(57)【要約】本発明は、治療化学の分野に関し、より詳細には糖尿病を治療するための新規な医薬品の製剤に関する。具体的には、本発明の主題は、一種または複数の薬剤として許容される不活性賦形剤との組合せまたは混合物として抗糖尿病薬ビグアニドおよび抗糖尿病薬スルホンアミドから形成された、閾値下用量で経口によって有効である二種の活性成分の組合せからなる新規な抗糖尿病医薬品である。本発明はさらに、ビグアニドおよびスルホンアミドから形成されたそのような医薬品を製剤する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一種または複数の薬剤として許容される不活性賦形剤との組合せまたは混合物として、各々低用量の抗糖尿病薬ビグアニドおよび抗糖尿病薬スルホンアミドの組合せからなる新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項２】
ビグアニドが、メトホルミン、ブホルミン、およびフェンホルミン、ならびに治療適合性の鉱酸または有機酸との塩によって形成されたグループから選択される請求項１に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項３】
スルホンアミドが、以下の一般式に相当し、
【化１】
2004513962.tif 000012
式中、Ｒ１は、ＮＨ２、ＣＨ３、Ｃｌ、または以下の基を表し、
【化２】
2004513962.tif 000013
あるいは、Ｒ１は、Ｒ２と以下の基を形成し、
【化３】
2004513962.tif 000014
Ｒ２は、ＨまたはＮＨ２を表し、
Ｒ３は、４−ｎ−ブチル基、シクロヘキシル基、または以下の基を表す
【化４】
2004513962.tif 000015
請求項１に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項４】
スルホンアミドがグリベンクラミドである請求項１から３のいずれか一項に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項５】
スルホンアミドがグリクラジドである請求項１から３のいずれか一項に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項６】
ビグアニドとスルファミドの用量比が、１０：１から４５：１の範囲である請求項１から５のいずれか一項に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項７】
活性成分の重量比が、５０：５ｍｇから１００：２．５ｍｇの範囲である請求項１から５のいずれか一項に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項８】
経口投与に適した一形態をしている請求項１から７のいずれか一項に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項９】
不活性、非毒性の固体または液体薬剤賦形剤が、鉱物充填剤および有機充填剤から選択される請求項８に記載の新規な抗糖尿病医薬品。
【請求項１０】
製剤学の知られている現行の方法によって行われることを特徴とするビグアニド−スルホンアミドの組合せを含有する薬剤組成物の製剤方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、治療化学の分野に関し、より詳細には糖尿病を治療するための新規医薬品に関する。
【０００２】
より詳細には、本発明の主題は、それらの効果が相乗性を示す二種の知られている活性成分から形成された新規な抗糖尿病医薬品である。
【０００３】
具体的には、本発明の主題は、一種または複数の薬剤として許容される不活性賦形剤との組合せまたは混合物として、抗糖尿病薬ビグアニドおよび抗糖尿病薬スルホンアミドから形成された、閾値下用量で経口によって有効である二種の活性成分の組合せからなる新規な抗糖尿病医薬品である。
【０００４】
より具体的には、このビグアニド型の抗糖尿病薬は、メトホルミン、ブホルミン、およびフェンホルミン、または治療適合性の鉱酸または有機酸とのそれらの塩から選択される。
【０００５】
スルホンアミド型の抗糖尿病薬は、以下の一般式に相当し、
【０００６】
【化５】
2004513962.tif 000002
式中、Ｒ１は、ＮＨ２、ＣＨ３、Ｃｌ、以下の基を表し、
【０００７】
【化６】
2004513962.tif 000003
あるいは、Ｒ１は、Ｒ２と以下の基を形成し、
【０００８】
【化７】
2004513962.tif 000004
Ｒ２は、Ｈ、またはＮＨ２を表し、
Ｒ３は、４−ｎ−ブチル基、シクロヘキシル基、以下の基を表す。
【０００９】
【化８】
2004513962.tif 000005
これらの構成成分の主な出発原料は、グリベンクラミド
【００１０】
【化９】
2004513962.tif 000006
またはグリクラジド
【００１１】
【化１０】
2004513962.tif 000007
によって形成されたものである。
【００１２】
この組合せは、それらが不活性である低用量でのビグアニド型の抗糖尿病薬剤とスルホンアミド型の抗糖尿病薬剤との組合せ投与が血糖の大幅な低減をもたらすことが見出されたので、非常に例外的な特性を有する。
【００１３】
特に、ストレプトゾトシンの投与によるランゲルハンス島の破壊によって糖尿病にしたラットにおいて、低用量のビグアニド（例えばメトホルミン）およびスルファミド（例えばグリベンクラミド）は有意に糖尿病を改善する。
【００１４】
ＬＩＰＨＡの名義による特許ＥＰ０９７４３５６Ａ１がすでに文献において知られており、これはバイオアベイラビリティが保証されるようにグリベンクラミド粒子の粒径が確保されているメトホルミンおよびグリベンクラミド錠剤の実施形態を記載している。前記文書に記載されているのはこの例であり、粒子の１０パーセント以下が２μｍ未満の粒径を有し、粒子の１０パーセント以下が６０μｍ超の粒径を有する。
【００１５】
さらに、錠剤を製剤するために、２％から４％の割合で粉末混合物に結合剤が添加される。このような方法での実用は、生成のために特定の手段を必要とするそのような比較的に狭い粒径範囲の確保に重大な不利益を有する。
【００１６】
国際特許ＷＯ９７／１７９７５（Ｇｅｎｔｉｌｉ　Ｓ．ｐ．Ａ．）も、重量比１：１００のグリベンクラミドとメトホルミンとの組合せ、特にグリベンクラミド５ｍｇとメトホルミン５００ｍｇとの組合せを記載している。この投与量は、グリベンクラミド１５ｍｇおよびメトホルミン１５００ｍｇの１日３回投与を可能にする。追及された目的は、本特許出願の目的と実質的に異なる。
【００１７】
文書ＷＯ９９／２９３１４（Ｂｒｉｓｔｏｌ　Ｍｙｅｒｓ　Ｓｑｕｉｂｂ　Ｃｏｍｐａｎｙ）は、他の抗糖尿病薬剤と別々に、または組み合わせて用いられる、二塩基酸塩（フマル酸塩またはコハク酸塩）形態のメトホルミン混合物に関する。この場合、記載されている抗糖尿病薬剤はグリブリドである。この製剤は、その低い吸湿性、および粉末のより良い流動性のために、より良好な貯蔵性を示す。この製剤はまた、その低い水溶性のために著しく改善された風味によって特徴づけられる。このメトホルミン塩とスルファミドまたはスルホニル尿素（グリブリド［またはグリベンクラミド］、グリメピリド、グリピジド、グリクラジド、またはクロルプロパミドなど）との組合せは、β細胞のＡＴＰ依存性チャネルに作用する。メトホルミン塩とスルホニル尿素との重量比は、３００：１から約５０：１の範囲内で変化し得る。したがって、前記文書中の実施例は、メトホルミンフマレート（２：１）６００ｍｇとグリブリドまたはグリピジド５．０ｍｇとの組合せを記載している。湿気の存在下での貯蔵を除いて、そのような薬剤配合物の製剤に関する技術的データは提供されていない。そのような製剤の抗糖尿病活性に関する情報は与えられていない。
【００１８】
本発明による組成物は異なる効果を生じる。１日量０．５ｍｇ／ｋｇのグリベンクラミドが不活性であると判定することは前に可能であった。すでに活性である（１ｍｇ／ｋｇ／日）スルホンアミドのより高い用量（または２ｍｇ／ｋｇ／日）では、スルホンアミドの投与は血糖を変更しないが、その代わりに血中インスリンの有意な増加と、血中乳酸濃度の低下をもたらす。
【００１９】
スルホンアミド、たとえばグリベンクラミドの最小活性用量２ｍｇ／ｋｇ／日を求めることが可能であった。同様に、ビグアニド、同様にメトホルミンの最小活性用量は、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ／日に等しい高用量である。この用量は、血糖のわずかな減少、トリグリセリドの常態への回復、乳酸の有意な減少、および血中インスリンの増加をもたらす。
【００２０】
メトホルミンの抗高血糖活性に関する豊富な文献において、用いられた動物モデルの大多数は、１００から２００ｍｇ／ｋｇの間の活性用量を示している。動物におけるこれらの活性用量は、糖尿病の平衡化に関して、糖尿病の重症度に応じて１日当たり５００ｍｇから３ｇの用量範囲でのヒトにおける確認された治療上の使用に対応する。
【００２１】
本発明は、コンプライアンスおよび耐性に関するリスクを低減しながら糖尿病状態を治療するために、１日当たり５００ｍｇ未満の用量のメトホルミンを使用できることが、適合させた動物モデルを用いて示唆および実証されることに存する。
【００２２】
さらに閾値下用量において、ビグアニドとスルホンアミドの作用の間に相乗効果が認められることが示された。これらの二種の型の物質の組合せは、ストレプトゾトシンで処置したラットの場合そのレベルが非常に上昇するコレステロールおよびトリグリセリドを有意に低減する。
【００２３】
さらに、スルホンアミドは乳酸を低減するだけでなく、それらを増加する傾向を有するビグアニドの作用を阻害する。個別に投与された（２０ｍｇ／ｋｇ／日）生成物によって得られた血糖の減少の合計は、本発明による組合せによって得られたものより実質的に少ない。
【００２４】
【表１】
2004513962.tif 000008
このように、これらの活性用量において、二種の経口抗糖尿病薬が組み合わせて投与されるとき、それらの効果が相乗される。
【００２５】
−血糖の低減に対する相乗効果
−グリセロールおよびトリグリセリド含量の低減に対する相乗効果
−スルホンアミド特異の血中インスリンの増加
−ビグアニド特異の効果の抑制を伴う、グリベンクラミド特異の効果である乳酸の低減
インスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤ）が高血糖および低インスリン血症の両方を示すとき、これら二種の型の分子を組み合わせた使用は道理にかなっている。さらに高インスリン血症の場合、予想に反して、糖尿病の発症においてインスリンの過分泌の消失が認められ、本発明による組合せが必要となる。
【００２６】
本発明による組成物において、ビグアニド／スルホンアミドの用量比は１０：１から４５：１の範囲であり、重量比は５０：５ｍｇから１００：２．５ｍｇの範囲である。したがって、この比率は、国際特許ＷＯ９７／１７９７５（比１００：１）、および国際特許ＷＯ９９／２９８１４（Ｂｒｉｓｔｏｌ　Ｍｙｅｒｓ）に記載されているものと大幅に異なる。このように、この比率はビグアニドの用量の大きな低減を可能にするので、特に有利である。
【００２７】
本発明による組成物は、錠剤、フィルムコート錠、被覆錠、糖衣錠、ゲルカプセル、オブラートカプセル、丸剤、トローチ剤、ロゼンジ、小さい棒状物に分割可能な錠剤、顆粒剤、微小顆粒剤、ミクロスフェアおよび類似の製剤など、経口投与に適切な一形態である。
【００２８】
これらの薬剤形態を調製するために、ビグアニドおよびスルホンアミドを、一種または複数の不活性、非毒性の固体または液体薬剤賦形剤と混合する。賦形剤に関して挙げられるのは、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、リン酸三カルシウム、リン酸マグネシウム、カオリン、タルク、ステアリン酸マグネシウム、二酸化ケイ素、二酸化チタン、二酸化ジルコニウム、またはコロイダルシリカなどの鉱物充填剤である。挙げることのできる有機充填剤は、セルロースおよびその誘導体、アルギン酸塩、カラギネート、キトサン誘導体、植物ガム、たとえばトラガカントゴム、グアールガムおよびその誘導体、キサンタンガム、デンプン、マルトデキストリン、および植物油である。
【００２９】
ビグアニド−スルホンアミド抗糖尿病薬組合せを含有する薬剤組成物は、当該分野の技術者に知られている現行の方法によって調製される。それらの方法は、詳細な製剤実施例に基づいてより明確に理解されるであろう。
【００３０】
本発明による組成物の特定の一特徴によれば、特に有利な一種の製剤は、塩酸メトホルミン３０ｍｇ／ｋｇ、およびグリベンクラミド２ｍｇ／ｋｇに相当するものである。
【００３１】
上記のとおり、スルホンアミドの用量は、本発明による組成物によって低減することができる。ビグアニドの用量は、製造の不都合となることなく広範な割合で変動することができる。
【００３２】
以下の実施例は本発明を例示するが、本発明を限定するものではない。
【００３３】
本発明によるビグアニド−スルホンアミド組合せの薬理研究
動物
平均体重２８０ｇの４０頭の雄のＷｉｓｔａｒラット（Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ、Ｓａｉｎｔ　Ａｕｂｉｎ　ｌｅｓ　Ｅｌｂｅｕｆ、フランス）をこの実験に用いる。以下のパラメータを制御し、標準化動物飼育において１週間これらの動物を飼育する。
【００３４】
−昼／夜周期　７：００／１９：００
−温度　２２±１℃
−湿度　５０±１０％
動物は、飲料水および標準飼料ＵＡＲ　Ａ０３を自由に入手できる。
【００３５】
実験
４０頭のラットを、生理食塩水に溶解したストレプトゾトシン５０ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与（単回投与）によって糖尿病にする。インスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤ）が２週間以内に発症し、少なくとも１カ月安定性を維持する。
【００３６】
ＳＴＺ投与の２１日後、ＮＩＤＤ糖尿病に相当する１０から１５ｍＭの間の血糖値、および血中インスリン（１５から２０μＵ／ｌの値）の関数として、動物を選択する。ラットの約３０％が、明らかな減量を伴う低血中インスリンと高血糖を有する（ＩＤＤ）。これらのＩＤＤは実験から除く。２４頭のラットが残る（１２頭ずつ２グループに無作為に分配）。
【００３７】
ＳＴＺ投与の２１日後、選択したラットを次いでグリベンクラミドまたはメトホルミン、あるいは本発明によるグリベンクラミド−メトホルミン組合せで処置する。
【００３８】
実験の第１段階
６頭のラットの２群を無作為に選別する
−１群は、８日間、グリベンクラミド１ｍｇ／ｋｇ／日を経口２回投与で受ける
−１群は、８日間、グリベンクラミド２ｍｇ／ｋｇ／日を経口２回投与で受ける。
【００３９】
実験の第２段階
次いで無作為に選別した別の２群を処置する
−１群は、８日間、メトホルミン（塩酸形）３０ｍｇ／ｋｇ／日を経口２回投与で受ける。３０ｍｇ／ｋｇ／日は、このモデルにおいて、定義された実験条件下での最小活性用量である
−１群は、８日間毎日、メトホルミン３０ｍｇ／ｋｇ／日およびグリベンクラミド２ｍｇ／ｋｇ／日の組合せを、経口２回投与で受ける（前半部分の結果の関数として選択された最小活性用量）。
【００４０】
測定される生物パラメータ
それぞれのラットに関して、Ｄ０時点（ＳＴＺ投与前）、Ｄ２１時点（ＳＴＺ２１日後、処置前）、およびＤ２９（処置８日後）に、尾部静脈の静脈穿刺によって、ヘパリン上に１００μｌの血液を採集する。試料をすぐに遠心分離し（４０００ｒｐｍで１０分）、血球から血漿を分離する。試料は、生物パラメータ判定時まで凍結する。
【００４１】
血糖、コレステロール、トリグリセリド、乳酸
血漿試料を解凍した後、上記のパラメータを、ＣＯＢＡＳ自動装置（Ｒｏｃｈｅ）を用い、酵素法によって求める。血糖はヘキソキナーゼ法によって、コレステロールは酵素最終ランドックス（Ｒａｎｄｏｘ）ポイント法によって、トリグリセリドはＧＰＯ−ＰＡＰ法によって、乳酸は乳酸デヒドロゲナーゼ法によって測定する。
【００４２】
血中インスリン
循環インスリンを、ＣＥＡキットを用いて、ラジオイムノアッセイによって求める。ヒトインスリンとラットインスリンとの間には非常に大きな相同性があり、得られる結果はそれらの真の値の９５％である。すべての方法は、標準を用いて確証し、組織的に制御される。
【００４３】
統計的分析
得られた個々の結果の平均は、平均に予期される誤差によって影響される。Ｄ０およびＤ２１において、分散分析ＡＮＯＶＡ後、グループ間に有意差のないことをスチューデントｔ検定によって分析する。処置の有効性を、対の系に適合させたｔ検定によって、Ｄ２９とＤ２１との間で評価する（それぞれのラットに関して、Ｄ２９に対するＤ２１値はコントロールとなる）。
【００４４】
結果
１．グリベンクラミドの最小活性用量の決定
ＳＴＺ型のＮＩＤＤラットで同様に行われた研究において、１日量０．５ｍｇ／ｋｇのグリベンクラミドの投与は不活性であることが見出された。したがって、より強い２つの用量、すなわち１ｍｇ／ｋｇ／日、または２ｍｇ／ｋｇ／日を試験した。
【００４５】
この試験に関する結果を照合した。処置前のＤ０では、２群のラットは同等である。同様に、ストレプトゾトシン投与後のＤ２１では、２群の動物間に差異はない。低用量のグリベンクラミドの投与は、血糖を変更しない。しかしながら、血中インスリンの有意な増加、および血中乳酸濃度の低下が認められる。
【００４６】
より高用量のグリベンクラミドは、血糖値を有意に低減する。この有意な低減は、一連の対標本に対するスチューデントｔ検定で認められる（ペア法）。この用量で、乳酸濃度は有意に減じたままであり、依然として血中インスリンは平均して高い（表３）。
【００４７】
これらの結果は、グリベンクラミド２ｍｇ／ｋｇ／日の用量が最小活性用量であることを示す。
【００４８】
これらの条件下で、この用量のグリベンクラミドの有効性を、メトホルミン（３０ｍｇ／ｋｇ／日）、およびこれら二種の最小用量の組合せと比較した。結果を表ＩＩで対照する。
【００４９】
【表２】
2004513962.tif 000009
【００５０】
【表３】
2004513962.tif 000010
メトホルミンとグリベンクラミドの作用の相乗効果が血糖に対して認められる。この二種の物質の組合せは、ＳＴＺラットにおいて増加するコレステロールおよびトリグリセリドを有意に低減する。グリベンクラミドの効果は、血中インスリンおよび乳酸に対して完全に認められる。
【００５１】
後者の場合、グリベンクラミドは乳酸を低減するだけでなく、乳酸を増加する傾向を有するメトホルミンの作用を抑制する。
【００５２】
処置後のＤ２９とＤ２１との間で統計的分析を行った。相乗効果の様式、加成性または相乗性を特定するために、血糖の変動パーセントにスチューデントｔ検定を行った（表ＩＩＩ）。上述の結果から、コレステロールおよびトリグリセリドレベルに関して二種の物質の相乗作用があると、もはや断言することができる。さらに血中インスリンに対するグリベンクラミドの効果が維持される。最後に、グリベンクラミドは乳酸に対するメトホルミンの効果を抑制する。
【００５３】
【表４】
2004513962.tif 000011
この研究は、メトホルミンとグリベンクラミドの各効果の共同が実際に働いていることを示す。単独で投与された生成物によって得られた血糖の減少（メトホルミン単独で１３．７％、およびグリベンクラミド単独で６．５１％）の合計（２０．２１％）は、組合せによって得られたもの（２１．５４％）よりわずかに少ない。しかしながら、作用の相乗効果があると断言するのは困難である。少なくとも二種の生成物の加成性の共同効果が真に存在する。
【００５４】
結論
ＮＩＤＤ　ＳＴＺラットへの、１日当たり２回投与で８日間、メトホルミン３０ｍｇ／ｋｇ／日、およびグリベンクラミド２ｍｇ／ｋｇ／日の二種の最小活性用量による併用投与は、
−血糖の低減に対する相乗効果
−コレステロールおよびトリグリセリドレベルの低下に対する相乗効果
−グリベンクラミドに特異の血中インスリンの増加
−このパラメータに対するメトホルミンの作用の抑制を伴う、グリベンクラミドに特異の乳酸の減少をもたらす。
【００５５】
したがって、この二種の経口抗糖尿病薬が最小活性用量で組み合わせて投与されるとき、それらの効果が総体的に相乗される。
【国際公開パンフレット】
2004513962.tif 000016
2004513962.tif 000017
2004513962.tif 000018
2004513962.tif 000019
2004513962.tif 000020
2004513962.tif 000021
2004513962.tif 000022
2004513962.tif 000023
2004513962.tif 000024
2004513962.tif 000025
2004513962.tif 000026
2004513962.tif 000027
2004513962.tif 000028
2004513962.tif 000029
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004513962.tif 000030
【国際調査報告】
2004513962.tif 000031
2004513962.tif 000032
2004513962.tif 000033
2004513962.tif 000034
2004513962.tif 000035