(57)【要約】任意的にＯ−置換されたグリセロ−ホスホイノシトール誘導体、その類似体、その塩（ここで置換基Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は記載された意味を有する）、その合成および、ｃＰＬＡ２の活性化または過剰刺激のモジュレーターとしてのその薬理学的効果。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
2004513176.tif 000013
の化合物、その鏡像体、ジアステレオマー、ラセミ体、その混合物、その水和物又は溶媒和物：
式中、
Ｉ）　Ｒ’、Ｒ２’、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は互いに同じかまたは異なることができ、
ａ）　Ｈまたは
基Ｃ（Ｏ）Ａ、モノカルボン酸のアシル残基またはジカルボン酸のヘミアシル残基であり、ここでＡは、飽和もしくは１〜４個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であることができ；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、−ＣＯＯＨの中から選択される１個以上の基で置換されており、これらの−ＣＯＯＨは、任意的に塩化されて、−ＣＯＯＭ塩を形成する（Ｍはポイント（ＩＩ）で記載したのと同じ意味を有する）か；または
−　基Ｂであり、ここでＢは、飽和もしくは１〜６個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基；または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アルキルアリールもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であり；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、−ＣＯＯＨの中から選択される１個以上の基で置換されており、これらの−ＣＯＯＨは、任意的に中和されて、−ＣＯＯＭ塩を形成する（Ｍはポイント（ＩＩ）で記載したのと同じ意味を有する）：
（ＩＩ）　Ｍは、薬理学的に許容できる無機元素のカチオンであるか、または価数ｎ＋を有する薬理学的に許容できる有機塩基のカチオンである（ここでｎは、以下のポイント（ＩＩＩ）で記載したのと同じ意味を有する）；
（ＩＩＩ）　ｎは、１または２または３である；
（ＩＶ）　ＸおよびＹは互いに同じかまたは異なり、ＯまたはＳであり；
ここで、ＹがＳであるとき、式（Ｉ）の化合物はまた、それぞれの非中和化合物を包含する。
【請求項２】
式中、Ｍが、
ａ）　 生物学的に許容できる無機カチオンまたは
ｂ）　 価数ｎ＋を有する生物学的に許容できる有機カチオンであり、ここでｎは１または２または３を意味する、
請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ａ）　 Ａが、好ましくは飽和もしくは１不飽和のアルキル基であるとき、１〜８個の炭素原子、好ましくは２〜６個の炭素原子を有する；
ｂ）　 Ａが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、５〜３０個の炭素原子、好ましくは６〜２４個の炭素原子を有する；
ｃ）　 Ａがアリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、４〜１５個の炭素原子、好ましくは４〜８個の炭素原子を有し、かつＮ、ＯおよびＳの中から選択され、好ましくはＮである１〜５個のヘテロ原子、好ましくは１〜３個のヘテロ原子を有する；
ｄ）　 Ｂがアルキルであるとき、１〜８個の炭素原子、より好ましくは２〜６個の炭素原子を有し、飽和であるかまたは１不飽和である；
ｅ）　 Ｂが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、５〜３０個の炭素原子、好ましくは６〜２４個の炭素原子を有する；
ｆ）　 Ｂがアリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、５〜１５個の炭素原子、好ましくは５〜８個の炭素原子を有し、かつＮ、ＯおよびＳの中から選択され、好ましくはＮである１〜５個のヘテロ原子、好ましくは１〜３個のヘテロ原子を有する、
請求項１記載の化合物。
【請求項４】
式中、Ｍが、
ａ）　 クロム、セレン、銅、アルカリ金属元素、アルカリ土類金属、ＺｎおよびＦｅの中から選択される生物学的に許容できる無機カチオン；
ｂ）　 好ましくは、モノ−、ジ−、トリ−もしくはテトラ−アルキルアンモニウム、好ましくはＮ−（２−ヒドロキシエチル）−ジメチルアンモニウム、コリンカチオンもしくはアミノ酸カチオン、好ましくはリシンもしくはアルギニンまたは、モノ−、ジ−、トリ−およびテトラ−ペプチドまたは、キサンチン塩基のカチオン、好ましくはカフェインの中から選択される、生物学的に許容できる有機塩基のカチオンである、請求項２記載の化合物。
【請求項５】
ｃＰＬＡ２の活性化もしくは過剰刺激によって仲介される病変の治療のための、請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物又はその塩化されていない誘導体の、ｃＰＬＡ２の活性化もしくは過剰刺激によって仲介される病変の治療のための薬剤組成物の製造のための使用。
【請求項７】
成長因子ＥＧＦもしくはＮＧＦおよび／またはＮＫ−１受容体および／または、ｃＰＬＡ２を活性化するＧタンパク質と結合される受容体、例えばＡＴＰ受容体および／またはボンベシン受容体の過剰刺激に関連する病変の治療のための、請求項６記載の使用。
【請求項８】
心臓性および敗血症性のショックならびに、ウィルスもしくは細菌の感染の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項９】
呼吸器の病変、例えば急性肺損傷（新生児病変を含む）、慢性閉塞性気管支病（喘息を含む）の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１０】
皮膚科の病変、例えば乾癬、脂漏性皮膚炎、アトピー性皮膚炎および、より一般的には、皮膚の不反応性（また、ＵＶ損傷後の酸化的ストレスを含む）ならびに、眼の病変、例えば緑内障および結膜炎の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１１】
腫瘍の病変、例えば前立腺および腎臓の癌の治療または、ｃＰＬＡ２の活性化に依存する病変の治療および、腎臓の病変の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１２】
細菌感染による歯肉組織の変調および、腸の虚血における粘膜損傷の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１３】
関節の病変、例えば慢性関節リュウマチを含む関節炎および関節症の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１４】
偏頭痛および頭痛、痛みおよび痛覚過敏の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１５】
心臓疾患および、血管再造形に関連する心臓血管の疾病の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１６】
炎症に関連する末梢神経系の病変の治療、毒素の非代謝による神経障害の治療ならびに、中枢神経系、例えばアルツハイマー病、行動変調、例えば精神分裂病うつ病、医原性損傷により引き起こされる病変または毒性剤、例えばコカインにより引き起こされる病変および皮膚の疾患またはスフィンゴミエリンサイクルに関連する変調（遺伝的形態、例えばヘルマンスキー−パドラック症候群およびニーマン−ピック症候群を含む）の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１７】
血管と神経系との間の関門、例えば神経の神経周膜に対する損傷に関連する病変および、血液脳関門の損傷に関連する病変、例えばニューロン浮腫、発作、大脳浮腫および出血、ＴＩＡ（一過性脳虚血）の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１８】
食物摂取疾患に関連する病変、例えば過食症、食欲不振、悪液質、肥満の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項１９】
非代謝的病変、例えば糖尿病および膵臓炎の治療のための、請求項６または７記載の使用。
【請求項２０】
製薬上許容できる賦形剤とともに、活性主剤として少なくとも１種の請求項１〜４のいずれか１項記載の誘導体を含む組成物。
【請求項２１】
経口投与、非経口投与、直腸投与、舌下、静脈内、筋肉内、皮下、局所、皮内、経皮の投与に適する、請求項２０記載の組成物。
【請求項２２】
局所経路が皮膚または眼内である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２３】
投与の経口形態が、粉末、錠剤、丸薬、カプセル、玉、液体懸濁物または、凍結乾燥出発物質に基づく処方物、例えば乾燥シロップである、請求項２１記載の組成物。
【請求項２４】
非経口投与の形態が、凍結乾燥化合物から出発する即座注射用処方物である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２５】
局所投与の形態が、クリーム、軟膏、ゲル、凍結乾燥粉末、溶液または噴霧形態である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２６】
薬剤が獣医用途である請求項６〜２０のいずれか１項記載の使用。
【請求項２７】
前記治療が、病変もしくは変調のタイプ、段階、重症さおよび発現の区切に依存して、かつヒトまたは獣医用途に依存して、治療の各サイクルにつき０．１〜１００ｍｇ／ｋｇで３〜９０日間を包含する活性主剤の投与量を含む、請求項６〜２０または請求項２６のいずれか１項記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、アラキドン酸の放出を抑制するための治療用薬剤の製造のためにグリセロホスホイノシトールを使用すること、グリセロホスホイノシトール構造を有する新規な誘導体およびその製造方法に関する。ホスホリパーゼは、膜のリン脂質の加水分解を触媒し、含まれる化学結合のタイプに従って、ホスホリパーゼＡ１、Ａ２、Ｂ、Ｃ、Ｄに分類される酵素である。
【０００２】
哺乳動物においては、リン脂質のｓｎ２エステル結合からのアラキドン酸の動態化は、サイトゾルのホスホリパーゼＡ２（ｃＰＬＡ２）の活性化、次いで多数の作用物質（ホルモン、神経伝達物質、ニューロペプチドおよび成長因子を含む）により誘発される受容体の活性化によるところが大きい。
【０００３】
作用物質−受容体相互作用によるＰＬＡ２の活性化のメカニズムについて考えると、Ｇ−タンパク質が、２つの別個のメカニズムによって、受容体が誘発する活性化を仲介すると提案されてきた：（ｉ）　ＰＬＡ２との直接相互作用（百日咳毒素での処理はその酵素活性を低下させることがよく知られているので）；または（ｉｉ）　ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）活性化、リン酸化およびマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）によるＰＬＡ２の活性化によって間接的に仲介される。
【０００４】
ホスホリパーゼＡ２の２つのイソ型が哺乳動物において同定されており、それは、１４ｋＤａの分泌性形態および８５ｋＤａのサイトゾル形態（ｃＰＬＡ２）であり、これらは、アミノ酸配列の相同性を分かたず、触媒および調節のメカニズムが異なる。サイトゾルのホスホリパーゼＡ２は、休止細胞、例えば血小板および白血球のサイトゾル中にある：リポ多糖、トロンビンまたはサイトカイン（例えばインターロイキン１β）、腫瘍壊死因子α、しかしまた、ニューロペプチド、例えばタキキニン、ブラジキニンまたは、神経伝達物質、例えばプリン、特にＡＴＰおよび、セロトニン、アドレナリンおよびムスカリン作用物質は、酵素を活性化し、細胞内カルシウム濃度の増加および、タンパク質キナーゼＣによる酵素の急速なリン酸化ならびに、引き続いて、それがリン脂質基質に結合する原形質膜への移動をもたらす。これらの仲介物はまた、酵素の新たな合成を引き起こす（Ｅ．アルマンディ−ブルゲルマイスター（Ａｒｍａｎｄｉ−Ｂｕｒｇｅｒｍｅｉｓｔｅｒ）、Ｕ．タイブズ（Ｔｉｂｅｓ）、Ｂ．Ｍ．カイザー（Ｋａｉｓｅｒ）、Ｗ．Ｇ．フリーベ（Ｆｒｉｅｂｅ）、Ｗ．Ｖ．ショイアー（Ｓｈｅｕｅｒ）、「サイトゾルのホスホリパーゼＡ２の阻害剤による、サイトカイン合成の抑制、インテグリン発現およびコニック炎症（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｙｔｏｃｋｉｎｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， ｉｎｔｅｇｒｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｏｎｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２）」、Ｅｕｒｏｐ． Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、３２６（１９９７）、２３７−２５０）。
【０００５】
Ｇタンパク質、ＰＫＣ、ｃＰＬＡ２系の緊密な相互変調および、脂質およびリゾ脂質（ｌｙｓｏｌｉｐｉｄ）の仲介物の製造におけるｃＰＬＡ２の関与（細胞内シグナリングにおけるグリセロホスホイノシトール−４−ホスフェート（Ｇｌｙｃｅｒｏｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｏｌ−４−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｉｎ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、Ｃ．Ｐ．ベリー（Ｂｅｒｒｉｅ）、Ｍ．ファラスカ（Ｆａｌａｓｃａ）、Ａ．カルベリ（Ｃａｒｖｅｌｌｉ）、Ｃ．イウリシ（Ｉｕｒｉｓｃｉ）およびＤ．コルダ（Ｃｏｒｄａ）、生物影響性脂質（Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ Ｌｉｐｉｄｓ）、バンデルボック（Ｖａｎｄｅｒｂｏｃｋ）ＹＹ／編、プレナム　パブリシングコーポレーション（Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｕｂｌｉｓｃｈｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ニューヨーク、１９９８年）は、ＰＬＡ２を潜在的に重要な薬理学的標的にする。
【０００６】
本出願人はここで、アラキドン酸の放出に付随して生じる物質、すなわちＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトール（ＧＰＩ）がオータコイドであり、さらには、そのカリウム塩、カルシウム塩および亜鉛塩および他の新規な誘導体ならびに化学的な半合成によって得られ、後に記載する一般式（Ｉ）を有する類似体が、ＰＬＡ２のイン　ビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）での活性化の調節によってアラキドン酸の放出に潜在的抑制効果を及ぼし、以下に記載するＰＬＡ２の活性化によって仲介される病変の治療のために有効に使用できることを独創的に見出した。
【０００７】
本発明の目的は、２、３、４、５、６または１’および２’位が任意的にＯ−置換された、グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールの誘導体および類似体であり、以下の一般式：
【化２】
2004513176.tif 000002
によることを特徴とし、ここで、Ｒ’１、Ｒ’２、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は、互いに同じまたは異なり、ＨまたはＣ（Ｏ）ＡまたはＢであることができ、ここで、Ａ、Ｂ、Ｘ、ＹおよびＭの意味は、以下に詳述する。
【０００８】
本発明はまた、Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトール（ＧＰＩ）およびその塩、特に式（Ｉ）に従う新規な誘導体とのアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属塩、特にカルシウムおよび亜鉛塩を、ＰＬＡ２の活性化または過剰活性化（ｏｖｅｒ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）により仲介される病変の治療のための薬剤の製造のために使用することに関する。
【０００９】
本発明はさらに、ＰＬＡ２の活性化または過剰刺激により仲介される病変、特に敗血症性ショックおよび、ウィルスおよび細菌性の感染、呼吸器の病変、例えば急性肺損傷（新生児の病変を含む）、慢性閉塞性気管支病（喘息を含む）；皮膚科の病変、例えば乾癬、脂漏性皮膚炎、アトピー性皮膚炎および、より一般的には、皮膚の不反応性（ｄｉｓ−ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ）（また、ＵＶ損傷後の酸化的ストレスを含む）；また細菌感染による歯肉組織への損傷；腸虚血；関節の病変、例えば関節炎および関節症（慢性関節リウマチを含む）；眼科の病変、頭痛、血管再造形に関連する心臓血管の病変、腎臓の病変および、特定の受容体および成長因子、例えばＥＧＦ、ＮＧＦの活性化またはタキキニン、たとえばＮＫ受容体の活性化またはプリン（例えばＡＴＰ）、例えばＰ２Ｙの活性化またはニューロペプチド、例えばボンベシンまたはＰＬＡ２を活性化するＧタンパク質と結合した他の受容体の活性化によって仲介されるＰＬＡ２酵素の過剰刺激に関連する任意の病変；腫瘍の病変、例えば前立腺および腎臓の癌、またはともかくＰＬＡ２の活性化に依存する痛みおよび痛覚異常（ｉｐｅｒａｌｇｅｓｉａ）、中枢神経系および末梢神経系の病変および、スフィンゴミエリンサイクルに依存する病変（遺伝形態、例えばヘルマンスキー−パドラック症候群およびニーマン−ピック症候群を含む）；血管と神経系との間の関門、例えば神経および血液脳関門の神経周膜に対する損傷に関連する病変、例えばニューロン浮腫、発作、大脳浮腫および出血、ＴＩＡ（一過性脳虚血）；アルツハイマー病または行動疾患、例えば精神分裂病；非代謝性病変、例えば糖尿病；膵臓炎、食物摂取疾患に関連する病変、例えば過食症、食欲不振、悪液質（ｃａｃｈｅｓｓｉａ）、肥満、うつ病の治療のための適当な賦形剤と関連して、活性成分として少なくとも１種の式（Ｉ）の誘導体を含む薬剤組成物に関する。
【００１０】
その後のアラキドン酸およびその代謝産物の放出の抑制を伴う、ホスホリパーゼＡ２、特にそのサイトゾルのイソ型（ｃＰＬＡ２）の過剰刺激を負に調節することができる剤としての、式（Ｉ）に従うグリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールの誘導体および類似体の特徴および利点は、以下の部分で詳細に説明される。
【００１１】
本発明は、一般式（Ｉ）
【化３】
2004513176.tif 000003
に従う化合物、その鏡像体、ジアステレオマー、ラセミ体、その混合物、その水和物又は溶媒和物に関し、ここで、
【００１２】
Ｉ）　Ｒ’、Ｒ２’、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は互いに同じかまたは異なることができ、
【００１３】
ａ）　Ｈまたは
基Ｃ（Ｏ）Ａ、モノカルボン酸のアシル残基またはジカルボン酸のヘミアシル残基であり、ここでＡは、飽和もしくは１〜４個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であることができ；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、−ＣＯＯＨの中から選択される１個以上の基で置換されていることができ、これらの−ＣＯＯＨは、任意的に中和されて、−ＣＯＯＭ塩を形成する（Ｍはポイント（ＩＩ）で記載したのと同じ意味を有する）か；または
【００１４】
−　基Ｂであり、ここでＢは、飽和もしくは１〜６個の二重結合を有する不飽和の、直鎖もしくは分岐のアルキル基；または、単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基または、アリール、アルキルアリールもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であり；これらの基は任意的に、ケト、ヒドロキシ、アシルアミド、ハロゲン、メルカプト、アルキルチオもしくはアルキルジチオ、−ＣＯＯＨの中から選択される１個以上の基で置換されており、これらの−ＣＯＯＨは、任意的に中和されて、−ＣＯＯＭ塩を形成する（Ｍはポイント（ＩＩ）で記載したのと同じ意味を有する）；
【００１５】
（ＩＩ）　Ｍは、薬理学的に許容できる無機元素のカチオンであるか、または価数ｎ＋を有する薬理学的に許容できる有機塩基のカチオンである（ここでｎは、以下のポイント（ＩＩＩ）で記載した意味を有する）；
【００１６】
（ＩＩＩ）　ｎは、１または２または３に等しい；
【００１７】
（ＩＶ）　ＸおよびＹは互いに同じかまたは異なり、ＯまたはＳであり；
ここで、ＹがＳであるとき、式（Ｉ）の化合物はまた、それぞれの非中和化合物を包含する。
より詳細には：
Ａの説明：
ｉ）　Ａがアルキル基であるとき、好ましくは飽和であるかまたは１不飽和であり、好ましくは１〜８個の炭素原子、好ましくは２〜６個の炭素原子を有する。
【００１８】
ｉｉ）　Ａが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、好ましくは５〜３０個の炭素原子、より好ましくは６〜２４個の炭素原子を有する。
【００１９】
Ａがアリール、アルキルアリールもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、好ましくは４〜１５個の炭素原子、より好ましくは４〜８個の炭素原子を有する。ヘテロ原子は、１〜５個、好ましくは１〜３個である。ヘテロ原子は、Ｎ、ＯまたはＳであり、好ましくはＮである。これらのヘテロ原子Ｎは任意的に中和されて、薬理学的に許容できる有機酸もしくは無機酸との塩を形成することができる。
【００２０】
Ｂの説明：
ｉ）　Ｂがアルキルであるとき、好ましくは飽和であるかまたは１不飽和である。好ましくは１〜８個の炭素原子、より好ましくは２〜６個の炭素原子を有する。
【００２１】
ｉｉ）　 Ｂが単環もしくは多環のアルキルもしくはアルケニル基であるとき、好ましくは５〜３０個の炭素原子、より好ましくは６〜２４個の炭素原子を有する。
【００２２】
Ｂがアリール、アリールアルキルもしくは１個以上のヘテロ原子を有する複素環式基であるとき、好ましくは５〜１５個の炭素原子、より好ましくは５〜８個の炭素原子を有する。ヘテロ原子は、好ましくは１〜５個、より好ましくは１〜３個である。ヘテロ原子は、Ｎ、ＯまたはＳであり、好ましくはＮである。これらのヘテロ原子Ｎは任意的に中和されて、薬理学的に許容できる有機酸もしくは無機酸との塩を形成することができる。
【００２３】
Ｍの説明：
ｉ）　 Ｍが薬理学的に許容できる無機元素のカチオンであるとき、好ましくは、ナトリウム、リチウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、鉄、セレン、クロム、銅の中から選択される。
【００２４】
ｉｉ）　Ｍが薬理学的に許容できる有機塩基のカチオンであるとき、好ましくはモノ−、ジ−、トリ−もしくはテトラ−アルキルアンモニウム、より好ましくはＮ−（２−ヒドロキシエチル）−ジメチルアンモニウム、コリンもしくはアミノ酸、好ましくはリシンもしくはアルギニンのカチオンまたは、モノ−、ジ−、トリ−もしくはテトラ−ペプチドのカチオン、好ましくはカルノシンまたは、キサンチン塩基のカチオン、好ましくはカフェインである。
【００２５】
アシルアミノという語は、好ましくはアセチルアミノ基を意味する。
【００２６】
アルコキシという語は、好ましくはメトキシ−、エトキシ−またはアリルオキシ基を意味する。
ハロゲンという語は、好ましくは塩化物、フッ化物、臭化物またはヨウ化物を意味する。
【００２７】
アリールアルキル基という語は、好ましくはＣ７〜Ｃ９−アリールアルキル基、より好ましくはベンジル基を意味する。
アリール基という語は、好ましくはＣ６〜Ｃ１２−アリール、好ましくはフェニルを意味する。
【００２８】
複素環式基という語は好ましくは、５−または６員環の、飽和、不飽和もしくは芳香族の複素環式基を意味する。
シクロアルキルまたはシクロアルキレン基という語は好ましくは、好ましくは５〜３０個の炭素原子、より好ましくは６〜２４個の炭素原子を有する単環もしくは多環を意味する。
【００２９】
ＸおよびＹは互いに同じかまたは異なり、ＯまたはＳであり、好ましくは互いに同じであり、好ましくはＯに等しい。
【００３０】
本発明のさらなる目的は、式（Ｉ）の化合物および関連する非塩化生成物を、ｃＰＬＡ２の活性化もしくは過剰刺激によって仲介される病変、特に先に挙げた病変に関しての治療のために使用することである。
【００３１】
本発明の化合物の製造
本発明の化合物の製造は、好ましくは（これに限定されることはないが）、Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトール（ＧＰＩ）から出発して行われる；硫黄原子を含むＧＰＩの同族体、グリセロホスホチオイノシトールは、以下の実施例に記載された方法に従って、市販の入手可能な中間体から出発して製造されるか、または文献に報告された簡単な方法に従って製造される。ＧＰＩは、カリウム塩の形態で市販の製品として入手可能な公知の物質である。室温で水性溶液のＧＰＩは、中性付近のｐＨ値でのみ安定である。異なるｐＨ値では、分子は加水分解反応に供され、分解する。本明細書に記載された、ＧＰＩの新規な塩の以下の製造方法は、ＧＰＩの構造の安定性を維持するのに有効であると示された。
【００３２】
本明細書に記載された以下の新規なＧＰＩの塩は、主としてカリウム塩から出発して製造されたが、それにもかかわらず、本明細書に記載された以下の方法は、工業的な機会に必要とされる場合にはいつでも異なる塩から出発する任意の新規な誘導体の製造のために適当である。
【００３３】
新規なＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトール塩（ＧＰＩ）の一般的製造方法
方法Ｉ
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトール（ＧＰＩ）の無機塩および有機塩の一般的製造方法は、米国特許第５，３０６，８４０号に従い、簡単には以下のとおりである：水または、水と有機溶媒との混合物中に出発塩を可溶化させること、次いで、４℃の温度でＨ＋形態として生じるカチオン交換樹脂のカラムに施用すること。溶出するＧＰＩ酸形態の溶液を集め、０〜４℃に保持した後、生物学的に許容できる有機もしくは無機のカチオンの塩基でモル対モル中和して、関連する塩を与える。この溶液は、次の処方の操作のためのものとして使用することができるかまたは、凍結乾燥もしくはスプレードライヤーにより減圧下で乾燥して、純粋で乾燥したＧＰＩの塩を固体として得ることができる。
【００３４】
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトール（ＧＰＩ）の−ＯＨ基のアルキルもしくはアシル誘導体の一般的製造方法は、一般に米国特許第５，３０６，８４０号に従い製造されたＧＰＩ塩、一般にカリウム塩もしくは４級アンモニウム、好ましくはｔｅｒｔ−ブチルアンモニウムとの塩から出発して、純有機溶媒または有機溶媒の混合物または有機溶媒と水との混合物中で、１０〜５００ｍｇ／ｍｌ、好ましくは５０〜２００ｍｇ／ｍｌの濃度にて行われる。有機溶媒の中で、以下のものが好ましい：アセトン、２−ブタノン、メチルイソブチルケトン、ジメチルスルホキシド、スルホラン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセチルアミド、ｎ−メチル−２−ピロリドン、ピリジン、テトラヒドロフラン、メチルテトラヒドロフラン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、１，１，１−トリクロロエタン、メタノール、エタノール、２−プロパノール、ブタノール。反応は、−３０℃〜＋１２０℃、好ましくは＋５〜＋４０℃の温度で、１５分間〜４８時間、好ましくは１時間〜１５時間かけて行われる。
【００３５】
詳細な説明のポイントＩで定義した、−Ｃ（Ｏ）Ａ基、モノカルボン酸のアシル基またはジカルボン酸のヘミアシル基を挿入するために、ＰＧＩは、上記酸の活性化した誘導体、好ましくは塩化物、臭化物、混合無水物、環状無水物、活性化したエステル、例えばｐ−ニトロフェニルエステル、スクシンイミジルエステル、アシルイミダゾール、Ｏ−アシルイソ尿素と、好ましくは（限定されないが）有機もしくは無機塩基の存在下で反応する。これらの塩基は好ましくは、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属、好ましくはリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カリウムの炭酸塩、重炭酸塩、酸化物、水酸化物、水素化物およびアルコラート、またはトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、テトラメチルアンモニウムヒドロキシド、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド、ピリジンまたはピコリンである。
【００３６】
詳細な説明のポイントＩで定義したＢ基を挿入するために、ＧＰＩは、式Ｚ−Ｂ［ここで、Ｚはハロゲン（好ましくは塩化物、臭化物もしくはヨウ化物である）またはアルキルスルホネート基、好ましくはメタンスルホネート、ベンゼンスルホネート、ｐ−トルエンスルホネートまたはトリフルオロメタンスルホネートである］の活性化された誘導体と反応する。ＧＰＩとＺ−Ｂとの反応は、好ましくは（限定されないが）無機もしくは有機塩基の存在下で行われる。これらの塩基は好ましくは、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属、好ましくはリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カリウムの炭酸塩、重炭酸塩、酸化物、水酸化物、ヨウ化物およびアルコラート、またはトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、テトラメチルアンモニウムヒドロキシド、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド、ピリジンまたはピコリンである。
【００３７】
同様のやり方で、Ｓ原子を含むＧＰＩの同族体：グリセロホスホチオイノシトールのアルキルまたはアシル誘導体が製造される。
【００３８】
実施例１
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのマグネシウム塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃で集め、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃に冷却し、窒素流を流し、０．２９２ｇの水酸化マグネシウムで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００３９】
反応収率は９８％である。
生成物であるＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのマグネシウム塩の化学的−物理的特性は：
【００４０】
概観　：　白色粉末
分子式　：　（Ｃ９Ｈ１８Ｏ１１Ｐ）２Ｍｇ
分子量　：　６９０．７１
元素分析　：　Ｃ＝３１．３％；Ｈ＝５．２５％；Ｏ＝５０．９６％；Ｐ＝８．９７％、Ｍｇ＝３．５２％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのガラスに施用した；
【００４１】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００４２】
実施例２
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカルシウム塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、０．３７０ｇの水酸化カルシウムで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００４３】
反応収率は９８％である。
【００４４】
生成物であるＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのマグネシウム塩の化学的−物理的特性は：
【００４５】
概観　：　白色粉末
分子式　：　（Ｃ９Ｈ１８Ｏ１１Ｐ）２Ｃａ
分子量　：　７０６．４８
元素分析　：　Ｃ＝３０．６％；Ｈ＝５．１４％；Ｏ＝４９．８２％；Ｐ＝８．７７％、Ｃａ＝５．６７％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのガラスに施用した；
【００４６】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００４７】
実施例３
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールの亜鉛塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、０．５４ｇの炭酸亜鉛塩基で中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００４８】
反応収率は９９％である。
【００４９】
生成物であるＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールの亜鉛塩の化学的−物理的特性は：
【００５０】
概観　：　白色粉末
分子式　：　（Ｃ９Ｈ１８Ｏ１１Ｐ）２Ｚｎ
分子量　：　７３１．７８
元素分析　：　Ｃ＝２９．５４％；Ｈ＝４．９６％；Ｏ＝４８．１％；Ｐ＝８．４７％、Ｚｎ＝８．９３％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００５１】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００５２】
実施例４
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのナトリウム塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、０．５３ｇの炭酸ナトリウム塩基で中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００５３】
反応収率は９８％である。
【００５４】
生成物であるＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのナトリウム塩の化学的−物理的特性は：
【００５５】
概観　：　白色粉末
分子式　：　Ｃ９Ｈ１８Ｏ１１ＰＮａ
分子量　：　３５６．２
元素分析　：　Ｃ＝３０．３５％；Ｈ＝５．０９％；Ｏ＝４９．４１％；Ｐ＝８．７０％、Ｎａ＝６．４５％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００５６】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００５７】
実施例５
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのコリン塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、２．６９ｇのコリンのメタノール溶液４５％で中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００５８】
反応収率は９８％である。
【００５９】
生成物であるＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのコリン塩の化学的−物理的特性は：
【００６０】
概観　：　粉末
式　：　Ｃ９Ｈ１８Ｏ１１Ｐ・Ｃ５Ｈ１４ＮＯ
分子式　：　Ｃ１４Ｈ３２ＮＯ１２Ｐ
分子量　：　４３７．３７
元素分析　：　Ｃ＝３８．４５％；Ｈ＝７．３８％；Ｎ＝３．２０％；Ｏ＝４３．９０％；Ｐ＝７．０８％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００６１】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００６２】
実施例６
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのリシン塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、１．４６ｇのリシンで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００６３】
反応収率は９９％である。
【００６４】
生成物であるＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのリシン塩の化学的−物理的特性は：
【００６５】
概観　：　粉末
式　：　Ｃ９Ｈ１９Ｏ１１Ｐ・Ｃ６Ｈ１４Ｎ２Ｏ２
分子式　：　Ｃ１５Ｈ３３Ｎ２Ｏ１３Ｐ
分子量　：　４８０．４０
元素分析　：　Ｃ＝３７．５０％；Ｈ＝６．９２％；Ｎ＝５．８３％；Ｏ＝４３．３０％；Ｐ＝６．４５％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００６６】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００６７】
実施例７
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのアルギニン塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、１．７４ｇのアルギニンで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００６８】
反応収率は９８％である。
【００６９】
生成物であるＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのアルギニン塩の化学的−物理的特性は：
【００７０】
概観　：　粉末
式　：　Ｃ９Ｈ１９Ｏ１１Ｐ・Ｃ６Ｈ１４Ｎ４Ｏ２
分子式　：　Ｃ１５Ｈ３３Ｎ４Ｏ１３Ｐ
分子量　：　５０８．４２
元素分析　：　Ｃ＝３５．４４％；Ｈ＝６．５４％；Ｎ＝１１．０２％；Ｏ＝４０．９１％；Ｐ＝６．０９％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００７１】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００７２】
実施例８
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのテトラブチルアンモニウム塩の製造
３．７ｇのＧＰＩカリウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの蒸留水に溶かす。溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを１５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、テトラブチルアンモニウムヒドロキシドの１Ｍ水性溶液１０ｍｌで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、凍結乾燥する。
【００７３】
反応収率は９７％である。
【００７４】
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのテトラブチルアンモニウム塩は以下の特性を示す：
概観　：　粉末
式　：　Ｃ９Ｈ１８Ｏ１１Ｐ・Ｃ１６Ｈ３６Ｎ
分子式　：　Ｃ２５Ｈ５４ＮＯ１１Ｐ
分子量　：　５７５．６９
元素分析　：　Ｃ＝５２．１６％；Ｈ＝９．４６％；Ｎ＝２．４３％；Ｏ＝３０．５７％；Ｐ＝５．３８％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶、ＤＭＦに≧１０ｍｇ／ｍｌ
水への溶解性　：　＞１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００７５】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　ＧＰＩ標準に従って、分解生成物は観察されない。
【００７６】
実施例９
過アセチル化されたＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカリウム塩の製造
５．７６ｇのＧＰＩテトラブチルアンモニウム塩（１０ミリモル）を３５ｍｌの無水ＤＭＦに溶かす。混合物を攪拌下で４℃に冷却する。１５ｍｌの無水ピリジンおよび１０ｍｌの無水酢酸を、攪拌下で３０分間かけてゆっくりと滴下して加える。混合物を室温にし、攪拌下で４８時間無水条件に保持する。次に、混合物を真空下で乾燥する。残渣を１０ｍｌのエタノールおよび１００ｍｇのＫＣｌに懸濁させた後、３０ｍｌのジエチルエーテルを添加することによって沈殿させる。得られた残渣を３０ｍｌの水および２０ｇの氷に懸濁させ、３０ｍｌのテトラヒドロフランで３回抽出する。上層を集め、乾燥する。得られた残渣を３０ｍｌのエタノールに溶かし、Ｋ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂１５ｍｌを含むカラムで溶出させる。溶出物を真空下で蒸発させた後、高真空下で乾燥する。
【００７７】
反応収率９０％。
【００７８】
生成物である過アセチル化されたＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカリウム塩の化学的−物理的特性は：
【００７９】
概観　：　粉末
分子式　：　Ｃ２３Ｈ３２Ｏ１８ＰＫ
分子量　：　６６６．５８
元素分析　：　Ｃ＝４１．４４％；Ｈ＝４．８４％； Ｏ＝４３．２１％；Ｐ＝４．６５％；Ｋ＝５．８７％
有機溶媒への溶解性　：　ＤＭＦおよびエタノールに≧１０ｍｇ／ｍｌ
【００８０】
実施例１０
グリセロチオ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカリウム塩［−Ｓ−Ｐ−］
Ｋ．クビアク（Ｋｕｂｉａｋ）らの「ＡＣＳ　シンポジウムシリーズ（ＡＣＳ ＳＹＭＰＯＳＩＵＭ ＳＥＲＩＥＳ）」７１８、ページ１８０により記載されたようにして得られるジアシルグリセロチオホスホリル−イノシトールから出発して化合物を製造する。
【００８１】
１．０ｇのジアシルグリセロチオホスホリル−イノシトールを、窒素雰囲気下で１０ｍｌの無水メタノールに懸濁させる。５０ｍｇのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを添加し、混合物を撹拌下で２０℃に３時間維持する。２６．７ｍｇの酢酸を添加し、混合物を乾燥する。残渣を１０ｍｌの冷水に溶かし、１０ｍｌのジエチルエーテルで抽出する。次に有機相を捨てる。
【００８２】
溶液を４℃に冷却し、サーモスタットで４℃に調温した、Ｈ＋形態で生じるカチオン交換スルホン樹脂５ｍｌを含むカラムに施用する。次に、カラムを５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、ｐＨ７．０まで０．１ＭのＫＯＨで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００８３】
反応収率は９５％である。
【００８４】
生成物であるグリセロチオ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカリウム塩の化学的−物理的特性は：
【００８５】
概観　：　粉末
分子式　：　Ｃ９Ｈ１８Ｏ１０ＰＳＫ
分子量　：　３８８．３８
元素分析　：　Ｃ＝２７．８４％；Ｈ＝４．６７％； Ｓ＝８．２５％；Ｏ＝４１．２０％；Ｐ＝７．９８％；Ｋ＝１０．０７％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　≧１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００８６】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　Ｒｆ＝０．３８。
【００８７】
実施例１１
グリセロチオ−ホスホチオ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカリウム塩［−Ｐ＝Ｓ］
Ｔ．Ｇ．メイヤー（Ｍａｙｅｒ）ら、Ｅｕｒ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． （１９９８）、ページ２９１−２９８により記載された２，３，４，５，６−ペンタ−Ｏ−メトキシメチル−Ｄ−ミオ−イノシトールから出発して合成を行う。
【００８８】
４００ｍｇの２，３，４，５，６−ペンタ−Ｏ−メトキシメチル−Ｄ−ミオ−イノシトール（１ミリモル）を５０ｍｌのテトラヒドロフラン／ジクロロメタン１：４に溶かし、混合物を−１５℃に冷却する。
７０ｍｇのイミダゾールおよび２２０ｍｇのトリエチルアミンを添加した後、無水ジクロロメタン５ｍｌ中１５０ｍｇの三塩化リンの溶液をゆっくりと滴下して添加する。
【００８９】
得られた混合物を撹拌下に２時間維持した後、室温に加熱し、１０ｍｌの重炭酸トリエチルアンモニウムを添加し、１時間撹拌する。相分離後、下層を集め、５ｍｌの冷水で２回洗浄し、蒸発させ、高真空下で乾燥する。
【００９０】
残渣を２０ｍｌの無水ピリジンに懸濁させた後、２００ｍｇの５，５−ジメチル−２−オキソ−２−クロロ−１，２，３−ジオキソホスホリナンおよび１３２．２ｍｇのＤ−α，β−イソプロピリデングリセロールを添加し、次いで混合物を、不活性雰囲気下で室温にて３０分間撹拌する。混合物を蒸発乾固させる。残渣を５０ｍｌの四塩化炭素に懸濁させ、１００ｍｇの硫黄を添加し、室温にて３０分間撹拌した後、高真空下で乾燥する。残渣を２０ｍｌの無水メタノールに可溶化し、１００ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸を添加する。混合物を４０℃に２時間加熱した後、室温に冷却し、２ｍｌの水を３０分間撹拌下で添加する。混合物を重炭酸アンモニウムで中和し、乾燥する。残渣を、展開溶媒としてクロロホルム／メタノール／水３５：２５：７の混合物を用いて、シリカゲルのカラムでの分離用クロマトグラフィーによって精製する。生成物を含む画分を集め、真空下で乾燥する。
【００９１】
残渣を５ｍｌの水に溶かし；溶液を４℃に冷却し、４℃にてＨ＋形態で生じるカチオン交換の５ｍｌのスルホン樹脂のカラムを通して溶出する。カラムを、５ｍｌの蒸留水で溶出し、溶出物を４℃で集め、窒素流を流し、ｐＨ７．０までＫＯＨ０．１Ｍで中和する。得られた溶液をろ過し、凍結させ、真空乾燥する。
【００９２】
反応収率は６５％である。
【００９３】
生成物であるグリセロチオ−ホスホチオ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカリウム塩の化学的−物理的特性は：
【００９４】
概観　：　粉末
分子式　：　Ｃ９Ｈ１８Ｏ１０ＰＳＫ
分子量　：　３８８．３８
元素分析　：　Ｃ＝２７．８４％；Ｈ＝４．６７％； Ｓ＝８．２５％；Ｏ＝４１．２０％；Ｐ＝７．９８％；Ｋ＝１０．０７％
有機溶媒への溶解性　：　有機溶媒にわずかに可溶
水への溶解性　：　≧１０ｍｇ／ｍｌ
ＴＬＣ　：　１００ｍｃｇをシリカゲルのプレートに施用した；
【００９５】
展開溶媒Ａクロロホルム／メタノール／水　３：３：１
展開溶媒Ｂアセトニトリル／水　３：１、塩基性ＫＭｎＯ４を噴霧
−　Ｒｆ＝０．３５。
【００９６】
生物活性
実施例に従い化合物をコード化し、以下のように番号付けした。
例　　化学名
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカルシウム塩
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールの亜鉛塩
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのナトリウム塩
４°　Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのカリウム塩
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのコリン塩
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールのリシン塩
【００９７】
化合物を、細胞系でイン　ビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）試験し、マウスにおいて物質ＰおよびそのペプチドＰ６−１１を用いて誘発した炎症モデルでイン　ビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）試験した。
【００９８】
略語、試薬および物質
ホルモン：　ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）（グランド　アイランド（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ）、ＮＹ）（６Ｈ−サイロトロピン、インスリン、トランスフェリン、コルチソル、ソマトスタチン、グリシル−Ｌ−イスチジル−Ｌ−リシン　アセテート）
ペニシリン：　ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）（グランド　アイランド（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ）、ＮＹ）
クーンズ（Ｃｏｏｎ’ｓ）Ｆ−１２　ハム（Ｈａｍ）に従って変性された培地：　ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）（グランド　アイランド（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ）、ＮＹ）
ストレプトマイシン：　ギブコ（Ｇｉｂｃｏ）（グランド　アイランド（Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ）、ＮＹ）
【００９９】
ＮａＦ、ＡｌＣｌ３：　フルカ　ケム（Ｆｌｕｋａ Ｃｈｅｍ）ＡＧ（ＣＨ）
５，６，８，１１，１２，１４，１５−３Ｈ（Ｎ）アラキドン酸：　デュ　ポン（Ｄｕ Ｐｏｎｔ）−ＮＥＮ（ボストン（Ｂｏｓｔｏｎ）、ＭＡ）
ＢＳＡ　ウシ血清アルブミン：　シグマ（Ｓｉｇｍａ）Ａ−３３１１
エバンスブルー（Ｅｖａｎ’ｓ Ｂｌｕｅ）：　シグマ（Ｓｉｇｍａ）Ｅ−２１２９
ホルムアミド：　シグマ（Ｓｉｇｍａ）Ｆ−７５０３
エチルエーテル：　フルカ　ケム（Ｆｌｕｋａ Ｃｈｅｍ）ＡＧ（ＣＨ）
ＰＴＦＥ　０．４５μｍフィルター：　コスター（Ｃｏｓｔａｒ）１３０６６２
【０１００】
サブスタンスＰ、ＳＰ：　クリナルファ（Ｃｌｉｎａｌｆａ）（ＩＴ）
ＳＰ　カルボキシ末端ペプチド　ＳＰ６−１１：　シグマ（Ｓｉｇｍａ）Ｓ−０７７２
プロテインキナーゼＣ、ＰＫＣ
ホスホリパーゼＡ２、ＰＬＡ２
ホスホリパーゼＣ、ＰＬＣ
マイトジェン活性化ＰＫ、ＭＡＰＫ
【０１０１】
Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールオータコイドの効果の評価は、種々の細胞系においてｃＰＬＡ２により誘発されるアラキドン酸の放出について、実施例３、実施例４および実施例４ａをコード化した。
【０１０２】
実験モデル
細胞培養
ＦＲＴＬ５、培養で増殖させたラット甲状腺からの上皮細胞の細胞系。簡単には、細胞は、ハム（Ｈａｍ）に従って変性され、５％ウシ血清、２０ｍＭのグルタミンおよび６種のホルモンの混合物（６Ｈ−サイロトロピン、インスリン、トランスフェリン、コルチソル、ソマトスタチン、グリシル−Ｌ−イスチジル−Ｌ−リシン　アセテート）を補ったたクーンズ（Ｃｏｏｎ’ｓ）Ｆ−１２培地で、３７℃にて、３〜４日毎に交換された５％ＣＯ２、９５％空気媒体の加湿大気中で培養された。
【０１０３】
スイス（Ｓｗｉｓｓ）３Ｔ３繊維芽細胞
培養物は、種々の刺激を用いて刺激されてアラキドン酸を放出する：
ｃＰＬＡ２−依存性メカニズム、例えばＡＴＰ、マストパラン（ｍａｓｔｏｐａｒａｎ）、ボンベシン；
ｃＰＬＡ２−非依存性メカニズム、例えばＣａ２＋イオン透過担体、イオノマイシン（ｉｏｎｏｍｉｃｉｎ）。
【０１０４】
試験
アラキドン酸の放出
細胞は最初に、種々の濃度の化合物と共に、６０分間の試験下でインキュベートされるか、または所定濃度１００μＭで種々の時間間隔で（１５〜１８０分間）インキュベートされ、遊離の脂肪酸の不在下、ｐＨ７．４で、１０ｍＭのＨｅｐｅｓおよび０．２％のＢＳＡを添加されたＨＢＳＳ（ハンクスの均衡塩類溶液、Ｃａ２＋およびＭｇ２＋イオンの存在下）で２回洗浄され、記載された緩衝液中の１００μＭのＡＴＰで３７℃にて１０分間刺激される。上清を、測定のためにシンチレーションキュベットに集めた。結果は、［３Ｈ］−アラキドン酸の全放出量の百分率として表される。
【０１０５】
結果
実施例４ａとしてコード化された評価下の化合物は、時間および濃度依存性の方法で、試験を行ったすべての細胞系において、ｃＰＬＡ２の活性化によって誘発されたアラキドン酸の放出を減らすことが示された（表１、２、３、４、５）。
【０１０６】
実施例３および実施例４としてコード化された化合物は、より効力の高い効果を示す（表６）。
それに対して、化合物実施例４ａは、ｃＰＬＡ２に関係のない刺激、例えばカルシウムイオン透過担体によって誘発されるアラキドン酸の放出の減少を引き起こさない（表７）。
【０１０７】
報告したデータはみな、実施例４ａの化合物ならびに実施例３および実施例４の化合物が、サイトゾルのｃＰＬＡ２の活性化の経路、言い換えればアラキドン酸の動態化に関連する主な経路の負の調節によって特異的に仲介されるメカニズムに従ってアラキドン酸の放出を制限することができることを示す。
【０１０８】
表１：　ＡＴＰで刺激されたＦＲＴＬ５細胞における実施例４ａの化合物の存在下でのアラキドン酸の放出の抑制の時間−経過
【表１】
2004513176.tif 000004
【０１０９】
プレロードした（ｐｒｅｌｏａｄｅｄ）細胞を、異なる時間間隔で実施例４ａの化合物１００μＭと共にインキュベートした後、ＡＴＰ（１００μＭ）で１０分間刺激する。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±ＳＥとして表される。対照細胞の刺激は一般に、対応する時間間隔における基本値の４〜５倍であった。
【０１１０】
表２：　実施例４ａの化合物は、ＡＴＰで刺激したＦＲＴＬ５細胞からアラキドン酸の放出の抑制を誘発する
【表２】
2004513176.tif 000005
【０１１１】
プレロードした細胞を、種々の濃度の実施例４ａと共に６０分間プレインキュベートした後、１００μＭのＡＴＰで１０分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±ＳＥとして表される。
【０１１２】
表３：　実施例４ａの化合物は、ＡＴＰで刺激したスイス（Ｓｗｉｓｓ）３Ｔ３繊維芽細胞から［３Ｈ］−アラキドン酸の放出を抑制する
【表３】
2004513176.tif 000006
【０１１３】
プレロードした細胞を、種々の濃度の実施例４ａと共に６０分間プレインキュベートした後、１００μＭのＡＴＰで１０分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±ＳＥとして表される。
【０１１４】
表４：　実施例４ａの化合物は、スイス（Ｓｗｉｓｓ）３Ｔ３繊維芽細胞において、マストパラン−依存性の［３Ｈ］−アラキドン酸放出を減らす
【表４】
2004513176.tif 000007
【０１１５】
プレロードした放射能活性に標識した細胞を、種々の濃度の実施例４ａと共に６０分間プレインキュベートした後、１００μＭのマストパランで１０分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±ＳＥとして表される。
【０１１６】
表５：　実施例４ａの化合物は、スイス（Ｓｗｉｓｓ）３Ｔ３繊維芽細胞において、ボンベシン−依存性の［３Ｈ］−アラキドン酸放出を減らす
【表５】
2004513176.tif 000008
【０１１７】
プレロードした細胞を、種々の濃度の実施例４ａと共に６０分間プレインキュベートした後、ボンベシンで１０分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±ＳＥとして表される。
【０１１８】
表６：　実施例４ａの化合物は、ＦＲＴＬ５細胞においてイオノマイシンによって誘発される［３Ｈ］−アラキドン酸の放出を抑制しない
【表６】
2004513176.tif 000009
【０１１９】
プレロードした細胞を、種々の濃度の実施例４ａと共に６０分間プレインキュベートした後、１０μＭのイオノマイシンで３０分間刺激した。結果は、３つの別々の実験における２点の平均±ＳＥとして表される。
サブスタンスＰに対してサブスタンスＰのペプチドＰ６−１１により誘発される局所的炎症への保護活性の評価
実験モデル
明／暗サイクルで、制約なしに給餌して標準条件で飼育した約２０〜２２ｇのメスのＢａｌｂ／ｃマウスを、エチルエーテル飽和雰囲気に暴露することによって麻酔する。次に動物を各１０匹の４群に分ける。
【０１２０】
サブスタンスＰ（１ピコモル／３μｌ）またはそのペプチド断片Ｐ６−１１（１ピコモル／３μｌ）の左耳の耳介への皮下注射によって、毛細血管透過を引き起こし；対照は、塩類溶液の注射を受ける（マッツァリ（Ｍａｚｚａｒｉ）ら、Ｅｕｒ． Ｊ． Ｐｈａｒｍ． １９９６）。
【０１２１】
マウスの耳介での血漿の管外遊出。
マウスは、サブスタンスＰまたはＰ６−１１ペプチドの後直ちにエバンスブルー（Ｅｖａｎ’ｓ Ｂｌｕｅ）（１００ｍｇ／ｋｇ）の静脈内注射を受け、２時間後に殺された。次に、２ｍｌのホルムアミド中での注射した耳介の均質化（ポリトロン（Ｐｏｌｙｔｒｏｎ）ホモジナイザー）により染料を抽出した。次に、均質化した組織を５０℃で２時間インキュベートした。サリア（Ｓａｒｉａ）とランベルグ（Ｌｕｎｂｅｒｇ）の方法（１９８３）に従って、６２０ｎｍ（Ａ６２０）でのエバンスブルーの光学密度として、血漿の管外遊出を測定した。
【０１２２】
化合物の可溶化および投与
実施例に記載された化合物を０．９％塩類溶液に可溶化し、毛細血管透過の３０分前に０．５〜５ｍｇ／ｋｇの範囲の投与量で、静脈内注射により投与した。
【０１２３】
結果
サブスタンスＰにより誘発された管外遊出は、肥満細胞および脈管内皮細胞の両方の二重の活性化メカニズムによるものであり、一方、サブスタンスＰ断片−ペプチドＰ６−１１は、ＮＫＩ受容体との相互作用による内皮細胞への効果のみによる管外遊出を引き起こす（「サブスタンスＰ、ブラジキニンおよび関連ペプチドのヒスタミン放出活性におけるＮ−末端アルギニンの役割（Ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｎ−ｔｅｒｍｉｎａｌ ａｒｇｉｎｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｈｉｓｔａｍｉｎｅ ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ Ｐ， ｂｒａｄｉｋｉｎｉｎ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅｓ）」；デビラー（Ｄｅｖｉｌｌｅｒ）Ｐ．、ドラピュー（Ｄｒａｐｅａｕ）Ｇ．、レノウックス（Ｒｅｎｏｕｘ）Ｍ．、レゴリ（Ｒｅｇｏｌｉ）Ｄ．、Ｅｕｒｏｐ． Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． １６８（１９８９）：５３−６０）。
【０１２４】
試験した化合物はすべて、ペプチドＰ６−１１により誘発される毛細血管透過性を有意に減らすが、ＳＰにより誘発される透過性に有意に影響を与えない（表９）。
【０１２５】
特に、実施例５ａのＧＰＩのカリウム塩は、サブスタンスＰ断片Ｐ６−１１により誘発される管外遊出を制限する。
【０１２６】
表７：実施例４ａおよび６とコード化された化合物は、Ｐ６−１１により誘発される管外遊出を制限する
【表７】
2004513176.tif 000010
【０１２７】
スチューデント−ニューマン−ケウルス試験（Ｓｔｕｄｅｎｔ −Ｎｅｗｍａｎ− Ｋｅｕｌｓ Ｔｅｓｔ）　＊ｐ＜０．０５対群１；・ｐ＜０．０５対群２；ｐ＜０．０５対群６。
【０１２８】
表８：Ｐ６−１１により誘発される管外遊出への、実施例４ａとコード化された化合物の投与量依存性効果
【表８】
2004513176.tif 000011
【０１２９】
スチューデント−ニューマン−ケウルス試験（Ｓｔｕｄｅｎｔ −Ｎｅｗｍａｎ− Ｋｅｕｌｓ Ｔｅｓｔ）　＊ｐ＜０．０５
【０１３０】
表９：サブスタンスＰにより誘発される管外遊出に対する、Ｌ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールカリウム塩（実施例４ａ）およびＬ−α−グリセロ−ホスホ−Ｄ−ミオ−イノシトールカルシウム塩（実施例２）
【表９】
2004513176.tif 000012
【０１３１】
報告した証拠は、本発明の化合物が、サブスタンスＰの末端ペプチド、Ｐ６−１１によって誘発される血漿タンパク質管外遊出を制限することを示す。ペプチドＰ６−１１は、ＮＫ１と称されるニューロキン（ｎｅｕｒｏｋｉｎ）受容体によって仲介される特定のメカニズムに従って、上皮を通してタンパク質管外遊出を誘発する。ＮＫ１、ＮＫ２およびＮＫ３受容体はそれぞれ、内因性リガンドＳＰ、ＮＫＡおよびＮＫＢのシグナルを仲介し、そのすべてが、ペプチドＰ６−１１に存在するＳＰの末端部分を認識することを思い出さねばならない。
【０１３２】
終わりに、試験した本発明の化合物は、ｃＰＬＡ２を負に調節することができ、よってアラキドン酸代謝に関連する事象のカスケードを制限することができる。本発明の化合物はさらに、種々の刺激、例えばＡＴＰによって誘発される、ｃＰＬＡ２の活性化ならびに、変えられた関門透過性の状況で、例えば末梢神経系の脈管−神経周膜および中枢神経系の血液脳関門で存在するアラキドン酸濃度の増加を制限することができる。
【０１３３】
本発明の化合物はまた、ボンベシン受容体により仲介されるｃＰＬＡ２の活性化を調節し、これは、食物摂取の不調節に関連し、かくして、そのような悪液質メカニズムにより仲介される病変、例えば過食症、食欲不振、肥満および悪液質の治療のために有用に使用することができる。
【０１３４】
本発明の化合物はさらに、イン　ビボ（ｉｎ ｖｉｖｏ）モデルのＮＫ−１受容体の刺激を調節することができる。
かくして本発明の化合物は、先に挙げたようなｃＰＬＡ２の活性化または過剰刺激によって仲介される病変の治療のための有効な治療手段であり得る。
【０１３５】
投与の量、タイミングおよび方法は、病変もしくは変調のタイプ、段階、重症さおよび概観の明確さまたは、ヒトもしくは獣医師の健康管理における来たるべき適用のタイプ、段階、重症さおよび概観の明確さに従って選択され、各治療サイクルについて０．１〜１００ｍｇ／ｋｇで３〜９０日間に含まれる。挙げられたすべての病変について、全身、非経口、経口および直腸の投与が示されるが、また局所、経皮および、活性物質の最高の利用可能性を達成するような任意の場合が示される。経口のためには、処方物は錠剤、糖衣錠およびカプセルとして投与することができるが、また粉末および溶液／懸濁液（噴霧を含む）として投与することができる。
【０１３６】
局所治療のためには、結膜嚢への投与のための目薬と共に、皮膚および粘膜使用（歯肉粘膜を含む）に親和性であるゲル、クリームおよび溶液が好ましい。
注射可能な形態は、製薬上の使用のために、かつ静脈内、筋肉内および皮下投与のために適合性の溶媒と共に処方される。
【０１３７】
人間および獣医学における非反応状態に関連する変調の予防またはコアジュバント（ｃｏａｄｉｕｖａｎｔ）治療のための経口摂取のための補給剤と同じ活性化合物を、適当な濃度で処方することができる。
【０１３８】
以下は、医薬および化粧品用調製物の例であり、これは説明する目的のみを有し、限定する目的を有していない。
【０１３９】
例Ａ　−　錠剤
活性主剤　実施例６　１００ｍｇ
賦形剤
微晶質セルロース　１６０ｍｇ
デンプン　　　　　２８ｍｇ
ラクトース　　　　１００ｍｇ
ステアリン酸　　　６．０ｍｇ
【０１４０】
例Ｂ　−　注射用処方物
バイアル１
活性主剤　凍結乾燥した実施例４　５０ｍｇ
【０１４１】
バイアル２
賦形剤
２塩基性リン酸ナトリウム１２Ｈ２Ｏ　１２ｍｇ
１塩基性リン酸ナトリウム２ Ｈ２Ｏ　１ｍｇ
塩化ナトリウム　　　　　　　　 ３２ｍｇ
注射用の水で　　　　　　　　　 ４ｍｌにする。
【０１４２】
例Ｃ　−　 局所施用のためのＷ／Ｏクリーム
％ｍｇ
活性主剤　実施例７　　　　　　２
賦形剤
Ｔｗｉｎ ６０　　　　　　　　　　 ０．５
Ｐｏｌｗａｘ　　　　　　　　　　　２．５
セチルステアリルアルコール　２
カルボマー　　　　　　　　　０．５
ＴＥＡ　　　　　　　　　　　　 ０．５
グリセリン　　　　　　　　　３
防腐剤　　　　　　　　　　　１
水で　　　　　　　　　　　　１００ｍｇにする。
【国際公開パンフレット】
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2004513176.tif 000015
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【国際調査報告】
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