(57)【要約】対象（好ましくはヒト）の脂質プロファイルを改善するために、ナイアシンおよびナイアシンプロドラッグを、適切な製剤または装置として局所投与する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
適切な医薬賦形剤中にナイアシンまたはナイアシンプロドラッグを含んでなる局所医薬製剤。
【請求項２】
１ 〜３０重量％のナイアシンまたはナイアシンプロドラッグを含む請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
１ 〜２０重量％のナイアシンまたはナイアシンプロドラッグを含む請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
１ 〜１０重量％のナイアシンまたはナイアシンプロドラッグを含む請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記ナイアシンプロドラッグがニコチニル化合物またはニコチン酸エステルである請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記ナイアシンプロドラッグがＣ１〜Ｃ２２ 炭素鎖を持つ請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記ナイアシンプロドラッグがＣ１０ 〜Ｃ１８ 炭素鎖を持つ請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記ナイアシンプロドラッグが０．５ 〜１２のｌｏｇＰ値を持つ請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記ナイアシンプロドラッグが５．０ 〜８．０ のｌｏｇＰ値を持つ請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ナイアシンプロドラッグが４．８ 〜９．７ のｌｏｇＰ値を持つ請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記製剤がニコチン酸ラウリルを含む請求項４に記載の組成物。
【請求項１２】
前記プロドラッグがラウリン酸ニコチニルである請求項４に記載の組成物。
【請求項１３】
ナイアシンまたはナイアシンプロドラッグと前記ナイアシンまたはナイアシンプロドラッグに対して透過性を持つ接着層とを含んでなる経皮送達装置。
【請求項１４】
哺乳動物の血清トリグリセリドを低下させる方法であって、請求項１に記載の製剤を患者に局所投与することを含む方法。
【請求項１５】
哺乳動物の血清ＬＤＬ を低下させる方法であって、請求項１に記載の製剤を患者に局所投与することを含む方法。
【請求項１６】
哺乳動物の血清ＨＤＬ レベルを上昇させる方法であって、請求項１に記載の製剤を患者に局所投与することを含む方法。
【請求項１７】
対象の総コレステロールプロファイルを改善する方法であって、前記対象に請求項１に記載の製剤を局所投与することを含み、総コレステロール：ＨＤＬ 比およびＬＤＬ ：ＨＤＬ 比の少なくとも一方が低下する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、ナイアシンおよびナイアシンエステルならびに本明細書に記載のアルコール脂肪酸エステル、その誘導体の経皮送達用局所製剤に関する。また本発明は、これらの薬剤による高脂血症および高コレステロール血症の経皮処置に関する。本システムの治療用途も説明する。本局所製剤は、例えば哺乳動物における高脂血症の処置などに有用である。
【０００２】
高脂血症および高コレステロール血症は他の状態、例えば心臓発作、アテローム性動脈硬化および他の有害な疾患のリスクの増加と相関関係にあることが確立されている。コレステロールレベルおよび脂質レベルを低下させるには、ゲムフィブリゾル（ｇｅｍｆｉｂｒｉｚｏｌ ）、プロブコール、さらに最近になって「スタチン類」、例えばロバスタチンなど、数多くの薬剤を利用することができる。
【０００３】
水溶性Ｂ 複合体ビタミンであるナイアシン（ニコチン酸）は高脂血症の処置に経口使用され、ＩＩ、ＩＩＩ 、ＩＶおよびＶ 型高リポタンパク血症患者における総血漿コレステロール（Ｃ ）、低密度リポタンパク質ＬＤＬ−Ｃ および超低密度リポタンパク質トリグリセリド（ＶＬＤＬ− トリグリセリド）（これらは全て健康リスクに関係する）を低下させ、同時に「健全な」リポタンパク質とみなされる高密度リポタンパク質（ＨＤＬ−Ｃ ）の血清レベルを上昇させるのに有効であることが示されている。
【０００４】
ナイアシンが脂質プロファイルを変化させる機序はまだ明確にはなっていないが、その作用機序には脂肪組織からの遊離脂肪酸放出の阻害（Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｌ．Ａ．、Ｆｒｏｂｅｒｇ，Ｓ．Ｏ．およびＮｙｅ，Ｅ．Ｒ．「ラットにおけるニコチン酸１１．血漿、肝、心および筋脂質に対するニコチン酸の急性効果」Ａｃｔａ Ｍｅｄ Ｓｃａｎｄ １８０：５７１−５７９，１９６６ 参照）およびリポタンパク質リパーゼ活性の増加（Ｐｒｉｅｇｏ，Ｊ．Ｇ． 、Ｐｉｎａ，Ｍ． 、Ａｒｍｉｊｏ，Ｍ． 、Ｓｕｎｋｅｌ，Ｃ． およびＭａｒｏｔｏ，Ｍ．Ｌ． 「正常脂血性ラットにおける脂質代謝に対するエトフィブラート（ｅｔｏｆｉｂｒａｔｅ）、クロフィブラートおよびニコチン酸の作用．短期効果および作用方法」Ａｒｃｈ Ｆａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ ５：２９−４２，１９７９参照）が含まれることが示されている。１４００万人を越えるアメリカ人が基準値より高い血中ＬＤＬ−Ｃ レベルを示す。ＨＭＧ−ＣｏＡ レダクターゼ阻害剤（スタチン類）はＬＤＬ−Ｃ レベルが高い患者の処置に最も広く使用されている種類の薬物である。しかしナイアシンは、ＬＤＬ−Ｃ の低下に加えて心血管疾患の一次予防としてのＨＤＬ 改善に、米国心臓病協会（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｈｅａｒｔ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）が唯一推奨している薬物である。ナイアシン療法は単剤療法として対費用効果が極めて高いだけでなく、ナイアシンによって他の種類の脂質低下薬の効果が補完されるので、併用療法としても有益である。経口ナイアシン療法は副作用の発生率が高いので、単独高コレステロール血症の場合、ナイアシンは第二または第三選択薬である。しかし、重症複合型高脂血症患者の場合のように、ＬＤＬ−Ｃ およびトリグリセリドをどちらも低下させることが望ましい場合、ナイアシンは単剤療法として治療上有利である。ナイアシンは脂質低下活性を最大にするために「スタチン類」などの他のコレステロール低下剤と併用することもできる。ある研究では、ナイアシン／ ロバスタチン併用が、ＬＤＬ−Ｃ 、トリグリセリドおよびリポタンパク質 ａ［Ｌｐ（ａ） ］の低下に極めて有効であり、しかも、ＨＤＬ−Ｃ を上昇させるというナイアシンの効力は失われないことが示されている（Ｋａｓｈｙａｐ，Ｍ．Ｌ．、Ｅｖａｎｓ Ｒ．、Ｓｉｍｍｏｎｓ，Ｐ．Ｄ．、Ｋｏｈｌｅｒ，Ｒ．Ｍ． およびＭｃＧｏｖｅｎ，Ｍ．Ｅ．「新しいナイアシン／ スタチン複合製剤は主要リポタンパク質に対して顕著な効果を示し忍容性が高い」Ｊ Ａｍ Ｃｏｌｌ Ｃａｒｄ Ｓｕｐｐｌ．Ａ ３５：３２６，２０００）。
【０００５】
ナイアシンは、対費用効果の高い治療法であるとみなされているので、血清コレステロールレベルの低下に広く使用されてきた。ヒトでは、１ 日あたり２ 〜３ｇの経口用量で、総コレステロールレベルおよびＬＤＬ−Ｃ レベルを平均２０％〜３０％低下させ、トリグリセリドレベルを３５％〜５５％低下させ、ＨＤＬ−Ｃ を２０％〜３５％増加させ、Ｌｐ（ａ） を低下させる。ナイアシンは総死亡率および冠動脈疾患による死亡率も低下させ（Ｔｈｅ Ｃｏｒｏｎａｒｙ Ｄｒｕｇ Ｐｒｏｊｅｃｔ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｇｒｏｕｐ，ＪＡＭＡ ２３１：３６０−３８１，１９７５ならびにＣａｎｎｅｒ，Ｐ．Ｌ． 、Ｂｅｒｇｅ，Ｋ．Ｇ．、Ｗｅｎｇｅｒ，Ｎ．Ｋ． 、Ｓｔａｍｌｅｒ，Ｊ．、Ｆｒｉｅｄｍａｎ，Ｌ． 、Ｐｒｉｎｅａｓ，Ｒ．Ｊ．およびＦｒｉｅｄｅｗａｌｄ，Ｗ． 「コロナリードラッグプロジェクト患者の１５年死亡率：ナイアシンによる長期利益」Ｊ Ａｍ Ｃｏｌｌ Ｃａｒｄｉｏｌ ８：１２４５−１２５５，１９８６参照）、アテローム性動脈硬化の進行を遅らせるか逆転させるのに役立つ（Ｂｌａｎｋｅｎｈｏｒｎ，Ｄ．Ｈ．、Ｎｅｓｓｉｍ，Ｓ．Ａ． 、Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｒ．Ｌ．、Ｓａｍｎａｒｃｏ，Ｍ．Ｅ． 、Ａｚｅｎ，Ｓ．Ｐ． およびＣａｓｈｉｎ−Ｈｅｍｐｈｉｌｌ，Ｌ．「冠動脈アテローム硬化および冠静脈バイパス移植に対するコレスチポール− ナイアシン併用療法の薬効」ＪＡＭＡ ２５７：３２３３−３２４０，１９８７ ならびにＣａｓｈｉｎ−Ｈｅｍｐｈｉｌｌ Ｌ．、Ｍａｃｋ，Ｗ．Ｊ． 、Ｐｏｇｏｄａ，Ｊ．Ｍ． 、Ｓａｍｎａｒｃｏ，Ｍ．Ｅ． 、Ａｚｅｎ，Ｓ．Ｐ． およびＢｌａｎｋｅｎｈｏｒｎ，Ｄ．Ｈ．「冠動脈アテローム硬化に対するコレスチポール− ナイアシンの薬効．４ 年追跡調査」ＪＡＭＡ ２６４：３０１３−３０１７，１９９０ 参照）。
【０００６】
経口ナイアシン療法には副作用があり、それがその有用性を制限している。ナイアシンはビタミンであるが、コレステロールを低下させるには治療量で使用しなければならない。これらの用量では即放性ナイアシンでも徐放性ナイアシンでも重篤な副作用が起こりうる。最もよくあるナイアシンの副作用は潮紅、すなわち一般に発赤を伴い、そう痒を伴うこともある皮膚の熱感である。潮紅は危険ではないがほとんどの患者は強い不快感をおぼえるので、患者の服薬率が著しく制限される。ナイアシンが誘発する紅潮はシクロオキシゲナーゼ阻害剤を使った前処置によってかなり軽減することができるので、血管拡張はプロスタグランジンが媒介する機構によって起こっていることが示唆される（Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｌ．Ａ．「ニコチン酸および脂肪動員リポリシスの阻害．脂質代謝に対する効果の現状」Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ １０９：２２５−２３８，１９７８ 参照）。
【０００７】
血清トランスアミナーゼレベルの上昇がナイアシン処置と関連づけられており、また徐放性ナイアシン製剤はさらに重篤な肝臓障害と関連づけられているので、ナイアシンを服薬している患者では、常に肝機能検査の監視が行われる（ＭｃＫｅｎｎｅｙ，Ｊ．Ｍ． 、Ｐｒｏｃｔｏｒ，Ｊ．Ｄ．、Ｈａｒｒｉｓ，Ｓ． およびＣｈｉｎｃｈｉｌｉ，Ｖ．Ｍ．「高コレステロール血症患者における徐放性および即放性ナイアシンの効力および毒作用の比較」ＪＡＭＡ ２７１：６７２−７７７，１９９４ ならびにＳｔａｆｆｏｒｄ，Ｒ．Ｓ． 、Ｂｌｕｍｅｎｔｈａｌ，Ｄ． およびＰａｓｔｅｒｎａｋ，Ｒ．Ｃ．「米国医師のコレステロール管理実務のばらつき」Ｊ Ａｍ Ｃｏｌｌ Ｃａｒｄｉｏｌ ２９：１３９−１４６，１９９７ 参照）。他に考えられる経口ナイアシン療法の副作用には、消化性潰瘍、痛風および糖尿病の管理状態の悪化などがある。副作用の可能性を考えると、経口ナイアシン療法には注意深い臨床監視が必要である。
【０００８】
経口摂取されたナイアシンの薬物動態プロファイルは、経口摂取されたナイアシンが迅速かつ大規模な初回通過代謝を受けてナイアシン用量との関係が非線形になるため複雑であり、したがって脂質パラメーターと血漿ナイアシンレベルとの間に相関関係はない。例えば用量１，０００ｍｇ のＮｉａｓｐａｎ （登録商標）は脂質プロファイルの改善をもたらすが、血漿ナイアシンの増加はほとんど検出されないことを示すデータがある（「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ 」第５３版（１９９９）の１５０５〜１５０６頁参照）。Ｎｉａｓｐａｎ （登録商標）は高コレステロール血症および高トリグリセリド血症の処置用としてＦＤＡ によって承認された持続放出ナイアシン製剤である（Ｃａｐｕｚｚｉ，Ｄ．Ｍ．、Ｇｕｙｔｏｎ，Ｊ．Ｒ． 、Ｍｏｒｇａｎ，Ｊ．Ｍ． 、Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ａ．Ｃ． 、Ｋｒｉｅｓｂｅｒｇ，Ｒ．Ａ．、Ｂｒｕｓｃｏ，Ｏ．Ａ． およびＢｒｏｄｙ，Ｊ．「持続放出ナイアシン（Ｎｉａｓｐａｎ ）の効力および安全性：長期調査」Ａｍ Ｊ Ｃａｒｄｉｏｌ ８２：７４ｕ−８Ｉｕ，１９９８ならびにＭｏｒｇａｎ，Ｊ．Ｍ． 、Ｃａｐｕｚｚｉ，Ｄ．Ｍ．およびＧｕｙｔｏｎ，Ｊ．Ｒ． 「新しい持続放出ナイアシン（Ｎｉａｓｐａｎ ）：高コレステロール血症患者における効力、忍容性および安全性」Ａｍ Ｊ Ｃａｒｄｉｏｌ ８２：２９ｕ−３４ｕ，１９９８）。したがって、ナイアシンの経口投与後にニコチン酸血漿レベルの劇的な増加が起こらなくても、血清脂質プロファイルをかなり改善させることができる（Ｋｎｏｐｐ，Ｒ．Ｈ．、Ａｌａｇｏｎａ，Ｐ．、Ｄａｖｉｄｓｏｎ，Ｍ． 、Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ａ．Ｃ． 、Ｋａｆｏｎｅｋ，Ｓ．Ｄ．、Ｋａｓｈｙａｐ，Ｍ．、Ｓｐｒｅｃｈｅｒ，Ｄ． 、Ｓｕｐｅｒｋｏ，Ｈ．Ｒ．、Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｓ．、Ｍａｒｃｏｖｉｎａ，Ｓ．「高脂血症の管理における毎夜１ 回服用される持続放出型ナイアシン（Ｎｉａｓｐａｎ ）とそのままのナイアシンとの等価な効力」Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ４７：１０９７−１０４，１９９８ 参照）。これは、血中ナイアシンレベルの持続的上昇は治療効果の達成には必要でないことを証明している。事実、ナイアシンによる組織飽和は治療上の利益を得る上で重要な要因であるらしいという主張を裏付けるデータがある。制御放出経口製剤による長期間にわたる低レベル曝露は、即放性製剤によって得られる高レベル短時間曝露よりも好ましい。なぜなら、これにより不便な用法が回避され、不快な副作用が軽減されるからである。しかし、ナイアシンの制御放出経口製剤は、まだかなりの潮紅および肝機能不全を示す。経口ナイアシンの薬物動態学的運命を考えると、理想的なナイアシン投与法はまだ実現されていない。
【０００９】
経皮薬物送達は、薬剤の投入量が制御され肝初回通過効果が回避されることから、魅力的な経路である。しかしナイアシンなどの親水性化合物が皮膚を横切って容易に浸透するとは思われない。本発明者らは、脂肪アルコールで化学修飾することにより、ナイアシンは制御された形で皮膚を透過して全身送達され、動物モデルにおける血中脂質プロファイルに影響を及ぼすようになることを、この研究で証明する。ナイアシンのプロドラッグエステルの化学的加水分解および酵素的加水分解はどちらも、ヒトおよびラット血漿、ならびにＷｅｒｎｌｙ−Ｃｈｕｎｇ，Ｇ．Ｎ． 、Ｍａｙｅｒ，Ｊ．Ｍ．、Ｔｓａｎｔｉｌｉ−Ｋｏｕｌｉｄｏｕ，Ａ．およびＴｅｓｔａ，Ｂ．「ニコチン酸のプロドラッグエステルの化学的加水分解における構造− 反応性相関」Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍａ ６３：１２９−１３４，１９９０に記載されているブタ肝臓カルボキシルエステラーゼ調製品を使って、詳細に評価されている。これらの研究は、化学的に安定なナイアシンエステルがエステラーゼの優れた基質であることを示している。ある研究は、ナイアシンエステルの結合が主に親油性（至適ｌｏｇＰｏｃｔ／ｗ＝２．３ ）と立体因子とに依存することを示している。ニコチン酸ヘキシルまでのナイアシンエステルは市販されている。
【００１０】
経皮送達システムは、抗狭心症薬（ニトログリセリン）、ホルモン（エストロゲン）および抗高血圧薬（クロンシジン（ｃｌｏｎｃｉｄｉｎｅ））を含む様々なタイプの医薬の投与に便利で有効な選択肢である。経皮送達は薬剤が血流に直接送達され、肝臓での初回通過代謝が回避されるので、薬物送達が連続的かつ持続的になる点で有益である。経皮送達では医薬が持続的かつ安定して送達され、経口剤形にしばしば付随し通常は望ましくない血中レベルの山や谷が回避される。したがって経皮送達を用いることにより、経口投与より少ない用量の投与で同じ治療効果を得ることができ、用量依存的な副作用を軽減または排除することができる。
【００１１】
適切な医薬製剤を製造することは困難な作業であり、適切な局所剤形を得るには多くの障害を克服しなければならない。活性剤を所望の部位に適用して血流に吸収させるには、異物の透過を防止するように設計された保護層を持つ皮膚を、十分に透過しなければならない。皮膚は複数の層からなる複雑な器官系である。皮膚の最上層、すなわち「角質層」は、主に表皮ケラチノサイトの最終分化によって生じた非生物からなり、皮膚の下層成分にとって保護障壁になっている。表皮ではケラチノサイトが主要な細胞タイプであるものの、表皮には多数の細胞タイプが含まれている。皮膚線維芽細胞はコラーゲン、エラスチン、プロテオグリカンその他の細胞外マトリックス分子からなるマトリックスに埋め込まれている。真皮には毛細血管が認められるが、表皮は無血管である。
【００１２】
さらに、薬物自体が投与に適してなければならない。薬物分子の大きさ、電荷および極性は、皮膚を透過して所望の部位に到達する薬剤の能力または血管に到達して全身分布する薬剤の能力に寄与する因子である。
【００１３】
経皮送達の利点は、例えば高脂血症の処置またはビタミン療法などには、ナイアシンの経皮送達システムが望ましいことを示している。
【００１４】
本発明の目的は、患者、例えばヒトなどの哺乳動物にナイアシンを全身送達するための経皮送達製剤および経皮送達システムであって、ナイアシンがナイアシンのプロドラッグとして、例えばニコチン酸エステルおよび対応するアルコールの脂肪酸エステルなどとして与えられるものを提供することである。本明細書ではこれらのプロドラッグを「プロナイアシン（ｐｒｏ−ｎｉａｃｉｎ）」という。
【００１５】
プロナイアシンエステルを使ってナイアシンを経皮送達することにより、高脂血症および高コレステロール血症を処置することも、本発明の目的である。
【００１６】
本発明のこれらの目的および他の目的は、以下に説明する本発明によって達成される。
【００１７】
（好ましい態様の詳細な説明）
経皮送達は、有毒な初回通過肝作用を回避する魅力的な代替的ナイアシン投与経路である。本発明の局所送達システムでは、図７ に示すようなナイアシンのエステル化または脂肪酸の付加によるニコチニル化合物の形成（これらを本発明のプロナイアシンと総称する）によって少なくとも部分的に制御される、角質層を通したナイアシンの分配を考慮する。プロナイアシンの代謝変換速度および代謝変換部位は、皮膚の透過および皮膚下層の血管への全身吸収に寄与する。ナイアシンなどの多くの親水性薬物の経皮送達でまず考慮すべきことは、無傷の角質層の高い拡散抵抗である。この問題はナイアシンの分子修飾、より一般的にはプロドラッグの形態をした薬物によって回避される。
【００１８】
ナイアシンプロドラッグ、例えばニコチン酸エステルは、経皮送達に著しく望ましい製剤特性を持つプロドラッグになるので、ニコチン酸より好ましい。また、皮膚に存在するエステラーゼによるナイアシンへの変換は、活性成分の持続放出をもたらす。Ｃ１−Ｃ２２ニコチン酸エステルでも適切な製剤を製造することはできるが、ナイアシンのＣ１０−Ｃ１８ エステルは特に好ましい。ナイアシンエステルおよびニコチニル化合物は、炭素の総数が本明細書に記載する基準を満たす限り、直鎖状でも分枝鎖状でもよく、置換されていても無置換でもよい。
【００１９】
本組成物は１ 〜３０重量％、好ましくは１ 〜２０重量％、最も好ましくは１ 〜１０重量％のナイアシンンプロドラッグを含むことが好ましい。
【００２０】
ナイアシンンまたはナイアシンンプロドラッグは、水／ オクタノール分配を使って測定した場合に、好ましくは０．５ 〜約１２、４．５ 〜１０、最も好ましくは４．８ 〜９．７ のｌｏｇＰを持つ。
【００２１】
経皮送達の効力を評価するために、ヘアレスマウスモデルおよびアポＢ／ＣＥＴＰ二重トランスジェニックマウスモデルを使用した。アポＢ／ＣＥＴＰ二重トランスジェニックマウスは正常脂血性のヒトに最も近いリポタンパク質コレステロール分布を示すことが知られているので、アポＢ／ＣＥＴＰモデルはヒト脂質代謝の適切なモデルになる。特定のヒト遺伝子を発現させるトランスジェニックマウスは脂質代謝の研究および脂質低下薬の試験に広く使用され、ヒトでの応答のより良い予測を可能にしている。ヒトアポＢ１００およびヒトＣＥＴＰを両方とも発現させるトランスジェニックマウスは、ヒト様の血清ＨＤＬ−Ｃ／ＬＤＬ−Ｃ 分布を示し、市販されている。アポＢ１００はＶＬＤＬおよびＬＤＬ のタンパク質成分であり、ＬＤＬ レセプターへの結合を担うリガンドである。一方、ＣＥＴＰは様々な種類のリポタンパク質間での脂質の分布を媒介する。この二重トランスジェニックマウスのリポタンパク質コレステロールプロファイルは、コレステロールのほとんどがＨＤＬ フラクションに見いだされる非トランスジェニックマウス、ヒトアポＢ 単一トランスジェニックマウスおよびＣＥＴＰ単一トランスジェニックマウスのものとはかなり異なる。アポＢ１００／ＣＥＴＰ 二重トランスジェニックマウスは、Ｇｒａｓｓ，Ｄ．Ｓ．、Ｓａｉｎａｉ，Ｕ． 、Ｆｅｌｋｎｅｒ，Ｒ．Ｈ．、Ｗａｌｌａｃｅ，Ｒ．Ｅ．、Ｌａｇｏ，Ｗ．Ｊ．Ｐ． 、Ｙｏｕｎｇ，Ｓ．Ｇ．およびＳｗａｎｓｏｎ，Ｍ．Ｅ．「ヒトアポリポタンパク質Ｂ およびヒトＣＥＴＰを両方とも発現させるトランスジェニックマウスは正常脂血性のヒトに似たリポタンパク質コレステロール分布を持つ」Ｊ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ ３６：１０８２−１０９１，１９９５ ）に記載の通常飼料を与えると、正常脂血性のヒトに最も近いリポタンパク質コレステロール分布を示す（すなわちＬＤＬ−Ｃ 対ＨＤＬ−Ｃ の比は約２ ：１ ）。
【００２２】
本発明の局所製剤は、血清コレステロールおよび／ またはＬＤＬ 、ＶＬＤＬの脂質レベルを低下させるためまたは血清ＨＤＬ レベルを上昇させるために、適切な局所用基剤に十分量すなわち治療有効量のナイアシンンプロドラッグを含んでいる十分量の経皮製剤を、対象の皮膚に適用することによって、その必要がある患者、哺乳動物およびヒトのコレステロールおよび／ または脂質を低下させるために使用することができる。したがって本製剤は高脂血症および高コレステロール血症の予防またはこれらの状態の処置に使用することができる。
【００２３】
実施例１ および２ −ナイアシンンエステルの製造
実施例１
ニコチン酸エステルは塩化ニコチニルを窒素下にトリエチルアミン（ＴＥＡ ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）および種々のＣ１〜Ｃ１８アルコールで処理することによって製造した（化学物質は全てＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ から入手した）。得られたエステルはシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離し、さらなる精製のためにそれぞれのＨＣｌ 塩に変換した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ ）および１Ｈ−ＮＭＲにより、下記表１ に挙げる最終生成物の純度および同定を確認した。ＴＬＣ による検査はＡｎａｌｔｅｃｈ Ｕｎｉｐｌａｔｅ シリカゲルＧＦプレートで行った。カラムクロマトグラフィー精製はシリカゲル（Ｍｅｒｃｋ 、６０Ａ 、２３０ 〜４００ メッシュ、フラッシュクロマトグラフィー用）を使って行った。
【００２４】
実施例２
雌ヘアレスマウス（ＨＲＳ−Ｊ 、６ 〜８ 週齢）を使用した。これらのマウスは平底ケージで飼育し、１４：１０の明− 暗周期で、滅菌飼料および水およびリチウムを与えた。実施例１ のニコチン酸エステルを０．５ 〜２．０ ％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度で２００ｍｇ のＶａｎｉｃｒｅａｍ Ｌｉｔｅ（商標）スキンケアローション（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｉｅｓ，Ｉｎｃ． ；精製水、白色ワセリン、セテアレスアルコールおよびセテアレス−２０ 、プロピレングリコール、ソルビトール溶液、シメチコン、モノステアリン酸グリセリン、モノステアリン酸ポリエチレングリコール、ソルビン酸およびＢＨＴ を含む）に混合したものを、毎日、手袋をした指でヘアレスマウスの背部に１ 週間にわたって適用した。対照マウスには２００ｍｇ のローションのみを塗布した。マウスを、ペントバルビタールの心臓注射によって安楽死させてから皮膚を切除した。背側および腹側の皮膚検体を液体窒素で直ちに凍結し、−８０ ℃で保存した。
【００２５】
ナイアシンは組織中でＮＡＤ に変換されるので、ＮＡＤ 含量をナイアシン飽和のマーカーとして使用した（Ｆｕ，Ｃ．Ｓ． 、Ｓｗｅｎｓｅｉｄ，Ｍ．Ｅ． 、Ｊａｃｏｂ，Ｒ．Ａ．およびＭｃＫｅｅ，Ｒ．Ｗ．「青年におけるナイアシン状態を評価するための生化学マーカー：赤血球ナイアシン補酵素および血漿トリプトファンのレベル」Ｊ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ １１９：１９４９−１９５５，１９８９）。局所適用部位から離れた位置にある皮膚部位のＮＡＤ 含量を決定することによって、ナイアシンの全身経皮送達を評価した。本発明の経皮送達システムを用いたナイアシンの組織飽和の実例を、ニコチン酸ミリスチルによる処置を表す図１ に示す。
【００２６】
ＮＡＤ 分析およびタンパク質分析のために、ポリトロンを使って１ｍｌ の氷冷０．５Ｍ ＨＣｌＯ４中で組織をホモジナイズし、３０００ｒｐｍ で１５分間遠心分離した。ＮＡＤ 分析のために、上清を氷冷２Ｍ ＫＯＨ／０．６６Ｍ ＫＨ２ＰＯ４で中和した。タンパク質分析のために、ペレットを１ｍｌ の０．１Ｍ ＮａＯＨ に溶解した。ＮＡＤ 含量は酵素サイクリング法の原理に基づいて評価した（Ｊａｃｏｂｓｏｎ，Ｅ．Ｌ． およびＪａｃｏｂｓｏｎ，Ｍ．Ｋ． 「ヒトにおけるナイアシン状態の生化学的尺度としての組織ＮＡＤ 」Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ ２８０：２２１−２３０，１９９７）。タンパク質量の決定にはＢＣＡ 法（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ． ）を使用した。Ｐｏｃｔ／ｗの決定は、Ｈａｒｎｉｓｃｈ Ｍ． 、Ｍｏｋｅｌ Ｈ．「ｎ−アルキルベンゼンおよびいくつかのＯＥＣＤ標準物質に関するＬｏｇＰｏｗ振とうフラスコ値と逆相高速液体クロマトグラフィーで得られるキャパシティーファクターとの関係」Ｊ．Ｃｈｒｏｍ ２８２：３１５−３３２，１９８３）に報告されている逆相ＨＰＬＣ法を使って行った。結果を表１ に示す。
【００２７】
【表１】
表１ ：ナイアシンプロドラッグの性質
2004500428.tif 000002
＊ＨａｒｎｉｓｃｈおよびＭｏｋｅｌ （前掲）の方法で決定。
【００２８】
上記表１ に要約した結果は、ナイアシンの経皮送達によって組織飽和を達成するには、約６．０ 〜約８．０ のｌｏｇＰ値を持つニコチン酸エステルが好ましい化合物であることを示している。Ｃ１〜Ｃ８エステルを含む約６ 未満のｌｏｇＰ値を持つエステルは紅斑反応を引き起し、６ より大きいｌｏｇＰ値を持つエステルは紅斑反応を引き起さないからである。Ｃ１０ エステルはＣ８以下のエステルよりも弱い紅斑反応を示した。
【００２９】
実施例３
ナイアシンのエステルをＯｎｏ，Ｎ．、Ｙａｍａｄａ，Ｔ． 、Ｓａｉｔｏ，Ｔ．、Ｔａｎａｋａ，Ｋ． およびＫａｊｉ，Ａ． 「カルボン酸の簡便なエステル化法」Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ． ５１：２４０１−２４０４，１９７８に記載の既知の方法でも合成した。ベンゼン中、窒素下で、ナイアシンを様々な臭化アルキルおよび１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ ウンデカ−７− エン（ＤＢＵ ）で処理することにより、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって分離することができるエステルを得た。最終生成物の純度および同定は、ＴＬＣ 、１Ｈ−ＮＭＲ分光法、逆相ＨＰＬＣおよび元素分析によって確認した。ナイアシン、ＤＢＵ および全ての臭化アルキルはＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ から購入した。ＴＬＣ による検査はＡｎａｌｔｅｃｈ Ｕｎｉｐｌａｔｅ シリカゲルＧＦプレートで行った。カラムクロマトグラフィー精製はシリカゲル（Ｍｅｒｃｋ 、６０Ａ 、２３０ 〜４００ メッシュ、フラッシュクロマトグラフィー用）を使って行った。１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、テトラメチルシランを内部標準として、Ｖａｒｉａｎ Ｇｅｍｉｎｉ−３００ＮＭＲスペクトロメーターで記録した。
【００３０】
実施例４
実施例３ に従って製造したラウリルナイアシンエステルを、濃度１ 〜１０％（ｗｔ／ｗｔ ）のラウリルナイアシンエステルを使用した点以外は実施例２ で説明した手法を用いて、ヘアレスマウスで評価した。ＮＡＤ 量およびタンパク質量の決定は実施例２ で述べたように行った。結果を図４ａおよび図４ｂに示す。
【００３１】
さらに、ヘアレスマウスの空腹時（１６時間）血液試料を開始時、３０日後および６０日後に後眼窩静脈叢から採取し、処置終了時に心臓穿刺によって採取することによって、血漿脂質分析も行った。血液収集に先立ってマウスをペントバルビタールの心臓注射によって安楽死させた。血液は１０μｌ のヘパリンを含む微量遠心管に収集し、２，０００ ×ｇ で１５分間の遠心分離によって血漿を分離し、１ 週間以内に分析を行うまで−８０℃で保存した。Ｂｅｃｋｍａｎ 製の臨床化学分析装置Ｓｙｎｃｒｈｏｎ ＣＸ７を使って、総コレステロール、ＨＤＬ−Ｃ およびトリグリセリドを酵素法で測定した。結果を図４ａおよび図４ｂに示す。
【００３２】
実施例５
雌アポＢ／ＣＥＴＰ二重トランスジェニックマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ （ニューヨーク州ジャーマンタウン））を６ つの群に分け、６ 匹を一組にして飼育した。ラウリルエステルを５ ％ローション製剤として使用し、標準飼料を与えている試験動物の剃毛した背部に、毎週５ 回、４ 週間にわたって適用した。経口投与の場合は、ナイアシン（ナトリウム塩）を０．７５％（遊離の酸として０．６３％）の濃度で飲料水に溶解した。ナイアシンの摂取量は水の消費量から見積もった。１ 日あたりの推定ナイアシン摂取量は約１，４００ｍｇ／ｋｇだった。
【００３３】
使用した経口用量はナイアシンとして７６０ｍｇ／ｋｇ／ 日、局所用量は２５０ｍｇ／ｋｇ／ 日である。選択した経口ナイアシン用量は、Ｓａｎｔｏｓ，Ｋ．Ｆ．Ｒ． 、Ｏｌｉｖｅｉｒａ，Ｔ．Ｔ． 、Ｎａｇｅｍ，Ｔ．Ｊ．、Ｐｉｎｔｏ，Ａ．Ｓ．およびＯｌｉｖｅｉｒａ，Ｍ．Ｇ．Ａ． 「ナリンゲニン、ルチン、ニコチン酸およびそれらの併用の脂質低下効果」Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｓ ４０，４９３−４９６，１９９９ に記載の前臨床齧歯類試験で通例使用される５００ 〜９００ｍｇ／ｋｇ／ 日の範囲内である。体表面積に基づく経口用量は３．７ｇ／ 日のヒト用量に相当し、局所用量は１．２ｇ／ 日に相当する。
【００３４】
局所投与の場合は、ナイアシンラウリルエステルを１ 、２ 、５ および１０％（ｗｔ／ｗｔ ）の濃度で２００ｍｇ のローションに混合したものを、マウスの剃毛した背部に毎日、１３週間にわたって適用した。２５ｇ のマウスにつき、１ 日あたりの局所用量は、ナイアシンとして３４〜３４０ｍｇ／ｋｇの範囲になる。対照マウスには等量の賦形剤ローションだけを塗布した。脂質分析は実施例４ で述べたように行った。結果を図６ａ〜ｄ に示す。
【００３５】
ナイアシンプロドラッグで処置したアポＢ１００／ＣＥＴＰ トランスジェニックマウスの脂質プロファイルの改善
アポＢ１００／ＣＥＴＰ 二重トランスジェニックマウスにおいて９０日間にわたるラウリルナイアシンエステルの経皮送達が血漿脂質プロファイルに及ぼす効果を経口ナイアシンと比較。この研究にはそれぞれ６ 匹のマウスからなる合計６ つの群を使用した。局所投与の場合はラウリルナイアシンエステルをマウスの剃毛した背部に毎日適用した。経口投与の場合は、ナイアシン（ナトリウム塩）を飲料水に溶解した。９０日後に、局所処置では、経口処置の用量の１／４ 量で、総コレステロール、トリグリセリドおよびＬＤＬ−Ｃ フラクションが１５、３３および３８％低下し、同時にＨＤＬ−Ｃ は８ ％上昇した。経口処置により、総コレステロール、トリグリセリド、ＬＤＬ およびＨＤＬ−Ｃ フラクションは、それぞれ２９、３７、４５および１３％低下した。これらの結果は、血清脂質プロファイルを改善するための経皮治療薬として、ニコチン酸ラウリルが極めて有効でありうること示している。
【００３６】
これらの結果は、局所処置が総血漿コレステロールレベルを５２％低下させたのに対して、経口ナイアシンは総コレステロールを１２％低下させたことを示している。
【００３７】
これらの結果は、血中脂質不均衡を制御するために、潮紅および潜在的に有毒な初回通過肝作用を回避する経口ナイアシンの代替手段として、ナイアシンプロドラッグ、例えばナイアシンエステルを、プロドラッグとして皮膚に適用できることを示している。これらの結果は、局所処置が総血漿コレステロールレベルを５２％低下させたのに対し、経口ナイアシンが総コレステロールを１２％低下させたことを示している。
【００３８】
ナイアシンのミリスチルエステルおよびラウリルエステルは皮膚血管拡張を示さないことから、そのような望ましくない作用を持たないナイアシンプロドラッグを製造できることがわかる。これらは、経皮送達にとって極めて望ましい製剤特性を持つプロドラッグとなり、皮膚に存在するエステラーゼによるナイアシンへの変換は、活性成分の持続放出をもたらし、血管拡張を伴わずに最適な全身送達が達成されるだろう。動物モデルでの結果から、ヒトまたは他の哺乳動物で、ナイアシン投与による脂質プロファイルの全体的改善に、この経皮アプローチをうまく応用できることが、強く示唆される。
【００３９】
ナイアシンならびに本発明のニコチン酸エステルおよびニコチニル化合物は、対象に投与されると組織を透過し組織を飽和させる。そして上記のように、組織飽和は血清コレステロールおよび脂質レベルの低下に関係し、ナイアシン、特にエステル型ナイアシンの経皮送達が血清ＬＤＬ 、ＶＬＤＬレベルを効果的に低下させ、かつ／ または血清ＨＤＬ レベルを効果的に上昇させることを示す。
【００４０】
ニコチン酸エステル、特にＣ１０ 以上のエステル、例えばＣ１０ 〜Ｃ１８ 、最も好ましくはＣ１２ 〜Ｃ１６ のエステルは、経皮送達に適している。しかし、Ｃ８以下のエステルを使って適切な製剤を製造することもでき、これらは本発明の範囲に包含される。対応するニコチニル化合物も有効である。
【００４１】
クリームおよびローションの他に、シャンプー、点眼剤などの液体、リップクリームおよびデオドラントスティックなどの香膏およびスティック、セッケン、パッチ剤、包帯、縫合糸、被覆植込み型装置などの局所製剤、ならびに局所適用のために設計された他の任意のタイプのシステム。本発明の経皮製剤の製造にはワセリン、ウィテップゾール軟膏、種々のローション、エマルション基剤、クリームなどの適切な医薬賦形剤が使用されるだろう。
【００４２】
最も好ましいのは経皮送達システムである。ニコチンの送達に適した経皮送達システム（パッチ剤）は、米国特許第４，８３９，１７４ 号、第４，９４３，４３５ 号および第５，０１６，６５２ 号に記載されているものなど、当技術分野で知られている。このようなタイプの装置の例は、当技術分野では他にも数多く知られている。典型的な経皮システムは、薬物を含むレザバーまたはマトリックスと、活性剤（この場合はナイアシン、より好ましくはニコチン酸エステル）に対して透過性を持つ接着層とを含む。接着層は透過層と同じであってよく、対象の皮膚に接着して薬剤を皮膚に放出し吸収させ、続いて全身循環させて他の組織に分布させる。使用時には、この装置は、対象の組織をナイアシンで飽和させて総コレステロール、ＶＬＤＬもしくはＬＤＬ レベルの低下および／ またはＨＤＬ レベルの上昇もしくは改善をもたらすのに十分な量のナイアシンが送達されるように、十分な量のナイアシンまたはニコチン酸エステルを経皮送達するだろう。総コレステロールの改善は、総コレステロール：ＨＤＬ またはＬＤＬ ：ＨＤＬ の比の低下で表すと便利である。結果は、本明細書に記載の化合物の経皮送達が、経口ナイアシン療法で達成されることがわかっている改善と同様な、対象のコレステロールおよび脂質プロファイルの改善をもたらすことを示している。
【００４３】
本発明の他の特徴は当業者には明らかであり、ここで説明する必要はないだろう。
【００４４】
引用した文献は全て参照により完全な形で本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【図１】ニコチン酸ミリスチルで７ 日間処置したマウス皮膚および無処置皮膚のＮＡＤ 含量を表す図
【図２】Ｎｉａｓｐａｎ （登録商標）に対する脂質応答を示す表
【図３】血漿ナイアシンに関する平均定常状態薬物動態パラメーターの表
【図４】ミリスタルナイアシン（ｍｙｒｉｓｔａｌ ｎｉａｃｉｎ ）で７ 日間処置したマウス皮膚（４ａ）および無処置皮膚（４ｂ）のＮＡＤ 含量を示すグラフ
【図５】ヘアレスマウスにおける経皮ラウリルナイアシンエステルおよび経口ナイアシンの対照に対するコレステロール低下効果を示すグラフ
【図６】アポＢ／ＣＥＴＰトランスジェニックマウスの脂質プロファイルに対する経口ナイアシンおよび経皮ラウリルナイアシンの効果を示すグラフ
【図７】図６ に示す結果と比較したラウリン酸ニコチノイル（ｎｉｃｏｔｉｎｏｙｌ ｌａｕｒａｔｅ）の効果を示す図
【図８】本発明での使用に適したニコチン酸およびニコチニル化合物の一般化学構造を示す図
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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