(57)【要約】【化５９】2004510701.tif 000061化学式（Ｉ）のピペラジンジオン化合物であって、【化６０】2004510701.tif 000062および【化６１】2004510701.tif 000063の各々は、独立して、単結合または二重結合であり、Ａは【化６２】2004510701.tif 000064が単結合のときはＨまたはＣＨ（ＲａＲｂ）であるか、または【化６３】2004510701.tif 000065が二重結合のときはＣ（ＲａＲｂ）であり、ＺはＲ３Ｏ−（Ａｒ）−Ｂであり、Ｂは【化６４】2004510701.tif 000066が単結合のときはＣＨ（Ｒｃ）であるか、または【化６５】2004510701.tif 000067が二重結合のときはＣ（Ｒｃ）であり、Ａｒはヘテロアリールであり、Ｒ３はＨ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、またはＳＯ２Ｒｄであり、Ｒ３はＨ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、またはＳＯ２Ｒｄであり、Ｒ１およびＲ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、またはＳＯ２Ｒｄであり、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、およびＲｅの各々は、独立して、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクリル、またはヘテロシクリルである。選択的に、ＲａおよびＲｂはひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルであり、やはり選択的に、Ｒ１およびＲａまたはＲ１およびＲｂもひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルである。
2004510701.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の化学式を有する化合物であって、
【化１】
2004510701.tif 000029
【化２】
2004510701.tif 000030
および
【化３】
2004510701.tif 000031
の各々は、独立して、単結合または二重結合であり、Ａは、
【化４】
2004510701.tif 000032
が単結合のときはＨまたはＣＨ（ＲａＲｂ）であるか、または
【化５】
2004510701.tif 000033
が二重結合のときはＣ（ＲａＲｂ）であり、ＺはＲ３Ｏ−（Ａｒ）−Ｂであり、Ｂは
【化６】
2004510701.tif 000034
が単結合のときはＣＨ（Ｒｃ）であるか、または
【化７】
2004510701.tif 000035
が二重結合のときはＣ（Ｒｃ）であり、Ａｒはヘテロアリールであり、Ｒ３はＨ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、またはＳＯ２Ｒｄであり、
Ｒ１およびＲ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ、またはＳＯ２Ｒｄであり、
Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、およびＲｅの各々は、独立して、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクリル、またはヘテロシクリルであり、
選択的に、ＲａおよびＲｂはひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルであり、やはり選択的に、Ｒ１およびＲａまたはＲ１およびＲｂもひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルである化合物。
【請求項２】
【化８】
2004510701.tif 000036
は二重結合である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
【化９】
2004510701.tif 000037
は二重結合である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＲｃがＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ａｒがピリジルである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ａｒが、２位においてＢと結合するピリジルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３Ｏが、ピリジルの５位と結合する、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ３Ｏがアリールアルコキシである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１およびＲ２の両方がＨである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
ＲａおよびＲｂの一方がアリールまたはヘテロアリールであり、ＲａおよびＲｂの他方がＨである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ３Ｏがベンジオキシである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
ＲａおよびＲｂがひとまとまりでヘテロシクリルである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ３Ｏはアリールアルコキシである、請求項３に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１およびＲ２の両方がＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項１５】
ＲＣがＨである、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ａｒがピリジルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ａｒが、２位においてＢと結合するピリジルである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
ＲａおよびＲｂの一方がアリールまたはヘテロアリールであり、ＲａおよびＲｂの他方がＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項１９】
Ａｒが、２位においてＢと結合するピリジルであり、ＲｃはＨである、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ３Ｏが、ピリジルの５位と結合するアリールアルコキシである、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
ＲａおよびＲｂがひとまとまりでヘテロシクリルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項２２】
ＲｃがＨである、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ａｒがピリジルである、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
Ａｒが、２位においてＢと結合するピリジルである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ３Ｏが、ピリジルの５位と結合するアリールアルコキシである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
【化１０】
2004510701.tif 000038
が単結合である、請求項２に記載の化合物。
【請求項２７】
【化１１】
2004510701.tif 000039
が単結合である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
【化１２】
2004510701.tif 000040
が二重結合である、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２９】
化合物が、
【化１３】
2004510701.tif 000041
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３０】
化合物が、
【化１４】
2004510701.tif 000042
である、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
化合物が
【化１５】
2004510701.tif 000043
である、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３２】
腫瘍治療のための方法であって、腫瘍治療を必要とする患者に有効量の、化学式
【化１６】
2004510701.tif 000044
を有する化合物を投与する工程から成り、ここで
【化１７】
2004510701.tif 000045
および
【化１８】
2004510701.tif 000046
の各々は、独立して、単結合または二重結合であり、Ａは
【化１９】
2004510701.tif 000047
が単結合のときはＨまたはＣＨ（ＲａＲｂ）であるか、または
【化２０】
2004510701.tif 000048
が二重結合のときはＣ（ＲａＲｂ）であり、Ｚは
【化２１】
2004510701.tif 000049
が単結合のときはＣＨ（ＲｃＲｄ）であるか、または
【化２２】
2004510701.tif 000050
が二重結合のときはＣ（ＲｃＲｄ）であり、
Ｒ１およびＲ２の各々は、独立して、Ｈ，Ｃ（Ｏ）Ｒｅ，Ｃ（Ｏ）ＯＲｅ，Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆ、またはＳＯ２Ｒｅであり、
Ｒａ，Ｒｂ，Ｒｃ，Ｒｄ，Ｒｅ，およびＲｆは、ＲｃおよびＲｄの一方がアリールまたはヘテロアリールであることを条件として、独立して、Ｈ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクリル、またはヘテロシクリルであり、
【化２３】
2004510701.tif 000051
が二重結合ならば、
【化２４】
2004510701.tif 000052
は単結合であり、Ｒｃ及びＲｄの一方がＨならば、ＲｃおよびＲｄの他方はヘテロアリールであり、
選択的に、ＲａおよびＲｂはひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルであり、
やはり選択的に、Ｒ１およびＲａまたはＲ１およびＲｂもひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルである方法。
【請求項３３】
【化２５】
2004510701.tif 000053
が二重結合である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
【化２６】
2004510701.tif 000054
が二重結合である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
ＲｃおよびＲｄの一方がヘテロアリールである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
ＲｃおよびＲｄの一方が２−ピリジルであり、ＲｃおよびＲｄの他方がＨである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
２−ピリジルが５位にてアリールアルコキシと置換されている、請求項３６に記載の方法
【請求項３８】
Ｒ１およびＲ２の両方がＨである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
ＲａおよびＲｂの一方がヘテロアリールであり、ＲａおよびＲｂの他方がＨである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４０】
ＲａおよびＲｂがひとまとまりでヘテロシクリルである、請求項３４に記載の方法。
【請求項４１】
【化２７】
2004510701.tif 000055
が単結合である、請求項３３に記載の方法。
【請求項４２】
【化２８】
2004510701.tif 000056
が単結合である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４３】
【化２９】
2004510701.tif 000057
が二重結合である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
化合物が、
【化３０】
2004510701.tif 000058
である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４５】
化合物が、
【化３１】
2004510701.tif 000059
である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
化合物が、
【化３２】
2004510701.tif 000060
である、請求項４４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の背景）
腫瘍の治療は、外科手術、放射線治療、化学療法、またはこれらいずれかの組み合わせを含む、様々な治療方法により達成される。その中でも、化学療法は、手術不可能なまたは転移形態のがんにとって欠くことの出来ないものである。細胞型、形態、成長率、その他の細胞特性の観点からの多様性を考慮して、米国国立がん研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ （ＮＣＩ））は、抗腫瘍活性スクリーニングに「病気指向」（ｄｉｓｅａｓｅ−ｏｒｉｅｎｔｅｄ）手法を開発した。Ｂｏｙｄ， Ｍ．Ｒ． （１９８９） Ｉｎ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｄｅｖｉｔａ， Ｊ．Ｔ．， Ｈｅｌｌｍａｎ， Ｓ．， およびＲｏｓｅｎｂｅｒｇ， Ｓ．Ａ．（Ｅｄｓ．） Ｖｏｌ． ３， ＰＰＯ Ｕｐｄａｔｅ， Ｎｏ． １０． 。このインビトロスクリーニング系は、約６０の主なヒトの腫瘍（例、白血病、肺がん、結腸がん、中枢神経系がん、黒色腫、子宮がん、腎臓がん、前立腺がん、または乳がん）の細胞株からなるヒト腫瘍細胞株パネルに基づいて、抗腫瘍活性を有する化合物を確証するためのツールとしての役割をする。
【０００２】
特に興味を引くのは、一つ以上の下記の四つの機構を経由して機能する、抗腫瘍化合物である。（１）細胞周期のＧ２／Ｍ進行の抑制。これは最終的にがん細胞内でアポトーシスを誘発し得る。（イエング（Ｙｅｕｎｇ）ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍ．第２６３巻、３９８〜４０４ページ（１９９９年））（２）チューブリンの組み立て／解体の阻害。これは細胞有糸分裂を抑制し、細胞アポトーシスを誘発し得る。（パンダ（Ｐａｎｄａ）ら、（１９９７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ第９４巻、１０， ５６０〜１０， ５６４ページ（１９９７年））（３）内皮の細胞増殖および血管形成効果の抑制。（ウィット（Ｗｉｔｔｅ）ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｖ．第１７巻、１５５〜１６１ページ（１９９８年）、プレウェット（Ｐｒｅｗｅｔｔ）ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． 第５９巻、５２０９〜５２１８ページ（１９９９年））または（４）Ｒａｓタンパク依存シグナル伝達経路の調節。（ヘルナンデス−アルコセバ（Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ−Ａｌｃｏｃｅｂａ）ら、Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ． Ｌｉｆ ｅ Ｓｃｉ． 第５７巻、６５〜７６ページ（２０００年）、ブオラムウィニ（Ｂｕｏｌａｍｗｉｎｉ）、Ｃｕｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅ．Ｂｉｏｌ．第３巻、５００〜５０９ページ（１９９９年））。
【０００３】
（概要）
本発明は、部分的には、ピペラジンジオン化合物が、 ＮＣＩスクリーニング系によって確証された抗腫瘍活性を有すること、及び上述の四つの機構の一つ以上を経由して機能することの発見に基づくものである。
【０００４】
本発明の１態様は、下記の化学式のピペラジンジオン化合物に関する。
【０００５】
【化３３】
2004510701.tif 000003
【０００６】
【化３４】
2004510701.tif 000004
および
【０００７】
【化３５】
2004510701.tif 000005
の各々は、独立して、単結合または二重結合であり、Ａは
【０００８】
【化３６】
2004510701.tif 000006
が単結合のときはＨまたはＣＨ（ＲａＲｂ）であるか、または
【０００９】
【化３７】
2004510701.tif 000007
が二重結合のときはＣ（ＲａＲｂ）である。Ｚは、Ｒ３Ｏ−（Ａｒ）−Ｂであり、Ｂは
【００１０】
【化３８】
2004510701.tif 000008
が単結合のときはＣＨ（Ｒｃ）であるか、または
【００１１】
【化３９】
2004510701.tif 000009
が二重結合のときはＣ（Ｒｃ）である。
Ａｒはヘテロアリール；Ｒ３はＨ、アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）Ｒｄ，Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ，Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ，Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ，またはＳＯ２Ｒｄ；およびＢとＲ３Ｏの両方はＡｒのいずれかの適切な位置において置換可能である。Ｒ１およびＲ２の各々は、独立して、Ｈ，Ｃ（Ｏ）Ｒｄ，Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ，Ｃ（Ｏ）ＮＲｄＲｅ，またはＳＯ２Ｒｄ；およびＲａ，Ｒｂ，Ｒｃ，Ｒｄ，およびＲｅの各々は、独立して、Ｈ，アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクリル、またはヘテロシクリルである。選択的に、ＲａとＲｂはひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリル；やはり選択的に、Ｒ１とＲａまたはＲ１とＲｂもひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルである。
【００１２】
上記の化学式を参照すると、本発明のピペラジンジオン化合物の部分セットは、
【化４０】
2004510701.tif 000010
および
【００１３】
【化４１】
2004510701.tif 000011
【００１４】
の両方が二重結合であることに特徴づけられる。これらの化合物では、Ａｒは２位にてＢに結合するピリジルであり、ＲｃはＨであり、Ｒ３Ｏが、ピリジルの５位と結合するアリールアルコキシであり、Ｒ１とＲ２の両方はＨであり、ＲａとＲｂの一方はアリールまたはヘテロアリールであり、ＲａとＲｂの他方はＨである。本発明のピペラジンジオン化合物の他の部分セットは、
【化４２】
2004510701.tif 000012
および
【００１５】
【化４３】
2004510701.tif 000013
の両方が単結合であることに特徴づけられる。これらの化合物では、Ａｒは２位にてＢに結合するピリジルであり、ＲｃはＨであり、Ｒ３Ｏが、ピリジルの５位と結合するアリールアルコキシであり、Ｒ１とＲ２の両方はＨであり、ＲａとＲｂの一方はＨ、アリールまたはヘテロアリールであり、ＲａとＲｂの他方はＨである。
【００１６】
ここに記述するアルキル、アリール、ヘテロアリール、シクリル、およびヘテロシクリルは、置換および非置換部分（ｍｏｉｅｔｉｅｓ）の両方を含む。用語「置換」は、各々水素原子と置き換わる一つ以上の置換基（同一または異なるものであり得る）を意味する。置換基の例は、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、ジアルキルアミノ、ジアリールアミノ、シアノ、ニトロ、メルカプト、カルボニル、カルバミド、カルバミル、カルボキシル、チオウレイド、チオシアナト、スルホアミド、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクリル、ヘテロシクリルを含むが、これらに限定されることはなく、ここでアルキル、アルケニル、アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクリル、およびヘテロシクリルは、選択的にＣ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、メルカプト、シアノ、またはニトロと置換される。用語「アリール」は、少なくとも一つの芳香環を有する炭化水素環を意味する。アリール部分の例には、フェニル、ナフチル、およびピレニルが含まれるが、これらに限定されることはない。用語「ヘテロアリール」は、Ｏ，Ｎ，またはＳのような、少なくとも一つのヘテロ原子を含む少なくとも一つの芳香環を有する炭化水素環を意味する。ヘテロアリール部分の例には、フリル、フルオレニル、ピロリル、チエニル、オキサゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、キナゾリニル、およびインドリルが含まれるが、これらに限定されることはない。
【００１７】
本発明の他の実施態様は、薬剤的に許容されるキャリアと、有効量の少なくとも一つの上記のピペラジンジオン化合物とを含む、薬剤化合物に関するものである。
【００１８】
本発明のさらなる実施態様は、腫瘍（例、白血病、肺がん、結腸がん、中枢神経系がん、黒色腫、子宮がん、腎臓がん、前立腺がん、乳がん）の治療方法に関するものである。この方法は、化学式
【００１９】
【化４４】
2004510701.tif 000014
を有するピペラジンジオン化合物の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む。
【００２０】
【化４５】
2004510701.tif 000015
および
【００２１】
【化４６】
2004510701.tif 000016
の各々は、独立して、単結合または二重結合であり、Ａは
【００２２】
【化４７】
2004510701.tif 000017
が単結合のときは、ＨまたはＣＨ（ＲａＲｂ）であるか、または
【００２３】
【化４８】
2004510701.tif 000018
【００２４】
が二重結合のときは、Ｃ（ＲａＲｂ）である。Ｚは
【化４９】
2004510701.tif 000019
が単結合のときは、ＣＨ（ＲｃＲｄ）であるか、または
【００２５】
【化５０】
2004510701.tif 000020
【００２６】
が二重結合のときは、Ｃ（ＲｃＲｄ）である。Ｒ１とＲ２の各々は、独立して、Ｈ，Ｃ（Ｏ）Ｒｅ，Ｃ（Ｏ）ＯＲｅ，Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆ，またはＳＯ２Ｒｅ であり；Ｒａ，Ｒｂ，Ｒｃ，Ｒｄ，Ｒｅ，およびＲｆの各々は、ＲｃとＲｄの一方がアリールまたはヘテロアリールであることを条件として、独立して、Ｈ，アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクリル、またはヘテロシクリルである。もし、
【化５１】
2004510701.tif 000021
【００２７】
が二重結合ならば、
【化５２】
2004510701.tif 000022
は単結合であり、ＲｃおよびＲｄの一つがＨならば、ＲｃおよびＲｄの他方はヘテロアリールである。選択的に、ＲａおよびＲｂはひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルであり、やはり選択的に、Ｒ１およびＲａまたはＲ１およびＲｂもひとまとまりでシクリルまたはヘテロシクリルである。
【００２８】
上記の化学式を参照すると、たった今記述されたピペラジンジオン化合物の部分セットは、
【化５３】
2004510701.tif 000023
および
【００２９】
【化５４】
2004510701.tif 000024
【００３０】
の両方が二重結合であることに特徴づけられる。これらの化合物では、ＲｃおよびＲｄの一方が２−ピリジルであり、ＲｃおよびＲｄの他方がＨであり、Ｒ１およびＲ２の両方がＨであり、ＲａおよびＲｂの一方はアリールまたはヘテロアリールであり、ＲａおよびＲｂの他方はＨである。２−ピリジルは、さらに５−アリールアルコキシと置換することができる。ピペラジンジオン化合物のもう一つの部分セットは、
【化５５】
2004510701.tif 000025
および
【００３１】
【化５６】
2004510701.tif 000026
の両方が単結合であることに特徴づけられる。これらの化合物では、ＲｃおよびＲｄの一方が２−ピリジルであり、ＲｃおよびＲｄの他方がＨであり、Ｒ１およびＲ２の両方がＨであり、ＲａおよびＲｂの一方はＨ，アリール、またはヘテロアリールであり、ＲａおよびＲｂの他方はＨである。
【００３２】
７個の代表的なピペラジンジオン化合物は、３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−フェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン、３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−ヒドロキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン、３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−フルオロフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン、３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−クロロフェニルメチリジンピペラジン−２，５ジオン、３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−フェニルメトキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン、３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−［ （チエン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン、および３，６−ジ［ ５−フェニルメトキシピリジン−２−イル）メチル］ ピペラジン２，５−ジオンである。これらの構造を下記する。
【００３３】
【化５７】
2004510701.tif 000027
上述のピペラジンジオン化合物は、もし適用可能であれば、これら自体の化合物、これらの塩、およびこれらのプロドラッグを含む。これらの塩は、例えば、ピペラジンジオン化合物の正電荷置換基（例、アミノ）とアニオンとで形成することができる。適切なアニオンには、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、および酢酸塩が含まれるが、これらに限定されることはない。同様に、ピペラジンジオン化合物の負電荷置換基（例、カルボキシラート）は、カチオンとで塩を形成することができる。適切なカチオンには、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、およびテトラメチルアンモニウムイオンのようなアンモニウムカチオンが含まれるが、これらに限定されることはない。プロドラッグの例は、患者に投与することにより、上述のピペラジンジオン化合物を提供可能な、エステルおよび薬剤的に許容される他の誘導体を含む。
【００３４】
上述したピペラジンジオン化合物の一つ以上を含む組成物が、腫瘍治療において使用でき、今記述した使用のための薬品を製造するためにこれらの組成物を使用することもまた、本発明の範囲に含まれる。
【００３５】
本発明の他の特徴または利点は、以後詳細するいくつかの実施態様と、後述の請求項とから明白となる。
【００３６】
（詳細な説明）
上述のピペラジンジオン化合物は、当業者によく知られる方法と、ここに開示する合成経路により調製される。例えば、中間体のヘテロアリール−メチリジン−ピペラジン−２，５−ジオンを生成するために、ピペラジン−２，５−ジオン化合物を、ヘテロアリールホルムアルデヒドと反応させ得る。中間体はその後、ヘテロアリール−メチル−ピペラジン−２，５−ジオン（本発明の化合物）に還元されるか、またはケトンまたは他のホルムアルデヒドと反応され、その後塩基処理され、シス−、トランス−、Ｅ−、またはＺ−二重結合異性体であるピペラジンジオン異性体の混合物を生成する。所望の異性体生成物は、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、他の異性体から分離され得る。所望なら、さらなる修飾によって適切な官能基をヘテロアリール環に導入することもできる。代替として、所望の還元生成物を、生成物を還元剤と反応させることにより得ることができる。
【００３７】
下に示すのは、１７個のピペラジンジオン化合物の合成法を図示する概略図である。
【００３８】
【化５８】
2004510701.tif 000028
化合物１〜１７の合成法の詳細は、各々実施例１〜１７に記述される。他のピペラジンジオン化合物を調製するために、ピリジニル（上の概略図に示される）は、アリールまたは他のヘテロアリール（例、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピリミジニル、またはインドリル）と取り換えることができ、ピペラジンジオン環（これもまた上の概略図に示される）の二つのアセチル基（Ａｃ）の一方は、他の置換基（例、カルボニル、カルバミド、カルバミル、またはカルボキシル）と取り換えることができる。
【００３９】
ピペラジンジオン化合物は、少なくとも二つの二重結合を含み、さらに一つ以上の対称点を含むことに留意されたい。従って、これらは、ラセミ体やラセミ混合物、単体のエナンチオマー、個別のジアステレオマー、ジアステレオマー混合物、およびシス−、トランス−、Ｅ−、またはＺ−二重結合の異性体として生成し得る。このような異性体の全てが想定される。
【００４０】
有効量の本発明のピペラジンジオン化合物の少なくとも一つと、薬剤的に許容されるキャリアとを含む薬剤組成物もまた、本発明の範囲に含まれる。さらに本発明は、上の「概要」のセクションにて記述したピペラジンジオン化合物の一つ以上の有効量を、腫瘍治療を必要とする患者に投与する方法をも範囲に含む。ピペラジンジオン化合物は、上述した作用機構を経て、または他のいかなる機構をも経て、機能することができる。「有効量」とは、治療される患者に、治療効果を与えるのに必要な化合物の量を意味する。動物とヒトの投与量の相互関係（人体の表面１メートル平方についてのミリグラムに基づく）は、フライライヒ（Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈ）ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ Ｒｅｐ　第５０巻、２１９ページ（１９６６年）に記述されている。人体の表面積は、患者の身長と体重からおおよそ決定される。例えば、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｔａｂｌｅｓ， Ｇｅｉｇｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ａｒｄｌｅｙ， Ｎ．Ｙ．， ５３７ページ、（１９７０）を参照されたい。効果的なピペラジンジオン化合物の量は、約０．１ｍｇ／Ｋｇから約５０ｍｇ／Ｋｇの範囲であり得る。当業者によって認識されるように、治療される腫瘍の種類、投与経路、賦形剤使用、および他の抗腫瘍剤の使用または放射線治療などのような他の治療的処置と同時に使用される可能性とによって、効果的な投与量もまた変化する。
【００４１】
本発明の方法を実行するために、ピペラジンジオン化合物を含有する組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸から、鼻から、頬側から、膣から、またはインプラントされた供給装置を介して、投与される。ここで使用される用語「非経口」は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液内、胸骨内、くも膜内、病巣内、および頭蓋内への、注射または注入技術を含む。
【００４２】
例えば、無菌の水溶性または油性の懸濁液のような注射液組成物は、例えば、適切な分散剤または湿潤剤（例、トウィーン（Ｔｗｅｅｎ）８０の様な）と懸濁剤を使用して、当業者に周知の方法に従って処方される。この無菌の注射可能な製剤は、例えば、１，３−ブタンジオールの溶液のような、無毒の、非経口的に可能な希釈液または溶媒であってもよい。使用可能な、許容される媒体および溶媒は、マンニトール、水、リンゲル液、および等浸透性塩化ナトリウム溶液であり得る。加えて、無菌の、不揮発性の油が、従来から溶媒または懸濁媒体（例、合成モノ−またはジグリセライド）として使用されている。オレイン酸とそのグリセリド誘導体のような脂肪酸は、特にそのポリオキシエチル体で、例えばオリーブオイルやひまし油のような天然の薬剤的に許容される油として、注射液の調製に便利である。これらの油溶液または懸濁液は、長鎖アルコール希釈剤または分散剤、もしくはカルボキシメチルセルロースまたは同様の分散剤をも含むことができる。薬学的に許容される固体、液体、または他の剤形の製造に普通に使用される、トウィーン（Ｔｗｅｅｎ）またはスパン（Ｓｐａｎ）もしくは他の同様な乳化剤または生体利用効率エンハンサーのような、他の通常使用される界面活性剤もまた、処方を目的として使用することができる。
【００４３】
経口投与のための組成物は、カプセル、タブレット、乳化剤および水溶性懸濁液、分散液および溶液を含むが、これらに限定されないいずれの経口的に許容される剤形でもよい。経口使用のためのタブレットの場合は、通常使用されるキャリアは、ラクトースおよびコーンスターチを含む。ステアリン酸マグネシウムのような滑剤が通常加えられる。カプセル形での経口投与のためには、有用な希釈剤は、ラクトースおよび乾燥コーンスターチを含む。水溶性の懸濁液またはエマルジョンが経口的に投与されるときは、乳化または懸濁試薬と組み合わされた油相に、懸濁または溶解され得る。所望ならば、特定の甘味料、香料、または着色剤を加えることができる。鼻用エアロゾールまたは吸入組成物は、製剤の分野でよく知られている技術によって調製することができ、生理食塩水における溶液として、ベンジルアルコールまたは他の適切な保存料と、生体学的利用能を高めるための吸入促進剤と、フルオロカーボン及び／又は当業者に知られる他の可溶性または分散性剤を使用して、調整され得る。ピペラジンジオン化合物を含む組成物は、直腸投与のための座薬の形で投与することもできる。
【００４４】
薬剤組成物のキャリアは、剤形の活性成分と融和性があり（好ましくは、それを安定化する）、治療を受ける患者にとって有害ではない点において、「許容される」ものでなければならない。例えば、ピペラジンジオン化合物と、特定の、より溶解性の高い錯体を作るシクロデキストリンのような安定化剤、または一つ以上の安定化剤が、ピペラジンジオンの供給のための薬剤賦形剤として利用できる。他のキャリアの例は、コロイド状二酸化ケイ素、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、ラウリル硫酸ナトリウム、およびＤ＆Ｃ　イエロー（Ｙｅｌｌｏｗ）＃１０を含む。
【００４５】
ピペラジンジオン化合物は、そのがん治療における有効性を、以下のインビトロアッセイの一つ以上によって、事前にスクリーニングされた。
一つのアッセイは、主なヒト腫瘍の約６０の細胞株からなる、ＮＣＩスクリーニング系に基づいている。モンクス（Ｍｏｎｋｓ）ら、ＪＮＣＩ，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ 　Ｉｎｓｔ．第８３巻、７５７−７６６ページ（１９９９年）、アレイ（Ａｌｌｅｙ）らＣａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． 第４８巻、５８９〜６０１ページ（１９８８）、ショーメイカー（Ｓｈｏｅｍａｋｅｒ）ら、Ｐｒｏｇ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ． 第２７６巻、２６５〜２８６ページ（１９８８）、およびスティンソン（Ｓｔｉｎｓｏｎ）ら、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． 第３０巻、６１３ページ（１９８９）を参照されたい。簡単に言えば、特定の細胞型と、期待されるターゲットの細胞密度（細胞成長特性に基いて１容器当たり５，０００〜４０，０００の細胞）に従って希釈された細胞懸濁液（１００μＬ）を、９６ウェルマイクロタイタープレートに加える。前培養は、３７℃で２４時間行う。意図する試験濃度の二倍の希釈剤を、時間ゼロにおいて、１００μＬアリコートで、マイクロタイタープレートの各容器に加える。通常、試験化合物は、５個の１０倍希釈液において評価される。ルーチン試験において、化合物の最も高い濃度は、１０− ４Ｍである。培養は、５％の大気中ＣＯ２濃度および湿度１００％において４８時間行った。細胞は、ルビンスタイン（Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ）ら（ＪＮＣＩ，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．第８２巻、１１１３〜１１１８ページ（１９９０））と、スケハン（Ｓｋｅｈａｎ）ら、ＪＮＣＩ，Ｊ．Ｎａｔｌ ．Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎｓｔ． 第８２巻、１１０７〜１１１２ページ（１９９０）に記述される、スルホホダミンＢを使用してアッセイした。光学密度を読むためにプレートリーダーを使用し、マイクロコンピューターが光学密度を特別な濃度変数に処理する。ＮＣＩは、５０％の成長抑制の原因となる濃度であるＩＣ５０値を、時間ゼロにおいて数えた細胞の訂正を強調するために、ＧＩ５０に改名した。従って、ＧＩ５０は、試験化合物の成長抑制力を評価する。Ｂｏｙｄ（ボイド）ら、（１９９２） Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇｓ ：Ｍｏｄｅｌｓ ａｎｄ Ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；Ｖｌｅｒｉｏｔｅ， Ｆ．Ａ．；Ｃｏｒｂｅｔｔ， Ｔ．Ｈ； Ｂａｋｅｒ， Ｌ．Ｈ．（Ｅｄｓ．）； Ｋｌｕｗｅｒ Ａｃａｄｅｍｉｃ：Ｈｉｎｇｈａｍ， ＭＡ，ｐｐ １１−３４。
【００４６】
他の一つのアッセイにおいて、ピペラジンジオン化合物は、そのＰＣ−３細胞（前立腺がん細胞株）での細胞毒性について試験された。より詳細には、細胞を試験化合物と共に無血清培地にて２４時間培養した。細胞毒性効果は、ボイド（Ｂｏｙｄ）（Ｉｎ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｄｅｖｉｔａ， Ｊ．Ｔ．， Ｈｅｌｌｍａｎ， Ｓ．， ａｎｄ Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ， Ｓ．Ａ．（Ｅｄｓ．） Ｖｏｌ．３， ＰＰＯ Ｕｐｄａｔｅ， Ｎｏ．１０， １９８９） に記述される、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−臭化ジフェニルテトラゾリウム（ＭＴＴ）アッセイ方法を使用して決定された。
【００４７】
他の一つのインビトロアッセイが、ピペラジンジオン化合物の細胞周期進行の阻害における効果を評価するため使用され得る。より詳細には、試験するピペラジンジオン化合物を、プロピジウムヨウ素染色フロー血清計算評価を使用して、濃度依存的な様式で、ＰＣ−３に加える。サブ− Ｇ０／Ｇ１、Ｇ０／Ｇ１、ＳおよびＧ２／Ｍ相の細胞数が、その後決定される。加えて、Ｒａｓ活性におけるピペラジンジオン化合物の効果が、化合物のＲａｓタンパク依存的シグナル伝達経路の該化合物による調節を決定するために、試験され得る。
【００４８】
ピペラジンジオン化合物の抗腫瘍活性は、さらに、インビボ動物モデルによって評価され得る。ＳＣＩＤマウスをモデルとして使用し、前立腺腫瘍を発症させるためにＰＣ−３細胞を皮下注射する。ピペラジンジオン化合物の抗腫瘍活性が、治療後に決定される。加えて、ピペラジンジオン化合物の抗腫瘍活性は、インビボ抗血管形成試験を使用して評価され得る。例えば、ｂＦＧＦ−誘導血管形成におけるピペラジンジオン化合物の効果を試験するために、ヌードマウスを使用することができる。ｂＦＧＦのマトリゲル（ｍａｔｒｉｇｅｌ）、または血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）が、ピペラジンジオン化合物の腹膜細胞内投与がなされると同時に、マウスに皮下注入される。数日間培養した後、マトリゲルは血管形成試験のため切除される。
【００４９】
さらに詳述せずとも、上記の説明により本発明は十分に実施可能になったものと思われる。従って、下記の特定の実施例は、単なる例証であり、開示する残りの部分を如何様にも制限するものではない。本明細書に引用される文献の全ては、その全体が参照により組み込まれる。
【００５０】
実施例１
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−フェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物１）の合成。
１，４−ジアセチル−ピペラジン−２，５−ジオン（８．６ｇ）を、５−ベンジオキシピリジン−２−イル−ホルムアルデヒド（４．０ｇ）のトリエチルアミン５．６ｍＬと、ジネチルホルムアミド４０ｍＬの溶液に加えた。混合物を、室温にて１６時間攪拌し、その後氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、５．４ｇ（７７％）の１−アセチル−３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物Ａ）を得た。
【００５１】
融点：１８９〜１９１℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ２．５２（ｓ，３Ｈ），δ４．５４（ｓ，３Ｈ），δ４．３３（ｓ，２Ｈ），δ５．２５（ｓ，２Ｈ），δ６．８５（ｓ，１Ｈ），δ７．３８４〜δ７．４８８（ｍ，５Ｈ，芳香族），δ７．４９９（ｄ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），δ７．６８９（ｄ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），δ８．５３３（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．１４７（ｓ，１Ｈ）
【００５２】
化合物Ａ（３．５１ｇ）を、等モルのベンズアルデヒドと４当量のトリエチルアミンを含むジメチルホルムアミド溶液４０ｍＬに加えた。この溶液を、６０℃にて１６時間攪拌し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、３．３ｇ（８３％）の所望の生成物３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−フェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物１）を、異性体の混合物として得た。混合物は、ＺＺおよびＥＺ異性体が優勢であった。
【００５３】
融点：２２３〜２２５℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．２４３（ｓ，２Ｈ），δ６．６９５（ｓ，１Ｈ），δ６．８１２（ｓ，１Ｈ），δ７．３４６〜δ７．６３４（ｍ，１２Ｈ，芳香族），δ８．５２８（ｓ，１Ｈ），δ１０．２４５（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．２８９（ｓ，１Ｈ）
【００５４】
実施例２
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−ヒドロキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物２）の合成。
【００５５】
実施例１で得られた化合物Ａ（３．５１ｇ）を、１．５ｇの４−ヒドロキシベンズアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、１３０℃にて１６時間還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、３．３ｇ（８３％）の所望の３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−ヒドロキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物２）を得た。
【００５６】
融点：２６０〜２６３℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．２４４（ｓ，２Ｈ），δ６．６６９（ｓ，１Ｈ），δ６．７５３（ｓ，１Ｈ），δ６．７９８（ｓ，１Ｈ，芳香族），δ６．８１９（ｓ，１Ｈ，芳香族），δ７．３４７〜δ７．６４７（ｍ，９Ｈ，芳香族），δ９．８２１（ｓ，１Ｈ），δ１０．０６４（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．２１６（ｓ，１Ｈ）
【００５７】
実施例３
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−メトキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物３）の合成。
【００５８】
実施例１で得られた化合物Ａ（３．５１ｇ）を、１．４ｇの４−ヒドロキシベンズアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、１３０℃にて１６時間還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、３．３ｇ（８３％）の所望の３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−メトキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物３）を得た。
【００５９】
融点：２３８〜２４０℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．２４４（ｓ，２Ｈ），δ６．６６９（ｓ，１Ｈ），δ６．７５３（ｓ，１Ｈ），δ６．７９８（ｓ，１Ｈ，芳香族），δ６．８１９（ｓ，１Ｈ，芳香族），δ７．３４７〜δ７．６４７（ｍ，９Ｈ，芳香族），δ９，８２１（ｓ，１Ｈ），δ１０．０６４（ｓ，１Ｈ）、およびδ１２．２１６（ｓ，１Ｈ）
【００６０】
実施例４
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−フルオロフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物４）の合成。
実施例１で得られた化合物Ａ（３．５１ｇ）を、１．３ｇの４−フルオロベンズアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、１３０℃にて１６時間還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、３．１２ｇ（７５％）の所望の３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−フルオロフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物４）を得た。
【００６１】
融点：２４２〜２４４℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．２３７（ｓ，２Ｈ），δ６．６８８（ｓ，１Ｈ），δ６．７９４（ｓ，１Ｈ），δ７．２０９〜δ７．６２４（ｍ，１１Ｈ，芳香族），δ８．５２０（ｓ，１Ｈ），δ１０．３４８（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．２７９（ｓ，１Ｈ）
【００６２】
実施例５
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−クロロフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物５）の合成。
実施例１で得られた化合物Ａ（３．５１ｇ）を、１．３ｇの４−クロロベンズアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、１３０℃にて１６時間還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、３．４５ｇ（８０％）の所望の３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−クロロフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物５）を得た。
【００６３】
融点：２５０〜２５１℃
【００６４】
実施例６
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−ベンジオキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物６）の合成。
【００６５】
実施例１で得られた化合物Ａ（３．５１ｇ）を、１．４５ｇの４−ベンジオキシベンズアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、１３０℃にて１６時間還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、ジエチルホルムアミドから再結晶させ、３．４５ｇ（８０％）の所望の３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−ｐ−ベンジオキシフェニルメチリジンピペラジン−２，５−ジオン（化合物６）を得た。
【００６６】
融点：２５３〜２５５℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．１４２（ｓ，２Ｈ），δ５．２３５（ｓ，２Ｈ），δ６．６７２（ｓ，１Ｈ），δ６．７７７（ｓ，１Ｈ），δ７．０４１〜δ７．６３９（ｍ，１６Ｈ，芳香族），δ８．５２０（ｓ，１Ｈ），δ１０．１８０（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．２３５（ｓ，１Ｈ）
【００６７】
実施例７
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−［ （フラン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物７）の合成。
【００６８】
実施例１で得られた化合物Ａ（２．８ｇ）を、２ｍＬのフルフラールと４等量のトリエチルアミンを含む４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、６０℃にて４８時間還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルにて洗浄し、ジメチルホルムアミドから再結晶させ、２．５ｇ（８０％）の所望の３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−［ （フラン−２−イル）メチリジンピペラジン］ −２，５−ジオン（化合物７）を得た。
【００６９】
融点：２５６〜２５７℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．２４５（ｓ，２Ｈ），δ６．６５６（ｄ，Ｊ＝１．６，１Ｈ），δ６．６６４（ｄ，Ｊ＝１．６，１Ｈ），δ６．６８５（ｓ，１Ｈ），δ６．７２０（ｓ，１Ｈ），δ７．３４９〜δ７．９４２（ｍ，８Ｈ，芳香族），δ８．５２７（ｓ，１Ｈ），δ９．５１５（ｓ，１Ｈ），及びδ１２．３１２（ｓ，１Ｈ）
【００７０】
実施例８
３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−［ （チエン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物８）の合成。
【００７１】
実施例１で得られた化合物Ａ（２．８ｇ）を、２ｍＬのチオフェン−２−カルボアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、６０℃にて２日間還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルにて洗浄し、ジメチルホルムアミドから再結晶させ、１．９ｇ（５９％）の所望の３−［ （５−ベンジオキシピリジン２−イル）メチリジン］ −６−［ （チオフェン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン２，５−ジオン（化合物８）を得た。
【００７２】
融点：２１５〜２１７℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．２４５（ｓ，２Ｈ），δ６．７１６（ｓ，１Ｈ），δ６．９７４（ｓ，１Ｈ），δ７．１８６（ｓ，１Ｈ），δ７．３８４〜δ７．７４６（ｍ，９Ｈ，芳香族），δ８．５２５（ｓ，１Ｈ），δ９．７５３（ｓ，１Ｈ），δ９，７５３（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．２８８（ｓ，１Ｈ）
【００７３】
実施例９
３−［ （５−ベンジルオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−［ （２−ピリジニル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物９）の合成。
【００７４】
実施例１で得られた化合物Ａ（２．８ｇ）を、２ｍＬのピリジン−２−カルボアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミドに加えた。この溶液を、６０℃にて２日間攪拌し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、ジエチルホルムアミドから再結晶させ、２．７ｇ（８５％）の所望の３−［ （５−ベンジルオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−［ （２−ピリジニル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物９）を得た。
【００７５】
融点：２４８〜２５０℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．２４６（ｓ，２Ｈ），δ６．７０９（ｓ，１Ｈ），δ６．７８８（ｓ，１Ｈ），δ７．３４９〜δ７．６６１（ｍ，８Ｈ，芳香族），δ７．９２３（ｄ，Ｊ＝８，１Ｈ，芳香族），δ８，４７３（ｄ，Ｊ＝３．６，１Ｈ），δ８．５３３（ｄ，Ｊ＝２．８，１Ｈ），δ８．６８０（ｄ，Ｊ＝２，１Ｈ），δ１０．６６７（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．３２４（ｓ，１Ｈ）
【００７６】
実施例１０
３，６−ジ［ （５−フェニルメトキシピリジン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン２，５−ジオン（化合物１０）の合成。
実施例１で得られた化合物Ａ（０．３１ｇ）を、当モル量の５−ベンジオキシピリジン−２−イル−ホルムアルデヒドと４等量のトリエチルアミンを含む４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。溶液は、１３０℃にて一晩還流し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルにて洗浄し、０．３６ｇ（８０％）の所望の３，６−ジ［ （５−フェニルメトキシピリジン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１０）を得た。
【００７７】
融点：２８３〜２８℃
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ５．１４５（ｓ，４Ｈ），δ６．７８０（ｓ，２Ｈ），δ７．２４０〜δ７．３９４（ｍ，１４Ｈ，芳香族），δ８，３８１（ｓ，２Ｈ），δ１０．１４５（ｓ，１Ｈ），およびδ１２，５８（ｓ，１Ｈ）
【００７８】
実施例１１
３−［ （５−フェニルメトキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−（２−オキソ−３−インドリルイデンピペラジン−２，５−ジオン（化合物１１）の合成。
【００７９】
実施例１で得られた化合物Ａ（２．８ｇ）を、１．５ｇのイサチンと４等量のトリエチルアミンを含む、４０ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に加えた。この溶液を、１３０℃にて２時間攪拌し、氷浴槽にて冷却し、黄色の沈殿物を生成した。その後、沈殿物を収集し、酢酸エチルによって洗浄し、３．０４ｇ（８７％）の所望の３−［ （５−フェニルメトキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−（２−オキソ−３−インドリルイデンピペラジン−２，５−ジオン（化合物１１）を得た。
【００８０】
融点：＞３００℃
【００８１】
実施例１２
１−アセチル−３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチル］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１２）の合成。
１００ｍＬの酢酸と１０ｍＬの水の混合物における３．５１ｇの１，４−ジアセチル−ピペラジン−２，５−ジオンと過剰な亜鉛紛の懸濁液を、５〜１０分間攪拌および還流し、冷却した。混合物を濾過した。このようにして得られた固体を収集し、水で洗浄し、所望の１−アセチル−３−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチル］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１２）を得た。
【００８２】
融点：２１５〜２１６℃
【００８３】
実施例１３
３，６−ジ−［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチル］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１３）の合成。
１０ｍＬの酢酸と１０ｍＬの水の混合物における３，６−ジ［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ ピペラジン−２，５−ジオン（０．２ｇ）のと過剰な亜鉛紛の懸濁液を５〜１０分間攪拌および還流し、熱いうちに濾過した。溶解した酢酸亜鉛に水を加えた。濾液を濃縮し濾過した。このようにして得られた固体を収集し、水で洗浄し、８０ｍｇ（４０％）の所望の３，６−ジ［ （５−ベンジオキシピリジン−２−イル）メチル］ ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１３）を得た。
【００８４】
融点：２２８〜２３１℃
【００８５】
実施例１４
３−［ （５−アセトキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−（ベンジルメチリジン）ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１４）の合成。
３−［ （５−ベンジルオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−（ベンジルメチリジン）ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１、０．５ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）とＮａＯＨ（０．５ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）を、１００ｍＬのメタノールに溶解した。混合物は、１気圧下で０．５ｇパラジウム／炭（ｃｈａｒｃｏａｌ）によって水素化した。ＴＬＣにより監視されるように反応を完了させた後、触媒を濾過により除去し、濾液を真空中で蒸散し、残留物を生成した。残留物に５０ｍＬの水を加え、得られた水溶液をｐＨ＝７に調整した。沈殿物は、０．２７ｇの３−［ （５−ヒドロキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−（ベンジルメチリジン）ピペラジン−２，５−ジオン（化合物Ｂ）の生成物を得るため、形成され収集された。（７０％収率）
【００８６】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ６．７５８（ｓ，１Ｈ），δ７．０８７（ｓ，１Ｈ），δ７．２９０〜δ７．５８０（ｍ，７Ｈ，芳香剤），δ８．３２８（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．２８９（ｓ，１Ｈ）
【００８７】
化合物Ｂ（０．０５ｇ，０．１６ｍｍｏｌｅ）の無水酢酸（５０ｍＬ）溶液を、１５０℃で２４時間還流した。未反応の無水酢酸と生成された酢酸は、残留物を得るため真空中で除去した。残留物を、展開液（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ＝９　：１）を用いてシリカゲルカラムを使用してクロマトグラフィーし、０．０５１ｇ（９０％）の化合物１４を、異性体の混合物として得た。混合物はＺＺ異性体が優位であった。
【００８８】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＣＤｌ３）：δ２．３７７（ｓ，３Ｈ），δ６．７８６（ｓ，１Ｈ），δ７．１０７（ｓ，１Ｈ），δ７．３６８〜δ８．４９６（ｍ，７Ｈ，芳香族），δ８．２２４（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．４９８（ｓ，１Ｈ）
【００８９】
実施例１５
３−［ （５−ベンゾイルオキシピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−（ベンジルメチリジン）ジペラジン−２，５−ジオン（化合物１５）の合成。
化合物Ｂ（０．０５ｇ，０．１６ｍｍｏｌｅ、実施例１４で得られたもの）、塩化ベンゾイル、および５０ｍＬのクロロホルムを含む反応混合物を、１５０℃にて２時間加熱した。残留物を生成するため、クロロホルムを真空中にて除去した。残留物を、展開液（ＣＨ２Ｃｌ２）を用いてシリカゲルカラムを使用してクロマトグラフィーし、０．００７ｇ（１０％）の化合物１５を得た。
【００９０】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ６．７８６（ｓ，１Ｈ），δ７．１０７（ｓ，１Ｈ），δ７．１０７（ｓ，１Ｈ），δ７．３６８〜δ８．４９６（ｍ，１３Ｈ，芳香族），及びδ８．２２３（ｓ，１Ｈ）
【００９１】
実施例１６
３−［ （５−（４−トルエンスルフォニル）ピリジン−２−イル）メチリジン］ −６−（ベンジルメチリジン）ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１６）の合成。
【００９２】
化合物Ｂ（０．０５ｇ，０．１６ｍｍｏｌｅ、実施例１４にて得られたもの）、塩化トルエンスルフォニル（０．０３ｇ、０．１６ｍｍｏｌｅ）、および５０ｍＬのトルエンの反応混合物を１５０℃で２時間加熱した。トルエンは、残留物を生成するために真空にて除去された。残留物を、展開液（ＣＨ２Ｃｌ２）を用いてシリカゲルカラムを使用してクロマトグラフィーし、０．００７ｇ（１０％）の化合物１６を得た。
【００９３】
１ＨＮＭＲ（４００ＮＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ２．５０３（ｓ，３Ｈ），δ６．７５１（ｓ，１Ｈ），δ７．１０２（ｓ，１Ｈ），δ７．３４３〜δ８．１５９（ｍ，１２Ｈ，芳香族），δ８．２２３（ｓ，１Ｈ），およびδ１２．３１５（ｓ，１Ｈ）
【００９４】
実施例１７
３−［ （５−（４−クロロフェニルカルバミド）ピリジン２−イル）メチリジン］ −６−（ベンジルメチリジン）ピペラジン−２，５−ジオン（化合物１７）の合成。
【００９５】
化合物Ｂ（０．０５ｇ，０．１６ｍｍｏｌｅ、実施例１４で得られたもの）、４−クロロフェニルイソシアネート（０．０２４ｇ，０．１６ｍｍｏｌｅ）、および５０ｍＬのクロロホルムの反応混合物を１００℃で２４時間加熱した。クロロホルムは、残留物を生成するために真空にて除去された。残留物を、展開液（ＣＨ２Ｃｌ２）を用いてシリカゲルカラムを使用してクロマトグラフィーし、０．０１ｇ（１５％）の化合物１７を得た。
【００９６】
実施例１８
抗腫瘍活性についてのスクリーニング（ＮＣＩ細胞株）。
多数のピペラジンジオン化合物の細胞毒性活性を、６０の異なるＮＣＩヒト腫瘍細胞株のパネルに対して測定した。
全ての試験化合物に、活性が見られた。最も小さい効力の化合物は、４個の細胞株に関して、ＧＩ５０値＜１０− ４Ｍを示した。最も効力のある化合物は、６０個の細胞株に関してＧＩ５０値＜１０−４Ｍを示し、９個の細胞株に関してＧＩ５０値＜１０− ８Ｍを示した。
【００９７】
実施例１９
抗腫瘍活性についてのスクリーニング（前立腺細胞株）。
多数のピペラジンジオン化合物と、タキソール（ｔａｘｏｌ ）（周知の抗腫瘍剤）のの細胞毒性活性を、ＰＣ−３細胞にて試験した。細胞は、各化合物の存在下、無血清培地にて２４時間培養した。細胞毒性活性を、ＭＴＴアッセイによって決定した。全ての試験化合物に活性があった。期せずして、最も効力のあるピペラジンジオン化合物は、タキソールよりも、＞３０倍の効力である０．３μＭのＥＣ５０値を有した。
【００９８】
実施例２０
インビトロアッセイ（細胞周期のＧ２／Ｍ進行の抑制）。
ＰＣ−３細胞を、ピペラジンジオン化合物の存在下、無血清培地にて培養し、収集し、固定し、６時間目、１２時間目、１８時間目、２４時間目の各々につき、プロピジウムヨウ素によって染色した。細胞サイクルの段階は、フローサイトメトリー測定に基づき決定された。試験化合物は、Ｇ２／Ｍ相にて、多数の細胞によって開始された細胞周期の抑制を誘発した。加えて、ピペラジンジオン化合物は、ラス活性の調節にて著しい効果を示した。
【００９９】
実施例２１
インビトロアッセイ（チューブリン／マイクロチューブリン組み立ての阻害）。
チューブリン／マイクロチューブリンを、ピペラジンジオン化合物の存在下、異なる濃度の溶液（０．１ＭＭＥＳ、１ｍＭＥＧＴＡ，０．５ｍＭＭｇＣｌ２、０．１ｍＭＥＤＴＡ，および２．５Ｍグリセロール）にて、３７℃で培養した。その後、チューブリン／マイクロチューブリンのポリマー化を誘発するために、ＧＴＰを加えた。試験化合物は、１０− ６〜１０− ５Ｍにてポリマー化を抑制した。
【０１００】
実施例２２
インビボアッセイ（腫瘍拡大の抑制）。
ＰＣ−３細胞に皮下注射されたＳＣＩＤマウスは、容積８００ｍｍ３以上の腫瘍を発現した。ピペラジンジオン化合物は、１４〜２８日の治療の後、腫瘍をかなり消滅させた。
【０１０１】
実施例２３
インビボアッセイ（血管形成活性の規制）
ｂＦＧＦまたはＶＥＧＦを含むマトリゲルプラグ（０．５ｍＬ ／２０ｇマウス）の６日間の皮下培養の後、プラグにおいて、かなりの血管形成効果が発見された。ピペラジンジオン化合物の腹腔内注射によって、血管形成効果がほぼ完全に消滅した。
【０１０２】
（その他の実施態様）
この明細書に開示される特徴の全ては、いかなる組み合わせにも組み合わせられ得る。この明細書において開示される各特徴は、同一、等価、または同様の目的を果たす代替特性に取り変わり得る。従って、他に明記されなければ、開示された各特性は、等価または同様の特徴の包括的な連続の単なる例である。
【０１０３】
上記の記述から、当業者は本発明の本質的特徴を簡単に確証することができ、その趣旨と範囲から逸脱することなしに、本発明に様々な変更や修正を行って、様々な使用法と状況に適用させることが出来る。例えば、本発明のピペラジンジオン化合物と構造的に類似の化合物を製造し、その抗腫瘍活性についてスクリーニングし、本発明を実施するために使用することもできる。従って、他の実施態様もまた、請求項に含まれる。
【国際公開パンフレット】
2004510701.tif 000068
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2004510701.tif 000091
2004510701.tif 000092
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004510701.tif 000093
【国際調査報告】
2004510701.tif 000094
2004510701.tif 000095