(57)【要約】本発明は、より高い濃度か又はより低い濃度のいずれかの方に、筋肉組織中の筋肉細胞内脂質の水準に特異的に影響を与えるように適合化された規定食脂質の特定のブレンドを含有する栄養組成物に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
５０〜７０％のオレイン酸、
２０〜３５％のｎ−６リノール酸、
１５〜２５％のｎ−６リノレン酸又はｎ−６族のより長い鎖の脂肪酸、
０〜１５％の量で一緒に、ステアリン酸及びパルミチン酸、及び
１〜１０％の、ｎ−３族の多価不飽和脂肪酸、
を含有することを特徴とする、個人における筋肉細胞内脂質水準を増大させるように設計された脂質ブレンド。
【請求項２】
４０〜６５％の量で中鎖脂肪酸、
２０〜５０％の、長鎖飽和脂肪酸を有するグリセリド類、及び
０〜３０％の量で一価不飽和又は多価不飽和脂肪酸、
を含有することを特徴とする、個人における筋肉細胞内脂質の蓄積を減少するように設計された脂質ブレンド。
【請求項３】
請求項１又は請求項２に記載された脂質ブレンドを含有することを特徴とする、食料製品。
【請求項４】
炭水化物を含有することを特徴とする、請求項３に記載の食料製品。
【請求項５】
インシュリン生成性タンパク質及び随意的に追加的にアミノ酸類をさらに含む、請求項３又は４に記載の食料製品。
【請求項６】
請求項５に記載の脂質ブレンドを含有することを特徴とする、食料製品。
【請求項７】
牛乳、ヨーグルト、凝乳（カード）、チーズ、発酵乳、牛乳をベースとする発酵製品、アイスクリーム、発酵穀類をベースとする製品、牛乳をベースとする粉末、乳児用調合乳、活力発揮用バー、液体食品、臨床経腸栄養補給のための調合食、活力発揮用飲料及びペットフードから選ばれる、請求項３〜６のいずれか１項に記載の食料製品。
【請求項８】
食料製品の調製のために、請求項１又は２に記載の脂質ブレンドの使用。
【請求項９】
食料製品が、牛乳、ヨーグルト、凝乳（カード）、チーズ、発酵乳、牛乳をベースとする発酵製品、アイスクリーム、発酵穀類をベースとする製品、牛乳をベースとする粉末、乳児用調合乳、活力発揮用バー、液体食品、臨床経腸栄養補給のための調合食、活力発揮用飲料及びペットフードから選ばれる、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
請求項１又は請求項２に記載の脂質ブレンドを、食物摂取可能なキャリヤーと混合する工程を含む、個人における筋肉細胞内脂質水準を増大させるか又は減少させるように設計された食料製品の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、より高い濃度又はより低い濃度のいずれかに、筋肉組織中の筋肉細胞内脂質（ｉｎｔｒａｍｙｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｌｉｐｉｄｓ）の水準に特異的に影響を与えるために適合化された規定食（ダイエット）脂質類の特定のブレンドを含有する栄養組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
哺乳動物筋肉細胞のための主要なエネルギー源は炭水化物、特にグリコーゲン、及び脂肪である。
【０００３】
グリコーゲン、即ち１２０，０００までのグルコース単量体からなる高分子は、筋肉及び肝細胞の細胞質中の個々の顆粒中に貯蔵され、これらの顆粒はまた、前記高分子の合成又は分解のために必要とされる酵素を含有している。筋肉及び肝細胞中のグリコーゲンの分解は筋肉細胞又は低いグルコース水準による高いエネルギー要求のような外部シグナルにより行われる。
【０００４】
グルコースも酸素欠如的に分解することができるので、身体において、グリコーゲンはエネルギーを迅速に提供するために主として用いられる。さらに血液において一定のグルコース水準を提供することとは別に、筋肉におけるグリコーゲンの濃度は持久性能力のための主要な決定因子の１つであることが示されている。それ故に、スポーツマンにとって、持久性を増大させるためにスポーツ活動の前に適当な量の炭水化物を摂取することが重要である。
【０００５】
必須脂肪酸、及びビタミン類のための溶媒システムを提供することとは別に、脂肪はまた、哺乳動物の毎日の身体活動のための主要な燃料となる。それは循環している脂質類により代表される筋肉外源、及び筋肉内源の両方から、筋肉細胞における酸化のために利用することができる。
【０００６】
筋肉内源は２つの異なる脂質区画により本質的に構成される。１つの源は筋肉繊維間中に存在し、筋肉細胞外脂質（ｅｘｔｒａｍｙｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｌｉｐｉｄｓ）（ＥＭＣＬ）と称せられる脂肪細胞により構成される。脂質貯蔵のための他の区画は筋肉ミトコンドリアと接触している個々の脂質液滴により示され、この脂質源は筋肉細胞内脂質（ｉｎｔｒａｍｙｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｌｉｐｉｄｓ）（ＩＭＣＬ）と称せられる。
【０００７】
標準仕事量に依存して、筋肉エネルギー代謝は異なる割合の炭水化物と脂質とを使用する。最近、研究によれば、持続性運動中に予想外に高い割合の脂質エネルギーが筋肉トリグリセリドから由来していたことが示されている。
【０００８】
この結果に対して、延長された持続運動は、トリグリセリド貯蔵（Ｍｏｒｇａｎ等、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２１６（１９６９）第８２頁〜第８６頁）ならびに脂肪酸取り込み及び酸化（Ｔｕｒｃｏｔｔｅ等、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２６２（１９９２）Ｅ７９１−Ｅ７９９）を増大させることが観察され、この事実が、運動が最大になる前の期間中にグリコーゲンを節約する理由の１つであると考えられ、最終的には身体的効率の増大に寄与すると考えられる。
【０００９】
他方、活動前のグリコーゲンローディングのために最適であると知られている高炭水化物食品材料の供給はまた、筋肉脂肪貯蔵の減少を招く可能性があるだろう。さらに、延長された持続運動はＩＭＣＬの激減を本質的に導くと考えられる（Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ等、Ｓｃｈｗｅｉｚ  Ｚ．Ｓｐｏｒｔｍｅｄ．２４（１９７６）第７１頁〜第９８頁）。それ故、局所的に貯蔵された脂質の利用が減少するという理由だけのために、運動能力を制限する運動条件が存在する可能性があると、現在のところ考えられている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
したがって、エネルギー貯蔵としてグリコーゲンとＩＭＣＬとの間の最適なバランスを提供するように、筋肉細胞中の筋肉細胞内脂質水準に影響を与えるための手段が、当業界において必要とされている。
それ故、本発明の目的はそのような手段を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
この課題は、各個人の筋肉細胞中の筋肉細胞内脂質の水準が影響を受けるような量で特定の脂質を含有する脂質ブレンドにより解決された。
【００１２】
ＩＭＣＬ貯蔵を増進させるために設計された本発明の脂質ブレンドは、各々グリセリドの形で及び全て栄養製品の最終脂肪含有量に基づいて、５０〜７０％の量でオレイン酸、２０〜３５％の量でｎ−６リノール酸、１５〜２５％の量でｎ−６リノレン酸又はｎ−６族のより長い鎖の脂肪酸、両方一緒で０〜１５％の量でステアリン酸とパルミチン酸、及び１〜１０％の量でｎ−３族の多価不飽和脂肪酸を含有する。
【００１３】
使用されるべき多価不飽和脂肪酸についての例は、ｎ−３リノール酸、ｎ−３リノレン酸、エイコサトリエン酸（Ｃ２０：２  ｎ−６  シス）、ジホモ−ガンマ−リノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸（Ｃ２０：５  ｎ−３シス）及びドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６  ｎ−３  シス）である。
【００１４】
当該ブレンドにおいてステアリン及びパルミチン酸の主要な役割は、主として製造者がブレンドを混合することを軽減することにある。
【００１５】
脂質ブレンドは、例えば食用油としてそのまま用いることができるが、脂肪としてエネルギーの３０％以上、好ましくは３０〜７０％で、炭水化物含有食品中に同様に含ませることができる。エネルギーの０〜２０％を提供する、乳漿部分又は加水分解生成物からのようなインシュリン生成性タンパク質、さらに（エネルギーの０〜５％で）ロイシン及び／又は（エネルギーの０〜５％で）アルギニンのようなアミノ酸をも組成物中に含ませることができる。
【００１６】
別の態様に従えば、本発明はまた個人におけるＩＭＣＬの蓄積を減少するように設計された脂質ブレンドを提供する。当該ブレンドは、４０〜６５％の量で中鎖トリグリセリド類（Ｃ6−Ｃ12脂肪酸）、及び２０〜５０％の量で、好ましくはグリセロール分子の１及び／又は３の位置においてエステル化された長鎖（＞Ｃ14の鎖長）飽和脂肪酸を有するトリグリセリド類、及び０〜３０％の量で、好ましくは長鎖脂肪酸が結合されている同じグリセロール分子の２の位置でエステル化されている一価不飽和又は多価不飽和脂肪酸を含有する。
【００１７】
Ｃ6−Ｃ12脂肪酸についての例はヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸及びドデカン酸であり、長鎖脂肪酸についての例はパルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸及びオレイン酸であり、その一方で当該ブレンドにおいて用いられるべき多価不飽和脂肪酸についての例は、リノール酸、リノレン酸、エイコサトリエン酸（Ｃ２０：２  ｎ−６  シス）、ジホモ−ガンマ−リノレン酸、アラキドン酸及びエイコサペンタエン酸（Ｃ２０：５  ｎ−３  シス）である。
【００１８】
一価−又は多価−不飽和脂肪酸の役割は、主として胃腸管において分子に加水分解をより受けやすくさせることである。
【００１９】
脂質ブレンドはそのままで用いることができる。なお、上に記載されたような脂質混合物を含む組成物はまた、（中鎖トリグリセリド部分の成分として）ココアバター及び／又はパーム核油、モノ−及びジ−ならびに他のトリグリセリド類、そしてトリアセチン（脂肪の０〜１０％）を含有することができる。
【００２０】
最終組成物はまた、ミネラル類、特に塩としてのカルシウム又はマグネシウム（重量により０．５〜２．０％）を含むことができる。この特徴により脂肪の部分を消化しにくいものにし、したがって身体に利用できないものにすることができる。
【００２１】
カルニチン又はクレアチンのような他の構成成分は、ＩＭＣＬ付着を高めるか又は阻害するために、あるいはビタミン類又は他の必須脂肪酸のような他の構成成分は栄養価を改良するために、又は食品等級の酸化防止剤のような他の構成成分は適当な貯蔵寿命を確保するために、組成物に加えることができる。
【００２２】
最終栄養配合物は固体食品形であることは勿論のこと、液体食品形であることができる。個人の脂肪摂取が、所望の目標を得るために、即ち増大された又は減少されたＩＭＣＬ水準を提供するために、本発明の脂質ブレンドにより主として行われることを条件として、原則として、本発明の脂質ブレンドは、そのまま用いられることができるか、又は任意の食品材料中に含ませることができる。そのような食品材料についての例は、牛乳、ヨーグルト、凝乳（カード）、チーズ、発酵乳、牛乳をベースとする発酵製品、アイスクリーム、発酵穀類をベースとする製品、牛乳をベースとする粉末、乳児用調合乳、活力発揮用バー、液体食品、臨床経腸栄養補給のための調合食、活力発揮用飲料及びペットフードである。
【００２３】
本発明の特定の脂質ブレンド物はまた、（サラダドレッシング中に、又はケーキを焼くためにのような）成分として又はフライ用油として、食用油と同じ方法で用いることができる。
【００２４】
また、ＩＭＣＬ水準がやや増大するか若しくは減少するか又は一定の状態になるような、２種の脂質ブレンドの混合物も本発明により包含されることが理解されるだろう。予備的運動、通常の身体活動、カロリー制限又は時間厳守カロリ−過剰供給のような生活様式要素は、所望の効果を達成させるために脂質ブレンドと組み合わせて用いることができる。
【００２５】
本発明に従えば、機能を調節することを目的に、規定食（ダイエット）脂質類の特定のブレンド及び随意的に他の成分を含有する栄養又は食品組成物を用いて、高い濃度か又は低い濃度のいずれかに、筋肉細胞内脂質（ＩＭＣＬ）の蓄積に影響を与えることが今や可能である。ＩＭＣＬのより多量の蓄積は、持続性スポーツマンのための局所脂質エネルギーの余分な源を結果的に提供してスポーツマンの身体的効率を改良するだろう。減少した蓄積は、例えば座っていて運動をしない個人、そしてある程度のグルコース不耐性及びインシュリン抵抗性を有する個人における代謝制御を改良し、したがって良好な健康を促進することに寄与するだろう。
【００２６】
毎日の食物の一部分として摂取した場合に、適当に設計された脂質混合物を有する本発明の食品組成物はＩＭＣＬ貯蔵を増進するだろう。ＩＭＣＬを引き上げるように設計された処置において、本発明は、持続スポーツマンのＩＭＣＬ貯蔵が効率を最大にするように予測的に増大させることができるという利点を提供する。それ故、本発明により提供される利点は、持続スポーツマンがイベントのための規定食調整中、又はイベントの後に、ＩＭＣＬとして筋エネルギー貯蔵を最大にすることを希望するときに、制御された方法でスポーツマンのＩＭＣＬを増大させるか又は減少させることができる点にある。
【００２７】
本発明の基本概念は、効率のために重要であることが何であれ、慢性代謝順応性を誘発することなしに、特定の脂質燃料タンクを充たし、それがはるかに短い期間で脂肪供給を可能にするということを理解することにおいて見られるだろう。このことは、続けられた訓練期間中の高い脂肪供給が、特に激しい且つ疲れているときのスポーツマンにより認識されるので、有利である。効率のために必須な筋肉内エネルギー燃料であるＩＭＣＬ及びグリコーゲンの両方の回復及び充足（過剰補償さえ）が最適化されるように、筋肉グリコーゲン貯蔵を促進するための規定食戦略に加えて、本発明は用いられる。本発明に従う組成物に含有されている炭水化物成分は、規定食を酸化よりもむしろ貯蔵の方に導く助けをする。
【００２８】
ＩＭＣＬ蓄積を防止するように設計された処置において、本発明は、運動をしないで座っている人のＩＭＣＬ貯蔵を、インシュリン感受性を改良するように予測的に減少させることができ、それにより彼等の一般的な健康に有益となるという利点を提供する。本発明の１つの利点はインシュリン抵抗性がスポーツマンでない個人において積極的に且つ独立してＩＭＣＬと相関連していることを示す断面観察から結果として起こる。ＩＭＣＬ防止のために用いられる特定の脂質ブレンドの利点は、様々な脂肪酸が様々な程度で筋肉細胞中にインビトロで蓄積するという観察から裏付けられており、そしてそれは飽和脂肪酸の利用性の増大と、骨格筋中のインシュリン抵抗性の確立との間に、分子的なリンクが存在することの証拠に基づいている。中鎖グリセリド類の使用は、これらの脂質がより迅速に酸化され、そして身体において長鎖グリセリド類よりもより低い効率で貯蔵されるという観察により裏付けられる。組成物中のミネラル類の包含は、（特にグリセロール分子上の１又は３の位置に飽和長鎖脂肪酸が或る場合に）飽和長鎖脂肪酸が鹸化され、糞便中に消化されていないカルシウム（又はマグネシウム）塩として排出され、この結果、これらの部分は血液に到達することすらできないという観察により裏付けられる。
【実施例】
【００２９】
以下、本発明は非限定的例により記載される。
例  １
ＩＭＣＬ貯蔵を増大させるか、又は減少させるための栄養組成物の調製
（前駆体として）様々な脂肪酸が筋肉トリグリセリド貯蔵の程度において有することができる効果を試験するために、モデルとして、ヒト骨格筋細胞が用いられた。
【００３０】
筋肉疾患が存在しない被検者から得られた筋肉生検材料の外套細胞のバンクから、一次培養を開始した。無神経筋肉培養を単層に定着させ、次に、１０％胎仔ウシ血清、１０μｇ／ｍｌのインシュリン、２ｍＭのグルタミン、２５ｎｇ／ｍｌ線維芽細胞成長因子、及び１０ｎｇ／ｍｌの上皮増殖因子を補充したＤＭＥＭ−Ｍ−１９９培地，３：１中でそれらを増殖させた。筋芽細胞融解直後に、ハンク（Ｈａｎｋ）のバランスのとれた塩溶液中で細胞をリンスし、そしてＦＧＦ、ＥＧＦ及びグルタミンを欠いている培地を加えた。筋肉培養が４週間までの間、この培地中に維持された。
【００３１】
３７℃で２４時間、（各々ＦＦＡについての独立した実験において）ＤＭＥＭ＋グルコース（２５ｍＭ）＋アルブミンに結合された０．５ｍＭのＦＦＡ塩を用いて細胞をインキュベートした。脂肪酸についての例として、（ＩＭＣＬ貯蔵を増進する）ブレンド１において、オレエート（Ｃ１８：１  シス）、リノレエート（Ｃ１８：２  シス／シス）、ｎ−６リノレエート及びｎ−３リノレエートを用いた。
脂肪酸についての例として、（ＩＭＣＬ貯蔵を阻止する）ブレンド２において、オクタノエート（Ｃ８：０）、パルミテート（Ｃ１６：０）及びステアレート（Ｃ１８：０）を用いた。
【００３２】
インキュベーション後、細胞脂質を、ブライ（Ｂｌｉｇｈ）及びダィエル（Ｄｙｅｒ）（Ｃａｎ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ３７：第９１１頁〜第９１７頁（１９５９））の方法に従って抽出した。ＩＭＣＬ含有量を測定するために、５０ｍＭのトリス（Ｔｒｉｓ）、１００ｍＭのＫＣｌ、２０ｍＭのＫＦ、０．５ｍＭのＥＤＴＡ及び０．０５％のＬｕｂｒｏｌ  ＰＸ（ｐＨ  ７．９）からなる緩衝液中に細胞単層をこすり取ることによって抽出物が調製され、そしてそれらは５秒間３回超音波処理された。ホモジネートを１５分間１１０００ｇで遠心分離し、得られた上澄み液を集めた。合計トリアシルグリセロール（即ちＩＭＣＬ）が、標準として抽出緩衝液中に再懸濁されたトリオレインを用いて、ＧＰＯ−トリンダー（ＧＰＯ−Ｔｒｉｎｄｅｒ）キットを有するコバス−バイオ（Ｃｏｂａｓ−Ｂｉｏ）自動分析器で測定された。トリグリセリドの筋肉細胞内の性質は７０％エタノール中のスダンＩＩＩ（Ｓｕｄａｎ  ＩＩＩ）を用いての組織化学的染色により明白に示された。
【００３３】
図１に示されるように、（ＦＡ酸が存在しない対照培地に比較することができる）中鎖長のＦＡオクタノエートにさらされた細胞においてＩＭＣＬの蓄積がないことが観察されたのに対して、長鎖ＦＡを用いてのインキュベーション後に有意な蓄積が達成された。飽和ＦＡパルミテート及びステアレートは中程度の合成を引き起し、これらの間に有意差はなかった。それに反して、飽和ＦＡと比較して、不飽和ＦＡであるオレエート及びリノレエートから著しく高い（２．５〜４倍高い）合成が観察された。
【００３４】
この例は、様々な脂肪酸にさらされた筋肉細胞が、様々な程度でこれらを蓄積し、より高いか又はより低いＩＭＣＬ水準を生ずることを示す。
【００３５】
例  ２
規定食によりヒトにおいてＩＭＣＬを調節する能力
プロトンＮＭＲ分光分析を用いて、ヒトにおけるＩＭＣＬ上への規定食の影響を調べた。６人の持続的訓練した被検者が、（筋肉におけるＩＭＣＬ貯蔵を減少させるように設計された）２時間の運動に従い、その後に彼等は１日半の間、脂肪が低い（脂質としてエネルギーの１５％）規定食に従った。
【００３６】
他の場合に、運動の後に、彼等は脂肪に富んでいる（脂質としてエネルギーの５５％）規定食に従った。高い脂肪中の脂肪酸の５０％より多くは、ＩＭＣＬ貯蔵を増進させるために選ばれた脂肪酸プロファイルを有する食品が提供された。この場合に、オレイン酸の５９％、リノール酸の２６％、パルミチン酸の５％及びステアリン酸の３％であった。それらの規定食は等カロリーであった。
【００３７】
ＩＭＣＬ水準は、ベッシュ（Ｂｏｅｓｃｈ）等、Ｍａｇｎ．Ｒｅｓｏｎ．Ｍｅｄ（１９９７）２７：第４８４頁〜第４９３頁に従って、右足の脛側前方筋（ｔｉｂｉａｌｉｓ  ａｎｔｅｒｉｏｒ  ｍｕｓｃｌｅ）において、規定食前及び規定食後に測定された。
【００３８】
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【００３９】
低脂肪規定食後のＩＭＣＬ水準における変化はゼロと異ならなかった。高脂肪規定食後にＩＭＣＬ水準は６８％増大した（ｐ＜０．００１）。
【００４０】
この例は、貯蔵を増進するように選ばれた脂肪酸を有する脂質を提供する生成物にさらされたヒトがＩＭＣＬを蓄積することを示している。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】筋肉細胞が種々の脂肪酸にさらされた実験の結果を示す。
【図１】
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【国際公開パンフレット】
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【手続補正書】
【提出日】平成15年7月18日(2003.7.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５０〜７０％のオレイン酸、
２０〜３５％のｎ−６リノール酸、
１５〜２５％のｎ−６リノレン酸又はｎ−６族のより長い鎖の脂肪酸、
０〜１５％の量で一緒に、ステアリン酸及びパルミチン酸、及び
１〜１０％の、ｎ−３族の多価不飽和脂肪酸、
を含有することを特徴とする、個人における筋肉細胞内脂質水準を増大させるように設計された脂質ブレンド。
【請求項２】
請求項１に記載された脂質ブレンドを含有することを特徴とする食料製品。
【請求項３】
炭水化物を含有することを特徴とする、請求項２に記載の食料製品。
【請求項４】
インシュリン生成性タンパク質及び随意的に追加的にアミノ酸類をさらに含む、請求項３に記載の食料製品。
【請求項５】
請求項４に記載の脂質ブレンドを含有することを特徴とする、食料製品。
【請求項６】
牛乳、ヨーグルト、凝乳（カード）、チーズ、発酵乳、牛乳をベースとする発酵製品、アイスクリーム、発酵穀類をベースとする製品、牛乳をベースとする粉末、乳児用調合乳、活力発揮用バー、液体食品、臨床経腸栄養補給のための調合食、活力発揮用飲料及びペットフードから選ばれる、請求項３〜５のいずれか１項に記載の食料製品。
【請求項７】
食料製品の調製のために、請求項１に記載の脂質ブレンドの使用。
【請求項８】
食料製品が、牛乳、ヨーグルト、凝乳（カード）、チーズ、発酵乳、牛乳をベースとする発酵製品、アイスクリーム、発酵穀類をベースとする製品、牛乳をベースとする粉末、乳児用調合乳、活力発揮用バー、液体食品、臨床経腸栄養補給のための調合食、活力発揮用飲料及びペットフードから選ばれる、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
請求項１に記載の脂質ブレンドを、食物摂取可能なキャリヤーと混合する工程を含む、個人における筋肉細胞内脂質水準を増大させるように設計された食料製品の調製方法。
【国際調査報告】
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