(57)【要約】本発明は、アルツハイマー病の診断における式 （Ｉ） の放射性医薬の使用に関する。特に、本発明の放射性医薬は血液脳関門を通過し、アルツハイマー病の患者の脳組織の中に存在するＣＣＲ１レセプターに結合することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式 （Ｉ）：
【化１】
2004513123.tif 000023
（式中、
Ｘ１およびＸ２は各々独立してハロゲンであり、
Ｒ１およびＲ２は各々独立して水素またはアルキルであり、
Ｒ３は水素、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノアラルキルアミノ、アルキルカルボニルアミノ、アルケニルカルボニルアミノ、ハロアルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アルコキシアルキルカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルカルボニルアミノ、グリシンアミド、モノアルキルグリシンアミド、アリールカルボニルグリシンアミド、アミノカルボニルグリシンアミド、（アミノカルボニル） （アルキル） グリシンアミド、（アルコキシアルキルカルボニル） グリシンアミド、ウレイド、モノアルキルウレイド、モノアリールウレイド、モノアラルキルウレイド、またはアラニンアミドであり、
Ｘ１またはＸ２のいずれか１つは１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２８Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、８０Ｂｒおよび１８Ｆから成る群から選択されるか、あるいはこの化合物中の炭素原子の１つが１１Ｃである）
で表わされる化合物またはその薬学上許容される塩。
【請求項２】
式 （ＩＩ）：
【化２】
2004513123.tif 000024
（式中、
Ｘ１およびＸ２は各々独立してハロゲンであり、
Ｒ１およびＲ２は各々独立して水素またはアルキルであり、そして
Ｒ４は水素であり、そして
Ｒ５は９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅおよび１８８Ｒｅから成る群から選択される放射性金属原子に結合することができるか、あるいは９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅおよび１８８Ｒｅと錯体を形成することができるキレート化剤である）
で表わされる化合物またはその薬学上許容される塩。
【請求項３】
前記化合物がケモカインレセプターＣＣＲ１に結合し、そして血液脳関門を通過する、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がピペラジニル基の２位におけるメチルであり、そしてＲ２がピペラジニル基の５位におけるメチルである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がピペラジニル基の２位におけるメチルであり、そしてＲ２が水素である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ１がフェニル基の４位におけるクロロであり、そしてＸ２がフェニル基の４位における１８Ｆである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ５が式 （ＩＩＩ）：
【化３】
2004513123.tif 000025
のキレート化剤である、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５が式 （ＩＶ）：
【化４】
2004513123.tif 000026
のキレート化剤である、請求項２に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５が１〜１０個の炭素原子を有するアルキル基を含んでなるリンカー部分を含んでなり、ここでアルキル基は必要に応じて１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）−基、１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）２基、１〜１０個のヒドロキシ基、１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）ＯＲ−基、１〜１０個の酸素原子、１〜１０個の硫黄原子、１〜１０個の窒素原子、１〜１０個のハロゲン原子、１〜１０個のアリール基、および１〜１０個の飽和または不飽和複素環式環を含有し、ここでＲは水素またはアルキルである、請求項７または８に記載の化合物。
【請求項１０】
リンカー部分が−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ） である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載の一塩化物塩。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれかに記載の二塩化物塩。
【請求項１３】
アルツハイマー病の診断を必要とするヒトに請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物を投与し、そしてガンマカメラまたは陽電子放射断層写真 （ＰＥＴ） によりヒトへの化合物の投与から生ずる放射能を測定することを含んでなる、ヒトにおけるアルツハイマー病を診断する方法。
【請求項１４】
ヒトにおけるアルツハイマー病を診断する放射性医薬を製造するために請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物を使用する方法。
【請求項１５】
式 （ｆ） ：
【化５】
2004513123.tif 000027
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＸ１は請求項１において定義した通りである） の化合物を、式 （ｂ） ：
【化６】
2004513123.tif 000028
の化合物と還元剤の存在下に反応させることを含んでなる、式 （Ｉ） の化合物を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、アルツハイマー病の診断において有用である新規な放射性医薬に関する。
【０００２】
背景の技術の簡単な説明
アルツハイマー病は重度の神経変性障害であり、そして現在約４００万人のアメリカ人がこの病気を患っている。老化する人口は増加し続けているので、この数は治癒または予防が発見されないかぎり、次の世紀の中ごろまでに１４００万人に到達するであろう。現在、アルツハイマー病を容易に診断する感受性、特異的死亡前 （ｐｒｅｍｏｒｔｅｍ） 試験は存在しない。現在、アルツハイマー病は、認識の減少の臨床的観測、ならびにそれらの症候の他の可能な原因の全身的排除に基づいて診断される。「確からしいアルツハイマー病」の臨床的診断の確認は、死亡直後の （ｐｏｓｔｍｏｒｔｅｍ） 脳の検査よってのみ実施することができる。アルツハイマー病の脳は、学習および記憶に関係する脳領域 （例えば、脳皮質および海馬） における２つの明確な異常なタンパク質沈着により特徴づけられる。
【０００３】
これらの沈着は、アルツハイマー病の特徴を示す、細胞外アミロイドプラーク、および他の神経変性障害において同様に見出すことができる、細胞内神経原繊維もつれ （ＮＦＬ） である。アミロイドペプチドは典型的には４０または４２アミノ酸長さ （それぞれ，″Ａβ１−４０ｕまたは″Ａβ１−４２ｕ） であり、未知機能のより大きい膜関連タンパク質、アミロイド前駆体タンパク質 （「ＡＰＰ」） の異常なプロセシングから形成される。これらのペプチドのオリゴマー凝集物は神経毒性であると考えられ、究極的にシナプス変性および神経喪失を生ずる。アミロイドの沈着量は、死亡時における症候の重症度におおよそ相関する。
【０００４】
過去において、アルツハイマー病の死亡前の診断剤として使用できる放射性医薬を設計する試みはいくつか存在した。
Ｂｏｍｅｂｒｏｅｋ他は、１２３Ｉで標識化した、アミロイド関連タンパク質の血清アミロイドＰ成分 （ＳＡＰ） が、脳アミロイド症の患者の、多分血管壁において、脳皮質中に低レベルで蓄積することを示した （Ｂｏｍｅｂｒｏｅｋ， Ｍ．， ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃｌ． Ｍｅｄ． Ｃｏｍｍｕｎ． （１９９６）， Ｖｏｌ． １７， ｐｐ． ９２９−９３３）。
【０００５】
Ｓａｉｔｏ他は、血液脳関門を通して１２５Ｉ標識化Ａβ１−４０をベクター仲介で送出すことを提案した。ヨウ素化Ａβ１−４０は組織切片中でＡβアミロイドプラークに結合することが報告されている （Ｓａｉｔｏ， Ｙ．， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９９５， Ｖｏｌ． ９２， ｐｐ． １０２２７−１０２３１）。
米国特許第５，２３１，０００号には、アルツハイマー病の患者の脳の中に見出されるＡ４アミロイドペプチドに対する特異性を有する抗体が開示されている。しかしながら、血液脳関門を横切ってこれらの抗体を送出す方法は記載されてきていない。
【０００６】
Ｚｈｅｎ他は、「Ｃｏｎｇｏ ＲｅｄＴＭ」として知られているアミロイド結合性色素の修飾およびこれらの修飾された分子とテクネチウムおよびレニウムとの錯体を記載している。放射性イオンとの錯体は、アルツハイマー病についての潜在的造影剤であると主張されている （Ｚｈｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｃｈｅｍ． （１９９９）， Ｖｏｌ． ４２， ｐｐ． ２８０５−２８１５）。しかしながら、血液脳関門を横切る錯体の潜在性は限定される。
【０００７】
アメリカ合衆国におけるペンシルベニア大学の１グループ （Ｓｋｏｖｒｏｎｓｋｙ， Ｍ．， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ２０００， Ｖｏｌ．， ９７， ｐｐ． ７６０９−７６１４） は、脳透過性であり、かつアミロイド物質 （すなわち、β−プリーツシートのコンフォメーションのペプチド） に非特異的に結合する、Ｃｏｎｇｏ Ｒｅｄの蛍光標識化誘導体を開発した。この化合物は放射線標識化し、次いで臨床被験前に前臨床スクリーンを通して薬物速度論および毒性について実験した。
【０００８】
Ｋｌｕｎｋ他は、Ｃｏｎｇｏ ＲｅｄＴＭの誘導体、クリサミンＧ （ＣＧ） を使用する実験を報告した。ＣＧはｉｎ ｖｉｔｒｏで合成β−アミロイドの十分に結合し、正常マウスの血液脳関門を横切ることが報告されている （Ｋｌｕｎｋ ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ． Ａｇｉｎｇ （１９９４）， Ｖｏｌ． １５， Ｎｏ． ６， ｐｐ． ６９１−６９８）。
Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ他は、アルツハイマー病においてＭ１およびＭ２ムスカリンアセチルコリンレセプターの可視化するための潜在的ラジオリガンドとしてヨード−１２３として提示した （Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｎｕｃｌ． Ｍｅｄ． （１９９９）， Ｖｏｌ． ２６， ｐｐ． １４８２−１４８５）。
【０００９】
最近、ある種の特定のレセプターはアルツハイマー病の患者の脳においてアップレギュレートされることが発見された （Ｈｏｒｕｋ， Ｒ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． （１９９７）， Ｖｏｌ． １５８， ｐｐ． ２８８２−２８９０）；Ｘｉａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｎｅｕｒｏ． Ｖｉｒｏｌ． （１９９９）， Ｖｏｌ． ５， ｐｐ． ３２−４１）。さらに、ケモカインレセプターＣＣＲ１は進行したアルツハイマー病の患者の脳においてアップレギュレートされ、そして正常の年齢の脳の中に存在しないことが最近示された （Ｈａｌｋｓ−Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， ＣＣＲ１ Ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｂｒａｉｎｓ， Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ， ＃７８６．６， Ｖｏｌｕｍｅ ２４， １９９８）。ＣＣＲ１レセプターに対するアンタゴニストおよび抗炎症剤としてそれらの使用はＰＣＴ公開特許出願、ＷＯ ９８／５６７７１に記載されている。
【００１０】
前述の提案のいずれも、アルツハイマー病の初期の診断のための造影剤を開発しなかった。したがって、アルツハイマー病の信頼性ある初期の診断のために使用できる診断剤が臨床的に要求されている。
【００１１】
発明の要約
本発明は、ＣＣＲ１レセプターに結合し、血液脳関門を通過することができ、したがって、好ましくはアルツハイマー病の初期段階において、アルツハイマー病の診断において有用である放射性医薬に関する。
したがって、１つの面において、本発明は、式 （Ｉ）：
【００１２】
【化７】
2004513123.tif 000002
【００１３】
（式中、
Ｘ１およびＸ２は各々独立してハロであり、
Ｒ１およびＲ２は各々独立して水素またはアルキルであり、
Ｒ３は水素、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノアラルキルアミノ、アルキルカルボニルアミノ、アルケニルカルボニルアミノ、ハロアルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アルコキシアルキルカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアルキルカルボニルアミノ、グリシンアミド、モノアルキルグリシンアミド、アリールカルボニルグリシンアミド、アミノカルボニルグリシンアミド、（アミノカルボニル） （アルキル） グリシンアミド、（アルコキシアルキルカルボニル） グリシンアミド、ウレイド、モノアルキルウレイド、モノアリールウレイド、モノアラルキルウレイド、またはアラニンアミドであり、
Ｘ１またはＸ２のいずれか１つは１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２８Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、８０Ｂｒおよび１８Ｆから成る群から選択されるか、あるいはこの化合物中の炭素原子の１つは１１Ｃである）
の化合物またはその薬学上許容される塩に関する。
【００１４】
他の面において、本発明は、式 （ＩＩ）：
【００１５】
【化８】
2004513123.tif 000003
【００１６】
（式中、
Ｘ１およびＸ２は各々独立してハロであり、
Ｒ１およびＲ２は各々独立して水素またはアルキルであり、そして
Ｒ４は水素であり、そして
Ｒ５は９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅおよび１８８Ｒｅから成る群から選択される放射性金属原子に結合することができるか、あるいは９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅおよび１８８Ｒｅと錯体を形成することができるキレート化剤である）
の化合物またはその薬学上許容される塩に関する。
【００１７】
他の面において、本発明は、アルツハイマー病の診断を必要とするヒトに前述しかつ本明細書に記載する式 （Ｉ） または式 （ＩＩ） の化合物を投与し、そしてガンマカメラまたは陽電子放射断層写真 （ＰＥＴ） によりヒトへの化合物の投与から生ずる放射能を測定することを含んでなる、ヒトにおけるアルツハイマー病を診断する方法に関する。
他の面において、本発明は、ヒトにおけるアルツハイマー病を診断する放射性医薬を製造するために本発明による化合物を使用する方法に関する。
他の面において、本発明は、本発明の化合物を製造する方法に関する。
【００１８】
発明の詳細な説明
定義
本明細書および添付された特許請求の範囲において使用するとき、特記しない限り、下記の用語は示した意味を有する：
「アルキル」は、もっぱら炭素および水素から成り、不飽和を含有せず、１〜８個の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状の１価または２価の基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル （ｉ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−プロピル、１，１−ジメチルエチル （ｔ−ブチル）、ｎ−ヘプチル、およびその他を意味する。
【００１９】
「アルキルカルボニルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒａ （ここでＲａは上に定義したアルキル基である） の基、例えば、アセチルアミノ、エチルカルボニルアミノ、ｎ−プロピルカルボニルアミノ、およびその他を意味する。
「アルケニル」は、もっぱら炭素および水素から成り、少なくとも１つの二重結合を含有し、１〜８個の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状の１価または２価の基、例えば、エテニル、プロプ−１−エニル、ブト−１−エニル、ペントブト−１−エニル、ペンタ−１，４−ジエニル、およびその他を意味する。
【００２０】
「アルケニルカルボニルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒｃ （ここでＲｃは上に定義したアルケニル基である） の基、例えば、エテニルカルボニルアミノ、プロプ−２−エニルカルボニルアミノ、ブト−２−エニルカルボニルアミノ、およびその他を意味する。
「アルコキシ」は、式−ＯＲａ （ここでＲａは上に定義したアルキル基である） の基、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、１−メチルエトキシ （ｉ−プロポキシ）、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、１，１−ジメチルエトキシ （ｔ−ブトキシ）、およびその他を意味する。
【００２１】
「アルコキシカルボニルアルキルカルボニルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒａ−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ （ここで各Ｒａは独立して上に定義したアルキル基である） の基、例えば、エトキシカルボニルメチルカルボニルアミノ、メトキシカルボニルメチルカルボニルアミノ、（２−エトキシカルボニルエチル） カルボニルアミノ、（２−メトキシカルボニルエチル） カルボニルアミノ、およびその他を意味する。
「 （アルコキシカルボニル） グリシンアミド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒａ−Ｏ−Ｒａ （ここで各Ｒａは独立して上に定義したアルキル基である） の基、例えば、（メトキシアセチル） グリシンアミド、（エトキシアセチル） グリシンアミド、およびその他を意味する。
【００２２】
「アミノ」は、基−ＮＨ２を意味する。
「アミノカルボニルグリシンアミド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２の基を意味する。
「 （アミノカルボニル） （アルキル） グリシンアミド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒａ）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２ （ここでＲａは上に定義したアルキル基である） の基を意味する。
【００２３】
「アリール」はフェニルまたはナフチル基を意味する。特記しない限り、用語「アリール」および接頭語「アラ」（「アラルキル」におけるような） は、ここにおいて定義するように、ハロ、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ニトロ、アミノ、モノアルキルアミノ、およびジアルキルアミノから成る群から選択される１または２以上の置換基により置換されていてもよいアリール基を包含することを意味する。
【００２４】
「アリールカルボニルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ （ここでＲｂは上に定義したアリール基である） の基、例えば、（４−メトキシフェニル） カルボニルアミノ、（４−フルオロフェニル） カルボニルアミノ、（４−クロロフェニル） カルボニルアミノ、およびその他を意味する。
「アリールカルボニルグリシンアミド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒｂ （ここでＲｂは上に定義したアリール基である） の基、例えば、フェニルカルボニルグリシンアミド、（４−フルオロ−３−トリフルオロメチルフェニル） カルボニルグリシンアミド、（４−フルオロフェニル） カルボニルグリシンアミド、およびその他を意味する。
【００２５】
「アラルキル」は、式−ＲａＲｂ （ここでＲａは上に定義したアルキル基であり、そしてＲｂは上に定義したアリール基である） の基、例えば、ベンジル、およびその他を意味する。
「アルコキシカルボニルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒａ−Ｏ−Ｒａ （ここで各Ｒａは独立して上に定義したアルキル基である） の基、例えば、メトキシメチルカルボニルアミノ、エトキシエチルカルボニルアミノ、メトキシエチルカルボニルアミノ、およびその他を意味する。
「アラニンアミド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｃ（ＣＨ３）Ｈ−ＮＨ２の基を意味する。
【００２６】
「ベンジル」は、式−ＣＨ２−Ｒｈ （ここでＲｈはハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ニトロ、アミノ、モノアルキルアミノ、およびジアルキルアミノから成る群から選択される１または２以上の置換基により置換されていてもよいフェニル基である） の基を意味する。
「ジアルキルアミノ」は、式−Ｎ（Ｒａ）Ｒｂ （ここでＲａは上に定義したアルキル基であり、そしてＲｂは上に定義したアリール基である） の基、例えば、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、エチルプロピルアミノ、およびその他を意味する。
【００２７】
「グリシンアミド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＮＨ２の基を意味する。
「ハロ」は、ブロモ、クロロ、ヨード、またはフルオロを意味する。
「ハロアルキル」は、上に定義したように、１または２以上のハロ基により置換された、上に定義した、アルキル基、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロ、トリクロロメチル、２−フルオロエチル、１−フルオロメチル−２−フルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、１−ブロモメチル−２−ブロモエチル、およびその他を意味する。
【００２８】
「ハロアルキルカルボニルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒｆ （ここでＲｆは上に定義したハロアルキル基である） の基、例えば、トリフルオロメチルカルボニルアミノ、トリフルオロエチルカルボニルアミノ、２−ブロモエチルカルボニルアミノ、およびその他を意味する。
「モノアルキルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）Ｒａ （ここでＲａは上に定義したアルキル基である） の基、例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、およびその他を意味する。
【００２９】
「モノアラルキルアミノ」は、式−Ｎ（Ｈ）Ｒｄ （ここでＲｄは上に定義したアラルキル基である） の基、例えば、ベンジルアミノ、（３，４，５−トリメトキシベンジル） アミノ、（４−クロロベンジル） アミノ、およびその他を意味する。
「モノアルキルウレイド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ） Ｒａの基または式−Ｎ（Ｒａ）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２の基（ここでＲａは上に定義したアルキル基である） の基を意味する。
「モノアリールウレイド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ） Ｒｂの基または式−Ｎ（Ｒｂ）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２の基（ここでＲｂは上に定義したアリール基である） の基を意味する。
「モノアラルキルウレイド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ） Ｒｄの基または式−Ｎ（Ｒｄ）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２の基（ここでＲｄは上に定義したアラルキル基である） の基を意味する。
【００３０】
「任意の」または「必要に応じて」は、環境の引き続いて記載する事象が起こることがあるか、あるいはないこと、および前記事象または環境グルタミン酸起こる場合および起こらない場合を記載が包含することを意味する。例えば、「置換されていてもよいアリール」は、アリール基が置換されることができるか、あるいはできないこと、および置換されたアリール基および置換基をもたないアリール基の両方を記載が包含することを意味する。
「薬学上許容される塩」は、酸および塩基の両方の付加塩を意味する。
【００３１】
「薬学上許容される酸付加塩」は、生物学的にまたは他の方法で望ましい、遊離塩基の生物学的有効性および性質を保持し、そして無機酸、例えば、フッ化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸およびその他、および有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、ピルビン酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、およびその他と形成された塩を意味する。本発明の化合物特に好ましい塩は、一塩化物および二塩化物である。
【００３２】
「薬学上許容される塩基付加塩」は、生物学的にまたは他の方法で望ましい、遊離塩基の生物学的有効性および性質を保持する塩である。これらの塩は、遊離酸に対する無機塩基または有機塩基の付加から製造される。無機塩基から誘導される塩は下記のものを包含するが、これらに限定されない：ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、アルミニウムの塩およびその他。好ましい無機塩はアンモニウム、ナトリウム、カルシウム、およびマグネシウムの塩である。
【００３３】
有機塩基から誘導される塩は下記のものを包含するが、これらに限定されない：第一級、第二級、および第三級アミン、天然に産出する置換アミンを包含する置換アミン、環式アミンおよび塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルコサミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂およびその他の塩。
【００３４】
「ウレイド」は、式−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２の基を意味する。
上の定義および例から理解されるように、置換アルキル基を含有するアルキル基について、それに対する任意の置換がアルキル基の任意の炭素上で起こることができる。
【００３５】
本発明の化合物、またはそれらの薬学上許容される塩は、それらの構造中に非対称炭素原子を有することができる。したがって、本発明の化合物またはそれらの薬学上許容される塩は単一の鏡像異性体、ジアスレオマー、ラセミ体、および鏡像異性体とジアスレオマーとの混合物として存在することができる。すべてのこのような単一の鏡像異性体、ジアスレオマー、ラセミ体、およびそれらの混合物は本発明の範囲内に入ることを意図する。化合物内のある種の炭素原子の絶対的立体配置は、知られている場合、適当な絶対的デスクリプターＲまたはＳで示される。
【００３６】
実用性および投与
本明細書に記載する本発明の化合物は、ＣＣＲ１として知られているケモカインレセプターに対するアンタゴニストであり、血液脳関門を通過する能力を有する。したがって、化合物はアルツハイマー病の造影するｉｎ ｖｉｖｏ診断剤として有用である。放射能はよく知られている手法に従いガンマカメラを使用するか、あるいは陽電子放射断層写真 （ＰＥＴ） により検出する。
【００３７】
好ましくは、本発明の化合物の遊離塩基または薬学上許容される塩の形態、例えば、一塩化物または二塩化物は診断剤として生薬処方物において使用するとができる。本発明の化合物を含有する生薬処方物は必要に応じてこの分野において知られているアジュバント、例えば、緩衝剤、塩化ナトリウム、乳酸、界面活性剤およびその他を含有する。使用前に無菌条件下に生薬処方物を濾過することによって、滅菌することができる。
放射性物質の投与量は１〜１００ ｍＣｉ、好ましくは５〜３０ ｍＣｉ、最も好ましくは５〜２０ ｍＣｉの範囲である。
【００３８】
試験
アルツハイマー病の造影剤としての化合物の適性は、この分野において知られている実験のプロトコルにより証明することができる。例えば、アルツハイマー病の脳中のＣＣＲ１レセプターのアップレギュレーションは、実施例において以後詳細に記載するように、アルツハイマー病の患者から収集した剖検脳組織の免疫組織学的染色実験により証明することができる。ＣＣＲ１レセプターに結合する本発明の化合物の能力および血液脳関門を通過するそれらの能力は、また、実施例において後述するように、既知のｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで評価することができる。
【００３９】
特に、実施例１０において、アルツハイマー病の異なる段階におけるＣＣＲ１発現の程度を扱うために実施した大規模実験を記載する。５０の剖検症例からの脳組織は、アルツハイマー病における臨床的重症度 （痴呆） とジストロフィー性神経炎におけるＣＣＲ１発現との間の相関を示した。臨床的の正常の個体の脳内のプラーク様構造におけるＣＣＲ１発現は稀であった。また、付随するアルツハイマー病の病理学 （特に、プラーク中のＡβ１−４２） が存在しないかぎり、他の神経変性疾患を有する個体の脳においてＣＣＲ１発現は見出されない。
【００４０】
好ましい態様
本発明の種々の面のうちで、式 （Ｉ） のある種の化合物は好ましい。Ｘ１がフェニル基の４位におけるクロロであり、そしてＸ２がフェニル基の４位における１８Ｆである、式 （Ｉ） の化合物は好ましい。陽電子放射断層写真 （ＰＥＴ） において診断剤として使用するための化合物は特に好ましい。
Ｒ３がフェニル環の２位に存在し、Ｒ１がピペラジニル環の２位におけるメチルであり、そしてＲ２がピペラジニル環の５位におけるメチルである、式 （Ｉ） の化合物は特に好ましい。Ｒ３がフェニル環の２位に存在し、Ｒ１がピペラジニル基の２位におけるメチルであり、そしてＲ２が水素である、式 （Ｉ） の化合物は特に好ましい。
【００４１】
一塩化物および二塩化物の形態である、これらの好ましい化合物はさらに好ましい。
本発明の種々の面のうちで、式 （ＩＩ） のある種の化合物は好ましい。特に、−Ｎ（Ｒ４）Ｒ５がフェニル環の２位に存在し、Ｒ１がピペラジニル環の２位に存在し、そしてＲ２がピペラジニル環の５位に存在する、式 （ＩＩ） の化合物は好ましい。−Ｎ（Ｒ４）Ｒ５がフェニル環の２位に存在し、Ｒ１がピペラジニル環の２位におけるメチルであり、そしてＲ２が水素である、式 （ＩＩ） の化合物は特に好ましい。
【００４２】
Ｒ５が式 （ＩＩＩ）：
【化９】
2004513123.tif 000004
【００４３】
のキレート化剤であるか、あるいはＲ５が式 （ＩＶ）：
【化１０】
2004513123.tif 000005
【００４４】
のキレート化剤である、式 （ＩＩ） の化合物、ならびに９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅおよび１８８Ｒｅとのそれらの錯体はさらにいっそう好ましい。Ｒ５が式 （ＩＩＩ） または式 （ＩＶ） のキレート化剤を含んでなり、キレート化剤が１〜１０個の炭素原子を有するアルキル基を含んでなるリンカー部分を介して式 （ＩＩ） の非放射性化合物の−Ｎ（Ｒ４）Ｒ５基中の窒素に結合しており、ここでアルキル基が必要に応じて１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）−基、１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）２基、１〜１０個のヒドロキシ基、１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）ＯＲ−基、１〜１０個の酸素原子、１〜１０個の硫黄原子、１〜１０個の窒素原子、１〜１０個のハロゲン原子、１〜１０個のアリール基、および１〜１０個の飽和または不飽和複素環式環を含有し、ここでＲは水素またはアルキルである、式 （ＩＩ） の化合物はさらにいっそう好ましい。好ましいリンカー部分は−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ） −である。
【００４５】
本発明の化合物のうちで、式 （Ｉ） の最も好ましい化合物は下記の化合物から成る群から選択される化合物である：
１− （５−クロロ−２−｛２−［ （２Ｒ） −４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエチルオキシ｝フェニル） 尿素；
Ｎ’− （メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル｝グリシルグリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体；
１− （２−｛２−［ （２Ｒ） −４− （４−フルオロベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝−５−ヨード−１２３Ｉ−フェニル） 尿素；
Ｎ’− （２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル｝グリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体；
【００４６】
Ｎ− （２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ− （５−メルカプト−３−アザペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル｝グリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体；
２− （２−アミノ−４−クロロフェノキシ） −［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
２− （２−アミノ−４−クロロフェノキシ） −［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
２− （２−アミノ−４−クロロフェノキシ） −［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
【００４７】
２− （２−アミノ−４−クロロフェノキシ） −［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
４−［４−クロロ−２− （ジエチルアミノ） フェノキシ］ −［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
４−［４−クロロ−２− （ジエチルアミノ） フェノキシ］ −［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
４−［４−クロロ−２− （ジエチルアミノ） フェノキシ］ −［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
４−［４−クロロ−２− （ジエチルアミノ） フェノキシ］ −［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−エタン−１−オン；
【００４８】
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ −２−オキソエトキシ｝フェニル） −３− （２，４−ジクロロフェニル） 尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ −２−オキソエトキシ｝フェニル） −３− （２，４−ジクロロフェニル） 尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル） −３− （２，４−ジクロロフェニル） 尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］ −２−オキソエトキシ｝フェニル） −３− （２，４−ジクロロフェニル） 尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素；
【００４９】
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
【００５０】
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
１−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−イソペンチルアミノ−４−クロロフェノキシ） エタン−１−オン；
１−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−イソペンチルアミノ−４−クロロフェノキシ） エタン−１−オン；
１−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−イソペンチルアミノ−４−クロロフェノキシ） エタン−１−オン；
【００５１】
１−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−（２−イソペンチルアミノ−４−クロロフェノキシ） エタン−１−オン；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−２−メチルプロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−２−メチルプロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−メチルプロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−メチルプロパンアミド；
【００５２】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−２−（メトキシ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−２−（メトキシ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メトキシ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メトキシ）アセトアミド；
（Ｅ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−ブタンアミド；
【００５３】
（Ｅ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−ブタンアミド；
（Ｅ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−ブタンアミド；
（Ｅ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−ブタンアミド；
メチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
メチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
【００５４】
メチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
メチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
エチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
エチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
エチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
【００５５】
エチルＮ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）スクシナメート；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
【００５６】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）プロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）プロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）プロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）プロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−フルオロベンズアミド；
【００５７】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−フルオロベンズアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−フルオロベンズアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−フルオロベンズアミド；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−３−（ｐ−トリル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−３−（ｐ−トリル）尿素；
【００５８】
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−（ｐ−トリル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−（ｐ−トリル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−エチル尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−エチル尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−３−エチル尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−３−エチル尿素；
【００５９】
１−ベンジル−３−（５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
１−ベンジル−３−（５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
１−ベンジル−３−（５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素；
１−ベンジル−３−（５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−（４−ニトロフェニル）尿素；
【００６０】
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−３−（４−ニトロフェニル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−３−（４−ニトロフェニル）尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル−３−（４−ニトロフェニル）尿素；
２−（ベンジルアミノ−４−クロロフェノキシ）−１−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］エタン−１−オン；
２−（ベンジルアミノ−４−クロロフェノキシ）−１−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］エタン−１−オン；
【００６１】
２−（ベンジルアミノ−４−クロロフェノキシ）−１−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］エタン−１−オン；
２−（ベンジルアミノ−４−クロロフェノキシ）−１−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］エタン−１−オン；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）グリシンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）グリシンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）グリシンアミド；
【００６２】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）グリシンアミド；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
１− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｓ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド；
【００６３】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メチルアミノ）アセトアミド；
２−ブロモ−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
２−ブロモ−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
２−ブロモ−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
【００６４】
２−ブロモ−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（ウレイド）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（ウレイド）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（ウレイド）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（ウレイド）アセトアミド；
【００６５】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（１−メチルウレイド）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（１−メチルウレイド）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（１−メチルウレイド）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（１−メチルウレイド）アセトアミド；
（２ＲＳ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
【００６６】
（２ＳＲ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
（２ＲＳ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
（２ＳＲ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
（２ＲＳ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
（２ＳＲ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
【００６７】
（２ＲＳ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
（２ＳＲ）−Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−アミノプロパンアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２，４−ジフルオロベンゾイルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２，４−ジフルオロベンゾイルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２，４−ジフルオロベンゾイルアミノ）アセトアミド；
【００６８】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２，４−ジフルオロベンゾイルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メトキシアセチルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メトキシアセチルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メトキシアセチルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（メトキシアセチルアミノ）アセトアミド；
【００６９】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２−ヨードベンゾイルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＲＳ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２−ヨードベンゾイルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＳＲ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２−ヨードベンゾイルアミノ）アセトアミド；
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２ＲＳ，５ＳＲ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２，５−ジメチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）−２−（２−ヨードベンゾイルアミノ）アセトアミド；
【００７０】
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝グリシンアミド；および
Ｎ− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｓ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝グリシンアミド；
ならびにそれらの一塩化物および二塩化物。
【００７１】
本発明の化合物の製造
Ａ．　式 （Ｉ） の化合物の製造
一般に、本発明の式 （Ｉ） の放射性造影剤は、反応性４−ハロベンゾイル誘導体をピペラジン誘導体と反応させることによって製造される。ＰＥＴ造影のための１８Ｆ標識化４−フルオロベンゾイル誘導体は好ましい。４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジルハロゲン化物を製造する一般的方法は下記の文献に記載されている：Ｉｗａｔａ ｅｔ ａｌ．， Ａｐｐｌｉｅｄ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｓｏｔｏｐｅｓ （２０００）， Ｖｏｌ． ５２， ｐｐ． ８７−９２。
１８Ｆ標識化４−フルオロベンゾイル誘導体は、式 （ａ） のベンズアルデヒド化合物を１８Ｆイオンと反応させて式 （ｂ） のベンズアルデヒドを生成させることによって製造される：
【００７２】
【化１１】
2004513123.tif 000006
【００７３】
式中ＬＧは離脱基、例えば、ブロモ、クロロ、ヨード、ニトロ、またはＮ（Ｒ）３＋Ｘ−であり、ここでＲはアルキルであり、そしてＸはハロイオン、例えば、Ｂｒ−、Ｃｌ−、またはＩ−；アルカン酸のイオン、例えば、アセテートイオン（ＣＨ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−）；またはアルキルスルホン酸、例えば、トリフラート （ＣＦ３ＳＯ３−） である）。好ましくは、ＬＧはトリフラートである。式 （ｂ） の化合物から出発すると、いくつかの合成経路が式 （Ｉ） の化合物の製造において可能である。
【００７４】
第１合成経路において、式 （ｂ） の化合物をＢａＢＨ４で還元して式 （ｃ） の化合物を生成する：
【化１２】
2004513123.tif 000007
【００７５】
次いで式 （ｃ） の化合物をＨＩ、Ｐ２Ｉ４またはＰｈ３ＰＢｒ２と反応させて、式 （ｄ） または （ｅ） のヨードまたはブロモ置換化合物を生成する：
【化１３】
2004513123.tif 000008
【００７６】
式 （ｄ） および （ｅ） の化合物は５０〜６０％の放射線化学的収率で得ることができる。放射線化学的純度は９５％より大きい。化合物の比活性は５ ｍＣｉ／１ ｎＭである。
次いで式 （ｄ） または （ｅ） の化合物をピペラジン誘導体 （ｆ） と反応させて、式 （ｇ） の化合物 （式 （Ｉ） の化合物） を生成することができる：
【００７７】
【化１４】
2004513123.tif 000009
【００７８】
式 （ｆ） の化合物臭化水素酸は当業者に知られている方法に従い製造することができ、ＰＣＴ公開特許出願、ＷＯ ９８／５６７７１に詳細に記載されている。
第２合成経路において、還元剤、例えば、ギ酸、フマル酸アンモニウム、ＮａＢＨ３ＣＮを使用して、式 （ｂ） の化合物を式 （ｆ） の化合物と直接反応させて、式 （ｇ） の化合物 （式 （Ｉ） の化合物） を生成する：
【００７９】
【化１５】
2004513123.tif 000010
【００８０】
Ｂ．　式 （ＩＩ） の化合物の製造
単一フォトン放射計算断層写真（“ＳＰＥＣＴ”） のために、９９ｍＴｃ標識化化合物は好ましい。それらの化合物は式 （ＩＩ） の化合物である。９９ｍＴｃ結合性キレート化剤、例えば、Ｎ２Ｓ２キレート化剤と反応させる式 （ＩＩ） の化合物の非放射性類似体を使用して、これらの化合物の一般的合成経路を開始する。式 （ＩＩ） の化合物の非放射性類似体の製造は、ＰＣＴ公開特許出願、ＷＯ ９８／５６７７１に詳細に記載されている。キレート化剤の合成は標準的手順、例えば、下記の文献に記載されている手順に従う：Ａ． Ｍａｈｍｏｏｄ ｅｔ ａｌ．， Ａ Ｎ２Ｓ２−Ｔｅｔｒａｄｅｎｔａｔｅ Ｃｈｅｌａｔｅ ｆｏｒ Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ： Ｔｅｃｈｎｅｔｕｍ， Ｒｈｅｎｉｕｍ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ （１９９９）， Ｖｏｌ． ５， ｐ． ７１またはＺ． Ｐ． Ｚｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ （１９９９）， Ｖｏｌ． １０， ｐ． １５９。
【００８１】
好ましいキレート化剤は式 （ＩＩＩ） または （ＩＶ） のキレート化剤である：
【化１６】
2004513123.tif 000011
【００８２】
キレート化剤の１つが式 （ＩＩ） の非放射性化合物の−Ｎ（Ｒ４）Ｒ５基中の窒素に直接結合しているか、あるいは１〜１０個の炭素原子を有するアルキル基を含んでなるリンカー部分を介して式 （ＩＩ） の非放射性化合物の−Ｎ（Ｒ４）Ｒ５基中の窒素に結合しており、ここでアルキル基が必要に応じて１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）−基、１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）−基、１〜１０個の−Ｎ（Ｒ）２基、１〜１０個のヒドロキシ基、１〜１０個の−Ｃ（Ｏ）ＯＲ−基、１〜１０個の酸素原子、１〜１０個の硫黄原子、１〜１０個の窒素原子、１〜１０個のハロゲン原子、１〜１０個のアリール基、および１〜１０個の飽和または不飽和複素環式環を含有し、ここでＲは水素またはアルキルである。好ましいリンカー部分は−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ） −である。
本発明の実施を促進するガイドとして下記の特定の実施例を提供する。これらの実施例は本発明を限定ことを意図しない。
【００８３】
実施例１．１− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素の製造
【化１７】
2004513123.tif 000012
【００８４】
Ａ．ＤＩＥＡ （１９．１０ ｍＬ、１１０ ｍｍｏｌ） を２５０ ｍＬの塩化メチレン中の （Ｒ）−（−）−２−メチルピペラジン （１０ ｇ、１００ ｍｍｏｌ） の溶液に添加した。この溶液を−１０ ℃に冷却した。ＢＯＣ無水物を２５０ ｍＬの塩化メチレン中に溶解し、冷却したピペラジン溶液に１時間かけて添加した。この反応を１６時間かけて周囲温度に放温した。反応混合物を濾過して溶液を除去し、濾液を５００ ｍＬの水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させると、油状物が得られた。この油状物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、１１．０ ｇの式 （ａ） の化合物が得られた。
【００８５】
Ｂ．　式 （ａ） の化合物 （１１．０ ｇ、５５ ｍｍｏｌ） およびＤＩＥＡ （１０．５ ｍＬ、６０．４ ｍｍｏｌ） を１００ ｍＬの塩化メチレン中に溶解した。生ずる溶液を−１０ ℃に冷却した。−１０ ℃の温度に維持した溶液に、塩化クロロアセチル （４．３７ ｍＬ、５５ ｍｍｏｌ） を滴下した。１時間攪拌した後、反応混合物を１００ ｍＬの水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させると、油状物が得られた。この油状物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、１４．８ ｇの式 （ｂ） の化合物が得られた。
【００８６】
Ｃ．　７５ ｍＬのＤＭＳＯ中の式 （ｂ） の化合物 （１４．８ ｇ、５３．５ ｍｍｏｌ） および式 （ｅ） の化合物 （９．９８ ｇ、５３．５ ｍｍｏｌ） の溶液に、塩化カリウム （１８．４８ ｇ、１３３．７ ｍｍｏｌ） を添加した。生ずる混合物を５０ ℃に３時間加熱した。この混合物を３０ ℃に冷却し、７００ ｍＬの水の中に注いだ。水を２００ ｍＬの酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル抽出液を一緒にし、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させると、泡状物が得られた。泡状物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、１９．６ ｇの式 （ｃ） の化合物が得られた。
【００８７】
Ｄ．　式 （ｃ） の化合物 （７．６８ ｇ、１８ ｍｍｏｌ） を４０ ｍＬの酢酸エチル中に溶解した。生ずる溶液を氷浴中で冷却し、この溶液を通して無水ＨＣｌガスを泡立てて通入した。この混合物を周囲温度において１時間放置すると、生成物は沈殿した。この生成物を濾過により集め、フィルター上において新鮮な酢酸エチルで洗浄すると、５．９ ｇの１− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）− ２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素、式 （ｄ） の化合物が白色固体状物として得られた；ＮＭＲ （２ロトマー）；（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）、９．７ （ｍ、０．５ Ｈ）、９．２ （ｍ、０．５ Ｈ）、８．１６ （ｓ、１ Ｈ）、８．１３ （ｓ、０．５ Ｈ）、６．８ （ｓ、２ Ｈ）、４．９ （ｍ、２ Ｈ）、４．４ （ｍ、５ Ｈ）、３．８ （ｂｓ、０．５ Ｈ）、３．４ （ｂｓ、０．５ Ｈ）、３．２ （ｍ、２．５ Ｈ）、３．０ （ｍ、２ Ｈ）、１．２〜１．４ （ｍ、３ Ｈ） ｐｐｍ。
【００８８】
実施例２．式（ｅ） の化合物の製造
【化１８】
2004513123.tif 000013
【００８９】
周囲温度において１００ ｍＬの無水ＴＨＦ中の２−アミノ−４−クロロフェノール （１０ ｇ、６９．７ ｍｍｏｌ） の溶液に、トリメチルシリルイソシアネート （１８．８ ｍＬ、１３９．４ ｍｍｏｌ） を添加した。この溶液を６０ ℃に加熱し、この温度に２２時間維持し、この時水 （１．３ ｍＬ、７６．７ ｍｍｏｌ） を添加した。３０分後、この溶液を周囲温度に冷却し、濃縮すると、褐色油状物が得られた。この油状物を酢酸エチル中に溶解し、活性炭で処理し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮すると、ピンク色固体が得られ、これを１０：１、トルエン／メタノールから結晶化させると、５．４ ｇの式 （ｅ） の化合物が黄褐色粉末として得られた。
【００９０】
実施例３．１− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）尿素の製造
Ａ．　Ｈ２Ｏ−１８Ｏをプロトンで衝撃することによって、フッ化水素−１８Ｆを調製した。生ずるフッ化水素−１８Ｆをアニオン交換カートリッジ上に吸収させた。水性アセトニトリル （１．５ ｍＬ、６６％） 中のＫｒｙｐｔｏｆｉｘ ２２２ （１５ ｍｇ、４０μｍｏｌ） およびＫ２ＣＯ３ （２．７７ ｍｇ、２０μｍｏｌ） の溶液で、フッ化水素−１８Ｆを溶離した。放射性画分を窒素ガス流中で蒸発乾固した。乾燥アセトニトリル （１ ｍＬ） を使用して、この手順を３回反復した。乾燥ＤＭＦ （２５０μｌ） 中の４−トリメチルアンモニウム−ベンズアルデヒド−トリフレート （２ ｍｇ、６．４μｍｏｌ） の溶液を添加した後、生ずる反応混合物を１００ ℃に５分間加熱した。
【００９１】
周囲温度に冷却した後、５０μｌの酢酸中の１− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）− ２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素、式 （ｄ） の化合物、（３ ｍｇ、８．３μｍｏｌ） の溶液および１００μｌのＤＭＦ中のシアノホウ水素化ナトリウム （４ ｍｇ、６３．７μｍｏｌ） の溶液を添加した。反応混合物を１２０ ℃に１０分間加熱した。５ ｍＬの水を添加した後、この混合物をポリスチロール−カートリッジ上で濾過した。吸着された生成物を２ ｍＬの水で洗浄すると、標題化合物、１− （５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−４− （４−フルオロ−１８Ｆ−ベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル尿素が得られ、これを１．５ ｍＬのアセトニトリルで溶離し、ＨＰＬＣにより精製した。
【００９２】
Ｂ．　同様な方法において、１８Ｆ原子を含有する式 （Ｉ） の他の化合物を製造する。
実施例４．Ｎ−（５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−４− （４−フルオロベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）グリシンアミドの製造
【化１９】
2004513123.tif 000014
【００９３】
Ａ．　 ２０ ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中の （Ｒ）−（−）−２−メチルピペラジン （２．０ ｇ、２０ ｍｍｏｌ） の溶液に、ＤＩＥＡ （５．２ ｇ、４０ ｍｍｏｌ） および塩化４−フルオロベンジル （２．３９ ｍＬ、２０ ｍｍｏｌ） を添加した。生ずる混合物を周囲温度において１５時間攪拌した。反応が完結した後、反応混合物を水 （３×２０ ｍＬ） およびブラインで洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、式 （ｆ） の化合物 （２．２ ｇ）が白色固体状物として得られた。
【００９４】
Ｂ．　５０ ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中の式 （ｆ） の化合物 （２．２ ｇ、１０ ｍｍｏｌ） の溶液に、塩化クロロアセチル （０．４ ｍＬ、１０ ｍｍｏｌ） を添加した。生ずる混合物を周囲温度において１０分間攪拌し、次いでトリエチルアミン （３ ｍＬ、２１ ｍｍｏｌ） を添加した。３０分後、この混合物を水 （３×２０ ｍＬ） およびブラインで洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、式 （ｇ） の化合物 （２．５ ｇ）が得られた。
【００９５】
Ｃ．　５０ ｍＬのＤＭＦ中の式 （ｇ） の化合物 （２．４ ｇ、８．４ ｍｍｏｌ） の溶液に、Ｋ２ＣＯ３ （２．５ ｇ、１７ ｍｍｏｌ）、ＮａＩ （０．２ ｇ） および４−クロロ−２−ニトロフェノール （１．３ ｇ、８．４ ｍｍｏｌ） を添加した。生ずる混合物を７０〜８０ ℃に加熱した。１時間後、この混合物を真空濃縮し、次いで酢酸エチル （１５０ ｍＬ） の中に取り、水 （３×１００ ｍＬ）、次いでブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、式 （ｈ） の化合物 （３．１ ｇ） が得られた。
【００９６】
Ｄ．　１０ ｍＬのエタノール中の式 （ｈ） の化合物 （１．１ ｇ、２．６ ｍｍｏｌ） の溶液に、５ ｍＬのエタノール中の塩化錫 （ＩＩ） 二水和物 （３．０ ｇ、１３ ｍｍｏｌ） の溶液を添加した。生ずる混合物を７５ ℃に加熱した。１時間後、この混合物を真空濃縮し、次いで酢酸エチル （１００ ｍＬ） の中に取り、水中の１Ｎ ＮａＯＨ （３×１００ ｍＬ） およびブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、式 （ｉ） の化合物 （０．７５ ｇ） が得られた。
【００９７】
Ｅ．　１０ ｍＬのＤＭＦ中の式 （ｉ） の化合物 （０．７ ｇ、１．７８ ｍｍｏｌ） の溶液に、ＢＯＣ−Ｇｌｙ−ＯＳＵ （０．５８ ｇ、２．１３ ｍｍｏｌ） を添加した。生ずる混合物を５０〜６０ ℃に加熱した。２４時間後、この混合物を真空濃縮し、次いで酢酸エチル （１５０ ｍＬ） の中に取り、水 （３×１００ ｍＬ）、次いでブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、式 （ｊ） の化合物 （０．７ ｇ） が得られた。
【００９８】
Ｆ．　１０ ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中の式 （ｊ） の化合物 （０．６ ｇ、１．１ ｍｍｏｌ） の溶液に、ＴＦＡ （５ ｍＬ） を添加した。生ずる混合物を周囲温度に加熱した。１時間で反応が完結した後、反応混合物を真空濃縮し、酢酸エチル （１００ ｍＬ） の中に取り、水中の１Ｎ ＮａＯＨ （３×１００ ｍＬ） およびブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、Ｎ−（５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−４− （４−フルオロベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル）グリシンアミド、式 （ｋ） の化合物 （０．４５ ｇ）が白色固体状物として得られた。ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） １０．２ （ｓ、１）、８．５ （ｓ、１）、７．３ （ｍ、２）、７．０ （ｍ、３）、６．８ （ｄ、１）、４．７ （ｍ、２）、３．４〜３．６ （ｍ、５）、３．０ （ｍ、１）、２．８ （ｍ、１）、２．６ （ｄ、１）、２．２ （ｍ、１）、２．０ （ｍ、２）、１．２〜１．４ （ｍ、３） ｐｐｍ。
【００９９】
実施例５．Ｎ’− （メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］ フェン−１−イル ｝グリシルグリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体の製造
Ａ．　５ ｍＬのジクロロメタン中のＮ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル｝グリシンアミド （１７５．５ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） （上記実施例４において製造した式 （ｋ） の化合物） 、Ｎ−（Ｓ−トリチル−２−メルカプト−１−イル）−Ｎ−（Ｓ−トリチル−５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル）グリシン （２９１．４ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） （これはＡ． Ｍａｈｍｏｏｄ ｅｔ ａｌ．， Ａ Ｎ２Ｓ２−Ｔｅｔｒａｄｅｎｔａｔｅ Ｃｈｅｌａｔｅ ｆｏｒ Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ： Ｔｅｃｈｎｅｔｕｍ， Ｒｈｅｎｉｕｍ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ （１９９９）， Ｖｏｌ． ７１に従い合成することができる）、およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド （４５．５ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） の攪拌した溶液に、３ ｍＬのジクロロメタン中のジシクロヘキシルカーボジイミド （８１．４ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） の溶液を添加した。生ずる懸濁液を一夜周囲温度において攪拌した。
【０１００】
濾過後、生ずる溶液を減圧下に蒸発させた。シリカゲルのクロマトグラフィー （溶離液：ジクロロメタン／メタノール、９８：２） 後、所望生成物、Ｎ− （Ｓ−トリチル−２−スルファニルエト−１−イル） −Ｎ− （Ｓ−トリチル−５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシルグリシンアミド （３４０ ｍｇ、７２．８％）が白色粉末として単離された。
元素分析：
2004513123.tif 000015
【０１０１】
Ｂ．　 上で製造した Ｎ− （Ｓ−トリチル−２−スルファニルエト−１−イル） −Ｎ− （Ｓ−トリチル−５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシルグリシンアミド　（１１６．８ ｍｇ、０．１ ｍｍｏｌ） を５ ｍＬのトリフルオロ酢酸中に溶解した。トリエチルシラン （４８ μｌ、０．３ ｍｍｏｌ） を添加した後、生ずる懸濁液を周囲温度において１５分間攪拌した。濾液を減圧下に蒸発させ、残留物を７ ｍＬのジエチルエーテルで粉砕した。
【０１０２】
沈殿を周囲温度において１時間攪拌し、濾過し、所望生成物、Ｎ− （メルカプト−１−イル） −Ｎ− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシルグリシンアミド、ビス−トリフルオロ酢酸塩 （８７ ｍｇ、９５．５％） が白色固体状物として得られた。
2004513123.tif 000016
【０１０３】
Ｃ．　酒石酸二ナトリウム （１ ｍｇ） および上で製造したＮ− （メルカプト−１−イル） −Ｎ− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシルグリシンアミド、ビス−トリフルオロ酢酸塩 （１００ μｇ） を５００ μｌのリン酸ナトリウム緩衝液 （０．１ Ｍ、ｐＨ＝８．５） 中に溶解した。３７ＭＢｑ９９ｍＴｃ−発生剤溶出液の添加後、５ μｌの塩化錫 （ＩＩ） 溶液を添加し、この混合物を１００ ℃に１０分間加熱した。ＨＰＬＣ分析は、所望生成物、Ｎ’− （メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］ フェン−１−イル ｝グリシルグリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体がＲＣＰ＞９０％で合成されたことを示す主要なピークを示した。
【０１０４】
実施例６．１− （２−｛２−［ （２Ｒ） −４− （４−フルオロベンジル） −２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝−５−ヨードフェニル） 尿素の製造
【化２０】
2004513123.tif 000017
Ａ．　１８ ｍＬの酢酸中のｐ−ヨードフェノール （２．２ ｇ、１０ ｍｍｏｌ） の溶液に、５ ｍＬの中のＨＮＯ３ （０．７ ｍＬ、７０％） の溶液を滴下した。生ずる混合物を周囲温度において攪拌した。３０分後、反応混合物を１００ ｍＬの氷水により希釈した。沈殿を収集し、１００ ｍＬの水で洗浄した。フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、１．２ ｇの２−ニトロ−４−ヨードフェノールが得られた。
【０１０５】
Ｂ．　１０ ｍＬのＤＭＦ中の式 （ｇ） の化合物 （０．３ ｇ、１．０５　ｍｍｏｌ） （ここにおいて製造した） の溶液に、Ｋ２ＣＯ３ （０．４５ ｇ、３．２ ｍｍｏｌ）、ＮａＩ （０．０１ ｇ） および２−ニト−４−ヨードロフェノール （０．２８ ｇ、１．０５ ｍｍｏｌ） を添加した。生ずる混合物を７０〜８０ ℃に加熱した。１時間後、この混合物を真空濃縮し、次いで酢酸エチル （１５０ ｍＬ） の中に取り、水 （３×１００ ｍＬ）、次いでブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、０．２８ ｇの式 （ｌ） の化合物が得られた。
【０１０６】
Ｃ．　５ ｍＬのエタノール中の式 （ｌ） の化合物 （０．２８ ｇ、０．５５ ｍｍｏｌ） の溶液に、５ ｍＬのエタノール中の塩化錫 （ＩＩ） 二水和物 （０．６１６ ｇ、２．７３ ｍｍｏｌ） の溶液を添加した。生ずる混合物を７５ ℃に加熱した。１時間後、この混合物を真空濃縮し、次いで酢酸エチル （１００ ｍＬ） の中に取り、水中の１Ｎ ＮａＯＨ （３×１００ ｍＬ） およびブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、式 （ｍ） の化合物 （０．２５ ｇ） が得られた。
【０１０７】
Ｄ．　３ ｍＬのＡｃＯＨ中の式 （ｍ） の化合物 （０．２５ ｇ、０．５２ ｍｍｏｌ） の溶液に、水 （６ ｍＬ） を添加した。生ずる混合物を周囲温度において１０分間攪拌し、次いで１ ｍＬの水中のＫＯＣＮ （０．０８５ ｇ、１．０ ｍｍｏｌ） の溶液をを滴下した。反応混合物を周囲温度において１０分間攪拌し、次いで５５ ℃に５分間加熱した。反応が完結した後、反応混合物を真空濃縮し、次いでＣＨ２Ｃｌ２ （５０ ｍＬ） の中に取り、水中の２Ｎ ＮａＯＨ （２×１００ ｍＬ） およびブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮すると、油状物が得られた。シリカのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製すると、式 （ｎ） の化合物 （０．１６ ｇ） が白色固体状物として得られた。ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） ９．０ （ｓ、１）、８．６ （ｓ、１）、７．３ （ｍ、２）、７．０ （ｔ、３）、６．６ （ｄ、１）、４．９ （ｓ、２）、４．７ （ｍ、２）、４．４ （ｍ、１）、３．４〜３．６　（ｍ、３）、３．０ （ｍ、１）、２．８ （ｍ、１）、２．６ （ｄ、１）、２．２ （ｍ、１）、２．０ （ｍ、２）、１．２〜１．４ （ｍ、３） ｐｐｍ。
【０１０８】
実施例７．１−（２−｛２−［（２Ｒ）−４−（４−フルオロベンジル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝−５−ヨード−１２３Ｉ−フェニル） 尿素の製造
Ａ．　３００ μｌのＤＭＦ中の上で製造した式 （ｎ） の化合物 （１ ｍｇ） および１０μｇの硫酸銅 （ＩＩ） の溶液に、１ ｍＣｉのヨウ化ナトリウム ［１２３Ｉ］ 溶液を添加した。生ずる反応混合物を一夜１００ ℃に加熱した。１ ｍＬの半飽和水性ＮａＨＣＯ３溶液を添加した後、生成物を２ ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を窒素ガス流中で蒸発乾固した。ＲＰ−カートリッジ ［溶出液：ＥｔＯＨ／水 （２：１）］ を使用して、所望生成物、１−（２−｛２−［（２Ｒ）−４−（４−フルオロベンジル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝−５−ヨード−１２３Ｉ−フェニル） 尿素を精製した。
【０１０９】
Ｂ． 前述したように同様な方法において、式 （Ｉ） の他の化合物を製造する。
実施例８．Ｎ’− （メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］ フェン−１−イル ｝グリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体の製造
Ａ．　５ ｍＬのジクロロメタン中の１５６．７ ｍｇ （０．４ ｍｍｏｌ） の５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］アニリン （式 （ｊ） の化合物に対応する） 、（２９１．４ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ）、Ｎ−（Ｓ−トリチル−２−メルカプト−１−イル）−Ｎ−（Ｓ−トリチル−５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル）グリシン （これはＡ． Ｍａｈｍｏｏｄ ｅｔ ａｌ．， Ａ Ｎ２Ｓ２−Ｔｅｔｒａｄｅｎｔａｔｅ Ｃｈｅｌａｔｅ ｆｏｒ Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ： Ｔｅｃｈｎｅｔｕｍ， Ｒｈｅｎｉｕｍ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ （１９９９）， Ｖｏｌ． ７１に従い合成することができる）、およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド （４５．５ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） の攪拌した溶液に、３ ｍＬのジクロロメタン中のジシクロヘキシルカーボジイミド （８１．４ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） の溶液を添加した。
【０１１０】
生ずる懸濁液を一夜周囲温度において攪拌した。濾過後、生ずる溶液を減圧下に蒸発させた。シリカゲルのクロマトグラフィー （溶離液：ジクロロメタン／メタノール、９８：２） 後、所望生成物、Ｎ’− （Ｓ−トリチル−２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （Ｓ−トリチル−５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシンアミド （３５２ ｍｇ、７９．２％）が白色粉末として単離された。
元素分析：
2004513123.tif 000018
【０１１１】
Ｂ．　 Ｎ’− （Ｓ−トリチル−２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （Ｓ−トリチル−５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシン （１１１．１ ｍｇ、０．１ ｍｍｏｌ） を５ ｍＬのトリフルオロ酢酸中に溶解した。トリエチルシラン （４８ μｌ、０．３ ｍｍｏｌ） を添加した後、生ずる懸濁液を周囲温度において１５分間攪拌した。濾液を減圧下に蒸発させ、残留物を７ ｍＬのジエチルエーテルで粉砕した。
【０１１２】
沈殿を周囲温度において１時間攪拌し、濾過し、所望生成物、Ｎ− （メルカプト−１−イル） −Ｎ− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシンアミド、ビス−トリフルオロ酢酸塩 （７５ ｍｇ、８７．８％） が白色固体状物として得られた。
2004513123.tif 000019
【０１１３】
Ｃ．　酒石酸二ナトリウム （１ ｍｇ） および上で製造したＮ− （２−メルカプト−１−イル） −Ｎ− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシンアミド、ビス−トリフルオロ酢酸塩 （１００ μｇ） を５００ μｌのリン酸ナトリウム緩衝液 （０．１ Ｍ、ｐＨ＝８．５） 中に溶解した。３７．５ＭＢｑ９９ｍＴｃ−発生剤溶出液の添加後、５ μｌの塩化錫 （ＩＩ） 溶液を添加し、この混合物を１００ ℃に１０分間加熱した。ＨＰＬＣ分析は、所望生成物、Ｎ’− （２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザ−２−オキソペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］ フェン−１−イル ｝グリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体がＲＣＰ＞９１％で合成されたことを示す主要なピークを示した。
【０１１４】
実施例９．Ｎ’− （２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］ フェン−１−イル ｝グリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体の製造
Ａ．　５ ｍＬのジクロロメタン中の５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］アニリン　（１５６．７ ｍｇ （０．４ ｍｍｏｌ） およびトリエチルアミン （４０．５ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） を３ ｍＬのジクロロメタン中の臭化α−ブロモアセチル （６３ ｍｇ、０．４ ｍｍｏｌ） の溶液をを滴下した。生ずる溶液を一夜周囲温度において攪拌した。
【０１１５】
溶媒を減圧下に蒸発させた。シリカゲルのクロマトグラフィー （溶離液：ジクロロメタン／メタノール、９９：１） 後、所望生成物、Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝−２−ブロモアセトアミド （１７５ ｍｇ、８５．３％） が白色粉末として単離された。
元素分析：
計算値：　Ｃ ５１．５３　Ｈ ４．７２　Ｎ ８．１９　Ｏ ５．７６
実測値：　Ｃ ５１．２３　Ｈ ４．９９　Ｎ ７．９２　Ｏ
【０１１６】
Ｂ．　１，４−ジオキサン （５ ｍＬ） 中のＮ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝−２−ブロモアセトアミド （１６５ ｍｇ、０．４２ ｍｍｏｌ） およびＮ，Ｎ−ビス−（Ｓ−（４−メトキシベンジル）−２−メルカプトエト−１−イル）エチレンジアミン（８４１．３ ｍｇ、２ ｍｍｏｌ） （Ｚ． Ｐ． Ｚｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ （１９９９）， Ｖｏｌ． １０， ｐ． １５９に従い合成した） の攪拌した溶液を還流下に２４時間加熱した。残留物を１５ ｍＬのジクロロメタン中に溶解し、飽和水性炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。ＭｇＳＯ４で乾燥した後、溶媒を減圧下に蒸発させた。
【０１１７】
シリカゲルのクロマトグラフィー （溶離液：ジクロロメタン／メタノール、９９：１） 後、所望生成物、Ｎ−（Ｓ−（４−メトキシベンジル）−２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ− （Ｓ−（４’−メトキシベンジル）−５−メルカプト−３−アザペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシン （１５４ ｍｇ、４３％）が白色固体状物として単離された。
2004513123.tif 000020
【０１１８】
Ｃ．　Ｎ−（Ｓ−（４−メトキシベンジル）−２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ− （Ｓ−（４’−メトキシベンジル）−５−メルカプト−３−アザペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２−（２Ｒ）−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシンアミド （１４０ ｍｇ、０．１６４ ｍｍｏｌ） を０ ℃において５ ｍＬのトリフルオロ酢酸中に溶解した。Ｈｇ（ＯＡｃ）２ （１０４．５ ｍｇ、０．３２８ ｍｍｏｌ） を添加した後、生ずる混合物を０ ℃において３０分間攪拌し、Ｈ２Ｓで１５分間飽和させた。
【０１１９】
濾過後、溶媒を減圧下に蒸発させた。生ずる褐色油状物を３ ｍＬのジエチルエーテルで粉砕した。濾過後、所望生成物、Ｎ’− （２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシンアミド、トリス−トリフルオロ酢酸塩（１２６　ｍｇ、８０．５％） が白色粉末として単離された。
2004513123.tif 000021
【０１２０】
Ｄ．　酒石酸二ナトリウム （１ ｍｇ） および上で製造したＮ’− （２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］フェン−１−イル ｝グリシンアミド、トリス−トリフルオロ酢酸塩 （１００ μｇ） を５００ μｌのリン酸ナトリウム緩衝液 （０．１ Ｍ、ｐＨ＝８．５） 中に溶解した。
【０１２１】
３７．５ＭＢｑ９９ｍＴｃ−発生剤溶出液の添加後、５ μｌの塩化錫 （ＩＩ） 溶液を添加し、この混合物を１００ ℃に１０分間加熱した。ＨＰＬＣ分析は、所望生成物、Ｎ’− （２−メルカプトエト−１−イル） −Ｎ’− （５−メルカプト−３−アザペント−１−イル） −Ｎ−｛５−クロロ−２−［２−［４− （４−フルオロベンジル） −２− （２Ｒ） −メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ］ フェン−１−イル ｝グリシンアミド、テクネチウム−９９ｍ−錯体がＲＣＰ＞９１％で合成されたことを示す主要なピークを示した。
【０１２２】
実施例１０．ヒト脳におけるＣＣＲ１の免疫組織学的局在化
材料および方法
アルツハイマー病および対照の脳におけるケモカインレセプターＣＣＲ１の免疫組織学的染色のために、死亡から１２時間以内の剖検において得られた脳からの組織試料の第１グループを使用した。前頭皮質および海馬からのパラフィンに埋め込んだ、厚さ５μｍの、非染色切片をすべての免疫組織学的および組織化学的染色のために使用した。
【０１２３】
スライドをキシレン中で前もってパラフィン処理し、０．００５％のトリトンＸ−１００を含有するリン酸緩衝生理食塩水 （ＰＢＳ−Ｔ） に対して水和した。光学顕微鏡検査 （色原体としてＤＡＢを使用する） のために、スライドをメタノール中の０．０１％Ｈ２Ｏ２と３０分間インキュベートすることによって、内因的ペルオキシダーゼ活性をブロックした。ＰＢＳ中の１０％正常ヤギ血清 （ＮＧＳ） 中で３０分間ブロックすることによって、非特異的結合を減少させた。
【０１２４】
一次抗体［ウサギ抗ＣＣＲ１、（Ｎ−末端ペプチド）；マウス抗ニューロフィラメント；マウス抗ＧＦＡＰ；マウス抗Ｔａｕ （ＡＴ８）；マウス抗ＣＤ６８ （クローンＫＰ１）；マウス抗β−アミロイド （Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ、＃１ ３８１ ４３１）；ウサギ抗ＣＣＲ８、（Ｎ−末端ペプチド）］をＰＢＳ−Ｔ中で希釈し、スライドを室温において一夜インキュベートした。Ｂｉｏｇｅｎｅｘ ＡＢＣＴＭキットを使用して、染色を完結した。すべての洗浄において、ＰＢＳ−Ｔを使用した。ＤＡＢ反応が完結したとき、スライドをギルのヘマトキシリン （Ｇｉｌｌ’ｓ Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ） で薄く対比染色し、脱水し、パーマウント （Ｐｅｒｍｏｕｎｔ） のカバーガラスをかぶせた。カバーガラスをかぶせる前に、クロモーゲンがＴｒｕｅ ＢｌｕｅＴＭである以外同一方法を使用して、いくつかのスライドをＡβペプチドに対する抗体で再染色した。
【０１２５】
免疫蛍光二重標識化研究のために、スライドを脱パラフィンし、１０％ＮＧＳでブロックし、両方の一次抗体のカクテルと一夜インキュベートした。スライドをＰＢＳ−Ｔで洗浄し、次いで各々１／５０希釈のヤギ二次抗体のカクテルとインキュベートした。内因的 （黄緑色） 組織の蛍光からの混乱を回避するために、二次抗体をＣｙ３ （εｍａｘ＝５６５ ｎｍ；ヤギ抗マウス、Ａｍｅｒｓｈａｍ）またはＣｙ５ （εｍａｘ＝７００ ｎｍ；ヤギ抗ウサギ、Ａｍｅｒｓｈａｍ） に対して複合化した。スライドをクリプトン−アルゴンのレーザーを使用する共焦点顕微鏡 （２０１０型、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｙｎａｍｉｃｓ、カリフォルニア州サニーベイル） で見た。
【０１２６】
引き続いて、認識的に正常の中年過ぎの人からの１０症例および臨床的痴呆等級 （ＣＤＲ） について評価したアルツハイマー病の患者からの４０症例から構成された脳組織の第２グループを獲得し、ＣＣＲ１の免疫組織化学的発現について評価した。Ａβ１−４２に対して特異的なモノクローナル抗体 （クローン６Ｄ５） （散在性、初期アミロイド沈着ならびにいっそう成熟した神経炎性プラークについてのマーカー） をＵｒｓｕｌａ Ｍｏｅｎｎｉｎｇ博士から入手した以外前述したような他のマーカーについて、試料を獲得した。これらの抗体をＶｅｃｔｏｒ ＲｅｄＴＭ （Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｓ） で可視化した。また、Ｍｏｅｎｎｉｎｇ博士により、Ａβ１−４０ （クローン＃１３Ｅ９） に対して特異的なモノクローナル抗体、すなわち、後期段階の疾患において見出されるプラークについてのマーカーが提供され、これをＴｒｕｅ ＢｌｕｅＴＭで可視化した。
【０１２７】
結果
脳の両方の組において、アルツハイマー病の病理学を有する領域は特徴的な染色パターンを示した。海馬構成体および脳皮質の両方の場合において、ＣＣＲ１免疫反応性は神経炎 （すなわち、老人性） プラークに関連して見出された。免疫染色された構造は卵形に丸くなり、通常細胞本体に関連しなかった。それらはサイズが変化し、点状粒状物質で充填されているように見えた。これらの構造は老人性プラーク中のアミロイド沈着付近に「コロナ」を形成することが見出されたが、Ａβそれ自体と区別された （第１図〜第４図）。
【０１２８】
第１図の上部パネルは、ＣＣＲ１陽性プロセスのコロナを有する神経炎性プラークを示す。アルツハイマー病の症例におけるいくつかのＣＡ１およびＣＡ３ニューロンの神経細胞本体は、時にはＣＣＲ１抗体により染色された。第１図における下部パネルはこの結合を図解する。この染色は内神経原繊維のもつれ （ＮＦＴ） または顆粒空胞体と区別されたが、それは普通にこれらの変性的変化を有するニューロンの体質の中に存在した。
【０１２９】
ＣＣＲ１レセプタータンパク質の細胞外 （Ｎ−末端） 領域からの１６マーのポリペプチドと抗体を前インキュベートすると、第２図に図解するように、すべての組織の染色は完全にブロックされた。特に、第２図中の上部の画像はポリペプチドと前インキュベートしたＣＣＲ１抗体によるアルツハイマー病の脳における染色の欠如を示すが、第２図中の下部の画像はインキュベートしなかった抗体で染色した姉妹切片における多数のＣＣＲ１陽性構造を示す。
【０１３０】
二重標識化研究において、第４図に示すように、ほとんどすべてのＣＣＲ１陽性構造はＡβ１−４２を含有する神経炎性プラークに関連することが示された。拡散性プラーク中のＡβ１−４２ （第５図） は、典型的にはＣＣＲ１に関連せず、また任意の有意な細胞の応答に関連しなかった。アルツハイマー病のいっそう進行した症例において、多数のより多くのＡβ１−４０陽性プラークが見られた。これらのすべてではなく、いくつかは第３図に示すようにＣＣＲ１染色に関連した。いくつかの症例において、ＣＣＲ１陽性プラークはＡβ１−４０染色を完全に含有しなかった。
【０１３１】
有意なニューロンの喪失およびグリオーシスが見られた、重度のアルツハイマー病の症例において、海馬台および内嗅野中の反応性神経膠星状細胞はまたＣＣＲ１陽性であった。それほど重度でない症例において、ＣＣＲ１陽性反応性神経膠星状細胞は異常であった。
二重標識化された切片の共焦点顕微鏡検査において、ＣＣＲ１免疫反応性はニューロフィラメントプロセスと共局在化された。マクロファージ／小グリア細胞マーカーＣＤ６８はＣＣＲ１染色に関連せず、また異常にリン酸化されたタウタンパク質に対するＡＴ８抗体に関連しなかった。光学顕微鏡検査の研究から期待されるように、ＣＣＲ１免疫反応性は大グリア細胞症の領域においてＧＦＡＰと共局在化した。
【０１３２】
アルツハイマー病の脳組織および、染色法のための陽性の内部の対照として働く、対照脳組織の両方において、脳血管内に存在する白血球は強くＣＣＲ１陽性であった。第５図において、２つの脈管内細胞のＣＣＲ１陽性染色が認められる （矢印）。また、いくつかのＣＣＲ１陽性物質が星印において見られるが、一般に、拡散性プラークはＣＣＲ１に関連しない。
第２の研究 （ここで患者はＣＤＲスコアにより既知の臨床的カテゴリーにグループ化した） からの海馬組織を使用して、海馬におけるＣＣＲ１陽性プラーク様構造の数の定量的評価を行った。臨床的 （ＣＤＲ） 状態に関して手探りの条件下に、個々の切片の組織学的評価を実施した。不偏コンピュータ化法を使用して、体積の解析を実施した。
【０１３３】
第３図は、ＣＣＲ１陽性ジストロフィー性神経突起 （褐色の染色） とＡβ１−４０を含有する神経炎性プラーク （青色の染色） との間の組織学的関係を証明する。第３図において、ＣＣＲ１陽性プロセスはアミロイドと区別されることが認められる。Ａβ１−４０を含有するプラーク、ならびにＣＣＲ１陽性神経突起のクラスターは離散し、容易に計数された。海馬のスライドをＣＣＲ１陽性コロナの数、Ａβ１−４０陽性プラークの数、および両方のマーカーを含有するプラークの数について評価した。内嗅野を含む、全海馬形成内の領域 （例えば、ＣＡ３、ＣＡ１、および海馬台） により構造を計数し、次いで合計した。値は海馬蛍光顕微鏡の厚さ５μｍの断面で表した、海馬中の構造物の数の相対的推定値である。第６図は、ＣＤＲスコアによるＣＣＲ１とＡβ１−４０との間の関係を示す。
【０１３４】
Ａβ１−４２はいっそう豊富であり、かつ容易に計数できない「散在性」プラークを形成するので、Ａβ１−４２の定量は異なる技術を必要した （第５図）。これらのスライドについて、コンピューター援用法 （Ｃ．Ａ．Ｓ．Ｔ．立体学） を使用して、Ａβ１−４２により占有される内嗅野の面積を推定した。この面積をスライド上の皮質の総面積の百分率として表した。神経炎性プラークおよび拡散性プラークにより占有される領域を別々に計数した。コンピューター駆動顕微鏡段階は、組織切片のランダム （不偏） 評価を保証した。Ａβ１−４２により占有される内嗅野 （拡散性および神経炎性の両方） の容量％を、第７図において内嗅野の姉妹切片中のＣＣＲ１陽性プラークの数と比較する。
【０１３５】
第６図が示すように、海馬中のＣＣＲ１陽性ジストロフィー性神経突起の平均数はアルツハイマー病におけるＣＤＲスコアの関数として増加する。初期のアルツハイマー病中の陽性構造の数 （ＣＤＲ ０．５） は、対照 （ＣＤＲ ０） より上に増加する。対照とアルツハイマー病のグループとの間の差はグループＣＤＲ ２まで統計的に有意とならなかったが、これらの発現パターンはＣＣＲ１がアルツハイマー病の非常に初期の段階においてさえジストロフィー性ニューロンプロセスにおいてアップレギュレートされることを支持する。Ａβ１−４０プラークの数はアルツハイマー病において後期まで上昇しないことが認められる。こうして、脳組織中のＣＣＲ１発現はアルツハイマー病の比較的初期のインジケーターであると考えることができる。
【０１３６】
内嗅野中のＣＣＲ１陽性プラークの数とＡβ１−４２の量との間の相関は第７図に示されている。一般に、内嗅野におけるＣＣＲ１レベルはアルツハイマー病の状態が増加するにつれて上昇する；しかしながら、サンプリングした面積は第６図においてサンプリングした面積よりも非常に小さい。しかしながら、Ａβ１−４２レベルはアルツハイマー病において初期に上昇することが認められる。
【０１３７】
実施例１１．１４Ｃ標識化トレーサーを使用する脳有効性の評価
１−（５−クロロ−２−｛２−［（２Ｒ）−４−（４−フルオロベンジル）−２−メチルピペラジン−１−イル］−２−オキソエトキシ｝フェニル） 尿素の１４Ｃアナローグを調製し、脳有効性の薬物速度論の研究のために使用した。３３４，０００ ｄｐｍ／投与量を含有するアナローグを３６ ｍｇ／ｋｇで、カニューレ挿入頸静脈を通してマウスに静脈内注入した。注入後１、１５、３０、１２０、および１４４０分にマウス （４匹のグループ中の） をＣＯ２吸入により殺し、次いで全血を取出すために心臓内穿刺した。次いで胸部を開き、心臓を通してマウスにリン酸緩衝生理食塩水を５分間潅流して、残留する放射性薬剤を血液区画から除去した。
【０１３８】
次いで脳を取出し、秤量し、脳皮質の２つの別々の片中の放射能の量のためにサンプリングした。２つの試料における組織１ ｍｇ当たりの放射能レベルを平均し、第８図に図解するように、データを総脳重量に対して正規化した。棒は標準誤差を表す （ｎ＝４マウス／時点）。特に、第８図中のグラフが示すように、全マウス脳中の１４Ｃアナローグについて崩壊の総数／分 （ＤＰＭ） は注入後２時間までに無視できるレベルに減少する。１分の時点において、計算により、注入した投与量の平均約３％が全マウス脳 （平均重量４５０ ｇ） の中に見出されることが示される。
【０１３９】
また、マウスから取出した全血から調製した血漿試料を放射能含量について分析した。等しい体積の脳および血漿中の放射能の量を、第９図に図解するように、注入した投与量の百分率として経時的に比較した。血漿１ ｍｌ当たりの見出された注入投与量 （ｉ．ｄ．） の％は経時的に減少して、２時間後に無視できるレベルに到達する。脳レベルに対する比較のために、ＤＰＭ／脳の総数を脳重量に対して正規化し、脳組織１ ｇ当たりのｉ．ｄ．の百分率として表す。グラフに示したマウス脳の１ ｇ中のｉ．ｄ．の％は現実の値を約２倍だけ過大評価するので、マウス脳は平均約４５０ ｍｇであることが認められる。脳中のアナローグのレベルは血漿レベルと共同するようになることが明らかである。アナローグは親油性であるが、正常のマウスの脳はＣＣＲ１アンタゴニストのための蓄積部位のように思われない。
【０１４０】
実施例１２．他の神経変性疾患におけるＣＣＲ１発現
材料および方法
７つの異なる神経変性疾患 （アルツハイマー病以外） からの合計２９症例からの剖検脳組織の組織学的試料を獲得し、ＣＣＲ１含量について研究した。上の実施例１０に記載されているように、スライドをＣＣＲ１に対する抗体で免疫染色し、特異的神経変性溶解に関して手探りの条件下に概観した。引き続いて、姉妹切片をＣＣＣＲ１に対する抗体 （色原体としてＤＡＢ） およびＡβ１−４２に対する抗体 （色原体ンとしてＶｅｃｔｏｒ ＲｅｄＴＭ） 二重標識化した。検査した疾患を単位列挙する：
【０１４１】
2004513123.tif 000022
染色したスライドをＣＣＲ１およびＡβ１−４２含量について組織学的目盛りを使用して等級づけ、ここで０は染色の非存在であり、０．５は稀な発現を示し、そして等級１〜４は発現の増加するレベルを示し、４は高度に豊富であることを示す。
【０１４２】
結果
パーキンソン病のすべての６症例およびＧｕａｍのパーキンソン症候群の痴呆のすべての症例はＣＣＲ１について陰性であった。ＣＣＲ１陽性プラーク様構造物は、アルツハイマー病において見出されるものに類似し、コンゴフィリック血管損傷のすべての４症例、ＤＬＢＤの４症例のうちの３症例、ＰＳＰの４症例のうちの２症例、およびＭＩＤおよびピック病の両方の４症例のうちの１症例において観測された。
【０１４３】
二重標識化研究において、アルツハイマー病の純粋な症例において見出される （実施例１０） ように、これらのＣＣＲ１陽性プラーク様構造物がＡβ１−４２に関連するという仮定が確認された。第１０図は、パーキンソン病 （脳中のＣＣＲ１について陰性であった） を除外した、すべての疾患についてグラフの形で病理学的評価の結果を示す。基本的には、Ａβ１−４２陽性神経炎性プラークがまた存在しないかぎり、ＣＣＲ１発現は脳組織試料の中に決して見出されなかった。
【０１４４】
コードが破壊された後、ＣＣＲ１発現を示すピック病の１症例をアルツハイマー病の診断を保持することが発見された。また、ＣＣＲ１を有する２つのＰＳＰ症例は同時のアルツハイマー病とともに診断された。コンゴフィリック血管損傷およびＤＬＢＤは、アルツハイマー病病理学に精密に関連する疾患である。したがって、それらはまたＡβ１−４２に関連して高いレベルのＣＣＲ１発現を有するであろうことは驚くべきことではない。中年過ぎの個体群において、アルツハイマー病の病理学は他の疾患のプロセスをオーバーレイする症例がしばしば存在する。
【０１４５】
これはＭＩＤの４症例のうちの１症例において見出された。これらの結果が示唆するように、脳中に存在することがある他の同時の病理学的プロセスを無視して、ＣＣＲ１はアルツハイマー病の病理学 （特に、Ａβ１−４２陽性神経炎性プラーク） に精密に関連するマーカーである。それ自体、それはアルツハイマー病の病理学に対して高度に特異的であるようであり、したがって疾患の進行の診断の代理マーカーとして有用であることができる。
【０１４６】
本発明を特定の態様を参照して記載してきたが、本発明の範囲および精神から逸脱しないで、種々の変化が可能であり、かつ評価を置換することができることを理解すべきである。さらに、特定の状況、物質、組成物、プロセス、プロセスの１または２以上の工程、本発明の目的、精神および範囲に適合するように、多数の変更を行うことができる。すべてのこのような変更は添付された特許請求の範囲内に入ることを意図する。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、アルツハイマー病の脳組織におけるＣＣＲ１の発現を示す。
【図２】
図２は、アルツハイマー病の脳組織におけるＣＣＲ１の抗体特異性を示す。
【図３】
図３は、ＣＣＲ１−Ａβ１−４０二重標識化組織切片を示す。
【図４】
図４は、ＣＣＲ１およびＡβ１−４２について二重標識化精巣上体神経炎プラークを示す。
【図５】
図５は、アルツハイマー病の脳における拡散性Ａβ１−４２の染色を示す。
【図６】
図６は、ＣＤＲスコアによるＣＣＲ１とＡβ１−４０との間の関係を示すグラフである。
【図７】
図７は、ＣＤＲスコアによるＣＣＲ１とＡβ１−４２との間の関係を示すグラフである。
【図８】
図８は、全脳放射能の経時的減少を証明するグラフである。
【図９】
図９は、脳および血漿の中に注入された投与量の百分率を示すグラフである。
【図１０】
図１０は、他の神経変性疾患におけるＣＣＲ１発現を示すグラフである。
【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
2004513123.tif 000094
2004513123.tif 000095
2004513123.tif 000096