(57)【要約】一日の正常および異常コルチゾール分泌パターンが人間の唾液標本からインビトロ法により識別される。同日の第１および第２所定時刻に一人の個人から第１および第２唾液標本が採られる。第１唾液標本で第１コルチゾール濃縮が決定され、第２唾液標本で第２コルチゾール濃縮が決定される。それから、ファジー論理アルゴリズムにより、異常分泌パターンが正常分泌パターンに比較される。それから個人について、視床下部−下垂体−副腎（ＨＰＡ）軸の機能が決定される。オプションとして、標本の１つからテストステロン水準が決定され、コルチゾール濃縮と組合わせて使用されて、洗練された決定を供給する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
人間の唾液標本から一日の正常および異常コルチゾール分泌パターンとテストステロンの水準を識別するインビトロ（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）法において、第１および第２の唾液標本が一個人から同一日の所定の第１および第２時間に取られ、前記第１唾液標本において第１コルチゾール濃縮が決定され、また前記第２唾液標本において第２コルチゾール濃縮が決定され、
第１変数と第２変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）を供給するステップと、
前記第１および第２のコルチゾール濃縮に関連する前記第１および第２の変数へ値を割り当てるステップと、
各変数へ一組の所定定数（アルファ、ベータ、ガンマ）を供給することと、
前記変数が前記所定定数に関して高い値を有する次数を表現する第１ファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ）を、各変数について計算するステップと、
前記変数が前記所定定数に関して低い値を有する次数を表現する第２ファジー論理指数（ｌｏｗ＿ｉｎｄ）を、各変数について計算するステップと、
前記第１および第２変数について計算される前記第１および第２ファジー論理指数の種々の組合せを、一日の正常コルチゾール分泌パターン（ｎｏｒｍａｌ  ｄｉｕｒｎａｌ  ｃｏｒｔｉｓｏｌ  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ｐａｔｔｅｒｎ）および少なくとも１つの一日の異常コルチゾール分泌パターンの所定定義と一致させるステップと、
最良の一致が起こる前記定義を選択するステップを含む前記インビトロ法。
【請求項２】
前記決定された第１濃縮と第２濃縮の間の差として前記第１変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ）が計算され、また前記決定された第１濃縮と第２濃縮の算術平均として前記第２変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）が計算される請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記第１および第２のファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ、ｌｏｗ＿ｉｎｄ）が０．０と１．０の間の十進数値である請求項１または請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記一組の所定定数（アルファ、ベータ、ガンマ）が３つの定数を含み、前記第１および第２の変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）の各々についての第１ファジー論理指数は、
前記変数が前記一組の所定定数における第１定数（アルファ）と等しいかまたはより小さい場合は０．０にセットされ、
前記変数が前記一組の所定定数における第３定数（ガンマ）よりも大きい場合は１．０にセットされ、
前記変数が前記一組の所定定数における第１定数（アルファ）よりも大きいかまたは第２定数（ベータ）に等しい場合は０．０と０．５の間の値にセットされ、
前記変数が第２定数（ベータ）よりも大きくて第３定数（ガンマ）よりも小さい場合は０．５と１．０の間の値にセットされる請求項１、請求項２または請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記第２ファジー論理指数（ｌｏｗ＿ｉｎｄ）が前記第１ファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ）の補数として計算される請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記選択された一日のコルチゾール分泌パターン定義に応答して前記個人についてＨＰＡ（視床下部−下垂体−副腎）軸の機能を決定する追加のステップを含み、前記機能が、正常ＨＰＡ機能、活性ＨＰＡ機能、鈍化ＨＰＡ機能のうちの１つを含む請求項１ないし請求項５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記第１および第２の唾液標本の少なくとも１つにおいてテストステロンの水準を評価するステップと、
前記視床下部−下垂体−副腎（ＨＰＡ）軸を決定するときに前記テストステロン評価の前記結果を使用するステップを更に含む請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記選択された一日のコルチゾール分泌パターン定義に基づいて前記個人について健康障害の危険を予告するステップを更に含む請求項１ないし請求項７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記同一日の間の前記第１および第２所定時刻の間の差が４時間である請求項１ないし請求項８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記同一日の間の前記第１所定時刻が午前７時００分であり、また前記第２所定時刻が午前１１時００分である請求項９記載の方法。
【請求項１１】
コンピュータ（２０）の内部メモリ（２２）へ直接にロードできるコンピュータ・プログラム製品であって、前記コンピュータ上で実行されるときに、請求項１ないし請求項８のいずれかのステップを遂行するプログラム・コードを含む前記コンピュータ・プログラム製品。
【請求項１２】
コンピュータ読み取り可能な媒体（２３）上で実施される請求項９に定義されるコンピュータ・プログラム製品。
【請求項１３】
メモリ（２２）とプロセッサ（２１）を有するコンピュータであって、前記プロセッサにより実行されるときに請求項１ないし請求項８のいずれかのステップを遂行するプログラム・コードを前記メモリが含む前記コンピュータ。
【請求項１４】
人の唾液標本から一日のコルチゾール分泌パターンのリモート・テストと評価をする方法であって、
クライアント・コンピュータ（３１）を使用して一日のコルチゾール分泌唾液テストをユーザ（３０）がそこから発注できるサーバ・コンピュータ（２７）を供給するステップと、
前記ユーザからオーダーを受信するのに応答して、前記ユーザへテスト・キットをディスパッチし、同じ日の第１および第２の所定時刻に前記ユーザから採られた唾液の第１および第２の標本を受信するように前記テスト・キットが適合されるステップと、
前記第１および第２の唾液標本に基づいて、一日の正常および異常コルチゾール分泌パターンの間を区別できるコンピュータ・プログラムを有するコンピュータ（２０）を供給するステップと、
前記コンピュータ・プログラムの実行からの出力をデータベース（２４）内に記憶するステップと、
前記データベース（２４）に結合され、前記データベース（２４）内に記憶された前記出力に関連するテスト結果を前記ユーザ（３０）へ提示するように適合されたサーバ・コンピュータ（２７）を供給するステップを特徴とする前記方法。
【請求項１５】
実行に際して前記コンピュータ・プログラムが、
第１および第２の変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）を供給するステップと、
前記第１および第２の唾液標本における前記コルチゾール濃縮に関連する前記第１および第２の変数へ値を割り当てるステップと、
各変数について１組の所定定数（アルファ、ベータ、ガンマ）を供給するステップと、
各変数について第１ファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ）を計算して、前記あらかじめ定義された定数に関して高い値を前記変数が有する次数を表現するステップと、
各変数について第２ファジー論理指数（ｌｏｗ＿ｉｎｄ）を計算して、前記あらかじめ定義された定数に関して低い値を前記変数が有する次数を表現するステップと、
前記第１および第２の変数について計算された前記第１および第２のファジー論理指数の種々の組合せを、一日の正常コルチゾール分泌パターンおよび少なくとも１つの一日の異常コルチゾール分泌パターンの所定定義と一致させるステップと、
前記出力として、最良の対応が起きる前記定義を選択するステップを遂行するように適合された請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記テスト結果が、前記ユーザ（３０）について正常ＨＰＡ（視床下部−下垂体−副腎）軸機能、前記ユーザ（３０）について活性ＨＰＡ軸機能、および前記ユーザ（３０）について鈍化ＨＰＡ軸機能のうちの１つである請求項１４または請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記コンピュータ・プログラムが更に前記第１および第２の唾液標本の少なくとも１つにおいてテストステロンの水準を評価できる請求項１６記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、人間の唾液標本から正常および異常一日コルチゾール分泌パターンおよびテストステロンの水準を識別して、これにより個体における視床下部−下垂体−副腎（ＨＰＡ）軸の機能を決定することに関する。
【０００２】
（背景技術）
視床下部は、たとえば外部ストレスに対する身体的反応、体重（特に代謝的に好ましくない腹部肥満）、睡眠・覚醒サイクルおよび気分変動に関するいくつかの重要な制御機能を有する脳の小さな中心部である。図１に示すように、中枢神経組織の一部として視床下部２は下垂体３に接続されて、この内分泌腺からの種々のホルモンの分泌を制御する。これらのホルモンの１つはＡＣＴＨ（副腎皮質刺激ホルモン）であって、その分泌は図１の参照番号７で示すように、視床下部２からの副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン（ＣＲＨ）の分泌を通じて活性化される。応答として、これは副腎５の皮質からストレス関連ホルモン・コルチゾール６の分泌を活発にする（図１の参照番号８と９を見よ）。
【０００３】
コルチゾール６は血流中を循環して、脳の他の小部分、海馬４内で、糖質コルチコイド受容器（ＧＲ）など特定の受容器を活性化する。この活性化は図１に１０で示され、ＡＣＴＨ（参照番号１１）とともにＣＲＨ（参照番号１２）の放出の抑制へ導く。こうして帰還ループが確立され、これがコルチゾールの血液濃縮を制御する。
【０００４】
医学文献で一般に視床下部−下垂体−副腎（ＨＰＡ）軸と呼ばれる上記諸機能の共同作業は、人体の定常状態維持のために重要な仕組みを構成する。この仕組みにおける障害は、インシュリン抵抗性の増加および腹部肥満のような、代謝合併症へ導くことが示されてきた。これらの代謝異常は、工業化された諸国における主要な死亡原因である心臓血管病の危険に関係がある。上記に関する考察が、「インシュリン抵抗性の原因としての神経性内分泌混乱」、糖尿病／代謝研究調査、１９９９年、１５、４２７頁−４４１頁、筆者ビョルントルプ  Ｐ．（Ｂｊｏｒｎｔｏｒｐ  Ｐ．）に見出される。一層詳細な説明が、「代謝性症候群における精神神経性内分泌の諸側面」ＩＳＢＮ  ９１−６２８−３１９５−Ｘ、筆者ロズモンド  Ｒ．（Ｒｏｓｍｏｎｄ  Ｒ．）、イェーテボリ大学（Ｇｏｔｅｂｏｒｇ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、１９９８年に見える。
【０００５】
コルチゾールの異常濃縮もまた、代謝システムにおける外部ストレスの影響についての生化学メカニズムであって、人間と実験動物の両方において、心臓病の危険を増すことになることが示されてきた。
【０００６】
血清内のこのホルモンの濃縮が一日の変動を示すので、ＨＰＡ軸の機能分析は、その日じゅうで何回もコルチゾール測定をする必要があり、通常７回ないし１０回、また更なる試験により完了する。
【０００７】
コルチゾールの唾液水準が血清内の水準に強く相関していることは、「唾液内のコルチゾール−基準範囲と血清内のコルチゾールとの関係」、臨床化学と生化学のヨーロピアン・ジャーナル、１９９５年、３３（１２）、９２７頁−９３２頁に、Ａａｒｄａｌ  Ｅ．およびＨｏｌｍ  ＡＣ．により報告された通りである。標識免疫検定（ＲＩＡ）を使用して唾液コルチゾールの量を測定するテスト装置は、フィンランド、エスポー市のオリオン・ダイアグノスチカ社から商用可能であり、人口に基づく研究においてＨＰＡ軸の特性を明らかにするために使用されてきた。しかしながら、異常性の識別は現在までのところ被験者のグループの統計的分析によってのみ可能である。個別間および個別内の変動のために、個別の被験者を分類することはこれまで不可能であった。
【０００８】
テストステロンは男性ホルモンであるが、非常に低い濃度では女性にもある。このホルモンは、かなり複雑な仕方でコルチゾールと相互作用するが、それはビョルントルプ  Ｐ．により、「ホルモン、脳および、行動」、アカデミック・プレス、２００１年（ｉｎ  ｐｒｅｓｓ）の中の「人間の流行病の視床下部起源」に説明されていて、その要旨は下記の通りである。
【０００９】
１．  男性ではテストステロンが低いことは、平均または中間のテストステロン水準に比べて、コルチゾール変質に対して一層否定的な反応をすることを意味する。しかしながら、テストステロンの水準が高いことも、否定的な効果を示す。したがって、低、正常／中間および高の三つのテストステロンの水準を定義すべきである。男性においては、生殖腺すなわち睾丸が、テストステロンの大部分を分泌する。
【００１０】
２．  女性ではテストステロンの水準が一般に低く、識別可能な否定的な影響がなければ、テストステロンがゼロに近い。しかしながら、正常な人口において上位四分の一におけるテストステロンは、心臓病の危険の増大に関連していて、コルチゾールの水準が異常なときはこの関係が一層強くなる。女性のテストステロンは、コルチゾールと同様に、副腎皮質により分泌されるものと想定される。
【００１１】
シフレン・ＪＬ（ｓｈｉｆｒｅｎ  ＪＬ）、ブラウンシュタイン・ＧＤ（Ｂｒａｕｎｓｔｅｉｎ  ＧＤ）、シモン・ＪＡ（Ｓｉｍｏｎ  ＪＡ）他による最近の研究、「卵巣切除語の性機能不全の女性における経皮テストステロン処置」、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ（米国）、２０００年９月、３４３（１０）、６８２頁から６８８頁において、一般的な幸福と性生活の満足を維持するために、ある（非常に低い）水準のテストステロンが、女性にも必要であることが発見された。
【００１２】
コルチゾールを測定するときと同じ原理を使用して、唾液内でテストステロンを測定できることが、オブミンスキー・Ｚ（Ｏｂｍｉｎｓｋｉ  Ｚ）とスツプニッキー・Ｒ（Ｓｔｕｎｐｎｉｃｋｉ  Ｒ）により、「唾液および血清でのホルモン分析から得られるテストステロン対コルチゾール比率値の比較」、Ｊ  Ｓｐｏｒｔｓ  Ｍｅｄ  Ｐｈｙｓ  Ｆｉｔｎｅｓｓ  １９９７年３月、３７（１）、５０頁−５５頁、ナバルロ・ＭＡ（Ｎａｖａｒｒｏ  ＭＡ）他筆に報告されている。「リューマチ性関節炎を有する閉経後女性の唾液テストステロン」、Ｊ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ、１９９８年６月、２５（６）、１０５９頁ー１０６２頁、および、グレンジャー・ＤＡ（Ｇｒａｎｇｅｒ  ＤＡ）他により、「児童の健康と発育の研究における唾液テストステロンの測定」、Ｈｏｒｍ  Ｂｅｈａｖ、１９９９年２月、３５（１）、１８頁−２７頁に報告されている。
【００１３】
（発明の要約）
先行技術の上述の短所を考慮に入れて、本発明は、人間の唾液標本から正常および異常な一日のコルチゾール分泌パターンを識別する方法を提供することを追及し、特に、高度な精度を持つ構造化された方法で、個別の被験者についてのＨＰＡ軸の機能が決定されるようにすることである。
【００１４】
この目的は、前記した特許請求の範囲の独立項により、正常および異常ない一日コルチゾール分泌パターンを識別するコンピュータ化された方法により達成される。１つの好ましい実施例によれば、先行技術での７回ないし１０回の測定に比べて、同一日の所定時刻に唾液コルチゾールの測定が２回だけ遂行される。唾液コルチゾールの２つの測定値はコンピュータ・プログラムへ入力され、コンピュータ・プログラムはこれらの値をファジー論理アルゴリズムにより変換する。コンピュータ・プログラムの主要出力は、３つのあり得る分類の１つ、すなわち正常、活性、または鈍化のＨＰＡ軸機能である。これら３分類の最後の２つは、代謝異常の異なる水準に対応していて、テストされる個人により訂正測定の基礎として、また医者により治療的介入の基礎として使用され得る。
【００１５】
有利には、第１の唾液標本がテストステロンの水準の決定にも利用されて、類似の方法で分析される。
【００１６】
本発明によるコンピュータ・プログラムの使用は、全人口についてよりもむしろ個別の被験者についてＨＰＡ軸の機能をはじめて決定できるだけでなく、その上かなりの便宜を供給するが、その理由は、一日のコルチゾール・パターンを決定するのに、２回だけ唾液コルチゾール測定をすればよいからである。更に、ＨＰＡ軸の評価に影響するテストステロンの水準を同時的に測定でき、測定されたテストステロン値をコンピュータ・プログラムが使用して、ＨＰＡ軸の評価を更に洗練することができる。
【００１７】
本発明はまた、構造化した解決法を保証するが、それはＨＰＡ軸機能が全ての試験において厳密に同一の方法で決定されるからである。更に、コンピュータ・プログラムが、グループ帰属関係指数によって、特定分類グループ内の帰属関係の程度を定量化でき、これにより、後述のようにＨＰＡ軸の機能の一層詳細な分析さえ可能になる。
【００１８】
本発明の他の諸目的、特徴および利点は、以下の詳細な説明から、従属請求項とともに添付図面から、明らかになる。
【００１９】
（発明の詳細な開示）
詳細は後述するが、本発明の主要特長には下記のものが含まれる。
【００２０】
１．  同一日の所定時間に標本化される唯２つの唾液コルチゾーン濃縮測定のみを使用すること。
【００２１】
２．  好ましくはコンピュータ・アルゴリズムとして実施され、測定値を分析してＨＰＡ軸機能が正常であるかまたは異常であるかを評価するコルチゾール分析アルゴリズム。ＨＰＡ軸が異常であれば、このプログラムは異常性のタイプを決定することもできる。
【００２２】
３．  上記のコンピュータ・プログラムを、インターネット（Ｒ）上でテストとテスト結果の遠隔配布のために使用すること。
【００２３】
好ましくは、本発明はまた、コンピュータ・プログラムの一部分として有利に実施されるテストステロン評価アルゴリズムを含み、それはテストステロンの水準を評価して、この情報をＨＰＡ軸異常の最終評価へ統合する。
【００２４】
上述のように、本発明は、一般住民の保健および疾病予防における診断ツールとして、唾液コルチゾール測定を使用することを可能にし、オプションとしてテストステロン測定の使用を可能にする。インターネットを使用することにより、このテストを多数の個人に応用できる。
【００２５】
図２ａないし図２ｃは、ＨＰＡ軸機能の３つの異なる主要カテゴリ、すなわち、正常、異常および鈍化のそれぞれによる唾液コルチゾール濃縮の典型的な１日変動を図示する。このグラフは、その日の７つの異なる時刻（ｘ軸上でｓｐｉｔ１．．．ｓｐｉｔ７と記す）を通じての典型的な濃縮値をｎｍｏｌ／ｄｍ３で図示する。上記のように、従来は、その日を通して（少なくとも）これら７つの瞬間の全てにおいて、唾液コルチゾールの濃縮が測定される。他方、本発明によれば、唾液コルチゾール濃縮はその日のこれら異なる時刻のうちの第１回と第２回、すなわちｓｐｉｔ１とｓｐｉｔ２で測定されるだけである。好ましくは、図２ａないし図２ｃに示すように、午前７時００分と午前１１時００分に、これら２つの測定が行われる。
【００２６】
さて図３と図４を参照して、中央処理装置（ＣＰＵ）２１、ランダム・アクセス・メモリ（ＲＡＭ）などのワーク・メモリ２２、およびリード・オンリー・メモリ（ＲＯＭ）および／またはハード・ディスク（ＨＤ）などのパーマネント・メモリを有するテスト評価コンピュータ２０を図示する。テスト評価コンピュータ２０は、インターネット使用の場合を参照して後述するが、複数の個人についてのテスト結果を記憶するデータベースへの作業的なアクセスを有する。データベース２４は、テスト評価コンピュータ２０内（たとえばパーマネント・メモリ２３の一部分）にローカル的に記憶できるが、同様にコンピュータ２０の外部に配置することもできる。後者の場合、コンピュータ２０は、好ましくはローカル接続（直列または並列のインターフェイス、赤外線インターフェイス、アクセサリ・バスなど）またはローカル・エリア・インターフェイス（ＬＡＮ）またはインターネット５０のような広域ネットワーク（ＷＡＮ）を通じてデータベース２４へのアクセスを獲得する。
【００２７】
その上、コンピュータ２０は、出力２５手段とともに入力手段２６を有する。入力手段２６は、キーボード、マウス、またはいずれかのタイプのディジタル入力インターフェイス（モデム、ＩＳＤＮ、ＴＣＰ／ＩＰに基づく情報交換など）のようなそれ自体一般に知られている種々の異なる装置を含む。同様に、出力手段２５は、ＣＲＴディスプレイ、またはＬＣＤ、プリンタ、またはいずれかのタイプのディジタル・データ出力インターフェイス（モデム、ＩＳＤＮ、ＴＣＰ／ＩＰに基づく情報交換など）のような種々の異なった公知の装置を含む。一般に、テスト評価コンピュータ２０の全てのハードウェア構成要素は、当業者に容易に理解されるように、商用できる構成要素により実施される。その上、テスト評価コンピュータ２０は、マイクロソフト・ウィンドウズ（Ｒ）・ファミリ（たとえばＮＴ）、ユニックス（Ｒ）（たとえばＬｉｎｕｘ）などのような商用可能なオペレーティング・システムを備えている。
【００２８】
次に、特に図４を参照して、テスト手順の現在好ましい実施例を説明するが、そこでテスト評価コンピュータ２０はスタンド・アローン・コンピュータとして使用される。テスト評価コンピュータがインターネット・アプリケーション内で使用されるもう一つの実施例をその後に続けて説明する。
【００２９】
（テスト手順）
１．  図２ａないし図２ｃで示されるように、従来の技術を使用して、テストされる被験者からの唾液が７時００分と１１時００分に得られる。
【００３０】
２．  ２つのテスト標本内のコルチゾール濃縮が、たとえば上記のＲＩＡ技法に基づいた従来の分析機械で測定される。
【００３１】
３．  コルチゾール濃縮のときように、同じ基本原理（たとえばＲＩＡ技法）を使用して、唾液標本の一つ、好ましくは第１標本（７時００分）について、テストステロンの水準が決定される。
【００３２】
４．  第１および第２の測定値が、入力手段２６を通じて、コンピュータ２０のワーキング・メモリ２２へ入力される（図４のステップ７０）。これは、分析機械とコンピュータの間の電子通信を使用して自動的に遂行することも、たとえばキーボードおよび／またはマウスを使用して、実験室の職員が手動で遂行することもできる。代りに、特にインターネット・アプリケーションにおいて、テスト・データベース２４から測定値を読み取ることもできる。
【００３３】
５．  ワーキング・メモリ２２へ読み込まれてプロセッサ２１により実行されるように適合されたプログラム・コードを含むコンピュータ・プログラムがパーマネント・メモリ２３に備えられ、これにより、作業と計算の順序付きシーケンスにおいて後続のテスト評価アルゴリズムを遂行するようにされる。
【００３４】
最初にステップ７０で、第１および第２の測定値から、２つの測定変数ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿１とｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿２がそれぞれ形成される。
【００３５】
それからステップ７１で、測定変数ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿１とｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿２が検証されて、明らかに非現実的な値が除去される。必要ならば、ステップ７２でエラー・メッセージが表示されて、ここで実行が終結する。
【００３６】
さもなければ、ステップ７３で、プログラムは２つの分析変数、すなわち第１および第２の測定値変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿１とｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿２）の間の差であるｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ、および変数ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿１とｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿２の算術平均であるｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎを計算する。
【００３７】
これら２つの分析変数、すなわちｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅとｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎの各々について、アルファ、ベータ、ガンマの３つの定数の組がプログラム内に予め定められている。ステップ７４で、これら定数が検索される。
【００３８】
ステップ７５で各変数について、０．００と１．００の間の十進数である２つの指数が計算される。第１指数ｈｉｇｈ＿ｉｎｄは、その変数の値がどの次数に対して高とみなされるかを定義する。第２指数ｌｏｗ＿ｉｎｄは、同様にその変数の値がどの次数に対して低とみなされるかを定義する。好ましくは、それはｈｉｇｈ＿ｉｎｄの補数として計算される（すなわち、ｌｏｗ＿ｉｎｄ＝１‐ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ）。これら指数計算は、各指数つきの変数について、上記３つの定数、アルファ、ベータ、ガンマに基づいている。これら定数の値は、プログラムの実行以前に経験的に導かれている。発明者によりなされた１つの実施例において、これらの定数は、中年のスウェーデン人からランダムに選択された５５０人からなる研究人口からの情報と組み合わされた科学文献の調査に基づいている。これら定数は、測定値とＨＰＡ軸機能の種々なタイプとの間の統計的相関に基づく。心臓病についての代謝的および生理学的危険因子の相関が、ＨＰＡ軸の異常性を定義するために使用されている。
【００３９】
これらの定数アルファ、ベータおよびガンマは、ステップ７５で変数の各々について第１指標ｈｉｇｈ＿ｉｎｄを計算するときに、下記の方法で使用される。
【００４０】
変数の値が定数アルファ、ベータ、ガンマより小さい（または等しい）ときは、指標を０．００にセットする。
【００４１】
変数が定数ガンマより大きい（または等しい）ときは、指標を１．００にセットする。
【００４２】
変数の値が定数アルファより大きくて定数ベータよりも小さい（または等しい）ときは、プログラム機能（ｐｒｏｇｒａｍ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ）が０．００と０．５０の間の指数を計算する。一層詳しくは、指数が２＊（（（ｘ−アルファ）／（ガンマ−アルファ））２）にセットされ、ここでｘは変数の値である。
【００４３】
変数の値が定数ベータより大きくて（または等しくて）定数ガンマよりも小さいときは、プログラム機能が０．５０と１．００の間の指標を計算する。一層詳しくは指数が１−（２＊（（（ｘ−ガンマ）／（ｘ−アルファ））２））にセットされ、ここでｘは変数の値である。
【００４４】
計算された指標はステップ７６で記憶される。
【００４５】
可能な各ＨＰＡ軸は、計算された２つの指数の特定組み合わを特徴とする。これらの組み合わせは、下記の基本グループ定義マトリクスで定義される。
2004515765.tif 000003
【００４６】
このマトリクスには、Ａ−Ｄでラベルされた４つの可能なカテゴリーがある。カテゴリーＡおよびＢ＝正常ＨＰＡ軸、カテゴリーＣ＝活性ＨＰＡ軸、カテゴリーＤ＝鈍化ＨＰＡ軸である。テストされた個人から計算された指標が、下記の仕方でその個人を特定分類グループに割り当てるの使用される。
【００４７】
ステップ７７で示されるように、グループ定義マトリクスの対応するコラム内の最小指標値を検索することにより、各分類グループについて、上記の表に定義された帰属関係指標（ｍｅｍｂｅｒｓｈｉｐ  ｉｎｄｅｘ）が計算される。ステップに示されるように、こうして各グループ（Ａ−Ｄ）について、帰属関係指標が、ｍｉｎ（ｉｎｄｅｘ＿ｆｏｒ＿ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ，ｉｎｄｅｘ＿ｆｏｒ＿ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）として定義される。ステップ７８で、この最小値が記憶される。
【００４８】
それから、ステップ７９で、テストされた被験者が最高の帰属関係指標を有するグループへ割り当てられる。
【００４９】
上記は、下記のように例示できる。
【００５０】
（例）
正常な被験者において、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅの値が大きく、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎの値は大きいかまたは小さい。これは図２ａの最左部に見える。
【００５１】
ある被験者に対応する諸指標は、そのとき下記の通りである。
【００５２】
ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅのｈｉｇｈ＿ｉｎｄｅｘは１．００である（午前７時００分の朝の標本における高いテスト値に対応し、また１１時００分の第２の標本における低いテスト値に対応する）。
【００５３】
ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎのｈｉｇｈ＿ｉｎｄは０．６である。
【００５４】
この被験者は、０．６の帰属関係値（すなわち１．００と０．６の最小）を有する正常ＨＰＡ軸（グループ定義マトリクス内のグループＡ）に属する。いずれか他のグループの帰属関係値は、この値よりも小さい。
【００５５】
境界線の場合、すなわち、同一の帰属関係指標を有する２つの分類グループが起こり得る。これらの被験者は、指標に関して適当な、正常／活性境界線、正常／鈍化境界線、または活性／鈍化境界線としてラベルされる。
【００５６】
ステップ８０で、被験者について単一の分類グループまたは上述の境界線の場合を決定できるようになれば、出力手段２５を通じて結果が出力される。
【００５７】
この評価は、テストステロン水準についての情報を追加することにより洗練される。テストステロン値は下記のように評価される。
【００５８】
１．  男性においては、この値がスレッショルド値より低ければ、この水準が低とラベルされる。この値がスレッショルド値より高ければ、この水準が正常とラベルされる。
【００５９】
２．  女性においては、この値がスレッショルド値より高ければ、この水準が高とラベルされ、さもなければ、それは正常とラベルされる。
【００６０】
有利には、このプログラムは、第２コルチゾール濃縮（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿２）が第１コルチゾール濃縮（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿１）よりも高いかどうかを評価するように適合されている。そうした状況は、反転されたＨＰＡ軸としてラベルされ、図６に図示されている。この異常性は妨害された睡眠パターンおよび／または一日のリズムに関連する。
【００６１】
（インターネット使用）
上述の手順は、インターネット上で好ましく使用できるので、図３ないし図５を参照して説明する。
【００６２】
１．  顧客（ユーザ３０）は、ウェブ・クライアント３１を使用して、ウェブサーバ２７上で関連情報を提供するウェブ・サイトへアクセスする。
【００６３】
２．  顧客はテスト・キット（図３の鎖線ｉを参照）を注文して、本書に後述する標準的電子支払い手順を使用して、支払う。
【００６４】
３．  顧客は標準的な郵便配達６０を使用して、彼または彼女のアドレスへテスト・キットを受信する（図３の線ｉｉ参照）。このテスト・キットには、各テストキットに独自のＩＤコードが含まれる。
【００６５】
４．  テスト・キットとともに顧客へ送信される宛名記入済みの封筒を使用して、今や第１および第２の唾液標本を含むテスト・キットを、顧客は契約した研究室４０へ送信する。図３の線ｉｉｉを参照されたい。
【００６６】
５．  研究室は分析を遂行して、その結果をテストＩＤとともに、ウェブ・サーバ２７とテスト・コンピュータ２０へ接続されたテスト・データベース２４へ報告する。図３の線ｉｖを参照されたい。
【００６７】
６．  顧客は、ウェブ・サイトに２回目のアクセスをして、テスト・キットＩＤコードを入力する。上述のプログラムがＩＤコードによりデータベースからテスト結果を検索して、上述のように評価を遂行して、顧客に結果を提示し、顧客は、彼／または彼女が希望するならば、印刷出力を得るオプションを有する。図３の線ｖを参照されたい。この結果は、測定評価の結果（すなわちＨＰＡ軸機能性の決定したカテゴリー）だけでなく、顧客の健康障害の危険の予測も含むことが望ましい。
【００６８】
図５に示す流れは、コルチゾール濃縮測定のみ、コルチゾール濃縮測定とテストステロン測定の両方、またはテストステロン測定のみを遂行する。しかしながら、現在では、コルチゾール濃縮とテストステロン測定の組み合わせが、ＨＰＡ軸機能の分析および顧客の健康障害の危険の予測における最高の精度を供給すると信じられている。
【００６９】
（プログラム実施）
社会科学用統計的パッケージ（ＳＰＳＳ）内の構文モジュールを使用し、またインターネット上で使用するためのＶＢＳｃｒｉｐｔを使用して、上述のプログラムの実施例をインプリメントする。しかしながら、このプログラムは、Ｃ＋＋、Ｊａｖａ（Ｒ）、Ｖｉｓｕａｌ  Ｂａｓｉｃ、ＤｅｌｐｈｉまたはＪａｖａＳｃｒｉｐｔを含むがこれらに限定されないいずれか他の汎用プログラミング言語またはスクリプティング言語でインプリメントできる。
【００７０】
（プログラム検証）
プログラム出力は、上記の研究人口からの実際の測定値と比較してある。プログラムは、（午前７時００分と午前１１時００分の）２つだけの唾液コルチゾール測定を使用して、図２ａないし図２Ｃに見るＨＰＡ軸一日パターンの３つの主要タイプを明確に識別する。
【００７１】
（３つの主要カテゴリーにおける）分類は、唾液コルチゾールに関する関連のテストの出力へ比較してある。これらのテストは過去の通りである。
【００７２】
１．  標準化されたランチへの応答。食物は血液と唾液コルチゾールの増加を導く。この増加は、反復テストにより測定でき、特定個人におけるＨＰＡ軸の機能を決定するのを支援する。
【００７３】
２．  デクサメタゾーン抑制テスト。デクサメタゾーンは、コルチゾールと本質的に同一で、副腎から分泌されるものである。錠剤の形でデクサメタゾーンが投与されると、血液と唾液コルチゾールが減少する。減少の比率は反復テストにより測定でき、特定個人におけるＨＰＡ軸の機能を決定するのを支援するのに使用される。
【００７４】
これら２つの関連テストとコンピュータ・プログラムで遂行される分類との間の相関は非常に良好であって、７つのテストの統計的分析を使用する従来の方法と比較して、２つだけのテスト結果のプログラム分析を使用して確立されたこの情報が同一であることを示した。
【００７５】
（３つの主要カテゴリーにおける）分類はまた、心臓病について知られる危険因子と比較されて、重要な関連が観察された。１つの例は、男性におけるインシュリン抵抗（ｓ−インシュリン／ｓ−ブドウ糖の率）であって、これは異常ＨＰＡ軸のグループ内で、より高いものであった。したがって、この方法は、正常性からやや離散した逸脱を、明らかに識別する。
【００７６】
この評価は、テストステロン水準についての情報を追加することにより、更に洗練される。テストステロン値は正常または異常であるので、すなわち女性に高で男性に低のときに異常であり、さもなければ正常であるので、これはグループの数が２倍になる結果になる。
【００７７】
（利点）
本発明は、唾液内テストステロン水準の１つの同時的に遂行される測定にオプションとして追加される、唾液内コルチゾール濃縮のただ２回の測定に基づいて、ＨＰＡ軸の機能的状態を決定できるようにする。コンピュータ・プログラムがテスト結果の解釈を遂行する。本発明は、各被験者に２回の唾液テストしか必要ないので、ＨＰＡ軸の機能の決定に唾液コルチゾールを実際に使用しやすくする。測定値の評価にコンピュータ・プログラムを使用することにより、全ての被験者が全ての試験において同一の方法で評価されることを保証する。プログラムにより識別されるＨＰＡ軸機能の乱れは、個別被験者の健康に関係があり、測定値のコンピュータに基づく分析は、従来利用できなかった新しい情報を与える。インターネット上での使用は、多数の個人に、システムへのアクセスを供給する。テストステロン値の追加は、診断グループと心臓血管病などの危険因子の間の関係を改良する。
【００７８】
好ましい実施例に関連して本発明を上記に説明してきた。しかしながら、前記の独立の特許請求項に定義されるように、上記に開示されたもの以外の実施例も、同等に本発明の範囲内にあり得る。
【図面の簡単な説明】
下記の添付図面を参照しながら、本発明の好ましい実施例と種々の他の面を詳細に説明してきた。
【図１】
視床下部−下垂体−副腎（ＨＰＡ）軸の略図である。
【図２ａ】
ＨＰＡ機能の３つの異なる主要カテゴリーによる一日のコルチゾール変動のグラフ的表現である。
【図２ｂ】
ＨＰＡ機能の３つの異なる主要カテゴリーによる一日のコルチゾール変動のグラフ的表現である。
【図２ｃ】
ＨＰＡ機能の３つの異なる主要カテゴリーによる一日のコルチゾール変動のグラフ的表現である。
【図３】
インターネット・アプリケーションに使用される場合に、本発明によりコンピュータ・プログラムが実行されるコンピュータ・システム環境の概要図である。
【図４】
本発明による方法の主要ステップのフローチャートである。
【図５】
人間の唾液からの一日のコルチゾール分泌パターンの遠隔テストと評価のためにインターネットを利用する場合のフローチャートである。
【図６】
反転ＨＰＡ軸機能として知られる一日のコルチゾール変動のグラフ的表現である。
【図１】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図２ｃ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際公開パンフレット】
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【手続補正書】
【提出日】平成14年6月19日(2002.6.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
人間の唾液標本から正常および異常一日コルチゾール分泌パターンとテストステロンの水準を識別するインビトロ（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）法において、第１および第２の唾液標本が一個人から同一日の所定の第１および第２時間に取られ、前記第１唾液標本において第１コルチゾール濃縮が決定され、また前記第２唾液標本において第２コルチゾール濃縮が決定され、
第１変数と第２変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）を供給するステップと、
前記第１および第２のコルチゾール濃縮に関連する前記第１および第２の変数へ値を割り当てるステップと、
各変数へ一組の所定定数（アルファ、ベータ、ガンマ）を供給することと、
前記変数が前記所定定数に関して高い値を有する次数を表現する第１ファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ）を、各変数について計算するステップと、
前記変数が前記所定定数に関して低い値を有する次数を表現する第２ファジー論理指数（ｌｏｗ＿ｉｎｄ）を、各変数について計算するステップと、
前記第１および第２変数について計算される前記第１および第２ファジー論理指数の種々の組合せを、正常一日コルチゾール分泌パターン（ｎｏｒｍａｌ  ｄｉｕｒｎａｌ  ｃｏｒｔｉｓｏｌ  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ｐａｔｔｅｒｎ）および少なくとも１つの異常一日コルチゾール分泌パターンの所定定義と一致させるステップと、
最良の一致が起こる前記定義を選択するステップを含む前記インビトロ法。
【請求項２】
前記決定された第１濃縮と第２濃縮の間の差として前記第１変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ）が計算され、また前記決定された第１濃縮と第２濃縮の算術平均として前記第２変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）が計算される請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記第１および第２のファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ、ｌｏｗ＿ｉｎｄ）が０．０と１．０の間の十進数値である請求項１または請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記一組の所定定数（アルファ、ベータ、ガンマ）が３つの定数を含み、前記第１および第２の変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）の各々についての第１ファジー論理指数は、
前記変数が前記一組の所定定数における第１定数（アルファ）と等しいかまたはより小さい場合は０．０にセットされ、
前記変数が前記一組の所定定数における第３定数（ガンマ）よりも大きい場合は１．０にセットされ、
前記変数が前記一組の所定定数における第１定数（アルファ）よりも大きいかまたは第２定数（ベータ）に等しい場合は０．０と０．５の間の値にセットされ、
前記変数が第２定数（ベータ）よりも大きくて第３定数（ガンマ）よりも小さい場合は０．５と１．０の間の値にセットされる請求項１、請求項２または請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記第２ファジー論理指数（ｌｏｗ＿ｉｎｄ）が前記第１ファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ）の補数として計算される請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記選択された一日のコルチゾール分泌パターン定義に応答して前記個人についてＨＰＡ（視床下部−下垂体−副腎）軸の機能を決定する追加のステップを含む請求項１ないし請求項５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記第１および第２の唾液標本の少なくとも１つにおいてテストステロンの水準を評価するステップと、
前記視床下部−下垂体−副腎（ＨＰＡ）軸を決定するときに前記テストステロン評価の前記結果を使用するステップを更に含む請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記選択された一日のコルチゾール分泌パターン定義に基づいて前記個人について健康障害の危険を予告するステップを更に含む請求項１ないし請求項７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記同一日の間の前記第１および第２所定時刻の間の差が４時間である請求項１ないし請求項８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記同一日の間の前記第１所定時刻が午前７時００分であり、また前記第２所定時刻が午前１１時００分である請求項９記載による方法。
【請求項１１】
コンピュータ（２０）の内部メモリ（２２）へ直接にロードできるコンピュータ・プログラム製品であって、前記コンピュータ上で実行されるときに、請求項１ないし請求項８のいずれかのステップを遂行するプログラム・コードを含む前記コンピュータ・プログラム製品。
【請求項１２】
コンピュータ読み取り可能な媒体（２３）上で実施される請求項９に定義されるコンピュータ・プログラム製品。
【請求項１３】
メモリ（２２）とプロセッサ（２１）を有するコンピュータであって、前記プロセッサにより実行されるときに請求項１ないし請求項８のいずれかのステップを遂行するプログラム・コードを前記メモリが含む前記コンピュータ。
【請求項１４】
人の唾液標本から一日のコルチゾール分泌パターンのリモート・テストと評価をする方法であって、
クライアント・コンピュータ（３１）を使用して一日のコルチゾール分泌唾液テストをユーザ（３０）がそこから発注できるサーバ・コンピュータ（２７）を供給するステップと、
前記ユーザからオーダーを受信するのに応答して、前記ユーザへテスト・キットをディスパッチし、前記第１および第２の唾液標本に基づいて、一日の正常および異常コルチゾール分泌パターンの間をファジー論理アルゴリズムにより区別できるコンピュータ・プログラムを有するコンピュータ（２０）から、唾液の第１および第２の標本を受信するように前記テスト・キットが適合されてているステップと、
前記コンピュータ・プログラムの実行からの出力をデータベース（２４）内に記憶するステップと、
前記データベース（２４）に結合され、前記データベース（２４）内に記憶された前記出力に関連するテスト結果を前記ユーザ（３０）へ提示するように適合されたサーバ・コンピュータ（２７）を供給するステップを特徴とする前記方法。
【請求項１５】
実行に際して前記コンピュータ・プログラムが、
第１および第２の変数（ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｓｌｏｐｅ、ｃｏｒｔ＿ｃｏｎｃ＿ｍｅａｎ）を供給するステップと、
前記第１および第２の唾液標本における前記コルチゾール濃縮に関連する前記第１および第２の変数へ値を割り当てるステップと、
各変数について１組の所定定数（アルファ、ベータ、ガンマ）を供給するステップと、
各変数について第１ファジー論理指数（ｈｉｇｈ＿ｉｎｄ）を計算して、前記あらかじめ定義された定数に関して高い値を前記変数が有する次数を表現するステップと、
各変数について第２ファジー論理指数（ｌｏｗ＿ｉｎｄ）を計算して、前記あらかじめ定義された定数に関して低い値を前記変数が有する次数を表現するステップと、
前記第１および第２の変数について計算された前記第１および第２のファジー論理指数の種々の組合せを、一日の正常コルチゾール分泌パターンおよび少なくとも１つの一日の異常コルチゾール分泌パターンの所定定義と一致させるステップと、
前記出力として、最良の対応が起きる前記定義を選択するステップを遂行するように適合された請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記テスト結果が、前記ユーザ（３０）について正常ＨＰＡ（視床下部−下垂体−副腎）軸機能、前記ユーザ（３０）について活性ＨＰＡ軸機能、および前記ユーザ（３０）について鈍化ＨＰＡ軸機能のうちの１つである請求項１４または請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記コンピュータ・プログラムが更に前記第１および第２の唾液標本の少なくとも１つにおいてテストステロンの水準を評価できる請求項１６記載の方法。
【国際調査報告】
2004515765.tif 000041
2004515765.tif 000042
2004515765.tif 000043