(57)【要約】本発明は、（ａ）生体適合性の有機又は無機バルク材料、及び（ｂ）前記バルク表面の少なくとも一部に共有結合した重合性炭素−炭素二重結合を含むコーティングを含む生物医学的装置に関する。生物医学的装置は放射線感受性であり、例えば、眼科手術における角膜アンレーとして使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）生体適合性の有機又は無機バルク材料、及び
（ｂ）前記バルク表面の少なくとも一部に共有結合した重合性炭素−炭素二重結合を含むコーティング
を含む生物医学的装置。
【請求項２】
眼科用装置、好ましくはコンタクトレンズ、眼内レンズ又は人工角膜である、請求項１記載の生物医学的装置。
【請求項３】
前記生体適合性の有機バルク材料が、ポリシロキサン、ぺルフルオロアルキルポリエーテル、フッ素化ポリ（メタ）アクリレート、ポリアルキル（メタ）アクリレート及びフッ素化ポリオレフィンからなる群より選択される、請求項１又は２記載の生物医学的装置。
【請求項４】
ステップ（ｂ）の前記コーティングが、前記医学的装置の表面の官能基を、少なくとも一つの重合性炭素−炭素二重結合及び前記装置表面の前記官能基に対して共反応性である少なくとも一つのさらなる官能基を含む多官能性化合物と、共有結合させることによって得られる、請求項１〜３のいずれか１項記載の生物医学的装置。
【請求項５】
前記コーティングが、前記医学的装置の表面の官能基を、共反応性基を含む天然又は合成ポリマーと共有結合させ、少なくとも一つの重合性炭素−炭素二重結合及び少なくとも一つのさらなる官能基を含む多官能性化合物を前記天然又は合成ポリマーに共有結合させることによって得られる、請求項１〜３のいずれか１項記載の生物医学的装置。
【請求項６】
前記多官能性化合物が、式（１ａ）、（１ｂ）、（１ｃ）、（１ｄ）、（１ｅ）、（１ｆ）、（１ｇ）：
【化１】
2004525686.tif 000004
（式中、
Ｒ1は、水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル又はハロゲンであり、
Ｒ2は、水素、非置換であるか、ヒドロキシ置換されているＣ1〜Ｃ6アルキル又はフェニルであり、
Ｒ3及びＲ3′は、それぞれが、Ｃ原子２〜６個を有するエチレン性不飽和基であるか、一緒になって、二価の基−Ｃ（Ｒ4）＝Ｃ（Ｒ4′）−（Ｒ4及びＲ4′は、互いに独立して、水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル又はハロゲンである）を形成し、
（Ａｌｋ*）はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり、（Ａｌｋ**）はＣ2〜Ｃ12アルキレンであり、
Ｒ5は、置換されていてもよい二価の有機基であり、
Ｒ6は、水素、メチル又はフェニルであり、
ｓ及びｔは、互いに独立して、整数０又は１であり、
Ｘ1及びＸ2は、互いに独立して、Ｏ、ＮＨ又はＮ−Ｃ1〜Ｃ4アルキルであり、
Ｒ7はカルボキシ誘導体である）
の化合物からなる群より選択される、請求項４又は５記載の生物医学的装置。
【請求項７】
前記多官能性化合物が式（１ａ）又は（１ｂ）の化合物である、請求項６記載の生物医学的装置。
【請求項８】
前記天然又は合成ポリマーが糖タンパク質、好ましくはコラーゲンである、請求項５〜７のいずれか記載の生物医学的装置。
【請求項９】
（ａ）官能基を表面に含む生物医学的装置を用意するステップと、
（ｂ）少なくとも一つの重合性炭素−炭素二重結合及び前記生物医学的装置の表面の前記官能基に対して共反応性である少なくとも一つのさらなる官能基を含む多官能性化合物を共有結合させるステップと
を含む、生物医学的装置のコーティング方法。
【請求項１０】
（ａ）官能基を表面に含む生物医学的装置を用意するステップと、
（ｂ）前記医学的装置の表面の官能基を、共反応性基を含む天然又は合成ポリマーと共有結合させるステップと、
（ｃ）少なくとも一つの重合性炭素−炭素二重結合及び前記天然又は合成ポリマーの前記反応性基に対して共反応性である少なくとも一つのさらなる官能基を含む多官能性化合物を共有結合させるステップと
を含む、生物医学的装置のコーティング方法。
【請求項１１】
前記多官能性化合物が、請求項６記載の式（１ａ）〜（１ｇ）の化合物である、請求項９又は１０記載の生物医学的装置のコーティング方法。
【請求項１２】
前記多官能性化合物が、請求項６記載の式（１ａ）又は（１ｂ）の化合物である、請求項９又は１０記載の生物医学的装置のコーティング方法。
【請求項１３】
角膜に埋め込むための眼内レンズとしての、請求項１〜８のいずれか１項記載の生物医学的装置の使用。
【請求項１４】
眼内レンズを製造するための、請求項９又は１０記載の方法から得ることができる生物医学的装置の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、必要に応じて硬化させることができる接着剤によって組織に固定することができる、すぐにでも使用可の生物医学的装置に関する。特に、光源による照射によって角膜基底膜に固定することができる、すぐにでも使用可の角膜アンレーに関する。
【背景技術】
【０００２】
多くの用途、特に生体材料及び医療分野において、生体材料及び他の材料又は装置を組織に付着させることが望ましい。組織とは、身体（生死を問わず）のいずれかの部分と定義される。組織に直接、接着させることができ、十分な界面結合強度を達成する生物医学的装置は、縫合のような外科的方法の必要性を省くことができるため、魅力的である。有用な用途は、薬物送達装置の表皮への付着、手術のための癒着防止障壁の接着及び合成アンレーの角膜への付着を含む。従来の外科用接着剤は、広い範囲の接着用途には適さないことが多い。現在、軟組織接着剤としてはシアノアクリレート及びフィブリン接着剤が臨床使用されている。しかし、硬化した接着剤の脆性、その生分解産物の潜在的毒性及び硬化時間の制御の欠如がシアノアクリレートの主な欠点である。
【０００３】
装置を組織に結合するための多様な方法が従来技術で開示されている。たとえば、米国特許第５，３５４，３３６号は、レンチクルを角膜表面にシールする方法であって、レンチクルを正しい位置に配置するステップと、重合性コラーゲン組成物をレンチクル及び角膜表面に塗布してレンチクル及び角膜表面上にコラーゲンコーティングを形成するステップと、開始剤の存在でコーティングを重合させ、それにより、レンチクルを角膜表面にシールするステップとを含む方法を記載している。しかし、前記接着剤は、主として重大な取り扱い問題のせいで、満足であるとは立証されていない。たとえば、医師は常に使用の前に接着剤成分を混合しなければならない。ひとたび予備混合が起こると、その接着剤に特有の硬化時間に依存して、接着剤を使用するのに限られた時間しか利用できなくなる。これは、医師に対して時間的圧迫を課す。アンレーを角膜に付着させたのち、余分な接着剤を入念に取り除かなければならず、さもないと、接着剤の残渣が生物学的組織の正常な機能を妨げるおそれがある。公知の接着剤のさらなる欠点は、たとえば、不十分な機械的安定性及び接着期間に関するものである。これら及び他の欠点を考慮すると、「オン・デマンド硬化」生物医学的装置が要望されていることは明かである。
【０００４】
驚くことに今、適当な生体適合性バルク材料を含む生物医学的装置、特に角膜アンレーが、前記バルク材料の表面に共有結合した特定の重合性炭素−炭素二重結合を含むならば、それらを好都合にも生体組織に付着させることができることがわかった。
したがって、本発明は、一つの態様で、
（ａ）生体適合性有機バルク材料、及び
（ｂ）バルク表面の少なくとも一部に共有結合した重合性炭素−炭素二重結合を含むコーティング
を含む生物医学的装置に関する。
【０００５】
本発明の好ましい実施態様は、以下に概説する方法によって得ることができる生物医学的装置に関する。
【０００６】
好ましい方法は、
（ａ１）官能基を表面に含む生物医学的装置を用意するステップと、
（ｂ１）少なくとも一つの重合性炭素−炭素二重結合及び生物医学的装置の表面の官能基に対して共反応性である少なくとも一つのさらなる官能基を含む多官能性化合物を、共有結合させるステップと
を含む。
【０００７】
特に好ましい方法は、
（ａ１）官能基を表面に含む生物医学的装置を用意するステップと、
（ｂ２）医学的装置の表面の官能基を、共反応性基を含む天然又は合成ポリマーと共有結合させるステップと、
（ｂ３）少なくとも一つの重合性炭素−炭素二重結合及び前記天然又は合成ポリマーの反応性基に対して共反応性である少なくとも一つのさらなる官能基を含む多官能性化合物を、共有結合させるステップと
を含む。
【０００８】
本発明の方法にしたがってコーティングすることができるバルク材料の例は、天然又は合成の有機ポリマー、又は前記材料の積層体、複合体若しくはブレンドである。ポリマーのいくつかの例は、重付加及び重縮合ポリマー（ポリウレタン、エポキシ樹脂、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミド、ポリカーボネート及びポリイミド）、ビニルポリマー（ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリアクリルアミド及びそれらのハロゲン化誘導体、ポリ酢酸ビニル並びにポリアクリロニトリル）、エラストマー（シリコーン、ポリブタジエン及びポリイソプレン）又は変性若しくは非変性バイオポリマー（コラーゲン、セルロース、キトサンなど）である。
【０００９】
バルク材料のもう一つの好ましい群は、生物医学的装置、たとえばコンタクトレンズ、眼内レンズ又は人工角膜の製造に従来から使用されているものであり、本質的に親水性ではないものである。そのような材料は当業者に公知であり、たとえば、ポリシロキサン、ペルフルオロポリエーテル、フッ素化ポリ（メタ）アクリレート若しくはたとえば他の重合性カルボン酸、ポリアルキル（メタ）アクリレート若しくは他の重合性カルボン酸から誘導される同等なアルキルエステルポリマーから誘導される同等なフッ素化ポリマー、又はフッ素化ポリオレフィン、たとえばフッ素化エチレンプロピレン、又は好ましくは特定のジオキソール（たとえばペルフルオロ−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソール）と組み合わされたテトラフルオロエチレン、を含むことができる。適当なバルク材料の例は、たとえばLotrafilcon  A、Neofocon、Pasifocon、Telefocon、Fluorsilfocon、Paflufocon、Silafocon、Elastofilcon、Fluorofocon又はTeflon  AF材料、たとえば、ペルフルオロ−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソール約６３〜７３モル％とテトラフルオロエチレン約３７〜２７モル％とのコポリマーであるTeflon  AF1600、若しくはペルフルオロ−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソール約８０〜９０モル％とテトラフルオロエチレン約２０〜１０モル％とのコポリマーであるTeflon  AF2400である。
【００１０】
生体適合性ポリマーのもう一つの好ましい群は、生物医学的装置、たとえばコンタクトレンズの製造に従来から使用されているものであり、親水性基、たとえばカルボキシ、カルバモイル、スルフェート、スルホネート、ホスフェート、アミン、アンモニウム又はヒドロキシ基が材料中に元から存在するため、本質的に親水性であるものである。このような材料は当業者に公知であり、たとえば、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ポリヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリルアミド、ポリ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ポリビニルアルコール、たとえば、群ヒドロキシエチルアクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート、Ｎ−ビニルピロリドン、アクリル酸、メタクリル酸、アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、ビニルアルコール、酢酸ビニルなどからの２種以上のモノマーからのコポリマー、ポリアルキレングリコール、たとえばポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール又はポリエチレン／ポリプロピレングリコールブロックコポリマーを含む。典型的な例は、たとえばPolymacon、Tefilcon、Methafilcon、Deltafilcon、Bufilcon、Phemfilcon、Ocufilcon、Focofilcon、Etafilcon、Hefilcon、Vifilcon、Tetrafilcon、Perfilcon、Droxifilcon、Dimefilcon、Isofilcon、Mafilcon、Nelfilcon又はAtlafilconである。
【００１１】
バルク材料のさらに好ましい群は、たとえば、ＷＯ９７／３５９０６又はＷＯ００／１５６８６に記載されている、湿潤性及び細胞増殖能力を改善させた多孔質ポリマーである。
【００１２】
バルク材料の表面は、元から官能基を含むこともあるし、たとえばプラズマ蒸着によって共有結合した官能基を付けられることもある。プラズマ蒸着によって表面をコーティングする方法は当業者には周知であり、たとえばＷＯ９８／５２６２０及びＷＯ００／２９５４８に記載されている。プラズマ表面処理によってバルク材料の表面に導入される反応性基の典型的な例は、アルデヒド基、アミノ基、ヒドロキシ基、カルボキシ基、カルボニル基、スルホン酸基、塩化スルホニル基及びアミノ又はヒドロキシ基によって置き換えることができる基、たとえばハロ基を含む。アルデヒド基、チオール基、アミノ基、ヒドロキシ基及びカルボキシ基が好ましい。
【００１３】
ステップ（ｂ２）で使用される天然又は合成ポリマーの例は、細胞接着糖タンパク質、たとえばコラーゲン（各種）、フィブロネクチン、ビトロネクチン、ラミニン、ポリ（エチルイミン）、アミノデキストラン、ＰＡＭＡＭデンドリマー、ポリ（アリルアミン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（アクリル酸）及びポリ（メタクリル酸）である。コラーゲン及びコラーゲン様のタンパク質が好ましい。下にあるバルク材料に共有結合したプラズマポリマーへの細胞接着糖タンパク質の結合は公知であり、たとえばＷＯ００／２９５４８に記載されている。
【００１４】
生物医学的装置の表面に共有結合した官能基と結合されるか、天然又は合成ポリマーに共有結合される、少なくとも一つの重合性炭素−炭素二重結合を含む多官能性化合物は、たとえば、式（１ａ）、（１ｂ）、（１ｃ）、（１ｄ）、（１ｅ）、（１ｆ）、（１ｇ）：
【００１５】
【化２】
2004525686.tif 000002
【００１６】
（式中、Ｒ1は、水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル又はハロゲンであり、
Ｒ2は、水素、非置換であるか、ヒドロキシ置換されているＣ1〜Ｃ6アルキル又はフェニルであり、
Ｒ3及びＲ3′は、それぞれが、Ｃ原子２〜６個を有するエチレン性不飽和基であるか、一緒になって、二価の基−Ｃ（Ｒ4）＝Ｃ（Ｒ4′）−（Ｒ4及びＲ4′は、互いに独立して、水素、Ｃ1〜Ｃ4アルキル又はハロゲンである）を形成し、
（Ａｌｋ*）はＣ1〜Ｃ6アルキレンであり、（Ａｌｋ**）はＣ2〜Ｃ12アルキレンであり、
Ｒ5は、たとえば１個以上のアクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、メタクリルアミド、ビニル又はスチリル官能基によって置換されていてもよい二価の有機基であり、
Ｒ6は、水素、メチル又はフェニルであり、
ｓ及びｔは、互いに独立して、整数０又は１であり、
Ｘ1及びＸ2は、互いに独立して、Ｏ、ＮＨ又はＮ−Ｃ1〜Ｃ4アルキルであり、
Ｒ7は、カルボキシ誘導体である）の化合物である。
【００１７】
以下の好ましいものが、式（１ａ）〜（１ｇ）に含まれる変数に当てはまる。
Ｒ1は、好ましくは水素又はＣ1〜Ｃ4アルキル、特に水素又はメチルである。
Ｒ2は、好ましくは水素又はヒドロキシ−Ｃ1〜Ｃ4アルキル、特に水素又はβ−ヒドロキシエチルである。
Ｒ3及びＲ3′は、好ましくは、それぞれがビニル又は１−メチルビニルであるか、一緒になって、基−Ｃ（Ｒ4）＝Ｃ（Ｒ4′）−（Ｒ4及びＲ4′は、互いに独立して、水素又はメチルである）を形成する。
（Ａｌｋ*）は、好ましくはメチレン、エチレン又は１，１−ジメチル−メチレン、特に基−ＣＨ2−又は−Ｃ（ＣＨ3）2−である。
（Ａｌｋ**）は、好ましくはＣ2〜Ｃ4アルキレン、特に１，２−エチレンである。
Ｘは、好ましくはＮＨ又は特にＯである。
【００１８】
二価の有機基Ｒ5の例は、たとえば、場合によっては分岐鎖状のＣ1〜Ｃ12アルキレン、デンドリマー又は星型ポリマーの基、ポリエチレングリコールの基、ポリビニルアルコール、たとえばＷＯ９６／２４０７５に記載されている重合性ペンダント基を有するポリビニルアルコールの基又はM.  Johansson及びA.  HultによってJournal  of  Coatings  Technology,  67,  No.  849,  35(1995)に記載されているハイパーブランチポリエステル樹脂の基である。
【００１９】
Ｒ6は、好ましくは水素又はメチルである。
【００２０】
適当なカルボキシ誘導体Ｒ7の例は、酸ハロゲン化物、たとえば−ＣＯＣｌ若しくは−ＣＯＢｒ又はエステル若しくはアミド、好ましくはそれらの活性化誘導体である。
【００２１】
活性化エステル又はアミドとしてのＲ7は、たとえば、式（２ａ）、（２ｂ）、（２ｃ）、（２ｄ）、（２ｅ）、（２ｆ）、（２ｇ）、（２ｈ）、（２ｉ）：
【００２２】
【化３】
2004525686.tif 000003
【００２３】
の基である。
【００２４】
好ましい活性化カルボキシ誘導体は、式（２ａ）、（２ｄ）又は特に式（２ｈ）の誘導体である。
【００２５】
反応性基を有する好ましいビニルモノマーは、５，５−ジメチル−２−ビニル−オキサゾリン−４−オン、２−イソシアナトエチルメタクリレート（ＩＥＭ）、アクリル酸、メタクリル酸、アクリル酸無水物、無水マレイン酸、２−ヒドロキシエチルアクリレート（ＨＥＡ）、２−ヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ）、グリシジルアクリレート若しくはグリシジルメタクリレート、ポリエチレングリコール（ジメタクリレート）、ポリエチレングリコール（ジアクリレート）であり、特に好ましいものは、５，５−ジメチル−２−ビニル−オキサゾリン−４−オン及び２−イソシアナトエチルメタクリレート（ＩＥＭ）である。
【００２６】
式（１ａ）〜（１ｆ）の二官能性化合物を、共反応性官能基を付されたバルク材料表面又は共反応性官能基を含む天然若しくは合成ポリマーに結合させる方法は、化合物（１ａ）〜（１ｅ）中及び前記バルク材料又は天然若しくは合成ポリマーの表面に存在する反応性基の性質に依存する。
【００２７】
式（１ａ）の化合物を、バルク材料の表面又はアミノ基を含有する天然若しくは合成ポリマーに結合させる場合、反応は、水、適当な有機溶媒又はそれらの混合物中、たとえば水性媒体又は非プロトン性極性溶媒、たとえばＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ジオキサン、アセトニトリルなどの中、室温又は高温で、たとえば約２０〜７５℃で好都合に実施することができる。
式（１ａ）の化合物を、バルク材料の表面又はヒドロキシ基を含有する天然若しくは合成ポリマーに結合させる場合、非プロトン性極性溶媒が好ましい。
【００２８】
式（１ｂ）の化合物を、バルク材料の表面又はアミノ若しくはヒドロキシ基を含有する天然若しくは合成ポリマーに結合させる場合、反応は、不活性有機溶媒、たとえばアセトニトリル、場合によりハロゲン化されている炭化水素、たとえば石油エーテル、メチルシクロヘキサン、トルエン、クロロホルム、塩化メチレンなど、又はエーテル、たとえばジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、又はより極性の溶媒、たとえばＤＭＳＯ、ＤＭＡ、Ｎ−メチルピロリドン又は低級アルコール若しくは水の中、０〜１００℃、好ましくは０〜５０℃、特に好ましくは室温で、場合によっては触媒、たとえば第三級アミン、たとえばトリエチルアミン若しくはトリ−ｎ−ブチルアミン、１，４−ジアザビシクロオクタン又はスズ化合物、たとえばジブチルスズジラウレート若しくはスズジオクタノエートの存在下で実施することができる。加えて、イソシアナト基とアミノ基との反応はまた、水性溶液中、触媒の非存在下で実施することもできる。上記反応を不活性雰囲気下、たとえば窒素又はアルゴン雰囲気下で実施することが有利である。
【００２９】
式（１ｃ）のカルボキシ化合物を、バルク材料の表面又はアミノ、チオール若しくはヒドロキシ基を含有する天然若しくは合成ポリマー又は表面のカルボキシ基を有する式（１ｃ）のヒドロキシ化合物に結合させる場合、反応は、エステル又はアミド形成に通例である条件の下で実施することができる。活性化剤、たとえばＮ−エチル−Ｎ′−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）又はＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＤＣ）の存在下でエステル化又はアミド化反応を実施することが好ましい。
【００３０】
式（１ｄ）の化合物を、バルク材料の表面又はアミノ、チオール若しくはヒドロキシ基を含有する天然若しくは合成ポリマーに結合させる場合、反応は、有機の教本に記載されているように、たとえば非プロトン性溶媒、たとえば上述した非プロトン性溶媒の１種の中、室温〜約１００℃の温度で実施することができる。
【００３１】
式（１ｅ）の化合物を、バルク材料の表面又はアミノ、チオール若しくはヒドロキシ基を含有する天然若しくは合成ポリマーに結合させる場合、反応は、非プロトン性媒体中、塩基触媒、たとえばＡｌ（Ｏ−Ｃ1〜Ｃ6アルキル）3又はＴｉ（Ｏ−Ｃ1〜Ｃ6アルキル）4を使用して、室温又は高温で、たとえば約２０〜１００℃で実施することができる。
【００３２】
式（１ｆ）の化合物を、バルク材料の表面又はアミノ、チオール若しくはヒドロキシ基を含有する天然若しくは合成ポリマーに結合させる場合、たとえば、非プロトン性又はプロトン性媒体中、室温で、たとえば約２０〜１００℃でマイケル付加反応を実施することができる。
【００３３】
式（１ｇ）の化合物を、バルク材料の表面又はアミノ、チオール若しくはヒドロキシ基を含有する天然若しくは合成ポリマーに結合させる場合、反応は、非プロトン性媒体中、室温又は高温で、たとえば約２０〜１００℃で実施することができる。
【００３４】
本発明の生物医学的装置、たとえば角膜アンレーの角膜への固定は、たとえば、照射、特にＵＶ又は可視光の照射によって開始させることができる。好ましくは、たとえば角膜の上皮細胞層を掻き取りによって除去することにより、アンレーの付着に備えて角膜を下処理しておく。
【００３５】
場合によっては、装置を付着させる組織及び装置そのものを開始剤又は触媒で処理して、組織表面に対する装置の付着を促進してもよい。開始剤は、装置又は組織に対して有害な作用を及ぼさないいかなる濃度で使用してもよい。「開始剤」とは、本明細書では、適切な条件下、モノマーの重合をもたらす組成物であるという広い意味で使用する。光開始剤の使用が好ましい。生体適合性であり、特定の表面に付着するものならば、当該技術で見られる光開始剤のいずれも適当である。例は、重合を開始するために使用することができる光酸化性及び光還元性染料、たとえばアクリジン染料、たとえばacriblarine、チアジン染料、たとえばチオニン、キサンチン染料、たとえばローズベンガル、及びフェナジン染料、たとえばメチレンブルーである。他の開始剤は、ショウノウキノン及びアセトフェノン誘導体を含む。生物学的使用に好ましい光開始剤は、大部分の組織に対して強く吸収し、効率的な光開始剤であるEosin  Yである。
【００３６】
光開始におけるラジカル生成剤又は共開始剤として当該技術で典型的に使用される化合物のいずれを使用してもよい。これらは、共触媒又は共開始剤、たとえばアミン、たとえばトリエタノールアミン並びに他のトリアルキルアミン及びトリアルキロールアミン、硫黄化合物、複素環式化合物、たとえばイミダゾール、エノレート、有機金属化合物並びに他の化合物、たとえばＮ−フェニルグリシンを含む。
【００３７】
一般に、アンレーは、角膜組織に密接させて配置された後、照射を受ける。照射に適した光源は、当業者に周知であり、たとえば、水銀灯、高圧水銀灯、キセノン灯、カーボンアーク灯又は陽光を含む。増感剤を使用して照射波長を移動させてもよい。加えて、適当なフィルタを使用して照射を特定の波長範囲に限定してもよい。好ましくは、式（１）の基を含む化合物を事前に塗布しておいたアンレー表面に、波長≧３００nm、好ましくは３５０〜４００nmの光を照射する。照射期間は重要ではないが、普通は３０分まで、好ましくは１０秒〜１０分、より好ましくは１５秒〜５分、特に好ましくは３０秒〜１．５分である。
【００３８】
本発明の生物医学的装置は、実施しやすく、装用者の視覚に影響せず、安全である、角膜アンレーを角膜に埋め込むための新規な方法を提供する。特に、術後、正常な生物学的機能が回復するのに十分な期間持続する、角膜へのインプラントの機械的に安定な固定が得られる。これには、上皮細胞が回復し、インプラント上に成長し、ひいてはインプラントを永続的に固定することを可能にする機会を含み得る。このアンレーの使用は、たとえば、接着剤成分を予備混合すること又は接着剤成分に特有の硬化時間に起因する医師に対する時間的圧迫を伴わないため、このアンレーは非常に取り扱いやすい。加えて、アンレーを角膜に固定した後の余分な接着剤のやっかいな除去が不要であり、接着剤残渣による過剰成長を抑止するという以前の問題は存在しない。そのうえ、本発明のアンレーは、長期間、たとえば表面を保護するカバーフォイル付きのパッチの形態で好都合に貯蔵することができる。そして、アンレーは、カバーフォイルを表面から剥がすだけですぐにでも使用することができる。上述した利点のすべては当然、コンタクトレンズだけでなく、先に述べたような本発明の他の生物医学的成形物にも当てはまる。
【００３９】
以下の非限定的な例によって本発明をさらに説明する。断りない限り、部はすべて重量部である。温度は摂氏度である。
【００４０】
例Ａ−１：コラーゲンに対して２−ビニル−５，５−ジメチル−オキサゾリン−４−オンを使用するレンチクルの官能化
両面に薄いコラーゲンコーティングを有するレンチクル６個をＰＢＳ（リン酸緩衝液）からメタノール中に平衡させた。メタノールを、アセトニトリル２５％、５０％、７５％及び１００％の段階的交換によってアセトニトリルに交換した。次に、レンチクルを１個ずつ室温で穏やかに振とうしながらアセトニトリル（８ml）中２−ビニル−５，５−ジメチル−オキサゾリン−４−オンの１０％（ｖ／ｖ）溶液で４時間処理した。２−ビニル−５，５−ジメチル−オキサゾリン−４−オン溶液を除去し、アセトニトリルで交換した。レンチクルを新鮮なアセトニトリルとで一夜振とうした。翌朝、レンチクルを再び新鮮なアセトニトリルとで８時間振とうした。レンチクルを脱イオン水２５％、５０％、７５％及び１００％の段階的交換に通した。
【００４１】
例Ａ−２：コラーゲンに対してポリエチレングリコール（ジアクリレート）［ＰＥＧ（ジアクリレート）］（Ｍw７００）を使用するレンチクルの官能化
両面に薄いコラーゲンコーティングを有するレンチクル６個をＰＢＳ（リン酸緩衝液）から水／メタノール（５０：５０）中に平衡させた。次に、レンチクルを１個ずつ室温で穏やかに振とうしながら水／メタノール（５０：５０）（８ml）中ＰＥＧ（ジアクリレート）（Ｍw７００）の１０％（ｖ／ｖ）溶液で２４時間処理した。ＰＥＧ（ジアクリレート）溶液を除去し、メタノールで交換した。レンチクルを新鮮なメタノールとで一夜振とうした。レンチクルを脱イオン水２５％、５０％、７５％及び１００％の段階的交換に通した。
【００４２】
例Ｂ−１：アズラクトン変性レンチクルのインサイチュ硬化
殺処分したばかりのウシの眼から上皮を創縁切除した。脱イオン水中Eosin  Y（Aldrich）の１mg/ml溶液を調製し、遮光しておいた。創縁切除したウシ角膜をEosin  Y溶液（約１〜３ml）で１分間処理した。例Ａ−１で調製したばかりの変性レンチクルをEosin  Y溶液で１分間処理した。余分な溶液をけば立ちのないティッシュペーパへの吸着によって除去した。レンチクルを眼に載せ、レンチクルの上面をなめらかな物体でしっかり拭くことにより、レンチクルの下の余分な流体又は気泡をやさしく除去した。キセノン放電灯からの光（１ワットよりも大）を１cmの距離で１分間眼に照射した。照射後、水の噴射によってレンチクルを外すことはできなかった。縁はしっかり角膜に結合し、角膜を突いたときの浮き上がりにも抵抗した。ピンセットでレンチクルを取り外そうとすると、レンチクルが破れて、角膜への接着力がアンレーの結合力よりも大きいことを示した。
【００４３】
例Ｂ−２：ＰＥＧ（ジアクリレート）変性レンチクルのインサイチュ硬化
殺処分したばかりのウシの眼から上皮を創縁切除した。脱イオン水中Eosin  Y（Aldrich）の１mg/ml溶液を調製し、遮光しておいた。創縁切除したウシ角膜をEosin  Y溶液（約１〜３ml）で１分間処理した。例Ａ−２で調製したばかりの変性レンチクルをEosin  Y溶液で１分間処理した。余分な溶液をけば立ちのないティッシュペーパへの吸着によって除去した。レンチクルを眼に載せ、レンチクルの上面をなめらかな物体でしっかり拭くことにより、レンチクルの下の余分な流体又は気泡をやさしく除去した。キセノン放電灯からの光（１ワットよりも大）を１cmの距離で１分間眼に照射した。照射後、水の噴射によってレンチクルを外すことはできなかった。縁はしっかり角膜に結合し、角膜を突いたときの浮き上がりにも抵抗した。ピンセットでレンチクルを取り外そうとすると、レンチクルが破れて、角膜への接着力がアンレーの結合力よりも大きいことを示した。
【００４４】
例Ｂ−３：変性レンチクルの細胞毒性試験
例Ｂ−１及びＢ−２のＰＥＧ（ジアクリレート）変性レンチクル及びアズラクトン変性レンチクルを細胞毒性に関して試験した。両レンチクルとも、直接接触検定及び細胞増殖阻害検定に合格した。
【００４５】
例Ｂ−４：変性レンチクルの器官培養試験
器官培養の一般的手順
Foremanらによってはじめて開発された角膜器官培養系［D.  M.  Foreman,  S.  Pancholi,  J.  Jarvis-Evans,  D.  McLeod,  M.  E.  Boulton,  A  simple  organ  culture  model  for  assessing  the  effects  of  growth  factors  on  corneal  re-epithelialization,  Exp.  Eye  Res.  62,  555-564(1996)］を改良して、上皮形成を要する眼科用途に向けられたポリマー及び接着剤配合物を評価した。角膜器官培養は、殺処分したばかりのウシから摘出した眼を使用し、これを外科的に損傷させたのち、ポリマーレンチクルを、接着剤配合物を用いて、また、接着剤配合物なしで埋め込んだ。損傷させ、埋め込んだ後、眼球から角膜を強膜の縁５mm分とともに切除し、培養期間中に支持を提供し、角膜湾曲を維持する個々の予備成形されたアガープラグに直接移した。アガープラグは、蒸留水中、添加物（以下参照）を含む二倍強度（double strength）の無血清培地と２％寒天（Bacto-Agar、Difco、オーストラリア）との１：１混合物を使用して調製した。これを、事前に切除したウシ角膜を裏返すことによって形成した型の中でゲル化させた。損傷した角膜を、そのアガープラグに載せたまま、培地を強膜の縁の高さにするのに十分である、完全な無血清培地５mlを含む個々のペトリ皿に載せた。終始使用した培地は、Ｌ−グルタミン（ICN  Biomedicals、米）２０mMをペニシリンＧ１２０ug/ml、硫酸ストレプトマイシン２００ug/ml、アンホテリシンＢ５ug/ml及びＩＴＳプレミックス（Collaborative  Biomedical  Products、Becton  Dickinson、米）とともにインスリン及びトランスフェリン５μg/ml及び亜セレン酸５ng/mlの最終濃度まで含有するダルベッコ変性イーグル培地であった。試料を、５％ＣＯ2の空気中３７℃で８日間、１日１回培地交換し、角膜表面を洗浄して、落屑する上皮細胞を眼の前面から除去しながらインキュベートした。レンチクル面上の上皮の成長をステレオマイクロスコープによって毎日観察した。角膜を１０％中性緩衝ホルマリン中で８日間固定し、パラフィン組織学的検査を使用して、移動する上皮の構造及び形態並びに下にある間質組織の状態を検査した。この系は、インビボ創傷治癒過程をモデル化するということが示され、特定の眼科用途の場合に候補ポリマー、表面処理及び接着剤の評価に有用性をもつ。
【００４６】
アズラクトン変性レンチクルの器官培養試験
上記手法により、器官培養物で表層角膜切除術及びアンレー（創縁切除）外科モデルを使用してアズラクトン変性レンチクル（例Ｂ−１のとおりに調製）を埋め込んだ。創傷床を脱イオン水中Eosin  Yの溶液（１mg/ml）で２分間処理した後、レンチクルを創傷床に配置した。Prolite光源（強さ７８mW/cm2のDentsply  Model  301）からの光を１cmの距離で２分間眼に照射した。
アンレーモデルで創傷床に対して硬化させた臨床的にアズラクトン変性したレンチクルは、６．５日目までに上皮で完全に被包された。これらの試料の一つに対する組織学的検査は、基底細胞層における分化のいくらかの証拠をもって、１〜２層の上皮細胞からなる角膜上皮によるレンチクルの完全な被包を示した。接着剤に対する細胞毒性の証拠はない。大部分の場所で、レンチクルは間質表面に固着しており、レンチクルの後面と間質創傷床との間の接着を示した。
【００４７】
アンレーモデルで創傷床に対して硬化させた臨床的にアズラクトン変性したレンチクルは、６日目までに上皮で完全に被包された。これらの試料の一つに対する組織学的検査は、基底細胞層における分化のいくらかの証拠をもって、３〜４層の上皮細胞からなる角膜上皮によるレンチクルの完全な被包を示した。接着剤に対する細胞毒性の証拠はない。大部分の場所で、レンチクルは間質表面に固着しており、レンチクルの後面と間質創傷床との間の接着を示した。
【００４８】
ＰＥＧ（ジアクリレート）変性レンチクルの器官培養試験
上記手法により、器官培養物で表層角膜切除術及びアンレー（創縁切除）外科モデルを使用して、ＰＥＧ（ジアクリレート）変性レンチクル（例Ｂ−２のとおりに調製）を埋め込んだ。創傷床を脱イオン水中Eosin  Yの溶液（１mg/ml）で２分間処理した後、レンチ
クルを創傷床に配置した。Prolite光源（強さ７８mW/cm2のDentsply  Model  301）からの光を１cmの距離で２分間眼に照射した。
【００４９】
アンレーモデルで創傷床に対して硬化させた臨床的にＰＥＧ（ジアクリレート）変性したレンチクルは、４〜５日目までに上皮で完全に被包された。組織学的検査は、これらのケースの上皮が、柱状の基底細胞を有する５〜７層の上皮細胞（すなわち、正常に見える上皮）で構成されていることを示した。いずれの場合にもレンチクルの下に上皮細胞はなく、ＰＥＧ（ジアクリレート）がレンチクルと前間質との間の付着を提供することを示した。
【００５０】
表層角膜切除創傷床に埋め込まれた臨床的にＰＥＧ（ジアクリレート）変性したレンチクルは、７日目までに上皮で完全に被包された。この試料の組織学的検査は、創傷床上の５層の上皮細胞を示した。組織学的検査は、基底細胞層における分化のいくらかの証拠をもって、上皮が前面に限られ、下にはなく、そして４〜５層の上皮細胞で構成されていることを示した。
【００５１】
ＰＥＧ（ジアクリレート）変性したレンチクルは、器官培養物中で試験されたとき、見かけ細胞毒性を示すことなく、アンレー及び表層角膜切除外科モデルの両方で上皮形成をサポートした。
【００５２】
例Ｂ−５：変性されたレンチクルのインビボ硬化
ケタミン１０〜１５mg/kg体重及びキシラジン１mg/kg体重の筋内注射を使用して、第３期第２相の深さまでネコに麻酔を施した。直径８mmのトレパンを使用して角膜表面の中央を軽くマーキングし、この区域内の角膜上皮をビーバーブレードによって創縁切除して基底膜を露出させた。脱イオン水中Eosin  Y（Aldrich）の１mg/ml溶液を調製し、遮光しておいた。創縁切除したネコ角膜をEosin  Y溶液（約１〜３ml）で１分間処理した。例Ａ−１からの調製したばかりの変性レンチクルをEosin  Y溶液で１分間処理した。余分な溶液をけば立ちのないティッシュペーパへの吸着によって除去した。レンチクルを眼に載せ、レンチクルの上面をなめらかな物体でしっかり拭くことにより、レンチクルの下の余分な流体又は気泡をやさしく除去した。Prolite光源（強さ７８mW/cm2のDentsply  Model  301）からの光を１cmの距離で２分間眼に照射した。照射後、水の噴射によってレンチクルを外すことはできなかった。縁はしっかり角膜に結合し、角膜を突いたときの浮き上がりにも抵抗した。レンチクルは、６日を超える間所定位置に保持され、眼は平静であった。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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