(57)【要約】（Ａ）プロリン、オルニチン又はタンパク質加水分解物、及び（Ｂ）ラムノース、フルクトース又はフコースを含むフレイバー前駆体の混合物を脂肪−ベースの媒体に添加すること及び当該混合物を焼く１０−１２０分間、１００−１４０℃で加熱することを含む、フレイバー濃縮物の製造方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）プロリン、オルチニン又はタンパク質加水分解物、及び
（Ｂ）ラムノース、フルクトース又はフコース、
を含むフレイバー前駆体混合物を脂肪−ベースの媒体に加えること、ならびに、混合物を約１００‐１４０℃へ１０−１２０分間加熱することを含む、
フレイバー濃縮物の製造方法。
【請求項２】
混合物が、少なくとも３０分間、約１２５℃で加熱される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
脂肪−ベースの媒体を加熱し、フレイバー前駆体を加熱された脂肪−ベースの媒体中に分散し、還流下、１２５℃で反応させる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
フレイバー前駆体を１．５％アルカリ水溶液又はｐＨ５．０−８．０の緩衝液又は５−５０％ｗ／ｗの炭酸カリウム溶液中に溶解し、フレイバー前駆体溶液又は懸濁液を生成する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
フレイバー前駆体溶液又は懸濁液が１．５％ｗ／ｗより少ない割合で、加熱された脂肪−ベースの媒体に添加され、還流下、１２５℃で反応させる、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
フレイバー前駆体溶液又は懸濁液が、１．５から５．０％ｗ／ｗの割合で、加熱された脂肪−ベースの媒体に添加され、反応混合物を１０−２０分間、１００℃から１２５℃で加熱し、還流下、１２５℃で反応させる、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
反応前の混合物のｐＨが８．０である、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
ラムノース及びプロリンを用いる、請求項１−７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
ラムノース及びプロリンを５％ｗ／ｗ緩衝液中に溶解し、加熱された脂肪−ベースの媒体に添加し、少なくとも１０分間、１００℃から１２５℃で加熱し、次いで、還流下、１２５℃で１０分間反応させること、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
脂肪−ベースの媒体が無水乳脂肪、カカオバター、カカオ液、複合脂質、リパーゼ加水分解乳脂肪、バター、植物油、中鎖トリグリセリド、トリアセチン又は熱帯性脂肪及びそれらの分画である、請求項１−９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
チョコレート又は複合物チョコレート又はアイスクリームコーティングの製造における、総チョコレート質量に基づく０．０１−５％の量での、請求項１−１０のいずれか一向に記載のフレイバー濃縮物の使用。
【請求項１２】
フレイバー濃縮物がチョコレート又は化合物チョコレート中へ直接混合される、請求項１０又は１１に記載の使用。
【請求項１３】
フレイバー濃縮物が他のフレイバーとの組み合わせで添加される、請求項１１又は１２に記載の使用。
【請求項１４】
請求項１−１３のいずれかに記載のフレイバー濃縮物を含む、改変されたフレイバー特性を有するチョコレート製品。
【請求項１５】
ミルクチョコレート、ダークチョコレート、ホワイトチョコレート、複合物コーティング、又はアイスクリームコーティングである、請求項１４に記載のチョコレート製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フレイバー濃縮物の調整方法及びそれらのチョコレートの調製における使用に関する。本明細書中で使用されるように、チョコレートという用語は複合物及びアイスクリームコーティングと一般的に呼ばれるチョコレート物質も包含する。
【背景技術】
【０００２】
チョコレートに関連する数多くのフレイバー属性が存在することが知られている。それらのなかには、ココア、乳製品、ロースト、甘味、苦味、フルーティー、麦芽、キャラメル及びビスケット／クッキーの属性がある。特に、キャラメル及びビスケット／クッキーは一定のチョコレート製品においては非常に望ましい属性である。
【０００３】
キャラメル及びビスケットフレイバーの生成は、多くのモデル反応系において記載されてきた。４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン（Ｆｉｒｍｅｎｉｃｈ社の登録商標であるＦｕｒａｎｅｏｌに対応する）は、キャラメルフレイバーに関連した化合物の一つである。４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンは、６−デオキシ−ヘキソース類、例えばラムノース（６−デオキシ−Ｌ−マンノース）、フコース（６−デオキシ−Ｌ−ガラクトース）及び６−デオキシ−フルクトース等、からアミンとの反応により高いレベルで製造し得る（Ｗｏｎｇら（１９８３年）、Ｊ  Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ  ４８：３４９３−３４９７；Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ（１９９８年）、Ｆｏｏｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｆｅｂ  ５２：４０−４６）。特に、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンは、アミンの喪失を経るアマドリ形成によるラムノースとアミンの相互作用、脱水及び環化の後４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンを導く、ジケトンへと導く２，３−エノール化の形成から生成される。塩基性のｐＨでは、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンは、ラムノース単独から生成されるものの、酸性条件下では、アミノ酸（例えば、アルギニン）の存在下でしか生成が見られない。ラムノースとアルギニンの組み合わせは、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンの生成を与え、これは、他の如何なる糖−アミンの組み合わせの４０−５０倍高い（Ｈａｌｅｖａ−Ｔｏｌｅｄｏら（１９９７年）、Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  ４５：１３１４−１３１９；（１９９９年）Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  ４７：４１４０−４１４５）。最大の４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンの生成は、水性バッファー中、温度の上昇（９０℃）と共にｐＨ８．０で見られる。より少量の４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンであれば、塩基触媒のフルクトース分解の間に生成される（Ｓｈａｗら（１９６８年）、Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  １６：９７９−９８２）。
【０００４】
フレイバー前駆体としてのプロリンは還元糖との組み合わせで、水又はエタノールモデルのメイラード反応系において、大規模に研究されてきた。プロリン及びラムノースから生成される化合物群のうちには、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン及び幾つかの２，３−ジヒドロ−（１Ｈ）−ピロリジン類がある（ＳｈａｗとＨｏ（１９８９年）、Ｔｈｅｒｅｍａｌ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｒｏｍａｓ，  ｅｄｓ．Ｐａｒｌｉａｍｅｎｔ  ＴＨ，  Ｍｃｇｏｒｒｉｎ  ＲＪ，  Ｈｏ  Ｃ−Ｔ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，  ＤＣ．；  Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．  １９９０，  Ｐｅｒｆｕｍｅｒ  ＆  Ｆｌａｖｏｒｉｓｔ  １５：６０−６６；  Ｔｒｅｓｓｌら（１９８５年）、Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  ３３：９１９−９２３及びＪ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  ３３：９３４−９２８）。４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンは熱的に不安定であるため、その濃度は、水性反応系のモデル中、１５０℃より高い温度では非常に低下する。ビスケット／パン様／ローストフレイバー属性もまた、多くのモデル系において研究されてきている。プロリンはＨｏｄｇｅら（１９７２年、Ｃｅｒｅａｌ  Ｓｃｉ  Ｔｏｄａｙ  １７：３４‐４０）によって、ローストアロマのための重要なアミノ酸前駆体として記載されている。さらに、Ｓｃｈｉｅｂｅｒｌｅ（１９９０、Ｚ  Ｌｅｂｅｎｓｍ  Ｕｎｔｅｒｓ  Ｆｏｒｓｃｈ  １９１：２０６‐２０９）によって、プロリン及びオルニチンから重要な衝撃化合物である、２‐アセチル‐１‐ピロリンが生成されることが示されている。ＵＳ−Ａ−３６８７６９２号及びＵＳ−Ａ−３７８２９７３においては、プロリンに基づく反応混合物が、環状ケトン類と共に加熱した際に、キャラメル特性を生じることが報告されている。ＵＳ４，０２２，９２０は、プロリン及びラムノース等の６−デオキシ−アルドヘキソースから、エタノール中の還流下、乾燥後に、アマドリ転位化合物が製造されたことを開示している。乾燥させた混合物は食品マトリックス中に加えられ、その後、加熱された。
【０００５】
ＵＳ４，９４９，５９２は、ラムノースを水又はプロピレングリコール中でＰｈｅ、Ａｌａ及びＬｅｕ等のアミノ酸と混合し、未調理の食料品上にコートし、次いでマイクロ波照射に付す方法に向けられている。ＵＳ５，０４１，２９６はまた、食料品と混合する前にマイクロ波照射によって処理されるフレイバー前駆体も開示している。これらの米国特許の両方において、反応物が溶解性でないため、油類は溶媒として有用でなかったことが述べられている。ＥＰ  ０  ３９８  ４１７  Ｂ１もまた、水、エタノール、プロピレングリコール及びグリコール等の他の非脂肪系におけるラムノース及びプロリンの間の反応を開示した。
【０００６】
ＵＳ  ４７０１３３５は、乳脂肪、乳タンパク質、及びラクトース、グルコース及びアラビノース等の糖の穏やかな加熱によって、バター様の濃縮物が生成することを開示した。当該バター様の濃縮物は、それぞれ少なくとも６倍及び２倍に増大した５−ヒドロキシメチル−フルフラール及びマルトールのレベルを含有しており、そしてこれらはベーカリー製品において使用された。ＵＳ  ３，６６３，２３６においては、乳脂肪、糖、植物性脂肪、及び２４−３５％の水を用いた、バターフレイバーの組成物が開示されている。ＵＳ  ４，３４７，２５８は、粉乳を３０−８０％の水の存在下で乳脂肪と反応すると、安定な食品を製造することが開示した。
【０００７】
チョコレートフレイバー反応において、フレイバー前駆体のレベルを上昇させるために数多くの試みがなされてきている。例えば、ＵＳ−Ａ−２，８８７，３８８及びＵＳ−Ａ−２，８３５，５９２は還元糖と、とうもろこし、小麦、ヘンプ、大豆、ライ麦、オーツ麦、ピーナッツ、大麦、動物性の及び魚類のタンパク質加水分解物とを反応させることによる、人工チョコレートフレイバーの製造方法を開示した。ココアフレイバーを増強するための他のアプローチは、遊離アミノ酸のプールを増かすることであった。ＵＳ−Ａ−５，６７６，９９３は、アミノ酸及び還元糖の組み合わせを、例えば、カカオの実の子葉（浸す）、カカオ液、又はカカオバターなどの脂肪マトリックス中でローストすることによるココアフレイバーの増強方法を開示した。ＵＳ−Ａ−５，６７６，９９３によると、ココアフレイバーは、脂肪マトリックス中で、フェニルアラニン、ロイシン、チロシン、アルギニン、バリン、及び／又はイソロイシン等の疎水性遊離アミノ酸及びグルコース、フルクトース、アラビノース等の還元糖又はその混合物を添加することによって増強される。
【０００８】
本発明の目的は、キャラメル及び／又はビスケット／クッキーフレイバーを与えるためにチョコレート中で使用するためのフレイバー濃縮物を調製することである。
【０００９】
本発明の第一の面によると、フレイバー濃縮物の製造方法であって、プロリン、オルニチン又はタンパク質加水分解物（フレイバー前駆体Ａ）及びラムノース、フコース又はフルクトース（フレイバー前駆体Ｂ）を含有するフレイバー前駆体の混合物を、脂肪−ベースの媒体に添加し、混合物を約１００−１４０℃で約１０−１２０分間加熱し、フレイバー混合物を生成することを含む、上記方法が提供される。
【００１０】
好ましくは、反応は１２５℃で３０分間行われる。フレイバー前駆体の濃度は、約５−２５０ｍＭ、好ましくは約５０ｍＭである。好ましくは、脂肪ベースの媒体は無水乳脂肪、カカオバター、リパーゼ加水分解乳脂肪、カカオ液（ｃｏｃｏａ  ｌｉｑｕｏｒ）、バター、植物油、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、トリアセチン、熱帯性脂肪、及びそれらの分画である。
【００１１】
好ましくは、フレイバー前駆体はプロリン、ラムノース及びフルクトースである。フレイバー前駆体の他の組み合わせは、フコース及びオルニチンを包含する。乳又は植物タンパク質加水分解物を用いることもでき、これらは粉乳、カゼイン、ホエー、大豆、小麦、綿、ピーナッツ、米又はえんどう豆タンパク質単離物又は濃縮物から調製することができる。
【００１２】
好ましくは、フレイバー反応は以下の方法によって行い得る：
ｉ）脂肪−ベースの媒体を加熱し、フレイバー前駆体（Ａ）及び（Ｂ）を融解した脂肪−ベースの媒体中に分散し、１２５℃での還流下反応させる。これは、好ましくは攪拌下で行う。この方法において、フレイバー前駆体は脂肪−ベースの媒体に、水分の添加なしに直接添加される。
【００１３】
ｉｉ）フレイバー前駆体Ａ及びＢはまた、アルカリ水溶液、ｐＨ５．０−８．０の緩衝液又は５−５０％の炭酸カリウム溶液中に溶解させて、フレイバー前駆体溶液又は懸濁液を生成してもよく、当該溶液又は懸濁液は次いで、融解した脂肪中に１．５％（ｗ／ｗ）より低いレベルで添加し、攪拌下、１２５℃での還流下で反応させる。好ましくは、反応前の混合物のｐＨは８．０である。
【００１４】
ｉｉｉ）フレイバー前駆体Ａ及びＢをアルカリ水溶液、ｐＨ５．０−８．０の緩衝液、又は５−５０％の炭酸カリウム溶液に溶解させてもよい。生成したフレイバー前駆体溶液又は懸濁液を融解した脂肪ベースの媒体に１．５−５％（ｗ／ｗ）より低いレベルで添加し、そうして得られた反応混合物を、容器を閉鎖することなく、攪拌下、１０−２０分間、１００℃から１２５℃で加熱して水分のほとんどを蒸発させ、そして、反応の残りの１０−２０分間を１２５℃で攪拌及び還流下行う。好ましくは、反応前の混合物のｐＨは８．０である。
【００１５】
脂肪ベースの反応系の使用は、以下の結果を確保する：
ｉ）フレイバー濃縮物のチョコレート製品への混合についての混和性。例えば、無水乳脂肪は、チョコレートと混和性であり、多くの化合物コーティング及びカカオバターはチョコレートと混和性である。しかしながら、プロピレングリコール（ＰＧ）及びグリセロールはチョコレート及び化合物コーティングの粘性を上昇させ、菓子用途に関する最適の堆積又はコーティング及びアイスクリームコーティング用途における最適の浸漬を妨げる。
ｉｉ）不安定な化合物の上昇した安定性。さらに、乳脂肪の加熱の間、例えば、メチルケトン、ラクトン、及び短鎖脂肪酸等のフレイバー活性化合物が存在し、又は、生成される可能性があり、反応混合物の品質をさらに向上する。しかしながら、ＰＧ、グリセロール、又は、水ベースの反応フレイバーはチョコレートへの混合に有用であることは示されていない。
ｉｉｉ）脂肪の溶媒としての使用は、１００℃を越える温度での大気圧の使用を可能にする。
ｉｖ）脂肪−ベースの反応の使用により、フレイバー濃縮物の独自性が得られる。
【００１６】
好ましくは、ラムノース及びプロリンフレイバー前駆体は使用され、それは、５％緩衝液（１００ｍＭ、燐酸ナトリウム  ｐＨ８．０）に溶解され、加熱された脂肪ベースの媒体、好ましくは無水乳脂肪に添加された。反応混合物を、反応器を閉じることなく、１００℃から１２５℃で、１０分間加熱し、水分のほとんどを蒸発させた。反応の残りの２０分を脂肪ベースの媒体において、還流下、１２５℃で行った。この方法は、最大の４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン濃度を可能にした。このように、本発明は、古典的な水性系と比較して、キャラメル及びビス家とフレイバーの生成において、驚くほど積極的な結果を有する。
【００１７】
プロリンは、キャラメル、及び、ビスケット／パン／ローストタイプのアロマ揮発物の前駆体であることから、プロリンをアミンフレイバー前駆体として使用した。脂肪ベースの媒体中でのプロリン及びラムノースの間の反応は、幅広いフレイバー活性化合物を製造する。キャラメル及びビスケット／パン／ローストフレイバーのそれぞれに関連する、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン及び２−アセチル−１−ピロリンを記載された発明の化学的マーカーとして使用した。４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンは反応フレイバー製品のほとんどにおいて主要化合物であった。豊かで、バランスのとれたフレイバーは、反応で生成された化合物の混合物によって与えられていた可能性が最も高い。反応混合物中の他の化合物の例は、３−ヒドロキシ２−ブタノン（アセトイン）、１−ヒドロキシ２−プロパノン（アセトール）、５−メチルフルフラール、２−ヒドロキシ３−メチル２−シクロペンテン−１−オン（コリロン）、及び４−アセトキシ２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンであった。驚くべきことに、脂肪ベースの反応系において、プロリンは最高レベルの４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン蓄積を与えたことが見出された。しかしながら、フレイバー濃縮物の芳香は言及した化合物のいずれにも連結されない又は限定されないことがある。
【００１８】
ｐＨ８．０の５％緩衝液は、改善されたフレイバー前駆体の溶解性、それによる高い４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン生成及び脂肪混合物の強いキャラメルフレイバーを促進させた。しかしながら、例えば、１．５％等への水相の削減であっても、水分蒸発を含む反応の第一段階を避けるために有益である。フレイバー前駆体に伴う、水性溶液の添加をなしに反応を行うことも可能である。特に、この方法は直接脂肪相中で特定の芳香を安定化するために好ましい。
【００１９】
ラムノースとの全ての脂肪ベースの反応は、強力なキャラメル及びビスケット／クッキーフレイバーを与えた。より安価な糖フレイバー前駆体であるフルクトースとの反応は、実質的に低い４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンの量を与えた。プロリンに対するフルクトースの割合を増加することにより４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンのレベルならびにキャラメルフレイバーを上昇させることができた。５０ｍＭプロリン及び１００ｍＭフルクトースとの無水乳脂肪中での反応は、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンのレベルのさらなる上昇ならびに強力なキャラメル及びビスケット／クッキーフレイバーを与えた。従って、フルクトース及びプロリンはまた、脂肪−ベースのフレイバー反応におけるフレイバー前駆体としても使用できる。
【００２０】
本発明のさらなる面は、チョコレート全体の質量に基づいて０．０１−５質量％、好ましくは０．５質量％のフレイバー濃縮物を使用する、上記のフレイバー濃縮物のチョコレート（複合物を含む）の製造における使用に向けられている。好ましくは、フレイバー濃縮物はチョコレートに直接混合される。フレイバー濃縮物は、チョコレートと混和性の成分中で直接生成されるため、チョコレート塊への混合の前に乾燥又は抽出は一切必要ない。これらのフレイバー濃縮物は、チョコレートにキャラメル及び／又はクッキー／ビスケットノートを与える。フレイバー濃縮物は単独で、又は他のフレイバーとの組み合わせで添加することができる。
【００２１】
本発明のさらに他の面によると、上記のフレイバー濃縮物を含む、改変されたフレイバー特性を有するチョコレート製品が提供される。そのようなチョコレート製品には、例えばバーやアイスクリームコーティングで用いる、ミルク、ダーク及びホワイトチョコレート並びに複合物コーティングが包含される。
【００２２】
本発明を、以下の非限定的な例に言及しながら、さらに詳しく説明する：
以下の方法及びレシピを実験の中で使用した。
【００２３】
揮発物分析をガス−質量分光測定と組み合わせたＳＰＭＥ（固相マイクロ抽出）を用いて行った。フレイバー濃縮物、チョコレート及び化合物の官能検査は、６−９人の訓練された味の鑑定人のパネルによって行われた。
【００２４】
以下の実験で使用されたチョコレートは、以下の一般的な調合及び方法による、チョコレート加工によって調製された。ホワイトチョコレートは、結晶糖（４０−５５％）、カカオバター（２０−２６％）、スキムミルク粉末（１６−２５％）、乳脂肪（６−１０％）及び大豆レシチン（０．１−０．５％）を含んでいた。以下の実験で用いられたミルクチョコレートは、カカオバター（１５−２２％）、糖（４０−５５％）、カカオ液（１０−１８％）、乳脂肪（４−７％）及びスキムミルク粉末（１０−１５％）を含んでいた。
【００２５】
以下の実験で使用したホワイトチョコレート菓子複合物コーティングは、結晶糖（２５−６０％）、菓子コーティング脂肪（２４−４０％）、粉乳（５−２５％）、バニリン（０．０１−０．１％）及び大豆レシチン（０．０１−０．５％）を含んでいた。ミルクチョコレート菓子複合物コーティングは結晶糖（２５−６０％）、菓子コーティング脂肪（２４−４０％）、粉乳（５−２５％）、カカオ粉末（３−２０％）、バニリン（０．０１−０．１％）及び大豆レシチン（０．０１−０．５％）を含んでいた。ホワイトチョコレート複合物アイスクリームコーティングは結晶糖（３０−４０％）、コーティング脂肪（３４−５４％）、粉乳（１８−３０％）、大豆レシチン（０．２−１．１％）及びバニリン（０．０１−０．０６％）を含んでいた。ミルクチョコレート複合物アイスクリームコーティングは結晶糖（２５−４０％）、コーティング脂肪（３４−５４％）、粉乳（４−１９％）、カカオ粉末（３−１３％）、大豆レシチン（０．２−１．１％）及びバニリン（０．０１−０．０６％）を含んでいた。
【００２６】
例１：
温度調節を備えた丸底三つ首攪拌反応器中でフレイバー反応を行った。無水乳脂肪（８０ｇ）を反応器中で溶解し、１２５℃へ加熱した。乳脂肪の温度が１２５℃に到達した時に、フレイバー前駆体、ラムノース（５０ｍＭ）及びプロリン（５０ｍＭ）を直接乳脂肪と共に添加するか、又は別々に添加した。ラムノース及びプロリンは、乳脂肪中、還流下１２５℃で６０分間反応させた。反応した物質を室温まで冷まし、４℃又は室温で保存した。フレイバーをチョコレート塊中へ、０．５％の添加レベルで混合した。
【００２７】
複合物への混合
１グラムの反応フレイバーを１９９グラムの完全に溶解した複合物塊に添加し、手で完全に混合し、２０グラムのバーへと生成した。冷却後、バーを取り出し、少なくとも４時間、室温と平衡にした。テイスティングの前に、試料を１５℃で平衡にした。
【００２８】
ホワイト及びミルクチョコレートへの混合
１グラムの反応フレイバーを１９９グラムの完全に融解したチョコレートの塊に添加し、手で５０℃で混合し、試料を均質化した、次いで前結晶化し、５ｇのバーへと成形した。冷却に続いて、バーを取り出し、少なくとも４時間、室温へと平衡化させた。テイスティングの前に試料を１−３０日間、１５℃で平衡化させた。
【００２９】
チョコレート試料を６−９名の訓練されたパネリストによるブラインドテイスティングにより評価した。全ての試料を、一切混合していない対照チョコレート塊と比較した。脂肪−ベースのフレイバーの混合は、チョコレート塊中のキャラメル、ビスケット及びクッキー属性の強い増強を与えた。
【００３０】
フレイバー濃縮物の揮発物分析を、ガスクロマトグラフィー−質量分光測定と組み合わせた固相マイクロ抽出（ＳＰＭＥ）を用いて行った。４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン及び２−アセチル−１−ピロリンをキャラメル及びビスケットフレイバー発生の化学的マーカーとしてそれぞれ選択した（図４）。４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンがクロマトグラムにおける主要なピークであった。２−アセチル−１−ピロリンもまた反応混合物中に同定された。脂肪系における反応が４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンの高い蓄積を容易にすることが図１から明らかである。さらに、フレイバー前駆体としてのプロリンは、アルギニン（図２）と比較して、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンの蓄積を容易にすることがさらに示されている。
【００３１】
例２
１．５％のアルカリ水溶液（ストック溶液：２０ｍｌの水中に５０％ＮａＯＨ４滴）をラムノース及びプロリンと添加したことを除き、例１に従ってフレイバー反応を行った。このアプローチは、塩基性ｐＨでの反応を容易にし、前駆体の溶解性を増加する。例１に記載した０．５％の脂肪ベースフレイバーのチョコレートへの混合は、キャラメル、ビスケット及びクッキーの属性を与えた。最も強いキャラメルフレイバーは反応の３０分後に達成された。
【００３２】
例３：
ラムノース及びプロリンフレイバー前駆体を１００ｍＭのｐＨ８．０のＮａ−燐酸塩緩衝液に溶解させて乳脂肪が１００℃に到達した時に添加したことを除き、例１に従って、フレイバー反応をおこなった。このアプローチは、塩基性ｐＨにおける反応を容易にし、前駆体の溶解度を上昇させた。混合物を、水分のほとんどが蒸発し、生成物温度が１２５℃に到達するまで反応器を閉じることなく加熱した。反応を１２５℃の還流下で続行した。総反応時間は、３０−６０分であった。例１に記載の０．５％の脂肪ベースのフレイバーのチョコレートへの混入は、キャラメル、ビスケット及びクッキー等の属性を与えた。最も強いキャラメルフレイバーは反応の３０分後に達成された。強いキャラメルフレイバーは高い４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンレベルと相関していた（図１）。
【００３３】
例４
フレイバー前駆体を５０ｍＭフルクトース及び５０ｍＭプロリンとしたことを除き、例１に従ってフレイバー反応を行った。脂肪ベースのフレイバー０．５％のチョコレートへの混合は、キャラメル及びビスケットの属性を与えた。最も強いビスケットフレイバーは６０分の反応後に達成された。無水乳脂肪中のフルクトース／プロリン反応は２−アセチル−１−ピロリンの最も高い蓄積を与えた（図３）。４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンのレベルはラムノースとの反応と比較すると、より低かった（図２）。
【００３４】
例５
フレイバー前駆体が１００ｍＭフルクトース及び５０ｍＭプロリンであったことを除き、例４に従って、フレイバー反応を行った。０．５％の脂肪−ベースのフレイバーのチョコレートへの混合は、キャラメル、クッキー及びビスケット糖の属性を与えた。キャラメル属性は、５０から１００ｍＭへフルクトース濃度を上げることによって増大された。
【００３５】
例６：
フレイバー前駆体が１％フルクトース及び１％カゼイン加水分解物であることを除き、例４に従ってフレイバー反応を行った。カゼイン加水分解物はＦｌａｖｏｕｒｚｙｍｅ  １０００Ｌ（デンマークのＮｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋからの真菌プロテアーゼ／ペプチダーゼ混合物）を用いて標準的な方法により調製した。加水分解は、約５０％の加水分解度を達成するために、タンパク質の１質量％の酵素を用いて５０℃で行った。５％の脂肪−ベースのフレイバーのチョコレート中への混合は、キャラメル属性の増加を与えた。
【００３６】
例７
ビスケット／パン／ベークの効果の化合物の前駆体として公知のオルニチンもまた乳脂肪系において反応させた。フレイバー前駆体を５０ｍＭラムノース及び５０ｍＭオルニチンとしたことを除き、例２にしたがって、フレイバー反応を行った。チョコレートへの１．０％の脂肪−ベースのフレイバーの混合はキャラメル属性の増加を与えた。オルニチンによるフレイバー効果が得られたものの、プロリンよりもはっきりしていなかった。
【００３７】
例８
フレイバー前駆体５０ｍＭフコース及び５０ｍＭプロリンにしたことを除き、例１に従って、フレイバー反応を行った。チョコレートへの１．０％の脂肪ベースのフレイバーの混合は、キャラメル及びビスケット属性の増加を与えた。
【００３８】
例９
カカオバターを反応媒体として使用し得る。反応媒体をカカオバターとしたことを除き、例１にしたがってフレイバー反応を行った。フレイバー前駆体は、５０ｍＭラムノース及び５０ｍＭプロリンであった。チョコレートへの１．０％の脂肪−ベースのフレイバーの混合は、キャラメル及びビスケット属性の増大を与えた。ｐＨ８．０、５％緩衝液の存在下のプロリン／ラムノースの組み合わせが高い４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン濃度を得るために最適であることが証明された。これらの試料において、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン濃度は高かったものの、乳脂肪中の反応フレイバーを用いて調製したチョコレートサンプルと比較して、パネリストによるキャラメル属性の知覚は低かった。従って、乳脂肪は最終的なチョコレートに混合された時、乳脂肪はフレイバーに貢献するようだった。
【００３９】
例１０
反応媒体をカカオ液としたことを除き、例３にしたがってフレイバー反応を行った。フレイバー前駆体は５０ｍＭラムノース及び５０ｍＭプロリンであった。チョコレートへの脂肪−ベースのフレイバーの１．０％の混合は、キャラメル及びビスケット属性の増加を与えた。
【００４０】
例１１
反応媒体をリパーゼ加水分解乳脂肪とした以外、例５にしたがって、フレイバー反応を行った。加水分解は、固定化リパーゼ、デンマークのＮｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ｌｉｐｏｚｙｍｅ  ＲＭ  ＩＭを用いて行った。フレイバー前駆体は５０ｍＭのプロリン及び１００ｍＭのフルクトースであった。０．２％の脂肪−ベースのフレイバーのチョコレート中への混合により、キャラメル、ビスケット、及びチーズ様属性の増大が得られた。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】ラムノース／プロリン脂肪−ベース反応フレイバー中の４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンの蓄積に対する反応媒体の効果を示す図である。
【図２】無水乳脂肪中、６０分間１２５℃で生成した反応フレイバー中の４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノンの蓄積に対するアミノ酸及び糖フレイバー前駆体の効果を示す図である。
【図３】無水乳脂肪中、６０分間１２５℃で生成した反応フレイバー中の２−アセチル−１−ピロリンの蓄積に対するアミノ酸及び糖フレイバー前駆体の効果を示す図である。
【図４】水性緩衝液の添加なしに無水乳脂肪中で１２５℃で３０分間反応させた５０ｍＭラムノース及び５０ｍＭプロリンから調製されたフレイバー濃縮物のクロマトグラム。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【手続補正書】
【提出日】平成15年8月19日(2003.8.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）プロリン、オルチニン又はタンパク質加水分解物、及び
（Ｂ）ラムノース、フルクトース又はフコース、
を含むフレイバー前駆体混合物を無水乳脂肪又はリパーゼ加水分解乳脂肪である脂肪−ベースの媒体に加えること、ならびに、混合物を約１００‐１４０℃へ１０−１２０分間加熱することを含む、
フレイバー濃縮物の製造方法。
【請求項２】
混合物が、少なくとも３０分間、約１２５℃で加熱される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
脂肪−ベースの媒体を加熱し、フレイバー前駆体を加熱された脂肪−ベースの媒体中に分散し、還流下、１２５℃で反応させる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
フレイバー前駆体を１．５％アルカリ水溶液又はｐＨ５．０−８．０の緩衝液又は５−５０％ｗ／ｗの炭酸カリウム溶液中に溶解し、フレイバー前駆体溶液又は懸濁液を生成する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
フレイバー前駆体溶液又は懸濁液が１．５％ｗ／ｗより少ない割合で、加熱された脂肪−ベースの媒体に添加され、還流下、１２５℃で反応させる、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
フレイバー前駆体溶液又は懸濁液が、１．５から５．０％ｗ／ｗの割合で、加熱された脂肪−ベースの媒体に添加され、反応混合物を１０−２０分間、１００℃から１２５℃で加熱し、還流下、１２５℃で反応させる、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
反応前の混合物のｐＨが８．０である、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
ラムノース及びプロリンを用いる、請求項１−７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
ラムノース及びプロリンを５％ｗ／ｗ緩衝液中に溶解し、加熱された脂肪−ベースの媒体に添加し、少なくとも１０分間、１００℃から１２５℃で加熱し、次いで、還流下、１２５℃で１０分間反応させること、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
チョコレート又は複合物チョコレート又はアイスクリームコーティングの製造における、総チョコレート質量に基づく０．０１−５％の量での、請求項１−１０のいずれか一向に記載のフレイバー濃縮物の使用。
【請求項１１】
フレイバー濃縮物がチョコレート又は化合物チョコレート中へ直接混合される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
フレイバー濃縮物が他のフレイバーとの組み合わせで添加される、請求項１０又は１１に記載の使用。
【請求項１３】
請求項１−１２のいずれかに記載のフレイバー濃縮物を含む、改変されたフレイバー特性を有するチョコレート製品。
【請求項１４】
ミルクチョコレート、ダークチョコレート、ホワイトチョコレート、複合物コーティング、又はアイスクリームコーティングである、請求項１３に記載のチョコレート製品。請求項１を補正し、請求項１０を削除した。
【国際調査報告】
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