(57)【要約】【解決手段】下記一般式（Ｉ）：【化１】2004538292.tif 000015（Ｒ1 は水素原子又はＣ1−Ｃ6 のアルキル基などを表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基又はＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含み、ナトリウム・カルシウム交換系を阻害する医薬。臨床で起こる虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた、非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム蓄積の抑制に有用である。
2004538292.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）
【化１】
2004538292.tif 000014
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリ−ル基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す）
で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含むナトリウム・カルシウム交換系を阻害する医薬。
【請求項２】
虚血・再灌流障害の治療及び／又は予防のための請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
虚血・再灌流障害により誘発した心筋カルシウム含量の増加を抑制するための請求項１又は２に記載の医薬。
【請求項４】
虚血・再灌流に心筋ナトリウム含量の増加を組み合わせた状態で起こる心筋カルシウム含量の増加を抑制するための請求項１から３のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項５】
Ｒ1の置換位置が５位である請求項１から４のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項６】
ｎが２である請求項１から５のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項７】
Ｒ2が水素原子、Ｃ1−Ｃ3のアルキル基、又は、Ｃ1−Ｃ3のアルキル基、Ｃ1−Ｃ3のアルコキシ基、及びハロゲン原子からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基である請求項１から６のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項８】
Ｒ2が水素原子及びＣ1−Ｃ3のアルコキシ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基である請求項１から７のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項９】
Ｒ2が水素原子である請求項１から８のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１０】
Ｒ1が水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ5−Ｃ6のシクロアルキル基、トリフルオロメチル基、ハロゲン原子、又はフェニル基である請求項１から９のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１１】
Ｒ1がＣ1−Ｃ3のアルキル基、シクロヘキシル基、トリフルオロメチル基、塩素原子、臭素原子、又はフェニル基である請求項１から１０のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１２】
Ｒ1がメチル基又はプロピル基である請求項１から１１のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１３】
有効成分が、下記の化合物：
５−メチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−トリフルオロメチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−フェニル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−クロロ−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ブロモ−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−iso−プロピル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−シクロヘキシル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−（１−ホモピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−[４−（２，３，４−トリメトキシベンジル）−１−ピペラジニル]ベンゼンスルホン酸；及び
５−ｎ−プロピル−２−[４−（３，４−ジメトキシベンジル）−１−ピペラジニル]ベンゼンスルホン酸
からなる群から選ばれる化合物及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質である請求項１から４のいずれか１項に記載の医薬。
【請求項１４】
有効成分が、下記化合物：
５−メチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；及び
５−ｎ−プロピル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸
からなる群から選ばれる化合物及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質である請求項１３に記載の医薬。
【請求項１５】
有効成分が、５−メチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸  一水和物である請求項１から１４のいずれか１項に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナトリウム・カルシウム交換系を阻害する医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
心筋梗塞や狭心症などの虚血性心疾患では一定時間の冠動脈血流遮断と再開通療法に伴う冠動脈血流の再開が起こる。再開通に伴って心筋の細胞外より細胞内にカルシウムイオンの急激な流入がおこり、引き続いてカルシウム依存性プロテア−ゼの活性化、カルシウム依存性脂質分解酵素の活性化、エネルギ−産生低下など、カルシウム依存性の様々な反応を介して不可逆性の心筋障害を引き起こすことが知られている。このカルシウム流入は、虚血中に細胞内に蓄積したプロトンの細胞外洗い流しに共役してナトリウム・プロトン交換系を介して起こる細胞内へのナトリウム流入、及び細胞内ナトリウムの細胞外への洗い流しに共役してナトリウム・カルシウム交換系を介して起こる細胞内へのカルシウム流入によると考えられている。
【０００３】
臨床で起こる虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた、非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム蓄積を抑制する薬物は、本発明者の知る限り現在のところ知られていない。
【０００４】
ところで、心筋又は血管平滑筋の細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有するアミノベンゼンスルホン酸誘導体が知られている（特開平3−7263号公報）。これらの化合物については、β受容体刺激剤様の作用、β受容体遮断剤様の作用、又はカルシウムチャネル拮抗剤様の作用を有さずに心筋障害、心臓刺激伝導障害等を抑制又は軽減し、虚血性心疾患、心不全、高血圧あるいは不整脈等に対して有用な予防又は治療剤となりうることが知られている（特開平3−7263号公報及び特開平4−139127号公報）。また、特開平10−298077号公報には、同化合物が心筋症病態下における心機能低下を顕著に改善する作用を有するとともに、突発性の心筋症において長期的に生存率を改善し、延命させる効果を有することが開示されており、さらに、国際公開公報WO99/40919号には、同化合物が心筋筋小胞体におけるカルシウムイオン取り込み促進作用を有し、心拡張障害の治療又は予防に有用であることが開示されている。
【０００５】
しかしながら、これらの刊行物には、同化合物が、臨床で起こる虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた、非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム蓄積を抑制するかについては全く記載されていない。すなわち、同化合物が、虚血・再灌流に伴う心筋カルシウム含量の増加（カルシウム・オ−バ−ロ−ド）を抑制することは既に知られているが、上記のような障害性の強い条件でもカルシウム増加を抑制するか否かについてはこれまでのところ知られていないのが現状であった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、臨床で起こる虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた、非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム蓄積を抑制する医薬を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意努力した結果、特定のアミノベンゼンスルホン酸誘導体若しくはその塩、又はそれらの水和物若しくはそれらの溶媒和物が、ナトリウム・カルシウム交換系阻害作用を有していること、及び、その作用に基づいて、臨床で起こる虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム蓄積を抑制することを見い出した。
【０００８】
すなわち、本発明は、下記一般式（Ｉ）：
【化１】
2004538292.tif 000003
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリ−ル基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す）
で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含み、ナトリウム・カルシウム交換系を阻害する医薬を提供するものである。
【０００９】
本発明の好ましい態様として、虚血・再灌流障害の治療及び／又は予防のための上記医薬；虚血・再灌流障害により誘発した心筋カルシウム含量の増加を抑制するための上記医薬；並びに、虚血・再灌流に心筋ナトリウム含量の増加を組み合わせた状態で起こる心筋カルシウム含量の増加を抑制するための上記医薬が提供される。
【００１０】
別の観点からは、本発明により、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質を含むナトリウム・カルシウム交換系阻害剤が提供される。
【００１１】
さらに別の観点からは、本発明により、上記の医薬の製造のための上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質の使用が提供される。
【００１２】
また、本発明により、
ナトリウム・カルシウム交換系を阻害する方法であって、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質の有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法；
【００１３】
虚血・再灌流障害の治療及び／又は予防方法であって、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質の治療及び／又は予防有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法；
【００１４】
虚血・再灌流障害により誘発した心筋カルシウム含量の増加を抑制する方法であって、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質の有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法；並びに、
【００１５】
虚血・再灌流に心筋ナトリウム含量の増加を組み合わせた状態で起こる心筋カルシウム含量の増加を抑制する方法であって、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質の有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法
が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明の医薬は、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質を有効成分として含み、ナトリウム・カルシウム交換系阻害作用を有する。以下の実施例に示すように、本発明の医薬は、臨床で起こる虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム含量の増加の抑制に有効である。
【００１７】
虚血・再灌流に伴う心筋障害の程度は虚血時間に依存している。すなわち、虚血時間が長くなれば長くなるほど、多量のプロトンが代謝産物として心筋細胞内に蓄積するため、それと交換にナトリウム・プロトン交換系を介して多量のナトリウムが心筋細胞内に流入し、引き続いて細胞内に増加したナトリウムと交換にナトリウム・カルシウム交換系を介してより多量のカルシウムが心筋細胞内に流入する。本発明の医薬は、ナトリウム・カルシウム交換系の抑制作用により、虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム蓄積を抑制することができる。この作用に基づいて、本発明の医薬は、虚血性心臓発作後病院への患者搬送に時間がかかったり、再開通療法が不成功であったなどの理由により虚血時間が長引いた場合にでも、心筋障害を効果的に抑制することができる。
【００１８】
本発明の医薬の有効成分としては、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質が挙げられる。
【００１９】
上記一般式（Ｉ）中、Ｒ1 で定義されるＣ1−Ｃ6のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、 tert−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、 tert−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基等が挙げられる。Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基等が挙げられる。Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基としては、例えば、トリフルオロメチル基、トリフルオロエチル基、ペンタフルオロエチル基等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子等が挙げられる。Ｃ6−Ｃ12のアリ−ル基としては、例えば、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。
【００２０】
Ｒ1の好ましい例として、水素原子、Ｃ1−Ｃ6のアルキル基、Ｃ5−Ｃ6のシクロアルキル基、トリフルオロメチル基、ハロゲン原子又はフェニル基が挙げられ、さらに好ましい例として、Ｃ1−Ｃ3のアルキル基、シクロヘキシル基、トリフルオロメチル基、塩素原子、臭素原子又はフェニル基が挙げられ、特にメチル基又はプロピル基であることが好ましい。
【００２１】
Ｒ2 で定義されるＣ1−Ｃ6 のアルキル基としては、例えば、上記Ｒ1で定義したようなアルキル基が挙げられる。Ｃ7−Ｃ12のアラルキル基としては、例えば、ベンジル基、フェネチル基、ナフチルメチル基等が挙げられる。このアラルキル基は、シアノ基；ニトロ基；メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、 tert−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、 tert−ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基等のＣ1−Ｃ6 のアルコキシ基；上記Ｒ1で定義したようなハロゲン原子；上記Ｒ1で定義したようなアルキル基；及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２個以上の置換基を有していてもよい。
【００２２】
Ｒ2の好ましい例としては、水素原子、Ｃ1−Ｃ3のアルキル基、並びに、Ｃ1−Ｃ3のアルキル基、Ｃ1−Ｃ3のアルコキシ基及びハロゲン原子から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基が挙げられ、さらに好ましい例としては、水素原子、又はＣ1−Ｃ3のアルコキシ基から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基が挙げられる。特に、Ｒ2が水素原子であることが好ましい。
【００２３】
また、上記一般式（Ｉ）中、ｎとしては２であることが好ましい。
なお、本発明の医薬の有効成分として好適な上記一般式（Ｉ）で表される化合物の具体例としては、下記表１及び表２に示す化合物を挙げることができる。
【００２４】
【表１】
2004538292.tif 000004
【００２５】
【表２】
2004538292.tif 000005
【００２６】
【表３】
2004538292.tif 000006
【００２７】
【表４】
2004538292.tif 000007
【００２８】
【表５】
2004538292.tif 000008
【００２９】
【表６】
2004538292.tif 000009
【００３０】
【表７】
2004538292.tif 000010
【００３１】
【表８】
2004538292.tif 000011
【００３２】
【表９】
2004538292.tif 000012
【００３３】
上記表１及び表２中、Ｒ1の置換位置が５位である化合物が好ましく、さらに好適な化合物としては以下の化合物が挙げられる。
５−メチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−トリフルオロメチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−フェニル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−クロロ−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ブロモ−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−iso−プロピル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−シクロヘキシル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−（１−ホモピペラジニル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−[４−（２，３，４−トリメトキシベンジル）−１−ピペラジニル]ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−[４−（３，４−ジメトキシベンジル）−１−ピペラジニル]ベンゼンスルホン酸
【００３４】
なお、上記の化合物のうち、特に好ましい例としては、５−メチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸及び５−ｎ−プロピル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸が挙げられる。
【００３５】
また上記で挙げた化合物の薬学的に許容されうる塩類も本発明の医薬の有効成分として使用できる。上記化合物の塩類としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、アルミニウム塩等のアルカリ金属塩又はアルカリ土類金属塩；アンモニウム塩、トリエチルアミン塩等の低級アルキルアミン塩、２−ヒドロキシエチルアミン塩、ビス−（２−ヒドロキシエチル）アミン塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩等のヒドロキシ低級アルキルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩等のシクロアルキルアミン塩、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン塩等のベンジルアミン塩、ジベンジルアミン塩等のアミン塩；塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩；又は、フマル酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩等の有機酸塩等が挙げられる。
【００３６】
なお、遊離形態の化合物又は塩のほか、これらの任意の水和物あるいは溶媒和物を本発明の医薬の有効成分として用いてもよい。上記化合物の溶媒和物を形成しうる溶媒としては、例えば、メタノ−ル、エタノ−ル、イソプロピルアルコ−ル、アセトン、酢酸エチル、塩化メチレン等が挙げられる。
本発明の医薬の有効成分としては、５−メチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸・一水和物が最も好ましい。
【００３７】
上記一般式（Ｉ）で示されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体は公知の化合物であり、例えば日本国特開平３−７２６３号公報、及び同特開平９−２２１４７９号公報、欧州特許出願公開公報３９０６５４号、及び同７７９２８３号、並びに、米国特許第５０５３４０９号明細書、及び同５９９０１１３号明細書等に記載の方法により容易に合成することができ、当業者が容易に入手することができる化合物である。
【００３８】
本発明の医薬としては、上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質をそのまま投与してもよいが、有効成分である上記物質と１又は２種以上の製剤用添加物とを含む医薬組成物を調製して投与してもよい。
本発明の医薬は、ヒトを含む哺乳類動物に経口的又は非経口的に投与される。経口投与に適する医薬組成物の形態としては、顆粒剤、細粒剤、散剤、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤又は液剤等が挙げられる。また、非経口投与に適する医薬組成物の形態としては、注射剤、坐剤、経皮剤等が挙げられる。
【００３９】
上記医薬組成物の製造には、例えば、固体若しくは液体の医薬用担体、又は賦形剤、安定剤、潤滑剤、甘味剤、保存剤、若しくは懸濁化剤等の通常用いられる製剤用添加物を用いることができる。製剤用添加物に対する有効成分の割合は特に限定されないが、例えば１重量％−９０重量％の範囲が好ましい。
固体の製剤用添加物の例としては、例えば、乳糖、白陶土、ショ糖、結晶セルロ−ス、コ−ンスタ−チ、タルク、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウム等が挙げられる。液状担体の例としては、シロップ、グリセリン、落花生油、ポリビニルピロリドン、オリ−ブ油、エタノ−ル、ベンジルアルコ−ル、プロピレングリコ−ル、水等が挙げられる。
【００４０】
本発明の医薬の投与量は、治療や予防の目的、治療又は予防すべき疾患の種類、患者の症状、体重、年齢や性別、有効成分である上記物質の種類等に応じて適宜決定することができる。例えば、上記一般式（Ｉ）で表される化合物の重量として、通常の場合、成人一日あたり経口投与により０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇ程度を投与することができる。このような投与量を１日あたり１〜数回に分けて投与するのが望ましい。
【実施例】
【００４１】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されるものではない。
なお、以下の実施例では、本発明の医薬の有効成分として５−メチル−２−（１−ピペラジニル）ベンゼンスルホン酸・一水和物を用いた（以下、「本発明医薬」と呼ぶ。）。この物質は、特開平９−２２１４７９号公報の例１に記載の方法に従って製造した。
【００４２】
実施例１
（実験方法）
ラットの心臓を摘出し、ランゲンドルフ法に従ってKrebs Buffer (in mM; NaCl 119, KCl 4.6, MgSO4・7H2O 1.2, CaCl2・2H2O 1.3, NaHCO3 25, KH2PO4 1.2, glucose 11; pH 7.4, 37(C)で灌流した。心尖に糸を縫いつけ、その端を張力トランスデュ−サ−に接続して収縮張力を測定した。モネンシン（5μM；ナトリウム・イオノフォア）を含む灌流液で１０分間灌流した後、冠灌流量を０にして虚血を誘発した（１５分間）。再灌流３０分後に心臓を硝酸中で融解し、原子吸光分析により心室の総カルシウム含量を測定した。実験の間中収縮張力を測定し、実験開始時の収縮張力に対する、再灌流３０分後の時点での収縮張力の回復率を心臓収縮性の指標として用いた。
【００４３】
（結果）
結果を下記表３に示す。表中、＊＊は、対照に対するDunnettの多重比較検定によるＰが０．０１未満、＊＊＊は対照に対するDunnettの多重比較検定によるＰが０．００１未満を示す。
モネンシン処理と虚血・再灌流の組み合わせた心臓（対照）においては、正常灌流心臓（正常）と比べて心室総カルシウム含量の増加と収縮張力回復率の低下が観察された。ここで増加したカルシウム含量は細胞内ナトリウム依存性であることより、ナトリウム・カルシウム交換系を介して流入したものであると考えられた。また、収縮張力回復率の低下は、モネンシンが無い条件では小さいことから、カルシウム含量増加と関連した変化であると考えられた。本発明医薬は、モネンシン処理及び虚血再灌流により引き起こされた心室カルシウム含量増加並びに収縮張力回復率低下を改善した。Diltiazem（カルシウム拮抗薬、シグマ社より購入）及びAmiloride（ナトリウム・プロトン交換系阻害薬、シグマ社より購入）はこれらの作用を示さなかった。
【００４４】
【表１０】
2004538292.tif 000013
【００４５】
上記の結果より、本発明の医薬は、ナトリウム・カルシウム交換系の阻害により、ナトリウム負荷並びに虚血・再灌流により誘発した心筋カルシウム含量増加の抑制に有効であることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明によれば、ナトリウム・カルシウム交換系を阻害する新しいタイプの医薬が提供される。本発明の医薬は、臨床で起こる虚血・再灌流に細胞内ナトリウム増加を組み合わせた、非常に障害の強い条件で起こる細胞内カルシウム蓄積の抑制に有効である。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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