(57)【要約】Ｒ１、Ｙ、（Ｘ）ｏ、（Ｗ）ｎ、（Ｖ）ｍ、Ｚ及びＵは、本明細書に記載されるのと同様の定義である、一般式（Ｉ）の化合物は、クルジパインの阻害剤及び他のシステインプロテアーゼの阻害剤であり、例えば、シャーガス病の、治療剤として、または治療のための標的化合物の確認に有用である。
2004520365.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2004520365.tif 000084
ただし、Ｒ１は、Ｃ０−７−アルキル（Ｃ＝０である時は、Ｒ１は、単に水素である）、Ｃ３−６−シクロアルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキル（Ｃ＝０である時は、Ｒ１は、単に芳香族部分Ａｒである）であり；
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＣＲ２Ｒ３またはＮＲ４であり、この際、Ｒ４は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ；
Ｒ２及びＲ３のそれぞれは、独立して、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル、Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｏ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｓ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ３−６−シクロアルキル、ＮＨ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｎ（Ｃ０−７−アルキル）２、Ｎ（Ｃ３−６−シクロアルキル）２またはＮ（Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル）２から選ばれ；
Ｙは、ＣＲ５Ｒ６−ＣＯであり、この際、Ｒ５、Ｒ６は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ；
（Ｘ）ｏは、ＣＲ７Ｒ８であり、この際、Ｒ７及びＲ８は、独立して、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル及びＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ、及び、ｏは、０〜３の数であり；
（Ｗ）ｎは、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２またはＮＲ９であり、この際、Ｒ９は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル及びＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ、及び、ｎは、０または１であり；
（Ｖ）ｍは、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨまたはＣＲ１０Ｒ１１であり、この際、Ｒ１０及びＲ１１は、独立して、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル、Ａｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ、及び、ｍは、０〜３の数であり、ｍが１より大きい場合には、（Ｖ）ｍは、最大１個のカルボニルまたはスルホニル基を含み；
Ｕは、（下記に詳述されるように）飽和または不飽和のいずれかであり、０〜４個のヘテロ原子を含む、安定した５−〜７−員の一環または安定した８−〜１１−員の２環であり；
【化２】
2004520365.tif 000085
ただし、Ｒ１２は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル、Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｏ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｓ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ３−６−シクロアルキル、ＮＨ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｎ（Ｃ０−７−アルキル）２、Ｎ（Ｃ３−６−シクロアルキル）２またはＮ（Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル）２から選ばれる、または基ＣＨＲ１２若しくはＣＲ１２の一部である際には、Ｒ１２は、ハロゲンであってもよい；
Ａは、ＣＨ２、ＣＨＲ１２、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１３から選ばれ、この際、Ｒ１２は、上記と同様の定義であり、及びＲ１３は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル及びＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ；
Ｂ、Ｄ及びＧは、独立して、ＣＲ１２から選ばれ、この際、Ｒ１２は、上記と同様の定義である、またはＮであり；
Ｅは、ＣＨ２、ＣＨＲ１２、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１３から選ばれ、この際、Ｒ１２及びＲ１３は、上記と同様の定義であり；
Ｊ、Ｌ、Ｍ、Ｒ、Ｔ、Ｔ２、Ｔ３及びＴ４は、独立して、ＣＲ１２及びＮから選ばれ、この際、Ｒ１２は、上記と同様の定義であり；
Ｔ５は、ＣＨまたはＮから選ばれ；
ｑは、１〜３の数であり、これにより５−、６−または７−員環を規定する。
【請求項２】
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＣＨ２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｚは、ＮＲ４であり、この際、Ｒ４は、Ａｒ−Ｃ１−４−アルキルまたは置換カルボニル若しくはスルホニル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１は、Ｃ０−７−アルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルを有する、請求項１、２または３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１は、水素または下記部分：
【化３】
2004520365.tif 000086
の一から選ばれる、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙは、ＣＲ５Ｒ６ＣＯであり、この際、Ｒ５、Ｒ６は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙは、下記部分：
【化４】
2004520365.tif 000087
ただし、Ｒ１２、Ｒ１３及びＡｒは、上記と同様の定義である、
の一から選ばれる、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｙは、ＣＨＲ６ＣＯであり、この際、Ｒ６は、Ａｒ−ＣＨ２−であり、この際、芳香族環は、必要であれば置換されてもよいフェニルまたは１環式ヘテロ環である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｙは、ＣＨＲ６ＣＯであり、この際、Ｒ６は、単純分岐鎖のアルキル基または直鎖ヘテロアルキル鎖である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙは、ＣＨＲ６ＣＯであり、この際、Ｒ６は、シクロヘキシルメチルを有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙは、以下：
【化５】
2004520365.tif 000088
ただし、Ｒ１２及びＡｒは、上記と同様の定義である、
から選ばれる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
基（Ｘ）ｏにおいて、Ｘは、ＣＲ７Ｒ８であり、ならびにＲ７及びＲ８は、それぞれ、Ｃ０−７−アルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
（Ｘ）ｏは、下記部分：
【化６】
2004520365.tif 000089
ただし、Ｒ１２及びＲ１３は、上記と同様の定義である、
の一である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
（Ｘ）ｏは、単純アルキル基であり、この際、ｏは、０または１である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
基（Ｗ）ｎにおいて：
Ｗは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、ＳＯ、Ｃ（Ｏ）またはＮＲ９であり、この際、Ｒ９は、Ｃ０−４−アルキルであり；ならびにｎは、０または１である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
基（Ｗ）ｎにおいて：
Ｗは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、Ｃ（Ｏ）またはＮＨであり、およびｎは、０または１である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１７】
基（Ｗ）ｎにおいて：
ＮＨであり、この際、ｎは、１である、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１８】
基（Ｖ）ｍにおいて：
Ｖは、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＨまたはＣＨＲ１１であり、この際、Ｒ１１は、Ｃ０−４−アルキルであり；およびｍは、０または１である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１９】
（Ｖ）ｍ及び（Ｗ）ｍの組み合わせは、下記：
【化７】
2004520365.tif 000090
の一である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２０】
（Ｖ）ｍ及び（Ｗ）ｍの組み合わせは、請求項１９で示される初めの８個の構造の一である、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
（Ｖ）ｍ及び（Ｗ）ｍの組み合わせは、請求項１９で示される９番目の構造である、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２２】
（Ｘ）ｏ、（Ｖ）ｍ及び（Ｗ）ｍの組み合わせは、下記：
【化８】
2004520365.tif 000091
の一である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｕは、必要であれば置換されてもよい５−若しくは６−員の飽和若しくは不飽和ヘテロ環または必要であれば置換されてもよい飽和若しくは不飽和の９−若しくは１０−員のヘテロ環を有する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｕは、下記：
【化９】
2004520365.tif 000092
ただし、Ｒ１２は、上記と同様の定義である、
の一を有する、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｕは、アリールＡｒのパラ位に嵩高いアルキルまたはアリール基を有する、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｕは、メタまたはパラ−２アリールＡｒ−Ａｒを有し、この際、Ａｒは、上記と同様の定義である、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｕは、６，６または６，５または５，６−融合芳香環を有する、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｕは、下記基：
【化１０】
2004520365.tif 000093
ただし、Ｒ１２、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍ、Ｒ、Ｔ、Ｔ２、Ｔ３及びＴ４は、上記と同様の定義である、
を表わす、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｕは、下記基：
【化１１】
2004520365.tif 000094
ただし、Ｒ１２、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍ、Ｒ及びＴは、上記と同様の定義である、
を表わす、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｕは、下記基：
【化１２】
2004520365.tif 000095
ただし、Ｒ１２、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ及びＬは、上記と同様の定義である、
を表わす、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３１】
（ａ）単離された既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼへの請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物のインビトロでの結合を評価して、「潜在性」の基準を提供し；さらに必要であれば下記段階：
（ｂ）標的の及び一般的なハウスキーピングプロテアーゼ（例えば、トリプシン）の密接に関連する相同性プロテアーゼへの請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物の結合を評価して、「選択性」の基準を提供する；
（ｃ）請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物の存在下での、特定のシステインプロテアーゼ活性の細胞に基づく機能性マーカーをモニターする；および
（ｄ）請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物の存在下での、特定のシステインプロテアーゼ活性の動物モデルに基づく機能性マーカーをモニターする、
の一以上を有する、治療のための標的としての既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼ阻害剤の確認方法。
【請求項３２】
治療のための標的としての既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼ阻害剤の確認における請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３３】
特に、病気の状態がシステインプロテアーゼを阻害することによって修飾される病気を予防または処置することを目的として、医薬に使用される請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３４】
病気の状態がシステインプロテアーゼを阻害することによって修飾される病気を予防または処置するための医薬の調製における請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３５】
シャーガス病の予防または処置に使用される請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３６】
シャーガス病の予防または処置に使用される請求項２５〜３０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３７】
シャーガス病を予防または処置するための医薬の調製における請求項１〜３０のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３８】
シャーガス病を予防または処置するための医薬の調製における請求項２５〜３０のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３９】
請求項１〜３０のいずれか１項に記載の一以上の化合物及び製薬上または獣医学上許容できる担体を含む薬剤または獣医薬組成物。
【請求項４０】
例えば、混合によって、活性化合物を担体と組み合わせて取り入れることを有する、請求項３９に記載の薬剤または獣医薬組成物の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロテアーゼクルジパイン(protease cruzipain)、トリパノソーマ  クルージ寄生虫(Trypanosoma cruzi parasite)の遺伝子産物の阻害剤である化合物に関するものである。特に、本発明は、トリパノソーマ  クルージ(Trypanosomacruzi)感染の治療のための処置に有用である化合物、これらの化合物の使用、およびこれらを含む薬剤組成物を提供するものである。さらに、本発明は、広範なシステインプロテアーゼの阻害剤である化合物、これらの化合物の使用、およびこれらを含む薬剤組成物に関するものである。このような化合物は、システインプロテアーゼが関与する病気の治療のための処置に有用である。
【背景技術】
【０００２】
トリパノソーマ科の寄生虫は、ヒト及び動物の健康管理にかなりの世界的な衝撃がある(McKerrow, J. H., et al, Ann. Rev. Microbiol. 47, 821-853, 1993)。この科の寄生虫の一つである、トリパノソーマ  クルージ(Trypanosomacruzi)は、ラテン及び南アメリカで毎年２０００万人を超える人々に罹患し、これらの地域で心臓病の主要な原因であり、毎年、４５，０００人を超える人を死亡させる、シャーガス病の原因物質である（疾患制御センター(Centersfor Disease Control)及び予防ウェブサイト(prevention website)）。加えて、田舎から都会への感染集団の移動ならびに南及び中央アメリカから北アメリカへの移動の増加に伴って、感染が輸血を介して、及び誕生時に広がっている。トリパノソーマ  クルージ(Trypanosomacruzi)感染で選択される現在の処置剤である、ニフルティモックス(nifurtimox)及びベンズニダゾール(benznidazole)（ＮＡＤＨフマル酸レダクターゼ阻害剤、Turrens,JF, et al, Mol Biochem Parasitol., 82(1),125-9, 1996）が最も中等度にうまくいっており、感染急性期に約６０％の治癒を達成している（一般的な討論に関して、Docampo,R. Curr. Pharm. Design, 7, 1157-1164, 2001を参照）が、心筋障害が関連する心不全がしばしば起こる慢性期には全く処方されていない(Kirchhoff,L. V. New Engl. J. Med., 329, 639-644, 1993)。加えて、これらの２種の薬は、重篤な悪い毒性効果があり、処置中細かい医学的な監視を必要とし、シャーガス病の乳児に染色体の損傷を誘導することが示された(Gorla,N. B. et al, Mutat. Res. 206, 217-220, 1988)。したがって、トリパノソーマ  クルージ(Trypanosomacruzi)感染症の化学療法処置に有効な新規な薬剤に対する強い医療面での必要性がある。
【０００３】
従来、感染疾患の定着または伝播に重要であることが知られている酵素の同定は、アンチウィルス（例えば、ＨＩＶアスパルチルプロテアーゼ阻害剤）及び抗菌（例えば、β−ラクタム系抗生物質）等の良好な薬剤の開発を助けてきた。寄生虫感染における同様の弱点に関する調査により、多くの酵素が試験された（例えば、寄生虫のジヒドロ葉酸レダクターゼ、Chowdhury,S. F. et al, J. Med. Chem., 42(21), 4300-4312, 1999を参照；トリパノチオンレダクターゼ(trypanothionereductase)、Li, Z. et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 11(2), 251-254, 2001を参照；寄生虫のグリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素、Aranov,A. M. et al, J. Med. Chem., 41(24), 4790-4799, 1998を参照）。特に顕著な研究領域としては、寄生虫の寿命中に重要な役割を果たす、寄生虫によってコードされる、システインプロテアーゼの役割の同定がある(McKerrow,J. H., et al, Bioorg. Med. Chem., 7, 639-644, 1999)。現在まですべての遺伝子産物の約２％を構成する生物分子のかなりの群由来のプロテアーゼが、幾つかのゲノム配列決定プログラムの分析後に同定された（例えば、Southan,C. J. Pept. Sci, 6, 453-458, 2000を参照）。プロテアーゼは、天然で見出される無数のタンパク質内のペプチドアミド結合の切断によってこれらの効果を仲介する、広範な生物学的プロセスに関与するように展開してきた。この加水分解作用は、正確にプロテアーゼ触媒部位内にある切断に関する結合を並べる、タンパク質によって発揮される特定の３次元の電子表面を、まず認識した後、これに結合することによって行なわれる。次に、触媒による加水分解は、プロテアーゼ自身のアミノ酸側鎖を介して、またはプロテアーゼに結合し、これによって活性化される水分子の作用のいずれかにより切断されるアミド結合の求核性アタックにより開始する。アタックする求核試薬がＣｙｓ残基のチオール側鎖であるプロテアーゼは、システインプロテアーゼとして知られている。「システインプロテアーゼ」の一般的な分類は、ウィルス、細菌、原生動物、植物及び真菌から哺乳動物までの広範な生物にわたって見出される多くのものを含む。
【０００４】
トリパノソーマ  クルージ感染の生物学的な調査によって、寄生虫のライフサイクルの継続に重要である数多くの特定の酵素が明らかになった。このような酵素の一つである、クルジパイン(cruzipain)、カテプシンＬ様システインプロテアーゼは、シャーガス病の処置を目的とする明らかな治療標的である((a)Cazzulo, J. J. et al, Curr. Pharm. Des. 7, 1143-1156, 2001; (b) Caffrey,C. R. et al, Curr. Drug Targets, 1, 155-162, 2000)。寄生虫のライフサイクルにおけるクルジパインの正確な生物学的な役割は不明なままであるが、エピマスティゴート発達段階におけるクルジパインｍＲＮＡの上昇はリソソーム様ベシクルにおける宿主分子の栄養分解での役割を示す(Engel,J. C. et al, J. Cell. Sci, 111, 597-606, 1998)。実行可能な治療標的としてのクルジパインの確認は、複雑さのレベルが増して達成された。一般的なシステインプロテアーゼ阻害剤である、Ｚ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−ＦＭＫをトリパノソーマ  クルージが感染した哺乳動物細胞培養物に添加すると、寄生虫の複製及び分化が遮断され、これにより寄生虫のライフサイクルが停止する(Harth,G., et al, Mol. Biochem. Parasitol. 58, 17-24, 1993)。トリパノソーマ  クルージが感染したマウス動物モデルにおけるビニルスルホン系阻害剤の投与は、マウスを致命的な感染から救うのみでなく、完全に回復させた(Engel, J. C. et al, J. Exp.Med, 188(4), 725-734, 1998)。多くの他のインビボでの研究によって、メジャーリーシュマニア(Leishmaniamajor)(Selzer, P. M. et al, Proc. Nat’l. Acad. Sci. U.S.A., 96,11015-11022, 1999)、マンソン住血吸虫(Schistosoma mansoni)及び熱帯熱マラリア原虫(Plasmodiumfalciparium)(Olson, J. E. et al, Bioorg. Med. Chem., 7, 633-638, 1999)等の別の寄生虫による感染がシステインプロテアーゼ阻害剤による処置によって停止または治癒されうることが確認された。
【０００５】
様々な合成方法が、クルジパイン阻害剤の設計について記載されてきた。しかしながら、トリパノソーマ  クルージ感染症の処置を目的として生物学的な「プルーフ−オブ−プリンシプル(proof-of-principle)」を提供するものの、現在の阻害剤は、それらの臨床での開発を妨げる多くの生化学的及び物理的な性質を示す（例えば、(a)Brinen, L. S. et al, Structure, 8, 831-840, 2000, peptidomimetic vinylsulphones, possible adverse mammalian cell toxicity（McKerrow, J. H. and Engel,J. unpublished results cited in Scheidt, K. A. et al, Bioorg. Med. Chem, 6,2477-2494, 1998を参照）；(b) Du, X. et al, Chem. Biol., 7, 733-742, 2000,aryl ureas, generally with low μM activity, and high ClogP values, thus pooraqueous solubility and probably low oral bioavailability；(c) Roush, W. R. et al,Tetrahedron, 56, 9747-9762, 2000, peptidyl epoxysuccinates, irreversibleinhibitors, with potent activity verses house-keeping mammalian proteases suchas cathepsin B；(d) Li,R. et al, Bioorg. Med. Chem. 4(9), 1421-1427, 1996,bisarylacylhydrazides and chalcones, polyhydroxylated aromatics；(e) US6143931,WO 9846559, non-peptide α-ketoamidesを参照）。今日までの多くの異なる酵素阻害方法のうち、クルジパインプロテアーゼ阻害剤のみがトリパノソーマ  クルージ感染の病気関連動物モデルを治癒するのに有効であることが分かっている。したがって、潜在性、選択性、低毒性及び最適化された薬物動態パラメーターの望ましい組み合わせを有するより有効なクルジパイン阻害剤の発見による、ヒトへの使用に適する、臨床上の候補へのこれらの「プルーフ−オブ−プリンシプル(proof-of-principle)」知得を続けることが明らかに医療上必要である。
【０００６】
クルジパイン及び多くの他の重要な寄生虫プロテアーゼは、パパイン様ＣＡ  Ｃ１科に属し、密接な構造上の哺乳動物の相同性を有する。システインプロテアーゼは、３次元構造での類似性またはプロテアーゼ１次配列内の触媒残基の保存配列に基づいて「クラン」に分類される。加えて、「クラン」はさらに、各プロテアーゼがプロテアーゼ活性に応答できる部分を構成するアミノ酸配列の部分を比較すると他のものとの統計学的に有意な関係を共有する「科」に分類される（徹底的な討論については、Barrett, A.J et al, in ‘Handbook of Proteolytic Enzymes’, Eds.Barrett, A. J., Rawlings, N. D., 及び Woessner, J. F. Publ. Academic Press, 1998を参照）。今日まで、システインプロテアーゼは５種のクラン、ＣＡ、ＣＢ、ＣＣ、ＣＤ及びＣＥに分類される(Barrett,A. J. et al, 1998)。トロピカルパパイヤフルーツである「パパイン」のプロテアーゼは、クランＣＡの基礎を形成し、これは、現在、より多くのものが現在のゲノム配列決定の努力により予想されて、様々な配列データベースで８０種を超える別の完全な登録を有する。クランＣＡ／科Ｃ１のプロテアーゼ、例えば、カテプシンＫ（骨粗鬆症）、カテプシンＳ（自己免疫疾患）、カテプシンＬ（転移）等のヒトのプロテアーゼまたはファルシパイン(falcipain)（マラリア原虫  熱帯熱マラリア原虫(Plasmodiumfalciparum)）、クルジパイン（トリパノソーマ  クルージ感染）等の寄生虫のプロテアーゼは、多数の病気のプロセスにかかわりがある。最近、細菌のプロテアーゼ、スタフィロパイン(staphylopain)（S.aureus感染）がまた、試験的にクランＣＡに分類された。Ｘ線結晶構造が、ある範囲の阻害剤、例えば、パパイン（ＰＤＢ登録、１ｐａｄ、１ｐｅ６、１ｐｉｐ、１ｐｏｐ、４ｐａｄ、５ｐａｄ、６ｐａｄ、１ｐｐｐ、１ｔｈｅ、１ｃｓｂ、１ｈｕｃ）、カテプシンＫ（１ａｕ０、１ａｕ２、１ａｕ３、１ａｕ４、１ａｔｋ、１ｍｅｍ、１ｂｇｏ、１ａｙｗ、１ａｙｕ）、カテプシンＬ（１ｃｓ８）、カテプシンＳ（現在、待機中であるが、McGrath,M. E. et al, Protein Science, 7, 1294-1302, 1998で公表された）、クルザイン(cruzain)（クルジパインの組換え形態、Eakin,A. E. et al, 268(9), 6115-6118, 1993を参照）（１ｅｗｐ、１ａｉｍ、２ａｉｍ、１Ｆ２９、１Ｆ２Ａ、１Ｆ２Ｂ、１Ｆ２Ｃ）、スタフィロパイン(staphylopain)（１ｃｖ８）と複合したある範囲の上記プロテアーゼで利用できる。各構造は、これらの「クラン」及び「科」の分類によって予想されるように、同様の全体の活性部位のトポロジーを示し、このような構造の類似性は、ヒトへの使用に適するクルジパインの選択的な阻害剤を発見するのに伴われる困難性の一概念を具体化する。しかしながら、各ＣＡ  Ｃ１プロテアーゼの活性部位溝の深さ及び複雑な形状の点での微妙な相違が明らかであり、これは選択的な阻害剤設計で開発されてもよい。加えて、ＣＡ  Ｃ１科プロテアーゼの多くの現在の基質による阻害剤複合体は、阻害剤の潜在性に有意に寄与する、阻害剤及びプロテアーゼバックボーン間の一連の保存された水素結合を示す。主に２座水素結合がプロテアーゼＧｌｙ６６（Ｃ＝Ｏ）／阻害剤Ｎ−Ｈ及びプロテアーゼＧｌｙ６６（ＮＨ）／阻害剤（Ｃ＝Ｏ）の間で観察され、この際、阻害剤（Ｃ＝Ｏ）及び（ＮＨ）は阻害剤内のＳ２サブサイト結合要素を構��するアミノ酸残基ＮＨＣＨＲＣＯによって提供される（プロテアーゼ結合部位の命名の記載に関しては、Berger,A. and Schecter, I. Philos. Trans. R. Soc. Lond. [Biol.], 257, 249-264,1970を参照）。アスパルギンまたはアスパルギン酸のプロテアーゼ主鎖（Ｃ＝Ｏ）（１５８〜１６３、残基の番号はプロテアーゼによって異なる）及び阻害剤（Ｎ−Ｈ）間のさらなる水素結合が多くの場合観察され、この際、阻害剤（Ｎ−Ｈ）は、阻害剤内のＳ１サブサイト結合要素によって提供される。ゆえに、モチーフＸ−ＮＨＣＨＲＣＯ−ＮＨ−Ｙが、ＣＡ  Ｃ１プロテアーゼの従来の基質に基づく阻害剤の中で広範に観察される。
【０００７】
従来技術では、ヒトに使用されるシステインプロテアーゼ阻害剤の開発が、近年、活発に行なわれる領域であった。ＣＡ  Ｃ１科のものを考慮すると、ペプチド及びペプチド様(peptidomimetic)のニトリル（例えば、ＷＯ−Ａ−０１０９９１０、ＷＯ−Ａ−００５１９９８、ＷＯ−Ａ−０１１９８１６、ＷＯ−Ａ−９９２４４６０、ＷＯ−Ａ−００４９００８、ＷＯ−Ａ−００４８９９２、ＷＯ−Ａ−００４９００７、ＷＯ−Ａ−０１３０７７２、ＷＯ−Ａ−００５５１２５、ＷＯ−Ａ−００５５１２６、ＷＯ−Ａ−０１１９８０８、ＷＯ−Ａ−０１４９２８８、ＷＯ−Ａ−０１４７８８６を参照）、直鎖及び環状ペプチド及びペプチド様ケトン（例えば、Veber, D. F. andThompson, S. K., Curr. Opin. Drug Discovery Dev., 3(4), 362-369, 2000,、ＷＯ−Ａ−０１７０２３２、ＷＯ−Ａ−０１７８７３４、ＷＯ−Ａ−０００９６５３、ＷＯ−Ａ−００６９８５５、ＷＯ−Ａ−００２９４０８、ＷＯ−Ａ−０１３４１５３からＷＯ−Ａ−０１３４１６０、ＷＯ−Ａ−００２９４０８、ＷＯ−Ａ−９９６４３９９、ＷＯ−Ａ−９８０５３３６、ＷＯ−Ａ−９８５０５３３を参照）、ケトヘテロ環（例えば、ＷＯ−Ａ−００５５１４４、ＷＯ−Ａ−００５５１２４を参照）およびモノバクタム（例えば、ＷＯ−Ａ−００５９８８１、ＷＯ−Ａ−９９４８９１１、ＷＯ−Ａ−０１０９１６９を参照）の使用により、ヒトのカテプシン、主にカテプシンＫ（骨粗鬆症）、カテプシンＳ（自己免疫疾患）及びカテプシンＬ（転移）の阻害剤の開発が特に強調されてきた。従来技術では、潜在的なインビトロでの阻害剤が記載されるが、ヒトの治療剤を開発する上での多くの困難も明らかにされた。例えば、ＷＯ−Ａ−９８５０５３３及びＷＯ−Ａ−００２９４０８には、環状ケトンに言及し、パパイン科のプロテアーゼ、及び最も好ましい実施態様としては、カテプシンＫを特に参照してシステインプロテアーゼの阻害剤である化合物が記載される。ＷＯ−Ａ−９８５０５３３には、良好な経口生物学的利用能を有するカテプシンＫの潜在的な阻害剤として文献に後に詳述される化合物が記載される(Witherington, J., ‘Tetrahydrofurans as Selective cathepsin KInhibitors’, RSC meeting, Burlington House, London, 1999)。ＷＯ−Ａ−９８５０５３３の化合物は、テトラヒドロフランカルボニル及び活性部位触媒性システイン残基間の可逆的な共有結合の形成によりカテプシンＫに結合することが報告された(Witherington,J., 1999)。加えて、同様の環状ケトン化合物が、特にファルシパインの阻害によるマラリアの処置について、寄生虫病に関連するシステインプロテアーゼの阻害剤の広範な説明の一部として、ＷＯ−Ａ−９９５３０３９に記載される。しかしながら、後の文献では、ＷＯ−Ａ−９８５０５３３の環状ケトン化合物は、阻害剤の生理化学的な性質、α−アミノケトンキラル中心のキラル安定性が劣っていることにより、さらなる開発または十分な薬物動態評価には不適切であることが記載される(Marquis,R. W. et al, J. Med. Chem., 44(5), 725-736, 2001)。ＷＯ−Ａ−００６９８５５には、特にカテプシンＳの阻害に関する環状ケトンについても言及される化合物が記載される。ＷＯ−Ａ−００６９８５５の化合物は、環状ケトン環系のα−炭素に向上したキラル安定性を提供する環状ケトン環系のβ−置換基の存在��より、ＷＯ−Ａ−９８５０５３３の化合物より進歩していると考えられる。低いキラル保全性の問題を解決しようとして、後の文献では、ＷＯ−Ａ−９８５０５３３に記載されるのに密接に関連する環状ケトン群が提供され、ここでは、阻害剤の潜在性の約３００倍の損失が不安定なα−プロトンの代わりにアルキル基を導入すると観察された(Marquis, R. W. et al, J. Med. Chem., 44, 1380-1395, 2001)。加えて、後の文献では、ＷＯ−Ａ−９８５０５３３に記載される環状ケトン群では、α（Ｓ）−異性体は、α（Ｒ）−異性体に比べて１０〜８０倍より潜在的であることが示された(Fenwick, A. E. et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 11, 199-202,2001)。
【発明の開示】
【０００８】
ここで、一般式（Ｉ）で規定される、特定の化合物がトリパノソーマ  クルージ感染症の処置に有用である潜在的かつ選択的なクルジパインプロテアーゼ阻害剤であることを発見した。一般式（Ｉ）で規定される他の化合物は、広範なＣＡ  Ｃ１システインプロテアーゼのプロテアーゼ阻害剤であり、システインプロテアーゼによって引き起こされる病気の処置に有用な化合物である。一般式（Ｉ）で記載される化合物は、Ｒ−立体配置（またはＺ＝‘Ｓ’の場合には、Ｓ−立体配置）の、α−アルキル基を含むが、驚くべきことに、一般式（Ｉ）で規定される化合物は良好な潜在性を保持する。本発明は、一般式（Ｉ）で規定される置換された（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＳ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＲ，６ａＳ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロペンタレン−３ａ−イル）アルキルアミドまたは（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）アルキルアミド化合物を提供するものである。
【０００９】
したがって、本発明の第一の態様は、一般式（Ｉ）の化合物を提供するものである。
【００１０】
【化１】
2004520365.tif 000003
ただし、Ｒ１は、Ｃ０−７−アルキル（Ｃ＝０である時は、Ｒ１は、単に水素である）、Ｃ３−６−シクロアルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキル（Ｃ＝０である時は、Ｒ１は、単に芳香族部分Ａｒである）であり；
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＣＲ２Ｒ３またはＮＲ４であり、この際、Ｒ４は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ；
Ｒ２及びＲ３のそれぞれは、独立して、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル、Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｏ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｓ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ３−６−シクロアルキル、ＮＨ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｎ（Ｃ０−７−アルキル）２、Ｎ（Ｃ３−６−シクロアルキル）２またはＮ（Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル）２から選ばれ；
Ｙは、ＣＲ５Ｒ６−ＣＯであり、この際、Ｒ５、Ｒ６は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ；
（Ｘ）ｏは、ＣＲ７Ｒ８であり、この際、Ｒ７及びＲ８は、独立して、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル及びＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ、及び、ｏは、０〜３の数であり；
（Ｗ）ｎは、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２またはＮＲ９であり、この際、Ｒ９は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル及びＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ、及び、ｎは、０または１であり；
（Ｖ）ｍは、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＯＣ（Ｏ）、ＮＨＣ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）、ＮＨＳ（Ｏ）２、ＯＣ（Ｏ）ＮＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨまたはＣＲ１０Ｒ１１であり、この際、Ｒ１０及びＲ１１は、独立して、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル、Ａｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ、及び、ｍは、０〜３の数であり、ｍが１より大きい場合には、（Ｖ）ｍは、最大１個のカルボニルまたはスルホニル基を含み；
Ｕは、（下記に詳述されるように）飽和または不飽和のいずれかであり、０〜４個のヘテロ原子を含む、安定した５−〜７−員の一環または安定した８−〜１１−員の２環であり；
【００１１】
【化２】
2004520365.tif 000004
ただし、Ｒ１２は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル、Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ０−７−アルキル、Ｏ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｏ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ０−７−アルキル、Ｓ−Ｃ３−６−シクロアルキル、Ｓ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ０−７−アルキル、ＮＨ−Ｃ３−６−シクロアルキル、ＮＨ−Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル、Ｎ（Ｃ０−７−アルキル）２、Ｎ（Ｃ３−６−シクロアルキル）２またはＮ（Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル）２から選ばれる、または基ＣＨＲ１２若しくはＣＲ１２の一部である際には、Ｒ１２は、ハロゲンであってもよい；
Ａは、ＣＨ２、ＣＨＲ１２、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１３から選ばれ、この際、Ｒ１２は、上記と同様の定義であり、及びＲ１３は、Ｃ０−７−アルキル、Ｃ３−６−シクロアルキル及びＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ；
Ｂ、Ｄ及びＧは、独立して、ＣＲ１２から選ばれ、この際、Ｒ１２は、上記と同様の定義である、またはＮであり；
Ｅは、ＣＨ２、ＣＨＲ１２、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１３から選ばれ、この際、Ｒ１２及びＲ１３は、上記と同様の定義であり；
Ｊ、Ｌ、Ｍ、Ｒ、Ｔ、Ｔ２、Ｔ３及びＴ４は、独立して、ＣＲ１２及びＮから選ばれ、この際、Ｒ１２は、上記と同様の定義であり；
Ｔ５は、ＣＨまたはＮから選ばれ；
ｑは、１〜３の数であり、これにより５−、６−または７−員環を規定する。
【００１２】
Ｂ、Ｄ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍ、Ｒ、Ｔ、Ｔ２、Ｔ３及びＴ４は、さらに、Ｎ−オキシド（Ｎ→Ｏ）を表わしてもよい。
【００１３】
本発明は、本発明の化合物のすべての塩、水和物、溶媒和化合物、複合体及びプロドラッグを包含する。「化合物」ということばは、特記しない限り、このようなすべての塩、水和物、溶媒和化合物、複合体及びプロドラッグを包含するものとする。
【００１４】
一般式（Ｉ）の化合物の適当な製薬上または獣医学上許容できる塩としては、有機酸、特に、以下に制限されないが、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩、グルコン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、パントテン酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、酪酸塩、ジグルコン酸塩、シクロペンタネート、グルコヘプタネート、グリセロリン酸塩、シュウ酸塩、ヘプタノエート、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、ニコチネート、パルモエート、ペクチネート、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩、ラクトビオネート(lactobionate)、ピボレート(pivolate)、樟脳酸塩、ウンデカン酸塩及びコハク酸塩などの、カルボン酸、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、樟脳スルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸塩、及びｐ−トルエンスルホン酸塩等の、有機スルホン酸；ならびに塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ヘミスルフェート、チオシアン酸塩、過硫酸塩、リン酸塩及びスルホン酸塩等の、無機酸の塩が挙げられる。
【００１５】
プロドラッグは、インビボで一般式（Ｉ）の活性のある親薬剤を放出する共有結合化合物である。プロドラッグは、例えば、（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＳ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＲ，６ａＳ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロペンタレン−３ａ−イル）アルキルアミドまたは（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）アルキルアミド足場に存在する環外ケトン官能性を有するアセタールまたはヘミアセタール誘導体を構成してもよい。キラル中心または他の形態の異性体中心が本発明の化合物に存在する際には、鏡像異性体及びジアステレオ異性体等の、すべての形態のこのような一つの異性体または複数の異性体は、本発明に包含される。キラル中心を含む本発明の化合物はラセミ混合物、鏡像異性体が多く含まれる混合物として使用されてもよい、またはラセミ混合物を既知の技術を用いて分離して、個々の鏡像異性体を単独で使用してもよい。
【００１６】
本明細書で適用する際の「ハロゲン」は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉを含むことを意味する。
【００１７】
本明細書で適用する際の「ヘテロ原子」は、Ｏ、Ｓ及びＮを含むことを意味する。
【００１８】
本明細書で適用する際の「Ｃ０−７−アルキル」は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、ヘプチル及びこれらの単純異性体等の０（即ち、単純に水素）〜７炭素原子を有する安定した直鎖及び分岐鎖の脂肪族炭素鎖を含むことを意味する。加えて、Ｃ０−７−アルキルは、必要であれば、１、２または３個のハロゲン原子（上記定義と同様）でいずれかの位置で置換されて、例えば、トリフルオロメチル置換基を形成してもよい。さらに、Ｃ０−７−アルキルは、一以上のヘテロ原子（上記定義と同様）を有して、例えば、エーテル、チオエーテル、スルホン、スルホンアミド、置換アミン、アミジン、グアニジン、カルボン酸、カルボキサミドを形成してもよい。ヘテロ原子が鎖の末端に位置する際には、１または２個の水素原子で適当に置換される。ヘテロ原子またはハロゲンは、Ｃ０−７−アルキルが最小限１個の炭素原子を含む際にのみ存在する。
【００１９】
本明細書で適用する際の「Ｃ１−７−アルキル」は、最小限１個の炭素を有する置換基を記載する以外は（上記と同様の定義の）Ｃ０−７−アルキルの定義を包含することを意味する。
【００２０】
本明細書で適用する際の「Ｃ３−６−シクロアルキル」は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等の環状炭素をさらに含む「Ｃ０−７−アルキル」のいずれかのバリエーションを含むことを意味する。環状炭素は、必要であれば、一以上のハロゲン（上記定義と同様）またはヘテロ原子（上記定義と同様）で置換されて、例えば、テトラヒドロフラン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジンまたはモルホリン置換基を形成してもよい。
【００２１】
本明細書で適用する際の「Ａｒ−Ｃ０−７−アルキル」は、さらに芳香環部分「Ａｒ」を含むＣ０−７−アルキルのいずれかのバリエーションを含むことを意味する。芳香環部分Ａｒは、一般式（Ｉ）におけるＵで前記したのと同様、不飽和である安定した５−若しくは６−員の一環または安定した９若しくは１０員の２環であってもよい。芳香環部分Ａｒは、（一般式（Ｉ）におけるＵで前記したのと同様）Ｒ１４で置換されてもよい。置換基Ａｒ−Ｃ０−７−アルキルでＣ＝０である場合には、置換基は単に芳香環部分Ａｒである。
【００２２】
アルキル及びシクロアルキル等のことばを含む他の表現は、上記定義に従って解されるものとする。例えば、「Ｃ１−４−アルキル」は、１〜４個の炭素原子を含む以外はＣ０−７−アルキルと同様である。
【００２３】
異なる構造の異性体が存在する、および／または一以上のキラル中心が存在する際には、すべての異性体の形態を包含するものと解する。鏡像異性体は、これらのキラル中心の絶対配置によって特徴が明らかであり、Cahn, Ingold and PrelogのＲ−及びＳ−配列規則によって記載される。このような規則は当該分野においてよく知られている（例えば、‘Advanced Organic Chemistry’, 3rd edition, ed. March, J.,John Wiley and Sons, New York, 1985を参照）。
【００２４】
一般式（Ｉ）の好ましい化合物としては、以下に制限されないが、下記を単独であるいは組み合わせてなるものがある：
Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＣＨ２である。
【００２５】
加えて、一般式（Ｉ）の好ましい化合物としては、以下に制限されないが、下記を単独であるいは組み合わせてなるものがある：
Ｚは、ＮＲ４であり、この際、Ｒ４は、Ａｒ−Ｃ１−４−アルキルまたは置換カルボニル若しくはスルホニル基である。
【００２６】
ゆえに、好ましい化合物の例としては、以下に示されるように、（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＳ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＲ，６ａＳ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロペンタレン−３ａ−イル）アルキルアミドまたは（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）アルキルアミド２環部分を含むものがある。
【００２７】
【化３】
2004520365.tif 000005
一般式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１がＣ０−７−アルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルを有することが好ましい。ゆえに、例えば、好ましいＲ１部分としては、水素または直鎖若しくは分岐鎖アルキル鎖、または直鎖若しくは分岐鎖ヘテロアルキル鎖、または必要であれば置換されてもよいアリールアルキル鎖、または必要であれば置換されてもよいアリールヘテロアルキル鎖がある。
【００２８】
Ｒ１が水素またはＣ１−４−アルキルまたはＡｒ−Ｃ１−４−アルキルであることが特に好ましく、このようなＲ１置換基の例としては、以下に制限されないが、下記がある。
【００２９】
【化４】
2004520365.tif 000006
ただし、Ｒ１２は、上記と同様の定義である。
【００３０】
一般式（Ｉ）の好ましい化合物において、Ｙは、ＣＨＲ６ＣＯであり、この際、Ｒ６は、Ｃ０−７−アルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキルから選ばれ、例えば、水素、直鎖若しくは分岐鎖アルキル鎖、直鎖若しくは分岐鎖ヘテロアルキル鎖、必要であれば置換されてもよいアリールアルキル鎖または必要であれば置換されてもよいアリールヘテロアルキル鎖がある。加えて、一般式（Ｉ）の好ましい化合物においては、Ｒ６は、Ｃ３−６−シクロアルキルから選ばれ、例えば、シクロヘキシルメチルがある。
【００３１】
好ましいＹ置換基の例としては、下記が挙げられる。
【００３２】
【化５】
2004520365.tif 000007
ただし、Ｒ１２、Ｒ１３及びＡｒは、上記と同様の定義である。
【００３３】
より好ましいＲ６基としては、ＯＨ、ＮＲ１２Ｒ１３、ＣＯＯＲ１３、若しくはＣＯＮＲ１３で置換されてもよい、Ｃ１−４−アルキルまたはアリール基がＲ１２で置換されてもよい、シクロアルキルメチル若しくはＡｒ−Ｃ１−４−アルキルがある；この際、Ｒ１２及びＲ１３は、それぞれ独立して、上記と同様の定義である。
【００３４】
さらにより好ましいＲ６基は、Ａｒ−ＣＨ２−を有し、この際、芳香環は、必要であれば置換されてもよいフェニルまたは１環式ヘテロ環である。加えて、さらにより好ましいＲ６基は、イソブチル等の単純分岐鎖アルキル基またはベンジルスルファニルメチルまたはベンジルスルホニルメチル等の直鎖のヘテロアルキル鎖を有する。さらに、より好ましいＲ６基は、シクロヘキシルメチルを有する。より好ましいＹ置換基の例としては、下記がある。
【００３５】
【化６】
2004520365.tif 000008
ただし、Ｒ１２及びＡｒは、上記と同様の定義である。
【００３６】
基（Ｘ）ｏにおいて、Ｒ７及びＲ８は、それぞれ、Ｃ０−７−アルキルまたはＡｒ−Ｃ０−７−アルキル、例えば、水素、直鎖若しくは分岐鎖アルキル鎖、直鎖若しくは分岐鎖ヘテロアルキル鎖、必要であれば置換されてもよいアリールアルキル鎖または必要であれば置換されてもよいアリールへテロアルキル鎖から選ばれることが好ましい。
【００３７】
より好ましい（Ｘ）ｏ基は、水素から選ばれるＲ７を有する；Ｒ８は、ＯＨ、ＮＲ１３Ｒ１３、ＣＯＯＲ１３、若しくはＣＯＮＲ１３で置換されてもよい、Ｃ１−４−アルキル；またはアリール基はＲ１２で置換されてもよい、Ａｒ−Ｃ１−４−アルキルであり、この際、Ｒ１２及びＲ１３は、それぞれ独立して、上記と同様の定義である。
【００３８】
好ましい（Ｘ）ｏ基の例としては、下記がある：
【００３９】
【化７】
2004520365.tif 000009
ただし、Ｒ１２及びＲ１３は、上記と同様の定義である。
【００４０】
一般式（Ｉ）のさらにより好ましい化合物は、メチレン等の単純アルキル基である（Ｘ）ｏ基を有し、この際、ｏは、０または１である。
【００４１】
基（Ｗ）ｎにおいて、Ｗは、好ましくは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ２、Ｓ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）またはＮＲ９であり、この際、Ｒ９は、Ｃ０−４-−アルキルであり；及びｎは、０または１である。
【００４２】
一般式（Ｉ）のより好ましい化合物は、ｎは０または１であるＯ、Ｓ、ＳＯ２、Ｃ（Ｏ）及びＮＨとして規定される（Ｗ）ｎ基を有する。
【００４３】
一般式（Ｉ）のさらにより好ましい化合物は、ｎは１であるＮＨとして規定される（Ｗ）ｎ基を有する。
【００４４】
基（Ｖ）ｍにおいて：
Ｖは、好ましくはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＨまたはＣＨＲ１１であり、この際、Ｒ１１は、Ｃ０−４−アルキルであり；およびｍは０または１である。
【００４５】
一般式（Ｉ）に包含される好ましいＶ及びＷ置換基の組み合わせとしては、以下に制限されないが、以下が挙げられる。
【００４６】
【化８】
2004520365.tif 000010
加えて、一般式（Ｉ）に包含される好ましいＶ及びＷ置換基の組み合わせとしては、以下に制限されないが、以下が挙げられる。
【００４７】
【化９】
2004520365.tif 000011
一般式（Ｉ）に包含されるより好ましいＶ、Ｗ及びＸ置換基の組み合わせとしては、以下に制限されないが、以下が挙げられる。
【００４８】
【化１０】
2004520365.tif 000012
一般式（Ｉ）の好ましい化合物において、Ｕは、必要であれば置換されてもよい５−若しくは６−員の飽和若しくは不飽和のヘテロ環若しくはＡｒ基または必要であれば置換されてもよい飽和若しくは不飽和の９−若しくは１０−員のヘテロ環若しくはＡｒ基を有する。このような好ましいＵ環の例としては、下記：
【００４９】
【化１１】
2004520365.tif 000013
および下記：
【００５０】
【化１２】
2004520365.tif 000014
ただし、Ｒ１２は、上記と同様の定義である、
がある。
【００５１】
一般式（Ｉ）のより好ましい化合物は、アリールＡｒのパラ位に嵩高いアルキルまたはアリール基を有するＵを含む。また、より好ましい化合物は、メタまたはパラ−２アリールＡｒ−Ａｒを有し、この際、Ａｒは、上記と同様の定義である。加えて、より好ましい化合物は、６，６または６，５または５，６−融合芳香環を有する。より好ましいＵ基の例としては、下記がある。
【００５２】
【化１３】
2004520365.tif 000015
ただし、Ｒ１２、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍ、Ｒ、Ｔ、Ｔ２、Ｔ３及びＴ４は、上記と同様の定義である。
【００５３】
特にクルジパインの阻害を目的とする、一般式（Ｉ）のさらにより好ましい化合物は、パラ位に嵩高いアルキルまたはアリール基を含む６員のＡｒ環を有するＵ基を含み、この際、Ａｒは、上記と同様の定義である。
【００５４】
【化１４】
2004520365.tif 000016
ただし、Ｒ１２、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ、Ｌ、Ｍ、Ｒ及びＴは、上記と同様の定義である。
【００５５】
一般式（Ｉ）のさらにより好ましい化合物は、以下に制限されないが、以下を含むＵ基を有する。
【００５６】
【化１５】
2004520365.tif 000017
Ｒ１２、Ｄ、Ｅ、Ｇ、Ｊ及びＬは、上記と同様の定義である。
【００５７】
ペプチド及び化学の分野で一般的に使用される略称及び記号は、Eur. J. Biochem., 158, 9-, 1984に記載されるのと同様にしてIUPAC-IUB JointCommission on Biochemical Nomenclatureによって表わされる一般的なガイドラインに従って、本発明の化合物を説明するのに本明細書において使用される。一般式（Ｉ）の化合物ならびにこれらの調製に使用される中間体及び出発材料は、特定の基が主な基として列挙するために優先度を低くした命名法のＩＵＰＡＣ規則に従って、名付けられる。一般式（Ｉ）の化合物の一例である、Ｒ１はＨであり、Ｚは酸素であり、Ｙは４−メチルペンチルであり、（Ｘ）０は０であり、（Ｗ）ｎは酸素であり、（Ｖ）ｍはメチレンであり、およびＵはフェニルである化合物（１）は、以下のような名称である。
【００５８】
【化１６】
2004520365.tif 000018
（３ａＲ，６ａＲ）２−ベンジルオキシ−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
一般式（Ｉ）の化合物の第２の例である、Ｒ１はであり、Ｚは硫黄であり、Ｙは４−メチルペンチルであり、（Ｘ）０は０であり、（Ｗ）ｎは酸素であり、（Ｖ）ｍはメチレンであり、およびＵはフェニルである化合物（２）は、以下のような名称である。
【００５９】
【化１７】
2004520365.tif 000019
（３ａＳ，６ａＲ）２−ベンジルオキシ−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）−アミド
一般式（Ｉ）の化合物の第３の例である、Ｒ１はＨであり、Ｚはメチレンであり、Ｙは４−メチルペンチルであり、（Ｘ）０は０であり、（Ｗ）ｎは酸素であり、（Ｖ）ｍはメチレンであり、およびＵはフェニルである化合物（３）は、以下のような名称である。
【００６０】
【化１８】
2004520365.tif 000020
（３ａＲ，６ａＳ）２−ベンジルオキシ−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−ペンタレン−３ａ−イル）−アミド
一般式（Ｉ）の化合物の第４の例である、Ｒ１はＨであり、ＺはＮＨであり、Ｙは４−メチルペンチルであり、（Ｘ）０は０であり、（Ｗ）ｎは酸素であり、（Ｖ）ｍはメチレンであり、およびＵはフェニルである化合物（４）は、以下のような名称である。
【００６１】
【化１９】
2004520365.tif 000021
（３ａＲ，６ａＲ）２−ベンジルオキシ−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）−アミド
本発明の化合物は、以下に制限されないが、Ｚが‘Ｏ’でありＲ１が‘Ｈ’である一般式（Ｉ）の（３ａＲ，６ａＲ）異性体である下記例を包含し、また、Ｚ及びＲ１の全定義に含まれる等価の類似体を包含する。
【００６２】
４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメトキシ−ベンズアミド
４−ジメチルアミノ−Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］−４−イソプロピル−ベンズアミド
４−ジフルオロメトキシ−Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメチル−ベンズアミド
ナフタレン−２−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ナフタレン−１−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
キノリン−６−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾチアゾール−５−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ビフェニル−４−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−イミダゾール−１−イル−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−チオフェン−２−イルベンズアミド
Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−５−チオフェン−２−イルニコチンアミド
２−フェニルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−ピリジン−３−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−フェニルチオフェン−２−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−チオフェン−２−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
３−フェニルピロール−１−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−ベンズアミド
Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−４−トリフルオロメトキシ−ベンズアミド
４−ジメチルアミノ−Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−ベンズアミド
４−イソプロピル−Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−ベンズアミド
４−ジフルオロメトキシ−Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−ベンズアミド
Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−４−トリフルオロメチル−ベンズアミド
ナフタレン−２−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
ナフタレン−１−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
キノリン−６−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
ベンゾチアゾール−５−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
ビフェニル−４−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−４−イミダゾール−１−イルベンズアミド
Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−４−チオフェン−２−イルベンズアミド
Ｎ−［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−５−チオフェン−２−イルニコチンアミド
２−フェニルチアゾール−４−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
２−ピリジン−３−イルチアゾール−４−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
４−フェニルチオフェン−２−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
２−チオフェン−２−イルチアゾール−４−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
３−フェニルピロール−１−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメトキシ−ベンズアミド
４−ジメチルアミノ−Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］−４−イソプロピル−ベンズアミド
４−ジフルオロメトキシ−Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメチル−ベンズアミド
ナフタレン−２−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ナフタレン−１−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
キノリン−６−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾチアゾール−５−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
【００６３】
ビフェニル−４−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−イミダゾール−１−イル−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−チオフェン−２−イルベンズアミド
Ｎ−［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−５−チオフェン−２−イルニコチンアミド
２−フェニルチアゾール−４−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−ピリジン−３−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−フェニルチオフェン−２−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−チオフェン−２−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
３−フェニルピロール−１−カルボン酸［２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメトキシ−ベンズアミド
４−ジメチルアミノ−Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］−４−イソプロピル−ベンズアミド
４−ジフルオロメトキシ−Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメチル−ベンズアミド
【００６４】
ナフタレン−２−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ナフタレン−１−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
キノリン−６−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾチアゾール−５−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ビフェニル−４−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−イミダゾール−１−イル−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−チオフェン−２−イルベンズアミド
Ｎ−［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−５−チオフェン−２−イルニコチンアミド
２−フェニルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−ピリジン−３−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−フェニルチオフェン−２−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
【００６５】
２−チオフェン−２−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
３−フェニルピロール−１−カルボン酸［２−（４−フルオロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメトキシ−ベンズアミド
４−ジメチルアミノ−Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］−４−イソプロピル−ベンズアミド
４−ジフルオロメトキシ−Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメチル−ベンズアミド
ナフタレン−２−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ナフタレン−１−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
キノリン−６−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾチアゾール−５−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ビフェニル−４−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−イミダゾール−１−イル−ベンズアミド
【００６６】
Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−チオフェン−２−イルベンズアミド
Ｎ−［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−５−チオフェン−２−イルニコチンアミド
２−フェニルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−ピリジン−３−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−フェニルチオフェン−２−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−チオフェン−２−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
３−フェニルピロール−１−カルボン酸［２−（４−クロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメトキシ−ベンズアミド
４−ジメチルアミノ−Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］−４−イソプロピル−ベンズアミド
４−ジフルオロメトキシ−Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−トリフルオロメチル−ベンズアミド
ナフタレン−２−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ナフタレン−１−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
キノリン−６−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
【００６７】
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾチアゾール−５−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ビフェニル−４−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−イミダゾール−１−イル−ベンズアミド
Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−４−チオフェン−２−イルベンズアミド
Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−５−チオフェン−２−イルニコチンアミド
２−フェニルチアゾール−４−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−ピリジン−３−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
４−フェニルチオフェン−２−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−チオフェン−２−イルチアゾール−４−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
３−フェニルピロール−１−カルボン酸［２−（３，４−ジクロロフェニル）−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジルスルファニル）−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジルスルファニル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジルスルファニル）−３−（３−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
【００６８】
２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジルスルファニル）−３−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
２−（４−ヒドロキシベンジル）−４−オキソ−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−４−（３−フェニル−ピロール−１−イル）−ブチルアミド
２−（４−ヒドロキシベンジル）−４−オキソ−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−４−（３−フェニル−ピロリジン−１−イル）−ブチルアミド
４−メチル−２−［２−オキソ−２−（３−フェニル−ピロール−１−イル）−エチル］−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
４−メチル−２−［２−オキソ−２−（３−フェニル−ピロリジン−１−イル）−エチル］−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
２−［２−（１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−２−オキソ−エチル］−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
４−（１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−２−（４−ヒドロキシベンジル）−４−オキソ−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−ブチルアミド
４−（３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−２−（４−ヒドロキシベンジル）−４−オキソ−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−ブチルアミド
２−［２−（３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル）−２−オキソ−エチル］−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
【００６９】
本発明のさらなる化合物は、以下に制限されないが、Ｚが‘Ｏ’でありＲ１が‘Ｈ’である一般式（Ｉ）の（３ａＲ，６ａＲ）異性体である下記例を包含し、また、Ｚ及びＲ１の全定義に含まれる等価の類似体を包含する。
【００７０】
フラン−２−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
フラン−３−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
チオフェン−２−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
チオフェン−３−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［３−メチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
フラン−２−カルボン酸［２−シクロヘキシル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
フラン−３−カルボン酸［２−シクロヘキシル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
チオフェン−２−カルボン酸［［２−シクロヘキシル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
チオフェン−３−カルボン酸［２−シクロヘキシル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［２−シクロヘキシル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
フラン−２−カルボン酸［３，３−ジメチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
フラン−３−カルボン酸［３，３−ジメチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
チオフェン−２−カルボン酸［３，３−ジメチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
チオフェン−３−カルボン酸［３，３−ジメチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［３，３−ジメチル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−ブチル］−アミド
フラン−２−カルボン酸［２−ベンジルスルファニル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
フラン−３−カルボン酸［２−ベンジルスルファニル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
チオフェン−２−カルボン酸［２−ベンジルスルファニル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
チオフェン−３−カルボン酸［２−ベンジルスルファニル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［２−ベンジルスルファニル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチル］−アミド
【００７１】
フラン−２−カルボン酸［１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−２−フェニルメタンスルホニル−エチル］−アミド
フラン−３−カルボン酸［１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−２−フェニルメタンスルホニル−エチル］−アミド
チオフェン−２−カルボン酸［１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−２−フェニルメタンスルホニル−エチル］−アミド
チオフェン−３−カルボン酸［１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−２−フェニルメタンスルホニル−エチル］−アミド
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［１−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−２−フェニルメタンスルホニル−エチル］−アミド
２−ベンジルオキシ−３−シクロヘキシル−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
モルホリン−４−カルボン酸２−シクロヘキシル−１−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）−エチルエステル
２−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−ブチルアミド
２−ビフェニル−３−イル−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
３−シクロヘキシル−２−（フラン−２−イルメタンスルファニル）−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
３−シクロヘキシル−２−（フラン−３−イルメタンスルファニル）−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
３−シクロヘキシル−２−（フラン−２−イルメタンスルホニル）−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
３−シクロヘキシル−２−（フラン−３−イルメタンスルホニル）−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−プロピオンアミド
２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニルメタンスルホニル）−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジルオキシ）−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル)−アミド
【００７２】
上記すべての例を考慮すると、Ｎ−オキシドを形成するために容易に酸化される窒素またはスルホンを形成するために容易に酸化する硫黄を含むキャッピング基の酸化類似体をも包含するものである。下記構造は、詳細な例である。
【００７３】
【化２０】
2004520365.tif 000022
有機化学を実施する当業者にとって、一般式（Ｉ）の化合物は、溶液中であるいは固相でのいずれかで行なわれる、数多くの化学ストラテジーによって容易に合成される（固相合成原則の一般的なレビューに関しては、Atherton, E. and Sheppard, R. C. In ‘Solid Phase Peptide Synthesis: A Practical Approach’, Oxford University Press, Oxford, U.K. 1989を参照）。固相ストラテジーは、確立された平行合成方法により、一般的に５〜１００ｍｇのスケールで、何千という類似体を得ることができるという点で魅力的である（例えば、(a) Bastos, M.; Maeji, N. J.; Abeles, R. H. Proc. Natl. Acad. Sci.USA, 92, 6738-6742, 1995を参照）。
【００７４】
したがって、一般式（Ｉ）の化合物の合成の一つのストラテジーとしては、下記を有する。
【００７５】
（ａ）溶液における適当に官能化され(functionalised)及び保護されたシクロペンタン２環式のケトン構成単位の調製。
【００７６】
（ｂ）合成条件に安定であるが、合成終了時に容易に切断されやすいリンカーを介した固相への構成単位（ａ）の結合（固相合成に適用される「リンカー」機能について、例えば、James, I. W., Tetrahedron, 55(Report No 489),4855-4946, 1999を参照）。
【００７７】
（ｃ）残りの分子を構築するための、固相有機化学（Brown, R. D.  J. Chem. Soc., Perkin Trans.1, 19, 3293-3320,1998を参照）。
【００７８】
（ｄ）固相から溶液への化合物の切断。
【００７９】
（ｅ）切断ウォークアップ(work-up)及び化合物の分析。
【００８０】
一般式（Ｉ）の化合物の合成の第一段階は、官能化され及び保護された構成単位の溶液での調製である。（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド（８）への具体的なスキームをスキーム１に詳述する。
【００８１】
【化２１】
2004520365.tif 000023
ＦｍＯＣ（Ｏ）は、既知のアミン保護基９−フルオレニルメトキシカルボニルを示し（Ｆｍｏｃ、Atherton, E. and Sheppard, R. C., 1989を参照）、「Ｐｇ」は、遊離ヒドロキシルまたはｔｅｒｔ−ブチルエーテル等のヒドロキシル保護基のいずれかを示す。詳細には、ジアゾメタンによる縮合によって、Ｒ１＝Ｈが形成される。
【００８２】
段階（ａ）を考えると、合成は、適当に保護された１−アミノ−２−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸（５）から開始する。コアのアミノ酸は、非対称ストレッカーまたはブッヘラー−バーグス(Bucherer-Bergs)合成等の様々な文献の方法、例えば、(a)Ohfune, Y., Nanba, K., Takada, I., Kan, T., Horikawa, N., Nakajima, T.Chirality, 9, 459-462, 1997. (b) Ohfune, Y., Horikawa, N., J. Synth.Org. Chem. Jpn., 55, 982-993, 1997. (c) Volk, F-J., Frahm, A. W. LiebigsAnn. Chem. 1893-1903, 1996. (d) Fonderkar, K. P., Volk, F-J., Frahm, A. W.Tetrahedron: Asymmetry, 10, 727-735, 1999により利用できる。イソブチルクロロホルメート(isobutyl chloroformate)混合無水物を介して適当に保護された１−アミノ−２−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸（５）を活性化した後、ジアゾメタンで縮合することによって、ジアゾメチルケトン中間体（７）が得られる。スキーム１で詳述された反応条件によると、ジアゾケトンの形成が明らかに観察される。しかしながら、ジアゾケトン（７）の単離された収率の全体の向上は、活性の低い（５Ｒ，６Ｒ）６−アルコキシ−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）−３−オキサ−１−アザアピロ［４，４］ノン−１−エン−４−オン（６）を形成しにくい、（５）のアシルフルオライド(acylfluoride)を予め形成することによっておよびエーテル性ジアゾメタン(ethereal diazomethane)との反応を２４時間続けることによっても得られる。ジアゾメチルケトン中間体（７）を酢酸水溶液中で塩化リチウムで処理すると、保護された（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド（８）が形成する。単純Ｒ１置換基の導入は、活性化された（５）をジアゾエタン（Ｒ１＝ＣＨ３）、または１−フェニルオキシジアゾエタン（Ｒ１＝ＣＨ２ＯＰｈ）等をジアゾメタンの代わりに使用して縮合することによって達成されてもよい。
【００８３】
スキーム１で詳述された保護構成単位（（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド（８）で例示された合成）は、阻害剤分子の固相合成で使用されてもよい（段階（ｂ）〜（ｅ））。段階（ｂ）、アルデヒドまたはケトンの固相結合は、様々な方法によって従来記載されてきた（例えば、 (a) James, I. W., 1999, (b)Lee, A., Huang, L., Ellman, J. A., J. Am. Chem. Soc, 121(43), 9907-9914, 1999,(c) Murphy, A. M., et al, J. Am. Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992を参照）。（８）等のアルキルケトン官能性の可逆的な結合が可能な適当な方法は、従来記載されてきた化学の組み合わせによる。セミカルバジド(semicarbazide)、４−［［（ヒドラジノカルボニル）アミノ］メチルシクロヘキサンカルボン酸トリフルオロアセテート（９）(Murphy, A. M., et al, J. Am.Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992)を、（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド（８）の結合で例示した、スキーム２に詳述されるように用いてもよい。
【００８４】
構築物（１０）を、エタノール／酢酸ナトリウムの水溶液中での還流によってリンカー分子（９）及び（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド（８）の反応により調製する。構築物（１０）の形成は２時間の反応で観察されるが、構築物（１０）の最適な形成は２４時間の反応で起こる。標準的な固相技術（例えば、Atherton, E.and Sheppard, R. C., 1989を参照）を用いて、（１０）の遊離カルボン酸官能性を介してアミノ官能化固相(amino-functionalised solid phase)に構築物を固定し、ローディングされた(loaded)構築物（１１）を形成する。十分構築された化合物の酸による切断は、２４時間の反応時に最適である。
【００８５】
【化２２】
2004520365.tif 000024
ローディングされた構築物（１１）を、市販または文献の広範なカルボン酸と反応させて、一般式（Ｉ）の左側の部分「Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｙ」を導入してもよい。最も簡単な例では、一般式（Ｉ）の阻害剤の左側部分全体は、キャップドアミノ酸(capped amino acid)を有し（スキーム３）、例えば、Ｒ５＝‘Ｈ’、（Ｘ）ｏ＝‘−‘、（Ｗ）ｎ＝‘ＮＨ’、Ｒ９＝‘Ｈ’、ｎ＝１、（Ｖ）ｍ＝‘ＣＯ‘、ｍ＝１及びＵ＝アリールの一般式（Ｉ）の類似体を形成する。
【００８６】
【化２３】
2004520365.tif 000025
または、カルボン酸を、典型的な有機化学方法によって溶液中で調製し、固相上で構築物（１１）にカップリングしてもよい（スキーム４〜８）。例えば（スキーム４）、亜硝酸ナトリウム／Ｈ２ＳＯ４による、（１３）で例示される、アミノ酸の溶液における処理によって、（１４）で例示される、α−ヒドロキシ酸が形成する(Degerbeck, F. et al, J. Chem. Soc, PerkinTrans. 1, 11-14, 1993)。α−ヒドロキシ酸、（１４）を、ジメチルホルムアミド／ジクロロメタン混合物において水素化ナトリウムで処理した後、臭化ベンジルを添加することによって、２ＲＳ−ベンジルオキシ−３−シクロヘキシルプロピオン酸（１５）が形成する。（１５）を固相構築物（１１）にカップリングした後、切断することによって、Ｒ５＝‘Ｈ’、（Ｘ）ｏ＝‘−‘、（Ｗ）ｎ＝‘Ｏ’、ｎ＝１、（Ｖ）ｍ＝‘ＣＨ２’、即ち、Ｒ１０、Ｒ１１＝‘Ｈ’、ｍ＝１及びＵ＝フェニルの一般式（Ｉ）の一例、（１６）が形成する。有機化学を実施する当業者にとって、（１３）等の広範なアミノ酸が、詳述した一般的な条件により（１４）等の相当するα−ヒドロキシ酸に変換される。加えて、臭化ベンジルの代わりに、適当なＡｒ−ＣＲ１０Ｒ１１−ハロゲン化物を使用して、詳述した一般的な条件によりカルボン酸（１５）の多くのバリエーションを形成してもよい。場合によっては、アルキルハロゲン化物との反応前にメチルエステルとしてカルボン酸を一時的に保護することが好ましい（例えば、化合物（２１）、スキーム６）。次に、このエステル中間体を、簡単に酸（１５）に加水分解する。一般式（Ｉ）において広範な（Ｖ）ｍ及びＵを調べる、（１６）の類似体が、スキーム４で詳述される一般的な条件で調製される。最終合成段階は固相に結合した化合物のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）が介する切断を含むため、置換エーテルがＴＦＡに不安定である場合には類似体を別の経路によって溶液中で調製してもよい（スキーム１１を参照）。
【００８７】
【化２４】
2004520365.tif 000026
または、構築物（１１）（Ｆｍｏｃの除去後）のα−ヒドロキシ酸（１４）とのカップリングによって、多くの試薬と反応する一般式（Ｉ）の様々な固相結合中間体「Ｙ」置換基が形成する。例えば、α−ヒドロキシルを、ミツノブ条件(Mitsunobu conditions)下で反応させて(Hughes, D. L. Org. React.(N.Y), 42,335-656, 1992)、エーテル（即ち、一般式（Ｉ）において、Ｘ＝‘−‘，Ｗ＝‘Ｏ’）を得てもよい（固相上でのミツノブ反応(Mitsunobu reaction)の一例について、Grabowska, U. et al, J. Comb. Chem., 2(5),475-490, 2000を参照）。または、α−ヒドロキシルを、カルバミルクロライドと反応させて、カルバメート（即ち、一般式（Ｉ）において、Ｘ＝‘−‘，Ｗ＝‘Ｏ’，Ｖ＝‘ＮＨＣ（Ｏ）’）を得てもよい。
【００８８】
または、（スキーム５）、亜硝酸ナトリウム／Ｈ２ＳＯ４／臭化カリウムによる（１３）で例示される、アミノ酸の溶液における処理によって、立体を保持した（１７）(Souers, A. J. et al,Synthesis, 4, 583-585, 1999)で例示される、α−ブロモ酸を得てもよい。ジメチルホルムアミド／トリエチルアミンにおける４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルメタンチオール（１８）で例示されるアルキルチオールによるα−ブロモ酸（１７）の処理によって、逆の構造を有する、２Ｓ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルスルファニル）−４−メチルプロピオン酸（１９）が得られる。（１９）を固相構築物（１１）にカップリングした後、切断することによって、（２０）、Ｒ５＝‘Ｈ’、（Ｘ）ｏ＝‘−‘、（Ｗ）ｎ＝‘Ｓ’、ｎ＝１、（Ｖ）ｍ＝‘ＣＨ２’、即ち、Ｒ１０、Ｒ１１＝‘Ｈ’、ｍ＝１及びＵ＝４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルの一般式（Ｉ）の一例が得られる。有機化学を実施する当業者にとって、（１３）等の広範なアミノ酸が、詳述された一般的な条件で（１７）等の相当するα−ブロモ酸に変換される。加えて、（１３）のＳ−異性体で出発することによって、（１７）のＳ−ブロモ酸類似体及び（１９）のＲ−チオエーテル類似体が得られる。加えて、（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）メタンチオール（１８）の代わりに、適当なＡｒ−ＣＲ１０Ｒ１１−ＳＨを使用して、詳述した一般的な条件によりカルボン酸（１９）の多くのバリエーションを形成してもよい。ゆえに、一般式（Ｉ）において広範な（Ｖ）ｍ及びＵを調べる、（２０）の類似体が、スキーム５で詳述される一般的な条件で調製される。
【００８９】
【化２５】
2004520365.tif 000027
または、構築物（１１）（Ｆｍｏｃの除去後）のα−ブロモ酸、例えば（１７）とのカップリングによって、多くの試薬と反応する一般式（Ｉ）の様々な固相結合中間体「Ｙ」置換基が形成する。例えば、α−ブロミドを、求核試薬、例えば、アルコール、チオール、カルバニオン等で置換して、エーテル（即ち、一般式（Ｉ）において、Ｘ＝‘−‘、Ｗ＝‘Ｏ’）、チオエーテル（即ち、一般式（Ｉ）において、Ｘ＝‘−‘、Ｗ＝‘Ｓ’）を得てもよい。チオエーテルは、必要であれば、スルホンに酸化してもよい（スキーム９参照；即ち、一般式（Ｉ）において、Ｘ＝‘−‘、Ｗ＝‘ＳＯ２’）（固相でのブロミドの置換及びチオエーテルの酸化の一例に関して、Grabowska、U. et al、J. Comb. Chem.、2(5)、475-490、2000を参照）。
【００９０】
または、（スキーム６）、（１４）で例示される、α−ヒドロキシ酸を、トリメチルシリルクロライド及びメタノールで処理することによって、メチルエステル（２１）が得られる。ジクロロメタンでのホスゲンによる遊離ヒドロキシルからクロロホルメートへの活性後にモルホリンを添加し、さらに加水分解することによって、モルホリン−４−カルボン酸−１Ｓ−カルボキシ−２−シクロヘキシルエチルエステル（２２）が形成する。（２２）を固相構築物（１１）にカップリングした後切断することによって、（２３）、Ｒ５＝‘Ｈ’，（Ｘ）ｏ＝‘−‘，（Ｗ）ｎ＝‘Ｏ’，ｎ＝１，（Ｖ）ｍ＝‘ＣＯ‘及びＵ＝モルホリノの一般式（Ｉ）の一例が得られる。有機化学を実施する当業者にとって、（２１）等の広範なα−ヒドロキシ酸エステルが、詳述された一般的な条件で活性化クロロホルメートに変換されうる。加えて、モルホリンの代わりに、適当なアミンを使用して、詳述した一般的な条件により、カルボン酸（２２）の多くのバリエーションを形成してもよい。ゆえに、一般式（Ｉ）において広範な（Ｖ）ｍ及びＵを調べる、（２３）の類似体が、スキーム６で詳述される一般的な条件で調製される。
【００９１】
【化２６】
2004520365.tif 000028
または、（スキーム７）、２Ｒ−シクロヘキシルメチルコハク酸１−メチルエステル（２４）で例示される広範なアルキルコハク酸エステルは、市販されているまたは既知の方法によって容易に調製される（(a) Azam et al, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 621-, 1996; (b) Evanset al, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 103, 2127, 1981; (c) Oikawa et al, Tet.Lett, 37, 6169, 1996を参照）。アルキルコハク酸エステル（２４）のカルボキシル活性後にジメチルホルムアミドにおけるモルホリンを添加し、さらにエステルの加水分解を行なうことによって、２Ｒ−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−酪酸（２５）が得られる。（２５）を固相構築物（１１）にカップリングした後切断することによって、（２６）、Ｒ５＝‘Ｈ’、（Ｘ）ｏ＝‘ＣＨ２’、即ち、Ｒ７、Ｒ８＝‘Ｈ’、ｏ＝１、（Ｗ）ｎ＝‘ＣＯ’、ｎ＝１、（Ｖ）ｍ＝‘−’及びＵ＝モルホリノの一般式（Ｉ）の一例が得られる。有機化学を実施する当業者にとって、（２４）等の広範なアルキルコハク酸エステルが、詳述された一般的な条件で調製され、（２５）等の相当する置換アルキルコハク酸に変換されてもよい。加えて、モルホリンの代わりに、適当なアミンを使用して、詳述した一般的な条件によりカルボン酸（２５）の多くのバリエーションを形成してもよい。ゆえに、一般式（Ｉ）において広範な（Ｘ）ｏ、（Ｖ）ｍ及びＵを調べる、（２６）の類似体が、スキーム７で詳述される一般的な条件で調製される。
【００９２】
【化２７】
2004520365.tif 000029
または、（スキーム８）、２ＲＳ−ビフェニル−３−イル−４−メチルペンタン酸（２８）で例示される、広範なビアリールアルキル酢酸は、既知の方法によって容易に利用できる（(a) DesJarlais、R. L. et al、J. Am. Chem. Soc、120、9114-9115、1998;(b) Oballa、R. M. et al、WO 0149288を参照）。ビアリールアルキル酢酸（２８）を固相構築物に（１１）にカップリングした後切断することによって、（２９）、Ｒ５＝‘Ｈ’、（Ｘ）ｏ＝‘−‘、（Ｗ）ｎ＝‘−’、（Ｖ）ｍ＝‘−’及びＵ＝ｍ−ビフェニルの一般式（Ｉ）の一例が得られる。有機化学を実施する当業者にとって、（２８）等の広範なビアリールアルキル酢酸が、（２７）の遊離酸類似体のα−アニオンのアルキル化によって調製されてもよく、これはさらにフェニルボロン酸(phenylboronic acid)及び３−ブロモフェニル酢酸メチルエステルのスズキカップリング(Suzuki coupling)によって調製される。フェニルボロン酸の代わりに、スズキカップリングにおいて広範なアリールボロン酸(arylboronicacid)を使用して、詳述した一般的な条件によりカルボン酸（２８）の多くのバリエーションを形成してもよい。ゆえに、一般式（Ｉ）において広範な基「Ｕ」を調べる（２９）の類似体が、スキーム８で詳述される一般的な条件で調製される。
【００９３】
【化２８】
2004520365.tif 000030
固相有機化学の多くの他の可能性（例えば、最近のＳＰＯＣ公表のレビューに関して、Brown,R. D.  J. Chem. Soc., Perkin Trans.1, 19, 3293-3320, 1998を参照）を用いて、一般式（Ｉ）の化合物に構築物（１１）を誘導してもよい。例えば、一般式（Ｉ）における左側の部分の‘Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｙ’を、一部溶液中で構築して、構築物（１１）にカップリングし、さらに固相上で修飾してもよい。例えば（スキーム９）、スキーム５の簡単な拡張を、切断前にジクロロメタンでｍ−クロロ過安息香酸を用いて、中間固相結合種の酸化により行ない、スルホン類似体（３０）、Ｒ５＝‘Ｈ’、（Ｘ）ｏ＝‘−‘、（Ｗ）ｎ＝‘ＳＯ２’、ｎ＝１、（Ｖ）ｍ＝‘ＣＨ２’、即ち、Ｒ１０，Ｒ１１＝‘Ｈ’，ｍ＝１及びＵ＝４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルの一般式（Ｉ）の一例を得る。スキーム５に記載されるのと同様、カルボン酸（１９）の多くのバリエーションが、詳述された一般的な条件により、調製される。ゆえに、一般式（Ｉ）において広範な（Ｖ）ｍ及びＵを調べる（３０）の類似体が、スキーム５及び９で詳述される一般的な条件で調製される。
【００９４】
【化２９】
2004520365.tif 000031
一般式（Ｉ）の化合物は、最終的に、トリフルオロ酢酸／水で処理することによって固相から放出され、その後に、蒸発、凍結乾燥及び標準的な分析による特性化を行なう。
【００９５】
一般式（Ｉ）の化合物の第２の合成ストラテジーは、下記を有する。
【００９６】
（ｆ）溶液における適当に官能化及び保護された（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＳ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＲ，６ａＳ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロペンタレン−３ａ−イル）アルキルアミドまたは（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）アルキルアミド構成単位の調製。液相化学の好ましい保護基は、Ｎα−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基及びＮα−ベンジルオキシカルボニル基である。
【００９７】
（ｇ）構成単位（ｆ）の一般式（Ｉ）の化合物への変換に関する標準的な有機化学方法（スキーム１０）。
【００９８】
【化３０】
2004520365.tif 000032
（３１）の混合無水物による活性化の魅力的な代替法としては、予め形成されたアシルフルオライドを使用することによるものがある（スキーム１で詳述されたのと同様）。スキーム１０で詳述された一般的なストラテジーは、一般式（Ｉ）の化合物がトリフルオロ酢酸で分解されやすい置換基を含む際に特に有用であり、これは固相スキーム４〜９のそれぞれで使用された最終試薬である。例えば（スキーム１１）、ジメチルホルムアミド／ジクロロメタン混合物における水素化ナトリウムによるα−ヒドロキシ酸（３５）の溶液における処理後に、４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルブロミド(4-tert-butylbenzyl bromide)を添加することによって、２ＲＳ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルオキシ）−４−メチルペンタン酸(2RS-(4-tert-butylbenzyloxy)-4-methylpentanoicacid)（３６）が形成する。（３６）を塩酸塩（３４）にカップリングすると、（３７）、Ｒ５＝‘Ｈ’、（Ｘ）ｏ＝‘−‘、（Ｗ）ｎ＝‘Ｏ’、ｎ＝１、（Ｖ）ｍ＝‘ＣＨ２’、即ち、Ｒ１０、Ｒ１１＝‘Ｈ’、ｍ＝１及びＵ＝４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルである、一般式（Ｉ）の化合物の一例を得る。有機化学を実施する当業者にとって、４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルブロミドの代わりに、適当なＡｒ−ＣＲ１０Ｒ１１−ハロゲン化物を用いて、示された条件下で、カルボン酸（３６）の多くのバリエーションを形成してもよい。ゆえに、一般式（Ｉ）において広範な（Ｖ）ｍ及びＵを調べる（３７）の類似体が、スキーム１１で詳述される条件で調製される。
【００９９】
【化３１】
2004520365.tif 000033
Ｕ−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｙの保護された（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＳ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＲ，６ａＳ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロペンタレン−３ａ−イル）アルキルアミドまたは（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）アルキルアミド構成単位への添加が多段階有機反応を伴う一般式（Ｉ）の化合物の第３の合成ストラテジーは、下記を有する。
【０１００】
（ｈ）溶液における適当に官能化及び保護された（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＳ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＲ，６ａＳ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロペンタレン−３ａ−イル）アルキルアミドまたは（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）アルキルアミド構成単位の調製。液相化学で好ましい保護基は、Ｎα−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基及びＮα−ベンジルオキシカルボニル基である。
【０１０１】
（ｉ）例えば、ジメチルアセタールとしての、（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＳ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］チオフェン−３ａ−イル）アルキルアミド、（３ａＲ，６ａＳ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロペンタレン−３ａ−イル）アルキルアミドまたは（３ａＲ，６ａＲ）Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール−３ａ−イル）アルキルアミド構成単位のケトン官能性の保護。または、ケトンを、アキラル性の第２級アルコールに還元して、最終合成段階として再度酸化してもよい。
【０１０２】
（ｊ）構成単位（ｉ）の一般式（Ｉ）の化合物への変換に関する標準的な有機化学方法。
【０１０３】
中間体を溶液中で調製した後、構成単位（ｉ）にカップリングし、さらに一般式（Ｉ）の化合物に誘導してもよい（（３−ヒドロキシヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３８）の調製及び使用が例示されるスキーム１２を参照）。
【０１０４】
【化３２】
2004520365.tif 000034
または、一般式（Ｉ）の化合物の左側のＵ−Ｖ−Ｗ−Ｘ−Ｙを構築するのに使用される化学のタイプによっては、ケトンは、例えば、ジメチルアセタールとしての、保護を必要としてもよい。このような方法は、（３，３−ジメトキシヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）カルバミン酸ベンジルエステル（４２）の調製及び使用によってスキーム１３に詳述、例示される。
【０１０５】
【化３３】
2004520365.tif 000035
本発明は、上記したような新規な中間体、およびこれらの中間前駆体からの一般式（Ｉ）の化合物の調製方法にまで拡張するものである。さらに、これらの中間前駆体からの中間体の調製方法もまた本発明の一部を形成する。
【０１０６】
一般式（Ｉ）の化合物は、実験道具として及び治療剤として有用である。実験室においては、本発明の化合物によっては、既知のまたは新たに発見されたシステインプロテアーゼが、「標的確認(target validation)」と一般的に称されるプロセスである、病気の状態の定着(establishment)または進行中の重要なまたは少なくとも有意な生化学的機能をもたらすかどうかを確立するのに有用である。
【０１０７】
本発明の第二の態様によると、（ａ）単離された既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼへの上記したような化合物のインビトロでの結合を評価して、潜在性(potency)の基準(measure)を提供し；さらに必要であれば下記段階：
（ｂ）標的の及び一般的なハウスキーピングプロテアーゼ(house-keeping protease)（例えば、トリプシン）の密接に関連する相同性プロテアーゼへの化合物の結合を評価して、選択性の基準を提供する；
（ｃ）化合物の存在下での、特定のシステインプロテアーゼ活性の細胞に基づく機能性マーカーをモニターする；および
（ｄ）化合物の存在下での、特定のシステインプロテアーゼ活性の動物モデルに基づく機能性マーカーをモニターする、
の一以上を有する、治療のための標的としての既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼ阻害剤の確認方法が提供される。
【０１０８】
したがって、本発明は、治療標的としての既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼ阻害剤の確認方法を提供する。様々なアプローチ及び複雑さのレベルが特定の標的の効果的な阻害及び「確認」に適当である。第一の場合では、本方法は、単離された既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼへの一般式（Ｉ）の化合物のインビトロでの結合を評価して、「潜在性」の基準を提供する。標的の及び一般的なハウスキーピングプロテアーゼ（例えば、トリプシン）の密接に関連する相同性プロテアーゼへの一般式（Ｉ）の化合物の結合のさらなる評価は、「選択性」の基準を提供する。複雑さの第二のレベルは、一般式（Ｉ）の化合物の存在下で、特定のシステインプロテアーゼ活性の細胞に基づく機能性マーカーをモニターすることによって評価されてもよい。例えば、「ヒト破骨細胞性吸収アッセイ」が、カテプシンＫの活性及びプロテアーゼ阻害剤の生物学的な効果をモニターするための細胞に基づく第二のインビトロの試験系として使用された（例えば、ＷＯ−Ａ−９８５０５３３を参照）。「ＭＨＣ−ＩＩプロセシング−Ｔ細胞活性化アッセイ」は、カテプシンＳの活性及びプロテアーゼ阻害剤の生物学的な効果をモニターするための細胞に基づく第二のインビトロの試験系として使用された(Shi, G-P., et al, Immunity, 10, 197-206, 1999)。ウィルスまたは細菌感染を調べる際には、このようなマーカーは、単に、ウィルスの（例えば、ｍＲＮＡコピーのカウント）または細菌のローディングの機能的な評価及びプロテアーゼ阻害剤の生物学的な効果の評価であってもよい。複雑さの第三のレベルは、一般式（Ｉ）の化合物の存在下で、特定のシステインプロテアーゼ活性の動物モデルに基づく機能性マーカーをモニターすることによって評価されてもよい。例えば、リーシュマニア(Leishmania)感染、ピー．ビンクケイ(P. vinckei)感染、マラリア（ファルシパイン(falcipain)の阻害）及びトリパノソーマ  クルージ感染（クルジパイン(cruzipain)）のマウスモデルは、病原の伝播に鍵となる役割を果たすシステインプロテアーゼの阻害が、病気の症状を阻止し、当該標的を「確認する」のに有効であることを示す。
【０１０９】
したがって、本発明は、治療のための標的としての既知のまたは推定上のシステインプロテアーゼ阻害剤の確認における一般式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１１０】
一般式（Ｉ）の化合物は、システインプロテアーゼが関与する病気のインビボでの処置または予防に有用である。
【０１１１】
本発明の第三の態様によると、特に、病気の状態(disease pathology)がシステインプロテアーゼを阻害することによって修飾される病気を予防または処置するするための、医薬に使用される一般式（Ｉ）の化合物が提供される。
【０１１２】
本発明の第四の態様によると、病気の状態がシステインプロテアーゼを阻害することによって修飾される病気を予防または処置するための医薬の調製における一般式（Ｉ）の化合物の使用が提供される。
【０１１３】
システインプロテアーゼによっては、ヒトを含む、動物でのタンパク質の分解の正常な生理学的なプロセスで、例えば、結合組織の破壊で機能する。しかしながら、体内でのこれらの酵素のレベルが上昇すると、病気を引き起こす病的な状態が生じうる。ゆえに、システインプロテアーゼは、以下に制限されないが、ニューモシスティス  カリニ(Pneumocystis carinii)、トリパノソーマ  クルージ(Trypsanoma cruzi)、トリパノソーマ  ブルーセイ  ブルーセイ(Trypsanomabrucei brucei)及びクリチジア  フシキュラタ(Crithidia fusiculata)による感染、さらには、骨粗鬆症、自己免疫性、住血吸虫症、マラリア、腫瘍の転移、変染色性白質ジストロフィー、筋ジストロフィー、脊髄萎縮などの、様々な病気の病態にかかわりがある。ＷＯ−Ａ−９４０４１７２及びＥＰ−Ａ−０６０３８７３ならびに双方に列挙される参考文献を参照。加えて、スタフィロパイン(staphylopain)と称される黄色ブドウ球菌(S.Aureus)から分泌される細菌性のシステインプロテアーゼは細菌力因子として関連がある(Potempa, J., et al. J. Biol. Chem, 262(6),2664-2667, 1998)。
【０１１４】
本発明は、上記したまたは上記に包含される病気の状態の予防および／または処置に有用である。本発明はまた、本発明の化合物を、必要のある動物、特に哺乳動物、最も好ましくはヒトに投与することを有する、システインプロテアーゼ、特にパパイン超科のシステインプロテアーゼの異常なレベルによって引き起こされる病気の処置または予防方法に有用である。本発明は、特に、ニューモシスティス  カリニ(Pneumocystis carinii)、トリパノソーマ  クルージ(Trypsanoma cruzi)、トリパノソーマ  ブルーセイ(Trypsanomabrucei)、メキシコリーシュマニア(Leishmania mexicana)、クロストリジウム  ヒストリチカム(Clostridiumhistolyticum)、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、口蹄疫ウィルス及びクリチジア  フシキュラタ(Crithidiafusiculata)による感染；ならびに骨粗鬆症、自己免疫性、住血吸虫症、マラリア、腫瘍の転移、変染色性白質ジストロフィー、筋ジストロフィー、脊髄萎縮などの、システインプロテアーゼが関連する病気の処置方法を提供するものである。
【０１１５】
クルジパインの阻害剤、特にクルジパインに特異的な化合物は、シャーガス病の処置に有用である。
【０１１６】
本発明によると、有効量の一般式（Ｉ）の化合物が投与されて、特定の症状または病気に関連のあるプロテアーゼを阻害してもよい。いうまでもなく、この投与量はさらに、化合物の投与タイプによって修飾されるであろう。例えば、急性治療に関する「有効量」を達成するためには、一般式（Ｉ）の化合物の非経口投与が好ましい。筋肉内大量注射もまた使用できるが、水または正常生理食塩水における５％デキストロースにおける化合物、または適当な賦形剤を含む同様の配合物の静脈内注入が最も有効である。具体的には、非経口投与量は、システインプロテアーゼを阻害するのに有効な濃度で血漿中で薬剤の濃度を維持するように、約０．０１〜約１００ｍｇ／ｋｇ；好ましくは０．１〜２０ｍｇ／ｋｇであろう。化合物は、約０．４〜約４００ｍｇ／ｋｇ／日の１日当たりの全投与量を達成するようなレベルで毎日１〜４回投与されてもよい。治療上有効である本発明の化合物の正確な量、およびこのような化合物が最良に投与される経路は、薬剤の血中レベルを治療効果を有するのに必要な濃度と比較することによって当業者によって容易に決定される。本発明の化合物のプロドラッグを適当な方法によって調製してもよい。プロドラッグ部分がケトン官能性であるこれらの化合物、特にケタールおよび／またはヘミアセタールでは、公知の方法に従って変換を行なってもよい。
【０１１７】
本発明の化合物はまた、薬剤の濃度が骨の再吸収を阻害するのにまたは本明細書に開示されるような他の治療指示を達成するのに十分であるように、患者に経口投与されてもよい。具体的には、化合物を含む薬剤組成物は、患者の状態に適合するように約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの経口投与量で投与される。好ましくは、経口投与量は、約０．５〜約２０ｍｇ／ｋｇである。
【０１１８】
本発明の化合物を本発明に従って投与される際に、許容できない毒性効果は予想されない。良好な生物学的利用能を有する、本発明の化合物は、所定の薬理効果を有するのに必要である化合物の濃度を決定するために幾つかの生物学的アッセイの一で試験されてもよい。
【０１１９】
本発明の第五の態様によると、一以上の一般式（Ｉ）の化合物及び製薬上または獣医学上許容できる担体を含む薬剤または獣医薬組成物が提供される。処置されるまたは予防される病気または症状に適当であるまたは勧められると考えられる場合には、他の活性材料が存在していてもよい。
【０１２０】
担体、または一以上が存在する場合には、各担体は、配合物の他の成分と適合し、レシピエントに有害でない点で許容できなければならない。
【０１２１】
配合物は、直腸内、経鼻、局所（口腔内及び舌下を含む）、経膣または非経口（皮下、筋肉内、静脈内及び皮内を含む）投与に適するものを含むが、好ましくは、配合物は経口投与される配合物である。配合物は、簡便に、単位投与形態(unit dosage form)、例えば、錠剤及び持続放出性カプセルで提示されてもよく、薬学の分野において既知である方法によって調製されてもよい。
【０１２２】
このような方法は、上記で規定される活性剤を担体と組み合わせて取り入れる(bringing into association with)ことを含む。通常、配合物は、活性剤を液状担体若しくは微粉砕された固体担体または双方と組み合わせて均一かつ均質に取り入れて、さらに必要であれば生成物を成形することによって調製される。本発明は、製薬上または獣医学上許容できる担体またはベヒクルと一緒に(inconjunction with)または組み合わせて(in association with)一般式（Ｉ）の化合物を取り入れてなる薬剤組成物の調製方法にまで拡張する。
【０１２３】
本発明における経口投与用の配合物は、各々所定量の活性剤を含むカプセル、カシェ剤若しくは錠剤等の離散単位(discrete unit)として；粉末若しくは顆粒として；水性液体若しくは非水性液体における活性剤の溶液若しくは懸濁液として；または水中油液状エマルジョン若しくは油中水液状エマルジョンとして；またはボーラスとしてなどとして提示されてもよい。
【０１２４】
経口投与用の組成物（例えば、錠剤及びカプセル）では、「許容できる担体」ということばは、一般的な賦形剤、例えば、結合剤、例えば、糖ミツ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、スクロース及びデンプン；充填剤及び担体、例えば、コーンスターチ、ゼラチン、ラクトース、スクロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸２カルシウム、塩化ナトリウム及びアルギン酸；ならびにステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム及び他の金属ステアリン酸(metallic stearate)、グリセロールステアレート、ステアリン酸、シリコーン油、タルクワックス、油及びコロイドシリカ等の潤滑剤などのベヒクルを包含する。ペパーミント、ウインターグリーン油、チェリー着香剤(cherryflavouring)などの着香剤もまた使用できる。容易に同定できる投与形態にできるように着色剤を添加することが望ましい。錠剤は、当該分野において既知の方法によって被覆されてもよい。
【０１２５】
錠剤は、必要であれば一以上の補助成分と共に、圧縮または成形によって作製されてもよい。圧縮錠剤は、必要であれば、結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、保存剤、表面活性剤または分散剤と混合して、粉末または顆粒などの自由に流れる形態(free flowing form)で活性剤を適当な機械で圧縮することによって調製されてもよい。成形錠剤は、不活性な液状希釈剤で湿潤化された粉末の化合物の混合物を適当な機械で成形することによって作製されてもよい。錠剤は、必要であれば被覆されてもまたは刻み目を入れられてもよく、また、活性剤が緩やかにまたは制御されて放出されるように配合されてもよい。
【０１２６】
経口投与に適する他の配合剤としては、フレーバーベース、一般的には、スクロース及びアカシアまたはトラガカント内に活性剤を含むロゼンジ；ゼラチン及びグリセリン、またはスクロース及びアカシア等の不活性基剤内に活性剤を含む香錠；および適当な液状担体内に活性剤を含むマウスウォッシュがある。
【０１２７】
非経口配合物は通常滅菌されているであろう。
【０１２８】
本発明の第六の態様によると、例えば、混合によって、活性成分を担体と組み合わせて取り入れることを有する、上記した薬剤または獣医薬組成物の調製方法が提供される。
【０１２９】
本発明の各態様の好ましい特徴は、必要であれば変更を加えて、各態様と同様である。
【０１３０】
ここで、本発明を下記実施例により詳細に説明する。
【０１３１】
液相化学−一般的な方法
すべての溶剤は、特記しない限り、ＳｐＳまたはＨｉ−ＤｒｙグレードでROMIL Ltd(Waterbeach, Cambridge, UK)から購入した。一般的なペプチド合成試薬は、Chem-ImpexIntl. Inc.(Wood Dale IL 60191. USA)から得た。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、予め被覆されたプレート（メルクアルミニウムシートシリカ６０  Ｆ２５４(Merckaluminium sheets silica 60 F254)、part no. 5554）上で行なった。化合物の可視化は、紫外線（２５４ｎｍ）下でまたは適当な染色試薬を用いて達成された。フラッシュカラム精製は、シリカゲル６０(Merck9385)で行なった。すべての分析用ＨＰＬＣは、２１５および／または２５４ｎｍのＵＶで検出する自動化Ａｇｉｌｅｎｔシステム(automated Agilentsystem)で溶剤Ａ＝０．１％トリフルオロ酢酸水溶液（ＴＦＡ）及び溶剤Ｂ＝９０％アセトニトリル／１０％溶剤Ａの混合液を用いて、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｊｕｐｉｔｅｒ  Ｃ４、５μ、３００Ａ、２５０×４．６ｍｍで得られた。特記しない限り、１．５ｍＬ／分での２５分にわたる１０〜９０％  ＡにおけるＢの勾配を、全分析用ＨＰＬＣ分析で行なった。ＨＰＬＣ−ＭＳ分析は、０．４ｍＬ／分のＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｃ８、５μ、３００Ａ、５０×２．０ｍｍで１０分にわたり１０〜９０％  ＡにおけるＢの勾配で、自動化Ａｇｉｌｅｎｔ  ＨＰＬＣシステム(automatedAgilent HPLC system)を用いて、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００シリーズ  ＬＣ／ＭＳＤ(Agilent 1100 series LC/MSD)で行なった。核磁気共鳴（ＮＭＲ）は、示された溶媒及び温度でＢｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ４００（４００ＭＨｚ  １Ｈ  周波数；ＱＸＩプローブ）で得られた。化学シフトは、部／ミリオン（δ）で表わし、溶剤の残留シグナル(residualsignal)を参考にする。カップリング定数（Ｊ）は、Ｈｚで表わす。
【０１３２】
固相化学−一般的な方法
例示阻害剤（１〜１２）は、溶液及び固相Ｆｍｏｃによる化学を組み合わせることにより調製した（一般的な説明に関しては、‘Solid Phase Peptide Synthesis’, Atherton, E. and Sheppard, R. C.,IRL Press Ltd, Oxford, UK, 1989を参照）。適当に保護され官能化された構成単位は、溶液中で調製した（例えば、一般的な化合物（８）、スキーム１）後、適当なリンカーを介して固相に可逆的に結合した。次に、カップリング／脱保護／化学的修飾、例えば、酸化のラウンドを、全長の所望の分子が完了するまで行なった（スキーム２）。さらに、例示の阻害剤（１〜１２）は、固相から放出され（切断され）、分析され、精製されて、ある範囲のプロテアーゼに対する阻害についてアッセイした。
【０１３３】
通常、適当な固相表面が選択されうるものの、マルチピン(multipin)（ポリアミド１．２→１０マイクロモルのローディング、www.mimotopes.comを参照）を、固相合成に使用した。通常、１．２マイクロモルのギヤを用いて、予備スクリーニング用に小スケールの未精製例示物を得、また、１０マイクロモルのクラウンを好ましい実施例のスケールアップ合成及び精製で使用した。標準的なカップリング及びＦｍｏｃ脱保護方法を使用した（固相マルチピン方法(solidphase multipin methodology)の徹底的な説明に関しては、Grabowska, U. et al, J. Comb. Chem. 2(5),475-490, 2000を参照）。
【０１３４】
初期アセンブリの調製
構成単位−リンカー構築物（例えば、（１０））を、５分間、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、具体的には、１〜１０ｍＬ）中で２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ、１モル当量）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ、１モル当量）、及びＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ、２モル当量）でカルボキシル活性化を行なった。アミノ官能化ＤＡ／ＭＤＡクラウンまたはＨＥＭＡギア（１クラウン当たり１０マイクロモル／１ギア当たり１．２マイクロモル、活性化構築物に比して０．３３モル当量の全表面アミノ官能化）を添加した後、ＤＭＦを添加して、固相表面を被覆した。ローディング反応を一晩行なった。一晩ローディングした後、クラウン／ギアについて、洗浄、Ｆｍｏｃ脱保護及びローディングの定量の標準的なサイクルを行ない（Grabowska, U. et alを参照）、ローディングされた構成単位−リンカー構築物（例えば、（１１））を得た。分析から、すべての実施例においてほとんど定量的なローディングが示された。
【０１３５】
カップリングサイクル
標準的なＦｍｏｃ−アミノ酸および新規なカルボン酸（１０または２０モル当量）のカップリングを、５分間予め活性化して、ジメチルホルムアミド中で２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ、１０または２０モル当量）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ、１０または２０モル当量）及びＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ、２０または４０モル当量）で活性化されたカルボキシルを介して行なった。活性化された物質を、合成に必要なパターンでポリプロピレン製９６ウェルプレート（Beckman, １ｍＬウェル、クラウンでは１ウェル当たり５００μＬ溶液またはギアでは１ウェル当たり２５０μＬ溶液）の適当なウェルに分取した。ローディングされた遊離アミノ構成単位−リンカー構築物（例えば、（１１））を添加して、カップリング反応を一晩行なった。一晩カップリングした後、クラウン／ギアについて、洗浄、Ｆｍｏｃ脱保護の標準的なサイクルを行なった（Grabowska,U. et alを参照）。同様の活性化及びカップリング条件をある範囲のカルボン酸（Ｒ−ＣＯＯＨ）のカップリングに使用した。または、クロロホルメート、例えば、モルホリン−４−カルボニルクロライド（１０モル当量）を、ＮＭＭ（１０モル当量）を添加しながらＤＭＦ中でカップリングした。
【０１３６】
酸分解切断サイクル(Acidolytic Cleavage Cycle)
９５％  ＴＦＡ／５％水の混合液を、合成のパターンに相当するパターンでポリスチレンの９６ウェルプレート（Beckman1, １ｍＬ  ウェル、クラウンでは１ウェル当たり６００μＬ溶液またはギアでは１ウェル当たり３００μＬ溶液）に予め分取した。完了したマルチピンアセンブリを第一のプレート（マザープレート）に添加し、単位を錫箔中にカバーして、２時間切断した。次に、切断されたマルチピンアセンブリを、第一のプレートから除去して、１５分間、第二のプレート（洗浄プレート）に添加した。さらに、消費されたマルチピンアセンブリを捨て、マザー／洗浄プレートをＨＴ−４  ＧｅｎｅＶａｃプレートエバポレーター(HT-4GeneVac plate evaporator)で蒸発させた。
【０１３７】
切断された例示物の分析及び精製
（ａ）１．２マイクロモルのギアの例。１００μＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を各切断後の乾燥した洗浄プレートのウェルに添加し、よく混合して、相当する切断後の乾燥したマザープレートのウェルに移し、再度よく混合した。１０μＬのこのＤＭＳＯ溶液を、９０％アセトニトリル／１０％  ０．１％ＴＦＡ水溶液の混合液で１００μＬに希釈した。２０μＬのアリコートを、ＨＰＬＣ−ＭＳ及び全分析用ＨＰＬＣ(full analytical HPLC)で分析した。それぞれの場合、未精製の例示分子は、予想された［Ｍ＋Ｈ］＋イオン及び８０％超（２１５ｎｍ  ＵＶ分析による）のＨＰＬＣピークを示した。これにより、予備的なプロテアーゼ阻害スクリーニング用に良質な未精製例示物を含む約１０ｍＭ  ＤＭＳＯストック溶液が得られた。
【０１３８】
（ｂ）１０マイクロモルのクラウンの例。５００μＬの９０％アセトニトリル／１０％  ０．１％ＴＦＡ水溶液の混合液を、各洗浄プレートのウェルに添加し、よく混合して、相当するマザープレートのウェルに移し、再度よく混合した。５μＬのこの溶液を、９０％アセトニトリル／１０％  ０．１％ＴＦＡ水溶液の混合液で１００μＬに希釈した。２０μＬのアリコートを、ＨＰＬＣ−ＭＳ及び全分析用ＨＰＬＣで分析した。それぞれの場合、未精製の例示分子は、予想された［Ｍ＋Ｈ］＋イオン及び８０％超（２１５ｎｍ  ＵＶ分析による）のＨＰＬＣピークを示した。次に、未精製例示物を含むポリスチレン単位を凍結乾燥した。
【０１３９】
（ｃ）個々の例示物（例（ｂ））を、０．１％ＴＦＡ水溶液／アセトニトリルの１：１の混合液（１ｍＬ）中に再溶解して、半予備的ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｊｕｐｉｔｅｒ  Ｃ４、５μ、３００Ａ、２５０×１０ｍｍ、２５分にわたる２５〜９０％のＡにおけるＢの勾配、４．０ｍＬ／分、２１５ｎｍ  ＵＶ検出）によって精製した。画分を、予めタールが塗布された(pre-tarred)グラスサンプルバイアル瓶中で凍結乾燥して、精製された例示物（具体的には、２〜４ｍｇ、４０〜８０％収率）を得た。
【０１４０】
（ｄ）精製された例示物を、適当な容積のＤＭＳＯに溶かして、正確なプロテアーゼ阻害スクリーニング用の、１０ｍＭのストック溶液を得た。
【０１４１】
実施例１  （３ａＲ，６ａＲ）４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］ベンズアミド
【０１４２】
【化３４】
2004520365.tif 000036
スキーム１の一般的な詳細に従って、必要な２環式の構成単位、（３ａＲ，６ａＲ）（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（８）を下記のように調製した。
【０１４３】
（１）（２Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−フェニルプロピオン酸２−オキソ−シクロペンチルエステルの調製
ａ）メタノール（２５０ｍｌ）におけるシクロペンタノン（１１．６ｍｌ、１３０ｍｍｏｌ）の溶液を、メタノール（７５ｍｌ）における水酸化カリウム（８５％ｔｅｃｈ．、２２．１ｇ、３３５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、０℃で２０分かけて滴下した。この混合物を、０℃で３０分間攪拌した後、２−ヨードシル安息香酸（３６．４５ｇ、１３８ｍｍｏｌ）を１時間にわたって一部ずつ添加した。この混合物を４時間で周囲温度に加温した後、周囲温度で２０時間攪拌した。大部分の溶剤を真空中で除去した後、生成物をジクロロメタン（４００ｍｌ）で抽出した後、抽出物を水で洗浄し（２×２５０ｍｌ）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去したところ、２，２−ジメトキシシクロペンタノールが無色の油として残り（１１．９８ｇ）、これをさらに精製せずに使用した。
【０１４４】
ｂ）４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１．０ｇ、８．２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（５００ｍｌ）における２，２−ジメトキシシクロペンタノール（１１．９８ｇ、８２ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−３−フェニルプロピオン酸（２３．９ｇ、９０．３ｍｍｏｌ）及び１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２３．６ｇ、１２３．１ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に０℃で添加した。この混合物を０℃で４時間攪拌した後、水（２×３００ｍｌ）及び飽和塩化ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去したところ、（２Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−フェニルプロピオン酸２，２−ジメトキシシクロペンチルエステルが黄色の油として残り（３６．０ｇ）、これをさらに精製せずに使用した。
【０１４５】
ｃ）４−トルエンスルホン酸一水和物（１．７ｇ、９．２ｍｍｏｌ）を、周囲温度でアセトン（４５０ｍｌ）における（２Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−フェニルプロピオン酸２，２−ジメトキシシクロペンチルエステル（３６ｇ、９１．６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加した。この溶液を３日間攪拌した後、水（６００ｍｌ）及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）を添加し、さらに生成物を酢酸エチル（６００ｍｌ）で抽出した。水相を酢酸エチル（２×４００ｍｌ）で抽出した後、合わせた酢酸エチル溶液を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し（２×１５０ｍｌ）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去した。残渣（１８．０５ｇ）を、ヘプタン：酢酸エチル３：１→２：１の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、（２Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−フェニルプロピオン酸２−オキソシクロペンチルエステルが無色の油として残った（１８．０５ｇ、シクロペンタノンから４０％）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．２５、ヘプタン：酢酸エチル  ７：３）、Ｒｔ＝１７．９〜１９．２分のメインなブロードなピークを有する分析用ＨＰＬＣ、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．０４〜９．２４分、２４８．１［Ｍ-Ｂｏｃ＋２Ｈ］＋、３７０．２［Ｍ＋Ｎａ］＋、７１７．３［２Ｍ＋Ｎａ］＋のメインなブロードＵＶピーク）。
【０１４６】
【化３５】
2004520365.tif 000037
（２）（４ａＳ，７ａＳ）  ３Ｓ−ベンジル−２−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［１，４］オキサジン−４ａＳ−カルボニトリルの調製
【０１４７】
【化３６】
2004520365.tif 000038
トリフルオロ酢酸（７５ｍｌ）を、ジクロロメタン（２５０ｍｌ）における（２Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−フェニルプロピオン酸２−オキソシクロペンチルエステル（１７．０５ｇ、４９．１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に０℃で６０分かけて滴下した。この混合物を０℃で７５分間攪拌した後、大部分の溶剤を真空中で除去した。トルエン（７５ｍｌ）を残渣に添加した後、溶剤を真空中で除去して、油を得、これをアセトニトリル（７００ｍｌ）に溶解した。硫酸マグネシウム（２９．５ｇ）、次に、酢酸ナトリウム（２０．１ｇ）を、攪拌溶液に加えた。得られた懸濁液を９０分間攪拌した後、固体を瀘過によって除去し、さらに溶剤を真空中で除去した。残渣をプロパン−２−オール（６５０ｍｌ）に溶解した後、窒素下で攪拌した。トリメチルシリルシナニド(trimethylsilyl cyanide)（１３．１ｍｌ、９８．４ｍｍｏｌ）を１５分かけて滴下した後、塩化亜鉛（４９ｍｌ、ジエチルエーテルにおける１Ｍ溶液）を４０分かけて添加した。この混合物を１８時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（７５０ｍｌ）に注意深く添加した。この混合物を水（７５０ｍｌ）で希釈した後、生成物をジエチルエーテルで抽出した（３×５００ｍｌ）。合わせたエーテル性溶液を飽和塩化ナトリウム水溶液（３５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去して、茶色の油（１０．０５ｇ）を得、これを、ヘプタン：酢酸エチル  ４：１→３：２の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、（３Ｓ，４ａＲ，７ａＳ）３−ベンジル−２−オキソヘキサヒドロシクロペンタ［１，４］オキサジン−４ａ−カルボニトリルを白色固体として得た（４．５４ｇ、３６％）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．４５、ヘプタン：酢酸エチル  ３：１）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１４．５２１分、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝７．６４５分、２５７．２［Ｍ＋Ｈ］＋、２７９［Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のメインのＵＶピーク）。
【０１４８】
【化３７】
2004520365.tif 000039
（３）１Ｒ−アミノ−２Ｓ−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸の調製
【０１４９】
【化３８】
2004520365.tif 000040
ｔｅｒｔ−ブチルハイポクロライト(tert-butylhypochlorite)（４．０ｍｌ、３５．４ｍｍｏｌ）を、ジエチルエーテル（３５０ｍｌ）における（３Ｓ，４ａＲ，７ａＳ）３−ベンジル−２−オキソヘキサヒドロシクロペンタ［１，４］オキサジン−４ａ−カルボニトリル（４．５３ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、０℃で２分にわたって窒素下で滴下した。この混合物を０℃で１４０分間攪拌した後、トリエチルアミン（７．４ｍｌ、５３ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下した。得られた懸濁液を０℃で３時間、次に周囲温度で２３時間、攪拌した。不溶性材料を瀘過によって除去した後、濾液を真空中で濃縮した。残渣を、ヘプタン：酢酸エチル（７：３）で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、白色固体（３．３ｇ、ＴＬＣ［単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．３、ヘプタン：酢酸エチル  ２：１］、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１６．０７１分）が残り、これを０℃に冷却した後、０℃で濃塩酸を１回添加した。この懸濁液を２時間で周囲温度まで加温した後、２０時間攪拌した。反応混合物を、６個の加圧容器に等しく分配し、これを密閉した後、１００℃で２６時間加熱し、さらに周囲温度まで冷却した。反応混合物を再度合わせた後、生成物を水（４００ｍｌ）で抽出し、さらにジエチルエーテル（２×２００ｍｌ）で洗浄し、溶剤を真空中で除去したところ、残渣が残り、これを、０．０１Ｍ  塩酸、水及び次に１．０Ｍ  水酸化アンモニウム水溶液で連続して溶出してＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂で精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、固体が残り、これを水：アセトニトリル（１：１）の混合液から３回凍結乾燥して、（１Ｒ，２Ｓ）１−アミノ−２−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸を明るい茶色の固体として得た（１．７３ｇ、６７％）。ＨＰＬＣ−ＭＳ（ＵＶで活性化しない、Ｒｔ＝０．５４１分、１４６．１［Ｍ＋Ｈ］＋）。
【０１５０】
【化３９】
2004520365.tif 000041
（４）１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２Ｓ−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸の調製
（０．６７ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を、水：１，４−ジオキサン（２：１、４５ｍｌ）における炭酸ナトリウム（１．０ｇ、９．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に０℃で添加した。１，４−ジオキサン（１５ｍｌ）における９−フルオレニルメチルクロロホルメート（１．２５ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）の溶液を、３０分かけて滴下した。得られた懸濁液を、０℃で７５分間、次に周囲温度で４５分間、攪拌した。水（２００ｍｌ）を添加した後、濁った溶液をクロロホルムで洗浄した（２×１４０ｍｌ）。クロロホルム（１００ｍｌ）を添加して、混合物を１Ｍ  塩酸で酸性にした（ｐＨ〜２）。クロロホルム層を分離した後、水層をクロロホルムで再抽出した（２×１００ｍｌ）。酸性化した水層から予め分離されたクロロホルム抽出物を合わせた後、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去したところ、無色の油が残り、これにヘプタン（１００ｍｌ）を、−８０℃で１６時間貯蔵する前に加えた。溶剤を、油状の残渣から迅速にデカンテーションし、これをヘプタン（５ｍｌ）で洗浄した後、残った溶剤を真空中で除去して、（１Ｒ，２Ｓ）１−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸を油として得た（１．２７ｇ、７５％）。ＴＬＣ（メインなＵＶスポット、Ｒｆ＝０．２０、マイナーなＵＶスポット、Ｒｆ＝０．１５、ＣＨＣｌ３における２０％ＭｅＯＨ）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１７．１７２分（メジャー）、Ｒｔ＝１６．８００分（マイナー）及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝７．８４０分、３６８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、３９０．１［Ｍ＋Ｎａ］＋のメインＵＶピーク、Ｒｔ＝７．６４６分、３６８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、３９０．１［Ｍ＋Ｎａ］＋のマイナーなＵＶピーク）。
【０１５１】
【化４０】
2004520365.tif 000042
（５）１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２Ｓ−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸アリルエステルの調製
【０１５２】
【化４１】
2004520365.tif 000043
ジクロロメタン（１４ｍｌ）における１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２Ｓ−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸（１．７５ｇ、４．８ｍｍｏｌ）及びトリカプリルメチルアンモニウムクロライド（トリカプリルメチルアンモニウムクロライド）（１．９３ｇ、４．８ｍｍｏｌ）の溶液を、水（１４ｍｌ）における炭酸水素ナトリウム（０．４ｇ、４．８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加した後、臭化アリル（１．４４ｍｌ、１６．７ｍｍｏｌ）を一度に添加した。２相混合物を２０時間攪拌した後、水（５０ｍｌ）で希釈し、生成物をジクロロメタンで抽出した（２×５０ｍｌ）。合わせた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶剤を真空中で除去して、無色の油を得、これを、ヘプタン：酢酸エチル  １０：３→２０：７の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、（１Ｒ，２Ｓ）１−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸アリルエステルが無色の油として残った（１．３２ｇ、６７％）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．２５，ヘプタン：酢酸エチル  ３：１）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２０．３７１分（メジャー）、Ｒｔ＝１９．７０６分（マイナー）及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．４１２分、４０８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、４３０．１［Ｍ＋Ｎａ］＋のメインＵＶピーク；Ｒｔ＝９．１０２分、４０８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、４３０．１［Ｍ＋Ｎａ］＋のマイナーなＵＶピーク）。
【０１５３】
【化４２】
2004520365.tif 000044
（６）１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２−オキソ−シクロペンタンカルボン酸アリルエステルの調製
【０１５４】
【化４３】
2004520365.tif 000045
ジクロロメタン（１．０ｍｌ）におけるジメチルスルホキシド（０．２２４ｍｌ、３．１５ｍｍｏｌ）の溶液を、２０分かけて−７０℃でジクロロメタン（２．５ｍｌ）における塩化オキサリル（０．１３２ｍｌ、１．５１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に窒素下で添加した。この混合物を１０分間攪拌した後、ジクロロメタン（３ｍｌ）における（１Ｒ，２Ｓ）１−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸アリルエステル（０．５３５ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）の溶液を２０分にわたって添加した。この混合物を１０分間攪拌した後、トリエチルアミン（０．９２ｍｌ、６．５７ｍｍｏｌ）を５分かけて滴下した。次に、冷却浴を取り除いて、周囲温度で４５分間攪拌し続けた。飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍｌ）を添加した後、生成物をジエチルエーテルで抽出した（２×５０ｍｌ）。合わせたエーテル層を、水（２５ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去して、無色の油（５２０ｍｇ）を得、これを、ヘプタン：酢酸エチル（３：１）で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、（１Ｒ）１−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２−オキソシクロペンタンカルボン酸アリルエステルが無色の油として残った（０．４３ｇ、８１％）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．３０、ヘプタン：酢酸エチル  ２：１）、Ｒｔ＝１９．９９３分のメインピークを有する分析用ＨＰＬＣ、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝１０．１３２分、４０６．１［Ｍ＋Ｈ］＋、４２８．１［Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のＵＶピーク）。
【０１５５】
【化４４】
2004520365.tif 000046
（７）１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２Ｒ−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸アリルエステルの調製
【０１５６】
【化４５】
2004520365.tif 000047
水素化ホウ素ナトリウム（３９ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を、０℃で１度にメタノール（６ｍｌ）における１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２−オキソシクロペンタンカルボン酸アリルエステル（０．４２ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加した。この混合物を１０分間攪拌した後、溶剤を真空中で除去したところ、残渣が残った。水（２０ｍｌ）及びジクロロメタン（２０ｍｌ）を添加した後、１Ｍ  塩酸を加えて、混合物を酸性にした（ｐＨ〜１．５）。ジクロロメタン層を集めた後、水層をジクロロメタン（２０ｍｌ）で抽出した。合わせたジクロロメタン層を飽和塩化ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）で洗浄した。飽和塩化ナトリウム水溶液をジクロロメタン（１０ｍｌ）で抽出した後、ジクロロメタン層を合わせて、さらに乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶剤を真空中で除去して、無色の油（４２０ｍｇ）を得、これをヘプタン：酢酸エチル  ７：３→１３：７の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２Ｒ−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸アリルエステルが無色の油として残った（２８８ｍｇ、６８％）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．２５、ヘプタン：酢酸エチル  ３：１）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１９．６８０分（メジャー）、Ｒｔ＝２０．３２３分（マイナー）及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．０７６分、４０８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、４３０．０［Ｍ＋Ｎａ］＋のメインＵＶピーク；Ｒｔ＝９．４５１分、４０８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、４３０．０［Ｍ＋Ｎａ］＋のマイナーなＵＶピーク）。４−トルエンスルホン酸一水和物（３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を、トルエン（１２ｍｌ）におけるこの油（２３０ｍｇ）の溶液に添加した後、混合物を１００℃に７５分間加熱した。この油（上記と同様の方法を用いて調製した）の２個のさらなるバッチ（１７０ｍｇ及び３５ｍｇ）を、量を適当に測って４−トルエンスルホン酸一水和物で同様にして処理した後、これら３個のトルエン混合物を合わせて、溶剤を真空中で除去して、残渣を得、これを、ヘプタン：酢酸エチル  ７：３→１３：７の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、（１Ｒ，２Ｒ）１−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸アリルエステルが無色の油として残った（３８０ｍｇ）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．２５、ヘプタン：酢酸エチル  ３：１）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１８．１４１分の単一のＵＶピーク及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．１４０分、４０８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、４３０．１［Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のＵＶピーク）。
【０１５７】
【化４６】
2004520365.tif 000048
（８）２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸アリルエステルの調製
【０１５８】
【化４７】
2004520365.tif 000049
ジクロロメタン（５ｍｌ）における１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−２Ｒ−ヒドロキシシクロペンタンカルボン酸アリルエステル（３６０ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液を、−７０℃に密閉した加圧容器中で冷却した後、イソブチレンガス（〜３ｍｌ）を溶液中に凝縮させた。濃硫酸（２５μｌ）を添加した後、加圧容器を密閉した。この混合物を周囲温度で２０時間攪拌した後、−７０℃に冷却した。Ｎ−メチルモルホリン（５０μｌ）を加えた後、開放した加圧容器を周囲温度まで加温した。この混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）で希釈した後、生成物をジクロロメタンで抽出した（５０ｍｌ、次に２×２５ｍｌ）。合わせたジクロロメタン層を、飽和塩化ナトリウム水溶液（２５ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去した。残渣（３７０ｍｇ）を、ヘプタン：酢酸エチル  ４：１→７：３の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸アリルエステルが無色の油として残った（３０５ｍｇ、７５％）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．５０、ヘプタン：酢酸エチル  ２：１）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２２．６２３分及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝１１．６１１分、４０８．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］＋、４８６．１［Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のＵＶピーク）。
【０１５９】
【化４８】
2004520365.tif 000050
（９）２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸の調製
【０１６０】
【化４９】
2004520365.tif 000051
テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０）（１５ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（５ｍｌ）、次にフェニルトリヒドロシラン（１５３μｌ、１．２４ｍｍｏｌ）を、窒素下で２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸アリルエステル（２８８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）に連続して添加した。この混合物を、４５分間攪拌した後、０．０１Ｍ  塩酸（３０ｍｌ）を添加し、生成物をクロロホルムで抽出した（１×２０ｍｌ、次に１×１０ｍｌ）。合わせたクロロホルム層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、溶剤を真空中で除去した。残渣（４６０ｍｇ）を、ヘプタン：酢酸エチル  ２：１→１：３の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸が無色の油として残った（２０５ｍｇ、７８％）。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．２５、ヘプタン：酢酸エチル  １：２）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１９．５３９分及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．８５０分、３６８．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］＋、４４６．１［Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のＵＶピーク）。
【０１６１】
【化５０】
2004520365.tif 000052
（１０）（２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−フルオロカルボニル−シクロペンチル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステルの調製
【０１６２】
【化５１】
2004520365.tif 000053
ピリジン（５３μｌ、０．６６ｍｍｏｌ）、次にシアヌル酸フッ化物（７１μｌ、０．８５ｍｍｏｌ）を、窒素下でジクロロメタン（５ｍｌ）における２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）シクロペンタンカルボン酸（１５９ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、０℃で連続して添加した。懸濁液を、０℃で３０分間、次に周囲温度で５時間、攪拌した。砕いた氷（〜１０ｍｌ）及び氷冷した水（１０ｍｌ）を添加した後、生成物をジクロロメタン（２０ｍｌ）で抽出した。ジクロロメタン層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶剤を真空中で除去して、（２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−フルオロカルボニルシクロペンチル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステルを薄茶色の油として得（１１５ｍｇ、７１％）、これをさらに精製せずに使用した。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．４５、ヘプタン：酢酸エチル  ２：１）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２３．９３３分のメインＵＶピーク及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝１１．４３９分、３７０．１［Ｍ-ｔＢｕ＋２Ｈ］＋、４４８．１［Ｍ＋Ｎａ］＋のメインＵＶピーク）。
【０１６３】
（１１）（３ａＲ，６ａＲ）（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステルの調製
【０１６４】
【化５２】
2004520365.tif 000054
ａ）エーテル性ジアゾメタン［６０℃で水（１．５ｍｌ）／エタノール（３．０ｍｌ）における水酸化ナトリウム（１．０５ｇ）にジエチルエーテル（１５ｍｌ）におけるジアザルド(diazald)（０．９４ｇ、〜３ｍｍｏｌ）を添加することにより生成］を、０℃でジクロロメタン（２ｍｌ）における（１Ｒ，２Ｒ）（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１−フルオロカルボニルシクロペンチル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（１１５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加した。この溶液を、０℃で２０分間、次に周囲温度で２０時間、攪拌した。酢酸（０．６ｍｌ、１０．５ｍｍｏｌ）を添加した後、溶液を、ｔ−ブチルメチルエーテル（５０ｍｌ）を添加する前に、５分間攪拌した。エーテル層を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（４０ｍｌ）、次に水（２×３０ｍｌ）で洗浄した後、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、溶剤を真空中で除去した。残渣（１３０ｍｇ）を、ヘプタン：酢酸エチル  ４：１→１：３の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、［２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（２−ジアゾアセチル）シクロペンチル］カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（１６ｍｇ）が油として残り、これをさらに精製せずに使用した。
【０１６５】
ｂ）酢酸：水（４：１、１．０ｍｌ）における塩化リチウム（１５ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の溶液を、［２Ｒ−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１Ｒ−（２−ジアゾアセチル）シクロペンチル］カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（１６ｍｇ）に添加した。この溶液を２．５時間攪拌した後、クロロホルム（２５ｍｌ）及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍｌ）を添加した。クロロホルム層を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（２５ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去した。残渣（１６ｍｇ）を、ヘプタン：酢酸エチル  ３１：９→３：１の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、（３ａＲ，６ａＲ）（３−オキソヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（１１．０ｍｇ）が白色固体として残った。ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．３、ヘプタン：酢酸エチル  ２：１）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１８．８７２分のメインＵＶピーク及びＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．２０８分、３６４．０［Ｍ＋Ｈ］＋、３８６．０［Ｍ＋Ｎａ］＋のメインＵＶピーク）。
【０１６６】
【化５３】
2004520365.tif 000055
スキーム２の一般的な詳細に従って、必要な２環式の構成単位、（３ａＲ，６ａＲ）（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（８）を、下記のようにして、構成単位−リンカー構築物（１０）に変換した。
【０１６７】
（３ａＲ、６ａＲ）（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）カルバミン酸９Ｈ−フルオレン−９−イルメチルエステル（８）（２６．０ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌｅ）を、酢酸ナトリウム３水和物（１４．６ｍｇ、０．１０７ｍｍｏｌｅ、１．５当量）を含むエタノール（１．７５ｍＬ）及び水（０．２５ｍＬ）の混合液に溶解した。４−［［（ヒドラジノカルボニル）アミノ］メチル］シクロヘキサンカルボン酸トリフルオロアセテート（２３．６ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌｅ、１．０当量、Murphy, A. M. et al, J.Am. Chem. Soc., 114, 3156-3157, 1992）を添加し、混合物を２４時間還流した。クロロホルム（３５ｍＬ）を添加し、有機溶液をＨＣｌ（２×１５ｍＬ、〜ｐＨ３）、次にブライン（１×１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で還元にすることによって、未精製の構成単位−リンカー構築物（１０）を無色のガムとして得た。収率４０．８ｍｇ、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１７．５７及び１８．０８分に２個の生成物のピーク（ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ幾何異性体）、ＨＰＬＣ−ＭＳ（双方とも５６１［Ｍ＋Ｈ］＋、１１２１［２Ｍ＋Ｎａ］＋の２×ＵＶピーク）。未構築物（１０）を、構築物のローディングに直接使用した。
【０１６８】
スキーム２の一般的な詳細に従って、必要な構成単位−リンカー構築物（１０）を、下記のようにして、ローディングされた構成単位−リンカー構築物（１１）を提供する固相に結合させた。
【０１６９】
構成単位−リンカー構築物（１０）（０．０６６ｍｍｏｌｅ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ、２５．０ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物及び（ＨＯＢＴ、１０．１ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌｅ）を、ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解し、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ、１４．４μＬ，０．１３ｍｍｏｌｅ）を添加した。５分間予め活性化した後、遊離アミンギア（２０×１．２μｍｏｌｅ）、次にジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）を添加し、一晩放置した。次に、消費されたカップリング溶液を遊離アミンクラウン（２×１０μｍｏｌｅ）に添加し、一晩放置した。標準的な洗浄及び分析から、８７％でローディングが示された。
【０１７０】
スキーム２の一般的な詳細に従って、必要なローディングされた構成単位−リンカー構築物（１１）を、下記のようにして、固相上で作製した。
【０１７１】
ローディングされた構築物（１１）を、標準的なＦｍｏｃ脱保護及びＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（ＯＢｕｔ）−ＯＨ、次に４−ｔｅｒｔ−ブチル安息香酸との順次カップリングによって、実施例１の（３ａＲ，６ａＲ）４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］ベンズアミドにした。この未精製例示物を切断して、分析した（一般的な技術を参照）。ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１７．９９分（＞９０％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ４６５．２［Ｍ＋Ｈ］＋、９５１．４［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１７２】
下記実施例（２〜１２）を、実施例１で詳述したのと同様にして調製し、必要な試薬を用いてカップリングして、全長分子を得た。
【０１７３】
実施例２  （３ａＲ，６ａＲ）ビフェニル−４−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］アミド
【０１７４】
【化５４】
2004520365.tif 000056
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１７．４３分（＞９５％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４８５．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７５】
実施例３  （３ａＲ，６ａＲ）ナフタレン−１−カルボン酸［２−（４−ヒドロキシフェニル）−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］アミド
【０１７６】
【化５５】
2004520365.tif 000057
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１５．１９５分（＞９５％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４５９．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１７７】
実施例４  （３ａＲ，６ａＲ）４−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−［３−メチル−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）ブチル］ベンズアミド
【０１７８】
【化５６】
2004520365.tif 000058
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２０．１５８分（＞８０％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４１５．１［Ｍ＋Ｈ］＋、８５１．３［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１７９】
実施例５  （３ａＲ，６ａＲ）ビフェニル−４−カルボン酸−［３−メチル−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）ブチル］ベンズアミド
【０１８０】
【化５７】
2004520365.tif 000059
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１９．５３分（＞８５％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４３５．２［Ｍ＋Ｈ］＋、８９１．４［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１８１】
実施例６  （３ａＲ，６ａＲ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸［３−メチル−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）ブチル］アミド
【０１８２】
【化５８】
2004520365.tif 000060
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１８．３６分（＞８０％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４１５．１［Ｍ＋Ｈ］＋、８５１．３［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１８３】
実施例７  （３ａＲ，６ａＲ）チオフェン−３−カルボン酸［２−シクロヘキシル−１Ｓ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イルカルバモイル）エチル］アミド
【０１８４】
【化５９】
2004520365.tif 000061
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１７．７９分（＞８５％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４０５．２［Ｍ＋Ｈ］＋，８３１．３［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１８５】
実施例８  （２ＲＳ，３ａＲ，６ａＲ）２−ベンジルオキシ−３−シクロヘキシル−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）プロピオンアミド
【０１８６】
【化６０】
2004520365.tif 000062
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２１．７７−２１．９７分（＞９０％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ３８６．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１８７】
（ａ）３−シクロヘキシル−２Ｓ−ヒドロキシプロピオン酸（化合物（１４）スキーム４）の調製
水（４０ｍｌ）における亜硝酸ナトリウム（１２．１ｇ、１７５ｍｍｏｌ）の溶液を、１．５時間にわたって０℃で０．５Ｍ  硫酸（１２０ｍｌ、６０ｍｍｏｌ）における（Ｓ）−α−アミノシクロヘキサンプロピオン酸水和物（５ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁溶液に滴下した。この混合物を２０時間かけて周囲温度にまで加温した。生成物をジエチルエーテルで抽出した（２×２５ｍｌ）後、エーテル層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し（２×２５ｍｌ）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、溶剤を真空中で除去した。残渣（５．３ｇ）を、ジエチルエーテル（１０ｍｌ）及びヘプタン（２５ｍｌ）から再結晶化して、３−シクロヘキシル−２Ｓ−ヒドロキシプロピオン酸を白色固体として得た、収率２．４ｇ、（５３％）。
【０１８８】
【化６１】
2004520365.tif 000063
（ｂ）２ＲＳ−ベンジルオキシ−３−シクロヘキシルプロピオン酸（化合物（１５）スキーム４）の調製
水素化ナトリウム（２６５ｍｇの油における６０％分散液、６．６ｍｍｏｌ）を、５分にわたって０℃で３−シクロヘキシル−２Ｓ−ヒドロキシプロピオン酸（０．５２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍｌ）及びジクロロメタン（５ｍｌ）の攪拌混合物に２回に分けて添加した。この混合物を０℃で５分間、次に周囲温度で４５分間攪拌した。次に、臭化ベンジル（０．４５ｍｌ、３．８ｍｍｏｌ）を加えた後、この混合物を、ジメチルホルムアミド（５ｍｌ）を添加する前に、１時間、攪拌した。４時間攪拌した後、ヨウ化カリウム（５０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２０時間攪拌した後、５５℃で１時間加熱し、さらに周囲温度まで冷却して、水（１５ｍｌ）に注いだ。飽和塩化ナトリウム水溶液（５ｍｌ）を添加した後、混合物をジクロロメタン（５ｍｌ、次に１０ｍｌ）で抽出して、これを捨てた。水層を１Ｍ  塩酸（１０ｍｌ）で酸性化した後、ジクロロメタンで抽出した（２×１０ｍｌ）。ジクロロメタン層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、溶剤を真空中で除去した。残渣（０．５５ｇ）をジメチルホルムアミド（８ｍｌ）に溶解した後、水素化ナトリウム（１９０ｍｇの油における６０％分散液、４．７５ｍｍｏｌ）を添加する前に０℃に冷却した。この混合物を３０分間攪拌した後、ポリマー結合イソシアネート（３８０ｍｇ、２ｍｍｏｌＮｇ−１）を添加した。この混合物を周囲温度で２時間攪拌した後、水（１５ｍｌ）に注いだ。１Ｍ  塩酸（１０ｍｌ）を添加した後、生成物をジクロロメタン（２×１０ｍｌ）で抽出し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去した。残渣を、メタノール：ジロロメタン  ０：１→１：２０の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、２ＲＳ−ベンジルオキシ−３−シクロヘキシルプロピオン酸を無色の油として得た、収率４１ｍｇ（５．２％）。
【０１８９】
ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．４７分、２６１．２［Ｍ−Ｈ］−、２８５．２［Ｍ＋Ｎａ］＋、５４７．３［２Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のメインＵＶピーク）。
【０１９０】
【化６２】
2004520365.tif 000064
化合物（１５）を、（Ｆｍｏｃの標準的な除去後）ローディングされた構成単位−リンカー構築物（１１）に標準的な条件下でカップリングした後、切断して、実施例８を得た。
【０１９１】
実施例９  （３ａＲ，６ａＲ）２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−ベンジルスルファニル）−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）アミド
【０１９２】
【化６３】
2004520365.tif 000065
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２３．６７分（＞８０％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４１８．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１９３】
（ａ）２Ｒ−ブロモ−４−メチルペンタン酸（化合物（１７）、スキーム５）の調製
水（１５ｍｌ）における亜硝酸ナトリウム（５．１ｇ、７３ｍｍｏｌ）の溶液を、水（１００ｍｌ）におけるＤ−ロイシン（８．７５ｇ、６７ｍｍｏｌ）、臭化カリウム（２９．７５ｇ、０．２５ｍｏｌ）及び濃硫酸（８．６ｍｌ）の攪拌混合液に０℃で５時間かけて滴下した。この混合物を０℃で３０分間、次に周囲温度で２０時間攪拌した。生成物をジエチルエーテルで抽出した（２×１５０ｍｌ）後、合わせたエーテル層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し（２×１００ｍｌ）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去した。残渣を、メタノール：ジクロロメタン  １：５０→１：２０の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去したところ、２Ｒ−ブロモ−４−メチルペンタン酸（１７）が無色の油として残った、収率１．６０ｇ、（１２．３％）。ＴＬＣ（単一のスポット、Ｒｆ＝０．２、メタノール：ジクロロメタン  １：２０）。加えて、若干不純物のある生成物の第二の収穫（５．２ｇ、４０％）が得られた。
【０１９４】
【化６４】
2004520365.tif 000066
（ｂ）２Ｓ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルスルファニル）−４−メチルペンタン酸の調製（化合物（１９）、スキーム５）
ジメチルホルムアミド（１５ｍｌ）における２Ｒ−ブロモ−４−メチルペンタン酸（化合物（１７）、１．１ｇ、５．６ｍｍｏｌ）及び（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル）メタンチオール（１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）の溶液に窒素を５分間流した後、０℃に冷却した。トリエチルアミン（０．７９ｍｌ、５．７ｍｍｏｌ）を１分かけて滴下した後、混合物を周囲温度で２日間攪拌した。溶剤を真空中で除去し、残渣を、メタノール：ジクロロメタン  ０：１→１：２０の勾配で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去すると、残渣が残り、これを酢酸エチル：ヘプタン  ２：５で溶出してシリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去して、２Ｓ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルスルファニル）−４−メチルペンタン酸（１９）を無色の油として得た、収率１５０ｍｇ、（９％）。ＴＬＣ（単一のスポット、Ｒｆ＝０．２、ヘプタン：酢酸エチル  ５：２）、Ｒｔ＝２２．１１７分のメインピークを有する分析用ＨＰＬＣ、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝１１．０７２分、３１７．２［Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のメインＵＶピーク）。
【０１９５】
【化６５】
2004520365.tif 000067
化合物（１９）を、（Ｆｍｏｃの標準的な除去後）ローディングされた構成単位−リンカー構築物（１１）に標準的な条件下でカップリングした後、切断して、実施例９を得た。
【０１９６】
実施例１０  （３ａＲ，６ａＲ）２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニルメタンスルホニル）−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
【０１９７】
【化６６】
2004520365.tif 000068
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２１．８６分（＞８０％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４５０．２［Ｍ＋Ｈ］
＋。
【０１９８】
スキーム９  化合物（１９）を、（Ｆｍｏｃの標準的な除去後）ローディングされた構成単位−リンカー構築物（１１）に標準的な条件下でカップリングした。この中間のローディングされたチオエーテル（１．２μｍｏｌｅ  ギア）を、５時間、ジクロロメタン（２００μＬ）におけるｍ−クロロ過安息香酸（５当量、６５％試薬、１．６ｍｇ）で酸化した後、標準的な洗浄を行ない、さらに切断して、実施例１０を得た。
【０１９９】
実施例１１  （３ａＲ，６ａＲ）２−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−Ｎ−（３−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−ブチルアミド
【０２００】
【化６７】
2004520365.tif 000069
ＨＰＬＣ−ＭＳ  ４０７．１［Ｍ＋Ｈ］＋、８３５．１［２Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０２０１】
（ａ）２Ｒ−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−酪酸メチルエステルの調製
１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド・ＨＣｌ（１．１２ｇ、５．６９ｍｍｏｌ）、次に１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（０．８７ｇ、５．６９ｍｍｏｌ）を、アルゴン下で０℃でジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）における２Ｒ−（シクロヘキシルメチル）コハク酸１−メチルエステル（化合物（２４）、１．０ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加した。この混合物を２５分間攪拌した後、モルホリン（０．７ｍｌ、８．７６ｍｍｏｌ）を１分かけて滴下し、周囲温度で１６時間攪拌し続けた。生成物を酢酸エチル（２００ｍｌ）で抽出した後、１．０Ｍ  塩酸（３×１００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３×１００ｍｌ）、水（１００ｍｌ）、さらに飽和塩化ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去して、２Ｒ−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−酪酸メチルエステルをオフホワイトの固体として得た、収率１．２２ｇ、（９４％）。ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝７．９１分、２９８．１［Ｍ＋Ｈ］＋、６１７．３［２Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のピーク）。
【０２０２】
（ｂ）２Ｒ−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−酪酸の調製（化合物（２５）、スキーム７）
水（２７ｍｌ）における水酸化リチウム一水和物（０．５１ｇ、１２．１８ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃でテトラヒドロフラン（５５ｍｌ）及びメタノール（２７ｍｌ）における２Ｒ−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−酪酸メチルエステル（１．２１ｇ、４．０６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加した。この混合物を１時間周囲温度で攪拌した後、水（１００ｍｌ）で希釈した。水層をジエチルエーテルで抽出し（２×５０ｍｌ）、これを捨てた後、１Ｍ  塩酸でｐＨ＝１〜２に酸性化した。生成物をジクロロメタンで抽出した（３×５０ｍｌ）後、合わせたエーテル層を水（２×５０ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（２×５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、さらに溶剤を真空中で除去したところ、残渣が残った。この残渣をメタノール：ジクロロメタン  １：１００→３：１００の勾配で溶出してシリカゲルによるクロマトグラフィーによって精製した。適当な画分を合わせ、溶剤を真空中で除去して、２Ｒ−シクロヘキシルメチル−４−モルホリン−４−イル−４−オキソ−酪酸（２５）を白色固体として得た、収率０．８２ｇ、（７１％）。ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝６．７６９分、２８４．２［Ｍ＋Ｈ］＋
、５８９．２［２Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のピーク）。
【０２０３】
【化６８】
2004520365.tif 000070
化合物（２５）を、（Ｆｍｏｃの標準的な除去後）ローディングされた構成単位−リンカー構築物（１１）に標準的な条件下でカップリングした後、切断して、実施例１１を得た。
【０２０４】
実施例１２  （３ａＲ，６ａＲ）２−ビフェニル−３−イル−４−メチル−ペンタン酸（３−オキソ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｂ］フラン−３ａ−イル）−アミド
【０２０５】
【化６９】
2004520365.tif 000071
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２０．５３分（＞９０％）、ＨＰＬＣ−ＭＳ  ３９２．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２０６】
（ａ）ビフェニル−３−イル−酢酸メチルエステルの調製（化合物（２７）、スキーム８）
濃硫酸（５８８μＬ）を、メタノール（１００ｍＬ）における３−ブロモフェニル酢酸（１０ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を１．５時間還流した後、周囲温度に冷却し、減圧下で蒸発させて、残渣を得た。この残渣をジエチルエーテル（５００ｍＬ）に再度溶解し、水（２×１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、さらに減圧下で蒸発させて、３−ブロモフェニル酢酸メチルエステル（１０．６５ｇ）を得た。この３−ブロモフェニル酢酸メチルエステルを、トルエン（１１７ｍＬ）に溶かした後、フェニルボロン酸（６．８ｇ、５５．６９ｍｍｏｌ）、次に炭酸ナトリウムの水溶液（９３ｍＬ、２Ｍ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．６ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を一晩攪拌した後、周囲温度に冷却し、飽和塩化アンモニウムの水溶液（１００ｍＬ）を添加した。この混合物を酢酸エチルで抽出し（２×２００ｍＬ）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、さらに減圧下で蒸発させて、残渣を得た。酢酸エチル：ヘプタン（３：４８）を溶出液として用いたシリカ（２００ｇ）による残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、ビフェニル−３−イル酢酸メチルエステルを得た、収率１０．５ｇ、（９９％）。ＴＬＣ（単一のスポット、Ｒｆ＝０．２４、ヘプタンにおける１０％酢酸エチル）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１９．５５分、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．３５分、２２７．１［Ｍ＋Ｈ］＋の単一のメインＵＶピーク）。
【０２０７】
【化７０】
2004520365.tif 000072
（ｂ）ビフェニル−３−イル−酢酸の調製
水（３９ｍＬ）、次に水酸化リチウム一水和物（４．２ｇ、１０１．５ｍｍｏｌ）を、メタノール（２６５ｍＬ）におけるビフェニル−３−イル酢酸メチルエステル（１１．４３ｇ、５０．５７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この混合物を周囲温度で２時間攪拌した後、有機溶液を減圧下で除去した。混合物を希釈塩酸（１Ｍ、８０ｍＬ）で酸性化し、クロロホルムで抽出し（２×１００ｍＬ）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、さらに減圧下で蒸発させて、ビフェニル−３−イル酢酸を白色固体として得た、収率１０．６ｇ、（９９％）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１６．５６５分、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝７．９１分、２１３．１［Ｍ＋Ｈ］＋の単一のメインＵＶピーク）。
【０２０８】
【化７１】
2004520365.tif 000073
（ｃ）２ＲＳ−ビフェニル−３−イル−４−メチルペンテ−４−ン酸(2RS-biphenyl-3-yl-4-methylpent-4-enoicacid)の調製
無水テトラヒドロフラン（８４ｍＬ）におけるビフェニル−３−イル酢酸（７．０ｇ、３３ｍｍｏｌ）の溶液を、−７８℃で無水テトラヒドロフラン（８４ｍＬ）におけるリチウムジイソプロピルアミド（３６．４ｍＬ、ヘキサンにおける２Ｍ溶液）の溶液に滴下した。この混合物を０℃まで加温し、４０分間攪拌した。次に、混合物を−７８℃まで冷却し、３−ブロモ−２−メチルプロペン（４．９７ｍＬ）をすばやく添加した。この混合物を、−７８℃で１時間攪拌した後、水（２８ｍＬ）を添加して、有機溶液を減圧下で除去した。さらに、混合物を塩酸（６Ｍ、１４ｍｌ）で酸性化し、酢酸エチルで抽出し（３×１００ｍｌ）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、減圧下で蒸発させて、残渣を得た。メタノール：ジクロロメタン（３：９７）を溶出液として用いたシリカ（４００ｇ）による残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、不純物を含む２−ビフェニル−３−イル−４−メチルペンテ−４−ン酸（８．３ｇ）が得られた。メタノール：ジクロロメタン（１．５：９８．５）を用いたシリカ（４００ｇ）による残渣のフラッシュクロマトグラフィーによって、純粋な２−ビフェニル−３−イル−４−メチルペンテ−４−ン酸が得られた、収率５．２７ｇ、（６０％）、ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．２８、ジクロロメタンにおける５％メタノール）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝１９．９９分、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝９．５７分、２６７．１［Ｍ＋Ｈ］＋の単一のメインＵＶピーク）。
【０２０９】
【化７２】
2004520365.tif 000074
（ｄ）２ＲＳ−ビフェニル−３−イル−４−メチルペンタン酸の調製（化合物（２８）、スキーム８）
炭素上のパラジウム(Palladium on carbon)（１０％、３００ｍｇ）を、０℃でエタノール（４０ｍＬ）における２ＲＳ−ビフェニル−３−イル−４−メチルペンテ−４−ン酸（１ｇ、３．７６ｍｍｏｌ）の溶液に一部ずつ添加した。次に、水素雰囲気を導入し、混合物を周囲温度まで加温した。この混合物を１８時間攪拌した後、水素雰囲気を除去し、混合物をセライトで瀘過し、触媒をエタノール（４０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機濾液を減圧下で濃縮して、残渣を得、これをメタノール：ジクロロメタン（１：９９）を溶出液として用いたシリカ（１５０ｇ）でフラッシュクロマトグラフィーにかけることによって、２ＲＳ−ビフェニル−３−イル−４−メチルペンタン酸を得た、収率９８０ｍｇ、（９８％）、ＴＬＣ（単一のＵＶスポット、Ｒｆ＝０．４５、ジクロロメタンにおける５％メタノール）、分析用ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２０．９２分、ＨＰＬＣ−ＭＳ（Ｒｔ＝１０．１５分、２６９．１［Ｍ＋Ｈ］＋、２９１．１［Ｍ＋Ｎａ］＋の単一のメインＵＶピーク）。
【０２１０】
【化７３】
2004520365.tif 000075
化合物（２８）をローディングされた構成単位−リンカー構築物（１１）に標準的な条件下でカップリングした後、切断して、実施例１２を得た。
【０２１１】
実施例Ａ  システインプロテアーゼ活性に関するアッセイ
本発明の化合物を、化合物の阻害の特徴を明瞭にするように設計された数多くの文献に基づいた生化学的なアッセイの一で試験してもよい。これらのタイプのアッセイのデータから、化合物の潜在性及び反応の率を測定、定量できる。この情報は、単独であるいは他の情報と組み合わせて、所定の薬理学な効果を生じるのに必要な化合物の量が測定できるであろう。
【０２１２】
一般的な材料および方法
特記しない限り、すべての一般的な化学物質及び生化学物質は、Sigma Chemical Company, Poole, Dorset, U.K.からまたはFisher Scientific UK,Loughborough, Leicestershire, U.Kのいずれかから購入した。吸光度アッセイは、SpectraMax PLUS384 platereader (Molecular Devices, Crawley, U.K.)を用いて平底の９６ウェルプレート(Spectra; Greiner Bio−OneLtd., Stonehouse, Gloucestershire, U.K.)で行なった。蛍光高スループットアッセイ(Fluorescence highthroughput assay)は、３８４ウェルのマイクロタイタープレート(Corning Costar 3705 plates, Fisher Scientific)または９６ウェルの「Ｕ」底マイクロフオーＷ１マイクロタイタープレート(‘U’bottomed Microfluor W1 microtitre plate)(Thermo Labsystems, Ashford, Middlesex,U.K.)で行なった。蛍光アッセイは、SpectraMax Gemini fluorescence plate reader (MolecularDevices)を用いてモニターした。７−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）または７−アミノ−４−トリフルオロメチルクマリン（ＡＦＣ）蛍光体のいずれかを用いる基質では、アッセイは、３６５ｎｍの励起波長及び４５０ｎｍの発光波長(emissionwavelength)でモニターし、蛍光プレートリーダーをＡＭＣで較正した。３−アミノ−ベンゾイル（Ａｂｚ）蛍光体を用いる基質では、アッセイは、３１０ｎｍの励起波長及び４４５ｎｍの発光波長でモニターし；蛍光プレートリーダーを３−アミノ−ベンズアミド(Fluka)で較正した。特記しない限り、すべてのペプチダーゼ基質は、BachemUK, St. Helens, Merseyside, UKから購入した。蛍光共鳴エネルギー転移方法(fluorescence resonanceenergy transfer methodology)を用いた基質（即ち、ＦＲＥＴ−系基質(FRET-based substrate))は、公表された方法(Atherton& Sheppard, Solid Phase Peptide Synthesis, IRL Press, Oxford, U.K., 1989)を用いてIncenta Limitedで合成され、蛍光ドナーとしてＡｂｚ（２−アミノベンゾイル）を及び蛍光消光剤として３−ニトロ−チロシン［Ｔｙｒ（ＮＯ２）］を用いた(Meldal,M. and Breddam, K., Anal. Biochem., 195, 141-147, 1991)。ヒドロキシエチルピペラジンエタンスルホネート（ＨＥＰＥＳ）、トリス−ヒドロキシメチルアミノメタン（トリス）ベース、ビス−トリス−プロパン及びすべての生物界面活性剤（例えば、ＣＨＡＰＳ、チッタージェント(zwittergent)など）は、CNBiosciences UK, Beeston, Nottinghamshire, U.Kから購入した。グリセロールは、Amersham PharmaciaBiotech, Little Chalfont, Buckinghamshire, U.Kから購入した。基質または阻害剤のストック溶液は、１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）(Rathburns,Glasgow, U.K.)中で１０ｍＭ以下に作製され、適当に必要であるように希釈した。すべての場合において、アッセイ中のＤＭＳＯ濃度は１％（ｖｏｌ．／ｖｏｌ．）未満に維持した。
【０２１３】
アッセイプロトコルは、先の文献（表１；Barrett, A.J., Rawlings, N.D. 及び Woessner, J.F., 1998, Handbook ofProteolytic Enzymes, Academic Press, London及びこれの引用文献）に基づき、局所アッセイプロトコルに適するのに必要であるように修飾した。酵素を反応を開始するのに必要であるように添加し、生成物への基質の変換時の蛍光の変化によって判断される際の、活性を経時的にモニターした。すべてのアッセイは２５±１℃で行なった。
【０２１４】
【表１】
2004520365.tif 000076
Ｉ：１ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ２−メルカプトエタノール及び１ｍＭ  ＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＢＴＰ、ｐＨ６．５
ＩＩ：１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１４２ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．０３５ｍＭ  チッタージェント３−１６(Zwittergent3-16)を含む１０ｍＭ  ＢＴＰ、ｐＨ６．５
ＩＩＩ：５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．２、１０％グリセロール、０．１％  ＣＨＡＰＳ、１４２ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ＤＴＴ
ＩＶ：１ｍＭ  ＥＤＴＡ及び１０ｍＭ  Ｌ−システインを含む１００ｍＭ  リン酸ナトリウム、ｐＨ６．７５
Ｖ：１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  Ｌ−システイン及び０．２５％（ｗ／ｖ）  ＣＨＡＰＳを含む５０ｍＭ  トリスアセテート、ｐＨ８．４
ＶＩ：５ｍＭ  ＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ８．０
ＶＩＩ：２ｍＭ  ２−メルカプトエタノール及び１００μＭ  ＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５
ＶＩＩＩ：２ｍＭ  ２−メルカプトエタノール及び２００μＭ  ＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５
ＩＸ：１０ｍＭ  Ｌ−システイン及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含む１００ｍＭ  酢酸ナトリウム；ｐＨ５．５
Ｘ：１０ｍＭＬ−システイン；０．０５％（ｗ／ｖ）ブリッジ３５及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含む１００ｍＭ  酢酸ナトリウム；ｐＨ５．５
ＸＩ：１０ｍＭ  Ｌ−システイン；１４２ｍＭ  塩化ナトリウム及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含む１００ｍＭ  酢酸ナトリウム；ｐＨ５．５
【０２１５】
【化７４】
2004520365.tif 000077
トリパノソーマ  クルージ  クルジパインペプチダーゼ活性アッセイ
トリパノソーマ  クルージＤｍ２８(Trypanosoma cruzi Dm28)エピマスティゴート由来の、野生型のクルジパインは、Dr. Julio Scharfstein (Instituto de Biofisica Carlos Chagas Filho, Universidade Federal do Rio de Janeiro,Rio de Janeiro, Brazil)から得た。活性アッセイは、２．５ｎＭ  酵素を用いて１ｍＭ  ＥＤＴＡ及び１０ｍＭ  Ｌ−システインを含む１００ｍＭ  リン酸ナトリウム、ｐＨ６．７５中で行なわれた。Ａｃ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約１２μＭ）及びＤ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約４μＭ）を、基質として用いた。定常的に、Ａｃ−ＦＲ−ＡＭＣを、ＫＭａｐｐと等しい濃度で使用し、Ｄ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ＡＭＣを、２５μＭの濃度で使用した。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２１６】
メキシコリーシュマニア(Leishmania mexicana)システインプロテアーゼＢ（ＣＰＢ）ペプチダーゼ活性アッセイ
Ｃ末端拡張を持たない野生型の組み換えＣＰＢ（即ち、ＣＰＢ２．８AＣＴＥ；Sanderson,S.J., et. al., Biochem. J., 347, 383-388， 2000）を、Dr. JeremyMottram (Wellcome Centre for Molecular Parasitology, The Anderson College,University of Glasgow, Glasgow, U.K.)から得た。活性アッセイは、０．２５ｎＭの酵素を用いて１ｍＭ  ＥＤＴＡ；２００ｍＭ  ＮａＣｌ及び１０ｍＭ  ＤＴＴ(Alves,L.C., et. al., Mol. Biochem. Parasitol, 116, 1-9, 2001)を含む１００ｍＭ  酢酸ナトリウム；ｐＨ５．５中で行なわれた。Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約３８μＭ）をＫＭａｐｐと等しい濃度で基質として使用した。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２１７】
カテプシンペプチダーゼ活性アッセイ
ウシカテプシンＳ、ヒトカテプシンＬ、ヒトカテプシンＨ及びヒトカテプシンＢは、CNBiosciencesから得た。組み換えヒトカテプシンＳ、ヒトカテプシンＫ及びヒトカテプシンＸは、Dr. Boris Turk (Josef StefanInstitute, Ljubljana, Slovenia)から得た。特記しない限り、すべてのペプチダーゼ活性アッセイは、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ２−メルカプトエタノール及び１ｍＭＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ビス−トリス−プロパン（ＢＴＰ）、ｐＨ６．５中で行なった。ヒトカテプシンＨ活性アッセイは、１０ｍＭ  ＢＴＰ、ｐＨ６．５、１４２ｍＭ  ＮａＣｌ２、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．０３５ｍＭ  チッタージェント３−１６中で行なった。ヒトカテプシンＫアッセイは、２０ｍＭ  Ｌ−システイン及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含む１００ｍＭ  酢酸ナトリウム；ｐＨ５．５中で行なった(Bossard, M.J., et. al., J. Biol. Chem., 21, 12517-12524， 1996)。ヒトカテプシンＸアッセイは、２０ｍＭ  Ｌ−システイン；０．０５％（ｗ／ｖ）  ブリッジ３５及び１ｍＭ  ＥＤＴＡを含む１００ｍＭ  酢酸ナトリウム；ｐＨ５．５中で行なった(Santamaria,I., et. al., J. Biol. Chem., 273, 16816-16823, 1998; Klemencic, J, et al., Eur. J. Biochem., 267,5404-5412， 2000)。アッセイに使用される最終的な酵素濃度は、０．５ｎＭ  ウシカテプシンＳ、１ｎＭ  カテプシンＬ、０．１ｎＭ  カテプシンＢ、０．２５ｎＭ  カテプシンＫ；１ｎＭ  カテプシンＸ及び１０ｎＭ  カテプシンＨであった。阻害アッセイでは、カテプシンＳ、カテプシンＬ、カテプシンＢ、カテプシンＫ及びカテプシンＨに使用される基質は、それぞれ、ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約３０μＭ）、Ａｃ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約２０μＭ）、Ｚ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約４０μＭ）、Ｚ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約２μＭ）；Ｂｚ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約１５０μＭ）であった。それぞれの場合において、各アッセイに使用される基質濃度はＫＭａｐｐに等しくした。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２１８】
トリプシンペプチダーゼ活性アッセイ
ヒト膵臓トリプシン（ヨウ素化グレード；CN Biosciences）活性アッセイは、０．１ｎＭ  トリプシンを用いて５ｍＭ  ＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ８．０中で行なった。阻害アッセイでは、Ｚ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約８４μＭ）を、ＫＭａｐｐと等しい濃度で基質として使用した。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２１９】
クロストリパインペプチダーゼ活性アッセイ
クロストリパイン(Sigma)活性アッセイは、０．３ｎＭ酵素を用いて１ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ２−メルカプトエタノール及び１ｍＭ  ＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＢＴＰ、ｐＨ６．５中で行なった。阻害アッセイでは、Ｚ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ（ＫＭａｐｐ＝約１００μＭ）を、ＫＭａｐｐと等しい濃度で基質として使用した。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２２０】
カルパインペプチダーゼ活性アッセイ
カルパイン(ヒト赤血球μ−カルパイン及びブタの腎臓ｍ−カルパイン；CNBiosciences）活性アッセイを、２５ｎＭのいずれかの酵素(Sasaki, et. al., J. Biol. Chem., 259, 12489-12494， 1984)を用いて２ｍＭ  ２−メルカプトエタノール及びＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５中で行なった。μ−カルパイン阻害アッセイでは、緩衝液に１００μＭ  ＣａＣｌ２を含ませ、Ａｂｚ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ（ＮＯ２）−Ａｓｐ−ＮＨ２（ＫＭａｐｐ＝約２０μＭ；IncentaLimited）を基質として使用した。ｍ−カルパイン阻害アッセイでは、アッセイ緩衝液に２００μＭ  ＣａＣｌ２を含ませ、Ａｂｚ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ（Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（ＮＯ２）−Ａｓｐ−ＮＨ２（ＫＭａｐｐ＝約２２μＭ；IncentaLimited）を基質として使用した。双方の場合において、アッセイに使用される基質濃度はＫＭａｐｐに等しくした。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２２１】
細胞外S. aureus V8システインペプチダーゼ（スタフィロパイン）ペプチダーゼ活性アッセイ
S. aureus V8は、Prof. S. Arvidson,Karolinska Institute, Stockholm, Swedenから得た。細胞外S. aureus V8システインペプチダーゼ（スタフィロパイン）活性アッセイを、部分精製されたS.aureus V8培養物の上清（Dr. Peter Lambert, Aston University, Birmingham, U.K.から得た）を用いて行なった。活性アッセイを、２倍希釈した部分精製抽出物を用いて１ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ２−メルカプトエタノール及び１ｍＭＣａＣｌ２を含む１０ｍＭ  ＢＴＰ、ｐＨ６．５中で行なった。阻害アッセイでは、Ａｂｚ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ（ＮＯ２）−Ｇｌｕ−ＮＨ２（ＫＭａｐｐ＝約１１７μＭ；IncentaLimited）を、ＫＭａｐｐと等しい濃度で基質として使用した。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２２２】
口蹄疫リーダーペプチダーゼ（ＦＭＤＶ−ＬＰ）活性アッセイ
組み換え野生型ＦＭＤＶ−ＬＰは、Dr. Tim Skern (Institut fur Medizinische Biochemie, Abteilung fur Biochemie, Universtat Wien, Wien,Austria)から得た。活性アッセイを、１０ｎＭ酵素を用いて１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  Ｌ−システイン及び０．２５％（ｗ／ｖ）  ＣＨＡＰＳを含む５０ｍＭ  トリス・アセテート中で行なった。阻害アッセイでは、Ａｂｚ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ（ＮＯ２）−Ｇｌｕ−ＮＨ２（ＫＭａｐｐ＝約５１μＭ、IncentaLimited）を、ＫＭａｐｐと等しい濃度で基質として使用した。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２２３】
カスパーゼペプチダーゼ活性アッセイ
カスパーゼ(Caspase)１−１０は、CN BiosciencesまたはBioVisionInc. (Mountain View, CA, USA)から得、すべてのアッセイを、アッセイ当たり０．１〜１Ｕを用いて５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ；ｐＨ７．２、１０％（ｖ／ｖ）  グリセロール、０．１％（ｗ／ｖ）  ＣＨＡＰＳ、１４２ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ジチオトレイトール（ＤＴＴ）中で行なった。カスパーゼ１では、Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ２では、Ｚ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−ＡＦＣを基質として使用した；カスパーゼ３では、Ａｃ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ４では、Ｓｕｃ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ５では、Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ６では、Ａｃ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ７では、Ａｃ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ８では、Ａｃ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ９では、Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した；カスパーゼ１０では、Ａｃ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−ＡＭＣを基質として使用した(Nicholson,D.W. 及び Thornberry, N.A., TIBS, 22, 299-306, 1997; Stennicke, H.R. 及び Salvesen, G.S., J. Biol. Chem., 272(41),25719-25723, 1997; Talanian,R.V., et. al., J. Biol. Chem., 272(15), 9677-9682, 1997; Wolf, B.B. 及び Green, D.R., J.Biol. Chem., 274（１８）, 20049-20052, 1999)。基質の生成物への変換率は、経時的に連続してモニターされた蛍光の増加の傾斜から求めた。
【０２２４】
基質に関する見かけの巨視的結合（ミカエリス）定数（ＫＭａｐｐ）の測定
各基質に関する見かけの巨視的結合定数（ＫＭａｐｐ）を、基質濃度の関数としての酵素活性の依存性から、算出した。観察された比を、横座標の関連基質濃度に対して縦座標にプロットして、データを、式１を用いて直接回帰分析(Prism v 3.02; GraphPad, San Diego, USA)にあわせた(Cornish-Bowden, A.Fundamentals of enzyme kinetics Portl及び Press; 1995, 93-128)。
【０２２５】
【数１】
2004520365.tif 000078
式１において、「ｖｉ」は、観察された初期率であり、「Ｖｍａｘａｐｐ」は、飽和基質濃度での観察された最大活性であり、「ＫＭａｐｐ」は、基質に関する見かけの巨視的結合（ミカエリス）定数であり、「［Ｓｏ］」は、初期基質濃度である。
【０２２６】
阻害定数の測定
各化合物に関する見かけの阻害定数（Ｋｉ）を、阻害が可逆的であり、純競合メカニズム(pure-competitive mechanism)によって起こることに基づいて測定した。Ｋｉ値は、式２を用いて直接回帰分析(Prismv 3.02)によって、阻害剤濃度の関数としての酵素活性の依存性から、算出した(Cornish-Bowden, A., 1995.)。
【０２２７】
【数２】
2004520365.tif 000079
式２において、「ｖｉ」は、観察された残存活性であり、「Ｖｍａｘａｐｐ」は、（即ち、阻害剤不存在下での）観察された最大活性であり、「ＫＭａｐｐ」は、基質に関する見かけの巨視的結合（ミカエリス）定数であり、「［Ｓ］」は、初期基質濃度であり、「Ｋｉ」は、見かけの解離定数であり、および「［Ｉ］」は、阻害剤濃度である。
【０２２８】
見かけの解離定数（Ｋｉａｐｐ）が酵素濃度に近づくと、Ｋｉａｐｐ値は、式３に記載された形態の二次解決法(quadratic solution)を用いて算出した(Morrison, J.F. Trends Biochem. Sci.,7, 102-105, 1982; Morrison, J.F. Biochim. Biophys. Acta, 185,269-286, 1969; Stone, S.R. 及び Hofsteenge, J. Biochemistry, 25,4622-4628, 1986)。
【０２２９】
【数３】
2004520365.tif 000080
式３において、「ｖｉ」は、観察された残存活性であり、「Ｆ」は、（即ち、阻害剤不存在下での）観察された最大活性及び最小酵素活性の差であり、「Ｅｏ」は、全酵素濃度であり、「Ｋｉａｐｐ」は、見かけの解離定数であり、および「Ｉｏ」は、阻害剤濃度である。曲線を、酵素濃度に関する固定値を用いて非線形回帰分析(Prism)に合わせた。式４は、基質動態を説明するのに使用され、この際、「Ｋｉ」は、阻害定数であり、「［Ｓｏ］」は、初期基質濃度であり、および「ＫＭａｐｐ」は、基質に関する見かけの巨視的結合（ミカエリス）定数である(Morrison,1982)。
【０２３０】
阻害剤の酵素との反応の二次率(second-order rate)
該当する場合には、各化合物の酵素との反応の観察された率（ｋｏｂｓ）の濃度依存性を、基質の存在下での擬１次条件下での酵素不活化の割合を測定することによって分析した(Morrison, J.F., TIBS, 102-105, 1982; Tian, W.X. 及び Tsou, C.L.,Biochemistry, 21, 1028-1032,1982; Morrison, J.F. 及び Walsh, C.T., from Meister (Ed.), Advances in Enzymol., 61,201-301, 1988; Tsou, C.L., from Meister (Ed.), Advances in Enzymol., 61,381-436, 1988;)。アッセイは、様々な濃度の阻害剤を添加して、基質を含む緩衝液をアッセイすることによって行なった。アッセイを、酵素を反応混合物に添加することによって開始し、蛍光の変化を経時的にモニターした。アッセイ期間中、１０％未満の基質が消費された。
【０２３１】
【数４】
2004520365.tif 000081
活性蛍光経過曲線(activity fluorescence progresscurve)を、式５を用いて非線形回帰分析(Prism)に合わせた(Morrison, 1969; Morrison, 1982)；この際、「Ｆ」は、蛍光応答であり、「ｔ」は、時間であり、「ｖｏ」は、初期速度であり、「ｖｓ」は、平衡定常状態速度であり、「ｋｏｂｓ」は、観察された擬１次速度定数であり、および「Ｄ」は、０時間での切片（即ち、曲線の縦座標変位(ordinatedisplacement)）である。２次速度定数は、阻害剤濃度に対するｋｏｂｓのプロットの線の傾斜（即ち、ｋｏｂｓ／［Ｉ］）から得られた。基質動態を修正するために、式６が使用され、この際、「［Ｓｏ］」は、初期基質濃度であり、「ＫＭａｐｐ」は、基質に関する見かけの巨視的結合（ミカエリス）定数である。
【０２３２】
【数５】
2004520365.tif 000082
本発明の化合物を、上記したアッセイによって試験したところ、１００μＭ以下のインビトロのＫｉ阻害定数でクルジパイン阻害活性または別のＣＡ  Ｃ１システインプロテアーゼに対する阻害活性を示すことが観察された。本発明の数多くの例示化合物に関する具体的な阻害データを表２に示す。
【０２３３】
【表２】
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【国際公開パンフレット】
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2004520365.tif 000212
2004520365.tif 000213
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004520365.tif 000214
2004520365.tif 000215
【国際調査報告】
2004520365.tif 000216
2004520365.tif 000217
2004520365.tif 000218