(57)【要約】本発明は、メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の局所的な処置のための新規な方法および組成物に関する。該処置は、治療学的に有効な量のＦ−タイプのプロスタグランジンを内耳に投与することに基づく。該処置は連続的または間欠的のいずれかであり得て、そしてポンプ、ゲルまたは徐放性薬物挿入物の使用を含み得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置方法であって、医薬的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬を内耳に局所投与することを特徴とする、該方法。
【請求項２】
内耳の正円窓および／または卵円窓を、治療学的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬を含有する生理学的に許容し得る組成物と接触させることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
プロスタノイドＦＰ受容体作動薬はＦ−タイプのプロスタグランジンまたはその誘導体であることを特徴とする、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
プロスタノイドＦＰ受容体作動薬はＰＧＦ２αまたはそのＰＧＦ２α誘導体であることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
プロスタグランジンはオメガ鎖中、芳香族環式構造およびまたは非芳香族環式構造で置換されることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
プロスタグランジンは、１３,１４−ジヒドロ−１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、１６−[(３−トリフルオロメチル)−フェノキシ]−１７,１８,１９,２０−テトラノル−ＰＧＦ２α、１７−[(３,５−ジフルオロ)−フェニル]−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２αおよび１３,１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αからなる群から選ばれることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
プロスタグランジンは、ラタノプロストおよび医薬的に適当な塩を含むラタノプロスト酸からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
プロスタグランジンをプロドラッグの形態で投与することを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
プロスタグランジンを医薬的に適当な塩、アルキルエステルまたはアミドの形態で投与することを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項１０】
医薬的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬を内耳に１年に１〜１００回投与することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
医薬的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬を医学的なポンプ装置を用いて、内耳に連続投与することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
医薬的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬をゲルまたは徐放性薬物挿入物の形態で内耳に投与することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
医薬的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬を、プロスタノイドＦＰ受容体作動薬、並びにヒアルロン酸および／または架橋結合したヒアルロン酸を含有するゲル形態で内耳に投与することを特徴とする、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の局所処置のための薬物の製造における、プロスタノイドＦＰ受容体作動薬の使用。
【請求項１５】
メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の局所処置のための薬物の製造における、F−タイプのプロスタグランジンまたはその誘導体の使用。
【請求項１６】
プロスタグランジンはＰＧＦ２αまたはＰＧＦ２α誘導体である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
プロスタグランジンはオメガ鎖中、芳香族環式構造または非芳香族環式構造で置換されることを特徴とする、請求項１５に記載の使用。
【請求項１８】
プロスタグランジンは、１３,１４−ジヒドロ−１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、１６−[(３−トリフルオロメチル)−フェノキシ]−１７,１８,１９, ２０−テトラノル−ＰＧＦ２α、１７−[(３,５−ジフルオロ)−フェニル]−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２αおよび１３,１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αからなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１５に記載の使用。
【請求項１９】
プロスタグランジンは、ラタノプロストおよび医薬的に適当な塩を含むラタノプロスト酸からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１５に記載の使用。
【請求項２０】
プロスタグランジンは、医薬的に適当な塩、アルキルエステルまたはアミドの形態であることを特徴とする、請求項１５に記載の使用。
【請求項２１】
Ｆ−タイプのプロスタグランジンまたはプロスタノイド受容体作動薬の治療学的に有効な量および医薬的に許容し得る担体を含有する、メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置のための医薬組成物であって、内耳への局所投与に適当である、該組成物。
【請求項２２】
担体は徐放性のマトリックスまたはゲルであることを特徴とする、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
担体はヒアルロン酸または架橋結合したヒアルロン酸であることを特徴とする、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置のための装置であって、プロスタグランジンまたはプロスタノイド受容体作動薬の治療学的に有効な量を徐放期間中、ヒト患者の内耳にまで運搬することができることを特徴とする、該装置。
【請求項２５】
装置は中耳への挿入に適当な挿入物であって、プロスタグランジンまたはプロスタノイドＦＰ受容体作動薬の治療学的に有効な量を徐放期間中、ヒト患者の内耳の正円窓および／または卵円窓にまで運搬することができることを特徴とする、請求項２４に記載の装置。
【請求項２６】
装置はプロスタグランジンまたはプロスタノイドＦＰ受容体作動薬の治療学的に有効な量を徐放期間中、ヒト患者の内耳の正円窓および／または卵円窓にまで連続的にまたは半連続的に運搬するのに適当なポンプであることを特徴とする、請求項２４に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、メニエール病、聴覚損失および耳鳴の処置のための新規な方法および組成物に関する。
【０００２】
（背景技術）
内耳の障害であるメニエール病は、成人の人口の約０．１〜０．５％を悩ませている。該疾患は、めまい、聴覚損失および耳鳴を特徴とし、それはより低年齢でさえも現れ得るが、通常中年で発症する。該疾患は、ほぼ同じ割合で両方の性別において発症する。それは典型的に、顕著なめまい、聴覚損失および耳鳴のエピソード時に生じ、数時間〜数日間続くが、間欠性期間中でも、該患者は耳鳴および聴覚損失を患うことがある。通常、メニエール病は片側性であるが、時間の経過と共に両方の耳が関与するようになり得て、推定１２パーセントが両側性疾患を有する。
【０００３】
該疾患は、激しいめまい、悪心および聴覚損失、並びにその後の寛解を伴って発症する(episodic)傾向があるが、時間の経過と共に該患者は通常、一般的な聴覚の損失および耳鳴を患う。該寛解は、１日から数年間続き得るが、最も一般的にはそれらは数週間〜数ヶ月続く。めずらしくもない言語知覚は、発作の間に低下する。冒された耳における完全な聴覚障害は、約１０パーセントの割合で生じると報告されている。メニエール病の個々の症状は、患者の間で非常に大きく変わり得て、寛解の期間はあり得るが、該疾患は典型的に、発症から残り全ての生涯にまで慢性的に続く。該疾患は、患者の作業能力および社会生活を損なうことがあり、これは心理学的な不安および精神的な不安となり、そして重度の場合には、患者は該疾患が原因で自殺さえする。
【０００４】
メニエール病の病態生理学は現在十分には理解されていないが、一般的には、内耳の内リンパ液の圧が病態学的に上昇し、それにより水症（非常に高い圧が原因の、内耳の蝸牛を含めた膜性迷路の膨潤）と呼ばれる病気を引き起こす。該圧の上昇は、迷路における膜の破裂を生じ得て、このことによりその上昇した圧は低下し、従って急性発作の症状は軽減する。内耳の解剖学を、以下に記載する。
【０００５】
メニエール病は比較的に一般的なものであって且つ能力欠損障害であると言う事実にも関わらず、該疾患に対する原因療法は存在しない。現在、全ての努力が、対症療法、または外科的なインターベンションによるかもしくは耳毒性薬物（例えば、ゲンタマイシン）の内耳ヘの投与による直接的な破壊的な処置に関しなければいけない。従って、メニエール病は患者をより大きく患わせる重要な臨床的な問題であり、その結果として急性発作および寛解中の該症状についての原因療法は、臨床的な観点から非常に所望されるであろう。
【０００６】
耳鳴、音刺激のない時の音の認知は、中年および高齢者の間で非常に一般的な障害である。中年／高齢者の人口の１０パーセント程が、ある程度の耳鳴を患い得る。しかしながら、耳鳴の症状を訴えるほとんどの患者がメニエール病を患わないが、有毛細胞を含むコルチ(Corti)器官における局所的な障害を有する。これらの細胞は、脳への聴覚インパルスの伝播のために、力学的なエネルギーを電気化学的なエネルギーに変換する。耳鳴の病態生理学的な病因論(ethiology)についての理解は乏しい。耳鳴の様々な原因としては例えば聴覚の外傷を含み得て、これは例えばコルチ器官における有毛細胞の永続的な破壊、蝸牛における微小血管脈管障害、薬物の毒性効果および感染を引き起こす。耳鳴は聴覚損失と関係することが多く、これはオージオメトリーによって測定することができる。多数の種類の耳鳴が存在し、そのいくつかは鼓膜および外耳における障害によって生じ、それらは十分に処置することができることが多いが、通常内耳由来の耳鳴は不治であったりまたは処置が困難である。
【０００７】
聴覚の損失または聴覚の障害、すなわち正常な聴覚を持つ個体にとって聞き取れる正常な範囲の音を認知することの無能はまた、非常に一般的な障害である。聴覚損失は、ある周波数でそれ以外よりも大きくなり得たり、または全ての周波数は等しく影響を受け得る。聴覚損失の病因は全く複雑であり、そして十分には解明されていない。原因因子は、外耳もしくは中耳への身体的な損傷、急性もしくは慢性の聴覚の外傷、加齢、内耳もしくは聴覚神経ヘの損傷であり得る。聴覚損失が他の疾患の続発症として、またはある医薬の望まれない副作用として出現することも珍しいことではない。
【０００８】
本明細書、実施例および特許請求の範囲において、用語：聴覚損失および耳鳴は、当該分野の当業者によって通常理解されるとおり、それらの最も広義の意味で使用する。
【０００９】
現在、耳鳴または聴覚損失の処置のための臨床的に立証された療法は全く存在せず、従ってこれらの症状を予防し、軽減しまたは除去するのに使用することができるであろう薬物は臨床的な観点から非常に望まれる。
【００１０】
耳の解剖学および生理学
耳は、３つの主な部分：外耳、中耳および内耳に分かれる。外耳は心耳（耳介）および鼓膜で終わる耳細管(ear canal)からなる。中耳は、鼓膜、鼓室腔、聴覚小骨および耳管からなる。内耳はその複雑な構造のために迷路とも呼ばれ、このものは側頭骨の錐体部部分の腔中に懸濁したのう(sac)および細管からなる。これらの構造は、内リンパと呼ばれる液体を含み、一方で膜性迷路および該骨の間の空隙は外リンパで満たされている。該骨性迷路は、２つの部分：前庭（これは、球形のう、卵形のう、半規管を収容する）およびラセン状にコイルした構造である蝸牛からなる。平衡の感覚は前庭に位置し、一方で聴覚の感覚は蝸牛に位置する。
【００１１】
蝸牛は、液体で満たされた膜性構造を含有する骨中での４分の２と３のコイルした腔である。該蝸牛膜性構造は、３つの腔：前庭階（これは、卵円窓および中耳小骨と結合している）；鼓室階（これは、中耳の正円窓と結合している）；および最後に、内リンパ系の部分である中心階または蝸牛管を含む。該前庭階および鼓室階は、外リンパ系の部分である。該中心階は、音を認知する器官、コルチ器官、流体力学的なエネルギーを受け取りそしてそれを電気化学的な信号に変換する有毛細胞を含有する複雑な構造、支持細胞、基底膜および蓋膜、並びに該器官と近くに位置するラセン神経節とを結合させる神経線維を含む。ラセン神経節から、神経線維は聴覚信号の更なる加工処理のために脳に投射(project)される。該中心階はまた非常に血管新生化した構造（血管条と呼ばれる）をも含み、そして蝸牛の内リンパはこの構造中で生成するとみなされている。
【００１２】
中耳の鼓膜に達した音は振動され、次いで該エネルギーは小骨によって内耳の卵円窓にまで通過する。該卵円窓からのエネルギーは、前庭階における圧力波(pressure wave)を蝸牛の先端部を通って、その開口部から鼓室階（これは、中耳で正円窓と結合している）ヘ伝達させる。外リンパ液系におけるこの圧力波は、基底膜を通して有毛細胞を蓋膜に対して振動させ、その結果力学的なエネルギーを電気化学的なエネルギーに変換する。最後に、外部音由来のエネルギーのほとんどは、正円窓を通して蝸牛から中耳ヘ放出される。
【００１３】
蝸牛の内リンパ系は、結合管(ductus reuniens)を通して、前庭器官における球形のうの内リンパ系と結合する。該球形のうは更に、三半規管が結合した卵形のうと結合する。球形のう、卵形のうおよび半規管は、運動および位置を検出する際の生理学的な機能を有し、従って平衡の感覚に関連する。内耳におけるこの部分の障害は通常、悪心と関連することが多いめまいの症状を引き起こす。卵形のうおよび球形のうは共に、内リンパ管と呼ばれる小管を通して内リンパのうと結合する。極小構造である内リンパ管は、内リンパがこの構造中のリンパ管および／または血管中に再吸収されると考えられる非常に重要な機能を有する。
【００１４】
従って、内リンパは全てではないが大部分、蝸牛の中心階および卵形のうの壁中の血管条において生成すると考えられる。次いで、そのものは蝸牛から球形のうおよび卵形のうへ流れ、最後にそのものが再吸収される内リンパ管およびのうで終わる。内リンパ管は、対応する骨性小管中の疎性結合組織に包埋された小さな約２ｍｍ長の狭小管である。リンパ管および血管は、該疎性結合組織から延びる。該内リンパ管は１つの上皮細胞層と結合しており、水および溶質はこの細胞層を横切って該疎性結合組織に入る。腔内圧は該結合組織間質および該内リンパ管中の大気圧（０ｍｍＨｇ）と比べて負である（−５〜−１０ｍｍＨｇと推定される）ので、この部分から該水はリンパ管または静脈中に再吸収される。従って、内リンパが内リンパ管を離れるための推進力は大部分が、該結合組織間質中の内リンパ管およびリンパ管の間の静水学的な圧の差異であるようである。該リンパ管は、静脈中に移る(empty)。膠質浸透圧の勾配は知られていない。メニエール病の場合、該液体の再吸収が損なわれて、前庭および蝸牛の両方における内リンパ液の圧が上昇し、その結果典型的な症状（例えば、めまい、悪心、聴覚損傷および耳鳴）が生じると、現在みなされている。
【００１５】
（先行技術）
蝸牛における内因性プロスタグランジン、特にＰＧＥ１、ＰＧＥ２およびＰＧＩ２（プロスタサイクリン）の生理学的な機能は、これまでに多数の研究において調べられており、これらのアラキドン酸代謝物質が蝸牛の血流の調節において重要であり得ると示唆されている（例えば、Umemuraらによる1990；Rheeらによる1999）。ＰＧＦ２αもまた実験動物の蝸牛構造で合成されることが分かっているが、ＰＧＦ２αの生理学的な機能は完全に未知のままであり（Escoubetらによる1985；Kawataらによる1988；Umemuraらによる1990）、ＰＧＦ２αが蝸牛の脈管構造に及ぼす影響は全く観察されていない。従って、ＰＧＦ２αについての受容体（ＦＰプロスタノイド受容体）が有毛細胞およびラセン神経節中に大量に分布しているという、本発明者によって見出された発見は非常に驚きであって、これは蝸牛中でのＰＧＦ２αのこれまで未知の機能に関係する。
【００１６】
従来、プロスタグランジンは広い様々な疾患（例えば、メニエール病、耳鳴、緑内障、関節炎および滑液包炎）の病態生理学的な機構に関与すると仮説が立てられており（Rudinによる1980）、そしてインドメタシンはメニエール病を持つ２患者の判別スコアに及ぼすフロセミドの影響をブロックすることが見出されており、このことは恐らく内耳液体の動態における未決定のプロスタグランジンの関与を示唆する（ArenbergおよびGoodfriendによる1980）。これまで、臨床研究において、スルプロストン(sulprostone)、ＰＧＥ２誘導体が、静脈注入の１時間後にフロセミドによって引き起こされるのと同様な短い聴覚閾値シフトを生じることも分かっており、そしてＰＧＥ２が聴覚機能に関与し得ると推測されている（MichelおよびMatthiasによる1992）。このことに加えて、全身投与された別の合成ＰＧＥアナログ、ミソプロストールが臨床研究において耳鳴にある効果を及ぼすことが分かっている（Brinelらによる1993）。本研究において、ミソプロストールを経口投与した。
【００１７】
（発明の記載）
本発明者は今回、プロスタグランジンの局所投与はメニエール病、耳鳴および聴覚損失の処置において非常に有益な効果を有することを予期せずに見出した。これらの薬物は、内リンパ管由来の液体の再吸収を増大させて、内リンパ腔中での圧の低下およびメニエール病の症状の緩和を引き起こすと思われる。加えて、本発明者が驚くべきことにＦＰプロスタノイド受容体は内耳の蝸牛領域、例えばコルチ器官、ラセン神経節および血管条において大量に発現することを発見した理由で、プロスタグランジン、少なくともＦ−タイプのプロスタグランジンは、蝸牛において直接的に有益な効果を有し得る。この発見は、非ステロイド性の抗炎症薬物ＮＳＡＩＤｓ（例えば、アセチルサリチル酸（アスピリン）およびインドメタシン）が耳毒性であることが知られ、そしてそれらは多数の患者において副作用として耳鳴を引き起こすことが多いという観点から特に関心が持たれる。そして、これらの薬物はシクロ−オキシゲナーゼ酵素、従って内在性プロスタグランジンの産生をブロックする理由で、プロスタグランジンは正常な生理学的な状態を維持するために蝸牛において重要であって、そしてそれらを用いて耳鳴および聴覚損失を治療し、軽減しまたは予防することができることを予期できないわけではない。
【００１８】
従って、内耳に投与した外因性プロスタグランジン（特に、Ｆ−タイプ）、それらの誘導体またはプロスタノイドＦＰ受容体作動薬は、耳鳴症状を軽減する助けとなり得る。メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失のための原因療法が今日存在しないので、本明細書に開示する発見は、臨床の観点から特に価値がある。従って、本発明はメニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置におけるプロスタノイドＦＰ受容体作動薬（例えば、Ｆ−タイプのプロスタグランジン）の使用、並びにこの使用のための具体的な方法および組成物を提供する。
【００１９】
本発明の発明者は、ＥＰプロスタノイド受容体ではなく、ＦＰプロスタノイド受容体の内耳での大量の発現を示し、そして、ラタノプロスト、ＰＧＦ２αアナログおよびＦＰ受容体作動薬の局所適用はメニエール病の耳鳴症状に及ぼす予期しない軽減効果、加えて聴覚能力を改善する効果を有することを示した。
【００２０】
プロスタノイドＦＰ受容体は、十分に定義され、クローニングされ、配列決定され、そして薬理学的に確認された実体である。従って、受容体における作動薬とは、該受容体と結合し、それを活性化する化合物（例えば、プロスタグランジンアナログ）である。該受容体における選択的な作動薬とは、他のプロスタノイド受容体よりも該受容体と優先して結合し、そして活性化し、薬理学的な意味ではＦＰ受容体と他のプロスタノイド受容体との間のＥＣ５０値またはＫｄ値の差異が少なくとも１ログ単位であることを通常意味する、化合物（例えば、プロスタグランジンアナログ）である。
【００２１】
プロスタグランジンとは、シクロ−オキシゲアーゼ酵素（ＣＯＸ−１およびＣＯＸ−２）によって触媒される閉環および酸素化を含む代謝段階によって前駆体エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸（アラキドン酸）またはエイコサンペンタエン酸から通常誘導される脂肪酸である。プロスタグランジンは典型的に、２つの炭素鎖が結合したシクロペンタン環を有する。その上方部は通常、末端カルボン酸部分を含めて７個の炭素からなるアルファ鎖と呼ばれ、一方で下方部の鎖は通常オメガ鎖と呼ばれ、これは末端メチル基を含めて８個の炭素を含む。該プロスタグランジンは、一般式：
【化１】
2004520361.tif 000002
を有する。
【００２２】
ここで、該シクロペンタン環（Ｘ）は、以下の通り置換され得る：
【化２】
2004520361.tif 000003
【００２３】
該鎖中の二重結合の数に応じて、下付き１〜３を使用する。下付き１を有するプロスタグランジン、例えばＰＧＦ１αおよびＰＧＥ１の場合には、二重結合はオメガ鎖中の炭素１３および１４の間に位置し、天然に存在するプロスタグランジンのトランス配置を示す。下付き２を有するプロスタグランジン、例えばＰＧＦ２αおよびＰＧＤ２の場合には、シス配置である別の二重結合がアルファ鎖中の炭素５および６の間に位置する。下付き３を有するプロスタグランジンの場合には、第３の二重結合がオメガ鎖中の炭素１７および１８の間に位置し、天然に存在するプロスタグランジンのシス配置を示す。プロスタグランジンの炭素１５におけるヒドロキシル基は生物学的な活性にとって必須であり、そして該ヒドロキシ基のケトへの脱水素添加は、該プロスタグランジンの活性／効力を著しく低下させる。
【００２４】
プロスタグランジンは現在、いくつかの異なる障害のための医薬として使用されている。例えば、胃潰瘍の処置またはＮＳＡＩＤ処置の間の胃潰瘍の予防（ミソプロストール）、性交不能の処置（アルプロスタジル）、分娩の誘発および子宮の頚部組織の軟化（ＥおよびＦのプロスタグランジン）、並びに緑内障の処置（ラタノプロストおよびイソプロピルウノプロストン）が挙げられる。特に、プロスタグランジンエステル（例えば、イソプロピルエステルまたはメチルエステル）は、バイオアベイラビリティを増大させるのに、並びに該プロスタグランジンの安定化のために有利であることが分かった。多数の天然に存在するプロスタグランジンが局所適用した場合に、例えば眼において刺激作用を生じる傾向があるが、オメガ鎖中に末端の環−置換を有するプロスタグランジン、好ましくは例えばＰＧＦ２αの１７−フェニルまたは１６−フェノキシ誘導体は眼における優れた治療学的な指標を有することが分かっており（WO89/03384, StjernschantzおよびResulによる）、そしてそれらの化合物もまた本発明において好ましい。
【００２５】
現在特に、ラタノプロスト(latanoprost)（１３,１４−ジヒドロ−１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α−イソプロピルエステル）、１６−[(３−トリフルオロメチル)−フェノキシ]−１７,１８,１９,２０−テトラノル−ＰＧＦ２α−イソプロピルエステル、１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α−イソプロピルエステル、および１７−[(３,５−ジフルオロ)−フェニル]−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、並びにこれらのアナログのエステルは本発明によれば、メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置において使用することが好ましい。プロスタグランジン関連化合物（例えば、プロスタミド（例えば、ＡＧＮ１９２０２４(ビマトロプロスト(Bimatoprost)）、並びにプロスタグランジンの誘導体およびアナログ（例えば、トラボプロスト(travoprost)およびイソプロピルウノプロストン(unoprostone)）はまた、本発明の範囲内にある化合物である。
【００２６】
従って、本発明はプロスタノイドＦＰ受容体作動薬もしくはＦ−タイププロスタグランジン、またはそれらの誘導体の治療学的に有用な量を内耳に局所投与する場合に、メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置のための新規な方法を提供する。特に、内耳の正円窓および／または卵円窓を医薬的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬もしくはＦ−タイププロスタグランジン、またはそれらの誘導体を含有する薬理学的に許容し得る組成物と接触させる。
【００２７】
本発明の１態様によれば、プロスタノイドＦＰ受容体作動薬はＰＧＦ２αまたはＰＧＦ２α誘導体である。本発明によれば、プロスタグランジンはオメガ中、芳香族環式構造または非芳香族環式構造で置換され得る。プロスタグランジンは、１３,１４−ジヒドロ−１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、１６−[(３−トリフルオロメチル)フェノキシ]−１７,１８,１９,２０−テトラノル−ＰＧＦ２α、１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、および１７−[(３,５−ジフルオロ)フェニル]−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、並びにそれらのアルキルエステルおよびアミドからなる群から選ばれることが好ましい。
【００２８】
プロスタグランジンは、ラタノプロストおよび医薬的に適当な塩を含むラタノプロスト酸からなる群から選ばれることが、最も好ましい。
【００２９】
本発明の１態様によれば、プロスタグランジンをプロドラッグの形態で投与する。該プロスタグランジンは例えば、アルキルエステルまたはアミドの形態で（例えば、イソプロピルエステルまたはアミドであり、エチルアミドが好ましい）投与することができる。
【００３０】
本発明の方法によれば、医薬的に有効な量のプロスタノイドＦＰ受容体作動薬もしくはＦ−タイププロスタグランジン、またはそれらの誘導体を内耳に１年に１〜１００回投与する。本発明の態様によれば、該化合物を、医学的なポンプ装置を用いるかあるいは該プロスタグランジンおよび薬理学的に適当なゲル形成物質、担体またはマトリックス（例えば、ヒアルロン酸および／または架橋結合したヒアルロン酸）を含有するゲルの形態で、連続的にまたは半連続的に投与する。
【００３１】
本発明の１態様によれば、該化合物は、内耳中に置くのに適当であったり、そして該活性化合物を正円窓および／または卵円窓ヘもしくはその近傍ヘ運搬することができる徐放出性薬物挿入物の形態で投与する。
【００３２】
本発明は、メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置のための薬物の製造における、Ｆ−タイプのプロスタグランジン、その誘導体またはプロスタノイドＦＰ受容体作動薬の使用を提供する。１態様によれば、プロスタグランジンはＰＧＦ２αまたはＰＧＦ２α誘導体である。該プロスタグランジンはまた、オメガ鎖中、芳香族環式構造または非芳香族環式構造で置換されたプロスタグランジンでもあり得る。該プロスタグランジンは、１３,１４−ジヒドロ−１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、１６−[(３−トリフルオロメチル)フェノキシ]−１７,１８,１９,２０−テトラノル−ＰＧＦ２α、１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２αおよび１７−[(３,５−ジフルオロ)フェニル]−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２αからなる群から選ばれることが好ましい。
【００３３】
該プロスタグランジンは、ラタノプロストおよび医薬的に適当な塩を含むラタノプロスト酸酸からなる群から選ばれることが最も好ましい。本発明の使用のためのプロスタグランジンはまた、プロスタグランジンアルキルエステルまたはアミド、例えばイソプロピルエステルまたはエチルアミドの形態であるプロスタグランジンであり得る。
【００３４】
本発明は、治療学的に活性な量のＦ−タイプのプロスタグランジンまたはプロスタノイドＦＰ受容体作動薬、および医薬的に許容し得る担体を含有する、メニエール病、耳鳴または聴覚損失の処置のための、局所投与に適当な医薬組成物を提供する。本組成物において、担体は薬理学的に適当なゲル形成物質、担体または徐放出性マトリックス（例えば、ヒアルロン酸または架橋結合したヒアルロン酸）であることが好ましい。
【００３５】
本発明は更に、メニエール病、耳鳴および／または聴覚損失の処置のための装置を提供し、該装置は治療学的に有効な量のプロスタグランジンまたはプロスタノイドＦＰ受容体作動薬を、徐放性期間中にヒト患者の中耳内で放出することができる。この装置は、正円窓および／または卵円窓でまたはその近くで上記化合物の連続的にまたは間欠的に制御された運搬のためのポンプとなり得る。
【００３６】
本発明は、以下により詳細に例示するが、これは本発明を限定するものではない。
【００３７】
（実施例）
１．内耳におけるＦＰプロスタノイド受容体の同定
いずれかの性別の体重が３００〜５００ｇの成体白色種(albino)モルモットを、ペントバルビタール−エタノール溶液の腹腔内注射を用いて安楽死させた。該内耳構造を早く解剖し、４％の新しいホルムアルデヒド溶液中に浸漬させた。同じ溶液をまた、卵円窓および正円窓にわたる蝸牛および内耳にわたって灌流させた。適当に固定化させた後に、該骨性組織を２〜３週間、８％ＥＤＴＡナトリウム処置によって脱灰させた。その後に、該標本を通常のパラフィン包埋のために加工処理し、５〜１０μｍの切片をミクロトームを用いて切断した。該切片を更に、免疫組織化学のために加工処理して、ＦＰ、ＥＰ１およびＥＰ３プロスタノイド受容体、並びにＣＯＸ−１酵素およびＣＯＸ−２酵素を示した。ヒトＦＰ、ＥＰ１およびＥＰ３プロスタノイド受容体の第１細胞外ループに対して産生したポリクローナル抗体を用いた。ＣＯＸ−１酵素を検出するために、アミノ酸２７２〜２８２に相当するヒツジＣＯＸ−１配列に対して産生したポリクローナル抗体を用い、そしてＣＯＸ−２酵素を検出するために、アミノ酸５８４〜５９８に相当するマウスＣＯＸ−２配列に対して産生したポリクローナル抗体を使用した。
【００３８】
免疫染色をパラフィン切片について行ない、このものについてろうを取り除き、再水和し、そしてトリプシン（０．１％）を用いて室温で１５分間インキュベートした。内因性ペルオキシダーゼを、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、１％Ｈ２Ｏ２を用いて室温で３０分間ブロックした。ＰＢＳ中で洗浄後に、非特異的な結合を、５％の正常なヤギ血清（ＤＡＫＯ）を用いて室温で３０分間ブロックした。一次抗体をＰＢＳ中の０．１％ウシ血清アルブミン中で、１：２５０（ＣＯＸ−１およびＣＯＸ−２の検出の場合）、または８μｇ／ｍＬ（ＦＰ、ＥＰ１およびＥＰ３受容体の検出の場合）のいずれかにまで希釈し、引き続いて該組織と一緒に室温で６０分間インキュベートした。ペルオキシダーゼEnVision ＋ TM（DAKO Readytouse）と結合させた二次抗体を用いて、インキュベートを室温で３０分間行なった。ジアミノベンジジンをペルオキシダーゼについての基質として使用し、そしてインキュベートを室温で約１０分間行った。該スライドを、マイヤー(Mayer)ヘマトキシリン（Histolab）を用いて対比染色し、カバーガラスを用いてマウントし、そして光学顕微鏡で検査した。特異的な抗体を有しない適当なコントロールを含めた。
【００３９】
特に、蝸牛構造を検査した。ＣＯＸ−１およびＣＯＸ−２の両方についての染色は、コルチの器官および蝸牛の多くの部分に存在することが分かった。通常、該ＣＯＸ−１発現はＣＯＸ−２発現よりもより強いようであった。ＦＰプロスタノイド受容体は、コルチ器官（これは、有毛細胞そのものを含む）中で、ラセン靭帯(spiral ligament)および血管条中で、並びにラセン神経節中で大量に発現することを見出した。加えて、該ＦＰ受容体は内リンパ管領域において検出された。ＥＰ１およびＥＰ３プロスタノイド受容体についての染色は非常に弱く、このことはこれらの受容体がＦＰ受容体と対比して内耳中で強くは発現しないことを示す。従って、ＦＰプロスタノイド受容体は、メニエール病、耳鳴および聴覚損失について最も関連する構造中で、すなわちコルチ器官、血管条、ラセン神経節および内リンパ管領域中で検出された。該ＣＯＸ酵素が蝸牛中で少なくとも発現することを見出したという事実は、内因性プロスタグランジンが内耳において生理学的な機能を有するであろうことを示すものであり、このことは例えば耳鳴症状を治療し、軽減しまたは予防するのに重要となり得る。
【００４０】
２．ラタノプロストが内リンパ管構造の形態学に及ぼす影響の証明
ラタノプロストの鼓室内（中耳内に）投与のためおよび脳幹聴力測定のために、いずれかの性別の体重が２００〜３００ｇの４色素性モルモットを、ペントバルビタールを用いて安楽死させた。聴力測定を、ラタノプロスト（５８μｇ／ｍＬ；約１４μｇのラタノプロストに相当する総計２５０μＬ／注射）およびビヒクルの投与前後に、８、１６および３２ｋＨｚの周波数で行なった。ラタノプロストを一方の耳に、１日１回、３日間投与し、一方で他方の耳はビヒクルだけを同様に注射した。４日目に、該動物を過剰量の該麻酔薬を用いて安楽死させた。中耳を解剖し、該粘膜を視察した。その後に、該内耳を取り出し、該迷路を、卵円窓および正円窓を通して３％緩衝化グルタルアルデヒド溶液を用いて灌流固定した。次いで、該組織を同じ溶液中に約２４時間浸漬固定化させ、そして０．１Ｍ  ＥＤＴＡナトリウム溶液中で約２週間脱灰させた。その後に、該組織を光学顕微鏡についての通常の方法に従って調製し、そしてEpon包埋の組織片の超薄切片を透過型電子顕微鏡用に切断した。
【００４１】
ラタノプロスト処理またはビヒクル処理の耳における中耳の粘膜においてまたは鼓膜において、炎症性の変化は全く検出されなかった。そして、蝸牛（これは、有毛細胞を有するコルチ器官を含む）中では、形態学上の変化は全く検出されなかった。脳幹オージオグラムは、ラタノプロストまたはビヒクルを用いた処置によるであろう変化を全く示さなかった。従って、投与様式は技術的に成功であり、ラタノプロストは十分に耐性であった。最も重要なことに、いくつかの動物においては、内リンパ管における形態学上の明確な変化が検出された。これらの変化は、内リンパ管の周囲にある疎性結合組織中での線維芽細胞にわたる細胞外マトリックス密度の減少の帯域を含んだ。これらの発見は、３人によって実証された。該結果は、ラタノプロストは内リンパ管に到達し、そして該細胞が細胞外マトリックスを改変するように誘発させたことを示す。同様な効果は、これまでにランタプロストおよび他のプロスタグランジンを用いた局所処置後に、眼の毛様体筋において観察されている（Lutjen-DrecollおよびTammによる1989；Lindseyらによる1998；Stjernschantzらによる1998）。該結果は、ラタノプロスト並びに他のプロスタグランジン（少なくとも、ＰＧＦ２αタイプ）が内リンパ管にわたる細胞外マトリックスを改変する能力を有することを示す。このことにより、多分、該組織からリンパ管または静脈までの水流の抵抗が減少し、従って内リンパ系中の圧が結果として低下するにつれて、メニエール病の処置において有益となる。
【００４２】
３．メニエール病を患っている２患者ヘのラタノプロストの局所投与の有益な効果の説明
中から強の程度であると臨床的に評価された一側性のメニエール病を患っている中年の雌性および雄性の患者を、１日１回、３日間ラタノプロスト（キサラタン(Xalatan)登録商標）を用いて処置した。約０．３〜０．４ｍＬの減菌キサラタン（登録商標）（０．００５％のラタノプロスト）溶液を、適当な局所麻酔後に、該正円窓にほぼ同格に(in close apposition)鼓室内点滴注入(installation)することによって投与した。その後に、内耳内へのラタノプロストの浸透を増大させるために、該処置した耳を持つ側を上にして３０分間以上横たわるように頼んだ。該患者は、ラタノプロストの処置前にベースラインで、０．５、１および２ｋＨｚ周波数でのオージオグラムにおいて少なくとも４０デシベル低下した。加えて、彼等は耳鳴と合わせてめまいおよび悪心のエピソードを患っていた。オージオグラムおよび蝸牛での放出(emission)を、処置前および処置開始後の７日目または１３日目に記録し、そして自覚症状についての情報を集めた。該オージオグラムは、ラタノプロストの投与後に有意な変化を示さないが、蝸牛での放出は有意に改善され、そして該患者は耳鳴および聴覚損失についての彼等の状態において顕著に改善された（表１）。
表１．ラタノプロストの処置前後の、メニエール病を患っている２患者において得られたデータ
耳鳴は、以下の通り類別する：０はなし、１は弱、２は中、および３は強とする。
ラタノプロストを、１日１回、３日間、鼓室内注射によって投与し、そして処置の開始前および処置の開始後７または１３日目にデータを記録した。
2004520361.tif 000004
【００４３】
４．メニエール病におけるラタノプロストを用いた最初の臨床治験の結果
優先年期間中に、無作為化した二重盲の(double-masked)プラセボ対照臨床試験を、本特許出願の発明者によって行なった。一側性メニエール病を患っている９患者（５雄性および４雌性；３９〜６５齢）を、乗り換え設計の形を取る、ラタノプロスト（約５０マイクログラム／ｍＬ）またはプラセボを用いて３日間連続で、毎日処置した。従って、各患者は、ラタノプロストまたはプラセボの両方を用いて無作為な順序で処置した。各処置期間は３日間持続し、その後該患者を処置の開始から５日目および１５日目に調べた。該２つの処置期間の間（洗い出し期間）に、約１ヶ月を要した。該処置は、本質的に上記の通り、中耳内に鼓室内注射（約０．２〜０．８ｍＬ）によって行なった。いくつかのパラメータ／症状を記載し、それは以下の通りである：特に、純粋な音の平均値（デシベル）、識別値（％）、耳鳴の大きさ（デシベル）；および目視アナログスケール方法を用いることによる、自覚的な聴覚能力、耳鳴およびめまい。該患者は毎日、該３つの最後に述べたパラメーターを記録し、そしてラタノプロストおよびプラセボを用いた処置の開始後の２〜５日間および２〜１５日間についての平均値を算出した。
【００４４】
９患者中の３患者において、ラタノプロストを用いた処置後に、識別値の顕著な改善（２５〜５０％）が観察された。該改善は、プラセボ処置の間には決して観察されなかった。１５日目での、ラタノプロスト処置後の平均的な識別値は６８．２±７．２％であり、一方でプラセボ処置後では５２．９±１１．５％であった。２９％の差異はｐ＜０．０５レベルで統計学的に有意であった。同様に、プラセボと比較してラタノプロスト処置後に、１５日目での純粋な音の平均値における統計学的に有意な（ｐ＜０．０１）改善が見出され、それぞれの値は５８．９±３．６および６４．３±３．５デシベルであった（より低い方の値は改善を示す）。最後に、該９患者のうちの少なくとも７患者は、ラタノプロスト処置の開始後の早い期間（２〜５日）、およびラタノプロスト処置の開始後のより長い期間（２〜１５日）の両方で、めまいをあまり被らなかった。目視アナログスケールでの値（単位はｍｍ；値の減少は改善、すなわちめまいの感覚が低いことを反映する）は以下の通りであった；２〜５日のラタノプロスト処置の場合では２２．４±９．１であり、そしてプラセボ処置の場合では３３．５±１０．８（ｐ＜０．０５）であった；２〜１５日のラタノプロスト処置の場合では、２４．２±１０．０であり、そしてプラセボ処置の場合では、３４．２±１１．４（ｐ＜０．０５）であった。耳鳴の大きさ、耳鳴の自覚的な経験または自覚的な聴覚能力においては統計学的に有意な変化は観察されず、そして不定の結果が蝸牛での放出において得られた。
【００４５】
従って、本発明者によって実施される本研究の結果は、聴覚の反応、特に言語を識別する能力、および平衡器官である前庭装置の両方に及ぼす該プロスタグランジンの正の効果を証明する。ラタノプロスト処置に対する応答が該２人の最初の患者と臨床治験に含まれた患者との間でいくらか変わるという事実は、該疾患の重度の差異、被験時間の差異および研究設計の差異に起因し得る。しかしながら、両方の研究において、ラタノプロスト処置後の内耳機能における明快な改善を観察することができるであろう。
【００４６】
結論として、本発明者は、前臨床実験においてＣＯＸ酵素およびプロスタノイド受容体（特に、ＦＰ受容体）がメニエール病、耳鳴および聴覚損失に関して内耳の関連構造において発現することを示した。本発明者は、モルモットにおけるラタノプロストの鼓室内注射により、内リンパ管構造における形態学的な変化（これは、細胞外マトリックスの空隙率の増大を暗示する）を生じることも示し、このことより、内リンパ液の再吸収の増大を予想することができる。最後に、本発明者はメニエール病を患っている患者において、鼓室内ラタノプロスト注射後に有意な臨床的な改善を示した。従って、プロスタグランジンはメニエール病、耳鳴および聴覚損失を患っている患者の処置において治療学的な可能性を有することは非常にあり得ると考えられる。
【００４７】
投与様式、医薬組成物、プロスタグランジンおよび用量
好ましい投与様式は、鼓膜からの直接的な点滴注入によるか、または中耳内ヘのポンプを用いた徐放性注入による。医薬組成物は、中耳での使用に適合し得るビヒクルに溶解する薬理学的に活性な原理を含む。それらのビヒクルとしては、水溶液、ある油状溶液、および適合し得る軟膏を含むことができるが、特に合成または天然のマトリックスまたは担体ベース（例えば、ヒアルロン酸またはコンドロイチン硫酸および他のグルコサミングリカンベース）のゲルを含む。特に、該ゲルの分解を防止するある架橋したヒアルロン酸ゲルは徐放性製剤を確立し、その結果該プロスタグランジンアナログは徐放性期間中（例えば、数週間、数ヶ月間、または一層より長い期間）、内耳に放出されるために、所望される。更に、該ビヒクルは可溶化剤、リポソームおよび生理学的に適合し得る高分子（例えば、ポリビニルアルコール、ヒドロキシメチルセルロース、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸および他のグルコサミノグリカン）を含むことができ、粘性を増大させることができる。更に、生理学的に適合し得るナノ粒子製剤をも使用することができる。該製剤は中耳で使用するための適当な濃度で、適合し得る保存剤と一緒に保存することができる。
【００４８】
従って、本発明はメニエール病、耳鳴および聴覚損失の処置における、ＰＧＦ２αアナログおよび、ＦＰプロスタノイド受容体での作動薬の使用を提供する。特に、ラタノプロスト（１３,１４−ジヒドロ−１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２αイソプロピルエステル）、（これは、緑内障の処置のための広い臨床的な使用における薬物）、および医薬的に適当な塩を含む該ラタノプロストの酸が好ましい。加えて、ＦＰ受容体作動薬（例えば、フルプロステノールおよびフルプロステノールのイソプロピルエステル（トラボプロスト(travoprost)）、１７−フェニル−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２α、並びにそれらのプロドラッグ（例えば、イソプロピルエステルまたはエチルアミド（ビマトプロスト(bimatoprost)）、並びに１７−[(３,５−ジフルオロ)−フェニル]−１８,１９,２０−トリノル−ＰＧＦ２αおよびこのアナログのエステルは、適当な薬物候補である。特に、オメガ鎖上に末端の芳香族環式置換基または非芳香族環式置換基（例えば、炭素１７上のフェニル、ビフェニル、フリル、チオフェン、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチル）を有するプロスタグランジンアナログ、または炭素１６上でのフェノキシ置換のアナログが好ましい。しかしながら、ＰＧＦ２αそのもの、並びにＰＧＦ２αのより単純な誘導体およびエステルもまた適当であり得る。
【００４９】
異なるプロスタグランジンアナログの用量は、各アナログの内因性活性に応じて変わるが、これは１日当たり０．０１〜１０００μｇの範囲であり、より典型的には約１〜１００μｇである。該プロスタグランジンは優先的に、徐放性システム（例えば、ゲルまたは挿入物）によって投与すべきであるが、鼓膜からの注射を、例えばある期間中、１日１回または毎週１回、使用することもできる。インプラントポンプ装置を用いた連続投与もまた可能であり、そして特に該化合物の長期間投与が好ましい。インプラント可能な装置としては例えば、中耳、並びに正円窓および／または卵円窓の領域と結合させた耳介インプラント後再充填可能な浸透圧ポンプ装置を含む。典型的に、該プロスタグランジンは、寛解の期間および該組成物からの該プロスタグランジンの放出の性質に応じて、１日に１回から１年に数回、投与すべきである。現在、該プロスタグランジンの投与は寛解の期間中に連続であるべきか、またはメニエール病の攻撃中にだけ投与すべきであるのかは、分かっていない。しかしながら、耳鳴および聴覚の損失の処置の場合は、規則的な間隔で、例えば該疾患の激しさに応じて１年に１〜１２回またはより多い回数で徐放性製剤での該プロスタグランジンの連続投与が必要と考えられる。
【００５０】
本発明は本発明者にとって現在知られる最良の形態を構成する好ましい態様について記載するが、本分野の当業者によって明らかであろう様々な変化および改変を本明細書に添付する特許請求の範囲に記載した本発明の範囲を逸脱することなく行なうことができると理解されるべきである。
【００５１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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2004520361.tif 000029
2004520361.tif 000030