(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）2004517928.tif 000047を有する新規な化合物に関し、ここでＣｙ、Ｘ、Ｙ、Ｌ及びＲ１−６はここで定義される通りである。該化合物は、白血球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）のようなＣＤ１１／ＣＤ１８接着レセプターに結合し、よって、炎症及び自己免疫疾患のような、ＬＦＡ−１によって媒介される疾患を治療するのに有用である。
2004517928.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ｉ）：
2004517928.tif 000046
［上式中、
Ｃｙは、ヒドロキシル、メルカプト、チオアルキル、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミノアルキル、アミジン、グアニジン、ニトロ、アルキル、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい非芳香族炭素環又は複素環であり；
Ｘは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、アミノ、アミノアルキル、ニトロ、オキソ又はチオで置換されていてもよく、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２が挿入されていてもよい二価の炭化水素鎖であり；
Ｙは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、オキソ、チオ、チオアルキル、アミノ、アミノアルキル、炭素環又は複素環、炭化水素、ハロ置換炭化水素、アミノ、アミジン、グアニジン、シアノ、ニトロ、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｌは、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ又はチオで置換されていてもよく、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２あるいはアミノ酸残基が挿入されていてもよい二価の炭化水素鎖又は結合であり；３又は５未満の原子であり、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、アミノ、Ｏ−炭素環又はアルコキシで、アミノ、炭素環又は複素環で置換されていてもよいものであり；
Ｒ２−５は、独立して、Ｈ、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、シアノ、アミノ、アミジン、グアニジン、ニトロ又はアルコキシであり；あるいはＲ３及びＲ４は共同して、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミジン、グアニジン又はアルコキシで置換されていてもよい縮合炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ６はＨ又は炭素環又は複素環で置換されていてもよい炭化水素鎖であり、
但し、Ｙがフェニルであり、Ｒ２、Ｒ４及びＲ５がＨであり、Ｒ３がＣｌであり、Ｒ１がＯＨである場合、Ｘはシクロヘキシル以外である］
の化合物；並びにそれらの塩、溶媒和物及び水和物。
【請求項２】
Ｃｙが、ヒドロキシル、メルカプト、チオアルキル、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミノアルキル、アミジン、グアニジン、ニトロ、アルキル、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい５員又は６員の非芳香族複素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
上記複素環が一又は二のヘテロ原子を含み、ヒドロキシル、オキソ、メルカプト、チオ、アルキル又はアルカノイルで置換されていてもよい、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
上記複素環が、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、オキサゾリジン、シクロプロパ−ピロリジン及びチアゾリジンで、ヒドロキシ、オキソ、メルカプト、チオ、アルキル又はアルカノイルで置換されていてもよいものからなる群から選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
上記複素環が、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、オキサゾリジン、チアゾリジンで、ヒドロキシ、オキソ、メルカプト、チオ、アルキル又はアルカノイルで置換されていてもよいものからなる群から選択される、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｃｙが、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミジン、グアニジン、アルキル、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい３−６員の炭素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
上記炭素環が部分的に不飽和である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｃｙが、シクロプロピル、シクロプロペニル、シクロブチル、シクロルブテニル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル又はシクロヘキセニルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘが、一又は複数の炭素原子がＮ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２で置き換えられていてもよく、ヒドロキシル、オキソ又はチオで置換されていてもよいＣ１−５の二価の炭化水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｘが、−ＣＨ２−ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−であり、そのカルボニル−Ｃ（Ｏ）−部分がＣｙに共有結合し、Ｒ６がＨ又はアルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙが、ヒドロキシル又はハロゲンで置換されていてもよい炭素環又は複素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｙが、フラン−２−イル、チオフェン−２−イル又はフェニルであり、該フェニルはハロゲン又はヒドロキシルで置換されていてもよい、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｌが、一又は複数の炭素原子がＮ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２で置き換えられていてもよく、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ又はチオで置換されていてもよい二価の炭化水素であり；あるいは炭化水素の３個の炭素原子がアミノ酸残基で置き換えられている、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｌが、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ６−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＯＨ）−、−（ＣＨ２）３−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−ＣＨ（Ｒ７）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−、ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（Ｒ７）−ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−又は−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＦ２−ＣＨ２− であり、各Ｒ６は独立してＨ又はアルキルであり、Ｒ７はアミノ酸側鎖である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１がＨ、ＯＨ、アミノ、Ｏ−炭素環又は炭素環で置換されていてもよいアルコキシである、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１がＨ又はＣ１−４アルキルオキシである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ２とＲ３の少なくとも一方がハロゲンであり、他方がＨ又はハロゲンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ２とＲ３が共にＣｌである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ４とＲ５が共にＨである、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
医薬的に許容可能なアジュバント、希釈剤又は担体と共に請求項１に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項２１】
蛋白リガンドに対するＬＦＡ−１の結合を阻害する方法であって、ＬＦＡ−１を請求項１に記載の化合物と接触させることを含んでなる方法。
【請求項２２】
哺乳動物におけるＬＦＡ−１により媒介される疾患又は症状を治療する方法において、有効量の請求項１に記載の化合物を上記哺乳動物に投与することを含んでなる方法。
【請求項２３】
上記疾患又は症状が、関節炎、乾癬、移植臓器拒絶、喘息及び炎症性腸疾患である、請求項２に記載の方法。
【請求項２４】
哺乳動物における炎症性疾患又は症状を抑制する方法において、有効量の請求項１に記載の化合物を上記哺乳動物に投与することを含んでなる方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明はＣＤ１１／ＣＤ１８接着レセプター、特にリンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）に結合する新規化合物、並びにそれによって媒介される疾患の治療に有用な、これら化合物を含む医薬組成物に関する。
【０００２】
（発明の背景）
炎症
ヒト末梢血は、主に赤血球、血小板及び白血球（ｗｈｉｔｅ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ又はｌｅｕｋｏｃｙｔｅ）からなる。白血球のファミリーは、更に好中球、リンパ球（殆どＢ−及びＴ−細胞サブタイプ）、単球、好酸球及び好塩基球に分類される。好中球、好酸球及び好塩基球は、それらの細胞質の顆粒状の外観とそれらの複数の核により「顆粒球」又は「多形核（ＰＭＮ）顆粒球」と呼ばれることがある。顆粒球及び単球は、それらの微生物及び一般に「抗原」と呼ばれる異物を食菌又は摂取する能力により、しばしば「貪食細胞」として分類される。単球は、それらの大きな単一の核のためにそう呼ばれ、これらの細胞は翻ってマクロファージになることもある。貪食細胞は種々の感染から宿主を防御するのに重要であり、リンパ球とともに炎症疾患にも関連している。好中球は、ヒトの末梢血中の最も普通に見られる白血球であり、リンパ球がそれに直ぐ続く。正常なヒト末梢血１マイクロリットル中に、約６０００の白血球があり、その約４０００が好中球、１５００がリンパ球、２５０が単球、１５０が好酸球、２５が好塩基球である。
【０００３】
炎症反応の間に、末梢血白血球は、連続した特異的な細胞性相互作用により炎症又は損傷部位に補充される（図１参照）。免疫機能の開始及び維持は、細胞間接着相互作用並びに白血球と他の細胞との間の相互作用によってもたらされるシグナル伝達によって調節される。白血球の血管内皮への接着と循環から炎症部位への移動は、炎症反応における重要な過程である（図１）。Ｔ細胞リンパ球免疫認識には、Ｔ細胞レセプターと（主要組織適合性複合体と組み合わされた）抗原、並びにＴ細胞の抗原提示細胞への結合を促進しＴ細胞活性化シグナルを伝達する接着レセプターとの相互作用を必要とする。リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）は、リンパ球接着と正常な免疫反応に導く活性化、並びに幾つかの病理学的状態を媒介する主要なインテグリンとして同定された（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ， Ｔ．Ａ．， Ｎａｔｕｒｅ  ３４６： ４２５−４３４（１９９０））。免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーである細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）−１、−２、及び−３は、内皮、白血球及び他の細胞型で見られるＬＦＡ−１のリガンドである。ＬＦＡ−１のＩＣＡＭへの結合は、抗原提示細胞に応答してのヘルパーＴ細胞のリンホカイン生成、Ｔリンパ球媒介標的細胞溶解、腫瘍細胞の自然殺傷、及びＴ細胞−Ｂ細胞相互作用による免疫グロブリン生成を含むある範囲のリンパ球機能を媒介する。このように、リンパ球機能の多くの側面は、ＬＦＡ−１インテグリンとそのＩＣＡＭリガンドとの相互作用を含む。これらのＬＦＡ−１：ＩＣＡＭに媒介された相互作用は、移植片拒絶、皮膚炎、乾癬、喘息及び慢性関節リウマチを含む数多くの炎症性疾患状態に直接関与している。
【０００４】
リンパ球上のＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）は、慢性炎症及び免疫反応において鍵となる役割を果たしているが、白血球インテグリンファミリーの他のメンバー（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８、ＣＤ１１ｃ／ＣＤ１８及びＣＤ１１ｄ／ＣＤ１８）も、顆粒球及び単球などの他の白血球に対して、特に感染物質に対する初期反応及び急性炎症反応において重要な役割を果たす。
【０００５】
好中球、好酸球及び好塩基球系統から誘導された多形核白血球の主要な機能は、炎症性刺激を知覚し、内皮障壁を横切って遊出して宿主防御の第一線としてスカベンジャー作用を行うことである。インテグリンＭａｃ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）は、活性化及びその多数のリガンドへの結合に際してこれらの細胞上で即座にアップレギュレートされ、酸素由来のフリーラジカル、プロテアーゼ及びホスホリパーゼの放出をもたらす。ある種の慢性的炎症状態では、この補充が不適切に調節され、重大な細胞性及び組織性損傷をもたらす。（Ｈａｒｌａｎ， Ｊ．Ｍ．， Ａｃｔａ Ｍｅｄ Ｓｃａｎｄ Ｓｕｐｐｌ．， ７１５： １２３ （１９８７）； Ｗｅｉｓｓ， Ｓ．， Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊ． ｏｆ Ｍｅｄ．， ３２０： ３６５ （１９８９））。
【０００６】
ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）及びＭａｃ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）
接着レセプター分子の（ＣＤ１１／ＣＤ１８）ファミリーは、４種の非常に関連した細胞表面糖蛋白；ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、Ｍａｃ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）、ｐ１５０．９５（ＣＤ１１ｃ／ＣＤ１８）及び（ＣＤ１１ｄ／ＣＤ１８）を含む。ＬＦＡ−１はマクロファージのサブセットを除く全ての成熟白血球の表面に存在し、主要なリンパ球インテグリンと考えられる。Ｍａｃ−１、ｐ１５０．９５及びＣＤ１１ｄ／ＣＤ１８の発現は、骨髄系統の細胞（好中球、単球、マクロファージ及び肥満細胞を含む）に主に制限されている。機能的研究は、ＬＦＡ−１が、ＩＣＡＭ−１（Ｒｏｔｈｌｅｉｎｅｔ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３７： １２７０−１２７４ （１９８６））、ＩＣＡＭ−２（Ｓｔａｕｔｏｎ等， Ｎａｔｕｒｅ ３３９： ３６１−３６４ （１９８９））、ＩＣＡＭ−３（Ｆａｗｃｅｔｔ等， Ｎａｔｕｒｅ ３６０： ４８１−４８４ （１９９２）； Ｖｅｚｅｕｘ等， Ｎａｔｕｒｅ ３６０： ４８５−４８８ （１９９２）； ｄｅ Ｆｏｕｇｅｒｏｌｌｅｓ及びＳｐｒｉｎｇｅｒ， Ｊ． Ｅｘｐ． Ｍｅｄ． １７５： １８５−１９０ （１９９０））及びテレンセファリン（Ｔｉａｎ 等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １５８： ９２８−９３６ （１９９７））を含む幾つかのリガンドと相互作用することを示唆している。
【０００７】
ＣＤ１１／ＣＤ１８ファミリーは、胚形成、細胞外基質への接着、及び細胞分化を含む細胞接着性相互作用を変調させるレセプターのより大きなインテグリンファミリーと構造的かつ遺伝学的に関連している（Ｈｙｎｅｓ， Ｒ．Ｏ．， Ｃｅｌｌ ４８： ５４９−５５４ （１９８７）； Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ等， Ａｄｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ４６： １４９−１８２ （１９８９）； Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ等， Ｃｅｌｌ ４８： ６８１−６９０ （１９８７）； Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ等， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３８： ４９１−４９７ （１９８７））。
【０００８】
インテグリンは、βサブユニットと非共有結合したαサブユニットを含む膜貫通ヘテロ二量体の一クラスである。βサブユニットは一般的に１より多いαサブユニットと結合でき、共通のβサブユニットを有するヘテロ二量体はインテグリン集団のサブファミリーとして分類されている（Ｌａｒｓｏｎ及びＳｐｒｉｎｇｅｒ， 「Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ」，  Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｒｅｖ． １１４： １８１−２１７ （１９９０））。
【０００９】
ＣＤ１１／ＣＤ１８ファミリーのインテグリン分子とそれらの細胞性リガンドは、特に免疫における種々の細胞−細胞相互作用を媒介することが見出されている。これらの蛋白は、免疫系における接着作用に重要であることが証明されている（Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ等， Ａｄｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ４６： １４９−１８２ （１９８９））。ＬＦＡ−１に対するモノクローナル抗体が、内皮細胞への白血球接着を阻止すること（Ｄｕｓｔｉｎ等， Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １０７： ３２１−３３１ （１９８８）； Ｓｍｉｔｈ等， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ８３： ２００８−２０１７ （１９８９））、及びＴ細胞活性化（Ｋｕｙｐｅｒｓ等， Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １４０： ４６１ （１９８９））、抗原特異的なＣＴＬ殺傷に必要な複合体形成（Ｋｉｓｈｉｍｉｔｏ等， Ａｄｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ４６： １４９−１８２ （１９８９））、Ｔ細胞増殖（Ｄａｖｉｇｎｏｎ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １２７： ５９０−５９５ （１９８１））及びＮＫ細胞殺傷（Ｋｒｅｎｓｋｙ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３１： ６１１−６１６ （１９８３））を阻害することが示されている。
【００１０】
ＩＣＡＭ類
ＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）は、免疫グロブリン蛋白スーパーファミリーのメンバーである細胞表面接着レセプターである（Ｒｏｔｈｌｅｉｎ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３７： １２７０−１２７４ （１９８６）； Ｓｔａｕｎｔｏｎ等， Ｃｅｌｌ ５２： ９２５−９３３ （１９８８））。このスーパーファミリーのメンバーは、一又は複数のＩｇ相同性領域の存在を特徴とし、各々が、２つのシートに配置される多数の反平行βプリーツ鎖を有するジスルフィド架橋ループからなる。３つの型の相同性領域が同定されており、各々が典型的な長さを持ちジスルフィド結合のシステインの間に位置するアミノ酸残基のコンセンサス配列を有している（Ｗｉｌｌｉａｍｓ， Ａ．Ｆ．等， Ａｎｎ Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６： ３８１−４０５ （１９８８）； Ｈｕｎｋａｐｉｌｌａｒ， Ｔ．等， Ａｄｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ４４： １−６３ （１９８９））。ＩＣＡＭ−１は、種々の造血及び非造血細胞で発現され、種々の炎症メディエータによって炎症部位においてアップレギュレートされる（Ｄｕｓｔｉｎ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １３７： ２５６−２５４ （１９８６））。ＩＣＡＭ−１は９００００−１１００００Ｍｒ糖蛋白であり、低いメッセンジャーＲＮＡレベル及び非刺激内皮細胞上での中程度の表面発現性を有する。ＬＰＳ、ＩＬ−１及びＴＮＦはＩＣＡＭ−１のｍＲＮＡと約１８−２４時間にピークの発現を持つ表面発現を強くアップレギュレートする（Ｄｕｓｔｉｎ等， Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １０７： ３２１−３３１ （１９８８）； Ｓｔａｕｎｔｏｎ等， Ｃｅｌｌ ５２： ９２５−９３３ （１９８８））。ＩＣＡＭ−１は５つの細胞外Ｉｇ様ドメイン（ドメイン１，２，３，４及び５、又はＤ１，Ｄ２，Ｄ３，Ｄ４及びＤ５と命名）と細胞内又は細胞質ドメインを有する。ドメインの構造と配列はＳｔａｕｔｏｎ等（Ｃｅｌｌ ５２： ９２５−９３３ （１９８８））に記載されている。
【００１１】
ＩＣＡＭ−１は元々はＬＦＡ−１に対するカウンターレセプターと定義された（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ等， Ａｎｎ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ５： ２２３−２５２ （１９８７）； Ｍａｒｌｉｎ， Ｃｅｌｌ ５１： ８１３−８１９ （１９８７）； Ｓｉｍｍｏｎｓ等， Ｎａｔｕｒｅ ３３１： ６２４−６２７ （１９８８）； Ｓｔａｕｎｔｏｎ， Ｎａｔｕｒｅ ３３９： ６１−６４ （１９８９）； Ｓｔａｕｎｔｏｎ等， Ｃｅｌｌ ５２： ９２５−９３３ （１９８８））。ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１相互作用は、少なくとも部分的に内皮細胞へのリンパ球接着（Ｄｕｓｔｉｎ等， Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １０７： ３２１−３３１ （１９８８）； Ｍｅｎｔｚｅｒ等， Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｐｈｙｓｉｏｌ． １２６： ２８５−２９０ （１９８６））、単球接着（Ａｍａｏｕｔ等， Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ． １３７： ３０５ （１９８８）； Ｍｅｎｔｚｅｒ等， Ｊ． Ｃｅｌ． Ｐｈｙｓｉｏｌ． １３０： ４１０−４１５ （１９８７）；ｔｅ Ｖｅｌｄｅ等， Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６１：２６１−２６７ （１９８７））、及び好中球接着（Ｌｏ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４３（１０）： ３３２５−３３２９ （１９８９）； Ｓｍｉｔｈ等， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ８３： ２００８−２０１７ （１９８９））に寄与していることが知られている。ＩＣＡＭ−１に対する機能阻止モノクローナル抗体の開発を通して、ＬＦＡ−１に対する更なるリガンドであるＩＣＡＭ−２及びＩＣＡＭ−３が同定されており（Ｓｉｍｍｏｎｓ， Ｃａｎｃｅｒ Ｓｕｒｖｅｙｓ ２４， Ｃｅｌｌ Ａｄｈｅｓｉｏｎ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ， １９９５）、それらはリンパ球の他の白血球並びに非造血細胞への接着を媒介する。ＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−２との相互作用はナチュラルキラー細胞活性を媒介すると考えられ（Ｈｅｌａｎｄｅｒ等， Ｎａｔｕｒｅ ３８２： ２６５−２６７ （１９９６））、ＩＣＡＭ−３結合はリンパ球活性化及び免疫反応の開始において役割を果たすと考えられる（Ｓｉｍｍｏｎｓ， 上掲）。正常及び異常な免疫反応におけるこれらのリガンドの正確な役割はまだ決定されなければならない。
【００１２】
Ｔリンパ球に媒介される疾患
機能阻止モノクローナル抗体は、Ｔリンパ球媒介死滅、Ｔ−ヘルパーリンパ球反応、自然死滅、及び抗体依存的死滅においてＬＦＡ−１が重要であることを示した（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ等， Ａｎｎ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ５： ２２３−２５２ （１９８７））。標的細胞への接着並びに活性化及びシグナル伝達は、ＬＦＡ−１に対する抗体によって阻止される過程である。
【００１３】
多くの疾患及び疾病がＴリンパ球を通して媒介され、これらの疾患の治療は多くの経路を通してなされてきた。慢性関節リウマチ（ＲＡ）は、そのような疾患の一つである。ＲＡの現在の治療法は、ベッドでの休息、温度及び薬剤の適用を含む。サリチル酸塩は、特に免疫抑制剤及びアデノコルチコステロイド等の他の代替物が、その疾患自体より大きな病的状態を生ずる可能性があるため、現在好ましいとされる治療薬である。非ステロイド系抗炎症薬が利用可能であり、それらの多くはＲＡ患者に対して有効な鎮痛、解熱及び抗炎症活性を有する。これらは、シクロスポリン、インドメタシン、フェニルブタゾン、イブプロフェン及びフェノプロフェン等のフェニル酢酸誘導体、ナフタレン酢酸（ナプロキセン）、ピロールアルカン酸（トメチン（ｔｏｍｅｔｉｎ））、インドール酢酸（スリンダク）、ハロゲン化アンスラニル酸（メクロフェナム酸ナトリウム）、ピロキシカム、及びジフルニサルを含む。ＲＡで用いられる他の薬剤は、クロロキン、金塩及びペニシラミン等の抗マラリア薬を含む。これらの代替物は、網膜損傷及び腎臓及び骨髄毒を含む重篤な副作用を生ずることが多い。メトトレキセート等の免疫抑制剤は、それらの毒性のため、重篤で間断のないＲＡの治療にのみ使用されている。またコルチコステロイドも望ましくない副作用を起こし（例えば、白内障、骨粗しょう症、及びクッシング病症候群）、多くのＲＡ患者で良好には寛容されない。
【００１４】
Ｔリンパ球に媒介される他の疾患は、移植後の移植片の宿主拒絶である。移植された同種移植片及び異種移植片の生存を長くし、又は宿主対移植片拒絶を防止するための試みは、実験モデルと医療実務の両方において、主として宿主／レシピエントの免疫機構の抑制に集中していた。この治療の目的は予防的免疫抑制及び／又は移植片拒絶の治療である。予防的免疫抑制に使用される薬剤の例には、細胞毒性薬、抗−代謝薬、コルチコステロイド、及び抗−リンパ球血清が含まれる。予防的免疫抑制において特に有効であることが分かった非特異的免疫抑制剤（アザチオプリン、ブロモクリプチン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、最も最近ではシクロスポリンＡ）は、移植の臨床的成功を有意に改善した。網膜移植後のシクロスポリンＡの腎毒性は、プレドニゾロン等のステロイドの同時投与、又はアザチオプリンと組み合わせたプレドニゾロンによって低減されている。更に、抗−リンパ球グロブリン、ついでシクロスポリンＡを用いることにより腎臓が成功裏に移植されている。評価される他のプロトコールは、移植前にレシピエントに全リンパ照射を施し、移植後の免疫抑制を最小にするものである。
【００１５】
拒絶の治療は、ステロイド、２−アミノ−６−アリール−５−置換ピリミジン、異種抗−リンパ球グロブリン、及びＯＫＴ−３を含む種々の白血球集団に対するモノクローナル抗体の使用を含んでいた。一般には、Ｊ． Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ， １１１： １００４−１００７ （１９８７）、特に米国特許第４６６５０７７号を参照のこと。
【００１６】
免疫抑制剤の第一に厄介な問題は感染である。加えて、全身性免疫抑制には、望ましくない毒性作用（例えば、網膜移植後にシクロスポリンＡが使用された場合の腎毒性）と造血幹細胞のレベル低下が伴う。また免疫抑制剤は、肥満、創傷治癒の低下、ステロイド高血糖、ステロイド精神病、白血球減少、胃腸出血、リンパ腫及び高血圧をもたらすことがある。
【００１７】
これらの厄介な問題に鑑みて、移植免疫学者は、抗原特異的な形で免疫反応性を抑制する（そしてドナーの同種抗原に対する反応のみを無くす）ための方法を探索した。更に、自己免疫疾患が専門の医師は、自己免疫反応性を抑制して自己抗原に対する反応のみを無くす方法を得ようと努力した。このような特異的な免疫抑制は、一般に、移植される組織の抗原性かあるいは拒絶を媒介することができる特定の細胞のいずれかを改変することにより達成された。ある場合には、免疫性又は寛容性が誘発されるか否かは、抗原が免疫系に提示される方式に依存する。
【００１８】
同種移植組織を移植前に組織培養で成長させることにより前処理すると、ＭＨＣ障壁を越えて永久に許容されることが２つのマウスモデル系において見出されている。Ｌａｆｆｅｒｔｙ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ２２： １３８−１４９ （１９７６）； Ｂｒｏｗｅｎ等， Ｌａｎｃｅｔ ２： ５８５−５８６ （１９７９）。このような処理がパッセンジャーリンパ球の枯渇、よって組織免疫原性に必要なスティミュレーター細胞集団の不存在をもたらすと仮説された。Ｌａｆｆｅｒｔｙ等， Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １： １４３ （１９８３）。また、Ｌａｆｆｅｒｔｙ等， Ｓｃｉｅｎｃｅ， １８８： ２５９−２６１ （１９７５）（器官培養に保持された甲状腺）、及びＧｏｒｅｓ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １３７： １４８２−１４８５ （１９８６）及びＦａｕｓｔｍａｎ等， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ．， ７８： ５１５６−５１５９ （１９８１）（移植前にマウス抗−Ｉａ抗血清及び補体で処理された島細胞）も参照のこと。また、リンパ球毒性薬及びガンマ線照射で前処理され、インビトロで１０日間培養されたドナー動物から取り出された甲状腺は、任意の正常な同種レシピエントに拒絶されなかった（Ｇｏｓｅ及びＢａｃｈ， Ｊ． Ｅｘｐ． Ｍｅｄ．， １４９： １２５４−１２５９ （１９７９））。これらの技術は全てドナーのリンパ球細胞の枯渇又は除去を含んでいる。
【００１９】
血管及び腎臓移植などの幾つかのモデルでは、クラスＩＩマッチと長くなった同種移植片の生着率の間に相関があるが、皮膚移植片では相関は存在しない（Ｐｅｓｃｏｖｉｔｚ等， Ｊ． Ｅｘｐ． Ｍｅｄ．， １６０： １４９５−１５０８ （１９８４）； Ｃｏｎｔｉ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． Ｐｒｏｃ．， １９： ６５２−６５４ （１９８７））。従って、ドナー−レシピエントＨＬＡマッチが利用された。更に、移植前の輸血が有効であることも分かった（Ｏｐｅｌｚ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． Ｐｒｏｃ．， ４： ２５３ （１９７３）； Ｐｅｒｓｉｊｎ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． Ｐｒｏｃ．， ２３： ３９６ （１９７９））。移植前の輸血、ドナー−レシピエントＨＬＡマッチ、及び移植後の免疫抑制治療（シクロスポリンＡ）の組み合わせは、移植片の生着率の割合を有意に増加させ、その効果は相加的であることが分かった（Ｏｐｅｌｚ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． Ｐｒｏｃ．， １７： ２１７９ （１９８５））。
【００２０】
また移植反応は、免疫レセプターにおいてＭＨＣ抗原に向けられた抗体によっても変調されうる（Ｂｌｕｅｓｔｏｎｅ等， Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｒｅｖ． ９０： ５−２７ （１９８６））。更に、移植片の生着率は、次には特異的免疫抑制を生ずる宿主反応を導く抗移植片抗体の存在によっても延長できる（Ｌａｎｃａｓｔｅｒ等， Ｎａｔｕｒｅ， ３１５： ３３６−３３７ （１９８５））。宿主のＭＨＣ抗原に対する免疫反応は、器官移植のための準備手法として骨髄移植を用いることにより特異的に変調させうる。よって、抗−Ｔ細胞モノクローナル抗体がドナー骨髄接種材料から成熟Ｔ細胞を除去し、宿主対移植片疾患を起こさないで骨髄移植を可能にするために使用される（Ｍｕｅｌｌｅｒ−Ｒｕｃｈｈｏｌｔｚ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．， ８： ５３７−５４１ （１９７６））。更に、骨髄移植のために残される宿主のリンパ球の成分は、完全に同種異系の移植組織が用いられる場合に起こる免疫機能不全の問題を解決する。
【００２１】
図１に示すように、内皮へのリンパ球接着は炎症過程の鍵となる事象である。Ｔ細胞及び内皮細胞の活性化状態に応じて、内皮へのリンパ球接着の少なくとも３つの知られた経路がある。Ｔ細胞免疫認識は、Ｔ細胞レセプター並びに接着レセプターの寄与を必要とし、それはＴ細胞の抗原提示細胞への結合を促進しＴ細胞活性化の調節シグナルを伝達する。リンパ球機能関連（ＬＦＡ）抗原−１（ＬＦＡ−１、ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、αＬβ２：ここで、αＬはＣＤ１１ａでありβ２はＣＤ１８である）は、幾つかの病理状態を導くこれらの細胞接着性相互作用に関連するリンパ球上の主要なインテグリンレセプターとして同定されている。内皮細胞免疫グロブリン様接着分子であるＩＣＡＭ−１は、ＬＦＡ−１の既知のリガンドであり、移植拒絶、乾癬、及び関節炎に直接関与している。
【００２２】
ＬＦＡ−１は、抗原提示細胞に応答してのヘルパーＴ細胞のリンホカインの生成、キラーＴ細胞媒介標的細胞溶解、及びＴ細胞／Ｂ細胞相互作用を介する免疫グロブリンの生成を含むある範囲の白血球機能に必要とされる。Ｔ細胞及びＢ細胞上の抗原レセプターの活性化は、ＬＦＡ−１がそのリガンドに高い親和性で結合するのを可能にする。
【００２３】
ＬＦＡ−１に対するモノクローナル抗体（ＭＡｂｓ）により、ＬＦＡ−１が最初に同定され、機能研究がされた（Ｄａｖｉｇｎｏｎ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １２７： ５９０ （１９８１））。ＬＦＡ−１は白血球にのみ存在し（Ｋｒｅｎｓｋｅｙ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １３１： ６１１ （１９８３））、ＩＣＡＭ−１は活性化された白血球、皮膚線維芽細胞、及び内皮に分布している（Ｄｕｓｔｉｎ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３７： ２４５ （１９８６））。
【００２４】
以前の研究では、多数のインビトロでのＴ細胞依存的免疫機能及び限られた数のインビボの免疫反応に対する抗−ＣＤ１１ａＭＡｂｓの影響が実験されている。インビトロでは、抗−ＣＤ１１ａＭＡｂｓはＴ細胞活性化（Ｋｕｙｐｅｒｓ等， Ｒｅｓ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １４０： ４６１ （１９８９））、Ｔ細胞依存的Ｂ細胞増殖及び分化（Ｄａｖｉｇｎｏｎ等， 上掲； Ｆｉｓｃｈｅｒ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １３６： ３１９８ （１９８６））、細胞毒性Ｔリンパ球による標的細胞溶解（Ｋｒｅｎｓｋｙ等， 上掲）、免疫複合体の形成（Ｓａｎｄｅｒｓ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １３７： ２３９５ （１９８６）； Ｍｅｎｔｚｅｒ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １３５： ９ （１９８５））、及びＴ細胞の血管内皮への接着（Ｌｏ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １４３： ３３２５ （１９８９））を阻害する。また、ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８に対する抗体５Ｃ６は、マウスにおいて、マクロファージ及びＴ細胞の両方により島内浸潤を防止し、インスリン依存性真性糖尿病の進行を阻害することが分かった（Ｈｕｔｃｈｉｎｇｓ等， Ｎａｔｕｒｅ， ３４８： ６３９ （１９９０））。
【００２５】
インビトロでのＴ細胞機能の最適化にＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１相互作用が必要であること、及び抗−ＣＤ１１ａＭＡｂｓが蛋白抗原に対する寛容を誘発し（Ｂｅｎｊａｍｉｎ等， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １８： １０７９ （１９８８））、マウスにおける腫瘍移植片の生着率を延ばす（Ｈｅａｇｙ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ３７： ５２０−５２３ （１９８４））という知見は、ヒトにおける移植片拒絶の防止のためにこれらの分子に対するＭＡｂｓを試験することの基礎となった。
【００２６】
実験は霊長類でもまた行われている。例えば、サルにおける実験に基づいて、ＩＣＡＭ−１に対するＭＡｂが腎臓移植拒絶を防止でき又は回復さえできることが示唆されている（Ｃｏｓｉｍｉ等， 「Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ Ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓ ｏｆ Ｒｅｎａｌ Ａｌｌｏｇｒａｆｔｓ ｂｙ Ｒ６．５， ａ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ Ａｄｈｅｓｉｏｎ Ｍｏｌｅｃｕｌｅ−１」， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ等（編）， Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ａｄｈｅｓｉｏｎ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ： Ｓｐｒｉｎｇｅｒ， （１９８８）， ｐ．２７４； Ｃｏｓｉｍｉ等， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， １４４： ４６０４−４６１２ （１９９０））。更に、抗−ＣＤ１１ａＭＡｂのカニクイザルへのインビボ投与は、皮膚移植片の生存を延ばした（Ｂｅｒｌｉｎ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ５３： ８４０−８４９ （１９９２））。
【００２７】
遺伝疾患を持つ子供において骨髄ミスマッチハプロアイデンティカル移植の拒絶を防止するための、ラット抗−マウスＣＤ１１ａ抗体（２５−３； ＩｇＧ１）の使用の最初の成功が、Ｆｉｓｃｈｅｒ等， Ｌａｎｃｅｔ， ２： １０５８ （１９８６）に報告された。最小の副作用が観察された。また、Ｆｉｓｃｈｅｒ等， Ｂｌｏｏｄ， ７７： ２４９ （１９９１）； ｖａｎ Ｄｉｊｋｅｎ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ４９： ８８２ （１９９０）；及びＰｅｒｅｚ等， Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ４： ３７９ （１９８９）も参照のこと。更に、抗体２５−３は、ヒトのステロイド耐性急性宿主対移植片疾患の抑制において有効であった（Ｓｔｏｐｐａ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． Ｉｎｔ．， ４： ３−７ （１９９１））。
【００２８】
しかしながら、これらの結果は、このＭＡｂで（Ｍａｒａｎｉｎｃｈｉ等， Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ， ４： １４７−１５０ （１９８９））、又は他の試験的な実験におけるＬＦＡ−１のインバリアント鎖に対する抗−ＣＤ１８ＭＡｂでは（Ｂａｕｍｅ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ４７： ４７２ （１９８９））、白血病成人の移植術において再現性が無かった。更に、ラット抗−マウスＣＤ１１ａＭＡｂ、２５−３は、ヒト腎臓移植における急性拒絶の進行を抑制できなかった（ＬｅＭａｕｆｆ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ５２： ２９１ （１９９１））。
【００２９】
ヒト移植におけるモノクローナル抗体の使用の概説は、Ｄａｎｔａｌ及びＳｏｕｌｉｌｌｏｕ， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， ３： ７４０−７４７ （１９９１）に与えられている。以前の報告では、抗−ＬＦＡ−１又は抗−ＩＣＡＭ−１ＭＡｂｓのいずれかでの簡単な処置により、マウスにおいて原発性血管新生化する異所心臓同種移植片の生存が僅かに延びたことが示されている（Ｉｓｏｂｅ等， Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２５５： １１２５ （１９９２））。しかしながら、このモデルで長期間の移植片の生着率を達成するには両方のＭＡｂｓを組み合わせた処置が必要であった。
【００３０】
独立して、抗−ＬＦＡ−１ＭＡｂのみでの治療が、４ｍｇ／ｋｇ／日の最大用量及び毎日投与後の週に１回の治療によって、異所（耳−耳介）非原発性血管新生マウス心臓移植片の生存を強力にかつ効果的に延ばすことが示された（Ｎａｋａｍｕｒａ等， Ｊ． Ｈｅａｒｔ Ｌｕｎｇ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．， １１： ２２３ （１９９２））。非原発性血管新生心臓同種移植片は、原発性血管新生心臓同種移植片より免疫原性でありＭＡｂｓによる生存延長に対して耐性が強い（Ｗａｒｒｅｎ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． Ｐｒｏｃ．， ５： ７１７ （１９７３）； Ｔｒａｇｅｒ等， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ， ４７： ５８７ （１９８９））。後者の参考文献は、高い初期用量と続く低用量を用いたＬ３Ｔ４抗体での処置を検討している。
【００３１】
上掲のＮａｋａｍｕｒａ等で使用されたものと同様の抗体を用いた齧歯類における硬化症型の疾患の治療についての他の研究は、Ｙｅｄｎｏｃｋ等， Ｎａｔｕｒｅ， ３５６： ６３−６６ （１９９２）に報告されている。ＬＦＡ−１媒介疾患の治療のための抗−ＬＦＡ−１抗体及びＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、及びＩＣＡＭ−３及びそれらの抗体の使用に関する更なる開示は、１１／２８／９１に公開されたＷＯ９１／１８０１１、１１／１４／９１に公開されたＷＯ９１／１６９２８、１１／１４／９１に公開されたＷＯ９１／１６９２７、６／１３／９１に公開されたカナダ国特許出願２００８３６８、ＷＯ９０／０３４００、１２／１３／９０に公開されたＷＯ９０／１５０７６、９／２０／９０に公開されたＷＯ９０／１０６５２、９／１９／９０に公開されたＥＰ３８７６６８、７／２６／９０に公開されたＷＯ９０／０８１８７、ＷＯ９０／１３２８１、ＷＯ９０／１３３１６、ＷＯ９０／１３２８１、ＷＯ９３／０６８６４、ＷＯ９３／２１９５３、ＷＯ９３／１３２１０、ＷＯ９４／１１４００、８／１／９０に公開されたＥＰ３７９９０４、１２／１３／８９に公開されたＥＰ３４６０７８、米国特許第５００２８６９号、米国特許第５０７１９６４号、米国特許第５２０９９２８号、米国特許第５２２３３９６号、米国特許第５２３５０４９号、米国特許第５２８４９３１号、米国特許第５２８８８５４号、米国特許第５３５４６５９号、１１／１０／８８に公開されたオーストラリア国特許出願１５５１８／８８、１１／９／８８に公開されたＥＰ２８９９４９及び２／２２／８９に公開されたＥＰ３０３６９２、ＥＰ３６５８３７、ＥＰ３１４８６３、ＥＰ３１９８１５、ＥＰ４６８２５７、ＥＰ３６２５２６、ＥＰ３６２５３１、ＥＰ４３８３１０を含む。
【００３２】
ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭペプチド断片及びアンタゴニストの使用に関する他の開示は、米国特許第５１４９７８０号、米国特許第５２８８８５４号、米国特許第５３４０８００号、米国特許第５４２４３９９号、米国特許第５４７０９５３号、ＷＯ９０／０３４００、ＷＯ９０／１３３１６、ＷＯ９０／１０６５２、ＷＯ９１／１９５１１、ＷＯ９２／０３４７３、ＷＯ９４／１１４００、ＷＯ９５／２８１７０、ＪＰ４１９３８９５、ＥＰ３１４８６３、ＥＰ３６２５２６、及びＥＰ３６２５３１を含む。
【００３３】
抗−ＬＦＡ−１又は抗ＩＣＡＭ−１抗体、ＬＦＡ−１又はＩＣＡＭ−１ペプチド、断片又はペプチドアンタゴニストを成功裏に使用する上述の方法は、伝統的な免疫抑制剤による治療を越える改善を示している。これらの研究はＬＦＡ−１及びＩＣＡＭ−１が拮抗作用の適当な標的であることを示している。この分野では、自己免疫疾患、移植片対宿主又は宿主対移植片拒絶、及びＴ細胞性炎症反応を含むＬＦＡ−１に媒介される疾患を、副作用を最小にし、自己又は異種抗原に対する特異的寛容を維持するようにより良く治療する必要性がある。また、この分野には、ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１相互作用に対する非ペプチドアンタゴニストを提供する必要性もある。
【００３４】
アルブミンは、脂肪酸の輸送を請け負う豊富な血漿蛋白である。しかし、アルブミンはまた広範囲の薬剤化合物に結合し、その薬物速度を乱す。従って、あらゆる薬物の薬物動態学的性質における重要な因子はアルブミンのような血清血漿蛋白に対するその結合特性である。ある薬物化合物は血漿蛋白に対して高い親和性を持つので、その標的組織、細胞又は蛋白と相互作用するのに血清中で利用されない。例えば、その９９％が投与時に血漿蛋白に結合する化合物は、９８％だけ結合する化合物よりもその標的との相互作用に利用される血漿中濃度は半分になる。従って、血清血漿蛋白結合親和性が低いＬＦＡアンタゴニスト化合物を提供することが望ましい。
【００３５】
（発明の概要）
本発明の一側面では、次の式（Ｉ）：
2004517928.tif 000003
［上式中、
Ｃｙは、ヒドロキシル、メルカプト、チオアルキル、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミノアルキル、アミジン、グアニジン、ニトロ、アルキル、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい非芳香族炭素環又は複素環であり；
Ｘは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、アミノ、アミノアルキル、ニトロ、オキソ又はチオで置換されていてもよく、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２が挿入されていてもよい二価の炭化水素鎖であり；
Ｙは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、オキソ、チオ、炭化水素、ハロ置換炭化水素、アミノ、アミジン、グアニジン、シアノ、ニトロ、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい炭素環又は複素環であり；
Ｌは、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ又はチオで置換されていてもよく、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２が挿入された一又は複数の炭素原子を有していてもよい二価の炭化水素鎖又は結合であり；又は炭化水素の３個の炭素原子がアミノ酸残基で置き換えられていてもよく；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、アミノ、Ｏ−炭素環又はアルコキシで、アミノ、炭素環又は複素環で置換されていてもよいものであり；
Ｒ２−５は、独立して、Ｈ、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、シアノ、アミノ、アミジン、グアニジン、ニトロ又はアルコキシであり；あるいはＲ３及びＲ４は共同して、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミジン、グアニジン又はアルコキシで置換されていてもよい縮合炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ６はＨ又は炭素環又は複素環で置換されていてもよい炭化水素鎖であり；
但し、Ｙがフェニルであり、Ｒ２、Ｒ４及びＲ５がＨであり、Ｒ３がＣｌであり、Ｒ１がＯＨである場合、Ｘはシクロヘキシル以外である］
の新規化合物；並びにそれらの塩、溶媒和物及び水和物が提供される。
【００３６】
本発明の他の側面では、本発明の化合物と医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物が提供される。
また本発明の他の側面では、哺乳動物におけるＬＦＡ−１により媒介される疾患又は症状を処置する方法において、有効量の本発明の化合物を上記哺乳動物に投与することを含んでなる方法が提供される。
【００３７】
（本発明の詳細な記載）
本発明は、式（Ｉ）：
2004517928.tif 000004
［上式中、Ｃｙ，Ｘ、Ｙ、Ｌ及びＲ１−６はここで定義されるものである］
の新規化合物を提供する。本発明の化合物は置換基Ｃｙの非芳香族環によって、分子中のこの部分に芳香族環を持つものと比較して、低減した血漿蛋白結合親和性を示す。
【００３８】
「非芳香族」という用語は芳香族性を決める性質を持たない炭素環又は複素環を意味する。芳香族性を持つためには、環は平面状で、各環原子において環の面に直交するｐ軌道を持ち、かつ環のパイ電子の数が（４ｎ＋２）（ここで、ｎは整数である（つまり、パイ電子の数は２、６、１０又は１４である））であるというヒュッケル則を満たさなければならない。ここで提供される非芳香族環は芳香族性に対するこれらの基準の一又は全てを満たさない。
【００３９】
ここで使用される「アルコキシ」という用語は、飽和基、つまりＯ−アルキルと、不飽和基、つまりＯ−アルケニル及びＯ−アルキニル基を含む。アルコキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ及びヘキシルオキシが含まれる。
【００４０】
「アミノ」という用語は、第１級（−ＮＨ２）、第２級（−ＮＨＲ）、第３級（−Ｎ（Ｒ）２）又は第４級（−Ｎ＋（Ｒ）４）アミンを意味し、ここでＲは炭化水素鎖、ヒドロキシ、炭素環、複素環又は炭素環もしくは複素環で置換された炭化水素鎖である。
【００４１】
「アミノ酸」という用語は、天然に生じるか天然に生じるものではないα−（アルファ）、β−（ベータ）、Ｄ−及びＬ−アミノ酸残基を意味する。非天然アミノ酸には、天然に生じるもの以外の側鎖を持つものが含まれる。
【００４２】
ここでは「カルボキシル」とは、フリーの酸−ＣＯＯＨ並びにそのエステル、例えばアルキル、アリール及びアラルキルエステルであることを意味する。好ましいエステルはメチル、エチル、プロピル、ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル及びｔ−ブチルである。
【００４３】
「炭素環」という用語は、飽和、不飽和もしくは部分的に不飽和で芳香（アリール）環系を含む（非芳香族と特定されない場合）、４−１６員（架橋を含む）の単環、二環又は三環炭素環又は環系を意味する。好適な非芳香族炭素環には、シクロプロピル、シクロプロペニル、シクロブチル、シクロブテニル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル及びシクロヘキセニルが含まれる。好適な芳香族炭素環にはフェニルとナフチルが含まれる。
【００４４】
「複素環」という用語は、少なくとも一の環原子がヘテロ原子（すなわちＮ、Ｏ及びＳ、並びにＳＯ又はＳＯ２）である５−１６員を有する単環、二環又は三環系を意味する。該環系は飽和、不飽和又は部分的に不飽和であり、芳香族でもよい（非芳香族と特定されない場合）。例示的な複素環には、ピペリジン、ピペラジン、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、モルホリン、ピラン、ピロール、フラン、チオフェン（チエニル）、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール、イソチアゾール、ジチアゾール、オキサゾール、イソキサゾール、ジオキサゾール、チアジアゾール、オキサジアゾール、テトラゾール、トリアゾール、チアトリアゾール、オキサトリアゾール、チアジアゾール、オキサジアゾール、プリン及びそのベンゾ縮合誘導体が含まれる。
【００４５】
「炭化水素鎖」という用語は、飽和、不飽和、直鎖状又は分枝状の炭素鎖、すなわちアルキル、アルケニル及びアルキニルを意味する。好適な炭化水素鎖は１−１２の炭素原子、より好ましくは１−６、最も好ましくは１−４の炭素原子を有するもの、すなわち、メチル、エチル、プロピル、ブチル及びアリルである。
【００４６】
「で置換されていてもよい」という語句は、それ以外のことを述べない限り、特定の置換基の一又は複数が置換された部分に共有結合することを意味するものと理解される。一より多い場合、置換基は同じでも異なった基でもよい。
【００４７】
Ｃｙは、ヒドロキシル（−ＯＨ）、メルカプト（−ＳＨ）、チオアルキル、ハロゲン（例えばＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、オキソ（＝Ｏ）、チオ（＝Ｓ）、アミノ、アミノアルキル、アミジン（−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ２）、グアニジン（−ＮＨ２−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ２）、ニトロ、アルキル又はアルコキシで置換されていてもよい非芳香族炭素環又は複素環である。特定の実施態様では、Ｃｙは３−５員環である。好適な実施態様では、Ｃｙは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン（好ましくはＦ又はＣｌ）、オキソ（＝Ｏ）、チオ（＝Ｓ）、アミノ、アミジン、グアニジン、ニトロ、アルキル又はアルコキシで置換されていてもよい５員又は６員の非芳香族複素環である。より好適な実施態様では、Ｃｙはヒドロキシル、オキソ、チオ、Ｃｌ、Ｃ１−４アルキル（好ましくはメチル）又はＣ１−４アルカノイル（好ましくはアセチル、プロパノイル又はブタノイル）で置換されていてもよい５員の非芳香族複素環である。より好ましくは、非芳香族複素環は一又は複数のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）を含み、ヒドロキシル、オキソ、メルカプト、チオ、メチル、アセチル、プロパノイル又はブチルで置換されていてもよい。特定の実施態様では、非芳香族複素環はメチル又はアセチルで置換されていてもよい少なくとも一の窒素原子を含む。特に好適な実施態様では、非芳香族複素環は、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、オキサゾリジン、チアゾリジンで、ヒドロキシル、オキソ、メルカプト、チオ、アルキル又はアルカノイルで置換されていてもよいものからなる群から選択される。最も好適な実施態様では、Ｃｙは、テトラヒドロフラン−２−イル、チアゾリジン−５−イル、チアゾリジン−２−オン−５−イル、及びチアゾリジン−２−チオン−５−イル及びシクロプロパピロリジンからなる群から選択される非芳香族複素環である。
【００４８】
他の好適な実施態様では、Ｃｙはヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミジン、グアニジン、アルキル、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい３−６員の炭素環である。特定の実施態様では、炭素環は飽和しているか部分的に不飽和である。特定の実施態様では、Ｃｙは、シクロプロピル、シクロプロペニル、シクロブチル、シクロブテニル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル及びシクロヘキセニルから選択される炭素環である。
【００４９】
Ｘは、一又は複数の炭素原子がＮ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２で置き換えられていてもよく、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、アミノ、アミノアルキル、ニトロ、オキソ又はチオで置換されていてもよいＣ１−５の二価の炭化水素結合手である。好適な実施態様では、Ｘは、少なくとも一の炭素原子を持つ。置き換えと置換は炭化水素鎖内か又は何れかもしくは双方の末端にアミド部分（−ＮＲＣ（Ｏ）−又は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−）を形成しうる。他の部分には、スルホンアミド（−ＮＲＳＯ２−又は−ＳＯ２ＮＲ）、アシル、エーテル、チオエーテル及びアミンが含まれる。特に好適な実施態様では、Ｘは−ＣＨ２−ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−であり、そのカルボニル−Ｃ（Ｏ）−部分がＣｙに隣接し（つまり共有結合し）、Ｒ６がアルキル、つまりメチルであり、より好ましくはＨである。
【００５０】
Ｙは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、オキソ、チオ、炭化水素、ハロ置換炭化水素、アミノ、アミジン、グアニジン、シアノ、ニトロ、アルコキシ又はアシルで置換されていてもよい炭素環又は複素環である。特定の実施態様では、Ｙは、ヒドロキシル又はハロゲンで置換されていてもよいアリール又はヘテロアリールである。特に好適な実施態様では、Ｙは、フェニル、フラン−２−イル、チオフェン−２−イル、好ましくはメタ位がハロゲン（好ましくはＣｌ）又はヒドロキシルで置換されたフェニルである。
【００５１】
Ｌは、一又は複数の炭素原子がＮ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ又はＳＯ２で置き換えられていてもよく、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ又はチオで置換されていてもよい二価の炭化水素鎖であり；あるいは炭化水素の３個の炭素原子がアミノ酸残基で置き換えられている。好ましくは、Ｌは、長さが１０原子未満であり、より好ましくは５以下、最も好ましくは５又は３原子長である。特定の実施態様では、Ｌは、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＯＨ）−、−（ＣＨ２）３−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−ＣＨ（Ｒ７）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−、ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（Ｒ７）−ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−及び−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＦ２−ＣＨ２−からなる群から選択され、各Ｒ６は独立してＨ又はアルキルであり、Ｒ７はアミノ酸側鎖である。好適なアミノ酸側鎖には、天然には生じない側鎖、例えばフェニル、あるいは天然に生じる側鎖が含まれる。好適な側鎖は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ及びＡｓｎからのものである。好適な実施態様では、Ｌは、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ６−ＣＨ２−であり、ここで、その−ＣＨ＝ＣＨ−部分がＹに隣接している（つまり、共有結合している）ものである。他の好適な実施態様では、Ｌは、−ＣＨ２−ＮＲ６−Ｃ（Ｏ）−であり、そのメチレン部分（−ＣＨ２−）がＹに隣接しているものである。
【００５２】
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、アミノ、Ｏ−炭素環又はアミノ、炭素環もしくは複素環で置換されていてもよいアルコキシである。好適な実施態様では、Ｒ１はＨ、フェニル又はＣ１−４アルコキシで、フェニルのような炭素環で置換されていてもよいものである。特定の実施態様では、Ｒ１はＨである。他の特定の実施態様では、Ｒ１はメトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、イソブチルオキシ、ｓ−ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、フェノキシ又はベンジルオキシである。更に他の特定の実施態様では、Ｒ１はＮＨ２である。特に好適な実施態様では、Ｒ１はエトキシである。他の特に好適な実施態様では、Ｒ１はイソブチルオキシである。他の特に好適な実施態様では、Ｒ１はアミノで置換されたアルコキシ、例えば２−アミノエトキシ、Ｎ−モルホリノエトキシ、Ｎ，Ｎ−ジアルキアミノエトキシ、第４級アンモニウムヒドロキシアルコキシ（例えばトリメチルアンモニウムヒドロキシエトキシ）である。
【００５３】
Ｒ２−５は独立してＨ、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、シアノ、アミノ、アミジン、グアニジン、ニトロ又はアルコキシであり；あるいはＲ３とＲ４は共同して、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミジン、グアニジン又はアルコキシで置換されていてもよい縮合炭素環又は複素環を形成する。特定の実施態様では、Ｒ２とＲ３は独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。他の特定の実施態様では、Ｒ４とＲ５が共にＨである。他の特定の実施態様では、Ｒ２とＲ３の一方がハロゲンで、他方が水素又はハロゲンである。特に好適な実施態様では、Ｒ３はＣｌで、Ｒ２、Ｒ４及びＲ５がそれぞれＨである。他の特に好適な実施態様では、Ｒ２及びＲ３は共にＣｌであり、Ｒ４及びＲ５は共にＨである。
【００５４】
Ｒ６は、Ｈ又は炭素環もしくは複素環で置換されていてよい炭化水素鎖である。好適な実施態様では、Ｒ６はＨ又はアルキル、つまり、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル又はｔ−ブチルである。特定の実施態様ではＲ６はＨである。
【００５５】
好適な実施態様では、本発明の化合物は次の一般式（Ｉａ）−（Ｉｆ）を有する。
2004517928.tif 000005
2004517928.tif 000006
2004517928.tif 000007
2004517928.tif 000008
ここで、Ｃｙ、Ｙ、Ｌ及びＲ１−６は既に定義したものである。特に好適な実施態様では、式（Ｉａ）−（Ｉｆ）の化合物中のアステリスク（＊）を付けた炭素原子はキラルである。特定の実施態様では、炭素原子はＲ配置を有する。他の特定の実施態様では、炭素原子はＳ配置を有する。
【００５６】
本発明の好ましい化合物には：
2004517928.tif 000009
2004517928.tif 000010
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2004517928.tif 000013
のもの、及びそれらの塩、溶媒和物、水和物及びエステルが含まれる。
【００５７】
本発明の化合物は不斉中心を有しており、よって幾何及び立体異性体として存在することが理解される。このような異性体の全てが考慮され、純粋な異性体形態であってもこのような異性体の混合物並びにラセミ体であっても、本発明の範囲に入る。立体異性化合物はクロマトグラフィー等の当該分野において確立された技術、すなわちキラルＨＰＬＣ、又は結晶化法により分離できる。
【００５８】
「医薬的に許容可能な」塩には、酸及び塩基付加塩の双方が含まれる。医薬的に許容可能な酸付加塩とは、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸等の無機酸、及び脂肪族、脂環式、芳香族、アリール脂肪族、複素環、カルボン酸及びスルホン酸クラスの有機酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、グルコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボン酸（ｅｍｂｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸等から選択される有機酸で形成される、フリーの塩基の性質及び生物学的な効能を保持し、生物学的等の点で望ましくないものではない塩を意味する。
【００５９】
医薬的に許容可能な塩基付加塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩等の無機塩基から誘導されたものが含まれる。特に好ましくは、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム及びマグネシウムの塩である。医薬的に許容可能な無毒性の有機塩基から誘導される塩には、第１級、第２級及び第３級アミン、天然に生じた置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂等の塩が含まれる。特に好ましい無毒性の有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン及びカフェインである。
【００６０】
本発明の化合物は、商業的に入手可能な出発物質及び試薬からか、商業的に入手可能な出発物質から調製されうる出発物質から、確立された有機合成法に従い調製することができる。多くの標準的な化学技術及び手順が、Ｍａｒｃｈ， Ｊ．，「Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」 ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９９７；及びＣｏｌｌｍａｎ， Ｊ．，「Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｏｒｇａｎｏｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ Ｍｅｔａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｍｉｌｌ Ｖａｌｌｅｙ， １９８７；及びＬａｒｏｃｋ， Ｒ．，「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ」Ｖｅｒｌａｇ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９８９に記載されている。化合物上に存在する特定の置換基に応じて、ここに記載した工程に加えて、適切な保護及び脱保護手順が必要となることが理解される。Ｇｒｅｅｎｅ及びＷｕｔｓ， Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， 第２版， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， １９９１には数多くの保護基が、詳細な保護及び脱保護手順と併せて、記載されている。例えば、適切なアミノ保護基には、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、フルオレニル−メチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、２−トリメチルシリル−エチオキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）、１−メチル−１−（４−ビフェニルイル）エトキシカルボニル（Ｂｐｏｃ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、及びベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）が含まれる。カルボキシル基は、フルオレニルメチル基として、又はアルキルエステル、すなわちメチル又はエチル、あるいはアルケニルエステル、例えばアリルとして、保護されうる。ヒドロキシル基はトリチル、モノメトキシトリチル、ジメトキシトリチル及びトリメトキシトリチル基で保護されうる。
【００６１】
化合物は、その全体が出典明示によりここに取り込まれる２０００年９月１４日出願の米国特許出願第０９／６４４６３３０号に記載された有機合成法によって調製することができる。一般に、化合物は反応スキーム１に従って調製されうる。
【００６２】
2004517928.tif 000014
【００６３】
スキーム１において、市販のグリシンアミノ酸残基がアミノ（例えばｆｍｏｃ）及びカルボキシル基（Ｐｒ）で保護されるか、あるいは固体支持体上に固定される。アミノ保護基は適当な試薬で除去され、ジフェニルケチミンと反応させられ、続いて（ｉｉｉ）ハロ−Ｘ−Ｃｙでα炭素においてアルキル化されて中間体（ｖｉ）を生じる。イミン（ｖｉ）はフリーのアミン（ｖ）に転換させられた後、中間体（ｖｉ）とカップリングされて本発明の化合物が得られ、これは場合によってはカルボキシル基が脱保護されてフリーの酸（ｖｉｉ）を生じる。フリーの酸はついで置換基Ｒ１の定義に応じてエステル化又はアミド化されうる。
【００６４】
特定の実施態様では、本発明の式（Ｉｂ）の化合物がスキーム２に従って調製されうる。
2004517928.tif 000015
【００６５】
スキーム２において、商業的に入手されるか又は市販の試薬から合成される出発化合物（ｉ）がＮ−ヒドロキシメチルフタルアミドと反応させられて中間体（ｉｉ）が得られ、これがヒドラジンと反応させられてフリーのアミン（ｉｉｉ）が生じる。アミンは、Ｂｏｃ２Ｏ及び炭酸水素ナトリウムと反応させることによってＢｏｃ保護された後、無水トリフル酸（ｔｒｉｆｌｉｃ）と反応させられて中間体（ｖ）が得られる。ついで、トリフレート中間体（ｖ）は、酢酸パラジウム（ＩＩ）及び１，３−ビ（ジフェニルホスフィノプロパン）（ｄｐｐｐ）と、ついでジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）と反応させることによってメチルエステル中間体（ｖｉ）に転換される。（ｖｉ）のＢｏｃ基がＴＦＡで除去された後、カルボン酸（ｖｉｉ）と反応させられて中間体（ｖｉｉｉ）が得られる。スキーム２の好適な実施態様では、中間体（ｖｉｉ）Ｙ−Ｌ−Ｃ（Ｏ）ＯＨはフリルアクリル酸又はチエニルアクリル酸である。（ｖｉｉｉ）のメチルエステルはＬｉＯＨで除去されてフリーの酸が得られ、これがＮ−Ｂｏｃ保護ジアミノプロパン酸／エステル（ｘ）と反応させられて中間体（ｘｉ）が得られる。（ｘｉ）のＢｏｃ基はＴＦＡで除去された後、カルボキシル置換非芳香族環（ｘｉｉ）と反応させられて本発明の最終化合物（Ｉｂ）が得られる。
【００６６】
他の特定の実施態様では、本発明の式（Ｉｃ）の化合物がスキーム３に従って調製されうる。
2004517928.tif 000016
【００６７】
スキーム３において、出発試薬カルボキシレート（ｉ）はアミン試薬（ｉｉ）Ｙ−Ｌ−ＮＨＲ６とカップリングされて中間体（ｉｉｉ）が得られ、これが（ｉｖ）とカップリングされて本発明の化合物（ｖ）が得られる。スキーム３の好適な実施態様では、Ｙ−Ｌ−は、ヒドロキシ、ハロゲン、アルキル又はアルコキシで置換されていてもよいベンジルである。より好ましくは、Ｙ−Ｌ−は３−ヒドロキシ−ベンジルである。
【００６８】
他の特定の実施態様では、本発明の式（Ｉｄ）の化合物がスキーム４に従って調製されうる。
2004517928.tif 000017
【００６９】
スキーム４において、スキーム２に記載された手順に従って調製された出発化合物（ｉ）がヨード中間体（ｉｉ）に転換され、アルキン（ｉｉｉ）と反応させられて中間体（ｉｖ）が得られる。アルキン（ｉｉｉ）はＹ−ＣＯＯＨをＴＨＦ中でＢｒ−Ｃ≡ＣＨと反応させて調製される。ついで中間体（ｉｖ）は、Ｈ２雰囲気中でＲｈ／Ａｌ２Ｏ３と反応させられてアルカンに転換され、エステル基がピリジン中でＬｉＩと反応させられてフリーの酸に転換され、（ｖｉ）が得られる。中間体（ｖｉ）はアミノ酸（ｖｉｉ）と反応させられて本発明の化合物（ｖｉｉｉ）が得られる。スキーム４の特定の実施態様では、Ｙはアルキル、ヒドロキシ又はハロゲンで置換されていてもよいフェニルである。特に好適な実施態様ではＹは３−クロロ−フェニル又は３−ヒドロキシ−フェニルである。
【００７０】
他の特定の実施態様では、本発明の式（Ｉｅ）の化合物がスキーム５に従って調製されうる。
2004517928.tif 000018
【００７１】
スキーム５において、出発化合物（ｉ）が無水トリフル酸及び２，６−ルチジンと反応させられて中間体（ｉｉ）が得られ、これが酢酸パラジウム（ＩＩ）、１，３−ビ（ジフェニルホスフィノプロパン）（ｄｐｐｐ）と、ついでジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）とＤＭＦ及びメタノール中で反応させることによってメチルエステル中間体（ｉｉｉ）に転換される。ついで、エステル（ｉｉｉ）は酢酸及び無水酢酸中でＣｒＯ３と反応させられてアルデヒド（ｉｖ）が得られ、これがＴＨＦ中でグリニャール試薬エチニル−マグネシウムブロミドと反応させられてアルキン中間体（ｖ）が得られる。ヨード試薬（ｖｉ）Ｙ−Ｉは（ｖ）と反応させられて中間体（ｖｉｉ）が得られ、これが、水素雰囲気下でＲｈ／Ａｌ２Ｏ３と反応させることによってアルカン（ｖｉｉｉ）に転換される。メチルエステルはピリジン中でＬｉＩによってフリーの酸（ｉｘ）に転換され、これがついでアミノ酸残基（ｘ）とカップリングされて本発明の化合物（ｘｉ）が得られる。スキーム５の好適な実施態様では、Ｙは、ヒドロキシ、ハロゲン、アルキル又はアルコキシで置換されていてもよいフェニルである。より好適な実施態様ではＹは３−ヒドロキシ−フェニル又は３−クロロ−フェニルである。
【００７２】
本発明の化合物はＭａｃ−１より優先してＬＦＡ−１に結合する。従って、本発明の一側面では、ＩＣＡＭｓ（細胞接着分子）へのＬＦＡ−１の結合を阻害する方法であって、ＬＦＡ−１を式（Ｉ）の化合物に接触させることを含んでなる方法が提供される。本方法は、溶液ベース又は細胞ベースのアッセイとしてエキソビボ又はインビボで実施することができ、本発明の化合物は推定又は既知のリガンド（例えばＩＣＡＭ−１）の存在下で、ＬＦＡ−１に導入される。本発明の化合物は、プロテアーゼへのリガンドの結合又はその低減の検出が容易になるように標識され、例えば同位体を用いて放射標識され、又はフルオレッセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）のようなフルオロフォアで標識されうる。よって本発明の化合物は、診断及びスクリーニングアッセイに有用である。
【００７３】
本発明の化合物は、ＬＦＡ−１活性によって媒介される疾患又は症状を治療的及び／又は予防的に処置するのに有用である。従って、本発明の一側面では、哺乳動物、つまりヒトにおけるＬＦＡ−１により媒介される疾患又は症状を処置する方法であって、有効量の本発明の化合物を上記哺乳動物に投与することを含んでなる方法が提供される。「有効量」とは、投与することで、ＬＦＡ−１の活性を低減することができる化合物の量；又は投与することで、ＬＦＡ−１により媒介される疾患又は病状に関連した徴候を予防、抑制又はその重症度を低減するのに必要な化合物の量を意味する。
【００７４】
本発明の化合物又はその組成物は、乾癬；炎症性腸疾患に関連する反応（クローン病及び潰瘍性大腸結腸炎など）、皮膚炎、髄膜炎、脳炎、ブドウ膜炎、湿疹及び喘息を含むアレルギー症状、Ｔ細胞の浸潤及び慢性炎症反応を含む症状、皮膚過敏反応（ツタウルシ及びオーク過敏症を含む）；アテローム性硬化症、自己免疫疾患、例えば慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、真性糖尿病、多発性硬化症、レーノー症候群、自己免疫性甲状腺炎、実験的自己免疫性脳脊髄炎、シェーグレン症候群、若年発症性糖尿病、及び結核、サルコイドーシス、多発性筋炎、肉芽腫症及び脈管炎において典型的に見られるサイトカイン及びＴリンパ球に媒介される遅発型過敏症に関連する免疫反応；悪性貧血；白血球血管外遊出を含む疾患；ＣＮＳ炎症性疾患、敗血症又は外傷の二次的な多発性器官障害症候群；自己免疫性溶血性貧血；重症筋無力症；抗原−抗体複合体媒介疾患；移植片対宿主又は宿主対移植片疾患を含むあらゆるタイプの移植、ＨＩＶ及びレトロウイルス感染、肺性線維症、脱毛症、浮腫性硬化症（ｓｃｌｅｒｅｄｏｍａ）、子宮内膜症、白斑、好中球によって媒介される虚血性再潅流傷害、例えば急性心筋梗塞、ＰＴＣＡ、侵襲術、例えば心肺バイパス手術後の再狭窄、脳浮腫、脳梗塞、外傷性脳損傷、出血性ショック、火傷、虚血性腎臓病、多器官不全、創傷治癒及び瘢痕形成、アテローム性動脈硬化症を含む、症状又は疾患を治療するのに有用である。
【００７５】
投与される化合物の実際の量と投与経路は、特定の疾患又は病状並びに他の要因、例えば大きさ、年齢、性別及び処置される個人の種族的出身に依存し、常套的な分析により決定される。一般に、静脈内投与量は一日当たり約０．０１−１０００ｍｇ／ｋｇ（患者の体重）、好ましくは０．１から２０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．３から１５ｍｇ／ｋｇの範囲となる。投与は、数日、数週又は数年の間、一日当たり１回又は複数回としうるか、あるいは数週間又は数年の間、毎週数回としうる。他の経路で投与される化合物の量は、投与される特定の化合物の血漿バイオアベイラビリティを考慮して、記載した静脈内投与量と比較して、血漿中に同様の量の化合物をもたらす量である。
【００７６】
本発明の方法において、化合物は、経口的（口腔内、舌下、吸入を含む）、経鼻的、経腸的、経膣的、静脈内（動脈内を含む）、真皮下、皮下、筋肉内及び局所的に投与されうる。化合物は、製剤化技術において常套的なように、例えば適切な担体、希釈剤、増粘剤、アジュバント等々と共に、投与に適切な組成物に製剤化される。従って、本発明の他の側面は、式（Ｉ）の化合物と医薬的に許容可能な担体、賦形剤又はアジュバントを含有する医薬組成物を提供するもので、抗炎症剤、例えばＮＳＡＩＤｓのような更なる活性成分をまた含みうる。
【００７７】
投与形態には、溶液、パウダー、錠剤、カプセル、ゲルカプセル、座薬、局所用軟膏及びクリーム、及び吸入用エアゾールが含まれる。非腸管外投与用の製剤は、バッファー、希釈剤、及び他の適切な添加剤を含みうる滅菌水溶液を含みうる。本発明の化合物と有害な反応をしない非腸管外投与に適した医薬的に許容可能な有機又は無機の担体物質を使用することができる。適切な医薬的に許容可能な担体には、限定されるものではないが、水、食塩水、アルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が含まれる。製剤は、滅菌され、所望されるならば、本発明の化合物と有害な反応をしない助剤、例えば滑沢剤、保存料、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を及ぼす塩、バッファー、着色用フレーバー及び／又は芳香物質等と混合することができる。水性懸濁液は、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び／又はデキストランを含む、懸濁液の粘度を増加させる物質を含んでもよい。場合によっては、懸濁液は更に安定剤を含有してもよい。
【００７８】
本発明の化合物は高度の経口バイオアベイラビリティを示す。従って、好ましい実施態様では、本発明の化合物は経口送達によって投与される。経口投与用組成物には、パウダー又は顆粒、水性又は非水性媒体の溶液又は懸濁液、カプセル、袋（サシェ）、トローチ、錠剤又はＳＥＣ（ｓｏｆｔ ｅｌａｓｔｉｃ ｃａｐｓｕｌｅｓ（柔軟な弾性カプセル）又はキャプレット）が含まれる。増粘剤、香料添加剤、希釈剤、乳化剤、分散補助剤、担体物質又はバインダーを、このような製剤に望ましくは添加してもよい。このような製剤は、その粘膜に暴露するための消化管に化合物を送達させるために使用されうる。従って、製剤は、胃の極度のｐＨから化合物を保護し、又は経時的に化合物を放出し、特定の粘膜部位へのその送達を最適化するのに有効な物質からなり得る。耐酸性の錠剤、カプセル及びキャプレットのための腸溶コーティングは当該分野において知られており、典型的にはアセテート、フタレート、プロピレングリコール及びソルビタンモノオレエートが含まれる。
【００７９】
食餌性送達のための製剤を生産する様々な方法が当該分野においてよく知られている。一般的には、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， １８版， Ｇｅｎｎａｒｏ編， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．， Ｅａｓｔｏｎ， ＰＡ， １９９０を参照のこと。本発明の製剤は、公知の方法で、不活性で無毒性の医薬的に適切な賦形剤又は溶媒を使用し、常套的な製剤、例えば錠剤、コーティング錠剤、丸薬、顆粒、エアゾール、シロップ、エマルション、懸濁液及び溶液に転換することができる。治療的に活性な化合物は、それぞれの場合、全混合物の重量に対して約０．１重量％から約９９重量％の濃度、すなわち所望する用量範囲を達成するのに十分な量で存在しなければならない。製剤は、適切ならば乳化剤及び／又は分散剤を使用して、例えば溶媒及び／又は賦形剤で活性化合物を薄めることにより調製され、例えば水が希釈剤として使用される場合では、適切ならば有機溶媒を補助溶媒として使用することができる。
【００８０】
また組成物は、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）；フィラー（例えば、ラクトース、マイクロクリスタリンセルロース又はリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）；分解剤（例えば、デンプン又はグリコール酸デンプンナトリウム）；又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）を用いて製剤化されてもよい。錠剤は当該分野においてよく知られている方法によりコーティングしてもよい。また製剤は、適切な香料添加剤、着色剤及び／又は甘味料を更に含有していてもよい。
【００８１】
経口投与に適切した本発明の製剤は、それぞれ予め決定された量の活性成分を含有する個別単位として、例えばカプセル、カシェ剤（ｃａｃｈｅｔ）又は錠剤；パウダー又は顆粒；水性液体又は非水性液体の溶液又は懸濁液；又は水中油型エマルション又は油中水型エマルションとして提供されてもよい。錠剤は、場合によっては一又は複数の副成分と共に、圧密化又は成型により作製され得る。圧密化錠剤は、適切な機械において、流動性形態の活性成分、例えばパウダー又は顆粒を圧密化し、場合によってはバインダー、滑沢剤、不活性希釈剤、保存料、界面活性剤又は分散剤と混合して、調製されうる。成型錠剤は、適切な機械において、不活性希釈剤で湿らされたパウダー化合物の混合物を成型することにより作製されうる。錠剤は、コーティングされても割線を入れてもよく、中の活性成分がゆっくりと又は制御されて放出されるように製剤され得る。
【００８２】
実施例
次のセクションで使用される省略形：Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル；Ｂｏｃ２Ｏ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル無水物；ＤＭＡ＝ジメチルアセチミド；ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド；Ｈｏｂｔ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸；ＤＣＭ＝ジクロロメタン；ＭｅＯＨ＝メタノール；ＨＯＡｃ＝酢酸；ＨＣｌ＝塩酸；Ｈ２ＳＯ４＝硫酸；Ｋ２ＣＯ３＝炭酸カリウム；ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン；ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン；ＮａＨＣＯ３＝炭酸水素ナトリウム；ＡＣＮ＝アセトニトリル；Ｎａ２・ＥＤＴＡ＝エチレンジアミン四酢酸ナトリウム塩；ＴＢＡＦ＝フッ化テトラブチルアンモニウム；ＥＤＣ＝１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド・ＨＣｌ；ＴＥＡ＝トリエチルアミン；ＭｇＳＯ４＝硫酸マグネシウム；ＴＥＳ＝トリエチルシラン；Ｅｔ２Ｏ＝ジエチルエーテル；ＢＢｒ３＝三臭化ホウ素。
【００８３】
実施例１  化合物１６、１７、３８−４０、４６−５０の合成
2004517928.tif 000019
【００８４】
丸底フラスコに効率的なオーバーヘッド攪拌器を装備し、濃Ｈ２ＳＯ４（Ｈ２Ｏの２．７ｘ容量）とＨ２Ｏを入れ、エタノール／氷浴で〜−５℃まで冷却した。冷却した後、１当量の２，６ジクロロフェノールと１当量のＮ−（ヒドロキシメチル）フタルイミドを激しく撹拌しながら添加した。反応物を４時間冷却したまま維持した後、絶えず撹拌しながら一晩かけて室温まで温めた。反応は一般に丸底フラスコ中に丁度固形物ができた時点まで進めた。その時点で、ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏを添加して撹拌して固形物にした。大きな塊を破壊した後、沈殿物を濾過し、更なるＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで洗浄した。次に、生成物を、真空下で一晩乾燥させた後に更に精製しないで使用した。
【００８５】
１当量の乾燥した生成物とメタノール（２２．５ｍｌｘ＃ｇ出発材料）を、Ｈ２Ｏ凝縮器と撹拌棒を備えた丸底フラスコに添加した。１．２当量のヒドラジン一水化物を加え、混合物を４時間還流させた。室温への冷却後、濃ＨＣｌ（４．５ｍｌｘ＃ｇ出発材料）を注意して添加した。添加の終了後に、混合物を一晩（＞８時間）還流させた。反応物を０℃まで冷却し、沈殿した副産物を濾過によって除いた。ついで濾液を真空濃縮した。
【００８６】
粗アミン残留物を３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体になるまで真空濃縮した。熱いメタノール及びＨ２Ｏからの再結晶化により純粋な生成物を得た。
【００８７】
１当量のＢｏｃ保護アミンと１．５当量の２，６−ルチジンを、丸底フラスコにおいてＤＣＭ中で必要に応じて穏やかに加熱しながら溶解させた。出発材料が完全に溶解したところで、混合物をドライアイスエタノール浴でＮ２下にて−７８℃まで冷却した。冷却されたところで、２．５当量の無水トリフル酸を添加して、撹拌しながらゆっくりと室温にした。反応をＴＬＣによってモニターして、一般に４時間で完了した。完了したところで、反応物を真空濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで分配した。有機層を０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭを用いてシリカゲルで精製し、純粋なトリフレートを得た。
【００８８】
１当量のトリフレートを高圧パール反応器（Ｐａｒｒ ｂｏｍｂ）のガラスインサート中でＤＭＦ及びＭｅＯＨに溶解させた。ついで１０分間ＣＯで撹拌しながら出発材料からガスを抜いた。ついで、０．１５当量の酢酸パラジウム（ＩＩ）と０．１５当量の１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンを添加した後、更に１０分間ＣＯで撹拌しながら混合物からガスを抜き、その時点で２．５当量のジイソプロピルエチルアミンを添加した。反応器を正しく組み立てた後、３００ｐｓｉのＣＯガスを充填し、一晩撹拌しながら７０℃に加熱した。ついで反応器を冷却して通気した。混合物を丸底フラスコに移し真空濃縮した。ついで、残留物を、溶離剤として１％アセトンと１％ＴＥＡを含むＤＣＭを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【００８９】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、真空濃縮した。アミンのＴＦＡ塩をＥｔ２Ｏに溶解させ、Ｈ２ＯにＫ２ＣＯ３が入った１０％溶液で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
【００９０】
１当量のフリーベースのアミン、３当量のフリルアクリル酸、３当量のＥＤＣ及び１当量のＨｏｂｔをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【００９１】
２．３当量のヨウ化リチウムをピリジン中の１当量のメチルエステルに添加し、混合物を８時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮させ、残留物をＥｔＯＡｃと１ＮのＨＣｌで分配した。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をＮＭＭに溶解させ、溶液を真空濃縮した。残留物をＤＣＭに取り上げた後、１ＮのＨＣｌで３回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、更なる精製なしに使用される十分に高い純度で安息香酸を得た。
【００９２】
１当量の酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【００９３】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量の適当な商業的に入手できるカルボン酸（化合物１６、Ｎ−アセチル−Ｄ−プロリン；化合物１７、Ｎ−アセチル−Ｌ−プロリン；化合物３８、（−）−２−オキソ−４−チアゾリジンカルボン酸；化合物３９、１−シクロヘキセン−１−カルボン酸；化合物４０、（４Ｒ）−（−）−２−チオキソ−４−チアゾリジンカルボン酸；化合物４５、シクロブタンカルボン酸；化合物４６、シクロペンタンカルボン酸；化合物４７、シクロヘキサンカルボン酸；化合物４８、３，４−ジヒドロ−２，２−ジメチル−４−オキソ−２Ｈ−ピラン−６−カルボン酸；化合物４９，１，３−ジチオラン−２−カルボン酸エチル（２当量のエチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）中で３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏで鹸化した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２に酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物を更に精製しないで用いた）；化合物５０、シクロプロパンカルボン酸；化合物５１、テトラヒドロ−２−フロ酸）、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【００９４】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【００９５】
実施例２  化合物１−１５、４１、４３の合成
2004517928.tif 000020
2004517928.tif 000021
【００９６】
丸底フラスコに効率的なオーバーヘッド攪拌器を装備し、濃Ｈ２ＳＯ４（Ｈ２Ｏの２．７ｘ容量）とＨ２Ｏを入れ、エタノール／氷浴で〜−５℃まで冷却した。冷却した後、１当量の２，６ジクロロフェノールと１当量のＮ−（ヒドロキシメチル）フタルイミドを激しく撹拌しながら添加した。反応物を４時間冷却したまま維持した後、絶えず撹拌しながら一晩かけて室温まで温めた。反応は一般に丸底フラスコ中に丁度固形物ができた時点まで進めた。その時点で、ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏを添加して撹拌して固形物にした。大きな塊を破壊した後、沈殿物を濾過し、更なるＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで洗浄した。生成物を、真空下で一晩乾燥させた後に更に精製しないで使用した。
【００９７】
１当量の乾燥した生成物とメタノール（２２．５ｍｌｘ＃ｇ出発材料）を、Ｈ２Ｏ凝縮器と撹拌棒を備えた丸底フラスコに添加した。１．２当量のヒドラジン一水化物を加え、混合物を４時間還流させた。室温への冷却後、濃ＨＣｌ（４．５ｍｌｘ＃ｇ出発材料）を注意して添加した。添加の終了後に、混合物を一晩（＞８時間）還流させた。反応物を０℃まで冷却し、沈殿した副産物を濾過によって除いた。ついで濾液を真空濃縮した。
【００９８】
粗アミン残留物を３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体になるまで真空濃縮した。熱いメタノール及びＨ２Ｏからの再結晶化により純粋な生成物を得た。
【００９９】
１当量のＢｏｃ保護アミンと１．５当量の２，６−ルチジンを、丸底フラスコ中でＤＣＭに必要に応じて穏やかに加熱しながら溶解させた。出発材料が完全に溶解したところで、混合物をドライアイスエタノール浴でＮ２下にて−７８℃まで冷却した。冷却されたところで、２．５当量の無水トリフル酸を添加して、撹拌しながらゆっくりと室温にした。反応をＴＬＣによってモニターして、一般に４時間で完了した。完了したところで、反応物を真空濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで分配した。有機層を０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭを用いてシリカゲルで精製し、純粋なトリフレートを得た。
【０１００】
１当量のトリフレートを高圧パール反応器のガラスインサート中でＤＭＦ及びＭｅＯＨに溶解させた。ついで１０分間ＣＯで撹拌しながら出発材料からガスを抜いた。ついで、０．１５当量の酢酸パラジウム（ＩＩ）と０．１５当量の１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンを添加した後、更に１０分間ＣＯで撹拌しながら混合物からガスを抜き、その時点で２．５当量のジイソプロピルエチルアミンを添加した。反応器を正しく組み立てた後、３００ｐｓｉのＣＯガスを充填し、一晩撹拌しながら７０℃に加熱した。ついで反応器を冷却して通気した。混合物を丸底フラスコに移し真空濃縮した。ついで、残留物を、溶離剤として１％アセトンと１％ＴＥＡを含むＤＣＭを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１０１】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。アミンのＴＦＡ塩をＥｔ２Ｏに溶解させ、Ｈ２ＯにＫ２ＣＯ３が入った１０％溶液で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
【０１０２】
１当量のフリーベースのアミン、３当量のフリルアクリル酸、３当量のＥＤＣ及び１当量のＨｏｂｔをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１０３】
２．３当量のヨウ化リチウムをピリジン中の１当量のメチルエステルに添加し、混合物を８時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮させ、残留物をＥｔＯＡｃと１ＮのＨＣｌで分配した。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をＮＭＭに溶解させ、溶液を真空濃縮した。残留物をＤＣＭに取り上げた後、１ＮのＨＣｌで３回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、更なる精製なしに使用される十分に高い純度で安息香酸を得た。
【０１０４】
１当量の酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１０５】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量の適当な商業的に入手できるカルボン酸（（Ｎ−Ｂｏｃ酸を入手できる場合には購入した。他の酸はフリーアミンとして購入し、次の手順でＢｏｃ保護した：アミンを３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液に溶解した。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮してＴＨＦを除去し、得られた水性層をヘキサンで分配した。ついで水性層を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化した後、ＥｔＯＡｃで２回分配した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。得られた生成物を更なる精製を行わないで使用した）化合物１、Ｄ，Ｌ−ピペコリン酸；化合物２、ニペコ酸；化合物３、イソニペコ酸；化合物４、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン；化合物５、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−プロリン；化合物６、Ｂｏｃ−Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸；化合物７、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ピログルタミン酸；化合物８、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−ピログルタミン酸；化合物９、Ｌ−ピペコリン酸；化合物１０，Ｄ−シス−４−ヒドロキシプロリン；化合物１１、Ｌ−シス−４−ヒドロキシプロリン；化合物１２、Ｄ−ヒドロキシプロリン；化合物１３、（２Ｓ，３Ｓ）−３−メチルピロリジン−２−カルボン酸；化合物１４、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ヒドロキシプロリン；化合物１５、Ｂｏｃ−Ｄ−チアゾリジン−４−カルボン酸；化合物４１、Ｌ−３−ヒドロキシプロリン；化合物４３、トランス−３−アザビシクロ［３．１．０］−ヘキサン−２−カルボン酸）、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１０６】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
【０１０７】
適切な場合には、Ｂｏｃ保護残留物をＤＣＭにＴＦＡを入れた（１：１）溶液に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、真空下で再濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１０８】
実施例３  化合物１８−２１の合成
2004517928.tif 000022
2004517928.tif 000023
【０１０９】
１当量の４−アミノ−２，６−ジクロロフェノールを３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、溶液を一晩撹拌した。反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体になるまで真空濃縮した。Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンからの再結晶化により純粋な生成物を得た。
【０１１０】
１当量のフェノールを、２．６当量の２，６−ルチジンを含むＤＣＭ中に溶解させ、混合物を−７８℃まで冷却した。１．２５当量の無水トリフル酸を添加した後、撹拌して反応を一晩かけて室温まで温めた。ついで反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なトリフレートを得た。
【０１１１】
ＤＭＦ／ＭｅＯＨの２／１混合物中の１当量のトリフレートの撹拌溶液に、０．１５当量の１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンと２．５当量のＴＥＡを添加した。一酸化炭素ガスをこの溶液に１５分間バブリングさせた後、０．１５当量のＰｄ（ＯＡｃ）２を添加し、（ＣＯを満たしたバルーンを用いて）ＣＯ雰囲気下で５−７時間７０℃で反応物を撹拌した。ついで、反応物を真空濃縮し、残留物をＥｔ２ＯとＨ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで２回抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、シリカゲルの栓を通して濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１：０．０２のヘキサン／ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なメチルエステルを得た。
【０１１２】
１当量のＢｏｃ−アニリンをメタノールに溶解させ、溶液をＨＣｌで飽和させた。反応物を５０℃で３時間加熱した後、真空濃縮した。淡い黄色の固形物を完全に溶解するまで３５％Ｈ２ＳＯ４中で加熱した。氷Ｈ２Ｏを添加して混合物を冷却したところ、重硫酸アミンが沈殿した。反応フラスコを氷浴で冷却し、Ｈ２Ｏ中１．１当量の亜硝酸ナトリウムを滴下して加えながら混合物を激しく撹拌した。反応物を更に１．５時間０℃にて撹拌した。１０当量のＫＩの水溶液を添加した後、直ぐに１７当量のＣｕＩを添加した。反応物を１４時間室温で撹拌した後、Ｅｔ２Ｏで３回抽出した。混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた後、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９５：５のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なヨウ化アリールメチルエステルを得た。
【０１１３】
ＴＨＦ中１当量の３−クロロベンズアルデヒドの溶液を−７８℃まで冷却し、１．１当量の０．５Ｍ臭化エチニルマグネシウム／ＴＨＦを加えた。室温で３時間反応物を撹拌した後、Ｅｔ２Ｏで希釈し１０％クエン酸で２回洗浄した。混合した水性層をＥｔ２Ｏで１回逆抽出した。混合した有機層を飽和した水性ＮａＨＣＯ３で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１から３：２のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なアルキンを得た。
【０１１４】
１当量のヨウ化アリールメチルエステルをＥｔＯＡｃに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。１．２５当量のアルキンを添加した後、０．０２当量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、０．０４当量のＣｕＩ及び５当量のＴＥＡを添加した。反応物を１４時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、５％のＮａ２・ＥＤＴＡ、塩水で２回洗浄した後、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋なアリールアルキンを得た。
【０１１５】
１当量のアリールアルキンをＭｅＯＨに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。５％のＲｈ／Ａｌ２Ｏ３を添加し、一バルーン一杯の水素を溶液中に通過させ、反応物を７時間（バルーンを用いて）Ｈ２雰囲気下で撹拌した後、反応物をセライトパッドによって濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋な生成物を得た。
【０１１６】
２．３当量のヨウ化リチウムをピリジン中の１当量のメチルエステルに添加し、混合物を８時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮させ、残留物をＥｔＯＡｃと１ＮのＨＣｌで分配した。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をＮＭＭに溶解させ、溶液を真空濃縮した。残留物をＤＣＭに取り上げた後、１ＮのＨＣｌで３回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、更なる精製なしに使用される十分に高い純度で安息香酸を得た。
【０１１７】
１当量の酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１１８】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量の適当な商業的に入手できるカルボン酸（（入手できる場合はＮ−Ｂｏｃ酸を購入した。他の酸はフリーアミンとして購入し次の手順でＢｏｃ保護した：アミンを３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液に溶解した。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮してＴＨＦを除去し、得られた水性層をヘキサンで分配した。ついで水性層を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化した後、ＥｔＯＡｃで２回分配した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。得られた生成物を更なる精製を行わないで使用した）実施例１８、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−プロリン；実施例１９、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン；実施例２０、Ｂｏｃ−Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸；実施例２１、イソニペコ酸；２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１１９】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
【０１２０】
Ｂｏｃ保護残留物をＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１２１】
実施例４  化合物２２−２５の合成
2004517928.tif 000024
2004517928.tif 000025
【０１２２】
１当量の４−アミノ−２，６−ジクロロフェノールを３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、溶液を一晩撹拌した。反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体になるまで真空濃縮した。Ｅｔ２Ｏ／ヘキサンからの再結晶化により純粋な生成物を得た。
【０１２３】
１当量のフェノールを、２．６当量の２，６−ルチジンを含むＤＣＭ中に溶解させ、混合物を−７８℃まで冷却した。１．２５当量の無水トリフル酸を添加した後、撹拌して反応物を一晩かけて室温まで温めた。ついで反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なトリフレートを得た。
【０１２４】
ＤＭＦ／ＭｅＯＨの２／１混合物中の１当量のトリフレートの撹拌溶液に、０．１５当量の１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンと２．５当量のＴＥＡを添加した。一酸化炭素ガスをこの溶液に１５分間バブリングさせた後、０．１５当量のＰｄ（ＯＡｃ）２を添加し、（ＣＯを満たしたバルーンを用いて）ＣＯ雰囲気下で５−７時間７０℃で反応物を撹拌した。ついで、反応物を真空濃縮し、残留物をＥｔ２ＯとＨ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで２回抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、シリカゲルの栓を通して濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１：０．０２のヘキサン／ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なメチルエステルを得た。
【０１２５】
１当量のＢｏｃ−アニリンをメタノールに溶解させ、溶液をＨＣｌで飽和させた。反応物を５０℃で３時間加熱した後、真空濃縮した。淡い黄色の固形物を完全に溶解するまで３５％Ｈ２ＳＯ４中で加熱した。氷Ｈ２Ｏを添加して混合物を冷却したところ、重硫酸アミンが沈殿した。反応フラスコを氷浴で冷却し、Ｈ２Ｏ中１．１当量の亜硝酸ナトリウムを滴下して加えながら混合物を激しく撹拌した。反応物を更に１．５時間０℃にて撹拌した。１０当量のＫＩの水溶液を添加した後、直ぐに１７当量のＣｕＩを添加した。反応物を１４時間室温で撹拌した後、Ｅｔ２Ｏで３回抽出した。混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させた後、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９５：５のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なヨウ化アリールメチルエステルを得た。
【０１２６】
ＤＭＦ中で撹拌しながら、１当量の３−ヒドロキシ安息香酸、１．３当量のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩、１．３当量のＨＯＢｔ及び１．３当量のＥＤＣの不均一な混合物に１．３当量のＤＩＰＥＡを加えた。混合物を室温で２８時間撹拌したところ全ての固形物はやがて溶解した。混合物を濃縮後、残留物をＥｔ２ＯとＨ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで３回抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なヒドロキサマートを得た。
【０１２７】
１当量のヒドロキサマート、２．２当量の塩化ｔ−ブチルジメチルシリル及び３当量のイミジゾールをＤＭＦに溶解し室温で撹拌した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで生成物を更なる精製を行わないで使用した。
【０１２８】
ＴＭＦ中に入った１当量の保護されたヒドロキサマートの撹拌した−７８℃溶液に、トルエン中に１．５ＭのＤＩＢＡＬ１．２当量が入った溶液を滴下して加えた。反応混合物を、−７８℃で更に３時間、あるいはＴＬＣがほんの微量にしか出発材料を含まない清澄な生成物の生成を示すまで、撹拌した。反応物を、Ｅｔ２Ｏと０．３５ＭのＮａＨＳＯ４を含む分液漏斗に加えることによって、急冷した。層を分離させた。水性層をエチルエーテルで３回抽出した。混合した有機層を１ＮのＨＣｌ、飽和した水性ＮａＨＣＯ３で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４にかけて、シリカゲルの栓に通して濾過し、真空濃縮した。アルデヒドの更なる精製は必要なかった。
【０１２９】
ＴＨＦ中の１当量の保護されたアルデヒドの溶液を−７８℃まで冷却し、１．１当量の０．５Ｍ臭化エチニルマグネシウム／ＴＨＦを加えた。室温で３時間反応物を撹拌した後、Ｅｔ２Ｏで希釈し、１０％クエン酸で２回洗浄した。混合した水性層をＥｔ２Ｏで１回逆抽出した。混合した有機層を飽和した水性ＮａＨＣＯ３で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１から３：２のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なアルキンを得た。
【０１３０】
１当量のヨウ化アリールメチルエステルをＥｔＯＡｃに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。１．２５当量のアルキンを添加した後、０．０２当量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、０．０４当量のＣｕＩ及び５当量のＴＥＡを添加した。反応物を１４時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、５％のＮａ２・ＥＤＴＡ、塩水で２回洗浄した後、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋なアリールアルキンを得た。
【０１３１】
１当量のアリールアルキンをＭｅＯＨに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。５％のＲｈ／Ａｌ２Ｏ３を添加し、一バルーン一杯の水素を溶液中に通過させ、反応物を７時間（バルーンを用いて）Ｈ２雰囲気下で撹拌した後、反応物をセライトパッドによって濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋な生成物を得た。
【０１３２】
２．３当量のヨウ化リチウムをピリジン中の１当量のメチルエステルに添加し、混合物を８時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮させ、残留物をＥｔＯＡｃと１ＮのＨＣｌで分配した。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をＮＭＭに溶解させ、溶液を真空濃縮した。残留物をＤＣＭに取り上げた後、１ＮのＨＣｌで３回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、更なる精製なしに使用される十分に高い純度で安息香酸を得た。
【０１３３】
１当量の酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１３４】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量の適当な商業的に入手できるカルボン酸（（入手できる場合はＮ−Ｂｏｃ酸を購入した。他の酸はフリーアミンとして購入し次の手順でＢｏｃ保護した：アミンを３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液に溶解した。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮してＴＨＦを除去し、得られた水性層をヘキサンで分配した。ついで水性層を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化した後、ＥｔＯＡｃで２回分配した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。得られた生成物を更なる精製を行わないで使用した）実施例２２、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン；実施例２３、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−プロリン；実施例２４、Ｂｏｃ−Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸；実施例２５、Ｄ−ヒドロキシプロリン；２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１３５】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
Ｂｏｃシリル残留物を、３当量のＴＢＡＦを有するＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１３６】
実施例５  化合物２６−２８、３１の合成
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【０１３７】
１当量のジメチル２−クロロテレフタル酸をＤＣＭに溶解させ、窒素下で氷／アセトン浴中で−５℃まで冷却した。３０分かけてＤＣＭの溶液として１当量のＢＢｒ３を滴下して加えた。反応物を室温まで温め、ＴＬＣ（ＤＣＭ／２％  ＨＯＡｃ／２％  ＭｅＯＨ）で完了するまで撹拌した。溶液を氷上に注ぎ、氷を融解させた。ついで混合物ＥｔＯＡｃで分配し、真空濃縮した。この生成物をｐＨが８を越えたままになるまで飽和ＮａＨＣＯ３を加えてＨ２Ｏに溶解させた。この溶液を等容量のＤＣＭで一回分配して未反応ジエステルを除去した。塩基性溶液を濃ＨＣｌで０℃にてｐＨ＝１−１．５まで酸性化し、沈殿物を等容量のＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機物を塩水で１回分配し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。生成物は、ＨＰＬＣでは７：１の正しい位置異性体（レジオアイソマー）であった。
【０１３８】
モノエステルをＤＣＭに溶解し、撹拌棒を含む予め計量したパールフラスコに移した。フラスコを窒素下でドライアイス／アルコール浴で−５℃まで冷却した。冷却されたところで、〜３０当量のイソブチレンを撹拌しながら溶液中にポンプで投入した。２．１当量の濃硫酸を添加しフラスコをワイヤーが入ったゴムストッパーでシールし、撹拌しながら室温にした。溶液を清澄になるまで（１−２日）撹拌した。溶液が清澄になったところで、氷浴で０℃まで冷却した。ストッパーを取り除いて過剰のイソブチレンを、窒素をバブリングすることによって吹き飛ばした。飽和ＮａＨＣＯ３を加えて酸を中和し、混合物を、ＤＣＭがなくなるまで真空濃縮した。ついで溶液をＥｔＯＡｃで分配した。有機物を希ＨＣｌで２回、飽和ＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回分配し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。生成物は更なる精製を行わないで使用した。
【０１３９】
１当量のメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を濃ＨＣｌでｐＨ２まで注意して酸性化した後、真空濃縮してＴＨＦを除去した。得られた水性層をＥｔ２Ｏで２回洗浄し、混合した有機層を塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。安息香酸ｔ−ブチルエステルを更なる精製を行わないで使用した。
【０１４０】
１当量の３−メトキシベンゾニトリルを、ＥｔＯＨ、０．０２当量のＨＣｌ及び１０％（ｗ／ｗ）の１０％Ｐｄ炭素と共にパールボトル中に入れた。反応容器をパール振盪器中に配し、５０ｐｓｉのＨ２を充填し、１２時間振盪した。反応物を、セライトパッドを通して濾過し、Ｅｔ２Ｏで１：１０に希釈した。一晩放置したところ、微細な白色の針状物が生成した。生成物を濾過しＥｔ２Ｏで洗浄し真空乾燥した。ついで得られたアミン塩酸塩を更なる精製を行わないで使用した。
【０１４１】
３当量の安息香酸ｔ−ブチルエステルを、ＤＭＡ中３当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡを用いて１当量のアミン塩酸塩にカップリングさせた。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで生成物を、溶離剤としてＤＣＭ中５％のメタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なｔ−ブチルエステルを得た。
【０１４２】
ｔ−ブチルエステルをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、２回真空濃縮した。
【０１４３】
得られた化合物をＤＣＭに溶解させ、窒素下で氷／アセトン浴中で−５℃まで冷却した。３０分かけてＤＣＭの溶液として２当量のＢＢｒ３を滴下して加えた。反応物を室温まで温め、ＴＬＣ（ＤＣＭ／２％  ＨＯＡｃ／２％  ＭｅＯＨ）で完了するまで撹拌した。溶液を氷上に注ぎ、氷を融解させた。ついで混合物ＥｔＯＡｃで２回分配し、混合された有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。ついで、濾液を、シリカゲルの栓を通過させ、真空濃縮して、純粋な安息香酸を得た。
【０１４４】
１当量の安息香酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１４５】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量の適当な商業的に入手できるカルボン酸（（入手できる場合はＮ−Ｂｏｃ酸を購入した。他の酸はフリーアミンとして購入し次の手順でＢｏｃ保護した：アミンを３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液に溶解した。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮してＴＨＦを除去し、得られた水性層をヘキサンで分配した。ついで水性層を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化した後、ＥｔＯＡｃで２回分配した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。得られた生成物を更なる精製を行わないで使用した）実施例２６、シクロヘキサンカルボン酸；実施例２７、イソニペコ酸；実施例２８、Ｄ，Ｌ−ピペコリン酸；実施例３１、ニペコ酸；２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１４６】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
適当な場合には、Ｂｏｃ保護残留物を、ＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再度真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１４７】
実施例６  化合物２９、３０の合成
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2004517928.tif 000029
【０１４８】
１当量のジメチル２−クロロテレフタル酸をＤＣＭに溶解させ、窒素下で氷／アセトン浴中で−５℃まで冷却した。３０分かけてＤＣＭの溶液として１当量のＢＢｒ３を滴下して加えた。反応物を室温まで温め、ＴＬＣ（ＤＣＭ／２％  ＨＯＡｃ／２％  ＭｅＯＨ）で完了するまで撹拌した。溶液を氷上に注ぎ、氷を融解させた。ついで混合物ＥｔＯＡｃで分配し、真空濃縮した。この生成物をｐＨが８を越えたままになるまで飽和ＮａＨＣＯ３を加えてＨ２Ｏに溶解させた。この溶液を等容量のＤＣＭと一回分配して未反応ジエステルを除去した。塩基性溶液を濃ＨＣｌで０℃にてｐＨ＝１−１．５まで酸性化し、沈殿物を等容量のＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機物を塩水で１回分配し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。生成物は、ＨＰＬＣでは７：１の正しい位置異性体であった。
【０１４９】
モノエステルをＤＣＭに溶解し、撹拌棒を含む予め計量したパールフラスコに移した。フラスコを窒素下でドライアイス／アルコール浴で−５℃まで冷却した。冷却されたところで、〜３０当量のイソブチレンを撹拌しながら溶液中にポンプで投入した。２．１当量の濃硫酸を添加しフラスコをワイヤーが入ったゴムストッパーでシールし、撹拌しながら室温にした。溶液を清澄になるまで（１−２日）撹拌した。溶液が清澄になったところで、氷浴で０℃まで冷却した。ストッパーを取り除いて過剰のイソブチレンを、窒素をバブリングすることによって吹き飛ばした。飽和ＮａＨＣＯ３を加えて酸を中和し、混合物を、ＤＣＭがなくなるまで真空濃縮した。ついで溶液をＥｔＯＡｃで分配した。有機物を希ＨＣｌで２回、飽和ＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回分配し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。生成物は更なる精製を行わないで使用した。
【０１５０】
１当量のメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を濃ＨＣｌでｐＨ２まで注意して酸性化した後、真空濃縮してＴＨＦを除去した。得られた水性層をＥｔ２Ｏで２回洗浄し、混合した有機層を塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。安息香酸ｔ−ブチルエステルを更なる精製を行わないで使用した。
【０１５１】
１当量の３−メトキシベンゾニトリルを、ＥｔＯＨ、０．０２当量のＨＣｌ及び１０％（ｗ／ｗ）の１０％Ｐｄ炭素と共にパールボトル中に入れた。反応容器をパール振盪器中に配し、５０ｐｓｉのＨ２を充填し、１２時間振盪した。反応物を、セライトパッドを通して濾過し、Ｅｔ２Ｏで１：１０に希釈した。一晩放置したところ、微細な白色の針状物が生成した。生成物を濾過しＥｔ２Ｏで洗浄し真空乾燥した。ついで得られたアミン塩酸塩を更なる精製を行わないで使用した。
【０１５２】
３当量の安息香酸ｔ−ブチルエステルを、ＤＭＡ中３当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡを用いて１当量のアミン塩酸塩にカップリングさせた。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで生成物を、溶離剤としてＤＣＭ中５％のメタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なｔ−ブチルエステルを得た。
【０１５３】
ｔ−ブチルエステルをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、２回真空濃縮した。
【０１５４】
得られた化合物をＤＣＭに溶解させ、窒素下で氷／アセトン浴中で−５℃まで冷却した。３０分かけてＤＣＭの溶液として２当量のＢＢｒ３を滴下して加えた。反応物を室温まで温め、ＴＬＣ（ＤＣＭ／２％  ＨＯＡｃ／２％  ＭｅＯＨ）で完了するまで撹拌した。溶液を氷上に注ぎ、氷を融解させた。ついで混合物ＥｔＯＡｃで２回分配し、混合された有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。ついで、濾液を、シリカゲルの栓を通過させ、真空濃縮して、純粋な安息香酸を得た。
【０１５５】
１当量の安息香酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なＢｏｃメチルエステルを得た。
【０１５６】
１当量の商業的に入手できるニペコ酸を３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮してＴＨＦを除去し、得られた水性層をヘキサンで分配した。ついで水性層を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化した後、ＥｔＯＡｃで分配した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。得られたＢｏｃ保護ニペコ酸を更なる精製を行わないで使用した。
【０１５７】
Ｂｏｃメチルエステルを、ＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量の得られたＢｏｃ保護ニペコ酸、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋な生成物を得た。
【０１５８】
このＢｏｃ保護生成物を、ＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、２回真空濃縮して、純粋なアミンを得た。１当量のこのアミン、２当量の適当な市販の酸（実施例２９；プロピオン酸；実施例３０、酢酸）、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋な生成物を得た。
【０１５９】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１６０】
実施例７  化合物３２−３４の合成
2004517928.tif 000030
2004517928.tif 000031
【０１６１】
１当量のジメチル２−クロロテレフタル酸をＤＣＭに溶解させ、窒素下で氷／アセトン浴中で−５℃まで冷却した。３０分かけてＤＣＭの溶液として１当量のＢＢｒ３を滴下して加えた。反応物を室温まで温め、ＴＬＣ（ＤＣＭ／２％  ＨＯＡｃ／２％  ＭｅＯＨ）で完了するまで撹拌した。溶液を氷上に注ぎ、氷を融解させた。ついで混合物ＥｔＯＡｃで分配し、真空濃縮した。この生成物をｐＨが８を越えたままになるまで飽和ＮａＨＣＯ３を加えてＨ２Ｏに溶解させた。この溶液を等容量のＤＣＭと一回分配して未反応ジエステルを除去した。塩基性溶液を濃ＨＣｌで０℃にてｐＨ＝１−１．５まで酸性化し、沈殿物を等容量のＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機物を塩水で１回分配し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。生成物は、ＨＰＬＣでは７：１の正しい位置異性体であった。
【０１６２】
モノエステルをＤＣＭに溶解し、撹拌棒を含む予め計量したパールフラスコに移した。フラスコを窒素下でドライアイス／アルコール浴で−５℃まで冷却した。冷却されたところで、〜３０当量のイソブチレンを撹拌しながら溶液中にポンプで投入した。２．１当量の濃硫酸を添加しフラスコをワイヤーが入ったゴムストッパーでシールし、撹拌しながら室温にした。溶液を清澄になるまで（１−２日）撹拌した。溶液が清澄になったところで、氷浴で０℃まで冷却した。ストッパーを取り除いて過剰のイソブチレンを、窒素をバブリングすることによって吹き飛ばした。飽和ＮａＨＣＯ３を加えて酸を中和し、混合物を、ＤＣＭがなくなるまで真空濃縮した。ついで溶液をＥｔＯＡｃで分配した。有機物を希ＨＣｌで２回、飽和ＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回分配し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。生成物は更なる精製を行わないで使用した。
【０１６３】
１当量のメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を濃ＨＣｌでｐＨ２まで注意して酸性化した後、真空濃縮してＴＨＦを除去した。得られた水性層をＥｔ２Ｏで２回洗浄し、混合した有機層を塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。安息香酸ｔ−ブチルエステルを更なる精製を行わないで使用した。
【０１６４】
１当量の３−メトキシベンゾニトリルを、ＥｔＯＨ、０．０２当量のＨＣｌ及び１０％（ｗ／ｗ）の１０％Ｐｄ炭素と共にパールボトル中に入れた。反応容器をパール振盪器中に配し、５０ｐｓｉのＨ２を充填し、１２時間振盪した。反応物を、セライトパッドを通して濾過し、Ｅｔ２Ｏで１：１０に希釈した。一晩放置したところ、微細な白色の針状物が生成した。生成物を濾過しＥｔ２Ｏで洗浄し真空乾燥した。ついで得られたアミン塩酸塩を更なる精製を行わないで使用した。
【０１６５】
３当量の安息香酸ｔ−ブチルエステルを、ＤＭＡ中３当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡを用いて１当量のアミン塩酸塩にカップリングさせた。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで生成物を、溶離剤としてＤＣＭ中５％のメタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なｔ−ブチルエステルを得た。
【０１６６】
ｔ−ブチルエステルをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、２回真空濃縮した。
【０１６７】
得られた化合物をＤＣＭに溶解させ、窒素下で氷／アセトン浴中で−５℃まで冷却した。３０分かけてＤＣＭの溶液として２当量のＢＢｒ３を滴下して加えた。反応物を室温まで温め、ＴＬＣ（ＤＣＭ／２％  ＨＯＡｃ／２％  ＭｅＯＨ）で完了するまで撹拌した。溶液を氷上に注ぎ、氷を融解させた。ついで混合物ＥｔＯＡｃで２回分配し、混合された有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。ついで、濾液を、シリカゲルの栓を通過させ、真空濃縮して、純粋な安息香酸を得た。
【０１６８】
１当量の安息香酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なＢｏｃメチルエステルを得た。
【０１６９】
１当量の商業的に入手できるイソニペコ酸を３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮してＴＨＦを除去し、得られた水性層をヘキサンで分配した。ついで水性層を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化した後、ＥｔＯＡｃで分配した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。得られたＢｏｃ保護イソニペコ酸を更なる精製を行わないで使用した。
【０１７０】
Ｂｏｃメチルエステルを、ＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量の得られたＢｏｃ保護イソニペコ酸、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋な生成物を得た。
【０１７１】
このＢｏｃ保護生成物を、ＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、２回真空濃縮して、純粋なアミンを得た。１当量のこのアミン、２当量の適当な市販の酸（実施例３２；プロピオン酸；実施例３３、酪酸；実施例３４、酢酸）、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋な生成物を得た。
【０１７２】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１７３】
実施例８  化合物３６の合成
2004517928.tif 000032
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【０１７４】
１当量の２，６−ジクロロ−４−メチルフェノールを、２．６当量の２，６−ルチジンを含むＤＣＭ中に溶解させ、混合物を−７８℃まで冷却した。１．２５当量の無水トリフル酸を添加した後、撹拌して反応を一晩かけて室温まで温めた。ついで反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なトリフレートを得た。
【０１７５】
ＤＭＦ／ＭｅＯＨの２／１混合物中の１当量のトリフレートの撹拌溶液に、０．１５当量の１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンと２．５当量のＴＥＡを添加した。一酸化炭素ガスをこの溶液に１５分間バブリングさせた後、０．１５当量のＰｄ（ＯＡｃ）２を添加し、（ＣＯを満たしたバルーンを用いて）ＣＯ雰囲気下で５−７時間７０℃で反応物を撹拌した。ついで、反応物を真空濃縮し、残留物をＥｔ２ＯとＨ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで２回抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、シリカゲルの栓で濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１：０．０２のヘキサン／ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なトリルメチルエステルを得た。
【０１７６】
１当量のトリルメチルエステルを無水酢酸及びＨＯＡｃ中に溶解させた後、濃Ｈ２ＳＯ４を加える前に氷塩浴（−５℃）中で冷却した。無水酢酸及びＨＯＡｃ中のＣｒＯ３（２．６当量）の溶液を滴下して加え、反応物を−５℃で３．５時間撹拌した。反応物を氷Ｈ２Ｏ中に注ぎ、３０分撹拌した。混合物をエチルエーテルで３回抽出した。混合した有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３及び塩水で洗浄した後、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、油に真空濃縮した。トルエンを油に加え、溶液を再び真空濃縮した。これを繰り返して結晶性固形物を得た。固形物をメタノール及び濃ＨＣｌに溶解し、１２時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮し、残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なアルデヒドを得た。
【０１７７】
ＴＨＦ中１当量のアルデヒドの溶液を−７８℃まで冷却し、１．１当量の０．５Ｍ臭化エチニルマグネシウム／ＴＨＦを加えた。室温で３時間反応物を撹拌した後、Ｅｔ２Ｏで希釈し１０％クエン酸で２回洗浄した。混合した水性層をＥｔ２Ｏで１回逆抽出した。混合した有機層を飽和した水性ＮａＨＣＯ３で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１から３：２のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なアルキンを得た。
【０１７８】
１当量の３−ヨードフェノール、２．２当量の塩化ｔ−ブチルジメチルシリル及び３当量のイミジゾールをＤＭＦに溶解し室温で撹拌した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで生成物を更なる精製を行わないで使用した。
【０１７９】
１当量のヨウ化シリルをＥｔＯＡｃに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。１．２５当量のアルキンを添加した後、０．０２当量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、０．０４当量のＣｕＩ及び５当量のＴＥＡを添加した。反応物を１４時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、５％のＮａ２・ＥＤＴＡ、塩水で２回洗浄した後、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋なアリールアルキンを得た。
【０１８０】
１当量のアリールアルキンをＭｅＯＨに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。５％のＲｈ／Ａｌ２Ｏ３を添加し、一バルーン一杯の水素を溶液中に通過させ、反応物を７時間（バルーンを用いて）Ｈ２雰囲気下で撹拌した後、反応物をセライトパッドによって濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋な生成物を得た。
【０１８１】
２．３当量のヨウ化リチウムをピリジン中の１当量のメチルエステルに添加し、混合物を８時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮させ、残留物をＥｔＯＡｃと１ＮのＨＣｌの間で分配した。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をＮＭＭに溶解させ、溶液を真空濃縮した。残留物をＤＣＭに取り上げた後、１ＮのＨＣｌで３回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、更なる精製なしに使用される十分に高い純度で安息香酸を得た。
【０１８２】
１当量の酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１８３】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量のＢｏｃ−Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸；２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１８４】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
Ｂｏｃシリル残留物を、３当量のＴＢＡＦを有するＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１８５】
実施例９  化合物３７の合成
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2004517928.tif 000036
【０１８６】
１当量の２，６−ジクロロ−４−メチルフェノールを、２．６当量の２，６−ルチジンを含むＤＣＭ中に溶解させ、混合物を−７８℃まで冷却した。１．２５当量の無水トリフル酸を添加した後、撹拌して反応を一晩かけて室温まで温めた。ついで反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なトリフレートを得た。
【０１８７】
ＤＭＦ／ＭｅＯＨの２／１混合物中の１当量のトリフレートの撹拌溶液に、０．１５当量の１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンと２．５当量のＴＥＡを添加した。一酸化炭素ガスをこの溶液に１５分間バブリングさせた後、０．１５当量のＰｄ（ＯＡｃ）２を添加し、（ＣＯを満たしたバルーンを用いて）ＣＯ雰囲気下で５−７時間７０℃で反応物を撹拌した。ついで、反応物を真空濃縮し、残留物をＥｔ２ＯとＨ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで２回抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、シリカゲルの栓で濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１：０．０２のヘキサン／ＤＣＭ／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なトリルメチルエステルを得た。
【０１８８】
１当量のトリルメチルエステルを無水酢酸及びＨＯＡｃ中に溶解させた後、濃Ｈ２ＳＯ４を加える前に氷塩浴（−５℃）中で冷却した。無水酢酸及びＨＯＡｃ中のＣｒＯ３（２．６当量）の溶液を滴下して加え、反応物を−５℃で３．５時間撹拌した。反応物を氷Ｈ２Ｏ中に注ぎ、３０分撹拌した。混合物をエチルエーテルで３回抽出した。混合した有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３及び塩水で洗浄した後、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、油に真空濃縮した。トルエンを油に加え、溶液を再び真空濃縮した。これを繰り返して結晶性固形物を得た。固形物をメタノール及び濃ＨＣｌに溶解し、１２時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮し、残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（９：１のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なアルデヒドを得た。
【０１８９】
ＴＨＦ中１当量のアルデヒドの溶液を−７８℃まで冷却し、１．１当量の０．５Ｍ臭化エチニルマグネシウム／ＴＨＦを加えた。室温で３時間反応物を撹拌した後、Ｅｔ２Ｏで希釈し１０％クエン酸で２回洗浄した。混合した水性層をＥｔ２Ｏで１回逆抽出した。混合した有機層を飽和した水性ＮａＨＣＯ３で２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４：１から３：２のヘキサン／Ｅｔ２Ｏ）によって精製して純粋なアルキンを得た。
【０１９０】
１当量の１−クロロ−３−ヨードベンゼンをＥｔＯＡｃに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。１．２５当量のアルキンを添加した後、０．０２当量のジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、０．０４当量のＣｕＩ及び５当量のＴＥＡを添加した。反応物を１４時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、５％のＮａ２・ＥＤＴＡ、塩水で２回洗浄した後、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋なアリールアルキンを得た。
【０１９１】
１当量のアリールアルキンをＭｅＯＨに溶解させ、ピペットで溶液中に１０分間Ｎ２を通過させることによって溶液からガスを抜いた。５％のＲｈ／Ａｌ２Ｏ３を添加し、一バルーン一杯の水素を溶液中に通過させ、反応物を７時間（バルーンを用いて）Ｈ２雰囲気下で撹拌した後、反応物をセライトパッドによって濾過し、真空濃縮した。残留物をシルカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ２ＯからＥｔＯＡｃを用いる勾配溶離）によって精製して純粋な生成物を得た。
【０１９２】
２．３当量のヨウ化リチウムをピリジン中の１当量のメチルエステルに添加し、混合物を８時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮させ、残留物をＥｔＯＡｃと１ＮのＨＣｌの間で分配した。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をＮＭＭに溶解させ、溶液を真空濃縮した。残留物をＤＣＭに取り上げた後、１ＮのＨＣｌで３回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、更なる精製なしに使用される十分に高い純度で安息香酸を得た。
【０１９３】
１当量の酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１９４】
１当量の商業的に入手できるＤ−ヒドロキシプロリンを３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮してＴＨＦを除去し、得られた水層をヘキサンで分配した。ついで水性層を１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化した後、ＥｔＯＡｃで２回分配した。混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。得られたＮ−Ｂｏｃ−Ｄ−ヒドロキシプロリンは更なる精製を行わないで使用した。
【０１９５】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。１当量のこのアミン、２当量のＢｏｃ−Ｄ−ヒドロキシ−プロリン、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０１９６】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。Ｂｏｃシリル残留物を、ＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０１９７】
実施例１０  化合物３５の合成
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【０１９８】
丸底フラスコに効率的なオーバーヘッド攪拌器を装備し、濃Ｈ２ＳＯ４（Ｈ２Ｏの２．７ｘ容量）とＨ２Ｏを入れ、エタノール／氷浴で〜−５℃まで冷却した。冷却した後、１当量の２，６ジクロロフェノールと１当量のＮ−（ヒドロキシメチル）フタルイミドを激しく撹拌しながら添加した。反応物を４時間冷却したまま維持した後、絶えず撹拌しながら一晩かけて室温まで温めた。反応は一般に丸底フラスコ中に丁度固形物ができた時点まで進めた。その時点で、ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏを添加して撹拌して固形物にした。大きな塊を破壊した後、沈殿物を濾過し、更なるＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで洗浄した。生成物を、真空下で一晩乾燥させた後に更に精製しないで使用した。
【０１９９】
１当量の乾燥した生成物とメタノール（２２．５ｍｌｘ＃ｇ出発材料）を、Ｈ２Ｏ凝縮器と撹拌棒を備えた丸底フラスコに添加した。１．２当量のヒドラジン一水化物を加え、混合物を４時間還流させた。室温への冷却後、濃ＨＣｌ（４．５ｍｌｘ＃ｇ出発材料）を注意して添加した。添加の終了後に、混合物を一晩（＞８時間）還流させた。反応物を０℃まで冷却し、沈殿した副産物を濾過によって除いた。ついで濾液を真空濃縮した。
【０２００】
粗アミン残留物を３：２ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ溶液中に溶解させた。１．１当量の固形のＮａＨＣＯ３と１．１当量のＢｏｃ２Ｏを添加し、混合物を一晩撹拌した。反応物を濃縮し、残留物をＨ２ＯとＥｔ２Ｏで分配した。水性層をＥｔ２Ｏで抽出し、混合した有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体になるまで真空濃縮した。熱いメタノール及びＨ２Ｏからの再結晶化により純粋な生成物を得た。
【０２０１】
１当量のＢｏｃ保護アミンと１．５当量の２，６−ルチジンを、丸底フラスコ中でＤＣＭに必要に応じて穏やかに加熱しながら溶解させた。出発材料が完全に溶解したところで、混合物をドライアイスエタノール浴でＮ２下にて−７８℃まで冷却した。冷却されたところで、２．５当量の無水トリフル酸を添加して、撹拌しながらゆっくりと室温にした。反応はＴＬＣによってモニターし、一般に４時間で完了した。完了したところで、反応物を真空濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで分配した。有機層を０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭを用いてシリカゲルで精製し、純粋なトリフレートを得た。
【０２０２】
１当量のトリフレートを高圧パール反応器のガラスインサート中でＤＭＦ及びＭｅＯＨに溶解させた。ついで１０分間ＣＯで撹拌しながら出発材料からガスを抜いた。ついで、０．１５当量の酢酸パラジウム（ＩＩ）と０．１５当量の１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンを添加した後、更に１０分間ＣＯで撹拌しながら混合物からガスを抜き、その時点で２．５当量のジイソプロピルエチルアミンを添加した。反応器を正しく組み立てた後、３００ｐｓｉのＣＯガスを充填し、一晩撹拌しながら７０℃に加熱した。ついで反応器を冷却して通気した。混合物を丸底フラスコに移し真空濃縮した。ついで、残留物を、溶離剤として１％アセトンと１％ＴＥＡを含むＤＣＭを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０２０３】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。アミンのＴＦＡ塩をＥｔ２Ｏに溶解させ、Ｈ２ＯにＫ２ＣＯ３が入った１０％溶液で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
【０２０４】
１当量のフリーベースのアミン、３当量のフリルアクリル酸、３当量のＥＤＣ及び１当量のＨｏｂｔをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０２０５】
２．３当量のヨウ化リチウムをピリジン中の１当量のメチルエステルに添加し、混合物を８時間還流して加熱した。反応物を真空濃縮させ、残留物をＥｔＯＡｃと１ＮのＨＣｌで分配した。水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出し、混合した有機層を１ＭのＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。残留物をＮＭＭに溶解させ、溶液を真空濃縮した。残留物をＤＣＭに取り上げた後、１ＮのＨＣｌで３回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、更なる精製なしに使用される十分に高い純度で安息香酸を得た。
【０２０６】
１当量の酸、２当量の商業的に入手できるβ−Ｂｏｃ−ジアミノプロピオン酸メチルエステル、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０２０７】
Ｂｏｃ保護アミンをＤＣＭ中にＴＦＡが入った溶液（１：１）に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、再び真空濃縮した。
【０２０８】
１当量のこのアミンに、ＤＭＦ中、１．０５当量のヨウ化メチルと２．１当量の炭酸カリウムを加えた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。反応が完了したところで、ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏで希釈した。水性層を再びＥｔＯＡｃで分配し、混合した有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。
【０２０９】
１当量のこのアミン、２当量のＢｏｃ−Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸、２当量のＥＤＣ、１当量のＨｏｂｔ及び３当量のＤＩＰＥＡをＤＭＡに溶解させた。反応物を室温で撹拌し、ＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を真空濃縮した。得られた油をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＮのＨ２ＳＯ４で２回、飽和したＮａＨＣＯ３で２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。ついで残留物を溶離剤としてＤＣＭ中の５％メタノールを用いてシリカゲルで精製して、純粋なメチルエステルを得た。
【０２１０】
１当量の得られたメチルエステルをＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（３／１）に溶解させ、３当量のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏを添加した。反応をＴＬＣ（９／１ ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）によってモニターした。完了したところで、混合物を１ＭのＨＣｌでｐＨ２まで酸性化した後、真空濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏに再び懸濁させ、０．１ＭのＨＣｌで２回、塩水で１回洗浄した。ついで有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮した。
残留物をＤＣＭにＴＦＡを入れた（１：１）溶液に溶解させた。２０分後、反応物を真空濃縮した。得られた油をトルエンに溶解させた後、真空下で再濃縮した。ついで得られた酸を逆相ＨＰＬＣによって精製し、エレクトロスプレー質量分析によって確認し、パウダーに凍結乾燥させた。
【０２１１】
実施例１１  ＰＬＭ２抗体捕捉ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１アッセイ
ヒトＣＤ１８に対する非機能阻害モノクローナル抗体であるＰＬＭ−２（Ｈｉｌｄｒｅｔｈ等， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， Ｖｏｌ． ２６， Ｎｏ． ９， ｐｐ．８８３−８９５， １９８９に記載）が、ＰＢＳ中５μｇ／ｍｌに希釈され、９６ウェルの平底プレートに４℃で一晩かけて１００μｌ／ウェルで被覆される。プレートは室温で１時間、アッセイバッファー（０．０２ＭのＨｅｐｅｓ、０．１５ＭのＮａＣｌ及び１ｍＭのＭｎＣｌ２）中０．５％のＢＳＡでブロックされる。プレートは５０ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ７．５、０．１ＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０及び１ｍＭのＭｎＣｌ２で洗浄される。精製した全長組換えヒトＬＦＡ−１蛋白がアッセイバッファーで２μｇ／ｍｌになるまで希釈され、１００μｌ／ウェルがプレートに加えられ、３７℃で１時間インキュベートされる。プレートは３Ｘ洗浄される。アッセイバッファーに適当に希釈された５０μｌ／ウェルのインヒビターが２Ｘの最終濃度になるまで添加され、３７℃で３０’インキュベートされる。アッセイバッファーに１６１ｎｇ／ｍｌになるように希釈された（８０ｎｇ／ｍｌの最終濃度）５０μｌ／ウェルの精製組換えヒト５ドメインＩＣＡＭ−Ｉｇが添加され、３７℃で２時間インキュベートされる。プレートは洗浄され、結合したＩＣＡＭ−Ｉｇが室温で１時間ヤギ抗ＨｕＩｇＧ（Ｆｃ）−ＨＲＰで検出される。プレートは洗浄され、室温で５−１０’の間、１００μｌ／ウェルのＴＭＢ基質で発色させられる。発色を１００μｌ／ウェルの１ＭのＨ３ＰＯ４で停止させ、プレートリーダーで４５０ｎＭにて読み取られる。ＰＬＭ２アッセイの結果は以下の表１−４に示す。
【０２１２】
実施例１２  血清／血漿蛋白結合
試験化合物の結合実験を、Ｂｏｒｇａ等（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ＆ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ， １９９７， ２５（１）：６３−７７）及びＧｏｄｏｌｐｈｉｎ等（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｄｒｕｇ ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ， １９８３， ５：３１９−２３）に記載された手順に従って実施した。１０μｌの試験化合物原液（１μｇ／μＬ）の二組のサンプルを、室温でＣＯ２を用いてｐＨ７．４に調節された１ｍＬのバッファーか血清／血漿中にスパイクした。３７℃で１５分間、振盪器を備えた水浴中でバイアルをインキュベートすることによってサンプルを平衡化させた。２００μｌのバッファーをスパイクしたサンプルを濾過前液として保存した。８００μｌのバッファーをスパイクしたサンプルと１ｍｌの血清をスパイクしたサンプルをＣｅｎｔｒｉｆｒｅｅ限外濾過装置（アミコン・インク）において１５００ｇ、３７℃で３０分間遠心分離した。ついで、濾過前及び濾過後液を、ＬＣ／ＭＳ−ＭＳによって分析し、血清／血漿蛋白に対する試験化合物の結合率％を、バッファーコントロールから決定した任意の非特異的結合に対する割合として濾過後及び濾過前液から決定した。
【０２１３】
置換基Ｃｙに非芳香族環を有する本発明の化合物は、驚いたことに、治療的に適切な血清レベルを維持するのに有利である低い血清血漿蛋白結合特性を示す。表１−４に示されるように、置換基Ｃｙに芳香族環を持つ対照化合物（対照）は、非芳香族環を有する本発明の等価な化合物と比較して、より高い血漿蛋白結合率％を一貫して示している。
【０２１４】
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【国際調査報告】
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