(57)【要約】４α−結合したエピカテキン単位を含有するオリゴマープロシアニジンは現存しており、これまで立体選択的合成により入手できていない。臭化アリールからのハロゲン／金属の交換により誘導されたアリールリチウム試薬との保護された４−ケトンの反応により、原型的な二量体であるエピカテキン−４α，８−エピカテキンの調製がここに提供される。得られた第３ベンジルアルコールからの４−ヒドロキシル基の除去は、完全に立体選択的な様式で、トリ−ｎ−ブチルスズヒドリドおよびトリフルオロ酢酸により行われて、β面から排他的に水素化物が得られる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
４α−アリール置換エピカテキン誘導体を調製する方法であって、
（ａ）　５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンのＣ−３ヒドロキシル基を保護し、
（ｂ）　Ｃ−３が保護された５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンのＣ−４位置を酸化し、
（ｃ）　Ｃ−４が酸化され、Ｃ−３が保護された５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンに求核アリール有機金属試薬を加え、
（ｄ）　Ｃ−３が保護された４−アリール−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキンのＣ−４位置を脱酸素化して、Ｃ−３が保護された４α−アリール−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンを得る、
各工程を有してなることを特徴とする方法。
【請求項２】
Ｃ−３保護基を除去する工程をさらに含むことを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
ベンジル基を除去する工程をさらに含むことを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記ベンジル基が水素化分解により除去されることを特徴とする請求項３記載の方法。
【請求項５】
ヒドロキシル基をアセチル化する工程をさらに含むことを特徴とする請求項３記載の方法。
【請求項６】
前記４−アリール置換基がエピカテキンの誘導体またはカテキンの誘導体であることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項７】
エピカテキンまたはカテキンが、該エピカテキンまたはカテキンのＣ−８位置により連結されていることを特徴とする請求項５記載の方法。
【請求項８】
前記求核アリール有機金属試薬が、Ｃ−３が保護された５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモエピカテキンを第３ブチルリチウムと反応させることにより形成されることを特徴とする請求項５記載の方法。
【請求項９】
前記４−アリール置換基がトリメトキシフェニルであることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項１０】
Ｃ−３保護基がベンジル基またはトリアルキルシリル保護基であることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項１１】
前記トリアルキルシリル保護基が第３ブチルジメチルシリル基であることを特徴とする請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
前記酸化工程において、Ｃ−３が保護された５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−ケトエピカテキンが生成されることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項１３】
前記酸化工程が、
（ａ）　前記Ｃ−３が保護された５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンをキノン型の酸化剤と反応させて、Ｃ−３が保護された５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキンを形成し、
（ｂ）　前記Ｃ−３が保護された５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキンを、Ｎ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシドおよび過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムと反応させる、
ことにより行われることを特徴とする請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記脱酸素化工程が、４−アリール−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキンをトリアルキル金属水素化物および有機酸と反応させることにより行われることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記トリアルキル金属水素化物がトリブチルスズヒドリドまたはトリエチルシランであり、前記有機酸がトリフルオロ酢酸であることを特徴とする請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記４−アリール−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンをＣ−３位置で誘導体化して、少なくとも１つのＣ−３エステルを形成する工程をさらに含むことを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項１７】
誘導体化剤が、カフェー酸、桂皮酸、クマル酸、フェルラ酸、没食子酸、ヒドロキシ安息香酸およびシナピン酸からなる群より選択されることを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
ベンジル基を除去する工程をさらに含むことを特徴とする請求項１６記載の方法。
【請求項１９】
前記ベンジル基が水素化分解により除去されることを特徴とする請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
ヒドロキシル基をアセチル化する工程をさらに含むことを特徴とする請求項１８記載の方法。
【請求項２１】
化学式：
【化１】
2004508362.tif 000030
の化合物であって、
Ｒが水素、ベンジルまたはアセチルであり、Ｘがヒドロキシまたはβ−水素であることを特徴とする化合物。
【請求項２２】
化学式：
【化２】
2004508362.tif 000031
の化合物であって、
Ｒ１がシリルベースの保護基またはベンジル型の保護基であり、ＸおよびＹが独立して水素またはヒドロキシであるか、またはＸおよびＹが共に酸素であり、Ｚが水素またはハロゲンであることを特徴とする化合物。
【請求項２３】
化学式：
【化３】
2004508362.tif 000032
の化合物であって、
Ｒ１がシリルベースの保護基またはベンジル型の保護基であり、Ｘが水素またはβ−水素であることを特徴とする化合物。
【請求項２４】
化学式：
【化４】
2004508362.tif 000033
の化合物であって、
Ｒ２が水素、ベンジルまたはアセチルであり、Ｒ３およびＲ４が独立して水素、アセチル、保護されたガロイルまたはガロイルであることを特徴とする化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願の説明
本出願は、２０００年９月５日に出願された米国特許出願第０９／６５５３６０号に対する優先権を主張するものである。
【０００２】
発明の分野
本発明は、広く、ポリフェノール生成物に関し、特に、プロアントシアニジンに関する。本発明はさらに、ポリフェノール天然生成物および他の関連する化合物を調製する合成方法に関する。
【０００３】
発明の背景
プロアントシアニジン（非加水分解型のタンニン）は、様々な生物学的活性、食品中に広範囲に存在すること、および結果として生じる人間の健康のための関連性のために、現在関心を集めているポリフェノール天然生成物の一群である。
【０００４】
プロアントシアニジンは、その芳香環に１つまたはいくつかのヒドロキシル基を、しばしば３位置に追加のヒドロキシル基を有するダイマーまたはオリゴマーフラバノイドである。Ａ環およびＢ環の１１の異なるヒドロキシル化パターンが天然で見つかっている。代表的なプロアントシアニジンとしては、以下のものが挙げられる：
【化５】
2004508362.tif 000002
プロアントシアニジンのポリフェノールモノマー単位上の置換基の立体化学は、相対立体化学、「アルファ／ベータ」または「シス／トランス」に関して記載されるであろう。「アルファ」（α）という用語は、置換基がフラバン環の平面の下に向いていることを示し、一方で、「ベータ」（β）という用語は、置換基がその環の平面の上に向いていることを示す。「シス」という用語は、２つの置換基が環の同じ面に向いていることを示し、一方で、「トランス」という用語は、２つの置換基が環の反対の面に向いていることを示す。
【０００５】
天然供給源からの純粋なプロアントシアニジンの単離は、オリゴメリゼーション度が増すにつれ、次第に難しくなる。チオ開裂による分解によって、基礎的モノマー単位を同定することができるが、フラバン間結合の位置と立体化学を解明する課題は些細なことではない。これらの要因の両方のために、四量体よりも大きいオリゴマーは従来技術においてわずかしか定義されていない。プロアントシアニジンおよびそれらの元のモノマーも、様々な誘導体の形態、例えば、没食子酸またはヘキサヒドロキシ二石炭酸のような、ヒドロキシル化芳香族カルボン酸を持つエステルまたはグリコシドの形態で天然に生じる。
【０００６】
プロアントシアニジンの中でも、２つの亜類型のプロシアニジン（５，７，３’，４’−ヒドロキシル化）およびプロデルフィニジン（５，７，３’，４’，５’−ヒドロキシル化）が、人間の食品、例えば、ココアにおいて広く行き渡っている。カカオプロシアニジンは主に、エピカテキン（カテキンのＣ−３エピマー）構成単位からなる。デカマーまでのサイズのオリゴマーが同定されている。これらのオリゴマーは、ペンタマーからは、様々なガン細胞系統に対して成長阻害活性を示す。（Ｒｏｍａｎｃｚｋ，Ｌ．Ｊ．Ｊｒ．； Ｈａｍｍｅｒｓｔｏｎｅ，Ｊ．Ｆ．，Ｊｒ．； Ｂｕｃｋ，Ｍ．Ｍ．米国特許第５５５４６４５号、１９９６年９月１０日）フラバン−３−オールは、（２Ｓ）−フェニルアラニンからフラバン−３，４−ジオールを経て、生合成により得られる。これらのジオール中間体は、位置Ｃ−４において高安定化されたカルベニウムイオン（またはキノンメチド）を容易に形成し、これは、実質的にフリーデル・クラフツアルキル化プロセスであるプロセスにおいてフラバン−３−オールのＡ環を攻撃して、フラバン間結合を形成する。このプロセスは、一回または数回繰り返すことができ、ダイマーと共に、非加水分解型のタンニン、縮合タンニン、またはプロアントシアニジンとして知られている鎖状オリゴマーが得られる。当業者には理解されるように、これらの化合物の構造的複雑さは、モノマー単位における異なるヒドロキシル化パターンおよびＣ−３立体化学、フラバン間結合の異なる位置化学および立体化学、並びに追加の構造的変更の結果として、鎖長と共に急激に増す。それに加え、鎖の枝分れは、６位置と８位置の両方においてモノマー単位のアルキル化により生じるであろう。
【０００７】
ココアから精製した化合物に指定される構造を明確に証明するために、合成により調製された所定の構造のエピカテキンダイマーおよびオリゴマーを比較しなければならない。合成モノマー、ダイマーおよびオリゴマーは、抗ガン活性の様々なイン・ビトロモデルにおいて、最終的には、イン・ビボモデルにおいて、構造−活性の関係を構築するのに有用である。
【０００８】
プロシアニジンにより課せられた合成の課題は、フラバン間の位置化学および立体化学、並びに酸、塩基、および酸化剤に対する保護されていない化合物の感受性を制御する上での難点に関係する。フラバン−３−オールと４−置換求電子フラバンとの間の縮合は、伝統的に弱酸性媒体中でフェノール保護基を使用せずに行われ、または最近では、４−置換基としてベンジルチオの代わりにＡｇＢＦ４により行われている。その生成物は、過剰の求核構成単位の施用にもかかわらず、位置異性体および時には立体異性体、並びに高級オリゴマーの混合物である。それらの異性体は、通常、セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ−２０上でのゲルクロマトグラフィーにより分離された。このプロセスでは、ＨＰＬＣカラムまたはこの吸着材のための薄層板のような高速分析器具が利用できないために、特定の分離操作の各々に関して進展するのに膨大な時間を投資する必要がある。さらに、高価な天然生成物である（＋）−タキシホリン（４−ケトン）の還元により、またはその商業的な供給源が同定するのが難しいかまたは存在しない天然のプロアントシアニジンオリゴマー分画のその場の分解またはチオ開裂分解により調製される、光学的に純粋な非保護４−置換カテキンおよびエピカテキンは容易には得られない。
【０００９】
したがって、従来技術の合成では、構成単位として保護されたオリゴマープロシアニジンを用いていることは意外なことではない。さらなる誘因として、アルコールのヒドロキシルの保護ではなく、フェノールのヒドロキシルを保護することにより、アセチル保護基を用いたカテキンの場合に行われてきたように、３−エステルおよび３−グリコシドのような誘導体を位置選択的に合成できるであろう。３−Ｏ−ベンジル−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−メチルカテキンの８−ブロモ誘導体が、ハロゲン−リチウム交換を施され、Ｏ−メチル化４−ケトンと反応させられて、したがって、完全な位置制御が確実となる興味深い手法が報告された。しかしながら、メチルＯ−遮断基は、遊離ダイマーを得るために除去できない。残りの発表された研究では、反応パートナーの内の一方または両方にフェノール保護基を含めると共に、上述した求電子置換プロセスを使用した。
【００１０】
所定のエピカテキンオリゴマーの合成に向けられた本出願人自身の以前の研究は、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−４−（２−ヒドロキシエトキシ）エピカテキンによる５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−（−）−エピカテキンのＴｉＣｌ４媒介アルキル化を用いていた。収率が分子量の増加と共に急激に減少する高級オリゴマーの他に、フラバン間結合のベータ立体化学を持つ１つのダイマー生成物（プロシアニジンＢ２誘導体）が得られた。
【００１１】
ごく最近まで、これらの化合物におけるフラバン間結合の位置化学および立体化学の指定に用いられた分析方法は、どのようなダイマープロアントシアニジンの構造の独立した確認によっても正しいことが証明されなかった。プロアントシアニジンおよびその誘導体の不十分な結晶化能のために、Ｘ線結晶学は適用できなかった。１Ｈ　ＮＭＲ結合定数および円偏光二色性に基づく立体化学の指定は、Ｃ環が立体配座的に柔軟であるという基礎的事実をなおざりにする。控えめな観点から、柔軟な分子の特定の立体配座の前提は、それらの源（直感的または計算的）にもかかわらず、構造を証明するための慎重な手法とは考えられない。
【００１２】
天然供給源から様々なプロアントシアニジンを単離した後に行われた合成方法論の進歩により、プロシアニジンＢ２において以前に推定された４β立体化学を明白に証明することが今ではできる。共通の誘導体によりプロシアニジンＢ２について校正された、区別を付けて保護されたエピカテキンダイマーは、一連の脱官能化工程が行われ、最後に、そのベンズヒドリルエステルとして単離される、（Ｒ）−（−）−２，４−ジフェニル酪酸に分解された。この分解生成物の唯一の残りの不斉中心は、プロシアニジンＢ２中の「頂部」エピカテキン部分のＣ−４から直接導かれ、したがって、その絶対配置がＸ線結晶学により確定した前記分解生成物の旋光性の徴候により、Ｃ−４での絶対配置が示された。
【００１３】
当業者には、今では、比較のためのエピカテキン−４α，８−エピカテキンとしてデフォルトで認識できる、反対の立体異性体の真正の試料を持つ重要性が認識されるであろう。Ｃ環の置換基の２，３−シスおよび３，４−シスの関係が同時に仮定されたプロアントシアニジンの文献の報告は珍しく、エピカテキン−４α，８−エピカテキンは、天然供給源からは単離されていない。実際、４α−結合単位を含有するどのようなプロシアニジンの立体選択的合成も、今日まで全く報告されていない。
【００１４】
４β，８−ダイマーを形成する過程において、２−アリール基および３−酸素が、フラバン求核体の推定されるカルボカチオン性中間体に対する手法をそのβ面に向ける上で協同するということはもっともな推定である。したがって、単に反応条件を変更することにより、または３−ヒドロキシル基の内の１つまたは両方に保護基を取り付けることにより、４α−立体異性体に到達する可能性は、見込みがないと考えられた。それゆえ、４α位置で置換されたエピカテキンを調製する新規な合成方法が必要とされている。この開示は、そのまだ満たされていない必要性に対して提言されたものである。
【００１５】
発明の概要
本発明の方法により、好ましくは、芳香族ラジカルにより、４α位置で置換された保護されていないエピカテキン誘導体を調製することができる。ある好ましい実施の形態において、ダイマーであるエピカテキン−４α，８−エピカテキンが調製される。本発明の利点の１つは、より敏感な最終的な極性中間体よりも、各々の段階で容易に分離できる非極性中間体の形成である。
【００１６】
本発明の方法において重大な工程は、既に適所に芳香族単位を持つＣ−４−カルボカチオンが、そのβ面から水素化物求核体により攻撃され、これにより、４−アリール基がα面を占めさせられる変換である。カルボカチオンは、第３アルコールから都合良く生成されるであろう。このアルコールは、アリール有機金属試薬および保護された４−ケト−エピカテキンから入手できる。
【００１７】
本発明は、４α−アリール置換エピカテキンを調製する方法に向けられている。この方法は、
（Ａ）　５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンのＣ−３ヒドロキシル基を保護基により保護することにより、適切に保護されたエピカテキンを形成して、化学式：
【化６】
2004508362.tif 000003
を有し、Ｂｎがベンジル基であり、Ｒがヒドロキシル保護基である化合物を生成し、
（Ｂ）　保護されたエピカテキンの４−位置を酸化して、化学式：
【化７】
2004508362.tif 000004
を有する保護されたフラバン−４−ワンを生成し、
（Ｃ）　フラバン−４−ワンを求核アリール有機金属試薬と接触させて、化学式：
【化８】
2004508362.tif 000005
の化合物を生成し、
（Ｄ）　Ｃ−４位置を立体選択的に脱酸素化して、化学式：
【化９】
2004508362.tif 000006
の化合物を生成し、
（Ｅ）　必要に応じて、Ｃ−３ヒドロキシル基を脱保護し、次いでさらに必要に応じて、Ｃ−３ヒドロキシル基を適切なアセチル化剤でアセチル化し、その後、ベンジル基を除去して、または
（Ｆ）　必要に応じて、Ｃ−３ヒドロキシル基を脱保護し、ベンジル基を除去して、化学式：
【化１０】
2004508362.tif 000007
を有する遊離４α−アリール−エピカテキンを生成する、
各工程を有してなる。
【００１８】
また、ベンジル基を除去した後に、フェノール基をアシル化することにより、４α−アリールエピカテキンの他の誘導体を調製する方法も提供される。
【００１９】
本発明は、ある態様において、エピカテキン−エピカテキンダイマーまたはエピカテキン−カテキンダイマーを調製する方法であって、求核アリール有機金属試薬が、保護された８−ブロモエピカテキン、または保護された８−ブロモカテキンもしくはそれらの誘導体から導かれるものである方法に関する。
【００２０】
提案された実施の形態
ここに用いているように、エピカテキン（カテキンのエピマー）という用語は、化学式：
【化１１】
2004508362.tif 000008
の化合物を称する。
【００２１】
５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンは、各々のフェノールヒドロキシル基のプロトンがベンジル基により置換されているエピカテキンを称する。有機合成の当業者には、テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンを調製する方法が数多くあることが認識されるであろう。そのような化合物を得る特に有用な方法の１つが、Ｔｕｅｃｋｍａｎｔｅｌ等， Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１，１２０７３−１２０８１により記載されている。
【００２２】
ここに用いているように、「アリール」は、芳香族炭化水素化合物または複素環を意味する。アリール基はフェニルまたは置換フェニルであってよく、ここで、置換基は、求核有機金属試薬の形成に適合するという条件で、ハロ、アリール、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３−Ｃ８シクロアルコキシからなる群より選択される。アリール基は、他の芳香族環または飽和炭化水素環もしくは複素環の環系に組み込まれてもよい。
【００２３】
本発明の方法における重要な変換は、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンのＣ−３位置でのヒドロキシル基の保護である。ある実施の形態において、その保護としては、完全に保護されたエピカテキンを得るための、臭化ベンジルのようなハロゲン化ベンジルによるアルキル化が挙げられる。一般に、反応は、塩基、特に、アルカリ金属水素化物、ジアルキルアミド、ビス（トリアルキルシリル）アミドまたは水酸化物のような強塩基、より好ましくは、水素化ナトリウムのようなアルカリ金属水素化物の存在下で行われる。反応は、一般に、極性有機溶媒中で行われる。当業者は、特定の塩基と相溶性のある溶媒を選択できるであろう。好ましい溶媒は、アセトニトリル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドのようなスルホキシド、またはＮ−メチルピロリジノンであってよい。より好ましい溶媒は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのようなアミドである。典型的な反応温度は、約０℃から溶媒の還流温度まで、好ましくは、約１５℃から約４０℃までの温度、より好ましくは、約２３℃である。全ての試薬を添加した後、反応体は、１５分から２４時間まで、好ましくは、３０分から１時間までの期間に亘り撹拌される。
【００２４】
別の実施の形態において、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンのＣ−３位置でヒドロキシル基を保護するのに用いられる保護基は、ベンジル基に対して垂直である。一般に、反応は、シリルエーテルを得るためのＣ−３ヒドロキシル基のＯ−シリル化を含む。シリル化剤は塩化シリルであってよい。ケイ素上のアルキル置換基が第３ブチルジメチルである場合、シリル化剤は塩化第３ブチルジメチルシリルであり、反応は、４−（ジメチルアミノ）ピリジンを持つトリエチルアミン、またはイミダゾールのような弱塩基の存在下で行われる。反応は、不活性極性有機溶媒、好ましくは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、またはＴＨＦ中で行われる。典型的に、Ｏ−シリル化反応は、０℃から約４０℃まで、好ましくは、約１５℃から約３０℃までの温度、より好ましくは、約２３℃で、約１時間から約２４時間までの期間に亘り、好ましくは、約６時間から約１２時間までの期間に亘り、より好ましくは、約１２時間に亘り行われる。当業者には、ヒドロキシル基をシリル化する他の方法が適していることが理解されるであろう。シリル化剤はトリフルオロメタンスルホン酸シリルであってよく、この場合、好ましい塩基はピリジンまたは２，６−ルチジンであり、溶媒はジクロロメタンまたはクロロホルムである。
【００２５】
当業者には、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモエピカテキンまたは５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモカテキンのＣ−３ヒドロキシルを同様な様式で保護できることが認識されるであろう。
【００２６】
本発明の方法の別の重要な工程は、保護されたエピカテキンの酸化である。酸化は、どのような適切な酸化剤を用いて行っても差し支えない。一般に、酸化は二工程で行われる。第１の工程は、おそらく４β立体化学を持つ保護された４−ヒドロキシエピカテキンを提供するためのＣ−４メチレンの第２アルコールへの変換を含む。この反応は、一般に、保護されたエピカテキンを、酸化剤、好ましくは、テトラ酢酸鉛、または２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−ｐ−ベンゾキノン（ＤＤＱ）のような、Ｏ−アルキル化カテキンおよびエピカテキンを酸化するのに用いられてきた試薬と接触させることにより行われる。より好ましくは、ＤＤＱのような電子が不足したキノン型の酸化剤またはそれらの変種が用いられる。反応は、有機溶媒中、好ましくは、アルキル基が１から４までの炭素原子を持つジアルキルエーテル、テトラヒドロフランのような環状エーテル、もしくはジクロロメタンまたはクロロホルムのような塩素化溶媒中で行われる。ＤＤＱが酸化剤である場合、溶媒中には水が存在する。反応は、一般に、０℃から溶媒の還流温度までの温度で、好ましくは、約１５℃から約３０℃までの温度で、より好ましくは、約２３℃で、約１時間から約２４時間までの期間に亘り、好ましくは、約６時間から約１２時間までの期間に亘り、より好ましくは、約１２時間に亘り行われる。
【００２７】
第２の工程は、保護された４−ヒドロキシエピカテキンの保護されたフラバン−４−ワンへの転化を含むさらなる酸化である。この反応は、酸化剤、好ましくは、Ｎ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシドおよび過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムを組み合わせることにより形成された酸化剤の存在下で、かつ非反応性乾燥剤、好ましくは、モレキュラーシーブの存在下で行われる。この酸化技法は、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ，１９８７，１６２５においてＬｅｙ等により記載されている。一般に、そのような反応は、有機溶媒、好ましくは、ジクロロメタンのような塩素化アルカン中において、０℃から溶媒の還流温度までの温度で、好ましくは、約１５℃から約３０℃までの温度で、より好ましくは、約２３℃で、約１時間から約２４時間までの期間に亘り、好ましくは、約６時間から約１２時間までの期間に亘り、より好ましくは、約１２時間に亘り行われる。
【００２８】
本発明の方法におけるさらなる変換としては、保護された４−アリール−４−ヒドロキシエピカテキンを生成するための、保護されたフラバン−４−ワンの求核アリール有機金属試薬との反応が挙げられる。一般に、この反応は、最初に、無水エーテル溶媒中、好ましくは、テトラヒドロフラン中、不活性雰囲気において、約−１００℃から約０℃までの温度で、約１時間から約２４時間の期間に亘り、ハロゲン化アリール、好ましくは、臭化アリールをアルキルリチウムと、好ましくは、第３ブチルリチウムと組み合わせることにより求核アリール有機金属試薬をその場で形成し、次いで、これも無水エーテル溶媒中、好ましくは、テトラヒドロフラン中、不活性雰囲気において、約−１００℃から約０℃までの温度で、約１時間から約２４時間の期間に亘り、形成された求核アリール有機金属試薬を保護されたフラバン−４−ワンと接触させることにより行われる。当業者には、グリニャール試薬のような他の有機金属試薬を本発明に用いてもよいことが理解されよう。
【００２９】
当業者には、ハロゲン化アリール以外の材料から、ある求核アリール有機金属試薬を形成してもよいことも理解されるであろう。特に、求核アリール有機金属試薬は、オルトメタレーションおよびトランスメタレーションとして当該技術分野において知られているプロセスにより調製してもよい。
【００３０】
本発明のある特定の実施の形態は、２，４，６−トリメトキシフェニルリチウムの保護されたフラバン−４−ワンとの反応を提供する。本発明のさらなる特定の実施の形態は、本発明の求核有機金属試薬を形成するための、保護された８−ブロモエピカテキンまたは保護された８−ブロモカテキンの第３ブチルリチウムによる処理を検討する。典型的な保護された８−ブロモ−エピカテキンは、５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモ−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキンであり、これは、無水エーテル溶媒中、好ましくは、テトラヒドロフラン中、不活性雰囲気において、約−１００℃から約０℃までの温度で、約１時間から約２４時間の期間に亘り、アルキルリチウム、好ましくは、第３ブチルリチウムにより処理され、次いで、これも無水エーテル溶媒中、好ましくは、テトラヒドロフラン中、不活性雰囲気において、約−１００℃から約０℃までの温度で、約１時間から約２４時間の期間に亘り、形成されたアリールリチウムが保護されたフラバン−４−ワンと接触させられる。
【００３１】
本発明の方法は、保護された４α−アリールエピカテキンを単独の立体異性体として得るための、保護された４−アリール−４−ヒドロキシエピカテキンの脱酸素化を提供する。脱酸素化は、還元剤、好ましくは、各々のアルキル基が１から４までの炭素原子を含有しているトリアルキルシランを有機酸と、不活性有機溶媒、好ましくは、ジクロロメタンのような塩素化アルカン中において、０℃から還流温度までの温度で、約５分から約２４時間までの期間に亘り組み合わせることにより形成された還元剤の存在下で行われる。より好ましくは、反応は、各々のアルキル部分が１から６までの炭素を含有している水素化トリアルキルスズを過フルオロカルボン酸と、不活性有機溶媒、好ましくは、ジクロロメタンのような塩素化アルカン中において、０℃から還流温度までの温度で、約５分から約２４時間までの期間に亘り組み合わせることにより形成された還元剤の存在下で行われる。
【００３２】
本発明はさらに、Ｃ−３ヒドロキシル基で、もしくは４−アリール置換基がそれ自体でカテキンまたはエピカテキンである場合には、両方のＣ−３ヒドロキシル基で、脱保護すべき、保護された４−アリール−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンを提供する。Ｃ−３ヒドロキシル基がシリル基により保護されている実施の形態において、脱保護反応は、フッ化物により、一般的には、アセトニトリル中のフッ化水素酸水溶液により行われる。当業者には、Ｃ−３ヒドロキシル基は、脱保護後に、さらに誘導体化されてもよいことが理解されるであろう。一般に、誘導体化は、Ｃ−３ヒドロキシル基の活性化酸または酸塩化物のようなアシル化剤によるアシル化を含む。好ましいアシル化剤は、酸塩化物としてトリ−Ｏ−ベンジル没食子酸を活性化させることにより形成されたものである。当業者には、適切なアシル化剤を形成するために、酸を様々な様式で活性化してもよいことが理解されるであろう。
【００３３】
本発明の方法の別の重要な工程としては、ベンジル基の除去が挙げられる。ベンジル基は、保護された芳香族ヒドロキシル基（すなわち、フェノール）および保護された脂肪族ヒドロキシル基から水素化分解により除去してもよい。一般に、水素化分解反応は、メタノール、エタノール、酢酸エチルまたはそれらの混合物のような適切な有機溶媒中において、標準の温度と圧力で、または約１−５バールの高圧で、より好ましくは、約３．５−５バールで、水素ガス雰囲気において行われる。一般に、ベンジル基の除去を促進するために、金属触媒が用いられる。好ましい触媒は、固体支持体に吸着されたＰｄ、Ｐｔ、またはＮｉであり、より好ましい触媒は、炭素に吸着された水酸化パラジウムである。しかしながら、当業者には、ベンジル基の除去を促進するために、様々な他の触媒を用いても差し支えないことが理解されるであろう。ある実施の形態において、ベンジル基を除去することにより、遊離した４−アリールエピカテキンが生成され、これは単離され、精製されるであろう。あるいは、水素化分解粗生成物は、この粗生成物を無水酢酸および塩基と反応させることにより、その酢酸誘導体に直接転化させても差し支えない。４−アリール置換基がエピカテキンであるより好ましい実施の形態において、水素化分解により、遊離したエピカテキン−４α，８−エピカテキンが生成され、アセチル化により、デカアセテート誘導体が生成される。これらのアセテート誘導体は、１Ｈ　ＮＭＲ分光法によりそれらのＣ−４エピマーとは異なることが示されているので、かつそれらのフラバン間結合の４，８−位置は、出発材料の構造の必然的な結果であるので、この方法により生成された遊離したエピカテキンダイマーは、これまで知られていないエピカテキン−４α，８−エピカテキンとして明白に同定される。
【００３４】
別の実施の形態において、ベンジル基は、Ｃ−３ヒドロキシル基がアシル化されて、Ｃ−３で誘導体化された遊離した４−アリールエピカテキンが生成された後に除去される。
【００３５】
本発明はまた、アシル化剤の成分として導入されたベンジル基の除去を提供する。トリ−Ｏ−ベンジル没食子酸の活性化された誘導体により、少なくとも１つのＣ−３ヒドロキシル基がアシル化されている好ましい実施の形態において、没食子酸ヒドロキシル基にあるベンジル基は、前記エピカテキンまたはカテキンの一団からのベンジル基の除去と共に、一工程で除去しても差し支えない。
【００３６】
本発明を、以下の非限定的実施例によりさらに説明する。
【００３７】
実施例
一般方法　　パールマン（Ｐｅａｒｌｍａｎ）の触媒（炭素上の２０％の水酸化パラジウム）をアルドリッチ（Ａｌｄｒｉｃｈ）社から購入した。この触媒は５０％以下の水を含有していた。１Ｈおよび１３Ｃ　ＮＭＲスペクトルを、それぞれ、３００ＭＨｚおよび７５ＭＨｚの公称周波数で得た。１Ｈおよび１３Ｃ　ＮＭＲスペクトルは、そのように印されていれば内部ＴＭＳに関係付けられ、そうでなければ、ＣＤＣｌ３信号（δ　７７．００）に関係付けられている。燃焼分析：マイクロ・アナリシス社（Ｍｉｃｒｏ−Ａｎａｌｙｓｉｓ， Ｉｎｃ．）（デラウェア州、ウィルミントン）。カラムクロマトグラフィー（ｃｃ）：メルクシリカゲル６０（Ｎｏ．７７３４−７）、粒径６３−２００μｍ。薄層クロマトグラフィー：メルクシリカゲル６０Ｆ２５４（Ｎｏ．７７３４−７）、層厚２５０μｍ；アルカリ過マンガン酸カリウム溶液による視覚化。
【００３８】
実施例１：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキンの調製
１０ｍＬの乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｔｕｅｃｋｍａｎｔｅｌ等，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１，１２０７３−１２０８１）中の１８０ｇの水素化ナトリウム（油中６０％）の懸濁液に、１０ｍＬの乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２．６０ｇ（４．００ミリモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキンの溶液を室温で加えた。１時間後、０．５６ｍＬ（４．７ミリモル）の臭化ベンジルを加えた。この混合物を一晩撹拌し、氷水中に注ぎ、５０ｍＬのジクロロメタンにより３回抽出した。混合有機相を水および塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサン　１：１：６）により精製して、無色の非晶質固体として２．２０ｇ（７４％）の生成物を得た：
【表１】
2004508362.tif 000009
実施例２：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキンの調製
２０ｍＬのテトラヒドロフランおよび０．１６ｍＬ（８．９ミリモル）の水中の２．２０ｇ（３．３８ミリモル）の３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキンの溶液に、２．００ｇ（７．４ミリモル）の２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−ｐ−ベンゾキノンを室温で加えた。混合物を一晩撹拌し、次いで、０．９１ｇ（７．４ミリモル）の４−（ジメチルアミノ）ピリジンを加え、撹拌を５分間継続し、２０ｇのシリカゲルを加えた。蒸発後、この残留物をシリカゲル（酢酸エチル／ヘキサン　１：４、次いで、ジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサン　１：１：４）で濾過して、白色気泡体として１．０５ｇ（４７％）の生成物を得た：
【表２】
2004508362.tif 000010
実施例３：（２Ｒ，３Ｓ）−３，５，７，３’，４’−ペンタキス（ベンジルオキシ）フラバン−４−ワンの調製
８ｍＬの乾燥ジクロロメタン中の１．００ｇ（１．３２ミリモル）の３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキンの溶液に、３００ｍｇの４Åモレキュラーシーブ、１８０ｍｇ（１．５４ミリモル）のＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド、および５８ｍｇ（１６５マイクロモル）の過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムを室温で加えた。この反応混合物を一晩撹拌し、蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ジクロロメタン／ヘキサン　１：１：１０）により精製して、白色気泡体として０．６６ｇ（６６％）の前記ケトンを得た：
【表３】
2004508362.tif 000011
実施例４：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシ−４−（２，４，６−トリメトキシフェニル）エピカテキンの調製
１ｍｌの乾燥テトラヒドロフラン中の３２ｍｇ（１３０マイクロモル）の１−ブロモ−２，４，６−トリメトキシベンゼンの溶液に、８５μＬ（１４５マイクロモル）の第３ブチルリチウム（１．７Ｍのペンタン中）を−７８℃で加えた。−７８℃での１時間後、１ｍｌの乾燥テトラヒドロフラン中の５０ｍｇ（６６マイクロモル）の（２Ｒ，３Ｓ）−３，５，７，３’，４’−ペンタキス（ベンジルオキシ）フラバン−４−ワンの溶液を加えた。−７８℃でのもう３時間後、２ｍＬの塩化アンモニウム水溶液を加え、生成物を、１０ｍＬのジクロロメタン中に３回抽出した。混合有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン　１：４）により精製し、２５ｍｇ（４５％）の生成物を得た：
【表４】
2004508362.tif 000012
実施例５：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４α−（２，４，６−トリメトキシフェニル）エピカテキンの調製
（ａ）トリエチルシラン／トリフルオロ酢酸による還元：１ｍＬのジクロロメタン中の２２ｍｇ（２４マイクロモル）の３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシ−４−（２，４，６−トリメトキシフェニル）エピカテキンの溶液に、３８μＬ（０．２４ミリモル）のトリエチルシランを、次いで、２２μＬ（０．２９ミリモル）のトリフルオロ酢酸を、室温で加えた。２時間後、固体の炭酸ナトリウムを加えた。濾過、蒸発、および薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン　１：３）による精製により、１５ｍｇ（６９％）の生成物を得た。
【００３９】
（ｂ）トリブチルスズヒドリド／トリフルオロ酢酸による還元：１ｍＬのジクロロメタン中の４６ｍｇ（２４マイクロモル）の３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシ−４−（２，４，６−トリメトキシフェニル）エピカテキンの溶液に、２０μＬ（７４マイクロモル）のトリブチルスズヒドリドを、次いで、７５μＬの１Ｍのトリフルオロ酢酸／ジクロロメタンを室温で加えた。１０分後、固体の炭酸ナトリウムを加えた。濾過、蒸発、および薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン　１：２）による精製によって、３９ｍｇ（８６％）の生成物を得た：
【表５】
2004508362.tif 000013
実施例６：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−アセチル−４α−（２，４，６−トリメトキシフェニル）エピカテキンの調製
２：１の比率のメタノール／酢酸エチル６ｍＬ中の１００ｍｇ（１１０マイクロモル）の３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４α−（２，４，６−トリメトキシフェニル）エピカテキンの溶液に、炭素上の２０％の水酸化パラジウム２０ｍｇを加えた。この混合物を３時間に亘り１バールの水素の元で撹拌し、その期間の後、薄層クロマトグラフィーにより、反応の完了が示された。触媒を濾過により除き、メタノールで洗浄した。溶液を蒸発させ、残留物を真空中で乾燥させ、４ｍＬの無水酢酸／ピリジン中に室温で溶解させた。一晩撹拌した後、混合物を蒸発させ、４０ｍＬのジクロロメタンを加え、それらの相を分離し、有機相を１０ｍＬの水および１０ｍＬの塩水で５回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶液を蒸発させ、粗生成物を薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン　１：１）により精製して、３０ｍｇ（４１％）の前記ペンタアセテートを得た：
【表６】
2004508362.tif 000014
実施例７：５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキンの調製
６ｍＬの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の４．３７ｇ（６．７２ミリモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン（Ｔｕｅｃｋｍａｎｔｅｌ等，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１，１２０７３−１２０８１）、０．６９ｇ（１０．１ミリモル、１．５当量）、および１．４２ｇ（９．４ミリモル、１．４当量）の塩化第３ブチルジメチルシリルの溶液を１９．５時間に亘り閉じられたフラスコ中において室温で撹拌した。１：５の比率の酢酸エチル／ヘキサンによるシリカゲル上での直接カラムクロマトグラフィー、蒸発、および真空中での乾燥により、黄色っぽいガラスとして５．０２ｇ（９８％）の前記シリルエーテルを得た：
【表７】
2004508362.tif 000015
実施例８：５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）−４−ヒドロキシエピカテキンの調製
１０ｍＬのテトラヒドロフランおよび０．１０ｍＬ（５．６ミリモル）の水中の１．５２ｇ（１．９８ミリモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキンの溶液に、１．３４ｇ（５．９ミリモル）の２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−ｐ−ベンゾキノンを室温で加えた。この混合物を一晩撹拌し、次いで、０．６１ｇ（５．０ミリモル）の４−（ジメチルアミノ）ピリジンを加え、撹拌を５分間に亘り継続し、２０ｇのシリカゲルを加えた。蒸発後、残留物をシリカゲル（酢酸エチル／ヘキサン　１：４）上で濾過して、白色気泡体として１．１２ｇ（７２％）の生成物を得た：
【表８】
2004508362.tif 000016
実施例９：（２Ｒ，３Ｓ）−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−［（第３ブチルジメチルシリル）オキシ］フラバン−４−ワンの調製
２ｍＬの乾燥ジクロロメタン中の０．３９ｇ（０．５０ミリモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）−４−ヒドロキシエピカテキンの溶液に、１００ｍｇの４Åのモレキュラーシーブ、６０ｍｇ（０．５５ミリモル）のＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド、および２０ｍｇ（５５マイクロモル）の過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムを室温で加えた。反応混合物を一晩撹拌し、蒸発させ、残留物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン　１：４）により精製して、白色気泡体として０．３８ｇ（９９％）の前記ケトンを得た：
【表９】
2004508362.tif 000017
実施例１０：５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモ−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキンの調製
１ｍＬの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の１８０ｍｇ（２４７マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモエピカテキン（Ｔｕｅｃｋｍａｎｔｅｌ等，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１，１２０７３−１２０８１）、５６ｍｇ（０．３７ミリモル）の塩化第３ブチルジメチルシリル、および４９ｍｇ（０．７２ミリモル）のイミダゾールを一晩室温で撹拌した。この混合物を氷水中に注ぎ、２０ｍＬのエーテルで３回抽出した。混合有機相を２０ｍＬの水および２０ｍＬの塩水で３回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。蒸発およびカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサン　１：１：４）により、気泡体として１８７ｍｇ（８８％）の生成物を得た：
【表１０】
2004508362.tif 000018
実施例１１：５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）−４−ヒドロキシエピカテキン−４，８−［５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキン］の調製
２ｍＬの乾燥テトラヒドロフラン中の４５０ｍｇ（５３３マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモ−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキンの溶液に、０．６４ｍＬ（１．１ミリモル）の第３ブチルリチウム（ペンタン中で１．７Ｍ）を−７８℃で窒素雰囲気下で加えた。６０分間に亘る−７８℃での撹拌後、２ｍＬの乾燥テトラヒドロフラン中の２８０ｍｇ（３５９マイクロモル）の（２Ｒ，３Ｓ）−５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−［（第３ブチルジメチルシリル）オキシ］フラバン−４−ワンの溶液を加えた。−７８℃でもう３時間経過した後、２ｍＬの塩化アンモニウム水溶液を加え、この混合物を室温まで暖まらせ、２０ｍＬのジクロロメタンにより３回抽出した。混合有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発させ、その残留物をシリカゲル（ジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサン　１：１：１０）上でクロマトグラフィーにかけて、無色気泡体として４１０ｍｇ（７４％）の生成物を得た：
【表１１】
2004508362.tif 000019
実施例１２：５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキン−４α，８−［５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキン］の調製
１ｍＬの乾燥ジクロロメタン中の２４０ｍｇ（１５５マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）−４−ヒドロキシエピカテキン−４，８−［５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキン］の溶液に、５０μＬ（１８６マイクロモル）のトリ−ｎ−ブチルスズヒドリドを、次いで、１５４μＬのトリフルオロ酢酸（ジクロロメタン中で１Ｍ）を０℃で加えた。１時間後、１ｇの固体の炭酸ナトリウムを加え、この溶液を濾過し、蒸発させた。残留物をシリカゲル（ジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサン　１：１：１０）上でクロマトグラフィーにかけて、無色気泡体として１８１ｍｇ（７６％）の生成物を得た：
【表１２】
2004508362.tif 000020
実施例１３：５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−４α，８−（５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン）の調製
１ｍＬのアセトニトリル中の１３０ｍｇ（８５マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキン−４α，８−［５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（第３ブチルジメチルシリル）エピカテキン］の溶液に、５０μＬの４８％フッ化水素酸水溶液を０℃で加えた。この混合物を８時間に亘り室温で撹拌し、次いで、１０ｍＬの酢酸エチルを加え、この溶液を各々１０ｍＬの、重炭酸ナトリウム水溶液、水、および塩水により洗浄した。硫酸マグネシウム上での乾燥および蒸発後、残留物をシリカゲル上で１：１：５の比率のジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサンによりクロマトグラフィーにかけて、気泡体として８９ｍｇ（８１％）の生成物を得た：
【表１３】
2004508362.tif 000021
実施例１４：５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−４α，８−［５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（３，４，５−トリ−Ｏ−ベンジルガロイル）エピカテキン］の調製
１ｍＬの無水ジクロロメタン中の６８ｍｇ（１５４マイクロモル）のトリ−Ｏ−ベンジル没食子酸および１μＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの懸濁液に、１５μＬ（０．１７ミリモル）の塩化オキサリルを加えた。水分を除いて、２時間に亘り室温で撹拌した後、得られた溶液を蒸発させ、残留物を真空中で乾燥させた。０．５ｍＬの無水ピリジン中の４０ｍｇ（３１マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−４α，８−（５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン）の溶液を前記粗製酸塩化物に加え、２４ｍｇ（０．２０ミリモル）の４−（ジメチルアミノ）ピリジンを加え、混合物を４８時間に亘り閉じたフラスコ中において室温で撹拌した。２０μＬの水を添加した後、室温での撹拌を２時間に亘り継続した。１０ｍＬの５％ＨＣｌを加え、その生成物を５ｍＬのジクロロメタン中に３回抽出した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濃縮し、粗製材料を１：４の比率の酢酸エチル／ヘキサンによりシリカゲル上でカラムクロマトグラフィーにより精製した。蒸発および真空中での乾燥により、５０ｍｇ（９４％）の生成物を生成した：
【表１４】
2004508362.tif 000022
実施例１５：エピカテキン−４α，８−（３−Ｏ−ガロイルエピカテキン）の調製
４ｍＬの酢酸エチル／メタノール（１：１）中の２２ｍｇ（１３マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−４α，８−［５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジル−３−Ｏ−（３，４，５−トリ−Ｏ−ベンジルガロイル）エピカテキン］の溶液を、４．５時間に亘り、炭素上の２０％の水酸化パラジウム３３ｍｇの上において室温および３．５バールで水素化した。綿による濾過および蒸発後、残留物を２ｍＬの水（ＨＰＬＣ等級）から凍結乾燥させて、無色の非晶質固体として６．３ｍｇ（６７％）のエピカテキン−４α，８−（３−Ｏ−ガロイルエピカテキン）を得た：
【表１５】
2004508362.tif 000023
実施例１６：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモエピカテキンの調製
２ｍＬの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２９ｍｇ（０．７３ミリモル）の水素化ナトリウム（油中６０％）の懸濁液に、３ｍＬの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の４５０ｍｇ（６１７マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン（Ｔｕｅｃｋｍａｎｔｅｌ等，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１，１２０７３−１２０８１）を室温で加えた。３０分に亘る撹拌後、９０μＬ（０．７３ミリモル）の臭化ベンジルおよび２０ｍｇ（５４マイクロモル）のヨウ化テトラブチルアンモニウムを加えた。この混合物を一晩撹拌し、氷水中に注ぎ、５０ｍＬの酢酸エチルにより３回抽出した。混合有機相を５０ｍＬの水および５０ｍＬの塩水により３回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発させた。カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン　１：２）により、４８０ｍｇ（９５％）の生成物を得た：
【表１６】
2004508362.tif 000024
実施例１７：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモカテキンの調製
０．２３ｇ（５．８ミリモル）の水素化ナトリウム（鉱油中で６０％の懸濁液）に、８ｍＬの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２．８２ｇ（３．８７ミリモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルカテキン（Ｔｕｅｃｋｍａｎｔｅｌ等，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１，１２０７３−１２０８１）を撹拌しながら窒素雰囲気下において室温で加えた。１０分後、水冷しながら、０．７４ｍＬ（６．２ミリモル）の純粋な臭化ベンジルを１０分以内で加えた。この混合物を７０分間に亘り室温で撹拌し、次いで、１ｍＬの水により注意深く加水分解した。８０ｍＬの水を加え、生成物を４０＋２０ｍＬのトルエン中に抽出し、混合有機相を８０ｍＬの水で洗浄し、蒸発させた。残留物をシリカゲルでクロマトグラフィーにかけ、先駆物を１：２：１７の比率の酢酸エチル／クロロホルム／ヘキサンにより除去し、生成物を、１：９：１０の比率の酢酸エチル／クロロホルム／ヘキサンにより溶離した。蒸発および真空中での乾燥（室温で、次いで、８０℃で）により、無色ガラスとして３．１３ｇ（９９％）の生成物を得た：
【表１７】
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実施例１８：３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキン−４，８−（ペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキン）の調製
１ｍｌの乾燥テトラヒドロフラン中の２００ｍｇ（２４４マイクロモル）の３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−８−ブロモカテキンの溶液に、０．３０ｍＬ（０．５１ミリモル）の第３ブチルリチウム（ペンタン中で１．７Ｍ）を窒素下において−７８℃で加えた。９０分間に亘り−７８℃で撹拌した後、１ｍｌの乾燥テトラヒドロフラン中の１２０ｍｇ（１５９マイクロモル）の（２Ｒ，３Ｓ）−３，５，７，３’，４’−ペンタキス（ベンジルオキシ）フラバン−４−ワンの溶液を加えた。−７８℃でのもう３時間後、２ｍＬの塩化アンモニウム水溶液を加え、この混合物を室温まで暖まらせ、２０ｍＬのジクロロメタンにより３回抽出した。混合有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発させ、残留物をシリカゲル（ジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサン　１：１：８）上でクロマトグラフィーにかけて、無色気泡体として１６５ｍｇ（６９％）の生成物を得た：
【表１８】
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実施例１９：ペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−４α，８−（ペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキン）の調製
１ｍＬの乾燥ジクロロメタン中の７０ｍｇ（４６．８マイクロモル）の３，５，７，３’，４’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−４−ヒドロキシエピカテキン−４，８−（ペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキン）の溶液に、２０μＬ（７４マイクロモル）のトリ−ｎ−ブチルスズヒドリドを、次いで、７１μＬのトリフルオロ酢酸（ジクロロメタン中で１Ｍ）を０℃で加えた。１時間後、１ｇの固体の炭酸ナトリウムを加え、この溶液を濾過し、蒸発させた。残留物をシリカゲル（ジクロロメタン／酢酸エチル／ヘキサン　１：１：８）上でクロマトグラフィーにかけて、無色気泡体として５５ｍｇ（７９％）の生成物を得た：
【表１９】
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実施例２０：エピカテキン−４α，８−エピカテキンの調製
５ｍＬのメタノール／テトラヒドロフラン／水（２０：２０：１）中の４０ｍｇ（３１マイクロモル）の５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−４α，８−（５，７，３’，４’−テトラ−Ｏ−ベンジルエピカテキン）の溶液を、５時間に亘り、室温および５バールで炭素上の２０％の水酸化パラジウム６０ｍｇの上で水素化した。この触媒をセライト上で濾過により除去し、固体を１０ｍＬのメタノールにより洗浄し、溶液を蒸発させた。残留物をＨＰＬＣ等級の水中に溶解させ、この溶液を５ｍＬのトルエンで洗浄して、非極性不純物を除去した。この溶液を再度蒸発させ、次いで、５ｍＬのＨＰＬＣ等級の水から凍結乾燥させて、無色の非晶質固体として１３ｍｇ（７３％）のエピカテキン−４α，８−エピカテキンを得た：
【表２０】
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実施例２１：ペンタ−Ｏ−アセチルエピカテキン−４α，８−（ペンタ−Ｏ−アセチルエピカテキン）の調製
２ｍＬのメタノールおよび１ｍＬの酢酸エチル中の７５ｍｇ（５１マイクロモル）のペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキン−４α，８−（ペンタ−Ｏ−ベンジルエピカテキン）の溶液に、炭素上の２０％の水酸化パラジウム１０ｍｇを加えた。この混合物を１０時間に亘り１バールの水素下で撹拌し、濾過し、蒸発させた。この脱保護された粗製ダイマーを１：２の比率の無水酢酸／ピリジン３ｍＬ中に溶解させ、この混合物を一晩撹拌した。蒸発後、３０ｍＬの酢酸エチルを加えた。この溶液を２０ｍＬの水および２０ｍＬの塩水により５回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、蒸発させた。残留物をシリカゲル（酢酸エチル／ヘキサン　２：１）上でクロマトグラフィーにかけて、１２ｍｇ（２４％）のパーアセテートを得た：
【表２１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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