(57)【要約】個人における女性の生殖器官の障害を治療する方法であって、該方法は、前記生殖器官においてＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節することを含む。通常、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する作用剤が用いられる。通常、女性の生殖器官の障害は、月経機能不全、早期分娩又は子宮内膜症である。女性の生殖器官の障害に対する個人の素因をスクリーニングする方法であって、該方法は、ＣＤ４０及び／又はＣＤ４０Ｌの核酸又はタンパク質を含有する個人から試料を入手すること並びにＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌの核酸又はタンパク質が女性の生殖器官の障害を生じる素因を示すような量や濃度、又は形態で存在するかどうかを判定することを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
個人における女性の生殖器官の障害を治療する方法であって、前記生殖器官におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節することを含む方法。
【請求項２】
障害が生殖系の癌ではない請求項１に記載の方法。
【請求項３】
障害が良性の症状である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
障害が子宮の脈管構造を含むものである請求項１に記載の方法。
【請求項５】
障害が、月経機能不全、早期分娩、子宮内膜症、子宮筋腫のいずれか一つである請求項１乃至請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項６】
個人における女性の生殖器官の障害を治療する方法であって、前記生殖器官におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害することを含む方法。
【請求項７】
ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤を個人に投与する請求項１乃至請求項５のいずれか一つに記載の方法。
【請求項８】
作用剤がＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する請求項６または請求項７に記載の方法。
【請求項９】
作用剤がＣＤ４０又はＣＤ４０Ｌを標的とする請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
作用剤が生物製剤である請求項７または請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
作用剤が、１又はそれより多くの抗体、ＣＤ４０Ｌ変異体、可溶化ＣＤ４０、抗ＣＤ４０、抗ＣＤ４０Ｌアンチセンス核酸のいずれかである請求項７乃至請求項１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１２】
作用剤がＣＤ４０Ｌ拮抗剤である請求項１乃至請求項９のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１３】
作用剤が抗体である請求項７乃至請求項１２のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１４】
作用剤がアンチセンス核酸である請求項７乃至請求項１２のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１５】
個人がヒト女性である請求項１乃至請求項１４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１６】
女性の生殖器官の障害を治療するための薬剤の製造における、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤の使用。
【請求項１７】
作用剤がＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する請求項１６に記載の作用剤の使用。
【請求項１８】
女性の生殖器官の障害を治療する治療システムであって、前記生殖器官におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤を有する治療システム。
【請求項１９】
作用剤がＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する請求項１８に記載の治療システム。
【請求項２０】
作用剤と共に、経口避妊薬（プロゲストゲン化合物、そして、プロゲストゲンのみ）、プロゲストゲン類、抗ゲスタゲン類のいずれかを使用する請求項１８または請求項１９に記載の治療システム。
【請求項２１】
個人における女性の生殖器官の障害を治療するのに使用するためのＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤。
【請求項２２】
作用剤がＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する請求項２１に記載の作用剤。
【請求項２３】
個人における女性の生殖器官の障害を治療するためのＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤の使用。
【請求項２４】
作用剤がＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する請求項２３に記載の作用剤の使用。
【請求項２５】
女性の生殖器官に送達するよう適応させた、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤を含む医薬製剤。
【請求項２６】
作用剤がＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する請求項２５に記載の医薬製剤。
【請求項２７】
女性の生殖器官の障害に対する個人の素因をスクリーニングする方法であって、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの少なくとも一方の核酸又はタンパク質を含有する試料を個人から入手し、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの核酸又はタンパク質が女性の生殖器官に障害を及ぼす素因を示すような量や濃度、又は形態で存在するかどうかを判定することを含む方法。
【請求項２８】
女性の生殖器官の障害が、月経機能不全、早期分娩、子宮内膜症のいずれか一つである請求項２７に記載のスクリーニング方法。
【請求項２９】
女性の生殖器官の障害が子宮内膜症である請求項２７に記載のスクリーニング方法。
【請求項３０】
ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの少なくとも一方の遺伝子における多型が判定されたときに、その遺伝子における多型が女性の生殖器官に障害を及ぼす素因と相関するかを判定する請求項２７乃至請求項２９のいずれか一つに記載のスクリーニング方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の属する分野】
【０００１】
本発明は女性の生殖器官の障害を治療する方法に関する。
【０００２】
女性の生殖器官の組織や臓器に障害が起きうることが知られている。これらの障害の例には、月経機能不全、早期分娩、子宮内膜症が挙げられる。
【０００３】
本発明は、月経機能不全や早期分娩のような障害が特定の炎症性成分のレベルの上昇に関係しており、これにはＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムが介在するという知見に基づくが、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムは本研究まで子宮内膜組織では検出されていなかった。
【０００４】
特に、本発明は、少なくとも一つの炎症性成分の有害効果を調節することができる作用剤、つまり、例えば上記炎症性成分の有害効果を軽減する又は除く又は緩和するような作用剤を用いた、月経機能不全や早期分娩のような女性の生殖器官の組織及び臓器における障害の治療に関する。通常、この作用剤はＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節することができるものである。
【０００５】
本発明はまた、少なくとも一つの炎症性成分の有害効果を調節することができる作用剤、つまり、例えば上記炎症性成分の有害効果を軽減する又は除く又は緩和するような作用剤及び、該作用剤を含む組成物（特に、医薬組成物）に関する。通常、この作用剤は、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節することができるものである。
【０００６】
上記のように、本発明は、少なくとも一つの炎症性成分の有害効果を調節することによって、通常、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節することによって、女性の生殖器官の障害の一部を調節することが可能であってもよいという知見に基づく。
【０００７】
ここで、用語「炎症性成分」は、例えば、月経機能不全、早期分娩、子宮内膜症のような女性の生殖器官の障害を直接又は間接的に起こす成分であり、この成分は、１つ以上の炎症効果を直接又は間接的に起すことが可能である成分を意味する。
【０００８】
典型的な炎症性成分は、炎症性サイトカイン又は炎症性ケモカインである。
【０００９】
典型的炎症性成分である炎症性サイトカインは、例えば、月経機能不全、早期分娩、子宮内膜症のような女性の生殖器官の障害を直接又は間接的に起こすサイトカインであり、炎症性サイトカインは１つの炎症効果又は多数の炎症効果を直接又は間接的に起すことが可能である。
【００１０】
サイトカインは通常、哺乳類の細胞により放出され、特異的な受容体を介して他の細胞に作用するタンパク質である。それらは、サイトカインとその標的細胞によって、標的細胞から種々の応答を誘発する。サイトカインの作用には、増殖及び分化の制御、免疫反応、造血及び炎症反応の調節が挙げられる。
【００１１】
炎症性サイトカインの例は、特定のインターロイキンであり、特にＩＬ−６である。
【００１２】
典型的炎症性成分である炎症性ケモカインは、例えば、月経機能不全、早期分娩、子宮内膜症のような女性の生殖器官の障害を直接又は間接的に起こすケモカインであり、炎症性ケモカインは、１つの炎症効果又は多数の炎症効果を直接又は間接的に起すことが可能である。
【００１３】
用語「ケモカイン」は、「走化性サイトカイン」の短縮である。ケモカイン類は、共通して重要な構造特性を有し、白血球を引き付ける能力を有するタンパク質の大きなファミリーを含む。白血球走化性因子であるケモカインは、身体の種々の組織への白血球の誘引、すなわち炎症と感染への身体の応答の双方に必須である過程において不可欠な役割を担っている。ケモカイン及びそれらの受容体は、炎症性疾患及び感染性疾患の病態生理の要となるので、ケモカイン及びそれらの受容体の活性を調節すること、好ましくはそれらと拮抗することにおいて活性のある作用剤は、上記炎症性疾患及び感染性疾患の治療的処置に有用である。
【００１４】
炎症性ケモカインの例は、特定のインターロイキン、特にＩＬ−８、及び単球化学誘引ペプチド、さらに特には単球化学誘引ペプチド１（ＭＣＰ−１）のような単球の化学誘引物質である。
【００１５】
議論されるサイトカイン及びケモカインは当該分野で周知であり；例えば、イベルガウフツ（Ｉｂｅｌｇａｕｆｔｓ）Ｈ．のサイトカインの辞書（ワインヘイム（Ｗｅｉｎｈｅｉｍ）、ＶＣＨ）（１９９５年）を参照のこと。
【００１６】
本発明の重要な知見は、女性の生殖器官の組織及び臓器における線維芽細胞又は筋線維芽細胞のＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを標的とすることが、１つ以上の炎症性成分の有害効果を調節する、つまり、炎症成分の有害効果を軽減する又は除く又は緩和することを可能とするということである。
【００１７】
周知のように、線維芽細胞は、脊椎動物の結合組織の至る所で見出される平坦な、不規則な、枝分かれした、運動性の細胞である。線維芽細胞はこの組織の細胞外コラーゲン及びムコ多糖類を形成し、分泌し、維持する。類似の細胞は多数の非脊椎動物にも存在する。筋線維芽細胞は、平滑筋のアクチンの発現を特徴づける線維芽細胞の特性と平滑筋の特性を持つ細胞である。
【００１８】
特に、我々は、子宮内膜と子宮筋層と子宮頸部と脱落膜と栄養芽層の少なくとも一つの組織及び臓器における線維芽細胞のＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを標的にすることにより、１又はそれより多くの炎症性成分の有害効果を調節すること、例えば上記有害効果を軽減する又は除く又は緩和することができることが可能であることを見出した。子宮内膜は、月経前の子宮内膜、増殖している子宮内膜、又は分泌している子宮内膜であってもよく、その場所は任意の場所でよい。
【００１９】
ＣＤ４０−ＣＤ４Ｌシステムは、線維芽細胞で見出された細胞表面の糖タンパク（ＣＤ４０）及びＣＤ４０に対するリガンド（すなわちＣＤ４０Ｌ）からできている。このシステムは、ベルガウフツ（Ｉｂｅｌｇａｕｆｔｓ）Ｈ．のサイトカインの辞書（ワインヘイム（Ｗｅｉｎｈｅｉｍ）、ＶＣＨ）（１９９５年）に記載されている。
【００２０】
【背景技術】
ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌに関する背景の教示はまた、ビクター（Ｖｉｃｔｏｒ）Ａ．マックシック（Ｍｃｋｕｓｉｃｋ）らによってｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｏｍｉｎに提示されている。ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌに関する以下の情報はこの情報源から抽出された。
【００２１】
４８−ｋＤの糖タンパクであるＣＤ４０は、成熟Ｂ細胞のすべて、ほとんどのＢ細胞悪性腫瘍、及び初期Ｂ細胞急性リンパ性白血病の一部の細胞表面に発現されているが、形質細胞には発現されていない（クラーク（Ｃｌａｒｋ）、１９９０年）。スタメンコビック（Ｓｔａｍｅｎｋｏｖｉｃ）らは、１９８９年に、ＣＤ４０をコードするｃＤＮＡを単離し、そのタンパク質の予想された配列から、ＣＤ４０がヒトの神経成長因子の受容体に関係することを立証した。それは、ＴＮＦアルファの受容体及びＣＤ２７にも密接に関係している。これらの相同性は、ＣＤ４０に対するリガンドが可溶性因子であってもよく、ＣＤ４０がサイトカインの受容体ファミリーのメンバーであることを示している。ＣＤ４０は、リンタンパク質であり、ホモダイマーとしての発現が可能である。
【００２２】
染色体の本来の位置での（ｉｎ　ｓｉｔｕ）ハイブリッド形成を用いて、ラファジ−ポキタロフ（Ｌａｆａｇｅ−Ｐｏｃｈｉｔａｌｏｆｆ）らは１９９４年に、ＤＣ４０遺伝子の位置を２０ｑ１２−ｑ１３．２に決定した。この局所化は、第２染色体の遠位領域へのマウスのＣＤ４０のマッピングとよく相関しており、ヒト２０ｑ１１−ｑ１３へのシンテニーのむしろ広範囲の相同性を示している。
【００２３】
２０ｑ欠損を持つリンパ芽球状細胞株を解析することによって、アシマコポウロス（Ａｓｉｍａｋｏｐｏｕｌｏｓ）らは、１９９６年に、ＣＤ４０の位置を１９〜２１−ｃＭの間隔範囲内に決め、それは、骨髄系悪性腫瘍の患者の試料の以前の解析によって同定された共通の欠損領域とほとんど一致していた。ＣＤ４０−ＣＤ４０リガンド（ＣＤ１５４）の相互作用は免疫の活性化に重大な役割を担っている。マウスのＣＤ１５４をコードする複製欠損のアデノウイルス（Ａｄ−ＣＤ１５４）を用いて、カトウ（Ｋａｔｏ）らは、１９９８年に、ヒト慢性リンパ性白血病のＢ細胞を改変してＣＤ４０に対する機能的なリガンドを発現させた。これは、感染細胞に免疫アクセサリー分子の発現を誘導しただけでなく、感染していない傍観者の白血病Ｂ細胞までも活性化した。また、白血病Ｂ細胞の抗原提示能を損なう因子は下方調節された。カトウ（Ｋａｔｏ）らは、１９９８年に、Ａｄ−ＣＤ１５４は、治療の可能性を有してもよい、宿主の抗白血病反応を誘導できることを示唆した。
【００２４】
アテローム発生における炎症及び免疫の関与を支持する証拠が増えつつある。ヒトのアテローム性硬化症病変における細胞は、免疫メディエータＣＤ４０及びそのリガンドＣＤ４０Ｌを発現しており、ＣＤ４０Ｌの欠損は、過剰ＩｇＭを伴ったＸ連鎖免疫不全に関与する。ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの相互作用は、体液性及び細胞性の免疫応答の双方に顕著に表れる。ＣＤ４０Ｌ陽性のＴ細胞は粥腫に蓄積され、病変増殖および合併症のその初期の出現、持続及び局在化によって活性化Ｔ細胞はアテローム発生の重要な側面を調節する。抗ＣＤ４０Ｌ抗体の投与によるＣＤ４０Ｌ−ＣＤ４０のシグナル伝達の妨害は、例えば、コラーゲン誘導の関節炎、ループス腎炎、急性又は慢性の移植片宿主疾患、多発性硬化症、及び甲状腺炎のような自己免疫疾患を抑えることが実験的に見出された。粥腫に関連する細胞上のＣＤ４０リガンドは生体外でアテローム発生に関連する機能を活性化する。マック（Ｍａｃｈ）らは１９９８年に、高脂血症マウスにおける生体内のアテローム発生にＣＤ４０のシグナル伝達の妨害が影響を及ぼすかどうか調べた。マウスのＣＤ４０Ｌに対する抗体による処理は、低密度リポタンパクに対する受容体を欠き、１２週間、高コレステロール餌を与えたマウスにおけるアテローム性硬化症を抑えた。抗体は、大動脈のアテローム性硬化病変のサイズを５９％減らし、脂質含量を７９％減らした。その上、抗ＣＤ４０Ｌ抗体で処理されたマウスの粥腫は、有意に少ないマクロファージ（６４％）及びＴ細胞（７０％）を含有し、血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）の発現低下を示した。これらのデータは、アテローム性硬化症における炎症性経路の関与を示唆しており、高脂血症マウスにおけるアテローム形成の間のＣＤ４０のシグナル伝達の役割を示した。
【００２５】
アルツハイマー病は、実質的な炎症性成分を有し、活性化された小グリアが神経退化における中心的な役割を担っている。タン（Ｔａｎ）らは、１９９９年に、新しく可溶化したアミロイド−ベータで処理した培養小グリア及びアルツハイマー病のトランスジェニックマウスモデル（ＴｇＡＰＰｓｗ）の小グリアでＣＤ４０の発現が増加していることを実証した。
【００２６】
アミロイド−ベータで刺激した小グリアをＣＤ４０リガンドで処理するとＴＮＦ−アルファ産生の上昇及び神経損傷の誘導が生じた。ＣＤ４０リガンドを欠損したＴｇＡＰＰｓｗマウスの小グリアがあまり活性化されなかったということは、アミロイド−ベータが誘導する小グリアの活性化にはＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの相互作用が必要であることを示唆している。さらに、ＣＤ４０リガンドを欠損したＴｇＡＰＰｓｗ動物では、異常タウ（ｔａｕ）のリン酸化が低下していたということは、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの相互作用はアルツハイマー病の病態発生の初期の出来事であることを示唆している。
【００２７】
【発明の実施の形態】
本発明の第１の態様は、個人における女性の生殖器官の障害を治療する方法を提供することであり、この方法は、前記生殖器官におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節することを含む。
【００２８】
「ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステム」とは、ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌ（ＣＤ１５４としても知られる）及びそれらの相互作用を意味する。従来技術で述べたように、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムはマウス及びヒトで研究されているが、驚くべきことに、ヒトの正常な生殖器官、特に、正常な子宮内膜及び子宮筋層の血管周囲の位置で見出されたのは、唯一我々の仕事によってである。
【００２９】
「女性の生殖器官の障害」とは、女性の生殖器官における疾患のいかなるものも包含するが、特に障害が良性の状態であり、生殖器官の癌でなければ好ましい。さらに、疾患が血管構造に関与するものであれば好ましい。本発明の方法を用いて治療することができる女性の生殖器官の典型的障害には、月経過多及び月経困難症のような月経機能不全、早期分娩、子宮内膜症、子宮筋腫が挙げられる。
【００３０】
月経困難症や月経過多のような共通する内膜の病態は、双方共、血管のすぐそばを取り囲む細胞における機能不全事象によって引き起こされる。これらの障害の双方にプロスタグランジンが関係している。ＰＧＥは、血管に作用し、浮腫や血管からの細胞の滲出を起こし、過剰に疼痛性である。プロゲステロンは血管を囲む細胞（血管周囲細胞）においてプロスタグランジン濃度を低く保つと思われる（チェン、ケリー（Ｃｈｅｎｇ，Ｋｅｌｌｙ）ら、ジャーナル・オブ・クリニカル・エンドクリノロジー・アンド・メタボリズム（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．７７：８７３〜８７７、１９９３年）。これらの血管周囲細胞におけるＣＤ４０発現の発見は、ＣＤ４０の下流のシグナル伝達が、通常、プロスタグランジン感受性であるＮＫκＢ経路を介して進行し、言いかえれば、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムはプロスタグランジンにより調節され、月経に先立って生じるプロスタグランジン濃度の低下によって感作されることが知られているので、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌがこれらの遺伝子座においてプロスタグランジン濃度を制御できることを示している。血管周囲細胞におけるＣＤ４０の鍵となる分布によって、生殖器系の障害、特に子宮の血管と関係のある細胞の過剰刺激又は不完全な制御の結果である部分障害を治療する予期しない機会が得られる。
【００３１】
月経困難症及び月経過多については、作用剤の投与は月経時を避けるのが好ましい。早期分娩については、作用剤は通常、妊娠１６〜３０週の間で投与される。
【００３２】
ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの調節は、以下でさらに詳細に議論するようにいかなる好適な手段によっても達成することができる。障害の治療では、場合によっては、例えば、子宮内膜細胞のクリアランス及び月経の誘導においては、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの相互作用を高めることが有益であってもよいが（従って、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの相互作用の強化は、多分、妊娠防止剤と組み合わせて避妊薬として用いることができるが）、通常、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの相互作用を妨害することが好ましい。ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの妨害は、月経過多、月経困難症、子宮内膜症及び早期分娩の治療において有用である。ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの妨害は、特に子宮内膜症に関係する痛みを緩和するのに有用であると考えられる。ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害する作用剤を以下でさらに詳細に議論する。
【００３３】
つまり、本発明の好ましい態様は、個人における女性の生殖器官の障害を治療する方法を提供し、該方法は、前記生殖器官においてＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害することを含む。
【００３４】
ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの所望の調節（例えば、妨害）を達成するためには、個人がＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する（例えば、妨害する）作用剤を投与されれば好ましい。ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する（例えば、妨害する）作用剤は、例えば、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌのうち、一方又は両方の成分と直接相互作用することによって直接作用してもよいし、例えば、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌのうち、一方又は両方の成分の発現を調節することによって間接的に作用してもよい。通常、作用剤はＣＤ４０Ｌを直接標的とするものである。作用剤がＣＤ４０Ｌを標的とし、ＣＤ４０と相互作用するのを妨げれば特に好ましい。
【００３５】
作用剤は通常、生物製剤であり、したがって、作用剤は、例えば、抗体、ＣＤ４０又はＣＤ４０Ｌの変異体、アンチセンスの核酸分子などを包含する。
【００３６】
生物製剤を用いたＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの妨害は、その他の状況、例えば、移植片の拒絶（キルク（Ｋｉｒｋ）ら、ネイチャーメディシン（Ｎａｔｕｒｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）５：６８６〜６９３ページ、１９９９年）、肺の傷害（アダウィ（Ａｄａｗｉ）ら、アメリカンジャーナル・オブ・パソロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．），１５２：６５１〜６５７ページ、１９９８年；アダウィら、クリニカル・イムノロジー・アンド・イムノパソロジー（Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．），８９：２２２〜２３０ページ、１９９８年）、及び、自己免疫疾患（カルド（Ｋａｌｌｅｄ）ら、ジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１６０：２１５８〜２１６５ページ、１９９８年）で上手く行くことが証明されており、それらのすべてを参考として本明細書に組み入れる。これらの研究は、種々の抗ＣＤ４０Ｌ抗体を利用しており、参考としてそれらを具体的に記載に組み入れる。
【００３７】
好適な作用剤を以下に記載する。作用剤がＣＤ４０Ｌの拮抗剤であれば好ましい。好適なＣＤ４０Ｌ拮抗剤には、ＣＤ４０Ｌと反応する抗体、ＣＤ４０に結合するが、それを活性化しないＣＤ４０Ｌの変異体（通常、可溶性）、ＣＤ４０に結合し、ＣＤ４０Ｌの結合を妨害するが、ＣＤ４０を活性化しない抗体、及びＣＤ４０Ｌに結合することができる可溶性のＣＤ４０が挙げられる。
【００３８】
本発明の他の態様は、女性の生殖器官の障害を治療する薬剤の製造におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤の使用を提供する。上記のように、通常、作用剤はＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害するものである。
【００３９】
本発明のさらに他の態様は、女性の生殖器官の障害を治療するための治療システムを提供することであり、該治療システムは、前記生殖器官におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤を含む。通常、作用剤はＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害するものである。
【００４０】
治療システムは上記作用剤と共に治療剤を含むものとしてもよい。例えば、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する（例えば、妨害する）作用剤による治療を、経口避妊薬ピル（プロゲストゲン化合物、そして、プロゲストゲン（黄体ホルモン）のみ）、プロゲストゲン類、抗ゲスタゲン類（ａｎｔｉｇｅｓｔａｇｅｎｓ）による治療と組み合わせてもよい。
【００４１】
本発明のさらに他の態様は、個人における女性の生殖器官の障害を治療するのに用いるためのＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤と、個人における女性の生殖器官の障害を治療するためのＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤の使用とを包含する。通常、作用剤はＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害するものである。
【００４２】
本発明のさらなる他の態様は、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節する作用剤を含む、女性の生殖器官への送達に適応した医薬製剤を提供する。女性の生殖器官への送達に対する好適な適応を以下に記載する。
【００４３】
治療又は治療することに対する本明細書での参照はすべて、１又はそれより多くの治癒的な、一時的に緩和する及び予防的な治療を包含することが十分理解されるべきである。好ましくは、用語、治療は、少なくとも治癒的なことと一時的に緩和する治療の少なくとも一方を包含する。
【００４４】
治療法（治療）はヒト又は動物において用いられる。好ましくは、本発明の方法はヒトを治療するのに用いられる。
【００４５】
治療法は、女性の生殖組織又は臓器における障害に関係する治療条件であってもよい。
【００４６】
本明細書で使用するとき、用語「作用剤」は、単一構成要素であってもよいし、作用剤の併用であってもよい。
【００４７】
作用剤は抗体であってもよい。好適な抗体はＣＤ４０Ｌに反応性であるものである。通常、これらの抗体は、例えば、ＣＤ４０への結合を妨害することによってＣＤ４０Ｌの活性を中和する。本発明の実践で使用するのに好適であってもよいＣＤ４０Ｌに対する抗体は上記のようなものである。さらに、本発明で使用するのに好適であってもよい（及びＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの相互作用の遮断剤として作用してもよい）ＣＤ４０Ｌに対する抗体は、ＷＯ０１／３０３８６、ＷＯ００／４３０３２、ＵＳ５，９６１，９７４、ＷＯ９９／４５９５８及びＷＯ９９／３８５２５に記載されており、それらすべてを参考として本明細書に組み入れる。
【００４８】
その他の好適な抗体は、ＣＤ４０に結合するがそれを活性化しないものである。通常、これらの抗体はＣＤ４０を架橋すること（ＣＤ４０の活性化の一手段である）ができないものである。従って、好適な抗体は、ＣＤ４０に対して反応性であるが、一価（例えば、Ｆａｂ断片、単鎖Ｆｖ断片など）であるものである。ＣＤ４０に対する抗体は、ＷＯ９９／４２０７５、ＵＳ５，６７４，４９２及びＷＯ９５／０９６５３に記載されており、それらすべてを参考として本明細書に組み入れる。
【００４９】
本明細書で使用するとき、「抗体」には、ポリクローナル、モノクローナル、キメラ、単鎖、Ｆａｂ断片及びＦａｂ発現ライブラリで作製した断片が挙げられるが、これに限定されない。上記断片には、標的物質に対する結合活性を保持する抗体全体の断片、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）及びＦ（ａｂ’）２断片、並びに単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、抗体の抗原結合部位を含む融合タンパク及びその他の合成タンパクが挙げられる。そのうえ、ＵＳ−Ａ−２３９４００に記載されるように抗体及びその断片はヒト化抗体であってもよい。中和抗体、すなわち、物質ポリペプチドの生物活性を阻害するものは、診断及び治療にとって特に好ましい。
【００５０】
例えば、抗体は、本発明の物質で免疫すること又はファージディスプレイライブラリを用いることのような通常の技法によって産生してもよい。
【００５１】
ポリクローナル抗体が所望であれば、選択した哺乳類（例えば、マウス、ウサギ、ヤギ、ウマなど）を、本発明の特定された作用剤と物質の少なくとも一方から入手可能なエピトープを持つ免疫原性のあるポリペプチドで免疫する。宿主の種によって、免疫応答を高めるために種々の補助薬（アジュバント）を用いてもよい。補助薬には、水酸化アルミニウムのようなフロインドの鉱物ゲル、及びリソレシチン、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、油性エマルション、キーホール　カサ貝のヘモシアニン、及びジニトロフェノールのような界面活性物質が挙げられる。ＢＣＧ（カルメット・ゲラン桿菌）及びコリネバクテリウムパルバムは、全身性の防御を刺激する目的で、免疫不全の個人に精製された物質ポリペプチドを投与するのであれば用いてもよい有用な可能性のあるヒトのアジュバントである。
【００５２】
免疫された動物から血清を採取し、既知の手順に従って処理する。本発明の特徴的な作用剤や物質から入手可能なエピトープに対してポリクローナル抗体を含有する血清が他の抗原に対する抗体を含有していれば、免疫アフィニティクロマトグラフィによってポリクローナル抗体を精製することができる。ポリクローナルの抗血清を産生し、処理する技法は公知である。上記抗体を作製する目的で、本発明は、動物又はヒトで免疫原として使用するためにもう１つのポリペプチドに対して付着化した本発明のポリペプチド又はその断片を提供する。
【００５３】
特定のエピトープに向けられたモノクローナル抗体も当業者によって容易に作製することができる。ハイブリドーマによるモノクローナル抗体を作製するための一般的な方法は周知である。不死化した抗体産生細胞株は、細胞融合によって、及び癌遺伝子ＤＮＡによるＢリンパ球の直接形質転換、又はエプステイン・バーウイルスによる形質導入のようなその他の方法によって創製することができる。目的のエピトープに対して産生されたモノクローナル抗体のパネルを、種々の特性、例えばアイソタイプ及びエピトープの親和性についてスクリーニングすることができる。
【００５４】
培養中の細胞株による抗体分子の産生のために提供されるいかなる技法を用いてモノクローナル抗体を調製してもよい。これらには、ケラー（Ｋｏｅｈｌｅｒ）及びミルステイン（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ）によって最初に記載されたハイブリドーマ法（ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），２５６：４９５〜４９７，１９７５年）、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ法（コスボール（Ｋｏｓｂｏｒ）ら、イムノロジーツデイ（Ｉｍｍｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ），４：７２，１９８３年；コート（Ｃｏｔｅ）ら、プロシーディングズ・オブ・ナショナル・アカデミー・サイエンス（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．），８０：２０２６〜２０３０，１９８３年）、及びＥＢＶハイブリドーマ法（コール（Ｃｏｌｅ）ら、モノクローナル抗体及び癌の治療法、アラン・アール・リス社（Ａｌａｎ　Ｒ　Ｌｉｓｓ　Ｉｎｃ）、７７〜９６ページ、１９８５年）が挙げられるが、これに限定されない。さらに、「キメラ抗体」の産生のために開発された技法、マウスの抗体遺伝子をヒトの抗体遺伝子に継いで（スプライシングして）適当な抗原特異性及び生物活性を得る技法を用いることができる（モリソン（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ）ら、プロシーディングズ・オブ・ナショナル・アカデミー・サイエンス（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．），８１：６８５１〜６８５５，１９８４年；ニューバーガー（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ）ら、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），３１２：６０４〜６０８、１９９４年；タケダ（Ｔａｋｅｄａ）ら、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），３１４：４５２〜４５４，１９８５年）。あるいは、単鎖抗体の産生のために記載された技法（米国特許第４，９４６，７７９号）を適用して物質に特異的な単鎖抗体を産生することができる。
【００５５】
オルランディ（Ｏｒｌａｎｄｉ）ら（プロシーディングズ・オブ・ナショナル・アカデミー・サイエンス（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ），８６：３８３３〜３８３７，１９８９年）及びウインター（Ｗｉｎｔｅｒ）Ｇとミルステイン（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ）Ｃ（ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），３４９：２９３〜２９９，１９９１年）に記載されるように、リンパ球集団において生体内の産生を誘導することによって、又は組換え免疫グロブリンのライブラリ又は特異性の高い結合試薬のパネルをスクリーニングすることによって、抗体を作製してもよい。
【００５６】
物質に対する特異的結合部位を含有する抗体断片を作製してもよい。該断片は、例えば抗体分子のペプシン消化によって作製することができるＦ（ａｂ’）２断片及びＦ（ａｂ’）２断片のジスルフィド結合を還元することによって作製することができるＦａｂ断片が挙げられるが、これに限定されない。もう１つの方法として、Ｆａｂ発現ライブラリを構築して所望の特異性を持つモノクローナルＦａｂ断片を迅速に且つ容易に同定できるようにしてもよい（ヒューズ（Ｈｕｓｅ）ら、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２５６：１２７５〜１２８１，１９８９年）。
【００５７】
作用剤は、ＣＤ４０に結合するが、それを活性化しない、ＣＤ４０Ｌの変異体又は類縁体又は誘導体（すなわち、ＣＤ４０Ｌ拮抗剤の変異体）であってもよい。通常、ＣＤ４０Ｌの変異体又は類縁体又は誘導体は可溶性である。可溶性ＣＤ４０Ｌは、ＷＯ９９／３２１３８及びＷＯ９３／０８２０７に記載されており、参考として本明細書に組み入れる。
【００５８】
作用剤は、ＣＤ４０Ｌに結合することができる可溶性ＣＤ４０であってもよい。可溶性ＣＤ４０はＥＰ５９５６５９に記載されており、参考として本明細書に組み入れる。
【００５９】
ＣＤ４０のアミノ酸配列は、ジェンバンク（ＧｅｎＢａｎｋ）受入番号Ｎｏ．Ｘ６０５９２で提供されており、Ｂリンパ球活性化分子と呼ばれている（スタメンコビック（Ｓｔａｍｅｎｋｏｖｉｃ）ら、エンボ・ジャーナル（ＥＭＢＯ　Ｊ．），８：１４０３〜１４１０，１９８９年も参照のこと）。
【００６０】
従って、作用剤はアミノ酸配列であってもよい。本明細書で使用するとき、用語「アミノ酸配列」は、用語「ポリペプチド」や用語「タンパク質」と同義語である。場合によっては、用語「アミノ酸配列」は用語「ペプチド」と同義語である。場合によっては用語「アミノ酸配列」は用語「タンパク質」と同義語である。
【００６１】
アミノ酸配列は、好適なアミノ酸源から単離調整されてもよく、合成して作製してもよいし、組換えＤＮＡ技術を用いて調製してもよい。
【００６２】
作用剤は通常、ＣＤ４０Ｌの変異体又は類縁体又は誘導体である。
【００６３】
ＣＤ４０Ｌのアミノ酸配列は、ジェンバンク受入番号Ｎｏ．Ｚ１５０１７（及びスイスポート（ＳｗｉｓｓＰｏｒｔ）受入番号Ｎｏ．Ｐ２９９６５）で提供されており、ｇｐ３９と呼ばれている（ホレンバウ（Ｈｏｌｌｅｎｂａｕｇｈ）、エンボ・ジャーナル（ＥＮＢＯ　Ｊ．），１１：４３１３〜４３２１，１９９２年も参照のこと）。
【００６４】
ここで、用語「類縁体」は、主題のアミノ酸配列（すなわち、ＣＤ４０Ｌ）と特定の相同性を有する構成要素を意味する。ここで、用語「相同性」は「同一性」と同等視することができる。
【００６５】
本背景では、相同性の配列は、主題の配列と少なくとも７５％、８５％又は９０％同一、好ましくは少なくとも９５％又は９８％同一のアミノ酸配列を包含すると解釈される。通常、類縁体は、主題のアミノ酸配列と同一の活性部位を含む。本発明の背景では、相同性は類似性という点でも考慮することができる（すなわち、類似の化学的特性／機能を有するアミノ酸残基）が、配列同一性という点で相同性を表現するのが好ましい。
【００６６】
視覚的に、又は普通は、容易に利用可能な配列比較プログラムの助けによって相同性の比較を行うことができる。これら市販のコンピュータプログラムは、２以上の配列の間の％相同性を算出する。
【００６７】
従って、最大の％相同性の算出には先ず、ギャップの不利を考慮して、最適な配列配置の作製が必要である。
【００６８】
上記配列配置を実行するための好適なコンピュータプログラムは、ＧＣＧウィスコンシンベストフィットパッケージ（米国、ウィスコンシン大学；セベレックス（Ｃｅｖｅｒｅｕｘ）ら、ヌクレイック・アシッド・リサーチ（Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ），１２：３８７，１９８４年）である。配列比較を実行することができるそれ以外のソフトウエアの例には、ＢＬＡＳＴパッケージ（オースベル（Ａｕｓｕｂｅｌ）ら、１９９９年、上記−第１８項を参照のこと）、ＦＡＳＴＡ（アッシュル（Ａｔｓｃｈｕｌ）ら、ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．），４０３〜４１０，１９９０）及び比較ツールのＧＥＮＥＷＯＲＫＳソフトが挙げられるが、これに限定されない。ＢＬＡＳＴ及びＦＡＳＴＡはオフライン及びオンラインの検索で利用可能である（オースベル（Ａｕｓｕｂｅｌ）ら、１９９９年、上記７−５８〜７−６０を参照のこと）。しかしながら、適用によっては、ＧＣＧベストフィットプログラムを用いるのが好ましいこともある。タンパク質とヌクレオチドの配列を比較するには、ＢＬＡＳＴ２シークエンスと呼ばれる新しいツールが利用可能である（ＦＥＭＳ　マイクロバイオロジーレター（Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｌｅｔｔ）：１７４（２）２４７〜２５０，１９９９年；ＦＥＭＳ　マイクロバイオロジーレター（Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｌｅｔｔ）：１７７（１）：１８７〜１８８，１９９９年及びＮＣＢＩを参照のこと）。
【００６９】
配列は、サイレント変化を生み、その結果機能的には同等の物質を生じるアミノ酸残基の欠失、挿入又は置換した部分を有してもよい。物質の二次的結合活性が保持される限り、残基の極性、電荷、溶解性、疎水性、親水性や両親媒性の性質の類似性に基づいて、意図的なアミノ酸置換を行ってもよい。例えば、負に荷電するアミノ酸にはアスパラギン酸及びグルタミン酸が挙げられ；正に荷電するアミノ酸にはリジン及びアルギニンが挙げられ；類似する親水性値を有する荷電しない極性の頭基を持つアミノ酸にはロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン及びチロシンが挙げられる。
【００７０】
例えば、以下の表に従って、保存的置換を行ってもよい。２番目の縦列で同じ区画にあり、好ましくは３番目の縦列で同じ横列にあるアミノ酸は互いに置換してもよい：
【００７１】
2004510828.tif 000002
【００７２】
本発明はまた相同性置換も包含する（置換及び交換は双方共、既存のアミノ酸残基と別のアミノ酸残基の交換が生じてもよい）、すなわち、塩基性には塩基性、酸性には酸性、極性には極性などのような似たもの同士の置換が生じてもよいことを意味して本明細書で用いられる。非相同性の置換が生じてもよく、すなわち、あるクラスの残基から、例えば、オルニチン（以後、Ｚという）、ジアミノ酪酸オルニチン（以後、Ｂという）、ノルロイシンオルニチン（以後、Ｏという）、ピリルアラニン、チエニルアラニン、ナフチルアラニン及びフェニルグリシンのような非天然アミノ酸の包含を含むもう１つの又は別のクラスの残基への置換が生じてもよい。
【００７３】
交換は非天然アミノ酸によって行われてもよく、例えば、アルファ＊及びアルファ−二置換＊のアミノ酸、Ｎ−アルキルアミノ酸＊、乳酸＊、トリフルオロチロシン＊、ｐ−Ｃｌフェニルアラニン＊、ｐ−Ｂｒフェニルアラニン＊、ｐ−Ｉフェニルアラニン＊のような天然アミノ酸のハロゲン化合物誘導体、Ｌ−アリル−グリシン＊、β−アラニン＊、Ｌ−α−アミノ酪酸＊、Ｌ−γ−アミノ酪酸＊、Ｌ−α−アミノイソ酪酸＊、Ｌ−ε−アミノカプロン酸＃、７−アミノヘプタン酸＊、Ｌ−メチオニンスルホン＃＊、Ｌ−ノルロイシン＊、Ｌ−ノルバリン＊、ｐ−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン＊、Ｌ−ヒドロキシプロリン＃、Ｌ−チオプロリン＊、４−メチル−Ｐｈｅ＊、ペンタメチル−Ｐｈｅ＊のようなフェニルアラニン（Ｐｈｅ）のメチル誘導体、Ｌ−Ｐｈｅ（４−アミノ）＃、Ｌ−Ｔｙｒ（メチル）＊、Ｌ−Ｐｈｅ（４−イソプロピル）＊、Ｌ−Ｔｉｃ（１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸）＊、Ｌ−ジアミノプロピオン酸＃、及びＬ−Ｐｈｅ（４−ベンジル）＊を含む非天然アミノ酸によって行ってもよい。
注釈：＊は上記議論（相同性又は非相同性の置換に関する）の目的で利用され、誘導体の疎水性の性質を指すが、＃は誘導体の親水性の性質を指すのに利用され、＃＊は、両親媒性の特徴を指す。
【００７４】
変異体アミノ酸の配列は、グリシン残基又はβ−アラニン残基のようなアミノ酸スペーサーに加えて、メチル基、エチル基又はプロピル基のようなアルキル基を含む好適なスペーサー基を、配列のいかなる２つのアミノ酸残基の間に挿入されたものを包含してもよい。ペプトイド形態における１又はそれより多くのアミノ酸残基の存在を含む、変異のさらなる形態は、当業者によく理解されるであろう。疑いを避けるために、「ペプトイド形態」は、α炭素置換基がα炭素上ではなくて残基の窒素原子上にある変異アミノ酸残基をいうのに用いられる。ペプトイド形態でペプチドを調製する方法は公知であり、例えば、シモン（Ｓｉｍｏｎ）　ＲＪらのピーエヌエース（ＰＮＡＳ）：８９（２０）：９３６７〜９３７１，１９９２年、及びホーウエル（Ｈｏｒｗｅｌｌ）ＤＣのトレンド・オブ・バイオテクノロジー（Ｔｒｅｎｄｓ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．），１３（４）：１３２〜１３４，１９９５年である。
【００７５】
ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムのその他の好適な遮断剤は、ＷＯ９８／５８６６９、ＷＯ９８／５８６７２、ＷＯ９８／５２６０６、ＷＯ９８／０１１４５、ＷＯ９７／２６０００及びＷＯ９５／１７２０２、並びに上記の特許出願及び特許に記載されており、そのすべてを参考として本明細書に組み入れる。
【００７６】
例えば、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを妨害することによってＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節するその他の作用剤は、参考として本明細書に組み入れられるＷＯ９７／００８９５に記載されるようなＣＤ４０Ｌの結晶構造を参照することによって設計してもよいし、又は好適なスクリーニングにおいて選択されてもよい。
【００７７】
作用剤は、例えば、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌのいずれかの発現を調節することによって間接的にＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節するものであってもよい。
【００７８】
従って、作用剤はアンチセンスの配列であってもよい。本発明で使用するための作用剤であるアンチセンス配列は、ＣＤ４０又はＣＤ４０Ｌのヌクレオチド配列とハイブリッド形成することが可能である。用語「アンチセンス配列」は、長さ１０〜３０の間のヌクレオチドのようなアンチセンスオリゴヌクレオチド並びにさらに長い配列を包含する。ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌをコードするヌクレオチド配列（それぞれ、ジェンバンク受入番号Ｎｏ．Ｘ６０５９２及びＮｏ．Ｚ１５０１７）を参照して当業者によってアンチセンス配列を設計することができる。
【００７９】
本明細書で使用するとき、用語「ハイブリッド形成」は、「１本鎖の核酸が塩基対を介して相補的な鎖に結合する工程」並びにポリメラーゼ鎖反応（ＰＣＲ）技術で実行される増幅の工程を包含する。
【００８０】
本発明はまた、本明細書で提示される配列、又はそのいかなる誘導体、断片又は誘導体に相補的である配列にハイブリッド形成することが可能であるヌクレオチド配列の使用を包含する。
【００８１】
用語「変異体」は、本明細書で提示されるヌクレオチド配列にハイブリッド形成することが可能である配列に相補的である配列も包含する。
【００８２】
好ましくは、用語「変異体」は、厳しい条件下（例えば、５０℃及び０．２ｘＳＳＣ｛１ｘＳＳＣ＝０．１５ＭのＮａＣｌ、０．０１５Ｍのクエン酸ナトリウム、ｐＨ７．０）にて本明細書で提示されるヌクレオチド配列にハイブリッド形成することが可能である配列に相補的である配列を包含する。
【００８３】
さらに好ましくは、用語「変異体」は、非常に厳しい条件下（例えば、６５℃及び０．１ｘＳＳＣ（１ｘＳＳＣ＝０．１５ＭのＮａＣｌ、０．０１５Ｍのクエン酸ナトリウム、ｐＨ７．０）にて本明細書で提示されるヌクレオチド配列にハイブリッド形成することが可能である配列に相補的である配列を包含する。
【００８４】
本発明はまた、本発明のヌクレオチド配列にハイブリッド形成することができるヌクレオチド配列に関する（本明細書で提示されるものの相補的配列を含む）。
【００８５】
本発明はまた、本発明のヌクレオチド配列にハイブリッド形成することができる配列に相補的であるヌクレオチド配列に関する（本明細書で提示されるものの相補的配列を含む）。
【００８６】
また、本発明の範囲内に包含されるのは、中程度から非常に厳しい条件下にて本明細書で提示されるヌクレオチド配列にハイブリッド形成することが可能であるポリヌクレオチド配列である。
【００８７】
好ましい態様において、本発明は、厳しい条件下（例えば、５０℃及び０．２ｘＳＳＣ）にて本発明のヌクレオチド配列又はその相補物にハイブリッド形成することが可能であるヌクレオチド配列を網羅する。
【００８８】
さらに好ましい態様では、本発明は、さらに厳しい条件下（例えば、６５℃及び０．１ｘＳＳＣ）にて本発明のヌクレオチド配列又はその相補物にハイブリッド形成することが可能であるヌクレオチド配列を網羅する。
【００８９】
本発明で使用するためのポリヌクレオチドは、適用によっては、例えば選択された宿主細胞によるポリヌクレオチドの発現に備えることが可能である調節性配列に操作可能に連結される。一例として、本発明は、該調節性配列に操作可能に連結された本発明のポリヌクレオチドを含むベクターを網羅する、すなわち、該ベクターは発現ベクターである。
【００９０】
用語「操作可能に連結される」は、例えば、アンチセンスポリヌクレオチドを産生するといったように、記載される成分が意図する様式にてそれらを機能させる関係にあることと並ぶものをいう。アンチセンス配列に「操作可能に連結された」調節性配列は、対照配列に適合する条件下でアンチセンス配列の発現が達成されるような方式で連結される。
【００９１】
用語「調節性配列」は、プロモータ及びエンハンサ及びその他の発現調節シグナルを包含する。
【００９２】
用語「プロモータ」は、当該技術の普通の意味、例えば、ＲＮＡポリメラーゼ結合部位で用いられる。
【００９３】
本明細書で使用するとき、用語「ヌクレオチド配列」は、用語「ポリヌクレオチド」と同義語である。
【００９４】
ヌクレオチド配列は、ゲノム起源又は合成起源又は組換え起源のＤＮＡであっても、ＲＮＡであってもよい。ヌクレオチド配列は、センス鎖であろうと又はアンチセンス鎖であろうと又はその組み合わせであろうと、２本鎖であってもよいし、１本鎖であってもよい。
【００９５】
適用によっては、好ましくは、ヌクレオチド配列はＤＮＡである。
【００９６】
適用によっては、好ましくは、ヌクレオチド配列は、組換えＤＮＡ技術（例えば、組換えＤＮＡ）の使用によって調製される。
【００９７】
適用によっては、好ましくは、ヌクレオチド配列はｃＤＮＡである。
【００９８】
適用によっては、好ましくは、ヌクレオチド配列は、天然に生じる形態と同一であってもよい。
【００９９】
本明細書で述べられているヌクレオチド配列の技術は一般に当該技術で周知であるが、特に、サムブルック（Ｓａｍｂｒｏｏｋ）らの分子クローニング：実験室マニュアル（１９８９年）及びオースベル（Ａｕｓｕｂｅｌ）らの分子生物学における手短なプロトコール（１９９９年、第４版、ジョン・ウイリーアンドサン社（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｙ＆　Ｓｏｎｓ　Ｉｎｃ．））を参照して行ってもよい。ＰＣＲは、ＵＳ−Ａ−４６８３１９５、ＵＳ−Ａ−４８００１９５及びＵＳ−Ａ４９６５１８８に記載されている。
【０１００】
ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌの変異体のような、本発明の方法で使用するための多数の作用剤はペプチドである。ペプチド作用剤の合成は種々の固相技術を用いて行うことができ（ロバージ　ジェイワイ（Ｒｏｂｅｒｇｅ　ＪＹ）ら、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２６９：２０２〜２０４，１９９５年）、自動的な合成は、例えばＡＢＩ４３１Ａペプチドシンセサイザー（パーキンエルマー）を用い、製造元により提供される説明書に従って達成されてもよい。加えて、作用剤又はそのいかなる一部を含むアミノ酸配列を直接合成の間に改変したり、化学的方法を用いて、そのほかのサブユニットからの配列又はそのいかなる一部と組み合わせたりして、変異作用剤を作製してもよい。
【０１０１】
もう１つの方法として、当該技術で周知の化学的方法を用いてペプチド剤（又はその変異体、類縁体、誘導体、断片又は模倣体）のコーディング配列を全体として又は一部で合成してもよい（カルサーズ　エムエイチ（Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ　ＭＨ）ら、ヌクレイック・アシッズ・リサーチ・シンポジウムシリーズ（Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．），２１５〜２２３，１９８０年；ホーン　ティー（Ｈｏｒｎ　Ｔ）ら、ヌクレイック・アシッズ・リサーチ・シンポジウムシリーズ（Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．），２２５〜２３２，１９８０年を参照のこと）。
【０１０２】
本発明で使用するのに好適な、ペプチド作用剤を発現するための発現宿主の例は、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）種（例えば、ＥＰ−Ａ−０１８４４３８及びＥＰ−Ａ−０２８４６０３に記載されるもの）及びトリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）種のような真菌；バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種（例えば、ＥＰ−Ａ−０１３４０４８及びＥＰ−Ａ−０２５３４５５に記載されるもの）、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）種及びシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）種のような細菌；及びクルイベロマイセス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）種（例えば、ＥＰ−Ａ−００９６４３０及びＥＰ−Ａ−０３０１６７０に記載されるもの）及びサッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）のような酵母である。一例として、典型的な発現宿主は、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・ニガー・バー・ツビゲニス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　ｖａｒ．ｔｕｂｉｇｅｎｉｓ）、アスペルギルス・ニガー・バー・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　ｖａｒ．ａｗａｍｏｒｉ）、アスペルギルス・アクレアチス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ａｃｕｌｅａｔｉｓ）、アスペルギルス・ニヅランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｄｕｌａｎｓ）、アスペルギルス・オルバーエ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｏｒｖａｅ）、トリコデルマ・レッセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｒｅｅｓｅｉ）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・リヘニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、クルベロマイセス・ラクチス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ　ｌａｃｔｉｓ）及びサッカロマイセス・セレビシアエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）から選択してもよい。
【０１０３】
酵母、真菌及び植物の宿主細胞のような好適な宿主細胞の使用によって、それが、ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌの変異体のような組換え発現産物上に本発明での使用に最適な生物活性を与えることが必要であってもよいので、翻訳後修飾（例えば、メチル化、グリコシル化、切断（トランケーション）、脂質化（ｌａｐｉｄａｔｉｏｎ）及びチロシン、セリン又はスレオニンのリン酸化）に備えてもよい。
【０１０４】
作用剤は有機化合物であってもよいし、その他の化学薬品であってもよい。作用剤には、天然であろうとなかろうと、いかなる好適な供給元から入手可能であってもよく、又は供給元によって製造されてもよい化合物が挙げられるが、これに限定されない。作用剤は、アミノ酸配列（すなわち、ペプチド又はポリペプチド）又はその化学的誘導体、又はその組み合せであることができる。作用剤はさらにヌクレオチド配列であってもよく、それはセンス配列であってもアンチセンス配列であってもよい。
【０１０５】
作用剤は阻害剤及び／又は拮抗剤として作用してもよい。
【０１０６】
作用剤は、ペプチド、並びに鉛化合物のような、小型有機分子のような、その他の化合物を含んでもよい化合物のライブラリから設計してもよいし、又は入手してもよい。
【０１０７】
一例として、作用剤は、天然の物質、生物巨大分子、又は細菌、真菌又は動物（特に哺乳類）の細胞又は組織のような生物材料から作製した抽出物、有機分子又は無機分子、合成作用剤、半合成作用剤、構造模倣体又は機能模倣体、ペプチド、ペプチドミメティクス、誘導体化作用剤、タンパク全体から切断したペプチド又は（一例としてペプチドシンセサイザー又は組換え技術のいずれかを用いて）合成的に合成したペプチド又はそれらの組み合わせ、組換え作用剤、抗体、天然又は非天然の作用剤、融合タンパク又はその同等物及び突然変異体、その誘導体又はその組み合わせであってもよい。
【０１０８】
将来、例えば、低分子量の有機分子のような、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを調節することができるさらなる化合物が発見されることが熟考される。
これらは本発明の範囲内であるとみなされる。
【０１０９】
作用剤は、例えば、その水和物を含む酸付加塩又は塩基塩−またはその溶媒和物のような薬学上採択し得る塩の形態であってもよい。好適な塩の概略については、ベルゲ（Ｂｅｒｇｅ）らのジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンス（Ｊ．Ｐｈａｒｍ，Ｓｃｉ．），６６：１〜１９（１９７７年）を参照のこと。
【０１１０】
本発明に使用するための作用剤は、さらにその他の治療特性を示すことが可能であってもよい。
【０１１１】
１又はそれより多くの薬学上活性のある作用剤との併用で作用剤を用いてもよい。
【０１１２】
活性の作用剤を組み合わせて投与する場合には、同時に投与しても、分けて、もしくは順次的に投与してもよい。
【０１１３】
作用剤は立体異性体や幾何異性体として存在してもよく−例えば、それらは、１又はそれより多くの非対称性中心や幾何中心を持ってもよく、従って２以上の立体異性体の形態や幾何形態で存在してもよい。本発明はそれらの作用剤の個々の立体異性体及び幾何異性体及びそれらの混合物すべての使用を熟考する。前記形態が適当な機能的活性を保持していることを条件として（必ずしも同程度必要ではないが）、クレームで使用される用語はこれらの形態を包含する。
【０１１４】
本発明で使用するための作用剤は、特に、作用剤が低分子量の有機分子である場合、薬学上採択し得る塩の形態で投与されてもよい。
【０１１５】
薬学上採択し得る塩は、当業者に周知であり、例えば、ベルゲ（Ｂｅｒｇｅ）らによってジャーナル・オブ・ファーマシューティカル・サイエンス（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ），６６：１〜１９，１９７７年に言及されたものを含む。好適な酸付加塩は非毒性の塩を形成する酸から形成され、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、蟻酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩及びｐ−トルエンスルホン酸塩が挙げられる。
【０１１６】
１又はそれより多くの酸性部分が存在する場合、薬学上採択し得る塩基付加塩は、非毒性の塩を形成する塩基から形成することができ、それには、アルミニウム塩、カルシウム塩、リチウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩、およびジエタノールアミン塩のような薬学上活性のあるアミン塩が挙げられる。
【０１１７】
本発明で使用するための作用剤の薬学上採択し得る塩は、作用剤の溶液と所望の酸又は塩基を適宜一緒に混合することによって容易に調製されてもよい。塩は、溶液から沈殿してもよく、ろ過によって集められてもよく、溶媒の蒸発によって回収されてもよい。
【０１１８】
本発明で使用するための作用剤は多型の形態で存在してもよい。
【０１１９】
本発明で使用するための作用剤はプロドラッグに由来してもよいことは当業者によって十分に理解されるであろう。プロドラッグの例には、特定の保護基を有し、そのままでは薬学上の活性を持たなくてもよいが、特定の例では、投与されてもよく（例えば、経口的に又は非経口的に）、その後、体内で代謝されて薬学上活性のある本発明の作用剤を形成する構成要素が挙げられる。
【０１２０】
例えば、エイチ・ブンドガード（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ）により「プロドラッグの設計」（エルセビア（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）、１９８５年）（その開示を参考として本明細書に組み入れる）の中で記載されている「プロ部分」として知られる特定の部分が、作用剤の適当な官能基の上に置かれてもよい。このようなプロドラッグもまた本発明の範囲内に包含される。
【０１２１】
本発明はまた、本発明で使用するための作用剤の双性イオンの形態の使用も包含する。クレームで使用される、作用剤という用語は、上記形態の１又はそれより多くを包含する。
【０１２２】
本発明はまた、本発明で使用するための作用剤の溶媒和物の形態も包含する。クレームで使用される用語はこれらの形態を包含する。
【０１２３】
本発明はまた、本発明で使用するための作用剤のプロドラッグ形態の使用を包含する。クレームで使用される用語はこれらの形態を包含する。
【０１２４】
本明細書で使用するとき、用語「ミメティック（模倣体）」は、ペプチド、ポリペプチド、抗体又は参照作用剤と同じ質的活性又は効果を有するその他の有機化学薬品を含むが、これに限定されないいかなる化学薬品にも関する。
【０１２５】
本明細書で使用するとき、用語「誘導体」又は「誘導体化される」は、作用剤の化学的修飾を包含する。該化学的修飾の例は、ハロ基、アルキル基、アシル基又はアミノ基による水素の交換である。
【０１２６】
本発明の実施態様の１つでは、作用剤は化学的に修飾された作用剤であってもよい。
【０１２７】
本発明の作用剤の化学的修飾は、作用剤と標的との間に生じる水素結合の相互作用、電荷相互作用、疎水性相互作用、ファン・デル・ワールス相互作用又は双極相互作用を、高めても低下させてもよい。
【０１２８】
本発明は、また、本発明で使用するための、治療上有効量の作用剤、薬学上採択し得るキャリア、希釈剤、賦形剤（その組み合せを含む）を含む医薬組成物も提供する。
【０１２９】
医薬組成物は、医学及び獣医学においてヒト又は動物に使用するためであってもよく、通常、１又はそれより多くの薬学上採択し得る希釈剤、キャリア、賦形剤を含む。治療上の用途で採択し得るキャリアや希釈剤は薬学技術では周知であり、例えば、レミングトン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ）の製剤科学、（マックパブリッシング（Ｍａｃｋ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ）　ＣＯ．，　エイ・アール・ゲナロ（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ）編、１９８５年）に記載されている。医薬品のキャリア、賦形剤、希釈剤は、意図する投与経路及び標準的な製剤習慣に関して選択することができる。医薬組成物は、キャリア、賦形剤、希釈剤として、又はそれに加えて、いかなる好適な結合剤、潤滑剤、懸濁剤、被覆剤、可溶化剤を含んでもよい。
【０１３０】
防腐剤、安定剤、染料及びフレーバ剤が医薬組成物に提供されてもよい。防腐剤の例には、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステル類が挙げられる。抗酸化剤及び懸濁剤も用いてもよい。
【０１３１】
これらは、異なった送達システムによって異なった組成／製剤の必要要件であってもよい。一例として、本発明の医薬組成物は、ミニポンプを用いて、又は例えば鼻内スプレーや、吸入又は摂取可能な溶液のエアゾールとして粘膜経路によって、被経口的に投与されるように配合されてもよいし、組成物が、例えば、静脈内、筋肉内又は皮下の経路で送達されるように注射可能な形態に、被経口的に投与されるように配合されてもよい。
【０１３２】
もう１つの方法として、配合は、多数の経路により投与されるように設計されてもよい。
【０１３３】
作用剤が、消化管の粘膜を介して粘膜経由で投与されるべき場合、作用剤は消化管を通過する間、安定状態を保つことができなければならず；　例えば、それは、タンパク分解の消化に耐性であり、酸性ｐＨに安定であり、胆汁の界面活性効果に耐性であるべきである。
【０１３４】
適当な場合、医薬組成物は、吸入により、座薬又はペッサリーの形態で、ローション、溶液、クリーム、軟膏又は微粉末の形態で局所的に、皮膚貼付剤の使用によって、デンプン又はラクトースのような賦形剤を含有する錠剤の形態で、又は単独又は賦形剤との混合でカプセル又は胚珠（ｏｖｕｌｅ）にて、又はフレーバ剤又は着色剤を含有するエリキシル、溶液又は懸濁液の形態にて経口的に投与することができるし、例えば、静脈内に、筋肉内に又は皮下に、非経口的にそれらを注射することもできる。非経口投与については、組成物は、例えば、溶液を血液と等張にするために十分な塩又は単糖類のようなその他の物質を含有して無菌の水溶液の形態で良好に使用されてもよい。頬内又は舌下の投与については、従来の方式で配合することができる錠剤又はロゼンジの形態で組成物を投与してもよい。
【０１３５】
実施態様によっては、本発明の作用剤はまたシクロデキストリンと組み合わせて用いてもよい。シクロデキストリンは薬剤分子と封入及び非封入の錯体を形成することが知られている。薬剤−シクロデキストリン錯体の形成は、薬剤分子の溶解性、溶解速度、生物利用性及び／又は安定特性を改変してもよい。
薬剤−シクロデキストリン錯体は一般に、ほとんどの投与形態及び投与経路について有用である。薬剤との直接的錯体化の代替として、シクロデキストリンは、例えば、キャリア、希釈剤又は溶解剤、補助添加剤として用いられてもよい。アルファ−、ベータ−及びガンマ−シクロデキストリンが最も一般的に用いられており、好適な例は、ＷＯ−Ａ−９１／１１１７２、ＷＯ−Ａ−９４／０２５１８及びＷＯ−Ａ−９８／５５１４８に記載されている。
【０１３６】
作用剤がタンパク質であれば、前記タンパク質は被験者が治療される本来の位置（ｉｎ　ｓｉｔｕ）で調製されてもよい。この点では、前記タンパク質をコードするヌクレオチド配列を、前記タンパク質が前記ヌクレオチド配列から発現されるように、非ウイルス法の使用（例えば、リポソームの使用）やウイルス法の使用（例えば、レトロウイルスベクターの使用）によって送達してもよい。
【０１３７】
作用剤がアンチセンス剤であれば、それはいかなる好適な技法を用いて投与されてもよい。用語「投与される」は、ウイルス法又は非ウイルス法による送達を包含する。ウイルス送達機構には、アデノウイルスベクター、アデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、ヘルペスウイルスベクター、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター及びバキュロウイルスベクターが挙げられるが、これに限定されない。非ウイルス送達機構には、脂質介在の形質移入、リポソーム、免疫リポソーム、リポフェクチン、陽イオン面両親媒性物質（ＣＦＡ）及びそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１３８】
当該技術で周知の方法を用いてアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与してもよい。
【０１３９】
本発明の成分は単独で投与されてもよいが、例えば、成分が、意図する投与経路及び標準的な製剤習慣に関して選択された好適な製剤上の賦形剤、希釈剤、キャリアとの混合物にある場合には、一般に、医薬組成物として投与される。
【０１４０】
例えば、即時の、遅延の、改変した、持続的な、パルスの又は徐放性の適用のために、フレーバ剤又は着色剤を含有してもよい錠剤、カプセル、胚珠（ｏｖｕｌｅ）、エリキシル、溶液又は懸濁液の形態で成分を投与（例えば、経口的に又は局所的に）することができる。
【０１４１】
医薬品が錠剤であれば、そのとき、該錠剤は、例えば、微結晶性セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、第２リン酸カルシウム及びグリシンのような賦形剤、デンプン（好ましくは、トウモロコシ、ジャガイモ又はタピオカのデンプン）、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカメローズナトリウム及び特定の錯体珪酸塩のような崩壊剤、並びにポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、スクロース、ゼラチン及びアカシアのような造粒結合剤を含有してもよい。加えて、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリル及びタルクのような潤滑剤が包含されてもよい。
【０１４２】
ゼラチンカプセルの充填剤として、類似の型の固形組成物を用いてもよい。この点での好ましい賦形剤には、ラクトース、デンプン、セルロース、乳糖、又は高分子ポリエチレングリコール類が挙げられる。水性懸濁液やエリキシルについては、作用剤は、種々の甘味剤又はフレーバ剤、着色物質又は染料、乳化剤及び／又は懸濁剤、並びに例えば、水、エタノール、プロピレングリコール及びグリセリンのような希釈剤、並びにそれらの組み合わせと組み合わせられてもよい。
【０１４３】
投与（送達）経路には、経口（例えば、錠剤、カプセルとして、又は摂取可能な溶液として）、局所、粘膜（例えば、鼻内スプレー又は吸入用エアゾール）、鼻内、非経口（例えば、注射の形態によって）、消化管内、脊髄内、腹腔内、筋肉内、静脈内、子宮内、眼内、皮膚内、頭蓋内、気管内、膣内、脳血管内、脳内、皮下、眼科的（硝子体内、眼房内を含む）、経皮、直腸、頬内、膣、硬膜外、舌下の１又はそれより多くが挙げられるが、これに限定されない。
【０１４４】
作用剤が膣内にて送達されれば特に好ましい。作用剤が公知のような徐放性の技術を用いて送達されればまた好ましい。
【０１４５】
医薬品の成分のすべてが同一経路で投与される必要があるわけではないことを理解すべきである。同様に、組成物が１より多くの有効成分を含んでいれば、そのとき、それらの成分は異なった経路で投与されてもよい。
【０１４６】
本発明の成分が非経口で投与されるのであれば、例として、静脈内、動脈内、腹腔内、包膜内、心室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、又は皮下の１つまたはそれ以上に投与することや点滴技術を用いることが挙げられる。
【０１４７】
非経口投与については、例えば、溶液を血液と等張にするのに十分な塩又はグルコースのようなその他の物質を含有してもよい無菌の水溶液の形態にて、その成分は最良に用いられる。必要に応じて、水溶液を好適に緩衝すべきである（好ましくは、３〜９のｐＨに）。当業者に周知の標準的な製剤技術によって無菌条件下での好適な非経口製剤の調製は容易に達成される。
【０１４８】
本発明の成分は、鼻内に又は吸入によって投与することができ、乾燥粉末吸入器の形態で、又は、好適な高圧ガス、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、例えば、１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ＡＴＭ）又は１，１，１，２，３，３．３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ２２７ＥＡＴＭ）のようなヒドロフルオロアルカン、二酸化炭素又はその他の好適な気体の使用を伴う加圧した容器、ポンプ、スプレー又は噴霧器からのエアゾールスプレー提示の形態にて従来のように送達される。加圧されたエアゾールの場合、測定された量を送達するバルブを提供することによって投与量単位を決定してもよい。加圧した容器、ポンプ、スプレー又は噴射器は、例えば、ソルビタンチオレエートのような潤滑剤をさらに含有してもよい溶媒としてのエタノール及び高圧ガスの混合物を用いて、活性のある化合物の溶液又は懸濁液を含有してもよい。吸入器又は粉吹き器における使用のためのカプセル及びカートリッジ（例えばゼラチンから作られる）は、作用剤及びラクトース又はデンプンのような好適な粉末基剤の粉末ミックスを含有するように製剤されてもよい。
【０１４９】
もう１つの方法としては、本発明の成分は、座薬又はペッサリーの形態で投与することができるし、ゲル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏又は微粉末の形態にて局所的に投与してもよい。本発明の成分はまた、例えば、皮膚貼付剤の使用によって皮膚に又は経皮的に投与されてもよい。肺又は直腸の経路によってもそれらを投与してもよい。眼の経路によってもそれらを投与してもよい。眼科的用途については、等張のｐＨを調整した無菌の生理食塩水中の微粉懸濁液として、又は、好ましくは、等張のｐＨを調整した無菌の生理食塩水中の溶液として、任意には塩化ベンジルアルコニウムのような防腐剤と組み合わせて、成分を配合することができる。もう１つの方法として、ペトロラタムのような軟膏においてそれらを配合してもよい。
【０１５０】
皮膚に局所的に適用するには、本発明の成分は、例えば以下の：鉱物油、ワセリン液、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス及び水の１又はそれより多くの混合物に懸濁される又は溶解される有効化合物を含有する好適な軟膏として配合することができる。もう１つの方法としては、例えば以下の：鉱物油、ソルビタンモノステアレート、ポリエチレングリコール、流動パラフィン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水の１又はそれより多くの混合物に懸濁されるか溶解される好適なローション又はクリームとして配合することができる。
【０１５１】
通常、個々の被験者に最も好適である実際の投薬量は医師が決定する。いかなる特定の患者についても、具体的な服用レベル及び投薬頻度は変化し、用いられる具体的な化合物の活性、その化合物の代謝安定性及び作用の長さ、年齢、体重、一般的健康状態、食事、投与様式及び時間、排出速度、併用薬剤、特定の症状の重症度、及び受けている個々の治療法などの様々な要因に依存する。
【０１５２】
本発明の成分は、公知である技法を用いることによって１又はそれより多くの好適なキャリア、希釈剤、賦形剤と混合することによって医薬組成物に配合することができる。
【０１５３】
作用剤が女性の生殖器官に送達するように適合されれば特に好ましい。従って、好ましくは、作用剤は膣内的に子宮頸部に送達するよう適合される。好適には、作用剤は膣投与のためのペッサリー内に含まれ、又は膣内的に子宮頸部に投与するのに好適なゲルに配合される。通常、膣リングを投与に用いてもよい。
【０１５４】
女性の生殖器官へ送達するためのその他の好適な適合は、当業者によって容易に予見される。例えば、作用剤でタンポンをコーティングすることが望ましいだろう。抗体及びＣＤ４０変異体ＣＤ４０Ｌ変異体のようなタンパク質作用剤については、作用剤が投与部位に到達するまで作用剤を保護するリポソーム又はその他の送達ビヒクルの中にそれが含有されれば好ましい。
【０１５５】
好ましくは、作用剤は、例えば、皮膚貼付剤を用いることによって末梢血を介して女性の生殖器官に送達される。
【０１５６】
作用剤は経口によって送達されてもよい。通常、作用剤がタンパク質作用剤であれば、脂質複合体にて送達されるか、又は長鎖エステルのような疎水基に取り付けられる。
【０１５７】
本発明のさらなる態様は、女性の生殖器官の障害に対する個人の素因に関するスクリーニング法を提供し、該方法は、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの少なくとも一方の核酸又はタンパク質を含有する試料を個人から入手することと、ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの少なくとも一方の核酸又はタンパク質が女性の生殖器官に障害を及ぼす素因を示す量や濃度で、又は形態で存在するかどうかを判定することを含む。
【０１５８】
個人から入手される試料は好適な材料であり、通常、核酸とタンパク質の少なくとも一方を含有する試料（例えば、組織試料）である。核酸及びタンパク質の双方を含有する好適な試料は個人からの有核細胞である。細胞は個人の生殖器官のものであってもよいが、そうでなくてもよい。例えば、遺伝的試験が適用される場合、白血球細胞がスクリーニングにおいて有用であろう。ピペット（英国、ユーロサージカルリミテッド（Ｅｕｒｏｓｕｒｇｉｃａｌ　Ｌｉｍｉｔｅｄ）、ザコモンクランレイ（Ｔｈｅ　Ｃｏｍｍｏｎ　Ｃｒａｎｌｅｉｇｈ））を用いて、子宮内膜の生検にて組織試料を入手できよう。
【０１５９】
「ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの少なくとも一方の核酸又はタンパク質が、女性の生殖器官に障害を及ぼす素因を示す量や濃度で、又は形態で存在するかどうかを判定すること」によって、我々は、試料中のＣＤ４０又はＣＤ４０Ｌのタンパク質又はｍＲＮＡの量や濃度を決定し、その量や濃度を対照のそれと比較する意味がある。
【０１６０】
通常、個人の子宮内膜間質細胞においてＣＤ４０が発現しているかどうか、どの程度発現しているかについて調査を行うことができる。
【０１６１】
対照は、感受性であることが判っている個人のものでもよいし、感受性でないことが判っている個人のものであってもよい。もう１つの方法としては、対照は、感受性又は感受性の欠如に関するタンパク質ｍＲＮＡの量（又は濃度）を記録している「参照」データポイントや表の形態であってもよい。
【０１６２】
我々はまた、核酸又はタンパク質の形態を決定すること及び対照との比較によって、形態が感受性に関係するものであるか、又は感受性の欠如に関係するものであるかを決定することを有する。タンパク質の異なった形態を測定するのは可能であるけれども、ＤＮＡの形態が決定されれば（すなわち、多型の状態が決定されれば）好ましい。従って、例えば、方法は、ＣＤ４０やＣＤ４０Ｌの遺伝子の中で１又はそれより多くのヌクレオチドの位置にて、どの塩基が存在し、感受性又はその欠如に相関しているのかを決定することを包含する。
【０１６３】
試料中のタンパク質又はｍＲＮＡの定量は、例えば、ＥＬＩＳＡ（タンパク質用）及び定量用逆転写ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）又はｍＲＮＡ用のノーザンブロットのようないかなる好適な方法によって測定してもよい。
【０１６４】
例えば、ウエスタンブロットによってタンパク質の形態の決定を行ってもよい。
【０１６５】
例えば、ＤＮＡの配列決定によって、又は例えば、制限断片長多型（ＲＦＬＰ）の決定又は単一ヌクレオチド多型（ＳＮＰ）の解析のような周知の方法を用いることによってＤＮＡの形態の決定を行うことができる。
【０１６６】
好適な起源から対照試料を入手することができる。例えば、パラメータ（すなわち、核酸又はタンパク質の量や濃度、又はその形態）を障害のある個人と相関させることによって参照データポイント又は表を容易に作成することができる。必要に応じて過去に遡ってこれを行うことができる。
【０１６７】
月経機能不全、早期分娩又は子宮内膜症のいずれか１つに対する素因を決定するのにスクリーニング法は有用であり；好ましくは、子宮内膜症に対する素因を判定するのにそれを用いる。
【０１６８】
特に好ましい実施態様では、個人のＣＤ４０やＣＤ４０Ｌの遺伝子の多型を評価することによって子宮内膜症に対する素因を判定する。ＣＤ４０及びＣＤ４０Ｌの遺伝子に相当する相補的ＤＮＡは、それぞれ、ジェンバンク受入番号Ｎｏ．Ｘ６０５９２及びＮｏ．Ｚ１５０１７に記載されている。
【０１６９】
（実施例）
以下の説明は、本発明の一例として記載され、その中においてのみ、参照は以下の図について行われる：
写真を提示する図１
グラフを提示する図２
写真を提示する図３
写真を提示する図４
グラフを提示する図５
さらに詳しくは
【０１７０】
図１は、組織外植片からの線維芽細胞の増生（暗領域）を示し、（Ａ）子宮筋層株５（ｘ１００）、（Ｂ）子宮内膜株９（ｘ１００）、（Ｃ）子宮筋層株５（ｘ２００）、（Ｄ）子宮内膜株９（ｘ２００）である。
【０１７１】
図２は、ＩＦＮγ処理の際の線維芽細胞のＣＤ４０発現の上方調節を示す。抗ＣＤ４０モノクローナル抗体（明るい灰色のヒストグラム）又は等モル濃度のマウスＩｇＧ１（アイソタイプ対照；黒色のヒストグラム）と共に線維芽細胞をインキュベートした。マウスＩｇＧ１と共にインキュベートしたものに比べて無処理の線維芽細胞では低レベルのＣＤ４０が検出された（四角の中の％を参照）。７２時間のＩＦＮγによる処理はＣＤ４０の発現を高めた（四角の中の％を参照）。データは、子宮内膜（Ｅ８）、子宮筋層（Ｍ２）及び子宮頸部（ＣＸ−ＮＵ）の線維芽細胞について示す。
【０１７２】
図３は、ヒトの子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部におけるＣＤ４０の免疫組織化学的局在を示す。
【０１７３】
図４の写真は、子宮内膜／子宮筋層の境界におけるＣＤ４０の血管周囲の分布を示す。
【０１７４】
図５は、線維芽細胞によるケモカインの放出及び脱落膜化の有無を示す。
【０１７５】
一般的序論
ＣＤ４０は、当初、造血系系列の細胞で発見された細胞表面受容体である。免疫担当細胞におけるその主要な役割は、それらの活性化、ならびに、サイトカイン及び免疫調節分子の産生を増強することである。最近、ＣＤ４０はヒトの線維芽細胞でも検出された。線維芽細胞の新しい見解は、それは構造的細胞よりもはるかに、免疫システムの細胞と密接な相互作用が可能であるということである。いくつかの組織における線維芽細胞では、ＣＤ４０とそのリガンド（ＣＤ４０Ｌ）との会合によってＩＬ−６及びＩＬ−８のような炎症誘発性分子の分泌を生じる。現在、女性の生殖器官におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの存在に関するデータはほとんどない。本研究は、本来の位置（ｉｎ　ｓｉｔｕ）及び組織外植片に由来する線維芽細胞の両方において、ヒトの子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部によるＣＤ４０の発現について調べる。ＣＤ４０は主として子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部の血管周囲領域で検出された。ＣＤ４０の光染色は、間質要素に認められた。さらに、子宮頸部の基底上皮はＣＤ４０を発現していた。３つの箇所に由来する線維芽細胞は３つの箇所すべてで低レベルのＣＤ４０を発現しており、これは、インターフェロン−γ処理（５００Ｕ／ｍｌ；７２時間）によって上方調節される。これらのデータは、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムが、これらの生殖器官にもともと存在する構造的細胞とＣＤ４０Ｌを発現している可能性があって浸潤している免疫担当細胞又は活性化された血小板との連鎖を提供する可能性を示唆している。ヘン（Ｈｅｎｎ）らは、１９９８年に、ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），３９１：５９１−５９４において、活性化された血小板におけるＣＤ４０Ｌの発現を明らかにしている。ＣＤ４０がＣＤ４０Ｌと相互作用する可能性は、月経及び頚管熟化のような事象の間特に重要であり、そのような場合、炎症誘発性分子であるＩＬ−６及びＩＬ−８の上方調節がこのような過程の臨界としてみなされている。さらに、このシステムの調節不全が、月経機能不全や早期分娩のような問題に対する有力な要因となろう。
【０１７６】
詳細な序論
女性の生殖器官の正常な機能性、例えば、月経、頚管熟化及び分娩は、炎症様の反応に関係している（１）。これらの過程は炎症性メディエータの発現の上昇、白血球浸潤および組織の分解を特徴とする。また、おそらく、炎症性経路の不適当な活性化が、早期分娩や月経機能不全のような病態生理的状況に関与すると思われる。
【０１７７】
サイトカインであるインターロイキン−６（ＩＬ−６）及びケモカインであるインターロイキン−８（ＩＬ−８；主として好中球を誘引する）及び単球化学誘引ペプチド１（ＭＣＰ−１；主として単球を誘引する）は、おそらく、女性の生殖における決定的なメディエータであると思われる。ＩＬ−８及びＭＣＰ−１の発現は、月経周期の分泌期後期で上昇するが（２）、ＩＬ−６の発現は、分泌期中期に明らかになり、分泌期後期及び月経期に徐々に上昇する（３）。このことは、月経におけるこれらメディエータの役割を示唆している。子宮頸部では、ＩＬ−８の産生は、熟化と密接に関係しており（４）、ＰＧＥ２との相乗作用が報告されている（５）。分娩も炎症性メディエータの発現の上方調節に関与しており、ＩＬ−６は特に早期分娩に関連している（６）。プロゲステロンもおそらく、生殖組織における炎症性メディエータ発現の制御に関与していると思われ、プロゲステロン離脱モデルは子宮内膜におけるケモカイン発現の上昇を示した（７）。しかしながら、この上方調節を誘発する分子機序は不明のままである。
【０１７８】
ＣＤ４０は、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦα）受容体ファミリーの一員であり、Ｂリンパ球（８）、単球、血管内皮細胞（９）及び上皮細胞の一部（１０）を含む数種の細胞で発現されている。ＣＤ４０に対する内因性リガンドであるＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）は、活性化Ｔ細胞、肥満細胞（１１）、好酸球（１２）及び好塩基球（１１）で見出されている。興味深いことに、血小板は、予備形成されたＣＤ４０Ｌの細胞内プールを有し、それは活性化によって表面に発現される（１３）。ＣＤ４０−ＣＤ４０ＬシステムはＢ細胞−Ｔ細胞のシグナル伝達に関与しており（１４）、また、非造血系細胞の活性化においても重要であることが見出されている。例えば、ＣＤ４０は最近、ヒトの幾つかの部位に由来する線維芽細胞上に見出され、インターフェロン−γ（ＩＦＮγ）処理がこれらの細胞におけるＣＤ４０の発現を上方調節する（１５、１６）。線維芽細胞の一部の型でＣＤ４０を活性化すると炎症誘発性サイトカインＩＬ６及びＩＬ−８の上方調節を生じる（１６−１８）。
【０１７９】
最近、子宮頸癌の扁平上皮においてＣＤ４０が検出されたが（１９）、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムは、ヒトの正常な子宮内膜及び子宮筋層では研究されてこなかった。生殖系組織におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの存在は、もともとそこにある構造的細胞と浸潤してきた免疫担当細胞との間の鍵となる連鎖を提供しうる。このような連鎖がおそらく、生理的な及び病態生理的な生殖事象の双方に関わる炎症様反応に関与すると思われる。本研究はヒトの子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部におけるＣＤ４０の発現を調べる。
【０１８０】
材料と方法
組織採取
良性の症状で産婦人科の処置を受けている女性から、子宮内膜の生検（ｎ＝２４）と、子宮筋層の生検（ｎ＝２６）と、妊娠していない子宮の頸部（ｎ＝３）の生検を採取した。女性はすべて定期的な月経周期（２５〜３５日）を有し、生検の前３ヶ月間はいかなるホルモン療法も受けていなかった。子宮内膜生検は、月経周期を通して（増殖期、ｎ＝１０；分泌期早期〜中期、ｎ＝８；分泌期後期、ｎ＝３）採取した。ノイエス（Ｎｏｙｅｓら）（２０）に基づいた組織学的日付決定及び循環しているプロゲステロンのレベルはすぐ前の月経期間の日付に一致した。頸部の生検は、頸部の前部穴のふち領域から採取した。妊娠女性からの頸部生検（ｎ＝８）は、妊娠３ヶ月の間に未経産の患者から採取した。
【０１８１】
［生検採取に先立って患者のすべてから文書によるインフォームドコンセントを受け取った。倫理的承認は、ロージアンリサーチ（Ｌｏｔｈｉａｎ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ）倫理委員会及びカロリンスカ（Ｋａｒｏｌｉｎｓｋａ）病院の倫理委員会から受領した。］
【０１８２】
免疫組織化学
室温にて１０分間、中性緩衝ホルマリン（ＮＢＦ）にて凍結組織切片を軽く固定した。室温にて１０分間、蒸留水中３％の過酸化水素（英国、プールのＢＨＤラボラトリーサプライズ）によって内因性のペルオキシダーゼ活性をブロックした。室温にて湿潤箱において２０分間、希釈した正常ウマ血清（ベクタスタイン（Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ）４００２；英国、ピーターバラのベクターラボラトリーズ）を組織切片に適用した。４℃にて一晩、５０μｌのマウス抗ＣＤ４０抗体（Ｇ２８−５、ウマ血清で希釈（２１、２２））とともに組織切片をインキュベートした。陰性対照切片では、１次抗体を等モル濃度のマウス免疫グロブリン（ベクターラボラトリーズ）に置き換えた。ビオチン化したウマ抗マウス免疫グロブリン（ベクターラボラトリーズ）、次いでアビジン−ビオチンペルオキシダーゼ検出システム（双方共、室温にて６０分間；エリート（Ｅｌｉｔｅ）ＡＢＣ６１０１；ベクターラボラトリーズ）と共に、切片をインキュベートした。ペルオキシターゼの基質、ジアミノベンジジン（ＤＡＢ、ベクターラボラトリーズ）を用いて陽性の染色を同定した。切片をハリス（Ｈａｒｒｉｓ）のヘマトキシリン（英国、コールチェスターのパイオニアリサーチケミカルズ社）で対比染色し、上級アルコールで脱水し、キシレンからペルテックス（Ｐｅｒｔｅｘ）（英国、ハムステッドのセロパス（Ｃｅｌｌｏｐａｔｈ）ｐｌｃヘメル（Ｈｅｍｅｌ））に包埋した。結果を図４に示す。
【０１８３】
線維芽細胞染色の導出
子宮内膜の外植片と子宮筋層の外植片を完全培地、すなわち、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ；英国、テディングトン、マイコプレックス（Ｍｙｃｏｐｌｅｘ）ＰＡＡラボラトリーズ）、ペニシリン（５０μｇ／ｍｌ；シグマ）、ストレプトマイシン（５０μｇ／ｍｌ；シグマ）及びゲンタマイシン（５μｇ／ｍｌ；シグマ）を補完したＲＰＭＩ１６４０（英国、ドーセット州、プールのシグマ）中で培養した。子宮頸部の線維芽細胞は、１０％の供与ウシ血清を補完したＭＥＭ中で樹立し、次いで、上記のように培養した。組織をおよそ１ｍｍ３に切断した。次いで、直径１００ｍｍの組織培養用ディッシュ（英国、ハイウィカムのコーニングコースター）におけるガラス製のカバースリップの下に外植片を置き、以前記載したように（１５、１８）個々の組織から線維芽細胞の増生を生じた。場合によっては、ジスパーゼＩＩ（２．４Ｕ／ｍｌ；英国、ルイスのベーリンガーマンハイム）で３７℃にて４５分間、組織を消化し、得られた細胞浮遊液を２５ｃｍ２の培養フラスコ（コーニングコースター）で培養した。双方の技法で線維芽細胞の染色を得（内膜　ｎ＝３；筋層　ｎ＝５；頸部　ｎ＝３）、線維芽細胞染色を作成する効率という点では差異は見られなかった。線維芽細胞の染色は、Ｅ（内膜）、Ｍ（筋層）又はＣＸ（頸部）と命名して、その組織起源を記載し、続いて、研究追跡目的で番号を付け、書き込みを行った。免疫染色は、ビメンチン陽性でしかしＣＤ４５とサイトケラチンには陰性である細胞を示した。これは線維芽細胞の表現型に一致する。細胞はまた線維芽細胞のマーカーであるＴｈｙ−１も発現していた。実験に用いた細胞はすべてできるだけ早い世代のものであった。
【０１８４】
フローサイトメトリー及び免疫蛍光法
ヒトのインターフェロン−γ（５００Ｕ／ｍｌ；英国、ロンドンのペプロテック（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ））の有無で３７℃にて７２時間、線維芽細胞を培養した。細胞を軽くトリプシン処理し、洗浄し、次いで０．１％のアジド及び１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を補完したＰＢＳ中に再浮遊した。トリプシンによる迅速な処理は、細胞から感知できるほどＣＤ４０を切断しない（１７）。次いで、細胞（１ｘ１０６）を氷上で抗ヒトＣＤ４０（Ｇ２８−５）と共に３０分間インキュベートした。陰性対照として、マウスＩｇＧ又はマウスＩｇＧ１（シグマ）を用いた。細胞を洗浄し、次いで、フルオレセインを結合した（ＦＩＴＣ）ヤギ抗マウスＩｇ（１：１００希釈；カリフォルニア州、コスタメサのカッペル（Ｃａｐｐｅｌ）ＩＣＮバイオメディカル）と共に氷上にて３０分間、インキュベートした。洗浄した後、ＰＢＳ＋０．１％アジド＋１％ＢＳＡに細胞を再浮遊した。コールターモデルＸＬフローサイトメータにて解析を行った。イムノ−４−プログラム（フロリダ州、ハイアリーアのコールターエレクトロニクス）を用いてデータ解析及びサブトラクションを完了した。
【０１８５】
線維芽細胞におけるＣＤ４０の発現を免疫蛍光により本来の場所（ｉｎ　ｓｉｔｕ）でも調べた。細胞を８穴のチャンバースライドで培養し、続いて上記のように抗ヒトＣＤ４０とＦＩＴＣヤギ抗マウスＩｇで染色した。オリンパスプロビス（Ｐｒｏｖｉｓ）システムを用いた標準免疫蛍光及びツァイス（Ｚｅｉｓｓ）ＬＳＭ５１０レーザー走査顕微鏡によって線維芽細胞を調べた。
【０１８６】
結果
ヒトの子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部におけるＣＤ４０の局在
免疫組織化学によって、調べた子宮内膜生検すべて（ｎ＝２１）の血管周囲領域においてＣＤ４０に対する陽性の免疫反応性が明らかにされた。ＣＤ４０を発現している血管の周りの領域は数層の細胞の深さであった。これらの細胞を筋線維芽細胞と名付けた（２５）。特に間質の基底領域及び腺下領域における線維芽細胞様細胞の一部に中程度の免疫染色も存在した（図３ａ）。生検の中には、極めてかすかな上皮の染色及び明白な白血球のＣＤ４０発現が認められるものもあった。月経周期を通してＣＤ４０の染色に有意差はなかった。
【０１８７】
子宮筋層では（ｎ＝２１）、陽性の免疫反応性は血管周囲領域に認められ、場合によっては間質の線維芽細胞にかすかな免疫染色も見られた（図３ｃ）。
【０１８８】
子宮頸部の生検（ｎ＝８）の免疫染色も血管の周り及び間質細胞の一部に局在するＣＤ４０を示した。加えて、子宮内膜とは対照的に、基底上皮において強い陽性の免疫反応が存在した。表面の上皮はＣＤ４０を発現していなかった（図３ｅ）。このことは、ヒトの皮膚における所見に類似しており、皮膚では、真皮線維芽細胞と基底上皮がＣＤ４０を発現している（１０）。
【０１８９】
図３は、ヒトの子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部におけるＣＤ４０の免疫組織化学的局在を示す。挿入写真はすべて強拡大での血管を示す。矢印は血管の位置を示す。核はヘマトキシリンで対比染色した。尺度棒は主写真で５０μｍであり；挿入写真で２０μｍである。（Ａ）分泌期初期の子宮内膜（プロゲステロンレベル；３９．７１ミリモル／Ｌ）。免疫反応性は、血管周囲領域及び間質細胞の一部に存在する。ごくわずかな免疫染色のみが腺上皮に存在する。（Ｂ）子宮内膜。陰性対照。１次抗体を等モル濃度にてマウスの免疫グロブリンに置き換えた。（Ｃ）子宮筋層。ＣＤ４０は血管周囲の細胞に存在する。かすかな免疫染色が間質細胞の一部にも見出される。（Ｄ）子宮筋層。陰性対照。（Ｅ）子宮頸部（妊娠６５日）。ＣＤ４０の免疫反応性は血管周囲領域、間質細胞の一部及び基底上皮に見出される。ＣＤ４０は表面上皮には存在しない。（Ｆ）子宮頸部。強拡大で示された基底上皮及び血管。（Ｇ）子宮頸部。陰性対照。（Ｈ及びＩ）ＩＦＮγで処理した子宮内膜の線維芽細胞株におけるＣＤ４０染色。子宮内膜の線維芽細胞株のＥ８株をＩＦＮγの有無で７２時間処理した。次いで、アイソタイプを制御した抗体又は抗ＣＤ４０抗体であるＧ２８−５、続いてＦＩＴＣ標識した抗ヤギ抗マウスＩｇによって細胞を染色した。画像は細胞の面のコントラストも示す。これらの画像は、ＣＤ４０の表面染色パターンを示す。ＩＦＮγで処理していない細胞は、ＩＦＮγで処理した線維芽細胞に比べて弱い染色を示した（データは示さず）。これらの結果は図２におけるフローサイトメトリーのデータを反映した。
【０１９０】
子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部におけるＣＤ４０の発現
ヒトの線維芽細胞の株は、子宮内膜（ｎ＝３）、子宮筋層（ｎ＝５）及び子宮頸部（ｎ＝３）の外植片に由来した。得られた細胞（図１）は形態的に線維芽細胞の表現型と一致し、線維芽細胞のマーカーであるＴｈｙ−１及びビメンチン（データは示さず）を発現していた。これらの細胞はまた、上皮マーカーであるサイトケラチン及び骨髄由来の細胞のマーカーであるＣＤ４５を示すことができなかった。それらは形態的に内皮細胞に似ていなかった。細胞すべてが上で詳説される特徴を表示したということは、細胞集団が純粋であったことを示している。表面のＣＤ４０の発現をフローサイトメトリー及び免疫蛍光法によって測定した。フローサイトメトリーの解析により、子宮筋層の株９を除いてすべての株が少量のＣＤ４０を表示したことが明らかになった。月経周期の種々の時期に採取した生検に由来する線維芽細胞の株でのＣＤ４０の発現には一貫した差異は認められなかった。図２は、内膜８（Ｅ８）、筋層２（Ｍ２）及び頸部ＮＵ（ＣＸ−ＮＵ）の線維芽細胞株に関する結果を示す。無処理の内膜線維芽細胞のおよそ８％がＣＤ４０を発現しているが、筋層の線維芽細胞の４％がその分子を表示した。頸部線維芽細胞の２２％がＣＤ４０を発現していた。ＩＦＮγで７２時間処理した後、これらの数字はそれぞれ、およそ３６％、２２％及び２７％に上昇した。一般に、ピーク全体がＣＤ４０増加の方向にシフトし、それは、線維芽細胞の大半がそのＣＤ４０の表示を上方調節していることを示唆していた。このことに関するさらなる証拠は、従来の顕微鏡と共焦顕微鏡を併せた本来の場で（ｉｎ　ｓｉｔｕ）の免疫蛍光法によって得られた。ＩＦＮγで処理していない細胞に比べて、ＩＦＮγで処理した線維芽細胞はほとんど表面の点状パターンの発現を伴ったＣＤ４０の上方調節を示した（図３ｈ及び３ｉ）
【０１９１】
線維芽細胞によるケモカインの放出及び脱落膜化の有無
線維芽細胞増殖因子及び１μＭ濃度での酢酸メドロキシプロゲステロンで強化した１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ培地にて５つの別個の子宮内膜間質細胞を増殖させた。ウエル当り５ｘ１０５個の細胞を培養し、８−ブロモ環状ＡＭＰ５ｘ１０−４Ｍ及びＭＰＡ（１ｘ１０−６Ｍ）により５日間で脱落膜化させた。培地中の細胞は培養２日目で変化した。インターフェロンγ（ＩＦＮγ）で処理した細胞を２０ｎｇ／ｍｌのＩＦＮγと共に４８時間培養し、次いで１０％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０にてそのまま２４時間増殖させた。ＣＤ４０リガンド（２０ｎｇ／ｍｌ）及びエンハンサ抗体（１００ｎｇ／ｍｌ）（双方共、ノッティンガムのアレクシス（Ａｌｅｘｉｓ）より）による処理を２４時間行った。細胞を生理食塩水で洗浄し、Ｔｒｉ試薬（ドーセット州、プールのシグマ）により回収し、製造元の説明書に従ってＲＮＡを抽出した。ＲＮＡをｃＤＮＡに逆転写し、定量ＰＣＲを用いて、脱落膜化及びＣＤ４０の発現を確認した。培養液を回収し、以前報告された（デニソン（Ｄｅｎｉｓｏｎ）、ケリー（Ｋｅｌｌｙ）ら、ジャーナル・オブ・リプロダクティブ・イムノロジー（Ｊ．Ｒｅｐｒｏ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），３４：２２５−２４０，１９９７年；デニソン（Ｄｅｎｉｓｏｎ）　グラント（Ｇｒａｎｔ）ら、モレキュラー・ヒューマン・リプロダクション（Ｍｏｌ．Ｈｕｍａｎ　Ｒｅｐｒｏ．），５：２２０−２２６，１９９８年）ようにＥＬＩＳＡによってＩＬ−８及びＭＣＰ−１を測定した。データは平均値±平均値の標準誤差（Ｎ＝５）として示す。結果を図５に提供する。
【０１９２】
考察
明らかになったパラダイムは、線維芽細胞は、構造的細胞を不活性化するときのみ役立つのではなく、免疫システムの細胞と相互作用し、それを制御するための鍵となる要素であるということである。線維芽細胞が、造血系細胞との相互作用ができる表面マーカーを発現し、免疫担当細胞の輸送を制御するケモカインも分泌するときにこれは達成される。以前、ＣＤ４０は、肺のような組織からのヒト線維芽細胞で検出された。線維芽細胞ＣＤ４０の会合は、強力な「活性化」段階として役立ち、ＩＬ−６及びＩＬ−８の合成を刺激した（１５、１７、１８）。我々は、初めて、ヒトの子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部からの線維芽細胞もまたＣＤ４０を発現していることを報告する。ＣＤ４０Ｌによる会合はこれらの線維芽細胞を「活性化」し、ＩＬ−８のようなサイトカインの合成を誘発する。これらの刺激的な知見は、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムが子宮の線維芽細胞における炎症誘発性サイトカインの発現の調節に関して、普遍的な機序を提供しているらしいことを示している。生殖系組織の線維芽細胞がその他の組織由来の線維芽細胞とは異なったサイトカインの独特なスペクトルを発現するかも知れない可能性はあるが、未だ不明である。
【０１９３】
炎症性機序（ケモカインの放出と免疫担当細胞の浸潤を伴う）が生殖系の生理では鍵となる要素なので、女性の生殖系組織おける本来の場所（ｉｎ　ｓｉｔｕ）で、生殖系組織に由来する新鮮な線維芽細胞株においてＣＤ４０を検出することは特に興味深い。我々は、ＣＤ４０の存在がもともとそこにある線維芽細胞と免疫担当細胞との相互作用を可能にすると提案している。従来、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの相互作用は細胞の接触を介して生じるとみなされている。しかしながら、我々のデータは、生殖器官では、相互作用は、可溶性ＣＤ４０Ｌ又は血小板（血小板）の表面におけるＣＤ４０Ｌを介している生じている可能性を排除していない。子宮内膜では、ＩＬ−８及びＭＣＰ−１の発現は月経に先立って血管周囲領域で高まる（２）。ＩＬ−８のｍＲＮＡ及びタンパク質の上方調節は、プロゲステロンの離脱モデルでも認められている（７）。血管周囲領域における免疫組織化学法によるＣＤ４０の検出は、これらのメディエータの上方調節を可能にする機序を示唆している。ＣＤ４０の発現は月経周期を通して一定のままではあるが、子宮内膜におけるＣＤ４０Ｌの存在は、月経時におそらく血小板の管外遊出が増加することを介して高まることが可能である。このことは、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムを介したシグナル伝達の増加を可能にする。加えて、月経周期の分泌期後期（２）及びプロゲステロン離脱後（７）ＣＯＸ−２の発現が血管周囲で高まり、これは、血管の透過性に影響を及ぼす可能性がある（コルディッツ（Ｃｏｌｄｉｔｚ）ら、イムノロジー・アンド・セルバイオロジー（Ｉｍｍｕｎｏｌ．ＣｅｌｌＢｉｏｌ．），６８：３９７−４０３，１９９０年を参照のこと）。肺の線維芽細胞を刺激するとＣＯＸ−２及びＰＧＥ２の発現の増加が起きるので（３１）、ＣＤ４０の活性化もこれに関与している可能性がある。血管周囲の細胞によるＣＤ４０の発現はまた、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムが月経中に生じる組織の改造（リモデリング）に寄与する可能性があることを示唆している。子宮内膜の血管周囲領域の細胞（脱落前の間質細胞）は、α−平滑筋アクチンを発現することが明らかにされている（２５）ので、おそらく筋線維芽細胞系列のものであると思われる。筋線維芽細胞は収縮活性を有し、創傷治癒に関与すると考えられている。ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムに関するもう１つの可能性のある興味深い役割は、頸管熟化及び分娩にある。ＩＬ−８の放出は、熟化の時、子宮頸部にて（４、３２）及び分娩中、筋層下位部分にて（３０）上昇する。
【０１９４】
生体内のＣＤ４０の活性化は、局所におけるＣＤ４０Ｌ発現細胞又は血小板の存在に依っている。生殖系組織に存在する数種の細胞がＣＤ４０Ｌを発現している可能性がある。子宮内膜では、月経周期を通してもともとＴ細胞、マクロファージ、及び肥満細胞が存在し、月経前には好酸球が出現し、分泌期中後期には子宮のＮＫ細胞が出現する（３４、３５）。分娩の開始時、Ｔ細胞及びマクロファージは子宮筋層に浸潤する。肥満細胞は妊娠中ずっと低レベルで存在するが、妊娠していない状態ではさらに高いレベルで存在する（３０）。熟化している子宮頸部では、肥満細胞及び好酸球（３６）が存在し、妊娠後期以降、マクロファージが存在する（３７）。感染時、出血時又は血管透過性が増した時、血小板もまた、生殖系組織に存在する可能性がある。
【０１９５】
生理的な生殖事象における生産的な役割に加えて、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムも関与する可能性がある病態生理的問題がある。月経の不正出血はおそらく子宮のメディエータの異常発現が関与していると思われる。例えば、子宮内膜及び子宮筋層の血管周囲領域に関わりを持つものが月経過多の原因になるかも知れないし、ＣＤ４０システムの調節障害が関与している可能性もありそうである。月経病理におけるＣＤ４０システムの重要性は、リガンドの該当する起源の同定に依存している。Ｔ細胞又は血小板が子宮内膜におけるそのシステムを活性化することができるかどうかを確定するにはさらなる研究が必要である。しかしながら、月経開始時の血液の管外遊出が大量の血小板をＣＤ４０発現部位の近傍に送達するのは明らかである。これらの血小板が、ＣＤ４０を活性化させるＣＤ４０Ｌを発現している可能性がある（１３）。その結果としてのサイトカインの発現が血管の透過性を調節し、従って、負のフィードバック調節因子として作用しうる。
【０１９６】
早期分娩は、特に感染の間、子宮腔における炎症誘発性サイトカインの発現の増加に関係している（６、３８）。子宮感染の間にＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムが活性化され、従って、サイトカインの上方調節に関与する可能性がある。最近、浸潤しているＴ細胞上のＣＤ４０Ｌと共に、子宮頚癌でＣＤ４０が検出された。ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌの相互作用が癌細胞におけるケモカイン発現の調節因子としての可能性があると示唆されたということは、ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムが生殖系の癌に関与している可能性があることを示している（１９）。
【０１９７】
現在、生物製剤を用いたＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの妨害は、鈍麻移植拒絶（３９）、肺傷害（４０、４１）及び自己免疫疾患（４２）で極めて効果があることが判明している。女性の生殖器官におけるＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの妨害が生殖系の障害を治療するのに有益であると判明する可能性がある。
【０１９８】
上記明細書で言及した出版物はすべて参考として本明細書に組み入れる。本発明の記載された方法及びシステムの種々の改変及び変化は、本発明の範囲及び精神から逸脱することなく当業者に明らかであろう。本発明は具体的な好ましい実施態様と併せて記載されてきたが、請求される本発明は、かかる具体的な実施態様に過度に限定すべきでないことを理解すべきである。実際、生化学及びバイオテクノロジー又は関連分野における、当業者に明白である、本発明の実施が記載された形態についての種々の改変は、クレームの範囲内であると意図される。
【０１９９】
ＣＤ４０−ＣＤ４０Ｌシステムの参考文献
１．アシマコポウロス・エフ・エイ（Ａｓｉｍａｋｏｐｏｕｌｏｓ，Ｆ．Ａ）；ホワイト・エヌ・ジェイ（Ｗｈｉｔｅ，Ｎ．Ｊ）；ナシェバ・イー・ピー（Ｎａｃｈｅｖａ，Ｅ．Ｐ）；グリーン・エイ・アール（Ｇｒｅｅｎ，Ａ．Ｒ）；ヒトＣＤ４０遺伝子は骨髄系悪性腫瘍と関連する染色体２０ｑ欠損の範囲内にある。ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ヘマトロジー（Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔ．，）９２：１２７〜１３０，１９９６年。
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４．ラファジ−ポキタロフ・エム（Ｌａｆａｇｅ−Ｐｏｃｈｉｔａｌｏｆｆ，Ｍ．）；ハーマン・ピー（Ｈｅｒｍａｎ，Ｐ．）；バーグ・エフ（Ｂｉｒｇ，Ｆ．）：ガリッジ・ジェイ・ピー（Ｇａｌｉｚｚｉ，Ｊ．Ｐ．）；シモネッティ・ジェイ（Ｓｉｍｏｎｅｔｔｉ，Ｊ．）；マノニ・ピー（Ｍａｎｎｏｎｉ，Ｐ．）；バンケルー・ジェイ（Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ，Ｊ．）；第２０染色体、ｑ１２〜ｑ１３．２バンドへのヒトＣＤ４０遺伝子の局在。リューケミア（Ｌｅｕｋｅｍｉａ），８：１１７２〜１１７５，１９９４年。
５．マック・エフ（Ｍａｃｈ，Ｆ．）；シュネベック・ユー（Ｓｃｈｏｎｂｅｃｋ，Ｕ．）；スコウバ・ジー・ケイ（Ｓｕｋｈｏｖａ，Ｇ．Ｋ．）；アトキンソン・イー（Ａｔｋｉｎｓｏｎ，Ｅ．）；リビー・ピー（Ｌｉｂｂｙ，Ｐ）；ＣＤ４０シグナル伝達の阻害によるマウスにおけるアテローム性硬化症の軽減。ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），３９４：２００〜２０３，１９９８年。
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【０２００】
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４．センストローム・エムケイ（Ｓｅｎｎｓｔｒｏｍ，ＭＫ．）、ブラウナー・エイ（Ｂｒａｕｎｅｒ，Ａ．）、ルー・ワイ（Ｌｕ，Ｙ．）、グランストローム・エルエム（Ｇｒａｎｓｔｒｏｍ，ＬＭ．）、マルムストローム・エイエル（Ｍａｌｍｓｔｒｏｍ，ＡＬ．）、エクマン・ジーイー（Ｅｋｍａｎ，ＧＥ．）、インターロイキン−８はヒトにおける最終頸部熟化のメディエータである。ヨーロピアンジャーナル・オブ・オブステトリカル・ギネコロジカル・リプロダクション・バイオロジー（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｂｉｏｌ．），７４：８９〜９２，１９９７年。
５．コルジッツ・アイジー（Ｃｏｌｄｉｔｚ，ＩＧ．）、好中球活性化ペプチド−１／インターロイキン−８により誘導される血漿漏出における外因性プロスタグランジンＥ２及びアクチノマイシンＤの効果。イムノロジー・アンド・セル・バイオロジー（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ．），６８：３９７〜４０３，１９９０年。
６．ロメロ・アール（Ｒｏｍｅｒｏ，Ｒ．）、アビラ・シー（Ａｖｉｌａ，Ｃ．）、サンタマン・ユー（Ｓａｎｔｈａｎａｍ，Ｕ．）、セーガル・ピービー（Ｓｅｈｇａｌ，ＰＢ．）、早期分娩における羊水インターロイキン−６：感染との関係。ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーション（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．），８５：１３９２〜１４００，１９９０年。
７．クリックレイ・エイチオーディー（Ｃｒｉｔｃｈｌｅｙ，ＨＯＤ．）、ジョーンズ・アールエル（Ｊｏｎｅｓ，ＲＬ．）、リー・アールジー（Ｌｅａ，ＲＧ．）ら、プロゲステロン離脱及び妊娠初期におけるヒト子宮内膜での炎症性メディエータの役割。　ジャーナル・オブ・クリニカル・エンドクリノロジー・メタボリズム（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．），８４：２４０〜２４８，１９９９年。
８．スタメンコビック・アイ（Ｓｔａｍｅｎｋｏｖｉｃ，Ｉ）．、クラーク・イーエイ（Ｃｌａｒｋ，ＥＡ．）、シード・ビー（Ｓｅｅｄ，Ｂ．）、神経成長因子受容体に関係し、癌におけるサイトカインによって誘導されるＢリンパ球活性化分子。エンボ・ジャーナル（ＥＭＢＯ　Ｊ．），８：１４０３〜１４１０，１９８９年。
９．ホレンバウ・ディー（Ｈｏｌｌｅｎｂａｕｇｈ，Ｄ．）、ミスケル−ペティ・エヌ（Ｍｉｓｃｈｅｌ−Ｐｅｔｔｙ，Ｎ．）、エドワーズ・シーピー（Ｅｄｗａｒｄｓ，ＣＰ．）ら、血管内皮細胞による機能的ＣＤ４０の発現。ジャーナル・オブ・エクスペリメンタル・メディシン（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．），１８２：３３〜４０，１９９５年。
１０．ガスパリ・エイエイ（Ｇａｓｐａｒｉ，ＡＡ．）、センポウスキイ・ジーディー（Ｓｅｍｐｏｗｓｋｉ，ＧＤ．）、チェス・ピー（Ｃｈｅｓｓ，Ｐ．）、ギッシュ・ジェイ（Ｇｉｓｈ，Ｊ．）、フィップス・アールピー（Ｐｈｉｐｐｓ，ＲＰ．）、ＣＤ４０依存性の機序によりヒト上皮角化細胞は、インターロイキン−６を分泌し、Ｔリンパ球の増殖を刺激するように誘導される。ヨーロピアンジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），２６：１３７１〜１３７７，１９９６年。
１１．ゴーチャット・ジェイエフ（Ｇａｕｃｈａｔ，ＪＦ．）、ヘンコツ・エス（Ｈｅｎｃｈｏｚ，Ｓ．）、マッゼイ・ジー（Ｍａｚｚｅｉ，Ｇ．）ら、肥満細胞及び好塩基球によるＢ細胞におけるヒトＩｇＥ合成の誘導。ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），３６５：３４０〜３４３，１９９３年。
１２．ゴーチャット・ジェイエフ（Ｇａｕｃｈａｔ，ＪＦ．）、ヘンコツ・エス（Ｈｅｎｃｈｏｚ，Ｓ．）、ファッタ・ディー（Ｆａｔｔａｈ，Ｄ．）ら、ＣＤ４０リガンドはヒト好酸球上に機能的に発現されている。ヨーロピアンジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），２５：８６３〜８６５，１９９５年。
１３．ヘン・ブイ（Ｈｅｎｎ，Ｖ．）、スラプスキイ・ジェイアール（Ｓｌｕｐｓｋｙ，ＪＲ．）、グラフェ・エム（Ｇｒａｆｅ，Ｍ．）ら、活性化血小板上のＣＤ４０リガンドは内皮細胞の炎症反応の引きがねを引く。ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ），３９１：５９１〜５９４，１９９８年。
１４．クラーク・エルビー（Ｃｌａｒｋ，ＬＢ．）、フォイ・ティーエム（Ｆｏｙ，ＴＭ．）、ノエレ・アールジェイ（Ｎｏｅｌｌｅ，ＲＪ．）、ＣＤ４０及びそのリガンド。アドバンスト・イムノロジー（Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），６３：４３〜７８，１９９６年。
１５．フライズ・ケーエム（Ｆｒｉｅｓ，ＫＭ．）、センポウスキイ・ジーディー（Ｓｅｍｐｏｗｓｋｉ，ＧＤ．）、グラスパリ・エイエイ（Ｇｒａｓｐａｒｉ，ＡＡ．）、ブリーデン・ティー（Ｂｌｉｅｄｅｎ，Ｔ．）、ローニイ・アールジェイ（Ｌｏｏｎｅｙ，ＲＪ．）、フィップス・アールピー（Ｐｈｉｐｐｓ，ＲＰ．）、ヒト線維芽細胞におけるＣＤ４０の発現。ジャーナル・オブ・クリニカル・イムノロジー・イムノパソロジー（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．），７７：４２〜５１，１９９５年。
１６．センポウスキイ・ジーディー（Ｓｅｍｐｏｗｓｋｉ，ＧＤ）．，ロゼンブリット・ジェイ（Ｒｏｚｅｎｂｌｉｔ，Ｊ．）、スミス・ティージェイ（Ｓｍｉｔｈ，ＴＪ．）、フィップス・アールピー（Ｐｈｉｐｐｓ，ＲＰ．）、ヒト眼窩線維芽細胞はＣＤ４０を介して活性化されて炎症誘発性サイトカインの産生を誘導する。アメリカンジャーナル・オブ・フィジオロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．），２７４：Ｃ７０７〜７１４，１９９８年。
１７．センポウスキイ・ジーディー（Ｓｅｍｐｏｗｓｋｉ，ＧＤ．）、チェス・ピーアール（Ｃｈｅｓｓ，ＰＲ．）、フィップス・アールピー（Ｐｈｉｐｐｓ，ＲＰ．）、ＣＤ４０は、ヒトの正常な肺線維芽細胞における機能的活性化抗原であり、Ｂ７非依存性のＴ細胞共刺激分子である。ジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１５８：４６７０〜４６７７，１９９７年。
１８．センポウスキイ・ジーディー（Ｓｅｍｐｏｗｓｋｉ，ＧＤ．）、チェス・ピーアール（Ｃｈｅｓｓ，ＰＲ．）、モレッティ・エイジェイ（Ｍｏｒｅｔｔｉ，ＡＪ．）、パディラ・ジェイ（Ｐａｄｉｌｌａ，Ｊ．）、フィップス・アールピー（Ｐｈｉｐｐｓ，ＲＰ．）、ブリーデン・ティーエム（Ｂｌｉｅｄｅｎ，ＴＭ．）、歯肉及び歯周の靭帯線維芽細胞のＣＤ４０が介在する活性化。ジャーナル・オブ・ペリオドントロジー（Ｊ．Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ．），６８：２８４〜２９２，１９９７年。
１９．アルテンバーグ・エイ（Ａｌｔｅｎｂｕｒｇ，Ａ．）、バルダス・エスイー（Ｂａｌｄｕｓ，ＳＥ）、スモラ・エイチ（Ｓｍｏｌａ，Ｈ．）、フィスター・エイチ（Ｐｆｉｓｔｅｒ，Ｈ．）、ヘス・エス（Ｈｅｓｓ，Ｓ．）、ＣＤ４０リガンド−ＣＤ４０の相互作用はＩＦＮガンマとの相乗作用で子宮頚癌細胞においてケモカインを誘導する。ジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１６２：４１４０〜４１４７，１９９９年。
２０．ノイエス・アールダブリュー（Ｎｏｙｅｓ，ＲＷ．）、ハーティグ・エイティー（Ｈｅｒｔｉｇ，ＡＴ．）、ロック・ジェイ（Ｒｏｃｋ，Ｊ．）、子宮内膜生検の日付決定。ファーティリティ・アンド・ステリリティ（Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　Ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ）１：３〜２５，１９５０年。
２１．クラーク・イーエイ（Ｃｌａｒｋ，ＥＡ．）、レドベター・ジェイエイ（Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ，ＪＡ．）、２つの異なった細胞表面の分化抗原、Ｂｐ３５及びＢｐ５０が介在するヒトＢ細胞の活性化。　プロシーディングズ・オブ・ナショナル・アカデミー・サイエンス・ユーエスエイ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ），８３：４４９４〜４４９８，１９８６年。
２２．クラーク・イーエイ（Ｃｌａｒｋ，ＥＡ．）、イップ・ティーシー（Ｙｉｐ，ＴＣ．）、レドベター・ジェイエイ（Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ，ＪＡ．）、ら、ＣＤｗ４０及びＢＬＣａに特異的なモノクローナル抗体は、ヒトＢ細胞に進行シグナルを伝達する２つの異なった分子を検出する。　ヨーロピアンジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１８：４５１〜４５７，１９８８年。
２４．イダ・エヌ（Ｉｄａ，Ｎ．）、サクライ・エス（Ｓａｋｕｒａｉ，Ｓ．）、カワノ・ジー（Ｋａｗａｎｏ，Ｇ．）、高感度ＥＬＩＳＡを用いた正常な血液及び尿における単球走化性及び活性化因子（ＭＣＡＦ）の検出。　サイトカイン（Ｃｙｔｏｋｉｎｅ），６：３２〜３９，１９９４年。
２５．　オリバー・シー（Ｏｌｉｖｅｒ，Ｃ．）、モンテス・エムジェイ（Ｍｏｎｔｅｓ，ＭＪ）．、ガリンド・ジェイエイ（Ｇａｌｉｎｄｏ，ＪＡ．）、ルイツ・シー（Ｒｕｉｚ，Ｃ．）、オリバレス・イージー（Ｏｌｉｖａｒｅｓ，ＥＧ．）、ヒト脱落膜間質細胞はアルファ−平滑筋アクチンを発現し、筋線維芽細胞と微細構造類似性を示す。ヒューマン・リプロダクション（Ｈｕｍａｎ　Ｒｅｐｒｏｄ．），１４：１５９９〜１６０５、１９９９年。
３０．トムソン・エイジェイ（Ｔｈｏｍｓｏｎ，ＡＪ．）、テルファー・ジェイエフ（Ｔｅｌｆｅｒ，ＪＦ．）、ヤング・エイ（Ｙｏｕｎｇ，Ａ．）、ら、ヒトの分娩時、白血球は筋層に浸潤する：分娩が炎症性過程であるさらなる証拠［過程の引用にて］。ヒューマン・リプロダクション（Ｈｕｍａｎ　Ｒｅｐｒｏｄ．），１４：２２９〜２３６，１９９９年。
３１．チャン・ワイ（Ｚｈａｎｇ，Ｙ）、カオ・エイチジェイ（Ｃａｏ，ＨＪ．）、グラフ・ビー（Ｇｒａｆ，Ｂ．）、ミーキングズ・エイチ（Ｍｅｅｋｉｎｓ，Ｈ．）、スミス・ティージェイ（Ｓｍｉｔｈ，ＴＪ．）、フィップス・アールピー（Ｐｈｉｐｐｓ，ＲＰ．）、ヒトの肺線維芽細胞においてＣＤ４０の会合は、シクロオキシゲナーゼ−２の発現及びプロスタグランジンＥ２の産生を上方調節する。ジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１６０：１０５３〜１０５７，１９９８年。
３２．ケリー・アールダブリュー（Ｋｅｌｌｙ，ＲＷ．）、リースク・アール（Ｌｅａｓｋ，Ｒ．）、カルダー・エイエイ（Ｃａｌｄｅｒ，ＡＡ．）、絨毛脱落膜におけるインターロイキン−８の産生及び分娩の機序。ランセット（Ｌａｎｃｅｔ），３３９：７７６〜７７７，１９９２年。
３４．　ジェジオルスカ・エム（Ｊｅｚｉｏｒｓｋａ，Ｍ．）、サラモンセン・エルエイ（Ｓａｌａｍｏｎｓｅｎ，ＬＡ．）、ウーリー・ディーイー（Ｗｏｏｌｌｅｙ，ＤＥ．）、月経周期を通したヒト子宮内膜における肥満細胞及び好酸球の分布及び活性化。バイオロジー・オブ・リプロダクション（Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．），５３：３１２〜３２０，１９９５年。
３５．　ローク・ワイダブリュー（Ｌｏｋｅ，ＹＷ．）、キング・エイ（Ｋｉｎｇ，Ａ．）、子宮粘膜のリンパ球、ワイダブリュー・ローク（ＹＷ．Ｌｏｋｅ）及びエイ・キング（Ａ．Ｋｉｎｇ）編の「子宮粘膜のリンパ球」（ケンブリッジ、ケンブリッジ大学出版）の中１０２〜１２９ページ。
３６．ネドソン・ユービー（Ｋｎｕｄｓｅｎ，ＵＢ．）、ウルブジェルグ・エヌ（Ｕｌｄｂｊｅｒｇ，Ｎ．）、レクバーガー・ティー（Ｒｅｃｈｂｅｒｇｅｒ，Ｔ．）、フレデンス・ケイ（Ｆｒｅｄｅｎｓ，Ｋ．）、ヒトの頚管熟化における好酸球。ヨーロピアンジャーナル・オブ・オブステトリカル・ギネコロジカル・リプロダクション・バイオロジー（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｂｉｏｌ．），７２：１６５〜１６８、１９９７年。
３７．ボクストローム・エイチ（Ｂｏｋｓｔｒｏｍ，Ｈ．）、ブランストローム・エム（Ｂｒａｎｎｓｔｒｏｍ，Ｍ．）、アレキサンダーソン・エム（Ａｌｅｘａｎｄｅｒｓｓｏｎ，Ｍ．）、ノーストローム・エイ（Ｎｏｒｓｔｒｏｍ，Ａ．）、妊娠初期及び出産間近におけるヒトの子宮頸部間質での白血球の亜集団。ヒューマン・リプロダクション（Ｈｕｍａｎ　Ｒｅｐｒｏｄ．），１２：５８６〜５９０，１９９７年。
３８．ロメロ・アール（Ｒｏｍｅｒｏ，Ｒ．）、セスカ・エム（Ｃｅｓｋａ，Ｍ．）、アビラ・シー（Ａｖｉｌａ，Ｃ．）、マゾール・エム（Ｍａｚｏｒ，Ｍ．）、ベーンケ・イー（Ｂｅｈｎｋｅ，Ｅ．）、リンドレイ・アイ（Ｌｉｎｄｌｅｙ，Ｉ．）、出産間近及び分娩における好中球誘引／活性化ペプチド−１／インターロイキン−８。アメリカンジャーナル・オブ・オブステトリクス・アンド・ギネコロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．），１６５：８１３〜８２０，１９９１年。
３９．キルク・エイディー（Ｋｉｒｋ，ＡＤ．）、バークリー・エルシー（Ｂｕｒｋｌｙ，ＬＣ．）、バティ・ディーエス（Ｂａｔｔｙ，ＤＳ．）、ら、ＣＤ１５４に対するヒト化モノクローナル抗体による処理は、非ヒト霊長類における急性腎移植拒絶を妨げる［コメント参照のこと］。ネイチャー・メディシン（Ｎａｔ．Ｍｅｄ．），５：６８６〜６９３，１９９９年。
４０．アダウイ・エイ（Ａｄａｗｉ，Ａ．）、チャン・ワイ（Ｚｈａｎｇ，Ｙ．）、バグズ・アール（Ｂａｇｇｓ，Ｒ．）、フィンケルステイン・ジェイ（Ｆｉｎｋｅｌｓｔｅｉｎ，Ｊ．）、フィップス・アールピー（Ｐｈｉｐｐｓ，ＲＰ．）、ＣＤ４０−ＣＤ４０リガンドシステムの妨害は酸素誘発型呼吸窮迫症候群を妨げる。アメリカンジャーナル・オブ・パソロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．），１５２：６５１〜６５７，１９９８年。
４１．アダウイ・エイ（Ａｄａｗｉ，Ａ．）、チャン・ワイ（Ｚｈａｎｇ，Ｙ．）、バグズ・アール（Ｂａｇｇｓ，Ｒ．）ら、ＣＤ４０−ＣＤ４０リガンド相互作用の阻止は、放射線照射誘発の肺炎症及び肺線維症に対して防護する。クリニカル・イムノロジー・アンド・イムノパソロジー（Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．），８９：２２２〜２３０，１９９８年。
４２．カレド・エスエル（Ｋａｌｌｅｄ，ＳＬ．）、カトラー・エイエイチ（Ｃｕｔｌｅｒ，ＡＨ．）、ダッタ・エスケイ（Ｄａｔｔａ，ＳＫ．）、トーマス・ディーダブリュー（Ｔｈｏｍａｓ，ＤＷ．）、確立した腎炎を持つＳＮＦ１マウスの抗ＣＤ４０リガンド抗体による処理：腎機能の保存。ジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．），１６０：２１５８〜２１６５、１９９８年。
【図面の簡単な説明】
【図１】
組織外植片からの線維芽細胞の増生（暗領域）の写真を提示する図である。
【図２】
ＩＦＮγ処理の際の線維芽細胞のＣＤ４０発現の上方調節を示すグラフである。
【図３】
ヒトの子宮内膜、子宮筋層及び子宮頸部におけるＣＤ４０の免疫組織化学的局在の写真を提示する図である。
【図４】
子宮内膜／子宮筋層の境界におけるＣＤ４０の血管周囲の分布の写真を提示する図である。
【図５】
線維芽細胞によるケモカインの放出及び脱落膜化の有無を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004510828.tif 000080
【国際調査報告】
2004510828.tif 000081
2004510828.tif 000082
2004510828.tif 000083