(57)【要約】本発明はペプチド塩を含有する製薬製剤、その製造および使用に関する。本発明は特に長く持続する効果を有する、哺乳動物に非経口的に投与するためのセトロレリックスエンボン酸塩のようなＬＨＲＨアゴニストまたはアンタゴニストのわずかに溶解する塩を含有する製薬製剤に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペプチド塩の製造方法において、塩基性ペプチドの酸付加塩（出発ペプチド塩）（１）を、適当な希釈剤の存在で、混合した層状イオン交換体または酸性イオン交換体および塩基性イオン交換体の混合物と反応させ、遊離塩基性ペプチドを形成し、引き続きイオン交換体を分離し、その後遊離塩基性ペプチドを無機酸または有機酸と反応させ、所望のペプチドの酸付加塩（最終ペプチド塩）（２）を形成し、引き続き希釈剤を除去することを特徴とするペプチド塩の製造方法。
【請求項２】
出発ペプチド塩として、セトロレリックス、テベレリックス、アバレリックス、ガニレリックス、アザリンＢアンチド、Ａ−７５９９８、デチレリックス、ラモレリックス、ＲＳ−６８４３９を使用する請求項１記載の方法。
【請求項３】
酸がエンボン酸、ステアリン酸またはサリチル酸である請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
セトロレリックスとエンボン酸のモル比が２：１である請求項１から３までのいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
希釈剤を凍結乾燥により除去する請求項１から４までのいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
請求項１から５までのいずれか１項記載の方法により得られるペプチド塩。
【請求項７】
請求項５記載の方法により得られる凍結乾燥したペプチド塩。
【請求項８】
製薬的賦形剤、担持物質および／または充填剤と一緒に請求項６または７記載のペプチド塩を含有する製薬製剤。
【請求項９】
希釈剤を除去する前に、製薬的賦形剤、担持物質および／または充填剤を全部または一部分添加することを特徴とする請求項８記載の製薬製剤の製造方法。
【請求項１０】
哺乳動物に非経口投与する薬剤を製造するための請求項１から５までのいずれか１項記載の方法により得られるペプチド塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明はペプチド塩、特にわずかに溶解するペプチド塩の新規製造方法および薬剤を製造するためのその使用に関する。本発明は更に本発明により製造される少なくとも１種のペプチド塩を含有する製薬製剤およびその製造方法に関する。
【０００２】
国際特許ＰＣＴ／ＥＰ９４／０３９０４号には酸性塩の水溶液と塩基性ペプチドの酢酸溶液とを反応させ、わずかに溶解するペプチドの酸付加塩を沈殿することによるわずかに溶解するペプチドの製造方法が記載されている。例えばＬＨＲＨアンタゴニスト、セトロレリックスエンボン酸塩（ｃｅｔｒｏｒｅｌｉｘ　ｅｍｂｏｎａｔｅ）の製造が記載されている。
【０００３】
本発明は、塩基性ペプチドの酸付加塩（出発ペプチド塩）（１）を、適当な希釈剤の存在で、混合した層状イオン交換体または酸性イオン交換体および塩基性イオン交換体の混合物と反応させ、遊離塩基性ペプチドを形成し、引き続きイオン交換体を分離し、その後遊離塩基性ペプチドを無機酸または有機酸と反応させ、所望のペプチドの酸付加塩（最終ペプチド塩）（２）を形成し、引き続き希釈剤を除去することを特徴とするペプチド塩の新規製造方法に関する。
【０００４】
ここで塩基性ペプチドの表現は、アルギニン、ピリジルアラニンまたはリシンのような塩基性アミノ酸またはペプチドのＮ末端または単に少なくとも１個の塩基性基を含有するポリ（アミノ酸）を意味する。
【０００５】
有利なペプチドはＬＨＲＨアンタゴニストアンチド（ａｎｔｉｄｅ）、Ａ−７５９９８、ガニレリックス（ｇａｎｉｒｅｌｉｘ）、ＮａＩ−Ｇｌｕアンタゴニスト、セトロレリックス（ｃｅｔｒｏｒｅｌｉｘ）、テベレリックス（ｔｅｖｅｒｅｌｉｘ）（アンタレリックス（ａｎｔａｒｅｌｉｘ、登録商標））および米国特許第５９４２４９３号およびドイツ特許第１９９１１７７１．３号に記載のアンタゴニストであり、これらの成分は引用により本発明に含まれる。他のペプチドはアバレリックス（ａｂａｒｅｌｉｘ）、アザリン（ａｚａｌｉｎｅ）Ｂ、デチレリックス（ｄｅｔｉｒｅｌｉｘ）、ラモレリックス（ｒａｍｏｒｅｌｉｘ）（Ｓｔｏｅｃｋｅｍａｎｎ　ａｎｄ　Ｓａｎｄｏｗ、Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９９３、１１９、４５７）およびＲＳ−６８４３９である。前記ペプチドの構造は、Ｂｅｈｒｅ等、ＧｎＲＨ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ、ａｎ　ｏｖｅｒｖｉｅｗ、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　２ｎｄ　Ｗｏｒｌｄ　Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　ｏｎ　Ｏｖｕｌａｔｉｏｎ　Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ、Ｔｈｅ　Ｐａｒｔｈｅｎｏｎ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｇｒｏｕｐ　Ｉｎｔ．Ｋｕｔｓｃｈｅｒ等、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．１９９７、１０９、２２４０に記載されている。
【０００６】
出発物質として使用されるペプチドの酸付加塩は、有利には酢酸塩、塩酸塩、硫酸塩のような容易に溶解する塩である。
【０００７】
本発明の方法により、出発ペプチド塩を希釈剤に全部または部分的に溶解するかまたはこれに懸濁させる。引き続き希釈剤を添加する。溶剤と希釈剤は同じでも異なっていてもよい。可能な溶剤および希釈剤は、例えば水、エタノール、メタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、アセトン、ジメチルケトン、メチルエチルケトン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、アセトニトリル、ペンタン、ヘキサン、ヘプタンおよびこれらの混合物である。エタノール、イソプロパノールまたはアセトンが有利である。１〜６０％、有利には５〜５０％の含水量が同様に有利である。
【０００８】
混合した層状イオン交換体、すなわち酸性イオン交換体と塩基性イオン交換体の混合物を出発ペプチド塩の溶液または懸濁液に添加する。可能なイオン交換体は、例えばアンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ、登録商標）である。
【０００９】
イオン交換体の量はペプチド１個当たりの塩基性基の数に依存する。この量は一定のｐＨ値が得られるまでの添加により決定する。例えばセトロレリックス１ｇに対して１０ｇのアンバーライトＭＢ−３が必要である。
【００１０】
塩基の製造中に塩基溶液のｐＨ値を、特に塩基反応するアミノ酸を有するペプチド塩の場合は、使用される活性化合物塩に依存して、しかし特にＬＨＲＨアンタゴニスト（例えばセトロレリックス、Ｄ−６３１５３、アバレリックス、ガニレリックス、ラモレリックス、これらは例えば酢酸塩として存在してもよい）の塩の場合は、使用される活性化合物に依存して７．５〜１３に調節する。
【００１１】
ペプチドの分解を避けるために、温度は２５〜３０℃を上回るべきでない。遊離塩基を製造する反応はセトロレリックス酢酸塩から出発する場合は、通常は数分以内、例えば２０分以内で行う。セトロレリックスエンボン酸塩から出発する場合はこれより長く、例えば約１時間であってもよい。一定のｐＨ値に達した後で分解生成物が、例えば溶液の塩基性により形成されることがあるので反応を停止すべきである。
【００１２】
引き続き反応混合物からイオン交換体を除去する。除去はスクリーニング、濾過、遠心分離またはカラム濾過により行うことができる。
【００１３】
不安定である遊離ペプチド塩基の透明から不透明までの溶液をできるだけ速く酸と反応させ、所望の酸付加塩を形成すべきである。酸を固体の物質としてまたは溶液でまたは懸濁液として添加することができる。厳密に同じ方法で酸溶液への遊離ペプチド塩基の溶解を行うことができる。
【００１４】
反応時間は数分から数時間までの範囲にある。例えばセトロレリックスエンボン酸塩の形成のためには反応時間は１．５時間である。
【００１５】
通常は透明である反応溶液を、引き続き滅菌濾過する。引き続き溶剤を除去し、純粋なペプチド塩を取得することができる。選択的に溶剤を除去する前に、溶液に賦形剤、添加剤または担持物質を添加することができる。賦形剤の添加は滅菌濾過の前に固体としてまたは滅菌濾過後に滅菌濾過した溶液として行うことができる。
【００１６】
適当な賦形剤は、例えばマンニトール、ソルビトール、キシリトール、可溶性澱粉である。
【００１７】
本発明により、適当な酸を添加することにより以下の塩を製造することができる。酢酸塩、アジピン酸塩、アスコルビン酸塩、アルギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、臭化物、炭酸塩、クエン酸塩、塩化物、ジブチル燐酸塩、クエン酸二水素塩、ジオクチル燐酸塩、ジヘキサデシル燐酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、グルタミン酸塩、炭酸水素塩、酒石酸水素塩、塩酸塩、クエン酸水素塩、ヨウ化物、乳酸塩、α−リポ酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、パモア酸塩（エンボン酸塩）、パルミチン酸塩、燐酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、タンニン酸塩、オレイン酸塩、オクチル燐酸塩。
【００１８】
本発明を以下の実施例により説明する。本発明は実施例に限定されない。
【００１９】
例１
Ｄ−２０７６１　セトロレリックスエンボン酸塩（パモア酸塩）４６．４７ｇを水１１９３ｇに少量ずつ添加し、撹拌しながら溶解した（＝溶液１）。引き続き溶液１を９６％エタノール３２６１ｇを加えて撹拌しながら希釈した（＝溶液２）。希釈後、溶液２をガラス繊維プレフィルターを通過して濾過し、濾液をアンバーライトＭＢ−３（強酸性カチオン交換体とアニオン交換体から形成される混合した層状イオン交換体）３９０ｇと撹拌しながら混合した（＝混合物１）。マンニトール３１６．８ｇを水１２６７ｇに撹拌しながら溶解した（＝溶液３）。１５分間撹拌後、混合物１の上澄み溶液のｐＨ値を測定し、更に５分間撹拌後、再びｐＨ値を測定した。引き続き溶液を、１２．５のｐＨ値に達した後に細かい網のふるいを通過してアンバーライトＭＢ−３から分離した（＝溶液４）。
【００２０】
溶液４　４１６２ｇをエンボン酸５．３４ｇと撹拌しながら混合した。この混合物を更に１．５時間激しく撹拌し、いくらか濁った溶液を引き続きガラス繊維プレフィルターを通過して濾過した。この溶液で８．４のｐＨ値を測定した（＝溶液５）。測定したｐＨ値は粘性電解液を使用してすりガラス電極で測定した。ｐＨ値は相対的な値としてのみ評価され、それというのも測定した溶液または懸濁液はエタノールを含有し、従って明らかにより高い値を示すからである。
【００２１】
溶液５　３３３３ｇを、室温に調節した反応装置中で滅菌濾過し、溶液３　５２８ｇを滅菌濾過し、溶液５が得られ、これを撹拌しながら室温に調節した（＝溶液６）。
【００２２】
溶液６を４０℃に加温し、引き続きエタノール／水混合物を真空で蒸留して１９３１ｇまで分離した（＝懸濁液１）。セトロレリックスエンボン酸塩懸濁液１を室温に冷却し、撹拌しながら滅菌した注入用水を加えて３０００ｇに希釈した（＝懸濁液２）。室温に調節した、使用できる懸濁液２それぞれ３．０ｇを引き続き１０ｍｌ注入びんに分配し、凍結乾燥ストッパーを備え、凍結乾燥装置に移した。注入びんを凍結乾燥装置中でプレート温度−４０℃で凍結した。プレート温度を−４０℃から２０℃に上昇して乾燥工程を使用して乾燥した。凍結乾燥装置に滅菌濾過した窒素を充填し、装置中の注入びんを密閉し、引き続き波形のキャップを装着し、回転した。
【００２３】
凍結乾燥後、密閉した注入びんをγ線により１２ｋＧｙ（ｍｉｎ）から１５ｋＧｙで滅菌した。これは任意である。
【００２４】
注入びん１１４０．０（７）ｍｇはセトロレリックス３０ｍｇに相当するセトロレリックスエンボン酸塩３４．０７ｍｇおよびマンニトール１０６ｍｇを含有する。再生のために注入用水２ｍｌを使用する。得られる懸濁液は筋肉内投与または皮下投与により投与できる。
【００２５】
生物学的作用
例１により得られたセトロレリックスエンボン酸塩（２：１）、凍結乾燥物（３０ｍｇ）を注入用水２ｍｌ中に再懸濁させ、引き続き非経口的に、有利には皮下投与または筋肉内投与できる。
【００２６】
皮下投与の場合に、セトロレリックスエンボン酸塩（２：１）に関して約３０〜５０％のバイオアベイラビリティ（静脈内投与したセトロレリクス酢酸塩＝１００％）が見い出される。セトロレリックスエンボン酸塩（２：１）凍結乾燥物の特別の利点は、患者にバースト効果が見られないかまたは少ないことである。効果の継続時間は用量に依存し、３０〜１５０ｍｇの用量で２〜８週間またはそれ以上である。本発明によるセトロレリックスエンボン酸塩（２：１）凍結乾燥物はすでにヒトで、臨床段階Ｉで検査された。
【００２７】
図１はヒトでの例１によるセトロレリックスエンボン酸塩（２：１）凍結乾燥物６０ｍｇの筋肉内投与から開始する時間の関数としてのセトロレリックス血漿濃度の経過を示す。バースト効果（約１００ｎｇ／ｍｌ）は検出されない。効果の継続時間は７００時間より長い。投与後１５０時間から約２ｎｇ／ｍｌの一定の血漿水準である。バイオアベイラビリティは約４０％であった。
【００２８】
本発明によるペプチド塩の適用領域は、例えばＢＰＨ、筋腫および子宮内膜症である。
【図面の簡単な説明】
【図１】
ヒトでの例１によるセトロレリックスエンボン酸塩（２：１）凍結乾燥物６０ｍｇの筋肉内投与から開始する時間の関数としてのセトロレリックス血漿濃度の経過を示すグラフである。
【図１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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