(57)【要約】本発明は、腫瘍および腫瘍転移を治療するための併用療法であって、受容体型チロシンキナーゼアンタゴニスト／阻害剤、特にＥｒｂＢ受容体アンタゴニスト、より好ましくはＥＧＦ受容体（Ｈｅｒ  １）アンタゴニストおよび抗血管新生剤、好ましくはインテグリンアンタゴニストを、場合により、アンタゴニスト／阻害剤の前記組合せと一緒に投与した場合に相加または相乗効果を有する化学療法剤および／または放射線療法などの薬剤または療法と一緒に投与することを含む方法に関する。この療法は、腫瘍細胞増殖に対する個々の治療剤の阻害効果に相乗的な潜在的増加をもたらし、個々の成分を単独で投与することにより見いだされるよりも効果的な治療を得ることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（i）少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性および
（ii）少なくとも１種類の血管新生阻害特異性を有する１つまたは複数の薬剤
と（ここで、前記１つまたは複数の薬剤はサイトカイン免疫複合体ではない）、
場合により薬剤として許容される担体、希釈剤またはレシピエントを一緒に含む薬剤組成物。
【請求項２】
細胞傷害性薬剤をさらに含む請求項１に記載の薬剤組成物。
【請求項３】
（i）受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性を有する少なくとも１つの薬剤、および
（ii）血管新生阻害特異性を有する少なくとも１つの薬剤
を含む、請求項１または２に記載の薬剤組成物。
【請求項４】
受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性ならびに血管新生阻害特異性を有する１つの薬剤を含む、請求項１または２に記載の薬剤組成物。
【請求項５】
前記薬剤（i）がＥｒｂＢ受容体遮断特異性を有する、請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項６】
前記薬剤のＥｒｂＢ受容体特異性がＥＧＦ受容体（ＥｒｂＢ１／Ｈｅｒ１）またはＥｒｂＢ２／Ｈｅｒ２受容体と関連する、請求項５に記載の薬剤組成物。
【請求項７】
前記薬剤が、ＥｒｂＢ１（Ｈｅｒ１）またはＥｒｂ２（Ｈｅｒ２）受容体のエピトープと結合する結合部位を含む抗体または機能的に無傷なその誘導体である、請求項６に記載の薬剤組成物。
【請求項８】
前記抗体または機能的に無傷なその誘導体が以下の群：
−ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）
−キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）
−ヒト化モノクローナル抗体Ｈｅｒ２
からなる群から選択される、請求項７に記載の薬剤組成物。
【請求項９】
前記血管新生阻害剤がａVβ3、ａVβ5またはａVβ6インテグリン阻害剤である、請求項１から８のいずれかに記載の薬剤組成物。
【請求項１０】
前記インテグリン阻害剤がＲＧＤ含有直鎖状または環状ペプチドである、請求項９に記載の薬剤組成物。
【請求項１１】
前記ペプチドがシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）である、請求項１０に記載の薬剤組成物。
【請求項１２】
前記抗体または機能的に無傷なその誘導体がヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）またはキメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）であり、前記インテグリン阻害剤がシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）である、請求項７および９に記載の薬剤組成物。
【請求項１３】
シスプラチン、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシンの一群の化合物のいずれかから選択される化学療法剤をさらに含む、請求項１２に記載の薬剤組成物。
【請求項１４】
前記インテグリン阻害剤が、インテグリン受容体のエピトープと結合する結合部位を含む抗体または機能的に無傷なその誘導体である、請求項９に記載の薬剤組成物。
【請求項１５】
前記抗体がＬＭ６０９またはＰ１Ｆ６である、請求項１４に記載の薬剤組成物。
【請求項１６】
前記薬剤が、受容体型チロシンキナーゼのエピトープと結合する第１の結合部位、および血管新生受容体のエピトープと結合する第２の結合部位を含む二重特異性抗体またはヘテロ抗体分子である、請求項４に記載の薬剤組成物。
【請求項１７】
前記二重特異性抗体またはヘテロ抗体分子が、ＥｒｂＢ受容体のエピトープと結合する第１の結合部位と、およびインテグリン受容体のエピトープと結合する第２の結合部位とを含む、請求項１６に記載の薬剤組成物。
【請求項１８】
ＥｒｂＢ受容体のエピトープと結合する前記結合部位がモノクローナル抗体ｈ４２５、ｃ２２５またはＨｅｒ２から選択され、インテグリン受容体のエピトープと結合する前記結合部位がモノクローナル抗体ＬＭ６０９またはＰ１Ｆ６から選択される、請求項１７に記載の薬剤組成物。
【請求項１９】
前記薬剤が、前記特異性の１つを有する抗体または抗体フラグメント、およびその抗体または抗体フラグメントに融合した、他の特異性を有する非免疫学的分子からなる免疫複合体である、請求項４に記載の薬剤組成物。
【請求項２０】
抗体部分またはそのフラグメントがＥｒｂＢ受容体のエピトープと結合する結合部位を含み、融合した非免疫学的分子がインテグリン受容体のエピトープと結合する結合部位を含む、請求項１９に記載の薬剤組成物。
【請求項２１】
ＥｒｂＢ受容体のエピトープと結合する前記抗体部分がモノクローナル抗体ｈ４２５、ｃ２２５またはＨｅｒ２から選択され、インテグリン受容体のエピトープと結合する前記非免疫学的部分がシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）である、請求項２０に記載の薬剤組成物。
【請求項２２】
（i）少なくとも１つのＥｒｂＢ受容体遮断剤を含む包装、および
（ii）少なくとも１つの血管新生阻害剤を含む包装
を含む薬剤キット。
【請求項２３】
細胞傷害性薬剤を含む包装をさらに含む、請求項２２に記載の薬剤キット。
【請求項２４】
（i）少なくとも１つのＥｒｂＢ受容体遮断剤および少なくとも１つの血管新生阻害剤を含む包装、および
（ii）細胞傷害性薬剤を含む包装
を含む薬剤キット。
【請求項２５】
前記ＥｒｂＢ受容体遮断剤が前記受容体のエピトープと結合する結合部位を有する抗体または機能的に無傷なその誘導体である、請求項２２〜２４のいずれかに記載の薬剤キット。
【請求項２６】
抗体または機能的に無傷なその誘導体が、ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）、キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）またはヒト化モノクローナル抗体Ｈｅｒ２からなる群から選択される、請求項２５に記載の薬剤キット。
【請求項２７】
前記血管新生阻害剤がａVβ3、ａVβ5またはａVβ6インテグリン阻害剤である、請求項２２から２６のいずれかに記載の薬剤キット。
【請求項２８】
前記インテグリン阻害剤がＲＧＤ含有直鎖状または環状ペプチドである、請求項２７に記載の薬剤組成物。
【請求項２９】
前記ペプチドがシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）である、請求項２８に記載の薬剤組成物。
【請求項３０】
前記血管新生阻害剤が抗体または機能的に無傷なその誘導体である、請求項２２から２６のいずれかに記載の薬剤キット。
【請求項３１】
前記抗体がＬＭ６０９またはＰ１Ｆ６である、請求項３０に記載の薬剤キット。
【請求項３２】
（i）ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）、キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）、または機能的に無傷なその誘導体を含む包装、および
（ii）シクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）を含む包装
を含む、請求項２２に記載の薬剤キット。
【請求項３３】
群：シスプラチン、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシンの一群の化合物のいずれかから選択される化学療法剤をさらに含む、請求項３２に記載の薬剤キット。
【請求項３４】
腫瘍および腫瘍転移を治療するための医薬品を製造するための、請求項１から３３のいずれかに記載の薬剤組成物または薬剤キットの使用方法。
【請求項３５】
患者において腫瘍または腫瘍転移を治療する方法であって、
（i）少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性および
（ii）少なくとも１種類の血管新生阻害特異性
を有する治療上有効な量の１つまたは複数の薬剤（ここで、前記１つまたは複数の薬剤はサイトカイン免疫複合体ではない）を前記患者に投与することを含む方法。
【請求項３６】
さらに細胞傷害性薬剤を患者に投与する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記１つまたは複数の薬剤がＥｒｂＢ受容体ファミリーと関連する受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性を有する、請求項３５または３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記薬剤のＥｒｂＢ受容体特異性がＥＧＦ受容体（ＥｒｂＢ１／Ｈｅｒ１）またはＥｒｂＢ２／Ｈｅｒ２受容体と関連する、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記薬剤がＥｒｂＢ１（Ｈｅｒ１）またはＥｒｂ２（Ｈｅｒ２）受容体のエピトープと結合する結合部位を含む抗体または機能的に無傷なその誘導体である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記抗体またはその誘導体が、ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）、キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）またはヒト化モノクローナル抗体Ｈｅｒ２からなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記血管新生阻害剤が、ａVβ3、ａVβ5もしくはａVβ6インテグリン阻害剤またはＶＥＧＦ受容体遮断剤である、請求項３５から４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
治療上有効な量の（i）ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）またはキメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）、（ii）シクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）、および場合により（iii）シスプラチン、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシンを患者に投与することを含む、請求項４１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍および腫瘍転移を治療するための併用療法であって、受容体型チロシンキナーゼアンタゴニスト／阻害剤、特にＥｒｂＢ受容体アンタゴニスト、より好ましくはＥＧＦ受容体（Ｈｅｒ１）アンタゴニストおよび抗血管新生剤、好ましくはインテグリンアンタゴニストを、場合により、アンタゴニスト／阻害剤の前記組合せと一緒に投与した場合に相加または相乗効果を有する化学療法剤および／または放射線療法などの薬剤または治療形態と一緒に投与することを含む方法に関する。この療法は、腫瘍細胞増殖に対する個々の治療剤の阻害効果に相乗的ポテンシャル増加をもたらすことができ、個々の成分を単独で投与することにより見いだされるよりも効果的な治療が得られる。
【背景技術】
【０００２】
上皮成長因子受容体（ＥＧＦ受容体またはＥＧＦＲ）、ｃ−ｅｒｂＢ１／Ｈｅｒ１としても公知である、およびｎｅｕ癌遺伝子の産物（ｃ−ｅｒｂＢ２／Ｈｅｒ２としても公知）は、ＥＦＧ受容体スーパーファミリーのメンバーであり、受容体型チロシンキナーゼの大ファミリーに属している。それらの受容体は、細胞表面上でＥＧＦまたはＴＧＦアルファなどの特異的成長因子または天然リガンドと相互作用し、受容体型チロシンキナーゼを活性化する。一般に、下流のシグナル伝達タンパク質のカスケードが活性化され、遺伝子発現の変化および成長速度の増加につながる。
【０００３】
Ｃ−ｅｒｂＢ２（Ｈｅｒ２）は、約１８５，０００の分子量を有する膜貫通型チロシンキナーゼであり、ＥＧＦ受容体（Ｈｅｒ１）とはかなりの相同性を持つが、Ｈｅｒ２に特異的なリガンドはこれまでのところ明確には同定されていない。
【０００４】
ＥＧＦ受容体は、１７０，０００の分子量を有する膜貫通型糖タンパク質であり、多くの上皮細胞タイプ上に見いだされる。この受容体は、少なくとも３種類のリガンド、ＥＧＦ、ＴＧＦ−α（トランスフォーミング成長因子アルファ）およびアンフィレギュリンによって活性化される。上皮成長因子（ＥＧＦ）とトランスフォーミング成長因子−アルファ（ＴＧＦ−α）は共に、ＥＧＦ受容体と結合し、細胞増殖および腫瘍成長をもたらすことが明らかにされている。これらの成長因子はＨｅｒ２とは結合しない（ＵｌｒｉｃｈおよびＳｃｈｌｅｓｉｎｇｅｒ、１９９０、Ｃｅｌｌ  ６１、２０３）。成長因子のいくつかのファミリーがそれらの二量体的性質によって受容体二量化を引き起こすのとは対照的に（例えばＰＤＧＦ）、ＥＧＦなどの単量体成長因子は、それらの受容体に対する２個の結合部位を含むため、２個の隣接するＥＧＦ受容体を架橋することができる（Ｌｅｍｍｏｎ他、１９９７、ＥＭＢＯ  Ｊ．１６、２８１）。受容体二量化は、内因性触媒活性の刺激および成長因子受容体の自己リン酸化にとって不可欠である。受容体型タンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）は、ホモ二量化もヘテロ二量化も受けることができることに注意しなければならない。
【０００５】
臨床試験は、ＥＧＦ受容体とｃ−ｅｒｂＢ２が共に、特定タイプの腫瘍、特に乳癌、卵巣癌、膀胱癌、大腸癌、腎臓癌、頭部および頸部癌、ならびに肺の扁平上皮癌において過剰発現されていることを示している。（Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ、１９８９、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ  ７、３５９；Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ、１９９０、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １、３３９）。したがって、これらの観察は、癌を治療するための新規な治療的手法としてヒトＥＧＦ受容体またはｃ−ｅｒｂＢ２の機能を阻害することを目標とする前臨床研究を促した（例えば、Ｂａｓｅｌｇａ他、１９９６、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１４、７３７；ＦａｎおよびＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎ、１９９８、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１０、６７を参照）。例えば、抗ＥＧＦ受容体抗体および抗Ｈｅｒ２抗体がヒトの癌治療に実りの多い結果を示したことが報告されている。それ故に、ヒト化モノクローナル抗体４Ｄ５（ｈＭＡｂ４Ｄ５、ハーセプチン（登録商標））は、すでに市販されている製品である。
【０００６】
抗ＥＧＦ受容体抗体は、ＥＧＦおよびＴＧＦ−ａが受容体と結合するのを阻止する上に腫瘍細胞増殖を阻害するらしいことが明らかにされている。これらの知見に鑑みて、ＥＧＦ受容体に対するマウスおよびラットの多くのモノクローナル抗体が開発され、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏにおいて腫瘍細胞の成長を阻害する能力について試験されている（ＭｏｄｊｔａｈｅｄｉおよびＤｅａｎ、１９９４、Ｊ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ４、２７７）。ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈＭＡｂ４２５）（ＵＳ５，５５８，８６４；ＥＰ０５３１  ４７２）とキメラモノクローナル抗体２２５（ｃＭＡｂ２２５）（Ｎａｒａｍｕｒａ他、１９９３、Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３７、３４３〜３４９、ＷＯ９６／４０２１０）は共にＥＧＦ受容体を対象とし、臨床試験で有効性を示した。Ｃ２２５抗体は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてはＥＧＦ媒介性腫瘍細胞成長を阻害し、ヌードマウスではｉｎ  ｖｉｖｏにおいてヒト腫瘍形成を阻害することが明らかとなった。さらに、この抗体は、とりわけある種の化学療法剤（すなわち、ドキソルビシン、アドリアマイシン、タキソール、およびシスプラチン）と相乗して作用し、異種移植片マウスモデルではｉｎ  ｖｉｖｏにおいてヒト腫瘍を根絶するように思われた。Ｙｅ他（１９９９、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １８、７３１）は、ｃＭＡｂ２２５とｈＭＡｂ４Ｄ５との組合せでヒト卵巣癌細胞が首尾よく治療できることを報告している。
【０００７】
血管新生は新血管新生とも呼ばれ、組織中への新たな血管の成長を含む組織の血管新生化の一プロセスである。このプロセスは、内皮細胞および平滑筋細胞の浸潤によって媒介される。このプロセスは、３つの方法、すなわち（１）血管が既存の血管から伸びる；（２）血管の新たな発生が前駆細胞から生じる（血管形成）；または（３）既存の小血管の直径が広がるうちいずれか１つにより進行すると考えられている（Ｂｌｏｏｄ他、１９９０、Ｂｉｏｃｈ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １０３２、８９）。血管内皮細胞は、少なくとも５種類のＲＧＤ依存性インテグリンを含有することが知られており、ビトロネクチン受容体（αVβ3またはαVβ5）、ＩおよびＩＶ型コラーゲン受容体、ラミニン受容体、フィブロネクチン／ラミニン／コラーゲン受容体ならびにフィブロネクチン受容体が含まれる（Ｄａｖｉｓ他、１９９３、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５１、２０６）。平滑筋細胞は、少なくとも６種類のＲＧＤ依存性インテグリンを含有することが知られており、αVβ3αVβ5が含まれる。
【０００８】
様々なインテグリンαまたはβサブユニットに対して免疫特異的なモノクローナル抗体を用いるｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける細胞接着の阻害は、微小血管内皮細胞を含む様々な細胞タイプの細胞接着におけるビトロネクチン受容体αVβ3と結びつけられてきた（Ｄａｖｉｓ他、１９９３、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５１、２０６）。
【０００９】
インテグリンは、細胞外マトリックスタンパク質と結合することが知られている細胞受容体の一種であり、細胞−細胞外マトリックス相互作用および一般的に細胞接着事象と呼ばれる細胞−細胞相互作用を媒介する。インテグリン受容体は、αおよびβサブユニットから形成された非共有結合性のヘテロ二量体糖タンパク質複合体という共通の構造的特徴を持つタンパク質の１ファミリーを構成する。ビトロネクチン受容体は、ビトロネクチンと優先的に結合するもともとの特徴から名付けられ、現在はαVβ1、αVβ3およびαVβ5で表される３種類の異なるインテグリンを指すことが知られている。αVβ1は、フィブロネクチンおよびビトロネクチンと結合する。αVβ3は、フィブリン、フィブリノーゲン、ラミニン、トロンボスポンジン、ビトロネクチンおよびフォンヴィレブランド因子を含む様々なリガンドと結合する。αVβ5は、ビトロネクチンと結合する。異なる生物学的機能を有する異なるインテグリンならびに共通の生物学的特異性および機能を有する異なるインテグリンおよびサブユニットが存在することは明らかである。多くのインテグリンにとって重要なリガンド中の認識部位の１つは、アルギニン−グリシン−アスパラギン酸（ＲＧＤ）トリペプチド配列である。ＲＧＤは、ビトロネクチン受容体インテグリンについて上記で同定されたすべてのリガンド中に見いだされる。このＲＧＤ認識部位は、ＲＧＤ配列を含む直鎖状または環状（ポリ）ペプチドによって模倣することができる。このようなＲＧＤペプチドは、インテグリン機能のそれぞれ阻害剤すなわちアンタゴニストであることが知られている。しかしながら、ＲＧＤペプチドの配列および構造に応じて、特異的インテグリンを標的とするように阻害の特異性を変化させることができることに注目することは重要である。様々なインテグリン特異性の様々なＲＧＤポリペプチドが、例えばＣｈｅｒｅｓｈ、他、１９８９、Ｃｅｌｌ  ５８、９４５、Ａｕｍａｉｌｌｅｙ他、１９９１、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｓ．２９１、５０により、および多数の特許出願および特許（例えば、ＵＳ特許４，５１７，６８６、４，５７８，０７９、４，５８９，８８１、４，６１４，５１７、４，６６１，１１１、４，７９２，５２５；ＥＰ０７７０  ６２２）中に記載されている。
【００１０】
新たな血管の発生、すなわち血管新生は、悪性疾患の成長において重要な役割を果たしており、血管新生を阻害する薬剤の開発に大きな関心を生み出した（例えば、Ｈｏｌｍｇｒｅｎ他、１９９５、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １、１４９；Ｆｏｌｋｍａｎ、１９９５、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １、２７；Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ他、１９９４、Ｃｅｌｌ  ７９、３１５を参照）。血管新生を阻害するためのαVβ3インテグリンアンタゴニストの使用法は、固形腫瘍への血液供給を減少させることにより固形腫瘍の成長を阻害するための方法として知られている（例えば、ＵＳ５，７５３，２３０およびＵＳ５，７６６，５９１を参照。αVβ3受容体と結合して血管新生を阻害する合成ポリペプチド、モノクローナル抗体およびαVβ3模倣体などのαVβ3アンタゴニストの使用法について記載している）。ビトロネクチン受容体αVβ5のアンタゴニストを用いて組織のαVβ5媒介性血管新生を阻害する方法および組成物がＷＯ９７／４５４４７に開示されている。血管新生の特徴は、内皮細胞の浸潤、遊走および増殖、細胞外マトリックス成分との細胞相互作用に依存するプロセスである。この文脈において、インテグリン細胞−マトリックス受容体は、細胞の伝播および遊走を媒介する。抗血管新生治療戦略において脈管構造特異的標的を提供することにより、インテグリンαVβ3の内皮接着受容体が中心的存在であることが分かった（Ｂｒｏｏｋｓ他、１９９４、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６４、５６９；Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒ他、１９９５、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７０）。血管新生における血管インテグリンαVβ3の必要性は、いくつかのｉｎ  ｖｉｖｏモデルによって証明されており、移植ヒト腫瘍による新たな血管の発生は、前述のインテグリンαVβ3およびαVβ5のペプチドアンタゴニストを全身投与することにより、あるいは抗αVβ3抗体ＬＭ６０９（Ｂｒｏｏｋｓ他、１９９４、Ｃｅｌｌ  ７９、１１５７；ＡＴＣＣ  ＨＢ９５３７）により完全に阻害された。この抗体はαVβ3インテグリン受容体を遮断し、その天然リガンドによる活性化は増殖性の血管新性血管細胞のアポトーシスを促進し、それによって腫瘍の増殖に不可欠な新たに作成された血管の成熟を中断させる。しかしながら、黒色腫細胞は内皮細胞の非存在下であってもクモの巣状に血管を形成することが最近になって報告され（１９９９、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８５、１４）、腫瘍は、内皮組織の存在下でのみ有効な抗血管新生薬を回避することができることを意味している。
【００１１】
多くの分子は、内皮の増殖、遊走および組立を刺激し、それにはＶＥＧＦ、Ａｎｇ１およびｂＦＧＦを含み、重要な生存要素である。ＶＥＧＦ（血管内皮増殖因子）は、内皮細胞有糸分裂誘発を刺激することができる選択的血管新生増殖因子として同定されている。特に、ＶＥＧＦは、原発腫瘍および虚血性眼疾患における血管新生の主要なメディエータであると考えられている。ＶＥＧＦはホモ二量体（ＭＷ：４６，０００）であり、内皮細胞特異的血管新性（Ｆｅｒｒａｒａ他、１９９２、Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．Ｒｅｖ．、１３、１８）および血管透過性（vasopermeability）因子（Ｓｅｎｇｅｒ他、１９８６、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、４６５６２９）であって、チロシンキナーゼ活性を持つ高親和性膜結合性受容体と結合する（Ｊａｋｅｍａｎ他、１９９２、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、８９、２４４）。ヒト腫瘍生検は、悪性細胞によるＶＥＧＦ  ｍＲＮＡおよび隣接内皮細胞中のＶＥＧＦ受容体ｍＲＮＡの発現の亢進を示す。ＶＥＧＦ発現は、壊死の血管領域に隣接する腫瘍の領域で最大であるように見える。（総説については、Ｔｈｏｍａｓ他、１９９６、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１（２）、６０３；Ｆｏｌｋｍａｎ、１９９５、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １、２７を参照）。ＷＯ９７／４５４４７は、新血管新生におけるαVβ5インテグリン、特にＶＥＧＦ、ＥＧＦおよびＴＧＦ−αにより誘発されるインテグリンに関し、αVβ5アンタゴニストがＶＥＧＦ促進性血管新生を阻害できることを開示している。
【００１２】
また、有効な抗腫瘍治療法は、モノクローナル抗体を用いて血管新生を阻害するために標的とするＶＥＧＦ受容体を利用することができる。（Ｗｉｔｔｅ他、１９９８、Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖ．１７（２）、１５５）。ＭＡｂ  ＤＣ−１０１は、腫瘍細胞の血管新生を阻害することが知られている。
【００１３】
上記に要約して説明したように、ＥＧＦ、ＶＥＧＦならびにインテグリンαVβ3およびαVβ5、およびそれらの受容体が、腫瘍の増殖および腫瘍の血管新生と基本的に関与し、ＥＧＦ受容体および／またはＶＥＧＦ受容体および／またはインテグリン受容体またはその他のタンパク質チロシンキナーゼ受容体を対象とする有効な阻害剤、特にモノクローナル抗体が主に腫瘍治療法に適した候補であることは明らかである。特に興味深いのは、関連受容体上の抗原エピトープを特異的に認識することができるモノクローナル抗体である。
【００１４】
しかしながら、そのような抗体の使用は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび動物モデルにおいて成功したものの、単剤療法としては患者で満足のいく有効性を示したことはない。同様の結果は、抗体以外の抗血管新生剤またはＥＧＦ受容体アンタゴニストを臨床試験で使用した場合にも得られた。腫瘍は、ある特異的部位が遮断されると、他の細胞表面分子を用い、前記の当初の遮断を代償することができるようである。したがって、様々な抗血管新生療法または抗増殖療法の間も腫瘍はあまり縮小しない。これらの理由から、細胞傷害性薬剤または化学療法剤と一緒に、または放射線療法と組み合わせてモノクローナル抗体を用い、この問題を回避するために併用療法が提案された。実際、臨床試験は、これらの併用療法が対応する単剤投与よりも効率的であることを示した。すなわち、例えば抗体−サイトカイン融合タンパク質療法は、癌転移などの樹立腫瘍の免疫反応媒介性阻害を促進すると報告されている。例えば、サイトカインのインターロイキン２（ＩＬ−２）が、それぞれ、腫瘍関連抗原である上皮細胞接着分子（Ｅｐ−ＣＡＭ、ＫＳＡ、ＫＳ１／４抗原）またはジシアロガングリオシドＧＤを対象とする特異的モノクローナル抗体ＫＳ１／４およびｃｈ１４，１８と融合され、それぞれ融合タンパク質ｃｈ１４，１８−ＩＬ−２およびＫＳ１／４−ＩＬ−２が作成されている（ＵＳ５，６５０，１５０）。
【００１５】
別の臨床的手法は、ハーセプチン（登録商標）と組み合わせたモノクローナル抗体ｃ２２５の投与に基づいている（Ｙｅ他、１９９９、Ｉ．ｃ．）。さらに、抗ＥＧＦ受容体抗体とシスプラチンまたはドキソルビシンなどの抗悪性腫瘍薬の組合せがＥＰ０６６７  １６５（Ａ１）およびＵＳ６，２１７，８６６に開示され、同様の組合せ、特にハーセプチン（登録商標）とシスプラチンおよび他の細胞傷害性因子との組合せがＧｅｎｅｎｔｅｃｈのＵＳ５，７７０，１９５に記載された。抗血管新生インテグリンαVアンタゴニストと前述の抗体−サイトカイン融合タンパク質との相乗効果が腫瘍転移で観察された（Ｌｏｄｅ他、１９９９、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９６、１５９１、ＷＯ００／４７２２８）。最近、抗悪性腫瘍剤と一緒にインテグリンアンタゴニストを使用する方法がＷＯ００／３８６６５の特許請求の範囲に記載された。最近、ゲムシタビンと特異的モノクローナル抗体ＤＣ−１０１の組合せが血管新生を阻害し、ゲムシタビン単独に比べてマウスの膵臓癌における抗腫瘍効果を増加させることが見いだされた。ＤＥ１９８  ４２４１５は、インテグリン阻害剤としての特異的環状ＲＧＤペプチドと特異的抗血管新生剤との組合せを開示している。その他の手法は、ＥＧＦ受容体遮断剤、記載された抗体、またはインテグリンアンタゴニストを、それぞれ放射線または放射線療法と組み合わせて投与することを提案している（例えば、ＷＯ９９／６００２３、ＷＯ００／００３８７１５）。
【００１６】
しかしながら、様々な併用療法が研究中かつ臨床試験中であるにもかかわらず、これらの治療法の結果は十分に実を結んではいない。したがって、有効性の向上と副作用の減少を示すことができるさらなる組合せを開発する必要がある。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体、より好ましくはＥＧＦ受容体を遮断または阻害する薬剤を治療上有効な量で抗血管新生剤と一緒に患者へ投与するという腫瘍治療における新たな概念に基づく新規薬剤治療について初めて記載する。場合により、本発明による組成物は、治療上活性な化合物、好ましくは細胞傷害性薬剤、化学療法剤および前記薬剤の有効性を増強するか前記薬剤の副作用を減少させることができるその他の薬理学的に活性な化合物からなる群から選択される化合物をさらに含むことができる。
【００１８】
すなわち、本発明は、好ましいＥｒｂＢ受容体アンタゴニストとして抗ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１／Ｈｅｒ１）抗体および抗血管新生剤としてａVβ3、ａVβ5またはａVβ6インテグリン受容体のいずれかの阻害剤またはアンタゴニスト、好ましくはＲＧＤ含有の直鎖状または環状ペプチドを含む薬剤組成物に関する。特に、本発明は、好ましい実施形態として、ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５、ＥＭＤ７２０００）、キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）またはハーセプチン（登録商標）などの抗ＥＧＦＲ抗体または抗Ｈｅｒ２抗体を、好ましくはＲＧＤ含有インテグリン阻害剤、最も好ましくは環状ペプチドであるシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅ−Ｖａｌ）と一緒に、場合により化学療法化合物と一緒に含む特異的併用療法に関する。
【００１９】
本発明によれば、前記の治療上活性な薬剤は、１つまたは複数の受容体型チロシンキナーゼアンタゴニスト、１つまたは複数の抗血管新生剤、および場合により１つまたは複数の細胞傷害性薬剤／化学療法剤を単一包装または別個の容器に含む包装を含む薬剤キットにより提供することもできる。この組合せによる療法には、場合により放射線による治療が含まれる。
【００２０】
しかしながら、本発明はさらに、抗受容体型チロシンキナーゼ、好ましくは抗ＥｒｂＢ受容体活性および抗血管新生活性を有するただ１つの（融合）分子を、場合により１つまたは複数の細胞傷害性薬剤／化学療法剤と一緒に投与することを含む併用療法に関する。一例は、前述および後述のｈ４２５またはｃ２２５などの抗ＥＧＦＲ抗体であり、これらをＦｃ部分のＣ末端において、公知の組み換え法または化学的方法により抗ホルモン剤と融合させる。別の例は二重特異性抗体であり、１つの特異性は核ホルモン受容体を対象とし、もう１つの特異性はＥＧＦ受容体を対象とする。
【００２１】
基本的に、投与には放射線療法が伴うことがあり、放射線治療は、薬物投与と実質的に同時あるいはその前または後に行うことができる。本発明による併用療法の異なる薬剤の投与は、実質的に同時または逐次行うことができる。腫瘍は、それらの細胞表面上に血管の発生に関与する受容体を有しており、本発明の併用療法によって成功裡に治療することができる。
【００２２】
腫瘍は、それらの発生および成長のために代替経路を引き出すことが知られている。１つの経路が遮断された場合、他の受容体およびシグナル伝達経路を発現しかつ用いることにより別の経路にスイッチする能力を有していることが多い。したがって、本発明の薬剤の組合せは、そのような可能性のある、腫瘍の発生方策のいくつかを遮断し、その結果様々な利益を提供することができる。本発明による組合せは、腫瘍細胞の表面上に存在する関連ホルモン受容体の活性化により発生しかつ成長する腫瘍、腫瘍様および新形成障害ならびに腫瘍転移を治療するのに有用である。本発明の様々な混合薬剤は、低用量、すなわち臨床状況で従来から用いられていたよりも低い用量で組み合わせて投与することが好ましい。患者に投与される本発明の化合物、組成物、薬剤および療法の用量を下げる利点には、高用量に伴う有害作用の発生率の減少が含まれる。例えば、前述および後述の薬剤の用量を下げることにより、高用量で観察される場合に比べて悪心および嘔吐の回数および重症度の低下が見られるはずである。有害作用の発生率を低下させることにより、癌患者の生活の質改善を企図している。有害作用の発生率を低下させる別の利点には、患者コンプライアンスの改善、有害作用の治療に必要な入院数の減少、および有害作用に伴う疼痛を治療するのに必要な鎮痛剤の投与の減少が含まれる。あるいは、本発明の方法および組合せは、高用量における治療効果を最大限に引き出すこともできる。
【００２３】
本発明による組合せにより、細胞表面上に（過剰発現した）ＥｒｂＢ受容体、好ましくはＥｒｂＢ１（Ｈｅｒ１、ＥＧＦＲ）またはＥｒｂＢ２（Ｈｅｒ２）受容体を有する腫瘍を成功裡に治療することができる。本発明による薬剤治療の範囲に含まれる組合せは、驚くべき相乗効果を示す。薬物の組合せを投与すると、顕著な有害薬物反応が検出されることなく、本当の腫瘍縮小および崩壊が臨床試験の間に観察されるであろう。とりわけ、３薬組合せ（受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断剤プラス抗血管新生剤プラス化学療法剤）は優れた有効性を示す。しかしながら、化学療法薬が相乗的に有効であるか否かは薬物自体、受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体アンタゴニストおよび前記薬剤で治療される腫瘍細胞にかかっており、通常はケースバイケースでチェックしなければならない。
【００２４】
詳細には、本発明は、
・（i）少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ遮断／阻害特異性および
（ii）少なくとも１種類の血管新生遮断／阻害特異性
を有する１つまたは複数の薬剤と（ここで、前記１つまたは複数の薬剤はサイトカイン免疫複合体ではない）、
場合により薬剤として許容される担体、希釈剤またはレシピエントとを一緒に含む薬剤組成物；
・第１の代替物として、（i）受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性を有する少なくとも１つの薬剤、および
（ii）血管新生阻害特異性を有する少なくとも１つの薬剤
を含む薬剤；
・第２の代替物として、受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性ならびに血管新生阻害特異性を有する薬剤を含む薬剤組成物；
・少なくとも１つの細胞傷害性薬剤、好ましくは化学療法剤をさらに含む対応する組成物；
・より詳細には、前記薬剤（i）がＥｒｂＢ受容体遮断／阻害特異性を有する薬剤組成物；。
【００２５】
・前記薬剤のＥｒｂＢ受容体特異性がＥＧＦ受容体（ＥｒｂＢ１／Ｈｅｒ１）またはＥｒｂＢ２／Ｈｅｒ２受容体と関連している、相当する薬剤組成物；
・より詳細には、前記薬剤が、ＥｒｂＢ１（Ｈｅｒ１）またはＥｒｂＢ２（Ｈｅｒ２）受容体のエピトープと結合する結合部位を含む抗体または機能的に無傷なその誘導体である薬剤組成物；
・好ましい実施形態として、前記抗体または機能的に無傷なその誘導体が、群：
−ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）
−キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）
−ヒト化モノクローナル抗体Ｈｅｒ２、記載された対応するヒト化、キメラまたは脱免疫化された（de-immunized）機能的に無傷な誘導体
から選択される薬剤組成物；
・前記血管新生阻害剤が、ａVβ3、ａVβ5またはａVβ6インテグリン阻害剤である対応する薬剤組成物；
・前記インテグリン阻害剤が、ＲＧＤ含有直鎖状または環状ペプチド、好ましくはシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）である対応する薬剤組成物；。
【００２６】
・具体的実施形態として、前記抗体または機能的に無傷なその誘導体が、ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）またはキメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）、記載された脱免疫化体であり、前記インテグリン阻害剤が、シクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）であり、場合により、群：シスプラチン、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシンの化合物のいずれかより選択される化学療法剤を場合により別個の容器または包装中に含む薬剤組成物；
・前記インテグリン阻害剤が、インテグリン受容体のエピトープと結合する結合部位を含み、抗体の群：ＬＭ６０９、Ｐ１Ｆ６、１７Ｅ６、１４Ｄ９．Ｆ８、記載されたそのヒト化、キメラおよび脱免疫化バージョンから選択されることが好ましい抗体または機能的に無傷なその誘導体である、対応する薬剤組成物；
・前記薬剤の１つが、受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体のエピトープと結合する第１の結合部位、および血管新生受容体、好ましくはインテグリン受容体のエピトープと結合する第２の結合部位を含む二重特異性抗体またはヘテロ抗体（heteroantibody）分子である薬剤組成物；
・前記モノクローナル抗体が、ｈ４２５、ｃ２２５またはＨｅｒ２、並びにモノクローナル抗体ＬＭ６０９、Ｐ１Ｆ６、１７Ｅ６および１４Ｄ９．Ｆ８から選択される、特異的な対応する薬剤組成物；
・前記薬剤の１つが、前記遮断特異性の１つを有する抗体または抗体フラグメント、および他の特異性を有する抗体または抗体フラグメントと融合した非免疫学的分子からなる免疫複合体である薬剤組成物；。
【００２７】
・抗体部分またはそのフラグメントが、ＥｒｂＢ受容体、好ましくはＥＧＦ受容体（Ｈｅｒ１）のエピトープと結合する結合部位を含み、融合した非免疫学的分子が、インテグリン受容体のエピトープと結合する結合部位を含む対応する薬剤組成物；
・ＥｒｂＢ受容体のエピトープと結合する前記抗体部分が、モノクローナル抗体ｈ４２５、ｃ２２５またはＨｅｒ２から選択され、インテグリン受容体のエピトープと結合する非免疫学的部分がシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）であるその特異的薬剤組成物；
・（i）少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ阻害剤、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断剤を含む包装、および
（ii）少なくとも１種類の血管新生阻害剤、好ましくはａVβ3、ａVβ5またはａVβ6インテグリン受容体阻害剤、より好ましくはＲＧＤ含有直鎖状または環状ペプチド、特にシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）を含む包装、
場合により、細胞傷害性薬剤を含む包装をさらに含む薬剤キット；
・前記ＥｒｂＢ受容体遮断剤が、前記受容体のエピトープと結合する結合部位を有する抗体または機能的に無傷なその誘導体であり、前記抗体が、抗体の群：ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）、キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）またはヒト化モノクローナル抗体Ｈｅｒ２から選択されることが好ましい、対応する薬剤キット；
・前記血管新生阻害剤が、抗体の群：ＬＭ６０９、Ｐ１Ｈ６、１７Ｅ６および１４Ｄ９．Ｆ８から選択されることが好ましい抗体または活性なその誘導体である、薬剤キット；
・本発明の具体的実施形態として、
（i）ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）、キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）、または機能的に無傷なその誘導体を含む包装、および
（ii）シクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）を含み、場合により群：シスプラチン、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシンの化合物のいずれかから選択される化学療法剤を含む包装
を含む特異的薬剤キット；。
【００２８】
・上記、下記および特許請求の範囲で定義する薬剤組成物または薬剤キットの、腫瘍および腫瘍転移を治療するための医薬品を製造するための使用法；
・患者において腫瘍または腫瘍転移を治療するための薬剤治療または方法であって、
（i）少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ遮断特異性、および
（ii）少なくとも１種類の血管新生阻害特異性
を有する治療上有効な量の１つまたは複数の薬剤を（ここで、前記１つまたは複数の薬剤は、サイトカイン免疫複合体ではない）、場合により、細胞傷害性薬剤、好ましくは化学療法剤と一緒に前記患者に投与することを含み、前記薬剤（ｉ）は、ＥｒｂＢ受容体、好ましくはＥｒｂＢ１（Ｈｅｒ１）またはＥｒｂ２（Ｈｅｒ２）受容体のエピトープと結合する結合部位を含む抗体または機能的に無傷なその誘導体であり、前記薬剤（ｉｉ）は、ａVβ3、ａVβ5またはａVβ6インテグリン阻害剤またはＶＥＧＦ受容体遮断剤であることが好ましい、薬剤治療または方法；最後には、
・ＥｒｂＢ受容体を対象とする前記抗体が、群：ヒト化モノクローナル抗体４２５（ｈ４２５）、キメラモノクローナル抗体２２５（ｃ２２５）またはヒト化モノクローナル抗体Ｈｅｒ２から選択され、抗血管新生剤がシクロ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）であり、場合により群：シスプラチン、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシンから選択される細胞傷害性薬物が一緒である対応する方法を指す。
【００２９】
本発明による薬剤組成物およびキットを用いる薬剤治療と同時または連続して放射線療法を行うことができる。
【００３０】
主に、薬剤組成物の４種類の組合せを本発明に従って区別することができる。
【００３１】
（i）少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤と組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性を備える薬剤（２薬組合せ）；
（ii）少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤と組み合わされ、かつ少なくとも１つの化学療法剤と組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性を備える薬剤（３薬組合せ）；
（iii）１分子中に組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性および少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤（２薬活性を有する１薬組合せ）；
（iv）１分子中に組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性および少なくとも１種類の抗血管新生活性を備え、少なくとも１つの化学療法剤と組み合わされた薬剤（３薬活性を有する２薬組合せ）。
【００３２】
薬剤は、前記のいずれの場合においても同時または連続して投与することができる。
【００３３】
上記により、本発明の方法は、主に以下の投与の組合せを含む。
【００３４】
（i）少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤と組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性を備える薬剤（２薬投与）；
（ii）少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤と組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性を備える薬剤（２薬投与）および放射線療法；
（iii）少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤と組み合わされ、かつ少なくとも１つの化学療法剤と組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性を備える薬剤（３薬投与）；
（iv）少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤と組み合わされ、かつ少なくとも１つの化学療法剤と組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性を備える薬剤（３薬投与）および放射線療法；。
【００３５】
（v）１分子中に組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性および少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤（「２薬活性」を有する１薬投与）；
（vi）１分子中に組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性および少なくとも１種類の抗血管新生活性を備える薬剤（「２薬活性」を有する１薬投与）および放射線療法；
（vii）１分子中に組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性および少なくとも１種類の抗血管新生活性を備え、少なくとも１つの化学療法剤と組み合わされる薬剤（「３薬活性」を有する２薬投与）。
【００３６】
（viii）１分子中に組み合わされた少なくとも１種類の受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ受容体遮断活性／特異性および少なくとも１種類の抗血管新生活性を備え、少なくとも１つの化学療法剤と組み合わされる薬剤（「３薬活性」を有する２薬投与）および放射線療法。
【発明の効果】
【００３７】
本発明による薬剤の組合せおよび方法は、様々な利点を提供する。本発明による組合せは、腫瘍、腫瘍様および新形成障害を治療しかつ予防するのに有用である。本発明の様々な混合薬剤は、低用量、すなわち臨床状況で従来から用いられていたよりも低い用量で組み合わせて投与することが好ましい。哺乳類に投与される本発明の化合物、組成物、薬剤および療法の用量を下げる利点には、高用量に伴う有害作用の発生率の減少が含まれる。例えば、メトトレキセート、ドキソルビシン、ゲムシタビン、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシンまたはシスプラチンなどの化学療法剤の用量を下げることにより、高用量で観察される場合に比べて悪心および嘔吐の回数ならびに重症度の低下が見られるはずである。同様の利点は、本発明のインテグリンアンタゴニストと組み合わせた化合物、組成物、薬剤および療法にも企図されている。有害作用の発生率を低下させることにより、癌患者の生活の質改善を企図している。有害作用の発生率を低下させる別の利点には、患者コンプライアンスの改善、有害作用の治療に必要な入院数の減少、および有害作用に伴う疼痛を治療するのに必要な鎮痛剤の投与の減少が含まれる。あるいは、本発明の方法および組合せは、高用量における治療効果を最大限に引き出すこともできる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３８】
特別の指示がない限り、本発明で使用する用語および語句は以下に示す意味および定義を有する。さらに、これらの定義および意味は、本発明をより詳細に、記載された好ましい実施形態を説明している。
【００３９】
「受容体」または「受容体分子」は、１つまたは複数のドメインを含む可溶性または膜結合性（bound）／結合型（associated）タンパク質または糖タンパク質であり、これにリガンドが結合して受容体−リガンド複合体を形成する。アゴニストまたはアンタゴニストであるリガンドが結合することにより、受容体は活性化または不活性化され、シグナル伝達経路を開始または遮断する。
【００４０】
「リガンド」または「受容体リガンド」は、受容体分子と結合して受容体−リガンド複合体を形成する天然または合成化合物を意味する。用語リガンドには、アゴニスト、アンタゴニスト、および部分的アゴニスト／アンタゴニスト作用を持つ化合物が含まれる。
【００４１】
「アゴニスト」または「受容体アゴニスト」は、受容体と結合して受容体−アゴニスト複合体を形成し、それぞれ前記受容体および受容体−リガンド複合体を活性化することによりシグナル伝達経路とさらに生物学的プロセスを開始させる天然または合成化合物である。
【００４２】
「アンタゴニスト」または「受容体アンタゴニスト」は、アゴニストと反対の生物学的作用を有する天然または合成化合物である。アンタゴニストは、受容体と結合し、受容体のアゴニストと競合することによって受容体アゴニストの作用を遮断する。アンタゴニストは、アゴニストの作用を遮断するその能力によって定義される。また、受容体アンタゴニストは、抗体または免疫療法に有効なそのフラグメントであってもよい。本発明による好ましいアンタゴニストを挙げ、以下で論じる。
【００４３】
「ＥｒｂＢ受容体」は、ＥｒｂＢ受容体ファミリーに属する受容体型タンパク質チロシンキナーゼであり、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４受容体ならびに今後同定されるこのファミリーの他のメンバーが含まれる。一般に、ＥｒｂＢ受容体は、ＥｒｂＢリガンドと結合することができる細胞外ドメイン；親油性の膜貫通ドメイン；保存的細胞内チロシンキナーゼドメイン；およびリン酸化されうるいくつかのチロシン残基を有するカルボキシ末端シグナル伝達ドメインを含む。ＥｒｂＢ受容体は、「天然配列」ＥｒｂＢ受容体、またはその「アミノ酸配列変異体」であってもよい。ＥｒｂＢ受容体は、天然配列ヒトＥｒｂＢ受容体であることが好ましい。ＥｒｂＢ１は、ＥＧＦＲタンパク質産物をコードする遺伝子を指す。ＥＧＦ受容体（Ｈｅｒ１）が最も好ましい。表現「ＥｒｂＢ１」および「Ｈｅｒ１」は、本明細書中で互換的に使用され、ヒトＨｅｒ１タンパク質を指す。表現「ＥｒｂＢ２」および「Ｈｅｒ２」は、本明細書中で互換的に使用され、ヒトＨｅｒ２タンパク質を指す。本発明によれば、ＥｒｂＢ１受容体（ＥＧＦＲ）が好ましい。
【００４４】
「ＥｒｂＢリガンド」は、ＥｒｂＢ受容体と結合しおよび／または活性化するポリペプチドである。ＥＧＦＲと結合するＥｒｂＢリガンドには、ＥＧＦ、ＴＧＦ−ａ、アンフィレギュリン、ベータセルリン、ＨＢ−ＥＧＦおよびエピレギュリンが含まれる。
【００４５】
用語「チロシンキナーゼアンタゴニスト／阻害剤」は、チロシンキナーゼを阻害または遮断することができる天然または合成薬剤を指し、記載された受容体型チロシンキナーゼに本発明の具体的関心がある。したがって、この用語には「ＥｒｂＢ受容体アンタゴニスト／阻害剤」が含まれ、以下でより詳細に定義する。これらのアンタゴニストは例外として、本発明のチロシンキナーゼアンタゴニストとしてさらに適している抗ＥｒｂＢ受容体抗体は、単剤療法において、例えば乳癌および前立腺癌に有効性を示した化合物であることが好ましい。好適なインドロカルバゾール型チロシンキナーゼ阻害剤は、米国特許５，５１６，７７１；米国特許５，６５４，４２７；米国特許５，４６１，１４６；米国特許５，６５０，４０７などの文書に見いだされる情報を用いて入手することができる。ＵＳ特許５，４７５，１１０；ＵＳ特許５，５９１，８５５；ＵＳ特許５，５９４，００９およびＷＯ９６／１１９３３は、ピロロカルバゾール型チロシンキナーゼ阻害剤および前立腺癌を開示している。上記で定義される化学的チロシンキナーゼ阻害剤の用量は、１日につき体重１ｋｇ当たり１ｐｇから１ｇであることが好ましい。チロシンキナーゼ阻害剤の用量は、１日につき体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇから１００ｍｇであることがより好ましい。
【００４６】
用語「ＥｒｂＢ受容体アンタゴニスト／阻害剤」は、ＥｒｂＢ受容体と結合して遮断または阻害する天然または合成分子であり、したがって、「（受容体）チロシンキナーゼアンタゴニスト／阻害剤」ファミリーのメンバーである。すなわち、受容体を遮断することにより、アンタゴニストは、ＥｒｂＢリガンド（アゴニスト）の結合およびアゴニスト／リガンド受容体複合体の活性化を妨げる。ＥｒｂＢアンタゴニストは、Ｈｅｒ１（すなわちＥＧＦＲ／Ｈｅｒ１）またはＨｅｒ２を対象とすることができる。本発明の好ましいアンタゴニストは、ＥＧＦ受容体（ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ１）を対象とする。ＥｒｂＢ受容体アンタゴニストは、抗体もしくは免疫療法に有効なそのフラグメントまたは、ペプチド、ポリペプチドタンパク質などの非免疫学的分子であってもよい。化学分子も含まれるが、抗ＥＧＦＲ抗体および抗Ｈｅｒ２抗体が本発明による好ましいアンタゴニストである。
【００４７】
本発明の好ましい抗体は、抗Ｈｅｒ１および抗Ｈｅｒ２抗体であり、抗Ｈｅｒ１抗体であることがより好ましい。好ましい抗Ｈｅｒ１抗体はＭＡｂ４２５、好ましくはヒト化ＭＡｂ４２５（ｈＭＡｂ４２５、ＵＳ５，５５８，８６４；ＥＰ０５３１  ４７２）およびキメラＭＡｂ２２５（ｃＭＡｂ２２５、ＵＳ４，９４３，５３３およびＥＰ０３５９  ２８２）である。軽減された有害作用および副作用と相まって単剤療法において高い有効性を示すモノクローナル抗体ｈ４２５が最も好ましい。最も好ましい抗Ｈｅｒ２抗体は、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅより市販されているハーセプチン（登録商標）である。
【００４８】
また、本発明による有効なＥＧＦ受容体アンタゴニストは、他の天然または合成化合物であってもよい。この範疇の好ましい分子のいくつかの例には、有機化合物、有機金属化合物、有機および有機金属化合物の塩が含まれる。
【００４９】
また、本発明による有効なＥｒｂＢ受容体アンタゴニストは、小さな分子であってもよい。本発明の小さな分子は、上記で定義した生物学的分子ではなく、約４００を超えない分子量を有する。それらはタンパク質またはペプチド構造を有していないことが好ましく、合成的に製造される化合物であることが最も好ましい。小さな分子のいくつかの例には、有機化合物、有機金属化合物、有機および有機金属化合物の塩が含まれる。
【００５０】
ＥＧＦ受容体および／またはＨｅｒ２受容体を阻害するのに有用であるとして多くの小分子が報告されている。その例は、スチリル置換ヘテロアリール化合物（ＵＳ５，６５６，６５５）；ビス単環式および／または二環式アリールヘテロアリール、炭素環式、およびヘテロ炭素環式化合物（ＵＳ５，６４６，１５３）；三環式ピリミジン化合物（ＵＳ５，６７９，６８３）；受容体型チロシンキナーゼ阻害活性を有するキナゾリン誘導体（ＵＳ５，６１６，５８２）；ヘテロアリールエテンジイルまたはヘテロアリールエテンジイルアリール化合物（ＵＳ５，１９６，４４６）；ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、およびＦＧＦＲファミリーの受容体を阻害する、６−（２，６−ジクロロフェニル）−２−（４−（２−ジエチル−アミノエトキシ）フェニルアミノ）−８−メチル−８Ｈ−ピリド（２，３）−５−ピリミジン−７−オンと名付けられた化合物（Ｐａｎｅｋ、他、１９９７、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．２８３、１４３３）である。
【００５１】
「抗血管新生剤」は、血管の発生をある程度まで遮断または妨害する天然または合成化合物である。例えば、抗血管新生分子は、血管新生成長因子または成長因子受容体と結合し遮断する生物学的分子であってもよい。本明細書における好ましい抗血管新生分子は、受容体、好ましくはインテグリン受容体またはＶＥＧＦ受容体と結合する。この用語には、本発明によれば、前記血管新生剤のプロドラッグも含まれる。様々な構造および起源を有し抗血管新生特性をもたらす多くの分子が存在する。本発明に適している最も関連ある種類の血管新生阻害剤または遮断剤は、例えば、以下の通りである。
【００５２】
（i）フルオロウラシル、マイトマイシン−Ｃ、タキソールなどの抗有糸分裂剤；
（ii）２−メトキシエストラジオールなどのエストロゲン代謝物；
（iii）亜鉛メタロプロテイナーゼ（メタロプロテアーゼ）を阻害するマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）阻害剤（例えばベチマスタット（betimastat）、ＢＢ１６、ＴＩＭＰ、ミノサイクリン、ＧＭ６００１、または「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ：Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」（Ｇｏｌｕｂ、Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｖｏｌ．８７８ａ；Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ、Ｚｕｃｋｅｒ（Ｅｄｓ．）、１９９９）に記載の阻害剤）；
（iv）ＩＦＮα（ＵＳ４，５３０，９０１；ＵＳ４，５０３，０３５；５，２３１，１７６）；アンギオスタチンおよびプラスミノーゲンフラグメント（例えば、クリングル１−４、クリングル５、クリングル１−３（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ、Ｍ．Ｓ．他、Ｃｅｌｌ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｓｓ．）７９（２）：３１５〜３２８、１９９４；Ｃａｏ他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２９４６１〜２９４６７、１９９６；Ｃａｏ他、Ｊ．ＢｉｏｌＣｈｅｍ．２７２：２２９２４〜２２９２８、１９９７）；エンドスタチン（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ、Ｍ．Ｓ．他、Ｃｅｌｌ  ８８（２）、２７７、１９９７およびＷＯ９７／１５６６６）、トロンボスポンジン（ＴＳＰ−１；Ｆｒａｚｉｅｒ、１９９１、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ３（５）：７９２；血小板因子４（ＰＦ４）などの抗血管新生多機能薬剤および因子；。
【００５３】
（v）プラスミノーゲン活性化因子／ウロキナーゼ阻害剤；
（vi）ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト；
（vii）へパリナーゼ；
（viii）ＴＮＰ−４７０などのフマギリン類縁体；
（ix）ＳＵＩ０１などのチロシンキナーゼ阻害剤（前述および後述のＥｒｂＢ受容体アンタゴニスト（ＥＧＦＲ／Ｈｅｒ２アンタゴニスト）の多くもチロシンキナーゼ阻害剤であり、それぞれ腫瘍成長の阻害をもたらす抗ＥＧＦ受容体遮断活性ならびに血管および内皮細胞の発生の阻害をもたらす抗血管新生活性を示すことがある）；
（X）スラミンおよびスラミン類縁体；
（xi）血管形成抑制（angiostatic）ステロイド
（xii）ＶＥＧＦおよびｂＦＧＦアンタゴニスト；
（xiii）抗ＶＥＧＦ受容体抗体（ＤＣ−１０１）などのＶＥＧＦ受容体アンタゴニスト；
（xiv）ｆｌｋ−１およびｆｌｔ−１アンタゴニスト；
（xv）ＣＯＸ−ＩＩなどのシクロオキシゲナーゼ阻害剤；
（xvi）αｖアンタゴニストおよびαｖ受容体アンタゴニスト、例えば、抗αｖ受容体抗体およびＲＧＤペプチドなどのインテグリンアンタゴニストおよびインテグリン受容体アンタゴニスト。本発明によれば、インテグリン（受容体）アンタゴニストが好ましい。
【００５４】
用語「インテグリンアンタゴニスト／阻害剤」または「インテグリン受容体アンタゴニスト／阻害剤」は、インテグリン受容体を遮断しかつ阻害する天然または合成分子を指す。場合によっては、この用語には、前記インテグリン受容体のリガンド（αVβ3の場合には：ビトロネクチン、フィブリン、フィブリノーゲン、フォンヴィレブランド因子、トロンボスポンジン、ラミニン；αVβ5の場合には：ビトロネクチン；αVβ1の場合には：フィブロネクチンおよびビトロネクチン；αVβ6の場合には：フィブロネクチンなど）を対象とするアンタゴニストが含まれる。本発明によれば、インテグリン受容体を対象とするアンタゴニストが好ましい。インテグリン（受容体）アンタゴニストは、天然もしくは合成ペプチド、非ペプチド、ペプチドミメティカ（peptidomimetica）、抗体もしくはその機能性フラグメントなどの免疫グロブリンまたは免疫複合体（融合タンパク質）のいずれであってもよい。本発明の好ましいインテグリン阻害剤は、αVインテグリン（例えば、αVβ3、αVβ5、αVβ6およびサブクラス）の受容体を対象とする。好ましいインテグリン阻害剤は、αVアンタゴニスト、特にαVβ3アンタゴニストである。本発明による好ましいαVアンタゴニストは、ＲＧＤペプチド、ペプチドミメティック（非ペプチド）アンタゴニストおよびαV受容体を遮断する抗体などの抗インテグリン受容体抗体である。
【００５５】
典型的な非免疫学的αVβ3アンタゴニストがＵＳ５，７５３，２３０およびＵＳ５，７６６，５９１の教示中に記載されている。好ましいアンタゴニストは、直鎖状および環状ＲＧＤ含有ペプチドである。一般に、環状ペプチドはより安定であり、増強された血清半減期をもたらす。しかしながら、本発明の最も好ましいインテグリンアンタゴニストは、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）（ＥＭＤ１２１９７４、シレンギチド（Cilengitide）（登録商標）、Ｍｅｒｃｋ  ＫｇａＡ、Ｇｅｒｍａｎｙ；ＥＰ０７７０  ６２２）であり、これは、インテグリン受容体αVβ3、αVβ1、αVβ6、αVβ8、αIIbβ3を遮断するのに有効である。αVβ3／αVβ5／αVβ6インテグリン受容体の好適なペプチジルおよびペプチドミメティック（非ペプチド）アンタゴニストが科学文献にも特許文献にも記載されている。例えば、ＨｏｅｋｓｔｒａおよびＰｏｕｌｔｅｒ、１９９８、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５、１９５；ＷＯ９５／３２７１０；ＷＯ９５／３７６５５；ＷＯ９７／０１５４０；ＷＯ９７／３７６５５；ＷＯ９７／４５１３７；ＷＯ９７／４１８４４；ＷＯ９８／０８８４０；ＷＯ９８／１８４６０；ＷＯ９８／１８４６１；ＷＯ９８／２５８９２；ＷＯ９８／３１３５９；ＷＯ９８／３０５４２；ＷＯ９９／１５５０６；ＷＯ９９／１５５０７；ＷＯ９９／３１０６１；ＷＯ００／０６１６９；ＥＰ０８５３  ０８４；ＥＰ０８５４  １４０；ＥＰ０８５４  １４５；ＵＳ５，７８０，４２６；およびＵＳ６，０４８，８６１を参照されたい。
【００５６】
本発明における使用にも適しているベンゾアゼピンならびに関連ベンゾジアゼピンおよびベンゾシクロヘプテンαVβ3インテグリン受容体アンタゴニストを開示している特許には、ＷＯ９６／００５７４、ＷＯ９６／００７３０、ＷＯ９６／０６０８７、ＷＯ９６／２６１９０、ＷＯ９７／２４１１９、ＷＯ９７／２４１２２、ＷＯ９７／２４１２４、ＷＯ９８／１５２７８、ＷＯ９９／０５１０７、ＷＯ９９／０６０４９、ＷＯ９９／１５１７０、ＷＯ９９／１５１７８、ＷＯ９７／３４８６５、ＷＯ９７／０１５４０、ＷＯ９８／３０５４２、ＷＯ９９／１１６２６、およびＷＯ９９／１５５０８が含まれる。主鎖の立体配置的環束縛を特徴とするその他のインテグリン受容体アンタゴニストは、ＷＯ９８／０８８４０；ＷＯ９９／３０７０９；ＷＯ９９／３０７１３；ＷＯ９９／３１０９９；ＷＯ００／０９５０３；ＵＳ５，９１９，７９２；ＵＳ５，９２５，６５５；ＵＳ５，９８１，５４６；およびＵＳ６，０１７，９２６に記載されている。ＵＳ６，０４８，８６１およびＷＯ００／７２８０１には、強力なαVβ3インテグリン受容体アンタゴニストである一連のノナン酸誘導体が開示された。その他の化学的小分子のインテグリンアンタゴニスト（大部分はビトロネクチンアンタゴニスト）は、ＷＯ００／３８６６５に記載されている。その他のαVβ3受容体アンタゴニストは、血管新生を阻害するのに有効であることが分かった。例えば、（Ｓ）−１０，１１−ジヒドロ−３−［３−（ピリジン−２−イルアミノ）−１−プロピルオキシ］−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−１０−酢酸（ＳＢ−２６５１２３として知られる）などの合成受容体アンタゴニストが様々な哺乳類モデル系で試験されている。（Ｋｅｅｎａｎ他、１９９８、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８（２２）、３１７１；Ｗａｒｄ他、１９９９、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２７（１１）、１２３２）。
【００５７】
アンタゴニストとして使用するのに適したインテグリンアンタゴニストを同定するためのアッセイは、例えば、Ｓｍｉｔｈ他、１９９０、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５、１２２６７により、および参照する特許文献中に記載されている。また、抗インテグリン受容体抗体もよく知られている。好適な抗インテグリン（例えば、αVβ3、αVβ5、αVβ6）モノクローナル抗体を修飾し、Ｆ（ａｂ）2、Ｆａｂおよび組み換えＦｖまたは単鎖抗体を含むそれらの抗原結合フラグメントを包含することができる。好適かつ使用が好ましいインテグリン受容体αVβ3を対象とするモノクローナル抗体の１つがＬＭ６０９として同定されている（Ｂｒｏｏｋｓ他、１９９４、Ｃｅｌｌ  ７９、１１５７；ＡＴＣＣ  ＨＢ  ９５３７）。強力な特異的抗αVβ5抗体であるＰ１Ｆ６がＷＯ９７／４５４４７に開示され、これも本発明によれば好ましい。さらに好適なαVβ6選択的抗体は、ＭＡｂ  １４Ｄ９．Ｆ８（ＷＯ９９／３７６８３、ＤＳＭ  ＡＣＣ２３３１、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ、Ｇｅｒｍａｎｙ）ならびにＭＡｂ  １７．Ｅ６（ＥＰ０７１９  ８５９、ＤＳＭ  ＡＣＣ２１６０、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ）であり、これらはインテグリン受容体のαV鎖を選択的に対象とする。別の好適な抗インテグリン抗体は、市販されているビトラキシン（Vitraxin）（登録商標）である。
【００５８】
本明細書の用語「抗体」または「免疫グロブリン」は、最も幅広い意味で使用され、具体的には無傷なモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つの無傷な抗体から生成した多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および所望の生物活性を示す限りは抗体フラグメントを網羅する。一般に、この用語には、異なる結合特異性の２つ以上の抗体またはそれらのフラグメントからなり、互いに連結しているヘテロ抗体が含まれる。
【００５９】
それらの定常領域のアミノ酸配列に応じて、無傷な抗体を様々な「抗体（免疫グロブリン）クラス」に割り当てることができる。無傷な抗体にはＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭの５つの主なクラスがあり、それらのいくつかは「サブクラス」（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡおよびＩｇＡ２にさらに分けることができる。異なるクラスの抗体に対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γおよびμと呼ばれる。本発明による抗体に好ましい主なクラスはＩｇＧであり、より詳細にはＩｇＧ１およびＩｇＧ２である。
【００６０】
通常、抗体は、約１５０，０００の分子量を有する糖タンパク質であり、２本の同一軽（Ｌ）鎖および２本の同一重（Ｈ）鎖からなる。各軽鎖は１つの共有結合性ジスルフィド結合により重鎖と連結しているが、ジスルフィド結合数は、異なる免疫グロブリン・アイソタイプの重鎖間で異なる。また、各重鎖および軽鎖は、規則正しい間隔の鎖内ジスルフィド架橋を有する。各重鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＨ）と、続いて多くの定常ドメインを有する。可変領域は、超可変領域すなわち「ＣＤＲ」領域を含み、この領域は抗原結合部位を含み抗体の特異性を担っており、「ＦＲ」領域は、抗体の親和性／結合活性にとって重要である。一般に、超可変領域は、「相補性決定領域」すなわち「ＣＤＲ」（例えば、軽鎖可変ドメイン中の残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）および８９〜９７（Ｌ３）、ならびに重鎖可変ドメイン中の３１〜３５（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）および９５〜１０２（Ｈ３）；および／または「超可変ループ」（例えば、軽鎖可変ドメイン中の残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）および９１〜９６（Ｌ３）、ならびに重鎖可変ドメイン中の残基２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）および９６〜１０１（Ｈ３）；ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１〜９１７（１９８７））からのアミノ酸残基を含む。「ＦＲ」残基（フレームワーク領域）は、本明細書で定義する超可変領域残基以外の可変ドメイン残基である。各軽鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＬ）を、他方の端に定常ドメインを有する。軽鎖の定常ドメインは、重鎖の最初の定常ドメインと並び、軽鎖可変ドメインは重鎖の可変ドメインと並んでいる。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインの間の境界面を形成していると考えられている。どの脊椎動物種に由来する抗体の「軽鎖」も、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、カッパ（κ）およびラムダ（λ）と呼ばれる２つの明確に異なるタイプのうちの１つに割り当てることができる。
【００６１】
本明細書で用いる用語「モノクローナル抗体」は、実質的に同種の抗体の母集団から得られる抗体、すなわち母集団を含む個々の抗体が、少量存在する可能性のある天然に存在する突然変異を除いては同一であることを指す。モノクローナル抗体は極めて特異的であり、単一の抗原部位を対象とする。さらに、様々な決定基（エピトープ）を対象とする様々な抗体が含まれるポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は抗原上の単一の決定基を対象とする。それらの特異性に加え、モノクローナル抗体は、他の抗体によって汚染されずに合成することができるという点で有利である。モノクローナル抗体を製造する方法には、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５、Ｎａｔｕｒｅ  ２５６、４９５）により、および「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｏｄｅｎｔ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ」（１９８５、Ｂｕｒｄｏｎ他、編、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、１３巻、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ａｍｓｔｅｒｄａｍ）中に記載のハイブリドーマ法が含まれ、公知の組み換えＤＮＡ法（例えば、ＵＳ４，８１６，５６７を参照）によって製造することができる。また、「モノクローナル抗体」は、例えばＣｌａｃｋｓｏｎ他、Ｎａｔｕｒｅ、３５２：６２４〜６２８（１９９１）およびＭａｒｋｓ他、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８、１〜５９７（１９９１）に記載の技法を用い、ファージ抗体ライブラリーから単離することができる。
【００６２】
「キメラ抗体」は、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来する、または特定の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と一致するか相同的であるが、鎖の残部は、別の種に由来する、または別の抗体クラスまたはサブクラスに属する抗体、ならびに所望の生物活性を示す限りはそのような抗体のフラグメント中の対応する配列と一致するか相同的である抗体を意味する（例えば、：ＵＳ４，８１６，５６７；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ他、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１〜６８５５（１９８４））。また、キメラおよびヒト化抗体を作成する方法は当技術分野で知られている。例えば、キメラ抗体を作成する方法には、Ｂｏｓｓ（Ｃｅｌｌｔｅｃｈ）およびＣａｂｉｌｌｙ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）による特許（ＵＳ４，８１６，３９７；ＵＳ４，８１６，５６７）に記載の方法が含まれる。
【００６３】
「ヒト化抗体」は、ヒト以外の免疫グロブリンに由来する最小配列を含むヒト以外の（例えば、齧歯類）キメラ抗体の形態である。多くの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域（ＣＤＲ）からの残基が、所望の特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、ウサギまたはヒト以外の霊長類などのヒト以外の動物種の超可変領域からの残基（ドナー抗体）により置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。ある場合には、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応するヒト以外の残基で置き換えられている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体中に見いだされない残基を含むことができる。これらの修飾は、抗体性能をさらに改良するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、通常は２つの可変領域の実質的にすべてを含み、すべてまたは実質的にすべての超可変ループはヒト以外の免疫グロブリンの超可変ループに対応し、すべてまたは実質的にすべてのＦＲは、ヒト免疫グロブリン配列のＦＲである。また、場合により、ヒト化抗体は、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、通常はヒト免疫グロブリンの少なくとも一部を含む。ヒト化抗体を作成する方法は、例えばＷｉｎｔｅｒ（ＵＳ５，２２５，５３９）およびＢｏｓｓ（Ｃｅｌｌｔｅｃｈ、ＵＳ４，８１６，３９７）により記載されている。
【００６４】
「抗体フラグメント」は、無傷な抗体の一部を含み、その抗原結合領域または可変領域を含むことが好ましい。抗体フラグメントの例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ＦｖおよびＦｃフラグメント、ダイアボディ（diabody）、直鎖状抗体、単鎖抗体分子；および抗体フラグメントから生成した多重特異性抗体が含まれる。「無傷な」抗体は、抗原結合可変領域ならびに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）および重鎖定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３を含む抗体である。無傷な抗体は、１つまたは複数のエフェクター機能を有することが好ましい。抗体のパパイン消化は「Ｆａｂ」フラグメントと呼ばれ、各々が単一の抗原結合部位ならびにＣＬおよびＣＨ１領域を含む２つの同一抗原結合フラグメント、および容易に結晶化する能力を表す名前である残りの「Ｆｃ」フラグメントを生成する。一般に、抗体の「Ｆｃ」領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ２抗体主要クラスのＣＨ２、ＣＨ３およびヒンジ領域を含む。ヒンジ領域は、ＣＨ１領域をＣＨ２−ＣＨ３領域と結びつける約１５個のアミノ酸残基のグループである。ペプシン処理により、２つの抗原結合部位を有し、依然として抗原と架橋することができる「Ｆ（ａｂ’）２」フラグメントが得られる。「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位および抗原結合部位を含む最小の抗体フラグメントである。この領域は、１つの重鎖可変ドメインおよび１つの軽鎖可変ドメインが堅固であるが非共有結合で会合した二量体からなる。この配置で、各可変ドメインの３個の超可変領域（ＣＤＲ）が相互作用し、ＶＨ−ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を規定する。まとめると、６個の超可変領域が抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（すなわち抗原に特異的な３個の超可変領域のみを含む半分のＦｖ）であっても、全体の結合部位に比べて親和性は低いが、抗原を認識し結合する能力を有している。
【００６５】
また、Ｆａｂフラグメントは、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の最初の定常ドメイン（ＣＨ１）を含む。「Ｆａｂ’」フラグメントはＦａｂフラグメントと異なり、抗体ヒンジ領域からの１つまたは複数のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に数個の残基が付加されている。Ｆ（ａｂ’）２抗体フラグメントは当初、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’フラグメントの対として製造された。抗体フラグメントの他の化学的カップリングも知られている（例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、１９９６；ＵＳ４，３４２，５６６）。「単鎖Ｆｖ」すなわち「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、抗体のＶ，およびＶ，ドメインを含み、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖として存在する。Ｆｖポリペプチドは、ＶＨとＶＬドメインの間に、ｓｃＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成することを可能にするポリペプチドリンカーを含むことが好ましい。単鎖ＦＶ抗体は、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｖｏｌ．１１３、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ｐｐ．２６９〜３１５（１９９４））、ＷＯ９３／１６１８５；ＵＳ５，５７１，８９４；ＵＳ５，５８７，４５８；Ｈｕｓｔｏｎ他、（１９８８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５，５８７９）またはＳｋｅｒｒａおよびＰｌｕｅｃｋｔｈｕｎ（１９８８、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０、１０３８）により知られている。
【００６６】
「二重特異性抗体」は、２つの異なる特異性の抗原結合部位を有する単一の二価抗体（または免疫療法に有効なそのフラグメント）である。例えば、第１の抗原結合部位は、血管新生受容体（例えば、インテグリンまたはＶＥＧＦ受容体）を対象とするが、第２の抗原結合部位は、ＥｒｂＢ受容体（例えば、ＥＧＦＲまたはＨｅｒ２）を対象とする。二重特異性抗体は、化学的技法（例えば、Ｋｒａｎｚ他（１９８１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７８、５８０７を参照）により、「ポリドーマ」技法（ＵＳ４，４７４，８９３を参照）により、またはそれ自体よく知られている組換えＤＮＡ技法により製造することができる。他の方法は、ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／０５７９３およびＷＯ９６／０４３０５に記載されている。また、二重特異性抗体は、単鎖抗体から調製することができる（例えば、Ｈｕｓｔｏｎ他、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５，５８７９；ＳｋｅｒｒａおよびＰｌｕｅｃｋｔｈｕｎ（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０、１０３８を参照）。これらは、単一ポリペプチド鎖として製造された抗体可変領域の類縁体である。二重特異性結合剤を生成するために、単鎖抗体を化学的、または当技術分野で知られている遺伝子組み換え法により一緒にカップリングすることができる。
【００６７】
また、ロイシンジッパー配列を用いて本発明による二重特異性抗体を製造することも可能である。用いる配列は、転写因子ＦｏｓおよびＪｕｎのロイシンジッパー領域に由来する（Ｌａｎｄｓｃｈｕｌｚ他、１９８８、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４０、１７５９；総説としては、ＭａｎｉａｔｉｓおよびＡｂｅｌ、１９８９、Ｎａｔｕｒｅ  ３４１、２４を参照）。ロイシンジッパーは、通常７番目の残基毎にロイシンが存在する長さが約２０〜４０残基の特異的アミノ酸配列である。このようなジッパー配列は両親媒性のαラセンを形成し、ロイシン残基は二量体形成のために疎水性の面上に並ぶ。ＦｏｓおよびＪｕｎタンパク質のロイシンジッパーに対応するペプチドは、ヘテロ二量体を優先的に形成する（Ｏ’Ｓｈｅａ他、１９８９、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４５、６４６）。また、二重特異性抗体を含むジッパーおよびそれらを製造する方法は、ＷＯ９２／１０２０９およびＷＯ９３／１１１６２に開示されている。本発明による二重特異性抗体は、単一の特異性を有する抗体に関しては、前述のＶＥＧＦ受容体およびαＶβ３受容体を対象とする抗体であってもよい。
【００６８】
「ヘテロ抗体」は、互いに連結する２つ以上の抗体または抗体結合フラグメントであり、各々は異なる結合特異性を有する。ヘテロ抗体は、２つ以上の抗体または抗体フラグメントを互いに結合させることにより調製することができる。好ましいヘテロ抗体は、架橋Ｆａｂ／Ｆａｂ’フラグメントを含む。抗体を結合させるためには様々なカップリング剤または架橋剤を用いることができる。そのような例は、タンパク質Ａ、カルボジイミド、Ｎ−スクシンイミジル−Ｓ−アセチル−チオアセテート（ＳＡＴＡ）およびＮ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）である（例えば、Ｋａｒｐｏｖｓｋｙ他、（１９８４）Ｊ．ＥＸＰ．Ｍｅｄ．１６０、１６８６；Ｌｉｕ他（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２、８６４８を参照）。その他の方法には、Ｐａｕｌｕｓ、Ｂｅｈｒｉｎｇ  Ｉｎｓｔ．Ｍｉｔｔ．、Ｎｏ．７８、１１８（１９８５）；Ｂｒｅｎｎａｎ他（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３０ｍ：８１またはＧｌｅｎｎｉｅ他（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９、２３６７によって記載された方法が含まれる。別の方法は、３個のＦａｂ’フラグメントをカップリングするのにｏ−フェニレンジマレイミド（ｏＰＤＭ）を用いている（ＷＯ９１／０３４９３）。本発明の文脈中では、多重特異性抗体も適しており、例えば、ＷＯ９４／１３８０４およびＷＯ９８／５０４３１の教示に従って調製することができる。
【００６９】
「融合タンパク質」は、異なる特異性を有する１つもしくは複数のタンパク質またはペプチドあるいはそれらのフラグメントからなり、場合によりリンカー分子により互いに融合された天然または合成分子を指す。具体的実施形態として、この用語には、少なくとも１つのタンパク質またはペプチドが、それぞれ免疫グロブリンもしくは抗体またはそれらの部分である、融合構築物（「免疫複合体」）が含まれる。
【００７０】
用語「免疫複合体」は、免疫学的に有効でない分子と共有結合により融合されたそれぞれ抗体または免疫グロブリン、または免疫学的に有効なそれらのフラグメントを指す。この融合パートナーはペプチドまたはタンパク質であることが好ましく、グリコシル化されていてもよい。前記非抗体分子を、抗体の定常重鎖のＣ末端または可変軽鎖および／または重鎖のＮ末端に連結することができる。融合パートナーは、リンカー分子を介して連結することができ、この分子は一般にペプチドを含む３〜１５個のアミノ酸残基である。本発明による免疫複合体は、免疫グロブリンまたは免疫療法で有効なそのフラグメントからなり、受容体型チロシンキナーゼ、好ましくはＥｒｂＢ（ＥｒｂＢ１／ＥｒｂＢ２）受容体、およびインテグリンアンタゴニストペプチド、または血管新生受容体、好ましくはインテグリンまたはＶＥＧＦ受容体および、本質的にＴＮＦαおよびＩＦＮγまたは前記免疫グロブリン、好ましくはそのＦｃ部分のＣ末端にそのＮ末端で連結する他の好適なサイトカインからなるＴＮＦαまたは融合タンパク質を対象とする。また、この用語には、二重特異性または多重特異性免疫グロブリン（抗体）あるいはそれらのフラグメントを含む対応する融合構築物が含まれる。
【００７１】
用語「機能的に無傷な誘導体」は、本発明への理解によれば、当初の化合物、ペプチド、タンパク質、抗体（免疫グロブリン）、免疫複合体などに比べて本質的に同一の生物学的機能および／または治療的機能を有する、化合物、ペプチド、タンパク質、抗体（免疫グロブリン）、免疫複合体などのフラグメントもしくは部分、修飾、変異体、相同体または脱免疫化形態（免疫反応を担うエピトープの修飾は除外する）を意味する。しかしながら、この用語には有効性の低下または増強をもたらすような誘導体も含まれる。
【００７２】
用語「サイトカイン」は、ある細胞母集団によって放出され、細胞間メディエータとして別の細胞に作用するタンパク質の総称である。このようなサイトカインの例は、リンフォカイン、モノカイン、および従来のポリペプチド・ホルモンである。サイトカインには、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、およびウシ成長ホルモンなどの成長ホルモン；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、および黄体形成ホルモン（ＬＨ）などの糖タンパク質ホルモン；肝成長因子；線維芽細胞成長因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦβなどの神経成長因子；血小板成長因子；ＴＧＦαおよびＴＧＦβなどのトランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；ＩＦＮα、ＩＦＮβ、およびＩＦＮγなどのインターフェロン；Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦなどのコロニー刺激因子；ＩＬ−１、ＩＬ−１ａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２などのインターロイキン；およびＴＮＦαまたはＴＮＦβなどが含まれる。本発明による好ましいサイトカインは、インターフェロンおよびＴＮＦａである。
【００７３】
本明細書で用いる用語「細胞傷害性薬剤」は、細胞の機能を阻害または妨げおよび／または細胞の破壊を引き起こす物質を指す。この用語には、放射性同位体、化学療法剤、および細菌、真菌、植物もしくは動物起源の酵素的に活性な毒素などの毒素、またはそれらの断片が含まれることを意図している。また、この用語には、サイトカインファミリーのメンバー、好ましくはＩＦＮγならびに細胞傷害活性を有する抗新生物薬も含まれる。
【００７４】
用語「化学療法剤」または「抗新生物薬」は、本発明への理解によれば、前述した「細胞傷害性薬剤」のクラスのメンバーとして見なされ、抗新生物効果を発揮する、すなわち新生物細胞の発生、成熟、または伝播を、例えば細胞分裂静止作用または細胞傷害性作用により直接、および生物反応修飾などの機序を介して間接的でなく妨げる化学薬品が含まれる。本発明による好適な化学療法剤は、天然または合成化合物であることが好ましいが、タンパク質、ポリペプチドなどの生物学的分子も排除されない。商業的利用、臨床評価および前臨床開発に利用できる多くの抗新生物薬があり、前述のＴＮＦαと抗血管新生剤、場合によりＥＧＦ受容体アンタゴニストなどの他の薬剤との併用療法により腫瘍／新形成を治療するため、本発明にそれらを含めることができる。場合により、前記薬物の組合せと一緒に化学療法剤を投与できることを指摘しなければならない。化学療法剤の例には、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン化合物、アルキルスルホネートおよびニトロソ尿素などのアルキル化作用を持つ他の化合物、シスプラチンおよびダカルバジン；代謝拮抗剤、例えば葉酸、プリンまたはピリミジンアンタゴニスト；有糸分裂阻害剤、例えばビンカアルカロイドおよびポドフィロトキシンの誘導体；細胞傷害性抗生物質およびカンプトセシン誘導体が含まれる。
【００７５】
好ましい化学療法剤または化学療法には、アミフォスチン（エチオール（ethyol））、シスプラチン、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、ダクチノマイシン、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、ストレプトゾトシン、シクロホスファミド、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、ドキソルビシンリポ（ドキシル（Doxil））、ゲムシタビン（ジェムザール）、ダウノルビシン、ダウノルビシンリポ（ダウノキソーム（daunoxome））、プロカルバジン、マイトマイシン、シタラビン、エトポシド、メトトレキセート、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ブレオマイシン、パクリタキセル（タキソール）、ドセタキセル（タキソテール）、アルデスロイキン、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、クラドリビン（cladribine）、カンプトセシン、ＣＰＴ−１１、１０−ヒドロキシ−７−エチルカンプトセシン（ＳＮ３８）、ダカルバジン、フロクスウリジン、フルダラビン、ヒドロキシ尿素、イホスファミド、イダルビシン、メスナ、インターフェロンアルファ、インターフェロンベータ、イリノテカン、ミトキサントロン、トポテカン、ロイプロリド、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、プリカマイシン、ミトタン、ペガスパルガーゼ（pegaspargase）、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、ストレプトゾトシン、タモキシフェン、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、チオテパ、ウラシルマスタード、ビノレルビン、クロラムブシルおよびそれらの組合せが含まれる。
【００７６】
本発明による最も好ましい化学療法剤は、シスプラチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、パクリタキセル（タキソール）およびブレオマイシンである。
【００７７】
用語「癌」および「腫瘍」は、一般的には規制されない細胞成長を特徴とする、哺乳動物における生理的状態を指すかそれについて記載する。本発明による薬剤組成物により、乳房、心臓、肺、小腸、大腸、脾臓、腎臓、膀胱、頭部および頸部、卵巣、前立腺、脳、膵臓、皮膚、骨、骨髄、血液、胸腺、子宮、精巣、子宮頸部、および肝臓の腫瘍などの腫瘍を治療することができる。より具体的には、腫瘍は、腺腫、血管肉腫、星細胞腫、上皮癌、胚細胞腫、グリア芽細胞腫、神経膠腫、過誤腫、血管内皮腫、血管肉腫、血腫、肝芽腫、白血病、リンパ腫、髄芽腫、黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉腫、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、肉腫および奇形腫から選択される。詳細には、腫瘍は、末端性黒子性黒色腫、光線性角化症、腺癌、腺様嚢胞癌、腺腫、腺肉腫、腺扁平上皮癌、星状細胞腫瘍、バルトリン腺癌、基底細胞癌、気管支腺癌、毛細血管、カルチノイド、癌、癌肉腫、海綿状、胆管癌、軟骨肉腫、脈絡叢乳頭腫／癌、明細胞癌、嚢胞腺腫、内胚葉洞腫瘍、子宮内膜増殖症、子宮内膜間質部肉腫、子宮内膜様腺癌、上衣、類上皮、ユーイング肉腫、線維層状（fibrolamellar）、限局性結節性再生、ガストリン産生腫瘍、胚細胞腫瘍、グリア芽細胞腫、グルカゴン産生腫瘍、血管芽細胞腫、血管内皮腫、血管腫、肝細胞腺腫、肝腺腫症、肝細胞癌、膵島細胞腺腫、上皮内異常増殖、上皮間扁平上皮細胞異常増殖、浸潤性扁平上皮細胞癌、大細胞癌、平滑筋肉腫、悪性黒子型黒色腫、悪性黒色腫、悪性中皮腫、髄芽腫、髄様上皮腫、黒色腫、髄膜、中皮、転移性癌、粘液性類表皮癌、神経芽細胞腫、神経上皮腺癌結節型黒色腫、燕麦細胞癌、オリゴデンドログリア、骨肉腫、膵臓ポリペプチド、乳頭状漿液性腺癌、松果体細胞、下垂体部腫瘍、プラズマ細胞腫、偽肉腫、肺芽細胞腫、腎細胞癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、肉腫、漿液性癌、小細胞癌、軟部組織癌、ソマトスタチン分泌腫瘍、扁平上皮癌、扁平上皮細胞癌、中皮下（submesothelial）、表在拡大型黒色腫、未分化癌、ブドウ膜黒色腫、疣状癌、ビポーマ、高分化癌、およびウィルムス腫瘍からなる群から選択される。
【００７８】
本発明の「薬剤組成物」は、本発明の併用療法に伴う副作用を軽減するか回避する薬剤を含むことができ（「補助療法」）、例えば、抗癌剤の毒作用を軽減する薬剤、例えば骨吸収阻害剤、心保護剤が含まれるが、これらに限定されるものではない。前記補助剤は、化学療法、放射線療法または手術に伴う悪心および嘔吐の発生を防ぐか減少させ、または骨髄抑制性抗癌剤の投与に伴う感染の発生率を低下させる。補助剤は当技術分野でよく知られている。さらに、本発明による免疫療法剤は、ＢＣＧのようなアジュバントおよび免疫系刺激剤と一緒に投与することができる。さらに、組成物には、細胞傷害性の有効な放射標識同位元素、または細胞傷害性ペプチド（例えばサイトカイン）または細胞傷害性薬物などの他の細胞傷害性薬剤を含む免疫療法剤または化学療法剤が含まれる。
【００７９】
腫瘍または腫瘍転移を治療するための用語「薬剤キット」は、腫瘍および腫瘍転移を治療するための方法で試薬を用いるための包装、および一般には使用説明書を指す。通常、本発明のキットにおける試薬は、本明細書に記載の治療用組成物として製剤化されており、したがってキットの配布に適した様々な形態のいずれであってもよい。そのような形態には、本発明のアンタゴニストおよび／または融合タンパク質を提供するための液体、粉末、錠剤、懸濁液などが含まれる。本方法によれば、別個に投与するのに適した別個の容器で試薬を提供するか、あるいは包装中の単一容器に組成物を一体化して提供してもよい。この包装は、本明細書に記載の治療方法によれば、１回または複数の試薬の投与に十分な量を含むことができる。また、本発明のキットは、包装中に含まれる材料の「使用説明書」を含む。
【００８０】
用語「薬剤治療」は、腫瘍における腫瘍細胞および腫瘍転移を治療するための本発明の治療方法を指し、受容体型チロシンキナーゼ遮断剤、好ましくはＥｒｂＢアンタゴニスト、中でも抗ＥｒｂＢ１（ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ１）／抗ＥｒｂＢ２（Ｈｅｒ２）抗体を用いることによる血管新生阻害（抗血管新生）療法と抗腫瘍免疫療法の併用に基づいている。２タイプ以上の血管新生阻害剤を、２タイプ以上の、好ましくは抗ＥｒｂＢ受容体阻害剤と組み合わせて用いることができる。この併用は、同時に、順次に、または治療間に介入の期間をおいて行うことができる。具体的などの治療剤も、治療の過程で２回以上投与することができる。この方法により、各治療剤の腫瘍細胞増殖阻害効果が相乗的に強化され、各成分を単独で投与することにより見いだされるより有効な治療を行うことができる。したがって、一態様では、本発明の方法は、単独で投与した場合には有効な血管新生阻害、または抗腫瘍細胞活性をもたらさないと思われる量の抗血管新生剤および抗ＥｒｂＢ受容体（Ｈｅｒ１／Ｈｅｒ２）剤を組み合わせて患者に投与することを包含する。本発明の方法は、そのステップに関して本発明を実施するための様々な様式を含んでいる。例えば、本発明による薬剤を同時、順次、または別個に投与することができる。さらに、受容体型チロシンキナーゼ遮断剤および抗血管新生剤を、投与と投与の間に約３週間の時間間隔以内、すなわち実質的に第１の薬剤を投与した直後から第１の薬剤を投与して約３週間後までに別個に投与することができる。外科的処置の後でこの方法を実施することができる。あるいは、第１の活性薬剤の投与と第２の活性薬剤の投与との間に外科的処置を実施することができる。この方法の例は、本方法と外科的腫瘍除去の組合せである。通常、本方法による治療は、１または複数サイクルの投与で治療用組成物を投与することを含む。例えば、同時投与を実施する場合、両薬剤を含む治療用組成物を単一サイクルで約２日から約３週間にわたって投与する。その後、医師の判断により必要に応じて治療サイクルを繰り返すことができる。同様に、逐次投与を企図する場合には、各治療剤の投与時間を、通常同一時間をカバーするように調整しなければならない。サイクル間の間隔は約０から２カ月まで変えることができる。本発明のモノクローナル抗体、ポリペプチドまたは有機ミメティック／化学療法剤は、注射または長時間の注入により非経口的に投与することができる。通常、治療される組織は全身投与によって体内で評価されるため、ほとんどの場合治療用組成物の静脈内投与によって治療されるが、標的組織が標的分子を含む可能性がある場合にはその他の組織および送達手段も企図されている。すなわち、本発明のモノクローナル抗体、ポリペプチドまたは有機薬剤を、眼内、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内、経皮で、同所注射および注入により投与でき、かつ蠕動手段によっても送達することができる。例えば、本発明のインテグリンアンタゴニストを含有する治療用組成物は、例えば単位投与量の注射として従来のように静脈内投与される。本発明の治療用組成物は、本明細書に記載の関連薬剤と一緒に、生理的に耐容性のある坦体を含み、薬剤は活性成分として坦体中に溶解または懸濁している。
【００８１】
組成物、担体、希釈剤および試薬に言及する場合に本明細書で使用する用語「薬剤として許容される」およびそれらの文法的変形形態は互換的に用いられ、材料が、悪心、眩暈、胃の不快感などの望ましくない生理的影響を生じることなしに哺乳類に投与することができることを表す。それらの材料に溶解または懸濁した活性成分を含有する薬剤組成物の調製は、当技術分野ではよく理解されており、製剤に基づいて限定する必要はない。通常、このような組成物は、注射用として液体溶液または懸濁液のどちらかとして調製されるが、使用前には液体中の溶液または懸濁液に適した固体を調製することもできる。また、調製物を乳化することもできる。活性成分は、薬剤として許容され活性成分と適合する賦形剤と、本明細書に記載の治療方法で使用するのに適した量で混合することができる。好適な賦形剤は、例えば、水、生理食塩水、ブドウ糖、グリセロール、エタノールなどおよびそれらの組合せである。
【００８２】
さらに、必要に応じて、組成物は、少量の湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤などの活性成分の有効性を増強する補助物質を含有することができる。本発明の治療用組成物には、組成物中の成分の薬剤として許容される塩を含むことができる。薬剤として許容される塩には、例えば、塩酸もしくはリン酸などの無機塩、または酢酸、酒石酸、マンデル酸などの有機酸により生成する酸付加塩（ポリペプチドの遊離アミノ基により生成）が含まれる。また、遊離カルボキシル基により生成する塩は、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムまたは水酸化第二鉄などの無機塩基、およびイソプロピルアミン、トリメチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどの有機塩基から誘導することができる。環状ポリペプチドαｖアンタゴニストの調製で使用する場合にはＨＣｌ塩が特に好ましい。生理学的に耐容性のある坦体は、当技術分野でよく知られている。液体坦体の例は、活性成分および水の他には材料を一切含有しない、または生理的ｐＨ値のリン酸ナトリウムなどの緩衝液、生理的食塩水もしくはリン酸緩衝食塩水などの両者を含有する無菌水溶液である。さらに、水性坦体は、２種類以上の緩衝塩、ならびに塩化ナトリウムおよび塩化カリウムなどの塩、ブドウ糖、ポリエチレングリコールおよび他の溶質を含有することができる。また、液体組成物は、水の他に、および水ではない液相を含有することができる。このような追加の液相の例は、グリセリン、綿実油などの植物油、および水−油エマルジョンである。
【００８３】
通常、例えば抗ＥｒｂＢ受容体抗体もしくは抗体フラグメントもしくは抗体複合体または抗血管新生受容体抗体、フラグメントもしくは複合体の形態である免疫療法剤の治療上有効な量は、生理学的に耐容性のある組成物で投与した場合に、１ミリリットル（ｍｌ）当たり約０．０１マイクログラム（μｇ）から約１００μｇ／ｍｌ、好ましくは約１μｇ／ｍｌから約５μｇ／ｍｌ、通常は約５μｇ／ｍｌの血漿中濃度を得るのに十分な量である。換言すれば、用量は、１日または数日間に１日１回または複数回の投与において約０．１ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇまで、好ましくは約０．２ｍｇ／ｋｇから約２００ｍｇ／ｋｇまで、最も好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇから約２０ｍｇ／ｋｇまで変化することができる。免疫療法剤がモノクローナル抗体のフラグメントまたは複合体の形態である場合には、全抗体の質量に対するフラグメント／複合体の質量に基づき、量を容易に調整することができる。好ましい血漿中濃度のモル濃度は、約２マイクロモル（μＭ）から約５ミリモル（ｍＭ）まで、好ましくは約１００μＭから１ｍＭまでの抗体アンタゴニストである。通常、非免疫療法ペプチドもしくはタンパク質ポリペプチド（例えばＩＦＮ−アルファ）またはその他の大きさの類似した小分子である本発明による薬剤の治療上有効な量は、生理学的に耐容性のある組成物で投与した場合に、１ミリリットル（ｍｌ）当たり約０．１マイクログラム（μｇ）から約２００μｇ／ｍｌ、好ましくは約１μｇ／ｍｌから約１５０μｇ／ｍｌの血漿中濃度を得るのに十分なポリペプチドの量である。１モル当たり約５００グラムの質量を有するポリペプチドに基づくと、好ましい血漿中濃度のモル濃度は、約２マイクロモル（μＭ）から約５ミリモル（ｍＭ）まで、好ましくは約１００μＭから１ｍＭまでのポリペプチドアンタゴニストである。本発明による化学的アンタゴニストまたは（化学的）化学療法剤であることが好ましい（免疫療法剤または非免疫療法ペプチド／タンパク質のどちらでもない）活性薬剤の典型的用量は、１日につき体重１ｋｇ当たり１０ｍｇから１０００ｍｇ、好ましくは約２０から２００ｍｇ、より好ましくは５０から１００ｍｇである。
【００８４】
用語「治療上有効な」または「治療上有効な量」は、哺乳類において疾患または傷害を治療するのに有効な薬物の量を指す。癌の場合には、治療上有効な量の薬物は、癌細胞の数を減少させ；癌の大きさを縮小し；周辺器官への癌細胞浸潤を阻害し（すなわち、ある程度遅延させる、好ましくは止める）；腫瘍成長をある程度阻害し；および／または癌に伴う１つまたは複数の症状をある程度軽減することができる。薬物が成長を妨げおよび／または既存の癌細胞を死滅させる限り、その薬物は細胞増殖抑制性でおよび／または細胞傷害性である。癌治療の場合、例えば、疾患進行までの時間（ＴＴＰ）を評価し、および／または反応速度（ＲＲ）を決定することにより有効性を測定することができる。
【実施例】
【００８５】
実施例：下記は短い臨床試験報告である：
患者は４５歳で当初から上顎の進行性扁平上皮細胞癌に苦しんでいた。
【００８６】
ＥＭＤ７２０００：モノクローナルヒト抗体４２５（ｈ４２５）、Ｍｅｒｃｋ  ＫｇａＡ、Ｇｅｒｍａｎｙ
ＥＭＤ１２１９７４：シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−ＤＰｈｅ−ＮＭｅＶａｌ）、シレンギチド（Cilengitide）（登録商標）、Ｍｅｒｃｋ  ＫｇａＡ、Ｇｅｒｍａｎｙ；
化学療法：各種（ゲムシタビン、シスプラチンなど）
病歴および例外的使用の治療開始時における臨床所見／状況：
１９９７年７月、患者は初めてＶｉｒｃｈｏｗ  Ｋｌｉｎｉｋｕｍ、Ｇｅｒｍａｎｙを訪れた。上顎内の疑わしい大きな腫瘍の生検を行った。組織像は、Ｔ４  Ｎ０  Ｍ０に分類される扁平上皮細胞癌を示した。１９９７年８月５日、上顎の部分切除および局所リンパ節の切除を行った。組織像は、腫瘍が完全に除去されなかったことを示したため、同じ入院中に追加の切除を行った。組織学的分類が芳しくないため、患者は、１９９７年９月から１０月までに最高５０．４グレイまでの術後放射線療法を受けた。
【００８７】
１９９８年７月、疾患の進行が疑われ入院した。今度は組織像が腺扁平上皮癌を示した。放射線治療士に相談後、別の放射線療法を勧められ、１９９８年８月に開始した。同時に放射線増感剤としてゲムシタビン（１００ｍｇ）を用い患者を治療した。６週間の治療により完全な臨床的緩解に至った。併用放射線−化学療法の後、患者は１０００ｍｇゲムシタビン（１６回の投与を５サークル）による治療を受けた。
【００８８】
１９９９年３月、癌の進行が再び起こり、追加の放射線療法および腫瘍の緩和切除を行った。１９９９年８月、再び腫瘍が進行し、シスプラチン（７５ｍｇ／ｍ2）およびドセタキセル（７５ｍｇ／ｍ2）による化学療法を開始した。３回の投与後、腫瘍成長に対する効果がないために治療を中止した。
【００８９】
大きな腫瘍塊からのびまん性出血により、赤血球濃縮物の頻繁な輸血が必要となった。
【００９０】
抗血管新生剤／化学療法剤による例外的使用治療の経過：
ＥＭＤ１２１９７４（６００ｍｇ／ｍ2）およびゲムシタビン（ジェムザール）（１０００ｍｇ／ｍ2）による治療の下で、１９９９年１１月、腫瘍の退縮が診断された。２０００年１月中旬から、患者は右耳で再び聞き取れるようになり、１９９９年１２月に比べると３０％以上も口を開けられるようになった。腫瘍の表面は肉芽形成および創傷治癒の徴候を示した。出血は止まり、さらに輸血する必要はなかった。
【００９１】
１９９９年１１月１７日から２０００年３月３０日まで、ＥＭＤ１２１９７４およびジェムザールで患者を治療した。２０００年４月６日から２０００年４月２８日まで、腫瘍の進行が認められたため、ＥＭＤ１２１９７４、ジェムザールならびに５−ＦＵ、シスプラチンおよびレスキュボリン（rescuvolin）による化学療法を患者に施した。血液毒性のために化学療法治療を中止し、シレンギチド治療を単独で続けた。２０００年４月から６月まで、１週間に２度ＥＭＤ１２１９７４  ６００ｍｇ／ｍ2を患者に投与したが疾患が安定したに過ぎなかった。
【００９２】
数週間後に患者の状態が悪化し、ＥＭＤ１２１９７４を１２００ｍｇ／ｍ2に増量して１週間に２回患者を治療した。
【００９３】
ｈ４２５＋シレンギチド＋化学療法剤による治療：
２０００年１１月、デキサメタゾン／マレイン酸ジメチンデン（フェニスティル（Fenistil））およびラニチジン（ザンティック（Zantic））の前投与の後、まずＥＭＤ７２０００を２００ｍｇの用量（３０分にわたる注入）で投与した。１週間後、さらにゲムシタビン（１０００ｍｇ／ｍ2）を患者に投与した。１週間の治療スケジュールは：月曜日：シレンギチド１２００ｍｇ／ｍ2（１時間の注入）、木曜日ＥＭＤ７２０００  ２００ｍｇ（３０分の注入）と、続いてゲムシタビン１０００ｍｇ／ｍ2（１時間の注入）、金曜日シレンギチド１２００ｍｇ／ｍ2（１時間の注入）。この治療の下で、腫瘍塊のクレーター様崩壊が観察された。腫瘍塊を外科的に何度か除去した。治療する医師には併用療法の効果が非常に印象的に見えた。ＥＭＤ１２１９７４およびＥＭＤ７２０００に関連した有害薬物反応は一切観察されなかった。今日まで患者の状態は改善されたままであった。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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