(57)【要約】本発明は、ケモカイン、インターロイキン−８（ＩＬ−８）によって媒介される病態の治療におけるジアニリノスクアラートの新規使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2004509070.tif 000005
（Ｉ）
［式中、
Ｒ１は、独立して、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、ハロ置換Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−１０アルコキシ、アジド、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲ４、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキル；ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、アリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｈ、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１２、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１７、（ＣＲ８Ｒ８）ｑ；および（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択されるか；または２つのＲ１基が一緒になってＯ−（ＣＨ２）ｓＯ−または５〜６員不飽和環を形成し；
ｑは、０、または１〜１０の値を有する整数であり；
ｔは、０、または１もしくは２の値を有する整数であり；
ｓは、１〜３の値を有する整数であり；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換されていてもよいＣ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリック、およびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択されるか、またはＲ４およびＲ５がそれらが結合している窒素と一緒になって酸素、窒素または硫黄から選択される付加的ヘテロ原子を含んでいてもよい５〜７員環を形成し；
Ｙは、独立して、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、ハロ置換Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−１０アルコキシ、アジド、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲ４、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキル；アリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｈ、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１２、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）２Ｒｄ、および（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択されるか；または、２つのＹ基が一緒になってＯ−（ＣＨ２）ｓＯ−または５〜６員不飽和環を形成し；
ｎは、１〜５の値を有する整数であり；
ｍは、１〜４の値を有する整数であり；
Ｒ８は、水素またはＣ１−４アルキルであり；
Ｒ１０は、Ｃ１−１０アルキルＣ（Ｏ）２Ｒ８であり；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロサイクリック、および置換されていてもよいヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択され；
Ｒ１２は、水素、Ｃ１−１０アルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいアリールアルキルから選択され；
Ｒ１７は、Ｃ１−４アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリック、およびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択され、ここで、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロサイクリック環は、全て、置換されていてもよい］
で示される化合物。
【請求項２】
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジクロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−ニトロ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−メトキシ−ベンジルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジクロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−フェニルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−メトキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−エチルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−フェノキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
６−クロロ−３−（３，４−ジオキソ−２−フェニルアミノ−シクロブタ−１−エニルアミノ）−２−ヒドロキシ−ベンゼンスルホンアミド、
３，４−ビス−（４−シアノ−２−ヒドロキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジメチルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−メチル−４−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−プロピルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−メチル−３−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジメトキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロ−３−メチルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−ニトロ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−ニトロ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３，４−ビス−（４−ニトロ−２−ヒドロキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−［（２−ヒドロキシ−フェニル）−メチル−アミノ］−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（３−ヒドロキシ−ピリジン−２−イルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
またはその医薬上許容される塩
である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
有効量の請求項１記載の化合物、および医薬上許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項４】
哺乳動物における、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するケモカイン媒介病態の治療方法であって、該哺乳動物に有効量の請求項１記載の式で示される化合物を投与することを含む方法。
【請求項５】
哺乳動物が１７から選択されるケモカイン媒介疾患に悩んでいる請求項４記載の方法。
【請求項６】
哺乳動物がアトピー性皮膚炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、卒中、敗血症性ショック、多発性硬化症、エンドトキシンショック、乾癬、グラム陰性敗血症、トキシックショック症候群、心臓および腎臓再潅流傷害、糸球体腎炎、血栓症、対宿主性移植片反応、アルツハイマー病、同種移植片拒絶反応、マラリア、再狭窄、脈管形成、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、歯肉炎および望ましくない造血性幹細胞放出、呼吸器ウイルス、ヘルペスウイルスおよび肝炎ウイルスによって引き起こされる疾患、髄膜炎、ヘルペス脳炎、ＣＮＳ脈管炎、外傷性脳損傷、ＣＮＳ腫瘍、クモ膜下出血、術後外傷、嚢胞性線維症、早期分娩、咳、掻痒症、間質性肺炎、過敏症、結晶性関節炎、ライム関節炎、進行性骨化性線維形成異常症、急性および慢性膵炎、急性アルコール性肝炎、壊死性全腸炎、慢性副鼻腔炎、ブドウ膜炎、多発性筋炎、脈管炎、ざ瘡、胃および十二指腸潰瘍、セリアック病、食道炎、舌炎、気道閉塞、気道反応性亢進、閉塞性細気管支炎器質化肺炎、気管支拡張症、細気管支炎、閉塞性細気管支炎、慢性気管支炎、肺性心、呼吸困難、気腫、高炭酸ガス症、過膨張、低酸素血症、低酸素症、外科的肺気量減少、肺線維症、肺高血圧、右心室肥大、サルコイドーシス、小気道疾患、呼吸−還流不適合、ぜん鳴および狼瘡から選択されるケモカイン媒介疾患に悩んでいる請求項１６記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、新規ジアニリノスクアラン化合物群、その製造方法、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２、およびＥＮＡ−７８媒介疾患の治療おけるそれらの使用、ならびにかかる治療に使用するための医薬組成物に関する。
【０００２】
（発明の背景）
インターロイキン−８（ＩＬ−８）に対し、好中球誘引／活性化タンパク質−１（ＮＡＰ−１）、単球由来好中球走化性因子（ＭＤＮＣＦ）、好中球活性化因子（ＮＡＦ）およびＴ−細胞リンパ球走化性因子などの、多数の異なる名称が使われている。インターロイキン−８は、好中球、好塩基球、およびＴ−細胞のサブセットに対する化学誘引物質である。これは、ＴＮＦ、ＩＬ−１α、ＩＬ−１βまたはＬＰＳに曝露されたマクロファージ、線維芽細胞、内皮細胞および上皮細胞を含むほとんどの有核細胞により、およびＬＰＳまたはＦＭＬＰのような走化性因子に曝露された場合に好中球自体により産生される。Ｍ． Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ８４， １０４５ （１９８９）；Ｊ． Ｓｃｈｒｏｄｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３９， ３４７４ （１９８７） および Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４４， ２２２３ （１９９０）；Ｓｔｒｉｅｔｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４３， １４６７ （１９８９） および Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６４， １０６２１ （１９８９）；Ｃａｓｓａｔｅｌｌａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４８， ３２１６ （１９９２）。
【０００３】
Ｇｒｏα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２もまたケモカインαファミリーに属する。ＩＬ−８と同様に、これらのケモカインもまた様々な名称で呼ばれてきた。例えば、ＧＲＯα、β、γは、各々、ＭＧＳＡα、βおよびγと呼ばれてきた（黒色腫増殖刺激活性）。Ｒｉｃｈｍｏｎｄ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ １２９， ３７５ （１９８６） および Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ １４８， ４５１ （１９９２） を参照のこと。ＣＸＣモチーフの直ぐ前にＥＬＲモチーフを有するα−ファミリーのケモカインは、全て、ＩＬ−８Ｂ受容体に結合する。
【０００４】
ＩＬ−８、Ｇｒｏα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２、およびＥＮＡ−７８は、インビトロで多くの機能を刺激する。それらはすべて好中球に対して化学誘引性を有することが明らかにされたが、ＩＬ−８およびＧＲＯαはＴ−リンパ球および好塩基球走化性活性を示した。加えて、ＩＬ−８は正常な個体由来およびアトピー性個体由来の両方の好塩基球からのヒスタミン放出を誘発しうる。ＧＲＯ−αおよびＩＬ−８はさらに、好中球からのリソソーム酵素放出および呼吸バーストを誘発しうる。ＩＬ−８はまた、新たにタンパク質を合成することなく、好中球上でのＭａｃ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）の表面発現を増加させることが明らかにされた。このことは、好中球の血管内皮細胞への付着の増加を引き起こすかもしれない。多くの既知の疾患が、大量の好中球浸潤により特徴付けられる。ＩＬ−８、Ｇｒｏα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２は好中球の蓄積および活性化を促進するので、これらのケモカインは、乾癬および慢性関節リウマチを含む広範囲に及ぶ急性および慢性炎症性障害と関係付けられてきた。Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ． ３０７， ９７ （１９９２）；Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｃｒｉｔ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １２， １７ （１９９２）；Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ９， ６１７ （１９９１）；Ｓｅｉｔｚ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ８７， ４６３ （１９９１）；Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ａｍ． Ｒｅｖ． Ｒｅｓｐｉｒ． Ｄｉｓ． １４６， ４２７ （１９９２）；Ｄｏｎｎｅｌｙ ｅｔ ａｌ．， Ｌａｎｃｅｔ ３４１， ６４３ （１９９３）。加えて、ＥＬＲケモカイン（ＣＸＣモチーフの直前にアミノ酸ＥＬＲモチーフを含有するもの）はまた、アンギオスタシス（ａｎｇｉｏｓｔａｓｉｓ）とも関連付けられてきた。Ｓｔｒｉｅｔｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５８， １７９８ （１９９２）。
【０００５】
インビトロで、ＩＬ−８、Ｇｒｏα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２は、７回膜貫通型Ｇ−タンパク質結合ファミリーの受容体と結合してそれを活性化することにより、特に、ＩＬ−８受容体、最も顕著には、Ｂ受容体と結合することにより、好中球形状変化、走化性、顆粒放出および呼吸バーストを誘発する。Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６６， １４８３９ （１９９１）；および Ｈｏｌｍｅｓ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５３， １２７８ （１９９１）。この受容体ファミリーのメンバーに対する非ペプチド性小型分子アンタゴニストの開発が進められてきた。総説については、Ｒ． Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒ ｉｎ： Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， Ｖｏｌ． ４０， ｐｐ． ３３−９８， Ｂｉｒｋｈａｕｓｅｒ Ｖｅｒｌａｇ， Ｂａｓｅｌ １９９３ を参照のこと。したがって、ＩＬ−８受容体は新規抗炎症剤の創薬のための有望な標的である。
【０００６】
２つの高親和性ヒトＩＬ−８受容体（７７％相同性）が特徴付けられている：ＩＬ−８ＲαはＩＬ−８のみと高親和性をもって結合し、ＩＬ−８ＲＢはＩＬ−８に対して、ならびにＧＲＯ−α、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２に対して高親和性を有する。Ｈｏｌｍｅｓ ｅｔ ａｌ．， 上掲；Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５３， １２８０ （１９９１）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６７， １６２８３ （１９９２）；ＬａＲｏｓａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６７， ２５４０２ （１９９２）；および Ｇａｙｌｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６８， ７２８３ （１９９３） を参照のこと。
【０００７】
当該分野において、ＩＬ−８αまたはβ受容体との結合能を有する化合物に対する処理が依然として必要とされている。したがって、ＩＬ−８産生の増加（好中球およびＴ−細胞サブセットの炎症部位への走化性に関与する）に付随する症状はＩＬ−８受容体結合の阻害物質である化合物により利益を得るであろう。
【０００８】
（発明の概要）
本発明は、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するものであるケモカイン媒介疾患の治療法であって、有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。特に、ケモカインはＩＬ−８である。
【０００９】
本発明は、また、ＩＬ−８とその受容体との結合の阻害を必要とする哺乳動物におけるかかる阻害方法であって、かかる哺乳動物に有効量の式（Ｉ）で示される化合物を投与することを含む方法に関する。
【００１０】
本発明に有用な式（Ｉ）で示される化合物は、構造式：
【化２】
2004509070.tif 000002
（Ｉ）
［式中、
Ｒ１は、独立して、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、ハロ置換Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−１０アルコキシ、アジド、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲ４、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキル，；ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、アリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｈ、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１２、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１７、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択されるか；または２つのＲ１基が一緒になってＯ−（ＣＨ２）ｓＯ−または５〜６員不飽和環を形成し；
ｑは、０、または１〜１０の値を有する整数であり；
ｔは、０、または１もしくは２の値を有する整数であり；
ｓは、１〜３の値を有する整数であり；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換されていてもよいＣ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリック、およびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択されるか、またはＲ４およびＲ５がそれらが結合している窒素と一緒になって酸素、窒素または硫黄から選択される付加的ヘテロ原子を含んでいてもよい５〜７員環を形成し；
Ｙは、独立して、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、ハロ置換Ｃ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ハロ置換Ｃ１−１０アルコキシ、アジド、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲ４、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキル；アリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｈ、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１２、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）２Ｒｄ、および（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択されるか；または２つのＹ基が一緒になってＯ−（ＣＨ２）ｓＯ−または５〜６員不飽和環を形成し；
ｎは、１〜５の値を有する整数であり；
ｍは、１〜４の値を有する整数であり；
Ｒ８は、水素またはＣ１−４アルキルであり；
Ｒ１０は、Ｃ１−１０アルキルＣ（Ｏ）２Ｒ８であり；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロサイクリック、および置換されていてもよいヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択され；
Ｒ１２は、水素、Ｃ１−１０アルキル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいアリールアルキルから選択され；
Ｒ１７は、Ｃ１−４アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリック、およびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択され、ここで、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロサイクリック環は、全て、置換されていてもよい］
で示される。
【００１１】
（発明の詳細な説明）
式（Ｉ）で示される化合物はまた、ＩＬ−８またはＩＬ−８ＲＡおよびＲＢ受容体と結合する他のケモカインの阻害を必要とする、ヒト以外の哺乳動物の獣医学的治療に関連しても用いられる。動物における治療的または予防的処置に関するケモカイン媒介疾患は、本明細書において治療法のセクションに列挙するような病態を包含する。
【００１２】
本明細書で用いる場合、以下の用語は、以下のとおり意味する：
【００１３】
・「ハロ」は、全てのハロゲン、すなわち、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードを意味する。
【００１４】
・「Ｃ２−５アルキル」または「アルキル」は、共に、鎖長を他に限定しない限り、炭素原子２〜５個の直鎖または分枝鎖を意味し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１５】
・「アルケニル」なる用語は、全ての場合、鎖長を他に限定しない限り、炭素原子２〜１０個の直鎖または分枝鎖を意味するために用いられ、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１６】
・「アリール」は、フェニルおよびナフチルを意味する。
【００１７】
・「ヘテロアリール」（それ自体で、または「ヘテロアリールオキシ」もしくは「ヘテロアリールアルキル」のようないずれもの組合せにおいて）は、１個またはそれ以上の環がＮ、ＯまたはＳからなる群から選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子を含有する５〜１０員芳香環系を意味し、例えば、ピロール、ピラゾール、フラン、チオフェン、キノリン、イソキノリン、キナゾリニル、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾール、またはベンゾイミダゾールが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１８】
・「ヘテロサイクリック」（それ自体で、または「ヘテロサイクリックアルキル」のようないずれもの組合せにおいて）は、１個またはそれ以上の環がＮ、Ｏ、またはＳからなる群から選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子を含有する飽和または部分不飽和４〜１０員環系を意味する；例えば、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロピラン、またはイミダゾリジンが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１９】
・「アリールアルキル」または「ヘテロアリールアルキル」または「ヘテロサイクリックアルキル」なる用語は、本明細書において、他に指示しない限り、本明細書で定義したアリール、ヘテロアリールまたはヘテロサイクリック基に結合した、上記で定義したＣ１−１０アルキルを意味するために用いられる。
【００２０】
式（Ｉ）で示される化合物の例としては、以下の化合物が挙げられる：
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジクロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−ニトロ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−メトキシ−ベンジルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−シアノ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジクロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−フェニルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−メトキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−エチルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−フェノキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
６−クロロ−３−（３，４−ジオキソ−２−フェニルアミノ−シクロブタ−１−エニルアミノ）−２−ヒドロキシ−ベンゼンスルホンアミド、
３，４−ビス−（４−シアノ−２−ヒドロキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジメチルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−メチル−４−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−プロピルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−メチル−３−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２，３−ジメトキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロ−３−メチルフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−ニトロ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−ブロモフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（４−ニトロ−２−ヒドロキシ−フェニルアミノ）−４−（２−クロロフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３，４−ビス−（４−ニトロ−２−ヒドロキシフェニルアミノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−［（２−ヒドロキシ−フェニル）−メチル−アミノ］−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
３−（３−ヒドロキシ−ピリジン−２−イルアミノ）−４−フェニルアミノ−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン、
またはその医薬上許容される塩。
【００２１】
製造方法
式（Ｉ）で示される化合物は、いくつかを以下のスキームに例示する合成法を用いることによって得ることができる。これらのスキームにおいて提供される合成法は、本明細書に概要を記載した反応との適合性を達成するように適当に保護される任意の置換基を用いて反応させられる種々のＲ、Ｒ１、およびアリール基を有する式（Ｉ）で示される化合物の製造に用いることができる。これらの場合において、次なる脱保護により、一般的に開示されている性質を有する化合物が得られる。グアニジン核が一旦確立されると、これらの式で示されるさらなる化合物は、当該技術分野においてよく知られている官能基相互変換の標準的な技法を用いることにより調製することができる。該スキームは、式（Ｉ）で示される化合物ついてのみ示されているが、これは、単に例示目的のためだけである。
【００２２】
【化３】
2004509070.tif 000003
【００２３】
所望のアニリン６−スキーム１は、市販のベンゾオキサゾリノン１−スキーム１から製造され得る。酢酸中の臭素および酢酸ナトリウムのような標準的な臭素化条件を用いてベンゾオキサゾリノン１−スキーム１から臭素化物２−スキーム１を製造することができる。還流ＤＭＦ中シアン化銅（Ｉ）のような標準的な手法を用いて臭素化物２−スキーム１をシアン化物３−スキーム１に転換することができる。塩化メチレンまたは他の適当な有機溶媒中、ＢＯＣ無水物およびトリエチルアミンならびに触媒量のジメチルアミノピリジンのような標準的な条件を用いてアミド３−スキーム１をＢＯＣ保護化合物４−スキーム１に転換することができる。オキサゾリノン４−スキーム１を、まず、メタノール中の炭酸カリウムのような標準的な条件を用いてフェノール５−スキーム１に加水分解し、次いで、塩化メチレンまたは他の適当な有機溶媒中のトリフルオロ酢酸のような標準的な条件を用いてＢＯＣ保護基を除去してアニリン６−スキーム１を得ることによって、所望のアニリン６−スキーム１に転換することができる。
【００２４】
【化４】
2004509070.tif 000004
【００２５】
構造式５で示される化合物は、スキーム１に概略記載するように市販のスクエア酸ジメチルエーテル１から得られる。還流エタノールまたは他の適当な有機溶媒中、スクエア酸ジエチルエーテル１と所望のアニリン２とを反応させることによって中間体３を得ることができる。還流エタノールまたは他の適当な有機溶媒中、スクアラン３と第２のアニリン４とを反応させることによって所望のスクアラン化合物５を得ることができる。
【００２６】
合成実施例
単なる例示であり、本発明の範囲を限定するものではない以下の実施例を引用して本発明を記載する。温度は、全て、摂氏で示され、溶媒は、全て、入手可能な最高純度のものであり、反応は、全て、他に指示しない限り、アルゴン雰囲気下で無水条件下にて行われる。
【００２７】
実施例において、温度は、全て、摂氏（℃）で示される。質量スペクトルは、他に指示しない限り、高速原子衝撃を用いてＶＧ Ｚａｂ質量分析計にて行なった。１Ｈ−ＮＭＲ（以下、「ＮＭＲ」と記す）スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＭ ２５０またはＡｍ ４００分光計を用いて、２５０ＭＨｚで記録した。示される多重度は、ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線を表し、ｂｒは幅広いシグナルを表す。Ｓａｔ．は飽和溶液を表し、当量は主たる反応体に対する試薬のモル当量の割合を表す。
【００２８】
３−（２，３−ジクロロアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（１００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のトルエン（２ｍＬ）およびＤＭＳＯ（１滴）中溶液に２，３−ジクロロアニリン（０．０７ｍＬ、０．４３ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。得られた固体を濾過により回収し、酢酸エチルで洗浄してトルエンを除去し、真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３４９（Ｍ＋）。
【００２９】
３−（２−ブロモアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−ブロモアニリン（３６．９ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３５９（Ｍ−）。
【００３０】
３−（２−フェニルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−アミノビフェニル（３６．３ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３５７．２（Ｍ＋）。
【００３１】
３−（２−メトキシアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−メトキシアニリン（０．０２４ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３１１．４（Ｍ＋）。
【００３２】
３−（２−エチルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−エチルアニリン（０．０２４ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３０９（Ｍ＋）。
【００３３】
３−（２−フェノキシアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−ペノキシアニリン（４９ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３７３（Ｍ＋）。
【００３４】
３−（２−クロロアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−クロロアニリン（０．０２３ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３１５（Ｍ＋）。
【００３５】
３−（２−メチルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−メチルアニリン（０．０２３ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２９５（Ｍ＋）。
【００３６】
３−（２，３−ジメチルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２，３−ジメチルアニリン（０．０２６ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３０９（Ｍ＋）。
【００３７】
３−（４−ブロモ−２−メチルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に４−ブロモ−２−メチルアニリン（４０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３７３（Ｍ＋）。
【００３８】
３−（２−プロピルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−プロピルアニリン（０．０３０ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３２３（Ｍ＋）。
【００３９】
３−（３−クロロ−２−メチルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に３−クロロ−２−メチルアニリン（０．０２６ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３２９（Ｍ＋）。
【００４０】
３−（２，３−メトキシアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２，３−メトキシアニリン（０．０３１ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３４１（Ｍ＋）。
【００４１】
３−（２−クロロ−３−メチルアニリノ）−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−シクロブタ−３−エン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）中溶液に２−クロロ−３−メチルアニリン（０．０２６ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加し、反応を１１０℃で一夜撹拌した。反応をＨＰＬＣ（アセトニトリル：水）にて精製し、生成物を濃縮した。固体を真空乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３２９（Ｍ＋）。
【００４２】
３−（２−ヒドロキシアニリノ）−４−（２−ブロモアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン
室温で、ブロモアニリン（７４ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）にトルエン中２Ｍトリメチルアルミニウム２１４μＬを添加した。該混合物をガス発生が止むまで撹拌し、次いで、塩化メチレン１ｍＬ中の３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物を室温で一夜反応させた。該反応混合物を水でクエンチし、次いで、水で後処理した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。Ｇｉｌｓｏｎ ＨＰＬＣに付した後、精製生成物１４ｍｇ（１２％）を得た。ＬＣＭＳ（Ｈ＋）３５９。
【００４３】
３−（２−ブロモアニリノ）−４−（２−ヒドロキシ−４−シアノアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン
３，４−ジエトキシ−３−シクロブテン−１，２−ジオン（１．２ｍＬ、８．１２ｍｍｏｌ）および３−ヒドロキシ−４−アミノベンゾトリル（１．２５ｇ、８．１１ｍｍｏｌ）のエタノール中溶液を８５℃で一夜加熱した。黄褐色の沈澱物が形成する。固体を濾過し、回収した。３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシ−４−シアノアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン１．１２ｇ（５３％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（Ｈ＋）２５９。
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシ−４−シアノアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン（０．７ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）と２−ブロモアニリン（０．４７ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）との混合物をＤＭＳＯ ６ｍｌ中にて一夜加熱した。該反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルを添加し、沈澱物が形成した。濾液を酢酸エチルと水との間で分配させた。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。Ｇｉｌｓｏｎ ＨＰＬＣに付した後、精製生成物３４ｍｇ（３％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（Ｈ＋）３８６。
【００４４】
３−（２−ブロモアニリノ）−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン（０．３９ｇ、１．４ｍｍｏｌ）および２−ブロモアニリン（０．３６ｇ、２．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ ２ｍＬ中溶液を１１０℃で一夜加熱した。該反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルを添加し、沈澱物が形成した。濾液を酢酸エチルと水との間で分配させた。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。アセトンおよびヘキサンからの滴定によって３−（２−ブロモアニリノ）−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン１０６ｍｇ（１９％）を得た。ＬＣＭＳ（Ｈ＋）４０４。
【００４５】
３−（２−クロロアニリノ）−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン（０．３８ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）および２−クロロアニリン（０．２３ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ ２ｍＬ中溶液を１１０℃で一夜加熱した。該反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルを添加し、沈澱物が形成した。濾液を酢酸エチルと水との間で分配させた。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。酢酸エチルおよびヘキサンから再結晶して、３−（２−クロロアニリノ）−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン２０３ｍｇ（４１％）を得た。ＬＣＭＳ（Ｈ＋）３６０。
【００４６】
３−（２，３−ジクロロアニリノ）−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン
３−エトキシ−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン（０．４０ｇ、１．４４ｍｍｏｌ）および２，３−ジクロロアニリン（０．３４ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ ２ｍＬ中溶液を１１０℃で一夜加熱した。該反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルを添加し、沈澱物が形成した。濾過ケークを回収した。アセトンおよびヘキサンからの滴定によって３−（２−クロロアニリノ）−４−（２−ヒドロキシ−４−ニトロアニリノ）−３−シクロブテン−１，２−ジオン６８ｍｇ（１１％）を得た。ＬＣＭＳ（Ｈ＋）３９４。
【００４７】
治療法
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を、ヒトまたは他の哺乳動物における、かかる哺乳動物の細胞、例えば、限定されないが、単球および／またはマクロファージ、またはＩＬ−８α受容体もしくはβ受容体（Ｉ型受容体もしくはＩＩ型受容体とも称する）と結合する他のケモカインなどによる過剰または未調整のＩＬ−８サイトカイン産生により悪化するかまたは引き起こされる病態の予防的または治療的処置用医薬の製造において用いることができる。
【００４８】
したがって、本発明は、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体と結合するものであるケモカイン媒介疾患の治療法であって、有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。特に、ケモカインは、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８である。
【００４９】
式（Ｉ）で示される化合物は、サイトカイン機能、特に、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８を阻害して、生理学的機能を正常なレベルまたは場合によっては正常下レベルに生物学的にダウンレギュレートして病態を改善するのに十分な量で投与される。例えば、本発明に関するＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８の異常なレベルとは、（ｉ）１ピコグラム／ｍＬ以上の遊離ＩＬ−８のレベル；（ｉｉ）正常な生理学的レベルより高いいずれかの細胞性ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８；または（ｉｉｉ）ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８を各々産生する細胞または組織における基底レベル以上のＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８の存在である。
【００５０】
式（Ｉ）で示される化合物は、一般に、ＷＯ ９６／２５１５７およびＷＯ ９７／２９７４３（出典明示により本明細書の記載とする）に開示されている化合物よりも長いｔ１／２および改良された経口生物学的利用能を有することが証明されている。
【００５１】
過度または未調整のＩＬ−８産生が疾患の憎悪および／または発生に関与している多くの病態がある。ケモカイン媒介疾患としては、乾癬、アトピー性皮膚炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、喘息、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、卒中、敗血症性ショック、多発性硬化症、エンドトキシンショック、グラム陰性敗血症、トキシックショック症候群、心臓および腎臓再潅流傷害、糸球体腎炎、血栓症、対宿主性移植片反応、アルツハイマー病、同種移植片拒絶反応、マラリア、再狭窄、脈管形成、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、歯肉炎および望ましくない造血性幹細胞放出、ならびに呼吸器ウイルス、ヘルペスウイルスおよび肝炎ウイルスによって引き起こされる疾患、髄膜炎、ヘルペス脳炎、ＣＮＳ脈管炎、外傷性脳損傷、ＣＮＳ腫瘍、クモ膜下出血、術後外傷、間質性肺炎、過敏症、結晶性関節炎、急性および慢性膵炎、急性アルコール性肝炎、壊死性全腸炎、慢性副鼻腔炎、ブドウ膜炎、多発性筋炎、脈管炎、ざ瘡、胃および十二指腸潰瘍、セリアック病、食道炎、舌炎、気道閉塞、気道反応性亢進、閉塞性細気管支炎器質化肺炎、気管支拡張症、細気管支炎、閉塞性細気管支炎、慢性気管支炎、肺性心、呼吸困難、気腫、高炭酸ガス症、過膨張、低酸素血症、低酸素症、外科的肺気量減少、肺線維症、肺高血圧、右心室肥大、サルコイドーシス、小気道疾患、呼吸−還流不適合、ぜん鳴および狼瘡が挙げられる。
【００５２】
これらの疾患は、主に、大量の好中球浸潤、Ｔ細胞浸潤、または新生血管成長により特徴付けられ、好中球の炎症部位への走化性または内皮細胞の定方向増殖を引き起こすＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８産生の増加に付随する。他の炎症性サイトカイン（ＩＬ−１、ＴＮＦおよびＩＬ−６）とは異なり、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８は、好中球走化性、エラスターゼ放出を包含するがこれに限定されない酵素放出、ならびにスーパーオキシド産生および活性化を促進する独特の性質を有する。ＩＬ−８ Ｉ型またはＩＩ型受容体を介して作用するα−ケモカイン、特に、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８は、内皮細胞の定方向増殖の促進により腫瘍の新生血管形成を促進しうる。したがって、ＩＬ−８誘発性走化性または活性化の阻害は好中球浸潤の直接的減少をもたらす。
【００５３】
最近の証拠は、また、ＨＩＶ感染の治療におけるケモカインの役割を示している。Ｌｉｔｔｌｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３８１， ｐｐ． ６６１ （１９９６） および Ｋｏｕｐ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３８１， ｐｐ． ６６７ （１９９６）。
【００５４】
最近の証拠は、また、アテローム性動脈硬化症の治療におけるＩＬ−８阻害剤の使用を示している。第一の文献、Ｂｏｉｓｖｅｒｔ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ， １９９８， １０１： ３５３−３６３ は、骨髄移植を介して、幹細胞（および、したがって、単球／マクロファージ）上のＩＬ−８受容体の不在がＬＤＬ受容体欠損マウスにおいてアテローム性硬化性斑の発生を減少させることを証明している。さらなる支持文献には以下のものがある：Ａｐｏｓｔｏｌｏｐｏｕｌｏｓ， ｅｔ ａｌ．， Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ． Ｔｈｒｏｍｂ． Ｖａｓｃ． Ｂｉｏｌ． １９９６， １６： １００７−１０１２；Ｌｉｕ， ｅｔ ａｌ．， Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ． Ｔｈｒｏｍｂ． Ｖａｓｃ． Ｂｉｏｌ， １９９７， １７： ３１７−３２３；Ｒｕｓ， ｅｔ ａｌ．， Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ． １９９６， １２７： ２６３−２７１．；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． １９９６， ２７１： ８８３７−８８４２；Ｙｕｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． １９９３， ２４０： ８１−８４；Ｋｏｃｈ， ｅｔ ａｌ．， Ａｍ． Ｊ． Ｐａｔｈｏｌ．， １９９３， １４２： １４２３−１４３１．；Ｌｅｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｌｅｔｔ．， １９９６， ５３， １０９−１１３．；および Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ ｅｔ ａｌ．， Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ． Ｔｈｒｏｍｂ．， １９９４， １４： ４７−５３。
【００５５】
本発明は、また、式（Ｉ）で示されるケモカイン受容体アンタゴニスト化合物による、ＣＮＳ損傷の急性発症における治療手段、およびＣＮＳ損傷に罹患し易いと考えられる個体における予防手段を提供する。
【００５６】
本明細書で定義されるＣＮＳ損傷は、手術によるような開放性もしくは穿通性頭部外傷、または頭部への損傷によるような非開放性頭部外傷の両方を包含する。また、特に、脳領域の虚血性発作もまたこの定義に含まれる。
【００５７】
虚血性発作は、通常、血管の塞栓、血栓、または局所性アテローム性閉鎖の結果として、特定の脳領域への不十分な血液供給により引き起こされる焦点神経障害であると定義できる。この領域における炎症性サイトカインの役割が明らかになってきており、本発明は、これらの損傷の有効な治療手段を提供する。これらのような急性損傷について利用可能な治療法は比較的少ない。
【００５８】
ＴＮＦ−αは、内皮白血球接着分子発現を包含する炎症誘発作用を有するサイトカインである。白血球は虚血性脳病変へ浸潤し、故に、ＴＮＦのレベルを阻害するかまたは減少させる化合物は、虚血性脳損傷の治療に有用である。Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．， Ｓｔｒｏｋｅ， Ｖｏｌ． ２５．， Ｎｏ． ７， ｐｐ． １４８１−８８ （１９９４） を参照のこと（出典明示によりその内容を本明細書の記載とする）。
【００５９】
非開放性頭部損傷のモデルおよび５−ＬＯ／ＣＯ混合薬剤での処置は、Ｓｈｏｈａｍｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． ｏｆ Ｖａｉｓｃ ＆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ， Ｖｏｌ． ３， Ｎｏ． ２， ｐｐ． ９９−１０７ （１９９２） において検討されている（出典明示により本明細書の記載とする）。浮腫形成を減少させる処置は、これらの治療される動物における機能的結果を改善することが判明した。
【００６０】
式（Ｉ）で示される化合物を、例えば、好中球走化性および活性化の減少により証明されるような、ＩＬ−８αまたはβ受容体と結合するＩＬ−８がこれらの受容体と結合するのを阻害するのに十分な量で投与する。式（Ｉ）で示される化合物がＩＬ−８結合の阻害物質であるという知見は、本明細書において記載するインビトロ受容体結合検定における式（Ｉ）で示される化合物の効果に基づいている。式（Ｉ）で示される化合物はＩＬ−８ ＩＩ型受容体の阻害物質であることが明らかにされた。
【００６１】
本明細書において用いる場合、「ＩＬ−８媒介疾患または病態」なる用語は、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８が、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８その物を産生することにより、またはＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８が限定されないがＩＬ−１、ＩＬ−６またはＴＮＦなどの別のモノカインを放出させることにより役割を果たす全ての病態を意味する。したがって、例えば、ＩＬ−１が主成分であり、その産生または作用がＩＬ−８に応答して悪化または分泌される病態は、ＩＬ−８により媒介される病態であると考えられる。
【００６２】
本明細書において用いる場合、「ケモカイン媒介疾患または病態」なる用語は、ＩＬ−８αまたはβ受容体と結合するケモカイン、例えば、限定されないがＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＧＲＯ−β、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８などが役割を果たす全ての病態を意味する。これは、ＩＬ−８が、ＩＬ−８その物を産生することにより、またはＩＬ−８が限定されないがＩＬ−１、ＩＬ−６またはＴＮＦなどの別のモノカインを放出させることにより役割を果たす病態を包含する。したがって、例えば、ＩＬ−１が主成分であり、その産生または作用がＩＬ−８に応答して悪化または分泌される病態は、ＩＬ−８により媒介される病態であると考えられる。
【００６３】
本明細書において用いる場合、「サイトカイン」なる用語は、細胞の機能に影響を与え、免疫、炎症または造血応答における細胞間の相互作用を調節する分子である分泌ポリペプチドを意味する。サイトカインとしては、どの細胞が産生するかにかかわらず、モノカインおよびリンホカインが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、モノカインは、一般に、単核細胞、例えば、マクロファージおよび／または単球により産生および分泌されるものをいう。しかしながら、ナチュラルキラー細胞、線維芽細胞、好塩基球、好中球、内皮細胞、脳星状細胞、骨髄ストローマ細胞、表皮性ケラチノサイトおよびＢ−リンパ球などの多くの他の細胞もまたモノカインを産生する。リンホカインは、一般に、リンパ球により産生されるものをいう。サイトカインの例としては、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）および腫瘍壊死因子ベータ（ＴＮＦ−β）が挙げられるがこれらに限定されるものではない。
【００６４】
本明細書において用いる場合、「ケモカイン」なる用語は、上記した「サイトカイン」なる用語と同様に、細胞の機能に影響を与え、免疫、炎症または造血応答における細胞間の相互作用を調節する分子である分泌ポリペプチドを意味する。ケモカインは主に細胞膜貫通を介して分泌され、特定の白血球、好中球、単球、マクロファージ、Ｔ−細胞、Ｂ−細胞、内皮細胞および平滑筋細胞の走化性および活性化を引き起こす。ケモカインの例としては、ＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＧＲＯ−β、ＧＲＯ−γ、ＮＡＰ−２、ＥＮＡ−７８、ＩＰ−１０、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−β、ＰＦ４、ならびにＭＣＰ１、２および３が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６５】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を治療において用いるためには、通常、これを標準的製薬プラクティスにしたがって医薬組成物に処方する。したがって、本発明は、また、有効な非毒性量の式（Ｉ）で示される化合物および医薬上許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物に関する。
【００６６】
式（Ｉ）で示される化合物、その医薬上許容される塩およびこれを配合した医薬組成物は、好都合には、薬剤投与に慣用的に用いられる経路のいずれか、例えば、経口、局所、非経口または吸入によって投与される。式（Ｉ）で示される化合物は、それを慣用的な方法に従って標準的医薬担体と組み合わせることにより調製される慣用的な投与剤形で投与される。式（Ｉ）で示される化合物は、また、公知の第二の治療上活性な化合物と組合せて慣用的な投与形態で投与できる。これらの方法は、成分を、所望の調製物に適するように、混合し、造粒し、次いで、圧縮または溶解させることからなる。医薬上許容される担体または希釈剤の形態および特性は、組合せる有効成分の量、投与経路および他のよく知られている要因に依存すると考えられる。担体は、他の処方成分と適合し、レシピエントに有害でないという意味で「許容され」なければならない。
【００６７】
用いられる医薬担体は、例えば、固体または液体のいずれでもよい。固体担体の例は、ラクトース、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などである。液体担体の例は、シロップ、落花生油、オリーブ油、水などである。同様に、担体または希釈剤は、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンなどの当該分野で周知の遅延性物質を単独でまたはワックスと共に含んでもよい。
【００６８】
広範囲に及ぶ医薬形態を用いることができる。したがって、固体担体を用いる場合、製剤は、錠剤にしたり、粉末またはペレット形態でハードゼラチンカプセル中に入れたり、トローチまたはロゼンジの形態にできる。固体担体の量は、広範囲に及ぶが、好ましくは、約２５ｍｇないし約１ｇである。液体担体を用いる場合、製剤は、シロップ剤、乳剤、ソフトゼラチンカプセル剤、滅菌注射液剤、例えば、アンプル剤、または非水性液体懸濁剤の形態にされる。
【００６９】
式（Ｉ）で示される化合物は、局所的に、すなわち、非全身性投与により投与される。これは、式（Ｉ）で示される化合物の表皮へまたは口腔内への外用、およびかかる化合物の耳、目および鼻への滴下注入を包含し、化合物が著しく血流に入らないようにする。これに対して、全身性投与は、経口、静脈内、腹腔内および筋肉内投与を意味する。
【００７０】
局所投与に適した処方は、皮膚を通して炎症部位へ浸透するのに適した液体または半液体製剤、例えば、リニメント剤、ローション剤、クリーム剤、軟膏剤またはペースト剤、および目、耳または鼻への投与に適した滴剤を包含する。有効成分は、局所投与の場合、処方物の０．００１％ｗ／ｗないし１０％ｗ／ｗ、例えば、１重量％ないし２重量％を含む。しかしながら、それを処方物の１０％ｗ／ｗほども含んでもよいが、好ましくは、５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは、０．１％ないし１％ｗ／ｗ含む。
【００７１】
本発明のローション剤は、皮膚または目への適用に適したものを包含する。眼ローション剤は、所望により殺菌剤を含んでもよい無菌水溶液を含み、滴剤の調製法と類似の方法により調製される。皮膚へ適用するためのローション剤またはリニメント剤は、また、アルコールまたはアセトンなどの皮膚の乾燥を促進し、冷却する薬剤および／またはグリセロールなどの保湿剤またはヒマシ油もしくは落花生油などの油を含んでもよい。
【００７２】
本発明のクリーム剤、軟膏剤またはペースト剤は、外用のための有効成分を含む半固体処方物である。これらは、有効成分を微粉末または粉末形態で、単独または水性または非水性流体中溶液または懸濁液の形態で、適当な機械を用いて、グリース状または非グリース状基剤と混練することにより調製される。基剤は、炭化水素、例えば、固型、軟または流動パラフィン、グリセロール、ミツロウ、金属石鹸；漿剤；扁桃油、トウモロコシ油、落花生油、ヒマシ油またはオリーブ油などの天然起源の油；羊毛脂もしくはその誘導体またはステアリン酸もしくはオレイン酸などの脂肪酸などをアルコール、例えば、プロピレングリコールまたはマクロゲルとともに含んでもよい。処方物は、いずれの適当な界面活性剤、例えば、アニオン、カチオンまたは非イオン性界面活性剤、例えば、ソルビタンエステルまたはそのポリオキシエチレン誘導体を配合してもよい。懸濁化剤、例えば、天然ガム、セルロース誘導体または無機物質、例えば、ケイ酸質シリカ（ｓｉｌｉｃａｃｅｏｕｓ ｓｉｌｉｃａｓ）、および他の成分、例えば、ラノリンを配合してもよい。
【００７３】
本発明の滴剤は、滅菌水性または油性溶液または懸濁液を含んでもよく、有効成分を殺菌剤および／または殺真菌剤および／または他の適当な保存剤の適当な水溶液に溶かし、好ましくは、界面活性剤を配合することにより調製される。次いで、得られた溶液を濾過により清澄化し、適当な容器に移し、次いで、これを密封し、オートクレーブ処理または９８〜１００℃に半時間維持することにより滅菌する。別法として、溶液を濾過滅菌し、無菌技法により容器に移す。滴剤に配合するのに適した殺菌剤および殺真菌剤の例は、硝酸フェニル水銀または酢酸フェニル水銀（０．００２％）、塩化ベンザルコニウム（０．０１％）および酢酸クロルヘキシジン（０．０１％）である。油性溶液の調製に適した溶媒としては、グリセロール、希アルコールおよびプロピレングリコールが挙げられる。
【００７４】
式（Ｉ）で示される化合物は、非経口的、すなわち、静脈内、筋肉内、皮下、鼻内、直腸内、膣内または腹腔内投与により投与される。皮下および筋肉内形態の非経口投与が一般に好ましい。かかる投与に適する投与剤形は慣用技術により調製される。式（Ｉ）で示される化合物は、また、吸入、すなわち、鼻内または経口吸入投与によっても投与できる。エアゾール処方物または定量型吸入器などのかかる投与に適した投与形態は、慣用技術により調製される。
【００７５】
式（Ｉ）で示される化合物に関して本明細書に記載したあらゆる使用法に関して、１日の経口投与量は、好ましくは、全体重１ｋｇあたり約０．０１ないし約８０ｍｇである。１日の非経口投与量は、全体重１ｋｇあたり約０．００１ないし約８０ｍｇである。１日の局所投与量は、好ましくは、０．１ｍｇないし１５０ｍｇであり、１日に１ないし４回、好ましくは、２または３回投与する。１日の吸入量は、好ましくは、１日に約０．０１ｍｇ／ｋｇないし約１ｍｇ／ｋｇである。式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の最適量および個々の投与間隔は、治療する症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、ならびに治療する個々の患者により決定されること、およびこのような最適値は慣用技術により決定できることも当業者には理解できるであろう。また、最適な治療単位、すなわち、特定の日数の間、１日につき投与される式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の投与回数は、慣用的な治療単位決定試験を用いて当業者により確認できることも、当業者には理解できるであろう。
【００７６】
単なる例示であり、本発明の範囲を限定するものではない以下の生物学的実施例を引用して本発明を記載する。
【００７７】
生物学的実施例
本発明の化合物のＩＬ−８、およびＧｒｏ−αケモカイン阻害効果を以下のインビトロ検定により測定した：
【００７８】
受容体結合検定
比活性が２０００Ｃｉ／ｍｍｏｌである［１２５Ｉ］ＩＬ−８（ヒト組換体）をイリノイ州アーリントン・ハイツのアマシャム・コーポレイション（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｃｏｒｐ．）から入手した。Ｇｒｏ−αをエヌイーエヌ−ニュー・イングランド・ニュークリア（ＮＥＮ−Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ）から入手した。他の薬品はすべて分析用であった。すでに開示されているようにして（Ｈｏｌｍｅｓ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ， １９９１， ２５３， １２７８）、高レベルの組換えヒトＩＬ−８αおよびβ型受容体を、個別に、チャイニーズハムスター卵巣細胞において発現させた。すでに開示されているプロトコル（Ｈａｏｕｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２４９， ｐｐ ２１９５−２２０５ （１９７４））に従って、チャイニーズハムスター卵巣膜をホモジナイズした。ただし、ホモジナイゼーション緩衝液を１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＳＯ４、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）、１ｍＭ ＰＭＳＦ（α−トルエンスルホニルフルオリド）、０．５ｍｇ／Ｌ ロイペプチン、ｐＨ７．５に変更した。膜タンパク質濃度を、ピアス・カンパニー（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｏ．）のミクロ検定キットを用いて、ウシ血清アルブミンを標準として用いて測定した。すべての検定は、９６−ウェルマイクロプレートフォーマットで行った。各反応混合物は、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ４、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、２５ｍＭ Ｎａおよび０．０３％ ＣＨＡＰＳを含有する２０ｍＭ ビス−トリスプロパンおよび０．４ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ８．０）中１２５Ｉ ＩＬ−８（０．２５ｎＭ）または１２５Ｉ Ｇｒｏ−αおよび０．５μｇ／ｍＬのＩＬ−８Ｒαまたは１．０μｇ／ｍＬのＩＬ−８Ｒβ膜を含有した。加えて、あらかじめＤＭＳＯに溶解させて最終濃度を０．０１ｎＭ〜１００ｕＭにした目的の薬物または化合物を添加した。検定を、１２５Ｉ−ＩＬ−８の添加により開始した。室温で１時間後、Ｔｏｍｔｅｃ ９６−ウェルハーベスターを用いて１％ポリエチレンイミン／０．５％ ＢＳＡでブロックしたガラス繊維フィルターマット上にてプレートを収穫し、２５ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＳＯ４、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０３％ ＣＨＡＰＳ（Ｈ７．４）で３回洗浄した。次いで、フィルターを乾燥させ、Ｂｅｔａｐｌａｔｅ液体シンチレーションカウンターで計数した。組換えＩＬ−８ＲαまたはＩ型受容体は、また、本明細書において非許容受容体とも称され、組換えＩＬ−８ＲβまたはＩＩ型受容体は許容受容体と称される。
【００７９】
合成化学セクションの実施例１〜１５に記載した式（Ｉ）で示される代表的化合物は、全て、ＩＬ−８受容体阻害のための許容モデルにおいて約４５〜約＜１μｇ／ｍＬのＩＣ５０を示した。これらの被験化合物のうち実施例１〜１２は、ほぼ同一レベルでＧｒｏ−α結合の阻害物質であることも判明した。
【００８０】
走化性検定
Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， ｖｏｌ． Ｉ， Ｓｕｐｐｌ １， Ｕｎｉｔ ６．１２．３．（その開示内容は、全体として出典明示により本明細書の一部とする）に記載されているようにして好中球走化性検定法でこれらの化合物のインビトロ阻害特性を測定する。Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ． Ｉ， Ｓｕｐｐｌ １ Ｕｎｉｔ ７．２３．１（その開示内容は、全体として出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているようにしてヒト血液から好中球を単離する。化学誘引物質ＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＧＲＯ−β、ＧＲＯ−γおよびＮＡＰ−２を０．１〜１００ｎＭの濃度で４８マルチウェルチャンバー（メリーランド州キャビン・ジョンのニューロ・プローブ（Ｎｅｕｒｏ Ｐｒｏｂｅ））の下部チャンバーに入れる。２つのチャンバーは５ｕｍポリカーボネートフィルターで隔てられている。本発明の化合物を試験する場合、細胞を上部チャンバーに添加する直前に、該化合物を細胞と混合する（０．００１−１０００ｎＭ）。インキュベーションは、５％ＣＯ２を有する加湿インキュベータ中にて約３７℃で約４５〜９０分間行う。インキュベーション期間の最後に、ポリカーボネート膜を取り出し、最上部を洗浄し、次いで、該膜を、Ｄｉｆｆ Ｑｕｉｃｋ染色プロトコル（アメリカ合衆国イリノイ州マックゴー・パークのバクスター・プロダクツ（Ｂａｘｔｅｒ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ））を用いて染色する。ケモカインに対して走化性を示した細胞を顕微鏡を用いて目視により計数する。一般に、各サンプルについて４つのフィールドを計数し、これらの数を平均して、移動した細胞の平均数を求める。各サンプルを三重に試験し、各化合物を少なくとも４回繰り返し試験する。特定の細胞（正の対照細胞）には化合物を添加せず、これらの細胞は細胞の最大走化性応答を示す。負の対照（刺激しない）が望ましい場合には、下部チャンバーにケモカインを添加しない。正の対照と負の対照との差異は、細胞の走化性活性を表す。
【００８１】
エラスターゼ放出検定：
ヒト好中球からのエラスターゼ放出を防止する能力について本発明の化合物を試験する。Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ． Ｉ， Ｓｕｐｐｌ １ Ｕｎｉｔ ７．２３．１．に記載されているようにしてヒト血液から好中球を単離する。リンゲル溶液（ＮａＣｌ １１８、ＫＣｌ ４．５６、ＮａＨＣＯ３ ２５、ＫＨ２ＰＯ４ １．０３、グルコース １１．１、ＨＥＰＥＳ ５ｍＭ、ｐＨ７．４）中に懸濁したＰＭＮ ０．８８×１０６細胞を、５０ｕｌの容量で９６ウェルプレートの各ウェルに入れる。このプレートに、５０ｕｌの容量の試験化合物（０．００１−１０００ｎＭ）、５０ｕｌ（２０ｕｇ／ｍｌ）の容量のシトカラシンＢおよび５０ｕｌの容量のリンゲル緩衝液を添加する。これらの細胞を５分間加温（３７℃、５％ ＣＯ２、９５％ ＲＨ）した後、最終濃度０．０１−１０００ｎＭのＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγまたはＮＡＰ−２を添加した。該反応を４５分間進行させた後、９６ウェルプレートを遠心分離し（８００×ｇ、５分）、上清１００ｕｌを取り出した。この上清を第２の９６ウェルプレートに添加し、次いで、リン酸緩衝生理食塩水に溶解した人工エラスターゼ基質（ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＡＭＣ、カリフォルニア州ラ・ジョラのノヴァ・ビオケム（Ｎｏｖａ Ｂｉｏｃｈｅｍ））を最終濃度６ｕｇ／ｍｌになるように添加する。直ちに、プレートを蛍光９６ウェルプレートリーダー（Ｃｙｔｏｆｌｕｏｒ ２３５０、マサチューセッツ州ベッドフォードのミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ））に入れ、Ｎａｋａｊｉｍａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２５４ ４０２７ （１９７９） の方法に従って３分間隔でデータを集める。ＰＭＮから放出されたエラスターゼの量を、ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＡＭＣ分解速度を測定することにより計算する。
【００８２】
ＴＮＦ−α外傷性脳傷害検定
この検定は、ラットにおいて実験的に誘発した側液衝撃外傷性脳傷害（ＴＢＩ）の後に起こる特定の脳領域における腫瘍壊死因子ｍＲＮＡの発現を調べるために行う。成体スプレーグ−ドーリーラット（ｎ＝４２）をペントバルビタールナトリウム（６０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）で麻酔し、左側頭頭頂皮質上に集中する中度の重篤度（２．４ ａｔｍ）の側液衝撃脳傷害（ｎ＝１８）、または「擬似」処置（麻酔、および傷害を伴わない手術、ｎ＝１８）を与えた。傷害の１時間後、６時間後および２４時間後に動物を断頭により屠殺し、脳を取り出し、左（傷害）頭頂皮質（ＬＣ）、対側性右皮質の対応する領域（ＲＣ）、傷害頭頂皮質と隣接する皮質（ＬＡ）、右皮質における対応する隣接領域（ＲＡ）、左海馬（ＬＨ）および右海馬（ＲＨ）の組織試料を調製する。全ＲＮＡを単離し、ノーザンブロットハイブリダイゼーション処理し、ＴＮＦ−α正対照ＲＮＡと比較して定量化する（マクロファージ＝１００％）。傷害の１時間後、損傷した半球において、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡ発現の著しい増加がＬＨ（正対照の１０４±１７％、擬似処置と比較してｐ＜０．０５）、ＬＣ（１０５±２１％、ｐ＜０．０５）およびＬＡ（６９±８％、ｐ＜０．０１）にて見られる。傷害の６時間後、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡ発現の増加がまたＬＨ（４６±８％、ｐ＜０．０５）、ＬＣ（３０±３％、ｐ＜０．０１）およびＬＡ（３２±３％、ｐ＜０．０１）にて見られ、２４時間後まで続く。対側性半球において、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡの発現は、傷害の１時間後には、ＲＨ（４６±２％、ｐ＜０．０１）、ＲＣ（４±３％）およびＲＡ（２２±８％）において増加し、６時間後にはＲＨ（２８±１１％）、ＲＣ（７±５％）およびＲＡ（２６±６％、ｐ＜０．０５）において増加するが、２４時間後には増加しない。擬似処置（傷害を伴わない手術）またはナイーブ動物においては、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡの発現の一貫した変化は、いずれの時点でもいずれの半球における６つの脳領域のいずれにおいても見られない。これらの結果は、側矢状液衝撃脳傷害後、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡの一時的発現が、損傷してない半球のものを含めて特定の脳領域において変えられることを示す。ＴＮＦ−αは、神経成長因子（ＮＧＦ）を誘発でき、活性化星状細胞からの他のサイトカインの放出を刺激するので、ＴＮＦ−αの遺伝子発現におけるこの外傷後の変化は、ＣＮＳ外傷に対する急性応答および再生性応答の両方において重要な役割を果たす。
【００８３】
ＩＬ−β ｍＲＮＡについてのＣＮＳ傷害モデル
この検定は、ラットにおいて実験的側液衝撃外傷性脳傷害（ＴＢＩ）後の特定の脳領域におけるインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）ｍＲＮＡの局所的発現を特徴付ける。成体スプレーグ−ドーリーラット（ｎ＝４２）をペントバルビタールナトリウム（６０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）で麻酔し、左側頭頭頂皮質上に集中する中度の重篤度（２．４ ａｔｍ）の側液衝撃脳傷害（ｎ＝１８）、または「擬似」処置（麻酔、および傷害を伴わない手術、ｎ＝１８）を与えた。傷害の１時間後、６時間後および２４時間後に動物を屠殺し、脳を取り出し、左（傷害）頭頂皮質（ＬＣ）、対側性右皮質の対応する領域（ＲＣ）、傷害頭頂皮質と隣接する皮質（ＬＡ）、右皮質における対応する隣接領域（ＲＡ）、左海馬（ＬＨ）および右海馬（ＲＨ）の組織試料を調製する。全ＲＮＡを単離し、ノーザンブロットハイブリダイゼーション処理し、脳組織ＩＬ−１β ｍＲＮＡの量を、同一ゲル上に負荷したＩＬ−１β正マクロファージＲＮＡの相対的な放射能の％として表す。脳傷害の１時間後、損傷した半球において、ＩＬ−１β ｍＲＮＡの発現の著しくかつ有意な増加がＬＣ（正対照の２０．０±０．７％、ｎ＝６、擬似処置動物と比較してｐ＜０．０５）、ＬＨ（２４．５±０．９％、ｐ＜０．０５）およびＬＡ（２１．５±３．１％、ｐ＜０．０５）にて見られ、傷害の６時間後まで、ＬＣ（４．０±０．４％、ｎ＝６、ｐ＜０．０５）およびＬＨ（５．０±１．３％、ｐ＜０．０５）にて上昇し続ける。擬似処置またはナイーブ動物においては、ＩＬ−１β ｍＲＮＡの発現は、個々の脳領域のいずれにおいても見られない。これらの結果は、ＴＢＩ後、ＩＬ−１β ｍＲＮＡの一時的発現が特定の脳領域において局部的に刺激されることを示す。ＩＬ−１βのようなサイトカインにおけるこれらの局部的変化は、外傷後において役割を果たす。
【００８４】
本明細書にて引用した特許および特許出願を包含するがこれらに限定されない全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典明示により本明細書の一部とする。
好ましい実施態様を包含する上記記載事項は本発明を十分に開示する。本明細書に具体的に開示した実施態様の変更および改良は特許請求の範囲の範囲内に含まれる。さらに推敲することなく、当業者は上記記載事項を用いて本発明を最大限に利用することができると考えられる。したがって、本明細書における実施例は単に例示的であって、如何なる場合も本発明の範囲を制限するものではないと考えられる。排他的性質および優先権を主張する本発明の実施態様は特許請求の範囲に定義するとおりである。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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