(57)【要約】本発明は、抗原（ワクチン接種に適うあらゆる疾患または状態に対するワクチンとして用いることのできる抗原を含む）とともに投与したときに免疫アジュバントとして機能する新規な化合物を提供する。本発明はまた、本発明の新規な化合物を含むアジュバント製剤およびヒトおよび非ヒト動物の免疫方法をも提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2004505059.tif 000116
［式中、
Ｒ１は以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）−Ｃ（Ｏ）−；
（ｂ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルケニレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンまたはＣ１−１４アルケニレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６カルバモイル、Ｃ１−６アシルアミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで、該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）で任意に置換されている）；
（ｃ）ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ１５の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｄ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ６−１２アリーレン−Ｃ（Ｏ）−（式中、該アリーレンは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン、ニトロまたはアミノで任意に置換されている）；
ａおよびｂは独立して０〜約４の整数；
ｄおよびｅは独立して１〜約６の整数；
ｄ’およびｅ’は独立して０〜約２の整数；
Ｘ１およびＹ１は、独立して、非存在、酸素原子、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル）−、および−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−よりなる群から選ばれる；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、酸素原子、メチレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ［Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル］−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）、および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｂ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；および
（ｃ）式：
【化２】
2004505059.tif 000117
で示される基（式中、
Ｒ８は、Ｃ１−６の直鎖または分枝鎖のアルキル、またはＣ２−６の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；
Ｇ５は、酸素原子、メチレン、アリーレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｉｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル）；
またはＧ１Ｒ２、Ｇ２Ｒ４、Ｇ３Ｒ５およびＧ４Ｒ７のいずれか１または２は、一緒になって水素原子またはヒドロキシル］
で示される化合物または薬理学的に許容しうるその塩。
【請求項２】
ａおよびｂが２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘ１およびＹ１がＮＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ｄおよびｅが１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
ｄ’およびｅ’が０、１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
ｄおよびｅが１であり、ｄ’およびｅ’が０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
ｄおよびｅが１であり、ｄ’およびｅ’が１または２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）よりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されている）である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４が、独立して、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−よりなる群から選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも２つが、Ｃ６−２０の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも４つが、Ｃ６−２０の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも６つが、Ｃ６−２０の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも２つが、Ｃ８−１５の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも４つが、Ｃ８−１５の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも６つが、Ｃ８−１５の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
式Ｉ：
【化３】
2004505059.tif 000118
［式中、
Ｒ１は以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）−Ｃ（Ｏ）−；
（ｂ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルケニレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンまたはＣ１−１４アルケニレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６カルバモイル、Ｃ１−６アシルアミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで、該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）で任意に置換されている）；
（ｃ）ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ１５の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｄ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ６−１２アリーレン−Ｃ（Ｏ）−（式中、該アリーレンは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン、ニトロまたはアミノで任意に置換されている）；
ａおよびｂは独立して０〜約４の整数；
ｄおよびｅは独立して１〜約６の整数；
ｄ’およびｅ’は独立して０〜約２の整数；
Ｘ１およびＹ１は、独立して、非存在、酸素原子、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル）−、および−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−よりなる群から選ばれる；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、酸素原子、メチレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ［Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル］−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）、および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｂ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；および
（ｃ）式：
【化４】
2004505059.tif 000119
で示される基（式中、
Ｒ８は、Ｃ１−６の直鎖または分枝鎖のアルキル、またはＣ２−６の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；
Ｇ５は、酸素原子、メチレン、アリーレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｉｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル）；
またはＧ１Ｒ２、Ｇ２Ｒ４、Ｇ３Ｒ５およびＧ４Ｒ７のいずれか１または２は、一緒になって水素原子またはヒドロキシル］
で示される化合物または薬理学的に許容しうるその塩、および薬理学的に許容しうる担体、希釈液または賦形剤を含む免疫アジュバント製剤。
【請求項１７】
抗原、および式Ｉ：
【化５】
2004505059.tif 000120
［式中、
Ｒ１は以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）−Ｃ（Ｏ）−；
（ｂ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルケニレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンまたはＣ１−１４アルケニレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６カルバモイル、Ｃ１−６アシルアミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで、該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）で任意に置換されている）；
（ｃ）ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ１５の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｄ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ６−１２アリーレン−Ｃ（Ｏ）−（式中、該アリーレンは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン、ニトロまたはアミノで任意に置換されている）；
ａおよびｂは独立して０〜約４の整数；
ｄおよびｅは独立して１〜約６の整数；
ｄ’およびｅ’は独立して０〜約２の整数；
Ｘ１およびＹ１は、独立して、非存在、酸素原子、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル）−、および−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−よりなる群から選ばれる；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、酸素原子、メチレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ［Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル］−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）、および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｂ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；および
（ｃ）式：
【化６】
2004505059.tif 000121
で示される基（式中、
Ｒ８は、Ｃ１−６の直鎖または分枝鎖のアルキル、またはＣ２−６の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；
Ｇ５は、酸素原子、メチレン、アリーレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｉｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル）；
またはＧ１Ｒ２、Ｇ２Ｒ４、Ｇ３Ｒ５およびＧ４Ｒ７のいずれか１または２は、一緒になって水素原子またはヒドロキシル］
で示されるアジュバント化合物または薬理学的に許容しうるその塩を含む、ワクチン製剤。
【請求項１８】
抗原に対する免疫応答を刺激する方法であって、有効量の該抗原、および該抗原に対する免疫応答を刺激するのに有効な量の式Ｉ：
【化７】
2004505059.tif 000122
［式中、
Ｒ１は以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）−Ｃ（Ｏ）−；
（ｂ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルケニレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンまたはＣ１−１４アルケニレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６カルバモイル、Ｃ１−６アシルアミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで、該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）で任意に置換されている）；
（ｃ）ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ１５の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｄ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ６−１２アリーレン−Ｃ（Ｏ）−（式中、該アリーレンは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン、ニトロまたはアミノで任意に置換されている）；
ａおよびｂは独立して０〜約４の整数；
ｄおよびｅは独立して１〜約６の整数；
ｄ’およびｅ’は独立して０〜約２の整数；
Ｘ１およびＹ１は、独立して、非存在、酸素原子、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル）−、および−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−よりなる群から選ばれる；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、酸素原子、メチレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ［Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル］−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）、および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｂ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；および
（ｃ）式：
【化８】
2004505059.tif 000123
で示される基（式中、
Ｒ８は、Ｃ１−６の直鎖または分枝鎖のアルキル、またはＣ２−６の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；
Ｇ５は、酸素原子、メチレン、アリーレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｉｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル）；
またはＧ１Ｒ２、Ｇ２Ｒ４、Ｇ３Ｒ５およびＧ４Ｒ７のいずれか１または２は、一緒になって水素原子またはヒドロキシル］
で示されるアジュバント化合物または薬理学的に許容しうるその塩を投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、動物に投与したときに動物において免疫応答を促進し得る新規な化合物に関する。本発明はまた、該新規な化合物を含む免疫組成物およびヒトおよび非ヒト動物を免疫する方法に関する。
【０００２】
（背景技術）
ワクチンは、感染疾患の予防法として好結果をもたらす極めて受け入れられた方法であることがわかっている。ワクチンは費用効果が高く、標的病原に対する抗生物質耐性を引き起こさず、ホストに存在する正常な菌叢に影響を与えない。抗ウイルス免疫を誘発するときなどの多くの場合、ワクチンは実行しうる治療法や改善法がないような疾患を阻止することができる。
【０００３】
ワクチンは、免疫系を誘起して、体内に非感染性または非病原性の形態で導入された因子、すなわち抗原、典型的には感染生物またはその部分に対する応答を開始することによって機能する。一旦、免疫系が「初回抗原刺激」されたら、すなわち生物に対して感作されたら、免疫系が感染性病原としての該生物に後に暴露されたときに迅速かつ強力な免疫応答という結果となり、該生物が疾患徴候を起こすのに充分なほど宿主生物内で菌体を増殖および感染する前に該病原を破壊してしまう。
免疫系を初回抗原刺激するのに用いる因子または抗原は、弱毒化生物として知られる感染状態でない全体の生物であってよいし、または幾つかの場合には、生物の種々の構造的成分を表す炭水化物、タンパク質またはペプチドなどの生物の成分、またはそのような成分をコードする核酸であってよい。
【０００４】
多くの場合、ワクチンを有効にするのに充分な程度に、すなわち免疫を付与するのに充分な程度に免疫系を刺激するため、ワクチン中に存在する抗原に対する免疫応答を高める必要がある。多くのタンパク質および大抵のペプチドおよび炭水化物抗原は、単独で投与したときに免疫を付与するに充分な抗体応答を引き起こさない。そのような抗原は、外来物として認識され免疫応答を引き起こすような仕方で免疫系に提示される必要がある。この目的で、免疫応答を刺激する添加剤（アジュバント）が工夫されている。
【０００５】
最もよく知られたアジュバントであるフロイントの完全アジュバントは、油／水エマルジョン中のマイコバクテリウムの混合物からなる。フロイントのアジュバントは２つの仕方で機能する：第一に、細胞および体液媒体免疫を促進することによって、第二に、抗原攻撃の迅速な分散をブロッキングすることによって（「貯留効果（ｄｅｐｏｔ ｅｆｆｅｃｔ）」）。しかしながら、この物質に対する毒性の生理反応および免疫反応が頻繁に起るため、フロイントのアジュバントはヒトには用いることはできない。
【０００６】
（発明の開示）
（発明が解決しようとする技術的課題）
免疫刺激またはアジュバント活性を有することが示されている他の分子は、リポ多糖（ＬＰＳ）としても知られる内毒素である。ＬＰＳは、「先天性の」免疫応答、すなわち生物が以前に暴露される必要なしに内毒素（および該内毒素を成分とする侵入細菌）を認識することができるように進化した応答を誘起することによって免疫系を刺激する。ＬＰＳは毒性が強すぎるので実行できるアジュバントではないが、モノホスホリルリピッドＡ（ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ ｌｉｐｉｄ Ａ）（「ＭＰＬ」）などのような構造が内毒素に関連した分子がアジュバントとして臨床場面で試験されつつある。しかしながら、現在のところヒトに使用することがＦＤＡによって承認された唯一のアジュバントはアルミニウム塩（ミョウバン）であり、これは抗原を沈降させることによって抗原を「貯留する」（ｄｅｐｏｔ）のに用いられる。ミョウバンはまた抗原に対する免疫応答をも刺激する。
それゆえ、免疫系を刺激して、抗原を単独でまたはミョウバンとともに投与したときに比べて抗原に対する一層強力な抗体応答を生成させるために抗原とともに投与することのできる化合物に対する当該技術分野で認められた必要性が存在する。
【０００７】
（その解決方法）
一つの側面において、本発明は、動物に投与したときに該動物において免疫応答を促進しうる新規な化合物を提供する。一つの態様において、本発明の化合物は、抗原（ワクチン接種に適ういかなる疾患または状態に対するワクチンとして使用される抗原を含む）とともに投与したときに免疫アジュバントとして機能する。本発明の新規なアジュバント化合物は、式Ｉ：
【化９】
2004505059.tif 000002
［式中、
Ｒ１は以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）−Ｃ（Ｏ）−；
（ｂ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルケニレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンまたはＣ１−１４アルケニレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６カルバモイル、Ｃ１−６アシルアミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで、該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）で任意に置換されている）；
（ｃ）ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ１５の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｄ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ６−１２アリーレン−Ｃ（Ｏ）−（式中、該アリーレンは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン、ニトロまたはアミノで任意に置換されている）；
ａおよびｂは独立して０〜約４の整数；
ｄおよびｅは独立して１〜約６の整数；
ｄ’およびｅ’は独立して０〜約２の整数；
Ｘ１およびＹ１は、独立して、非存在、酸素原子、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル）−、および−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−よりなる群から選ばれる；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、酸素原子、メチレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ［Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル］−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）、および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｂ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；および
（ｃ）式：
【化１０】
2004505059.tif 000003
で示される基（式中、
Ｒ８は、Ｃ１−６の直鎖または分枝鎖のアルキル、またはＣ２−６の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；
Ｇ５は、酸素原子、メチレン、アリーレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｉｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル）；
またはＧ１Ｒ２、Ｇ２Ｒ４、Ｇ３Ｒ５およびＧ４Ｒ７のいずれか１または２は、一緒になって水素原子またはヒドロキシル］
または薬理学的に許容しうるその塩である。
【０００８】
第二の側面において、本発明は、本発明のアジュバント化合物の少なくとも１つを含有する新規免疫製剤に関する。
第三の側面において、本発明は、抗原と、本発明のアジュバント化合物の少なくとも１つを含有する新規な免疫組成物に関する。
他の側面において、本発明は、本発明の化合物を動物に投与することを含む、動物において免疫応答を促進する方法に関する。
【０００９】
本発明は、動物に投与したときに該動物において免疫応答を促進することのできる新規な化合物を提供する。ある好ましい態様において、本発明の化合物は単独で投与したときに免疫効果を生成することができる。他のある好ましい態様において、本発明の化合物は、抗原（ワクチン接種に適ういかなる疾患または状態に対するワクチンとして使用される抗原を含む）とともに投与したときに免疫アジュバントとして機能する。本発明はまた、本発明の新規化合物を含む免疫組成物およびヒトおよび非ヒト動物の免疫方法をも提供する。
【００１０】
本明細書において言及する特許および科学的文献は、当業者に利用できる知見を確認するものである。本明細書において引用する発行された特許、特許出願および文献は、個々のものが明確かつ個別に参照のために引用されるのと同程度で本明細書に参照のため引用される。不一致の場合には本開示が優先するであろう。
【００１１】
本発明の目的のためには以下の定義が用いられる：
定義
本明細書において用いる「免疫組成物」なる語は、免疫予防作用、免疫治療作用、免疫強化作用、または免疫抑制作用を含む（これらに限られるものではない）、動物の免疫系に対して何らかの作用を及ぼすことのできる組成物を包含することを意図している。
本明細書において用いる「動物」なる語は、ヒト患者および非ヒト動物をいう。非ヒト動物は、ワクチンに対して免疫応答を生成できるあらゆる動物を包含する。
【００１２】
本明細書において用いる「カルボニル」および「オキソ」なる語は、（Ｃ＝Ｏ）残基をいう。カルボニル基はまた−Ｃ（Ｏ）−としても表すことができる。
本明細書において用いる「ジカルボニル」なる語は、−Ｃ（Ｏ）−アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−アリーレン−Ｃ（Ｏ）−の構造を有する残基をいい、これら残基は両末端のカルボニル残基の炭素原子により分子に結合する。
【００１３】
本明細書において用いる「アルキルエステル」は、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−アルキルの構造を有する残基であり、該残基はエステル基の単結合した酸素原子により分子に結合する。「アルコキシカルボニル」とは、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−アルキルの構造を有する残基であり、該残基はカルボニル炭素原子により分子に結合する。
本明細書において用いる「アルケニルエステル」は、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−炭素鎖（その際、炭素鎖は炭素−炭素二重結合を含む）の構造を有する残基であり、該エステル残基は単結合した酸素原子により分子に結合する。
【００１４】
「アルキレン」なる語は、２価の直鎖または分枝鎖アルキル炭化水素基を意味する。
「アルケニレン」なる語は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する２価の直鎖または分枝鎖炭化水素基を意味する。
「ジアルケニレン」なる語は、少なくとも２つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分枝鎖炭化水素基を意味する。
「アリーレン」なる語は、２価の芳香属基をいう。
【００１５】
「アルキレン」、「アルケニレン」または「ジアルケニレン」の語が、たとえばＣ１−１４アルキレンのように炭素原子の数または炭素原子の数の範囲を示す記述子を含む場合は、そのような炭素原子の数は、該アルキレン基が間に位置している２つの化学基を連結する炭素鎖の長さをいう。「アリーレン」の語が、炭素原子の数または炭素原子の数の範囲を示す記述子を含む場合は、そのような炭素原子の数は、芳香環系中の炭素原子の数をいう。アルキレン、アルケニレン、ジアルケニレンまたはアリーレン基の炭素原子のいずれも以下に記載するように任意に置換されていてよく、置換基はさらに炭素原子を含んでいてよい。
【００１６】
本明細書において用いる「アルキル」の語は、１〜２０の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖の脂肪族基をいい、１つ、２つまたは３つの置換基で任意に置換されていてよい。
「アリール」基は、１〜３の芳香環を含むＣ６〜Ｃ１４芳香族残基であり、任意に置換されていてよい。好ましくは、アリール基はＣ６〜Ｃ１０アリール基である。「アリール」の語はまた、５〜１４の環原子、好ましくは５、６、９または１０の環原子を含み、環状の配列にて共有される６、１０または１４のπ電子を有し、炭素原子の他にＮ、ＯおよびＳよりなる群から選ばれた１〜約３のへテロ原子を有するへテロアリール基をも包含する。
【００１７】
「アラルキル」または「アリールアルキル」基は、アルキル基に共有結合した上記アリール基を含み、これらアルキル基およびアリール基のいずれも独立に置換されていてよいし置換されていなくてもよい。
本明細書において用いる「ハロゲン」または「ハロ」なる語は、塩素、臭素、フッ素またはヨウ素をいう。
【００１８】
「アシルアミノ」なる語は、窒素原子にて結合したアミド基をいう。「カルバモイル」なる語は、カルボニル炭素原子にて結合したアミド基をいう。アシルアミノまたはカルバモイル置換基の窒素原子はさらに任意に置換されていてよい。
特に制限的に断らない限り、「アミノ」の語は、ＮＨ２、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、および環状アミノ基を包含することを意味する。
【００１９】
本明細書において用いる「アシル」なる語は、アルキルカルボニルまたはアリールカルボニル置換基をいう。
本明細書において用いる略語「Ｂｏｃ」は、ｔ−ブチルオキシカルボニルをいう。
所定の置換基を参照して本明細書において用いる「非存在」の語は、置換基が存在しないことを意味し、当該置換基がその間に位置する２つの化学基が共有化学結合により直接互いに結合することを意味する。
【００２０】
本発明の化合物および組成物を参照して本明細書において用いる「タイプ１」の語は、上記式Ｉにおいてａとｂの値が同じであり、ｄとｅの値が同じであり、ｄ’とｅ’の値が同じであり、Ｘ１とＹ１が同じであり、Ｇ１とＧ３が同じであり、Ｇ２とＧ４が同じであり、Ｒ２とＲ５が同じであり、Ｒ３とＲ６が同じであり、Ｒ４とＲ７が同じである本発明の化合物をいう。
【００２１】
本明細書において用いる「タイプ２」の語は、式Ｉにおいて以下の１またはそれ以上が当てはまる化合物または組成物をいう：ａとｂの値が異なる；ｄとｅの値が異なる；ｄ’とｅ’の値が異なる；Ｘ１とＹ１が異なる；Ｇ１とＧ３が異なる；Ｇ２とＧ４が異なる；Ｒ２とＲ５が異なる；Ｒ３とＲ６が異なる；およびＲ４とＲ７が異なる。
【００２２】
化合物
第一の側面において、本発明は、式Ｉ：
【化１１】
2004505059.tif 000004
［式中、
Ｒ１は以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）−Ｃ（Ｏ）−；
（ｂ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルケニレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンまたはＣ１−１４アルケニレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６カルバモイル、Ｃ１−６アシルアミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで、該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）で任意に置換されている）；
（ｃ）ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ１５の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｄ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ６−１２アリーレン−Ｃ（Ｏ）−（式中、該アリーレンは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン、ニトロまたはアミノで任意に置換されている）；
ａおよびｂは独立して０〜約４の整数；
ｄおよびｅは独立して１〜約６の整数；
ｄ’およびｅ’は独立して０〜約２の整数；
Ｘ１およびＹ１は、独立して、非存在、酸素原子、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル）−、および−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−よりなる群から選ばれる；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、酸素原子、メチレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ［Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル］−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）、および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｂ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；および
（ｃ）式：
【化１２】
2004505059.tif 000005
で示される基（式中、
Ｒ８は、Ｃ１−６の直鎖または分枝鎖のアルキル、またはＣ２−６の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；
Ｇ５は、酸素原子、メチレン、アリーレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｉｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル）；
またはＧ１Ｒ２、Ｇ２Ｒ４、Ｇ３Ｒ５およびＧ４Ｒ７のいずれか１または２は、一緒になって水素原子またはヒドロキシル］
で示される新規な化合物または薬理学的に許容しうるその塩を提供する。
【００２３】
本発明の化合物は酸であり、一般に対応する塩の形態で単離される。従って、本発明の範囲内として特に意図されるのは、式ＩＩ：
【化１３】
2004505059.tif 000006
（式中、Ｍは薬理学的に許容しうるカチオンであり、他の変数はすべて上記式Ｉと同じ）
で示される化合物である。２価のカチオンでは、カチオンは上記式ＩＩの２つのＭ変数の位置を占める。薬理学的に許容しうるカチオンは当業者によく知られている。
【００２４】
本発明の幾つかの好ましい態様において、以下の限定の１またはそれ以上が存在する：ａおよびｂが２である；Ｘ１およびＹ１がＮＨである；ｄおよびｅが１または２である；ｄ’およびｅ’が０、１または２である。ある好ましい態様において、ｄおよびｅが１であり、ｄ’およびｅ’が０である。他の好ましい態様において、ｄおよびｅが１または１であり、ｄ’およびｅ’が１または２である。
【００２５】
幾つかの好ましい態様において、Ｒ１は、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）よりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されている）である。
【００２６】
幾つかの好ましい態様において、Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−よりなる群から選ばれる。
幾つかの好ましい態様において、Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも２つはＣ６−２０の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい。ある好ましい態様において、Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも２つはＣ８−１５の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい。
【００２７】
幾つかの好ましい態様において、Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも４つはＣ６−２０の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい。ある好ましい態様において、Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも４つはＣ８−１５の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい。
【００２８】
幾つかの好ましい態様において、Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも６つはＣ６−２０の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい。ある好ましい態様において、Ｒ２〜Ｒ７、Ｒ９およびＲ１０のうちの少なくとも６つはＣ８−１５の直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、またはジアルケニルであり、これら基のいずれもハロゲン、オキソ、ヒドロキシおよびアルコキシよりなる群から選ばれた１または２の置換基で任意に置換されていてよい。
【００２９】
合成法
タイプ１の化合物
式Ｉにおいてｄおよびｅが１であり、ｄ’およびｅ’が０であるタイプ１の化合物は、スキーム１に示す合成経路に従って合成するのが好ましい。それゆえ、アルデヒドＩＩＩ（Ｌ−セリンから文献記載の手順により得られる）をグリニャール試薬などの有機金属試薬で処理してアルコールＩＶを得る。化合物ＩＶを酸処理して、たとえばメタノール中の無水ＨＣｌガスで処理して対応のアミノジオールを得、これを窒素上で選択的にアシル化して化合物Ｖを得る。第一級アルコールを保護し、ついで第二級アルコールをアシル化すると化合物ＶＩが得られる。第一級アルコールの脱保護およびリン酸化試薬（実験セクションの記載に従って調製）との反応により化合物ＶＩＩが得られる。トリエチルシランおよびトリフルオロ酢酸による処理はＢｏｃ保護基を除去し、ついでホスゲンによる処理は対称的な二量体ＶＩＩＩを生成する。最後にフェニルシランおよびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）で処理するとアリル保護基が除去されて化合物ＩＸを得る。
【００３０】
スキーム１
【化１４】
2004505059.tif 000007
【００３１】
別法として、中間体ＩＶは、好ましくはスキーム２に概略を示す合成経路に従って単一のジアステレオマーとして調製できる。
スキーム２
【化１５】
2004505059.tif 000008
【００３２】
それゆえ、化合物ＩＩＩをアリルクロライドおよび（＋）−Ｂ−メトキシジイソピノカンフェイルボラン（ｍｅｔｈｏｘｙｄｉｉｓｏｐｉｎｏｃａｍｐｈｅｙｌｂｏｒａｎｅ）で処理して化合物Ｘを単一のジアステレオマーとして得る。ＤＢＵで処理してエポキシド閉環し、ついでオルガノ銅（ｏｒｇａｎｏｃｕｐｒａｔｅ）試薬でＳＮ２’開環して化合物ＸＩＩを得る。ついで、水素化してアルコールＸＩＩＩを得、これを化合物ＩＶと同様にして化合物ＩＸに変換する。
【００３３】
式Ｉにおいてｄおよびｅが１であり、ｄ’およびｅ’が１であるタイプ１の化合物は、上記スキーム１および２に概略を示したのと同様の手順だが化合物ＩＩＩの代わりにアルデヒドＸＩＶを出発物質とすることにより調製するのが好ましい。アルデヒドＸＩＶの調製は、スキーム３に概略を示すように、化合物ＩＩＩのホモログ生成（ｈｏｍｏｌｏｇａｔｉｏｎ）により行うのが好ましい。それゆえ、アルデヒドＩＩＩを［２−（トリメチルシリル）エトキシメチル］トリフェニルホスホニウムクロライドおよびｎ−ブチルリチウムで処理してエノールエーテルを得、これを酢酸で処理して化合物ＸＩＶを得る。
スキーム３
【化１６】
2004505059.tif 000009
【００３４】
式Ｉにおいてｄとｅ、および／またはｄ’とｅ’が異なる値のタイプ１の化合物は、下記実施例にさらに記載するように、一般に上記と同様の方法により調製するのが好ましい。当業者はまた、上記で概略を示した合成法が、上記アシル化工程の代わりに別の標準的な官能基変換を行うことにより式ＩにおいてＧ３および／またはＧ４が−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−または−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−以外である化合物の合成に適用できることを容易に認識するであろう。
【００３５】
タイプ２の化合物
式Ｉで示されるタイプ２の化合物は、リン酸エステル化合物の第一級アミン基からの保護基の解離の直後まではタイプ１の化合物の合成と同様の方法により合成するのが好ましい。該解離の時点でリン酸エステル化合物をジカルボン酸などの単保護二官能化合物で処理する。得られた化合物を脱保護し、第二のリン酸エステル化合物と反応させる。ついで、最終的なリン酸脱保護をタイプ１の化合物と同様に行う。
【００３６】
タイプ２の化合物を合成するための別法は、リン酸エステル化合物の脱保護した第一級アミン基のイソシアナート中間体を生成させることである。ついで、このイソシアナート中間体をリン酸エステル化合物の第二の脱保護した第一級アミンで処理し、ついでタイプ１の化合物と同様に脱保護する。
【００３７】
アジュバントおよびワクチン製剤および投与
第二の側面において、本発明は、式Ｉ：
【化１７】
2004505059.tif 000010
［式中、
Ｒ１は以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）−Ｃ（Ｏ）−；
（ｂ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルキレン−Ｃ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−１４アルケニレン−Ｃ（Ｏ）−（ここで、Ｃ１−１４アルキレンまたはＣ１−１４アルケニレンは、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキレンジオキシ、カルボキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６カルバモイル、Ｃ１−６アシルアミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、または（アリール）Ｃ１−６アルキル（ここで、該（アリール）Ｃ１−６アルキルの該アリール残基は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキルアミノ、（Ｃ１−６アルキルアミノ）Ｃ１−６アルコキシ、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ１−６アルキレン−Ｏ−Ｃ１−６アルキル、−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＯＨまたは−Ｏ−Ｃ１−６アルキレン−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキレン−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルで任意に置換されている）で任意に置換されている）；
（ｃ）ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ１５の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｄ）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ６−１２アリーレン−Ｃ（Ｏ）−（式中、該アリーレンは、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、ハロゲン、ニトロまたはアミノで任意に置換されている）；
ａおよびｂは独立して０〜約４の整数；
ｄおよびｅは独立して１〜約６の整数；
ｄ’およびｅ’は独立して０〜約２の整数；
Ｘ１およびＹ１は、独立して、非存在、酸素原子、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｃ１−４アルキル）−、および−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−よりなる群から選ばれる；
Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３およびＧ４は、独立して、酸素原子、メチレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ［Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル］−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ１−４アルキル）、および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ａ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；
（ｂ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；および
（ｃ）式：
【化１８】
2004505059.tif 000011
で示される基（式中、
Ｒ８は、Ｃ１−６の直鎖または分枝鎖のアルキル、またはＣ２−６の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル；
Ｇ５は、酸素原子、メチレン、アリーレン、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−４アルキル）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−および−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは０、１または２）よりなる群から選ばれる；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、以下よりなる群から選ばれる：
（ｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ１〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルキル；および
（ｉｉ）ハロゲン、オキソ、ヒドロキシまたはアルコキシで任意に置換された、Ｃ２〜Ｃ２０の直鎖または分枝鎖のアルケニル、アルキニルまたはジアルケニル）；
またはＧ１Ｒ２、Ｇ２Ｒ４、Ｇ３Ｒ５およびＧ４Ｒ７のいずれか１または２は、一緒になって水素原子またはヒドロキシル］
で示される化合物または薬理学的に許容しうるその塩；および薬理学的に許容しうる担体、希釈液または賦形剤を含む免疫組成物を提供する。
【００３８】
本発明のこの側面による好ましい態様は、上記第一の側面で記載したのと同様である。
本発明はまた、上記式Ｉで示される化合物、抗原、および薬理学的に許容しうる担体、希釈液または賦形剤を含む新規な免疫組成物にも関する。
本発明の免疫組成物では、本発明のアジュバント化合物とともにいかなる適当な抗原またはワクチン成分をも利用できる。さらなる例として、そのような免疫組成物は、弱毒化した生物、または生物の成分、たとえば炭化水素、タンパク質、またはペプチド、またはそのような成分をコードする核酸を適切に含んでいてよい。
【００３９】
典型的に、抗原は本発明のアジュバント化合物と混合して用いる。他のある態様において、本発明のアジュバント化合物のアミノ、カルボキシル、ヒドロキシルおよび／またはリン酸残基に共有結合した抗原を用いるのが幾つかの応用において有用である。かくして、本発明の治療学的に有効な組成物の特別な製剤は、該製剤を投与する患者において該アジュバントが生物学的に利用でき、安全で、かつ有効な適切な仕方で行うことができる。
【００４０】
そのような免疫組成物は、たとえば、下記を含む（これらに限られるものではない）ワクチン接種に適う疾患または状態にワクチンとして用いる少なくとも１の抗原性物質を含む：
（Ａ）細菌、ウイルス、寄生虫（たとえば、マイコプラズマ、真菌、および原生動物）およびプリオンによって引き起こされるものを含む、ヒトおよび動物の感染性疾患；
（Ｂ）たとえば、下記を含む（これらに限られるものではない）自己由来の分子に対する免疫応答が有用である疾患または病理：アルツハイマー病（アミロイドβ４２に対する免疫が有用である）；胃液の病的流出疾患（ｇａｓｔｒｉｃ ｒｅｆｌｕｘ ｄｉｓｅａｓｅ）（ガストリンに対する免疫が有用である）；黒色腫、前立腺癌、および直腸癌を含む（これらに限られるものではない）癌（癌抗原に対する免疫が有用である）；および糖尿病（インスリンに対する免疫がインスリン産生細胞に対する免疫応答を低減させる）を含む（これらに限られるものではない）自己免疫疾患；および
（Ｃ）たとえば、ｈＣＧに対する免疫によって誘発される避妊作用などの（これらに限られるものではない）、免疫応答が機能または生理作用において所望の変化をもたらす非病的状態。
【００４１】
さらなる例として、本発明の免疫組成物は、疾患状態および条件、たとえば、天然痘、黄熱、ジステンパー、コレラ、鶏痘、猩紅熱、ジフテリア、破傷風、百日咳、インフルエンザ、狂犬病、おたふくかぜ、ＨＩＶ、水痘、風疹、麻疹、手足口病、および小児麻痺に対して薬理学的に活性な抗原またはワクチン成分を含んでいてよい。
その結果得られる、（ｉ）抗原、および（ｉｉ）本発明の少なくとも１のアジュバント化合物を含むワクチン製剤において、抗原およびアジュバント化合物は、該製剤をワクチン接種した宿主動物、胚または卵子に投与したときに免疫応答を引き起こすのに有効な量で互いに存在する。
【００４２】
さらなる態様において、本発明の化合物はワクチン抗原に、たとえば、アミノ、チオール、カルボキシル、ヒドロキシルまたはリン酸残基により共有結合してよい。本発明のアジュバント組成物をワクチン抗原に結合させる方法は、本明細書の開示を参照して当業者によって理解される。アジュバント組成物のワクチンへの結合は、Ｐ． Ｈｏｆｆｍａｎら、Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． Ｈｏｐｐｅ−Ｓａｙｌｅｒ， １９８９， ３７０： ５７５−５８２； Ｋ．−Ｈ． Ｗｉｅｓｍｕｌｌｅｒら、Ｖａｃｃｉｎｅ， １９８９， ７： ２９−３３； Ｋ．−Ｈ． Ｗｉｅｓｍｕｌｌｅｒら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．， １９９２， ４０： ２５５−２６０； Ｊ．−Ｐ． Ｄｅｆｏｕｒｔら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． １９９２， ８９： ３８７９−３８８３； Ｔ． Ｔｏｈｏｋｕｎｉら、Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， １９９４， １１６： ３９５−３９６； Ｆ． Ｒｅｉｃｈｅｌ， Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ．， １９９７， ２０８７−２０８８； Ｈ． Ｋａｍｉｔａｋａｈａｒａ， Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． １９９８， ３７： １５２４−１５２８； Ｗ． Ｄｕｌｌｅｎｋｏｐｆら、Ｃｈｅｍ． Ｅｕｒ． Ｊ．， １９９９， ５： ２４３２−２４３８（これら全てを参照のため引用する）に記載の方法のいずれによっても行うことができる。
【００４３】
かくして得られた（ｉ）抗原、および（ｉｉ）アジュバント化合物を含むワクチン製剤は、動物において抗体応答を産生するのに充分な量で該ワクチン製剤を該動物に投与することによって、該動物において免疫応答を誘発させるために有用に用いられる。
投与方法としては、アジュバント、アジュバント含有ワクチン、またはアジュバントおよび／または抗原を、アジュバントおよび関連する抗原が免疫刺激として有効である宿主動物の１またはそれ以上の体腔部位に送達するのに適した手段および／または方法の使用が挙げられる。送達方法としては、これらに限られるものではないが、非経口投与法、たとえば、皮下（ＳＣ）注射、経皮（ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、鼻内（ＩＮ）、眼内、経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）、筋肉内（ＩＭ）、皮内（ＩＤ）、腹腔内（ＩＰ）、膣内、肺内、および直腸投与、並びに非非経口投与、たとえば経口投与が挙げられる。
【００４４】
本発明のアジュバントおよびワクチン組成物の投与量および適当な剤型は、通常の抗体力価決定法および通常の生物学的有効性（ｂｉｏｅｆｆｉｃａｃｙ）／生物学的適合性（ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ）プロトコールの使用により、またアジュバントとともに用いた特定の抗原または治療剤、所望の治療効果、および生物学的活性の所望の期間の長さに依存して、当業者が不当な実験を行うことなく容易に決定できる。
本発明のアジュバントは、他の適当な薬理学的または生理学的に活性な薬剤、たとえば抗原性の物質および／または他の生物学的に活性な物質とともに宿主動物に有用に投与できる。
本発明の製剤は、さらなる成分、たとえば、生理食塩水、オイル、スクアレン、油−水分散剤、リポソームなど、および他のアジュバント、たとえば、ＱＳ−２１、ムラミルペプチド、フロイントの不完全アジュバントなどを含んでいてよい。
【００４５】
つぎに本発明を以下の実施例により説明するが、これらは本発明を限定することを意図するものではない。
合成の実施例
全ての反応生成物は、満足のいくＮＭＲスペクトルおよびシリカゲル薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を与えた。クロマトグラフィーはすべてシリカゲル上で行い、溶出をＴＬＣによりモニターした。完了した反応は全てｔｌｃ分析により決定した。反応は全て、特に断らない限り、窒素下、室温で行った。反応溶媒は全て、特に断らない限り、無水であった。通常の処理は、水洗、有機溶媒抽出、無水硫酸ナトリウムでの乾燥および減圧下での溶媒除去を含んでいた。
【００４６】
実施例１：ＥＲ−８０５０２８の調製
【化１９】
2004505059.tif 000012
−７８℃の塩化メチレン（５０ｍＬ）中の塩化オキザリル（０．６５ｍＬ）の攪拌溶液にＤＭＳＯ（１．１ｍＬ）を滴下して加え、ついで３０分間攪拌した。塩化メチレン（５ｍＬ）中のキラルなアルコール１（９０８ｍｇ；文献公知の方法によりＬ−セリンから）を滴下して加え、ついで−４０〜−６０℃で１時間攪拌し、その後、トリエチルアミン（３．４８ｍＬ）を滴下して加え、反応液を１時間かけて室温に温めた。処理後に得られた粗製のアルデヒド２をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、前もって調製したウンデカニルマグネシウムブロマイド３（ＴＨＦ（４ｍＬ）中でマグネシウム末（１３２ｍｇ）およびウンデカニルブロマイド（１．０５４ｇ）をヨウ素の結晶とともに５０℃で３時間反応させることにより調製）に−２０℃にて滴下して加えた。このグリニャール反応液を室温に温め、２時間攪拌した。通常の処理およびシリカゲルクロマトグラフィー精製は化合物４（１．４２ｇ）を与えた。
【００４７】
【化２０】
2004505059.tif 000013
メタノール（１００ｍＬ）中の化合物４（１．４２ｇ）の攪拌溶液に無水ＨＣｌガスを０℃にて１０分間加え、その後、反応混合物を室温に温めた。混合物を濃縮乾固した後、得られた粗製の生成物を１Ｎ水酸化ナトリウムで塩基性にし、酢酸エチルで抽出して粗製の化合物５（５０９ｍｇ）を得た。化合物５（５０９ｍｇ）をＴＨＦ（４ｍＬ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウムを加え（８ｍＬ）、ついでテトラデカノイルクロライド（０．５７ｍＬ）を０℃にて滴下して加え、ついで１時間激しく攪拌した。通常の処理およびシリカゲル精製は化合物６（４６６ｍｇ）を与えた。
【００４８】
【化２１】
2004505059.tif 000014
塩化メチレン（１０ｍＬ）中の化合物６（４６６ｍｇ）の攪拌溶液にイミダゾール（１０５ｍｇ）を加え、ついでｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロライド（３０２ｍｇ）を加えた。室温で４８時間攪拌した後、通常の処理、ついでシリカゲル精製を行って異性体７（２９３ｍｇ）を異性体８（２３５ｍｇ）から分離した。注：これら２つの生成物の立体化学は、化合物１７（以下に記載するようにして調製）から得られたキラル異性体と直接比較（１Ｈ−ＮＭＲおよびｔｌｃ）することによって決定した。
【００４９】
【化２２】
2004505059.tif 000015
塩化メチレン（０．５ｍＬ）中の化合物８（１５４ｍｇ）の攪拌溶液に、ラウリン酸（５９ｍｇ）、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ、７０ｍｇ）およびＮ，Ｎ−４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、３ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、水性処理、およびシリカゲル精製して化合物９（１９７ｍｇ）を得た。
【００５０】
【化２３】
2004505059.tif 000016
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の化合物９（１９７ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（２０ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（８８ｍｇ）を室温にて加えた。１６時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物１０（１３４ｍｇ）を得た。
【００５１】
【化２４】
2004505059.tif 000017
塩化メチレン（０．８ｍＬ）中の化合物１０（１３４ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（４５ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（ｉ）（１０６ｍｇ）を０℃にて加えた。１時間攪拌した後、反応混合物を、ＴＨＦ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）中にオキソン（２０４ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物１１（１４０ｍｇ）を得た。
【００５２】
【化２５】
2004505059.tif 000018
リン酸化試薬（ｉ）を調製するため、塩化メチレン中の蒸留したジイソプロピルアミン（９．０ｍＬ）の溶液にテトラゾール（４．５１ｇ）を室温にて加え、ついで１．５時間攪拌した。アリルホスホロジアミダイト（２０．５ｍＬ）を６．５ｍＬ／時の速度で滴下して加え、ついでさらに３時間攪拌した。上記反応混合物に塩化メチレン（５０ｍＬ）中のＮ−Ｂｏｃ−２−アミノエタノール（１０．３６ｇ）を８．４ｍＬ／時の速度で滴下して加え、ついでさらに１８時間攪拌した。得られた白色懸濁液を、塩化メチレン（２０ｍＬ）で２回洗浄しながらセライト５４５で濾過した。濾液を濃縮し、残渣をヘキサン（２００ｍＬ）で懸濁および濾過した。得られたヘキサン濾液を濃縮乾固し、トルエンの２つの１０ｍＬ部分と共沸して粗製の生成物（ｉ）（２１．５４ｇ）を油状物として得た。
【００５３】
【化２６】
2004505059.tif 000019
塩化メチレン（０．１６ｍＬ）中の化合物１１（５８ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．１６ｍＬ）を加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を室温にて加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。得られた粗製のアミン１２を飽和重炭酸ナトリウム（０．６ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．６ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍの溶液を０．０１８ｍＬ）を０℃にて滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲルで精製して化合物１３（５５ｍｇ）を得た。
【００５４】
【化２７】
2004505059.tif 000020
脱気クロロホルム（３ｍＬ）中の化合物１３（５５ｍｇ）の攪拌溶液に、フェニルシラン（５６ｍｇ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（５４ｍｇ）を０℃にて加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０５０２８（２．２ｍｇ）を得た。
【００５５】
実施例２：キラル特異的な方法による化合物８の調製
【化２８】
2004505059.tif 000021
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のジシクロヘキシルアミン（６３４ｍｇ）の攪拌溶液にｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍ；２．１９ｍＬ）を０℃にて加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を、−９５℃に冷却したエチルエーテル（１０ｍＬ）中のアリルクロライド（２７０ｍｇ）および（＋）−Ｂ−メトキシジイソピノカンフェイルボラン（８２４ｍｇ）の攪拌溶液を滴下して加えた。この混合物を−９５℃で１時間攪拌し、その後、三フッ化ホウ素エーテレート（８２７ｍｇ）を加えた。−９５℃でさらに２０分間攪拌した後、エチルエーテル（２ｍＬ）中のアルデヒド２（５７０ｍｇ）を加えた。最終反応混合物をゆっくりと室温に温め、１２時間攪拌し、過酸化水素（９ｍＬ）およびメタノール（４．５ｍＬ）の溶液中の重炭酸ナトリウム（０．９ｇ）および飽和重炭酸ナトリウム（２．５ｍＬ）を用いて酸化的に反応停止させた。通常の処理およびシリカゲルクロマトグラフィーの後に化合物１４（１．３０ｇ）を得た。
【００５６】
【化２９】
2004505059.tif 000022
化合物１４（１．３ｇ）の攪拌溶液に、塩化メチレン（４６ｍＬ）中の１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（１．７７ｇ）を０℃にて加えた。反応混合物を室温にて７２時間攪拌した後、通常の処理およびシリカゲル精製を行って化合物１５（３００ｍｇ）を得た。
【００５７】
【化３０】
2004505059.tif 000023
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のシアン化銅（Ｉ）（１０５ｍｇ）の攪拌懸濁液にオクチルマグネシウムブロマイド（２．０Ｍ；０．７４ｍＬ）を−７８℃にて滴下して加え、ついで１５分間攪拌し、室温で２時間攪拌した。反応混合物を−７８℃に戻した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の化合物１５（１９８ｍｇ）を滴下して加え、−７８℃で１時間攪拌し、ついで０℃で１時間攪拌した。通常の処理、ついでシリカゲル精製を行って化合物１６（１６８ｍｇ）を得た。
【００５８】
【化３１】
2004505059.tif 000024
酢酸エチル（５０ｍＬ）中の化合物１６（３０ｍｇ）の攪拌溶液に１０％パラジウム／炭素（１０ｍｇ）を加え、その後、混合物を水素雰囲気（６０ｐｓｉ）下に置き、室温で１６時間振盪した。濾過し、ついで濃縮およびシリカゲルクロマトグラフィーを行って化合物１７（３０ｍｇ）を得た。
化合物７および化合物８の立体化学は，上記で概略を示した化合物４からの工程を用いて化合物１７を化合物８に変換した後に明確に確立された。
【００５９】
実施例３：ＥＲ−８０４８７４の調製
【化３２】
2004505059.tif 000025
塩化メチレン（０．５ｍＬ）中の化合物７（１９６ｍｇ）の攪拌溶液に、ラウリン酸（７３．５ｍｇ）、ＥＤＣ（８７ｍｇ）を加え、ついでＤＭＡＰ（３．５ｍｇ）を加えた。室温で１６時間攪拌し、処理およびシリカゲル精製した後に化合物１８（２４２ｍｇ）が得られた。
【００６０】
【化３３】
2004505059.tif 000026
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の化合物１８（２４２ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（２５ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（１０９ｍｇ）を室温にて加えた。１６時間攪拌した後に反応混合物の反応を停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物１９（１４４ｍｇ）を得た。
【００６１】
【化３４】
2004505059.tif 000027
塩化メチレン（０．８ｍＬ）中の化合物１９（１０８ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（３６ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（３６ｍｇ）を０℃にて加えた。１時間攪拌した後、反応混合物をＴＨＦ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）中にオキソン（２０４ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物２０（１２８ｍｇ）を得た。
【００６２】
【化３５】
2004505059.tif 000028
塩化メチレン（０．１６ｍＬ）中の化合物２０（４０ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．１１ｍＬ）を加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を室温にて加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン２１を飽和重炭酸ナトリウム（０．５ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．５ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を０．０１２ｍＬ）を０℃にて滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物２２（３１ｍｇ）を得た。
【００６３】
【化３６】
2004505059.tif 000029
脱気クロロホルム（２ｍＬ）中の化合物２２（３１ｍｇ）の攪拌溶液に、フェニルシラン（１２μＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３２ｍｇ）を０℃にて加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）して所望の生成物ＥＲ−８０４８７４（６．０ｍｇ）を得た。
【００６４】
実施例４：ＥＲ−８０４６６６の調製
【化３７】
2004505059.tif 000030
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の［２−（トリメチルシリル）エトキシメチル］トリフェニルホスホニウムクロライド（１．５４ｇ）の攪拌懸濁液にｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍ；２．２５ｍＬ）を０℃にて加え、ついでＴＨＦ（５ｍＬ）中の化合物２（６４９ｍｇ）を滴下して加えた。室温でさらに１時間攪拌し、処理およびシリカゲル精製した後に化合物２３（３７１ｍｇ）を得た。
【００６５】
【化３８】
2004505059.tif 000031
化合物２３（４００ｍｇ）を酢酸（５ｍＬ）と水（１ｍＬ）との混合物に溶解し、室温で４時間攪拌した。濃縮およびシリカゲル精製の後に化合物２４（１１２ｍｇ）を得た。
【００６６】
【化３９】
2004505059.tif 000032
ＴＨＦ（２ｍＬ）中の化合物２４（１１２ｍｇ）の攪拌溶液にｎ−デシルマグネシウムブロマイド（ＴＨＦ中に１．０Ｍのものを０．６ｍＬ）を０℃にて滴下して加えた。室温で２時間攪拌し、処理およびシリカゲル精製した後に化合物２５（１４８ｍｇ）を得た。
【００６７】
【化４０】
2004505059.tif 000033
メタノール（１０ｍＬ）中の化合物２５（１４８ｍｇ）の攪拌溶液に無水塩化水素ガスを６℃にて１５分間加えた。混合物を室温で１６時間攪拌し、その後、濃縮乾固して粗製の化合物２６（１２４ｍｇ）を得た。化合物２６（１２４ｍｇ）をＴＨＦ（１ｍＬ）に０℃にて溶解し、ついで飽和重炭酸ナトリウム（２ｍＬ）およびテトラデカノイルクロライド（９９ｍｇ）を加えた。室温で１時間攪拌し、ついで処理およびシリカゲル精製して化合物２７（６９ｍｇ）を得た。
【００６８】
【化４１】
2004505059.tif 000034
塩化メチレン（１０ｍＬ）中の化合物２７（６９ｍｇ）の攪拌溶液にイミダゾール（１５．４ｍｇ）を加え、ついでｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロライド（３９μＬ）を加えた。室温で４８時間攪拌した後、常法の処理、ついでシリカゲル精製を行って化合物２８（９５ｍｇ）を得た。
【００６９】
【化４２】
2004505059.tif 000035
塩化メチレン（０．５ｍＬ）中の化合物２８（９５ｍｇ）の攪拌溶液に、ペンタデカン酸（４１ｍｇ）、ＥＤＣ（４０ｍｇ）およびＤＭＡＰ（２ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、水性の処理およびシリカゲル精製して化合物２９（１２１ｍｇ）を得た。
【００７０】
【化４３】
2004505059.tif 000036
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の化合物２９（１２１ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（１８ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（７３ｍｇ）を室温にて加えた。１６時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物３０（８１ｍｇ）を得た。
【００７１】
【化４４】
2004505059.tif 000037
塩化メチレン（０．６ｍＬ）中の化合物３０（１３４ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（２５ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（６０ｍｇ）を０℃にて加えた。１時間攪拌した後、反応混合物をＴＨＦ（１ｍＬ）と水（１ｍＬ）との混合物中にオキソン（１４８ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物３１（１００ｍｇ）を得た。
【００７２】
【化４５】
2004505059.tif 000038
塩化メチレン（０．１０ｍＬ）中の化合物３１（１００ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．１０ｍＬ）を加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を室温にて加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン３２を飽和重炭酸ナトリウム（０．５ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．５ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を０．０１３ｍＬ）を０℃にて滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物３３（４６ｍｇ）を得た。
【００７３】
【化４６】
2004505059.tif 000039
脱気クロロホルム（２ｍＬ）中の化合物３３（４６ｍｇ）の攪拌溶液に、フェニルシラン（１６μＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４２ｍｇ）を０℃にて加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０４６６６（２１．２ｍｇ）を得た。
【００７４】
実施例５：ＥＲ−８０５２７４の調製
【化４７】
2004505059.tif 000040
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ；５ｍＬ）中の市販のキラルな化合物３４（２．６９ｇ）の溶液に４−メトキシベンズアルデヒドジメチルアセタール（６．１９ｇ）およびｐ−トルエンスルホン酸（０．６５ｇ）を加え、ついで室温で１６時間攪拌した。高真空濃縮、処理およびシリカゲル精製した後に化合物３５（３．３９ｇ）を得た。
【００７５】
【化４８】
2004505059.tif 000041
塩化メチレン（２５ｍＬ）中の化合物３５（１．７８ｇ）の攪拌溶液にイミダゾール（０．８１ｇ）を加え、ついでｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロライド（２．４１ｇ）を加えた。室温で１６時間攪拌した後、常法の処理、ついでシリカゲル精製して化合物３６（３．５５ｇ）を得た。
【００７６】
【化４９】
2004505059.tif 000042
塩化メチレン（３５ｍＬ）中の化合物３６（３．５５ｇ）の攪拌溶液に水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ；ヘキサン中の１．０Ｍ溶液を３１ｍＬ）を−７８℃にて滴下して加えた。−７８℃でさらに２時間攪拌した後、反応混合物をまずメタノール：水で、ついでロシェル塩で反応停止させた。処理およびシリカゲルクロマトグラフィーの後に化合物３７（７２５ｍｇ）を得た。
【００７７】
【化５０】
2004505059.tif 000043
−７８℃の塩化メチレン（８ｍＬ）中の塩化オキザリル（０．１１ｍＬ）の攪拌溶液にＤＭＳＯ（０．１７ｍＬ）を滴下して加え、ついで３０分間攪拌した。塩化メチレン（２ｍＬ）中の化合物３７（３７８ｍｇ）を滴下して加え、ついで−４０〜−６０℃で１時間攪拌し、その後、トリエチルアミン（０．５７ｍＬ）を滴下して加え、反応混合物を１時間かけて室温に温めた。処理後、粗製のアルデヒド３８（３３２ｍｇ）を得た。
【００７８】
【化５１】
2004505059.tif 000044
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の化合物３８（３３２ｍｇ）の攪拌溶液にデカニルマグネシウムブロマイド（エチルエーテル中に１．０Ｍ；１．４４ｍＬ）を滴下して０℃にて加えた。室温で１６時間攪拌した後、デカニルマグネシウムブロマイド（エチルエーテル中に１．０Ｍ；０．５ｍＬ）を加え、反応液をさらに１時間攪拌させた。処理およびシリカゲルクロマトグラフィーの後に化合物３９（２３８ｍｇ）を得た。
【００７９】
【化５２】
2004505059.tif 000045
塩化メチレン（４．０ｍＬ）中の化合物３９（２３８ｍｇ）の攪拌溶液にウンデカン酸（９８ｍｇ）、ＥＤＣ（１２５ｍｇ）およびＤＭＡＰ（４．４ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、ウンデカン酸（７５ｍｇ）、ＥＤＣ（９４ｍｇ）およびＤＭＡＰ（９ｍｇ）を加え、反応液をさらに２４時間攪拌した。水性の処理、ついでシリカゲル精製して化合物４０（３１４ｍｇ）を得た。
【００８０】
【化５３】
2004505059.tif 000046
アセトニトリル：水の５：１混合物（７．５ｍＬ）中の化合物４０（５７７ｍｇ）の攪拌溶液に硝酸セリウムアンモニウム（ＣＡＮ；１．２３ｇ）を０℃にて加えた。反応混合物を室温で７２時間攪拌し、処理し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して化合物４１（２２８ｍｇ）および化合物４２（２２４ｍｇ）を得た。
【００８１】
【化５４】
2004505059.tif 000047
ＴＨＦ（２．３ｍＬ）中の化合物４１（１５３ｍｇ）の攪拌溶液に、トリフェニルホスフィン（２４６ｍｇ）、ジフェニルホスホリルアジド（２５９ｍｇ）およびアゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ；１６４ｍｇ）を加えた。室温で２時間攪拌した後、処理、ついでシリカゲルクロマトグラフィー後に化合物４３（１１３ｍｇ）を得た。
【００８２】
【化５５】
2004505059.tif 000048
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の化合物４３（１３０ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（１８ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（７９ｍｇ）を室温にて加えた。４８時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物４４（７５ｍｇ）を得た。
【００８３】
【化５６】
2004505059.tif 000049
塩化メチレン（０．６ｍＬ）中の化合物４４（７５ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（７２ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（１７０ｍｇ）を０℃にて加えた。１時間攪拌した後、反応混合物をＴＨＦ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）中にオキソン（６２７ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物４５（７３ｍｇ）を得た。
【００８４】
【化５７】
2004505059.tif 000050
塩化メチレン（０．１０ｍＬ）中の化合物４５（３７ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．０９ｍＬ）を加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を室温にて加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン４６（３３ｍｇ）を飽和重炭酸ナトリウム（０．５ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．５ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を０．０１４ｍＬ）を０℃にて滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物４７（３５ｍｇ）を得た。
【００８５】
【化５８】
2004505059.tif 000051
化合物４７（３５ｍｇ）の攪拌溶液に塩化メチレン中の（ＰｈＳ）３ＳｎＨ＊Ｅｔ３Ｎ錯体（０．５Ｍ；０．３４ｍＬ）を室温にて加えた。反応混合物を１時間攪拌し、その後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して粗製の化合物４８（２９ｍｇ）を得、これを次の工程に直ちに用いた。
【００８６】
【化５９】
2004505059.tif 000052
塩化メチレン（０．５ｍＬ）中の化合物４８（２９ｍｇ）の攪拌溶液にトリデカン酸（３６ｍｇ）およびＥＤＣ（４４ｍｇ）を加えた。４８時間攪拌した後、水性の処理、ついでシリカゲル精製して化合物４９（２１ｍｇ）を得た。
【００８７】
【化６０】
2004505059.tif 000053
脱気クロロホルム（１．５ｍＬ）中の化合物４９（２１ｍｇ）の攪拌溶液に、フェニルシラン（１６μＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１８ｍｇ）を０℃にて加えた。０℃で１０分間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０５２７４（８．９ｍｇ）を得た。
【００８８】
実施例６：ＥＲ−８０５２７１の調製
【化６１】
2004505059.tif 000054
塩化メチレン（２．０ｍＬ）中の化合物４１（１２８ｍｇ）の攪拌溶液に、トリデカン酸（８３ｍｇ）、ＥＤＣ（１１３ｍｇ）およびＤＭＡＰ（５．０ｍｇ）を加えた。７２時間攪拌した後、水性の処理およびシリカゲル精製して化合物５０（１３６ｍｇ）を得た。
【００８９】
【化６２】
2004505059.tif 000055
ＴＨＦ（０．８ｍＬ）中の化合物５０（１３６ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（１４ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（６３ｍｇ）を室温にて加えた。１６時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物５１（８２ｍｇ）を得た。
【００９０】
【化６３】
2004505059.tif 000056
塩化メチレン（０．７ｍＬ）中の化合物５１（８２ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（３７ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（８９ｍｇ）を０℃にて加えた。２時間攪拌した後、反応混合物をＴＨＦ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）中にオキソン（３３０ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに２時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物５２（７０ｍｇ）を得た。
【００９１】
【化６４】
2004505059.tif 000057
塩化メチレン（０．１０ｍＬ）中の化合物５２（７０ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．１３ｍＬ）を加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を室温にて加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン５３（４０ｍｇ）を飽和重炭酸ナトリウム（０．５ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．５ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を０．０１４ｍＬ）を０℃にて滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物５４（２４ｍｇ）を得た。
【００９２】
【化６５】
2004505059.tif 000058
脱気クロロホルム（１．５ｍＬ）中の化合物５４（２４ｍｇ）の攪拌溶液に、フェニルシラン（１７ｍｇ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１８ｍｇ）を０℃にて加えた。０℃で１０分間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０５２７１（３．３ｍｇ）を得た。
【００９３】
実施例７：ＥＲ−８０５２７０の調製
【化６６】
2004505059.tif 000059
塩化メチレン（５．０ｍＬ）および飽和重炭酸ナトリウム（２．５ｍＬ）中の市販のＤ−スフィンゴシンサルフェート５５（１２０ｍｇ）の攪拌懸濁液に、テトラデカノイルクロライド（９９ｍｇ）を０℃にて滴下して加えた。室温で１６時間攪拌した後、反応混合物を処理し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して化合物５６（１８３ｍｇ）を得た。
【００９４】
【化６７】
2004505059.tif 000060
塩化メチレン（３．６ｍＬ）中の化合物５６（１８３ｍｇ）の攪拌溶液にイミダゾール（３９ｍｇ）を加え、ついでｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロライド（１０９ｍｇ）を加えた。室温で１６時間攪拌した後、常法の処理、ついでシリカゲル精製して化合物５７（１９３ｍｇ）を得た。
【００９５】
【化６８】
2004505059.tif 000061
塩化メチレン（０．５ｍＬ）中の化合物５７（１９３ｍｇ）の攪拌溶液に、ドデカン酸（７４ｍｇ）、ＥＤＣ（７０ｍｇ）およびＤＭＡＰ（４ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、水性の処理およびシリカゲル精製して化合物５８（２１９ｍｇ）を得た。
【００９６】
【化６９】
2004505059.tif 000062
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の化合物５８（２１９ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（２１ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（９３ｍｇ）を室温にて加えた。４８時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物５９（１４０ｍｇ）を得た。
【００９７】
【化７０】
2004505059.tif 000063
塩化メチレン（１．０ｍＬ）中の化合物５９（１４０ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（４２ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（１００ｍｇ）を０℃にて加えた。２時間攪拌した後、反応混合物をＴＨＦ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）中にオキソン（３６９ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。室温でさらに１６時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物６０（１５２ｍｇ）を得た。
【００９８】
【化７１】
2004505059.tif 000064
塩化メチレン（０．２ｍＬ）中の化合物６０（４６ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．１２ｍＬ）を加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を室温にて加えた。１時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン６１を飽和重炭酸ナトリウム（０．６ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．６ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を０．０１４ｍＬ）を０℃にて滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物６２（４４ｍｇ）を得た。
【００９９】
【化７２】
2004505059.tif 000065
脱気クロロホルム（２ｍＬ）中の化合物６２（４４ｍｇ）の攪拌溶液に、フェニルシラン（４０μＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２３ｍｇ）を０℃にて加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０５２７０（７．１ｍｇ）を得た。
【０１００】
実施例８：ＥＲ−８０５３２８の調製
【化７３】
2004505059.tif 000066
−７８℃の塩化メチレン（２０ｍＬ）中の塩化オキザリル（０．６６ｍＬ）の攪拌溶液にＤＭＳＯ（１．０６ｍＬ）を滴下して加えた。１５分間攪拌した後、塩化メチレン（５ｍＬ）中の市販の保護グリセリン６３（０．６２ｇ）を滴下して加え、ついで３０分間さらに攪拌した。トリエチルアミン（３．５ｍＬ）を滴下して加え、ついで室温に温め、希ＨＣｌを用いた常法の処理を行った。得られた粗製のアルデヒド６４を次の工程に直ちに用いた。
【０１０１】
【化７４】
2004505059.tif 000067
０℃のトルエン（３０ｍＬ）中の洗浄水素化ナトリウム（０．１４４ｇ）の攪拌懸濁液にホスホネート６５（１．２ｍＬ）を滴下して加え、ついで室温で１５分間攪拌した。０℃に冷却した後、トルエン（５ｍＬ）中の粗製のアルデヒド６４（０．６２ｇ）を滴下して加え、ついで室温で２時間攪拌した。反応液を常法で処理し、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて生成物６６（０．４６ｇ）を得た。
【０１０２】
【化７５】
2004505059.tif 000068
室温の酢酸エチル（１００ｍＬ）中のキラルなエステル６６（３．８０ｇ）の攪拌溶液に１０％パラジウム／炭素（１００ｍｇ）を加え、その後、混合物を水素雰囲気下（６０ｐｓｉ）に置き、２時間振盪した。濾過、ついで濃縮して粗製の化合物６７（４．００ｇ）を得た。
【０１０３】
【化７６】
2004505059.tif 000069
ヘキサン（１００ｍＬ）中の化合物６７（４．００ｇ）の攪拌溶液にＤＩＢＡＬ（ヘキサン中に１．０Ｍ；４０ｍＬ）を滴下して加えた。０℃でさらに２０分間攪拌した後、反応混合物をまずメタノール：水で、ついでロシェル塩で反応停止させた。処理およびシリカゲルクロマトグラフィー後に化合物６８（２．６６ｇ）を得た。
【０１０４】
【化７７】
2004505059.tif 000070
−７８℃の塩化メチレン（１００ｍＬ）中の塩化オキザリル（２．４６ｍＬ）の攪拌溶液にＤＭＳＯ（４．０ｍＬ）を滴下して加え、ついで３０分間攪拌した。塩化メチレン（１０ｍＬ）中の化合物６８（２．８２８ｇ）を滴下して加え、ついで−４０〜−６０℃で１時間攪拌し、その後、トリエチルアミン（１３．２ｍＬ）を滴下して加え、反応混合物を１時間かけて室温に温めた。処理後に得られた粗製のアルデヒド６９（３．０２ｇ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、ＴＨＦ（３．８２ｍＬ）中のノナニルマグネシウムブロマイド（４．１４ｇ）に室温にて滴下して加えた。さらに２時間攪拌した後、常法の処理およびシリカゲルクロマトグラフィー精製を行って化合物７０（２．２７ｇ）を得た。
【０１０５】
【化７８】
2004505059.tif 000071
ＴＨＦ（４０ｍＬ）中の化合物７０（１．１３ｇ）の攪拌溶液に、室温にてトリフェニルホスフィン（１．５５ｇ）、ジフェニルホスホリルアジド（１．６３ｇ）およびアゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ；１．０３ｇ）を加えた。１５分間攪拌した後、混合物にトリフェニルホスフィン（１．０４ｇ）、ジフェニルホスホリルアジド（１．０９ｇ）およびアゾジカルボン酸ジエチル（０．６９ｇ）を加え、最終混合物を２０分間攪拌した。処理およびシリカゲルクロマトグラフィー後に粗製の化合物７１（１．８３ｇ）を得た。
【０１０６】
【化７９】
2004505059.tif 000072
粗製の化合物７１（１．８３ｇ）に塩化メチレン中の（ＰｈＳ）３ＳｎＨ＊Ｅｔ３Ｎ錯体（０．５Ｍ；２０ｍＬ）を室温にて加えた。反応混合物を２０分間攪拌し、その後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して粗製の化合物７２（２．０１ｇ）を得、これを次の工程に直ちに用いた。
【０１０７】
【化８０】
2004505059.tif 000073
ＴＨＦ（１５ｍＬ）および飽和重炭酸ナトリウム（３０ｍＬ）中の粗製の化合物７２（２．０１ｇ）の攪拌懸濁液に、テトラデカノイルクロライド（１．７４ｇ）を０℃にて滴下して加えた。室温で３０分間攪拌した後、反応混合物を処理し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して化合物７３（１．５８ｇ）を得た。
【０１０８】
【化８１】
2004505059.tif 000074
ＴＨＦ（８ｍＬ）中の化合物７３（７８５ｍｇ）の攪拌溶液に、室温にて希ＨＣｌ（２．４Ｎ；１０ｍＬ）を加えた。反応混合物を２時間攪拌した後、常法の処理により粗製の生成物７４（６６７ｍｇ）を得た。
【０１０９】
【化８２】
2004505059.tif 000075
塩化メチレン（１６ｍＬ）中の化合物７１（６６７ｍｇ）の攪拌溶液にイミダゾール（１６１ｍｇ）を加え、ついでｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロライド（４３５ｍｇ）を加えた。１８時間攪拌した後、常法の処理、ついでシリカゲル精製して化合物７２（８５０ｍｇ）を得た。
【０１１０】
【化８３】
2004505059.tif 000076
塩化メチレン（０．５ｍＬ）中の化合物７２（１０６ｍｇ）の攪拌溶液に、室温にてテトラデカン酸（４２ｍｇ）、ＥＤＣ（４４ｍｇ）およびＤＭＡＰ（４ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、水性の処理およびシリカゲル精製して化合物７３（１３２ｍｇ）を得た。
【０１１１】
【化８４】
2004505059.tif 000077
ＴＨＦ（１．０ｍＬ）中の化合物７３（１３２ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（１３ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（５８ｍｇ）を室温にて加えた。１６時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物７４（８０ｍｇ）を得た。
【０１１２】
【化８５】
2004505059.tif 000078
塩化メチレン（０．６ｍＬ）中の化合物７４（８０ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（２５ｍｇ）を０℃にて加え、ついでリン酸化試薬（６０ｍｇ）を加えた。１時間攪拌した後、反応混合物をＴＨＦ（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）中にオキソン（２０４ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物７５（６５ｍｇ）を得た。
【０１１３】
【化８６】
2004505059.tif 000079
塩化メチレン（０．１ｍＬ）中の化合物７５（６５ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（８２ｍｇ）を室温にて加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン７６を０℃にて飽和重炭酸ナトリウム（０．７ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．７ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を０．０１９ｍＬ）を滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物７７（５０ｍｇ）を得た。
【０１１４】
【化８７】
2004505059.tif 000080
脱気クロロホルム（３ｍＬ）中の化合物７７（５０ｍｇ）の攪拌溶液に、フェニルシラン（３２ｍｇ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２６ｍｇ）を０℃にて加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０５３２８（３８ｍｇ）を得た。
【０１１５】
実施例９：ＥＲ−８０５３２９の調製
【化８８】
2004505059.tif 000081
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の化合物７５（０．１４ｇ）の攪拌溶液に、室温にてトリフェニルホスフィン（０．１５９ｇ）、ジフェニルホスホリルアジド（０．１６７ｇ）およびＤＥＡＤ（０．１０５ｇ）を加えた。１時間攪拌した後、処理後に粗製のアジド８１（０．１４ｇ）を得た。
【０１１６】
【化８９】
2004505059.tif 000082
粗製の化合物８１（０．１４ｇ）に塩化メチレン中の（ＰｈＳ）３ＳｎＨ＊Ｅｔ３Ｎ錯体（０．５Ｍ；５ｍＬ）を室温にて加えた。反応混合物を２０分間攪拌し、その後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して粗製の化合物８２（０．１４ｇ）を得、これを次の工程に直ちに用いた。
【０１１７】
【化９０】
2004505059.tif 000083
塩化メチレン（２．０ｍＬ）中の化合物８２（０．１４ｇ）の攪拌溶液に、室温にてテトラデカン酸（９２ｍｇ）およびＥＤＣ（１１６ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、水性の処理およびシリカゲル精製して化合物８３（１９０ｍｇ）を得た。
【０１１８】
【化９１】
2004505059.tif 000084
ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中の化合物８３（１９０ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（２０ｍｇ）を室温にて加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（８９ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物８４（１０４ｍｇ）を得た。
【０１１９】
【化９２】
2004505059.tif 000085
塩化メチレン（０．８ｍＬ）中の化合物８４（１０４ｍｇ）の攪拌溶液にテトラゾール（４２ｍｇ）を０℃にて加え、ついでリン酸化試薬（１００ｍｇ）を加えた。１時間攪拌した後、反応混合物をＴＨＦ（２ｍＬ）および水（２ｍＬ）中にオキソン（６１５ｍｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物８５（８２ｍｇ）を得た。
【０１２０】
【化９３】
2004505059.tif 000086
塩化メチレン（０．１ｍＬ）中の化合物８５（８２ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（１０３ｍｇ）を室温にて加え、ついでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン８６を０℃にて飽和重炭酸ナトリウム（０．８ｍＬ）とともに塩化メチレン（０．８ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を０．０２３ｍＬ）を滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物８７（６３ｍｇ）を得た。
【０１２１】
【化９４】
2004505059.tif 000087
脱気クロロホルム（３ｍＬ）中の化合物８７（６３ｍｇ）の攪拌溶液に、０℃にてフェニルシラン（４０ｍｇ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（３３ｍｇ）を加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０５３２９（５．１ｍｇ）を得た。
【０１２２】
実施例１０：ＥＲ−８０５５１７の調製
【化９５】
2004505059.tif 000088
アセトン（１００ｍＬ）中の市販のキラルな化合物８８（３．１８ｇ）の溶液に室温にて２，２−ジメトキシプロパン（４．０５ｍＬ）およびｐ−トルエンスルホン酸（０．５７ｇ）を加え、ついで７２時間攪拌した。処理およびシリカゲル精製した後に化合物８９（３．６７ｇ）を得た。
【０１２３】
【化９６】
2004505059.tif 000089
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のメチルホスホネート９０（４．５６ｇ）の攪拌溶液に、−７８℃にてｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中に１．６Ｍのものを１８．８ｍＬ）を滴下して加えた。５分間攪拌した後、ヨウ化銅（Ｉ）（５．７ｇ）を加え、ついで−５℃でさらに２時間攪拌した。この透明な黄色の混合物に酸クロライド９１（５．３１ｇ）を滴下して加え、その後、反応液を室温で１時間攪拌した。常法の処理およびシリカゲルクロマトグラフィーの後に化合物９２（７．２８ｇ）を得た。
【０１２４】
【化９７】
2004505059.tif 000090
−７８℃の塩化メチレン（６５ｍＬ）中の塩化オキザリル（２．５４ｇ）の攪拌溶液にＤＭＳＯ（２．８３ｍＬ）を滴下して加え、ついで３０分間攪拌した。塩化メチレン（５ｍＬ）中の化合物８９（１．９０ｇ）を滴下して加え、ついで−４０〜−６０℃で１時間攪拌し、その後、トリエチルアミン（９．０４ｍＬ）を滴下して加え、反応混合物を１時間かけて室温に温めた。処理後に得られた粗製のアルデヒド９３（３．０２ｇ）をさらに精製することなく次の反応に直ちに用いた。
【０１２５】
【化９８】
2004505059.tif 000091
０℃のトルエン（３０ｍＬ）中の洗浄水素化ナトリウム（７９ｍｇ）の攪拌懸濁液にホスホネート９２（０．８８ｇ）を加えた。室温で３０分間攪拌した後、反応混合物を−１５℃に冷却し、その後、アルデヒド９３（０．４３ｇ）を加えた。最終反応混合物を室温で３０分間攪拌し、ついで常法の処理およびシリカゲルクロマトグラフィー精製により化合物９４（１．０６ｇ）を得た。
【０１２６】
【化９９】
2004505059.tif 000092
酢酸エチル（２５ｍＬ）中の化合物９４（０．７２６ｇ）の攪拌溶液に室温にて２０％水素化パラジウム（１００ｍｇ）を加え、その後、混合物を水素雰囲気（６０ｐｓｉ）下に置き、１６時間振盪した。濾過し、ついで濃縮して化合物９５（０．７２ｇ）をさらに精製することなく得た。
【０１２７】
【化１００】
2004505059.tif 000093
室温のメタノール（２０ｍＬ）中の化合物９５（０．７２ｇ）の攪拌溶液に０℃の水素化ホウ素ナトリウム（１５０ｍｇ）を加え、その後、混合物を１．５時間攪拌した。処理、ついで濃縮して化合物９６（０．６７ｇ）をさらに精製することなく得た。
【０１２８】
【化１０１】
2004505059.tif 000094
塩化メチレン（１０ｍＬ）中の化合物９６（０．６７ｇ）の攪拌溶液に、室温にてトリデカン酸（０．６６ｇ）、ＥＤＣ（０．７２ｇ）およびＤＭＡＰ（２９ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、さらにＥＤＣ（０．１０ｇ）を加え、ついでさらに１時間攪拌した。水性の処理およびシリカゲル精製して化合物９７（１．０１ｇ）を得た。
【０１２９】
【化１０２】
2004505059.tif 000095
ＴＨＦ（２１ｍＬ）中の化合物９７（１．０１ｇ）の攪拌溶液に３Ｎ ＨＣｌ（２１ｍＬ）を加えた。反応混合物を２６時間攪拌した後、常法の処理により粗製の生成物９８（０．９２ｇ）を得た。
【０１３０】
【化１０３】
2004505059.tif 000096
塩化メチレン（１０ｍＬ）中の化合物９８（０．９４ｇ）の攪拌溶液に０℃にてイミダゾール（２１４ｍｇ）を加え、ついでｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロライド（６０８ｍｇ）を加えた。室温で７２時間攪拌した後、常法の処理、ついでシリカゲル精製して化合物９９（１．４４ｇ）を得た。
【０１３１】
【化１０４】
2004505059.tif 000097
ＴＨＦ（８ｍＬ）中の化合物９９（５５２ｍｇ）の攪拌溶液に、室温にてトリフェニルホスフィン（６３９ｍｇ）、ジフェニルホスホリルアジド（６７１ｍｇ）およびＤＥＡＤ（４２５ｍｇ）を加えた。１時間攪拌した後、処理後に粗製のアジド１００（４０２ｍｇ）を得た。
【０１３２】
【化１０５】
2004505059.tif 000098
化合物１００（４２０ｍｇ）に塩化メチレン中の（ＰｈＳ）３ＳｎＨ＊Ｅｔ３Ｎ錯体（０．５Ｍ；３．４３ｍＬ）を室温にて加えた。反応混合物を２０分間攪拌し、その後、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して化合物１０１（４３４ｍｇ）を得、これを次の工程に直ちに用いた。
【０１３３】
【化１０６】
2004505059.tif 000099
室温の塩化メチレン（６．０ｍＬ）および飽和重炭酸ナトリウム水溶液（６．０ｍＬ）中の化合物１０１（４３４ｍｇ）の攪拌溶液に、テトラデカノイルクロライド（１５６ｍｇ）を加えた。１５分間攪拌した後、処理およびシリカゲル精製を行って化合物１０２（４２２ｍｇ）を得た。
【０１３４】
【化１０７】
2004505059.tif 000100
ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中の化合物１０２（４２２ｍｇ）の攪拌溶液に酢酸（４３ｍｇ）を室温にて加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（１８９ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、反応混合物を反応停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物１０３（２５８ｍｇ）を得た。
【０１３５】
【化１０８】
2004505059.tif 000101
塩化メチレン（２．０ｍＬ）中の化合物１０３（２５８ｍｇ）の攪拌溶液に０℃にてテトラゾール（１１２ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（２６６ｍｇ）を加えた。室温で２時間攪拌した後、反応混合物を０℃のＴＨＦ（２ｍＬ）および水（２ｍＬ）中にオキソン（１．４８ｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物１０４（３２５ｍｇ）を得た。
【０１３６】
【化１０９】
2004505059.tif 000102
塩化メチレン（０．１ｍＬ）中の化合物１０４（３１３ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．６４μＬ）を室温にて加え、ついでトリフルオロ酢酸（４．０ｍＬ）を加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン７６を０℃にて飽和重炭酸ナトリウム水溶液（３．４ｍＬ）とともに塩化メチレン（３．４ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を９４μＬ）を滴下して加えた。室温で３時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物１０５（１４３ｍｇ）を得た。
【０１３７】
【化１１０】
2004505059.tif 000103
脱気クロロホルム（８ｍＬ）中の化合物１０５（１４３ｍｇ）の攪拌溶液に、０℃にてフェニルシラン（９４ｍｇ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（７５ｍｇ）を加えた。室温で０．５時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により所望の生成物ＥＲ−８０５５１７（８４ｍｇ）を得た。
【０１３８】
実施例１１：ＥＲ−８０５５１８およびＥＲ−８０５５１９の調製
【化１１１】
2004505059.tif 000104
メタノール（２０ｍＬ）中の化合物１６（４２７ｍｇ）の攪拌溶液に０℃にて無水ＨＣｌガスを１０分間加え、その後、反応混合物を室温に温め、さらに２時間攪拌した。この混合物を濃縮乾固し、得られた粗製の生成物を凍結乾固して粗製の化合物１０６（３０７ｍｇ）を得た。化合物１０６（３０７ｍｇ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム（４ｍＬ）を０℃にて加え、ついでテトラデカノイルクロライド（０．３１ｍＬ）を滴下して加え、ついで室温で３０分間激しく攪拌した。常法の処理およびシリカゲル精製により化合物１０７（２６６ｍｇ）を得た。
【０１３９】
【化１１２】
2004505059.tif 000105
塩化メチレン（５ｍＬ）中の化合物１０７（２６６ｍｇ）の攪拌溶液に室温にてイミダゾール（６０ｍｇ）を加え、ついでｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロライド（１７０ｍｇ）を加えた。２０時間攪拌した後、常法の処理、ついでシリカゲル精製して異性体１０８（２７７ｍｇ）を得た。
【０１４０】
【化１１３】
2004505059.tif 000106
塩化メチレン（２．０ｍＬ）中の化合物１０８（１５４ｍｇ）の攪拌溶液に、室温にてラウリン酸（１０４ｍｇ）、ＥＤＣ（１２３ｍｇ）およびＤＭＡＰ（５ｍｇ）を加えた。１６時間攪拌した後、水性の処理およびシリカゲル精製を行って化合物１０９（３６１ｍｇ）を得た。
【０１４１】
【化１１４】
2004505059.tif 000107
ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中の化合物１０９（３６１ｍｇ）の攪拌溶液に室温にて酢酸（３６ｍｇ）を加え、ついでテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（１５７ｍｇ）を加えた。７２時間攪拌した後に混合物の反応を停止させ、シリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製して化合物１１０（１３４ｍｇ）を得た。
【０１４２】
【化１１５】
2004505059.tif 000108
塩化メチレン（１．６６ｍＬ）中の化合物１１０（２１０ｍｇ）の攪拌溶液に室温にてテトラゾール（９３ｍｇ）を加え、ついでリン酸化試薬（２２１ｍｇ）を加えた。２時間攪拌した後、反応混合物を０℃のＴＨＦ（２ｍＬ）および水（２ｍＬ）中にオキソン（１．４８ｇ）を含む攪拌懸濁液に注いだ。０℃でさらに１時間攪拌した後、混合物を処理し、シリカゲル上で精製して化合物１１１（１７４ｍｇ）を得た。
【０１４３】
【化１１６】
2004505059.tif 000109
塩化メチレン（０．１０ｍＬ）中の化合物１１１（１７４ｍｇ）の攪拌溶液にトリエチルシラン（０．３１ｍＬ）を室温にて加え、ついでトリフルオロ酢酸（２．０ｍＬ）を加えた。２時間攪拌した後、溶媒を濃縮し、トルエンを用いて共沸乾固した。粗製のアミン１１２を０℃にて飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２．０ｍＬ）とともに塩化メチレン（２．０ｍＬ）に溶解し、ついでホスゲン（トルエン中の１．９３Ｍ溶液を５３μＬ）を滴下して加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を処理し、常法によりシリカゲル精製して化合物１１３（１２４ｍｇ）を得た。
【０１４４】
【化１１７】
2004505059.tif 000110
脱気クロロホルム（７ｍＬ）中の化合物１１３（１２４ｍｇ）の攪拌溶液に、０℃にてフェニルシラン（８２５ｍｇ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（６６ｍｇ）を加えた。室温で１時間攪拌した後、反応混合物を２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（５ｍＬ）で希釈し、さらに３０分間攪拌した。この混合物をＤＥＡＥ−セルロース（２０ｍＬ）上に注ぎ、２：３：１の比のクロロホルム：メタノール：水（１００ｍＬ）中の増大濃度の酢酸アンモニウム（０．０〜０．０５Ｍ）で溶出した。ＨＰＬＣ精製（シリカゲル；ヘキサン：イソプロパノール：水勾配溶出）により２つの異性体生成物、異性体Ａ：ＥＲ−８０５５１８（６８ｍｇ）および異性体Ｂ：ＥＲ−８０５５１９（２８ｍｇ）を得た。
【０１４５】
生物学的実施例
実施例１２：サイトカインの誘導（インビトロ）
マクロファージにおいて刺激応答を誘起する能力は、免疫アジュバント特性を有する分子の必要な特性であると思われる。それゆえ、化合物が免疫細胞からのＴＮＦ−αや他のサイトカインの放出を刺激する能力を、該化合物が免疫応答を刺激する能力（アジュバント活性という結果となる）の指標として試験する。
【０１４６】
単球／マクロファージに対する被験化合物の活性を試験するのに最も利用しやすいヒトの系は全血のものである。種々の濃度の本発明の化合物を、プラスチックアッセイプレートのウエルに５０μｌの５％デキストラン中、ついで正常なボランティア（年齢１８〜５１歳；１１０〜２３０ｌｂ）から得た４００μｌのヘパリン処理全血への５０μｌの５％デキストラン中の１０×ストックとして、全量５００μｌ／ウエル（全血の最終濃度は８０％であった）にて加えた。１０×ストックは、化合物を水中に１ｍＭに溶解し、氷浴中で２分間超音波処理することにより調製した。ついで、化合物を５％デキストラン中で１０×とした。３７℃、５％ＣＯ２雰囲気で穏やかに振盪しながら３時間インキュベートした後、アッセイプレートを１０００×ｇで４℃にて１０分間遠心分離にかけ、血漿を抜き取り、−８０℃に凍結した。血漿試料をＥＬＩＳＡ（Ｒ ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネアポリス、ミネソタ）によりＴＮＦ−αについて分析した。各アッセイポイントを３回試験した。
【０１４７】
表１に示すように、本発明の代表的な化合物は、血液由来の（ｂｌｏｏｄ−ｂｏｒｎｅ）細胞を刺激して０．００８μＭから＞１０．０μＭの刺激値でＴＮＦ−αを放出させる。この刺激値は、１０ｎｇ／ｍｌのＬＰＳを用いて同じ全血試料から得られる放出の半分に等しいＴＮＦ−α放出を刺激するのに要する化合物の濃度である。
【０１４８】
表１：化合物によるインビトロでのサイトカイン放出の刺激
【表１】
2004505059.tif 000111
【０１４９】
【表２】
2004505059.tif 000112
【０１５０】
【表３】
2004505059.tif 000113
【０１５１】
【表４】
2004505059.tif 000114
【０１５２】
実施例１３：抗体応答のインビボ誘発
アジュバント活性の最も重要な試験は、ある化合物を抗原調製物に添加することが、該抗原を生きた動物に投与したときに該抗原に対して産生される抗体レベルを上昇させることによって免疫応答を増大させるか否かを決定することである。
【０１５３】
インビボでの抗体産生に対する本発明の化合物の作用を調べるため、Ｂａｌｂ／ｃマウスに被験化合物を破傷風トキソイドなどのタンパク質とともに注射する。破傷風トキソイドは０．２５μｇの投与量にて免疫原として用いる。メスのＢａｌｂ／ｃマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ；約６〜８週齢（１８〜２５ｇ））にＰＢＳ中の抗原およびアジュバントの混合物（２００μｌ）を３週間毎に全部で３回注射する。対照の動物にはミョウバンまたはＰＢＳを注射する。注射はすべて首の背側に皮下にて行う。２回目および３回目の注射の２週間後にマウスから採血する。血液の回収は、尾静脈に傷を入れ、ベクトンディッキンソンブランドのマイクロテナー（ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ）血清セパレーター管に血滴を回収することにより行う。血清をマイクロ遠心分離により血球から分離し、ＥＬＩＳＡにより抗原特異的なＩｇＧレベルを試験する。
【０１５４】
ペプチドに対する免疫応答は、酵素結合抗体免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）により試験することができ、これはＥＬＩＳＡプレート上にコーティングした破傷風トキソイドに結合する血清抗体のレベルを定量することができるものである。
血清抗体の測定は、２回目の免疫の２週間後に行う。表２に示すように、破傷風トキソイドとともに本発明の化合物を注射したマウスは破傷風トキソイド単独を注射したマウスに比べて高い免疫応答（高い抗体レベル）を示す。
Ａｃｃｕｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌからの破傷風トキソイド（カタログ＃ｓｓｔｅｔｔｏｘ）を免疫抗原として用い、一方、Ｌｉｓｔ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓからの精製トキソイド（カタログ＃１９１）をＥＬＩＳＡアッセイの標的抗原として用いる。
【０１５５】
抗原／アジュバント混合物の調製のため、凍結乾燥した被験化合物をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ；カタログ＃Ｐ−３８１３；Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．、セントルイス、ミズーリ）で２ｍｇ／ｍｌに再構成し、冷水浴中で２分間超音波処理する。Ｐｉｅｒｃｅ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌから購入したＩｍｊｅｃｔＲ Ａｌｕｍを製造業者のガイドラインに従って用い、注射容量の１５％を構成する。抗原をＰＢＳ中に希釈し、被験化合物の最終濃度が２００μｌの注射容量中で３０μｇとなるように被験化合物またはミョウバンと混合する。注射の前に混合物を室温で少なくとも４０分間インキュベートする。
【０１５６】
抗原特異的なＩｇＧのレベルを、抗原を９６ウエルＣｏｓｔａｒ ＥＩＡ／ＲＩＡプレートに受動的にコーティングした直接ＥＬＩＳＡによりモニターする。プレートを５０μｌ／ウエルの破傷風トキソイドで３μｇ／ｍｌ重炭酸緩衝液にてコーティングし、４℃で一夜インキュベートし、自動プレート洗浄機で０．０５％ｔｗｅｅｎ２０を含有するＰＢＳ（ＰＢＳ−ｔ）で３回洗浄する。ついで、プレートをＰＢＳ中の０．５％ゼラチン（２００μｌ／ウエル）で室温（ＲＴ）にて１時間ブロッキングし、ＰＢＳ−ｔで３回洗浄する。マウス血清を１．０％ＢＳＡを含有するＰＢＳ−ｔ中に希釈し、１００μｌの種々の希釈液を抗原コーティングウエルに加え、ＲＴで１時間インキュベートし、再びＰＢＳ−ｔで３回洗浄する。
【０１５７】
ビオチン化ラット抗マウスＩｇＧ（Ｚｙｍｅｄ、サウスサンフランシスコ、カリフォルニア）をＰＢＳ−ｔ中に５０ｎｇ／ｍｌに希釈し、１００μｌ／ウエルを適用する。ＲＴで１時間インキュベートした後、ウエルをＰＢＳ−ｔで３回洗浄し、ついでＰＢＳ−ｔ中の４０ｎｇ／ｍｌのストレプトアビジン−西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲート（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ Ｉｎｃ．、バーミンガム、アラバマ）を加える。ＲＴで３０分間インキュベートした後、ウエルを再びＰＢＳ−ｔで３回洗浄する。ついで、ウエルを１００μｌのＴＭＢ基質（Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ ａｎｄ Ｐｅｒｒｙ Ｌａｂｓ）中で５分間インキュベートする。等容量の１Ｍリン酸を加えて発色を停止させ、４５０ｎｍでの吸光度をＤｅｌｔａｓｏｆｔソフトウエア分析パッケージを有するＴｉｔｅｒｔｅｋ Ｍｕｌｔｉｓｃａｎプレートリーダーで読み取る。
【０１５８】
抗原特異的なＩｇＧレベルの定量のため、曲線を既知の標準と比較する。直接付着させた既知の量の精製ＩｇＧ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈから購入）をＩｇＧ標準曲線として用いる全ＩｇＧアッセイを、破傷風トキソイドに対する直接ＥＬＩＳＡとともに行う。これにより、抗体の抗原特異的捕捉を測定するのに用いたのと同じ試薬により結合抗体を検出することが可能となる。破傷風トキソイドに結合した抗体の検出に用いる同じ試薬溶液、すなわち、ビオチン化抗ＩｇＧ、ついでＨＲＰ−ストレプトアビジンを、全ＩｇＧ定量アッセイおよび抗原特異的アッセイに同時に適用する。それゆえ、精製ＩｇＧ標準曲線の結合からのシグナルは、抗破傷風トキソイドアッセイで結合した等量のＩｇＧに対して生成されたものと等しい。ついで、４パラメータ曲線適合（ｆｉｔ）（ＤｅｌｔａＳｏｆｔ ３ソフトウエアパッケージ）を用い、血清中の破傷風トキソイド特異的抗体の量を精製ＩｇＧ標準から外挿する。
【０１５９】
表２：化合物のインビボでのアジュバント活性
【表５】
2004505059.tif 000115
【０１６０】
上記本発明を明確および理解の目的のために若干詳細に記載したが、当業者には本開示を読んで本発明の真の範囲および添付の特許請求の範囲から逸脱することなく形態および詳細において種々の変化を行いうることが理解されるであろう。
【国際公開パンフレット】
2004505059.tif 000124
2004505059.tif 000125
2004505059.tif 000126
2004505059.tif 000127
2004505059.tif 000128
2004505059.tif 000129
2004505059.tif 000130
2004505059.tif 000131
2004505059.tif 000132
2004505059.tif 000133
2004505059.tif 000134
2004505059.tif 000135
2004505059.tif 000136
2004505059.tif 000137
2004505059.tif 000138
2004505059.tif 000139
2004505059.tif 000140
2004505059.tif 000141
2004505059.tif 000142
2004505059.tif 000143
2004505059.tif 000144
2004505059.tif 000145
2004505059.tif 000146
2004505059.tif 000147
2004505059.tif 000148
2004505059.tif 000149
2004505059.tif 000150
2004505059.tif 000151
2004505059.tif 000152
2004505059.tif 000153
2004505059.tif 000154
2004505059.tif 000155
2004505059.tif 000156
2004505059.tif 000157
2004505059.tif 000158
2004505059.tif 000159
2004505059.tif 000160
2004505059.tif 000161
2004505059.tif 000162
2004505059.tif 000163
2004505059.tif 000164
2004505059.tif 000165
2004505059.tif 000166
2004505059.tif 000167
2004505059.tif 000168
2004505059.tif 000169
2004505059.tif 000170
2004505059.tif 000171
2004505059.tif 000172
2004505059.tif 000173
2004505059.tif 000174
2004505059.tif 000175
2004505059.tif 000176
2004505059.tif 000177
2004505059.tif 000178
2004505059.tif 000179
2004505059.tif 000180
2004505059.tif 000181
2004505059.tif 000182
2004505059.tif 000183
2004505059.tif 000184
2004505059.tif 000185
2004505059.tif 000186
2004505059.tif 000187
2004505059.tif 000188
2004505059.tif 000189
2004505059.tif 000190
2004505059.tif 000191
2004505059.tif 000192
2004505059.tif 000193
2004505059.tif 000194
2004505059.tif 000195
2004505059.tif 000196
2004505059.tif 000197
2004505059.tif 000198
2004505059.tif 000199
2004505059.tif 000200
2004505059.tif 000201
2004505059.tif 000202
2004505059.tif 000203
2004505059.tif 000204
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004505059.tif 000205
【国際調査報告】
2004505059.tif 000206
2004505059.tif 000207