(57)【要約】本発明は、環式尿素誘導体、これらの合成、およびανインテグリン受容体アンタゴニストとしてのこれらの使用に関する。より詳細には、本発明の化合物は、インテグリン受容体ανβ３および／またはανβ５のアンタゴニストであり、骨吸収の阻害、骨粗しょう症の治療および予防、および血管再発狭窄症、糖尿病性網膜症、黄斑変性、血管形成、アテローム性動脈硬化症、炎症性関節炎、腫瘍成長、および転移の阻害に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2004508400.tif 000019
の化合物または医薬適合性の塩（ここで：
Ｘは、
【化２】
2004508400.tif 000020
であり、ここで、各々の非芳香環炭素原子は非置換であるか、または独立して１つまたは２つのＲ１置換基で置換されており、各芳香環炭素原子は非置換であるか、または独立して、
Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、
Ｃ３〜８シクロヘテロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル−Ｃ１〜６アルキル、
Ｃ３〜８シクロヘテロアルキル−Ｃ１〜６アルキル、アリール、アリール−Ｃ１〜６アルキル、アミノ、
アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノ、Ｃ３〜６シクロアルキル−Ｃ０〜２アミノ、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、
ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、Ｃ１〜８アルキル−Ｓ（Ｏ）０〜２、（Ｃ１〜８アルキル）０〜２アミノカルボニル、
Ｃ１〜８アルキルオキシカルボニルアミノ、（Ｃ１〜８アルキル）１〜２アミノカルボニルオキシ、
（アリールＣ１〜３アルキル）１〜２アミノ、（アリール）１〜２アミノ、アリール−Ｃ１〜３アルキルスルホニル−アミノ、およびＣ１〜８アルキルスルホニルアミノ、
から成る群から選択される１つのＲ１置換基で置換されているか、
または２つのＲ１置換基は、同じ非芳香族炭素原子上にある時、これらが結合している炭素原子と共にカルボニル基を形成するか、または２つのＲ１置換基は、これらが結合している非芳香族炭素原子と共に、結合して４から６員飽和または不飽和炭素環式環を形成し；
Ｒ２は、水素であるかまたはＣ１〜４アルキルであり；
Ｗは、
（１）硫黄、
（２）Ｎ−ＣＮ、
（３）ＮＣＯＲ３、
（４）ＮＳＯ２Ｒ３、
（５）ＮＣＯＮＨ２、
（６）ＮＳＯ２ＮＨ２、
（７）ＣＨＮＯ２、
（８）ＣＨＳＯ２Ｒ３、
（９）ＣＨＣＮ、および
（１０）ＣＨＣＯＲ３、
（ここで、Ｒ３は、Ｃ１〜６アルキルまたはフェニル−Ｃ１〜３アルキルである）
から成る群から選択され；
Ｒ４は、アリール基が、
（１）フェニル、
（２）ナフチル、
（３）ピリジニル、
（４）フリル、
（５）チエニル、
（６）ピロリル、
（７）オキサゾリル、
（８）チアゾリル、
（９）イミダゾリル、
（１０）ピラゾリル、
（１１）イソキサゾリル、
（１２）イソチアゾリル、
（１３）ピリミジニル、
（１４）ピラジニル、
（１５）ピリダジニル、
（１６）キノリル、
（１７）イソキノリル、
（１８）ベンズイミダゾリル、
（１９）ベンゾフリル、
（２０）ベンゾチエニル、
（２１）インドリル、
（２２）ベンズチアゾリル、
（２３）ベンゾキサゾリル、
（２４）ジヒドロベンゾフリル、
（２５）ベンゾ（１，３）ジオキソラニル、および
（２６）ベンゾ（１，４）ジオキサニル、
から成る群から選択されるアリール、およびアリールが上に規定されているものと同じである一、二、および三置換アリールであり、これらの置換基は独立して、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜３アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、Ｃ１〜４アルキルスルフィニル、Ｃ１〜４アルキルスルホニル、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルキルカルボニルオキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、またはニトロであるか；または２つの隣接置換基は、これらが結合している炭素原子と共に、結合して、Ｎ、Ｏ、およびＳから成る群から選択される１または２個のヘテロ原子を含む、５または６員飽和または不飽和環を形成し、これらの環炭素原子は、オキソまたはＣ１〜３アルキルで置換されていてもよく；
Ｒ５は、水素、メチル、およびエチルから成る群から選択され、
Ｒ６およびＲ７は各々独立して、水素またはＣ１〜４アルキルである）。
【請求項２】
Ｘが、
【化３】
2004508400.tif 000021
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｗが硫黄またはＮ−ＣＮである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＷがＮ−ＣＮである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４は、一または二置換の
フェニル、
ピリジニル、
キノリル、
ピリミジニル
ピラジニル、
ピラゾリル、または
ジヒドロベンゾフリル、
であり、ここで、これらの置換基は独立して、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜３アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、Ｃ１〜４アルキルスルフィニル、Ｃ１〜４アルキルスルホニル、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルキルカルボニルオキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、またはニトロであるか；または２つの隣接置換基は、これらが結合している炭素原子と共に、結合して、Ｎ、Ｏ、およびＳから成る群から選択される１または２個のヘテロ原子を含む、５または６員飽和または不飽和環を形成し、これらの環炭素原子は、オキソまたはＣ１〜３アルキルで置換されていてもよい、
請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４は、一または二置換の
キノリル、
ピリジニル、または
ピリミジニル、
であり、ここで、これらの置換基は独立して、水素、ハロゲン、フェニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜３）アルキルアミノ、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、またはトリフルオロエトキシである、
請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１は、
水素、
アミノ、
Ｃ１〜４アルキルアミノ、
Ｃ３〜６シクロアルキル−Ｃ０〜２アルキルアミノ、
シアノ、
Ｃ１〜４アルキル、
シクロプロピル、
アリールＣ１〜３アルキル、
Ｃ１〜４アシルアミノ、
Ｃ１〜４アルコキシ、
Ｃ１〜４アルキルチオ、
アミノカルボニル、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノカルボニル、
Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、
トリフルオロメチル、および
トリフルオロメトキシ、
から成る群から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１は、
水素、
アミノ、
Ｃ１〜３アルキルアミノ、
Ｃ３〜６シクロアルキルメチルアミノ、
Ｃ１〜４アルキル、
シクロプロピル、
トリフルオロメチル、および
トリフルオロメトキシ、
から成る群から選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５が水素である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
【化４】
2004508400.tif 000022
である、請求項９に記載の化合物または医薬適合性の塩。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物と製薬的に許容しうるキャリヤとを含む製薬組成物。
【請求項１２】
さらに、
ａ）有機ビスホスホネートまたは医薬適合性の塩またはエステル、
ｂ）エストロゲン受容体モジュレータ、
ｃ）細胞障害／抗増殖剤、
ｄ）マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、
ｅ）表皮由来、線維芽細胞由来、または血小板由来成長因子の阻害剤、
ｆ）ＶＥＧＦの阻害剤、
ｇ）Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ、Ｆｌｔ−１、Ｔｃｋ／Ｔｉｅ−２、またはＴｉｅ−１の阻害剤、
ｈ）カテプシンＫ阻害剤、および
ｉ）プレニル化阻害剤、例えばファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、またはゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ阻害剤、または二重ファルネシル／ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ阻害剤、
およびこれらの混合物、
から成る群から選択される活性成分も含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記活性成分が、
ａ）有機ビスホスホネートまたは医薬適合性の塩またはエステル、
ｂ）エストロゲン受容体モジュレータ、
ｃ）カテプシンＫ阻害剤、
およびこれらの混合物、
から成る群から選択される、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１４】
前記有機ビスホスホネートまたは医薬適合性の塩またはエステルが、アレンドロネート一ナトリウム三水和物である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記活性成分が、
ａ）細胞障害／抗増殖剤、
ｂ）マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、
ｃ）表皮由来、線維芽細胞由来、または血小板由来成長因子の阻害剤、
ｄ）ＶＥＧＦの阻害剤、および
ｅ）Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ、Ｆｌｔ−１、Ｔｃｋ／Ｔｉｅ−２、またはＴｉｅ−１の阻害剤、
およびこれらの混合物、
から成る群から選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１６】
それを必要としている哺乳動物における、インテグリン受容体拮抗作用の誘発方法であって、請求項１に記載の化合物の治療的有効量をその哺乳動物に投与する方法。
【請求項１７】
このインテグリン受容体拮抗作用が、ανβ３拮抗作用である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
このανβ３拮抗作用が、骨吸収、再発狭窄症、血管形成、糖尿病性網膜症、黄斑変性、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害から成る群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
このανβ３拮抗作用が、骨吸収の阻害である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
このインテグリン受容体拮抗作用が、ανβ５拮抗作用である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
このανβ５拮抗作用が、再発狭窄症、血管形成、糖尿病性網膜症、黄斑変性、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害から成る群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
それを必要としている哺乳動物における、骨吸収の阻害方法であって、請求項１１に記載の組成物の治療的有効量をその哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項２３】
それを必要としている哺乳動物における、骨吸収の阻害方法であって、請求項１３に記載の組成物の治療的有効量をその哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項２４】
それを必要としている哺乳動物における、腫瘍成長の治療方法であって、請求項１５に記載の組成物の治療的有効量をその哺乳動物に投与することを含む方法。
【請求項２５】
それを必要としている哺乳動物における、腫瘍成長の治療方法であって、放射線療法と組合わせて、請求項１に記載の化合物の治療的有効量をその哺乳動物に投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、環式尿素誘導体、これらの合成、およびανインテグリン受容体アンタゴニストとしてのこれらの使用に関する。より詳細には、本発明の化合物は、インテグリン受容体ανβ３、ανβ５、およびその他のβサブユニットと組合わされたανインテグリン受容体のアンタゴニストであり、骨吸収の阻害、骨粗しょう症の治療および予防、および血管再発狭窄症、糖尿病性網膜症、黄斑変性、血管形成、アテローム性動脈硬化症、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害に有用である。
【０００２】
（発明の背景）
非常に多様な疾病状態および条件は、インテグリン受容体への作用によって仲介されることがあり、インテグリン受容体アンタゴニストが有用な種類の薬剤を示すと考えられている。インテグリン受容体は、ヘテロダイマー膜貫通受容体であり、これらを通して細胞が細胞外マトリックスおよびその他の細胞に結合し、これらと連絡している。（Ｓ．Ｂ．ＲｏｄａｎおよびＧ．Ａ．Ｒｏｄａｎ、「破骨細胞におけるインテグリンの機能（Ｉｎｔｅｇｒｉｎ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　Ｉｎ　Ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｓ）」、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１５４：Ｓ４７−Ｓ５６（１９９７）参照）。この文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる。
【０００３】
本発明の１つの態様において、本明細書における化合物は、骨吸収を阻害するのに有用である。骨吸収は、破骨細胞として知られている細胞の作用によって仲介される。破骨細胞は、直径約４００ｍｍまでの大きい多核細胞であり、これらの細胞は、脊椎動物において石化組織、主として炭酸カルシウムおよびリン酸カルシウムを吸収する。破骨細胞は、骨の表面に沿って移動する活発な運動細胞であり、骨と結合することができ、必要な酸およびプロテアーゼを分泌し、これによって骨から石化組織の実際の吸収を引起こす。より特定すれば、破骨細胞は、少なくとも２つの生理学的状態、すなわち分泌状態と移動または運動状態において存在すると考えられる。分泌状態において、破骨細胞は平らであり、狭い接着ゾーン（シーリングゾーン）を経て骨マトリックスに結合し、高度に極性化され、ひだべりのある（ｒｕｆｆｌｅｄ）境界を形成し、リソソーム酵素およびプロトンを分泌し、骨を吸収する。破骨細胞の骨表面への接着は、骨吸収における重要な最初のステップである。移動または運動状態において、破骨細胞は、骨マトリックスを横断して移動し、これらが再び骨に接着するまでは吸収に参加しない。
【０００４】
インテグリンは、破骨細胞結合、活性化、および移動に関わっている。破骨細胞、例えばラット、ニワトリ、マウス、およびヒトの破骨細胞上の最も豊富なインテグリンは、ανβ３として知られているインテグリン受容体であり、これは、ＲＧＤ配列を含むマトリックスタンパク質と、骨中で相互作用すると考えられる。ανβ３への抗体は、インビトロで骨吸収を阻止するが、このことは、このインテグリンが吸収プロセスにおいて重要な役割を果たすことを示している。ανβ３リガンドが、哺乳動物においてインビボで、破骨細胞仲介骨吸収を効果的に阻害するのに用いうることを示唆する証拠がますます増えている。
【０００５】
人々の関心を集めている現在の主な骨疾患は、骨粗しょう症、悪性高カルシウム血症、骨転移による骨減少症、歯周病、副甲状腺機能亢進症、慢性関節リウマチにおける関節周囲びらん、パジェット病、不動化誘発骨減少症、およびグルココルチコイド誘発骨粗しょう症である。これらの状態のすべては、骨吸収すなわち機能停止と骨形成との間の不均衡の結果生じる骨損失を特徴とする。これは、生涯を通じて平均１年あたり約１４％の割合で続く。しかしながら骨のターンオーバー速度は、部位毎に異なる。例えばこれは、長骨の皮質よりも、脊椎の小柱骨およびあごの歯槽骨の方が高い。骨損失の可能性は、ターンオーバーと直接関係しており、脊椎動物において閉経直後は１年あたり５％以上にもなることがある。これは、骨折のリスクの増加を生じる条件である。
【０００６】
米国において現在、骨粗しょう症による脊椎の検出しうる骨折を有する人が約２千万人もいる。さらには骨粗しょう症によるとされる股関節骨折が１年あたり約２５０，０００もある。この臨床状況は、最初の２年以内の１２％の死亡率を伴ない、一方、これらの患者の３０％が、骨折後、老人ホームでの介護を必要とする。
【０００７】
上に列挙された状態のすべてを患っている人々が、骨吸収を阻害する薬剤での治療から恩恵を受けるであろう。
【０００８】
さらにはανβ３リガンドは、再発狭窄症（すなわち心臓弁への矯正外科手術後の狭窄の再発）、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性網膜症、黄斑変性、および血管形成（すなわち新しい血管の形成）の治療／または阻害、およびウイルス病の阻害に有用であることが発見された。加えて、腫瘍の成長は、適切な血管供給に応じ、これ自体は新しい血管の腫瘍中への成長に応じ、したがって血管形成の阻害は、動物モデルにおいて腫瘍の退化を引起こしうると仮定されてきた（「内科学のハリソンの原理（Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ　Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）」、第１２版、１９９１年参照。この文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる）。したがって血管形成を阻害するανβ３アンタゴニストは、腫瘍成長を阻害することによってガンの治療に有効でありうる（例えばＢｒｏｏｋｓらの、「細胞（Ｃｅｌｌｓ）」、７９：１１５７−１１６４（１９９４）参照。この文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる）。
【０００９】
同様に、血管形成が関節病の開始および持続における中心的要因であること、および血管インテグリンανβ３が、炎症性関節炎における好ましい標的でありうることを示唆する証拠も提示されている。したがって血管形成を阻害するανβ３アンタゴニストは、関節病、例えば慢性関節リウマチの治療への新規治療方法となりうる（Ｃ．Ｍ．Ｓｔｏｒｇａｒｄら、「ανβ３アンタゴニストで治療されたウサギにおける、血管形成および関節病の減少（Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　Ａｒｔｈｒｉｔｉｃ　Ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎ　Ｒａｂｂｉｔｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｎ　ανβ３　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）」、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、１０３：４７−５４（１９９９）参照。この文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる）。
【００１０】
さらにはこの発明の化合物はまた、インテグリン受容体ανβ５のアンタゴニストとして作用することによって、新血管形成を阻害しうる。ανβ５に対するモノクローナル抗体は、ウサギの角膜およびヒヨコの絨毛尿膜モデルにおいてＶＥＧＦ−誘発血管形成を阻害することが証明されている（Ｍ．Ｃ．Ｆｒｉｅｄｌａｎｄｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２７０：１５００〜１５０２（１９９５）参照。この文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる）。したがってανβ５を拮抗させる化合物は、黄斑変性、糖尿病性網膜症、ガン、および転移腫瘍成長を治療および予防するのに有用である。
【００１１】
加えて、本発明の化合物は、その他のβサブユニット、例えばανβ６およびανβ８に伴なうανインテグリン受容体のアンタゴニストとして作用することによって、血管形成および炎症を阻害しうる（例えばＭｅｌｐｏ　Ｃｈｒｉｓｔｏｆｉｄｏｕ−Ｓｏｌｏｍｉｄｏｕら、「ヒトの皮膚／ＳＣＩＤマウスのキメラにおける、傷誘発されたヒトの血管形成における内皮細胞ανインテグリン受容体の発現および機能（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　Ｃｅｌｌ　αν　Ｉｎｔｅｇｒｉｎ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｉｎ　Ｗｏｕｎｄ−Ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｈｕｍａｎ　Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｉｎ　Ｈｕｍａｎ　Ｓｋｉｎ／ＳＣＩＤ　Ｍｉｃｅ　Ｃｈｉｍｅｒａｓ）」、Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ、１５１：９７５−８３（１９９７）、およびＸｉａｏ−Ｚｈｕ　Ｈｕａｎｇら、「インテグリンβ６サブユニット遺伝子の不活性化が、肺および皮膚の炎症の調節における上皮インテグリンの役割を明らかにする（Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｉｎｔｅｇｒｉｎ　β６　Ｓｕｂｕｎｉｔ　Ｇｅｎｅ　Ｒｅｖｅａｌｓ　ａ　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　Ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ　ｉｎ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｕｎｇｓ　ａｎｄ　Ｓｋｉｎ）」、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ、１３３：９２１−２８（１９９６）参照。これらの文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる）。
【００１２】
加えて、この発明のあるいくつかの化合物は、ανβ３およびανβ５受容体のどちらも拮抗させる。これらの化合物は、「二重ανβ３／ανβ５アンタゴニスト」と呼ばれるが、これらは、骨吸収の阻害、骨粗しょう症の治療および予防、および血管再発狭窄症、糖尿病性網膜症、黄斑変性、血管形成、アテローム性動脈硬化症、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害に有用である。
【００１３】
ペプチドアンタゴニストならびにανβ３インテグリン受容体のペプチド模擬アンタゴニストは、科学文献および特許文献のどちらにも記載されている。例えばＷ．Ｊ．ＨｏｅｋｓｔｒａおよびＢ．Ｌ．Ｐｏｕｌｔｅｒ、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５：１９５−２０４（１９９８）およびその中で引用されている下記の文献が参照される。すなわち、第ＷＯ９５／３２１７０号；第ＷＯ９５／３７６５５号；第ＷＯ９７／０１５４０号；第ＷＯ９７／３７６５５号；第ＷＯ９８／０８８４０号；第ＷＯ９８／１８４６０号；第ＷＯ９８／１８４６１号；第ＷＯ９８／２５８９２号；第ＷＯ９８／３１３５９号；第ＷＯ９８／３０５４２号；第ＷＯ９９／１５５０６号；第ＷＯ９９／１５５０７号；第ＷＯ００／０３９７３号；第ＥＰ８５３０８４号；第ＥＰ８５４１４０号；第ＥＰ８５４１４５号；米国特許第５，２０４，３５０号；第５，２１７，９９４号；第５，６３９，７５４号；第５，７４１，７９６号；第５，７８０，４２６号；第５，９２９，１２０号；第５，９５２，３４１号；第６，０１７，９２５号；および第６，０４８，８６１号である。ανβ３インテグリン受容体アンタゴニストがインビトロおよびインビボで骨吸収を防ぐことができることの証拠が提出されている（Ｖ．Ｗ．Ｅｎｇｌｅｍａｎら、「ανβ３インテグリンのペプチド模擬アンタゴニストは、インビトロでの骨吸収を阻害し、インビボで骨粗しょう症を防ぐ（Ａ　Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ανβ３　Ｉｎｔｅｇｒｉｎ　Ｉｎｈｉｂｉｔｓ　Ｂｏｎｅ　Ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ　Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　Ｐｒｅｖｅｎｔｓ　Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ　ｉｎ　Ｖｉｖｏ）」、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９９：２２８４−２２９２（１９９７）；Ｓ．Ｂ．Ｒｏｄａｎら、「高親和性非ペプチドανβ３リガンドが、インビトロおよびインビボで破骨活性を阻害する（Ａ　Ｈｉｇｈ　Ａｆｆｉｎｉｔｙ　Ｎｏｎ−Ｐｅｐｔｉｄｅ　ανβ３　Ｌｉｇａｎｄ　Ｉｎｈｉｂｉｔｓ　Ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　Ｉｎ　Ｖｉｖｏ）」、Ｊ．Ｂｏｎｅ　Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．１１：Ｓ２８９（１９９６）；Ｊ．Ｆ．Ｇｏｕｒｖｅｓｔら、「ανβ３ビトロネクチン受容体の非ペプチドリガンドを用いたＯＶＸ−誘発骨損失の予防（Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ｏｆ　ＯＶＸ−Ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｂｏｎｅ　Ｌｏｓｓ　Ｗｉｔｈ　ａ　Ｎｏｎ−Ｐｅｐｔｉｄｉｃ　Ｌｉｇａｎｄ　ｏｆ　ｔｈｅ　ανβ３　Ｖｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ）」、Ｂｏｎｅ　２３：Ｓ６１２（１９９８）；Ｍ．Ｗ．Ｌａｒｋら、「経口活性ビトロネクチン受容体ανβ３アンタゴニストは、卵巣切除ラットにおけるインビトロおよびインビボでの骨吸収を防ぐ（Ａｎ　Ｏｒａｌｌｙ　Ａｃｔｉｖｅ　Ｖｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ανβ３　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　Ｐｒｅｖｅｎｔｓ　Ｂｏｎｅ　Ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ　Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　Ｉｎ　Ｖｉｖｏ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｉｚｅｄ　Ｒａｔ）」、Ｂｏｎｅ　２３：Ｓ２１９（１９９８）参照）。
【００１４】
ανβ３インテグリン受容体は、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＲＧＤ）トリペプチド配列をその同族体マトリックスおよび細胞表面糖タンパク質中に認識する（Ｊ．Ｓａｍａｎｅｎら、「インテグリンανアンタゴニストに対する血管の指標（Ｖａｓｃｕｌａｒ　Ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　Ｉｎｔｅｇｒｉｎ　αν　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ）」、Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｄｅｓｉｇｎ　３：５４５−５８４（１９９７）参照）。とりわけ、ジェネンテック社（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）およびスミスクライン・ビーチャム社（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ　Ｂｅｅｃｈａｍ）によって、Ｎ−末端においてヘテロ環式アルギニン模擬体で置換された非ペプチドανβ３インテグリン受容体アンタゴニストを作るために、立体配座的に強制されたＧｌｙ−Ａｓｐ模擬体として、ベンズアゼピン核が用いられて来た（Ｒ．Ｍ．Ｋｅｅｎａｎら、「強力な非ペプチドビトロネクチン受容体（ανβ３）アンタゴニストの発見（Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　Ｐｏｔｅｎｔ　Ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ　Ｖｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　（ανβ３）　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ）」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４０：２２８９−２２９２（１９９７）；Ｒ．Ｍ．Ｋｅｅｎａｎら、「１，４−ベンゾジアゼピン非ペプチドビトロネクチン受容体（ανβ３）アンタゴニストにおけるアルギニン模擬体としてのベンズイミダゾール誘導体（Ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ　Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　Ａｓ　Ａｒｇｉｎｉｎｅ　Ｍｉｍｅｔｉｃｓ　ｉｎ　１，４−Ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ　Ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ　Ｖｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　（ανβ３）　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ）」、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８：３１６５−３１７０（１９９８）；およびＲ．Ｍ．Ｋｅｅｎａｎら、「再発狭窄症モデルにおいて有効性を有する、イミダゾピリジン含有１，４−ベンゾジアゼピン非ペプチドビトロネクチン受容体（ανβ３）アンタゴニストの発見（Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ａｎ　Ｉｍｉｄａｚｏｐｙｒｉｄｉｎｅ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　１，４−Ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ　Ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ　Ｖｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　（ανβ３）　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　Ｗｉｔｈ　Ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｉｎ　ａ　Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ　Ｍｏｄｅｌ）」、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８：３１７１−３１７６（１９９８）参照）。このようなベンズアゼピンならびに関連するベンゾジアゼピンおよびベンゾシクロヘプテン、ανβ３インテグリン受容体アンタゴニストを開示しているスミスクライン・ビーチャム社に与えられた（ａｓｓｉｇｎｅｄ）特許には、次のものが含まれる。すなわち、第ＷＯ９６／００５７４号、第ＷＯ９６／００７３０号、第ＷＯ９６／０６０８７号、第ＷＯ９６／２６１９０号、第ＷＯ９７／２４１１９号、第ＷＯ９７／２４１２２号、第ＷＯ９７／２４１２４号、第ＷＯ９８／１４１９２号、第ＷＯ９８／１５２７８号、第ＷＯ９９／０５１０７号、第ＷＯ９９／０６０４９号、第ＷＯ９９／１５１７０号、第ＷＯ９９／１５１７８号、および第ＷＯ９９／１５５０６号が含まれ、ジェネンテック社に与えられた特許には、第ＷＯ���７／３４８６５号が含まれる。ジベンゾシクロヘプテンならびにジベンゾキサゼピン核も、ανβ３アンタゴニストを得るためにＧｌｙ−Ａｓｐ模擬体として用いられてきた（第ＷＯ９７／０１５４０号、第ＷＯ９８／３０５４２号、第ＷＯ９９／１１６２６号、第ＷＯ９９／１５５０８号、米国特許第６，００８，２１３号、および第６，０６９，１５８号参照。すべてスミスクライン・ビーチャム社に与えられたものである）。
【００１５】
バックボーン立体配座環の制約を組込んでいるその他のインテグリン受容体アンタゴニストが、特許文献に記載されている。フェニル制約を有するアンタゴニストを開示している、公開された特許出願または発行された特許には、第ＷＯ９８／００３９５号、第ＷＯ９９／３２４５７号、第ＷＯ９９／３７６２１号、第ＷＯ９９／４４９９４号、第ＷＯ９９／４５９２７号、第ＷＯ９９／５２８７２号、第ＷＯ９９／５２８７９号、第ＷＯ９９／５２８９６号、第ＷＯ００／０６１６９号、第ＥＰ０８２０，９８８号、第ＥＰ０８２０，９９１号、米国特許第５，７４１，７９６号；第５，７７３，６４４号；第５，７７３，６４６号；第５，８４３，９０６号；第５，８５２，２１０号；第５，９２９，１２０号；第５，９５２，３８１号；第６，０２８，２２３号、および第６，０４０，３１１号が含まれる。単環式環の制約を有するアンタゴニストを開示している、公開された特許出願または発行された特許には、第ＷＯ９９／２６９４５号、第ＷＯ９９／３０７０９号、第ＷＯ９９／３０７１３号、第ＷＯ９９／３１０９９号、第ＷＯ９９／５９９９２号、第ＷＯ００／００４８６号、第ＷＯ００／０９５０３号、第ＥＰ０７９６，８５５号、第ＥＰ０９２８，７９０号、第ＥＰ０９２８，７９３号、米国特許第５，７１０，１５９号；第５，７２３，４８０号；第５，９８１，５４６号；第６，０１７，９２６号、および第６，０６６，６４８号が含まれる。二環式環の制約を有するアンタゴニストを開示している、公開された特許出願または発行された特許には、第ＷＯ９８／２３６０８号、第ＷＯ９８／３５９４９号、第ＷＯ９９／３３７９８号、第ＥＰ０８５３，０８４号、米国特許第５，７６０，０２８号；第５，９１９，７９２号；および第５，９２５，６５５号が含まれる。
【００１６】
しかしながら、既に記載されている化合物に勝る、改良された効能、薬力学的および薬物動態学的特性、例えば経口バイオアベイラビリティ、および作用期間を示す小分子非ペプチド選択性ανインテグリン受容体アンタゴニストへのニーズが依然として存在する。このような化合物は、ανインテグリン受容体結合および細胞結合および活性化によって仲介される、上に列挙された様々な病状の治療、予防、または抑制における増強を与えるであろう。
【００１７】
米国特許第６，０１７，９２６号（２０００年１月２５日）において、本発明者らは、強力なανインテグリン受容体アンタゴニストである一連の２−オキソ−イミダゾリジン−１−イルプロピオン酸誘導体を開示した。本発明において、本発明者らは、環式尿素カルボニルへの置換を含み、かつプロピオン酸側鎖のＣ−３において場合によって置換されたアリール基で置換されたこれらの５員環環式尿素の新規類似体を記載する。本発明の化合物は、強力なανインテグリン受容体アンタゴニストである。
【００１８】
したがって、ανインテグリン受容体アンタゴニストとして有用な新規環式尿素類似体を提供することが、本発明の１つの目的である。
【００１９】
ανβ３受容体アンタゴニストとして有用な新規環式尿素類似体を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２０】
ανβ５受容体アンタゴニストとして有用な新規環式尿素類似体を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２１】
二重ανβ３／ανβ５受容体アンタゴニストとして有用な新規環式尿素類似体を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２２】
ανインテグリン受容体アンタゴニストを含む製薬組成物を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２３】
本発明の製薬組成物の製造方法を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２４】
本発明の化合物および製薬組成物を投与することによって、それを必要としている哺乳動物における、ανインテグリン受容体拮抗作用の誘発方法を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２５】
骨吸収、再発狭窄症、アテローム性動脈硬化症、炎症性関節炎、糖尿病性網膜症、黄斑変性、血管形成、ガン、および転移腫瘍成長の阻害に有用な化合物および製薬組成物を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２６】
骨粗しょう症の治療に有用な化合物および製薬組成物を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２７】
骨吸収、再発狭窄症、アテローム性動脈硬化症、炎症性関節炎、糖尿病性網膜症、黄斑変性、血管形成、ガン、および転移腫瘍成長の阻害方法を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２８】
骨粗しょう症の治療方法を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２９】
これらの目的およびその他の目的は、下記の詳細な説明から容易に明らかになるであろう。
【００３０】
（発明の概要）
本発明は、構造式（Ｉ）：
【００３１】
【化５】
2004508400.tif 000002
を有する化合物または医薬適合性の塩に関する。ここで：
Ｘは、
【００３２】
【化６】
2004508400.tif 000003
であり、ここで、各々の非芳香環炭素原子は非置換であるか、または独立して１つまたは２つのＲ１置換基で置換されており、各芳香環炭素原子は非置換であるか、または独立して、
Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、
Ｃ３〜８シクロヘテロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル−Ｃ１〜６アルキル、
Ｃ３〜８シクロヘテロアルキル−Ｃ１〜６アルキル、アリール、アリール−Ｃ１〜６アルキル、アミノ、
アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノ、Ｃ３〜６シクロアルキル−Ｃ０〜２アミノ、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、
ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、Ｃ１〜８アルキル−Ｓ（Ｏ）０〜２、（Ｃ１〜８アルキル）０〜２アミノカルボニル、
Ｃ１〜８アルキルオキシカルボニルアミノ、（Ｃ１〜８アルキル）１〜２アミノカルボニルオキシ、
（アリールＣ１〜３アルキル）１〜２アミノ、（アリール）１〜２アミノ、アリール−Ｃ１〜３アルキルスルホニル−アミノ、およびＣ１〜８アルキルスルホニルアミノ、
から成る群から選択される１つのＲ１置換基で置換されているか、
または２つのＲ１置換基は、同じ非芳香族炭素原子上にある時、これらが結合している炭素原子と共にカルボニル基を形成するか、または２つのＲ１置換基は、これらが結合している非芳香族炭素原子と共に、結合して４から６員飽和または不飽和炭素環式環を形成し；
Ｒ２は、水素であるかまたはＣ１〜４アルキルであり；
Ｗは、
（１）硫黄、
（２）Ｎ−ＣＮ、
（３）ＮＣＯＲ３、
（４）ＮＳＯ２Ｒ３、
（５）ＮＣＯＮＨ２、
（６）ＮＳＯ２ＮＨ２、
（７）ＣＨＮＯ２、
（８）ＣＨＳＯ２Ｒ３、
（９）ＣＨＣＮ、および
（１０）ＣＨＣＯＲ３、
（ここで、Ｒ３は、Ｃ１〜６アルキルまたはフェニル−Ｃ１〜３アルキルである）
から成る群から選択され；
Ｒ４は、アリール基が、
（１）フェニル、
（２）ナフチル、
（３）ピリジニル、
（４）フリル、
（５）チエニル、
（６）ピロリル、
（７）オキサゾリル、
（８）チアゾリル、
（９）イミダゾリル、
（１０）ピラゾリル、
（１１）イソキサゾリル、
（１２）イソチアゾリル、
（１３）ピリミジニル、
（１４）ピラジニル、
（１５）ピリダジニル、
（１６）キノリル、
（１７）イソキノリル、
（１８）ベンズイミダゾリル、
（１９）ベンゾフリル、
（２０）ベンゾチエニル、
（２１）インドリル、
（２２）ベンズチアゾリル、
（２３）ベンゾキサゾリル、
（２４）ジヒドロベンゾフリル、
（２５）ベンゾ（１，３）ジオキソラニル、および
（２６）ベンゾ（１，４）ジオキサニル、
から成る群から選択されるアリール、およびアリールが上に規定されているものと同じである一、二、および三置換アリールであり、これらの置換基は独立して、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜３アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、Ｃ１〜４アルキルスルフィニル、Ｃ１〜４アルキルスルホニル、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルキルカルボニルオキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、またはニトロであるか；または２つの隣接置換基は、これらが結合している炭素原子と共に、結合して、Ｎ、Ｏ、およびＳから成る群から選択される１または２個のヘテロ原子を含む、５または６員飽和または不飽和環を形成し、これらの環炭素原子は、オキソまたはＣ１〜３アルキルで置換されていてもよく；
Ｒ５は、水素、メチル、およびエチルから成る群から選択され、
Ｒ６およびＲ７は各々独立して、水素またはＣ１〜４アルキルである。
【００３３】
本発明はまた、本発明の化合物と製薬的に許容しうるキャリヤとを含む製薬組成物にも関する。
【００３４】
本発明はまた、本発明の製薬組成物の製造方法にも関する。
【００３５】
本発明はまた、本発明の化合物および製薬組成物を投与することによる、それを必要としている哺乳動物における、ανインテグリン受容体拮抗作用の誘発方法にも関する。
【００３６】
本発明はまた、本発明の化合物および製薬組成物を投与することによる、骨吸収、再発狭窄症、アテローム性動脈硬化症、炎症性関節炎、糖尿病性網膜症、黄斑変性、血管形成、ガン、および転移腫瘍成長の阻害方法にも関する。
【００３７】
本発明はまた、本発明の化合物および製薬組成物を投与することによる、骨粗しょう症の治療方法にも関する。
【００３８】
（発明の詳細な説明）
本発明は、ανインテグリン受容体アンタゴニストとして有用な化合物に関する。本発明の化合物は、下記構造式（Ｉ）：
【００３９】
【化７】
2004508400.tif 000004
によって記載されるか、または医薬適合性の塩である。ここで：
Ｘは、
【００４０】
【化８】
2004508400.tif 000005
であり、ここで、各々の非芳香環炭素原子は非置換であるか、または独立して１つまたは２つのＲ１置換基で置換されており、各芳香環炭素原子は非置換であるか、または独立して、
Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、
Ｃ３〜８シクロヘテロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル−Ｃ１〜６アルキル、
Ｃ３〜８シクロヘテロアルキル−Ｃ１〜６アルキル、アリール、アリール−Ｃ１〜６アルキル、アミノ、
アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノ、Ｃ３〜６シクロアルキル−Ｃ０〜２アミノ、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、
ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、Ｃ１〜８アルキル−Ｓ（Ｏ）０〜２、（Ｃ１〜８アルキル）０〜２アミノカルボニル、
Ｃ１〜８アルキルオキシカルボニルアミノ、（Ｃ１〜８アルキル）１〜２アミノカルボニルオキシ、
（アリールＣ１〜３アルキル）１〜２アミノ、（アリール）１〜２アミノ、アリール−Ｃ１〜３アルキルスルホニル−アミノ、およびＣ１〜８アルキルスルホニルアミノ、
から成る群から選択される１つのＲ１置換基で置換されているか、
または２つのＲ１置換基は、同じ非芳香族炭素原子上にある時、これらが結合している炭素原子と共にカルボニル基を形成するか、または２つのＲ１置換基は、これらが結合している非芳香族炭素原子と共に、結合して４から６員飽和または不飽和炭素環式環を形成し；
Ｒ２は、水素であるかまたはＣ１〜４アルキルであり；
Ｗは、
（１）硫黄、
（２）Ｎ−ＣＮ、
（３）ＮＣＯＲ３、
（４）ＮＳＯ２Ｒ３、
（５）ＮＣＯＮＨ２、
（６）ＮＳＯ２ＮＨ２、
（７）ＣＨＮＯ２、
（８）ＣＨＳＯ２Ｒ３、
（９）ＣＨＣＮ、および
（１０）ＣＨＣＯＲ３、
（ここで、Ｒ３は、Ｃ１〜６アルキルまたはフェニル−Ｃ１〜３アルキルである）
から成る群から選択され；
Ｒ４は、アリール基が、
（１）フェニル、
（２）ナフチル、
（３）ピリジニル、
（４）フリル、
（５）チエニル、
（６）ピロリル、
（７）オキサゾリル、
（８）チアゾリル、
（９）イミダゾリル、
（１０）ピラゾリル、
（１１）イソキサゾリル、
（１２）イソチアゾリル、
（１３）ピリミジニル、
（１４）ピラジニル、
（１５）ピリダジニル、
（１６）キノリル、
（１７）イソキノリル、
（１８）ベンズイミダゾリル、
（１９）ベンゾフリル、
（２０）ベンゾチエニル、
（２１）インドリル、
（２２）ベンズチアゾリル、
（２３）ベンゾキサゾリル、
（２４）ジヒドロベンゾフリル、
（２５）ベンゾ（１，３）ジオキソラニル、および
（２６）ベンゾ（１，４）ジオキサニル、
から成る群から選択されるアリール、およびアリールが上に規定されているものと同じである一、二、および三置換アリールであり、これらの置換基は独立して、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜３アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、Ｃ１〜４アルキルスルフィニル、Ｃ１〜４アルキルスルホニル、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルキルカルボニルオキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、またはニトロであるか；または２つの隣接置換基は、これらが結合している炭素原子と共に、結合して、Ｎ、Ｏ、およびＳから成る群から選択される１または２個のヘテロ原子を含む、５または６員飽和または不飽和環を形成し、これらの環炭素原子は、オキソまたはＣ１〜３アルキルで置換されていてもよく；
Ｒ５は、水素、メチル、およびエチルから成る群から選択され、
Ｒ６およびＲ７は各々独立して、水素またはＣ１〜４アルキルである。
【００４１】
本発明の１つの実施形態において、Ｘは、
【００４２】
【化９】
2004508400.tif 000006
である。
【００４３】
本発明の化合物の第二実施形態において、Ｒ４は、一または二置換の
フェニル、
ピリジニル、
キノリル、
ピリミジニル
ピラジニル、
ピラゾリル、または
ジヒドロベンゾフリル、
であり、ここで、これらの置換基は独立して、水素、ヒドロキシ、ヒドロキシ−Ｃ１〜６アルキル、ハロゲン、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜３アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、Ｃ１〜４アルキルスルフィニル、Ｃ１〜４アルキルスルホニル、Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルキルカルボニルオキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、またはニトロであるか；または２つの隣接置換基は、これらが結合している炭素原子と共に、結合して、Ｎ、Ｏ、およびＳから成る群から選択される１または２個のヘテロ原子を含む、５または６員飽和または不飽和環を形成し、これらの環炭素原子は、オキソまたはＣ１〜３アルキルで置換されていてもよい。
【００４４】
本発明のこの実施形態の１つの種類において、Ｒ４は、一または二置換の
キノリル、
ピリジニル、または
ピリミジニル、
であり、ここで、これらの置換基は独立して、水素、ハロゲン、フェニル、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、アミノ、Ｃ１〜３アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜３）アルキルアミノ、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１，１−トリフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、またはトリフルオロエトキシである。
【００４５】
本発明の第三実施形態において、Ｒ１は、
水素、
アミノ、
Ｃ１〜４アルキルアミノ、
Ｃ３〜６シクロアルキル−Ｃ０〜２アルキルアミノ、
シアノ、
Ｃ１〜４アルキル、
シクロプロピル、
アリールＣ１〜３アルキル、
Ｃ１〜４アシルアミノ、
Ｃ１〜４アルコキシ、
Ｃ１〜４アルキルチオ、
アミノカルボニル、
（Ｃ１〜６アルキル）１〜２アミノカルボニル、
Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、
トリフルオロメチル、および
トリフルオロメトキシ、
から成る群から選択される。
【００４６】
本発明のこの実施形態の１つの種類において、Ｒ１は、
水素、
アミノ、
Ｃ１〜３アルキルアミノ、
Ｃ３〜６シクロアルキルメチルアミノ、
Ｃ１〜４アルキル、
シクロプロピル、
トリフルオロメチル、および
トリフルオロメトキシ、
から成る群から選択される。
【００４７】
本発明の化合物のもう１つの実施形態において、Ｗは硫黄またはＮ−ＣＮである。
【００４８】
本発明のこの実施形態の１つの種類において、ＷはＮ−ＣＮである。
【００４９】
本発明のこの実施形態のもう１つの種類において、Ｗは硫黄である。
【００５０】
本発明のもう１つの実施形態において、Ｒ５は、水素、メチル、およびエチルから成る群から選択される。
【００５１】
本発明のこの実施形態の１つの種類において、Ｒ５は水素である。
【００５２】
本発明のさらにもう１つの実施形態において、Ｒ６およびＲ７はどちらも水素である。
【００５３】
本発明の化合物の例証的ではあるが非限定的な例は、次のものである：
３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−シアノイミノ−３−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］−イミダゾリジン−イル｝−プロピオン酸：
【００５４】
【化１０】
2004508400.tif 000007
【００５５】
および３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−チオ−３−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］−イミダゾリジン−イル｝−プロピオン酸：
【００５６】
【化１１】
2004508400.tif 000008
または医薬適合性の塩。
【００５７】
本発明のあるいくつかの実施形態において、これらの化合物は、Ｒ４が結合している炭素原子のところで指定されたものを伴なった下記式に対応する：
【００５８】
【化１２】
2004508400.tif 000009
ここで、置換基Ｘ、Ｗ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、上記と同じである。
【００５９】
医薬への使用の場合、この発明の化合物の塩は、非毒性の「医薬適合性の塩」のことを言う。しかしながらその他の塩も、本発明による化合物またはこれらの医薬適合性の塩の調製において有用でありうる。「医薬適合性の塩」という用語に包含される基本的な化合物の塩は、一般に遊離塩基と適切な有機または無機酸とを反応させて調製される、この発明の化合物の非毒性塩のことを言う。本発明の基本的な化合物の代表的な塩には下記のものが含まれるが、これらに限定されるわけではない。すなわち、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、硫酸水素塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物、カムシレート、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エディシレート、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニレート、ヘキシルレゾルシネート、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエート、ヨウ化物、イソチオネート、乳酸塩、ラクトビオネート、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシレート、メチル臭化物、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナプシレート、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、蓚酸塩、パモエート（エムボネート）、パルミテート、パントテネート、リン酸塩／ジホスフェート、ポリガラクツロネート、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート、トシレート、トリエチオダイド、および吉草酸塩である。さらには本発明の化合物が酸性部分を含んでいる場合、これらの適切な医薬適合性の塩には、下記のものを含む無機塩基に由来する塩が含まれるが、これらに限定されるわけではない。すなわち、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン、亜マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛等である。特に好ましいものは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウム塩である。製薬的に許容しうる有機非毒性塩基に由来する塩には次のものが含まれる。すなわち、第一、第二、および第三アミン、環式アミン、および塩基性イオン交換樹脂の塩、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂；プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等である。
【００６０】
本発明の化合物は、キラル中心を有していてもよく、したがってラセミ酸塩、ラセミ混合物、単一鏡像異性体、ジアステレオ異性体混合物、および個々のジアステレオ異性体として生じてもよく、すべての異性体形態が本発明に含まれる。したがって化合物がキラルである場合、実質的にもう一方のものを含まない別々の鏡像異性体またはジアステレオ異性体は、本発明の範囲内に含まれる。加えて、これらの２つの鏡像異性体の混合物すべてが含まれる。
【００６１】
本明細書に記載されている化合物の中には、オレフィン二重結合を含むものもあり、ほかに特定されていなければ、ＥおよびＺの両方の幾何異性体を含むことを意味する。
【００６２】
本明細書に記載されている化合物の中には、互変体と呼ばれる様々な水素の結合点を有するものが存在することもある。この一例はケトンであってもよく、ケト−エノール互変体として知られているそのエノール形態であってもよい。個々の互変体、ならびにこれらの混合物は、本発明の化合物の範囲内に包含される。
【００６３】
本発明の化合物は、適切な溶媒、例えばメタノールまたは酢酸エチルまたはこれらの混合物からの例えば分別結晶によって、鏡像異性体のジアステレオ異性体ペアに分けられてもよい。このようにして得られた鏡像異性体ペアは、通常の手段によって、例えば分解剤として光学活性酸を使用することによって、あるいはキラル固定相を用いたＨＰＬＣによって、個々の立体異性体に分けられてもよい。あるいはまた、本発明の化合物のあらゆる鏡像異性体は、光学的に純粋な出発原料または既知の立体配座の試薬を用いた立体特異性合成によって得られてもよい。
【００６４】
同様に、本発明の化合物の多形体および水和物も、本発明の範囲内に含まれる。
【００６５】
本発明は、この発明の化合物のプロドラッグも発明の範囲内に含む。一般にこのようなプロドラッグは、必要とされる化合物にインビボで容易に転換しうる、この発明の化合物の官能誘導体である。したがって本発明の治療方法において、「投与する」という用語は、特別に開示された化合物、または特別に開示されていなくてもよいが、患者への投与後にインビボで特定の化合物に転換される化合物を用いた、記載されている様々な状態の治療を包含するものとする。適切なプロドラッグ誘導体の選択および調製のための通常の手順は、例えば「プロドラッグの設計（Ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　Ｐｒｏｄｒｕｇｓ）」、ｅｄ．Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５に記載されている。この文献は、その全体が参照して本発明に組込まれる。これらの化合物の代謝産物には、この発明の化合物の生物培地への導入の時に生産された活性種が含まれる。
【００６６】
「治療的有効量」という用語は、研究者または臨床医によって追求されている組織、系、動物、またはヒトの生物学的または医学的応答を誘発する薬品または薬剤の量を意味するものとする。
【００６７】
本明細書において用いられる「ανインテグリン受容体アンタゴニスト」という用語は、ανβ３受容体またはανβ５受容体のどちらかに結合して拮抗させる化合物、またはこれらの受容体の組合わせに結合して拮抗させる化合物（例えば二重ανβ３／ανβ５受容体アンタゴニスト）のことを言う。
【００６８】
本明細書において用いられる「骨吸収」という用語は、破骨細胞が骨を劣化させるプロセスのことを言う。
【００６９】
「アルキル」という用語は、１から１０個の総炭素原子、またはこの範囲内のあらゆる数の直鎖または枝分かれ鎖アルカンを意味するものとする（すなわち、メチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル等）。
【００７０】
「アルケニル」という用語は、２から１０個の総炭素原子、またはこの範囲内のあらゆる数の直鎖または枝分かれ鎖アルケンを意味するものとする。
【００７１】
「アルキニル」という用語は、２から１０個の総炭素原子、またはこの範囲内のあらゆる数の直鎖または枝分かれ鎖アルキンを意味するものとする。
【００７２】
「シクロアルキル」という用語は、３から８個の総炭素原子、またはこの範囲内のあらゆる数のアルカンの環式環を意味するものとする（すなわち、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、またはシクロオクチル）。
【００７３】
本明細書において用いられる「シクロヘテロアルキル」という用語は、Ｎ、Ｏ、またはＳから選ばれた１または２個のヘテロ原子を含む、３〜８員の完全飽和へテロ環式環を意味するものとする。シクロヘテロアルキル基の例には、ピペリジニル、ピロリジニル、アゼチジニル、モルホリニル、ピペラジニルが含まれるが、これらに限定されるわけではない。
【００７４】
本明細書において用いられる「アルコキシ」という用語は、特定された炭素原子数（例えばＣ１〜５アルコキシ）、またはこの範囲内のあらゆる数（すなわちメトキシ、エトキシ等）の直鎖または枝分かれ鎖アルコキシドを意味するものとする。
【００７５】
本明細書において用いられる「アリール」という用語は、少なくとも１つの芳香環を含む単環式または二環式系のことを言う。この場合、この単環式または二環式系は、Ｎ、Ｏ、またはＳから選ばれた０、１、２、３、または４個のヘテロ原子を含み、この単環式または二環式系は、非置換であるか、あるいは独立して次のものから選ばれる１つまたはそれ以上の基で置換されている。すなわち、ハロゲン、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜３アルキル、アミノ、アミノＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノＣ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、Ｃ１〜４アルキルスルフィニル、Ｃ１〜４アルキルスルホニル、Ｃ１〜４アルコキシＣ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニル−Ｃ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニルＣ１〜６アルキルオキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１〜６アルキル、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、オキソ、およびＣ１〜５アルキルカルボニルオキシである。アリールの例には、非限定的ではあるが、フェニル、ナフチル、ピリジニル、ピロリル、ピラゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、ベンゾキサゾリル、インドリル、チエチル、フリル、ジヒドロベンゾフリル、ベンゾ（１，３）ジオキソラニル、ベンゾ（１，４）ジオキサニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、およびイソチアゾリルが含まれ、これらは非置換であるか、あるいは独立して下記のものから選ばれる１つまたはそれ以上の基で置換されている。すなわち、ハロゲン、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜３アルキル、アミノ、アミノＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜３アシルアミノ、Ｃ１〜３アシルアミノＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノＣ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６）アルキルアミノ−Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、Ｃ１〜４アルキルスルフィニル、Ｃ１〜４アルキルスルホニル、Ｃ１〜４アルコキシＣ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニル、ヒドロキシカルボニルＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜５アルコキシカルボニル、Ｃ１〜３アルコキシカルボニルＣ１〜６アルキル、ヒドロキシカルボニルＣ１〜６アルキルオキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１〜６アルキル、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、オキソ、およびＣ１〜５アルキルカルボニルオキシである。好ましくはこのアリール基は、非置換であるか、上に挙げられた置換基のうちの１から３個で一、二、または三置換されている。より好ましくはこのアリール基は、非置換であるか、上に挙げられた置換基のうちの１から２個で一または二置換されている。
【００７６】
「アルキル」または「アリール」という用語、またはこれらの接頭語根のどちらかが、１つの置換基の名称に現われる（例えばアリールＣ０〜８アルキル）時はいつも、「アルキル」および「アリール」について上に挙げられた限定を含むものと解釈されるものとする。炭素原子の指定された数（例えばＣ１〜８）は独立して、アルキルまたは環式アルキル部分における炭素原子数のことを言うか、またはアルキルがその接頭語根として現われている比較的大きい置換基のアルキル部分のことを言うものとする。
【００７７】
「アリールアルキル」および「アルキルアリール」という用語は、アルキルが上で規定されているものと同じであるアルキル部分を含み、アリールが上に規定されているものと同じであるアリール部分を含む。アリールアルキルの例には、ベンジル、フルオロベンジル、クロロベンジル、フェニルエチル、フェニルプロピル、フルオロフェニルエチル、クロロフェニルエチル、チエニルメチル、チエニルエチル、およびチエニルプロピルが含まれるが、これらに限定されるわけではない。アルキルアリールの例には、トルエン、エチルベンゼン、プロピルベンゼン、メチルピリジン、エチルピリジン、プロピルピリジン、およびブチルピリジンが含まれるが、これらに限定されるわけではない。
【００７８】
本発明の化合物において、２つのＲ１置換基は、同じ炭素原子上にある時、これらが結合している炭素原子と共にカルボニル基を形成してもよい。
【００７９】
本発明の化合物において、２つのＲ３置換基は、同じ炭素原子上にある時、これらが結合している炭素原子と共にカルボニル基を形成してもよい。このような場合、この結果として生じた化合物において、Ｒ３が結合している１つまたは複数の炭素原子自体は、ただ１つのヘテロ原子に結合するという制限は当てはまらない。同様に、本発明の化合物において、２つのＲ３置換基は、同じ炭素原子上にある時、これらが結合している炭素原子と共にシクロプロピル基を形成してもよい。
【００８０】
置換基の定義が、Ｃ０という用語（例えばＣ０〜８アルキル）を含む時、Ｃ０によって修飾されている基は、Ｃがゼロである場合、この置換基中に存在しない。同様に、これらの変数のどれかがゼロである時、その場合にはこの変数によって修飾された基は存在しない。加えて、置換基「（Ｃ１〜６アルキル）ｐアミノ」（ここでｐは０、１、または２である）は、それぞれアミノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、およびＣ１〜６ジアルキルアミノ基のことを言う。Ｃ１〜６ジアルキルアミノ置換基が対象とされている時、このＣ１〜６アルキル基は、同一であってもよく（例えばジメチルアミノ）、または異なっていてもよい（例えばＮ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３））。同様に置換基「（アリール）ｐアミノ」または［「（アリールＣ１〜６アルキル）ｐアミノ」］（ここでｐは０、１、または２である）は、それぞれアミノ、アリールアミノ、およびジアリールアミノ基、［またはアミノ、アリールＣ１〜６アルキルアミノ、またはジ−（アリールＣ１〜６アルキル）アミノ］のことを言い、この場合、ジアリールアミノ［またはジ−（アリールＣ１〜６アルキル）アミノ］置換基中のアリール［またはアリールＣ１〜６アルキル］基は、同一であってもよく、異なっていてもよい。
【００８１】
「ハロゲン」という用語は、ヨウ素、臭素、塩素、およびフッ素を含むものとする。
「オキシ」という用語は、酸素（Ｏ）原子を意味する。「チオ」という用語は、硫黄「Ｓ」原子を意味する。「オキソ」という用語は、「＝Ｏ」を意味する。「カルボニル」という用語は、「Ｃ＝Ｏ」を意味する。
【００８２】
「置換された」という用語は、名前が挙げられている置換基による置換の多重の程度を意味するものとする。多重置換基部分が開示または特許請求されている場合、この置換された化合物は、開示されているかまたは特許請求されている置換基部分のうちの１つまたはそれ以上によって、独立して単一または複数、置換されていてもよい。独立して置換されているとは、この（２つまたはそれ以上の）置換基が同一または異なっていてもよいという意味である。
【００８３】
この開示全体において用いられる標準的命名法において、指定されている側鎖の末端部分が最初に記載され、ついで結合点の方へ向かって隣接官能価が記載される。例えばＣ１〜５アルキルカルボニルアミノＣ１〜６アルキル置換基は、下記のものに相当する：
【００８４】
【化１３】
2004508400.tif 000010
【００８５】
本発明の化合物を選ぶ時、当業者なら、様々な置換基、すなわちＸ、Ｗ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＲ７は、化学構造の連結性のよく知られている原理にしたがって選ばれるべきであることを理解するであろう。
【００８６】
本発明の代表的な化合物は一般的に、ανインテグリン受容体、特にανβ３およびανβ５へのサブミクロモル親和性を示す。したがってこの発明の化合物は、骨吸収の増加によって引起こされるかまたは仲介された骨の状態を患っていて、このような治療を必要としている哺乳動物の治療に有用である。医薬適合性の塩を含むこれらの化合物の薬理学的有効量が、哺乳類の破骨細胞の活性を阻害するために哺乳類に投与される。
【００８７】
本発明の化合物は、ανβ３受容体を拮抗させるのに有効な投薬量で、このような治療が必要とされる場合、例えば骨粗しょう症の予防または治療において投与される。
【００８８】
本発明が例証するものは、ανインテグリン受容体拮抗作用が、ανβ３拮抗作用である方法である。より詳細には、このανβ３拮抗作用は、骨吸収、再発狭窄症、血管形成、糖尿病性網膜症、黄斑変性、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害から選ばれる。この方法の１つの実施形態において、ανβ３拮抗作用は、骨吸収の阻害である。
【００８９】
本発明のもう１つの例は、ανインテグリン受容体拮抗作用が、ανβ５拮抗作用である方法である。より特定すれば、このανβ５拮抗作用は、再発狭窄症、血管形成、糖尿病性網膜症、黄斑変性、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害から選ばれる。
【００９０】
本発明がさらに例証するものは、ανインテグリン受容体拮抗作用が、二重ανβ３／ανβ５拮抗作用である方法である。より詳細には、二重ανβ３／ανβ５拮抗作用は、骨吸収、再発狭窄症、血管形成、糖尿病性網膜症、黄斑変性、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害から選ばれる。
【００９１】
より詳細には、本発明が例証するものは、前記化合物のいずれかと、製薬的に許容しうるキャリヤとを含む製薬組成物である。本発明のもう１つの例は、前記化合物のいずれかと製薬的に許容しうるキャリヤとを組合わせて製造された製薬組成物である。本発明のもう１つの例は、前記化合物のいずれかと製薬的に許容しうるキャリヤとを組合わせることを含む製薬組成物の製造方法である。
【００９２】
本発明がさらに例証するものは、それを必要としている哺乳動物における、ανインテグリン受容体の拮抗作用によって仲介される状態の治療および／または予防方法であって、前記化合物のいずれかの治療的有効量を哺乳動物に投与することを含む方法である。好ましくはこの状態は、骨吸収、骨粗しょう症、再発狭窄症、糖尿病性網膜症、黄斑変性、血管形成、アテローム性動脈硬化症、炎症性関節炎、ガン、腫瘍成長、および転移から選ばれる。より好ましくはこの状態は、骨粗しょう症およびガンから選ばれる。最も好ましくはこの状態は骨粗しょう症である。
【００９３】
より特定すれば、本発明を例証するものは、それを必要としている哺乳動物における、ανインテグリン拮抗作用の誘発方法であって、前記化合物のいずれかまたは前記製薬組成物のいずれかの治療的有効量を哺乳動物に投与することを含む方法である。好ましくはこのανインテグリン拮抗作用は、ανβ３拮抗作用である。より特定すれば、このανβ３拮抗作用は、骨吸収の阻害、再発狭窄症の阻害、アテローム性動脈硬化症の阻害、血管形成の阻害、糖尿病性網膜症の阻害、黄斑変性の阻害、炎症性関節炎の阻害、ガンまたは転移腫瘍成長の阻害から選ばれる。最も好ましくは、このανインテグリン拮抗作用は、骨吸収の阻害である。あるいはまた、このανインテグリン拮抗作用は、ανβ５拮抗作用または二重ανβ３／ανβ５拮抗作用である。ανβ５拮抗作用の例は、再発狭窄症、アテローム性動脈硬化症、血管形成、糖尿病性網膜症、黄斑変性、炎症性関節炎、ガン、および転移腫瘍成長の阻害である。
【００９４】
本発明のさらなる例は、それを必要としている哺乳動物における、骨吸収の阻害および骨粗しょう症の治療および／または予防方法であって、前記化合物のいずれか、または前記製薬組成物のいずれかの治療的有効量を哺乳動物に投与することを含む方法である。
【００９５】
本発明のその他の例は、それを必要としている哺乳動物における、悪性高カルシウム血症、骨転移による骨減少症、歯周病、副甲状腺機能亢進症、慢性関節リウマチにおける関節周囲びらん、パジェット病、不動化誘発骨減少症、およびグルココルチコイドの治療方法であって、前記化合物のいずれか、または前記製薬組成物のいずれかの治療的有効量を哺乳動物に投与することを含む方法である。
【００９６】
より詳細には、本発明を例証するものは、それを必要としている哺乳動物における、骨粗しょう症の治療および／または予防のための薬剤の調製における前記化合物のいずれかの使用である。さらにもう１つの本発明を例証するものは、骨吸収、転移腫瘍成長、ガン、再発狭窄症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性網膜症、黄斑変性、炎症性関節炎、および／または血管形成の治療および／または予防のための薬剤の調製における、前記化合物のいずれかの使用である。
【００９７】
同様に、本発明を例証するものは、下記のものから成る群から選択される活性成分をさらに含む組成物である：
ａ）有機ビスホスホネートまたは医薬適合性の塩またはエステル、
ｂ）エストロゲン受容体モジュレータ、
ｃ）アンドロゲン受容体モジュレータ、
ｄ）細胞障害／抗増殖剤、
ｅ）マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、
ｆ）表皮由来、線維芽細胞由来、または血小板由来成長因子の阻害剤、
ｇ）ＶＥＧＦ受容体アンタゴニスト、
ｈ）成長因子または成長因子受容体への抗体、
ｉ）Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ、Ｆｌｔ−１、Ｔｃｋ／Ｔｉｅ−２、またはＴｉｅ−１の阻害剤、
ｊ）カテプシンＫ阻害剤、
ｋ）成長ホルモン分泌促進薬、
ｌ）破骨細胞プロトンＡＴＰａｓｅの阻害剤、
ｍ）ウロキナーゼプラスミノゲン活性化剤（ｕ−ＰＡ）の阻害剤、
ｎ）腫瘍特異的抗体−インターロイキン−２−融合タンパク質、
ｏ）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤、および
ｐ）ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、またはゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ阻害剤、または二重ファルネシル／ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ阻害剤、
およびこれらの混合物。
【００９８】
（Ｂ．Ｍｉｌｌａｕｅｒら、「Ｆｌｋ−１の優性ネガティブ阻害が、インビボで多くの腫瘍型の成長を抑制する（Ｄｏｍｉｎａｎｔ−Ｎｅｇａｔｉｖｅ　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｌｋ−１　Ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ　ｔｈｅ　Ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｍａｎｙ　Ｔｕｍｏｒ　Ｔｙｐｅｓ　Ｉｎ　Ｖｉｖｏ）」、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５６、１６１５−１６２０（１９９６）参照。この文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる）。
【００９９】
好ましくは、この活性成分は、下記のものから成る群から選択される：
ａ）有機ビスホスホネートまたは医薬適合性の塩またはエステル、
ｂ）エストロゲン受容体モジュレータ、
ｃ）アンドロゲン受容体モジュレータ、
ｄ）破骨細胞プロトンＡＴＰａｓｅの阻害剤、
ｅ）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤、および
ｆ）カテプシンＫ阻害剤、
およびこれらの混合物。
【０１００】
このようなビスホスホネートの非限定例には、アレンドロネート、エチドロネート、パミドロネート、リセドロネート、イバンドロネート、および製薬的に許容しうるこれらの塩およびエステルが含まれる。特に好ましいビスホスホネートは、アレンドロネート、特にアレンドロネート一ナトリウム三水和物である。
【０１０１】
エストロゲン受容体モジュレータの非限定例には、エストロゲン、プロゲステリン、エストラジオール、ドロロキシフェン、ラロキシフェン、およびタモキシフェンが含まれる。
【０１０２】
細胞障害／抗増殖剤の非限定例は、タキソール、ビンクリスティン、ビンブラスティン、およびドキソルビシンである。
【０１０３】
以前にカテプシンＯ２として知られていたカテプシンＫは、システインプロテアーゼであり、次の特許に記載されている。すなわち、１９９６年５月９日に公開されたＰＣＴ国際出願公報第ＷＯ９６／１３５２３号；１９９６年３月３日に発行された米国特許第５，５０１，９６９号；および１９９８年４月７日に発行された米国特許第５，７３６，３５７号である。これらのすべては、その全体が参照して本発明に組込まれる。システインプロテアーゼ、特にカテプシンは、いくつかの疾病状態、例えば腫瘍転移、炎症、関節炎、および骨改造作用に関連している。酸性ｐＨにおいて、カテプシンはＩ型コラーゲンを分解しうる。カテプシンプロテアーゼ阻害剤は、コラーゲン線維の分解を阻害して、破骨細胞骨吸収を阻害することができ、したがって骨吸収病、例えば骨粗しょう症の治療に有用である。
【０１０４】
「スタチン」として知られているＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の種類のメンバーは、新しい骨の成長を引起こし、骨粗しょう症の結果として失われた骨量に取って代わることが発見された（Ｔｈｅ　Ｗａｌｌ　Ｓｔｒｅｅｔ　Ｊｏｕｒｎａｌ，１９９９年１２月３日金曜日、Ｂ１ページ参照）。したがってスタチンは、骨吸収の治療のために期待できる。スタチンの非限定例は、ロバスタチン、シムバスタチン、アトルバスタチン、およびプラバスタチンである。
【０１０５】
血管形成、腫瘍浸潤、炎症、および傷治療中のマトリックス改造作用におけるウロキナーゼ−ウロキナーゼ受容体（ｕ−ＰＡ−ｕ−ＰＡＲ）の決定的な役割の証拠が提示されている［Ｙ．Ｋｏｓｈｅｌｎｉｃｋら、「ウロキナーゼ受容体および細胞応答を通じたシグナリングのメカニズム（Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｔｈｒｏｕｇｈ　Ｕｒｏｋｉｎａｓｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）」、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　ａｎｄ　Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ　８２：３０５−３１１（１９９９）、およびＦ．Ｂｌａｓｉ、「タンパク質分解、細胞結合、走化性、および侵襲性は、ｕ−ＰＡ−ｕ−ＰＡＲ−ＰＡＩ−１系によって調節される（Ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ，Ｃｅｌｌ　Ａｄｈｅｓｉｏｎ，Ｃｈｅｍｏｔａｘｉｓ，ａｎｄ　Ｉｎｖａｓｉｖｅｎｅｓｓ　Ａｒｅ　Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｕ−ＰＡ−ｕ−ＰＡＲ−ＰＡＩ−１　Ｓｙｓｔｅｍ）」、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　ａｎｄ　Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ　８２：２９８−３０４（１９９９）参照］。したがってｕ−ＰＡのｕ−ＰＡＲへの結合の特異的アンタゴニストは、インビトロおよびインビボモデルの両方において細胞表面プラスミノゲン活性化、腫瘍成長、および血管成長を阻害する。
【０１０６】
Ｈ．Ｎ．Ｌｏｄｅおよび共同研究者らは、ＰＮＡＳ　ＵＳＡ９６：１５９１−１５９６（１９９９）において、自然発生腫瘍転移の根絶における、抗血管形成ανインテグリンアンタゴニストと腫瘍特異的抗体−サイトカイン（インターロイキン−２）融合タンパク質との間の相乗作用を観察している。これらの結果は、この組合わせが、ガンおよび転移腫瘍成長の治療への可能性を有することを示唆した。
【０１０７】
破骨細胞の頂端膜上に見られるプロトンＡＴＰａｓｅは、骨吸収プロセスにおいて有意な役割を果たすと報告されている。したがってこのプロトンポンプは、骨粗しょう症および関連代謝疾患の治療および予防に潜在的に有用な骨吸収の阻害剤の設計への魅力的な標的である（Ｃ．Ｆａｒｉｎａら、「新規抗骨吸収剤としての破骨細胞液胞プロトンＡＴＰａｓｅの選択的阻害剤（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ　ｖａｃｕｏｌａｒ　ｐｒｏｔｏｎ　ＡＴＰａｓｅ　ａｓ　ｎｏｖｅｌ　ｂｏｎｅ　ａｎｔｉｒｅｓｏｒｐｔｉｖｅ　ａｇｅｎｔｓ）」、ＤＤＴ、４：１６３−１７２（１９９９））。
【０１０８】
アンドロゲンステロイドが男性および女性における骨量の発達において生理学的役割を果たし、アンドロゲンが直接骨に作用するという証拠が提示されている。アンドロゲン受容体は、ヒトの骨芽細胞様細胞系において証明されており、アンドロゲンは骨細胞増殖および分化を直接刺激することが証明されている。考察のために、Ｓ．Ｒ．Ｄａｖｉｓ、「女性におけるアンドロゲンの治療のための使用（Ｔｈｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｕｓｅ　ｏｆ　ａｎｄｒｏｇｅｎｓ　ｉｎ　ｗｏｍｅｎ）」、Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、６９：１７７−１８４（１９９９）、およびＫ．Ａ．ＨａｎｓｅｎおよびＳ．Ｐ．Ｔ．Ｔｈｏ、「アンドロゲンおよび骨の健康（Ａｎｄｒｏｇｅｎｓ　ａｎｄ　Ｂｏｎｅ　Ｈｅａｌｔｈ）」、Ｓｅｍｉｎａｒ　ｉｎ　Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１６：１２９−１３４（１９９８）が参照される。したがってアンドロゲン受容体モジュレータは、女性における骨損失の治療および予防において有用性を有しうる。
【０１０９】
血管形成因子ＶＥＧＦは、破骨細胞上のその受容体への結合を介して、単離された成熟ウサギ破骨細胞の骨吸収活性を刺激することが証明されている（Ｍ．Ｎａｋａｇａｗａら、「血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、破骨細胞骨吸収および成熟破骨細胞の生存を直接増強する（Ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）　ｄｉｒｅｃｔｌｙ　ｅｎｈａｎｃｅｓ　ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｉｃ　ｂｏｎｅ　ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｏｆ　ｍａｔｕｒｅ　ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｓ）」、ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ，４７３：１６１−１６４（２０００）参照）。したがって破骨細胞受容体、例えばＫＤＲ／Ｆｌｋ−１およびＦｌｔ−１へのＶＥＧＦ結合のアンタゴニストの開発は、骨吸収の治療または予防へのさらにもう１つの方法を提供しうる。
【０１１０】
ペルオキシソーム増殖剤活性化された受容体−γ（ＰＰＡＲγ）の活性化剤、例えばチアゾリジンジオン（ＴＺＤ）は、インビトロでの破骨細胞様細胞形成、および骨吸収を阻害する。Ｒ．ＯｋａｚａｋｉらによってＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１４０、ｐｐ５０６０−５０６５、（１９９９）において報告された結果は、骨髄細胞への局所的メカニズム、ならびにグルコース代謝に対する全身的メカニズムを指し示している。ＰＰＡＲγ活性化剤の非限定例には、トログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、およびＢＲＬ４９６５３が含まれる。
【０１１１】
本発明はまた、本発明の化合物と、骨粗しょう症の予防または治療に有用な１つまたはそれ以上の薬剤との組合わせも目的とする。例えば本発明の化合物は、その他の薬剤、例えば有機ビスホスホネート、エストロゲン受容体モジュレータ、アンドロゲン受容体モジュレータ、カテプシンＫ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＰＰＡＲγ活性化剤、ＶＥＧＦ受容体アンタゴニスト、または破骨細胞プロトンＡＴＰａｓｅの阻害剤の有効量と組合わせて効果的に投与されてもよい。
【０１１２】
本発明のその他の例は、それを必要としている哺乳動物における、ガンまたは転移腫瘍成長の治療方法であって、前記化合物の治療的有効量および細胞障害／抗増殖性であると知られている１つまたはそれ以上の薬剤をこの哺乳動物に投与することを含む方法である。同様に、本発明の化合物は、ガンおよび転移腫瘍成長の治療のために、放射線治療と組合わせて投与することもできる。
【０１１３】
さらには本発明のインテグリンανβ３アンタゴニスト化合物は、カルシウムまたはリン酸塩代謝の障害およびそれに伴なう疾患の治療的または予防的治療において、成長ホルモン分泌促進薬と組合わせて効果的に投与されてもよい。これらの疾患には、骨吸収の減少から利益を得ることができる状態が含まれる。骨吸収の減少は、吸収と形成との間のバランスを改良し、骨損失を減少させるか、または骨の増加を結果として生じさせるべきである。骨吸収の減少は、溶骨性障害に伴なう痛みを軽減することができ、これらの障害の発生および／または成長を減少させることができる。これらの病気には、骨粗しょう症（エストロゲン欠乏、不動化、グルココルチコイド誘発性、および老人性）、骨形成異常症、パジェット病、骨化性筋炎、ベクテリエフ病、悪性高カルシウム血症、転移骨疾患、歯周病、胆石症、腎結石症、尿路結石症、尿結石、動脈の硬化（硬化症）、関節炎、滑液包炎、神経炎、およびテタニーが含まれる。骨吸収の増加は、血漿中への病的高カルシウムおよびリン酸塩濃度を伴なうことがある。これは、この治療によって軽減されるであろう。同様に本発明は、成長ホルモン欠乏患者における骨量の増加において有用であろう。したがって好ましい組合わせは、本発明のανβ３受容体アンタゴニストと、成長ホルモン分泌促進薬との同時または交互治療であり、場合によっては、有機ビスホスホネート、好ましくはアレンドロネート一ナトリウム三水和物を含む第三成分が含まれる。
【０１１４】
本発明の方法によれば、この組合わせの個々の成分は、治療経過中の異なる時間に別々に投与されてもよく、あるいは分けられたまたは単一の組合わせ形態において同時に投与されてもよい。したがって本発明は、このようなすべての同時または交互治療法を包含するものと理解すべきであり、「投与する」という用語は、それに応じて解釈されるべきである。この発明の化合物と、インテグリン仲介された状態の治療に有用なその他の薬剤との組合わせの範囲には、原則的に、骨粗しょう症の治療に有用なあらゆる製薬組成物とのあらゆる組合わせが含まれると理解される。
【０１１５】
本明細書において用いられる「組成物」という用語は、特定の成分を特定量で含む生成物、ならびに特定量における特定の成分の組合わせの結果直接または間接的に生じるあらゆる生成物を包含するものとする。
【０１１６】
本発明の化合物は、例えばタブレット、カプセル（これらの各々は、徐放性または指定時刻に放出する配合物を含む）、ピル、粉末、グラニュール、エリキシル、チンキ、懸濁液、シロップ、およびエマルジョンなどの経口投薬形態で投与されてもよい。同様にこれらはまた、静脈内（注射または注入）、腹膜内、局所（例えば点眼薬）、皮下、筋肉内、または経皮（例えばパッチ）形態で投与されてもよい。すべては、製薬業の業者によく知られた使用形態である。望まれている化合物の有効であるが非毒性的な量を、ανβ３アンタゴニストとして用いることができる。
【０１１７】
本発明の化合物を用いる投薬計画は、患者の種類、種、年齢、体重、性、および医学的状態；治療される状態の重症度；投与経路；患者の腎臓および肝臓の機能；および用いられる特定の化合物またはその塩を含む多様な要因にしたがって選択される。通常の技術を有する医師、獣医師、または臨床医なら、この状態の進行を防ぎ、これに対処するか、または停止させるのに必要とされる薬剤の有効量を容易に決定し、処方することができる。
【０１１８】
本発明の経口投薬量は、指示された効果のために用いられる時、１日につき体重１ｋｇあたり約０．０１ｍｇ（ｍｇ／ｋｇ／日）から約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１から１０ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは０．１から５．０ｍｇ／ｋｇ／日であろう。経口投与の場合、これらの組成物は好ましくは、治療される患者への投薬量の症候による調節のために、活性成分０．０１、０．０５、０．１、０．５、１．０、２．５、５．０、１０．０、１５．０、２５．０、５０．０、１００、および５００ミリグラムを含むタブレットの形態で提供される。薬剤は一般的には、活性成分約０．０１ｍｇから約５００ｍｇ、好ましくは活性成分約１ｍｇから約１００ｍｇを含む。静脈内の場合、最も好ましい用量は、一定速度の注入の間、約０．１から約１０ｍｇ／ｋｇ／分であろう。有利には本発明の化合物は、単一の一日用量として投与されてもよく、あるいは一日の投薬量全体が、毎日２、３、または４回の分割用量として投与されてもよい。さらには本発明に好ましい化合物は、適切な鼻腔内ビヒクルの局所使用による鼻腔内形態で、または当業者によく知られている経皮パッチの形態を用いて経皮的に投与されてもよい。経皮送出し系の形態で投与されるために、この投薬量投与は、当然ながら、この投薬計画全体を通じて断続的であるよりは連続的であろう。
【０１１９】
本発明の方法において、本明細書に詳細に記載されている化合物は、活性成分を形成することができ、一般的には、意図された投与形態、すなわち、経口タブレット、カプセルエリキシル、シロップ等に関連して、かつ通常の製薬慣習と一致して適切に選ばれた、適切な製薬希釈剤、賦形剤、またはキャリヤ（本明細書では集合的に「キャリヤ」物質と呼ばれる）と混合して投与される。
【０１２０】
例えば、タブレットまたはカプセルの形態における経口投与の場合、活性薬剤成分は、製薬的に許容しうる経口非毒性不活性キャリヤ、例えばラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトール等と組合わされてもよい。液体形態における経口投与の場合、これらの経口薬剤成分は、製薬的に許容しうる経口非毒性不活性キャリヤ、例えばエタノール、グリセロール、水等と組合わされてもよい。さらには所望であるか、または必要である場合、適切なバインダー、潤滑剤、崩壊剤、および着色剤が、この混合物中に組込まれてもよい。適切なバインダには、デンプン、ゼラチン、天然糖、例えばグルコースまたはベータラクトース、コーン甘味料、天然および合成ゴム、例えばアカシアゴム、トラガカントゴム、またはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス等が含まれる。これらの投薬形態に用いられる潤滑剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が含まれる。崩壊剤には、非限定的に、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等が含まれる。
【０１２１】
本発明の化合物はまた、リポソーム送出し系、例えば小さい単層小胞、大きい単層小胞、および多層小胞の形態で投与されてもよい。リポソームは、多様なリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリンから形成されていてもよい。
【０１２２】
本発明の化合物はまた、モノクローナル抗体の使用によって、これらの化合物分子が組合わされる個々のキャリヤとして送り出されてもよい。本発明の化合物はまた、標的可能な薬剤キャリヤとしての可溶性ポリマーと組合わされてもよい。このようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシ−エチルアスパルタミド−フェノール、またはパルミトイル残渣で置換されたポリ酸化エチレン−ポリリシンを含めることもできる。さらには本発明の化合物は、薬剤の制御された放出を得るのに有用な種類の生物分解性ポリマー、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリエプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーと組合わされてもよい。
【０１２３】
下記のスキームおよび実施例は、本発明の代表的化合物の製造手順を説明する。加えて、米国特許第６，０１７，９２６号（２０００年１月２５日）（この特許は、その全体が参照して本明細書に組込まれる）に詳細に記載されている手順を用いて、本明細書に含まれている開示と共に、当業者は、本明細書において特許請求されている本発明のその他の化合物を容易に調製することができる。加えて、本発明の化合物のＣ−末端として用いることができるβ−アラニンの合成を記載している一般的な論評については、次のものを参照されたい：Ｃｏｌｅ，Ｄ．Ｃ．「β−アミノ酸への最新の立体選択的合成方法（Ｒｅｃｅｎｔ　Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ　ｔｏ　β−Ａｍｉｎｏ　Ａｃｉｄｓ）」、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，５０：９５１７−９５８２（１９９４）；およびＪｕａｒｉｓｔｉ，Ｅら、「β−アミノ酸のエナンチオ選択的合成（Ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　β−Ａｍｉｎｏ　Ａｃｉｄｓ）」、Ａｌｄｒｉｃｈｉｍｉｃａ　Ａｃｔａ，２７：３（１９９４）。特に３−（ピリジン−３−イル）−β−アラニンの合成は、Ｒｉｃｏ，Ｊ．Ｇ．ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５８：７９４８−７９５１（１９９３）に教示されている。このパラグラフに記載されている参考文献はすべて、その全体が参照して本明細書に組込まれる。
【０１２４】
本発明の化合物は、米国特許第６，０１７，９２６号（その全体が参照して本明細書に組込まれる）にその調製法が開示されている中間体１−１から、または１−１と同様な方法で調製することができるが、中間体として３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−β−アラニン第三ブチルｐ−トルエンスルホネートを用いる、対応ｔ−ブチルエステル２−１から調製された。
【０１２５】
下記の実施例は、本発明の比較的好ましい化合物を例証している。しかしながらこれらは、本発明として考えられる唯一の種類を形成すると考えるべきではない。これらの実施例はさらに、本発明の化合物の調製についての詳細を例証する。当業者なら、これらの化合物を調製するために、条件および下記調製手順のプロセスの既知の変形例を用いることができることを、容易に理解するであろう。ほかの記載がなければ、すべての操作は、室温または周囲温度において実施された。すべての温度は℃である。
【０１２６】
【化１４】
2004508400.tif 000011
【０１２７】
実施例１
３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−シアノイミノ−３−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］−イミダゾリジン−１−イル｝−プロピオン酸（１−４）
工程Ａ：３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピルアミノ］−エチルアミノ｝−プロピオン酸エチルエステル（１−２）
ＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）中のエチルエステル１−１（調製法については、米国特許第６，０１７，９２６号参照）（１４．１ｇ、２６ミリモル）の溶液を−２０℃まで冷却し、ＨＣｌ（ガス）で１０分間処理し、ついで栓で塞ぎ、０℃で１．５時間攪拌した。揮発性物質を真空除去し、残渣を水１５０ｍＬに取り、固体Ｋ２ＣＯ３でｐＨ約１０まで処理した。この溶液を、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濃縮すると油を生じた。ＣＨＣｌ３中の５％ＭｅＯＨで溶離するシリカゲル上カラムクロマトグラフィー、ついでＮＨ３で飽和されたＣＨＣｌ３中の５％ＭｅＯＨでのさらなる溶離によって、粘性油として１−２を生じた。
【０１２８】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１．２０（３Ｈ，ｔ），１．８−１．９５（４Ｈ，ｍ），２．５−２．８（１２Ｈ，ｍ），３．３９（２Ｈ，ｍ），３．９２（３Ｈ，ｓ），４．０９（２Ｈ，ｑ），５．０１（１Ｈ，ｂｓ），６．３４（１Ｈ，ｄ），７．０６（１Ｈ，ｄ），７．５９（１Ｈ，ｄｄ），８．０７（１Ｈ，ｄ）。
【０１２９】
工程Ｂ：３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−シアノイミノ−３−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］−イミダゾリジン−１−イル｝−プロピオン酸エチルエステル（１−３）
ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）および水（５ｍＬ）中のジアミン１−２（１２０ｍｇ、０．２７ミリモル）、ジフェニルシアノカルボンイミデート（６５ｍｇ、０．２７ミリモル）、およびＫ２ＣＯ３（９４ｍｇ、０．６８ミリモル）の溶液を、室温で１６時間攪拌し、ついで６時間７５℃まで加熱した。冷却後、この混合物を、飽和Ｎａ２ＣＯ３中に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出し、水およびブラインで連続的に洗浄した。このＥｔＯＡｃ層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、真空中で濃縮すると、１−３の油を生じたが、これは次工程においてそのまま用いられた。
【０１３０】
マススペクトル：実測値：４９２．１；（Ｍ＋Ｈ）計算値：４９２．３
工程Ｃ：３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−シアノイミノ−３−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］−イミダゾリジン−１−イル｝−プロピオン酸（１−４）
ＴＨＦ（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）中のエステル１−３（１８０ｍｇ、０．３７ミリモル）の溶液に、室温において、１Ｎ　ＬｉＯＨ溶液（５ｍＬ、５ミリモル）を添加し、この混合物を１６時間攪拌した。この混合物を、１Ｎ　ＨＣｌで中和し、溶媒を除去した。この残渣のカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ８：１：１）は、１−４を白色固体として生じた。
正確なマススペクトル：実測値：４６４．２４２８；（Ｍ＋Ｈ）計算値：４６４．２４０５。
【０１３１】
【化１５】
2004508400.tif 000012
【０１３２】
３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−β−アラニン第三ブチルエステルｐ−トルエンスルホン酸塩（２−１）
この化合物は、ｐ−トルエンスルホン酸塩として、最終結晶化を用いて、スキーム２における手順に従って調製された。
【０１３３】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１．２６（９Ｈ，ｓ），２．１６（３Ｈ，ｓ），２．３６（２Ｈ，ｓ），３．０７−２．７７（２Ｈ，ｍ），３．８８（３Ｈ，ｓ），４．５５（１Ｈ，ｍ），６．５５（１Ｈ，ｄ），７．１１（２Ｈ，ｄ），７．５１（２Ｈ，ｄ），７．６８（１Ｈ，ｄｄ），８．０９（１Ｈ，ｄ），８．２５（１Ｈ，ｂｒ）。
【０１３４】
【化１６】
2004508400.tif 000013
【０１３５】
実施例２
３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−チオ−３−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］−イミダゾリジン−１−イル｝−プロピオン酸（３−３）
工程Ａ：３（Ｓ）−（２−｛第三−ブトキシカルボニル−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］アミノ｝−エチルアミノ）−３−（２−メトキシピリジン−５−イル）−プロピオン酸第三−ブチルエステル（３−１）
米国特許第６，０１７，９２６号のスキーム７における手順に従うが、出発原料として７−５の代わりに２−１を用いて、掲題化合物３−１が、粘性油として調製された。
マススペクトル：実測値：５７０．０；（Ｍ＋１）計算値：５７０．７。
【０１３６】
工程Ｂ：３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピルアミノ］−エチルアミノ｝−プロピオン酸（３−２）
３ｍＬトリフルオロ酢酸中の３−１（０．８ｇ、１．３４ミリモル）の溶液を、６０℃で２０分間攪拌し、真空下濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、５％ＭｅＯＨ／９３％ＣＨ２Ｃｌ２／２％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ〜１５％ＭｅＯＨ／８３％ＣＨ２Ｃｌ２／２％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ）で精製すると、所望の生成物３−２が油として得られた。
マススペクトル：実測値：４１４．０；（Ｍ＋１）計算値：４１４．５。
【０１３７】
工程Ｃ：３（Ｓ）−（６−メトキシピリジン−３−イル）−３−｛２−チオ−３−［３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−プロピル］−イミダゾリジン−１−イル｝−プロピオン酸（３−３）
１０ｍＬＴＨＦ中の３−２（０．２１ｇ、０．５１ミリモル）の溶液に、５ｍＬＴＨＦ中のチオカルボニルジイミダゾール（０．１２ｇ、０．６６ミリモル）を添加した。この反応混合物を、室温で３０分間攪拌し、ついで３時間還流した。溶媒の除去後、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、５％ＭｅＯＨ／９３％ＣＨ２Ｃｌ２／２％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ〜１５％ＭｅＯＨ／８３％ＣＨ２Ｃｌ２／２％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ）で精製すると、所望の生成物３−３が固体として得られた。
【０１３８】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１１．０５（１Ｈ，ｂｒ），８．１２（１Ｈ，ｄ），７．６０（１Ｈ，ｄｄ），７．２１（１Ｈ，ｄ），６．７２（１Ｈ，ｄ），６．５４（１Ｈ，ｄｄ），６．２６（１Ｈ，ｄ），４．３７（１Ｈ，ｍ），３．９８（３Ｈ，ｓ），３．７０（１Ｈ，ｍ），３．４８（２Ｈ，ｍ），３．２９（１Ｈ，ｍ），３．１６（１Ｈ，ｍ），２．９７（２Ｈ，ｍ），２．７１（ｍ），２．１２（１Ｈ，ｍ），１．８９（ｍ）。
【０１３９】
【化１７】
2004508400.tif 000014
2004508400.tif 000015
2004508400.tif 000016
2004508400.tif 000017
【０１４０】
Ｎ−（４−ヨード−フェニルスルホニルアミノ）−Ｌ−アスパラギン（Ａ−２）
酸Ａ−１（４．３９ｇ、３３．２ミリモル）、ＮａＯＨ（１．４９ｇ、３７．２ミリモル）、ジオキサン（３０ｍｌ）、およびＨ２Ｏ（３０ｍｌ）の０℃における攪拌溶液に、塩化ピプシル（１０．３４ｇ、３４．２ミリモル）を添加した。約５分後、１５ｍｌのＨ２Ｏ中に溶解されたＮａＯＨ（１．４９ｇ、３７．２ミリモル）を添加し、ついで冷却浴を除去した。２．０時間後、この反応混合物を濃縮した。残渣をＨ２Ｏ（３００ｍｌ）中に溶解し、ついでＥｔＯＡｃで洗浄した。水性部分を０℃まで冷却し、ついで濃縮ＨＣｌで酸性化した。この固体を回収し、ついでＥｔ２Ｏで洗浄すると、酸Ａ−２が白色固体として生じた。
【０１４１】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ７．８６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）３．７０（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｍ，２Ｈ）。
【０１４２】
２（Ｓ）−（４−ヨード−フェニルスルホニルアミノ）−β−アラニン（Ａ−３）
ＮａＯＨ（７．１４ｇ、１８１．８ミリモル）およびＨ２Ｏ（４０ｍｌ）の０℃における攪拌溶液に、１０分間にわたってＢｒ２（１．３０ｍｌ、２４．９ミリモル）を一滴ずつ添加した。約５分後、酸Ａ−２（９．９ｇ、２４．９ミリモル）、ＮａＯＨ（２．００ｇ、４９．８ミリモル）、およびＨ２Ｏ（３５ｍｌ）を組合わせ、０℃まで冷却し、ついで単一ポーションとしてこの反応物に添加した。０℃で２０分間の攪拌後、この反応物を３０分間９０℃まで加熱し、ついで０℃まで再冷却した。濃縮ＨＣｌの一滴ずつの添加によってｐＨを約７に調節した。この固体を回収し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、ついで真空乾燥すると、酸Ａ−３が白色固体として生じた。
【０１４３】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ８．０２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）７．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），４．３６（ｍ，１Ｈ），３．５１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ，１３Ｈｚ）３．２１（ｍ，１Ｈ）。
【０１４４】
エチル２（Ｓ）−（４−ヨード−フェニルスルホニルアミノ）−β−アラニン塩酸塩（Ａ−４）
ＨＣｌガスを、０℃で１０分間ＥｔＯＨ（５０ｍｌ）中の酸Ａ−３（４．０ｇ、１０．８１ミリモル）の懸濁液を通して急速にバブリングさせた。冷却浴を除去し、この反応物を６０℃まで加熱した。１８時間後、この反応物を濃縮すると、エステルＡ−４が白色固体として生じた。
【０１４５】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ７．９８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），４．２５（ｑ，１Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ），３．９２（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｍ，１Ｈ），３．０６（ｍ，１Ｈ），１．０１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）。
【０１４６】
エチル４−［２−（２−アミノピリジン−６−イル）エチル］ベンゾエート（Ａ−５ａ）
エステルＡ−５（７００ｍｇ、２．６３ミリモル）（調製法については、米国特許第５，７４１，７９６号（１９９８年４月２１日）のスキーム２９（中間体２９−３）参照）、１０％Ｐｄ／Ｃ（３５０ｍｇ）、およびＥｔＯＨの混合物を、１気圧のＨ２下に攪拌した。２０時間後、この反応物を、セリートパッドを通して濾過し、ついで濃縮すると、エステルＡ−５ａを褐色油として生じた。
【０１４７】
ＴＬＣＲｆ＝０．２３（シリカ、４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．９５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．２６（ｍ，３Ｈ），６．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），６．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），４．３７（ｍ，４Ｈ），３．０５（ｍ，２Ｈ），２．９１（ｍ，２Ｈ），１．３９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）。
【０１４８】
４−［２−（２−アミノピリジン−６−イル）エチル］安息香酸塩酸塩（Ａ−６）
６ＮＨＣｌ（１２ｍｌ）中のエステルＡ−５ａ（６２５ｍｇ、２．３１ミリモル）の懸濁液を６０℃まで加熱した。約２０時間後、この反応物を濃縮すると、酸Ａ−６を黄褐色固体として生じた。
【０１４９】
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ７．９６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．８０（ｍ，１Ｈ），７．３３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），６．８４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ），６．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），３．０９（ｍ，４Ｈ）。
【０１５０】
エチル４−［２−（２−アミノピリジン−６−イル）エチル］ベンゾイル−２（Ｓ）−（４−ヨード−フェニルスルホニルアミノ）−β−アラニン（Ａ−７）
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の酸１５−６（４００ｍｇ、１．４３ミリモル）、アミンＡ−４（６８６ｍｇ、１．５７ミリモル）、ＥＤＣ（３５８ｍｇ、１．８６ミリモル）、ＨＯＢＴ（２５２ｍｇ、１．８６ミリモル）、ＮＭＭ（６３２μｌ、５．７２ミリモル）の溶液を、約２０時間攪拌した。この反応物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、ついで飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ、ついで５％イソプロパノール／ＥｔＯＡｃ）は、アミドＡ−７を白色固体として生じた。
【０１５１】
ＴＬＣＲｆ＝０．４（シリカ、１０％イソプロパノール／ＥｔＯＡｃ）
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ７．７９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ），７．６１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．５２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９Ｈｚ），７．２９（ｍ，１Ｈ），７．２７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），４．２０（ｍ，１Ｈ），３．９（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），３．６６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ，１４Ｈｚ），３．４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ，１３Ｈｚ），３．０１（ｍ，２Ｈ），２．８６（ｍ，２Ｈ），１．０８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ）。
【０１５２】
４−［２−（２−アミノピリジン−６−イル）エチル］ベンゾイル−２（Ｓ）−（４−ヨードフェニル−スルホニルアミノ）−β−アラニン（Ａ−８）
エステルＡ−７（２００ｍｇ、０．３２１３ミリモル）および６ＮＨＣｌ（３０ｍｌ）の溶液を６０℃まで加熱した。約２０時間後、この反応混合物を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、２０：２０：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ／Ｈ２Ｏ）は、酸Ａ−８を白色固体として生じた。
【０１５３】
ＴＬＣＲｆ＝０．４５（シリカ、２０：２０：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ／Ｈ２Ｏ）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．４０（Ｂｓ，１Ｈ），７．８１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．４８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．２７（ｍ，３Ｈ），６．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），６．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），５．８５（ｂｓ，２Ｈ），３．８９（ｂｓ，１Ｈ），３．３５（ｍ，２Ｈ），２．９７（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｍ，２Ｈ）。
【０１５４】
４−［２−（２−アミノピリジン−６−イル）エチル］ベンゾイル−２（Ｓ）−（４−トリメチルスタニル−フェニルスルホニルアミノ）−β−アラニン（Ａ−９）
ヨウ化物Ａ−８（７０ｍｇ、０．１１７８ミリモル］、［（ＣＨ３）３Ｓｎ］２（４９μｌ、０．２３５６ミリモル）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（５ｍｇ）、およびジオキサン（７ｍｌ）の溶液を、９０℃まで加熱した。２時間後、この反応物を濃縮し、ついで分取ＨＰＬＣ（デルタパックＣ１８１５μＭ１００Ａ°、４０×１００ｍｍ；９５：５ついで５：９５Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮ）によって精製すると、トリフルオロアセテート塩を生じた。この塩をＨ２Ｏ（１０ｍｌ）中に懸濁し、ＮＨ４ＯＨ（５滴）で処理し、ついで凍結乾燥すると、アミドＡ−９を白色固体として生じた。
【０１５５】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．４０（ｍ，１Ｈ），８．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．６７（ｍ，５Ｈ），７．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．２９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），６．９５−７．５２（ｍ，２Ｈ），６．４５（ｂｓ，２Ｈ），４．００（ｍ，１Ｈ），３．５０（ｍ，１Ｈ），３．３３（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，２Ｈ），２．８６（ｍ，２Ｈ）。
【０１５６】
４−［２−（２−アミノピリジン−６−イル）エチル］ベンゾイル−２（Ｓ）−４−１２５ヨード−フェニルスルホニルアミノ−β−アラニン（Ａ−１０）
ヨードビーズ（ピアス社（Ｐｉｅｒｃｅ））を、５ｍＣｉのＮａ１２５Ｉ（アマーシャム社（Ａｍｅｒｓｈａｍ）、ＩＭＳ３０）の発送用ガラスビン（ｓｈｉｐｐｉｎｇ　ｖｉａｌ）に加え、室温で５分間攪拌した。０．０５ｍＬの１０％Ｈ２ＳＯ４／ＭｅＯＨ中の０．１ｍｇのＡ−９溶液を作り、直ちにＮａ１２５Ｉ／ヨードビーズガラスビンに加えた。室温で３分間攪拌した後、約０．０４〜０．０５ｍＬのＮＨ４ＯＨを添加し、したがってこの反応混合物はｐＨ６から７になった。反応混合物全体を、精製のためにＨＰＬＣ上に注入した［バイダック（Ｖｙｄａｃ）ペプチド−タンパク質Ｃ−１８カラム、４．６×２５０ｍｍ、３０分にわたり１ｍＬ／分で、１０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）〜９０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）の直線勾配］。Ａ−１０の保持時間は、これらの条件下１７分である。放射能の大部分を含むフラクションをプールし、凍結乾燥し、エタノールで希釈すると、約１ｍＣｉのＡ−１０を生じた。これを、ＨＰＬＣ分析上でＡ−８の基準試料と共溶離した。
【０１５７】
【化１８】
2004508400.tif 000018
【０１５８】
２（Ｓ）−（４−ヨード−ベンゼンスルホニルアミノ）−３−｛４−［２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−エチル］−ベンゾイルアミノ｝−プロピオン酸エチルエステル（Ｂ−２）
アセトニトリル（３ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）中のＢ−１（０．２３ｇ、０．７２ミリモル；調製法については、米国特許第５，７４１，７９６号参照）、Ａ−４（０．３４３ｇ、０．７９２ミリモル）、ＥＤＣ（０．１７９ｇ、０．９３ミリモル）、ＨＯＢＴ（０．１２６ｇ、０．９３ミリモル）、ＮＭＭ（０．３１６ｍＬ、２．８６ミリモル）の混合物を、周囲温度において２時間攪拌し、ついで酢酸エチルで希釈し、水、飽和水性ＮａＨＣＯ３、およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。残渣をシリカゲル（７０：２５：５ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）上でクロマトグラフすると、Ｂ−２を白色固体として生じた。
【０１５９】
ＴＬＣＲｆ＝０．２２（シリカ、７０：２５：５ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．７９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．５４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．２７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．０４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），６．６０（ｍ，１Ｈ），６．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．８３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．０９（ｍ，３Ｈ），３．８４（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｍ，１Ｈ），３．４２（ｍ，２Ｈ），３．０１（ｍ，４Ｈ），２．８６（ｍ，４Ｈ），２．６９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），１．８８（ｍ，２Ｈ）。
【０１６０】
２（Ｓ）−（４−ヨード−ベンゼンスルホニルアミノ）−３−｛４−［２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−エチル］−ベンゾイルアミノ｝−プロピオン酸（Ｂ−３）
Ｂ−２（０．３８ｇ、０．５７３ミリモル）と６ＮＨＣｌ（５０ｍＬ）との混合物を、６０℃で１４時間攪拌した。室温までの冷却後、この混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル（２５：１０：１：１〜１５：１０：１：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ／Ｈ２Ｏ）上でクロマトグラフすると、Ｂ−３を白色固体として生じた。
【０１６１】
ＴＬＣＲｆ＝０．４３（シリカ、１０：１０：１：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ／Ｈ２Ｏ）
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．４２（ｍ，１Ｈ），７．７９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．６３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．４４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．２７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），６．５８（ｂｒｓ，１Ｈ），６．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｍ，５Ｈ），２．９６（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｍ，２Ｈ），２．６２（ｍ，２Ｈ），１．７７（ｍ，２Ｈ）。
【０１６２】
ＨＲＭＳ：Ｃ２６Ｈ２７ＩＮ４Ｏ５Ｓの場合、予測値６３５．０８１８、実測値６３５．０８３１。
【０１６３】
３−｛４−［２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−エチル］−ベンゾイルアミノ｝−２（Ｓ）−（４−トリメチルスタンナニル−ベンゼンスルホニルアミノ）−プロピオン酸（Ｂ−４）
Ｂ−３（０．１０ｇ、０．１６ミリモル）、ヘキサメチルジスタンナン（０．０６５ｍＬ、０．３２ミリモル）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、およびジオキサン（１０ｍｌ）の混合物を、９０℃で１時間攪拌した。室温まで冷却した後、この混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル（５０：１０：１：１〜２５：１０：１：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ／Ｈ２Ｏ）上でクロマトグラフすると、Ｂ−４を白色固体として生じた。
【０１６４】
ＴＬＣＲｆ＝０．４８（シリカ、１５：１０：１：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ／ＮＨ４ＯＨ／Ｈ２Ｏ）
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．３８（ｍ，１Ｈ），８．１４（ｍ，１Ｈ），７．６３（ｍ，４Ｈ），７．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），６．５０（ｂｒｓ，１Ｈ），６．２８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．４８（ｍ，１Ｈ），３．３１（ｍ，５Ｈ），２．９６（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｍ，２Ｈ），２．６２（ｍ，２Ｈ），１．７７（ｍ，２Ｈ），０．２８（ｓ，９Ｈ）。
【０１６５】
高分解能マススペクトル：Ｃ２９Ｈ３６Ｎ４Ｏ５ＳＳｎの場合、予測値６６５．１５３３（１１２Ｓｎ）および６７３．１５０７（１２０Ｓｎ）、実測値６６５．１５１０および６７３．１５０５。
【０１６６】
２（Ｓ）−（４−１２５ヨード−ベンゼンスルホニルアミノ）−３−｛４−［２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジン−２−イル）−エチル］−ベンゾイルアミノ｝−プロピオン酸エチルエステル（Ｂ−５）
攪拌棒、メタノール（０．０５ｍＬ）、およびヨードビーズ（ピアス社）を、Ｎａ１２５Ｉ（１０ｍＣｉ、アマーシャム社、ＩＭＳ３００）の発送用ガラスビンに加え、室温で５分間攪拌した。メタノール（０．０４ｍＬ）中のＢ−４（約０．１ｍｇ）溶液を作り、１ポーション（０．０２ｍＬ）を、メタノール（約０．０２５ｍＬ）中のＨ２ＳＯ４（０．００５ｍＬ）の混合物に添加し、この溶液を、直ちにＮａ１２５Ｉ／ヨードビーズガラスビンに加えた。室温で２分間攪拌した後、この反応物をＮＨ４ＯＨ（０．０４〜０．０５ｍＬ）で急冷し、反応混合物全体を、精製のためにＨＰＬＣ上に注入した［バイダックペプチド−タンパク質Ｃ−１８カラム、４．６×２５０ｍｍ、２０分にわたり１ｍＬ／分で、１０％アセトニトリル：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）〜９０％アセトニトリル：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）の直線勾配］。Ｂ−５の保持時間は、これらの条件下で１６分である。放射能の大部分を含むフラクションをプールし、凍結乾燥し、エタノールで希釈すると、約１ｍＣｉのＢ−５を生じた。これを、ＨＰＬＣ分析上でＢ−３の基準試料と共溶離した。
【０１６７】
計測：レオダイン（Ｒｈｅｏｄｙｎｅ）７１２５インジェクターを備えた０．１ｍＬヘッドを有するウオーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）６００Ｅパワーラインマルチソルベントデリバリー装置およびギルソン（Ｇｉｌｓｏｎ）ＦＣ２０３ミクロフラクションコレクターを備えたウオーターズ９９０フォトダイオードアレイデテクターを用いて、分析分取ＨＰＬＣを実施した。分析分取ＨＰＬＣのために、バイダックペプチド−タンパク質Ｃ−１８カラム、４．６×２５０ｍｍを、Ｃ−１８ブラウンリー（Ｂｒｏｗｎｌｅｅ）モジュラーガードカラムと共に用いた。ＨＰＬＣ分析に用いられたアセトニトリルは、フィッシャーオプティマ（Ｆｉｓｈｅｒ　Ｏｐｔｉｍａ）グレードであった。ＨＰＬＣラジオデテクターは、ベックマン（Ｂｅｃｋｍａｎ）１７０ラジオアイソトープデテクターであった。バイダックＣ−１８タンパク質およびペプチドカラム、３．９×２５０ｍｍを、分析分取ＨＰＬＣのために用いた。放射能の溶液は、スピードバック（Ｓｐｅｅｄｖａｃ）真空遠心分離機を用いて濃縮した。校正曲線および化学的濃度は、ヒューレットパッカード（Ｈｅｗｌｅｔｔ　Ｐａｃｋａｒｄ）モデル８４５２Ａ　ＵＶ／ビスダイオードアレイスペクトロフォトメーターを用いて測定した。サンプル放射能は、パッカードＡ５５３０ガンマカウンターで測定した。
【０１６８】
ανβ３およびανβ５結合および本発明の化合物の骨吸収阻害活性を測定するために用いられたテスト手順を、次に記載する。
【０１６９】
骨吸収−陥凹（ｐｉｔ）アッセイ
破骨細胞が骨吸収に参加する時、これらは、これらが作用する骨の表面に陥凹の形成を引起こすことがある。したがって、破骨細胞を阻害する能力について化合物をテストする場合、阻害化合物が存在する時に破骨細胞がこれらの吸収陥凹を作る能力を測定することは有用である。
【０１７０】
ウシ大腿骨の骨幹の６ｍｍ円筒から、連続した２００ミクロン厚さの断面を、低速ダイアモンドのこぎりでカットする（イリノイ州レイクブラフのイソメット、ブーラー社（Ｉｓｏｍｅｔ，Ｂｅｕｌｅｒ，Ｌｔｄ．，Ｌａｋｅ　Ｂｌｕｆｆ，Ｉｌ））。骨スライスをプールし、１０％エタノール溶液中に入れ、その後の使用まで冷蔵する。
【０１７１】
実験に先立ち、ウシの骨スライスを、Ｈ２Ｏ中で各々２０分間２回超音波処理する。きれいになったスライスを、２つの対照レーンと各々の薬剤投薬量用の１つのレーンが利用できるように、９６ウエルプレートに入れる。各レーンは、三重または四重培養を表わす。９６ウエルプレート中の骨スライスを、ＵＶ照射によって滅菌する。破骨細胞でのインキュベーションに先立ち、これらの骨スライスを、５％胎児ウシ血清と１％ペニシリン／ストレプトマイシンとを含む０．１ｍｌαＭＥＭ、ｐＨ６．９の添加によって水和する。
【０１７２】
生後７〜１４日のウサギ（ニュージーランド白ウサギ）からの長骨を切り裂き、軟組織を取除き、２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳを含むαＭＥＭに入れる。これらの骨は、はさみを用いて、１片が＜１ｍｍになるまで細かく刻み、２５ｍｌの容積における５０ｍｌ管に移し替える。この管を６０サイクルの間、手で静かに揺り動かし、この組織を１分間沈殿させ、上澄み液を除去する。さらに２５ｍｌの培地をこの組織に添加し、もう一度揺り動かす。第二上澄み液を、第一上澄み液と組合わせる。細胞数を、赤血球を除いて計数する（一般的に約２×１０７細胞／ｍｌ）。５％胎児ウシ血清、１０ｎＭ１．２５（ＯＨ）２Ｄ３、およびペニシリン−ストレプトマイシンを含む、αＭＥＭ中の５×１０６／ｍｌから成る細胞懸濁液を調製する。２００ｍｌのアリコートを、ウシの骨スライス（２００ｍｍ×６ｍｍ）に添加し、３７℃で、湿潤５％ＣＯ２雰囲気中に２時間インキュベーションする。この培地を、ミクロピペッターで静かに除去し、テスト化合物を含む新鮮な培地を添加する。これらの培養物を４８時間インキュベーションし、培養培地用のクロスラップ（Ｃｒｏｓｓｌａｐｓ）（デンマーク国ハーレブ（Ｈｅｒｌｅｖ，Ｄｅｎｍａｒｋ））によって、ｃ−テロペプチド（Ｉ型コラーゲンのａｌ鎖の断片）について検定する。
【０１７３】
ウシの骨スライスを、２０から２４時間破骨細胞に暴露し、染色のために処理する。組織培養培地を各骨スライスから除去する。各ウエルを、２００ｍｌのＨ２Ｏで洗浄し、ついでこれらの骨スライスを、２．５％グルタルアルデヒド、０．１Ｍカコジレート、ｐＨ７．４中に２０分間固定する。固定後、あらゆる残留細胞屑を、０．２５ＭのＮＨ４ＯＨの存在下における２分間の超音波処理、ついでＨ２Ｏ中の２×１５分間の超音波処理によって除去する。骨スライスを、濾過された１％トルイジンブルーおよび１％ホウ砂で６から８分間速やかに染色する。
【０１７４】
これらの骨スライスが乾燥した後、テストスライスおよび対照スライスにおいて吸収陥凹を計数する。吸収陥凹は、偏光ニコンＩＧＳフィルターキューブを用いて、マイクロフォト（Ｍｉｃｒｏｐｈｏｔ）ＦＸ（ニコン）蛍光顕微鏡で見る。テスト投薬量結果を対照と比較し、その結果生じたＩＣ５０値を、テストされた各々の化合物について決定する。
【０１７５】
哺乳動物（ヒトを含む）の病気の状態に対するこのアッセイから推定するデータの適切さは、Ｓａｔｏ，Ｍら、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｏｎｅ　ａｎｄ　Ｍｉｎｅｒａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．５，Ｎｏ．１、ｐｐ．３１−４０、１９９０に見られる教示によって裏付けられる。この文献は、その全体が参照して本明細書に組込まれる。この論文は、あるいくつかのビスホスホネートが臨床的に用いられ、パジェット病、悪性高カルシウム血症、骨転移によって生じた溶骨障害、および不動化または性ホルモン欠乏による骨損失の治療に有効であるように見えることを教示している。ついでこれらの同じビスホスホネートを、前記吸収陥凹アッセイにおいてテストすると、これらの既知の有用性とこのアッセイにおける肯定的な成績との相関関係が確認される。
【０１７６】
ＥＩＢアッセイ
Ｄｕｏｎｇら、Ｊ．Ｂｏｎｅ　Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．，８：Ｓ３７８（１９９３）は、ヒトインテグリンανβ３を発現するための系について記載している。このインテグリンは、破骨細胞の骨マトリックスへの結合を刺激するが、その理由は、インテグリンに対する抗体、またはＲＧＤ含有分子、例えばエキスタチン（欧州公報第３８２，４５１号）が、骨吸収を効果的に阻止しうるからであると示唆されている。
【０１７７】
反応混合物：
１．１７５μｌＴＢＳ緩衝液（５０ｍＭトリス・ＨＣｌｐＨ７．２、１５０ｍＭ　ＮａＣｌ、１％ＢＳＡ、１ｍＭ　ＣａＣｌ２、１ｍＭ　ＭｇＣｌ２）；
２．２５ｍｌ細胞抽出物（１００ｍＭオクチルグルコシド緩衝液で希釈して２０００ｃｐｍ／２５μｌを生じる）；
３．１２５Ｉ−エキスタチン（２５μｌ／５０，０００ｃｐｍ）（第ＥＰ３８２，４５１号参照）；
４．２５μｌ緩衝液（全結合）または非標識エキスタチン（非特異的結合）。
【０１７８】
ついでこの反応混合物を、室温で１時間インキュベーションした。これらの非結合および結合ανβ３を、スカトロンセルハーベスター（Ｓｋａｔｒｏｎ　Ｃｅｌｌ　Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ）を用いた濾過によって分離した。ついでこれらのフィルター（１．５％ポリ−エチレンイミン中で１０分間予湿潤したもの）を、洗浄緩衝液（５０ｍＭトリスＨＣｌ、１ｍＭ　ＣａＣｌ２／ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．２）で洗浄した。ついでこのフィルターをガンマカウンターで計数した。
【０１７９】
ＳＰＶ３アッセイ
材料：
１．小麦麦芽アグルチニンシンチレーションプロキシミティビーズ（ＳＰＡ）：アマーシャム社；
２．オクチルグルコピラノシド：カルビオケム社（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）；
３．ＨＥＰＥＳ：カルビオケム社；
４．ＮａＣｌ：フィッシャー社（Ｆｉｓｈｅｒ）；
５．ＣａＣｌ２：フィッシャー社；
６．ＭｇＣｌ２：シグマ社（ＳＩＧＭＡ）；
７．フェニルメチルスルホニルフッ化物（ＰＭＳＦ）：シグマ社；
８．オプティプレート：パッカード社；
９．化合物Ａ−１０（比活性５００から１０００Ｃｉ／ミリモル）；
１０．テスト化合物；
１１．精製インテグリン受容体：ανβ３を、Ｐｙｔｅｌａ（「酵素学における方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ）」、１４４：４７５、１９８７）にしたがって、ανβ３を過発現する２９３細胞から精製した（Ｄｕｏｎｇら、Ｊ．Ｂｏｎｅ　Ｍｉｎ．Ｒｅｓ．，８：Ｓ３７８（１９９３））；
１２．結合緩衝液：５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．８、１００ｍＭ　ＮａＣｌ、１ｍＭ　Ｃａ２＋／Ｍｇ２＋、０．５ｍＭ　ＰＭＳＦ；
１３．結合緩衝液中の５０ｍＭオクチルグルコシド：５０−ＯＧ緩衝液。
【０１８０】
手順：
１．ＳＰＡビーズの前処理：
まず５００ｍｇの凍結乾燥ＳＰＡビーズを、２００ｍｌの５０−ＯＧ緩衝液で４回、１００ｍｌの結合緩衝液で１回洗浄し、ついで１２．５ｍｌの結合緩衝液中に再懸濁した。
【０１８１】
２．ＳＰＡビーズおよび受容体混合物の調製：
各アッセイ管において、２．５μｌ（４０ｍｇ／ｍｌ）の前処理ビーズを、９７．５μｌの結合緩衝液および２０ｍｌの５０−ＯＧ緩衝液中に懸濁した。５ｍｌ（約３０ｎｇ／μｌ）の精製受容体を、室温で３０分間攪拌しつつ懸濁しているビーズに添加した。ついでこの混合物を、４℃で１０分間ベックマンＧＰＲベンチトップ遠心分離機において２，５００ｒｐｍで遠心分離した。ついでこれらのペレットを、５０μｌの結合緩衝液および２５μｌの５０−ＯＧ緩衝液中に再懸濁した。
【０１８２】
３．反応：
下記のものを、対応ウエルにおいてオプティプレートの中に連続的に添加した：
（ｉ）受容体／ビーズ混合物（７５μｌ）；
（ｉｉ）下記のものの各々２５μｌ：テストされる化合物、全結合のための結合緩衝液、または非特異的結合のためのＡ−８（最終濃度１μＭ）；
（ｉｉｉ）結合緩衝液中のＡ−１０（２５μｌ、最終濃度４０ｐＭ）；
（ｉｖ）結合緩衝液（１２５μｌ）；
（ｖ）各プレートを、パッカード社のプレートシーラーで密封し、４℃で揺り動かしつつ一晩インキュベーションした。
【０１８３】
４．パッカードトップカウント（ＰＡＣＫＡＲＤ　ＴＯＰＣＯＵＮＴ）を用いて、プレートを計数した。
【０１８４】
５．％阻害を下記のように計算した。
【０１８５】
Ａ＝総計数
Ｂ＝非特異的計数
Ｃ＝サンプル計数
％阻害＝［｛（Ａ−Ｂ）−（Ｃ−Ｂ）｝／（Ａ−Ｂ）］／（Ａ−Ｂ）×１００。
【０１８６】
ＯＣ形態（ＯＣＦＯＲＭ）アッセイ
もともとマウスの頭蓋冠に由来する骨芽細胞様細胞（１．８細胞）を、リボ−およびデオキシリボヌクレオシド、１０％胎児ウシ血清、およびペニシリン−ストレプトマイシンを含むαＭＥＭ培地中のコーニング（ＣＯＲＮＩＮＧ）２４ウエル組織培養プレートにおいて培養した。朝、細胞を４０，０００／ウエルで植付けた。午後に、骨髄細胞を、下記のようにして生後６週間のオスのバルブ／Ｃマウスから調製した。
【０１８７】
マウスを犠牲にし、脛骨を除去し、前記培地に入れた。末端部を切除し、骨髄を、２７．５ゲージ針を備えた１ｍＬ注射器を用いて、空洞から管の中へ流し出した。この骨髄を、ピペットで吸上げて落とし、懸濁させた。この懸濁液を、＞１００ｍｍナイロン細胞ストレーナに通過させた。その結果生じた懸濁液を、３５０×ｇで７分間遠心分離した。ペレットを再懸濁させ、サンプルを、２％酢酸中に希釈して、赤血球を溶解した。残留細胞を、血球計で計数した。これらの細胞をペレット化し、１×１０６細胞／ｍＬで再懸濁した。５０μＬを、１．８細胞の各ウエルに添加して、５０，０００細胞／ウエルを生じ、１．２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ３（Ｄ３）を、最終濃度１０ｎＭまで各ウエルに添加した。これらの培養物を、湿潤５％ＣＯ２雰囲気中において３７℃でインキュベーションした。４８時間後、培地を変えた。骨髄の添加の７２時間後、テスト化合物を、Ｄ３を含む新鮮培地と共に四重ウエルに添加した。再び化合物を、４８時間後、Ｄ３を含む新鮮培地と共に添加した。さらに４８時間後、培地を除去し、細胞を、室温で１０分間リン酸塩緩衝塩水中の１０％ホルムアルデヒドと共に固定し、ついでエタノール：アセトン（１：１）で１から２分処理し、空気乾燥した。ついでこれらの細胞を、下記のように酒石酸塩抵抗性酸ホスファターゼのために染色した。
【０１８８】
これらの細胞を、室温で１０から１５分間、３０ｍＭ酒石酸ナトリウム、０．３ｍｇ／ｍＬファストレッドバイオレットＬＢ塩、および０．１ｍｇ／ｍＬナフトールＡＳ−ＭＸホスフェートを含む、５０ｍＭ酢酸塩緩衝液、ｐＨ５．０で染色した。染色後、これらのプレートを、脱イオン水で徹底的に洗浄し、空気乾燥した。多核陽性染色細胞の数を、各ウエルにおいて計数した。
【０１８９】
ＳＰＡＶ５アッセイ
材料：
１．小麦麦芽アグルチニンシンチレーションプロキシミティビーズ（ＳＰＡ）：アマーシャム社；
２．オクチルグルコピラノシドおよびフォルボ−１２−ミリステート−１３−酢酸塩（ＰＭＡ）：カルビオケム社；
３．トリス−ＨＣｌ、ＮａＣｌ、およびＣａＣｌ２：フィッシャー社；
４．最少必須培地（ＭＥＭ）：ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）／ＢＲＬ社；
５．　胎児ウシ血清（ＦＢＳ）：ハイクローン社（Ｈｙｃｌｏｎｅ）；
６．ＭｇＣｌ２、ＭｎＣｌ２、およびフェニルメチルスルホニルフッ化物（ＰＭＳＦ）：シグマ社；
７．プロテアーゼ阻害剤カクテルタブレット：ベーリンガーマンハイム社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ　Ｍａｎｎｈｅｉｍ）；
８．オプティプレート−９６ウエル：パッカード社；
９．Ｂ−５を放射標識リガンドとして用い（比活性５００〜１０００Ｃｉ／ミリモル）、１００％阻害を得るためにＢ−３（２．５μＭ）を用いた；
１０．テスト化合物；
１１．ανβ５インテグリンを過発現するＨＥＫ２９３細胞（Ｓｉｍｏｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２、２９３８０−２９３８９、１９９７）を、１５０ｍｍ皿で、１０％ＦＢＳ／ＭＥＭ培地（ギブコ／ＢＲＬ社）中で培養する；
１２．溶解緩衝液：１００ｍＭオクチルグルコピラノシド、５０ｍＭトリス、ｐＨ７．５、１００ｍＭ　ＮａＣｌ、１ｍＭ　ＣａＣｌ２、１ｍＭ　ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ　ＰＭＳＦ、およびプロテアーゼ阻害剤（１タブレット／５０ｍｌ緩衝液）；
１３．結合緩衝液：５０ｍＭトリス、ｐＨ７．５、１００ｍＭ　ＮａＣｌ、１ｍＭ　ＣａＣｌ２、１ｍＭ　ＭｇＣｌ２、およびＭｎＣｌ２；
１４．結合緩衝液中の５０ｍＭオクチルグルコピラノシド：５０−ＯＧ緩衝液。
【０１９０】
手順：
１．ανβ５−細胞溶解物：ανβ５インテグリンを発現するＨＥＫ２９３細胞を、密集成長するまで培養した。ついで細胞を、０．５％ＦＢＳを含む培地中で一晩飢餓させ、ついで１００ｎＭ　ＰＭＡで２０分間処理した。細胞を、冷たいリン酸塩緩衝液塩水（４℃）で２回洗浄し、氷上で３０分間溶解緩衝液中で可溶化した。溶解物を、ベックマンＪＡ−２０を用いて２０，０００ｘｇで清澄化した。清澄化溶解物のタンパク質濃度を、ミクロＢＣＡキット（ピアス社）を用いて測定し、アリコートとして８０℃で保存した。
【０１９１】
２．ＳＰＡビーズの前処理
まず５００ｍｇの凍結乾燥ＳＰＡビーズを、２００ｍｌの５０−ＯＧ緩衝液で４回、１００ｍｌの結合緩衝液で１回洗浄し、ついで１２．５ｍｌの結合緩衝液中に再懸濁した。
【０１９２】
３．ＳＰＡＶ５結合反応物の調製
各アッセイウエルに、下記のものを、オプティプレート中に連続的に加えた：
（ｉ）１ウエルあたり１２５μｌの最終容積を構成するための結合緩衝液；
（ｉｉ）２２μｌの５０−ＯＧ緩衝液で希釈された３μｌ（１２０μｇ／ウエル）の前処理ビーズ；
（ｉｉｉ）１５μｇのανβ５−細胞溶解物タンパク質；
（ｉｖ）５０，０００ｃｐｍにおけるＢ−５；
（ｖ）２５μｌの段階付け濃度のテスト化合物；
（ｖｉ）各プレートを、パッカード社のプレートシーラーで密封し、４℃で揺り動かしつつ一晩インキュベーションした。
【０１９３】
４．パッカードトップカウントミクロプレートシンチレーションカウンターを用いて、プレートを計数した。
【０１９４】
５．％阻害を下記のように計算した。
【０１９５】
Ａ＝総計数（受容体のＢ−５への結合）
Ｂ＝非特異的計数（２．５μＭの冷たいリガンドの存在下における受容体のＢ−５への結合）
Ｃ＝テスト化合物への受容体結合からの計数
％阻害＝［｛（Ａ−Ｂ）−（Ｃ−Ｂ）｝／（Ａ−Ｂ）］／（Ａ−Ｂ）×１００。
【０１９６】
テスト化合物のＩＣ５０を、５０％の阻害として計算した。
【０１９７】
本発明の代表的化合物をテストし、ヒトανβ５インテグリンに結合することが分かった。これらの化合物は一般に、ＳＰＡＶ３アッセイにおいて５０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有することが分かった。
【０１９８】
同様に本発明の代表的化合物をＳＰＡＶ３アッセイにおいてテストし、ανβ５受容体への親和性を測定した。これらの化合物は一般に、１００ｎＭ未満のＩＣ５０値を有することが分かった。
【０１９９】
製薬配合物の例
経口組成物の特別な実施形態として、本発明の化合物のうちのいずれか１００ｍｇを、十分に細かく分割されたラクトースと共に配合して、５８０から５９０ｍｇの総量を生じて、サイズＯハードジェルカプセルに充填する。
【０２００】
本発明は、あるいくつかの好ましい実施形態を参照して記載され、例証されてはいるが、当業者なら、様々な変更、修正、および置換を、本発明の精神および範囲から逸脱することなく行なうことができることが分かるであろう。吸収によって引起こされた重症の骨障害のために、あるいは前記の本発明の化合物についてのその他の兆候のために治療される哺乳動物の応答性における差異の結果として、例えば上記において示されているような好ましい用量以外の有効な投薬量も適用可能である。同様に、観察された特別な薬理学的応答は、選択された特別な活性化合物、あるいは製薬キャリヤが存在するかどうか、ならびに配合物の種類、および用いられる投与方法にしたがって、およびこれに応じて、様々に変えることができ、これらの結果におけるこのような変化または差は、本発明の目的および実施にしたがって考慮される。したがって本発明は、クレームの範囲によってのみ限定されるものとし、このようなクレームは、合理的である程度に幅広く解釈されるものとする。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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2004508400.tif 000089