(57)【要約】本発明は、診断、実験および他の実験室における手順（または操作）のための装置、ならびにそれらに関連する方法に関する。特に、本発明では、サポート、サポートと一緒にサンプル・スペースを規定するレセプタクル、およびサンプル・スペースと熱接触するが、それから電気的に絶縁された状態で該サポート取り付けられたヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナが供される。本発明のコンテナは、ＰＣＲ用途で使用するのが特に適当である。
2004506183.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サポート、サポートと一緒にサンプル・スペースを規定するレセプタクル、およびサンプル・スペースと熱接触するが、それから電気的に絶縁された状態で該サポートに取り付けられたヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナ。
【請求項２】
サンプル・スペースは、多くとも１ｍｌの容量を有する、請求項１に記載のサンプル・コンテナ。
【請求項３】
サポート、流体サンプルを受容するように各々配置されたサンプル・スペースのアレイをサポートと一緒に規定する別々のレセプタクルのアレイ、サンプル・スペースと熱接触するが、それから電気的に絶縁された状態で該サポートに取り付けられたヒーター手段を有して成るサンプル・コンテナであって、アレイの１またはそれ以上のサンプル・スペースに、そのアレイの別のまたはそれ以上のサンプル・スペースに適用される加熱条件と異なる加熱条件を適用できるように、ヒーター手段が配置されているサンプル・コンテナ。
【請求項４】
ヒーター手段は、複数のヒーター要素を有して成る、請求項３に記載のサンプル・コンテナ。
【請求項５】
各々のヒーター要素は、それぞれ個々のサンプル・スペースを加熱するように配置されている、請求項４に記載のサンプル・コンテナ。
【請求項６】
各々のサンプル・スペースは、多くとも１００μｌの容量を有する、請求項３〜請求項５のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項７】
ヒーター手段または各々のヒーター手段は、サポート上に設けられる、請求項１〜請求項６のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項８】
ヒーター手段または各々のヒーター手段は、サポート上に直接的または間接的に印刷される、請求項１〜請求項７のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項９】
サポートは層状構造である、請求項１〜請求項８のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項１０】
サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、加熱要素を有して成る実質的に平坦な表面を有する第１部材、ボイドを規定する開口部または複数のボイドを規定する複数の開口部を有する層である第２部材、および実質的に平坦な表面を有する第３部材を有して成る、少なくとも３つの協働部材から構成されている、請求項１〜請求項９のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項１１】
サンプル・コンテナは、電源手段および制御供給手段から取り外すことができる、請求項１〜請求項１０のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項１２】
サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、アーチ状の壁によって規定されるサポートの面に対して垂直方向から見てアーチ形状を有しており、サンプル流体がサンプル・スペースに入ると、サンプル流体のメニスカスがサンプル・スペースの両側の壁と同時に接触できるような幅をアーチ状のサンプル・スペースが有する、請求項１〜請求項１１のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項１３】
サンプル・コンテナは、流体サンプルを受容するように各々配置されたサンプル・スペースのアレイを有して成り、
アレイの１またはそれ以上のサンプル・スペースに、アレイの１またはそれ以上の他のサンプル・スペースに適用される加熱条件と異なる加熱条件を適用できるようにヒーター手段が配置されている、請求項１〜請求項１２のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項１４】
サンプル・スペースを規定するレセプタクル、レセプタクルが受容されるサポート、およびサンプル・スペースと熱接触するが、それから電気的に絶縁される状態で該サポート取り付けられたスクリーン印刷されたヒーター手段を有して成る、流体サンプル用サンプル・コンテナ。
【請求項１５】
サポート、サポート上にサンプル・スペースを規定する手段、およびサンプル・スペースと熱接触する状態でサポートに取り付けられたヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナであって、サンプル・スペースを規定する手段、サポートおよびヒーター手段は、一体化したユニットを構成する流体サンプル用サンプル・コンテナ。
【請求項１６】
内部で少なくとも１つのサンプル・スペースを規定する実質的に平坦なボディーおよび該ボディー内で一体化されたヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナであって、ヒーター手段がサンプル・スペースと熱接触している流体サンプル用サンプル・コンテナ。
【請求項１７】
請求項１〜請求項１３のいずれかに記載の１またはそれ以上の付加的な特徴を有して成る、請求項１４〜請求項１６のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項１８】
請求項１〜請求項１７のいずれかに記載のサンプル・コンテナおよびサンプル・コンテナのヒーター手段を制御する制御手段を有して成る装置。
【請求項１９】
請求項１〜請求項１７のいずれかに記載された、個々のヒーター要素と各々組み合わされた複数のサンプル・スペースを有するサンプル・コンテナを有して成る装置であって、対応するサンプル・スペースに関連した温度検出手段から生じる温度に関した値に応じて各々のヒーター要素を個々に独立に制御するように制御手段が配置されている装置。
【請求項２０】
流体の化学物質サンプルを加熱する請求項１〜請求項１７のいずれかに記載のサンプル・コンテナの使用。
【請求項２１】
実施例を参照して本明細書にて実質的に開示される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
第１部分、第２部分、第１部分と第２部分との間に位置するサンプル・スペースを規定するレセプタクル、サンプル・スペースにサンプルを供給するためのアクセス・チューブ、アクセス・チューブがサンプル・スペースと連通させる連通チャンネルを有して成る流体サンプル用のコンテナであって、第１部分と第２部分とを一緒に押圧する圧力が加わると、コンテナは連通チャンネルを閉鎖するように変形できるサンプル・コンテナ。
【請求項２３】
サンプル・スペースは、多くとも１ｍｌの容量を有する、請求項２２に記載のサンプル・コンテナ。
【請求項２４】
第１部分、第２部分、別々のレセプタクルのアレイ（各々のレセプタクルは、第１部分と第２部分との間に位置するサンプル・スペースを規定し、流体のサンプルを受容すべく配置されている）、サンプル・スペースにサンプルを供給するように各々のサンプル・スペースに関連したアクセス・チューブ、および各々のサンプル・スペースと関連した連通チャンネル（各々のアクセス・チューブが、連通チャンネルを通ってそれに関連するサンプル・スペースと連通している）を有して成るサンプル・コンテナであって、第１部分と第２部分とを一緒に押圧する圧力が加わると、コンテナは連通チャンネルを閉鎖するように変形できるサンプル・コンテナ。
【請求項２５】
各々のサンプル・スペースは、多くとも１００μｌの容量を有する、請求項２４に記載のサンプル・コンテナ。
【請求項２６】
コンテナは弾性変形できる、請求項２２〜請求項２５のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項２７】
レセプタクルまたは各々のレセプタクルはベント穴部を更に有して成る、請求項２２〜請求項２５のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項２８】
ベント穴部または各々のベント穴部を封止することができる、請求項２７に記載のサンプル・コンテナ。
【請求項２９】
サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースに関連したそれぞれの加熱要素を有して成る、請求項２２〜請求項２８のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項３０】
サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、実質的に平坦な表面を有する第１部材、１または複数のボイド（各々のボイドは、アクセス・チューブおよび連通チャンネルと関連し、アクセス・チューブが連通チャンネルを通ってボイドと連通している）を規定する開口部を有する第２部材、および実質的に平坦な表面を有する第３部材を有して成る、少なくとも３つの協働部材から構成されており、第１部材と第３部材とを一緒に押圧する圧力が加わると、連通チャンネルまたは各々の連通チャンネルを閉鎖するように弾性変形できる材料から第２層が構成されている、請求項２２〜請求項２９のいずれかに記載のサンプル・コンテナ。
【請求項３１】
連通チャンネルは、第１部材と第２部材との間または第２部材と第３部材との間に位置する、請求項３０に記載のサンプル・コンテナ。
【請求項３２】
発明の詳細な説明および図１〜図１５のいずれかを参照して本明細書で実質的に記載されるサンプル・コンテナ。
【請求項３３】
サンプル・コンテナのホルダーであって、サンプル・コンテナが、少なくとも１つの第１外表面および第２外表面（それらの少なくとも１つが物質をコンテナ内に導入するための少なくとも１つのアクセス開口部を有する）を有しており、ホルダーが、第１の開いた状態と第２の閉じた状態との間で相互に対して可動できる第１プレートおよび第２プレートを有しており、閉じた状態では、第１プレートおよび第２プレートが、該コンテナの該第１外表面および該第２外表面をそれぞれ押圧でき、少なくとも１つのアクセス開口部を閉鎖できるようにプレートがディメンションおよび構造を有するホルダー。
【請求項３４】
プレートの１つは、熱伝導性材料から構成されており、サンプル・スペースからのヒートシンクとして機能するように、サンプル・スペースに隣接するコンテナの一部と接触する領域を有するように配置されている、請求項３３に記載のホルダー。
【請求項３５】
プレートの１つは、前記コンテナのサンプル・レセプタクルまたは各々のサンプル・レセプタクルに対応するように配置されるノジュールまたは複数のノジュールを有して成り、ノジュールまたは各々のノジュールが、サンプル・レセプタクルまたは各々のサンプル・レセプタクルに隣接するコンテナの第１外表面または第２外表面に圧力を加えることができるように配置され、圧力を加えることによって、アクセス開口部の閉鎖が助力される、請求項３３または請求項３４に記載のホルダー。
【請求項３６】
図１７〜図２０を参照して本明細書にて実質的に記載されるホルダー。
【請求項３７】
電気抵抗要素が、第１期間ではヒーターとして機能し、第２期間では温度検出手段として機能するように、電気抵抗要素に電圧が印加されるまたは電流が供給される流体サンプルの加熱方法。
【請求項３８】
各々の電気抵抗要素が、第１期間ではサンプルのヒーターとして機能し、第２期間ではサンプルの温度検出手段として機能するように、複数の電気抵抗要素の各々に電圧が印加されるまたは電流が供給される複数の流体サンプルの加熱方法。
【請求項３９】
複数の流体サンプルの各々は、独立に加熱される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
第１期間は、０．１ｍ秒〜１００秒の時間を有する、請求項３７〜請求項３９のいずれかに記載の方法。
【請求項４１】
第２期間は、１ｍ秒〜１００ｍ秒の時間を有する、請求項３７〜請求項４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
第２期間での温度検出手段からの情報は、第１期間の間において、電気抵抗要素もしくは各々の電気抵抗要素を印加する電圧またはそれに供給する電流を調節するために、制御手段によって使用される、請求項３７〜請求項４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
温度の決定は、第２期間の間での電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素の抵抗の測定を含んで成る、請求項３７〜請求項４２のいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素の回路の抵抗とサンプル温度との関係は、複数の温度における電気抵抗要素の抵抗のキャリブレーション測定によって得られる、請求項３７〜請求項３９のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
温度の決定または各々の温度の決定は、第１期間の終了に引き続く時間遅れ後に行なわれる、請求項３７〜請求項４４のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
時間遅れは、２５０ｍ秒である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
サンプルまたは各々のサンプルの温度は、第１期間の終了後に電気抵抗要素が冷却される速度から見積もることによって決定される、請求項３７〜請求項４４のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
請求項３７〜請求項４７のいずれかに記載の方法をコンピューターに実行させるようにアレンジしたコンピューター・プログラム・プロダクト。
【請求項４９】
請求項１〜請求項１７のいずれかに記載のサンプル・コンテナを使用する、請求項３７〜請求項４７のいずれかに記載の方法。
【請求項５０】
時間の経過に伴う流体サンプルの所望の温度プロファイルを表すデータセット信号および流体サンプルの温度を表す入力データセット信号をコンピューターが入力として受け取り、および
データセット信号を電気抵抗要素に印加する電圧または供給する電流の時間および大きさを表す出力信号へとコンピューターが変換し、流体サンプルを加熱するように、
コンピューターを作動させるコンピューター・プログラム・プロダクトであって、
第１期間では、制御手段が電気抵抗要素に電圧を印加または電流を供給するように命令され、第２期間では、同じ電気抵抗要素によって、流体サンプルの温度を表す入力データセット信号が供されるコンピューター・プログラム・プロダクト。
【請求項５１】
サンプルを受容するための受容スペース、電気抵抗要素、および制御手段を有して成る流体サンプルの加熱装置であって、電気抵抗要素が、第１期間ではヒーターとして機能し得、第２期間では温度検出手段として機能し得るべく、電気抵抗要素に電圧を印加または電流を供給するように制御手段を操作できる装置。
【請求項５２】
サンプルを受容するための受容スペースは、サンプル・コンテナのためのスペースを有して成る、請求項５１に記載の装置。
【請求項５３】
サンプル・コンテナは、別々のレセプタクルのアレイを有して成り得る、請求項５２に記載の装置。
【請求項５４】
サンプルを受容するための受容スペースは、複数のサンプル・コンテナのためのスペースを有して成る、請求項５１に記載の装置。
【請求項５５】
流体サンプルためのサンプル・スペースは、多くとも１ｍｌの体積を有する、請求項５１〜請求項５４のいずれかに記載の装置。
【請求項５６】
サポート、サポートと一緒にサンプル・スペースを規定するレセプタクル、および該サポートに取り付けられたヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナのホルダーであって、電気抵抗要素が、第１期間ではヒーターとして機能し得、第２期間では温度検出手段として機能し得るように、電気抵抗要素に電圧の印加または電流の供給を行なうことができる制御手段を有して成るホルダー。
【請求項５７】
コンテナは、サポート、流体サンプルを受容するように各々配置されたサンプル・スペースのアレイをサポートと一緒に規定する別々のレセプタクルのアレイ、および該サポートに取り付けられたヒーター手段を有して成り、電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素が、第１期間ではヒーターとして機能し得、第２期間では温度検出手段として機能し得るように、電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素に電圧の印加または電流の供給を行なうことができる制御手段を有して成る、請求項５６に記載のホルダー。
【請求項５８】
アレイの１またはそれ以上のレセプタクルに、アレイの他のまたは複数のレセプタクルに適用される加熱条件とは異なる加熱条件を適用できるように制御手段および電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素が配置される、請求項５７に記載のホルダー。
【請求項５９】
複数の要素および要素への複数のコネクターを有して成る、請求項５８に記載のホルダー。
【請求項６０】
請求項５４〜請求項５７の各々で規定された特徴を有するコンテナを有して成る、請求項５４〜請求項５７のいずれかに記載のホルダー。
【請求項６１】
発明の詳細な説明および図１〜図１１のいずれかを参照して本明細書にて実質的に開示されるサンプル・コンテナ。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、診断、実験および他の実験室における手順（または操作）のための装置、ならびにそれらに関連する方法に関する。
【０００２】
多数の診断手順は、温度変化を生じさせる工程を含んでいる。再現性があって正確な結果を達成するためには、サンプルの温度を正確に制御することが必要とされる。更に、多くの診断手順では、酵素を利用しており、酵素の最適な性能を維持するために正確な熱制御も必要とされる。或る手順における温度の許容誤差は、典型的には±０．２℃のオーダーである。必要とされる正確な温度制御には、加熱要素もしくは冷却要素とサンプルとの間の密接な接触が一般的に必要とされる。
【０００３】
診断手順にて信頼性があって再現性のある結果を得ることを確保するために、装置および試薬の高度な無菌性が必要とされる。更に、アッセイ処理回数を減少させることが求められている。無菌性を維持しながらアッセイ処理回数を減少することができる方法の一つには、使い捨ての（または処分可能な）無菌性の装置のパーツ（または装置部品）を用いる方法がある。
【０００４】
加熱要素／冷却要素とサンプルとが極めて近接する必要があるために、許容できるコストで信頼性があって使い捨ての加熱要素を得ることが困難であるということがこれまでのところ判っている。診断装置の常套の加熱システムは、水加熱／水冷却またはペルチェ・ブロックを利用している。一般的に必要とされる高い加熱速度によって、使い捨ての加熱要素は、その操作範囲の限界まで使用され、また、作動故障が生じることが極めて一般的である。
【０００５】
制御された加熱が特に重要となる分子関連用途の１つには、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）がある。ＰＣＲ核酸増幅法の原理は、米国特許第４６８３１９５号（シータス社／ロシュ、Ｃｅｔｕｓ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ／Ｒｏｃｈｅ）に開示されている。ＰＣＲ反応を実施するための装置は、例えば欧州特許出願（ＥＰ）第０２３６０６９号に開示されている（シータス社／ロシュ／ＰＥ、Ｃｅｔｕｓ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ／Ｒｏｃｈｅ／ＰＥ）。かかる装置は、一般的に「サーモサイクラー」と呼ばれている。
【０００６】
広範な第１の要旨において、本発明は、ヒーター手段を各々有した１またはそれ以上のサンプル・スペース（またはサンプル空間）を有するサンプル・コンテナ（またはサンプル容器）を供する。従って、本発明では、サポート（または支持部材）、サポートと一緒に（または共に）サンプル・スペースを規定するレセプタクル、およびサンプル・スペースと熱接触するが、それから電気的に絶縁された状態で該サポートに取り付けられた（または固定された）ヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナが供される。好ましくは、サンプル・スペースは、多くとも１ｍｌの容量を有する。
【０００７】
更に、本発明では、サポート、流体サンプルを受容するように各々配置されたサンプル・スペースのアレイをサポートと一緒に規定する別々のレセプタクルのアレイ、およびサンプル・スペースと熱接触するが、電気的に絶縁された状態で該サポートに取り付けられたヒーター手段を有して成るサンプル・コンテナが供され、アレイの１またはそれ以上のサンプル・スペースに、アレイの他のもう１つまたは複数のサンプル・スペースに適用される加熱条件とは異なる加熱条件を適用できるようにヒーター手段が配置される。
【０００８】
かかるサンプル・コンテナにおいて、ヒーター手段は、複数の（または多数の）ヒーター要素を有して成ることが好ましい。更に好ましくは、各々のヒーター要素は、それぞれ個々のレセプタクルを加熱するように配置されている。好ましくは、各々のレセプタクルは、多くとも１００μｌの容量を有する。
【０００９】
「レセプタクル」という用語は、流体サンプルを収容（または包囲）するのに適当なボディー（または物体）を意味するものとして本明細書において用いられる。好ましい態様において、レセプタクルは、実質的に平坦なボディーにおいてキャビティーの形態であり、好ましくは、かかるボディーの平面に対して垂直方向にて平坦なボディーを通る開口部の形態である。サンプル・コンテナでは、サポートを有して成り得る適当な閉鎖手段によって、かかるキャビティーまたは開口部が閉鎖されることが理解されよう。
【００１０】
ヒーター手段は、電気抵抗ヒーターを含む適当な種類のヒーター手段であってよい。
【００１１】
サンプル・スペースをサポートおよびレセプタクルだけによって規定する必要はない。サポート、レセプタクル、更に、包囲部材によって、サンプル・スペースを規定してよい。場合によっては、例えば電気絶縁層等のコーティング層によって、サポートを被覆してもよい。確認のために説明するが、かかる層が存在する場合であっても、サポートがサンプル・スペースを規定するものと考えられる。
【００１２】
本発明では、ディスポーザブルであってよく、かつ、分子診断の用途、臨床分析もしくは他の分析の用途または化学的合成もしくは生化学的合成の用途で使用するのに適当な比較的簡単で安価なコンテナの可能性が供される。本発明のコンテナは、ＰＣＲの用途で使用するのに特に適当である。本発明のコンテナによって特有な利点がもたらされる他の用途には、合成の用途、制限摂取法、シーケンス法、ライゲーション法およびＤＮＡもしくはＲＮＡサイジング法がある。
【００１３】
本発明のコンテナには、好ましくは電気抵抗ヒーター手段が供される。好ましくは、ヒーターまたは各々のヒーターがサポートに設けられ（または塗布され）ている。電気抵抗ヒーター手段は、有利には直接的または間接的にサポート上に印刷される（例えばサポート上にスクリーン印刷され得る）。別法では、化学エッチング、薄膜付着、純金属蒸着またはフォトリソグラフィーによってヒーター手段を形成してよい。なお、フォトリソグラフィーは、０．１ｍｍよりも小さい解像度（または最小単位）を有したヒーター手段に対して特に適当である。スクリーン印刷される加熱手段は、１またはそれ以上の導電性インクを用いて構成され得る。好ましくは、インクは、炭素、金または銀から選択され得る導電性成分を含んで成り得る。適当なインクは、例えば、オランダのアケソン・コロイデン・ビー・ブイ（Ａｃｈｅｓｏｎ　Ｃｏｌｌｏｉｄｅｎ　Ｂ．Ｖ．）または英国のワイト島（Ｉｓｌｅ　ｏｆ　Ｗｉｇｈｔ）のポリ−フレックス・エル・ティー・ディー（Ｐｏｌｙ−Ｆｌｅｘ　Ｌｔｄ）から入手することができる。
【００１４】
特に効率的かつ精密であり、しかも比較的小さいスケール（典型的には、加熱要素の断面が０．５ｃｍよりも小さく成り得る）でもって、多数の加熱要素および関連する回路（または電気回路）をサポートに塗布できるので、スクリーン印刷がヒーター手段を適用するのに特に有利な手段である。使用に際して、周囲の装置の大部分が加熱されることなく、小さいヒーターによって、目的とするサンプルが優先的に加熱される。従って、特に効率的な加熱がもたらされる。常套の種類のスクリーン印刷インクを用いることができる。既に上述したように、炭素、金または銀を含んで成るインクが適当である。回路の性質を適当に調節するために、回路の異なる部分に別のインクおよび／または別の厚さでインクを用いてもよい。例えば、ヒーター要素に低導電率のインクの薄い層を用いて、回路のかかる部分にて発熱させてもよい。同様に、回路の電気接続部分に高導電率のインクの厚い層を用いて、回路のかかる部分における発熱を最小限度にしてもよい。
【００１５】
常套の加熱される反応コンテナでは、一般的に加熱された水またはペルチェ・ブロック（Ｐｅｌｔｉｅｒ　Ｂｌｏｃｋ）を用いることによって、加熱または冷却が行なわれている。これらの加熱アレンジメントのいずれも、本発明の抵抗ヒーターのように、小さい反応ベッセルを効率的に加熱することはできない。典型的には、ペルチェ・ブロックは、１００〜５００Ｗの電源を必要とする一方、本発明のスクリーン印刷された電気抵抗ヒーターでは、典型的には１０Ｗよりも小さい電力を必要とする。ベッセルの形状およびサンプルを加熱すべき速度（温度ランプ速度として知られる）に応じて、本発明のコンテナのヒーター要素の幾何学的形状（または幾何学的配列）を適合させてもよい。
【００１６】
従来技術のほとんどの診断用サンプルまたは実験用サンプルのヒーターでは、使い捨てコンテナ内でサンプルが加熱されており、コンテナが、加熱のためにヒーターと接触させられ、使用後にヒーターから取り除かれ、処分される。従って、ヒーターによって、コンテナ内でサンプルが存在するスペースに熱が供給される。本発明では、ヒーターを有するサンプル・コンテナの可能性が供されており、ヒーターは、更なるコンテナを必要とすることなく、サンプルが直接的に存在するスペースに熱を供給する。
【００１７】
国際公開第９８／２４５４８号では、電流が流れると、発熱できる導電性ポリマーを有して成る試薬ベッセルが開示されている。１つの態様において、ベッセルは、複数のレセプターのベイ（ｂａｙ）を有して成るボックスであり、各々のベイが、電気接続部を有したポリマーのヒーター・シースを有して成り、各々のレセプターのベイに種々の電力が供給できるようになっている。サンプルを含んだ別々のチューブが、ベイへの導入のために供される。
【００１８】
サポート、適当には実質的に平坦なサポート、好ましくはフィルム状サポートにヒーター手段が適用される。フィルムが実質的に平坦である場合、ヒーター手段の適用は容易である。可撓性であり得るフィルム状サポートは、アッセイまたは他の用途にて一般的に用いられる水および試薬に対して耐性を有する必要があり、また、典型的な操作温度まで耐熱性を有する必要がある。印刷によりヒーター手段を塗布する場合、フィルム状サポートは印刷されたインクに対して受理性を有する必要があることは理解されよう。好ましくは、フィルム・サポートは熱絶縁性を有する。適当なフィルムには、所望の性質を固有（または本質的）に有する材料から成るフィルム、および、かかる性質を固有に有していないが、適当な処理により適切にされた材料から成るフィルムが含まれる。適当なフィルムの例示として、アセテート、ポリエステルおよびポリイミドのフィルム（商品名カプトン（Ｋａｐｔｏｎ）（ＲＴＭ）で市販されている）、これらは必要に応じて適宜処理されていてよい。特に適当なフィルムは、ポリエステル・シートである。かかるシートは、例えば、商品名オートスタート（Ａｕｔｏｓｔａｒｔ）として英国のオートタイプ・インターナショナル・エル・ティー・ディー（Ａｕｔｏｔｙｐｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｌｔｄ．）から市販されている。好ましくは、サポートはポリマーのフィルム材料から成る。フィルムは、常套のプリント回路基板の裏面のサポートよりも薄い点および耐水性を有し得る点において利点を有する。或る用途では、適当に処理されたペーパーが、適当なサポートと成り得る。
【００１９】
大部分の常套のポリエステル・シートは、スクリーン印刷されたヒーターをサポートするのに十分な熱抵抗を有していない。シートが必要な性質を有することを確保するために、ポリエステル・シートの適当な処理、例えば、ポリエステル・シートのＵＶ効果が必要と成り得る。
【００２０】
好ましくは、１またはそれ以上の加熱要素は、サンプル・スペースをヒーター自体から電気的に絶縁させる不動態層で被覆（またはコート）される。不動態層は、熱伝導性であって電気絶縁性であることが好ましい。不動態層は、絶縁性（または誘電性）インクから構成され得る。絶縁性インクは、周知であり、いずれの適当な絶縁性インクを用いてもよい。適当な絶縁性インクは、例えば英国のワイト島のポリ−フレックス・サーキット・エル・ティー・ディーから市販されている。
【００２１】
好ましくは、サポートは層状構造である。サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、加熱要素を有して成る実質的に平坦な表面を有する第１部材、ボイド（または空孔）を規定する開口部または複数のボイドを規定する複数の開口部を有する層である第２部材、および実質的に平坦な表面を有する第３部材を有して成る、少なくとも３つの協働部材から構成されていることが好ましい。例えば、両側が接着剤（例えばベルギーのエイブリィ・デニソン（Ａｖｅｒｙ　Ｄｅｎｎｉｓｏｎ）のスペシャルティー・テープ・ディビィジョン（Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ　Ｔａｐｅ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ）から市販されている）で被覆されたテープ等の適当な接着剤によって、部材を相互に接触させて保持することが好ましい。レセプタクルの壁部および他の構造部品は、一般に第２部材の一部を成し、好ましくは、典型的な操作温度までの耐熱性、耐水性および耐薬品性を有する材料から構成されることが好ましい。好ましくは、材料は断熱材である。材料は、所望の構造を形成するのに適当であって、コンテナの使用に望ましい性質を有する種類であり得る。射出成形可能材料が特に適している。適当な材料の例には、ポリカーボネートおよびアクリロニトリル−ブタジエン−スチレンポリマーが含まれる。適当な材料は、例えばスイスのホルゲン（Ｈｏｒｇｅｎ）のダウ・プラスチックス（Ｄｏｗ　Ｐｌａｓｔｉｃｓ）から市販されている。
【００２２】
好ましくは、サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、アーチ状壁部によって規定されるサポートの面に対して垂直方向から見てアーチ形状を有する。好ましくは、サンプル・スペースに入ると、サンプル流体（例えば水）のメニスカスがサンプル・スペースの両側の壁部と同時接触できるような幅をアーチ状サンプル・スペースが有している。アーチ形状（または腎臓の形状）および適当な幅によって、流体は、底部から頂部へと入るというより水平方向で単一のフロントとしてのサンプル・スペースに入ることができる。かかる充填（または供給）メカニズムによって、サンプル・スペース内のサンプル内での気泡の形成が減じられることになる。
【００２３】
本発明のコンテナは、サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースにサンプルを供給するためのアクセス・チューブを有して成ることが好ましい。コンテナは、１または複数のレセプタクル内にて空気圧が形成されるのを回避するベントを有して成り、サンプルの付着が防止される。アクセス・チューブは、第１部材（加熱要素を有して成る実質的に平坦な表面を有する部材）と第２部材（１または複数のボイドを規定する開口部を有する層）との間のギャップ、または、第２部材（１または複数のボイドを規定する開口部を有する層）と第３部材の実質的に平坦な表面との間のギャップによって、それぞれのサンプル・スペースと連通してよい。好ましくは、サンプルを収容した後に１または複数のサンプル・スペースを封止（またはシール）することができる。層の間のギャップを閉じるように、レセプタクルの層を一体的に押圧をすることによって封止が行なわれ得る。
【００２４】
好ましくは、本発明のサンプル・コンテナは、電力供給および制御供給手段から取り外すことができる。
【００２５】
特に分子診断の用途では、複数の実験を同時に行なうことが一般的である。かかる場合、コンテナが複数のレセプタクルを有することが有利と成り得る。
【００２６】
上述のように、アレイまたはマトリックスに多数のレセプタクルを供する場合が有利と成り得る。かかるレセプタクルのアレイまたはマトリックスでは、複数のヒーター要素（各ヒーター要素が、それ自体サンプル・スペースを加熱する）を同じ実質的に平坦なサポート上にスクリーン印刷することが都合がよい。一方の加熱されるコンテナからもう一方の加熱されるコンテナへと多くの熱の流れが許容されないように、有利にはサポートが十分な熱絶縁性を有している。
【００２７】
好ましくは、サンプル・コンテナは、流体サンプルを受容するように各々配置されたレセプタクルのアレイを有して成り、アレイの１またはそれ以上のサンプル・スペースには、アレイの他のもう１つまたはそれ以上のサンプル・スペースに適用される加熱条件とは異なる加熱条件を適用できるようにヒーター手段が配置される。
【００２８】
いずれのサイズのサンプルであっても本発明のコンテナを用いることができるが、体積にして多くとも１ｍｌのサンプルを加熱するのに最も適している。従って、本発明のコンテナのサンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、多くとも１ｍｌの容量を有し得る。有利には、サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、多くとも２５０μｌの容量を有する。例えば、サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、多くとも１００μｌの容量を有する。アレイの構成では、本発明のコンテナの個々のサンプル・スペースは、多くとも１００μｌの容量を各々有することが好ましい。好ましくは、サンプル・スペースの各々は、多くとも５０μｌ、より好ましくは多くとも３０μｌの容量を有する。典型的には、サンプル・スペースの各々は２０μｌの容量を有する。実際には、各々のサンプル・スペースは、少なくとも０．５μｌの容量を有する。
【００２９】
本発明のコンテナは、使い捨て（または処分）できる（また、ディスポーザブルである）ことが好ましい。従って、コンテナは、電力供給手段および制御供給手段から取り外しできることが必要とされ、形成に使用される材料が、通常の実験室の廃棄物と共に焼却できることが好ましい。更に、デバイスが、十分に経済的であり、使い捨て要素を許容できるコストでデバイスを生産できることが好ましい。
【００３０】
必要に応じて、デバイスは、レセプタクル内のサンプルの導電率を検出するための手段を有して成り得る。例えば、導電率検出手段は、加熱手段が取り付けられた表面に面するレセプタクルの表面上に存在し得る。導電率検出手段は、加熱要素回路の場合に類似する方法で製造される回路を有して成り得る。それはスクリーン印刷され得、その構成に用いられる材料は、加熱手段が構成され得る基準と同様な基準を満たし得る。
【００３１】
必要に応じて、本発明のコンテナは、温度検出手段を有して成り得る。温度検出手段は、サンプルと直接的に接触してもよく、または、サンプルと熱的に接触するだけでもよい。例えば、温度検出センサーは、導電率検出手段が取り付けられたサポートの他方の面上にあってもよい。使用に際して、温度検出手段は、サンプルの温度を測定し得、必要とされるサンプル温度に応じてサンプルへの熱供給を変えることができる。
【００３２】
更に、本発明では、サンプル・スペースを規定するレセプタクル、サポート、およびサンプル・スペースと熱接触するが、それから電気的に絶縁された状態で該サポートに取り付けられたスクリーン印刷されたヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナが供される。かかるサンプル・コンテナは、上述の付加的な特徴のいずれかまたはそのいずれかの組み合せを有し得る。
【００３３】
また、本発明では、サポート、サポート上にサンプル・スペースを規定する手段、およびサンプル・スペースと熱接触してサポートに取り付けられたヒーター手段を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナが供され、サンプル・スペースを規定する手段、サポートおよびヒーター手段は、一体化したユニットを構成する。サンプル・スペースを規定する手段は、実質的に平坦なボディー、１もしくは複数の壁部、または他の構造物内の開口部であり得る。かかるサンプル・コンテナは、上述の付加的な特徴のいずれかまたはそのいずれかの組み合せを有し得る。
【００３４】
更に、本発明では、実質的に平坦なボディー（ボディー内に少なくとも１つのサンプル・スペースが規定される）および該ボディー内で一体化されたヒーター手段（サンプルスペースと熱接触している）を有して成る流体サンプル用サンプル・コンテナが供される。かかるサンプル・コンテナは、上述の付加的な特徴のいずれかまたはそのいずれかの組み合せを有し得る。
【００３５】
更に、本発明では、本発明のサンプル・コンテナ、およびサンプル・コンテナのヒーター手段を制御する制御手段を有して成る装置が供される。好ましくは、制御手段は、サンプル温度の測定値に応じて加熱手段を制御するように構成される。好ましくは、制御手段はコンピューターである。
【００３６】
好ましい態様において、制御手段は、ヒーター手段への電流の供給を制御する。温度をモニタリングするセンサーは、サンプル付近に存在し得、温度情報を制御手段（ヒーター手段への電力供給を調節するように構成され得る）へとフィードバックする。好ましくは、コンピューター手段によって、ヒーター手段への電力供給が制御される。
【００３７】
更に、本発明では、多数のサンプル・スペース（個々のヒーター要素を各々有する）を有する本発明のサンプル・コンテナを有して成る装置が供され、制御手段は、対応するサンプル・スペースに関連する温度検出手段より生じる温度に関する値に応じて、各々のヒーター要素を独立に制御するように構成されている。
【００３８】
更に、本発明は、本発明のサンプル・コンテナに対して、電力および制御を供給し得るホルダーを提供し、それからサンプル・コンテナを取り外しできる。
【００３９】
必要に応じて、本発明の装置またはホルダーは、サンプルに関する蛍光または紫外線認識の情報を得るための蛍光または紫外線認識吸収検出手段を有して成り得る。
【００４０】
光源は、当該分野にて既知の種類のものであってよい。適当な光源には、発光ダイオード（ＬＥＤ）、レーザー、およびハロゲン電球を含む常套の電球が含まれる。光源は、単一波長の光、複数の単一波長の光、または波長が混ざった光を発生し得る。
【００４１】
検出手段は、当該分野にて既知の種類であってよい。適当な検出器には、電荷結合デバイス（ＣＣＤ）およびＣＣＤのアレイが含まれる。１よりも大きい数の波長の光を用いるまたは検出する場合、検出手段が、検出のために種々の波長の光に分けるデマルチプレクサー（または多重分離装置）を含むことが望ましい場合がある。
【００４２】
蛍光または紫外線認識の吸収検出手段を有して成る本発明の装置またはホルダーと共に使用されるコンテナは、電気抵抗要素が光源または発光／透過光のパスを遮ることのないように配置されることが好ましい。
【００４３】
ＰＣＲ増幅産物（またはＰＣＲ増幅生成物）のリアル・タイム測定に対しては蛍光に基づいたアプローチ（または取り組み）が提案されており、一般的に用いられている。かかるアプローチのいくつかでは、二重螺旋ＤＮＡが結合した染料（例えばＳＹＢＲ　Ｇｒｅｅｎ　Ｉ（ＲＴＭ）システムで用いられるようなフルオレセインまたは臭化エチジウム等のインターカレート染料）が用いられ、存在する二重螺旋ＤＮＡの量が示される。他のアプローチでは、増幅の間にて開裂して、存在する二重螺旋ＤＮＡの量を濃度により示唆する蛍光生成物を放出する蛍光剤−消光対（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｒ−ｑｕｅｎｃｈｅｒ　ｐａｉｒｓ）を含んだプローブが用いられる（例えば「タックマン（ＴａｑＭａｎ）」（ＲＴＭ）によるアプローチ）。かかるアプローチを適用したものは、（例えば、国際公開第９５／３０１３９号で開示されているように）既知であり、２またはそれ以上の染料が用いられている。
【００４４】
本発明の装置またはホルダーは、上述の蛍光システムと共に用いるのが特に適当である。通常用いられる発光波長には、５３０ｎｍ（フルオレセイン）、６４０ｎｍ（ＬＣ赤６４０）および７１０ｎｍ（ＬＣ赤７０５）が含まれる。
【００４５】
また、ハイブリダイゼーション・プローブによって、特定の増幅産物の存在を検出するのが一般的である。かかるプローブには、種々の発光特性を有する蛍光染料が供され得、ある種の実験では、２種類以上の染料を使用することが望ましく成り得る。また、本発明の装置は、かかる検出システムに使用するのに適当である。パーツを動かさずに複数の光の波長を分析する性能が、特にかかる用途に対して有利である。
【００４６】
更に、本発明は、流体サンプルを加熱するための本発明のサンプル・コンテナの使用方法を供する。また、本発明では通常のサポートに供された多数の別々のレセプタクル内の多数の流体サンプルを加熱する方法が供され、１またはそれ以上のサンプルは、他のもう１つのサンプルまたは複数のサンプルとは異なるように加熱される。好ましくは、該１またはそれ以上のサンプルは、該他の１または複数のサンプルとは異なる温度にまで加熱される。有利には、該１またはそれ以上のサンプルは、該他の１または複数のサンプルとは異なる速度で加熱される。好ましい態様において、加熱は、パルス的である。パルス加熱によって、或る利点がもたらされることが判っており、本発明のコンテナと共に、例えば可変電流供給等のいずれかの適当な形態の電力供給が使用されてもよいことが理解されよう。
【００４７】
多数の診断手順は、流体のサンプルに関して実施され、流体の試薬に関した工程を含んでいる。かかる手順は、レセプタクル内にてサンプルに対して共通して行なわれる。流体の試薬およびサンプルが散逸しないように、流体の試薬およびサンプルをレセプタクル内で確実に収容し、封止することが非常に好ましい。
【００４８】
レセプタクルからの流体のリークによって、操作員（もしくは運転員）または機器に危険がもたらされることに成り得、アッセイから得られるデータに信頼性がなくなることになる。診断手順で信頼性があって再現性のある結果を得ることを確保するために、装置および試薬の高度の無菌性が必要とされる。この目的を達成するため、サンプル用レセプタクルを適当に封止することが必要である。特に重要なことは、レセプタクル内で流体を収容（または保持）することであるが、そのように封じ込めることは、サンプルを加熱および／または冷却する手順では達成することが困難と成り得る。
【００４９】
本発明の第２の要旨において、第１部分、第２部分、第１部分と第２部分との間に位置するサンプル・スペースを規定するレセプタクル、サンプル・スペースにサンプルを収容させるためのアクセス・チューブ、および連通チャンネル（アクセス・チューブが連通チャンネルを介してサンプル・スペースと連通している）を有して成る流体サンプル・コンテナが供され、第１部分と第２部分とを一体的に押圧する圧力が加わると、連通チャンネルを閉鎖するようにコンテナは変形することができる。好ましくは、サンプル・スペースは多くとも１ｍｌの容量を有する。
【００５０】
サンプル・コンテナの第１部分および第２部分は、（例えば層状アレンジメントの場合のように）個々の部材であってよく、または（例えば成形したコンテナように）単一の構造的な要素の部分であってよい。連通チャンネルが開いている場合では、連通チャンネルは、レセプタクル内にサンプルを供給し得るように機能する。チャンネルは、毛管作用によって、アクセス・チューブからレセプタクルへのサンプル流体の移動が助力され得るサイズであってよい。連通チャンネルが閉鎖されている場合、アクセス・チューブとレセプタクルとの間の流体の連通が妨げられるようにサンプル・スペースは封止される。
【００５１】
この本発明の第２の要旨では、可動パーツ（または可動部）のないコンテナの可能性が供される。従って、分子診断の用途、臨床分析もしくは他の分析の用途または化学的合成もしくは生化学的合成の用途において使用するのに適当な比較的シンプルで安価なコンテナの可能性が供され、そのコンテナーはディスポーザブルであってよい。本発明のコンテナは、ＰＣＲの用途で使用するのに特に適当である。本発明のコンテナによって特有な利点がもたらされる他の用途には、合成の用途、制限摂取法、シーケンス法、ライゲーション法およびＤＮＡまたはＲＮＡサイジング法がある。
【００５２】
更に、本発明のこの第２の要旨では、第１部分、第２部分、第１部分と第２部分との間に位置するサンプル・スペースを規定し、流体サンプルを受容するように配置される各々の独立したレセプタクルのアレイ、各々のサンプル・スペースに関連するアクセス・チューブ（サンプル・スペースにサンプルを供給する）、および各々のサンプル・スペースに関連する連通チャンネル（各々のアクセス・チューブが連通チャンネルを通ってそれに関連するサンプル・スペースと連通している）を有して成るサンプル・コンテナが供されており、第１部分と第２部分とを一体的に押圧する圧力が加わると、連通チャンネルが閉鎖されるようにコンテナは変形することができる。好ましくは、各々のサンプル・スペースは、多くとも１００μｌの容量を有する。
【００５３】
また、本発明の第１の要旨のコンテナに関連する上述の好ましい容量は、本発明のこの第２の要旨のコンテナのサンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースに当て嵌まる。
【００５４】
好ましくは、本発明の第２の要旨のコンテナは弾性変形することができ、圧力が除かれると連通チャンネルが開くようになっている。これによって、第１の閉鎖の後において、一部の流体がレセプタクルから除去される可能性が供される。また、第１の閉鎖の後において、レセプタクル内に更なるサンプルまたは更なる試薬が供給される可能性が供される。
【００５５】
好ましくは、本発明の第２の要旨のコンテナ内のレセプタクルまたは各々のレセプタクルは、ベント穴部を更に有して成る。レセプタクル内にて流体を供給する場合、ベント穴部は、空気をレセプタクルから逃すように機能し、レセプタクル内で空気圧が形成されることが回避される。好ましくは、ベント穴部は封止可能である。好ましくは、連通チャンネルを閉鎖する過程の前または間においてベント穴部を封止できる。好ましくは、変形、特にコンテナの弾性変形等によってベント穴部を封止できる。従って、好ましい態様のコンテナでは弾性変形ができ、コンテナに加わる力に応じて変形する場合、連通チャンネルおよびベント穴部が封止される。特に好ましい態様のコンテナは弾性変形できるものであり、該力が取り除かれると、連通チャンネルおよび／またはベント穴部を再度開くことができる。
【００５６】
本発明の第２の要旨のコンテナは、好ましくはサンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースに関連した加熱要素を有して成る。加熱要素は、レセプタクル内の流体の温度を制御するように機能する。独立したレセプタクルのアレイでは、各々のレセプタクルは、個々の加熱要素を有して成ることが好ましい。加熱要素には、本発明の第１の要旨での使用するのに適当なヒーター手段に関連した上述のいずれかの特徴が組み込まれていてもよい。
【００５７】
サンプル・スペースまたは各々のサンプル・スペースは、実質的に平坦な表面を有する第１部材、ボイドまたは複数のボイド（各々のボイドは、関連するアクセス・チューブおよび連通チャンネルを有しており、アクセス・チューブが連通チャンネルを介してボイドと連通している）を規定する開口部を有する第２部材、および実質的に平坦な表面を有する第３部材を有して成る少なくとも３つの協働部材から構成されることが好ましく、第１部材と第３部材とを一体的に押圧する圧力が加わると、連通チャンネルまたは各々の連通チャンネルが閉鎖されるように弾性変形可能な材料から第２層は構成されている。かかる構造によって、構成が簡単なコンテナの可能性が供される。好ましくは、連通チャンネルは、第１部材と第２部材との間または第２部材と第３部材との間に位置する。
【００５８】
第３の要旨では、本発明は、サンプル・コンテナ用のホルダーを供する。サンプル・コンテナは少なくとも第１外表面および第２外表面を有しており、それらの外表面の少なくとも一方が、物質をコンテナ内に導入するための少なくとも１つのアクセス開口部を有している。ホルダーは、第１プレートおよび第２プレートを有して成り、該第１プレートおよび該第２プレートは、第１の開いた状態と第２の閉じた状態との間で相互に対して移動することができる。閉じた状態では、プレートによって、該コンテナの該第１外表面および第２外表面がそれぞれ押圧され、少なくとも１つのアクセス開口部が閉鎖できるように、プレートは寸法を決められ、また、構成されている。
【００５９】
本発明の第２の要旨のホルダーによって、サンプル・レセプタクルまたはコンテナを迅速かつ手間をかけずに確実に封止する可能性が提供され。更に、ホルダーによって、多数のサンプル・レセプタクルを同時かつ確実に封止することができる。
【００６０】
好ましくは、少なくとも１つのプレートは、熱伝導性材料から成っており、サンプル・スペースからのヒートシンクとして機能するように、サンプル・スペースに隣接するコンテナの一部と接触する領域を有して配置されている。コンテナ部分と接触する領域は、好ましくはコンテナ内のサンプル・スペースに対応する形状および構造となっている。好ましくは、プレートは、サンプル・スペースに隣接するコンテナ表面の５０％以上と接触する。より好ましくは、プレートは、サンプル・スペースに隣接するコンテナ表面の８０％以上と接触する。更により好ましくは、プレートは、サンプル・スペースに隣接するコンテナ表面の９５％以上と接触する。
【００６１】
好ましくは、一方のプレートは、該コンテナの１または各々のサンプル用レセプタクルに対応するように配置された１または複数のノジュール（ｎｏｄｕｌｅ）を有して成っており、ノジュールまたは各々のノジュールが、サンプル・レセプタクルまたは各々のサンプル・レセプタクルに隣接するコンテナの第１外表面または第２外表面に圧力を加えることができるように配置されており、従って、アクセス用開口部の閉鎖が助力される。アクセス開口部または各々のアクセス開口部は、一般に、サンプル・コンテナ上の特定の位置だけに存在する。従って、コンテナの表面の特定の部分に、アクセス用開口部を閉鎖するように圧力を及ぼさせるということが有利となり得る。これは、プレートの一方または双方にノジュールが存在することによって好都合に達成される。
【００６２】
一方のプレートが動かないように配置され、他方のプレートが該一方のプレートに対して可動するように装置を構成してもよい。好ましくは、可動するプレートは、ヒンジの回りでピボット回転（または軸回転）することができる。かかる構成では、可動パーツは比較的少なく、簡単な構造が有効である。
【００６３】
別法では、サンプル・コンテナを受容するスペースに対してプレートの双方が可動するように装置を構成してもよい。好ましくは、各々のプレートは、個々のヒンジ回りで独立にピボット回転できる。各々のプレートを個々のロッド（実質的に相互に平行となっている）に回転可能に取り付けてもよい。単一のヒンジのみを有して成る構成では、サンプル・コンテナが不均一に圧縮される危険がある。一般的に、かかる構成では、ヒンジに最も近いサンプル・コンテナの部分が最も圧縮されることになる。サンプル・コンテナを受容するスペースに対して双方のプレートが可動であるという構成では、２つのプレート間にサンプル・コンテナを「浮いた（ｆｌｏａｔｉｎｇ）」状態で保持することができ、サンプル・コンテナにかかる圧力を減少させることなくプレートが相互に僅かに動くことができる。これによって、サンプル・ホルダー表面にわたる圧力の均等な分布が維持される。
【００６４】
有利には、装置は、プレートを相互に動かす機能を有するモーターを有して成る。好ましくは、各々のプレートは、個々のヒンジの回りでピボット回転することができ、連通部材が各々のプレートからヒンジの他の側部へと突出している。好ましくは、モーターは、回転させた場合、連通部材を押圧し、プレートを相互に近づくように移動させる駆動部材を有して成る。駆動部材は、その外表面の半径方向の変位がその軸の回りで変わるように有利には卵形状である。それぞれのプレートから突出する連通部材は、駆動部材と接触しており、それらは駆動部材によって要求される距離分だけ相互に離隔される。従って、第１の状態では、駆動部材の半径方向の変位は、比較的小さく、２つの連通部材は、比較的小さい距離で離れている。モーターの作動によって、駆動部材は、その半径方向の変位がより大きい第２の状態へと回転する。第２の状態では、２つの連通部材は、より大きい距離でもって離れており、連通部材に取り付けられているプレートが一体的に押圧される。
【００６５】
本発明は、診断、実験および他の実験室における手順のための温度制御方法、ならびにそれらに関連する装置に関する。
【００６６】
常套的に、流体と熱接触するヒーターを使用することによって、流体の加熱が行なわれる。サーモスタット（または自動温度調節）式の加熱が望ましい場合では、更なる装置要素、温度センサー（または温度検出器）が必要とされる。使用に際して、所望の目標温度が制御手段に伝えられる。温度センサーは、流体の温度に関連する情報を制御手段にフィードバックし、所望の温度が達成されるように加熱速度（または割合）が適当に調節される。かかる装置では、２つの回路を使用する必要がある。
【００６７】
第３の要旨において、本発明は、流体サンプルを加熱する方法を供し、電気抵抗要素が、第１期間でヒーターとして機能し、第２期間では温度検出手段として機能するように、電気抵抗要素に電圧が印加されるまたは電流が供給される。
【００６８】
特に分子診断の用途では、複数の実験を同時に行なうことが一般的である。かかる場合、複数のサンプルを同時に加熱することが有利と成り得る。従って、本発明の第３の要旨では、複数の流体サンプルを加熱する方法が供されており、各々の電気抵抗要素が、第１期間ではサンプルのヒーターとして機能し、第２期間ではサンプルの温度検出手段として機能するように、複数の電気抵抗要素の各々に電圧が印加されるまたは電流が供給される。
【００６９】
好ましくは、複数の流体サンプルの各々は、独立に加熱される。
【００７０】
電気的抵抗要素に電圧を印加することによって、要素に電流が流れ、同様に、電気抵抗要素に電流を供給することによって、その端部の間で電位差が生じることが理解されよう。既知の電圧を印加することが可能であり、また既知の電流を供給することが可能である。
【００７１】
電気抵抗要素への電圧の印加または電流の供給は、加熱レベルと温度測定レベルとの間でパルス的に効率的に行なわれる。使用に際して、正弦波、矩形波、放物線、三角形またはそれらの組み合せを含むいずれかの適当な形態（または形状）を成し得る可変電圧供給（即ち、パルス幅変調）によって、サンプルのパルス加熱が行なわれ得る。好ましくは、電圧供給は、スルーレートが制限された矩形波のプロファイルを有する。
【００７２】
加熱電流ＩＨは、時間ｔＨの期間サンプルに供給され、温度測定電流ＩＴは、時間ｔＴの期間供給される。好ましくは、ｔＨは、０．１ｍ秒〜１００秒の範囲である。より好ましくは、ｔＨは、０．２ｍ秒〜１秒である。更により好ましくは、ｔＨは、１ｍ秒〜１００ｍ秒であり、例えば３ｍ秒〜５０ｍ秒のオーダーである。好ましくは、ｔＴは、０．１ｍ秒〜１００秒であり、より好ましくは、ｔＴは、０．２ｍ秒〜１秒である。更により好ましくは、ｔＴは、１ｍ秒〜１００ｍ秒であり、例えば３ｍ秒〜５０ｍ秒のオーダーである。
【００７３】
ＩＨ、ｔＨおよびｔＴに対する正確な値は、電気抵抗要素の性質およびサンプルが到達すべき温度に依存する。ある所望温度に対して、先行した実験により設定されたｔＨ、ｔＴおよびＩＨの値のセットをサンプルに電流を供給するのに用いることができる。加熱電流ＩＨおよび温度測定電流ＩＴは、交流または直流で有り得る。抵抗要素に無視できるほどの加熱がもたらされる程度になるように十分に小さくＩＴを設定することが好ましい。ＩＨはＩＴより大きい。好ましくは、ＩＨは、ＩＴより１０倍以上大きい。
【００７４】
従って、本発明の方法では、加熱および温度測定のための単一の回路のみを用いることによって、加熱、冷却または安定な温度が維持される間のサンプル温度をリアルタイムでモニタリングすることができる。
【００７５】
正確に温度制御するために、個々の抵抗要素の温度に関連するパラメーターの測定値を用いて、特定の時刻におけるサンプルの現実の温度に関する情報を制御手段へとフィードバックし、制御手段がＩＨ、ｔＨおよびｔＴを調節し、所望の温度にまでサンプルを加熱し得る。好ましくは、ＩＨを調節する。好ましくは、第２期間における温度検出手段からの情報は、制御手段によって、第１期間での電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素に印加される電圧または供給される電流を調節するために用いられる。好ましくは、第２期間の間では電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素の抵抗（または抵抗値）の測定によって温度測定が行なわれる。
【００７６】
ある用途では、加熱サイクルのピッチが一定（即ち、ｔＨ＋ｔＴ＝一定）に維持されることが望ましいことがあり、その結果、ｔＴの減少によりｔＨが増加し、その逆が生じる。他の用途では、ｔＴを最小限度に維持し、総時間に占める割合をできるだけ大きくして回路を加熱することが好ましいことがある。多くの用途では、実際には電気抵抗要素の温度またはサンプルの温度を計算する必要がないことがある。測定される電気抵抗要素の抵抗は、要素の温度およびサンプルの温度に関係しており、多くの場合、抵抗情報を直接的に用いることができ、温度の測定値（または読み取り値）への計算は不要である。
【００７７】
温度測定期間ｔＴの間、電気抵抗要素または各々の関連する電気抵抗要素の温度を測定することによって、サンプルの温度を評価することが好ましい。電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素の抵抗を測定し、測定される抵抗から温度を計算することによって、電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素の温度を決定することができる。回路の制約により、実際、現実に測定される抵抗には電気抵抗要素以外の回路パーツの抵抗が含まれ得る。一般的に、かかる追加的なパーツでは、温度が一定のままであり、従って、かかるパーツは、サンプル温度によっては実質的に変化しない抵抗を有する。従って、測定される回路の抵抗の変化は、電気抵抗要素の抵抗の変化を示しており、それゆえ電気抵抗要素の温度の変化を示している。
【００７８】
抵抗器の抵抗（Ｒ）は、印加される電圧（Ｖ）および電流（Ｉ）と関係式Ｖ＝ＩＲによって関係付けられる。電気抵抗要素に既知の電圧を印加し、発生する電流を測定することによって、電気抵抗要素の抵抗を測定することができる。別法では、電気抵抗要素に既知に電流を供給し、生じる電圧を測定することによって、電気抵抗要素の抵抗を測定することが好ましい。
【００７９】
電気抵抗要素の温度、従ってサンプルの温度を決定するために抵抗測定を用いる前に、回路の抵抗を電気抵抗要素の温度に関係づけるキャリブレーション曲線（または検量線）を測定することが一般的に必要とされる。従って、複数の温度での電気抵抗要素の抵抗のキャリブレーション測定によって、電気抵抗要素回路または各々の電気抵抗要素回路の抵抗とサンプルの温度との関係を導き出すことが好ましい。このような種類の装置では、キャリブレーションを行なう必要なく、正確な温度決定を可能ならしめる、十分に予測できる抵抗を有した手頃な回路を作ることは一般的に経済的に可能ではない。製造方法をより正確にすると、かかる回路が可能となる。
【００８０】
電気抵抗要素は、金属、半導体材料、導電性ポリマーもしくはいずれかの他の適当な材料またはそれらの組合せを含んで成り得る。電気抵抗要素は、本発明の第１の要旨および第２の要旨に関する１またはそれ以上の上述の特徴を有し得る。
【００８１】
実際、多くの金属抵抗器では、温度による抵抗の変化が、関連する温度範囲（典型的にはおよそ２５〜１００℃）にてほぼ直線的であり、従って、２つのキャリブレーション・ポイント（または検量点）、即ち、２つの異なる温度において回路の抵抗を測定することによって、十分に正確な温度−抵抗のキャリブレーション関係を得ることができる。このようにして、絶対抵抗および温度による抵抗の変化割合が考慮に入れられ得ることになる。温度による線形的な抵抗変化を有していない電気抵抗要素に対しては、より多くのキャリブレーション・ポイントが必要とされ得る。
【００８２】
ペルチェ効果ヒートポンプでは、熱が、デバイスの一方の端部で吸収される一方、他方の端部では捨てられる。かかるデバイスは、温度が制御された診断装置において一般的に使用される。ペルチェ効果ヒート・ポンプによる加熱のほとんどは、厳密には抵抗加熱ではないが、かかるデバイスは抵抗を有している。ペルチェ・デバイスの抵抗は、温度に伴う変化を有しており、従って、ペルチェ・デバイスは、本発明の電気抵抗ヒーターとして用いられ得る。
【００８３】
電気抵抗要素は、サンプルと密接して熱接触する。加熱期間の間では、電流ＩＨが要素に供給され、抵抗または他の形態の加熱により、要素が熱くなる。熱の一部がサンプルに移動する。加熱期間の終了時にヒーターの電流ＩＨの供給を停止すると、要素は、その要素の周囲（サンプルを含む）よりも温かい温度を維持する。電気抵抗要素とサンプルとの間の密接な熱接触の結果、要素は、温度測定期間の間、サンプル温度に向かって冷却されることになる（かかるプロセスではサンプルが加熱されることになる）。
【００８４】
好ましくは、抵抗要素に関する温度決定または各々の温度決定は、第１期間の終了に引き続いて時間遅れの後に行なわれ、従って、温度決定は個々のサンプル温度の真の評価である。好ましくは、サンプルと電気抵抗要素との間の熱接触は、それらが２５０ｍ秒以内で熱的に実質的に平衡に達する程に十分に効率的である。より好ましくは、サンプルと電気抵抗要素との間の熱接触は、それらが５０ｍ秒以内で熱的に実質的に平衡になる程に十分に効率的である。更により好ましくは、サンプルと電気抵抗要素との間の熱接触は、それらが１０ｍ秒以内で熱的に実質的に平衡になる程に十分に効率的である。従って、かかる期間の後に行なわれる抵抗の測定によって、サンプル温度を正確に示唆する電気抵抗要素の温度を決定できる。温度の決定は、温度測定期間の間にて行なわれ、従って、温度の読み取り（または測定）を行なう前の時間遅れが、温度測定期間ｔＴの長さよりも短い必要がある。
【００８５】
電気抵抗要素とサンプルとの間の熱平衡が温度測定期間の所要長さに対して遅くなり過ぎる場合、電気抵抗要素の冷却の間にて幾つかの抵抗の読み取りが行なわれ得る。電気抵抗要素が冷却されるにつれ、電気抵抗要素は、指数的に減少して平衡温度に近づく。温度の指数的な減少が予測されるので、冷却の初期の間の冷却曲線から電気抵抗要素が収束する温度を計算することができる。曲線の形状は、平衡に近い曲線上のあるポイントを示唆し、曲線上のかかるポイントにおける温度が与えられると、平衡温度が計算され得る。従って、第１期間の終了の後の電気抵抗要素の冷却曲線から見積もることによって、サンプルまたは各々のサンプルの温度を決定できる。ある場合では、冷却曲線の形状は、装置のアーチファクトにより数学的な指数的に減少でないことがある。適当なキャリブレーション実験を用いることによって、かかるアーチファクトを考慮することができる。
【００８６】
電気抵抗要素の製造モードに応じて、要素の抵抗が使用の程度および／または期間によって変化し得る。しかしながら、スクリーン印刷された金属インク回路の場合、要素の抵抗は、例えば９９℃で２０００分の間の高温の期間の後にて実質的に一定のレベルを達成することが一般的に判った。電気抵抗要素のかかる「熟成（ｃｕｒｉｎｇ）」は、電気抵抗要素自体または外部手段によって供給される熱によって行なわれ得る。特定の場合、効率的な熟成に必要とされる加熱の時間および程度は、要素のサイズ、要素の形状、その製造モード、および製造に用いる材料に依存する。
【００８７】
本発明の第３の要旨の方法は、サンプルがいずれのサイズであっても用いることができるが、体積にして多くとも１ｍｌのサンプルを加熱するのに最も適している。受容用スペースもしくはレセプタクルまたは各々の受容用スペースもしくは各々のレセプタクルは、本発明の第１の要旨または第２の要旨のレセプタクルに関して上述した容量を有してよい。
【００８８】
本発明の第３の要旨の方法は、ＰＣＲの用途に用いることが特に適当である。本発明の方法によって特有な利点がもたらされる他の用途には、合成の用途、制限摂取法、シーケンス法、ライゲーション法およびＤＮＡもしくはＲＮＡサイジング法がある。
【００８９】
上述の本発明の第１の要旨および第２の要旨のコンテナに用いられるヒーター要素の寿命は延ばすことができること、また、パルス加熱を用いることによって、時間の経過中、流体の温度をより安定にできることが判った。パルス加熱では、エネルギーの供給が矩形波の形態であり得る。時間ＴＨの期間では高い電流が供給され、時間ＴＬの期間では低い電流が供給され（または電流が供給されず）、高い電流値と低い電流値との差によって、振幅Ａが規定される。あるサンプルに対するＴＨ、ＴＬおよびＡの値は、サンプルが達する温度を表している。所定の所望の温度に対して、先行した実験により設定したＴＨ、ＴＬおよびＡの値のセットがサンプルへの熱供給に用いられ得る。この設定が用いられる場合、あるサンプル温度を得るために必要な予め決められたパラメーターＴＨ、ＴＬおよびＡを、コンピュータのメモリーまたは他のコンピュータが読み取り可能媒体に保存することが好ましい。コンピューターのユーザーが特定の温度値を選択する際に、値をソフトウェアによってメモリーから引き出すことができる。一般的に、ＴＨは１ｍ秒〜１秒の範囲であり、例えば１０ｍ秒のオーダーの範囲である。一般的に、ＴＬは、１ｍ秒〜１秒の範囲であり、例えば１０ｍ秒のオーダーの範囲である。一般的に、印加される電圧は、０．１Ｖ〜７Ｖの範囲であり、例えば５Ｖのオーダーの範囲であり得る。実際、ＴＴＬ（トランジスタ−トランジスタ論理回路）パルスおよびＰＩＤ（比例積分または比例微分）パルスでは、特に満足のいく結果が得られることが判った。
【００９０】
好ましくは、本発明の第１の要旨または第２の要旨のサンプル・コンテナがこと方法に用いられる。
【００９１】
また、本発明では、コンピューターに本発明の方法を実行させるように構成されたコンピューター・プログラム・プロダクト（または製品）が供される。
【００９２】
更に、本発明の第３の要旨は、
時間の経過に伴う流体サンプルの所望の温度プロファイルを表すデータセット信号および流体サンプルの温度を表す入力データセット信号を入力として受け取ること、および
流体サンプルを加熱するために、データセット信号を電気抵抗要素に印加する電圧または供給する電流の時間および大きさを表す出力信号へと変換すること、をコンピューターに実行させるコンピューター・プログラム・プロダクトを供しており、
第１期間では、制御手段が電気抵抗要素に電圧を印加または電流を供給するように命令され、第２期間の間では、同じ電気抵抗要素によって、流体サンプルの温度を表す入力データセット信号が提供される。
【００９３】
本発明の第３の要旨のコンピューター・プログラム・プロダクトは、標準的なコンピューターで使用することができる。時間の経過に伴う流体サンプルの温度変化のプロファイルは、オペレーターによって設定され得る。培養または合成の用途の場合、長期間、一定の温度であることが望ましいことがある。核酸または蛋白質の変性に関した手順の場合、時間の経過と共に温度を増加させることが必要と成り得る。ＰＣＲプロトコルにおいて、一連の加熱と冷却とのサイクルが一般的に用いられる。
【００９４】
流体サンプルの温度を表すデータセット信号は、電気抵抗要素回路の抵抗を測定することによって得ることができる。
【００９５】
更に、本発明の第３の要旨は、サンプルを受容するための受容スペース、電気抵抗要素および制御手段を有して成る流体サンプルの加熱装置を供しており、電気抵抗要素が、第１期間ではヒーターとして機能し得、第２期間では温度検出手段として機能し得るように、制御手段が電気抵抗要素に電圧を印加するまたは電流を供給する。
【００９６】
好ましくは、本発明の装置は、複数の流体サンプルを加熱するのに適当である。
【００９７】
装置は、受容スペース内に直接的にサンプルを受容するように構成され得る。かかる構成において、電気抵抗要素は、受容スペースから電気的に絶縁されることが好ましい。
【００９８】
好ましくは、サンプルを受容するための受容スペースがサンプル・コンテナのためのスペースを有して成るように装置が構成される。かかる構成は、無菌性であっておそらくは使い捨てのコンテナ内にサンプルを保持することができるので、試薬の高度の無菌性が要求される用途に使用されるのが適切である。本発明の装置に関連して使用するコンテナは、例えばエッペンドルフチューブ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ　ｔｕｂｅ）等の標準タイプであってよい。好ましくは、サンプル・コンテナは、独立したレセプタクルのアレイを有して成る。
【００９９】
或る用途では、電気抵抗要素がサンプル・コンテナまたは各々のサンプル・コンテナに取り付けられることが好ましいことがある。従って、本発明の第３の要旨は、流体サンプル用サンプル・コンテナのホルダーを更に供し、コンテナが、サポート、サポートと一緒にサンプル・スペースを規定するレセプタクルおよび該サポートに取り付けられたヒーター手段を有して成っており、電気抵抗要素が、第１期間ではヒーターとして機能し得、第２期間では温度検出手段として機能し得るように、電気抵抗要素に電圧を印加するまたは電流を供給する制御手段を該ホルダーは有して成る。
【０１００】
更に、本発明はホルダーを供しており、コンテナが、サポート、サポートと一緒に流体サンプルを受容するために各々配置されたサンプル・スペースのアレイを規定する独立したレセプタクルのアレイ、および該サポートに取り付けられたヒーター手段を有して成り、電気抵抗要素または各々の電気抵抗要素が第１期間ではヒーターとして機能し得、第２期間では温度検出手段として機能し得るように、電気抵抗要素および各々の電気抵抗要素に電圧を印加するまたは電流を供給する制御手段を該ホルダーは有して成る。
【０１０１】
好ましくは、アレイの１またはそれ以上のレセプタクルに、アレイの他のもう１つまたは複数のレセプタクルに適用される加熱条件と異なる加熱条件を適用できるように、制御手段および電気抵抗要素もしくは各々の電気抵抗要素が構成される。
【０１０２】
かかるサンプル・コンテナでは、多数（または複数）の電気抵抗要素が存在することが好ましく、ホルダーが要素へのコネクターを多数（または複数）有して成る。
【０１０３】
更に好ましくは、各々の電気抵抗要素が、それぞれ個々のサンプル・スペースを加熱するように構成される。
【０１０４】
更に、本発明では、適当なコンテナに関連した上述のホルダーが供される。
【０１０５】
本発明では、分子診断の用途、臨床分析もしくは他の分析の用途または化学的合成もしくは生化学的合成の用途において使用するのに適当な比較的シンプルで安価な装置またはホルダーの可能性が供される。本発明の装置またはホルダーでは、サンプル温度を精密にモニタリングできるが、加熱回路と温度検出回路とが別々に必要とされることはない。
【０１０６】
本発明の装置またはホルダーは、サンプルがいずれのサイズであっても使用することができるが、体積にして多くとも１ｍｌのサンプルを加熱するのに最も適している。受容用スペースもしくはレセプタクルまたは各々の受容用スペースもしくは各々のレセプタクルは、本発明の第１の要旨または第２の要旨のサンプル・スペースに関して上述した容量を有し得る。
【０１０７】
本発明の装置およびホルダーは、ＰＣＲの用途に用いるのが特に適している。適当なコンテナに関連する本発明のホルダーによって特定の利点がもたらされる他の用途には、合成の用途、制限摂取法、シーケンス法、ライゲーション法およびＤＮＡもしくはＲＮＡサイジング法がある。
【０１０８】
本発明のホルダーに関連して使用される好ましい態様のコンテナは、本発明の第１の要旨または第２の要旨のコンテナに関して上述したコンテナである。
【０１０９】
添付図面を参照して、本発明の或る態様をより詳細に説明する。
【０１１０】
図１の図面を参照すると、平坦な下方部材２、平坦な上方部材３、およびサンプル受容スペース５を規定する壁部４、４’を有して成るコンテナが、参照番号１で一般的に示される。壁部４、４’は、平坦な上方部材３と平坦な下方部材２との間でこれらに平行に延在する中央の平坦な部材によって構成されている。下方部材２は、スクリーン印刷された電気抵抗ヒーター６を有する。電気抵抗ヒーター６および下方部材２の上表面は、電気的に絶縁性を有する不動態層７（この図面には図示せず）によって被覆されている。上方部材３の内表面には、導電率センサー８が取り付けられている。アクセス・チューブ９が、サンプル受容スペース５の一方の側方に存在する。
【０１１１】
図２に示す更なる態様を参照すると、下方部材２、上方部材３、および壁部４、４’を有して成る、組み立てられたコンテナが参照番号１で一般的に示される。上方部材３は、壁部４’に取り付けられている。ふた３と壁部４’との間の係合は、壁部４’のリムの周りにて延在するテープ・シール１０によって気密にされている。ふた３の内表面には、保持部材１１および接着剤によって所定のように保持される導電率センサー８が取り付けられている。壁部４は、スクリーン印刷された電気抵抗ヒーター６（図２には図示せず）を有する下方部材２に取り付けられている。壁部４と下方部材２との間の係合は、壁部４の下方エッジの周りにて延在するテープ・シール１２によって気密にされている。スクリーン印刷された抵抗ヒーター６は、電気絶縁性の不動態層７（図２には図示せず）によって被覆されている。壁部４、４’およびふた３は、およそ０．５〜２．０ｍｍの厚さであり、例えば１〜１．５ｍｍの厚さである。
【０１１２】
図２のコンテナは、図３で展開図により示される。
【０１１３】
図４を参照すると、参照番号１３によって一般的に示すウェルのマルチプレックス・アレイ（または多数のアレイ）が示されている。図示したマルチプレックス・アレイの部分は、１４ａ〜１４ｅとして一般的に示される５つのウェルを有する。アレイ中の各々のウェルは、図１のコンテナと同じ基本的な特徴を有する。ウェル１４ｅを参照すると、下方部材２、上方部材３および壁部４によって、サンプル受容スペース５ｅが規定される。下方部材２は、スクリーン印刷された電気抵抗ヒーター６ｅを有する。電気抵抗ヒーター６ｅは、電気絶縁性の不動態層７ｅ（図示せず）によって被覆されている。上方部材３の内表面には、導電率センサー８ｅが取り付けられている。アクセス・チューブ９ｅは、サンプル受容スペース５ｅの一方の側方に存在する。
【０１１４】
図５において、ウェルのアレイの下方面２に位置する、参照番号１５によって一般的に示す回路のレイアウトを示す。ウェル１４ａ〜１４ｆｆの各々は、それぞれの電気接続部１７を介して個々の電源に接続されたスクリーン印刷された電気抵抗ヒーター１６、および電気接続部１８を介したアースへの電気出力部を有している。電気出力接続部１８は、ベース２の穴部を通ってベースの他方の側の出力導電体１９（図５には図示せず）へと延びている。
【０１１５】
図６に示すようなボイド規定層２０は、ヒーター要素１６ａ〜１６ｆｆ上に適合するように適当に離隔した複数の開口部２１ａ〜２１ｆ（図面には６つの開口部が示されている）を有して成る。開口部２１ａ〜２１ｆはレセプタクルのアレイを構成しており、下方部材２と一体的に、サンプル・スペースの対応するアレイを規定している。各々の開口部２１は、アクセス・チューブ２２を有し、そのアクセス・チューブ２２を通って、開口部２１と下方部材２と上方部材３とによって規定されるサンプル・スペースへと流体が毛管作用に起因して送られる。ボイド規定層２０は、およそ１ｍｍの厚さを有する。各々の開口部は、およそ３ｍｍの幅、および、およそ６ｍｍの長さを有し、従って、およそ２０μｌのサンプル体積が規定される。
【０１１６】
上方部材３は、複数の導電率プローブ２４（図７を参照）を含んだ導電率検出手段回路２３を有するポリエステル・シートを有して成り得る。図７は、図６とは異なる縮尺で示されている。実際には、上方部材３および被覆部材２は同様の寸法（またはディメンション）であるので、各々の導電率プローブ２４は、図６の対応するヒーター１６をと整列している。ウェル１４ａ〜１４ｆｆの各々は、電気接続部２５を介して検出手段へと接続されたスクリーン印刷された導電率プローブ２４ａ〜２４ｆｆ、および、電気接続部２７によって供される導電率メーターの電源を有する。
【０１１７】
図面の図８を参照すると、ヒーター要素１６ａ〜１６ｆｆおよび導電率プローブ２４ａ〜２４ｆｆが、中央の折り曲げ線２９で折り曲げることができる単一シート２８上に印刷されている。
【０１１８】
図９は、穴部２１ａ〜２１ｆｆを規定するボイド規定層１８の周りで折り曲げられた導電率プローブ２４ａ〜２４ｆｆおよびヒーター要素１６ａ〜１６ｆｆを有する単一シート２８から形成される、ウェルの部分的に組み立てたアレイを示す。。
【０１１９】
図１０ａおよび図１０ｂを参照すると、ウェルのアレイを含む態様のボイド規定層の一部が示されている。かかる態様では、ボイド規定層２９は、サンプル・スペース３０ａ〜３０ｄを規定する（図面には４つウェルを示しているが、それ以上のウェルが存在してもよい）。各々のウェルは、それに関連するアクセス・チューブ３１およびベント３２を有する。各々のウェル３０は湾曲している。周縁部分の高さよりも中央部３３が窪むように、ボイド規定層２９の周縁部分が高くなっている。スクリーン印刷されたヒーター要素（図１０には図示せず）を備えた部材２がボイド規定層上に配置される場合、ボイド規定層の中央部分３３と部材２との間にギャップが生じる。このギャップによって、アクセス・チューブ３１、ベント３２およびウェル３０の間で流体の接触が生じ、従って、アクセス・チューブ３１を通って挿入されるサンプルがウェル３０内に入ることができる。サンプルがウェルに収容されると、ボイド規定層２９と部材２とを一体的に押圧して、ボイド規定層２９の嵌め込み中央部３３と部材２との間のギャップが閉鎖するように、クランプ３６（図示せず）によってボイド規定層２９および部材２に圧力が加えられる。
【０１２０】
図１１では、参照番号３３により一般的に示す単一ウェルを示す。ウェルは、ウェルのアレイの一部であり得る。ウェル３３は、下方部材２、上方部材３およびサンプル受容スペース５を規定するボイド規定層３４を有して成る。下方部材２は、スクリーン印刷された電気抵抗ヒーター６を有する。電気抵抗ヒーター６は、電気絶縁性の不動態層７（この図面には図示せず）によって被覆される。電気抵抗ヒーター６には、電気接続部１７および出力接続部１８が供される。上方部材３の下方表面には、導電率センサー８が取り付けられる。アクセス・チューブ９は、サンプル受容スペース５の一方の側方に存在する。レセプタクルは、ベント３２および温度センサー３５を更に有して成る。参照番号３１１は、アクセス・チューブ３１用のガスケット・シールを示し、参照番号３２１は、ベント３２のガスケット・シールを示す。
【０１２１】
図１〜図１１のいずれかに記載のコンテナは、ヒーターに電力を供給し、導電率および温度検出手段から測定値を採取する受け入れ装置３６（図１〜図１１には図示しておらず、図１６にてコンピューター３８の開口部３９および図１７の装置の開口部６５として図示している）に必要に応じて組み込んでよい。受け入れ装置３６は、ヒーター回路とコンダクタンス測定回路と電気的に接触するターミナル（または端子）を含む。ターミナルに接続される制御手段は、各々のレセプタクルのヒーター手段への電力供給を個々に制御し得る。更に、本発明のコンテナまたはコンテナのアレイの各々は、ウェルの頂部、底部または側方表面と接触し得、流体から熱を効率的に伝導させて除去するヒートシンク冷却要素３７（図１〜図１１には図示しておらず、図１７にてヒートシンク部分６６として図示している）を備えている。
【０１２２】
図１６では、本発明のコンテナにと共に使用される、駆動手段３９を有するコンピューター３８を有して成る装置が示されており、必要な場合には、適当なキャリアー内に入れたコンテナを駆動手段３９に挿入することができる。
【０１２３】
図１７は、本発明のサンプル・ホルダー装置の分解図を示す。装置は、第１プレート４０および第２プレート４１を有して成る。連通部材４２が、突出部材４４の遠位穴部４３を通るように、第１プレート４０に回転可能にて取り付けられている。プレート４０は、突出部材４４の近位穴部４６を通るように、第１ロッド４５（図示せず）に回転可能にて取り付けられている。同様に、連通部材４７が、突出部材４９の遠位穴部４８を通るように第２プレート４１に回転可能にて取り付けられている。第２プレート４１は、突出部材４９の近位穴部５１を通るように第２ロッド５０（図示せず）に回転可能にて取り付けられている。使用中では、サンプル・コンテナ５２は、２つのプレートの間に位置する。駆動シャフト５３がモーター５４に取り付けられ、駆動部材５５がシャフト５３に取り付けられている。駆動部材５５は、断面が卵形である。
【０１２４】
光学フラグ（または光標識）５６、５７が第２プレート４１に取り付けられている。光学フラグ５６が光学スイッチ５８と作用し、光学フラグ５７が光学スイッチ５９と係合するような位置において、光学スイッチ５８、５９が第１プレート４０上に取り付けられており、プレート・コントローラー６０（図示せず）に情報が供されることになる。
【０１２５】
第１プレート４０および第２プレート４１は、第１ロッド４５（図示せず）および第２ロッド５０（図示せず）を通るようにシャッシ６１上に回転可能にて取り付けられる。サンプル・コンテナ５２を排出する必要がある場合、サンプル・コンテナ５２をホルダーから押し出す機能を有するソレノイド６２がサンプル・ホルダーに供される。ソレノイド６２は、プレート・コントローラー６０（図示せず）で制御される。
【０１２６】
サンプル・ホルダーは、計器盤６４を有した外ボックス６３内に入れられる。正面プレート（または計器盤）６４は、サンプル・コンテナ５２を挿入および取り出しのための開口部６５を含む。
【０１２７】
図１８ａは、開いた状態の本発明のサンプル・ホルダーの模式図である。上述のように、駆動部材５５は、卵形状の断面を有する。サンプル・コンテナを挿入した後、駆動部材５５は、モーター（図１８ａには図示せず）によって回転し、プレート４０とプレート４１とがサンプル・コンテナの外表面を閉鎖し、従って、かかる表面にてアクセス・チューブの入口が封止される。図１８ｂは、閉じた状態のホルダーを示している。
【０１２８】
図１９は、第１プレート４０の平面図を示す。プレート４０は、（図１０ａおよび図１０ｂに示すように）サンプル・コンテナ５２のウェル３０に対応する形状を有する凸状の（また突出した）ヒートシンク接触部分６６を備えている。第１突出部材４４ａおよび第２突出部材４４ｂは、プレート４０から突出しており、第１ロッド４５（図示せず）および連通部材４２（図示せず）にそれぞれ取り付けるための近位穴部４６（図示せず）および遠位穴部４３（図示せず）を供している。
【０１２９】
図２０は、第２クランプ・プレート４１の平面図を示す。プレート４１は、（図１０ａおよび図１０ｂに示すように）サンプル・コンテナ５２のウェル３０に対応するように各々配置された凸状のノジュール６７を備えている。第１突出部材４９ａおよび第２突出部材４９ｂは、プレート４１から突出しており、第２ロッド５０および連通部材４７にそれぞれ取り付けるための近位穴部５１（図１７を参照）および遠位穴部４８（図１７を参照）を供している。各々のノジュール６７は、サンプル・ウェル３０または各々のサンプル・ウェル３０（図示せず）に隣接するサンプル・コンテナ５２の外表面に圧力をかけるように配置されており、従って、アクセス開口部６８（図示せず）の閉鎖が助力される。
【０１３０】
図２１では、典型的な実験における時間に対するヒーター電流を表すグラフが示される。図１、図２、図３、図４、図９、図１０ａ、図１０ｂまたは図１１のいずれかにて示す種類のコンテナを用いて実験を行なってよい。第１期間ｔＨ（加熱期間）において、０〜５ｍ秒の間で電気抵抗要素６に供給される電流ＩＨはおよそ２５０ｍＡである。第２期間ｔＴにおいて、５〜１０ｍ秒の間で電気抵抗要素６に供給される電流ＩＴは、およそ１０ｍＡであって、電気抵抗要素６の抵抗を測定するには十分であるが、認識できるほどの加熱をもたらすには十分ではない。
【０１３１】
図２２は、第２期間ｔＴ（温度測定期間）で温度に関して得られた情報が、ＩＨ、ｔＨおよびｔＴの値を設定する制御手段５によって、どのように使用されるのかについて示すフィードバック・ループである。
【０１３２】
図２３では、第２期間ｔＴ（温度測定期間）の間の電気抵抗要素６の冷却を示す。ｔＡ、ｔＢおよびｔＣの時刻では、要素６がそれぞれＴＡ、ＴＢおよびＴＣの温度に冷却された。冷却速度から、電気抵抗要素が冷却される方向にある温度Ｔ∞を演繹することができる。
【０１３３】
図２４は、本発明の制御手段またはホルダーに使用するのに適当な回路図を、参照番号６９で一般的に示す。回路６９は、第１ターミナル（または第１端子）、第２ターミナルおよび制御ターミナルを有したスイッチ７０（スイッチが開いているか閉じているかを制御ターミナルの電位が決められる）、第１ターミナルおよび第２ターミナルを有した抵抗器７１、プラス・ターミナルおよびマイナス・ターミナルを有した電圧源７２、スイッチ７０の第１ターミナル、ならびにジャンクション７３にて電圧源７２のプラス・ターミナルに接続される抵抗器７１の第１ターミナルを有して成る。回路は、第１ターミナルおよび第２ターミナルを有した電流源７４を更に有して成る。スイッチ７０の第２ターミナルは電流源７４の第１ターミナルに接続され、電流源７４の第２ターミナルはジャンクション７５にて抵抗器７１の第２ターミナルに接続される。回路は、第１ターミナルおよび第２ターミナルを有した電気抵抗要素６、第１ターミナルおよび第２ターミナルを有した抵抗器７６、第１ターミナルおよび第２ターミナルを有した抵抗器７７ならびに第１ターミナルおよび第２ターミナルを有した抵抗器７８を更に有して成る。電気抵抗要素６の第１ターミナルと抵抗器７６の第１ターミナルとは、ジャンクション７９で接続されており、ジャンクション７９は、ジャンクション７５に接続されている。電気抵抗要素６の第２ターミナルは、ジャンクション８０（抵抗器７７の第１ターミナルに接続されている）で電圧源７２のマイナス・ターミナルに接続されている。
【０１３４】
回路は、プラス入力部、マイナス入力部および出力部を有したアンプ８１（または増幅器）を更に有して成る。アンプ８１のプラス入力部は、抵抗器７６の第２ターミナルに接続され、マイナス入力部は、抵抗器７７の第２ターミナルに接続される。アンプ８１の出力部は、マイクロコントローラー８５のアナログ−デジタル変換器に接続される。回路は、第１ターミナル、第２ターミナルおよび第３ターミナルを有した可変抵抗器８２、ならびに第１ターミナル、第２ターミナルおよび第３ターミナルを有した可変抵抗器８３を更に有して成る。可変抵抗器８２の第１ターミナルは、アンプ８１の出力部に接続されており、第１電位にある。可変抵抗器８２の第２ターミナルは、アンプ８１のマイナス入力部に接続されており、第２電位にある。可変抵抗器８２の第３ターミナルは、可変抵抗器の設定に応じて第１電位と第２電位との間の電圧を有する入力部である。可変抵抗器８３の第１ターミナルは第１電位に維持され、可変抵抗器８３の第２ターミナルは第２電位に維持される。可変抵抗器８３の第３ターミナルは、可変抵抗器の設置に応じて第１電位と第２電位との間の電圧を有する出力部である。抵抗器７８の第１ターミナルは可変抵抗器８３の第３ターミナルに接続され、抵抗器７８の第２ターミナルはアンプ８１のマイナス入力部に接続されている。
【０１３５】
回路は、マイクロコントローラー８５の出力部に接続される入力部およびスイッチ７０の制御ターミナルに接続される出力部を有したアンプ８４を更に有して成る。マイクロコントローラー８５は、例えばＲＳ２３２ポートを介してパーソナル・コンピューター８６に接続され得る。
【０１３６】
使用に際して、スイッチ７０を開いている場合、電源７２からの電圧によって、抵抗器７１および電気抵抗要素６に電流が流れる。電気抵抗要素６において電位が降下し、その降下によって、アンプ８１のプラス・ターミナルおよびマイナス・ターミナルの間に電位差が生じる。従って、アンプ８１の出力は、電気抵抗要素６における電位の降下の尺度である。可変抵抗器８３によって、補償電位をマイナス入力部の電位に加えることができ、その結果、電気抵抗要素６における電位差の大きさの所望の範囲においてアンプが飽和することはない。可変抵抗器８２を用いてアンプ８１のゲインを変えることができ、その結果、電気抵抗要素６における電位差の所望の範囲のアンプが飽和することはない。アンプ８１の出力電流は、マイクロコントローラー８５に接続され、例えば、複数の温度での電気抵抗要素の抵抗の予め求めたキャリブレーション曲線と比較することによって、電気抵抗要素６の温度の測定値としてマイクロコントローラーによって判断される。
【０１３７】
スイッチ７０を閉じている場合、電流源７４によって、電気抵抗要素６（効果的には短絡抵抗器７１）に電流が供される。電流が十分に大きくなるように電流源が配置されており、抵抗加熱に起因して電気抵抗要素６が温かくなる。電気抵抗要素６における電位の降下は、一般的に大きく、従って、アンプ８１が飽和し、電気抵抗要素６の温度に関する有用な情報を演繹することができない。
【０１３８】
開いた状態と閉じた状態との間のスイッチ７０の切り換えは、マイクロコントローラー８５によって制御される。マイクロコントローラー８５によって検出されるＰＷＭ（パルス幅変調、Ｐｕｌｓｅ　Ｗｉｄｔｈ　Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ）信号によって、加熱期間と温度測定期間との相対的な長さが決められ、従って、サンプルを加熱する速度が決められる。
【０１３９】
スイッチ７０が開いている場合（即ち、電気抵抗要素６を通ってＩＴが流れるが、ＩＨは流れない場合）、アンプ８１を保護するために、アンプ８１が理想的には電気抵抗要素６にだけ接続される必要がある。
【０１４０】
図２５は、参照番号８７によって一般的に示す代替的な回路図を示している。回路８７には、電圧源７２および抵抗器７１が存在せず、代わりに、第１ターミナルおよび第２ターミナルを有した第２電流源８８を回路が有して成るという点を除いて、回路８７は、上述の回路６９と同様である。電流源８８の第１ターミナルは、ジャンクション７３でスイッチ７０の第２ターミナルに接続され、電流源８８の第２ターミナルは、ジャンクション７５で電流源７４の第２ターミナルに接続されている。
【０１４１】
使用に際して、スイッチ７０を開いている場合、電気抵抗要素６を通るように電流源８８から電流ＩＴが供給される。電気抵抗要素６にて電位が降下し、その降下によって、アンプ８１のプラス・ターミナルおよびマイナス・ターミナルの間で電位差が生じる。従って、アンプ８１の出力は、電気抵抗要素６における電位の降下の尺度である。可変抵抗器８３によって、補償電位をマイナス入力部の電位に加えることができ、その結果、電気抵抗要素６における電位差の大きさの所望の範囲においてアンプが飽和することはない。可変抵抗器８３を用いてアンプ８１のゲインを変えることができ、その結果、電気抵抗要素６における電位差の所望の範囲ではアンプが飽和することはない。アンプ８１の出力電流は、マイクロコントローラー８５に接続され、電気抵抗要素６の温度の測定値としてマイクロコントローラーによって判断される。
【０１４２】
スイッチ７０を閉じている場合、電流源８８および電流源７４の双方によって、電気抵抗要素６に電流が供給される。電流源８８によって電流ＩＴが供され、電流源７４によって電流ＩＨが供給される。電流ＩＨが十分に大きくなるように電流源７４が配置されており、抵抗加熱に起因して電気抵抗要素６が温かくなる。電気抵抗要素６における電位の降下は、一般的に大きく、従って、アンプ８１が飽和し、電気抵抗要素６の温度に関する有用な情報を演繹ができない。スイッチ７０が開いている場合（即ち、電気抵抗要素６を通ってＩＴが流れるが、ＩＨは流れない場合）、アンプ８１を保護するために、アンプ８１が理想的には電気抵抗要素６にだけ接続される必要がある。
【０１４３】
図２６において、典型的なＰＣＲ熱サイクル実験における時間に対するサンプル温度のトレース（または軌跡）が示される。初期では、サンプルは周囲温度から変性温度（ここでは８０℃）へと加熱される。変性温度にて時間が経過した後、サンプルをアニール温度（ここでは５０℃）にまで冷却することができる。アニール温度にて時間が十分に経過した後、サンプルは、エクステンション温度（またはより高い温度、ここでは７０℃）にまで加熱される。エクステンション温度で時間が十分に経過した後、サンプルは、再び変性温度へと加熱され、その後、サイクルは繰り返される。なお、７サイクルが示されている。
【０１４４】
所望の温度プロファイルをコンピューター（例えば、マイクロコントローラー８５またはＰＣ８６）に入力して、保存することができ、上述の加熱および温度測定をサンプルに対して交互に行なう。温度測定の工程の間の抵抗要素６の抵抗が、保持している温度プロファイルに関してマイクロコントローラー８５によって評価され、その後、マイクロコントローラーが、ＩＨの適当な値を計算し、必要に応じて、所望の温度プロファイルを維持するためにｔＨおよびｔＴの適当な値をも計算する。
【０１４５】
次の実施例によって、本発明を更に説明する：
実施例１：加熱方法の実施例
図１、図２、図３、図４、図９、図１０ａ、図１０ｂ、図１１および図１６を参照して上述した装置において、５ｖの振幅Ａにて０．４秒の「オフ」タイムＴＬおよび０．６秒の「オン」タイムＴＨで熱をパルス的に供給することによって２０μｌの水のサンプルを６０℃の一定温度にまで加熱した。時間の経過に伴うサンプル温度の変化を図１２に示す。
【０１４６】
実施例２：ＰＣＲプロトコルにおける本発明のコンテナの使用
ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）では、サンプルを繰返し加熱および冷却する必要がある。ヒートシンク２６にレセプタクルの内容物を熱的に接触させてレセプタクルの内容物を交互に加熱することによって、温度サイクルを達成することができる。達成した温度プロファイルの例を図１３ａに示している。なお、これは、１ユニットのＴａｑポリメラーゼおよび１ｍＭの塩化マグネシウムの存在下にて１０ピコモル（ｐｍｏｌ）のプライマーを有した１０ｎｇのターゲットＤＮＡを用いたＰＣＲ反応に関するものである。増幅ターゲットは、クローン化したアクチンのインサートであった。反応において、サンプルを９２℃で１秒で保持し、５９℃で５秒保持し、７２℃で１２秒保持するというサイクルを３０回実施した。反応のエクステンション・フェーズの間の温度制御は、５ｖの振幅（Ａ）にて、０．２秒間維持される「オフ」値（ＴＬ）と０．６秒の「オン」値（ＴＨ）とを交互に用いることによって達成され、７２℃の目標温度が達成された。図１３ｂは、サンプルの導電率の測定によって示されるクローン化したＤＮＡの濃度の増加を示している。
【０１４７】
実施例３：ヌクレアーゼ分解（または核酸摂取）プロトコルにおける本発明のコンテナの使用
最終的な体積が５０μｌとなるように、１．０ｎｇのｐＵＣ１８ＤＮＡ、５μｇのＢＳＡ（牛血清アルブミン）、１ｘバッファー、および１０ユニットのＰｖｕＩＩを含む溶液を作った。図１のコンテナ内に混合物を供給した。用いたコンテナは２０μｌの容量（従って、レセプタクルに入れられる量）を有する。ヒーターによって、反応混合物がおよそ３７℃にまで加熱され、サンプルの温度を記録した。４５分間にわたっておよそ３７℃の温度を維持するように装置を設定した。時間に対する実際の温度のトレースを図１４に示す。４５分経過した後、温度は６５℃にまで増加し、１５分間かかるレベルで維持した（図１４には図示せず）。その後、１２０Ｖにて０．５ｘＴＢＥ（トリス−ホウ酸塩−ＥＤＴＡ）中の１％のアガロースゲルで反応生成物をゲル電気泳動に付した。臭化エチジウムを添加することによって、ゲル中にてバンドを目視確認した。ゲルのトレースを、図１５に示す。レーンａは、λＤＮＡ／ＨｉｎｄＩＩＩマーカーを含んでおり、レーンｂは、分解（または摂取）されなかったプラスミドＤＮＡを含んでおり、またレーンｃは、核酸分解後にて摂取されたプラスミドを含んでいた。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、単一のサンプルに適当な本発明のコンテナの断面の模式図である。
【図２】図２は、本発明のコンテナの態様の断面である。
【図３】図３は、図２のコンテナの分解図である。
【図４】図４は、本発明のマルチプレックス・コンテナの断面の模式図である。
【図５】図５は、本発明のマルチプレックス・コンテナのヒーター手段回路の平面図である。
【図６】図６は、本発明のマルチプレックス・コンテナのボイド規定層の一部の平面図である。
【図７】図７は、本発明のマルチプレックス・コンテナの導電率検出手段回路の拡大平面図である。
【図８】図８は、本発明のマルチプレックス・コンテナの態様のヒーター手段回路および導電率検出手段回路の平面図であり、ヒーター手段回路および導電率検出手段回路が単一の折り曲げ可能なシート上に印刷されている。
【図９】図９は、本発明のマルチプレックス・コンテナの斜視図である。
【図１０ａ】図１０ａは、本発明のコンテナの更なる態様のパーツの上方からの斜視図である。
【図１０ｂ】図１０ｂは、図１０ａのコンテナ部品の下方からの斜視図である。
【図１１】図１１は、本発明の更にもう１つの態様の分解図であり、サンプル・コンテナが３つの部品から構成されている。
【図１２】図１２は、実施例１に記載されるサンプルを加熱する際の時間に伴うサンプルの温度変化のグラフである。
【図１３ａ】図１３ａは、実施例２に記載される本発明のコンテナを用いて実施するＰＣＲ反応での時間に伴う温度変化を示すグラフである。
【図１３ｂ】図１３ｂは、図１３ａが関連するＰＣＲ反応での導電率測定を示すグラフである。
【図１４】図１４は、実施例３に記載される本発明のコンテナを用いて実施するヌクレアーゼ分解プロトコルでの時間に伴う温度変化を示すグラフである。
【図１５】図１５は、ゲルを表しており、そのゲル上にて実施例３のヌクレアーゼ分解プロトコルの生成物が分離されている。
【図１６】図１６は、本発明のコンテナと共に使用され得る装置を示す。
【図１７】図１７は、サンプル・コンテナを含む本発明の第２の要旨のサンプル・ホルダー装置の分解図である。
【図１８ａ】図１８ａは、本発明のサンプル・ホルダーの模式図であり、駆動手段部分を示す。
【図１８ｂ】図１８ｂは、閉じた状態の図１８ａの駆動手段部分が示されるサンプル・ホルダーの模式図である。
【図１９】図１９は、ヒートシンクの接触部分を含むクランプ・プレートの平面図である。
【図２０】図２０は、圧力をもたらすノジュールを有したクランプ・プレートの平面図である。
【図２１】図２１は、本発明の方法の電気抵抗要素に対する電流のパルス変化を示すグラフである。
【図２２】図２２は、本発明の方法の工程を示すフローチャートである。
【図２３】図２３は、本発明の方法の第２期間の間の電気抵抗要素の冷却を示すグラフである。
【図２４】図２４は、本発明の方法を実施するのに適当な回路の回路図を示す。
【図２５】図２５は、本発明の方法を実施するのに適当な回路の第２回路図を示す。
【図２６】図２６は、典型的な熱サイクル実験での時間に伴うサンプル温度の変化を示す。
【図１２】
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【図１３ａ】
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【図１３ｂ】
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【図１４】
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【図２２】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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