(57)【要約】本発明は、特に上皮／基質間付着力の増強により改善され得る疾病の治療のためのコルチコステロイドおよびプロピオン酸フルチカゾンの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
上皮／基質間付着力の増強によって改善される疾病の治療のための医薬の製造における、プロピオン酸フルチカゾンまたはそれの生理学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項２】
前記疾病に喘息またはCOPDが含まれていない、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
上皮／基質間付着力の増強によって改善される疾病の治療のための医薬の製造における、プロピオン酸フルチカゾンまたはそれの生理学的に許容される塩もしくは溶媒和物とCFCフリーエアロゾル推進剤を含んでなる、吸入法に好適な医薬組成物の使用。
【請求項４】
前記組成物にHFA134-a推進剤が含まれていない、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
上皮／基質間付着力の増強によって改善される疾患の予防のために、β-2アゴニストと順次にもしくは同時に投与される医薬の製造における、プロピオン酸フルチカゾンまたはそれの生理学的に許容される塩の使用。
【請求項６】
プロピオン酸フルチカゾンおよびノイラミニダーゼ阻害物質および１つ以上の担体または賦形剤の組み合せを含んでなる医薬組成物。
【請求項７】
前記ノイラミニダーゼ阻害物質がザナミビルである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
上皮／基質間付着力の増強によって改善される疾患の予防のために、ノイラミニダーゼ阻害物質と順次にもしくは同時に投与される医薬の製造における、プロピオン酸フルチカゾンまたはそれの生理学的に許容される塩の使用。
【請求項９】
上皮／基質間付着力の増強によって改善される疾病の治療のための医薬の製造における、プロピオン酸フルチカゾンおよびラクトースを含んでなる、通気法に好適な乾燥粉末医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、上皮／基質間相互作用の増強によって改善される病状の治療における、コルチコステロイドならびにそれの生理学的に許容される塩および溶媒和物ならびに医薬組成物の、新規な医療用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
呼吸器上皮は、物理的且つ化学的バリアとして機能することで、吸入される粒子、有毒ガス、アレルギー誘発物質、微生物およびウイルス病原体に対する肺防御の第一線である。表面上皮層には、繊毛細胞および杯細胞ならびに量は少ないが他の細胞がある。この細胞層の一体性はバリアの有効性にとっては必須であり、主に上皮細胞間結合が介在する細胞／細胞間付着力により維持される。杯細胞は刺激原によって刺激されてムチンを分泌し、このムチンは繊毛の動きにより気道から排除される。上皮細胞間のタイト結合は水および溶質の経上皮通過を調節するが、それらはまた、粘膜繊毛体クリアランスによりクリアされなかった多くの外的病原因子が、さもなくば深刻な損傷を与え得る肺組織に浸透するのを防いでいる。喘息の特徴の１つは上皮の損傷で、脱落上皮細胞シートが気道の管腔内にしばしば見られる。この上皮喪失の機序は十分に理解されていないが、円柱細胞と基底細胞との間ならびに基底細胞とその基底膜との間の付着力の減少があるに違いないと思われる。脱落上皮領域の修復は比較的速く、最初にその傷からの細胞の移行が起り、そして暫らくして細胞増殖が起ってその傷部位をおおう上皮バリアが再構築される。しかしながらこれらの細胞は分化していない（すなわちこれらには繊毛あるいはムチンがない）ので、修復の初期の段階では正常な気道上皮組織表現型が存在しない。事実これらの細胞は、炎症性の刺激に対しより応答性のある、またそれにより容易に生じる特有の「傷表現型」を呈す。COPDの主な原因であるタバコの煙もまた肺上皮の浸透増加を誘発する。タバコの煙はタイト(密着)結合に悪い影響を与え且つその上皮の傍細胞浸透性を増大させることが知られている。しかしながら、その細胞の基質への付着力に対する煙の影響は明らかでない。加えて、呼吸器気道の細菌感染およびウイルス感染は広範囲の上皮損傷を引き起こし得、インフルエンザの場合特に明白である。肺疾患以外では、腸の上皮一体性もまた非常に重要であり、そして潰瘍性大腸炎、クローン病(炎症性腸疾患)、およびNSAID(非ステロイド系抗炎症薬)誘発潰瘍では上皮バリアが損傷を受ける。
【０００３】
喘息のような疾患の薬物療法（単なる症状の軽減ではない）に成功するには正常上皮の回復を誘発し、そしてその後その正常上皮の維持を可能とすることが必要であろうことは十分考えられる。喘息患者の上皮構造はコルチコステロイドの治療経過のあと再構築されることから、この点ステロイドは有効であると思われる。しかしながら、喘息治療におけるステロイドの治療効果のどれ位の割合が、その上皮への直接的な影響により得るものなのかは、現時点では分かっていない。
【０００４】
コルチコステロイドは、局所的にぬられるクリームまたは軟膏としての治療有用性、あるいは吸入製剤としての治療有用性を有する抗炎症性化合物類を代表する。コルチコステロイドの例としては（これらは全て本発明の範囲内に包含される）、ベタメタゾン、プロピオン酸フルチカゾン、ブデソニド、チプレダン、デキサメタゾン、ベクラメタゾン、フルオシノロン、トリアムシノロンアセトニド、モメタソン、フルニソリド、およびロフレポニドが挙げられる。特に、UK特許明細書番号第2088877B号に記載のコルチコステロイド プロピオン酸フルチカゾン（S-フルオロメチル6α,9β-ジフルオロ-11β-ヒドロキシ-16α-メチル-17α‐プロピオニルオキシ-3-オキソアンドロスタ-1,4-ジエン-17β-カルボチオエート）は確認された抗炎症活性を有し、呼吸器疾患、特に喘息の治療に非常に有用である。
【発明の開示】
【０００５】
前炎症性サイトカインを阻害すること以外で、上皮に対するプロピオン酸フルチカゾンなどのコルチコステロイドの効果についてはほとんど知られていない。本発明者は、上皮細胞へのコルチコステロイドの局所投与が、その細胞を損傷から機械的もしくは酵素誘導的に保護するという薬効を有していることを見出した。気管支上皮細胞の基底外側表面をヒト唾液エラスターゼ、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)エラスターゼ、およびブタ膵臓エラスターゼで処理すると、その一部の細胞の、その下にある膜への付着力、もしくはその下にある膜にリリースされつつある細胞の完全シートへの付着力の喪失により、その単層中に穴が生じる。この細胞をFPで前処理すると、酵素誘導的損傷に対していくぶんかの保護が与えられる。同じ量の機械的損傷を与えると、FPで処理しておいた細胞ではより小さい傷面積になる。
【発明を実施するための最良の手段】
【０００６】
従って、本発明の第１の態様として、上皮／基質間相互作用の増強により改善される疾病の治療のための医薬の製造におけるコルチコステロイド化合物の使用が提供される。
【０００７】
別の態様として、本発明は、コルチコステロイド化合物を投与することからなる、上皮／基質間相互作用の増強により改善される疾病の、ヒトを含めた哺乳動物被検体の治療方法を提供する。
【０００８】
本発明の前記第１または別の態様の好ましい態様として、前記コルチコステロイドは好ましくはプロピオン酸フルチカゾンである。
【０００９】
治療という表現には、予防ならびに確定された症状の軽減が包含されることは理解されよう。例えば、本発明の化合物は、肺のアレルギー誘発物質、刺激原、あるいは微生物への暴露を低減するのに用いることができる。
【００１０】
上皮バリア機能の損傷は、喘息、COPD(慢性閉塞性肺疾患)、嚢胞性線維症（CF）、インフルエンザなどのウイルス感染症、煤煙吸入損傷、およびその他の感染症などの多くの疾病の病状に関係しているとみなされている。従って、本発明のコルチコステロイドを用いて喘息あるいはCOPDの状態にある上皮を安定させることができる。別の態様として、本発明のコルチコステロイドを、上皮細胞に傷を引き起こす嚢胞性線維症、ウイルス感染症、およびその他の疾病の症状の予防に用いることができる。
【００１１】
本発明の別の態様として、ある種の疾病の治療に関する限りにおいて、喘息とCOPDが除外される。
【００１２】
本発明の化合物をそのままの化学物質として単独で投与するのは可能であるが、その活性成分を医薬製剤として提供するのが好ましい。動物用途ならびにヒト医療用途のために本発明で使用されるコルチコステロイドの製剤は、本活性化合物を、１つ以上の医薬的に許容される担体、ならびに必要な場合は他の治療用成分と一緒に含んでなる。担体は、製剤の他の成分と適合性があるという意味において、またその服用者に対して有害でないという意味において医薬的に許容されるものでなければならない。
【００１３】
本発明で使用されるコルチコステロイドは、吸入法もしくは通気法による投与の技術分野で公知の在来の方法で製剤化することができる。
【００１４】
吸入法による投薬には、本発明の組成物は在来の方法により都合よく投与することができ、例えば在来の方法で製造された計量式吸入器の形体での方法、あるいはVolumatic（Glaxo Groupの商標）デバイスのようなスペーサーデバイスと組み合せた方法により投与することができる。計量式吸入器の場合、本組成物の所定量を送達するための計量バルブが備わっている。スプレー組成物は、例えば水溶液もしくは水性懸濁液として製剤化でき、噴霧器で投与することができる。例えば本活性成分が懸濁しているエアロゾルスプレー製剤は、必要な場合は１つ以上の安定剤と一緒に推進剤（例えばトリクロロフルオロメタン（推進剤11）、ジクロロジフルオロメタン（推進剤12）、1,2-ジクロロテトラフルオロエタン（推進剤114）、トリクロロトリフルオロエタン、モノクロロペンタフルオロエタン、クロロホルム、あるいは塩化メチレン）中に製剤化する。また、いわゆるオゾンに優しい推進剤、例えば1,1,1,2-テトラフルオロエタン（推進剤134a）を用いることもできる。他の好適な推進剤としては、例えば、CH2ClF、CClF2CHClF、CF3CHClF、CHF2CClF2、CHClFCHF2、CF3CH2Cl、およびCClF2CH3などのC1-4水素含有クロロフルオロカーボン；CHF2CHF2、CHF2CH3、およびCF3CHFCF3などのC1-4水素含有フルオロカーボン；ならびにCF3CF3、およびCF3CF2CF3などのペルフルオロカーボン；が挙げられる。吸入法に好適な組成物に関する限り、本発明の別の態様として、CFCフリー推進剤HFA134-aが除外される。
【００１５】
あるいは、吸入法もしくは通気法による投薬には、本発明の組成物は乾燥粉末組成物の形態をとることができ、例えば本活性成分と、ラクトースのような適当な担体との粉末混合物である。粉末組成物は、例えばカプセル、カートリッジ、あるいはブリスターパックなどの単位用量の形態で提供でき、その粉末は、例えば Rotahaler吸入器（Glaxo Groupの商標）のような吸入器を使って、あるいはブリスターパックの場合はDiskhaler吸入器（Glaxo Groupの商標）により投与することができる。
【００１６】
従って、本発明はまた、上皮／基質間相互作用の増強により改善される疾病の治療のための医薬の製造における、吸入法もしくは通気法による投与のために製剤化された、コルチコステロイドと１以上の医薬的に許容される担体もしくは賦形剤を含んでなる医薬組成物の使用を提供する。
【００１７】
本組成物は、投与の方法に応じて活性物質を0.1%より上、例えば0.1〜99%含有することができる。本発明の化合物の推奨される用量は、１日当り0.25mg/kg〜約125mg/kg体重、例えば１日当り20mg/kg〜100mg/kgである。患者の年齢や病状に応じて用量を日常業務的に変えなければならないことがあること、また正確な用量は最終的には担当の医師もしくは獣医の判断によることは理解されよう。用量はまた投与の経路ならびに選択されたその特定の化合物にも依存すると考えられる。
【００１８】
本発明のコルチコステロイドはこれだけで投与してもよい。あるいはそれらは、１つ以上の他の治療剤と一緒に投与してもよいし、投与用に処方してもよい。適切な用量は当業者なら容易に解るところである。
【００１９】
例えば、本発明は、上皮・基質間付着力の増強により改善される疾患の予防のためにβ-2アゴニストと順次にもしくは同時に投与される医薬の製造における、コルチコステロイドまたはそれの生理学的に許容される塩の使用を提供する。他の好適なβ2-アゴニストの例としては、限定するものではないが、サルブタモール、ホルモテロール、およびサルメテロールが挙げられる。
【００２０】
肺の細菌感染を予防もしくは軽減するために本発明の組み合せを用いることもできる。従って、さらなる態様として、肺細菌感染の予防のために抗細菌化合物と順次にもしくは同時に投与される医薬の製造における、コルチコステロイドまたはそれの生理学的に許容される塩の使用が提供される。好適な抗細菌薬は、スルホンアミド（例：スルファメトキサゾール）、ジアミノピリミジン（例：トリメトプリム）、スルホンアミドとジアミノピリミジンの組み合せ（例：スルファメトキサゾール-トリメトプリム）、キノロン、特にフルオロキノロン（例：シプロフロキサシン、レボフロキサシン、およびトロバフロキサシン）、ニトロイミダゾール、ペニシリン（例：アモキシシリン）、セファロスポリン（例：セフロキシムまたはセフタジジム）、グリコペプチド（例：バンコマイシン）、テトラサイクリン、アミノグリコシド、クロラムフェニコール、あるいはマクロライドから選択することができる。
【実施例】
【００２１】
本発明を以下の非限定的実施例により説明する。
【００２２】
実験の詳細
16HBe14o-細胞をトランスウェル透明メンブレン上で、細胞が電気的密着の単層を形成するまで増殖した。血清の不存在下、この細胞をFPもしくはビークルで24時間処理した。次にこの細胞の基底外側の表面に、ヒト唾液エラスターゼ（HSE）5μg/mLもしくは緑膿菌エラスターゼ（PAE）5μg/mLを加えた。単層の経上皮抵抗（TER）およびそのモルホロジーをその後の24時間に亘ってモニターした。
【００２３】
16HBe14o-細胞と一次気管支上皮細胞の両方の基底面にHSEを加えた場合は、TERの低下および、細胞単層中の穴形成が起った。FPで処理すると、穴形成の速度が減速された。細胞をPAEで処理した場合、単層が、その下にある膜から完全なシートとして剥れた。PAEで処理した全てのコントロール培養細胞が剥れるまでには4時間を要したが、全てのFPで前処理された培養細胞が剥れるまでには8時間を要した。
【００２４】
機械的な損傷からの保護に対するFPの効果を調べるために、複数の同心円状の傷をマルチウェルプレート中につくり、結果的に分析用の大きな全体傷長さを得た。5%のステロイドフリーFCSを含有する増殖培地0.2mL中の細胞104個を96ウェルプレートのウェルに加え、そして増殖培地を規則的に交換しながらコンフルエントとなるまで培養した。コンフルエンスの後、図７に示すように、培地を新鮮な培地±各種濃度のステロイドで置換した。培養細胞をさらに24時間もしくは48時間インキュベートしたあと傷を付けた。傷を付けた後、培養細胞をPBS中でリンスし、メタノール／アセトン（50/50）中室温で固定し、空気乾燥し、そしてその後0.1%クリスタルバイオレットで染色した。傷の面積はLeica Q550IWイメージアナリシスシステムを用いて測定した。傷の大きさを図７に示す。コントロール培養細胞は一番大きな傷面積を有していたが、デキサメタゾン処理培養細胞あるいはFP処理培養細胞では用量と関係する傷寸法の低下が認められた。ステロイドの効果は24時間で明らかであるが、48時間ではさらに顕著である。後者の時点では、24時間暴露後の傷と比較すると、コントロールの傷の大きさは増大していたが、ステロイドの最高用量における傷寸法はいずれも縮小していた。このデータは、ステロイドが細胞間付着力を低下させているか、あるいは上皮細胞基質付着力を増強させているかのどちらかであることを示唆している。コントロール培養細胞では、ニードルで直接接触した領域を越えてディッシュ表面からの上皮の剥離が起り、ニードルの幅よりずっと大きい傷幅ができる。これとは対照的に、ステロイド処理培養細胞では、傷はステロイド濃度を増加させていくとともに次第に小さくなり、ついには傷面積は、ニードルと直接接触のあった上皮に限られたものとなる。本発明者は、ステロイドは16HBe14o-細胞間タイト結合機能を増強するという知見を持っているので、このデータはステロイド誘発上皮／基質間付着力の増大を反映するものであると本発明者は考える。
【００２５】
まとめとして上記結果は、FPで気管支上皮細胞を処理すると、細胞の基質からのエラスターゼ誘発剥離から、ならびに機械的に引き起こされた傷からも保護されることを示している。この保護は、細胞と基質を付着させている接着分子の発現および／または活性化のアップレギュレーション、あるいは基質付着の変化に対するアップレギュレーションの結果であると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】16HBe14o-細胞の単層中にヒト唾液エラスターゼにより誘発された穴形成に対するFPの保護効果を示す図である。
【図２】HSEで24時間インキュベートした後に誘発された16HBe14o-細胞のTER喪失に対するFPの保護効果を示す図である。
【図３】ヒト唾液エラスターゼにより誘発された一次気管支上皮細胞のTER喪失に対するFPの保護効果を示す図である。
【図４】ヒト一次気管支上皮細胞中でヒト唾液エラスターゼにより誘発された穴形成に対するFPの保護効果を示す図である。
【図５】シュードモナスエラスターゼにより誘発された16HBe14o-細胞のTER喪失に対するFPの保護効果を示す図である。
【図６】シュードモナスエラスターゼにより誘発された16HBe14o-単層の、その下にある膜からの剥離に対するFPの保護効果を示す図である。
【図７】16HBE上皮傷領域に対するFPの効果を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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