(57)【要約】本発明は、抗腫瘍化学療法剤を組み込むマイクロスフェア及びそのマイクロスフェアを取り囲む懸濁溶液を含んで成る、腫瘍を有する患者への抗腫瘍化学療法剤の投与のための組成物を提供する。本発明はまた、腫瘍に化学療法剤溜めとして抗腫瘍化学療法剤を供給し、そして前記化学療法剤溜めから抗腫瘍化学療法剤を、治療的に有効な量で、腫瘍の問質空間に開放する段階を含んで成る、腫瘍を有する患者に抗腫瘍化学療法剤を投与するための方法を提供し、ここで前記化学療法剤溜めは、抗腫瘍化学療法剤を組み込む多数のマイクロスフェア及びそのマイクロスフェアを取り囲む懸濁溶液を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍を有する患者に抗−腫瘍化学療法剤を局所投与するための組成物であって、懸濁溶液の包囲された抗−腫瘍化学療法剤を含む複数のマイクロスフェアを含んで成る組成物。
【請求項２】
前記抗−腫瘍化学療法剤が、抗−腫瘍化学療法剤と、当該抗−腫瘍化学療法剤を可溶化するのに効果的な量の血漿蛋白質との混合物を含んで成る製剤中に存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記血漿蛋白質が、ヒト血清アルブミン及びγ−免疫グロブリンから成る群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記マイクロスフェアの最長直径が約２０ミクロン未満である、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記マイクルスフェアがマイクロカプセルである、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記抗−腫瘍化学療法剤が、前記マイクロスフェア内に含まれる、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
前記抗−腫瘍化学療法剤が、前記マイクロスフェアに付着している、請求項２に記載の組成物。
【請求項８】
前記マイクロスフェアが、生分解性ポリマーを含んで成る、請求項２に記載の組成物。
【請求項９】
前記生分解性ポリマーが、ポリ酢酸、ポリグリコール酸、及びポリグリコール酸とポリ酢酸とのコポリマーから成る群から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記マイクルスフェアが、非生分解性ポリマーである、請求項２に記載の組成物。
【請求項１１】
前記非生分解性ポリマーが、エチレン−酢酸ビニルコポリマーである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記マイクロスフェアの分解が当該マイクロスフェアから前記抗−腫瘍化学療法剤を療法的に有効な量で放出する、請求項２に記載の組成物。
【請求項１３】
約５０％までの前記抗−腫瘍化学療法剤が、前記マイクロスフェアを患者に投与した後２４時間以内に当該マイクロスフェアから放出される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
約１５％〜約２５％の前記抗−腫瘍化学療法剤が、前記マイクロスフェアを患者に投与した後２４時間以内に当該マイクロスフェアから放出される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
前記抗−腫瘍化学療法剤が拡散により前記マイクロスフェアこら放出される請求項２に記載の組成物。
【請求項１６】
前記抗−腫瘍化学療法剤が、患者への投与後約１週間〜約６箇月の期間に亘って、療法的に有効な量で放出される、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記抗−腫瘍化学療法剤が、患者への投与後約３週間〜約２箇月の期間に亘って、療法的に有効な量で放出される、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
前記抗−腫瘍化学療法剤がアポトーシス誘導性化学療法剤である、請求項２に記載の組成物。
【請求項１９】
前記アポトーシス誘導性化学療法剤が、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、アドリアマイシン（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、酪酸、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、及びミトグアゾン（ｍｉｔｏｇｕａｚｏｎｅ）から成る群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記抗−腫瘍化学療法剤がパクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
前記パクリタキセルが、約０．１〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度にある、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記パクリタキセルが、約０．５〜約５ｍｇ／ｍＬの濃度にある、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２３】
前記懸濁液が、アポトーシス誘導性化学療法剤を更に含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記アポトーシス誘導性化学療法剤がパクリタキセルである、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記マイクロスフェア及び前記溶液の両者中にパクリタキセルが約７０〜約２８０ｍｇ存在する、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記マイクロスフェア及び前記溶液の両者中にパクリタキセルが約１３５ｍｇ／ｍ２〜約１７５ｍｇ／ｍ２の濃度で存在する請求項２４に記載の組成物。
【請求項２７】
前記パクリタキセルの約１０％〜約９０％が前記マイクロスフェア中の存在する、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２８】
前記パクリタキセルの約６０％〜約９０％が前記マイクロスフェア中の存在する、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２９】
前記パクリタキセルの約８０％〜約９０％が前記マイクロスフェア中の存在する、請求項２３に記載の組成物。
【請求項３０】
前記懸濁溶液中に第二の抗−腫瘍化学療法剤を含んで成る、請求項２に記載の組成物。
【請求項３１】
前記第二の抗−腫瘍化学療法剤がアポトーシス誘導性化学療法剤である、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記第二の抗−腫瘍化学療法剤が、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、アドリアマイシン（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、酪酸、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、及びミトグアゾン（ｍｉｔｏｇｕａｚｏｎｅ）から成る群から選択される、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３３】
抗−腫瘍化学療法剤を腫瘍に局所投与する方法において、
化学療法剤の溜めを腫瘍に供給し、そして
前記溜めから前記化学療法剤を、化学療法的に有効な量で、腫瘍の間質空間（ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｓｐａｃｅ）に放出せしめる、
ことを含んで成り、
ここで、前記化学療法剤の溜めは、前記抗−腫瘍化学療法剤を含有する複数のマイクロスフェア、及び当該マイクロスフェアを包囲する懸濁溶液を含んで成る、ことを特とする方法。
【請求項３４】
前記化学療法剤の溜めが、抗−腫瘍化学療法剤と、当該抗−腫瘍化学療法剤を可溶化するのに効果的な量の血漿蛋白質とを含んで成る、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記血漿蛋白質が、ヒト血清アルブミン及びγ−免疫グロブリンから成る群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記マイクロスフェアが、生分解性ポリマーを含んで成る、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記生分解性ポリマーが、ポリ酢酸、ポリグリコール酸、及びポリグリコール酸とポリ酢酸とのコポリマーから成る群から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記マイクルスフェアが、非生分解性ポリマーである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
前記非生分解性ポリマーが、エチレン−酢酸ビニルコポリマーである、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
前記マイクロスフェアの分解により、当該マイクロスフェアから前記抗−腫瘍化学療法剤が療法的に有効な量で放出される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４１】
約５０％までの前記抗−腫瘍化学療法剤が、前記マイクロスフェアの溜めを腫瘍に供給した後２４時間以内に当該マイクロスフェアから放出される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
約１５％〜約２５％の前記抗−腫瘍化学療法剤が、前記マイクロスフェアの溜めを腫瘍に供給した後２４時間以内に当該マイクロスフェアから放出される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記抗−腫瘍化学療法剤が拡散により前記マイクロスフェアこら放出される請求項３４に記載の方法。
【請求項４４】
前記抗−腫瘍化学療法剤が、約１週間〜約６箇月の期間に亘って、療法的に有効な量で連続的に放出される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記抗−腫瘍化学療法剤が、約３週間〜約２箇月の期間に亘って、療法的に有効な量で連続的に放出される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記マイクロスフェアの最長直径が約２０ミクロン未満である、請求項３４に記載の方法。
【請求項４７】
前記マイクルスフェアがマイクロカプセルである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４８】
前記抗−腫瘍化学療法剤がアポトーシス誘導性化学療法剤である、請求項３４に記載の方法。
【請求項４９】
前記アポトーシス誘導性化学療法剤が、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、アドリアマイシン（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、酪酸、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、及びミトグアゾン（ｍｉｔｏｇｕａｚｏｎｅ）から成る群から選択される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記抗−腫瘍化学療法剤がパクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
前記パクリタキセルが、約０．１〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度にある、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記パクリタキセルが、約０．５〜約５ｍｇ／ｍＬの濃度にある、請求項５０に記載の方法。
【請求項５３】
前記懸濁液が、アポトーシス誘導性化学療法剤を更に含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項５４】
前記アポトーシス誘導性化学療法剤がパクリタキセルである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記マイクロスフェア及び前記溶液の両者中にパクリタキセルが約７０〜約２８０ｍｇ存在する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記マイクロスフェア及び前記溶液の両者中にパクリタキセルが約１３５ｍｇ／ｍ２〜約１７５ｍｇ／ｍ２の濃度で存在する請求項５３に記載の方法。
【請求項５７】
前記パクリタキセルの約１０％〜約９０％が前記マイクロスフェア中の存在する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５８】
前記パクリタキセルの約６０％〜約９０％が前記マイクロスフェア中の存在する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５９】
前記パクリタキセルの約８０％〜約９０％が前記マイクロスフェア中の存在する、請求項５３に記載の方法。
【請求項６０】
前記懸濁溶液中に第二の抗−腫瘍化学療法剤を含んで成る、請求項３４に記載の方法。
【請求項６１】
前記第二の抗−腫瘍化学療法剤がアポトーシス誘導性化学療法剤である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記第二の抗−腫瘍化学療法剤が、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、アドリアマイシン（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、酪酸、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、及びミトグアゾン（ｍｉｔｏｇｕａｚｏｎｅ）から成る群から選択される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６３】
供給工程が、腫瘍内に化学療法剤の溜めを配置する工程を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項６４】
供給工程が、腫瘍内に化学療法剤の溜めを注入する工程を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項６５】
供給工程が、腫瘍に隣接して化学療法剤の溜めを配置する工程を含む、請求項３４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野：
本発明は抗腫瘍化学療法剤の供給の分野に関する。
背景：
パクリタキセルは、卵巣、乳房及び肺癌、及びＡＩＤＳ関連のカポジ肉腫の治療において抗腫瘍剤として使用される。高分子量（８５４ｇ／モル）の高い親油性の細胞毒性化学療法剤である。パクリタキセルは、全身的に化学療法剤を術前投与することによって乳癌を治療するために現在使用されている。術前療法は手術の前、腫瘍負荷を減じ、従って手術後の予後を実質的に改良する。印象的な成功がこのアプローチを用いて達成されて来たが、この治療は延長された入院を必要とし、そして重度の副作用を伴なう。さらに、有意な数の症例（３０％）は、腫瘍が減じられず、又は副作用がパクリタキセル投与の中断を必要とするために、臨床学的に満足する結果をもたらさない。
【０００２】
いくつかの医薬会社及び実験研究所が、有用な化学療法剤パクリタキセルのより持効性製剤の開発に関与して来た。パクリタキセルのマイクロスフェア又はパクリタキセルのゲルを含む溜めビークル利用性ポリマーは、それらが約２週間にわたって固形腫瘍への薬剤の持効性を提供できるかどうかを決定するために、現在、臨床学的調査を受けている。しかしながら、マイクロスフェアはより延長された薬物用量を理論的に供給できるが、マイクロスフェアは、間質性腫瘍流体により誘導される高血圧のために、腫瘍コアーに達するためには圧力傾斜に対してまず移動すべきであることが示されている。
【０００３】
しかしながら、Ａｎなど， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， （１９９８） ５８ （１０）： ２１４１−８により示されるように、固形腫瘍中への薬物侵入は、パクリタキセルによるアポプトーシス誘導性前処理により増強され得る。
パクリタキセルの細胞毒性及び抗腫瘍性質は、チューブリンダイマーからの微小管のアセンブリーを誘導し、そして微小管の解重合を妨げることによって、アポプトーシスを促進するその能力に由来する。安定化された微小管は、活動的な分裂間期及び有系分裂機能のために必須である微小管網の通常の力学的認識を阻害する。さらに、パクリタキセルは、細胞周期を通しての微小管の異常整列又は“束”、及び有糸分裂の間、微小管の複数異常体を誘導する。
【０００４】
パクリタキセル製剤：
パクリタキセルは実質的に水不溶性であり、そして溶解性キャリヤーを用いて投与されるべきである。現在許容されるパクリタキセルキャリヤー製剤は、エタノール及びＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬ （ポリオキシエチル化されたヒマシ油）に溶解されたパクリタキセルを含んで成るＴＡＸＯＬ（商標）として市販されている。
【０００５】
ＴＡＸＯＬ（商標）キャリヤーＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬは、副作用、例えばアナフィラキシー及び重度の過敏性を引き起こす（Ｓａｒｏｓｙ ａｎｄ Ｒｅｅｄ， Ｊ． Ｎａｔｌ． Ｍｅｄ． Ａｓｓｏｃ． （１９９３） ８５ （６）： ４２７−３１）。副作用を低めるためには、ＴＡＸＯＬ（商標）による現在推薦される治療は、コルチコステロイド、ジフェンヒドラミン及びＨ２アンタゴニストによる予備投薬を包含する。
【０００６】
いくつかの他のキャリヤーは、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬにより引き起こされるアナフィラキシー及び重度の過敏性と取り組むことが提案されている。例えば、引用により組み込まれるアメリカ特許第５，６８４，１６９号は、水におけるパクリタキセルの溶解性を改良するパクリタキセルの枝なし鎖のサイクロデキストリン又は枝分かれ鎖のサイクロデキストリン封入複合体を開示する。前記複合体は、パクリタキセルに枝なし鎖のサイクロデキストリン又は枝分かれ鎖のサイクロデキストリンを、パクリタキセルの１〜２０倍のモル割合で添加することによって生成される。サイクロデキストリン封入複合体は、溶解性を改良することによって癌患者におけるパクリタキセル吸収性を改良する。
【０００７】
引用により組み込まれるアメリカ特許第５，４１５，８５９号は、１又は複数の負に荷電されたリン脂質及び１又は複数の両性イオンリン脂質を用いて溶解されたパクリタキセル又はパクリタキセル腫瘍活性類似体を開示する。リン脂質混合物は、リポソームにパクリタキセル又はその類似体を閉じ込める。リポソームは、パクリタキセル又はその類似体の結晶を実質的に有さない、０．０２５〜１０ミクロンのサイズを有する粒子の形で存在する。
【０００８】
引用により組み込まれるアメリカ特許第５，５８０，５７５号は、ガス充填されたマイクロスフェア及び治療用化学療法剤を含んで成る治療用化学療法剤供給システム、及び治療用化学療法剤供給へのそのようなマイクロスフェアの使用方法を開示する。前記開示の好ましいマイクロスフェアは、封入された化学療法剤を有する、ガス充填されたリポソームである。化学療法剤供給用途におけるそのようなリポソームを調製するための方法もまた開示される。
【０００９】
引用により本明細書に組み込まれるＷＯ９９／１３９１４号は、パクリタキセル及び他のわずかに水溶性の化学療法剤が、結晶タンパク質、例えばヒト結晶アルブミン（ＨＡＳ）又はヒトγグロブリン（γ−グロブリン）と共に水溶性均質複合体を形成することによって、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬ又は他の毒性溶解剤を用いないで配合され得ることを開示する。ＷＯ９９／１３９１４号により開示されるように、少なくとも４．６８ｍＭまでのパクリタキセルの均質水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）がＨＡＳを用いて配合され得る。血漿タンパク質は、パクリタキセルの持効性溜めとして作用する。ＷＯ９９／１３９１４号はさらに、治療当たり７０〜２８０ｍｇのパクリタキセルを含むパクリタキセル−ＨＡＳ複合体の投与量範囲を開示する。そのような製剤は、従来のＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬ含有配合物と同等に製造され得る。
【００１０】
パクリタキセルを投与するための他の製剤は、引用により本明細書に組み込まれるアメリカ特許第５，５０４，１０２号及び第５，４０７，６８３号に開示される。
【００１１】
さらに、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬ溶液の遅い注入が、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬビークルの副作用を回避するか又は改良する手段として研究されて来た。３，６又は２４時間の投与スケジュールで投与される、最も通常の用量は、１３５〜１７５ｍｇ／ｍ２のＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（商標）ＥＬである（引用により本明細書に組み込まれるアメリカ特許第５，６４１，８０３号及び第５，６２１，００１号を参照のこと）。他の投与スケジュール、例えば２１日ごとの９６時間の注入（引用により本明細書に組み込まれるアメリカ特許第５，４９６，８４６号）、及び２１日間、多数回、反復される、６０〜１８０分の注入（個々の注入は４〜５日の間隔で分けられている）（引用により本明細書に組み込まれるアメリカ特許第５，６９６，１５３号）が提案されている。
【００１２】
パクリタキセル化学療法剤溜め：
パクリタキセルを投与する他の方法は、化学療法剤溜めの使用である。引用により本明細書に組み込まれるアメリカ特許第５，８４６，５６５号、第５，６２６，８６２号及び第５，６５１，９８６号は、血液−脳バリヤーを交差せず、そして不良な生物利用性及び／又はインビボでの短い半減期により特徴づけられる化学療法剤の固形腫瘍への局部投与のための方法及び組成物を開示する。組成物は、同時に化学療法剤の生物活性及び生物利用性を保存しながら、延長された期間にわたって化学療法剤を開放する溜めから成る。好ましい態様は、生分解性ポリマーマトリックスから製造される多数のマイクロスフェアである。
【００１３】
他方では、溜めは、非生分解性ポリマーから製造される多数のマイクロスフェアであり得る。他の態様においては、溜めは、移植された注入ポンプであり得るか、又はそれに連結され得る。マイクロスフェアは、処理されるべき腫瘍内に、又はそれに隣接して、又は腫瘍が手術により除去されている部位に移植される。前記特許はさらに、それぞれ、生分解性及び非生分解性ポリマーの圧縮成形により調製されるポリマー移植物に供給されるパクリタキセル及びカンプトセシンの効能を開示する。
【００１４】
引用により本明細書に組み込まれるアメリカ特許第５，８８８，５３０号は、標的部位における流体静力学的圧力と標的組織部位近くの領域との間に一時的な差を創造することによって、哺乳類における標的組織部位に供給される医薬組成物の量を高める方法を開示する。前記方法を行うための装置が提供されている。１つの形においては、その装置は、医薬溜め、ポンプ、及び剤溜め及びポンプを包含する。
【００１５】
化学療法剤溜めがまた、引用により本明細書に組み込まれるアメリカ特許第５，４７０，３１１号に開示される。
そのような化学療法剤溜めを試験する初期結果は失望するものであった。有意に低められた副作用プロフィールが示されているが、臨床学的改良転の指摘は存在しない。
【００１６】
発明の要約：
現在の化学療法剤溜め技法の限界は、腫瘍の高い間質性流体圧力の結果として化学療法剤の不良な侵入及び分布のために、腫瘍周囲上で又は注入部位でのみ化学療法剤の保持のためであり得る。より有力な抗腫瘍効果は、全身性注入によってよりもむしろ、腫瘍に、すなわち腫瘍内に直接的に化学療法剤を標的化することによって達成され得る。固形腫瘍へのマイクロスフェア侵入は、アポプトーシスを誘導するために投与される初期薬剤注入がタキソール、すなわちパクリタキセル／ＨＡＳ、タキソール及びアルブミンの複合体により可溶性である場合、さらに増強され、それにより、さらなる圧力傾斜にそってのアポプトーシスを高めることが理論づけられる。
【００１７】
本発明者は現在、化学療法剤溜めとしての抗腫瘍化学療法剤の局部投与の溜めの組成物を用いて、抗癌化学療法剤、例えばパクリタキセルの腫瘍を有する患者への供給を報告する。本発明は、抗腫瘍化学療法剤を組み込む多数のマイクロスフェア；及びマイクロスフェアを取り囲む懸濁溶液を含んで成る。抗癌化学療法剤、例えばパクリタキセルのための持効性溜めとして作用する血漿タンパク質、例えばＨＡＳを利用する。
【００１８】
本発明は、腫瘍を有する患者に、化学療法剤溜めとして抗腫瘍化学療法剤を投与するための組成物を提供し、ここで前記組成物は、抗腫瘍化学療法剤を組み込む多数のマイクロスフェア、及びそのマイクロスフェアを取り囲む懸濁溶液を含んで成る。好ましい態様は、生分解性ポリマーマトリックスから製造される多数のマイクロスフェアである。他方では、溜めは、非生分解性ポリマーから製造される多数のマイクロスフェアであり得る。
【００１９】
本発明はまた、腫瘍に化学療法剤溜めとして抗腫瘍化学療法剤を供給し、そして前記化学療法剤溜めから抗腫瘍化学療法剤を、治療的に有効な量で、腫瘍の問質空間に開放する段階を含んで成る、腫瘍を有する患者に抗腫瘍化学療法剤を投与するための方法を提供し、ここで前記化学療法剤溜めは、抗腫瘍化学療法剤を組み込む多数のマイクロスフェア及びそのマイクロスフェアを取り囲む懸濁溶液を含む。
【００２０】
発明の特定の記載：
化学療法剤溜めとして抗腫瘍化学療法剤を投与するための組成物：
本発明は、腫瘍を有する患者に、化学療法剤溜めとして抗腫瘍化学療法剤を投与するための組成物を提供し、ここで前記組成物は、抗腫瘍化学療法剤を組み込む多数のマイクロスフェア、及び個々のマイクロスフェアを取り囲む懸濁溶液を含んで成る。本明細書において使用される場合、前記組成物は時々、装置として言及され得る。
【００２１】
好ましい態様は、生分解性ポリマーマトリックスから製造される多くのマイクロスフェアを提供する。他方では、溜めは、非生分解性ポリマーから製造される多数のマイクロスフェアであり得る。
抗腫瘍化学療法剤は、好ましくは、抗腫瘍化学療法剤、及び前記抗腫瘍化学療法剤を溶解するのに有効な量の血漿タンパク質の混合物を含んで成る製剤に存在する。最も好ましくは、血漿タンパク質は、ヒト血清アルブミン及びγ−免疫グロブリンから成る群から選択される。引用により本明細書に組み込まれるＷＯ９９／１３９１４号により開示されるように、少なくとも４．６８ｍＭまでのパクリタキセルの均質水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）がＨＡＳを用いて配合され得る。血漿タンパク質は、パクリタキセルの持効性溜めとして作用する。
【００２２】
マイクロスフェア中に化学療法剤を組み込むための方法は、アメリカ特許第５，６８４，１６９号、第５，４７０，３１１号、第５，５８０，５７５号、第５，８４６，５６５号、第５，６２６，８６２号及び第５，６５１，９８６号に開示される。
本発明の１つの態様においては、抗腫瘍化学療法剤は、マイクロスフェア内に含まれ得る。任意には、抗腫瘍化学療法剤は、マイクロスフェアに結合され得る。結合は、マイクロスフェア内部又は外部への結合を言及する。
本発明においては、マイクロスフェアの最長の直径は好ましくは、約２０ミクロン未満である。マイクロスフェアは不規則な形状を有する。マイクロスフェアは、本明細書において使用される場合、マイクロカプセルを言及する。
【００２３】
本発明の１つの態様は、生分解性ポリマーマトリックスから製造される多数のマイクロスフェアを提供する。生分解性ポリマーは、ポリ酢酸、ポリグリコール酸及びポリグリコール酸とポリ酢酸とのコポリマーから成る群から選択され得る。
１つの態様においては、生分解性ポリマーの分解は、マイクロスフェアから抗腫瘍化学療法剤を、治療的に有効な量、開放する。好ましくは、約５０％までの抗腫瘍化学療法剤が、患者へのマイクロスフェアの投与後、２４時間以内にマイクロスフェアから開放される。より好ましくは、約１５〜約２５％の抗腫瘍化学療法剤が、患者へのマイクロスフェアの投与の後、２４時間以内にマイクロスフェアから開放される。
【００２４】
他方では、溜めは、非生分解性ポリマーから製造される多数のマイクロスフェアであり得る。前記非生分解性ポリマーは任意には、エチレン−酢酸ビニルのコポリマーである。
遅い拡散により、抗腫瘍化学療法剤が一定の期間にわたって、治療的有効量で開放されるよう、生分解性ポリマー又は非分解性ポリマーから製造されるマイクロスフェアが構成され得る。好ましくは、抗腫瘍化学療法剤は、１週〜６ヶ月間、持続する期間、開放される。最も好ましくは、抗腫瘍化学療法は、３週〜２ヶ月間、持続する期間、治療的有効な量で開放される。
【００２５】
組成物中の抗腫瘍化学療法剤は好ましくは、アポプトーシス誘導性化学療法剤である。好ましくは、アポプトーシス誘導性化学療法剤はパクリタキセルである。他方では、アポプトーシス誘導性化学療法剤は、シスプラチン、アドリアマイシン、酪酸、シクロホスファミド、エトポシド、アムサクリン、ゲニステイン及びミトグアゾンから成る群から選択される。
好ましくは、パクリタキセルは、約０．１〜約１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。最も好ましくは、パクリタキセルは、約０．５〜約５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００２６】
組成物中の懸濁溶液はまた、抗腫瘍化学療法剤も含んで成る。好ましくは、懸濁溶液は、抗腫瘍化学療法剤と、上記の多くのマイクロスフェアのために記載される抗腫瘍化学療法剤を溶解するために有効な量での血漿タンパク質との混合物を含んで成る製剤を含む。最も好ましくは、血漿タンパク質は、ヒト血清アルブミン及びγ−免疫グロブリンから成る群から選択される。
もう１つの態様においては、多数のマイクロスフェア及び懸濁溶液の両者は、パクリタキセルを含む。この態様においては、多数のマイクロスフェア及び溶液の両者におけるパクリタキセルは、約７０〜約２８０ｍｇである。好ましくは、多数のマイクロスフェア及び溶液の両者におけるパクリタキセルは、約１３５〜約１７５ｍｇ／ｍ２の濃度で存在する。
【００２７】
１つの好ましい態様においては、パクリタキセルの約１０〜約９０％が多数のマイクロスフェアに存在する。より好ましくは、パクリタキセルの約６０〜約９０％が多数のマイクロスフェアに存在する。最も好ましくは、パクリタキセルの約８０〜約９０％が多数のマイクロスフェアに存在する。
もう１つの態様においては、懸濁溶液は、第２の抗腫瘍化学療法剤を含む。前記第２の抗腫瘍化学療法剤は任意には、アポプトーシス誘導性化学療法剤である。前記アポプトーシス誘導性化学療法剤は、パクリタキセル、シスプラチン、アドリアマイシン、酪酸、シクロホスファミド、エトポシド、アムサクリン、ゲニステイン及びミトグアゾンから成る群から選択される。
【００２８】
抗腫瘍化学療法剤を供給するための方法：
本発明はまた、本発明の組成物を用いて、腫瘍を有する患者に、抗腫瘍化学療法剤を投与するための方法も提供する。前記投与方法は、腫瘍に化学療法剤溜めとして抗腫瘍化学療法剤を供給し、そして化学療法剤溜めから腫瘍の間質空間に治療的に効果的な量、開放する段階を含んで成り、ここで前記化学療法剤溜めは、抗腫瘍化学療法剤を組み込む多数のマイクロスフェア及びその多数のマイクロスフェアを取り囲む懸濁溶液を含む。
【００２９】
１つの態様においては、供給段階は、腫瘍内に化学療法剤溜めを位置決定する段階を包含する。供給システムは、腫瘍内に化学療法剤溜めを腫瘍内投与する段階を包含する。他方では、供給段階は、腫瘍に隣接して化学療法剤溜めを位置決定する段階を包含する。
本発明の１つの態様においては、組成物は、注射器を用いて、腫瘍に隣接して、又は腫瘍内注射される。他方では、注射器ポンプが、組成物を注射するために使用され得る。注射器ポンプの流速及び圧力は、治療されるべき腫瘍に依存するであろう。注射器ポンプの流速は、約０．０１６７ｍｇ／分〜約０．５ｍｌ／分である。好ましい流速は、腫瘍外に実質的にパクリタキセルを供給しないで、腫瘍の９０％以上にパクリタキセル製剤を供給するであろう。
【００３０】
１つの態様においては、開放段階は、多数のマイクロスフェアから抗腫瘍化学療法剤を開放する段階を包含し、生分解性ポリマーの分解が前記マイクロスフェアから抗腫瘍化学療法を治療的に有効な量で開放する。好ましい開放段階は、腫瘍への化学療法剤溜めの供給に続いて、２５時間以内で、多数のマイクロスフェアから抗腫瘍化学療法剤の約５０％までを開放することを包含する。より好ましくは、開放段階は、腫瘍への化学療法剤の溜めの供給に続いて、２４時間以内で多数のマイクロスフェアから抗腫瘍化学療法剤の約１５〜約２５％を開放することを包含する。
【００３１】
他方では、溜めは、生分解性又は非生分解性ポリマーから製造される多数のマイクロスフェアであり得る。非生分解性ポリマーは任意には、エチレン−酢酸ビニルのコポリマーである。
生分解性又は非生分解性ポリマーから製造されるマイクロスフェアは、遅い拡散性により、抗腫瘍化学療法剤ば一定の期間にわたって治療的に有効な量で開放されるよう、構成され得る。好ましくは、抗腫瘍化学療法剤は、１週〜６ヶ月、持続する期間にわたって開放される。最も好ましくは、抗腫瘍化学療法剤は、３週〜２ヶ月間にわたって、治療的に有効な量で開放される。
【００３２】
１つの態様においては、開放段階は、可溶性製剤としての腫瘍細胞への抗腫瘍化学療法剤の拡散段階を包含する。任意には、前記の可溶性剤は、抗腫瘍化学療法剤と、その抗腫瘍化学療法剤を溶解するのに効果的な量での血漿タンパク質との混合物を含んで成る。好ましくは、血漿タンパク質は、ヒト血清アルブミン及びγ−免疫グロブリンから成る群から選択される。それらの血漿タンパク質は、抗腫瘍化学療法剤の拡散を促進する。
【００３３】
理論的に結びつけられないが、抗腫瘍化学療法剤の可溶性形、例えばパクリタキセル／血漿タンパク質複合体の投与がパクリタキセル拡散を促進することによって薬剤効能を高めることが提案されている。高められた拡散性は、注射の直接の領域のみならず、またパクリタキセル移動した腫瘍中の部位で、アポプトーシス腫瘍死を促進する。
本発明のそれらの及び他の態様の機能及び利点は、下記例からより十分に理解あれるであろう。次の例は、本発明の利点を例示するものであって、本発明の範囲を限定するものではない。
【００３４】
実施例
例１．ヌードマウス研究対象におけるヒト乳腫瘍異種移植片（細胞系ＭＣＦ７）の腫瘍内にマイクロスフェアを供給するためのパクリタキセル／ＨＡＳの効果のインビボ評価
この研究の目的は、初期用量のパクリタキセル／ＨＡＳが投与されない場合に観察される蛍光ラベルされたマイクロスフェアの分散性に対して、パクリタキセル／ＨＡＳの初期注射に続いての固形腫瘍中に注射される蛍光ラベルされたマイクロスフェア粒子の分散性の程度を比較することである。
【００３５】
研究グループ：
グループ当たり１０匹のマウスから成る５種の研究グループが存在する。マウスは、次の５つのグループに割り当てられる：
【表１】
2004507451.tif 000002
【００３６】
研究企画：
生後約５週の免疫欠損ヌードマウス（無胸腺マウス）に、約１０７個の細胞／０．１ｍｌのヒト乳癌細胞系ＭＣＦ７を含む細胞懸濁液を皮下注射する。マウスを、腫瘍の出現について通常通りに試験する。腫瘍細胞移植に続いて２８日目、すべての腫瘍を下記のようにして測定し、そして測定を、“前−処理基線腫瘍体積”として個々のマウスについて記録する。腫瘍測定をカリパスを用いて行い、最長及び最も広い点で、お互い約９０°で２つの寸法により腫瘍を測定する。腫瘍体積は、式 （Ｗ２×ｌ）／２（ここで、Ｗは最も広い点での腫瘍測定であり、そしてＬは最長の点での腫瘍の寸法である）に従って計算されるであろう。
【００３７】
グループ間の効果的な化学療法剤分散性が比較され得るよう、腫瘍体積の相対的均質性を確かめるために、５〜８ｇの範囲内の腫瘍体積を有するマウスのみを、研究グループに割り当てることができる。治療相の“０”日目で、グループＩは、蛍光色素のみを含む不活性マイクロスフェアの溜め注射を受け、そしてグループＩＩはパクリタキセル／ＨＡＳの最少負荷注射を受け、続いて２４時間以内に、蛍光色素を含む不活性マイクロスフェアの第２注射を受ける。グループＩＩＩは、蛍光色素のみを含むが、しかし高められた圧力で供給される不活性マイクロスフェアの溜め注射を受ける。グループＩＶは高められた圧力で供給されるパクリタキセル／ＨＡＳの初期負荷注射、続いて２４時間内に、通常の圧力で供給される、蛍光色素を含む不活性マイクロスフェアの第２注射を受ける。
【００３８】
グループＶは、高められた圧力で供給される、パクリタキセル／ＨＡＳの初期負荷注射、続いて２４時間以内に、高められた圧力で供給される、蛍光色素不活性マイクロスフェアの第２注射を受ける。個々のグループにおけるマイクロスフェアの注入の後、２４時間以内に、マウスは殺され、そして腫瘍が除かれる。腫瘍組織をすぐに固定し、そして１００μｍのスライスに切断する。個々のスライスにおける蛍光ラベルの分布領域を、マクロイメージングシステム、例えば感度の高いＣＣＤカメラを備えた蛍光立体顕微鏡を用いて定量化する。分布体積を、個々のスライスにおいて定義化された分布領域から計算する。
【００３９】
研究パラメーター：
研究グループ内の個々のマウスに関して、注射されるマイクロスフェア内の蛍光色素の分布体積を測定する。グループ内のすべてのマウスについての平均分布体積を決定し、そして２種のグループ（初期パクリタキセル／ＨＡＳ注射に続くマイクロスフェア対マイクロスフェアのみ）について得られる値を比較する。
【００４０】
結果：
５種のグループの分布体積の結果（予測される結果）は次の通りである：
【表２】
2004507451.tif 000003
【００４１】
結論：
腫瘍中への可溶性パクリタキセルの予備注射は、マイクロスフェアのより効果的に続く分布を付与するアポプトーシスを引き起こす。高められた圧力の助けは、すべての場合において改良された分布を提供する。予備用量についての高められた圧力は、その予備用量を、腫瘍体積のより大きな部分に分布し、マイクロスフェアの続く注射の分布を可能にする。この注射に関しての高められた圧力をまた、マイクロスフェア分布において有意な改良をもたらし、そして腫瘍収縮の結果を有意に改良する可能性を有する。
【００４２】
例２．ヌードマウス研究対象におけるヒト乳癌（細胞系ＭＣＦ７）異種移植片におけるパクリタキセル／ＨＡＳに懸濁されるパクリタキセルマイクロスフェアの腫瘍内注射の抗腫瘍効果のインビボ評価
この研究の目的は、免疫欠損マウスにおけるヒト乳癌異種移植片（細胞系ＭＣＦ７）に対するパクリタキセル／ＨＡＳ（アルブミンにより複合体化されたパクリタキセル（タキソール）の新規専有化合物）の溶液に懸濁されるパクリタキセルを含むマイクロスフェアの抗腫瘍効果を評価することである。異種移植片腫瘍サイズを低める、パクリタキセルマイクロスフェア−パクリタキセル／ＨＡＳ溶液の組み合わせの腫瘍内注射を、標準の化学療法剤、すなわちタキソールに比較する。
【００４３】
研究グループ：
グルウープ当たり６〜１０匹を含む５種の研究グループが存在する。マウスは、次の５つのグループに割り当てられる：
【表３】
2004507451.tif 000004
【００４４】
研究企画：
ヌードマウス（無胸腺マウス）（生後約５週）に、約１０７個の細胞／０．１ｍｌのヒト乳癌細胞系ＭＣＦ７を含む細胞懸濁液を皮下注射する。マウスを、腫瘍の出現について通常通りに試験する。腫瘍細胞移植に続いて２８日目、すべての腫瘍を下記のようにして測定し、そして測定を、“前−処理基線腫瘍体積”として個々のマウスについて記録する。腫瘍測定をカリパスを用いて行い、最長及び最も広い点で、お互い約９０°で２つの寸法により腫瘍を測定する。腫瘍体積は、式 （Ｗ２×ｌ）／２（ここで、Ｗは最も広い点での腫瘍測定であり、そしてＬは最長の点での腫瘍の寸法である）に従って計算されるであろう。
【００４５】
５〜８ｇの範囲内の腫瘍体積を有するすべてのマウスが、グループを研究するために割り当てられる。処理グループへの割り当てが、個々の腫瘍の体積に基づいて行われ、そして個々の研究グループは、すべての腫瘍体積のほぼ等しい代表を受ける。研究基線で、すなわち処理相の“０”日目、２回の注射を受けるよう予定されるすべてのマウスは、それらの研究グループ割り当てに従って第１の注射を受ける。約２３時間後、腫瘍を上記のようにして測定し、そして体積を記録する。測定に続いてすぐに、すなわち第１の注射の２４時間以内で、マウスは研究グループ割り当てに従って第２の注射、又はそれらの１回の注射を受ける。処理後の腫瘍体積を、初期注射に続いて、４８時間、７日、１４日、及び２１日で評価する。マウスを殺し、そして腫瘍を除き、そして計算する。個々の処理グループについて最終重量を平均し、そして“非処理”グループについての得られる最終重量と比較する。
【００４６】
研究パラメーター；
研究グループ内の個々のマウスに関しては、初期注射に続いて、２４時間、及び４８時間、７日、１４日及び２４時間での第２の直前の後処理腫瘍体積を測定し、そして記録する。相対的腫瘍体積（後−処理腫瘍体積／前−処理基線腫瘍体積）を、個々の時点で記録し、そして研究グループ内のすべてのマウスについて、個々の時点での平均相対的腫瘍体積を決定する。さらに、殺害した後、個々の研究グループについての腫瘍の最終重量を平均し、そして“処理なし”グループについて観察される最終重量に比較する。
【００４７】
結果：
相対的腫瘍体積（１００×後−処理腫瘍体積／前−処理基線腫瘍体積）の結果（予測される結果）を、次の表において集める：
【表４】
2004507451.tif 000005
【００４８】
結果：
高められた圧力で、可溶性パクリタキセルに懸濁されたパクリタキセルマイクロスフェアの腫瘍内注入は、腫瘍体積の大きな部分へのマイクロスフェアの広がりを可能にする。大部分の腫瘍体積への化学療法剤の拡張された開放性が、有意な腫瘍の収縮を付与する。マイクロスフェア−可溶性パクリタキセルの組合せの注入の約２４時間前、パクリタキセルの可溶性複合体による前処理は、腫瘍収縮に関して、改良された効果を与える。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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