(57)【要約】微生物のビルレンス因子をコードする核酸の断片を含むＤＮＡ配列を、疾患またはその遺伝的素因を同定するための手段として用いる使用法ならびに、これを疾患動物モデルの開発に利用する使用法について開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
突然変異によって生じる疾患またはその遺伝的素因を同定するための手段として、微生物の推定上のビルレンス因子をコードする核酸の断片を含むＤＮＡ配列を用いることを特徴とする微生物ＤＮＡ配列の使用。
【請求項２】
前記ビルレンス因子が、線状または環状の染色体またはプラスミドに位置することを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記ビルレンス因子が細胞内微生物由来のものであることを特徴とする請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
前記ビルレンス因子が、非細胞内病原体由来であり、細胞内微生物と共通のクラスタの一部をなすことを特徴とする請求項１または２に記載の使用。
【請求項５】
前記微生物が、ボレリア種と、クラミジア種と、大腸菌種と、マラリア原虫種と、リケッチア種と、からなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項６】
前記断片が、配列番号１から配列番号１７からなる群から選択されることを特徴とする請求項１乃至５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
前記配列が、好ましくはポリアデニル化シグナル配列で同一または異なる種によって引き起こされる突然変異を含むことを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
前記疾患がヒトの疾患であることを特徴とする請求項１乃至７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
前記ヒトの疾患が、統合失調症と、アルツハイマー病と、パーキンソン病と、ミオパシーと、他の形態の痴呆と、からなる群から選択されることを特徴とする請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
前記ヒトの疾患が素因または遺伝的変異であり、その病的徴候が薬剤または薬種によって誘発されるものであることを特徴とする請求項８に記載の使用。
【請求項１１】
前記薬種が大麻であることを特徴とする請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記病的徴候が、痴呆、統合失調症または関連の精神的障害の形態を含むことを特徴とする請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
配列番号１から配列番号１７からなる群から選択される核酸配列内の突然変異が被験者の組織試料または血液試料に存在するのを検出することを含み、前記配列が前記被験者の遺伝子の一部であることを特徴とする疾患またはその遺伝的素因を同定するための方法。
【請求項１４】
前記組織試料が移植用の胎児の神経細胞であることを特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記配列を前記遺伝子の３’ＵＴＲに挿入することを特徴とする請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記突然変異が前記遺伝子のポリアデニル化シグナルに認められることを特徴とする請求項１３乃至１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記突然変異が、前記遺伝子によってコード化されるタンパク質の発現に影響することを特徴とする請求項１３乃至１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記遺伝子が、カンナビノイド受容体１遺伝子と、ＭＡＰ　２Ｃ遺伝子と、アポリポタンパク質Ｅ遺伝子と、プレセニリン２遺伝子と、内在性膜タンパク質２Ｂ遺伝子と、αシヌクレイン遺伝子と、オリゴフレニン１遺伝子と、ミオトニンタンパク質キナーゼ遺伝子と、からなる群から選択されることを特徴とする請求項１３乃至１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１８に記載の部分的に失活または完全に失活した内在性遺伝子がゲノムに含まれるトランスジェニック非ヒト動物であって、前記失活が、その３’非翻訳領域の少なくとも１つの突然変異によるものであり、前記突然変異が以後の遺伝子翻訳を阻害または抑制することを特徴とするトランスジェニック非ヒト動物。
【請求項２０】
突然変異が、ポリアデニル化シグナルよりも後ろの核酸配列に位置し、より好ましくは前記遺伝子のポリアデニル化配列に位置することを特徴とする請求項１９に記載のトランスジェニック非ヒト動物。
【請求項２１】
前記突然変異が点突然変異であることを特徴とする請求項２０に記載のトランスジェニック非ヒト動物。
【請求項２２】
前記動物が哺乳動物であり、特に齧歯類であることを特徴とする請求項１９乃至２１のいずれか１項に記載のトランスジェニック非ヒト動物。
【請求項２３】
前記動物がマウスまたはラットであることを特徴とする請求項２２に記載のトランスジェニック非ヒト動物。
【請求項２４】
前記失活が同型（ｈｏｍｏｚｙｇｏｕｓ）または異型（ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ）の失活であることを特徴とする請求項１９乃至２３のいずれか１項に記載のトランスジェニック非ヒト動物。
【請求項２５】
請求項１９乃至２４のいずれか１項に記載のトランスジェニック非ヒト動物の使用であって、翻訳タンパク質の活性、発現または調節に何らかの作用をおよぼす化合物の同定に用いることを特徴とする使用。
【請求項２６】
請求項１８に記載の遺伝子によってコードされるタンパク質の活性、発現または調節に何らかの作用をおよぼす化合物のスクリーニング方法であって、請求項１９乃至２４のいずれか１項に記載の動物に化合物を導入し、対照動物と比較して前記動物の行動の変化をモニタリングすることを含むことを特徴とするスクリーニング方法。
【請求項２７】
非機能的内在性ＣＢ１遺伝子がゲノムに含まれるトランスジェニック非ヒト動物の使用であって、ＣＢ１タンパク質の活性、発現または調節に何らかの作用をおよぼす化合物の同定に用いることを特徴とする使用。
【請求項２８】
配列番号１から配列番号１７からなる群から選択される核酸配列のうち少なくとも１つを含むことを特徴とするＤＮＡおよび／またはＲＮＡチップ。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願へのクロスリファレンス
本件特許出願は、２０００年８月１６日にファイルされたＰＣＴ特許出願第ＩＢ００／０１１２７号（その開示内容全体を本願明細書に援用する）の優先権の利益を主張するものである。
【０００２】
技術分野
本発明は、疾患またはその遺伝的素因を同定するための手段として、微生物のビルレンス因子をコードする核酸の断片を含むＤＮＡ配列を用いるＤＮＡ配列の使用と、これを疾患動物モデルの開発のための使用に関する。
【０００３】
背景技術
高等真核生物の機能的配列は少なくとも２種類の遺伝モジュールで構成されている。コード配列のモジュールがさまざまな形で組み合わさるとタンパク質が生成されるのに対し、非コード配列のモジュールは遺伝子の発現を調節する。発生する突然変異の中には遺伝子をそっくりそのまま複製したものもあり、これが進化して新しい機能が生まれてきた。一方、遺伝子シャッフリングによって遺伝子を新たな制御配列に暴露して古い遺伝子の発現を変化させる突然変異もある。このようにしてヒトゲノム全体が進化して今日の複雑な形に至っている。遺伝子の翻訳や発現を調節しているのは、３’非翻訳領域（３’ＵＴＲ）、特に３’ＵＴＲのポリアデニル化シグナルであるため、分子の摂動全般が一次標的としての３’ＵＴＲで行われている可能性がある。
【０００４】
したがって、３’ＵＴＲでの突然変異によって発生する疾患またはその素因を検出できる分子ツールが必要とされている。
【０００５】
発明の開示
本発明の範囲において、ヒトの疾患に関連したヒト遺伝子の３’ＵＴＲに微生物ＤＮＡの挿入片があることが明らかになった。
【０００６】
このため、本発明の目的は、細菌の突然変異によって生じる疾患またはその遺伝的素因を同定するための手段として推定上の微生物のビルレンス因子をコードする核酸配列の断片を含むＤＮＡ配列を用いる微生物ＤＮＡ配列の使用を提供することにある。ビルレンス因子が細胞内微生物由来のものであって、線状または環状の染色体またはプラスミドに位置していると好ましく、前記ビルレンス因子が、ボレリア種と、クラミジア種と、大腸菌種と、マラリア原虫種と、リケッチアと、からなる群から選択される微生物由来のものであると一層好ましい。さらに好ましくは、ビルレンス因子をコードする前記核酸が、配列番号１から配列番号１７からなる群から選択される。細胞内微生物と共通のクラスタの一部である非細胞内微生物由来のビルレンス因子も本発明で使用するのに適している。
【０００７】
本発明の別の目的は、被験者の組織試料または血液試料あるいは胎児の神経細胞で配列番号１から配列番号１７からなる群から選択される核酸配列内の突然変異を含み、前記配列が前記被験者の遺伝子に挿入される、疾患またはその遺伝的素因を同定するための方法を提供することである。好ましくは、前記配列が前記遺伝子の３’ＵＴＲに挿入され、前記突然変異が前記遺伝子のポリアデニル化シグナルに見出され、前記突然変異が前記遺伝子によってコードされるタンパク質の発現に影響するものであると好ましい。
【０００８】
本発明の別の目的は、カンナビノイド受容体１遺伝子と、ＭＡＰ　２Ｃ遺伝子と、アポリポタンパク質Ｅ遺伝子と、プレセニリン２遺伝子と、内在性膜タンパク質２Ｂ遺伝子と、αシヌクレイン遺伝子と、オリゴフレニン１遺伝子と、ミオトニンタンパク質キナーゼ遺伝子と、からなる群から選択される部分的または完全に不活性な内在性遺伝子がゲノムに含まれるトランスジェニック非ヒト動物を提供することにある。この遺伝子はその３’非翻訳領域（３’ＵＴＲ）における少なくとも１つの突然変異によって失活し、前記突然変異はタンパク質の発現の阻害または抑制につながるものである。本願明細書で使用する突然変異という用語は、長さにかかわらず、遺伝子の活性、発現または調節に影響をおよぼすヌクレオチドの変化、挿入または欠失をすべて包含する。
【０００９】
本発明に関していえば、ＣＢ１タンパク質の発現などのタンパク質の発現の阻害または抑制につながる３’ＵＴＲ領域の突然変異であればどのようなものでも利用できるが、好ましいのはポリアデニル化シグナルよりも後ろの配列に位置する突然変異であり、さらに好ましくは前記遺伝子のポリアデニル化シグナル配列に位置する突然変異である。前記シグナルの失活につながるポリアデニル化シグナル配列に位置する突然変異であればどのようなものであっても利用できる。この突然変異は、たとえば、遺伝子変換または遺伝子の組換えなどによって、同一または異なる微生物種の配列で引き起こすことができるものである。
【００１０】
真核生物のポリアデニル化シグナルには、ＡＡＴＡＡＡという保存配列がある。
【００１１】
本発明の目的では、どのような非ヒト哺乳動物であっても利用することができる。好ましいのはマウスまたはラットなどの齧歯類であり、そのゲノムに同型または異型のＣＢ１遺伝子失活があると好ましい。
【００１２】
本発明の他の目的は、本発明のトランスジェニック動物を、遺伝子コードタンパク質の活性、発現または調節に何らかの作用をおよぼす化合物の同定に用いるトランスジェニック動物の使用を提供することにある。本発明の動物を用いることで、ＣＢ１タンパク質、ＭＡＰ　２Ｃタンパク質、アポリポタンパク質Ｅ、プレセニリン２タンパク質、内在性膜タンパク質２Ｂ、αシヌクレインタンパク質、オリゴフレニン１タンパク質、ミオトニンタンパク質キナーゼの、活性、発現または調節に対して、直接または間接的な作用をもつ化合物を同定することができる。この化合物は、たとえばコンビナトリアル化学ライブラリから得られるものなどの多数の化合物からなるものであってもよい。本発明の動物を用いることで同定される化合物は、統合失調症または他の形態の痴呆などを治療するための薬剤の開発用のリード化合物として役立てることができるものである。
【００１３】
本発明のさらに他の目的は、ＣＢ１タンパク質と、ＭＡＰ　２Ｃタンパク質と、アポリポタンパク質Ｅと、プレセニリン２タンパク質と、内在性膜タンパク質２Ｂと、αシヌクレインタンパク質と、オリゴフレニン１タンパク質と、ミオトニンタンパク質キナーゼと、からなる群から選択されるタンパク質の活性、発現または調節に何らかの作用をおよぼす化合物をスクリーニングするための方法を提供することにある。前記方法は、この化合物を本発明のトランスジェニック動物に導入し、好ましくはマウスまたはラットに導入し、たとえば前記動物における行動の変化をモニタリングすることを含む。観察可能な行動の変化が臨床現象学（ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｌｏｇｙ）に関連しているとみなされていることから、マウスおよびラットが好ましい動物である。ポリアデニル化シグナルよりも後ろの配列における突然変異またはポリアデニル化シグナルにおける突然変異によって失活されたゲノムに上述した遺伝子のうちひとつが含まれるトランスジェニック動物を本発明のスクリーニング方法で使用すると好ましい。このような動物には、たとえば、統合失調症、他の形態の痴呆および他の神経障害に羅患したヒトの被験者に見られる状況が反映されるためである。
【００１４】
さらに他の態様において、本発明は、内在性ＣＢ１遺伝子の破壊がゲノムに含まれるトランスジェニック非ヒト動物を、ＣＢ１タンパク質の活性、発現または調節に何らかの作用をおよぼす化合物の同定に用いる使用法を提供するものである。このような使用法には、ゲノムに非機能的ＣＢ１遺伝子が含まれる動物であればどのような動物であっても適しており、マウスまたはラットであると好ましい。
【００１５】
以下の詳細な説明を考慮することで、本発明について一層深く理解し、上述した以外の目的を明らかにできよう。この説明では添付の図面を参照する。
【００１６】
発明を実施するための形態
本発明のトランスジェニック動物を作出するための遺伝子コンストラクトは、部分的または完全に失活した遺伝子をゲノムに含むものであり、Ｍａｎｉａｔｉｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ、Ｎ．Ｙ．に記載されているような従来技術において周知の標準的な遺伝子工学技術を用いて作出できるものである。前記コンストラクトの開始材料は、たとえばゲノムまたはｃＤＮＡ　ＣＢ１ヌクレオチド配列の一部であってもよい。部位特異的突然変異誘発などの当業者間で周知の方法によって必要な突然変異をたとえばＣＢ１配列に導入することができる。本願明細書で使用する突然変異という用語は、遺伝子の活性、発現または調節に影響するヌクレオチドの変化、挿入または欠失を長さとは無関係に包含する。
【００１７】
本発明によるトランスジェニック動物は、この分野で一般に知られている方法で作出可能なものである。たとえば、Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｍｏｕｓｅ Ｅｍｂｒｙｏ、（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、Ｎ．Ｙ．、１９８６）、Ｋｎｏｃｋ−ｏｕｔ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｙｓｔｅｍｓ（神経生物学的系の研究に用いられるノックアウトマウスモデル）、Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、１３（２）、１０３〜１４９、（１９９９）を参照のこと。たとえば相同的組換えによってリコンビナーゼ依存性ノックアウトを作出し、アレルの失活の組織特異的および／または時間的制御をコントロールできるように、内在性遺伝子の一部をフランキングしているリコンビナーゼ標的配列を挿入することも可能である。
【００１８】
本発明のトランスジェニック動物は、たとえば、統合失調症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ミオパシーまたは他の形態の痴呆を治療するための薬剤開発の開始点として役立てることのできるリード化合物を同定するのに適している。このような有用な化合物のスクリーニングでは一般に、候補化合物を動物に投与し、前記動物における行動の変化をモニタリングする。前記行動の変化としては、たとえば、歩行活動の変化、ステレオタイプ的行動、空間記憶の亢進、作動記憶の破壊があげられる。また、スクリーニング試験に生化学的または分子生物学的アッセイを利用して、活性化合物を同定することもできる。このような試験としては、動物のさまざまな組織において、異なる時点で、たとえばＣＢ１タンパク質の発現および／または安定性および／または活性の増大または減少を探す、あるいは、ダイノルフィン、サブスタンスＰなどのメッセンジャーのレベルおよび／または活性の増大または減少を探すことがあげられる。試験終了時に、動物を屠殺し、たとえば投与した試験化合物が脳におけるＣＢ１タンパク質の発現レベルおよび／または発現部位にどのように作用しているのかをｉｎ　ｓｉｔｕ法などによって判断するようにすると好ましい。
【００１９】
本発明のスクリーニング試験でスクリーニング可能な化合物は、化学ライブラリ、天然物ライブラリ、コンビナトリアルライブラリという少なくとも３つの異なるカテゴリに分けられる。化学ライブラリは、既知の化合物の構造的な類似体からなる。天然物ライブラリは、土壌、植物または海洋微生物からブロスをたとえば発酵および抽出によってスクリーニングする、あるいは、植物または海洋生物を抽出するための混合物の生成に使用される、微生物、動物、植物または海洋生物の集合である。コンビナトリアルライブラリは、混合物としての多数のペプチド、オリゴヌクレオチドまたは有機化合物で構成される。このようなライブラリは、従来からの合成方法、ＰＣＲまたはクローニングによって比較的容易に調製される。
【００２０】
上述したスクリーニング系では、本発明のトランスジェニック動物のみならず、ＣＢ１タンパク質と、ＭＡＰ　２Ｃタンパク質と、アポリポタンパク質Ｅと、プレセニリン２タンパク質と、内在性膜タンパク質２Ｂと、αシヌクレインタンパク質と、オリゴフレニン１タンパク質と、ミオトニンタンパク質キナーゼと、からなる群から選択されるタンパク質をコードする非機能的遺伝子をゲノムに含む他のトランスジェニック動物を用いることができる。このとき、少なくとも１つの突然変異を、遺伝子のコード配列および／または５’または３’制御配列あるいはイントロンに導入することで非機能的遺伝子を生成できると好ましい。
【００２１】
いくつかの遺伝子に見られる微生物ＤＮＡ配列の挿入片を利用して、出生前の感染性疾患、細菌の突然変異および他の疾患を同定できる可能性があり、好ましくはたとえば痴呆またはその素因などのヒトの疾患を同定できる可能性がある。このような挿入のある遺伝子としては、たとえば、カンナビノイド受容体、微小管関連タンパク質２Ｃ、アポリポタンパク質Ｂ、プレセニリン２、アミロイド前駆体タンパク質、内在性膜タンパク質２Ｂ、ｎｏｔｃｈ　３、微小管関連タンパク質τ、αシヌクレイン、ミオトニンタンパク質キナーゼなどをコードする遺伝子があげられる。前記遺伝子は、統合失調症、パーキンソン病、アルツハイマー病、ミオパシー、前頭側頭葉型痴呆、遺伝性の多発梗塞性痴呆、常染色体優性パーキンソン病におけるレビ小体痴呆、家族性英国型痴呆、原発性（ｐｒｉｍａｒｙ）のＸ連鎖性精神遅滞などの疾患の発症または素因に関連していることが明らかになっている。これらの疾患は病的徴候が薬剤や大麻などの薬種によって誘発されるものであり、その素因または遺伝的突然変異の検出には前記微生物のＤＮＡ配列も適している。上述した使用法には、微生物のビルレンス因子をコードし、かつ、前記遺伝子によってコードされるタンパク質の発現、活性または調節に影響する突然変異を少なくとも１つ含む配列が好ましい。
【００２２】
上記にてすでに述べたとおり、本発明は、細菌の突然変異によって引き起こされる疾患またはその遺伝的素因を同定するための方法にも関するものである。前記方法は、配列番号１から配列番号１７からなる群から選択される核酸配列内の突然変異が被験者の組織試料または血液試料に存在するのを検出することを含み、前記配列は前記被験者の遺伝子の一部である。本発明の方法は、たとえば上述した疾患のうちひとつを同定する目的などに適している。
【００２３】
ヒトにおいて前記疾患またはその遺伝的素因を同定するのに適した方法としては、たとえば、ＰＣＲ法、ＤＮＡチップまたは遺伝子チップ、ハイブリダイゼーション法、リガーゼ連鎖反応（ＬＣＲ）があげられる。
【００２４】
好ましい実施形態では、前記方法は、以下のステップを含む。
１．血液または組織を試料採取する
２．ＤＮＡ抽出
３．フランキングオリゴヌクレオチドプライマーを用いて配列番号１から１７からなる群から選択される少なくとも１つの配列を増幅
４．配列決定により増幅産物を分析
【００２５】
配列決定ステップでは、対象となる挿入配列に存在する突然変異を同定することができる。オリゴヌクレオチドプライマーの設計については当業者間で周知であり、標準的なソフトウェアを用いて行うことが可能である。
【００２６】
【実施例】
実施例１
統合失調症遺伝子および痴呆遺伝子の３’ＵＴＲポリアデニル化領域中の微生物配列には微生物のビルレンス因子およびプラスミドがある
Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、クラミジアおよび他の細胞内微生物に由来するＤＮＡを、中心のカンナビノイド受容体遺伝子（ＣＢ１）、アルツハイマー病遺伝子および他の痴呆の遺伝子、パーキンソン病および筋緊張性ジストロフィの各候補神経遺伝子の祖先の３’ポリアデニル化部位に挿入した（配列番号１から１７および表１Ａから１Ｅを参照のこと）。ほとんどの挿入片が、微生物のビルレンス因子、転移因子およびプラスミドに由来するものである。
【００２７】
ＣＢ１および５ＨＴ１Ｅには、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉから得られる関連の挿入片が含まれる。ヒトＣＢ１遺伝子は６ｑ１４に位置し、これが統合失調症の候補領域であるとの報告がなされている。この候補領域には統合失調症の場合に共分離する転座断端点が認められ、５−ヒドロキシトリプタミン（５ＨＴ１Ｅ）遺伝子に隣接している。５ＨＴ１Ｅへのスピロヘータ挿入片は、走化作用、移動および細胞への注入機序（ｓｙｒｉｎｇｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ）を担うＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉのビルレンス因子のひとつである鞭毛基底小体ロッドタンパク質（ｆｂｒｐ）由来のものであった。感染性組換えによって、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉは、ｐ１１５およびポリアデニル化部位を含む別のヌクレオチド配列を本願発明者らの祖先のゲノムに導入した。この組換えの結果、ｐ１１５がｆｂｒｐと重複した。重複配列のヌクレオチドのうち最初の３つ（表１Ａ参照）が５ＨＴ１Ｅ上にあってＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉのｆｂｒｐにはないことから、ＣＢ１遺伝子のｆｂｒｐ部分は、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉの６ｑ１４への直接的な転移によるものではなく、すでにスピロヘータ挿入片を持っていた古代の５ＨＴ１Ｅ受容体に由来していることになる。ｆｂｒｐを含まないＣＢ１およびヒト５ＨＴ１Ｅがいずれも６ｑ１４上にタンデムに位置していることから、遺伝子変換がなされたと考えるのが最も自然である。
【００２８】
ｐ１１５によるスピロヘータ組換えはその後、ＣＢ１の翻訳と遺伝子発現とをコードするポリＡシグナル（ＡＡＴＡＡＡ）の導入へとつながった。微生物配列はタンパク質コード領域のサイレントな点突然変異からなる分子時計よりも時間をかけて変異する重要な３’制御コード上に位置しているため、突然変異が少なく、結果として安定しているのである。
【００２９】
Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉおよびＣｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅについては死後のアルツハイマー脳から検出されている。統合失調症、アルツハイマー病、クラミジア感染症の危険因子である候補遺伝子アポリポタンパク質Ｅ（Ａｐｏ　Ｅ）ε４アレルのポリアデニル化シグナル内で、これに対する分子的な根拠ではないかと思われる配列すなわち、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉの線状染色体（プラスミド上の２つのコピーを含む）およびヒト病原種Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに由来する微生物のビルレンス因子の重複配列（表１Ｂ参照）が同定された。
【００３０】
微生物遺伝子が哺乳動物に伝わる水平伝達によって新たな形質が作られる起点はずっと初期の段階にあるが、これは進化が既存配列の突然変異と選択とによってなされるという定説とは逆行している。むしろ、あらかじめ挿入された鋳型が複数回にわたる感染性組換えと遺伝子暴露（ｇｅｎｅｔｉｃ ｅｘｐｏｓｕｒｅ）を通してヒトゲノム全体のボレリアＤＮＡにさらに拡がっていくのである。おもしろいことに、もとの転移酵素内で単一のフレームシフト突然変異が生じることで、ゲノム崩壊が起こってＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉは明らかに遺伝子鋳型をそれ以上宿主に転座させることができなくなっている。プラスミドでの同じゲノム崩壊のプロセス、あるいは、ビルレンス因子のオペロンｏｓｐ　ＡおよびＯｓｐ　Ｂによって遺伝的に誘発される変異性が原因で、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉとそのあらかじめ挿入されたヒト鋳型との間にヌクレオチドの違いが発生していたのである。Ｏｓｐ　Ａでさらに感染性組換えがなされると、これが原因でポリＡシグナル内でのでミスマッチ修復突然変異とＣＢ１の遺伝子ノックアウトとが起こるかもしれない。遺伝子発現に有意な変化が起こることで節足動物ベクターからヒト宿主に寄生体が移動し、これが実際に予防にも関連してきたのである。最近になって承認されたライム病のワクチンは免疫原性Ｏｓｐ　Ａからなるものである。このワクチンは、マダニの腸内にある間はスピロヘータの寄生体によって発現されるが、ヒトへの進入時に遮断され、以後の慢性期で再度発現される。感染マダニが咬着して吸血し始めると、抗ＯｓｐＡ抗体がマダニの腸に入り込み、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉを殺すのである。
【００３１】
実施例２
５ＨＴ１ＥへのＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉの遺伝子の水平伝達、遺伝子変換およびＣＢ１との相同的組換え
５ＨＴ１Ｅ（５−ヒドロキシトリプタミン）遺伝子に隣接する６ｑ１４で統合失調症の候補領域内に位置するヒトＣＢ１遺伝子で、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ由来の（ｐ１１５）のヌクレオチド配列を同定することができた（配列番号１）。５ＨＴ１Ｅでのもうひとつの祖先のスピロヘータ封入体にＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉのビルレンス因子すなわち鞭毛基底小体ロッドタンパク質（ｆｂｒｐ）に由来するものがある。これについては、マウス（Ｍｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓ）およびラット（Ｒａｔｔｕｓ ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）のセロトニン受容体１Ｅ遺伝子（５ＨＴ１Ｅ）内に今でも残っている。系統発生の間に、スピロヘータのｆｂｒｐとあらかじめ挿入されたそのｆｂｒｐ鋳型との間で何度も組換えが起こり、隣接する非微生物ヌクレオチドを含む二重らせんの相補鎖の同一配列がヒトゲノム全体でさらに組換えられ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｍｕｒｉｄａｒｕｍ鉄結合タンパク質、亜熱帯マラリアロプトリーおよび黄色ブドウ球菌ペニシリン結合タンパク質由来の微生物のビルレンス因子がクラスター形成され、特定の遺伝子変換が起こった（図１および図２参照）。感染性組換えによって、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉから本願発明者らの祖先のゲノムにｐ１１５が導入され、これによってｆｂｒｐとの間で遺伝的な重複が生じた。ｐ１１５にはポリＡシグナル（ＡＡＴＡＡＡ）が含まれるため、ｐ１１５によってＣＢ１の実際の遺伝子発現と翻訳のコードが導入された。
【００３２】
実施例３
ポリアデニル化シグナル（ＡＡＴＡＡＡ）内には点突然変異がない
挿入されたポリアデニル化部位の導入と自然な選択とが起こったことで、ＣＢ１の遺伝的発現に対して遺伝子の水平伝達が効果的に作用した。この重要なシグナルは微生物ＤＮＡにとっての安全な隠れ場となるため、ここでは点突然変異が起こらない。シグナルが変化するとＣＢ１の遺伝子発現が乱れてしまうであろうことが理由である。仮にポリアデニル化シグナル上の互いに有利な配列同士が若干異なったスピロヘータ鎖と再度組換えられたとすると、以後のミスマッチ修復突然変異は宿主と寄生体の両方にとって有害なものとなる。微生物配列はタンパク質コード領域のサイレントな点突然変異からなる分子時計よりも時間をかけて変異する重要な３’制御コード上に位置しているため、突然変異が少なく、結果として安定しているのである。
【００３３】
実施例４
Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉのＤＮＡが統合失調症の遺伝子型の根底にある
遺伝子の水平伝達が哺乳動物などの高等真核生物の進化に影響しているというのは、すでに確立された見解とは逆行している。Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉには微生物間での広範囲にわたる遺伝子水平伝達による利益がないようにみえるが、不完全なゲノムを持つ細胞内寄生体としてＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉは自己の複製に利用する宿主遺伝子に直接アクセスすることができ、異質なものとみなされることはなく、スピロヘータはヒトゲノム内の自己の配列によって決まる。宿主のＣＤ４５白血球防御系のｆｂｐｒ抗原と核タンパク質に相同な構造との分子擬態により、たとえばそれぞれＤＮＡレベルおよびタンパク質レベルでＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉの保護シールドが除去されるのである。
【００３４】
それにもかかわらず、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉとあらかじめ挿入されたそのヒト鋳型とが相違してミスマッチ突然変異が発生することがある。その原因となっているのは、ビルレンス因子のオペロンであるｏｓｐ　Ａおよびｏｐｓ　Ｂによって遺伝的に誘発される変異性あるいはプラスミドでのゲノム崩壊（Ｃａｓｊｅｎｓら、Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２０００、３５、４９０〜５１６）すなわちＡＡＴＡＡＡで推定上の突然変異を引き起こすボレリア再感染である。おもしろいことに、もとの転移酵素内で単一のフレームシフト突然変異が生じることで、同じゲノム崩壊のプロセスでＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉは明らかに遺伝子鋳型をそれ以上宿主に転座させることができなくなっている（Ｃａｓｊｅｎｓら、Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２０００、３５、４９０〜５１６）。ポリＡシグナル内で点突然変異が起こると遺伝子発現が弱まるであろうのに対し、ポリアデニル化尾のアデニン含有量が変化（Ａｌｂｅｒｔｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ、１９９４、Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ）するとＣＢ１のリボソーム翻訳が亢進または減少するであろう。初期胞胚期にいくつかの突然変異が生じるとＣＢ１（おそらく他の遺伝子も）のさまざまな形の（キメラの）発現につながる可能性があり、こうした突然変異によって、主な精神病で報告されている連続性が統合失調症と双極性躁鬱との間にみられることの説明がつく。
【００３５】
一方、統合失調症患者で報告されている白血球の染色質の超微細構造については、ヒト染色体関連タンパク質ｈＣＡＰとボレリアＰ１１５のタンパク質コード配列間の相違および感染性組換え（Ｐ１１５と６３％同一）によって説明がつく。
【００３６】
遺伝疫学では、統合失調症には遺伝要素があり、この遺伝要素は複雑かつ多遺伝子性のものである（ＲｉｌｅｙおよびＭｃＧｕｆｆｉｎ、Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ Ｇｅｎｅｔ ２０００、９７、２３〜４４）ことを何年にもわたって一貫して実証してきたが、本願開示の中心となる見解を課題とすることはなかった。統合失調症とヒトゲノム内のＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉの配列に対して同じ領域が数多く報告されているが、いずれも同じ現象すなわち感染性組換えを２つの異なる局面から映し出しているだけである（図１および図２参照）。図１は、祖先の５ＨＴ１Ｅでスピロヘータのｆｂｒｐとそのあらかじめ挿入されたｆｂｒｐ鋳型との組換えが複数回にわたって発生し、隣接する非微生物ヌクレオチドを含む二重らせん上の相補鎖が、微生物および祖先のＤＮＡの両方とさらに組換えられたことを示している。これは統合失調症の６ｑ１４候補領域上に互いに隣接して位置する５ＨＴ１ＥからＣＢ１への遺伝子変換につながった。ヌクレオチドのうち最初の３つ（ａｔｔ）は今でもマウス（Ｍｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓ）およびラット（Ｒａｔｔｕｓ ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）の５ＨＴ１Ｅで見られるが、ボレリアブルグドルフェリのｆｂｒｐには見られないことから、ＣＢ１遺伝子上のスピロヘータ鋳型は、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉの６ｑ１４への直接的な転移によるものではなく、すでにスピロヘータ封入体を持っていた古代の５ＨＴ１Ｅに由来していることになる。他のアデニンをＣＢ１に挿入して「ループホール」突然変異を観察せよ。Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ　ｐ１１５とボレリア鋳型ｆｂｒｐとの間の相同的組換えとミスマッチ修復突然変異とが起こるとポリアデニル化シグナルＡＡＴＡＡＡが導入され、こうして導入されるとポリアデニル化シグナルはＣＢ１のリボソーム翻訳と遺伝子発現とをコードするようになる。
【００３７】
図２ａおよび図２ｂは、祖先の５ＨＴ１ＥにおけるＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ　ｆｂｒｐとそのあらかじめ挿入されたｆｂｒｐ鋳型との間の感染性組換えによって、隣接する非微生物ヌクレオチドを含む二重らせん上の相補鎖が祖先のＤＮＡとさらに組換えられることを示している。これは、５ＨＴ１Ｅ上のあらかじめ挿入されたｆｂｒｐ内でのアデニンからチミンへのＡ−Ｔ点突然変異の前後に発生していた。同じ長さ（３２塩基対）の隣接した非暴露対照配列と比較して、遺伝子暴露によってヒトゲノム内でより多くの数の転座が起こっていたことになる。大半の転座は、染色体Ｘだけでなく、近くの６ｑ１４上で祖先の５ＨＴ１Ｅから最初に拡散した状態を反映して６ｑ上に位置している。６ｑ２１、６ｐ２１およびＸｑ２８への複数回にわたる転座も主な精神病の候補領域の様相を見せており、６ｑ２１で統合失調症に対するロッドスコアが最も高く、６ｐ２２が統合失調症の候補領域、Ｘｑ２８が双極性躁鬱病の候補領域であることと転座との間に相関がある。
【００３８】
系統発生的な追跡から、上記のような組換えが繰返し起こっており、かつ、あらかじめ挿入されたスピロヘータの鋳型内で新規な突然変異が生じる可能性が高いのではないかと思われる。冬から春出生の孤発性統合失調症罹患率が他の季節出生より高く、春から夏の季節にマダニを媒介にした感染が続き、さらにはマダニのベクターと孤発性統合失調症の危険性が高い地域とが重なる（Ｂｒｏｗｎ、Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒ Ｂｕｌｌ １９９４、２０、７５５〜７５）ことから、最も重要な感染候補はＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉではないかと思われる。経胎盤感染および胎児感染に係るヌクレオチド配列を発現する他の微生物はほとんどなく、いずれも自己の宿主のヌクレオチド配列と相同であるため、異質なものとはみなされない。除去時に不完全なゲノムしかないと、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉはその宿主細胞の遺伝子機構を複製に利用し、この遺伝子機構に介入する（Ｆｒａｓｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ １９９７、３９０、５８０〜８６）。神経病原性マウス白血病ウイルスと同様であるとすれば、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉは妊娠初期のオリゴ細胞性胞胚に感染し、生殖系列細胞の水平形質移入が疾患の垂直伝播につながるであろう。これは実際に成体のイクソイド（ｉｘｏｉｄ）マダニから卵および幼虫へのＢ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉの伝播時に発生しており、前に吸血がなくても感染性となり得るため、特に人間で出生前の孤発性Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ感染が報告されてきたのである（Ｓｔｅｅｒｅ ｉｎ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ． Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ： Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ Ｌｉｖｉｎｇ−ｓｔｏｎｅ、２０００、２５０４〜２５１８）。遺伝的に脆弱な症例を母集団に加えることで、統合失調症に羅患すると繁殖適応度（ｐｒｏｃｒｅａｔｉｏｎａｌ ｆｉｔｎｅｓｓ）と妊性が落ちるにもかかわらず、この疾患が依然として高い羅患率で存在しつづけるのは、Ｂ．ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉによるヒト生殖系列の形質移入が原因であるといえよう。
【００３９】
４５，５７０名のスウェーデン人徴集兵からなる同齢集団で１５年の経過観察を行い、大麻の摂取濃度と統合失調症の発症との関連性について研究した。大麻を取らない人の場合と比較して、大麻摂取量の多い人々（５回以上使用）が統合失調症にかかる相対危険度は６．０（９５％信頼区間４．０〜８．９）であった。他の精神病および社会的背景を斟酌してもなお根強い関連性があることから、大麻が統合失調症の独立した危険因子であることが指摘された（Ａｎｄｒｅａｓｓｏｎら、Ｌａｎｃｅｔ　１９８７年１２月２６日；　２　（８５７４：１４８３〜６）。
【００４０】
実施例５
有意なＣＢ１−Ｄ１タンパク質相同性ｖｓ．ＣＢ１−Ｄ２ヌクレオチド相同性　遺伝子の水平伝達では片付かない有意な相同性がいくつかある。ＣＢ１にはアミノ酸レベルでドーパミンＤ１すなわちＩ型Ｇタンパク質共役受容体との間に有意な相同性がある（Ｓｃｏｒｅ＝７１．０ビット（１７１）、Ｅｘｐｅｃｔ＝２ｅ−１１、Ｉｄｅｎｔｉｔｉｅｓ＝７５／３２０（２３％）、Ｐｏｓｉｔｉｖｅｓ＝１３７／３２０（４２％）、Ｇａｐｓ＝５０／３２０（１５％）（Ｏｎｌｉｎｅ Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ ｉｎ Ｍａｎ、ＯＭＩＭ ２０００、Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、Ｊｏｈｎ Ｈｏｐｋｉｎｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（メリーランド州ボルチモア）およびＮａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ、（Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｉｂｒａｒｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２０００）。また、他の相同なタンパク質として、嗅覚または視角などの細胞の外から情報を受けるＧ−タンパク質共役受容体があげられる。しかしながら、ヌクレオチドレベルで相同な１９の塩基対のうち特定の一配列がゆえに、ＣＢ１に対してはドーパミン２受容体（Ｄ２）すなわちＩＩ型Ｇ−タンパク質共役受容体が有意なＤＮＡ相同性を示す（Ｓｃｏｒｅ＝３７．２ビット（１９）、Ｉｄｅｎｔｉｔｉｅｓ＝１９／１９（１００％）。このようなＣＢ１とＤ２受容体との間の限られた相同性は、統合失調症を治療する上での重要な薬理学的な標的であり、代謝調節作用の阻害様式（ｉ−モード）で知られる膜貫通領域の第７ループをコードする。３５００万年前におけるラットとマウスとの系統発生的な分岐後に生じたラットＤ２受容体遺伝子（Ｒａｔｔｕｓ ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）におけるＧＴＧからＧＴＣへのサイレントな点突然変異以外に、この相同なヌクレオチド配列は、全配列決定された霊長類（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ、Ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｕｓ ａｅｔｈｉｏｐｓ、Ｈ． ｓａｐｉｅｎｓ； ＯＭＩＭ、２０００）および齧歯類（Ｍｕｓ ｍｕｓｃｕｌｕｓ）のＤ２受容体遺伝子に認められる。
【００４１】
妊娠中期に皮質内側の層構造（ｌａｍｉｎａｅ）から外側の層構造へのニューロンの遊走を妨害する事象が出生前の早い段階で起こるが、この事象の原因は統合失調症患者の脳に認められる細胞錯綜配列の一貫したパターンにある可能性が極めて高い。皮質の外側の層で皮質間の層よりも高いレベルでＣＢ１が発現される（Ｇｌａｓｓら、１９９７、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、７７、２９９〜３１８）のはニューロンの遊走をＣＢ１が媒介するからだとすれば、ＣＢ１をノックアウトすることで皮質間の錯綜配列を説明することができるはずだが、その代謝調節作用のｉ−モードが細胞の移動に不可欠だということが最近になって報告された（ＳｏｎｇおよびＺｈｏｎｇ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙおよびＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、２０００、２９４、２０４〜２０９）。さらに、ＣＢ１の分布は主に統合失調症の場合に影響されるマクロ解剖的な領域を正確に反映している（ＳｃｈｕｌｔｚおよびＡｎｄｒｅａｓｅｎ、１９９９、Ｌａｎｃｅｔ、３５３、１４２５〜３０）。
【００４２】
ｉ−モードを脱抑制すると、ＣＢ１ノックアウトマウスで空間記憶（海馬の長期増強）が亢進され（Ｂｏｈｍｅら、２０００、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、９５、５〜７）、目標指向的な時間記憶が低下する。しかしながら、この記憶増進作用は統合失調症における空間時間的な歪みのパターンと似ているだけではない。アルツハイマー痴呆や第３期神経梅毒の患者にはまさに幻覚が起こるにもかかわらず、彼らがこの幻覚を覚えておらず、一定の妄想と再度結びつけることもないのは明らかである。早期痴呆（統合失調症）が梅毒性痴呆と違うのは、記憶のないまま幻覚が消失し、統合失調症の思考に一定の幻覚が紛れ込み、明らかな妄想へと発展していくことである。さらに、ＣＢ１ノックアウトマウスでは、探索行動、目標指向性行動の減少すなわち、統合失調症の徴候のなかで最も確固たるものであろう症状が認められる（Ｓｔｅｉｎｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、２０００、９６、５７８６〜５７９０）。経時的な作動記憶のない状態では、創造的な発話もできなければ論理的な思考もできないであろう。したがって、目標指向性行動および発話障害の原因はＣＢ１の崩壊（これは左半球のウェルニッケ野部分で最大レベルに達する）にあろうと思われる。すなわち、統合失調症患者では、順を追ってなされる人間の行動のうち最も高度なものが健常な人よりも型にはまってしまっているのである。
【００４３】
実施例６
ヒトゲノムへの微生物挿入片の系統発生的な形跡を調査し、遺伝的な機序を解析した結果、細胞内寄生体からの転移因子と細菌のビルレンス因子とによって統合失調症および痴呆の候補遺伝子を破壊することができた。これについては、神経病原性微生物と、中心のカンナビノイド受容体ＣＢ１と、３’ＵＴＲおよびポリアデニル化シグナルのある完全配列がジーンバンクのデータベースに記録された他の既知の痴呆遺伝子とについて、ＢＬＡＳＴによるＤＮＡの同時相同性検索を使用して行った。現在ではこのような遺伝子がすでにいくつかキャラクタライズされている。一例として、ＡｐｏＥ４アルツハイマー病ＩＩ型（ＡＤ２）やプレセニリン２（ＡＤ４）があげられる。家族性英国型痴呆（不可欠な膜タンパク質２Ａについて遺伝子に突然変異）、遺伝性の多発梗塞性痴呆（Ｎｏｔｃｈ３遺伝子）、原発性のＸ連鎖性精神遅滞（オリゴフレニン１遺伝子）、前頭側頭骨葉型痴呆、常染色体優性パーキンソン病におけるレビ小体痴呆、家族性パーキンソン病Ｉ型（αシヌクレイン遺伝子に突然変異）などの他の痴呆では、位置クローニングや配列決定も実施されている。ここで利用したゲノム施設にはＯｎｌｉｎｅ Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ ｏｆ Ｍａｎ（ＯＭＩＭ）でアクセスできる。いずれも先進医療遺伝学に興味のある者すべてに非常に推奨できるものである。
【００４４】
【表１】
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【００４５】
【表２】
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【００４６】
【表３】
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【００４７】
【表４】
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【００４８】
【表５】
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【００４９】
【表６】
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【００５０】
【表７】
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【００５１】
【表８】
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【００５２】
【表９】
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【００５３】
以上、本発明の現段階で好ましい実施形態について図示および説明したが、本発明はこれに限定されるものではなく、これ以外にも請求の範囲に記載の範囲内でさまざまに具体化および実現できるものであることは明確に理解できよう。
【００５４】
【配列表】
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【図面の簡単な説明】
【図１】遺伝子変換を誘発し、さらには感染性組換えも誘発する遺伝子暴露について示す図である。
【図２ａ】ヒトゲノムへの複数回の転座につながる遺伝子暴露について示す図である。
【図２ｂ】ヒトゲノムへの複数回の転座につながる遺伝子暴露について示す図である。
【図１】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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