(57)【要約】本発明は、ヒト卵母細胞における減数分裂を刺激するために都合よく使用され得る、一般式Xで表されるステロイド化合物に関し、ここで前記ステロイドは、スペーサーAを通してステロイド骨格のC17に結合されるアミノ窒素により特に特徴づけられる。【化１】2004534011.tif 000016
2004534011.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式X：
【化１】
2004534011.tif 000010
［式中、化合物X中の下記成分XA：
【化２】
2004534011.tif 000011
において、C5とC6との間、C6とC7との間、C7とC8との間、C8とC9との間、C8とC14との間、及びC14とC15との間の個々の結合は、単結合又は二重結合であり、それらの結合の少なくと１つは二重結合であり、そして個々の炭素原子C5, C6, C7, C8, C9, C14及びC15は、単結合により、又は多くとも二重結合により、個々の隣接するC原始に結合され、そして
C3R3は、下記の通りであり：
ａ）C3＝O又は
ｂ）C3−OR3’、ここでR3’は、水素、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキル、及びC(O)成分を通してCH−Oに結合されるC3(O)−R3’’を含んで成る群から選択され、ここでR3’’は、
ｉ）置換されているか又は置換されていない、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキル、
ii) 置換されているか又は置換されていない、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10フルオロアルキル、
iii) 置換されていないか又は置換されているC1−C10アリール、
iv) 置換されていないか又は置換されているC1−C10ヘテロアリール、
v) 置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキルオキシ及び
vi) 置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキルアミノから成る群から選択され、又は
ｃ）C3H−SO2−R3’’又はC3＝NOR3’’、ここでR3’’は上記と同じ意味を有し、又は
ｄ）C3H−O−R3’’’、ここでR3’’’は、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C10アルキレンであり、そしてステロイド骨格のC原子又はO原子と共に、環状エーテルを形成し、又は
ｅ）C3原子を有する環状環構造体、ここでR3は置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C10アルキレンであり、又は
ｆ）C3H−Hal、ここでHalはF、Cl、Br又はIであり、そして
R4、R4’及びR20は独立して、水素、及び置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキルから成る群から選択され、そして
R23及びR23’は独立して、
ａ）水素、
ｂ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルキル、
ｃ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルケニル
ｄ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルキル、アルキル炭素原子の少なくとも１つは、O, N及びSのいずれかにより置換され、
ｅ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルケニル、アルケニル炭素原子の少なくとも１つは、O, N及びSのいずれかにより置換され、及び
ｆ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC6−C10アリールを含んで成る群から選択され、を含んで成る群から選択され、又は
R23及びR23’は一緒に、
ａ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C7アルキレン基、又は
ｂ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C7アルキレン基（ここで、アルキレン炭素原子の少なくとも１つがO, N及びSのいずれかにより置換される）を形成し、そして
Aは、置換されていないか又は置換されているメチレン又はエチレン基である］で表されるステロイド化合物、但し次の化合物を除く：（20R）−20−メチル−23−ジメチルアミノ−５α−プレグナ−８, 14−ジエン−３β−オール及び（20R）−20−メチル−23−ジメチルアミノ−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オール、23−アザ−ザイモステロール、22−アミノ−23, 24−ビスノルコール−５−エン−３β−オール、23−アミノ−24−ノルコール−５−エン−３β−オール。
【請求項２】
少なくとも２つの二重結合、好ましくは２つの共役二重結合が、前記ステロイド骨格に存在する請求項１記載のステロイド化合物。
【請求項３】
前記成分XAが、下記一般式：
【化３】
2004534011.tif 000012
の１つを有する請求項１又は２記載のステロイド化合物。
【請求項４】
C3R3が、CH−OH、C3H−O−C(O)−R3’’、モノカルボン酸、ジカルボン酸又は無機酸のエステル基、(CH2)n−COOH（ここで、ｎ＝１，２，３，４，５又は６）、及びフルオロメチルを含んで成る群から選択された成分である請求項１〜３のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項５】
R3’が、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、ブタノイル、ベンゾイル、ニコチニル、イソニコチニル、ヘミスクシノイル及びヘミグルタロイルである請求項１〜４のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項６】
R4及びR4’は独立して、水素、メチル、及びハロゲン、ヒドロキシル、アルキルオキシ又はアリールオキシにより置換されたC1−C4アルキルを含んで成る群から選択される請求項１〜５のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項７】
R20が水素又はメチルである請求項１〜６のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項８】
R23及びR23’が独立して、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキル、及びC1−C4アルコキシを含んで成る群から選択された少なくとも１つの基により置換されている、C1−C4アルキル又はC2−C4アルケニルである請求項１〜７のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項９】
R23及びR23’は、アミノ窒素と共に、ピペリジン−１−イル、モルホリン−４−イル、ピペラジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピロール−１−イル、インドール−１−イル、ピラゾール−１−イル、イミダゾール−１−イル、チアゾリジン−１−イル及びオキサゾリジン−３−イル環構造体及びそれらの誘導体を含んで成る群から選択された、窒素含有複素環式環構造体を形成する請求項１〜８のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項１０】
前記複素環式環構造体が、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルキルシクロアルキル、アリール、アルキルアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルシクロアルキルオキシ、アルキルオキシシクロアルキル、アルキルアリールオキシ、アルキルオキシアリール、ハロゲン及びアシルを含んで成る群から選択された基により置換されている請求項９記載のステロイド化合物。
【請求項１１】
Aがメチレン又はエチレンである請求項１〜10のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項１２】
請求項１〜11のいずれか１項記載のステロイド化合物、すなわち（20S）−４，４−ジメチル−20−ヒドロキシメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール及び（20S）−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール−20−カルバルデヒドの調製における中間体化合物。
【請求項１３】
下記一般式X’：
【化４】
2004534011.tif 000013
［式中、下記成分XA’：
【化５】
2004534011.tif 000014
において、C6とC7との間、C7とC8との間、C8とC9との間、C8とC14との間、及びC14とC15との間との間の個々の結合は、単結合又は二重結合であり、それらの結合の少なくと１つは二重結合であり、そして個々の炭素原子C5, C6, C7, C8, C9, C14及びC15は、単結合により、又は多くとも二重結合により、個々の隣接するC原始に結合され、そして
CR3は、下記の通りであり：
ａ）C＝O又は
ｂ）CH−OR3’、ここでR3’は、水素、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキル、及びC(O)成分を通してCH−Oに結合されるC(O)−R3’’を含んで成る群から選択され、ここでR3’’は、
ｉ）置換されているか又は置換されていない、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキル、
ii) 置換されているか又は置換されていない、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10フルオロアルキル、
iii) 置換されていないか又は置換されているC1−C10アリール、
iv) 置換されていないか又は置換されているC1−C10ヘテロアリール、
v) 置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキルオキシ及び
vi) 置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキルアミノから成る群から選択され、又は
ｃ）CH−SO2−R3’’又はC＝NOR3’’、ここでR3’’は上記と同じ意味を有し、又は
ｄ）CH−O−R3’’’、ここでR3’’’は、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のアルキレンであり、そしてステロイド骨格のC原子又はO原子と共に、環状エーテルを形成し、又は
ｅ）C3原子を有する環状環構造体、ここでR3は置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C10アルキレンであり、又は
ｆ）CH−Hal、ここでHalはF、Cl、Br又はIであり、そして
R4、R4’及びR20は独立して、水素、及び置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキルから成る群から選択され、そして
R23及びR23’は独立して、水素、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルキル、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルケニル置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルキル、アルキル炭素原子の少なくとも１つは、O, N及びSのいずれかにより置換され、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルケニル、アルケニル炭素原子の少なくとも１つは、O, N及びSのいずれかにより置換され、及び置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC6−C10アリールを含んで成る群から選択され、を含んで成る群から選択され、又は
R23及びR23’は一緒に、
ａ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C7アルキレンスペーサー、又は
ｂ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C7アルキレンスペーサー、ここでアルキレン炭素原子の少なくとも１つがO, N及びSのいずれかにより置換され、を形成し、そして
Aは、単結合又は置換されていないか又は置換されているメチレン又はエチレンスペーサーである］で表されるステロイド化合物を有する請求項１項記載のステロイド化合物。
【請求項１４】
前記成分が、下記一般式XA：
【化６】
2004534011.tif 000015
の１つを有する請求項12記載のステロイド化合物。
【請求項１５】
CR3が、CH−OH又はCH−O−C(O)−R3’’である請求項12又は13記載のステロイド化合物。
【請求項１６】
R3が、モノカルボン酸、ジカルボン酸又は無機酸のエステル基である請求項12〜14のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項１７】
R3’’が、(CH2)n−COOH（ｎ＝１，２，３，４，５又は６）である請求項15記載のステロイド化合物。
【請求項１８】
R3’が、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、ブタノイル、ベンゾイル、ニコチニル、イソニコチニル、ヘミスクシノイル及びヘミグルタロイルである請求項15又は16記載のステロイド化合物。
【請求項１９】
R3’’がフルオロメチルである請求項14記載のステロイド化合物。
【請求項２０】
R4及びR4’が独立して、水素又はメチルである請求項12〜18のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項２１】
R4及びR4’は独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルオキシ又はアリールオキシにより置換されたC1−C4アルキルである請求項12〜19のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項２２】
R20が水素又はメチルである請求項12〜19のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項２３】
R23及びR23’が独立して、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキル、及びC1−C4アルコキシを含んで成る群から選択された少なくとも１つの基により置換されている、C1−C4アルキル又はC2−C4アルケニルである請求項12〜21のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項２４】
R23及びR23’が、アミノ窒素と共に、ピペリジン−１−イル、モルホリン−４−イル、ピペラジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピリジン−１−イル、キノリン−１−イル、イソキノリン−１−イル、ピリダジン−１−イル、ピリミジン−１−イル,ピラジン−１−イル、ピロール−１−イル、インドール−１−イル、キノキサリン−１−イル、ピラゾール−１−イル、イミダゾール−１−イル、チアゾール−１−イル及びオキサゾール−３−イル環構造体、及び特にピペリジン−１−イル、モルホリン−４−イル、ピペラジン−１−イル及びピロリジン−１−イル、及び置換されたそれらの誘導体を含んで成る群から選択された、窒素含有複素環式環構造体を形成する請求項12〜22のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項２５】
前記環構造体が、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルキルシクロアルキル、アリール、アルキルアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルシクロアルキルオキシ、アルキルオキシシクロアルキル、アルキルアリールオキシ、アルキルオキシアリール、ハロゲン及びアシルを含んで成る群から選択された基により置換される請求項23記載のステロイド化合物。
【請求項２６】
Aがメチレンである請求項12〜25のいずれか１項記載のステロイド化合物。
【請求項２７】
（20S）−20−［（３，３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４，４−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（３,３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールヘミスクシネート；
（20S）−20−［N−（３−メトキシプロピル）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−アミノメチル−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［N,N−ジ−（２−メトキシエチル）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［N−（２,２−ジメチルエチレン）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（N,N−ジメチルアミノ）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−フェニルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−カルボキシエチルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（３−ヒドロキシピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−ベンゾイルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−（ピペリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−チオモルホリニル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−ジメチルアミノピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−ケトピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（３−ケトピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−カルボキシルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（３−カルボキシルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（３,３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４,４−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−ピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−ベンジルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−アセチルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（４−ベンゾイルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［｛４−（２−ピリジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［｛４−（３−ピリジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［｛４−（４−ピリジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［｛４−（２−ピリミジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４,４−ジメチル−５α−プレグナ−Δ8(14)−エン−３β−オールを含んで成る群から選択される請求項１又は12記載のステロイド化合物。
【請求項２８】
少なくとも１つの請求項１〜27のいずれか１項記載の一般式Xのステロイド化合物、及び少なくとも１つの医薬的に許容できる賦形剤を含んで成る医薬組成物。
【請求項２９】
前記一般式Xのステロイド化合物が、有効量で含まれる請求項28記載の医薬組成物。
【請求項３０】
生殖、特に減数分裂を調節するために有用である医薬組成物の調製への請求項１〜27のいずれか１項記載の一般式Xのステロイド化合物の使用。
【請求項３１】
非インビボ使用のためへの請求項30記載の一般式Xのステロイド化合物の使用。
【請求項３２】
避妊薬又は前受精能薬剤の調製のためへの請求項１〜27のいずれか１項記載の一般式Xのステロイド化合物の使用。
【請求項３３】
生殖、特に減数分裂を調節するための方法であって、有効量の少なくとも１つの請求項１〜27のいずれか１項記載の一般式Xのステロイド化合物を、そのような調節の必要な対象に投与することを含んで成る方法。
【請求項３４】
哺乳類中での卵母細胞の成長能力の可能性を改良するための方法であって、前記哺乳類から除去された卵母細胞と、請求項１〜27のいずれか１項記載のステロイド化合物とを接触せしめることを含んで成る方法。
【請求項３５】
R4及びR4’が置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキルである、請求項１〜27のいずれか１項記載の一般式Xのステロイド化合物の調製方法であって、
a. (20S)−20−メチル−プレグナ−８，14−ジエン−３β、21−ジオールから開始し、
b. C21において求核攻撃により置換し、
c. C21において新たな炭素−炭素結合を形成するために、前記C21における求核基をシアニドにより置換し、
d. アルデヒドを得るために、前記形成されたニトリルを還元し、
e. 種々のアミンを形成するために、前記ニトリルを還元的にアミノ化することを含んで成る方法。
【請求項３６】
R4及びR4’が置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキルである、請求項１〜27のいずれか１項記載の一般式Xのステロイド化合物の調製方法であって、
a. （20S）−20−ヒドロキシメチル−プレグナ−４−エン−３−オンから出発し、
b. アルキル化により位置４で２つのアルキル基を導入し、
c. 前記ケト基をヒドロキシ基に還元し、
d. 臭素化/脱臭化水素化によりΔ7二重結合を導入し、
e. 酸の存在下で加熱により、前記ジエンΔ5,7をジエンΔ8,14に異性化し、
f. 前記17−ヒドロキシ基をアルデヒド基に酸化し、そして
g. 前記アルデヒド基を還元的にアミノ化することを含んで成る方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬的活性ステロイド化合物類、それらの化合物を含んで成る医薬組成物、生殖、特に減数分裂を調節するために適切な医薬組成物、避妊薬又は前受精能薬剤の調製のためへのそれらの化合物の使用、生殖、例えば減数分裂を調節するための方法、哺乳類中の卵母細胞の成長能力の可能性を改良するための方法、及び新規ステロイド化合物の調製方法に関する。
【０００２】
減数分析は、生殖に基づく生殖細胞のユニーク且つ究極的な現象である。減数分裂は、２回の減数分裂を包含する。最初の分裂の間、母遺伝子と父遺伝子との間の交換が、染色体対が娘細胞中に分離される前に生じる。それらは、染色体の数の半分（1n）のみ及び2cDNAを含む。第２の減数分裂は、DNA合成を伴なわないで進行する。従って、この分裂は、１cDNAのみを有する一倍体生殖細胞の形成をもたらす。
【０００３】
減数分裂現象は、雄及び雌生殖細胞において類似するが、しかし卵子及び精子を導く、時間スケジュール及び分化工程は、非常に異なる。すべての雄生殖細胞は初期生命において、しばしば生まれる前、第１の減数分裂の前記に入るが、しかしすべては、思春期の後の排卵まで、前記において卵母細胞として抑制される。従って、初期生命から、雌は、卵母細胞群を有し、その群が消耗されるまで、誘発される。雌における減数分裂は、受精の後、完結されず、そして生殖細胞当たりわずか１つの卵子及び２つの発育不全の極体をもたらす。対照的に、わずかな雄生殖細胞が思春期からの減数分裂に入り、そして生涯を通して生殖細胞集団を放す。開始されると、雄細胞における減数分裂は、有意な遅延を伴なわないで進行し、そして４個の精子を生成する。
【０００４】
男性及び女性における減数分裂の開始を調節する機構については、ほとんど知られていない。新しい研究は、小胞プリン、ヒポキサンチン及びアデノシンが卵母細胞における減数分裂阻止を担当することができることを示している［S. M. Downs など., Dev. Biol., 82, 454-458 (1985); J.J. Epply. など., Dev. Biol., 119, 313-321 (1986); S. M. Downs, Mol. Reprod. Dev., 35, 82-94 (1993)］。拡散性減数分裂調節物質の存在は、胎児マウス生殖腺の培養システムにおいて、Byskovなどにより最初に記載された［A. G. Byskovなど., Dev. Biol,. 52, 193-200 (1976)。減数分裂活性化物質（MAS）は、胎児卵巣により分裂され、ここで減数分裂が進行し、そして減数分裂阻止物質（MPS）が休止する非減数分裂性生殖細胞による形態学的に分化された精巣から放出される。
【０００５】
MAS及びMPSの相対濃度が雄及び雌生殖の細胞における減数分裂の開始、阻止及び再開を調節することが提案されている［A. G. Byskocなど., The Physiology of Reproduction (eds. E. Knobil and J. D. Neill), Raven Press, New York (1994)］。明らかに、減数分裂が調節される場合、生殖が制御され得る。最近の文献［A. G. Byskovなど., Naturo, 374, 559-562 (1995)］においては、雄牛精巣及びヒト小胞流体からの卵母細胞減数分裂を活性化する一定のステロール［T−MAS（精巣減数分裂−活性化ステロール）及びFF−MAS（小胞流体減数分裂−活性化ステロール）：４，４−ジメチル−５α−コレスタ−８，14, 24−トリエン−３β−オール］の単離が記載されている。
【０００６】
μモル濃度の合成FF−MASが、ホスホジエステラーゼインヒビターIBMX（３−イソブチル−１−メチルキサンチン）により阻止されるラット卵母細胞において、用量−依存性態様で減数分裂の再開を誘発できることがまた示されている［C. Hegele-Hartung など., Biol. Reprod., 64, 418-424 (2001)］。この効果は、CEO（丘−封入された卵母細胞）及びDO（露出された卵母細胞）がFF−MASの存在下でインビトロで培養される場合、観察され得ることが示された。
【０００７】
減数分裂を調節するさらなる物質は、WO96/27658A1号、WO97/00884A1号、WO98/28323A1号、WO98/52965A1号、WO99/58549A1号及びWO00/68245A1号に記載されている。
WO98/52965A1号においては、減数分裂活性化20−アラルキル−５α−プレグナン誘導体が記載されている。
【０００８】
WO00/68245A1号においては、女性及び男性において避妊薬として有用である。減数分裂を阻害できるステロイド化合物が開示される。それらの化合物は、コレスタン骨格のC14炭素原子に結合される３β−水素原子により特徴づけられる主に不飽和のコレスタン誘導体である。
【０００９】
WO96/00235A1においては、コレステロールの生合成における中間体として知られている、減数分裂誘発ステロール、及び一定の構造的に関連する合成ステロールが記載されている。それらの物質は、減数分裂を調節することが見出された。ステロール骨格におけるC17上に側鎖、さらに少なくとも１つのΔ7、Δ8又はΔ8(14)二重結合を有する、コレステロールに類似するそれらのステロールが供給される。
【００１０】
WO96/27658A1号においては、減数分裂が誘発されるレベルへの内因性減数分裂活性化物質の蓄積を引き起こす、有効量の化合物を、インビボ、エクスビボ又はインビトロで細胞に投与することを含んで成る、生殖細胞の減数分裂を刺激する方法が開示される。減数分裂活性化物質の蓄積を引き起こすそのような化合物は、アンホテリシンB、アミノグアニジン、３β、５α、６β−トリヒドロキシコレスタン、メラトニン、６−クロロメタロニン及び５−メトキシトリプタミン、並びにそれらの誘導体及びアゴニストであることが開示される。
【００１１】
減数分裂活性化物質はまた、中でも、５α−コレスタン−３β−オール、D−ホモ−コレスター８，14−ジエン−３β−オール、及び22，25−ジアザコレストロール、25−アザ−24, 25−ジヒドロラノステロール、24, 25−イミノラノステロール、23−及び24−アザコレストロール、並びに25−アザコレスタノール誘導体であることが報告されている。
【００１２】
WO97/00884A1号及びWO98/23323A1号においては、インビトロ、インビボ又はエクスビボで減数分裂を刺激するために使用され得る物質が記載される。開示される化合物は、天然に存在る減数分裂活性化物質のアゴニストであり、そして従って、女性及び男性における減数分裂の不十分な刺激のためである不妊症の処理に使用され得る。この資料においては、避妊薬としての使用のために適切である、天然に存在する減数分裂活性化物質のアンタゴニストであるいくつかの化合物がまた開示される。開示される化合物は中でも、C4−スペーサーを通してステロール骨格に結合される、コレステロール骨格のC17に結合される側鎖におけるアミノ基が供給されている、５α−コレスト−８−エン−３β−オール及び５α−コレスト−８，14−ジエン−３β−オールを含んで成る。アミノ基に、C1−C4アルキル又はC3−C6シクロアルキルが結合される。
【００１３】
さらに、WO99/58549A1号においては、減数分裂の調節において効果的であるステロール誘導体が開示される。それらの化合物は、雌及び雄、特にヒトにおける不妊症を軽減する能力を有することが記載されている。調節物質として効果的であるステロール誘導体は中でも、（20R）−20−メチル−23−ジメチルアミノ−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール、（20R）−20−メチル−23−ジメチルアミノ−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オール、４，４−ジメチル−24−フェニルアミノ−５α−コラ−８，14−ジエン−３β−オール、４，４−ジメチル−24−（N, N−ジメチルアミノ）−24−シアノ−５α−コレスタ−８，14−ジエン−３β−オール、及びさらに、ステロール骨格に１又は複数の二重結合を有するステロールの種々の24−オール酸（oic acid）アミドである。
【００１４】
C17での側鎖にアミノ基を有する不飽和ステロール誘導体がまた、ウシアデノコルチコイドコレステロール側鎖分解チトクロームP−450（P−450scc）に対するそれらのステロールの効果に関して、J.J. Sheets and L.E. Vickery, “Active Site-directed Inhibitors of cytochrome P-450scc”, J. Biol. Chem., Vol. 258 (19), 1983, p11446-11452により記載されている。この資料においては、中でも、22−アミノ−23、24−ビスノル−コル−５−エン−３β−オール及び23−アミノ−24−ノルコル−５−エン−３β−オールが開示される。
【００１５】
さらに、C17での側鎖にアミノ基を有する不飽和誘導体が、A.T. Mangla and W.D. Nes, “Sterol C-methyl Transferase from Prototheca wickerhamii, Mechanism, Sterol Specificity and Inhibition” in Bioorg. And Med. Chem. (200), 8(5), 925-936により報告されている。この資料においては、中でも、23−アザ−チモステロールが開示される。
【００１６】
減数分裂の再開がインビトロで、裸の卵母細胞において生じることが、これまでに記載された減数分裂調節化合物を用いる場合、発現されている。しかしながら、それらの化合物は、顆粒層細胞により取り囲まれる卵母細胞（CEO＝丘封入卵母細胞）において減数分裂を刺激する場合、単なる周辺効果的であった。上記資料の開示は、引用により組込まれる。
【００１７】
本発明の１つの目的は、雌及び雄、特に哺乳類及びより特定にはヒトにおける生殖、特に減数分裂を調節するために有用である物質を見出すことである。
前記新規物質を含んで成る新規医薬組成物を供給することが、本発明のもう１つの目的である。
生殖、特に減数分裂を調節するために適切である医療組成物の調製への前記新規化合物の使用を提供することが、本発明のもう１つの好ましい目的である。
【００１８】
生殖、例えば減数分裂を調節する新規方法を提供することが、本発明のもう１つの好ましい目的である。
ヒト受精能を処理する方法を提供することが、本発明のさらなる目的である。
ヒト卵母細胞の成熟を改良することが、本発明のさらなる目的である。
核、細胞質及び/又は膜卵母細胞成熟の同調性を改良することが、本発明のさらにもう１つの目的である。
【００１９】
卵母細胞の受精能を改良することが、本発明のさらにもう１つの目的である。
ヒトインビトロの成熟による卵母細胞の移植及び受精割合を改良することが、本発明のさらにもう１つの目的である。
染色体異常性（異数性）を有するヒト前胚の発生率を低めることが、本発明のさらなる目的である。
ヒト前胚の分解割合を改良することが、本発明のさらなる目的である。
ヒト前胚の品質を改良することが、本発明のさらなる目的である。
新規物質の調製方法を提供することが、本発明のもう１つの目的である。
【００２０】
本発明によれば、一般式Xのステロイド化合物が、哺乳類、例えば雌及び雄における生殖、例えば減数分裂の調節において都合良く使用され得、ここで前記ステロイド化合物は、下記一般式X：
【化１】
2004534011.tif 000003
【００２１】
［式中、化合物X中の下記成分XA：
【化２】
2004534011.tif 000004
【００２２】
において、C5とC6との間、C6とC7との間、C7とC8との間、C8とC9との間、C8とC14との間、及びC14とC15との間との間の個々の結合は、単結合又は二重結合であり、それらの結合の少なくと１つは二重結合であり、そして個々の炭素原子C5, C6, C7, C8, C9, C14及びC15は、単結合により、又は多くとも二重結合により、個々の隣接するC原始に結合され、そして
【００２３】
C3R3は、下記の通りであり：
ａ）C3＝O又は
ｂ）C3−OR3’、ここでR3’は、水素、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキル、及びC(O)成分を通してCH−Oに結合されるC3(O)−R3’’を含んで成る群から選択され、ここでR3’’は、
ｉ）置換されているか又は置換されていない、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキル、
ii) 置換されているか又は置換されていない、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10フルオロアルキル、
iii) 置換されていないか又は置換されているC1−C10アリール、
iv) 置換されていないか又は置換されているC1−C10ヘテロアリール、
v) 置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキルオキシ及び
vi) 置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C10アルキルアミノから成る群から選択され、又は
【００２４】
ｃ）C3H−SO2−R3’’又はC3＝NOR3’’、ここでR3’’は上記と同じ意味を有し、又は
ｄ）C3H−O−R3’’’、ここでR3’’’は、置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C10アルキレンであり、そしてステロイド骨格のC原子又はO原子と共に、環状エーテルを形成し、又は
ｅ）C3原子を有する環状環構造体、ここでR3は置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C10アルキレンであり、又は
ｆ）C3H−Hal、ここでHalはF、Cl、Br又はIであり、そして
R4、R4’及びR20は独立して、水素、及び置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキルから成る群から選択され、そして
【００２５】
R23及びR23’は独立して、
ａ）水素、
ｂ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルキル、
ｃ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルケニル
ｄ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルキル、アルキル炭素原子の少なくとも１つは、O, N及びSのいずれかにより置換され、
ｅ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C8アルケニル、アルケニル炭素原子の少なくとも１つは、O, N及びSのいずれかにより置換され、及び
【００２６】
ｆ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC6−C10アリールを含んで成る群から選択され、を含んで成る群から選択され、又は
R23及びR23’は一緒に、
ａ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C7アルキレン基、又は
ｂ）置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C7アルキレン基、ここでアルキレン炭素原子の少なくとも１つがO, N及びSのいずれかにより置換され、を形成し、そして
【００２７】
Aは、置換されていないか又は置換されているメチレン又はエチレン基である］により表され、但し次の化合物を除く：（20R）−20−メチル−23−ジメチルアミノ−５α−プレグナ−８, 14−ジエン−３β−オール及び（20R）−20−メチル−23−ジメチルアミノ−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オール、23−アザ−ザイモステロール、22−アミノ−23, 24−ビスノルコール−５−エン−３β−オール、23−アミノ−24−ノルコール−５−エン−３β−オール。
【００２８】
好ましくは、本発明は、少なくとも１つの二重結合がそれぞれ、炭素原子C6, C7, C8, C9, C14及びC15間のステロイド骨格に存在するステロイド化合物に関する。本発明の１つのさらに好ましい態様においては、二重結合が、それぞれC6, C7, C8, C9, C14及びC15間の少なくとも１つの二重結合の他に、C5とC6との間に存在することができる。二重結合が、１つよりも多くの二重結合がステロイド骨格に存在する場合、お互いに供役されるステロイドを有することが、特に好ましい。
【００２９】
Cnアルキルに対するすべての表示、すなわちCnフルオロアルキル、Cnアルキルオキシ、Cnアルキルアミノ、Cnシクロアルキル、Cnアルキレン、Cnアルケニル、Cnアリール、Cnヘテロアリール及び同様のものは、成分におけるｎ個の炭素原子、すなわち、例えば枝分かれ鎖の基の側鎖におけるすべての炭素原子を包含する、ｎ個の炭素原子の数の基に関する。
【００３０】
特にことわらない限り、アルキル、アルコキシ、アルキレン又はアシル基は、それらの基が枝分かれである場合、側鎖炭素原子を包含する、１〜10個の炭素原子を有し；アルキレン又はアルキニル基は、それらの基が枝分かれである場合、側鎖炭素原子を包含する、２〜10個の炭素原子を有し；さらに、シクロアルキルは、４〜７個の炭素原子を有し；アリールは６〜10個の炭素原子を有し；そして複素環式環又はヘテロアリールは６〜10個の環原子を有する。さらに、アリールはまた、アルキルアリールを表し；ヘテロアリールはまた、アルキルへテロアリールを表し；そしてシクロアルキルはまた、アルキルシクロアルキルを表す。
【００３１】
新規ステロイド化合物は、それらの化合物がいくつかの異性体形で存在するよう、多くのキラル中心を有する。すべてのそれらの異性体形は、特にことわらない限り、本発明の範囲内にある。
【００３２】
次の一般式：
【化３】
2004534011.tif 000005
で表されるステロイド化合物が好ましい。
【００３３】
特に、Δ5−プレゲネン誘導体、Δ8,14−プレグナジエン誘導体、Δ8−プレグネン誘導体及びΔ5,7−プレグナジエン誘導体が、すなわち下記一般式：
【化４】
2004534011.tif 000006
を有する化合物が、生殖、例えば減数分裂を調節するための医薬的活性ステロイド化合物として有用である。
【００３４】
本発明の化合物は、ステロールFF−MASとは構造的に非常に異なっているが、卵母細胞、特にCEOにおいて強い減数分裂刺激効果を有することが、驚くべきことには、見出された。この観点から、本発明の化合物は、これまでに記載されている減数分裂−調節物質よりも卓越している［例えば、A.G. Byskovなど., Nature, 374, 562 (1995)］。一般式Xの好ましい化合物は、例23に記載のようにして卵母細胞において試験される場合、胚胞を、少なくとも40％、好ましくは少なくとも60％及び特に少なくとも80％、誘発するそれらの化合物である。
【００３５】
本発明化合物は、第２の観点において、これまで記載された化合物よりも卓越している。FF−MAFは、細胞培養システムにおいて成熟を誘発することができないが、本発明の化合物は、この情況下で減数分裂を活性化することができる。
【００３６】
この理由のために、新規ステロイド化合物は、インビボ使用のために、及び非インビボ使用のために使用され得、特にインビトロ使用のために使用され得る。ステロイド化合物は、哺乳類、特にヒトのインビトロ及びインビボ受精のために特に適切である。
新規化合物の顕著な性質は、C2−C3アルキレンスペーサー（例えば、C20−R20基）を通してステロイド骨格におけるC17炭素原子に結合される側鎖におけるアミノ基に寄与することができる。
【００３７】
成分C3R3がCH-OH、特に３β−ヒドロキシ基がステロイド骨格のC3原子に結合される化合物が特にこのましい。前記成分はまた、R3’’が前記の通りに定義される、CH−O−C(O)−R3’(＝CH−O−R3’’、ここでR3’はC(O)−R3’’である）でもあり得る。特に、R3は、ステロイド骨格のC3原子に結合される、モノカルボン酸、ジカルボン酸、無機酸又はいずれか他のエステル基であり得る。特に、R3はジカルボン酸のエステル基であり、そしてR3’は (CH2)n−COOH（ここで、ｎ＝１，２，３，４，５又は６である）であり得る。エステル基はまた、無機酸、例えばリン酸、硫酸及びスルファミド酸から、さらにモノカルボン酸、例えば酢酸、プロピオン酸、ｎ−ブタン酸、ピバル酸、安息香酸、ニコチン酸及びイソニコチン酸から形成され得る。特に、エステル基は、カルボン酸、例えば琥珀酸及びグルタル酸から得る。
【００３８】
本発明の追加のステロイド化合物はまた、C−O−R3が、ステロイド骨格のC3原子を包含する環状エーテルを表す誘導体を包含することができる。
R3はC3原子と共に環状環構造体を形成することができ、R3は置換されていないか、又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC2−C10アルキレンである。例えば、C3R3は、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン又はシクロヘキシレン基であり得る。それはまた、不飽和環状環構造、例えばシクロプロペニレン、シクロブテニレン、シクロペンテニレン及びシクロヘキセニレンを表すことができる。環構造はまた、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ及び同様のもののいずれかにより置換され得る。
【００３９】
本発明の物質は好都合にはまた、R3’’がフルオロメチル、アリール、ヘテロアリール及び (CH2)n−COOH（ここで、ｎ＝１，２，３，４，５又は６）を含んで成る群から選択されている化合物、特にR3’（＝C(O)−R3’’）がアセチル、プロピオニル、ピパロイル、ブタノイル、ベンゾイル、ニコチニル、イソニコチニル、ヘミグルタロイル、ブチルカルバモイル、フェニルカルバモイル、エトキシカルボニル及びtert−ブトキシカルボニルである化合物でもあり得る。特に好ましいステロイド化合物においては、R3’はヘミスクシノイルである。
【００４０】
さらに、新規ステロイド化合物R4及びR4’は独立して、好ましくは水素、又は直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキル基、すなわちメチル、エチル、プロピル及びブチル、及び特にメチルである。
さらにR4及びR4’は独立して、またハロゲン、水素、アルコキシ又はアリールオキシにより置換されたC1−C4アルキルでもあり得る。
R20は好ましくは、水素、又は直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキル、すなわちメチル、エチル、プロピル及びブチルである。R20は、特にメチルである。
【００４１】
R23及びR23’は独立して、特に水素又はC1−C8アルキル基、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、tert−ペンチル、ネオペンチル、さらにヘキシル及びシクロヘキシル及び同様のものであり得る。さらに、R23及びR23’は独立して、またC2−C8アルケニル基、すなわち不飽和アルキル基、例えばビニル、アリル、イソプロペニル及びフェニル、追加のC6−C10アリール、例えばフェニル及び１−ナフチルであり得、この基はまた、アリール成分又はアルキル成分を通して、窒素原子に結合されるアルキルアリール、例えばベンジル及びトリルを包含する。
【００４２】
R23及びR23’は好ましくは、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキル及びC1−C4アルコキシを含んで成る群から選択された少なくとも１つの基により置換されたアルキル及びアルケニルであり得る。フェニル及び１−ナフチル基はまた、水素、C1−C4アルコキシ、ヒドロキシ又はC1−C4アルキル、例えばフルオロアルキル及びフルオロアルキル誘導体により置換され得る。さらに、R23及びR23’は独立して、例えば４−ヒドロキシフェニル、４−メトキシフェニル、２，４，６−トリメチルフェニル、２，４−ジクロロフェニル、４−フルオロフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル及び２−ペンタフルオロエチルフェニルであり得る。
【００４３】
さらに、R23及びR23’は独立して、アルキル及びアルケニルを表し、前記アルキル及びアルケニル基の炭素原子の少なくとも１つは、それぞれ、O, N及びSのいずれかにより置換され、例えばメトキシメチレン、メトキシエチレン、メトキシプロピレン、エトキシプロピレン及び同様のものを包含する。
【００４４】
R23及びR23’は一緒にまた、スペーサー基Aを通してステロイド骨格のC20炭素原子に結合される、側鎖における窒素原子を通して側鎖に結合される複素環式環構造体を形成することができる。N(R23)（R23’）により形成されるこの複素環式環構造体は特に、ピペリジン−１−イル、モルホリン−4−イル、ピペラジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピロール−１−イル、インドール−１−イル、ピラゾール−１−イル、イミダゾール−１−イル、チアゾリジン−１−イル及びオキサゾリジン−３−イル環構造体、及びそれらの置換誘導体を含んで成る群から選択された成分であり得る。
【００４５】
特に好ましい複素環式環構造体は、飽和された基、すなわちピペリジン−1−イル、モルホリン−４−イル、ピペラジン−１−イル及びピロリジン−１−イルである。複素環式環構造体は、次の成分により置換され得る：ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルキルシクロアルキル、アリール、アルキルアリール、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルシクロアルキルオキシ、アルキルオキシシクロアルキル、アルキルアリールオキシ、アルキルオキシアリール、ハロゲン、及びアシル、ここでアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、アルコキシ及びアシルは上記に示されるように、多くの炭素原子を有する。
【００４６】
複素環式環構造体はまた、複素環式基、例えばそれらが結合され得る複素環式環構造体及びそれらの他に、追加の基、例えばピリジニル、キノリニル、イソキノリニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノキサリニル、チアゾリル及びオキサゾリル、さらに、それらの基のすべての他の異性体、例えばピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル及びピリジン−４−イルにより置換され得る。さらに、N(R23)(R23’)が複素環式環構造体である場合、この環構造体はまた、その環にオキソ基を包含することができる。
【００４７】
N(R23)(R23’)がピペラジン−１−イルである場合、この成分は特に、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル及びピリジン−４−イルにより置換され得、ピペラジン−１−イル基がパラ−位置で置換されているそれぞれのN(R23)(R23’)基、例えば４−（ピリジン−３−イル）ピペラジン−１−イルが得られる。
N(R23)(R23’)はまた、この成分の窒素原子を通してステロイド骨格の側鎖におけるC20に結合される下記成分：
【００４８】
【化５】
2004534011.tif 000007
【００４９】
のいずれかであり得、ここでZはO, S, N−R24、N−C(O)−R24であり、R24はアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールであり、炭素原子の数は上記の通りに定義される。さらに、R24は、複素環式環構造体であり得、ここで環原子の数は上記で定義された通りである。
N(R23)(R23’)の窒素原子は、直接的に結合されないが、しかしAを通して、C20原子に結合され、ここでAは置換されていないか又は置換されているメチレン又はエチレンスペーサー基、例えば（置換されていない）メチレン及び（置換されていない）エチレン、及びさらに、イソプロピレン、tert−ブチレン及び同様のものである。好ましくは、Aはメチレン及びエチレンである。
【００５０】
R3がヒドロキシ又はヘミスクシネートエステルであり、R4, R4’及びR20がそれぞれ、メチルであり、そしてアミノ窒素原子を含む複素環式環構造体N(R23)(R23’) が置換されていないか又は置換されているモルホリン−４−イル、ピペリジン−１−イル、ピペラジン−１−イル又はピロリジン−１−イルである化合物が特に好ましい。
【００５１】
N(R23)(R23’) は特に、３−ヒドロキシピペリジン−１−イル、４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル、３−ケトピペリジン−１−イル、４−ケトピペリジン−１−イル、４−ジメチルアミノピペリジン−１−イル、３，３−ジメチルピペリジン−１−イル、４，４−ジメチルピペリジン−１−イル、３−カルボキシピペリジン−１−イル、４−カルボキシ−ピペリジン、４−フェニルピペリジン−１−イル、４−ベンゾイル−ピペリジン−１−イル、４−（ピペリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル、４−メチルピペラジン−１−イル、４−アセチルピペラジン−1−イル、４−フェニルピペラジン−１−イル、４−ベンジルピペラジン−１−イル、４−ベンゾイルピペラジン−１−イル、４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル、４−（ピリジン−４−イル）ピペラジン−1−イル、４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イルである。
【００５２】
水素原子は、ステロイド化合物のすべての他の骨格C原子、すなわちC1, C2, C6, C7, C8, C9, C11, C12, C15及びC16に結合され得る。
【００５３】
本発明の好ましい医薬的に許容できる化合物は、一般式Xのステロイド化合物の塩である。それらの塩の例は、引用により本明細書に組込まれる、Journal of Pharmaceutical Science, 66 , 2 (1977) に列挙される。そのような塩の例は、有機酸、例えば蟻酸、フマル酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、琥珀酸、リン酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、サリチル酸、メタンスルホン酸及び同様のものの塩を包含する。医薬的に許容できる塩を形成するための適切な無機酸は、塩酸、臭酸、硫酸、リン酸及び同様のものを包含する。
【００５４】
本発明の次の化合物が特に好ましい：
１）（20S）−20−［（３，３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
２）（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
３）（20S）−20−［（４，４−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
４）（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
５）（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
【００５５】
６）（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
７）（20S）−20−［（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
８）（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
９）（20S）−20−［（３,３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールヘミスクシネート；
10）（20S）−20−［N−（３−メトキシプロピル）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
【００５６】
11）（20S）−20−アミノメチル−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
12）（20S）−20−［N,N−ジ−（２−メトキシエチル）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
13）（20S）−20−［N−（２,２−ジメチルエチレン）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
14）（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オール；
15）（20S）−20−［（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
【００５７】
16）（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
17）（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
18）（20S）−20−［（N,N−ジメチルアミノ）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
19）（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
20）（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
【００５８】
21）（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール；
22）（20S）−20−［（４−フェニルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
23）（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
24）（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
25）（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
【００５９】
26）（20S）−20−［（４−カルボキシエチルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
27）（20S）−20−［（３−ヒドロキシピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
28）（20S）−20−［（４−ベンゾイルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
29）（20S）−20−［（４−（ピペリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
30）（20S）−20−［（４−チオモルホリニル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
【００６０】
31）（20S）−20−［（４−ジメチルアミノピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
32）（20S）−20−［（４−ケトピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
33）（20S）−20−［（３−ケトピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
34）（20S）−20−［（４−カルボキシルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
35）（20S）−20−［（３−カルボキシルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
【００６１】
36）（20S）−20−［（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
37）（20S）−20−［（３,３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
38）（20S）−20−［（４,４−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
39）（20S）−20−［（４−ピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
40）（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
【００６２】
41）（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
42）（20S）−20−［（４−ベンジルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
43）（20S）−20−［（４−アセチルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
44）（20S）−20−［（４−ベンゾイルピペラジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
45）（20S）−20−［｛４−（２−ピリジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
【００６３】
46）（20S）−20−［｛４−（３−ピリジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
47）（20S）−20−［｛４−（４−ピリジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
48）（20S）−20−［｛４−（２−ピリミジル）ピペラジン−１−イル｝メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール；
49）（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４,４−ジメチル−５α−プレグナ−Δ8(14)−エン−３β−オール。
それらのステロイド化合物の構造式は、図１A−１Kに示される。
【００６４】
本発明のさらなる目的は、一般式Xの少なくとも１つのステロイド化合物、及び当業界において良く知られている少なくとも１つの医薬的に許容できる賦形剤、例えば少なくとも１つのキャリヤー、希釈剤、吸収エンハンサー、保存剤、緩衝剤、液体である場合、薬剤の浸透圧及びレオロジーを調節するための剤、界面活性剤、溶媒、錠剤砕解剤、マイクロカプセル、充填剤、スリップ剤、着色剤、風味剤及び他の成分を含んで成る医薬組成物である。それらの物質は、当業界において使用される。本発明のステロイド化合物は好ましくは、医薬組成物に有効量で含んで成る。
【００６５】
固体キャリヤーについての例は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、デキストリン、ラクトース、糖、タルク、ゼラチン、ペクチン、スターチ、シリカゲル、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、低溶融ワックス及びカカオバターである。
【００６６】
液体組成物は、例えば鼻腔投与により経口的に、又は軟膏として投与され得る、無菌溶液、懸濁液及びエマルジョンを包含する。そのような液体組成物はまた、注射のために、又はエクスビボ又はインビボ適用に関しての使用のために適切であり得る。経口投与に関しては、液体は、水と混和性である、医薬的に許容できる油及び/又は親油性界面活性剤及び/又は溶媒を含むことができる。これに関しては、引用により本明細書に組込まれるWO97/21440A1号に言及される。
【００６７】
液体組成物はまた、当業界において従来通りに使用される他の成分も含むことができ、それらのいくつかは上記に言及される。さらに、本発明の化合物の経皮投与のための組成物は、パッチの形で供給され得る。鼻腔投与のための組成物は、液体で又は粉末形で、鼻腔用スプレーの形で供給され得る。
ステロイド化合物の生物利用性を増強するためには、それらの化合物はまた、シクロデキストリンキレトレートとして配合され得る。このためには、化合物は、α−、β−又はγ―シクロデキストリン又はその誘導体と共に配合される。
【００６８】
軟膏、ローション及び外部から投与されるべき他の液体は、本発明のステロイド化合物が十分な量で減数分裂の調節の必要な対象に供給され得るような条件下にあるべきである。このためには、薬剤は、その薬剤、界面活性剤、保存剤、溶媒、希釈剤、皮膚浸透能力を増強するための物質、追加の風味剤及び皮膚保護物質、例えばコンディショナー及び湿布調節剤のレオロジーを調節するための賦形剤を含む。
【００６９】
薬剤はまた、ステロイド化合物の有効性を増強するか又は調節するために、又は薬剤の他の所望する効果を生成するために、追加の活性剤を含むことができる。
非経口投与に関しては、ステロイド化合物は、医薬的に許容できる希釈剤に溶解されるか又は懸濁され得る。油は非常にしばしば、溶媒、界面活性剤、懸濁又は乳化剤、例えばオリーブ油、ピーナツ油、大豆油、ヒマシ油及び同様のものとして組合して使用される。注射用薬剤の調製に関しては、いずれかの液体キャリヤーが使用され得る。それらの液体はまた、しばしば、その粘度の調節のための剤、及び液体の等張性を調節するための剤を含む。
【００７０】
本発明のステロイド化合物はさらに、ステロイド化合物の遅延された開放性が可能にされるよう、例えば皮下投与され得る、注射用貯蔵体として又は移植体として投与され得る。このためには、種々の技法、例えば活性化合物を含む膜を含む貯蔵体、又はゆっくりと溶解する貯蔵体の投与が使用され得る。移植体は、例えば不活性材料として生物学的に分解できるポリマー又は合成シリコーンを含むことができる。
【００７１】
使用されるステロイド化合物の用量は、医者により決定され、そして中でも、使用される特定のステロイド化合物、投与路及び使用の目的に依存するであろう。一般的に、本発明の組成物は、液体又は固体助剤成分と活性剤を親密に会合し、そして次に必要なら、生成物を所望する製剤に形状化することによって調製される。
【００７２】
通常、3000mg以下、好ましくは350mg以下及びいくつかの好ましい場合、30mg以下のステロイド化合物が、哺乳類、例えばヒトに対して、１日当たり投与される。
本発明はまた、生殖、例えば減数分裂を調節するために有用な組成物の調製のためへの、一般式Xのステロイド化合物の使用にも関する。好ましくは、この組成物は、薬剤として適用できる。
本発明さらに、避妊薬又は前受精能薬剤の調製のためへの一般式Xの新規ステロイド化合物の使用に関する。
【００７３】
本発明はさらに、非インビボ使用のためへの一般式Xのステロイド化合物の使用に関する。
本発明はまた、生殖、例えば減数分裂の調節の必要な対象に、有効量の少なくとも１つの一般式Xのステロイド化合物を投与することを含んで成る、生殖、例えば減数分裂の調節方法にも関する。
さらに、本発明は、一般式Xのステロイド化合物と、哺乳類から除去された卵母細胞とを接触せしめることを含んで成る、哺乳類中への卵母細胞の成長能力の可能性を改良するための方法に関する。
【００７４】
生殖、例えば減数分裂の調節は、本発明の化合物が、哺乳類、特にヒトにおける生殖、例えば減数分裂を刺激するために特に適切であり、天然に存在する減数分裂活性化物質のアゴニスト類似体であるそれらの化合物が、雌及び雄における減数分裂の不十分な刺激のためである不妊症の処理に使用され得ることを示すために本明細書において使用される。
本発明の化合物を含む組成物の投与路は、活性ステロイド化合物を、その作用部位に効果的に輸送するいずれかの経路であり得る。
【００７５】
従って、ステロイド化合物が哺乳類に投与される予定である場合、それらは便利には、医薬的に許容できるキャリヤーと共に本発明の少なくとも１つのステロイド化合物を含んでなる医薬組成物の形で供給される。経口使用に関しては、そのような組成物は好ましくは、錠剤又はカプセルの形で存在する。
本発明はまた、R4及びR4’が置換されていないか又は置換されている、直鎖又は枝分かれ鎖のC1−C4アルキルであり、そして水素ではない、一般式Xのステロイド化合物の調製方法にも関する。
【００７６】
前述のステロイド化合物は、既知化合物の調製に類似して合成され得る。従って、式Xのステロイド化合物の合成は、総合的なステロール及びステロイド文献に記載される十分に確立された合成路に従う。次の文献が合成のための主要源として使用され得る：L.F. Fieser & M. Fieser: Steroids, reinhold Publishing Corporation, N. Y., 1959; Rood’s Chemistry of Carbon Compounds (ed. S. Coffrey): Elsevier Publishing Company, 1971; 及び特に、Dictionary of Steroids (eds. R.A. hill, D.N. Kirk, H.L.J. Makin and G.M. Murphy), Chapaman & Hall (この文献は引用により本明細書に組込まれる)。最後の１つは、1990年までの期間をカバーするオリジナル文献の引例の広範囲の列挙を含む。
【００７７】
特に、ステロイド化合物は、
a. （20S）−20−ヒドロキシメチル−プレグナ−４−エン−３−オンから出発し、
b. アルキル化により位置４で２つのアルキル基を導入し、
c. 前記ケト基をヒドロキシ基に還元し、
d. 臭素化/脱臭化水素化によりΔ7二重結合を導入し、
e. 酸の存在下で加熱により、前記ジエンΔ5,7をジエンΔ8,14に対して異性体化し、
f. 前記17−ヒドロキシ基をアルデヒド基に酸化し、そして
g. 前記アルデヒド基を還元的にアミノ化することを含んで成る一般方法に従って合成され得る。
【００７８】
この第１の合成方法のその対応する合成スキームは図２に示される。これによれば、（20S）−20−ヒドロキシメチル−プレグナ−４−エン−３−オン１の側鎖におけるヒドロキシ基が、シリルエステルとして、例えばトリイソプロピルシリル（TIPS）エーテルとして保護され、化合物２がもたらされる。化合物３を生成するためには、２つのメチル基が、ステロール骨格の位置４でカリウムtert−ブトキシドのような塩基の存在下でヨウ化メチルによるアルキル化を通して導入される。次の段階においては、３−ケト基が、通常の還元剤、例えば水素化リチウムアルミニウム又は硼水素化ナトリウムにより還元される。次に得られるアルコール４が、アセテート（化合物５）として保護される。二重結合が臭素化−脱臭化水素化順序を通して導入される。
【００７９】
次に、化合物６におけるその得られるΔ5,7−ジエンステムが、塩酸の存在下での加熱を通してΔ8,14−ジエンシステムに異性体化され、化合物７が得られる。この酸触媒された段階におては、両ヒドロキシル基が保護解除され、そしてジオール７が得られる。Dess−Martin Periodinanceによる側鎖におけるヒドロキシル基の適度な選択的酸化がアルデヒド８をもたらし、これは、還元性アミノ化を通して側鎖における異なったアミンを導入するために中心中間体として作用する。このためには、異なった還元剤、例えば硼水素化ナトリウム又はトリス−（アセトキシ）硼水素化物が使用され得る。結果として、本発明ステロイド化合物９が得られる。
【００８０】
本発明ステロイド化合物の調製方法においては、次の新規化合物が生成される：（20S）−４，４−ジメチル−20−ヒドロキシメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール及び（20S）−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール−20−カルバルデヒド。従って、本発明はまた、それらの中間体化合物にも関する。
【００８１】
他方では、ステロイド化合物はまた、次の方法：
a. (20S)−20−メチル−プレグナ−８，14−ジエン−３β、21−ジオール、特に(20S)−4,4,20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−３β、21−ジオールから開始し、
b. それぞれトシレートを得るために、好ましくはトルエンスルホン酸のよるC21での求核性置換し、
c. C21で新規炭素−炭素結合を形成するために、前記C21での求核基（トシレート）をシアニドにより置換し、
d. アルデヒドを得るために、前記形成されたニトリルを還元し、
e. 種々のアミンを形成するために、前記ニトリルを還元的にアミノ化することによっても合成され得る。
【００８２】
第２の合成方法のその対応する合成スキームは図３に示される。（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−３β、21−ジオール１が、側鎖でトルエンスルホン酸塩化物によりトシレート化される。次に、トシレート２が、C1−構成単位として、シアン化物により置換される。その得られるニトリル３は、ジイソブチルアルミニウム水素化物により還元され、アルデヒド４が得られる。次に、アルデヒド４がナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物の存在下で還元性アミノ化反応においてアミンと反応せしめられる。形成されるその得られる生成物５は、標準カラムクロマトグラフィーにより又はHPLCにより精製され得る。
本発明をより詳細に記載するために、次の例が与えられる。
【実施例】
【００８３】
例１.（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物番号２）
a) (20S)−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−４−エン−３−オン：
300mlのジクロロメタン中、30gの（20S）−20−［ヒドロキシメチル］−プレグナ−４−エン−３−オン及び13.5gのイミダゾールの溶液に、26mlのトリイソプロピルシリル塩化物を、室温で滴下した。その反応混合物を、室温で20時間、撹拌し、そして次に、水に注いだ。水性層を酢酸エチルにより抽出した。有機層を組合し、ブラインにより洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、45.4gの粗(20S)−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−４−エン−３−オンを、褐色油状物として得、これをさらに精製しないで使用した。MS（Cl＋）：487（M＋H）。
【００８４】
ｂ）（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３−オン：
320mlのテトラヒドロフラン中、45.4gの粗(20S)−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−４−エン−３−オンの溶液を、950mlのtert−ブチノール中、42.3gのカリウムtert−ブチレートの溶液に、50℃の温度で添加した。その混合物を、同じ温度で10分間、撹拌した。次に、50mlのヨウ化メチルを添加し、そして撹拌を１時間、続けた。反応混合物を水中に注ぎ、そして酢酸エチルにより抽出した。有機層を組合し、ブラインにより洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、淡黄色固形物として、27.3gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３−オンを得た。MS（Cl＋）：515（M＋H）。
【００８５】
ｃ）（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オール：
500mlのテトラヒドロフラン中、27.3gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３−オンの溶液に、1.24gの水素化リチウムアルミニウムを、室温で少しづつ注意して添加した。反応混合物を１時間、撹拌し、そして次に、0℃で冷却し、2.5mlの水、2.5mlの１Nの水酸化ナトリウム及び7.5mlの水を連続的に添加した。その混合物をセライトを通して濾過した。濾液を真空下で濃縮した。残留物を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、淡黄色の固形物として、18.2gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールを得た。MS（Cl＋）：517（M＋H）。
【００８６】
ｄ）（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールアセテート：
17.5mlのピリジン中、18.2gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールの溶液に、6.24mlの無水酢酸を室温で添加した。反応混合物を、20時間、撹拌し、そして次に、氷/塩酸混合物中に注いだ。これを、酢酸エチルにより抽出した。有機層を組合し、ブラインにより洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、白色固形物として、16.2gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールアセテートを得、これをさらに精製しないで使用した。MS（Cl＋）：559（M＋H）。
【００８７】
ｅ）（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５,７−ジエン−３β−オールアセテート：
100mlのベンゼン及び100mlのヘキサンの混合物中、16.2gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールアセテートの溶液に、4.93gの１，３−ジブロモ−５，５−ジメチル−ヒダンチオンを70℃で少しづつ添加した。30分後、その混合物を0℃に冷却し、そして濾過した。濾液を真空下に蒸発した。
【００８８】
その得られる残留物に、160mlのトルエン及び7.8mlの２，４，６−トリメチルピリジンを添加した。その混合物を2.5時間、還流した。冷却の後、反応混合物を、INの塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム溶液及びブラインにより洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして真空下で蒸発した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固形物として、12.5gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５,７−ジエン−３β−オールアセテートを得た。MS（Cl＋）：557（M＋H）。
【００８９】
ｆ）（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−３β，21−ジオール：
16.1gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５,７−ジエン−３β−オールアセテート、210mlのエタノール、28mlのベンゼン及び28mlの濃塩酸の混合物を６時間、還流した。冷却の後、その混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム中に注ぎ、酢酸エチルにより抽出し、そしてブラインにより洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。残留物を、ジクロロメタン及びメタノールから再結晶化し、4.48gの（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−３β、21−ジオールを得た。MS（EI＋）：358（M）。
【００９０】
ｇ）（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アール：
10mlのジクロロメタン中、1gの（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−３β，21−ジオールの溶液に、5.4mlの0.5MのDess−Martin−Periodinane溶液を室温で添加した。その混合物を１時間、撹拌し、飽和炭素水素ナトリウム液中に注ぎ、酢酸エチルにより抽出し、そしてブラインにより洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固形物として、230mgの（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アールを得た。MS（EI＋）：356（M）。
【００９１】
ｈ）（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール：
38mgのアトリウムトリス（アセトキシ）硼水酸化物を、3mlのテトラヒドロフラン中、42mgの（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アール及び10μlのピペリジンの溶液に添加した。その混合物を、２時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液に注ぎ、酢酸エチルにより抽出し、そしてブラインにより洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固形物として15mgの（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを得た。MS（EI＋）：425（M）。
【００９２】
例２．（20S）−20−［（３，３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アールを、例１ｈに記載のようにして、３，３−ジメチル−ピペリジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。白色固形物として、（20S）−20−［（３，３−ジメチルピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを単離した。MS（EI＋）：453（M）。
【００９３】
例３．（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物５）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アールを、例１ｈに記載のようにして、N−フェニル−ピペラジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。白色固形物として、（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを単離した。MS（EI＋）：502（M）。
【００９４】
例４．（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物６）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アールを、例１ｈに記載のようにして、モルホリン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。白色固形物として、（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを単離した。MS（EI＋）：427（M）。
【００９５】
例５．（20S）−20−［（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物７）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アールを、例１ｈに記載のようにして、N−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。白色固形物として、（20S）−20−［（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを単離した。MS（EI＋）：504（M）。
【００９６】
例６．（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物８）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アールを、例１ｈに記載のようにして、ピロリジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。白色固形物として、（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを単離した。MS（EI＋）：411（M）。
【００９７】
例７．（20S）−20−［N−（３−メトキシプロピル）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物10）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−アールを、例１ｈに記載のようにして、３−メトキシプロピルアミン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。白色固形物として、（20S）−20−［N−（３−メトキシプロピル）アミノメチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを単離した。MS（EI＋）：429（M）。
【００９８】
例８．（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オール（化合物14）
ａ）（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールベンゾエート：
34.4mlの塩化ベンゾイルを、670mgのピリジン中、70gの粗（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オール（例1ｃ）クロマトグラフィーにより精製されていない）の溶液に、０〜3℃で添加した。その反応混合物を、室温で２時間、撹拌し、そして氷水中に注いだ。沈殿物を濾過し、水により洗浄し、そしてアセトンから再結晶化し、42gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールベンゾエートを得た。
1H−NMR（CDCl3）：δ＝8.05 (2H, d); 7.56 (1H, t); 7.45 (2H, t); 5.60 (1H, t); 4.74 (1H, m); 3.68 (1H, dd); 3.36 (1H, m)。
【００９９】
ｂ）（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５,７−ジエン−３β−オールベンゾエート：
42ｇの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５−エン−３β−オールベンゾエートを、例１ｅに記載のようにして、13.7ｇの1.3−ジブロモ−５，５−ジメチル−ヒダントイン及び18ｍｌの２，４，６−トリメチルピペリジンにより処理し、41.9ｇの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５,７−ジエン−３β−オールベンゾエートを得た（カラムクロマトグラフィーにより精製しなかった。）
1H−NMR（CDCl3）：δ＝8.05（2H, d）; 7.57 (1H, t); 7.45 (2H, t); 5.95 (1H, d); 5.56 (1H, m); 4.85 (1H, m); 3.7 (1H, dd); 3.39 (1H, m)。
【０１００】
ｃ)（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−５，７−ジエン−３β，21−ジオール−３−ベンゾエート：
微粉砕された2gの分子節（４Å）及び1.27gのテトラブチルアルミニウムフルオリド水和物を、50mlのテトラヒドロフラン中、2.0gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル］−プレグナ−５,７−ジエン−３β−オールの溶液に添加した。その混合物を室温で一晩、撹拌し、減圧下で濃縮し、そしてカリウムクロマトグラフィーにより精製し、1.17gの（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−５，７−ジエン−３β，21−ジオール−３−ベンゾエートを得た。
1H−NMR（CDCl3）：δ＝8.06 (2H, d); 7.56 (1H, t); 7.45 (2H, t); 5.94 (1H, d); 5.56 (1H, m); 4.85 (1H, m); 3.66 (1H, m); 3.41 (1H, m)。
【０１０１】
ｄ）（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トルエン−４−スルホニル）オキシ）メチル］−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オールベンゾエート：
4mlのピリジン中、0.573gのトルエン−４−スルホニル塩化物の溶液を、15mlのピリジン中、0.926gの（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−５，７−ジエン−３β，21−ジオール−３−ベンゾエートの溶液に、氷浴上で冷却しながら滴下した。反応混合物を、０〜３℃で１時間、及び室温で一晩、冷却した。その反応混合物を氷水中に注ぎ、そして酢酸エチルにより抽出した。
【０１０２】
有機層を組合し、１Nの塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム溶液及びブラインにより洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、1.0gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トルエン−４−スルホニル）オキシ）メチル］−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オールベンゾエートを得、これをさらに、メタノールから再結晶化により精製した。
1H−NMR (CDCl3) : δ＝8.05 (2H, d); 7.8 (1H, d); 7.56 (1H, t); 7.45 (2H, t); 7.34 (2H, d); 5.94 (1H, d); 5.55 (1H, m); 4.85 (1H, m); 4.0 (1H, dd); 3.81 (1H, m); 2.45 (3H, s)。
【０１０３】
ｅ）(20S)−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オールベンゾエート：
0.625mlのピペリジンを、3mlのN, N−ジメチルホルムアミド中、0.154gの（20S）−４，４−ジメチル−20−［（（トルエン−４−スルホニル）オキシ）メチル］−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オールベンゾエートの溶液に添加した。反応混合物を、室温で48時間、撹拌し、そして減圧下で濃縮した。残留物を、ジクロロメタンに溶解し、そして水により３度、洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして真空下で蒸発した。残留物（125mg）を、メタノールから再結晶化し、45mgの(20S)−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オールベンゾエートを得た。
1H−NMR（CDCl3）：δ＝8.05 (2H, d); 7.57 (1H, t); 7.46 (2H, t); 5.94 (1H, d); 5.56 (1H, m); 4.88 (1H, t); 2.43 (2H, m)。
【０１０４】
ｆ）(20S)−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オール：
2.5mlのテトラヒドロフラン中、45mgの(20S)−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オールベンゾエートの溶液を、2mlのテトラヒドロフラン中、45mgの水素化リチウムアルミニウムの懸濁液に添加した。室温での２時間の撹拌の後、3mlの飽和硫酸ナトリウム溶液及び5mlの１Nの水酸化ナトリウムを添加した。
【０１０５】
その混合物を、10mlのジクロロメタンにより３度、抽出した。有機層を組合し、１Nの水酸化ナトリウム及び水により洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。残留物（35mg）を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、22mgの(20S)−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−５，７−ジエン−３β−オールを得た。
1H−NMR (CDCl3):δ＝5.93 (1H, d); 5.53 (1H, m); 3.4 (1H, t); 2.42 (2H, m); 1.22 (3H, s); 1.13 (3H, s); 1.02 (3H, d); 0.98 (3H, s); 0.6 (3H, s)。
【０１０６】
例９．（20S）−20−［（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物15）
ａ）（20S）−４，４，20−トリメチル−21−トシルオキシ−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール：
4.7ｇP−トシルクロリドを、91mlのピリジン中、4.5gの（20S）−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−３β，21−ジオールの溶液に少しづつ添加した。その混合物を室温で３時間、撹拌し、そして次に、減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチルに溶解し、水及び塩化ナトリウム溶液により洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固形物をして、3.2gの（20S）−４，４，20−トリメチル−21−トシルオキシ−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを得た。MS（EI＋）：512（M）。
【０１０７】
ｂ）（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルボニトリル：
1.7gのシアン化カリウムを、90mlのDMSO中、4.7gの（20S）−４，４，20−トリメチル−21−トシルオキシ−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールの溶液に室温で添加した。その混合物を90℃で２時間、撹拌し、水中に注ぎ、酢酸エチルにより抽出し、そして水により洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、白色固形物として、2.8ｇの（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルボニトリルを得、これをさらに精製しないで使用した。MS（EI＋）：367（M）。
【０１０８】
ｃ）（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒド：
16mlのジイソブチルアルミニウム水素化合物（トルエン中、20％）を、60mlのトルエン中、920mgの（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルボニトリルの溶液に、−72℃の温度で滴下した。その混合物を、同じ温度で２時間、撹拌し、２Nの硫酸中に注ぎ、酢酸エチルにより抽出し、２Nの硫酸により洗浄し、そして次に、塩化ナトリウムの半飽和溶液により洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、白色固形物として、750mgの（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒドを得、これをさらに精製しないで使用した。MS (EI＋)：370（M）。
【０１０９】
ｄ）（20S）−［（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール：
107mgのナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物を、2mlのテトラヒドロフラン中、125mgの（20S）−３β−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒド及び82.6mgのN−（２−ピリジル）−ピペラジンの溶液に室温で添加した。その混合物を、20時間、撹拌し、水中に注ぎ、そして減圧下で濃縮した。残留物を、カラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固形物として84mgの（20S）−20−［（ピリジン−１−イル）メチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを得た。MS（EI＋）：517（M）。
【０１１０】
例10．（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物16）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒドを、例９ｄに記載のようにして、N−フェニルピペラジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。（20S）−20−［（４−フェニルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを、白色固形物として単離した。MS（EI＋）：516（M）。
【０１１１】
例11．（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物17）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒドを、例９ｄに記載のようにして、１−メチルピペラジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。（20S）−20−［（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを、白色固形物として単離した。MS（EI＋）：454（M）。
【０１１２】
例12．（20S）−20−［（N,N−ジメチルアミノ）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物18）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒドを、例９ｄに記載のようにして、N,N−ジメチルアミン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。（20S）−20−［（N,N−ジメチルアミノ）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを、白色固形物として単離した。MS（EI＋）：399（M）。
【０１１３】
例13．（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物19）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒドを、例９ｄに記載のようにして、モルホリン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを、白色固形物として単離した。MS（EI＋）：441（M）。
【０１１４】
例14．（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物20）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒドを、例９ｄに記載のようにして、ピロリジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを、白色固形物として単離した。MS（EI＋）：425（M）。
【０１１５】
例15．（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オール（化合物21）
（20S）−３β−ヒドロキシ−４，４，20−トリメチル−プレグナ−８，14−ジエン−21−カルバルデヒドを、例９ｄに記載のようにして、ピペリジン及びナトリウムトリス（アセトキシ）硼水素化物により処理した。（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）エチル］−４，４−ジメチル−５α−プレグナ−８，14−ジエン−３β−オールを、白色固形物として単離した。MS（EI＋）：439（M）。
【０１１６】
例16.（20S）−20−［（４−フェニルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール（化合物22）
ａ）３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシビスノルコレン酸メチルエーテル：
３β−ヒドロキシビスノルコレン酸（10g）、炭酸水素カリウム（12g）、ヨウ化メチル（10mg）及びジメチルホルムアミドを、室温で３日間、撹拌し、そして水（1.5ml）中に注いだ。
【０１１７】
白色沈殿物を濾過した。ジエチルエーテルを、その白色沈殿物に添加し、そして不溶性材料を濾過した。真空下でのエーテル相の濃縮により、粗シリルエーテルを得、これをジメチルホルムアミド（400ml）に溶解た。Tert−ブチルジメチルシリル塩化物（６g）及びイミダゾール（６g）を添加し、そしてその混合物を真空下で濃縮し、そしてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、5.3gの３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシビスノルコレン酸メチルエーテルを得た。
【０１１８】
ｂ）３β−tert−ブチルメチルシリルオキシ−（20S）−20−メチル−５α−プレグナ−５−エン−21−オール：
トルエン中、2.2当量のジイソブチルアルミニウム水素化物（2M）を、３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシビスノルコレン酸メチルエーテルに添加し、そしてその反応混合物を室温で撹拌した。その反応混合物を水に添加し、ジエチルエーテルを用いて抽出し、真空下で濃縮し、そしてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、3.3ｇの３β−tert−ブチルメチルシリルオキシ−（20S）−20−メチル−５α−プレグナ−５−エン−21−オールを得た。
【０１１９】
ｃ）３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−（20S）−20−メチル−５α−プレグナ−５−エン−21−アール：
Dess−Martin−Periodinane溶液（30ml中、1.9g）、ジクロロメタンを、ジクロロメタン（30ml）中、３β−tert−ブチルメチルシリルオキシ−（20S）−20−メチル−５α−プレグナ−５−エン−21−オール（1.6g）に添加し、そしてその反応混合物を24時間、撹拌し、次にジエチルエーテル中に注ぎ、そして水酸化ナトリウムにより抽出した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、そして真空下で濃縮し、1.6gの３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−（20S）−20−メチル−５α−プレグナ−５−エン−21−アールを得た。
【０１２０】
ｄ）３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−（20S）−20［（４−フェニルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナー５−エン：
４−フェニルピペリジン（0.16g）を、THF（20ml）中、0.26gの３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−（20S）−20−メチル−５α−プレグナ−５−エン−21−アールに添加し、続いてナトリウムトリス（アセトキシ）硼酸水素化物（0.38g）を添加した。５時間後、その反応混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム中に注ぎ、酢酸エチルにより抽出し、乾燥し、そして真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー処理により、76mgの３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−（20S）−20−［（４−フェニルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナー５−エンを得た。
【０１２１】
ｅ）（20Ｓ）−20−［（４−フェニルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール：
６Nの塩酸（0.2ml）を、10mlのエタノール中、100mgの３β−tert−ブチルジメチルシリルオキシ−（20S）−20−［（４−フェニルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナー５−エンの混合物に添加し、そしてその混合物を室温で４日間、混合した。ジクロロメタンを添加し、そして有機層を、炭酸水素ナトリウム溶液により洗浄し、硫酸のマグネシウム上で乾燥し、そして減圧下で濃縮し、標記化合物を得た。MS（MI＋）：487（M）。
【０１２２】
例17−22．
例16からの方法ｄ）でｅ）を、３β―tert−ブチルジメチルシリルオキシ−（20S）−20−メチル−５α−プレグナ−５−エン−21−アールに対して反復し、次の例を得た：
【０１２３】
例17．（20S）−20−［（ピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール（化合物23）
還元性アミノ化段階ｄ）、続いて酸保護解除段階ｅ）において、ピペリジンを用いて、標記化合物を得た。MS（EI＋）：400（M）。
【０１２４】
例18．（20S）−20−［（モルホリン−４−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール（化合物24）
還元性アミノ化段階ｄ）、続いてシリル保護解除段階ｅ）において、モルホリンを用いて、標記化合物を得た。MS（EI＋）：402（M）。
【０１２５】
例19．（20S）−20−［（ピロリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール（化合物25）
還元性アミノ化段階ｄ）、続いてシリル保護解除段階ｅ）において、ピロリジンを用いて、標記化合物を得た。MS（EI＋）：386（M）。
【０１２６】
例20．（20S）−20−［（４−カルボキシエチルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール（化合物26）
還元性アミノ化段階ｄ）、続いてシリル保護解除段階ｅ）において、４−カルボキシエチルピペリジンを用いて、標記化合物を得た。MS（EI＋）：472（M）。
【０１２７】
例21．（20S）−20−［（３−ヒドロキシピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール（化合物27）
還元性アミノ化段階ｄ）、続いてシリル保護解除段階ｅ）において、３−ヒドロキシピペリジンを用いて、標記化合物を得た。MS（EI＋）：416（M）。
【０１２８】
例22．（20S）−20−［（４−ベンゾイルピペリジン−１−イル）メチル］−５α−プレグナ−５−エン−３β−オール（化合物28）
還元性アミノ化段階ｄ）、続いてシリル保護解除段階ｅ）において、４−ベンゾイルピペリジンを用いて、標記化合物を得た。MS（EI＋）：504（M）。
【０１２９】
例23．マウス卵母細胞アッセイにおける減数分裂−活性化物質の試験
動物：
調節された光及び温度下で維持された、13〜16gの体重の未成熟雌マウス（C57BI/6J×DBA/2JF１−ハイブリッド、Bomholtgaard, Denmark）から、卵母細胞を得た。マウスは、0.2mgのゴナドトロピン（10IU PMSGを含む、妊娠した雌馬血清ゴナドトロピン、Sigmaカタログ番号G−4877）の腹腔内注射を受け、そして48時間後、動物を、頸部脱臼により殺害した。
【０１３０】
卵母細胞の収集及び培養：
卵巣を切開し、そして卵母細胞を、１対の27ゲージの針を用いて胚胞の手動的破裂により立体顕微鏡下でHx−培地（下記参照のこと）に単離した。損なわれていない胚胞（GV）を示す、球状の丘封入卵母細胞（CEO）を、3mMのヒポキサンチン（Sigmaカタログ番号H−9377）、8mg/mlのヒト血清アルブミン（HAS, State Serum Institute, Denmark）、0.23mMのピルベート（Sigmaカタログ番号S−8636）、2mMのグルタミン（Flowカタログ番号16−801）、100IU/mlのペニシリン及び100μg/mgのストレプトマイシン（Flowカタログ番号16−700）により補充されたα−最小必須培地（リボヌクレアーゼを有さないα−MEM；Gibco BRL, カタログ番号22561）に配置した。この培地を、Hx−培地と命名した。
【０１３１】
卵母細胞を、Hx−培地により３度すすぎ、そして個々のウェルが0.4mlのHx−培地及び約25個の卵母細胞を含む、４−ウェルマルチ皿（Nunclon, Denmark）において培養した。１つの対照（すなわち、試験化合物を有さないHx−培地において培養された約25個の卵母細胞）は、種々の濃度の試験される化合物により製造された試験培養と同時に常に実施される。培養は、37℃及び100％湿度並びに空気中における５％CO2下でで行われた。培養時間は22時間であった。
【０１３２】
卵母細胞の試験：
減数分裂を阻止された卵母細胞は、胚胞（GV）として知られている顕著な核小体を有する損なわれていない核により特徴づけられる。減数分裂の再開始に基づいて、核小体及び核エンベロープは消出し、そしてこれは、胚胞分解（GVB）と呼ばれる、GVの分解により特徴づけられる。数時間後、卵母細胞は、減数分裂を完結し、そして最初のいわゆる極体（PB）を誘発する。
【０１３３】
培養期間の最後までに、胚胞（GV）又は胚胞分解（GVB）を有する卵母細胞、及び極体（PB）を有するそれらの卵母細胞の数を、立体顕微鏡又は示差干渉対比装置を有する逆転顕微鏡を用いて計数した。合計数の卵母細胞当たりのGVBを有する卵母細胞の％、及び合計数の卵母細胞当たりのPBを有する卵母細胞の％を試験培養物において計算し、そして対照培養物に比較した。
【０１３４】
【表１】
2004534011.tif 000008
【０１３５】
例24．マウス小胞培養システムにおける減数分裂−活性化物質の試験
動物：
小胞を、調節された光及び温度下で維持された、生後19〜21日の末成熟マウス（C57BI/6J×CBA/J）から得た。
【０１３６】
血清の収集及び小胞の培養：
動物をエーテルにより麻酔し、そして血液を眼からの抽出により集めた。凝固した後、血液を、4000×gで15分間、遠心分離し、そして血清を集め、そして−20℃で、使用まで貯蔵した。卵巣を取り出し、そして１mモル/Lのグルタミン、3mg/mlのBSA、５μg/mlのヒトトランスフェリン（鉄を含まない）、５μg/mlのインスリン（培養品種の化学薬品、Sigma, St. Louis, MO）により補充されたLeibovitz L-15培地（Gibcoカタログ番号41300）に、37℃で配置した。
【０１３７】
直径170〜190μmの前腔性小胞を、1mlの注射器に結合される２本の27ゲージの針により機械的に単離した。それらを、2mモル/Lのグルタミン、10μg/mlのトランスフェリン及び10μg/mlのインスリン及び3mg/mlのBSAにより補充されたα−最少必須培地（α−MEM；Gibcoカタログ番号11900）を含む４−ウェル培養プレート（Nunclon, Denmark）に配置し、そしてその後、洗浄した（３度）。
【０１３８】
正常な形態学的外観、すなわち中央の球状卵母細胞、高密度の顆粒層細胞、及び完全な小胞を封入する膜層を有する、170〜190μmの小胞を選択し、そして50μg/mlの未成熟マウス血清、５μg/mlのインスリン、2mモル/Lのグルタミン、10μg/mlのヒトトランスフェリン及び0.2IU FSH (Gonal F, Serono, Solna, Sweden) により補充された、40μlのα−MEM培地を含む96−ウェル培養プレート（Nunclon, Denmark）において、それぞれ培養した。いずれの油カバーも伴なわないで、小胞を、37℃で、空気中、５％CO2により換気された、湿潤されたインキュベーターにおいて培養した。
【０１３９】
培養の開始を、０日として定義した。培養培地は１日おきに交換された。小胞の直径を、毎日、倍率100倍及び検量されたマイクロメーターを用いて測定した。さらに、小胞の生存率を変性（小胞の黒色化）及び破裂（卵母細胞の損失）の評価により調べた。培養時間は４日であった。
培養の２及び３日目で、1.72μlの体積での試験化合物又はビークルを、培養培地に添加した。試験化合物を、エタノール（ビークル）に溶解した。
【０１４０】
小胞の試験：
減数分裂を阻止された卵母細胞は、胚胞（GV）として知られている顕著な核小体を有する損なわれていない核により特徴づけられる。減数分裂の再開始に基づいて、核小体及び核エンベロープは消出し、そしてこれは、胚胞分解（GVB）と呼ばれる、GVの分解により特徴づけられる。
【０１４１】
４日目で、すなわち培養時間の最後までに、小胞を、減数分裂の再開について調べた。胚胞（GV）又は胚胞分解（GVB）を有する卵母細胞を有する小胞の数を、立体顕微鏡又は示差干渉対比装置を有する逆転顕微鏡を用いて計数した。合計数の小胞当たりのGVBを有する小胞の％を試験培養物において計算し、そして対照培養物に比較した。
【０１４２】
【表２】
2004534011.tif 000009
【０１４３】
例25．MASアゴニストの使用による不妊症のインビトロでの処理
ホルモン刺激されているか又は刺激されていない雌患者の卵巣から、超音波誘導された経膣吸引により卵を回収した。
ホルモン刺激は、ゴナドドロピンアンタゴニストによるダウンレギュレーションの使用を包含する標準の長いIVFプロトコール、例えばSynarella鼻用スプレー、続いて、14日後、150IUの毎日のFSH注射（Gonal−F、皮下）であり得る。卵の採取の36時間前、患者は、小胞及び卵母細胞の最終成熟を誘発するために、hCG (10,000IUヒト繊毛膜ゴナドトロピン、SC)を与えられた。
【０１４４】
化合物を３μMの濃度で培養培地に添加し、そして減数分裂成熟の工程を介在するか又は改良するために、受精の前、配偶子との相互作用を可能にした。卵母細胞をインビトロで受精し、インビトロで培養し、そして典型的には、卵母細胞採取の３日後、患者の子宮に戻した。患者は、移植を改善し、そして子宮をより受動性にするために、プロゲステロン（クリノン膣用ゲル、１日当たり１回の用量）及び/又はエストラジオール−吉草酸塩2mg/日）を与えられた。
【０１４５】
例26．MASアゴニストの使用による雌不妊症のインビボ処理
化合物は、hCG（10,000IUのヒト繊毛膜ゴナドトロピン、SC）の注入により誘発された最終卵母細胞成熟の時点での日から女性患者に、１日当たり２度、10mg/kgの用量で経口投与された。hCG は通常の周期で与えられる。周期は、無月経又はPCO（多嚢胞性卵巣症候群）を有する患者において出血及び周期的活性を誘発するために、中止の前、最少10日間、投与されるプロゲステロンの中止により誘発され得た。hCGが、ゴナドトロピンアンタゴニストによるダウンレギュレーションを用いてのIVFプロトコール、例えばSynarella鼻用スプレー、続いて、14日後、150−225IUの毎日のFSH注射にいより、通常の長期−ホルモン刺激の統合された部分として与えられ得た。
【０１４６】
患者は、卵採取、IVF及び胚移行による通常のIVF処理への付加物としての処理を受けた。他方では、処理は、精子注入又は自然な性交を用いて得られる受精と組合して使用される。
処理は、排卵真近でMASアゴニストの患者血清レベルを高め、それにより、改良された卵母細胞成熟品質が得られた。排卵された卵品質は、高い受精率、高い前着床進行性、高い着床率及び究極的には、健康に生まれるヒト幼児の高い成功率を導く、毎日投与される化合物の減数分裂誘発により改良された。
【０１４７】
例27．MASアゴニストの使用による雄不妊症のインビボ処理
化合物は、男性患者に、10mg/kgの用量で１日当たり２度、少なくとも60日間連続して、経口投与された。
処理は、MASアゴニストの患者血清レベルを高め、これが、精巣における減数分裂の進行、及び結果的に、精液品質パラメーターを正に刺激した。患者の精液品質パラメーター（精子数、形態学、前進移動性、等）は、それぞれ又は共に、前記精液の改良された受精能の改良された誘導性であった。
これは、ICSI受精が回避され、そしてIVF受精のみが得られ、又はもう１つの例においては、IVF/ICSI受精が回避され、そして精子注入又は自然の性交による受精が得られた結果を有した。
【０１４８】
例28．MASアゴニストを用いての女性避妊及び早まった卵母細胞成熟の処理レジメ
化合物は、通常の周期を通して、女性患者に50mg/kgの用量で毎日、１日当たり２度、経口投与された。患者は、卵採取、IVF及び胚移行による通常のIVF処理への付加物としての処理を受けた。他方では、処理は、精子注入又は自然な性交を用いて得られた受精と組合して使用された。
【０１４９】
処理は、排卵が生じるかなり前にMASの患者の血清レベルを高め、そして排卵のかなり前、卵母細胞の成熟を仲介した。排卵が生じる場合、得られる過成熟卵母細胞は、もはや生存しないか、又は受精され得なかった。正常な月経周期は、影響されても、又はステロイドホルモンの正常レベル及び力学も変更されなかった。
【０１５０】
例29．卵巣における減数分裂の工程を阻止するMASアンタゴニストを用いての女性用避妊のための処理レジメ
化合物は、通常の周期を通して女性に、50mg/kgの容量で１日当たり２度、毎日、経口投与された。
処理は、MASアンタゴニストの対象血清レベルを高め、天然の卵母細胞発生を効果的に阻害した。排卵の工程は正常に生じ、そして周期的活性は変更されないまま存続した。しかしながら、排卵の時点で、減数分裂は阻止され、そして従って、未成熟及び受精できない卵母細胞は排卵された。ステロイドホルモンの正常レベル及び力学は影響されないまま存続し、そして天然の周期的活性及び毎日の月経は影響されないまま存続した。
【０１５１】
例30．精巣における減数分裂の工程を阻止するMASアンタゴニストを用いての男性用避妊のための処理レジメ
化合物は、男性に50mg/kgの用量で１日当たり２度、毎日、最少60日間、連続して経口投与された。精子形成の工程は、ヒト男性において約60〜65日を要する。
処理は、処理された対象の血清においてMASアンタゴニストのレベルを誘発し、対象の精巣における受精する成熟精子の形成を導く天然の減数分裂工程及び特殊化を効果的に阻止した。精子形成の工程は阻害され、そして独占的に受精しない精子が生成され、そして放出される。しかしながら、精巣の内分泌学は影響されず、そしてステロイドホルモンの正常レベル及び力学も影響されずに存続した。
【図面の簡単な説明】
【０１５２】
【図１Ａ】図１Ａは、本発明の化合物１〜５の構造を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、本発明の化合物６〜10の構造を示す。
【図１Ｃ】図１Ｃは、本発明の化合物11〜15の構造を示す。
【図１Ｄ】図１Ｄは、本発明の化合物16〜21の構造を示す。
【図１Ｅ】図１Ｅは、本発明の化合物22〜26の構造を示す。
【図１Ｆ】図１Ｆは、本発明の化合物27〜31の構造を示す。
【図１Ｇ】図１Ｇは、本発明の化合物32〜36の構造を示す。
【図１Ｈ】図１Ｈは、本発明の化合物37〜41の構造を示す。
【図１Ｉ】図１Ｉは、本発明の化合物42〜46の構造を示す。
【図１Ｋ】図１Ｋは、本発明の化合物47〜49の構造を示す。
【図２】図２は、スキーム１の反応経路を示す。
【図３】図３は、スキーム２にの反応経路を示す。
【図２】
2004534011.tif 000017
【図３】
2004534011.tif 000018
【国際公開パンフレット】
2004534011.tif 000019
2004534011.tif 000020
2004534011.tif 000021
2004534011.tif 000022
2004534011.tif 000023
2004534011.tif 000024
2004534011.tif 000025
2004534011.tif 000026
2004534011.tif 000027
2004534011.tif 000028
2004534011.tif 000029
2004534011.tif 000030
2004534011.tif 000031
2004534011.tif 000032
2004534011.tif 000033
2004534011.tif 000034
2004534011.tif 000035
2004534011.tif 000036
2004534011.tif 000037
2004534011.tif 000038
2004534011.tif 000039
2004534011.tif 000040
2004534011.tif 000041
2004534011.tif 000042
2004534011.tif 000043
2004534011.tif 000044
2004534011.tif 000045
2004534011.tif 000046
2004534011.tif 000047
2004534011.tif 000048
2004534011.tif 000049
2004534011.tif 000050
2004534011.tif 000051
2004534011.tif 000052
2004534011.tif 000053
2004534011.tif 000054
2004534011.tif 000055
2004534011.tif 000056
2004534011.tif 000057
2004534011.tif 000058
2004534011.tif 000059
2004534011.tif 000060
2004534011.tif 000061
2004534011.tif 000062
2004534011.tif 000063
2004534011.tif 000064
2004534011.tif 000065
2004534011.tif 000066
2004534011.tif 000067
2004534011.tif 000068
2004534011.tif 000069
2004534011.tif 000070
2004534011.tif 000071
2004534011.tif 000072
2004534011.tif 000073
2004534011.tif 000074
2004534011.tif 000075
2004534011.tif 000076
2004534011.tif 000077
2004534011.tif 000078
2004534011.tif 000079
2004534011.tif 000080
2004534011.tif 000081
2004534011.tif 000082
2004534011.tif 000083
2004534011.tif 000084
2004534011.tif 000085
2004534011.tif 000086
2004534011.tif 000087
2004534011.tif 000088
2004534011.tif 000089
2004534011.tif 000090
2004534011.tif 000091
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004534011.tif 000092
【国際調査報告】
2004534011.tif 000093
2004534011.tif 000094
2004534011.tif 000095
2004534011.tif 000096
2004534011.tif 000097
2004534011.tif 000098
2004534011.tif 000099
2004534011.tif 000100