２】
エピスミラゲニンのカチル酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンの酢酸塩、エピサルササポゲニンのコハク酸塩、サルササポゲニングリシネート、エピサルササポゲニングリシネート、スミラゲニングリシネート、エピスミラゲニングリシネート、サルササポゲニンアラニネート、エピサルササポゲニンアラニネート、スミラゲニンアラニネート、エピスミラゲニンアラニネート、サルササポゲニンバリネート、エピサルササポゲニンバリネート、スミラゲニンバリネート、エピスミラゲニンバリネート、サルササポゲニンフェニルアラニネート、エピサルササポゲニンフェニルアラニネート、スミラゲニンフェニルアラニネート、エピスミラゲニンフェニルアラニネート、サルササポゲニンイソロイシネート、エピサルササポゲニンイソロイシネート、スミラゲニンイソロイシネート、エピスミラゲニンイソロイシネート、サルササポゲニンメチオニネート、エピサルササポゲニンメチオニネート、スミラゲニンメチオニネート、エピスミラゲニンメチオニネート、およびそれらの薬剤学的に許容しうる塩から選ばれる、化合物。
【請求項１３】
請求項８ないし１２のいずれかにおいて、薬物として使用される、化合物。
【請求項１４】
一般式ＩＩで表される化合物の合成方法であって、該化合物はＲが水素原子以外であり、
一般式ＩＩで表され、Ｒが水素原子である化合物と、下記式で表される化合物とを反応させること、を含み、
Ｌ−Ｒ
上記式において、Ｒはアルキルカルボニル基、アルコキシカルボニル基から選択され、アルキル基はアリール基、アミノ基、モノ−アルキル−アミノ基、ジ−アルキル−アミノ基、カルボン酸残基（−ＣＯＯＨ）、またはこれらの組み合わせから任意に置換され、Ｌは求核置換に適した条件下で脱離基である、化合物の合成方法。
【請求項１５】
請求項１４において、
化合物Ｌ−Ｒはカルボン酸、無水物、またはハロゲン化アシルである、化合物の合成方法。
【請求項１６】
選択されたステロイド性サポゲニンを塩基存在下でクロロギ酸エチルで処理して、３−エトキシカルボニル誘導体を形成すること、を含む、ステロイド性サポゲニン誘導体の合成方法。
【請求項１７】
請求項１６において、
前記塩基は、乾燥ジクロロメタンに溶解させた乾燥ピリジンからなる、ステロイド性サポゲニン誘導体の合成方法。
【請求項１８】
クロロギ酸エチルまたは関連する試薬と塩基との反応による、エピスミラゲニンからエピスミラゲニンカチル酸塩の合成。
【請求項１９】
クロロギ酸エチルまたは関連する試薬と塩基との反応による、サルササポゲニンからサルササポゲニンカチル酸塩の合成。
【請求項２０】
クロロギ酸エチルまたは関連する試薬と塩基との反応による、エピサルササポゲニンからエピサルササポゲニンカチル酸塩の合成。
【請求項２１】
コハク酸無水物または関連する試薬と塩基との反応による、エピサルササポゲニンからコハク酸エピサルササポゲニンの合成。
【請求項２２】
ヒトまたはヒト以外の動物について、受容体の数またはターンオーバーを増加させるため、あるいは受容体の機能を高めるための薬物の製造における、請求項９ないし１２のいずれかに記載された化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩の使用。
【請求項２３】
ヒトまたはヒト以外の動物について、非認識的な神経変性、非認識的な神経筋変性、または認識的な神経または神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失に対する活性を有する組成物であって、請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量含む、組成物。
【請求項２４】
ヒトまたはヒト以外の動物について、認識障害に対する活性を有する組成物であって、
請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量含み、
一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない、組成物。
【請求項２５】
請求項８ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される１以上の化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を薬理学的に有効な量含む、薬剤組成物。
【請求項２６】
請求項８ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される１以上の化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を薬理学的に有効な量含む、食品、サプリメント食品、または飲料。
【請求項２７】
エピスミラゲニンのカチル酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンの酢酸塩、エピサルササポゲニンのコハク酸塩、サルササポゲニングリシネート、エピサルササポゲニングリシネート、スミラゲニングリシネート、エピスミラゲニングリシネート、サルササポゲニンアラニネート、エピサルササポゲニンアラニネート、スミラゲニンアラニネート、エピスミラゲニンアラニネート、サルササポゲニンバリネート、エピサルササポゲニンバリネート、スミラゲニンバリネート、エピスミラゲニンバリネート、サルササポゲニンフェニルアラニネート、エピサルササポゲニンフェニルアラニネート、スミラゲニンフェニルアラニネート、エピスミラゲニンフェニルアラニネート、サルササポゲニンイソロイシネート、エピサルササポゲニンイソロイシネート、スミラゲニンイソロイシネート、エピスミラゲニンイソロイシネート、サルササポゲニンメチオニネート、エピサルササポゲニンメチオニネート、スミラゲニンメチオニネート、エピスミラゲニンメチオニネート、およびそれらの薬剤学的に許容しうる塩のうち１種以上を薬学的に有効な量含む、特性を高める認識機能を有する組成物。
【請求項２８】
エピスミラゲニンのカチル酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンの酢酸塩、エピサルササポゲニンのコハク酸塩、サルササポゲニングリシネート、エピサルササポゲニングリシネート、スミラゲニングリシネート、エピスミラゲニングリシネート、サルササポゲニンアラニネート、エピサルササポゲニンアラニネート、スミラゲニンアラニネート、エピスミラゲニンアラニネート、サルササポゲニンバリネート、エピサルササポゲニンバリネート、スミラゲニンバリネート、エピスミラゲニンバリネート、サルササポゲニンフェニルアラニネート、エピサルササポゲニンフェニルアラニネート、スミラゲニンフェニルアラニネート、エピスミラゲニンフェニルアラニネート、サルササポゲニンイソロイシネート、エピサルササポゲニンイソロイシネート、スミラゲニンイソロイシネート、エピスミラゲニンイソロイシネート、サルササポゲニンメチオニネート、エピサルササポゲニンメチオニネート、スミラゲニンメチオニネート、エピスミラゲニンメチオニネート、およびそれらの薬剤学的に許容しうる塩のうち１種以上を含む、薬剤。
【請求項２９】
必要としているヒトまたはヒト以外の動物について、非認識的な神経変性、非認識的な神経筋変性、または認識的な神経または神経筋の損傷がない場合における受容体の損失を治療または予防する方法であって、
請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量、前記ヒトまたは前記ヒト以外の動物に投与すること、を含む、方法。
【請求項３０】
必要としているヒトまたはヒト以外の動物について、認識障害を治療または予防する方法であって、
請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量、前記ヒトまたは前記ヒト以外の動物に投与すること、を含み、
一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない、方法。
【請求項３１】
アルツハイマー病、アルツハイマー型老年痴呆、老年性記憶障害、レビー小体型痴呆、または自閉症に罹患している患者の認識障害を治療する方法であって、
請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を薬理学的に有効な量前記患者に投与すること、を含み、
一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない、方法。
【請求項３２】
ヒトまたはヒト以外の動物における認識機能を高める方法であって、
請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量、患者に投与すること、を含み、
一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない、方法。
【請求項３３】
請求項３２において、
治療は、健常被験者の認識機能を高めるために、該健常被験者に施される非治療的方法である、方法。
【請求項３４】
患者であるヒトまたはヒト以外の動物について、（i）非認識的な神経変性、（ii）非認識的な神経筋変性、または（iii）認識的な神経または神経筋の損傷がない場合における受容体の損失を治療する方法であって、
前記患者は、パーキンソン病、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー（ＦＳＨ），デュッセン型筋ジストロフィー，ベッカー型筋ジストロフィーおよびブルース型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー、フューチ型ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、角膜変性症、反射性交感神経性萎縮症（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、起立性低血圧、慢性疲労症候群、喘息、心不全への罹患性、および黄斑変性のうち１つに罹患し、
請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を薬学的に有効な量、前記患者に投与すること、を含む、方法。
【請求項３５】
パーキンソン病、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー（ＦＳＨ），デュッセン型筋ジストロフィー，ベッカー型筋ジストロフィーおよびブルース型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー、フューチ型ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、角膜変性症、反射性交感神経性萎縮症（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、起立性低血圧、慢性疲労症候群、喘息、心不全への罹患性、および黄斑変性を治療する方法において、薬剤組成物、食品、サプリメント食品、または飲料中で、請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される１種以上の化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を成分とする使用。
【請求項３６】
アルツハイマー病、ＳＤＡＴ、ＡＡＭＩ、ＭＣＩ、および自閉症の治療のための方法において、薬剤組成物、食品、サプリメント食品、または飲料中における、請求項１ないし１２のいずれかに定義される一般式ＩＩで表される１種以上の化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩の使用であって、
一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない、使用。
【請求項３７】
加齢に関連する認識障害に罹患する患者の認識機能を高める方法であって、請求項１ないし１２のいずれかに定義される化合物を薬理学的に有効な量、前記患者に投与すること、を含む、方法。
【請求項３８】
請求項３０、３１、３２、または３６において、
アルツハイマー病またはアルツハイマー型老年痴呆の治療のための、方法。
【請求項３９】
パーキンソン病、レビー小体型痴呆、起立性低血圧、自閉症、慢性疲労症候群、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、喘息、心不全、てんかん、および加齢に伴う病気および疾患のうち１つを治療する方法であって、請求項９ないし１２のいずれかに定義される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を薬理学的に有効な量、患者に投与すること、を含む、方法。
【請求項４０】
パーキンソン病、レビー小体型痴呆、起立性低血圧、自閉症、慢性疲労症候群、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、喘息、心不全、てんかん、および加齢に伴う病気および疾患のうち１つを治療する方法であって、薬理学的に有効な量のサルササポゲニンを患者に投与すること、を含む、方法。
【請求項４１】
請求項４０において、
前記サルササポゲニンは、植物抽出物または乾燥粉末植物材料の形態であり、かつ、サリトリイバラ属、アスパラガス、ハナスゲ、ヤマノイモ、イトラン、またはリュウゼツランから選ばれる植物から抽出された、方法。
【請求項４２】
請求項４０または４１において、
有効な量のサルササポゲニンを含む食品または飲料を投与すること、を含む、方法。
【請求項４３】
パーキンソン病、レビー小体型痴呆、起立性低血圧、自閉症、慢性疲労症候群、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、喘息、心不全、てんかん、および加齢に伴う病気および疾患の治療のための方法における、食品または飲料中の成分としてのサルササポゲニンの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サポゲニンおよびその誘導体、サポゲニン誘導体の合成および使用、ならびにサポゲニン誘導体の使用に基づく方法に関する。
【０００２】
サポゲニンおよびその誘導体は、認識障害、非認識的な神経変性、非認識的な神経筋変性、および受容体の損失の治療において使用され、本発明はそのような治療において使用される組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
認識障害は、アルツハイマー病（ＡＤ）、アルツハイマー型老年痴呆（ＳＤＡＴ）、老年性記憶障害、レビー小体型痴呆、および血管型痴呆などの痴呆症状ならびに痴呆症候群の特徴の１つである。さらに、より軽度の認識障害は、軽度認識障害（ＭＣＩ）、加齢に関連する記憶障害（ＡＡＭＩ）、および自閉症などのある種の非痴呆症状および非痴呆症候群の１つの特徴である。
【０００４】
非認識的な神経変性（すなわち、認識障害がない場合における神経変性）および非認識的な神経筋変性（すなわち、認識障害がない場合における神経筋変性）は、パーキンソン病、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー（ＦＳＨ），デュッセン（Ｄｕｃｈｅｎｎｅ）型筋ジストロフィー，ベッカー（Ｂｅｃｋｅｒ）型筋ジストロフィーおよびブルース型（Ｂｒｕｃｅ’ｓ）筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー、フューチ型（Ｆｕｃｈｓ’）ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、角膜変性症、反射性交感神経性萎縮症（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、および多発性硬化症などの症状ならびに症候群の特徴の１つである。
【０００５】
受容体の損失−特に、ニコチン受容体および／またはムスカリン受容体および／またはドーパミン受容体および／またはアドレナリン受容体の損失は、上記症状および症候群のうちいくつかまたはすべての特徴の１つである。認識的な神経および神経筋の損傷がない場合における上記受容体の損失はまた、起立性低血圧、慢性疲労症候群、喘息、心不全への罹患性、および黄斑変性などの症状ならびに症候群の特徴の１つである。
【０００６】
平均寿命の上昇および後天的な病気の制御により、上記症状および症候群は、すべての社会において深刻でかつ増大している問題であり、人口プロファイルがより高齢人口へと伸長している。このような疾患の調整または防止において、処置または手助けとなる薬剤が緊急に必要とされている。
【０００７】
ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６はここで開示されたものとし、その内容はこの参照、クレーム、他の化合物、一般式（Ｉ）で表されるサポゲニン誘導体、およびこれらの立体異性体および光学異性体、ならびにこれらの薬剤学的に許容しうるプロドラッグおよび塩、ならびにこれらの化合物を薬剤として使用することによって開示に含まれる。前記薬剤は、ヒトまたはヒト以外の動物において、ムスカリン受容体の数を増加させるため、あるいはムスカリン受容体の機能を高めるためのものであり、特に、病気の機能障害の治療のため、特に、ＡＤ，ＳＤＡＴ，パーキンソン病，レビー小体型痴呆、自閉症、重症筋無力症、ランバート−イートン病、起立性低血圧、慢性疲労症候群、および加齢に伴う病気および疾患に罹患している患者の認識障害の治療のためのものである。
【０００８】
【化２】
2004525945.tif 000002
【０００９】
一般式（Ｉ）において、−Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７，Ｒ８，Ｒ１０はそれぞれ独立に、Ｈ，ＯＨ，＝Ｏ，およびＯＲのいずれかであり、ここで、Ｒは、任意に置換されたアルキル基、任意に置換されたアシル基、任意に置換されたカルバモイル基、アルコキシカルボニル基であり、
−Ｒ９，Ｒ１２，Ｒ１１，Ｒ１３はＨ，ＯＨ，ＯＲのいずれかであり、ここで、Ｒは、任意に置換されたアルキル基、任意に置換されたアシル基、任意に置換されたカルバモイル基、アルコキシカルボニル基であり、
−Ｒ１４は、任意に置換されたアルキル基であり、
【００１０】
【数１】
2004525945.tif 000003
【００１１】
は、任意の二重結合である。
【００１２】
しかし、同時に、
−Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ４＝Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８＝Ｒ１０＝Ｒ１１＝Ｒ９＝Ｒ１２＝Ｒ１３＝Ｈ，
−Ｒ３＝βＯＨ，
−Ｒ１４＝ＣＨ３，
−Ｃ２２位のメチル基がα，
−Ｃ２０がαでかつＣ２５位がＳ配置である
ことを除く。
【００１３】
ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６の記載に含まれる定義によると、上記式（Ｉ）の可変基において、
「アシル基」はＨ−ＣＯ−基またはアルキル−ＣＯ−基を意味し、前記アルキル基は以下のように定義される。好ましいアシル基は低級アルキル基を含む。アシル基は例えば、ホルミル基、アセチル基、プロパノイル基、２−メチルプロパノイル基、ブタノイル基、およびパルミトイル基を含む。
【００１４】
「アルキル基」は、鎖中に約１〜約２０の炭素原子を有し、任意に直鎖状または分岐状である脂肪族炭化水素基を意味する。好ましいアルキル基は鎖中に１〜約１２の炭素原子を有する。「分岐状」とは、メチル基、エチル基またはプロピル基などの１以上の低級アルキル基が、線状のアルキル鎖に結合していることを意味する。「低級アルキル基」とは、鎖中の約１〜約４の炭素原子を意味し、直鎖状または分岐状であってもよい。アルキル基は例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、３−ペンチル基を含む。
【００１５】
「任意に置換された」とは、前記基が１以上の置換基によって置換されていてもよいことを意味し、前記置換基は同一でも異なっていてもよく、ハロゲン原子，アルキル基，環状アルキル基、水酸基、アルコキシル基、アミノ基、アシルアミノ基、アリール基、アロイルアミノ基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、ヘレロアラルコキシカルボニル基、任意に置換されたカルバモイル基を含む。
【００１６】
「薬剤学的に許容しうる」とは、医学的見地および獣医学的見地の範囲内において、過度の毒性、炎症、アレルギー反応およびそれと同様のものが発生することなく、ヒトおよび下等動物の細胞と接触させて使用するのに適していることを意味し、合理的な利点／リスクの比と同様である。「薬剤学的に許容しうるプロドラッグ」とは、医学的および獣医学的見地からの範囲内において、過度の毒性、炎症、アレルギー反応およびそれと同様のものが発生することなく、ヒトおよび下等動物の組織と接触させて使用するのに適していることを意味し、合理的な利点／リスク比と同様であり、可能であれば化合物が双極性イオンの形態であるとともに、目的とする用途に効果的であることをいう。「プロドラッグ」なる用語は、インビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）にて上記式で表される親化合物へと速やかに変換される化合物を意味し、前記変換は、例えば血液中の加水分解によって引き起こされる。代謝的な開裂によって、速やかに変換され得る官能基は、インビボでカルボキシル基と反応するある種の基を形成する。化合物において代謝的に開裂可能な基がインビボで開裂しやすいため、このような基を生じる化合物はプロドラッグとして機能する。プロドラッグについての解説は次に示されている。Ｈ．バンドガード編，「プロドラッグの設計」，１９８５年，エルセバイアー社（H. Bundgaard, ed., Elsevier, 1985）、Ｋ．ウィダー他編，「酵素学における方法」，１９８５年，第４２号，３０９−３９６頁，アカデミックプレス社（"Methods in Enzymology", K. Widder et al, Ed., Academic Press, 42, p.309-396, 1985）、クロッッグスガード−ラーセンおよびＨ．バンドガード編，「ドラック設計およびその発展に関するテキストブック」， 第５章（"A Textbook of Drug design and Development", Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, ed., Chapter 5）、「プロドラッグの設計と応用」，１９９１年，１１３−１９１頁（"Design and Applications of Prodrugs", p.113-191, 1991）、Ｈ．バンドガード，「応用のドラックデリバリー総説」，１９９２年，第８号，１−３８頁（Advanced Drug Delivery Reviews, 8, p.1-38, 1992）、ジャーナル・オブ・ファーマスーティカル・サイエンセス，１９８８年，第７７号，２８５頁（Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, p.285, 1988）、Ｎ．ナケヤ他，ケム・ファーム・ブリテン，１９８４年，第３２号，６９２頁（Chem. Pharm. Bull., N. Nakeya et al, 32, p.692, 1984）、Ｔ．ヒグチおよびＶ．ステラ，「新規なデリバリーシステムとしてのプロドラッグ」，Ａ．Ｃ．Ｓ．シンポジウムシリーズ第１４巻（"Pro-drugs as Novel Delivery Systems", T. Higuchi and V. Stella, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series）、およびエドワード  Ｂ  ロシュ編，「ドラッグデザインにおけるバイオリバーシブルなキャリア」，１９８７年，アメリカ薬学会およびパーガモン出版（"Bioreversible Carriers in Drug Design", Edward B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987）。これらは参照によって含まれる。
【００１７】
「薬剤学的に許容しうる塩」とは、相対的に非毒性、非有機物で、かつ、前記化合物の有機酸添加塩および前記化合物の塩基添加塩である。これらの塩は、前記化合物の最終的な分離精製中にインシチュ（ｉｎ  ｓｉｔｕ）で調製可能である。特に、酸添加塩は、遊離塩基の形態で精製された化合物を、適当な有機酸または非有機酸と分離して反応させ、このように形成された塩を単離することにより調製することができる。例えば、Ｓ．Ｍ．バージ他，「薬剤塩」，１９７７年，ジャーナル・ファーム・サイエンス，第６６号，１−１９頁（S. M. Berge, et al., Pharmaceutical Salt, J. Pharm. Sci., 66, p.1-19, 1977）を参照されたい。この文献はここで参照として含まれる。塩基添加塩はまた、酸の形態で精製された化合物を適当な有機塩基または非有機塩基と分離して反応させ、このように形成された塩を単離することにより調製することができる。塩基添加塩は、薬剤学的に許容しうる金属塩およびアミン塩を含む。
【００１８】
ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６における記載によれば、一般式Ｉで表されるサポゲニン（その立体異性体および光学異性体、ならびにその薬剤学的に許容しうるプロドラッグおよび塩を含む）の効果は、少なくともその一部は化合物の活性に起因する。前記活性は、受容体の数を正常化（すなわち、受容体数の経時的な減少を防止すること）したり、また、受容体数を減少した数から正常なレベル（本願の国際特許出願の英文明細書２０頁、６−９行目に相当する箇所を参照）へと戻したりすることをいう。
【００１９】
ＤＥ−Ａ−４３０３２１４はここで参照として開示されたものとし、このＤＥ−Ａ−４３０３２１４には、幅広い範囲のウイルス性の病気の治療において、非常に幅広い範囲のサポニンおよびサポゲニンを使用することが記載されているが、特定のウイルス性の病気のためにより好ましい化合物を当業者が選択できることを示すデータは記載されていない。アルツハイマー病およびパーキンソン病が記載されているけれども、これらの症状はウイルスが原因ではないことが知られている。以上により、このＤＥ−Ａ−４３０３２１４には、本発明と関連する教示が記載されていないと理解するべきである。
【００２０】
ＷＯ−Ａ−１６７８６（１９９９年４月８日に発行）はここで参照として開示されたものとし、このＷＯ−Ａ−１６７８６には、痴呆症の治療のために天然サポニンを使用することが記載されている。サポゲニンは脂溶性であるのに対して、サポニンは水溶性の傾向を有する。このため、サポニンは血液−脳関門を通過する際の効果がより小さい。
【００２１】
中国特許出願番号第ＣＮ−Ａ−１０９６０３１号はここで参照として開示されたものとし、この出願には、β−アドレナリン受容体およびＭ−コリネジック受容体の双方向制御において、スピロスタンサポゲニン、サルササポゲニンを使用することが記載されている。特定の薬理活性は示されていない。しかしながら、「化合物の合成および応用」，１９９８年，３１５−３２０頁（"Synthesis and Applications of Isotopically Labeled Compounds", 1998, page 315-320）において、イ他は、サルササポゲニンを老年痴呆の治療に使用することについて述べている。
【００２２】
しかしながら、パーキンソン病、重症筋無力症、ランバート−イートン病、起立性低血圧、および慢性疲労症候群の場合、認識障害は主要な症状ではなく、可能性がある多くの二次的な症状のうちの１つとして発生し得る。そのうえ、これらの症状はウイルス性の病気または痴呆ではない。これらの疾患のうちの多くがいわゆる「広範な範囲の（spectrum）」病気であり、それ自体広範囲で比較的重篤である広範囲な症状の組み合わせである。このため、多くの事例において、認識障害（例えば、痴呆）のための治療は必要ではない。
【００２３】
本発明は、ある種のサポゲニンおよびその誘導体であって、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６で定義された式Ｉに含まれる化合物を含むものが、認識的な神経および神経筋の損傷がない場合における受容体の損失とともに、非認識的な神経変性および非認識的な神経筋変性に対して驚異的な活性を有することを見出したことに基づく。この発見は、認識障害が主要な症状でないある種の非ウイルス性の広範囲（spectrum）および広範囲でない疾患（例えば、パーキンソン病、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー（ＦＳＨ），デュッセン型筋ジストロフィー，ベッカー型筋ジストロフィーおよびブルース型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー、フューチ型ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、角膜変性症、反射性交感神経性萎縮症（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、起立性低血圧、慢性疲労症候群、喘息、心不全への罹患性、および黄斑変性など）の治療を改善することができる。
【発明の開示】
【００２４】
［発明の簡潔な説明］
本発明の一態様によれば、一般式ＩＩで表される化合物の使用を提供する。
【００２５】
【化３】
2004525945.tif 000004
【００２６】
式中、Ｒは水素原子、アルキルカルボニル基、アルコキシカルボニル基から選択され、いずれのアルキル基も任意に、アリール基、アミノ基、モノまたはジアルキルアミノ基、カルボン酸残基（−ＣＯＯＨ）、あるいはこれらの組み合わせで置換され、
前記化合物には、すべての立体異性体および光学異性体、ならびにこれらの薬剤学的に許容しうる塩が含まれ、
ヒトおよびヒト以外の動物についての、（i）非認識的な神経変性、（ii）非認識的な神経筋変性、または（iii）認識的な神経および神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失の治療または予防あるいは治療または予防のための組成物の調製（例えば、薬剤組成物、食品、サプリメント食品、および飲料）における使用であって、前記ヒトおよび前記ヒト以外の動物は前記（i）、 (ii)、または（iii）に罹患しているかまたは罹患しやすい。
【００２７】
特に、前記治療は、パーキンソン病、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー（ＦＳＨ），デュッセン型筋ジストロフィー，ベッカー型筋ジストロフィーおよびブルース型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー、フューチ型ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、角膜変性症、反射性交感神経性萎縮症（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、起立性低血圧、慢性疲労症候群、喘息、心不全への罹患性、および黄斑変性のいずれかに罹患しているヒトおよびヒト以外の動物に適用可能である。
【００２８】
本発明のさらなる態様によれば、式ＩＩで表される化合物の使用であって、式ＩＩ中、Ｒが水素原子、アルキルカルボニル基、アルコキシカルボニル基から選択され、いずれのアルキル基も任意に、アリール基、アミノ基、モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、カルボン酸残基（−ＣＯＯＨ）、あるいはこれらの組み合わせで置換され、
Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、
Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、
Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではなく、
（上記条件を満たしたうえで、前記化合物には、すべての立体異性体および光学異性体が含まれ、）ならびに前記化合物には、これらの薬剤学的に許容しうる塩が含まれ、
ヒトおよびヒト以外の動物についての、（i）認識障害、（ii）非認識的な神経変性、（iii）非認識的な神経筋変性、または（iv）認識的な神経および神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失の治療または予防あるいは治療または予防のための組成物の調製（例えば、薬剤組成物、食品、サプリメント食品、および飲料）における使用であって、前記ヒトおよび前記ヒト以外の動物は前記（i）、 (ii)、（iii）または（iv）に罹患しているかまたは罹患しやすい。
【００２９】
１つの態様では、Ｃ２５位のメチル基がＳ配置であり、本発明に係るこれらの化合物は、サルササポゲニンおよびエピサルササポゲニンまたはこれらの誘導体である。別の態様では、Ｃ２５位のメチル基がＲ配置であり、本発明に係るこれらの化合物は、スミラゲニンおよびエピスミラゲニンまたはこれらの誘導体である。
【００３０】
本発明はまた、ヒトおよびヒト以外の動物の治療のための相応な方法、および前記治療方法で使用される活性物質を含む。そのうえ、活性物質を調製する方法において使用されるある種の中間体と同様に、ある種の活性物質は新規であり、そして、活性物質を調製する方法と同様に、これらはそれ自体で本発明のさらなる態様を構成する。これらの態様については後で詳述する。
【００３１】
本発明の活性物質は、必要に応じて、１種以上の付加的な活性物質（例えば、コリンエステラーゼ阻害剤およびＬ−ドーパ）とともに投与してもよい。
【００３２】
［発明の簡潔な説明］
（活性物質）
式ＩＩについての上記定義において、
アルキル基の任意の置換基であるアミノ基、モノ−アルキル−アミノ基、ジ−アルキル−アミノ基は、好ましくはアルキル基のα位に結合する１個の置換基（単置換基）である。
【００３３】
アルキル基の任意の置換基である−ＣＯＯＨは、アルキル基の末端または他のいずれかの位置に結合していてもよい。
【００３４】
「アルキル基」は、鎖中に約１〜約２０の炭素原子を有する脂肪族炭化水素基であって、該脂肪族炭化水素基は直鎖状または分岐状であってもよいことを意味する。好ましいアルキル基は鎖中に１〜約１２の炭素原子を有する。「分岐状」とは、メチル基、エチル基またはプロピル基などの１以上の低級アルキル基が、線状のアルキル鎖に結合していることを意味する。「低級アルキル基」とは、鎖中の約１〜約４の炭素原子であって、直鎖状または分岐状であってもよいことを意味する。アルキル基は例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、３−ペンチル基を含む。
【００３５】
「アリール基」は芳香族環、または連結した環からなる芳香族系を含む基を意味し、好ましくは１２個以下の炭素原子を含む。アリール基は例えば、フェニル基である。アリール基は、任意に単置換または多置換されていてもよく、例えば、ハロゲン原子（例えば、塩素原子または臭素原子）、アルキル基、環状アルキル基、水酸基、アルコキシル基、アミノ基、ニトロ基、アシルアミノ基、カルボキシル基、およびアルコキシカルボニル基から独立して選ばれる置換基によって置換されていてもよい。
【００３６】
「カルボン酸残基」は−ＣＯＯＨ基を意味する。
【００３７】
「薬剤学的に許容しうる塩」とは、相対的に非毒性、非有機物で、かつ、本発明の化合物に係る有機酸添加塩および塩基添加塩である。これらの塩は、前記化合物の最終的な分離精製中にインシチュ（ｉｎ  ｓｉｔｕ）で調製可能である。特に、酸添加塩は、遊離塩基の形態で精製された化合物を、適当な有機酸または非有機酸と分離して反応させ、このようにして形成された塩を単離することにより調製することができる。例えば、Ｓ．Ｍ．バージ他，「薬剤塩」，１９７７年，ジャーナル・ファーム・サイエンス，６６号，１−１９頁（S. M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salt", J. Pharm. Sci., 66, p.1-19, 1977）を参照されたい。この文献はここで参照として含まれる。塩基添加塩はまた、酸の形態で精製された化合物を、適当な有機塩基または非有機塩基と分離して反応させ、このようにして形成された塩を単離することにより調製することができる。塩基添加塩は、薬剤学的に許容しうる金属塩およびアミン塩を含む。適当な酸添加塩の例としては、塩酸、硫酸、リン酸、および硝酸から選ばれる酸を用いて形成された塩が挙げられる。適当な塩基添加塩の例としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、および水酸化アンモニウムから選ばれる塩基を用いて形成された塩が挙げられる。
【００３８】
「薬剤学的に許容しうる」とは、医学的見地および獣医学的見地の範囲内において、過度の毒性、炎症、アレルギー反応およびそれと同様のものが発生することなく、ヒトおよび下等動物の細胞と接触させて使用するのに適していることをいい、合理的な利点／リスクの比と同様である。
【００３９】
上記式ＩＩにおいて、−ＯＲは例えば、以下のものから選択してもよい（条件によって排除されない限り）：水酸基、カチレート（エトキシカルボニルオキシ：カチル酸塩）、アセテート（酢酸塩）、スクシネート（コハク酸塩）、プロピオネート、ブチレート、バレレート、イソバレレート、カプロレート、イソカプロンレート、ジエチルアセテート、オクタノエート、デナノエート、ラウレート、ミリステート、パルミテート、ステアレート、ベンゾエート、フェニルアセテート、フェニルプロピオネート、シンナメート、ｐ−ニトロベンゾイルオキシ、３，５−ジニトロベンゾイルオキシ、ｐ−クロロベンゾイルオキシ、２，４−ジクロロベンゾイルオキシ、ｐ−ブロモベンゾイルオキシ、ｍ−ブロモベンゾイルオキシ、ｐ−メトキシベンゾイルオキシ、フタルイル、グリシネート、アラニネート、バリネート、フェニルアラニネート、イソロイシネート、メチオニネート、アルギニネート、アスパルテート、システイネート、グルタミネート、ヒスチジネート、リジネート、プロリネート、セリネート、スレオニネート、トリプトファネート、チロシネート、フマレート、およびマレエート。
【００４０】
上記式ＩＩにおいて、Ｒは例えば、低級アルキル基および低級アルコキシル基から選択してもよく、末端カルボン酸（−ＣＯＯＨ）残基で任意に置換されてよい。
【００４１】
一般式ＩＩで表される化合物およびその薬剤学的に許容しうる塩は、特に好ましくは以下の化合物である（条件によって排除されない限り）：
サルササポゲニン、
サルササポゲニンのカチル酸塩、
サルササポゲニンの酢酸塩、
サルササポゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニン、
エピサルササポゲニンのカチル酸塩、
エピサルササポゲニンの酢酸塩、
エピサルササポゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニン、
スミラゲニンのカチル酸塩、
スミラゲニンの酢酸塩、
スミラゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニン、
エピスミラゲニンのカチル酸塩、
エピスミラゲニンの酢酸塩、および
エピスミラゲニンのコハク酸塩およびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニングリシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンバリネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンフェニルアラニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピスミラゲニンイソロイシネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
サルササポゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
エピサルササポゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、
スミラゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩、および
エピスミラゲニンメチオニネートおよびその薬剤学的に許容しうる塩。
【００４２】
特に好ましい活性物質はエピサルササポゲニンおよびそのカチレート（cathylate; カチル酸塩）、アセテート（acetate; 酢酸塩）、グリシネート（glycinate）、アラニネート（alaninate）、バリネート（valinate）、フェニルアラニネート（phenylalaninate）、イソロイシネート（isoleucinate）、およびメチオニネート（methioninate）、ならびにこれらの薬剤学的に許容しうる塩である。
【００４３】
活性物質は薬剤学的に許容しうるプロドラックとして、輸送のために「製剤化（formulated）」することもでき、このことは、上述したように、ＷＯ−Ａ−０１／２３４０６に定義された方法と同様の方法で理解することができる。このようなプロドラッグの例には、３位にＯＨ基を有する形態を含み、３位の分子がスルホニル基（−ＳＯ３Ｈ）、ホスホニル基（−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２））、任意に置換されたアリールカルボニルオキシ基、または任意に置換されたアルキル−カルバモイルオキシ基であるものを含む。
【００４４】
（組成物および使用）
本発明のさらなる態様によれば、必要としているヒトまたはヒト以外の動物について、非認識的な神経変性、非認識的な神経筋変性、または認識的な神経または神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失を治療または予防する方法であって、上述したように定義された一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量、前記ヒトまたは前記ヒト以外の動物に投与すること、を含む方法を提供する。
【００４５】
本発明のさらなる態様によれば、必要としているヒトまたはヒト以外の動物について、認識障害を治療または予防する方法であって、上述したように定義された一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量、前記ヒトまたは前記ヒト以外の動物に投与すること、を含み、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない方法を提供する。
【００４６】
活性物質は、活性物質および適当な付加的成分を含む組成物の形態で投与してもよい。前記組成物は、例えば、薬剤組成物（薬物）、食品、サプリメント食品、または飲料であってもよい。そのような組成物は特定の化合物および／またはこれらの薬剤学的に許容しうる塩の混合物を含んでいてもよい。
【００４７】
本発明のさらなる態様によれば、ヒトまたはヒト以外の動物について、非認識的な神経変性、非認識的な神経筋変性、または認識的な神経または神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失に対する活性を有する組成物であって、上述したように定義された一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量含む組成物を提供する。
【００４８】
本発明のさらなる態様によれば、ヒトまたはヒト以外の動物について、認識障害に対する活性を有する組成物であって、上述したように定義された一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量含み、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない組成物を提供する。
【００４９】
本発明の文脈中、「薬剤組成物(pharmaceutical composition)」なる用語は、活性物質を含む組成物を意味し、投与および投与量の形態に応じて、保存剤、フィラー、分解剤、保湿剤、乳化剤、懸濁剤、甘味料、調味料、香料、抗菌剤、抗かび剤、潤滑剤、および調合剤などの薬剤学的に許容しうるキャリア、希釈剤、補助剤、添加剤、または賦形剤を付加的に含む。
【００５０】
ここで使用される「食品」、「サプリメント食品」、および「飲料」なる用語は、これらの用語の通常の意味を有し、薬学的な調剤に限定されない。
【００５１】
活性物質の投与量は、治療または予防の対象となる症状の重篤さに応じて幅広く変更可能である。適切な投与量を選択することは、過度な負荷なしにいわゆる当業者の能力の範囲内である。活性物質の投与量は例えば、体重１ｋｇあたり約０．３ｍｇより多くすることができ、好ましくは１日１回投与する。より典型的には、投与量を約１〜約２５ｍｇ／ｋｇの間（例えば、約１〜約１０ｍｇ／ｋｇの間）にし、好ましくは１日１回投与することができる。前記組成物は、単位投与の形式として適当に調合することができ、患者あたり約１〜約１０ｍｇ／ｋｇを１単位投与として投与するように調節され、所定時間内における投与回数および投与頻度が指定される。ヒトに使用する場合、投与量は、好適には、１日あたり約７０〜約７００ｍｇである。
【００５２】
「薬剤学的に許容しうる投与形式」とは、本発明の化合物の投与形式または本発明の組成物の投与形式を意味し、例えば、注射のための液体調剤のみならず、錠剤、糖衣錠、粉末、エリキシル剤、シロップ、懸濁液、スプレー、吸入剤、ドロップ、乳化液、溶液、顆粒、カプセル、座薬、およびリポゾーム調剤を含む。技術および調合は一般に、レミングトン，「薬科学」，マーク出版社，イーストン，ＰＡ，最新版（Remington, Pharmaceutical Science, Mark Publishing Co., Easton, PA, latest edition.）に記載されている。
【００５３】
ここで、一般に、特定群の化合物のうち１つが存在するということは、このような化合物が２種以上混合して存在することの中に含まれる。
【００５４】
本発明のさらなる態様によれば、アルツハイマー病（ＡＤ）、アルツハイマー型老年痴呆（ＳＤＡＴ）、加齢に関連する記憶障害（ＡＡＭＩ）、レビー小体型痴呆、または自閉症のうち１つに罹患する患者の認識障害を治療する方法であって、一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を薬理学的に有効な量投与することを含み、一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない方法を提供する。
【００５５】
本発明のさらなる態様によれば、ヒトまたはヒト以外の動物における認識機能を高める方法であって、一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を有効な量、患者に投与すること、を含み、一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない方法を提供する。この治療は、健常被験者の認識機能を高めるために、該健常被験者に施される非治療的方法であることができる。
【００５６】
本発明のさらなる態様によれば、患者であるヒトまたはヒト以外の動物について、（i）非認識的な神経変性、（ii）非認識的な神経筋変性、または（iii）認識的な神経または神経筋の損傷がない場合における、受容体の損失を治療する方法であって、前記患者は、パーキンソン病、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー（ＦＳＨ），デュッセン型筋ジストロフィー，ベッカー型筋ジストロフィーおよびブルース型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー、フューチ型ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、角膜変性症、反射性交感神経性萎縮症（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、起立性低血圧、慢性疲労症候群、喘息、心不全への罹患性、および黄斑変性のうち１つに罹患し、一般式ＩＩで表される化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を薬理学的に有効な量、前記患者に投与すること、を含む、方法を提供する。
【００５７】
認識機能または神経機能を高める方法、および上述したように定義されたある種の症状を治療する方法は、場合に応じて、薬剤組成物、食品、サプリメント食品または飲料の形態として、化合物または組成物あるいは薬剤を投与することによって達成することができる。
【００５８】
本発明はまた、パーキンソン病、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー（ＦＳＨ），デュッセン型筋ジストロフィー，ベッカー型筋ジストロフィーおよびブルース型筋ジストロフィーを含む筋ジストロフィー、フューチ型ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、角膜変性症、反射性交感神経性萎縮症（ＲＳＤＳＡ）、神経血管ジストロフィー、重症筋無力症、ランバート−イートン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症、起立性低血圧、慢性疲労症候群、喘息、心不全への罹患性、および黄斑変性を治療する方法において、薬剤組成物、食品、サプリメント食品、または飲料中で、一般式ＩＩで表される１種以上の化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩を成分とする使用を提供する。
【００５９】
本発明はまた、アルツハイマー病、ＳＤＡＴ、ＡＡＭＩ、ＭＣＩ、および自閉症の治療方法において、薬剤組成物、食品、サプリメント食品、または飲料中における、一般式ＩＩで表される１種以上の化合物またはその薬剤学的に許容しうる塩の使用であって、一般式ＩＩにおいて、Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは水素原子または無置換のアセチル基であり、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではない、使用を提供する。
【００６０】
（本発明の使用のための化合物の調製）
スミラゲニン、エピスミラゲニン、サルササポゲニン、およびエピサルササポゲニンは商業的に入手可能な材料である。供給者としては、例えば、シグマ  アルドリッチ（Sigma Ardrich）、リサーチプラスインク（Reseach Plus Inc.）、およびステラロイズインク（Steraloids Inc.）を含む。これらの材料の調製方法はまた、文献に記載されている（例えば、エピサルササポゲニンの調製がジャーナル・オブ・ケミカル・ソサイエティ，１９５９年，５２２５頁（JACS, p.5225, 1959）に記載されている）。エピサルササポゲニンは、金属水素化物の還元剤を用いてサルササポゲニンを還元することにより調製することができる。サルササポゲニンは、ラジスらの方法（ステロイド，１９９３年，第５８巻，３７８−３８９頁（Lajis et al, Steroids, 1993, 58, 387-389））を用いることにより調製することができる。
【００６１】
また、出発物質として、無置換のサポゲニンは幅広い植物種において天然に存在しており、特筆すべき植物としては、サリトリイバラ属、アスパラガス、ハナスゲ、ヤマノイモ、イトラン、またはリュウゼツランがある。スミラゲニンまたはサルササポゲニンは、本発明にしたがって使用され、サリトリイバラ属、アスパラガス、ハナスゲ、ヤマノイモ、イトラン、またはリュウゼツランから誘導された植物抽出物または乾燥粉末状植物材料の形態をとることができる。
【００６２】
式ＩＩで表される化合物であって、Ｒが水素原子であるもの以外は、Ｒが水素原子である化合物から従来の方法を用いて調製することができる。好ましい反応は求核置換反応であり、この求核置換反応では、式ＩＩで表される化合物のうちＲが水素原子である化合物を、下記式で表される化合物と反応させる。
【００６３】
Ｌ−Ｒ
上記式において、Ｒは水素原子、アルキルカルボニル基、アルコキシカルボニル基から選択され、アルキル基はアリール基、アミノ基、モノ−アルキル−アミノ基、ジ−アルキル−アミノ基、カルボン酸残基（−ＣＯＯＨ）、またはこれらの組み合わせで任意に置換され、Ｌは求核置換に適した条件下で脱離基である。
【００６４】
Ｌ−Ｒで表される化合物は例えば、カルボン酸、または適切であれば、無水物またはハロゲン化アシル（例えば、塩化アシル）であってもよい。例えば、Ｌ−Ｒで表される化合物において、Ｒはカチレート（エトキシカルボニル）部位であり、Ｌ−Ｒで表される化合物は好適には、クロロギ酸エチルである。
【００６５】
この反応は、好適には、ピリジンなどの塩基中で行なわれ、任意に、塩酸などの酸存在下で行なわれる。
【００６６】
求核置換反応の詳細はよく知られている。例えば、ＲＣ  ラロック，「総括的な有機変換」，１９８９年，ＶＣＨ出版（RC Larock, "in Comprehensive Organic, Transformations", VCH publishers, 1989）を参照されたい。
【００６７】
ここで言及された反応においては、反応性の官能基（例えば、水酸基、カルボキシル基、またはアミノ基）を保護することが必要な場合がある。前記反応において不必要な関与を防ぐために、これらの反応性の官能基は最終生成物に必要とされる。例えば、ＴＷ  グリーンおよびＰＧＭ  ワッツ，「有機化学における保護基」，１９９１年，ジョン  ウイリー＆ソンズ（TW Green and PGM Wuts, "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley & Sons, 1991）、およびＪＦＷ  マクオミー，「有機化学における保護基」，１９７３年，プレナム  プレス（JFW McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, 1973）を参照されたい。式Ｌ−Ｒで表される化合物中のアミノ置換基であって、Ｒが置換されたアミノ基であるものを保護するためには、アルコキシカルボニル保護基を使用することが好ましい。これにより、アミノ官能基は、合成工程において、乾燥溶媒中、酸条件下で脱保護されるまでは、アルコキシカルボニルアミノ基（好ましくは、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ基）として存在する。
【００６８】
このようにして調製された前記化合物は、従来の手法にて反応混合物から取り出すことができる。例えば、前記反応混合物から溶媒を蒸留留去するか、あるいは必要に応じて前記反応混合物から溶媒を蒸留留去した後、得られた残渣を水に加え、次いで、水と混和する溶媒を用いて抽出し、前記抽出物から溶媒を蒸留留去することにより、前記化合物を取り出すことができる。付加的に、希望に応じて、再結晶、再沈殿、または種々のクロマトグラフィー技術（特筆すべきは、カラムクロマトグラフィーまたはプレパラティブ薄層クロマトグラフィー）などの種々の公知の技術を用いて、前記生産物をさらに精製することができる。
【００６９】
（新規な化合物）
一般式ＩＩで表されるある種の化合物、これらを調製する方法における保護された中間体、およびこれらの塩はそれ自体新規であり、そしてこれらの新規な化合物は、本発明のさらなる態様に相当する。
【００７０】
本発明のさらなる態様によれば、一般式ＩＩで表される化合物を提供する。一般式ＩＩにおいて、Ｒはアルキルカルボニル基、アルコキシカルボニル基から選択され、アルキル基はアリール基、アミノ基、アルコキシカルボニルアミノ基、モノ−アルキル−アミノ基、ジ−アルキル−アミノ基、Ｎ−アルキル基、Ｎ−アルコキシカルボニル−アミノ基、またはカルボン酸残基（−ＣＯＯＨ）、あるいはこれらの組み合わせと任意に置換され、
Ｃ３位の立体化学がαでかつＣ２５位の立体化学がＳである場合に限り、Ｒは無置換のアセチル基であり、
Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒは無置換のエトキシカルボニル基ではなく、
Ｃ３位の立体化学がＳ（β）でかつＣ２５位の立体化学がＳである場合、あるいはＣ３位の立体化学がＲ（α）でかつＣ２５位の立体化学がＲである場合、Ｒはスクシニル基ではなく、
Ｃ２５位の立体化学がＲでかつＣ３位の立体化学がＳ（β）である場合、Ｒはプロピオニル基、ブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、カプロイル基、イソカプロイル基、ジエチルアセチル基、オクタノイル基、デカノイル基、ラウリル基、ミリスチル基、パルミトイル基、ステアリル基、ベンゾイル基、フェニルアセチル基、フェニルプロピオネート基、シンナメート基、ｐ−ニトロベンゾエート基、３，５−ジニトロベンゾエート基、ｐ−クロロベンゾエート基、２，４−ジクロロベンゾイル基、ｐ−ブロモベンゾイル基、ｍ−ブロモベンゾイル基、ｐ−メトキシベンゾイル基、ベンゼンスルホニル基、ｐ−トルエンスルホニル基、シクロペンチルプロピオニル基、フロイル基、またはフタルイル基ではない；
（上記条件を満たしたうえで、前記化合物には、すべての立体異性体および光学異性体、ならびにこれらの薬剤学的に許容しうる塩が含まれる）。
【００７１】
式ＩＩで表される化合物であって、Ｒがアセチル基以外の上述したように定義された基であるものを、新規な化合物として特に言及することができる。
【００７２】
それ自体が薬剤学的に許容しうるものでないものを含む、一般式ＩＩで表される化合物の新規な塩は、一般式ＩＩで表される化合物およびその薬剤学的な許容しうる塩を調製する方法において、中間体としての用途を見いだすことができる。
【００７３】
（活性に対する原理の検討）
理論に縛れることを望まずに、上述したように定義された化合物は、受容体を制御する能力を発揮すると考えられている。例えば、これらの化合物のうちのいくつかは、脳内でムスカリン受容体またはドーパミン受容体の損失を防止または抑制することが明らかになっている。治療を施されている動物において、前記化合物は、受容体の数または機能あるいはターンオーバーにおける欠陥を修復することによって機能していると考えられている。
【００７４】
前記化合物は、脳由来成長因子および／または神経成長因子などの神経栄養因子の合成または放出を増加させるか、または前記神経栄養因子の分解率を低下させているという１つの仮説がある。成長因子に対する効果は、細胞質ゾル受容体または核受容体に対する化合物の影響、またはプロモーター領域に対する化合物の結合に起因すると考えられ、最終的な効果は、成長因子に対するｍＲＮＡの生産率に直接影響するか、あるいは別の物質因子の生産の増加という結果として表れる。
【００７５】
アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の増加した表出（expression）および／または異常な発生（processing）は、アミロイド斑や脳血管性アミロイド沈着の形成と関連付けられる。アミロイド斑や脳血管性アミロイド沈着の形成は、アルツハイマー病の主要な形態学的特徴である。ＡＰＰのタンパク質分解を制御してアミロイド発生断片および非アミロイド発生断片を形成するプロセスは特に興味深い。タンパク質のβアミロイド配列中でα−セクレターゼ酵素によってＡＰＰが開裂する結果、非アミロイド発生断片のＣ−末端断片および可溶性のＡＰＰＳα断面が形成される。後者の断片（可溶性のＡＰＰＳα断面）は、大脳室（ＩＣＶ）内に注入するとマウスの記憶を高めるとともに神経活性および神経保護活性を有することが示されている。これに対して、βセクレターゼによるＡＰＰの発生は、βアミロイドのＮ末端を露出させる。このβアミロイドは、可変Ｃ−末端にてγ−セクレターゼによって放出される。その結果得られるβ−アミロイドのペプチドは３９−４３個のアミノ酸を含み、かつ神経毒性を示し、さらに内部ニュ−ロン結合（inter-neurone connection）を阻害する斑内に堆積されることが明らかになっている。
【００７６】
ムスカリン受容体の刺激がα−セクレターゼの活性を増加させることを示す数多くの研究がなされている。結果として、ＡＰＰが処理されることで、神経保護効果とともにＡＰＰＳαの発生が増加している。同時に、β−セクレターゼおよびγ−セクレターゼによるＡＰＰの処理は減少し、結果としてβ−アミロイドが減少する。ブラジキニンおよびバソプレシンと同様に、神経成長因子（ＮＧＦ）および脳由来成長因子（ＢＤＮＦ）などの他の転写因子は、ＡＰＰＳαへと処理されるＡＰＰの割合を増加させる点で類似する効果を有するかもしれない。ＮＧＦの効果に関与する因子は数多く存在するかもしれない。このＮＧＦの効果には、チロシンキナーゼ受容体（ＴｒｋＡ）への因子の結合、ならびに引き続いて起こるリン酸化を用いたホスホリパーゼＣγの刺激、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）の活性化、およびα−セクレターゼの相対的な活性の増加が含まれる。
【００７７】
本発明に係る化合物は、ムスカリン受容体数の減少を抑制し、および／またはムスカリン受容体数を増加させるため、特に有用性が高い。本発明に係る化合物の特徴は、以下のように３つのパートに示すことができる。
１．ムスカリン受容体数の増加は、シナプスの転写を増加させる。これにより、ニコチン受容体数の減少が抑制されるか、および／またはニコチン受容体数が増加する。ニコチン受容体はシナプス間隙の上流に配置され、シナプス間隙へのアセチルコリンの放出を誘導すると考えられている。これにより、ムスカリン受容体の活動が促進されるため、全体の効果が増幅される。
２．副次的に、受容体数の増加はα−セクレターゼの活動を結果的に増加させる。これにより、
２．１  β−アミロイドの産生が減少し、その結果、斑の形成およびニューロンの損失が減少する。
２．２  ＡＰＰＳαが増加し、その結果、大脳機能が改善される。大脳機能の改善は、短期間および長期間の記憶が改善されたことに裏付けられる。
【００７８】
［図面および実施例の詳細な説明］
限定されない実施例によって、本発明をさらに説明するために、添付する図面および以下に示す実施例に対して参照が作成されるだろう。
【００７９】
図１に示す図面によれば、本発明の化合物の機能の概略説明が示されている。前記化合物は主に細胞の核に作用すると考えられている。しかしながら、本発明は特定の作用様式に限定されるわけではない。活性物質を投与した結果、観察された受容体数の増加は、ムスカリン受容体タンパク質（および／またはニコチン受容体タンパク質および／またはドーパミン受容体タンパク質）の発生の増加を誘導したと解釈された。セクレターゼとβ−アミロイドとの間で関連する可能性が、前記図面において示唆された。
【００８０】
図２〜図５は以下に詳述するとおりであり、実施例の説明に関連する。
【００８１】
エピスミラゲニンのカチル酸塩、エピスミラゲニンの酢酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのコハク酸塩、エピサルササポゲニンのエチルコハク酸塩（エチルサクシネート；比較例）、サルササポゲニン、エピサルササポゲニン、スミラゲニン、およびエピスミラゲニンについて、多くのインビトロおよびインビボアッセイにおいて、活性に関する試験がなされた。受容体数の調節において可能性のある活性を決定する際に重要な鍵となるアッセイ／実験は以下の通りである。
【００８２】
アッセイ１：細胞系アッセイ
チャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞に、ムスカリン受容体および／またはβ−アドレナリン受容体をコードするベクターを形質移入した。大部分の実験で用いられた細胞系は、ムスカリン受容体を発生する細胞系だった。
【００８３】
アッセイ２：アルツハイマー病モデル
β−アミロイドおよびイボテン酸をラットの脳に注入したアルツハイマー病のインビボモデルである。
【００８４】
アッセイ３：学習および記憶試験
試験化合物を投与したラットについて学習および記憶をテストするために、Ｙ−迷路（Ｙ−ｍａｚｅ）を用いた。引き続いてラットを殺し、二重サイト競合的結合法（dual-site competitive binding）によって脳内のムスカリン受容体の密度をアッセイし、Ｙ−迷路の行動、受容体の密度、および活性物質の活性とを相関させた。
【００８５】
アッセイ４：培養したニューロンの神経保護
試験化合物について、ニューロンにとって好ましくない環境下での傷害に対してニューロンを保護する能力をインビトロでテストした。
【００８６】
（方法および結果）
これらの実験の方法および結果は以下の実施例に示されており、この実施例はまた、合成方法の実施例を提供する。
【実施例１】
【００８７】
［細胞系アッセイ］
ムスカリン受容体に対応するベクターを移植したＣＨＯ細胞中のムスカリン受容体の発現に対する、エピスミラゲニンのカチル酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのコハク酸塩、エピスミラゲニンの酢酸塩、およびサルササポゲニンの効果を調べた。受容体の数は、［３Ｈ］ＮＭＳ結合を用いてアッセイされ、非特異的な結合を差し引いた。前記化合物は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解させ、ＤＭＳＯがコントロール（対照）として用いられた。
【００８８】
方法：
高レベルのムスカリン受容体（〜２．２ｐｍｏｌｍｇ／タンパク質）を発現するチャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞を、実験開始前１日に、２４ウエルプレートに接種した。培地は溶媒（ＤＭＳＯ）または化合物を含む培養液と交換した。細胞は２／３日間インキュベートし、次いで培養液を交換した後、さらに２／３日間インキュベートした。細胞は、飽和濃度の標識Ｎ−メチル−スコポラミン（３［Ｈ］ＮＭＳ）とともにインキュベートした。細胞は氷冷したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（３ｘ）で洗浄した後、液体シンチレーション計測により、ＲＩＰＡ緩衝液を用いて受容体を溶解させることにより、結合［３Ｈ］ＮＭＳが決定された。
【００８９】
図５に示される結果は、ＣＨＯ細胞系を使用しており、このＣＨＯ細胞系は同時形質移入され、β２アドレナリン受容体およびｍ３ムスカリン受容体の両方を発現する。β２アドレナリン受容体およびｍ３ムスカリン受容体を測定するために、［３Ｈ］ＮＭＳおよび［３Ｈ］ＣＧＰが使用された。
【００９０】
結果：
結果は下記の表１および図５に示されている。培養時間中、エピスミラゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのコハク酸塩、およびサルササポゲニンを用いた処理はそれぞれ、ムスカリン受容体の数の減少を抑制した。同時形質移入した細胞系と、エピスミラゲニンの酢酸塩とのコインキュベーション（co-incubation）では、ｍ３受容体の密度は大きく変化しなかったが、エピスミラゲニンの酢酸塩はβ２アドレナリン受容体の減少を有意に抑制した。
【００９１】
【表１】
2004525945.tif 000005
【００９２】
このように、前記実験は、エピスミラゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのコハク酸塩、エピスミラゲニンの酢酸塩、およびサルササポゲニンは、インビトロで培養されたＣＨＯ細胞に発現されたムスカリン受容体の数またはアドレナリン受容体の数を増加させることができることを示唆している。本発明の化合物は受容体の数を正常化させる機能を有する。すなわち、本発明の化合物は受容体の数が経時的に減少するのを抑制する傾向があり、かつ、受容体のレベルが減少した細胞において、受容体の数を正常なレベルに回復させる傾向を有する。
【実施例２】
【００９３】
［アルツハイマー病モデル］
アルツハイマー病のインビボモデルが使用された。このアルツハイマー病モデルでは、βアミロイドおよびイボテン酸がラットの脳内に注入されて、脳内での受容体の損失および認識障害が引き起こされる。従来の研究では、ラットの脳の基底核（nucleus vasalis）にβアミロイドを局所注射することで、術後２ヶ月までにコリン作動性の機能低下および行動障害が引き起こされる（ジオバンネリ他，１９９５年，ニューロサイエンス，６６，７８１−７９２頁（Giovannneli, et al., 1995, Neuroscience, 66, 781-792））。加えて、βアミロイドを少量のイボテン酸とともにラットの海馬に同時注入することにより、注入部位に隣接する箇所だけではなく、注入部位から離れている箇所においても、神経膠細胞が浸潤するとともにニューロンが減少する（モリモト他，１９９８年，ニューロサイエンス，８４，４７９−４８７（Morimoto et al., 1998, Neuroscience, 84, 479-487））。
【００９４】
方法：
我々の研究では、モリモトの方法（モリモト他，１９９８年，ニューロサイエンス，８４，４７９−４８７（Morimoto et al., 1998, Neuroscience, 84, 479-487））に、いくつかの修正（双方向注入のかわりに一方向注入を用いた）を加えた方法を使用した。３ヶ月齢のSprague Dawleyラットを各群にランダムに分けた。β１−４０アミロイドおよびイボテン酸（両方ともシグマより入手した）を定位的な装置（ストールティング（Stoelting）（株）製）によって注入し、座標はＡＰ＝−０．５ｍｍ（正中線に対して右）、Ｌ＝−２．８ｍｍ（ブレグマから後方）、Ｈ＝−７．０ｍｍ（硬膜の腹側）であった。各ラットへの投与量は、生理食塩水１μｌ中にβ１−４０アミロイドが４μｇおよびイボテン酸が１μｇであった。注入は２０分間で完了し、注射針は１０分後に引き抜かれた。次に、皮膚を縫合した。
【００９５】
８群は、
通常の生理食塩水が注入された手術コントロール（コントロール）
モデル（βアミロイドおよびイボテン酸が注入されたコントロール）
モデル＋エピサルササポゲニンのカチル酸塩（１８ｍｇ／ｋｇ／日）＊
モデル＋サルササポゲニンのカチル酸塩（１８ｍｇ／ｋｇ／日）＊
モデル＋エピサルササポゲニンのエチルコハク酸塩（１８ｍｇ／ｋｇ／日）（比較例）
モデル＋エピサルササポゲニン（１８ｍｇ／ｋｇ／日）＊
モデル＋エピスミラゲニン（１８ｍｇ／ｋｇ／日）＊
モデル＋ジイソゲニン（１８ｍｇ／ｋｇ／日）
＊を付した化合物は本発明の化合物
［薬物投与］
エピサルササポゲニンのカチル酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニンのエチルコハク酸塩（比較例の化合物）、エピサルササポゲニン、エピスミラゲニン、およびジオスゲニン（投与量はすべて１８ｍｇ／ｋｇ／日）が、胃管を通してカルボキシメチルセルロースのナトリウム塩（ＣＭＣ−ナトリウム）（０．５％）中の安定な懸濁液として動物に１日１回投与された。コントロールおよびアルツハイマー病モデル群は１日１回、同体積のＣＭＣ−ナトリウムを投与された。薬物および溶媒は、手術の２０日前から２ヶ月間与えられた。
【００９６】
［ムスカリン受容体の密度の測定］
脳サンプルはホモジナイズされ、遠心分離されて、２７０００×ｇにて遠心分離のペレットを再度ホモジナイズした後、測定に用いられた。３Ｈ−ＱＮＢの濃度は飽和範囲で選択された。インキュベーションおよび分離後、結合部分を液体シンチレーションカウンタにて測定した。
【００９７】
［ステップスルーテスト］
試験化合物の記憶に関する効果はステップスルーテストを用いて評価された。Ａ６０×１５×１５ｃｍの箱を２つの均等な大きさの部屋に仕切り、そのうちの１つの部屋は銅棒の基盤を有し、使用時に電気的にチャージ（交流４０Ｖ）される暗室とし、もう１つの部屋は電気的にチャージされない明室とした。２つの部屋の間には、ラットが通過できる開口部（穴）が設けられた。実験は各ラットにつき２日間連続して行なわれた。第１日目は訓練用であり、ラットを初めの３分間で箱の中に慣れさせ、次に明室に入れ、ラットが穴へと入ると、暗室の銅棒を５分間チャージした。第２日目は試験用であり、5分間に横断した回数が記録された。記憶の改善が横断した回数の減少によって示された。
【００９８】
［結果］
アルツハイマー病モデルの脳におけるムスカリン受容体の密度は、コントロールと比較して有意に低かった。エピスミラゲニンのカチル酸塩、サルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニン、およびエピスミラゲニンは、脳のムスカリン受容体の密度を有意に増加させたのに対し、ジオスゲニンおよびエピサルササポゲニンのエチルコハク酸塩はムスカリン受容体の濃度を大きく変化させなかった。これにより、前記実験は、本発明の化合物が受容体の数を正常化する機能を有していること、すなわち、受容体のレベルが減少した細胞に本発明の化合物を投与した場合、本発明の化合物が受容体の数を正常なレベルに回復させる傾向を有することを示唆している。
【００９９】
５分間の誤った応答数（錯誤数）は、コントロール群と比較してアルツハイマー病モデル群のほうが有意に高かったことから、記憶障害が示唆された（表２を参照）。エピスミラゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、エピサルササポゲニン、およびサルササポゲニンのコハク酸塩はそれぞれ、誤った応答の数を有意に減少させたのに対し、ジオスゲニンおよびエピサルササポゲニンのエチルコハク酸塩はいずれも、誤った応答の数を減少させるのに効果的でなかった。
【０１００】
【表２】
2004525945.tif 000006
【０１０１】
統計的分析は対応のないｔ検定（unpaired Student t test）を使用した。＊はｐ＜０．０５を示す。
【実施例３】
【０１０２】
学習および記憶試験
老齢Sprague Dawleyラットを４群（１つのコントロール群とサルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、またはスミラゲニン（１８ｍｇ／ｋｇ／日，ｎ＝１０）を３ヶ月間投与する群）にランダムに分けた。投与していない若齢ラットのコントロール群（ｎ＝１４）も研究に含めた。薬物の１日用量は最小限の餌に混ぜ、毎朝各ラットに別々に投与した。
【０１０３】
Ｙ−迷路装置は学習および記憶試験に用いられた。Ｙ−迷路装置の各アームの床には、必要なときにいつでも、調節された電圧を付加することにより電流を付加するための銅棒が配列している。各アームは長さ４５ｃｍであり、末端に１５Ｗのランプを有し、このランプの電源を必要なときにオンにする。薬物の投与を３ヶ月行なった後、以下のように、各ラットを７日間連続して訓練した。各訓練期間において、ラットをＹ−迷路装置のアームに入れ、その２分後に電流を銅棒に流して、時計回りのアームのランプを灯して、非刺激領域を示した。ラットがそのアームへと進む場合、１つの正しい反応として記録され、一方、そうでない場合、１つの誤った反応として記録される。この刺激−反応試験は毎日２０回繰り返され、２回の連続した試験の間には５秒の休憩を挟んだ。学習能力を示すために、７日目における２０回の試験後の正しい反応の数が用いられた（正しい反応の数が多いほど学習能力が高い）。次いで、ラットは３０日間休憩させて、もう一度この手順を繰り返した。記憶能力を表すために、３０日間の試験期間後の２０回の試験における正しい反応の数が用いられた。
【０１０４】
［脳内のムスカリン受容体の密度の測定］
組織の調製：脳は断頭した後即座に摘出し、ドライアイス中で凍らせて、冷凍庫へと移動させた。脳はホモジナイズし、ペレットを最終的に緩衝液中で懸濁させた。
【０１０５】
二重サイト競合的結合法：３Ｈ−ＱＮＢ（キヌクリニジル  ベンジレート）が、インビトロでムスカリン受容体のサブタイプに非選択的な放射性リガンドとして用いられた。ピレンジピンが選択的な非放射性競合剤として用いられた。タンパク質の濃度がマイクロロウリー（micro-Lowry）法によって決定された。
【０１０６】
結果を図２および図３に示した。Ｙ−迷路実験から、老齢ラットでは学習能力および記憶能力の両方とも悪いことが明らかになった。サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンを老齢ラットに投与することにより、学習能力および記憶能力が回復した。老齢ラットではムスカリン受容体の密度は有意に減少した。サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンはムスカリン受容体の数を大幅に回復させた。
【０１０７】
［結論］
サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンは、老齢ラットの脳内でのムスカリン受容体の数を、若齢ラットのムスカリン受容体の数まで回復させた。老齢ラットの脳内における、サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンによるムスカリン受容体の密度の回復は、学習能力および記憶能力の増加と関連があった。
【実施例４】
【０１０８】
［サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンの神経保護効果］
本研究の目的は、グルタメートを用いて処理したラットの初代大脳皮質培養の生存率に関するサルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンの効果を検査することであった。グルタメートは神経変性を誘導するものとして知られている。
【０１０９】
［皮質ニューロンの初代培養］
ラットの皮質ニューロンは１０日間培養された。１０日目に、培地を無血清の規定培地に交換した。１２日目に、グルタメートを添加する２４時間前に、培養細胞を洗浄して、陽性コントロール（β−オエストラジオール）、試験化合物（サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、またはスミラゲニン）または溶媒のコントロール（ＤＭＳＯ，０．２５％）を含む新しい培地と交換した。
【０１１０】
１３日目に、グルタメートを培地に添加した。
【０１１１】
インキュベーション期間の後、培養細胞を新たな培養液で洗浄し、新たな培地中に入れた後、関連する化合物または溶媒を添加して、グルタメート投与後２４時間における前記試験化合物の保護効果を評価した。
【０１１２】
神経細胞の生存率は、試験化合物またはグルタメートと試験化合物の添加後２４時間において、培地中に遊離された乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）活性を測定することにより、サイトトックス（Cytotox）９６非放射性キットを使用して、４５０ｎｍでの吸収波長を測定することにより定量した。
【０１１３】
［結果］
グルタメートを用いたラット初代皮質培養の処理では、処理後２４時間において皮質ニューロンを有意に変性させた。このことは、培地中への乳酸デヒドロゲナーゼの遊離が増加したことにより実証された。
【０１１４】
サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンを用いて前処理を２４時間行なった初代皮質培養においては、グルタメートにより誘導された神経変性が有意に減少した（図４）。
【０１１５】
サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンはいずれも、インビトロでのラット一次皮質ニューロンにおいて、グルタメートにより誘導された神経変性に対して、顕著な神経保護効果を発揮した。
【実施例５】
【０１１６】
サルササポゲニンのカチル酸塩（３−エトキシカルボニル −５β，２０α，２２α，２５Ｓ−スピロスタン−３β−オール）の合成
サルササポゲニン (2.08 g, 5.0 mmol)を溶解させた乾燥ジクロロメタン溶液 (20 ml)および乾燥ピリジン (1.02 g, 12.9 mmol)を攪拌しながら、ギ酸クロロエチル (1.40 g, 12.9 mmol) を滴下した。混合液を室温で１８時間攪拌し、次いで水 (30 ml)およびジクロロメタンの間で分液処理を行なった。水層をジクロロメタンで２回抽出した後、有機層をあわせて水で洗浄した後、硫酸マグネシウムを用いて乾燥させた。溶媒を減圧蒸留して、灰白色の固体 (2.6 g)を得た。この物質を、酢酸エチル−ヘキサン(1:9)による溶出を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した後、アセトン(2x)から再結晶することにより、サルササポゲニンのカチル酸塩 (0.72 g, 29%)を得た；m/z 488 (M+for C３０H４８O５);１H-NMR (270 MHz, CDCl３) δ0.76 (3H, s, 18-CH３), 0.98 (3H, s, 19-CH３), 0.99 (3H, d, J＝6.4 Hz, 21-CH３),  1.08 (3H, d, J＝7.0 Hz, 27-CH３), 1.09-2.10 (27H, complex m, aliphatic H)は1.31 (3H, t, J＝7 Hz, CO２-C-CH３)と重複, 3.30 (1H, brd, 26-OCHH), 3.95 (1H, brdd, J＝2.7, 10.9 Hz, 26-OCHH), 4.18 (2H, q, J＝7 Hz, CO２CH２), 4.40 (1H, brdd, J＝8.8, 7.2 Hz, 16-OCH), 4.95 (1H, brピーク, H-3) ppm;；１３C NMR (67 MHz, CDCl３) δ14.3 (C-21, C-C-O２C), 16.1, 16.5, 20.9, 23.7, 25.0, 25.8, 26.0, 26.3, 26.4, 27.1, 30.5, 30.6, 31.7, 35.0, 35.3, 37.1, 40.0, 40.3, 40.7, 42.1, 56.4 (C-14), 62.1 (C-17), 63.5 (C-O２C), 65.1 (C-26), 74.8 (C-3), 81.0 (C-16), 109.7 (C-22), 154.8 (carbonyl) ppm；Rｆ0.7 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４)。
【実施例６】
【０１１７】
エピサルササポゲニンのカチル酸塩（３−エトキシカルボニル −５β，２０α，２２α，２５Ｓ−スピロスタン−３α−オール）の合成
リチウム  トリ−ｔｅｒｔ−ブトキシアルミノハイドライドのテトラヒドロフラン溶液 (1M, 150 ml, 0.15 mol)を、サルササポゲノン (41.4 g, 0.10 mol)（サルササポゲノンはラジス（Lajis）他の方法により製造された；ラジス他，ステロイド，１９９３年，５８，３８７−３８９頁（Lajis et al, Steroids, 1993, 58, 387-389））の乾燥テトラヒドロフラン (400 ml)溶液に、乾燥窒素雰囲気下２０±５℃で注意深く（２０分間より長く）滴下した。反応混合物を室温で２時間攪拌した。得られた溶液を硫酸ナトリウムの飽和水溶液 (50 ml)で注意深くクエンチし、ハイフロ（hyflo）パッドでろ過することにより無機塩を除去し、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）で洗浄した。溶媒を減圧除去し、残渣 (約40 g)を酢酸エチル (500 ml)と１Ｍ塩酸 (200 ml)との間で分液処理した。２つの溶媒の界面に溶解せずに残った白い物質をろ過により除去し、水 (2 x 100 ml)で洗浄し真空乾燥した。固体を酢酸エチル (2 x 250 ml, 各５分間)で二度こねて、溶媒の上澄みを静かに捨てて、不溶性の物質を真空炉内で乾燥させた。以上により、粗エピサルササポゲニン (23.1 g)を得、これをアセトン (1,500 ml)から再結晶することにより、エピサルササポゲニン (12.6 g, 30%)を白色結晶として得た。
【０１１８】
融点 214-216℃； m/z  416 (M+for C２７H４４O３)；１H NMR (270 MHz, CDCl３) δ0.75 (3H, s, 18-CH３), 0.94 (3H, s, 19-CH３), 0.99 (3H, d, J＝6.6 Hz, 21-CH３), 1.08 (3H, d, J＝7.3 Hz, 27-CH３), 1.1-2.1 (27H, complex m, aliphatic H), 3.30 (1H, brd, J＝11.0 Hz, 26-OCHH), 3.55-3.72 (1H, 7 line m, J＝11.0, 5.5, 5.5 Hz, H-3), 3.95 (1H, dd, J＝11.0 , 2.6 Hz, 26-OCHH), 4.40 (1H, dd, J＝8.0, 5.5 Hz, 16-OCH) ppm;１３C NMR (67 MHz, CDCl３)δ14.3 (C-21), 16.1 (C-27), 16.5 (C-18), 20.6 (C-11), 23.4 (C-19), 25.8 (C-24), 26.0 (C-23), 26.7 (C-6), 27.1 (C-25,C-7), 30.5 (C-2), 31.8 (C-15), 34.7 (C-10), 35.4 (C-1), 35.5 (C-8), 36.5 (C-4), 40.3 (C-12), 40.5 (C-9), 40.6 (C-13), 42.0 (C-5), 42.1 (C-20), 56.4 (C-14), 62.1  (C-17), 65.1 (C-26), 71.8 (C-3), 81.0 (C-16), 109.7 (C-22) ppm； Rｆ0.35 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン, １：４)。
【０１１９】
二次収集物 (5.2 g)が引き続いて得られた。上記実験で得られた酢酸エチル抽出物が約１／５の体積に濃縮されて、エピサルササポゲニン (3.6 g)がさらに得られた。
【０１２０】
エピサルササポゲニン (10.0 g, 0.024 mol)を溶解させた乾燥ジクロロメタン溶液 (200 ml)および乾燥ピリジン (10.2 g, 0.13 mol)を攪拌しながら、ギ酸クロロエチル (14.0 g, 0.13 mol)を滴下した。桃色の混合液を室温で１８時間攪拌し、次いで水(30 ml)およびジクロロメタンの間で分液処理を行なった。水層をジクロロメタンで２回抽出した後、有機層をあわせて水で洗浄した後、硫酸マグネシウムを用いて乾燥させた。溶媒を減圧蒸留して、灰白色の固体 (13.4 g)を得た。この物質をアセトン (約300 ml)から再結晶することにより、エピサルササポゲニンのカチル酸塩(8.9 g, 76%)を得た；融点：154-156℃； m/z 488 (M+ for C３０H４８O５);１H NMR (270 MHz, CDCl３) δ0.75 (3H, s, 18-CH３), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 0.99 (3H, d, J＝6.6 Hz, 21-CH３), 1.08 (3H, d, J＝7.0 Hz, 27-CH３), 1.1-2.1 (27H, complex m, aliphatic H)は1.30 (3H, t, J＝7.1 Hz, CO２-C-CH３)と重複, 3.30 (1H, brd, J＝11.0 Hz, 26-OCHH), 3.95 (1H, dd, J＝11.0, 2.6 Hz, 26-OCHH), 4.18 (2H, q, J＝7 Hz, CO２CH２), 4.41 (1H, brdd, J＝8.0, 6.3 Hz, 16-OCH), 4.51-4.66 (1H, 7 line m, H-3) ppm；１３C NMR (67 MHz, CDCl３) δ14.3 (C-C-O２C), 14.4 (C-21), 16.1, 16.5, 20.6, 23.3, 25.8, 26.0, 26.5, 26.6, 26.9, 27.1, 31.7, 32.1, 32.8, 34.7, 35.0, 35.4, 40.3, 40.5, 40.6, 41.8, 42.1, 56.4 (C-14), 62.1 (C-17), 63.6 (C-O２C), 65.1 (C-26), 77.9 (C-3), 81.0 (C-16), 109.7 (C-22), 154.6 (carbonyl) ppm；Rｆ0.75 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４)。
【実施例７】
【０１２１】
エピサルササポゲニンのコハク酸塩（モノ−３α，５β，２０α，２５Ｓ−スピロスタニル）の合成
エピサルササポゲニン(8.0 g, 19.2 mmol)およびコハク酸無水物 (8.0 g; 80 mmol)を、微細な粒子からなる均一な混合物が得られるまで、乳棒および乳鉢を用いて粉砕した。この粉末状の混合物に乾燥ピリジンを滴下しながら攪拌し、オイルバス上で８０℃に加熱した。混合物をオイルバスの温度を１２０±５℃に昇温して窒素雰囲気下で攪拌して、「溶解」した状態を得、この溶解物を３０分間この温度に維持した。冷却後、残った固体を水(300 ml)中で粉砕し、１Ｍ塩酸を加えて酸性にし、前記混合物を粉砕した。得られた薄灰色の固体をろ過により集め、水で洗浄し、メタノール(c a. 400 ml)から再結晶し、熱時ろ過によって炭素を脱色して、エピサルササポゲニンのコハク酸塩を白色結晶(7.46 g, 75%)として得た；融点：195-197℃； m/z 516 (M+for C３１H４８O６)；１H NMR (270 MHz, CDCl３) δ0.76 (3H, s, 18-CH３), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 1.00 (3H, d, J＝6.2 Hz, 21-CH３), 1.08 (3H, d, J＝7.0 Hz, 27-CH３), 1.2-2.1 (27H, complex m, aliphatic H), 2.63 (4H, m, COCH２CH２CO), 3.31 (1H, brd, J＝11.0 Hz, 26-OCHH), 3.96 (1H, dd, J＝11.0, 2.6 Hz, 26-OCHH), 4.42 (1H, brdd, J＝8.0, 6.4Hz, 16-OCH), 4.75 (1H, m, H-3) ppm;13C NMR (67 MHz, CDCl３) δ14.3 (C-21), 16.1 (C-27), 16.5 (C-18), 20.6 (C-11), 23.4 (C-19), 25.8, 25.9, 26.6, 27.0, 27.1, 29.1, 29.3, 31.7 (CCO２), 32.1 (CCO２), 34.7, 35.1, 35.5, 40.2, 40.6, 40.7, 41.9, 42.2, 56.3 (C-14), 62.1 (C-17), 65.1 (C-26), 74.9 (C-3), 81.0 (C-16), 109.8 (C-22), 171.7 (ester carbonyl), 177.9 (carbonyl) ppm； Rｆ0.14 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，３：７)。
【実施例８】
【０１２２】
エピスミラゲニンのカチル酸塩（３−エトキシカルボニル −５β，２０α，２２α，２５Ｒ−スピロスタン−３α−オール）の合成
エピスミラゲニン (1.0 g, 2.4 mmol)を溶解させた乾燥ジクロロメタン溶液 (30 ml)および乾燥ピリジン (1.02 g, 12.9 mmol)を攪拌しながら、ギ酸クロロエチル (1.40g, 12.9 mmol)を滴下した。桃色の混合液を室温で４時間攪拌し、次いで水 (50 ml)およびジクロロメタンの間で分液処理を行なった。水層をジクロロメタンで２回抽出した後このジクロロメタンを有機層とあわせて水で洗浄した後、硫酸マグネシウムを用いて乾燥させた。溶媒を減圧蒸留して、薄黄色の固体 (1.1 g)を得た。この化合物をアセトンから再結晶することにより、エピスミラゲニンのカチル酸塩 (0.47 g, 40%)を結晶として得た；融点：176-179℃; m/z 488 (M+for C３０H４８O５)１H NMR (270 MHz, CDCl３) δ0.75 (3H, s, 18-CH３), 0.79 (3H, d, J＝6.2 Hz, 27-CH３), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 0.96 (3H, d, J＝7.3 Hz, 21-CH３), 1.0-2.05 (27H, complex m, aliphatic H) は1.30 (3H, t, J＝7.3 Hz, CO2-C-CH3)と重複, 3.37 (1H, t, J＝11.0 Hz, 26-OCHH), 3.48 (1H, m, 26-OCHH), 4.17 (2H, q, J＝7.3 Hz, CO２CH２), 4.40 (1H, m, 16-OCH), 4.58 (1H, 7 line m, H-3) ppm;１３C NMR (67 MHz, CDCl３) δ14.3 (C-C-O２C), 14.5 (C-21), 16.5 (C-18), 17.2 (C-27), 20.6 (C-11), 23.3 (C-19), 26.5, 26.6, 26.9, 28.8, 30.3, 31.4, 31.8, 32.1, 34.7, 35.0, 35.4, 40.2, 40.5, 40.6, 41.6, 41.8, 56.4 (C-14), 62.2 (C-17), 63.6 (C-O２C), 66.8 (C-26), 77.9 (C-3), 80.9 (C-16), 109.2 (C-22), 154.6 (carbonyl) ppm； Rｆ0.8 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４)。
【実施例９】
【０１２３】
エピサルササポゲニンのグリシネート塩酸塩の合成
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｓ−スピロスタン−３α−イル  グリシネート（エピサルササポゲニン  ＢＯＣ  グリシネート）
ジシクロヘキシルカルボジイミド (0.68 g, 3.3 mmol)を１分間かけて、エピサルササポゲニン (1.0 g, 2.4 mmol)，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグリシン (0.53 g, 3.0 mmol)，４−ジメチルアミノピリジン(10 mg, 0.1 mmol)，および乾燥ジクロロメタン (20ml)の攪拌した混合物に０−５℃で滴下した。混合物を室温で一晩攪拌し、ジシクロヘキシルウレアをろ過により除去し、次いで炭酸水素ナトリウム溶液 (水20 mlに1.5 gを溶解)およびジクロロメタン (15 ml)との間で分液処理を行なった。有機層を分離し、１Ｎ塩酸(15 ml)、次いで水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減圧留去し、灰白色の泡状物を得た。この物質を粉砕して、エーテル (25 ml)中で３時間攪拌させた。一晩静置して、（残留するジシクロヘキシルウレアを除去するため）ろ過を行ない、ろ液を減圧留去して、灰白色の固体(約1.1 g)を得た。メタノール(約30 ml)から再結晶して、ＢＯＣグリシネート誘導体を白色微細結晶(0.40 g)として得た。
【０１２４】
融点：171-173℃； m/z  573.5 (M+for C３４H５５NO６) δＨ(270 MHz, CDCl３)  0.76 (3H, s, 18-CH３), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 0.99 (3H, d, J＝6.2 Hz, 21-CH３), 1.08 (3H, d, J＝7.0 Hz, 27-CH３), 1.1-2.1 (27H, complex m, aliphatic H) は1.46 (9H, s, C(CH３)３)と重複， 3.30 (1H, brd, J＝11.0 Hz, 26-OC"H"H), 3.86 (2H, brd, J＝4.8 Hz, CH２N),  3.95 (1H, dd, J＝11.0, 2.6 Hz, 26-OCH"H"),  4.42 (1H, m, 16-OCH), 4.79 (1H, 7 line m, H-3), 5.04 (1H, brs,NH). δｃ (270 MHz, CDCl３)  14.3 (C-21), 16.1 (C-27), 16.5 (C-18), 20.7 (C-11), 23.3 (C-19), 25.8, 26.0, 26.6, 26.9, 27.1, 28.4, 31.8, 32.2, 34.7, 35.0, 35.5, 40.2, 40.6, 40.7, 41.9, 42.2, 42.8, 56.4 (C-14), 62.2 (C-17), 65.2 (C-26), 75.6 (C-3), 79.9 (CH２N), 81.0 (C-16), 109.7 (C-22), 155.7 (carbamate carbonyl), 169.8 (ester carbonyl)； Rf0.4 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：８)。
【０１２５】
５β，２０α，２２α，２５Ｓ−スピロスタン−３α−イル  グリシネート塩酸塩（エピサルササポゲニンのグリシネート塩酸塩）
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｓ−スピロスタン−３α−イル  グリシネート (0.40 g, 0.78 mmol)の乾燥アセトン−エーテル混合液（1/8, 24ml）を攪拌しながら、禁水条件下０−５℃で塩化水素を一定にゆっくりと吹き込んだ。４５分後、反応混合物を飽和させ（過剰のガスはトラップにて不活化した）、塩化水素の供給を切断した。攪拌を続け、混合物を室温まで昇温させた。TLCから、除蛋白反応が約２−３時間で完了したことが示唆された。得られた白色懸濁液を３時間放置し、粉末状の白色固体をろ過により除去してエーテルで洗浄した。この物質を空気乾燥し、次いで、一定の重量になるまで塩化カルシウムを入れた真空デシケータ内で乾燥して、白色微細結晶固体 (0.24g)を得た。
【０１２６】
融点：270-272℃(分解), m/z  473  (M+for C29H47NO4) HCl塩，M＝510.2δＨ(270 MHz, CDCl３) 0.76 (3H, s, 18-CH３), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 0.99 (3H, d, J＝6.2 Hz, 21-CH３), 1.08 (3H, d, J＝7.0 Hz, 27-CH３), 1.1-2.1 (27H, complex m, aliphatic H) は1.46 (9H, s, C(CH３)３)と重複， 3.30 (1H, brd, J＝11.0 Hz, 26-OC"H"H), 3.86 (2H, brd, J＝4.8 Hz, CH２N),  3.95 (1H, dd, J＝11.0, 2.6 Hz, 26-OCH"H"),  4.42 (1H, m, 16-OCH), 4.79 (1H, 7 line m, H-3), 5.04 (1H, brs,NH)；δｃ(270 MHz, CDCl３)  14.3 (C-21), 16.1 (C-27), 16.5 (C-18), 20.7 (C-11), 23.3 (C-19), 25.8, 26.0, 26.6, 26.9, 27.1, 28.4, 31.8, 32.2, 34.7, 35.0, 35.5, 40.2, 40.6, 40.7, 41.9, 42.2, 42.8, 56.4 (C-14), 62.2 (C-17), 65.2 (C-26), 75.6 (C-3), 79.9 (CH２N), 81.0 (C-16), 109.7 (C-22), 155.7 (carbamate carbonyl), 169.8 (ester carbonyl)； Rｆ0.6 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア， 9:1:0.1)
【実施例１０】
【０１２７】
サルササポゲニンのグリシネート塩酸塩の合成
表題化合物は、実施例９におけるエピサルササポゲニンのかわりにサルササポゲニンを出発物質として、実施例９の合成と類似の合成により得られた。
【０１２８】
中間体であるN−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｓ−スピロスタン−３β−イル  グリシネート（サルササポゲニン  ＢＯＣ  グリシネート）は白色微細結晶として得られた；m/z  573.5 (M+for C３４H５５NO６), Rｆ0.45 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４), そして、表題化合物は自由流動性（free-flowing）の微細結晶固体として得られた；融点：2 59-261℃(分解)；m/z 473 (M+for C２９H４７NO４)塩酸塩 M＝510.2； Rｆ0.5 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア，12:1:0.1)。
【実施例１１】
【０１２９】
エピスミラゲニンのグリシネート塩酸塩の合成
表題化合物は、実施例９におけるエピサルササポゲニンのかわりにエピスミラゲニンを出発物質として、実施例９の合成と類似の合成により得られた。
【０１３０】
中間体であるN−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｒ−スピロスタン−３α−イル  グリシネート（エピスミラゲニン  ＢＯＣ  グリシネート）は白色微細結晶として得られた；mp 100-103℃； m/z 573.5 (M+for C３４H５５NO６) ； δＨ(500MHz, CDCl３)  0.75 (3H, s, 18-CH３), 0.79 (3H, d, J＝6.3 Hz, 27-CH3), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 0.96 (3H, d, J＝6.9 Hz, 21-CH３), 1.0-2.0 (27H, complex m, aliphatic H)は1.45 (9H, s, C(CH３)３)と重複, 3.37 (1H, t, J＝10.9 Hz, 26-OC"H"H), 3.47 (1H, m, 26-OCH"H"), 3.87 (2H, J＝5.3 Hz, CH２N), 4.40 (1H, m, 16-OCH), 4.79 (1H, 7 line m, H-3), 5.04 (1H, br peak, NH)；δｃ (270 MHz, CDCl３) 14.7 (C-21), 16.6 (C-18), 17.3 (C-27), 20.8 (C-11), 23.5 (C-19), 26.7, 26.8, 27.1, 28.5, 29.0, 30.5, 31.6, 32.0, 32.3, 34.9, 35.2, 35.6, 40.4, 40.7, 40.8, 41.8, 42.0, 42.9, 56.5 (C-14), 62.4 (C-17), 67.0 (C-26), 75.7 (C-3), 80.1 (CO2C), 81.1 (C-16), 109.4 (C-22), 155.9 (carbamate carbonyl), 170.0 (ester carbonyl)； Rf0.46 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４)。
【０１３１】
表題化合物は自由流動性（free-flowing）の微細結晶固体として得られた；融点：273-275℃(分解)； m/z 473 (M+for C２９H４７NO４)塩酸塩 M＝510.2;H[500MHz, (CD３)２SO] 0.71 (3H, s, 18-CH３), 0.75 (3H, d, J＝6.3 Hz, 27-CH３), 0.91 (3H, d, J＝6.9 Hz, 21-CH３), 0.92 (3H, s, 19-CH３), 1.0-2.0 (27H, complex m, aliphatic H) , 3.20 (1H, t, J＝11.1 Hz, 26-OC"H"H), 3.41 (1H, m, 26-OCH"H"), 3.71 (2H, brs, CH２N), 4.28 (1H, m, 16-OCH), 4.75 (1H, 7 line m, H-3), 8.54 (3H, s, NH３)；δc [125MHz, (CD３)２SO] 14.6 (C-21), 16.1 (C-18), 17.0 (C-27), 20.1 (C-11), 22.9 (C-19), 26.0, 26.2, 26.4, 28.5, 29.7, 30.9, 31.4, 31.6, 34.2, 34.3, 34.9, 41.0, 41.1, 55.5 (C-14), 61.9 (C-17), 65.9 (C-26), 75.4 (C-3), 80.2 (C-16), 108.3 (C-22), 166.9 (carbonyl)；Rf0.5 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア，12:1:0.1)。
【実施例１２】
【０１３２】
エピスミラゲニンのＬ−アラニネート塩酸塩の合成
表題化合物は、実施例９におけるエピサルササポゲニンのかわりに、エピスミラゲニンおよびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−アラニンを出発物質として、実施例９の合成と類似の合成により得られた。
【０１３３】
中間体であるN−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｒ−スピロスタン−３α−イル  Ｌ−アラニネート（エピスミラゲニン  ＢＯＣ  Ｌ−アラニネート）は白色微細結晶として得られた；融点：171-173℃； m/z 587.5 (M+for C３５H５７NO６) ；δＨ(500MHz, CDCl３)：0.76 (3H, s, 18-CH３), 0.79 (3H, d, J＝6.4 Hz, 27-CH３), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 0.97 (3H, d, J＝7.0 Hz, 21-CH３), 1.0-2.03 (27H, complex m, aliphatic H)は1.37 (3H, d, J＝7.1 Hz)および1.45 (9H, s, C(CH３)３)と重複, 3.38 (1H, t, J＝10.9 Hz, 26-OC"H"H), 3.47 (1H, m, 26-OCH"H"), 4.25 (1H, m, CHN), 4.40 (1H, m, 16-OCH), 4.76 (1H, 7 line m, H-3), 5.06 (1H, br d, J＝5.7 Hz, NH)；δｃ (125 MHz, CDCl３)：14.7 (C-21), 16.6 (C-18), 17.3 (C-27), 19.0 (CH３-C-N), 20.8 (C-11), 23.5 (C-19), 26.7, 26.8, 27.1, 28.5, 29.0, 30.5, 31.6, 32.0, 32.3, 34.9, 35.2, 35.6, 40.4, 40.7, 40.9, 41.8, 42.0, 49.6, 56.5 (C-14), 62.5 (C-17), 67.0 (C-26), 75.5 (C-3), 79.9 (CO２C), 81.1 (C-16), 109.4 (C-22), 155.3 (carbamate carbonyl), 173.1 (ester carbonyl)； Rf0.53 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４)。
【０１３４】
表題化合物は自由流動性（free-flowing）の微細結晶固体として得られた；融点：233-235℃(分解)； m/z 487 (M+for C３０H４９NO４)塩酸塩；M ＝524.2；δH[500 MHz, (CD３)２SO] 0.71 (3H, s, 18-CH３), 0.74 (3H, d, J＝6.3 Hz, 27-CH3), 0.90 (3H, d, J＝6.9 Hz, 21-CH３), 0.92 (3H, s, 19-CH３), 1.0-1.95 (27H, complex m, aliphatic H) overlapping with 1.42 (3H, d, J＝7.2 Hz, CH３-C-N) , 3.21 (1H, t, J＝11.0 Hz, 26-OC"H"H), 3.41 (1H, m, 26-OCH"H"), 3.96 (1H, q, J＝7.0 Hz, CHN), 4.29 (1H, m, 16-OCH), 4.73 (1H, 7 line m, H-3), 8.66 (3H, s, NH３)；δc [125 MHz, (CD３)２SO] 14.5 (C-21), 15.6 (Ala Me), 16.0 (C-18), 17.0 (C-27), 20.1 (C-11), 22.8 (C-19), 25.9, 26.1, 26.4, 28.4, 29.7, 30.9, 31.3, 31.5, 34.2, 34.9, 40.9, 41.0, 47.8, 55.5 (C-14), 61.9 (C-17), 65.8 (C-26), 75.4 (C-3), 80.2 (C-16), 108.2 (C-22), 169.3 (carbonyl)。４つのシグナルが検出されなかったが、おそらく溶媒のピークに隠れている。Rf0.56 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア，12:1:0.1)。
【実施例１３】
【０１３５】
エピスミラゲニンのＬ−バリネート塩酸塩の合成
表題化合物は、実施例９におけるエピサルササポゲニンのかわりに、エピスミラゲニンおよびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−バリンを出発物質として、実施例９の合成と類似の合成により得られた。
【０１３６】
中間体であるN−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｒ−スピロスタン−３α−イル  Ｌ−バリネート（エピスミラゲニン  ＢＯＣ  Ｌ−バリネート）は白色微細結晶として得られた；融点：68-71℃；m/z 615.5 (M+for C３７H６１NO６)；δＨ(500MHz, CDCl３) 0.76 (3H, s, 18-CH３), 0.79 (3H, d, J＝6.4 Hz, 27-CH3), 0.89 (6H, d, J＝6.9 Hz, C(CH３)２), 0.95 (3H, s, 19-CH３), 0.96 (3H, d, J＝6.9 Hz, 21-CH３), 1.0-2.2 (28H, complex m, aliphatic H)は1.43, 1.45 (9H, 2 x s, C(CH３)３), 3.38 (1H, t, J＝10.9 Hz, 26-OC"H"H), 3.47 (1H, m, 26-OCH"H"), 4.17 (1H, dd, J＝9.9, 4.1 Hz, CHN), 4.40 (1H, m, 16-OCH), 4.79 (1H, 7 line m, H-3), 5.01 (1H, br t, J＝9.9 Hz, NH)；δｃ(125 MHz, CDCl３) 14.7 (C-21), 16.6 (C-18), 17.3 (C-27), 17.7 (Val Me), 19.2 (Val Me), 20.8 (C-11), 23.5 (C-19), 26.7, 26.9, 27.1, 28.5 (t-butyl Me), 29.0, 30.5, 31.6, 32.0, 32.4, 34.9, 35.2, 35.7, 40.4, 40.7, 40.9, 41.8, 42.0, 56.4 (C-14), 58.8 (CHN), 62.5 (C-17), 67.1 (C-26), 75.4 (C-3), 79.8 (CO2C), 81.1 (C-16), 109.4 (C-22), 155.9 (carbamate carbonyl), 172.1 (ester carbonyl)； Rf0.60 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４)。
【０１３７】
表題化合物は自由流動性（free-flowing）の微細結晶固体として得られた；融点：171-173℃(分解)；m/z 515.7 (M+for C３２H５３NO４)塩酸塩M ＝552.2；δH[500 MHz, (CD３)２SO] 0.71 (3H, s, 18-CH３), 0.74 (3H, d, J＝6.4 Hz, 27-CH３), 0.90 (3H, d, J＝6.9 Hz, 21-CH３), 0.93 (3H, s, 19-CH３), 0.95 (3H, d, J＝6.9 Hz, バリン-CH３), 1.00 (3H, d, J＝6.9 Hz, バリン-CH３), 1.01-2.0 (27H, complex m, aliphatic H), 2.22 (1H, m, CH-C-N), 3.21 (1H, t, J＝11.0 Hz, 26-OCHH), 3.41 (1H, m, 26-OCHH), 3.75 (1H, m, CHN),  4.28 (1H, m, 16-OCH), 4.77 (1H, 7 line m, H-3), 8.6 (3H, br peak, NH3)；δc [125 MHz, (CD３)２SO] 14.5 (C-21), 16.0 (C-18), 17.0 (C-27), 17.4 (Val Me), 18.4 (Val Me), 20.1 (C-11), 22.9 (C-19), 26.1, 26.2, 26.4, 28.4 (t-Bu), 29.2, 29.7, 30.9, 31.3, 31.7, 34.2, 34.9, 41.0, 41.1, 55.5 (C-14), 57.1 (CHN), 61.9 (C-17), 65.8 (C-26), 75.4 (C-3), 80.2 (C-16), 108.3 (C-22), 168.0 (carbonyl)。４つのシグナルが検出されなかったが、おそらく溶媒のピークに隠れている。Rf0.64 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア，12:1:0.1)。
【実施例１４】
【０１３８】
エピスミラゲニンのＬ−イソロイシネート塩酸塩の合成
表題化合物は、実施例９におけるエピサルササポゲニンのかわりに、エピスミラゲニンおよびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−イソロイシンを出発物質として、実施例９の合成と類似の合成により得られた。
【０１３９】
中間体であるN−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｒ−スピロスタン−３α−イル  Ｌ−イソロイシネート（エピスミラゲニン  ＢＯＣ  Ｌ−イソロイシネート）は白色微細結晶として得られた；融点：67-70℃； m/z 629.5 (M+for C３８H６３NO６), Rf0.6 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：４)。
【０１４０】
表題化合物は自由流動性（free-flowing）の微細結晶固体として得られた；融点：169-171℃(分解)；m/z 529.7 (M+for C３３H５５NO４) 塩酸塩M＝566.2； Rf0.7 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア，12:1:0.1)。
【実施例１５】
【０１４１】
エピスミラゲニンのＬ−フェニルアラニネート塩酸塩の合成
表題化合物は、実施例９におけるエピサルササポゲニンのかわりに、エピスミラゲニンおよびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−フェニルアラニンを出発物質として、実施例９の合成と類似の合成により得られた。
【０１４２】
中間体であるN−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｒ−スピロスタン−３α−イル  Ｌ−フェニルアラニネート（エピスミラゲニン  ＢＯＣ  Ｌ−フェニルアラニネート）は白色微細結晶として得られた；融点：66-68℃； m/z 663.5 (M+for C４１H６１NO６)； Rf0.6 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：５)。
【０１４３】
表題化合物は自由流動性（free-flowing）の微細結晶固体として得られた；融点：254-256℃ (分解)； m/z 563.5 (M+for C３６H５３NO４)塩酸塩 M＝600.2； Rf0.6 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア，12:1:0.1)。
【実施例１６】
【０１４４】
エピスミラゲニンのＬ−メチオニネート塩酸塩の合成
表題化合物は、実施例９におけるエピサルササポゲニンのかわりに、エピスミラゲニンおよびＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−メチオニンを出発物質として、実施例９の合成と類似の合成により得られた。
【０１４５】
中間体であるN−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル  ５β，２０α，２２α，２５Ｒ−スピロスタン−３α−イル  Ｌ−メチオニネート（エピスミラゲニン  ＢＯＣ  Ｌ−メチオニネート）は白色微細結晶として得られた；融点：76-79℃； m/z 647.9 (M+for C３７H６１NO６S), Rf0.5 (シリカ, 酢酸エチル−ヘキサン，１：５)。
【０１４６】
表題化合物は自由流動性（free-flowing）の微細結晶固体として得られた；融点：173-176℃(分解)； m/z 547.8 (M+for C３２H５３NO４S)塩酸塩 M＝584.3, Rf0.5 (シリカ, ジクロロメタン−メタノール−0.88アンモニア，12 :1:0.1)。
【図面の簡単な説明】
【０１４７】
【図１】図１は、本発明の方法によって実行された化合物のための仮説的な作用様式を説明する図である。
【図２】図２は、老齢ラットの学習能力および記憶に対する、サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンの効果を示す図である。
【図３】図３は、ムスカリン受容体の数に対する、サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンの効果を示す図である。
【図４】図４は、ラット初代皮質ニューロンでのグルタメート誘導神経変性に対する、サルササポゲニン、エピサルササポゲニンのカチル酸塩、およびスミラゲニンの効果を示す図である。
【図５】図５は、ＣＨＯのβ２アドレナリン受容体とｍ３ムスカリン受容体とが同時形質移入された細胞系中において、５日目のｍ３ムスカリン受容体およびβ２アドレナリン受容体に対するエピスミラゲニンのアセチル化物の効果を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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