(57)【要約】本発明では、出発原料としてジスタマイシンＡを用いることにより、本明細書中で示す式を有する抗腫瘍活性を有するジスタマイシン誘導体を合成する際に有用な中間体を合成するための方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）：
【化１】
2004504378.tif 000020
（式中、ｎは、１から４までの整数であり、Ｒは、下記式から選択され、
【化２】
2004504378.tif 000021
これらの式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一であっても異なっていてもよく、水素、メチルおよびエチルから独自に選択される）
のポリピロールアミド誘導体を合成するための方法であって、
ａ）下記式（ＩＩ）：
【化３】
2004504378.tif 000022
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基の存在下で無水コハク酸と反応させる工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【化４】
2004504378.tif 000023
（式中、Ｐは、ｔ−ブトキシカルボニルである）
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下でｔ−ブチルジカーボネートと反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）：
【化５】
2004504378.tif 000024
（式中、Ｐは、上で定義したとおりである）
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｄ）好適なカップリング剤の存在下で、式（ＩＶ）の化合物を下記式（Ｖ）：
【化６】
2004504378.tif 000025
（式中、ｎおよびＲは、上で定義したとおりである）
の化合物と反応させる工程；および
ｅ）式（Ｉ）の遊離アミノ誘導体が得られるように、得られた化合物を脱保護する工程、
を含む方法。
【請求項２】
Ｒが、下記式：
【化７】
2004504378.tif 000026
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一であっても異なっていてもよく、水素、メチルおよびエチルから独自に選択される）
の基である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の各々が水素である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
下記式（ＶＩ）：
【化８】
2004504378.tif 000027
（式中、
ｎは、１から４までの整数であり；
Ｒは、下記から選択され：
【化９】
2004504378.tif 000028
これらの式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一であっても異なっていてもよく、水素、メチルおよびエチルから独自に選択され；
Ｒ４は、下記から選択され、
【化１０】
2004504378.tif 000029
これらの式中、
Ｒ５およびＲ６は、塩素または臭素であり；
Ｒ７は、水素、塩素または臭素であり；
ＸおよびＹは、同一であっても異なっていてもよく、窒素およびＣＨ基から選択され；
Ｗは、フェニレンであるか、またはＮ、ＯおよびＳから選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を有するベンゾ縮合した５員複素環もしくは６員複素環であり、それらはともに、無置換であるかまたは１個以上の低級アルキル基によりさらに置換される）
のジスタマイシン誘導体またはその薬学的に許容される塩を合成するための方法であって、
ａ）下記式（ＩＩ）：
【化１１】
2004504378.tif 000030
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基の存在下で無水コハク酸と反応させる工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【化１２】
2004504378.tif 000031
（式中、Ｐは、ｔ−ブトキシカルボニルである）
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下でｔ−ブチルジカーボネートと反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）
【化１３】
2004504378.tif 000032
（式中、Ｐは、上で定義したとおりである）
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｄ）好適なカップリング剤の存在下で、式（ＩＶ）の化合物を下記式（Ｖ）：
【化１４】
2004504378.tif 000033
（式中、ｎおよびＲは、上で定義したとおりである）
の化合物と反応させる工程；
ｅ）下記式（Ｉ）：
【化１５】
2004504378.tif 000034
（式中、ｎおよびＲは、上で定義したとおりである）
の遊離アミノ誘導体が得られるように、得られた化合物を脱保護する工程；および
ｆ）式（ＶＩ）の化合物が得られるように、式（Ｉ）の化合物を下記式：
Ｒ４−ＣＯＺ　（ＶＩＩ）
（式中、Ｒ４は、上で定義したとおりであり、Ｚは、ヒドロキシまたは好適な脱離基である）
のカルボン酸誘導体でアシル化し、所望であれば、前記化合物をその薬学的に許容される塩に転換する工程、
を含む方法。
【請求項５】
Ｒが、下記式：
【化１６】
2004504378.tif 000035
（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一であっても異なっていてもよく、水素、メチルおよびエチルから選択され；
Ｒ４は、下記式のα−ブロモアクリロイル部分またはα−クロロアクリロイル部分であり、
【化１７】
2004504378.tif 000036
この式中、
Ｒ５は、塩素または臭素であり；
ＸおよびＹは、同一であっても異なっていてもよく、窒素およびＣＨ基から選択される）
の基を表す、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
合成される化合物が、Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミドであり、場合によってその薬学的に許容される塩の形態である、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
工程ｂ）において、２当量から４当量までのジ−ｔ−ブチルジカーボネートおよび２当量から４当量までのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）が用いられる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
工程ｄ）において、式（ＩＶ）の化合物と式（Ｖ）の化合物との反応が、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド・塩酸塩（ＥＤＣＩ）、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム（ＢＯＰ）およびテトラフルオロホウ酸Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム（ＴＢＴＵ）から選択される好適なカップリング剤の存在下で行われる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
カップリング剤が、テトラフルオロホウ酸Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム（ＴＢＴＵ）である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
工程ｅ）において、アミノ保護ｔ−ブトキシカルボニル基が、酸性条件下、塩酸またはトリフルオロ酢酸の存在下で行われる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
工程ｆ）において、式（Ｉ）の化合物を、Ｚがヒドロキシ、臭素または塩素である式（ＶＩＩ）の化合物と反応させる、請求項６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ジスタマイシン誘導体の合成方法に関し、より詳細には、窒素含有末端基を有し、抗腫瘍剤として有益な生物学的特性を有する様々なジスタマイシン誘導体を合成する際の重要な中間体を合成するための方法に関する。
【０００２】
ジスタマイシンＡは、下記の式：
【０００３】
【化１８】
2004504378.tif 000002
により示されるが、ピロールアミジン抗生物質のファミリーに属し、ＤＮＡ−ＡＴ配列と可逆的かつ選択的に相互作用し、そうすることで複製および転写の両方を妨げることが報告されている。参考文献については、Ｎａｔｕｒｅ、２０３、１０６４（１９６４）；ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、７（１９７０）９０；Ｐｒｏｇ．　Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ．　Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１５、２８５（１９７５）を参照のこと。
【０００４】
いくつかのジスタマイシン誘導体が抗腫瘍剤として当該分野で知られている。
【０００５】
一例として、本出願人自身の名義での国際特許出願公開ＷＯ９８／０４５２４には、抗腫瘍活性を有する新規なジスタマイシン誘導体が開示されており、ここで、ジスタマイシンのホルミル基は、アクリロイル基により置換され、アミジノ基は、何種かの窒素含有末端基により置換されており、グアニジノがその１つである。
【０００６】
このような後者の化合物を、以下、ジスタマイシン−グアニジンと簡略化して示すが、これらはまた下記の特許出願明細書にも開示される：国際特許出願公開ＷＯ９７／２８１２３、同ＷＯ９７／４３２５８、同ＷＯ９９／５０２６５、同ＷＯ９９／５０２６６、同ＷＯ９９／６４４１３および同ＷＯ０１／４０１８１（これは、英国特許出願第９９２８７０３．９号から優先権を主張する）、これらはすべて、本出願人自身の名義であり、そして参考として本明細書に組み込まれる。
【０００７】
このクラスの化合物の代表的なものは、場合によって医薬適合性の塩の形態にあるが、例えば、下記がある：
１）Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド；
２）Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−クロロアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド；
３）Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド；
４）Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−３−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
５）Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−（｛［４−（｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゾイル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル］カルボニル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド；
６）Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−３−（｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゾイル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
７）Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（｛４−［（−３−｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］フェニル｝−２−プロペノイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド。
【０００８】
グアニジノ以外の窒素含有末端基、例えば、アミノ基、アミジノ基およびアミド基を有するいくつかの他のジスタマイシン誘導体は、抗腫瘍剤としてこの分野では広く知られている。
【０００９】
これらの化合物すべておよびそれらの類似体は、既知の化学的手法に従って合成され、そのような方法には、適正に活性化されたカルボン酸誘導体と、所望する窒素含有末端基を有するポリピロールアミド骨格との縮合反応が基本的に含まれる。
【００１０】
この後者のポリピロールアミド中間体を合成するには、対応するニトロ誘導体の還元により得られる２−カルボキシ−４−アミノピロール類に、実質的に数回のアシル化反応を含むかなり面倒な段階毎の手順を踏む。
【００１１】
ジスタマイシン誘導体およびポリピロールアミド中間体を合成するための上記方法に対する一般的な参考文献については、例えば、上記の国際特許出願公開ＷＯ９８／０４５２４を参照のこと。
【００１２】
この点に関して、本発明者らは、驚くべきことに、上記のポリピロールアミド誘導体が、ジスタマイシンＡそのものから出発することにより、所望する生成物を高収率かつ高純度で、そして限られた数の工程に従って得ることが可能な方法により有利に合成され得ることを見出した。
【００１３】
従って、本発明の１つの目的は、下記式（Ｉ）：
【００１４】
【化１９】
2004504378.tif 000003
（式中、ｎは、１から４までの整数であり、Ｒは、下記から成る群より選択され、
【００１５】
【化２０】
2004504378.tif 000004
これらの式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、水素、メチルおよびエチルから独自に選択される）
のポリピロールアミド誘導体を合成するための方法である。この方法は、
ａ）下記式（ＩＩ）：
【００１６】
【化２１】
2004504378.tif 000005
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基の存在下で無水コハク酸と反応させる工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【００１７】
【化２２】
2004504378.tif 000006
（式中、Ｐは、ｔ−ブトキシカルボニルである）
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下でｔ−ブチルジカーボネートと反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）：
【００１８】
【化２３】
2004504378.tif 000007
（式中、Ｐは、上記に示される意味を有する）
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｄ）好適なカップリング剤の存在下で、式（ＩＶ）の化合物を下記式（Ｖ）：
【００１９】
【化２４】
2004504378.tif 000008
（式中、ｎおよびＲは、上記に示される意味を有する）
の化合物と反応させる工程；および
ｅ）式（Ｉ）の遊離アミノ誘導体が得られるように、得られた化合物を脱保護する工程、を含む。
【００２０】
本発明の目的であるこの方法により、式（Ｉ）の化合物を、様々なジスタマイシン誘導体の合成における有用な中間体として、穏和な条件のもとで、高収率かつ高純度で得ることができる。
【００２１】
さらに、本発明の方法により、いくつかの工程を行う必要がなく、かつ／または望ましくない副生成物をもたらし得る中間体のアミノ誘導体を単離する必要がなく上記化合物を合成することが可能になる。
【００２２】
本発明の好ましい実施形態によれば、本方法は、Ｒが下記式：
【００２３】
【化２５】
2004504378.tif 000009
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、水素、メチルおよびエチルから独自に選択される。さらにいっそう好ましくは、上記の基Ｒ１、基Ｒ２および基Ｒ３は、すべて水素原子である）
の基である式（Ｉ）の化合物の合成に有利に適用することができる。
【００２４】
本発明の方法の工程ａ）において、式（ＩＩ）の化合物は、市販されているジスタマイシンＡを、通常の塩基、例えば、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムの存在下で、好ましくは少し過剰な無水コハク酸で処理することにより得ることができる。
【００２５】
この反応は、有機溶媒、好ましくはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で、約２時間から約４８時間までの範囲の時間にわたって、約２０℃から約１００℃までの範囲の温度で行われる。
【００２６】
工程ｂ）において、式（ＩＩＩ）の化合物は、約２当量から約４当量までのジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で、式（ＩＩ）の化合物を約２当量から約４当量までのジ−ｔ−ブチルジカーボネートと反応させ、そして少し過剰な有機塩基、好ましくはトリエチルアミン（ＴＥＡ）と反応させることにより得ることができる。
【００２７】
上記の反応は、好ましくは、有機溶媒、例えばＤＭＦ中、約０℃から約３０℃までの範囲の温度で、約１時間から約２４時間までの時間にわたって行われる。
【００２８】
段階ｃ）において、式（ＩＶ）の化合物を得るための式（ＩＩＩ）の化合物の加水分解は、水／有機溶媒（ジオキサン、アセトニトリルまたは好ましくはテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）など）の混合物中において、塩基性条件下で、例えば、過剰の無機塩基、例えば水酸化ナトリウムまたは水酸化リチウムを用いて行われる。
【００２９】
反応温度は、約１時間から約２４時間の時間にわたって、約０℃から約７０℃まで変化させることができる。
【００３０】
工程ｄ）において、式（ＩＶ）の化合物と式（Ｖ）の化合物の間の反応は、例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド・塩酸塩（ＥＤＣＩ）、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム（ＢＯＰ）または好ましくはテトラフルオロホウ酸Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム（ＴＢＴＵ）などの好適なカップリング剤の存在下、有機塩基、例えば、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、ピリジンまたは好ましくはトリエチルアミン（ＴＥＡ）の存在下で、有機溶媒、好ましくはＤＭＦ中において行われる。
【００３１】
反応温度は、約５時間から約２４時間までの時間にわたって、約−２０℃から約４０℃まで変化させることができる。
【００３２】
工程ｅ）において、対応する式（Ｉ）の化合物を得るためのアミノ保護ｔ−ブトキシカルボニル基の除去は、有機化学では広く知られている従来の技術に従って行われる。一例として、上記脱保護反応は、ジクロロメタン、エタノールまたは好ましくはメタノールなどの有機溶媒中、約−２０℃から約４０℃までの範囲の温度において、酸性条件下で、例えば、塩酸またはトリフルオロ酢酸を用いて行うことができる。
【００３３】
上記のことから、上で示したような脱保護反応を例えば塩酸の存在下で行うことにより、塩酸との酸付加塩として対応する式（Ｉ）のアミノ誘導体が得られることは、当業者には明らかである。
【００３４】
同様に、所望されるいずれの目的に対しても、それ自体または酸付加塩のいずれかとしての式（Ｉ）の化合物は、従来の技術に従って対応するアミノ保護誘導体に適便に転換することができる。この分野において知られている好適なアミノ保護基は、例えば、ホルミル、ベンジルオキシカルボニルまたはｔ−ブトキシカルボニルである。
【００３５】
本発明の目的である上記方法の試薬のすべては、市販されているか、または既知の方法に従って容易に合成することができる。
【００３６】
一例として、Ｒが上記の意味を有する式（Ｖ）の化合物は、例えば、Ｊ．　Ａｍｅｒ．　Ｃｈｅｍ．　Ｓｏｃ．　８１、１９５９、４３２８；Ｊ．　Ｃｈｅｍ．　Ｓｏｃ．　１９６１、５１２０−５１２７；またはＣｈｅｍ．　Ｂｅｒ．　９７、１９６４、７０４−７０８に報告されるようにして合成することができる。
【００３７】
同様に、出発原料のジスタマイシンＡは、例えば、ＡｒｃａｍｏｎｅらによるＮａｔｕｒｅ　２０３、１０６４（１９６４）に記載されるような微生物学的プロセスに従って合成することができる。
【００３８】
上に記載したように、式（Ｉ）の化合物は、抗腫瘍活性を有するジスタマイシン誘導体を合成する際の有用な中間体である。
【００３９】
従って、本発明のさらなる目的は、下記式（ＶＩ）：
【００４０】
【化２６】
2004504378.tif 000010
（式中、
ｎは、１から４までの整数であり；
Ｒは、下記から成る群より選択され：
【００４１】
【化２７】
2004504378.tif 000011
これらの式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、水素、メチルおよびエチルから独自に選択され；
Ｒ４は、下記から成る群より選択され、
【００４２】
【化２８】
2004504378.tif 000012
これらの式中、
Ｒ５およびＲ６は、塩素原子または臭素原子であり；
Ｒ７は、水素、塩素または臭素であり；
ＸおよびＹは同一または異なって、窒素原子およびＣＨ基から選択され；
Ｗは、フェニレンであるか、またはＮ、ＯもしくはＳから選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を有するベンゾ縮合した５員複素環もしくは６員複素環であり、それらはともに、場合によって低級アルキル基によりさらに置換される）のジスタマイシン誘導体またはそれらの薬学的に許容される塩を合成するための方法である。この方法は、
ａ）下記式（ＩＩ）：
【００４３】
【化２９】
2004504378.tif 000013
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基の存在下で無水コハク酸と反応させる工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【００４４】
【化３０】
2004504378.tif 000014
（式中、Ｐは、ｔ−ブトキシカルボニルである）
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下でｔ−ブチルジカーボネートと反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）：
【００４５】
【化３１】
2004504378.tif 000015
（式中、Ｐは、上記に示される意味を有する）
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｂ）好適なカップリング剤の存在下で、式（ＩＶ）の化合物を下記式（Ｖ）：
【００４６】
【化３２】
2004504378.tif 000016
（式中、ｎおよびＲは、上記に示される意味を有する）
の化合物と反応させる工程；
ｅ）下記式（Ｉ）：
【００４７】
【化３３】
2004504378.tif 000017
（式中、ｎおよびＲは、上記に示される意味を有する）
の遊離アミノ誘導体が得られるように、得られた化合物を脱保護する工程；および
ｆ）式（ＶＩ）の化合物が得られるように、式（Ｉ）の化合物を下記式：
Ｒ４−ＣＯＺ　（ＶＩＩ）
（式中、Ｒ４は、上記に示される意味を有し、Ｚは、ヒドロキシまたは好適な脱離基である）
のカルボン酸誘導体でアシル化し、そして所望であれば、式（ＶＩ）の化合物をその薬学的に許容される塩に転換する工程、を含む。
【００４８】
式（Ｉ）の化合物と式（ＶＩＩ）の化合物との工程ｆ）によるアシル化反応は、従来の技術に従って行われる。
【００４９】
一例として、式（Ｉ）の化合物と、Ｚがヒドロキシである式（ＶＩＩ）の化合物との反応は、好ましくは、有機溶媒、例えばジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、エタノール、ベンゼンまたはピリジン中において、有機塩基または無機塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムもしくは重炭酸カリウムの存在下および縮合剤、例えば、Ｎ−エチル−Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび／またはヒドロキシベンゾトリアゾール水和物の存在下で行われる。
【００５０】
反応温度は、約１時間から約２４時間までの時間にわたって、約−１０℃から約１００℃まで変化させることができる。
【００５１】
Ｚがハロゲン原子、好ましくは臭素または塩素である式（ＶＩＩ）の化合物が使用されるときには、類似した操作条件が適用される。
【００５２】
この反応は、具体的には、ジメチルホルムアミド、ジオキサン、ピリジン、ベンゼン、テトラヒドロフランなどの有機溶媒またはその水性混和物中において、場合によって塩基の存在下で行われる。
【００５３】
反応は、約０℃から約１００℃までの範囲の温度で、約２時間から約４８時間までの範囲の時間にわたって行われる。
【００５４】
式（ＶＩ）の化合物をその薬学的に許容される塩へと場合によって転換するには、従来の方法を用いることができる。
【００５５】
式（ＶＩ）の化合物の薬学的に許容される塩の例は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、マロン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびこれらに類するものなどの薬学的に許容される無機酸または有機酸との塩である。
【００５６】
式（ＶＩＩ）の中間体化合物は既知であるか、または例えば、上記特許出願に報告されるような既知の方法に従って容易に合成される。
【００５７】
本発明のこの後者の局面によれば、そのようにして合成され得る好ましいジスタマイシン誘導体は、Ｒが、下記式：
【００５８】
【化３４】
2004504378.tif 000018
（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、水素、メチルまたはエチルから選択され；
Ｒ４は、下記式のα−ブロモアクリロイル部分またはα−クロロアクリロイル部分である：
【００５９】
【化３５】
2004504378.tif 000019
この式中、
Ｒ５は、塩素原子または臭素原子であり；
ＸおよびＹは同一または異なって、窒素原子またはＣＨ基から選択される）の基を表すものである。
【００６０】
本発明の目的であるこの方法に従って合成され得る式（Ｉ）のジスタマイシン誘導体の中で、上記Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミドは、特に好ましい。
【００６１】
それを合成するための本発明の好ましい実施形態によれば、対応する式（ＩＩ）の誘導体が得られるように、適正な量のジスタマイシンＡを塩基性条件下で少し過剰な無水コハク酸と反応させ、その後、これを、適正な量のジメチルアミノピリジンの存在下で適正な量のジ−ｔ−ブチルジカーボネートと反応させる。
【００６２】
好ましくは、上記反応において、２当量から４当量までのジ−ｔ−ブチルジカーボネートおよび２当量から４当量までのジメチルアミノピリジンが用いられる。
【００６３】
そのようにして得られた式（ＩＩＩ）の化合物を、その後、塩基性条件下で加水分解し、続いて、適正な量の式（Ｖ）のＮ−（２−アミノエチル）グアニジンと反応させる。
【００６４】
得られた化合物を、さらに、従来の技術に従って、例えば塩酸の存在下で脱保護することにより、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３がすべて水素原子である、所望するグアニジノ末端基を有する対応する式（Ｉ）のピロールアミド骨格を生じる。
【００６５】
その後、所望する化合物が得られるように、式（Ｉ）の化合物を、好適な量、例えば（Ｉ）：（ＶＩＩ）のモル比が１：１〜１：２で、式（ＶＩＩ）の１−メチル−４−（α−ブロモアクリロイルアミド）ピロール−２−カルボニルクロリドと反応させる。
【００６６】
何ら限定することなく本発明を説明するために、下記の実施例を本明細書に示す。
【００６７】
実施例１
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−シアノエチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−ホルミル−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミドの合成
ＤＭＦ（２４０ｍＬ）中のジスタマイシンＡ（１２．０ｇ）の溶液に無水コハク酸（５．８ｇ）およびＮａ２ＣＯ３（８．０ｇ）を加えた。その懸濁液を７０℃に温め、４時間攪拌した。有機溶媒を真空下で除き、残留物を水（６０ｍＬ）で処理し、懸濁液を一晩５℃で冷却した。その後、懸濁液を真空下で濾過して、４０℃で真空乾燥した後、表題化合物（９．４ｇ；収率８７％）を淡褐色の粉末として得た。
【００６８】
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ４６５（１００，［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．０５（ｓ，１Ｈ），９．９５（ｓ，２Ｈ），８．２５（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．４２−３．２８（ｍ，２Ｈ），２．７５−２．６８（ｍ，２Ｈ）。
【００６９】
実施例２
５−｛［（５−｛［（５−｛［（ｔ−ブトキシカルボニル）（２−シアノエチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル（ホルミル）カルバミン酸ｔ−ブチルの合成
５℃に冷却した乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の実施例１に従って合成した化合物（４．６４ｇ）の溶液に、ジ−ｔ−ブチルジカーボネート（８．７３ｇ）、ＴＥＡ（２．７８ｍＬ）およびＤＭＡＰ（２．４４ｇ）を加えた。その溶液を５時間攪拌し、その後、有機溶媒を真空下で除いた。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル＝６：４）により精製して、表題化合物（２．６１ｇ；収率４０％）をベージュ色の粉末として得た。
【００７０】
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ６６５（１００，［Ｍ＋Ｈ］＋）；５６５（２０）；４６５（５５）
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．９７（ｓ，１Ｈ），９．８９（ｓ，１Ｈ），９．２５（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８７（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｍ，２Ｈ），２．４５（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．２７（ｓ，９Ｈ）。
【００７１】
実施例３
４−［（｛４−［（｛４−［（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸の合成
ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の実施例２に従って合成した化合物（３．３ｇ）の溶液に、ＬｉＯＨの１Ｎ溶液（３ｍＬ）を加えた。その溶液を室温で２４時間攪拌し、その後、真空下で有機溶媒を除き、残留物を水（２００ｍＬ）で処理し、その後、酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。水性相を１０％酢酸で酸性化し、その懸濁液を真空下で濾過し、得られた白色の固体を水（２０ｍＬ）で洗浄した。４０℃、真空下で乾燥させた後、表題化合物（１．２ｇ；収率５０％）を象牙色の粉末として得た。
【００７２】
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ４８５（１００，［Ｍ＋Ｈ］＋）；４９１（７０）；３８５（３０）
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．８３（ｓ，２Ｈ），９．０６（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
【００７３】
実施例４
５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル−カルバミン酸ｔ−ブチル＝塩酸塩の合成
乾燥ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の実施例３に従って合成した化合物（２ｇ）の溶液に、ＴＥＡ（０．６ｍＬ）、ＴＢＴＵ（１．３２ｇ）およびＮ−（２−アミノエチル）グアニジン（０．８０ｇ）を加え、その溶液を室温で２４時間攪拌した。真空下で溶媒を除き、残留物を水で処理し、その懸濁液を真空下で濾過して、表題化合物（１．５ｇ；収率６０％）をゴム状の固体として得た。
【００７４】
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ５６９（１００，［Ｍ＋Ｈ］＋）；４６９（２５）
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．８８（ｓ，１Ｈ），９．８３（ｓ，１Ｈ），９．０６（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．４０−３．２０（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
【００７５】
実施例５
４−アミノ−Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド＝二塩酸塩［式（Ｉ）の化合物］の合成
実施例４に従って合成した化合物（１．５ｇ）をＨＣｌ／ＥｔＯＨ溶液（２０ｍＬ）に溶解し、室温で１２時間攪拌した。真空下で溶媒を蒸発させて、表題化合物（１．１ｇ；収率９０％）を褐色の粉末として得た。
【００７６】
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ４６９（１５，［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．３８−１０．１１（ｂｓ，４Ｈ），９．９８（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｂｓ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｂｓ，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０−７．００（ｂｓ，４Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．２８（ｍ，４Ｈ）。
【００７７】
実施例６
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド［化合物ＰＮＵ　１６６１９６］の合成
３０ｍＬのベンゼン中の、国際特許出願公開ＷＯ９８／０４５２４に報告されるようにして合成した５００ｍｇの１−メチル−４−（α−ブロモアクリルアミド）ピロール−２−カルボキシルクロリドの溶液を、１０ｍＬのＨ２Ｏ中の実施例５に従って合成した化合物（５００ｍｇ）と１６４ｍｇのＮａＨＣＯ３の溶液に加えた。その溶液を８時間、室温で激しく攪拌し、その後、真空下で蒸発させた。その粗残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝８／２）により精製して、４４０ｍｇの表題化合物を黄色の固体として得た。
【００７８】
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ７２３（３２，［Ｍ＋Ｈ］＋）
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．３０（ｓ，１Ｈ），９．９５（ｓ，１Ｈ），９．９２（ｓ，１Ｈ），９．９０（ｓ，１Ｈ），８．１０（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２（ｂｓ，４Ｈ），６．９−７．３（ｍ，８Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），６．２１（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．３０（ｂｓ，４Ｈ）。
【国際公開パンフレット】
2004504378.tif 000037
2004504378.tif 000038
2004504378.tif 000039
2004504378.tif 000040
2004504378.tif 000041
2004504378.tif 000042
2004504378.tif 000043
2004504378.tif 000044
2004504378.tif 000045
2004504378.tif 000046
2004504378.tif 000047
2004504378.tif 000048
2004504378.tif 000049
2004504378.tif 000050
2004504378.tif 000051
2004504378.tif 000052
2004504378.tif 000053
2004504378.tif 000054
2004504378.tif 000055
2004504378.tif 000056
2004504378.tif 000057
2004504378.tif 000058
2004504378.tif 000059
2004504378.tif 000060
2004504378.tif 000061
2004504378.tif 000062
2004504378.tif 000063
【国際調査報告】
2004504378.tif 000064
2004504378.tif 000065
2004504378.tif 000066