(57)【要約】本発明は、インドロピロロカルバゾール化合物のフルオロシュガーおよび他のシュガー誘導体、これらの塩および水和物、並びにこれらの製造方法を提供し、かかるシュガー誘導体等は選択的トポイソメラーゼ（トポＩ）活性を示し、腫瘍細胞の増殖抑制に有用で、抗腫瘍効果を示す。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2004534006.tif 000046
［式中、ＲaおよびＲbはそれぞれ独立して、ＨおよびＯからなる群から選ばれ、但し、Ｏが選ばれるとき、ＲaとＲbは共に合してＯを形成；
Ｒa'およびＲb'はそれぞれ独立して、ＨおよびＯからなる群から選ばれ、但し、Ｏが選ばれるとき、Ｒa'とＲb'は共に合してＯを形成；
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'はそれぞれ独立して、Ｆ、ＢrおよびＨからなる群から選ばれ；
ＱはＮＨ、ＳおよびＯからなる群から選ばれ；および
Ｒは置換ヘキソース基である］
で示され、約１００以上のトポイソメラーゼＩ選択度指数を有する化合物、またはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、医薬的に許容しうる塩、水和物、プロドラッグもしくは溶媒化合物。
【請求項２】
Ｘ１がＦ；Ｘ１'がＦおよびＢrからなる群から選ばれ；およびＸ２およびＸ２'がＦおよびＨからなる群から選ばれる請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；およびＲa'およびＲb'が共に合してＯを形成する請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'がＨ；および置換ヘキソース基が、
【化２】
2004534006.tif 000047
である請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；ＲaおよびＲbがＨ；および置換ヘキソース基が、
【化３】
2004534006.tif 000048
である請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化４】
2004534006.tif 000049
である請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化５】
2004534006.tif 000050
である請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化６】
2004534006.tif 000051
である請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化７】
2004534006.tif 000052
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化８】
2004534006.tif 000053
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化９】
2004534006.tif 000054
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１０】
2004534006.tif 000055
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘ１およびＸ１'がＦ，Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１１】
2004534006.tif 000056
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１２】
2004534006.tif 000057
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１３】
2004534006.tif 000058
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１４】
2004534006.tif 000059
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１５】
2004534006.tif 000060
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１６】
2004534006.tif 000061
である請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１７】
2004534006.tif 000062
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘ１がＦ；Ｘ１'がＢr；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＯ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１８】
2004534006.tif 000063
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；，Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化１９】
2004534006.tif 000064
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２０】
2004534006.tif 000065
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２１】
2004534006.tif 000066
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２２】
2004534006.tif 000067
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２３】
2004534006.tif 000068
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２４】
2004534006.tif 000069
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２５】
2004534006.tif 000070
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２６】
2004534006.tif 000071
である請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２７】
2004534006.tif 000072
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２８】
2004534006.tif 000073
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｘ１，Ｘ１'，Ｘ２およびＸ２'がＦ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化２９】
2004534006.tif 000074
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化３０】
2004534006.tif 000075
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＳ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化３１】
2004534006.tif 000076
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化３２】
2004534006.tif 000077
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｘ１およびＸ１'がＦ；Ｘ２およびＸ２'がＨ；ＱがＮＨ；ＲaおよびＲbが共に合してＯを形成；Ｒa'およびＲb'が共に合してＯを形成；および置換ヘキソース基が、
【化３３】
2004534006.tif 000078
である請求項１に記載の化合物。
【請求項３６】
トポイソメラーゼＩ選択度指数が、約１０００以上である請求項１に記載の化合物。
【請求項３７】
式：
【化３４】
2004534006.tif 000079
の化合物。
【請求項３８】
式：
【化３５】
2004534006.tif 000080
の化合物。
【請求項３９】
式：
【化３６】
2004534006.tif 000081
の化合物。
【請求項４０】
トポイソメラーゼＩの転形による症状を処置する方法であって、該処置を必要とする哺乳動物種に対し、有効量の請求項１に記載の化合物の少なくとも１種を投与することから成る処置法。
【請求項４１】
症状が癌である請求項４０に記載の処置法。
【請求項４２】
さらに他の抗癌剤の少なくとも１種を組合せて、哺乳動物種に投与する請求項４０に記載の処置法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、選択的トポイソメラーゼ（topoisomerase）Ｉ活性を示し、腫瘍細胞の増殖抑制に有用で、かつ抗腫瘍効果を示す、インドロピロロカルバゾール化合物（indolopyrrolocarbazoles）のフルオロシュガー（fluoro  sugar）および他のシュガー誘導体、これらの塩および水和物、並びにこれらの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
トポイソメラーゼは、生体核酵素であって、ＤＮＡにおけるトポロジーのジレンマ、たとえば、標準的に複製、転写およびことによると他のＤＮＡプロセス中に起こる、オーバーウィンディング（overwinding）、アンダーウィンディング（underwinding）および連鎖を解決するように機能する。これらの酵素は、ＤＮＡを弛緩させるが、これは、他のＤＮＡストランドの通過用の一時的ゲートまたはピボットポイントとして作用する、酵素−ブリッジド（bridged）・ストランド破断の形成による。トポイソメラーゼ−標的薬物は、このＤＮＡトポイソメラーゼの破損−再結合反応を干渉すると思われる。
トポイソメラーゼ−活性作用物質の存在下、“開裂性錯体”と呼ばれる頓挫反応中間体が蓄積して複製／転写を阻止し、これは結局、細胞死に導く。
【０００３】
従って、トポイソメラーゼＩ（トポＩ）−活性作用物質の開発は、癌処置のためクリニックで一般に用いられる多様な統制的療法に対し、新しいアプローチを付与する。最近の記事として、「Ｃancer  Ｃhemother．Ｐharmacol」（３４（増刊）、Ｓ４１−Ｓ４５、１９９４年）に、臨床実験中のトポイソメラーゼＩ−活性化合物が論じられ、これらの化合物は有効な臨床的抗腫瘍剤であることが認められている。これらの臨床的候補化合物は構造上、下記式１のアルカロイド・カンプトセシン（camptothecin）（１）と関係がある。他のカンプトセシン類縁体と関係する報告によれば［「Ｃancer  Ｃommun．」（２、３９５、１９９０年）；「Ｆarm．Ｃlin．」（１４、２５０、２５３、２５６−２５８、１９９７年）］、種々のヒト腫瘍において、選択的トポイソメラーゼＩ抑制特性と効力ある抗腫瘍性活性の相互関係が示唆されている。
【０００４】
加えて、ヒトのトポイソメラーゼＩを過発現する、ヒト結腸癌腫細胞を含む一定の細胞系は、カンプトセシンに対し過敏であることが立証されている［「Ｃancer  Ｒesearch」（５２、５２５、１９９２年）］。
【化１】
2004534006.tif 000002
【０００５】
最近の論評されたハイライトとして、非カンプトセシン・トポイソメラーゼＩ活性作用物質の幾つかが挙げられる［「Ｅxpert  Ｏpin．Ｔher．Ｐat．」（１０：６３５−６６６、２０００）］。さらに、レベッカマイシン（rebeccamycin）種に関係するインドロ［２，３−ａ］カルバゾール誘導体、たとえばＮＢ−５０６が開示され［ＥＰ出願Ｎｏ．０５４５１９５Ｂ１および０６０２５９７Ａ２；「Ｃancer  Ｒesearch」（５３、４９０−４９４、１９９３年）；「ibid」（５５、１３１０−１３１５、１９９５年）］、かつクレームで抗腫瘍活性を示すことが記載されている。しかしながら、これらの誘導体は、選択的トポ（topo）Ｉ毒として作用するカンプトセシンとは異なり、非選択的であって、特別の生物学的効果、たとえばＤＮＡ挿入（intercalation）［「Ｃancer  Ｒesearch」（５５、１３１０、１９９５年）］、チロシン・キナーゼ活性［「Ｍolecular  Ｐharmacol．」（５６、１８５−１９５、１９９９年）］およびトポイソメラーゼＩＩ活性［「Ｐroc．ＡＡＣＲ」（３８、７５、１９９７年）］を示すと報告されている。インドロ［２，３−ａ］カルバゾール・アルカロイド化合物、たとえばレベッカマイシン（Ｕ．Ｓ．特許Ｎｏ．４４８７９２５および４５５２８４２）およびその水溶性の臨床的活性類縁体の、６−（２−ジエチルアミノエチル）レベッカマイシン（Ｕ．Ｓ．特許Ｎｏ．４７８５０８５）は、ＤＮＡを標的にする有用な抗腫瘍剤である。上記に関連する他のインドロカルバゾール化合物も開示され（ＷＯ９５／３０６８２）、かつクレームで抗腫瘍活性を示すことが記載されている。
【０００６】
さらに、フルオロインドロカルバゾール化合物、たとえばＷＯ９８／０７４３３に記載の化合物は、トポイソメラーゼＩ抑制活性を持つ抗腫瘍性作用物質である。Ｕ．Ｓ．特許Ｎｏ．５４６８８４９に、有用な抗腫瘍剤としての特定フルオロレベッカマイシン類縁体、並びにサッカロスリックス・アエロコロニジーンズ（Ｓaccharothrix  aerocolonigenes）、好ましくはサッカロスリックス・アエロコロニジーンズＣ３８３８３−ＲＫ２（ＡＴＣＣ３９２４３）のレベッカマイシン−産生菌株のフルオロトリプトファン類縁体栄養補給による、上記類縁体の製造法が開示されている。
【０００７】
より最近に、Ｐrudhommeらは、全てがいわゆる耐性指数（resistance  index）２０以下を示す、レベッカマイシンから誘導される一連のインドロカルバゾール化合物を報告している［「Ｃurrent  Ｍedicinal  Ｃhemistry」（７、１１８９、２０００年）］。耐性指数は、ＩＣ５０Ｐ３８８ＣＰＴ５／ＩＣ５０Ｐ３８８として定義されるが、ここで、これらのＩＣ５０値はそれぞれ、ハツカネズミ（単にネズミと称す）のカンプトセシン耐性のＰ３８８ＣＰＴ５白血病細胞および親Ｐ３８８細胞に対する抗増殖活性の目安である。
これらの実例に拘らず、トポイソメラーゼＩ活性を選択的に抑制するのに有用で、これによって抗癌剤として使用できる。新規で効力のある細胞毒化合物が必要とされる。
【０００８】
（発明の概要）
本発明は、トポイソメラーゼＩ（トポＩ）活性を示し、腫瘍細胞の増殖抑制に有用で、かつ抗腫瘍効果を示す、置換インドロピロロカルバゾール化合物のフルオロシュガーおよびこれらの塩および水和物、並びにこれらの製造方法に関係する。
【０００９】
さらに詳しくは、本発明は、下記式Ｉで示され、約１００以上のトポイソメラーゼＩ選択度指数（selectivity  index）を有する化合物、並びにそのエナンチオマー、ジアステレオマー、医薬的に許容しうる塩、水和物、プロドラッグおよび溶媒化合物を提供する。
【化２】
2004534006.tif 000003
【００１０】
式中、ＲａおよびＲｂはそれぞれ独立して、ＨおよびＯからなる群から選ばれ、但し、Ｏが選ばれるとき、ＲａとＲｂは共に合してＯを形成；
Ｒａ’およびＲｂ’はそれぞれ独立して、ＨおよびＯからなる群から選ばれ、但し、Ｏが選ばれるとき、Ｒａ’とＲｂ’は共に合してＯを形成；
Ｘ１，Ｘ１’，Ｘ２およびＸ２’はそれぞれ独立して、Ｆ、ＢｒおよびＨからなる群から選ばれ；
ＱはＮＨ、ＳおよびＯからなる群から選ばれ；および
Ｒは置換ヘキソース基である。
【００１１】
また本発明は、トポイソメラーゼＩの転形（modulation）による症状を処置する方法であって、該処置を必要とする哺乳動物種に対し、有効量の上記式Ｉの化合物の少なくとも１種を投与することから成る処置法も提供する。
【００１２】
（発明の詳細）
本発明は、上述の式（Ｉ）のインドロピロロカルバゾール化合物のフルオロシュガーおよび他のシュガー誘導体を包含する。これらの化合物およびその医薬的に許容しうる塩および水和物は、選択的トポイソメラーゼＩ（トポＩ）活性を示し、腫瘍細胞の増殖抑制に有用で、かつ重要な抗腫瘍効果を示す。最も重要なのは、本発明がＷＯ９８／０７４３３および同時係属Ｕ．Ｓ．特許出願Ｎｏ．０８／９１４５６６に開示の化合物に関係する、トポＩ活性化合物を記載し、該化合物が、細胞増殖に要せられる標準レベルのトポＩを発現する一定細胞系において、トポＩが不十分なあるいはトポＩの発現不足な細胞系と比較して細胞毒性を評価したときに、驚くべき予想外の選択度指数を示すことである。
【００１３】
上記“選択度指数”（Ｒ／Ｓ）は、カンプトセシン−耐性ハツカネズミ白血病細胞系，Ｐ３８８／ＣＰＴ４５に対する個々の化合物の細胞毒ＩＣ５０を、親Ｐ３８８細胞系の使用時のＩＣ５０で割ることにより得られる。トポＩ活性を有するとして以前に同定されたインドロピロロカルバゾール化合物に構造上密に関係する化合物、並びに他の作用メカニズムの結果として細胞毒効果を示すことが知られている参照物質は、予測できない広範囲の選択度指数（Ｒ／Ｓ）を示すことが認められている［「Ｐroc．ＡＡＣＲ」（３８、７５、１９９７年）］。
【００１４】
選択度のレベルは、たとえば潜在的な望ましくない副作用および／または毒性を調節するのに有利でかつ有益であると判断される。本発明の化合物は、ＷＯ９８／０７４３３および同時係属Ｕ．Ｓ．特許出願Ｎｏ．０８／９１４５６６に包括的に開示された化合物から、予想外でかつ予測できない選択度指数に基づき（表ＩおよびＩＩ参照）、選ばれたものである。表ＩおよびＩＩから明らかな如く、下記の方法で判断されるように、トポイソメラーゼＩ活性と細胞増殖の抑制を示しうる、構造上密に関係する類縁体でも、それらのトポイソメラーゼＩ選択度は変化する。
【００１５】
本発明のシュガー部またはインドロピロロカルバゾール部の代用を単に変えただけでも、選択度は変化するだろう。この選択度の変化は、当業者によって予測できるものではない。カンプトセシン部類の化合物は、これもトポＩ活性および選択度を示すが、上記のような予測できない選択度を示さない。処置母集団において人口学的変化が起るので、行き届いた療法用の選択的物質の同定は、許容できる治療指標、このため高い安全性と許容性を付与する基本要因となるだろう。要するに、報告された文献の中で、本発明の選定したインドロカルバゾール化合物が、カンプトセシン様トポイソメラーゼＩ選択度および抗腫瘍活性を示すことが予測可能であったことを示唆もしくは教示するものは全くない。
【００１６】
本発明は概して、約１００以上のトポイソメラーゼＩ選択度指数を有する下記式Ｉの化合物、そのエナンチオマー、ジアステレオマー、医薬的に許容しうる塩、水和物、プロドラッグおよび溶媒化合物を包含する。
【化３】
2004534006.tif 000004
【００１７】
上記ＲａおよびＲｂは、それぞれＨであるかまたは共に合してＯを形成してもよい。同様に、Ｒａ’およびＲｂ’もＨであるかまたは共に合してＯを形成する。Ｘ１，Ｘ１’，Ｘ２およびＸ２’はそれぞれ独立して、Ｆ、ＢｒおよびＨからなる群から選ばれる。ＱはＮＨ、ＳおよびＯからなる群から選ばれる。最後に、Ｒは置換ヘキソース基である。
【００１８】
好ましい具体例において、Ｘ１がＦ；Ｘ１’がＦおよびＢｒからなる群から選ばれ；およびＸ２およびＸ２’がＦおよびＨからなる群から選ばれる。
他の好ましい具体例において、Ｘ１およびＸ１’がＦ；Ｘ２およびＸ２’がＨ；およびＱがＮＨである。
【００１９】
さらに他の好ましい具体例において、Ｘ１およびＸ１’がＦ；Ｘ２およびＸ２’がＨ；ＱがＮＨ；ＲａおよびＲｂが共に合してＯを形成；Ｒａ’およびＲｂ’がＨ；および置換ヘキソース基が、
【化４】
2004534006.tif 000005
である。
【００２０】
さらにまた他の好ましい具体例において、Ｘ１およびＸ１’がＦ；Ｘ２およびＸ２’がＨ；ＱがＮＨ；Ｒａ’およびＲｂ’が共に合してＯを形成；ＲａおよびＲｂがＨ；および置換ヘキソース基が、
【化５】
2004534006.tif 000006
である。
【００２１】
さらに好ましい具体例において、本発明は式：
【化６】
2004534006.tif 000007
の化合物である。
【００２２】
さらに他の好ましい具体例において、本発明は式：
【化７】
2004534006.tif 000008
の化合物である。
【００２３】
さらにまた他の好ましい具体例において、本発明は式：
【化８】
2004534006.tif 000009
の化合物である。
【００２４】
また本発明は、トポイソメラーゼＩの転形による症状を処置する方法であって、該処置を必要とする哺乳動物種に対し、有効量の上記式Ｉの化合物の少なくとも１種を投与することから成る処置法も提供する。好ましい具体例において、トポイソメラーゼＩに付随する症状は癌である。他の好ましい具体例において、該処置法は、式Ｉの化合物の少なくとも１種と共に、他の抗癌剤の少なくとも１種を組合せて（逐次または同時に）、上記哺乳動物種に投与することから成る。
【００２５】
理解すべき点は、他に特別な記載が明記されていない限り、本発明が、いずれかおよび全ての可能な立体異性体、幾何異性体、ジアステレオ異性体（ジアステレオマー）、エナンチオマーおよびアノマーを含むことである。本発明の化合物は、医薬的に許容しうる塩の形状で存在しうる。かかる塩としては、たとえば、塩酸および硫酸などの無機酸や、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、酒石酸およびマレイン酸などの有機酸との付加塩が挙げられる。
【００２６】
さらに、本発明化合物が酸性の塩を含有する場合、該酸性基はたとえば、カリウム塩およびナトリウム塩などのアルカリ金属塩；マグネシウム塩およびカルシウム塩などのアルカリ土類金属塩；およびトリエチルアンモニウム塩およびアルギニン塩などの有機塩基との塩の形状で存在しうる。本発明化合物は、水和されてあるいはそうでなくてもよい。
【００２７】
本発明化合物は、錠剤、カプセル剤（これらは、それぞれ持続放出性（徐放性）もしくは時限放出性の配合を含む）、丸剤、粉剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁液、シロップおよびエマルジョンといった経口投与剤形で投与することができる。また本発明化合物は、医薬分野の当業者にとって周知の投与剤形を用い、静脈内、腹腔内、皮下または筋肉内に投与されてもよい。
【００２８】
本発明化合物は単独投与できるが、一般には、選択投与方法や標準医薬実務に基づいて選ばれる医薬用担体と一緒に投与される。また本発明化合物は、適当な鼻腔内ビヒクルの局所使用による鼻腔内剤形で、または経皮パッチを用いる経皮ルートで投与することもできる。本発明化合物を経皮投与すると、投与生活規則を通じて投与量が連続するだろう。
【００２９】
（特定具体例の説明）
本発明化合物（Ｉ）の代表的な製造手順を、下記反応式１〜９で説明する。
反応式１：実施例（Ｅｘ．）２２および２８の製造
【化９】
2004534006.tif 000010
注）式中のaq．＝水性、conc．＝濃を示す（以下同様）。
【００３０】
反応式２：実施例１７の製造
【化１０】
2004534006.tif 000011
【００３１】
反応式３：実施例１１および３１の製造
【化１１】
2004534006.tif 000012
【００３２】
反応式４：実施例５の製造
【化１２】
2004534006.tif 000013
【００３３】
反応式５：実施例１８および２９の製造
【化１３】
2004534006.tif 000014
【００３４】
反応式６：実施例８の製造
【化１４】
2004534006.tif 000015
【００３５】
反応式７：実施例２３の製造
【化１５】
2004534006.tif 000016
【００３６】
反応式８：実施例１２の製造
【化１６】
2004534006.tif 000017
【００３７】
反応式９：実施例３２および３４の製造
【化１７】
2004534006.tif 000018
【００３８】
フルオロインドロカルバゾール化合物のフルオロシュガー置換誘導体は、上記反応式１の代表手順で示されるように、便利に製造される。フルオロインドロカルバゾール核（１）を、以下の手順でグリコシル化する。すなわち、適当な塩基、たとえばナトリウム・ヘキサメチルジシラザンで脱プロトンし、次いでクロロシュガー、たとえば４−フルオログルコピラノシド２で処理して、Ｎ−グリコシルインドロカルバゾール３を得る。
【００３９】
３のような過ベンジル化グリコシドのイミド成分の脱保護を、塩基−誘発加水分解で行った後、酸性化を行って中間体無水物を得る。この無水物を、適当なアミンを用いて、たとえばジメチルホルムアミド中ヘキサメチルジシラザンとメタノールの混合物との反応によって［Ｐ．Ｄ．Ｄavis、Ｒ．Ａ．Ｂitの「Ｔetrahedron  Ｌett．」（３１、５２０１、１９９０年）参照］、便利にイミド（たとえば４）に変換する。
【００４０】
次にベンジル保護基の脱離を、パールマン（Ｐearlman）触媒（２０％Ｐｄ（ＯＨ）２／活性炭）での水添分解を伴う通常の手順で行って、完全脱保護グリコシド（７）を得ることができる。別法として、対応する過ベンジル化グリコシド（４）を無水酢酸中、ヨウ素で処理した後［Ｋ．Ｐ．Ｒ．Ｋartha、Ｒ．Ａ．Ｆieldの「Ｔetrahedron」（５３、１１７５３、１９９７年）］、中間体アセテートの加水分解を行なうことにより、部分脱保護グリコシド（５）を製造することができる。次にこの選択的脱保護のグリコシドを、周知のフッ素化剤ＤＡＳＴ［（ジエチルアミノ）硫黄トリフルオライド］で処理した後、上記の脱ベンジル化を行って、フッ素化グリコシド（６）を得る。
【００４１】
一連のデオキシグリコシド化合物は、上記反応式２に示される類似の方法で製造することができる。この場合に、反応条件の賢明な選択を採用して、過ベンジル化グリコシド（１０）を、ジベンジル（１１）およびモノベンジル（１２）グリコシドの容易に分離できる混合物に変換する。ジベンジルグリコシド（１１）を上記のように、ＤＡＳＴで処理し、次いで脱保護を行って、フルオロデオキシグリコシド（１３）を得る。ジオール１２の全く同じ処理で、ジフルオロデオキシアロシド（１４）を得る。関連のデオキシグリコシド化合物は、上記反応式３に示されるように製造される。上記の如く化合物１６の水添分解により、モノデオキシグリコシド（１７）を得る。
【００４２】
別法として、前述のアプローチを用い、反応条件の賢明な選択によって部分脱保護グリコシド（１５）を得る。次いで、得られる第１アルコールを、たとえばそのメシレートとして活性化した後、対応するヨージドとし、次いで適当なアミン塩基、たとえば１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）を用いて、ＨＩ要素の除去を受けるように誘発せしめ、ビニルエーテルを得る。次いで最終の水添分解工程により、ジデオキシグリコシド１８を得る。
【００４３】
また上記の方法で製造した未保護グリコシド化合物も、上記反応式４で示されるように、選択的に官能基を付与する（functionalized）ことができる。フルオログリコシド（１３）と保護アミノ酸、たとえばＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ロイシンのカップリング反応は、標準エステル化条件下で、たとえば該反応をもたらすジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を用いて、選択的に行なうことができる。
【００４４】
次いで、標準水添分解条件下脱保護を行って、アミノ酸エステル（１９）を得る。同様に、アミノ酸アミドは上記反応式７に示されるようにして製造することができる。アミノグリコシド（２７）を標準ペプチドカップリング反応／脱保護条件下、保護アミノ酸のｐ−ニトロフェニルエステル、たとえばＮ−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ−メチルグリシンのそれと反応させて、アミド２８を得る。
【００４５】
またアルキル化グリコシド化合物も、上記反応式５で示されるようにして製造することができる。前記製造のジオール（１２）をそのモノシリルエーテルとして選択的に保護するが、この場合標準シリル化条件を採用して、たとえばジメチルホルムアミドなどの適当な溶媒を用い、イミダゾールの存在下、ｔ−ブチルジフェニルクロロシランで処理する。次に残った未保護ヒドロキシ置換基の酸化は、酸化剤としてデス−マーチン（Ｄess−Ｍartin）パーヨージナンを用いて便利に行なうことにより、中間体ケトン（２０）を得る。
【００４６】
ケトン２０をグリニヤール試薬、たとえばメチルマグネシウム・ブロミドと反応させ、次いでトリエチルアミン・トリフッ化水素酸を用いてシリル保護基を脱離して、２種の第３アルコール２１および２２の容易に分離できる混合物を得る。次いで後者２種化合物を個別に上記と同様に脱保護して、メチルグルコシド２３とメチルアロシド２４を得る。
【００４７】
またフルオロインドロカルバゾール核１に関連する種々の芳香族核のモノフッ素化グリコシド化合物も、上記反応式６で示されるようにして製造することができ、この場合、反応式１で記載した類似のアプローチおよび反応条件を採用する。
【００４８】
また２９などの選択フルオログリコシド化合物も、上記反応式８で示されるようにしてさらに官能基を付与することができる。第１アルコールのそのメシレートとしての選択的活性化、次いでナトリウムアジド／ジメチルホルムアミドを用いる置換反応を行って、対応するアジドを得る。次にアジドをＳtaudinger反応条件下で還元して、アミン３０を得る。
【００４９】
また選択フルオロインドロカルバゾール化合物の芳香族核を、上記反応式９で示されるように容易に還元する。イミド成分を先ず、還元水素化物、たとえばホウ水素化ナトリウムで処理して還元し、さらにベンゼンセレノールを用いて還元し、実質的に等量の対応するラクタム３２および３３を、分離できる混合物として得る。
【００５０】
本発明化合物の薬理学的特性は、数多くの薬理学的アッセイによって確認することができる。以下に示す具体例の薬理学的アッセイは、本発明に係る化合物またはその塩を用いて実施した。
【００５１】
トポイソメラーゼＩ活性（インビトロ）
トポイソメラーゼＩ活性を、下記の手順で測定する。ＤＮＡにおいて化合物−誘発の、トポイソメラーゼＩ−仲介単一ストランド破断を検定する手順は、本質的にＨsiangらの「Ｊ．Ｂiol．Ｃhem．」（２６０、１４８７３−１４８７８、１９８５年）に記載されている。１００％ＤＭＳＯに１０μＭまたは１０ｍｇ／ｍｌ溶液で溶解したサンプルは、他に特別な記載がない限り、Ｔris−ＥＤＴＡ緩衝剤で希釈する。またマリン（marine）バクテリオファージＰＭ２ＤＮＡ（Ｂoehringer  Ｍannheim）は、Ｔris−ＥＤＴＡ緩衝剤で０．０２μｇ／μｌ濃度に希釈する。
【００５２】
希釈の異なる被評価化合物を、希釈ＤＮＡと混合し、該混合物を、２倍の反応緩衝剤中の精製したヒト・トポイソメラーゼＩ（Ｔopogen）の１０００ユニット（１ユニットの酵素活性は、１００ｎｇのスーパーコイル化ＤＮＡを３７℃で約３０分内で弛緩しうる量として規定する）のアリコートに加え、反応を開始する。化合物−ＤＮＡ−酵素混合物を、３７℃で３０分間培養してから、ドデシル硫酸ナトリウムおよびプロティナーゼＫ（Ｓigma）を含有する温ストップ緩衝剤で反応を停止する。
【００５３】
これらの混合物をさらに３７℃で１０分間培養させ、この時、混合物をウォーターバスから取出し、クロロホルム／イソアミルアルコール（２４：１）混合物で抽出する。遠心分離を行ってから、水性相のアリコートを、０．５μｇ／ｍｌのエチジウムブロマイド含有のＴris−ボレート緩衝剤中の０．９％アガロース（ＳeaＫem）ゲルのウェルに入れ、１５時間電気泳動に付して、異なるトポロジー異性体とニックおよび破断したＤＮＡｓを分離する。水中でゲルのよごれを除いた後、ゲルをＵＶ照射にさらすことによって、エチジウムブロマイド染色ＤＮＡ反応産物を可視化する。
【００５４】
照射したゲルの写真のネガを、濃度計でスキャンし、各サンプルの単一ストランドＤＮＡ破断形成のパーセントを得るために、ピーク下の面積を計算する。得られる用量−効果曲線のポイント間の補間によって、各化合物の中間有効濃度（ＥＣ５０）を得るが、これは、ＤＮＡにおいてトポイソメラーゼＩ−仲介単一ストランド破断を誘発する、化合物の効果の潜在力を規定する。本発明の選択化合物のトポイソメラーゼＩ活性を、後記表Ｉに示す。
【００５５】
細胞に基づく細胞毒活性（インビトロ）
ネズミＰ３８８細胞系に対する増殖抑制活性を、以下の手順で測定する。
ヒトおよび他の腫瘍細胞系を用い、「Ｃancer  Ｒes．」（４８、４８２７−４８３３、１９８８年）に記載の手順に従って、細胞成長および培養中の薬物感受性の可溶性テトラゾリウム／ホルマザン・アッセイの評価を行なう。細胞を９６ウェル・マイクロタイター平板にて、４０００細胞／ウェルで培養し、２４ｈ後に薬物を加え、連続して希釈する。
【００５６】
細胞を３７℃で７２ｈ培養し、この時、メト硫酸フェナジン含有のテトラゾリウム染料，ＸＴＴを加える。生きている細胞中のデヒドロゲナーゼ酵素でＸＴＴを還元して、４５０ｎｍで光を吸収する形状とし、これを分光光度計で定量分析することができる。吸光度が増大すればするほど、生存細胞の数が増大する。結果をＩＣ５０で表示するが、これは、細胞増殖（すなわち、４５０ｎｍでの吸光度）を、未処理対照細胞のそれの５０％に抑制するのに必要な薬物濃度である。
【００５７】
同様に、Ｐ３３８ネズミ白血病細胞を、２０％ウシ胎児血清および１０μＭの２−メルカプトエタノールを補給したＲＰＭＩ１６４０に維持する。カンプトセシン耐性サブライン（subline）の、Ｐ３８８／ＣＰＴ４５のカンプトセシンに対する耐性を選択したが、本化合物に対し１０００倍を超える耐性である［Ｗoessnerらの「Ｏncol  Ｒes．」（４、４８１−４８８、１９９２年）］。耐性のメカニズムは、低レベルのトポイソメラーゼＩであることが認められている。
【００５８】
インビトロ細胞毒性を組織培養細胞にて、ＭＴＳ［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム内部塩］で検定する［ＲissおよびＭoravecの「Ｍol．Ｂiol．Ｃell」（３（増刊）、１８４ａ、１９９２年）］。細胞を９６ウェル・ミクロタイター平板にて、８０００細胞／ウェルで平板培養し、２４時間後に試験化合物の連続希釈を行い、細胞に加える。細胞を３７℃で７２時間培養し、この時点で、テトラゾリウム染料のＭＴＳを３３３μｇ／ｍＬ（最終濃度）で、２５μＭ（最終濃度）の電子カップリング剤、フェナジンメトスルフェートと組合せて加える。
【００５９】
生存細胞中のデヒドロゲナーゼ酵素は、ＭＴＳを還元して４９２ｎｍで光を吸収する形状とし、これを分光測光法で定量することができる。吸光度が大きくなるにつれて、生きている細胞の数が増大する。結果をＩＣ５０で表示するが、これは、細胞増殖（すなわち、４９２ｎｍでの吸光度）を、未処理対照細胞のそれの５０％に抑制するのに必要な薬物濃度である。
親Ｐ３８８およびカンプトセシン−耐性Ｐ３８８／ＣＰＴ４５細胞系の両方における、本発明の一定化合物の細胞毒活性を、下記表Ｉに示す。
【００６０】
選択度指数（Ｒ／Ｓ）
選択度指数（Ｒ／Ｓ）は、Ｐ３８８／ＣＰＴ４５細胞の使用で得られるＩＣ５０値を、親Ｐ３８８細胞の使用で得られるＩＣ５０値で割って得られる比として定義される。本発明の選定化合物の相対的トポＩ選択度の決定に用いるＲ／Ｓ比を、表Ｉに示す。
比較のために、密に関連する非選択的な、トポＩ−活性フルオロインドロカルバゾール化合物のトポＩ活性、細胞毒性および選択度指数を、下記表ＩＩに示す。
【００６１】
表Ｉ：ネズミＰ３８８白血病細胞に対するトポイソメラーゼＩ選択的類縁体のインビトロのトポイソメラーゼＩ活性および細胞毒性
【化１８】
2004534006.tif 000019
（注：この構造式は、下記実施例（Ｅx．）の限定に使用される。全ての実施例（但し、３２と３４を除く）の場合、ＲaおよびＲbは共に合してＯを形成；およびＲa'およびＲb'も共に合してＯを形成する。実施例３２の場合、ＲaとＲbは共にＨ；およびＲa'およびＲb'は共に合してＯを形成する。実施例３４の場合、ＲaおよびＲbは共に合してＯを形成；およびＲa'とＲb'は共にＨである。）
【００６２】
【表１】
2004534006.tif 000020
【００６３】
【表２】
2004534006.tif 000021
【００６４】
【表３】
2004534006.tif 000022
【００６５】
【表４】
2004534006.tif 000023
【００６６】
§：上述のトポイソメラーゼＩアッセイを、スクリーニングアッセイとして用いた。ＤＮＡ基質において単一ストランド破断を誘発する、類縁体の中間有効濃度。
†：高レベルのカンプトセシン耐性を取得したＰ３８８ネズミ白血病細胞またはＰ３８８／ＣＰＴ４５細胞に類縁体を３日間連続露出した後の中間細胞毒濃度（ＩＣ５０）。
‡：Ｐ３８８／ＣＰＴ４５細胞の場合に得られるＩＣ５０値を、親Ｐ３８８細胞の場合に得られるＩＣ５０値で割った比。
【００６７】
表ＩＩ：ネズミＰ３８８白血病細胞に対するトポイソメラーゼＩ非選択的類縁体のインビトロのトポイソメラーゼＩ活性および細胞毒性
【化１９】
2004534006.tif 000024
（注：この構造式は、下記実施例の限定に使用される）
【００６８】
【表５】
2004534006.tif 000025
【００６９】
§：上述のトポイソメラーゼＩアッセイを、スクリーニングアッセイとして用いた。ＤＮＡ基質において単一ストランド破断を誘発する、類縁体の中間有効濃度。注：トポＩ活性は予測できなかった。
†：高レベルのカンプトセシン耐性を取得したＰ３８８ネズミ白血病細胞またはＰ３８８／ＣＰＴ４５細胞に類縁体を３日間連続露出した後の中間細胞毒濃度（ＩＣ５０）。
‡：Ｐ３８８／ＣＰＴ４５細胞の場合に得られるＩＣ５０値を、親Ｐ３８８細胞の場合に得られるＩＣ５０値で割った比。
【００７０】
インビトロ抗腫瘍活性
材料と方法
化合物：本発明の実施例化合物を適当なビヒクル、たとえば規定食塩水、水／カルボキシメチルセルロースビヒクルの、クレモホア（cremophor）／エタノール／水（１０％／１０％／８０％）中にて投与する。
全ての化合物は、数種の用量で試験し、そのたびに、最大許容用量（ＭＴＤ）に達する試みを行なう。ＭＴＤは、マウス８匹セット当り１匹より以上の死を招かない最高試験用量として定義される。最適用量（ＯＤ）は、最良の治療効果をもたらす用量で、通常、しかし常にＭＴＤと同義とは必らない。
【００７１】
腫瘍：ヒト腫瘍（ＨＣＴ−１１６およびＨＴ−２９結腸癌腫）を、Ｂalb／ｃ無胸腺症（ヌード）雌マウスにおいて異種移植片として成長させる。
抗腫瘍アッセイ：全ての腫瘍は、１３ゲージ・トロカールを用い、３〜４mmフラグメントで皮下（ｓｃ）に移植する。１つの処置および対照グループ当り、一般に８匹のマウスがいる。腫瘍が一定の大きさ（重量）になるまで処置を遅らせるとき、これを病期（staged）腫瘍実験（expt．）と称するが、この場合、個々のexpt．において、腫瘍を持つマウスを、その腫瘍が大きさの制限範囲内に属するように選定する。
【００７２】
腫瘍をカリパスで測定し、かつ腫瘍重量を下式で算定する。
腫瘍重量（mg）＝長さ（mm）×幅（mm)２／２
処置（Ｔ）マウスの所定腫瘍標的大きさ（たとえば５００mg）に達する時間（日数）に対して、未処置の対照（Ｃ）マウスの同標的大きさに達する中央時間（日数）を、Ｔ−Ｃ値として算定する。Ｔ−Ｃ値を腫瘍容積を２倍にする時間（ＴＶＤＴ）で割り、これに３.３２を掛けると、グロスlog 細胞殺（ＬＣＫ）値が得られる［すなわち、ＬＣＫ＝（Ｔ−Ｃ）／ＴＶＤＴ×３.３２］。
【００７３】
処置後ＴＶＤＴ×１０に匹敵する一定期間後に、触診できる腫瘍が全くなかったとき、マウスは治療済みと見なす（Ｒｘ）。
下記表ＩＩＩは、このパラダイムで評価した代表的な具体例を示すが、これらに限定されるものでない。
【００７４】
表ＩＩＩ：ヒト結腸癌腫細胞に対するトポイソメラーゼＩ選択的類縁体のインビボ活性
【表６】
2004534006.tif 000026
【００７５】
ａ＝８匹の内１匹が治癒
ｂ＝８匹の内２匹が治癒
ｃ＝治癒の可能性
†：Ｌog細胞殺（ＬＣＫ）は、（Ｔ−Ｃ）／（ＴＶＤＴ×３.３２）に相当する
‡：mg／kgで試験した最適または最大許容用量
【００７６】
本発明を構成する化合物およびその製造法については、以下に挙げる実施例に徴し、より具体的に明らかになるが、これらの実施例は、単に例示のみを目的とするもので、いかなる場合も本発明の技術的範囲を制限すると解釈すべきではない。
【００７７】
中間体の合成
式Ｉの最終生成物の製造に用いる、幾つかの中間体化合物並びに他の通常の出発物質は一般に、文献で公知または商業上入手可能である。式Ｉ化合物の追加の具体例として、前記ＷＯ９８／０７４３３および同時係属Ｕ.Ｓ.特許出願Ｎo．０８／９１４５６６に記載の合成手順の改変によって合成しうるものを本明細書に例示するが、その置換基は、他に特別な言及がない限り、式Ｉに記載のものと同意義である。それにも拘らず、これら化合物の幾つかの代表的な合成を以下に記載する。
【００７８】
無水反応の全ては、商業上入手可能な乾燥溶媒または新たに蒸留した溶媒を用い、窒素またはアルゴンの雰囲気下で行った。融点は、トーマス−ヒューバー融点装置を用い開口毛細管で測定し、修正せず。カラムクロマトグラフィーは、ＥＭ  Ｓcience シリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ）にて、溶離剤として指定溶剤系を用いて行った。薄層クロマトグラフィーは、Ｅ．Ｍerckシリカゲル６０  Ｆ２５４プレート（０.５mm）にて行った。
【００７９】
ＨＰＬＣ純度測定は、ＳＰＤ−１０ＡＶ  ＵＶ−Ｖis検出器と、下記カラム：ＹＭＣ  Ｃombiscreen  ＯＤＳ−Ａ（４.６×５０mm）もしくはＨＰ  Ｚorbax  ＳＢ−Ｃ１８（４.６×７５０mm）の１つを備えたＳhimadzu  ＬＣ−１０ＡＳ；または二極管アレイ検出器とＷaters  Ｎova−Ｐak  Ｃ１８カラム（３.９×１５０mm）を備えたＨＰ１０９０ＤＲ５を用いて行った。赤外スペクトルは、薄フィルムまたはＫＢrペレットで、Ｎicolet  Ｐrotege  ４６０ＦＴＩＲにて記録した。
【００８０】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Ｂruker  ＡＭＸ−４００またはＢruker  ＡＲＸ−５００ＮＭＲ分光計で記録し、化学シフトは、内部標準液として使用の溶剤と共に、ppm（またはδ）で表示する。カップリング定数は、ヘルツ（Ｈz）で記載し、多重線は以下の通りに表示する：一重（ｓ）、二重（ｄ）、三重（ｔ）、四重（ｑ）、多重（ｍ）、およびブロード（br）。
【００８１】
低分解能質量スペクトルは、陰イオンモードで作動するＦinnigan  Ｍatt  ＴＳＱ−７０００トリプル・ステージ・四極子分光計（陽／陰ＥＳＩ）で測定した。高分解能質量スペクトルは、陰イオンモードで調和する高分解能ピークを用い、Ｋratos  ＭＳ ５０ ＥＢＥ質量分光計で測定した。全ての化合物は、入手可能な場合、満足なＩＲ、ＭＳ、１Ｈ−および１３Ｃ−ＮＭＲ、元素分析および／または高分解能質量スペクトルを示した。
【００８２】
実施例４
１２−［６−デオキシ−６−フルオロ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］−３,９−ジフルオロ−１２,１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２,３−ａ］ピロロ［３,４−ｃ］カルバゾール−５,７（６Ｈ）−ジオン
【化２０】
2004534006.tif 000027
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１８Ｆ３Ｎ３Ｏ６）として、m／z５２４
【００８３】
実施例５
１２−［４，６−ジデオキシ−６−フルオロ−２−Ｏ−ロイシル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２１】
2004534006.tif 000028
【００８４】
５ｍＬのＴＨＦ中の１２−［４，６−ジデオキシ−６−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．１００ｇ、０．１８ミリモル）の溶液に、１ｍＬのＴＨＦ中のＺ−Ｌｅｕ−ＯＨ（０．０５７ｇ、０．２１６ミリモル）の溶液を加えた後、ＤＭＡＰ（０．０２６ｇ、０．２１６ミリモル）およびＤＣＣ（０．０４５ｇ、０．２１６ミリモル）を加える。得られる混合物を室温で１８ｈ攪拌し、次いで酢酸エチルで希釈し、洗い（冷１Ｎ−ＨＣｌ、Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発する。残渣のフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／２〜３０％酢酸エチル−ヘキサン）により、保護されたロイシルエステル（０．１１２ｇ、７０％）を黄色固体で得、これを次工程に直接使用する。
【００８５】
３０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の保護されたロイシルエステル（０．３００ｇ、０．３８ミリモル）および２０％Ｐｄ（ＯＨ)２／Ｃ（０．３ｇ）に、４Ｍ−ＨＣｌ／ジオキサン（０．４５ｍＬ、１．８ミリモル）を加え、得られる混合物を１６ｈ水素添加する（１気圧）。次いで混合物を濾過し（Ｍillipore、０．２２μｍ）、濾液を蒸発して、本質的に純粋な標記化合物（０．２４３ｇ、９２％）をその塩酸塩で得る。
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ３２Ｈ２７Ｆ５Ｎ４Ｏ６として），ｍ／ｚ６５７
【００８６】
実施例８
３−［６−ジデオキシ−６−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル（２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２２】
2004534006.tif 000029
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ５Ｎ２Ｏ６Ｓとして），ｍ／ｚ５７７；ＨＲＭＳ（陽ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ＋）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ５Ｎ２Ｏ６Ｓとして），ｍ／ｚ計算値５７９．０６４７８０（実測値５７９．０６４７６）
【００８７】
実施例９
１２−［４，６−ジデオキシ−６−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２３】
2004534006.tif 000030
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ５Ｎ２Ｏ５Ｓとして），ｍ／ｚ５６１
【００８８】
実施例１１
１２−［４，６−ジデオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２４】
2004534006.tif 000031
【００８９】
１５ｍＬのジクロロメタン中の３，９−ジフルオロ−１２−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ−（５Ｈ）インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（０．３１２ｇ、０．４５ミリモル）および新たに活性化した微粉状４Åモレキュラーシーブス（０．５ｇ）の混合物を、Ａｒ下５℃で冷却し、次いでトリエチルアミン（０．０９５ｍＬ、０．６８ミリモル）およびメタンスルホニルクロリド（０．０３９ｍＬ、０．５０ミリモル）を連続して加える。混合物を同温度で３ｈ攪拌し、次いで混合物に１０％飽和水性ＮａＨＣＯ３を加えて反応を抑え、酢酸エチルで希釈し、濾過する。濾液を洗い（Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発して黄色ガラス状物を得る。
【００９０】
この物質を１５ｍＬのアセトンに溶かし、ＮａＩ（０．６７５ｇ、４．５０ミリモル）を加え、混合物をＡｒ下で１７ｈ加熱還流する。次いで冷却した混合物を蒸発乾固し、残渣を酢酸エチルに溶かし、洗い（Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発する。得られる固体をクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／酢酸エチル−ヘキサン＝１：１）に付して、３，９−ジフルオロ−１２−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４，６−ジデオキシ−６−ヨード−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロ（５Ｈ）インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（０．２７６ｇ、総７７％）を黄色ガラス状物で得る。１０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中のこのヨージドの氷冷溶液に、ＤＢＵ（０．１５７ｍＬ、１．０５ミリモル）を加え、次いで溶液を室温で５日間保持する。
【００９１】
得られる混合物に飽和水性ＮＨ４Ｃｌを加えて反応を抑え、酢酸エチルで希釈し、次いで洗い（Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発して生成物（０．２３２ｇ、９９％）を黄色ガラス状物で得る。この物質／乾燥ＴＨＦの溶液に、２０％Ｐｄ（ＯＨ)２／Ｃを加え、ｔｌｃにより反応が完了するまで、混合物を水素添加する（バルーン圧）。次いで混合物を濾過し［セライト（Ｃelite）］、濾液を蒸発して、黄色ガラス状物を得る。カラムクロマトグラフィー（Ｓephadex  ＬＨ−２０／メタノール）により、純粋な標記化合物を黄色固体で得る。
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１９Ｆ２Ｎ３Ｏ５として），ｍ／ｚ４９０
【００９２】
実施例１２
１２−［６−アミノ−４，６−ジデオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９．１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２５】
2004534006.tif 000032
【００９３】
１２−（４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．２０ｇ、０．３５ミリモル）を窒素下室温にて、乾燥ピリジン（１０ｍＬ）に溶解し、火炎乾燥した粉末４Åモレキュラーシーブス（３．０ｇ）で処理する。混合物を−３０℃に１５分間冷却後、メタンスルホニルクロリド（０．０３０ｍＬ、０．３８ミリモル）を加える。混合物を−３０℃で１５分間攪拌し、次いで１５分にわたって０℃まで加温せしめ、最後に酢酸エチルとエタノールで反応を抑える。
【００９４】
得られる混合物を濾過し（セライト）、濾液を減圧濃縮する。残渣を酢酸エチルおよびテトラヒドロフランに溶かし、洗い（０．１Ｎ−ＨＣｌ、飽和重炭酸ナトリウム、塩水）、乾燥し、蒸発する。これによって、１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−６−Ｏ−（メタンスルホニル）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオンが黄色固体で得られ、これは十分に純粋であって、次工程に直接使用する。
【００９５】
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．６１（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、９．７６−９．６６（２ｍ、１Ｈ）、９．０１−８．９４（２ｍ、１Ｈ）、８．２２−８．１９（ｍ、１Ｈ）、８．１２−８．００（２ｍ、１Ｈ）、７．５８−７．４８（２ｍ、２Ｈ）、６．３３および６．２３（２ｄ、Ｊ＝８．８、９．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．７２−５．１５（ｍのシリーズ、３Ｈ）、４．６６−４．５３（ｍ、２Ｈ）、４．０７−３．９８（ｍ、２Ｈ）、３．６２−３．５６（ｍ、２Ｈ）、３．１３および３．１０（２ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（−ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−），ｍ／ｚ６５５
【００９６】
無水ジメチルホルムアミド（９０ｍＬ）中の１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−６−Ｏ−（メタンスルホニル）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．２３０ｇ、０．３５１ミリモル）の攪拌溶液に、ナトリウムアジド（０．２２８ｇ、３．５１ミリモル）を加え、混合物を１４０℃に４ｈ加熱する。周囲温度に冷却後、混合物をテトラヒドロフラン−酢酸エチルおよび水で希釈する。有機相を分離し、洗い（飽和重炭酸ナトリウム溶液、塩水）、乾燥し、蒸発する。水性相を酢酸エチル（３回）で逆抽出し、有機抽出物を前記と同様に処理する。
【００９７】
残渣のフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／１０％メタノール、クロロホルム中）により、１２−［（６−アジド−４，６−ジデオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオンを黄色固体で得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．６０（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、９．７６−９．６０（２ｍ、１Ｈ）、９．０９−８．９８（２ｍ、１Ｈ）、８．１８−８．１５（３ｍ、１Ｈ）、８．０１−７．９１（ｍ、１Ｈ）、６．２８および６．２０（２ｄ、Ｊ＝８．９および９．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．６４−５．１４（ｍ、１Ｈ）、５．０６−４．７６（ｍのシリーズ、１Ｈ）、４．３５−３．９５（ｍのシリーズ、３Ｈ）、３．８６−３．３１（ｍ、３Ｈ）
ＭＳ（−ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−），ｍ／ｚ６０２
【００９８】
テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物中の１２−［（６−アジド−４，６−ジデオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．１００ｇ、０．１６６ミリモル）およびトリフェニルホスフィン（０．１３０ｇ、０．４９７ミリモル）の混合物を、Ｎ２下１６ｈ５０℃まで加熱する。次いで冷却した混合物を５０℃にて、濃水酸化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）で１ｈ処理する。室温に冷却し、混合物をテトラヒドロフランで希釈し、予めシリカゲルに吸着する。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／ジクロロメタン−テトラヒドロフラン−メタノール＝７：２．５：０．５、次いで６：２：２）で精製して、標記化合物を黄色固体で得る。
【００９９】
この物質をＴＨＦに溶かし、メタノール性ＨＣｌを加え、混合物を蒸発して、塩酸塩（０．０１５ｇ、１６％）を粒状黄色固体で得る。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．６６（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、９．８６−９．８２（２ｍ、１Ｈ）、９．１１−９．０６（２ｍ、１Ｈ）、８．４９−８．４６（ｍ、１Ｈ）、８．２９−８．２５（ｍ、１Ｈ）、８．１９（ｂｒ  ｓ、３Ｈ）、６．３２および６．１２７７（２ｄ、Ｊ＝８．９、９．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．７４−５．７０（２ｍ、１Ｈ）、５．２２−５．１０（３ｍ、２Ｈ）、４．４０−４．０１（ｍのシリーズ、７Ｈ）
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１６Ｆ５Ｎ３Ｏ５Ｓとして），ｍ／ｚ５７６
【０１００】
実施例１７
１２−［３，６−ジフルオロ−３，４，６−トリデオキシ−β−Ｄ−アロピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２６】
2004534006.tif 000033
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ６Ｎ３Ｏ４として），ｍ／ｚ５４６
【０１０１】
実施例１８および２９
１２−［４−デオキシ−３−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（Ｉｂ：Ｘ１＝Ｘ１’＝Ｘ２＝Ｘ２’＝Ｆ；Ｒ６＝Ｈ；Ｒ２＝Ｒ５＝ＯＨ；Ｒ３＝ＯＨ、ＣＨ３、Ｒ４＝Ｈ２；Ｑ＝ＮＨ）および
１２−［４−デオキシ−３−メチル−β−Ｄ−アロピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２７】
2004534006.tif 000034
【０１０２】
９０ｍＬの無水酢酸中の１２−［４−デオキシ−２，３，６−トリ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（６．４９ｇ、７．９７ミリモル）の溶液に、Ｉ２固体（０．４０６ｇ、１．６ミリモル）を加え、混合物を室温で１６ｈ攪拌する。得られる混合物を酢酸エチルで希釈し、洗い（３０％水性Ｎａ２Ｓ２Ｏ３、飽和水性ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発する。残渣をメタノール（１５０ｍＬ）に溶かし、１５ｍＬの濃ＮＨ４ＯＨを加え、混合物を室温で１８ｈ攪拌する。
【０１０３】
次いで混合物を蒸発乾固し、残渣をクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／ヘキサン−酢酸エチル＝９５：５〜１：１）に付して、１２−［４−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（２．３５ｇ、４１％）、次いで１２−［４−デオキシ−２−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（２．４０ｇ、４８％）を共に黄色固体で得る。
【０１０４】
６ｍＬの乾燥ＤＭＦ中の１２−［４−デオキシ−２−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ−［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．５００ｇ、０．７９ミリモル）の溶液に、Ａｒ下５℃にて、ｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（０．２０５ｍＬ、０．７９ミリモル）およびイミダゾール（０．１６１ｇ、２．３７ミリモル）を加える。この混合物を室温で２０ｈ攪拌後、５℃で再冷却し、さらにｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（０．２０５ｍＬ、０．７９ミリモル）およびイミダゾール（０．１６１ｇ、２．３７ミリモル）を加える。
【０１０５】
得られる混合物を室温で２．５ｈ攪拌し、次いで酢酸エチルで希釈し、洗い（１Ｍ−ＮａＨＣＯ３、塩水）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発する。残渣のクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／２０〜３５％酢酸エチル−ヘキサン）により、１２−［４−デオキシ−６−Ｏ−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）−２−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．４７４ｇ、６９％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ−），ｍ／ｅ８７０（Ｍ−Ｈ)−。この物質の一部（０．０５０ｇ、０．０５７ミリモル）／２ｍＬのジクロロメタンの溶液に、３ｍＬのジクロロメタン中のデス−マーチン・パーヨージナン（０．０４８ｇ、０．１１４ミリモル）の懸濁液を加え、混合物を３０分間攪拌する。
【０１０６】
次いで混合物を酢酸エチルで希釈し、洗い（冷３０％水性Ｎａ２Ｓ２Ｏ３、１Ｍ−ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発する。残渣の分取ｔｌｃ（ＳｉＯ２／酢酸エチル−ヘキサン＝２：３）により、１２−［４−デオキシ−６−Ｏ−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）−２−Ｏ−ベンジル−３−オキソ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．０３５ｇ、７０％）をゴム状物で得、これを静置して固化せしめる。ＭＳ（ＥＳＩ−），ｍ／ｅ８６８（Ｍ−Ｈ)−。
【０１０７】
５ｍＬの乾燥ＴＨＦ中のこの物質溶液に、Ａｒ下−７８℃にて、ＭｅＭｇＢｒ（ＴＨＦ−トルエン中１．４Ｍ溶液、０．４９ｍＬ、０．６９ミリモル）を滴下する。得られる混合物を−７８℃で２ｈ攪拌し、次いで２ｈにわたって−２０℃まで加温せしめる。次いで混合物に１ｍＬの１Ｍ−ＮａＨＣＯ３を加えて反応を抑え、これを酢酸エチル（２０ｍＬ）と１Ｍ−ＮａＨＣＯ３（５ｍＬ）間に分配する。有機相を分離し、洗い（Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発する。
【０１０８】
残渣のフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／２〜２８％酢酸エチル−ヘキサン）により、１２−［４−デオキシ−６−Ｏ−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）−２−Ｏ−ベンジル−３−メチル−β−Ｄ−アロピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．０５２ｇ、４３％）、次いで１２−［４−デオキシ−６−Ｏ−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）−２−Ｏ−ベンジル−３−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．０２８ｇ、２３％）を得る。ＭＳ（ＥＳＩ−），ｍ／ｅ８８４（Ｍ−Ｈ)−。
【０１０９】
５ｍＬのＭｅＣＮ中の１２−［４−デオキシ−６−Ｏ−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）−２−Ｏ−ベンジル−３−メチル−β−Ｄ−アロピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．０５０ｇ、０．０５６ミリモル）の冷（５℃）溶液にＡｒ下、Ｅｔ３Ｎ・３ＨＦ（０．０９１ｍＬ、０．５６ミリモル）を加え、混合物を室温で２日間攪拌する。
【０１１０】
得られる混合物を酢酸エチルで希釈し、洗い（１Ｍ−ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏ、塩水）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、蒸発する。残渣を分取ｔｌｃ（ＳｉＯ２／酢酸エチル−ヘキサン＝３：２）で精製して、１２−［４−デオキシ−２−Ｏ−ベンジル−３−メチル−β−Ｄ−アロピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．０２６ｇ、７２％）を黄色固体で得る。ＭＳ（ＥＳＩ−），ｍ／ｅ６４６（Ｍ−Ｈ)−。
【０１１１】
６ｍＬのクロロホルム−メタノール（１：１）中の上記物質（０．０２５ｇ、０．０３９ミリモル）および２０％Ｐｄ（ＯＨ)２／Ｃ（０．０２５ｇ）の混合物を、１８ｈ水素添加し（１気圧）、次いで濾過し、濾過ケーキをＴＨＦで洗う。濾液の蒸発および残渣の分取ｔｌｃ（ＳｉＯ２／ＴＨＦ−ヘキサン＝１：１）による精製によって、１２−［４−デオキシ−３−メチル−β−Ｄ−アロピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．０１０ｇ、４５％）を黄色固体で得る。ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２７Ｈ１９Ｆ４Ｎ３Ｏ６として），ｍ／ｚ５５６。
【０１１２】
１２−［４−デオキシ−６−Ｏ−（ｔ−ブチルジフェニルシリル）−２−Ｏ−ベンジル−３−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオンを上記と同様に脱保護して、１２−［４−デオキシ−３−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオンを黄色固体で得る（総収率５７％）。ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２７Ｈ１９Ｆ４Ｎ３Ｏ６として），ｍ／ｚ５５６。
【０１１３】
実施例２０
１２−［４−デオキシ−β−Ｄ−アロピラノシル）−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２８】
2004534006.tif 000035
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１９Ｆ２Ｎ３Ｏ６として），ｍ／ｚ５０６
【０１１４】
実施例２２
１２−［４，６−ジフルオロ−４，６−ジデオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化２９】
2004534006.tif 000036
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ６Ｎ３Ｏ５として），ｍ／ｚ５６２；ＨＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ６Ｎ３Ｏ５として），ｍ／ｚ計算値５６２．０８３７（実測値５６２．０８１５）。
【０１１５】
実施例２３
１２−［６−デオキシ−６−［（Ｎ−メチルグリシニル）アミノ］−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３０】
2004534006.tif 000037
【０１１６】
無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１２−（６−アミノ−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−３，９−ジフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．２００ｇ、０．３６９ミリモル）、ＨＯＢＴ（０．０５０ｇ、０．３６９ミリモル）、ＨＭＰＡ（１．０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ、１．０４ミリモル）の冷（−７０℃）懸濁液にＮ２下、乾燥ＴＨＦ（３ｍＬ）中のＮ−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ−メチルグリシン・（４−ニトロフェニル）エステル（０．１５０ｇ、０．３９０ミリモル）の溶液をカニューレで加える。混合物を−７０℃で１５分間、次いで室温で２．５ｈ攪拌する。
【０１１７】
得られる混合物を酢酸エチルで希釈し、洗い（飽和水性重炭酸ナトリウム、塩水）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発する。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２／８％メタノール−クロロホルム）で精製して、１２−［６−［［Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ−メチルグリシニル］アミノ］−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．２３１ｇ、８０％）を黄色泡状物で得る。
【０１１８】
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６、ロートメリック）：δ１１．６１および１１．５９（２ｓ、１Ｈ）、９．７９−９．７１（２ｍ、１Ｈ）、９．０４−８．９５（２ｍ、１Ｈ）、８．３２−８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．０９−８．０３（ｍ、１Ｈ）、７．９６−７．９２（ｍ、１Ｈ）、７．５８−７．５１（ｍ、２Ｈ）、６．３１および６．１２（ｄおよびｍ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．６０−５．２０（ｂｒ  ｍ、３Ｈ）、４．２２−３．３６（ｍのシリーズ、８Ｈ）、２．７２および２．６７（２ｓ、３Ｈ）、１．３３、１．１１および１．１０（３ｓ、９Ｈ）
ＩＲ（ＫＢｒ、ｃｍ−１）：３４２４、３１０２、２９７７、２９３２、１７６３、１７０９、１６７８、１６０３、１５６６、１４８２、１４６３、１４２６、１３９４、１３７０、１３２２、１２５７、１１９８，１１５５、１０７９、９１５、８８７、８０７、７６５、７４２
ＭＳ（＋ＥＳＩ＋，Ｍ＋Ｈ＋，Ｍ＋ＮＨ３＋），ｍ／ｚ７１１および７２８
【０１１９】
ＴＨＦ（０．１ｍＬ）中の１２−［６−［［Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ−メチルグリシニル］アミノ］−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．０９５ｇ、０．１３３ミリモル）の懸濁液に、塩化水素酸／ジオキサンの冷（０℃）溶液（４Ｍ、５ｍＬ）を加える。混合物を１．５ｈにわたって室温まで加温せしめてから、減圧濃縮し、ジエチルエーテルで希釈する。得られる懸濁液を濾過して、標記化合物（０．０８７ｇ、１００％）を黄色固体で得る。
【０１２０】
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６、ロートメリック）：δ１１．６１および１１．５９（２ｓ、１Ｈ）、９．７６および９．７１（２ｄｄ、Ｊ＝１１．５、２．５Ｈｚおよび１１．３、２．５Ｈｚ、１Ｈ）、９．０２および８．９６（２ｄｄ、Ｊ＝９．７、２．６および９．６、２．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．７１（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、８．５５−８．５３（ｍ、１Ｈ）、８．３４および８．２８（２ｄｄ、Ｊ＝８．８、５．２および８．８、５．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．０９および８．０６（２ｄｄ、Ｊ＝９．４、４．３および１０．４、４．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８−７．５５（ｍ、１Ｈ）、７．５３−７．５０（ｍ、１Ｈ）、６．３０および６．１３（２ｄ、Ｊ＝８．９および９．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．５５−５．２０（ｍのシリーズ、３Ｈ）、４．１１−３．５３（ｍのシリーズ、８Ｈ）、２．４４および２．３８（２ｓ、３Ｈ）
【０１２１】
ＩＲ（ＫＢｒ、ｃｍ−１）：３４１２、３０７０、１７４５、１７０２、１６８６、１６２３、１６０２、１５６７、１４８１、１４６４、１４２６、１３２４、１２５８、１１９６、１０７７、９１５、８２６、７６４、７４２
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２９Ｈ２４Ｆ２Ｎ４Ｏ７Ｓとして），ｍ／ｚ６０９およびＬＲＭＳ（陽ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ＋）（Ｃ２９Ｈ２４Ｆ２Ｎ４Ｏ７Ｓとして），ｍ／ｚ６１１
【０１２２】
実施例２４
１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３１】
2004534006.tif 000038
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１８Ｆ３Ｎ３Ｏ６として），ｍ／ｚ５２４
【０１２３】
実施例２５
１２−［４，４−ジフルオロ−４−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３２】
2004534006.tif 000039
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１７Ｆ４Ｎ３Ｏ６として），ｍ／ｚ５４２
【０１２４】
実施例２６
１２−［４，６−ジフルオロ−４，６−ジデオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３３】
2004534006.tif 000040
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１４Ｆ６Ｎ２Ｏ５Ｓとして），ｍ／ｚ５７９
【０１２５】
実施例２８
１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３４】
2004534006.tif 000041
ＨＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１６Ｆ５Ｎ３Ｏ６として），ｍ／ｚ計算値５６０．０８８０７（実測値５６０．０８６６０）
【０１２６】
実施例３０
１２−［４，４−ジフルオロ−４−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３５】
2004534006.tif 000042
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１４Ｆ６Ｎ２Ｏ６Ｓとして），ｍ／ｚ５９５
【０１２７】
実施例３１
１２−［４−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３６】
2004534006.tif 000043
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１９Ｆ２Ｎ３Ｏ６として），ｍ／ｚ５０６
【０１２８】
実施例３２および３４
１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５（６Ｈ）−オンおよび
１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−７（６Ｈ）−オン
【化３７】
2004534006.tif 000044
【０１２９】
１１ｍＬのエタノール−ＴＨＦ（１０：１）中の１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン（０．１８０ｇ、０．３４ミリモル）の溶液に、ＮａＢＨ４（０．０６５ｇ、１．７ミリモル）を一度に加え、混合物をＡｒ下室温にて４日間攪拌する。得られる混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、洗い、（飽和水性ＮＨ４Ｃｌ、塩水）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発する。得られる淡黄色固体を１０ｍＬの乾燥ＴＨＦに溶かし、次いでｐ−トルエンスルホン酸・モノ水和物（０．００７ｇ）およびフェニルセレノール（０．２５３ｍＬ、２．３８ミリモル）を加える。
【０１３０】
ｔｌｃにより反応が完了するまで、反応混合物を室温で攪拌し、次いで混合物を蒸発乾固する。残渣をエーテルとともにトリチュレートし、エーテル不溶画分をカラムクロマトグラフィー（Ｓephadex  ＬＨ−２０／メタノール）で精製して、２つの主要画分を得る。画分１は、１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−７（６Ｈ）−オンとして同定した。ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ２０Ｆ３Ｎ３Ｏ５として），ｍ／ｚ５１０。
画分２は、１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−３，９−ジフルオロ−１２，１３−ジヒドロ−５Ｈ−インドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５（６Ｈ）−オンとして同定した。ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ２０Ｆ３Ｎ３Ｏ５として），ｍ／ｚ５１０。
【０１３１】
実施例３３
１２−［４−デオキシ−４−フルオロ−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２，３，９，１０−テトラフルオロ−５Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｂ］チエニル［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７（６Ｈ）−ジオン
【化３８】
2004534006.tif 000045
ＬＲＭＳ（陰ＥＳＩ、Ｍ−Ｈ−）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ５Ｎ２Ｏ６Ｓとして），ｍ／ｚ５７７；ＨＲＭＳ（陽ＥＳＩ、Ｍ＋Ｈ＋）（Ｃ２６Ｈ１５Ｆ５Ｎ２Ｏ６Ｓとして），ｍ／ｚ５７９．０６４２２６（実測値５７９．０６４２０）。
【国際公開パンフレット】
2004534006.tif 000082
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【国際調査報告】
2004534006.tif 000141