(57)【要約】本発明は、式：｛式中、Ｘは、水素もしくはハロゲン基であり；Ｒ２は、水素、アシル、またはヒドロキシ保護基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシル、または−ＯＲａ［式中、Ｒａは、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分である］であり；Ｒ１３は、水素、または部分が、メチル；Ｃ３−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分であり；そしてＲは、水素、または部分が、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分である｝の化合物ならびにその製薬的に許容しうる塩、エステルおよびプロドラッグ型を含む。これらの化合物は、抗感染活性を有し、そして細菌および原虫感染症の治療のために有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2004517819.tif 000026
｛式中、
Ｘは、水素もしくはハロゲン基であり；
Ｒ２は、水素、アシル、またはヒドロキシ保護基であり；
Ｒ６は、水素、ヒドロキシル、または−ＯＲａ［式中、Ｒａは、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分である］であり；
Ｒ１３は、水素、または、メチル；Ｃ３−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分であり；
そして
Ｒは、水素、または、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分である｝
の化合物ならびにその製薬的に許容しうる塩、エステルおよびプロドラッグ型。
【請求項２】
Ｘが水素もしくはフッ素基であり；
Ｒが水素であり；
Ｒ２が水素、−ＣＯＣＨ３もしくは−ＣＯフェニルであり；
Ｒ１３がメチル、プロピルもしくはビニルであり；そして
Ｒ６が、３−（キノリン−３−イル）プロプ−２−エニル；３−（キノリン−３−イル）プロプ−２−イニル；３−（キノリン−６−イル）プロプ−２−エニル；３−（キノリン−６−イル）プロプ−２−イニル；３−（キノリン−７−イル）プロプ−２−エニル；；３−フェニルプロプ−２−エニル；３−（ナフト−１−イル）プロプ−２−エニル；３−（ナフト−１−イル）プロプ−２−イニル；３−（ナフト−２−イル）プロプ−２−イニル；５−フェニルペント−４−エン−２−イニル；３−（フル−２−イル）プロプ−２−イニル；３−（チエン−２−イル）プロプ−２−エニル；３−（カルバゾル−３−イル）プロプ−２−エニル；および３−（キノキサリン−６−イル）プロプ−２−エニル
からなる群から選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式
【化２】
2004517819.tif 000027
｛式中、
Ｒ２は、水素、−ＣＯＣＨ３または−ＣＯフェニルであり；
Ｒ１３は、メチル、プロピル、ビニル、ブチル、３−ブテニル、３−ヒドロキシブチル、２−フルオロエチルもしくは２−アジドエチルであり；
Ｒ６は、−ＯＲａ［式中、Ｒａは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、または−ＹＺ（式中、ＹはＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニルもしくはＣ２−Ｃ１０アルキニルであり；そしてＺは置換アリール、非置換アリール、置換ヘテロシクロもしくは非置換ヘテロシクロである）である］であり；そして
Ｒは、水素またはＲａである｝
の化合物ならびにその製薬的に許容しうる塩、エステルおよびプロドラッグ型。
【請求項４】
Ｘが水素もしくはフッ素基であり；
Ｒが水素であり；
Ｒ２が水素、−ＣＯＣＨ３または−ＣＯフェニルであり；
Ｒ１３がメチル、プロピルもしくはビニルであり；そして
Ｒ６が請求項３に列挙されているとおりである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒａが−ＹＺである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
ＹがＣ３−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６アルケニルもしくはＣ３−Ｃ６アルキニルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｚが置換もしくは非置換ヘテロアリールである、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
Ｚが、
【化３】
2004517819.tif 000028
からなる群から選ばれる、請求項５に記載の化合物。
【請求項９】
Ｚが、
【化４】
2004517819.tif 000029
からなる群から選ばれる、請求項５に記載の化合物。
【請求項１０】
式
【化５】
2004517819.tif 000030
［式中、Ｘは、ＨもしくはＦであり；
Ｒ１３は、メチル、プロピルもしくはビニルであり；そして
Ｒａは、置換もしくは非置換のヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルもしくはヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルである］
の化合物ならびにその製薬的に許容しうる塩、エステルおよびプロドラッグ型。
【請求項１１】
Ｒａが、置換もしくは非置換のヘテロアリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロアリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルもしくはヘテロアリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル基である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒａが、
【化６】
2004517819.tif 000031
からなる群から選ばれる、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１３がメチルである、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１３がビニルである、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１３がプロピルである、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１６】
式
【化７】
2004517819.tif 000032
［式中、
Ｘは、水素もしくはフッ素基であり；そして
Ｒａは、
【化８】
2004517819.tif 000033
からなる群から選ばれる］
の化合物。
【請求項１７】
Ｘが水素であり、そしてＲａが
【化９】
2004517819.tif 000034
である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘがフッ素基であり、そしてＲａが
【化１０】
2004517819.tif 000035
である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｘが水素であり、そしてＲａが
【化１１】
2004517819.tif 000036
である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘがフッ素基であり、そしてＲａが
【化１２】
2004517819.tif 000037
である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘが水素であり、そしてＲａが
【化１３】
2004517819.tif 000038
である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｘがフッ素基であり、そしてＲａが
【化１４】
2004517819.tif 000039
である、請求項１６に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本出願は、２０００年４月１３日提出の米国特許第０９／５４８，５６８号；２０００年４月１３日提出の同第０９／５４８，５８４号；２０００年４月１４日提出の同第０９／５５０，０４５号；および２０００年４月１４日提出の同第０９／５５１，１６２号に基づく優先権を主張するものであり、これらのすべては完全に引用によって本明細書に組み入れられている。
【０００２】
発明の分野
本発明は、マクロライドファミリーにおける一連のケトライド（ｋｅｔｏｌｉｄｅ）抗菌剤、それらの製造において使用される中間体およびそれらを含有する製薬組成物に関する。本化合物は、細菌および原虫感染症の治療および他の胃運動性に伴う症状の治療において有用であるエリスロマイシン類似体である。
【０００３】
発明の背景
ポリケチドは、抗生作用および他の薬理学的性質を保持する多くの化合物を含む天然生産物のファミリーである。エリスロマイシンは、ストレプトミセス・エリスレウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｅｒｙｔｈｒｅｕｓ）菌株の代謝産物中に１９５２年に最初に発見されたマクロライド抗生物質の一種である。この抗生物質はＡ，Ｂ，ＣおよびＤと名付けられた種々のグリコシル化形態において存在する。それらの発見以来、多くの者が分子の誘導体を調製してその性質を改良または改変すべく研究してきた。多数のこの研究の焦点は、天然に生産されるエリスロマイシン分子の化学的改変を伴った。例えば、クラリスロマイシンは、Ｃ−６におけるヒドロキシル基を−ＯＭｅに化学的に改変することによって作成される半合成抗生物質である。
【０００４】
ケトライドは、Ｃ−３クラジノース糖が化学的に除去され、そして得られる遊離ヒドロキシル基がケト基に転化されたエリスロマイシン誘導体である。例えば、米国特許第６，１２４，２６９号は、Ｃ−１１およびＣ−１２に環状カルバメート基を、そしてＣ−６にアルキルアリール基を有するケトライドを記述している。また、米国特許第５，６３５，４８５号は、Ｃ−１１およびＣ−１２に環状カルバメート基を有するが、Ｃ−６に−ＯＭｅ基およびカルバメート窒素にアルキルアリール基を有するケトライドを記述している。しかしながら、マクロライド分子の複雑さのために、誘導体を製造する薬化学的努力は、天然に存在するエリスロマイシンおよびそれらの前駆物質に対してなし得る種類の改変によって制約されてきた。
【０００５】
近年、モジュ−ルの（ｍｏｄｕｌａｒ）ポリケチドシンターゼ（「ＰＫＳ」）の発見および分離が、作成できるマクロライド構造の範囲を拡大した。ＰＫＳは脂肪酸合成に係わる多機能酵素であり、これは、そのアシルチオエステル間で繰り返される反応を介してポリケチド鎖の形成を触媒する。
【０００６】
Ｓ．エリスレア（Ｓ．ｅｒｙｔｈｒａｅａ）ＰＫＳは、３個の別々の遺伝子によってコードされている３種の多機能タンパク質の集合体であり、そして米国特許第５，８２４，５１３号、同第６，００４，７８７号、同第６，０６０，２３４号および同第６，０６３，５６１号によって記述されている。Ｓ．エリスレアＰＫＳ産物は、６−デオキシエリスロノライドＢであり、続いてこれはさらなるテイラーリング（ｔａｉｌｏｒｉｎｇ）酵素によって処理されてエリスロマイシンＡ−Ｄを生成する。ＰＫＳ遺伝子およびテイラーリング酵素の遺伝子の集団的集合体は生合成遺伝子クラスターと呼ばれている。Ｓ．エリスレアＰＫＳ生合成遺伝子クラスターは、Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ：Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，（１９９３），Ｒ．Ｈ．Ｂａｌｚ，Ｇ．Ｄ．Ｈｅｇｅｍａｎ，ａｎｄ  Ｐ．Ｌ．Ｓｋａｔｒｕｄ（ｅｄｓ．），Ａｍｅｒ．Ｓｏｃ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．においてＤｏｎａｄｉｏらによって記述されている。
【０００７】
新規なポリケチドを作成するために、Ｓ．エリスレア由来のＰＫＳを含む種々のＰＫＳをコードしているベクターを用いる組み換え法が米国特許第５，６７２，４９１号、同第５，８３０，７５０号、同第５，６７２，４９１号、同第５，７１２，１４６号、同第５，９６２，２９０号、同第６，０２２，７３１号、同第６，０６６，７２２号および同第６，０７７，６９６号に記述されている。ＰＣＴ公開ＷＯ９８／０１５４６は、ローディング（ｌｏａｄｉｎｇ）ドメインを改変し、その結果ポリケチド合成を開始するスターターユニットの性質を変えるさらなる方法を記述している。無細胞系でポリケチドを作成する方法は、例えば、米国特許第６，０８０，５５５号およびＰＣＴ公開ＷＯ９７／０２３５８に記述されている。これらの技術を使用して、Ｃ−１３における天然に存在するエチル基が他の基により置換されているエリスロマイシン類似体が、例えば、ＰＣＴ公開：ＷＯ９７／２３６３０；ＷＯ９８／０１５７１，ＷＯ９９／３５１５７，ＷＯ００／０３９８６およびＷＯ００／４４７６１において報告されている。
【０００８】
近年使用される抗生物質に対する耐性株の出現における切迫した増大により、特に耐性株に対して抗生物活性を有する新規化合物へのニーズが存在する。本発明は、新規なエリスロマイシン誘導体を提供することによってこのニーズを満足させる。これらの化合物は、一般に、ＰＫＳ遺伝子クラスターの操作からもたらされる非天然エリスロマイシン類似体の半合成または化学的改変の生成物である。
【０００９】
発明の概要
本発明は、広いスペクトルの細菌菌株に対して抗菌活性を保持することが期待され、それによりヒトおよび動物における細菌感染症の治療に有用である新規な化合物に関する。本発明は、式：
【００１０】
【化１５】
2004517819.tif 000002
【００１１】
｛式中、
Ｘは、水素もしくはハロゲン基であり；
Ｒ２は、水素、アシル、またはヒドロキシ保護基であり；
Ｒ６は、水素、ヒドロキシル、または−ＯＲａ［式中、Ｒａは、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分である］であり；
Ｒ１３は、水素、または部分が、メチル；Ｃ３−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分であり；
そして
Ｒは、水素、または部分が、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、Ｃ２−Ｃ１０アルキニル、アリール、ヘテロシクロ、アリール（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニル、アリール（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニル、ヘテロシクロ（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、ヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルケニルおよびヘテロシクロ（Ｃ２−Ｃ１０）アルキニルからなる群から選ばれる置換もしくは非置換部分である｝
の化合物ならびにその製薬的に許容しうる塩、エステルおよびプロドラッグ型に関する。
【００１２】
好適な実施態様の詳細な記述
本発明は、新規なエリスロマイシン誘導体およびそれへの中間体に関する。一般に、本発明の化合物は、グラム陽性、グラム陰性および嫌気性細菌に対する抗菌活性を保持し、そしてヒトおよび動物における細菌感染症の治療のための広スペクトル抗菌剤として有用である。これらの化合物は、限定されるものではないがＳ．アウレウス（Ｓ，ａｕｒｅｕｓ）、Ｓ．エピデルミヂス（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、Ｓ．ニューモニエ（Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）Ｓ．ピオゲネス（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、腸球菌、モラキセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）およびＨ．インフルエンゼ（Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）を含む種々の菌株に対して効果がある。治療できる代表的な感染症は、市中肺炎、上下気道感染症、皮膚および軟組織感染症、髄膜炎、院内長期感染ならびに骨および関節感染症を含む。
【００１３】
本化合物の多くは１種以上のキラル中心を含有する。立体異性体のすべては、純化合物ならびに立体異性体の混合物と同様、本発明の範囲内に含まれる。同様に、すべての幾何異性体もまた本発明の範囲内に含まれる。本発明による化合物が少なくとも１つのキラル中心を有している場合、それに応じてそれらは鏡像異性体として存在してもよい。化合物が２つ以上のキラル中心を有している場合、それに応じてそれらはジアステレオマーとして存在してもよい。すべてのそのような異性体およびその混合物は本発明の範囲内に包含される。さらにまた、化合物の結晶型のあるものは多形として存在してもよく、そしてそれ自体本発明に包含されることを意図する。さらに、若干の化合物は水と溶媒和物（すなわち水和物）または通常の有機溶媒と溶媒和物を形成してもよく、そしてそのような溶媒は本発明の範囲内に包含されることをまた意図する。
【００１４】
医薬における使用のためには、本発明の化合物の塩は、無毒な「製薬的に許容しうる塩」を指す。しかしながら、他の塩も本発明による化合物またはそれらの製薬的に許容しうる塩の製造において有用である。化合物の適当な許容しうる塩は、例えば、化合物の溶液を製薬的に許容しうる酸、例えば塩酸、硫酸、フマール酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸もしくはリン酸の溶液と混合することによって形成されてもよい酸付加塩を含む。さらにまた、本発明の化合物が酸性部分を担持している場合は、適当なその製薬的に許容しうる塩は、アルカリ金属塩、例えばナトリウムもしくはカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムもしくはマグネシウム塩；および適当な有機配位子と形成される塩、例えば第４級アンモニウム塩を含む。かくして、代表的な製薬的に許容しうる塩は次の塩を含む：
酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カムシレート、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、ジヒドロクロリド、エデト酸塩、エディシレート、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプレート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニレート、ヘキシルレゾルシネート、ヒドラバミン、臭化水素塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエート、ヨウ化物、イソチオネート、乳酸塩、ラクトビオネート、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシレート、メチルブロミド、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムケート、ナプシレート、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモ酸塩（エモネート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート、トシレート、トリエチオダイドおよび吉草酸塩。
【００１５】
本発明は、その範囲内に本発明の化合物のプロドラッグを含む。一般に、そのようなプロドラッグは、イン・ビボにおいて要求される化合物に容易に転化される化合物の機能性誘導体である。かくして、本発明の治療方法では、用語「投与する」は、具体的に開示される化合物または具体的には開示されないが患者への投与後に特定の化合物に転化する化合物による、記述される種々の障害の治療を包含する。適当なプロドラッグ誘導体の選択および製造のための慣例的操作は、例えば、”Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇ”，ｅｄ．Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５において記述されている。
【００１６】
本発明を記述するために使用された種々の用語の定義が以下に列挙される。これらの定義は、別に特定の例に限定されなければ、個々にも、またはより大きい群の一部としても、それらがこの明細書を通じて使用される用語に適合する。
【００１７】
特定の基が「置換」される（例えば、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール）場合、その基は、独立して置換基のリストから選ばれる、１個以上の置換基、好ましくは１〜５個の置換基、より好ましくは１〜３個の置換基、もっとも好ましくは１〜２個の置換基を有してもよい。分子中の特定の位置におけるいかなる置換基または改変の定義も、その分子における他の場所のその定義とは独立していることが意図される。本発明の化合物における置換基または置換パターンは、化学的に安定である化合物を提供するように当業者によって選択することができ、そして当該技術分野において既知の技術ならびに本明細書に記述される方法によって容易に合成することができると理解される。安定な置換基の例は、別に本明細書で特定されるものに加えて、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ハロ、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロオキシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アラルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、ヘテロシクロアミノ、ジアルキルアミノ、アルカノイルアミノ、チオ、アルキルチオ、シクロアルキルチオ、ヘテロシクロチオ、ウレイド、ニトロ、シアノ、カルボキシ、カルボキシルアルキル、カルバミル、アルコキシカルボニル、アルキルチオノ、アリールチオノ、アルキルスルホニル、スルホンアミンド、アリールオキシおよび類するものを含む。置換基は、例えば、ハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ；アリール、置換アリール、置換アルキル、置換アラルキルおよび類するものによってさらに置換されてもよい。
【００１８】
本開示をとおして使用される標準命名法の下では、指示される側鎖の末端部分が最初に記述され、続いて結合点に向かって隣接する官能基が記述される。かくして、例えば、「フェニル（アルキル）アミド（アルキル）」置換基は、式
【００１９】
【化１６】
2004517819.tif 000003
【００２０】
の基を指す。
【００２１】
本明細書で使用されるように用語「被験者」は、治療、観察もしくは実験の対象であった動物、好ましくは哺乳動物、もっとも好ましくはヒトを指す。
【００２２】
本明細書で使用されるように用語「治療的に有効な量」は、治療されている疾病もしくは障害の症候の緩和を含む、研究者、獣医、医者もしくは他の臨床医によって探求されつつある組織系、動物もしくはヒトにおける生物学的または医薬的応答を惹起する活性化合物もしくは薬剤の量を意味する。
【００２３】
本明細書で使用されるように用語「組成物」は、特定の量における特定の成分を含んでなる生産物、ならびに特定の量における特定の成分の組み合わせから直接または間接にもたらされるすべての生産物を包含することを意図する。
【００２４】
用語「アルキル」は、直鎖もしくは分枝鎖炭化水素を指す。「アルケニル」は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合をもつ直鎖もしくは分枝鎖炭化水素を指す。「アルキニル」は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合をもつ直鎖もしくは分枝鎖炭化水素を指す。
【００２５】
用語「置換アルキル」、「置換アルケニル」、もしくは「置換アルキニル」は、１個以上の置換基によって置換されているそれぞれアルキル、アルケニルもしくはアルキニル基を指す。置換基の具体的例は、限定されるものではないがアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ハロ；トリフルオロメチル；トリフルオロメトキシ；ヒドロキシ；アルコキシ；シクロアルコキシ；ヘテロシクロオキシ；オキソ；アルカノイル（−Ｃ（＝Ｏ）−アルキル）；アリールオキシ；アルカノイルオキシ；アミノ；アルキルアミノ；アリールアミノ；アラルキルアミノ；シクロアルキルアミノ；ヘテロシクロアミノ；２個のアミノ置換基がアルキル、アリールもしくはアラルキルから選ばれる二置換アミン；アルカノイルアミノ；アロイルアミノ；アラルカノイルアミノ；置換アルカノイルアミノ；置換アリールアミノ；置換アラルカノイルアミノ；チオール；アルキルチオ；アリールチオ；アラルキルチオ；シクロアルキルチオ；ヘテロシクロチオ；アルキルチオノ；アリールチオノ；アラルキルチオノ；アルキルスルホニル；アリールスルホニル；アラルキルスルホニル；スルホンアミド（例えばＳＯ２ＮＨ２）；置換スルホンアミド；ニトロ；シアノ；カルボキシ；カルバミル（例えばＣＯＮＨ２）；置換カルバミル（例えば−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＲ’、この場合ＲおよびＲ’は各々独立して水素、アルキル、アリール、アラルキルなどである）；アルコキシカルボニル、アリール、置換アリール、グアニジノ、およびヘテロシクロ、例えばインドイル、イミダゾリル、フリル、チエニル、チアゾリル、ピロリジル、ピリジル、ピリミジルなどを含む。
【００２６】
用語「アシル」は、Ｒがアルキル基、典型的にはＣ１−Ｃ６低級アルキル基であるＲ−ＣＯ−基を指す。
【００２７】
用語「ハロゲン」、「ハロ」もしくは「ハロゲン基」は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を指す。
【００２８】
用語「アリール」は、環部分に炭素原子６〜１２個をもつ単環式もしくは二環式芳香族炭化水素基、例えばフェニル、ナフチルおよびビフェニルなどを指し、これらの各々は置換されていてもよい。
【００２９】
用語「アルキルアリール」もしくは「アリールアルキル」は、アルキル基を通して直接結合されたアリール基、例えばベンジルを指す。同様に、「アリールアルケニル」および「アリールアルキニル」は、それぞれアルケニルもしくはアルキニル基をとおして直接結合されたアリール基を指す。
【００３０】
用語「置換アリール」は、例えば、１〜４個の置換基、例えば置換および非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、およびアリール；ハロ；トリフルオロメトキシ；トリフルオロメチル；ヒドロキシ；アルコキシ；シクロアルコキシ；ヘテロシクロオキシ；アルカノイル；アルカノイルオキシ；アミノ；アルキルアミノ；アラルキルアミノ；シクロアルキルアミノ；ヘテロシクロアミノ；ジアルキルアミノ；アルカノイルアミノ；チオ；アルキルチオ；シクロアルキルチオ；ヘテロシクロチオ；ウレイド；ニトロ；シアノ；カルボキシ；カルボキシルアルキル；カルバミル；アルコキシカルボニル；アルキルチオノ；アリールチオノ；アルキルスルホニル；スルホンアミド；アリールオキシなど、によって置換されているアリール基を指す。置換基は、例えば、ハロ、ヒドロキシ；アルキル、アルコキシ；アリール、置換アリール、置換アルキル、置換アラルキルなどによってさらに置換されてもよい。
【００３１】
用語「シクロアルキル」は、好ましくは１〜３個の環および環当たり３〜７個の炭素原子を含有する、場合によっては置換されている飽和環式炭化水素環系を指し、これは不飽和のＣ３−Ｃ７炭素環式環とさらに縮合されてもよい。代表的な基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル；およびアダマンチルを含む。代表的な置換基は、１個以上のアルキル基またはアルキル置換基としての前記１個以上の基を含む。
【００３２】
用語「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ）」、「複素環式（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ）」および「ヘテロシクロ」は、例えば、少なくとも１個の炭素原子を含有する環中に少なくとも１個のヘテロ原子を有する、４〜７員の単環式、７〜１１員の二環式、または１０〜１５員の三環式環系である、場合によっては置換されている完全に飽和または不飽和の芳香族または非芳香族環式基を指す。ヘテロ原子を含有する複素環式基の各環は、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれるヘテロ原子１，２もしくは３個を有してもよく、この場合、窒素および硫黄ヘテロ原子はまた場合によっては酸化されていてもよい。窒素原子は場合によっては第４級化されてもよい。複素環式基は、いかなるヘテロ原子もしくは炭素原子に結合されていてもよい。
【００３３】
代表的な単環式複素環式基は、ピロリジニル；ピロリル；インドリル；ピラゾリル；オキセタニル；ピラゾリニル；イミダゾリル；イミダゾリニル；イミダゾリジニル；オキサゾリル；オキサゾリジニル；イソオキサゾリニル；イソオキサゾリル；チアゾリル；チアダゾリル；チアゾリジニル；イソチアゾリル；イソチアゾリジニル；フリル；テトラヒドロフリル；チエニル；オキサジアゾリル；ピペリジニル；ピペラジニル；２−オキソピペラジニル；２−オキソピペリジニル；２−オキソピロリジニル；２−オキサゼピニル；アゼピニル；４−ピペリドニル；ピリジニル；Ｎ−オキソピリジル；ピラジニル：ピリミジニル；ピリダジニル；テトラヒドロピラニル；テトラヒドロチオピラニル；テトラヒドロチオピラニルスルホン；モルホリニル；チオモルホリニル；チオモルホリニルスルホキシド；チオモルホリニルスルホン；１，３−ジオキソラン；１−ジオキソチエニル；ジオキサニル；チエンタニル；チイラニル；トリアジニル；トリアゾリルなどを含む。好適なヘテロシクロ基は、ピリジニル；ピラジニル：ピリミジニル；ピロリル；ピラゾリル；イミダゾリル；チアゾリル；オキサゾリル；イソオキサゾリル；チアジアゾリル；オキサジアゾリル；チエニル；フラニル；キノリニル；イソキノリニルなどを含む。
【００３４】
代表的な二環式複素環式基は、ベンゾチアゾリル；ベンゾオキサゾリル；ベンゾチエニル；キヌクリジニル；キノリニル；キノリニル−Ｎ−オキシド；テトラヒドロイソキノリニル；イソキノリニル；ベンズイミダゾリル；ベンゾピラニル；インドリジニル；ベンゾフラニル；クロモニル；クマリニル；シノリニル；キノキサリニル；インダゾリル；ピロロピリジニル；フロピリジニル（例えばフロ［２，３−ｃ］ピリジニル、フロ［３，２−ｂ］ピリジニルもしくはフロ［２，３−ｂ］ピリジニル）；イミダゾピリジニル（例えばイミダゾ［４，５−ｂ］ピリジニルもしくはイミダゾ［４，５−ｃ］ピリジニル）；ジヒドロイソインドリル；ジヒドロキナゾリニル（例えば３，４−ジヒドロ−４−オキソ−キナゾリニル）；ベンズイソチアゾリル；ベンズイソオキサゾリル；ベンゾジアジニル；ベンゾフラザニル；ベンゾチオピラニル；ベンズピラゾリル；ジヒドロベンゾフラニル；ジヒドロベンゾチエニル；ジヒドロベンゾチオピラニル；ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン；ジヒドロベンゾピラニル；インドリニル；イソクロマニル；イソインドリニル；ナフチリジニル；フタラジニル；ピペロニル；プリニル；ピリドピリジル；キナゾリニル；テトラヒドロキノリニル；チエノフリル；チエノピリジル；チエノチエニルなどを含む。
【００３５】
用語「ヘテロアリール」は、芳香族複素環を指す。
【００３６】
「置換ヘテロシクロ」もしくは「置換ヘテロアリール」は、１個以上の置換基により置換されているそれぞれの部分（ヘテロシクロもしくはヘテロアリール）を指す。代表的な置換基は、１個以上のアルキル基もしくはアルキル置換基として記述された１個以上の基を含む。置換ヘテロシクロもしくはヘテロアリールは、モノ−オキソにより置換されて、例えば４−オキソ−１Ｈ−キノリンを生成してもよい。また、置換ヘテロシクロもしくはヘテロアリールは、置換アリールもしくは第２の置換ヘテロシクロにより置換されて、例えば４−フェニルイミダゾル−１−イルもしくは４−（ピリジン−３−イル）−イミダゾル−１−イルを生成してもよい。
【００３７】
用語「ヒドロキシ保護基」は、そのような目的のための当該技術分野において既知の基を指す。通常使用される保護基は、例えば、Ｔ．Ｈ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９１）において開示されており、これは引用によって本明細書に組み入れられている。具体的なヒドロキシル保護基は、限定されるものではないが、テトラヒドロピラニル；ベンジル；メチルチオメチル；エチルチオメチル；ピバロイル；フェニルスルホニル；トリフェニルメチル；三置換シリル、例えばトリメチルシリル、トリエチルシリル、トリブチルシリル、トリ−イソプロピルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、トリ−ｔ−ブチルシリル、メチルジフェニルシリル、エチルジフェニルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリルなど；アシルおよびアロイル、例えばアセチル、ピバロイルベンゾイル、４−メトキシベンゾイル、４−ニトロベンゾイルおよび脂肪族アシルアリールなどを含む。
【００３８】
前記の基における明白な置換に加えて、本化合物は応用しうる他の置換を含んでもよい。例えば、エリスロマイシン骨格または骨格置換基は、１個以上の置換基、例えばＣ１−Ｃ５アルキル、Ｃ１−Ｃ５アルコキシ、フェニルまたは官能基によりさらに置換（例えば、水素の１個を置換するか、または非水素基を誘導することによって）されてもよい。適当な官能基の具体的な例は、限定されるものではないがアルコール、スルホン酸、ホスフィン、ホスホネート、リン酸、チオール、ケトン、アルデヒド、エステル、エーテル、アミン、第４級アンモニウム、イミン、アミド、ニトロ、カルボン酸、ジスルフィド、カーボネート、イソシアネート、カルボジイミド、カルボアルコキシ、カルバメート、アセタール、ケタール、ボロネート、シアノヒドリン、ヒドラゾン、オキシム、ヒドラジン、エナミン、スルフィド、スルフェニルおよびハロゲンを含む。
【００３９】
本発明の化合物
本発明の化合物の好適な実施態様は、式Ｉ
【００４０】
【化１７】
2004517819.tif 000004
【００４１】
｛式中、
Ｘは、水素もしくはフッ素基であり；
Ｒ２は、水素、−ＣＯＣＨ３または−ＣＯフェニルであり；
Ｒ１３は、メチル、プロピル、ビニル、ブチル、３−ブテニル、３−ヒドロキシブチル、２−フルオロエチルもしくは２−アジドエチルであり；
Ｒ６は、−ＯＲａ［式中、Ｒａは、水素、Ｃ１−Ｃ５アルキル、または−ＹＺ（式中、ＹはＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニルもしくはＣ２−Ｃ１０アルキニル、より好ましくはＣ３−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６アルケニルもしくはＣ３−Ｃ６アルキニルであり；そしてＺは置換アリール、非置換アリール、置換ヘテロシクロもしくは非置換ヘテロシクロ、より好ましくは置換もしくは非置換ヘテロアリールである）である］であり；
Ｒは、水素またはＲａである｝
の化合物を含む。
【００４２】
Ｒ６もしくはＲについての好適な置換および非置換複素環化合物の具体的な例は、限定されるものではないが、
【００４３】
【化１８】
2004517819.tif 000005
【００４４】
［式中、置換もしくは非置換ヘテロアリールまたはその互変異性型は、いずれか適当な原子に結合されていてもよい］
を含む。
【００４５】
Ｒ６もしくはＲについての置換および非置換複素環化合物のさらなる例は、核酸塩基およびその誘導体、例えば、
【００４６】
【化１９】
2004517819.tif 000006
【００４７】
［式中、核酸もしくは誘導体は、いずれか適当な原子に結合されていてもよい］を含む。
【００４８】
本発明の特に好適な化合物は、
【００４９】
【化２０】
2004517819.tif 000007
【００５０】
［式中、
Ｘは、ＨもしくはＦであり；
Ｒ１３は、メチル、プロピルもしくはビニルであり；
Ｒ６は、
【００５１】
【化２１】
2004517819.tif 000008
【００５２】
からなる群から選ばれる］
を含む。
【００５３】
本発明の特に好適な化合物は、式ＩＩＩ
【００５４】
【化２２】
2004517819.tif 000009
【００５５】
［式中、Ｘは、水素もしくはフッ素基であり、そしてＲａは、
【００５６】
【化２３】
2004517819.tif 000010
【００５７】
からなる群から選ばれる］
の化合物を含む。
【００５８】
特に好適な化合物は、
Ｘが水素もしくはフッ素基であり；
Ｒが水素であり；
Ｒ２が水素、−ＣＯＣＨ３もしくは−ＣＯフェニルであり；
Ｒ１３がメチル、プロピルもしくはビニルであり；そして
Ｒ６が、３−（キノリン−３−イル）プロプ−２−エニル；３−（キノリン−３−イル）プロプ−２−イニル；３−（キノリン−６−イル）プロプ−２−エニル；３−（キノリン−６−イル）プロプ−２−イニル；３−（キノリン−７−イル）プロプ−２−エニル；；３−フェニルプロプ−２−エニル；３−（ナフト−１−イル）プロプ−２−エニル；３−（ナフト−１−イル）プロプ−２−イニル；３−（ナフト−２−イル）プロプ−２−イニル；５−フェニルペント−４−エン−２−イニル；３−（フル−２−イル）プロプ−２−イニル；３−（チエン−２−イル）プロプ−２−エニル；３−（カルバゾル−３−イル）プロプ−２−エニル；および３−（キノキサリン−６−イル）プロプ−２−エニル
からなる群から選ばれる、式Ｉの化合物である。
【００５９】
Ｒについての特に好適な基は、Ｈ、フェニル、場合によってはフェニル、ヒドロキシおよび次の置換ヘテロシクロ基
【００６０】
【化２４】
2004517819.tif 000011
【００６１】
からなる群から選ばれる１個以上の置換基により置換されているＣ１−Ｃ８−アルキルもしくはＣ１−Ｃ８−アルケニルを含む。
【００６２】
生合成
アグリコン中間体は、米国特許第５，６７２，４９１号、同第５，８３０，７５０号、同第５，８４３，７１８号、同第５，７１２，１４６号、同第５，９６２，２９０号、同第６，０２２，７３１号、同第６，０６６，７２１号および同第６，０８０，５５５号に記述されている方法によって製造されてもよく、これらはすべて引用によって本明細書に組み入れられている。１つの実施態様では、「非天然」エリスロマイシン前駆物質は、６−デオキシエリスロノライドＢシンターゼ（「ＤＥＢＳ」）のモジュール１のケトシンターゼドメインにおける突然変異により、その天然の基質、プロピオニルＣｏＡに作用できないＤＥＢＳに対して、適当なチオエステルジケチド基質が提供される方法によって調製されてもよい。この組み換えＤＥＢＳは、正常ではエリスロマイシンを生産する天然の宿主、サッカロポリスポラ・エリスレア（Ｓａｃｃｈａｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ  ｅｒｙｔｈｒａｅａ）において発現させることができるか、あるいは完全ＰＫＳ遺伝子クラスターが、適当な宿主、例えばその内因性アクチノロジン（ａｃｔｉｎｏｒｈｏｄｉｎ）ポリケチド合成機構を欠失するように改変されたＳ．コエリカラー（Ｓ．ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）（参照、例えば、Ｊａｃｏｂｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７７：３６７−３６９（１９９７））またはＳ．リビダンス（Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓ）においてプラスミドによって挿入することができる。例えば、適当な宿主は、不活性化されたモジュール１ケトシンターゼを有する変異６−ＤＥＢシンターゼを発現するＳ．コエリカラーＣＨ９９９／ｐＪＲＪ２でもよい。
【００６３】
また、米国特許第６，０８０，５５５号およびＰＣＴ公開ＷＯ９７／０２３５８に記述されている無細胞系が使用されて、関連するＰＫＳタンパク質を組み換え法により生産させ、そしてそれらの分泌をもたらすか、またはそれらを含有する細胞を溶解させてもよい。典型的な無細胞系は、ポリケチドの触媒合成のために必要とされる適当なＰＫＳ、ＮＡＤＰＨおよび適当なバッファーと基質を含有する。
【００６４】
さらに、適当なチオエステルジケチド基質が、サッカロポリスポラ・エリスレアの６−ＤＥＢ以外のＰＫＳ酵素に提供されてもよい。他のＰＫＳ酵素は、米国特許第６０／１９０，０２４号および同第６０／１５８，３０５号に記述されているミクロモノスポラ・メガロミセア（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ  ｍｅｇａｌｏｍｉｃｅａ）の６−ＤＥＢシンターゼおよびそのＫＳ１°誘導体、ＰＣＴ出願ＵＳ９９／２４４７８に記述されているオレアンドライドＰＫＳおよびそのＫＳ１°誘導体、およびＰＣＴ公開ＷＯ９９／６１５９９に記述されているナルボノライドＰＫＳおよびそのＫＳ１°誘導体を含み、これらのすべては引用によって本明細書に組み入れられている。
【００６５】
Ｒ１３がメチルであるそれらのアグリコン中間体では、本明細書においてさらに記述されるように、所望のアグリコンが組み換え宿主細胞ストレプトミセス・コエリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）ＣＨ９９９ｐＣＫ７によって生産されるので、ジケチドのフィーディングは必要ではない。
【００６６】
このようにして生産されたアグリコンが、次に、使用される菌株に応じて、Ｃ−３とＣ−５位においてグリコシル化し、Ｃ−１２位においてヒドロキシル化し、そして場合によってはＣ−６位においてヒドロキシル化するサッカロポリスポラ・エリスレア菌株の発酵ブロスに添加される。ヒドロキシル化およびグリコシル化の好適な実施態様は、一般式
【００６７】
【化２５】
2004517819.tif 000012
【００６８】
［式中、Ｒ１３は先に記述されるとおりである］
の化合物である。先に詳述されたこれらおよび他の「非天然」エリスロマイシン化合物が、さらなる化学合成のための出発材料として使用される。
【００６９】
化学合成
生合成により得られた出発材料は、さらに化学合成によって改変される。その後の改変は、Ｃ−２におけるハロゲン化；Ｃ−３におけるケト基の生成；Ｃ−１１とＣ−１２における環式カルバメートの形成；Ｃ−６ヒドロキシル（ヒドロキシルがこの位置に存在している場合）における誘導体化；およびそれらの組み合わせを含む。すべての得られる化合物（すべての中間体を含む）は本発明の一部と考えられる。
【００７０】
ヒドロキシルが生合成により得られた出発材料のＣ−６位に存在する場合、それは典型的にはアルキル基により改変される。スキーム１は、生物学的に得られたＣ−１３改変エリスロマイシンＡから出発するＣ−６ヒドロキシルのアルキル化の１つの方法を具体的に説明する。
【００７１】
【化２６】
2004517819.tif 000013
【００７２】
簡単に言えば、出発エリスロマイシン化合物１のＣ−９ケト基がケト保護基によって、好ましくはケト基を誘導されるオキシム（＝ＮＯＲ’、この場合Ｒ’は置換もしくは非置換部分、例えばＣ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ３−Ｃ１２シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリールおよびヘテロアリールである）に転化することによって保護される。好適な誘導オキシムは、式＝ＮＯＲ’（式中、Ｒ’は化合物３のようにイソプロポキシシクロヘキシルである）をもつ。あるいはまた、オキシムの生成の代わりに、Ｃ−９ケト基はヒドロキシルに還元されてもよく、これは、場合によってはＣ−６におけるアルキル化反応の前に選択的ヒドロキシル保護基により保護されてもよい。
【００７３】
糖ヒドロキシル（２’および４”位）は、非プロトン性溶媒中で、無水酢酸、無水安息香酸、クロロギ酸ベンジル、ヘキサメチルジシラザンもしくは塩化トリアルキルシリルのような試薬を用いて保護される。非プロトン性溶媒の具体的な例は、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）、ジメチルホルムアミド（「ＤＭＦ」）およびトリメチルシリルイミダゾールを含む。好適な保護剤はトリメチルシリルイミダゾール中塩化トリメチルシリルを含む。
【００７４】
得られる化合物４は、塩基の存在下、アルキル化剤、例えばアルキルハロゲン化物、スルホネートおよびトシレートと反応されて化合物５を生成する。好適なアルキル化剤は、臭化アルキルＲａＢｒ、例えば臭化メチル、臭化アリル、臭化プロパルギル、臭化２−フルオロエチル、臭化シナミルおよび臭化クロトニルを含む。適当な塩基は、水酸化カリウム、ハロゲン化ナトリウム、カリウムイソプロポキシド、カリウムｔ−ブトキシド、および非プロトン性溶媒を含む。
【００７５】
Ｃ−６ヒドロキシルのアルキル化が完了した時点で、糖残渣とマクロライド環は脱保護される。グリコシド部分の脱保護は、下記、Ｔ．Ｈ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓによる記述のように実施される。類似の条件が誘導オキシムを＝ＮＯＨに転化させる。非誘導オキシムの形成が脱保護と同時に起こらなければ、オキシムへの転化は別に実施される。
【００７６】
オキシムは除去され、そして当該技術分野における既知の標準方法によってケト基に転化される。脱オキシム剤は、無機の酸化硫黄化合物、例えば亜硫酸水素ナトリウム、ピロ硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウムなどを含む。この場合、プロトン性溶媒、例えば水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、トリメチルシラノールおよびそれらの混合液が使用される。一般に、脱オキシム反応は有機酸、例えばギ酸の存在下で実施される。脱オキシム反応の生成物は化合物７、出発材料のＣ−６アルキル化誘導体である。
【００７７】
Ｃ−６アルキル化化合物７は、さらに改変されてもよい。例えば、Ｒａがアリルである場合、それは四酸化オスミウムで処理されて、２，３−ジヒドロキシルプロピル化合物を生成し、これがさらに各酸素原子においてエステル化できる。また、６−Ｏ−アリル化合物は、非プロトン性溶媒中ｍ−クロロペルオキシ安息香酸により酸化されてエポキシ化合物を生成し、これがアミンもしくはＮ−含有ヘテロアリール化合物により開くことができる。あるいはまた、アリル側鎖がＷａｃｋｅｒ条件下で酸化されて置換基−Ｏ−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３を生成するか、またはオゾン化されてアルデヒドを生成してもよい。次いで、アルデヒドはオキシムに転化され、これが順に非プロトン性溶媒中で脱水剤と反応されてニトリルを生成できる。あるいはまた、アルデヒドは適当なアミンと反応され、そしてホウ水素化物還元剤の存在下で還元されてアミンを生成することができる。
【００７８】
化合物７の好適な改変は、スキーム２によって具体的に説明されるＣ−３におけるケト基の形成である。
【００７９】
【化２７】
2004517819.tif 000014
【００８０】
Ｃ−３糖は、酸、好ましくはＨＣｌ水溶液または脱グリコシル酵素により除去されて対応するデス−クラジノーズ誘導体８を生成する。適当な酸は、アルコールおよび水の存在下の塩酸、硫酸、クロロ酢酸、トリフルオロ酢酸などを含む。反応時間は、典型的には温度約１０〜３５℃において０．５−２４時間である。エリスロマイシン骨格のＣ−５位に残っている糖部分（「デソサミン」）の遊離ヒドロキシルは、保護基、例えば無水酢酸もしくは安息香酸により選択的に保護される（これによってＲ２はＡｃもしくはＢｚである）。Ｃ−３ヒドロキシルはケト基に酸化されて化合物１０を生成する。この操作では、酸化剤、例えばＮ−クロロスクシンイミド−ジメチルスルフィドもしくはカルボジイミド−ジメチルスルホキシドが使用される。典型的には、化合物９が、１０−２５℃において塩素化溶媒、例えば塩化メチレン中、予め形成されたＮ−クロロスクシンイミドおよびジメチルスルフィド錯体に添加される。０．５〜４時間撹拌された後、第３級アミン、例えばトリエチルアミンが添加されて対応するケトンを生じる。
【００８１】
また、化合物１０は、好ましくはＣ−１１およびＣ−１２位において環式カルバメートによりさらに改変されてもよい。カルバメート部分を形成する１つの方法は、スキーム３によって概要を示される。
【００８２】
【化２８】
2004517819.tif 000015
【００８３】
簡単に言えば、化合物１１が、例えば、２段階操作において化合物１０から製造される。第１には、Ｃ−１１ヒドロキシル基が、ピリジンのような有機塩基の存在下で塩化アルキルもしくはアリールスルホニル、例えば塩化メタンスルホニルとの反応によって優先的に脱離基に転化される。次の段階では、脱離基がアセトンのような適当な溶媒中ジアザビシクロウンデカンによる処理によって除去されて、Ｃ−１０とＣ−１１の間に二重結合を生成する。化合物１１は１，１’−カルボニルジイミダゾールと、次いでアミンＲＮＨ２と反応される。２’−ヒドロキシル保護基の除去はメタノールを用いて実施されて化合物１３を生成する。あるいはまた、化合物１０が水素化ナトリウムのような塩基の存在下１，１’−カルボニルジイミダゾールと反応されて直接化合物１２を生成してもよく、次いでこれがＲＮＨ２と反応されて所望の生成物、化合物１３を製造してもよい。
【００８４】
本発明の化合物の好適な実施態様は、一般に、ＲもしくはＲａに置換アリールもしくはヘテロシクロを含有する。Ｒが置換アリールもしくはヘテロシクロであるそれらの化合物では、Ｒａは、好ましくはＣ１−Ｃ１０アルキルであり、そしてより好ましくはもっとも好適であるＣＨ３を有するＣ１−Ｃ５アルキルである。Ｒが置換アリールもしくはヘテロシクロである化合物を得るために、対応するアミン、ＲＮＨ２がスキーム３に記されるように使用される。適当な−Ｒ基の具体的な例は、限定されるものではないが：キノリン−４イルブチル；４−フェニルイミダゾル−１−イルブチル；４−（ピリジン−３−イル）イミダゾル−１−イルブチル；４−（ピリジン−３−イル−イミダゾル−１−イルブチル；ピリジン−４−イルブチル；３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イルブチル；１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブチル；１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−１−イルブチル；３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−３−イルブチル；１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−１−イルブチル；プリン−７−イルブチル；プリン−９−イルブチル；および１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブト−２−エニル；および４−（ピリミジン−５−イル）イミダゾル−１−イルブチルを含む。
【００８５】
Ｒａが置換アリールもしくはヘテロシクロであるそれらの化合物では、Ｒは好ましくは水素である。それらの化合物がいずれの適当な方法によって作成されてもよいが、Ｃ−６ヒドロキシルにおける２段階改変が好適である。一般に、Ｃ−６ヒドロキシルは、ＹがＣ２−Ｃ１０アルケニルもしくはＣ２−Ｃ１０アルキニル、より好ましくはＣ３−Ｃ６アルケニルもしくはＣ３−Ｃ６アルキニルである臭化アルキルＹＢｒが、Ｃ−６ヒドロキシルにおける最初のアルキル化反応において使用されることを除いては、既にスキーム１に記述されたように改変される。得られる生成物はスキーム２および３の記述のようにさらに改変されて化合物１３ａをもたらす。
【００８６】
【化２９】
2004517819.tif 000016
【００８７】
スキーム４によって示されるように、化合物１３ａはＨｅｃｋ条件（Ｐｂ（ＩＩ）もしくはＰｂ（０）、ホスフィンおよびアミンもしくは無機塩基）下でＺ−ハロゲン化物と反応されて、ＺがＹに結合した化合物１４を与える。これらの化合物において、基−ＹＺは一緒になってＲａである。ＹＺの具体的な例は、限定されるものではないが：３−（キノリン−３−イル）プロプ−２−エニル；３−（キノリン−３−イル）プロプ−２−イニル；３−（キノリン−６−イル）プロプ−２−エニル；３−（キノリン−６−イル）プロプ−２−イニル；３−（キノリン−７−イル）プロプ−２−エニル；３−フェニルプロプ−２−エニル；３−（ナフト−１−イル）プロプ−２−エニル；３−（ナフト−１−イル）プロプ−２−イニル；３−（ナフト−２−イル）プロプ−２−イニル；５−フェニルペント−４−エン−２−イニル；３−（フル−２−イル）プロプ−２−イニル；３−（チエン−２−イル）プロプ−２−エニル；３−（カルバゾル−３−イル）プロプ−２−エニル；および３−（キノキサリン−６−イル）プロプ−２−エニルを含む。これらの誘導体は、場合によっては、例えば水素および炭素担持のパラジウムを用いて還元されてもよく、Ｙ中の１個以上の二重もしくは三重炭素−炭素結合が完全に飽和された（例えばプロペニルをプロピルに）対応する化合物を生成する。
【００８８】
Ｒ６が水素（ＯＲａの代わりに）であるそれらの化合物では、Ｃ−３ケト誘導体およびＣ−１１、１２環式カルバメート誘導体を作成する好適な方法がスキーム５によって記される。
【００８９】
【化３０】
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【００９０】
これらの化合物において、炭素１０と１１の間の二重結合が形成されて、Ｃ−３のケト基の形成前に化合物１５を生成する。得られるケト化合物は場合によってはこの時点でハロゲン化されてもよいし、またはケト化合物は１，１−カルボニルジイミダゾールと反応されて化合物１２ｂを作成してもよい。化合物１２ｂのアミンＲＮＨ２との反応、続くデソサミン糖における保護基の除去は環式カルバメート誘導体化合物１３ａをもたらす。
【００９１】
また、この改変方法は、Ｃ−３ケト誘導体およびＲ１３がビニルであるＣ−１１，１２環式カルバメート誘導体を作成する場合に好適である。これらの化合物では、Ｃ−６ヒドロキシルにおける最初のアルキル化（好ましくはこの位置において−ＯＣＨ３を生成する）は、スキーム１に記述されたように達成される。次いで、Ｃ−３ケト誘導体およびＣ−１１，１２環式カルバメート誘導体はスキーム５の記述のように製造される。
【００９２】
スキーム１−５によって記述された反応からもたらされるすべての最終化合物は、場合によってはＣ−２においてハロゲン化されてもよく、対応するハロゲン化された化合物を与える。好適な方法は、塩基および求電子性ハロゲン化試薬、例えばピリジニウムペルブロミドもしくはＮ−フルオロベンゼンスルホンイミドを用いて所望の化合物を処理することを含む。化合物１３と１４のハロゲン化された対応化合物は、それぞれの化合物をハロゲン化することによるか、または環式カルバメートの形成前に、そのそれぞれの前駆物質、化合物１１をハロゲン化することによって生成されてもよい。所望の化合物が化合物１４のハロゲン化された対応化合物である場合は、化合物１１をハロゲン化する代わりに、化合物１４をハロゲン化することが好適である。
【００９３】
使用の方法
さらに本発明は、本発明の化合物単独でまたは希釈剤との混合物においてまたは本発明による薬剤の形態において動物に投与することを含む、温血動物において、細菌感染症治療する方法、または他の抗菌剤の活性を増進する方法を提供する。
【００９４】
化合物が上記用途のために使用される場合、それらは、１種以上の製薬的に許容しうるキャリヤー、例えば溶媒、希釈剤およびそれに類するものと組み合わされてもよく、そして錠剤、カプセル剤、分散性散剤、顆粒剤、または例えば懸濁化剤約０．５〜５％を含有する懸濁剤、例えば糖約１０〜５０％を含有するシロップ剤、および例えばエタノール約２０〜５０％を含有するエリキシル剤、およびそれに類するような形態において経口的に、あるいは等張性媒質中に懸濁化剤約０．５〜５％を含有する無菌注射用液剤もしくは懸濁剤の形態において非経口的に投与されてもよい。これらの製薬調製物は、例えば、キャリヤーとの組み合わせにおいて有効成分約０．５％〜約９０重量％、より普通には約５〜６０重量％を含有してもよい。
【００９５】
局所適用用組成物は、皮膚科学的に許容しうるキャリヤーと混合された治療的に有効濃度の本発明の化合物を含有する液剤、クリーム剤もしくはゲル剤の形態をとってもよい。
【００９６】
経口投与形態における組成物を製造するには、通常の製薬上の媒質のいずれが使用されてもよい。有効成分の性質および所望される特定の投与形態に適当であるように、固形キャリヤーは、澱粉、乳糖、リン酸二カルシウム、微結晶セルロース、スクロースおよびカオリンを含み、一方、液状キャリヤーは、無菌水、ポリエチレングリコール、非イオン性界面活性剤および食用油、例えばコーン、ピーナッツおよびゴマ油を含む。製薬組成物の製造において慣用的に使用される補助剤は、有利には、例えば着香剤、着色剤、保存剤、および抗酸化剤、例えばビタミンＥ、アスコルビン酸、ＢＨＴおよびＢＨＡを含んでもよい。
【００９７】
製造および投与の容易さの観点から好適な製薬組成物は、固形組成物、特に錠剤および硬、軟カプセル剤である。化合物の経口投与が好適である。
【００９８】
また、これらの活性化合物は非経口的もしくは腹腔内に投与されてもよい。遊離塩基もしくは薬理学的に許容しうる塩としてのこれらの活性化合物の液剤もしくは懸濁剤は、ヒドロキシプロピル−セルロースのような界面活性剤を適当に混合された水において製造することができる。また、分散剤は、油中グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物において製造することができる。通常の貯蔵および使用条件下では、これらの調製物は、微生物の増殖を防ぐために保存剤を含有してもよい。
【００９９】
注射用途に適当な剤形は、無菌水性液剤もしくは分散剤、および無菌注射用液剤もしくは分散剤の即席調製のための無菌散剤を含む。すべての場合、製剤は無菌でなければならず、そして容易に注射できる程度に流体でなければならない。それは製造および貯蔵条件下で安定でなければならず、そして細菌および真菌のような微生物の汚染作用に対して保護されねばならない。キャリヤーは、例えば水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、それらの適当な混合物および植物油を含有する溶媒もしくは分散媒であってもよい。
【０１００】
使用される有効成分の有効用量は、使用される特定の化合物、投与方式および治療される症状の重篤度に非常に依存する。しかしながら、本発明の化合物は、好ましくは１日に１回、または１日２〜４回の分割用量で、または徐放性形態において、動物の体重１ｋｇ当たり１日用量約０．１ｍｇ〜約４００ｍｇにおいて投与される場合に、一般に満足できる結果が得られる。もっとも大きな哺乳動物では、総１日用量は、約０．０７ｇ〜７．０ｇ、好ましくは約１００ｍｇ〜１０００ｍｇである。内部使用に適当な製剤は、固形もしくは液状の製薬的に許容しうるキャリヤーとの直接混合物中に活性化合物約１００ｍｇ〜５００ｍｇを含有する。この投薬処方は、最適な治療応答を提供するべく調節することができる。例えば、治療状況の危急性によって指示されるように、数回に分割された用量が１日に投与されてもまたは用量が比例的に減少されてもよい。
【０１０１】
前記製薬組成物および薬剤の製造は、当該技術分野において既知のすべての方法によって、例えば、有効成分を希釈剤と混合することによって実施されて、製薬組成物（例えば顆粒）を形成させ、次いで組成物を薬剤（例えば錠剤）に形成させる。
【０１０２】
一般的プロトコール
本発明の化合物は、組み換え宿主細胞および有機化学方法を含む化学生合成（ｃｈｅｍｏｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ）操作によって製造される中間体を用いて製造することができる。この化学生合成操作の段階は、一般的には以下に記述されており、そしてさらに多数の実施例における各段階で詳述される。
【０１０３】
方法の最初の一般段階では、６−デオキシエリスロノライドＢ（「６−ｄＥＢ」）誘導化合物が、組み換えストレプトミセス宿主細胞の発酵によって製造される。１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢおよび１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢを生産するための発酵は、発酵中の細胞にフィードされる合成ジケチド中間体を必要とする。これらの合成ジケチドの製造は実施例１において記述されている。これらの合成ジケチドは、ＤＥＢＳのモジュール１のケトシンターゼドメインにおける変異により、その天然の基質（プロピオニルＣｏＡ）に作用することができない６−デオキシエリスロノライドＢシンターゼ（「ＤＥＢＳ」）に対する基質である。この組み換えＤＥＢＳは、ストレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９におけるプラスミドｐＪＲＪ２によって提供される。Ｓ．コエリカラーＣＨ９９９は、引用によって本明細書に組み入れられている米国特許第５，６７２，４９１号において記述されている。ｐｔｐＡ遺伝子を含有するように遺伝的に改変されたＳ．コエリカラーＣＨ９９９の誘導体、Ｓ．コエリカラーＫ３９−０２は、引用によって本明細書に組み入れられている米国特許出願第０９／１８１，８３３号に記述されていて、また、この目的のために使用できる。プラスミドｐＪＲＪ２はｅｒｙＡＩ，ｅｒｙＡＩＩおよびｅｒｙＡＩＩＩ遺伝子をコードしており；プラスミド中に含有されているｅｒｙＡＩ遺伝子はＫＳ１ヌル変異を含有している。ＫＳ１ヌル変異は、外因性基質が提供されなければ、野生型遺伝子によって生産される６−デオキシエリスロノライドＢの生成を妨げる。プラスミドｐＪＲＪ２およびそのプラスミドを使用して新規なＣ−１３−置換エリスロマイシンを生産する方法は、ＰＣＴ公開９９／０３９８６および９７／０２３５８に；米国特許第６，０８０，５５５号および同第６，０６６，７２１号に；そして１９９９年５月１４日に提出された米国特許出願第０９／３１１，７５６号に記述されていて、これらの各々は引用によって本明細書に組み入れられている。提供された外因性基質は、発明者Ｇ．Ａｓｈｌｅｙらによって２０００年１月２７日に提供され、共に引用によって本明細書に組み入れられているＰＣＴ／ＵＳ００／０２３９７および米国特許出願第０９／４９２，７３３号において記述されている方法によって製造され、そしてそれらの化合物を含む。また、ｅｒｙ遺伝子以外のＰＫＳ遺伝子が使用でき；適当な遺伝子は、発明者Ｒｏｂｅｒｔ  ＭｃＤａｎｉｅｌ  ａｎｄ  Ｙａｎａ  ＶｏｌｃｈｅｇｕｒｓｋｙによりＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｍｅｇａｌｏｍｉｃｉｎ  Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｃ  Ｇｅｎｅｓと題して、２０００年１０月４日に提出された米国特許出願第０９／ 号；１９９９年１０月８日に提出された同第６０／１５８，３０５号；および１９９９年１０月２８日に提出された同第０９／４２８，５１７号；および１９９９年１０月２２日に提出されたＰＣＴ出願ＵＳ９９／２４４７８に記述されているオレアンドライドおよびメガロマイシンＰＫＳ遺伝子を含有するＫＳ１ヌル変異を含み、これらの各々は引用によって本明細書に組み入れられている。
【０１０４】
１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢを生産する発酵は、所望の化合物が組み換え宿主細胞ストレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９／ｐＣＫ７
によって生産されるので、ジケチドのフィーディングを必要としない。プラスミドｐＣＫ７は米国特許第５，６７２，４９１号にきて記述されており、ＤＥＢＳ遺伝子を含有している。プラスミドｐＣＫ７の誘導体、ｐＫＯＳ０１１−２６がまた使用できる。ｐＫＯＳ０１１−２６および組み換えｐｔｐＡ遺伝子を含有する宿主細胞はＳ．コエリカラー２７−２６／ｐＫＯＳ０１１−２６と呼ばれる。これらの宿主細胞は、ＤＥＢＳの基質として共に役立つプロピオニルＣｏＡおよびアセチルＣｏＡの組み入れによって両６−デオキシエリスロノライドＢおよび１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドを生産する。
【０１０５】
ストレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９／ｐＪＲＪ２およびＳ．コエリカラーＣＨ９９９／ｐＣＫ７の発酵は実施例２において記述される。また、この発酵から得られる６−デオキシエリスロノライド生産物の単離も実施例２において記述されている。
【０１０６】
次いで、単離された生産物がサッカロポリスポラ・エリスレア株の発酵ブロスに添加されて、本発明の他の有用な中間化合物を作成する。Ｓ．エリスレア株は、６−ｄＥＢ誘導化合物のＣ−３およびＣ−５位にへの糖残基の生合成と結合を触媒する。また、これらの菌株は機能的なｅｒｙＫ遺伝子産物を含有し、そしてＣ−１２位において６−ｄＥＢ誘導化合物をヒドロキシル化する。菌株は機能的なｅｒｙＦ遺伝子産物が生産されるか否かに関しては異なる。そうである場合は、次に生産された化合物はＣ−６位において同様にヒドロキシル化される。そうでなければ、次に６−デオキシエリスロマイシンＡ誘導体が生産される。これらのＳ．エリスレア発酵は、発酵ブロスからのエリスロマイシンＡ誘導化合物の単離とともに、実施例３において記述されている。
【０１０７】
次いで、単離された生産物が本発明の化合物の化学合成における出発物質として使用される。６−ヒドロキシルを含有する本発明のエリスロマイシンＡ誘導化合物については、実施例４−６，１１および１６が、その化合物をアルキル化して、Ｃ−６−Ｏ−アルキル、Ｃ−６−Ｏ−アリルおよびＣ−６−Ｏ−プロパルギル中間体を作成する方法を記述している。
【０１０８】
Ｃ−６−Ｏ−アルキル基を含有する本発明のエリスロマイシンＡ誘導化合物では、実施例７−９が、本発明の１０，１１−アンヒドロ化合物を作成する方法を記述している。
【０１０９】
実施例１０は、本発明のＣ−２−ハロ化合物を作成する方法を記述している。特に、ハロゲン化される化合物は、塩基および求電子性ハロゲン化試薬、例えばピリミジニウムペルブロミドもしくはＮ−フルオロベンゼンスルホンイミドにより処理される。実施例１２は、Ｃ−６−Ｏ−アリル基を含有するエリスロマイシンＡ誘導体からクラジノース糖を除去し、そして得られるＣ−３−ヒドロキシル基をケトンに酸化する方法を記述している。実施例１３は、本発明の化合物の合成において有用な数種の中間体へのＣ−６−Ｏ−アリル基を含有する化合物の転化を具体的に説明している。実施例１４は、Ｒ＝Ｈ，Ｒ２＝Ｈ，Ｘ＝ＨおよびＲ６＝Ｏ−アリルである式Ｉの化合物の合成を記述する。実施例１５は、Ｈｅｃｋ反応および続くデソサミン糖の脱保護を介する、６−Ｏ−アリルおよび１１，１２−環式カルバメート官能基を含有するマクロライドを式Ｉの化合物へ転化する方法を記述している。実施例１６は６−Ｏ−プロパルギル中間体への化合物のアルキル化を記述し、そして実施例１７は、式Ｉの６−Ｏ−プロパルギル−ヘテロアリール化合物への６−Ｏ−プロパルギル基の転化を記述している。
【０１１０】
Ｃ−６ヒドロキシルを含有していない本発明のエリスロマイシンＡ誘導化合物では、実施例１８−２０が、本発明の１０，１１−アンヒドロ化合物を作成する方法を記述している。これらの反応配列はスキーム５と６に描かれている。
【０１１１】
実施例２１は、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−（４−アミノ−２−ブテン）、Ｒ＝１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジンである本発明の化合物の合成で使用されるアミンの合成方法を記述している。
【０１１２】
本発明のカルバメート誘導化合物への１０，１１−アンヒドロ化合物の転化方法は実施例２２と２３に記述されている。式Ｉのカルバメート誘導化合物の合成に使用されるアミンは市販品を得ることもできるし、またはＤｅｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．９：３０７５−３０８０（１９９９）において記述されているように容易に製造することができる。
【０１１３】
実施例１
ジケチドチオエステルの製造
１５−メチルおよび１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢ中間化合物を作成するために、組み換えストレプトミセス宿主細胞にフィードするのに使用されるＮ−アセチルシステアミンチオエステル（「ＮＡＣＳ」）の製造に使用される方法がこの実施例において記述される。また、下記合成プロトコールは、引用によって本明細書に組み入れられている米国特許出願第０９／４９２，７３３号；発明者Ｇ．Ａｓｈｌｅｙ，Ｍ．ＢｕｒｌｉｎｇａｍｅおよびＩ．Ｃｈａｎ−Ｋａｉにおいて記述されている。
【０１１４】
かくして、１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢ中間体を作成するために使用される（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシヘキサノエートＮＡＣＳ（製造Ｅ）は、（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシヘキサノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（製造Ｄ）をＮ−アセチルシステアミン（製造Ｂ）と反応させることから製造される。Ｎ−アセチルシステアミンは、順に、Ｎ，Ｓ−ジアセチルシステアミン（製造Ａ）から製造される。（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシヘキサノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（製造Ｄ）は、（４Ｓ）−Ｎ−プロピオニル−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（プロピオニル−Ｎｏｘ；製造Ｃ）から製造される。
【０１１５】
類似の方式で、１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢ中間体を作成するために使用される（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４−ペンテノエートＮＡＣＳ（製造Ｇ）は、（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４−ペンテノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（製造Ｆ）をＮ−アセチルシステアミン（製造Ｂ）と反応させることから製造される。（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４−ペンテノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（製造Ｆ）は、（４Ｓ）−Ｎ−プロピオニル−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（プロピオニル−Ｎｏｘ；製造Ｃ）から製造される。
【０１１６】
Ａ：Ｎ，Ｓ−ジアセチルシステアミンの製造
システアミン塩酸塩（５０．０ｇ）を、磁気撹拌棒、２つの添加ロートおよびｐＨ電極を備えた１Ｌ容３口丸底フラスコに添加する。水（３００ｍｌ）を添加し、そして撹拌溶液を氷上で冷却する。ｐＨを８ＮＫＯＨの添加によって８．０に調節する。無水酢酸（１２５ｍｌ）を１つの添加ロートに入れておき、そして８ＮＫＯＨ（３５０ｍｌ）を他の添加ロートに入れておく。無水酢酸を、反応ｐＨを８＋／−１に維持するよう８ＮＫＯＨを添加しながらシステアミン溶液に滴下する。無水酢酸の添加が終了した後、ｐＨを１ＮＨＣｌを用いて７．０に調節し、そして混合液を氷上で７５分間撹拌させる。固体ＮａＣｌを飽和まで添加し、そして溶液をＣＨ２Ｃｌ２４００ｍｌづつを用いて４回抽出する。有機抽出液を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥、濾過そして減圧下で濃縮して、淡黄色オイル６８．９ｇ（収率９７％）を得て、これを４℃で放置して結晶化させる。
【０１１７】
Ｂ：Ｎ−アセチルシステアミンの製造
Ｎ，Ｓ−ジアセチルシステアミン（４２．６４ｇ）をマグネチックスターラーを備えた２Ｌ容丸底フラスコに入れ、そして水１４００ｍｌに溶解する。フラスコをＮ２でパージし、そして混合液を氷浴中で冷却する。水酸化カリウム（４９．４２ｇ）を添加し、混合液を不活性雰囲気下で氷上で２時間撹拌する。ｐＨを６ＮＨＣｌを用いて７に調節し、そして固体ＮａＣｌを飽和まで添加する。混合液をＣＨ２Ｃｌ２５００ｍｌづつを用いて７回抽出する。有機抽出液を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥、濾過そして減圧下で濃縮して、生成物３０．２ｇ（収率９６％）を得る。この物質を使用直前に蒸留する、ｂｐ１３８−１４０℃／７ｍｍＨｇ。
【０１１８】
Ｃ：（４Ｓ）−Ｎ−プロピオニル−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（プロピオニル−Ｎｏｘ）の製造
５００ｍＬ添加ロートおよび撹拌棒を備えた乾燥した１Ｌ３口丸底フラスコに（４Ｓ）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン２０ｇを負荷し、隔膜で蓋をし、そして窒素を通気した。無水ＴＨＦ（３００ｍｌ）をカニューレによって添加し、そして得られる溶液をドライアイス／イソプロパノールの−７８℃浴で冷却した。添加ロートにｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ）７８ｍｌをカニューレによって負荷し、これを反応液にゆっくりした流れで添加した。蒸留塩化プロピオニル（ｂｐ７７−７９℃）８．０ｍｌを注射針を通して急速に添加した。反応液をドライアイス／イソプロパノール浴中で３０分間撹拌させた。
【０１１９】
反応液を冷浴から除き、＞０℃まで暖め、そして飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液５０ｍｌで反応を停止した。混合液をロータリーエバポレーターにおいてスラリーまで濃縮した。スラリーをエチルエーテル２５０ｍｌづつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして飽和ＮａＨＣＯ３およびブライン各５０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥、濾過そして濃縮して、黄色オイルを得た。この物質を静置して結晶化させた。結晶を冷（−２０℃）ヘキサンで１回粉砕して、白色結晶物質２１．０ｇ（収率８０％）を得た、ｍ．ｐ．４１−４３℃。ＡＰＣＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２３４（ＭＨ＋），１７８，１１７． １Ｈ−ＮＭＲ（３６０ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：∂７．２−７．４（５Ｈ，ｍ）；４．６７（１Ｈ，ｍ，Ｈ４）；４．１４−４．２２（２Ｈ，ｍ，Ｈ５）；３．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．１３Ｈｚ，ｂｅｎｚｙｌｉｃ）；２．８９−３．０３（２Ｈ，ｍ，Ｈ２′）；２．７７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９，１３，ｂｅｎｚｙｌｉｃ）；１．２０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，Ｈ２′）。
【０１２０】
Ｄ：（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシヘキサノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノンの製造
５００ｍＬ添加ロート、低温温度計および撹拌棒を備えた乾燥した２Ｌ３口丸底フラスコにＮ−プロピオニル−オキサゾリジノン１９．８４ｇを負荷し、隔膜で蓋をし、そして窒素を通気した。無水ジクロロメタン（１００ｍｌ）をカニューレによって添加し、そして得られる溶液をドライアイス／イソプロパノール浴中で−６５℃に冷却した。添加ロートにジブチルホウ素トリフレート（ジクロロメタン中１．０Ｍ）１００ｍｌをカニューレによって負荷し、これを反応液にゆっくりした流れで添加した。トリエチルアミン（１５．６ｍｌ）を、反応温度を−１０℃以下に保ちつつ注射針によって滴下した。次いで、反応液を氷浴に移し、３０分間０℃で撹拌させた。その後、反応液をドライアイス／イソプロパノール浴に戻し、−６５℃まで冷却させた。ブチルアルデヒド（８．６ｍｌ）を注射針によって急速に添加し、そして反応液を３０分間撹拌させた。
【０１２１】
反応液を氷浴に移し、そして添加ロートに１Ｍリン酸水溶液、ｐＨ７．０（リン酸溶液は等モル量の１塩基性および２塩基性リン酸カリウムからなる）１００ｍｌを負荷した。リン酸溶液を反応温度を１０℃以下に保ちつつ可能な限り急速に添加した。次いで、添加ロートにメタノール３００ｍｌを負荷し、これを反応温度を１０℃以下に保ちつつ可能な限り急速に添加した。最後に、添加ロートに２：１メタノール：３０％過酸化水素３００ｍｌを負荷した。これを温度を１０℃以下に確実に保って滴下した。反応液を添加終了後１時間撹拌した。次いで、溶媒をロータリーエバポレーターにおいてスラリーが残るまで除去した。スラリーをエチルエーテル５００ｍｌづつで４回抽出した。合わせた有機抽出液を飽和重炭酸水溶液およびブライン各２５０ｍｌで洗浄した。次いで、抽出液をＭｇＳＯ４で乾燥、濾過そして濃縮して、やや黄色のオイルを得た。この物質を、２：１ヘキサン：酢酸エチルを用いてＳｉＯ２においてクロマトグラフィー処理（生成物Ｒｆ＝０．４）して、無色オイルとして表題の化合物２２．０ｇ（収率８５％）を得た。
ＡＰＣＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３０６（ＭＨ＋），１Ｈ−ＮＭＲ（３６０ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：∂７．２−７．４（５Ｈ，ｍ，ｐｈｅｎｙｌ）；４．７１（１Ｈ，ｍ，Ｈ４）；４．１７−４．２５（２Ｈ，ｍ，Ｈ５）；３．９６（１Ｈ，ｍ，Ｈ３’）；３．７７（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝２．５，７Ｈｚ，Ｈ２’）；３．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４， １３Ｈｚ，ｂｅｎｚｙｌｉｃ）；２．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９，１３Ｈｚ，ｂｅｎｚｙｌｉｃ）；１．５−１．６（２Ｈ，ｍ，Ｈ４’）；１．３−１．５（２Ｈ，ｍ，Ｈ５’）；１．２７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，２’−Ｍｅ）；０．９４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝Ｈｚ，Ｈ６’）。
【０１２２】
Ｅ：（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシヘキサノエートＮ−アセチルシステアミンチオエステルの製造
Ｎ−アセチルシステアミンを１３０℃／７ｍｍＨｇで蒸留して室温で無色の液体を得た。５００ｍＬ添加ロートおよび撹拌棒を備えた乾燥した１Ｌ３口丸底フラスコに隔膜で蓋をし、そして窒素を通気した。次いで、フラスコにＮ−アセチルシステアミン１０．７ｍｌを注射針によって、そして無水ＴＨＦ４００ｍｌをカニューレによって添加した。混合液をＭｅＯＨ／氷浴中で冷却した。ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍの６４ｍｌ）を注射針によって滴下し、白色沈殿の形成をもたらした。３０分間撹拌後、トリメチルアルミニウム（ヘキサン中２．０Ｍの５１ｍｌ）を注射針によって滴下した。反応液はトリメチルアルミニウムの添加後透明になり、さらに３０分間撹拌させた。この後、（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシヘキサノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン２０．５ｇ（０．０６８ｍｏｌ）を窒素のブランケット下に置き、無水ＴＨＦ１００ｍｌ中に溶解した；この溶液を次に反応液中にカニューレによってゆっくりした流れで注入した。得られる反応混合液は黄緑色に変化し、そして１時間撹拌した。出発材料が薄層クロマトグラフィー分析によってもはや見られなくなった時点（約１時間）で反応は終了した。
【０１２３】
反応液を十分な飽和シュウ酸により処理して、ｐＨペーパーで中性反応液を得た（約９０ｍｌ）。次いで、溶媒をロータリーエバポレーターで除去して白色スラリーを得た。スラリーをエチルエーテル２５０ｍｌづつで６回抽出した。有機抽出液を合わせ、そしてブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥、濾過そして濃縮して、やや黄色のオイルを得た。チオエステル生成物を、１：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃを用いてＳｉＯ２におけるフラッシュクロマトグラフィーにより４−ベンジル−２−オキサゾリジノンの溶出まで精製した。その時点で、溶媒系を１００％ＥｔＯＡｃに切り替えて、ジケチドチオエステルの純粋な画分を得た。生成物画分を合わせ、そして濃縮して表題の化合物１４．９ｇ（収率８９％）を得た。この化合物を実施例２におけるプロピルジケチドチオエステルと呼ぶ。
ＡＰＣＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４８（ＭＨ＋），１Ｈ−ＮＭＲ（３６０ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：∂５．８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；３．９４（ｄｔ，１Ｈ）；３．４６（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｄｔ，２Ｈ），２．７１（ｄｑ，１Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｍ，２Ｈ），１．３７（ｍ，２Ｈ），１．２１（ｄ，３Ｈ），０．９４（ｔ，３Ｈ）。
【０１２４】
Ｆ：（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４−ペンテノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノンの製造
５００ｍＬ添加ロート、低温温度計および撹拌棒を備えた乾燥した２Ｌ３口丸底フラスコにプロピオニルオキサゾリジノンＡ２０．０ｇを負荷し、隔膜で蓋をし、そして窒素を通気した。無水ジクロロメタン（１００ｍｌ）を添加し、そして得られる溶液をメタノール／氷浴中で−１５℃に冷却した。ジブチルホウ素トリフレート（ジクロロメタン中１．０Ｍの１００ｍｌ）を反応温度を３℃以下に維持するような速度で添加ロートを通してゆっくりした流れで添加した。ジイソプロピルエチルアミン（１７．９ｍｌ）を、再び内部温度を３℃以下に保ちつつ注射針によって滴下した。次いで、反応液をドライアイス／イソプロパノール浴を用いて−６５℃まで冷却した。アクロレインを注射針によって５分かけて添加した。添加終了後、反応液を３０分間撹拌させた。
【０１２５】
次いで、反応液を氷浴に移し、そして添加ロートに１Ｍリン酸水溶液、ｐＨ７．０（リン酸溶液は等モル量の１塩基性および２塩基性リン酸カリウムからなる）１２０ｍｌ（０．１ｍｏｌ）を負荷した。リン酸溶液を反応温度を１０℃以下に保ちつつ可能な限り急速に添加した。次いで、添加ロートにメタノール４００ｍｌを負荷し、これを反応温度を１０℃以下に保ちつつ可能な限り急速に添加した。最後に、添加ロートに２：１メタノール：３０％過酸化水素４００ｍｌを負荷し、これを温度を１０℃以下に保って滴下した。反応液を１時間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレーターにおいて除去してスラリーを残した。スラリーをエチルエーテル５００ｍｌづつで４回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして飽和重炭酸水溶液およびブライン各２５０ｍｌで洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥、濾過そして濃縮して、やや黄色のオイルを得た。ヘキサンを用いて粉砕により結晶を誘導した。ヘキサンの添加によってエーテルからの再結晶化により生成物１３．６７ｇ（収率５５％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３６０ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：∂７．２−７．４（ｍ，５Ｈ）；５．８６（ｄｄｄ，１Ｈ），５．３５（ｄｔ，１Ｈ），５．２２（ｄｔ，１Ｈ），４．７１（ｍ，１Ｈ），４．５１（ｍ，１Ｈ），４．２１（ｍ，２Ｈ），３．８９（ｄｑ，１Ｈ），３．２６（ｄｄ，１Ｈ），２．８０（ｄｄ，１Ｈ），１．２５（ｄ，３Ｈ）。
【０１２６】
Ｇ：（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４−ペンテノエートＮ−アセチルシステアミンチオエステルの製造
Ｎ−アセチルシステアミンを１３０℃／７ｍｍＨｇで蒸留して室温で無色の液体を得た。５００ｍＬ添加ロートおよび撹拌棒を備えた乾燥した１Ｌ３口丸底フラスコに隔膜で蓋をし、そして窒素を通気した。次いで、フラスコにＮ−アセチルシステアミン７．５ｍｌを注射針によって、そして無水ＴＨＦ５００ｍｌをカニューレによって負荷した。次いで反応液をＭｅＯＨ／氷浴中で冷却した。ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍの４４ｍｌ）を注射針によって滴下した。ｎ−ＢｕＬｉとして形成した白色沈殿を添加した。３０分間撹拌後、トリメチルアルミニウム（ヘキサン中２．０Ｍ）３５．５ｍｌ（０．０７１ｍｏｌ）を注射針によって滴下した。反応液はトリメチルアルミニウムの添加後透明になり、さらに３０分間撹拌させた。製造Ｆからの（４Ｓ）−Ｎ−［（２Ｓ，３Ｒ）−２−メチル−３−ヒドロキシ−４−ペンテノイル］−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（１３．６ｇ）を窒素のブランケット下に置き、無水ＴＨＦ５０ｍｌ中に溶解し、次いでこの溶液を反応液中にカニューレによってゆっくりした流れで移した。得られる反応混合液は黄緑色に変化し、そして１時間撹拌した。出発材料が薄層クロマトグラフィーによってもはや見られなくなった時点（約３０分）で終了と判断した。
【０１２７】
十分な飽和シュウ酸を添加して、ｐＨペーパーで中性反応液を得た（約６０ｍｌ）。次いで、溶媒をロータリーエバポレーターで除去して白色スラリーを得た。スラリーをエチルエーテル２５０ｍｌづつで６回抽出した。有機抽出液を合わせ、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥、濾過そして濃縮して、やや黄色のオイルを得た。次いで、チオエステルをＳｉＯ２におけるフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。カラムに１：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃをオキサゾリジノンの溶出まで流した。その時点で、溶出液を１００％酢酸エチルに切り替えて、生成物の純粋な画分を得た。この画分を合わせ、そして濃縮して表題の化合物生成物７．７ｇ（収率７１％）を得た。この生成物を実施例２におけるビニルジケチドチオエステルと呼ぶ。
１Ｈ−ＮＭＲ（３６０ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：∂５．８２（ｄｄｄ，１Ｈ），５．７８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）；５．３２（ｄｔ，１Ｈ），５．２１（ｄｔ，１Ｈ），４．４７（ｍ，１Ｈ），３．４５（ｍ，２Ｈ），３．０４（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｄｑ，１Ｈ），１．９６（ｓ，３Ｈ），１．２２（ｄ，３Ｈ）。
【０１２８】
実施例２
エリスロノライドの製造
Ａ：１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢの製造
ストレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９／ｐＪＲＪ２は、各々引用によって本明細書に組み入れられている米国特許第６，０６６，７２１号および同第６，０８０，５５５号に記述されている。プラスミドｐＪＲＪ２は、モジュール１のケトシンターゼドメイン（ＫＳ１）が突然変異によって不活性化されたＤＥＢＳの変異型（ＫＳ１°）をコードしている。実施例１にしたがって生成されたビニルジケチドチオエステルをフィードされたこのプラスミドを含有するＳ．コエリカラー株は、１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢを生産する。
【０１２９】
Ｓ．コエリカラーＣＨ９９９／ｐＪＲＪ２は、ビニルジケチドチオエステルを１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢに転化するその能力について試験された。凍結胞子保存株が希釈され、チオストレプトン５０ｍｇ／Ｌを含有するＲ２ＹＥ寒天プレート上に平板塗布され、そして５日間３０℃で増殖されて単一コロニーを得た。Ｒ２ＹＥ培地各１リットルは、スクロース１０３ｇ、グルコース１０ｇ、ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ１０．１２ｇ、Ｋ２ＳＯ４０．２５ｇ、カザミノ酸０．１ｇ、酵母エキス５ｇ、ＴＥＳ（Ｎ−トリス［ヒドロキシメチル］メチル−２−アミノエタンスルホン酸、Ｓｉｇｍａ）バッファー５．７３ｇ、寒天（含有された場合）２２ｇおよび微量元素溶液２ｍｌを含有している。オートクレーブ後、５ｇ／Ｌ（０．５％）ＫＨ２ＰＯ４１０ｍｌ、２．５ＭＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ８ｍｌ、２００ｇ／Ｌ（２０％）Ｌ−プロリン１５ｍｌおよび１ＮＮａＯＨ７ｍｌが添加された。微量元素溶液各１リットルは、ＺｎＳＯ４１ｍｇ、ＦｅＳＯ４１ｍｇ、ＭｎＣｌ２１ｍｇおよびＣａＣｌ２１ｍｇを含有する。ＴＥＳは、培養がｐＨ調整バイオリアクターにおいて増殖される場合はＲ２ＹＥ培地から省かれた。
【０１３０】
コロニーは増殖のために２次プレート上に移植され、次いでチオストレプトン５０ｍｇ／Ｌを含有する新しいＲ２ＹＥプレート上に塗布して菌糸叢を作らせた。これらの菌叢に対するトレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９／ｐＪＲＪ２のジケチドフィーディングは前記のように実施された。これらの培養において生産された１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢは、培養物が増殖した寒天のホモジナイゼーションと酢酸エチル抽出によって単離された。これらの抽出液の逆相ＨＰＬＣ／ＭＳ分析が、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ  ＯＤＳカラム（４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ）を備えたＢｅｃｋｍａｎ１２７ｓ溶媒モジュールおよび移動相として水→アセトニトリル勾配を用いて実施された。１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢは、質量分光測定（ＰＥＳｃｉｅｘ  ＡＰＩ１００ＬＣ）によって同定され、そして蒸発光散乱検出器（Ａｌｌｔｅｃｈ  ５００ＥＬＳＤ）を用いて定量された。高生産性分離株がプレート上で増殖され、そして凍結胞子懸濁液として保存中のそれらの安定性を決定するために再試験された。
【０１３１】
ビニルジケチドチオエステルを１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢに転化する能力について試験されたストレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９／ｐＪＲＪ２の２０分離株については５株が非生産株であり、そして１株が生産物＞６ｍｇ／Ｌを生産した。高生産性分離株は、寒天培地上での増殖（〜１０日毎に再接種）と凍結胞子保存としての増殖の両方が実施された。菌株が凍結胞子保存として保存された場合、菌株の再分離は、無視できない継代変化をもたらした。菌株をＲ２ＹＥ寒天において室温で保存した場合、この変異性は観察されなかった。凍結胞子懸濁液としての保存中の菌株の生産能の分離は、それが生じるメカニズムは分かっていないが、以前から観察されていた。
【０１３２】
寒天培地上での増殖および凍結菌糸懸濁液の増殖は分離株の生産能力を保持している。その結果、細胞バンクは、チオストレプトン５０μｇ／ｍｌを含有するＲ２ＹＥ５０ｍｌ中に約１０ｍｍ２菌糸パッチを移植し、そして２５０ｍｌバッフル付きフラスコにおいて４８時間２００−２５０ｒｐｍ／２８−３０℃で振盪（シリーズ２５Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ  ｃｏｆｆｉｎ  ｓｈａｋｅｒ）することによって調製された。細胞を検鏡により検査し、９０％グリセロール２５ｍｌを培養液に混入し、そして１ｍｌ分量を液体窒素中で凍結し、そして−８０℃で保存した。この操作は、ストレプトミセス・コエリカラーおよびサッカロポリスポラ・エリスレア両菌株の保存のために使用された。
【０１３３】
１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢは振盪フラスコにおいて生産できる。ストレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９／ｐＪＲＪ２の種菌培養は、チオストレプトン５０μｇ／ｍｌおよび消泡剤（Ｂａｋｅｒ）〜１ｍｌ／ｌを含有するＲ２ＹＥ５０ｍｌに凍結保存物１ｍｌを添加することによって作成された。Ｓ．コエリカラーＫ３９−０２／ｐＪＲＪ２の種菌培養は、場合によってはアプラマイシン５０μｇ／ｍｌを含有してもよい。培養は、２００−２５０ｒｐｍ、２８−３０℃で〜４８時間振盪（シリーズ２５Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ  ｃｏｆｆｉｎ  ｓｈａｋｅｒ）された。生産培養は、チオストレプトン５０μｇ／ｍｌを含有するＳＯ１培地（場合によっては、バッファーを含まないＲ６培地を使用してもよい）５００ｍｌ中に種菌培養液１０ｍｌを接種することによって調製された。ＳＯ１培地各１リットルは、スクロース５１．５ｇ、Ｋ２ＳＯ４０．２５ｇ、カザミノ酸０．１ｇ、酵母エキス５ｇ、ＴＥＳバッファー５．７３ｇ、プロピオン酸ナトリウム０．９６ｇおよび微量元素溶液２ｍｌを含有した。オートクレーブ後、０．５％（５ｇ／Ｌ）ＫＨ２ＰＯ４１０ｍｌ、２．５ＭＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ８ｍｌ、２０％（２００ｇ／Ｌ）Ｌ−プロリン７．５ｍｌおよび１ＮＮａＯＨ７ｍｌが添加された。ＴＥＳは、培養がｐＨ調整バイオリアクターにおいて増殖される場合はＳＯ１培地から省かれた。
【０１３４】
また、Ｒ６培地が生産培養のために使用された。Ｒ６培地各１リットルは、スクロース１０３ｇ、Ｋ２ＳＯ４０．２５ｇ、ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ１０．１２ｇ、カザミノ酸０．１ｇ、酵母エキス５ｇ、ＴＥＳバッファー５．７３ｇ、プロピオン酸ナトリウム０．９６ｇおよび微量元素溶液２ｍｌを含有した。オートクレーブ後、０．５％ＫＨ２ＰＯ４１０ｍｌ、２．５ＭＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ８ｍｌ、２０％Ｌ−プロリン１５ｍｌおよび１ＮＮａＯＨ７ｍｌが添加された。ＴＥＳは、培養がｐＨ調整バイオリアクターにおいて増殖される場合はＲ６培地から省かれた。
【０１３５】
培養は、２００−２５０ｒｐｍ／２８−３０℃で３６〜４８時間増殖された。次いで、培養液に４−ペンチノイクアシド（４−ｐｅｎｔｙｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）（Ｆｌｕｋａ，２５ｍｇ／Ｌ）および１ｍＭビニルジケチドチオエステル（１０％ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ）中ジケチド４．６７ｍｇ／ｍｌの３ｍｌ）を補充し、そしてさらに４日間増殖した。Ｒ６培地へのジケチドのフィーディングでは、ジケチドは、グルコースレベルが０．５ｇ／Ｌ以下に落ちた場合；グルコース濃度が分析されて、より正確にフィーディングの時間が決定できた接種後２４−４８時間目に添加された。１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢは、ＸＡＤ樹脂による固相抽出とエタノールによる溶出によって培養液から回収された。
【０１３６】
１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢの大規模製造では、ストレプトミセス・コエリカラーＫ３９−０２／ｐＪＲＪ２の種菌培養は、場合によってはアプラマイシン５０μｇ／ｍｌ、チオストレプトン５０μｇ／ｍｌおよび消泡剤１ｍｌ／ｌを含有するＲ２ＹＥ５００ｍｌを有する２．８Ｌ容バッフル付きフラスコ中に凍結菌糸１ｍｌを接種し、そして１５０−２００ｒｐｍ／２８−３０℃で約２日間振盪する（Ｉｎｎｏｖａ  ｆｌｏｏｒ  ｓｈａｋｅｒ）ことによって作成された。１０Ｌ容撹拌タンクバイオリアクター（Ｂ．Ｂｒａｕｎ，Ａ−１０）を準備し、Ｒ６培地１０Ｌを満たし、１２１℃で３０分間オートクレーブし、冷却し、次いで種菌培養液５００ｍｌ（５％）を接種した。
【０１３７】
温度は、ラシュトン翼３枚による５００−７５０ｒｐｍで、通気０．５−２Ｌ／ｍｉｎの撹拌をしながら３０℃に維持し、そしてｐＨは１ＮＮａＯＨまたは１ＮＨ２ＳＯ４の自動添加により７．００に調節した。グルコース消費、溶存酸素、ｐＨおよび細胞量がモニターされた。グルコース濃度が０．１ｇ／Ｌ以下に低下した場合、培養液に４−ペンチノイクアシド２５−５０μｇ／ｍｌおよびＤＭＳＯ５０ｍｌ中ビニルジケチドチオエステル２．５ｇを補充した。グルコースフィーディングの調節はグルコース濃度０−２ｇ／Ｌ（０．５ｇ／Ｌを目標）に維持した。１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢの力価はＨＰＬＣ／ＭＳによってモニターされ、そして最高力価に達した時培養液を遠心によって収穫した。この操作はＢｉｏＬａｆｉｔｔｅ１５０Ｌバイオリアクターを用いて１００Ｌまで拡大された。
【０１３８】
１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢは固相抽出によって精製された。発酵ブロスを４−１５℃に冷却し、そしてエタノールを添加した（０．１Ｌ／Ｌブロス）。ブロスを遠心によって澄明にし、そしてＸＡＤ−１６樹脂（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ）カラム上に流速２−４ｍｌ／ｃｍ２−ｍｉｎにおいて負荷（ＸＡＤ  １ｋｇ／１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢ  １ｇ）した。負荷された樹脂を水中１５％（ｖ／ｖ）エタノールの２カラム容積で洗浄し、そして１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢをアセトンにより樹脂から溶出し、１／２カラム容積画分を回収した。１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢを含有する画分を薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン１：１）およびＨＰＬＣ／ＭＳによって同定した。
【０１３９】
１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢを含有するアセトン画分をプールし、そして揮発物を減圧下で除去した。得られる水性混合液を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出液を飽和ＮａＨＣＯ３およびブライン溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムもしくはマグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗物質をヘキサンと酢酸エチルの勾配液を用いるシリカゲルにおけるクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有する画分をプールし、そして黄色オイルまで濃縮したが、これは自然に結晶化した。
エーテル−ヘキサンからの再結晶化により純粋な１４，１５−デヒドロ−６−デオキシエリスロノライドＢを得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ］＝３８５を示した。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：２１３．６７（Ｃ９），１７７．５１（Ｃ１），１３４．８０（Ｃ１４），１１６．５８（Ｃ１５），７９．４０（Ｃ３），７６．４７（Ｃ５），７４．１１（Ｃ１３），７０．８４（Ｃ１１），４３．８０（Ｃ２），４３．１６（Ｃ１０），４１．４８（Ｃ１２），３９．５８（Ｃ８），３７．６１（Ｃ７），３７．４２（Ｃ４），３５．５６（Ｃ６），１６．６０（６Ｍｅ），１４．５５（２Ｍｅ），１３．３４（８Ｍｅ），９．２０（１２Ｍｅ），６．９１（４Ｍｅ），６．３０（１０Ｍｅ）。
【０１４０】
Ｂ：１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢの製造
ストレプトミセス・コエリカラーＫ３９−０２／ｐＪＲＪ２の高生産性分離株を振盪フラスコにおいて１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢを生産するために使用した。ストレプトミセス・コエリカラーＫ３９−０２／ｐＪＲＪ２の種菌培養は、チオストレプトン（および場合によってはアプラマイシン）５０μｇ／ｍｌを含有するＲ２ＹＥ５０ｍｌに凍結保存物１ｍｌを添加することによって作成された。培養は、２００−２５０ｒｐｍ、２８−３０℃で３６〜４８時間振盪された。生産培養は、チオストレプトン（および場合によってはアプラマイシン）５０μｇ／ｍｌを含有するＳＯ１もしくはＲ６培地５０ｍｌ中に種菌培養液１ｍｌを接種することによって調製された。消泡剤は１ｍｌ／Ｌにおいて添加した。培養は、２００−２５０ｒｐｍ／２８−３０℃で３６〜４８時間増殖された。培養液に４−ペンチノイクアシド（Ｆｌｕｋａ，２５−５０ｍｇ／Ｌ）および１ｍＭプロピルジケチドチオエステル（１０％ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ）中ジケチド４．６７ｍｇ／ｍｌの３ｍｌ）を補充し、そしてさらに４−７日間増殖させた。１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢは最高力価に達した時培養液から酢酸エチルによる抽出によって収穫された。
１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢの大規模製造では、ストレプトミセス・コエリカラーＫ３９−０２／ｐＪＲＪ２の種菌培養は、Ｒ２ＹＥ５００ｍｌを有する２．８Ｌ容バッフル付きフラスコ中に凍結菌糸１ｍｌを接種し、そして１５０−２００ｒｐｍ／２８−３０℃で２日間振盪することによって作成された。１０Ｌ容撹拌タンクバイオリアクターを準備し、ＳＯ１もしくはＲ６培地１０Ｌを満たし、１２１℃で３０分間オートクレーブし、冷却し、次いで種菌培養液４００−５００ｍｌを接種した。
【０１４１】
温度は、ラシュトン翼３枚による５００−７５０ｒｐｍで、通気〜１Ｌ／ｍｉｎの撹拌をしながら２８−３０℃に維持し、そしてｐＨは１ＮＮａＯＨまたは１ＮＨ２ＳＯ４の自動添加により７．００に調節した。グルコース消費、溶存酸素、ｐＨおよび細胞量がモニターされた。グルコース濃度が０．１ｇ／Ｌ以下に低下した場合、培養液に４−ペンチノイクアシド（２５μｇ／ｍｌ）およびＤＭＳＯ５０ｍｌ中プロピルジケチドチオエステル２．５ｇを補充した。グルコースフィーディングの調節はグルコース濃度〜０．５ｇ／Ｌに維持した。１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢの力価はＨＰＬＣ／ＭＳによってモニターされ、そして最高力価に達した時培養液を遠心によって収穫した。この操作はＢｉｏＬａｆｉｔｔｅ１５０Ｌバイオリアクターを用いて１００Ｌまで拡大された。
【０１４２】
１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢは固相抽出によって精製された。発酵ブロスを４−１５℃に冷却し、そしてエタノールを添加した（０．１Ｌ／Ｌブロス）。ブロスを遠心によって澄明にし、そしてＸＡＤ−１６樹脂（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ）カラム上に流速２−４ｍｌ／ｃｍ２−ｍｉｎにおいて負荷（ＸＡＤ  １ｋｇ／１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢ  １ｇ）した。負荷された樹脂を水中１５％（ｖ／ｖ）エタノールの２カラム容積で洗浄し、そして１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢをアセトンにより樹脂から溶出し、１／２カラム容積画分を回収した。１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢを含有する画分を薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン１：１）およびＨＰＬＣ／ＭＳによって同定した。
【０１４３】
１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢを含有するアセトン画分をプールし、そして揮発物を減圧下で除去した。得られる水性混合液を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出液を飽和ＮａＨＣＯ３およびブライン溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムもしくはマグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗物質をヘキサンと酢酸エチルの勾配液を用いるシリカゲルにおけるクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有する画分をプールし、そして黄色オイルまで濃縮したが、これは自然に結晶化した。エーテル−ヘキサンからの再結晶化により純粋な１５−メチル−６−デオキシエリスロノライドＢを得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ］＝４０１を示した。
【０１４４】
Ｃ：１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢの製造
引用によって本明細書に組み入れられている米国特許第５，７１２，１４６号は組み換え宿主細胞ストレプトミセス・コエリカラーＣＨ９９９／ｐＣＫ７の作成を記述してイル。本特許は、組み換え菌株がＲ２ＹＥ培地で増殖した場合、この菌株が６−デオキシエリスロノライドＢと１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢ（また８，８ａ−デオキシオレアンドライドとして知られている）の混合物を生産することを報告している。関連する菌株、Ｓ．コエリカラー２７−２６／ｐＫＯＳ０１１−２６は、改変ｐＣＫ７プラスミドおよび組み換えｐｔｐＡ遺伝子を含有している。
【０１４５】
ストレプトミセス・コエリカラー２７−２６／ｐＫＯＳ０１１−２６の高生産性分離株を振盪フラスコにおいて１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢを生産するために使用した。ストレプトミセス・コエリカラー２７−２６／ｐＫＯＳ０１１−２６の種菌培養は、チオストレプトン（および場合によってはアプラマイシン）５０μｇ／ｍｌを含有するＲ２ＹＥ５０ｍｌに凍結保存物１ｍｌを添加することによって作成された。培養は、２００−２５０ｒｐｍ、２８−３０℃で３６〜４８時間振盪された。生産培養は、チオストレプトン（および場合によってはアプラマイシン）５０μｇ／ｍｌを含有するＳＯ１培地５０ｍｌ中に種菌培養液１ｍｌを接種することによって調製された。培養は、２００−２５０ｒｐｍ／２８−３０℃で３６〜４８時間増殖された。１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢは培養液から酢酸エチルによる抽出によって回収された。
【０１４６】
１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢの大規模製造では、ストレプトミセス・コエリカラー２７−２６／ｐＫＯＳ０１１−２６の種菌培養は、Ｒ２ＹＥ５００ｍｌを有する２．８Ｌ容バッフル付きフラスコ中に凍結菌糸１ｍｌを接種し、そして１５０−２００ｒｐｍ／２８−３０℃で３６−４８時間振盪することによって作成された。１０Ｌ容撹拌タンクバイオリアクターを準備し、グルコース不含のＲ２ＹＥ培地１０Ｌを満たし、１２１℃で３０分間オートクレーブし、冷却し、次いで種菌培養液４００−５００ｍｌを接種した。
【０１４７】
温度は、ラシュトン翼３枚による５００−７５０ｒｐｍで、通気〜１Ｌ／ｍｉｎの撹拌をしながら２８−３０℃に維持し、そしてｐＨは１ＮＮａＯＨまたは１ＮＨ２ＳＯ４の自動添加により７．００に調節した。グルコース消費、溶存酸素、ｐＨおよび細胞量がモニターされた。グルコースフィーディングの調節はグルコース濃度〜０．５ｇ／Ｌに維持した。１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢの力価はＨＰＬＣ／ＭＳによってモニターされ、そして最高力価に達した時培養液を遠心によって収穫した。この操作はＢｉｏＬａｆｉｔｔｅ１５０Ｌバイオリアクターを用いて１００Ｌまで拡大された。
【０１４８】
１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢは固相抽出によって精製された。発酵ブロスを４−１５℃に冷却し、そしてエタノールを添加した（０．１Ｌ／Ｌブロス）。ブロスを遠心によって清澄にし、そしてＸＡＤ−１６樹脂（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ）カラム上に流速２−４ｍｌ／ｃｍ２−ｍｉｎにおいて負荷（ＸＡＤ  １ｋｇ／１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢ  １ｇ）した。負荷された樹脂を水中１５％（ｖ／ｖ）エタノールの２カラム容積で洗浄し、そして１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢをアセトンにより樹脂から溶出し、１／２カラム容積画分を回収した。１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢを含有する画分を薄層クロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン１：１）およびＨＰＬＣ／ＭＳによって同定した。
【０１４９】
１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢを含有するアセトン画分をプールし、そして揮発物を減圧下で除去した。得られる水性混合液を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出液を飽和ＮａＨＣＯ３およびブライン溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムもしくはマグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗物質を酢酸エチル／ヘキサンによって展開したＳｉＯ２カラムを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。エーテル−ヘキサンからの再結晶化により純粋な１４−ノル−６−デオキシエリスロノライドＢを得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ］＝３７３を示した。
【０１５０】
実施例３
エリスロマイシンの製造
実施例２、製造Ａ−Ｃにおいて製造された６−ｄＥＢ化合物は、サッカロポリスポラ・エリスレアの組み換え株を用いてエリスロマイシン誘導体に変換される。両Ｃ−６およびＣ−１２ヒドロキシル基を有するエリスロマイシンの製造では、使用されるＳ．エリスレア株はＫ４０−６７であった。この菌株は、不活性化されたＫＳ１ドメインをコードしている変異ｅｒｙＡ１配列を含有するｐＷＨＭ３由来のプラスミドにより高レベルのエリスロマイシンＡを生産できるＳ．エリスレア株を形質転換することによって作成された。相同組み換えによって、得られる形質転換株は６−デオキシエリスロノライドＢを生産できなくされた。１２−ヒドロキシル基のみを有するエリスロマイシン誘導体の生産では、使用されるＳ．エリスレア株はＫ３９−０７であった。この菌株は、ｅｒｙＦヒドロキシラーゼ遺伝子の破壊によってＫ４０−６７から構築された。両菌株は下記のように本質的に類似条件下で発酵された。
【０１５１】
発酵は１０Ｌ（および１５０Ｌ）容バイオリアクターにおいて実施された。凍結Ｓ．エリスレアＫ４０−６７菌糸１ｍｌ分量がＲ２ＹＥ培地５００ｍｌ中に種菌培養を接種するために使用された。培養は、２．８Ｌ容バッフル付きＦｅｒｎｂａｃｈフラスコにおいて１５０−２００ｒｐｍ／２８−３０℃で〜４８時間振盪された。１０Ｌ容撹拌タンクバイオリアクターを準備し、Ｒ２ＹＥ培地１０Ｌ（１５０Ｌ発酵では７０Ｌ）を満たし、１２１℃で４５分間オートクレーブし、冷却し、次いで種菌培養液２００ｍｌ（１５０Ｌ発酵では１．４Ｌ）を接種した。温度は、ラシュトン翼２枚による５００−７００ｒｐｍで、通気〜１Ｌ／ｍｉｎの撹拌をしながら２８−３０℃に維持し、そしてｐＨは１ＮＮａＯＨまたは１ＮＨ２ＳＯ４の自動添加により７．２０に調節した。発泡を１ｍｌ／Ｌの消泡剤添加により抑えた。ｐＨを調節してエノールエーテルおよびスピロケタールへの潜在的な生成物分解を避けた。スクロース消費、グルコース発生、溶存酸素、ｐＨおよび６００ｎｍにおける吸光度（細胞量）がモニターされた。２４−３６時間後、１００％エタノール３ｍｌ（１５０Ｌ発酵では１５ｍｌ）に溶解したこの実施例の製造Ａ−Ｃにしたがって製造された６−ｄＥＢ誘導体３００ｍｇ（１５０Ｌ発酵では１．６２ｇ）を培養液にフィードした。発酵をさらに〜６８−８５時間継続し、そして発酵ブロスを遠心によって収穫した。この発酵過程中のエリスロマイシンＡ，Ｂ，ＣおよびＤ類似体の力価はエレクトロスプレーＭＳ分析によって決定された。
【０１５２】
化合物は固相抽出によって精製された。発酵ブロスをＮａＯＨの添加によってｐＨ８．０にして４−１５℃に冷却し、そしてエタノールを添加した（０．１Ｌ／Ｌブロス）。ブロスを遠心によって澄明にし、そしてＸＡＤ−１６樹脂（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ）カラム上に流速２−４ｍｌ／ｃｍ２−ｍｉｎにおいて負荷（ＸＡＤ  １ｋｇ／エリスロマイシン誘導体１ｇ）した。負荷された樹脂を水中１５％（ｖ／ｖ）エタノールの２カラム容積で洗浄し、そしてエリスロマイシン誘導体をアセトンにより樹脂から溶出し、１／２カラム容積画分を回収した。エリスロマイシン誘導体を含有する画分を薄層クロマトグラフィーおよびＨＰＬＣ／ＭＳによって同定した。
【０１５３】
エリスロマイシン誘導体を含有するアセトン画分をプールし、そして揮発物を減圧下で除去した。得られる水性混合液を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出液を飽和ＮａＨＣＯ３およびブライン溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムもしくはマグネシウムで乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮乾固した。粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール／トリエチルアミン）によって精製した。この物質は、次の実施例において記述される化学的誘導体化工程のための出発材料として用いられた。純粋な生成物は、遠心向流分配の使用を通して得ることができる（例えば、引用によって本明細書に組み入れられているＷＯ９１／１６３３４に記述されているＩｔｏ  Ｃｏｉｌ  Ｐｌａｎｅｔ  Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅを使用して）。
【０１５４】
この方法によって製造された化合物は、（ｉ）１４−ノル−エリスロマイシンＡ；（ｉｉ）１４，１５−デヒドロ−エリスロマイシンＡ；（ｉｉｉ）１５−メチル−エリスロマイシンＡ；（ｉｖ）１４−ノル−６−デオキシ−エリスロマイシンＡ；（ｖ）１４，１５−デヒドロ−６−デオキシ−エリスロマイシンＡ；および（ｖｉ）１５−メチル−６−デオキシ−エリスロマイシンＡであった。３−デスクラジノース−３−オキソ−誘導体を作成するために使用される場合、エリスロマイシンＡ誘導体はエリスロマイシンＣ誘導体からは分離されなかった；代わりに、ＡおよびＣ化合物の混合物が化学的誘導体化のための出発材料として使用された。
【０１５５】
実施例４
製造Ａ：１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム
イソプロパノール（２ｍｌ）中１４−ノルエリスロマイシンＡ（０．６２１ｇ，８０％純度）、ヒドロキシルアミン（５０％水溶液０．５ｍｌ）および酢酸（０．２ｍｌ）溶液を５０℃で２２時間維持した。それをクロロホルム／エタノール（３／２）で抽出し、重炭酸ナトリウム、ブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥した。濾過および真空蒸発により白色固形物としての粗生成物（０．６５ｇ）を得て、これを直接次の変換のために使用した。
【０１５６】
製造Ｂ：１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
塩化メチレン（２ｍｌ）中、前記粗１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム（０．６５ｇ）および１，１−ジイソプロポキシシクロヘキサノン（０．９５ｍｌ）の溶液に、塩化メチレン（２ｍｌ）中ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（ＰＰＴＳ）（０．３３３ｇ）を添加した。一夜撹拌後、混合液を抽出（クロロホルム／エタノール３：２）、洗浄（ＮａＨＣＯ３−Ｈ２Ｏ，ブライン）、そして乾燥（ＭｇＳＯ４）した。濾過および真空蒸発後、粗生成物をトルエンおよびイソプロパノールで繰り返してドライブ（ｄｒｉｖｅ）して、生成物０．７４ｇを得て、これを次の反応のために直接使用した。
【０１５７】
製造Ｃ：２’，４”−ビス（Ｏ−トリメチルシリル）−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
塩化メチレン（６ｍｌ）中１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム（０．７４ｇ）溶液に、０℃において塩化メチレン（２ｍｌ）中トリメチルシリルイミダゾール（０．３３ｍｌ）および塩化トリメチルシリル（０．１８ｍｌ）の溶液を添加した。５分間撹拌後、酢酸エチルを添加し、洗浄（ＮａＨＣＯ３−Ｈ２Ｏ，ブライン）、そして乾燥（ＭｇＳＯ４）した。シリカゲルにおけるフラッシュクロマトグラフィー（１０：１ヘキサン：アセトン，１％トリエチルアミン）により白色固体としての純粋な生成物（０．５０ｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝１０２０を表す。
【０１５８】
製造Ｄ：２’，４”−ビス（Ｏ−トリメチルシリル）−６−Ｏ−メチル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
１：１メチルスルホキシド／テトラヒドロフラン（ＤＭＳＯ／ＴＨＦ）（１．４ｍｌ）中２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（０．３ｇ，０．２９ｍｍｏｌ）溶液を、エーテル中２Ｍ臭化メチル溶液０．３ｍｌと処理し、そして１０℃に冷却した。ＴＨＦ中１Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド溶液（０．６ｍｌ）およびＤＭＳＯ（０．６ｍｌ）の混合液を、シリンジポンプを用いて６時間かけて添加した。次いで、反応液を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥した。濾過および真空蒸発により白色固体としての生成物（０．２９ｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝１０３４を表す。
【０１５９】
製造Ｅ：６−Ｏ−メチル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム
６−Ｏ−メチル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム（０．２９ｇ）、酢酸（３．６ｍｌ）、アセトニトリル（６ｍｌ）および水（３ｍｌ）の混合液を周囲温度において４．５時間撹拌した。混合液をトルエンを用いてドライブ乾固して白色固形物としての粗生成物（０．２４ｇ）を得て、これをさらなる精製なしに次の段階のために直接使用した。
【０１６０】
製造Ｆ：６−Ｏ−メチル−１４−ノルエリスロマイシンＡ
６−Ｏ−メチル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム（０．２４ｇ）、亜硫酸水素ナトリウム（０．４５ｇ，８５％純度）、水（３ｍｌ）、エタノール（３ｍｌ）およびギ酸（０．０７ｍｌ）の混合液を８５℃において８時間維持した。反応液を１ＮＮａＯＨによってｐＨ８に調整し、そして酢酸エチルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮して、白色固形物としての粗生成物（０．２ｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝７３５を表す。
【０１６１】
実施例５
製造Ａ：１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−オキシム
２−プロパノール６ｍｌ中１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ（１．９８４ｇ，４７％純度，１．２ｍｍｏｌ）の懸濁液を、５０％ヒドロキシルアミン水溶液１．９７ｍｌと処理し、そして溶解するまで撹拌した。酢酸（０．６２ｍｌ）を添加し、そして混合液を５０℃で２５時間撹拌した。周囲温度に冷却して、飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、そして混合液を真空濃縮してイソプロパノールを除去した。得られる水性混合液をＣＨＣｌ３２５０ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、そして濃縮して生成物０．９２ｇを得た。
【０１６２】
製造Ｂ：１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
（Ａ）からのオキシム（０．９２ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２６．２ｍｌ中に溶解し、そして１，１−ジイソプロポキシシクロヘキサン（１．２３ｇ）およびｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（０．４６４ｇ）とともに周囲温度で１５時間処理した。混合液をＣＨ２Ｃｌ２１６０ｍｌで希釈し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過および蒸発して褐色シロップを得た。シリカゲルにおけるクロマトグラフィー（トルエン→１：１トルエン／アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎの勾配）により、生成物０．９９８ｇを得た。
【０１６３】
製造Ｃ：２’，４”−ビス（Ｏ−トリメチルシリル）−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
ＣＨ２Ｃｌ２１１．２５ｍｌ中１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（９９８ｍｇ，９．９６）溶液を不活性雰囲気下で氷上で冷却し、そしてクロロトリメチルシラン（０．２４ｍｌ）および１−トリメチルシリルイミダゾール（０．４４ｍｌ）の溶液と処理した。３０分後、反応液を酢酸エチル２５０ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して生成物１．００２ｇを得た。
【０１６４】
製造Ｄ：２’，４”−ビス（Ｏ−トリメチルシリル）−６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
１：１テトラヒドロフラン／メチルスルホキシド９．６９ｍｌ中２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（１．００ｇ，２０．７ｍｍｏｌ）溶液を１０℃に冷却し、そして不活性雰囲気下でエーテル中２．０Ｍ臭化メチル０．９７ｍｌと処理した。メチルスルホキシド（１．９４ｍｌ）およびテトラヒドロフラン中１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．９４ｍｌ）の混合液を徐々に添加した。反応を薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、１０：１トルエン／アセトン）によってモニターし、そして塩基１．６モル当量の添加後、終了と判定した。反応液を酢酸エチル２００ｍｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３７０ｍｌで希釈した。混合液を分液ロートに移し、酢酸エチル８５０ｍｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３２８０ｍｌで希釈し、次いで水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、セライトを通して濾過し、そして蒸発して粗６−Ｏ−メチル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム２１．２ｇを得た。これをさらなる精製なしに進めた。
【０１６５】
製造Ｅ：６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−オキシム
２：１アセトニトリル／水の９．８ｍｌ中、６−Ｏ−メチル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム（１．０ｇ）溶液を、酢酸５．３ｍｌと処理し、そして周囲温度において８時間撹拌した。混合液を真空濃縮し、次いでトルエンの添加後、繰り返して濃縮して粗６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−オキシム０．７９７ｇを得た。
【０１６６】
製造Ｆ：６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ
１：１エタノール／水の７．５ｍｌ中６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−オキシム（０．７９７ｇ）および亜硫酸水素ナトリウム（８５％，１．０２ｇ）溶液を、不活性雰囲気下に置いた。ギ酸（０．１８６ｍｌ）を滴下し、そして混合液を８０℃において３時間撹拌した。周囲温度に冷却後、反応液を６ＮＮａＯＨによってｐＨ１０に調整し、そして酢酸エチル１５０ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して、さらなる変換のために適当な６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ０．６８ｇを得た。
【０１６７】
実施例６
製造Ａ：１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム
２−プロパノール４０ｍｌ中１５−メチルエリスロマイシンＡ（２０．０ｇ，８５％純度，２２．６ｍｍｏｌ）の懸濁液を、５０％ヒドロキシルアミン水溶液２０．５ｍｌと処理し、そして溶解するまで撹拌した。酢酸（６．４１ｍｌ）を添加し、そして混合液を５０℃で１５時間撹拌した。周囲温度に冷却して、飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、そして混合液を真空濃縮してイソプロパノールを除去した。得られる水性混合液をＣＨＣｌ３２５０ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、そして濃縮して粗生成物２０．５ｇを得た。ＬＣ／ＭＳによる分析は、ＥおよびＺオキシムの９４：６混合物を表した。［Ｍ＋Ｈ］＋＝７６４．
製造Ｂ：１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
前記の粗オキシム（２０．５ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２５５ｍｌ中に溶解し、そして１，１−ジイソプロポキシシクロヘキサン（２７．３ｍｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（９．８ｇ）とともに周囲温度で１５時間処理した。混合液をＣＨ２Ｃｌ２１６０ｍｌで希釈し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過および蒸発して褐色シロップを得た。シリカゲルにおけるクロマトグラフィー（２：１→３：２ヘキサン／アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎの勾配）により、生成物１８．０ｇを得た。
【０１６８】
製造Ｃ：２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
ＣＨ２Ｃｌ２１１．２５ｍｌ中１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（９．００ｇ，９．９６ｍｍｏｌ）溶液を不活性雰囲気下で氷上で冷却し、そしてＣＨ２Ｃｌ２８ｍｌ中クロロトリメチルシラン（１．８９ｍｌ）および１−トリメチルシリルイミダゾール（３．６５ｍｌ）の溶液と処理した。３０分後、反応液を酢酸エチル２５０ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン→１０：１ヘキサン／アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎの勾配）により精製して、生成物７．８ｇを得た。
【０１６９】
製造Ｄ：２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−６−Ｏ−メチル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム
テトラヒドロフラン４１．４ｍｌ中２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（２１．７ｇ，２０．７ｍｍｏｌ）溶液を１０℃に冷却し、そして不活性雰囲気下でエーテル中メチルスルホキシド４１．４ｍｌおよび２．０Ｍ臭化メチル２０．７ｍｌと処理した。メチルスルホキシド（４１．４ｍｌ）およびテトラヒドロフラン中１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４１．４ｍｌ）の混合液を速度１時間当たり約２０ｍｌで添加した。反応を薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、１０：１トルエン／アセトン）によってモニターし、そして塩基１．６モル当量の添加後、終了と判定した。反応液を酢酸エチル２００ｍｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３７０ｍｌで希釈した。混合液を分液ロートに移し、酢酸エチル８５０ｍｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３２８０ｍｌで希釈し、次いで水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、セライトを通して濾過し、そして蒸発して粗６−Ｏ−メチル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム２１．２ｇを得た。これをさらなる精製なしに進めた。
【０１７０】
製造Ｅ：６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ  ９−オキシム
アセトニトリル１１０ｍｌ中、６−Ｏ−メチル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム（２１．２ｇ）溶液を、水５５ｍｌおよび酢酸６７ｍｌと処理し、そして周囲温度において８時間撹拌した。混合液を真空濃縮し、次いでトルエンの添加後、繰り返して濃縮して６−Ｏ−メチル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム１９．７ｇを得た。
【０１７１】
製造Ｆ：６−Ｏ−メチル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
１：１エタノール／水の２８０ｍｌ中６−Ｏ−メチル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム（１９．７ｇ）および亜硫酸水素ナトリウム（８５％，２３．１ｇ）溶液を、不活性雰囲気下に置いた。ギ酸（３．７５ｍｌ）を滴下し、そして混合液を８０℃において４．５時間撹拌した。周囲温度に冷却後、反応液を飽和ＮａＨＣＯ３と処理し、そして酢酸エチル４００ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して、さらなる変換のために適当な６−Ｏ−メチル−１５−メチルエリスロマイシンＡ１５．１ｇを得た。
【０１７２】
実施例７
製造Ａ：６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１４−ノルエリスロマイシンＡ
６−Ｏ−メチル−１４−ノルエリスロマイシンＡ（７７ｍｇ），１２ＮＨＣｌ  ０．０７３ｍｌおよび水（２ｍｌ）の混合液を周囲温度において３時間撹拌した。混合物を８ＮＫＯＨによりｐＨ８に調整し、そして酢酸エチルで抽出した。有機抽出液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（３：１ヘキサン／アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、白色固体としての純粋な生成物（４２ｍｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝５７６を示す。
【０１７３】
製造Ｂ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１４−ノルエリスロマイシンＡ
６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１４−ノルエリスロマイシンＡ（７３ｍｇ）、炭酸カリウム（２０ｍｇ）、無水酢酸（１４μｌ）およびアセトン（１ｍｌ）の混合液を周囲温度において１８時間撹拌した。酢酸エチルを添加し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（３：１／ヘキサン：アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、白色固体としての純粋な生成物（７１ｍｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝６１８を示す。
【０１７４】
製造Ｃ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１４−ノルエリスロマイシンＡ
ジクロロメタン（２ｍｌ）中２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１４−ノルエリスロマイシンＡ（９９ｍｇ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）塩酸塩（２０６ｍｇ）溶液をＤＭＳＯ（０．２１ｍｌ）と処理し、そして５℃に冷却した。ジクロロメタン（２ｍｌ）中トリフルオロ酢酸ピリジニウム（２０８ｍｇ）溶液をシリンジポンプを通して４時間に添加した。次いで、酢酸エチルを添加し、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（３：１／ヘキサン：アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、白色固体としての純粋な生成物（９４ｍｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝６１６を示す。
【０１７５】
製造Ｄ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−Ｏ−メタンスルホニル−１４−ノルエリスロマイシンＡ
乾燥ピリジン（１ｍｌ）中２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１４−ノルエリスロマイシンＡ（９３ｍｇ）溶液に５℃において塩化メタンスルホニル（０．０５７ｍ）を添加した。５℃で３時間後、反応液を周囲温度までもたらし、そしてさらに１５時間撹拌した。混合液を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２ｘ）、水（３ｘ），ブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（２：１／ヘキサン：アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、白色固体としての純粋な生成物（７２ｍｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝６９５を示す。
【０１７６】
製造Ｅ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１４−ノルエリスロマイシンＡ
アセトン（１ｍｌ）中２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−Ｏ−メタンスルホニル−１４−ノルエリスロマイシンＡ（７３ｍｇ）溶液をジアザビシクロウンデセン（３２μｌ）と周囲温度で１８時間処理した。混合液を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、水，ブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（２：１／ヘキサン：アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、白色固体としての純粋な生成物（５０ｍｇ）を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ＋］＝５９８を示す。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２０７．０２，２０４．５０，１６９．６３，１６８．７２，１４２．５２，１３９．４０，１０１．８７，８０．６１，８０．０２，７７．１４，７２．６６，７１．４８，６９．０９，６３．５６，５１．３５，５０．５６，４７．１２，４０．６１，３９．７３，３７．３６，３０．３６，２１．３２，２１．０６，２０．９６，２０．６７，１８．４５，１４．３４，１３．８９，１３．５５，１３．４５。
【０１７７】
実施例８
製造Ａ：２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ
ＣＨ２Ｃｌ２３．６ｍｌ中、６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ（６６８ｍｇ）、無水安息香酸（３８５ｍｇ）およびトリエチルアミン（０．２５ｍｌ）の溶液を２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３の添加後、混合液をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして蒸発乾固し、そして生成物をシリカクロマトグラフィー（９０：９：１トルエン／アセトン／Ｅｔ３Ｎ）により精製して生成物４７７ｍｇを得た；ＬＣ−ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＋＝８５０．６を示す。
【０１７８】
製造Ｂ：２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−４”，１１−ビス（Ｏ−メタンスルホニル）−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ
ピリジン２．３９ｍｌ中、２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ（５４９ｍｇ）および塩化メタンスルホニル（０．５０ｍｌ）溶液を２４時間撹拌し、次いでＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３で希釈した。混合液をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして蒸発乾固し、そして生成物をシリカクロマトグラフィー（９０：９：１トルエン／アセトン／Ｅｔ３Ｎ）により精製して生成物５３０ｍｇを得た；ＬＣ−ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＋＝１００６．５を示す。
【０１７９】
製造Ｃ：２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−４”−Ｏ−メタンスルホニル−１０，１１−アンヒドロ−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ
アセトン０．１９５ｍｌ中、２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−４”，１１−ビス（Ｏ−メタンスルホニル）−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ（５９ｍｇ）およびジアザビシクロウンデセン（０．０１８ｍｌ）の混合液を２４時間撹拌し、次いで真空乾燥した。生成物をシリカクロマトグラフィー（９０：９：１トルエン／アセトン／Ｅｔ３Ｎ）により精製して生成物５０ｍｇを得た；ＬＣ−ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＋＝９１０．５を示す。
【０１８０】
製造Ｄ：２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１０，１１−アンヒドロ−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−４”−Ｏ−メタンスルホニル−１０，１１−アンヒドロ−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ（３３７ｍｇ）、アセトニトリル１．５ｍｌおよび３ＮＨＣｌ  ６．９ｍｌの混合液を２２時間撹拌した。アセトニトリルを真空下で除去し、水性残渣のｐＨをＮａＯＨの添加によって１２に調節し、そして生成物をＣＨ２Ｃｌ２の４分量を用いて抽出した。あわせた抽出液を乾燥および蒸発した。生成物をシリカクロマトグラフィー（９６：４ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ→９５：４：１ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／Ｅｔ３Ｎの勾配）により精製して１９７ｍｇを得た；［Ｍ＋Ｈ］＋＝６７４．４。
【０１８１】
製造Ｅ：２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ
ＣＨ２Ｃｌ２（１４．６ｍｌ）中２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１０，１１−アンヒドロ−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ（２２６ｍｇ）およびＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリイオヂナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）（４２７ｍｇ）の懸濁液を１時間撹拌した。混合液をＣＨ２Ｃｌ２および飽和ＮａＨＣＯ３で希釈した。生成物をＣＨ２Ｃｌ２の３分量を用いて抽出し、そして抽出液を合わせ、乾燥し、そして蒸発した。シリカゲルクロマトグラフィー（９０：９：１トルエン／アセトン／Ｅｔ３Ｎ）により生成物１６８ｍｇを得た。［Ｍ＋Ｈ］＋＝６７２．４．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２０６．７８，２０３（ｂｒ），１６８．１９，１６５．０８，１４１．３６，１３９．５８，１３２．７４，１３１．５１，１３０．４６，１２９．７９，１２８．２５，１２０．１８，１０２．０９，８０．７９，８０．４０，７８．７０，７２．５２，７１．９１，６９．１９，６３．７６，５１．１０，５０．５４，４７．０８，４０．７３，３９．８７，３７．７７，３１．２３，２２．１３，２０．９８，１８．５２，１４．２８，１４．１５，１３．５５。
【０１８２】
実施例９
製造Ａ：６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
６−Ｏ−メチル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（１５．１ｇ）および０．５ＮＨＣｌ  ２８０ｍｌの混合液を周囲温度において３時間撹拌した。ｐＨを６ＮＮａＯＨにより９に調整し、そして得られる沈殿を真空濾過により回収し、水で洗浄し、そして乾燥した。濾液を酢酸エチル４００ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発してさらなる生成物を得た。合わせた粗生成物をシリカゲルでクロマトグラフィー処理して、純粋な６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ９．３５ｇを得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝６０５を示す。
【０１８３】
製造Ｂ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
酢酸エチル３５ｍｌ中無水酢酸（２．９２ｍｌ）溶液を酢酸エチル４０ｍｌ中６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（９．３５ｇ）溶液に滴下した。添加終了後、混合液を３０分間撹拌し、次いで濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（２：１ヘキサン／アセトン）により２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ８．３５ｇを得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝６４７を示す。
【０１８４】
製造Ｃ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ
ジクロロメタン６４ｍｌおよびメチルスルホキシド１５．４７ｍｌ中２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（８．３ｇ）および１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１６．５１ｇ）溶液を不活性雰囲気下に置き、そして氷上で冷却した。ジクロロメタン６４ｍｌ中トリフルオロ酢酸ピリジニウム（１６．６３ｇ）溶液を、添加が４時間で終了するような速度で添加し、そして反応液を薄層クロマトグラフィーによってモニターした。溶液の７３％の添加後、完了した反応を観察した。次いで、その反応を酢酸エチル６００ｍｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３２００ｍｌの添加によって停止した。有機層を回収し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して、粗生成物８．４ｇを得た。シリカゲルでのクロマトグラフィー（３：１ヘキサン／アセトン）によって２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ６．７５ｇを得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝６４５を示す。
【０１８５】
製造Ｄ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−Ｏ−メタンスルホニル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
塩化メタンスルホニル（５．６８ｍ）を０℃においてピリジン３５ｍｌ中２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ（６．７３ｇ）溶液に滴下した。混合液を周囲温度までもたらし、そして酢酸エチル７００ｍｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３２００ｍｌで反応停止した。有機層を回収し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して粗生成物を８．２ｇ得た。シリカゲルでのクロマトグラフィー（５：２ヘキサン／アセトン）により２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−Ｏ−メタンスルホニル−１５−メチルエリスロマイシンＡ５．０４ｇを得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝７２３を示す。
【０１８６】
製造Ｅ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１５−メチルエリスロマイシンＡ
１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（５．２２ｍｌ）をアセトン２３ｍｌ中２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−Ｏ−メタンスルホニル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（５．０３ｇ）溶液に滴下した。４．５時間後溶液を濃縮し、そして残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（５：２ヘキサン／アセトン）処理して、２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１５−メチルエリスロマイシンＡ３．７２ｇを得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝６２７を示す。
【０１８７】
実施例１０
２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−２−フルオロ−１５−メチルエリスロマイシンＡの合成
不活性雰囲気下でテトラヒドロフラン２．１ｍｌ中２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１５−メチルエリスロマイシンＡ（１９８ｍｇ，０．３１６ｍｍｏｌ）溶液を−７８℃に冷却し、そしてテトラヒドロフラン中１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド０．９３１ｍｌと処理した。混合液を５分間撹拌し、そしてテトラヒドロフラン０．５ｍｌ中Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド（２３０ｍｇ）溶液を３分量ずつ２時間かけて添加した。添加後、反応液を周囲温度まで暖め、そしてさらに５時間維持した。Ｋ２ＣＯ３水溶液を添加し、そして混合液をＣＨ２Ｃｌ２５０ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９０：９：１トルエン／アセトン／Ｅｔ３Ｎ）により白色固体として生成物９５ｍｇを得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝６４５．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２０６．９５，２０３．０２（ｂｒ），１６９．７７，１６６．０８（ｄ，ＪＣＦ＝２３Ｈｚ），１４１．７１，１３８．４３，１０１．６３，９８．０２（ｄ，ＪＣＦ＝２０３Ｈｚ），８０．０９（ｂｒ），７９．７１，７８．２７，７３．２６，７１．５２，６９．０８，６３．３３，４９．１８，４０．６１，４０．３２，４１．７９，４０．６１，４０．３２，３１．５６，３１．４７，３０．５０，２４．３７（ｄ，ＪＣＦ＝２３Ｈｚ），２３．１９，２２．６３，２０．９５，２０．６８，１９．８０，１９．４７，１４．１０，１４．００，１３．５５。
【０１８８】
実施例１１
製造Ａ：化合物４の化合物７（式中、Ｘ＝Ｈ，Ｒ１３＝プロピルおよびＲａ＝アリル）への転化
段階１：  テトラヒドロフラン３０ｍｌ中２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（７．８ｇ，７．４４ｍｍｏｌ）溶液を氷上で冷却し、そして不活性雰囲気下でメチルスルホキシド３０ｍｌおよび新たに蒸留した臭化アリル２．５８ｍｌと処理した。メチルスルホキシド（２９．８ｍｌ）およびテトラヒドロフラン中１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２９．８ｍｌ）の混合液を速度１時間当たり塩基１．３３モル当量で添加した。反応を薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、１０：１トルエン／アセトン）によってモニターし、そして塩基３．６モル当量の添加後、終了と判定した。反応液を酢酸エチル７００ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して粗６−Ｏ−アリル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム８．０８ｇを得た。これをさらなる精製なしに進めた。
【０１８９】
段階２：  アセトニトリル４２ｍｌ中６−Ｏ−アリル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム（８．０８ｇ）溶液を、水２１ｍｌおよび酢酸２４ｍｌと処理し、そして周囲温度において１８時間撹拌した。混合液を２−プロパノールの添加後濃縮し、次いでトルエンの添加後、繰り返して濃縮して粗生成物７．７ｇを得た。シリカゲルでのクロマトグラフィー（２：１→１：１ヘキサン／アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）により６−Ｏ−アリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム３．７５ｇを得た。
【０１９０】
段階３：  １：１エタノール／水の６６ｍｌ中６−Ｏ−アリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム（３．７５ｇ）および亜硫酸水素ナトリウム（８５％，５．３７ｇ）溶液を不活性雰囲気下に置いた。ギ酸（０．８４５ｍｌ）を滴下し、そして混合液を８０℃において３．５時間撹拌した。周囲温度に冷却後、反応液を６ＮＮａＯＨでｐＨ１０に調節し、そして酢酸エチル１５０ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して、さらなる転化のために適当な６−Ｏ−アリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ３．４２ｇを得た。
【０１９１】
製造Ｂ：化合物４の化合物７（式中、Ｘ＝Ｈ，Ｒ１３＝メチルおよびＲａ＝アリル）への転化
段階１：  テトラヒドロフラン（０．４ｍｌ）、ＤＭＳＯ（０．４ｍｌ）およびエーテル（０．０４ｍｌ）中２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（２０２ｍｇ）溶液を１０℃に冷却し、そして不活性雰囲気下で新たに蒸留した臭化アリル０．０３５ｍｌと処理した。メチルスルホキシド（０．４ｍｌ）およびテトラヒドロフラン中１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．４ｍｌ）の混合液を速度０．２２ｍｌ／ｈｒで添加した。反応を薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、５：１トルエン／アセトン）によってモニターした。反応液を酢酸エチルで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して粗６−Ｏ−アリル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム２２２ｍｇを得た。これをさらなる精製なしに進めた。
【０１９２】
段階２：  アセトニトリル４ｍｌ中６−Ｏ−アリル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム（２２２ｍｇ）溶液を、水２ｍｌおよび酢酸２．４ｍｌと処理し、そして周囲温度において１８時間撹拌した。混合液を２−プロパノールの添加後濃縮し、次いでトルエンの添加後、繰り返し濃縮して粗６−Ｏ−アリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム２２０ｍｇを得た。
【０１９３】
段階３：  １：１エタノール／水の４ｍｌ中６−Ｏ−アリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  ９−オキシム（２２０ｍｇ）および亜硫酸水素ナトリウム（８５％，３２２ｍｇ）溶液を不活性雰囲気下に置いた。ギ酸（０．０５０ｍｌ）を滴下し、そして混合液を８０℃において１５時間撹拌した。周囲温度に冷却後、反応液を６ＮＮａＯＨでｐＨ１０に調節し、そして酢酸エチル１５０ｍｌずつで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して、さらなる転化のために適当な６−Ｏ−アリル−１４−ノルエリスロマイシンＡ  １５６ｍｇを得た。
【０１９４】
他の実施態様：Ｒａがアリルであり、そして他のＣ−１３置換基（例えば、Ｒ１３が３−ブテニル、ブチル、ベンジル、ビニル、２−アジドエチル、２−フルオロエチルもしくは３−ヒドロキシブチルである）を有する化合物７の他の実施態様は、同様にして作成できる。
【０１９５】
実施例１２
化合物７の化合物１０への転化（スキーム２）
段階１．実施例１１において生成した化合物（７７ｍｇ，粗化合物），１２ＮＨＣｌ  ０．０７３ｍｌおよび水（２ｍｌ）の混合液を周囲温度において３時間撹拌した。混合物を８ＮＫＯＨによりｐＨ８に調整し、そして酢酸エチルで抽出した。有機抽出液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（３：１／ヘキサン：アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、白色固体としての純粋な生成物（４２ｍｇ）を得た。
【０１９６】
段階２．２’ＯＨを保護するために、上記化合物（７３ｍｇ）、炭酸カリウム（２０ｍｇ）、無水酢酸（１４μｌ）およびアセトン（１ｍｌ）の混合液を周囲温度において１８時間撹拌した。酢酸エチルを添加し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（３：１／ヘキサン：アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、白色固体としての純粋な生成物（７１ｍｇ）を得た。
【０１９７】
段階３．ジクロロメタン（２ｍｌ）中段階２から得られる化合物（９９ｍｇ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）塩酸塩（２０６ｍｇ）溶液をＤＭＳＯ（０．２１ｍｌ）と処理し、そして５℃に冷却した。ジクロロメタン（２ｍｌ）中トリフルオロ酢酸ピリジニウム（２０８ｍｇ）溶液をシリンジポンプを通して４時間に添加した。次いで、酢酸エチルを添加し、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー（３：１／ヘキサン：アセトン、１％トリエチルアミン）処理して、純粋な生成物（９４ｍｇ，Ｒａはアリルであり、Ｒ２はアセテートであり、そしてＲ１３はＣＨ３である）を得た。
【０１９８】
段階４．２’ＯＨを脱保護するために、メタノール５ｍｌ中、段階３から得られる化合物（９４ｍｇ）溶液を室温で２４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去して、所望の化合物（Ｒａはアリルであり、Ｒ２はＨであり、そしてＲ１３はＣＨ３である）を得た。
【０１９９】
他の実施態様：Ｒａがアリルであり、そして他のＣ−１３置換基（例えば、Ｒ１３が３−ブテニル、ブチル、ベンジル、ビニル、２−アジドエチル、２−フルオロエチルもしくは３−ヒドロキシブチルである）を有する化合物１０の他の実施態様は、同様にして作成できる。
【０２００】
実施例１３
−ＯＲａにおける転化
Ａ．アリル→プロピル
エタノール中実施例１２の段階３もしくは４からのいずれかの化合物（０．２ｍｍｏｌ）溶液に窒素をフラッシュし、そして炭素担持の１０％パラジウム（２０ｍｇ）を添加した。次いで、混合液に水素をフラッシュし、そして反応混合液を陽圧水素下で一夜撹拌した。反応混合液を濾過し、そして真空濃縮してガラス状物を得た。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９５：５：０．５  ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により白色固体としてのプロピル化合物を得た。
【０２０１】
Ｂ．アリル→−ＣＨ２ＣＨＯ
実施例１２の段階３もしくは４からのいずれかの化合物（４．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍｌ）中−７８℃溶液にオゾンを通気した。次いで、反応混合液に窒素を１０分間フラッシュした。ジメチルスルホキシド（１．４６ｍｌ，２０ｍｍｏｌ）をー７８℃で添加し、そして反応混合液を０℃で３０分間撹拌した。反応混合液を真空濃縮して白色泡状物を得て、これを、ＴＨＦ中化合物（４０ｍｌ，４．０ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２．６２ｇ，１０．ｍｍｏｌ）溶液を５５℃で２．５時間加熱することによって、さらなる精製なしに使用した。反応混合液を真空濃縮して白色泡状物を得た。シリカゲルでのクロマトグラフィー（１：１アセトン−ヘキサン、次いで７５：２５：０．５アセトン−ヘキサン−トリエチルアミン）により白色固体としての所望の化合物を得た。
【０２０２】
Ｃ．アリル→−ＣＨ２ＣＨ＝ＮＯＨ
Ｒａが−ＣＨ２ＣＨＯであるＢにおいて生成した化合物（０．０８ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（５ｍｌ）に、トリエチルアミン（３１μｌ、０．２２５ｍｍｏｌ）およびヒドロキシルアミン塩酸塩（７．７ｍｇ，０．１１２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合液を周囲温度において６時間撹拌した。反応混合液を酢酸エチル中に採取し、そして５％重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして真空濃縮して澄明ガラス状物を得た。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９５：５：０．５  ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により白色固体としての化合物を得た。
【０２０３】
Ｄ．−ＣＨ２ＣＨ＝ＮＯＨ→−ＣＨ２ＣＮ
ＴＨＦ（５ｍｌ）中Ｃにおいて生成した化合物（０．２６７ｍｍｏｌ）の窒素下の溶液にジイソプロピルカルボジイミド（８３μｌ，０．５３４ｍｍｏｌ）およびＣｕＣｌ（２．７ｍｇ，０．０２７ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合液を周囲温度において一夜撹拌した。反応混合液を酢酸エチル中に採取し、そして５％重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして真空濃縮して澄明ガラス状物を得た。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９５：５：０．５  ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により白色固体としての所望の化合物を得た。
【０２０４】
Ｅ．−ＣＨ２ＣＨＯ→−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２
Ｂにおいて生成した化合物（０．２７６ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（１０ｍｌ）に、酢酸アンモニウム（２１２ｍｇ，２．７６ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合液を０℃に冷却した。ホウ水素化シアノナトリウム（３４ｍｇ，０．５５３ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合液を０℃において３０時間撹拌した。反応混合液を酢酸エチル中に採取し、そして５％炭酸ナトリウム水溶液、２％トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして真空濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９０：１０：０．５ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により白色固体としての所望の化合物を得た。
【０２０５】
Ｆ．−ＣＨ２ＣＨＯ→−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２−フェニル
Ｂにおいて生成した化合物（０．２００ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）中０℃溶液に、酢酸（１１４μｌ，２．００ｍｍｏｌ）およびベンジルアミン（２１８μｌ，２．００ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合液を１０分間撹拌した。ホウ水素化シアノナトリウム（２４．８ｍｇ，０．４００ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合液を１６時間撹拌した。次いで、さらなるホウ水素化シアノナトリウム（２４．８ｍｇ，０．４００ｍｍｏｌ）を添加し、そして撹拌を５時間継続した。反応混合液を酢酸エチル中に採取し、そして５％炭酸ナトリウム水溶液、２％トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして真空濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９５：５：０．５ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）と続く第２回クロマトグラフィー（５０：５０：０．５アセトン−ヘキサン−トリエチルアミン）により白色泡状物としての所望の化合物を得た。
【０２０６】
Ｇ．−ＣＨ２ＣＨＯ→−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２−フェニル
Ｂにおいて生成した化合物（０．２００ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）中０℃溶液に、酢酸（１１４μｌ，２．００ｍｍｏｌ）およびフェネチルアミン（２１８μｌ，２．００ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合液を１０分間撹拌した。ホウ水素化シアノナトリウム（２４．８ｍｇ，０．４００ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合液を１６時間撹拌した。反応混合液を酢酸エチル中に採取し、そして５％炭酸ナトリウム水溶液、２％トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして真空濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９０：１０：０．５ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により所望の化合物を得た。
【０２０７】
Ｈ．−ＣＨ２ＣＨＯ→−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ（ＣＯ２ＣＨ３）ＣＨ２−フェニル
Ｂにおいて生成した化合物（０．２００ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）中０℃溶液に、Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（１２９ｍｇ，０．６００ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合液を１０分間撹拌した。ホウ水素化シアノナトリウム（２４．８ｍｇ，０．４００ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合液を２２時間撹拌した。反応混合液を酢酸エチル中に採取し、そして５％炭酸ナトリウム水溶液、２％トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして真空濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９５：５：０．５ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により所望の化合物を得た。
【０２０８】
Ｉ．−ＣＨ２ＣＨＯ→−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２−（４−ピリジル）
所望の化合物を、フェネチルアミンを４−アミノメチルピリジンに代える以外は、Ｇにおける方法にしたがって生成した。
【０２０９】
Ｊ．−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２→−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２−（４−キノリル）
メタノール（２ｍｌ）中Ｅにおいて生成した化合物（０．１５ｍｍｏｌ）の溶液に、４−キノリンカルボキシアルデヒド（２３ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、酢酸（８．６μｌ，０．１５ｍｍｏｌ）およびホウ水素化シアノナトリウム（９．４ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合液を１５時間撹拌した。反応混合液を酢酸エチル中に採取し、そして５％炭酸ナトリウム水溶液、２％トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン水溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして真空濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９５：１０：０．５ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により所望の化合物を得た。
【０２１０】
Ｋ．アリル→−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ−フェニル
アセトニトリル（５ｍｌ）中、実施例１２において作成した２’保護化合物（１．００ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（２２ｍｇ，０．１００ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（５２ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）の窒素下の溶液に、ヨードベンゼン（２２０μｌ，２．００ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２８０μｌ，２．００ｍｍｏｌ）を添加し、そして混合液を−７８℃に冷却、脱気し、そして密閉した。次いで、反応混合液を０．５時間６０℃に加温し、そして８０℃で１２時間撹拌し、酢酸エチル中に採取し、そして５％重炭酸ナトリウム水溶液で２回、２％トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン水溶液で１回およびブラインで１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして真空濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィー（９５：５：０．５ジクロロメタン−メタノール−アンモニア）により所望の化合物を得た。
【０２１１】
脱保護はメタノール中での加熱によって実施した。
【０２１２】
化合物１０の他の実施態様は、Ｒ２がＨであり；Ｒ１３がプロピル、ブチル、ベンジル、ビニル、３−ブテニル、２−フルオロエチル、２−アジドエチルもしくは３−ヒドロキシブチルである化合物を含む。他の実施態様は、Ｒａが表１に列挙したメンバーであるそれらの化合物を含む。
【０２１３】
【表１】
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【０２１４】
実施例１４
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ  １１，１２−サイクリックカルバメートの製造
Ａ．６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−１５−メチル−エリスロマイシンＡ
６−Ｏ−アリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（６．５８ｇ）および０．５ＮＨＣｌ  １２５ｍｌの混合液を、周囲温度において２０時間撹拌した。ｐＨを６ＮＮａＯＨの添加によって１０に調整し、そして混合液を酢酸エチル２２５ｍｌ分量により３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。粗生成物をシリカゲルでクロマトグラフィー（３：２トルエン／アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）処理して、純粋な６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ３．０４ｇを得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝６１７を示す。
【０２１５】
Ｂ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−１５−メチル−エリスロマイシンＡ
６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（２．４３ｇ，３．８６ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）および無水安息香酸（１．７８ｇ，７．７２ｍｍｏｌ，２．００ｅｑ）を丸底フラスコに入れ、そしてＮ２をフラッシュさせた。酢酸エチル（１７．５ｍｌ）を添加した。溶液を３．５時間撹拌し、次いでＥｔＯＡｃ４００ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液１５０ｍｌで２回、そして水およびブライン１５０ｍｌで各１回洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（３：１ヘキサン／アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）による精製で、白色固形物としての所望の生成物１．９４ｇ（６８．１％）を得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝７２１を示す。１３Ｃ ＮＭＲ（１００．６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２１９．４，１７４．３，１６５．４，１３５．３，１３２．６，１３０．８，１２９．７，１２８．２，１１７．２，９９．７，８０．７，７９．０，７７．９，７７．７，７５．１，７４．３，７２．３，６９．０，６４．７，６３．３，４５．６，４３．９，４０．７，３７．９，３７．７，３５．７，３２．１，３０．８，２１．１，２０．２，１９．３．１８．１，１６．３，１５．１，１４．０，１２．４，７．７。
【０２１６】
Ｃ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチル−エリスロマイシンＡ
Ｎ−クロロスクシンイミド（０．５１０ｇ，３．８２ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２１３ｍｌに溶解し、そしてＮ２下で−１０℃に冷却した。メチルスルフィド（０．３２８ｍｌ，４．４６ｍｍｏｌ，１．７５ｅｑ）を添加し、そして反応液を１５分間撹拌した。無水ＣＨ２Ｃｌ２１３ｍｌ中２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（１．８７ｇ，２．５５ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）溶液を滴下した。３０分後、新たに蒸留したＥｔ３Ｎ（０．３５５ｍｌ，２．５５ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）を添加し；そして反応液を３０分かけて０℃にした。反応混合液をＥｔＯＡｃ４００ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各１００ｍｌで連続して洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、そしてフラッシュクロマトグラフィー（９：１ヘキサン：アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）で精製して白色固形物としての所望の生成物０．９３１ｇ（４９．９％）を得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳは［Ｍ＋Ｈ］＝＝７１９を示す。１３Ｃ ＮＭＲ（１００．６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２１９．１，２０６．１，１６９．５，１６５．３，１３５．３，１３２．７，１２９．０，１２９．７，１２８．３，１１７．４，１００．７，７８．５，７６．６，７５．３，７４．２，７２．１，６９．２，６９．０，６４．５，６３．７，５０．６，４５．３，４４．８，４０．７，３８．３，３７．８，３１．７，３１．０，２１．１，２０．２，１９．５，１８．１，１６．５，１４．５，１４．０，１２．６，１２．２。
【０２１７】
Ｄ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−Ｏ−メタンスルホニル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ（９０４ｍｇ．１．２４ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）を新たに蒸留したピリジン（４ｍｌ）に溶解し、そして０℃に冷却した。塩化メタンスルホニル（０．４７８ｍｌ，６．１７ｍｍｏｌ，５．００ｅｑ）を滴下した。反応液を周囲温度までもたらし、そして一夜撹拌した。混合液をＥｔＯＡｃ３５０ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液１００ｍｌで反応停止した。層を分離し、そして有機相を水およびブライン各１００ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（４：１ヘキサン：アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）により、白色固形物としての所望の化合物７４１ｍｇ（７４．１％）を得た。１３Ｃ ＮＭＲ（１００．６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２０３．０，１６８．９，１６５．０，１３７．６，１３３．１，１３０．３，１２９．８，１２８．５，１１４．４，１０８．８，１０２．２，９１．１，８４．４，８１．６，７８．８，７２．２，６９．２，６４．３，６３．９，５２．１，４６．６，４５．８，４０．７，３８．８，３８．２，３５．９，３１．８，３０．９，２９．７，２４．８，２１．０，１９．６，１８．２，１５．５，１５．４，１３．８，１３．５。
【０２１８】
Ｅ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１５−メチル−エリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−メタンスルホニル−１５−メチル−エリスロマイシンＡ（７０５ｍｇ．０．８７０ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）をアセトン（３ｍｌ）に溶解し、そして１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（０．６５１ｍｌ，４．３５ｍｍｏｌ，５．００ｅｑ）を滴下した。反応液を周囲温度で６時間撹拌し、次いで濃縮した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（４：１ヘキサン：アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）により、白色固形物としての所望の化合物４８６ｍｇ（７８．０％）を得た。１３Ｃ ＮＭＲ（１００．６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２１０．１，２０８．４，１７０．２，１６５．２，１４１．０，１４０．２，１３６．３，１３２．７，１３０．４，１２９．８，１２８．２，１１５．５，１００．６，８１．０，７８．７，７７．２，７３．８，７２．０，６９．１，６４．６，６３．３，５１．０，４７．４，４０．８，３９．４，３６．２，３１．９，３１．３，２３．６，２１．２，２１．１，２１．０，１９．４，１４．１，１３．９，１３．７，１３．１。
【０２１９】
Ｆ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ  １１，１２−サイクリックカルバメート
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−１０，１１−アンヒドロ−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチル−エリスロマイシンＡ（２２７ｍｇ，０．３１７ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）を新たに蒸留したＴＨＦ１．３ｍｌに溶解し、そしてＮ２下で−１５℃に冷却した。水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散液２５ｍｇ，０．６３４ｍｍｏｌ，２．００ｅｑ）を添加し、そして反応液を１５分間撹拌した。新たに蒸留したＴＨＦ１．３ｍｌ中１，１−カルボニルジイミダゾール（１４０ｍｇ，０．８６６ｍｍｏｌ，３．００ｅｑ）溶液を滴下した。３０分間撹拌後、反応液を１．５時間かけて周囲温度まで暖めた。混合液をＥｔＯＡｃ１００ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各３０ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮して、粗生成物２７５ｍｇ（１００％）を得て、これをＡＣＮ２ｍｌおよび無水ＴＨＦ０．２ｍｌに溶解した。飽和水酸化アンモニウム水溶液（２ｍｌ）添加した。反応液を密閉し、そして２日間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、そして残渣をＥｔＯＡｃ１００ｍｌに再溶解した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各３０ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。粗生成物のフラッシュクロマトグラフィー（４：１ヘキサン：アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）で所望の生成物１８４ｍｇ（７６．５％）を得た。
【０２２０】
実施例１５
式Ｉ［式中、Ｒ６はＹＺ（式中Ｙは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−であり、そしてＺは種々のヘテロアリールである）である］の化合物の製造
製造Ａ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−キノリル）である
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメート（４０ｍｇ，０．０５２８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）−クロロホルム付加物（１４ｍｇ，０．０１４ｍｍｏｌ，０．５ｅｑ）、トリ−ｏ−トリルホスフィン（１７ｍｇ，０．０５５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）および３−ブロモキノリン（７２μｌ，０．５３ｍｍｏｌ，１０ｅｑ）を丸底フラスコに入れ、これにＮ２をフラッシュさせた。脱気アセトニトリル（１ｍｌ）および新たに蒸留したＥｔ３Ｎ（０．０１５ｍｌ，０．１１ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を添加した。反応液を６３時間還流した。混合液を周囲温度まで戻し、そしてＥｔＯＡｃ４０ｍｌで希釈した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各１０ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。粗生成物のフラッシュクロマトグラフィー（５：１→２：１ヘキサン：アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ濃度勾配）により所望の生成物３４ｍｇを得た。
【０２２１】
上記生成物（３４ｍｇ）をメタノール１ｍｌ中に溶解し、密閉し、そして８０℃で１６時間還流した。揮発性物質を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（１：１ヘキサン：アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）により明黄色固形物として所望の生成物（２５ｍｇ，２段階にわたって６１％）を得た。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝７８０．５．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２１７．４４，２０５．３７，１６９．４８，１５７．６９，１４９．７１，１４７．６１，１３２．５１，１２９．９６，１２９．５６，１２９．１５，１２９．０５，１２８．４９，１２８．０５，１２６．７０，１０２．９０，８３．４２，７８．７１，７６．４２，７５．９１，７０．２２，６９．５３，６５．８３，６４．３１，５８．１２，５０．８１，４６．２９，４６．１２，４５．０５，４０．１８（２Ｃ），３９．０５，３７．３１，３１．６４，２８．１９，２１．１５，２０．１８，１９．４３，１８．０５，１４．３８，１４．１１，１３．７６，１３．６３（２Ｃ）。
【０２２２】
製造Ｂ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−（６−フルオロキノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−ブロモ−６−フルオロキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝７９８．５．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２１７．４９，２０５．３６，１６９．５４，１６０．６（ＪＣＦ＝２４８Ｈｚ），１５７．６８，１４９．０５，１４４．６９，１３１．８４，１３１．６４（ＪＣＦ＝９Ｈｚ），１３０．２８，１２９．６３，１２９．３１，１２８．７（ＪＣＦ＝１０Ｈｚ），１１９．２０（ＪＣＦ＝２７Ｈｚ），１１０．８７（ＪＣＦ＝２２Ｈｚ），１０２．９４，８３．４２，７８．７７，７６．４４，７５．９１，７０．２２，６９．５５，６５．８４，６４．２４，５８．０９，５０．８３，４６．３６，４６．０６，４５．０５，４０．１８（２Ｃ）３９．０４，３７．３２，３１．６３，２８．１９，２１．１６，２０．１９，１９．４６，１８．０４，１４．３７，１４．１８，１３．７６，１３．６２（２Ｃ）。
【０２２３】
製造Ｃ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−（６−クロロキノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−ブロモ−６−クロロキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝８１４．５．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２１７．４８，２０５．３５，１６９．５５，１５７．６７，１４９．９０，１４５．９２，１３２．４２，１３１．４９，１３０．８０，１３０．４４，１２９．９２，１２９．４９，１２９．４６，１２８．７１，１２６．５７，１０２．９４，８３．４１，７８．７８，７６．４５，７５．９１，７０．２２，６９．５４，６５．８３，６４．２３，５８．０７，５０．８３，４６．３９，４５．９９，４５．０４，４０．１７（２Ｃ），３９．０３，３７．３２，３１．６２，３１．５３，２８．１８，２１．１６，２０．１７，１９．４９，１８．０４，１４．３６，１４．２１，１３．７６，１３．６１（２Ｃ）。
【０２２４】
製造Ｄ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（４−イソキノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに４−ブロモイソキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝７８１．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２１７．１９，２０５．４３，１６９．７５，１５７．３９，１５２．０７，１４０．７４，１３３．６１，１３０．６５，１３０．４４，１２８．０７，１２７．７２，１２７．０５，１２６．８９，１２２．７７，１０２．８５，８３．２８，７８．７４，７５．７２，７０．２２，６９．５１，６５．８８，６４．４５，５８．１０，５０．９１，４６．０７，４５．０９，４０．１８（２Ｃ）３８．９９，３７．３４，３１．４８，２９．６６，２８．２８，２１．１８，２０．３９，１９．３３，１４．５３，１４．０１，１３．８６，１３．６６，１３．６２。
【０２２５】
製造Ｅ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−ピリジル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−ブロモピリジンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝７３１．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２１７．３９，２０５．２７，１６９．５０，１５７．６１，１４８．８１，１４８．６８，１３２．６３，１３２．１６，１２９．６５，１２８．１８，１２３．４６，１０２．９１，８３．３６，７８．６３，７６．３５，７５．７９，７０．２０，６９．５２，６５．８３，６４．１７，５８．０６，５０．７８，４６．２８，４５．０３，４０．１６（２Ｃ），３８．９６，３７．２９，３１．６４，３１．５２，２８．１９，２２．５８，２１．１４，２０．２１，１９．４２，１８．０４，１．３５，１４．１２，１４．０５，１３．７９，１３．６１（２Ｃ）。
【０２２６】
製造Ｆ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−（６−メチルキノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−ブロモ−６−メチルキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝７９５．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２１７．３７，２０５．３５，１６９．４７，１５７．６５，１４８．８２，１４６．２３，１３６．４５，１３１．８７，１３１．３７，１３０．０９，１２９．５１，１２８．７８，１２８．２２，１２８．０６，１２６．８６，１０２．８７，８３．４０，７８．６８，７５．９１，７０．２０，６９．４７，６５．８３，６４．３３，５８．１１，５０．８１，４６．２８，４５．０４，４０．１５（２Ｃ），３９．０５，３７．３１，３１．６４，２８．２４，２１．５２，２１．１４，２０．１８，１９．４５，１８．０５，１４．３８，１４．１１，１３．７７，１３．６３（２Ｃ）。
【０２２７】
製造Ｇ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−（６−アミノキノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−ブロモ−６−アミノキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。ＥＳ−ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝７９６．
製造Ｈ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−（５−イソオキサゾル−３−イル）チエニル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに５−（イソオキサゾル−３−イル）−２−ブロモチオフェンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２２８】
製造Ｉ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（６−キノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに６−ブロモキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２２９】
製造Ｊ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−キノキサル−６−イル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに６−ブロモキノキサリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３０】
製造Ｋ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（５−（Ｎ−（２−ピリジル）−２−フラミジル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりにＮ−（２−ピリジル）５−ブロモ−２−フルアミドを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３１】
製造Ｌ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（１，８−ナフチリジン）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−Ｂｒ−１，８−ナフチリジンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３２】
製造Ｍ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（１，５−ナフチリジン）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−Ｂｒ−１，５−ナフチリジンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３３】
製造Ｎ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（１，６−ナフチリジン）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−Ｂｒ−１，６−ナフチリジンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３４】
製造Ｏ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（６−プリニル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに６−Ｂｒ−プリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３５】
製造Ｐ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（２−（テトラゾル−５−イル）フェニル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに５−（２−ブロモフェニル）テトラゾールを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３６】
製造Ｑ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−（イソオキサゾル−５−イル）−４−メトキシフェニル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに５−（５−ブロモ−２−メトキシフェニル）イソオキサゾールを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３７】
製造Ｒ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（ウラシル−５−イル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに５−ブロモウラシルを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３８】
製造Ｓ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−（ウラシル−５−イル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに５−（２−ブロモビニル）ウラシルを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２３９】
製造Ｔ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−（６−メトキシキノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに３−ブロモ−６−メトキシキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２４０】
製造Ｕ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（５−キノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに５−ブロモキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２４１】
製造Ｖ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（７−キノリル）である
これは、３−ブロモキノリンの代わりに７−ブロモキノリンを使用して、製造Ａの方法にしたがって製造された。
【０２４２】
製造Ａ−Ｓにおいて作成した化合物の２−フルオロ誘導体
製造Ａ−Ｓにおいて記述される化合物の対応する２−フルオロ誘導体は、それぞれの方法において、２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメートの代わりに２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−２−フルオロ−１５−メチルエリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメートを用いて出発して製造されてもよい。２−フルオロ誘導体についてのＮＭＲデータの具体的例は、Ｒａが−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−（３−キノリル）である製造Ａにおいて作成された化合物に対する２−フルオロ対応物である。ＬＣ／ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＝＝７９８．６．１９Ｆ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３７６ＭＨｚ）：δ−１６３．９３．１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ２１７．９７，２０４．２８（ＪＣＦ＝２７Ｈｚ），１６５．６２（ＪＣＦ＝２３Ｈｚ），１５７．１８，１４９．７１，１４７．７０，１３２．６５，１３０．２５，１２９．５３，１２９．２２，１２９．１２，１２９．０６，１２８．１５，１２８．０８，１２６．７８，１０４．１０，９８．０２（ＪＣＦ＝２０６Ｈｚ），８３．４０，７９．５９，７９．３７，７７．５７，７０．４１，６９．７４，６５．８４，６４．３６，５８．１１，４４．２３，４０．８３（ＪＣＦ＝１．５Ｈｚ），４０．２５（２Ｃ），３９．０４，３７．４５，３１．３７，２８．１６，２５．３０（ＪＣＦ＝２２Ｈｚ），２１．１９，２０．８６，１９．５４，１７．６７，１５．４６（ＪＣＦ＝１．７Ｈｚ），，１３．８２，１３．８０，１３．２９。
【０２４３】
製造Ａ−Ｓにおいて作成した化合物のプロピル誘導体（ここでＹはプロピルである）
プロペニル基がプロピルに還元された対応する化合物は次のように製造されてもよい。製造Ａ−Ｓにおいて製造されたいずれかの化合物（それらのＣ−２フッ素化対応物を含む）を２：１メタノール／酢酸エチル（１００ｍｌ）に溶解した。混合液に窒素をフラッシュし、そして炭素担持の１０％パラジウム（１５０ｍｇ）を添加した。窒素雰囲気を水素と置換し、そして懸濁液をＨ２圧１ａｔｍ下で激しく撹拌した。反応液を薄層クロマトグラフィーによってモニターそ、そして完了した時点で濾過し、そして濃縮乾固した。生成物をシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。
【０２４４】
実施例１６
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメートの製造
Ａ．６−Ｏ−プロパルギル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
テトラヒドロフラン０．１ｍｌ、エーテル０．１ｍｌおよびＤＭＳＯ  ０．１ｍｌ中２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（１００ｍｇ）溶液を、１０℃に冷却し、そして不活性雰囲気下で３−ブロモ−１−（トリメチルシリル）−１−プロピン０．０２８ｍｌと処理した。メチルスルホキシド（０．１９ｍｌ）およびテトラヒドロフラン（０．３８ｍｌ）中１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの混合液を、１時間当たり塩基２．０モル当量の速度で添加した。臭化ＴＭＳ−プロパルギルの追加当量（０．０１４ｍｌ）を０．５および１時間後に添加した。反応を薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、１０：１トルエン／アセトン）によってモニターし、そして塩基２．３モル当量の添加後完了と判定した。反応液を酢酸エチル１００ｍｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３３０ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。粗生成物をシリカゲルでクロマトグラフィー（４０：１ヘキサン／アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）処理して、部分精製された６−Ｏ−（３−トリメチルシリル）プロパルギル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシムを得た。
【０２４５】
アセトニトリル４．４ｍｌ中上記の不純な６−Ｏ−（３−トリメチルシリル）プロパルギル−２’，４”−ビス−Ｏ−トリメチルシリル−１５−メチルエリスロマイシンＡ９−［Ｏ−（１−イソプロポキシシクロヘキシル）］オキシム（０．８８ｇ）溶液を、水２．２ｍｌおよび酢酸２．５ｍｌとともに処理し、そして周囲温度で２４時間撹拌した。混合液を２−プロパノール添加後濃縮し、次いでトルエンの添加後繰り返し濃縮した。この物質を炭酸カリウムおよびメタノール（６ｍｌ）とともに２．５時間撹拌した。混合液を酢酸エチル（２００ｍｌ）で希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して生成物を得た。
【０２４６】
１：１エタノール／水７ｍｌ中得られる生成物および亜硫酸水素ナトリウム（０．５９ｇ）の溶液を、不活性雰囲気下にもたらした。ギ酸（０．０９６ｍｌ）を滴下し、そして混合液を８０℃において５時間撹拌した。周囲温度に冷却後、反応液を６ＮＮａＯＨによってｐＨ１０に調整し、そして酢酸エチル１５０ｍｌ分量により３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して、さらなる転化のために適当な６−Ｏ−プロパルギル−１５−メチルエリスロマイシンＡを得た。純粋な物質はシリカゲルでのクロマトグラフィーによって製造することができる。
【０２４７】
Ｂ．６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
６−Ｏ−プロパルギル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（０．４０ｇ）および０．６ＮＨＣｌ  ６ｍｌの混合液を周囲温度で１７時間撹拌した。ｐＨを６ＮＮａＯＨの添加によって９に調整し、そして酢酸エチル１５０ｍｌを添加した。有機抽出液を飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して、さらなる生成物を得た。粗生成物をシリカゲルでクロマトグラフィー処理して純粋な６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡを得た。
【０２４８】
Ｃ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ
酢酸エチル１．３ｍｌ中６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（０．１６ｇ）および無水安息香酸（０．１２ｇ）溶液を１７時間撹拌し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで連続して洗浄した。溶液をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。粗生成物をシリカゲルでクロマトグラフィー処理して２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡを得た。
【０２４９】
Ｄ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ
Ｎ−クロロスクシンイミド（０．５１０ｇ，３．８２ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２１３ｍｌに溶解し、そしてＮ２下で−１０℃に冷却した。メチルスルフィド（０．３２８ｍｌ，４．４６ｍｍｏｌ，１．７５ｅｑ）を添加し、そして反応液を１５分間撹拌した。無水ＣＨ２Ｃｌ２１３ｍｌ中２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（１．８７ｇ，２．５５ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）溶液を滴下した。３０分後、新たに蒸留したＥｔ３Ｎ（０．３５５ｍｌ，２．５５ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）を添加し、そして反応液を３０分かけて０℃にした。反応混合液をＥｔＯＡｃ４００ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各１００ｍｌで連続して洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、そしてクロマトグラフィーによって精製した。
【０２５０】
Ｅ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−メタンスルホニル−１５−メチル−エリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ（９０４ｍｇ）を新たに蒸留したピリジン（４ｍｌ）に溶解し、そして０℃に冷却した。塩化メタンスルホニル（０．４７８ｍｌ，６．１７ｍｍｏｌ，５．００ｅｑ）を滴下した。反応液を周囲温度までもたらし、そして一夜撹拌した。混合液をＥｔＯＡｃ３５０ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液１００ｍｌで反応停止した。層を分離し、そして有機相を水およびブライン各１００ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより生成物を得た。
【０２５１】
Ｆ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１５−メチルエリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−メタンスルホニル−１５−メチルエリスロマイシンＡ（７０５ｍｇ）をアセトン（３ｍｌ）に溶解し、そして１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−ウンデク−７−エン（０．６５１ｍｌ，４．３５ｍｍｏｌ，５．００ｅｑ）を滴下した。反応液を周囲温度で６時間撹拌し、次いで濃縮した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより生成物を得た。
【０２５２】
Ｇ．２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメート
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−１０，１１−アンヒドロ−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ（２２７ｍｇ）を新たに蒸留したＴＨＦ１．３ｍｌに溶解し、そしてＮ２下で−１５℃に冷却した。水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散液２５ｍｇ，０．６３４ｍｍｏｌ，２．００ｅｑ）を添加し、そして反応液を１５分間撹拌した。新たに蒸留したＴＨＦ１．３ｍｌ中１，１−カルボニルジイミダゾール（１４０ｍｇ）溶液を滴下した。３０分間撹拌後、反応液を１．５時間かけて周囲温度まで暖めた。混合液をＥｔＯＡｃ１００ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各３０ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮し、次いで残渣をＡＣＮ２ｍｌおよび無水ＴＨＦ０．２ｍｌに溶解した。飽和水酸化アンモニウム水溶液（２ｍｌ）添加した。反応液を密閉し、そして２日間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、そして残渣をＥｔＯＡｃ１００ｍｌに再溶解した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各３０ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによりサイクリックカルバメート生成物を得た。
【０２５３】
実施例１７
式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒ６＝Ｏ−３−（キノリン−３−イル）プロプ−２−インイルの化合物の合成
製造Ａ：式（Ｉ）：Ｘ＝Ｈ，Ｒａは−ＣＨ２−ＣＣ−（３−キノリル）である
段階１：２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−１１−アミノ−３−デスクラジノシル−１１−デオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメート（４０ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）−クロロホルム付加物（１４ｍｇ）、トリ−ｏ−トリルホスフィン（１７ｍｇ）、ヨウ化銅および３−ブロモキノリン（７２μｌ，０．５３ｍｍｏｌ，１０ｅｑ）を丸底フラスコに入れ、これにＮ２をフラッシュさせた。脱気アセトニトリル（１ｍｌ）および新たに蒸留したＥｔ３Ｎ（０．０１５ｍｌ，０．１１ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を添加した。反応液を６３時間還流した。混合液を周囲温度まで戻し、そしてＥｔＯＡｃ４０ｍｌで希釈した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブライン各１０ｍｌで連続して洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーにより所望の生成物を得た。
【０２５４】
段階２：上記生成物をメタノール１ｍｌ中に溶解し、密閉し、そして８０℃で１６時間還流した。揮発性物質を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィーにより所望の生成物を得た。
【０２５５】
式Ｉ［式中、Ｒ６はＹＺ（式中Ｙはプロピニルである）である］の化合物の製造
これらの化合物の２−水素および２−フルオロ誘導体は、適当なハロゲン化複素環化合物を３−ブロモキノリンの代わりに使用する以外は、製造Ａの記述と同様にして製造される。マタ、Ｙがプロピルである対応する化合物は、実施例１５の記述のようにプロピニル基を還元することによってこれらの化合物（Ｃ−２フッ素化対応物を含む）から製造されてもよい。Ｒ１３における他の基に関する実施態様は、この実施例および実施例１５の記述と類似する方式で製造できる。
【０２５６】
実施例１８
５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−３，６−ジデオキシ−３−オキソ−１４−ノルエリスロノライドＡの合成
製造Ａ：５−Ｏ−デソサミニル−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４−ノルエリスロノライドＡ
発酵から得られた６−デオキシ−１４−ノルエリスロマイシンＡ，Ｂ，ＣおよびＤの混合物（０．５ｇ）を、ジクロロメタン（６ｍｌ）中に溶解し、そしてクロロトリメチルシラン（０．１４４ｍｌ）および１−トリメチルシリルイミダゾール（０．２０ｍｌ）とともに処理した。１０分後、反応液を１ＮＮａＯＨで処理し、そしてジクロロメタンにより３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して泡状物質を得た。この物質をテトラヒドロフラン（５ｍｌ）に溶解し、そして１，１’−カルボニルジイミダゾール（０．４５ｇ）および水素化ナトリウム（ヘキサンで洗浄された、油中６０％分散液５０ｍｇ）により処理した。混合物を７０℃において１時間加熱し、次いで冷却し、そして１ＮＮａＯＨで処理し、そして酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。得られる生成物混合物をエタノール（０．５ｍｌ）に溶解し、そして水（１ｍｌ）中２％ＨＣｌで処理して３−Ｏ−グリコシル基を除去した。生成物をクロマトグラフィーによって回収した。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ］＋＝５５９を表す。
【０２５７】
製造Ｂ：５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４−ノルエリスロノライドＡ
アセトン（１０ｍｌ）中５−Ｏ−デソサミニル−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４−ノルエリスロノライドＡ（０．５ｇ）溶液を、無水酢酸（０．１０ｍｌ）および炭酸カリウム（０．１５ｇ）により周囲温度で２４時間処理し、そして濾過し、そして蒸発乾固して生成物を得た。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ］＋＝６０１を表す。
【０２５８】
製造Ｃ：５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−３，６−ジデオキシ−３−オキソ−１４−ノルエリスロノライドＡ
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４−ノルエリスロノライドＡ（０．５ｇ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１．０ｇ）溶液を、メチルスルホキシド（１．０ｍｌ）と処理し、そして５℃に冷却した。ジクロロメタン（１０ｍｌ）中トリフルオロ酢酸ピリジニウム（１．０ｇ）溶液を滴下し、そして混合液を５℃で２時間撹拌した。混合液を酢酸エチルで希釈し、水および飽和ＮａＣｌで洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。生成物をクロマトグラフィーによって精製した。質量分光測定は［Ｍ＋Ｈ］＋＝５９９を表す。
【０２５９】
実施例１９
５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−３，６−ジデオキシ−３−オキソ−１４，１５−デヒドロエリスロノライドＡの合成
製造Ａ：５−Ｏ−デソサミニル−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４，１５−デヒドロエリスロノライドＡ
発酵から得られた６−デオキシ−１４，１５−デヒドロエリスロマイシンＡ，Ｂ，ＣおよびＤの混合物（０．５ｇ）を、ジクロロメタン（６ｍｌ）中に溶解し、そしてクロロトリメチルシラン（０．１４４ｍｌ）および１−トリメチルシリルイミダゾール（０．２０ｍｌ）と処理した。１０分後、反応液を１ＮＮａＯＨで処理し、そしてジクロロメタンにより３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発して泡状物質を得た。この物質をテトラヒドロフラン（５ｍｌ）に溶解し、そして１，１’−カルボニルジイミダゾール（０．４５ｇ）および水素化ナトリウム（ヘキサンで洗浄された、油中６０％分散液５０ｍｇ）により処理した。混合液を７０℃において１時間加熱し、次いで冷却し、そして１ＮＮａＯＨで処理し、そして酢酸エチルで３回抽出した。有機抽出液を合わせ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。得られる生成物混合物をエタノール（０．５ｍｌ）に溶解し、そして水（１ｍｌ）中２％ＨＣｌで処理して３−Ｏ−グリコシル基を除去した。生成物をクロマトグラフィーによって回収した。
【０２６０】
製造Ｂ：５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４，１５−デヒドロエリスロノライドＡ
アセトン（１０ｍｌ）中５−Ｏ−デソサミニル−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４，１５−デヒドロエリスロノライドＡ（０．５ｇ）溶液を、無水酢酸（０．１０ｍｌ）および炭酸カリウム（０．１５ｇ）により周囲温度で２４時間処理し、濾過し、そして濃縮乾固して生成物を得た。
【０２６１】
製造Ｃ：５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−３，６−ジデオキシ−３−オキソ−１４，１５−デヒドロエリスロノライドＡ
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−６−デオキシ−１４，１５−デヒドロエリスロノライドＡ（０．５ｇ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１．０ｇ）溶液を、メチルスルホキシド（１．０ｍｌ）とともに処理し、そして５℃に冷却した。ジクロロメタン（１０ｍｌ）中トリフルオロ酢酸ピリジニウム（１．０ｇ）溶液を滴下し、そして混合液を５℃で２時間撹拌した。混合液を酢酸エチルで希釈し、水および飽和ＮａＣｌで洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。生成物をクロマトグラフィーによって精製した。
【０２６２】
実施例２０
５−Ｏ−（２’−アセチルデソサミニル）−１０，１１−アンヒドロ−３，６−ジデオキシ−３−オキソ−１５−メチルエリスロノライドＡの合成
この実施例は、３−ケト１１，１２−カルバメート誘導体を作成するために使用されるＣ−６ヒドロキシルを欠くエリスロマイシン化合物から３−オキソ−１１，１２−アンヒドロ前駆物質を作成する１つの実施態様である。スキーム６は６−デオキシ−１３−プロピル−エリスロマイシンＣについてのこのプロトコールを具体的説明する。
【０２６３】
【化３１】
2004517819.tif 000019
【０２６４】
段階１
ジクロロメタン（５ｍｌ）中化合物６−Ａ（２２０ｍｇ，０．３０７ｍｍｏｌ）溶液に、炭酸カリウム（５０ｍｇ）および無水酢酸（１００μｌ，０．９ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応液を室温で１６時間撹拌した。溶液を濾過し、水酸化ナトリウム（１Ｎ，２５ｍｌ）およびブライン（２５ｍｌ）を添加し、そして水層を酢酸エチルで６回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を真空除去した。粗生成物６−Ｂを次の段階に進めた。
【０２６５】
段階２：
化合物６−Ｂ（反応１からの粗生成物）をピリジン（５ｍｌ）に溶解し、そして塩化メシル（７０μｌ，０．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を−２０℃で２日間撹拌し、水酸化ナトリウム（１Ｎ，２５ｍｌ）およびブライン（２５ｍｌ）に注入し、そして水層を酢酸エチルで６回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を真空除去した。残渣をシリカゲルにおけるクロマトグラフィー（トルエン／アセトン＝３：１，１％水酸化アンモニウム）によって精製して化合物６−Ｃ（１９０ｍｇ，２段階にわたって６８％）を得た。
【０２６６】
段階３：
化合物６−Ｃ（１９０ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）をアセトン（７ｍｌ）中に溶解し、そしてＤＢＵ（６３μｌ，０．４２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応液を室温で一夜撹拌した。混合液を水酸化ナトリウム（１Ｎ，２５ｍｌ）およびブライン（２５ｍｌ）に注入し、そして水層を酢酸エチルで６回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を真空除去した。粗生成物６−Ｄを次の段階に進めた。
【０２６７】
段階４：
化合物６−Ｄ（前段階からの粗生成物）に、塩酸（３０ｍｌ，３Ｎ）およびエタノール（２ｍｌ）を添加し、そして混合液を激しく６時間撹拌した。水酸化ナトリウム（５ｍ，ｌ１０Ｎ）を添加し、そして水層を酢酸エチルで６回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を真空除去した。粗生成物６−Ｅを次の段階に進めた。
【０２６８】
段階５：
ジクロロメタン（５ｍｌ）中化合物６−Ｅ（前段階からの粗生成物）に、無水酢酸（５０μｌ，０．４５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１００ｍｇ）を添加し、そして混合液を激しく９時間撹拌した。反応液を濾過し、水酸化ナトリウム（２０ｍｌ，１Ｎ）およびブライン（２５ｍｌ）を添加し、そして水層を酢酸エチルで６回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を真空除去した。残渣をシリカゲルにおけるクロマトグラフィー（トルエン／アセトン＝３：１，１％水酸化アンモニウム）によって精製して化合物６−Ｆ（１１０ｍｇ，３段階にわたって８９％）を得た。
【０２６９】
段階６：
化合物６−Ｆ（１１０ｍｇ，０．１８４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解し、そしてＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（２２０ｍｇ，０．５３ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を室温で４５分間撹拌した。反応を水酸化ナトリウム（２０ｍｌ，１Ｎ）およびブライン（２５ｍｌ）で停止させ、そして水層を酢酸エチルで６回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を真空除去した。残渣をシリカゲルにおけるクロマトグラフィー（トルエン／アセトン，濃度勾配＝６：１−３：１，１％水酸化アンモニウム）によって精製して化合物６−Ｇ（９４ｍｇ，８６％）を得た。化合物６−Ｇは、前記のように対応する１１，１２カルバメート誘導体を作成するために使用してもよい。
【０２７０】
実施例２１
１−（４−アミノ−２−ブテニル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジンの合成
製造Ａ：（Ｅ）−Ｎ−（４−ブロモ−２−ブテニル）フタルイミド
室温におけるＤＭＦ（５０ｍｌ）中１，４−ジブロモ−２−ブテン（２３ｇ，１０７．９ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１６．３９ｇ，１１８．７ｍｍｏｌ）溶液をカリウムフタルイミド（１０ｇ，５３．９ｍｍｏｌ）と処理した。１０分後、反応混合液を２４時間撹拌させ、濾過し、そして真空濃縮した。得られるオイルを酢酸エチル（２００ｍｌ）で希釈し、飽和一塩基性リン酸ナトリウム水溶液（２ｘ１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空濃縮して赤味のあるオイルを得た。フラッシュクロマトグラフィー（０−２０％酢酸エチル／ヘキサン）による精製により表題の化合物５．７３ｇを得た；質量（ＣＩ）ｍ／ｚ＝３０３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７１】
製造Ｂ：１−［（Ｅ）−４−フタルイミド−２−ブテニル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジンおよび３−［（Ｅ）−４−フタルイミド−２−ブテニル］−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン
室温におけるＤＭＦ（５０ｍｌ）中ＮａＨ（１．０２ｇ，２５．４ｍｍｏｌ）のスラリーを４−アザベンズイミダゾール（２．９０ｇ，２４．４ｍｍｏｌ）と処理した。１０分後、反応混合液をＤＭＦ（５ｍｌ）中（Ｅ）−Ｎ−（４−ブロモ−２−ブテニル）フタルイミド（５．７ｇ，２０．３ｍｍｏｌ）溶液と３０分間処理した。反応混合液を１時間撹拌させ、次いで水（５ｍｌ）を注意深く添加して反応を停止させ、そして反応混合液を真空濃縮した。得られる残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）で希釈し、ブライン（２ｘ２５ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、そして真空濃縮してオフホワイト固形物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（３％ＮＨ４ＯＨを含有する酢酸エチル）による精製により３−［（Ｅ）−４−フタルイミド−２−ブテニル］−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン２．０８ｇを得た。クロマトグラフィーの溶媒を５％メタノール／５％ＮＨ４ＯＨを含有する酢酸エチルに変えて１−［（Ｅ）−４−フタルイミド−２−ブテニル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン１．６６ｇを得た；質量（ＣＩ）ｍ／ｚ＝３１９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７２】
製造Ｃ：１−（４−アミノ−２−ブテニル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン
室温におけるエタノール（１００ｍｌ）中１−［（Ｅ）−４−フタルイミド−２−ブテニル］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン（２．１９ｇ，６．８７ｍｍｏｌ）溶液をヒドラジン一水塩（３．３３ｍｌ，６８．７ｍｍｏｌ）と処理した。１０分後、反応混合液を２時間６０℃に加温し、２５℃に冷却させ、そして氷浴において０℃に再冷却した。得られるスラリーを濾過し、そして濾液を真空濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（６％ＮＨ４ＯＨ／エタノール）による精製により表題の化合物０．９２ｇを得た；質量（ＣＩ）ｍ／ｚ＝２１１（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７３】
実施例２２
式Ｉ［式中、Ｒ６＝ＯＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｈ，Ｒ＝１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブチル］の化合物（表２における化合物Ｋ）
段階１：化合物１２（スキーム３）［式中、Ｒ６＝ＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｈ，Ｒ２＝アセチル］
窒素下、−１０℃におけるＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍｌ）中化合物１１［式中、Ｒ６＝ＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｈ，Ｒ２＝アセチル］（６２５ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）の溶液を、水素化ナトリウム（鉱油中６０重量％，８０ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）と処理した。３０分後、得られる反応混合液を１，１’−カルボニルジイミダゾール（４９０ｍｇ，３．０２ｍｍｏｌ）と処理し、そして反応混合液を−１０℃において２時間撹拌させた。反応混合液を水（３０ｍｌ）により反応を停止させ、そしてエーテル（３ｘ３０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を水（３０ｍｌ）およびブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空濃縮してオフホワイト泡状物としての１２を得た。
段階２：式Ｉ［式中、Ｒ６＝ＯＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｈ，Ｒ＝１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブチル］の化合物
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍｌ）中化合物１２［式中、Ｒａ＝ＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｈ，Ｒ２＝アセチル］（１．００ｍｍｏｌ）および１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブチルアミン（５７０ｍｇ，３．００ｍｍｏｌ）の溶液を、６０℃で２４時間加熱した。反応混合液を室温まで冷却させ、水（３０ｍｌ）で希釈し、そして酢酸エチル（３ｘ３０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を水（２ｘ３０ｍｌ）およびブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして真空濃縮して油状残渣を得た。（Ｒ２がセチルである対応する化合物の精製はフラッシュクロマトグラフィー（１−２％濃度の水酸化アンモニウムを含有するジクロロメタン中０−５％メタノール）によって達成できる。）残渣をメタノール（２０ｍｌ）に溶解し、そして得られる混合液を室温で１８時間撹拌させた。反応混合液を真空濃縮し、そして精製をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（９５：５：０．５ジクロロメタン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）によって達成して表題の化合物（４８７ｍｇ，６１％）を得た。
【０２７４】
実施例２３
式Ｉ［式中、Ｒ６＝ＯＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｆ，Ｒ＝１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブチル］の化合物（表２における化合物Ｏ）
段階１：化合物１９（スキーム２）：Ｒａ＝ＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｈ，Ｒ２＝アセチル
表題の化合物は、化合物１１［式中、Ｒａ＝ＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｆ，Ｒ２＝アセチル］のＣ−２フッ素化対応物が、非フッ素化化合物［式中、Ｒａ＝ＣＨ３，Ｒ１３＝ｎ−プロピル，Ｘ＝Ｈ，Ｒ２＝アセチル］の代わりに使用される以外は、実施例２１において記述されたように製造された。収率＝２５％。同様の方式において、種々のＲ１３置換基（例えば、メチル、ビニル、ブチル、３−ブテニル、２−フルオロエチルおよび２−アジドエチル）および／または種々のＲ６置換基（例えば水素）をもつ対応する化合物を、適当な出発材料を用いて出発して製造できる。
【０２７５】
他のＲ基（Ｒ１３および／またはＲ６における他の置換基をもつ化合物ならびにそれらのＣ−２フッ素化対応物を含む）を有する実施態様は、適当なアミンを置換することによって実施例２２において記述された類似の操作および方法によって製造できる。適当なＲ基の具体的な例は、限定されるものではないが、キノリン−４−イルブチル；４−フェニルイミダゾル−１−イルブチル；４−（ピリジン−３−イル）イミダゾル−１−イルブチル；ピリジン−４−イルブチル；３Ｈ−イミダゾ〔４，５−ｂ］ピリジン−３−イルブチル；１Ｈ−イミダゾ〔４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブチル；１Ｈ−イミダゾ〔４，５−ｃ］ピリジン−１−イルブチル；プリン−７−イルブチル；プリン−９−イルブチル；１Ｈ−イミダゾ〔４，５−ｂ］ピリジン−１−イルブト−２−エニル；および４−（ピリミジン−５−イル）イミダゾル−１−イルブチルを含む。選ばれた化合物のＮＭＲおよび質量分光測定データは表２によって提供される。
【０２７６】
【表２】
2004517819.tif 000020
【０２７７】
【表３】
2004517819.tif 000021
【０２７８】
【表４】
2004517819.tif 000022
【０２７９】
実施例２４
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−２−フルオロ−１５−メチルエリスロマイシンＡの合成
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−アリル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１１−デオキシ−１１−アミノ−１５−メチルエリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメート（１００ｍｇ，０．１３２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）のＴＨＦ溶液（０．５ｍｌ）に、−７８℃においてカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．３ｍｌ，１Ｍ，２．３ｅｑ）のＴＨＦ溶液を添加した。次いで反応混合液を、−６０℃〜−４０℃において２０分間維持し、続いて−７８℃においてＴＨＦ（０．２ｍｌ）中Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド（４６ｍｇ，０．１４６ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を導入した。反応混合液を、−７０℃〜−４０℃において１時間維持し、続いて−７０℃から０℃まで１．５時間内に加温させた。次いで、それをＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水およびブラインで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。粗生成物のフラッシュクロマトグラフィー（４：１ヘキサン：アセトン＋１％Ｅｔ３Ｎ）により、所望の生成物７６ｍｇ（７４％）を得た。１３Ｃ−ＮＭＲ（１００．６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２１７．５，２０３（ｄ，Ｊ＝２７．６Ｈｚ），１６５．５（ｄ，Ｊ＝２３．８Ｈｚ），１６５．２，１５７．５，１３５．４，１３２．９，１３０．４，１２９．８，１２８．３，１１８．０，１０１．７，９８（ｄ，Ｊ＝２０７Ｈｚ），８３．５，７９．１，７８．６，７２．１，６９．４，６４．６，６３．５，５７．５，４４．２，４０．７，４０．４，３８．５，３７．３，３１．４，３１．３，２４．９（ｄ，Ｊ＝２４．３Ｈｚ），２１．０，２０．７，１９．４，１７．７，１５．０，１３．９，１３．７，１３．３。
【０２８０】
実施例２５
２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−２−フルオロ−１５−メチルエリスロマイシンＡの合成
不活性雰囲気下でテトラヒドロフラン中２’−Ｏ−ベンゾイル−６−Ｏ−プロパルギル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−１０，１１−アンヒドロ−１５−メチルエリスロマイシンＡ溶液を−７８℃に冷却し、そしてテトラヒドロフラン中１．０Ｍカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドとともに処理した。混合液を５分間撹拌し、そしてテトラヒドロフラン中Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド溶液を２時間かけて３分量づつ添加した。添加後、反応液を周囲温度まで加温し、さらに５時間維持した。Ｋ２ＣＯ３水溶液を添加し、そして混合液をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機抽出液を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして蒸発した。シリカゲルでのクロマトグラフィーにより生成物を得た。
【０２８１】
実施例２６
１５−（２−（３−キノリル）エチル）−３−デスクラジノシル−３−オキソ−６−Ｏ−メチルエリスロマイシンＡ  １１，１２−サイクリックカルバメート
製造Ａ：１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−オキシム
１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ（２５．７ｇ，２８．９ｍｍｏｌ，１．００ｅｑ）を２−プロパノール４２ｍｌ中に懸濁した。ヒドロキシルアミン（Ｈ２Ｏ中５０重量％，２２．２ｍｌ，３７５ｍｍｏｌ，１３．０ｅｑ）を添加した。混合液を均質になるまで撹拌した。氷ＨＯＡｃを添加した。溶液を５０℃で１１時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３を添加した。混合液を濃縮し、そしてＣＨＣｌ３（４ｘ４００ｍｌ）で抽出し；ＮａＨＣＯ３および水で洗浄した。合わせ水層をＣＨＣｌ３４００ｍｌで逆抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮して粗物質を得た。これを、さらなる精製なしに進めた。
【０２８２】
製造Ｂ：１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−（イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム
先の粗１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−オキシムを無水ＣＨ２Ｃｌ２７２ｍｌ中に溶解し、そして１，１−ジイソプロポキシシクロヘキサン（２９．２ｍｌ，１４０ｍｍｏｌ，４．８６ｅｑ）を滴下した。ＣＨ２Ｃｌ２（３６ｍｌ）中ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（１０．５ｇ，４１．９ｍｍｏｌ，１．４５ｅｑ）溶液を滴下した。ジクロロメタン（２００ｍｌ）を１５時間後に添加した。溶液をＮａＨＣＯ３（２ｘ１００ｍｌ）および水（１００ｍｌ）で洗浄した。合わせ水層をＣＨ２Ｃｌ３１００ｍｌで逆抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。物質をシリカゲルにおいてクロマトグラフィー処理して所望の生成物を得た。
【０２８３】
製造Ｃ：２’，４”−ビス（Ｏ−トリメチルシリル）−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−（イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム
１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−（イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム（２２．２ｇ，２１．３ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２５４ｍｌに溶解し、そして氷／水浴において冷却した。クロロトリメチルシラン（４．０５ｍｌ，３１．９ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）、Ｎ−（トリメチルシリル）−イミダゾール（７．８１ｍｌ，５３．２ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１８ｍｌ）の混合液を滴下した。添加終了後反応液を１５分間撹拌し、ＥｔＯＡｃ６００ｍｌにより停止した。混合液を飽和ＮａＨＣＯ３（２ｘ２００ｍｌ）、水（２００ｍｌ）およびブライン（２００ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮して粗生成物を得て、これをさらなる精製なしに進めた。
【０２８４】
製造Ｄ：２’，４”−ビス（Ｏ−トリメチルシリル）−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−（イソプロポキシシクロヘキシル）オキシム
粗２’，４”−ビス（Ｏ−トリメチルシリル）−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−（イソプロポキシシクロヘキシル）オキシムを無水テトラヒドロフラン（４１ｍｌ）に溶解し、そして１０℃に冷却した。無水メチルスルホキシド（４１．４ｍｌ）および臭化メチル（エーテル中２．０Ｍ，２０．７ｍｌ，４１．４ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を添加した。ＴＨＦ（４１．４ｍｌ，４１．４ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）中１．０Ｍカリウムｔ−ブトキシド溶液を、無水メチルスルホキシド（４１．４ｍｌ）で希釈した。これを、１時間当たり０．５当量の速度で反応混合液に添加した。反応をＴＬＣ（５：１トルエン：アセトン）によってモニターした。反応液を酢酸エチル（２００ｍｌ）および飽和ＮａＨＣＯ３（７０ｍｌ）の添加によって停止した。混合液を分液ロートに移し、酢酸エチル８５０ｍｌで希釈した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブライン（各３００ｍｌ）で洗浄した。得られるエマルジョンをセライトを通して濾過した。次いで、分離した有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮して粗生成物を得て、これをさらなる精製なしに進めた。
【０２８５】
製造Ｅ：６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−オキシム
先の粗２’，４”−ビス（トリメチルシリル）−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−（イソプロポキシシクロヘキシル）オキシムをアセトニトリル（１１０ｍｌ）に溶解した。水（５５ｍｌ）で希釈した氷酢酸（６７ｍｌ）を徐々に添加した。溶液を８時間撹拌した。トルエンおよび２−プロパノールを添加し、そして溶液を濃縮した。次いで生成物をトルエンに溶解し、そして２回濃縮して粗生成物を得て、これをさらなる精製なしに進めた。
【０２８６】
製造Ｆ：６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ
先の粗６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ−９−オキシムおよび亜硫酸水素ナトリウム（２３．１ｇ，１１３ｍｍｏｌ，５．６３ｅｑ）を、コンデンサーを備えた丸底フラスコ中に入れ、そしてＮ２をフラッシュした。エタノール（１４０ｍｌ）および水（１４０ｍｌ）を添加した。ギ酸（３．７５ｍｌ，９５．４ｍｍｏｌ，４．７７ｅｑ）を滴下した。混合液を８０℃において４．５時間撹拌した。溶液を室温まで戻し、飽和ＮａＨＣＯ３を添加した。ｐＨを６ＮＮａＯＨによって９−１０に調整した。次いで混合液を酢酸エチル３ｘ４００ｍｌで抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３、次いで水（各２５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた水相を酢酸エチル（４００ｍｌ）で逆抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮して、さらなる精製なしで進められる粗生成物を得た。純粋な生成物はシリカゲルでのクロマトグラフィーによって得られる。
【０２８７】
製造Ｇ：６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）−３−デスクラジノシルエリスロマイシンＡ
粗６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡを、０．５ＭＨＣｌ  ２８０ｍｌ中で３時間撹拌した。ｐＨを６ＮＮａＯＨで９−１０に調整した。沈殿物を真空濾過によって回収し、そして水で洗浄した。母液を酢酸エチル３ｘ４００ｍｌで抽出した。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３および水で洗浄した。合わせた水相を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。合わせた生成物をシリカゲルでクロマトグラフィー処理して白色固形物としての所望の生成物を得た。
【０２８８】
製造Ｈ：２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）−３−デスクラジノシルエリスロマイシンＡ
６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）−３−デスクラジノシルエリスロマイシンＡ（１１．５ｇ，１５．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を酢酸エチル４０ｍｌに溶解した。酢酸エチル（３５ｍｌ）中無水酢酸（２．９２ｍｌ，３１．０ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）溶液を滴下した。反応液を３０分間撹拌し、次いで濃縮した。物質をシリカゲルでクロマトグラフィー処理して白色固形物としての所望の生成物を得た。
【０２８９】
製造Ｉ：２’−Ｏ−アセチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）−３−デスクラジノシルエリスロマイシンＡ（１０ｇ，１２．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）および１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１６．５１ｇ，８６．１ｍｍｏｌ，６．７ｅｑ）を丸底フラスコ中に合わせて、そしてＮ２をフラッシュした。固形物を無水ＣＨ２Ｃｌ２（６４ｍｌ）に溶解し、そして氷水浴で冷却した。無水ＤＭＳＯ（１５．５ｍｌ，２１８ｍｍｏｌ，１７ｅｑ）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２（４７ｍｌ）中トリフルオロ酢酸ピリジニウム（１２．１４ｇ，６２．９ｍｍｏｌ，４．９ｅｑ）溶液を３時間かけて添加した。溶液を酢酸エチル６００ｍｌで希釈し、そして飽和ＮａＣｌ、水およびブライン（各２００ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィーによって所望の生成物を得た。
【０２９０】
製造Ｊ：２’−Ｏ−アセチル−３−オキソ−３−デスクラジノシル−１１−メタンスルホニル−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−アセチル−３−デスクラジノシル−３−オキソ−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡを、新たに蒸留したピリジン（３５ｍｌ）に溶解し、そして氷水浴中で冷却した。塩化メタンスルホニルを滴下した。反応液を周囲温度までもたらし、そして一夜撹拌した。酢酸エチル（７００ｍｌ）を添加し、そして溶液を飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブライン（各２００ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィーにより所望の化合物を得た。
【０２９１】
製造Ｋ：２’−Ｏ−アセチル−１０，１１−アンヒドロ−３−デスクラジノシル−３−オキソ−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ
２’−Ｏ−アセチル−３−オキソ−３−デスクラジノシル−１１−メタンスルホニル−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ（６ｇ，６．９８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をアセトン（２３ｍｌ）に溶解した。１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（５．２２ｍｌ，３４．９ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）を滴下した。反応液を周囲温度で４時間撹拌し、次いで濃縮した。シリカゲルでのクロマトグラフィーにより所望の化合物を得た。
【０２９２】
製造Ｌ：３−デスクラジノシル−３−オキソ−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡ１１，１２−サイクリックカルバメート
乾燥テトラヒドロフラン中２’−Ｏ−アセチル−１０，１１−アンヒドロ−３−デスクラジノシル−３−オキソ−６−Ｏ−メチル−１５−（２−（３−キノリル）エチル）エリスロマイシンＡの溶液を、−１０℃に冷却したＴＨＦ中ＮａＨ（３ｅｑ）の撹拌懸濁液に添加した。これに、ＴＨＦ／ＤＭＦ（５：３）中カルボニルジイミダゾール（１０ｅｑ．）溶液を添加し、そして２時間撹拌した。反応液を周囲温度まで暖め、濃アンモニア水溶液で希釈し、そして一夜撹拌した。混合液を酢酸エチルで希釈し、そしてＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、そして蒸発した。シリカゲルでのクロマトグラフィーにより生成物を得た。
【０２９３】
実施例２７
イン・ビトロの感受性試験
最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、好気的に増殖した細菌に対する感受性試験のためのＮＣＣＬＳブロス微小希釈操作によって決定した（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ，１９９７．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｔｅｓｔｓ  ｆｏｒ  ｂａｃｔｅｒｉａ  ｔｈａｔ  ｇｒｏｗ  ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ，４ｔｈ  ｅｄ．Ａｐｐｒｏｖｅｄ  ｓｔａｎｄａｒｄ．ＮＣＣＬＳ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ７−Ａ４．Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ，Ｖｉｌａｎｏｖａ，ＰＡ．）。保存溶液を試験当日に調製し、そして適当な一定分量を、陽イオン調節したＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス（ＣＡＭＨＢ）またはヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）試験培地に添加した。２倍連続希釈液を調製し、そしてミクロタイタープレートのウェルに添加した。最終試験濃度は１６〜０．０１５μｇ／ｍｌの範囲であった。ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）およびヘモフィルス・インフルエンゼ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）を除く全ての試験細菌については、一夜プレート培養物から接種された細菌のブロス培養液を３５℃で培養し、次いでＫｉｒｂｙ  Ｂａｕｅｒ標準に調整し、そしてＣＡＭＨＢにおいて希釈して最終種菌濃度約５ｘ１０５ＣＦＵ／ｍｌを達成した。Ｓ．ニューモニエおよびＨ．インフルエンゼのための種菌は、一夜培養プレートからのコロニーを直接懸濁し、濁度を調整し、そして上記のように希釈することによって調製した。Ｓ．ニューモニエ培地は２．５％溶解ウマ血液を補足した。全プレートは、Ｓ．ニューモニエおよびＨ．インフルエンゼでは２０−２４時間、そしてすべての他の細菌では１６−２０時間、周囲大気下で３５℃において培養した。ＭＩＣ終点は、試験細菌の増殖を完全に阻止した試験化合物の最低濃度を読み取ることによって決定した。表３は表２の化合物（実施例２３）についてのＭＩＣ終点を示す。
【０２９４】
【表５】
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【０２９５】
表４は式ＩＩＩの選ばれた化合物についての代表的なＭＩＣ終点を示す。
【０２９６】
【化３２】
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【０２９７】
［式中、ＸおよびＲａは指示したとおりである］
【０２９８】
【表６】
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【国際公開パンフレット】
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2004517819.tif 000147
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004517819.tif 000148
【国際調査報告】
2004517819.tif 000149
2004517819.tif 000150