(57)【要約】本発明は、一般にＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と結合する分子を特定する方法に関する。本発明はさらに、対象者に投与した後、Ｒ７．１エピトープと結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と結合する分子によるＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法に関する。本発明はさらに、本発明の方法で有用な分子に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合または前記エピトープを改変する分子を特定する方法であって、
（ａ）ＬＦＡ−１を発現する細胞を、第一のテスト分子、およびＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するかまたはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子とともにインキュベートする工程、及び
（ｂ）前記第二の分子を検出する工程、
を含み、前記第二の分子の結合の減少が前記第一のテスト分子の結合を示すことを特徴とする方法。
【請求項２】
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合または前記エピトープを改変する分子を特定する方法であって、
（ａ）ＬＦＡ−１を発現している精製ＬＦＡ−１を、第一のテスト分子、およびＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するかまたはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子とともにインキュベートする工程、及び
（ｂ）前記第二の分子を検出する工程、
を含み、前記第二の分子の結合の減少が第一のテスト分子の結合を示すことを特徴とする方法。
【請求項３】
前記第二の分子が式Ｉの化合物である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記第二の分子が式Ｉの化合物である請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記第二の分子が式ＩＩの化合物である請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記第二の分子が式ＩＩの化合物である請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記第二の分子が式ＩＩＩの化合物である請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記第二の分子が式ＩＩＩの化合物である請求項２に記載の方法。
【請求項９】
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合または前記エピトープを特異的に改変する分子を特定する方法であって、
（ａ）ＬＦＡ−１を発現する細胞を、（ｉ）第一のテスト分子、（ｉｉ）ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子、および（ｉｉｉ）第三の標識分子とともにインキュベートする工程であって、前記第三の標識分子は前記第二の分子と結合する工程、及び、
（ｂ）前記第二の分子と結合した前記第三の標識分子を検出する工程、
を含み、前記第二の分子の結合の減少が前記第一のテスト分子の結合を示すことを特徴とする方法。
【請求項１０】
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合または前記エピトープを特異的に改変する分子を特定する方法であって、
（ａ）ＬＦＡ−１を発現する精製ＬＦＡ−１を、（ｉ）第一のテスト分子、（ｉｉ）ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子、および（ｉｉｉ）第三の標識分子とともにインキュベートする工程であって、前記第三の標識分子は前記第二の分子と結合する工程、及び、
（ｂ）前記第二の分子と結合した前記第三の標識分子を検出する工程、
を含み、前記第二の分子の結合の減少が前記第一のテスト分子の結合を示すことを特徴とする方法。
【請求項１１】
前記Ｒ７．１エピトープと特異的に結合または前記エピトープを特異的に改変する分子がモノクローナル抗体またはそのフラグメントである、請求項１、２、９または１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記モノクローナル抗体がＲ７．１である請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記標識されてある分子が蛍光化合物で標識される請求項１から１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
ＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法であって、
（ａ）第一のテスト分子を対象に投与する工程、
（ｂ）前記対象から血液サンプルを回収する工程、
（ｃ）前記サンプルを、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の標識分子とともにインキュベートする工程、及び、
（ｄ）前記第二の分子の量を検出する工程、
を含み、前記第二の標識分子の結合量の減少が第一のテスト分子の結合を示すことを特徴とする方法。
【請求項１５】
ＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法であって、
（ａ）第一のテスト分子を対象に投与する工程、
（ｂ）前記対象から血液サンプルを回収する工程、
（ｃ）前記サンプルを、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子とともにインキュベートする工程、
（ｄ）前記サンプルを、第三の標識分子とともにインキュベートする工程であって、前記第三の標識分子は前記第二の分子と結合する工程、及び、
（ｅ）前記第二の分子と結合した前記第三の標識分子を検出する工程、
を含み、前記第二の分子の結合量の減少が第一のテスト分子の結合を示すことを特徴とする方法。
【請求項１６】
前記第二の分子がモノクローナル抗体またはそのフラグメントである、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記モノクローナル抗体がＲ７．１である請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記第二の分子が式Ｉの化合物である請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記第二の分子が式ＩＩの化合物である請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記第二の分子が式ＩＩＩの化合物である請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記対象がヒトである請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項２２】
前記標識分子が蛍光化合物で標識される請求項１４または１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願：本出願は、米国特許仮出願第６０／２２５，３２７号（２０００年８月１４日出願）の優先権を主張する。
本発明は、一般にＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合するか、またはこれを改変する分子を特定する方法に関する。Ｒ７．１は、抗ＣＤ１１ａモノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。本発明はさらに、対象者に投与した後、Ｒ７．１エピトープと結合する分子によるＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法に関する。本発明はさらに前記方法で有用な分子に関する。
【０００２】
従来技術
ここ１０年間の研究は、体内の細胞間相互作用に付随する分子事象、特に免疫系における細胞の移動および活性化に付随する前記事象の解明に役立った。例えば以下の文献を参照されたい：Ｔ． Ｓｐｒｉｎｇｅｒ， １９９０， Ｎａｔｕｒｅ ３４６：４２５−４３４。細胞表面タンパク質、特に細胞粘着分子（“ＣＡＭ”）およびロイコインテグリン（Ｌｅｕｋｏｉｎｔｅｇｒｉｎ）（ＬＦＡ−１、ＭＡＣ−１およびｇｐ１５０．９５を含む（前記はＷＨＯの命名ではそれぞれＣＤ１８／ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８／ＣＤ１１ｂおよびＣＤ１８／ＣＤ１１ｃと称される））は、それぞれ、損傷部位への白血球の血管外遊出および個々の標的への白血球の移動プロセスにおける調節をその目標とする医薬の研究開発の対象であった。例えば、現在のところ、白血球の血管外遊出（これは炎症反応の指令的成分である）に先立って、白血球上で構成的に発現されるインテグリン活性化が惹起され、その後インテグリン（例えばＬＦＡ−１）と１つまたはいくつかの別個の細胞間粘着分子（ＩＣＡＭ）（ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、ＩＣＡＭ−３またはＩＣＡＭ−４と称され、これらは白血球上で発現される）間の強固なリガンド／レセプター相互作用が続くと考えられている。ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２およびＩＣＡＭ−３は血管の内皮細胞表面でも同様に発現される。ＣＡＭとロイコインテグリンとの相互作用は、免疫系の正常な機能において不可欠な工程である。免疫プロセス、例えば抗原提示、Ｔ細胞仲介細胞毒性および白血球の血管外遊出は、いずれもロイコインテグリンと相互作用するＩＣＡＭによって仲介される細胞粘着を必要とする。一般的には以下の文献を参照されたい：Ｔ．Ｋ． Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ ＆ Ｒ．Ｒ． Ｒｏｔｈｌｅｉｎ， １９９２， Ａｄｖ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ２５：１１７−１３８。
【０００３】
適切なロイコインテグリンの発現を欠く個体群が特定された。前記は“白血球粘着不全”と呼ばれる症状である（Ｄ．Ｃ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９８５， Ｆｅｄ． Ｐｒｏｃ． ４４：６７１−２６７７； Ｄ．Ｃ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９８５， Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １５２：６６８−６８９）。前記の個体は、それらの細胞を細胞性基質に粘着させることができないので正常な炎症反応および／または免疫反応を起こすことができない。これらのデータは、リンパ球がＣＤ１８の機能的粘着分子の欠如のために正常な態様で粘着できないとき、免疫反応は軽減されることを示している。ＣＤ１８を欠くＬＡＤ患者は炎症反応を起こすことができないという事実のために、ＣＤ１８、ＣＤ１１／ＩＣＡＭ−１相互作用の拮抗物質はまた炎症反応を抑制するであろうと考えられている。
【０００４】
ＣＡＭおよびロイコインテグリンとの間の相互作用の拮抗は、いずれかの成分に対して作製された物質によって認識できることが示された。特に、ＣＡＭ（例えばＣＡＭ−１）またはロイコインテグリン（例えばＬＦＡ−１）の、これら両分子またはどちらか一方に対して作製された抗体による遮断は、炎症反応を効果的に抑制する。ＣＡＭまたはロイコインテグリンに対する抗体により抑制される炎症および免疫反応のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルは、抗原またはマイトジェン誘発リンパ球増殖、リンパ球の同型凝集、Ｔ細胞仲介細胞溶解および抗原特異的誘発寛容（ａｎｔｉｇｅｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｎｄｕｃｅｄ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）を含む。一般的には例えば以下を参照されたい：Ｔ．Ｋ． Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ ＆ Ｒ．Ｒ． Ｒｏｔｈｌｅｉｎ， １９９２， Ａｄｖ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ２５：１１７−１３８。これらＩｎ ｖｉｔｒｏ実験の相関性は、ＩＣＡＭ−１またはＬＦＡ−１に対して作製された抗体を用いたｉｎ ｖｉｖｏ実験によって支持される。一般的には以下の文献を参照されたい：Ｒ． Ｒｏｔｈｌｅｉｎ ａｎｄ Ｊ．Ｒ． Ｊａｅｇｅｒ， １９９６， ”Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ”， （ｅｄｓ）Ａｕｓｔｅｎ ｅｔ ａｌ． Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｍａｓｓ．， ｐ．３４７。例えば、ＬＦＡ−１に対して作製された抗体は、甲状腺移植拒絶を防ぎ、さらにマウスの同種心臓移植の生存を延長する（Ａ． Ｇｏｒｓｋｉ， １９９４， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ １５：２５１−２５５）。より重要なことには、ＩＣＡＭ−１に対して作製された抗体は、ヒトの疾患（例えば腎臓の同種移植片拒絶および慢性関節リウマチ）で抗炎症性薬剤として有効であることを示し（Ｒ．Ｒ． Ｒｏｔｈｌｅｉｎ， Ｌ． Ｓｃｈａｒｓｃｈｍｉｄｔ， ”Ａｄｈｅｓｉｏｎ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ”， Ｃ．Ｄ． Ｗｅｇｎｅｒ， Ｅｄ．， １９９４， １−３８； Ｃ．Ｂ． Ｃｏｓｉｍｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９０， １４４：４６０４−４６１２； Ａ． Ｋａｖａｎａｕｇｈ ｅｔ ａｌ．， Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ． １９９４， ３７：９９２−１００４）、さらに、ＬＦＡ−１に対して作製された抗体は、骨髄移植および腎同種移植の初期拒絶の予防で免疫抑制効果を示した（Ａ． Ｆｉｓｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｌａｎｃｅｔ， １９８９， ２：１０５８−１０６０； Ｂ． Ｌｅ Ｍａｕｆｆ， ｅｔ ａｌ．， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ １９９１， ５２：２９１−２９５）。
【０００５】
さらに、ＩＣＡＭ−１のリコンビナント可溶形は、ＬＦＡ−１との相互作用でＩＣＡＭ−１の抑制物質として作用することができることも示された。可溶性ＩＣＡＭ−１は、細胞上でのＣＤ１８、ＣＤ１１／ＩＣＡＭ−１相互作用の直接的拮抗物質として作用し、免疫反応のｉｎ ｖｉｔｒｏモデル（例えばヒトリンパ球混合反応、細胞毒性Ｔ細胞反応および膵島細胞との反応における糖尿病患者のＴ細胞増殖）で抑制活性を示す（Ｊ．Ｃ． Ｂｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９３， １５１：７２２４； Ｂ．Ｏ． Ｒｏｐｅ ｅｔ ａｌ．， Ｌａｎｃｅｔ １９９４， ３４３：１５９０）。
【０００６】
さらに、ＣＡＭとロイコインテグリンとの相互作用に影響を与えるいくつかの小分子が文献に報告された。トリキリア＝ルブラ（Ｔｒｉｃｈｉｌｉａ ｒｕｂｒａ）の根から単離された天然の生成物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞結合アッセイで抑制作用をもつことが判明した（Ｌ．Ｌ． Ｍｕｓｚａ ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９４， ５０：１１３６９−１１３７８）。一連の分子（Ｄ．Ｈ． Ｂｏｓｃｈｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９９４， ３７：７１７； Ｄ．Ｈ． Ｂｏｓｃｈｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９９５， ３８：４５９７−４６１４）は、逆受動的アルツス反応（好中球蓄積を特徴とする炎症誘発モデル）で経口的に活性を有することが見出された（Ｙ．Ｈ． Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． １９９２， ６９：１５５−１６４）。別の一連の分子もまた、ラットの遅延型過敏反応で経口的に活性を有することが見出された（Ｐ．Ｊ． Ｓａｎｆｉｌｉｐｐｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９９５， ３８：１０５７−１０５９）。これらの分子はいずれも、他のタンパク質とともにＩＣＡＭ−１の転写を抑制することによって、または未知のメカニズムにより細胞内で作用してロイコインテグリンの活性化を抑制することによって非特異的に機能するように思われる。前記分子はいずれも、ＣＡＭとロイコインテグリンの相互作用に対して直接の拮抗作用をもたない。
【０００７】
したがって、従来技術は、ＣＡＭとロイコインテグリンとの結合に拮抗作用をもつ分子は、多くの自己免疫疾患または炎症性疾患の病理発生にしばしば付随する炎症反応および免疫反応の緩和に治療薬として潜在的有用性を有することを示している。
最近、小分子、（Ｒ）−５−（４−ブロモベンジル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１，５−ジメチルイミダゾリジン−２，４−ジオン（本明細書では化合物１と称する）は、ＣＤ１１ａ鎖との非共有結合によりＬＦＡ−１と特異的に相互作用し、ＬＦＡ−１がＩＣＡＭ−１と結合するのを妨げることが示された（Ｋｅｌｌｅｙ ｅｔ ａｌ．， １９９９， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １６３：５１７３−５１７７）。
従来技術の状況から、ＬＦＡ−１と特異的に結合またはこれを改変する分子を特定する方法が必要とされていることは明瞭である。さらに、前記分子で治療される対象者の標的細胞上でＬＦＡ−１レセプターが占拠されているか否かを決定する方法が、とりわけ、処置後に標的細胞にどれくらいの化合物が到達したか；ＬＦＡ−１レセプターを飽和させるために必要な化合物の量；および有効性のためにはどれくらいのレセプターの占拠が必要であるかを決定するために臨床的に必要とされている。
【０００８】
発明が解決しようとする課題
本発明の第一の特徴は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、または、ＬＦＡ−１が精製されているかもしくは細胞表面ＬＦＡ−１である場合に、Ｒ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する分子を特定する方法を含む。本発明の第二の特徴は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する分子で治療される対象者の標的細胞上でＬＦＡ−１レセプターが占拠されているか否かを決定する方法を含む。第三の特徴は本発明の方法で有用な分子を含む。
【０００９】
具体的な実施態様では、前記標的細胞は、末梢血の単核球細胞および多形核白血球である。本細胞アッセイの利点の１つは、ＬＦＡ−１の精製が不要であることで、それによって自然の状態で見出される系により類似する系が提供される。本明細書で述べるレセプター占拠を決定する方法は、とりわけ、どれくらいの化合物が処置後標的細胞に到達したか；ＬＦＡ−１レセプターを飽和させるために必要な化合物の量；およびどれくらいのレセプターの占拠が有効性のために必要であるかを決定するために臨床において重要な情報を提供することができる。
本発明は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合またはこれを改変する分子を特定する方法を提供する。前記方法は、精製ＬＦＡ−１またはＬＦＡ−１を発現する細胞を、第一のテスト分子、およびＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の標識分子とともにインキュベートし；さらに前記第二の標識分子を検出することを含み、本方法で、前記第二の分子の結合減少は前記第一のテスト分子の結合を示す。
【００１０】
さらに本発明は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合またはこれを改変する分子を特定する方法を提供し、前記方法は、精製ＬＦＡ−１またはＬＦＡ−１発現細胞を、（ｉ）第一のテスト分子、（ｉｉ）ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子、および（ｉｉｉ）第三の標識分子（前記第三の標識分子は第二の分子と結合する）とともにインキュベートし；さらに前記第二の分子と結合した前記第三の標識分子を検出することを含む。前記方法で、第二の分子の結合減少は第一のテスト分子の結合を示す。
【００１１】
本発明の別の特徴はＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法を提供し、前記方法は、第一のテスト分子を対象者に投与し；前記対象者から血液サンプルを回収し；ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の標識分子とともに前記サンプルをインキュベートし；さらに第二の標識分子の量を決定することを含む。前記方法で、第二の標識分子の結合量の減少は第一のテスト分子の結合を示す。
本発明はさらにＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法を提供し、前記方法は、第一のテスト分子を対象者に投与し；前記対象者から血液サンプルを回収し；ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の標識分子、および前記第二の分子と結合する第三の標識分子とともに前記サンプルをインキュベートし；さらに第二の分子の量を決定することを含む。前記方法で、第二の分子の結合量の減少は第一のテスト分子の結合を示す。
【００１２】
特別な実施態様では、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子はモノクローナル抗体またはそのフラグメントである。別の実施態様では、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子はＲ７．１（Ｂｅｎｄｅｒ ＭｅｄＳｙｓｔｅｍｓ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍＢＨ； Ｖｉｅｎｎａ， オーストリア）である。本発明はさらにＲ７．１同等物（例えばＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合またはこれを改変する分子）に関し、前記は以下に記載された小分子を含むがただしこれらに限定されない：米国特許出願第０９／３７５，０１０号（１９９９年８月１６日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願）；米国特許出願第０９／６０４，３１２号（２０００年６月２７日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願）；米国特許出願第０９／６０５，５８４号（２０００年６月２８日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願）（前記の文献は参照により本明細書に含まれる）。別の実施態様では、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子は蛍光化合物で標識される。
【００１３】
課題を解決するための手段
本発明は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子を特定するために有用なスクリーニング方法および組成物を提供する。前記のようにして特定された分子は、炎症性疾患および免疫細胞仲介疾患の治療または予防のために有用な治療薬剤であろう。本発明のまた別の特徴は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子で治療された対象者の標的細胞上のＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法および分子に関する。本明細書で開示するレセプターの占拠を決定する方法は、とりわけ、どれくらいの化合物が処置後標的細胞に到達したか；ＬＦＡ−１レセプターを飽和させるために必要な化合物の量；およびどれくらいのレセプターの占拠が有効性のために必要であるかを決定するために、臨床において重要な情報を提供することができる。
【００１４】
本発明はＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合またはこれを改変する分子を特定する方法を提供し、前記方法は、精製ＬＦＡ−１またはＬＦＡ−１を発現する細胞を、第一のテスト分子、およびＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の標識分子とともにインキュベートし；さらに前記第二の標識分子を検出することを含み、本方法で、前記第二の分子の結合の減少は前記第一のテスト分子の結合を示す。
【００１５】
さらに本発明は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合またはこれを改変する分子を特定する方法を提供し、前記方法は、精製ＬＦＡ−１またはＬＦＡ−１発現細胞を、（ｉ）第一のテスト分子、（ｉｉ）ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子、および（ｉｉｉ）第三の標識分子（前記第三の標識分子は第二の分子と結合する）とインキュベートし；さらに前記第二の分子と結合した前記第三の標識分子を検出することを含む。前記方法で、第二の分子のＲ７．１エピトープとの結合の減少は第一のテスト分子の結合を示す。
【００１６】
本発明の別の特徴はＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法を提供し、前記方法は、第一のテスト分子を対象者に投与し；前記対象者から血液サンプルを回収し；ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の標識分子とともに前記サンプルをインキュベートし；さらに第二の標識分子の量を決定することを含む。前記方法で、第二の標識分子の結合量の減少は第一のテスト分子の結合を示す。
本発明はさらにＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定する方法を提供し、前記方法は、第一のテスト分子を対象者に投与し；前記対象者から血液サンプルを回収し；ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するか、またはＲ７．１エピトープを改変できるようにＬＦＡ−１と特異的に結合する第二の分子、および前記第二の分子と結合する第三の標識分子と前記サンプルをインキュベートし；さらに第二の分子の量を決定することを含む。前記方法で、第二の分子の結合量の減少は第一のテスト分子の結合を示す。
【００１７】
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するかまたはこれを改変する本発明の分子には以下が含まれるが、ただしこれらに限定されない：抗体、好ましくはモノクローナル抗体、例えばＲ３．１（Ｍａ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ８６：９３７）、Ｒ７．１（Ｂｅｎｄｅｒ ＭｅｄＳｙｓｔｅｍｓ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍＢＨ； Ｖｉｅｎｎａ， オーストリア）、その誘導体またはフラグメント（例えばＦａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ´）２フラグメント、Ｆａｂ発現ライブラリーによって生成されるフラグメント）、および上記のいずれかのエピトープ結合フラグメント。特別な実施態様では、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子は、ｍＡｂＲ７．１である。別の実施態様では、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子はＦａｂフラグメントである。
【００１８】
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変するモノクローナル抗体の調製のために、持続的培養細胞株による抗体分子の製造を提供する任意の技術を用いることができる。例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ＆ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５， Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５−４９７）が最初に開発したハイブリドーマ技術だけでなく、トリオーマ技術（ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術）（Ｋｏｚｂｏｒ ｅｔ ａｌ．， １９８３， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ ４：７２）、およびヒトのモノクローナル抗体を製造するＥＢＶ−ハイブリドーマ技術（Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．， １９８５， ”Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ”， Ａｌａｎ Ｒ． Ｌｉｓｓ， Ｉｎｃ．， ｐｐ．７７−９６）を用いることができる。
【００１９】
Ｒ７．１エピトープを認識する抗体フラグメントは公知の技術によって生成できる。例えば、そのようなフラグメントには（Ｆａｂ´）２フラグメント（抗体分子のペプシン消化によって生成できる）、およびＦａｂフラグメント（（Ｆａｂ´）２フラグメントのジスルフィド結合を還元することによって生成することができる）が含まれるが、ただしこれらに限定されない。また別には、所望の特異性を有するモノクローナルＦａｂフラグメントの迅速で容易な特定を可能にする抗体Ｆａｂ発現ライブラリーを構築してもよい（Ｈｕｓｅ ｅｔ ａｌ．， １９８９， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１）。
【００２０】
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合するかまたはこれを改変する本発明の分子はまた化学的化合物を含むことができる。前記には、例えば以下に記載された小分子が含まれるがただしこれらに限定されない：米国特許出願第０９／３７５，０１０号（１９９９年８月１６日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願）；米国特許出願第０９／６０４，３１２号（２０００年６月２７日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願）；米国特許出願第０９／６０５，５８４号（２０００年６月２８日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願）。前記化合物は、下記に示す式Ｉ、式ＩＩ、および式ＩＩＩの化合物並びに医薬的に許容できる式Ｉ、式ＩＩ、および式ＩＩＩの塩を含むが、ただしこれらに限定されない。
【００２１】
【化１】
2004514422.tif 000002
【００２２】
式中、
Ｙは、酸素または硫黄原子であり；
Ｚは、酸素または硫黄原子であり；
Ｘは、式、＞ＣＨＲ１、＞ＮＲ１、＞ＣＨＳＯ２Ｒ１、もしくは＞ＮＳＯ２Ｒ１の二価の基、または酸素もしくは硫黄原子であり；
式中Ｒ１は：
（Ａ）水素原子、
（Ｂ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキル、ここでアルキルまたはシクロアルキル基は以下の（ｉ）から（ｘ）で一置換または多置換されていてもよく：
（ｉ）ハロゲン、
（ｉｉ）オキソ、
（ｉｉｉ）下記から成るクラスから選択されるアリール；フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニル、
ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の基で置換されていてもよく：
（ａ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｂ）−ＣＯＯＨ、
（ｃ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｄ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｅ）式：−ＣＯＯＲ７の基（ここでＲ７は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｆ）式：−ＮＲ８Ｒ９の基（ここでＲ８およびＲ９はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ８およびＲ９は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ８およびＲ９の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｇ）式：−ＣＯＮＲ１０Ｒ１１の基（ここでＲ１０およびＲ１１はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１０およびＲ１１は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ１０およびＲ１１の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｈ）式：−ＯＲ１２ａの基（ここでＲ１２ａは水素原子、１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉ）式：−ＳＲ１２ｂの基（ここでＲ１２ｂは水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｊ）シアノ、または
（ｋ）下記式のアミジノ基：
【００２３】
【化２】
2004514422.tif 000003
【００２４】
（式中、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（ｉｖ）式：−ＣＯＯＲ１６の基（ここでＲ１６は、１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖ）シアノ、
（ｖｉ）式：−ＣＯＮＲ１７Ｒ１８の基（ここでＲ１７およびＲ１８はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１７およびＲ１８は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ１７およびＲ１８の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＯＲ１９の基（ここでＲ１９は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシルである）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＳＲ２０の基（ここでＲ２０は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＮＲ２１Ｒ２２の基［ここでＲ２１およびＲ２２はそれぞれ別個に（ａ）水素原子、（ｂ）１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル、または３から７個の炭素原子のシクロアルキル、（ｃ）式：−（ＣＨ２）ｍＣＯＯＨの基、（ここでｍは０、１または２である）、または（ｄ）式：−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ２３の基（ここでｎは０、１または２で、Ｒ２３は１から６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキルである）であるか、またはＲ２１およびＲ２２は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する］、または
（ｘ）下記式の四級基、
【００２５】
【化３】
2004514422.tif 000004
【００２６】
（式中、Ｒ２４、Ｒ２５およびＲ２６は、それぞれ別個に１から７個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル基であり、Ｑ−は塩素、臭素またはヨウ素対イオンである）、
（Ｃ）３から６個の炭素原子の分枝または非分枝カルボン酸基、
（Ｄ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝ホスホン酸基、
（Ｅ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝スルホン酸基、
（Ｆ）下記式のアミジノ基：
【００２７】
【化４】
2004514422.tif 000005
【００２８】
（式中、ｒは２、３、４、５または６であり、
Ｒ２７、Ｒ２８およびＲ２９はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ２７、Ｒ２８およびＲ２９のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｇ）下記式のグアニジノ基：
【００２９】
【化５】
2004514422.tif 000006
【００３０】
（式中、ｓは２、３、４、５または６であり、さらに
Ｒ３０、Ｒ３１、Ｒ３２およびＲ３３はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ３０、Ｒ３１、Ｒ３２およびＲ３３のうちの２つはさらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｈ）ピペリジル（ここで前記の基の窒素原子は場合によって以下の基で置換されている：（ｉ）１から３個の炭素原子のアルキル、（ｉｉ）２から７個の炭素原子のカルボン酸エステル基、（ｉｉｉ）２から５個の炭素原子のカルボン酸基、（ｉｖ）１から６個の炭素原子のホスホン酸基、または（ｖ）１から６個のスルホン酸基）、または、
（Ｉ）下記から成るクラスから選択されるアリール；フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニル、
ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の基で置換されていてもよく：
（ｉ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
（ｉｉｉ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｉｖ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｖ）式：−ＣＯＯＲ７の基（ここでＲ７は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖｉ）式：−ＮＲ８Ｒ９の基（ここでＲ８およびＲ９はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ８およびＲ９は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＣＯＮＲ１０Ｒ１１の基（ここでＲ１０およびＲ１１はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１０およびＲ１１は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＯＲ１２ａの基（ここでＲ１２ａは水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＳＲ１２ｂの基（ここでＲ１２ｂは水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｘ）シアノ、または
（ｘｉ）下記式のアミジノ基：
【００３１】
【化６】
2004514422.tif 000007
【００３２】
式中、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよく；
Ｒ２は：
（Ａ）水素原子、または
（Ｂ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキル、ここで前記アルキルまたはシクロアルキル基は場合によって下記の基（ｉ）〜（ｘｉｉ）で置換されていてもよく：
（ｉ）式：−ＯＲ３４の基（ここでＲ３４は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、または（ｉｉ）式：−ＮＲ３５Ｒ３６の基（ここでＲ３５およびＲ３６はそれぞれ別個に、水素原子、１から２個の炭素原子のアルキル、または１から２個の炭素原子のアシルである）；
Ｒ３は、式：−（ＣＲ３７Ｒ３８）ｘ（ＣＲ３９Ｒ４０）ｙＲ４１の基であり、ここでｘおよびｙは各々別個に０または１であり、Ｒ３７、Ｒ３８およびＲ３９はそれぞれ別個に下記の基であり：
（Ａ）水素原子、（Ｂ）式：−ＯＲ４２の基（ここでＲ４２は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、または（Ｃ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から５個の炭素原子のシクロアルキル、
Ｒ４０は下記であり：
（Ａ）水素原子、（Ｂ）式：−ＯＲ４２の基（ここでＲ４２は、水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、（Ｃ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から５個の炭素原子のシクロアルキル、または（Ｄ）下記の基から成るクラスから選択されるアリール；フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニル、
ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の基で置換されていてもよく：
（ｉ）Ｒ４３、前記Ｒ４３は下記の基から成るクラスから選択されるアリールである；フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニル、
ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらにそれぞれ別個に下記の（ａ）から（ｍ）で置換されていてもよく：
［（ａ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキルは、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、
（ｂ）−ＣＯＯＨ、
（ｃ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｄ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｅ）式：−ＣＯＯＲ４４の基（ここでＲ４４は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｆ）式：−ＮＲ４５Ｒ４６の基（ここでＲ４５およびＲ４６はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ４５およびＲ４６は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｇ）式：−ＣＯＮＲ４７Ｒ４８の基（ここでＲ４７およびＲ４８はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ４７およびＲ４８は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｈ）式：−ＯＲ４９の基（ここでＲ４９は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉ）式：−ＳＲ５０の基（ここでＲ５０は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、
（ｊ）シアノ、
（ｋ）ニトロ、
（ｌ）下記式のアミジノ基：
【００３３】
【化７】
2004514422.tif 000008
【００３４】
（式中、Ｒ５１、Ｒ５２およびＲ５３は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ５１、Ｒ５２およびＲ５３のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）；
（ｍ）ハロゲン］、
（ｉｉ）メチル（前記メチル基はフッ素原子で一置換もしくは多置換されていてもよく、さらにＲ４３で一置換されていてもよい）、
（ｉｉｉ）２から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル，または３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキル基は、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、
（ｉｖ）式：−ＣＯＯＲ５４の基（ここでＲ５４は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖ）式：−ＮＲ５５Ｒ５６の基（ここでＲ５５およびＲ５６はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ５５およびＲ５６は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ５５およびＲ５６の１つはさらに別に基Ｒ４３であってもよい）、
（ｖｉ）式：−ＣＯＮＲ５７Ｒ５８の基（ここでＲ５７およびＲ５８はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ５７およびＲ５８は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ５７およびＲ５８の１つはさらに別に基Ｒ４３であってもよい）、
（ｖｉｉ）式：−ＣＯＲ５９の基（ここでＲ５９は水素原子、１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、３から５個の炭素原子のシクロアルキル、またはＲ４３である）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＯＲ６０の基（ここでＲ６０は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ４３である）、
（ｉｘ）式：−ＳＲ６１の基（ここでＲ６１は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ４３である）、
（ｘ）シアノ、
（ｘｉ）ニトロ、または
（ｘｉｉ）ハロゲン、
Ｒ４１は、フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニルから成るクラスから選択されるアリールであり、
ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（Ａ）から（Ｌ）で置換されていてもよく：
（Ａ）Ｒ６２、前記Ｒ６２は下記の基から成るクラスから選択されるアリールである；フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニル、
［ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらにそれぞれ別個に下記の（ｉ）から（ｘｉｉｉ）で置換されていてもよく：
（ｉ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキル基は、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、
（ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
（ｉｉｉ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｉｖ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｖ）式：−ＣＯＯＲ６３の基（ここでＲ６３は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖｉ）式：−ＮＲ６４Ｒ６５の基（ここでＲ６４およびＲ６５はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ６４およびＲ６５は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＣＯＮＲ６６Ｒ６７の基（ここでＲ６６およびＲ６７はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ６６およびＲ６７は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＯＲ６８の基（ここでＲ６８は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＳＲ６９の基（ここでＲ６９は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、
（ｘ）シアノ、
（ｘｉ）ニトロ、
（ｘｉｉ）下記式のアミジノ基：
【００３５】
【化８】
2004514422.tif 000009
【００３６】
（式中、Ｒ７０、Ｒ７１およびＲ７２は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキルであり、さらに、Ｒ７０、Ｒ７１およびＲ７２のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）；または
（ｘｉｉｉ）ハロゲン］、
（Ｂ）メチル（前記メチル基はフッ素原子で一置換もしくは多置換されていてもよく、さらにＲ６２で一置換されていてもよい）、
（Ｃ）２から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル，または３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキルは、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、
（Ｄ）式：−ＣＯＯＲ７３の基（ここでＲ７３は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（Ｅ）式：−ＮＲ７４Ｒ７５の基（ここでＲ７４およびＲ７５はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ７４およびＲ７５は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ７４およびＲ７５の１つはさらに別に基Ｒ６２であってもよい）、
（Ｆ）式：−ＣＯＮＲ７６Ｒ７７の基（ここでＲ７６およびＲ７７はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ７６およびＲ７７は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ７６およびＲ７７の１つはさらに別に基Ｒ６２であってもよい）、
（Ｇ）式：−ＣＯＲ７８の基（ここでＲ７８は水素原子、１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、３から５個の炭素原子のシクロアルキル、またはＲ６２である）、
（Ｈ）式：−ＯＲ７９の基（ここでＲ７９は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ６２である）、
（Ｉ）式：−ＳＲ８０の基（ここでＲ８０は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ６２である）、
（Ｊ）シアノ、
（Ｋ）ニトロ、または
（Ｌ）ハロゲン、
Ｒ４はＣｌまたはトリフルオロメチルであり；さらに
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に水素、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素原子、メチルまたはトリフルオロメチルである。
式（ＩＩ）は下記で、
【００３７】
【化９】
2004514422.tif 000010
【００３８】
式中、
Ａ１は＝Ｎ−または＝Ｃ（Ｈ）−であり；
Ａ２は＝Ｎ−、＝Ｃ（Ｈ）−または＝Ｃ（Ｒ´）−（ここでＲ´はハロゲン、−ＣＮ、−Ｏアルキル、−ＣＯ２アルキルまたは−ＳＯ２アルキル（ここで前記アルキル部分は１から３個の炭素原子を有する）である）であり；
Ｄは＝Ｎ−、＝Ｃ（Ｒ１）−、＝Ｃ（Ｈ）−、＝Ｃ（ＳＯ２Ｒ１）−、＝Ｃ（Ｓ（Ｏ）Ｒ１）−、＝Ｃ（Ｃ（Ｏ）Ｒ１）−、＝Ｃ（Ｃ（Ｏ）Ｈ）−、＝Ｃ（ＳＲ１ａ）−、＝Ｃ（ＯＲ１ａ）−または＝Ｃ（ＮＨＲ１ａ）−であり、ここでＲ１は以下の（Ａ）から（Ｋ）から成るクラスから選択され：
（Ａ）−Ｒ１００、前記−Ｒ１００は１から６個の炭素原子の分枝または非分枝アルキル、２から６個の炭素原子のアルケニル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルもしくはシクロアルケニルで、前記アルキル、アルケニル、シクロアルキルまたはシクロアルケニル基では、１つまたは２つ以上の水素原子は場合によってさらにそれぞれ別個に以下の（ｉ）から（ｘｉｉ）で置換されており：
（ｉ）ハロゲン、
（ｉｉ）オキソ、
（ｉｉｉ）アリールまたはヘテロアリール（前記アリールまたはヘテロアリールは、フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択される）、［ここで、前記アリールまたはヘテロアリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（ａ）から（ｎ）で置換されていてもよく：
（ａ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｂ）−ＣＯＯＨ、
（ｃ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｄ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｅ）式：−ＣＯＯＲ８の基（ここでＲ８は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｆ）式：−ＮＲ９Ｒ１０の基（ここでＲ９およびＲ１０はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシル、または、Ｒ９およびＲ１０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ９およびＲ１０の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｇ）式：−ＣＯＮＲ１１Ｒ１２の基（ここでＲ１１およびＲ１２はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１１およびＲ１２は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ１１およびＲ１２の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらに前記炭化水素架橋内の１つの炭素原子は場合によって−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、ＳＯ２−、−ＮＨ−または−ＮＭｅ−で置換されている）、
（ｈ）式：−ＯＲ１３の基（ここでＲ１３は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉ）式：−ＳＲ１４の基（ここでＲ１４は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｊ）シアノ、または
（ｋ）下記式のアミジノ基：
【００３９】
【化１０】
2004514422.tif 000011
【００４０】
（式中、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（ｌ）ハロゲン、
（ｍ）式：−ＮＨＣＯＮＨアルキルの基（ここでアルキル部分は１から３個の炭素原子を含む）、
（ｎ）式：−ＮＨＣＯＯアルキルの基（ここでアルキル部分は１から３個の炭素原子を含む）］、
（ｉｖ）式：−ＣＯＯＲ１８の基（ここでＲ１８は、１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖ）−ＣＮ、
（ｖｉ）式：−ＣＯＮＲ１９Ｒ２０の基（ここでＲ１９およびＲ２０はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１９およびＲ２０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ１９およびＲ２０の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらに前記炭化水素架橋内の１つの炭素原子は場合によって場合によって−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、ＳＯ２−、−ＮＨ−または−ＮＭｅ−で置換されている）、
（ｖｉｉ）式：−ＯＲ２１の基（ここでＲ２１は水素原子または１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルもしくはアシルで、前記アルキルまたはアシル基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、−ＯＨ、−Ｏアルキル（ここで前記アルキル部分は１から６個の炭素原子を含む）、−ＮＨ２−、−ＮＨＭｅおよび−ＮＭｅ２から成る種類から別個に選択される基で置換されている）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＳＲ２２の基（ここでＲ２２は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基で、前記アルキルまたはアシル基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、−ＯＨ、−Ｏアルキル（ここで前記アルキル部分は１から６個の炭素原子を含む）、−ＮＨ２−、−ＮＨＭｅおよび−ＮＭｅ２から成る種類から別個に選択される基で置換されている）、
（ｉｘ）式：−ＮＲ２３Ｒ２４の基［ここでＲ２３およびＲ２４はそれぞれ別個に（ａ）水素原子、（ｂ）１から７個の炭素原子の直鎖または分枝アルキルもしくはアシル、または３から７個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはアシル基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、−ＯＨ、−Ｏアルキル（ここで前記アルキル部分は１から６個の炭素原子である）、−ＮＨ２−、−ＮＨＭｅおよび−ＮＭｅ２から成る種類から別個に選択される基で置換されている）、（ｃ）式：−（ＣＨ２）ｍＣＯＯＨの基、（ここでｍは０、１または２である）、（ｄ）式：−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ２５の基（ここでｎは０、１または２で、Ｒ２５は１から６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキルである）、または（ｅ）式：−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＲ２５の基（ここでｎは０、１または２で、Ｒ２５は１から６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキルである）である］、
（ｘ）下記式の四級基、
【００４１】
【化１１】
2004514422.tif 000012
【００４２】
（式中、Ｒ２６、Ｒ２７およびＲ２８は、それぞれ別個に１から７個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル基であり、Ｑ−は医薬的に許容できる対イオンである）、
（ｘｉ）Ｎ、Ｏ、ＣおよびＳから選択される３から７個の環原子から成る飽和または部分的不飽和の複素環式基（イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニル、チオモルフォリニル、チアゾリジニル、アゼピニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、ベンゾジオキソリル、テトラヒドロチオフェニルおよびスルホラニルを含むが、ただしこれらに限定されず、前記複素環式基は場合によってオキソで一置換または多置換されている）、
（Ｂ）３から６個の炭素原子の分枝または非分枝カルボン酸基、
（Ｃ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝ホスホン酸基、
（Ｄ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝スルホン酸基、
（Ｅ）下記式のアミジノ基：
【００４３】
【化１２】
2004514422.tif 000013
【００４４】
（式中、ｒは２、３、４、５または６であり、Ｒ２９、Ｒ３０およびＲ３１はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ２９、Ｒ３０およびＲ３１のうちの２つはさらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｆ）下記式のグアニジノ基：
【００４５】
【化１３】
2004514422.tif 000014
【００４６】
（式中、ｓは２、３、４、５または６であり、さらにＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４およびＲ３５はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４およびＲ３５のうちの２つはさらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｇ）アリールまたはヘテロアリール（前記アリールまたはヘテロアリールは下記の基から成るクラスから選択される；フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニル）、［ここで、前記アリールまたはヘテロアリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（ｉ）から（ｘｉ）で置換されていてもよく：
（ｉ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
（ｉｉｉ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｉｖ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｖ）式：−ＣＯＯＲ３６の基（ここでＲ３６は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖｉ）式：−ＮＲ３７Ｒ３８の基（ここでＲ３７およびＲ３９はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ３７およびＲ３８は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＣＯＮＲ３９Ｒ４０の基（ここでＲ３９およびＲ４０はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ３９およびＲ４０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらに前記炭化水素架橋内の１つの炭素原子は場合によって−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、ＳＯ２−、−ＮＨ−または−ＮＭｅ−で置換されている）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＯＲ４１の基（ここでＲ４１は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＳＲ４２の基（ここでＲ４２は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｘ）−ＣＮ、または
（ｘｉ）下記式のアミジノ基：
【００４７】
【化１４】
2004514422.tif 000015
【００４８】
（式中、Ｒ４３、Ｒ４４およびＲ４５は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ４３、Ｒ４４およびＲ４５のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）］、
（Ｈ）式：−ＮＲ４６Ｒ４７の基（ここでＲ４６およびＲ４７は各々別個に水素原子、フェニル（場合によってハロゲンで一置換または多置換されている）、またはＲ１００（Ｒ１００は上記で定義したとおりである）、
（Ｉ）Ｎ、Ｏ、ＣおよびＳから選択される３から７個の環原子から成る飽和または部分的不飽和の複素環式基、またはＮ、Ｏ、ＣおよびＳから選択される８から１１個の原子から成る二環式複素環式基（イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニル、チオモルフォリニル、チアゾリジニル、アゼピニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、ベンゾジオキソリル、テトラヒドロチオフェニルおよびスルホラニルを含むが、ただしこれらに限定されない）、［前記複素環式基は場合によって以下の（ｉ）から（ｘｉ）から成るクラスから選択される成分で場合によって一置換または多置換されている：
（ｉ）オキソ、
（ｉｉ）−ＯＲ１０１［ここでＲ１０１は下記の（ａ）から（ｅ）であり：
（ａ）水素原子、（ｂ）１から７個の炭素原子のアルキル（前記アルキル基のいずれの水素原子も場合によって−ＯＨ、−ＯＲ１１０（Ｒ１１０は１から６個の炭素原子のアルキル部分である）、−ＮＨ２、−ＮＨＭｅまたは−ＮＭｅ２で置換されている）、（ｃ）１から７個の炭素原子のアシル（前記アシル基のいずれの水素原子も場合によって−ＯＨ、−ＯＲ１１１（Ｒ１１１は１から６個の炭素原子のアルキル部分である）、−ＮＨ２、−ＮＨＭｅまたは−ＮＭｅ２で置換されている）、（ｄ）−ＣＯＮＲ１０２Ｒ１０３（ここでＲ１０２およびＲ１０３は各々別個に水素原子または１から７個の原子のアルキルであるか、またはＲ１０２およびＲ１０３は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらに前記炭化水素架橋の１つの炭素原子は場合によって−Ｏ−、−Ｓ−、Ｓ（Ｏ）−、ＳＯ２−、−ＮＨ−または−ＮＭｅ−で置換されている）、または（ｅ）ＣＯＯＲ１０４（ここでＲ１０４は１から７個の原子のアルキルである）］、
（ｉｉｉ）−ＣＯＮＲ１０５Ｒ１０６［ここでＲ１０５およびＲ１０６は各々別個に（ａ）水素原子、（ｂ）１から７個の原子の直鎖もしくは分枝アルキルまたは３から７個の原子のシクロアルキル、（ｃ）ベンゾイル、（ｄ）ベンジル、または（ｅ）フェニル（前記フェニル環は場合によって−ＯＲ１１２で置換されており、前記Ｒ１１２は１から６個の炭素原子のアルキルである）であるか、またはＲ１０５およびＲ１０６は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらに前記炭化水素架橋の１つの炭素原子は場合によって−Ｏ−、−Ｓ−、Ｓ（Ｏ）−、ＳＯ２−、−ＮＨ−または−ＮＭｅ−で置換されている］、
（ｉｖ）−ＣＯＯＲ１０７（ここでＲ１０７は水素原子、１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルである）、
（ｖ）１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、２から７個の炭素原子のアルケニルもしくはアルキニル、または３から７個の炭素原子のシクロアルキル［ここで前記アルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキル基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、（ａ）オキソ、（ｂ）−ＯＨ、（ｃ）−ＯＲ１１３（ここでＲ１１３は１から６個の炭素原子のアルキルである）、（ｄ）−ＯＣＯＣＨ３、（ｅ）−ＮＨ２、（ｆ）−ＮＨＭｅ、（ｇ）−ＮＭｅ２、（ｈ）−ＣＯ２Ｈおよび（ｉ）−ＣＯ２Ｒ１１４（ここでＲ１１４は、１から３個の炭素原子のアルキルまたは３から７個の炭素原子のシクロアルキルである）から成る種類から別個に選択される成分で置換されている］、
（ｖｉ）１から７個の炭素原子のアシル［前記アシルは直鎖でも分枝でもまたは環式でもよく、さらに前記アシル基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、（ａ）−ＯＨ、（ｂ）−ＯＲ１１５（ここでＲ１１５は１から６個の炭素原子のアルキルである）、（ｃ）−ＮＨ２、（ｄ）−ＮＨＭｅ、（ｅ）−ＮＭｅ２、（ｆ）−ＮＨＣＯＭｅ、（ｇ）オキソ、（ｈ）−ＣＯ２Ｒ１１６（ここでＲ１１６は、１から３個の炭素原子アルキルである）、（ｉ）−ＣＮ、（ｊ）ハロゲン原子、（ｋ）イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニル、チオモルフォリニル、チアゾリジニル、アゼピニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、ベンゾジオキソリル、テトラヒドロチオフェニルおよびスルホラニルから成るクラスから選択される複素環、および（ｌ）フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択されるアリールまたはヘテロアリール、から成る種類から別個の選択される成分で置換されている］、
（ｖｉｉ）−ＳＯ２Ｒ１０８［ここでＲ１０８は、（ａ）フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成る群から選択されるアリールまたはヘテロアリール（前記アリールまたはヘテロアリール部分は、場合によって、ハロゲン原子、１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルおよび−ＯＲ１１７（ここでＲ１１７は水素または１から６個の炭素原子のアルキルである）から成るクラスから選択される１つまたは２つ以上の成分で置換されている）、（ｂ）イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニル、チオモルフォリニル、チアゾリジニル、アゼピニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、ベンゾジオキソリル、テトラヒドロチオフェニルおよびスルホラニルから成るクラスから選択される複素環式環基（前記複素環式環基は、場合によって、ハロゲン原子、１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルおよび−ＯＲ１１８（ここでＲ１１８は水素または１から６個の炭素原子のアルキルである）から成るクラスから選択される１つまたは２つ以上の成分で置換されている）、または（ｃ）１から７個の原子の直鎖または分枝アルキル（前記アルキルは、場合によって、ハロゲン原子、１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルおよび−ＯＲ１１９（ここでＲ１１９は水素または１から６個の炭素原子のアルキルである）から成るクラスから選択される１つまたは２つ以上の成分で置換されている）である］、
（ｖｉｉｉ）−ＣＯＲ１０９［ここでＲ１０９は、（ａ）フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択されるアリールまたはヘテロアリール（前記アリールまたはヘテロアリール部分は、場合によって、ハロゲン原子、１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルおよび−ＯＲ１２０（ここでＲ１２０は水素または１から６個の炭素原子のアルキルである）から成るクラスから選択される１つまたは２つ以上の成分で置換されている）、（ｂ）イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニル、チオモルフォリニル、チアゾリジニル、アゼピニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、ベンゾジオキソリル、テトラヒドロチオフェニルおよびスルホラニルから成るクラスから選択される複素環式環基（前記複素環式環基は、場合によって、１つまたは２つ以上のハロゲン原子、１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルまたは−ＯＲ１２１（ここでＲ１２１は水素または１から６個の炭素原子のアルキルである）で置換されている）、または（ｃ）１から７個の原子の直鎖または分枝アルキル（前記アルキル部分は、場合によって、ハロゲン原子、１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルおよび−ＯＲ１２２（ここでＲ１２２は水素または１から６個の炭素原子のアルキルである）から成るクラスから選択される１つまたは２つ以上の成分で置換されている）である］、
（ｉｖ）−ＣＨＯ、
（ｘ）ハロゲン原子、および
（ｘｉ）アリールまたはヘテロアリール（前記アリールまたはヘテロアリールは、フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択される）、
（Ｊ）ハロゲン原子
（Ｋ）−ＣＮ、さらに、
Ｒ１ａはＲ１００であり；
Ｘは酸素または硫黄原子であり；
Ｒ３は、（Ａ）水素原子、または（Ｂ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキル［前記アルキルまたはシクロアルキル基は場合によって、（ｉ）式：−ＯＲ４８の基（ここでＲ４８は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、または（ｉｉ）式：−ＮＲ４９Ｒ５０の基（ここでＲ４９およびＲ５０はそれぞれ別個に、水素原子、１から２個の炭素原子のアルキル、または１から２個の炭素原子のアシルである）で置換されている］であり；
Ｒ４は、式：−（ＣＲ５１Ｒ５２）ｘ（ＣＲ５３Ｒ５４）ｙＲ５５の基であり、式中、
ｘは０または１であり；
ｙは０または１であり；
Ｒ５１、Ｒ５２およびＲ５３はそれぞれ別個に（Ａ）水素原子、（Ｂ）式：−ＯＲ５６の基（ここでＲ５６は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、または（Ｃ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から５個の炭素原子のシクロアルキルであり；
Ｒ５４は（Ａ）式Ｒ５７の基（ここでＲ５７はＲ１の場合と同じ種類からそれそれ別個に選択される）、または（Ｂ）式：−ＯＲ５８の基（ここでＲ５８は、Ｒ１の場合と同じ種類からそれそれ別個に選択される）であり；
Ｒ５５は、アリールまたはヘテロアリール、前記アリールまたはヘテロアリールは、フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択され、ここで、前記アリールまたはヘテロアリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（Ａ）から（Ｌ）で置換されており：
（Ａ）Ｒ５９（前記Ｒ５９は、フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択されるアリールまたはヘテロアリールである）、ここで、前記アリールまたはヘテロアリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらにそれぞれ別個に下記の（ｉ）から（ｉｘ）で置換されており：［（ｉ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキル基は、場合によってハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されている）、（ｉｉ）式：−ＣＯＯＲ６０の基（ここでＲ６０は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、（ｉｉｉ）式：−ＮＲ６１Ｒ６２の基（ここでＲ６１およびＲ６２はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ６１およびＲ６２は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、（ｉｖ）式：−ＣＯＮＲ６３Ｒ６４の基（ここでＲ６３およびＲ６４はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ６３およびＲ６４は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、（ｖ）式：−ＯＲ６５の基（ここでＲ６５は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、（ｖｉ）式：−ＳＲ６６の基（ここでＲ６６は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、（ｖｉｉ）−ＣＮ、（ｖｉｉｉ）ニトロ、または（ｉｘ）ハロゲン］、
（Ｂ）メチル（前記メチル基は場合によってフッ素原子で一置換または多置換されており、さらに場合によってＲ５９で一置換されている）、
（Ｃ）２から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル，または３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキルは、場合によってハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されている）、
（Ｄ）式：−ＣＯＯＲ６７の基（ここでＲ６７は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（Ｅ）式：−ＮＲ６８Ｒ６９の基（ここでＲ６８およびＲ６９はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ６８およびＲ６９は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ６８およびＲ６９の１つはさらに別に基Ｒ５９であってもよい）、
（Ｆ）式：−ＣＯＮＲ７０Ｒ７１の基（ここでＲ７０およびＲ７１はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ７０およびＲ７１は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ７０およびＲ７１の１つはさらに別に基Ｒ５９であってもよい）、
（Ｇ）式：−ＣＯＲ７２の基（ここでＲ７２は水素原子、１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、３から５個の炭素原子のシクロアルキル、またはＲ５９である）、
（Ｈ）式：−ＯＲ７３の基（ここでＲ７３は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ５９である）、
（Ｉ）式：−ＳＲ７４の基（ここでＲ７４は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ５９である）、
（Ｊ）−ＣＮ、
（Ｋ）ニトロ、または
（Ｌ）ハロゲン；
Ｒ５はＣｌまたはトリフルオロメチルであり；
Ｚは、＝Ｎ−または＝Ｃ（Ｒ６）−（ここでＲ６は水素、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素原子、メチルまたはトリフルオロメチルである）であり；さらに
Ｒ７は水素、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素原子、メチル、−ＣＮ、ニトロまたはトリフルオロメチルであるが、ただしＺが＝Ｎ−または＝Ｃ（Ｈ）−のときは、Ｒ７は塩素、トリフルオロメチル、−ＣＮまたはニトロであることを条件とする。
式（ＩＩＩ）は以下のとおりであり：
【００４９】
【化１５】
2004514422.tif 000016
【００５０】
式中、
Ａ１、Ａ２およびＡ３は各々別個に＝Ｎ−または＝ＣＨ−であり；
Ｄは、＝Ｎ−、＝ＣＲ１−、＝ＣＳＯ２Ｒ１−、＝ＣＳＯＲ１−、＝ＣＳＲ１−、＝ＣＯＲ１−、＝ＣＣＯＲ１−、または＝ＣＮＨＲ１−であり、
式中、Ｒ１は、
（Ａ）水素原子、
（Ｂ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキル、ここでアルキルまたはシクロアルキル基は以下の（ｉ）から（ｘ）で一置換または多置換されていてもよく：
（ｉ）ハロゲン、
（ｉｉ）オキソ、
（ｉｉｉ）アリール（前記アリールは、フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択される）、
［ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（ａ）から（ｋ）で置換されていてもよく：
（ａ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｂ）−ＣＯＯＨ、
（ｃ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｄ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｅ）式：−ＣＯＯＲ８の基（ここでＲ８は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｆ）式：−ＮＲ９Ｒ１０の基（ここでＲ９およびＲ１０はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ９およびＲ１０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ９およびＲ１０の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｇ）式：−ＣＯＮＲ１１Ｒ１２の基（ここでＲ１１およびＲ１２はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１１およびＲ１２は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ１１およびＲ１２の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｈ）式：−ＯＲ１３の基（ここでＲ１３は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉ）式：−ＳＲ１４の基（ここでＲ１４は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｊ）シアノ、または
（ｋ）下記式のアミジノ基：
【００５１】
【化１６】
2004514422.tif 000017
【００５２】
（式中、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）］、
（ｉｖ）式：−ＣＯＯＲ１８の基（ここでＲ１８は、１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖ）シアノ、
（ｖｉ）式：−ＣＯＮＲ１９Ｒ２０の基（ここでＲ１９およびＲ２０はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１９およびＲ２０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、Ｒ１９およびＲ２０の間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＯＲ２１の基（ここでＲ２１は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＳＲ２２の基（ここでＲ２２は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＮＲ２３Ｒ２４の基［ここでＲ２３およびＲ２４はそれぞれ別個に（ａ）水素原子、（ｂ）１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル、または３から７個の炭素原子のシクロアルキル、（ｃ）式：−（ＣＨ２）ｍＣＯＯＨの基、（ここでｍは０、１または２である）、または（ｄ）式：−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ２５の基（ここでｎは０、１または２で、Ｒ２５は１から６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキルである）であるか、またはＲ２３およびＲ２４は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する］、または
（ｘ）下記式の四級基、
【００５３】
【化１７】
2004514422.tif 000018
【００５４】
（式中、Ｒ２６、Ｒ２７およびＲ２８は、それぞれ別個に１から７個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル基であり、Ｑ−は塩素、臭素またはヨウ素対イオンである）、
（Ｃ）３から６個の炭素原子の分枝または非分枝カルボン酸基、
（Ｄ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝ホスホン酸基、
（Ｅ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝スルホン酸基、
（Ｆ）下記式のアミジノ基：
【００５５】
【化１８】
2004514422.tif 000019
【００５６】
（式中、ｒは２、３、４、５または６であり、
Ｒ２９、Ｒ３０およびＲ３１はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ２９、Ｒ３０およびＲ３１はさらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｇ）下記式のグアニジノ基：
【００５７】
【化１９】
2004514422.tif 000020
【００５８】
（式中、ｓは２、３、４、５または６であり、さらに
Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３４およびＲ３５はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４およびＲ３５のうちの２つはさらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｈ）アリール（前記アリールは、フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択される）、［ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（ｉ）から（ｘｉ）で置換されていてもよく：
（ｉ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
（ｉｉｉ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｉｖ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｖ）式：−ＣＯＯＲ３６の基（ここでＲ３６は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖｉ）式：−ＮＲ３７Ｒ３８の基（ここでＲ３７およびＲ３８はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ３７およびＲ３８は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＣＯＮＲ３９Ｒ４０の基（ここでＲ３９およびＲ４０はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ３９およびＲ４０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＯＲ４１の基（ここでＲ４１は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＳＲ４２の基（ここでＲ４２は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｘ）シアノ、または
（ｘｉ）下記式のアミジノ基：
【００５９】
【化２０】
2004514422.tif 000021
【００６０】
（式中、Ｒ４３、Ｒ４４およびＲ４５は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ４３、Ｒ４４およびＲ４５のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）］；
（Ｉ）式：−ＮＲ４６Ｒ４７の基（ここでＲ４６およびＲ４７はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ４６およびＲ４７は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（Ｊ）モルフォリノ部分、または
（Ｋ）ハロゲン；
Ｘは酸素または硫黄原子であり；
Ｒ３は、
（Ａ）水素原子、または
（Ｂ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキル［ここで前記アルキルまたはシクロアルキル基は場合によって、（ｉ）式：−ＯＲ４８の基（ここでＲ４８は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、または（ｉｉ）式：−ＮＲ４９Ｒ５０の基（ここでＲ４９およびＲ５０はそれぞれ別個に、水素原子、１から２個の炭素原子のアルキル、または１から２個の炭素原子のアシルである）で置換されていてもよい］であり；
Ｒ４は、式：−（ＣＲ５１Ｒ５２）ｘ（ＣＲ５３Ｒ５４）ｙＲ５５の基であり、ここでｘおよびｙは各々別個に０または１であり、Ｒ５１、Ｒ５２およびＲ５３はそれぞれ別個に（Ａ）水素原子、（Ｂ）式：−ＯＲ５６の基（ここでＲ５６は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、または（Ｃ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から５個の炭素原子のシクロアルキルであり；
Ｒ５４は（Ａ）式：Ｒ５７の基（ここでＲ５７は上記のＲ１と同様に定義される）、（Ｂ）式：−ＯＲ５８の基（ここでＲ５８は上記のＲ１と同様に定義される）；
Ｒ５５は、フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニルから成るクラスから選択されるアリールであり、
ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（Ａ）から（Ｌ）で置換されていてもよく：
（Ａ）Ｒ５９（前記Ｒ５９は下記の基から成るクラスから選択されるアリールである；フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニル、［ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらにそれぞれ別個に下記の（ｉ）から（ｉｘ）で置換されていてもよく：
（ｉ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキルは、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、
（ｉｉ）式：−ＣＯＯＲ６０の基（ここでＲ６０は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルまたは３から５個の炭素原子のシクロアルキル）、
（ｉｉｉ）式：−ＮＲ６１Ｒ６２の基（ここでＲ６１およびＲ６２はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ６１およびＲ６２は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｉｖ）式：−ＣＯＮＲ６３Ｒ６４の基（ここでＲ６３およびＲ６４はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ６３およびＲ６４は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖ）式：−ＯＲ６５の基（ここでＲ６５は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、
（ｖｉ）式：−ＳＲ６６の基（ここでＲ６６は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基である）、
（ｖｉｉ）シアノ、
（ｖｉｉｉ）ニトロ、
（ｉｘ）ハロゲン］、
（Ｂ）メチル（前記メチル基はフッ素原子で一置換もしくは多置換されていてもよく、さらにＲ５９で一置換されていてもよい）、
（Ｃ）２から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル，または３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキル基は、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、
（Ｄ）式：−ＣＯＯＲ６７の基（ここでＲ６７は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（Ｅ）式：−ＮＲ６８Ｒ６９の基（ここでＲ６８およびＲ６９はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ６８およびＲ６９は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ６８およびＲ６９の１つはさらに別に基Ｒ５９であってもよい）、
（Ｆ）式：−ＣＯＮＲ７０Ｒ７１の基（ここでＲ７０およびＲ７１はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ７０およびＲ７１は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ７０およびＲ７１の１つはさらに別に基Ｒ５９であってもよい）、
（Ｇ）式：−ＣＯＲ７２の基（ここでＲ７２は水素原子、１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、３から５個の炭素原子のシクロアルキル、またはＲ５９である）、
（Ｈ）式：−ＯＲ７３の基（ここでＲ７３は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ５９である）、
（Ｉ）式：−ＳＲ７４の基（ここでＲ７４は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ７４である）、
（Ｊ）シアノ、
（Ｋ）ニトロ、または
（Ｌ）ハロゲン、
Ｒ５は塩素またはトリフルオロメチルであり；
Ｚは＝Ｎ−または＝ＣＲ６−で、ここでＲ６は水素、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素原子、メチルまたはトリフルオロメチルであり；さらに
Ｒ７は水素、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素原子、メチル、シアノ、ニトロもしくはトリフルオロメチルであるが、ＺがＮまたは＝ＣＨ−であるときは、Ｒ７は塩素またはトリフルオロメチルであることを条件とする。
【００６１】
本明細書で用いられるように、“医薬的に許容できる対イオン”という用語は、当業者が医薬的に許容できると一般的にみなす任意の対イオンである。医薬的に許容できる対イオンとは何かに関しては以下を参照されたい：Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｍ． Ｂｅｒｇｌｅ， Ｌｙｌｅ Ｄ． Ｂｉｇｈｌｅｙ ａｎｄ Ｄｏｎａｌｄ Ｃ． Ｍｏｎｋｈｏｕｓｅ， ”Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ”， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ６６（１９７７）， １−１９。非限定的な例を挙げれば、塩素、臭素、酢酸および硫酸イオンは医薬的に許容できる対イオンである。
【００６２】
好ましい式Ｉの化合物は、式中が以下のような化合物および医薬的に許容できるその塩である：
Ｙは酸素原子であり；
Ｚは酸素原子であり；
Ｘは式＞ＮＲ１の二価の基であり、ここでＲ１は（Ａ）水素原子、（Ｂ）メチルまたはエチル、または（Ｃ）−ＣＯＣＨ３であり；
Ｒ３は式：−ＣＨ２Ｒ４１の基であり、
式中、Ｒ４１はフェニルであり、ここで前記フェニル基の１つまたは２つ以上の水素原子は必然的にさらにそれぞれ別個に下記の（Ａ）から（Ｄ）で置換されており：
（Ａ）フェニルまたはピリジルから成るクラスから選択されるアリールであるＲ６２［ここで前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は（ｉ）メチルまたは（ｉｉ）ハロゲンで置換されている］、
（Ｂ）メチル（前記メチル基はフッ素原子で一置換または多置換されている）、
（Ｃ）式：−ＣＯＲ７８の基（ここでＲ７８はメチルまたはＲ６２である）、
（Ｄ）ハロゲン；
Ｒ４は塩素原子であり；
Ｒ５は水素原子であり；
Ｒ６は塩素原子である。
【００６３】
好ましい式ＩＩの化合物は、式中が以下のような化合物および医薬的に許容できるその塩である：
Ａ１は＝Ｎ−であり；
Ａ２は＝Ｃ（Ｈ）−であり；
Ｄは＝Ｃ（ＳＯ２Ｒ１）−で、ここでＲ１は以下の（Ａ）および（Ｂ）から成るクラスから選択され：
（Ａ）メチル、および
（Ｂ）ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニルおよびモルフォリニルから成るクラスから選択される飽和複素環式基、｛ここで前記複素環式基は、場合によって以下の（ｉ）から（ｉｘ）から成る種類から別個に選択される成分で一置換または二置換されている：
（ｉ）オキソ、
（ｉｉ）−ＯＲ１０１［ここでＲ１０１は、（ａ）水素原子、（ｂ）１から７個の炭素原子のアルキル（ここで前記アルキル基の１つの水素原子は、場合によって−ＯＨ、−ＯＲ１１０（ここでＲ１１０は１から６個の炭素原子のアルキル成分である）、−ＮＨ２、−ＮＨＭｅまたは−ＮＭｅ２で置換されている）、または（ｃ）１から７個の炭素原子のアシル（ここで前記アシル基の１つの水素原子は、場合によって−ＯＨ、−ＯＲ１１１（ここでＲ１１１は１から６個の炭素原子のアルキル成分である）、−ＮＨ２、−ＮＨＭｅまたは−ＮＭｅ２で置換されている）である］、
（ｉｉｉ）式：−ＣＯＮＲ１０５Ｒ１０６の基［ここでＲ１０５およびＲ１０６はそれぞれ別個に（ａ）水素原子、または（ｂ）１から７個の原子の直鎖もしくは分枝アルキルまたは３から７個の原子のシクロアルキル（ここで前記アルキルまたはシクロアルキル基は、場合によって−ＯＨ、−ＯＲ１２３（ここでＲ１２３は１から６個の炭素原子のアルキル成分である）、−ＮＨ２、−ＮＨＭｅ、−ＮＭｅ２、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニルまたはモルフォリニルで置換されているか、またはＲ１０５およびＲ１０６は３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらに前記炭化水素架橋の１つの炭素は場合によって−Ｏ−、−ＮＨ−または−ＮＭｅ−で置換されている）である］、
（ｉｖ）−ＣＯＯＲ１０７（ここでＲ１０７は水素原子または１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルである）、
（ｖ）１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル［ここで前記アルキル基の１つまたは２つの水素原子は場合によって、（ａ）オキソ、（ｂ）−ＯＨ、（ｃ）−ＯＲ１１３（ここでＲ１１３は１から６個の炭素原子のアルキル）、（ｄ）−ＯＣＯＣＨ３、（ｅ）−ＮＨ２、（ｆ）−ＮＨＭｅ、（ｇ）−ＮＭｅ２、（ｈ）−ＣＯ２Ｈおよび（ｉ）−ＣＯ２Ｒ１１４（ここでＲ１１４は１から３個の炭素原子のアルキルまたは３から７個の炭素原子のシクロアルキルである）から成る種類から別個に選択される成分で置換されている］、
（ｖｉ）１から７個の炭素原子のアシル［ここで前記アシル基は直鎖でも分子鎖でもまたは環式でもよく、さらに前記アシル基の１つまたは２つの水素原子は場合によって、（ａ）−ＯＨ、（ｂ）−ＯＲ１１５（ここでＲ１１５は１から６個の炭素原子のアルキル）、（ｃ）−ＮＨ２、（ｄ）−ＮＨＭｅ、（ｅ）−ＮＭｅ２、（ｆ）−ＮＨＣＯＭｅ、（ｇ）オキソ、（ｈ）−ＣＯ２Ｒ１１６（ここでＲ１１６は１から３個の炭素原子のアルキル）、（ｉ）−ＣＮ、（ｊ）ハロゲン原子、（ｋ）ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニルおよびチオモルフォリニルからなるクラスから選択される複素環、および（ｌ）フェニル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリルおよびオキサゾリルから成るクラスから選択されるアリールまたはヘテロアリールから成るクラスから選択される成分で置換されている］、
（ｖｉｉ）−ＳＯ２Ｒ１０８［ここでＲ１０８は、（ａ）ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニルおよびモルフォリニルからなる種類選択される複素環式基（ここで前記複素環式基は、場合によって１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキルおよび−ＯＲ１１８（ここでＲ１１８は１から６個の炭素原子のアルキルである）から成るクラスから選択される１つの成分で置換されている）である］、
（ｖｉｉｉ）−ＣＯＲ１０９［ここでＲ１０９は（ａ）ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニルおよびモルフォリニルからなるクラスから選択される複素環式基（ここで前記ヘテロシクリルは、場合によってハロゲン、１から６個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または−ＯＲ１２１（ここでＲ１２１は水素または１から６個の炭素原子のアルキルである）から成るクラスから選択される１つの成分で置換されている）である］、および
（ｉｘ）−ＣＨＯ｝；
Ｘは酸素原子であり；
Ｒ３はメチルであり；
Ｒ４は式：−ＣＨ２Ｒ５５の基であり、ここでＲ５５はフェニルであるが、前記フェニルは場合によってその４位で、（Ａ）Ｒ５９ｅは（前記Ｒ５９ｅはフェニル、ピリジルおよびピリミジニルから成るクラスから選択されるアリールまたはヘテロアリールである）、（Ｂ）−ＣＮ、（Ｂ）ニトロまたは（Ｃ）ハロゲンで置換されており；
Ｒ５はＣｌであり；
Ｚは＝Ｃ（Ｈ）−であり；さらに
Ｒ７はＣｌである。
【００６４】
好ましい式ＩＩＩの化合物は、式中が以下のような化合物および医薬的に許容できるその塩である：
Ａ１、Ａ２、およびＡ３は、それぞれ別個に＝Ｎ−または＝Ｃ（Ｈ）−であり；
Ｄは、＝Ｎ−、＝ＣＲ１−、＝ＣＳＯ２Ｒ１−、＝ＣＳＯＲ１−、＝ＣＳＲ１−、＝ＣＯＲ１−、＝ＣＣＯＲ１−、または＝ＣＮＨＲ１−であり、ここでＲ１は以下の（Ａ）から（Ｈ）であり：
（Ａ）水素原子、
（Ｂ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキル、ここで前記アルキルまたはシクロアルキルは以下の（ｉ）から（ｘ）で一置換または多置換されていてもよく：
（ｉ）ハロゲン、
（ｉｉ）オキソ、
（ｉｉｉ）フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択されるアリール、ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下（ａ）から（ｋ）で置換されていてもよく：
（ａ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｂ）−ＣＯＯＨ、
（ｃ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｄ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｅ）式：−ＣＯＯＲ８の基（ここでＲ８は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｆ）式：−ＮＲ９Ｒ１０の基（ここでＲ９およびＲ１０はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ９およびＲ１０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｇ）式：−ＣＯＮＲ１１Ｒ１２の基（ここでＲ１１およびＲ１２はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１１およびＲ１２は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｈ）式：−ＯＲ１３の基（ここでＲ１３は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉ）式：−ＳＲ１４の基（ここでＲ１４は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｊ）シアノ、または
（ｋ）下記式のアミジノ基：
【００６５】
【化２１】
2004514422.tif 000022
【００６６】
（式中、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（ｉｖ）式：−ＣＯＯＲ１８の基（ここでＲ１８は、１から７個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖ）シアノ、
（ｖｉ）式：−ＣＯＮＲ１９Ｒ２０の基（ここでＲ１９およびＲ２０はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ１９およびＲ２０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＯＲ２１の基（ここでＲ２１は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシルである）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＳＲ２２の基（ここでＲ２２は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＮＲ２３Ｒ２４の基［ここでＲ２３およびＲ２４はそれぞれ別個に（ａ）水素原子、（ｂ）１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル、または３から７個の炭素原子のシクロアルキル、（ｃ）式：−（ＣＨ２）ｍＣＯＯＨの基、（ここでｍは０、１または２である）、または（ｄ）式：−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ２５の基（ここでｎは０、１または２で、Ｒ２５は１から６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキルである）であるか、またはＲ２３およびＲ２４は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する］、または
（ｘ）下記式の四級基、
【００６７】
【化２２】
2004514422.tif 000023
【００６８】
（式中、Ｒ２６、Ｒ２７およびＲ２８は、それぞれ別個に１から７個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル基であり、Ｑ−は塩素、臭素またはヨウ素対イオンである）、
（Ｃ）３から６個の炭素原子の分枝または非分枝カルボン酸基、
（Ｄ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝ホスホン酸基、
（Ｅ）２から６個の炭素原子の分枝または非分枝スルホン酸基、
（Ｆ）下記式のアミジノ基：
【００６９】
【化２３】
2004514422.tif 000024
【００７０】
（式中、ｒは２、３、４、５または６であり、
Ｒ２９、Ｒ３０およびＲ３１はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ２９、Ｒ３０およびＲ３１はさらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｇ）下記式のグアニジノ基：
【００７１】
【化２４】
2004514422.tif 000025
【００７２】
（式中、ｓは２、３、４、５または６であり、さらにＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４およびＲ３５はそれぞれ別個に、水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらにＲ３２、Ｒ３３、Ｒ３４およびＲ３５のうちの２つはさらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）、
（Ｈ）フェニル、ナフチル、インドリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジニル、フリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、キノリジニル、シノリニル、プタラニニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルおよびキナゾリニルから成るクラスから選択されるアリール、［ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（ｉ）から（ｘｉ）で置換されていてもよく：
（ｉ）１から３個の炭素原子のアルキル、
（ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
（ｉｉｉ）−ＳＯ２ＯＨ、
（ｉｖ）−ＰＯ（ＯＨ）２、
（ｖ）式：−ＣＯＯＲ３６の基（ここでＲ３６は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（ｖｉ）式：−ＮＲ３７Ｒ３８の基（ここでＲ３７およびＲ３８はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ３７およびＲ３８は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉ）式：−ＣＯＮＲ３９Ｒ４０の基（ここでＲ３９およびＲ４０はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ３９およびＲ４０は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（ｖｉｉｉ）式：−ＯＲ４１の基（ここでＲ４１は水素原子、または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｉｘ）式：−ＳＲ４２の基（ここでＲ４２は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、
（ｘ）シアノ、または
（ｘｉ）下記式のアミジノ基：
【００７３】
【化２５】
2004514422.tif 000026
【００７４】
（式中、Ｒ４３、Ｒ４４およびＲ４５は、各々別個に水素原子または１から３個の炭素原子のアルキルであり、さらに、Ｒ４３、Ｒ４４およびＲ４５のうちの２つは、さらに３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の１つまたは複数の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成してもよい）］、
（Ｉ）式：−ＮＲ４６Ｒ４７の基（ここでＲ４６およびＲ４７はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ４６およびＲ４７は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成する）、
（Ｊ）モルフォリノ成分、または
（Ｋ）ハロゲン；
Ｘは酸素または硫黄原子であり；
Ｒ３は（Ａ）水素原子、または（Ｂ）１から３個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルであり、ここで前記アルキルまたはシクロアルキル基は場合によって、（ｉ）式：−ＯＲ４８の基（ここでＲ４８は水素原子または１から７個の炭素原子のアルキルもしくはアシル基である）、または（ｉｉ）式：−ＮＲ４９Ｒ５０の基（ここでＲ４９およびＲ５０はそれぞれ別個に、水素原子、１から２個の炭素原子のアルキル、または１から２個の炭素原子のアシルである）で置換されていてもよく；
Ｒ４は、式：−ＣＨ２Ｒ５５の基であり、ここでＲ５５は、フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニルから成るクラスから選択されるアリールであり、
ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらに、それぞれ別個に以下の（Ａ）から（Ｌ）で置換されていてもよく：
（Ａ）Ｒ５９（フェニル、２−ナフチル、２−，３−，５−または６−インドリル、２−または３−チオフェニル、２−，３−または４−ピリジル、２−，４−または５−ピリミジニル、２−または３−フリル、１−，２−または３−ピロリル、２−，４−または５−オキサゾリル、２−，４−または５−チアゾリル、１−，３−，４−または５−ピラゾリル、３−，４−または５−イソキサゾリル、１−，２−，４−または５−イミダゾリル、３−，４−または５−イソチアゾリル、４−または５−オキサジアゾリル、１−，４−または５−トリアゾリル、２−チアジアゾリル、３−または４−ピリダジニル、２−ピラジニル、２−トリアジニル、２−，３−，６−または７−インドリジニル、２−，３−，５−または６−イソインドリル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］フラニル、２−，３−，５−または６−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、３−，５−または６−インダゾリル、２−、５−または６−ベンゾチアゾリル、２−，５−または６−ベンゾイミダゾリル、２−，３−，６−または７−キノリニル、３−，６−または７−イソキノリニル、２−または８−プリニル、２−，３−，７−または８−キノリジニル、３−，６−または７−シノリニル、６−または７−プタラニニル、２−，３−，６−または７−キノキサリニル、２−，３−，６−または７−ナフチリジニル、２−，６−または７−プテリジニルおよび２−，６−または７−キナゾリニルから成るクラスから選択されるアリールで、ここで、前記アリール基の１つまたは２つ以上の水素原子は場合によって、さらにそれぞれ別個に、（ｉ）１から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキルまたは３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキルは、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、（ｉｉ）シアノ、（ｉｉｉ）ニトロ、または（ｉｖ）ハロゲンで置換されている）、
（Ｂ）メチル（前記メチル基はフッ素原子で一置換もしくは多置換されていてもよく、さらにＲ５９で一置換されていてもよい）、
（Ｃ）２から６個の炭素原子の分枝もしくは非分枝アルキル，または３から６個の炭素原子のシクロアルキル（前記アルキルまたはシクロアルキル基は、ハロゲンまたはオキソで一置換または多置換されていてもよい）、
（Ｄ）式：−ＣＯＯＲ６７の基（ここでＲ６７は１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、または３から５個の炭素原子のシクロアルキルである）、
（Ｅ）式：−ＮＲ６８Ｒ６９の基（ここでＲ６８およびＲ６９はそれぞれ別個に、水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、３から６個の炭素原子のシクロアルキル、または１から７個の炭素原子のアシルであるか、または、Ｒ６８およびＲ６９は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ６８およびＲ６９の１つはさらに別に基Ｒ５９であってもよい）、
（Ｆ）式：−ＣＯＮＲ７０Ｒ７１の基（ここでＲ７０およびＲ７１はそれぞれ別個に水素原子、１から６個の炭素原子のアルキルもしくはフルオロアルキル、または３から６個の炭素原子のシクロアルキルであるか、またはＲ７０およびＲ７１は、３から５個の炭素原子の飽和炭化水素架橋を構成し、それらの間の窒素原子と一緒になって複素環式環を形成し、さらにＲ７０およびＲ７１の１つはさらに別に基Ｒ５９であってもよい）、
（Ｇ）式：−ＣＯＲ７２の基（ここでＲ７２は水素原子、１から５個の炭素原子の直鎖もしくは分枝アルキル、３から５個の炭素原子のシクロアルキル、またはＲ５９である）、
（Ｈ）式：−ＯＲ７３の基（ここでＲ７３は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ５９である）、
（Ｉ）式：−ＳＲ７４の基（ここでＲ７４は水素原子、１から７個の炭素原子のアルキル、フルオロアルキルもしくはアシル基、またはＲ５９である）、
（Ｊ）シアノ、
（Ｋ）ニトロ、または
（Ｌ）ハロゲン、
Ｒ５は、Ｃｌまたはトリフルオロメチルであり；
Ｚは、＝Ｎ−またはＣＲ６−（ここでＲ６は水素、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素原子、メチルまたはトリフルオロメチルである）であり；
Ｒ７は、水素、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素原子、メチル、シアノ、ニトロまたはトリフルオロメチルであるが、ただしＺがＮまたは＝ＣＨ−であるときは、Ｒ７は塩素またはトリフルオロメチルであることを条件とする。
【００７５】
本発明の分子は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと結合またはこれを改変する能力について、当分野で公知の技術（競合結合アッセイおよび非競合結合アッセイ、例えば放射性イムノアッセイ、ＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイなどが含まれるが、ただしこれらに限定されない）を用いてスクリーニングすることができる。例えば、テスト分子は、競合免疫蛍光アッセイでｍＡｂＲ７．１に対してスクリーニングすることができる。Ｒ７．１と交差競合する分子（すなわち同一〜類似のエピトープと結合する）はＲ３．１である（データは示されていない）。
ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子は、当分野で公知の種々の化合物（酵素、放射性同位元素、蛍光化合物が含まれるが、ただしこれらに限定されない）で標識することができる。本明細書で用いられる標識方法および検出方法は、例えば以下の文献に記載されているような方法である：Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ， １９８８， Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ。
【００７６】
本明細書に記載した分子を標識するために用いることができる酵素には、とりわけビオチン、セイヨウイワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼが含まれる。検出は、酵素に対応する発色性基質を用いる比色法によって実施できる。検出はまた、基質の酵素反応の程度を同じように調製した標準物質と視覚的に比較して実施してもよい。
本明細書に記載した分子を標識するために用いることができる放射性同位元素には、とりわけ１２５Ｉ、１３１Ｉ、３Ｈが含まれる。前記標識された分子は、放射性免疫アッセイ（ＲＩＡ）または放射性プローブを用い、例えばガンマカウンターまたはシンチレーションカウンターを使用することによりまたはオートラジオグラフィーによりｉｎ ｖｉｔｒｏのアッセイで検出できる。
【００７７】
本発明の検出方法で使用するためには、前記分子は好ましくは蛍光化合物、例えばオレゴングリーン（登録商標）４８８−Ｘ、スクシンイミジルエステル６−アイソマー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ， Ｉｎｃ．， Ｅｕｇｅｎｅ ＯＲ）で標識される。蛍光で標識された分子を適切な波長の光に曝露したとき、前記分子の存在は、例えば蛍光顕微鏡またはフロー活性化細胞分類システム（例えばＦＡＣＳｃａｎ）によって蛍光により検出できる。とりわけもっとも一般的に用いられる蛍光標識化合物は、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ローダミン、フィコエリトリン（ＰＥ）、フィコシアニン、アロフィコシアニン、ｏ−フタルアルデヒドおよびフルオレサミンである。
【００７８】
別の特徴では、本発明の分子は、本発明の分子と結合する標識された分子を用いて検出できる。前記標識は上記で述べた標識から選択できる。例えば、Ｒ７．１はヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＥ共役物を用いて検出できる。
本発明のレセプターを占拠する方法の場合、テスト分子は対象者に投与される。対象者は動物（哺乳類、例えばネコ、イヌ、新世界サルおよび旧世界サル、ヒトを含むがこれらに限定されない）である。好ましい実施態様では、対象者はヒトである。
本発明の方法は、ヒトで使用するためにテスト化合物の用量範囲を規定するために用いることができる。
本発明はまた、１つまたは２つ以上の本発明の分子を収納した１つまたは２つ以上の容器を含むキットを提供する。
本発明をさらに以下の実施例（本発明の範囲を全く制限するものではない）で説明する。
【００７９】
実施例
本発明の第一の特徴は、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子の特定方法を含む。
ＬＦＡ−１と結合する分子を特定する分子アッセイ
アッセイの目的：本アッセイプロトコルは、ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子と精製ＬＦＡ−１との結合を抑制する分子を特定する方法を開発するためにデザインした。
実施例１
ＬＦＡ−１は、以前に報告されたプロトコル（Ｍ．Ｊ． Ｄｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４８：２６５４−２６６０）を利用し、ＴＳ２／４ｍＡｂ（米国菌培養収集所；Ｍａｎａｓｓａｓ， ＶＡ）を用いてヒトＪＹまたはＳＫＷ３細胞の２０グラムペレットから精製した。ＬＦＡ−１は、ＴＳ２／４ＬＦＡ−１ｍＡｂセファロースのイムノアフィニティークロマトグラフィーによってＳＫＷ３溶解物から精製し、２ｍＭのＭｇＣｌ２および１％オクチルグルコシドの存在下でｐＨ１１．５で溶出させた。ＴＳ２／４カラムの分画を採集し中和した後、サンプルをプールしプロテインＧアガロースで予備的に清澄にした。
【００８０】
ミセル状のＬＦＡ−１（５０μＬ）を、アッセイ緩衝液（ＡＢ：ｄＰＢＳ＋２ｍＭのＭｇ＋＋）中に約３μｇ／ｍＬの濃度で１時間室温で吸着させることによってマイクロタイタープレートに固定した。非特異的部位は２％のＢＳＡ−ＡＢで３０分封鎖した。続いて、種々の精製ｍＡｂ（１０μｇ／ｍＬで５０μＬ）（ＣＬＢ−ＬＦＡ−１，Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｉｎｃ．， Ｆｌａｎｄｅｒｓ， ＮＪ；Ｒ７．１およびＲ３．１，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｐｈａｒｍｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ．（ＢＩＰＩ）， ＲｉｄｇｅＦｉｅｌｄ， ＣＴで作製された；ＭＨＭ２４，Ｂｉｏｍｅｄｉａ， Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ， ＣＡ；ＴＳ２／４およびＴ／Ｓ１／２２，米国菌培養収集所（Ｍａｎａｓｓａｓ， ＶＡ）；およびｍＡｂ３８，Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｉｎｃ．， Ｆｌａｎｄｅｒｓ， ＮＪ）および５０μＬの化合物１、（（Ｒ）−５−（４−ブロモベンジル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１，５−ジメチルイミダゾリジン−４，５−ジオン）またはその鏡像体（化合物２；ＡＢ中で５μＭ）またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を添加し、３７℃で１時間結合させた。続いてプレートを４回洗浄し、５０μＬのヤギ抗マウス−セイヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）共役物（Ｚｙｍｅｄ， Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ， ＣＡ）を１％ＢＳＡ−ＡＢ中の１／４０００希釈で添加した。３７℃で２０分後、プレートを上記のように洗浄し、さらにアジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）試薬（Ｚｙｍｅｄ， Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ， ＣＡ）２００μＬを添加して結合を可視化させた。約１５分後、吸収を４０５ｎｍで測定した。棒線は、２組のウェルの平均±標準誤差を示している。
【００８１】
結果：図１は、化合物１はＲ３．１およびＲ７．１と精製ＬＦＡ−１との結合を顕著に抑制するが、その鏡像体またはＤＭＳＯコントロールは抑制しないことを示している。上記で述べたように、Ｒ３．１およびＲ７．１は同一または類似のエピトープとの結合と交差競合する（データは示されていない）。化合物１は他の抗ＬＦＡモノクローナル抗体の結合を抑制しなかった。
【００８２】
ＬＦＡ−１と結合する分子を特定する細胞アッセイ
アッセイの目的：本アッセイプロトコル（実施例２から４で例示される）は、ＬＦＡ−１と特異的に結合またはこれを改変する分子と細胞表面のＬＦＡ−１との結合を抑制する分子を特定するためにデザインした。本アッセイはまた、下記実施例５で述べるように、ＬＦＡ−１と特異的に結合する分子で処理された標的細胞上でのＬＦＡ−１レセプターの占拠を決定するために用いることができる。
【００８３】
実施例２：ＳＫＷ−３細胞
フローサイトメトリーを用いて、ＳＫＷ−３細胞（大量のＬＦＡ−１を発現するＴ細胞リンパ腫）へのＲ３．１の結合を調べた。洗浄して数を数えた後、１００μＬのＳＫＷ−３細胞（１×１０７細胞／ｍＬ）を１３．３ｎＭのｍＡｂ３８またはＲ３．１またはＲ１５．７（ＢＩＰＩ（Ｒｉｄｇｅｆｉｅｌｄ， ＣＴ）で作製）および１０μＭの化合物１またはＤＭＳＯ（０．０９％）（陰性コントロール）とともに３７℃で３０分インキュベートした。遠心してＨＢＳＳ（ＧＩＢＣＯ， Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ， ＮＹ）で２回洗浄した後、細胞をヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＥ共役物（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ， Ｃａｍａｒｉｌｌｏ， ＣＡ）（ｄＰＢＳで１：５０に希釈）とともに４℃で２０分インキュベートした。ｄＰＢＳで２回洗浄した後、細胞を５００μＬの１％パラホルムアルデヒドで固定し、ＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ， Ｓａｎ Ｊｏｓｅ， ＣＡ）で分析した。
結果：図２は、化合物１はＲ３．１と細胞結合ＬＦＡ−１との結合を抑制するが、ＤＭＳＯは抑制しないことを示している。実施例１で述べた分子アッセイと同様に、化合物１は、ｍＡｂ３８（また別のＩドメイン結合ｍＡｂ）または抗ＣＤ１８ｍＡｂ、Ｒ１５．７（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．， １９８９， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ８３（６）：２００８−２０１７）の結合は抑制しなかった。
【００８４】
実施例３：ヒト全血細胞
フローサイトメトリーを用いて、Ｒ３．１とヒト全血細胞との結合を調べた。末梢血を健常ドナーから静脈穿刺により得た。Ｒ３．１（３．３ｎＭ）またはＲ７．１（３．３ｎＭ）および種々の希釈の化合物１またはＤＭＳＯ（０．２％）を１００μＬのヒト全血とともに４℃で２０分インキュベートした。遠心しｄＰＢＳで１回洗浄した後、ｄＰＢＳで１：５０に希釈したヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＥ共役物（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ， Ｃａｍａｒｉｌｌｏ， ＣＡ）とともに細胞を４℃で２０分インキュベートした。二次試薬中で４℃１５分インキュベートした後、細胞を溶解し、さらに１００μＬの溶解緩衝液（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ， Ｗｅｓｔｂｒｏｏｋ， Ｍａｉｎｅ）中で１０分室温で固定し、その後、ＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ， Ｓａｎ Ｊｏｓｅ， ＣＡ）による分析の前に各サンプルに１ｍＬの水を添加した。
結果：図３は、化合物１は、用量依存態様でＲ３．１と白血球との結合を抑制するが、ＤＭＳＯは抑制しないことを示している。同じ濃度の化合物は、抗ＣＤ１８ｍＡｂ、Ｒ１５．７の結合を抑制しなかった。
【００８５】
実施例４：Ｆａｂフラグメントの結合の抑制
フローサイトメトリーを用いて、Ｒ３．１Ｆａｂフラグメントとヒト全血細胞との結合の小分子（“化合物”）（例えば以下に記載されたような分子：米国特許出願第０９／３７５，０１０号１９９９年８月１６日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願；米国特許出願第０９／６０４，３１２号２０００年６月２７日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願；米国特許出願第０９／６０５，５８４号２０００年６月２８日Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．出願）による抑制を調べる。
Ｒ３．１Ｆａｂフラグメントは以下のようにパパイン消化によって生成する：０．１Ｍリン酸ナトリウム（ＥＭ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、５０ｍＭ塩化ナトリウム（ＥＭ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）緩衝液（ＰＢＳ）（ｐＨ７．２）に対してＲ３．１を透析し、抗体の濃度を１から５ｍｇ／ｍＬに調節し、５ｍＭのＬ−システイン（Ｓｉｇｍａ， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ）を抗体溶液に加え、直後にパパイン（Ｓｉｇｍａ， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ）を１：４０ｗ／ｗ（抗体：パパイン）で添加する。ウェルの攪拌後、３７℃の温水浴で２から３時間溶液をインキュベートする。ＰＢＳ（５から１０ｍＬ）中の０．２ｍＭのヨードアセトアミドを前記ＡＢ溶液に添加し、これを続いて３０分インキュベートする。フラグメントを還元および非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（ポリアクリルアミドゲル電気泳動）で分析する。
Ｆａｂフラグメントは、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィー（ＰｒｏＳｅｐＡ， Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ， Ｉｎｃ．， Ｓｃａｒｂｏｒｏｕｇｈ， ＭＥ）、続いて陰イオン交換（ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ ｒｅｓｉｎ， Ｐｈａｒｍａｃｉａ）を実施してＦｃ部分から分離する。陰イオン交換の後、アミコンフィルトンシステム（Ａｍｉｃｏｎ Ｆｉｌｔｏｎ ｓｙｓｙｔｅｍ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ））を用い１０Ｋｄのダイアフロ（Ｄｉａｆｌｏ）限外ろ過膜でＦａｂフラグメント溶液を濃縮する。アミノ酸分析を実施して（Ｙａｌｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｅｎｔｅｒ， Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎ， ＣＴ）Ｆａｂ濃度を決定する。
【００８６】
前記Ｒ３．１Ｆａｂフラグメントを製造元（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ， Ｉｎｃ．， Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）の指示にしたがってアレクサ（Ａｌｅｘａ）４８８（登録商標）で標識する。
末梢血は健常ドナーから静脈穿刺により得る。アレクサ４８８（登録商標）で標識したＲ３．１Ｆａｂフラグメント（１０ｎＭ）および種々の希釈の化合物または化合物の非存在下でＦａｂフラグメント（１０ｎＭ）を１００μＬのヒト全血とともに４℃で２０分インキュベートする。遠心しｄＰＢＳで１回洗浄後、細胞を溶解し、さらに１００μＬの溶解緩衝液（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ， Ｗｅｓｔｂｒｏｏｋ， Ｍａｉｎｅ）中で１０分室温で固定し、続いてＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ， Ｓａｎ Ｊｏｓｅ， ＣＡ）による分析の前に各サンプルに１ｍＬの水を添加する。
【００８７】
実施例５：
テスト化合物を対象者に経口的、経粘液的、または非経口的に投与する。前記対象者からテスト化合物投与後種々の時点で末梢血を回収する。ＬＦＡ−１のＲ７．１エピトープと特異的に結合またはこれを改変する分子を前記血液に添加し４℃で２０分インキュベートする。遠心しｄＰＢＳで１回洗浄後、ｄＰＢＳで１：５０に希釈したヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＥ共役物（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ， Ｃａｍａｒｉｌｌｏ， ＣＡ）とともに細胞を４℃で２０分インキュベートする。二次試薬中で４℃１５分インキュベートした後、細胞を溶解し、さらに１００μＬの溶解緩衝液（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ， Ｗｅｓｔｂｒｏｏｋ， Ｍａｉｎｅ）中で１０分室温で固定し、続いてＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ， Ｓａｎ Ｊｏｓｅ， ＣＡ）による分析の前に各サンプルに１ｍＬの水を添加する。
【００８８】
本発明は、本発明の個々の一例を挙げて本明細書に記載した具体的な実施態様によって範囲を制限されず、機能的に同等な方法および成分は本発明の範囲内に包含される。実際、本明細書に記載および例示した実施態様の他に、本発明の多様な改変が、前述の説明および添付の図面から当業者には明白であろう。そのような改変は、添付の請求の範囲内に包含される。
種々の特許出願および文献が本明細書に引用され、それらの内容は参照により本明細書に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、化合物１（５μＭ）、（（Ｒ）−５−（４−ブロモベンジル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１，５−ジメチルイミダゾリジン−２，４−ジオン）による固定ＬＦＡ−１とモノクローナル抗体（ｍＡｂ）との結合の抑制を示す。固定ＬＦＡ−１を種々の抗ＬＦＡ−１ｍＡｂ（ＣＬＢ−ＬＦＡ−１、Ｒ７．１、Ｒ３．１、ＭＨＭ２４、ＴＳ２／４、Ｔ／Ｓ１／２２およびｍＡｂ３８）とともに化合物１（５μＭ）もしくはその鏡像体、化合物２（５μＭ）、またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）コントロールの存在下でインキュベートした。結果は２組のウェルの平均±ＳＥである。
【図２】
図２は、化合物１によるＳＫＷ−３細胞とｍＡｂとの結合の抑制を示す。ＳＫＷ−３細胞を抗ＬＦＡ−１ｍＡｂ（ｍＡｂ３８またはＲ３．１、１３．３ｎＭ）または抗ＣＤ１８ｍＡｂ（ｍＡｂ１５．７、１３．３ｎＭ）とともに化合物１（１０μＭ）またはＤＭＳＯコントロール（０．０９％）の存在下でインキュベートした。結果は２組のウェルの平均±ＳＥである。フローサイトメトリーを用いて蛍光中央値を調べた。
【図３】
図３は、化合物１によるヒトリンパ球とｍＡｂとの結合の用量依存抑制を示す。ヒト全血をｍＡｂ（Ｒ３．１またはＲ１５．７、３．３ｎＭ）および化合物１（１０μＭまたは２μＭ）またはＤＭＳＯコントロール（０．２％）とともにインキュベートした。結果は２組のウェルの平均±ＳＥである。フローサイトメトリーを用いて蛍光中央値を調べた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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