(57)【要約】【解決手段】Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅから抽出した一般式［Ａ］の新規トララクトンのクラスであって、式中、Ｒ３は、ＨまたはＣ２〜Ｃ４アシルであり、Ｒ１、Ｒ２は、同じであるかまたは異なり、それぞれ、Ｈ、グリコシルまたはＣ２〜Ｃ４アシルであるもの、及びその誘導体。これらの化合物は、血清総コレステロールのレベルを低下させ、胆汁酸のレベルを上昇させることができ、これらの化合物が、血中脂質を低下させ、かつ体重を減少させる薬効を有することを明らかにしている。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式［Ａ］：
【化１】
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（式中、Ｒ３は、ＨまたはＣ２〜Ｃ４アシルであり、Ｒ１、Ｒ２は、同じであるかまたは異なり、それぞれ、Ｈ、グリコシルまたはＣ２〜Ｃ４アシルである。）の化合物。
【請求項２】
Ｒ３がＨであり、Ｒ１がＨであり、及びＲ２がＨである請求項１の化合物。
【請求項３】
Ｒ３がＨであり、Ｒ１がグルコシルであり、及びＲ２がＨである請求項１の化合物。
【請求項４】
Ｒ３がＨであり、Ｒ１がＨであり、及びＲ２がグルコシルである請求項１の化合物。
【請求項５】
Ｒ３がＨであり、Ｒ１がガラクトシルであり、及びＲ２がＨである請求項１の化合物。
【請求項６】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３がアセチルである請求項１の化合物。
【請求項７】
血中脂質低下及び体重減少のための医薬の製造における請求項１ないし６のいずれか１項の化合物の使用。
【請求項８】
請求項１の化合物及び薬学的に許容し得るキャリヤを含有する薬学的組成物。
【請求項９】
前記化合物がネオトララクトン−６−Ｏ−β−Ｄ−グルコシドである請求項８の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅから抽出された新規な化合物のクラス、並びに血中脂質低下及び体重減少におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
【従来の技術】
Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅは、豆科植物であるＣａｓｓｉａ　ｏｂｒｕｓｉｆｏｌｉａ　Ｌ．の乾燥した成熟種子であり、病原性気配（ｗｉｎｄ）及び熱を払い、肝臓から熱を除去し、及び視力を向上させ、腸管を緩和し便秘を軽減する効果を有する。Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅは、臨床業務において、血清コレステロールのレベルを低下させるために使用される。Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅは、多様なアントラキノン及びベンゾピロン成分を含有している。これらの成分のうち、いくつかのアントラキノングリコシド及びベンゾピロングリコシドが、テトラクロロメタン及びガラクトサミンによるマウスの一次肝臓細胞培養（ｐｒｉｍａｒｙ ｈｅｐａｔｉｃ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅ）への損傷を防止する薬効を有することが報告されている（Ｑｉｗｅｉ、Ｚｈａｎｇら、中国の伝統的及び薬草の医薬（Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、１９９６、２７（２）：７９；　Ｗｏｎｇ，ＳＭら、Ｐｌａｎｔａ　Ｍｅｄ．１９８９、５５（３）：２７６及び２８（１）：２１１）。
【０００３】
Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ及び他の伝統的中国医薬から調製された、血中脂質を低下させ及び体重を減少させるための多くの医薬が、多くの特許出願において提案されている。しかしながら、それらの組成は複雑なので、重要な役割を果たす活性成分の同定が困難である。
【０００４】
タカハシらは、薬学雑誌　９３（３）　２６１−２６７（１９７３）において、Ｃａｓｓｉａ　ｔｏｒａ　Ｌ．の種子の成分についての研究結果を報告し、そこには、以下の一般式の化合物が開示された：
【化２】
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【０００５】
ここで、化合物Ｉは、トララクトン（ｔｏｒａｌａｃｔｏｎｅ）と命名されたものであり、黄色染料である。しかしながら、この化合物の薬学的効果は、この雑誌には報告されていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、新規なトララクトン化合物のクラスであって、血中脂質を低下させ及び体重を減少させる薬効を有するものを提供することである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明は、一般式［Ａ］の新規なトララクトンのクラス及びその誘導体であって、Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅから抽出されたものであるか、またはこの抽出された化合物の構造を修飾することにより得られたものを提供する。
【０００８】
【化３】
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【０００９】
ここで、Ｒ３は、ＨまたはＣ２〜Ｃ４アシルであり、Ｒ１、Ｒ２は、同じであるかまたは異なり、それぞれ、Ｈ、グリコシルまたはＣ２〜Ｃ４アシルである。
【００１０】
本発明は、また、血中脂質低下及び体重減少における上記化合物の使用、並びにそのような化合物を含有する薬学的組成物も提供する。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明者は、血中脂質低下におけるＳｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅからの抽出物の使用に関して長期間に亘り研究を行った。Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅの抽出は、次の工程が含まれる：
１．Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ（中国、Ａｎｈｕｉ県で産出したもの）を粉砕し、水、メタノール、エタノール、アセトン等のような親水性溶媒により抽出し、還流加熱し、次いで、減圧下に溶媒を除去し、抽出物（Ａ）を得；
２．抽出物（Ａ）を多孔質樹脂に載せ、水で洗浄し、メタノール、エタノール、アセトン等のような親水性溶媒で溶出し、次いで、溶出液を回収し、減圧下に溶媒を除去し、抽出物（Ｂ）を得：
３．抽出物（Ｂ）をシリカゲル（Ｓｈｉｌｉｃａ　Ｇｅｌ）　Ｈ、シリカゲル　Ｇまたは水酸化アルミニウムを使用してカラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルム、酢酸エチル、エタノールまたはメタノールを用いて溶出し、次いで、ＴＬＣによる検出で同じ成分を含有する画分を合わせ、溶媒を除去し、メタノールにより再結晶させ、化合物（１）、化合物（２）、化合物（３）、化合物（４）及び化合物（５）を得る：
【化４】
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【００１２】
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ここで、化合物（５）は、既知のトララクトン、すなわち、上述の化合物Ｉである。化合物（１）〜（４）は、新規な化合物であり、以下のように命名する：
（１）ネオトララクトン、またはノルトララクトン
（２）ネオトララクトン−６−Ｏ−β−Ｄ−グルコシド
（３）ネオトララクトン−８−Ｏ−β−Ｄ−グルコシド
（４）ネオトララクトン−６−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトシド
【００１３】
更なる合成研究により、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、アセチル化し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が独立してＣ１〜Ｃ４アセチルである化合物、例えば、化合物（６）が得られることが明らかになった。
【００１４】
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【００１５】
計器分析により、抽出化合物（１）〜（５）は、上述の構造を有することが確認された。
【００１６】
これらの化合物についての動物実験により、化合物（１）〜（４）は、高脂血症モルモットの血清コレストロールをモジュレートする効果を有し、かつ肥満の予防に寄与することが示された。
【００１７】
【実施例】
本発明を以下の例及び試験例によりさらに説明するが、本発明を限定することを意図するものではない。
【００１８】
例１
化合物（１）〜（５）の抽出及び構造決定
化合物（１）〜（５）を以下の工程で抽出した。
１．Ｓｅｍｅｎ　Ｃａｓｓｉａｅ（Ｃａｓｓｉａ　ｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａ及びＣａｓｓｉａ　ｔｏｒａの種子（中国、Ａｎｈｕｉ県において産出））を粗粉末に粉砕し、還流加熱しながらエタノール１０Ｌで抽出し、次いで、減圧下に溶媒を除去し、２１０ｇの抽出物（Ａ）を得；
２．抽出物（Ａ）２１０ｇを、ポーラスレジン（Ｐｏｒｏｕｓ　Ｒｅｓｉｎ）　Ｄ１０１、Ｄ２０１、Ｄ０６１（Ｔｉａｎｊｉｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ　Ｆａｃｔｏｒｙ製）を１：１：１の比に混合することにより得られる多孔質樹脂１０００ｇに載せ、次いで、１０Ｌの水及び５Ｌのエタノールで順次洗浄し、溶出液を回収し、溶媒を除去し、抽出物（Ｂ）１０ｇを得；
３．１０ｇの抽出物（Ｂ）を、シリカゲル　Ｈ１０００ｇを用いるカラムクロマトグラフィーにかけ、クロロホルムで溶出し、ＴＬＣにより同一の成分であると検出された部分を合わせ、次いで、溶媒を除去し、メタノールを用いて再結晶させ、化合物（１）（０．０２ｇ）、化合物（２）（２．４２ｇ）、化合物（３）（１．０５ｇ）、化合物（４）（０．５ｇ）及び化合物（５）（０．３２ｇ）を得る。
【００１９】
化合物（１）は、黄色針状結晶の形態にあり、ｍ．ｐ．１８７〜１８９℃（メタノール）であった。高分解能マススペクトルにより測定した分子量は、２５８．０５２８４９であり、分子式は、Ｃ１４Ｈ１０Ｏ５であり、ＥＩ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：２５８、２２９、１６２、１１５、６９であった。１３Ｃ−ＮＭＲ及び１Ｈ−ＮＭＲのデータを表１及び２に示す。化合物（１）は、ネオトララクトン（すなわち、ノルトララクトン）であることが確認された。
【００２０】
化合物（２）は、黄色針状結晶の形態にあり、ｍ．ｐ．２５２〜２５４℃（メタノール）であった。ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４２１（Ｍ＋１）、２５９（アグルコン＋１）、２３５。１３Ｃ−ＮＭＲ及び１Ｈ−ＮＭＲのデータを表１及び２に示す。化合物（２）を希酸の存在下に加水分解すると、化合物（１）及びグルコースが得られた。１３Ｃ−ＮＭＲは、グリコシルは、６位の水酸基に結合していることを示唆した。化合物（２）は、ネオトララクトン−６−Ｏ−β−Ｄ−グルコシドであると確認された。
【００２１】
化合物（３）は、黄色針状結晶の形態にあり、ｍ．ｐ．２６３〜２６５℃（メタノール）であった。ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４２１（Ｍ＋１）、２５９（アグルコン＋１）、２３５。１３Ｃ−ＮＭＲ及び１Ｈ−ＮＭＲのデータを表１及び２に示す。化合物（３）を加水分解すると、化合物（１）及びグルコースが得られた。１３Ｃ−ＮＭＲは、グリコシルは、８位の水酸基に結合していることを示唆した。化合物（３）は、ネオトララクトン−８−Ｏ−β−Ｄ−グルコシドであると確認された。
【００２２】
化合物（４）は、黄色針状結晶の形態にあり、ｍ．ｐ．２５８〜２６０℃（メタノール）であった。ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４２１、２５９（アグルコン＋１）、２３５。１３Ｃ−ＮＭＲ及び１Ｈ−ＮＭＲのデータを表１及び２に示す。化合物（４）を加水分解すると、化合物（１）及びガラクトースが得られた。１３Ｃ−ＮＭＲは、グリコシルは、６位の水酸基に結合していることを示唆した。化合物（４）は、ネオトララクトン−６−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトシドであると確認された。
【００２３】
化合物（５）は、黄色針状結晶の形態にあり、ｍ．ｐ．２３４〜２３６℃（メタノール）であった。ＴＣＬによるＲｆ値は、トララクトンと同じであった。
【００２４】
表１　１３Ｃ−ＮＭＲ分析
【表１】
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【００２５】
表２　１Ｈ−ＮＭＲ分析
【表２】
2004508282.tif 000009
【００２６】
例２
化合物６の調製
化合物（１）１０ｍｇをピリジンに溶解し、これに２ｍＬの無水酢酸を添加した。２４時間放置した後、混合物を氷水に注いだ。ろ過後、アセチル化した化合物（１）、すなわち、化合物（６）を得た。
【００２７】
化合物（６）は、黄色針状結晶の形態にあり、ｍ．ｐ．１５６〜１５８℃（メタノール）であった。ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：３８５（Ｍ＋＋１）、３８４（Ｍ＋）、３４２（Ｍ＋−ＣＯＣＨ３）、２９９（Ｍ＋−２×ＣＯＣＨ３）、２５７（Ｍ＋−３×ＣＯＣＨ３）、１６２、１１５。化合物（６）は、６，８，１０−トリアセチルネオトララクトンであると確認された。
【００２８】
試験例１
高脂血症モルモットの血清コレステロールのレベルに対するネオトララクトン及びその誘導体の影響
この試験は、Ｆｕｈｕａ、Ｗａｎｇ、中国外科ジャーナル（Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｕｒｇｅｒｙ）、１９９１；８（１）：１７に記載されるように行った。２００〜５００ｇの６０頭の健康なモルモットを、体重及び性に基づいて無作為に６群に分けた。各々の群には、雄及び雌を含む１０頭の動物が含まれた。第１群のモルモットには、高コレステロール食（基本食＋０．５％コレステロール）を、１日当り体重１００ｇ当り２０ｇ給餌した。第２、３、４、５群は、試験群であり、これらのモルモットには、高コレステロール食プラス１０ｍｇ／（ｋｇ・ｄ）の化合物（１）、（２）、（３）または（４）を３０日間給餌した。第６群のモルモットは、基本食のみ給餌した。各々の群の給餌は、３０日間続け、最後の給餌の２４時間後に、モルモットを１ｇ／ｋｇのＵｒｅｔｈａｎｅ（ウレタン）により腹腔内麻酔した。心臓から血液を採取し、血清を分離した。血清総コレステロール（ＴＣ）及びトリグリセリド（ＴＧ）のレベルを測定した。結果を表３に示す。
【００２９】
表３　高脂血症モルモットにおける血清コレステロール及びトリグリセリドレベルへの活性化合物の影響
【表３】
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【００３０】
表３から、基本食に０．０５％のコレステロールが添加されると、血清総コレステロールのレベルが上昇する一方で、胆汁酸のレベルは下がることが分かる。活性化合物を１０ｍｇ／（ｋｇ・ｄ）×３０ｄの量で給餌すると、血清ＴＣ及びＴＧレベルを下げることができた。また、化合物（２）の効果が最も顕著であった。このことは、これらの化合物が、血中脂質を調節（ｍｏｄｕｌａｔｅ）し、また、脂質代謝のバランスを促進させる効果を有すること示している。これらの化合物は、高脂血症肥満の予防に寄与する。また、化合物（２）が好ましい。
【００３１】
上記手順において、コレステロールは、ＢＧＨ社（台湾）の酵素薬剤アッセイキットを用いて酵素分析により測定した。全ての操作は、製造者のインストラクションにしたがって行い、測定は、ＥＮＣＯＲＥＩＩ自動生化学分析器において行った。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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