(57)【要約】【課題】慢性の心筋障害及びうっ血性心不全の発生の可能性がない抗癌剤ドキソルビシンの提供。【解決手段】４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンの併用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンの組合せからなることを特徴とする癌の治療剤。
【請求項２】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンが逐次投与されるように分かれて存在する請求項１の治療剤。
【請求項３】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンが同時に投与されるように合体して存在する請求項１の治療剤。
【請求項４】
該ドキソルビシンが最初に投与され、次に４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールが投与されるものである請求項２の治療剤。
【請求項５】
４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールが最初に投与され、次にドキソルビシンを投与されるものである請求項２の治療剤。
【請求項６】
該ドキソルビシンの投与量単位が約４０−２００ｍｇである請求項１の治療剤。
【請求項７】
該ドキソルビシンの投与量単位が約４０−１５０ｍｇである請求項１の治療剤。
【請求項８】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールの投与量単位が約５０−３８０ｍｇである請求項１の治療剤。
【請求項９】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールの投与量単位が約５０−３００ｍｇである請求項１の治療剤。
【請求項１０】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンが約３０分−約２４時間の間隔で逐次患者に点滴されるものである請求項１の治療剤。
【請求項１１】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンが約１時間の間隔で逐次患者に投与されるものである請求項１の治療剤。
【請求項１２】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンが、静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内注射及び経口投与からなる群から選ばれる投与手段を経て投与されるものである請求項１の治療剤。
【請求項１３】
該４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンが静脈内に投与されるものである請求項１の治療剤。
【請求項１４】
該癌が、乳癌、卵巣癌及び肺癌からなる群から選ばれる請求項１の治療剤。
【請求項１５】
化学療法的に有効な量の４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンを含むことを特徴とする化学療法用併用組成物。
【請求項１６】
製薬上許容できる担体中の請求項１５の化学療法用併用組成物。
【請求項１７】
化学療法による治療を必要とする患者における癌の化学療法による治療用である請求項１６の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、腫瘍学の領域及び改良された化学療法の処方に関する。
【０００２】
【従来の技術】
タキソール（Ｔａｘｏｌ（商標））（パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ））は、生体内で優れた抗腫瘍活性を有することが示されている。タキソールは、乳癌、卵巣癌及び肺癌を含む種々の癌の治療に使用されている。
【０００３】
癌の治療におけるドキソルビシン（ＤＯＸ）即ちアントラサイクリンの臨床上の使用は、特に累積の投与量が約５００ｍｇ／ｍ２を超えたとき、慢性の心筋障害及びうっ血性心不全の発生の可能性により制限される。ＤＯＸとパクリタキセル（ＰＴＸ）とを併用すると、約５００ｍｇ／ｍ２より少ないアントラサイクリンの累積投与量で心臓性の外傷が許容できない発生率で生ずることを示している。心臓毒性のこれらの増加のために、ＤＯＸの累積投与量は、アントラサイクリンがＰＴＸとの併用で投与されるとき、約３６０ｍｇ／ｍ２に低下されなければならない。また、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ（ＤＣＴ））との併用療法がＤＯＸの心臓毒性を増大させないことを示す報告がある。しかし、これらの研究において注目すべきことは、非常にわずかな患者が約３６０−４００ｍｇ／ｍ２より多いＤＯＸの累積投与量にさらされている。
【０００４】
ＤＯＸの側鎖のカルボニル基の２個の電子の還元が、アントラサイクリンをドキソルビシノール（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎｏｌ（ＤＯＸｏｌ））と呼ばれるジヒドロキシ（二価アルコール）代謝物に転換する。この反応は、サイトゾル中に存在するＮＡＤＰＨオキシドレダクターゼにより触媒化される。ＤＯＸｏｌが心臓毒性の重要なメディエータであるかもしれないという証拠が増えてきている。ＤＯＸのテトラサイクリン環中のキノン部分の１個の電子の還元が、酸素を還元してフリーラジカルにすることにより、酸化して元のアントラサイクリンを再発生させるセミキノンを生じさせる。この反応は、ミクロソームＮＡＤＰＨチトクロームＰ−４５０レダクターゼ及びミトコンドリアＮＡＤＨデヒドロゲナーゼを含む数種のレダクターゼにより触媒化される。アントラサイクリン誘発心臓毒性のフリーラジカルの役割は論議をよんでいるが、これらの種は、ＤＯＸｏｌの同時形成により相乗化されるとき、さらに明確な役割を果たすものと思われる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
腫瘍学の領域で経験する人々が理解するように、改良された有効性及び安全性を有する併用化学療法の処方が必要とされる。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明によれば、その必要がある患者に４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンを投与することからなる癌を治療する方法が提供される。驚くべきことに、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールが心臓毒性代謝物であるドキソルビシン副生物の形成を刺激しないことが分かった。本発明の１つの態様では、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンが、任意の順序で逐次患者に投与される。別の態様では、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンは併用して投与される。好ましくは、薬剤は、先ず投与されるドキソルビシンに逐次投与される。
【０００７】
また本発明により提供されるのは、化学療法的に有効な量の４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンからなる化学療法用組成物である。本発明の他の態様では、化学療法用組成物は、製薬上許容できる担体内に配置される。別の態様では、それぞれの薬剤である４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンは、別々に処方されて組成物の逐次的な投与を助けることができる。
【０００８】
製薬組成物は、所望の抗癌作用を得るのに好適な任意の経路及び任意の量で投与できる。１つの態様では、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンは、約３０分−２４時間に及ぶ点滴（ｉｎｆｕｓｉｏｎ）間の間隔で患者に別々に点滴され、約１時間の間隔が好ましい。薬剤の静脈内投与も好ましい。
【０００９】
図１は、有毒な副生物へのドキソルビシンの代謝転換を示す概略図である。
【００１０】
図２Ａ〜２Ｃは、パクリタキセル（ＰＴＸ）（図２Ａ）；ドセタキセル（ＤＣＴ）（図２Ｂ）；及び４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール（図２Ｃ）の構造を示す。
【００１１】
図３は、ＰＴＸ及びＤＣＴが心臓サイトゾル中のＤＯＸｏｌ形成を刺激することを示すグラフである。４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、テストされた濃度でＤＯＸｏｌ生成を刺激しなかった。＊Ｐ＝＜０．０５。
【００１２】
図４Ａ及び４Ｂは、ＰＴＸ及びＤＣＴが、ドキソルビシノロン（以下ＤＯＸｏｌアグリコン）へのドキソルビシン（以下ＤＯＸアグリコン）の転換を刺激することを示すグラフである（図４Ａ）。４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、この転換を刺激することができなかった（図４Ｂ）。＊Ｐ＝＜０．０２５対コントロール。
【００１３】
図５Ａ及び５Ｂは、ＰＴＸ及びＤＣＴがともに、ＤＯＸとインキュベートされたときヒトの心臓から単離されたデオキシコレート可溶化ミクロソームによりＮＡＤＰＨ酸化を刺激することを示すグラフである（図５Ａ）。４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、テストされた最高のレベルでのみこの酸化を刺激した（図５Ｂ）。＊Ｐ＝＜０．０５対コントロール。
【００１４】
図６は、ＤＯＸがスーパーオキシドアニオン形成を増大することを示すグラフである。１０μＭのＰＴＸまたはＤＣＴを含むことは、スーパーオキシドアニオン形成を有意に増大させたが、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールではそうでなかった。＊Ｐ＝＜０．０２５対ＤＯＸ；＊＊Ｐ＝ＮＳ対ＤＯＸ。
【００１５】
４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールが心臓のＤＯＸｏｌ及びフリーラジカルを増加させるかどうかについて知るために、系統だった研究が行われた。ＰＴＸ、ＤＣＴ及び４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールの並立的な比較をした。研究は、ドキソルビシン（ＤＯＸ）誘発心臓毒性の投与量依存発生率がパクリタキソール（ＰＴＸ）により増加するが、ドセタキソール（ＤＣＴ）ではそうではないことを示している。しかし、ＤＯＸ−ＤＣＴ併用による低下した心臓毒性作用は、ＤＯＸのより少ない累積投与量を投与することにより可能である。ＤＯＸ−タキサンの相互作用のメカニズム及びアナログ特異性を明らかにするために、ヒトの心筋における毒性種へのＤＯＸの代謝転換に対するＰＴＸ、ＤＣＴ及び新しいタキサン４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールの作用の評価を行った。ＤＯＸ代謝は、大動脈冠状動脈バイパス移植中に配置される心筋のサンプルの細胞レベル下のフラクションにおいて評価された。心臓毒性の急性及び慢性の相（それぞれ酸素フリーラジカル、アグリコン性アルコール代謝物ドキソルビシノロン、及びグリコシド性アルコール代謝物ドキソルビシノール）を仲介するＤＯＸ代謝物の形成を測定した。ＰＴＸ及びＤＣＴ（１μＭ）は、それぞれドキソルビシノール及びドキソルビシノロンへのＤＯＸ及びドキソルビシノンの細胞質転換を増加させる［ドキソルビシノール：０．４６±０．０４から１．１±０．２及び１．２±０．２ｎモル／ｍｇ蛋白／４時間；ドキソルビシノロン：０．８±０．１から１．４±０．２及び１．３±０．２ｎモル／ｍｇ蛋白／４時間；ｎ＝３、ｐ＜０．０５］。ＰＴＸ及びＤＣＴ（１０μＭ）も酸素によるＤＯＸのレドックスサイクル及びミクロソームフラクション中のスーパーオキシドアニオンラジカルの必然の発生を増加させる（それぞれ１．６±０．１から２．２±０．２及び２．４±０．２ｎモル／ｍｇ蛋白／分；ｎ＝４−１０、Ｐ＜０．０５）。同様な条件下、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、ドキソルビシノール、ドキソルビシノロンまたはスーパーオキシドアニオンラジカルを増加させなかった。下記のように、市販のタキサンＰＴＸ及びＤＣＴは、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールではないが、ヒトの心筋の有毒なＤＯＸ代謝物のレベルを増大させる可能性をともにする。ＤＯＸ及びＰＴＸまたはＤＣＴにより治療された患者において心臓の監視を勧めているが、これらの発見は、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールとＤＯＸとを組み合わせるとき、より心臓毒性の可能性が低いことを示唆している。有利には、より多い蓄積投与量のドキソルビシンは、ドキソルビシンとＰＴＸまたはＤＣＴとの組み合わせに比べて４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールとの組み合わせで使用できる。
【００１６】
ＤＯＸ代謝の酵素は、極めて種に関連する。動物モデルの研究に伴う見落としの可能性を避けるために、生体外のヒト心臓アッセイを利用した。アッセイは、ＤＯＸｏｌを発生するサイトゾルフラクション及びフリーラジカルへＤＯＸを転換するミクロソームフラクションの両者の単離を含む。
【００１７】
４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールを合成する材料及び方法は、ＰＣＴ／ＵＳ９３／１２１７３及びヨーロッパ特許０６０４９１０Ｂ１（これら特許のそれぞれの全記述は、本明細書で参考として引用される）で提供される。心臓毒性副生物の形成を刺激する能力が低下した４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールの製薬上許容できる塩は、本発明の範囲内にある。塩酸塩またはナトリウム塩を含むがそれらに限定されないこれらの塩は、当業者に周知の方法に従って製造できる。
【００１８】
本発明の化学療法剤の投与方法も開示されている。ドキソルビシン及び４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、同時に患者に投与されるか、またはそれらは任意の順序で逐次的に投与できる。好ましい態様では、アントラサイクリンであるドキソルビシンが最初に投与される。約３０分から２４時間のおよその期間後、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールを投与する。本発明の化学療法用組成物の投与に好適な投与量は、以下に示される。
【００１９】
逐次的にまたは同時に投与されるにせよ、組成物は、癌の治療に有効な任意の量または任意の投与経路により投与できる。従って、用語「化学療法的に有効な」は、本明細書で使用されるとき、所望の抗癌作用をもたらすのに充分な量の本発明の化合物をいう。必要な正確な量は、患者に応じて、または化学療法化合物の投与の態様などにより変化する。
【００２０】
本発明は、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンの両者からなる化学療法用組成物をまた提供する。別の態様では、本発明の化学療法用製薬組成物は、製薬上許容できる担体媒体または補助剤と組み合わされた、活性成分として上記の化合物の１つを含む。従って、この態様では、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソール及びドキソルビシンは、別々に処方される。
【００２１】
本発明の製薬組成物は、錠剤、カプレット、ピルまたは糖衣錠を含む投与用の種々の形態で製造されるか、または好適な容器例えばカプセルに充填されるか、あ懸濁物の場合には瓶に充填される。本明細書で使用するとき、「製薬上許容できる担体媒体」は、所望の特別な投与形態に好適な、任意かつすべての溶媒、希釈剤、他の液体媒体、分散または懸濁助剤、表面活性成分、保存剤、固体結合剤、潤滑剤などを含む。「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｎｅｃｅ」１５版、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．Ｅａｓｔｏｎ  ＰＡ  １９７５）は、製薬組成物を処方するのに使用される種々の媒体または担体、並びにその製造の周知の技術を開示している。任意の従来の担体媒体が、例えば任意の望ましくない生物学的作用を生成するか、またはそれ以外に製薬組成物の任意の他の成分の１つ以上と有害なやり方で相互反応することにより、本発明の化合物と共存できない場合を除いて、その使用は、本発明の範囲内にあると考えられる。
【００２２】
本発明の製薬的に併用する組成物では、活性剤は、担体媒体及び補助剤の１つ以上を含む組成物の全重量に基づいて、少なくとも約０．１重量％そして約９５重量％以下の量で存在できる。好ましくは、活性剤の割合は、組成物の約１重量％と約７５重量％との間で変化する。腸溶性または非経口の投与に好適な製薬上の有機または無機の固体または液体の担体媒体を使用して組成物を製造できる。ゼラチン、乳糖、澱粉、マグネシウム、ステアレート、タルク、植物及び動物の脂肪及び油、ガム、ポリアルキレングリコールまたは薬剤用の他の周知の助剤または希釈剤は、すべて担体媒体として好適である。
【００２３】
本明細書で記述された化学療法組成物は、好ましくは、投与の容易さ及び投与物の均一性のために投与物単位の形に処方される。「投与物単位の形」は、本明細書で使用されるとき、治療されるべき患者用の化学療法用組成物の物理的に分離した単位をいう。各投与物は、それ自体でまたは選択された製薬担体媒体と組み合わせての何れかで、所望の治療効果を生成するように計算された量の活性材料を含まねばならない。代表的には、ドキソルビシンを含むアントラサイクリンは、剤の約４０−約２００ｍｇに及ぶ投与物単位で投与され、約４０−１５０ｍｇの範囲が好ましい。代表的には、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールを含むタキサンは、剤の約５０−３８０ｍｇに及ぶ投与物単位で投与され、約５０−３００ｍｇの範囲が好ましい。本発明の化学療法用併用組成物は、筋肉内注射、腹腔内注射、静脈内点滴などにより、経口的、非経口的に投与できる。静脈内投与が特に好ましい。本発明の化学療法用組成物は、代表的には、種々の持続時間の静脈内点滴により投与され、１−２４時間の点滴が好ましい。
【００２４】
本発明の化学療法用組成物は、所望の治療効果を得るために、毎月１回以上投与される。本発明の好ましい態様では、化学療法剤は、静脈内点滴により逐次投与され、ドキソルビシンが好ましくは始めに投与される。化合物の投与間の異なる間隔が選択できる。これらの間隔は、約３０分から２４時間の間に及び、１時間が好ましい。
【００２５】
併用化学療法処方の生物学的研究は、心臓の細胞フラクションで行われた。驚くべきことに、ヒトの心臓のサイトゾル中のアントラサイクリンとのインキュベーション時に、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールがドキソルビシンの心臓毒性の代謝物及び副生物の生成を刺激しないことが分かった。これらの研究のテスト方法及び結果は以下に示される。
【００２６】
ヒトの心臓サイトゾル中のタキサンを添加または無添加したときのＤＯＸ代謝及びＤＯＸｏｌ形成の再構成
【００２７】
ヒトの心筋を、大動脈−冠状動脈のバイパス移植をした患者から得る。すべてのサンプルは、心臓−肺バイパス用のカニュレーション中摘出された右心房の外側から外科医により通常通り処理された。−８０℃で貯蔵された後、１５−２０個のサンプルのプールを、連続するホモゲネーション、超遠心分離及び１０５０００ｇ上清の１晩の６５％硫酸アンモニウム沈澱によりサイトゾル調製について処理される。次に、サイトゾルを１００ｍＭのトリスＨＣｌ−４０ｍＭのＫＣｌｐＨ８．９について透析し、同じ緩衝液により３ｍｇ蛋白／ｍＬに希釈し、そして１００ｍＭのジチオスレイトールで室温で１５分間インキュベートして細胞質アコニターゼの［４Ｆｅ−４Ｓ］クラスターの非変性分解を促進する。この処理は、ＤＯＸｏｌと［４Ｆｅ−４Ｓ］クラスターとの反応がこの代謝物をＤＯＸへ戻すかもしれないために、必要である。それゆえ、かなりな量のＤＯＸｏｌが、もしそれらがそれらのアッセイ前に［４Ｆｅ−４Ｓ］クラスターと反応したならば、検出されないままであろう。未反応ジチオスレイトールは、次いで連続する（１．５×１０ｃｍ）セファロース６Ｂカラムによるゲル濾過、６５％硫酸アンモニウムによる蛋白再沈澱、及び０．３Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０によるエキシテンシブ透析により除かれた。ドキソルビシン代謝は、０．３Ｍ  ＮａＣｌ（ｐＨ７．０）３７℃中のサイトゾル（０．１５ｍｇ蛋白）、ＮＡＤＰＨ（１００μＭ）及びＤＯＸ（２５μＭ）を含む０．５ｍＬのインキュベーション中で再構成された。指示されたように、エタノールに溶解したタキサン（１−５０μＭ）を含ませた。タキサンのないエタノール（５μＬ）の一部を適切ならば含ませて、すべてのインキュベーション中１０μＬの最終体積に調節した。４時間後、ＤＯＸ及びＤＯＸｏｌを２ｍＬのＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ（１：１）により抽出し、両方の次元で移動相としてＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ／ＣＨ３ＣＯＯＨ／Ｈ２Ｏ（８０：２０：１４：６）を使用して、（２０×２０ｃｍ）０．２５ｍＭ  Ｆ５２４シリカゲルプレート上の既に確認した二次元ＴＬＣにより分離した。ドキソルビシノールは、ＤＯＸのＮａＢＨ４還元後精製された（Ｓ）（Ｒ）−ＤＯＸｏｌまたはＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｐｅｕｃｅｔｉｕｓからの（Ｓ）ＤＯＸｏｌによる共クロマトグラフィにより同定された。指示されたように、インキュベーションは、ＤＯＸをＤＯＸアグリコンにより置換しそしてＤＯＸｏｌアグリコンの形成を測定することにより調製された。後者は、それぞれ第一の次元及び第二の次元でＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ／ＣＨ３ＣＯＯＨ（１００：２：５）及びＣＨ３ＣＯＯＣ２Ｈ５−ＣＨ３ＣＨ２ＯＨ−ＣＨ３ＣＯＯＨ−Ｈ２Ｏ（８０：１０：５：５）を使用することによりＤＯＸアグリコンから分離された。ＤＯＸアグリコンは、ＤＯＸの加熱酸加水分解後精製された。
【００２８】
ヒトの心臓のミクロソーム中のタキサンの添加または無添加のＤＯＸ代謝及びフリーラジカル形成の再構成
【００２９】
ヒトの心筋のホモジネートからの１０５０００ｇのペレットを、デオキシコレートにより可溶化し、そして０．３Ｍ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．０、３７℃中の１０μＭのＤＯＸ、１−１０μＭのタキサン及び０．１ｍＭのＮＡＤＰＨにより０．０２５ｍｇ  ｐｒｏｔ／ｍＬの最終濃度で再構成する。
【００３０】
ＮＡＤＰＨチトクロームＰ−４５０レダクターゼからＤＯＸのキノン基への電子の流れは、ＮＡＤＰＨ酸化をモニターすることにより検出される。酸素によるセミキノンのレドックスカップリングは、チトクロームｃ（２５μＭ）のスーパーオキシドディスムターゼ阻害可能な還元によりスーパーオキシドアニオンラジカルの形成をモニターすることにより検出される。これらのアッセイは、スキャーター及び濁度のためのコンピュータによる補正を備えたＨｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋｅｒｄ  ８４５３Ａ  ＵＶ／ＶＩＳ／ＮＩＲ分光計で行われる。
【００３１】
【実施例】
実施例  １  ＰＴＸ及びＤＣＴは有毒なドキソルビシン代謝物の形成を刺激する  ＰＴＸ及びＤＣＴの両者は、［４Ｆｅ−４Ｓ］欠如ヒト心臓サイトゾル中でＤＯＸｏｌ形成を刺激する。図３で示されるように、濃度レスポンス曲線は鐘状であり、タキサンがアントラサイクリンレダクターゼのアロステリックモジュレータとして作用することを示唆している。刺激を許容する濃度の範囲は、ＰＴＸの場合には、より広くなり勝ちであるが、２つのタキサンによる最大の刺激は、実験のこのセットで同じである。４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、テストされた濃度のすべてでＤＯＸｏｌ形成を刺激しなかった。
【００３２】
図４に示されるように、ＰＴＸ及びＤＣＴは、またＤＯＸｏｌアグリコンへのＤＯＸアグリコンの転換を刺激可能であった。また、濃度レスポンス曲線は鐘形であり、２つのタキサンは達成可能な全刺激とこの刺激を許容する濃度の範囲との両者に関して殆ど同じであった（パネルＡ）。４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、ＤＯＸアグリコンからのＤＯＸｏｌアグリコンの形成を刺激しないことが分かった（パネルＢ）。
【００３３】
実施例  ２  タキサンによるＮＡＤＰＨ酸化の刺激
ＰＴＸ及びＤＣＴは、ＤＯＸによりインキュベートされたヒトの心臓のデオキシコレート可溶化ミクロソームによるＮＡＤＰＨ酸化を刺激できた。この系では、濃度レスポンス曲線は、鐘形ではないが、刺激はそれが平坦になるまで増大した（図５Ａ）。４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、テストされた最高の濃度でのみＮＡＤＰＨ酸化を刺激したが、これは統計上有意ではなかった（図５Ｂ）。テストされたタキサンのいずれも、ＤＯＸの不存在下でＮＡＤＰＨ酸化に影響しなかった。
【００３４】
図６に示されるように、ＤＯＸは、デオキシコレート可溶化ミクロソームによるスーパーオキシドアニオン形成を増大でき、そのキノン基の還元−酸化を経てＮＡＤＰＨチトクロームＰ−４５０レダクターゼから分子状酸素への電子をそらすその能力と一致した。１０μＭのＰＴＸまたはＤＣＴの混在は、スーパーオキシド形成に有意な増加を生じさせ、それは同様な条件下ＮＡＤＰＨ酸化を刺激するこれら２つのタキサンの能力と一致した。また、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、これらの設定において有意な刺激を何ももたらさず、それはＮＡＤＰＨ酸化に対する有意な作用のないことと一致した。
【００３５】
本明細書で示された結果は、ＰＴＸ及びＤＣＴの両者がヒトの心臓においてＤＯＸ代謝を刺激し、スーパーオキシドアニオンのような潜在的な心臓毒性のＤＯＸｏｌ、ＤＯＸｏｌアグリコン、及び酸素フリーラジカルの形成を増大させることを示す。これらの知見は、ＤＯＸ−ＰＴＸの組み合わせの心臓毒性の増加を説明する分子の相関関係を提供し、そして増大した心臓毒性が、もしＤＯＸの蓄積投与量が約３６０−４００ｍｇ／ｍ２より多く増加するならば、ＤＯＸ−ＤＣＴ処方後にも生ずるだろうことを示唆している。対照的に、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、ＤＯＸ代謝に対するこの作用を欠いているようにみえる。従って、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、ＤＯＸとの組み合わせた化学療法処方で使用される優れたタキサンを提供する。
【００３６】
本発明の或る好ましい態様は、上記で記載されそして特に例示されているが、本発明がこれらの態様に限定されることを目的とするものではない。種々の変化が、特許請求の範囲に示された範囲及び趣旨から逸脱することなく本発明に行うことができる。
【００３７】
【非特許文献１】
Ｇｅｈｌ  Ｊ，Ｂｏｅｓｇａａｒｄ  Ｍ，Ｐａａｓｋｅ  Ｔ，Ｖｉｔｔｒｕｐ  Ｊｅｎｓｅｎ  Ｂ，Ｄｏｍｂｅｒｎｏｗｓｋｙ  Ｐ，Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  ａｎｄ  ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ  ｉｎ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ：ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ａｎｄ  ｃａｒｄｉｏｔｏｘｉｃ．  Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ  １９９６；７：６８７−９３．
【００３８】
【非特許文献２】
Ｇｉａｎｎｉ  Ｌ，Ｍｕｎｚｏｎｅ  Ｅ，Ｃａｐｒｉ  Ｇ，Ｆｕｌｆａｒｏ  Ｆ，Ｔａｒｅｎｚｉ  Ｅ，Ｖｉｌｌａｎｉ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ．Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ  ｂｙ  ３−ｈｏｕｒ  ｉｎｆｕｓｉｏｎ  ｉｎ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｂｏｌｕｓ  ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  ｉｎ  ｗｏｍｅｎ  ｗｉｔｈ  ｕｎｔｒｅａｔｅｄ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ：ｈｉｇｈ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ａｎｄ  ｃａｒｄｉａｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ａ  ｄｏｓｅ−ｆｉｎｄｉｎｇ  ａｎｄ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ−ｆｉｎｄｉｎｇ  ｓｔｕｄｙ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  １９９５；１３：２６８８−９９．
【００３９】
【非特許文献３】
Ｇｉａｎｎｉ  Ｌ，Ｄｏｍｂｅｒｎｏｗｓｋｙ  Ｐ，Ｓｌｅｄｇｅ  Ｇ，Ａｍａｄｏｒｉ  Ｇ，Ｍａｒｔｉｎ  Ｍ，Ｂａｙｎｅｓ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｒｄｉａｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｗｉｔｈ  Ｔａｘｏｌ７  ａｎｄ  Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  ｆｏｒ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｐｒｏｃ  Ａｎｎｕ  Ｍｅｅｔ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  １９９８；１７：１１５ａ（ａｂｓｔｒａｃｔ  ４４４）．
【００４０】
【非特許文献４】
Ｎａｂｈｏｌｔｚ  ＪＭ，Ｓｍｙｌｉｅ  Ｍ，Ｍａｃｋｅｙ  ＪＲ，Ｎｏｅｌ  Ｄ，Ｐａｔｅｒｓｏｎ  ＡＨ，ａｌ−Ｔｗｅｉｇｅｒｉ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ／ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ／ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐａｍｉｄｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  １９９７；１１（Ｓｕｐｐｌ  ８）：３７−４１．
【００４１】
【非特許文献５】
Ｏｌｓｏｎ  ＲＤ，Ｍｕｓｈｌｉｎ  ＰＳ．Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  ｃａｒｄｉｏｔｏｘｉｃｉｔｙ：ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｐｒｅｖａｉｌｉｎｇ  ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １９９０；４：３０７６−８６．
【００４２】
【非特許文献６】
Ｍｉｎｏｔｔｉ  Ｇ，Ｃａｉｒｏ  Ｇ，Ｍｏｎｔｉ  Ｅ，Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｉｒｏｎ  ｉｎ  ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅ  ｃａｒｄｉｏｔｏｘｉｃｉｔｙ：ｎｅｗ  ｔｕｎｅｓ  ｆｏｒ  ａｎ  ｏｌｄ  ｓｏｎｇ？  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １９９９；１３：１９９−２１２．
【００４３】
【非特許文献７】
Ｂｏｕｃｅｋ  ＲＪ  Ｊｒ，Ｏｌｓｏｎ  ＲＤ，Ｂｒｅｎｎｅｒ  ＤＥ，Ｏｇｕｍｂｕｍｎｉ  ＭＥ，Ｉｎｕｉ  Ｍ，Ｆｌｅｉｓｃｈｅｒ  Ｓ．Ｔｈｅ  ｍａｊｏｒ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｏｆ  ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  ｉｓ  ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｍｅｍｂｒａｎｅ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｉｏｎ  ｐｕｍｐｓ：ａ  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｖｅ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｃａｒｄｉａｃ  ｍｕｓｃｌｅ  ｗｉｔｈ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｆｒａｃｔｉｏｎｓ．  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  １９８７；２６２：１５８５１−５６．
【００４４】
【非特許文献８】
Ｍｉｎｏｔｔｉ  Ｇ，Ｒｅｃａｌａｃｔｉ  Ｓ，Ｌｉｂｅｒｉ  Ｇ，Ｃａｌａｆｉｏｒｅ  ＡＭ，Ｍａｎｃｕｓｏ  Ｃ，Ｐｒｅｚｉｏｓｉ  Ｐ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ａｌｃｏｈｏｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｏｆ  ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｙ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｓ  ａｃｏｎｔａｓｅ／ｉｒｏｎ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１  ｉｎ  ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ  ｆｒａｃｔｉｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｍｙｏｃａｒｉｄｉｕｍ．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １９９８；１２：５４１−５１．
【００４５】
【非特許文献９】
Ｍｉｎｏｔｉｉ  Ｇ，Ｃａｖａｌｉｅｒｅ  ＡＦ，Ｍｏｒｄｅｎｔｅ  Ａ，Ｒｏｓｓｉ  Ｍ，Ｓｃｈｉａｖｅｌｌｏ  Ｒ，Ｚａｍｐａｒｅｌｌｉ  Ｒ．ｅｔ  ａｌ．Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ａｌｃｏｈｏｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｍｅｄｉａｔｅ  ｉｒｏｎ  ｄｅｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ  ｆｒａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｂｉｏｐｓｉｅｓ  ｅｘｐｏｓｅｄ  ｔｏ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅｓ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １９９５；９５：１５９５−１６０５．
【００４６】
【非特許文献１０】
Ｐｏｗｉｓ  Ｇ，Ｆｒｅｅ  ｒａｄｉｃａｌ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ｑｕｉｎｏｎｅｓ．Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  １９８９；６：６３−１０１．
【図面の簡単な説明】
【図１】
有毒な副生物へのドキソルビシンの代謝転換を示す概略図である。
【図２】
Ａはパクリタキセル（ＰＴＸ）の構造を示す。Ｂはドセタキセル（ＤＣＴ）の構造を示す。Ｃは４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールの構造を示す。
【図３】
ＰＴＸ及びＤＣＴが心臓サイトゾル中のＤＯＸｏｌ形成を刺激することを示すグラフである。４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、テストされた濃度でＤＯＸｏｌ生成を刺激しなかった。＊Ｐ＝＜０．０５。
【図４】
ＡはＰＴＸ及びＤＣＴが、ドキソルビシノロン（以下ＤＯＸｏｌアグリコン）へのドキソルビシン（以下ＤＯＸアグリコン）の転換を刺激することを示すグラフである。Ｂは４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、この転換を刺激することができなかったことを示すグラフである。＊Ｐ＝＜０．０２５対コントロール。
【図５】
ＡはＰＴＸ及びＤＣＴがともに、ＤＯＸとインキュベートされたときヒトの心臓から単離されたデオキシコレート可溶化ミクロソームによりＮＡＤＰＨ酸化を刺激することを示すグラフである。Ｂは４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールは、テストされた最高のレベルでのみこの酸化を刺激したことを示すグラフである。＊Ｐ＝＜０．０５対コントロール。
【図６】
ＤＯＸがスーパーオキシドアニオン形成を増大することを示すグラフである。１０μＭのＰＴＸまたはＤＣＴを含むことは、スーパーオキシドアニオン形成を有意に増大させたが、４−デスアセチル−４−メチルカーボネートタキソールではそうでなかった。＊Ｐ＝＜０．０２５対ＤＯＸ；＊＊Ｐ＝ＮＳ対ＤＯＸ。
【図１】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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