(57)【要約】新規なアスコルビン酸誘導体およびそれらを含む組成物が提供されている。一般式（Ｉ）の化合物であって、Ｒ1はＣ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基；Ｒ2は次式（ＩＩ）の基、Ｒ5またはＲ6は同じか、または異なり、水素、Ｃ1−Ｃ4のアルキル基を示すか、またはＲ5はＣ1−Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ6は金属カチオンまたはアンモニウムカチオンであり、Ｒ3またはＲ4は同じか、または異なり、水素、Ｃ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基を示す化合物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
2004536872.tif 000008
の化合物であって、
Ｒ1はＣ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基；Ｒ2は次式（ＩＩ）の基、
【化２】
2004536872.tif 000009
Ｒ5またはＲ6は同じか、または異なり、水素、Ｃ1−Ｃ4のアルキル基を示すか、またはＲ5はＣ1−Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ6は金属カチオンまたはアンモニウムカチオンであり、Ｒ3またはＲ4は同じか、または異なり、水素、Ｃ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基を示す、
上記化合物。
【請求項２】
一般式（Ｉ）：
【化３】
2004536872.tif 000010
の化合物
（Ｒ1はＣ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基；Ｒ2は次式（ＩＩ）の基、
【化４】
2004536872.tif 000011
Ｒ5またはＲ6は同じか、または異なり、水素、Ｃ1−Ｃ4のアルキル基を示すか、またはＲ5はＣ1−Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ6は金属カチオンまたはアンモニウムカチオンであり、Ｒ3またはＲ4は同じか、または異なり、水素、Ｃ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基を示す）
を製造する方法であって、
（ｉ）式（ＩＩＩ）の化合物を与えるために、アスコルビン酸の５位および６位の加水分解を保護し、
【化５】
2004536872.tif 000012
（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物を得るために、得られた式（ＩＩＩ）の保護されたアスコルビン酸を一般式Ｒ1Ｈの化合物と反応させ、
【化６】
2004536872.tif 000013
（ｉｉｉ）式（Ｖ）の化合物を得るために、式（ＩＶ）の化合物をリン酸化剤と反応させ、
【化７】
2004536872.tif 000014
および
（ｉｖ）一般式（Ｉ）の化合物を得るために、５位および６位の加水分解の保護を解くために、式（ＶＩ）の化合物を加水分解する、
ことを含む上記方法。
【請求項３】
活性成分として、請求項１で定義した式（Ｉ）の化合物の有効量と許容される担体を任意に含む医薬組成物または化粧品組成物。
【請求項４】
ビタミンＣ欠乏に関連した疾患または状態を治療または管理するための請求項３記載の医薬組成物または化粧品組成物。
【請求項５】
局所用組成物であって、皮膚に適用するのに適した担体を含む請求項３または４に記載の組成物。
【請求項６】
経口用組成物であって、経口投与に適した担体を含む請求項３記載の組成物。
【請求項７】
該活性成分をカプセル化するマイクロカプセルまたはナノカプセルを含む請求項３〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なアスコルビン酸誘導体およびそれらを含む医薬品および化粧品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
下記の参考文献が本発明の技術分野の状況を説明するのに重要と考えられる。
ＥＰ３０６，９０４、ＵＳ５，０９８，９０４、ＵＳ３，６７１，５４９、ＪＰ６３，１０４，９７１、ＪＰ７，０１７，９８９、ＪＰ８，０３４，７９１、ＪＰ９８，３６３，３１６、ＪＰ９８，２０１，２４２、ＪＰ１０，３２４，６７２、ＤＥ３，６１３，５９０およびＤＥ１，８０５，９５８。
【０００３】
一般名ビタミンＣで広く知られているＬ−アスコルビン酸は医薬品、食品添加剤および化粧品に使用されている。Ｌ−アスコルビン酸はその抗酸化作用に関連して広く使用されている。しかし、ビタミンＣは、特に好気性の条件において、また光への曝露によって容易に酸化されるので、純粋なビタミンＣを最終製品に配合することは困難である。従って、アスコルビン酸は、通常、純粋な形で使用するよりもその誘導体が使用される。ラクトンの形のアスコルビン酸は２，３，５および６位の炭素に４つの水酸基を有する。これらの水酸基の化学活性は異なっている。２位と３位の水酸基は２位と３位の炭素を繋ぐ二重結合とともにエンジオール系を形成し、これは酸化に非常に敏感である。この系がアスコルビン酸の酸化分解の原因である。他方、５位と６位の水酸基はむしろ安定なジオール系を形成する。通常のアスコルビン酸の誘導体では水酸基がアルキル、アシル、スルホまたはホスホ含有基に換えられるが、これによって、水または油中のアスコルビン酸の溶解度が影響される。既知のアスコルビン酸の誘導体は２つの群に分けられる。即ち水溶性および油溶性のアスコルビン酸誘導体である。これらの２つの群はその潜在的な用途が異なる。
【０００４】
広く使用されている局所製剤は脂肪酸エステルである６−アスコルビン酸パルミチン酸塩またはステアリン酸塩を含み、脂溶性を有し、水溶性無機酸エステルである２または３マグネシウムアスコルビン酸リン酸塩を含む。６−アスコルビン酸パルミチン酸塩のエンジオール系は保護されておらず、この誘導体は水系で不安定である。それはまた一般に局所製剤に使用される水、油および溶剤に限定された溶解度を有する。２−または３−アスコルビン酸リン酸塩および２，３−ジ−Ｏ−アクリルエステルとのエンジオール系は比較的保護されているが、酸化される可能性がある。更に、それらは通常、皮膚製剤に調和しない極性のある塩の形で製造されなければならない。
【０００５】
これまでにアスコルビン酸およびその誘導体が培養皮膚線維芽細胞でのコラーゲン遺伝子の発現をアップレギュレートすることが見出された。コラーゲンおよびエラスチンの合成に脂質過酸化物またはその酸化応答が介在することは周知である。アスコルビン酸の酸化生成物が蛋白を糖化し、急速に蛋白結合付加物および蛋白架橋を生成する。糖化速度は組織内でのアスコルビン酸の酸化速度に依存する。酸化は角質層に浸透後にだけ始まり、浸透前に始まらないことは重要である。これは早期の酸化を防ぐために、アスコルビン酸が誘導体化されなければならないことを意味する。この場合、アスコルビン酸とその誘導体はコラーゲンとエラスチンの合成を刺激し、皮膚組織の表皮と角質の状態を顕著に改善することができる。
【０００６】
近年、ビタミンおよび他の活性物質を皮膚組成物または化粧品組成物に導入するための重要な段階がなされた。これらの組成物は老化、乾燥、にきびまたは色素異常のような様々な皮膚の問題の特別な治療に用いることができる。様々な組成物に組み入れられたビタミンＣは、酸化に対して、製剤、製剤化された時は貯蔵によって、および皮膚の処置によって強く保護されねばならない。
【０００７】
ＥＰ３０６，９０４はビタミン誘導体を担体に結合することを含むビタミン製剤の分野における他の手法を記載している。担体の１例はリン酸であり、それに例えばアスコルビン酸誘導体およびトコフェロール誘導体のような２つのビタミン誘導体が結合し、抗酸化組成物が得られる。しかし、このジビタミンの形では、遊離形に比べてビタミン誘導体の有効性は低い。ＵＳ５，０９８，８９８はリン酸残基を介してＬ−アスコルビン酸にグリセロールエステルまたはエーテルをカップリングすることを記載している。得られた化合物は良好な抗酸化作用と脂質過酸化阻害活性を示す。しかし、エンジオール系は適切に保護されず、従って、局所製剤のビタミンＣの資源として使用できない。
【０００８】
ＪＰ６３，１０４，９７１およびＤＥ３，６１３，５９０は上述のリン酸化Ｌ−アスコルビン酸に比べて、より光安定性のある２，３−ジ−Ｏ−アシルＬ−アスコルビン酸の合成を開示している。しかし、２，３−ジ−Ｏ−アシル化によって、化合物の水への溶解性が低下するため、生物活性および生物学的接近性が損なわれる。従って、そのような化合物は化粧品、皮膚および他の用途に実際に役立たない。
【０００９】
ＪＰ７，０１７，９８９、ＪＰ８，０３４，７９１、ＪＰ９８，３６３，３１６およびＪＰ９８，２０１，２４２は薬剤の皮膚深部への浸透および皮膚刺激を防ぐケミカルピーリング組成物と皮膚白化組成物へのＬ−アスコルビン酸−２−リン酸塩の使用を開示している。Ｌ−アスコルビン酸の誘導体を含む２−リン酸塩は適切な安定性を示し、その活性を保存する。
【００１０】
ＵＳ３，６７１，５４９とＤＥ１，８０５，９５８はアスコルビン酸とハロゲン化リン,リン酸およびハロゲン化リン酸および対応した酸無水物との直接リン酸化によるＬ−アスコルビル-３-リン酸の合成を開示している。この製造法は大規模な使用に適している。
【００１１】
ＪＰ１０，３２４，６２７は抗がん剤として使用する、２位にリン酸基、ピロリン酸基、トリリン酸基、ポリリン酸基、硫酸基またはグリコシル基を有し、３位にＯＨ基、リン酸基、ポリリン酸基、硫酸基、グリコシル基、アルコキシル基、アルケニルオキシル基またはフェノキシル基を有するＬ−アスコルビン酸誘導体の合成を開示している。安定性の問題は本特許の目的ではなく、新しい薬理活性のみが目的である。従って、２位はエンジオール二重結合の酸化の保護に十分に有効な残基であり、Ｏ−置換しなかった。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は一般式（Ｉ）の化合物を提供する。
【化１】
2004536872.tif 000002
Ｒ1はＣ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基；Ｒ2は次式（ＩＩ）の基、
【化２】
2004536872.tif 000003
Ｒ5またはＲ6は同じか、または異なり、水素、Ｃ1−Ｃ4のアルキル基を示すか、Ｒ5はＣ1−Ｃ4のアルキル基であり、Ｒ6は金属カチオンまたはアンモニウムカチオンであり、Ｒ3またはＲ4は同じか、または異なり、水素、Ｃ2−Ｃ22の飽和または不飽和脂肪酸残基、アミノ酸残基またはＣ1−Ｃ17のアルキル基を示す化合物。
【００１３】
上記式（Ｉ）の化合物は化粧品組成物または医薬品組成物（以降ビタミンＣ組成物と総称する）に含めるのに有用である。従って本発明によって、また本発明のその他の態様によって、式（Ｉ）の化合物と医薬品または化粧品に使用可能な担体、賦形剤または希釈剤とを含む医薬品組成物または化粧品組成物が提供される。本発明による好ましい組成物は皮膚に使用する局所組成物である。更に、本発明によるビタミンＣ組成物は時には経口投与のために製剤化できる。本発明によるビタミンＣ組成物は、例えば医薬品または化粧品の活性成分のような種々の他の成分を含むことができる。アスコルビン酸はその抗酸化性があるので、本発明の組成物に含めてもよい。しかし、時として本発明によるビタミンＣ組成物は式（１）のビタミンＣ誘導体のデリバリーを主な目的とすることができる。
【００１４】
本発明の更に他の態様に従って、次の段階を含む式（Ｉ）の化合物の合成法が提供されている。
（ｉ）アスコルビン酸とＲ7とＲ8（同じか異なる）がＣ1−Ｃ10のアルキル基である一般式Ｒ7Ｒ8ＣＯのケトンとを反応させて、アスコルビン酸の５位および６位の水酸基を保護して、一般式（ＩＩＩ）の化合物を得る段階、
【化３】
2004536872.tif 000004
（ｉｉ）式（ＩＩＩ）の得られた保護されたアスコルビン酸分子とＲ1が上記の意味を有する一般式Ｒ1Ｈの化合物とを反応させて、一般式（ＩＶ）の化合物を得る段階、
【化４】
2004536872.tif 000005
（ｉｉｉ）式（ＩＶ）の化合物と、オキシ塩化リンと、Ｒ6が上に規定した通りで、Ｚがアルカリ金属カチオンである塩Ｒ6−Ｏ−Ｚの混合物とを反応させて、式（Ｖ）の化合物を得る段階、
【化５】
2004536872.tif 000006
（ｉｖ）５-および６-水酸基を脱保護するために、式（Ｖ）の化合物を加水分解して、一般式（Ｉ）の化合物を得る段階。
【００１５】
上述したように、本発明は式（Ｉ）のアスコルビン酸誘導体を提供する。
【化６】
2004536872.tif 000007
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は上記の意味を有する。
【００１６】
これらの誘導体はアスコルビン酸と比べてより安定である。これらの誘導体の安定性は２−および３−水酸基の同時の誘導によって、２−および３−エンジオール系が保護されることによる。同時に式（Ｉ）の誘導体はそれを必要とするヒトの組織への、信頼性のある、適応性のある、効果的なアスコルビン酸の資源として役立つ。これらの化合物は皮膚のような組織中に存在する酵素によるｉｎ  ｓｉｔｕでの加水分解後、リン酸塩、炭素酸またはアミノ酸の資源として役立つ。加水分解後に比較的高い割合の遊離アスコルビン酸を得るためには、式（Ｉ）の化合物の全体の分子量はやや低く保つべきである。従って、５−および６−の水酸基はむしろ安定であり、誘導体は不必要にアスコルビン酸誘導体の分子量を増す可能性があるので、５−および６−の水酸基の誘導体化は必要でないことが好ましいが、必須ではない。そのような分子量の増加は化合物の単位重量当たりの遊離アスコルビン酸の量を減少することができる。しかし、時にはそのような分子量の増加が有益であり得る。
【００１７】
化合物がアスコルビン酸の生物学的に接近可能な資源として役立つためには、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3またはＲ4はそれぞれ独立に、飽和および不飽和脂肪酸、アミノ酸およびリン酸誘導体のような天然の生理学的に調和した部分から選ばれる。
【００１８】
脂肪酸はカプロン酸、パルミチン酸,オレイン酸,リノレイン酸,リノレン酸,アラキドン酸であってもよいが、これらに限定されない。皮膚細胞のような組織中の酵素はそのような誘導体を容易に加水分解でき、加水分解物はすべて、天然の化合物であり、従って生理学的な重要性がある。更にそれらは適度の極性があり、従って水性および親油性の媒体のどちらにも可溶性であり得る。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物はビタミンＣを皮膚に効果的にデリバリーするために化粧品組成物および皮膚組成物に用いることができる。更に、本発明の化合物は経口投与のために製剤化できる。組成物の局所投与は、ゲル、軟膏、サルブ、液体等を含む様々な剤形に調整できるが、これらに限定されない。経口投与するために、本発明の化合物はカプセル、ミクロカプセルまたはナノ粒子、錠剤または液体に製剤化してもよい。製剤の性質は使用目的と式（Ｉ）の特別に使用される化合物の全体的な極性によって変わり得る。例えば式（Ｉ）の極性のある化合物はゲルのような水性製剤に製剤化でき、他方式（Ｉ）のより疎水性の化合物はエマルジョンの形に製剤化できる。錠剤では、活性成分は、例えば必要な圧縮性を有する担体と適切な割合で混合され、所望の形状と大きさに固められる。固体の担体には、例えばリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク，砂糖、ラクトース、デキストリン、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよびポリビニルピロリドンが含まれる。液体製剤には、例えば懸濁物、エマルジョンまたはシロップが含まれる。液体の担体には、例えば水、有機溶剤、医薬品として許容できる油または脂肪の混合物が含まれる。経口投与に適した液体の担体は、例えば水、アルコールおよび油である。
【００２０】
本発明の組成物は式（Ｉ）の化合物の有効量を含む。有効量とは所望の治療または化粧効果を達成するために必要な化合物の量のことである。従って、有効量は所望の治療または化粧効果、治療される状態、治療される状況、治療される対象の性別、性と年齢、投与プログラム、式（Ｉ）の化合物の性質等に依存する。当業者はそれぞれの症例で、限られた、日常的な実験によって、有効量を決定できなければならない。
【００２１】
２，３−置換誘導体の合成は２−，３−エンジオール系を崩壊しないような仕方で行われなければならない。
【００２２】
式（Ｉ）の化合物を含む組成物は細胞（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）へのアスコルビン酸の良好なデリバリーを示す。従って、それらの組成物は本目的のために使用できる。本発明の組成物はまた、細胞または組織中のアスコルビン酸の欠乏に関連した疾患、障害または状態、または細胞または組織中へのアスコルビン酸のデリバリーによって改善する疾患、障害または状態の治療に使用できる。アスコルビン酸の補給で有益な効果得られる可能性がある様々な化粧品への応用もある。
【００２３】
本発明を非制限的実施例によって説明する。
【実施例】
【００２４】
実施例１：  ２−カプリロイル−３−エチル（カルシウム）ホスホリルアスコルビン酸の合成
段階１．  ５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
２０ｇ（０．１２５ｍｏｌ）の無水硫酸銅を６６０ｍＬの乾燥アセトン中の２０ｇ（０．１１４ｍｏｌ）のアスコルビン酸の懸濁物に加えた。反応混合物を室温で２０時間攪拌した。過程をＴＬＣ（クロロホルム−メタノール−水  １０：１０：３）でモニターした。濾過と蒸発後、５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸２２．５７ｇ（９２％）を得た。
【００２５】
段階２．  ２−カプリロイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
塩化カプリロイル（１２．０ｇ、０．０７４ｍｏｌ）を乾燥ピリジン（８０ｍＬ）の５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（１４．５ｇ、０．０６７ｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下して加えた。反応系を０℃で１．５時間攪拌し、過程をＴＬＣ（クロロホルム−メタノール  ３：１）でモニターした。その後氷水（３００ｍＬ）を加え、反応混合物をリン酸（１０ｍＬまで）を用いてｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２ｘ１００ｍＬ）で抽出した。併合した抽出物をｐＨ７まで、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。洗浄した有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、真空下で濃縮した。残渣をヘキサンで洗浄し、真空下で濃縮して、２−カプリロイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸２２．９ｇ（８９％）を得た。
【００２６】
段階３．  ２−カプリロイル−３−エチル（カルシウム）ホスホリルアスコルビン酸の合成
２−カプリロイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（４．１ｇ、０．０１２ｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解し、０℃でトリエチルアミン（１２．４ｍＬ、０．１２２ｍｏｌ）とジエチルクロロリン酸（４．２ｇ、０．０２４ｍｏｌ）を加えた。過程をＨＰＣＬでモニターした。反応混合物を室温で２時間攪拌し、ついで氷水で希釈し、リン酸（１５ｍＬまで）でｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２ｘ１００ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。真空下で溶剤を蒸発し、残渣を乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、ついで０℃で、トリメチルシリルブロマイド（２．２ｇ、０．０１４４ｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で３時間攪拌し、減圧下で溶剤を除去した。残渣を水（３０ｍＬ）に溶解し、溶液を３時間激しく攪拌し、水酸化カルシウムの１Ｍ水溶液でｐＨ７に調整した。溶液を真空下で濃縮し、残渣をメタノール−水（３：２）の混合物から結晶化し、次の物理化学的性質の白色粉末として２−カプロイル−３−エチル（カルシウム）ホスホリルアスコルビン酸２．８５ｇ（５３％）を得た：融点；１８７−１９１℃（分解）；組成：理論値；Ｃ，４２．８６％；Ｈ，５．５８％；Ｐ，６．９２％．Ｃ16Ｈ25Ｏ10ＰＣａ,測定値：Ｃ，４２．７７%；Ｈ，５．６６％；Ｐ，６．７９％．1Ｈ  ＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ6／Ｄ2Ｏ，２００ＭＨｚ）:δ４．５０（１Ｈ），４．０２（１Ｈ），３．７４（２Ｈ）（アスコルビン酸単位），１．１５（ｓ，ＣＨ3）；１．２８［（ｔ，３Ｈ，Ｊ６．８Ｈｚ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）(ＯＣa)のＭｅ］；４．１２［（ｄｄ，２Ｈ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）(ＯＣa)のＣＨ2）；４．１９−４．２５［ｍ，１２Ｈ，ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ2）6（ＣＨ3）］．31Ｐ  ＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ6／Ｄ2Ｏ，８１ＭＨｚ）：δp−１０．５．ＦＡＢ質量スペクトルｍ／ｚ４４８．９（ＭＨ+，Ｃ16Ｈ25Ｏ10ＰＣａは４４８．２を要求する）。
【００２７】
実施例２：  ２−パルミトイル−３−ジエチルホスホリルアスコルビン酸の合成
段階１．  ５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
２０ｇ（０．１１９ｍｏｌ）の無水硫酸銅を４６０ｍＬの乾燥アセトンの１４ｇ（０．０７９ｍｏｌ）のアスコルビン酸の懸濁物に加えた。反応混合物を室温で１６時間攪拌した。過程をＴＬＣ（クロロホルム−メタノール−水  １０：１０：３）でモニターした。濾過と蒸発後、５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸１６．３ｇ（９５％）を得た。
【００２８】
段階２．  ２−パルミトイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
塩化パルミトイル（１２．２ｇ、０．０４４３ｍｏｌ）を乾燥ピリジン（９０ｍＬ）の５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（８．７ｇ、０．０４０３ｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下して加えた。反応系を０℃で２時間攪拌し、過程をＴＬＣ（クロロホルム−メタノール  ３：１）でモニターした。氷水（４００ｍＬ）を加え、反応混合物をリン酸（１５ｍＬまで）を用いてｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２ｘ１５０ｍＬ）で抽出した。併合した抽出物をｐＨ７まで、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。洗浄した有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、真空下で濃縮した。残渣をヘキサンで洗浄し、２−パルミトイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸１６．８ｇ（９２％）を得た。
【００２９】
段階３．  ２−パルミトイル−３−ジエチルホスホリルアスコルビン酸の合成
２−パルミトイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（７．５ｇ、０．０１７ｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、０℃でトリエチルアミン（１６．８ｍＬ、０．１７０ｍｏｌ）とジエチルクロロリン酸（４．９ｇ、０．０３４ｍｏｌ）を加えた。過程をＨＰＣＬでモニターした。反応混合物を室温で２時間攪拌し、ついで氷水で希釈し、リン酸（２５ｍＬまで）でｐＨ３に調整し、ジエチルエーテル（２ｘ１００ｍＬ）で抽出し、未反応物を除去し、その後有機層をＭｇＳＯ4で乾燥した。減圧下で溶剤を蒸発し、残渣を１００ｍＬの冷水で洗浄し、クエン酸の１Ｍ水溶液でｐＨ４に調整し、反応混合物を４０℃で１６時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷やし、酢酸エチル（３ｘ１００ｍＬ）で抽出した。併合した抽出物をｐＨ７まで、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。洗浄した有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、真空下で濃縮した。次の物理化学的性質の白色粉末として２−パルミトイル−３−ジエチルホスホリルアスコルビン酸５．４０ｇ（５９％）を得た：融点；１３９−１４２°Ｃ（分解）；組成：理論値；Ｃ，５６．７３％；Ｈ，８．５５％；Ｐ，５．６４％．Ｃ26Ｈ47Ｏ10Ｐ,測定値：Ｃ，５６．６１％；Ｈ，８．４８％；Ｐ，５．８０％．1Ｈ  ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ3−ＭｅＯＨ−ｄ4，２００ＭＨｚ）:δ４．５２（１Ｈ），４．０１（１Ｈ），３．７３（２Ｈ）（アスコルビン酸単位），１．１８（ｓ，ＣＨ3）；１．２５［（ｔ，３Ｈ，Ｊ６．８Ｈｚ），ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＭｅ］；１．２８［（ｔ，３Ｈ，Ｊ６．８Ｈｚ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＭｅ］４．１３［（ｄｄｄ，２Ｈ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＣＨ2）；４．１７［ｄｄｄ，２Ｈ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＣＨ2］：４．２１−４．２９［ｍ，２８Ｈ，ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ2）14（ＣＨ3）］．31Ｐ  ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ3−ＭｅＯＨ−ｄ4，８１ＭＨｚ）：δp−７．３．ＣＩＭＳ質量スペクトルｍ／ｚ５５０．９（ＭＨ+，Ｃ26Ｈ47Ｏ10Ｐは５５０．４を要求する）
【００３０】
実施例３：  ２−カプリロイル−３−ジカルシウムホスホリル−６−パルミトイルアスコルビン酸の合成
段階１．  ５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
９ｇ（０．０５６ｍｏｌ）の無水硫酸銅を３００ｍＬの乾燥アセトンと５３ｍＬ（０．５１ｍｏｌ）の乾燥２，２ジメトキシプロパン中の９ｇ（０．０５１ｍｏｌ）のアスコルビン酸の懸濁物に加えた。反応混合物を室温で１０時間攪拌した。過程をＴＬＣ（クロロホルム−メタノール−水  １０：１０：３）でモニターした。濾過と蒸発後、５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸１０．６ｇ（９７％）を得た。
【００３１】
段階２  ２−カプリロイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
塩化カプリロイル（６．９ｇ、０．０２ｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（６０ｍＬ）とトリエチルアミン（５３ｍＬ、０．３８０ｍＬ）の５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（８．３ｇ、０．０３８ｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下して加えた。反応系を０℃で２時間攪拌し、過程をＴＬＣ（クロロホルム−メタノール  ３：１）でモニターした。氷水（３００ｍＬ）を加え、反応混合物を、リン酸（１０ｍＬまで）を用いてｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２ｘ１００ｍＬ）で抽出した。併合した抽出物をｐＨ７まで、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。洗浄した有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、真空下で濃縮した。残渣をヘキサンで洗浄し２−カプリロイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸１２．１ｇ（９２％）を得た。
【００３２】
段階３．  ２−カプリロイル−３−（ジカルシウム）ホスホリルアスコルビン酸の合成
２−カプリロイル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（５．７ｇ、０．０１７ｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、０℃でトリエチルアミン（１７．２ｍＬ、０．１７０ｍｏｌ）とジエチルクロロリン酸（７．４ｇ、０．０５１ｍｏｌ）を加えた。過程をＨＰＣＬでモニターした。反応混合物を室温で２時間攪拌し、ついで氷水で希釈し、リン酸（１５ｍＬまで）でｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２ｘ１００ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。減圧下で溶剤を蒸発し、残渣を乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、ついで０℃でトリメチルシリルブロマイド（１０．４ｇ、０．０６８ｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で５時間攪拌し、ついで溶剤を真空下で除去した。残渣を水（３０ｍＬ）に溶解し、溶液を３時間激しく攪拌し、ついで１Ｍ水酸化カルシウム溶液でｐＨ７まで調整した。溶液を真空下で濃縮し、混合物から結晶化し、２−カプリロイル−３−（ジカルシウム）ホスホリルアスコルビン酸３．７３ｇ（５９％）を得た。
【００３３】
段階４．  ２−カプリロイル−３−（ジカルシウム）ホスホリル−６−パルミトイルアスコルビン酸の合成
塩化パルミトイル（３．１ｇ、０．０１０ｍｏｌ）を乾燥ピリジン（４０ｍＬ）中で、２−カプリロイル−３−（ジカルシウム）ホスホリルアスコルビン酸（３．５ｇ、０．０９２ｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下して加えた。反応系を０℃で２時間攪拌し、過程をＨＰＬＣでモニターした。氷水（２００ｍＬ）を加え、反応混合物を、リン酸（１０ｍＬまで）を用いてｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２ｘ１００ｍＬ）で抽出した。併合した抽出物をｐＨ７まで、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。洗浄した有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、真空下で濃縮した。残渣をメタノール−水（１：１）の混合物から結晶化し、次の物理化学的性質の白色粉末として２−カプリロイル−３−（ジカルシウム）ホスホリル−６−パルミトイルアスコルビン酸３．１０ｇ（４７％）を得た。融点；１５７−１６１°Ｃ（分解）；組成：理論値；Ｃ，５１．５８％；Ｈ，７．３１％；Ｐ，４．４４％．Ｃ30Ｈ51Ｏ11ＰＣａ2,測定値：Ｃ、５１．７２％；Ｈ，７．５１％；Ｐ，４．６０％．1Ｈ  ＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ6／Ｄ2Ｏ，２００ＭＨｚ）:δ４．５１（１Ｈ），４．０１（１Ｈ），３．７５（２Ｈ）（アスコルビン酸単位），１．１５（ｓ，ＣＨ3）；１．１８（ｓ，ＣＨ3）；４．１７−４．２２［ｍ，１２Ｈ，ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ2）6（ＣＨ3）］；４．２８−４．３３［ｍ，２８Ｈ，ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ2）14（ＣＨ3）］；31Ｐ  ＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ6／Ｄ2Ｏ，８１ＭＨｚ）：δp−４．９．ＦＡＢ質量スペクトルｍ／ｚ６９８．４（ＭＨ+，Ｃ30Ｈ51Ｏ11ＰＣａ2は６９８．９を要求する）
【００３４】
実施例４：  ２−グリシネート−３−ジエチルホスホリルアスコルビン酸の合成
段階１．  ５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
実施例１（段階１）に記載したように５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸を調製した。
【００３５】
段階２．  ２−グリシネート−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
クロロアセチルクロライド（１．５ｇ、０．０１３ｍｏｌ）を乾燥ピリジン（５０ｍＬ）の５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（２．１６ｇ、０．０１０ｍｏｌ）の溶液に０℃で滴下して加えた。反応系を０℃で１時間攪拌し、過程をＨＰＬＣでモニターした。反応系を０℃で１時間攪拌後、２５％アンモニア（水溶液）１０ｍＬを反応混合物に加え、室温で一昼夜攪拌した。反応混合物を５００ｍＬの冷水で希釈し、クエン酸の１Ｍ水溶液でｐＨ７に調整し、酢酸エチル（３ｘ１００ｍＬ）で抽出した。併合した抽出物をｐＨ７まで、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した。洗浄した有機層を無水ＭｇＳＯ4乾燥し、真空下で濃縮した。残渣をヘキサンで洗浄し、真空下で濃縮して２−グリシネート−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸２．４ｇ（８８％）を得た。
【００３６】
段階３．  ２−グリシネート−３−ジエチルホスホリル−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸の合成
２−グリシネート−５，６−イソプロピリデンアスコルビン酸（２．７３ｇ、０．０１０ｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）に溶解し、０℃でトリエチルアミン（１５．０ｍＬ、０．１０８ｍｏｌ）とジエチルクロロリン酸（２．６ｇ、０．０１５ｍｏｌ）を加えた。反応過程をＨＰＣＬでモニターした。反応混合物を０℃で攪拌し、その後室温で２時間攪拌した。減圧下で溶剤を蒸発し、残渣を５０ｍＬの冷水で希釈し、クエン酸の１Ｍ水溶液でｐＨ４に調整し、５，６−イソプロピリデンの保護を解くために、反応混合物を室温で１６時間攪拌した。反応混合物を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、酢酸エチル（３ｘ１００ｍＬ）で抽出した。併合した抽出物を無水ＭｇＳＯ4乾燥し、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル−ヘキサン（１：１）の混合物から結晶化し、次の物理化学的性質の白色粉末として２−グリシネート−３−ジエチルホスホリルアスコルビン酸１．８９ｇ（５１％）を得た。組成：理論値；Ｃ，３９．０２％；Ｈ，５．４２％；Ｐ，８．４０％．Ｃ12Ｈ20ＮＯ10Ｐ,測定値：Ｃ，３９．２１％；Ｈ，５．５９％；Ｐ，８．２７％．1Ｈ  ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ3−ＤＭＳＯ−ｄ6，２００ＭＨｚ）:δ４．５２（１Ｈ），４．０１（１Ｈ），３．７３（２Ｈ）（アスコルビン酸単位），１．２５［（ｔ，３Ｈ，Ｊ６．７Ｈｚ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＭｅ］；１．２７［（ｔ，３Ｈ，Ｊ６．７Ｈｚ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＭｅ］；２．９３［（ｄｄ，２Ｈ，ＣＨ2，ＣＨ2ＮＨ2］３．２６［ＮＨ2のｂｓ，２Ｈ］；４．１０［ｄｄｄ，２Ｈ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＣＨ2］：４．１５［ｄｄｄ，２Ｈ，ＯＰ（Ｏ）（ＯＥｔ）2のＣＨ2］．31Ｐ  ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｌ3−ＤＭＳＯ−ｄ6，８１ＭＨｚ）：δp−３．４．ＣＩＭＳ質量スペクトルｍ／ｚ３６９．５（ＭＨ+，Ｃ12Ｈ20ＮＯ10Ｐは３６９．２を要求する）。
【００３７】
実施例５：  皮膚への作用。アスコルビン酸−２−カプリレート−３−モノエチルリン酸による初期ヒト包皮線維芽細胞におけるコラーゲン合成の刺激
線維芽細胞を１００μｇ／ｍｌのベータアミノプロピオニトリル、１０μＣｉ［２，３−3Ｈ］プロリンおよびアスコルビン酸（ＡＡ）またはアスコルビン酸−２−カプリレート−３モノエチルリン酸（ＡＡＣＰ）のいずれかを含む１０％のウシ胎児血清を補給されたＤＭＥＭ中で２４ウェルの微小培養プレートに入れた。培養は２４時間インキュベートした。［２，３−3Ｈ］プロリンのペプシン抵抗性の塩で析出した細胞外コラーゲンへの組み入れを測定し、コラーゲン合成での効率の指標として用いた。同じように処理した４回のウェルの結果を平均し、試料中の細胞数について補正した。コラーゲン合成へのＡＡおよびＡＡＣＰの影響を図１に示す。両化合物はヒト包皮線維芽細胞におけるコラーゲン合成の刺激に同様なレベルの活性を示した。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】アスコルビン酸（ＡＡ）または２−カプリレート−３−モノエチルリン酸（ＡＡＣＰ）の異なる濃度への曝露の関数として、コラーゲンの量を％で表した（対照を１００％とする）実験結果の棒グラフを示す。
【図１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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