(57)【要約】本発明は、山蔘不定根の抽出物を含む化粧料組成物に関する。山蔘不定根の抽出物は、エタノールを用いた天然山蔘の抽出によって調製する。前記抽出物を含む化粧料組成物は良好な美白効果を有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
組織培養した山蔘不定根（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｇｉｎｓｅｎｇ  Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ  Ｒｏｏｔｓ）抽出物を、０．１〜１０．０重量％含むことを特徴とする、化粧料組成物。
【請求項２】
前記抽出物を０．５〜２．０重量％含むことを特徴とする請求項１に記載の化粧料組成物。
【請求項３】
前記山蔘不定根抽出物が、組織培養した山蔘不定根を乾燥、洗浄、溶媒抽出、熟成、及び濾過の工程を通して調製されたものであることを特徴とする請求項１又は２に記載の化粧料組成物。
【請求項４】
前記溶媒抽出が、エタノールのみ、又は１，３−ブチレングリコール又はポリプロピレングリコールとの組み合わせの使用で実施されることを特徴とする請求項３に記載の化粧料組成物。
【請求項５】
前記抽出物が少なくとも１つの種とともに処方されることを特徴とする請求項１又は２に記載の化粧料組成物。
【請求項６】
前記化粧料組成物が、柔軟化粧水（スキンローション）、栄養化粧水（ミルクローション）、乳化状のクリーム、マッサージクリーム、エッセンス、ゲル状クリーム、パック、及び栄養乳化液よりなる群から選ばれるものであることを特徴とする請求項１又は２に記載の化粧料組成物。
【請求項７】
組織培養した山蔘不定根抽出物を調製するための方法であって、
組織培養した山蔘不定根を乾燥させること、
前記乾燥した組織培養山蔘不定根を、エタノールを含む溶媒中に浸すこと、
前記溶液を濾過すること、及び
場合によっては前記濾液よりエタノールを除去すること、
の工程を含む方法。
【請求項８】
前記溶液が、エタノールのみ、又は１，３−ブチレングリコール又はプロピレングリコールとの組み合わせを含むことを特徴とする請求項７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、一般的には化粧料組成物に関するものであり、とりわけ、組織培養した山蔘（又は野生蔘）不定根からの抽出物を含有する化粧料組成物に関するものである。
【０００２】
（発明の背景）
人の皮膚を黒くする原因には多くの因子が存在する。それらのうち、紫外線への曝露がよく知られている。いったん皮膚が紫外線に曝露されると、皮膚細胞メラニン細胞内にてメラニンの合成が増加し、表皮に放出される。メラニン細胞におけるメラニンの合成はチロシナーゼによって仲介される。詳細には、細胞内のチロシンが、チロシナーゼによってドパキノン（Ｄｏｐａｑｕｉｎｏｎｅ）に変換され、このドパキノンから色素であるメラニンが自発的酵素反応を介して産出される。従って、メラニンの産出は、メラニン合成経路のいくつかの反応を遮断することによって阻害することが可能であり、この考えは、皮膚の黒色化を抑止する典型的な方法に採用されている。
【０００３】
このために、従来、アスコルビン酸、コウジ酸、アルブチン、ハイドロキノン、油溶性甘草抽出物、及び各種植物溶出物などが使われてきた。コウジ酸は、チロシナーゼの活性部位に存在する銅イオンをキレートすることにより、前記酵素の活性を阻害する作用を持つ。コウジ酸は、チロシナーゼに対して、高い阻害活性を持つが、他の化粧料に対して適合性が良くないため、化粧料としては使用されない。ハイドロキノリンは、皮膚に対する刺激性が高い等、安全性に問題があり、化粧料には使用されない。
【０００４】
天然物、特に植物の中から美白活性成分を探すための研究が持続されてきている。その結果、桑白皮、甘草、芍薬、桂皮、くらら、葛根、当帰、牡丹皮、半夏、アロエなど多数の植物抽出物がチロシナーゼ阻害活性を持つという事実が明らかになってきた。しかしながら、これらは明白な美白効果を示さない。加えて、最終製品の安定性、変色可能性などの側面において、化粧品や医薬品に有効量で植物抽出物を使用できないことが、種々の実験より示されている。特に、大部分の植物抽出物の場合、高濃度で使用したときだけ有効なチロシナーゼ活性阻害効果を示す。すなわちほとんどのものは、低濃度ではチロシナーゼの阻害効果をほとんど示さない。
【０００５】
従って、美白効果に優れ、かつ他の化粧料との適合性に優れ、皮膚に対する刺激がほとんどない改善された化粧料に対する必要性が残っている。
【０００６】
（発明の詳細な説明）
本発明に先行して、先行技術にて存在した問題を解決することを目的に、天然美白物質に関して調査が本発明者らによって実施され、結果として、山蔘抽出物が、メラニン細胞中のメラニンの産出を強く阻害し、従って、優れた皮膚美白効果を示すことが明らかになった。
【０００７】
従って、本発明の目的は、美白効果に優れ、化粧料として使用可能な、山蔘抽出物を提供することである。
【０００８】
本発明の他の目的は、有効成分として、山蔘不定根抽出物を含有する皮膚美白化粧品処方を提供することである。
【０００９】
本発明のさらなる目的は、化粧有効成分として、山蔘不定根抽出物を含有する美白化粧品処方を調製するための方法を提供することである。
【００１０】
本発明の態様に従って、組織培養山蔘不定根からの抽出物を０．１〜１０．０重量％を含有する、化粧料組成物が提供される。
【００１１】
本発明の他の態様に従って、組織培養された山蔘不定根を乾燥させること、乾燥させた組織培養山蔘不定根を、エタノール含有溶液中で熟成させること、前記溶液を濾過すること、及び場合によっては前記濾液からエタノールを除去すること、の各工程を含む、組織培養された山蔘不定根から抽出物を調製するための方法が提供される。
【００１２】
（発明を実施するための最良の形態）
山蔘を植物学的に分類すれば、被子植物に属する五加皮科、顕花植物に分類され、その起源は、ほぼ１億年前と推定されている。韓国山蔘の起源は、全羅南道母後山で最初に発見されたと伝えられている。山蔘は、その成長には繊細な条件を要求することから、環境条件が適切でないところでは、長い間地中に埋められたままの種である。つまり、適切な環境条件が整うまで待つのである。
【００１３】
天然山蔘の種類は、土壌の自生地の条件によって、１８種類に分類される。自然的に山で生えて種が落ちて生じた天種蔘（天然山蔘）、野生動物や鳥類が山蔘の種を食べて山中に排泄して生長した地種蔘、人が種をまいて生長した人種蔘、すでに生長した蔘を山に植えた山養蔘、人が人為的に養生させた長脳蔘（家蔘）、年数が分からないほどに古くなった山蔘で、子供に似た童子蔘など、山蔘の種類は多いが、天然山蔘は、優れた薬効を持っていると言われる。また、他の植物が持っているものとは異なりサポニンなどの生理活性物質を多量に含有していることから、免疫機能亢進、ガン細胞増殖抑制、抗糖尿病作用、心臓刺激、血圧低下及び低血圧、肝機能強化、胃腸機能及び脳機能強化、老化抑制、虚弱体質改善などの効能がある。実際に、山蔘は、東洋の神秘な薬草として知られている。
【００１４】
山蔘の皮膚美白効果に関する報告は今まで開示されていない。
【００１５】
本発明では、山蔘不定根からの抽出物を、皮膚美白化粧料中で使用する。山蔘不定根は組織培養により得る。
【００１６】
本発明に従って、皮膚美白化粧品処方は、化粧有効成分として、山蔘不定根を０．１〜１０．０重量％、好ましくは０．５〜２．０重量％含有する。
【００１７】
美白化粧料として使用するのに効果的である物質を、山蔘不定根より抽出するために、まず、組織培養山蔘不定根を乾燥させる。前記乾燥させた山蔘不定根を、エタノールを含む溶液中に浸し、所定の時間熟成する。山蔘根からの抽出物を含む溶液を濾過する。場合によっては、エタノールを濾液より除去して良い。
【００１８】
山蔘不定根の抽出に使用する溶液は、エタノールを単独で含んでよく、又は１，３−ブチレングリコールやプロピレングリコールのような他のアルコールとの組み合わせでも良い。エタノールのみ単独で使用する場合には、乾燥した山蔘不定根重量の２０〜４０倍を超える量を使用し、溶液は７０％水溶液が好ましい。またエタノールを、１，３−ブチレングリコールやプロピレングリコールとの組み合わせで使用する場合には、７０％のエタノール溶液を山蔘不定根重量の２０〜４０倍を超える量で加え、一方、１，３−ブチレングリコール又はプロピレングリコールを、山蔘不定根重量の２〜１０倍を超える量で使用する。山蔘不定根抽出物は、少なくとも１つの種とともに化粧品に処方され得る。
【００１９】
概して、本発明を説明する際、特定の実施例を参照して、更なる理解が得られる。但し、下記実施例は、本発明を例示するためのものに過ぎず、本発明の範囲が実施例にのみ限定して解釈されるべきものではない。
【００２０】
１．山蔘からの抽出物の調製
【００２１】
実施例１
乾燥させた後、組織培養した山蔘不定根１ｋｇを、７０％のエタノール溶液３０ｋｇ中に浸し、十分な時間熟成させた。ついで、前記溶液を濾紙（５Ｃ、１８５ｍｍ、東洋濾紙株式会社（Ｔｏｙｏｒｏｓｈｉ  Ｋａｉｓｈａ，Ｌｔｄ．）で濾過し、抽出物を得た。
【００２２】
実施例２
乾燥させた後、組織培養した山蔘不定根１ｋｇを、７０％のエタノール溶液３０ｋｇ中に浸し、十分な時間熟成させた。ついで、前記溶液を濾紙（５Ｃ、１８５ｍｍ、東洋濾紙株式会社（Ｔｏｙｏｒｏｓｈｉ  Ｋａｉｓｈａ，Ｌｔｄ．）で濾過した。こうして得た濾液より、水浴にて１００℃で加熱することによってエタノールを除去し、シロップ状の抽出物を得た。
【００２３】
実施例３
乾燥させた後、組織培養した山蔘不定根１ｋｇを、７０％のエタノール溶液３０ｋｇ、及び１，３−ブチレングリコール又はプロピレングリコール３ｋｇ中に浸し、十分な時間熟成させた。ついで、前記溶液を濾紙（５Ｃ、１８５ｍｍ、東洋濾紙株式会社（Ｔｏｙｏｒｏｓｈｉ  Ｋａｉｓｈａ，Ｌｔｄ．）で濾過し、ついで５０〜６０℃で、濾液よりエタノールを除去し、抽出物を得た。
【００２４】
２．メラニン産出に対する阻害活性、及び細胞毒性に関する試験
【００２５】
実験実施例１：メラニンの産出に対する阻害活性
実施例１〜３での組織培養山蔘から調製した抽出物を、Ｂ−１６メラノーマ細胞（韓国延世大学校原州医科大学よりいただいた）を用いて、美白効果に関して試験した。測定方法としては、ブラックマウスより由来するＢ−１６メラノーマ細胞を、１０％ＦＢＳ（米国ＧＩＢＣＯ社製）含有ＤＭＥＭ培地（米国ＧＩＢＣＯ社製）を２ｍｌ含む、６ウェル細胞培養プレートに２×１０４細胞／ウェル濃度で２ｍｌずつ加え、３７℃にて２４時間、５％ＣＯ２下で培養した。その後、培養培地を２μＭ  α−ＭＳＨ（メラニン細胞刺激ホルモン、米国Ｓｉｇｍａ社製より購入）及び２ｍＭテオフィリン（米国Ｓｉｇｍａ社製）を含む１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭで置き換えた。その後、抽出物を同一の培地中で希釈し、細胞を添加した後、ついで細胞がウェルの底部分の８０％を満たすまで、５％ＣＯ２下、３７℃にて培養した。培地を除去し、細胞をＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水、米国ＧＩＢＣＯ社製）で洗浄し、トリプシンにて処理して、細胞ペレットを得た。回収した細胞ペレットを５，０００ｒｐｍにて１０分間遠心し、上清を除去した。こうして得た細胞ペレットを、６０℃にて２４時間、インキュベーター内で乾燥させ、１Ｎ  ＮａＯＨをこれらの細胞に添加して、細胞内メラニンを溶解させた。目視のために、溶解したメラニンをビデオ顕微鏡を使用して写真にとり、その結果を図１に示した。また。メラニンの希釈液をＥＬＩＳＡにて解析し、メラニン合成に対する阻害活性に関して、山蔘不定根からの抽出物を試験した。結果は以下の表１に示してある。
【００２６】
【表１】
2004521947.tif 000002
【００２７】
図１及び表１で見られるように、山蔘不定根からの抽出物は、皮膚において優れた美白効果を示す。
【００２８】
実験実施例２：細胞毒性
実施例１〜３にて調製した組織培養山蔘不定根からの抽出物を、従来より皮膚美白物質として使用されている、紅参抽出物及びアルブチンと比較して、細胞毒性に関して試験した。
【００２９】
トリプシン処理にて回収した後に、形質転換マウス繊維芽細胞Ｌ９２９細胞を、２％ＢＣＳ（子ウシ血清）含有ＤＭＥＭ中に懸濁させ、この懸濁液を９６ウェル細胞培養プレートの各ウェルに、２，５００〜３，０００細胞／ウェルになるように分注した後、５％ＣＯ２下、３７℃にて４８時間、インキュベートした培地を新鮮な、無血清培地に交換した後、細胞を以下表２で示した試験物質で処理し、４８時間培養した。それぞれのウェルに、ニュートラルレッド（Ｎｅｕｔｒａｌ  Ｒｅｄ）（５０μｇ／ｍｌ）を加え、細胞と共に３時間反応させた。生細胞中のニュートラルレッドの蓄積を完了させた後、１．０％ホルマリン／１．０％  ＣａＣｌ２を使用して、色素を固定させた。ニュートラルレッドを、１．０％酢酸／５０％エタノール溶液を用いて細胞より抽出した。こうして抽出したニュートラルレッドをＥＬＩＳＡによって解析し、濃度にしたがった試験物質の細胞毒性を測定した。結果を以下の表２に示す。
【００３０】
【表２】
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【００３１】
従来の物質に比べて、山蔘不定根抽出物のＮＲ５０が非常に高いことから、人体に対して非常に安全であることが分かる。
【００３２】
３．皮膚美白化粧料組成物の処方
組織培養した山蔘不定根からの抽出物を含む種々の化粧料組成物を以下のように調製した。
【００３３】
処方例１
以下の表３で示した処方に従って、柔軟化粧水（スキンローション）を調製した。
【００３４】
【表３】
2004521947.tif 000004
【００３５】
処方例２
以下の表４で示した処方に従って、栄養化粧水（ミルクローション）を処方した。
【００３６】
【表４】
2004521947.tif 000005
【００３７】
処方例３
以下の表５で示した処方に従って、栄養クリームを調製した。
【００３８】
【表５】
2004521947.tif 000006
【００３９】
処方例４
以下の表６で示した処方に従って、マッサージクリームを調製した。
【００４０】
【表６】
2004521947.tif 000007
【００４１】
処方例５
以下の表７で示した処方に従って、エッセンスを調製した。
【００４２】
【表７】
2004521947.tif 000008
【００４３】
処方例６
以下の表８で示した処方に従って、ゲル状クリームを調製した。
【００４４】
【表８】
2004521947.tif 000009
【００４５】
処方例７
以下の表９で示した成分で、スキンパックを調製した。
【００４６】
【表９】
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【００４７】
処方例８
以下の表１０で示した処方に従って、栄養乳化液を調製した。
【００４８】
【表１０】
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【００４９】
（産業上の利用可能性）
本明細書で上記したように、本発明に従って、皮膚美白のために、組織培養山蔘不定根からの抽出物を含む化粧料組成物が提供される。必須成分として山蔘不定根抽出物を含む本化粧料組成物は、皮膚を刺激することがなく、美白効果に優れている。
本発明は例示的な様式で記述されているが、使用した表現は、制限するためではなく、記述のためのものであることが理解されるべきである。以上の技術を考慮して、本発明の多くの変更及び変形が可能である。従って、本発明は、付随する請求項の範囲内で、特に記述される以外に実施されうることが理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、山蔘不定根抽出物、又は他の対照物質で処理したＢ−１６メラノーマ細胞における、メラニンの合成を示している顕微鏡写真である。
【国際公開パンフレット】
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2004521947.tif 000019
2004521947.tif 000020
2004521947.tif 000021
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【国際調査報告】
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