(57)【要約】本発明は、1種以上の消毒薬と抗生物質の組み合わせを含有する組成物に関する。本発明は、少なくとも部分的には、そのような組み合わせが抗生物質耐性生物が形成されるのを防止する傾向にあるという発見に基づいている。本発明の好ましい非限定的な実施態様においては、上記抗生物質はミノサイクリンであり、消毒薬はクロルヘキシジン化合物、トリクロサン又は塩化ベンザルコニウムである。特別の実施態様においては、銀塩又はビスマス塩を加える。本発明の特定の非限定的な実施態様の例としては、(i)ミノサイクリンとトリクロサンとビスマス塩の組み合わせ；(ii)ミノサイクリンとクロルヘキシジン化合物とビスマス塩の組み合わせ； 及び(iii)ミノサイクリンと塩化ベンザルコニウムとビスマス塩の組み合わせなどを挙げることができる。本発明は、さらに、消毒薬と抗生物質の組み合わせで処理されているか又は消毒薬と抗生物質の組み合わせを含んでいる物品、例えば、非限定的な例として、医療用品を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
1％(w/v)から8％(w/v)のミノサイクリンと1％(w/v)から8％(w/v)のクロルヘキシジン化合物を含有する処理溶液に高分子含有医療用品を有効な時間晒すことによって製造された抗感染性医療用品。
【請求項２】
前記処理溶液がさらにビスマス塩を0.5％(w/v)から2.0％(w/v)の濃度で含有する、請求項１に記載の抗感染性医療用品。
【請求項３】
前記処理溶液がさらに0.2％(w/v)から1.0％(w/v)の塩化ベンザルコニウムを含有する、請求項１に記載の抗感染性医療用品。
【請求項４】
前記処理溶液がさらに0.25％(w/v)から1.0％(w/v)の塩化ベンザルコニウムを含有する、請求項２に記載の抗感染性医療用品。
【請求項５】
前記ビスマス塩が硝酸ビスマスである、請求項２に記載の抗感染性医療用品 。
【請求項６】
前記ビスマス塩が硝酸ビスマスである、請求項４に記載の抗感染性医療用品。
【請求項７】
前記ビスマス塩がクエン酸ビスマスである、請求項２に記載の抗感染性医療用品。
【請求項８】
前記ビスマス塩がクエン酸ビスマスである、請求項４に記載の抗感染性医療用品。
【請求項９】
前記ビスマス塩がサリチル酸ビスマスである、請求項２に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１０】
前記ビスマス塩がサリチル酸ビスマスである、請求項４に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１１】
前記クロルヘキシジン化合物が、クロルヘキシジン遊離塩基、クロルヘキシジンジアセテート、クロルヘキシジングルコネート及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１２】
前記クロルヘキシジン化合物が、クロルヘキシジン遊離塩基、クロルヘキシジンジアセテート、クロルヘキシジングルコネート及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項２に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１３】
前記クロルヘキシジン化合物が、クロルヘキシジン遊離塩基、クロルヘキシジンジアセテート、クロルヘキシジングルコネート及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項３に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１４】
前記クロルヘキシジン化合物が、クロルヘキシジン遊離塩基、クロルヘキシジンジアセテート、クロルヘキシジングルコネート及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項４に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１５】
1％(w/v)から8％(w/v)のミノサイクリンと1％(w/v)から8％(w/v)のトリクロサンと0.5％(w/v)から2.0％(w/v)の濃度のビスマス塩を含有する処理溶液に高分子含有医療用品を有効な時間晒すことによって製造された抗感染性医療用品。
【請求項１６】
前記処理溶液がさらに0.25％(w/v)から1.0％(w/v)の塩化ベンザルコニウムを含有する、請求項１５に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１７】
前記ビスマス塩が硝酸ビスマスである、請求項１５に記載の抗感染性医療用品 。
【請求項１８】
前記ビスマス塩が硝酸ビスマスである、請求項１６に記載の抗感染性医療用品。
【請求項１９】
前記ビスマス塩がクエン酸ビスマスである、請求項１５に記載の抗感染性医療用品。
【請求項２０】
前記ビスマス塩がクエン酸ビスマスである、請求項１６に記載の抗感染性医療用品。
【請求項２１】
前記ビスマス塩がサリチル酸ビスマスである、請求項１５に記載の抗感染性医療用品。
【請求項２２】
前記ビスマス塩がサリチル酸ビスマスである、請求項１６に記載の抗感染性医療用品。
【請求項２３】
1％(w/v)から8％(w/v)のミノサイクリンと0.25％(w/v)から1.0％(w/v)の塩化ベンザルコニウムと0.5％(w/v)から2.0％(w/v)のビスマス塩を含有する処理溶液に高分子含有医療用品を有効な時間晒すことによって製造された抗感染性医療用品。
【請求項２４】
前記ビスマス塩が、硝酸ビスマス、クエン酸ビスマス及びサリチル酸ビスマスからなる群から選択される、請求項２３に記載の抗感染性医療用品。
【請求項２５】
1cm当たり100μgから450μgのミノサイクリンと130μgから520μgのクロルヘキシジン化合物を含有する血管内カテーテル。
【請求項２６】
さらに、1cm当たり50μgから300μgのビスマス塩を含有する、請求項２５に記載のカテーテル。
【請求項２７】
前記ビスマス塩が、硝酸ビスマス、クエン酸ビスマス及びサリチル酸ビスマスからなる群から選択される、請求項２６に記載のカテーテル。
【請求項２８】
さらに、1cm当たり25μgから100μgの塩化ベンザルコニウムを含有する、請求項２６に記載のカテーテル。
【請求項２９】
前記クロルヘキシジン化合物が、クロルヘキシジン遊離塩基、クロルヘキシジンジアセテート、クロルヘキシジングルコネート及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項２５に記載のカテーテル。
【請求項３０】
さらに、1cm当たり50μgから200μgの亜鉛塩を含有する、請求項２５に記載のカテーテル。
【請求項３１】
さらに、1cm当たり25μgから300μgの銀含有化合物を含有する、請求項２５に記載のカテーテル。
【請求項３２】
前記銀含有化合物が炭酸銀である、請求項３１に記載のカテーテル。
【請求項３３】
1cm当たり100μgから450μgのミノサイクリンと1cm当たり130μgから750μgのトリクロサンと1cm当たり50μgから300μgのビスマス塩を含有する血管内カテーテル。
【請求項３４】
前記ビスマス塩が、硝酸ビスマス、クエン酸ビスマス及びサリチル酸ビスマスからなる群から選択される、請求項３３に記載のカテーテル。
【請求項３５】
さらに、1cm当たり25μgから100μgの塩化ベンザルコニウムを含有する、請求項３３に記載のカテーテル。
【請求項３６】
さらに、1cm当たり50μgから200μgの亜鉛塩を含有する、請求項３３に記載のカテーテル。
【請求項３７】
さらに、1cm当たり25μgから300μgの銀含有化合物を含有する、請求項３３に記載のカテーテル。
【請求項３８】
前記銀含有化合物が炭酸銀である、請求項３３に記載のカテーテル。
【請求項３９】
1％(w/v)から8％(w/v)のミノサイクリンと0.5％(w/v)から2.0％(w/v)のビスマス塩を含有する処理溶液に高分子含有医療用品を有効な時間晒すことによって製造された抗感染性医療用品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌作用を示すが他の抗菌薬と比較して抗生物質耐性の微生物の出現を防止する、消毒薬と抗生物質の組み合わせに関する。
【背景技術】
【０００２】
消毒薬(antiseptic)は、微生物を殺すか又はその増殖を阻止する物質であって、一般に生きている組織に適用されるが、これによって、通常無生物に適用される殺菌薬(disinfectant)と区別される(Goodman 及び Gilman's "The Pharmacological Basis of Therapeutics", 第７版, Gilman ら, 編集者, 1985, Macmillan Publishing Co.,(以後、「Goodman 及び Gilman」と称する)pp. 959-960)。消毒薬の一般的な例は、エチルアルコールとヨードチンキである。アルコールは、通常、皮下注射針を刺す前に注射を受ける対象の皮膚を清潔にするのに使用され、ヨードチンキは、しばしば、傷の手当ての最初の段階として使用されるが、アルコールもヨードチンキも感染を予防するために皮膚の表面の細菌の数を減少させることを目的に使用される。
【０００３】
消毒薬は、かつては、傷の処理においてより実質的な役割を担っていたが、今では、消毒薬は、様々な種類の微生物によって生産されて別の微生物を殺すか又はそれらの増殖を抑制する化学物質(又は、その合成類似体若しくは半合成類似体)である抗生物質ほど重要ではない(Goodman 及び Gilman, p.1067)。抗生物質は、全身的に投与し得るか、又は、局所的に適用し得る。1941年にペニシリンが生産されて以来、抗生物質は広く使用されているが、その結果、1種以上の抗生物質に対して耐性を有する微生物の系統が出現することとなった。耐性を有する生物の発生は、新たな抗生物質の同定又は合成の必要を高めている(Goodman 及び Gilman, p.1066)。
【０００４】
特に有用な抗生物質の1つの種類はテトラサイクリン系であり、これらは、微生物のリボソームに結合してタンパク質の合成を阻止することにより抗菌活性を示す(Goodman 及び Gilman, p.1171)。テトラサイクリン系は、インビトロで試験したときに主として静菌性であり、微生物の増殖のみが影響を受ける。テトラサイクリン系は、グラム陽性菌とグラム陰性菌を包含するさまざまな微生物に対して抗菌活性を有しており、及び、別の種類の抗生物質に対して耐性を示す数種類の微生物、例えば、リケッチア属(Rickettsiae)、マイコプラズマ属(Mycoplasma)、クラミジア属(Chlamydia)、ある種の非定型抗酸菌(atypical Mycobacteria)及びアメーバ(ameobae)などに対して抗菌活性を有している(Id.)。ミノサイクリン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン及びオキシテトラサイクリンはテトラサイクリン系の薬物であり、この順で抗菌活性が弱くなっていく(Id.)。
【０００５】
ビスマスの医学的用途が最初に文書化されたのは、1773年にビスマスが膏薬で使用されたときである。それ以来、ビスマスは、下痢、胃腸炎、胃痙攣、嘔吐及び潰瘍を治療するために使用されてきた。ビスマスは、手術創を治療するために使用されてきた(Bierer, 1990, Rev. Infect. Dis. 12(Suppl.1): S3-S8)。ビスマスの抗菌作用はよく知られている。ビスマス化合物が結腸細菌による発酵を低減させる作用を有することはインビトロ及びインビボで示されている(Leon-Barua ら, 1990, Rev. Infect. Dis. 12(Suppl.1): S24-S29)。
【０００６】
ビスマス塩が抗生物質の阻害活性に対して大きな影響を有することも示されている。サリチル酸ビスマス(ＢＳＳ)及び硝酸ビスマスがグラム陰性菌に対してアミノグリコシド活性を増強することが報告されている(Domenico ら, 1991, J. Antimicrob. Chemother. 28:801-810)。ＢＳＳ、硝酸ビスマス及びビスマスジメルカプロール(Ｂｉｓ-ＢＡＬ)が細菌クレブシエラ・ニューモニアエ(Klebsiella pneumoniae)による莢膜多糖の生産を阻害することも報告されている(Domenico ら, 1991, J. Antimicrobial Chemother. 28:801-810; Domenico ら, 1996, Ann. N. Y. Acad. Sci. 797:269-270)。ＢｉｓＢＡＬが、エルシニア属(Yersinia)、シゲラ属(Shigella)、サルモネラ属(Salmonella)、シュードモナス属(Pseudomonas)、プロテウス属(Proteus)、エンテロバクター属(Enterobacter)、エシェリキア属(Escherichia)、ブドウ球菌属(Staphylococci)、ヘリコバクター属(Helicobacter)及びクロストリジウム属(Clostridia)の中の細菌の広いスペクトラムに対して良好な活性を示すことも示されており(Domenico, 1997, Antimicrob. Ag. Chemother. 41:1697-1703)、 また、ＢｉｓＢＡＬが、生物膜(biofilm)における多糖類の生産を阻害することも報告されている(Huang 及び Stewart, 1999, J. Antimicrob. Chemother. 44:601-605)。抗感染性を有する組成物を調製するためにチオール化合物と一緒にビスマス塩を使用することが、Domenico によって記述されている(1999, 米国特許第 5,928,671 号)。ピロリドンカルボン酸のビスマス塩によって抗生物質が増強され、その結果、当該抗生物質の組織内濃度が高くなることが、Bocher らによって記述されている(1977, 米国特許第 4,064,238 号)。十二指腸潰瘍の原因微生物であるヘリコバクター・ピロリ(Helicobacter pylori)を根絶するために抗生物質及びメトロニダソールと一緒にビスマス塩を使用することも記述されている(Borody, 1993, 米国特許第 5,196,205 号)。
【０００７】
The Trustees of Columbia University in the City of New York による「トリクロサンと銀化合物を含有する医療器具(TRICLOSAN AND SILVER COMPOUND CONTAINING MEDICAL DEVICES)」と題されている国際出願第 PCT/US00/08692 には、トリクロサンと銀塩の組み合わせに、本明細書に記載されている抗生物質を包含する様々な抗生物質を加えることが教示されている。本明細書に記載されているようなビスマス塩の使用に関しては開示されていない。
【発明の開示】
【０００８】
本発明は、1種以上の消毒薬と抗生物質の組み合わせを含有する組成物に関する。本発明は、少なくとも部分的には、そのような組み合わせが抗生物質耐性生物が形成されるのを防止する傾向にあるという発見に基づいている。本発明の好ましい非限定的な実施態様においては、上記抗生物質はミノサイクリンであり、消毒薬はクロルヘキシジン化合物、トリクロサン又は塩化ベンザルコニウムである。特別の実施態様においては、銀塩又はビスマス塩を加える。本発明の特定の非限定的な実施態様の例としては、(i)ミノサイクリンとトリクロサンとビスマス塩の組み合わせ；(ii)ミノサイクリンとクロルヘキシジン化合物とビスマス塩の組み合わせ； 及び(iii)ミノサイクリンと塩化ベンザルコニウムとビスマス塩の組み合わせなどを挙げることができる。本発明は、さらに、消毒薬と抗生物質の組み合わせで処理されているか又は消毒薬と抗生物質の組み合わせを含んでいる物品、例えば、非限定的な例として、医療用品を提供する。
【０００９】
消毒薬とは異なって、抗生物質は受容者の組織に対して毒性が低い傾向にあるので、比較的高濃度で使用し得る。より高濃度で使用すると、より長期にわたって効力が持続する。それに対して、消毒薬はしばしば受容者の組織に対して毒性を示すので、一般に低い濃度で使用すべきである。しかしながら、消毒薬は、低い濃度であっても広い範囲の微生物を殺し得る。従って、本発明による抗生物質と消毒薬の組み合わせは、広い範囲の微生物に対して、長期間、抗菌活性を示し得る。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明は、(i)ミノサイクリン、リファンピン及びノルフロキサシンからなる群から選択される抗生物質； 及び(ii)ビグアニド化合物、トリクロサン及び塩化ベンザルコニウムからなる群から選択される消毒薬の組み合わせを含有する組成物に関する。好ましい実施態様においては、そのような組成物は、さらに、ビスマスの塩、セリウムの塩若しくは亜鉛の塩、又は、銀含有化合物を含有する。そのような組成物は、医療器具に抗菌活性を賦与するために医療器具の中に又は上に組み入れることができる。本発明は、また、医療器具の製造におけるそのような組成物の使用方法も提供する。
【００１１】
本発明に従って使用し得るビグアニド化合物には、ポリ(ヘキサメチレンビグアニド)ヒドロクロリド及びクロルヘキシジン化合物などが包含される。クロルヘキシジンは、化合物 1,6 ビス(Ｎ5-ｐ-クロロフェニル-Ｎ1-ビグアニド)ヘキサン)を表す用語である。クロルヘキシジン化合物としては、クロルヘキシジン遊離塩基(ＣＨＸ)、及びクロルヘキシジン塩、例えば、クロルヘキシジンジホスファニレート、クロルヘキシジンジグルコネート(ＣＨＧ)、クロルヘキシジンジアセテート(ＣＨＡ)、クロルヘキシジンジヒドロクロリド、クロルヘキシジンジクロリド、クロルヘキシジンジヒドロヨージド、クロルヘキシジンジペルクロレート、クロルヘキシジンジニトレート、クロルヘキシジンスルフェート、クロルヘキシジンスルフィト、クロルヘキシジンチオスルフェート、クロルヘキシジンジ-アシッドホスフェート、クロルヘキシジンジフルオロホスフェート、クロルヘキシジンジホルメート、クロルヘキシジンジプロピオネート、クロルヘキシジンジ-ヨードブチレート、クロルヘキシジンジ-n-バレエート、クロルヘキシジンジカプロレート、クロルヘキシジンマロネート、クロルヘキシジンスクシネート、クロルヘキシジンマレエート、クロルヘキシジンタルタレート、クロルヘキシジンジモノグリコレート、クロルヘキシジンモノ-ジグリコレート、クロルヘキシジンジラクテート、クロルヘキシジンジ-y-ヒドロキシイソブチレート、クロルヘキシジンジグルコヘプトネート、クロルヘキシジンジ-イソチオネート、クロルヘキシジンジベンゾエート、クロルヘキシジンジシンナメート、クロルヘキシジンジマンデレート、クロルヘキシジンジ-イソフタレート、クロルヘキシジンジ-2-ヒドロキシ-ナフトエート及びクロルヘキシジンエンボネートなどを挙げることができる。
【００１２】
本発明に従って使用し得るビスマス塩としては、硝酸ビスマス、クエン酸ビスマス、サリチル酸ビスマス、ホウ酸ビスマス、マンデル酸ビスマス、パルミチン酸ビスマス、安息香酸ビスマス及びビスマススルファジアジンなどを挙げることができる。
【００１３】
本発明に従って使用し得るセリウム塩としては、硝酸セリウム、及び硝酸セリウムと同程度の水溶性を有する他のセリウム塩などを挙げることができる。
【００１４】
本明細書で使用する用語「銀含有化合物」は、共有結合又は非共有結合(例えばイオン結合)を介して別の分子に結合しているか又は結合していない銀イオン又は銀原子の形態における銀を含有する化合物を意味し、銀含有化合物としては、限定するものではないが、共有結合化合物、例えば、銀スルファジアジン(ＡｇＳＤ)、及び、銀塩、例えば、酸化銀(Ａｇ2Ｏ)、炭酸銀(Ａｇ2ＣＯ3)、デオキシコール酸銀、サリチル酸銀、ヨウ化銀、硝酸銀(ＡｇＮＯ3)、パラアミノ安息香酸銀、パラアミノサリチル酸銀、アセチルサリチル酸銀、銀エチレンジアミン四酢酸(ＡｇＥＤＴＡ)、ピクリン酸銀、プロテイン銀、クエン酸銀、乳酸銀及びラウリン酸銀などを挙げることができる。
【００１５】
本発明に従って使用し得る亜鉛塩としては、酢酸亜鉛、及び酢酸亜鉛と同程度の水溶性を有する他の亜鉛塩などを挙げることができる。
【００１６】
本発明は、上記成分の組み合わせの医療器具の中又は上への組み込み、及び、当該組み合わせを組み入れる医療器具を提供する。用語「医療用具(medical article)」及び「医療器具(medical device)」は、本明細書中では交換可能に使用されている。本発明に従って処理し得る医療用品は、医用高分子(biomedical polymer)から製造されているか、又は医用高分子でコーティングされているか若しくは処理されており(以後、「高分子含有医療用品(polymer-containing medical articles)」と称し得る)、そのような医療用品としては、限定するものではないが、カテーテル、例えば、尿管カテーテル及び血管カテーテル(例えば、末梢血管カテーテル及び中心血管カテーテルなど)、創傷排液管、動脈移植片、軟組織パッチ(例えば、ポリテトラフルオロエチレン(ＰＴＦＥ)軟組織パッチ)、手袋、シャント、ステント、気管カテーテル、創傷用包帯、縫合糸、誘導線及び人工補装具(例えば、心臓弁及びＬＶＡＤなど)などを挙げることができる。本発明に従って製造し得る血管カテーテルとしては、限定するものではないが、単一及び多重内腔中心静脈カテーテル、末梢挿入中心静脈カテーテル、緊急輸液カテーテル、経皮シース導入器システム(percutaneous sheath introducer systems)及び熱希釈法カテーテル(そのような血管カテーテルのハブ(hubs)及びポート(ports)を包含する)などを挙げることができる。
【００１７】
特定の実施態様においては、適切な溶媒系中に本発明の上記組み合わせを含有する処理溶液に医療器具を晒すことにより本発明の組み合わせを医療器具の中又は上に組み入れることができる。前記処理溶液は、本発明に包含される組成物の範囲内に入る。前記処理溶液がミノサイクリンを含む場合は、ミノサイクリンの濃度は、1％重量/容積(w/v)から8％(w/v)、好ましくは、3％(w/v)から5％(w/v)であり；  前記処理溶液がリファンピンを含む場合は、リファンピンの濃度は、1％(w/v)から8％(w/v)、好ましくは、3％(w/v)から5％(w/v)であり；  前記処理溶液がノルフロキサシンを含む場合は、ノルフロキサシンの濃度は、1％(w/v)から8％(w/v)、好ましくは、3％(w/v)から5％(w/v)であり；  前記処理溶液がクロルヘキシジン化合物を含む場合は、クロルヘキシジン化合物の濃度は、1％(w/v)から8％(w/v)、好ましくは、3％(w/v)から5％(w/v)であり；  前記処理溶液がトリクロサンを含む場合は、その濃度は、1％(w/v)から8％(w/v)、好ましくは、3％(w/v)から5％(w/v)であり；  前記処理溶液が塩化ベンザルコニウムを含む場合は、塩化ベンザルコニウム(ＢＺＫ)の濃度は、0.25％(w/v)から1％(w/v)、好ましくは、0.5％(w/v)であり；  前記処理溶液がビスマス塩を含む場合は、ビスマス塩の濃度は、0.5％(w/v)から2％(w/v)、好ましくは、2％(w/v)であり；  前記処理溶液がセリウム塩を含む場合は、セリウム塩の濃度は、好ましくは、1％(w/v)から5％(w/v)であり；  前記処理溶液が亜鉛塩を含む場合は、亜鉛塩の濃度は、1％(w/v)から5％(w/v)、好ましくは、2％(w/v)であり；  及び、前記処理溶液が銀含有化合物を含む場合は、銀含有化合物の濃度は、0.5％(w/v)から2％(w/v)好ましくは、1％である。上記した範囲、例えば、「Ｘ％からＹ％」は、境界値であるＸとＹを含み、本明細書においては、Ｘの値とＹの値の20％の変動も包含するものとする。即ち、上記範囲「Ｘ％からＹ％」は、「Ｘ±0.20ＸからＹ±0.20Ｙ」を意味すると解釈されるものとする。
【００１８】
適切な溶媒系は、抗感染性物質を溶解させるか、又は、あまり望ましくはないが、抗感染性物質の懸濁液を生成する溶媒系であり、好ましくは、医療器具をわずかに膨潤させる(抗感染性物質の組み込みが促進される)が、好ましくは、当該医療器具の表面を実質的に変えない(例えば、表面をざらざらにしたりしない)ので、当該医療器具の臨床上の有用性を損なうことがない。溶媒系の非限定的な特定の例には、70％(容積/容積；v/v)テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)と30％(v/v)メタノール(ＭｅＯＨ)が包含され、さらに好ましくは、抗生物質を溶解させるものとして、50％(v/v)テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)と50％(v/v)メタノールが包含される。そのような処理溶液は、さらに、医用高分子を含有し得る。非限定的な特定の例として、上記処理溶液は、3％(w/v)の９３Ａポリウレタンと1％(w/v)の６０Ｄポリウレタン、又は、1％(w/v)の９３Ａポリウレタンと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンを含有し得る。
【００１９】
例えば、ポリウレタン製カテーテルを、本発明の処理溶液に(浸漬(dipping)するか及び/又はカテーテルの内腔に処理溶液を流して通すことにより)、2秒間から200秒間、好ましくは、2秒間から100秒間晒した後、室温で乾燥させ得る。溶媒系として1:1のＴＨＦ/ＭｅＯＨを用いて前記方法で処理されたポリウレタン製カテーテルは、以下に示す量の抗感染性物質(ここで、用語「抗感染性(anti-infective)」は、抗生物質及び消毒薬を意味する)を含むであろう。即ち、当該カテーテルがミノサイクリンを含有する場合は、ミノサイクリンの量は、1cm当たり100μgから450μgであり；  当該カテーテルがリファンピンを含有する場合は、リファンピンの量は、1cm当たり100μgから450μgであり；  当該カテーテルがノルフロキサシンを含有する場合は、ノルフロキサシンの量は、1cm当たり100μgから450μgであり；  当該カテーテルがクロルヘキシジン化合物を含有する場合は、クロルヘキシジン化合物の量は、1cm当たり130μgから520μgであり；  当該カテーテルがトリクロサンを含有する場合は、その量は、1cm当たり130μgから750μgであり；  当該カテーテルが塩化ベンザルコニウムを含有する場合は、塩化ベンザルコニウム(ＢＺＫ)の量は、1cm当たり25μgから100μgであり；  当該カテーテルがビスマス塩を含有する場合は、ビスマス塩の量は、1cm当たり50μgから300μgであり；  当該カテーテルがセリウム塩を含有する場合は、セリウム塩の量は、1cm当たり50μgから200μgであり；  当該カテーテルが亜鉛塩を含有する場合は、亜鉛塩の量は、1cm当たり50μgから200μgであり；  及び、当該カテーテルが銀含有化合物を含有する場合は、銀含有化合物の量は、1cm当たり25μgから300μgである。さらに、本発明は、前記処理溶液を用いて製造された、又は別の手段で、例えば、押し出し、若しくは、本発明の組み合わせを含有するコーティング溶液の「塗布」、若しくは、本発明の組み合わせを含有する粉末でのコーティングなどにより製造された、本発明の組み合わせで上記量の抗感染性物質を含有するカテーテル及び別の医療器具も提供する。
【００２０】
本発明により包含される組み合わせの例は、限定するものではないが、以下の通りである。
【００２１】
ミノサイクリンとビスマス；
ミノサイクリンとクロルヘキシジン遊離塩基；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジアセテート；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジグルコネート；
ミノサイクリンとトリクロサン；
ミノサイクリンとクロルヘキシジン遊離塩基と硝酸ビスマス；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジアセテートと硝酸ビスマス；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジグルコネートと硝酸ビスマス；
ミノサイクリンとトリクロサンと硝酸ビスマス；
ミノサイクリンとクロルヘキシジン遊離塩基と塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジアセテートと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジグルコネートと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとトリクロサンと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとクロルヘキシジン遊離塩基と塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジアセテートと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジグルコネートと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとトリクロサンと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとクロルヘキシジン遊離塩基と硝酸ビスマスと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジアセテートと硝酸ビスマスと塩化ベンザルコニウム；
ミノサイクリンとトリクロサンと炭酸銀；
ミノサイクリンとクロルヘキシジンジグルコネートと硝酸ビスマスと塩化ベンザルコニウム；
及び
ミノサイクリンとトリクロサンと硝酸ビスマスと塩化ベンザルコニウム。
【実施例】
【００２２】
実施例：抗生物質耐性細菌に対する抗生物質含有カテーテルの効力の低下
最近、ミノサイクリンとリファンピンからなる2種の抗生物質の組み合わせを含浸させてあるカテーテルが臨床用に開発された。上記薬物はそれぞれ異なる薬理作用を有しており、協力的に作用し得るので、組み合わせて使用した上記薬物に対する耐性が発達するということはありそうもないと考えられた。しかしながら、カテーテルをラットに埋め込んだ試験において、当該カテーテルが、時間の経過に伴って、この抗生物質の組み合わせに対する耐性が低い菌株又はリファンピンに対して高い耐性を有している菌株に対して、抗菌活性を失うことが示された。それに対して、消毒薬であるクロルヘキシジンと銀スルファジアジンを含浸させてあるカテーテルは、これらの抗生物質耐性菌株に対して有効であった。
【００２３】
これらの試験をより詳細に説明するために、ミノサイクリンとリファンピン(ＭＲ)又はクロルヘキシジンと銀スルファジアジン(ＡＳＴ)で処理してある静脈内カテーテルを以下に示すように準備した。ＭＲポリウレタン製カテーテルはCook Critical Care, Inc.から購入したが、これは、1cm当たり約0.5mgのミノサイクリンと0.5mgのリファンピンを含有している。ＡＳＴカテーテルを準備するために、70％(v/v)のテトラヒドロフランと30％(v/v)のメタノールからなる溶媒系中に3％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート(ＣＨＡ)と0.75％(w/v)の銀スルファジアジン(ＡｇＳＤ)と3％(w/v)の９３Ａポリウレタンと1％(w/v)の６０Ｄポリウレタンを含有する処理溶液に、ポリウレタン製カテーテルを室温で2〜5秒間浸漬した。
【００２４】
ＭＲカテーテル又はＡＳＴカテーテルの断片をラットの皮下に埋め込んだ。カテーテルの埋め込み後、7日目、14日目及び21日目に、カテーテルの断片を取り去り、スタフィロコッカス・エピデルミディス(Staphylococcus epidermidis)の親株(Ｓ.ｅｐｉ-ｓ；ＡＴＣＣ  Acc. No.35983)又はそのリファンピン耐性変異体(Ｒ-ｒ)又はミノサイクリンとリファンピンの両方に耐性を示す株(ＭＲ-ｒ)のいずれかを播種してある寒天平板の上に置いた。ＭＲカテーテル又はＡＳＴカテーテルの断片によって形成されたこれらの菌株に対する阻害の領域を測定した。結果は表(Ｉ)に示してある。
【表１】
2004533882.tif 000002
【００２５】
要約すると、第7日目までにＲ-ｒ株に対するＭＲカテーテルの活性は著しく低減した。第7日目と第14日目において、ＭＲ-ｒ株とＲ-ｒ株に対する阻害領域はいずれも、耐性を有さないＳ.エピデルミディス(S.epidermidis)親株と比較して大きく低下した。ＡＳＴカテーテルの活性は、試験に用いた微生物の抗生物質耐性プロフィールには関係なく、影響を受けなかった。
【００２６】
実施例：抗生物質/消毒薬の組み合わせの効力
最小発育阻止濃度(ＭＩＣ)：単独又は組み合わせにおける各抗菌薬のＭＩＣを、液体培地、即ち、トリプチケースソイブロス(Trypticase Soy Broth)(ＴＳＢ)を用いて決定した。各試験管が5mLを含むように抗菌薬を連続的に希釈し、1ミリリットル当たり104又は106のコロニー形成単位(ｃｆｕ)のいずれかの濃度で細菌を接種した。接種菌の上記濃度は、ＩＶカテーテルに潜在的にコロニーを形成し得る低レベル及び中レベルの範囲の数の微生物を表している。試験管を37℃で24時間インキュベーションし、濁度についてチェックした。目に見える濁りが認められない薬物の最低濃度をＭＩＣとみなした。。
【００２７】
耐性の発達：様々な抗菌薬及びその組み合わせを用いて、Ｓ.エピデルミディス（S.epidermidis)を耐性菌の出現に関して評価した。5mLのＴＳＢを含有する培養試験管に播種して、薬物濃度が各薬物のＭＩＣの上下に2倍希釈で各3濃度で、1mL当たり約1×104の微生物とした。最初の接種菌は、培養菌をＴＳＢ中で一晩増殖させることで調製した。試験管を37℃で24時間インキュベーションした。ＭＩＣ含有試験管に連続して先行する培養試験管を希釈して105cfu/mLとし、次の転移(transfer)に用いた。10〜20継代の後、ＭＩＣ試験管を下回る培養物を血液寒天平板上で継代培養し、感受性試験用に保存した。この実験は、各継代で106cfu/mLの細胞密度で再度行った。上記試験により、以下に示す消毒薬と抗生物質を単独で及び組み合わせて耐性の発達に関して試験した。クロルヘキシジンジアセテート(ＣＨＸ)、トリクロサン(Ｔ)、パラクロロメタキシレノール(ＰＣＭＸ)、ポリヘキサメチレンビグアニド(ＰＨＭＢ)、ミノサイクリン(Ｍ)、トブラマイシン(Ｔｂ)、ノルフロキサシン(Ｎｆ)、ミノサイクリンとリファンピン(Ｍ＋Ｒ)、クロルヘキシジンとノルフロキサシン(ＣＨＸ＋Ｎｆ)、クロルヘキシジンとトブラマイシン(ＣＨＸ＋Ｔｂ)、トリクロサンとミノサイクリン(Ｔ＋Ｍ)、ミノサイクリンとパラクロロメタキシレノール(ＰＣＭＸ＋Ｍ)、ポリヘキサメチレンビグアニドとミノサイクリン(ＰＨＭＢ＋Ｍ)、及び、クロルヘキシジンとリファンピン(ＣＨＸ＋Ｒ)。3種類の試験の結果は、表(IIA)、表(IIB)、及び表(III)に示してある。
【表２】
2004533882.tif 000003
【００２８】
【表３】
2004533882.tif 000004
【００２９】
試験した全ての抗生物質の中で、ミノサイクリンは、低密度の攻撃(104cfu/mL)に対して、耐性細菌の出現がほとんどないように思われる。しかしながら、細胞密度が高い場合は、ミノサイクリンのＭＩＣは4倍上昇した。トリクロサンなどの消毒薬とミノサイクリンなどの抗生物質の組み合わせは、ミノサイクリン耐性細菌の出現を防止しているように思われる。
【表４】
2004533882.tif 000005
【００３０】
表(III)中の組み合わせにおける各物質の濃度は、同じ物質を単独で試験した場合に同じ効果が得られる濃度のフラクション(即ち、フラクション阻害濃度)として表してある。フラクション阻害濃度の合計が一方より小さい場合は、その組み合わせは協力的である。
【００３１】
結論として、ノルフロキサシンとミノサイクリンは、それぞれ、クロルヘキシジン及びトリクロサンとの組み合わせにおいて、インビトロで、準阻害濃度(sub-inhibitory concentration)での20継代後のＭＩＣの上昇が小さかったこと(表(IIA)を参照されたい)に加えて、協力作用を示すことが観察された。
【００３２】
実施例：消毒薬/抗生物質で処理されたカテーテル
方法  ポリウレタン製カテーテルの断片を以下の１つで処理した。
【００３３】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノール及び50％(v/v)のテトラヒドロフラン(ＴＨＦ)に5％(w/v)のトブラマイシンを懸濁させたか；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノール及び50％(v/v)のＴＨＦに5％(w/v)のノルフロキサシンを懸濁させたか；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノール及び50％(v/v)のＴＨＦに5％(w/v)のミノサイクリンを溶解させた。
【００３４】
処理は、上記カテーテルの断片を室温で処理溶液に2秒間〜5秒間晒した後、当該断片を空気乾燥することからなった。次いで、0.5cmのカテーテル断片を、スタフィロコッカス・エピデルミディス(Staphylococcus epidermidis)の試験培養物の108cfu/mLの0.3mlを播種しておいたトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)(ＴＳＡ)平板上に垂直に置いた。37℃で24時間インキュベーションした後、阻害領域を測定し、その後、前記カテーテル断片を同じ培養物を播種してある新たなＴＳＡ平板に転移させた。転移は、試験の期間中24時間ごとに行った。
【００３５】
結果：  結果は表(IV)に示してある。
【表５】
2004533882.tif 000006
【００３６】
領域の大きさが15mmより小さい場合、それは、抗生物質の処理がカテーテルに付着しているＳ.エピデルミディス（S.epidermidis)を阻害するのに有効ではないことを示している(Sheretz ら, 1993, J. Infect. Dis. 167:98-106)。
【００３７】
検討：  表(IIA)、表(IIB)及び表(III)に示されているデータに基づいて、クロルヘキシジン又はトリクロサンと組み合わせたノルフロキサシン、トブラマイシン及びミノサイクリンは、薬物の準阻害濃度(sub-inhibitory concentrations)で20回転移した後のＭＩＣの上昇が最も小さいように思われる。しかしながら、医療器具の抗菌活性が長期間にわたって有効であるためには、組み込まれている抗生物質及び/又は消毒薬がゆっくりと且つ安定して放出されるべきである。表(IV)に示されているデータは、カテーテルにとって、組み込む抗生物質の選択はミノサイクリンとリファンピンに限定すべきであることを示唆している。抗生物質のノルフロキサシンとトブラマイシンは、1日又は2日でカテーテルから拡散してしまうが、ミノサイクリンとリファンピンはゆっくりと長期間にわたって放出されるからである。さらに、ノルフロキサシンとトブラマイシンは不利な溶解特性を有していて、ポリウレタン製カテーテルを浸漬するのに使用するテトラヒドロフラン/メタノール溶媒系中で限られた溶解度しか有さない。この低い溶解度により、組み込まれるノルフロキサシン又はトブラマイシンの上限は約0.5％(w/v)となるが、この濃度では、抗菌活性は、長続しない低いものとなる(阻害領域が10mmより小さく、1〜2日間しか持続しない)。5％(w/v)のノルフロキサシン又はトブラマイシンを含有する懸濁液でカテーテルを処理した場合、カテーテルの表面は極めて粗くなってしまい、抗菌活性を上昇させることはできるが、そのようなカテーテルは臨床で使用することはできない。ミノサイクリンのみが、カテーテルの表面の平滑性を失うことなく、長期間にわたる抗菌活性を達成するための高濃度で使用し得ることが見いだされた。
【００３８】
実施例：リファンピンと消毒薬又はミノサイクリンと消毒薬
方法：  ポリウレタン製カテーテルの断片を以下の１つで処理した。
【００３９】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のクロルヘキシジン遊離塩基及び1％(w/v)のリファンピン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート及び1％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン及び3％(w/v)のリファンピン；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン及び3％(w/v)のミノサイクリン。
【００４０】
処理は、上記カテーテルの断片を室温で処理溶液に2秒間〜5秒間晒した後、当該断片を空気中で乾燥させることからなった。次いで、0.5cmのカテーテル断片を、(i) リファンピン耐性Ｓ.エピデルミディス（S.epidermidis)；  (ii) ミノサイクリンを通過させたＳ.エピデルミディス（S.epidermidis)(ここで、 ミノサイクリンのＭＩＣは変わっていない)；  又は、(iii) ミノサイクリンとリファンピンに感受性を有するＳ.エピデルミディス(S.epidermidis)のいずれかの試験培養物の108cfu/mLの0.3mlを播種しておいたトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)(ＴＳＡ)平板上に垂直に置いた。37℃で24時間インキュベーションした後、阻害領域を測定した。
【００４１】
結果：  前節に記載した実験により、表(Ｖ)に示される結果を得た。
【表６】
2004533882.tif 000007
【００４２】
検討：  上記結果は、細菌の耐性が発達しているようには見えず、また、充分な量をカテーテルに組み入れて長期にわたる活性を提供することができるので、ミノサイクリンに消毒薬を加えたものが医療器具で使用するのに好ましい組み合わせであることを示唆している。また、ミノサイクリンは、カテーテル関連疾患の主要な原因微生物の1種であるＳ.エピデルミディス（S.epidermidis)に対して極めて効果が高い。
【００４３】
実施例：抗生物質プラス消毒薬の優れた結果
方法：  ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００４４】
(1) 70％(v/v)のテトラヒドロフランと30％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の3％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート(ＣＨＡ)及び0.75％(w/v)の銀スルファジアジン(ＡｇＳＤ)；
(2) 50％(v/v)のテトラヒドロフランと50％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の3％(w/v)のミノサイクリン及び3％(w/v)のリファンピン；
(3) 50％(v/v)のテトラヒドロフランと50％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の3％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート、2％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の銀スルファジアジン；
(4) 70％(v/v)のテトラヒドロフランと30％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の5％(w/v)のトリクロサン、1％(w/v)の炭酸銀(Ａｇ2ＣＯ3)及び1％(w/v)のクエン酸；
(5) 50％(v/v)のテトラヒドロフランと50％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀(Ａｇ2ＣＯ3)；
(6) 70％(v/v)のテトラヒドロフランと30％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の6％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート；
(7) 70％(v/v)のテトラヒドロフランと30％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の6％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテートと1％(w/v)の銀スルファジアジン;
(8) 70％(v/v)のテトラヒドロフランと30％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の8％(w/v)のトリクロサン；
(9) 50％(v/v)のテトラヒドロフランと50％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の8％(w/v)のミノサイクリン；
又は、
(10) 70％(v/v)のテトラヒドロフランと30％(v/v)のメタノールと3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンからなる溶媒中の1％(w/v)の炭酸銀 (Ａｇ2ＣＯ3)。
【００４５】
カテーテルを処理溶液中に2秒間〜5秒間浸漬した後室温で24時間乾燥させることによりカテーテルを処理した。次いで、処理したカテーテルを切断して断片とし、Ｓ.エピデルミディス(S.epidermidis)、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)又はエンテロバクター・アエロゲネス(Enterobacter aerogenes)のいずれかの108cfu/mLの培養物の0.3mLを播種しておいたトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板において阻害領域を生成する能力について試験した。阻害領域は24時間後に測定した。
【００４６】
結果：  上記実験の結果は、表(VI)に示してある。
【表７】
2004533882.tif 000008
【００４７】
結論：  抗生物質と組み合わせた1種以上の消毒薬で処理されたカテーテルは、単一の薬物で処理されたものより大きな阻害領域を生成する。
【００４８】
実施例：抗生物質プラス消毒薬の抗付着効果
方法：  ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００４９】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の3％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート(ＣＨＡ)及び0.75％(w/v)の銀スルファジアジン(ＡｇＳＤ)；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン及び3％(w/v)のリファンピン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ3％(w/v)中のクロルヘキシジンジアセテート、2％(w/v)のミノサイクリン及び0.75％(w/v)の銀スルファジアジン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の5％(w/v)のトリクロサン、1％(w/v)の炭酸銀(Ａｇ2ＣＯ3)及び1％(w/v)のクエン酸；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀(Ａｇ2ＣＯ3)。
【００５０】
あるいは、上記のように処理した4cmの長さのカテーテルを5mLのトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)を含有する試験管に挿入して、カテーテルの約1cmが寒天から突出するようにした。次いで、スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus)の107cfu/mLの培養物の0.2ｍLを、寒天の頂部表面に適用した。試験管を37℃で7日間インキュベーションした。カテーテルを取り去り、カテーテルを薬物不活性化寒天平板上で回転させ、37℃で48時間インキュベーションした後、細菌のコロニーをカウントすることにより、カテーテルの外部表面への細菌の付着性を測定した。
【００５１】
結果：  表(VII)に示されているように、1種以上の消毒薬とミノサイクリンを含浸させてあるカテーテル上への細菌の付着は少ないことが見いだされた。
【表８】
2004533882.tif 000009
【００５２】
実施例：ミノサイクリンと消毒薬で処理されたカテーテル
方法：  ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００５３】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50(v/v)％のＴＨＦ中の8％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の8％(w/v)のトリクロサン；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50 (v/v)％ＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン及び3％(w/v)のミノサイクリン。
【００５４】
次いで、種々のカテーテルの断片を、アシネトバクター・カルコアセチクス(Acinetobacter calcoaceticus)、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)、エンテロバクター・アエロゲネス(Enterobacter aerogenes)又はスタフィロコッカス・エピデルミディス(Staphylococcus epidermidis)のいずれかの108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種することにより生成させた細菌マット(bacterial lawns)に阻害領域を生成する能力について試験した。阻害領域は、前記平板を37℃で24時間インキュベーションした後で測定した。
【００５５】
結果：  表(VIIIA)に示されているように、トリクロサンとミノサイクリンの組み合わせは、試験したミノサイクリン又はトリクロサンの濃度に関連して増強された活性を示した。Ｓ.エピデルミディス（S.epidermidis)に対する阻害領域が不明瞭だったため正確に測定することができなかったので、殺菌領域は、カテーテルを1日毎に転移させることを3回行った後、カテーテルに隣接する領域から得た1mm2の領域を二次培養することによりチェックした。結果は表(VIIIB)に示してある。このデータは、ミノサイクリンとトリクロサンの組み合わせの活性が、ミノサイクリンとトリクロサンの個々の薬剤を組み合わせにおけるのと同じ重量/容積(モルではない)の濃度で単独で使用した場合の活性よりも増強されているのを示している。
【表９】
2004533882.tif 000010
【００５６】
【表１０】
2004533882.tif 000011
【００５７】
表(VIIIB)のデータは、Ｓ.エピデルミディス（S.epidermidis)に関して、トリクロサンとミノサイクリンの組み合わせが、どちらかの単独の薬物で処理されたカテーテルよりも有効であったことを示している。
【００５８】
実施例：シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas Aeruginosa)に対する活性
カテーテルに基づく感染においてシュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)が臨床的に重要であることから、また、表(VIIIA)のデータがＰ.アエルギノサ(P.aeruginosa)に対する抗菌活性を示すことができなかったことから、ミノサイクリンと一緒に用いた場合の別の消毒薬のＰ.アエルギノサ(P.aeruginosa)に対する有効性を試験する実験を行った。
【００５９】
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００６０】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50(v/v)％のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50(v/v)％のＴＨＦ中の5％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の3％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の炭酸銀；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀。
【００６１】
次いで、処理したカテーテルを切断して断片とし、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)の108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種し、カテーテルの断片を前記播種した平板に垂直に置き、次いで、37℃で24時間インキュベーションすることにより生成された細菌マット(bacterial lawns)に、阻害領域を生成する能力について試験した。
【００６２】
結果は、表(IX)に示してある。
【表１１】
2004533882.tif 000012
【００６３】
硝酸ビスマスとミノサイクリンの組み合わせの増強された抗菌活性を立証している表(IX)に示されている結果に鑑みて、トリクロサン及び/又はミノサイクリンと組み合わせた亜鉛塩及びセリウム塩について以下の用に試験した。
【００６４】
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００６５】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び2％(w/v)の酢酸亜鉛；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び2％(w/v)の硝酸銀；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の1％(w/v)の炭酸銀；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)の硝酸セリウム；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン及び2.4％(w/v)の硝酸セリウム。
【００６６】
上記塩は、0.8％(w/v)の各塩の金属を提供する濃度で使用した。
【００６７】
次いで、カテーテルを切断して断片とし、108cfu/mLの培養濃度のＰ.アエルギノサ(P.aeruginosa)の0.3mL又は108cfu/mLの培養濃度のカンジダ・アルビカンス(Candida albicans)の0.5mLによってそれぞれ生成された細菌マット(bacterial lawns)又は酵母マット(yeast lawns)に、阻害領域を生成する能力について試験した。表(Ｘ)に記載されている以下の結果が得られた。
【表１２】
2004533882.tif 000013
【００６８】
実施例：ビスマスとミノサイクリンの組み合わせ
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００６９】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン。
【００７０】
次いで、種々のカテーテルの断片を、スタフィロコッカス・エピデルミディス(Staphylococcus epidermidis)、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)、アシネトバクター・カルコアセチクス(Acinetobacter calcoaceticus)又はエンテロバクター・アエロゲネス(Enterobacter aerogenes)の108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種することにより生成させた細菌マット(bacterial lawns)に阻害領域を生成する能力について試験した。阻害領域は、前記平板を37℃で24時間培養した後で測定した。結果は表(XI)に示してある。
【表１３】
2004533882.tif 000014
【００７１】
非クロルヘキシジン系のグループの抗菌スペクトラムをさらに改善するために、以下の組み合わせを評価した。ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００７２】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の5％(w/v)のトリクロサン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン、2％(w/v)の硝酸ビスマス及び5％(w/v)のトリクロサン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム(ＢＺＫ)；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン、2％(w/v)の硝酸ビスマス及び0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム。
【００７３】
酵母カンジダ・アルビカンス(Candida albicans)も試験パネルに加え、108cfu/mLの培養物の0.5mLを用いて酵母マット(yeast lawn)を生成させた以外は、本節において上記したのと同様にして、処理したカテーテルの阻害領域を生成する能力について試験した。結果は表(XII)に示してある。
【表１４】
2004533882.tif 000015
【００７４】
上記結果は、ビスマス塩及びミノサイクリンと一緒トリクロサンを使用することで、ともにカテーテルが関連する感染に関係しているエンテロバクター(Enterobacter)及びアシネトバクター(Acinetobacter)に対する抗菌活性が増大したことを示している。ビスマス塩及びミノサイクリンと一緒にＢＺＫを使用することで、抗菌スペクトラムが改善されて、抗菌スペクトラムにＣ.アルビカンス(C.albicans)も含まれるようになった。試験したグループの中で、5％トリクロサンを処理したグループ以外は全て、Ｓ.エピデルミディス（S.epidermidis)に対して良好な活性を示した。
【００７５】
実施例：ＢＺＫ、ミノサイクリン及びビスマス塩
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００７６】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム(ＢＺＫ)；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム、2％(w/v)の硝酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の5％(w/v)のトリクロサン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン、2％(w/v)の硝酸ビスマス及び5％(w/v)のトリクロサン；
及び、
対照としての、未処理カテーテル。
【００７７】
次いで、処理したカテーテルを乾燥させ、切断して断片とし、断片化されたカテーテルを用いて、Ｓ.エピデルミディス(S.epidermidis)の108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種した後播種した平板を当該平板上に垂直においた上記カテーテルの断片と一緒に37℃で24時間インキュベーションすることにより生成させたＳ.エピデルミディス(S.epidermidis)のマット(lawns)上に阻害領域を生成させた。
【００７８】
阻害領域が大きすぎて正確に測定できないことがわかったので、当該阻害領域内から1mm2の領域を1つ得て、抗生物質を含んでいない平板上で二次培養した。結果は表(XIII)に示してある。トリクロサン又はＢＺＫを使用することで、ビスマス塩及びミノサイクリンの抗菌活性が増強されることが見いだされた。
【表１５】
2004533882.tif 000016
【００７９】
実施例：抗菌薬/消毒薬の組み合わせ
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００８０】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス及び3％(w/v)のリファンピン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む2％(w/v)の硝酸ビスマス、3％(w/v)のミノサイクリン及び5％(w/v)のトリクロサン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス、3％(w/v)のリファンピン及び5％(w/v)のトリクロサン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス、3％(w/v)のミノサイクリン及び0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス及び0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のリファンピン；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム。
【００８１】
次いで、種々のカテーテルの断片を、スタフィロコッカス・エピデルミディス(Staphylococcus epidermidis)、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)、アシネトバクター・カルコアセチクス(Acinetobacter calcoaceticus)、エンテロバクター・アエロゲネス(Enterobacter aerogenes)又はカンジダ・アルビカンス(Candida albicans)の108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種することにより生成させた細菌マット(bacterial lawns)に阻害領域を生成する能力について試験した。阻害領域は、前記平板を37℃で24時間培養した後で測定した。結果は表(XIV)に示してある。
【００８２】
得られたデータは、硝酸ビスマスと抗生物質ミノサイクリン又はリファンピンのいずれかとの組み合わせがＰ.アエルギノサ(P.aeruginosa)に対して増強された活性を有することを示している。この点について、ミノサイクリンとビスマス塩の組み合わせは、リファンピンとビスマス塩の組み合わせよりも優れた活性を有しているように思われる。硝酸ビスマスとミノサイクリンの組み合わせは、アシネトバクター(Acinetobacter)及びエンテロバクター(Enterobacter)の細菌に対しても増強された活性を示した。この組み合わせに塩化ベンザルコニウムを加えることによって、Ｃ.アルビカンス(C.albicans)とアシネトバクター(Acinetobacter)に対する抗菌活性が上昇した。さらに、塩化ベンザルコニウムとミノサイクリンとビスマス塩の組み合わせが、広いスペクトラムの抗菌活性を示すことが見いだされた。
【表１６】
2004533882.tif 000017
【００８３】
実施例：抗生物質と硝酸ビスマスの組み合わせ
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００８４】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のリファンピン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のリファンピン及び2％(w/v)硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のゲンタマイシン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のゲンタマイシン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトブラマイシン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトブラマイシン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のセフタジジン(ceftazidine)；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のセフタジジン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のジクロキサシリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のジクロキサシリン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のノルフロキサシン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のノルフロキサシン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のミノサイクリン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のバシトラシン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のバシトラシン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のミコナゾール；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のミコナゾール及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)の硝酸ビスマス。
【００８５】
次いで、種々のカテーテルの断片を、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)の108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種することにより生成させた細菌マット(bacterial lawns)に阻害領域を生成する能力について試験した。カテーテルの断片を前記播種した平板の上に垂直に置き、次いで、前記平板を37℃で24時間インキュベーションした後、細菌増殖を阻害している領域を測定した。
【００８６】
結果は表(XV)に示してある。
【表１７】
2004533882.tif 000018
【００８７】
実施例：種々のビスマス塩/ミノサイクリンの組み合わせ
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の1つで処理した。
【００８８】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の硝酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の酢酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の酢酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のクエン酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のクエン酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のサリチル酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のサリチル酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のホウ酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のホウ酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のマンデル酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のマンデル酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のパルミチン酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のパルミチン酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の安息香酸ビスマス；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)の安息香酸ビスマス及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のビスマススルファジアジン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の2％(w/v)のビスマススルファジアジン及び3％(w/v)のミノサイクリン；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦの5％(w/v)のミノサイクリン。
【００８９】
次いで、種々のカテーテルの断片を、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)の108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種することにより生成させた細菌マット(bacterial lawns)に阻害領域を生成する能力について試験した。カテーテルの断片を前記播種した平板の上に垂直に置き、次いで、前記平板を37℃で24時間インキュベーションした後、細菌増殖を阻害している領域を測定した。
【００９０】
結果は表(XVI)に示してあり、これは、ミノサイクリンがビスマス塩の抗シュードモナス活性を増強することを示している。
【表１８】
2004533882.tif 000019
【００９１】
実施例：広域スペクトルの抗菌活性
ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００９２】
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の5％(w/v)のトリクロサン、3％(w/v)のミノサイクリン及び0.5% (w/v)の塩化ベンザルコニウム(ＢＺＫ)；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のクロルヘキシジン遊離塩基及び3％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のクロルヘキシジン遊離塩基、3％(w/v)のミノサイクリン及び1％(w/v)の炭酸銀；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の3％(w/v)のクロルヘキシジン遊離塩基、2％(w/v)のトリクロサン及び2％(w/v)のミノサイクリン；
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む50％(v/v)のメタノールと50％(v/v)のＴＨＦ中の0.5％(w/v)の塩化ベンザルコニウム、3％(w/v)のミノサイクリン及び2％(w/v)の硝酸ビスマス；
又は、
3％(w/v)の６０Ｄポリウレタンと1％(w/v)の９３Ａポリウレタンを含む70％(v/v)のＴＨＦと30％(v/v)のメタノール中の6％(w/v)のクロルヘキシジンジアセテート。
【００９３】
次いで、種々のカテーテルの断片を、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)、アシネトバクター・カルコアセチクス(Acinetobacter calcoaceticus)、スタフィロコッカス・エピデルミディス(Staphylococcus epidermidis)又はカンジダ・アルビカンス(Candida albicans)の108cfu/mLの培養物の0.3mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種することにより生成させた細菌マット(bacterial lawns)に阻害領域を生成する能力について試験した。阻害領域は、前記平板を37℃で24時間培養した後で測定した。結果は表(XVII)に示してある。
【表１９】
2004533882.tif 000020
【００９４】
実施例：ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテル
方法：  ポリウレタン製カテーテルを以下の溶液の１つで処理した。
【００９５】
70％(v/v)のテトラヒドロフラン(ＴＨＦ)と30％(v/v)のメタノール(ＭｅＯＨ)中の3.5％のクロルヘキシジンジアセテート(ＣＨＡ)、0.75％の銀スルファジアジン(ＡｇＳＤ)、3％の９３Ａポリウレタン(９３Ａ)及び1％の６０Ｄポリウレタン(６０Ｄ)で室温で2秒間〜5秒間；
50％のＴＨＦ中の3％のクロルヘキシジン遊離塩基(ＣＨＸ)、1％のミノサイクリン(Ｍ)及び3.5％の６０Ｄポリウレタンで室温で2秒間〜5秒間。
【００９６】
あるいは、ミノサイクリン(Ｍ)とリファンピン(Ｒ)が染み込ませてあって0.5mgのＭと0.5mgのＲを含んでいるカテーテルを購入した(Cook Critical Careから市販されている)。
【００９７】
次いで、種々のカテーテルを、1×108cfu/mLの培養濃度のＳ.エピデルミディス(S.epidermidis)若しくはＡ.カルコアセチクス(A.calcoaceticus)の0.3mL又は1×108cfu/mLの培養濃度のＣ.アルビカンス(C.albicans)の0.5mLをトリプチケースソイアガー(trypticase soy agar)平板に播種することにより生成させた細菌マット(bacterial lawns)又は酵母マット(yeast lawns)に阻害領域を生成する能力について試験した。試験カテーテルの0.5cm断片を、前記平板に垂直に埋め込んだ。阻害領域は、前記平板を37℃で24時間インキュベーションした後で測定した。
【００９８】
結果：  上記で調製したカテーテル中のクロルヘキシジンとミノサイクリンの薬物濃度は、下記表(XVIII)に示してある。
【表２０】
2004533882.tif 000021
【００９９】
前節に記載してある実験により表(XIX)及び表(XX)に示されている結果が得られた。
【表２１】
2004533882.tif 000022
【０１００】
【表２２】
2004533882.tif 000023
【０１０１】
上記結果は、ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理されたカテーテルが、残りのグループのカテーテルと比較して、Ｓ.エピデルミディス(S.epidermidis)及びＡ.カルコアセチクス(A.calcoaceticus)に対して長期間にわたり増強された活性を有することを示している。
【０１０２】
実施例：ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルのＳ.アウレウス(S.aureus)に対する抗付着作用
方法：  Ｓ.アウレウス(S.aureus)の細菌の付着性を測定するために、ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルの効力を、インビトロの寒天管(ager tract)モデルとインビボのラット皮下モデルを用いて試験した。
【０１０３】
ポリウレタン製カテーテルの断片を以下の溶液の１つで処理した。
【０１０４】
70％(v/v)のテトラヒドロフラン(ＴＨＦ)と30％(v/v)のメタノール(ＭｅＯＨ)中の3.5％のクロルヘキシジンジアセテート(ＣＨＡ)、0.75％の銀スルファジアジン(ＡｇＳＤ)、3％の９３Ａポリウレタン(９３Ａ)及び1％の６０Ｄポリウレタン(６０Ｄ)で室温で2秒間〜5秒間；
50％のＴＨＦ中の3％のクロルヘキシジン遊離塩基(ＣＨＸ)、1％のミノサイクリン(Ｍ)及び3.5％の６０Ｄポリウレタンで室温で2秒間〜5秒間。
【０１０５】
あるいは、ミノサイクリン(Ｍ)とリファンピン(Ｒ)が染み込ませてあって0.5mgのＭと0.5mgのＲを含んでいるカテーテルを購入した(Cook Critical Careから市販されている)。
【０１０６】
12.5mLの培養培地(0.5％寒天＋0.03％ＴＳＢ＋20％ＢＡＳ＋0.5％Parmalat)を含む培養試験管を準備した。種々のカテーテルの4cmの断片を軟寒天培地に垂直に埋め込んで、埋め込んだカテーテル断片の一端の0.5cmが培地から突き出るようにした。望ましい時間間隔でカテーテルを新しい培地に転移させて、インビボの薬物クリアランスをシミュレーションし、24時間後に、挿入部位に1×107cfu/mLを含んでいるＳ.アウレウス(S.aureus)の培養物の20μLを用いて感染させた。次いで、前記試験管を37℃で7日間インキュベーションした。次いで、カテーテルを培地から取り去り、そのカテーテルを2回すすぎ洗いした後ブロッティングして乾燥させ、両端から1cmを切り離し、前記断片の中央から2cm断片を切り取って4mLのＬＴＳＢに懸濁させ、20分間超音波処理することにより、細菌の付着性を測定した。その後、ＬＴＳＢの0.5mLをＴＳＡ平板又はＤＥ平板に播種した。
【０１０７】
インビボモデル：  インビボでの感染試験のために、カテーテルを上記した寒天管(agar tract)インビトロ試験におけるカテーテルと同様に処理したが、但し、カテーテルはラットの皮下嚢に埋め込み、望ましい時間間隔で、1×108cfu/mLのＳ.アウレウス(S.aureus)の培養物の25μLを用いて感染させた。細菌の付着性の測定は、上記した寒天管(agar tract)インビトロ試験におけるカテーテルと同様に行ったが、但し、カテーテルは、感染の7日後に前記皮下嚢から取り除いた。
【０１０８】
結果：  前節に記載した、インビトロの寒天管(agar tract)モデルとインビボのラット皮下モデルを用いた実験の結果は、表(XXI)に示してある。
【表２３】
2004533882.tif 000024
【０１０９】
上記結果は、埋め込み後14日目と21日目に感染させた場合は全てのグループのカテーテルがインビトロとインビボの両方のモデルにおいて等しく効果を有していたが、44日目に感染させた場合は、ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルが残りのグループのカテーテルに比較して、コロニー形成が著しく少なかったことを示している。
【０１１０】
実施例：ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルのＰ.アエルギノサ(P.aeruginosa)に対する抗付着作用
方法：  細菌の付着性を測定するインビトロモデルを用いた先の実施例に記載したように、ポリウレタン製カテーテルを上記溶液の１つで処理した。
【０１１１】
カテーテルの断片を先の実施例に記載したように試験培地に埋め込むことによって種々のカテーテルを試験したが、但し、5日後に培地を交換し、第6日目に、1×103cfu/mLのＰ.アエルギノサ(P.aeruginosa)の懸濁液の20μLを用いて挿入部位に接種した。7日間インキュベーションした後、先の実施例に記載したようにして細菌の付着性を測定した。
【０１１２】
結果：  表(XXII)に示されているように、Ｐ.アエルギノサ(P.aeruginosa)の細菌の付着性はミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルでより少ないことが見いだされた。
【表２４】
2004533882.tif 000025
【０１１３】
実施例：ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルのＣ.アルビカンス(C.albicans)に対する抗付着作用
方法：  寒天管(agar tract)インビトロモデルを用いたＰ.アエルギノサ(P.aeruginosa)に対する先の実施例に記載したように、ポリウレタン製カテーテルを上記溶液の１つで処理したが、但し、試験培地に0.5％のガラクトースと0.1mMのＣａＣｌ2を補足して酵母Ｃ.アルビカンス(C.albicans)の付着性を増強した。カテーテルの埋め込み後第0日目の埋め込み直後、埋め込み4時間後及び埋め込み4日後に、培地を交換した後、1×107cfu/mLのＣ.アルビカンス(C.albicans)の懸濁液の20μLを用いてカテーテルに感染させた。Ｐ.アエルギノサ(P.aeruginosa)に対する先の実施例に記載したように、7日後に付着性を試験した。
【０１１４】
結果：  表(XXIII)に示されているように、Ｃ.アルビカンス(C.albicans)の付着性はミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルで残りのグループのカテーテルより少ないことが見いだされた。
【表２５】
2004533882.tif 000026
【０１１５】
実施例：ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルのＳ.アウレウス(S.aureus)に対する長期抗付着作用
方法：  カテーテルが大量の液体に長期間にわたって囲まれている状況をシミュレーションするために、インビボモデルを用いたＳ.アウレウス(S.aureus)に対する先の実施例に記載したように、ポリウレタン製カテーテルを上記溶液の１つで処理したが、但し、試験カテーテルの4cm断片をラットの腹側の腹水の中に埋め込み、27日後に取り除いた。次いで、これらの断片を寒天管(agar tract)培地に埋め込んで、24時間後にＳ.アウレウス(S.aureus)を感染させた。感染の7日後、Ｓ.アウレウス(S.aureus)に対する先の実施例に記載したようにカテーテルを付着性を測定するために処理した。
【０１１６】
結果：  前節に記載した実験により、表(XXIV)に示されている結果が得られた。
【表２６】
2004533882.tif 000027
【０１１７】
上記結果は、Ｓ.アウレウス(S.aureus)の付着性に関し、ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテル上のコロニーが残りのグループのカテーテルと比較して1対数少ないことが見いだされたことを示している。
【０１１８】
実施例：ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルの内腔抗菌作用
方法：  ポリウレタン製カテーテルの内腔表面と外表面の両方を以下の１つで処理した。
【０１１９】
80％(v/v)のＭｅＯＨと20％(v/v)のＴＨＦ中の1.2％のＣＨＡ及び1.2％のＣＨＸ；
80％(v/v)のＭｅＯＨと20％(v/v)のＴＨＦ中の2％のＣＨＸ及び1％のミノサイクリン；又は、
80％(v/v)のＭｅＯＨと20％(v/v)のＴＨＦ中の1％のＣＨＡ、1％のＣＨＸ及び1％のトリクロサン(Ｔ)。
【０１２０】
次いで、種々のカテーテルを細菌の付着性について試験した。全ての試験カテーテルの内腔表面に、10％ＴＳＢを含んでいる食塩水を7日間連続的に灌流させた後、1×107cfu/mLのＳ.アウレウス(S.aureus)又はＥ.アエロゲネス(E.aerogenes)の培養物で24時間囲まれている状態に置いた。次いで、カテーテルを1cm断片に切断し、各断片を4mLのＬＴＳＢに懸濁させ、それらを20分間超音波処理することにより、カテーテル(本体、伸張管(extension lines)及びハブ)を細菌の付着性に関して評価した。その後、ＬＴＳＢの0.5mLをＴＳＡ平板又はＤＥ平板に播種した。
【０１２１】
結果：  結果は、表(XXV)、表(XXVI)及び表(XXVII)に示してある。
【表２７】
2004533882.tif 000028
【０１２２】
【表２８】
2004533882.tif 000029
【０１２３】
【表２９】
2004533882.tif 000030
【０１２４】
検討：  表(XXV)、表(XXVI)及び表(XXVII)に示されているデータに基づくと、特にハブにおいて、ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテルが細菌の付着が最も少ないように思われる。表(XXVI)では、Ｓ.アウレウス(S.aureus)の付着性に関し、ミノサイクリンとクロルヘキシジンで処理したカテーテル上のコロニーが残りのグループのカテーテルと比較して1対数少ないことが見いだされている。
【０１２５】
実施例：末梢挿入中心静脈カテーテル上での長期抗付着作用
方法：  末梢挿入中心静脈カテーテル(ＰＩＣＣ)を、Ｓ.アウレウス(S.aureus)に対する長期効果に関して試験した。ポリウレタン製ＰＩＣＣカテーテルの外表面を、以下の１つで処理した。
【０１２６】
80％(v/v)のＭｅＯＨと20％(v/v)のＴＨＦ中の2％のＣＨＡ、1.5％のＣＨＸ、0.75％のＡｇＳＤ、3％の９３Ａポリウレタン及び1％の６０Ｄポリウレタン；
又は、
80％(v/v)のＭｅＯＨと20％(v/v)のＴＨＦ中の2％のＣＨＡ、1％のＣＨＸ、1％のＭ、3％の９３Ａポリウレタン及び1％の６０Ｄポリウレタン。
【０１２７】
別々のポリウレタン製ＰＩＣＣカテーテルの内腔表面を、以下の溶液の１つで100秒間処理した。
【０１２８】
80％(v/v)のＭｅＯＨと20％(v/v)のＴＨＦ中の1.2％のＣＨＡ及び1.2％のＣＨＸ；
又は、
80％(v/v)のＭｅＯＨと20％(v/v)のＴＨＦ中の1％のＭ及び2％のＣＨＸ。
【０１２９】
上記カテーテルの外表面を、前述した寒天管(agar tract)インビトロモデルに従ってアッセイした。全ての試験カテーテルの内腔表面は、先の実施例に記載されているようにアッセイしたが、但し、試験カテーテルの内腔を、上記処理溶液に灌流により100秒間晒した。
【０１３０】
種々のカテーテルを先の実施例において記載した寒天管(agar tract)インビトロモデルで記載されているように細菌の付着性について試験したが、但し、12日後にカテーテルを新しい培地に転移させ、1×107cfu/mLのＳ.アウレウス(S.aureus)の懸濁液と一緒にインキュベーションした。感染の7日後に、先に記載したように細菌の付着性を評価した。
【０１３１】
結果：  結果は、表（XXVIII)及び表(XXVIV)に示してある。
【表３０】
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【０１３２】
【表３１】
2004533882.tif 000032
【０１３３】
検討：  表(XXVIII)及び表(XXVIV)に示されているデータに基づくと、特にハブにおいて、ミノサイクリンとクロルヘキシジンジアセテートとクロルヘキシジン遊離塩基で処理したカテーテルが外表面と内腔表面の両方で細菌の付着が最も少ないように思われる。
【０１３４】
本明細書中で種々の刊行物が引用されているが、その内容の全体は本明細書に組み入れられる。
【国際公開パンフレット】
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2004533882.tif 000034
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【国際調査報告】
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2004533882.tif 000089
2004533882.tif 000090