(57)【要約】癌治療のため、スチルベン誘導体及びカンプトセシンを含有する医薬の組合せが記載されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カンプトセシン又はその誘導体をスチルベン誘導体と組み合わせて含有する医薬組成物。
【請求項２】
スチルベン誘導体がコンブレタスタチンである請求項１記載の組成物。
【請求項３】
固形腫瘍を治療するため、有効量のＣＰＴ−１１を有効量のコンブレタスタチンと組み合わせて含有し、前記コンブレタスタチンが、次の式
【化１】
2004517821.tif 000009
を有する医薬組成物。
【請求項４】
固形腫瘍が結腸腺癌である請求項３記載の組成物。
【請求項５】
固形腫瘍を治療するため、有効量のＣＰＴ−１１を、請求項３に記載の有効量のコンブレタスタチンと組み合わせて含有する相乗治療の医薬組成物。
【請求項６】
有効量のＣＰＴ−１１を請求項３に記載の有効量のコンブレタスタチンと組み合わせて逐次投与することからなる固形腫瘍の治療方法。
【請求項７】
ＣＰＴ−１１の用量が、約１８０〜約４００ｍｇ／ｋｇからなり、そしてコンブレタスタチンの用量が、約３６ｍｇ／ｋｇ〜６０ｍｇ／ｋｇからなる請求項６記載の方法。
【請求項８】
組合せが、２４０ｍｇ／ｋｇのＣＰＴ−１１及び６０ｍｇ／ｋｇのコンブレタスタチンの用量レベルを含む請求項７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本願は、２０００年１０月２７日に出願された米国暫定特許出願第６０／２４３，３４１号；２０００年１１月６日に出願された同第６０／２４５，５８２号；及び２０００年１２月１日に出願された同第６０／２５０，１３８号の優先権を享受する。
【０００２】
本発明は、癌治療のため有効量のカンプトセシン（ＣＰＴ−１１）を、有効量のスチルベン誘導体、例えばコンブレタスタチンと共に含んでなる治療上の組合せに関する。
【０００３】
本発明は、カンプトセシン誘導体及び他の抗癌薬の組合せによる、癌、より具体的には固形腫瘍、最も具体的には、非小細胞生癌及び結腸直腸癌の治療、並びに改善された治療のためのこのような組合せの使用に関する。
【０００４】
より詳しくは、本発明は、イリノテカン（ＣＰＴ−１１；Ｃａｍｐｔｏ（Ｒ））及びスチルベン誘導体、例えばコンブレタスタチンの組合せを用いた抗癌治療に関する。
【０００５】
結腸直腸癌は、罹病率及び死亡率の主要な原因であり、ヨーロッパと米国では、毎年約３００，０００人の新しい患者が罹病し、２００，０００人が死亡している（Ｐ． Ｂｏｙｌｅ， Ｓｏｍｅ Ｒｅｃｅｎｔ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ， Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ中の第１９−３４頁， Ｂｌｅｉｂｅｒｇ Ｈ．， Ｒｏｕｇｉｅｒ Ｐ．， Ｗｉｌｋｅ Ｈ． Ｊ．， ｅｄｓ， （Ｍａｒｔｉｎ Ｄｕｎｉｔｚ， Ｌｏｎｄｏｎ １９９８）；及びＭｉｄｇｌｅｙ Ｒ． Ｓ．， Ｋｅｒｒ Ｄ． Ｊ．， Ｓｙｓｔｅｍｉｃ Ａｄｊｕｖａｎｔ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ， Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ中の第１２６−２７頁， Ｂｌｅｉｂｅｒｇ Ｈ．， Ｒｏｕｇｉｅｒ Ｐ．， Ｗｉｌｋｅ Ｈ． Ｊ．， ｅｄｓ， （Ｍａｒｔｉｎ Ｄｕｎｉｔｚ， Ｌｏｎｄｏｎ １９９８））。
【０００６】
約５０パーセントの患者は、手術だけで治癒するが、残りの半分は、最終的に転移疾患のため死に至り、これには診断時に転移の形跡がある患者の約２５％が含まれている。
【０００７】
欧州特許ＥＰ １３７，１４５は、本明細書に組み込まれており、式
【化２】
2004517821.tif 000002
〔式中、 特に、Ｒ１は水素、ハロゲン又はアルキルであり、Ｘは、塩素原子又はＮＲ２Ｒ３であり、その際、Ｒ２及びＲ３は、同じか又は異なっていてもよく、水素原子、場合により置換されたアルキル基、場合により置換された炭素環もしくは複素環を表すか、又はそれらが付いた窒素原子と共に、場合によりＯ、Ｓ及び／又はＮＲ４（Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である）から選ばれる別のヘテロ原子を含む複素環を形成する（場合により、置換された）アルキル基を表し、そして基Ｘ−ＣＯ−Ｏ−は、環Ａ上の９、１０又は１１位にある〕のカンプトセシン誘導体を記載している。
【０００８】
これらのカンプトセシン誘導体は、トポイソメラーゼＩを阻害する抗癌剤であり、その中でも、Ｘ−ＣＯ−Ｏ−が［４−（１−ピペリジノ−１−ピペリジノ］カルボニルオキシであるイリノテカン又はＣＰＴ−１１は、特に固形腫瘍そして特に結腸直腸癌の治療に有効な活性成分である。
【０００９】
また、欧州特許出願ＥＰ ７４，２５６には、別のカンプトセシン誘導体がこれもまた抗癌剤として記載されており、特に上に示した構造〔式中、Ｘ−ＣＯ−Ｏ−は、基−Ｘ′Ｒ′（ここで、Ｘ′はＯ又はＳであり、そしてＲ′は、水素原子又はアルキルもしくはアシル基である）で置換されている〕に類似した構造の誘導体が記載されている。
【００１０】
また、別のカンプトセシン誘導体は、例えば、特許又は特許出願ＥＰ ５６，６９２、ＥＰ ８８，６４２、ＥＰ ２９６，６１２、ＥＰ ３２１，１２２、ＥＰ ３２５，２４７、ＥＰ ５４０，０９９、ＥＰ ７３７，６８６、ＷＯ ９０／０３１６９、ＷＯ ９６／３７４９６、ＷＯ ９６／３８１４６、ＷＯ ９６／３８４４９、ＷＯ ９７／００８７６、ＵＳ ７，１０４，８９４、ＪＰ ５７ １１６，０１５、ＪＰ ５７ １１６，０７４、ＪＰ ５９ ００５，１８８、ＪＰ ６０ ０１９，７９０、ＪＰ ０１ ２４９，７７７、ＪＰ ０１ ２４６，２８７ 及びＪＰ ９１ １２０７０ 又はＣａｎｃ． Ｒｅｓ．， ３８ （１９９７） Ａｂｓｔ． １５２６ もしくは ９５ （Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ− １２−１６ Ａｐｒｉｌ）， Ｃａｎｃ． Ｒｅｓ．， ５５（３）： ６０３−６０９ （１９９５） もしくはＡＦＭＣ Ｉｎｔ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｓｙｍｐ． （１９９７） Ａｂｓｔ． ＰＢ−５５ （Ｓｅｏｕｌ− ２７ Ｊｕｌｙ−１ Ａｕｇｕｓｔ） に記載されている。
【００１１】
カンプトセシン誘導体は、通常、注射によって、より具体的には滅菌溶液又は乳剤の形態で静脈内に投与される。しかし、また、カンプトセシン誘導体は、固体又は液体組成物の形態で経口的に投与することができる。
【００１２】
カンプトセシンは、強い抗腫瘍活性を有する細胞毒性アルカロイドである。しかし、カンプトセシン誘導体は、結腸直腸癌に対して抗腫瘍活性を有する最も強力な物質のいくつかであると考えられ、これらの化合物の使用は、臨床治療において別の抗腫瘍剤と組合せて改善することができる。
【００１３】
ここで、カンプトセシン誘導体とスチルベン誘導体との組合せは、結腸直腸癌を含めた多くの固形腫瘍の治療において特に有効であることが見出された。有効なスチルベン誘導体の中には、コンブレタスタチンＡ−４及び単にコンブレタスタチンと称するその化合物の誘導体がある。これらの化合物は、いずれも強い細胞分裂阻害活性、細胞毒性を示し、そしてチューブリン重合を阻害する。
【００１４】
コンブレタスタチンＡ−４は、以下：
【化３】
2004517821.tif 000003
の式を有する。
【００１５】
本発明のコンブレタスタチンは、以下：
【化４】
2004517821.tif 000004
の式を有する。これらのコンブレタスタチンは、水溶性であり、そして塩酸塩、酢酸塩、リン酸塩、メタンスルホン酸塩等によって例示される塩形態で用いることができる。
【００１６】
コンブレタスタチンＡ−４を含めたスチルベン誘導体（これは医薬上許容しうる塩、水和物及び溶媒和物の形態であってもよい）の製造、並びに上記化合物、その不活性な医薬上許容しうる担体及び／又は希釈剤を含んでなる経口及び／又は非経口医薬組成物の製造は、米国特許第５，５２５，６３２号に開示されている。この特許及び米国特許第５，６７４，９０６号には、コンブレタスタチンを含めたスチルベン誘導体を単独で使用する場合、生体内に低い毒性及び抗癌性効果を有することが記載されている。
【００１７】
最近では、カンプトセシン及びコンブレタスタチンの組合せは、腫瘍のある哺乳動物にそれぞれの化合物を単独で投与して予想されるよりも腫瘍体積の増大を有意に低下させることが見出された。実際、ＣＰＴ−１１、カンプトセシンの誘導体、及びスチルベン誘導体、コンブレタスタチンの逐次的な組合せは、癌、特に結腸腺癌の治療において、それぞれの単一薬剤の最も高い非毒性用量よりも低い用量でより活性である。下の表ＩＶを参照のこと。
【００１８】
組合せの効力は、その治療上の相乗作用を測定することによって示すことができる。組合せが、それぞれ最適用量で用いた個々の成分よりも治療上優れている場合、組合せによる治療上の相乗作用が明らかになる（Ｔ． Ｈ． Ｃｏｒｂｅｔｔ 等， Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｒｅｐｏｒｔｓ， ６６， １１８７ （１９８２））。
【００１９】
また、組合せの効力は、当該研究において組合せの最大耐用量と個々の成分のそれぞれの最大耐用量とを比較することによって示すことができる。この効力は、例えばｌｏｇ１０死滅細胞によって定量化することができ、これは、以下：
ｌｏｇ１０死滅細胞＝Ｔ−Ｃ（日）／３．３２×Ｔｄ
の式によって測定され、式中Ｔ−Ｃは、細胞が成長するのにかかった時間を表し、これは、処置群（Ｔ）の腫瘍が所定の数値（例えば１ｇ）に達する、及び対照群（Ｃ）の腫瘍が同じ数値に達する平均的な時間（日）であり、そしてＴｄは、対照群の腫瘍体積が２倍になるのに必要な時間（日）を表している（Ｔ． Ｈ． Ｃｏｒｂｅｔｔ 等， Ｃａｎｃｅｒ， ４０， ２６６０． ２６８０ （１９７７）； Ｆ． Ｍ． Ｓｃｈａｂｅｌ 等， Ｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， Ｐａｒｔ Ｂ， Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， １７， ３−５１， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ． （１９７９））。ｌｏｇ１０死滅細胞が０．７又はそれ以上である場合、生成物は活性であると考えられる。ｌｏｇ１０死滅細胞が２．８より大きい場合、生成物は非常に活性であると考えられる。
【００２０】
本発明において、腫瘍細胞の成長を阻害するため、腫瘍増殖を阻害するのに十分な量のスチルベン誘導体、例えばコンブレタスタチンをカンプトセシン誘導体、例えばＣＰＴ−１１と共に用いて、腫瘍の治癒、軽減又は予防が必要な哺乳動物、特に腫瘍細胞の増殖で苦しむヒトに投与することができる。
【００２１】
腫瘍細胞の増殖の阻害は、腫瘍細胞の増殖で苦しむヒトに有効量のコンブレタスタチン及び有効量のＣＰＴ−１１を投与することからなる治療に対して感受性の腫瘍細胞を阻害することを意味する。許容しうる場合、この投与により、腫瘍細胞の増殖が抑制されるか又は腫瘍の大きさがかなり小さくなる。最適な場合、腫瘍は完全に退縮する。
【００２２】
上記の通り、治療する哺乳動物に本発明の抗腫瘍剤を投与する方法には具体的な制限がない。それは、例えば静脈内、皮下又は筋内経路によって、経口的に又は非経口的に投与することができる。即時効力を得るには、例えば注入等による静脈内及び皮下投与によってコンブレタスタチンを非経口投与するのが好ましい。本発明の医薬製剤の投与方法において、コンブレタスタチンは、ＣＰＴ−１１と同時に投与することができるし、又は二つは任意の順序で逐次投与することができる。実際には、投与方法及び順序は、コンブレタスタチンの個々の製剤、ＣＰＴ−１１の個々の製剤、治療する個々の腫瘍細胞、及び治療を受ける個々の被験者に応じて変化する。コンブレタスタチン及びＣＰＴ−１１を投与する最適な方法及び順序は、本明細書に包含される常用技術及び情報を用いて当業者が適切に選ぶことができる。
【００２３】
コンブレタスタチン及びカンプトセシンの腫瘍増殖阻害に有効な量とは、腫瘍細胞の増殖で苦しむヒトにおいて、投与に対して感受性の腫瘍細胞の増殖を阻害する治癒単位を意味する。実際に望ましい治癒単位は、使用するコンブレタスタチンの個々の剤形、使用するＣＰＴ−１１の個々の剤形、治療する個々の腫瘍細胞及び治療を受ける個々の被験者に応じて変化する。予め設定された所定の状態での最適な治癒単位は、本明細書に包含される治癒試験単位及び情報を利用して当業者が適切に選ぶことができる。
【００２４】
本発明の抗腫瘍剤は、上記のように、少なくともコンブレタスタチン及びカンプトセシン化合物を含んでなる、２つの活性成分を医薬製剤中に混合物として含むことができるような医薬製剤である。しかし、また、本発明における２つの活性成分は、別個の医薬製剤の中に別々に含有され、連続してかつ組合せて使用することができる。別の薬剤（第３及び第４の医学的な成分等）、例えば別の抗腫瘍剤を含むこのような医薬製剤は、医薬製剤中に本発明で用いる有効成分が含まれる限り、当然、本発明によって包含されうることは、留意される。さらに、本発明の任意の医薬製剤（本発明の両方の成分を含む単一の医薬製剤、及び組合せて使用するためそれぞれ２つの成分の一方を別々に含む別個の医薬製剤）について医薬上許容される担体、希釈剤及び他の物質は、本発明の抗腫瘍剤中に含めることができる。
【００２５】
医薬製剤を製造する当業者に知られている適切な医薬上許容しうる担体及び希釈剤は、本発明の抗腫瘍剤に必要に応じて使用することができる。本発明の抗腫瘍剤は、上で議論したように、非経口的に適切に適用することができる。この場合、抗腫瘍剤は、変更可能な当業者に周知の方法によって医薬上許容しうる担体と共に静脈内の注入剤又は注射剤に製造される。医薬剤は、常用技術によって、例えば単位剤形で２つの有効成分を冷凍乾燥した混合物の形態で製造し、そして投与の際に、水又は他の適切な液体注入剤に再調製するのが好ましい。
【００２６】
コンブレタスタチン２０〜１１６．５ｍｇ、好ましくは３６〜６０ｍｇ、及びＣＰＴ−１１、１４４〜４００ｍｇ、好ましくはＣＰＴ−１１、２４０〜４００ｍｇを、本発明の医薬製剤の各用量中に配合することができる。注射又は注入液として使用する医薬組成物の生理学的な医薬数値は、当該分野でよく知られた含量の緩衝剤によって適切に調節される。
【００２７】
さて、本発明を、その好ましい実施態様に関してより詳細に説明する。これらは、実施例としてのみ記載し、本発明を限定するものではないことに注意しなければならない。
【００２８】
抗腫瘍効果及び安全性試験
ＣＰＴ−１１及びコンブレタスタチンの組合せの効果を、結腸腺癌Ｃ５１を有するマウスにおいて評価した。ＣＰＴ−１１を、２〜５日、毎日４回異なる用量レベルで経口的に与えた。コンブレタスタチンを、１〜５日、１日２回静脈内に投与した。組合せの際、３つの異なる用量のＣＰＴ−１１を２〜５日、毎日２回経口的に投与し、そして３つの異なる用量のコンブレタスタチンを１〜５日、毎日２回静脈内投与した。
【００２９】
単一薬剤ＣＰＴ−１１及びコンブレタスタチン並びに同時的組合せＣＰＴ−１１／コンブレタスタチンの研究で得られた結果を下の表Ｉに示す。
【００３０】
【表１】
2004517821.tif 000005
【００３１】
表１は、それらの最も高い非毒性用量で得られる単一薬剤としてのコンブレタスタチン及びＣＰＴ−１１の効果を示している。また、抗腫瘍化合物を同時に与えた場合、治癒率は、低用量（単一薬剤の最も高い非毒性用量の４５％）で高められることを示している。したがって、低い毒性で有効な治療をすることができる。
【００３２】
表ＩＩは、コンブレタスタチン、続いてＣＰＴ−１１の逐次投与を説明している。
【００３３】
【表２】
2004517821.tif 000006
【００３４】
最初にコンブレタスタチンを投与する場合、最も効果的な逐次的組合せは、コンブレタスタチン６０ｍｇ／ｋｇ（ＨＮＴＤの５１％）、続いてＣＰＴ−１１、２４０ｍｇ／ｋｇ（ＨＮＴＤの６０％）であった。この組合せでは、ｌｏｇ死滅細胞が１．７であり、試験した５匹のマウス全てにおいてＣｏｌｏｎ５１の腫瘍が部分的に退縮した。したがって、その組合せは、それらの最適用量で使用した両方の単一薬剤よりも治療上優れていた。
【００３５】
最も高い非毒性用量の５１％及び３１％のコンブレタスタチン、続いて最も高い非毒性用量のＣＰＴ−１１（４００ｍｇ／）を与えると、試験動物に対して有毒であったが、わずか１８％のコンブレタスタチンを最も高い非毒性用量のＣＰＴ−１１と組合せると、ｌｏｇ１０死滅細胞が１．４となり、そして試験した５匹全てのマウスにおいて部分的な反応が見られた。このｌｏｇ死滅細胞は、各薬剤のそれぞれのｌｏｇ死滅細胞よりも高く、この組合せの治療上の有効性を示している。
【００３６】
驚いたことに、１８％のコンブレタスタチン、続いて最も高い非毒性用量の６０％のＣＰＴ−１１を投与した場合、ｌｏｇ死滅細胞は、同じままであり（１．４）、著しい有効性を示した。
【００３７】
下の表ＩＩＩは、まずＣＰＴ−１１をその最も高い非毒性用量（４００ｍｇ／ｋｇ）で、続いて３６ｍｇ／ｋｇのコンブレタスタチン（最も高い非毒性用量の３１％）を逐次的に投与すると、１．９のｌｏｇ１０死滅細胞が得られたことを示している。また、単一薬剤としてＣＰＴ−１１及びコンブレタスタチンの両方の最も高い非毒性用量のｌｏｇ１０死滅細胞は、それぞれ１．１及び１．３であり、ＣＰＴ−１１、その後のコンブレタスタチンのこの組合せは、治療において相乗作用を有することを示した。
【００３８】
【表３】
2004517821.tif 000007
【００３９】
試験では、表ＩＶに報告したようにいくつかの異なる計画でコンブレタスタチンを静脈内に投与、ＣＰＴ−１１を経口的に投与した。単一薬剤として使用する場合、コンブレタスタチンを５日連続１日２回投与した。ＣＰＴ−１１を単独で投与する場合、４日連続１日１回与えた。
【００４０】
逐次投与する場合、２つの計画を用いた。最初にコンブレタスタチンを与える場合、これを１日投与し、続いて２〜５日の間、１日１回ＣＰＴ−１１を投与した。順に与える最初の化合物がＣＰＴ−１１である場合、これを１〜４日の間、１日１回投与し、続いて５日目にコンブレタスタチンを投与した。
【００４１】
【表４】
2004517821.tif 000008
【００４２】
下の表ＩＶは、コンブレタスタチン及びＣＰＴ−１１の逐次投与は、いずれの順序でも、使用する化合物単独又は同時的組合せのどちらよりも実質的により有効であることを示している。ＣＰＴ−１１／コンブレタスタチンの逐次的組合せは、結腸腺癌に対して相乗的に活性であることがわかる。さらに、ＣＰＴ−１１／コンブレタスタチンの組合せは、ＣＰＴ−１１又はコンブレタスタチンのいずれか単独の最も高い非毒性用量よりも低い用量でさらに活性である。
【００４３】
これらの試験は、組合せて使用する場合、化合物の最大効力を得るには、コンブレタスタチン及びＣＰＴ−１１を異なる方法で投与することができることを示している。その結果、本発明は、薬剤の物理的な組合せによって得られる組成物に限定されず、別々に投与ができるものも含まれ、それは、同時又は逐次的であり得る。
【国際公開パンフレット】
2004517821.tif 000010
2004517821.tif 000011
2004517821.tif 000012
2004517821.tif 000013
2004517821.tif 000014
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2004517821.tif 000016
2004517821.tif 000017
2004517821.tif 000018
2004517821.tif 000019
2004517821.tif 000020
2004517821.tif 000021
2004517821.tif 000022
2004517821.tif 000023
2004517821.tif 000024
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004517821.tif 000025
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004517821.tif 000026
【国際調査報告】
2004517821.tif 000027
2004517821.tif 000028
2004517821.tif 000029
2004517821.tif 000030
2004517821.tif 000031