(57)【要約】本発明は、式(Ｉ)：【化１】2004530709.tif 000042で示される抗腫瘍化合物および抗腫瘍の方法を提供する。
2004530709.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2004530709.tif 000039
(式中、
ＸはOまたはNHであり、
R1は水素、ハロ、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、SCF3、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリル、キノリニルまたはトリアゾリルであり、
R2は水素、ハロ、シアノ、CF3、C1-C6アルキル、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、C1-C4アルコキシ、フェニルまたはキノリニルであり、
R2aは水素またはC1-C4アルコキシであり、
R2bは水素またはC1-C6アルキルであるが、R2aおよびR2bのうちの少なくとも１つは水素であり、
R3は水素、ハロ、C1-C6アルキル、CF3またはニトロであり、
R3aは水素、ハロまたはC1-C6アルキルであるが、ただしR3aがC1-C6アルキルである場合、R3は水素であり、R4はハロであり、
R4はハロ、C1-C6アルキルまたはCF3であるが、ただしR3およびR４のいずれか１つのみがC1-C6アルキルであり、R4がハロまたはC1-C6アルキルである場合、R3およびR3aのいずれか１つのみが水素である。
ただし、
ａ）R3およびR4の両方がクロロでありR2が水素である場合、R1はブロモ、ヨード、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリルまたはトリアゾリルであり、
ｂ）R3およびR4の両方がクロロでありR1が水素である場合、R2はブロモ、フルオロ、CF3、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、フェニルまたはキノリニルである。)
で示される化合物またはその製薬上許容される塩基付加塩。
【請求項２】
R2、R2aおよびR2bが水素であり、R1が水素、ハロ、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、SCF3、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリル、キノリニルおよびトリアゾリルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
化合物が製薬上許容される塩基付加塩である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
製薬上許容される塩基付加塩がナトリウム塩である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
N-[2-クロロ-4-ブロモベンゾイル]-4-クロロフェニルスルホンアミドまたはその塩基付加塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
N-[2,4-ジクロロベンゾイル]フェニルスルホンアミドまたはその塩基付加塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
塩基付加塩がナトリウム塩である、請求項５または６に記載の化合物。
【請求項８】
哺乳動物の感受性のある新生物を処置する方法であって、この処置を必要とする哺乳動物に、式II：
【化２】
2004530709.tif 000040
(式中、
ＸはOまたはNHであり、
R1は水素、ハロ、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、SCF3、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリル、キノリニルまたはトリアゾリルであり、
R2は水素、ハロ、シアノ、CF3、C1-C6アルキル、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、C1-C4アルコキシ、フェニルまたはキノリニルであり、
R2aは水素またはC1-C4アルコキシであり、
R2bは水素またはC1-C6アルキルであるが、R2aおよびR2bのうちの少なくとも１つは水素であり、
R3は水素、ハロ、C1-C6アルキル、CF3またはニトロであり、
R3aは水素、ハロまたはC1-C6アルキルであるが、ただしR3aがC1-C6アルキルである場合、R3は水素であり、R4はハロであり、
R4はハロ、C1-C6アルキルまたはCF3であるが、ただしR3およびR４のいずれか１つのみがC1-C6アルキルであり、R4がハロまたはC1-C6アルキルである場合、R3およびR3aのうちの１つのみが水素である)
で示される化合物またはその製薬上許容される塩基付加塩を腫瘍細胞崩壊に有効な量で投与することを含む方法。
【請求項９】
式II：
【化３】
2004530709.tif 000041
(式中、
ＸはOまたはNHであり、
R1は水素、ハロ、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、SCF3、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリル、キノリニルまたはトリアゾリルであり、
R2は水素、ハロ、シアノ、CF3、C1-C6アルキル、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、C1-C4アルコキシ、フェニルまたはキノリニルであり、
R2aは水素またはC1-C4アルコキシであり、
R2bは水素またはC1-C6アルキルであるが、R2aおよびR2bのうちの少なくとも１つは水素であり、
R3は水素、ハロ、C1-C6アルキル、CF3またはニトロであり、
R3aは水素、ハロまたはC1-C6アルキルであるが、ただしR3aがC1-C6アルキルである場合、R3は水素であり、R4はハロであり、
R4はハロ、C1-C6アルキルまたはCF3であるが、ただしR3およびR４のいずれか１つのみがC1-C6アルキルであり、R4がハロまたはC1-C6アルキルである場合、R3およびR3aのいずれか１つのみが水素である)
で示される化合物またはその製薬上許容される塩基付加塩、ならびに製薬上許容されるキャリア、希釈剤または賦形剤を含有する医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
近年、新生物疾患に対抗するための治療用化学薬剤およびレジメの開発に、根源的な進歩がなされている。これらの継続的な進歩にもかかわらず、癌は耐え難いレベルでヒトに疼痛および苦痛を強い続けている。(特に手術不能または転移性固形癌の領域における)悪性新生物および白血病の新規かつより良い治療方法に対する必要性により、新規なクラスの化合物を創作するための努力が費やされつづけている。新生物に関する基本的な生物学的プロセスに関する近年の大量の情報により、腫瘍の多様性(heterogeneity)のより深い理解が導かれた。新生物細胞集団における非常に強い多様性のために、新規な化学療法剤は広範な活性スペクトルおよび良好な治療インデックスを有さなければならない。さらに、このような薬剤は化学的に安定でなければならず、他の薬剤と適合性でなければならない。また、化学療法レジメはいずれも患者に対して可能な限り便利で痛みのないものであることが重要である。
【０００２】
化学療法および放射線療法は頻繁に癌の治療に用いられ、それらがしばしば悪性疾患で何らかの反応を生じるが、ほとんど治療可能ではない。悪性細胞および間質細胞(内皮細胞を含む)の増殖で、ほとんどの固形癌は塊で増加する。腫瘍が直径２〜３mmよりも成長するためには、脈環構造を形成しなければならない(血管新生として公知のプロセスである)。アンギオスタチンおよびエンドスタチンによる腫瘍誘発性の血管新生の抑制は、抗腫瘍活性を生じると報告されている(O'Reillyら、Cell, 88, 277-285 (1997))。血管新生はほとんどの固形腫瘍の塊での増殖に不可欠な構成要素であるので、このプロセスの阻害に関する新規薬剤の開発は抗腫瘍治療に対するアプローチの見こみを示す。この抗腫瘍治療に対するアプローチは、従来の化学療法の毒性副作用または薬剤耐性誘発特性を有さないかもしれない(Judah Folkman, Endogenous Inhibitors of Angiogenesis, The Harvey Lectures, Series 92, 65-82頁、Wiley-Liss Inc., (1998))。
【０００３】
N-[ベンゾイル]-フェニルスルホンアミドは農芸用化学薬剤の分野では殺虫剤および除草剤として周知である(DE 2744137)。N-[ベンゾイル]-フェニルスルホンアミドの、抗腫瘍剤としての使用は、通常、特に血管新生の阻害剤としてはこれまでは評価されていなかった。
【発明の要旨】
【０００４】
本発明は、式Ｉ：
【化１】
2004530709.tif 000003
(式中、
ＸはOまたはNHであり、
R1は水素、ハロ、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、SCF3、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリル、キノリニルまたはトリアゾリルであり、
R2は水素、ハロ、シアノ、CF3、C1-C6アルキル、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、C1-C4アルコキシ、フェニルまたはキノリニルであり、
R2aは水素またはC1-C4アルコキシであり、
R2bは水素またはC1-C6アルキルであるが、R2aおよびR2bのうちの少なくとも１つは水素であり、
R3は水素、ハロ、C1-C6アルキル、CF3またはニトロであり
R3aは水素、ハロまたはC1-C6アルキルであるが、ただしR3aがC1-C6アルキルである場合、R3は水素であり、R4はハロである。
R4はハロ、C1-C6アルキルまたはCF3であるが、ただしR3およびR４のいずれか１つのみがC1-C6アルキルであり、R4がハロまたはC1-C6アルキルである場合、R3およびR3aのいずれか１つのみが水素である。
ただし、
ａ）R3およびR4の両方がクロロでありR2が水素である場合、R1はブロモ、ヨード、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリルまたはトリアゾリルであり、
ｂ）R3およびR4の両方がクロロでありR1が水素である場合、R2はブロモ、フルオロ、CF3、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、フェニルまたはキノリニルである。)
で示される化合物またはその製薬上許容される塩基付加塩を提供する。
【０００５】
本発明はさらに、感受性新生物の治療を必要とする哺乳動物に腫瘍細胞崩壊に有効な量の式II：
【化２】
2004530709.tif 000004
(式中、
ＸはOまたはNHであり、
R1は水素、ハロ、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、SCF3、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリル、キノリニルまたはトリアゾリルであり、
R2は水素、ハロ、シアノ、CF3、C1-C6アルキル、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、C1-C4アルコキシ、フェニルまたはキノリニルであり、
R2aは水素またはC1-C4アルコキシであり、
R2bは水素またはC1-C6アルキルであるが、R2aおよびR2bのうちのすくなくとも１つは水素であり、
R3は水素、ハロ、C1-C6アルキル、CF3またはニトロであり、
R3aは水素、ハロまたはC1-C6アルキルであるが、ただしR3aがC1-C6アルキルである場合、R3は水素であり、R4はハロであり、
R4はハロ、C1-C6アルキルまたはCF3であるが、ただし、R4がハロまたはC1-C6アルキルであり、R3およびR3aのいずれか１つのみが水素である場合、R3およびR4のうちの1つのみがC1-C6アルキルであってよい。)
で示される化合物またはその製薬上許容される塩基付加塩を投与することを含む、哺乳動物の感受性新生物の治療方法を提供する。
【０００６】
本発明はまた、腫瘍血管新生の抑制を必要とする哺乳動物に、式IIの化合物またはその製薬上許容される塩基付加塩を血管新生抑制量で投与することを含む、哺乳動物の腫瘍血管新生の抑制方法を提供する。
【０００７】
本発明はまた、製薬上許容されるキャリア、希釈剤または賦形剤と組合せて、式IIの化合物または製薬上許容される塩基付加塩を含有する医薬製剤を提供する。
【０００８】
本発明はまた、感受性新生物の治療のための医薬の製造に対する式IIの化合物の使用を提供する。さらに、本発明は式IIの化合物を含有する感受性新生物の治療用に適合されている医薬製剤を提供する。さらに、本発明は、式IIの化合物を有効量投与することを含む
感受性新生物の治療方法を含む。
【０００９】
上記の式中で用いる一般的な化学用語は通常の意味を有する。例えば、用語「C1-C6アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチルおよびヘキシル部分を含む。用語「C1-C4アルキル」はC1-C6アルキルの意味内に含まれ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチルおよびtert-ブチルを意味するために採用される。用語「C1-C4アルコキシ」は、酸素原子を介して親分子に結合したC1-C4アルキル基を意味し、基、メトキシ、エトキシおよびイソプロポキシを含む。同様に、用語「C1-C4アルキルチオ」は硫黄原子を介して親分子に結合したC1-C4アルキル基を意味し、メチルチオ、エチルチオおよびイソブチルチオを含む。用語「ハロ」は、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードを意味するために採用される。用語「置換フェニル」は、置換基がC1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、C1-C4アシル、トリフルオロメチルおよびハロからなる群から選択されるモノ置換フェニルを意味する。用語「アシル」は、カルボキシ基のOHが他の置換基で置きかえられている有機酸基を意味する(RCO-)。
【００１０】
X=NHの場合、分子は２つの互変体形態：
【化３】
2004530709.tif 000005
で存在し得る。これらの形態の両方が本発明の範囲内にある。
【００１１】
式IIの化合物は全て有用な抗腫瘍剤であるが、特定のクラスの化合物が好ましい、以下の章はこのような好ましいクラスを記載する。
a)R1は水素であり、R2はブロモである、
b)R1はフルオロであり、R2はクロロである、
c)R1はフルオロである、
d)R1はクロロである、
e)R1はメチルである、
f)R1はメチルチオである、
g)R2は水素である、
h)R3はクロロ、ブロモまたはCF3である、
i)R3はクロロである、
j)R3はブロモである、
k)R3はCF3である、
1)R3aは水素である、
m)R4はクロロ、ブロモ、メチルまたはCF3である、
n)R4はクロロである、
o)R4はブロモである、
p)R4はメチルである、
q)R4はCF3である、
r)R3およびR4が両方ともクロロである、
s)R3およびR4が両方ともCF3である、
t)R3がブロモであり、R4がクロロである、
u)R3aは水素であり、R3およびR4は水素以外である、
v)XはOである、
w)化合物が製薬上許容される塩基付加塩である式IIの化合物、
x)化合物がナトリウム塩である式IIの化合物、
y)R1、R2aおよびR2bは水素であり、R2はハロ、C1-C4アルキル、C1-C4アルコキシ、シアノ、トリフルオロメチルおよびキノリニルからなる群から選択される、
z)R2およびR2bが水素であり、R1がハロまたはC1-C4アルキルであり、R2aがC1-C4アルキルまたはC1-C4アルコキシである、または
aa)R2aが水素であり、R1がC1-C4アルコキシであり、R2およびR2bがC1-C4アルキルである。
【００１２】
さらに、以下のクラスが特に好ましい。
a)R2、R2aおよびR2bは水素であり、R1は水素、ハロ、C1-C6アルキル、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルチオ、CF3、OCF3、SCF3、(C1-C4アルコキシ)カルボニル、ニトロ、アジド、O(SO2)CH3、N(CH3)2、ヒドロキシ、フェニル、置換フェニル、ピリジニル、チエニル、フリル、キノリニルおよびトリアゾリルであり、
b)R2aおよびR2bは水素であり、R1はハロおよびC1-C4アルキルからなる群から選択され、R2はハロ、C1-C4アルキルおよびC1-C4アルコキシカルボニルからなる群から選択される。
上記の好ましいクラスおよび特に好ましいクラスを組合せてさらに好ましいクラス、および特に好ましいクラスを形成することができることが理解される。
【００１３】
式IIの化合物は抗新生物薬剤である。従って、本発明はまた、感受性新生物の治療を必要とする哺乳動物に式IIで示される化合物を腫瘍細胞崩壊に有効な量で投与することを含む、哺乳動物の感受性新生物の治療方法を提供する。本発明の化合物は、癌腫(多形性膠芽腫、星状細胞腫、希突起膠細胞腫瘍、上衣および脈絡叢の腫瘍、松果体部腫瘍、ニューロン腫瘍、髄芽細胞腫、神経鞘腫、髄膜腫、髄膜肉腫等の中枢神経系の新生物、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、黒色腫、横紋筋肉腫、網膜芽細胞腫等の眼の新生物、下垂体新生物、甲状腺新生物、副腎皮質の新生物、神経内分泌系の新生物、胃腸膵管系内分泌系の新生物、生殖腺の新生物等の内分泌腺の新生物、頭頸部癌、口腔、咽頭、喉頭、歯原性腫瘍等の頭部および頚部の新生物、肺大細胞癌腫、肺小細胞癌腫、非肺小細胞癌腫、悪性中皮腫、胸腺腫、胸部の１次胚細胞腫瘍等の胸部の新生物、食道の新生物、胃の新生物、肝臓の新生物、胆嚢の新生物、膵外分泌の新生物、小腸、虫垂(veriform appendix)および腹膜の新生物、結腸および直腸の腺癌(adneocarcinoma)、肛門の新生物等の消化管の新生物、腎細胞癌、腎盂および尿管の新生物、膀胱の新生物、尿道の新生物、前立腺の新生物、陰茎の新生物、精巣の新生物等の尿生殖路の新生物、外陰部および膣の新生物、子宮頸部新生物、子宮体腺癌、卵巣癌、婦人科肉腫、乳癌の新生物等の女性生殖器官の新生物、基底細胞癌腫、扁平上皮癌、皮膚線維肉腫、メルケル(Merkel)細胞腫瘍、悪性黒色腫等の皮膚の新生物、骨原性肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、未分化神経外胚葉性腫瘍、血管肉腫等の骨および軟組織の新生物、骨髄異形成症候群、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ球性白血病、HTLV-1およびT-細胞白血病/リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、ヘアリー細胞白血病、ホジキン病、非ホジキン性リンパ腫、肥満細胞白血病等の細網内皮系の新生物、ならびに急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、神経芽細胞腫、骨腫瘍、横紋筋肉腫、リンパ腫、腎腫瘍等の児童の新生物)の治療に有用であると考えられる。特に、本発明の化合物は固形腫瘍、特に結腸および直腸の腫瘍の治療に有用であると考えられる。式IIの化合物の投与により処置される哺乳動物がヒトであることが好ましい。
【００１４】
本発明の化合物は本質的には酸性であるので、多数の無機および有機塩基(アミンおよび四級アンモニウム塩基を含む)とのいずれかと反応して製薬上許容される塩基付加塩を形成し得る。目的化合物の水溶液を必要とする場合には、投与を簡単にするために式IIの化合物を製薬上許容される塩基付加塩に変換することが好ましい。式IIの化合物は、アルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩および重炭酸塩のような塩基性物質(例えば、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化リチウム等を含むがこれらに限定しない)と反応して製薬上許容される塩(対応するナトリウム、カリウム、リチウムまたはカルシウム塩等)を形成する。ナトリウムおよびカリウムの塩が特に好ましい。
【００１５】
塩の形成に適したアミンの例としては、第１、第２および第３脂肪族および芳香族アミン(メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、i-プロピルアミン、４個のブチルアミン異性体、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、ジプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、ジ-n-ブチルアミン、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、キヌクリジン、ピリジン、キノリンおよびイソキノリン等)、特にエチル-、プロピル-、ジエチル-またはトリエチルアミンが挙げられるが、なかでも特にイソプロピルアミンおよびジエタノールアミンが挙げられる。
【００１６】
第４アンモニウム塩基の例としては、通常、ハロアンモニウム塩のカチオン(例えば、テトラメチルアンモニウムカチオン、トリメチルベンジルアンモニウムカチオン、トリエチルベンジルアンモニウムカチオン、テトラエチルアンモニウムカチオンまたはトリメチルアンモニウムカチオン)が挙げられるが、アンモニウムカチオンもまた挙げられる。
【００１７】
本発明の化合物は、当業者に周知の方法により製造することができる。通常、式IIのN-[ベンゾイル]フェニルスルホンアミドは、以下の反応式に例示するように、適切に置換したフェニルスルホンアミドを適切に置換した安息香酸または安息香酸誘導体とカップリングさせることにより製造する。可変基R1、R2、R2a、R3、R3aおよびR4は先の定義に従い、ZはOH、Cl、Br、メタンスルホニルオキシまたはトリフルオロメタンスルホニルオキシである。
【００１８】
【化４】
2004530709.tif 000006
【００１９】
ZがOHである場合、当業者に周知の通常のペプチドカップリング条件下で、対応する安息香酸をフェニルスルホンアミドに連結する。具体的には、フェニルスルホンアミドおよび安息香酸をペプチドカップリング試薬の存在下、場合により、触媒の存在下で、カップリングさせる。適当なペプチドカップリング試薬としては、N,N'-カルボニルジイミダゾール(CDI)、N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミドヒドロクロリド(EDC)および1-(3-(1-ピロリジニル)プロピル)-3-エチルカルボジイミド(PEPC)が挙げられる。ポリマー支持型形態のEDC (Tetrahedron Letters, 34 (48), 7685 (1993))およびPEPC (米国特許番号5,792,763)が記載されており、本発明の化合物の製造に非常に有用である。カップリング反応に適した触媒としては、N,N-ジメチル-4-アミノピリジン(DMAP)が挙げられる。試薬は全て適当な溶媒(代表的には、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジオキサンまたはジエチルエーテル)中で合わせ、周囲温度から溶媒の還流温度の間の温度で１〜72時間攪拌する。所望の生成物は通常の抽出および結晶化技術により単離し、必要な場合または望ましい場合にはクロマトグラフィーまたは結晶化により精製することができる。ポリマー結合型試薬を用いる場合、それらはろ過により反応混合物から都合良く取り除くことができる。
【００２０】
あるいは、スルホンアミドを、酸捕捉剤(ピリジン、トリエチルアミンまたは塩基性樹脂等)の存在下、場合により触媒の存在下で、安息香酸誘導体(例えば、Zがクロロ、ブロモ、メタンスルホニルオキシまたはトリフルオロメタンスルホニルオキシである化合物)と反応させてもよい。本質的には上記のように、試薬を合わせ、生成物を単離する。
【００２１】
当業者であれば、XがNHである式IIの化合物が反応式II(式中、R1、R2、R2a、R2b、R3、R3aおよびR4は先の定義に従う)に例示するように製造できることを理解する。
【００２２】
【化５】
2004530709.tif 000007
【００２３】
適切に置換したベンズアミジンを、酸捕捉剤(ピリジン、トリフルオロメタンスルホニルオキシ等)または塩基性樹脂の存在下、場合により触媒の存在下でスルホニル誘導体(Z’がクロロ、ブロモ、メタンスルホニルオキシまたはトリフルオロメタンスルホニルオキシである化合物等)と反応させる。試薬を合わせ、生成物を、基本的に上記のように単離する。
【００２４】
必須の安息香酸、安息香酸誘導体、ベンズアミジン、スルホニル誘導体およびスルホンアミドは、市販されているか、または当業者に周知の方法により製造することができる。
【００２５】
製造例１
2,4-ジブロモベンゾニトリル
シアン化銅(Ｉ)(2.32 g, 25.9 mmol)の無水ジメチルスルホキシド(50mL)溶液を60℃で攪拌し、この溶液に亜硝酸tert-ブチル(7.1mL, 59.7 mmol)を全て１度に加える。2,4-ジブロモアニリン(5.0 g, 19.9 mmol)の無水ジメチルスルホキシド(30 mL)溶液をカニューレで混合物に滴下する。添加が完了した後、反応混合物を１時間攪拌し、45℃に冷却し、次いで5N HCl (50 mL)でゆっくりと処理する。5分後、反応混合物を周囲温度まで冷却し、酢酸エチル：ヘキサン(１：１)(２×300mL)で抽出する。合わせた有機層を水(100mL)および飽和塩化ナトリウム水溶液(100mL)で洗浄し、乾燥させ、真空下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、０〜５％酢酸エチルを含有するヘキサンで溶離する。生成物を含む画分を合わせ、真空下で濃縮して表題化合物を得る(1.61 g, 収率31％)。mp＝76-78℃。
FDMS：m/e＝261 (M+)。
【００２６】
製造例２
2,4-ジブロモ安息香酸
2,4-ジブロモベンゾニトリル(1.57 g, 6.0 mmol)の硫酸(6 M, 150 mL)中の攪拌懸濁液を３日間加熱還流する。反応混合物を周囲温度まで冷却し、次いで酢酸エチル(２×75mL)で抽出する。合わせた有機層を水(100 mL)および飽和塩化ナトリウム水溶液(50 mL)で洗浄し、乾燥させ、濃縮し、次いでシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、0.5％メタノールおよび0.1％酢酸を含有するクロロホルムを用いて溶離する。生成物を含む画分を合わせ、真空下で濃縮して表題化合物を得る(0.81 g, 収率48％)。mp＝171-172℃。
ESIMS：m/e＝279 (M+-1)。
【００２７】
製造例３
2-ブロモ-4-クロロ安息香酸
亜硝酸ナトリウム(2.21 g)水(15 mL)溶液を、2-アミノ-4-クロロ安息香酸(5.00 g, 29.1 mmol)および48％臭化水素酸(150 mL)の水(150 mL)中の氷冷した攪拌混合物に滴下する。反応混合物を２時間、0℃で攪拌し、次いで臭化銅(II)(7.81 g)水(20 mL)溶液を滴下して処理する。添加の完了の際に、反応混合物を周囲温度まで昇温させ、一晩、攪拌する。次いで、反応混合物を酢酸エチル：ヘキサン(3:1)(2×400 mL)で抽出する。合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液(200 mL)で洗浄し、乾燥させ、真空下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、１％メタノールおよび0.5％酢酸を含有するクロロホルムで溶離する。生成物を含有する画分を合わせ、真空下で濃縮し、表題化合物を得る(4.04 g, 収率59％)。mp＝154〜155℃。
ESIMS：m/e＝233,235(M+-1)。
【００２８】
製造例４
4-スルファモイル安息香酸メチルエステル
4-カルボキシフェニルスルホンアミド(2.00 g, 9.9 mmol)をクロロホルム：メタノール(３：１)(200mL)に懸濁する。(トリメチルシリル)ジアゾメタンをヘキサン中の２Ｍ溶液(7.4mL, 14.8 mmol)として周囲温度で加え、５分間攪拌する。溶液を真空下で濃縮し、粗物質をシリカゲルクロマトグラフィー(CH2Cl2中0.5％MeOH/0.1％AcOH)にかける。生成物は白色固体である(2.11 g, 収率98％)。mp180℃。
ESIMS m/e 214(M+-1)。
【００２９】
製造例５
3,4-ジブロモフェニルスルホンアミド
塩化3,4-ジブロモフェニルスルホニル(20 mmol；Aldrich)を、30％NH4OH水溶液(40mL)に懸濁し、混合物を攪拌する。アセトンをゆっくりと少しずつ加え、均一な反応混合物を形成する(5〜10mL)。この添加は発熱性であり、はげしく発泡する。反応系を室温で攪拌し、ESI-MSでモニターする。混合物をロータリーエバポレーションで濃縮してアセトンを除去し、固体を形成させる。吸引ろ過により固体を回収し、水で洗浄し、風乾させる。物質を、さらに精製することなく得たままで用いる。ESIMS：312,314,316 (M+-1)；mp169〜171℃；lit mp175〜176℃。Huntress, E. H.; Carten,F. H. J. Am.Chem. Soc. 1940,62,511-514。
【００３０】
製造例６〜15の化合物は基本的には製造例５の方法で記載したように製造する。
【表１】
2004530709.tif 000008
【００３１】
製造例１６
2-クロロ-4-メチル安息香酸
DMF(25 mL)中の4-ブロモ-3-クロロトルエン(4.97 g, 24.2 mmol)に、Pd(OAc)2(0.54 g, 2.42mmol)、1,3-ビス(ジフェニルホスフィノ)プロパン(0.998 g, 2.42 mmol)、トリエチルアミン(12.5 mL)およびメタノール(12.5 mL)を加える。反応容器を脱気し、一酸化炭素ガスを３回パージする。一酸化炭素ガスを充填した風船を用いて一酸化炭素雰囲気を維持する。反応混合物を80℃で８時間加熱する。冷却後、H20(50 mL)を加える。混合物をヘキサン(２×50mL)で抽出する。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥させ、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィー(ヘキサン中０〜３％EtOAc)にかける。2-クロロ-4-メチル安息香酸メチル(1.24 g, 28％)を無色油状物として単離する。EIMS m/e 184(M+；35Cl)および186(M+；37Cl)。
【００３２】
THF(10mL)、MeOH (5 mL)およびH20 (2.5 mL)中の2-クロロ-4-メチル安息香酸メチル(1.00 g, 5.42 mmol)に、2N LiOH(8.12 mL, 16.2 mmol)を加える。反応混合物を50℃で2.5時間加熱し、室温まで冷却し、次いで5N HCl (3.24 mL)でクエンチする。混合物を濃縮してTHFおよびMeOHを除去する。白色の析出物が形成し、これをろ過する。乾燥後、2-クロロ-4-メチル安息香酸を単離する(0.922 g, 100％)。ESIMS m/e 169(M--1；35Cl)および171(M--1；37Cl)。
【００３３】
製造例17
4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)フェニルスルホンアミド
4-ヒドロキシフェニルスルホンアミド(3.46 g, 20 mmol)をDMF (40mL)に溶解し、tert-ブチルジメチルシリルクロリド(3.31 g, 22.0 mmol)およびイミダゾール(1.50 g, 22.0 mmol)を室温で処理する。20時間後、反応混合物をEtOAc (100mL)で希釈し、1.0 N HCl (2×50 mL)で洗浄する。有機相を乾燥(MgS04)させ、ろ過し、濃縮して油状物を得る。粗油状物をBiotageカラムクロマトグラフィー(40M SiO2カラム、1：1 ヘキサン：EtOAcを用いて75mL/分で溶離)で精製する。白色固体を得る(4.24 g, 15.4 mmol, 77％)。ESI-MS m/e 288.1(M++H)；mp 117〜118℃；1H NMR(CDCl3)δ7.78 (d, 2 H), 6.89 (d, 2 H), 4.86 (br s, 2 H), 0.97 (s, 9 H), 0.20 (s, 6 H)。
【００３４】
製造例18
N-(2,4-ジクロロベンゾイル)-4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)フェニルスルホンアミド
2,4-ジクロロ安息香酸(1.25当量)の乾燥ジクロロメタン(10 mL/mmol)中の攪拌溶液に、4-(tert-ブチルジメチルシロキシ)フェニルスルホンアミド(1.0当量)を１度に加え、続いてEDC(1.25〜1.5当量)、最後にN,N-ジメチル-4-アミノピリジン(1.2当量)を加える。混合物を窒素下で16時間、激しく攪拌し、真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチルと水との間で分配する。有機層を1N塩酸(４回、20mL/mmol)で洗浄し、次いで合わせた水相を酢酸エチル(２回、20mL/mmol)で抽出する。最後に、合わせた有機層を水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮する。必要な場合、または望ましい場合に、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーまたは晶出により精製する。ESI-MS m/e 458. 0(M+-H)；460. 0(M++H)。
【００３５】
製造例19〜21の化合物は基本的には製造例18の方法で記載したように製造する。
【表２】
2004530709.tif 000009
【００３６】
一般的なカップリング方法
安息香酸(1.25当量)の乾燥ジクロロメタン(10 mL/mmol)中の攪拌溶液に、フェニルスルホンアミド(1.0当量)を１度に加え、続いてEDC(1.25〜1.5当量)、最後にN,N-[ジメチル]-4-アミノピリジン(1.2当量)を加える。窒素下で16時間、混合物を激しく攪拌し、真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチルと水の間で分配する。有機層を1N塩酸(４回、20 mL/mmol)で洗浄し、次いで合わせた水層を酢酸エチル(２回、20mL/mmol)で抽出する。最後に、合わせた有機層を水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮する。必要な場合、または所望される場合に、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけるか、または晶出する。
【００３７】
実施例１〜84の化合物は基本的には、この一般方法で記載したように製造する。
【表３】
2004530709.tif 000010
【表４】
2004530709.tif 000011
【表５】
2004530709.tif 000012
【表６】
2004530709.tif 000013
【表７】
2004530709.tif 000014
【表８】
2004530709.tif 000015
【表９】
2004530709.tif 000016
【表１０】
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【表１１】
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【表１２】
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【００３８】
実施例85
N-[2-クロロ-4-ブロモベンゾイル]-4-クロロフェニルスルホンアミド
反応バイアル(８ mL)に2-クロロ-4-ブロモ安息香酸(0.39 mmol，1.5当量)およびジクロロメタン(2.0mL)を入れる。ジクロロメタン中に4-クロロフェニルスルホンアミド(0.26 mmol, 1当量)およびN,N-[ジメチル]-4-アミノピリジン(48 mg, 0.39 mmol, 1.5当量)を含有するストック溶液(4.0 mL)を加え、続いてカルボジイミドポリスチレン樹脂(0.261 g)(2.0 mmol/g, 0.52 mmol, 2.0当量, Novabiochem)を加え、バイアルにふたをして回転させる。72時間後、スルホン化ポリスチレン樹脂(MP-TsOH)(0.77g)(1.53 mmol/g, 1.17 mmol, Argonaut)を加える。約18時間後、反応混合物をろ過し、窒素流の下で濃縮する。残渣を逆相HPLC(CombiPrepカラム、YMC ODS-A 20×50 mmカラム(5ミクロン,C18,120オングストローム孔サイズ)、勾配：５％〜95％ CH3CN/0.01 HCl水溶液)にかける。生成物を含む画分を合わせ、真空下で濃縮して表題化合物を得る。
ESIMS：m/e＝408(M++l), 406 (M+-1), 410(M++3)。
【００３９】
実施例86〜107の化合物は基本的には実施例85に記載したように製造する。
【表１３】
2004530709.tif 000020
【表１４】
2004530709.tif 000021
【００４０】
実施例108
N-[2,4-ジクロロベンゾイル]-4-(1-メチルスルファニロ(methylsulfanylo)-フェン-4-イル)フェニルスルホンアミド
工程Ａ：樹脂の活性化方法
Rinkアミド樹脂(CA Novabiochem, 0.53mmol/g)を、DMF中の30％ピリジン溶液に懸濁し、室温で３時間攪拌した。混合物をろ過し、樹脂をDMFで2回洗浄し、次いで、CH2Cl2とMeOHで交互に洗浄した。遊離アミノ基を有する活性型樹脂を乾燥させ、さらなる精製は行なわずに用いた。
【００４１】
Rinkアミド樹脂(0.53mmol/g)をCH2Cl2/THFの１：１混合物中で、Et3N(４当量)、4-ヨードフェニルスルホンアミド(３当量)およびDMAP(触媒量)と懸濁した。溶液を一晩室温で攪拌した。混合物をろ過し、樹脂をCH2Cl2およびMeOHで交互に洗浄した。4-ヨードフェニルスルホンアミドRink樹脂を真空下で乾燥させた。
【００４２】
対応する4-ヨードフェニルスルホンアミドRink樹脂(0.26 mmol, 0.53 mmol/g)、メチルスルファニル-フェニルボロン酸(2当量)、炭酸カリウム(6当量)および酢酸パラジウム(0.5当量)と混合し、ジオキサン/水(6：1)の混合物(７mL)に懸濁した。この混合物をArgovant(登録商標)QUEST(登録商標)210中で、100℃で24時間加熱した。次いで、ジオキサン/水(６：１)混合物(5mL)で２回洗浄し、次いでCH2Cl2(7mL)で６回洗浄し、その都度MeOH (7 mL)で洗浄した。
【００４３】
95％トリフルオロ酢酸水溶液(3mL)を、予めCH2Cl2(3mL)に溶解した樹脂に加えた。混合物を30分間、室温で攪拌し、上記の通りろ過した。4'-メチルスルファニルビフェニル-4-スルホンアミドをさらなる精製は行なわずに用いた。
【００４４】
2,4-ジクロロ安息香酸(1.25当量)の乾燥CH2Cl2(10mL/mmol)中の攪拌溶液に、4'-メチルスルファニル-ビフェニル-4-スルホンアミド(1.0当量)を１度に加え、続いてEDC (1.25または1.5当量)を加え、最後にDMAP (1.2当量)を加えた。混合物を窒素下で16時間激しく攪拌し、次いで真空下でエバポレートし、残渣をEtOAcと水との間で分配した。有機層を1N HCl(４回、20mL/mmol)で洗浄し、次いで水相をEtOAc (２回、20mL/mmol)で抽出した。合わせた有機層を最後に水およびブラインで洗浄し、Na2S04で乾燥させ真空下で濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィー(適切な溶離液を用いる)で精製して表題化合物を得た。
ESI-MS (M+-H) 450.9870/450.0。
【００４５】
実施例109
N-[2,4-ジクロロベンゾイル]-4-3'-アセチルビフェニルスルホンアミド
4-ヨードフェニルスルホンアミドRink樹脂(0.26 mmol, 0.53 mmol/g)、3-アセチルフェニルボロン酸(2当量)および2,4-ジクロロ安息香酸(1.25当量)の懸濁液を用いて、基本的には、実施例108に記載したようにして表題化合物を製造する。
ESI-MS (M+-H) 447.0099/446.0。
【００４６】
実施例110
N-[2,4-ジクロロベンゾイル]フェニルスルホンアミド
フェニルスルホンアミド(0.16 mol， 25.12 g)および炭酸カリウム(0.2 mol， 27.6 g)のジオキサン(500mL)中の混合物に、塩化2,4-ジクロロベンゾイル(0.13 mol，18.0 mL)を滴下する。混合物を昇温させ、窒素下で16時間、還流する。次いで、反応系を水(500mL)で希釈し、濃塩酸でpH５まで中和し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた酢酸エチル層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、白色固体になるまで真空下で濃縮する。固体残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、0〜5％メタノールを含有するジクロロメタンで溶離する。生成物を含有する画分を合わせ、真空下で濃縮して表題化合物を得る。
MS(ES)：m/e＝329.9(M++l), 327.9(M+-1)。
【００４７】
実施例111
N-[2,4-ジクロロベンゾイル]-4-クロロフェニルスルホンアミド
4-クロロフェニルスルホンアミド(0.1 mol; 19.0 g)および2,4-ジクロロベンゾイルクロリド(0.12 mol; 16.8 mL)の混合物から、表題化合物を基本的には実施例110に記載の通りに製造した。
MS (ES):m/e = 363.9(M+)
EA:計算値(C13H8Cl3NO3S)：理論値：C, 42.82; H, 2.21; N, 3.84。実測値：C, 42.56; H, 2.14; N, 3.76。
【００４８】
実施例112
N-[2-クロロ-4-ブロモベンゾイル]-4-クロロフェニルスルホンアミド
4-クロロフェニルスルホンアミド(15.6 g, 81.4 mmol)、CDI (15.82 g, 97.7 mmol)および酢酸エチル(300 mL)の反応混合物に、室温で2-クロロ-4-ブロモ安息香酸(23.0 g, 97.7 mmol)の酢酸エチル(100.0 mL)中のスラリーを15分かけて加える。(注：気体の放出が観察される。これはスラリーの添加速度で調節できる。反応混合物は、スラリーの添加が終わるまでには溶液になる。反応をHPLCまたはTLC(酢酸エチル/ヘプタン(１：１）溶離液を用いる)によりモニターすることができる。)次いで、反応系を室温で30分間攪拌し、90分間または気体の放出が観察されなくなるまで60℃で加熱する。反応系を40℃まで冷却し、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エン(14.63mL)を(１度で)加える。反応系の温度は40℃から45℃になる。室温になるまで混合物を攪拌し、次いで脱イオン水(400mL)でクエンチする。上方の有機層を分離し、1N HCl(300.0 mL)で洗浄し、無水MgS04で乾燥させ、ろ過し、ケークを酢酸エチル(20.0 mL)で洗浄する。ろ液を、シロップ状の溶液(50.0g)になるまで濃縮し、次いでヘプタン(250.0mL)を激しく攪拌しながら加える。加熱していると、白色スラリーが形成され、還流し、次いで室温まで平衡化させる。白色沈殿物をろ過し、ケークをヘプタン(20.0 mL)で洗浄する。析出物をハウスバキューム(house vacuum)中55℃で18時間、乾燥させる(質量＝29.12 g, 収率87.4重量％)。
【００４９】
生成物(19.17g)および酢酸エチル/ヘプタン(１：２)(150.0mL)の混合物を30分間加熱還流し、次いで室温まで冷却する。オフホワイトの析出物をろ過し、次いでケークをヘプタン(50.0 mL)で洗浄する。析出物をハウスバキューム中50℃で18時間乾燥させる(質量＝14.93 g；回収率78％）。
ESIMS：m/e＝408(M++1), 406(M+-1), 410(M++3)。
【００５０】
実施例113
N-[2-クロロ-4-ブロモベンゾイル]-4-クロロフェニルスルホンアミドナトリウム塩
N-[2-クロロ-4-ブロモベンゾイル]-4-クロロフェニルスルホンアミド(5.2 g, 12.72 mmol)およびtert-ブチルメチルエーテル(88.0mL)の溶液に、室温でナトリウムメトキシド(0.69 g, 12.72 mmol) を全て１度に加える。次いで、反応系を５時間攪拌した後、ヘプタン(88.0mL)を加え、続いて60分間激しく攪拌する。白色沈殿物が生じ、窒素陽圧下(under a positive nitrogen pressure)でろ過し、続いてケークをヘプタン(２×44.0mL)で洗浄する。ケークを半分乾固するまで乾燥させ、続いてハウスバキュームオーブン中で130℃で18時間、乾燥させる(質量＝4.4 g, 80重量％）。
収率；１H nmr (DMSO d6) 7.8-7.85 (m, 1H), 7.81-7.82(m, 1H), 7.58-7.59 (d, 1H, J＝1.76Hz), 7.51-7.52 (m, 1H), 7.48-7.49 (m, 1H), 7.44-7.45 (d, 1H, J = 1.76) 7.37-7.4 (d, 1H)。
【００５１】
実施例114
N-[3-クロロ-4-フルオロフェニルスルホニル]-3-フルオロ-4-メチルベンズアミジン
THF (0.5 mL)中の3-フルオロ-4-メチルベンズアミジン塩酸塩(0.025 g, 0.133 mmol)を3-クロロ-4-フルオロフェニルスルホニルクロリド(0.0304 g, 0.133 mmol)に加え、つづけてN-メチルホルホリン(0.2 mL)を加える。反応混合物を濃縮し、逆相クロマトグラフィーを用いてクロマトグラフィー((H20中0.1％TFA)中５〜95％(CH3CN中0.1％TFA)の勾配)にかける。白色固体(16.4 mg, 36％)を単離する。ES陽イオン 観察されたMS[M+H]+イオン：m/z 345(35Cl)およびm/z 347(37Cl)。
【００５２】
実施例115
N-[3-クロロ-4-フルオロフェニルスルホニル]-4-クロロベンズアミジン
4-クロロベンズアミジンヒドロクロリド(0.025 g, 0.133 mmol)および3-クロロ-4-フルオロフェニルスルホニルクロリド(0.0304 g, 0.133 mmol)を、基本的には実施例114に記載されるように用いて表題化合物を製造した。ES陽イオンMS 観察した[M+H]+イオン：m/z 347(35Cl,35Cl), m/z 349(35Cl,37Cl)およびm/z 351 (37Cl,37Cl)。
【００５３】
実施例116
N-[3-クロロ-4-フルオロフェニルスルホニル]-3-クロロ-4-フルオロベンズアミジン
3-クロロ-4-フルオロベンズアミジンヒドロクロリド(0.025 g, 0.133 mmol)および3-クロロ-4-フルオロフェニルスルホニルクロリド (0.0304 g, 0.133 mmol)の混合物から、表題化合物を基本的には実施例115に記載されるように製造する。ES陽イオン 観察されたMS [M+H]+イオン：m/z 365 (35Cl,35Cl), m/z 367 (35Cl,37Cl)およびm/z 369 (37Cl,37Cl)。
【００５４】
実施例117
N-[2,4-ジクロロベンゾイル]-4-ヒドロキシフェニルスルホンアミド
4-メトキシフェニル-4-スルホンアミド(0.0608 g, 0.132 mmol)をTHE (1.25mL)に溶解し、テトラブチルアンモニウムフッ化物(1.0 N/THF；200μL, 2.0 mmol)を用いて室温で攪拌しながら18時間処理する。反応混合物をEtOAc(10 mL)で希釈し、飽和NH4Cl水溶液(1 mL)、H2O(2×1mL)およびブライン(1 mL)で洗浄する。有機相を乾燥(MgS04)させ、ろ過し、ロータリーエバポレーションで濃縮する。(H20/MeOHからの凍結乾燥によりガラス状固体を得る(20 mg, 0.058 mmol, 58％)。分取HPLCにより精製。）mp 155〜157℃；ESI-MS m/e 344.0 (M+-H);1H NMR (d6-DMSO) 7.90 (d, 2 H); 7.68 (s, 1 H); 7.44 (s, 2 H); 6.90 (d, 2H); 3.43 (br s, 3 H)。
【００５５】
実施例118
N-[2,4-ジクロロベンゾイル]-4-(チエン-3-イル)-フェニルスルホンアミド
N-(2,4-ジクロロベンゾイル)-4-ヨードフェニルスルホンアミド (0.10 mmol) のトルエン/エタノール(20/1)(3mL)溶液に、3-チオフェンボロン酸(0.18 mmol, 0.18mL, DMF中1.0M溶液)およびテトラキス-(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(10 mol％)を加える。次いで、2M Na2CO3水溶液(0.3mL)を加え、攪拌混合物を一晩(17時間)100℃まで加熱する(Buchi Syncore system)。反応混合物を濃縮し(Genevac装置)、次いで水(2.5 mL)および酢酸エチル(5 mL)を加える。相を分離し、水層を酢酸エチル(3×5 mL)で抽出する。Tecanシステムを用いてこのプロセスを自動的に行なう。溶媒をエバポレートし、対応する粗生成物をHPLCで精製して表題化合物を得る。
ESI-MS m/e 410.96/410.0[M+-H]。
【００５６】
実施例119〜130の化合物を、基本的には実施例118に関する方法に記載されるように製造する。
【表１５】
2004530709.tif 000022
【表１６】
2004530709.tif 000023
【００５７】
本発明に関する化合物は全て経口利用可能であり、通常は経口投与され、そのような経口投与が好ましい。しかし、経口投与は唯一の経路ではなく、唯一の好ましい経路でもない。例えば、経皮投与は医薬の経口摂取を忘れやすい、または短気な患者にとても望ましいかも知れず、静脈内経路は便宜上、または経口投与に関る複雑さの可能性を避けるために好ましいかもしれない。また、式IIの化合物は、特定の状況において、経皮、筋肉内、鼻内または直腸内投与により投与することができる。投与経路は、任意の様式で変更することができ、これは薬物の物理的特性、患者および介護人の都合、他の関連する状況により限定され得る(Remington's Pharmaceutical Sciences,第18版, Mack Publishing Co. (1990))。
【００５８】
製薬分野において周知の様式で医薬組成物を製造する。キャリアまたは賦形剤は固体、半固体または液体物質であるかも知れず、これらはビヒクルまたは活性成分に対する媒体として機能し得る。適当なキャリアまたは賦形剤は当該分野において周知である。医薬組成物は経口、吸入、非経口または局所用用途のために適合されていてもよく、錠剤、カプセル剤、エアロゾル、吸入剤、坐剤、液剤、懸濁剤などの形態で患者に投与されるかもしれない。
【００５９】
本発明の化合物は、例えば、カプセル用不活性希釈剤とともに、または錠剤に圧縮されて経口投与されてもよい。経口治療投与のために、化合物を賦形剤と共に組み込み、錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁剤、シロップ、ウェハ、チューイングガムなどの形態で用いてもよい。これらの製剤は、本発明の化合物(活性成分)を少なくとも４％含有するが、特定の形態に依存して変更されるかもしれず、適切には、単位重量の４重量％〜約70重量％であり得る。組成物中に存在する化合物の量は、適切な用量が得られるようなものである。本発明の好ましい組成物および製剤は、当業者に周知の方法により決定することができる。
【００６０】
錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチなどはまた、１種以上の以下の添加物を含有しても良い：ポビドン、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶性セルロースまたはゼラチン等の結合剤、デンプン、ラクトース、微結晶性セルロースまたはリン酸２カルシウム等の賦形剤または希釈剤、クロスカルメロース、クロスポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム(sodium starch glycolate)、コーンスターチ等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルクまたは水素化植物油等の滑沢剤、コロイド状二酸化ケイ素等の流動促進剤(glidant)、ラウリル硫酸ナトリウムおよびポリソルベート80(CAS No. 9005-65-6)等の湿潤化剤、ならびにスクロース、アスパルテームまたはサッカリン等の甘味料、またはペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ香料のような香料。投薬単位形態がカプセルである場合、上記のタイプの物質に加えて、ポリエチレングリコールまたは脂肪油等の液体キャリアを含有し得る。他の投薬単位形態は、投薬単位の物理的形態を修飾する他の種々の物質(例えばコーティングなど)を含有し得る。それゆえ、錠剤または丸剤は、糖、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリメタクリレートまたは他のコーティング剤でコーティングされていてもよい。シロップは、本発明の化合物に加えて、甘味料としてスクロース、および特定の保存剤、色素および着色料および香料を含有しても良い。これらの種々の組成物を製造する際に用いられる物質は、薬学上純粋であり、用いる量では非毒性であるべきである。
【００６１】
非経口用注射剤としては、滅菌の水性または非水性の液剤、懸濁剤および乳剤が挙げられる。水性液剤および懸濁剤は、注射用滅菌水または生理学的塩溶液を含有し得る。非水性液剤および懸濁剤としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油(オリーブ油等)、アルコール(エタノール等)またはポリソルベート80を挙げることができる。注射剤は、不活性希釈剤以外の追加の成分を含有してもよい(例えば、保存剤、湿潤化剤、乳化剤、分散剤、安定化剤(ラクトース等)、溶解を補助するための薬剤等の助剤(グルタミン酸またはアスパラギン酸等)。これらは、例えば、細菌捕捉(bacteria-retaining)フィルターでのろ過、組成物中への滅菌剤の組み込み、または放射線により滅菌され得る。これらはまた、使用直前に滅菌水または他の注射用滅菌希釈剤に溶解することができる滅菌固形組成物の形態で製造され得る。
【００６２】
式IIの化合物は、通常、広範な投薬範囲にわたり有効である。例えば、１日あたりの投薬量は、通常、約10〜約300 mg/体重１kgの範囲内にある。例えば、上記の範囲の下限より低い投薬レベルがより適している場合もあれば、その一方で、よりさらに高い投薬量を有害な副作用を引き起こすことなく用いうるかもしれないので、上記の投薬範囲はいかなる様式においても本発明の範囲を限定することは意図しない。実際に投与される化合物の量は、処置する病態、選択した投与経路、投与する実際の化合物、各患者の年齢、体重および反応、ならびに患者の症状の重篤度を含む関連する状況を考慮して、医師により決定されることが理解される。
【００６３】
HUVEC増殖の阻害
ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC；BioWhittaker/Clonetics, Walkersville, MD)を、ウシ脳抽出物、ヒト表皮増殖因子、ヒドロコルチゾン、ゲンタマイシン、アンフォテリシンＢおよび２％ウシ胎仔血清を含む基礎培地(EBM)を含有する内皮細胞増殖培地(EGM)に維持した。アッセイ用に、0.5％ウシ胎仔血清を含むEBM(200μl)中でHUVEC(5×103)を96ウェル細胞培養プレート中のウェルに入れ、37℃で24時間、加湿した５％二酸化炭素/大気中でインキュベートした。試験化合物をジメチルスルホキシド(DMSO)中で0.0013〜40μMの濃度で系列希釈し、20μlでウェルに加えた。次いで、リン酸緩衝化標準生理食塩水(0.1％ウシ血清アルブミン含有)中のストック溶液(100μg/mL)から調製したヒト血管内皮増殖因子(VEGF) (ウェル中20ng/mL；R & D Systems, Minneapolis,MN)をウェルに加えた。HUVECを、37℃で72時間、加湿した５％二酸化炭素/大気中でインキュベートした。WST-1細胞増殖試薬 (20μl；Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN)をウェルに加え、プレートをインキュベーターに１時間戻した。各ウェルの440nmでの吸光度を測定した。VEGF有り、および無しで処理したウェルの吸光度を、0および1.0に設定したコントロールウェルから得た吸光度で除算して、増殖割合を決定した。例示した化合物をこのアッセイで試験すると、全て1.0μM以上のIC50を示した。
【００６４】
ラット角膜マイクロポケットアッセイ
2〜3％イソフルレン/酸素吸入の開始20分前に、Fisher 344雌性ラット(145〜155グラム；Taconic, Inc., Germantown, NY)をアセプロマジン(2.5 mg/kg, ip)で麻酔した。循環温水パッドを用いて体温を維持した。眼科手術用顕微鏡(ophthalmic operating microscope, OMS. 75 Operating Microscope, TopCon Corporation, Japan)下で外科手術を行なった。外科用メス(15番)を用いて、目の中心のすぐ横に垂直に半分の厚さまで真直ぐに角膜に切込みを入れた。外科用メスの先を用いて角膜輪部に最も近い角膜の上部角膜層を丁寧にはがした(undermine)。角膜用はさみ(Roboz,Rockville, MD)を用いてのブラント切開(blunt dissection)で、角膜にポケットを形成した。20ゲージのニードルパンチを用いてニトロセルロースフィルター(0.45μm, Millipore, Bedford, MA)を小さいディスクに切り取った。ディスクを、２μｌのヒトVEGF溶液(0.82μg/μl；R＆D Systems)またはヒト塩基性線維芽細胞増殖因子(0.20μg/μl；R＆D Systems)に氷上で10分間浸した。ピンセットを用いて、ディスクが角膜上皮で覆われるように、脈管形成因子(VEGFまたはbFGF)を染み込ませたディスクを角膜ポケットに挿入した。ディスクの移植後１〜１０日目に、実施例110の化合物(160 mg/kg)をリン酸緩衝化生理食塩水中で胃管栄養法により、１日１回で経口投与して動物を処置した。ディスクの移植後７日目および14日目に目を撮影した。写真撮影用に、瞳孔散大させるために動物を硫酸アトロピン(AmTech Group, Inc., Phoenix Scientific, Inc., St. Joseph, MO)で局所的に処置し、2〜3％イソフルレン/酸素で麻酔した。眼科用顕微鏡を用いて目の写真を取り、画像はImage Pro-Plusソフトウェアを用いて保存した。目的の領域を高コントラストの白黒反転画像に変換し、脈管領域の判定として明るいピクセルを計測することにより、画像を分析した。データは少なくとも６個の眼の画像に由来する。実施例110の化合物はVEGF-誘発性新脈管形成の非常に有効なインヒビターであったが、bFGF-誘発性新脈管形成の有効なインヒビターではなかった。
【００６５】
HCT116結腸癌細胞増殖阻害
ヒトHCT116結腸癌細胞を、10％ウシ胎仔血清および１％ペニシリン-ストレプトマイシン(GibcoBRL, Grand Island, NY)を補充したRPMI 1640培地中で単層培養で増殖させた。対数増殖期のHCT116細胞を、37℃で72時間、５％二酸化炭素/大気中で、種々の濃度の試験化合物に曝した。薬剤への暴露後、細胞を0.9％リン酸緩衝化生理食塩水で洗浄した。上記のWST-1細胞増殖試薬を用いて増殖阻害を決定した。結果はコントロール培養物と比較した増殖割合として表す。本発明の代表的な化合物を、ヒト結腸HCT116腫瘍細胞に対する有効性について試験した。これらの実験からのデータを表1にまとめる。
【表１７】
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【表１８】
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【表１９】
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【００６６】
従来的なマウス腫瘍およびヒト腫瘍異種移植片アッセイ
マウスに移植した腫瘍の阻害は、抗腫瘍剤の有効性の研究のために認可されている方法である(Corbettら、In vivo Methods for Screening and Preclinical Testing; Use of rodent solid tumors for drug discovery.、Anticancer Drug Development Guide: Preclinical Screening, Clinical Trials, and Approval, B. Teicher (編), Humana Press Inc., Totowa)。マウス腫瘍またはヒト異種移植片を基本的には、Corbet, In vivo Methods for Screening and Preclinical Testing; Use of rodent solid tumors for drug discoveryに記載の通りに移植した。簡単に説明すると、マウス腫瘍またはヒト異種移植片を、12ゲージトロカールインプラントまたは測定数の細胞のいずれかで皮下移植した。トロカール挿入位置はマウスの横腹に沿った腋窩と鼠蹊部の中ほどである。トロカールを腋窩の方に持ち上げて、皮下約３/４インチまで抜いてから腫瘍断片を放出し、トロカールをはずしたら皮膚を挟む。あるいは、ドナー腫瘍(５×106)の汁(brie)から調製したヒト腫瘍細胞を雄性または雌性ヌードマウス(Charles River)の後足に皮下移植した。ビヒクル中の試験化合物またはビヒクル単独のいずれかを、静脈内ボーラス注射(iv)、腹膜内注射(ip)または経口胃管栄養(po)で投与した。各処置群、および未処置コントロール動物群は、各実験において１群あたり５匹の動物から構成した。皮下腫瘍反応を、実験中(60〜120日)、各週２回行なった腫瘍体積測定によりモニターした。体重を毒性の全体的な指標として採用した。実験期間中にわたって各処置群についての腫瘍重量の中央値を測定し、処置腫瘍とコントロール腫瘍が500または1000mm3のいずれかの体積まで到達する日数の差異として腫瘍増殖遅延を計算することにより、皮下腫瘍データを分析した。
【００６７】
種々のマウスおよびヒト腫瘍に対して実施例110の化合物を上記の通り試験した。これらの試験からのデータを実質的に上記の通りに試験した。これらの試験からのデータを表II〜XIIIにまとめた。各実験で測定したパラメーターを以下の段落にまとめる。
【００６８】
腫瘍重量(mg)＝(ａ×ｂ2)／２
(式中、ａは腫瘍長(mm)であり、ｂは腫瘍幅(mm)である。)
【００６９】
腫瘍増殖遅延＝Ｔ−Ｃ
(式中、Ｔは処置群の腫瘍が規定サイズに到達するために必要とする時間(日数)の中央値であり、Ｃはコントロール群の腫瘍が同じサイズに到達するために必要とする時間(日数)の中央値である。この計算からは腫瘍無しの生存体は除き、表中、別に示す(Tumor Free)。)
【００７０】
Log Kill＝腫瘍増殖遅延／［(3.32)(Td)］
(式中、腫瘍増殖遅延は上記定義に従い、Tdは腫瘍体積倍化時間(日数)であり、これは指数関数的な増殖(100〜800mg範囲)における腫瘍コントロール群のlog線形増殖プロットに最も良く適合した直線から推定する。)
【００７１】
％T/C質量
コントロール群の腫瘍がサイズ約700〜1200mg(中央値群)に到達した時点で処置群およびコントロール群を測定する。各群の腫瘍重量中央値を測定する(０を含む)。T/Cの値(％)は抗腫瘍有効性の指標である。42％未満のT/Cは有意な抗腫瘍活性とみなされる。10％未満は非常に有意な抗腫瘍活性を示すとみなされる。
【００７２】
体重損失の最低値
20％よりも高い体重損失の最低値(群の平均値)または20％よりも高い薬物死は、１回の試行経過において過度の毒性用量を示すとみなされる。
【００７３】
活性評価
以下の表にしたがって、Log Killから活性評価を得る。
【表２０】
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【表２１】
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【表２２】
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【表２３】
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【表２４】
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【表２５】
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【表２６】
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【表２７】
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【表２８】
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【表２９】
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【表３０】
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【表３１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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