(57)【要約】本発明は、血液または他の体液のような流体サンプルの特定の特徴を測定するために、少なくとも１つの電極（例えば、電気化学的センサカートリッジ）と共に使用するための、耐久性でありかつ正確な小型液体接合参照電極に関する。本発明は、ミニチュア液間参照電極を提供し、この電極は、以下の２つの構成要素を備える：参照センサおよびコネクタ。この参照センサは、耐久性のある厚膜Ａｇ／ＡｇＣｌ要素（これは、支持基材上に堆積した銀（Ａｇ）層およびこのＡｇ層の表面に（例えば、電気化学的酸化によって）形成されたＡｇＣｌ層からなる）を収容する。１つの実施形態において、この参照センサは、ブリッジ電解質入口およびブリッジ電解質チャネルに接続されており、このチャネルを通って、ブリッジ電解質溶液が流れ得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
参照電極であって、以下：
（ａ）参照センサ；
（ｂ）該参照センサと流体連絡しているブリッジ電解質チャネル；ならびに
（ｃ）ブリッジ電解質ポートを介して該ブリッジ電解質チャネルに連結されたコネクターチャネルであって、該コネクターチャネルは、サンプルが流れ得るサンプル入口チャネルおよびサンプル流出チャネル、およびある容量のブリッジ電解質溶液を収容するためのブリッジ電解質ウェル、を含む、コネクターチャネル、
を含み、
ここで、該ブリッジ電解質ウェルは、該サンプルと該ブリッジ電解質溶液との間に液体接合を提供するような形状にされる、
参照電極。
【請求項２】
前記液体接合が、約０．５ｍｍ２〜約１０ｍｍ２の範囲の表面積を含む、請求項１に記載の参照電極。
【請求項３】
請求項１に記載の参照電極であって、前記参照センサが、以下：
（ａ）支持基板；
（ｂ）該支持基板上に沈着された銀層（Ａｇ）；
（ｃ）該Ａｇ層上に沈着された塩化銀（ＡｇＣｌ）層；
（ｄ）該ＡｇＣｌ層の少なくとも一部の上に沈着されたグレーズ層；および
（ｅ）該グレーズ層上に配置されたガスケット、
を含む、参照電極。
【請求項４】
前記支持基板が、ポリマー材料および／またはセラミック材料を含む、請求項３に記載の参照電極。
【請求項５】
前記ポリマー材料が、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレン、ポリカーボネート、ポリアクリレートおよび／またはポリイミドを含む、請求項４に記載の参照電極。
【請求項６】
前記セラミック材料が、酸化アルミニウムおよび／または二酸化ケイ素を含む、請求項４に記載の参照電極。
【請求項７】
前記層の１つ以上が、スクリーン印刷層または蒸着層である、請求項３に記載の参照電極。
【請求項８】
前記Ａｇ層が、少なくとも１μｍ厚〜約１５μｍ厚である、請求項３に記載の参照電極。
【請求項９】
前記Ａｇ層が、少なくとも約１μｍ厚である、請求項３に記載の参照電極。
【請求項１０】
請求項３に記載の参照電極であって、前記ＡｇＣｌ層が、約０．００５ｍＡ／ｍｍ２と約０．５ｍＡ／ｍｍ２との間の電流密度で、約３０秒〜約２０分間、約０．０１Ｍと１．０Ｍとの間の塩化物電解質溶液で前記Ａｇ上に電着することにより、該Ａｇ上に沈着される、参照電極。
【請求項１１】
前記塩化物電解質溶液が、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、および／またはＣａＣｌ２を含む、請求項１０に記載の参照電極。
【請求項１２】
前記塩化物電解質溶液が、約ｐＨ１〜約ｐＨ７、約ｐＨ１〜約ｐＨ５、または約ｐＨ１〜約ｐＨ２の範囲のｐＨを有する、請求項１１に記載の参照電極。
【請求項１３】
前記グレーズ層が、アルミナおよび／またはケイ酸を含む、請求項３に記載の参照電極。
【請求項１４】
前記グレーズ層が、少なくとも約１０μｍ厚である、請求項１３に記載の参照電極。
【請求項１５】
前記グレーズ層が、約１０μｍと約５００μｍとの間の厚みを有する、請求項１４に記載の参照電極。
【請求項１６】
前記ガスケット層が、ポリウレタン、シリコーンゴム、ＰＶＣ、ｖｉｔｏｎ（登録商標）、天然ゴムおよび／または合成ゴムを含む、請求項３に記載の参照電極。
【請求項１７】
前記ガスケットが、少なくとも約５０μｍ厚である、請求項１５に記載の参照電極。
【請求項１８】
前記コネクターチャネルが、前記ブリッジ電解質溶液と反応することも、該溶液に溶解することもない、ポリマー材料または金属材料を含む、請求項１に記載の参照電極。
【請求項１９】
前記ポリマー材料が、成形プラスチックまたは機械加工可能プラスチックである、請求項１８に記載の参照電極。
【請求項２０】
前記ポリマー材料が、アクリル樹脂、ｐｌｅｘｉｇｌａｓ（登録商標）、ｌｅｘａｎ（登録商標）、ポリカーボネート、および／またはＰＶＣを含む、請求項１９に記載の参照電極。
【請求項２１】
前記金属材料が、ステンレス鋼、アルミニウム、および／または白金を含む、請求項１８に記載の参照電極。
【請求項２２】
前記ブリッジ電解質ウェルが、丸底ウェルである、請求項１に記載の参照電極。
【請求項２３】
前記ブリッジ電解質ウェルが、平底ウェルである、請求項１に記載の参照電極。
【請求項２４】
前記ブリッジ電解質ウェルが、円錐型ウェルである、請求項１に記載の参照電極。
【請求項２５】
請求項１に記載の参照電極であって、前記サンプル流出チャネルおよび前記サンプル入口チャネルの少なくとも１つが、各々、前記ブリッジ電解質チャネルの長手軸に対して約９０°〜約１８０°の傾斜角を形成する、参照電極。
【請求項２６】
請求項１に記載の参照電極であって、前記コネクターチャネルが、前記参照センサから、約２ｍｍ〜約１０ｍｍの間、約２ｍｍ〜約１５ｍｍの間、または約２ｍｍ〜約３０ｍｍの間の範囲の距離に位置する、参照電極。
【請求項２７】
前記ブリッジ電解質チャネルが、約１ｍｍの直径である、請求項１に記載の参照電極。
【請求項２８】
前記ブリッジ電解質チャネルが、約０．５ｍｍの直径である、請求項１に記載の参照電極。
【請求項２９】
前記サンプル入口チャネルが、約０．５ｍｍの直径である、請求項２７に記載の参照電極。
【請求項３０】
前記サンプル流出チャネルが、約２ｍｍの直径である、請求項１に記載の参照電極。
【請求項３１】
前記サンプル流出チャネルが、約２ｍｍの直径である、請求項２７に記載の参照電極。
【請求項３２】
前記サンプル流出チャネルが、約２ｍｍの直径である、請求項２８に記載の参照電極。
【請求項３３】
請求項１に記載の参照電極であって、前記サンプル流出チャネルおよび前記サンプル入口チャネルが、約１ｍｍ〜約２０ｍｍの直径の可撓性チューブを含む、参照電極。
【請求項３４】
請求項１に記載の参照電極であって、前記ブリッジ電解質溶液が、前記ブリッジ電解質溶液が、ＡｇＣｌで飽和されたＫＣｌを含み、塩化物イオン溶液は、該溶液が貯蔵および使用される温度において、約０．１Ｍ〜約０．５Ｍである、参照電極。
【請求項３５】
液体接合参照電極を使用するための方法であって、以下：
（ａ）参照電極を提供する工程であって、該参照電極は、参照センサ；該参照センサと流体連絡したブリッジ電解質チャネル；およびブリッジ電解質ポートを介して該ブリッジ電解質チャネルに連結されたコネクターチャネル、を含み、該コネクターチャネルは、サンプルが流れ得るサンプル入口チャネルおよびサンプル流出チャネル、およびある容量のブリッジ電解質溶液を保持するためのブリッジ電解質ウェルを含み、ここで、該ブリッジ電解質ウェルは、該サンプルと該ブリッジ電解質溶液との間に液体接合を提供するような形状にされる、工程；
（ｂ）較正溶液またはサンプルを、該サンプル入口チャネルに提供する工程；
（ｃ）ブリッジ電解質溶液を、該ブリッジ電解質入口に提供する工程；
（ｄ）該サンプルが該ブリッジ電解質ポートに向かって流れるように、該サンプルに力を与える工程；
（ｅ）該ブリッジ電解質溶液が該ブリッジ電解質ポートに向かって流れるように、該ブリッジ電解質溶液に力を与える工程；
（ｆ）該ブリッジ電解質ウェルにおいて、該サンプルと該ブリッジ電解質溶液との間に、約１ｍｍ２〜約１０ｍｍ２の範囲の表面積を有する液体接合を形成する工程；ならびに
（ｇ）測定を行う工程、
を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本願は、２００１年３月７日に米国特許庁に出願された仮特許出願番号６０／２７４，０９７（この全体の内容は本明細書中に参考として援用される）に対して優先権を主張する。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、一般に、液体接合参照電極およびその使用方法に関する。詳細には、本発明は、血液のような流体サンプルの特定の特徴を測定するための電気化学的センサカートリッジと共に使用するための小型液体接合参照電極に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
生物医学的適用において、少量の患者の体液サンプルの１つ以上の物理学的特性および／または成分を分析することが、しばしば望まれる。例えば、患者の全血サンプルは、しばしば、血液検体に関する情報（例えば、ｐＨ、ｐＣＯ２、ｐＯ２、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｃａ＋＋、Ｃｌ−、ヘマトクリットなど）を提供するために、分析および／またはモニタリングされる。血液サンプルにおける検体に由来する情報は、正常な生理学的機能および恒常性プロフィールと比較され、そして例えば、診断目的のため、患者のモニタリングのためおよび／または生命維持システムの制御のために、医師により使用され得る。
【０００４】
体液の成分を検出するために電気化学的電極を用いるシステムは、当該分野で周知であり、例えば、米国特許第３，６５８，４７８号；同第５，３８７，３２９号；同第５，３３８，４３５号；同第４，７３４，１８４号；同第４，３６１，５３９号および同第５，２００，０５１号（これらの内容全ては、本明細書中に参考として明確に援用される）に記載される。代表的には、血液の化学分析を提供するシステムは、独立型機械であるか、または体外短絡またはエキソビボ血液源（例えば、手術の間に患者を維持するために使用される心肺機器）に接続されるように適合される。流動する生のエキソビボの血液の少量の試験サンプルは、オフラインで、リアルタイムで、心肺機器の静脈流ラインまたは動脈流ラインのいずれかからチャンバへ直接方向を変えられ得、そしてセンサを含む微小電極のバンクに曝露され、このセンサは、リアルタイムで流動する血液サンプルの化学特性に比例するか、またはこの化学特性の指標となる電気的シグナルを生成する。
【０００５】
センサ自体を小型化し、そして集積回路技術における発達により最近利用可能になった技術によって、これらを製造する試みがなされてきた。この点において、集積回路技術により、センサは平面形態で製造され得、それにより、薄層材料が、厚膜および／または薄膜技術を使用して、誘電性基礎基板に連続的に適用される。平面センサの製造は、有意に自動化され得、低コストで大量生産を可能にする。平面センサは、より小さくされ得、そしてより密接して一緒に構成され、流体サンプル容量の要件を減少する。
【０００６】
このようなセンサを使用する種々の小型電気化学的センサおよび微小システムが、開発されたが、耐久性で、安定な信頼できる小型参照電極の非利用性は、産業的および生体医学的な用途のための小型電気化学的センサの使用を制限している。ポテンシオメトリにおける参照電極の安定性は、測定の信頼度および精度に非常に重要である。イオン選択電極を使用する一価イオンの測定および二価イオンの測定について、わずか１ｍＶの電位の誤差は、ｐＨ測定において約０．０２のｐＨ誤差、およびそれぞれ、４％または８％の濃度誤差を生じる。それにもかかわらず、小型化は、大部分が、作用電極および指示電極の開発に制限され、そして多くの場合、市販の大型参照電極が、正確な小型参照電極がない間使用されている。
【０００７】
別個の独立したユニットとして、マルチセンサ構造中のサブコンポーネントとして、または種々の小型イオン選択センサと一体的に、小型参照電極を作製するいくつかの試みがある。代表的には、このようなシステムは、薄膜Ａｇ／ＡｇＣｌ電極を使用する。この薄膜Ａｇ／ＡｇＣｌ電極は、非常に高い交換電流密度反応に基づく。すなわち、低い電流密度において、この電極は、分極されず、そしてこの電極／電解質界面における電位は、Ｃｌ−活量のみの関数である。しかし、いくつかの因子は、このＡｇ／ＡｇＣｌ要素の耐久性を制限し得る。従来のマクロ液体接合Ａｇ／ＡｇＣｌ電極は、ＡｇＣｌで飽和されたＫＣｌの高い活量を有するレザバから構成される。ＡｇＣｌは、高いＣｌ−活量において、ある程度の溶解度を示すので、ＡｇＣｌの薄膜は最終的に、ブリッジ電解質溶液の温度に依存して溶解し得る。さらに、標準的な液体接合小型電極は、サンプルと参照ブリッジ電解質溶液（これは参照電極用の回路を完成させる）との間に、適切な接触表面も液体接合も提供しない。従って、改良された小型参照電極の必要性が存在する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
１つの局面において、本発明は、ミニチュア液間参照電極を提供し、この電極は、以下の２つの構成要素を備える：参照センサおよびコネクタ。この参照センサは、耐久性のある厚膜Ａｇ／ＡｇＣｌ要素（これは、支持基材上に堆積した銀（Ａｇ）層およびこのＡｇ層の表面に（例えば、電気化学的酸化によって）形成されたＡｇＣｌ層からなる）を収容する。１つの実施形態において、この参照センサは、ブリッジ電解質入口およびブリッジ電解質チャネルに接続されており、このチャネルを通って、ブリッジ電解質溶液が流れ得る。コネクタチャネルは、サンプル入口チャネルおよびサンプル流出チャネルを備えるコネクタチャネルを収容し、これらのサンプル入口チャネルおよびサンプル流出チャネルを通って、サンプルまたは較正溶液が流れ得る。このコネクタはまた、ブリッジ電解質ウェルおよびブリッジ電解質ポートを有し、これらのウェルおよびポートに、ブリッジ電解質チャネルが接続されており、そしてこれらのウェルおよびポートを通って、ブリッジ電解質溶液が通過して、サンプルまたは較正溶液と接触する。
【０００９】
参照センサは、支持基材上に堆積した多数の層からなり得る。この層は、以下を含む：支持基材上に堆積する銀（Ａｇ）層、Ａｇ層の上に形成される塩化銀（ＡｇＣｌ）層、ＡｇＣｌ層の一部の上に堆積するグレース層、およびグレース層の上に配置されるポリマーガスケット。これらの層は、任意の手段によって堆積され得るが、好ましくは、スクリーン印刷または蒸着によって堆積される。
【００１０】
支持基材は、例えば、ポリマー材料および／またはセラミック材料で作製される。ポリマー材料は、例えば、可撓性または硬質のポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリカーボネート、ポリアクリレートおよび／またはポリイミドであり得る。セラミック材料は、例えば、酸化アルミニウムおよび／または二酸化ケイ素（ｓｉｌｉｃｉｕｍ  ｄｉｏｘｉｄｅ）であり得る。
【００１１】
Ａｇ層は、少なくとも約１μｍ、約１μｍ〜約１５μｍであり得るか、または好ましくは、約１５μｍの厚さである。
【００１２】
ＡｇＣｌ層は、例えば、電着によってＡｇ層上に形成され得る。１つの実施形態において、ＡｇＣｌ層は、Ａｇ層を、０．０１Ｍと１．０Ｍとの間の濃度を有する塩化物電解質溶液で、約０．０００５ｍＡ／ｍｍ２と約０．５ｍＡ／ｍｍ２との間の電流密度で、約３０秒間〜約２０分間処理することによって、Ａｇ層上に形成される。この塩化物電解質溶液は、例えば、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、またはＣａＣｌ２であり得、そして約ｐＨ１と約ｐＨ７との間、約ｐＨ１と約ｐＨ５との間、または約ｐＨ１と約ｐＨ２との間のｐＨ範囲を有し得る。
【００１３】
グレース層は、例えば、アルミナおよび／またはシリカで構成され得、そして１０μｍと５００μｍとの間、そして少なくとも約１０μｍの厚さである。
【００１４】
ポリマーガスケット層は、例えば、ポリウレタン、シリコーンゴム、ＰＶＣ、天然ゴムおよび／または合成ゴム（例えば、ｖｉｔｏｎ（登録商標））、あるいはブリッジ電解質溶液と反応せず、そしてこの溶液に溶解しない、他の任意の可撓性材料で作製され得る。ポリマーガスケット層は、少なくとも約５０μｍの厚さである。好ましい実施形態において、ポリマーガスケット層は、約５０μｍと約７００μｍとの間の厚さである。参照センサに接続され、そしてこのセンサを越えるブリッジ電解質チャネルは、好ましくは、約０．５ｍｍの直径であるが、これに限定されない。
【００１５】
コネクタチャネルは、例えば、ポリマー材料または金属材料で作製され、この材料は、ブリッジ電解質溶液と反応せず、そしてこの溶液に溶解しないべきである。適切な金属材料としては、ステンレス鋼、アルミニウムおよび／または白金が挙げられる。適切なポリマー材料としては、アクリル、ｐｌｅｘｉｇｌａｓ（登録商標）、ｌｅｘａｎ（登録商標）、ポリカーボネート、および／またはＰＶＣが挙げられる。コネクタチャネルのブリッジ電解質ポートは、好ましくは、参照センサの近くであり、参照電極から約２ｍｍと約１０ｍｍとの間、約２ｍｍと約１５ｍｍとの間、または約２ｍｍと約３０ｍｍとの間の範囲の距離に位置する。コネクタのサンプル入口チャネルは、好ましくは、直径約１ｍｍであるが、これに限定されない。サンプル流出チャネルは、好ましくは、直径約２ｍｍであるが、これに限定されない。コネクタチャネルのサンプル流出チャネルおよびサンプル入口チャネルは、１つ以上の管で構成されており、これらの管は一緒に結合され、そして共通の管腔を有する。例えば、サンプル入口チャネルおよびサンプル流出チャネルは、可撓性チューブであり得、好ましくは、直径約１ｍｍ〜約３０ｍｍであるが、これらに限定されない。１つの実施形態において、サンプル流出チャネルおよびサンプル入口チャネルの各々は、ブリッジ電解質チャネルの長手軸方向に対して約９０°〜約１８０°の角度で傾いて配向している。このサンプルチャネルを傾けるかまたは屈曲させる様式は、ブリッジ電解質ポートの上にブリッジ電解質ウェルを作製し得る。
【００１６】
ブリッジ電解質ポートは、ブリッジ電解質チャネルをコネクタチャネルに接続する穴を規定する。ブリッジ電解質ポートに近いコネクタチャネルは、ある容量のブリッジ電解質溶液を保持し得るブリッジ電解質ウェルを形成するような形状にされる。ブリッジ電解質ウェルは、例えば、平底、丸底、または円錐形であり得る。好ましい実施形態において、コネクタチャネルまたはブリッジ電解質ウェルは、ある容量のブリッジ電解質溶液を保持するような形状にされる。ブリッジ電解質ウェルにおいて、サンプルとブリッジ電解質溶液との間に形成される液体接合は、参照電極が使用中である場合に、約１ｍｍ２〜約１０ｍｍ２の範囲の表面積を有する。サンプルが、ブリッジ電解質溶液を含むブリッジ電解質ウェルを通過する（例えば、ポンピングされる）場合、サンプル／ブリッジ電解質溶液の液体接合（すなわち、界面）が形成される。１つの実施形態において、液体接合の表面積は、少なくとも約０．０５ｍｍ２〜約１０ｍｍ２である。
【００１７】
参照電極において使用されるブリッジ電解質溶液は、好ましくは、ＡｇＣｌを飽和させたＫＣｌであり、この溶液が貯蔵および使用される温度において、約０．１Ｍ〜約０．５Ｍの塩化物イオンの溶液を含む。
【００１８】
別の局面において、本発明は、液間参照電極を使用するための方法に関し、この方法は、サンプル中の１種以上の電解質または酵素を測定するために、この参照電極を使用することを包含する。１つの実施形態において、参照電極は、１種以上の分析物を測定するための、電極センサカートリッジに接続される。参照電極を使用する方法は、以下の工程を包含する：較正溶液またはサンプルを、サンプル入口チャネルに提供する工程；ブリッジ電解質溶液を、ブリッジ電解質入口に提供する工程；サンプルまたは較正溶液、およびブリッジ電解質溶液の各々が、ブリッジ電解質ポートに向かって流れるように、サンプルまたは較正溶液に対する力、およびブリッジ電解質溶液に対する力を提供する工程；ブリッジ電解質ウェルにおいて、サンプルとブリッジ電解質溶液との間に、接触界面または液体接合を形成する工程；ならびにある期間の後（例えば、読取り値が安定したとき）に測定を行う工程。コネクタチャネルを通してサンプルを移動させるため、およびブリッジ電解質チャネルを通してブリッジ電解質溶液を移動させるために使用される力は、１つ以上の蠕動ポンプによる正圧または負圧によって、引き起こされ得る。
【００１９】
本明細書中に開示される本発明の上述および他の目的、特徴および利点、ならびに本発明自体は、添付の図面と一緒に読まれる場合に、以下の好ましい実施形態の説明および特許請求範囲から、より完全に理解される。
【００２０】
図において、類似の参照記号は、一般に、異なる図にわたって同じ部品を表す。図は、必ずしも同一縮尺ではなく、本発明の原理を説明する際に、一般に強調がなされる。
【００２１】
（発明の詳細な説明）
本発明は、流体サンプル（例えば、体液（血液が挙げられるが、これに限定されない））の特徴を測定するための、ミニチュア電気化学センサカートリッジと共に使用するための、参照電極を提供する。この参照電極は、血液ガス（例えば、酸素および二酸化炭素）の未結合濃度または活性、イオン（例えば、ナトリウム、塩化物、カリウム、マグネシウム、リチウム、アンモニウム、およびカルシウムなど）、血液ｐＨおよびヘマトクリットを測定するための、耐久性のある参照源として、有用である。本発明の代替の実施形態は、グルコース、乳酸または他の酵素もしくは血液溶質のような因子を測定するために適合され得る。
【００２２】
（定義）
本発明の主題をより明瞭かつ簡潔に指摘および記載するために、以下の説明および特許請求の範囲において使用される特定の用語に対して、以下の定義が提供される。
【００２３】
本明細書中において使用される場合、用語「電極」とは、外部導体と内部イオン媒体との間の界面を作製する、電気化学的デバイスの成分をいう。この内部イオン媒体は、代表的に、塩が溶解した水溶液である。電極は、一般に３つの型であり、作用電極または指示電極、参照電極、および対電極である。作用電極または指示電極は、特定の化学種（例えば、イオン）を測定する。作用電極によって電位が測定される場合、この方法は、ポテンシオメトリーと称される。全てのイオン選択的電極は、ポテンシオメトリーによって作動する。作用電極によって電流が測定される場合、この方法は、電流測定と称される。例えば、酸素測定が、電流測定によって実施される。対電極は、電流経路のためのシンクとして働く。
【００２４】
「参照電極」とは、本発明によれば、参照センサ（これを通って、ブリッジ電解質溶液が通過する）およびコネクタ（これを通って、サンプルまたは較正流体が流れる）の組み合わせをいう。参照センサは、一般に、電気化学デバイスにおける電気参照点として働き、この点に対して、電位が測定および制御される。
【００２５】
本明細書中において使用される場合、用語「センサ」または「電気化学的センサ」とは、サンプル（例えば、体液サンプル）における特定の化学種の濃度の変動に応答するデバイスである。イオン感受性測定については、センサは通常、参照センサを備える参照電極と共に使用される。参照センサとは、参照電極において使用されるセンサである。１つの実施形態において、参照センサは、銀−塩化銀−塩化カリウムを含む。他の型の参照センサは、水銀−塩化水銀−塩化カリウムまたは銀−硝酸銀である。
【００２６】
本明細書中において使用される場合、用語「液体接合」とは、ブリッジ電解質溶液と、サンプルまたは較正溶液との間の界面をいう。
【００２７】
本明細書中において使用される場合、用語「サンプル」とは、参照電極を使用して試験され得る任意の流体または溶液をいい、例えば、水溶液（例えば、参照溶液もしくは較正溶液）、または体液（例えば、血液、血漿、滑液、および尿）が挙げられる。
【００２８】
本明細書中において使用される場合、用語「較正」とは、特定の分析物に対するセンサの応答特徴が定量的に決定されるプロセスをいう。センサを較正するためには、このセンサは、少なくとも２種類の試薬サンプルまたは較正溶液に曝露され、各試薬サンプルは、異なる既知の濃度の分析物を有する。２つの異なる試薬サンプルにおける分析物の濃度に応答して、センサによって測定される応答（すなわち、信号）は、未知の濃度の分析物を有するサンプルにおける分析物の測定のための参照点として働く。
【００２９】
「支持基材」とは、本明細書中において使用される場合、センサの種々の層（例えば、Ａｇ、ＡｇＣｌ、うわぐすり、ガスケットなど）が適用されるか、形成されるか、または堆積される、センサの基材をいう。
【００３０】
「コネクタ」とは、本明細書中において使用される場合、コネクタチャネル、ブリッジ電解質ポート、およびコネクタハウジングを含む参照電極の構成要素をいい、このチャネルは、サンプル入口チャネルおよびサンプル流出チャネルを備え、そしてこのブリッジ電解質ポートには、ブリッジ電解質チャネルが接合される。
【００３１】
サンプル入口チャネルの「傾き角」とは、サンプル入口チャネルと、ブリッジ電解質チャネルの長手方向軸との間の角度をいう。サンプル流出チャネルの「傾き角」とは、サンプル流出チャネルと、ブリッジ電解質チャネルの長手方向軸との間の角度をいう。
【００３２】
「ブリッジ電解質ウェル」は、コネクタのうちの、一定の容量のブリッジ電解質溶液を保持するように形成された部分である。
【００３３】
（参照電極のアセンブリ：参照センサ）
本発明に従う一つの実施形態において、図１Ａおよび図１Ｂに例示される参照電極２３は、参照センサ１およびコネクタ１０を備える。図１Ａを参照すると、参照センサ１は、参照電極２３のうちの、支持基板２、Ａｇ層３、ＡｇＣｌ層４、グレーズ層５およびガスケット層６から作製される部分である。ブリッジ電解質入口７は、ブリッジ電解質チャネル８に連結する導管であり、このブリッジ電解質チャネル８を、ブリッジ電解質溶液が流れ得る。ブリッジ電解質チャネル８は、ブリッジ電解質入口７をブリッジ電解質ポート１１に連結するチャネルである。この参照電極２３を作動させるために、ブリッジ電解質溶液は、ブリッジ電解質入口７を通ってポンピングされ、Ａｇ／ＡｇＣｌ層３、４を越え、ブリッジ電解質チャネル８を通り、ブリッジ電解質ポート１１を通り、ブリッジ電解質ウェル１５内に入り、ここで、ブリッジ電解質溶液は、ブリッジ電解質ウェル１５内の、例えば、較正溶液または較正サンプルと接触して、ブリッジ電解質溶液とこのサンプルとの間に流体接続部または界面１４を作製する。
【００３４】
一つの実施形態において、参照電極２３の支持基板２は、ポリマー材料もしくはセラミック材料またはそれらの組み合わせから作製される。このポリマー材料は、例えば、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリカーボネート、ポリアクリレートもしくはポリイミド、またはそれらの組み合わせであり得る。このセラミック材料は、例えば、酸化アルミニウムもしくは二酸化ケイ素（ｓｉｌｉｃｉｕｍ  ｄｉｏｘｉｄｅ）またはそれらの組み合わせであり得る。
【００３５】
さらに、図１Ａおよび図１Ｂを参照すると、Ａｇ層３は、当該分野で公知の方法に従って、例えば、スクリーン印刷または蒸着法により、支持基板２上に堆積される。スクリーン印刷のために、例えば、Ａｇ粒子を、セラミック結合材料と合わせ、次いでスクリーン印刷し、続いて高温（例えば、７００〜８００℃）で燃焼し得る。蒸着法のために、例えば、Ａｇ金属を、高減圧下で、エバポレートし、そして支持基板２上に凝縮させ得る。
【００３６】
本発明に従う一つの実施形態において、図１Ａおよび図１Ｂをさらに参照すると、参照電極２３のＡｇＣｌ層４は、Ａｇ層３を、約０．０１Ｍと約１．０Ｍとの間の濃度および約ｐＨ１〜約ｐＨ７のｐＨを有する塩化物電解質溶液で、０．００５ｍＡ／ｍｍ２〜０．５ｍＡ／ｍｍ２の電流密度で３０秒〜２０分間、電着することによって形成される。好ましい実施形態において、電着は、約０．０５ｍＡ／ｍｍ２の電流密度の塩化物電解質を有する塩化物電解質溶液で６分間にわたって行われる。
【００３７】
図１Ａおよび図１Ｂを続けて参照すると、参照電極２３のグレーズ層５は、アルミナおよび／またはシリカにより構成され得、そして少なくとも約１０μｍ厚である。このグレーズ層５は、ＡｇＣｌ層４で覆われていないＡｇ層３のあらゆる部分を覆うようなサイズおよび形状にされ、そしてＡｇＣｌ層４（例えば、Ａｇ層４の縁部の周り）を形成するために、酸化されないＡｇ層３の絶縁部を提供する。さらに図１Ａおよび１Ｂを参照すると、このグレーズ層５はまた、グレーズ層５と同程度の厚さのＡｇＣｌ層４の周りに、ウェル９の壁を形成する。次いで、絶縁グレーズ層５は、ガスケット層６で覆われる。
【００３８】
ガスケット層６は、好ましくは、ポリウレタン、シリコーンラバー、ポリビニルクロリド（ＰＶＣ）、ビトン（登録商標）、天然ゴムもしくは合成ゴム、および／またはブリッジ電解質溶液と反応しないか、もしくはこれに溶解しない任意の他の可撓性材料から作製される。ガスケット層６は、少なくとも約５０μｍ厚である。好ましい実施形態において、このガスケット層６は、約５０μｍ厚と約７００μｍ厚との間である。このガスケット層６は、グレーズ層５を覆うような形状にされる。
【００３９】
このブリッジ電解質入口７は、参照センサ１を通過して、ブリッジ電解質チャネル８を流れる、ブリッジ電解質溶液のための導管を提供する。一つの実施形態において、図１Ａおよび図１Ｂを参照すると、ブリッジ電解質入口７およびブリッジ電解質チャネル８は、アクリルブロック１７中に収容される。
【００４０】
（コネクタ）
図１Ａを参照すると、一般に、コネクタ１０は、サンプル入口チャネル１２、および廃棄物収集容器（示さず）に至るサンプル流出チャネル１３を備えるコネクタチャネル１０２、ブリッジ電解質ポート１１、ブリッジ電解質ウェル１５ならびにコネクタハウジング１６を有する。ブリッジ電解質チャネル８は、ブリッジ電解質ポート１１を介してコネクタ１０に連結される。サンプル入口チャンネル１２は、流体サンプル（例えば、血液または較正溶液）を、ブリッジ電解質ウェル１５を越えて、サンプル流出チャネル１３へ、次いで廃棄物容器へと流すための導管である。
【００４１】
本発明の一つの実施形態において、コネクタ１０は、図１Ａに例示されるようなＴ字形状で形成される。この実施形態において、このサンプル入口チャネル１２およびサンプル流出チャネル１３は、ブリッジ電解質チャネル８の長手軸に対して本質的に垂直（すなわち、約９０°）である。この配向において、ブリッジ電解質チャネル８に対するサンプル入口チャネル１２の傾斜角（ｂ）、およびブリッジ電解質チャネル８に対するサンプル流出チャネル１３の傾斜角（ａ）は、約９０°である。図１Ａに示される９０°の傾斜角（ａ）、（ｂ）は、単に例示であり、約９０°と約１８０°との間の任意の角度が、本発明によって意図される。例えば、図１Ｃに例示されるように、サンプル流出チャネル１３の傾斜角（ａ）は、１５０°であり得、そしてこのサンプル入口チャネル１２の傾斜角（ｂ）は、１２０°であり得る。
【００４２】
ブリッジ電解質ウェル１５のいくつかの実施形態が、図１Ａ、図２Ａおよび図３Ａに示される。図１Ａを参照すると、一つの実施形態において、ブリッジ電解質ウェル１５は、実質的に平底であり得る。図２Ａを参照すると、別の実施形態において、このブリッジ電解質ウェル１５は、実質的に円錐形状であり得る。図３Ａを参照すると、なお他の実施形態において、このブリッジ電解質チャネル８の長手軸に対するサンプル入口チャネル１２の傾斜角（ａ）および／またはサンプル流出チャネル１３の傾斜角（ｂ）が、約９０°より大きい場合、このブリッジ電解質ウェル１５は、コネクタチャネル１０２において湾曲状態で形成される。サンプル入口チャネル１２またはブリッジ電解質ウェル１５を作製するサンプル流出チャネル１３の一方または両方の、任意の上方への湾曲が、意図される。ブリッジ電解質ウェル１５は、一定の容量のブリッジ電解質溶液を保持し得るブリッジ電解質ポート１１の真上のコネクタチャネル１０２中に作製される。流体サンプルまたは較正溶液が、ブリッジ電解質ウェル１５中のブリッジ電解質溶液と界面を形成する場合、液体接合部１４が、サンプル溶液または較正溶液とブリッジ電解質溶液との間に作製される。一つの実施形態において、ブリッジ電解質ウェル１５は、１０μｌ〜５００μｌのブリッジ電解質溶液を保持する。本発明の特定の実施形態において、この液体接合部１４は、好ましくは、約０．５ｍｍ２〜約１０ｍｍ２の範囲の表面積を有する。
【００４３】
コネクタ１０は、参照電極２３において使用されるブリッジ電解質溶液と反応しないか、またはこれに溶解しない物質から作製される。一つの実施形態において、このコネクタ１０は、金属性であり、そして例えば、ステンレス鋼、アルミニウムおよび／または白金から作製される。別の実施形態において、このコネクタ１０は、ポリマー材料（例えば、アクリル、プレキシグラス（ｐｌｅｘｉｇｌａｓ（登録商標））、レキサン（ｌｅｘａｎ（登録商標））、ポリカーボネート、および／またはＰＶＣ）から作製される。
【００４４】
（参照電極の操作）
別の局面において、本発明は、センサシステムの参照電極２３を使用して、流体サンプル中の分析物を測定するための方法である。図１Ａを参照すると、このブリッジ電解質溶液は、ブリッジ電解質入口７に導入され、参照センサＡｇ／ＡｇＣｌ層３、４を通過し、参照センサＡｇ／ＡｇＣｌ層３、４と接触し、この流体は、ブリッジ電解質チャネル８を通ってポンピングされ、ブリッジ電解質ポート１１を通って、ブリッジ電解質ウェル１５に入る。流体サンプルが、例えば、蠕動式ポンプによる正の流れによって、サンプル入口チャネル１２に導入される場合、流体サンプルは、ブリッジ電解質ウェル１５中のブリッジ電解質溶液と接触し、液体接合部１４を形成する。サンプルとこのブリッジ電解質溶液との接触は、参照電極２３の回路を完了させる。
【００４５】
（センサカートリッジ）
図４を参照すると、本発明の特定の実施形態において、参照電極２３は、センサカートリッジ２１に導入されたサンプルについての電気測定を行うために改造されたカートリッジ入口チャネル２０によって接続された、少なくとも１つのセンサ２２、または複数のセンサ２２を取り込んだセンサカートリッジ２１と連結して使用される。好ましいセンサカートリッジ２１は、米国特許第４，７３４，１８４号および同第６，１２３，８２０号に詳細に記載されており、これらは、本明細書中で参考として援用されている。センサカートリッジ２１は、例えば、ｐＨ、ｐＣＯ２、ｐＯ２、Ｎａ＋、Ｃａ＋＋、およびヘマトクリットを測定するために、例えば、電気化学センサ（すなわち、電極）２２を参照電極２３とともに備え得る。あるいは、センサカートリッジ２１は、酵素センサ２２を備え得る。温度制御は、適切な加熱エレメントまたは冷却エレメント（例えば、ペルチエ効果デバイスおよびサーミスター）を使用して、所望の温度にセンサカートリッジ２１を維持することによって達成され得る。
【００４６】
（センサカートリッジ−参照電極アセンブリ）
図４を参照すると、このセンサカートリッジ２１および参照電極２３、ならびにセンサカートリッジ２１および参照電極２３の内側および外側に通じている種々のチャネル（例えば、ブリッジ電解質入口７、ブリッジ電解質チャネル８、サンプル入口チャネル１２、サンプル流出チャネル１３、カートリッジ入口チャネル２０）は、センサカートリッジ−参照電極アセンブリ２４（「アセンブリ２４」）に構築される。
【００４７】
図５は、参照電極２３が、サンプル入口チャネル１２、ｐＨ／ｍＶメータ４０およびポテンシオスタット４４を介してセンサカートリッジ２１に接続され、ポテンシオスタット４４が白金電極または金電極３５に必要に応じて連結される、電位差測定値および電流滴定測定値を得るのに使用するための本発明の実施形態を図示する。電位差測定センサ（例えば、ｐＨ、Ｎａ＋、Ｋ＋など）のために、ｐＨ／ｍＶメータ４０の一方のリード線（すなわち、第１のｐＨ／ｍＶメータ入力リード線３６）は、各電位差測定センサ３２に接続され、そしてｐＨ／ｍＶメータ４０の他方のリード線（すなわち、第２のｐＨ／ｍＶメータ入口リード線３８）は、参照電極２３に接続される。図５は、ｐＨセンサ３２に接続されたｐＨ／ｍＶメータ４０の第１のｐＨ／ｍＶメータ入口リード線３６、および参照電極２３に接続されたｐＨ／ｍＶメータ４０の第２のｐＨ／ｍＶメータ入口リード線３８の例示的な例を提供するが、さらなるｐＨ／ｍＶメータ入口リード線３６、３８が、さらなる電位差測定センサ（例えば、Ｃａ＋＋、Ｎａ＋およびＫ＋のため）３２および参照電極２３とｐＨ／ｍＶメータ４０とを接続し得る。ｐＨ／ｍＶメータ４０は、電位差測定センサ３２と参照電極２３との間の電位差を測定する。この電位差は、サンプルまたは較正溶液中の分析物の濃度に比例する。
【００４８】
さらに図５を参照すると、２電極型電池配置における電流滴定センサ（すなわち、作用電極）３４（例えば、ｐＯ２、グルコース、ラクタート、尿素、ｐＣＯ２など）に関して、いわゆるポテンシオスタット４４（すなわち、作用電極の接続部４２）の一方のリード線は、各電流滴定センサ３４に連結され、そしてポテンシオスタット４４（すなわち、参照電極の接続部４６）の他方のリード線は、参照電極２３に連結される。図５は、グルコースセンサ３４に連結されたポテンシオスタット４４の作用電極の接続部４２および参照電極２３に連結されたポテンシオスタット４４の参照電極の接続部４６の例示的な例を提供するが、さらなるポテンシオスタットのリード線４２、４６が、さらなる電流滴定センサ３４および参照電極２３とポテンシオスタット４４を接続し得る。３電極型電流滴定電池配置の場合において、ポテンシオスタット４４の第３のリード線（すなわち、対電極（ＣＥ）接続部４８）は、サンプルまたは較正溶液と直接接触する、白金電極３５または金電極３５（図５に斜線で例示されている）に接続される。ポテンシオスタット４４は、センサ３４と参照電極２３との間に予め決められた電位を印可する。センサ３４を流れ、そしてポテンシオスタット４４によって測定される電流は、サンプルまたは較正溶液中の分析物の濃度に比例する。
【００４９】
イオン選択性電極のようなセンサおよびセンサカートリッジのためのそれらの製造、ならびに使用される蠕動式ポンプシステムの詳細は、米国特許第４，２１４，９６８号、同第４，７３４，１８４号、同第６，１２３，８２０号に記載されており、そして微小電極の操作は、Ｕ．Ｓ．Ｓ．Ｎ．６０／１７０，１３６に詳細に記載されている（これらの全ての内容は、本明細書中で参考として援用されている）。
【００５０】
センサカートリッジ参照電極アセンブリ２４は、サンプル中の分析物の濃度を決定する前に較正する必要がある。センサカートリッジ２１のセンサ２２は、アセンブリ２４によって測定されるべきパラメータについて、既知の値を有する少なくとも１つの水溶液を用いて較正され得る。特定の分析物について異なる既知の値を有する２つの較正溶液は、このシステムが２点の基準で較正されるのを可能にする。アセンブリ２４の較正について、図４を参照すると、第１の蠕動式ポンプは、第１の較正溶液を、カートリッジ入口チャンネル２０に移動させ（例えば、引っ張られる）、そして１つ以上のセンサ２２を通ってセンサカートリッジ２１を通過させる。第２の蠕動式ポンプは、ブリッジ電解質溶液を、ブリッジ電解質入口７に移動させ、参照センサＡｇ／ＡｇＣｌ層３、４を通って、ブリッジ電解質チャネル８に入らせる（例えば、押し出される）。次いで、このブリッジ電解質溶液は、ブリッジ電解質チャネル８を通って、コネクタ１０に移動し、ここで、このブリッジ電解質溶液は、第１較正溶液との液体接合部１４を形成する。本発明の特定の実施形態において、液体接合部１４は、ブリッジ電解質ウェル１５中の約１０μｌ〜約５００μｌのブリッジ電解質溶液と、コネクタチャネル１０２中の１０μｌ〜約３００μのサンプルまたは第１の較正溶液との間で形成される。この液体接合部１４が形成された後、第１の蠕動式ポンプおよび第２の蠕動式ポンプが、停止される。約２０秒〜約９０秒後に、過渡的なシグナルが、センサ２２について安定化される一方で、測定値（例えば、電位値）が得られる。同一の手順は、第２の較正溶液を使用して繰り返され得る。一つの実施形態において、較正溶液を使用して、アセンブリ２４についてベースライン読取値を提供し得る。次いで、血液サンプルのようなサンプルが、同様のサイクルを使用して測定される。一つの実施形態において、サンプルが測定された後、リンス溶液（例えば、較正溶液）を使用して、センサカートリッジ２１、カートリッジ入口チャネル２０、サンプル入口チャネル１２、サンプル流出チャネル１３、ブリッジ電解質ウェル１５および／または液体接合部１４を洗浄し得る。洗浄後、第１の較正溶液が、センサカートリッジ２１のサンプル入口チャネル２０にローディングされ、ブリッジ電解質溶液が、新鮮なブリッジ電解質溶液を、ブリッジ電解質入口７およびブリッジ電解質チャネル８を通して、ブリッジ電解質ウェル１５内へとポンピングすることによってリフレッシュする。次いで、このアセンブリ２４は、次のサンプルのために準備ができている。
【００５１】
１つの実施形態において、ポンプの操作の間、カートリッジ−参照電極アセンブリ２４は、ブリッジ電極入り口７を介するブリッジ電極溶液の一定脈動流れ、およびカートリッジ入り口チャネル２０を介する血液サンプルまたは２つの較正溶液のうちの１つのいずれかの脈動流れを受容する。１つの実施形態において、センサーカートリッジ−参照電極アセンブリ２４を次のサンプルまたは較正のために準備する時間の間、較正溶液（好ましくは、第２較正溶液）のうちの１つは、一定ベースラインの較正の読みが時間にわたってそしてサンプル間で維持され得るようにセンサーの全面にある。
【００５２】
マイクロプロセッサーは、当該分野において周知なように、流体サンプル、較正溶液およびリンス溶液（例えば、第２較正溶液）の配列が、アセンブリ２４を通過し得るように、ポンプの活動を制御し得る。較正溶液がアセンブリ２４を通過する場合、アセンブリ２４の１部を形成するセンサー２２は、サンプルのパラメーターの測定を行い、そしてマイクロプロセッサーは、これらの電気的値を保存する。較正溶液がセンサーカートリッジ２４を通過する間になされる測定、および較正溶液内に含まれる測定パラメーターの既知の値に基づいて、マイクロプロセッサーは、測定パラメーターのそれぞれについての較正曲線を作製し得、その結果、サンプルがアセンブリ２４を通る場合に、センサー２２によってなされる測定が、目的のパラメーターの正確な測定を導くために使用され得る。これらの測定は、これらの測定は、マクロプロセッサーによって保存され、そして表示される。マイクロプロセッサーは、測定、計算、保存、および制御機能を実行するために適切にプログラムされる。
【００５３】
（血液サンプル）
血液サンプルは、瀉血によって得られ得るかまたは例えば開心手術する間、患者に接続される体外血流回路かの周期的な基準で誘導され得る。血液サンプルは、他の自動手段によってまたは手動によって（例えば、シリンジによって）、カートリッジ入り口チャネル２０に導入され得る。血液サンプルはまた、別のサンプルとして導入され得る。
【００５４】
（較正溶液）
１つの実施形態において、センサーカートリッジ−参照電極アセンブリ２４は、２つの較正溶液（例えば、較正溶液Ａおよび較正溶液Ｂ）を用いて較正され得る。較正溶液Ａの好ましい組成（３７℃でそして８％ＣＯ２−９２％Ｎ２ガスでトノメーターされた（ｔｏｎｏｍｅｔｅｒｅｄ）大気圧で調製される）は、以下の通りである：
【００５５】
【表１】
2004525369.tif 000002
この組成は、効果的な血液ファクシミリ（ｂｌｏｏｄ  ｆａｃｓｉｍｉｌｅ）であり、そしてアセンブリ２４によって測定される以下のパラメーターを有する。
【００５６】
【表２】
2004525369.tif 000003
較正溶液Ｂの好ましい組成（３７℃で、２１％Ｏ２−４％ＣＯ２−７５％Ｎ２ガスを用いてトノメーターされる７００ｍｍＨｇの絶対圧力で調製される）は、以下の通りである：
【００５７】
【表３】
2004525369.tif 000004
この組成は、効果的な血液ファクシミリであり、そしてアセンブリ２４によって測定される以下のパラメーターを有する。
【００５８】
【表４】
2004525369.tif 000005
２つの較正溶液の組成は、このシステムによって測定される特性のそれぞれについて、アセンブリ２４によって測定される許容可能な値の範囲にわたって間隔が空けられる一対の値が得られるように選択され、アセンブリ２４についての平衡化された２点較正を提供する。
【００５９】
較正組成物は、カルシウム二水和物塩を除いて、成分全てを予備混合し；窒素と混合された酸素およびＣＯ２を用いて溶液をトノメーターしてこの溶液について所望のレベルのｐＨを生成し；カルシウム二水和物塩を添加し；そして最後に、カルシウム二水和物塩の添加の間に生じるガスレベルの任意の変動を調整するためにこの溶液を再トノメーターすることによって調製される。
【００６０】
較正溶液ＡおよびＢの組成は、例示の目的である；任意の所望の較正溶液が参照電極１とともに使用され得ることが企図される。
【００６１】
（ブリッジ電解質溶液）
例えば、図１Ａに示されるように、参照電極２３に使用されるブリッジ電解質溶液は、液体接合部１４にサンプルまたは較正溶液を提供し、そしてそれによって、参照電極２３を較正溶液または血液の変動する電気化学電位から隔離して、サンプルまたは較正溶液のイオン活量と独立した環境を参照電極２３に確立する。ブリッジ電解質溶液は、本質的に、サンプルまたは較正溶液よりも高張性の塩化物溶液（例えば、ＫＣｌ）である。
【００６２】
ガス／電解質測定がなされた後に、ブリッジ電解質溶液がセンサー２２から下流でサンプル入り口チャネル１２と合わさるので、ブリッジ電解質溶液は、これらの測定にいかなるようにも影響しない。ブリッジ電解質溶液は、ポンピング力下で、ブリッジ電解質ウェル１５に向かって重力に対して上方に流れなければならない。従って、ポンプが停止した場合、ブリッジ電解質溶液は、コネクター１０のブリッジ電解質ウェル１５に固定されたままであり、そしてサンプル入り口チャネル１２内の較正溶液またはサンプル中に有意に拡散しない傾向があり、参照センサー１へのサンプルまたは較正溶液の望ましくない逆方向の通過または混合を妨げる。サンプルおよびブリッジ電解質溶液が液体接合部１４において幾分混合されるので、ブリッジ電解質溶液が、約０分と約６０分との間、必要に応じて、約５分と１５分との間の間隔で、新しくされることが重要である。
【００６３】
好ましい実施形態において、ブリッジ電解質溶液は、最初にＡｇＣｌで飽和された０．１Ｍ  ＫＣｌ溶液である。ブリッジ電解質溶液は、０．０１％と１．０％との間の濃度で、ポリオキシル水素化ヒマシ油２５（例えば、Ａｒｌａｔｏｎｅ  Ｇ（登録商標））のような界面活性剤を含み得る。他の型の界面活性剤（例えば、Ｂｒｉｊ３５（７０μｌ／ｌの溶液）もまた使用され得、気泡形成を最小化し得る。１つの実施形態において、ブリッジ電解質溶液は、室温で調製され、次いで、過剰のＡｇＣｌを用いて飽和される。次いで、懸濁されたＡｇＣｌ粒子を含む溶液は、ヘッドスペースを有さないシールされた可撓性容器内にパーケージされる。この技術は、この溶液が任意の保存温度でＡｇＣｌについて飽和されたままであることを確実にする。
【００６４】
（酵素センサー）
イオンセンサー２２を使用する上記較正および測定はまた、酵素センサーに企図される。このような酵素センサーは、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃｌ−、Ｃａ＋以外の溶質、ｐＯ２、ｐＣＯ２以外の気体、ヘマトクリットおよびｐＨの分析のために有用である。例えば、酵素センサーは、体液サンプル（例えば、血液）中のグルコース、またはラクトン、または他のタンパク質の分析のために有用である。
【００６５】
（等価物）
本発明は、その精神または必須の特徴から逸脱することなく他の特定形態で実施され得る。従って、上記実施形態は、本明細書中に記載される本発明を制限するというよりも、全ての局面において例示とみなされるべきである。従って、本発明の範囲は、上記記載によってよりも、添付の特許請求の範囲によって示され、そして特許請求の範囲の等価物の意味および範囲内に入る全ての変更は、その中に含まれると意図される。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１Ａ】図１Ａは、ブリッジ電解質ウェルが平底カップである、参照電極の実施形態の概略断面図を示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、図１Ａに示される参照電極の側面図を示す。
【図１Ｃ】図１Ｃは、本発明によるコネクタチャネルのブリッジ電解質ウェルの実施形態を示す。
【図２Ａ】図２Ａは、ブリッジ電解質ウェルが円錐形である、参照電極の実施形態の概略断面図を示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、図２Ａに示される参照電極の側面図を示す。
【図３Ａ】図３Ａは、ブリッジ電解質ウェルが、約９０°より大きな角度で傾くように、サンプル入口チャネルおよび／またはサンプル流出チャネルを屈曲させることによって形成されている、参照電極の実施形態の概略断面図を示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、図３Ａに示される参照電極の側面図を示す。
【図４】図４は、電気化学的センサカートリッジと共に使用される参照電極の概略図を示す。
【図５】図５は、サンプル入口チャネル、ｐＨ／ｍＶメータおよびポテンシオスタットを介してセンサカートリッジに接続された参照電極の概略図を示し、このポテンシオスタットは、必要に応じて、白金または金の電極に接続されている。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004525369.tif 000043
【国際調査報告】
2004525369.tif 000044
2004525369.tif 000045
2004525369.tif 000046