(57)【要約】本発明は、一つには、ある種の細菌、特に病原菌に対して、キノロン抗生物質、特にジェミフロキサシン化合物を使用する新規方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
肺炎双球病原菌を、ジェミフロキサシン化合物、または抗菌的に有効なその誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と接触させることを含む肺炎双球病原菌の代謝を調節する方法
【請求項２】
肺炎双球病原菌が、ペニシリン−感受性、中間性および耐性（シプロフロキサシン耐性を包含する）肺炎双球菌からなる群から選択される請求項１記載の方法。
【請求項３】
抗菌的に有効量のジェミフロキサシン化合物を含む組成物を肺炎双球病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に投与することを含む肺炎双球病原菌による感染を治療または予防する方法。
【請求項４】
肺炎双球病原菌が、ペニシリン感受性、中間性および耐性（シプロフロキサシン耐性を包含する）肺炎双球菌からなる群から選択される請求項３記載の方法。
【請求項５】
哺乳動物がヒトである請求項３記載の方法。
【請求項６】
代謝の調節が細菌の成長を阻害することである請求項１記載の方法。
【請求項７】
代謝の調節が細菌を殺すことである請求項１記載の方法。
【請求項８】
細菌を接触させることが組成物を哺乳動物中に導入するさらなる工程を含む請求項１記載の方法。
【請求項９】
哺乳動物がヒトである請求項８記載の方法。
【請求項１０】
細菌がペニシリン感受性および中間性肺炎双球菌である請求項１記載の方法。
【請求項１１】
細菌がペニシリン耐性（シプロフロキサシン耐性を包含する）肺炎双球菌である請求項１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、一つには、細菌、特に病原菌に対して、キノロン抗生物質、特にジェミフロキサシン化合物を用いる新たに同定された方法に関する。
【０００２】
（背景技術）
キノロンは、一連の病原菌に対してさまざまな程度に有効であることが明らかにされている。しかしながら、これらの病原体により引き起こされる疾患は増大する傾向にあるので、既存の一群のキノロンよりも強力な抗微生物化合物が必要とされる。
ジェミフロキサシンメシレート（ｇｅｍｉｆｌｏｘａｃｉｎ ｍｅｓｙｌａｔｅ）（ＳＢ−２６５８０５）は強力な抗菌剤として有用な新規フルオロキノロンである。ジェミフロキサシン化合物は、ＷＯ９８／４２７０５として公開された特許出願ＰＣＴ／ＫＲ９８／０００５１に詳細に記載されている。特許出願ＥＰ６８８７７２は、式Ｉ：
【０００３】
【化１】
2004507440.tif 000002
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（Ｉ）
で示される、無水（Ｒ，Ｓ）−７−（３−アミノメチル−４−メトキシイミノピロリジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボン酸を包含する新規キノリン（ナフチリジン）カルボン酸誘導体を開示する。
【０００４】
ＰＣＴ／ＫＲ９８／０００５１は（Ｒ，Ｓ）−７−（３−アミノメチル−４−ｓｙｎ−メトキシイミノ−ピロリジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−３−カルボン酸メタンスルホネートおよび１／２水和物および３／２水和物を包含するその水和物を開示する。
ジェミフロキサシン化合物がジェミフロキサシンメシレート３／２水和物である方法が請求項５４に記載されている。
本発明において、ある細菌種、特に、より有効な抗生物質を必要とする医学的に重大な病原体にしてジェミフロキサシン化合物を用いてなされた有意な発見を記載する。本発明は、これにより、まだ満たされていなかった医学的要求を満たすものである。
【０００５】
（発明の開示）
本発明の一の態様は、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）種の細菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、本発明において用いられるジェミフロキサシンの活性は、本明細書において記載する多くのキノロン類よりも優れていることを示す。
本発明の一の態様は、プレボテラ・デンティコラ／レシイ（Ｐｒｅｖｏｔｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ／ｌｏｅｓｃｈｉｉ）群、ベイヨネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）種、プレボテラ・ヘパリノリティカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｈｅｐａｒｉｎｏｌｙｔｉｃａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、プレボテラ・メラニノゲニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ）種（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ；Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｓｕｌｃｉ；Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃｉｒｃｕｍｄｅｎｔａｒｉａ；およびＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｌｅｖｉｉ）、プレボテラ・ビビア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｉｖｉａ）、プレボテラ・ブカエ−オリス（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｂｕｃｃａｅ−ｏｒｉｓ）群、ポルフィロモナス・カノリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｏｒｉｓ）、ポルフィロモナス・ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、ポルフィロモナス・マカカエ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｍａｃａｃｃａｅ）、ペプトストレプトコッカス・ミクロス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｉｃｒｏｓ）、ペプトストレプトッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉｉ）、ポルフィロモナスアサッカロリティカス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｓ）、フソバクテリウム・アリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖａｒｉｕｍ）、ペプトストレプトコッカス・アサッカロリティカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・マグヌス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍａｇｎｕｓ）、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）種１群（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｏｎｉｄｉａｆｏｒｍａｎｓ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎａｖｉｆｏｒｍｅ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ、およびＦｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ ｓｓ ａｎｉｍａｌｉｓ）、フソバクテリウム種２群（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｏｒｔｉｆｅｒｕｍ、Ｆｕｓｏｂａｃｅｔｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｇｅｎｅｓおよびＦｕｓｏｂａｃｅｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ）、フソバクテリウム・ルッシイ（Ｆｕｓｏｂａｃｅｔｅｉｕｍ ｒｕｓｉｉ）、クロストリジウム・ディフィシレ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、クロストリジウム・イノキューム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｉｎｏｃｕｕｍ）、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｒａｍｏｓｕｍ）、バクテロイデス・ウレオリチカス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｒｅｏｌｌｙｔｉｃｕｓ）、ビロフィラ・ワズワーシア（Ｂｉｌｏｐｈｉｌａ ｗａｄｓｗｏｒｔｈｉａ）、クロストリジウム・クロストリディオフォルメ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｏｆｏｒｍｅ）、アネロビオスピリルム・サクシニシプロデュセンス（Ａｎａｅｒｏｂｉｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｓｕｃｃｉｎｉｃｉｐｒｏ��ｕｃｅｎｓ）、バクテロイデス・グラシリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｇｒａｃｉｌｉｓ）、バクテロイデス・テクタム（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｔｅｃｔｕｍ）、アクチノマイセス・オドントリチカス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｏｄｏｎｔｏｌｙｔｉｃｕｓ）、アクチノマイセス・イスラエリイ（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｉｓｒａｅｌｉｉ）、およびアネロビオスピリルム・トマシイ（Ａｎａｅｒｏｂｉｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｔｈｏｍａｓｉｉ）、特にペプトストレプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）およびポルフィロモナス種に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は本明細書にさらに詳細に記載するの多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【０００６】
本発明のもう一つの態様は、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）種およびシゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）種に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明のもう一つの態様は、ペニシリン感受性、中間性および耐性（シプロフロキサシン耐性を包含する）肺炎双球菌を包含する肺炎双球菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【０００７】
本発明のさらにもう一つの態様は、上顎洞病原菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、グラム陰性、非発酵菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【０００８】
本発明の一の態様はクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルエンゼ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）およびレジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）種に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、気道菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【０００９】
本発明の一の態様は、細菌性髄膜炎に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、グラム陰性菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、グラム陽性またはグラム陰性好気性菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１０】
本発明の一の態様は、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ ｂａｃｔｅｒｉａ）に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、マイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１１】
本発明の一の態様は、レジオネラ種に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、ストレプトコッカス・ニューモニエに対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１２】
本発明の一態様は、ヘモフィルス・インフルエンゼに対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、グラム陽性菌、たとえば連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）およびブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）ならびに腸内細菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１３】
本発明の一の態様は、グラム陽性肺炎双球菌（ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ）に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、淋菌（ｇｏｎｏｃｏｃｃｉ）に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１４】
本発明の一の態様は、肺炎双球菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、好気性菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１５】
本発明の一の態様は、肺炎双球菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明のもう一つの態様は、グラム陽性球菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明のさらにもう一つの態様は、ストレプトコッカス・ニューモニエに対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１６】
本発明の一の態様は、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕ ａｕｒｅｕｓ）およびストレプトコッカス・ニューモニエに対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、腸球菌（ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ）に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、連鎖球菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１７】
本発明の一の態様は、アシネトバクター種に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、クラミジア・ニューモニエに対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１８】
本発明の一の態様は、連鎖球菌に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、ボルデテラ（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ）種に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００１９】
本発明の一の態様は、マイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）に対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本発明の一の態様は、ストレプトコッカス・ニューモニエに対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
【００２０】
本発明のさらにもう一つの態様は、ストレプトコッカス・ニューモニエに対するジェミフロキサシン化合物の使用に関し、使用されるジェミフロキサシン化合物の活性は、本明細書においてさらに詳細に記載される多くのキノロンよりも優れていたことを示す。
本明細書においてさらに詳細に記載するように、ジェミフロキサシン化合物は通常の経口療法に対する耐性菌を包含する本発明の一連の細菌により引き起こされる臨床的症状または徴候の治療に対して有用な化合物である。
【００２１】
（発明の要約）
本発明の目的は、アシネトバクター（Ａｃｉｎｔｏｂａｃｔｅｒ）病原菌を、抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物または抗菌的に有効なその誘導体を含む組成物と接触させる工程を含むアシネトバクター病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のもう一つの目的は、前記アシネトバクター病原菌が、エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍｏｎｎｉｉ）、エイ・アントラタス（Ａ．ａｎｉｔｒａｔｕｓ）、エイ・ルオフィイ（Ａ．ｌｗｏｆｆｉｉ）、エイ・カルコアセチカス（Ａ．ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）またはアシネトバクター種からなる群から選択される方法である。
【００２２】
抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、アシネトバクター病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に投与する工程を含むアシネトバクター病原菌による細菌感染症の治療または予防法も本発明により提供される。
前記細菌が、エイ・バウマンニイ、エイ・ルオフィイ（Ａ．ｌｗｏｆｆｉｉ）またはエイ・カルコアセチカス（Ａ．ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
本発明の目的は、嫌気性病原菌を、抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む組成物と接触させる工程を含む、嫌気性病原菌の代謝を調節する方法である。
【００２３】
本発明のもう一つの態様は、前記嫌気性病原菌が、プレボテラ・デンチコラ／レシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ／ｌｏｅｓｃｈｉｉ）群、ベイヨネラ種、プレボテラ・ヘパリノリティカ、プレボテラ・インターメディア、プレボテラ・メラニノゲニカ、ポルフィロモナス種（ポルフィロモナス・カンジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、ポルフィロモナス・カンサルシ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｓｕｌｃｉ）；ポルフィロモナス・サーキュムデンタリア（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃｉｒｃｕｍｄｅｎｔａｒｉａ）；ポルフィロモナス・レビイ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｌｅｖｉｉ））、プレボテラ・ビビア、プレボテラ・ブカエ−オリス群、ポルフィロモナス・カノリス、ポルフィロモナス・ジンジバリス、ポルフィロモナス・マカカエ、ペプトストレプトコッカス・ミクロス、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉｉ）、ポルフィロモナス・アサカロリティカス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、フソバクテリウム・バリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖａｒｉｕｍ）、ペプトストレプトコッカス・アサカロリティカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・マグヌス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍａｇｎｕｓ）、フソバクテリウム種１群（フソバクテリウム・ゴニディアフォルマンス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｏｎｉｄｉａｆｏｒｍａｎｓ）、フソバクテリウム・ナビフォルメ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎａｖｉｆｏｒｍｅ）、フソバクテリウム・ネクロフォールム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ）、フソバクテリム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、およびフソバクテリウム・ヌクレアタムアニマリス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ ｓｓ ａｎｉｍａｌｉｓ））、フソバクテリウム種２群（フソバクテリウム・モルティフェルム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｏｒｔｉｆｅｒｕｍ）、フソバクテリウム・ネクロゲネス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｇｅｎｅｓ）、およびフソバクテリウム・ウルセランス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ））、フソバクテリウム・ルシイ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｕｓｓｉｉ）、クロストリジウム・ディフィシレ、クロストリジウム・イノキューム、クロストリジウム・ラモーサム、バクテロイデス・ウレオリチカス（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ビロフィラ・ワズワーシア（Ｂｉｏｌｏｐｈｉｌａ ｗａｄｓｏｒｔｈｉａ）、クロストリジウム・クロストリディオフォルメ、アネロビオスピリルム・サクシニシプロデュセンス、バクテロイデス・グラシリス（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ ｇｒａｃｉｌｉｓ）、バクテロイデス・テクタム（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ ｔｅｃｔｕｍ）、アクチノマイセス・オドントリチカス、アクチノマイセス・イスラエリイ、またはアネロビオスピリルム・トマシイからなる群から選択される方法である。
【００２４】
さらに、抗菌的に有効量の、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、嫌気性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に投与する工程を含む、嫌気性病原菌による細菌感染症の治療または予防法も本発明により提供される。
【００２５】
前記細菌が、プレボテラ・デンチコラ／レシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ／ｌｏｅｓｃｈｉｉ）群、ベイヨネラ種、プレボテラ・ヘパリノリティカ、プレボテラ・インターメディアプレボテラ・メラニノゲニカ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉｃａ）、ポルフィロモナス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｏｎａｓ）種（ポルフィロモナス・カンジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）；ポルフィロモナス・カンサルシ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｓｕｌｃｉ）；ポルフィロモナス・サーキュムデンタリア（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃｉｒｃｕｍｄｅｎｔａｒｉａ）；およびポルフィロモナス・レビイ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｌｅｖｉｉ））、プレボテラ・ビビア、プレボテラ・ブカエ−オリス群、ポルフィロモナス・カノリス、ポルフィロモナス・ジンジバリス、ポルフィロモナス・マカカエ、ペプトストレプトコッカス・ミクロス、ペプトストレプトコッカス・プレボッチイ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉｉ）、ポルフィロモナス・アサカロリティカス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、フソバクテリウム・バリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖａｒｉｕｍ）、ペプトストレプトコッカス・アサカロリティカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・マグヌス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍａｇｎｕｓ）、フソバクテリウム種１群、（フソバクテリウム・ゴニディアフォルマンス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｏｎｉｄｉａｆｏｒｍａｎｓ）、フソバクテリウム・ナビフォルメ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎａｖｉｆｏｒｍｅ）、フソバクテリウム・ネクロフォールム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ）、フソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、フソバクテリウム・ヌクレアタム・ｓｓ・アニマリス（Ｆｕｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ ｓｓ ａｎｉｍａｌｉｓ））、フソバクテリウム種２群（フソバクテリウム・モルティフェルム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｏｒｔｉｆｅｒｕｍ）、フソバクテリウム・ネクロゲネス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｇｅｎｅｓ）、およびフソバクテリウム・ウルセランス（Ｆｕｓｏｂａｃｇｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ））、フソバクテリウム・ルシイ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｕｓｓｉｉ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、クロストリジウム・イノキューム、クロストリジウム・ラモーサム、バクテロイデス・ウレオリチカス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ビロフィラ・ワズワーシア、クロストリジウム・クロストリディオフォルメ、アネロビオスピリルム・サクシニシプロデュセンス、バクテロイデス・グラシリス、バクテロイデス・テクタム、アクチノミセス・オドントリティカス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｏｄｏｎｔｏｌｙｔｉｃｓ）、アクチノマイセス・イスラエリイ、またはアネロスピリルム・トマシイ（Ａｎａｅｒｏｂｉｏｓｐｉｒｉｌｌｕ�� ｔｈｏｍａｓｉｉ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００２６】
本発明の目的は、病原菌を抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む組成物と接触させる工程を含む病原性腸球菌の代謝を調節する方法である。
【００２７】
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌が、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）種、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）種、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、モルガネラ・モルガニイ（Ｍｏｒｇａｎｅｌｌａ ｍｏｒｇａｎｉｉ）、セラチア（Ｓｅｒｒａｔｉａ）種、プロビデンシア・スチュアルティイ（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ ｓｔｕａｒｔｉｉ）、サルモネラ種、ステノトロフォモナス・マルトフィラ（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）ＭＳＳＡ、スタフィロコッカス・アウレウスＭＲＳＡ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＳＳＥ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＲＳＥ、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｓ）、エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・ランスフィールド（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｎｃｅｆｉｅｌｄ）Ｇｐ　Ｂ、ストレプトコッカス・ミレリイ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｉｌｌｅｒｉｉ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ、キノロン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｕｃｃｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒａｈａｌｉｓ）、クロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ペプトストレプトコッカス・アネロビウス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉ）、およびバクテロイデス・フラジリス（バクテロイデス・フラジリス）からなる群から選択される方法である。
【００２８】
前記細菌が、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）種、スタフィロコッカス・アウレウスＭＳＳＡ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＳＳＥ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＲＳＥ、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、キノロン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒｅｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒａｈａｌｉｓ）、ペプトストレプトコッカス・アネロビウス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ）、およびペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉ）、およびバクテロイデス・フラジリス（バクテロイデス・フラジリス）からなる群から選択される好ましい方法が本発明により提供される。
本発明の目的は、サルモネラ種およびシゲラ種病原菌を抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物、または抗菌的に有効なその誘導体を含む組成物と接触させる工程を含むサルモネラ種およびシゲラ種病原菌の代謝を調節する方法である。
【００２９】
本発明のさらにもう一つの目的は、前記サルモネラ種およびシゲラ種病原菌が、サルモネラ種およびシゲラ種からなる群から選択される方法である。
抗菌的に有効量の、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を、サルモネラ種およびシゲラ種での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に投与する工程を含む、サルモネラ種およびシゲラ種病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
【００３０】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と肺炎双球病原菌を接触させる工程を含む肺炎双球病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記肺炎双球病原菌が、ペニシリン感受性、中間性および耐性（シプロフロキサシン耐性を包含する）肺炎双球菌からなる群から選択される方法である。
【００３１】
さらに、肺炎双球病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を投与する工程を含む肺炎双球病原菌による細菌感染症の治療または予防法も本発明により提供される。
前記細菌が、ペニシリン感受性、中間性および耐性（シプロフロキサシン耐性を包含する）肺炎双球菌からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００３２】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と、上顎洞病原菌を接触させる工程を含む、上顎洞病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記上顎洞病原菌が：ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、ヘモフィルス・パラインフルエンゼ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、モラクセラ・カタラーリス、スタフィロコッカス・アウレウス、ペプトストレプトコッカス種、バクテロイデス・ウレアリティカス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｓ）、腸内細菌、非発酵グラム陰性桿菌、ナイセリア・メニンジティディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）種、ベータ−溶血性ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）およびグラム陰性桿菌からなる群から選択される方法である。
【００３３】
上顎洞病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む上顎洞病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、ヘモフィルス・パラインフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリス、スタフィロコッカス・アウレウス、ペプトストレプトコッカス種、バクテロイデス・ウレアリティカス、腸内細菌、非発酵グラム陰性桿菌、ナイセリア・メニンギティディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）種、ベータ−溶血性ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）およびグラム陰性桿菌からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００３４】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と、グラム陰性非発酵性病原菌を接触させる工程を含む、グラム陰性非発酵性病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記グラム陰性非発酵性病原菌が、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、エルジノーサ（Ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、アシネトバクター種、ステノトロフォモナス・マルトフィリア（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）およびブルクホルデリア・セパシア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ）菌からなる群から選択される方法である。
【００３５】
さらに、グラム陰性非発酵性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、グラム陰性非発酵性病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、エルジノーサ（Ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、アシネトバクター種、ステノトロフォモナス・マルトフィリア（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）およびブルクホルデリア・セパシア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ）菌からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００３６】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、または抗菌的に有効なその誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とクラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌を接触させる工程を含む、クラミジア・ニューモニエまたは他の気道病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｏｉａｅ）または気道病原菌が：クラミジア・ニューモニエ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリス、マイコプラズマ・ニューモニエおよびレジオネラ種からなる群から選択される方法である。
【００３７】
クラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、クラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：クラミジア・ニューモニエ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリス、マイコプラズマ・ニューモニエおよびレジオネラ種からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００３８】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と気道病原菌を接触させる工程を含む気道病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のもう一つの目的は、前記気道病原菌が、ストレプトコッカス・ニューモニエおよびヘモフィルス・インフルエンゼ（Ｈａｅｍｏｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）からなる群から選択される方法である。
【００３９】
気道病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染症のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む気道病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：ストレプトコッカス・ニューモニエおよびヘモフィルス・インフルエンゼからなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００４０】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と細菌性髄膜炎病原菌を接触させる工程を含む、細菌性髄膜炎病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記細菌性髄膜炎病原菌がストレプトコッカス・ニューモニエである方法である。
細菌性髄膜炎病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、細菌性髄膜炎病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
【００４１】
前記細菌が、ストレプトコッカス・ニューモニエであるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とグラム陰性病原菌を接触させる工程を含む、グラム陰性病原菌の代謝を調節する方法である。
前記グラム陰性病原菌が：エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、エンテロバクター・エロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、エンテロバクター・クロアカエ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、モルガネラ・モルガニイ（Ｍｏｒｇａｎｅｌｌａ ｍｏｒｇａｎｉｉ）、プロテウス（Ｐｒｏｔｅｕｓ）種、ステノトロフォモナス・マルトフィリア（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、シトロバクター・フロインディイ（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｆｒｅｕｎｄｉｉ）、アシネトバクター種およびセラチア種からなる群から選択されるさらの好ましい方法が本発明により提供される。
【００４２】
グラム陰性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含むグラム陰性病原菌による細菌感染症の治療または予防法も本発明により提供される。
前記細菌が、エシェリキア・コリ、クレブシエラ・ニューモニエ、エンテロバクター・エロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、エンテロバクター・クロアカエ（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ）、シュードモナス・エルジノーサ、モルガネラ・モルガニイ、プロテウス種、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、クレブシエラ・オキシトカ、シトロバクター・フロインディイ、アシネトバクター種およびセラチア種からなる群から選択されるさらの好ましい方法が本発明により提供される。
【００４３】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、または抗菌的に有効なその誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とグラム陽性またはグラム陰性好気性病原菌を接触させる工程を含む、グラム陽性またはグラム陰性好気性病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記グラム陽性またはグラム陰性好気性病原菌が：スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ、エンテロコッカス・フェカーリス、エシェリキア・コリ、シュードモナス・エルジノーサ、クレブシエラ・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリスおよびプロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）から選択される方法である。
グラム陽性またはグラム陰性好気性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む、組成物を投与する工程を含むグラム陽性またはグラム陰性好気性病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
【００４４】
前記細菌が：スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・サプロフィチカス、ストレプトコッカス・ニューモニエ、エンテロコッカス・フェカーリス、エシェリキア・コリ、シュードモナス・エルジノーサ、クレブシエラ・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリスおよびプロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効なその誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と連鎖球菌を接触させる工程を含む、連鎖球菌の代謝を調節する方法である。
【００４５】
本発明のさらにもう一つの目的は、前記連鎖球菌がストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種である方法である。
連鎖球菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、連鎖球菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
【００４６】
前記細菌がストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種であるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とマイコプラズマ病原菌を接触させる工程を含むマイコプラズマ病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記マイコプラズマ病原菌が：マイコプラズマ・ニューモニエ、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ゲニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）からなる群から選択される方法である。
【００４７】
マイコプラズマ病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、マイコプラズマ病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：マイコプラズマ・ニューモニエ、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ゲニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００４８】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とレジオネラ種病原菌を接触させる工程を含むレジオネラ種病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記レジオネラ種病原菌が：レジオネラ・ニューモフィリア（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ）、レジオネラ・ボウズマニイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｂｏｚｅｍａｎｉｉ）、レジオネラ・ワズワーシイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｗａｄｓｗｏｒｔｈｉｉ）、レジオネラ・ジョルダニス（Ｌｅｇｏｎｅｌｌａ ｊｏｒｄａｎｉｓ）、レジオネラ・ダモフィイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｄｕｍｏｆｆｉｉ）、レジオネラ・ロングビーチェ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｌｏｎｇｂｅａｃｈｅａｅ）、レジオネラ・ミクダーディ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｍｉｃｄａｄｅｉ）およびレジオネラ（Ｌｅｇｉｉｏｎｅｌｌａ）種のエリスロマイシン耐性菌からなる群から選択される方法である。
【００４９】
レジオネラ種病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、レジオネラ種病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：レジオネラ・ニューモフィリア（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ）、レジオネラ・ボウズマニイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｂｏｚｅｍａｎｉｉ）、レジオネラ・ワズワーシイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｗａｄｓｗｏｒｔｈｉｉ）、レジオネラ・ジョルダニス（Ｌｅｇｏｎｅｌｌａ ｊｏｒｄａｎｉｓ）、レジオネラ・ダモフィイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｄｕｍｏｆｆｉｉ）、レジオネラ・ロングビーチェ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｌｏｎｇｂｅａｃｈｅａｅ）、レジオネラ・ミクダーディ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｍｉｃｄａｄｅｉ）およびレジオネラ（Ｌｅｇｉｉｏｎｅｌｌａ）種のエリスロマイシン耐性菌からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００５０】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効なその誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌を接触させる工程を含む、ストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記連鎖球菌がストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）である方法である。
【００５１】
ストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含むストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌がストレプトコッカス・ニューモニエであるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とヘモフィルス・インフルエンゼ病原菌を接触させる工程を含むヘモフィルス・インフルエンゼ病原菌の代謝を調節する方法である。
【００５２】
本発明のさらにもう一つの目的は、前記ヘモフィルス・インフルエンゼ病原菌が：ヘモフィルス・インフルエンゼおよび肺炎双球菌からなる群から選択される方法である。
ヘモフィルス・インフルエンゼおよび肺炎双球菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、ヘモフィルス・インフルエンゼおよび肺炎双球菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：ヘモフィルス・インフルエンゼおよび肺炎双球菌からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００５３】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とグラム陽性病原菌、例えば連鎖球菌およびブドウ球菌、ならびに腸内細菌病原菌を接触させる工程を含むグラム陽性病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌が：グラム陽性病原菌、例えば連鎖球菌およびブドウ球菌、ならびに腸内細菌からなる群から選択される方法である。
【００５４】
グラム陽性病原菌、例えば連鎖球菌およびブドウ球菌、ならびに腸内細菌病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、グラム陽性病原菌、例えば連鎖球菌およびブドウ球菌、ならびに腸内細菌病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：グラム陽性病原菌、例えば連鎖球菌およびブドウ球菌、ならびに腸内細菌からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００５５】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とグラム陽性肺炎双球病原菌を接触させる工程を含むグラム陽性肺炎双球病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記グラム陽性肺炎双球病原菌が：ストレプトコッカス・ニューモニエである方法である。
【００５６】
グラム陽性肺炎双球病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれのある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、グラム陽性肺炎双球病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：ストレプトコッカス・ニューモニエであるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００５７】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効なその誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と淋菌を接触させる工程を含む、淋菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記淋菌が：ナイセリア・ゴノレエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）のシプロフロキサシン耐性株を包含するナイセリア・ゴノレエである方法である。
【００５８】
淋病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む淋病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：ナイセリア・ゴノレエのシプロフロキサシン耐性株を包含するナイセリア・ゴノレエからなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００５９】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と肺炎双球病原菌を接触させる工程を含む肺炎双球病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記肺炎双球病原菌が：肺炎双球病原菌からなる群から選択される方法である。
肺炎双球病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、肺炎双球病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：肺炎双球病原菌からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００６０】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と好気性病原菌を接触させる工程を含む好気性病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌が：スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・サプロフィチカス、ストレプトコッカス・ニューモニエ、エンテロコッカス・フェカーリス、エシェリキア・コリ、シュードモナス・エルジノーサ、クレブシエラ・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリスおよびプロテウス・ブルガリスからなる群から選択される方法である。
【００６１】
好気性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、好気性病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・サプロフィチカス、ストレプトコッカス・ニューモニエ、エンテロコッカス・フェカーリス、エシェリキア・コリ、シュードモナス・エルジノーサ、クレブシエラ・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリスおよびプロテウス・ブルガリスからなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００６２】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と肺炎双球病原菌を接触させる工程を含む肺炎双球病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記肺炎双球病原菌がエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）である方法である。
肺炎双球病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、肺炎双球病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌がエス・ニューモニエであるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００６３】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とグラム陽性球菌を接触させる工程を含むグラム陽性球菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記グラム陽性球菌が：エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｉｕｍ）、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）種、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（Ｃｏａｇｕｌａｓｅ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ、β−溶血性ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ βｈｅｍｏｌｙｔｉｃ）、ストレプトコッカス・ビリダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｖｉｒｉｄａｎｓ）群、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種およびコリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）種からなる群から選択される方法である。
【００６４】
グラム陽性球菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、グラム陽性球菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｉｕｍ）、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）種、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌（Ｃｏａｇｕｌａｓｅ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ、β−溶血性ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ β−ｈｅｍｏｌｙｔｉｃ）、ストレプトコッカス・ビリダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｖｉｒｉｄａｎｓ）群、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種およびコリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）種からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００６５】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌を接触させる工程を含むストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌がストレプトコッカス・ニューモニエからなる群から選択される方法である。
ストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、ストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌がストレプトコッカス・ニューモニエからなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００６６】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とエシェリキア・コリ、スタフィロコッカス・アウレウス、またはストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌を接触させる工程を含む、エシェリキア・コリ、スタフィロコッカス・アウレウス、またはストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌が：エシェリキア・コリ、スタフィロコッカス・アウレウス、およびストレプトコッカス・ニューモニエからなる群から選択される方法である。
【００６７】
エシェリキア・コリ、スタフィロコッカス・アウレウス、またはストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、エシェリキア・コリ、スタフィロコッカス・アウレウス、またはストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：エシェリキア・コリ、スタフィロコッカス・アウレウス、またはストレプトコッカス・ニューモニエからなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００６８】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と腸球菌を接触させる工程を含む腸球菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記腸球菌がエンテロコッカス・フェカーリスおよびエンテロコッカス・フェシウムからなる群から選択される方法である。
腸球菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、腸球菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌がエンテロコッカス・フェカーリスおよびエンテロコッカス・フェシウムからなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００６９】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と連鎖球菌を接触させる工程を含む、連鎖球菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌が：ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス連鎖球菌（ｖｉｒｉｄａｎｓ ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）からなる群から選択される方法である。
連鎖球菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、連鎖球菌による細菌感染症の治療または予防法も本発明により提供される。
前記細菌が：ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス連鎖球菌（ｖｉｒｉｄａｎｓ ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法が本発明により提供される。
【００７０】
本発明の目的は、アシネトバクター種病原菌を、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む組成物と接触させる工程を含む、アシネトバクター種病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のもう一つの目的は、前記アシネトバクター種病原菌が：アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、アシネトバクター・カルコアセチカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、アシネトバクター・ルオフィイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｗｏｆｆｉｉ）、およびアシネトバクター・アニトラタス（Ａｃｉｎｅｔｏａｃｔｅｒ ａｎｉｔｒａｔｕｓ）からなる群から選択される方法である。
アシネトバクター種病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、アシネトバクター種病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記アシネトバクター種（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｓｐｐ）細菌が：アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、アシネトバクター・カルコアセチカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、アシネトバクター・ルオフィイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｗｏｆｆｉｉ）、およびアシネトバクター・アニトラタス（Ａｃｉｎｅｔｏａｃｔｅｒ ａｎｉｔｒａｔｕｓ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００７１】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とクラミジア・ニューモニエ病原菌を接触させる工程を含むクラミジア・ニューモニエ病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌が：クラミジア・ニューモニエからなる群から選択される方法である。
【００７２】
クラミジア・ニューモニエ病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、クラミジア・ニューモニエ病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記した細菌がクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｒａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）からなる群より選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００７３】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物と連鎖球菌を接触させる工程を含む連鎖球菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記連鎖球菌病原菌がストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス連鎖球菌（ｖｉｒｉｄａｎｓ ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）からなる群から選択される方法である。
連鎖球菌病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、連鎖球菌病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌がストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス連鎖球菌（ｖｉｒｉｄａｎｓ ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００７４】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とボルデテラ種病原菌を接触させる工程を含むボルデテラ種病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記ボルデテラ種病原菌が：ビー・ペルツッシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、ビー・パラペルツッシツ（Ｂ． ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、およびビー・ブロンキセプチカ（Ｂ．ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）からなる群から選択される方法である。
【００７５】
ボルデテラ種病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、ボルデテラ種病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：ビー・ペルツッシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、ビー・パラペルツッシツ（Ｂ． ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、およびビー・ブロンキセプチカ（Ｂ．ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００７６】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とマイコプラズマ病原菌を接触させる工程を含むマイコプラズマ病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記マイコプラズマ病原菌が：マイコプラズマ・ニューモニエ、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ジェニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）からなる群から選択される方法である。
【００７７】
マイコプラズマ病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、マイコプラズマ病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
前記細菌が：マイコプラズマ・ニューモニエ、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ジェニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）からなる群から選択されるさらに好ましい方法も本発明により提供される。
【００７８】
本発明の目的は、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物、またはその抗菌的に有効な誘導体を含む抗菌的に有効量の組成物とストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌を接触させる工程を含むストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌の代謝を調節する方法である。
本発明のさらにもう一つの目的は、前記病原菌がストレプトコッカス・ニューモニエからなる群から選択される方法である。
ストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染のおそれがある哺乳動物に、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、ストレプトコッカス・ニューモニエ病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
【００７９】
前記代謝の調節が前記細菌の成長を抑制するかまたは前記細菌を殺すことである好ましい方法が提供される。
前記細菌の接触が、前記組成物を哺乳動物、特にヒトに導入するさらにもう一つの工程を含むさらに好ましい方法が提供される。
前記細菌が、ストレプトコッカス・ニューモニエであるさらに好ましい方法が提供される。
【００８０】
さらに好ましい方法は、ジェミフロキサシン化合物が、ジェミフロキサシンメシレート、ジェミフロキサシンメシレートヒドレート、ジェミフロキサシンメシレートヘミヒドレートおよびジェミフロキサシンメシレートセスキヒドレートからなる群から選択されるジェミフロキサシン化合物を含む。
開示された本発明の精神および範囲内のさまざまな変更および修正は、以下の記載および本発明の開示の他の部分を読むと、当業者には容易に明らかになるであろう。
【００８１】
（発明を実施するための最良の形態）
本発明は、とりわけ、エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、エイ・アニトラタス（Ａ． ａｎｉｔｒａｔｕｓ）、エイ・ルオフィイ（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）、エイ・カルコアセチカス（Ａ． ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）またはアシネトバクター種に対して、キノロン、特に、ジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
本発明において使用される場合、「ジェミフロキサシン化合物」とは、特許出願番号ＰＣＴ／ＫＲ９８／００５１（ＷＯ９８／４２７０５として公開）、または特許出願番号ＥＰ６８８７７２（これらの出願は、本発明の一部として参照される）において記載されている抗菌活性を有する化合物を意味する。
【００８２】
本発明は、一つには、さまざまなアシネトバクター病原体に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。これらの分析の目的は、５種のアシネトバクター（すなわち、エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、エイ・カルコアセチカス（Ａ． ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、エイ・ルオフィイ（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）、エイ・アニトラタス（Ａ． ａｎｉｔｒａｔｕｓ）およびアシネトバクター種）に対するＭＩＣにより、シプロフロキサシン、カルバペネム、セファロスポリンおよびマクロライドを包含する比較剤であるキノロンと比較したジェミフロキサシンのＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値を測定することであった。
【００８３】
ジェミフロキサシンは、他の細菌のうち、グラム陽性およびグラム陰性好気性菌の両方に対する活性を包含するスペクトラムを有するフルオロキノロンである。本明細書において記載する研究において、寒天希釈法は、１２種の抗微生物剤：ジェミフロキサシン（ＧＥＭ）、スパルフロキサシン（ＳＰＡ）、グレパフロキサシン（ＧＲＥ）、シプロフロキサシン（ＣＩＰ）、モキシフロキサシン（ＭＯＸ）、トロバフロキサシン（ＴＲＯ）、レボフロキサシン（ＬＥＶ）、オフロキサシン（ＯＦＬ）、ガチフロキサシン（ＧＡＴ）、イミペネム（ＩＭＩ）、セフロキシム（ＳＥＦ）およびアジスロマイシン（ＡＺＩ）に対するアシネトバクター種の１００臨床分離株（４７エイ・バウマンニイ、１８エイ・アニトラタス、１８エイ・ルオフィイ、１３エイ・カルコアセチカス、４アシネトバクター種）のＭＩＣを測定するために用いられる。ＭＩＣ５０／９０値（μｇ／ｍｌ）を表１に示す。
【００８４】
表１におけるデータから、ジェミフロキサシンは、４種のアシネトバクターに対して良好な活性を有し、シプロフロキサシンよりも８倍以上有効であることがわかる。表１におけるデータからまた、ジェミフロキサシンは、グレパフロキサシン、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシンおよびガチフロキサシンよりも２ないし８倍活性であり、比較剤であるキノロン、スパルフロキサシンおよびトロバフロキサシンの１希釈以内であることもわかる。交差耐性はキノロン内でのみ見られ、キノロン以外の抗微生物剤にまでおよばなかった。
【００８５】
アシネトバクター属からの生物は、院内環境においてみられ、免疫抵抗性減弱、特に病院肺炎における二次感染の原因となる。これらの生物は、臨床医が利用でき、集中治療室などの高度の抗菌用途の領域において選択的利点を与える多くの抗菌剤に対して本質的に耐性である。シプロフロキサシンに対する耐性は、病院環境内でアシネトバクター株において見いだされ、さらに新しく、さらに有効なキノロン類の探索が続いている。ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）は、グラム陽性およびグラム陰性生物の両方に対して良好な活性のスペクトラムを示すこのようなキノロンの一種である。この研究において、ジェミフロキサシンのインビトロ活性を、５種のアシネトバクター（エイ・バウマンニイ、エイ・カルコアセチカス、エイ・ルオフィイ、エイ・アニトラタス、およびアシネトバクター種）に対するＭＩＣにより、シプロフロキサシン、カルバペネム、セファロスポリンおよびマクロライドを包含する８種の比較剤であるキノロンと比較した。
【００８６】
表１のデータを得る際に、すべての細菌株は、Ｕｎｉｖｅｒｔｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａ Ｃｅｎｔｕｒｙ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ， ＵＳＡからの血流分離株であった。感受性試験のＢＳＡＣガイドライン（Ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂａｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７（Ｓｕｐｐｌ Ｄ）参照）に従って、イソセンシテスト寒天上でＭＩＣを行った。ブレークポイント値をＢＳＡＣガイドラインから採用し、以下の通りである：セフロキシム２μｇ／ｍｌ；シプロフロキサシン４μｇ／ｍｌ；イミペネム８μｇ／ｍｌ；オフロキサシン４μｇ／ｍｌ；レボフロキサシン４μｇ／ｍｌ；アジスロマイシン０．５μｇ／ｍｌ。開示されていないが、ブレークポイントは任意に４μｇ／ｍｌとしたが、後にもっと高いことがわかった。
【００８７】
ＭＩＣ測定の結果を表１に示し、図１、２および３に要約する。キノリンに対する耐性はカルバペネム、セファロスポリンおよびマクロライドに対する耐性とは無関係であった（図２）。シプロフロキサシンの高いＭＩＣを示すこれらの生物は、すべての他のキノロンのＭＩＣにおける増加を反映した。
【００８８】
【表１】
さまざまなアシネトバクター種に対するジェミフロキサシンの活性
2004507440.tif 000003
【表２】
2004507440.tif 000004
【００８９】
従来の研究から、ジェミフロキサシンは、グラム陽性呼吸生物、例えば、ストレプトコッカス・ニューモニエおよびスタフィロコッカス・アウレウスに対して良好な活性を有し、ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値がシプロフロキサシンよりも３２−６４倍活性であることがわかる。この研究において、これは、グラム陰性生物のアシネトバクター属に対して高い活性が保持され、ジェミフロキサシンのＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値がシプロフロキサシンよりもそれぞれ８倍および１６倍少なく、トロバフロキサシンおよびスパルフロキサシンに匹敵する。種間のレベルでは、ジェミフロキサシンがエイ・カルコアセチカスおよびエイ・ルオフィイに対して最も有効で、ＭＩＣ９０値は任意のブレークポイントよりも低く、シプロフロキサシンよりも８倍有効であった。キノロン耐性のレベルは、試験した化合物に関して類似し（図２）、１９〜２５％の間であり、１種のキノロンに対するＭＩＣが高いのは、すべてについて増加することを表す。しかしながら、ジェミフロキサシンは依然として殆どのシプロフロキサシン耐性分離株を除くすべての種に対して活性を示すので、これは必ずしも処置の失敗が起こることを意味するものではない。
【００９０】
ジェミフロキサシンはグラム陰性生物の１つの属であるアシネトバクターに対して活性を有する。これはシプロフロキサシンよりもかなり良好な活性ならびにトロバフロキサシンおよびスパルフロキサシンに匹敵する活性を有する。ジェミフロキサシンはエイ・カルコアセチカスおよびエイ・ルオフィイに対して最も有効である。キノロン耐性のレベルは、試験された抗菌剤について類似しているが（１９−２５％）、ジェミフロキサシンは殆どのシプロフロキサシン耐性分離株を除くすべてに対して活性を示す。
これらの分析のもう一つの目的は、それぞれの最適殺菌濃度（ＯＢＣ）およびそれらのＭＩＣの４倍での比較剤であるキノロン、ＴＲＯ、ＭＯＸ、ＬＥＶ、ＣＩＰ、ＧＲＥおよびＳＰＡに対するエイ・ガウマンニイＡＴＣＣ１９６０６に関するジェミフロキサシンのインビトロ殺菌活性を比較することであった。
【００９１】
実験において、標準アシネトバクター・バウマンニイＡＴＣＣ１９６０６に対するＭＩＣ（それぞれ、０．５、０．２５、１、２、２、０．５、０．５μｇ／ｍｌ）の４倍の濃度および最適殺菌濃度（ＯＢＣ）（それぞれ４、４、４、４、４、８、８μｇ／ｍｌ）でのジェミフロキサシンの殺菌活性を、トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、グレパフロキサシンおよびスパルフロキサシンと比較した。ＯＢＣでは、ジェミフロキサシンと他のキノロン間には有意な差はなく、再成長が２４時間抑制され、生存細胞の減少は、５ｌｏｇ１０を越えた。しかしながら、インビボで達成可能な濃度であるＭＩＣの４倍では、ジェミフロキサシンは他のキノロンよりも利点を示し、わずか３０分後で、他の薬剤では１ｌｏｇ１０の減少が見られるのに比べて、生菌数がほぼ２ｌｏｇ１０に減少し、２４時間後に生存数は４ｌｏｇ１０を越えて減少した。この向上した殺菌性は、グラム陰性キノロン、シプロフロキサシンおよびレボフロキサシン、ならびにトロバフロキサシンおよびスパルフロキサシンについてみられるよりも著しく良好である。このデータから、そのＯＢＣよりも８倍低い濃度でジェミフロキサシンはエイ・バウマンニイに対して優れた殺菌活性を有することがわかる。
【００９２】
アシネトバクター・バウマンニイは院内環境においてしばしば見いだされる重要な日和見感染性病原体であり、菌血症、二次髄膜炎、尿管感染症および肺炎の原因である。これらの患者に関して、殺菌剤は、通常、静菌剤よりも好ましい。キノロンは殺菌剤であるが、二相用量応答を示し、これにより、最適殺菌濃度（ＯＢＣ）に達するまで濃度と共に薬剤の致死性が増大し、その後、殺菌活性は濃度と共に減少する。この研究は、ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）のエイ・バウマンニイＡＴＣＣ１９６０６に対するインビトロ殺菌活性を、比較剤であるキノロン、トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、グレパフロキサシン、およびスパルフロキサシンとそのＯＢＣおよびそのＭＩＣの４倍で比較する。
【００９３】
標準的エイ・バウマンニイＡＴＣＣ１９６０６実験室株を該研究中用いる。時間−殺菌実験の前に、エイ・バウマンニイＡＴＣＣ１９６０６について７種のキノロンのＭＩＣを、感受性試験のＢＳＡＣガイドラインにしたがった寒天希釈法を用いて測定する。（Ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７ （Ｓｕｐｐｌ Ｄ）参照）。ＯＢＣを測定するために、栄養培地にエイ・バウマンニイＡＴＣＣ１９６０６を接種し、一夜インキュベートする。０．０３−２５６μｇ／ｍｌの範囲の殺菌剤の栄養ブロス中二倍希釈を一夜培養物に接種し、さらに３時間インキュベートする。結果として得られる培養物を連続希釈し、栄養寒天培地上にプレートし、一夜インキュベートし、コロニーを数える（Ｌｅｗｉｎ ＣＳ， Ｈｏｗａｒｄ ＢＭＡ， Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ ＮＴ， Ｓｍｉｔｈ ＪＴ． ４−Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ＳＯＳ ｒｅｓｐｏｎｓｅ． Ｊ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ １９８９； ２９：１３９−１４４参照）。
【００９４】
対数期培養物を、そのＯＢＣまたはＭＩＣの４倍に相当する一定濃度の殺菌剤で攻撃する。一夜培養したものを用いて栄養ブロスに接種し、３時間インキュベートする。存在する微生物の１回目の計測数（ｔ＝０）を、連続希釈し、栄養寒天培地上にプレートすることにより測定する。殺菌剤を次に添加し、３時間にわたり、３０分ごとにサンプルを採取し、連続希釈し、生存数計測のためにプレートする。採取サンプルを２４時間後に採取し、希釈し、生存数計測のためにプレートする。
【００９５】
ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシンと比較した場合に、ＭＩＣの４倍で良好な殺菌活性を示し、１／８の濃度であっても殺菌速度はＯＢＣとほぼ同じである。ＯＢＣおよびＭＩＣの４倍のいずれにおいても、ジェミフロキサシンは２４時間で微生物の９９％以上を殺菌した。ＭＩＣの４倍でのジェミフロキサシンは、シプロフロキサシン、スパルフロキサシンおよびトロボフロキサシンと比較して、＞２ｌｏｇ１０を殺菌した。このデータは、ジェミフロキサシンが、低い濃度またはＭＩＣの数倍でも、アシネトバクター感染症の治療に有効であることを示唆する。
【００９６】
【表３】
2004507440.tif 000005
【００９７】
すべての分析は、特に詳細に記載しない限り、当業者に一般的で、慣例の標準的技術を用いて行った。以下の記載におけるすべての部または量は特記しない限り重量基準である。
本発明は、アシネトバクター病原菌の代謝を調節する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を実施するために、アシネトバクター病原菌またはこれらの生物に感染しているかまたは感染している疑いのある患者を容易に選択することができる。また、本発明の方法において有用な細菌は、本明細書に記載されているものである。
【００９８】
抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、アシネトバクター病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染の危険性のある哺乳動物、好ましくはヒトに投与する工程を含む、アシネトバクター病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法が本発明により提供される。
本発明の好ましい目的は、前記のアシネトバクター病原菌が：エイ・バウマンニイ、エイ・アニトラタス、エイ・ルオフィイ、エイ・カルコアセチカスまたはアシネトバクター種からなる群から選択される方法を提供する。他のアシネトバクター病原菌も該方法に包含される。当業者らは、本明細書に記載されるように、また当該分野で一般的な他の方法、例えばＭＩＣ試験を用いて、これらの生物を同定することができる。
【００９９】
本発明はまた、とりわけ、プレボテラ・デンティコラ／レシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ／ｌｏｅｓｃｈｉｉ）群、バイヨネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）種、プレボテラ・ヘパリノリティカ、プレボテラ・インターメディア、プレボテラ・メラニノゲニカ、ポルフィロモナス種（ポルフィロモナス・カンジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）； ポルフィロモナス・カンサルシ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｓｕｌｃｉ）；ポルフィロモナスサーキュムデンタリア（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃｉｒｃｕｍｄｅｎｔａｒｉａ）；ポルフィロモナス・レビイ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｌｅｖｉｉ））、プレボテラ・ビビア、プレボテラ・ブカエ−オリス群、ポルフィロモナス・カノリス、ポルフィロモナス・ジンジバリス、ポルフィロモナス・アサカロリチカス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ａｓａｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、フソバクテリウム・バリウム（Ｆｕｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖａｒｉｕｍ）、ペプトストレプトコッカス・アサカロリチカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・マグヌス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｕｓ ｍａｇｎｕｓ）、フソバクテリウム種１群（フソバクテリウム・ゴニディアフォルマンス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｏｎｉｄｉａｆｏｒｍａｎｓ）、フソバクテリウム・ナビフォルメ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎａｖｉｆｏｒｍｅ）、フソバクテリウム・ネクロホルム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｉｕｍ ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ）、フソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、およびフソバクテリウム・ヌクレアタムｓｓアニマリス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ ｓｓ ａｎｉｍａｌｉ））、フソバクテリウム種２群（フソバクテリウム・モルティフェルム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｏｒｔｉｆｅｒｕｍ）、フソバクテリウム・ネクロゲネス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｇｅｎｅｓ）、およびフソバクテリウム・ウルセランス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ））、フソバクテリウム・ラシイ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｕｓｓｉｉ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、クロストリジウム・イノキューム、クロストリジウム・ラモーサム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｒａｍｕｓｕｍ）、バクテロイデス・ウレロリチカス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ビロフィラ・ワズワーシア、クロストリジウム・クロストリジフォルメ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｏｆｏｒｍｅ）、アネロビオスピリルム・スクシニシプロデューセンス（Ａｎａｅｒｏｂｉｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｓｕｃｃｉｎｉｃｉｐｒｏｄｕｃｅｎｓ）、バクテロイデス・グラシリス、バクテロイデス・テクタム、アクチノマイセス・オドントリチカス、アクチノマイセス・イスラエリイ、またはアネロビオスピリルム・トマシイに対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法も提供する。
【０１００】
本発明は、一つには、さまざまな嫌気性病原菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。これらの分析の目的は、あまり一般に同定されていない嫌気性菌株の４１９臨床株に対する寒天希釈法によりジェミフロキサシンおよび比較薬剤の活性を測定することである。ジェミフロキサシンは、一般に、１〜２回の希釈により、グラム陽性菌に対してトロバフロキサシンよりも活性である。ペプト連鎖球菌（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｓｓｉ）、例えば、ペプトストレプトコッカス・アサカロリチカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・マグヌス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍａｇｎｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・ミクロス、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉｉ）およびポルフィロモナス種、たとえば、ポルフィロモナス・アサカロリチカ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ）、ポルフィロモナス・カロリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｏｒｉｓ）、ポルフィロモナス・ジンジバリス、ポルフィロモナス・マカカエ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｍａｃａｃａａｅ）は、すべて≦０．２５μｇｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性である。アクチノマイセス・イスラエリイ（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｅｓ ｉｓｒａｅｌｉｉ）、アクチノマイセス・オドントリチカス、クロストリジウム・イノキューム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｉｎｎｏｃｕｕｍ）、クロストリジウム・クロストリディオフォルメ、アネロビオスピリルム（Ａｎａｅｒｏｂｉｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ）種、バクテロイデス・テクタム、バクテロイデス・ウレオリチカス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）、バクテロイデス・グラシリス（現在、カンピロバクター・グラシリ（Ｃａｍｐｙｒｏｂａｃｔｅｒ ｇｒａｃｉｌｉｓ））、プレボテラ・インターメディア、プレボテラ・ヘパリノリティカ、およびプレボテラ・オリス−ブカエ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｏｒｉｓ−ｂｕｃｃａｅ）群は、≦２μｇ／ｍｌのＭＩＣ９０を有する。フソバクテリウム・ナビフォルメ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎａｂｖｉｆｏｒｍｅ）およびフソバクテリウム・ネクロホルム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ）も≦２μｇ／ｍｌに対して感受性であるが、フソバクテリウム・バリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖａｒｉｕｍ）株は、二峰形パターンを示し；他のフソバクテリウム種、たとえば、フソバクテリウム・ウルセランス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ）、フソバクテリウム・ルシイ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｕｓｉｉ）、ならびにバイヨネラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ）種、プレボテラ・メラニノゲニカ群、プレボテラ・ビビア、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、およびビロフィラ・ワズワーシアは比較的ジェミフロキサシンに対して耐性である［ＭＩＣ９０≧４ｕｇ／ｍｌ］。
【０１０１】
新規抗菌化合物の販売前のインビトロ試験は広範囲におよぶことが多いが、これらの研究は典型的な嫌気性病原菌、たとえばバクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｒｔｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ）群およびクロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）に集中する傾向がある。多くのあまり頻繁に遭遇しない嫌気性病原菌に対するこれらの新規化合物の活性についてのデータは殆どもしくは全くない。嫌気性菌感受性試験は殆どの臨床的実験室においては慣例的に行われないが、臨床医は、あまり一般的に単離または同定されていない嫌気性菌または他の部位での混合感染を含む状況においては、経験的療法ならびに特異的療法の両者のガイドを助ける確立された研究に依存しなければならない。
ヒトの臨床的感染症において遭遇する種々のあまり一般的でない嫌気性菌種に対するジェミフロキサシンの活性を測定し、その活性を他の一般的に用いられる経口剤と比較した。
【０１０２】
株は、あらかじめさまざまな供給源から得られるヒト臨床検体から単離し、標準的基準により同定する。殆どすべてのこれらの分離株は、同じ属および種を用いた場合、従来の研究において用いられる株と異なる。バクテロイデス・フラジリスＡＴＣＣ ２５２８５、およびバクテロイデス・セタイオタオムミクロンＡＴＣＣ ２９７４１を対照株と同時に試験する。試験した分離株の数および種を表３に示す。
【０１０３】
標準的実験室用粉末は以下のように供給される：ジェミフロキサシンおよびアモキシシリンクラブラン酸塩（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， ＰＡ）；トロバフロキサシンおよびアジスロマイシン（Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＮＹ）；クラリスロマイシン（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ａｂｂｏｔｔ Ｐａｒｋ， ＩＬ．）；クリンダマイシン（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏ．， Ｋａｌａｍａｚｏｏ， Ｍｉｃｈｉ．）；メトロニダゾール（Ｓｅａｒｌｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， Ｓｋｏｋｉｅ， ＩＬ．）；エリスロマイシン（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ＆ Ｃｏ．， Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ， ＩＮ）；およびペニシリンＧ（Ｇ， Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ， ＵＳＡ）。純度および良好な成長を確実にするために、凍結した培養物を少なくとも２回、ヘミン、ビタミンＫ１、および５％ヒツジ血液を補足したＢｒｕｃｅｌｌａ寒天上に移す。ＮＣＣＬＳ標準にしたがって感受性試験を行った。ヘミン、ビタミンＫ１、および５％レーキヒツジ血液を補足したＢｒｕｃｅｌｌａ寒天が使用された基礎培地であった。ビロフィラ・ワズワーシアについては、寒天をピルビン酸塩でも補足する。抗菌剤を製造業者の指示に従って復元する。抗菌剤の連続二倍希釈物を試験当日に調製し、さまざまな濃度（μｇ／ｍｌ）で培地に添加する。
【０１０４】
寒天プレートにＳｔｅｅｒレプリケーター（Ｃｒａｆｔ Ｍａｃｈｉｎｅ Ｉｎｃ．， Ｃｈｅｓｔｅｒ， ＰＡ， ＵＳＡ）を接種する。使用した接種物は、１０５ＣＦＵ／スポットであった。抗菌剤を含まない対照プレートは、薬剤含有プレートの各セットの前後に接種する。ＭＩＣを、成長対照プレートと比較して、成長、または成長の外観に著しい変化が生じない薬剤の最低濃度として定義した。
【０１０５】
ジェミフロキサシンおよび他の抗菌剤の相対的活性を表３に示す。全体的に、結果から、ジェミフロキサシンは、試験したグラム陽性嫌気性菌ならびに実験した他のあまり一般的でない分離株に対して活性であることがわかる。
ジェミフロキサシンは、グラム陽性嫌気性菌、特に、４種のペプトストレプトコッカス種およびポルフィロモナス種に対して活性を示す。ジェミフロキサシンはさらに一般的でない分離株に対しても活性である。
【０１０６】
４種からの４５株のペプトストレプトコッカスを含む実験から、これらのすべては≦０．２５μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性であったことがわかる。対照的に、ペプトストレプトコッカスの１０株の研究から、ジェミフロキサシンに対するＭＩＣ９０は２μｇ／ｍｌであった。いずれの実験もＢｒｕｃｅｌｌａ寒天および寒天希釈法を用いているので、この不一致の理由は、方法の違いによるものではない。Ｍａｒｃｏらは、ペプトストレプトコッカスの１８株を実験し、ジェフロキサシンについてＭＩＣ９０が２μｇ／ｍｌ（≦０．２５−８μｇ／ｍｌの範囲）であることを見いだした（Ｍａｒｃｏ Ｆ， Ｂａｒｒｅｔｔ ＭＳ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ， ｔｅｓｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ａｎａｅｒｏｂｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７； ４０： ６０５−６０７）。
【０１０７】
クロストリジウム種のジェミフロキサシンに対する感受性の差は、この研究において明らかであり、クロストリジウム・クロストリディオフォルメおよびクロストリジウム・イノキューム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｉｎｎｏｃｕｕｍ）は比較的感受性であるが、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）はジェミフロキサシンに対して耐性であることが多い。現在の研究においては、実験した１０のクロストリジウム・ラモーサム分離株のＭＩＣ９０は１μｇ／ｍｌであるのに対して、別の研究においては、実験した１４分離株についてＭＩＣ９０は８μｇ／ｍｌであった。株を除いては、２つの研究に置いてすべての株は異なり、ほとんど血液培養物由来である。明らかな相違は、従来の研究における３／１４株のＭＩＣが高いことに由来し、単一種の少数の分離株を試験することの問題を強調する。
【０１０８】
【表４】
2004507440.tif 000006
【０１０９】
【０１１０】
【表５】
2004507440.tif 000007
【０１１１】
【表６】
2004507440.tif 000008
【０１１２】
【表７】
2004507440.tif 000009
【０１１３】
【表８】
2004507440.tif 000010
【０１１４】
【表９】
2004507440.tif 000011
【０１１５】
【表１０】
2004507440.tif 000012
【０１１６】
【表１１】
2004507440.tif 000013
【０１１７】
【表１２】
2004507440.tif 000014
【０１１８】
【表１３】
2004507440.tif 000015
【０１１９】
ＣｏｒｍｉｃｏｎおよびＪｏｎｅｓは、１０のクロストリジウム分離株を研究し、ジェミフロキサシンに関して最大ＭＩＣ２μｇ／ｍｌを見いだした（Ｃｏｒｍｉｃｏｎ ＭＧ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＬＢ２０３０， ａ ｎｏｖｅｌ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７； ４１：２０４−２１１）。Ｍａｒｃｏらは、彼らが研究したすべての１９の特定されていないクロストリジウム分離株は、≦２μｇ／ｍｌに対して感受性であることを報告している（Ｍａｒｃｏ Ｆ， Ｂａｒｒｅｔｔ ＭＳ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ， ｔｅｓｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ａｎａｅｒｏｂｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ）。
【０１２０】
トロバフロキサシンおよびジェミフロキサシンに対する異なる嫌気性菌属および種の感受性パターンは著しく異なる。重要な臨床嫌気性分離株は、各株の感受性を測定しなければならない。あまり一般的でないかまたは同定されていない属のいくつかの種のグルーピングに基づいて感受性を予測することは困難である。
これらの知見を考慮して、本発明により、嫌気性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染する危険性のある哺乳動物、好ましくはヒトに、キノロン、特にジェミフロキサシンを含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む嫌気性病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法が提供される。
【０１２１】
本発明の好ましい目的は、前記嫌気性病原菌が：プレボテラ・デンチコラ／レシイ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ／ｌｏｅｓｃｈｉｉ）群、ベイヨネラ種、プレボテラ・ヘパリノリティカ、プレボテラ・インターメディア、プレボテラ・メラニノゲニカ、ポルフィロモナス種（ポルフィロモナス・カンジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、ポルフィロモナス・カンサルシ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃａｎｓｕｌｃｉ）；ポルフィロモナス・サーキュムデンタリア（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｃｉｒｃｕｍｄｅｎｔａｒｉａ）；ポルフィロモナス・レビイ（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｌｅｖｉｉ））、プレボテラ・ビビア、プレボテラ・ブカエ−オリス群、ポルフィロモナス・カノリス、ポルフィロモナス・ジンジバリス、ポルフィロモナス・マカカエ、ペプトストレプトコッカス・ミクロス、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉｉ）、ポルフィロモナス・アサカロリティカス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、フソバクテリウム・バリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖａｒｉｕｍ）、ペプトストレプトコッカス・アサカロリティカス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・マグヌス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍａｇｎｕｓ）、フソバクテリウム種１群（フソバクテリウム・ゴニディアフォルマンス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｏｎｉｄｉａｆｏｒｍａｎｓ）、フソバクテリウム・ナビフォルメ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎａｖｉｆｏｒｍｅ）、フソバクテリウム・ネクロフォールム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ）、フソバクテリム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、およびフソバクテリウム・ヌクレアタムアニマリスｓｓアニマリス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ ｓｓ ａｎｉｍａｌｉｓ））、フソバクテリウム種２群（フソバクテリウム・モルティフェルム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｍｏｒｔｉｆｅｒｕｍ）、フソバクテリウム・ネクロゲネス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｃｒｏｇｅｎｅｓ）、およびフソバクテリウム・ウルセランス（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ））、フソバクテリウム・ルシイ（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｕｓｓｉｉ）、クロストリジウム・ディフィシレ、クロストリジウム・イノキューム、クロストリジウム・ラモーサム、バクテロイデス・ウレオリチカス（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ ｕｒｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ビロフィラ・ワズワーシア（Ｂｉｏｌｏｐｈｉｌａ ｗａｄｓｏｒｔｈｉａ）、クロストリジウム・クロストリディオフォルメ、アネロビオスピリルム・サクシニシプロデュセンス、バクテロイデス・グラシリス（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ ｇｒａｃｉｌｉｓ）、バクテロイデス・テクタム（Ｂａｃｔｅｒｉｏｉｄｅｓ ｔｅｃｔｕｍ）、アクチノマイセス・オドントリチカス、アクチノマイセス・イスラエリイ、またはアネロビオスピリルム・トマシイからなる群から選択される方法を提供する。
【０１２２】
他の嫌気性病原菌も本発明の方法に含まれる。当業者らは、本発明に記載したように、また当該分野で一般的な方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
本発明はさらに、とりわけ、キノロン、特にジェミフロキサシンを含む組成物を、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）種、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）種、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、モルガネラ・モルガニイ、セラチア種、プロビデンシア・スチュアルティイ（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ ｓｔｕａｒｔｉｉ）、サルモネラ種、ステノトロフォモナス・マルトフィラ（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・エルジノーサ、アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、スタフィロコッカス・アウレウスＭＳＳＡ、スタフィロコッカス・アウレウスＭＲＳＡ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＳＳＥ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＲＳＥ、スタフィロコッカス・サプロフィチカス、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｓ）、ストレプトコッカス・ランスフィールドＧｐ　Ｂ、ストレプトコッカス・ミレリイ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、キノロン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、モラクセラ・カタラーリス、クロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ペプトストレプトコッカス・アネロビウス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉ）、またはバクテロイデス・フラジリス（バクテロイデス・フラジリス）に対して使用する方法を提供する。
【０１２３】
本発明のこの態様は、一つには、さまざまな病原菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づくものであった。これらの分析の目的は、７８２の最近の臨床分離株に対するジェミフロキサシン（ＧＦＸ）（ＳＢ−２６５８０５）のインビトロ活性を、シプロフロキサシン（ＣＩＰ）、トロバフロキサシン（ＴＲＸ）およびレボフロキサシン（ＬＥＶ）の活性に対して測定することであった。ＧＦＸは腸内細菌の９０％を≦０．５μｇ／ｍｌで阻害し（セラチア種、ＭＩＣ９０１μｇ／ｍｌを除く）、ＣＩＰ、ＴＲＸおよびＬＥＶに対して同様の活性を示す。シュードモナス・エルジノーサはＧＦＸに対して適度に感受性である（ＭＩＣ９０４μｇ／ｍｌ）。
【０１２４】
ストレプトコッカス・ニューモニエに対して、ＧＦＸ（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）はＴＲＸよりも２から４倍活性であり、ＣＩＰよりも１６−３２倍活性である。ＧＦＸは試験したキノロン耐性エス・ニューモニエに対して最も活性であり；ＣＩＰに対して耐性（ＭＩＣ４−８μｇ／ｍｌ）の１６株のうちすべてが≦０．１２μｇ／ｍｌのＧＦＸに対して感受性である。≧１２８μｇ／ｍｌＣＩＰに対して感受性の４株は０．５−２μｇ／ｍｌのＧＦＸに対して感受性である。ＭＳＳＡはＧＦＸおよびＴＲＸに対して同様に感受性であるが（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）、ＭＲＳＡはあまり感受性でない（ＧＦＸ　ＭＩＣ９０８μｇ／ｍｌ）。ヘモフィルス・インフルエンゼおよびモラクセラ・カタラーリスはＧＦＸに対して感受性である（ＭＩＣ９０≦０．０６μｇ／ｍｌ）。エンテロコッカス種 は他の薬剤よりもＧＦＸに対してより感受性である。ＧＦＸおよびＴＲＸはバクテロイデス・フラジリス（ＭＩＣ９００．５μｇ／ｍｌ）およびペプトストレプトコッカス（ＭＩＣ９００．２５μｇ／ｍｌ）に対して高い活性を有する。ＭＩＣに対してプロットされたディスクゾーンサイズの回帰分析にしたがって仮のブレークポイント０．５μｇ／ｍｌが提案される、１μｇディスクが提案され、ゾーン直径が＞２０ｍｍであることは感受性であることを示す。擬似感受性および耐性率はそれぞれ０％および５．６％である。
【０１２５】
ジェミフロキサシンはグラム陽性球菌に対して向上した活性を有すると報告されている（Ｏｈ ＪＩ， Ｐａｅｋ Ｋ−Ｓ， Ａｈｎ Ｍ−Ｊ ら、． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｉｎｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０ １５６４−１５６８； Ｃｏｍｉｃａｎ ＭＧ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｏｖｅｌ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７；４１：２０４−２１１参照）。この研究において、７８２の最近単離された細菌に対して通常使用される抗菌剤とジェミフロキサシンの活性を比較した。仮のインビトロブレークポイントを確立するために、Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ （ＢＳＡＣ） Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｎ Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｔｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｉｎｇの技術が用いられている（Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｖｉｔ ｔｅｓｔｉｎｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７ （Ｓｕｐｐｌ Ｄ）参照）。
【０１２６】
本明細書に記載するように、ジェミフロキサシンを、シプロフロキサシン、トロバフロキサシン、レボフロキサシン、ナリジクス酸およびアモキシシリン／クラブラン酸と比較した。感受性は、ＢＳＡＣ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙの技術にしたがって行った（Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７ （Ｓｕｐｐｌｅ Ｄ）参照）。最終接種物はおよそ１０４ＣＦＵであった。培地はＵｎｉｐａｔｈ Ｉｓｏ−Ｓｅｎｓｉｔｅｓｔ 寒天（所望により補足）またはＷｉｌｋｉｎ−Ｃｈａｌｇｒｅｎ寒天であった。適当な雰囲気中、３５℃〜３７℃でインキュベーションを行った。
【０１２７】
１、２および５μｇのジェミフロキサシンディスクのＭＩＣ（前記）およびゾーン直径を測定し、成長は半集密であり、ゾーンサイズのＭＩＣに対する分散ダイヤグラムを行い、ＢＳＡＣ式から、仮のブレークポイント０．５〜１μｇ／ｍｌが得られ、擬似感受性および耐性率が測定された（Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７ （Ｓｕｐｐｌｅ Ｄ）参照）。
【０１２８】
感受性試験の結果を表４に示す。ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびレボフロキサシンの腸内細菌に対する活性は類似し、ＭＩＣはそれぞれ±１倍化希釈である。シプロフロキサシンに対してあまり感受性でない株は、他のフルオロキノロンに対してあまり感受性でない。ジェミフロキサシンを包含するすべてのフルオロキノロンは、シュードモナス・エルジノーサに対して低い活性を示す（ＭＩＣ９０４μｇ／ｍｌ）。ＭＳＳＡに対して、ジェミフロキサシンはシプロフロキサシンよりも３２倍活性である。スタフィロコッカス・エピダーミディスおよび腸球菌について同様の差が見られる。ストレプトコッカス・ニューモニエに対して、ジェミフロキサシンはトロバフロキサシンよりも２〜４倍活性であり、シプロフロキサシンよりも１６〜３２倍活性である。合計１０株のエス・ニューモニエがシプロフロキサシンに対して耐性であり（ＭＩＣ４〜８μｇ／ｍｌ）；これらは０．０６〜０．１２μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性である。合計４株は高度にシプロフロキサシン耐性であり（ＭＩＣ＞１２８μｇ／ｍｌ）、これらは０．５〜２μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性である。
【０１２９】
【表１４】
2004507440.tif 000016
【０１３０】
【表１５】
2004507440.tif 000017
【０１３１】
【表１６】
2004507440.tif 000018
【０１３２】
【表１７】
2004507440.tif 000019
【０１３３】
【表１８】
2004507440.tif 000020
【０１３４】
【表１９】
2004507440.tif 000021
【０１３５】
【表２０】
2004507440.tif 000022
【０１３６】
【表２１】
2004507440.tif 000023
【０１３７】
他の呼吸病原菌（ヘモフィルス・インフルエンゼおよびモラクセラ・カタラーリス）はジェミフロキサシンに対して非常に感受性である。バクテロイデス・フラジリスはすべて≦０．５μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性である。
提案された仮のブレークポイント０．５〜１μｇ／ｍｌを選択した。図５は、１μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンのＭＩＣおよびゾーン直径を示す。２および５μｇディスクは感受性分離株について３０〜４５ｍｍのゾーン直径を示し、許容できないほど大きな領域を生じる。ブレークポイントとして２０ｍｍのゾーン直径を用いて、擬似耐性率は６％であり、擬似感受性率は約１％である。３６の擬似耐性株の内、８は腸球菌（ＭＩＣ０．１２〜０．５μｇ／ｍｌ）であり、１７はシプロフロキサシンに対する感受性が減少した腸内細菌であり、１１はＭＩＣがブレークポイントに近いセラチア、アシネトバクターおよびステノトロフォモナス種であった。仮の推奨値を表５に示す。
【０１３８】
データから、とりわけ、予想外の結果を除いて、ジェミフロキサシンがビー・フラジリスに対してより活性であるということがわかる（Ｏｈ ＪＩ， Ｐａｅｋ Ｋ−Ｓ， Ａｈｎ Ｍ−Ｊ ら、． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｉｎｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０： １５６４−１５６８； Ｃｏｍｉｃａｎ ＭＧ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｏｖｅｌ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７； ４１： ２０４−２１１参照）。シプロフロキサシンに対して耐性の株に対するものを包含する、エス・ニューモニエに対するジェミフロキサシンの高い活性は注目に値する。仮のブレークポイント０．５〜１μｇ／ｍｌは信頼性のある結果をもたらすようである。
【０１３９】
【表２２】
2004507440.tif 000024
【０１４０】
本発明の好ましい目的は、前記病原菌が、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）種、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）種、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、モルガネラ・モルガニイ、セラチア種、プロビデンシア・スチュアルティイ（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ ｓｔｕａｒｔｉｉ）、サルモネラ種、ステノトロフォモナス・マルトフィラ（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・エルジノーサ、アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、スタフィロコッカス・アウレウスＭＳＳＡ、スタフィロコッカス・アウレウスＭＲＳＡ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＳＳＥ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＲＳＥ、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｓ）、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム、ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・ランスフィールドＧｐ　Ｂ、ストレプトコッカス・ミレリイ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、キノロン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒａｈａｌｉｓ）、クロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ペプトストレプトコッカス・アネロビウス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉ）、およびバクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｇ）からなる群から選択される方法を提供する。他の病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に記載されたように、また当該分野で一般的な他の方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０１４１】
本発明はさらに、とりわけ、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）種、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）種、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、モルガネラ・モルガニイ、セラチア種、プロビデンシア・スチュアルティイ（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ ｓｔｕａｒｔｉｉ）、サルモネラ種、ステノトロフォモナス・マルトフィラ（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・エルジノーサ、アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、スタフィロコッカス・アウレウスＭＳＳＡ、スタフィロコッカス・アウレウスＭＲＳＡ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＳＳＥ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＲＳＥ、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｓ）、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム、ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・ランスフィールドＧｐ　Ｂ、ストレプトコッカス・ミレリイ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、キノロン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒａｈａｌｉｓ）、クロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ペプトストレプトコッカス・アネロビウス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉ）、またはバクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｇ）に対するキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。他の病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に記載されたように、また当該分野で一般的な他の方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０１４２】
本発明は、一つには、さまざまな病原菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づくものであった。これらの分析の目的は、７８２の最近の臨床分離株に対するジェミフロキサシン（ＧＦＸ）のインビトロ活性を、シプロフロキサシン（ＣＩＰ）、トロバフロキサシン（ＴＲＸ）およびレボフロキサシン（ＬＥＶ）の活性に対して測定することであった。ＧＦＸは腸内細菌の９０％を≦０．５μｇ／ｍｌで抑制し（セラチア種、ＭＩＣ９０１μｇ／ｍｌを除く）、ＣＩＰ、ＴＲＸおよびＬＥＶに対して同様の活性を示す。シュードモナス・エルジノーサはＧＦＸに対して適度に感受性である（ＭＩＣ９０４μｇ／ｍｌ）。
【０１４３】
ストレプトコッカス・ニューモニエに対して、ＧＦＸ（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）はＴＲＸよりも２〜４倍活性であり、ＣＩＰよりも１６〜３２倍活性である。ＧＦＸは試験されたキノロン耐性エス・ニューモニエに対して最も活性であり；ＣＩＰに対して耐性（ＭＩＣ４−８μｇ／ｍｌ）の１６株のうちすべてが≦０．１２μｇ／ｍｌのＧＦＸに対して感受性である。≧１２８μｇ／ｍｌＣＩＰに対して感受性の４株は０．５−２μｇ／ｍｌのＧＦＸに対して感受性である。ＭＳＳＡはＧＦＸおよびＴＲＸに対して同様に感受性であるが（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）、ＭＲＳＡはあまり感受性でない（ＧＦＸ　ＭＩＣ９０８μｇ／ｍｌ）。ヘモフィルス・インフルエンゼおよびモラクセラ・カタラーリスはＧＦＸに対して感受性である（ＭＩＣ９０≦０．０６μｇ／ｍｌ）。エンテロコッカス種は他の薬剤よりもＧＦＸに対してより感受性である。ＧＦＸおよびＴＲＸはバクテロイデス・フラジリス（ＭＩＣ９００．５μｇ／ｍｌ）およびペプトストレプトコッカス（ＭＩＣ９００．２５μｇ／ｍｌ）に対して高い活性を有する。ＭＩＣに対してプロットされたディスクゾーンサイズの回帰分析にしたがって仮のブレークポイント０．５μｇ／ｍｌが提案される。１μｇディスクが提案され、ゾーン直径が＞２０ｍｍであることは感受性であることを示す。擬似感受性および耐性率はそれぞれ０％および５．６％である。
【０１４４】
さらに進んだ研究において、７８２の最近単離された細菌に対するジェミフロキサシンの活性を通常用いられる抗菌剤と比較した。仮のインビトロブレークポイントを確立するためにＢｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ （ＢＳＡＣ） Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｎ Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｉｎｇの技術を用いた（Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７ （Ｓｕｐｐｌ Ｄ）参照）。
【０１４５】
ジェミフロキサシンを、シプロフロキサシン、トロバフロキサシン、レボフロキサシン、ナリジクス酸およびアモキシシリン／クラブラン酸と比較した。感受性は、ＢＳＡＣ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙの技術にしたがって行った（Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７ （Ｓｕｐｐｌｅ Ｄ）参照）。最終接種物はおよそ１０４ＣＦＵであった。培地はＵｎｉｐａｔｈ Ｉｓｏ−Ｓｅｎｓｉｔｅｓｔ 寒天（所望により補足）またはＷｉｌｋｉｎ−Ｃｈａｌｇｒｅｎ寒天であった。適当な雰囲気中、３５℃〜３７℃でインキュベーションを行った。
【０１４６】
１、２および５μｇジェミフロキサシンディスクのＭＩＣ（前記）およびゾーン直径を測定し、成長は半集密であり、ゾーンサイズのＭＩＣに対する分散ダイヤグラムを行い、ＢＳＡＣ式から、仮のブレークポイント０．５〜１μｇ／ｍｌが得られ、擬似感受性および耐性率が測定された（Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ｇ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９１； ２７ （Ｓｕｐｐｌｅ Ｄ）参照）。
【０１４７】
感受性試験の結果を表６に示す。ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびレボフロキサシンの腸内細菌に対する活性は類似し、ＭＩＣはそれぞれ±１倍希釈である。シプロフロキサシンに対してあまり感受性でない株は、他のフルオロキノロンに対してあまり感受性でない。ジェミフロキサシンを包含するすべてのフルオロキノロンは、シュードモナス・エルジノーサに対して低い活性を示す（ＭＩＣ９０４μｇ／ｍｌ）。ＭＳＳＡに対して、ジェミフロキサシンはシプロフロキサシンよりも３２倍活性である。スタフィロコッカス・エピダーミディスおよび腸球菌について同様の差が見られる。ストレプトコッカス・ニューモニエに対して、ジェミフロキサシンはトロバフロキサシンよりも２〜４倍活性であり、シプロフロキサシンよりも１６〜３２倍活性である。合計１０株のエス・ニューモニエがシプロフロキサシンに対して耐性であり（ＭＩＣ４〜８μｇ／ｍｌ）；これらは０．０６〜０．１２μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性である。合計４株は高度にシプロフロキサシン耐性であり（ＭＩＣ＞１２８μｇ／ｍｌ）、これらは０．５〜１μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性である。
【０１４８】
【表２３】
2004507440.tif 000025
【０１４９】
【表２４】
2004507440.tif 000026
【０１５０】
【表２５】
2004507440.tif 000027
【０１５１】
【表２６】
2004507440.tif 000028
【０１５２】
【表２７】
2004507440.tif 000029
【０１５３】
【表２８】
2004507440.tif 000030
【０１５４】
【表２９】
2004507440.tif 000031
【０１５５】
【表３０】
2004507440.tif 000032
【０１５６】
ある種の他の呼吸病原菌（ヘモフィルス・インフルエンゼおよびモラクセラ・カタラーリス）はジェミフロキサシンに対して非常に感受性である。バクテロイデス・フラジリスはすべて≦０．５μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンに対して感受性である。
提案された仮のブレークポイント０．５〜１μｇ／ｍｌを選択した。図１は、１μｇ／ｍｌのジェミフロキサシンのＭＩＣおよびゾーン直径を示す。２および５μｇディスクは感受性分離株について３０〜４５ｍｍのゾーン直径を示し、許容できないほど大きな領域を生じる。ブレークポイントとして２０ｍｍのゾーン直径を用いて、擬似耐性率は６％であり、擬似感受性率は約１％である。３６の擬似耐性株のうち、８は腸球菌（ＭＩＣ０．１２〜０．５μｇ／ｍｌ）であり、１７はシプロフロキサシンに対する感受性が減少した腸内細菌であり、１１はＭＩＣがブレークポイントに近いセラチア、アシネトバクターおよびステノトロフォモナス種であった。図２は５μｇディスクおよびピー・エルジノーサの分散ダイヤグラムを示す。仮の推奨値を表７に示す。
【０１５７】
データから、とりわけ、予想外の結果を除いて、ジェミフロキサシンがビー・フラジリスに対してより活性であるということがわかる（Ｏｈ ＪＩ， Ｐａｅｋ Ｋ−Ｓ， Ａｈｎ Ｍ−Ｊ ら、． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｉｎｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０： １５６４−１５６８； Ｃｏｍｉｃａｎ ＭＧ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｏｖｅｌ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７； ４１： ２０４−２１１参照）。シプロフロキサシンに対して耐性の株に対するものを包含する、エス・ニューモニエに対するジェミフロキサシンの高い活性は顕著である。仮のブレークポイント０．５〜１μｇ／ｍｌは信頼性のある結果をもたらすようである。
【０１５８】
【表３１】
2004507440.tif 000033
【０１５９】
本発明の好ましい目的は、前記病原菌が、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）種、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）種、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、モルガネラ・モルガニイ、セラチア種、プロビデンシア・スチュアルティイ（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｉａ ｓｔｕａｒｔｉｉ）、サルモネラ種、ステノトロフォモナス・マルトフィラ（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｍａｌｔｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・エルジノーサ、アシネトバクター・バウマンニイ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、スタフィロコッカス・アウレウスＭＳＳＡ、スタフィロコッカス・アウレウスＭＲＳＥ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＳＳＥ、スタフィロコッカス・エピダーミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）ＭＲＳＥ、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｓ）、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム、ストレプトコッカス・ピオゲネス、ストレプトコッカス・ランスフィールドＧｐ　Ｂ、ストレプトコッカス・ミレリイ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、キノロン耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒａｈａｌｉｓ）、クロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム・ディフィシル（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、ペプトストレプトコッカス・アネロビウス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ）、ペプトストレプトコッカス・プレボッティ（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｒｅｖｏｔｉ）、およびバクテロイデス・フラジリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｇ）からなる群から選択される方法を提供する。他の病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に記載されたように、また当該分野で一般的な他の方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０１６０】
本発明は、とりわけ、肺炎双球菌（ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ ｂａｃｔｅｒｉａ）に対してキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
本発明は、一つには、さまざまな肺炎双球病原菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づくものであった。これらの分析の目的は、時間−殺菌による４ペニシリン感受性、４中間性および４耐性（２シプロフロキサシン耐性株を包含する）肺炎双球菌に対するジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）のインビトロ活性を、シプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびレボフロキサシンの活性に対して測定することであった。ブロスＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）は以下の通りである：ジェミフロキサシン：０．０１６−０．５；シプロフロキサシン：０．５−３２；レボフロキサシン；１−３２；スパルフロキサシン０．１２５−３２；グレパフロキサシン：０．０６−１６；トロバフロキサシン：０．０６−８；アモキシシリン：０．０１６−２；セフロキシム：０．０１６−４；アジスロマイシン：０．００８−＞６４；クラリスロマイシン：０．００８−６４。結果を以下にＭＩＣ／２×ＭＩＣで示す（０時間と比較して菌株数が−１、−２、−３ｌｏｇ１０減少）。
【０１６１】
【表３２】
2004507440.tif 000034
ａＭＩＣ≦０．２５μｇ／ｍｌに関して７菌株のみを試験した。
【０１６２】
ジェミフロキサシンはＭＩＣが最低であり、ペニシリンまたはシプロフロキサシンＭＩＣに関係なく、ＭＩＣの２倍で均一に殺菌性である。ジェミフロキサシンは達成可能なＭＩＣでシプロフロキサシン耐性株に対して活性な唯一のキノロンである。他のキノロンおよびβ−ラクタムはＭＩＣに対して類似した速度を有し、マクロライドは反応速度が遅かった。
【０１６３】
ペニシリンＧおよび他のβ−ラクタムおよび非β−ラクタム化合物に対して耐性の肺炎双球菌はその範囲が驚くべき速度でアメリカ合衆国を含む世界中に広がっている。現在、感染の主な中心は、南アフリカ、スペイン、中央および東ヨーロッパ、およびアジアの一部を包含する（Ｆｒｉｅｄｌａｎｄ ＩＲ， ＭｃＣｒａｃｋｅｎ ＧＨ， Ｊｒ． Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ １９９４； ３３１：３７７−３８２；およびＪａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ． Ｒｅｖ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ １９９５； ６： ７７−９３参照）。アメリカ合衆国において、最近の調査からペニシリンに対する耐性は、１９８９年以前の＜５％（ＭＩＣ≦２．０μｇ／ｍｌの＜０．０２％分離株を包含する）から、１９９１−１９９２年には６．６％（１．３％分離株はＭＩＣ≧２．０μｇ／ｍｌ）まで増大していることが明らかになった（Ｂｒｅｉｍａｎ ＲＦ， Ｂｕｔｌｅｒ ＪＣ， Ｔｅｎｏｖｅｒ ＦＣ， Ｅｌｌｉｏｔｔ ＪＡ， Ｆａｃｋｌａｍ ＲＲ． Ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ ｏｆ Ｄｒｕｇ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ． ＪＡＭＡ １９９４； ２７１； １８３１−１８３５参照）。もう一つ別のさらに最近の調査においては、１５２７の臨床的に有意な肺炎双球菌分離株の２３．６０％（３６０）は、ペニシリンに対して感受性でなかった（Ｄｏｅｒｎ ＧＶ， Ｂｒｕｅｇｇｅｍａｎｎ Ａ， Ｈｏｌｌｅｙ ＨＰ， Ｒａｕｃｈ ＡＭ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｏｒｍ ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｗｉｎｔｅｒ ｍｏｎｔｈｓ ｏｆ １９９４ ｔｏ １９９５：ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａ ３０−ｃｅｎｔｅｒ ｎａｔｉｎａｌ ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ ｓｔｕｄｙ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０）：１２０８−１２１３参照）。難治性中耳炎の患者からの中耳液において、他の単離部位と比較して、ペニシリン−中間性およびペニシリン−耐性肺炎双球菌が高い割合（およそ３０％）で単離されることに注目することも重要である（Ｂｌｏｃｋ Ｓ， Ｈａｒｒｉｓｏｎ ＣＪ， Ｈｅｄｒｉｃｋ ＪＡ， ら、． Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｏｔｉｔｉｓ ｍｅｄｉａ： ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ， ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｐａｔｔｅｒｎｓ ａｎｄ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ． Ｐｅｄｉａｔｒ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｊ １９９５； １４： ７５１−７５９参照）。耐性クローンが国から国へ、大陸から大陸へと広がることができるために、薬剤耐性肺炎双球菌の問題はさらに増大する（Ｍｕｎｏｚ Ｒ， Ｍｕｓｓｅｒ ＪＭ， Ｃｒａｉｎ Ｍ， ら、． Ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｐｅ���ｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｃｌｏｎｅｓ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ： ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｒｏｆｉｌｅ， ｓｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ ｔｙｐｉｎｇ， ａｎｄ ｍｕｌｔｉｌｏｃｕｓ ｅｎｚｙｍｅ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｃｌｉｎ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ １９９２； １５： １１２−１１８参照）。
【０１６４】
ペニシリン−中間性およびペニシリン耐性肺炎双球菌により引き起こされる外来患者の中耳炎および気道感染症の治療のための経口化合物が早急に必要とされる（Ｂｒｅｉｍａｎ ＲＦ， Ｂｕｔｌｅｒ ＪＣ， Ｔｅｎｏｖｅｒ ＦＣ， Ｅｌｌｉｏｔｔ ＪＡ， Ｆａｃｋｌａｍ ＲＲ． Ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ ｏｆ ｄｒｕｇ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ． ＪＡＭＡ １９９４； ２７１：１８３１−１８３５参照）。利用可能なキノロン、たとえば、シプロフロキサシンおよびオフロキサシンは肺炎双球菌に対して中程度のインビトロ活性を示し、ＭＩＣはブレークポイント付近である（Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｐ ９９，２１９ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ＤＵ−６８５９ａ， ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｏｆｌｏｘｃｉｎ， ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｌｏｍｅｆｌｏｘａｃｉｎ， ｔｏｓｕｆｌｏｘａｃｉｎ， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｇｒｅｐａｆｌｏｘａｃｉｎ ａｇａｉｎｓｔ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９５；３５：２３０−２３２．；Ｓｐａｎｇｌｅｒ ＳＫ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｔｏ ＲＰ ５９５００， ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ， ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ， ＰＤ １３１６２８， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ， ｔｅｍａｆｌｏｘａｃｉｎ， Ｗｉｎ ５７２７３， ｏｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ； Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９２； ３６：８５６−８５９；およびＳｐａｎｇｌｅｒ ＳＫ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ １６０ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ ｔｏ ｓｉｘ ｏｒａｌ ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎｓ， ｆｏｕｒ ｑｕｉｎｏｌｏｅｓ， ｄｅｓａｃｅｔｙｌｆｏｔａｘｉｍｅ， Ｒｏ ２３−９４２４ ａｎｄ ＲＰ ６６８２９． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９３；３１：２７３−２８０参照）。
【０１６５】
従来の予備調査から、ジェミフロキサシンは肺炎双球菌に対して非常に活性であることが明らかになった（Ｃｏｒｍｉｃａｎ ＭＧ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｎｏｂｅｌ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７； ４１：２０４−２１１； Ｈｏｈｌ ＡＦ， Ｆｒｅｉ Ｒ， Ｐｕｎｔｅｒ Ｖ， ら、． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｎｆｅｃｔ １９９８；４：２８０−２８４；およびＯｈ Ｊ−Ｉ， Ｐａｅｋ Ｋ−Ｓ， Ａｈｎ Ｍ−Ｊ， ら、． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０：１５６４−１５６８参照）。
【０１６６】
さらに別の調査では、さまざまなキノロンおよびペニシリン感受性を有する１２肺炎双球菌株の時間−殺菌試験により、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、スパルフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシン、アモキシシリン、セフロキシム、アジスロマイシンおよびクラリスロマイシンと比較してジェミフロキサシンの抗肺炎双球菌活性を調べた。４つの時間−殺菌試験について、４ペニシリン感受性、４中間性、および４耐性菌株（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ Ｐｒｏｊｅｃｔ ＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎからＤａｖｉｄ Ｆｅｌｍｉｎｇｈａｍの好意により入手した２キノロン耐性）を試験する。
【０１６７】
ジェミフロキサシン感受性粉末をＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｈａｒｌｏｗ， ＵＫから入手し；他の抗菌剤は、それぞれの製造業者から入手する。時間−殺菌により試験した１２菌株おおよびＰＡＥにより試験した４菌株のブロスＭＩＣを、５％溶菌脱繊維素ウマ血液でカチオン調節されたＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロスを用いて、ＮＣＣＬＳの指示にしたがって行った（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ． Ｉｎ： Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔｓ ｆｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａ ｔｈａｔ ｇｒｏｗ ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ （３ｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ； ａｐｐｒｏｖｅｄ ｓｔａｎｄａｒｄ． ＮＣＣＬＳ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ｎｏ． Ｍ７−Ａ４） Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ： Ｖｉｌｌａｎｏｖａ， ＰＡ， １９９７参照）。ストレプトコッカス・ニューモニエ ＡＴＣＣ ４９６１９を包含する標準品質対照株が寒天およびブロス希釈ＭＩＣの各実験において含まれていた。
【０１６８】
時間−殺菌調査のために、５ｍｌのカチオン調節されたＭｕｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス（Ｄｉｆｃｏ）＋殺菌濃度の二倍の５％溶菌ウマ血液を含むガラス管を、５×１０５〜５×１０６ＣＦＵ／ｍｌで接種し、３５℃で振盪水浴中でインキュベートする。３倍希釈以上および３希釈以下の寒天希釈ＭＩＣを含むように抗菌濃度を選択した。各実験について、接種物を含むが、抗菌剤を含まない成長対照を用いた（Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ａｎｔｉｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ Ｇ， Ｒｐ ５９５００， ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ， ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｔｉｍｅ−ｋｉｌｌ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９４； ３８：２０６５−２０７２；およびＰａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ Ｃ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ａｎｔｉｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ＲＰ ５９５００ （ｑｕｉｎｕｐｒｉｓｔｉｎ／ｄａｌｆｏｐｒｉｓｔｉｎ）， ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ Ｇ， ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ， ａｎｄ ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ＭＩＣ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｔｉｍｅ−ｋｉｌｌ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｅｓ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９６；４０：１６５３−１６５６参照）。溶菌ウマ血液をすでに記載されているようにして調製した（Ｐａｎｋｕｃｈ， Ｊａｃｏｂｓ ら、およびＰａｎｋｕｃｈ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ら、， 前掲参照）。Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス中一夜血寒天プレートからの成長物を濁度がＭｃＦａｒｌａｎｄ標準の１に一致するまで懸濁することにより細菌接種物を調製した。適当な接種物を得るために必要な希釈度（５×１０５−５×１０６ＣＦＵ／ｍｌ）は、各菌株を用いた従来の生存性試験により決定した（Ｐａｎｋｕｃｈ， Ｊａｃｏｂｓ ら、およびＰａｎｋｕｃｈ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒ ら、前掲参照）。逐次希釈された抗菌剤の各試験管を接種するために、５０μｌの希釈された接種物をブロスの表面の下にピペットにより供給した。試験管を次に撹拌し、１０分（およそ０．２時間）以内の生存数を得るためにプレートした。もとの接種物は未処理の成長対照を用いて決定した。５×１０５−５×１０６ＣＦＵ／ｍｌの範囲の初期接種物を含む試験管のみが許容できる（Ｐａｎｋｕｃｈ， Ｊａｃｏｂｓら、およびＰａｎｋｕｃｈ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒら、前掲参照）。
【０１６９】
無菌の各試験管からの１０倍希釈の０．１ｍｌアリコートをトリプチカーゼ大豆寒天５％ヒツジ血液寒天プレート（ＢＢＬ）上のＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロスにプレートすることにより抗菌剤含有懸濁液の生存数計測を行った。回収プレートを７２時間までインキュベートした。３０−３００コロニーを生じるプレートに関してコロニー計測を行った。コロニー数の感受性の下限は３００ＣＦＵ／ｍｌであった（Ｊａｃｏｂｓら、およびＰｅｒｋｕｃｈ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒら、前掲参照）。
【０１７０】
０時間での計測数と比較して、０、３、６、１２および２４時間で−１、−２および−３のΔｌｏｇ１０ＣＦＵ／ｍｌを生じる菌株の数を測定することにより時間−殺菌検定を分析した。殺菌剤は、各時間で、もとの接種物を≧３ｌｏｇ１０ＣＦＵ／ｍｌ（９９．９％）減少させる最低濃度で殺菌性であるとみなし、接種物が０−＜ｌｏｇ１０ＣＦＵ／ｍｌ減少する場合には静菌性であるとみなす。これらの研究において使用される感受性閾値および接種物について、存在するならば９９．９％殺菌においてなんの問題もない。細菌のキャリーオーバーは前記のような希釈による（Ｐａｎｋｕｃｈ， Ｊａｃｏｂｓら、およびＰａｎｋｕｃｈ， Ｌｉｃｈｔｅｎｂｅｒｇｅｒら、前掲参照）。マクロライド時間−殺菌試験について、ＭＩＣ≦４．０μｇ／ｍｌの菌株のみを試験した。
【０１７１】
時間−殺菌により試験したミクロブロス希釈ＭＩＣの結果を表８に示す。ミクロ希釈ＭＩＣはすべて寒天ＭＩＣの１希釈以内である。２キノリン耐性株（いずれもペニシリン感受性）について、ジェミフロキサシンミクロブロスＭＩＣはそれぞれ０．５および０．２５μｇ／ｍｌである。時間−殺菌結果（表９）から、ＭＩＣでのレボフロキサシンおよび２×ＭＩＣでのスパルフロキサシンおよび４×ＭＩＣでのトロバフロキサシンは２４時間後に殺菌性である。３時間後にすべてにキノリンによるさまざまな程度の９０％および９９％殺菌が検出される。ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンはいずれも２のキノロン耐性肺炎双球菌株について２×ＭＩＣで殺菌性である。ジェミフロキサシンは≦０．５μｇ／ｍｌで２４時間後に殺菌性である。アモキシシリン（２×ＭＩＣ）およびセフロキシム（４×ＭＩＣ）は２４時間後に殺菌性であり、より早い時間である程度の殺菌性を示し、２４時間後に２−４×ＭＩＣですべての株の９９．９％を殺菌する。ペニシリン耐性肺炎双球菌株に対するジェミフロキサシンの時間−殺菌を図７にグラフで示す。
【０１７２】
従来の研究から、メチシリン感受性および耐性スタフィロコッカス・アウレウス、メチシリン耐性スタフィロコッカス・エピダーミディスおよびエス・ニューモニエに対して、ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシンおよびトロバフロキサシンよりも３２−６４倍活性であることが証明されている。ジェミフロキサシンも腸内細菌科の殆どの要素に対して非常に活性であり、スパルフロキサシンおよびオフロキサシンよりもさらに有効で、シプロフロキサシンに匹敵する活性を有する。ジェミフロキサシンは他のキノロンおよびグリコペプチドに対して耐性のグラム陽性種に対して最も活性な薬剤である。ジェミフロキサシンは嫌気性菌に対してさまざまな活性を有し、グラム陽性菌群に対して非常に活性である（Ｃｏｒｉｃａｎ ＭＧ， Ｊｏｎｅｓ ＲＮ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｎｏｖｅｌ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７；３１：２０４； Ｈｏｈｌ ＡＦ， Ｆｒｅｉ Ｒ， Ｐｕｎｔｅｒ Ｖら、． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｎｆｅｃｔ １９９８； ４：２８０−２８４；およびＯｈ Ｊ−Ｉ， Ｐａｅｋ Ｋ−Ｓ， Ａｈｎ Ｍ−Ｊら、． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＬＢ ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６；４０：１５６４−１５６８参照）。
【０１７３】
ジェミフロキサシンは、すべての試験された肺炎双球菌に対して最低のキノロンＭＩＣを示し、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、スパルフロキサシン、レボフロキサシンおよびシプロフロキサシンがそれに続く。ＭＩＣは前記のものと類似している（Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｐ ９９，２１９ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ＤＵ−６８５９ａ， ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｌｅｂｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｌｏｍｅｆｌｏｘａｃｉｎ， ｔｏｓｕｆｌｏｘａｃｉｎ， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｇｒｅｐａｆｌｏｘａｃｉｎ ａｇａｉｎｓｔ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９５；３５：２３０−２３２； Ｓｐａｎｇｌｅｒ ＳＫ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｅｉｓ ｏｆ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｔｏ ＲＰ ５９５０， ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ， ｅｒｙｔｈｒｏｍａｙｃｉｎ， ＰＤ １３１６２８， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ， ｔｅｍａｆｌｏｘａｃｉｎ， Ｗｉｎ ５７２７３， ｏｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ． Ａａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９２；３６：８５６−８５９；およびＳｐａｎｇｌｅｒ ＳＫ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ １７０ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ ｔｏ ｓｉｘ ｏｒａｌ ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｎｓ， ｆｏｕｒ ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｓ， ｄｅｓａｃｅｔｙｌｃｅｆｏｔａｘｉｍｅ， Ｒｏ ２３−９４２４ ａｎｄ ＲＰ ６７８２９． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９３；３１：２７３−２８０参照）。
【０１７４】
ジェミフロキサシンも、２のキノロン耐性菌株を包含する試験した１２の菌株に対して殺菌性を示す。≦０．５μｇ／ｍｌで、ジェミフロキサシンは１２菌株すべてに対して殺菌性である。ＭＩＣに対する殺菌率は、他のキノロンと同様で、β−ラクタムおよびマクロライドよりも速く顕著な殺菌が起こる（Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ前掲；Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ｃｏｍｐａｒａｔｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｍｐｉｃｉｌｉｎ， ａｍｏｘｙｃｉｌｌｉｎ， ａｍｏｘｙｃｉｌｌｉｎ／ｃｌａｖｕｌａｎａｔｅ ａｎｄ ｃｅｆｏｔａｘｉｍｅ ａｇａｉｎｓｔ １８９ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９５； ３５：８８３−８８８．；Ｖｉｓａｌｌｉ ＭＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＣＰ ９９，２１９（ｔｒｏｖａｆｌｏｘａｃｉｎ） ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｎ， ｆｌｉｎａｆｌｏｘａｃｉｎ， ｌｏｍｅｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｃｅｆｕｒｏｘｉｍｅ ａｇａｉｓｔ ｔｅｎ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ ｂｙ ｔｉｍｅ−ｋｉｌｌ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ３７：７７−８４；およびＶｉｓａｌｌｉ ＭＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． ＭＩＣ ａｎｄ ｔｉｍｅ ｋｉｌｌ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ＤＵ−６８５９ａ， ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ， ｃｅｆｏｔａｘｉｍｅ， ｉｍｉｐｅｎｅｍ ａｎｄ ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ ａｇａｉｎｓｔ ｎｉｎｅ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０：３６２−３５５）。キノロンおよびキノロン以外の化合物の殺菌速度はすでに記載されているものと同様である（１４、１−１８）Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ．前掲；Ｐａｎｋｕｃｈ ＧＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ．前掲；Ｖｉｓａｌｌｉ ＭＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ． Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｐ ９９，２１９（ｔｒｏｖａｆｌｏｘａｃｉｎ）ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ， ｓｐａｒｆｌｏｘａｃｉｎ， ｃｌｉｎａｆｌｏｘａｃｉｎ， ｌｏｍｅｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｃｅｆｕｒｏｘｉｍｅ ａｇａｉｎｓｔ ｔｅｎ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ａｎｄ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ ｂｙ ｔｉｍｅ−ｋｉｌｌ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ． Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ３７：７７−８３４； Ｖｉｓａｌｌｉ ＭＡ， Ｊａｃｏｂｓ ＭＲ， Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＰＣ．前掲）。
【０１７５】
証明されるように、ジェミフロキサシンはキノロン感受性およびキノロン耐性肺炎双球菌のいずれに対しても、ＭＩＣおよび時間−殺菌により試験された最も有効なキノロンである。キノロン耐性肺炎双球菌の発生率は現在非常に低いが、広範囲のキノロンを、特に小児集団における臨床例に導入することにより、キノロン耐性菌株の選択につながる可能性がある。キノロン、たとえばジェミフロキサシンは、医師により決められた適切な用量を用いて、小児環境において用いることができる。加えて、キノロン耐性肺炎双球菌について、ジェミフロキサシンを治療の選択肢として用いることができる。ジェミフロキサシンは、キノロンおよび他の薬剤に対する菌株の感受性に関係なく、将来有望な抗肺炎双球菌剤である。
【０１７６】
【表３３】
2004507440.tif 000035
【０１７７】
【表３４】
2004507440.tif 000036
【０１７８】
【表３５】
2004507440.tif 000037
【０１７９】
【表３６】
2004507440.tif 000038
【０１８０】
【表３７】
2004507440.tif 000039
【０１８１】
本発明により、肺炎双球菌での感染の疑いがあるかまたは感染する危険性のある哺乳動物、好ましくはヒトに、抗菌的に有効量のキノロン、特にジェミフロキサシンを含む組成物を投与する工程を含む、肺炎双球菌による細菌感染症を治療または予防する方法が提供される。
本発明の好ましい態様は、前記肺炎双球菌が：ペニシリン感受性、中間性および耐性（シプロフロキサシン−耐性を包含する）肺炎双球菌からなる群から選択される方法を提供する。他の肺炎双球菌も該方法に含むことができる。当業者らは、本発明に記載されたように、また当該分野で一般的な他の方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０１８２】
本発明は、とりわけ、上顎洞洞に対してキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
本発明は、一つには、さまざまな病原菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づくものであった。これらの分析の目的は、最近の急性または慢性上顎静脈洞炎から単離された合計２５０以上の菌株に対する新規フルオロキノリン、ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）の、シプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびレボフロキサシンの活性と比較した活性を測定することであった。ＭＩＣは寒天希釈技術により測定した。ジェミフロキサシン（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）のストレプトコッカス・ニューモニエ分離菌に対する活性は、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、グレパフロキサシン、モキシフロキサシンおよびスパルフロキサシンよりも優れている（ＭＩＣ９０≦０．０２μｇ／ｍｌ）。試験した嫌気性菌株に対して、ジェミフロキサシンおよびモキシフロキサシンについて、同様の活性（ＭＩＣ９０≦０．０２μｇ／ｍｌ）が観察された。モラクセラ・カタラーリスおよびヘモフィルス・インフルエンゼは、シプロフロキサシン、アモキシシリンおよびアモキシシリン／クラブラン酸（ＭＩＣ９０≧１μｇ／ｍｌ）よりも有効である（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）。さまざまな他の菌株、たとえば、ある種の腸内細菌または非発酵グラム陰性桿菌に対するジェミフロキサシンの活性は、オフロキサシン、トロバフロキサシン、モキシフロキサシンおよびスパルフロキサシン（ＭＩＣ９００．５μｇ／ｍｌ）と類似している。ヒトにおける好ましい薬物動力学と組み合わせて、ジェミフロキサシンは、通常の経口治療薬に対して耐性の分離株により引き起こされる急性または慢性静脈洞炎の治療用の有効な経口化合物である。
【０１８３】
他のキノロンと同様に、ジェミフロキサシンは、ＤＮＡジャイレース（ｇｙｒａｓｅ）、細菌ＤＮＡトポイソメラーゼのＡサブユニットの通常の機能を阻害することにより作用する。感受性研究において、ジェミフロキサシンは、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ストレプトコッカス・ピオゲネスおよびメシチリン耐性スタフィロコッカス種を包含する多くのグラム陽性生物に対して殆どのフルオロキノロンよりも顕著に活性である。ジェミフロキサシンは一連の耐性グラム陰性バチルスに対して活性を保持する。これはさまざまな嫌気性および不定型呼吸病原菌、たとえば、レジオネラ・ニューモフィラ、マイコプラズマ種、およびクラミジア種に対して有効な活性を有する。
【０１８４】
本明細書に記載した研究の目的は、急性または慢性上顎洞感染症から近年単離されたさまざまな菌株、たとえば、ヘモフィルス種、エス・ニューモニエおよびモラクセラ・カタラーリスに対するジェミフロキサシン、スパルフロキサシン、アモキシシリンおよびアモキシシリン／クラブラン酸のＭＩＣを測定することであった。
【０１８５】
さまざまな菌株が、最近、上顎洞吸引から得られた。検体からの新鮮な分離株を培養して、純粋な培養物を産生した。生物またはアンチビオグラムにおける変化が顕著でない限り、同じ患者または供給源からの複数の培養は除外した。生物の同定は、標準的方法により行った（Ｍｕｒｒａｙら、Ｉｎ：Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ （６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ）， Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， １９９５：ｐｐ２８２−６２０参照）。２５０の選択された分離株に対して抗菌活性を試験した（表１０）。通常単離される静脈洞炎生物または通常の経口療法に対して耐性を示す生物を含む可能な限り多くの分離株を試験することに重点をおいた。
【０１８６】
生物を一連の寒天プレート上に濃度を増加させて繰り返しプレートする寒天希釈法を用いた（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ， Ａｐｐｒｏｖｅｄ ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｍ ７−Ａ４． Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｖｉｌｌａｎｏｖａ， ＰＡ， １９９７参照）。一連の二倍希釈を２５６から０．０２μｇ／ｍｌまで行った。
ストック溶液を調製するために、抗生物質を水または対応する溶解溶液中に溶解させた。抗菌ストック溶液を１０００μｇ／ｍｌまたは試験した最高の濃度の１０倍のどちらか高い方の濃度で調製した。小体積の無菌ストック溶液を無菌ポリプロピレンバイアル中に調剤し、慎重に密封し、−２０℃〜−６０℃以下で保存した。バイアルを必要に応じて取り出し、同日に用いた。未使用の薬剤は捨てた。
【０１８７】
Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ（Ｍ−Ｈ）寒天を好気性および任意の嫌気性菌の慣例の感受性試験のために用いた。補足していない培地上で成長しない生物を試験するために、、Ｍ−Ｈ寒天を５％で脱繊維素ヒツジ血液で補足した。好血球を試験するために使用した培地は、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ Ｔｅｓｔ Ｍｅｄｉｕｍ（ＨＴＭ）であった。嫌気性菌を試験するために使用した培地は、Ｗｉｒｋｉｎｓ−Ｃｈａｌｇｒｅｎ寒天であった。Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ寒天、ＨＴＭまたはＷｉｌｋｉｎｓ−Ｃｈａｒｇｒｅｎ寒天を、脱水塩基から製造業者の進めにしたがって調製した。オートクレーブ処理後、抗菌剤溶液を添加する前に、寒天を水浴中で４８から５０℃に冷却させた。寒天の各バッチのｐＨをオートクレーブ処理後にチェックした。培地のｐＨは２５℃で６．９−６．９５であった。ｐＨ電極の標準的組合せまたは表面電極を用いて測定を行った。
【０１８８】
抗菌剤溶液の適当な希釈液をＭ−Ｈ寒天、ＨＴＭまたはＷｉｌｋｉｎｓ−Ｃｈａｌｇｒｅｎに添加し、これを水浴中で４８−５０℃で平衡にした。寒天および抗菌剤溶液をよく混合し、表面が水平なペトリ皿中に注いだ。容器内の冷却および部分的凝固を防止するために、混合後できるだけ素早くペトリ皿を注いだ。寒天の深さは３から４ｍｍの間であった。寒天を室温で凝固させた。プレートを直ちに用いるかまたはプラスチック製フリーザー用バッグ中で４℃で４週間まで保存した。保存後、プレートを使用前に室温で平衡にした。表面は接種前に乾燥した。
【０１８９】
５．０ｍｌのＭ−Ｈブロスを含む試験管中に単一種の４−５コロニーを接種することにより、標準化接種物を調製した。この細菌懸濁液を３５℃で視覚的に濁るまでインキュベートした。Ｍ−Ｈブロスの添加により、０．５ＭｃＦａｒｌａｎｄの濁度にこの接種物の密度を調節した。調節した懸濁液を無菌塩化ナトリウム溶液中で１：１０に希釈して、１０７ＣＦＵ／ｍｌの所望の接種濃度を得た。複製装置を用いて、寒天上の最終接種物は５−８ｍｍの部分に１０４ＣＦＵ／ｍｌを含んでいた。
【０１９０】
寒天の表面は接種前に乾燥した。プレートを蓋を開けてインキュベーター中に入れた。調節し、希釈した最近懸濁液を含む試験管（１０７ＣＦＵ／ｍｌ）を棚に順番に並べた。各懸濁液のアリコートをレプリケーターブロック中の対応するウェル中に入れた。接種物複製装置を用いて接種物を寒天表面に適用した。対照プレートを最初に、第二のプレートを最後に接種して、接種プロセス中に汚染または微生物のキャリーオーバーが起こらないようにした。
接種物中の水分が寒天中に吸収されるまで、接種したプレートを室温で放置した。プレートを反転させ、好気性菌または任意の嫌気性菌については好気性雰囲気中で、好血球については５−７％ＣＯ２を含む雰囲気中で、嫌気性菌については嫌気性雰囲気中で、３５℃で２４時間インキュベートした。
【０１９１】
感受性結果を表１１−１４に示す。経口化合物と比較したジェミフロキサシンに対するグラム陽性球菌（ｃｏｃｃｉ）の感受性を表１１に示す。グラム陽性球菌に対するジェミフロキサシンの活性は、試験されたある種の通常の経口化合物、たとえば、レボフロキサシン、オフロキサシン、アモキシシリンまたはアモキシシリン／クラブラン酸よりも著しく優れている（ｐ＜０．０５）。ジェミフロキサシンは０．０６μｇ／ｍｌの濃度で、グラム陽性球菌の９０％を阻害する。エス・ニューモニエに対して、ジェミフロキサシンの活性（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）はトロバフロキサシンと類似しているが、シプロフロキサシン、オフロキサシン、レボフロキサシン、およびスパルフロキサシン（ＭＩＣ９０≧０．５μｇ／ｍｌ）よりも優れている。エス・アウレウス洞病原菌に対して、ジェミフロキサシン、モキシフロキサシン、トロバフロキサシン（ＭＩＣ９００．０６μｇ／ｍｌ）およびスパルフロキサシン（ＭＩＣ９００．１２μｇ／ｍｌ）は試験されたうちで最高に活性な化合物である。ジェミフロキサシンの活性は、シプロフロキサシン、アモキシシリン（ＭＩＣ９０１μｇ／ｍｌ）およびアモキシシリン／クラブラン酸（ＭＩＣ９０２μｇ／ｍｌ）よりも重大である。
【０１９２】
表１２は好血球種のジェミフロキサシンに対する感受性を示す。エッチ・インフルエンゼの株はジェミフロキサシンに対してＭＩＣ９０が＜０．０２μｇ／ｍｌで感受性である。この活性はオフロキサシン、モキシフロキサシン、スパルフロキサシン、アモキシシリンおよびアモキシシリン／クラブラン酸塩よりも有意に優れている。ヘモフィルス・パラインフルエンゼに対して、ジェミフロキサシン（ＭＩＣ９０　０．１２μｇ／ｍｌ）はオフロキサシン（ＭＩＣ９０　０．５μｇ／ｍｌ）、モキシフロキサシン（ＭＩＣ９０　０．５μｇ／ｍｌ）、スパルフロキサシン（ＭＩＣ９０　１μｇ／ｍｌ）、アモキシシリン（ＭＩＣ９０　１μｇ／ｍｌ）およびアモキシシリン／クラブラン酸塩（ＭＩＣ９０　０．５μｇ／ｍｌ）よりもさらに優れている。
【０１９３】
表１３はエム・カタラーリスのジェミフロキサシンに対する感受性を示す。エム・カタラーリスに対して、ジェミフロキサシンおよびグレパフロキサシン（ＭＩＣ９０≦０．０２μｇ／ｍｌ）は試験した内で最も活性な化合物である。ジェミフロキサシンの活性は、スパルフロキサシン、アモキシシリン／クラブラン酸（ＭＩＣ９００．５μｇ／ｍｌ）およびアモキシシリン（ＭＩＣ９０８μｇ／ｍｌ）よりも著しく優れている。
上顎洞からの単離されたさまざまな菌株の感受性はを表１４に示す。嫌気性菌株に対して、ジェミフロキサシン（ＭＩＣ９００．２５μｇ／ｍｌ）およびモキシフロキサシン（ＭＩＣ９００．２５μｇ／ｍｌ）は試験した内で最も活性な薬剤である。しかしながら、ジェミフロキサシンの活性は、オフロキサシン（ＭＩＣ９０２μｇ／ｍｌ）、トロバフロキサシン（ＭＩＣ９０４μｇ／ｍｌ）、グレパフロキサシン（ＭＩＣ９０８μｇ／ｍｌ）、およびスパルフロキサシン（ＭＩＣ９０１６μｇ／ｍｌ）よりも著しく優れていた。他のさまざまな菌株に対して、ジェミフロキサシンは、オフロキサシン、トロバフロキサシン、モキシフロキサシンおよびスパルフロキサシン（ＭＩＣ９００．５μｇ／ｍｌ）と同程度に活性である。
【０１９４】
ジェミフロキサシンは、急性または慢性上顎洞から単離された殆どの菌株に対して広範囲の抗菌活性を示す。さらに、ジェミフロキサシンは、多くの上顎洞分離株、たとえば、エス・アウレウス、ヘモフィルス種、エム・カタラーリスおよび嫌気性菌株に対して、殆どのβ−ラクタム、たとえば、アモキシシリンおよびアモキシシリン／クラブラン酸よりも良好で、一定な活性を有する。エス・ニューモニエの菌株に対するジェミフロキサシンの全体的なインビトロ活性は、シプロフロキサシン、オフロキサシン、レボフロキサシンおよびスパルフロキサシンよりも著しく優れている。ジェミフロキサシンのもう一つの魅力的な特性は、該化学物質がヘモフィルス種、エム・カタラーリス、いくつかの嫌気性菌株および他の試験したさまざまな菌株、たとえば、非発酵性グラム陰性桿菌、ナイセリア・メニンギティディスおよびベータ−溶血性ストレプトコッカスに対して顕著な活性を有することである。ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、グレパフロキサシンおよびトロバフロキサシンは、ヘモフィルス種およびモラクセラ・サイヌス分離株に対して試験した最も活性な化合物であった。この特定の活性は、エイチ・インフルエンゼのベータ−ラクタマーゼ産生菌株に対して、また、ペニシリンに対してアレルギーである患者において著しく重要である。ヒトにおいて好ましい薬物動力学と組み合わせて、ジェミフロキサシンは、通常の経口治療に対して耐性の微生物により引き起こされる急性または慢性静脈洞炎の治療に有用な経口化合物である。
【０１９５】
【表３８】
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【０１９６】
【表３９】
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【０１９７】
【表４０】
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【０１９８】
【表４１】
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【０１９９】
【表４２】
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【０２００】
本発明により、上顎洞病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染する危険性のある哺乳動物、好ましくはヒトに、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与することを含む上顎洞病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も提供される。
本発明の好ましい目的は、前記上顎洞病原菌が：ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、ヘモフィルス・パラインフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリス、スタフィロコッカス・アウレウス、ペプトストレプトコッカス種、バクテロイデス・ウレアリティカス、腸内細菌、非発酵性グラム陰性桿菌、ナイセリア・メニンギティディス、バクテロイデス種、ベータ−溶血性ストレプトコッカスおよびグラム陰性桿菌からなる群から選択される方法を提供する。他の上顎洞病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に記載するように、また当該分野において一般的な他の方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０２０１】
本発明は、一つには、さまざまなグラム陰性、非発酵性病原菌、特にシュードモナス・エルジノーサ、アシネトバクター種、ステノフォモナス・マルトフィリアに対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。
１７８グラム陰性非発酵性臨床分離株に対するフルオロキノロンジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）のインビトロ活性を他の選択された抗菌剤と比較した。これらの分析の目的は、ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、ジェンタマイシンおよびコトリモキサゾールのＭＩＣを測定することであり、これは、シュードモナス・エルジノーサ、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、アシネトバクター種のそれぞれの５０分離株およびブルクホルデリア・セパシアの２８菌株に対して、カチオン調節されたＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス中ブロスミクロ希釈に行った。得られたＭＩＣ５０／ＭＩＣ９０値を表１５に示す。
【０２０２】
ジェミフロキサシンは広範囲におよぶグラム陰性およびグラム陽性菌に対して非常に活性である。本発明の一の態様は、一つには、他のフルオロキノロン、ジェンタマイシンおよびコトリモキサゾールと比較した、臨床的に関連した非発酵性グラム陰性桿菌のジェミフロキサシンに対する感受性を試験する別の分析に基づく。
グラム陰性非発酵性菌の合計１７８の臨床分離株を調査した：シュードモナス・エルジノーサ（ｎ＝５０）、アシネトバクター種（ｎ＝５０）、ステノトロフォモナス・マルトフィリア（ｎ＝５０）およびブルコホルデリア・セパシア（ｎ＝２８）。ＮＣＣＬＳガイドラインにしたがってカチオン調節したＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス中ブロスミクロ希釈技術を用いて、ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、ジェンタマイシンおよびコトリモキサゾールのＭＩＣを測定した。ＭＩＣ終点を視覚的な最近の成長を防止する薬剤の最低濃度とみなした。
【０２０３】
表１５は、グラム陰性非発酵性菌に対するジェミフロキサシンおよび他の抗微生物剤のインビトロ抗菌活性を示す。表１６および１７は、それぞれジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンのＭＩＣ分布を示す。ピー・エルジノーサ、アシネトバクター種およびエス・マルトフィリアに対するジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、レボフロキサシンおよびトロバフロキサシンのＭＩＣ分布を、それぞれ図８および９に示す。
【０２０４】
ピー・エルジノーサに対して、ジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンは、トロバフロキサシンおよびレボフロキサシンよりも活性である。アシネトバクター分離株は、トロバフロキサシンおよびジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンに対して最も感受性であり、８０またはそれ以上の菌株が、１μｇ／ｍｌの試験したすべてのフルオロキノロンにより阻害される。ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンは、エス・マルトフィリアに対する試験した最も活性な化合物である。シプロフロキサシンは最も活性が低い薬剤であるが、５０％以上のエス・マルトフィリア菌株が≧２μｇ／ｍのＭＩＣを有していた。すべての試験したキノロンは、ビー・セパシアに対して不十分な活性を示す。
【０２０５】
【表４３】
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【表４４】
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【０２０６】
【表４５】
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【０２０７】
【表４６】
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【０２０８】
本発明により、グラム陰性非発酵性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染する危険性のある哺乳動物、好ましくはヒトに、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、グラム陰性非発酵性病原菌による細菌感染症に治療または予防法も提供される。
本発明の好ましい目的は、前記グラム陰性非発酵性病原菌が：シュードモナス・エルジノーサ、アシネトバクター種、ステノトロフォモナス・マルトフィリアおよびブルコホルデリア・セパシア菌からなる群から選択される方法を提供する。他のグラム陰性非発酵性病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に記載するように、また当該分野において一般的な他の方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０２０９】
本発明は、とりわけ、クラミジア・ニューモニエまたは気道細菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシンを含む組成物を使用する方法を提供する。
本発明は、一つには、さまざまなクラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。これらの分析の目的は、最近の臨床分離株を包含するシー・ニューモニエの２０の分離株に対するレボフロキサシン、トロバフロキサシン、エリスロマイシンおよびドキシサイクリンと比較したジェミフロキサシンのインビトロ活性を測定することである。
【０２１０】
ジェミフロキサシンは、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラクセラ・カタラーリス、マイコプラズマ・ニューモニエ、およびレジオネラ種を包含する気道病原菌に対して有効な活性を有する。ジェミフロキサシン、レボフロキサシン、モキシフロキサシン、トロバフロキサシン、エリスロマイシンおよびドキシサイクリンの活性を、プロトタイプ株ＴＷ１８３、米国および日本からの４の他の実験室株＋集団獲得性肺炎の成人からの１５の最近の米国臨床分離株を包含するクラミジア・ニューモニエの２０の分離株に対して比較した。試験をシクロへキシイミド処理したＨＥｐ−２細胞において行った。結果を表１８に示す。
【０２１１】
実験した化合物のうち、ジェミフロキサシンがシー・ニューモニエに対して最も活性なキノロンであるが、エリスロマイシンおよびドキシサイクリンよりも活性が低い。ジェミフロキサシンの有効で広範囲の活性は、これがシー・ニューモニエにより引き起こされるものを包含する気道感染症の治療において役割を果たすことを示す。
クラミジア・ニューモニエは、成人および小児における肺炎および気管支炎を包含する集団獲得性気道感染症（ＲＩＴ）の主な原因である。キノロンは、これらの感染症の原因となる広範囲におよぶ病原菌、たとえば、マイコプラズマ・ニューモニエ、ストレプトコッカス・ニューモニエ（ペニシリン耐性菌を包含する）およびシー・ニューモニエなどに対して活性であるので、集団獲得性ＲＴＩの有効な治療法として注目を集めてきた。
【０２１２】
試験したシー・ニューモニエ分離株は：ＴＷ−１８３（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ， Ｓｅａｔｔｌｅ， ＷＡ， ＵＳＡ）、ＣＭ−１（ＡＴＣＣ１３６０）、Ｊ２１（日本から、ＡＴＣＣ ＶＲ１４３５）、Ｗ６８０５、Ｔ２２１９および成人から得られる複数の医療機関にまたがった集団獲得性肺炎治療研究において登録された１５の最近の臨床分離株陰性非発酵性菌であった。
試験は、９６−ウェルマイクロタイタープレート中成長させたＨＥｐ−２細胞において行った。各ウェルに、１ｍｌあたり１０３−１０４インクルージョン形成単位（ＩＦＵ）になるように希釈された０．１ｍｌ試験菌株を接種し、１７００×ｇで１時間遠心分離し、３５℃で１時間インキュベートした。ウェルを次に吸引し、１ｍｌあたり１μｇのシクロへキシイミドおよび試験薬剤の逐次二倍希釈物を含む０．２ｍｌの培地で覆った。３５℃で７２時間インキュベーションした後、培養物を固定し、リポポリサッカライド属抗原に対するフルオレセイン接合抗体を有するインクル−ジョンについて染色した（Ｐａｔｈｆｉｎｄｅｒ， Ｋａｌｌｅｓｔａｄ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ， Ｃｈａｓｋａ， ＭＮ， ＵＳＡ）。
本発明において、「ＭＩＣ」とは、インクルージョンが見られない最低抗菌剤濃度を意味する。最小殺菌剤濃度（「ＭＢＣ」）は、抗菌剤のない細胞における形態後にインクルージョンがない最低抗菌剤濃度として定義される。
シー・ニューモニエのＭＩＣおよびＭＢＣを表１に示す。
【０２１３】
実験した化合物のうち、ジェミフロキサシンが最も活性なキノロンであった。シー・ニューモニエに対してジェミフロキサシンについて得られたＭＩＣは株間で一致している。シー・ニューモニエに対するジェミフロキサシンの活性についてのデータは、一つには試験に利用可能な臨床分離株が比較的少ないために、限定されている。Ｒｉｄｇｗａｙらはシー・ニューモニエの５分離株を試験した際に、０．０６から０．１２μｇ／ｍｌの範囲のＭＩＣを得た。（Ｒｉｄｇｗａｙ ＧＬ， Ｓａｌｍａｎ Ｎ，ら、Ｉｎ： Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ３８ｔｈ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ， ＤＣ， ＵＳＡ： Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， １９９８： ｐ２５６， ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−９７）。これは、試験の標準誤差内であるか、または使用した方法に従属的である。
【０２１４】
この研究において試験した他のキノロン、レボフロキサシン、モキシフロキサシンおよびトロバフロキサシンの活性は、異なる分離株の選択を用いてすでに報告されているものと同じである（Ｂｌｏｃｋ Ｓ， Ｈｅｄｒｉｃｋ Ｊ，ら、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ａｎｄ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｉｎ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ａｃｑｕｉｒｅｄ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ： ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ ａｎｄ ｅｒｙｔｈｒｏｍａｙｃｉｎ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ． Ｐｅｄｉａｔｒ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｊ １９９５； １４： ４７１−４７７； Ｃｏｒｍｉｃａｎ ＭＧ， Ｊｏｎｅｓ ＴＮ．／ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｏｖｅｌ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９７； ４１： ２０−２１１； Ｇｒａｙｓｔｏｎ ＪＴ， Ｃａｍｐｂｅｌｌ ＬＡ，ら、Ａ ｎｅｗ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｔｒａｃｔ ｐａｔｈｏｇｅｎ： Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｓｔｒａｉｎ ＴＷＡＲ． Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ １９９０； １６１： ６１８−６２５； Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ ＭＲ． Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ−ａｃｑｕｉｒｅｄ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｄｕｅ ｔｏ ａｔｙｐｉｃａｌ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ ｉｎ ａｄｕｌｔｓ： ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ． Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｃｌｉｎ Ｐｒａｃｔ １９９９； ８： ２３２−２４０； Ｍｏｏｒｅ Ｔ， Ｎｉｃｏｎｏｖｉｃｈ Ｎ，ら、Ｉｎ： Ａｂｓｔｒａｃｔｓｗ ｏｆ ｔｈｅ ３８ｔｈ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ． Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ， ＵＳＡ： Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｔｙ， １９９８： ｐ２５７， ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−９８； Ｏｈ Ｊ−Ｉ， Ｐａｅｋ Ｋ−Ｓら、Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ＬＢ２０３０４， ａ ｎｅｗ ｆｌｕｏｒｏｎａｐｈｔｈｙｒｉｄｏｎｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０： １５６４−１５６８； Ｒｏｂｌｉｎ ＰＭ， Ｄｕｍｏｒｎａｙ Ｗ，ら、． Ｕｓｅ ｏｆ ＨＥｐ−２ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐａｓｓａｇｅ ｏｆ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ １９９２； ３０： １９６８−１９７１）。インビトロのジェミフロキサシンの広範囲の活性は、シー・ニューモニエ感染症を包含するＲＴＩの治療においてこれらが役割を果たすことを意味する。
【０２１５】
本発明の一の態様は、クラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌の代謝を調節する方法を提供する。当業者らは、本発明の方法を実施するために、クラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌またはこれらの生物で感染しているかまたは感染しやすい患者を容易に選択することができる。あるいは、本発明の方法において有用な細菌は本明細書において記載されているものである。
【０２１６】
【表４７】
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【０２１７】
本発明のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物または組成物は、関連する細菌、好ましくはクラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌に対して全身性効果を達成するために体内に留置する装置を挿入する直前に注射により投与することができる。治療は、装置の体内時間中手術後も継続することができる。加えて、組成物は、クラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌により引き起こされるかまたは関連した細菌による傷の感染症を予防するための任意の外科技術をペリオペラティブカバーを広げるために用いることもできる。
【０２１８】
上記した療法に加えて、本発明の方法において使用されるジェミフロキサシン化合物または組成物は、一般的にマトリックスタンパクに対する、創傷組織において曝露された細菌、特にクラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌の接着を防止するための傷治療剤として、抗生物質による歯の清浄の代替物として、またはこれと組み合わせて歯科治療において予防的用途に用いることができる。
別法として、本発明のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物または組成物は、体内に留置する装置を挿入する直前にすすぐために用いることができる。活性剤は、傷または体内留置装置をすすぐために１μｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在するのが好ましい。
【０２１９】
クラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染の危険性がある哺乳動物、好ましくはヒトに、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の阻止絵物を投与する工程を含む、クラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌による感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
本発明の好ましい目的は、前記したクラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌が：クラミジア・ニューモニエ、ストレプトコッカス・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラセラ・カタラーリス、マイコプラズマ・ニューモニエおよびレジオネラ種からなる群から選択される方法を提供する。他のクラミジア・ニューモニエまたは気道病原菌も該方法に含まれる。当業者は、本発明に記載したようにして、また当該分野で一般的な他の方法、たとえば、ＭＩＣ試験を用いて、これらの生物を同定することができる。
【０２２０】
本発明は、とりわけ、気道細菌に対してキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を用いる方法を提供する。
本発明は、一つには、さまざまな気道病原体に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。これらの分析の目的は、ストレプトコッカス・ニューモニエおよびヘモフィルス・インフルエンゼのシプロフロキサシン耐性（ｃｉｐｒ）菌株の効果を測定することである。
【０２２１】
ジェミフロキサシンを、アモキシシリン／クラブラン酸塩、シプロフロキサシン、セフロキシム、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、アジスロマイシン、トロバフロキサシンまたはトスフロキサシンと比較した。広範囲の抗菌活性を有するフルオロキノロン剤であるジェミフロキサシンは、ストレプトコッカス・ニューモニエおよびヘモフィルス・インフルエンゼのシプロフロキサシン感受性（ｃｉｐｓ）菌株に対して優れたインビボ効力を有する。気管支内点滴により感染させて肺炎を発症させ、１時間または２５時間に、アモキシシリン／クラブラン酸塩、シプロフロキサシン、セフロキシム、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、アジスロマイシン、トロバフロキサシンまたはトスフロキサシンで経口治療を開始した。ラット血清または組織において、治療投薬後のヒトにおいて測定される濃度に近くなるように用量を選択した。治療を一日に月１回または２回、３日間続け、感染後９６時間に、肺を切除して、回収し、生存細菌数を数えた。
【０２２２】
エス・ニューモニエのｃｉｐｒ菌株での感染後、ジェミフロキサシンは著しい応答を生じ、未処置のものと比較して、著しく細菌数が減少した（ｐ≦０．０１）。他のフルオロキノロン抗菌剤でジェミフロキサシンよりも細菌数の減少に優れたものはなく、シプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびレボフロキサシンは著しく効力が低い（ｐ≦０．０５）。ｃｉｐｒエッチ・インフルエンゼにより引き起こされた感染に対して、ジェミフロキサシンは、未処置と比較して細菌数を著しく減少させ（ｐ≦０．０１）、アモキシシリン／クラブラン酸と同程度に有効であった。対照的に、シプロフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシンは有効でなく、細菌数は未処置の動物におけるのとあまり変わらなかった（ｐ≧０．０５）。このデータは、ｃｉｐｒ エス・ニューモニエおよびエッチ・インフルエンゼにより引き起こされる気道感染症の治療において、ジェミフロキサシンの使用は非常に有効であることを示す。
【０２２３】
肺炎、気管支炎、静脈洞炎および中耳炎を包含する気道感染症（ＲＴＩ）は、世界的な罹患および死の一般的な原因である。ストレプトコッカス・ニューモニエは上部および下部ＲＴＩの重要な病原菌である。β−ラクタムおよびマクロライド抗菌剤はＲＴＩの優れた治療法であるが、細菌新規キノロンが臨床および／または研究的用途に利用可能になってきた。これらの薬剤は、ペニシリン耐性エス・ニューモニエに対するものを包含する広範囲の抗菌活性を有する。しかしながら、これらの使用は、エス・ニューモニエの菌株において見いだされるものに対する耐性の発生率が増大することにより制限される。ジェミフロキサシンは、現在集団獲得性感染症の治療のために開発中のフルオロキノロン抗菌剤であり、エス・ニューモニエおよびエッチ・インフルエンゼのシプロフロキサシン感受性菌株に対して優れたインビボ効率を有する。本明細書に記載した研究から、ラットにおいてシプロフロキサシン耐性エス・ニューモニエおよびエッチ・インフルエンゼにより引き起こされる実験的ＲＴＩに対するシプロフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、トロバフロキサシン、アモキシシリン／クラブラン酸、セフロキシムおよびアジスロマイシンと比較したジェミフロキサシンメシレートの効率が証明される。
【０２２４】
血寒天プレートから成長物を収穫し、これをリン酸塩緩衝塩溶液（ＰＢＳ）中に懸濁させることにより、エス・ニューモニエの細菌接種物を調製した。エッチ・インフルエンゼを５％フィルデス（Ｆｉｌｄｅｓ）抽出物を添加したＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス中で一夜培養物として成長させた。各生物の１０倍希釈物を冷却した（４１℃）の溶融栄養寒天中に調製した。動物を麻酔し、気管支内挿管法により、エス・ニューモニエ（６．０−６．７ｌｏｇ１０ＣＦＵ）について５０μｌ、エッチ・インフルエンゼ（５．２ｌｏｇ１０ＣＦＵ）について１００μｌの接種物の気管支内点滴により感染させた（Ｓｍｉｔｈ，ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３８： ６０８−６１０ （１９９４）参照）。エス・ニューモニエ感染症に関して、経口療法を感染後１時間で開始し、５時間にさらに投薬し、３日間一日に月１回または２回続けた。エッチ・インフルエンゼ感染症の治療は、感染後２４時間に開始し、３日間一日につき１回または２回続けた。ラットの別の群に蒸留水を与え、感染対照動物とした。治療停止のおよそ１７時間後に、動物を塗擦し、肺を摘出し、１ｍｌのＰＢＳ中でホモジナイズして、回収および生存筋の計数を可能にした。
【０２２５】
感染生物に対するこれらの薬剤のＭＩＣを表１９に示す。投与される用量は、ラットにおいて、治療投薬後ヒトにおいて達成される血清または組織ＡＵＳに近似させるように選択した（表２０）（Ｗｉｓｅ，ら、Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， １８ （Ｓｕｐｐｌ Ｄ）： ７１−８１ （１９８６）； Ｈａｒｄｉｎｇ，ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ２５： ７８−８２ （１９８４）； Ｆｏｕｌｄｓ，ら、Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ２５ （Ｓｕｐｐｌ． Ａ）： ７３−８２ （１９９０）； Ｔｅｎｇ，ら、Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３９ （Ｓｕｐｐｌ． Ｂ）： ８７−９２ （１９９７）； Ｃｈｉｅｎ，ら、Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ２２５６−２２６０ （１９９７）； Ｍｉｎａｍｉ，ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： ４５３−４５ （１９９８）； Ｅｆｔｈｙｍｉｐｏｕｌｏｕｓ， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０ （Ｓｕｐｐｌ． Ａ）： ３５−４３ （１９９７））。同じＡＵＣを維持しながら曝露の期間を拡大するために、ジェミフロキサシンおよび選択された薬剤を一日につき２回特定の研究における用量の半量で投与した。
【０２２６】
エス・ニューモニエ ６２２２８６（図１０）で感染させた後、ジェミフロキサシンは反応を示し、未処理動物に比べて著しく細菌数を減少させる（２．４±１．１および６．４±１．３ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≦０．０１）。アモキシシリン／クラブラン酸塩およびセフロキシムは有効な効果を有するが（≦１．６９ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≦０．０１）、アジスロマイシンは生存応答を生じ、平均細菌数は未処理動物におけるのと同様であった（６．４±２．０ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≧０．０１）。試験した比較剤であるキノロンのうち、トスフロキサシンは、ジェミフロキサシン（３．９±２．３ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≧０．０５）と類似した良好な効果を示す。ジェミフロキサシンはアジスロマイシン、およびフルオロキノロンシプロフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシンおよびレボフロキサシンよりも細菌数の減少において非常に優れている。
【０２２７】
エス・ニューモニエ ３０５３１３で感染させた後、未処理動物における細菌数は７．１±１．４ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺（図１１）である。ジェミフロキサシンは、アモキシシリン／クラブラン酸塩、セフロキシムおよびアジスロマイシン（それぞれ２．１±２．０１．４、≦１．６９、≦１．６９、≦１．６９ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≧０．０５）についてみられるのと同様の応答を示す。シプロフロキサシン、トスフロキサシンおよびレボフロキサシンは、未処理対照（２．６±１．０および４．３±１．０３ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≦０．０１）におけるのと比較すると著しく異なる；グレパフロキサシンについて細菌数の減少は、ジェミフロキサシンについて得られるのと類似し（ｐ＞０．０５）、トロバフロキサシンはあまり有効でない（ｐ≦０．０１）。興味深いのは、この研究においてグレパフロキサシンに関して得られる結果は、この菌株に対するインビトロ活性から予想されるよりも良好である。
【０２２８】
同じＡＵＣを維持しながらジェミフロキサシンの曝露期間を拡大する効果を、一日当たり２回、それぞれ１５０、１００、６２．５および２０ｍｇ／ｋｇの用量を用いて、グレパフロキサシン、レボフロキサシンおよびトロバフロキサシンとの直接比較において調べた（図１２）。エス・ニューモニエ３０５３１３で感染した動物から単離された細菌数は、７．９±０．４であり、これらは治療された動物から得られるよりも著しく高い。しかしながら、ジェミフロキサシンは、最大の応答を生じ、グレパフロキサシン、レボフロキサシンおよびトロバフロキサシン」よりも著しく有効である（それぞれ、３．３±１．３、６．９±０．５、５．７±１．３および５．３±１．２ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≦０．０１）。
【０２２９】
エッチ・インフルエンゼ Ｈ１４３（シプロフロキサシン耐性）での感染後、未処理動物における細菌数は５．１±１．２ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺であり、シプロフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシンおよびトロバフロキサシン処理された動物から得られるものと類似している（それぞれ、４．３±１．２、３．７±１．４、３．９±１．８および３．８±１．４ｌｏｇ１０ＣＦＵ／肺；ｐ≧０．０５）（図１３）。対照的に、ジェミフロキサシンは、アモキシシリン／クラブラン酸塩、アジスロマイシン、セフロキシムおよびレボフロキサシンと有利に比較される応答を生じる。
【０２３０】
ジェミフロキサシンは、エス・ニューモニエおよびエッチ・インフルエンゼのシプロフロキサシン耐性菌株に対して防御を提供し、細菌数は未処理動物におけるのと比較して著しく減少する。全体として、ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシン耐性Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａ菌株に対して、比較剤であるキノロンと比べて優れた効果を示す。エッチ・インフルエンゼのシプロフロキサシン耐性菌株に対して、ジェミフロキサシンは、アモキシシリン／クラブラン酸塩、アジスロマイシン、セフロキシムおよびレボフロキサシと同等の効力を有し、シプロフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシンおよびトスフロキサシンは有効でない。本明細書において記載するデータは、エス・ニューモニエおよびエッチ・インフルエンゼのシプロフロキサシン耐性菌株により引き起こされるＲＴＩの治療においてジェミフロキサシンの使用は非常に有用であることを示す。
【０２３１】
【表４８】
2004507440.tif 000050
【０２３２】
【表４９】
2004507440.tif 000051
【０２３３】
気道病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染の危険性のある哺乳動物、好ましくはヒトに、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、気道病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
本発明の好ましい目的は、前記気道病原菌が：ストレプトコッカス・ニューモニエおよびヘモフィルス・インフルエンゼからなる群から選択される方法を提供する。他の気道病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に記載したようにして、また当該分野において一般的な他の方法、たとえば、ＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０２３４】
本発明は、とりわけ、細菌性髄膜炎菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
本発明は、一つには、さまざまな細菌性髄膜炎菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。これらの分析の目的は、エス・ニューモニエ １６２９により引き起こされる未成熟ラット髄膜炎に対して、バンコマイシン、セフォトキシム、セフロキシム、シプロフロキサシン、レボフロキサシンおよびトロバフロキサシンと比較したジェミフロキサシンの効力を測定することである。
【０２３５】
ジェミフロキサシン（１００ｍｇ／ｋｇ）はエス・ニューモニエ髄膜炎に対して非常に有効であり、未処理（ｐ≦０．０１；７日まで生存した動物はいない）と比較して８３％の生存が得られた。対応する用量でジェミフロキサシンよりもエス・ニューモニエ髄膜炎に対して著しく（ｐ≧０．０５）優れた防御を提供した比較薬剤はなかった。このデータは、細菌性髄膜炎の治療におけるジェミフロキサシンの利点を示す。
【０２３６】
小児における細菌性髄膜炎は実質的な罹患および死をもたらす（Ｂａｒａｆｆ，ら、Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ， １２： ３８９−３９４ （１９９３））。神経学的効果、たとえば麻痺、発作または聴力損失は、この重大な感染症の結果から生じ得る。小児における細菌性髄膜炎に関連する重大な病原菌の一つがストレプトコッカス・ニューモニエである。（Ｋｏｒｎｅｌｉｓｓｅ，ら、Ｃｌｉｎ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， ２１： １３９０−１３９７ （１９９５））。ジェミフロキサシンは、エス・ニューモニエの菌株に対して優れたインビトロ効力を有する広域のフルオロキノロンである。本明細書に記載した研究は、エス・ニューモニエ １６２９により引き起こされる未成熟ラット髄膜炎に対して、バンコマイシン、セフォタキシム、セフロキシム、シプロフロキサシン、レボフロキサシンおよびトロバフロキサシンとの比較におけるジェミフロキサシンメシレートの効力を示す。
【０２３７】
ジェミフロキサシンのインビトロ活性を、ストレプトコッカス・ニューモニエにより引き起こされる未成熟ラットにおける実験的髄膜炎モデルにおいて評価した。感染後１５時間に、髄膜炎を確認するためにくも膜下槽の穿刺によりラットから大脳脊髄を得た。治療（５０および／または１００ｍｇ／ｋｇ腹膜組織内）を感染後１５時間に、ジェミフロキサシン、バンコマイシン、セフォトキシム、セフロキシム、レボフロキサシン、トロバフロキサシンまたはセフトリアキソンを用いて開始した。治療をさらに３日間、毎日（ｏ．ｄ．）または一日につき２回（ｂｉｄ）続け、生存を感染後７日までモニターした。
【０２３８】
雌スプラグ−ドーリー（ＣＤ）ラット（Ｔａｃｏｎｉｃ Ｆａｒｍｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＮＹ， ＵＳＡ）をケージごとに１匹入れ、実験室用食餌と水を随意に与えた。ラットを自然に出産させ、未成熟ラットを５日齢でエス・ニューモニエで感染させた。研究期間中、同腹子を母親と一緒にした。エス・ニューモニエ１６２９をチョコレートＩＩ寒天プレート上１８時間、５％ＣＯ２の存在下、３７℃で成長させ、成長物を収穫して、ストック懸濁液を調製した。吸光度（５６０ｎｍ）分析によりストックの濃度を測定し、感染接種物を、５％ヒツジ血液を含むトリプチカーゼ大豆寒天（ＴＳＡ）上の生存数計測により確認した（１００μｌスプレッド）。
【０２３９】
すでに記載した方法に基づいて髄膜炎を確立させた。（Ｄｅｌａｐｌａｎｅ，ら、Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， １１：６９−７３（１９８３））。簡単に言うと、エス・ニューモニエ １６２９（２０−８０ＣＦＵ／ラット）を５日齢ラットに腹膜組織内注射した。感染後１５時間に、サンプルを各ラットの脳脊髄液（ＣＳＦ）から採取して、髄膜炎状態を確認した。１５時間サンプルの直後に治療を開始し、３日間、毎日または一日あたり２回続けた。ラットを実験期間中（７日）生存についてモニターした。感染後４および６日に、ＣＳＦおよび血液サンプルを生存する動物から採取した。くも膜下槽の穿刺によりＣＳＦサンプル（１０μｌ）を得、生存細菌数を数えるために血液サンプル（１０μｌ）を尾静脈から採取した。ＣＳＦサンプルを目視で検査し、血液を含むことが判明した任意のＣＳＦサンプルを実験から除外した。サンプルを、５％ヒツジ血液を含むＴＳＡ上にプレートし、一夜５％ＣＯ２と共に３７℃でインキュベートした。生存データをＦｉｓｈｅｒ’ｓ ｅｘａｃｔ ｔｅｓｔを用いて比較した。
【０２４０】
エス・ニューモニエ １６２９に対するＭＩＣを表２１に示す。血液中の薬剤の濃度およびＣＳＦを測定して、未成熟ラットにおけるＡＵＣを測定した（表２２）。
感染後７日に、ＰＢＳ処置群において生存動物はいなかった（０％）（図１４）。すべての治療は、未処置動物と比較して生存率を著しく（ｐ≦０．０３）増大させた。ジェミフロキサシンは、１００ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇで良好な防御を提供し、それぞれ８３％および８０％の生存率が達成された（ｐ≦０．０１）。シプロフロキサシン（１００ｍｇ／ｋｇ）およびレボフロキサシン（１００ｍｇ／ｋｇ）も非常に有効であり、生存率はそれぞれ１００％および８８％であった（ｐ≦０．０１）。従来１００ｍｇ／ｋｇで毒性が見られたので、５０ｍｇ／ｋｇで試験したトロバフロキサシンは、５６％の若干低い生存率（ｐ≦０．０３）を示したが、これは対応する用量のジェミフロキサシンで達成されるもの、または１００ｍｇ／ｋｇ（ｐ≧０．０５）で試験された治療薬とあまり変わらない。バンコマイシンは、標準的試薬として含まれ、生存率８３％であった（ｐ≦０．０１）。
【０２４１】
ジェミフロキサシンは、ＰＢＳ処置対照と比較して未成熟ラットにおいて生存率を著しく増大させ（それぞれ８３％および０％［図１５］；ｐ≦０．０１）、有利には（ｐ≧０．０５）、セフロキシムおよびセフォタキシム生存率（１００％；ｐ≦０．０１）に匹敵する。バンコマイシンは、抗微生物剤対照として含まれ、８０％生存（ｐ≦０．０１）を示す。感染後４日および７日に生存するラットから採取した血液中およびＣＳＦサンプル中の細菌数は検出レベルに満たなかった（≦２ｌｏｇ１０ＣＦＵｍｌ）。
【０２４２】
ジェミフロキサシンは、未成熟ラットにおいて、エス・ニューモニエのペニシリン耐性菌株により引き起こされる実験的髄膜炎感染症に対して防御を提供する。ジェミフロキサシンを投与したラットの生存率は、試験した拮抗するキノロンについて得られるものと有利に匹敵する。ジェミフロキサシンは、エス・ニューモニエ髄膜炎に対して、セファロスポリン抗菌剤セフロキシムおよびセフォタキシムと同程度に有効である。対応する用量で、比較薬剤ではジェミフロキサシンよりもラットにおけるエス・ニューモニエ髄膜炎に対して著しく優れた防御が得られなかった。これらの研究において、エス・ニューモニエについて示される効力は、細菌性髄膜炎の治療においてジェミフロキサシンの使用の利点を示す。
【０２４３】
本発明は、細菌性髄膜炎病原菌の代謝を調節する方法を提供する。当業者らは、本発明の方法を実施するために、細菌性髄膜炎病原菌またはこれらの生物で感染したかまたは感染しやすい患者を容易に選択することができる。あるいは、本発明の方法において有用な細菌は、本明細書において記載されているものであってもよい。
【０２４４】
【表５０】
2004507440.tif 000052
【０２４５】
【表５１】
2004507440.tif 000053
【０２４６】
細菌性髄膜炎病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染の危険性がある哺乳動物、好ましくはヒトに、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含む、細菌性髄膜炎病原菌による感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
本発明の好ましい目的は、前記細菌性髄膜炎病原菌がストレプトコッカス・ニューモニエである方法を提供する。他の細菌性髄膜炎病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に示すように、また当該分野において一般的な他の方法、たとえばＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
【０２４７】
本発明は、とりわけ、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、グラム陰性菌に対して使用する方法を提供する。
本発明は、一つには、さまざまなグラム陰性病原菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。これらの分析の目的は、腸内細菌および非腸内細菌からなる８９５の細菌の臨床分離株に対するフルオロキノロンジェミフロキサシンのＭＩＣを測定することである。
【０２４８】
ジェミフロキサシンを、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、ナリジクス酸、ジェンタマイシン、セフロキシム、アモキシシリン／クラブラン酸塩、ペニシリン、アンピシリン、クラリスロマイシン、アジスロマイシンおよびトリメトプリム／スルファメトキサゾールと比較した。アメリカ合衆国内の３つの地域から分離株を病院実験室において集めた。ジェミフロキサシンならびに６のキノロン、４のβ−ラクタム、２のマクロライド、１のアミノグリコシドおよびリメトプリム／スルファメトキサゾールからなる比較化合物のＭＩＣを、ＮＣＣＬＳ推薦の手順を用いてブロスミクロ希釈により測定した。ジェンタマイシンを除いて、キノロンは一貫して他の試験した化合物よりも活性であった。ジェミフロキサシンの抗菌活性はレボフロキサシンおよびシプロフロキサシンと等しく、一般に、オフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシンおよびナリジクス酸よりも良好であった。ジェンタマイシンについて得られたＭＩＣ９０（μｇ／ｍｌ）は以下の通りであった：エシェリキア・コリ、０．０１６；クレブシラ・ニューモニエ、０．２５；エンテロバクター・アエロゲネス、０．２５；エンテロバクター・クロアカエ、１；シュードモナス・アエルギノサ、８；モルガネラ・モルガニイ、０．１２；プロテウス種、４；ステノトロフォモナス・マルトフィリア、４；クレブシラ・オキシトカ、０．２５；シトロバクター・フロインジイ、２；アシネトバクター種、３２；セラチア種、１。これらの結果から、ジェミフロキサシンはグラム陰性生物により引き起こされる感染症の治療に現在利用できるキノロンに勝るとも劣らない抗菌活性を有することがわかる。
【０２４９】
従来の研究から、ジェミフロキサシンはこれらの大部分の病原体に対して抗菌活性を有することが示された（Ｏｈ，ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １５６４−１５６８ （１９９６）： Ｃｏｒｍｉｃａｎ，ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． ４１：２０４−２１１ （１９９７））。これらの知見を確認するために、ジェミフロキサシンの抗菌活性を、腸内細菌および非腸内細菌からなる８９５の細菌の臨床細菌分離株に対して測定した。以下の１４の比較化合物の抗菌活性も測定した：トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、ナリジクス酸、ジェンタマイシン、セフロキシム、アモキシシリン／クラブラン酸塩、ペニシリン、アンピシリン、クラリスロマイシン、アジスロマイシンおよびリメトプリム／スルファメトキサゾール。
【０２５０】
８９５の細菌のグラム陰性臨床分離株を米国の地理的に分散した地域に位置する３つの病院実験室から入手した。収集プロセスの一部として、分離株を純度についてチェックし、−７０℃で１０％グリセロール中で保存した。試験前に、各分離株を凍結ストックから連続２日間５％ヒツジ血液を含有するトリプチカーゼ大豆寒天上で継代培養した。ＮＣＣＬＳ推奨の品質コントロール生物をＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ａｎｔｉ−ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ， Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ， ＰＡ， ＵＳＡから入手した。。
【０２５１】
マイクロタイター感受性プレートをＳｅｎｓｉｔｉｔｒｅ（ＡｃｃｕＭｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｔｄ， Ｗｅｓｔｌａｋｅ， ＯＨ， ＵＳＡ； ロット番号ＣＭＰ５ＡＳＭＫ−８３４２、−８４２３、−８３３１およびＣＭＰ４ＢＳＭＫ−８３３４Ａ、−８４５１、−８３５１）から入手した。プレートは連続二倍希釈物中に以下の化合物を含んでいた（濃度範囲、μｇ／ｍｌ）：ジェミフロキサシン、０．００１−２５６；トロバフロキサシン、０．０１６−１６；グレパフロキサシン、０．０１６−１６；レボフロキサシン、０．０１６−１６；シプロフロキサシン、０．０１６−１６；オフロキサシン、０．０６−６４；ナリジクス酸、０．０６−６４；ジェンタマイシン、０．０６−６４；セフロキシム、０．０６−６４；アモキシシリン／クラブラン酸塩、０．０３／０．０１６−３２／１６；ペニシリン、０．０１６−１６；アンピシリン、０．０６−６４；クラリスロマイシン、０．０１６−１６；アジスロマイシン、０．０６−６４；およびトリメトプリム／スルファメトキサゾール、０．０６／１．４−６４／１２１６。
【０２５２】
製造業者の推薦にしたがって、各プレートに１００μｌの単一試験分離株を接種し、その結果、最終接種密度が５×１０５ＣＦＵ／ｍｌになった。（ＡｃｃｕＭｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｔｄ．， Ｗｅｓｔｌａｋｅ， ＯＨ，ＵＳＡ； ロット番号ＣＭＰ％ＡＳＭＫ−８３４２、−８４２３、−８３３１およびＣＭＰ４ＢＳＭＫ−８３３４Ａ、−８４５１、−８３５１）。コロニー計測をランダムに行い、適当な接種物密度が確実に得られるようにした。Ｍｉｃｒｏｌａｂ ＡＴ Ｐｌｕｓ ２（Ｈａｍｉｌｔｏｎ Ｃｏ．， Ｒｅｎｏ， ＮＶ， ＵＳＡ）を用いて、接種物をマイクロタイタープレートに添加した。接種物の１０μｌアリコートを５％ヒツジ血液を含有するトリプチカーゼ大豆寒天上にプレートして、最終試験接種物の純度を測定した。
プレートをマイクロタイター蓋で覆い、空気中、３５℃で２０−２４時間インキュベートした。試験分離株の視覚的増殖を阻害する最低濃度としてＭＩＣを測定した。トリメトプリム／スルファメトキサゾールの場合、正の増殖対照と比較して８０−９０％の増殖をもたらす濃度としてＭＩＣを測定した。個々のＭＩＣデータを要約し、以下のパラメーター：ＭＩＣｒａｎｇｅ、ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０を用いて報告した。
【０２５３】
以下のアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）品質管理菌株を試験した：スタフィロコッカス・アウレウス２９２１３、エシェリキア・コリ２５９２２、シュードモナス・アエルギノサ ２７８５３、イー・コリ３５２１８およびエス・アウレウス ２５９２３。これらのＮＣＣＬＷ推奨の品質管理生物をＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ａｎｔｉ−ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ， Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ， ＰＡ， ＵＳＡから入手した。品質コントロール生物は試験の各日に封入した。その日の結果は、品質管理値がＮＣＣＬＳにより確立された許容できる範囲内にある場合にのみ許容した。（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ １９９９． Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ１００−Ｓ９， ｎｉｎｔｈ ｅｄ．， Ｗａｙｎｅ， ＰＡ， ＵＳＡ）。品質管理範囲（ＮＣＣＬＳにより１９９９年１月に仮承認）をジェミフロキサシンについて使用した。
【０２５４】
ブロスマイクロ希釈の結果をまとめたものを表２３に示す。キノロンはジェンタマイシンを除く試験されたすべての他の化合物よりも一貫して活性である。ジェミフロキサシンの抗菌活性は、レボフロキサシンおよびシプロフロキサシンと等しく、一般に、オフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシンおよびナリジクス酸よりも良好である。
ジェミフロキサシンはグラム陰性病原菌により引き起こされる感染症の治療に現在利用可能なキノロンに勝るとも劣らないインビトロ抗菌活性を有する。
【０２５５】
【表５２】
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【０２５６】
【表５３】
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【０２５７】
【表５４】
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【０２５８】
【表５５】
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【０２５９】
【表５６】
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【０２６０】
【表５７】
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【０２６１】
【表５８】
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【０２６２】
【表５９】
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【０２６３】
本発明は、グラム陰性病原菌の代謝を調節する方法を提供する。当業者らは、本発明の方法を実施するために、グラム陰性病原菌あるいはこれらの生物に感染しているかまたは感染しやすい患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法において有用な細菌は本明細書において記載されているものであってもよい。
グラム陰性病原菌での感染の疑いがあるかまたは感染する危険性のある哺乳動物、好ましくはヒトに、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む抗菌的に有効量の組成物を投与する工程を含むグラム陰性病原菌による細菌感染症を治療または予防する方法も本発明により提供される。
【０２６４】
本発明の好ましい目的は、前記グラム陰性病原菌が：エシェリキア・コリ、クレブシラ・ニューモニエ、エンテロバクター・アエロゲネス、エンテロバクター・クロアカエ、シュードモナス・アエルギノサ、モルガネラ・モルガニイ、プロテウス種、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、クレブシラ・オキシトカ、シトロバクター・フロインディイ、アシネトバクター種およびセラチア種からなる群から選択される方法を提供する。他のグラム陰性病原菌も該方法に含まれる。当業者らは、本発明に示すように、また当該分野において一般的な他の方法、たとえば、ＭＩＣ試験を用いてこれらの生物を同定することができる。
本発明は、とりわけ、グラム陽性またはグラム陰性好気性菌に対するキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物の使用法を提供する。
【０２６５】
本発明は、一つには、さまざまなグラム陽性またはグラム陰性好気性菌に対するジェミフロキサシンの相対的活性を評価する分析に基づく。これらの分析の目的は、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・サプロフィチカス、ストレプトコッカス・ニューモニエ、エンテロコッカス・フェカリス、エシェリキア・コリ、シュードモナス・アエルギノサ、クレブシラ・ニューモニエ、ヘモフィルス・インフルエンゼ、モラセラ・カタラーリスおよびプロテウス・ブルガリスを含む１０の分離株に対してシプロフロキサシンと比較したジェミフロキサシンの抗生物質後効果（ＰＡＥ）を測定することである。分離株を２および４×ＭＩＣの存在下でインキュベートした。１時間曝露後、抗菌剤を限外ろ過により除去し、生存数の計測を６時間行った。ＰＡＥはＴ−Ｃと定義され、ここに、Ｔは抗菌剤に曝露された培養物の生存数が１ｌｏｇ１０で増加する時間でありＣは成長対照の生存数が１ｌｏｇ１０で増加する時間である。
【０２６６】
両化合物について２および４×ＭＩＣで測定可能なＰＡＥが観察された。ジェミフロキサシンのＰＡＥはシプロフロキサシンのＰＡＥに匹敵し、両化合物について、２×ＭＩＣに曝露した結果、４×ＭＩＣに曝露したものよりもＰＡＥが短くなる。ピー・アエルギノサ、ピー・ブルガリスおよびエッチ・インフルエンゼに対する４×ＭＩＣでのジェミフロキサシンのＭＩＣは＞６時間であり、試験した他の分離株に対して０．１〜２．５時間の範囲である。これらの結果は、ジェミフロキサシンが広域の生物に対して著しいＰＡＥを有し、これはジェミフロキサシンの薬物動力学的特性と合わせて、臨床的使用において、この化合物について投薬スケジュールがあまり頻繁でないことを示す。
【０２６７】
抗生物質投与後効果（ＰＡＥ）は、細菌培養物を抗菌剤に短期間曝露した後の細菌の成長が持続して抑制されることとして定義される（Ｃｒａｉｇら、Ｉｎ： Ａｎｔｉｃｉｏｔｉｃｓ ｉｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ４ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｔｈｅ Ｗｉｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｃｏ．， ２９６−３２９ （１９８６））。ＰＡＥの測定は、抗菌剤の適当な投薬計画の設計において有用である。ＰＡＥが長い抗菌剤は、ＰＡＥが短いものよりも投薬計画が頻繁でなくてもよい。この研究において、広域のグラム陽性またはグラム陰性好気性生物を代表する１０の分離株に対してジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンについてＰＡＥを測定した。
ジェミフロキサシン、バッチ番号０３Ｒ１Ｐ２−１−１、効力７３・８％をＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ、Ｈａｒｌｏｗ、ＵＫ；シプロプロキサン、ロットＧ、効力１００％を、ＵＳＰ参照基準として入手した（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ， ＵＳＡ）。
【０２６８】
以下の分離株をＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ａｎｔｉ−ｉｎｆｅｃｔｉｖｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手した：スタフィロコッカス・アウレウス ＡＴＣＣ ２９２１３、スタフィロコッカス・サプロフィティカ ６６２、ストレプトコッカス・ニューモニエ ＡＴＣＣ ４９６１９、ヘモフィルス・インフルエンゼ ＡＴＣＣ ４９２４７、エンテロコッカス・フェカリス ＡＴＣＣ ２９２１２、モラセラ・カタラーリス ＭＣ２、エシェリキア・コリ ＡＴＣＣ ２５９２２、シュードモナス・アエルギノサ ＡＴＣＣ ２７８５３、クレブシラ・ニューモニエ ＫＰ２およびプロテウス・ブルガリス ＡＴＣＣ １３３１５。
【０２６９】
５％ヒツジ血液を含有するトリプチカーゼ大豆寒天（ＢＢＬ， Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ， ＭＤ， ＵＳＡ）を用いて凍結分離株ストックを二次培養し、エス・ニューモニエのコロニーを計数した。Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ ＩＩ寒天（ＢＢＬ）を、非選好性生物のコロニー計数に用いた。チョコレートＩＩ寒天（ＢＢＬ）をエッチ・インフルエンゼ分離株のコロニー計数に用いた。非選好性生物を試験するために、カチオン調節したＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス（ＣＡＭＨＢ）（ＢＢＬ）を用いた。エス・ニューモニエ分離株を試験するために５％溶菌ウマ血液（ＢＢＬ）で補足したＣＡＭＨＢを用いた。エッチ・インフルエンゼ分離株を試験するために試験培地（ＢＢＬ）を使用した。
【０２７０】
生物を凍結ストック（−８０℃）から５％ヒツジ血液を含有するトリプチカーゼ寒天プレート上に二次培養し、２０−２４時間、３５℃でインキュベートした。食塩水の５ｍｌ試験管に、一夜培養物から十分な数のコロニーを接種して、０．５ＭｃＦａｒｌａｎｄ標準に相当する濁度を得た。この接種物を１８ｍｌの適当な培地（５０ｍｌフラスコ中に入れたもの）中に１００倍に希釈して、およそ１×１０６ＣＦＵ／ｍｌの最終試験接種物を得た。
【０２７１】
ジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンのＭＩＣを、ブロスミクロ希釈のＮＣＣＬＳ推奨手順を用いて測定した（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅｏ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ２−Ａ６， ｓｉｘｔｈ ｅｄ， Ｗａｙｎｅ， ＰＡ， ＵＳＡ）。両化合物を０．０００１〜３２μｇ／ｍｌの濃度範囲の連続二倍希釈において試験した。正の成長対照（抗菌剤を含まない）は各マイクロタイタープレート上に含まれていた。接種後、プレートを３５℃で空気中１８−２４時間インキュベートした。接種物の１０μｌのアリコートを、５％ヒツジ血液を含有するトリプリカーゼ大豆寒天上にプレートして、最終試験接種物の純度を測定した。
【０２７２】
すでに記載されているろ過法を用いてＰＡＥ効果を測定した。（Ｔｈｏｒｎｂｕｒｎ，ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ２７９６−２８０１ （１９９６））。各試験分離株を、２０ｍｌの適当なブロス中に抗菌剤（２または４×ＭＩＣ）を含む５０ｍｌフラスコに添加した。分離株の添加後、コロニー計数を行って初期接種物の密度（ＣＦＵ／ｍｌ）を測定した。フラスコを３５℃でシェーカー上でインキュベートした。
【０２７３】
２時間抗菌剤に曝露した後、さらにコロニー計数を行った。各フラスコの内容物を０．２ミクロンフィルターを通してろ過して、抗菌剤を除去した。濾液を２回１０ｍｌの予熱したブロスで洗浄し、フィルターを２０ｍｌの予熱した培地中に再懸濁した。試験分離株の再懸濁直後にコロニー計数を行った。フラスコをインキュベーターに戻し、コロニー計数を１時間間隔で６時間行った。エス・ニューモニエおよびエッチ・インフルエンゼについて使用した培地補足物に関連するろ過の問題のために、接種物の１：１００希釈物を予熱したブロス中に調製して、抗菌剤を除去した。ＰＡＥを測定するための対照は、試験分離株を、薬剤不含培地中で２時間インキュベートし、続いてろ過し、分離株を薬剤不含培地中でインキュベーションすることを含む。
【０２７４】
各分離株抗菌剤および対照について、間隔をおいて５回１０倍希釈を行った。１０μｌの使い捨てループを用いて、各ウェルから５０μｌを適当な寒天培地上に広げた。プレートを一夜インキュベートし、コロニー計数を、３０−３００コロニーが得られるような希釈度で行った。
分離株の可視的成長を阻害する化合物の最低濃度としてＭＩＣを定義した。ＭＩＣ終点の決定を助けるためにマイクロタイターミラーリーダーを用いた。
ｙ軸にコロニー数、ｘ軸に時間をとった片対数グラフを各分離株について作成した。ＰＡＥ効果を式：
ＰＡＥ＝Ｔ−Ｃ
（式中、Ｔは試験分離株数が、抗菌剤を除去した直後に観察される数より１０倍（１×ｌｏｇ１０）増加するにの要する時間であり、Ｃは対照が、抗菌剤を除去した直後に観察される数より１０倍増加するのに要する時間である。）
を用いて測定した。
【０２７５】
ジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンのＭＩＣを表２４に示す。ＰＡＥの結果のまとめを表２５に示す。
試験した分離株すべてに対して両化合物に関して測定可能なＰＡＥが観察される。一般に、４×ＭＩＣに対して２×ＭＩＣで短いＰＡＥが観察され、エッチ・インフルエンゼ、ピー・アルギノサおよびピー・ブルガリスに対してジェミフロキサシンＰＡＥは＞６時間であり、試験したすべての分離株に対して０．１〜２．５時間の範囲である。４×ＭＩＣで観察されるシプロフロキサシンＰＡＥ値は、効果が観察されないイー・フェカリス ＡＴＣＣ ２９２１２を除いて、０．３から５．１時間の範囲である。
【０２７６】
試験したすべての分離株に対して、ジェミフロキサシンのＰＡＥはシプロフロキサシンに匹敵する。両化合物について、４×ＭＩＣに比べて２×ＭＩＣで短いＰＡＥが観察された。４×ＭＩＣでは、エッチ・インフルエンゼ、Ｐ． ＡｅｒｕｇｉｎｏｓａおよびＰ． Ｖｕｌｇａｒｉｓに対して、シプロフロキサシンよりもジェミフロキサシンについて長いＰＡＥ（＞６時間）が観察された。全体として、この研究の結果は、広域の生物に対してジェミフロキサシンは著しいＰＡＥを有することを示す。
【０２７７】
【表６０】
2004507440.tif 000062
【０２７８】
【表６１】
2004507440.tif 000063
【０２７９】
本発明は、グラム陽性またはグラム陰性の好気性病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を実行するために、グラム陽性またはグラム陰性の好気性病原細菌、またはこれら生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択できる。
あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記述されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、グラム陽性またはグラム陰性好気性病原細菌感染の疑い、あるいはおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与するという段階を含む、グラム陽性またはグラム陰性好気性病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は該グラム陽性またはグラム陰性好気性病原細菌がスタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スタフィロコッカス・サプロフィティクス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、モラキセラ・カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、およびプロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）からなる群より選択される方法を提供するが、他のグラム陽性またはグラム陰性好気性病原細菌も、また、方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定できる。
とりわけ、本発明は、特にストレプトコッカス属細菌に対するキノロン、ジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
【０２８０】
一つには、本発明は、種々のストレプトコッカス属細菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。
これらの分析の目的は、４００個のストレプトコッカス属分離株に対して１１個の他の抗微生物薬のそれと比較してジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の活性を測定することであった。
ジェミフロキサシンは、ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、スパルフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、ペニシリン、アンピシリン、エリスロマイシン、クラリスロマイシン、テトラサイクリンおよびバンコマイシンと比較した。
ジェミフロキサシンおよび１１個の他の抗微生物薬の活性は、連鎖球菌の種々の種に対して寒天希釈法（ＢＳＡＣ法）によって測定した。選択される種は、第一次病原体または「同乗者生物」とみなされた。同乗者生物は、正常細菌叢の一部である連鎖球菌と定義され、抗菌療法に影響され得る。合計４００個の臨床分離株を検討した：ランスフィールドＡおよびＣ群（ｎ ＝ ５０）、ＢおよびＧ群（ｎ ＝ ５１）、「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」群および「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群（ｎ ＝ ５１）、「ミュータンス（ｍｕｔａｎｓ）」群（ｎ ＝ ５０）、および「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」群（ｎ ＝ ４６）。種々のキノロンに対する全連鎖球菌のＭＩＣ９０（ｇ／ｍｌ）：ジェミフロキサシン０．００８‐０．０６、シプロフロキサシン０．１２５‐２．０、レボフロキサシン０．５‐４、スパルフロキサシン０．０６‐１．０、トロバフロキサシン≦０．０１６‐０．２５、および、グレパフロキサシン≦０．０１６‐１であった。他の基準抗生物質のＭＩＣ範囲は、ペニシリン≦０．００８−４、アンピシリン≦０．００８−８、エリスロマイシン≦０．０１６−≧３２、クラリスロマイシン≦０．０１６−≧３２、テトラサイクリン０．０６−≧６４およびバンコマイシン０．１２５−２：であった。結論として、ジェミフロキサシンは試験される最も強力なキノロンであった。ジェミフロキサシンは、他のキノロンと比較して連鎖球菌に対する活性を促進して、グラム陽性感染に対する使用のための有望な薬剤である。
【０２８１】
キノロンは、呼吸器、腹腔、皮膚および軟組織、および尿生殖器感染を含む種々の臨床徴候の治療に使用される。
ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）は、位置７にオキシム−誘導（アミノメチル）ピロリジニル置換を有する広域６−フルオロナフチリドンである。
現在使用されているキノロンと比較して、ジェミフロキサシンはストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）および他のグラム陽性病原体に対して強力な活性を示す。
この実験において選択されるストレプトコッカス属の種は、第一次病原体または「同乗者生物」を表す。これに関して、同乗者生物は、正常細菌叢として存在する連鎖球菌であって、従って、抗微生物薬療法に影響される。抗微生物薬の使用は、直接的に、根絶を介して、かつ／あるいはスーパー集落形成によって、あるいは間接的に耐性生物の選択を経て、正常細菌叢に影響でき、このことはストレプトコッカス属感染の治療における問題点につながり得る。
合計４００個のストレプトコッカス属の種の異なる臨床分離株が研究された。
【０２８２】
分離株は、ランスフィールドＡおよびＣ群（ｎ ＝ ５０）、ＢおよびＧ群（ｎ ＝ ５１）「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」群および「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒ）」群（ｎ ＝ ５１）、「ミュータンス（ｍｕｔａｎｓ）」群（ｎ ＝ ５０）、および「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」群（ｎ ＝ ４６）より成った。
試験される大多数の株は、この３年からの最近の分離株であった。使用される対照株は、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）ＮＣＴＣ ６５７１、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ ）ＡＴＣＣ ２９２１３、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ） ＡＴＣＣ ４９６１９であった。
株の最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、溶解ウマ血液（５％ ｖ／ｖ）で補足されたイソ‐センシテスト寒天（Ｉｓｏ−Ｓｅｎｓｉｔｅｓｔ ａｇａｒ） （ＣＭ４７１ Ｏｘｏｉｄ， Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ， ＵＫ） を用いて、ブリティッシュ・ソサイエティー・フォー・アンチミクロバイアル・ケモセラピー（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ）法１（Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ２７（Ｓｕｐｐｌ． Ｄ）： １−５０ （１９９１））に基づく寒天希釈によって測定された。コロニーは、直接０．５のマックファーランド（ＭｃＦａｒｌａｎｄ）基準に合致するようにプレートから培地へとられて、１：１０まで希釈した。抗微生物薬を含む寒天は、希釈培養液１ｕｌを接種され、最終接種量１０４のＣＦＵ／スポットを与えた。
ストレプトコッカス属のいくつかの株が、ＣＯ２依存性であったので、プレートは１８−２０ｈ、５％ＣＯ２中、３７℃でインキュベートされた。
ＭＩＣ終末点は、生育が見えなくなる最低濃度として、指示された。
【０２８３】
【表６２】
2004507440.tif 000064
【０２８４】
【表６３】
2004507440.tif 000065
【０２８５】
【表６４】
2004507440.tif 000066
【０２８６】
【表６５】
2004507440.tif 000067
【０２８７】
【表６６】
2004507440.tif 000068
【０２８８】
【表６７】
2004507440.tif 000069
【０２８９】
【表６８】
2004507440.tif 000070
【０２９０】
【表６９】
2004507440.tif 000071
【０２９１】
連鎖球菌はＣＯ２依存性である。ＭＩＣ終点を可視的増殖のない最低濃度として読み取った。
感受性結果は、ＭＩＣ範囲、ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０（表２６−３３）と表される。ランスフィールドＡ、Ｂ、ＣおよびＧ群のストレプトコッカス属は、重要なヒトの病原体であって、多くの臨床的に重要な感染における主な病因的因子である。エリスロマイシン−およびテトラサイクリン−耐性株に続いて、トロバフロキサシン、スパルフロキサシン、グレパフロキサシン、シプロフロキサシンおよびレボフロキサシンを含み；ジェミフロキサシンは、ランスフィールドＡ、Ｂ、ＣおよびＧ群の連鎖球菌に対して最も強力なキノロンである（表２６−２９）。ランスフィールドＡ、Ｂ、ＣおよびＧ群の最頻度ＭＩＣ９０は、ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、スパルフロキサシン、グレパフロキサシン、シプロフロキサシンおよびレボフロキサシン、それぞれにつき、０．０６、０．２５、０．５、１、１および２（μｇ／ｍｌ）である。ランスフィールドＡ、Ｂ、ＣおよびＧの全連鎖球菌は、ペニシリン（ＭＩＣ≦０．１２５μｇ／ｍｌ）、アンピシリン（ＭＩＣ≦０．２５μｇ／ｍｌ）、および、バンコマイシン（ＭＩＣ≦１μｇ／ｍｌ）に感受性であった。エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびテトラサイクリンは、変動的結果を示した；クラリスロマイシンは、エリスロマイシンより２倍活性であった。テトラサイクリンは、ランスフィールドＢおよびＧ群に対して低い活性を示した。
【０２９２】
連鎖球菌の「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」および「ミュータンス（ｍｕｔａｎｓ）」群は正常口腔細菌叢として存在する。（Ｈａｒｄｉｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ８３ （Ｓｕｐｐｌ．）： １Ｓ−１１Ｓ （１９９７））しかしながら、これら連鎖球菌は、好中球減少症患者において重篤な罹患率および死亡率を引き起こす菌血症の重要な原因として出現してきた。ジェミフロキサシンは、同乗者連鎖球菌「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」および「ミュータンス（ｍｕｔａｎｓ）」群）に対して試験される最も強力なキノロンであって、トロバフロキサシン、スパルフロキサシンおよびグレパフロキサシンが続く。シプロフロキサシンおよびレボフロキサシンは、その同一のＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値で反映される同様な活性を示す（表３０−３１）。ペニシリンおよびアンピシリンのＭＩＣ値は、ランスフィールドＡ、ＣおよびＧより「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」群のほうが高い。エリスロマイシンおよびテトラサイクリンのＭＩＣは、また、ランスフィールドＡ、ＣおよびＧ群と比較して「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」群でより高かった。クラリスロマイシンのＭＩＣ９０（２μｇ／ｍｌ）は、エリスロマイシン（８μｇ／ｍｌ）より同等に低い。単一の分離株は、ペニシリンに中間の感受性を示す。（ＭＩＣ９０ ０．２５μｇ／ｍｌ）。試験される「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」および「ミュータンス（ｍｕｔａｎｓ）」連鎖球菌は全て、エリスロマイシン感受性である（ＭＩＣ９０ ≦０．５μｇ／ｍｌ）。
【０２９３】
「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」および「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群２に属するストレプトコッカス属は、正常腸内細菌叢の一部であって、腹腔敗血症、膿胸および腸の癌に関連する細菌性心内膜炎に関係する。ジェミフロキサシンは連鎖球菌の「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」および「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群に対して非常に有効であり、トロバフロキサシン、スパルフロキサシン、グレパフロキサシン、シプロフロキサシンおよびレボフロキサシンが後に続くと示された（表３２−３３）。シプロフロキサシンおよびレボフロキサシンへの高いＭＩＣは、「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群と比較して試験される連鎖球菌の「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」群で観察された。全ての「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」および「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群、連鎖球菌は、ペニシリン（ＭＩＣ９０≦０．１２５μｇ／ｍｌ）、および、アンピシリン（ＭＩＣ９０≦０．２５μｇ／ｍｌ）に感受性である一方で、ランスフィールドＡ、ＣおよびＧ群より高いＭＩＣ値を示した。全ての「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」群試料は、バンコマイシン感受性であった（ＭＩＣ９０≦１μｇ／ｍｌ）；「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群のある株は、バンコマイシンに高いＭＩＣを有する（ＭＩＣ９０ ２μｇ／ｍｌ）。エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびテトラサイクリンに対して、「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」群で、様々な結果が得られた。ＭＩＣ９０は、エリスロマイシンと比較してクラリスロマイシンは有意に低い。「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群の１つの分離株のみ、エリスロマイシンおよびクラリスロマイシンに耐性であり（ＭＩＣ９０≧３２μｇ／ｍｌ）、テトラサイクリンは、連鎖球菌の「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」および「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群に対し低い活性を示した。
【０２９４】
院内感染を引き起こしている病原体のスペクトラムは、変化している。グラム陽性感染が増加しており、これら感染を取り扱うために抗菌器具を強化する必要性がある。新規フルオロキノロンは、この領域における治療の選択肢を提供する。このデータは、ジェミフロキサシンが連鎖球菌の全群に対して試験される最も強力なフルオロキノロンであることを示す。それは、公知の病原体ならびに同乗者生物に対して非常に活性である。
免疫力が低下している患者において、同乗者生物は、可能性のある病原体と同定されて、適当な条件下で、免疫適格患者において病気を引き起こし得る。インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）データは、ジェミフロキサシンがストレプトコッカス属感染の治療のための薬剤として作用し得ることを示す。同乗者生物は将来支配的な役割を担い得、抗微生物薬耐性が「治療困難な」生物の個体群内に出現するので、新規の治療の問題を起こし得る。
【０２９５】
ペニシリンは、ランスフィールドＡ、ＣおよびＧ群の連鎖球菌に対して非常に活性のままである。ペニシリンは、試験される他のス連鎖球菌（ランスフィールドＢ、「マイティス（ｍｉｔｉｓ）」、「ミュータンス（ｍｕｔａｎｓ）」、「ボビス（ｂｏｖｉｓ）」および「アンジノサス（ａｎｇｉｎｏｓｕｓ）／ミレーリ（ｍｉｌｌｅｒｉ）」群）に対して、減少した活性を示し；別の薬剤（マクロライド、テトラサイクリンおよびバンコマイシン）は、これら連鎖球菌に対し、ペニシリンより低い活性を示す。ジェミフロキサシンは、連鎖球菌の種々の群に対して試験される最も強力なキノロン化合物である。ジェミフロキサシンは、ペニシリン、エリスロマイシン、テトラサイクリンまたはシプロフロキサシンに中間的または耐性の感受性を有するものを含む、連鎖球菌の全ての株に低いＭＩＣを示した。ジェミフロキサシンの有力な抗ストレプトコッカス属活性は、それを、グラム陽性感染に対する使用のための有望な薬剤にする。
本発明は、ストレプトコッカス属病原細菌の代謝を変調するための方法を提供する。当業者は、本発明の方法を実行するために、ストレプトコッカス属病原体細菌または、これら生物に感染あるいはその疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は本明細書中に記載されるものであってよい。
本発明のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物または組成物は、内在デバイスの挿入の直前に、関連した細菌、好ましくはストレプトコッカス属病原細菌に対して、全身作用を達成するために注射によって投与されてよい。治療は、器具が体内にある間、手術後に続行され得る。さらに、組成物はまた、ストレプトコッカス属病原細菌によって、あるいは関連して引き起こされる細菌性創傷感染を防ぐために、いずれの外科的手法のためにでも術中のカバーを広げるのに使用され得る。
【０２９６】
前記の治療に加え、本発明の方法において使用されるジェミフロキサシン化合物または組成物は、一般に、創傷組織において暴露される細菌、特にストレプトコッカス属病原細菌の基質タンパク質への付着を妨げる創傷治療剤として、および、抗生物質の予防の代替品として、あるいはそれと関連した歯科治療における予防的使用のために使用され得る。また、抗菌的有効量のキノロン特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、ストレプトコッカス属病原細菌感染の疑いのある、あるいはそのリスクのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含むストレプトコッカス属病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が、本発明によって提供される。
本発明の好ましい目的は、該ストレプトコッカス属病原細菌が、ストレプトコッカス属の種：からなる群より選択される方法を提供するが。他のストレプトコッカス属病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供の、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験、を使用して、これらの生物を同定し得る。
とりわけ、本発明は、マイコプラズマ細菌に対し、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のマイコプラズマ細菌病原体に対するジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、通常、ヒトの呼吸器および尿生殖路に見出されるマイコプラズマ属の種の低継代された臨床分離株および基準株を使用してジェミフロキサシン、他の新規キノロンおよびマクロライドのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を測定することであった。
【０２９７】
ジェミフロキサシンは、レボフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、テトラサイクリンおよびクリンダマイシンと比較した。キノロン・ジェミフロキサシン、他の新規キノロンおよびマクロライドのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を、通常、ヒトの呼吸器および尿生殖路に見出されるマイコプラズマ属の種の低継代した臨床分離株および基準株を使用して測定した。
分析に使用される生物は、マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ゲニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）を含んだ。ＭＩＣは、微量培地希釈法を用いて測定された。ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）のアッセイは１０Ｂ培地で行われ、他の全てのマイコプラズマのアッセイはＳＰ４培地で行われた。コンパレーター薬剤は、レボフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、テトラサイクリンおよびクリンダマイシンを含む。
【０２９８】
本明細書中に提供されるデータは、試験される種に依存して、マクロライドと比較した場合、ジェミフロキサシンは変動する結果を示すことを示唆する。インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、ジェミフロキサシンはテトラサイクリン、クリンダマイシンおよび他のキノロンと同等またはそれ以上に活性である。
以前の研究は、ジェミフロキサシンが一般の気道病原体ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）およびモレキセラ・カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）（Ｍｏｏｒｅ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９８ （１９９８）； Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９３ （１９９８）） および 異型の生物レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ ）（Ｃｒｉｔｃｈｌｅｙ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１００ （１９９８）； Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１０５ （１９９８）） およびクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ） （Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９７ （１９９８）； Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９３ （１９９８）））に対して非常に活性であることを示した。
【０２９９】
限られた数のマイコプラズマ属の種が分析されたある研究で、ジェミフロキサシンもまた、抗微生物活性を示した（Ｈａｎｎａｎ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１０１ （１９９８））。マイコプラズマ属の種に対するジェミフロキサシンの活性を確認するために、多数の臨床分離株および基準株のＭＩＣが測定され、ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）での有効性は他の新規キノロン、マクロライド、テトラサイクリンおよびクリンダマイシンのそれと比較された。
低−継代される臨床分離株および基準株を含む、マイコプラズマの分離株は、抗微生物薬感受性について試験された。これら分離株のほとんどは、人工培地中で２−３回のみ継代されている。マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）分離株は、６つの異なる国から集められた１３０株を含んだ（１０年間に集められた分離株を代表する）。
【０３００】
全分離株は、証明された呼吸器疾病を有する個体の気道起源であった。分離株は、ＰＣＲ法によってエム・ニューモニエ（Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）と同定され、呼吸器または生殖器管のいずれかにおいてヒトで起こると知られているマイコプラズマ・ゲニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）または他のいずれのマイコプラズマ属の種とも交差反応性でないことが示された：ＡＴＣＣｎ ＝ ２；デンマークｎ ＝ ６；オーストラリアｎ ＝ ５；日本ｎ ＝ ４；英国ｎ ＝ ９；中国ｎ ＝ １１； 米国ｎ ＝ ９３。
マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）分離株（ｎ ＝ ５０）は、７個の基準株および４３個の低継代臨床分離株を含んだ。
臨床分離株の起源は、表３４に示される。マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ）（ｎ ＝ １８）は、１個の基準株、２個の臨床分離株（子宮内膜生検および尿道由来）および細胞培養、気道、骨髄または滑膜に由来する１５個のよくキャラクタライズされた株（Ｊ． Ｔｕｌｌｙ， Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ Ｓｅｃｔｉｏｎ， ＮＩＡＩＤにより提供）を含んだ。ウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）分離株（ｎ ＝ １００）は、１４個のセロタイプおよび８６個の臨床分離株（表３５）を含んだ。
【０３０１】
エム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）株は２の分離株（Ｊ． Ｔｕｌｌｙ， Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ Ｓｅｃｔｉｏｎ， ＮＩＡＩＤにより提供）より成り、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）の２つの分離株は試験された（Ｊ． Ｔｕｌｌｙ ａｔ ＮＩＡＩＤ および Ａ． Ｙａｎｅｚ， Ｐｕｅｂｌａ， Ｍｅｘｉｃｏより提供）。抗微生物薬散剤は、Ｓｉｇｍａ， Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ， ＵＳＡより購入のテトラサイクリンおよびクリンダマイシンを除き、それぞれの製造業者から得られた。以下の抗微生物薬が、使用された：ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、レボフロキサシン、グレパフロキサシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、テトラサイクリンおよびクリンダマイシン。散剤は、製造業者の推奨によって溶解された。各薬剤２０４８μｇ／ｍｌを含むストック溶液が各アッセイ用に新たに調製された。
微量培地希釈法（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎ： Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ， ＵＳＡ， １９９４）がＭＩＣを測定するために使用された。マイコプラズマ培地（ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）用の１０Ｂおよび他の全てのマイコプラズマ属の種用のＳＰ４）中の抗微生物薬の連続２倍希釈を行い、試験される各薬剤について０．００８ないし２５６μｇ／ｍｌまで濃度範囲とした。色変単位（ＣＣＵ）／ｍｌによって測定された１０４−１０５個の生物の接種量が使用された。プレートは、３７℃で好気的にインキュベートされた。全プレートを毎日、無薬剤（生育）対照において色変化が検出されるまで、検討した。ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）の急速な増殖のために、最初の読み取りはインキュベーション後１６時間に起こり、その後、日毎に複数回読み取りが続いた。各薬剤のＭＩＣは、全分離株について測定した。無薬剤対照が最初に色変化を示した時間（各種について時間点は変化する）に培地中の色変化の欠如によって証明されるごとく、初期のＭＩＣは生物の代謝が阻害される抗微生物薬の最低濃度と定義された。試験から、耐性の疑いのあるいずれのマイコプラズマ属分離株も、結果の再現性を確実にするために別の日に再試験された。
【０３０２】
この方法の詳細な記述は、以前に報告された（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎ： Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ， ＵＳＡ， １９９４）。
使用される方法を試験するマイクロタイター感受性は、同時の二重の運転内および別の日に行われるアッセイ間のＭＩＣ結果の優れた再現性を与えた。エム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）およびエム・ペネトランス（Ｍ． ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）を除くマイコプラズマ属およびウレアプラズマ属の株に対するジェミフロキサシンおよび他の抗微生物薬の相対インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の活性は、表３６に示される。エム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）およびエム・ペネトランス（Ｍ． ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）の分離株のＭＩＣ結果は、表３７に与えられる。ジェミフロキサシンは、試験される種に対して優れたインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を示す。全体的ＭＩＣ範囲は、十分に期待される臨床感受性の範囲内（≦０．００８−０．５μｇ／ｍｌ）である。
【０３０３】
エム・ニューモニエ（Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）およびエム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）について、ジェミフロキサシンのＭＩＣはグレパフロキサシンのそれに匹敵するが、それらは他のキノロンおよびテトラサイクリンより２−ないし４−倍低い。アジスロマイシンおよびクラリスロマイシンは、０．００８μｇ／ｍｌで全株を阻害し、これらの２つの種に向かって、最高活性を示す。エム・ファーメンタンス（Ｍ． ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）およびエム・ホミニス（Ｍ． ｈｏｍｉｎｉｓ）は、ジェミフロキサシンに高度な感受性を有する（ＭＩＣ９０≦０．００８μｇ／ｍｌ）。エム・ホミニス（Ｍ． ｈｏｍｉｎｉｓ）について、ジェミフロキサシンの活性は、クリンダマイシンおよびグレパフロキサシンのそれに匹敵し、テトラサイクリンおよび他のキノロンのそれを上回る。公知の耐性のため、マクロライドは試験されなかった。エム・ファーメンタンス（Ｍ． ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）はクラリスロマイシンに耐性であるが、アジスロマイシンに若干の感受性を示した。
【０３０４】
ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）はジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンに同等に感受性であるが、他のキノロンは２−ないし４−倍低い活性である。ジェミフロキサシンは、また、この微生物に対して、テトラサイクリンまたはアジスロマイシンより有効である。しかしながら、クラリスロマイシンはユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）に対して最も高い活性を有する。エム・ペネトランス（Ｍ． ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）に対して、ジェミフロキサシンは少なくとも試験される他の化合物と同等の活性である。
インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、ジェミフロキサシンは、試験されるマイコプラズマおよびウレアプラズマに対して、テトラサイクリン、クリンダマイシンおよび他のキノロンと同等あるいはそれ以上活性である。たとえ株が１０年間、広く異なる地理的地域で集められたとしても、ジェミフロキサシンへの耐性は観察されなかった。本研究および他の最近の研究（Ｈａｎｎａｎ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１０１ （１９９８））からの結果は、ジェミフロキサシンがマイコプラズマ属およびウレアプラズマ属の種によって引き起こされる呼吸器および尿生殖路感染症の治療のための有望な薬剤であることを示す。さらに、ジェミフロキサシンは広範囲にわたるグラム陰性およびグラム陽性病原体に対する非常に活性なフルオロキノロンであると報告され（Ｍｏｏｒｅ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９８ （１９９８）； Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９３ （１９９８）； Ｃｒｉｔｃｈｌｅｙ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１００ （１９９８）； Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１０５ （１９９８）； Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ．， ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９７ （１９９８））、感染症の治療に有効な新規薬剤となる。
【０３０５】
【表７０】
2004507440.tif 000072
【０３０６】
【表７１】
2004507440.tif 000073
【０３０７】
【表７２】
2004507440.tif 000074
【０３０８】
【表７３】
2004507440.tif 000075
本発明は、マイコプラズマ属病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、マイコプラズマ属病原細菌またはこれら生物に感染あるいはその疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、マイコプラズマ属病原細菌感染の疑いがあるか、あるいはそのリスクのある疑いのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含むマイコプラズマ属病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該マイコプラズマ病原細菌が：マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ゲニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）：からなる群より選択される方法を提供するが他のマイコプラズマ属病原細菌も、また方法に含まれてよい。
【０３０９】
当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、レジオネラ属の種に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のレジオネラ属の種の病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これらの分析の目的は、一団のレジオネラ属の種に対して、ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）、トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシンおよびリファンピシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性および抗生物質後効果（ＰＡＥ）を測定することであった。試験分離株は、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ） セログループ １−１２、レジオネラ・ダモフィ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｄｕｍｏｆｆｉｉ）、レジオネラ・ミクダダイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｍｉｃｄａｄｅｉ）およびレジオネラ・ロングビーチ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｌｏｎｇｂｅａｃｈｅａｅ）を含んだ。最小阻止濃度（ＭＩＣ）は標準的２倍寒天希釈によって測定されたが、ＰＡＥは、４ｘＭＩＣで１ｈ、分離株を試験薬剤に暴露することによって測定された。薬剤は３回連続の遠心によって新たな培地に移され、ＰＡＥは、同様な無薬剤培地中の細菌の発育動力学を測定することによって算出された。トロバフロキサシンおよびリファンピシンは、試験される全分離株に対して最も活性な薬剤であった（ＭＩＣ９０ ≦０．００８μｇ／ｍＬ）。ジェミフロキサシンは、全てのエル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）分離株に対して高い力価（ＭＩＣ９０ ≦０．０３μｇ／ｍＬ）を示し、それは、グレパフロキサシンおよびシプロフロキサシン（ＭＩＣ９０ ≦０．０３μｇ／ｍＬ）に匹敵し、オフロキサシン（ＭＩＣ９０ ≦０．０３μｇ／ｍＬ）より活性であった。エル・ダモフィ（Ｌ． ｄｕｍｏｆｆｉｉ）およびエル・ロングビーチ（Ｌ． ｌｏｎｇｂｅａｃｈｅａｅ）に対して、ジェミフロキサシンはグレパフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．０６μｇ／ｍＬ）と同等の活性であって、エル・ミクダダイ（Ｌ． ｍｉｃｄａｄｅｉ）に対して、ジェミフロキサシンはモキシフロキサシン、オフロキサシンおよびシプロフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．０３μｇ／ｍＬ）と同等に活性であった。エリスロマイシン耐性エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）に対して、グレパフロキサシン、４．１８ｈ、モキシフロキサシン、３．３８ｈおよびトロバフロキサシン、２．８３ｈと比較して、ジェミフロキサシンは最も長いＰＡＥ（４．６５ｈ）を示した。ジェミフロキサシンのＰＡＥは、リファンピシン（０．９３ｈ）、クラリスロマイシン（１．９ｈ）、アジスロマイシン（０．９）およびレボフロキサシン（２．５９ｈ）より有意に高かった（ｐ＜０．０５）。
【０３１０】
エリスロマイシン−感受性エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）に対して、ジェミフロキサシン、モキシフロキサシン、オフロキサシンおよびシプロフロキサシンのみが３ｈ以上のＰＡＥを有した。他のエリスロマイシン耐性レジオネラ属の種について、ジェミフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシンおよびリファンピシンは３ｈ超のＰＡＥを有し、それはシプロフロキサシン（２．１３ｈ）、モキシフロキサシン（２．０２ｈ）およびエリスロマイシン（０．４４ｈ）のＰＡＥより有意に長かった（ｐ＜０．０５）。ジェミフロキサシンの半減期およびこの研究からのデータは、レジオネラ属感染の治療のためにジェミフロキサシンの毎日一回投与を支時する有意なＰＡＥを示す。
近年、西洋半球およびヨーロッパ両者での院外感染の肺炎において主要な３つの病原体の中に位置する多くの研究で（Ａｕｂｅｒｔｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ， １５： ３２８−３３１ （１９８７））、レジオネラ属は院外感染の肺炎および院内の肺炎において重要な病原体として出現してきた（Ｓｔｏｕｔ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇ． Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， ３０： ３７−４３ （１９９８））。エリスロマイシンは、伝統的にいくつかの胃腸の副作用を有する選択薬剤を持つ（Ｔｓａｉ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ． Ｉｎｔｅｒ． Ｍｅｄ．， ９０： ５０９−５１７ （１９７９））。しかしながら、より新規のマクロライドおよびキノロンは、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を改善した（Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， １２： ８９−９１Ｓ （１９８９）； Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， ３６ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ １９９２ （１９９６）； Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， ３３： ２６１−２６５ （１９９９）； Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ．， ５： ２０５−２１２ （１９９９））。感受性実験は、新規フルオロキノロンジェミフロキサシンが多くのグラム陽性生物に対し、他のフルオロキノロンよりかなり強力であることを見出した。さらに、それは他の抗微生物薬に耐性の株を含むある範囲のグラム陰性の桿菌に対する活性を保持し、種々の異型の呼吸器病原体に対して強力な活性を有する。
この研究は、院内または院外気道感染患者から単離されるある範囲のレジオネラ属の種に対して、ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシンおよびリファンピシンのＭＩＣおよび抗生物質後効果（ＰＡＥ）を比較した。
【０３１１】
種々のレジオネラ属分離株は、気道および環境源から培養された。株の同定は、標準法（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ６ｔｈ ｅｄ．， ５３３−５４４ （１９９５））によった。
ＭＩＣは、緩衝化酵母エキス（ＢＹＥ）寒天を使用して、標準的２倍寒天希釈（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， ４ｔｈ ｅｄ．， Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ７−Ａ４ （１９９７））によって測定された。
最終接種量およそ１０４ｃｆｕを、倍加希釈の抗生物質（０．００４−２５６μｇ／ｍＬ）を含む緩衝化酵母エキス（ＢＹＥ）寒天上へ塗布し、４８ｈ、３５℃でインキュベートした。シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＡＴＣＣ ２７８５３およびエル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ） ＡＴＣＣ ３３１５２は、対照標準株として含まれた。
ＰＡＥは、各株が抗生物質濃度４ｘＭＩＣで暴露される、ＢＹＥ中培地法によって測定された（Ｃｒａｉｇ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ， ｐｐ． ５１５−５３６ （１９８６））。新たな接種量（１ｍＬ　最終濃度１０６−１０７ｃｆｕ／ｍｌ）を調製抗生物質含有培地９ｍＬおよび無薬剤対照培地９ｍＬに添加し、１ｈ、３７℃でインキュベートした。抗生物質は、ついで、１０分間、１２００ｘｇで３回連続の遠心によって除去された。細菌計数は、全培養液上、時間０、洗浄の前後および１時間毎、濁度を生じるまで行った。これら計数はグラフ上にプロットされ、ＰＡＥの持続時間は式：ＰＡＥ ＝ Ｔ−Ｃ［式中、Ｔは、抗生物質暴露培地中の計数が薬剤除去直後に記録される計数より、１ ｌｏｇ１０増加する時間であって、Ｃは、同一手順完了直後に観察される計数より１ｌｏｇ１０、対照倍地中計数が増加するのに必要な時間である］を用いて算出された。
エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ ）セログループ１−９に対する一団の試験抗生物質の活性は、表３８および３９に示される。これらのセログループに対するジェミフロキサシンのＭＩＣ範囲は、０．００８−０．０６μｇ／ｍＬであり；この活性は、エリスロマイシンおよびアジスロマイシン（０．００８−１．０μｇ／ｍＬ）より約６倍高い。ジェミフロキサシンは、グレパフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．１６μｇ／ｍＬ）、レボフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．１６μｇ／ｍＬ）およびモキシフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．１６μｇ／ｍＬ）と同様な活性を示したが、シプロフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．０３μｇ／ｍＬ）、オフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．０３μｇ／ｍＬ）およびオフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．０３μｇ／ｍＬ）より優れており、トロバフロキサシン（ＭＩＣ９０ ＜０．００４μｇ／ｍＬ）より劣っていた。
全体的にエル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ ）セログループ１−３（ＭＩＣ９０ ０．０１６μｇ／ｍＬ）および７−９（ＭＩＣ９０ ０．０１６μｇ／ｍＬ）は、セログループ ４−６（ＭＩＣ９０ ０．０３μｇ／ｍＬ）よりジェミフロキサシン感受性であった。最も一般的な株、エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ ）セログループ １に対して、ジェミフロキサシンの活性ＭＩＣ９０ ０．００４μｇ／ｍＬ）は、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン、オフロキサシンおよびシプロフロキサシンＭＩＣ９０ ０．０３−１．０μｇ／ｍＬ）より優れていた。
【０３１２】
レジオネラ・ダモフィ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｄｕｍｏｆｆｉｉ）およびレジオネラ・ロングビーチ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｌｏｎｇｂｅａｃｈｅａｅ）に対して、ジェミフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシンおよびクラリスロマイシンの活性（ＭＩＣ９０ ０．０６μｇ／ｍＬ）は、アジスロマイシン（ＭＩＣ９０ ０．２５μｇ／ｍＬ）およびエリスロマイシン（ＭＩＣ９０ ０．５μｇ／ｍＬ）より優れていた（表４０）。エル・ミクダダイ（Ｌ． ｍｉｃｄａｄｅｉ）に対して、ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシンおよびモキシフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．０３μｇ／ｍＬ）は、エリスロマイシンより５倍、活性であった。
【０３１３】
エリスロマイシン感受性および耐性レジオネラ属の種に対する試験抗生物質のＰＡＥの平均値は表４１に示される。これらの株に対して２ｈ未満のＰＡＥを示すクラリスロマイシン、エリスロマイシンおよびリファンピシンに対し、ジェミフロキサシン、モキシフロキサシンおよびグレパフロキサシンのみが、エリスロマイシン耐性エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）に対して有意な（ｐ＜０．０５）平均のＰＡＥ、３ｈ以上を示した。他のエリスロマイシン耐性レジオネラ属分離株に対して、平均ＰＡＥ３ｈ以上は、ジェミフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシンおよびリファンピシンに見出された。
エリスロマイシンおよびクラリスロマイシンは、最も短いＰＡＥ（２ｈ未満）を示した。
平均ＰＡＥ、３ｈ以上は、エリスロマイシン−感受性エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）に対して、ジェミフロキサシン、モキシフロキサシン、オフロキサシンおよびシプロフロキサシンについて記録された。ジェミフロキサシンおよびオフロキサシンは、他のエリスロマイシン−感受性レジオネラ属の種に対して、有意の（ｐ＜０．０５）平均ＰＡＥ、２ｈ以上を示す唯一のキノロンであった。
【０３１４】
エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）が食細胞内で増殖する任意細胞内細菌であるので、ＰＡＥおよびＭＩＣ活性両者は抗微生物薬投与計画と関係を有すると期待され得る。
リファンピシンが細胞内外両者のレジオネラ属の種に対して著しく活性である一方で、それは可逆的阻害であり、単一療法としてのその使用は耐性の出現という理論的根拠上認められない（Ｅｄｅｌｓｔｅｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， ２１ （ｓｕｐｐ． ３）， ２６５−２７６ （１９８９））。より新規のマクロライドクラリスロマイシンおよびアジスロマイシンがまた、有効であるけれども、単独であるいはリファンピシンのごとき薬剤と組み合わせて、エリスロマイシンはレジオネラ肺炎に対する選択の通常の治療である。
この研究からのＭＩＣデータに基づいて、ジェミフロキサシンは大部分のレジオネラ属の種に対する有効な抗微生物薬であり得る。特に、これらの結果は、ジェミフロキサシンが有意に（ｐ＜０．００１）、レジオネラ症の治療において最も一般的に使用される薬剤であるエリスロマイシンより優れていることを示す。ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）活性は、また、有意に（ｐ＜０．０５）アジスロマイシンより優れていた。
【０３１５】
エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）のエリスロマイシン−感受性分離株に対して、ジェミフロキサシンはトロバフロキサシンおよびレボフロキサシンのそれより１ｈ以上長く、エリスロマイシンおよびクラリスロマイシンより２．５ｈ以上長かった平均ＰＡＥ、３．４９ｈを示した。他のエリスロマイシン−感受性レジオネラ属の種に対するジェミフロキサシンの平均ＰＡＥ（２．２７ｈ）はまた、トロバフロキサシン、モキシフロキサシンおよびクラリスロマイシンのそれより少なくとも１ｈ長かった。
ジェミフロキサシンのＰＡＥは、エリスロマイシン耐性エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）分離株に対して、感受性株より大きかった（４．６５ｈ対３．４９ｈ）。この効果は、有意に（ｐ＜０．０５）トロバフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシンおよびリファンピシンのそれより優れていた。平均ＰＡＥにおける差異は、また、エル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）以外のエリスロマイシン耐性レジオネラ属の種に対して、ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンのごとき試験されるいくつかのキノロンの中で注目された。
【０３１６】
【表７４】
2004507440.tif 000076
【０３１７】
【表７５】
2004507440.tif 000077
【０３１８】
【表７６】
2004507440.tif 000078
【０３１９】
【表７７】
2004507440.tif 000079
【０３２０】
この研究の知見は、ジェミフロキサシンがレジオネラ属の種によって引き起こされる下方気道感染の治療において有望であることを示す。この研究で記録された細胞内のエル・ニューモフィラ（Ｌ． ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）に対するジェミフロキサシンの優れたインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性および長いＰＡＥを考慮して、薬剤は院外感染性肺炎患者の経験的治療において優れた治療の選択を提供するようである。
本発明は、レジオネラ属の種の病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、レジオネラ属の種の病原細菌またはこれら生物に感染あるいはその疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
【０３２１】
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、レジオネラ属の種の病原細菌の感染の疑いがあるかあるいはそのリスクのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、レジオネラ属の種の病原細菌による細菌感染を治療あるいは予防する方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該レジオネラ属の種の病原細菌が：レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ）、レジオネラ・ボゼマニ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｂｏｚｅｍａｎｉｉ）、レジオネラ・ワドスウォチ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｗａｄｓｗｏｒｔｈｉｉ）、レジオネラ・ジョーダニス（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｊｏｒｄａｎｉｓ）、レジオネラ・ダモフィ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｄｕｍｏｆｆｉｉ）、レジオネラ・ロングビーチ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｌｏｎｇｂｅａｃｈｅａｅ）、レジオネラ・ミクダダイ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｍｉｃｄａｄｅｉ）、レジオネラ属の種のエリスロマイシン−感受性株およびレジオネラ属の種のエリスロマイシン耐性株：からなる群より選択される該レジオネラ属の種の病原細菌方法を提供するが。他のレジオネラ属の種の病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
【０３２２】
本発明は、とりわけ、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、シプロフロキサシン（ＣＩＰ）およびトロバフロキサシン（ＴＲＯ−感受性、および−耐性のエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）におけるＧＥＭの抗生物質後効果（ＰＡＥ）を測定することであった。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）のＣＩＰ耐性、臨床分離株は、カナダ全域から集められた。これら分析のもう一つの目的は、ペニシリン−感受性およびペニシリン−耐性のエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対するジェミフロキサシンのＰＡＥを測定することであって、フルオロキノロンへの減少した感受性が、ジェミフロキサシンのＰＡＥに悪影響を及ぼすかどうかを測定することであった。
ジェミフロキサシン（ＧＥＭ）は、ペニシリン−感受性およびペニシリン−耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して活性であり、ＣＩＰ−およびＴＲＯ耐性分離株に対して活性である。ＭＩＣは、ＮＣＣＬＳによって記載される微量培地希釈法を用いて測定された。トポイソメラーゼＩＶ（ｐａｒＣ）およびＤＮＡギラーゼ（ｇｙｒＡ）変異が各遺伝子のＱＲＤＲ領域を配列決定して確認された。２個のフルオロキノロン−感受性および８個の耐性分離株（３個はＣＩＰ−耐性、５個はＣＩＰ、ＴＲＯ−耐性）が、研究のために選択された。ＰＡＥは、２ｈ ４ｘまたは１０ｘ ＭＩＣで対数増殖期生物を暴露することによって測定された。抗微生物薬は滅菌培地に希釈を用いて移され、ＰＡＥは生育可能コロニー計数法を用いて評価された。ＣＩＰのＭＩＣは、０．５−６４μｇ／ｍｌまで変動し、ＴＲＯのＭＩＣは、０．０６−８．０μｇ／ｍｌまで変動した。ＧＥＭのＭＩＣは、≦０．０３−０．５μｇ／ｍｌまで変動した。感受性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）でのＣＩＰの平均ＰＡＥは、４ｘ ＭＩＣで１．６ｈおよび１０ｘ ＭＩＣで２．５ｈであった。ＴＲＯ−感受性分離株で、４ｘ ＭＩＣでの平均ＰＡＥは２．１ｈ、１０ｘ ＭＩＣで３．２ｈであった。ＧＥＭの平均ＰＡＥは、４ｘ ＭＩＣで２．７ｈおよび１０ｘ ＭＩＣで３．８ｈであった。ＣＩＰまたはＴＲＯ−感受性および−耐性株間のＧＥＭ ＰＡＥの持続時間に有意差はなかった（ｐ ＜ ０．０５）。結論として、ＧＥＭは、ＣＩＰおよびＴＲＯ−感受性および−耐性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して非常に活性で、他のフルオロキノロンに減少した感受性を示す分離株において延長するＰＡＥをもたらす。
【０３２３】
ジェミフロキサシンは、ペニシリン−感受性および−耐性ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）両者に対して強力な活性を有する。いくつかのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）実験は、また、他のフルオロキノロンに減少した感受性を有するエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対してジェミフロキサシンが非常に活性であることを証明した。
抗生物質後効果（ＰＡＥ）は、抗微生物薬に短時間暴露後の細菌生育の持続的抑制と定義される。臨床的には、ＰＡＥはインビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）で、薬剤の投与計画および効力において重大な影響を有し得る。抗微生物薬の排泄速度および半減期次第で、抗微生物薬の組織および血中濃度は、次の計画用量の前にＭＩＣ以下に下がり得る。その結果、ＰＡＥを示さない薬剤−病原体組み合わせは、より頻繁な抗微生物薬投与を必要とし得る。しかしながら、延長するＰＡＥの実証は、たとえ抗微生物薬の組織および血清レベルがＭＩＣ以下に下がったとしても、細菌の再生育が起こらないことを保証する。かくして、ＰＡＥ期の間、効力の損失がない。
【０３２４】
エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の１０個の臨床分離株（２個はシプロフロキサシン−感受性、３個はシプロフロキサシン感受性減少、および５個はトロバフロキサシン−耐性「シプロフロキサシン−耐性」）が研究用に選択された。
全分離株は、呼吸器部位から得られた。
ＭＩＣは、ＮＣＣＬＳによって推奨されるの微量培地希釈法を用いて測定された。
簡単には、１８−２０ｈ血液寒天培養液は、生理食塩水中０．５のマックファーランド（ＭａｃＦａｒｌａｎｄ）と同等の懸濁液を調製するのに用いられた。
カチオン−補足ミュラー−ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培地（ＭＨＢ）は、最終濃度５ｘ １０５ＣＦＵ／ｍｌになるよう接種された。溶解ウマ血液は、最終濃度５％になるように添加された。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）のペニシリン感受性を測定する、感受性、中間および耐性の限界点は、：感受性≦０．０６μｇ／ｍｌは、中間０．１２−１μｇ／ｍｌ、および、耐性≧２．０μｇ／ｍｌであった。マイクロタイタープレートを３５℃でインキュベートし、ＭＩＣは、２０−２４ ｈインキュベーション後の細菌生育を阻害する抗微生物薬の最低濃度と定義された（ＮＣＣＬＳガイドラインは、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）について２０−２４ ｈである）。
１ないし２個のコロニーを、人は５０ｍｌのＭＨＢ（５％溶解ウマ血液中）に接種するのに使用し、培養液は３５℃で一晩のインキュベートした。一晩培養液を新たな培地中へ１：５に希釈し、対数増殖期に達するまで３５℃でインキュベートさせた。得られた中間対数期の培養液１ｍｌを、ｉ）培養液９ｍｌを含む生育対照およびｉｉ）培養液８．９ｍｌおよび試験抗微生物薬ストック溶液１００μｌを含む試験培養液、へ添加した。最終濃度、およそ１０６個の分離株に達し、生育可能なコロニー計数によって確認した。３５℃で２ｈインキュベーション後、試験抗微生物薬は、希釈法を用いて移動された。生育対照および試験培養液１００（１００）μｌを新たな培地９．９ｍｌへ移し、その結果１：１００の希釈となった。培養液は３５℃で再度インキュベートされ、著しい濁度が観察されるまで、アリコートを生育可能なコロニー計数のために移した。ＰＡＥは、式； ＰＡＥ＝Ｔ−Ｃ、［式中、Ｔは、試験培養液中の生物が、希釈直後に成育可能なコロニー数より１ｌｏｇ１０増加するのに必要な時間を表し、Ｃは、生育対照中の生物が希釈直後に生育可能なコロニー数より１ｌｏｇ１０を増加するのに必要な時間を表す。］を用いて算出された。
【０３２５】
シプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびジェミフロキサシンのＭＩＣは、表４２に示される。ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンは、ペニシリン−感受性およびペニシリン−耐性のエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、優れた活性を有する。ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシンに減少した感受性、およびトロバフロキサシン耐性を有する分離株に対して活性である。
全薬剤は、４ｘおよび１０ｘ ＭＩＣでエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の十分に感受性の株に対して延長したＰＡＥをもたらした（図１６および１７）。トロバフロキサシンおよびジェミフロキサシン両者は、シプロフロキサシンに減少した感受性を有するエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の分離株に対してかなりのＰＡＥをもたらす。トロバフロキサシンに耐性の分離株について、ジェミフロキサシンはかなりのＰＡＥを保持する（表４３）。
ジェミフロキサシンは、ペニシリン−感受性およびペニシリン−耐性両方のエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、優れた活性を有する。ジェミフロキサシンは、フルオロキノロン耐性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）分離株に対して、非常に活性である。
ジェミフロキサシンは、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）のペニシリン−感受性およびペニシリン−耐性両株に対して、延長したＰＡＥをもたらす。他のフルオロキノロンへの耐性は、ジェミフロキサシンのＰＡＥを有意に変えない。その延長したＰＡＥに結びつけられるジェミフロキサシンの優れた抗肺炎球菌活性は、ジェミフロキサシンが下方気道感染を治療する薬剤として使用され得ることを示す。
【０３２６】
【表７８】
2004507440.tif 000080
【０３２７】
【表７９】
2004507440.tif 000081
【０３２８】
本発明は、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を、容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載のものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ病原細菌感染の疑いを有するか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含むストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌がストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）である方法を提供するが。他のストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）または肺炎球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
【０３２９】
一つには、本発明は、種々のヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）または肺炎球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。
これら分析の目的は、ジェミフロキサシン、新規、広域のフルオロキノロンの抗生物質後効果（ＰＡＥ）を測定することであった。ジェミフロキサシンＰＡＥは、肺炎球菌の５個のキノロン−感受性株および１個のキノロン−耐性株に対して、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、スパルフロキサシン、グレパフロキサシンおよびトロバフロキサシンのそれと比較された。ジェミフロキサシンのＰＡＥは、また、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）の４個のキノロン−感受性株および１個の稀なキノロン−耐性株に対して、同じ５個のキノロンおよびアンピシリン、アモキシリン、アモキシリン／クラブラネート、セフィキシム、セフロキシムおよびアジスロマイシンのそれと比較された。
ジェミフロキサシンは、キノロン−感受性肺炎球菌（０．０１６−０．０３μｇ／ｍｌ対０．０６−２μｇ／ｍｌ他のキノロン）およびキノロン−耐性株（０．２５μｇ／ｍｌ対４−３２μｇ／ｍｌ他のキノロン）両方に対して最低の培地希釈ＭＩＣを有した。６個の肺炎球菌株全てについて、非キノロンのＭＩＣは０．００８−２．０μｇ／ｍｌの範囲であった。ジェミフロキサシンおよび他のキノロンは、全株で、かなりのかつ同様のＰＡＥを有した（１０ｘ ＭＩＣでジェミフロキサシンＰＡＥ ０．４−１．６ ｈ）。
１０ｘ ＭＩＣで、非フルオロキノロンのためＰＡＥは、以下の通りだった：アモキシリン０．４−５．８ｈ、セフロキシム０．８−２．９ｈ、アジスロマイシン１．３−２．９ｈおよびクラリスロマイシン１．８−４．５ｈ。
５ｘ ＭＩＣでのキノロン耐性肺炎球菌株の暴露は、ジェミフロキサシン（０．９ｈ）およびクラリスロマイシン（４．３ｈ）以外、全薬剤について、１０ｘ ＭＩＣでより低いＰＡＥを与え、両暴露のＰＡＥは同様だった。ジェミフロキサシンはまた、エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）のキノロン−感受性株に対して、低いマクロブロス希釈ＭＩＣ（他のキノロンの０．００４−０．０３μｇ／ｍｌと比較して０．００２−０．００４μｇ／ｍｌ）、β−ラクタマーゼを産生するキノロン−耐性株（他のキノロンのＭＩＣ１−４μｇ／ｍｌ）に対して、最も低いＭＩＣ（０．５μｇ／ｍｌ）を有した。５個のエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）株全てについて、非キノロンのＭＩＣが範囲０．０１６−＞１６μｇ／ｍｌであった。ジェミフロキサシンは、試験されるエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）全てのキノロン−感受性株のＰＡＥを与えた（他のキノロンの０−６．２ ｈと比較して１０ｘ ＭＩＣで０．３−２．３ ｈ）。５株のアジスロマイシンＰＡＥは、３．７−７．３であった。
β−ラクタムは４株においてＰＡＥを与えず、１個のβ−ラクタマーゼ欠損株においてＰＡＥ０．２−１．７を与えた。１０ｘ ＭＩＣで、キノロン−耐性菌において、キノロンのＰＡＥは、見出されなかった。
【０３３０】
ペニシリンＧおよび他のβ−ラクタムおよび非β−ラクタム化合物に耐性の肺炎球菌の世界的な出現率は、特に南アフリカ、スペイン、中央および東ヨーロッパおよびアジアの一部では、大いに増加している。肺炎球菌のペニシリン耐性はまた、１９９１−９２年に報告される値６．６％で米国でも増加しており、（Ｂｒｅｉｍａｎ， ｅｔ ａｌ．， ＪＡＭＡ， ２７１： １８３１−１８３５ （１９９４））、最近の調査で（１９９４−１９９５）は、２３．６％まで上がった （Ｄｏｅｒｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １２０８−１２１３ （１９９６））。ペニシリン−中間的およびペニシリン耐性肺炎球菌によって引き起こされる中耳炎および気道感染（ＲＴＩ）の通院患者治療のための口腔化合物の切迫した必要性がある。シプロフロキサシンおよびオフロキサシンのごとき利用できるキノロンは、限界点のあたりのＭＩＣクラスターで肺炎球菌に対する中程度のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を産する（Ｊａｃｏｂｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｒｅｖ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ６： ７７−９３ （１９９５））。ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５； ＬＢ ２０３０４ａ）、新規の、広域の新規ピロリドン置換基を有するカルボン酸フルオロナフチリドンの予備的研究（Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ２０４−２１１ （１９９７）； Ｈｏｈｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ．， ４： ２８０−２８４ （１９９６）； Ｏｈ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １５６４−１５６８ （１９９６））は、肺炎球菌に対して非常に活性であることを示した。
ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）ｂ型に対する有効なワクチンの開発により、世界の多くの地域でこの生物の消滅に至ったけれども、その位置は、分類不可能なヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）株によって取られた。後者生物（ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）およびモラキセラ・カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）が後に続く）は、現在慢性気管支炎の急性増悪の主要な原因および急性中耳炎、副鼻腔炎および院外感染性のＲＴＩの重要な原因であると考えられる。予備研究は、ジェミフロキサシンがエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）およびエム・カタラリス（Ｍ． ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）に対して非常に活性であることを示す（Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ２０４−２１１ （１９９７）； Ｈｏｈｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ．， ４： ２８０−２８４ （１９９６）； Ｏｈ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １５６４−１５６８ （１９９６））．
抗生物質後効果（ＰＡＥ）は、抗微生物薬への短時間暴露後細菌生育が抑制される時間の長さと定義される（Ｃｒａｉｇ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎ： Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ， ｐｐ． ２９６−３２９ （１９９６））。抗微生物薬の投与計画を選択する場合、この薬力学的パラメータは有用である。この研究は、肺炎球菌およびエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）株に対して、他の抗微生物薬と比較してジェミフロキサシンのＭＩＣおよびＰＡＥを検討した。
【０３３１】
ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、スパルフロキサシン、グレパフロキサシンおよびトロバフロキサシンは、肺炎球菌の５個のキノロン−感受性株（シプロフロキサシンＭＩＣ＜２μｇ／ｍｌ））および１個の耐性株（シプロフロキサシンＭＩＣ ＞８μｇ／ｍｌ））に対して試験された。これらキノロンおよびアンピシリン、アモキシリン、アモキシリン／クラブラネート、セフィキシム、セフロキシムおよびアジスロマイシンは、エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）の４個のキノロン−感受性株（シプロフロキサシンＭＩＣ≦０．０１６μｇ／ｍｌ）および１個の稀なキノロン−耐性株（シプロフロキサシンＭＩＣ ２μｇ／ｍｌ）に対して試験された。ジェミフロキサシン感受性散剤は、スミス・クライン・ビーチャム・ラボラトリーズ（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｈａｒｌｏｗ， Ｅｓｓｅｘ， ＵＫ）から得られた。他の薬剤はそれぞれの製造業者から得られた。
ＰＡＥについて試験される肺炎球菌株の培地ＭＩＣは、５％溶解脱繊維ウマ血液中、カチオン調整ミュラー−ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培地（ＭＨＢ）を用いてＮＣＣＬＳ推奨によって行った。（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ７−Ａ４， Ｖｉｌｌａｎｏｖａ， ＰＡ， ＵＳＡ （１９９７））。標準の品質管理株は、培地希釈ＭＩＣの各運転に含まれた。エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）について、β−ラクタマーゼ産生はセフィナーゼディスク法（ＢＢＬ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）によって試験された。以前の時間−死滅研究が、マクロブロス方法によって測定されるＭＩＣが微量培地法によって得られるものより１−２希釈低いことを示したため、ＭＩＣは視覚的にマクロブロス時間−死滅アッセイから視覚的にとられた。標準の品質管理株は、各運転に含まれた。
ＰＡＥは、肺炎球菌用５％溶解ウマ血液で補足されたＭＨＢおよびエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）用の新たに作られたＨＴＭＭＨＢを用いて、生菌プレート計数法によって測定された（Ｃｒａｉｇ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎ： Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ， ｐｐ． ２９６−３２９ （１９９６））。（＃１ マックファーランド（ＭｃＦａｒｌａｎｄ）濁度の）接種量は、およそ５ｘ １０６ＣＦＵ／ｍｌの懸濁液を生じるように希釈された。ＰＡＥは、１ｈ、１０ｘ ＭＩＣの試験薬剤への全株の暴露によって誘導された。キノロン耐性肺炎球菌株は、また、５ｘ ＭＩＣのキノロン濃度に暴露された。（抗微生物薬が希釈後、もはや静菌的でなかったことを確認するために）接種物を含むが抗微生物薬は含まない生育対照および細菌および０．０１ｘ ＭＩＣの抗微生物薬を含む対照は、また、試験された。
【０３３２】
チューブ濁度が＃１ マックファーランド（ＭｃＦａｒｌａｎｄ）基準に達するまで、細菌が試験薬剤に暴露される前、希釈直後（０ｈ）、およびついで２ｈ毎に、生菌数が測定された。
回収プレートは、２４ｈインキュベートされ、３０−３００個のコロニーを生じるプレート上でコロニー計数した（Ｃｒａｉｇ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎ： Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ， ｐｐ． ２９６−３２９ （１９９６））。
ＰＡＥはＴ−Ｃ［式中、Ｔが抗微生物薬−暴露培養液の生菌数が、希釈直後より１ ｌｏｇ１０増加するのに必要な時間であって、Ｃは生育対照の対応する時間である］と定義される。
各実験について、生菌数（ｌｏｇ１０ ＣＦＵ／ｍｌ）が時間に対してプロットされ、結果は２つ別のアッセイの平均として表された（Ｃｒａｉｇ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎ： Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ， ｐｐ． ２９６−３２９ （１９９６））。
キノロン−感受性肺炎球菌株の培地微量希釈ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）は：ジェミフロキサシン０．０１６−０．０３、シプロフロキサシン０．５−１、レボフロキサシン１−２、スパルフロキサシン０．１２５−０．５、グレパフロキサシン０．０６−０．２５、トロバフロキサシン、０．０６−０．１２５、アモキシリン０．０１６−１、セフロキシム０．２５−２、アジスロマイシン０．００８−０．１２５およびクラリスロマイシン０．００８−０．０３であった。
キノロン−耐性株の対応するＭＩＣは、キノロンそれぞれに対し、０．２５、３２、３２、１６、８、４μｇ／ｍｌであり、非キノロンそれぞれに対して、０．００８、０．０１６、０．１２５および０．０３μｇ／ｍｌであった。キノロン−感受性肺炎球菌株の１０ｘ ＭＩＣで得られるＰＡＥは、表４４に示される。
５ｘ ＭＩＣで、キノロン−耐性株のＰＡＥ（ｈ）は、：ジェミフロキサシン、０．９；シプロフロキサシン、３．７；レボフロキサシン、１．３；スパルフロキサシンおよびグレパフロキサシン、１．５；およびトロバフロキサシン、１．３であった。
エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）の４個のキノロン−感受性株および１個のキノロン−耐性株中で、３個（耐性菌を含むが）β−ラクタマーゼ陽性であり、アンピシリンまたはアモキシリンのＰＡＥについて試験されなかった。キノロン−感受性株のキノロンのマクロブロス希釈ＭＩＣ範囲（μｇ／ｍｌ）は、：ジェミフロキサシン、０．００２−０．００４；シプロフロキサシン、０．００４−０．０１６；レボフロキサシン、０．００８−０．０３；およびスパルフロキサシン、グレパフロキサシンおよびトロバフロキサシン、０．００４−０．００８であった。キノロン−耐性株の対応するＭＩＣは、それぞれ、０．５、２、２、２、１および４μｇ／ｍｌであった。５個のエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）株全てに対する非キノロンのＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）は：アンピシリン、アモキシリン、０．２５−＞１６；アモキシリン／クラブラネート、０．２５−０．５；セフィキシム、０．０１６−０．２５；セフロキシム、０．５−２；およびアジスロマイシン、０．５−２であった。１０ｘ ＭＩＣでのキノロン−感受性株のＰＡＥは、表４５に与えられる。β−ラクタムは３個の株においてＰＡＥを与えず、１個のβ−ラクタマーゼ−陰性株においてＰＡＥ０．２−１．７ ｈを与えた。
【０３３３】
１０ｘ ＭＩＣで、キノロンＰＡＥは、キノロン−耐性株に見出されなかった。
ジェミフロキサシンは、キノロン−感受性およびキノロン−耐性両方の肺炎球菌に対して、ＭＩＣによって試験される最も強力なキノロンである。
他のキノロンと共に、ジェミフロキサシンは、試験されるキノロン−耐性株を含む全ての肺炎球菌株に対してかなりのＰＡＥを有する。後者は、薬剤投与計画に関して有利であり、ジェミフロキサシンの使用が肺炎球菌におけるキノロン耐性の発生を遅くするのを助け得ることを示す。
ジェミフロキサシンは、エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）のキノロン− 感受性株に対して非常に活性である。ジェミフロキサシンのみは、増加したキノロンＭＩＣを有する稀な株に対するＭＩＣ≦０．５μｇ／ｍｌを論証した。ジェミフロキサシンは、キノロン−感受性エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）株に対してかなりのＰＡＥを有する。ジェミフロキサシンは、肺炎球菌（キノロン−耐性株を含む）、エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、レジオネラ属の種、クラミジア属の種およびマイコプラズマのごとき気道病原体に対して、広域スペクトラムの活性を有する。この化合物は、院外感染性ＲＴＩの経験的治療の他のキノロンおよび非キノロン剤の魅力的な代替品を表す。
【０３３４】
【表８０】
2004507440.tif 000082
【０３３５】
【表８１】
2004507440.tif 000083
【０３３６】
本発明は、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）または肺炎球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）または肺炎球菌病原細菌またはこれら生物に感染あるいは、その疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）または肺炎球菌病原細菌感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）または肺炎球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該病原細菌がヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）および肺炎球菌：よりなる群から選択される方法を提供するが。他のヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）または肺炎球菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、連鎖球菌およびブドウ球菌またはエンテロバクテリアカエ属細菌のごときグラム陽性細菌病原体に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のス連鎖球菌およびブドウ球菌またはエンテロバクテリアカエ属病原体のごときグラム陽性細菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、投与に続く７日、プラセボと比較して健康者の糞便細菌叢に対するジェミフロキサシンの効果を測定することであった。
【０３３７】
キノロンは、正常なヒト腸管のミクロフローラに対する選択的効果を有する。
異なるキノロン剤（シプロフロキサシン、エノキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、ペフロキサシン、ロメフロキサシン、レボフロキサシン、スパルフロキサシン、ルフロキサシン、シタフロキサシン、ガチフロキサシン、トロバフロキサシンおよびモキシフロキサシン）の公開データは、治療中、グラム陰性好気性細菌、特にエンテロバクテリアカエ属が強く抑制あるいは除去されることを示す。ジェミフロキサシンは、メチシリン−感受性およびメチシリン−耐性ブドウ球菌、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）およびエンテロバクテリアカエ属の大部分のメンバーを含むグラム陽性およびグラム陰性微生物に対して、広域の抗菌活性を有することが示された新規フルオロキノロンである。
本研究の目的は、ヒト腸管のミクロフローラに対するジェミフロキサシンの効果を調査することであった。ジェミフロキサシンは、１０人の健康者へ７日間、経口投与量３２０ｍｇで投与され、５人の被検者は、７日間、毎日一回量の比較プラセボを投与された。糞便試料は、投与前（−８および−６日）、投与期間（２および４日）および投与中止後（８、１１、２１、２８および５６日）集められた。好気性の腸管のミクロフローラで、ジェミフロキサシン投与期間、腸内細菌の数は抑制され、腸球菌および連鎖球菌の数もまた、減少した。他のいかなる好気性微生物も、影響されなかった。ジェミフロキサシン投与期間、嫌気性ミクロフローラで、嫌気性球菌および乳酸桿菌の数は抑制され、その一方で他のいかなる変化も起こらなかった。ジェミフロキサシンの投与中止４９日後、ミクロフローラは正常化された。耐性細菌株または酵母の選択または過成長は、起こらなかった。ジェミフロキサシンの生態学的影響は、好都合であり、選択的であり、かつガチフロキサシン、トロバフロキサシンおよびモキシフロキサシンのそれと同様であることが示された。
【０３３８】
キノロンは、概して好気性グラム陰性生物に対する強力な活性を有するが、グラム陽性生物に対してより低い活性である一群の抗微生物薬である。しかしながら、より新規のキノロンは、グラム陽性生物に対して促進された活性を有する。キノロンは、糞便でのエンテロバクテリアカエ属を減少するが、嫌気性のミクロフローラおよび腸球菌に対してほとんど影響しない。糞便のミクロフローラを調査する臨床研究において、キノロン−耐性菌による集落形成は一般に示されなかった。
ジェミフロキサシンは、連鎖球菌を含むグラム陽性細菌に対して高い活性を有する。単一のセンター、ランダム化、二重盲検、管理プラセボ、並行集団研究が実行された。被検者は、８人の健康な男子および７人の健康な女子ボランティアから成った（体重範囲５３．１０−９３．８０ｋｇ、身長範囲１．６０−１．８４ｍおよび年齢範囲は、２４−４４歳）。被検者は、２：１の割合で３２０ｍｇのジェミフロキサシンまたはプラセボを受けるためにランダム化された。１０人の被検者は、７日間、経口投与量３２０ｍｇのジェミフロキサシンを毎日１回、受け、５人の被検者は毎日１回、経口投与量の比較プラセボを受けた。
糞便試料は、投薬前６および８日、およびついでジェミフロキサシンまたは比較プラセボ初回投与後２、４、８、１１、２１、２８および５６日に取られた。
糞便試料は、８日目までの試料については±２４時間以内に標的の日に集められ、以降の試料については、±２日が許容できた。
糞便の試験片の微生物学的分析は、ハイムダール（Ｈｅｉｍｄａｈｌ）およびノード（Ｎｏｒｄ）に記載されるごとく実行された（Ｈｅｉｍｄａｈｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｓｃａｎｄ． Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １１： ２３３−２４２ （１９７９））。試験片は、予め減少したペプトン−酵母エキス培地で懸濁されて、希釈され、選択培地上に接種された。好気性寒天プレートは、３７℃、２４ｈ、嫌気性プレートは嫌気性ジャー（ＧａｓＰｌａｋ， ＢＢＬ， ＵＳＡ）で３７℃、４８ｈ インキュベートされた。インキュベーション後、異なるコロニー型は、計数され、純培養液に単離され、形態学的および生化学試験およびガス液体クロマトグラフィーを用いて属レベルで同定された。検出下限は、糞便のグラムにつき１０微生物であった（Ａｒｒｏｎｓｓｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， １４： ８５−８９ （１９８４））。さらに、ジェミフロキサシンの糞便の濃度を測定するために、微生物学的アッセイが実行された。
【０３３９】
脈拍、血圧、１２−リードＥＣＧ記録、臨床実験室パラメータおよび有害な事象は、実験を通して、全被検者でモニターされた。糞便のミクロフローラ終末点の変化は、ジェミフロキサシンおよびプラセボ間で時間について比較された。実行される正式な統計分析はなかった。
ジェミフロキサシンの投与による好気性糞便ミクロフローラに対する影響は、図２０に示される。エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）は投与期間中、抑制され、腸球菌および連鎖球菌の数は減少した。これら好気性細菌は、ジェミフロキサシンの最後の投与２１日後に正規化された。他のいかなる好気性微生物も、ジェミフロキサシン投与に影響を受けなかった。著しい交替は、プラセボ群において見出されなかった。
ジェミフロキサシンの投与による嫌気性の糞便ミクロフローラに対する影響は、図２１に示される。ジェミフロキサシンの投与の間嫌気性球菌および乳酸桿菌の数は減少し、その一方で他のいかなる大きな変化も起こらなかった。嫌気性ミクロフローラは、最後の投与２１日後、正常に戻った。プラセボ治療の間、嫌気性ミクロフローラでの著しい変化は、気づかれなかった。ジェミフロキサシン耐性細菌または酵母の選択または過成長は、起こらなかった。
ジェミフロキサシン（３２０ｍｇ）は、健康な男子および女子被検者で十分に許容された。
生存徴候、ＥＣＧまたは実験値に、臨床的に関連した変化はなかった。ジェミフロキサシン投与の間、腸内細菌、腸球菌および連鎖球菌の数は、抑制された。他のいかなる好気性微生物も、影響を受けなかった。ジェミフロキサシン投与の間、嫌気性球菌および乳酸桿菌の数は抑制され、その一方で他のいかなる変化も起こらなかった。ジェミフロキサシンの投与中止４９日後、全ての好気性および嫌気性微生物は正常化された。耐性細菌株または酵母の選択または過成長は、起こらなかった。ジェミフロキサシンの生態学的影響は、有利であり、選択的かつ、ガチフロキサシン、トロバフロキサシンおよびモキシフロキサシンのそれと同様であることが示された。
本発明は、連鎖球菌およびブドウ球菌のごとき、グラム陽性細菌病原体およびエンテロバクテリアカエ属病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。
【０３４０】
当業者は、本発明の方法を行うために、連鎖球菌およびブドウ球菌のごときグラム陽性細菌病原体またはエンテロバクテリアカエ属病原細菌またはこれら生物に感染あるいは、その疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、連鎖球菌およびブドウ球菌のごときグラム陽性細菌病原体またはエンテロバクテリアカエ属病原細菌感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、連鎖球菌およびブドウ球菌のごときグラム陽性細菌病原体またはエンテロバクテリアカエ属病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該病原細菌が連鎖球菌およびブドウ球菌のごときグラム陽性細菌病原体またはエンテロバクテリアカエ属細菌：からなる群より選択される方法を提供するが。他のグラム陽性またはグラム陰性病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、グラム陽性細肺炎球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のグラム陽性肺炎球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。
【０３４１】
これらの分析の目的は、ＢＯＸおよびＰＦＧＥフィンガープリント法を用いて、オフロキサシン、シプロフロキサシンおよびレボフロキサシンに対し上昇したＭＩＣで株の抗微生物薬感受性およびクロナリティーを測定することであった。
少数の多剤耐性肺炎球菌クローンがグ世界的に広まり、多くの国での侵入性肺炎球菌疾病の取り扱いに対しかなりの脅威となっている。フルオロキノロンが気道感染の経験的取り扱いについて、広く主張されてこなかったけれども、グラム陽性生物、特にストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対する促進された活性を有する同じクラスの薬剤の最近の開発は、将来、このクラスの薬剤より大いなる使用に至りそうである。合計３６１株は、オフロキサシン、シプロフロキサシン、レボフロキサシンおよびジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）を含む一団の抗生物質に対して試験された。２０株は「より古い」キノロンに対し耐性であった（ＭＩＣ≧８μｇ／ｍｌ）が、ジェミフロキサシンのＭＩＣは、低くいままであった（＜０．１２μｇ／ｍｌ）。これら耐性株のＤＮＡフィンガープリント法は、元来キノロン感受性であると思われた汎発流行性のスペイン２３Ｆ−１およびフランス９Ｖ−３クローンと同一であるセロタイプ９Ｖおよび２３Ｆ株を示した。ＵＳＡの十分なペニシリン耐性肺炎球菌のおよそ３分の１は、スペイン２３Ｆ−１クローンに属している。データは、フルオロキノロン耐性が多耐性肺炎球菌の汎発流行性クローンに出現し得ることを示し、フルオロキノロンへの肺炎球菌耐性の連続サーベイランスは必須である。新規フルオロキノロン　ジェミフロキサシンは、ペニシリンおよびより古いフルオロキノロンに耐性の肺炎球菌株に対して活性を保持する。
ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、ヒトの罹患率および死亡率の重大な原因であり続ける。ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、細菌性肺炎、副鼻腔炎および中耳炎の主要な原因であって、髄膜炎の重要な原因である。過去１０年は、ペニシリンＧおよび他のβ−ラクタムおよび非−β−ラクタム抗微生物薬に耐性である肺炎球菌株の出現率の劇的な増加が見られた。問題は、国から国までおよび大陸から大陸まで限られた数の肺炎球菌クローンの蔓延によって悪化した。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対する促進された活性を有する新規フルオロキノロン（ＦＱ）の最近の開発が、肺炎球菌疾病の取り扱いにおいてもしかすると、重要な進歩であるけれども、現在利用できるＦＱの耐性の出現の報告は増加している。ＦＱ耐性に寄与する因子を測定するために、オフロキサシン−耐性（≧８μｇ／ｍｌ）およびオフロキサシン−感受性（≦４μｇ／ｍｌ）株両者が調査された。この研究では、株のクロナリティーが評価され、ＤＮＡギラーゼおよびトポイソメラーゼＩＶのｇｙｒＡ、ｇｙｒＢ、ｐａｒＣおよびｐａｒＥ遺伝子での突然変異が同定された。
【０３４２】
株は、１９９７年のアレキサンダー・プロジェクトおよび北アイルランド研究から得られた。セロタイプ決定することは、ステイテンズ・シーラム・インスティテュート（Ｓｔａｔｅｎｓ Ｓｅｒｕｍ Ｉｎｓｔｉｔｕｔ）からの血清でクエラング（Ｑｕｅｌｌｕｎｇ）反応によって実行された。使用される抗微生物薬は、以下の通りだった：ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）、バッチ＃ＰＮＳ−Ａ−０３Ｃ、作用強度７５．４％（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， ＵＫ）；オフロキサシン、シプロフロキサシンおよびレボフロキサシンＥ試験ストリップ（ＡＢ Ｂｉｏｄｉｓｋ， Ｓｗｅｄｅｎ）；ペニシリンＧ、エリスロマイシン、クロラムフェニコール、クリンダマイシン、テトラサイクリン、リファンピン、セフォタキシムおよびトリメトプリムおよびサルファメトキサゾール（Ｓｉｇｍａ， ＵＳＡ）。
感受性試験は、ＮＣＣＬＳガイドラインによってＥ−試験および培地微量希釈法を使用して、実行された。ＢＯＸ−フィンガープリント法によるＤＮＡタイピングは、以下のごとく実行された：ゲノムＤＮＡは、プロテナーゼＫ−ＳＤＳフェノール／クロロホルム法によって単離された。ＰＣＲは、プライマーＡＲ１を用いて、体積５０ μｌ で、９０℃１分、５２℃１分および７２℃２分で３０サイクル、で実行された。産物は、１２０Ｖで２ｈ後、２％アガロースゲル上で視覚化された。ＳｍａＩ酵素を用いるＤＮＡ制限で、以前記載の、パルスフィールド・ゲル電気泳動（ＰＦＧＥ）が実行された（Ｆｏｘ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １７５： １３９６−１４０３ （１９９７） ）。ＧｙｒＡ、ｇｙｒＢ、ｐａｒＣおよびｐａｒＥ遺伝子は、ＰＣＲによって増幅され、シーケネース（Ｓｅｑｕｅｎａｓｅ ）ｖｅｒ．２シークエンシングキット（ＵＳ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ， Ｏｈｉｏ， ＵＳＡ）によって、手動で配列決定された。
表４６は、セロタイプ決定、感受性試験、ＤＮＡタイピングおよびキノロン耐性決定領域（ＱＲＤＲｓ）の配列決定のデータを示す。試験される３６１株中、オフロキサシンＭＩＣ≧８μｇ／ｍｌを有する２０株が同定された。多くの低レベルのオフロキサシン−感受性株（≦４μｇ／ｍｌ）は、比較のために含まれた。耐性株の大多数（７５％）は、セロタイプ９Ｖ、２３Ｆおよび６Ｂに属していた。ＢＯＸ−フィンガープリント法およびＰＦＧＥを用いるＤＮＡタイピングは、試験される４１株について同定される２６の型を伴う、基本的に異種の個体群を明らかにした。
【０３４３】
４個のセロタイプ９Ｖオフロキサシン耐性分離株が、スペインおよびフランスに存在するフランス９Ｖ−３クローンと同一であると同定された。これは、広く世界中至る所で広められ、イタリア、スウェーデン、ドイツ、ＵＳＡ英国および南アメリカおよび極東で同定された。さらに、２個の２３Ｆ ＦＱ分離株が、よく論証されているスペイン２３Ｆ−１クローンのメンバーと同定された。米国の最近の研究で、４０％の非常にペニシリン耐性な分離株がスペイン２３Ｆクローンに属していることが分かった（Ｋｉｌｍａｒｘ、ｅｔ，ａｌ．，Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．（１７７）：６７７−６８２ （１９９８）。研究中のキノロン−耐性株は、スペイン６Ｂ−２クローンに属していると同定されなかった。国際的なクローンでのＦＱ耐性の出現およびその播種能力は、したがって、潜在的な懸念である。
推定ＱＲＤＲアミノ酸変化は、オフロキサシン−感受性およびオフロキサシン−耐性株両方のｇｙｒＡ、ｇｙｒＢ、ｐａｒＣおよびｐａｒＥについて確認された。
最も頻繁なｇｙｒＡ置換は、それぞれ３個、および２個の分離株に存在するＳ８１Ｙを有するＳ８１ＦおよびＥ８５Ｋであった。１個の分離株は、Ｓ１１４ＧおよびＡ１７Ｔに置換を示した。５個の分離株は、ｇｙｒＢの変化を示した。ＰａｒＣは、最も多くの変化を含に、頻繁な置換、Ｋ１３７Ｎ は単独で、あるいはＳ７９ＦまたはＳ７９Ｙ組み合わせで遭遇し； ２個の他の突然変異は、また、主要な置換として、Ｄ８３ＮおよびＤ８３Ｇ単独で、あるいはＳ７９Ｆと組み合わされて、観察された。優勢なｐａｒＥ置換は、Ｉ４６０Ｖであった。ｐａｒＣでのアミノ酸置換Ｉ４６０ＶおよびＫ１３７Ｎは、多数のＦＱ感受性株に存在し、耐性においてより小さい役割をするように見える。ｐａｒＣでの置換Ｓ７９ＦおよびｇｙｒＡでのＳ８１Ｆは、最も高い平均ＭＩＣと関係しているようだ。
キノロン−感受性フランス９Ｖ−３対照株のｐａｒＣおよびｐａｒＥでの突然変異の存在は、重要である。スペイン２３Ｆ−１およびスペイン６Ｂ −２対照株での推定突然変異の同定は、進行中であり、これら国際的クローンにＦＱ耐性の出現率における若干の洞察を提供することができるだろう。
【０３４４】
ジェミフロキサシンは、ペニシリンおよび他のフルオロキノロンに耐性の肺炎球菌株に対して活性を保持する。国際的クローンスペイン２３Ｆ−１およびフランス９Ｖ−３のキノロン−耐性株が同定された。
【０３４５】
【表８２】
2004507440.tif 000084
【０３４６】
【表８３】
2004507440.tif 000085
【０３４７】
【表８４】
2004507440.tif 000086
【０３４８】
本発明は、グラム陽性肺炎球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、グラム陽性肺炎球菌病原細菌またはこれら生物に感染あるいは、その疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであるかもしれない。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、グラム陽性肺炎球菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、グラム陽性肺炎球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該グラム陽性肺炎球菌病原細菌がストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他のグラム陽性肺炎球菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、淋菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々の淋菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、上昇されたシプロフロキサシンＭＩＣを有する３分の１の株を含む１５０個の淋菌に対するジェミフロキサシンの活性を測定することおよび新規薬剤へのエヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）の感受性を定義するための基準を確立することであった。これら分析は、ＭＩＣおよびディスク拡散間ならびにＥ試験（ＡＢ ＢＩＯＤＩＳＫ， Ｓｏｌｎａ， Ｓｗｅｄｅｎ）、より複雑な寒天希釈法に対する単純かつ有効な代替法、で高い相関を示した。ルーチン的臨床実験の使用についてＥ試験を確認するために、Ｅ−試験結果は、また、対照標準ナショナル・コミッティー・フォー・クリニカル・ラボラトリー・スタンダード（ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ） （ＮＣＣＬＳ）寒天希釈法と比較された（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｔｅｎｔａｔｉｖｅ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ Ｍ２３−Ｔ３， Ｗａｙｎｅ， ＰＡ ＵＳＡ （１９９８））。
【０３４９】
ジェミフロキサシンの活性は、対照標準寒天希釈、標準化ディスク拡散およびＥ−試験（ＡＢ ＢＩＯＤＩＳＫ， Ｓｏｌｎａ， Ｓｗｅｄｅｎ）方法を使用して５０個のシプロフロキサシン耐性分離株を含む１５０個のナイセリア・ゴノロアエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）株に対して試験された。
ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシン−感受性株に対して非常に強力である（ＭＩＣ９０ ０．００８μｇ／ｍｌ）が、シプロフロキサシン耐性淋菌に対して１６倍活性が低い。フルオロキノロン−耐性変異株に対するフルオロキノロン活性の順位序列は：ジェミフロキサシン（ＭＩＣ９０、０．１２μｇ／ｍｌ）＞トロバフロキサシン（０．２５ μｇ／ｍｌ）＞モキシフロキサシン＝グレパフロキサシン（０．５μｇ／ｍｌ）＞シプロフロキサシン（１μｇ／ｍｌ）であった。Ｅ試験および対照標準寒天希釈ＭＩＣ結果は優れた相関（ｒ ＝ ０．９６）を示し、＞９８％ ＭＩＣは±１ ｌｏｇ２希釈（完全一致）の範囲内である。寒天希釈ＭＩＣは、また、ジェミフロキサシン５μｇ円板を用いて得られる帯直径と比較され；完全な方法間の絶対的一致（１００％）は、以下のごとくに提案される限界点を適用して達成された：感受性ついて、≦０．２５μｇ／ｍｌ（帯、≧２５ｍｍ）および耐性について≧１μｇ／ｍｌ（帯≦２１ｍｍ））。これら基準は、トロバフロキサシンのために承認されるものに従う。ガチフロキサシンＭＩＣおよびディスク拡散試験ＱＣ範囲は、エヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ） ＡＴＣＣ ４９２２６のために確立された。データは、≧７研究室から集められ、寒天ＭＩＣおよびディスク法両者のために３ 個のＧＣ寒天培地ロットおよび各々５および１０μｇディスク２ロット。提案されたＭＩＣ品質管理（ＱＣ）範囲は、０．００２−０．０１６μｇ／ｍｌであり、両ディスクに対する算出ｍｍ帯範囲（メジアン±０．５×平均値範囲）は類似的だったが、結果の８８．１および９１．９％のみを含んだ。許容されるものを達成する範囲内の全実験結果の≧９５％許容、を達成するために、４３−５４ｍｍの制限が必要だった。ジェミフロキサシンの優れた広域活性および低い副作用プロフィールは、キノロン耐性淋病の治療の可能性を示す。
【０３５０】
淋菌感染症は、重要な世界的問題であり続ける。初期には、ペニシリンおよび／またはテトラサイクリンがナイセリア・ゴノロアエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）に対する最初の系統薬剤であったが、最近３０年に、がペニシリナーゼ産生（ＰＰＮＧ）およびテトラサイクリン耐性（ＴＲＮＧ）ゴノコッカス属での広範囲にわたり、増加している感染があった。
セフトリアキソン、セフィキシム、セフポドキシム、セフォテタン、セフォタキシム、セフォキシチン、セフタジジムおよびセフロキシムのごときβ−ラクタマーゼ安定「第二−、または、第三世代」のセファロスポリンを含む、合併しない淋病のための代替療法が推奨されている。治療のもう一つの道は、フルオロキノロン・クラスの抗微生物薬であった。
シプロフロキサシンおよびオフロキサシンは、初期の一用量実施の間、非常に有効であることがわかった。しかしながら、シプロフロキサシン耐性を有する淋菌が急速に出現し、これら株の発生割合が世界的に増加しているように見える（Ｆｏｘ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １７５： １３９６−１４０３ （１９９７）； Ｋｉｌｍａｒｘ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １７７： ６７７−６８２ （１９９８）； Ｔａｐｓａｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｄ． Ｊ． Ａｕｓｔ．， １５６： １４３ （１９９２））； Ｖａｎ ｄｅ Ｌａａｒ， ｅｔ ａｌ．， Ｇｅｎｉｔｏｕｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄ．， ７３： ５１０−５１７ （１９９７））。さらに、ＰＰＮＧ株は、非−ＰＰＮＧと比較してセフトリアキソンおよびシプロフロキサシンのより高いＭＩＣを示した。１９９２−１９９４年間の淋菌のサーベイランスにおける最近のＷＨＯレポートは（Ａｎｏｎｙｍｏｕｓ， Ｇｅｎｉｔｏｕｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄ．， ７３： ３５５−３６１ （１９９７）） 、耐性分離株の数およびＭＩＣの程度に関して、フルオロキノロン耐性が増加し、広まるようになると文書化した。同一の時間枠の間、合衆国の研究がシプロフロキサシンに減少した感受性を有する淋菌感染の２０％増加を示した（Ｆｏｘ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １７５： １３９６−１４０３ （１９９７））．
シプロフロキサシンＭＩＣの上昇は、細菌染色体でｇｙｒ ＡおよびｐａｒＣ遺伝子の突然変異と関係していた（Ｄｅｇｕｃｈｉ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １０２０−１０２３ （１９９６））．
【０３５１】
シプロフロキサシン耐性の非常に高いレベル（８−６４μｇ／ｍｌ）はｐａｒＣ遺伝子での二重突然変異に追従する。これら多発性の突然変異は、また、その構造類似性のため、最も新規に発展したスペクトラムのフルオロキノロンにより低感受性の生物を産出する。
ジェミフロキサシンは、多様な病原体に対して他の現在利用できるフッ化キノロンと比較して、優れたインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を有することが示された（Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ２０４−２１１ （１９９７）； Ｈｏｈｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ．， ４： ２８０−２８３ （１９９８）； Ｍａｒｃｏ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ６０５−６０７ （１９９７）； Ｏｈ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １５６４−１５６８ （１９９６））。シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）対シプロフロキサシンのそれのごとき静菌的効果を示す一方、ジェミフロキサシンはまた、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）およびエシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に殺菌的である。コーミカン（Ｃｏｒｍｉｃａｎ）およびジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）は、ジェミフロキサシンがフルオロキノロン−およびグリコペプチド−耐性株を含むグラム陽性種に対して試験される最も活性な薬剤であることを見出した（Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ２０４−２１１ （１９９７））。ジェミフロキサシンはまた、多くのグラム陰性病原体に対してシプロフロキサシンと同様な活性を有した。いくつかの以前の報告は、非常に強力なジェミフロキサシンと、限られた数の淋菌（シプロフロキサシン耐性分離株を含まない）を研究した。ジェミフロキサシンが淋病の治療として用いられることになっている場合、より多くの数のフルオロキノロン−耐性株を含む生物を研究し、従って、交差耐性の可能性を評価することは重要である。また、品質管理限界は、ルーチン的臨床実験室試験または耐性サーベイランス研究における使用のために確立されなければならない。
スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， ＰＡ）は、臨床試験用医薬品、ジェミフロキサシンを供給した。他のコンパレータ−薬剤は、各々の製造業者から得られた。ジェミフロキサシンＥ試験ストリップは、ＡＢ ＢＩＯＤＩＳＫによって作られた。ジェミフロキサシン５および１０μｇディスクは、オキソイド（Ｏｘｏｉｄ）（Ｈａｍｐｓｈｉｒｅ， ＵＫ）によって生産され；ビーディー・マイクロバイオロジカル・システムズ（ＢＤ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ）（Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ（ＭＤ））が対照シプロフロキサシン（５μｇ）ディスクを生産した。対照標準寒天ＭＩＣ試験用の抗微生物薬溶液が製造業者の取扱説明書に従って調製され、使用されるまで、−７０℃でアリコートで貯蔵された。ジェミフロキサシン溶液は、試験の日毎に、新たに作られた。
【０３５２】
最近の、かつ対照標準のストック臨床分離株を含むエヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）の合計１５０株がこの調査で使用された。１００個の淋菌株は、シプロフロキサシン−感受性であった（帯直径、≧４１ｍｍ； ＭＩＣ、≦０．０６μｇ／ｍｌ）。これらのシプロフロキサシン−感受性株は、さらに、そのペニシリン感受性に基づいて、分類された：１９個のペニシリン−感受性株（ＭＩＣ≦０．０６μｇ／ｍｌ）、２５個の中程度に感受性または中間体株（ＭＩＣ ０．１２−１μｇ／ｍｌ）、非−β−ラクタマーゼ機構による２９個のペニシリン耐性株（ＭＩＣ≧２μｇ／ｍｌ）。さらなる２７株は、β−ラクタマーゼ産生の力によってペニシリンに耐性だった。
他の５０個のエヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）株はシプロフロキサシン耐性がそのフルオロキノロンに対し減少された感受性を２種類のレベル：低レベルの耐性を示す４３株（ＭＩＣ ０．１２−０．２５μｇ／ｍｌ）および高レベル耐性を有する７株（ＭＩＣ ０．５−８μｇ／ｍｌ）で示したと分類された。シプロフロキサシン−耐性株は、多様な場所に由来した：日本由来２７個、合衆国由来１７個およびオランダ由来６個。日本由来株は、ＰＣＲ分析によって、そのｇｙｒ ＡおよびｐａｒＣ突然変異について以前にキャラクタライズされた：１６個はｇｙｒ Ａ突然変異により、１１個はｇｙｒＡ ＋ｐａｒＣ置換による。シプロフロキサシン−感受性分離株は、実験室収集（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａ Ｈｏｓｐｉｔａｌｓ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃｓ）一部であり、ルーチン的な最近の国内臨床株を表した。
エヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）分離株は、チョコレート寒天培地プレート上で生育し、処理まで、−７０℃で溶解ウマ血液中に貯蔵された。新たな一晩の継代培養が、感受性試験に使用された。１００個のシプロフロキサシン−感受性分離株、ジェミフロキサシンを含む１個のＥ試験ストリップおよび１個の５μｇジェミフロキサシン拡散ディスクならびにジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンによる対照標準寒天希釈ＭＩＣ試験が試験された。シプロフロキサシン非−感受性、または−耐性の分離株は、Ｅ試験ストリップ、５μｇディスクおよびジェミフロキサシンおよび他のコンパレータ−薬剤（シプロフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、モキシフロキサシン、アモキシシリン、ペニシリンおよびアジスロマイシン）による対照標準寒天希釈試験に対して試験された。全試験は、ＮＣＣＬＳ ［１９９７ａおよびｂ］方法によって実行された。エヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ ）ＡＴＣＣ ４９２２６ＱＣ株は、繰り返して狭い範囲の値を生じた（ＭＩＣ、０．００４または０．００８μｇ／ｍｌ）；すべてその後確立した範囲（以下のセクション参照）の範囲内で。
７個の実験室研究は、１）７個の認定サイト； ２）２個のディスク作用強度（５および１０μｇ）各々のための２個のディスクロット； ３）３個の ＧＣ寒天ロット； ４）１０日間１０重複試験；および５）並列試験される対照フルオロキノロン（トロバフロキサシン）を使用して、ディスク拡散法のＮＣＣＬＳ Ｍ２３−Ａの規格に対応するように設計された。
【０３５３】
この研究設計は、トロバフロキサシン対照結果を除き、各々の関与している実験室での各ディスク作用強度に対する６０重複の帯直径または全８４０個の帯を生じた。寒天希釈ＱＣ設計は、１）７実験室； ２）実験室につき３０試験（１０試験／日）；および３）各々が１個のロットを試験する２個の実験室の３群での３個の寒天ロットおよび３個の培地ロット全てを試験する単一の参照サイト（９０個のＭＩＣ結果）を使用した。このプロトコールは、２７０個のＭＩＣ結果を生じた。寒天希釈試験（結果範囲０．００８−０．０１６μｇ／ｍｌ）およびディスク拡散試験（結果範囲４２−５３ ｍｍ）の対照トロバフロキサシン結果は全て、ＮＣＣＬＳ（１９９９）推奨の範囲内であった。ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシン−感受性株に対し非常に強力だった（ＭＩＣ９０ ０．００４−０．００８μｇ／ｍｌ）が、シプロフロキサシン耐性生物に対して１６−ないし３２−倍、低い活性であった（ＭＩＣ９０ ０．１２５μｇ／ｍｌ）。
記録した最も高いジェミフロキサシンＭＩＣは、ｇｙｒ Ａおよびｐａｒ Ｃにおいて多発性突然変異を有している株について、１μｇ／ｍｌ（Ｅ試験によって、０．５μｇ／ｍｌ）であった。
シプロフロキサシン−感受性株の中で、ペニシリン耐性およびペニシリナーゼ産生のレベルは、一般にフルオロキノロン感受性に影響しなかった。
シプロフロキサシン−耐性株の中で、ｇｙｒ Ａ中のみの突然変異によるものが、シプロフロキサシンおよびジェミフロキサシンＭＩＣ範囲それぞれ、０．１２−１および０．０３−０．１２μｇ／ｍｌを有した。ｇｙｒ Ａおよびｐａｒ Ｃ両者に突然変異を有している淋菌は、各フルオロキノロンに対し、８倍高いＭＩＣ範囲を有した（０．２５−８および０．０６−８μｇ／ｍｌ）。
表４７において、Ｅ試験からのＭＩＣ結果は、対照標準寒天希釈法［ ＮＣＣＬＳ、１９９７ｂ ］から得られるものと比較する。１５０個の試験された株由来のＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値を使用する場合、Ｅ試験のＭＩＣがわずかに低い傾向のあることが注目された（表４７）。
【０３５４】
これらデータの回帰分散ダイヤグラム・プロット（示されず）は、０．９６の相関係数（ｒ）およびｙ ＝ ０．６６ ＋ ０．９５ｘの回帰式を示す。方法間の必須の一致（±１ｌｏｇ２希釈）は９８．７％であったが、７６個（５０．７％）のＥ−試験ＭＩＣ値はそれらが対照標準寒天希釈試験によって測定したものより、２倍低かった。
分散ダイヤグラム比較は、また、ディスク拡散試験（ｘ軸にプロット）および対照標準ジェミフロキサシンＭＩＣ値（ｙ軸にプロット）で作成された（示されず）。相関は高く（ｒ ＝ ０．９１）、回帰式はｙ ＝ １３．２− ０．２４ｘであった　。
感受性ＭＩＣ限界点の≦０．２５μｇ／ｍｌは、帯直径≧２５ｍｍに相関するであろう（表４９）。ジェミフロキサシンＭＩＣ１μｇ／ｍｌの単一の分離株は、耐性あるいは、未決のいずれかと考えられ得る。
ジェミフロキサシンＱＣ範囲を確立する７個の実験室調査からの結果は、表５０および５１において見出される。ＱＣ エヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ） ＡＴＣＣ ４９２２６を使用して、それぞれ０．００４および、０．００８での１００および１３０の発生頻度で、ジェミフロキサシンＭＩＣが０．００２−０．０１６μｇ／ｍｌまで変動した。この広い最頻数値は、０．００２−０．０１６μｇ／ｍｌの４ｌｏｇ２希釈対照範囲を考える必要がある。各ディスク薬剤含有量の結果は、有意には異ならず、５μｇディスクは、ルーチン的臨床使用のために選択された。５μｇディスクについて、算出された範囲は４９±４ｍｍまたは４５−５３ｍｍであった。しかしながら、この範囲は、発生する結果の８８．１％を含んでいるのみであり、従って、４３−５４ｍｍに拡大された（範囲内に９７．６％結果）。
エヌ・ゴノロアエ（Ｎ． ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、特にシプロフロキサシン耐性のそれらの株に対するジェミフロキサシン活性は、顕著であり（ＭＩＣ９０、０．１２μｇ／ｍｌ）、トロバフロキサシンを含む試験された他の全てのフルオロキノロンより優れている。
このレベルの作用強度は、変異ＤＮＡギラーゼ／トポイソメラーゼ標的に対する、より大きい親和性によってより古いフルオロキノロンに耐性であると見られる淋菌感染症の治療のためのジェミフロキサシン使用を容認し得る。
【０３５５】
【表８５】
2004507440.tif 000087
【０３５６】
【表８６】
2004507440.tif 000088
【０３５７】
【表８７】
2004507440.tif 000089
【０３５８】
【表８８】
2004507440.tif 000090
【０３５９】
【表８９】
2004507440.tif 000091
【０３６０】
本発明は、淋菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、淋菌病原細菌またはこれら生物に感染あるいは、その疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、淋菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、淋菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該淋菌病原細菌が、シプロフロキサシンー耐性ナイセリア・ゴノロアエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）を含むナイセリア・ゴノロアエ（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他の淋菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、肺炎球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々の肺炎球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これらの分析の目的は、フルオロキノロンに耐性である（オフロキサシンＭＩＣ≧８μｇ／ｍｌ）肺炎球菌を同定し、シプロフロキサシンおよびペニシリン耐性の関連が以前に報告された北アイルランド由来の株を分析し、種々の肺炎球菌株に対してジェミフロキサシンの作用強度を評価することであった。チェン（Ｃｈｅｎ）および同僚（Ｃｈｅｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， ３４１： ２３３−２３９ （１９９９））はカナダでフルオロキノロンに対してストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の耐性が増加していることに典拠を示す。パルスフィールド・ゲル電気泳動は、その研究中の肺炎球菌の多くのクローンを同定するが、現在世界的分布を有する多剤耐性クローン（例えば、スペインセロタイプ２３Ｆクローン）中にフルオロキノロン耐性を発見しなかった。（Ｍｕｎｏｚ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １６４： ３０２−３０６ （１９９１）。著者らは（Ｃｈｅｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， ３４１： ２３３−２３９ （１９９９））かかるクローンでフルオロキノロン耐性が出現し得るという懸念を発表した。
【０３６１】
アレキサンダー（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ）研究は、スミスクライン・ビーチャム（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ）が後援する呼吸器病原体の世界的サーベイランス・プログラムである。
この収集から、フルオロキノロンに耐性である（オフロキサシンＭＩＣ≧８μｇ／ｍｌ）肺炎球菌が同定され、シプロフロキサシンおよびペニシリン耐性の関連が以前に報告された北アイルランド由来の株が分析された（Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ４２０−４２１ （１９９８））。合衆国において、現在非常に耐性の肺炎球菌の３分の１までに寄与する２３Ｆ多剤耐性スペインクローンは、フランスおよびスペイン由来の分離株でフルオロキノロン耐性に突然変異したと同定された。セロタイプ９Ｖ多剤耐性の世界的肺炎球菌クローン（Ｌｅｆｅｖｒｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， １４： ４９１−４９７ （１９９５））は、スペインおよび北アイルランド両国でフルオロキノロン耐性であると同定した。１９９３年に単離された９Ｖクローン（ＴＬ７）の基準株（Ｌｅｆｅｖｒｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， １４： ４９１−４９７ （１９９５））が、この突然変異単独で表現型耐性を発現するには不十分であるので、（オフロキサシンＭＩＣ ３μｇ／ｍｌ；シプロフロキサシンＭＩＣ １．５μｇ／ｍｌ）、以前に検出されていないｐａｒＣ遺伝子（Ｄ８３Ｇ）におけるフルオロキノロン耐性への第一段階突然変異を有するという最近の観察は、特に重大事である。ジェミフロキサシンが、試験される最も強力な新規フルオロキノロンであり、これらの株に対する活性を保持すると見出された。
このデータは、肺炎球菌の多剤耐性の国際的クローンにおけるフルオロキノロン耐性の出現を記載し、肺炎球菌における抗微生物薬耐性の持続的サーベイランスおよび肺炎球菌感染に対するフルオロキノロンの慎重な使用の必要を示す。
本発明は、肺炎球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、肺炎球菌病原細菌またはこれら生物に感染あるいは、その疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、肺炎球菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、肺炎球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
【０３６２】
本発明の好ましい目的は、該肺炎球菌病原細菌が、シ肺炎球菌病原細菌：からなる群より選択される方法を提供するが。他の肺炎球菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、好気性菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々の好気性病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。
これらの分析の目的は、広域のグラム陽性およびグラム陰性好気性生物を代表する１０個の分離株に対して、ジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンのＰＡＥを測定することであった。
ジェミフロキサシンの抗生物質後効果（ＰＡＥ）は、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、モレキセラ・カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）およびプロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）を含む１０個の分離株に対して、シプロフロキサシンのそれと比較された。分離株は、２および４ｘ ＭＩＣの存在下インキュベートされた。１ｈの暴露後、抗微生物薬は限外濾過によって除去され、生菌数計数は６ｈなされた。ＰＡＥはＴ−Ｃと定義され、式中、Ｔは、抗微生物薬暴露培養液が生菌数において１ｌｏｇ１０増加する時間であって、Ｃは、生育対照が、生菌数において１ｌｏｇ１０増加する時間である。測定可能なＰＡＥは、２および４ｘ ＭＩＣで、両化合物で観察された。ジェミフロキサシンのＰＡＥはシプロフロキサシンのそれらに匹敵し、両化合物について、２ｘ ＭＩＣへの暴露は４ｘ ＭＩＣへの暴露より短いＰＡＥという結果になった。４ｘ ＭＩＣでのジェミフロキサシンのＰＡＥは、ピー・エルジノーサ（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、ピー・ブルガリス（Ｐ． ｖｕｌｇａｒｉｓ）およびエイチ・インフルザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）に対して＞６ ｈであって、試験される他の分離株に対して０．１から２．５ｈまでの変動した。これらの結果はジェミフロキサシンが、広域の生物に対して明白なＰＡＥを有することを示し、このことは、ジェミフロキサシンの薬物動力学的プロフィルと共同して、臨床的使用におけるこの化合物のより頻繁でない投与計画を示す。
【０３６３】
抗生物質後効果（ＰＡＥ）は、抗微生物薬への細菌培養液の短い暴露後、細菌生育の持続的抑制と定義される。Ｃｒａｉｇ ＷＡ， Ｇｕｄｍｕｎｄｓｓｏｎ Ｓ． Ｔｈｅ ｐｏｓｔ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ． Ｉｎ： Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｉｎ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ （４ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ）． Ｅｄ． Ｌｏｒｉａｎ， Ｖ． Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ， ＭＤ， ＵＳＡ： Ｔｈｅ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｃｏ．， １９８６： ｐｐ ２９６−３２９を参照。ＰＡＥの測定は、抗微生物薬の適当な投与計画の設計において有用であり得る。理論では、長いＰＡＥを有する抗微生物薬は、短いＰＡＥを有するものより頻繁でない投与計画を必要とするであろう。
ジェミフロキサシン、バッチ＃ ０３Ｒ１Ｐ２−１−１、作用強度７３．８％は、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）， Ｈａｒｌｏｗ， ＵＫから得られた。シプロフロキサシン、ロットＧ、作用強度１００％は、ＵＳＰ 対照標準 （Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ， ＭＤ， ＵＳＡ）として得られた。以下の分離株は、スミスクライン・ビーチャム（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ）から得られた：抗感染性研究培養収集物：スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）ＡＴＣＣ ２９２１３、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ） ６６２、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）ＡＴＣＣ ４９６１９、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ） ＡＴＣＣ ４９２４７、エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ） ＡＴＣＣ ２９２１２、モレキセラ・カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ） ＭＣ２、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ ２５９２２、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＡＴＣＣ ２７８５３、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）ＫＰ２およびプロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）ＡＴＣＣ １３３１５。
【０３６４】
５％ヒツジ血液を含むトリプチカーゼダイズ寒天（ＢＢＬ、Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）は、継代培養凍結された分離株のストックにおよびエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）のコロニー計数に使用された。ミュラー−ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）ＩＩ寒天（ＢＢＬ）は、非選好性生物のコロニー計数に使用された。チョコレートＩＩ寒天（ＢＢＬ）は、エイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）分離株のコロニー計数に使用された。
カチオンー調整したミュラー−ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培地（ＣＡＭＨＢ）（ＢＢＬ）は、非選好性生物を試験するのに使用された。５％溶解ウマ血液（ＢＢＬ）で補足されるＣＡＭＨＢはエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）分離株を試験するのに使用された。ヘモフィルス試験培地（ＢＢＬ）はエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）分離株を試験するのに使用された。
生物は、凍結ストック（−８０℃）から５％ヒツジ血液を含むトリプチカーゼ寒天プレート上に継代培養され、３５℃で２０−２４ｈ、インキュベートされた。生理食塩水の５ｍｌのチューブは、０．５のマックファーランド（ＭｃＦａｒｌａｎｄ）基準に相当する濁度を得るために一晩培養から十分な数のコロニーを接種された。この接種量は、およそ１ｘ１０６ ＣＦＵ／ｍｌの最終試験接種量を生じるように、１８ｍｌの適当な培地（５０ｍｌのフラスコに含まれる）に１００倍に希釈された。
ジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンのＭＩＣは、培地微量希釈というＮＣＣＬＳ推奨法を使用して、測定された。（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ． １９９７． Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ２−Ａ６． Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｆｏｒ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｄｉｓｋ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔｓ （ｓｉｘｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ）． ＮＣＣＬＳ， Ｗａｙｎｅ， ＰＡ， ＵＳＡ．参照。）
両化合物は、濃度０．０００１ないし３２μｇ／ｍｌまで変動する連続２倍希釈で試験された。陽性の生育対照（無抗微生物薬）は、各マイクロタイタープレート上に含まれた。接種後、プレートは１８−２４ ｈ、空気中３５℃でインキュベートされた。接種量、１０ｍｌアリコートは、最終試験接種量の純度を測定するために、５％ヒツジ血液を含むトリプチカーゼダイズ寒天上に塗布された。
【０３６５】
以前に、記載されるごとく、濾過方法を使用してＰＡＥ効果は測定された。（Ｔｈｏｒｎｂｕｒｎ ＣＥ， Ｍｏｌｅｓｗｏｒｔｈ ＳＪ， ｅｔ ａｌ． Ｐｏｓｔ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ａｎｄ ｐｏｓｔ−β−ｌａｃｔａｍａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｍｏｘｉｃｉｌｌｉｎ ｐｌｕｓ ｃｌａｖｕｌａｎａｔｅ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ １９９６； ４０： ２７９６−２８０１参照。）各試験分離株は、適当な培地２０ｍｌ中、抗微生物薬（２または４ＬＭＩＣで）を含む５０ｍｌのフラスコに添加された。分離株の添加後、開始接種量の密度（ＣＦＵ／ｍｌ）を測定するためにコロニー計数が行われた。フラスコは、３５℃で振盪機上でインキュベートされた。抗微生物薬暴露の２時間後、更なるコロニー計数が実行された。各フラスコの含有物は、ついで、抗微生物薬を除去するために０．２ミクロン・フィルタを使用して濾過された。濾液は１０ｍｌの予め温められた培地で、２回洗浄され、フィルターは２０ｍｌの予め温められた培地に再懸濁された。コロニー計数は、試験分離株の再懸濁の直後に実行された。フラスコはインキュベーターに返され、コロニー計数は６ｈ、 １ｈ間隔で実行された。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）およびエイチ・インフルエンザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）用に使用される培地補足物と関連する濾過問題によって、抗微生物薬を除去するために予め温められた培地で接種量の１：１００希釈を作成した。ＰＡＥ測定のための対照は、試験分離株を２ｈ無薬剤培地でインキュベーション後、濾過および無薬剤培地中の分離株インキュベーションを含んだ。
５個の１０倍希釈は、時間間隔毎、各分離株／抗微生物薬および対照用に作成された。１０μｌの使い捨て可能なループを使用して、各穴から５０μｌ、適当な寒天培地に広げられた。プレートは一晩インキュベートされ、３０−３００個のコロニーを提供した希釈で、コロニー計数を行った。ＭＩＣは、分離株の可視的生育を阻害した化合物の最低濃度として測定された。
ＭＩＣ終末点の測定を援助するために、マイクロタイター・ミラー読み取り機が使用された。ｙ軸上のコロニー数およびｘ軸上の時間による半対数グラフは、各分離株に対して準備された。ＰＡＥ効果は、式：ＰＡＥ ＝ Ｔ−Ｃ［式中、Ｔは、試験分離株の計数が抗微生物薬除去直後に観察された計数より１０倍（１ｘ ｌｏｇ１０）増加するのに必要な時間であるって、Ｃは、対照が抗微生物薬の除去直後に観察される数より、１０倍増加するのに必要な時間である。］を使用して測定された。
ジェミフロキサシンおよびシプロフロキサシンのＭＩＣは、表５２に示される。ＰＡＥ結果の概要は、表５３に示される。
【０３６６】
一般に、より短いＰＡＥは、４ｘ ＭＩＣに対して２ｘ ＭＩＣで観察された。４’ＭＩＣで、ジェミフロキサシンＰＡＥは、エイチ・インフルザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、ピー・エルジノーサ（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）および、ピー・ブルガリス（Ｐ． ｖｕｌｇａｒｉｓ）に対する＞６ ｈであって、試験される他の分離株に対して０．１ないし２．５ｈまで変動した。イー・フェカーリス（Ｅ． ｆａｅｃａｌｉｓ） ＡＴＣＣ ２９２１２を除いて、４’ＭＩＣで得られるシプロフロキサシンＰＡＥ値は０．３から５．１ｈまで変動し、効果は観察されなかった。
ジェミフロキサシンのＰＡＥは、試験される全分離株に対してシプロフロキサシンのそれに匹敵する。より短いＰＡＥは、４ｘ ＭＩＣと比較して２ｘ ＭＩＣで両化合物について観察される。４ｘ ＭＩＣで、シプロフロキサシンより長いジェミフロキサシンのＰＡＥ（＞６ ｈ）は、エイチ・インフルザエ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、ピー・エルジノーサ（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）および、ピー・ブルガリス（Ｐ． ｖｕｌｇａｒｉｓ）に対して観察される。全体的に、この研究の結果は、ジェミフロキサシンが広域の生物に対して明白なＰＡＥを有することを示す。
【０３６７】
【表９０】
2004507440.tif 000092
【０３６８】
【表９１】
2004507440.tif 000093
【０３６９】
本発明は、好気性病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、好気性病原細菌またはこれら生物に感染あるいは、その疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されているものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、好気性病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、好気性病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該好気性病原細菌が、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スタフィロコッカス・サプロフィチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、モレキセラ・カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）およびプロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他の好気性病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、肺炎球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。一つには、本発明は、種々の肺炎球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これらの分析の目的は、ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の抗肺炎球菌活性を測定することであった。
【０３７０】
ジェミフロキサシンは、肺炎球菌でのキノロン耐性の２つの主要な機構であるそのｐａｒＣおよびｇｙｒＡ遺伝子で、特異的な耐性の突然変異を有するエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して他のキノロンと比較された（Ｖａｒｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３： ３０２−３０６ （１９９９））。
β−ラクタム−およびマクロライド耐性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の世界的増加は、重大な臨床問題になっている。良好な抗グラム陽性活性を有するより新規のキノロンは、これら生物に対して有効なままであり、治療の選択肢であり得る。しかしながら、院外でのキノロンの広範囲にわたる使用は、キノロン耐性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）を選択し、これらの化合物の使用を制限し得る。
キノロン−感受性およびキノロン耐性の肺炎球菌に対する、ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の抗肺炎球菌活性を調査する研究からのデータは、本明細書中に提供される（Ｋｅｌｌｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０８７ （１９９８））。
ジェミフロキサシンは、肺炎球菌でのキノロン耐性の２つの主要な機構であるそのｐａｒＣおよびｇｙｒＡ遺伝子で、特異的な耐性の突然変異を有するエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して他のキノロンと比較された（Ｖａｒｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３： ３０２−３０６ （１９９９））。新しく記載された流出−媒介キノロン系耐性（ｐｍｒＡ突然変異）（Ｇｉｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３： １８７−１８９ （１９９９））は試験されなかった。
【０３７１】
エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ） ＡＴＣＣ ４９６１９が、品質管理として使われた。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の３個のアイソジェニックの分離株が、研究された： ＷＢ４、シプロフロキサシン−感受性だが、ペニシリン−およびエリスロマイシン−耐性株； ＷＢ４ＣＲ、シプロフロキサシン−耐性、ＷＢ４株の実験室変異株；およびＷＢ４ＴＲ、トロバフロキサシン−耐性、ＷＢ４株の実験室変異株。両変異株は、薬剤のいずれにでも周期的暴露によって生じた。親（ＷＢ４）はシプロフロキサシン（ＣＩＰＲＯ）−感受性だが、ペニシリン−およびエリスロマイシン−耐性であった。これら薬剤への周期的暴露によって、２個の誘導体は、ＣＩＰＲＯ−耐性（ＷＢ４ＣＲ）またはトロバフロキサシン（ＴＲＯＶＡ）耐性（ＷＢ４ＴＲ）のいずれかが選択された。ＣＩＰＲＯ−感受性ＡＴＣＣおよびＷＢ４株は、ｐａｒＣまたはｇｙｒＡ突然変異を持っていなかった。ＣＩＰＲＯ−耐性変異株ＷＢ４ＣＲは、ｐａｒＣに１個の突然変異（７９ＳＹ）を持ち、ＴＲＯＶＡ−耐性変異株は、ｐａｒＣに１個の突然変異（７９Ｓ Ｆ）およびｇｙｒＡに１個の突然変異（８１Ｓ Ｆ）持っていた。ＭＩＣ（ｍｇ／ｌで）は、表５５に一覧にされる。
ｐａｒＣおよび／またはｇｙｒＡでの突然変異は、全キノロンのＭＩＣを増加した。
しかしながら、ジェミフロキサシンおよびクリナフロキサシンは、最少の影響を受けた。
研究で使用される抗生物質は、：ジェミフロキサシン；シプロフロキサシンおよびモキシフロキサシン；レボフロキサシン；スパルフロキサシン； クリナフロキサシン；グレパフロキサシン；トロバフロキサシンを含んだ。
最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、１０６のｃｆｕ／ｍｌの接種量で、ブライン−ハート（Ｂｒａｉｎ−Ｈｅａｒｔ）注入液（ＢＨＩ（Ｄｉｆｃｏ））中、培地希釈法によって測定された。
使用されたＱＲＤＲ遺伝子のＰＣＲ法およびＤＮＡ配列決定、およびＰａｎらによって公開されるプライマーおよび増幅条件（Ｐａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ２３２１−２３２６ （１９９６））は、ＱＲＤＲに対応するｐａｒＣおよびｇｙｒＡ断片のＰＣＲ増幅のために使用された。ＰＣＲ−増幅された産物のＤＮＡの塩基配列は、自動シーケンサーの運転であった。
ジェミフロキサシンおよびクリナフロキサシンは、試験されたキノロンの中でエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して最も強力な活性を有した。他の薬剤とは対照的に、ジェミフロキサシンおよびクリナフロキサシンは、ｐａｒＣ／ｇｙｒＡ二重突然変異キノロン−耐性肺炎球菌に対してさえ、治療範囲でＭＩＣを保持した。これらの結果は、インビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）でｐａｒＣ／ｇｙｒＡ二重突然変異体に対してかかる薬剤の活性を測定するために更なる研究を是認する。
【０３７２】
【表９２】
2004507440.tif 000094
【０３７３】
【表９３】
2004507440.tif 000095
【０３７４】
本発明は、肺炎球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、肺炎球菌病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、肺炎球菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、肺炎球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該肺炎球菌病原細菌が、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他の肺炎球菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、グラム陽性球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のグラム陽性球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これらの分析の目的は、比較薬剤に対してジェミフロキサシンのスペクトラムおよび作用強度を測定することであった。ジェミフロキサシンは、アンピシリン、オキサシリン、ペニシリン、シプロフロキサシン、トロバフロキサシン、ドキシサイクリン、クリンダマイシン、エリスロマイシンおよびバンコマイシンと比較された。
以前の研究はグラム陽性種に対するジェミフロキサシンの非常な作用強度を見出し、このさらなる調査は５０以上の医療センターから６，７９０個のこれら生物の試料を採取した。
【０３７５】
スペクトラム／作用強度を最もよく定義するために、ジェミフロキサシンはトロバフロキサシンおよび４個の他の比較薬剤に対して試験された。推奨された培地補足物を有する対照標準培地微量希釈方法がずっと使用された。収集物は、４９６２個のブドウ球菌、６００個の選好性連鎖球菌、１１８２個の腸球菌および４６個の他の種の株を含んだ。選択された結果（試験される株の数；ジェミフロキサシン／トロバフロキサシンのＭＩＣ９０； ％ ≦１μｇ／ｍｌジェミフロキサシン／トロバフロキサシン）は、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、（３６７２； ２／２； ８６／８５）、エス・エピダーミス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）（４０４； １／＞４； ９２／７１）、エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）（６３０； ４／＞４； ７６／６６）、イー・フェシウム（Ｅ．ｆａｅｃｉｕｍ）（２１６； ＞４／＞４； １５／１１）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）（３００； ０．０６／０．２５； １００／９７）、β−溶血性連鎖球菌（１５０； ０．０６／０．２５； １００／１００）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）群連鎖球菌（１５０； ０．１２／０．２５； ９９／９７）であった。モニターされた種の中の耐性の割合は、それぞれ、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）でのオキサシリン３１％、肺炎球菌でのペニシリン３５％および、腸球菌でのバンコマイシン１１％であった。ジェミフロキサシンは、感受性限界点濃度の選択まで、その全体的グラム陽性活性においてトロバフロキサシンと同等あるいはより優れているように見える。連続的インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の、薬力学的および臨床的調査は、是認されているようである。
ジェミフロキサシン・スペクトラムの初期評価は、シプロフロキサシンまたはオフロキサシンに耐性であると見られる多くの株を含むグラム陽性球菌に対して、非常に強力な活性を示す。グラム陰性桿菌に対するジェミフロキサシン活性は、より新規のフッ化キノロンの中でトロバフロキサシンまたはガチフロキサシンのそれに最も類似していたが、絶対的嫌気性生物に対するより適当な作用強度が報告された。これらの特徴は、１９９４年にＤｏｍａｇａｌａによって記載された構造活性相関（Ｄｏｍａｇａｌａ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３３： ６８５−７０６ （１９９４））に適合し、予備的安全性情報は、ジェミフロキサシンに対する許容される許容限界量を示す（Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｐｐｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ３： ３２２−３２６ （１９９５））．
【０３７６】
ジェミフロキサシンにおける既存のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の情報を補足するために、調査は、より多数の個体群のグラム陽性球菌および桿菌のルーチン的臨床分離株を研究するために開始された。ヨーロッパ、北アメリカおよび南アメリカの中の多様な地理的位置由来のこれら株は、対照標準培地微量希釈法（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ａｐｐｒｏｖｅｄ ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ７−Ａ４， Ｗａｙｎｅ， ＰＡ ＵＳＡ （１９９７））によって処理された。
これら実験のための試験生物は、グラム陽性種であり、ルーチン的臨床分離株を含み、大多数が１９９８−９９年に単離された。属および種の一般的分類化は、：腸球菌（１１８２株； ７種および種レベルで同定されなかった３１０株）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）（３６７２株）、コアグラーゼ陰性スタフィロコッカス属の種（１２９０株；種レベルで同定されなかった７７５株と１３種）、連鎖球菌（６００株）、コリネバクテリア生物（２７株； ４種）およびバシラス属の種（１９株）であった。全株は臨床的に重要な感染由来であり、ほとんどが、５０以上の医療センターおよび照会実験室から報告された血液培養、気道感染および皮膚／創傷感染由来であった。
生物は、対照標準培地微量希釈方法によって試験され、結果は、現在のガイドライン（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ、Ｎｉｎｔｈ Ｉｎｆｏｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ Ｍ１００−Ｓ９、Ｗａｙｎｅ、ＰＡ ＵＳＡ（１９９９））によって解釈された。ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンの感受性解釈および限界点は、ナショナル・コミッティー・フォー・クリニカル・ラボラトリー・スタンダード（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）　（ＮＣＣＬＳ）による承認まで、比較目的のためにのみ、≦１μｇ／ｍｌに帰された。
アンピシリン、オキサシリン、ペニシリン、シプロフロキサシン、トロバフロキサシン、ドキシサイクリン、クリンダマイシン、エリスロマイシンおよびバンコマイシンを含む９個の比較薬剤が試験された。全化合物はその製造業者から得られ、薬剤供給者またはＮＣＣＬＳによって指定されるごとく、対照標準感受性法において利用された。
【０３７７】
感受性結果は、表５６に示される。ジェミフロキサシンは、腸球菌に対して試験される最も活性なフルオロキノロンであり（４倍強力）、７６％のイー・フェカーリス（Ｅ． ｆａｅｃａｌｉｓ）、１５％のイー・フェシウム（Ｅ． ｆａｅｃｉｕｍ）および６８％の他のエンテロコッカス属の種の分離株を阻害した。
全ての腸球菌（１１８２株）について、≦１および≦２μｇ／ｍｌでそれぞれ、７％および１７％少ない株を阻害したトロバフロキサシンと比較して、ジェミフロキサシンは、≦１μｇ／ｍｌで６３％（≦２μｇ／ｍｌで７６％）の株に対して活性だった。この個体群の腸球菌は、以下の耐性集団動態学を有した：バンコマイシン耐性１０％、アンピシリン耐性２１％、ゲンタマイシン高水準耐性２８％（＞５００μｇ／ｍｌ）およびストレプトマイシン高水準耐性４０％（＞１０００μｇ／ｍｌ）。
バンコマイシンは、全ての３個の作表されたエンテロコッカス属群に対して、全体的に単一の最高薬剤のままだった。
エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）株はオキサシリン耐性３１％を示し、試験化合物の活性のスペクトラムの順位序列は（ＭＩＣ５０ ［μｇ／ｍｌ ］／％感受性）：バンコマイシン（１／１００）＞ドキシサイクリン（≦０．５／９３）＞ジェミフロキサシン（≦０．０３／８６）＝トロバフロキサシン（≦０．０３／８５）＞クリンダマイシン（０．２５／７２）＞シプロフロキサシン（０．５／６９）＝オキサシリン（１／６９）＞エリスロマイシン（０．５／５２）であった。ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンは、試験される最も強力なフルオロキノロンであり、シプロフロキサシンより≧１６倍活性であった。
１２９０個のコアグラーゼ陰性ブドウ球菌は、またジェミフロキサシンに非常に感受性（ＭＩＣ９０　１または２（μｇ／ｍｌ））であった。１６−２１％より多くの株は、トロバフロキサシン（ＭＩＣ９０＞４μｇ／ｍｌ）と比較して≦１μｇ／ｍｌで阻害された。
合計６００個の連鎖球菌は、この実験、２個のフルオロキノロンおよびペニシリンにおいて、ジェミフロキサシンに対して試験された。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）中のペニシリン非感受性割合は、４２％であった（≧２μｇ／ｍｌで１５％高水準）。ジェミフロキサシンは、トロバフロキサシンより２−または４−倍活性であって、≦１μｇ／ｍｌで全連鎖球菌の９９−１００％を阻害した。
【０３７８】
フルオロキノロンは、バシラス属の種に対してテトラサイクリンおよびバンコマイシンに匹敵するが、４１−５９％のコリネバクテリウム属の種の分離株は感受性である。
グラム陽性生物のこの現代の試料に対して、ジェミフロキサシンは、試験される最も強力なフルオロキノロンである。腸球菌およびブドウ球菌に対するジェミフロキサシンのスペクトラムおよび作用強度は、これら病原体に対して最も活性なフルオロキノロンのクラス中であると認識されているトロバフロキサシンのそれ同等であるか、より優れている。
【０３７９】
【表９４】
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【表９５】
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【表９６】
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【０３８０】
本発明は、グラム陽性球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、グラム陽性球菌病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、グラム陽性球菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、グラム陽性球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該グラム陽性球菌病原細菌が、エンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、エンテロコッカス属の種、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スタフィロコッカス・エピダーミス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、β−溶血性連鎖球菌ビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）群、バシラス属の種およびコリネバクテリウム属の種：からなる群より選択される方法を提供するが。他のグラム陽性球菌病原細菌は、また、方法に含まれてよい当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。 これら分析の目的は、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）におけるジェミフロキサシンの作用機構を測定することであった。
ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシン、ノルフロキサシン・ペフロキサシン、レボフロキサシン、トロバフロキサシン、スパルフロキサシンおよびガチフロキサシンと比較された。
ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）におけるキノロンの標的は、Ｔｏｐｏ ＩＶおよびギラーゼを含む。シプロフロキサシン、ノルフロキサシン・ペフロキサシン、レボフロキサシンおよびトロバフロキサシンはＴｏｐｏ ＩＶを標的とするが、スパルフロキサシンおよびガチフロキサシンはギラーゼを標的とする。
【０３８１】
ジェミフロキサシンは、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）およびエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）のごときグラム陽性細菌および一般的気道病原体（例えば、エム・カタラリス（Ｍ． ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）および、エイチ・インフルエンザ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａ）ＭＩＣ＜０．０６μｇ／ｍｌ）に対して非常に強力である。ジェミフロキサシンは、また、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）のペン−Ｒおよび−Ｓ株に対して活性であり（ＭＩＣ ＜ ０．１２５μｇ／ｍｌ）、シプロフロキサシン耐性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して活性を示す（ＭＩＣ ＜ ０．５μｇ／ｍｌ）。
２つのアプローチは、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）におけるジェミフロキサシンの作用機構を調査するのに用いられた：
（ｉ）キャラクタライズされたＱＲＤＲ突然変異を有する株の感受性を研究することおよび（ｉｉ）ジェミフロキサシン耐性菌を選択し、ＱＲＤＲ配列を決定すること。ジェミフロキサシンのＭＩＣは、シプロフロキサシンおよびスパルフロキサシンのそれより低い（スパルフロキサシンからのＭＩＣより２倍ないし３２倍低く、シプロフロキサシンからのＭＩＣより８倍ないし１２８倍低い。）
ｐａｒＣおよびｇｙｒＡ両者における突然変異は、ジェミフロキサシン感受性を非常に減少するのに必要である。第一段階ジェミフロキサシン・変異体（ＭＩＣ ０．２５のμｇ／ｍｌ）は、ｇｙｒＡ突然変異を抱き、スパルフロキサシンに交差耐性を示す。ＰａｒＣ変化は、更なる選択によって得られる（ＭＩＣ ０．５−１．０ μｇ／ｍｌ）。ジェミフロキサシンは、トポイソメラーゼ突然変異を有する株に対して、ギラーゼおよび活性に対するインビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）の優先権を有する。
本発明は、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
【０３８２】
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌がストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他のストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけエシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）またはストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のエシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）およびストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）およびストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対してフルオロキノロン・ジェミフロキサシンの殺菌活性および作用機構を測定することであった。
ジェミフロキサシンは、トロバフロキサシンおよびシタフロキサシンと比較された。フルオロキノロン特有の二相性用量反応曲線を生じるこれら細菌に対して、ジェミフロキサシンは非常に殺菌的であることが見出された。この新規フルオロキノロンは、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）に対してこれまで試験された他の全てのフルオロキノロンより殺菌的であり、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）またはエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対する他のほとんどのフルオロキノロンより殺菌的であった。データは、ジェミフロキサシンが、フルオロキノロン・クラスの抗菌薬の改善されたメンバであることを示す。
【０３８３】
多数のフルオロキノロンの殺菌活性は、一連の研究室で評価された（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ４３： ４−８ （１９９５））。この殺菌活性は、リン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）中の死滅、すなわち増殖しない細菌または（タンパク質合成を妨げるために）クロラムフェニコール存在下での死滅、を調査する実験に基づく４つの作用機構（Ａ、Ｂ、ＣおよびＢ１）に特徴づけられた。機構Ａは、増殖しており、活発にタンパク質およびＲＮＡ合成を受けている細菌を必要とする（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １０： ２４０−２４８ （１９９１））．これは、全てのキノロンによって共有される基礎的作用機構であり、ナリジクス酸のようなより古いキノロンの唯一の作用機構である。機構Ｂは、増殖する細菌またはタンパク質およびＲＮＡ合成を必要としない（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １０： ２４０−２４８ （１９９１））。機構Ｂは、イー・コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対して多くの現代のフルオロキノロンによって示される（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ４３： ４−８ （１９９５））。しかしながら、これはこの作用機構が他の細菌に対して存在すると保証しない。例えば、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）に対して、レボフロキサシンが有する（（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ３０： ２２７−２３１ （１９８９））機構Ｂをシプロフロキサシンは、有さない（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ２２ （Ｓｕｐｐｌ． Ｃ）： １−８ （１９８８））。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、シタフロキサシンのみがこの付加的機構を有することが見出された（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ４３： ４−８ （１９９５））。他方、機構Ｃは、増殖する細菌を必要としないが、活性タンパク質およびＲＮＡ合成を必要とする（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ４３： ４−８ （１９９５））。この機構は、エノキサシン（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， ８： ７３１−７３３ （１９８９））およびノルフロキサシン（Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， ３７ （Ｓｕｐｐｌ）： ９２Ｐ （１９８７））について同定されるのみであった。機構Ｂ１は、最も最近発見された作用機構である。この機構は、タンパク質またはＲＮＡ合成を必要としないが、分裂しない細菌に対しては失われる。機構Ｂ１は、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）またはブドウ球菌に対するシナフロキサシンについて（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ３３： ６７−７０ （１９９０））、およびエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）に対するシタフロキサシンまたはトロバフロキサシンに���いて（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ４３： ４−８ （１９９５）； Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３８： １０６１−１０６６ （１９９６））同定された。
この研究は、ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）、新規（Ｃ−７ ３−アミノメチル−４−メチルオキシム置換１，８−ナフチリジン）フルオロキノロンの殺菌活性を評価するために行われた。
【０３８４】
予備研究は、特にグラム陽性細菌に対して、ジェミフロキサシンが抗菌活性を促進したことを示唆する（Ｐａｅｋ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−９２， ｐ． ２５５ （１９９８））。
ジェミフロキサシンは、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシュティカルズ・Ｒ＆Ｄ（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｒ ＆ Ｄ ）（Ｎｅｗ Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐａｒｋ （Ｓｏｕｔｈ）， Ｔｈｉｒｄ Ａｖｅｎｕｅ， Ｈａｒｌｏｗ， Ｅｓｓｅｘ）によって供給された。１ｍｇ／ｍｌのストック液は、滅菌蒸留水で調製された。クロラムフェニコール（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ， Ｐｏｏｌｅ， Ｄｏｒｓｅｔ）は、最初に、メタノールに溶解され、ついで滅菌蒸留水に溶解された。両抗菌薬は、実験日毎に新たに調製された。
以下の実験室株が、この研究で使用された：
１． エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＫＬ１６
２． スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）Ｅ３Ｔ
３． ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４。
他のキノロンの殺菌作用機構を測定するのに、その以前の使用のため、これら株が選択された。細菌は、−７０℃で貯蔵され、使用前に、１．５％（ｗ／ｖ）寒天・バクテリオロジカル（ａｇａｒ ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｉｃａｌ）（Ｕｎｉｐａｔｈ Ｌｔｄ）で固形化されるニュートリエント・ブロスＮｏ．２（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ Ｎｏ．２）（Ｕｎｉｐａｔｈ Ｌｔｄ．， Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ， Ｈａｎｔｓ）上へ継代培養された。
エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）用に、寒天は５％（ｖ／ｖ）溶血ウマ血液（Ｕｎｉｐａｔｈ Ｌｔｄ．）で補足された。
ジェミフロキサシンの殺菌活性は、ＭｏｒｒｉｓｓｅｙおよびＳｍｉｔｈの方法を使用して調査された（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ４３： ４−８ （１９９５））．簡単には、０．００５のおよび１０ｍｇ／Ｌ間の濃度範囲は、ニュートリエント・ブロスＮｏ．２（Ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ Ｎｏ．２）で調製された。細菌は、初期接種量約１０７ｃｆｕ／Ｌに接種され、３７℃で３ｈインキュベートした。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）が使用された場合、７％（ｖ／ｖ）溶血ウマ血液で補足された。付加的機構Ｂ、Ｂ１またはＣの存在は、タンパク質合成を阻害するために２０ｍｇ／Ｌのクロラムフェニコール（エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）について２．５ｍｇ／Ｌ）の添加によって、あるいは細菌増殖を阻害するためにニュートリエント・ブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）をリン酸塩緩衝生理食塩水と置換することによって評価された。この生物がリン酸塩緩衝生理食塩水で研究された場合、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の自己分解を阻害するために、７％（ｖ／ｖ）ウマ血清（Ｕｎｉｐａｔｈ）が添加された。インキュベーション後、試料１ｍＬが取られ、遠心分離され、同等容量の滅菌ニュートリエント・ブロスｎｏ．２（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ ｎｏ．２）中に再懸濁された。この洗浄段階は、薬剤キャリーオーバーを防ぐために合計二回繰り返された。これら試料の生菌数計数はスパイラル・プレーティングによって固形寒天上でなされ、プレートは３５℃で４８ｈインキュベートされた。パーセント生存率が算出され、試験される薬剤濃度に対してプロットされた。
【０３８５】
ジェミフロキサシンはイー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）ＫＬ１６、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）Ｅ３Ｔまたはエスティーアール・ニューモニエ（Ｓｔｒ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ） Ｃ３ＬＮ４に対して二相性用量反応を生じ、３個の細菌全てに対して、ジェミフロキサシンの最適殺菌濃度を生じる（図２４、２５および２６）。この現象は、フルオロキノロン抗細菌薬の特徴を示す（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １０： ２４０−２４８ （１９９１））。イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）ＫＬ１６、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）Ｅ３Ｔおよびエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４に対するジェミフロキサシンの最適殺菌濃度は、それぞれ、１．０、０．５および０．５ｍｇ／Ｌである。
静菌濃度のクロラムフェニコールの添加は、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）に対してジェミフロキサシンの殺菌活性を減少した（図２４）。しかしながら、重要な殺菌活性は、なお、このタンパク質合成阻害剤の存在下起こった。他方、ジェミフロキサシンの活性がリン酸塩緩衝生理食塩水で試験された場合、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）に対して、より少ない殺菌活性が観察された（図２４）。従って、ジェミフロキサシンがタンパク質合成を欠いた細菌を死滅できるが、リン酸塩緩衝生理食塩水でインキュベートされる完全な非−増殖細菌を死滅する能力がより少ないことは、明らかとなろう。従って、ジェミフロキサシンはイー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）に対して殺菌機構ＡおよびＢ１を有する。
【０３８６】
エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）に対して、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）に対して見られるそれよりわずかに強い殺菌活性は、ニュートリエント・ブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）で起こった（図２５）。クロラムフェニコールが添加された場合、あるいは、実験がリン酸塩緩衝生理食塩水で実行された場合、ブドウ球菌に対して、減少した死滅がもたらされた（図２５）。それにも関わらず、これら条件下、すなわち、タンパク質合成を受けることができないブドウ球菌に対してあるいは増殖できないブドウ球菌に対して、良好な殺菌活性は、なお、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）Ｅ３Ｔに対して起こった。従って、ジェミフロキサシンがエス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）に対して、殺菌機構ＡおよびＢを有することは、明白である。
試験される他の２個の細菌種と同様、ジェミフロキサシンがニュートリエント・ブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）（溶血ウマ血液で補足）で、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して殺菌的であったことは、図２６から見られる。この殺菌活性は、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）またはエス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）のいずれかに対して、ジェミフロキサシンに観察されたものより低かった。さらに、クロラムフェニコールが添加された場合、あるいは、実験がリン酸塩緩衝生理食塩水（ウマ血清で補足）で実行された場合、ジェミフロキサシンを使用して、殺菌活性は、ほとんどまたは全く起こらなかった。従って、肺炎菌に対して、ジェミフロキサシンは、機構Ａの他に殺菌作用機構を有さなかった。
この研究の結果は、ジェミフロキサシンがイー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）ＫＬ１６、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）Ｅ３Ｔおよびエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４に対して殺菌的であることを示す。ジェミフロキサシンはイー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）ＫＬ１６およびエス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）Ｅ３Ｔに対してそれぞれ、付加的殺菌作用機構Ｂ１およびＢを有する。しかしながら、かかる付加的機構は、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４に対して存在しない。
【０３８７】
比較の目的のために、この研究の結果は、以前にトロバフロキサシンおよびシタフロキサシンで得られた同等な結果と一緒に示されている（表５７）。ジェミフロキサシンがシタフロキサシンに匹敵する最適殺菌濃度およびイー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）に対するトロバフロキサシンより低いＯＢＣを有することが分かる。ジェミフロキサシンはまた、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して最も低いＯＢＣを有する。最も重要なことに、しかしながら、ジェミフロキサシンはエス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）に対してトロバフロキサシンまたはシタフロキサシンよりかなり低いＯＢＣを有する。さらに、ニュートリエント・ブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）でのエス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）に対する最適殺菌濃度のジェミフロキサシンの殺菌活性は、また、他のフルオロキノロンで、見出されたより大きかった（表５７）。これらの結果は、ジェミフロキサシンがこの系を使用して、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）Ｅ３Ｔに対して、これまで試験される最も強力なフルオロキノロンであることを示す。興味深いことに、しかしながら、クロラムフェニコールが添加される場合、あるいは、実験がリン酸塩緩衝生理食塩水で実行された場合、エス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）に対するジェミフロキサシンの殺菌的利点は保持されない（表５７）。換言すれば、ジェミフロキサシンによる殺菌機構Ｂは、トロバフロキサシンまたはシタフロキサシンで見られるほど強力でない。
トロバフロキサシンで見られるごとく（表５７）、ジェミフロキサシンは、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、クロラムフェニコール存在下またはリン酸塩緩衝生理食塩水で殺菌活性を有さない。実際、シタフロキサシンはこれらの実験的条件下で、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４に対して殺菌活性を有すると知られている唯一のフルオロキノロンである。
トロバフロキサシンまたはシタフロキサシンと比較して弱い付加的機構 ＢまたはＢ１のため、細菌が増殖できない場合、ジェミフロキサシンは減少した殺菌活性を示す。それにも関わらず、増殖する細菌に対して、ジェミフロキサシンは非常に強い殺菌活性を示す。これら差異の臨床的意味は、ジェミフロキサシンのさらなる評価の後、明白になるであろう。
【０３８８】
【表９７】
2004507440.tif 000099
ＯＢＣ ＝ 最適細菌濃度、 ＮＢ ＝ ニュートリエント・ブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）、Ｃｍ ＝ クロラムフェニコール、 ＰＢＳ ＝ リン酸塩緩衝生理食塩水。
【０３８９】
本発明は、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）またはストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）またはストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）またはストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）またはストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
【０３９０】
本発明の好ましい目的は、該病原細菌がエシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）またはストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他の病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ腸球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、この本発明は、種々の腸球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、１９９８および１９９９年に大学病院で集められた１００個の臨床分離株に対して、ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の活性を測定することであった。
ジェミフロキサシンは、ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、ナリジクス酸、ペニシリン、アンピシリン、ゲンタマイシンおよびトリメトプリム／スルファメトキサゾールと比較しされた。
グリコペプチドを含む多くの抗微生物薬に対する腸球菌の増加した耐性は、新規薬剤の必要性を強調した。フルオロキノロンの中で、いくつかのより新規の化合物は、グラム陽性細菌に対して促進された活性を有する。この研究の目的は、１９９８および１９９９年に大学病院で集められた１００個の臨床分離株に対して、ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の活性を調査することであった。分離株は、５０個のエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）および５０個のエンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）株から成り、そのうち７個がグリコペプチド耐性（ＶＲＥ）であった。ジェミフロキサシンおよび１０個の他の抗微生物薬のＭＩＣは、ＮＣＣＬＳ方法論によって培地微量希釈法を使用して測定された。
【０３９１】
【表９８】
2004507440.tif 000100
【０３９２】
ジェミフロキサシンは、腸球菌に対して試験される他のキノロンより活性であった。一般に、ＭＩＣはグラム陽性細菌に対する活性について他のキノロンのそれらより１−２希釈低かった。ジェミフロキサシンおよびグレパフロキサシン両者のＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０間に、二モード分布を示す傾向から生じている３−４希釈の差異があった：
ＶＲＥ株のＭＩＣ５０／ＭＩＣ９０値は、グレパフロキサシン、０．５／１６μｇ／ｍｌおよびジェミフロキサシン、０．０６／８μｇ／ｍｌであった。グレパフロキサシンＭＩＣ≧２を有する１７株のうち、グレパフロキサシンおよびジェミフロキサシンのＭＩＣ５０／ＭＩＣ９０値は、それぞれ、４／１６μｇ／ｍｌおよび０．５／２μｇ／ｍｌであり、それはジェミフロキサシンの方を選んで３希釈の差異を意味する。
抗微生物薬耐性は、特にグラム陽性生物中で、増加している臨床的問題である。限界点のあたりに集まっているＭＩＣ値を有する、オフロキサシンおよびシプロフロキサシンのごとき利用できるキノロンは、グラム陽性生物に対して中程度の活性を生じる。グラム陽性球菌に対するより広いスペクトラムの活性を有するより新規のキノロンは、レボフロキサシン、グレパフロキサシンおよびトロバフロキサシンを含む。ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）は、新規ピロリジン置換基を有する新規フルオロナフチリドンカルボン酸である。予備研究は、ジェミフロキサシンが他のクラスの薬剤に耐性である株を含むグラム陽性細菌に対して、非常に活性であることを示した。
【０３９３】
この研究において、ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の抗微生物活性がエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）およびエンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）株に対して検討され、他のキノロンおよびβ−ラクタムのそれと比較された。
合計１００個の腸球菌は、入院患者および通院患者からの臨床試験片から単離された。分離株は、５０個のエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）および５０個のエンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）株を含んだ。７個のイー・フェシウム（Ｅ． ｆａｅｃｉｕｍ）分離株は、バンコマイシン耐性（ＶＲＥ）であり、バンコマイシン耐性株についてスクリーニングされた患者からの検便から単離された。
ＭＩＣは、ＮＣＣＬＳによる微量培地希釈法を使って測定された（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｎｉｎｔｈ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ， Ｔａｂｌｅ ２Ｈ， Ｖｏｌ． １９， Ｎｏ．： １， Ｖｉｌｌａｎｏｖａ， ＰＡ ＵＳＡ （１９９））。試験される抗微生物薬は、：ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、ナリジクス酸、ペニシリン、アンピシリン、アモキシリン／クラブラン酸、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、セフロキシム、ゲンタマイシンおよびトリメトプリム／スルファメトキサゾールであった。マイクロタイター・トレーは、センシタイター（ＳｅｎｓｉｔｉｔｒｅＲ）（ＡｃｃｕＭｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｔｄ， ＵＫ）によって製造された。
適当な品質管理生物は、各運転に含まれた。ＮＣＣＬＳによって推奨される品質管理範囲が範囲内である場合のみ、結果は受け入れられた。エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ ２５９２２、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ ３５２１８、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＡＴＣＣ ２７８５３、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）ＡＴＣＣ ２９２１３およびイー・フェカーリス（Ｅ． ｆａｅｃａｌｉｓ） ＡＴＣＣ ２９２１２は、対照生物として含まれた。エンテロコッカス属の種に対するジェミフロキサシンおよび他抗微生物薬のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の抗微生物活性は、表５９に示される。表６０は、バンコマイシン−感受性およびＶＲＥ株に対して、ジェミフロキサシンおよび他のキノロンのＭＩＣ５０／ＭＩＣ９０値を示す。
【０３９４】
最新の研究は、試験されるキノロンの中でジェミフロキサシンが腸球菌に対して最も強力なインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を有したことを示す。０．５μｇ／ｍｌおよび１μｇ／ｍｌの濃度で、シプロフロキサシン、それぞれわずか６％および７８％、レボフロキサシン、それぞれ６％および８８％と比較して、ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンおよびグレパフロキサシン両者は全イー・フェカーリス（Ｅ． ｆａｅｃａｌｉｓ）分離株の９０％を阻害した。
イー・フェシウム（Ｅ． ｆａｅｃｉｕｍ）に対して、０．５μｇ／ｍｌおよび１μｇ／ｍｌでのジェミフロキサシンの阻害率は、試験される他の全てのキノロンのそれらより高かった。１μｇ／ｍｌの濃度で、シプロフロキサシン６２％、レボフロキサシン４６％およびグレパフロキサシン６６％ と比較して、全イー・フェシウム（Ｅ． ｆａｅｃｉｕｍ）分離株の９４％は、ジェミフロキサシンによって阻害された。
イー・フェカーリス（Ｅ． ｆａｅｃａｌｉｓ）およびイー・フェシウム（Ｅ． ｆａｅｃｉｕｍ）両者について、ジェミフロキサシンのＭＩＣ５０が０．０６μｇ／ｍｌであった；これは、比較するフルオロキノロン・トロバフロキサシン（０．２５μｇ／ｍｌ）およびグレパフロキサシン（０．５μｇ／ｍｌ）のＭＩＣ５０より２−３希釈低かった。ジェミフロキサシンのＭＩＣ９０は、両腸球菌属の種について、トロバフロキサシンおよびグレパフロキサシンより１−２希釈低かった。
ジェミフロキサシンおよびグレパフロキサシンのＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０間に二モード分散を示す傾向から生じた３−４希釈の差違があった。これは、ＶＲＥによって部分的に説明されるのみで、そのために、ＭＩＣ５０／ＭＩＣ９０値は、グレパフロキサシン０．５／１６μｇ／ｍｌおよびジェミフロキサシン０．０６／８μｇ／ｍｌであった。
グレパフロキサシンＭＩＣ≧２を有する１７株のうち、グレパフロキサシンおよびジェミフロキサシンのＭＩＣ５０／ＭＩＣ９０値は、それぞれ、４／１６μｇ／ｍｌおよび０．５／２μｇ／ｍｌであり、それはジェミフロキサシンの方を選んで３希釈の差異を意味する。
【０３９５】
【表９９】
2004507440.tif 000101
【０３９６】
【表１００】
2004507440.tif 000102
【０３９７】
本発明は、腸球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、腸球菌病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、腸球菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、腸球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該腸球菌病原細菌がエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）およびエンテロコッカス・フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他の腸球菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
【０３９８】
本発明は、とりわけ連鎖球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々の連鎖球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、連鎖球菌に対して、他のキノロンマクロライドおよびβ−ラクタムのそれと比較してジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の抗菌活性を測定することであった。
初期のキノロンはグラム陰性感染の治療のために主に開発されたけれども、連鎖球菌および他のグラム陽性病原体に対する改善された活性を有するより新規のいくつかの化合物は現在調査中であり、利用できるようになりつつある。ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の活性は、５０個のストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、５０個のストレプトコッカス・アガラクチエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）および５０個のビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌株を含む１９９８−９９年に、アントワープ大学病院で集められた連鎖球菌の１５０個の最近の臨床分離株に対して評価された。ＭＩＣは、ＮＣＣＬＳの１５０個の最近の臨床分離株に対して評価された。ＭＩＣはＮＣＣＬＳ法による培地微量希釈法によって測定され、１４個の他の抗微生物薬のそれらと比較された。
試験される全キノロンの中で、ジェミフロキサシンは最も強力な活性を示した： ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０両者は、グラム陽性微生物に対する活性を有する他のキノロンのそれらより一般に１−２希釈低かった。オフロキサシンに中間的感受性、あるいは耐性のエス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）の４株は、ジェミフロキサシンＭＩＣ、０．０３−０．０６μｇ／ｍｌを有した。オフロキサシンに中間的に感受性で、そのうち２個がグレパフロキサシンに耐性である３個のエス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）株が、ジェミフロキサシンＭＩＣ０．０３−０．０６μｇ／ｍｌを有した。これらの結果は、他のキノロンに耐性になりつつあるスト連鎖球菌株に対するジェミフロキサシンの潜在的活性を示す。
抗微生物薬耐性は、特にグラム陽性生物の中で、増加している臨床的問題である。オフロキサシンおよびシプロフロキサシンのごとき入手可能なキノロンは、限界点のあたりのＭＩＣのクラスターで、グラム陽性生物に対して中程度活性を生じる。グラム陽性細菌に対する促進された活性を有するトロバフロキサシンおよびグレパフロキサシンのごとき多くのより新規なキノロンは、利用できるようになった。ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）は、フルオロキノロン・クラスの抗微生物薬のナフチリドン分子である。それは、他のクラスの薬剤に耐性の株を含むグラム陽性およびグラム陰性病原体に対して広域抗微生物活性を有する。
合計１５０個の連鎖球菌は、入院患者および通院患者からの臨床試験片から単離された：
【０３９９】
５０個のストレプトコッカス・アガラクチエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、５０個のストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）および５０個のビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌。
ＭＩＣは、ＮＣＣＬＳ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｎｉｎｔｈ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ， Ｔａｂｌｅ ２Ｈ， Ｖｏｌ．， １９， Ｖｉｌｌａｎｏｖａ， ＰＡ ＵＳＡ （１９９９））による微量培地希釈法を使用して測定された。試験される抗微生物薬は、：ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、ナリジクス酸、ペニシリン、アンピシリン、アモキシリン／クラブラン酸、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、セフロキシム、ゲンタマイシンおよびトリメトプリム／スルファメトキサゾールであった。
マイクロタイター・トレーは、センシタイター（ＳｅｎｓｉｔｉｔｒｅＲ） （ＡｃｃｕＭｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｔｄ， ＵＫ）によって製造された。
適当な品質管理生物は、各運転に含まれた。品質管理がＮＣＣＬＳによって推奨される範囲内である場合、結果は受け入れられるのみだった。エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ ２５９２２、イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ ３５２１８、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＡＴＣＣ ２７８５３、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）ＡＴＣＣ ２９２１３およびエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）ＡＴＣＣ ２９２１２は、対照生物として含まれた。
ストレプトコッカス属の種に対するジェミフロキサシンおよび他抗微生物薬のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の抗微生物活性は、表６１に示される。
ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシン１６−７６％、グレパフロキサシン９４−９８％、トロバフロキサシン９８−１００％と比較して０．５μｇ／ｍｌで全連鎖球菌の９８−１００％を阻害した
試験される全キノロンの中で、ジェミフロキサシンは最も強力な活性を示した。０．０１５から０．０６μｇ／ｍｌまで変動するＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０両者は、比較フルオロキノロンのそれらより１−４希釈低かった：トロバフロキサシン（０．１２−０．２５μｇ／ｍｌ）およびグレパフロキサシン（０．１２−０．５μｇ／ｍｌ）。
オフロキサシンに中間的感受性（ＭＩＣ ４μｇ／ｍｌ）または耐性（ＭＩＣ ８μｇ／ｍｌ）である４個のエス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）株で、ジェミフロキサシンＭＩＣは、範囲０．０３−０．０６μｇ／ｍｌであった。オフロキサシンに中間的感受性であり、そのうち２個がグレパフロキサシン耐性（ＭＩＣ ２μｇ／ｍｌ）である３個のエス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）株は（ジェミフロキサシンＭＩＣ、０．０３−０．０６μｇ／ｍｌを有した。
ジェミフロキサシンは、他のキノロンに耐性になりつつある連鎖球菌に対して、潜在的活性を含む、連鎖球菌に対して高い活性を示す新規フルオロキノロンである。
本発明は、連鎖球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、連鎖球菌病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
【０４００】
【表１０１】
2004507440.tif 000103
【０４０１】
【表１０２】
2004507440.tif 000104
【０４０２】
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、連鎖球菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、連鎖球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該連鎖球菌病原細菌がストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・アガラクチエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌：からなる群より選択される方法を提供するが。他の連鎖球菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけアシネトバクター属の種に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のアシネトバクター属の種の病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、５種のアシネトバクター属に対するジェミフロキサシンおよびコンパレータ−キノロンのＭＩＣ範囲、ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値およびＯＢＣおよび４ｘＭＩＣ両者で試験される７個の抗生物質の死滅キネティクスを測定することであった。
【０４０３】
ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の静菌の活性は、アシネトバクター属の種の１００個の臨床分離株（４７個のエー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、１８個のエー・アニトラタス（Ａ． ａｎｉｔｒａｔｕｓ）、１８個のエー・ルウォフィー（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）、１３個のエー・カルコアセチカス（Ａ． ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、４個のアシネトバクター属の種）に対するＭＩＣによって１１個の抗菌薬：スパルフロキサシン、グレパフロキサシン、シプロフロキサシン、モキシフロキサシン、トロバフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、ガチフロキサシン、イミペネム、セフロキシムおよびアジスロマイシンと比較された。ジェミフロキサシン（ＭＩＣ５０／９０ ０．０６／１６）は、シプロフロキサシン（ＭＩＣ５０／９０ ０．５／＞１２８）より８倍超強力であり、グレパフロキサシン、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシンおよびガチフロキサシンより２−８倍強力であり、トロバフロキサシンおよびスパルフロキサシンの１希釈の範囲内であった。交差耐性は、キノロンの群の範囲内でのみ見られ、非ーキノロン抗生物質に広がらなかった。ジェミフロキサシンおよび６個のコンパレーターキノロンの殺菌活性は、その最適の殺菌濃度（ＯＢＣ）および４倍ＭＩＣでエー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ １９６０６に対して用量−反応および時間−死滅によって調査された。ＯＢＣで、キノロン間に有意差がなかったが、４倍ＭＩＣで、ジェミフロキサシンは、他の薬剤で見られる１ｌｏｇ１０減少と比較して、３０分で生菌数をほぼ２ｌｏｇ１０算定を減少する利点を示す。この促進された死滅は、細胞数を４ｌｏｇ１０超減少して２４時間超延長した。これらのデータは、ジェミフロキサシンがアシネトバクター感染に対して治療値であり得ることを示す。
【０４０４】
アシネトバクター属からの細菌および、特に、アシネトバクター・バウマニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）は、それらが特に免疫力が低下している患者において菌血症、二次性髄膜炎、尿路感染症および肺炎の原因になっている入院患者からますます単離される（Ｔｏｗｎｅｒ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ４６： ７２１−７４６ （１９９７））。これら生物は、アミノグリコシドおよびより古いフルオロキノロンおよび広域のβ−ラクタムを含むほとんど全ての現在利用できる抗生物質に耐性になった；それらは現在、セファロスポリンにほとんど全部耐性であり、いくつかがイミペネムを含むカルバペネムに耐性である（Ｐａｔｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ， ２： ８１−８８ （１９９３）； Ｌｙｙｔｉｋａｉｎｅｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ， ３１： ４１−５４ （１９９５））。これら細菌を管理できないことは、より感受性の微生物が根絶された場合、その空になった場所にそれらをコロニー形成させてしまう。フルオロキノロン使用が高い、特に、以前の使用暦がある地域でより明白であると見出されたが（Ｍｕｄｅｒ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３５： ２５６−２５８ （１９９１））、シプロフロキサシンへの耐性は、病院環境内でアシネトバクター属の種に見出された（Ｖｉｌｌｅｒｓ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， １２９： １８２−１８９ （１９９８）； Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｂａｎｏ， Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， １０： ６７−７７ （１９９９））。
フルオロキノロン耐性の出現における相対的な遅延は、より新規で、より強力なキノロンがアシネトバクター属の種の管理において非常に有用であると立証し得ることを示す。（Ｐｉｅｒｏｎｉ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３９： ４１９−４２２ （１９９７）； Ｐａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４２： ２８１０−２８１６ （１９９８））。
ジェミフロキサシンは、グラム陽性およびグラム陰性両生物に対して、良好なスペクトラムの活性を示した新規世代フルオロキノロンである（Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４１： ２０４−２１１ （１９９７）； Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｇｒａｍ ａｎｄ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｉｘｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｎｅｗ Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ， ｐ．１７０ （１９９８）； Ｐａｅｋ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｇｒａｍ ａｎｄ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｉｘｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎＮｅｗ Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ， Ｄｅｎｖｅｒ， ｐ． １７０ （１９９８）； Ｋｅｌｌｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｇｒａｍ ａｎｄ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｉｘｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｎｅｗ Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ， Ｄｅｎｖｅｒ， ｐ． １７０ （１９９８））。この研究において、ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の活性は、アシネトバクター（エー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）、エー・カルコアセチカス（Ａ． ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、エー・ルウォフィ（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）、（種の決められなかった）アシネトバクター属の種およびエー・アニトラタス（Ａ． ａｎｉｔｒａｔｕｓ）の５個の代表的な種に対して、８個のコンパレーターフルオロキノロンならびにカルバペネム・イミペネム、セファロスポリン・セフロキシムおよびマクロライド・アジスロマイシンと比較された。フルオロキノロンの臨床の作用は殺菌であるが、異常には、二相性用量反応を示す（Ｃｒｕｍｐｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ８： ２５１−２６１ （１９７５））。最適殺菌濃度（ＯＢＣ）に達するまで、薬剤の致死率がその濃度二比例して増加することが証明されるインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、このことは測定可能である。この点より上では、殺菌活性は、濃度のさらなる増加で着実に減少する。より新規のフルオロキノロンは、主にグラム陽性の種に対して試験され、二相性反応はめったに証明されなかった、（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３０： ６２５−６３２ （１９９２）； Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ４３： ４−８ （１９９５））。おそらくこの理由で、濃度−依存的用量反応実験が、アシネトバクター属の種のごときグラム陰性細菌について実行されなかった。そういうわけで、この研究もまた、コンパレーターキノロン・トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、グレパフロキサシンおよびスパルフロキサシンに対してエー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ １９６０６について、ジェミフロキサシンの増加する濃度のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の固定−時間死滅活性を比較し、ついで、その各々のＯＢＣおよび４倍ＭＩＣ両者での時間依存性死滅を検討した。
【０４０５】
以下の抗菌薬が、使用された：ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、アジスロマイシン、イミペネム、スパルフロキサシン、セフロキシム、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシンおよびガチフロキサシン。標準の実験室株エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ １０４１８、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＡＴＣＣ １０６６２、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）ＡＴＣＣ ６５７１およびアシネトバクター・バウマニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ）ＡＴＣＣ １９６０６がＭＩＣ測定の対照として使用され、エー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）株が用量−反応および死滅−曲線両者のために使用された。１００個のアシネトバクター属（エー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）４７個、エー・アニトラタス（Ａ． ａｎｉｔｒａｔｕｓ）１８個、エー・ルウォフィー（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）１８個、エー・カルコアセチカス（Ａ． ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）１３個、アシネトバクター属の種４個）は、アイオワ大学医学部（ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｉｏｗａ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）からの血流分離株であった。
寒天希釈法は、感受性試験のために、ブリティッシュ・ソサイエティー・フォー・アンチマイクロバイアル・ケモセラピー（ｔｈｅ Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ） （Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ２７ （Ｓｕｐｐｌ． Ｄ） （１９９１）） （ＢＳＡＣ） ガイドラインに続きイソセンシテスト・アガー（Ｉｓｏ−ｓｅｎｓｉｔｅｓｔ ａｇａｒ） （Ｏｘｏｉｄ） 上で、最小阻止濃度（ＭＩＣ）を測定するのに使用された。
ＯＢＣを測定するために、ニュトーリエントブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）（Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｂｒｏｔｈ Ｎｏ． ２， Ｏｘｏｉｄ， ＵＫ）が、エー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ １９６０６と共に接種され、３７℃で一晩インキュベートされた。ニュトーリエントブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）で０．０３−２５６ ｍｇ／ｌまで変動する抗生物質の２倍希釈は、０．２ｍｌの一晩培養液（最終容量１０ｍｌ）を接種され、さらに３ 時間３７℃でインキュベートされた。得られた培養液の生菌数は、栄養寒天（Ｏｘｏｉｄ， ＵＫ）上へ連続希釈および塗布によって測定された（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２９： １３９−１４４ （１９８９））。結果は、最適殺菌濃度を測定するためにグラフ上にプロットされた。
死滅キネティクスは、ＯＢＣおよび４倍ＭＩＣ両者で実行された。簡単には、５ｍｌの滅菌２倍力価ニュトーリエントブロス（ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ）は２０ｍｌユニバーサルへ分注され、抗生物質および滅菌蒸留水が最終容量９．８ｍｌを与えるまで添加され、ユニバーサルは３７℃で１５分、予めインキュベートされた。対数増殖期培養液（０．２ｍｌ）は、実験を開始するのに用いられ、初期数は栄養寒天上への連続希釈および塗布によって測定された。試料は３時間、３０分毎に取られ、これらは連続的に希釈され、栄養寒天上へ塗布された。
【０４０６】
最終的な計数は、２４時間後に取られた。全プレートは、３７℃で空気中一晩インキュベートされた（Ｌｅｗｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， ２９： １３９−１４４ （１９８９））。
アシネトバクター属の５種に対するジェミフロキサシンおよびコンパレーターキノロンのＭＩＣ範囲、ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値は、表６２に示される。ジェミフロキサシンは、シプロフロキサシンより８倍強力であり、（それぞれ、ＭＩＣ５０／９０、０．５／＞１２８ ｍｇ／ｌ対０．０６／１６ｍｇ／ｌ）およびグレパフロキサシン、ガチフロキサシン、モキシフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシンおよびグレパフロキサシンより２−８倍強力であり、コンパレーターキノロン・スパルフロキサシンおよびトロバフロキサシンの１希釈の範囲内であった。これらの値は、非ーキノロン抗生物質に対して、生物の感受性にかかわりなかった。アシネトバクター属の中の、セフロキシムおよびアジスロマイシンに対する全体としての耐性は、なお、限界点より上にＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０を有するけれども、低いＭＩＣ範囲を記録するエー・ルウォフィー（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）およびアシネトバクター属の種でそれぞれ、９９％および９４％であった。アシネトバクター属のいずれも、８ｍｇ／ｌの限界点より上のイミペネムに対するＭＩＣを有さず（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ２７ （Ｓｕｐｐｌ． Ｄ） （１９９１））、種レベルで、ＭＩＣ５０、０．１２ｍｇ／ｌおよびＭＩＣ９０、０．２５または０．５ｍｇ／ｌを記録し、従って１００％の感受性を示した。
図２７は、ジェミフロキサシンに対するエー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ １９６０６の二相性用量反応を図示する。グラフの最も低い点は、そのＯＢＣと一致する。死滅−曲線実験で使用される抗生物質の濃度は、表６３に示される。図２８−３４は、ＯＢＣおよび４ｘＭＩＣ両者で７個の抗生物質の死滅キネティクスを示す。それらのＯＢＣで、２４ｈ阻害された再生育および５ｌｏｇ１０超の生菌数の減少を有する、ジェミフロキサシンおよび他のキノロン間の殺菌活性に有意差がなかった。しかしながら、インビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）で達成される濃度である４倍ＭＩＣ（０．５μｇ／ｍｌ）でのジェミフロキサシンは、他のキノロンより有利であり、わずか３０分後に生菌数をほぼ２ｌｏｇ１０減少し、２４ｈ後、生菌数を４ｌｏｇ１０超減少する。逆に、他のキノロンが、４倍ＭＩＣで最初３０分に、どうにか生菌数を１ｌｏｇ１０減少する。レボフロキサシン（図３１）は、最初３０分で、生菌数を３ｌｏｇ１０、減少したが、この時間点以後、死滅率が減少し、続く１５０分で、０．５ｌｏｇ１０のみを死滅させた。この時間−期間でで、ジェミフロキサシンは１．５ｌｏｇ１０超を死滅させた（図２８）。ジェミフロキサシンによって示されるこの促進された死滅は、グラム陰性で、キノロン・シプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびスパルフロキサシンで見られるより著しくよかった（図２９、３２および３４）。
【０４０７】
この研究において、ジェボンス（Ｊｅｖｏｎｓ）らによって設定された限界点０．５μｇ／ｍｌ（Ｊｅｖｏｎｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｇｒａｍｍｅ ａｎｄ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ２１ｓｔ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ｏｆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ， ｐ． １４１ （１９９９））が使用された場合、ジェミフロキサシンは分離株の７２％を阻害した。エー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）に対するキノロンの阻害活性の順位序列は、彼らがスパルフロキサシンはジェミフロキサシンと同等の効力を有すると報告する以外、コーミカン（Ｃｏｒｍｉｃａｎ）およびジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）によって報告されるものと同様であるが（Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４１： ２０４−２１１ （１９９７））、トロバフロキサシン＞ジェミフロキサシン＞レボフロキサシン＞シプロフロキサシン＝オフロキサシン、この研究において、スパルフロキサシンはジェミフロキサシンより１希釈強力であった。本明細書中に示されるエー・カルコアセチカス（Ａ． ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）に対するジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、スパルフロキサシン、シプロフロキサシンおよびオフロキサシンのＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値は、Ｐａｅｋら１１と一致するが、１希釈高いＭＩＣ９０を報告する、Ｏｈによって記録されるものとわずかに異なる（Ｏｈ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４０： １５６４−１５６８ （１９９６））。同じ限界点を用いてシプロフロキサシン３４％、トロバフロキサシン２７％ 、およびスパルフロキサシン２５％を記録するこの研究に比較して、多薬剤耐性のエー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）に対して、Ｐａｓｃｕａｌ（Ｐａｓｃｕａｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４０： １４０−１４２ （１９９７））はシプロフロキサシン、トロバフロキサシンおよびスパルフロキサシン耐性レベルはそれぞれ、９３．３％、５６．７％および６６．７％と記録する（限界点：シプロフロキサシン≧２ｍｇ／ｌ、スパルフロキサシンおよびトロバフロキサシン≧４ｍｇ／ｌ）。群として、アシネトバクター属によって示される耐性のレベルは、シプロフロキサシン２６％、トロバフロキサシン１９％およびスパルフロキサシン２３％であった。限界点の８倍以下のＭＩＣ５０で、ジェミフロキサシンはエー・ルウォフィー（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）およびエー・アニトラタス（Ａ． ａｎｉｔｒａｔｕｓ）に対して良好な活性を示した。エー・ルウォフィー（Ａ． ｌｗｏｆｆｉｉ）に対して、ジェミフロキサシンはスパルフロキサシン（ＭＩＣ９０：それぞれ１および４ｍｇ／ｌ）より強力であった。最も強力なキノロンであるスパルフロキサシンおよび４個の分離株全ては０．００８ｍｇ／ｌのＭＩＣを記録して、アシネトバクター属の種のわずかな試料は、セフロキシムを除く全抗生物質に感受性であった。１個のキノロンへの感受性の減少は、全くそれらへの減少によって反映された。��れは、しかしながら、全ての株がイミペネムに感受性であり、ほとんどがセフロキシムおよびアジスロマイシンに耐性だったので、非ーキノロンに対する同様な減少によって反映されなかった。
【０４０８】
ファス（Ｆａｓｓ）による以前の研究（Ｆａｓｓ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３７： ２０８０−２０８６ （１９９３））は、アシネトバクターおよびアジスロマイシンで４ｍｇ／ｌの濃度がこの種の大部分の分離株を阻害するのに十分であることを示した。ＭＩＣ５０４ｍｇ／ｌを記録したエー・バウマニ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）を除いて、この研究中のアジスロマイシンのＭＩＣ５０は、４ｍｇ／ｌ以下であった。しかしながら、これはなお、ＢＳＡＣ（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ２７ （Ｓｕｐｐｌ． Ｄ）（１９９１））によって設定された限界点０．５ｍｇ／ｌより上であり、従って、耐性であると記録される。セフロキシム（６４ｍｇ／ｌ）に対するアシネトバクター属によって記録される高いＭＩＣ５０は、ほとんど種差違がなく、セファロスポリンに対して同様に高いＭＩＣを記録したトラウブ（Ｔｒａｕｂ）およびスポール（Ｓｐｏｈｒ）（Ｔｒａｕｂ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３３： １６１７−１６１９ （１９８９））による調査と一致する。本明細書中に報告されるイミペネムへの１００％の感受性は、ＴｒａｕｂおよびＳｐｏｈｒ（Ｔｒａｕｂ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３３： １６１７−１６１９ （１９８９））およびＰｉｅｒｏｎｉ （Ｐｉｅｒｏｎｉ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３９： ４１９−４２２ （１９９７））と一致する。用量反応アッセイにおいて、全キノロンは、特有の二相性用量反応を示した。ＯＢＣのものが、たとえそれらの各ＭＩＣが非常に異なるとしても、各薬剤の死滅機構が類似的であることを示す互いに１希釈の範囲内であると見出された。
【０４０９】
ＯＢＣで、死滅がその最適であるが、この濃度がインビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）で必ずしも見出されるというわけではなく、従って４倍ＭＩＣはいかに薬剤がインビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）で作用できるかのより良い指標である。この研究において、４−倍ＭＩＣでジェミフロキサシンはシプロフロキサシンと比較して優れた死滅−キネティクスを示す。これに加えて、４ｘＭＩＣでのジェミフロキサシン死滅−キネティクスは、たとえそれが８分の１濃度であるとしても、そのＯＢＣのそれとほとんど等しかった（それぞれ、０．５および４ｍｇ／ｌ）。レボフロキサシンのみは、ジェミフロキサシンのそれの４倍濃度（０．５ｍｇ／ｌと比較して２ｍｇ／ｌ）であるけれども、等しい死滅を示した。
ジェミフロキサシンの良好なインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の殺菌および静菌活性を示すこの研究の結果は、この薬剤がアシネトバクター感染の治療に有効であり得ることを示す。
【０４１０】
【表１０３】
2004507440.tif 000105
【０４１１】
【表１０４】
2004507440.tif 000106
【０４１２】
【表１０５】
2004507440.tif 000107
【０４１３】
本発明は、アシネトバクター属の種の病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、アシネトバクター属の種の病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、アシネトバクター属の種の病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、アシネトバクター属の種の病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該アシネトバクター属の種の病原細菌が、アシネトバクター・バウマニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ ）、アシネトバクター・カルコアセチカス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）、アシネトバクター・ルウォフィ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｌｗｏｆｆｉｉ）およびアシネトバクター・アニトラタス（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ａｎｉｔｒａｔｕｓ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他のアシネトバクター属の種の病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、最小阻止濃度（ＭＩＣ）および最小殺菌濃度（ＭＢＣ）によってクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対するジェミフロキサシンおよびより新規フルオロキノロンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を測定することであった。
ジェミフロキサシンは、エリスロマイシン、ドキシサイクリン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、レボフロキサシン、スパルフロキサシン、グレパフロキサシン、トロバフロキサシン、モキシフロキサシン、ガチフロキサシン、ジェミフロキサシンおよびスルファメトキサゾールと比較された。
【０４１４】
それらがクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）を含む慣用的細菌および「異型の」病原体の広い範囲をカバーするので、キノロンは、院外感染性肺炎および他の呼吸器感染の治療のために、経験的療法として現在使われている。シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、成人の院外感染性肺炎の１０％ないし２０％と関連し、最近、アテローム性動脈硬化症を含むいくつかの非呼吸器条件と関連しているとして関係している。
より新規の「第三世代」キノロンは、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）含むグラム陽性菌に対する活性を促進し、持続性の血清半減期を延長し、日に一度の投与を可能にした。ジェミフロキサシンおよび他の新規キノロンは、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して良好な活性を有するけれども、実際には、全ての公開された治療研究は、血清学的診断法に依存し、従って、微生物学的効力は評価されなかった。逸話的経験は、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性が必ずしもインビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）での効力と相関し得ないことを示す。
クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、１９８６年にＧｒａｙｓｔｏｎおよび同僚によって最初に気道病原体と記載された（Ｇｒａｙｓｔｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １６１： ６１８−６２５ （１９９０））。伝染様式は不確実なままであるが、感染した気道分泌物を介し得る。
シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染に関連した院外感染性肺炎の比率は６−２２％まで変動し、地理学的位置、検討される年齢群および使用される診断法（Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ， Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． Ｃｌｉｎ． Ｐｒａｃｔ．， ８： ２３２−２４０ （１９９９））によって異なった。これらの研究のほとんどは、血清学にのみ基づいた。シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、また、慢性気管支炎、中耳炎、副鼻腔炎および反応性気道疾病の急性増悪を含む他の呼吸器感染と関連していた（Ｇｒａｙｓｔｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １６８： １２３１−１２３５ （１９９３）； Ｅｍｒｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｒｃｈ． Ｐｅｄｉａｔｒ． Ａｄｏｌｅｓｃ． Ｍｅｄ．， １４８： ７２７−７３２ （１９９４）； Ｂｌｏｃｋ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． Ｊｏｕｒｎａｌ， １６： ８５５−８６２ （１９９７））。急性呼吸器感染症に続くシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）による持続的鼻咽頭感染は、数年までの期間に成人で実証された（Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， １４： １７８−１８２ （１９９２）； Ｄｅａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎｉｎｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｈｕｍａｎ Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ， Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ： ＵＳＣＦ， ｐｐ． ２１９−２２３ （１９９８））。シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）による慢性感染は、また、アテローム性動脈硬化症の病因に関係した（Ｗｅｉｓｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｂｕｌｌ． Ｉｎｓｔｒ． Ｐａｓｔｅｕｒ， ９５： １０７−１１３ （１９９７））。生物の検出のための標準化された血清学的および非培養方法の欠如は、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の治療を研究する努力に対して重大な影響を有した。大部分の治療研究は、診断のために完全に血清学に依存し、従って、微生物学的な効力は評価されなかった。
【０４１５】
シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、タンパク質またはＤＮＡ合成に影響を及ぼす薬剤；マクロライド、テトラサイクリンおよびフルオロキノロン（表６４）（Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３８： １８７３−１８７８ （１９９４））にインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で感受性である。シー・トラコマチス（Ｃ． ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）での研究から推論して、ＤＮＡギラーゼは、おそらくシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対するキノロン作用のための主要な標的である（Ｄｅｓｓｕｓ−Ｂａｂｕｓ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： ２４７４−２４８１ （１９９８））。より古いキノロンは、１から≧１６μｇ／ｍｌまで変動するＭＩＣおよびＭＢＣで、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、マクロライドおよびテトラサイクリンより少ない活性であった（９）。
【０４１６】
レボフロキサシン、トロバフロキサシンおよびモキシフロキサシンを含むより新規キノロン系薬剤は、ＭＩＣ ０．２５−１□ｇ／ｍｌを有するオフロキサシンよりわずかに活性である（Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３８： １８７３−１８７８ （１９９４）； Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３６： ６８２−６８３ （１９９２）； Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ２０３３−２０３４ （１９９８）； Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： ９５１−９５２ （１９９８）； Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３６： １５７３−１５７４ （１９９２）； Ｗｏｏｄｃｏｃｋ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： １０１−１０６ （１９９７）； Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， １４： ４７１−４７７ （１９９７）； Ｍｉｙａｓｈｉｔａ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ４７１−４７７ （１９９７）； Ｋｉｍｕｒａ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３７： ８０１−８０３ （１９９３））。スパルフロキサシン、グレパフロキサシン、ガチフロキサシンおよびジェミフロキサシンは、ＭＩＣ、０．０３−０．５のμｇ／ｍｌを有する最も活性な化合物である（Ｈａｍｍｅｒｓｃｈｌａｇ， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３８： １８７３−１８７８ （１９９４）； Ｍｉｙａｓｈｉｔａ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： １３３１−１３３４ （１９９７）； Ｗｉｓｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３７： ４９７−５０４ （１９９３）； Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３８： １４０２−１４０３ （１９９４）； Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ． Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ， １２： １８１−１８４ （１９９９）； Ｄｏｎａｔｉ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３： ８２５−８２７ （１９９９）； Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９）； Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９７， （１９９８）； Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９））。個別研究の範囲内で、特定のキノロンに対するシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の異なる分離株の感受性はかなり一様であり、通常、１ないし２希釈だけ異なる。しかしながら、報告される感受性は、研究によって、１０−倍も変化し得る。シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の感受性試験に使用される方法は、主にシー・トラコマチス（Ｃ． ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）について使用されるものから適合された。方法は標準化されず、結果は、組織培養系、接種量、抗生物質添加の時間、数およびいずれの分離株が試験に使用されるかを含む多くの変数によって影響され得る。文献で報告される多くのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）実験は、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）５個より少ない分離株を使用し、多くは１個のみで、しばしば、広範囲に進むＴＷ １８３、ＩＯＬ ２０７または実験室分離株を使用している。多数の臨床分離株を試験した限られた数の研究がある。表６５は、より新規のフルオロキノロンの活性の個別研究の結果をまとめる。
【０４１７】
データは、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対するジェミフロキサシンの活性に限られる。利用できる２つの研究は、前記の問題を図示する。
Ｒｉｄｇｗａｙ （Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９７ （１９９８））は、ジェミフロキサシンに対して、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の５個の分離株； ＴＷ １８３、ＩＯＬ ２０７、２０４３（ＡＴＣＣ ＶＲ １３５５）、ＴＷ２７．９およびＣＷＬ−０２９（ＡＴＣＣ ＶＲ １３１０）を試験した。ＭＩＣ範囲は、０．０６−０．１２μｇ／ｍｌであった。続いて、ロブリン（Ｒｏｂｌｉｎ）（Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９））は、ジェミフロキサシンおよび他の抗生物質に対して、米国の多機関の肺炎治療研究に記載される患者からの１５個の最近の臨床分離株を含むシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の２０個の分離株を試験した。ジェミフロキサシンのＭＩＣ９０およびＭＢＣ９０は、０．□□□ｇ／ｍｌであり、リッジウェイ（Ｒｉｄｇｅｗａｙ）によって報告された値（Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９７ （１９９８））より２ないし４倍低い活性であった。この矛盾は、試験の標準誤差の範囲内であり得、使用された方法の補佐であり得、あるいは異なる分離株の感受性における変動率と関連があり得る。
リッジウェイ（Ｒｉｄｇｗａｙ）らは、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染に対して、ＨＥｐ−２細胞より１０ないし１００倍感受性が場合によってはより低い終末点へ導く低いマックコイ（ＭｃＣｏｙ）細胞を使用した。両研究はＴＷ １８３を試験したが、表６５に示されるごとく、ジェミフロキサシンへのこの分離株のＭＩＣでの重複部分はなかった。
より新規の「第三世代」キノロンはより古い薬剤より２ないし１０倍活性であるけれども、それらはなお、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、マクロライドおよびテトラサイクリンより少ない活性である。インビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）での感染の治療のために、これらの新規キノロンの効力のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）感受性試験の結果から推論することができるだろうか？クラリスロマイシンがインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）でエリスロマイシンより１０−１００−倍活性であるけれども、それは院外感染性肺炎を有する子供の鼻咽頭からシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）を根絶する上で、エリスロマイシンより有効でなかった（Ｂｌｏｃｋ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． Ｊ．， １４： ４７１−４７７ （１９９５））。根絶率は、クラリスロマイシン７９％およびエリスロマイシン８６％であった。より新規キノロンの促進された薬動力学および組織侵入を考慮して、これら薬剤がシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の治療においてマクロライドと同程度有効であると期待するであろう。しかしながら、実際的には、現在までに公開されるシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の治療のためにキノロンを評価するあらゆる研究は、診断のために、本来、臨床的終末点である血清学のみを使用した。
【０４１８】
１９９０年に、リップスキー（Ｌｉｐｓｋｙ）らは（Ｌｉｐｓｋｙ， ｅｔ ａｌ．， Ａｍ． Ｊ． Ｍｅｄ．， ８９： ７２２−７２４ （１９９０））回顧すると、急性シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の血清学的証拠を有する（ＩｇＧ／ＩｇＭにおいて４倍上昇、単一ＩｇＭ ＞ １６ またはＩｇＧ ＞ ５１２、）と同定された、オフロキサシンの１０日クールで治療された気管支炎および肺炎の４人の患者を記載する。伝えるところによると実証される全ては、臨床的に改良と記録した。オフロキサシンへの３個の実験室株のＭＩＣ（１−２□ｇ／ｍｌ）に基づき、著者らはＭＩＣが達成可能な血清レベルより少なかったので、オフロキサシンがこれら患者に有効であったと結論した。プローフェ（Ｐｌｏｕｆｆｅ）らは（Ｐｌｏｕｆｆｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １１７５−１１７９ （１９９６））標準療法（マクロライドまたはテトラサイクリンを加えたβ‐ラクタム抗生物質）を受けた人の７５％と比較して、オフロキサシンで治療されたシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の血清学的証拠を有する院外感染性肺炎の患者中に８３％の臨床反応率を見出した。同様にファイル（Ｆｉｌｅ）らは（Ｆｉｌｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： １９６５−１９７２ （１９９７））セフトリアキソンおよび／またはセフロキシムアキセチルで治療される患者の９３％と比較して、レボフロキサシンで治療された患者中の９８％の臨床的治ゆ率を報告した。さらに、エリスロマイシンまたはドキシサイクリンのいずれかが研究者の判断で添加され得、彼らの治療計画に加えられるエリスロマイシンまたはドキシサイクリンを有したそれらの患者の間で、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の血清学的証拠を有するものの反応率は異ならなかった。感染の見込みがある、すなわち単一ＩｇＧ ≧ ５１２またはＩｇＭ ≧ ３２を有した患者と比較して確定した感染、すなわちＭＩＦＩｇＧまたはＩｇＭの４−倍上昇）を有したそれら患者中の反応率に差異はまた、なかった。
【０４１９】
最近のいくつかの研究は、さらにこの一段階を越え、感染の血清学的証拠を有した患者が臨床的によくなった場合、たとえ培養されなかったとしても、生物が根絶されたとみなされることを示す（Ｌｅｏｐｈｏｎｔｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， １７： ４３４−４４０ （１９９８）； Ｄｅａｂａｔｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｈｅｓｔ， １１４： １２０−１３０ （１９９８））。ある研究は、慢性気管支炎の急性増悪の治療のためにトロバフロキサシンをアモキシシリンと比較した。アモキシシリンで治療されたシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の血清学的証拠を有するそれらの患者の中の「根絶」率は、また、１００％であった。アモキシリンおよびセファロスポリンのごとき、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して乏しい活性を有するかあるいは全く有さない抗生物質を使用する投与計画の明白な成功は、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染を診断するのに用いられる血清学的基準の特異性についての多くの疑問を提起する。
培養がなされたキノロンでの治療のあるの逸話的報告がある。ロブリン（Ｒｏｂｌｉｎ）らは（Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３８： １４０２−１４０３ （１９９４））、培養でシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染（気管支炎および肺炎）を実証された３人の患者をグレパフロキサシンで治療し、３人の患者のうちの２人は、薬剤での２週の治療にも関わらず、培養陽性および症候性のままであった。これらの培養陽性の患者のうちの２人は、急性シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の血清学的基準を満たさなかった。２つの多機関肺炎治療研究の予備結果は、レボフロキサシンおよびモキシフロキサシンが鼻咽頭からシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の根絶で７０−８０％効力を有すると見出し、それはエリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンで以前に報告された経験に非常に類似的だった（Ｂｌｏｃｋ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． Ｊ．， １４： ４７１−４７７ （１９９５）； Ｒｏｂｌｉｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： １９４−１９６ （１９９８））。治療後、患者から得られるシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の分離株のＭＩＣおよびＭＢＣは、治療前得られた分離株のそれらから、変化せず、残存率は耐性の発生によらなかったことを示した。これらの研究は、シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の治療を扱ういくつかの重要な問題を図示する。インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性は、必ずしも微生物学効力を予測しない。抗生物質抵抗性の発生がシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）についてまだ記載されていないけれども、アジスロマイシンへのＭＩＣの４倍増加が、２人の患者において薬剤療法後、得られるシー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の分離株で報告された（Ｂｌｏｃｋ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． Ｊ．， １４： ４７１−４７７ （１９９５））。デサス−バブス（Ｄｅｓｓｕｓ−Ｂａｂｕｓ）らは（Ｄｅｓｓｕｓ−Ｂａｂｕｓ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．， Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： ２４７４−２４８１ （１９９８））薬剤の亜阻止濃度で生物の連続継代の後、シー・トラコマチス（Ｃ． ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）で、オフロキサシンおよびスパルフロキサシン耐性を誘発することができた。培養がなされず、微生物学的効力が評価されない限り、それらは決して調査されず、耐性の出現を実証できない。これらの薬剤が慣用的なかつ「異型の」病原体に対して活性を有するので、院外感染性肺炎の経験的治療のためのキノロンの使用は普及している選択になりつつある（Ｂａｒｔｌｅｔｔ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， ２６： ８１１−８３８ （１９９８））。シー・ニューモニエ（Ｃ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染の治療のためにキノロンの効力を評価する場合、これらの問題は考慮に入れられる必要がある。
【０４２０】
【表１０６】
2004507440.tif 000108
【０４２１】
【表１０７】
2004507440.tif 000109
【０４２２】
本発明は、クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
【０４２３】
本発明の好ましい目的は、該クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌が、クラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他の病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、種々の連鎖球菌に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々の連鎖球菌病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、微量希釈法によって、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・アガラクチエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌、各５０個の臨床分離株に対するジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を測定することであって、活性をナリジクス酸、オフロキサシン、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、トロバフロキサシンおよびグレパフロキサシン、ペニシリンアンピシリン、ゲンタマイシンおよびトリメトプリム／スルファメトキサゾールのそれと比較した。
ジェミフロキサシンは、試験される他のキノロンより非常に活性であった。
ジェミフロキサシンは、エス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）に対してペニシリンと同程度活性であり、ビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ連鎖球菌に対してペニシリンより活性であった。
エス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）に対して、ＭＩＣ５０はペニシリンのそれと同等であり、ＭＩＣ９０値は１希釈で高かった。ジェミフロキサシンは、また、オフロキサシンおよびグレパフロキサシンの減少した感受性を有するエス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびエス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）の分離株に対して活性であった。
【０４２４】
微生物の抗生物質耐性は、現在特にグラム陽性の生物中で重要な絶えず増大する臨床的問題である。
７０年代に好中球減少症患者の菌血症の７０％がグラム陰性生物に起因したのに対して、８０年代には、ビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌がこれらの患者の中の菌血症の主要な原因になり（Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４１ （Ｓｕｐｐｌ． Ｄ）： ７−１１ （１９９８））；９０年代の間にこれらはますますペニシリン耐性になった（Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｒｕｇｓ， ５１ （Ｓｕｐｐｌ． １）： ６−１２ （１９９６））。
Ｐｆａｌｌｅｒほかによって公開された、ＵＳＡ、カナダおよびラテンアメリカにわたる大規模なサーベイランス・プログラムの結果から（Ｐｈａｌｌｅｒ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ， ３３： ２８３−２９７ （１９９９））、連鎖球菌分離株が全血流感染の９．８％に相当することは明白である。ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）が最もしばしば単離され（５０．７％）、β−溶血性連鎖球菌は、分離株の３２．８％およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌は１６．５％に相当した。
開発される最初のフルオロキノロンは、グラム陽性微生物に対して実質的に活性を有さなかった。次第に、新規誘導体は、これらの生物に対して改良された活性を有して開発され、一方でグラム陰性菌に対して広域を保持した（Ｊｏｈｎｓｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ， ３３： ８５−９１ （１９９９））。これは、クリナフロキサシン、グレパフロキサシン、モキシフロキサシン、スパルフロキサシンおよびトロバフロキサシンの場合である。
ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）（Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， ３５ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ２０４ （１９９５））は、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）およびペニシリン耐性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）および腸球菌を含むグラム陰性およびグラム陽性好気性細菌両者（Ｏｈ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： １５６４−１５６８ （１９９６）； Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： ２０４−２１１ （１９９７）； Ｈｏｈｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ， ４： ２８０−２８３ （１９９８））および嫌気性細菌（Ｍａｖｃｏ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ６０５−６０７ （１９９７））に対する広域スペクトラムの活性を有する新規フルオロナフチリドンである。
本研究では、ジェミフロキサシン、ナリジクス酸、オフロキサシン、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシンおよびトリメトプリム／スルファメトキサゾールの活性は、エス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、エス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌の各５０個の最近の臨床分離株に対して比較された。
【０４２５】
細菌の分離株は、入院および外来両患者由来のアントワープ大学病院微生物学研究室から：エス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、エス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌の各５０個の分離株であった。試験されるまで、生物は−２０℃で凍結保存された。試験するために、それらは５％のウマ血液寒天上、一晩継代培養された。
懸濁液は、マックファーランド（ＭｃＦａｒｌａｎｄ） ０．５と一致している密度で、ミュラー−ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）・培地で作られた。ＭＩＣ値は、マイクロタイター・トレー（ＳｅｎｓｉｔｉｔｒｅＲ， ＡｃｃｕＭｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｔｄ．， ＵＫ）を使用して、ナショナル・コミッティー・フォー・クリニカル・ラボラトリー・スタンダード（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ） （ＮＣＣＬＳ） （Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｎｉｎｔｈ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ， Ｔａｂｌｅ ２Ｈ， Ｖｏｌ １９， Ｎｏ： １ （１９９９））に従って、微量希釈法によって測定された。以下の抗生物質が、試験された：ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、レボフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、ナリジクス酸、ペニシリン、アンピシリン、ゲンタマイシンおよびトリメトプリム／スルファメトキサゾール。対照生物エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ ２５９２２、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＡＴＣＣ ３５２１８、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＡＴＣＣ ２７８５３、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ）ＡＴＣＣ ２９２１３およびエンテロコッカス・フェカーリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）２９２１２は、各運転に含まれた。対照株の結果がＮＣＣＬＳ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｎｉｎｔｈ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ， Ｔａｂｌｅ ２Ｈ， Ｖｏｌ １９， Ｎｏ： １ （１９９９））によって推奨される範囲内であった場合のみ、結果は受け入れられた。
【０４２６】
表６６における結果は、試験される好気性グラム陽性生物について、ジェミフロキサシンの高い活性を図示する：エス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、エス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌分離株の９０％は、それぞれ０．０６μｇ／ｍｌ、０．０３μｇ／ｍｌおよび０．０６μｇ／ｍｌで阻害される。試験される他のフルオロキノロンと比較して、差違が２の因子だけであるエス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）に対するトロバフロキサシンを除いて、ジェミフロキサシンはさらに非常に活性である。エス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌に対して、トロバフロキサシンのＭＩＣ９０は、ジェミフロキサシンのそれより４倍、高い。オフロキサシンに中間的感受性または耐性の４個のエス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）分離株（限界点≦２μｇ／ｍｌ）は、ジェミフロキサシンの０．０３−０．０６μｇ／ｍｌの低いＭＩＣ値を有した。そのうち２個は、グレパフロキサシンに耐性（限界点（０．５μｇ／ｍｌ）である、オフロキサシンに中間的感受性の３個のエス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）分離株もまた、ジェミフロキサシンの０．０３−０．０６μｇ／ｍｌの低いＭＩＣ値を有した。
ジェミフロキサシンは、エス・アガラクチエ（Ｓ． ａｇａｌａｃｔｉａｅ）に対してペニシリンと同程度活性で、ビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌に対して、ペニシリンより６倍活性である。
エス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）のみはジェミフロキサシンと比較してかなりペニシリンにより感受性であるが、これはペニシリンに対するエス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）の絶妙な感受性の結果である。
ジェミフロキサシン以外のキノロンのビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌の感受性結果は、Ｐｆａｌｌｅｒおよびジーンズ（Ｊｏｎｅｓ）のそれら（Ｐｆａｌｌｅｒ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ， ２９： １９９−２０１ （１９９７））、および特に、β−溶血性連鎖球菌に対するジェミフロキサシンについて、ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ）らのそれら（Ｊｏｈｎｓｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ， ３３： ８５−９１ （１９９９））と一致する。しかし、β−溶血性連鎖球菌に対するペニシリンについて、ジョンソンらのＭＩＣ結果（Ｊｏｈｎｓｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ， ３３： ８５−９１ （１９９９））は、非常に高い（ＭＩＣ９０ ＝ ０．２５）。それらのβ−溶血性連鎖球菌はまた、エス・ピオゲネス（Ｓ． ｐｙｏｇｅｎｅｓ）以外の種を含み得た。ビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌のＭＩＣ値は、２つの研究において非常には異ならない。
【０４２７】
１９９５年に、カラッタラ（Ｃａｒｒａｔａｌａ）ら（Ｃａｒｒａｔａｌａ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ， ２０： １１６９−１１７３ （１９９５））は、すでにペニシリン耐性ビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌の出現に注意を促し、デーン（Ｄｏｅｒｎ）ら（Ｄｏｅｒｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ８９１−８９４ （１９９６））およびトゥホイ（Ｔｕｈｏｙ） およびワシントン（ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）（Ｔｕｏｈｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｉｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ， ２９： ２７７−２８０ （１９９７））によって確認された。アルカイド（Ａｌｃａｉｄｅ）ら（Ａｌｃａｉｄｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ３９： ２２４３−２２４７ （１９９５））は他のβ−ラクタムによる若干の交差耐性を有するビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌の４１０個の分離株中にペニシリン耐性（ＭＩＣ＝０．２５ − ８μｇ／ｍｌ）３３．６％を記録した。
ジェミフロキサシンは臨床的使用に対し非常に有望である。ただし、それが良好な薬動力学および低い毒性を有するならば。それは、グラム陽性（本研究）およびグラム陰性生物（Ｏｈ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４０： １５６４−１５６８ （１９９６）； Ｃｏｒｍｉｃａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４１： ２０４−２１１ （１９９７）； Ｈｏｈｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ， ４： ２８０−２８３ （１９９８））および嫌気性菌（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ， Ｎｉｎｔｈ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ， Ｔａｂｌｅ ２Ｈ， Ｖｏｌ． １９， Ｎｏ．： １ （１９９９））に対して高い活性を有する。本研究中の予備観察に基づいて、それはまた、他のキノロンに対して耐性の連鎖球菌に対して活性である。
【０４２８】
【表１０８】
2004507440.tif 000110
【０４２９】
本発明は、連鎖球菌病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、連鎖球菌病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、連鎖球菌病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、連鎖球菌病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
【０４３０】
本発明の好ましい目的は、該連鎖球菌病原細菌がストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・アガラクチエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）およびビリダンス（ｖｉｒｉｄａｎｓ）連鎖球菌：からなる群より選択される方法を提供するが。他の連鎖球菌病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけボルデテラ属の種に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のボルデテラ属の種の病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。病原体。これら分析の目的は、新規キノロン抗微生物薬、ジェミフロキサシンを含む種々の抗微生物薬に対して、ビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、ビー・パラパーツシス（Ｂ． ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）およびビー・ブロンキセプチカ（Ｂ． ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）のＭＩＣを測定することであった。
特により若い、より重篤な影響を受けた乳児において、接触感染性を減少させ、症状を改善するので、エリスロマイシンは百日咳に対する抗生物質療法のメーンステーである（Ｂａｓｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， ５： １５４−１５７ （１９８６））。多くのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）実験は、ボルデテラ属に対する他の抗生物質、特により新規のマクロライド、アンピシリン、トリメトプリム−スルファメトキサゾール、キノロンおよび第三世代セファロスポリンの活性を示した（Ａｐｐｌｅｍａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ．， Ｄｉｓ．， ８： １３１−１３３ （１９８７）； Ｂａｎｎａｔｙｎｅ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ２１： ６６６−６６７ （１９８２）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｌ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３４： ２２８７−２２８８ （１９９０）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， ８： ６５３−６５４ （１９８９）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： １８６８ （１９９８）； Ｋｕｒｚｉｎｓｋｉ， ｅｔ ａｌ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３２： １３７−１４０ （１９８８）； Ｍｏｒｔｅｎｓｅｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３３： ７７１−７７２ （１９８９））。ビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）の臨床分離株の抗微生物薬感受性試験は、実験室法の標準化の欠如、生物のゆっくりした生育および選好性の性質および最近までのエリスロマイシンに対する普遍的感受性のために、ルーチン的には実行されなかった。１９９５年に、ルイス（Ｌｅｗｉｓ）らは（Ｌｅｗｉｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． Ｊ．， １４： ３３８−３９１ （１９９５））エリスロマイシン療法が臨床的に失敗した２ヵ月の乳児において、最初のエリスロマイシン耐性の（Ｅ試験による最小阻止濃度［ ＭＩＣ ］は、＞２５６ μｇ／ｍｌ）ビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）分離株を記載した。従って、ボルデテラ・パーツシス（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）耐性が一般的になる場合、あるいは、慣用的療法に耐えられない患者のために、代わりの治療薬が必要である。情報はインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の感受性データについて存在するけれども、インビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）の効力データはほとんどない。百日咳での代わりの薬剤の抗生物質的効力は、気道分泌物でこれら薬剤のインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）感受性およびな達成可能な濃度によって予測される。キノロンは、気道分泌物で高濃度を達成することが示された（Ｇｅｒｄｉｎｇ， ｅｔ ａｌ．， Ｒｅｖ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉａ．， １１ （Ｓｕｐｐｌ． ５）： Ｓ１０４６−１０４７ （１９８９））。
【０４３１】
以下の細菌分離株が、試験された： １９８７および１９９７年の間に集められたＰＡフィラデルフィアの聖クリストファー小児病院（Ｓｔ． Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ’ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｆｏｒ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ）で見られた患者由来の９９個の臨床分離株、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（ＡＴＣＣ）由来の株＃８４６７および＃９３４０およびセンターズ・フォー・ディジーズ・コントロール・アンド・プリベンション（ｔｈｅ Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）から得られた元来、ＡＺのユマ由来の１個のエリスロマイシン耐性株Ｌｅｗｉｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． Ｊ．， １４： ３３８−３９１ （１９９５））を含む１０２個のビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）分離株；聖クリストファー病院（ Ｓｔ． Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ’ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ） 由来の７個の臨床分離株およびＡＴＣＣ株＃１５３１１および＃１５９８９を含む９個のビー・パラパーツシス（Ｂ． ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）分離株；聖クリストファー病院（ Ｓｔ． Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ’ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ）由来の５個の臨床分離株およびＡＴＣＣ株、＃７８５、＃３１１２４、＃７８０および＃９３９５を含む９個のビー・ブロンキセプチカ（Ｂ． ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）分離株。
使用されるアッセイ条件は、１９８８年にＨｏｐｐｅらによって提案され、１９９８年にＭｏｒｔｅｎｓｅｎほかによってさらに発展されたものであった（Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： １８６８ （１９９８）； Ｍｏｒｔｅｎｓｅｎ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｄ−０３９ （１９９８））。簡単には、培地微量希釈法は、５％溶解ウマ血液と共にミュラー−ヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培地を用いて実行された。使用される接種量は、全分離株について最終密度５ｘ１０５ ＣＦＵ／ｍに相当する生物懸濁液であり、プレート計数で確認された。試験される抗微生物薬の濃度は、次の通りだった：アンピシリン、アジスロマイシン、エリスロマイシン、シプロフロキサシン、トリメトプリム／スルファメトキサゾール（ＳＸＴ）（０．０１５μｇ／ｍｌないし３２μｇ／ｍｌ）およびジェミフロキサシン（ＳＢ ２６５８０５）（０．００８μｇ／ｍｌないし１６μｇ／ｍｌ）。ＡＴＣＣ由来のエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）＃４９６１９が、品質管理のために使用された。マイクロタイタープレートは、３７℃で４８時間、周囲空気中インキュベートされた。ＭＩＣは、生育が阻害された抗微生物薬の最も低い濃度と定義された。
【０４３２】
エリスロマイシン、アジスロマイシン、シプロフロキサシンおよびジェミフロキサシンは、試験されるビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）分離株に対して、一貫して活性であった（表６７および６８）。試験される薬剤は、ボルデテラ属の他の種に対して、可変な活性を有した（表６７）。アジスロマイシン／エリスロマイシン耐性分離株は、試験される他の薬剤のいずれにも交差耐性を示さなかった：ジェミフロキサシン、＜０．００８μｇ／ｍｌ；シプロフロキサシン、＜０．０１５μｇ／ｍｌ；アンピシリン、２．０μｇ／ｍｌ；および、ＳＸＴ、４．０μｇ／ｍ。
アンピシリン、アジスロマイシン、エリスロマイシン、シプロフロキサシンおよびＳＸＴに対するビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）およびビー・パラパーツシス（Ｂ． ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）のこのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）試験の結果は、以前の報告に匹敵した（Ｂａｎｎａｔｙｎｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ２１： ６６６−６６７ （１９８２）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｌ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３４： ２２８７−２２８８ （１９９０）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ．， ８： ６５３−６５４ （１９８９）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： １８６８ （１９９８）； Ｋｕｒｚｉｎｓｋｉ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｏｍｏｔｈｅｒ．， ３２： １３７−１４０ （１９８８））。ビー・ブロンキセプチカ（Ｂ． ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）分離株は、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、ビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）およびビー・パラパーツシス（Ｂ． ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）より少ない感受性であった。本研究中のＭＩＣは、以前に、Ｍｏｒｔｅｎｓｅｎらによって報告されるより高く（Ｍｏｒｔｅｎｓｅｎ． ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｏｍｔｈｅｒ．， ３３： ７７１−７７２ （１９８９））、使用される異なる方法を示し得た。
ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）データは、ビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）およびビー・パラパーツシス（Ｂ． ｐａｒａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）に対して、以前に報告されていないが、本研究および他において報告されるごとく他のキノロンの活性に匹敵する（Ａｐｐｌｅｍａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｄｉａｇｎ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｎｆｅｃ． Ｄｉｓ．， ８： １３１−１３３ （１９８７）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３４： ２２８７−２２８８ （１９９０）； Ｈｏｐｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４２： １８６８ （１９９８））。気道分泌物でキノロンの高いな達成可能な濃度に結びつけられるビー・パーツシス（Ｂ． ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）に対するジェミフロキサシンの強力なインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性（Ｇｅｒｄｉｎｇ， ｅｔ ａｌ．， Ｒｅｖ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉａ．， １１ （Ｓｕｐｐｌ． ５）： Ｓ１０４６−１０５７ （１９８９））は、臨床的効力を予測することができ、これを百日咳の治療のための魅力的な他の薬剤にさせ得る。
【０４３３】
【表１０９】
2004507440.tif 000111
【０４３４】
【表１１０】
2004507440.tif 000112
【０４３５】
本発明は、ボルデテラ属の種の病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、ボルデテラ属の種の病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、ボルデテラ属の種の病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、ボルデテラ属の種の病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
【０４３６】
本発明の好ましい目的は、該ボルデテラ属の種の病原細菌がボルデテラ属の種：からなる群より選択される方法を提供するが。他のボルデテラ属の種の病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけマイコプラズマ属に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のマイコプラズマ属病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、他の新規キノロンおよびマクロライドと比較して、キノロン・ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を測定することであり、ヒトの呼吸器および尿生殖路に、一般に見出されるマイコプラズマ属の種の継代培養された臨床分離株および基準株を使用して測定された。分析に使用される生物は、マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ゲニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）を含んだ。最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、微量培地希釈法を用いて測定された。
コンパレーター薬剤は、レボフロキサシン、トロバフロキサシン、グレパフロキサシン、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、テトラサイクリンおよびクリンダマイシンを含んだ。分析は、異なる地理的領域から２００個のマイコプラズマ属および１００個のウレアプラズマ属分離株で実行された。
異なるマイコプラズマ属の種に対するジェミフロキサシンの全体的範囲は、≦０．００８ないし０．１２５μｇ／ｍｌであった。ウレアプラズマ属株について、ＭＩＣ範囲は≦０．００８ないし０．５μｇ／ｍｌであった。試験される種によって、マクロライドと比較される場合、ジェミフロキサシンは可変の結果を示した。しかしながら、この研究で実行されるアッセイにおいて、ジェミフロキサシンはテトラサイクリン、クリンダマイシンおよびの他のキノロンと同程度かあるいはより活性であった。
【０４３７】
特により若い年齢群において、マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は長い間、一般の病原体と認識され、一般集団における肺炎の２０％、軍事的環境において５０％までを引き起こした。（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＮＹ， ｐｐ． ６５−１０６ （１９８５））。エム・ニューモニエ（Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）による大部分の呼吸器感染は自己制限的であるが、若干の例で、致命的疾病が起こり得る（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＮＹ， ｐｐ． ６５−１０６ （１９８５））。エリスロマイシンに耐性のエム・ニューモニエ（Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の天然に起こる株は現在まで記載されなかったけれども、他の治療様式の必要性が正当化される用量関連の悪心、嘔吐または下痢のため、場合によっては、この薬剤の有効性は制限され得る（Ｃｈｏｗ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ， Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＮＹ， ｐｐ． ２０９−２２１ （１９８８））。これら生物が新生児（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓｅａｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ， ７： ５３５−５４１ （１９８８）； Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ａｄｖａｎｃｅｄ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ， ２４： ９３−１１５ （１９８７）； Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｌａｎｃｅｔ， ｉｉ： ２４０−２４５ （１９８８）； Ｗａｉｔｅｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ， ８３： ８４−８９ （１９８９）； Ｗａｉｔｅｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｌａｎｃｅｔ， Ｉ： １７−２１ （１９８８））および他の免疫抑制されたヒトにおけるＴａｙｌｏｒ−Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ， ５ （Ｓｕｐｐｌ．）： ２３６−２３８ （１９８６））日和見病原体として、および非淋菌性尿道炎および骨盤内炎症性疾病（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ， ２４： ９３−１１５ （１９８７））のごとき性感染病の主要な病原体として（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ， ２４： ９３−１１５ （１９８７））認識されるため、エム・ホミニス（Ｍ． ｈｏｍｉｎｉｓ）およびユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）の抗生物質感受性についての知識は、ますます重要性を増す。マイコプラズマ感染および他性感染病を治療する際に広く使用されていたテトラサイクリンのごとき、従来の薬剤への耐性は、ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）およびエム・ホミニス（Ｍ． ｈｏｍｉｎｉｓ）両者で認められる（Ｃｕｍｍｉｎｇｓ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ３４： ２２９７−２２９９ （１９９０）； Ｅｖａｎｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ４： ５７−８３ （１９７８）； Ｒｏｂｅｒｔｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ， ５ （Ｓｕｐｐｌ）： ３３８−Ｓ３４０ （１９８６）； Ｔａｙｌｏｒ−Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ， ５ （Ｓｕｐｐｌ）： ３３５−Ｓ３４０））。
【０４３８】
ジェミフロキサシンは、一般の気道病原体、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ヘモフィルス・インフルザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）およびモレキセラ・カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）（Ｍｏｏｒｅ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９８， ｐ． ２５７ （１９９８）； Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９３， ｐ． ２５６ （１９９８））および異型の生物レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）（Ｃｒｉｔｃｈｌｅｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１００， ｐ． ２５７ （１９９８）； Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１０５， ｐ． ２５８ （１９９８））およびクラミジア・ニューモニエ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）（Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９３， ｐ． ２５６ （１９９８）； Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９７， ｐ． ２５６ （１９９８））に対して非常に活性であることが示された。限られた数の試料が分析された場合、ジェミフロキサシンはまた、異なるマイコプラズマ属の種に対して良好な抗微生物活性を示した（Ｈａｎｎａｎ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１０１， ｐ． ２５７ （１９９８））。
異なるマイコプラズマ属の種に対するジェミフロキサシンの活性を確認するために、ＭＩＣは多数の臨床分離株および基準株について測定された。この研究において、ジェミフロキサシンのインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の有効性は、他の新規キノロン、マクロライド、テトラサイクリンおよびクリンダマイシンのそれと比較された。
【０４３９】
継代培養された臨床分離株および基準株を含む、マイコプラズマの３００個の分離株は、抗微生物薬感受性について試験された。これら分離株のほとんどは、人工培地上２−３回のみ継代培養された。エム・ニューモニエ（Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）分離株は、６つの異なる国から集められた１３０株（１０年にわたって集められた代表分離株）を含んだ。全分離株は、証明された呼吸器疾病を有する個体の気道から生じた。分離株は、ＰＣＲ法によって、エム・ニューモニエ（Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）と同定され、呼吸器または生殖管のいずれかにおいてヒトに起こると公知のエム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）または他のいずれのマイコプラズマ属の種でも交差反応を起こし得ないことが示された：ＡＴＣＣｎ ＝ ２；デンマークｎ ＝ ６；オーストラリアｎ ＝ ５；日本ｎ ＝ ４；英国ｎ ＝ ９；中国ｎ ＝ １１；および米国ｎ ＝ ９３。
エム・ホミニス（Ｍ． ｈｏｍｉｎｉｓ）分離株（ｎ ＝ ５０）は、７個の基準株および４３個の継代培養された臨床分離株を含んだ。臨床分離株の起源は、表６９に示される。エム・ファーメンタンス（Ｍ． ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）分離株（ｎ ＝ １８）は、１個の基準株、２個の臨床分離株（子宮内膜生検および尿道由来）細胞培養、気道、骨髄または滑膜由来のおよび１５個のよくキャラクタライズされた株を含んだ。ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）分離株（ｎ ＝ １００）は、１４個のセロタイプおよび８６個の臨床分離株を含んだ（表７０）。エム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）株は２個の分離株より成り、２個のエム・ペネトランス（Ｍ． ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）の分離株は試験された。
以下の抗微生物薬が使用された：ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、レボフロキサシン、グレパフロキサシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、テトラサイクリンおよびクリンダマイシン。散剤は、製造者の推奨によって溶解された。各薬剤２０４８μｇ／ｍＬを含むストック液は各アッセイのために新たに調製された。
【０４４０】
微量培地希釈法（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， Ｍｏｓｂｙ， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ， ｐｐ． ４９１−５０２ （１９９４））は、ＭＩＣを測定するために使用された。マイコプラズマ培地（ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）について１０Ｂおよび他の全てのマイコプラズマ属の種についてＳＰ４）での抗微生物薬の連続二倍希釈は、試験される各薬剤の濃度範囲≦０．００８ないし２５６μｇ／ｍＬとなるように実行された。色変化単位（ＣＣＵ）／ｍＬによって測定される１０４−１０５個の生物の接種量が使用された。プレートは、３７℃で好気的にインキュベートされた。無薬剤（生育）対照で色変化が検出されるまで、全プレートは毎日検討された。ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）の急速な増殖のために、最初の読み取りは、インキュベーション１６時間で起こり、以後毎日何回も読み取りを行った。各薬剤のＭＩＣは、全分離株について測定された。無薬剤対照が最初に色変化を示した時間（各種につき変動する時間点）で倍地中の色変化の欠如によって立証されるごとく、初期のＭＩＣは、生物の代謝が阻害された抗微生物薬の最低濃度と定義された。
【０４４１】
試験から耐性が疑われたいずれのマイコプラズマ分離株も、結果の再現性を確実にするために他の日に再試験された。この方法の詳細な記述は、以前に報告された（Ｃａｓｓｅｌｌ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， Ｍｏｓｂｙ， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ， ｐｐ． ４９１−５０２ （１９９４））。
用いられたマイクロタイター感受性試験法は、同時の二連運転内および異なる日に実行されたアッセイ間のＭＩＣ結果の優れた再現性を可能にした。ジェミフロキサシンは、試験された種に対して優れたインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性を示した。試験されたマイコプラズマ属およびウレアプラズマ属両者の株の全体的ＭＩＣ範囲は、十分に期待される臨床的感受性の範囲内である≦０．００８−０．５μｇ／ｍＬであった。ジェミフロキサシンのこの濃度範囲は、調査される全株を阻害した。エム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）およびエム・ペネトランス（Ｍ． ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）を除くマイコプラズマ属およびウレアプラズマ属の株に対するジェミフロキサシンおよび他の抗微生物薬の比較インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）活性（ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０）は、表７１に示される。エム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）およびエム・ペネトランス（Ｍ． ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）の分離株のＭＩＣ結果は、表７２に与えられる。
エム・ニューモニエ（Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）およびエム・ゲニタリウム（Ｍ． ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）について、ジェミフロキサシンのＭＩＣは、グレパフロキサシンのそれらに匹敵した（ＭＩＣ ０．０６３−０．１２５μｇ／ｍＬ）が、それらは、他のキノロンおよびテトラサイクリンのそれらより２−ないし４−倍低かった。アジスロマイシンおよびクラリスロマイシンは、これらの２つの種に対して最高の活性を示し、≦０．００８μｇ／ｍＬで全株を阻害した。エム・ファーメンタンス（Ｍ． ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）およびエム・ホミニス（Ｍ． ｈｏｍｉｎｉｓ）は、ジェミフロキサシンに高度な感受性を有した（ＭＩＣ９０≦０．００８μｇ／ｍＬ）。
【０４４２】
エム・ホミニス（Ｍ． ｈｏｍｉｎｉｓ）について、ジェミフロキサシンの活性は、クリンダマイシンおよびグレパフロキサシンのそれに匹敵し（ＭＩＣ９０≦０．０１６μｇ／ｍＬ）、テトラサイクリン（３−１２希釈、より低い）および他のキノロン（１−５希釈、より低い）のそれより優れていた。公知の耐性のため、マクロライドは試験されなかった。エム・ファーメンタンス（Ｍ． ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）は、クラリスロマイシンに耐性であった（ＭＩＣ９０６４μｇ／ｍＬ）が、アジスロマイシンに若干の感受性を示した（ＭＩＣ９０ ２．０μｇ／ｍＬ）。ユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）は、ジェミフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．２５０μｇ／ｍＬ）およびトロバフロキサシン（ＭＩＣ９０ ０．１２５μｇ／ｍＬ）に等しく感受性であったが、他のキノロンは、２−ないし４−倍より、活性でなかった。ジェミフロキサシンは、また、この微生物に対して、テトラサイクリン（多くとも６希釈、より低い）またはアジスロマイシン（３−４希釈、より低い）より有効であった。テトラサイクリン−耐性株は、テトラサイクリン−感受性株のごとく、ジェミフロキサシンおよびトロバフロキサシンに同程度感受性であった。クラリスロマイシンは、≦０．００８μｇ／ｍＬの濃度でユー・ウレアリチカム（Ｕ． ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）に対して最も高い活性を有した。
エム・ペネトランス（Ｍ． ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）に対して、ジェミフロキサシン（ＭＩＣ≦０．００８μｇ／ｍＬ）は、少なくとも試験された他の化合物と同程度活性であった。
インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）で、試験されるマイコプラズマ属およびウレアプラズマ属の種に対して、ジェミフロキサシンは、テトラサイクリン、クリンダマイシンおよび他のキノロンと同程度活性であるかあるいはより活性であった。試験されるマイコプラズマ属の種によって、マクロライドと比較した場合、ジェミフロキサシンは可変の結果を示した。１０年の期間にわたって、および広く異なる地理的地域から集められた６個の種の３００個以上の異なる株が分析されたけれども、ジェミフロキサシンへの耐性は観察されなかった。
【０４４３】
テトラサイクリンのごとき他の薬剤に耐性であるそれらの株を含む病原体の種に対して場合によって有効であるかもしれないので、フルオロキノロンはマイコプラズマ感染の治療に有用であると証明された。この研究および他の最近の研究からの結果（Ｗａｉｔｅｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ， ８３： ８４−８９ （１９８９））は、ジェミフロキサシンがマイコプラズマ属およびウレアプラズマ属の種に起因する呼吸器および尿生殖路感染の治療のための有望な薬剤であることを示す。さらに、ジェミフロキサシンは広範囲のグラム陰性およびグラム陽性病原体に対する非常に活性なフルオロキノロンであると報告され（Ｍｏｏｒｅ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９８， ｐ． ２５７ （１９９８）； Ｋｉｍ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９３ （１９９８）； Ｃｒｉｔｃｈｌｅｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１００， ｐ． ２５７ （１９９８）； Ｄｕｂｏｉｓ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−１０５， ｐ． ２５８ （１９９８）； Ｒｉｄｇｅｗａｙ， ｅｔ ａｌ．， ３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆ−０９７， ｐ． ２５６ （１９９８））、それを感染症の治療における有効な新規薬剤にする。
【０４４４】
【表１１１】
2004507440.tif 000113
【０４４５】
【表１１２】
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【０４４６】
【表１１３】
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【０４４７】
【表１１４】
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【０４４８】
本発明は、マイコプラズマ属病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、マイコプラズマ属病原細菌またはこれら生物に感染あるいはその疑いのある患者を容易に選択できる。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、マイコプラズマ属病原細菌感染を有する疑いがあるか、あるいはそのリスクのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含むマイコプラズマ属病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該マイコプラズマ病原細菌が：マイコプラズマ・ニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、マイコプラズマ・ホミニス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｈｏｍｉｎｉｓ）、マイコプラズマ・ファーメンタンス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、マイコプラズマ・ゲニタリウム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ）、マイコプラズマ・ペネトランス（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）およびウレアプラズマ・ウレアリチカム（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他のマイコプラズマ属病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において他の公知の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
【０４４９】
本発明は、とりわけ、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。
これらの分析の目的は、オフロキサシンに高いＭＩＣを有するストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の株において、キノロン耐性機構に寄与する因子を測定することであった。
本発明の態様が論拠とされたさらなる研究は、オフロキサシンに高いＭＩＣを有するストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の株においてキノロン耐性機構に寄与する因子を特キャラクタライズするために実行された。これら株は、また、ジェミフロキサシンを含む一連のキノロン系抗微生物薬に対する感受性について試験された。
２７個のオフロキサシン感受性、１８個のオフロキサシン−中間的、および５３個のオフロキサシン−耐性株（オフロキサシンＭＩＣ それぞれ、＜４、 ４、 ＞４ μｇ／ｍｌ）からなるエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）分離株の収集物がこの研究において使用された。通常、オフロキサシン感受性株は、ＧｙｒＡ、ＧｙｒＢ、ＰａｒＣまたはＰａｒＥにアミノ酸置換を有さなかった。オフロキサシンに対するＭＩＣが増加したので、置換は最初にＰａｒＣのキノロン耐性−決定領域（ＱＲＤＲ）に出現し、最も高いＭＩＣを示す株はまたＧｙｒＡのＱＲＤＲにも置換を有した。最も一般的な置換は、ＰａｒＣ → Ｓ７９ＦおよびＧｙｒＡ → Ｓ８１Ｆであった。付加的な置換は、ＰａｒＣのＱＲＤＲ領域内に、および感受性に影響にするようにみえないＰａｒＣおよびＰａｒＥのＱＲＤＲ領域の外側に同定された。
抗生物質の流出ポンプの効果は、グラム陽性流出ポンプの阻害剤レセルピンの存在および不存在下での一連のキノロンに対するＭＩＣを測定することによって研究された。このデータは、完全に流出による高度耐性が少数のオフロキサシン耐性エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）株において見られたことを示す。
ジェミフロキサシン、シプロフロキサシン、グレパフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシンおよびトロバフロキサシンへのこれらキノロン耐性株の感受性試験は、ジェミフロキサシンが、この多様な耐性機構に最も少なく影響を受け、全株に対してＭＩＣ≦０．５μｇ／ｍｌを示す唯一のキノロンであることを明らかにした。
【０４５０】
これらの結果は、ジェミフロキサシンがエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して非常に強力で、また、他のキノロンに耐性の株に対して有効であり得ることを示す。
ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の中で現在利用できるフルオロキノロン（ＦＱ）抗菌薬への耐性は、増加している世界的問題である。ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）においてＦＱ耐性に寄与する因子を測定するために、ある範囲のオフロキサシン感受性を示す９８株が調査された。
ＦＱ抗菌活性の標的は、ＤＮＡのトポロジー転換の原因であるＩＩ型トポイソメラーゼ、ＤＮＡギメラーゼおよびＤＮＡトポイソメラーゼＩＶであると考えられる（Ｔａｎｋｏｖｉｃ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ２５０５−２５１０ （１９９６）； Ｘｉａｏ−Ｓｕ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ２３２１−２３２６ （１９９６））。この研究において、それぞれ、ＤＮＡギラーゼのＧｙｒＡおよびＧｙｒＢサブユニットをコードするｇｙｒＡおよびｇｙｒＢ遺伝子での、および、それぞれ、トポイソメラーゼＩＶのＰａｒＣおよびＰａｒＥサブユニットをコードするｐａｒＣおよびｐａｒＥ遺伝子のＱＲＤＲ（キノロン耐性−決定領域）は、配列決定された。
ある生物におけるＦＱ耐性に寄与する主要な機構は、薬剤流出であり、耐性のこの機構はまた、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）においても報告されている（Ｂａｒａｎｏｖａ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： １３９６−１３９８ （１９９７）； Ｍｕｎｏｚ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４０： ２２５２−２２５７ （１９９６）； Ｚｅｌｌｅｒ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４１： １９７３−１９８７ （１９９７））。これら株におけるＦＱ耐性の流出ポンプの役割は、グラム陽性流出ポンプの阻害剤、レセルピン存在および不存在下でのある範囲のキノロンに対する、ＭＩＣを測定することによって研究された。
以下の試験薬剤が、本明細書中のある研究において使用された：ジェミフロキサシン、トロバフロキサシン、シプロフロキサシン、レセルピン、ノルフロキサシン、オフロキサシンおよびエリスロマイシン。
【０４５１】
エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）分離株は、１９９７年のアレキサンダー・プロジェクトおよび１９９６年のセントリー（ＳＥＮＴＲＹ）およびスパー（ＳＰＡＲ）サーベイランス研究および１９９７年のアラート（ＡＬＥＲＴ）サーベイランス・プロジェクトおよびアイオワ大学から得られた。
ＭＩＣは、培地微量希釈のＮＣＣＬＳ法を使用して測定された。全分離株は、％５ 酵母エキス（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ， Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ， ＭＤ， ＵＳＡ）で補足されるトッド・ヒューイット（Ｔｏｄｄ Ｈｅｗｉｔｔ）培地で試験された。濃度８０ｍｇ／ｍｌのレセルピンは、ｐｍｆ流出ポンプを阻害するために接種物に添加された。
細菌ＤＮＡは、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の４ｍｌの培養液から単離された。
標的遺伝子は、ＰＣＲによって増幅された。
ＰＣＲ産物は、ビッグ・ダイ・ターミネーター・ケミストリー（ＢｉｇＤｙｅ ｔｅｒｍｉｎａｔｏｒ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙでのサイクル・シークエンシングによってＡＢＩ ３７７（ＵＳＡ）で、自動ＤＮＡ配列決定のために調製された。ＤＮＡ塩基配列は、集められて、シークエンサー・Ｖ３．０・ジーン・コード 社（Ｓｅｑｕｅｎｃｈｅｒ Ｖ３．０ Ｇｅｎｅ Ｃｏｄｅｓ Ｃｏｒｐ）によって編集された。本明細書中に報告される９８個の分離株のうち、１２個の最も感受性なものはオフロキサシンＭＩＣ０．１２５−０．５μｇ／ｍｌを有した（表７３）。ほとんどの場合、これらの１２個の分離株はＧｙｒＡ、ＧｙｒＢ、ＰａｒＣまたはＰａｒＥのＱＲＤＲ領域内に、アミノ酸置換を示さなかったが、２個の分離株はＧｙｒＡにＳ１１４Ｇ置換およびＰａｒＣにＳ５２Ｇ ＋Ｎ９１Ｄの二重置換を示した。これら同一の置換はまた、ＭＩＣ、１−４μｇ／ｍｌを有する３株で見出されたが、それらが感受性分離株のＭＩＣに対する影響を有さないように見えるため、サイレントであると推測される。同様な様式で、多くの一見サイレントの置換は、全感受性株でＰａｒＥのＱＲＤＲ領域の外側で見出された。これらで最も一般的なものはＩ４６０Ｖであるが、通常一緒に、Ｈ３５１Ｌ、Ｈ３４７ＬおよびＣ３２９Ｓもまた、見出される。オフロキサシンはどんなに大きい程度ででも流出に影響を受けないが、これら１２株のうちの４個は一般にオフロキサシンＭＩＣをちょうど２倍増加したレセルピン−阻害可能な流出機構を示した。
【０４５２】
オフロキサシンＭＩＣ、１−２μｇ／ｍｌを有する１５株のうちの２個のみは、ＰａｒＣに置換（１個のＳ７９Ｙおよび１個のＤ８３Ｙ）を有した、全ては野生株ＧｙｒＡ、ＧｙｒＢおよびＰａｒＥを有した。この群は、観察される流出の高発生率が見られた。オフロキサシン流出は全体的に個体群のおよそ３分の１で観察されたが、このＭＩＣ群で１５株のうちの１２個はオフロキサシンＭＩＣ、０．５ないし１μｇ／ｍｌ増加した流出機構を示した。
置換はオフロキサシンＭＩＣ、４−８μｇ／ｍｌを有する２６株でＧｙｒＡ、ＧｙｒＢまたはＰａｒＥに見出されなかったが、ほとんどはＰａｒＣのＱＲＤＲに単一のアミノ酸置換を示した。６個はＳ７９Ｆ置換を有し、６個はＳ７９Ｙを有し、４個はＤ８３Ｎ置換を有し、４個は検出可能置換を有さなかった。１株は、前記のＳ５２Ｇ ＋Ｎ９１Ｄの二重のＰａｒＣ 置換を有し、ＭＩＣに影響を有さないと推測された。野生型ＧｙｒＡおよびＰａｒＣを有する株のうちの１個は、この株の高いＭＩＣ（４μｇ／ｍｌ）の原因となり得るＰａｒＥ上のＤ４３５Ｎ 置換を有した。ＭＩＣ４μｇ／ｍｌを有する他の３株について、増加したＭＩＣの理由は決定できず、いずれのギラーゼまたはトポイソメラーゼタンパク質中にも検出可能な置換は見出されなかった。
【０４５３】
オフロキサシンＭＩＣ、１６μｇ／ｍｌ以上を有する４５株のうち、２個以外は全て、ＧｙｒＡおよびＰａｒＣ両者で単一置換を有した。３２個の分離株で見出された最も一般的なＧｙｒＡ置換はＳ８１Ｆであったが、５株はＳ８１Ｙ、６個はＥ８５Ｋ置換を持っていた。最も一般的なＰａｒＣ置換はＳ７９Ｆ（３２株）であり、見られる他の置換はＳ７９Ｙ（９株）、Ｄ８３Ｎ（３株）およびＲ９５Ｃ（１株）であった。最も高いＭＩＣは、Ｓ８１ＹおよびＳ７９ＦのＧｙｒＡおよびＰａｒＣ置換を示す２株で見られた。オフロキサシンＭＩＣ３２および１６μｇ／ｍｌを有する２個の分離株は、ＧｙｒＡ上に置換を示さず、ＰａｒＣ上に単一のＳ７９Ｙ置換を示した。オフロキサシンの有意な流出はこれらの株のいずれについても見られなかったが、シプロフロキサシンの流出は、他のほとんどよりこれらの分離株について高かった。
概して、オフロキサシンに対してそうであるごとく、ＰａｒＣおよびＧｙｒＡのＱＲＤＲｓ内のアミノ酸置換は、ジェミフロキサシン、トロバフロキサシンおよびシプロフロキサシンのＭＩＣの二倍希釈法の同様な増加を引き起こす。抗生物質間の主要な差違は、ＭＩＣの範囲および流出活性の程度である。
シプロフロキサシン（０．２５−６４μｇ／ｍｌ）およびオフロキサシン（０．１２５−＞６４μｇ／ｍｌ）は、いくぶん低いトロバフロキサシン（０．００８−１６μｇ／ｍｌ）および全分離株に対して１μｇ／ｍｌ未満のＭＩＣを維持する唯一のキノロンであるジェミフロキサシン（０．００４−０．５μｇ／ｍｌ）と共に、最も高いＭＩＣ範囲を表示する。
トロバフロキサシンおよびオフロキサシンの流出は低かった。分離株の４０％のみは、流出を示し、ほとんどの場合、結果はＭＩＣの倍加であった。ジェミフロキサシンは全分離株の５５％ で流出され（表７４）、この群の３分の２は、ＭＩＣの倍加を示し、残りは、ＭＩＣの４ないし８倍増加を示した。流出に起因するＭＩＣの少なくとも４倍増加を示す大部分の分離株で、シプロフロキサシンは実質的に全分離株で流出された（表７５）。興味深いことに、最も大きいシプロフロキサシン流出を示す４個の分離株は、オフロキサシンＭＩＣ、４μｇ／ｍｌを有する４株であり、識別可能な標的突然変異はなかった。流出に対する感受性の順位序列は、シプロフロキサシン＝ノルフロキサシン＞ジェミフロキサシン＞オフロキサシン＝トロバフロキサシン＝グレパフロキサシンであった。
エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）において、大部分のキノロンについて、高いＭＩＣに帰着する第一段階突然変異はＰａｒＣで起こるが、ＧｙｒＡがスパルフロキサシンおよびガチフロキサシンのごとき２、３のキノロンの主要な標的であるという若干の証拠がある（Ｈｅａｔｏｎ， ｅｔ ａｌ．， ３９ｔｈ ＩＣＡＡＣ， Ａｂｓｔｒａｃｔ １３９４ （１９９９））。本明細書中に分析される全臨床分離株は、ＧｙｒＡのＱＲＤＲにおける第二の突然変異の後に起こるより高度の耐性と共に、ＰａｒＣのＱＲＤＲに第一段階突然変異を示した。このことは、ジェミフロキサシンの主要な標的がＰａｒＣであるということを示さない。実際、それはＧｙｒＡでありそうである７。最も有効な（および最も一般的な）置換はＰａｒＣでのＳ７９Ｆおよび、ＧｙｒＡでのＳ８１Ｙであるように見え、この研究において最も耐性の２個の分離株はこれらの両置換を持っていた。
【０４５４】
実質的に、大部分の非常に感受性のものを含む全分離株は、シプロフロキサシン流出の若干の証拠を示した。大多数（４１％）はＭＩＣの２倍増加を示したが、３３％の分離株は４倍増加を示し、１９％は８−倍以上の増加を示した。完全に流出に起因する高いＭＩＣは、５個の分離株のみであった。これら分離株の５個全ては、４−８μｇ／ｍｌまで変動するシプロフロキサシンＭＩＣと共に、オフロキサシンに中間的感受性（ＭＩＣ ４μｇ／ｍｌ）を有した。
エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の最近の臨床分離株でのキノロン耐性は、ＰａｒＣおよびＧｙｒＡのＱＲＤＲ領域でのアミノ酸置換によって主に媒介される。ほとんど全ての分離株はシプロフロキサシンの活性な流出の若干の証明を示したが、これは検討される分離株のうちのちょうど５個での耐性の主要な原因であった。トロバフロキサシン、シプロフロキサシンおよびオフロキサシンのＭＩＣ範囲は、それぞれ、０．００８−１６、０．２５−６４μｇ／ｍｌおよびオフロキサシン０．１２５−＞６４μｇ／ｍｌであった。ジェミフロキサシンは、０．００４−０．５μｇ／ｍｌのＭＩＣ範囲で、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の全分離株に対して試験される最も強力なキノロンであった。
【０４５５】
【表１１５】
2004507440.tif 000117
【０４５６】
【表１１６】
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【０４５７】
【表１１７】
2004507440.tif 000119
【０４５８】
本発明は、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
【０４５９】
本発明の好ましい目的は、該病原細菌がストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）：からなる群より選択される方法を提供するが。他の病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明は、とりわけ、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を使用する方法を提供する。
一つには、本発明は、種々のストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原体に対してジェミフロキサシンの相対活性を評価する分析に基づいた。これら分析の目的は、他のフルオロキノロンと比較してジェミフロキサシンの促進された抗肺炎球菌活性の分子的基礎を決定することであった。
ジェミフロキサシンは、レボフロキサシン（ＬＥＶ）、シプロフロキサシン（ＣＩＰ）、グレパフロキサシン（ＧＲＥ）、モキシフロキサシン（ＭＯＸ）またはトロバフロキサシン（ＴＲＯ）と比較された。
【０４６０】
ジェミフロキサシン（ＳＢ−２６５８０５）は、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対する強力な活性を有する新規フルオロキノロン（ＦＱ）である。この研究において、ＤＮＡギラーゼ（ＧＹＲ）およびトポイソメラーゼＩＶ（ＴＯＰ）は、以前に記載（３８ｔｈ ＩＣＡＡＣ， ａｂｓｔ． Ｃ−１７６）のごとく、宿主としてイー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）を使用する遺伝子クローニングおよび組換え法によってＦＱ−感受性（ＦＱ−Ｓ）エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４およびＦＱ耐性（ＦＱ−Ｒ）エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）５０２２２６から精製された。ＧＹＲスーパーコイル形成およびＴＯＰデカトネーティング（ｄｅｃａｔｅｎａｔｉｎｇ）反応は、ジェミフロキサシン（ＧＥＭ）、レボフロキサシン（ＬＥＶ）、シプロフロキサシン（ＣＩＰ）、グレパフロキサシン（ＧＲＥ）、モキシフロキサシン（ＭＯＸ）またはトロバフロキサシン（ＴＲＯ）によって阻害された。三連実験からのパーセント阻害は、算出され、薬剤濃度に対してプロットされた。５０％阻害濃度（ＩＣ５０）は、これらのプロットから推論された（以下の表７６参照）。
【０４６１】
【表１１８】
2004507440.tif 000120
【０４６２】
ＴＯＰは、ＴＯＰがエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対するこれらＦＱの主要な標的であることを示すＧＹＲよりかなりＦＱ感受性であった。ジェミフロキサシンは、ＦＱ−Ｓ Ｃ３ＬＮ４酵素に対して他のＦＱより少なくとも２．５倍活性なＴＯＰの最も強力な阻害剤であった。逆に、全ＦＱは、ＦＱ−Ｓ Ｃ３ＬＮ４由来のＧＹＲに対して非常に類似的な活性を所有した。ＦＱ−Ｒ ５０２２２６由来のＴＯＰおよびＧＹＲに対するＦＱ ＩＣ５０は、ＦＱ−Ｓ Ｃ３ＬＮ４由来の酵素に対するＩＣ５０より高かった。しかしながら、Ｃ３ＬＮ４酵素でのごとく、ＴＯＰを阻害する能力はＧＹＲを阻害する能力より良いＦＱ ＭＩＣの指標であった。ジェミフロキサシンは、ＦＱ−Ｒ ５０２２２６由来のＴＯＰに対して、この株に対するジェミフロキサシンの促進された作用強度を説明する良好な作用強度を保持した。従って、ＴＯＰを阻害する能力が、ＦＱ−Ｒ ＧＹＲおよびＦＱ−Ｒ ＴＯＰを有するＦＬＱ−Ｒ株に対してさえ、ＧＹＲを阻害する能力よりＦＱ ＭＩＣの重要な決定因子であることは、明白であろう。
フルオロキノロンは必須の細菌酵素、ＤＮＡギラーゼおよびトポイソメラーゼＩＶを阻害し、このことは二本鎖ＤＮＡ破壊を挿入した後にＤＮＡトポロジーを改変する。
ＤＮＡギラーゼは、ｇｙｒＡおよびｇｙｒＢ遺伝子にコードされるＡ２Ｂ２四量体として存在し、陰性ＤＮＡスーパーコイル形成を触媒する。トポイソメラーゼＩＶは、ｐａｒＣおよびｐａｒＥ遺伝子にコードされるＣ２Ｅ２四量体として存在し、染色体分割に関係する。以前の研究は、フルオロキノロンが肺炎球菌ＤＮＡギラーゼより肺炎球菌トポイソメラーゼＩＶの方の強い阻害剤であることを示した（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９）； Ｐａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３： １１２９−１１３６ （１９９９））。さらに、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対して、フルオロキノロンＭＩＣは、ＤＮＡギラーゼ ＩＣ５０とよりもトポイソメラーゼＩＶ ＩＣ５０との方がよりよく相関する（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９））。トポイソメラーゼＩＶは、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対するフルオロキノロンの最も有望な主要な標的である（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９））。
【０４６３】
本発明の態様が論拠とされたさらなる研究は、他のフルオロキノロンと比較してジェミフロキサシンの促進された抗肺炎球菌活性の分子的基礎を調査するために行われた。
細菌株は、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４−以前研究されたシプロフロキサシン感受性実験室株（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９））およびエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）５０２２２６−アレキサンダー・プロジェクト・カルチャー・コレクション（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ Ｐｒｏｊｅｃｔ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）由来のシプロフロキサシン耐性の（ＭＩＣ １６μｇ／ｍｌ）臨床分離株（Ｆｅｌｍｉｎｇｈａｍ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， １１ （Ｓｕｐｐｌ． １）： ５−２１ （１９９９））：を含んだ。
過剰発現するイー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）の構築およびトポイソメラーゼ・サブユニットの精製
以前に記載されるごとく（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９））、調製されたｇｙｒＡ、ｇｙｒＢ、ｐａｒＣおよびｐａｒＥサブユニットＰＣＲ産物はｐＭＡＬ−ｃ２ＴＭタンパク質融合ベクター（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ ＵＫ Ｌｔｄ）に、別々に挿入され、コンピテント・イー・コリ（Ｅ． ｃｏｌｉ）ＤＨ５をトランスフォームするのに使用された。マルトース−結合タンパク質に融合されるトポイソメラーゼ・サブユニットは、以前に記載のごとく１、産生され、切断され、精製された。
【０４６４】
反応混合物（２０μＬ）は、キネトプラストＤＮＡ（Ｔｏｐｏｇｅｎ Ｉｎｃ．， Ｏｈｉｏ， ＵＳＡ）０．４μｇ、４０ｍＭ、トリス−ＨＣｌ、２０ｍＭＫＣｌ、５ｍＭのＭｇＣｌ２、５０ｍｇ／Ｌウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、１ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）、０．５ｍＭＡＴＰおよびトポイソメラーゼＩＶ１単位を含むように用意された。トポイソメラーゼＩＶ１単位は、再構成されたＰａｒＣおよびＰａｒＥが３７℃、１ｈで０．４μｇのｋＤＮＡを脱連鎖するのに必要な量と定義された。３７℃ １ｈで、種々のフルオロキノロン濃度によるインキュベーション後、反応は５μＬの停止水溶液（５％（ｖ／ｖ）ザルコシル（ｓａｒｋｏｓｙｌ）、２５％（ｖ／ｖ）ブロムフェノールブルーおよび２５％の（ｖ／ｖ）グリセロール）の添加によって停止された。試料は、ついで１％アガロースゲル電気泳動に付され、脱連鎖されたＤＮＡバンドの強度はゲル・ドック・１０００・システム（Ｇｅｌ Ｄｏｃ １０００ ｓｙｓｔｅｍ）（Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｔｄ．， Ｈｅｍｅｌ Ｈｅｍｐｓｔｅａｄ， ＵＫ）を使用して分析された。トポイソメラーゼＩＶの阻害は、無薬剤対照と比較して脱連鎖されたバンドの強度の百分率として表された。三連実験の平均は、フルオロキノロン濃度に対してパーセント脱連鎖をプロットするのに用いられた。酵素活性を５０％阻害するのに必要なフルオロキノロン濃度（ＩＣ５０）は、これらのプロットから推定された。
反応混合物（２０μＬ）は、２０ｍＭ ＴｒｉｓＨＣｌ、２０ｍＭＫＣｌ、８ｍＭＭｇＣｌ２、２５ｍｇ／ＬＢＳＡ、１ｍＭＤＴＴ、５ｍＭＡＴＰ、５ｍＭスペルミジン、２．５μｇ ｔ−ＲＮＡ、０．２μｇ弛緩型ｐＢＲ３２２ ＤＮＡおよび１単位のＤＮＡギラーゼを含むように用意された。ＤＮＡギラーゼ１単位は、再構成された酵素が３７℃、１ｈで弛緩型ＤＮＡ０．２μｇをスーパーコイル形成するのに必要な量と定義された。３７℃ １ｈで、種々のフルオロキノロン濃度によるインキュベーション後、反応は、トポイソメラーゼＩＶについて記載されるごとく、停止され、分析された。ＤＮＡギラーゼ阻害のために、ＩＣ５０値は、スーパーコイルＤＮＡバンドの強度を比較することによって算出された。
実施例として、アガロースゲル分析から推論されるごとく、図３５および３６はそれぞれ、シプロフロキサシンによってエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４由来のＤＮＡギラーゼおよびトポイソメラーゼＩＶの阻害の結果を表す。同様なプロットから、表７７に要約されるごとく、残りのフルオロキノロンＩＣ５０値は算出された。産生されたトポイソメラーゼ・サブユニットの比活性は、ｍｇタンパク質につき４．２ないし７．２×１０３単位まで変動した。
データは、ジェミフロキサシンが試験されるフルオロキノロン感受性およびシプロフロキサシン耐性肺炎球菌両者から単離されるトポイソメラーゼＩＶの最も強力な阻害剤であったことを示す。
【０４６５】
逆に、ジェミフロキサシンはＤＮＡギラーゼの最も強力な阻害剤でなかった。
ジェミフロキサシンの強力な抗肺炎球菌活性は肺炎球菌のトポイソメラーゼＩＶに対する強い活性によるということのようである。
これらの抗微生物薬が生物を阻害する能力で異なるという事実にもかかわらず、シプロフロキサシンを除く、全てのフルオロキノロンは、エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｃ３ＬＮ４由来のＤＮＡギラーゼに対して非常に類似的なＩＣ５０値を示した。このデータは、トポイソメラーゼＩＶがエス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対するフルオロキノロンの主要な標的であるという以前の知見を証拠立てる（Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３， ｉｎ ｐｒｅｓｓ （１９９９）； Ｐａｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４３： １１２９−１１３６ （１９９９））。エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）５０２２２６によって示されるフルオロキノロン耐性表現型は、ＤＮＡギラーゼおよびトポイソメラーゼＩＶ両者の減少した阻害によるように見える。このことは、ＤＮＡギラーゼおよびトポイソメラーゼＩＶ両遺伝子で突然変異を有することが示されたトポイソメラーゼＱＲＤＲ配列データに一致する（Ｂｒｏｓｋｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， ４４ （Ｓｕｐｐｌ． Ａ）： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｐ３９１， ｐ． １２７ （１９９９））。
【０４６６】
【表１１９】
2004507440.tif 000121
【０４６７】
本発明は、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌の代謝を変調する方法を提供する。当業者は、本発明の方法を行うために、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌またはこれらの生物に感染、あるいはその疑いのある患者を容易に選択し得る。あるいは、本発明の方法に有用な細菌は、本明細書中に記載されるものであってよい。
また、本発明によって、抗菌的有効量のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物を、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌に感染の疑いがあるか、あるいはそのおそれのある哺乳類、好ましくはヒトに投与する段階を含む、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌による細菌感染の治療または予防方法が提供される。
本発明の好ましい目的は、該ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌が選択される方法を提供するが。他のストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）病原細菌も、また方法に含まれてよい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えばＭＩＣ試験を使用して、これら生物を同定し得る。
本発明のいずれの方法においても接触段階は、容易に、当業者に明らかである多くの方法で実行され得る。しかしながら、接触段階が、かかる組成物の必要なヒトの患者に、または培養液または緩衝液中の細菌に直接、ジェミフロキサシン化合物を含む組成物の供給であることは、好ましい。
例えば、ヒトの患者と接触、あるいは、ヒトの患者またはインビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）での該細菌と接触する場合、キノロン、特にジェミフロキサシン化合物を含む組成物、好ましくは医薬上組成物は、例えば、特に、局所、経口、肛門、経膣、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、鼻腔内または皮内経路による投与を含むいずれの有効な都合のよい様式ででも投与され得る。
【０４６８】
患者への投与に適当な医薬上担体のごとき、これら組成物が、細胞、組織または生物での使用について、未滅菌または滅菌の単一の担体または複数の担体と組み合わせて使用いられることは、また、好ましい。かかる組成物は、例えば、培地添加物または治療的有効量の本発明の化合物、キノロン、好ましくはジェミフロキサシン化合物および医薬上許容される担体または賦形剤を含む。かかる担体は、生理的食塩水、緩衝化生理的食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノールおよびその組み合わせを含み得るが、それに限定されない。剤形は、投与様式に適さなければならない。
本発明の方法のキノロン化合物、特にジェミフロキサシン化合物および組成物は、単独で、または、細菌流出ポンプ阻害化合物または抗生物質化合物、特に非−キノロン化合物、例えば、β‐ラクタム抗生物質化合物のごとき他の化合物と組み合わされて用いられ得る。
療法においてまたは予防薬として、本発明の方法の活性な薬剤は、例えば、滅菌水溶性分散剤、好ましくは等張なものとして注射可能な組成物として、個体に好ましくは投与される。
あるいは、本発明の方法におけるジェミフロキサシン化合物または組成物は、例えば、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、眼軟膏剤、点眼剤、点耳剤、うがい薬、含浸包帯および縫合糸、およびエアロゾルの形態で局所適用のために処方されてよく、例えば、保存剤、薬剤浸透を促進する溶剤、および軟膏およびクリームでの軟化剤を含む適当な慣用的添加物を含んでよい。かかる局所処方は、また、適合する慣用的担体、例えば、クリームまたは軟膏基剤およびローションのためのエタノールまたはオレイル・アルコーを含んでよい。かかる担体は、処方の重量でおよそ１％ないしおよそ９８％までを構成してよく；より一般的には、それらは処方の重量でおよそ８０％までを構成する。
哺乳類および特にヒトへの投与のために、抗菌的有効量が、活性薬剤の毎日の用量レベル、０．００１ｍｇ／ｋｇないし１０ｍｇ／ｋｇ、一般に、およそ０．１ｍｇ／ｋｇないし１ｍｇ／ｋｇ、好ましくはおよそ１ｍｇ／ｋｇであると期待される。いずれにしても、医師は、個体に最も適当な実際の薬用量を決定し、年齢、体重および特定の個体の反応によって変えるであろう。前記薬用量は、平均的場合の例示である。もちろん、より高い、あるいはより低い薬用量範囲が値される個体例が、あり得、それは本発明の範囲内である。該細菌の生育を阻害または停止することによるかかる方法または該細菌を死滅させることによって、薬用量が、細菌の代謝を変調するのに選択されることが好ましい。当業者は、本明細書中に提供され、ならびに当該分野において公知の他の方法、例えば応用ＭＩＣ試験を使用して、この量を同定し得る。
【０４６９】
本発明のさらなる具体例は、患者において内在デバイスに接触することをさらに含む方法の接触段階を提供する。内在デバイスは、外科的インプラント、補綴器具およびカテーテル、すなわち個体の体に導入されて長時間所定の場所に残留する器具を含むが、それに限定されない。かかる器具は、例えば、人工関節、心臓弁、ペースメーカー、血管移植片、血管カテーテル、脳脊髄液シャント、尿カテーテルおよび連続的携行式腹膜潅流（ＣＡＰＤ）カテーテルを含む。
本発明のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物または組成物は、内在デバイスの挿入直前に、本発明の細菌に対する全身作用を達成するために注射によって投与され得る。治療は、器具が体内にある間、術後、持続され得る。さらに、組成物はまた、本発明の細菌に起因するか、あるいは関連がある細菌性創傷感染を予防するために、いずれの外科的手法についても、手術中のカバーを広げるのに使用され得る。
前記療法に加えて、本発明の方法において使用されるジェミフロキサシン化合物または組成物は、一般に、創傷組織が暴露される細菌、特に本発明の細菌のそれの基質タンパク質への付着を妨害する創傷治療薬剤として、および抗生物質予防の代替として、あるいはそれと共に歯科治療における予防的使用のために使用され得る。
あるいは、本発明のキノロン、特にジェミフロキサシン化合物または組成物は、挿入直前に内在デバイスを浸すのに使用され得る。活性な薬剤は、好ましくは、創傷または内在デバイスを浸すために１μｇ／ｍｌないし１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在するであろう。
【０４７０】
とりわけ、本発明の好ましい具体例は、該組成物がジェミフロキサシンまたはその医薬上許容される誘導体を含む方法を含む。
本明細書中に提供される全研究は、さもなければ、詳細に記載される場合を除き、当業者に公知かつルーチン的である標準法を使用して、実行された。特に明記しない限り、以下の実施例で提示される全ての部または量は、重量による。
本明細書中に引用される各文献は、完全に出典明示して本明細書の一部とみなす。さらに、本願が優先を請求する各特許出願は、完全に出典明示して本明細書の一部とみなす。
【図面の簡単な説明】
【図１】５種のアシネトバクターについてのＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０値（μｇ／ｍｌ）を示す。
【図２】ブレークポイントを超えるＭＩＣを有する分離株のパーセンテージを示す。
【図３】ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）の範囲を示す。
【図４ａ】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するジェミフロキサシンの殺菌活性を示す。
【図４ｂ】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するトロバフロキサシンの殺菌活性を示す。
【図４ｃ】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するモキシフロキサシンの殺菌活性を示す。
【図４ｄ】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するレボフロキサシンの殺菌活性を示す。
【図４ｅ】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するシプロフロキサシンの殺菌活性を示す。
【図４ｆ】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するグレパフロキサシンの殺菌活性を示す。
【図４ｇ】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するスパルフロキサシンの殺菌活性を示す。
【図５】ディスク試験のＢＳＡＣ標準化法を用いた１μｇジェミフロキサシンディスク含量のシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）種を除くすべての属に対するＭＩＣ対抑制領域の図である。
【図６】ディスク試験のＢＳＡＣ標準化法を用いた５μｇジェミフロキサシンディスク含量のシュードモナス種に対するＭＩＣ対抑制領域の散布図である。
【図７】ペニシリン耐性肺炎双球菌に対するジェミフロキサシン時間−殺菌活性のグラフである。
【図８】ピー・エルジノーサ（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）に対する４種のキノロンのＭＩＣ分布を示す。
【図９】アシネトバクター種に対する４種のキノロンのＭＩＣ分布を示す。
【図１０】エス・ニューモニエ６２２２８６により引き起こされるラットにおけるＲＴＩに対するジェミフロキサシン（ＳＢ２６５８０５）および比較薬剤の効力を示す。
【図１１】エス・ニューモニエ３０５３１３により引き起こされるラットにおけるＲＴＩに対するジェミフロキサシンおよび比較薬剤の効力を示す。
【図１２】エス・ニューモニエにより引き起こされるラットにおけるＲＴＩに対するグレパフロキサシン（ＧＲＰ）、レボフロキサシンおよびトロバフロキサシン（ＴＲＶ）の効力と比較したジェミフロキサシンの効力を示す。
【図１３】エイチ・インフルエンゼ（Ｈ． ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）Ｈ１４３により引き起こされるラットにおけるＲＴＩに対するジェミフロキサシンおよび比較薬剤の効力を示す。
【図１４】エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｕｍｏｎｉａｅ）１６２９に対するジェミフロキサシンおよび比較薬剤の効力を示す。
【図１５】エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｕｍｏｎｉａｅ）１６２９に対するジェミフロキサシンおよび比較薬剤の効力を示す。
【図１６】エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｕｍｏｎｉａｅ）の評価可能な株におけるシプロフロキサシン、トロバフロキサシン、およびジェミフロキサシンの平均抗生物質投与後効果（ＰＡＥ）を示す。
【図１７】エス・ニューモニエ（Ｓ． ｐｎｕｍｏｎｉａｅ）の感受性株におけるシプロフロキサシン、トロバフロキサシン、およびジェミフロキサシンのＰＡＥを示す。
【図１８】シプロフロキサシンによる抑制率（％）をグラフで示す。
【図１９】シプロフロキサシンによる抑制（％）をグラフで示す。
【図２０】１０人のボランティアの腸内好気性細菌叢に対するジェミフロキサシン投与の効果を示す。
【図２１】１０人のボランティアの腸内嫌気性細菌叢に対するジェミフロキサシン投与の効果を示す。
【図２２】ジェミフロキサシンでの変異エス・ニューモニエ株の選択を示す。
【図２３】３７℃で３時間ジェミフロキサシンで処理したエシェリキア・コリ（Ｅｓｈｃｅｌｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＫＬ１６の生存を示す。
【図２４】３７℃で３時間ジェミフロキサシンで処理したスタフィロコッカス・アウレウスＥ３Ｔの生存を示す。
【図２５】３７℃で３時間ジェミフロキサシンで処理したストレプトコッカス・ニューモニエＣ３ＬＮ４の生存を示す。
【図２６】ジェミフロキサシンに対するエイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６の投与量反応を示す。
【図２７】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するジェミフロキサシンの殺菌効果を示す。
【図２８】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するトロボフロキサシンの殺菌効果を示す。
【図２９】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するモキシフロキサシンの殺菌効果を示す。
【図３０】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するレボフロキサシンの殺菌効果を示す。
【図３１】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するシプロフロキサシンの殺菌効果を示す。
【図３２】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するグレパフロキサシンの殺菌効果を示す。
【図３３】エイ・バウマンニイ（Ａ． ｂａｕｍａｎｎｉｉ）ＡＴＣＣ１９６０６に対するスパルフロキサシンの殺菌効果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４ａ】
2004507440.tif 000125
【図４ｂ】
2004507440.tif 000126
【図４ｃ】
2004507440.tif 000127
【図４ｄ】
2004507440.tif 000128
【図４ｅ】
2004507440.tif 000129
【図４ｆ】
2004507440.tif 000130
【図４ｇ】
2004507440.tif 000131
【図５】
2004507440.tif 000132
【図６】
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【図８】
2004507440.tif 000134
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004507440.tif 000459
2004507440.tif 000460
【国際調査報告】
2004507440.tif 000461
2004507440.tif 000462
2004507440.tif 000463