(57)【要約】式ＩＩ（式中、Ｘは脱離基または任意に保護されたグアニン残基、Ｒ１はヒドロキシ保護基または−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ1−Ｃ22アルキルエステル基、Ｒ２およびＲ３は独立に低級アルキルまたはベンジル、またはＲ２およびＲ３は一緒になって−ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−である）で示される中間体を酸加水分解して式ＩＩＩで示される対応アルデヒドとし、ついでホウ水素化物またはボランアルデヒド還元剤を添加して該アルデヒドを式ＩＶで示される対応アルコールに還元することを含み、その際、該ホウ水素化物またはボランアルデヒド還元剤を酸性条件下で導入することを特徴とする、ステアリン酸バロマシクロビルなどの非環状ヌクレオシドの製造方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩＩ：
【化１】
2004536101.tif 000013
（式中、Ｘは脱離基または任意に保護されたグアニン残基、Ｒ１はヒドロキシ保護基または−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ1−Ｃ22アルキルエステル基、Ｒ２およびＲ３は独立に低級アルキルまたはベンジル、またはＲ２およびＲ３は一緒になって−ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−である）
で示される中間体を酸加水分解して式ＩＩＩ：
【化２】
2004536101.tif 000014
で示される対応アルデヒドとし、ついでホウ水素化物またはボランアルデヒド還元剤を添加して該アルデヒドを式ＩＶ：
【化３】
2004536101.tif 000015
で示される対応アルコールに還元することを含み、その際、該ホウ水素化物またはボランアルデヒド還元剤を酸性条件下で導入することを特徴とする方法。
【請求項２】
該アルデヒド還元剤を１.６未満のｐＨにて導入する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
該アルデヒド還元剤が、ボラン−tert−ブチルアミン錯体である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
反応をテトラヒドロフランを含む溶媒中で行う、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
式Ｉ：
【化４】
2004536101.tif 000016
で示される化合物を活性化Ｃ1−Ｃ22ＣＯＯＨ誘導体でアシル化して式ＩＩの該化合物を生成させる前工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
該活性化誘導体が活性化ステアリン酸である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
式ＩＩの化合物を単離しない、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
式ＩＩＩのアルデヒドを単離しない、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
式ＩＩＩのアルデヒドを単離しない、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
Ｘがグアニン残基またはＮ−保護したおよび／またはヒドロキシ保護したグアニン残基である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ２およびＲ３がそれぞれメチルまたはエチルである、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
Ｒ１がステアリルエステルである、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒ１がアセチルエステルである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
式ＩＩで示される出発物質の水分含量が、２０ｍｇ Ｈ2Ｏ／ｇ（出発物質）未満、好ましくは１０ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくは＜５ｍｇ／ｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
未反応のアシル誘導体を除去する工程をさらに含む、請求項５に記載の方法。
【請求項１６】
未反応のアシル誘導体の含量が反応生成物の乾燥重量に対して２％乾燥重量未満に制御される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
アシル除去が、未反応のアシル誘導体は溶解するが式ＩＩのアシルエステルは沈殿させる有機溶媒で洗浄することを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
該溶媒がアセトンである、請求項１７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ステアリン酸バロマシクロビル（valomaciclovir stearate）などの分枝鎖非環状ヌクレオシドの合成の改良法に関する。詳細には、本発明は、そのような分枝鎖非環状ヌクレオシドの合成における重要な中間体に関して、改良されたアセタール加水分解およびそれと同時のアルデヒドのアルコールへの還元法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
下記式ＸＸで示されるステアリン酸バロマシクロビルは、ＶＺＶおよび他のヘルペスウイルスおよびＨＩＶの治療に有用な非環状ヌクレオシドアナログである。
【化１】
2004536101.tif 000002
【０００３】
本発明者らの以前の特許出願ＷＯ９８／３４９１７号、米国特許第６１８４３７６号およびＷＯ００／０８０２５号には種々の合成経路が記載されており、そのうちの幾つかは下記式Ｉ／ＩＩで一般的に示される重要なアセタール中間体を経ている：
【化２】
2004536101.tif 000003
（式中、Ｘは脱離基または任意に保護されたグアニン残基、Ｒ１は水素、ヒドロキシ保護基または−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ1−Ｃ22アルキルエステル、Ｒ２およびＲ３は独立に低級アルキルまたはベンジル、またはＲ２およびＲ３は一緒になって−ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−である）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
従来の方法（例えば、ＷＯ９８／３４９１７号の３０頁、１〜２４行を参照）では、これらアセタールはトリフルオロメタンスルホン酸、ＨＣｌ、酢酸または硫酸などの酸あるいはAmberlyst 15などの酸性樹脂の添加により加水分解される。かくして生成したアルデヒドは、ついでホウ水素化ナトリウム、RaNi/H2またはボランｔ−ブチルアミン錯体などのアルデヒド還元剤の添加により対応アルコールに還元される。しかしながら、これら還元剤は、ＷＯ９８／３４９１７号の３０頁、８行および実施例１４および３０、およびＷＯ００／０８０２５号の実施例２で詳細に説明されているように、非酸性の作業環境を必要とすることがよく知られている。従って、従来の方法では、アルデヒド還元剤を添加する前にアセタール加水分解に使用した酸を中和すべく、重炭酸ナトリウムや炭酸カリウムやトリエチルアミンやピリジンやＫＯＨなどの塩基を添加する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、ボランまたはホウ水素化物アルデヒド還元剤を酸性条件下で導入すれば、アルデヒドを精製せずとも、結果として得られるアルコールの純度を劇的に改良できることを今や見出した。
【０００６】
従って、本発明は、式ＩＩ：
【化３】
2004536101.tif 000004
（式中、Ｘは脱離基または任意に保護されたグアニン残基、Ｒ１はヒドロキシ保護基または−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ1−Ｃ22アルキルエステル基、Ｒ２およびＲ３は独立に低級アルキルまたはベンジル、またはＲ２およびＲ３は一緒になって−ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−である）
で示される中間体を酸加水分解して式ＩＩＩ：
【化４】
2004536101.tif 000005
で示される対応アルデヒドとし、ついでホウ水素化物またはボランアルデヒド還元剤を添加して該アルデヒドを式ＩＶ：
【化５】
2004536101.tif 000006
で示される対応アルコールに還元することを含み、その際、該アルデヒド還元剤を酸性条件下で導入することを特徴とする方法を提供する。
【０００７】
ついで、得られたアルコールＩＶを上記従来の特許出願に記載されたような活性化Ｎ−保護アルファアミノ酸誘導体でエステル化してステアリン酸バロマシクロビルＸＸを生成させる。必要なら、アルコールＩＶまたはそのＮ−保護アミノアシル誘導体をこれも従来技術に記載されたグアニン塩基と反応させることができるし、および／またはアルコール保護基Ｒ１を脱保護し、ついで通常のアシル化により脂肪酸エステルで置換することができる。
【０００８】
本発明の使用により、アルコールＩＶを８５％を超える純度、好ましくは９０％を超える純度で得ることができる。この中間体の純度は、ステアリン酸バロマシクロビルの全体収量に有意に貢献することがわかった。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
好ましくは、本発明の方法は式ＩＩＩで示される中間体アルデヒドを単離することなく行う。任意の前工程は、得られるアセタールＩＩを単離することなく、対応アルコールＩ：
【化６】
2004536101.tif 000007
のヒドロキシ基を常法のアシル化法により活性化ステアリン酸などの活性化Ｃ1−Ｃ22ＣＯＯＨ誘導体でエステル化することを含む。エステル化に都合のよい活性化誘導体としては、酸クロライドなどのハロゲン化酸、およびステアリン酸およびピバル酸の混合無水物および／または酢酸由来の無水物、イソブチルオキシカルボニルクロライドなどのハロゲン化アルコキシカルボニル由来の無水物、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール由来のエステル、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２,３−ジカルボキサミド由来のエステル、２,４,５−トリクロロフェニル由来のエステル、スルホン酸由来の無水物（例えば、ｐ−トルエンスルホン酸由来の無水物など）を含む（これらに限られるものではない）活性化エステルが挙げられる。あるいは、活性化エステルは、ＤＣＣ／ＤＭＡＰやＥＤＡＣ／ＤＭＡＰなどのカップリング剤と組み合わせた酸であってもよい。
【００１０】
好ましくは、式ＩＶで示される出発物質のＲ１がステアリン酸などのアルカン酸エステルである場合は、（Ｒ）−９−［２−ステアロイルオキシメチル−４−（ステアロイルオキシ）ブチル］グアニンなどの所望としない不純物の生成を最小にするため、材料を過剰のステアリン酸について精製する。精製は、アルカン酸を溶解できるアセトンなどの有機溶媒中での１またはそれ以上の還流工程を例えば１０分〜６時間、例えば１時間行い、典型的にはついで室温に冷却し、濾過し、同じかまたは異なる溶媒で洗浄し、ついで乾燥させる。アルカン酸の含量を＜約２％、好ましくは約１％未満、例えば＜０.５％に低下させるのが都合がよい。
【００１１】
酸性条件下でのホウ水素化物またはボランアルデヒド還元剤の反応の後、反応混合物を０.１〜１０.０モル当量の炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、トリエチルアミン、ピリジン、ＮａＯＨ、ＫＯＨなど、とりわけ重炭酸ナトリウムなどの塩基で中和するのが都合がよい。
【００１２】
アセタールＩＩの加水分解に都合のよい強酸としては、約０.１〜１０.０モル当量のトリフルオロメタンスルホン酸、塩酸、ギ酸または酢酸／ギ酸、硫酸、スルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸またはイオン交換スルホン酸、とりわけ塩酸が挙げられる。加水分解工程のための溶媒としては、ＴＨＦ／Ｈ2Ｏや塩化メチレン／Ｈ2Ｏや酢酸エチル／Ｈ2Ｏやエタノール／Ｈ2Ｏやメタノール／Ｈ2Ｏや水、とりわけＴＨＦなどの不活性溶媒が挙げられる。適当な反応温度としては、約−２５℃〜１００℃、例えば室温が挙げられる。
【００１３】
還元工程に都合のよいホウ水素化物としては、ホウ水素化カリウムおよびとりわけホウ水素化ナトリウムが挙げられる。都合のよいボランとしては、ＢＨ3・ｐｙ、
【化７】
2004536101.tif 000008
ＢＨ3・ｐｙ、ＣＦ3ＣＯＯＨ、ＢＨ3・ＮＨ3、ＢＨ3・ＮＭｅ3、ＢＨ3・ＳＭｅ2、およびとりわけボラン−tert−ブチルアミン錯体が挙げられる。
【００１４】
式ＩＩにおいてＲ１がアルカン酸エステルである場合の出発物質の酸加水分解の際のトランスエステル化による（Ｒ）−９−［２−ヒドロキシメチル−４−ステアロイルオキシブチル］グアニンなどの所望でない位置異性体の生成を最小にするため、酸加水分解を穏やかな条件下、例えば低温で短時間および／または低濃度の酸を用いて行うのが都合がよい。さらに、式ＩＩのアセタールを加水分解したらすぐに、および／または余分のホウ水素化物またはボランアルデヒド還元剤を加えて存在する最後のアルデヒドと反応させたらすぐに、反応混合物を中和するのが都合がよい。
【００１５】
式Ｉ〜ＩＶ中のＸの都合のよい脱離基としては、メタンスルホン酸エステル、トリフルオロメタンスルホン酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステル、ベンゼンスルホン酸エステル、とりわけＴｓＯなどのスルホン酸エステルが挙げられる。しかしながら、好ましくは、式Ｉ〜ＩＶ中のＸは、グアニン、６−デオキシグアニンや６−クロログアニンやヨードグアニンなどのグアニン誘導体、２−Ｎ−アセチル−グアニン、６−ベンジルオキシグアニンまたは２−Ｎ−アセチル−６−ジフェニル−カルバモイルグアニンなどのＮ−保護および／またはヒドロキシ保護グアニンである。
【００１６】
本明細書においてＲ２およびＲ３に関連して用いる「低級アルキル」なる語は、１〜７個の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖アルキルラジカルを意味し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、１−メチルブチル、２,２−ジメチルブチル、２−メチルペンチル、２,２−ジメチルプロピル、ｎ−ヘキシルなどを含むがこれらに限られるものではない。好ましくはＲ２およびＲ３は同じ低級アルキルの種、とりわけメチル、最も好ましくはエチルである。
【００１７】
Ｒ１の好ましい−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ1−Ｃ22アルキルエステル基としては、アセチル、パルミチル、セチル、エイコサニルおよびとりわけステアリルが挙げられる。Ｒ１の他のヒドロキシ保護基は、Greeneの「Protective Groups in Organic Synthesis」（ジョン・ウイリー・アンド・サンズ、ニューヨーク、１９８１）で詳細に検討されている。Ｏ−保護基としては、置換メチルエーテル、例えばメトキシメチル、ベンジルオキシメチル、２−メトキシエトキシメチル、２−(トリメチルシリル)エトキシメチル、ｔ−ブチル、ベンジルおよびトリフェニルメチル；テトラヒドロピラニルエーテル；置換エチルエーテル、例えば２,２,２−トリクロロエチル；シリルエーテル、例えばトリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリルおよびｔ−ブチルジフェニルシリル；およびヒドロキシル基とカルボン酸とを反応させて調製されるエステル、例えば酢酸エステル、プロピオン酸エステル、安息香酸エステルなどが挙げられる。
【００１８】
以下に図１（実施例１の結果を表にまとめたものである）のみを参照しながら実施例により本発明を詳細に説明する。
実施例１
マグネチックスターラー、温度計およびｐＨ電極を備えた平底リアクターに、下記を充填した：
１.０ｇ（１.７ミリモル）の（Ｒ）−９−［４,４−ジエトキシ−２−（ステアリルオキシメチル）ブチル］グアニン
９５％テトラヒドロフラン（２５ｍｌ）。
【００１９】
懸濁液を約２０分間混合してやや濁った溶液を得た。この溶液に４時間かけて下記を少しずつ加えた：
３７％塩酸（１.０ｍｌ、１０ミリモル）
３ｍｌの９５％テトラヒドロフラン中に懸濁したボラン−tert−ブチルアミン錯体
ボラン−tert−ブチルアミン錯体（０.２ｇ、２.３ミリモル）。
【００２０】
下記を添加して反応混合物をｐＨ＝１.６に調整した：
０.４ｇの炭酸水素ナトリウム（４.８ミリモル）
２０ｍｌの水。
【００２１】
翌日、下記を添加して懸濁液をｐＨ＝５に調整した：
１０ｍｌの水
３Ｎ水酸化ナトリウム（約１ｍｌ）。
【００２２】
攪拌した懸濁液を冷却して０℃に１時間保持した。懸濁液を濾過し、濾過ケーキをアセトン（２×２.５ｍｌ）で洗浄し、吸引乾燥した。この湿潤濾過ケーキを強制換気棚で乾燥して（５０℃、４.５時間）０.７２ｇ（８２％収率）の（Ｒ）−９−［４−ヒドロキシ−２−（ステアリルオキシメチル）ブチル］グアニンを９５.５％の純度で得た。上記実施例および７９％ＴＨＦを用いた対応例を添付の図１に表１としてまとめてある。ローマ数字のＩＩは出発物質、ＩＩＩはアルデヒド、およびＩＶはアルコールである。
【００２３】
実施例２
ジステアリン酸エステルの還元
マグネチックスターラーを備えた５０ｍｌ容の反応フラスコに下記を充填した：
ステアリン酸アルコール（０.４ｇ、０.７７ミリモル）
テトラヒドロフラン（２７ｍｌ）
３Ｎ ＨＣｌ（３ｍｌ、９ミリモル）。
【００２４】
攪拌した均質な溶液を４１℃に保持し、その間、試料（２５μｌ）を採り、２.５％Ｅｔ3Ｎを含有する９０％ＴＨＦで１.０ｍｌに希釈し、ＨＰＬＣにより分析した。
【００２５】
【表１】
2004536101.tif 000009
【００２６】
４時間後、２５％の位置異性体がステアリン酸アルコールのトランスエステル化により生成し、一方、５０％のステアリン酸アルコールおよび対応する位置異性体が加水分解されたことが明らかであろう。約２３.５時間後、約３％のステアリン酸アルコールおよび位置異性体が存在した。残りはステアリン酸アルコールおよびグアニンジアルコールに加水分解されたと思われた。結論は、アルカン酸アセタールの加水分解を穏やかな条件下、すなわち低温および／または短時間および／または低い酸濃度で行うと位置異性体の生成が最小になることである。さらに、不当に遅延することなく反応混合物を中和するのが便利である。同様に、残留するアルデヒドと反応させるべく余分のボラン錯体を添加するのが便利である。
【００２７】
実施例３
（Ｒ）−９−（２−ステアロイルオキシメチル−４−ヒドロキシブチル）グアニンの調製
本実施例は、中間体のステアリン酸グアニンおよびステアリン酸アルデヒドを単離することなく、グアニンアルコールからの標記化合物の調製を示す：
【化８】
2004536101.tif 000010
【００２８】
反応フラスコに下記を充填した：
ステアリン酸（２６.０ｇ、０.０９１３モル；９９％純度）
テトラヒドロフラン（５００ｇ）
トリエチルアミン（１０.５ｇ、０.１０４モル）
ピバロイルクロライド（１１.０ｇ、０.９１３モル；９９％純度）
グアニンアルコール（２７ｇ、０.０８３モル）
４−ジメチルアミノピリジン（２ｇ、０.０１６３モル；９９％純度）。
【００２９】
この攪拌懸濁液を２日後に分析したところ、９９.０％のステアリン酸グアニンを含むことがわかった。その後、下記を２時間かけて添加し、その間、温度を約２４℃に保持した：
６Ｎ塩酸（５０ｍｌ、０.３００モル）
ボラン−ｔ−ブチルアミン錯体（７.２５ｇ、０.０８３モル；約０.３ｇずつ）。
【００３０】
この反応混合物に下記を１０分間かけて加えた：
水８００ｍｌ
１.２Ｎ水酸化アンモニウム（１９５ｍｌ、０.２３４モル）。ｐＨは５.２であった。この白色懸濁液を冷却して５℃に２時間保持し、Ｇ３ガラスフィルターで１.５時間かけて濾過した。濾過ケーキをアセトン（２×５０ｍｌ）で洗浄し、湿潤濾過ケーキ（１０１ｇ）を５０℃で一夜乾燥させて、４３.５ｇ（９７％）のステアリン酸アルコールを７５.７％の純度（２３.３％のステアリン酸グアニンおよび０.５％のステアリン酸アルデヒド）で得た。
【００３１】
ステアリン酸グアニンの含量を下げるため、反応フラスコに下記を充填した：
４３ｇの上記工程で得られた物質
テトラヒドロフラン（６００ｇ）
水（５０ｇ）
６Ｎ硫酸（５０ｍｌ）。
【００３２】
ボランｔ−ブチルアミン錯体（４.５ｇ、０.０５２モル）を０.３ｇずつ７時間かけて加え、その間、温度を約２４℃に保持した。反応の完了をＨＰＬＣによりモニターし、最後の時点は０.１８％のステアリン酸グアニンであった。反応混合物に上記と同様の操作をして３９.５４ｇのステアリン酸アルコールを９４.４％の純度（２.６％のステアリン酸アルデヒドおよび０.１７％のステアリン酸グアニン）で得た。
【００３３】
生成物をアセトン中での還流により２回洗浄した。５００ｍｌ容のフラスコに下記を入れた：
アセトン（４００ｍｌ）
生成物（３１.７７ｇ）。
【００３４】
この攪拌懸濁液を加熱して１時間還流し、２７℃に冷却し、濾過し、ついでアセトン（３×２５ｍｌ）で洗浄した。この手順を繰り返した。得られた湿潤濾過ケーキ（３３.９ｇ）を５０℃で１６時間乾燥させて２７.９ｇ（グアニンアルコールに対して８２％）を９５.０％のステアリン酸アルコール、０.１％のステアリン酸グアニン、２.７％のステアリン酸アルコール位置異性体、１.４％の生成物（ＲＴ＝５０〜５８分）および２％のステアリン酸にて得た。
【００３５】
乾燥グアニンアルコール、ＨＣｌおよびボランｔ−ブチルアミン錯体を用いてさらに反応を行った。ステアリン酸アルコールの湿潤濾過ケーキをアセトンで２回還流してステアリン酸を除去した。
【００３６】
【表２】
2004536101.tif 000011
【００３７】
実施例４
加水分解の際の位置異性の回避
マグネチックスターラーを備えた５０ｍｌ容の反応フラスコに下記を充填した：
ステアリン酸アルコール（０.４ｇ、０.７７ミリモル）
テトラヒドロフラン（２７ｍｌ）
３Ｎ ＨＣｌ（３ｍｌ、９ミリモル）。
【００３８】
この攪拌した均質な溶液を４１℃に保持した。２５μｌの試料を採り、２.５％ＥＴ3Ｎを含む９０％ＴＨＦで１.０ｍｌに希釈し、ＨＰＬＣにより分析した。
【００３９】
【表３】
2004536101.tif 000012
【００４０】
４時間後、２５％の位置異性体（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシメチル−４−ステアロイルオキシ）ブチルグアニンが目的ステアリン酸アルコールのトランスエステル化により生成し、一方、約５０％のステアリン酸アルコールおよび位置異性体が加水分解された。約２３.５時間後、約３％の目的ステアリン酸アルコールおよび位置異性体が存在した。残りはステアリン酸およびグアニンジアルコールに加水分解されたと思われた。それゆえ、ステアリン酸グアニンの酸加水分解を穏やかな条件下、すなわち低温および／または短時間および／または低い酸濃度で行うと位置異性体の生成が最小になることが明らかである。さらに、ステアリン酸グアニンをすべて加水分解したらすぐに、および／または余分のボラン試薬を加えて残留するステアリン酸アルコールと反応させたらすぐに、反応混合物を中和するのが有利である。
【００４１】
反応時間の関数としての分析結果のプロット（示していない）を、９０％ＴＨＦ（２５ｍｌ）および酸（１０ミリモル）に溶解したステアリン酸グアニン（１ｇ、１.７ミリモル）から開始するさらなる２回の実験から得た。ＢＨ3,ｔ−ＢｕＮＨ2（２００ｍｇ、２.３ミリモル）を一定速度にて加え、その間、温度を３０℃に保持した。４〜５時間の反応の間のステアリン酸グアニン、ステアリン酸アルデヒド、ステアリン酸アルコールおよびグアニンアルコールのＨＰＬＣ分析のため、試料（２５μｌ）を採った。両プロットとも、ステアリン酸グアニンの最初の速い加水分解、ステアリン酸アルデヒドの高濃度、およびステアリン酸アルコールの一次増加に関して同様であり、ＢＨ3,ｔ−ＢｕＮＨ2の添加速度により支配されていた。
【００４２】
実施例５
純粋なステアリン酸グアニンの調製
ステアリン酸不含のステアリン酸グアニンを調製するため、９０モル％のみのステアリン酸およびピバロイルクロライドを用いて実験を行った。出発物質は、ステアリン酸（２１.３ｇ、７５ミリモル）、ピバロイルクロライド（９.０ｇ、７５ミリモル）およびグアニンアルコール（２７ｇ、８３ミリモル）であった。収量は３３.５ｇ（ステアリン酸に対して７５％）のステアリン酸グアニンで、純度は９９.６％（ＨＰＬＣ）であった。ステアリン酸の定量は、ステアリン酸グアニンがアセトン（１０００ｍｌ）の添加（ステアリン酸を溶解する）によって沈殿するので、予測通り＜１％であった。
【００４３】
濾液（１３５０ｍｌ）は、充填量の２３％に相当するステアリン酸（４.８ｇ、１７ミリモル）を含んでいた。このことは、反応混合物中に存在する水によって説明することができた。溶媒のテトラヒドロフランは殆ど無水（６ｍｇ Ｈ2Ｏ／ｌ）であったが、グアニンアルコールは２８ｍｇ Ｈ2／ｌを含んでおり、これは１／２モルの結晶水に相当した。このことは２７ｇのグアニンアルコールが４２ミリモルのＨ2を含んでいたことを意味しており、このＨ2はステアリン酸とピバル酸との混合酸無水物と反応し得たものである。従って、出発物質のグアニンアルコールを反応までに、例えば５０℃で２時間乾燥させて水分含量を２０ｍｇ Ｈ2Ｏ／ｇ未満、好ましくは１０ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくは＜５ｍｇ／ｇに下げておくのが有利である。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
(原文に記載なし)
【図１】
2004536101.tif 000017
【国際公開パンフレット】
2004536101.tif 000018
2004536101.tif 000019
2004536101.tif 000020
2004536101.tif 000021
2004536101.tif 000022
2004536101.tif 000023
2004536101.tif 000024
2004536101.tif 000025
2004536101.tif 000026
2004536101.tif 000027
2004536101.tif 000028
2004536101.tif 000029
2004536101.tif 000030
2004536101.tif 000031
2004536101.tif 000032
2004536101.tif 000033
2004536101.tif 000034
2004536101.tif 000035
【国際調査報告】
2004536101.tif 000036
2004536101.tif 000037