(57)【要約】腫瘍の成長もしくは転移を抑制または減少するための医薬品の調製用にチアゾリジンジオン誘導体の、単独でまたはRXR作動薬もしくは良く知られた抗腫瘍薬と共同での、使用法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍の成長を抑制または減少するための医薬の製造のための、下記式（Ｉ）：
【化１】
2004525168.tif 000006
（式中、
Aは、CH=CHまたはSであり;
Rは、ナフタレニル、チエニル、またはフェニルから選ばれ、これらは、C1-C3アルキル、CF3、C1-C3アルコキシ、F、Cl、BrまたはOHにより１または２置換されていてもよく；
R1は、HまたはC1-C6アルキルから選ばれれ；
Xは、S、OまたはNR'2から選ばれる、ここにR'はHまたははC1-C6アルキルを示し；
Yは、CHまたはNであり；そして
nは、１〜３の整数である）
により表される化合物、それらのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体もしくは混合物、または医薬として許容できる酸もしくは塩基とこれらの化合物の塩の使用。
【請求項２】
請求項1に記載の化合物の使用であって,
5-{4-[2-(5-メチル-2-フェニルオキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン；
5-{4-[2-(5-メチル-2-(チエン-2-イル)オキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン；
5-{4-[2-(5-メチル-2-フェニルオキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ナフト-1-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
5-{4-[2-(2-(4-フルオロフェニル)-5-メチルオキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
5-{4-[2-(2-(4-クロロフェニル)-5-メチルオキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
5-{4-[2-(5-メチル-2-(4-トリフルオロメチルフェニル)-オキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
5-{4-[2-(2-(4-ヒドロキシフェニル)-5-メチルオキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
5-{4-[2-(5-メチル-2-(チエン-2-イル)-オキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ナフタレン-1-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン；
からなる群から選ばれる、化合物の使用。
【請求項３】
RXRアゴニスト組み合わせての請求項１または２に記載の化合物の使用。
【請求項４】
前記RXRアゴニストが9-シスレチノイン酸（9-cis-retinoic acid）である、請求項３に記載の化合物の使用。
【請求項５】
抗腫瘍剤と組み合わせての請求項１または２に記載の化合物の使用。
【請求項６】
前記抗腫瘍薬が、シスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシン、5-フルオロウラシル、5'-デオキシ-5-フルオロ-N-ペンチルオキシカルボニルシチジン、ドキソルビシンまたはタモキシフェンからなる群から選ばれる、請求項５に記載の化合物の使用。
【請求項７】
転移を抑制または減少するための医薬の製造のための請求項１に記載の式（I）の化合物の使用。
【請求項８】
担体および医薬品賦形剤との混合物として請求項１に記載の式（I）の化合物およびRXR作動薬を含んで成り、該活性成分が100:1〜1:100の比で存在する、医薬品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体(PPAR)ガンマに結合しそして影響するリガンド、並びに腫瘍の成長を抑制もしくは減少するための、単独または他の治療薬と込み合わせてのそれらの療法的使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペルオキシゾーム増殖因子活性化受容体(PPARs)は、ステロイド受容体スーパーファミリーに属し、そして、そのままでリガンド活性化転写因子であり、そして異なるサブタイプおよびアイソマーとして存在する（たとえば、Pershadsingh, H.A., Exp. Opin. Invest. Drugs 8 (1999) 1859-1872; Wilson, T. M., et al., J. Med. Chem. 43 (2000) 527-550; Kersten, S., et al., Nature 405 (2000) 421-424; Rami H.K., and Smith, S.A., Exp. Opin. Ther. Patents 10 (2000) 623-634 およびそこに引用された参照文献を参照のこと）。
【０００３】
PPARsの3種のサブタイプ（PPARアルファ、PPARガンマおよびPPARデルタ）が同定されており、マウスおよびヒトからクローニングされている。３種のアイソタイプ（PPARガンマ１、PPARガンマ２、PPARガンマ３と名付けられた）で存在するPPARガンマは、最も徹底的に研究されており、かつ臨床的に重要であると考えられている。異なる天然および合成配位子の抗糖尿病活性は、この受容体の活性化に関連している。
【０００４】
チアゾリジンジオンは、選択的にPPARガンマを活性化し、そして血液脂質および血糖レベルを低下する経口インシュリン増感剤として働く種類の化合物である。典型的なチアゾリジンジオンは、トログリタゾン、ピオグリタゾン、シグリタゾン、ロシグリタゾン、エングリタゾン、BM 13.1258、BM 15.2054、およびそれらの誘導体である。BM 13.1258およびBM 15.2054のPPARガンマ活性は、Furnsinn, C., et al.（Br. J. Pharmacol. 128 (1999) 1141-1148）によりすでに報告されており、ここに引用により、本明細書に組み入れる。
【０００５】
代謝性疾患分野でPPARガンマアゴニストの認識された重要性に加えて、細胞周期のPPARガンマ依存性変調の発見により、PPARガンマに結合しおよびそれにより活性化する化合物を利用する増殖性疾患の治療に対する非常に多くの異なる取り組み方が開けた。脂肪組織に加えて、PPARガンマは、脂肪肉腫（Iijima, K., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 247 (1998)353-356）、乳癌（Mueller, E., et al., Molecular Cell (1998)465-470; Elstner, E., et al., Proc. Nat. Acad. Sci, USA 95(1998) 8806-8811）、前立腺癌（Kubota, T., et al., Cancer Res. 58(1998) 3344-3352）、および大腸癌（Sarraf, P., et al., Nat. Med. 4(1998) 1046-1052）を含む幾つかの癌細胞系で高度に発現されることが報告されている。
【０００６】
さらに、チアゾリジンジオン類からの特定のPPARガンマアゴニストとしてのトログリタゾンは、幾つかの特許出願（WO 98/25598、WO 00/18234、WO 00/30628）に開示され、および多くの報文に記述されている如く、in vitroおよびin vivoでヒトの癌細胞の成長を抑制することが知られている。さらに、トログリタゾンを含むチアゾリジンジオンは、ヒトの脂肪肉腫細胞の端末の分化を誘導することを示した（Tontonoz, P., et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 94(1997) 237- 241）。悪性細胞の分化は、細胞死仲介機構に反して、癌治療に対する理想的な概念を代表する。
【０００７】
PPARsは、伝統的なステロイド受容体と機能的に性質が異なり、そうしてホモダイマーを形成するために夫々の結合位置に結合しないII型ステロイド受容体に属する。PPARガンマは、ステロイド受容体群、レチノイド酸受容体、すなわちRXRアルファの少なくとも1個の他の1員とヘテロダイマーを形成する(Kliewer, S.A., et.al., Nature 358(1992) 771-774; Tontonoz, P., et al., Mol. Cell. Biol. 15 (1995)351)。
【０００８】
特定のPPARガンマ配位子およびRXRアルファリガンドの組み合わせは両方の受容体を活性化し、分化の付加的な刺激を引き起こし、および癌細胞の成長の相乗的な抑制をもたらす（Tontonoz, P., et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 94(1997)237-241; Elstner, E., et al., Proc. 8806-8811）。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明は、式（I）のチアゾリジンジオンは、in vivoで腫ようの成長を抑制もしくは減少するために、単独でまたは他の治療薬と共同で投与できるという予想外の発見に基づいている。適切な天然または合成リガンドを使用する内皮組織内のPPARガンマの活性化は、新しい血管の生成を抑制し、そうしてこれにより血管新生を抑制することが報告されている。血管新生を減少することにより、腫ようの寸法および成長を、抑制または減少できる。
【００１０】
ひとつの観点において、本発明は、下記式（Ｉ）：
【化１】
2004525168.tif 000002
【００１１】
（式中、
Aは、CH=CHまたはSであり;
Rは、ナフタレニル、チエニル、またはフェニルから選ばれ、これらは、C1-C3アルキル、CF3、C1-C3アルコキシ、F、Cl、BrまたはOHにより１または２置換されていてもよく；
R1は、HまたはC1-C6アルキルから選ばれれ；
Xは、S、OまたはNR'2から選ばれる、ここにR'はHまたははC1-C6アルキルを示し；
Yは、CHまたはNであり；そして
nは、１〜３の整数である）
により表される化合物に関する。
【００１２】
一般式Iの化合物のエナンチオマー、それらのジアステレオマー、それらのラセミ体および混合物、ならびに医薬として許容できる非毒性の無機または有機の酸または塩基との、これらの化合物の生理学的に許容できる塩および溶媒和物も本発明に含まれる。
一般式（I）の化合物は、他の出願に既に開示されており（WO 94/27995およびWO 98/42704）、引用により本明細書に組み入れる。
式（I）の好ましい化合物は、Ａがエチレン基または硫黄であり、Rがチエニル基、無置換もしくは１置換フェニル基であり、R1がメチル基であり、Ｗが酸素であり、Ｘが酸素であり、Ｙが窒素であり、そしてｎが２である化合物である。
【００１３】
最も好ましい化合物は：
(1) 5-{4-[2-(5-メチル-2-フェニルオキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン ＝ BM 13.1258；
(2) 5-{4-[2-(5-メチル-2-(チエン-2-イル)オキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン ＝ BM 15.2054；
(3) 5-{4-[2-(5-メチル-2-フェニルオキサゾル-4-イル)-エトキシ] -ナフチ-1-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
(4) 5-{4-[2-(2-(4-フルオロフェニル)-5-メチルオキサゾル-4-イル)- エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
【００１４】
(5) 5-{4-[2-(2-(4-クロロフェニル)- 5-メチルオキサゾル-4-イル)- エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
(6) 5-{4-[2-(5-メチル-2-(4-トリフルオロメチルフェニル)-オキサゾル-4-イル)- エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
(7) 5-{4-[2-(2-(4-ヒドロキシフェニル)- 5-メチルオキサゾル-4-イル)- エトキシ]-ベンゾ[b]チオフェン-7-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン;
(8) 5-{4-[2-(5-メチル-2-(チエン-2-イル)-オキサゾル-4-イル)-エトキシ]-ナフタレン-1-イルメチル}-チアゾリジン-2,4-ジオン；
である。
【００１５】
新規でありかつWO 94/27995またはWO 98/42704に開示されていない例(7)および(8)は、これらの発明出願に記述されている標準的合成戦略に従って調製された。
例7：  m.p. ＝  127-132℃(分解)
例8：  m.p. ＝  158-159℃
他の観点で、本発明は式（I）のチアゾリジンジオンおよびRXR配位子の相乗的方法での投与に関する。
【００１６】
多種類の天然および合成RXRリガンド、たとえば all-トランス-レチノイン酸（all-trans-retinoic acid、9-シス-レチノイン酸（9-cis-retinoic acid）、フィタン酸（phytanic acid）、フェンレチニド（fenretinide）、タザロテン（tazaotene）、および他のレチノイン酸（retinoic acid）誘導体は、種々の報文および特許に記述および開示されており、従って本発明の方法のRXR作動薬として使用するのに適している既知の化合物である。
【００１７】
製薬的に許容できる剤形を作るために、式（I）の化合物および随意にRXRアゴニストは、適切な医薬品担体物質、芳香剤、香味料、および色素と共に、既知の方法で混合され、たとえば錠剤もしくは被覆錠に成型され、または水もしくは適切な補助剤に加えてたとえばオリブオイルの様な油に懸濁または溶解される。
【００１８】
式（I）の化合物および随意にRXR作アゴニストは、液状もしくは固形で経口または非経口で投与できる。水は、通常注射液用に使用される安定剤、溶解補助剤および/または緩衝液を含む媒体として好ましくは使用される。そのような添加物は、たとえば酒石酸塩または硼酸塩緩衝液、エタノール、ジメチルスルホキシド、錯化剤（たとえばエチレンジアミン4酢酸）、粘度調節用高分子重合体（たとえば液状ポリエチレンオキシド）、または無水ソルビトールのポリエチレン誘導体である。
【００１９】
固体担体物質は、たとえば、澱粉、乳糖、マンニトール、メチルセルロース、滑石、高度に分散した珪酸、高分子量脂肪酸（たとえばステアリン酸）、ゼラチン、寒天、燐酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物性および植物性脂肪または固体高分子(たとえばポリエチレングリコール)である。経口用の適切な処方は、もし望ましければ、香味料および甘味料を含む。
【００２０】
式（I）の化合物および随意にRXRアゴニストは、静脈内もしくは筋肉内、腹腔内、皮下、関節内、滑液内、くも膜下、局所、腫瘍内、腫瘍周辺、病巣内、病巣周辺または吸入経由でも投与されるのに適している。
【００２１】
疾病の予防または治療用投与量は、患者の年齢、健康、体重、疾病の程度、恐らく同時に行われる治療の種類、治療頻度および望ましい効果の種類に依存する。活性化合物の1日当たり用量は、通常体重1kg当たり0.1〜200 mgである。通常0.5〜100 mg/kg/日、好ましくは1〜50 mg/kg/日を1日に1回または数回投与するのが、望ましい結果を得るのに効果的である。式Iの化合物および随意にRXR作動薬は、典型的には100:1から1:100の比で、および好ましくは10:1から1:10の比で、治療薬との混合物として投与される。
【００２２】
式（I）の化合物および随意にRXRアゴニストは、腫瘍性細胞増殖の結果であると発見されている種々の疾病および疾患の治療に有益である。そのような状態は、たとえば乳癌、大腸癌、前立腺癌、および脂肪肉腫を含む。
さらに他の観点で、本発明の方法は、一般式（I）の化合物を、シスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ドセタキセル、パクリタキセル、ブレオマイシン、5-フルオロウラシル、5’-デオキシ-5-フルオロ-N-ペンチルオキシカルボニルシチジン、ドキソルビシン、またはタモキシフェンのような1以上の他の抗腫瘍薬と組み合わせての使用を含む。
【００２３】
式（I）の化合物および通常の抗腫瘍化合物を使用する主要な目的は、潜在的に有毒な化学療法剤の用量を減少するが、一方依然として腫瘍の退縮を引き起こすことにある。一般的にチアゾリジンジオンおよび式（I）の化合物は、非有毒物質として知られる。かくて、通常の抗腫瘍化合物に加えての式Iの化合物の適用は、化学療法剤単独と比較して、同様な効果を得るための有害な化学療法剤の用量を100倍迄も減らすことが期待される。
【００２４】
薬理試験結果
式Iの化合物、典型的にはBM13.1258およびBM15.2054、は、種々の組織起源のヒトの癌細胞たとえば、乳癌、大腸癌および前立腺癌、における細胞増殖を抑制する。さらに、式Iの化合物は、ヒトの異種移植モデルにおける腫瘍増殖を阻止できる。驚いたことに、BM13.1258およびBM15.2054、はこれらのモデルの転移性負荷を減少するが、トログリタゾンはこの効果を示さないことが見出された。
【００２５】
雌のSCIDベージュマウスに、1×106 CX-1のヒト大腸癌細胞を皮下接種した。
42日間、１群当たり10匹に対し、トログリタゾン、BM13.1258またはBM15.2054（0.5%メチルセルロース中懸濁液）を経口で投与した。腫瘍容積（mm3で測定）の発達を45日目に測定した。さらに剖検後、肺を微小転移について組織学的に検査した。腫瘍成長の抑制および肺転移の数の抑制は、100と試験群の腫瘍容積または転移の数をビークル群のそれで除しものとの差を計算し、百分率として表した。化合物単独およびRXR特定作動薬9-シスレチノイン酸との共同でのPPARガンマ刺激活性は、既知の方法に従って決定した（Furnsinn, C., et al., Br. J. Pharmacol, 128(1999)1141-1148）。PPAR仲介遺伝子発現の相対活性化は、DMSO処理細胞(活性化＝1)に比較してx倍の刺激として与えられる。
【００２６】
表１に示された如く、チアゾリジンジオンBM 13.1258の投与は、SCIDベ−ジュマウスの大腸癌の寸法を減少するのに効果的である。この抗腫瘍効果は、トログリタゾンのそれより優れている。
【００２７】
【表１】
2004525168.tif 000003
【００２８】
表2は、BM 15.2054により肺転移の数がビークル群に比較して有意に（p＜0.05）減少することを示す。これに反して、トログリタゾンは、肺転移の数を減少しなかった。
【表２】
2004525168.tif 000004
【００２９】
表３は、式（I）の化合物とRXRアゴニスト9-シスレチノイン酸との組み合わせは、BM 13.1258または BM 15.2054単独より4〜7倍高いPPARガンマ仲介遺伝子発現の刺激をもたらすことを示す。この観察された効果は、相加的であるばかりでなく高度に相乗的である。
【表３】
2004525168.tif 000005
【００３０】
参照文献の表
Elstner, E., et al., Proc.Nat.Acad.Sci., USA 95(1998) 8806-8811
Furnsinn, C., et al., Br.J.Pharmacol. 128(1999) 1141-1148
Iijima, K.,et.al., Biochem.Biophys.Res.Commun.247(1998) 353-356
Kersten, S.et al., Nature 405(2000)421-424
Kliewer, S.A.,et.al., Nature 358(1992)771-774
Kubota, T.,et al., Cancer Res.58 (1998)3344-3352
Mueller,E.,et.al., Molecular Cell(1998)465-470
Pershadsingh, H.A., Exp.Opin.Invest.Drugs 8(1999) 1859-1872
Rami, H. K.,and Smith,S.A., Exp.Opin.Ther.Patents 10(2000)623-634
【００３１】
Saraf, P., et al., Nat.Med.4(1998)1046-1052
Tontonoz,P.,et al., Mol. Cell.Biol. 15(1995)351
Tontonoz,P.,et al., Proc.Nat.Acad.Sci. USA94(1997)237-241
Willson,T.M.,et al.,J.Med.Chem.43(2000)527-550
WO 00/18234
WO 00/30628
WO 94/27995
WO 98/25598
WO 98/42704
【国際公開パンフレット】
2004525168.tif 000007
2004525168.tif 000008
2004525168.tif 000009
2004525168.tif 000010
2004525168.tif 000011
2004525168.tif 000012
2004525168.tif 000013
2004525168.tif 000014
2004525168.tif 000015
2004525168.tif 000016
2004525168.tif 000017
2004525168.tif 000018
2004525168.tif 000019
【国際調査報告】
2004525168.tif 000020
2004525168.tif 000021
2004525168.tif 000022