(57)【要約】本発明は、シクロ［｛４−（ＮＨ２−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−）Ｐｒｏ｝−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ（４−ベンジル）−Ｐｈｅ］、所望によりその保護形態、またはその薬学的に許容される塩または複合体であって、興味深い薬学的特性を有するものを提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
所望によりアミノ基のいずれかが保護形態である、式
【化１】
2004505095.tif 000004
の化合物またはその塩または複合体。
【請求項２】
塩形態であり、非保護形態である、請求項１の化合物。
【請求項３】
モノまたはジ塩である請求項２の化合物。
【請求項４】
酢酸塩、安息香酸塩、アスパラギン酸塩またはパモ酸塩である、請求項３の化合物。
【請求項５】
保護され、ポリマーに結合、または非保護形態である線形ペプチドを、望まれる化合物を取得するようなやり方で環形成させること、および複数のこともある該保護基を所望により除去すること、およびこうして取得される、遊離または塩形態の望まれる化合物を回収することを含む、請求項１の化合物の製造方法。
【請求項６】
Ｐｒｏである該側鎖アミノ基が、キレート化剤にコンジュゲートされ、検出可能または放射性治療用元素と所望により複合体化されている、請求項１の化合物。
【請求項７】
請求項１の化合物またはその薬学的に許容される塩と、そのための１または２以上の薬学的に許容される希釈剤または担体とを含む、医薬組成物。
【請求項８】
持続的放出形態または局所用形態である、請求項７の医薬組成物。
【請求項９】
免疫抑制剤、抗炎症性物質、ＧＨ分泌促進物質レセプター調節物質、ＧＨレセプターアンタゴニスト、インスリン分泌促進物質、インスリン分泌増強剤、インスリン増感剤、低用量のインスリン、抗血管形成効果を有する物質または化学的治療物質との組み合わせ使用のための、請求項７の医薬組成物。
【請求項１０】
過剰ＧＨ分泌および／またはＩＧＦ−１の過剰、およびインスリンまたはグルカゴン放出に関連する他の代謝的障害、腸皮および膵皮膚瘻、過敏性腸症候群、炎症性障害および疾患、多発性嚢胞腎、ダンピング症候群、水様便症候群、ＡＩＤＳ関連性下痢、化学治療誘導性下痢、急性または慢性膵炎、消化管出血、腫瘍および悪性腫瘍、血管新生、黄斑浮腫、脈絡膜血管新生関連性障害、増殖性網膜症、移植片血管疾患、静脈移植片狭窄、レステノシスおよび／または血管損傷後の血管閉塞を含む、または連関する病因を有する障害を、そのような処置の必要のある対象において予防または処置する方法であって、当該対象に有効量の請求項１の化合物またはその薬学的に許容される塩または複合体を投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ソマトスタチンペプチド擬態物、それらの製造方法およびそれらを含む医薬製造に関する。
【０００２】
特に、本発明は式
【化２】
2004505095.tif 000002
の化合物であって、シクロ［｛４−（ＮＨ２−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−）Ｐｒｏ｝−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ（４−Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ］とも呼ばれ、ここで化合物Ａと称するもの、並びにそのジアステレオ異性体および混合物であって遊離形態、塩または複合体形態または保護形態であるものを提供する。Ｐｈｇは、−ＨＮ−ＣＨ（Ｃ６Ｈ５）−ＣＯ−を意味し、Ｂｚｌはベンジルを意味する。
【０００３】
保護形態の化合物Ａは、アミノ基の少なくともいずれかが保護され、好ましくは生理学的に除去可能である、脱保護によって化合物Ａにつながる、前記分子に対応する。好適なアミノ保護基は、例えば、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｔ． Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ， Ｊ． Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ ＮＹ（１９８１）， ２１９−２８７に開示されるようなものであり、引用によりここにその内容を含ませる。そのようなアミノ保護基の例は、アセチルである。
【０００４】
化合物Ａが複合体形態で存在するとき、それは、簡便にはＰｒｏの側鎖アミノ基のキレート化基を有する化合物Ａであり得、そして検出可能または放射性治療用元素と複合体化され得る。キレート化基を有する化合物Ａは、コンジュゲート性化合物Ａと以後称する。
【０００５】
キレート化基の例は、例えば、ポリ−アミノポリカルボン酸または無水物に由来するもの、例えば、非環式リガンドに由来するもの、例えば、ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレングリコール−０，０’−ビス（２−アミノエチル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ酢酸（ＥＧＴＡ）、Ｎ，Ｎ’−ビス（ヒドロキシベンジル）エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−ジ酢酸（ＨＢＥＤ）およびトリエチレンテトラアミンヘキサ酢酸（ＴＴＨＡ）、置換ＤＴＰＡに由来するもの、例えば、ｐ−イソチオシアネート−ベンジル−ＤＴＰＡに由来するもの、巨大環式リガンドに由来するもの、例えば、１，４，７，１０−テトラ−アザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−テトラ酢酸（ＤＯＴＡ）および１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−テトラ酢酸（ＴＥＴＡ）、または１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−テトラ−酢酸（ＴＩＴＲＡ）に由来するものを含む。
【０００６】
該キレート化基は、Ｐｒｏの側鎖のアミノ基へ、直接的またはスペーサーを介して結合し得る。好適なスペーサーは、当業界で既知のもの、例えば、ＧＢ−Ａ−２２２５５７９に開示のもの、例えば、アミノ−カルボン酸の二価残基、例えば、β−Ａｌａ、または６−アミノ−カプロン酸に由来する二価残基を含む。
【０００７】
好ましいキレート価基は、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡまたはＴＥＴＡに由来するものである。ＤＴＰＡまたはＤＯＴＡに由来するキレート化基が最も好ましい。
【０００８】
検出可能元素は、任意の元素、好ましくはインビボ診断的技法で検出可能な特性を示す金属イオン、例えば、検出可能放射を放射する金属イオン、またはＮＭＲ緩和特性に影響することの可能である金属イオンを意味する。放射性治療用元素は、処置すべき状態に有益な影響を有する放射を放射する任意の元素を意味する。
【０００９】
好適な元素は例えば、重金属元素、または稀土類イオン、例えば、ＣＡＴスキャニング（コンピューター断層写真）で使用されるようなもの、常磁性イオン、例えば、Ｇｄ３＋、Ｆｅ３＋、Ｍｎ２＋およびＣｒ２＋、蛍光性金属イオン、例えばＥｕ３＋、および放射性核種、例えば、放射性ランタニド、特にγ−放射する放射性核種、β−放射する放射性核種、α−放射する放射性核種、オージェ電子放射する放射性核種または陽電子放射する放射性核種、例えば６８Ｇａ、１８Ｆまたは８６Ｙを含む。
【００１０】
好適なγ放射する放射性核種は、診断的技法で有用であるものを含む。γ放射する放射性核種は有利には、１時間ないし４０日、好ましくは５時間ないし４日、より好ましくは１２時間ないし３日間の半減期を有する。例は、ガリウム、インジウム、テクネチウム、イッテルビウム、レニウム、テルビウム、ルテチウム、タリウムおよびサマリウム由来の放射性同位体、例えば、６７Ｇａ、１１１Ｉｎ、９９ｍＴｃ、１６１Ｔｂ、１６９Ｙｂ、１８６Ｒｅまたは１７７Ｌｕである。
【００１１】
好適なβ放射する放射性核種は、放射性治療的適用に有用であるもの、例えば、９０Ｙ、６７Ｃｕ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１６９Ｅｒ、１２１Ｓｎ、１２７Ｔｅ、１７７Ｌｕ、１４３Ｐｒ、１９８Ａｕ、１０９Ｐｄ、１６５Ｄｙ、１４２Ｐｒまたは１５３Ｓｍを含む。
【００１２】
好適なα放射する放射性核種は、治療的処置で使用されるもの、例えば、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉまたは２０１ＴＩである。
【００１３】
化合物Ａは、遊離または塩形態で存在し得る。塩は、例えば無機酸、ポリマー性酸または有機酸との酸付加塩、例えば、塩酸、酢酸、乳酸、アスパラギン酸、安息香酸、コハク酸またはパモ酸とのものである。酸付加塩は、例えば、１または２酸当量が、遊離塩基形態の化合物Ａに付加されるかに依存して一または二価塩で存在し得る。好ましい塩は、乳酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩およびパモ酸塩であって、モノまたはジ塩、より好ましくは、アスパラギン酸ジ塩およびパモ酸モノ塩を含むものである。
【００１４】
コンジュゲート性化合物Ａは追加的には、キレート化基中に存在するとき、カルボン酸基とで得られ得る塩形態、例えばアルカリ金属塩、例えばナトリウムまたはカリウムまたは置換または非置換アンモニウム塩として存在し得る。
【００１５】
本発明はまた、化合物Ａの製造方法を含む。それは既知方法、例えば：
ａ）保護され、ポリマー結合され、または非保護形態の線形ペプチドを、化合物Ａを取得するやり方で環形成させ、それから所望により保護基（複数もある）を除去すること、
ｂ）キレート化基とともに連結しているコンジュゲート性化合物Ａおよび保護されまたは非保護形態の化合物Ａを製造し、それから所望により保護基を除去すること、
および、遊離形態、塩形態または所望により検出可能または放射性治療用元素と複合体化されている、こうして取得した化合物Ａまたはコンジュゲート性化合物Ａを回収すること、
と類似して、製造し得る。
【００１６】
どのアミノ酸がＣ末端位置にあり、ペプチド鎖を開始するように選択されているかは、一般に重要ではなく、なぜなら、線形ペプチドを環形成させるからである。ただし、線形ペプチド中のアミノ酸の配列を、化合物Ａ中のそれに対応させることのみを条件とする。しかし、他のアミノ酸を上回る１の開始アミノ酸を優先し得る他の要因が存在し得る。化合物Ａが固相合成によって調製されるとき、該第１アミノ酸を樹脂、例えば、商業的入手可能ポリスチレンに基づく樹脂に、好適なリンカー、例えば側鎖保護をインタクトに保持する温和な条件下で切断可能なリンカー、例えばＳＡＳＲＩＮを介して、または所望により置換トリチルに基づくリンカー、たとえば４−（ヒドロキシ−ジフェニル−メチル）−安息香酸であって、ここで該フェニル基が所望により例えばＣｌで置換されているものを介して好ましくは結合させる。望まれるペプチド鎖の確立は、慣行態様で、例えばアミノ酸単位であって、該末端アミノ基が、Ｆｍｏｃ保護され、側鎖アミノ基は存在する場合は異なるアミノ保護基、例えばＢｏｃまたはＣＢＯで保護されるアミノ酸単位を使用して、実施し得る。好ましくは該リンカーペプチドを、Ｔｙｒ（４−Ｂｚｌ）−ＯＨおよびＰｈｅ、例えばＰｈｅ−｛４−（ＮＨＲ１−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−）Ｐｒｏ｝−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ（Ｒ２）−Ｌｙｓ（ε−ＮＨＲ３）−Ｔｙｒ（４−Ｂｚｌ）−ＯＨまたはその官能性誘導体であって、ここでそれぞれのＲ１、Ｒ２およびＲ３がアミノ保護基であるものの間の結合を生じるやり方で環形成する。環形成ステップａ）は、簡便には既知方法にしたがって、例えばアジド、活性エステル、混合無水物またはカルボジイミドを介して実施し得る。その後該保護基を、トリフルオロ酢酸でまたは水素化による、例えば切断によって除去し得る。
【００１７】
ペプチドであって、該第１アミノ酸がＮαおよびＣ末端保護形態であり、そして側鎖、例えばＬｙｓのε―アミノ官能基を介して、またはバックボーンアンカー形成によって結合されるペプチドの環形成はまた、固体支持体上で直接的に実施し得る。線形配列を次いで、標準的固相合成（ＳＰＰＳ）手法にしたがって合成する。該Ｃ末端保護の切断後、該ペプチドを例えば前記の様に環形成させる。その後該環ペプチドを樹脂から切断し、および脱保護する。
【００１８】
望まれれば、Ｐｒｏ上に存在する側枝鎖を、ステップａ）のペプチド環形成の前または後に該アミノ酸上に導入し得る。こうして、出発アミノ酸または出発線形または環式ペプチドであってそれぞれの場合にＰｒｏがＯＨで環置換されているものとしてのＰｒｏを、変換して、それぞれ化合物Ａまたは望まれるＰｒｏ単位または対応する線形ペプチドであって、ここでＰｒｏがＮＨＲ１−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−によって置換されているものを提供し得る。
【００１９】
コンジュゲート性化合物Ａの複合体化は、該コンジュゲート性化合物Ａを、対応する検出可能または放射性治療用元素と反応させることによって実施し得、化合物、例えば金属塩、好ましくは水溶性塩を得る。該反応を、既知方法、例えば、Ｐｅｒｒｉｎ， Ｏｒｇａｎｉｃ ｌｉｇａｎｄ， Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｄａｔａ，Ｓｅｒｉｅｓ ２２． ＮＹ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ（１９８２）に； Ｋｒｅｊｃａｒｉｔ ａｎｄ Ｔｕｃｋｅｒ， Ｂｉｏｐｈｙｓ． ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍ． ７７： ５８１（１９７７）におよびＷａｇｎｅｒ ａｎｄ Ｗｅｌｃｈ， Ｊ． Ｎｕｃｌ． Ｍｅｄ． ２０：４２８（１９７９）に開示されたような方法と類似して実施し得る。
【００２０】
以下の例は本発明を説明する。すべての温度は℃である。
略語
ＡｃＯＨ＝酢酸
Ｂｏｃ＝ｔｅｒｔ．−ブトキシ−カルボニル
Ｂｚｌ＝ベンジル
ＣＢＯ＝カルボベンズオキシ
ＤＩＰＣＩ＝Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド
ＤＰＰＡ＝ジフェニルホスホリラルアジド
Ｆｍｏｃ＝フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＯＢＴ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｏｓｕ＝Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
【００２１】
実施例１：シクロ［｛４−（ＮＨ２−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−）Ｐｒｏ｝−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ（４−Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ］
ａ）Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｂｏｃ）−ＯＨの合成
Ｌ−ヒドロキシプロリンメチルエステルヒドロクロリドを、水性１．０Ｎ　炭酸ナトリウム／ＴＨＦ中で室温でＦｍｏｃ−Ｏｓｕと反応させる。該反応の完了後、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ（４−ＯＨ）−ＯＭｅを沈殿によって単離する。Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ（４−ＯＨ）−ＯＭｅを次いで、ＴＨＦ中のトリスホスゲン（０．６当量）の溶液を滴状に添加し、クロロカルボネート中間体を得る。１時間後、ジメチルアミノピリジン（１．０当量）およびＮ−Ｂｏｃ−ジアミノエタン（６．０当量）を添加し、そして該反応物を、室温で撹拌する。反応完了後、溶媒を減圧除去し、そして得られたＦｍｏｃ−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｂｏｃ）−ＯＭｅを、酢酸エチル／０．１Ｍ　ＨＣｌの２相系から抽出し、粗生成物（ＭＨ＋＝５５４）を得、これを酢酸エチルからの結晶化によって精製する。該メチルエステルを次いで、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｂｏｃ）−ＯＨをシリカゲル上で精製する。［（Ｍ＋Ｎａ）］＋＝５６２）。
【００２２】
ｂ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｂｏｃ−）Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ−（Ｂｏｃ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ
商業的入手可能Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｏ−ＣＨ２−Ｐｈ（３−ＯＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−ポリスチレン樹脂（ＳＡＳＲＩＮ−樹脂，２．４ｍＭ）を、出発材料として使用し、そしてＮα−脱保護（ピペリジン／ＤＭＦ，２：８）、ＤＭＦでの反復洗浄およびカップリング（ＤＩＰＣＩ：４．８ｍＭ／ＨＯＢＴ：６ｍＭ，ＤＭＦ）の反復サイクルからなる標準的プロトコールによって実施する。以下のアミノ酸誘導体を逐次的に、カップリングする：Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｇ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−Ｏｈ。カップリング（２当量アミノ酸）を、完了まで、すなわち陰性「Ｋａｉｓｅｒ］ニンヒドリン試験によって監視される、残留アミノ基の十分な消失まで継続または反復する。完全に組みたてられた保護された線形ペプチドの、その樹脂支持体からの切断前に、最終樹脂からのＮα−Ｆｍｏｃ保護を除去する。
【００２３】
ｃ）Ｈ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｂｏｃ）−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ
ＣＨ２Ｃｌ２での洗浄後、該ペプチド−樹脂を、カラムまたは撹拌サクションフィルターに移動させ、そして該ペプチドフラグメントを切断し、そして１時間以内のＣＨ２Ｃｌ２中２％ＴＦＡでの短い処理で溶出させる。該溶出物を直ちに、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で中和する。該有機溶液を分離し、そして蒸発させ、そして保護された側鎖（ＭＨ＋＝１３６６）をさらなる精製なく環形成させる。
【００２４】
ｄ）シクロ［−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２）−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ−］、トリフルオロアセテート
前記線形フラグメントを、ＤＭＦ（４ｍＭ）中に溶解し、−５℃に冷却し、そして２当量ＤＩＰＥＡ次いで１．５当量ＤＰＰＡで処理し、そして完了まで（約２０時間）０−４℃で撹拌する。該溶媒を、減圧でほとんど完全に除去し；該濃縮物を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３、水で洗浄し、乾燥し、そして減圧で蒸発させた。
【００２５】
脱保護のために、該残基を、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ　９５：５（約５０ｍＭ）中に０℃で溶解し、そして３０分間冷却において撹拌する。該生成物を次いで、約１０当量ＨＣｌを含有するエーテルで沈殿させ、エーテルで洗浄し、そして乾燥する。残りのインドール−Ｎカルバミン酸を完全に分解するために、該生成物を５％ＡｃＯＨ中に溶解し、そして約５℃で１５時間後に凍結乾燥する。分取ＲＰ−ＨＰＬＣを０．５％ＴＦＡないし７０％アセトニトリル中の０．５％ＴＦＡの勾配を使用して、Ｃ−１８　１０μｍ　ＳＴＡＧＲＯＭＡカラム（５−２５ｃｍ）上で実施する。純粋な表題化合物を含むフラクションを合わせ、水で希釈し、そして凍結乾燥する。凍結乾燥物を水中に溶解し、次いで水中１０％ＮａＣＯ３で沈殿させる。該固体遊離塩基を濾別し、水で洗浄し、そして室温で真空で乾燥する。得られた白色粉末を直接的に種々の塩のために使用する。
【００２６】
実施例２：塩形態のシクロ［｛４−（ＮＨ２−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−）Ｐｒｏ｝−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ（４−Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ］
ａ．酢酸塩
酢酸塩形態への変換を、イオン交換樹脂（例えばＡＧ２−Ｘ４）を使用して実施する。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ５２４．５［Ｍ＋２Ｈ］２＋［α］Ｄ２０＝−４２°、ｃ＝０．２６ＡｃＯＨ９５％中。
【００２７】
ｂ．アスパラギン酸塩
モノまたはジアスパラギン酸塩への変換を、実施例１の化合物の１当量を、１または２当量のアスパラギン酸と、アセトニトリル／水１：３の混合物中で反応させることによって取得する。得られた混合物を凍結し凍結乾燥する。該ジアスパラギン酸塩を、また、実施例１の化合物を、水／アセトニトリル４：１中に溶解し、濾過し、イオン交換樹脂、例えばＢｉｏＲａｄＡＧ４Ｘ４カラム上に負荷し、そして水／アセトニトリル４：１で溶出させる。得られた溶離物を濃縮し凍結しそして凍結乾燥する。［α］Ｄ２０＝−４７．５°、ｃ＝２．５ｍｇ／ｍｌメタノール中。
【００２８】
ｃ．安息香酸塩
安息香酸塩への変換を、実施例１の化合物を、２当量の安息香酸と、アセトニトリル／水１：２の混合物中で溶解することによって取得し得る。得られた混合物を凍結し凍結乾燥する。
【００２９】
ｄ．パモ酸塩
１当量の実施例１の化合物を、１当量のエンボン酸（ｅｍｂｏｎｉｃ ａｃｉｄ）と一緒に、アセトニトリル／ＴＨＦ／水２：２：１の混合物中に溶解する。得られた混合物を凍結しそして凍結乾燥する。
【００３０】
実施例３：シクロ［｛４−（ＤＯＴＡ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−Ｏ−）Ｐｒｏ｝−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ（４−Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ
ａ）シクロ［−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ２）−Ｐｈｇ−Ｄｔｒｐ−Ｌｙｓ（Ｃｂｏ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ−］、トリフルオロ酢酸塩
ａ）酢酸塩
酢酸塩形態への変換を、イオン交換樹脂（例えば、ＡＧ　３−Ｘ４）を使用して実施する。ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ５２４．５［Ｍ＋２Ｈ］２＋［α］Ｄ２０＝−４２°、ｃ＝０．２６ＡｃＯＨ９５％中。
ｂ）４００ｍｇの商業的入手可能ＤＯＴＡｘ２Ｈ２Ｏ（ＳＹＭＡＦＥＸ−フランス）を、２０ｍｌ水に溶解する。２０ｍｌＤＭＦの添加後、１７０ｍｇのシクロ［−Ｐｒｏ（４−ＯＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２―ＣＨ２−ＮＨ２）−Ｐｈｇ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ（ＣＢＯ）−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ）−Ｐｈｅ−］、１９０ｍｇＤＣＣｌと一緒に、および６０ｍｇのＮ−ヒドロキシスクシンイミドを添加する。得られた懸濁物を室温で７２時間維持する。濾過後、溶媒を減圧下で除去し、そして残留粗生成物を、シリカゲル上で精製する（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ５０％８／２／０．２５――＞７／３／１移動相として）。
【００３１】
ｃ）脱保護のために、前記ＤＯＴＡ−コンジュゲートを５ｍｌトリフルオロ酢酸／チオアニソール（９／１）で室温で２時間処理する。その後、該溶液を１００ｍｌジエチルエーテル＋５ｍｌ　３Ｎ　ＨＣｌ／ジエチルエーテルの混合物中に注ぎ、そして得られた沈殿物を、濾過によって単離する。精製を、移動相としてＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ５０％７／４／２――＞７／５／４を使用してシリカゲル上で実施する。分析的に純粋な最終生成物を、ＲＰ１８−ＨＰＬＣカラム（Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ２５０ｘ４．６ｍｍ）上で０．１％ＴＦＡないし９０％ＣＨ３ＣＮ中の０．１％ＴＦＡ勾配を使用する脱塩ステップ後に取得する。
【００３２】
遊離形態または薬学的に許容される塩形態の化合物Ａおよび複合体は、インビトロおよびインビボで示される有益薬理学的特性を示し、そしてしたがって治療のために適用される。
【００３３】
特に、化合物Ａは、ヒトソマトスタチンレセプター（ｈｓｓｔ）、特にｈｓｓｔ１、ｈｓｓｔ２、ｈｓｓｔ３、およびｈｓｓｔ５について興味深い結合プロファイルを示す。５種類のソマトスタチンレセプターサブタイプである、ｓｓｔ１、ｓｓｔ２、ｓｓｔ３、ｓｓｔ４およびｓｓｔ５はクローニングされ、そして特性把握された。ｈｓｓｔ１、ｈｓｓｔ２およびｈｓｓｔ３およびこれらの配列は、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．， ８９， ２５１−２５５（１９９２）中Ｙ． Ｙａｍａｄａ ｅｔ ａｌ．， によって開示された。ｈｓｓｔ４およびその配列は、Ｐｒｏｃ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．， ９０， ４１９６−４２００（１９９３）中Ｌ． Ｒｏｈｒｅｒによって開示された。ｈｓｓｔ５およびその配列は、Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ４５， ４１７−４２７， １９９３中Ｒ． Ｐａｎｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．， によって記載された。
【００３４】
結合アッセイは、選択的にかつ安定的にｈｓｓｔ１、ｈｓｓｔ２、ｈｓｓｔ３、ｈｓｓｔ４またはｈｓｓｔ５を発現する細胞株、例えば、ＣＨＯまたはＣＯＳ細胞からの膜を使用して、以下に開示のように実施し得る。
【００３５】
膜を、既知方法、例えば、Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｊ．， １９９０， ６５，ｐａｇｅ ３９−４４中Ｃ． Ｂｒｕｎｓ ｅｔ ａｌ．，によって開示されたように調製する。ｈｓｓｔ選択性細胞株、例えばｈｓｓｔ１またはｈｓｓｔ２またはｈｓｓｔ３またはｈｓｓｔ４またはｈｓｓｔ５を安定的に発現するＣＨＯまたはＣＯＳから調製された膜を、０．５％ＢＳＡを含む１０ｍｍｏｌ／ｌ　Ｈｅｐｅｓバッファー（ｐＨ７．６）中の［１２５Ｉ−Ｔｙｒ１１］−ＳＲＩＦ−１４の増加濃度で、３０分２２℃で３００μｌの総体積中で３反復でインキュベートする。インキュベーションを、急速濾過によって終結しそしてフィルターをカウンターでカウントする。特異的結合は、総結合マイナス１μｍｏｌ／ｌソンマトスタチン−１４の存在下の非特異的結合である。実験を３反復で実施する。親和性定数（Ｋｐ）および結合部位の数を、適当な統計およびグラフィカルプログラムを使用して算出する。
【００３６】
化合物Ａは前記結合アッセイで、ｈｓｓｔ１、ｈｓｓｔ２、ｈｓｓｔ３および／またはｈｓｓｔ５に対して、ナノモル範囲のＩＣ５０、好ましくは０．１ないし１０ｎＭのＩＣ５０（ＩＣ５０＝ｈｓｓｔ１−５特異的放射性リガンドとして［１２５Ｉ−Ｔｙｒ１１］−ＳＲＩＦ−１４を使用する競合結合アッセイでの半分−最大阻害についての濃度。
【００３７】
【表１】
2004505095.tif 000003
【００３８】
化合物Ａはまた、成長ホルモン分泌促進剤レセプターへ結合する。そのようなレセプターは、Ｇ． Ｍｕｃｃｉｏｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１９９８， １５７， ９９−１０６によって、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １９９８， １３９， ４３２−４３５中Ｈ． Ｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，によっておよびＲ．Ｇ．Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．， Ｈｏｒｍ． Ｒｅｓ．， １９９９，３），１−８によって開示されている。これらのレセプターヘの結合アッセイを、Ｊ． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ． Ｉｎｖｅｓｔ． ２４：ＲＣ１−ＲＣ３， ２００１に開示のように実施し得る。このアッセイでは、化合物Ａは１２５Ｉ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−ヘキサレリンを置換する。化合物Ａはしたがって、成長ホルモン分泌促進剤レセプターの活性を調節するため有用であり、体重獲得または代謝調節において可能な役割を指摘する。
【００３９】
さらに、化合物Ａは、ＧＨ−放出阻害活性を示し、培養下垂体細胞からのインビトロでのＧＨ放出の阻害によって示されるとおりである。例えば、成体オスラットからの脳下垂体前葉を、小断片に切断し、２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳバッファー中の０．１％トリプシンを使用して分散させる。分散した細胞を、５％ウシ胎児血清、５％ウマ血清、１ｍＭ　ＮａＨＣＯ３、２．５ｎＭ　デキサメタゾン、２．５ｍｇ／ｍｌ　インスリンおよび２０Ｕ／ｍｌ　Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐで補足したＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ）中で４日間培養する。実験の日に、付着した細胞を、２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳで緩衝しそして５ｍＭグルコースおよび０．２％　ＢＳＡで補足したＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ培地で２回洗浄する。次に該細胞を３ｘ１０−１０成長ホルモン放出因子の存在下、化合物Ａと３時間インキュベートする。培地に放出された成長ホルモンの量を、ＲＩＡによって測定する。化合物Ａは、このアッセイで０．４ｍＭのＩＣ５０を有する。
【００４０】
化合物Ａは、ラットでは成長ホルモン（ＧＨ）の放出を阻害する。化合物Ａを、麻酔ラットにｓ．ｃ．投与する。血液を、該化合物の投与１時間後脱捕捉後に収集する。作用の期間を薬物処置６時間後の基礎ＧＨ分泌の阻害に基づいて評価する。ホルモンレベルを、処置１時間および６時間後にＲＩＡによって測定する。ホルモン分泌の阻害についてのＩＤ５０−値を、それぞれの実験についてグラフ的に決定し（ｌｏｇプロビット）、そして得られた値を対数的に平均化する。このインビボモデルでは、化合物Ａは、作用の長期間で成長ホルモン放出を有意に阻害する（平均基礎ＩＤ５０＝５．５μｇ／ｋｇｓ．ｃ．６時間）。インスリンへの影響を測定するための類似アッセイでは、化合物Ａはインスリン分泌を阻害する。
【００４１】
ＧＨの有力および有効な阻害をまた、サルでの実験で確認した。さらに、糖尿病性サルでの代謝的実験は、化合物Ａの有力な抗糖尿病／インスリン−増感化効果を実証した。
【００４２】
さらに、化合物Ａは、オスラットを使用する標準的試験で示されるようにインビボのＩＧＦ−１血漿レベルを阻害する。簡単には、化合物Ａをｓ．ｃ．に埋め込まれた浸透圧ポンプによって、Ｌｅｗｉｓ株のオスのラットに投与する。血液サンプルを、例えばイソフルランでの短時間麻酔状態を使用して延髄後叢から収集する。このアッセイでは、化合物Ａは長時間継続する効果を有してＩＧＦ−１血漿レベルを有意に低下させる：例えば、６０％以上の阻害が、１０μｇ／ｋｇ／ｈの化合物Ａの処置の１４日後に観察される。より特に、１０μｇ／ｋｇ／ｈで１２６日まで化合物Ａで連続的に点滴された大動脈または腎臓同種移植片のラットレシピエントでの連続的処置後に、エスケープが観察されない。これは、ＩＧＦ−１血漿レベルの有意な、かつ永続的な低減化を誘導する。
【００４３】
化合物Ａはよって、例えばアクロメガリー、並びにＩ型またはＩＩ型糖尿病、特にその合併症、例えば血管障害、糖尿病性増殖性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、ネフロパシー、ニューロパシー、および曙現象、およびインスリンまたはグルカゴン放出に関連する他の代謝障害、例えば肥満、例えば、病的肥満または視床下部または低インスリン性肥満の処置での、過剰ＧＨ分泌および／またはＩＧＦ−１の過剰を含むまたは連関する、病因を有する障害の予防または処置にの処置のために有用である。化合物Ａはまた、腸皮および膵皮膚瘻、過敏性腸症候群、炎症性疾患、例えば、グレーブス病、炎症性腸疾患、乾癬またはリウマチ様関節炎、多発性嚢胞腎、ダンピング症候群、水様便症候群、ＡＩＤＳ関連性下痢、化学治療誘導性下痢、急性または慢性膵炎および胃腸ホルモン分泌腫瘍（例えば、ＧＥＰ腫瘍、例えば、ビポーマ、グルカゴノーマ、インスリノーマ、カルシノイドなど）リンパ球悪性腫瘍、例えば、リンホーマまたは白血病、間細胞性癌並びに消化管出血、例えば、水痘性食道出血の処置に有用である。
【００４４】
化合物Ａはまた、ソマトスタチンレセプター陽性である腫瘍、例えば、ｈｓｓｔ１、ｈｓｓｔ２、ｈｓｓｔ３および／またはｈｓｓｔ５を有する腫瘍の処置に有用であり、そのようなソマトスタチンレセプターを有する種々の癌細胞株での増殖試験で示されるとおりである。
【００４５】
ＡＲ４２Ｊラット膵腫瘍細胞株は、アザセリン誘導性エキソクリン膵腫瘍から由来する（Ｊｅｓｓｏｐ ａｎｄ Ｈａｙ， １９８０）。マイコプラズマ細胞フリーカルチャーを、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）で補足したＤＭＥＭ中で５％ＣＯ２で増殖させる。細胞を、抗生物質または抗真菌性物質の不存在下で成長させる。サブコフルエントＡＲ４２Ｊ細胞を、トリプシン化し、ＤＭＥＭ＋２．５％　ＦＣＳ中に希釈し、そして非被覆９６ウェルプレートにまく。４８時間インキュベーション期間の後（０日）、別個のコントロールプレート中の細胞の数を、Ｃｏｕｌｔｅｒカウンターで細胞をカウントすることによっておよびＳＲＢ比色分析アッセイによって決定する。細胞を次いで、種々の濃度で２ないし４日に化合物Ａに曝露し、そしてカウントする。これらの条件下、化合物Ａは、１０−１２ないし１０−６の範囲の濃度で腫瘍細胞の増殖を阻害する。
【００４６】
インビボの腫瘍成長実験
１９−２２ｇ体重のメスヌードマウスを、５動物の群で維持し、そして飲料水および病原体フリーげっ歯動物飼料を自由に与える。皮下腫瘍を、培養ＡＲ４２Ｊ細胞からイニシエートさせる。処置を、腫瘍細胞の接種２−４日後に開始し、化合物Ａを連続点滴、例えば、１０ないし５０μｇ／ｋｇ／時の割合で投与する。腫瘍のサイズをカリパーで測定する。統計的計算のために、スチューデントのｔ検定を適用する。このアッセイでは、化合物Ａは１１日に腫瘍成長を、塩水コントロールに対して５１％阻害する。
化合物Ａはこうして、悪性細胞増殖性疾患、例えば癌腫瘍、特にそれが結合親和性を有するソマトスタチンレセプター型を有する腫瘍、例えば、複合体化コンジュゲート性化合物Ａについて以下に開示のようなものの処置のために有用である。
【００４７】
化合物Ａはまた、血管形成に阻害的効果を有し、標準的試験例えばヌードマウスで示されるとおりである。簡単には、腫瘍細胞（０．１ｍｌ中０．１ないし１０ｘ１０６）（ＳｉＨａ細胞およびＭＤＡ ＭＢ−２３１細胞であって、Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ， Ｅｄ． Ｒ． Ｓｔｅｉｎｅｒ， Ｒ．Ｂ． Ｗｅｉｓｚ ａｎｄ Ｒ． Ｌａｎｇｅｒ， １９９２， Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄに開示されるように調製した）を、皮膚内に接種する。通常は中腹側部位／口を注射し、これらは主な腹側皮膚血管から遠くに位置し、その結果バックグランド血管カウントが低い。コントロール群は、ＰＢＳ中の０．１ｍｌ　０．０２％　トリパンブルーを受容する。注射１０日後、麻酔したマウスを、ＣＯ２吸入によってと殺する。皮膚を、１２．５倍および２５倍拡大で、倒立顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ ＩＭ）によって評価するために、プラスチックリング（４０ｍｍ）　直径）上にマウントする。血管形成の測定として、血管を増殖させ、そして腫瘍と直接的に接続しているものをカウントする。コントロール動物では、注射部位周辺の定義された領域に接続しているこれらの血管をカウントする。この領域は、皮膚腫瘍の平均面積に対応する。後者は、等式３．１４ｘｒ２にしたがってカリパーの使用によって決定する。化合物Ａを腫瘍接種の日にまたは３日後にｓ．ｃ．投与する。コントロール動物を、賦形剤処置する。このアッセイでは、化合物Ａは、例えば０．０１ないし１０００μｇ／ｋｇｓ．ｃ．の用量で投与したときに、血管形成を阻害する。
【００４８】
化合物Ａはこうして、炎症性眼疾患、黄斑浮腫、例えば、類嚢胞黄斑浮腫、特発性類嚢胞黄斑浮腫、滲出性年齢関連性黄斑変性症、脈絡膜血管新生関連性障害および増殖性網膜症を含む、前記で示すような血管形成、炎症性障害の予防または処置に有用である。
化合物Ａはまた、以下の試験示されるとおり平滑筋細胞増殖および移動に阻害効果を有する。
【００４９】
慢性同種移植片拒絶
オスＤＡ（ＲＴ１ａ）ラットの腎臓を、同所移植的にオスＬｅｗｉｓ（ＲＴ１１）レシピエントに移植する。全部で２４動物に移植する。すべての動物を、移植の日に開始して１４日間ｏｓで７．５ｍｇ／ｋｇ／日でシクロスポリンＡで処置し、急性細胞性拒絶を予防する。対側片腎摘出は実施しない。化合物Ａの明確な用量で処置した、またはプラセボのそれぞれの実験群は、６動物を含む。移植１４日後に開始し、レシピエント動物は、化合物Ａの点滴によって１１２日まで処置され、またはプラセボを受容する。移植１４日後、臓器かん流をＭＲＩによって測定する。これを、移植５３−６４日および実験の終わりに反復する。動物を次いで解剖する。このラット腎臓同種移植片モデルの１０μｇ／ｋｇ／時間の用量の化合物Ａの投与は、改善された臓器かん流、並びに慢性拒絶関連性血管リモデリングおよび移植片浸潤（細胞性拒絶）の減少という結果である。ＩＧＦ−１レベルの顕著および不変の低下をまた測定する。これらの結果は、異所移植的マウス心臓同種移植片モデルを使用する第２セットの実験で確認し、血管リモデリング並びに移植片浸潤への有益な影響を実証する。
【００５０】
化合物Ａをまた、ドナーとしてＢ１０．Ａ（２Ｒ）（Ｈ−２ｈ２）マウスおよびレシピエントとしてＢ１０．ＢＲ（Ｈ−２ｋ）マウスを使用するけい動脈ループ移植モデルで処置した。簡単には、ドナーけい動脈を、末端ないし側面吻合術によってレシピエントのけい動脈に、ループとして亜所的に移植する。５０μｇ／ｋｇ／時の割合の化合物Ａを送達するミニポンプを、移植直後にｓ．ｃ．配置する。けい動脈移植片を、移植３０日後に収集し、血管リモデリングを、例えばコンピューター援助システムを使用する、Ｖｅｒｈｏｅｆｆエラスチン染色したパラフィン切片のモルホメトリック分析によって分析する。このモデルでは、化合物Ａは、広範な新生内膜が形成される非処置動物と比較して新生内膜形成を阻害する。
【００５１】
血管形成
血管形成の実験を、バルーンカテーテル損傷のラットモデルで実施する。バルーンカテーテル化を、本質的にＰｏｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．（１９８９）によって記載されるように０日に実施する。イソフルオレン麻酔法下で、Ｆｏｇａｒｔｙ ２Ｆカテーテルを、左総けい動脈に導入し、斉一脱内皮化を取得する。カテーテルを次いで除去し、外部けい動脈周辺に結糸を配置し、そして動物を回復するにまかせる。１２ＲｏＲｏラットの２群（４００ｇ、近似的に２４週齢）：１コントロール群および化合物Ａを受容する１群を実験に使用し、そしてラットを完全に無作為化する。化合物Ａを、バルーン損傷の２日前に（−３日）開始し、バルーン損傷の１４日後の実験の終わりまでで、ミニポンプを使用する連続点滴によって投与する。ラットを次いで、イソフルオレンで麻酔し、そして０．１Ｍ　リン酸緩衝塩水溶液（ＰＢＳ、ｐＨ７．４）で、それから１５分間リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中の２．５％　グルタルアルデヒドでかん流する。けい動脈を次いで切除し、周辺組織から分離し、そして７％サッカロースを含む０．１Ｍ　カコジレートバッファー（ｐＨ７．４）中に浸し、そして終夜４℃でインキュベートする。後の日、けい動脈を次いで、製造者の推奨にしたがってＴｅｃｈｎｏｖｉｔ７１００に包埋する。媒体、新生内膜および管腔の横断切片面積を、画像分析システム（ＭＣＩＤ， Ｔｏｒｏｎｔｏ， Ｃａｎａｄａ）の手段によってモルホメトリック的に評価する。このアッセイでは、化合物Ａは新生内膜肥厚化を有意に阻害する。
【００５２】
化合物Ａはこうしてまた移植片血管疾患、例えば臓器、例えば心臓、肺、心臓と肺の組み合わせ、肝臓、腎臓の移植または膵臓移植における、例えば同種または異種移植片血管病理、例えば移植血管アテローム性動脈硬化症を、予防または駆逐するために、または静脈移植片狭窄、レステノシスおよび／または経皮管腔間血管形成術、レーザー処置またはその他の侵襲的手法であって血管脈管内膜または内皮のインテグリティを崩壊させるもののようなカテーテル化手法または血管そうは手法によって生じる血管損傷後の血管閉塞の予防または処置に有用である。
化合物Ａは、有益な血漿半減期を有する。それは１５と３０時間の間の内皮半減期を有する。
【００５３】
すべての前記の適応について、要求される用量は、もちろん例えば宿主、投与の様式および処置すべき状態の重度に依存して変化する。一般にしかし、１μｇないし０．７ｍｇ／ｋｇ／日のオーダーの化合物Ａの投与によって満足な結果が取得される。指摘される患者のための１日用量は、約２μｇないし約５０ｍｇ、好ましくは約０．０１ないし約４０ｍｇ、例えば約０．０１ないし約３ｍｇｓ．ｓ．の化合物であり、例えば約０．５μｇないし約２５ｍｇ、例えば約２μｇないし２０ｍｇ、例えば、２μｇないし１．５ｍｇの化合物Ａを含む単位投与形態で一日に３回までの分割投与で簡便に投与される。
【００５４】
化合物Ａを、遊離形態または薬学的に許容される塩形態または複合体で投与し得る。そのような塩および複合体を、慣行態様で調製し、そして遊離化合物と同じオーダーの活性を示し得る。本発明はまた、遊離塩基形態または薬学的に許容される塩形態または複合体形態の化合物Ａを、１または２以上の薬学的に許容される希釈剤または担体を含む医薬組成物を提供する。そのような組成物を、慣行態様で製剤化し得る。化合物Ａはまた、例えば生物分解可能ポリマーまたはコポリマーを含む持続的放出形態で、例えば、インプラント、マイクロカプセル、ミクロスフェアまたはナノスフェア形態で、リポソーム製剤形態で、またはオートゲル、例えば、患者の体液との相互作用後にゲルを形成することにできる固体または半固体組成物の形態で投与し得る。
【００５５】
化合物Ａまたは薬学的に許容される塩またはその複合体を、任意の慣行経路、例えば非経腸的に、例えば注射可能溶液または懸濁液の形態（例えば前記の持続的放出形態）、によって慣行吸収増強剤を使用して経口的に、鼻的または坐薬形態でまたは局所的に、例えば、眼科用液体、ゲル、軟膏、懸濁調製物、例えば、リポソーム、ミクロスフェアまたはナノスフェア製剤、例えば、点眼または結膜下または目内または目の辺縁注射の形態で投与し得る。
【００５６】
前記にしたがって本発明はさらに以下を提供する：
１．医薬としての使用のための化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩または複合体；
２．処置の必要なる対象に前記のような疾患または障害を予防または処置する方法であって、当該対象に有効量の化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩または複合体を投与することを含む方法；または
３．前記２．で定義のような任意の方法で使用するための医薬組成物の製造のための使用のための、化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩または複合体。
【００５７】
コンジュゲート性化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩は、検出可能元素、例えば、γまたは陽電子を放射する核種、蛍光金属イオン、または常磁性イオン、例えば、１１１Ｉｎ、１６１Ｔｂ、１７７Ｌｕ、８６Ｙ、６８ＧａＥｕ３＋、Ｇｄ３＋、Ｆｅ３＋。Ｍｎ２＋またはＣｒ２＋と複合体化させたときに、例えばソマトスタチンレセプター陽性組織および細胞、例えばソマトスタチンレセプター陽性腫瘍および転移、炎症性または自己免疫性障害であってソマトスタチンレセプターを示すもの、結核または移植後の臓器拒絶の可視化のような造影剤として、またはαまたはβ放射する核種またはオージェ電子カスケードを有する核種、例えば、９０Ｙ、１６１Ｔｂ、１７７Ｌｕ、２１１Ａｔ、２１３Ｂｉまたは２０１ＴＩと複合体化したときに、ソマトスタチンレセプター陽性腫瘍および転移、リウマチ様関節炎および重症炎症状態のインビボの処置のための放射性医薬として有用であり、標準的試験によって示されるとおりである。
【００５８】
特に、該コンジュゲート性化合物Ａは、約８ないし１０のｐＫｉ値でソマトスタチンレセプターに結合することが、観察される。例えば、１１１Ｉｎ、８８Ｙ、９０Ｙまたは１７７Ｌｕと複合体化した実施例３の化合物は、ｎＭ範囲で、化合物Ａの結合プロファイルにしたがってそれぞれのｓｓｔサブタイプに結合する。
【００５９】
ソマトスタチンレセプターについての、コンジュゲート性化合物Ａおよびその複合体のアフィニティは、例えば、ＧＢ−Ａ−２２２５５７９に開示されたような標準的試験方法にしたがってインビボ試験によって示すことができる。例えば、例えば１１１Ｉｎ、８８Ｙ、９０Ｙまたは１７７Ｌｕと複合体化させた実施例３の化合物は、ｈｓｓｔ２レセプターを発現する外分泌性膵腫瘍を有するマウスまたはラットへの注射４時間後、有意な腫瘍蓄積を与える。
【００６０】
複合体形態のコンジュゲート性化合物Ａ、例えば、０．１ないし５ｍＣｉ放射性核種、好ましくは０．１ないし２ｍＣｉで標識された、１ないし５μｇ／ｋｇの用量の、１１１Ｉｎ、１７７Ｌｕ、８６Ｙまたは１６１Ｔｂ複合体化化合物Ａの投与後に、腫瘍部位が検出可能となる。
【００６１】
αまたはβ放射する放射性核種またはオージェ電子カスケードを有する核種で放射性標識されたとき、コンジュゲート性化合物Ａは、ソマトスタチンレセプターを有する腫瘍細胞への、抗増殖性および／または細胞毒性効果を示し、例えば、ヌードマウス試験で示されるとおりである。
【００６２】
ヌードマウスに、前開示ＡＲ４２Ｊラット膵腫瘍細胞またはＮＣＩ−Ｈ６９ヒト小細胞肺癌細胞を接種する。腫瘍が１ないし２ｃｍ３に達したときに、動物を、コントロールおよび処置群に無作為化する。複合体形態のコンジュゲート性化合物Ａを、ｉ．ｐ．またはｉ．ｖ．注射によって投与する。４０ｍＣｉ／ｋｇまでの用量をマウスあたり与える。腫瘍のサイズを、前開示のようにカリパーで決定する。統計的計算のために、スチューデントのｔ検定を適用する。この試験では、当初の５０％までの一過性腫瘍収縮が、１週間後に観察され、そして９０Ｙと複合体化した実施例３の化合物を単一適用すると、腫瘍成長が遅延する。対照的に、コントロール群は、約７日の体積倍化時間で連続的腫瘍成長を示した。
【００６３】
よって、一連の具体的または代替的実施態様で、本発明はまた以下を提供する：
４．対象における、ソマトスタチンレセプター陽性細胞および組織、例えば、ソマトスタチンレセプター陽性腫瘍および転移のインビボ検出、および当該複合体によって標的化されるレセプターの局在化を記録するための、検出可能元素と複合体化したコンジュゲート性化合物Ａの使用；
５．対象における、ソマトスタチンレセプター陽性組織および細胞、例えば、ソマトスタチンレセプター陽性腫瘍および転移のインビボ検出方法であって、検出可能元素と複合体化されたコンジュゲート性化合物Ａ、または薬学的に許容される塩形態を当該対象に投与すること、および当該複合体によって標的化されるレセプターの局在化を記録することを含む方法。
【００６４】
造影剤としての使用のための複合体化形態のコンジュゲート性化合物Ａを、例えば静脈内に、例えば、注射可能溶液または懸濁液、好ましくは単一注射の形態で投与し得る。放射性標識化は、好ましくは、対象ヘの投与の少し前に実施し得る。
【００６５】
動物では、適用される用量範囲は、０．０２ないし０．５ｍＣｉγ放射する放射性核種と複合体化された０．０１ないし１μｇ／ｋｇのコンジュゲート性化合物Ａであり得る。より大きい哺乳動物、例えばヒトでは、適用される用量範囲は、例えば１ないし１００ｍＣｉ／ｍ２の検出可能元素、例えば、１１１Ｉｎ、８６Ｙまたは１７７Ｌｕと複合体化された、１ないし１００μｇ／ｍ２のコンジュゲート性化合物Ａであり得る。
【００６６】
６．αまたはβ放射する核種またはオージェ電子カスケードを有する核種と複合体化されたコンジュゲート性化合物Ａの、ソマトスタチンレセプター陽性腫瘍および転移のインビボ処置のための使用。
７．ソマトスタチン陽性腫瘍および転移のインビボ処置のための、例えば、そのような腫瘍成長と連関するそのような腫瘍または症状の侵襲を処置するための、そのような処置の必要のある対象での方法であって、当該対象に治療有効量の、αまたはβ放射する核種またはオージェ電子カスケードのある核種と複合体化されたコンジュゲート性化合物Ａを投与することを含む方法。
８．造影剤または放射性医薬組成物の製造における、コンジュゲート性化合物Ａまたはその薬学的に許容される塩の使用。
【００６７】
本発明の放射治療的使用を実施化するときに使用される用量は、もちろん、例えば、処置すべき特定状態、例えば、ソマトスタチンレセプターを発現する正常臓器への既知の放射性毒性、腫瘍の体積および望まれる治療に依存して変化する。一般に、用量は、健康臓器で取得した薬理動態および放射活性分布データの基礎により、および観察された標的取りこみに基づいて算出する。コンジュゲート性化合物Ａのβ放射複合体は、反復的に、例えば、１ないし３月の期間にわたり投与し得る。
【００６８】
動物では、適用される用量範囲は、１５ないし７０ｍＣｉのαまたはβ放射核種またはオージェ電子カスケードのある核種、例えば９０Ｙ、１７７Ｌｕまたは１６１Ｔｂと複合体化された、２０ないし１００μｇ／ｋｇ　コンジュゲート性化合物Ａであり得る。より大きい哺乳動物、例えば、ヒトでは、指摘される用量範囲は、１ないし１００ｍＣｉ／ｍ２のαまたはβ放射する核種またはオージェ電子カスケードのある核種、例えば９０Ｙ、１７７Ｌｕまたは１６１Ｔｂと複合体化された１ないし１００μｇ．ｍ２の化合物Ａであり得る。
【００６９】
放射性治療物質としての使用のための複合体化形態のコンジュゲート性化合物Ａを、任意の慣行経路によって、例えば静脈内に、例えば、注射可能溶液の形態で投与し得る。それは、有利には点滴によって、例えば、１５ないし６０分にわたる点滴によってまた投与し得る。腫瘍の部位に依存して、腫瘍部位に可能な限り接近して、例えば、カテーテルの手段によって投与し得る。本発明はまた、遊離塩基形態のまたは薬学的に許容される塩形態または検出可能または放射性治療物質と複合体化されたコンジュゲート性化合物Ａを、１または２以上の薬学的に許容される希釈剤または担体とともに含む医薬組成物を提供する。
【００７０】
化合物Ａまたは複合体化形態のコンジュゲート性化合物Ａは、ソマトスタチンレセプターを発現または蓄積する腫瘍、例えば、下垂体、胃腸膵臓、類癌腫、中枢神経系、乳、前立腺（進行したホルモン難治性前立腺癌を含む）、卵巣または結腸腫瘍、小細胞肺癌、悪性腸閉塞、傍神経節腫、腎臓癌、皮膚癌、神経芽細胞腫、褐色細胞腫、髄質甲状腺癌腫、ミエローマ、リンホーマ、ホジキンスおよび非ホジキンスリンホーマ、骨腫瘍およびそれらの転移、ならびに自己免疫性または炎症性障害、例えば、リウマチ様関節炎、グレーブス病または他の炎症性目疾患を造影化または処置するために好適であり得る。
【００７１】
本発明の更なる側面にしたがって、コンジュゲート性化合物Ａまたはその複合体を、１または２以上のその薬学的に許容される担体または希釈剤とともに含む医薬組成物を提供する。そのような組成物を、慣行態様で製造し得、そして２種の別個の投与形態であって、一方は放射性核種であり、他方はコンジュゲート性化合物Ａであるものを、それらを混合するための指示とともに含むキットの形態で、例えば造影化のために使用し得る。放射性治療のために、複合体化形態のコンジュゲート性化合物Ａは、好ましくは放射性液体組成物の形態であり得る。
【００７２】
化合物Ａまたは複合体形態のコンジュゲート性化合物Ａを、単独活性成分として、または例えばアジュバントとして、他の薬物と組み合わせて投与し得る。化合物Ａを、免疫抑制剤、例えば、カルシニューリンインヒビター、例えば、シクロスポリンＡまたはＦＫ５０６；免疫抑制特性を有する巨大環式ラクトン、例えば、ラパマイシンまたは４０−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−ラパマイシン（ＲＡＤ）；免疫抑制特性を有するアスコマイシン、例えば、ＡＢＴ−２８１、ＡＳＭ９８１、など；コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプレン；メトトレキセート；レフノミド；ミゾリビン；ミコフェノール酸またはその塩、例えば、Ｍｙｆｏｒｔｉｃ（商標）；ミコフェノレートモフェチル；１５−デオキシスパーグアリンまたはその免疫抑制ホモログ、アナログまたは誘導体；加速リンパ球ホーミング剤、例えば、ＦＴＹ７２０；免疫抑制モノクローナル抗体、例えば白血球レセプター、例えばＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５８，ＣＤ８０、ＣＤ８６へのまたはそれらのリガンドへのモノクローナル抗体；他の免疫調節化合物、例えば、少なくとも一部分の、ＣＹＬＡ４の細胞外ドメインを有する組換え結合分子、またはその突然変異体、例えば非ＣＴＬＡ４タンパク質配列に結合された少なくとも一部分の、ＣＹＬＡ４の細胞外ドメインまたはその変異体、例えばＣＴＬＡ４ｌｇ（例えば、命名されたＡＴＣＣ６８６２９）またはその突然変異体、例えばＬＥＡ２９Ｙ；接着分子インヒビター、例えばＬＦＡ−１アンタゴニスト、ＩＣＡＭ−１または−３アンタゴニスト、ＶＣＡＭ−４アンタゴニストまたはＶＬＡ−４アンタゴニストと組み合わせて使用し得る。
【００７３】
化合物Ａを、抗炎症性物質、ＧＨ分泌促進物質レセプター調節剤、例えばグレリンまたはヘキサレリン、ＧＨレセプターアンタゴニスト、例えば、ペグビソマント、インスリン分泌促進物質またはインスリン分泌増強剤、例えば、スルホニルウレア、例えば、トルブタミド、クロルプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、４−クロロ−Ｎ−［（１−ピロリジニルアミノ）−カルボニル］−ベンゼンスルホンアミド（グリコピルアミド）、グリベンクラミド（グリブライド）、グリクルアジド、１−ブチル−３−メタニリルウレア、カルブタミド、グリボヌリド、グリピジド、グリキドン、グリソキセピド、グリブチアゾール、グリブゾール、グリヘキサミド、グリミジン、グリピンアミド、フェンブタミドまたはトリルシクルアミド、短作用非スルホニルウレア、経口インスリン刺激性物質誘導体、例えば、速効性インスリン増強剤、例えば、メジュリチニド、レパグリニド、フェニル酢酸誘導体、例えば、ナテグリニド、ＤＰＰ　ＩＶインヒビター、例えば、１−｛２−［（５−シアノピリジン−２−イル）アミノ］エチルアミノ｝アセチル（２Ｓ）−シアノ−ピロリジンジヒドロクロリド、ＬＡＦ２３７、ＧＬＰ−１またはＧＬＰ−１アゴニストアナログ、インスリン増感剤、例えば、ペルオキシソーム拡散剤活性化レセプターγアゴニスト（ＰＰＡＰγ）、例えば、グリタゾン、例えば、（（Ｓ）−（（３，４−ジヒドロ−２−（フェニルーメチル）−２Ｈ−１−ベンゾピラン−６−イル）メチルーチアゾリジン−２，４−ジオン（エングリタゾン）、５−｛［４−（３−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−１−オキソプロピル）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ダルグリタゾン）、５−｛［４−（１−メチル−シクロヘキシル）メトキシ）−フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（シグリタゾン）、５−｛［４−（１−インドリル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＲＦ２１８９）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−エトキシ）］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＢＭ−１３．１２４６）、５−（２−ナフチルスルホニル）−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＹ−３１６３７）、ビス｛４−［（２，４−ジオキソ−５−チアゾリジニル）−メチル］フェニル｝メタン（ＹＭ２６８）、５−｛４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）−２−ヒドロキシエトキシ］ベンジル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＡＤ−５０７５）、５−［４−（１−フェニル−１−シクロプロパン−カルボニルアミノ）−ベンジル］−チアゾリジン−２，４−ジオン（ＤＮ−１０８）５−｛［４−（２，３−ジヒドロインドール−１−イル）エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロローフェニル］）−２−プロピニル］−５−フェニルスルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−［３−（４−クロロフェニル］−２−プロピニル］−５−（４−フルオロフェニル−スルホニル）チアゾリジン−２，４−ジオン、５−｛［４−（２−メチル−２−ピリジニル−アミノ）−エトキシ）フェニル］メチル｝−チアゾリジン��２，４−ジオン（ロシグリタゾン）、５−｛［４−（２−（５−エチル−２−ピリジル）エトキシ）フェニル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（ピオグリタゾン）、５−｛［４−（（３−ジヒドロ−６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン−２−イル）メトキシ）−フェニル］−メチル｝−チアゾリジン−２，４−ジオン（トログリタゾン）、５−［６−（２−フルオロ−ベンジルオキシ）ナフタレン−２−イルメチル］−チアゾリジンー２，４−ジオン（ＭＣＣ５５５）、５−｛［２−（２−ナフチル）−ベンズオキサゾール−５−イル］−メチル｝チアゾリジン−２，４−ジオン（Ｔ−１７４）または５−（２，４−ジオキソチアゾリジン−５−イルメチル）−２−メトキシ−Ｎ−（４−トリフルオロメチル−ベンジル）ベンズアミド（ＫＲＰ２９７）、非グリタゾン型、例えば、Ｎ−（２−ベンゾイルフェニル）−Ｌ−チロシンアナログ、例えば、ＧＩ−２６２５７０、またはオキソリジンジオン、例えば、ＪＴＴ５０１、２重ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαアゴニスト、例えばＤＲＦ−５５４１５８、ＮＣ−２１００またはＮＮ−６２２、レチノイドＸレセプターアゴニストまたはレクシノイド、例えば２−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−シクロプロピル］−ピリジン−５−カルボン酸、４−［（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−２−カルボニル］−安息香酸、９−シスレチノイン酸またはそのアナログ、誘導体または薬学的に許容される塩、タンパク質チロシンホスファターゼキナーゼ１Ｂ、グルコーゲンシンターゼキナーゼ−３インヒビター、非−ペプチジル小分子インスリン擬態物化合物、例えば、Ｌ−７８３２８１またはＣＬＸ−９０１、または低用量のインスリン、グルタミン：フルクトース−６−リン酸アミドトランスフェラーゼインヒビター、グルコース−６−リン酸インヒビター、ビグアニド、例えば、メトホルミン、フルクトース−１，６−ビホスファターゼインヒビター、グリコーゲンホスホリラーゼインヒビター、例えばＣＰ−９１１４９、グルカゴンレセプターアンタゴニスト、例えば、ＣＰ−９９７１１、ＮＮＣ９２−１６８７、Ｌ−１６８０４９またはＢＡＹ２７−９９５５、ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ、ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼインヒビター、α−グルコシダーゼインヒビター、例えば、４’’，６’’−ジデオキシ−４’’−［（１Ｓ）−（１，４，６／５）−４，５，６−トリヒドロキシ−３−ヒドロキシメチル−２−シクロ−ヘキセニルアミノ｝マルトトリオースまたはＯ−４，６−ジデオキシ−４−｛［１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ］−４，５，６−トリヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−２−シクロヘキセン−１−イル］−アミノ｝−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１−＞４）−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１−＞４）−Ｄ−グルコピラノース（アカルボース、Ｎ−（１，３−ジヒドロキシ−２−プロピル）バリオールアミン（ボグリボース）またはミグリトール、または胃空腹化インヒビター、例えば、ＧＬＰ−１、ＣＣＫ−８およびアミリン（例えばプラムリンチド）、抗血���形成効果を有する物質、例えばベンゾポルフィリン、例えば、ベルテポルフィン、ミドスタウリンまたは４−ピリジルメチル−フタラジンと組み合わせて使用し得る。
【００７４】
化合物Ａまたは複合体形態のコンジュゲート性化合物Ａをまた、抗増殖性物質、例えば化学治療的薬物、例えば、パシリタキセル、ゲムシタビン、シスプラチヌム、ドキソルビシン、５−フルオロウラシルまたはタキソール、ホルモン性物質またはアンタゴニスト、例えば、抗アンドロゲンまたはミトキサントロン（特に前立腺癌の場合に）、または抗エストロゲン、レトロゾールなど（特に乳癌の場合に）、抗代謝物、植物アルカロイド、生物学的応答修飾剤、好ましくはリンホカインまたはインターフェロン、タンパク質チロシンキナーゼおよび／またはセリン／トレオニンキナーゼの阻害剤、または他のまたは未知の機構の作用の物質、例えば、任意のエポチロンまたはエポチロン誘導体、または巨大環式ラクトン、例えばラパマイシン、ＲＡＤまたはＣＣＩ７７９と組み合わせて使用し得る。
【００７５】
化合物Ａまたは複合体形態のコンジュゲート性化合物Ａを、さらなる薬物と組み合わせて投与される場合、共投与される薬物の用量は、もちろん、使用される共薬物の型に、使用される具体的薬物に、処置すべき状態に、およびその他に依存して変化し得る。用語「共投与」または「組み合わせ投与」などは、ここで利用するように、単一患者への選択される治療的物質の投与を含むことを意図し、そして該物質を、必ずしも必須ではないが投与の同じ経路によってまたは同じ時間に投与する処置養生法を含むことを意図する。
【００７６】
前記にしたがって本発明は、なおさらなる側面を提供する：
９．ａ）化合物Ａまたは複合体化形態のコンジュゲート性化合物Ａである第１物質、およびｂ）共物質、例えば前記のようなもの、を含む医薬組み合わせ。
１０．治療有効量の化合物Ａまたは複合体化形態のコンジュゲート性化合物Ａ、および第２薬物物質の、例えば付随的または逐次的な共投与を含む前定義の方法であって、当該第２薬物物質が例えば前記のようなものである、方法。
【００７７】
本発明の特定の組み合わせは、疾患または障害の予防または処置に依存して選択する；例えば、免疫抑制物質との組み合わせ、例えば慢性移植片拒絶の予防または処置、糖尿病またはその合併症の処置での、インスリン分泌促進物質、インスリン増強剤、インスリン増感剤または低用量のインスリンとの組み合わせ、炎症性疾患または障害の予防または処置のための抗炎症性物質との組み合わせ、例えば黄斑浮腫または分解または癌の予防または処置ための抗血管形成効果を有する物質との組み合わせ、癌での使用のための化学治療物質との組み合わせ。
【国際公開パンフレット】
2004505095.tif 000005
2004505095.tif 000006
2004505095.tif 000007
2004505095.tif 000008
2004505095.tif 000009
2004505095.tif 000010
2004505095.tif 000011
2004505095.tif 000012
2004505095.tif 000013
2004505095.tif 000014
2004505095.tif 000015
2004505095.tif 000016
2004505095.tif 000017
2004505095.tif 000018
2004505095.tif 000019
2004505095.tif 000020
2004505095.tif 000021
2004505095.tif 000022
2004505095.tif 000023
2004505095.tif 000024
2004505095.tif 000025
2004505095.tif 000026
2004505095.tif 000027
2004505095.tif 000028
2004505095.tif 000029
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004505095.tif 000030
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004505095.tif 000031
2004505095.tif 000032
2004505095.tif 000033
2004505095.tif 000034
2004505095.tif 000035
2004505095.tif 000036
2004505095.tif 000037
2004505095.tif 000038
2004505095.tif 000039
2004505095.tif 000040
2004505095.tif 000041
2004505095.tif 000042
2004505095.tif 000043
2004505095.tif 000044
2004505095.tif 000045
2004505095.tif 000046
2004505095.tif 000047
2004505095.tif 000048
2004505095.tif 000049
2004505095.tif 000050
2004505095.tif 000051
2004505095.tif 000052
2004505095.tif 000053
2004505095.tif 000054
2004505095.tif 000055
2004505095.tif 000056
【国際調査報告】
2004505095.tif 000057
2004505095.tif 000058