(57)【要約】本発明は、金属又は金属錯体をキレート化するための化合物であって、以下の式（ここで、ｎ及びｍは５≦ｍ＋ｎ≦１０のような整数であり、ＸはＳ及びＮＨから独立して選択され、Ｒ１， Ｒ２， Ｒ３及びＲ４は、Ｈ及び、−ＣＯＯＲ５， ＮＲ５Ｒ６及び−ＣＨ２ＯＲ５から独立して選択され［ここで、Ｒ５及びＲ６は、それが存在する場合、水素；アミノ酸；ペプチド；タンパク質；モノクローナル抗体；ホルモン；及び医薬として許容されるベクターから独立して選択される］を有するビスジチオカルバミン酸塩構造（Ｆ）から成ることを特徴とする化合物を提供する。本発明はまた、本発明に従うキレート化化合物を含んで成る診断用キットを提供する。
2004514721.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
金属又は金属錯体をキレート化するための化合物であって、以下の式
【化１】
2004514721.tif 000046
｛ここで、ｎ及びｍは５≦ｍ＋ｎ≦１０となる整数であり、
ＸはＳ及びＮＨから独立して選択され、
Ｒ１， Ｒ２， Ｒ３及びＲ４は、Ｈ並びに、−ＣＯＯＲ５， ＮＲ５Ｒ６及び−ＣＨ２ＯＲ５から選択される有機性官能基［ここで、Ｒ５及びＲ６は、それが存在する場合、水素；アミノ酸；ペプチド；タンパク質；有機性官能基；アルコキシカルボニル又はアリールオキシカルボニル（−ＣＯＯＲ７）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、アシルオキシ（−Ｏ２Ｒ７）、カルバモイル（−ＣＯＮＲ７）、シアノ（−ＣＮ）、アルキルカルボニル、アルキルアリールカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（ＮＲ７）、ハロゲン、アリル、アルコキシ（−ＯＲ７）、Ｓ−アルキル及びＳ−アリールから選択される基（ここで、Ｒ７はＣ１〜Ｃ１０アルキル又はアリール基を表す）；（ｉ）任意に置換されたアルキル、アシル、アリール又はアルキン基、（ｉｉ）飽和又は不飽和の、任意に置換された又は芳香族の炭素に基づいた環又は（ｉｉｉ）飽和又は不飽和の、任意に置換された又は芳香族のヘテロ環から選択される有機分子（ここで、これらの基及び環（ｉ）， （ｉｉ）及び（ｉｉｉ）は、置換されたフェニル基、置換された芳香族基又はアルコキシカルボニル又はアリールオキシカルボニル（−ＣＯＯＲ８）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、アシルオキシ（−Ｏ２Ｒ８）、カルバモイル（−ＣＯＮＲ８）、アルキルカルボニル、アルキルアリールカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（ＮＲ８）、ハロゲン、アリル、アルコキシ（−ＯＲ８）、Ｓ−アルキル及びＳ−アリールで置換されることがあり、Ｒ８はＣ１〜Ｃ１０アルキル又はアリール基を表す）；モノクローナル抗体；ホルモン；及び医薬として許容されるベクターから独立して選択される］から独立して選択される｝
を有するビスジチオカルバミン酸塩構造（Ｆ）から成ることを特徴とする化合物。
【請求項２】
ビスジチオカルバミン酸塩構造が、以下の式（Ｉ）， （ＩＩ）， （ＩＩＩ）及び（ＩＶ）
【化２】
2004514721.tif 000047
（ここで、Ｒ５， Ｒ６， ｎ及びｍは、それらが存在する場合、請求項１で限定したとおりである）から選択される構造から成る、請求項１に記載のキレート化化合物。
【請求項３】
ｍ及びｎが独立して３，４又は５である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ５＝Ｈである、請求項２又は３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５＝ＣＨ３である、請求項２又は３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５がトロパン誘導体である、請求項２又は３に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ５が以下の式
【化３】
2004514721.tif 000048
を有する、請求項２又は３に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１， Ｒ３及びＲ４＝Ｈであり、そしてＲ２がＮＲ５Ｒ６であり、ここで、Ｒ５＝Ｈであり、且つＲ６が
【化４】
2004514721.tif 000049
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のキレート化化合物及び金属又は金属錯体から成るキレート化生成物。
【請求項１０】
金属が銅又はその同位体である、請求項９に記載のキレート化生成物。
【請求項１１】
金属が遷移金属から選択される、請求項９に記載のキレート化生成物。
【請求項１２】
金属錯体がＴｃＮ又はＲｅＮである、請求項９に記載のキレート化生成物。
【請求項１３】
薬用製品又は診断用製品を製造するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載のキレート化化合物の使用。
【請求項１４】
治療又は診断のための放射性医薬を製造するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載のキレート化化合物の使用。
【請求項１５】
ドーパミン又はセロトニンの取り込みを可視化するための放射性医薬を製造するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載のキレート化化合物の使用。
【請求項１６】
薬用製品又は診断用製品を製造するための、請求項９〜１２のいずれか１項に記載のキレート化生成物の使用。
【請求項１７】
治療又は診断のための放射性医薬を製造するための、請求項９〜１２のいずれか１項に記載のキレート化生成物の使用。
【請求項１８】
ドーパミン又はセロトニンの取り込みを可視化するための放射性医薬を製造するための、請求項９〜１２のいずれか１項に記載のキレート化生成物の使用。
【請求項１９】
請求項１に記載のビスジチオカルバミン酸塩を製造するための方法であって、連続的に、
−以下の式（Ｖ）及び（ＶＩ）
【化５】
2004514721.tif 000050
（ここで、Ｒ１， Ｒ２， Ｒ３，Ｒ４， Ｘ， ｍ及びｎは請求項１で限定したとおりである）
の化合物のＸＨ官能基を保護する段階、
−化合物（ＶＩ）の−ＣＯＯＨ官能基を活性化する段階、
−式（Ｖ）の化合物と化合物（ＶＩ）とを、化合物（ＶＩ）の活性化したカルボキシル官能基を介して連結する段階、
−ＸＨ官能基を脱保護する段階、及び
−脱保護したＸＨ官能基をＣＳ２と反応させて、請求項１に記載のビスジチオカルバミン酸塩化合物を形成する段階、
を含んで成る、方法。
【請求項２０】
ビスジチオカルバミン酸塩化合物を製造するための請求項１９に記載の方法を含んで成り、そして更には、請求項１又は２に記載のキレート化化合物を得るためのその製造において遊離基Ｒ５、そして任意にＲ６を、このビスジチオカルバミド構造又は中間生成物に結合させる段階も含んで成る、請求項１又は２に記載の構造を製造するための方法。
【請求項２１】
請求項１又は２に記載の構造を製造するための方法であって、
−請求項１又は２に記載の構造を形成するために、請求項１又は２に記載の化合物の前駆体分子であって、遊離基Ｒ５、任意には遊離基Ｒ６を構成する前駆体分子の２つの連続したアミノ酸の２つのε−ＮＨ２官能基とＣＳ２とを反応させる段階、
を含んで成る方法。
【請求項２２】
請求項９に記載のキレート化生成物を製造するための方法であって、請求項２０又は２１に記載の製造方法に従う、請求項１又は２に記載のビスジチオカルバミン酸塩構造の製造、及び製造された前記ビスジチオカルバミン酸塩から構造を介して金属又は金属錯体を錯化するための反応、を含んで成る方法。
【請求項２３】
金属が遷移金属である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
金属が銅である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
金属錯体がＴｃＮ又はＲｅＮである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
請求項１〜８のいずれか１項に記載のキレート化化合物を含んで成る診断用キット。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明の技術分野
本発明は、金属又は金属錯体をキレート化するための化合物、放射性医薬、それらの製造方法、及び診断キット、に関する。
【０００２】
キレート化化合物は、診断用製品又は薬用製品を製造するために使用されうる。
【０００３】
前記金属は、例えば、Ｔｃ， Ｒｕ， Ｃｏ， Ｃｕ， Ｐｔ， Ｆｅ， Ｏｓ， Ｉｒ， Ｒｅ， Ｃｒ， Ｍｏ， Ｍｎ， Ｎｉ， Ｒｈ， Ｐｄ， Ｎｂ， Ｓｍ及びＴａ又はそれらの同位体から選択される遷移金属であってもよい。
【０００４】
前記金属錯体は、例えば、診断又は治療のための放射性医薬製品として使用されうる放射性遷移金属の窒化物錯体であってもよい。
【０００５】
診断のために使用されうる錯体の中でも、特にテクネチウム９９ｍ錯体を挙げることができる。
【０００６】
９９ｍＴｃの放射性核種を用いる放射性医薬製品は、その物理的且つ化学的特性の点で、診断のための核医学において非常に有用である。本発明に使用されうるテクネチウム錯体は、例えばＥ． ＤＥＵＴＳＣＨ ｅｔ ａｌ．：Ｐｒｏｇｒ． Ｉｎｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． （Ａｕｓｔｒａｌｉａ）， Ｖｏｌ． ３０， ｐｐ． ７６−１０６， １９８３において概説されており、そして調製方法はＪ． Ｂａｌｄａｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ １９８１， ｐｐ． １７９８−１８０１；Ｉｎｔ． Ａｐｐｌ． Ｒａｄｉｏｔ． Ｉｓｏｔ． ３６ （１９８５）， ｐｐ． １３３−１３９、国際特許出願ＷＯ ８５／０３０６３並びに特許出願ＥＰ−Ａ−５３７ ２４２及びＥＰ−Ａ−０ ４０３ ５２４において概説されている。
【０００７】
治療に使用されうる錯体は、例えば、レニウム錯体が使用されうる。
【０００８】
銅又はその同位体は、本発明にとって、例えば抗体又はペプチドを標識するために、診断、特に治療のために有用である（６７Ｃｕ， ６４Ｃｕ）。
【０００９】
本発明の説明
本発明の金属又は金属錯体をキレート化するための化合物は、以下の式
【化６】
2004514721.tif 000003
｛ここで、ｎ及びｍは５≦ｍ＋ｎ≦１０となる整数であり、
ＸはＳ及びＮＨから独立して選択され、
Ｒ１， Ｒ２， Ｒ３及びＲ４は、Ｈ並びに、−ＣＯＯＲ５， ＮＲ５Ｒ６及び−ＣＨ２ＯＲ５から選択される有機性官能基［ここで、Ｒ５及びＲ６は、それが存在する場合、水素；アミノ酸；ペプチド；タンパク質；有機性官能基；アルコキシカルボニル又はアリールオキシカルボニル（−ＣＯＯＲ７）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、アシルオキシ（−Ｏ２Ｒ７）、カルバモイル（−ＣＯＮＲ７）、シアノ（−ＣＮ）、アルキルカルボニル、アルキルアリールカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（ＮＲ７）、ハロゲン、アリル、アルコキシ（−ＯＲ７）、Ｓ−アルキル及びＳ−アリールから選択される基（ここで、Ｒ７はＣ１〜Ｃ１０アルキル又はアリール基を表す）；（ｉ）任意に置換されたアルキル、アシル、アリール又はアルキン基、（ｉｉ）飽和又は不飽和の、任意に置換された又は芳香族の炭素に基づいた環又は（ｉｉｉ）飽和又は不飽和の、任意に置換された又は芳香族のヘテロ環から選択される有機分子（ここで、これらの基及び環（ｉ）， （ｉｉ）及び（ｉｉｉ）は、置換されたフェニル基、置換された芳香族基又はアルコキシカルボニル又はアリールオキシカルボニル（−ＣＯＯＲ８）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、アシルオキシ（−Ｏ２Ｒ８）、カルバモイル（−ＣＯＮＲ８）、アルキルカルボニル、アルキルアリールカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（ＮＲ８）、ハロゲン、アリル、アルコキシ（−ＯＲ８）、Ｓ−アルキル及びＳ−アリールで置換されることがあり、Ｒ８はＣ１〜Ｃ１０アルキル又はアリール基を表す）；モノクローナル抗体；ホルモン；及び医薬として許容されるベクターから独立して選択される］から独立して選択される｝
を有するビスジチオカルバミン酸塩構造（Ｆ）から成ることを特徴とする。
【００１０】
ｎ及びｍは自然数である。それにより、ｍ及びｎは、独立して０，１，２，３，４，５，６，７，８，９又は１０であってもよく、ただし、５≦ｍ＋ｎ≦１０である。例えば、ｍ＝０の場合、ｎは５，６，７，８，９又は１０であってもよく、そしてｍ＝１の場合、ｎは４，５，６，７，８又は９であってもよい。本発明によると、官能基ＸＣＳ２は、事実ペプチド結合及び７以上、１０以下の炭素原子数によって分離される。
【００１１】
本発明は、任意の分子又は生体分子に連結しうる金属又は金属錯体を錯化するための新規系を提供する。この系は、以下のように、特に診断及び治療のための多くの利用を有する。
【００１２】
本発明によると、ビスジチオカルバミン酸塩化合物は、式が以下の式（Ｉ）， （ＩＩ）， （ＩＩＩ）及び（ＩＶ）
【化７】
2004514721.tif 000004
（ここで、ｎ及びＲ５、そしてｍ及びＲ６は、それらが存在する場合、上文で限定したとおりである）から選択される構造から成ることがある。
【００１３】
本発明によると、Ｒ５はＨ， ＣＨ３，トロパン誘導体又は式
【化８】
2004514721.tif 000005
の化合物から選択されることがある。
【００１４】
Ｒ５がトロパン誘導体である場合、それは以下の式（Ｇ）
【化９】
2004514721.tif 000006
｛ここで、遊離基Ｒ９， Ｒ１０及びＲ１１は式Ｆの化合物であり、他の遊離基は独立して水素；有機性官能基；アルコキシカルボニル又はアリールオキシカルボニル（−ＣＯＯＲ７）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、アシルオキシ（−Ｏ２Ｒ７）、カルバモイル（−ＣＯＮＲ８）、シアノ（−ＣＮ）、アルキルカルボニル、アルキルアリールカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（ＮＲ７）、ハロゲン、アリル、アルコキシ（−ＯＲ７）、Ｓ−アルキル及びＳ−アリールから選択される基（ここで、Ｒ７はＣ１〜Ｃ１０アルキル又はアリール基を表す）；（ｉ）任意に置換されたアルキル、アシル、アリール又はアルキン基、（ｉｉ）飽和又は不飽和の、任意に置換された又は芳香族の炭素に基づいた環又は（ｉｉｉ）飽和又は不飽和の、任意に置換された又は芳香族のヘテロ環から選択される有機分子（ここで、これらの基及び環（ｉ）， （ｉｉ）及び（ｉｉｉ）は、置換されたフェニル基、置換された芳香族基又はアルコキシカルボニル又はアリールオキシカルボニル（−ＣＯＯＲ８）、カルボキシル（−ＣＯＯＨ）、アシルオキシ（−Ｏ２Ｒ８）、カルバモイル（−ＣＯＮＲ７）、アルキルカルボニル、アルキルアリールカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アミノ（ＮＲ８）、ハロゲン、アリル、アルコキシ（−ＯＲ８）、Ｓ−アルキル及びＳ−アリールで置換されることがあり、Ｒ８はＣ１〜Ｃ１０アルキル又はアリール基を表す）から選択される｝のものであってもよい。
【００１５】
トロパン誘導体を含んで成る本発明の化合物は、例えばパーキンソン病の診断に使用されうる。
【００１６】
本発明に従う化合物の一例は、式（Ｆ）（ここで、Ｒ１， Ｒ３及びＲ４はＨであり、そしてＲ２はＮＲ５Ｒ６であり、ここで、Ｒ５はＨであり、そしてＲ６は
【化１０】
2004514721.tif 000007
から選択される）の構造から成ることがある。
【００１７】
Ｒ６が
【化１１】
2004514721.tif 000008
である化合物は、例えば腎機能の診断研究又は腎の病状の治療のために使用されうる。
【００１８】
本発明はまた、本発明に従うキレート化化合物、及び金属又は金属錯体から成るキレート化産物を提供する。金属又は金属錯体の例は上文で説明済みである。
【００１９】
例えば、金属は、銅、銅同位体及び遷移金属から選択されることがある。これは、例えば治療又は診断のための放射性医薬として有用なことがある。
【００２０】
例えば、金属錯体はＴｃＮ又はＲｅＮであってもよい。この産物は、放射性医薬として使用されうる。
【００２１】
本発明はまた、薬用製品又は診断用製品、例えば、治療又は診断のための放射性医薬を製造するための本発明に従うキレート化化合物又はキレート化産物の使用に関する。放射性医薬は、例えばドーパミン又はセロトニンの取り込みを可視化するための放射性医薬であってもよい。そのような放射性医薬は、神経変性病、例えばパーキンソン病を診断するために有用なことがある。
【００２２】
本発明はまた、本発明に従うビスジチオカルバミン酸塩化合物を製造するための方法であって、連続的に、
−以下の式（Ｖ）及び（ＶＩ）
【化１２】
2004514721.tif 000009
（ここで、Ｒ１， Ｒ２， Ｒ３，Ｒ４， Ｘ， ｍ及びｎは上文で限定したとおりである）
の化合物のＸＨ官能基を保護する段階、
−化合物（ＶＩ）の−ＣＯＯＨ官能基を活性化する段階、
−式（Ｖ）の化合物と化合物（ＶＩ）とを、化合物（ＶＩ）の活性化したカルボキシル官能基を介して連結する段階、
−ＸＨ官能基を脱保護する段階、及び
−脱保護したＸＨ官能基をＣＳ２と反応させて、本発明に従うビスジチオカルバミン酸塩化合物を形成する段階、
を含んで成る方法、も提供する。
【００２３】
出発化合物の１つには、これらの化合物を連結するペプチド結合を形成するための酸の官能基及び他のアミン官能基が含まれる。尚、当該化合物のそれぞれには、ＣＳ２に結合するための、少なくとも１つの遊離ＮＨ２又はＳＨ官能基が含まれなければならない。
【００２４】
化合物（Ｖ）及び（ＶＩ）のＸＨ官能基を保護するための段階の目的は、化合物（ＶＩ）の−ＣＯＯＨ官能基を活性化し、そして化合物（Ｖ）と活性化した化合物（ＶＩ）とを連結するために使用される試薬からこれらの官能基を保護することにある。それは、ＸがＳ又はＮＨである官能基Ｘを保護するために、当業者に知られている常用の試薬を用いることによって実施される。例は後述する。
【００２５】
他の段階は、各々、当業者に知られている方法によって実施されうる。本発明を例示するための例は後述する。
【００２６】
本発明のキレート化化合物の基礎は、例えば、ε−末端位に２つのアミン官能基を含む２つの天然又は非天然アミノ酸と、アキシアルな鎖上の、放射性医薬における使用のためのベクター分子を官能化する役割を果たす官能基との組み合わせにあることがある。ε−末端位におけるアミン官能基は、金属核としても知られる、金属を錯化する役割を果たすジチオカルバミン酸塩の官能基に修飾される。
【００２７】
本発明はまた、本発明に従う化合物を製造する方法であって、本発明に従うビスジチオカルバミン酸塩化合物を製造する方法を含んで成り、そして更には、序文で限定したような本発明に従うキレート化化合物を得るためのその製造において遊離基Ｒ５、そして任意にＲ６を、このビスジチオカルバミド構造又は中間産物に結合させる段階も含んで成る方法を提供する。
【００２８】
本発明は、このように、一方で金属、例えば放射性元素に結合し、そして、それらの官能化によって、最後の合成（遊離基Ｒ５又はＲ６の連結）を介して、又はベクター分子又はペプチドの合成の間、そのいずれかで、ベクター分子に連結されうる錯化剤ファミリーを提供する。
【００２９】
本発明の金属又は金属錯体をキレート化するための化合物は、例えば、一方で放射性元素に結合することができ、そして他方では、最後の合成を介して、又はベクター分子又はペプチドの合成の間、そのいずれかでベクター分子と連結されうる。
【００３０】
本発明はまた、本発明に従う化合物を製造する方法であって、
−請求項１又は２に記載の化合物を形成するために、請求項１又は２に記載の化合物の前駆体分子であって遊離基Ｒ５、任意には遊離基Ｒ６を構成する前駆体分子の２つの連続したアミノ酸の２つのε−ＮＨ２官能基とＣＳ２とを反応させる段階、
を含んで成る方法に関する。
【００３１】
前記前駆体分子は、例えばＮＨ２とＣＯＯＨとの側鎖の官能基間で形成したペプチド結合を介して連結される、上述の化合物（Ｖ）及び（ＶＩ）の形態であってもよい。
【００３２】
本発明の化合物は、例えば、側鎖のＮＨ２官能基上、ジペプチド、又はペプチド若しくはタンパク質のＮ末端での反応の場合には、側鎖のＮＨ２官能基及びＮ末端のＮＨ２官能基上での、２つの連続した天然又は非天然のアミノ酸のジチオカルバミン酸塩（ＤＴＣ）標識によって得ることができる。また、ペプチド結合及び、少なくとも７個の炭素によって分けられた２つのアミン官能基を含んで成る有機分子のＤＴＣ標識によって得ることもできる。
【００３３】
本発明の方法は、例えば、本発明の製造方法による、本発明に従うビスジチオカルバミン酸塩化合物の製造、及び製造された前記ビスジチオカルバミン酸塩を介して金属又は金属錯体をキレート化するための反応、を含んで成る、上文で限定した本発明に従うキレート化産物を製造するために使用されうる。
【００３４】
金属又は金属錯体は、上文で限定したものであってもよい。
【００３５】
本発明はまた、本発明に従うキレート化化合物を含んで成る診断用キットも提供する。
【００３６】
本発明の他の特徴及び利点も、以下の実施例を読むことで明らかとなるだろう。
【００３７】
実施例
Ａ）ジペプチドからの本発明に従うジチオカルバミン酸塩の調製例
例１：以下の配列：リジン−リジン（１）、アラニン−リジン（２）及びグリシン−リジン（３）からのビスジチオカルバミン酸塩の調製
各ジアミノ分子（０．５ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのエタノール中で懸濁し、そして水酸化ナトリウムのペレット（０．０８ｇ；２ｍｍｏｌ）を、アミノ酸分子を溶解するのに必要な最小量の水と一緒に添加する。混合物を１時間攪拌しながら放置し、そして水／エタノール混合物を、減圧下、低温で蒸留する。得られた油をアルコール中で溶解し、３つの水酸化ナトリウムのペレットを加え、そして過剰の純粋な二硫化炭素ＣＳ２を一滴ずつ導入する。黄色の発色が１時間後に出現し、そして硫化銅の試験はポジティブである。この試験は、反応混合物の液滴をシリカプレート上に載せ、そしてこの液滴上に、硫酸銅／水の液滴を載せることによって実施された：ビスジチオカルバミン酸塩が形成されると、茶色の点が観察される。４時間の攪拌後、溶媒を乾燥するまで蒸発させると、黄色のペーストが生成する。
【００３８】
ＨＰＬＣ解析；Ｃ１８−５μｍ−２５ ｃｍ−ＹＭＣカラム；流速１ｍｌ／分；３００ｎｍでのＵＶ検出；溶出剤Ａ＝水；Ｂ＝メタノール；グラジエント０〜５分０％のＢ−５〜２０分０〜１００％のＢ−２０〜２５分１００％のＢ；２５〜２５．１分の１００〜０％のＢ−２５．１〜３０分０％のＢ。当該合成産物の純度は３つの場合において９５％超である。
【００３９】
例２：リジン−リジン（ＤＴＣｌｙｓ−ｌｙｓＤＴＣ）：化合物（４）；アラニン−リジン（ＤＴＣａｌａ−ｌｙｓＤＴＣ）：化合物（５）及びグリシン−リジン（ＤＴＣｇｌｙ−ｌｙｓＤＴＣ）：化合物（６）ビスジチオカルバミン酸塩の放射性標識
９９Ｔｃによる放射性標識のプロトコール：
ａ−中間体の溶液：ヒドラジン（ＳＤＨ） ５ｍｇ，１，２−プロパンジアミノ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’，−テトラ酢酸（ＰＤＴＡ） ５ｍｇ， １０μｇの塩化第二スズを含む凍結乾燥物を１ｍｌの注射用水中に溶解する。１ｍｌの９９ＴｃＯ４−を添加する。混合物を３０分間作用させる。
【００４０】
ｂ−交換反応：０．１ＭのｐＨ７．４のリン酸緩衝液に溶解した１．８ｍｇのビスジチオカルバミン酸塩を０．５ｍｌの前述の中間体溶液と混合する。混合物を２時間作用させておく。
【００４１】
前記混合物をＨＰＬＣで解析する。これらの解析結果を以下の表１に示す。
【表１】
2004514721.tif 000010
【００４２】
最初の２つのジチオカルバミン酸塩を分子間で反応させ、一方、（ＤＴＣｇｌｙ−ｌｙｓＤＴＣ）ビスジチオカルバミン酸塩は分子内反応を介して反応する。
【００４３】
Ｂ）本発明の方法に従う式Ｖ及びＶＩの化合物のＸＨ官能基を保護するための段階の例例３：Ｎ−トリフルオロアセチル−５−アミノ−吉草酸：化合物（７）の合成
１．６当量のＳ−エチルトリフルオロチオアセテート（１６ｍｍｏｌ；２ｍｌ）を、シリンジを用いて、圧縮空気流を通し、隔壁を備えた三首フラスコ内の１Ｎ ＮａＯＨ（１６ｍｍｏｌ； １０ｍｌ）（ｌａｃｕｎａ）の混合物中に溶解した５−アミノ吉草酸（５ａ）（１０ｍｍｏｌ；１．１７ｇ）の溶液に対し、一滴ずつ添加する。エタンチオールの特徴的な発生が観察される。
【００４４】
反応溶液を室温で２４時間攪拌し、白色沈澱が形成する。１ｍｌの濃塩酸を続いて添加する。前記沈澱を続いて焼結漏斗で濾過し、そして大気中又はデシケーター内で乾燥させる。
【００４５】
粗製産物を１０ｍｌのベンゼン／ヘキサン混合物（１／１）から再結晶によって生成し、以下の式（７）
【化１３】
2004514721.tif 000011
の１．６０ｇのＮ−トリフルオロアセチル−５−アミノ吉草酸を生成する。
【００４６】
例４：Ｎ−トリフルオロアセチル−６−アミノ−カプロン酸：化合物（８）の合成
本方法は、化合物（８）を生成するために、例３と同様の方法で実施する。本方法は、１当量の１Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍｍｏｌ；１０ｍｌ）中に溶解した１当量の６−アミノカプロン酸（１０ｍｍｏｌ；１．３１ｇ）を用いて、これに１．６当量のＳ−エチルトリフルオロアセテート（１６ｍｍｏｌ；２ｍｌ）を添加して開始する。精製後、１．７０ｇのＮ−トリフルオロアセチル−６−アミノ−カプロン酸（６ｂ）（収率＝７５％）の以下の式８が回収される：
【化１４】
2004514721.tif 000012
【００４７】
例５：Ｎ−トリフルオロアセチルオルニチン：化合物（９）の合成
このプロトコールは、上述したものと同一である：１．６当量のＥｔＳＣＯＣＦ３（１６ｍｍｏｌ；２ｍｌ）を、１ＮのＮａＯＨ（１０ｍｍｏｌ；１０ｍｌ）（ｌａｃｕｎａ）の混合物中のオルニチン一塩酸塩溶液に対し添加する。
【００４８】
粗製産物を１０ｍｌの水／エタノール混合物（１／１）からの再結晶によって精製し、以下の式９の１．６０ｇのＮδ−トリフルオロアセチルオルニチンを、白色粉末の形態で、７０％の収率で生成せしめる。
【化１５】
2004514721.tif 000013
【００４９】
例６：Ｎ−トリフルオロアセチルリジン：化合物（１０）の合成
本プロトコールは上述のものと同一であり：１．６当量のＥｔＳＣＯＣＦ３（１６ｍｍｏｌ；２ｍｌ）が、１ＮのＮａＯＨ（１０ｍｍｏｌ；１０ｍｌ）（ｌａｃｕｎａ）と混合したリジン一塩酸塩（１０ｍｍｏｌ；１．８２ｇ）の溶液に対して添加される。
【００５０】
粗製産物が１０ｍｌの水／エタノール混合物（１／１）からの再結晶によって精製され、以下の式１０の１．７０ｇのＮδ−トリフルオロアセチルリジンが白色粉末の形態で、７０％の収率で生成する。
【化１６】
2004514721.tif 000014
【００５１】
例７：Ｎδ−トリフルオロアセチルジアミノペンタン：化合物（２２）の合成
５０ｍｍｏｌのジアミノペンタンを１００ｍｌのメタノールに溶解する。１０ｍｌのメタノール中の５０ｍｍｏｌの溶液を一滴ずつ添加する。反応混合物を３時間攪拌する。溶媒を蒸発させた後、黄色の油が得られ、これを氷冷して部分的に結晶化させる。この合成は以下のように図式的に表すことができる：
【化１７】
2004514721.tif 000015
【００５２】
精製は、シリカゲル上での、溶出液：ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９０／１０）を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって実施される。
【表２】
2004514721.tif 000016
【００５３】
例８：Ｎα−Ｂｏｃ−ジアミノブタン：化合物（２７）の合成
【化１８】
2004514721.tif 000017
ジオキサン（６０ｍｌ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（４．９ｇ， ０．２２ｍｏｌ）の溶液をジオキサン（６０ｍｌ）中の１，４−ブタンジアミン（１５．５１ｇ， ０．１７６ｍｏｌ）の溶液に対し２．５時間かけて添加する。混合物を２２時間攪拌し、そして溶媒をロータベーパーで蒸留する。水（５０ｍｌ）を残査に添加し、そして不溶性の二置換した生成物を濾過によって回収する。濾液を無水マグネシウムで脱水する。次に、それを塩化メチレン（３ｘ５０ｍｌ）で抽出する。溶媒を蒸発させた後、３．４ｇの無色の油（化合物２７）（８１％）が得られ、そして徐々に固化して白色固体が生成した（融点＝１１２℃、文献★に記載の融点＝１１０〜１１２℃）。
【表３】
2004514721.tif 000018
【００５４】
Ｃ）本発明の方法による式ＶＩの化合物のＣＯＯＨ官能基を活性化段階の例
例９：化合物（７）及び（８）の酸性官能基の活性化
４７０ｍｇの化合物（７）−又は５００ｍｇの化合物（８）−（２．２０ｍｍｏｌ）を、５０ｍｌの丸底フラスコ内にある２０ｍｌの酢酸エチル中で溶解する。１当量のＮ−ヒドロキシスクシンイミド（２．２０ｍｍｏｌ；２５３ｍｇ）を添加する。１当量のジシクロヘキシルカルボジイミド（２．２０ｍｍｏｌ， ４５４ｍｇ）をこの透明な溶液に対し添加する。混合物を室温で２４時間攪拌する。Ｎ，Ｎ’−ジヘキシルウレアの白色沈澱が直ちに出現し、そして焼結漏斗を介する濾過によって除去する。濾液を回収し、そして蒸発させる。淡い黄色の油が得られ、これを必要に応じて少量の酢酸エチル中で溶解し、そして混合物を再び濾過する。この作業は、残りのウレアを除去する。濾液を蒸発させ、濾液を蒸発させ、室温で結晶化する透明な油が生成し、その結果６８２ｍｇの化合物（１１）−又は７１３ｍｇの化合物（１２）が真珠光沢のある白色固体の形態で生成する（収率＝９０％）。
【化１９】
2004514721.tif 000019
【化２０】
2004514721.tif 000020
【００５５】
例１０：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドによる馬尿酸の活性化：化合物（２３）
【化２１】
2004514721.tif 000021
１７．３ｍｍｏｌ（２ｇ）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドを６０ｍｌの酢酸エチルに溶解する。１７．３ｍｍｏｌ（３．１ｇ）の馬尿酸を添加する。１５ｍｌの酢酸エチル中の１７．３ｍｍｏｌ（３．５７ｇ）のジシクロヘキシルカルボジイミドの溶液を添加する。膨大な白色沈澱が形成する。反応混合物を１５時間攪拌する。溶液を濾過し、そして白色固体を回収する。
【００５６】
精製：
酢酸エチルからの低温分別再結晶
融点＝１４９〜１５０℃
【表４】
2004514721.tif 000022
【００５７】
例１１ａ）：化合物（２４）を形成するための馬尿酸とリジンのカップリング
【化２２】
2004514721.tif 000023
１．５ｍｍｏｌ（０．５ｇ）の化合物２３を２０ｍｌのテトラヒドロフランに溶解する。１．５ｍｍｏｌ（０．４ｇ）のＮε−トリフルオロアセチルリジン及び１．５ｍｍｏｌ（０．２ｍｌ）のトリエチルアミンを続いて添加し、そして、２０時間攪拌した後、混合物は透明となる。ＴＨＦを蒸発させ、そして得られた油を酢酸エチル中で溶解し、そして水で洗浄する。水相を数滴の濃酢酸で酸性化し、そして次にジクロロメタンで抽出する。白色固体が有機相中で沈澱する（生成物）。
【表５】
2004514721.tif 000024
【００５８】
例１１ｂ）：化合物（２５）を形成するためのＮ−ヒドロキシスクシンイミドによるＮε−トリフルオロアセチルリジンＮα−馬尿酸（化合物２４）の活性化
１０ｍｍｏｌ（２ｇ）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドを６０ｍｌの酢酸エチルに溶解する。１０ｍｍｏｌのＮε−トリフルオロアセチルリジンＮα−馬尿酸を添加する。２０ｍｌの酢酸エチル中の１０ｍｍｏｌのジシクロヘキシルカルボジイミドの溶液を添加する。反応混合物を２４時間攪拌する。溶液を濾過し、そして白色固体が回収される。
【表６】
2004514721.tif 000025
【００５９】
精製：
酢酸エチルからの低温分別再結晶
【００６０】
Ｄ）本発明の方法によるカルボキシル官能基を介して活性化した式Ｖの化合物と式ＶＩの化合物を結合するための段階の例
例１２：Ｎδ，Ｎδ−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノペンタノイル）オルニチン：化合物（１３）の合成
１当量の化合物（９）又は［ｌａｃｕｎａ］（２ｍｍｏｌ；すなわち４５６ｍｇ）を、２５ｍｌの丸底フラスコ内の１０ｍｌのジメチルホルムアミド中で溶解する。懸濁物が得られ、これに対し１ｍｌのトリエチルアミン及び１．５当量の化合物（１１）（３ｍｍｏｌ；それぞれ６３９ｍｇ又は６８１ｍｇ）を添加する。反応混合物を室温で２４時間攪拌し、透明な溶液が生成する。
【００６１】
ｐＨ＝８となるまで炭酸ナトリウム溶液を漸次添加することにより、混合物をアルカリ性にする。次に、混合物を１５ｍｌの酢酸エチルを用いて２回抽出する。水相を回収し、そしてｐＨ＝２となるまで数滴の濃塩酸の添加により加水分解する。続いて、残りのＤＭＦを除去するために有機相を水で洗浄し、そして続いて塩溶液で洗浄し、そしてＮａ２ＳＯ４上で脱水する。続いて溶媒を蒸発させ、室温で結晶化する透明な溶液が生成する。収率は７０％である。
【化２３】
2004514721.tif 000026
【００６２】
例１３：Ｎδ，Ｎ−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノヘキサノイル）オルニチン：化合物（１４）の合成
本方法は、１当量の化合物（９）（２ｍｍｏｌ；すなわち４５６ｍｇ）を用いて、例１２と同様の方法で実施される。化合物（１１）は１．５当量の化合物（１２）（３ｍｍｏｌ；すなわち６８１ｍｇ）と交換される。収率は７０％である。
【化２４】
2004514721.tif 000027
【００６３】
例１４：Ｎ， Ｎδ−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノペンタノイル）リジン：化合物（１５）の合成
１当量の化合物（１０）（２ｍｍｏｌ；すなわち４８４ｍｇ）を２５ｍｌの丸底フラスコ内の１０ｍｌのジメチルホルムアミド中で溶解する。懸濁液が得られ、これに対し１ｍｌのトリエチルアミン及び１．５当量の化合物（１１）（３ｍｍｏｌ；すなわち６３９ｍｇ又は６８１ｍｇ）を添加する。反応混合物を室温で２４時間攪拌し、それにより透明な溶液が生成する。
【００６４】
ｐＨ＝８となるまで炭酸ナトリウム溶液を漸次添加することにより、混合物をアルカリ性にする。次に、混合物を１５ｍｌの酢酸エチルを用いて２回抽出する。水相を回収し、そしてｐＨ＝２となるまで数滴の濃塩酸の添加により加水分解する。続いて、残りのＤＭＦを除去するために有機相を水で洗浄し、そして続いて塩溶液で洗浄し、そしてＮａ２ＳＯ４上で脱水する。続いて溶媒を蒸発させ、室温で結晶化する透明な溶液が生成する。収率は７０％である。
【化２５】
2004514721.tif 000028
【００６５】
例１５：Ｎδ，Ｎδ−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノヘキサノイル）リジン：化合物（１６）の合成
本方法は、１当量の化合物（１０）（２ｍｍｏｌ；すなわち４５６ｍｇ又は４８４ｍｇ）を用いて、例１４と同様に実施される。化合物（１１）は上文の例９で得られた１．５当量の化合物（１２）（３ｍｍｏｌ；すなわち６８１ｍｇ）で置き換えられる。収率は７０％である。
【化２６】
2004514721.tif 000029
【００６６】
例１７：化合物（２６）を形成するためのＮε−トリフルオロアセチルジアミノペンタン（２２）に対するＮε−トリフルオロアセチルリジンＮα−馬尿酸ＮＨＳ（２４）のカップリング
１．５ｍｍｏｌのＮε−トリフルオロアセチルリジンＮα−馬尿酸ＮＨＳ（２４）を５０ｍｌのテトラヒドロフランに溶解する。１．５ｍｍｏｌのＮε−トリフルオロアセチルジアミノペンタン（２２）及び１．５ｍｍｏｌ（０．２ｍｌ）のトリエチルアミンを続いて添加し、そして２０時間の攪拌の後、混合物が透明となる。ＴＨＦを蒸発させ、そして得られた油を酢酸エチルに溶解し、そして水で洗浄する。水相を数滴の濃酢酸で酸性化し、そして次にジクロロメタンで抽出する。白色固体が有機相中で沈澱する。
【００６７】
この反応は以下のように図式的に表すことができる：
【化２７】
2004514721.tif 000030
【００６８】
例１８：Ｎε， Ｎδ−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（α’，δ’−ジアミノブチル）−Ｎα（カルボキシベンジルオキシ）−Ｄ−リジン：化合物（２８）の合成
【化２８】
2004514721.tif 000031
０．２００ｇ（１．０６７ｘ１０−３ｍｏｌ）のＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，４−ジアミノブタン（化合物（２７））、０．４０５ｇ（１．０６７ｘ１０−３ｍｏｌ）のＮα−ＣＢｚ−Ｎε−ｔＢｏｃ−Ｄ−リジン、０．２２０ｇ（１．０６７ｘ１０−３ｍｏｌ）の１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド及び０．１４４ｇ（１．０６７ｘ１０−３ｍｏｌ）の１Ｈ−ヒドロキシベンゾトリアゾールを、５０ｍｌの丸底フラスコ内の３０ｍｌの乾燥ジクロロメタン中に溶解する。Ｎ， Ｎ’−ジシクロヘキシルウレアの白色沈澱がこの反応の間に現れる。反応混合物を室温で２０時間攪拌する。濾液を蒸発させることにより白色固体が生成し、これをＨ２Ｏ（２０ｍｌ）に溶解し、そして飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２０ｍｌ）で処理する。水相をジクロロメタン（４０ｍｌ）で抽出し、そして水（１０ｍｌ）で洗浄する。有機相をＭｇＳＯ４上で脱水し、そして蒸発させて固体の化合物を生成させる。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（種々の溶出液：ＣＨ２Ｃｌ２単独（１００ｍｌ）、その後ＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ））によって精製する。純粋な画分は、０．３０２ｇ，５２％の固体の生成物、融点＝６０〜６２℃という結果をもたらす。
【表７】
2004514721.tif 000032
Ｎε，Ｎδ−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（α’，δ’−ジアミノブチル）−Ｄ−リジン：化合物（２９）の合成
【化２９】
2004514721.tif 000033
０．３００ｇ（５．４９ｘ１０−４ｍｏｌ）のＮε， Ｎδ−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（α’，δ’−ジアミノブチル）−Ｎα（カルボキシベンジルオキシ）−Ｄ−リジン（化合物（２８））を５０ｍｌの丸底フラスコ内の２０ｍｌのメタノールに溶解し、そして４０ｍｇのＰｄ／Ｃ（１０％）を添加する。反応混合物を６０時間攪拌し；Ｐｄはセライトを用いる濾過によって除去する。溶媒を減圧下で除去し、無色の液体が生成する。ヘキサンで洗浄し、そして脱水したこの液体は０．２０５ｇ（９０％）の化合物（２９）（液体）をもたらす。
【表８】
2004514721.tif 000034
【００６９】
Ｅ）本発明に従うビスジチオカルバミン酸塩化合物の製造方法であって、遊離基Ｒがこの化合物の中間生成物にカップリングする、方法の例
例１９：メチルＮδ，Ｎδ−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノヘキサノイル）リジン酸塩：化合物（１７）の合成
【化３０】
2004514721.tif 000035
１００ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）の化合物（１６）を１０ｍｌの無水メタノールに溶解する。２当量のＴＭＣＳ（０．４ｍｍｏｌ；５６μｌ）をこの懸濁物にゆっくりと添加し、そして混合物を室温で２４時間攪拌する。溶媒を蒸発させることで黄色の油が生成し、これを２０ｍｌの酢酸エチルに溶解する。有機相を２０ｍｌの炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、そして次に２０ｍｌの塩溶液で洗浄し、そしてＭｇ２ＳＯ４上で脱水する。溶媒を蒸発させることで、９０ｍｇのメチルＮε，Ｎε，−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（６−アミノヘキサノイル）リジン酸塩（化合物（１７））が９０％の収率で生成する。
【表９】
2004514721.tif 000036
【００７０】
例２０：２β−［Ｎδ，Ｎδ−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノヘキサノイル）オルニチルオキシメチル］−３β−（４’−トリル）−トロパン：化合物（１８）の合成
上文の例１２で得られた０．８当量の化合物（１３）（０．６５ｍｍｏｌ，すなわち２７５ｍｇ）を、室温で、且つ不活性雰囲気、例えば窒素のもとで、２０ｍｌのジクロロメタン中の２β−ヒドロキシメチル−３β−（４’−トリル）トロパン（２００ｍｇ；０．８ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。
【００７１】
０．８当量のＤＭＡＰ（０．６５ｍｍｏｌ；８０ｍｇ）及び０．８当量のＥＤＣＩ（０．６５ｍｍｏｌ；１２５ｍｇ）を続いて添加する。１５時間の攪拌の後、反応液を、ＮａＨＣＯ３溶液（２０ｍｌ）、そして続いて１Ｎの塩酸溶液（２０ｍｌ）、そして最後に塩溶液（２０ｍｌ）で洗浄し、そして有機相をＮａ２ＳＯ４上で脱水する。溶媒を蒸発させ、そして黄色の油を５０％の収率で回収する。
【化３１】
2004514721.tif 000037
【００７２】
例２１：２β−［Ｎε，Ｎε−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノヘキサノイル）オルニチルオキシメチル］−３β−（４’−トリル）−トロパン：化合物（１９）の合成
本方法は、２β−ヒドロキシメチル−３β−（４’−トリル）トロパン（２００ｍｇ；０．８ｍｍｏｌ）の溶液を用いて、例２０と同様に実施される。化合物（１３）を、上文の例１５で得られた０．８当量の化合物（１６）（０．６５ｍｍｏｌ；すなわち２８４ｍｇ）と置き換える。溶媒を蒸発させ、そして黄色い油が５０％の収率で得られる。
【化３２】
2004514721.tif 000038
【００７３】
例２２：２β−［Ｎδ，Ｎε−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノヘキサノイル）オルニチルオキシメチル］−３β−（４’−トリル）−トロパン：化合物（２０）の合成
本方法は、２β−ヒドロキシメチル−３β−（４’−トリル）トロパン（２００ｍｇ；０．８ｍｍｏｌ）の溶液を用いて、例２０と同様に実施される。化合物（１３）を、上文の例１５で得られた０．８当量の化合物（１６）（０．６５ｍｍｏｌ；すなわち２８４ｍｇ）と置き換える。溶媒を蒸発させ、そして黄色の油を５０％の収率で回収する。
【化３３】
2004514721.tif 000039
【００７４】
例２３：２β−［Ｎε，Ｎδ−ビス（トリフルオロアセチル）−Ｎ−（５−アミノペンタノイル）リジニルオキシメチル］−３β−（４’−トリル）−トロパン：化合物（２１）の合成
本方法は、２β−ヒドロキシメチル−３β−（４’−トリル）トロパン（２００ｍｇ；０．８ｍｍｏｌ）の溶液を用いて、例２０と同様に実施される。化合物（１３）を、上文の例１４で得られた０．８当量の化合物（１５）（０．６５ｍｍｏｌ；すなわち２９３ｍｇ）と置き換える。溶媒を蒸発させ、そして黄色の油を５０％の収率で回収する。
【化３４】
2004514721.tif 000040
【００７５】
例２４：２β−［Ｎε，Ｎδ−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（α’，δ’−ジアミノブチル）−Ｄ−リジン］−３β−（４’−トリル）トロパン：化合物（３０）
【化３５】
2004514721.tif 000041
０．１７３ｇ（４．１５ｘ１０−４ｍｏｌ）のＮε，Ｎδ−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（α’，δ’−ジアミノブチル）−Ｄ−リジン（化合物２９）、０．０８５ｇ（４．１５ｘ１０−４ｍｏｌ）の１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド、０．０５６ｇ（４．１５ｘ１０−４ｍｏｌ）の１Ｈ−ヒドロキシベンゾトリアゾール及び０．１２３ｇ（４．１５ｘ１０−４ｍｏｌ）の２−β−カルボキシ−３β−トリルプロパンを、５０ｍｌの丸底フラスコ内の３０ｍｌの乾燥ジクロロメタンに溶解する。Ｎ， Ｎ’−ジシクロヘキシルウレアがこの反応の間に現れる。反応混合物を室温で２０時間攪拌する。回収し、そして蒸発させた濾液は白色固体を与え、これを水Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ）に溶解し、そして飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍｌ）で処理する。水相をジクロロメタン（３ｘ２０ｍｌ）で抽出し、そして水（１０ｍｌ）で洗浄し；得られた有機相をＭｇＳＯ４上で脱水し、そして蒸発させて液体の化合物が生成する。生成物は、フラッシュクロマトグラフィー（溶出液：ＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ））によって精製される。０．０９ｇ、３３％の無色の液体産物（化合物３０）が得られる。
【表１０】
2004514721.tif 000042
【００７６】
Ｆ）本発明の方法に従う、ＸＨ官能基を脱保護し、そしてこれらの脱保護された官能基をＣＳ２と反応させてビスジクロロカルバミン酸塩構造を形成するための段階の例
例２５：Ｎε，Ｎδ’−ビス−（ジチオカルバメート）−（α’，δ−ジアミノブチル）Ｎα（カルボキシベンジルオキシ）−Ｄ−リジン：化合物（３１）の合成
５ｍｇの化合物（２８）を５００μｌの無水メタノールに溶解する。１００μｌのトリフルオロ酢酸を添加する。混合物を３０分間攪拌する。混合物を減圧下で蒸発させる。反応混合物が乾燥している場合、５００μｌのメタノール及び５００μｌのピペリジンを添加する。混合物を更に３０分放置する。続いて、反応混合物を減圧下で乾燥するまで蒸発させる。１ｍｌのメタノール及び２００ｍｌの硫化炭素（ＣＳ２）を添加する。反応混合物を室温で２時間攪拌し、そして続いて乾燥するまで蒸発させる。化合物（３１）を−１８℃で乾燥したまま維持する。
【００７７】
例２６：２β−［Ｎε，Ｎδ’−ビス（ジチオカルバメート）−（α’，δ’−ジアミノブチル）−Ｄ−リジン］−３β−（４’−トリル）トロパン：化合物（３２）
本方法は例２５と同様に実施されるが、５ｍｇの化合物（３０）を用いる。反応混合物を室温で２時間攪拌し、そして次に乾燥するまで蒸発させる。得られた化合物（３２）を−１８℃で乾燥したまま維持する。
【００７８】
例２７：前述の例で得られた生成物（１３）、（１４）、（１５）、（１６）及び（１７）のビスジチオカルバミン酸塩（官能化していない錯化剤）の脱保護及び合成は、相当する化合物（３４）、（３５）、（３６）、（３７）及び（３８）をもたらす
１０ｍｍｏｌの各ペプチドを５ｍｌの無水メタノールに溶解する。５ｍｌの０．１Ｍピペリジン／メタノール溶液を添加し、そして混合物を１時間攪拌する。混合物を減圧下で蒸発させる。
【００７９】
乾燥した残査を５ｍｌのメタノールに溶解し、そして３ｍｌの硫化炭素を添加する。混合物を２時間攪拌する。反応混合物を乾燥するまで蒸発させ、そして−１８℃で保存する。
【００８０】
例２８：前述の例で得られた生成物（１８）、（１９）、（２０）、及び（２１）のビスジチオカルバミン酸塩（トロパン誘導体で置換されたもの）の脱保護及び合成は、相当する化合物（４４）、（４５）、（４６）及び（４７）をもたらす
本方法は例２７と同様に実施されるが、生成物（１８）、（１９）、（２０）、及び（２１）を用いる。化合物（４４）、（４５）、（４６）及び（４７）が得られる。
【００８１】
Ｇ）本発明に従う化合物の放射性標識
例２９：ＴｃＮによる生成物（３１）、（３４）、（３５）、（３６）、（３７）及び（３８）の放射性標識は、化合物（３３）、（３９）、（４０）、（４１）、（４２）及び（４３）をもたらす
ＴｃＮ中間体の合成
１００μｇの塩化スズ、５ｍｇのＳＤＨ（スクシニルジヒドラジド）及び５ｍｇのＰＤＴＡ（１，２−プロパンジアミノ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ酢酸）を、標識用のフラスコ内で凍結乾燥させた。３ｍｌのＴｃＯ４−（６０ｍＣｉ）をこの凍結乾燥物に添加する。混合物を１５分間作用させる。
【００８２】
錯化：
１ｍｌのエタノール中の２ｍｇのビスジチオカルバミン酸塩を１ｍｌのＴｃＮに添加する。混合物を１時間作用させる。当該反応はＨＰＬＣ（逆相、メタノール−水）によって解析する。標識収率＞９５％。
【００８３】
化合物３８の放射性標識は、ＨＰＬＣによって単離され、そして室温で放置された放射性標識分子が４時間以上安定であったことを証明した。
【００８４】
例２９ａ：銅６４による生成物（３１）、（３４）、（３５）、（３６）、（３７）及び（３８）の放射性標識
０．５ｍｌのエタノール中の２ｍｇのビスジチオカルバミン酸塩（生成物３１，３４，３５，３６，３７又は３８）を、２ｍＣｉの６４Ｃｕ−酢酸を含む、１ｍｌの０．１Ｍで、ｐＨ５．５の炭酸アンモニウム緩衝液に添加する。混合物を１時間作用させる。当該反応をＨＰＬＣ（逆相、メタノール−水）によって解析する。
【００８５】
標識収率は、各生成物につき９５％超である。
【００８６】
例３０：ＴｃＮによる生成物（３２）、（４４）、（４６）及び（４７）の放射性標識は、生成物（４８）、（４９）、（５０）、（５１）及び（５２）をもたらす
本方法は例２９と同様に実施されるが、生成物（３２）、（４４）、（４５）、（４６）及び（４７）を用いる。生成物（４８）、（４９）、（５０）、（５１）及び（５２）が得られる。
【００８７】
例３０ａ：銅６４による生成物（３２）、（４４）、（４５）、（４６）及び（４７）の放射性標識は、生成物（４８）、（４９）、（５０）、（５１）及び（５２）をもたらす
本方法は例２９ａと同様に実施されるが、生成物（３２）、（４４）、（４５）、（４６）及び（４７）を用いる。
【００８８】
標識収率は、各生成物につき９５％超である。
【００８９】
Ｈ）本発明の化合物の使用例
例３１：ラットにおけるＬｙｓ−Ｌｙｓビスジチオカルバミン酸塩の生物学的利用能
分子は例（２９）に記載のように標識した。放射性標識した化合物は、ＨＰＬＣによって単離され、蒸発され、そして０．９％の塩溶液に溶解された。ラットにおける生物学的利用能は、以下の結果をもたらす（表１を参照のこと）：
−時間３０分及び６０分：各点につき３匹の動物
−時間３時間：各点につき２匹の動物
−時間２４時間：各点につき１匹の動物
【００９０】
結果は、器官につき注射された用量のパーセンテージとして表される。
【００９１】
ラットの尿は注射から１時間３０分後に回収し、そしてＨＰＬＣによって解析した。この解析結果は、８７％が未変化の錯体ということである。
【表１１】
2004514721.tif 000043
【００９２】
例３２：化合物（４８）及び生成物（５０）。（５１）及び（５２）の生物学的な結果
選択したモデルはラットである。化合物に依存して、我々は。１又は２つのと殺時間（３０分又は１時間）で実施した。
【００９３】
選択された時間に、脳を摘出し、そして注目の領域が単離され、そしてカウントされた。これらの結果から、我々は以下のことを推定した：
−考慮した化合物による血液−脳関門の通過
−線条体／小脳の比率。
【００９４】
以下の表ＩＩは、この実験結果の順に並ぶ。
【表１２】
2004514721.tif 000044
【００９５】
例３３：副腎皮質刺激ホルモンフラグメント１−１６（生成物（５３））
【表１３】
2004514721.tif 000045
のビスジチオカルバミン酸塩の合成
この１６アミノ酸のホルモンフラグメントは、１５及び１６位に２つのリジンを含む。我々は、このフラグメントから、且つ本発明の方法に従いビスジチオカルバミン酸塩を調製し、そしてどのような放射性標識が起こったかを観察した。
【００９６】
０．５ｍｇの副腎皮質刺激ホルモンフラグメント１−１６を５ｍｌの注射用水中で溶解する。２ｍｌのピペリジンを添加する。混合物を１時間３０分攪拌する。溶液を減圧下で蒸発させる。残査を５ｍｌの注射用水に溶解させ、そして３ｍｌの硫化炭素を添加する。混合物を２時間攪拌する。混合物を乾燥するまで蒸発させる。残査１５−１６上の、本発明に従うビスジチオカルバミン酸塩を含んで成る上記ホルモンフラグメントから成る生成物（５３）は、その結果凍結乾燥形態で得られる。
【００９７】
例３４：テクネチウムによる生成物（５３）の放射性標識
生成物（５３）の凍結乾燥物を含むフラスコを１ｍｌの注射用水に溶解させる。０．５ｍｌのＴｃＯ−４（２０ｍＣｉ）をこの溶液に添加する。３０分後、０．５ＭでｐＨ７．４のリン酸緩衝液中の０．２ｍｇのビスジチオカルバミン酸塩（生成物５３）及び、任意に混合物を溶解せしめるためのエタノールを添加する。反応させるための操作を１時間続ける。
【００９８】
ＰＲＣ解析はＨＰＬＣによって実施される。化合物５４の標識収率は９５％超である。
【００９９】
例３５：硫化炭素とモノクローナル抗体（ＡＣＭ）（生成物５５）との反応
５ｍｇの抗体（抗体ＡＣＥ）を３ｍｌの注射用水に溶解する。４００μｌの硫化炭素を添加する。混合物を４℃で４時間放置する。この時間の後、ＣＳ２を減圧下、室温で除去する（体積は３ｍｌになる）。生成物５５を−１８℃で溶液の状態で保存する。
【０１００】
例３６：テクネチウムによる修飾抗体（生成物５６）の放射性標識
ＴＣＮ中間体の合成
１００μｇの塩化スズ、５ｍｇのＳＤＨ（スクシニルジヒドラジド）及び５ｍｇのＰＤＴＡ（１，２−プロパンジアミノＮ， Ｎ， Ｎ’， Ｎ’−四酢酸）を標識用フラスコ内で凍結乾燥した。３ｍｌのＴｃＯ−４（６０ｍＣｉ）をこの凍結乾燥物に対し添加する。この試薬を１５分間作用させておく。
【０１０１】
１．５ｍｇの抗体（１ｍｌ）及び１．５ｍｌのＴｃＮ（３０ｍＣｉ）を標識用フラスコ内に据える。混合物を室温で１時間放置する。標識収率はペーパークロマトグラフィーによって確かめる。化合物（５３）の標識収率は９３％である。
【０１０２】
例３７：診断用キットの調製
フラスコ１：１００μｇの塩化スズ、５ｍｇのＳＤＨ（スクシニルジヒドラジド）及び５ｍｇのＰＤＴＡ（１，２−プロパンジアミノＮ， Ｎ， Ｎ’， Ｎ’−四酢酸）を標識用フラスコ内で凍結乾燥した。
【０１０３】
フラスコ２：２ｍｇのビスジチオカルバミン酸塩（更に具体的には、２つのジチオカルバミン酸塩の官能基を含む、本発明に従うキレート錯体）を１ｍｌの注射用水に含ませる。
【０１０４】
調製：３ｍｌのＴｃＯ４（６０ｍＣｉ）をフラスコ１に添加する。この試薬を１５分間作用させておき、そして１ｍｌのこの溶液をフラスコ２に添加する。この溶液を１時間作用させておく。放射性標識の準備が完了する。標識収率は９５％以上である。
【０１０５】
当該反応はＨＰＬＣ（逆相、メタノール−水）によって解析する。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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