(57)【要約】この発明は、哺乳動物に相乗的鎮痛効果をもたらすための薬剤製造における、ナトリウムチャンネルアルファサブユニットの細胞外領域のSS1またはSS2部位に結合するナトリウムチャンネル遮断化合物とアスピリンの組み合わせの使用に関するものである。この発明を基にした薬剤組成物は、アスピリンの鎮痛効果を高め、かつ投与量を減らすため、副作用や有害反応が相応に減少される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物に相乗的鎮痛効果をもたらすための薬剤製造における、ナトリウムチャンネルアルファサブユニットの細胞外領域のSS1またはSS2部位に結合するナトリウムチャンネル遮断化合物とアスピリンの組み合わせの使用。
【請求項２】
アスピリンとナトリウムチャンネル遮断化合物が、相乗的鎮痛効果をもたらすよう、別々の投薬形態で、あるいは一度に合わせて投与されるように設計されている請求項１記載の使用。
【請求項３】
投与経路が注射を含む請求項１記載の使用。
【請求項４】
ナトリウムチャンネル遮断化合物が、テトロドトキシンおよび／またはその誘導体である請求項１記載の使用。
【請求項５】
アスピリンが、サリチル酸またはサリチル酸塩である請求項１記載の使用。
【請求項６】
テトロドトキシンの投与量の範囲が、体重1キログラム当たり0.01μgから20μgである請求項４記載の使用。
【請求項７】
アスピリンの投与量の範囲が、体重1キログラム当たり0.02mgから200mgである請求項５または６記載の使用。
【請求項８】
テトロドトキシンの誘導体が、テトロドトキシン、デヒドロテトロドトキシン、アミノテトロドトキシン、メトキシテトロドトキシン、エトキシテトロドトキシン、デオキシテトロドトキシンまたはテトロドニック酸のうち少なくとも１つからなる請求項４記載の使用。
【請求項９】
ナトリウムチャンネル遮断化合物がサキシトキシンである請求項１記載の使用。
【請求項１０】
サキシトキシンが、分子式Ｃ10Ｈ17Ｎ7Ｏ4の化合物またはその誘導体である請求項９記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、哺乳動物に相乗的鎮痛効果をもたらすための薬剤製造における、ナトリウムチャンネルアルファサブユニットの細胞外領域のSS1またはSS2部位に結合するナトリウムチャンネル遮断化合物とアスピリンの組み合わせの使用に関するものである。この発明を基にした薬剤合成物は、アスピリンの鎮痛効果を高め、かつ投与量を減らすため、副作用や有害反応が相応に減少される。
【背景技術】
【０００２】
薬理学的に、抗炎症剤には、主にアスピリンとステロイドの二種類がある。アスピリンは非ステロイド系鎮痛剤かつ抗炎症鎮痛剤として非常に広く使われている。アセチルサリチル酸のカテゴリーに属し、アスピリンは主にアセチルサリチル酸（一般にアスピリンとして知られる）、サリチル酸塩（主にナトリウムサリチル酸塩）およびジフルニサル（ジフルニサルは、サリチル酸のジフルオロフェニル誘導体である。）からなる。サリチル酸がサリチル酸塩の有効成分である。
【０００３】
プロスタグランジン(PG)合成の阻害が、アスピリン類似薬の薬理学効果、治療効果、毒性および副作用をもたらす主メカニズムである。アスピリンには、ブラジキニンやヒスタミンのような疼痛感覚刺激物質の合成を阻害し、白血球の活動を抑制し、視床下部の体温調節中枢に影響を及ぼす効果があり、それにより鎮痛、抗炎症および解熱効果をもたらす。アスピリンはさらに、血小板のプロスタグランジンシクロオキシゲナーゼを抑制することによりトロンボキサン(TXAτ)合成を阻害し、これにより血小板凝集を阻害する(Xiaozhi CHENG, Pingtian XIAO, Zhongshen WANG, New Edition of Practical Manual for Drugs, 1994, SS10034400, Chaoxing Digital Library)。
アスピリンは感冒による疼痛の軽減、かつ一般的な精神的ストレスから起こる頭痛や熱の治療に、特筆すべき鎮痛効果がある。アスピリンは主に下記の兆候の治療に使われる。
(1) 感冒、熱、軽度から中度の疼痛（頭痛、歯痛、神経筋の痛み、生理痛など）。
(2) リウマチ、リウマチ性関節炎。
(3) 血栓の形成。長期間にわたる少量の投薬計画が必要。
【０００４】
アスピリンは下記のような副作用を引き起こすことがある(Qingwei SUN, Yi HOU, Novel Clinical Uses of Aspirin-Alike Drugs and Adverse Effects, 1998, SS10034347, Chaoxing Digital Library)。
(1) 腹痛、まれに胃潰瘍および出血、喘息、アレルギー反応性皮膚発疹、まれに可逆性の肝臓または腎臓への傷害。
(2) 過剰摂取反応：軽度反応ではサリチリズム、重度反応には血尿、痙攣、幻覚、精神疾患及び呼吸困難がある。
(3) アスピリンの長期使用は尿糖検査での偽陽性結果、血清尿酸の偽高値、トランスアミナーゼの異常レベル、コレステロールの減少、低カルシウム血症およびトロンビン生成の遅延を伴う。
【０００５】
1990年代に、中年層の人がアスピリンを頻繁に摂取すると、卒中や心臓病を予防する統計的に有意義な効果があることが分かった。明らかに、アスピリンには穏やかな抗凝血作用の特性があるため、血栓を予防し、これにより血液循環を向上させるのである。
【０００６】
アスピリンは有害反応が軽微で充分な治療効果があり、安価であるため、広く店頭販売薬として使われている。しかし、多量に摂取される場合、特にリウマチや関節炎による変形性の痛みを軽減する治療効果に必要な量の場合、アスピリンは胃潰瘍や虚血または上部消化管の出血の原因となることがある。出血は多量ではないが、アスピリンの多量摂取の期間が継続的になると深刻な問題を及ぼす。特に、消化器官に病気がある場合、アスピリンの過剰摂取は死に至ることもあり、少なくとも潰瘍、胃拡張および前胃枝薄弱のような中毒症状の原因となることがある。アメリカ合衆国特許第4,491,574号明細書で、Seiferらは1985年に、ビタミンAの同時または事前摂取により胃液分泌を増やすことでアスピリンの中毒を弱める解決策を提供した。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明では代わりに、鎮痛をもたらすために大量のアスピリン摂取が必要な場合に、相乗的効果のある鎮痛剤との組み合わせによってアスピリン投与量を軽減するアプローチを開示する。
【０００８】
テトロドトキシン(TTX)は鎮痛、局部麻酔および抗痙攣のような薬理学効果を持つ、強力な非タンパク系の神経毒である。TTXは様々な種類の鈍痛及び鋭痛を著しく軽減させながら、依存症を引き起こさない。しかし、その臨床応用価値は投与量により限界がある。実用性の見地から、薬同士の相乗的な相互作用が研究された。相乗的鎮痛剤としてTTXを臨床使用する可能性を評価するために、化学的刺激モデル、すなわち、マウスにおける酢酸によるライジング試験（解熱性鎮痛剤に敏感）を採用し、TTXと、解熱鎮痛薬であるアスピリンで、低投与量における相互作用を観察した。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、哺乳動物に相乗的鎮痛効果をもたらすための薬剤製造における、ナトリウムチャンネルアルファサブユニットの細胞外領域のSS1またはSS2部位に結合するナトリウムチャンネル遮断化合物とアスピリンの組み合わせの使用に関する。
本発明によると、前述のナトリウムチャンネル遮断化合物とアスピリンは相乗的鎮痛効果をもたらすよう、別々の投薬形態で、または一度に合わせて投与されるように設計される。投与経路は注射を含むが、これに限られることはない。
本発明によると、前述のナトリウムチャンネル遮断化合物は、テトロドトキシンおよび、またはその誘導体で、テトロドトキシン、デヒドロテトロドトキシン、アミノテトロドトキシン、メトキシテトロドトキシン、エトキシテトロドトキシン、デオキシテトロドトキシンまたはテトロドニック酸のうちの少なくとも１つからなる。これらの投与量の範囲は投与対象の体重1キログラム当たり0.01μgから20 μgである。
【００１０】
本発明によると、前述のアスピリン類似化合物はサリチル酸またはサリチル酸塩で、投与量の範囲は投与対象の体重1キログラム当たり0.02mgから200mgである。
前述のナトリウムチャンネル遮断化合物は、分子式Ｃ10Ｈ17Ｎ7Ｏ4の化合物であるサキシトキシンまたはその誘導体を含む。
【発明の効果】
【００１１】
本発明は、特に現行の解熱鎮痛剤があまり効かないタイプの急性および慢性疼痛に対して、鎮痛効果を高め、使用薬剤の投与量を減らす目的で少量のテトロドトキシンと組み合わせて使用し、その結果有害反応を減らすという、斬新なアプローチを臨床的な疼痛治療に提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下に、幾つかの例を参照しながら本発明の詳細を説明する。
TTXが鎮痛をもたらす作用のメカニズムは、TTX感受性(TTX-S)ナトリウムチャンネルを遮断することによるニューロンのパルス発生および伝達の阻害と、これによる内向きナトリウム電流の阻害である。解熱鎮痛薬としてのアスピリンは、プロスタグランジン(PG)の合成を抑止し、プロスタグランジン(PGE2)の痛覚誘発および痛覚過敏効果を低下させるために、シクロオキシゲナーゼを阻害し、ブラジキニンの疼痛誘発効果も軽減する。
【００１３】
組織損傷による痛覚過敏は最低でも２つのメカニズムに関係していることが、文献(Cesare P, Mcnaughton P, Peripheral pain mechanisms. Curr Opin Neurobiol 7(4):493-9, 1997 Aug)の中で明らかにされている。１つは熱性刺激を増加させるブラジキニンによるナトリウム電流と、もう１つはTTX抵抗性ナトリウムチャンネルを含むPGE2に影響された幾つかのタイプのイオンチャンネルのゲート電圧である。PGE2の痛覚過敏効果はTTX-Rナトリウムチャンネルに関係しており(Khasar SG; Gold MS; Levine JD. A tetrodotoxin-resistant sodium current mediates inflammatory pain in the rat. Neurosci Lett, 256(1):17-20，1998 Oct 30)、PGE2がTTX抵抗性ナトリウム電流(TTX-RINa)の振幅を上げることでTTX-Rナトリウムチャンネルの活動を増幅させる。慢性疼痛の場合は、侵害受容器の感作はTTX-Rナトリウムチャンネルを通じて媒介される(Tanaka M; Cummins TR; Ishikawa K; Dib-Hajj SD; Black JA; Waxman SG, SNS Na+ channel expression increases in dorsal root ganglion neurons in the carrageenan inflammatory pain model. Neuroreport 9(6):967-72, 1998 Apr 20)、(Kral MG; Xiong Z; Study RE, Alteration of Na+ currents in dorsal root ganglion neurons from rats with a painful neuropathy. Pain 81(1-2):15-24, 1999 May)。従って、TTX-Rチャンネルを遮断することで鎮痛効果をもたらすことが出来る。(Akopian AN; Souslova V; England S; Okuse K; Ogata N; Ure J; Smith A; Kerr BJ; McMahon SB; Boyee S; Hill R; Stanfa LC; Dickenson AH; Wood JN， The tetrodotoxin-resistant sodium channel SNS has a specialized function in pain pathways. Nat Neurosci 2(6):541-8, 1999 Jun)。これは、以前のマウスにおける熱によるテイルフリック試験で、投与量の増加に伴ってTTXの鎮痛効果が高まることがなかったことを説明する。アスピリンはPGE2の合成を抑止することでTTX-Rチャンネルに伝達されたナトリウム電流を減少させ、鎮痛を引き起こす。よって、TTX感受性およびTTX抵抗性ナトリウムチャンネルを共同で同時に抑制しうるため、アスピリンとTTXを組み合わせることによる相乗的な鎮痛が仮定される。
【００１４】
マウスにおける酢酸によるライジング試験では、テトロドトキシンは、投与量1/25および1/50 LD50 (0.79μg/kg、0.39μg/kg)でそれぞれ40.6%および27.7%の抑制率で、文献の通りであった(Data and References of Main Pharmacodynamics Studies for Tetrodotoxin Injection, Drug Product File 12)。アスピリンと組み合わせると、同様の２つのレベルの投与量において、アスピリンの半抑制量(ID50)は単独使用時の44.1 mg/kgから、5.0 mg/kgおよび10.0mg/kgに、95％抑制量(ID95)は単独使用時の361.8mg/kgから、94.5mg/kgおよび154.3mg/kgに、それぞれ減少した。アイソボログラム分析ではアスピリンとTTXの間に特筆すべき相乗的な相互作用があることが示された。
【実施例】
【００１５】
1. 材料と方法
1.1 動物
昆明マウス、18-22グラム、雌雄半々、Experimental Animal Center of Beijing University, Medical Branch供給。品質認可番号013056。等級1。
1.2 被験物質と試薬
テトロドトキシン(TTX)、純度95%、Nanning Maple Leaf Pharmaceutical Co., LTD.供給、バッチ番号0324C。クエン酸緩衝液で必要な濃度に希釈。
アスピリン(ASP)、粉末、純度99%、Shandong Xinhua Pharmaceutical Factory製造、バッチ番号0005564。砕いた後0.5%ナトリウムカルボキシメチルセルロース(CMC)溶液で希釈。氷酢酸、分析上純粋、Beijing 52952 Chemical Factory製造、バッチ番号991117。
【００１６】
1.3 方法
マウスにおける酢酸によるライジング試験(Shuyun XU; Rulian BIAN; Xiu CHEN, Methodology of Pharmacology Experiments)。380匹のマウスが選ばれ、実験前12時間は絶食させ水のみを与えた。任意に19グループに分けられた。
内訳は対照グループ(CMC溶液)、ASPのみのグループ(25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg、200 mg/kgの全5グループ)、TTXのみのグループ(投与量が1/25および1/50 LD50、または各0.79および0.39μg/kg)、組み合わせのグループはTTX(0.39μg/kg)＋ASP(6 mg/kg、12.5 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg、75 mg/kg)、およびTTX(0.79μg/kg)＋ASP(3 mg/kg、6 mg/kg、12.5 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg、75 mg/kg)。TTXのみ、またはASPのみのグループはマウスに筋投与を行った。組み合わせのグループではマウスの体の左右に薬をそれぞれ0.1 mL/10 g筋投与した。40分後に、痛みを起こすため0.6%氷酢酸が腹腔内投与された。続く15分間に、ライジング行動が観察され記録された。マウスが腰椎の筋肉を繰り返し収縮させる、腹部をへこませる、胴体および後ろ足を伸ばす、臀部を引き上げるといった行動を表した時にライジング行動の兆候が現れたものとした。ライジング抑制率は下記の式に従って計算した。
抑制率(%) ＝ (対照グループのライジング発生 − 被験グループのライジング発生)／対照グループのライジング発生×100%
半抑制率(ID50)はプロビット法を用いて測定された。
【００１７】
1.4 統計分析
SPSSソフトウエアが統計分析に採用され、アイソボログラム分析が薬同士の相互作用の試験に行われた。(Duanzheng XU, Application of Biostatistics in Pharmacology, Science Publishing, 1986, 357-359)、(Shuqin YANG, Medical Statistics, Encyclopedia of Chinese Medical Sciences, Shanghai Science and Technology Publishing, 1985, 197)。
【００１８】
2. 結果
表１に示されているとおり、マウスにおける酢酸によるライジング試験において、アスピリン単独では44.11 mg/kgの半抑制量(ID50)であった。TTX少量(1/25および1/50 LD50)との組み合わせでは、アスピリンのID50値はそれぞれ5.01 mg/kgおよび96 mg/kgまで減少し、ID95は361.77 mg/kg から、それぞれ94.47mg/kgおよび154.33mg/kgまで減少した。ID50とID95はどちらも半分以下に減少した。
【００１９】
【表１】
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【国際公開パンフレット】
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2004534821.tif 000011
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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