(57)【要約】デスモソーム媒介細胞接着を阻害または増強するための調整剤が提供される。この調節剤は、以下のうち１つ以上を含む：ａ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に少なくとも５０％同一である、ペプチド配列；ｂ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の非ペプチド模倣物；ｃ）デスモソームカドヘリンＣＡＲに特異的に結合する、抗体または抗原結合フラグメントのような物質；および／またはｄ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドまたはそのアナログ。種々の文脈において、デスモソームカドヘリン媒介細胞接着を調節するためのこのような調節剤を用いる方法がまた提供される。
2004504809.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
調節剤であって、以下：
（ａ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含み；そして
（ｂ）ペプチド結合によって連結された３〜１６アミノ酸残基を含む、
調節剤。
【請求項２】
調節剤であって、以下：
（ａ）以下の式：Ａａａ−Ｐｈｅ−Ｂａａ−Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ−Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ−Ｃａａ−Ｄａａ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ−Ｇｌｙ（配列番号（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．）３）を有する、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の少なくとも５つの保存的アミノ酸残基を含み、
ここで、Ａａａ、Ｂａａ、ＣａａおよびＤａａは、独立して選択されたアミノ酸残基であり；Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌは、イソロイシン、ロイシン、およびバリンからなる群より選択されるアミノ酸であり、Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕは、アスパルテート、アスパラギン、およびグルタメートからなる群から選択される１アミノ酸であり；そしてＳｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎは、セリン、スレオニン、およびアスパラギンからなる群より選択される１アミノ酸であり；そして
（ｂ）デスモソームカドヘリン内に存在する保存的アミノ酸残基を５０しか含まない、
調節剤。
【請求項３】
調節剤であって、以下：
（ａ）以下の式：Ａａａ−Ｐｈｅ−Ｂａａ−Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ−Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ−Ｃａａ−Ｄａａ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ−Ｇｌｙ（配列番号３）、を有するデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含み、
ここで、Ａａａ、Ｂａａ、Ｃａａ、およびＤａａは、独立して選択されたアミノ酸残基であって；Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌは、イソロイシン、ロイシン、およびバリンからなる群より選択される１アミノ酸であり、Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕは、アスパルテート、アスパラギン、およびグルタメートからなる群より選択される１アミノ酸であり；そしてＳｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎは、セリン、スレオニン、またはアスパラギンからなる群より選択される１アミノ酸であり；そして
（ｂ）デスモソームカドヘリン内に存在する保存的アミノ酸残基を５０までしか含まない、
調節剤。
【請求項４】
調節剤であって、以下：
（ａ）デスモソームカドヘリンの少なくとも９つの保存的アミノ酸残基を含み、ここで該９つの保存的アミノ酸残基は、以下の式：Ａａａ−Ｐｈｅ−Ｂａａ−Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ−Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ−Ｃａａ−Ｄａａ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ−Ｇｌｙ（配列番号３）、を有するデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含み、
ここで、Ａａａ、Ｂａａ、Ｃａａ、およびＤａａは、独立して選択されたアミノ酸残基であって；Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌは、イソロイシン、ロイシン、およびバリンからなる群より選択される１アミノ酸であり、Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕは、アスパルテート、アスパラギン、およびグルタメートからなる群より選択される１アミノ酸であり；そしてＳｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎは、セリン、スレオニン、およびアスパラギンからなる群より選択される１アミノ酸であり；そして
（ｂ）デスモソームカドヘリン内に存在する保存的アミノ酸残基を５０までしか含まない、
調節剤。
【請求項５】
調節剤であって、以下：ＮＱＫ、ＮＲＮ、ＮＫＤ、ＥＫＤ、ＥＲＤ、ＲＡＬ、ＹＡＬ、ＹＡＴ、ＦＡＴ、およびＹＡＳからなる群より選択されるデソモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含み、ここで該因子は、デスモソームカドヘリン内に存在する保存的アミノ酸残基を５０までしか含まない、
調節剤。
【請求項６】
請求項２〜５のいずれか１項に記載される調節剤であって、該調節剤は、３〜５０アミノ酸残基にわたるサイズのペプチドである、調節剤。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか１項に記載される調節剤であって、該調節剤は、４〜１６アミノ酸残基にわたるサイズのペプチドである、調節剤。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか１項に記載される調節剤であって、前記ＣＡＲ配列が、環状ペプチド内に存在する、調節剤。
【請求項９】
請求項８に記載の調節剤であって、前記環状ペプチドが以下の式：
【化１】
2004504809.tif 000035
を有し、
ここで、Ｗは、ＮＱＫ、ＮＲＮ、ＮＫＤ、ＥＫＤ、ＥＲＤ、ＲＡＬ、ＹＡＬ、ＹＡＴ、ＦＡＴ、およびＹＡＳからなる群より選択されるトリペプチドであり；
ここで、Ｘ１、およびＸ２は、任意であり、そして存在する場合、ペプチド結合によって結合されるアミノ酸残基およびその組み合わせからなる群より独立して選択され、そしてここでＸ１およびＸ２は、独立して０〜１０残基のサイズにわたり、その結果Ｘ１およびＸ２内に含まれる残基の合計は、１〜１２の範囲にわたり；
ここで、Ｙ１およびＹ２は、独立してアミノ酸残基からなる群より選択され、そしてここで共有結合は、残基Ｙ１およびＹ２の間で形成され；そして
ここで、Ｚ１およびＺ２は任意であり、そして存在する場合、ペプチド結合によって結合されるアミノ酸残基およびその組み合わせからなる群より独立して選択される、
調節剤。
【請求項１０】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の調節剤をコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項１１】
請求項１０に記載されるポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項１２】
請求項１１に記載の発現ベクターを用いて形質転換またはトランスフェクトされた、宿主細胞。
【請求項１３】
抗体またはその抗原結合フラグメントを含む調節剤であって、該抗体またはその抗原結合フラグメントは、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に特異的に結合し、そしてデスモソームカドヘリン媒介機能を調節し、ここで該デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列は、以下の式：Ａａａ−Ｐｈｅ−Ｂａａ−Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ−Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ−Ｃａａ−Ｄａａ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ−Ｇｌｙ（配列番号３）を有し、
ここで、Ａａａ、Ｂａａ、ＣａａおよびＤａａは、独立して選択されたアミノ酸残基であり；Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌは、イソロイシン、ロイシン、およびバリンかななる群より選択されるアミノ酸であり、Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕは、アスパルテート、アスパラギン、およびグルタメートからなる群から選択される１アミノ酸であり；そしてＳｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎは、セリン、スレオニン、およびアスパラギンからなる群より選択される１アミノ酸であり；そして
ここで、該調節剤は、デスモソームカドヘリンによって媒介される機能を阻害または増強する、
調節剤。
【請求項１４】
デソモソームカドヘリンＣＡＲ配列の模倣物を含む調節剤であって、該模倣物は、以下の式：Ａａａ−Ｐｈｅ−Ｂａａ−Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ−Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ−Ｃａａ−Ｄａａ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ−Ｇｌｙ（配列番号３）、を有するデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の少なくとも３つの連続するアミノ酸残基を含み、
ここで、Ａａａ、Ｂａａ、Ｃａａ、およびＤａａは、独立して選択されたアミノ酸残基であって；Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌは、イソロイシン、ロイシン、およびバリンからなる群より選択されるアミノ酸であり、Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕは、アスパルテート、アスパラギン、およびグルタメートからなる群より選択されるアミノ酸であり；そしてＳｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎは、セリン、スレオニン、またはアスパラギンからなる群より選択されるアミノ酸であり；
ここで、該模倣物は、デスモソームカドヘリン媒介機能を調節し得る、
調節剤。
【請求項１５】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の調節剤であって、該調節剤は、以下：
【化２】
2004504809.tif 000036
2004504809.tif 000037
からなる群より選択される１つ以上のデスモグレインＣＡＲ配列を含む、調節剤。
【請求項１６】
請求項１５に記載の調節剤であって、該調節剤が以下の配列：Ｎ−Ａｃ−ＩＦＶＩＮＱＫＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０５）、Ｎ−Ａｃ−ＭＦＩＩＮＲＮＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０６）、Ｎ−Ａｃ−ＶＦＹＬＮＫＤＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０７）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＭＧ−ＮＨ２（配列番号：１７８）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＬＧ−ＮＨ２（配列番号：１７９）、Ｎ−Ａｃ−ＬＴＧＹＡＬＤＡＲＧ−ＮＨ２（配列番号：１９９）、Ｎ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＱＧ−ＮＨ２（配列番号：２４４）、およびＮ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＬＧ−ＮＨ２（配列番号：２２５）を有する直線状ペプチドを含む、調節剤。
【請求項１７】
デスモグレインＣＡＲ配列が環状ペプチド内に存在する、請求項１５に記載の調節剤。
【請求項１８】
請求項１７に記載の調節剤であって、前記環状ペプチドは、以下：
【化３】
2004504809.tif 000038
2004504809.tif 000039
2004504809.tif 000040
2004504809.tif 000041
2004504809.tif 000042
2004504809.tif 000043
2004504809.tif 000044
からなる群より選択される配列を含む、調節剤。
【請求項１９】
抗体またはその抗原結合フラグメントを含む調節剤であって、該調節剤は、
（ａ）以下：：Ｎ−Ａｃ−ＩＦＶＩＮＱＫＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０５）、Ｎ−Ａｃ−ＭＦＩＩＮＲＮＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０６）、Ｎ−Ａｃ−ＶＦＹＬＮＫＤＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０７）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＭＧ−ＮＨ２（配列番号：１７８）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＬＧ−ＮＨ２（配列番号：１７９）、Ｎ−Ａｃ−ＬＴＧＹＡＬＤＡＲＧ−ＮＨ２（配列番号：１９９）、Ｎ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＱＧ−ＮＨ２（配列番号：２４４）、およびＮ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＬＧ−ＮＨ２（配列番号：２２５）からなる群より選択されるデスモグレインＣＡＲ配列に特異的に結合し；そして
（ｂ）デスモグレイン媒介機能を調節する、
、調節剤。
【請求項２０】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の調節剤であって、該調節剤は、以下
【化４】
2004504809.tif 000045
2004504809.tif 000046
からなる群より選択される１つ以上のデスモコリンＣＡＲ配列を含む、
調節剤。
【請求項２１】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の調節剤であって、該調節剤が、以下の配列：Ｎ−Ａｃ−ＬＦＹＩＥＫＤＴＧ−ＮＨ２（配列番号１４８）、Ｎ−Ａｃ−ＬＦＹＶＥＲＤＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１４９）、Ｎ−Ａｃ−ＬＦＹＩＥＲＤＴＧ−ＮＨ２（配列番号１５０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８１）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８２）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８３）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８４）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８５）、Ｎ−Ａｃ−ＩＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３１０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３１１）、またはＮ−Ａｃ−ＬＩＡＹＡＳＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３３１）を有する直線状ペプチドを含む、調節剤。
【請求項２２】
デスモコリンＣＡＲ配列が、環状ペプチド内に存在する、請求項２０に記載の調節剤。
【請求項２３】
前記環状ペプチドが、以下：
【化５】
2004504809.tif 000047
2004504809.tif 000048
2004504809.tif 000049
2004504809.tif 000050
2004504809.tif 000051
2004504809.tif 000052
2004504809.tif 000053
2004504809.tif 000054
からなる群より選択される、配列を含む、請求項２２に記載の調節剤。
【請求項２４】
抗体またはその抗原結合フラグメントを含む調節剤であって、該抗体またはその抗原結合フラグメントは、
（ａ）以下：ＬＦＹＩＥＫＤＴＧ（配列番号１２１）、ＬＦＹＶＥＲＤＴＧ（配列番号１３５）およびＬＦＹＩＥＲＤＴＧ（配列番号１４７）、Ｎ−Ａｃ−ＬＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８１）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８２）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８３）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８４）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８５）、Ｎ−Ａｃ−ＩＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３１０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３１１）、およびＮ−Ａｃ−ＬＩＡＹＡＳＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３３１）からなる群より選択されるデスモコリンＣＡＲ配列に特異的に結合し、そして
（ｂ）デスモコリン媒介機能を調節する、
調節剤。
【請求項２５】
請求項１〜５または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤であって、検出可能なマーカーに連結された、調節剤。
【請求項２６】
請求項１〜５または１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤であって、標的剤に連結された、調節剤。
【請求項２７】
請求項１〜５または１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤であって、支持物質に連結された、調節剤。
【請求項２８】
前記支持物質がポリマーマトリックスである、請求項２７に記載の調節剤。
【請求項２９】
前記支持物質が、プラスチック皿、プラスチックチューブ、縫合糸、膜、超薄層フィルム、バイオリアクターおよび微小粒子からなる群より選択される、請求項２７に記載の調節剤。
【請求項３０】
請求項１〜５または１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤であって、さらに１つ以上の以下：
（ａ）デスモソームカドヘリン以外の接着分子によって特異的に認識されるＣＡＲ配列；および／または
（ｂ）デスモソームカドヘリン以外の接着分子によって特異的に認識される、ＣＡＲ配列に特異的に結合する、抗体またはその抗原結合フラグメント
、を含む、調節剤。
【請求項３１】
請求項３０に記載の調節剤であって、前記接着分子が、古典的なカドヘリン、インテグリン、オクルディン、クラウディン、非古典的なカドヘリン、フィブロネクチン、ラミニン、クラウディン、および他の細胞外マトリックスタンパク質からなる群より選択される、調節剤。
【請求項３２】
薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤を含む、薬学的組成物。
【請求項３３】
さらに薬物を含む、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記調節剤が、徐放性処方物内に存在する、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３５】
請求項３２に記載の薬学的組成物であって、さらに、１つ以上の以下：
（ａ）デスモソームカドヘリン以外の接着分子によって特異的に認識されるＣＡＲ配列；および／または
（ｂ）デスモソームカドヘリン以外の接着分子によって特異的に認識される、ＣＡＲ配列に特異的に結合する、抗体またはその抗原結合フラグメント、
を含む、細胞接着の調節剤を含む、
調節剤。
【請求項３６】
請求項３５に記載の薬学的組成物であって、該接着分子が、古典的なカドヘリン、インテグリン、オクルディン、クラウディン、非古典的なカドヘリン、フィブロネクチン、ラミニン、および他の細胞外マトリックスタンパク質からなる群より選択される、調節剤。
【請求項３７】
デスモソームカドヘリン媒介機能を調節するための方法であって、デスモグレイン発現細胞および／またはデスモコリン発現細胞と、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤とを接触させ、これによってデスモソームカドヘリン媒介機能を調節する工程、を包含する、方法。
【請求項３８】
前記細胞が、上皮細胞、内皮細胞および腫瘍細胞からなる群より選択される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記調節剤が、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、薬学的組成物内に存在する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
細胞接着を調節する方法であって、デスモソームカドヘリン発現細胞を、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤と接触させ、これによって細胞接着を調節する工程、を包含する、方法。
【請求項４１】
前記細胞が、上皮細胞、内皮細胞および腫瘍細胞からなる群より選択される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記調節剤が、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、薬学的組成物内に存在する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
細胞接着が阻害される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
細胞接着が増強される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４５】
哺乳動物におけるデスモソームカドヘリン発現細胞の接着を阻害するための方法であって、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤を哺乳動物に投与する工程を包含し、ここで該調節剤は、デスモコリン媒介細胞接着、および／またはデスモグレイン媒介細胞接着を阻害する、方法。
【請求項４６】
前記調節剤が、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、薬学的組成物内に存在する、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
細胞接着が阻害される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
細胞接着が増強される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
哺乳動物の皮膚を介した薬物の送達を増強するための方法であって、哺乳動物の上皮細胞を、薬物および請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤と接触させる工程を包含し、ここで該接触工程は、該薬物が該上皮細胞を横切って通過するのを可能にするのに十分な条件および時間で実施され、そしてここで該調節剤が、デスモコリン媒介細胞接着および／またはデスモグレイン媒介細胞接着を阻害する、方法。
【請求項５０】
前記調節剤が、前記哺乳動物の血流中に通過する、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記調節剤が、前記薬物に結合される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
前記接触工程が、前記調節剤および前記薬物を含む皮膚パッチを介して実施される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
哺乳動物における血液サンプリングを容易にするための方法であって、該方法は、哺乳動物の上皮細胞を、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤と接触させる工程を包含し、ここで該調節剤は、デスモコリン媒介細胞接着および／またはデスモグレイン媒介細胞接着を阻害し、そして該接触工程は、１つ以上の血液成分が該上皮細胞を横切って通過するのを可能にするのに十分な条件および時間で実施される、方法。
【請求項５４】
前記接触工程が、前記調節剤を含む皮膚パッチを介して実施される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記皮膚パッチが、目的の血液成分を検出するための試薬をさらに含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記上皮細胞が、皮膚細胞であるか、または歯肉細胞である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５７】
デスモソームカドヘリン発現細胞の接着を増強するための方法であって、デスモコリン発現細胞および／またはデスモグレイン発現細胞を、
請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤と接触させる工程を包含し、ここで該調節剤が、デスモコリン媒介細胞接着および／またはデスモグレイン媒介細胞接着を増強し、そして該接触工程が、該細胞の接着を検出可能に増強するのに十分な条件下および時間で実施される、方法。
【請求項５８】
前記細胞が、上皮細胞、内皮細胞および腫瘍細胞からなる群より選択される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記調節剤が、支持体分子または固体支持体に連結される、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
哺乳動物において瘢痕組織の創傷治癒、および／または減少を促進するための方法であって、哺乳動物の創傷を、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤と接触させる工程を包含し、ここで、該調節剤がデスモソームカドヘリン媒介細胞接着を強化する、方法。
【請求項６１】
前記調節剤が、支持体分子または固体支持体に連結される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
哺乳動物に移植された外来組織の接着を増強するための方法であって、哺乳動物の外来組織の移植の部位を、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤と接触させる工程を包含し、ここで、該調節剤がデスモソームカドヘリン媒介細胞接着を増強する、方法。
【請求項６３】
前記外来組織が、皮膚移植片または器官インプラントである、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記調節剤が、支持体分子または固体支持体に連結される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６５】
哺乳動物において自己免疫性水疱障害を処置するための方法であって、請求項１〜５、または請求項１３〜１４のいずれか１項に記載の調節剤を、哺乳動物に投与する工程を包含し、ここで、該調節剤がデスモソームカドヘリン媒介細胞接着を強化する、方法。
【請求項６６】
前記調節剤が、水疱に代表的に投与される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記調節剤が、支持体分子または固体支持体に連結される、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
デスモソームカドヘリン媒介機能を調節し得る化合物を同定するための方法であって、以下：（ａ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントを試験化合物と接触させる工程；および（ｂ）該試験化合物に結合する抗体またはフラグメントのレベルを検出し、それからデスモソームカドヘリン媒介細胞接着を調節し得る化合物を同定する工程、を包含する、
方法。
【請求項６９】
請求項６８に記載の方法であって、前記抗体または抗原結合フラグメントが、以下：Ｎ−Ａｃ−ＩＦＶＩＮＱＫＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０５）、Ｎ−Ａｃ−ＭＦＩＩＮＲＮＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０６）、Ｎ−Ａｃ−ＶＦＹＬＮＫＤＴＧ−ＮＨ２（配列番号：１０７）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＭＧ−ＮＨ２（配列番号：１７８）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＬＧ−ＮＨ２（配列番号：１７９）、Ｎ−Ａｃ−ＬＴＧＹＡＬＤＡＲＧ−ＮＨ２（配列番号：１９９）、Ｎ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＱＧ−ＮＨ２（配列番号：２４４）、およびＮ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＬＧ−ＮＨ２（配列番号：２２５）からなる群より選択されるデスモグレインＣＡＲ配列に特異的に結合する、方法。
【請求項７０】
請求項６８に記載の方法であって、前記抗体または抗原結合フラグメントが、以下：ＬＦＹＩＥＫＤＴＧ（配列番号１２１）、ＬＦＹＶＥＲＤＴＧ（配列番号１３５）およびＬＦＹＩＥＲＤＴＧ（配列番号１４７）、Ｎ−Ａｃ−ＬＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８１）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８２）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８３）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号２８４）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：２８５）、Ｎ−Ａｃ−ＩＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３１０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３１１）、およびＮ−Ａｃ−ＬＩＡＹＡＳＴＡＤＧ−ＮＨ２（配列番号：３３１）からなる群より選択されるデスモコリンＣＡＲ配列に特異的に結合する、方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、一般に、デスモソームカドヘリンにより媒介される機能を調節するための方法に関し、そしてより具体的には、デスモコリン細胞接着認識配列およびデスモグレイン細胞接着認識配列由来の調節剤の、このようなデスモソームカドヘリンによって媒介される機能を阻害または増強するための使用に関する。
【０００２】
（発明の背景）
カドヘリンとは、カルシウム依存性の細胞接着分子（ＣＡＭ）の、急速に拡張しているスーパーファミリーである（総説については、Ｍｕｎｒｏら：Ｃｅｌｌ　Ａｄｈｅｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｎｖａｓｉｏｎ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ，Ｐ．Ｂｒｏｄｔ編、１７−３４頁，ＲＧ　Ｌａｎｄｅｓ　Ｃｏ．，Ａｕｓｔｉｎ　ＴＸ，１９９６を参照のこと）。全てのカドヘリンは、一般に、同種特異親和性相互作用（１つの細胞の表面上の１つのカドヘリンが、別の細胞の表面上の同一のカドヘリンと結合する）を介して、細胞接着を促進する膜糖タンパク質であるようであるが、カドヘリンはまた、特定の状況下で、そしてより低い親和性で、互いと異型複合体を形成し得るようである。
【０００３】
多くの異なるタイプのカドヘリンが存在する。最も広範に研究されているカドヘリンの群は、古典的な（すなわちタイプＩ）カドヘリンとして公知である。古典的なカドヘリンは、異なる細胞型において発現される異なるカドヘリンとの、上皮細胞接着、内皮細胞接着、神経細胞接着および癌細胞接着を調節することが示されている。全ての古典的なカドヘリンが、類似の構造を有する。図１Ａに示すように、古典的なカドヘリンは、５つの細胞外ドメイン（ＥＣ１〜ＥＣ５）、原形質膜（ＰＭ）を横切る単一の疎水性ドメイン（ＴＭ）、および２つの細胞質ドメイン（ＣＰ１およびＣＰ２）からなる。カルシウム結合モチーフＤＸＮＤＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１）、ＤＸＤおよびＬＤＲＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２）は、細胞外ドメイン全体にわたって散在しており、そしてこのようなモチーフを含む各１１０アミノ酸の領域は、カドヘリンリピートと考えられる。第１の細胞外ドメイン（ＥＣ１）は、細胞接着認識（ＣＡＲ）配列のいずれかの側の、特異性を与える際に役割を果たす隣接配列に沿って、ＣＡＲ配列ＨＡＶ（Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｖａｌ）を含む。ＨＡＶ配列を含む合成ペプチドおよびこのようなペプチドに対する抗体は、古典的なカドヘリン依存性のプロセスを阻害することが示されている（Ｍｕｎｒｏら、前出；Ｂｌａｓｃｈｕｋら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１１：６７９−８２，１９９０；Ｂｌａｓｃｈｕｋら、Ｄｅｖｅｌｏｐ．Ｂｉｏｌ．１３９：２２７−２９，１９９０；Ａｌｅｘａｎｄｅｒら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１５６：６１０−１８，１９９３）。
【０００４】
細胞外ドメインカドヘリンリピート内にカルシウム結合モチーフを含むが、ＨＡＶ　ＣＡＲ配列を含まないカドヘリンは、非古典的なカドヘリンであると考えられる（図１Ｂ〜１ＡＡに示される）。現在までに、非古典的なカドヘリンの９つの群が同定されている（タイプＩＩ〜Ｘ）。これらのカドヘリンもまた、膜糖タンパク質である。タイプＩＩ（すなわち非典型的な（ａｔｙｐｉｃａｌ））カドヘリンとしては、以下が挙げられる：ＯＢ−カドヘリン（カドヘリン−１１；Ｇｅｔｓｉｏｓら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｄｙｎａｍｉｃｓ　２１１：２３８−２４７，１９９８；Ｓｉｍｏｎｎｅａｕら、Ｃｅｌｌ　Ａｄｈｅｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ　３：１１５−１３０，１９９５；Ｏｋａｚａｋｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２６９：１２０９２−１２０９８，１９９４を参照のこと）、カドヘリン−５（ＶＥ−カドヘリン；Ｎａｖａｒｒｏら、Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１４０：１４７５−１４８４，１９９８を参照のこと）、カドヘリン−６（Ｋ−カドヘリン；Ｓｈｉｍｏｙａｍａら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　５５：２２０６−２２１１，１９９５；Ｓｈｉｍａｚｕｉら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　５６：３２３４−３２３７，１９９６；Ｉｎｏｕｅら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｄｙｎａｍｉｃｓ　２１１：３３８−３５１，１９９８；Ｇｅｔｓｉｏｓら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｄｙｎａｍｉｃｓ　２１１：２３８−２４７，１９９８を参照のこと）、カドヘリン−７（Ｎａｋａｇａｗａら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　１２１：１３２１−１３３２，１９９５を参照のこと）、カドヘリン−８（Ｓｕｚｕｋｉら、Ｃｅｌｌ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　２：２６１−２７０，１９９１を参照のこと）、カドヘリン−１２（Ｂｒ−カドヘリン；Ｔａｎｉｈａｒａら、Ｃｅｌｌ　Ａｄｈｅｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ　２：１５−２６，１９９４を参照のこと）、カドヘリン−１４（Ｓｈｉｂａｔａら、Ｊ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２７２：５２３６−５２４０，１９９７を参照のこと）、カドヘリン−１５（Ｍ−カドヘリン；Ｓｈｉｍｏｙａｍａら、Ｊ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２７３：１００１１−１００１８，１９９８を参照のこと）、およびＰＢ−カドヘリン（Ｓｕｇｉｍｏｔｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２７１：１１５４８−１１５５６，１９９６を参照のこと）。非典型的なカドヘリンの一般的な総説については、ＲｅｄｉｅｓおよびＴａｋｅｉｃｈｉ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１８０：４１３−４２３，１９９６ならびにＳｕｚｕｋｉら、Ｃｅｌｌ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　２：２６１−２７０，１９９１を参照のこと。
【０００５】
タイプＩＩＩ〜Ｘとしては、以下が挙げられる：ＬＩ−カドヘリン（タイプＩＩＩ；Ｂｅｒｎｄｏｒｆｆら、Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１２５：１３５３−１３６９，１９９４を参照のこと）、Ｔ−カドヘリン（タイプＩＶ；Ｒａｎｓｃｈｔ，米国特許第５，５８５，３５１号；Ｔｋａｃｈｕｋら、ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ．４２１：２０８−２１２，１９９８；Ｒａｎｓｃｈｔら、Ｎｅｕｒｏｎ　７：３９１−４０２，１９９１；Ｓａｃｒｉｓｔａｎら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　３４：６６４−６８０，１９９３；ＶｅｓｔａｌおよびＲａｎｓｃｈｔ，Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１１９：４５１−４６１，１９９２；ＦｒｅｄｅｔｔｅおよびＲａｎｓｃｈｔ，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ　１４：７３３１−７３４６，１９９４；ＲａｎｓｃｈｔおよびＢｒｏｎｎｅｒ−Ｆｒａｓｅｒ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　１１１：１５−２２，１９９１を参照のこと）、プロトカドヘリン（タイプＶ；例えば、プロトカドヘリン４２、４３および６８；Ｓａｎｏら、ＥＭＢＯ　Ｊ．１２：２２４９−２２５６，１９９３；ＧｅｎＢａｎｋ登録番号ＡＦ０２９３４３を参照のこと）、デスモコリン（タイプＶＩ；例えば、デスモコリン１、２、３および４；Ｋｉｎｇら、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　１８：１８５−１９４，１９９３；Ｐａｒｋｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６：１０４３８−１０４４５，１９９１；Ｋｉｎｇら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１０５：３１４−３２１，１９９５；Ｋａｗａｍｕｒａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：２６２９５−２６３０２，１９９４を参照のこと）、デスモグレイン（タイプＶＩＩ；例えば、デスモグレイン１および２；Ｗｈｅｅｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　８８：４７９６−４８００；Ｋｏｃｈら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５５：２００−２０８，１９９１を参照のこと）、ならびにカドヘリン関連ニューロンレセプター（タイプＸ；Ｋｏｈｍｕｒａら、Ｎｅｕｒｏｎ　２０：１１３７−１１５１，１９９８を参照のこと）。
【０００６】
非古典的なカドヘリンの大部分の研究は、非典型的な（すなわちタイプＩＩ）カドヘリンに焦点を当てた。このようなカドヘリンの構造は、タイプＩカドヘリンの構造と類似しているが、これらは、ＣＡＲ配列（ＨＡＶ）を含まない（図１Ｂ）。非典型的なカドヘリンは、広範な種々の機能を媒介するようである。さらなる改変物は、タイプＩＩＩ〜Ｘのカドヘリンの構造に見られる。さほど研究されてはないが、このようなカドヘリンもまた、様々な機能において役割を果たすようである。例えば、デスモソームカドヘリンは、デスモソーム（中間フィラメント細胞骨格に対する接着および膜アンカーを提供する、細胞間接合部）内に存在する。これらのカドヘリン（例えば、デスモグレインおよびデスモコリン）は、デスモソーム接着において役割を果たし、これは、正常な組織構築および表皮構造のために非常に重要である。異常なデスモソームは、特定の型の癌腫および他の皮膚障害において現れる（Ｃｈｉｄｇｅｙ，Ｈｉｓｔｏｌ．Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ．１２：１１５９−１１６８，１９９７を参照のこと）。
【０００７】
これらの最近の進歩にもかかわらず、非古典的なカドヘリンの機能は、生物学的レベルおよび分子レベルにおいて、あまり理解されないままである。従って、当該分野において、非古典的なカドヘリン依存性の機能（例えば、デスモソームカドヘリンによって媒介される細胞接着）の調節に関与する配列を同定する必要性、およびこのような配列を使用して細胞接着のようなプロセスを阻害する方法を開発する必要性が、存在する。本発明は、これらの必要性を満たし、そしてさらに、他の関連する利点を提供する。
【０００８】
（発明の要旨）
簡単に言えば、本発明は、デスモソームカドヘリンにより媒介される機能（例えば、細胞接着）を調節するための組成物および方法を提供する。特定の局面において、調節剤が提供される。このような因子は、デスモソームカドヘリンであるデスモグレイン（ｄｓｇ）またはデスモコリン（ｄｓｃ）によって媒介される、１つ以上の機能を調節（すなわち、阻害または増強）し得る。調節剤は、以下のうちの少なくとも１つを含み得る：（ａ）ネイティブのｄｓｃまたはｄｓｇ　ＣＡＲ配列；（ｂ）ｄｓｃまたはｄｓｇにより媒介される細胞接着を媒介し得るようなＣＡＲ配列のアナログ；（ｃ）ｄｓｃまたはｄｓｇにより媒介される細胞接着を調節し得る、ｄｓｇまたはｄｓｇ　ＣＡＲ配列のペプチド模倣物である非ペプチド；（ｄ）ｄｓｃまたはｄｓｇ　ＣＡＲ配列を特異的に結合する、抗体またはその抗原結合フラグメント；ならびに／あるいは（ｅ）ｄｓｃまたはｄｓｇにより媒介される細胞接着を調節し得る、ネイティブのｄｓｃもしくはｄｓｇ　ＣＡＲ配列またはそのアナログをコードするポリヌクレオチド。特定の好ましい調節剤は、デスモグレイン−１、デスモグレイン−２、デスモグレイン−３、デスモコリン−１、デスモコリン−２、デスモコリン−３またはデスモコリン−４　ＣＡＲ配列、あるいは上記ＣＡＲ配列のいずれかのアナログを含む。アナログとは、一般に、ｄｓｇまたはｄｓｃ　ＣＡＲ配列に対して少なくとも５０％同一であり、そして（ｉ）ｄｓｇまたはｄｓｃによって調節される機能を検出可能に阻害するか；あるいは（ｉｉ）ｄｓｇまたはｄｓｃを発現する細胞の接着を検出可能に増幅する、ペプチド配列である。調節剤は、好ましくは、８５以下、そして好ましくは、５０以下の、ｄｓｇまたはｄｓｃ内に存在する連続したアミノ酸残基を含む。特定の調節剤は、ｄｓｇまたはｄｓｃ　ＣＡＲ配列を含み、そして３〜１６アミノ酸残基長である。特定の具体的な実施形態において、上記のような調節剤は、大きさが３〜５０、好ましくは４〜１６アミノ酸残基の範囲の、ペプチドである。
【０００９】
特定の調節剤については、ｄｓｇまたはｄｓｃ　ＣＡＲ配列は、以下の式を有する：
Ａａａ−Ｐｈｅ−Ｂａａ−Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ−Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ−Ｃａａ−Ｄａａ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ−Ｇｌｙ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３）
ここで、Ａａａ、Ｂａａ、ＣａａおよびＤａａは、独立して選択されるアミノ酸残基であり；Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌはイソロイシン、ロイシンおよびバリンからなる群より選択されるアミノ酸であり、Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕは、アスパラギン酸、アスパラギンおよびグルタミン酸からなる群より選択されるアミノ酸であり；そしてＳｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎは、セリン、スレオニンおよびアスパラギンからなる群より選択されるアミノ酸である。上記のような他の調節剤に関して、ｄｓｇまたはｄｓｃ　ＣＡＲ配列は、上述の式を有するｄｓｇまたはｄｓｃの領域の、少なくとも３つの連続するアミノ酸残基、そして好ましくは、少なくとも５つの連続するアミノ酸残基からなる。
【００１０】
特定の具体的な実施形態において、本明細書中に提供されるような調節剤は、以下を含む：（ａ）ＮＱＫ（ＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６３）、ＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６４）、ＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６５）、ＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６６）、ＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６７）、ＶＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６８）、ＶＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６９）、ＶＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７０）、ＦＶＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７１）、ＦＶＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７２）、ＦＶＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７３）、ＩＦＶＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７４）、ＩＦＶＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７５）、ＩＦＶＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７６））、ＮＲＮ（ＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７７）、ＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７８）、ＩＮＲＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７９）、ＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８０）、ＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８１）、ＩＩＮＲＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８２）、ＩＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８３）、ＩＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８４）、ＦＩＩＮＲＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８５）、ＦＩＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８６）、ＦＩＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８７）、ＭＦＩＩＮＲＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８８）、ＭＦＩＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８９）、ＭＦＩＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９０））、ＮＫＤ（ＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９１）、ＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９２）、ＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９３）、ＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９４）、ＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９５）、ＹＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９６）、ＹＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９７）、ＹＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９８）、ＦＹＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９９）、ＦＹＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１００）、ＦＹＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０１）、ＶＦＹＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０２）、ＶＦＹＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０３）およびＶＦＹＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０４））からなる群より選択される、１つ以上のデスモグレインＣＡＲ配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入が異なり、その結果、デスモグレインにより媒介される機能を調節するアナログの能力が、さほど減少されない、上記配列のいずれかのアナログ。例えば、この因子は、配列Ｎ−Ａｃ−ＩＦＶＩＮＱＫＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０５）、Ｎ−Ａｃ−ＭＦＩＩＮＲＮＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０６）またはＮ−Ａｃ−ＶＦＹＬＮＫＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０７）を有する直鎖ペプチドを含み得る。デスモグレインＣＡＲ配列は、環状ペプチド内に存在し得るが、必ずしも必須ではない。
【００１１】
他の特定の実施形態において、本明細書中に提供されるような調節剤は、以下を含み得る：（ａ）ＥＫＤ（ＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０８）、ＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０９）、ＩＥＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１０）、ＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１１）、ＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１２）、ＹＩＥＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１３）、ＹＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１４）、ＹＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１５）、ＦＹＩＥＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１６）、ＦＹＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１７）、ＦＹＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１８）、ＬＦＹＩＥＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１９）、ＬＦＹＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２０）、ＬＦＹＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２１））、ＥＲＤ（ＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２２）、ＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２３）、ＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２４）、ＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２５）、ＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２６）、ＹＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２７）、ＹＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２８）、ＹＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２９）、ＦＹＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３０）、ＦＹＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３１）、ＦＹＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３２）、ＬＦＹＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３３）、ＬＦＹＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３４）、ＬＦＹＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３５）、ＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３６）、ＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３７）、ＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３８）、ＹＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３９）、ＹＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４０）、ＹＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４１）、ＦＹＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４２）、ＦＹＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４３）、ＦＹＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４４）、ＬＦＹＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４５）、ＬＦＹＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４６）および　ＬＦＹＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４７））からなる群より選択される１つ以上のデスモコリンＣＡＲ配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入が異なり、その結果、デスモコリンにより媒介される機能を調節するアナログの能力が、さほど減少されない、上記配列のいずれかのアナログ。例えば、この因子は、配列Ｎ−Ａｃ−ＬＦＹＩＥＫＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４８）、Ｎ−Ａｃ−ＬＦＹＶＥＲＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４９）または　Ｎ−Ａｃ−ＬＦＹＩＥＲＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５０）を有する直鎖ペプチドを含み得る。デスモコリンＣＡＲ配列は、環状ペプチド内に存在し得るが、必ずしも必須ではない。
【００１２】
他の具体的な実施形態において、本明細書中に提供されるような調節剤は、以下を含み得る：（ａ）ＲＡＬ（ＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５１）、ＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５２）、ＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５３）、ＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５４）、ＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５５）、ＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５６）、ＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５７）、ＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５８）、ＣＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５９）、ＣＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６０）、ＣＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６１）、ＣＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６２）、ＣＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６３）、ＹＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６４）、ＹＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６５）、ＹＣＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６６）、ＹＣＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６７）、ＹＣＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６８）、ＹＣＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６９）、ＹＣＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７０）、ＩＹＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７１）、ＩＹＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７２）、ＩＹＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７３）、ＩＹＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７４）、ＩＹＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７５）、ＩＹＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７６）またはＩＹＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７７））からなる群より選択される、１つ以上のデスモグレイン−１　ＣＡＲ配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入が異なり、その結果、デスモグレインにより媒介される機能を調節するアナログの能力が、さほど減少されない、上記配列のいずれかのアナログ。このような配列を有する直鎖ペプチドは、Ｎ末端および／またはＣ末端において、ペプチドＮ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＭＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７８）およびＮ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＬＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７９）などに、改変され得る。
【００１３】
他の具体的な実施形態において、本明細書中に提供されるような調節剤は、以下を含み得る：（ａ）ＹＡＬ（ＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８０）、ＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８１）、ＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８２）、ＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８３）、ＧＹＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８４）、ＧＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８５）、ＧＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８６）、ＧＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８７）、ＧＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８８）、ＴＧＹＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８９）、ＴＧＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９０）、ＴＧＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９１）、ＴＧＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９２）、ＴＧＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９３）、ＬＴＧＹＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９４）、ＬＴＧＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９５）、ＬＴＧＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９６）、ＬＴＧＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９７）またはＬＴＧＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９８））からなる群より選択される、１つ以上のデスモグレイン−２　ＣＡＲ配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入が異なり、その結果、デスモグレインにより媒介される機能を調節するアナログの能力が、さほど減少されない、上記配列のいずれかのアナログ。このような配列を有する直鎖ペプチドは、Ｎ末端および／またはＣ末端において、ペプチドＮ−Ａｃ−ＬＴＧＹＡＬＤＡＲＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９９）などに、改変され得る。
【００１４】
他の具体的な実施形態において、本明細書中に提供されるような調節剤は、以下を含み得る：（ａ）ＲＡＬ（ＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５１）、ＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２００）、ＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０１）、ＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０２）、ＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０３）、ＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０４）、ＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５７）、ＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５８）、ＣＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０５）、ＣＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０６）、ＣＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０７）、ＣＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０８）、ＣＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０９）、ＴＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１０）、ＴＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１１）、ＴＣＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１２）、ＴＣＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１３）、ＴＣＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１４）、ＴＣＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１５）、ＴＣＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１６）、ＩＴＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１７）、ＩＴＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１８）、ＩＴＣＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１９）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２０）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２１）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２２）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２３））からなる群より選択される、１つ以上のデスモグレイン−３　ＣＡＲ配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入が異なり、その結果、デスモグレインにより媒介される機能を調節するアナログの能力が、さほど減少されない、上記配列のいずれかのアナログ。このような配列を有する直鎖ペプチドは、Ｎ末端および／またはＣ末端において、ペプチドＮ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＱＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２４）およびＮ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＬＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２５）などに、改変され得る。
【００１５】
他の特定の実施形態において、本明細書中に提供される調節剤としては、（ａ）ＹＡＴ、ＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２６）、ＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２７）、ＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２８）、ＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２９）、ＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３０）、ＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３１）、ＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３２）、ＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３３）、ＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３４）、ＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３５）、ＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３６）、ＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３７）、ＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３８）、ＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３９）、ＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４０）、ＹＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４１）、ＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４２）、ＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４３）、ＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４４）、ＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４５）、ＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４６）、ＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４７）、ＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４８）、ＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４９）、ＬＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５０）、ＬＹＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５１）、ＬＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５２）、ＬＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５３）、ＬＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５４）、ＬＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５５）、ＬＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５６）、ＬＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５７）、ＬＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５８）、ＬＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５９）、ＶＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６０）、ＶＹＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６１）、ＶＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６２）、ＶＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６３）、ＶＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６４）、ＶＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６５）、ＶＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６６）、ＶＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６７）、ＶＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６８）、ＶＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６９）、ＩＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７０）、ＩＹＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７１）、ＩＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７２）、ＩＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７３）、ＩＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７４）、ＩＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ０：２７５）、ＩＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７６）、ＩＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７７）、ＩＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７８）またはＩＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７９）からなる群より選択される１つ以上のＤｅｓｍｏｃｏｌｌｉｎ−１　ＣＡＲ配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入において異なり、その結果、デスモコリン媒介機能を調節する能力が実質的に減少しない、上記配列の任意のアナログが挙げられ得る。このような配列を有する線状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＬＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８０）Ｎ−Ａｃ−ＬＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８１）Ｎ−Ａｃ−ＶＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８２）Ｎ−Ａｃ−ＶＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８３）Ｎ−Ａｃ−ＩＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８４）およびＮ−Ａｃ−ＩＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８５）におけるように、Ｎ末端および／またはＣ末端において改変され得る。
【００１６】
他の特定の実施形態において、本明細書中に提供される調節剤としては、（ａ）ＦＡＴ、ＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８６）、ＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８７）、ＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８８）、ＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８９）、ＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９０）、ＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９１）、ＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９２）、ＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９３）、ＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９４）、ＩＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９５）、ＩＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９６）、ＩＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９７）、ＩＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９８）、ＩＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９９）、ＩＩＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３００）、ＩＩＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０１）、ＩＩＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０２）、ＩＩＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０３）、ＩＩＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０４）、ＬＩＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０５）、ＬＩＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０６）、ＬＩＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０７）、ＬＩＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０８）、ＬＩＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０９）からなる群より選択される１つ以上のＤｅｓｍｏｃｏｌｌｉｎ−２　ＣＡＲ配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入において異なり、その結果、デスモコリン媒介機能を調節する能力が実質的に減少しない、上記配列の任意のアナログが挙げられ得る。このような配列を有する線状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＩＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１０）およびＮ−Ａｃ−ＬＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１１）におけるように、Ｎ末端および／またはＣ末端において改変され得る。
【００１７】
他の特定の実施形態において、本明細書中に提供される調節剤としては、（ａ）ＹＡＳ、ＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１２）、ＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１３）、ＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１４）、ＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１５）、ＡＹＡＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１６）、ＡＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１７）、ＡＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１８）、ＡＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１９）、ＡＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２０）、ＩＡＹＡＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２１）、ＩＡＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２２）、ＩＡＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２３）、ＩＡＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２４）、ＩＡＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２５）、ＬＩＡＹＡＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２６）、ＬＩＡＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２７）、ＬＩＡＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２８）、ＬＩＡＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２９）、ＬＩＡＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３０）からなる群より選択される１つ以上のＤｅｓｍｏｃｏｌｌｉｎ−３　ＣＡＲ配列またはデスモコリン−４配列；あるいは（ｂ）１つ以上の置換、欠失、付加および／または挿入において異なり、その結果、デスモコリン媒介機能を調節する能力が実質的に減少しない、上記配列の任意のアナログが挙げられ得る。このような配列を有する線状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＬＩＡＹＡＳＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３１）におけるように、Ｎ末端および／またはＣ末端において改変され得る。
【００１８】
他の実施形態において、調節剤は、環式ペプチド内に存在するｄｓｃ　ＣＡＲ配列またはｄｓｇ　ＣＡＲ配列を含む。このような環式ペプチドは、以下の式：
【００１９】
【化６】
2004504809.tif 000003
を有し得、ここで、Ｗは、ＮＱＫ、ＮＲＮ、ＮＫＤ、ＥＫＤ、ＥＲＤ、ＲＡＬ、ＹＡＬ、ＹＡＴ、ＦＡＴ、およびＹＡＳからなる群より選択されるトリペプチドであり；ここで、Ｘ１およびＸ２は、任意であり、存在するならば、独立して、残基がペプチド結合に連結するアミノ酸残基およびその組み合わせからなる群より選択され、そしてここで、Ｘ１およびＸ２は、独立して、０〜１０残基のサイズの範囲であり、その結果、Ｘ１およびＸ２に含まれる残基の合計が、１〜１２の範囲であり；ここで、Ｙ１およびＹ２は、独立して、アミノ酸残基からなる群より選択され、そしてここで、共有結合がＹ１とＹ２との間に形成され；そしてＺ１およびＺ２が、任意であり、存在するならば、独立して、残基がペプチド結合に連結するアミノ酸残基およびその組み合わせからなる群より選択される。
【００２０】
本発明の他の局面において、上記調節剤をコードするポリヌクレオチドが、このようなポリヌクレオチドを含む発現ベクターおよびこのような発現ベクターで形質転換されたかまたはトランスフェクトされた宿主細胞とともに提供される。
【００２１】
本発明は、さらに、上記ｄｓｇ　ＣＡＲ配列またはｄｓｃ　ＣＡＲ配列に特異的に結合し、そしてデスモソームカドヘリン媒介機能を調節する抗体またはその抗体結合フラグメントを含む調節剤を提供する。
【００２２】
さらなる局面において、本発明は、上に提供されるデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の任意の１つの非ペプチド模倣物を含む調節剤を提供する。
【００２３】
特定の実施形態において、調節剤は、薬物、検出マーカー、標的薬剤および／または支持材料に連結され得る。調節剤はまた、または代替として、以下の１つ以上を含む：（ａ）ｄｓｃ　ＣＡＲ配列またはｄｓｇ　ＣＡＲ配列以外の細胞接着認識配列；および／または（ｂ）ｄｓｃ　ＣＡＲ配列またはｄｓｇ　ＣＡＲ配列以外のＣＡＲ配列に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメント。例えば、このような接着分子は、古典的カドヘリン、非古典的カドヘリン、インテグリン、オクルディン、クラウディン（ｃｌａｕｄｉｎ）、Ｎ−ＣＡＭ、フィブロネクチン、ラミニンまたは他の細胞外マトリクスタンパク質であり得る。
【００２４】
さらなる局面において、薬学的に受容可能なキャリアとともに、上記調節剤を含む薬学的組成物が提供される。このような組成物は、さらに、薬物ならびに／あるいは（ａ）ｄｓｃ　ＣＡＲ配列もしくはｄｓｇ　ＣＡＲ配列以外の細胞接着認識配列を含むペプチド；および／または（ｂ）ｄｓｃ　ＣＡＲ配列もしくはｄｓｇ　ＣＡＲ配列以外のＣＡＲ配列に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントの１つ以上を含み得る。
【００２５】
本発明はさらに、他の局面において、１つ以上のデスモソームカドヘリン媒介機能を調節するための方法を提供する。このような方法は、一般的に、ｄｓｃ発原細胞またはｄｓｃ発現細胞を上記のような調節剤と接触させる工程を包含する。適切な細胞としては、限定しないが、上皮細胞、内皮細胞および腫瘍細胞が挙げられる。このような方法において、調節剤は、必要ではないが、上記薬学的組成物内に存在する。
【００２６】
本発明は、さらに、他の局面において、細胞接着を調節するための方法を提供し、この方法は、ｄｓｃ発現細胞および／またはｄｓｇ発現細胞を上記の調節剤または薬学的組成物と接触させる工程を包含する。このような調節剤および組成物は、細胞接着を阻害または増強し得る。
【００２７】
他の局面において、本発明は、哺乳動物においてｄｓｃ発現細胞および／またはｄｓｇ発現細胞の接着を阻害するための方法を提供し、この方法は、哺乳動物に上記調節剤を投与する工程を包含し、ここで、この調節剤は、ｄｓｃ媒介細胞接着および／またはｄｓｇ媒介細胞接着を阻害する。
【００２８】
さらなる局面において、本発明は、哺乳動物の皮膚を通る薬物の送達を増強するための方法を提供し、この方法は、哺乳動物の上皮細胞を上記薬物および調節剤と接触させる工程を包含し、ここで、この接触工程は、上皮細胞を横切る薬物の通過を可能にするのに十分な条件および時間で実施され、そしてこの調節剤は、ｄｓｇ媒介細胞接着および／またはｄｓｃ媒介細胞接着を阻害する。このような調節剤は、哺乳動物の血流に通過し得る。特定の実施形態において、調節剤は、薬物に連結される。この接触工程は、必要ではないが、調節剤および薬物を含む皮膚パッチを介して実行され得、そしてこのような皮膚パッチは、さらに本明細書中に提供される。
【００２９】
哺乳動物での血液サンプリングを容易にするための方法がさらに提供され、この方法は、哺乳動物の上皮細胞を上記調節剤と接触させる工程を包含し、ここで、この調節剤が、ｄｓｇ媒介細胞接着および／またはｄｓｃ媒介細胞接着を阻害し、そしてこの接触工程が、上皮細胞を横切る１つ以上の血液成分の通過を可能にするのに十分な条件および時間で実施される。接触工程は、調節剤および（必要に応じて）目的の血液成分を検出するための試薬を含む皮膚パッチを介して実行され得、このようなキットは、本明細書中で具体的に提供される。特定の実施形態において、上皮細胞は、皮膚細胞であるかまたは歯肉細胞である。
【００３０】
さらなる局面において、哺乳動物の腫瘍への薬物の送達を増強するための方法が提供され、この方法は、上記調節剤を哺乳動物に投与する工程を包含し、ここで、この調節剤は、ｄｓｇ媒介細胞接着またはｄｓｃ媒介細胞接着を阻害する。適切な腫瘍としては、限定しないが、膀胱腫瘍、卵巣腫瘍、乳房腫瘍、胃腫瘍および腎臓が挙げられ、そして調節剤は、腫瘍に局所的に投与され得るかまたは全身的に投与され得る。
【００３１】
他の局面において、本発明は、哺乳動物における癌を処置するための方法を提供し、この方法は、上記調節剤を哺乳動物に投与する工程を包含し、ここで、この調節剤は、ｄｓｇ媒介細胞接着またはｄｓｃ媒介細胞接着を阻害する。この哺乳動物は、癌腫、白血病または黒色腫のような癌に冒され得、この調節剤は、腫瘍にまたは全身的に投与され得る。
【００３２】
本発明は、さらに、他の局面において、デスモソームカドヘリン発現細胞におけるアポトーシスを誘導するための方法を提供し、この方法は、デスモソームカドヘリン発現細胞を上記調節剤と接触させる工程を包含し、この調節剤は、デスモソームカドヘリン媒介細胞接着を阻害する。
【００３３】
他の局面において、本発明は、デスモソームカドヘリン発現細胞の接着を増強するための方法を提供し、この方法は、ｄｓｇ発現細胞またはｄｓｃ発現細胞を上記薬剤と接触させる工程を包含し、ここで、この調節剤は、ｄｓｃ媒介細胞接着またはｄｓｇ媒介細胞接着を増強し、ここで、この接触工程は、細胞の接着を検出可能に増強するのに十分な条件および時間で実施される。特定の実施形態において、このような方法における使用のための調節剤は、支持分子または固体支持体に連結される。
【００３４】
関連する局面において、本発明は、哺乳動物において創傷治癒を容易にするためおよび／または瘢痕組織を減少させるための方法を提供し、この方法は、哺乳動物における創傷を上記調節剤と接触させる工程を包含し、ここでこの調節剤は、デスモソームカドヘリン媒介細胞接着を増強する。特定の実施形態において、このような方法における使用のための調節剤は、支持分子または固体支持体に連結される。
【００３５】
他の局面において、哺乳動物に移植された外来組織の接着を増強するための方法が提供され、この方法は、哺乳動物中の外来組織の移植部位を上記調節剤と接触させる工程を包含し、この調節剤は、ｄｓｇ媒介細胞接着またはｄｓｃ媒介細胞接着を増強する。このような外来組織は、皮膚移植片または器官移植であり得る。特定の実施形態において、このような方法における使用のための調節剤は、支持体分子または固体支持体に連結される。
【００３６】
さらなる局面において、哺乳動物における自己免疫性水疱形成障害を処置するための方法が提供され、この方法は、哺乳動物に上記調節剤を投与する工程を包含し、ここで、この調節剤は、デスモソームカドヘリン媒介細胞接着を増強する。特定の実施形態において、このような薬剤は、局所的に水疱に投与され得る。このような方法における使用のための調節剤は、支持分子または固体支持体に連結され得る。
【００３７】
本発明は、さらに、サンプル中のデスモソーム発現細胞の存在を検出するための方法を提供し、この方法は、（ａ）サンプルを上記ｄｓｇ　ＣＡＲ配列またはｄｓｃ　ＣＡＲ配列に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントと、抗体カドヘリン複合体の形成を可能にする条件および時間で接触させる工程；および（ｂ）抗体カドヘリン複合体のレベルを検出し、そしてそれからサンプル中のデスモソームカドヘリン発現細胞の存在を検出する工程を包含する。この抗体は、支持材料または検出マーカー（例えば、蛍光マーカー）に連結され得る。特定の実施形態において、この検出工程は、蛍光活性化細胞分類を使用して実行される。
【００３８】
サンプル中のｄｓｇ発現細胞またはｄｓｃ発現細胞の存在を検出するためのキットがまた提供される。このようなキットは、（ａ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメント；および検出試薬を含み得る。
【００３９】
他の局面において、本発明は、デスモソームカドヘリン媒介機能を調節し得る化合物を同定するための方法を提供し、この方法は、（ａ）上記ｄｓｇ　ＣＡＲ配列またはｄｓｃ　ＣＡＲ配列に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントを試験化合物と接触させる工程；および（ｂ）試験化合物に結合する抗体またはフラグメントのレベルを検出して、そしてそれからデスモソームカドヘリン媒介細胞接着を調製し得る化合物を同定する工程を包含する。
【００４０】
本発明のこれらおよび他の局面は、以下の詳細な説明および添付の図面を参照して明かとなる。本明細書中に開示される全ての参考文献は、それぞれが個々に援用されるかのように全体において参考として本明細書によって援用される。
【００４１】
（発明の詳細な説明）
上記のように、本発明は、デスモソームカドヘリン媒介機能（例えば、細胞接着）を調節するための方法を提供する。本発明は、デスモソームカドヘリンに存在する以前は未知であった細胞接着認識（ＣＡＲ）配列の同定に、一部基づく。調節剤は、以下に記載されるように、１以上のさらなる細胞接着分子ＣＡＲ配列を含むか、または含まない、１以上のこのようなデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列（またはそのアナログもしくは模倣物）を含み得る。ペプチドＣＡＲ配列は、線状ペプチドまたは環状ペプチド内に存在し得る。あるいは、またはさらに、調節剤は、１以上のデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み得、そして／または調節剤は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に特異的に結合する配列（例えば、抗体またはその抗原結合フラグメント）を含み得る。
【００４２】
一般に、デスモソームカドヘリン媒介機能を調節するために、デスモソームカドヘリンを発現する細胞は、インビボまたはインビトロのいずれかで、調節剤と接触させる。特定の局面において、本明細書中で提供される方法は、デスモソームカドヘリン媒介機能を阻害する。このような方法としては、例えば、所望されない細胞接着によって特徴付けられる疾患または他の症状を処置するための方法、または特定の組織または腫瘍への薬物送達を容易にするための方法が挙げられる。特定の方法は、細胞接着（例えば、癌細胞接着）を阻害し得る。あるいは、調節剤は、例えば、リンカーを介して、マトリクスまたは別の調節剤に連結される場合に、デスモソームカドヘリン媒介機能（例えば、細胞接着）を増強するために使用され得る。このような結合体は、例えば、創傷治癒または移植片の接着を容易にするために使用され得る。
（調節剤）
本明細書中で使用される場合、用語「調節剤」は、以下の成分の少なくとも１つを含む分子を言及する：
（ａ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列と少なくとも５０％同一である、線状ペプチド配列または環状ペプチド配列（すなわち、少なくとも５０％の配列同一性を保持する、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列またはそのアナログ）；
（ｂ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の模倣物（例えば、ペプチド模倣物または小分子模倣物）；
（ｃ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に特異的に結合する物質（例えば、抗体またはその抗原結合フラグメント）；および／または
（ｄ）デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列またはそのアナログを含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【００４３】
調節剤は、全体として、上記エレメントの１以上からなり得るか、あるいはペプチド領域および／または非ペプイド領域をさらに含み得る。さらなるペプチド領域は、デスモソームカドヘリン（好ましくは、ＣＡＲ配列を含む細胞外ドメイン）由来であり得、そして／または異種であり得る。特定の好ましい実施形態において、調節剤は、デスモソームカドヘリン内に存在する、８５以下の連続的アミノ酸残基、および好ましくは、５０以下の連続的アミノ酸残基を含む。
【００４４】
調節剤は、デスモソームカドヘリンによって媒介された機能をさらに調製し得る。このような活性は、一般に、例えば、本明細書中で提供される代表的なアッセイを使用して評価され得る。特定の調節剤は、デスモソームカドヘリン分子間および／またはデスモソームカドヘリンと異なる接着分子との間の相互作用を阻害する。全長デスモソームカドヘリンによって阻害される機能（例えば、細胞接着）に関して、このような調節剤は、全長デスモソームカドヘリンに比べて実質的に減少されない活性を有する機能を阻害し得る（すなわち、この調節剤は、カドヘリンを発現する細胞と接触する場合に、可溶性カドヘリンと少なくとも同程度良好に機能を阻害する）。例えば、調節剤は、デスモソームカドヘリン発現細胞の接着を防止および／または崩壊する際に、可溶性デスモソームカドヘリンと同程度有効であり得る。あるいは、デスモソームカドヘリン発現細胞の接着を増強するために、調節剤は、抗体もしくはその抗原結合フラグメント、および／または支持材料に連結される複数のペプチドもしくは模倣物を含む。このような調節剤は、デスモソームカドヘリン発現細胞と結合する生物学的な接着剤として機能し得、そして細胞接着の検出可能な増強（好ましくは、カドヘリンに対して固定化されたデスモソームカドヘリンまたはこのカドヘリンに対して指向された抗体について観測されたものと少なくとも同程度強力な増強）が得られるべきである。
【００４５】
本明細書中で使用される場合、用語「非古典的カドヘリン」は、特徴的なカドヘリンの繰り返しを含むが、ＨＡＶ　ＣＡＲ配列を含まない、ポリペプチドを言及する。本明細書中で使用される場合、「カドヘリンの繰り返し」は、約１１０アミノ酸残基長（一般に、１００〜１２０残基、好ましくは、１０５〜１１５残基）であり、細胞外ドメインを含み、そして同一のオーダーで、ほぼ同一の位置に、３種のカルシウム結合モチーフ（ＤＸＤ、ＸＤＸＥおよびＤＸＸＤＸ；それぞれＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯＳ：３３２および３３３）を含む、アミノ酸配列を言及する（例えば、図２を参照のこと）。細胞外ドメインの存在は、例えば、以下の１以上が存在するような周知の技術を使用して、一般に決定され得る：親水性配列、抗体によって認識される領域、トリプシンによって切断される領域および／またはグリコシル化モチーフを有する強力なグリコシル化部位（Ａｓｎ−Ｘ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）。第２のカルシウム結合モチーフは、一般に、配列ＬＤＲＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２）を有するが、保存的な置換基を有する配列の変異体がまた観測され、これらには、以下が挙げられる：ＭＤＲＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３４）、ＬＤＦＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３５）、ＬＤＹＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３６）、ＩＤＲＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３７）、ＶＤＲＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３８）およびＩＤＦＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３９）。ほどんどのカドヘリン繰り返し内で、この第３のカドヘリン結合モチーフは、配列［Ｌ，Ｉ，Ｖ］−Ｘ−［Ｌ，Ｉ，Ｖ］−Ｘ−Ｄ−Ｘ−Ｎ−Ｄ−［Ｎ，Ｈ］−Ｘ−Ｐ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３４０）を有し、ここで、括弧内に示された残基は、引用された残基のいずれか１つであり得る。好ましい第３のカルシウム結合モチーフは、配列ＤＸＮＤＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１）を有するが、Ｄ残基の一方または両方は、Ｅによって置換され得る。カドヘリン繰り返し内の相同性は、ＡＬＩＧＮアルゴリズム（Ｍｙｅｒｓ　ａｎｄ　Ｍｉｌｌｅｒ、ＣＡＢＩＯＳ４：１１−１７、１９８８）によって決定されるように、一般的に、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％である。ほどんどのカドヘリンは、図１Ｂ〜１ＡＡに示されるように、原形質膜を横切る疎水性ドメイン、および必要に応じて、１つ以上の細胞質ドメインと共に、少なくとも５つのカドヘリン繰り返しを含む。しかし、時折、カドヘリンは、モチーフと結合する３つより少ないカルシウムを含む細胞外ドメインを、１以上のカドヘリン繰り返しで置換し得る。例えば、図２に示されるように、ＬＩ−カドヘリンの第２の細胞外ドメインは、第１のカルシウム結合モチーフ（ＤＸＤ）のみを含む。上記のように、異型またはＩＩ型のカドヘリンとしては、カドヘリン−５（ＶＥ−カドヘリン）、カドヘリン−６（Ｋ−カドヘリン）、カドヘリン−７、カドヘリン−８、カドヘリン−１１（ＯＢカドヘリン）、カドヘリン−１２、カドヘリン−１４、カドヘリン−１５およびＰＢ−カドヘリンが挙げられる。ＩＩＩ〜Ｘ型としては、ＬＩ−カドヘリン、Ｔ−カドヘリン、プロトカドヘリン（例えば、プロトカドヘリン４２、４３および６８）、デスモコリン（ｄｅｓｍｏｃｏｌｌｉｎ）（例えば、デスモコリン１、２、３および４）、デスモグレイン（ｄｅｓｍｏｇｌｅｉｎ）（例えば、デスモグレイン１および２）、およびカドヘリン関連ニューロンレセプターが挙げられる。
【００４６】
用語「デスモソームカドヘリン」は、デスモソームとして公知の細胞間連結内に存在する、非古典的なカドヘリンを言及する。デスモソームカドヘリンとしては、デスモグレインおよびデスモコリンが挙げられる（例えば、Ｋｉｎｇら、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　１８：１８５−１９４、１９９３；Ｐａｒｋｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６：１０４３８−１０４４５、１９９１；Ｋｉｎｇら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１０５：３１４−３２１、１９９５；Ｋａｗａｍｕｒａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：２６２９５−２６３０２、１９９４；Ｗｈｅｅｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　８８：４７９６−４８００；およびＫｏｃｈら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５５：２００−２０８、１９９１を参照のこと）。デスモグレインおよびデスモコリンは、デスモソームを有する細胞（例えば、上皮細胞、心筋細胞および髄膜細胞）によって発現される。これらのカドヘリンは、このような細胞の細胞内接着に関連し、そしてヘテロタイプの様式で機能し得、これにより、デスモコリンのイソ型およびデスモグレインのイソ型の両方は、接着のために必要とされる。デスモグレインおよびデスモコリンは、多数の自己免疫水疱形成障害（例えば、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡および細胞間ＩｇＡ皮膚疾患）に関連し、そしていくらかのヒトの癌における発現を減少させることが示されている。公知のデスモソームカドヘリンの種々の細胞外ドメインの配列は、図２および３（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ４〜４３およびＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ４４〜５７）に示されている。
【００４７】
本明細書中で使用される場合、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列は、本明細書中に記載されるように、天然に存在するデスモソームカドヘリン内に存在し、そしてデスモソームカドヘリン媒介機能（例えば、細胞接着）を検出可能に調節し得る、アミノ酸配列である。言い換えれば、デスモソームカドヘリン発現細胞とＣＡＲ配列を含むペプチドとの接触により、本明細書に提供される代表的なアッセイの少なくとも１つを使用して、デスモソームカドヘリン媒介機能の検出可能な変化が生じる。ＣＡＲ配列は、一般に、デスモソームカドヘリンまたは他の接着分子（すなわち、細胞表面上のレセプターを介して細胞接着を媒介する分子）により、インビボで認識され、そして最大の異好性相互作用および／または同種親和性相互作用に必要である。ＣＡＲ配列は、任意の長さであり得るが、一般に、少なくとも３個のアミノ酸残基、好ましくは、４〜１６個のアミノン酸残基、そしてより好ましくは、５〜９個のアミノ酸残基を含む。ペプチド調節剤は、任意の数のアミノ酸残基を含み得るが、好ましい調節剤は、３〜５０個の残基、好ましくは、４〜１６個の残基、そしてより好ましくは、６〜１５個の残基を含む。
【００４８】
本発明の文脈の中で、特定の非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列は、以下のコンセンサス配列を共有することが、見出されている：
Ａａａ−Ｐｈｅ−Ｂａａ−Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ−Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ−Ｃａａ−Ｄａａ−Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ−Ｇｌｙ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３）。
【００４９】
コンセンサス配列内の、Ａａａ、Ｂａａ、ＣａａおよびＤａａは、独立して選択されたアミノ酸残基を示し、「Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｖａｌ」は、イソロイシン、ロイシンまたはバリンであるアミノ酸を示し；「Ａｓｐ／Ａｓｎ／Ｇｌｕ」は、アスパラギン酸、アスパラギンまたはグルタミン酸であるアミノ酸を示し；そして「Ｓｅｒ／Ｔｈｒ／Ａｓｎ」は、セリン、トレオニンまたはアスパラギンであるアミノ酸を示す。代表的なデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列および他の非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列は、表Ｉ内に提供されている。本明細書中で具体的に提供されているＣＡＲ配列は、このような代表的なＣＡＲ配列の一部、およびこのような配列の少なくとも一部を含むより長いポリペプチドをさらに含む。さらなる非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列は、本明細書に提供されている非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列に対する配列相同性に基づいて、そして本明細書中に記載の代表的なアッセイにおける、このような配列を含むペプチドの、非古典的なカドヘリン媒介機能を調節する能力に基づいて同定され得る。特定の実施形態において、調節剤は、上記コンセンサス配列を満足するデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の、少なくとも３個の連続する残基、好ましくは、少なくとも５個の連続する残基、およびより好ましくは、少なくとも７個の連続する残基を含む。同様に、異なる非古典的なカドヘリンのＣＡＲ配列が、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列と組み合わせて使用される場合、このようなＣＡＲ配列は、上記コンセンサス配列を満足するデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の、少なくとも３個の連続する残基、好ましくは、少なくとも５個の連続する残基、そしてより好ましくは、少なくとも７個の連続する残基を含むべきである。
（表Ｉ代表的な非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列）
【００５０】
【表１】
2004504809.tif 000004
2004504809.tif 000005
非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列は、一般に、物理的に接着分子の結合部位内またはその部位近くの、カドヘリン分子内（すなわち、１０個のアミノ酸内、そして好ましくは、５個のアミノ酸内）に配置される。結合部位の配置は、一般に、周知の技術（例えば、非古典的なカドヘリンの一部の、同一の非古典的なカドヘリンまたは別の接着分子に結合する能力を評価する技術）を使用して決定され得る。任意の標準的な結合アッセイは、このような評価のために使用され得る。非古典的なカドヘリンまたは他の接着分子によるＣＡＲ配列の認識により、接着分子の機能（例えば、細胞接着）での測定可能な効果が得られる。ＣＡＲ配列を含むペプチドは、一般に、本明細書中に記載されるように連結されない場合、このような機能を阻害し、接着分子の機能のエンハンサーを形成する。
【００５１】
特定の好ましいデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列は、表Ｉに提供されるデスモグレイン配列またはデスモコリン配列の、３〜９個のアミノ酸残基を含む。例えば、ＣＡＲ配列は、表Ｉの９個のアミノ酸配列中、３、４または５個の残基を含み得る。特定の実施形態において、ＣＡＲ配列は、表Ｉの配列の少なくとも５〜７個の残基を含み得る。デスモグレインＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１以上を含み得る：ＮＱＫ、ＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６３）、ＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤＮＯ：６４）、ＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６５）、ＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６６）、ＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６７）、ＶＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６８）、ＶＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６９）、ＶＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤＮＯ：７０）、ＦＶＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７１）、ＦＶＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７２）、ＦＶＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱＩＤ　ＮＯ：７３）、ＩＦＶＩＮＱＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７４）、ＩＦＶＩＮＱＫＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７５）、ＩＦＶＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７６）、ＮＲＮ、ＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７７）、ＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７８）、ＩＮＲＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７９）、ＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８０）、ＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８１）、ＩＩＮＲＮ（ＳＥＱＩＤ　ＮＯ：８２）、ＩＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８３）、ＩＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８４）、ＦＩＩＮＲＮ（ＳＥＱ　ＩＤＮＯ：８５）、ＦＩＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８６）、ＦＩＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８７）、ＭＦＩＩＮＲＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８８）、ＭＦＩＩＮＲＮＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８９）、ＭＦＩＩＮＲＮＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９０）、ＮＫＤ、ＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９１）、ＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９２）、ＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９３）、ＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９４）、ＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９５）、ＹＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９６）、ＹＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９７）、ＹＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９８）、ＦＹＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９９）、ＦＹＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１００）、ＦＹＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０１）、ＶＦＹＬＮＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０２）、ＶＦＹＬＮＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０３）およびＶＦＹＬＮＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０４）。このような配列を有する線状ペプチドは、以下のペプチドのようにＮ−末端および／またはＣ末端で改変され得る：Ｎ−Ａｃ−ＩＦＶＩＮＱＫＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０５）、Ｎ−Ａｃ−ＭＦＩＩＮＲＮＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０６）およびＮ−Ａｃ−ＶＦＹＬＮＫＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０７）。
【００５２】
デスモコリンＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１つ以上を含み得る：ＥＫＤ、ＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０８）、ＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０９）、ＩＥＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１０）、ＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１１）、ＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１２）、ＹＩＥＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１３）、ＹＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１４）、ＹＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１５）、ＦＹＩＥＫＤ　（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１６）、ＦＹＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１７）、ＦＹＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１８）、ＬＦＹＩＥＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１９）、ＬＦＹＩＥＫＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２０）、ＬＦＹＩＥＫＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２１）、ＥＲＤ、ＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２２）、ＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２３）、ＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２４）、ＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２５）、ＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２６）、ＹＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２７）、ＹＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２８）、ＹＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２９）、ＦＹＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３０）、ＦＹＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３１）、ＦＹＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３２）、ＬＦＹＶＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３３）、ＬＦＹＶＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３４）、ＬＦＹＶＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３５）、ＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３６）、ＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３７）、ＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３８）、ＹＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３９）、ＹＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４０）、ＹＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４１）、ＦＹＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４２）、ＦＹＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４３）、ＦＹＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４４）、ＬＦＹＩＥＲＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４５）、ＬＦＹＩＥＲＤＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４６）およびＬＦＹＩＥＲＤＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４７）。このような配列を有する直鎖状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＬＦＹＩＥＫＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４８）、Ｎ−Ａｃ−ＬＦＹＶＥＲＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４９）およびＮ−Ａｃ−ＬＦＹＩＥＲＤＴＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５０）におけるように、Ｎ末端および／またＣ末端で改変され得る。
【００５３】
さらなるデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列は、図３に示されるＥＣ１ドメイン由来である。デスモグレイン−１ＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１つ以上を含み得る：ＲＡＬ、ＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５１）、ＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５２）、ＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５３）、ＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５４）、ＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５５）、ＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５６）、ＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５７）、ＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５８）、ＣＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５９）、ＣＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６０）、ＣＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６１）、ＣＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６２）、ＣＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６３）、ＹＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６４）、ＹＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６５）、ＹＣＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６６）、ＹＣＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６７）、ＹＣＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６８）、ＹＣＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６９）、ＹＣＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７０）、ＩＹＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７１）、ＩＹＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７２）、ＩＹＲＡＬＮＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７３）、ＩＹＲＡＬＮＳＭ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７４）、ＩＹＲＡＬＮＳＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７５）、ＩＹＲＡＬＮＳＭＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７６）およびＩＹＲＡＬＮＳＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７７）。このような配列を有する直鎖状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＭＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７８）およびＮ−Ａｃ−ＩＹＲＡＬＮＳＬＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７９）におけるように、Ｎ末端および／またＣ末端で改変され得る。
【００５４】
デスモグレイン−２ＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１つ以上を含み得る：ＹＡＬ、ＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８０）、ＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８１）、ＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８２）、ＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８３）、ＧＹＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８４）、ＧＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８５）、ＧＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８６）、ＧＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８７）、ＧＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８８）、ＴＧＹＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８９）、ＴＧＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９０）、ＴＧＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９１）、ＴＧＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９２）、ＴＧＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９３）、ＬＴＧＹＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ　１９４）、ＬＴＧＹＡＬＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９５）、ＬＴＧＹＡＬＤＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９６）、ＬＴＧＹＡＬＤＡＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９７）、ＬＴＧＹＡＬＤＡＲＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９８）。このような配列を有する直鎖状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＬＴＧＹＡＬＤＡＲＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９９）におけるように、Ｎ末端および／またはＣ末端において改変され得る。
【００５５】
デスモグレイン−３ＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１つ以上を含み得る：ＲＡＬ、ＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５１）、ＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２００）、ＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０１）、ＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０２）、ＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０３）、ＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０４）、ＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５７）、ＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１５８）、ＣＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０５）、ＣＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０６）、ＣＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０７）、ＣＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０８）、ＣＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０９）、ＴＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１０）、ＴＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１１）、ＴＣＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１２）、ＴＣＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１３）、ＴＣＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１４）、ＴＣＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１５）、ＴＣＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１６）、ＩＴＣＲＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１７）、ＩＴＣＲＡＬＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１８）、ＩＴＣＲＡＬＮＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２１９）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２０）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＬ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２１）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＱＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２２）、ＩＴＣＲＡＬＮＡＬＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２３）。このような配列を有する直鎖状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＱＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２４）およびＮ−Ａｃ−ＩＴＣＲＡＬＮＡＬＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２５）におけるように、Ｎ末端および／またＣ末端で改変され得る。
【００５６】
デスモコリン−１ＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１つ以上を含み得る：ＹＡＴ、ＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２６）、ＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２７）、ＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２８）、ＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２２９）、ＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３０）、ＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３１）、ＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３２）、ＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３３）、ＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３４）、ＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３５）、ＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３６）、ＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３７）、ＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３８）、ＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３９）、ＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４０）、ＹＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４１）、ＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４２）、ＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４３）、ＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４４）、ＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４５）、ＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４６）、ＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４７）、ＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４８）、ＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４９）、ＬＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５０）、ＬＹＧＹＡＴＴ　（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５１）、ＬＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５２）、ＬＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５３）、ＬＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５４）、ＬＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５５）、ＬＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５６）、ＬＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５７）、ＬＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５８）、ＬＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５９）、ＶＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６０）、ＶＹＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６１）、ＶＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６２）、ＶＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６３）、ＶＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６４）、ＶＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６５）、ＶＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６６）、ＶＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６７）、ＶＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６８）、ＶＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６９）、ＩＹＧＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７０）、ＩＹＧＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７１）、ＩＹＧＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７２）、ＩＹＧＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７３）、ＩＹＧＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７４）、ＩＹＡＹＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７５）、ＩＹＡＹＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７６）、ＩＹＡＹＡＴＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７７）、ＩＹＡＹＡＴＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７８）およびＩＹＡＹＡＴＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２７９）。このような配列を有する直鎖状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＬＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８０）、Ｎ−Ａｃ−ＬＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８１）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８２）、Ｎ−Ａｃ−ＶＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８３）、Ｎ−Ａｃ−ＩＹＧＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８４）およびＮ−Ａｃ−ＩＹＡＹＡＴＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８５）におけるように、Ｎ末端および／またＣ末端で改変され得る。
【００５７】
デスモコリン−２　ＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１つ以上を含み得る：ＦＡＴ、ＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８６）、ＦＡＴＴＰ　（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８７）、ＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８８）、ＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２８９）、ＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９０）、ＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９１）、ＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９２）、ＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９３）、ＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９４）、ＩＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９５）、ＩＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９６）、ＩＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９７）、ＩＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９８）、ＩＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９９）、ＩＩＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３００）、ＩＩＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０１）、ＩＩＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０２）、ＩＩＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０３）、ＩＩＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０４）、ＬＩＡＦＡＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０５）、ＬＩＡＦＡＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０６）、ＬＩＡＦＡＴＴＰ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０７）、ＬＩＡＦＡＴＴＰＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０８）、ＬＩＡＦＡＴＴＰＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０９）。このような配列を有する直鎖状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＩＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１０）およびＮ−Ａｃ−ＬＩＡＦＡＴＴＰＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１１）におけるように、Ｎ末端および／またはＣ末端で改変され得る。
【００５８】
デスモコリン−３またはデスモコリン−４ＣＡＲ配列は、例えば、以下の配列の１つ以上を含み得る：ＹＡＳ、ＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１２）、ＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１３）、ＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１４）、ＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１５）、ＡＹＡＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１６）、ＡＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１７）、ＡＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１８）、ＡＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１９）、ＡＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２０）、ＩＡＹＡＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２１）、ＩＡＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２２）、ＩＡＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２３）、ＩＡＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２４）、ＩＡＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２５）、ＬＩＡＹＡＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２６）、ＬＩＡＹＡＳＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２７）、ＬＩＡＹＡＳＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２８）、ＬＩＡＹＡＳＴＡＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３２９）、ＬＩＡＹＡＳＴＡＤＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３３０）。このような配列を有する直鎖状ペプチドは、ペプチドＮ−Ａｃ−ＬＩＡＹＡＳＴＡＤＧ−ＮＨ２（ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ０：３３１）におけるように、Ｎ末端および／またはＣ末端で改変され得る。
【００５９】
当業者は、類似のペプチド配列が、上記のようなＣＡＲ配列の同定の後に、他のカドヘリンによって媒介される機能を調節するように設計され得ることを認識する。
【００６０】
上記の特定のペプチド配列は、複数の非古典的なカドヘリンによって媒介される機能を調節し得ることが明らかである。一般に、デスモソームカドヘリン由来の多数の保存的残基を含むペプチドは、そのカドヘリンに対してより大きな特異性を有する。さらに、さらなる隣接配列が、特異性を増強するように含まれ得る。このような隣接配列が、図２および３に提供される配列に基づいて、または公開された配列に基づいて同定され得る。特異性（すなわち、異なるカドヘリンによって媒介される機能の調節に対して増強されるデスモソームカドヘリン機能の調節）を達成するために、２〜５個の隣接残基（好ましくは、ＣＡＲ配列のいずれかの側方の少なくとも１つの残基）の添加が、一般的に十分である。
【００６１】
上記のように、本明細書中に提供された調節剤は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列のアナログまたは模倣物を含み得る。アナログは、一般的に、ネイティブなデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に対する少なくとも５０％の同一性を保持し、そして本明細書中に記載されるようなデスモソームカドヘリン媒介機能を調節する。このようなアナログは、好ましくは、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の少なくとも３つの保存的残基およびより好ましくは少なくとも５つの保存的残基を含む。アナログは、種々のアミノ酸置換、付加、欠失、および／または改変（例えば、側鎖改変）のいずれかを含み得る。好ましいアミノ酸置換は保存的である。「保存的置換」は、アミノ酸が、類似の特性を有する別のアミノ酸で置換される置換であり、その結果、ペプチド化学の当業者は、ポリペプチドの二次構造およびヒドロパシー特性が実質的に変化しないことを予期する。アミノ酸置換は、一般に、残基の極性、電荷、溶解性、疎水性、親水性および／または両親媒性の性質における類似性に基づいてなされ得る。例えば、負に荷電したアミノ酸としては、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられ；正に荷電したアミノ酸としては、リジンおよびアルギニンが挙げられ；そして類似の親水性性値を有する非荷電の極性ヘッド基を有するアミノ酸としては、ロイシン、イソロイシンおよびバリン；グリシンおよびアラニン；アスパラギンおよびグルタミン；ならびにセリン、スレオニン、フェニルアラニンおよびチロシンが挙げられる。保存的な変化を表し得るアミノ酸の他の群としては、以下が挙げられる：（１）ａｌａ、ｐｒｏ、ｇｌｙ、ｇｌｕ、ａｓｐ、ｇｌｎ、ａｓｎ、ｓｅｒ、ｔｈｒ；（２）ｃｙｓ、ｓｅｒ、ｔｙｒ、ｔｈｒ；（３）ｖａｌ、ｉｌｅ、ｌｅｕ、ｍｅｔ、ａｌａ、ｐｈｅ；（４）ｌｙｓ、ａｒｇ、ｈｉｓ；および（５）ｐｈｅ、ｔｙｒ、ｔｒｐ、ｈｉｓ。デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列アナログの重要な決定特徴は、デスモソームカドヘリン媒介機能を調節する能力であり、これは、本明細書中に提供される代表的なアッセイを使用して、評価され得る。
【００６２】
模倣物は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列にコンホメーション的に類似する非ペプチジル化合物であり、その結果、これは、以下に記載されるようなデスモソームカドヘリン媒介機能を調節する。このような模倣物は、ペプチドの三次元構造を評価する技術に基づいて設計され得る。例えば、核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）および計算技術を使用して、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列のコンホメーションを決定し得る。ＮＭＲは、ペプチジルおよび非ペプチジル化合物の両方の構造分析のために広く使用される。核オーバーハウザ増分（Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｏｖｅｒｈａｕｓｅｒ　Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ）（ＮＯＥ）、カップリング定数、および化学シフトは、化合物のコンホメーションに依存する。ＮＯＥデータは、空間を介するプロトン間のプロトン間距離を提供し、そしてデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に対する最も低いエネルギーのコンホメーションを計算するために使用され得る。次いでこの情報は、好ましいコンホメーションの模倣物を設計するために使用され得る。溶液中の直鎖状ペプチドは、多くのコンホメーションで存在する。コンホメーション的な制限技術を使用することによって、活性なコンホメーションにこのペプチドを固定することが可能である。コンホメーション的な制限は、ｉ）自由な結合回転を立体的に制限するメチル基のようなアルキル基の導入；ｉｉ）末端置換基とジェミナル置換基との相対的な位置を固定する不飽和の導入；および／またはｉｉｉ）環化（これは、側鎖の相対位置を固定する）によって達成され得る。模倣物は、１つ以上のアミド結合が、同じサイズまたは体積を有するアイソスター、置換基または基（例えば、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＳＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＯＮＭｅ−など）によって置換されている、模倣物が合成され得る。これらの骨格アミド結合はまた、環構造（例えば、ラクタム）の一部分であり得る。デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列の１つ以上の側鎖官能基が、同じサイズまたは体積を有する必要はないが、類似の生物学的応答を生成する類似の化学的および／または物理的特性を有する基によって置換される模倣物が、設計され得る。他の模倣物は、低分子模倣物であり得、これは、ＣＡＲ配列の三次元構造に基づいて、低分子ライブラリーから容易に同定され得る。以下に記載される実施形態において、アナログまたは模倣物は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列について置換され得ることが理解されるべきである。
【００６３】
調節剤またはそのペプチド部分は、直鎖状ペプチドまたは環状ペプチドであり得る。用語「環状ペプチド」は、本明細書中で使用される場合、以下を含むペプチドまたはその塩をいう：（１）２つの非隣接残基間の分子内共有結合および（２）少なくとも１つのデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列またはそのアナログ。この分子内結合は、骨格から骨格へ、側鎖から骨格へ、または側鎖から側鎖への結合であり得る（すなわち、直鎖状ペプチドの末端官能基および／または末端残基または内部残基の側鎖官能基が環化を達成するために連結され得る）。好ましい分子内結合としては、ジスルフィド結合、アミド結合およびチオエーテル結合が挙げれらるが、これらに限定されない。上記デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列のいずれかの１つ以上、あるいはそれらのアナログまたは模倣物が、１つ以上の他の接着分子結合部位を有してかまたは有さずに、環状ペプチドに組み込まれ得る。さらなる接着分子結合部位は、以下により詳細に記載される。
【００６４】
環状ペプチド環の大きさは、一般的に、５〜約１５残基、好ましくは５〜１０残基の範囲である。さらなる残基は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列のＮ末端側および／もしくはＣ末端側上に存在し得、そしてアミノ酸置換ならびに／または他の改変を伴ってかまたは伴わず、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に隣接する配列から誘導され得る。あるいは、ＣＡＲ配列の一方または両方の側方に存在するさらなる残基は、内因性配列（例えば、環化、精製、または他の操作を容易にする残基および／または標的化または他の機能を有する残基）と関係しなくてもよい。
【００６５】
特定の実施形態において、調節剤は、表Ｉに提供されるようなデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列（または、このようなＣＡＲ配列の一部分）を含む環状ペプチドを含み得る。特定の環状ペプチドは、以下の式：
【００６６】
【化７】
2004504809.tif 000006
を有する。
【００６７】
この式において、Ｗは、ＮＱＫ、ＮＲＮ、ＮＫＤ、ＥＫＤ、ＥＲＤ、ＲＡＬ、ＹＡＬ、ＹＡＴ、ＦＡＴ、およびＹＡＳからなる群から選択されるトリペプチドであり；Ｘ１およびＸ２は任意であり、そして存在する場合、アミノ酸残基およびこれらの残基がペプチド結合によって連結されるそれらの組み合わせからなる群から独立して選択され、そしてここで、Ｘ１およびＸ２は、独立して、０〜１０残基の大きさの範囲であり、その結果、Ｘ１およびＸ２に含まれる残基の合計は、１〜１２個の範囲であり；Ｙ１およびＹ２は、独立して、アミノ酸残基からなる群から選択され、ここで、残基Ｙ１とＹ２との間に共有結合が形成され；そしてＺ１およびＺ２は任意であり、そして存在する場合、独立して、アミノ酸残基およびこれらの残基がペプチド結合によって連結されるそれらの組合わせからなる群から選択される。
【００６８】
環状ペプチドは、上記のＣＡＲ配列のいずれかを含み得る。このような環状ペプチドは、改変することなく調節剤として使用され得るか、または調節剤に組み込まれ得る。
【００６９】
デスモグレインＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７０】
【数１】
2004504809.tif 000007
2004504809.tif 000008
2004504809.tif 000009
2004504809.tif 000010
2004504809.tif 000011
デスモコリンＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７１】
【数２】
2004504809.tif 000012
2004504809.tif 000013
2004504809.tif 000014
2004504809.tif 000015
デスモグレイン−１　ＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７２】
【数３】
2004504809.tif 000016
2004504809.tif 000017
2004504809.tif 000018
デスモグレイン−２　ＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７３】
【数４】
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2004504809.tif 000020
2004504809.tif 000021
デスモグレイン−３　ＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７４】
【数５】
2004504809.tif 000022
2004504809.tif 000023
2004504809.tif 000024
2004504809.tif 000025
デスモコリン−１　ＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７５】
【数６】
2004504809.tif 000026
2004504809.tif 000027
2004504809.tif 000028
デスモコリン−２　ＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７６】
【数７】
2004504809.tif 000029
2004504809.tif 000030
デスモコリン−３またはデスモコリン−４　ＣＡＲ配列を含む代表的な環状ペプチドとしては、以下が挙げられる：
【００７７】
【数８】
2004504809.tif 000031
2004504809.tif 000032
上記のように、特定の好ましい調節剤は、ペプチド（デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列またはそれのアナログを含む）を含む。このペプチドのうち、少なくとも１つの末端アミノ酸残基が改変される（例えば、Ｎ末端アミノ基が、例えば、アセチル化もしくはアルコキシベンジル化によって改変され、そして／またはアミドもしくはエステルがＣ末端で形成される）。本発明に関連して、直鎖または環状ペプチド調節剤への少なくとも１つのこのような基の付加が、この因子のデスモソームカドヘリン媒介機能を調節する能力を改善し得ることが見出されている。特定の好ましい調節剤は、Ｎ末端残基およびＣ末端残基での改変体（例えば、Ｎ末端アセチル化および／またはＣ末端アミド化）を含む。
【００７８】
本発明はさらに、他の生物体由来のデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を意図する。このようなＣＡＲ配列は、本明細書中で提供される配列への類似性、およびデスモソームカドヘリン媒介機能を調節する能力に基づいて同定され得る（例えば、本明細書中に記載されるように確認され得る）。
【００７９】
特定の実施形態において、以下で議論するように、小さなＣＡＲ配列を含む環状ペプチド（例えば、重要なフランキング配列のない３残基）が、デスモソームカドヘリン媒介機能を調節するために好まれる。このようなペプチドは、Ｎアセチル基およびＣアミド基を含み得る。小さな環状ペプチドは、一般的に使用されて、以下に議論するように、このペプチドへ標的因子を連結しようとしまいと、局所投与によってかまたは全身性投与によって癌および／もしくは他の細胞型の接着を特異的に調節し得る。
【００８０】
デスモソームカドヘリン相互作用の阻害が所望される実施形態において、調節剤は、１つのデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列、または複数のＣＡＲ配列を含み得る。この配列は、いずれか（すなわち、介在配列なし）または非常に近くで（すなわち、デスモソームＣＡＲ配列間に距離（約０．１〜４００ｎｍの範囲）を与えるためにペプチドリンカーおよび／または非ペプチドリンカーによって分離される）隣接する。リンカーは、任意の分子であり得る（ペプチドおよび／または非ペプチド配列を含む）。この分子は、ＣＡＲ配列を含まず、そして少なくとも２つのペプチド配列に供給結合的に連結され得る。リンカーを使用して、ペプチドおよび他のペプチドを含むＣＡＲ配列またはタンパク質配列は、末端と末端で（すなわち、このリンカーは、各ペプチド配列のカルボキシル基もしくはアミノ基に共有結合的に結合され得る）、および／または側鎖を介して連結され得る。このような目的のために使用され得る１つのリンカーは、（Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈ）であり、またはそれらの誘導体であり、ここでｎは１〜４の範囲である。使用され得る他のリンカーは、当業者にとって明らかである。ペプチドリンカーおよび非ペプチドリンカーは、一般的に当該分野で公知の適切な方法を使用して調節剤に組み込まれ得る。
【００８１】
デスモソームカドヘリンによって媒介される細胞接着の向上が所望される実施形態において、調節剤は、複数のデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列、または上記のようにリンカーによって結合されるこのような配列に特異的に結合する抗体を含み得る。カドヘリン機能の向上のために、リンカー距離は、一般的に４００〜１０，０００ｎｍであるべきである。このような目的のために使用され得る１つのリンカーは、（Ｈ２Ｎ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｈ）ｍであり、またはそれらの誘導体であり、ここでｎは１〜１０の範囲であり、ｍは１〜４０００の範囲である。例えば、グリシン（Ｈ２ＮＣＨ２ＣＯ２Ｈ）またはその多量体がリンカーとして使用され、各グリシン単位は、分子モデル技術を使用して他のアミノ酸に連結する場合、その最も低いエネルギー配座の計算によって決定されるように、２．４５オングストローム、すなわち０．２４５ｎｍの結合距離に対応する。同様に、アミノプロピオン酸は、３．７３オングストローム、アミノ酪酸は、４．９６オングストローム、アミノペンタン酸は６．３０オングストローム、そしてアミノヘキサン酸は６．１２オングストロームの結合距離に対応する。細胞接着の向上はまた、下でさらに議論するように、複数の調節剤の支持体材料への結合によって達成され得る。
【００８２】
特定の好ましい調節剤は、デスモコリンＣＡＲ配列と組み合わせてデスモグレインＣＡＲ配列を含み得る。ＣＡＲ配列が上記のようにリンカーによって結合される場合、このような因子は使用されて、例えば、種々の情況において細胞接着を促進し得る。実施例によって、このような因子は、ｄｓｃ−２　ＣＡＲ配列ＦＡＴと組み合わせてｄｓｇ−２　ＣＡＲ配列ＹＡＬを含み得た。
【００８３】
本明細書中で記載されるような調節剤は、そのうえ、１つ以上の異なる接着分子（非古典型的カドヘリンおよび他のＣＡＭを含むが、これらに限定されない）ならびに／または１つ以上の基質（例えば、このような配列に結合する抗体もしくはそのフラグメント）に対して１つ以上のＣＡＲ配列を含み得る。リンカーは、使用されて、このようなＣＡＲ配列および／またはこのＣＡＲ配列由来の抗体配列および／または各々を分離し得るが、必ずしも必要ではない。このような調節剤は、所望され得る方法内で一般的に使用されて、複数の接着分子によって媒介される機能を同時に粉砕し得る。本明細書中で使用される場合、「接着分子」は、細胞の表面上のレセプターを介して細胞接着を媒介する任意の分子である。接着分子として、細胞接着タンパク質（例えば、Ｎ−カドヘリンおよびＥ−カドヘリンなどのカドヘリン遺伝子スーパーファミリーの他のメンバー）；インテグリン、細胞外マトリクスタンパク質（例えば、ラミニン、フィブロネクチン、コラーゲン、ビトロネクチン、エンタクチンおよびテネイシン）；ならびに免疫グロブリンスーパー遺伝子ファミリーの膜（例えば、Ｎ−ＣＡＭ）が挙げられる。調節剤に含まれる好ましいＣＡＲ配列としては、古典型的カドヘリンＣＡＲ配列Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｖａｌ（ＨＡＶ）；Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（ＲＧＤ）（インテグリンによって結合される（Ｃａｒｄａｒｅｌｌｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７：２３１５９−６４，１９９２））；Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ（ＹＩＧＳＲ；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）（これは、α６β１インテグリンによって結合される）；ＫＹＳＦＮＹＤＧＳＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）（これは、Ｎ−ＣＡＭによって結合される）、；Ｎ−ＣＡＭ硫酸へパリン結合部位ＩＷＫＨＫＧＲＤＶＩＬＫＫＤＶＲＦ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）；推定クラウディンＣＡＲ配列ＩＹＳＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）および／またはオクルディンＣＡＲ配列ＬＹＨＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）が挙げられる。
【００８４】
調節剤に含まれる他の好ましいＣＡＲ配列としては、ＯＢ−カドヘリンＣＡＲ配列（例えば、ＤＤＫ、ＩＤＤＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＤＤＫＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＩＤＤＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＩＤＤＫＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＩＤＤＫＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＤＤＫＳＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＩＤＤＫＳＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＩＤＤＫＳＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＶＩＤＤＫ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＶＩＤＤＫＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＶＩＤＤＫＳＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＩＦＶＩＤＤＫ（（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＩＦＶＩＤＤＫＳ（（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＩＦＶＩＤＤＫＳＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＥＥＹ、ＩＥＥＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＥＥＹＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＩＥＥＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＩＥＥＹＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＩＥＥＹＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＥＥＹＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＩＥＥＹＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＩＥＥＹＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＶＩＥＥＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＶＩＥＥＹＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＶＩＥＥＹＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＦＶＩＥＥＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＦＶＩＥＥＹＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＦＶＩＥＥＹＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＥＡＱ、ＶＥＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＥＡＱＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＳＶＥＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＥＡＱＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＳＶＥＡＱＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＥＡＱＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＥＡＱＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＳＶＥＡＱＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＳＶＥＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＳＶＥＡＱＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＳＶＥＡＱＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＹＦＳＶＥＡＱ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＹＦＳＶＥＡＱＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）およびＹＦＳＶＥＡＱＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿））が挙げられる。
【００８５】
調節剤に含まれ得るまださらなるＣＡＲ配列は、カドヘリン−５　ＣＡＲ配列（例えば、ＤＡＥ、ＶＤＡＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＤＡＥＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＲＶＤＡＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＤＡＥＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＲＶＤＡＥＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＤＡＥＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＤＡＥＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＲＶＤＡＥＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＲＶＤＡＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＲＶＤＡＥＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＦＲＶＤＡＥＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＦＲＶＤＡＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＶＦＲＶＤＡＥＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）およびＶＦＲＶＤＡＥＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿））である。
【００８６】
リンカーを使用する場合、このような調節剤は、直鎖構造または分枝構造を形成し得る。１つの実施形態において、分枝構造を有する調節剤は、４つの異なるＣＡＲ配列（例えば、ＩＦＶＩＤＤＫＳＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）、ＲＧＤ、ＹＩＧＳＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ．：＿）およびＨＡＶ）を含む。リンカーを介して古典型的カドヘリンＣＡＲ配列に結合されるデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含む二機能性調節剤はまた、特定の実施形態として好ましい。上記のように、リンカーは、好ましくは、０．１〜１０，０００ｎｍの範囲、より好ましくは０．１〜４００ｎｍの範囲のＣＡＲ配列間の距離を生成する。認識部位間の分離距離は、一般的に、調節剤の所望の機能に従って決定され得る。
【００８７】
調節剤内に存在するＣＡＲ配列の総数（１つ以上の異なる接着分枝由来の他のＣＡＲ配列を有しているかまたは有していないデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含む）は、１個〜多数（例えば１００個）、好ましくは１個〜１０個、より好ましくは１個〜５個の範囲であり得る。複数のＣＡＲ配列を含むペプチド調節剤は、代表的に、６アミノ酸残基〜約１０００アミノ酸残基、好ましくは、６残基〜５０残基を含む。非ペプチドリンカーが使用され、調節剤の各ＣＡＲ配列は、一般的に３残基長〜５０残基長、好ましくは４残基〜２５残基、そしてより好ましくは、５残基〜１５残基のサイズの範囲であるペプチド内に存在する。
【００８８】
上記のように、調節剤は、ペプチド結合のみで連結されたアミノ酸残基のみを含むポリペプチドまたはそれらの塩であり得、そして、非ペプチド領域（例えば、リンカー）を含み得る。調節剤のペプチド領域は、Ｌ−アミノ酸残基、Ｄ−アミノ酸残基、または任意のそれらの残基の組合せを含み得る。アミノ酸は、少なくとも１つのアミノ基および少なくとも１つのカルボキシル基が分子内に存在する場合、天然供給源または非天然供給源由来であり得、αアミノ酸およびβアミノ酸が一般的に好まれる。一般的にタンパク質に見出される２０個のＬ−アミノ酸が、慣用的な３文字略記または１文字略記によって本明細書中で同定され、そして対応するＤ−アミノ酸は、小文字の１文字記号で示される。
【００８９】
調節剤はまた、まれなアミノ酸（例えば、４−ヒドロキシプロリンもしくはヒドロキシリジン）、有機酸またはアミドおよび／あるいは一般的なアミノ酸の誘導体（例えば、Ｃ末端カルボキシル化エステル化（例えば、ベンジルエステル、メチルエステルもしくはエチルエステル）またはアミド化を有するアミノ酸および／あるいはＮ末端アミノ基の改変（例えば、アセチル化もしくはアルコキシカルボニル化）を有するアミノ酸、任意の広く多様な側鎖改変および／もしくは置換（例えば、メチル化、ベンジル化、ｔ−ブチル化、トシル化、アルコキシカルボニル化など）を有するかまたは有さないアミノ酸）を含み得る。好ましい誘導体は、Ｃ末端アミド基を有するアミノ酸を含む。調節剤と共に存在し得る一般的なアミノ酸以外の残基としては、２−メルカプトアニリン、２−メルカプトプロリン、オルニチン、ジアミノ酪酸、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸およびα、β−ジアミノプロピオン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９０】
本明細書中で記載されるペプチド調節剤（および調節剤のペプチド部分）は、当該分野で周知の方法（化学合成および組換えＤＮＡ方法を含む）によって合成され得る。約５０残基長までの調節剤について、化学合成が、溶液または固相ペプチド合成技術を使用して実施され得る。この技術において、ペプチド結合は、水分子の放出によって他のアミノ酸のα−カルボキシ基と１つのアミノ酸のα−アミノ基との直接縮合を介して生じる。上で形成されるような直接縮合によるペプチド結合合成は、第１のアミノ酸のアミノ基および第２のアミノ酸のカルボキシル基の反応性特徴の抑制を必要とする。マスキング置換基は、不安定なペプチド分子の破壊を誘発せずに、その迅速な除去を可能にしなければならない。
【００９１】
溶液相合成において、広範な種々のカップリング方法および保護基が使用され得る（ＧｒｏｓｓおよびＭｅｉｅｎｈｏｆｅｒ編、「Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｌｏｇｙ」１〜４巻（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ，１９７９）；ＢｏｄａｎｓｋｙおよびＢｏｄａｎｓｋｙ，「Ｔｈｅ　Ｐｒａｃｔｉｃｅ　ｏｆ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第２版（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ　Ｖｅｒｌａｇ，１９９４）を参照のこと）。さらに、中間体精製および線形スケールアップが可能である。当業者は、溶液合成が、主鎖および側鎖の保護基ならびに活性化方法の考慮を必要とすることを理解する。さらに、セグメント縮合の間にラセミ化を最小化するために、注意深いセグメント選択が必要である。溶解度の考慮もまた、要因である。
【００９２】
固相ペプチド合成は、有機合成の間に支持体としての不溶性ポリマーを使用する。ポリマー支持のペプチド鎖は、中間工程での骨の折れる精製の代わりに簡単な洗浄工程およびろ過工程の使用を可能にする。固相ペプチド合成は、一般にＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９，１９６３の方法に従って行なわれ得るが、この方法は、保護されたアミノ酸を使用する樹脂支持体上で直鎖状ペプチド鎖をアセンブリする工程を包含する。固相ペプチド合成は、代表的にＢｏｃまたはＦｍｏｃストラテジーのいずれかを利用する。Ｂｏｃストラテジーは、１％の架橋ポリスチレン樹脂を使用する。αアミノ官能基のための標準的な保護基は、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）基である。この基は、２５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）のような強酸の希釈溶液を用いて除去され得る。次のＢｏｃ−アミノ酸は、代表的に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を使用してアミノアシル樹脂に結合される。アセンブリの完了後、このペプチド樹脂を、無水ＨＦで処理して、ベンジルエステル結合を切断し、そして遊離ペプチドを遊離する。側鎖官能基は、ＨＦによってまた切断されるベンジル誘導されたブロック基による合成の間に、通常ブロックされる。次いで、遊離ペプチドは、適切な溶媒を用いて樹脂から抽出され、精製され、そして特徴付けられる。新しく合成されたペプチドは、例えば、ゲルろ過、ＨＰＬＣ、分配クロマトグラフィーおよび／またはイオン交換クロマトグラフィーによって精製され得、そして、例えば、質量分析法またはアミノ酸配列分析によって特徴付けられ得る。Ｂｏｃストラテジーにおいて、Ｃ末端アミド化ペプチドは、ベンズヒドリルアミンまたはメチルベンズヒドリルアミン樹脂を使用して得られ得、これは、ＨＦを用いる切断の際にペプチドアミドを直接生じる。
【００９３】
上記の手順において、側鎖ブロック基およびペプチド樹脂連結の選択性は、酸分解性（ａｃｉｄｏｌｙｔｉｃ）切断の速度の差異に依存する。側鎖ブロック基およびペプチド樹脂連結が、合成の各工程でα保護基を除去するために使用される試薬に対して完全に安定している、直交性（ｏｒｔｈｏｇａｎｏｌ）システムが、導入されている。これらの方法のうちで最も一般的な方法は、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）アプローチを包含する。この方法において、側鎖保護基およびペプチド樹脂連結は、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ基を切断するために使用される２次アミンに対して完全に安定している。側鎖保護およびペプチド樹脂連結は、穏やかな酸分解によって切断される。塩基との繰り返された接触は、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ樹脂を、Ｆｍｏｃ化学について不適切とし、そして樹脂に連結されたｐ−アルコキシベンジルエステルが、一般的に使用される。脱保護および切断は、一般的にＴＦＡを使用して達成される。
【００９４】
当業者は、固相合成、脱保護およびカップリングにおいて、反応が完了しなければならず、そして側鎖保護基は、全ての合成の間中安定していなければならないことを理解する。さらに、固相合成は、ペプチドが小規模で作製される場合に、一般に最も適している。
【００９５】
Ｎ末端のアセチル化は、樹脂からの切断の前に、最終ペプチドと無水酢酸とを反応させることによって達成され得る。Ｃアミド化は、Ｂｏｃ技術を使用して、メチルベンズヒドルアミン樹脂のような適切な樹脂を使用して達成され得る。
【００９６】
直鎖状ペプチドの合成後、所望の場合、当該分野で周知の種々の技術のいずれかによって、Ｎアセチル化および／またはＣアミド化を用いてかまたは用いずに、環化が達成され得る。１つの実施形態において、結合は、反応性アミノ酸側鎖間で生成し得る。例えば、ジスルフィド架橋は、種々の方法のいずれかを使用して、ペプチドの酸化によって、２つのチオール含有残基を含む直鎖状ペプチドから形成され得る。１つのこのような方法において、チオールの空気酸化は、塩基性または中性の水性培地のいずれかを使用して、何日かの期間にわたって、ジスルフィド結合を生成し得る。このペプチドは、高い希釈で使用され、凝縮および分子間副反応を最小化する。この方法は、緩徐であるという不利益に苦しむが、副産物としてＨ２Ｏのみを生成するという利点を有する。あるいは、Ｉ２およびＫ３Ｆｅ（ＣＮ）６のような強酸化剤を使用して、ジスルフィド結合を形成し得る。当業者は、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、ＴｒｐまたはＨｉｓの感受性側鎖を酸化しないように注意しなければならないことを認識する。この方法によって生成される環状ペプチドは、標準的な技術を使用する精製を必要とするが、この酸化は、酸性のｐＨにおいて適用可能である。酸化剤はまた、適切なＳ保護された直鎖状前駆体の同時の脱保護／酸化が、遊離システインの成熟前の非特異的な酸化を避けることを可能にする。
【００９７】
Ｉ２およびＫ３Ｆｅ（ＣＮ）６とは異なり、ＤＭＳＯは、上記の求核性アミノ酸の酸化的な副反応を引き起こさない穏やかな酸化剤である。ＤＭＳＯは、全ての濃度においてＨ２Ｏと混和性であり、そして酸化が、無害な副産物を有して、酸性ｐＨから中性ｐＨにおいて行なわれ得る。メチルトリクロロシラン−ジフェニルスルホキシドは、他の求核性アミノ酸に影響を与えることなく、Ｓ−Ａｃｍ、Ｓ−ＴａｃｍまたはＳ−ｔ−Ｂｕの同時の脱保護／酸化のために、酸化剤として代替的に使用され得る。分子間ジスルフィド結合構造から重合体産物は全く生じない。このような酸化方法における使用のための適切なチオール含有残基としては、以下を含むがこれらに限定されない：システイン、β，β−ジメチルシステイン（ペニシルアミンすなわちＰｅｎ）、β，β−テトラメチレンシステイン（Ｔｍｃ）、β，β−ペンタメチレンシステイン（Ｐｍｃ）、β−メルカプトプロピオン酸（Ｍｐｒ）、β，β−ペンタメチレン−β−メルカプトプロピオン酸（Ｐｍｐ）、２−メルカプトベンゼン、２−メルカプトアニリンおよび２−メルカプトプロリン。このような残基を含むペプチドは、以下の代表的な式によって例示されるが、この式において、デスモソームカドヘリンはデスモグレインであり、下線部は環化され、Ｎ−アセチル基はＮ−Ａｃによって示され、そしてＣ末端アミド基はＮＨ２によって示される：
【００９８】
【数９】
2004504809.tif 000033
これらの代表的な式の各々において、任意の上記チオール含有残基が、示されるチオール含有残基の１つまたは両方の代わりに使用され得ることが当業者に容易に明らかである。異なる非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列を含む同様の処方物は、本明細書中に提供されるＣＡＲ配列に基づいて、当業者によって作製される。
【００９９】
別の実施形態において、環化は、アミド結合構造によって達成され得る。例えば、ペプチド結合は、末端官能基（すなわち、環化の前に直鎖状ペプチドのアミノ末端およびカルボキシ末端）間で形成され得る。デスモグレインＣＡＲ配列を含むこのような環状ペプチドの１つは、Ｎ末端アセチル基および／またはＣ末端アミドを有するかまたは有さないＩＮＱＫＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　）である。別のこのような実施形態において、直鎖状ペプチドは、Ｄ−アミノ酸（例えば、ＮＱＫｔＳ；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　）を含む。あるいは、環化は、ＫＮＱＫＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　）またはＫＩＮＱＫＴＧＤ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　）におけるように、Ｎ末端アセチル基および／またはＣ末端アミドを有するかまたは有さない、１つの末端および残基の側鎖を連結することによってかまたは２つの側鎖を使用することによって達成され得る。ラクタム結合を形成し得る残基としては、リジン、オルニチン（Ｏｒｎ）、α−アミノアジピン酸、ｍ−アミノメチル安息香酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、グルタミン酸またはアスパラギン酸が挙げられる。
【０１００】
アミド結合を形成するための方法は、当該分野で周知であり、そして化学反応性の十分に確立された原理に基づいている。１つのこのような方法において、カルボジイミド媒介ラクタム形成は、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＡＣまたはＤＣＣＩを用いるカルボン酸の反応によって達成され得、遊離アミノ基と直ぐに反応して環化を完了し得るＯ−アシルウレアの形成を生じる。Ｏ→Ｎの転移から生じる不活性Ｎ−アシルウレアの形成は、１−ヒドロキシルベンゾトリアゾール、１−ヒドロキシスクシンイミド、１−ヒドロキシノルボルネンカルボキサミドまたはエチル２−ヒドロキシイミノ−２−シアノアセテートのようなＮ−ヒドロキシ化合物を用いる反応によって活性エステルにＯ−アシルウレアを変換することによって、回避され得る。Ｏ→Ｎ転移を最小化することに加えて、これらの添加物はまた、環化の間触媒として役立ち、そしてラセミ化を低下させるための補助となる。あるいは、環化は、アジ化合物方法を用いて行なわれ得、この方法において、反応性アジ化合物中間体は、ヒドラジドを介してアルキルエステルから生成される。末端エステルのヒドラジン分解は、アシル化成分における側鎖カルボキシル官能基の保護のためのｔ−ブチル基の使用を必要とする。この制限は、ジフェニルホスホリル酸（ＤＰＰＡ）を使用することによって克服され得、これは、カルボキシル基との反応の際に直接アジ化合物を提供する。アジ化合物の緩徐な反応性およびそれらの不均一化によるイソシアン塩の形成は、この方法の有用性を制限する。ラクタム形成の混合無水物方法は、反応副産物の容易な除去のために、広範に使用される。無水物は、カルボン酸アニオンのクロロギ酸アルキルまたは塩化ピバロイルとの反応の際に形成される。次いで、アミノ成分の攻撃は、アルコキシ基の電子供与効果または塩化ピバロイルｔ−ブチル基の立体的なバルク（これは、誤ったカルボニル基の攻撃を妨げる）によって、アシル化成分のカルボニル炭素に導かれる。リン酸誘導体との混合無水物はまた、首尾良く使用されている。あるいは、環化は、活性化エステルを使用して達成され得る。エステルのアルコキシ炭素の電子除去置換の存在は、アミノ分解に対するそれらの感受性を増加する。ｐ−ニトロフェノール、Ｎ−ヒドロキシ化合物およびポリハロゲン化フェノールの高反応性のエステルは、アミド結合の合成において有用であるこれらの「活性エステル」を作製してきた。最近数年、有利なカップリング試薬としてのベンゾトリアゾリルオキシトリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロリン酸（ＢＯＰ）およびその同族種の発見を目にしてきた。これらの性質は、十分に確立されたカルボジイミドアミド結合形成反応の性能に対して、一般に優れている。
【０１０１】
さらなる実施形態において、チオエーテル結合は、チオールを含む残基の側鎖と、適切に誘導されたαアミノ酸との間で形成され得る。例として、リジン側鎖は、カルボジイミド結合方法（ＤＣＣ、ＥＤＡＣ）を介してブロモ酢酸に結合し得、次いで、上に記載のチオール含有残基のいずれかの側鎖と反応してチオエーテル結合を形成する。ジチオエーテルを形成するために、任意の２つのチオール含有側鎖は、ＤＭＦ中でジブロモエタンおよびジイソプロピルアミンと反応し得る。チオールを含む結合の例は、以下に示される：
【０１０２】
【化８】
2004504809.tif 000034
環化はまた、δ１，δ１−ジトリプトファン（例えば、Ａｃ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−ＯＭｅ）（配列番号：　）を用いて達成され得る。
【０１０３】
本明細書中に列挙される構造および式は、例示の目的としてのみ提供され、そして本明細書中で記載される環状ペプチドの範囲を限定することを意図されない。
【０１０４】
より長い調節剤について、組換え方法は、合成に好ましい。このような方法で、特定の宿主細胞に適切であることが当業者に公知の種々の発現ベクターのいずれかを用いて、調節剤の全てまたは一部を生きた細胞内で合成し得る。適切な宿主細胞は、細菌、酵母細胞、哺乳動物細胞、昆虫細胞、植物細胞、藻類細胞、および他の動物細胞（例えば、ハイブリドーマ、ＣＨＯ、骨髄腫）を含み得る。この様式で発現されるＤＮＡ配列は、デスモソームのカドヘリンもしくは他の接着分子の部分をコードし得るか、またはデスモソームのカドヘリンのアナログもしくはデスモソームのカドヘリンＣＡＲ配列に特異的に結合する抗体フラグメントを含むペプチドをコードし得る。このようなＤＮＡ配列は、または公知のｃＤＮＡまたは遺伝子配列に基づいて調製され得るか、公知のデスモソームのカドヘリンの配列に基づいて設計したプローブを用いて適切なライブラリーをスクリーニングすることによって単離された配列から調製され得る。このようなスクリーニングは、一般にＳａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｒｙ　Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｒｉｅｓ、Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ、１９８９（およびこれらにおいて列挙される参考文献）において記載されるように実施され得る。ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）はまた、当該分野で周知の方法においてオリゴヌクレオチドプライマーを用いて、利用されて、内在性の接着分子の全てまた一部をコードする核酸分子を単離し得る。所望の調節剤をコードする核酸分子を生成するために、内在性のカドヘリン配列を周知の技術を用いて改変し得る。例えば、１つ以上のＣＡＲ配列をコードする部分を、上記のようにリンカーをコードする核酸配列によって分離することで、あるいは分離しないことで結合し得る。あるいは、所望の核酸配列の部分は、周知の技術を用いて合成され得、次いで、共に連結して、調節剤をコードする配列を形成され得る。
【０１０５】
上記のように、ポリヌクレオチドはまた、調節剤として機能し得る。一般に、このようなポリヌクレオチドは、哺乳動物への投与後に、ポリペプチド調節剤の発現を可能にするように処方されるべきである。このような処方物は、以下に記載のような治療目的に対して特に有用である。当業者は、哺乳動物においてポリヌクレオチドの発現を達成するための多くの方法が存在し、そして任意の適切な方法が用いられ得ることを理解する。例えば、ポリヌクレオチドは、ウイルスベクター（例えば、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルス、またはワクシニアウイルス、または他のポックスウイルス（例えば、鳥類ポックスウイルス）であるが、これらに限定されない）に取り込まれ得る。ＤＮＡをこのようなベクターに取り込むための技術は、当業者に周知である。レトロウイルスベクターは、さらに選択マーカー（トランスフェクトされた細胞の同定または選択を補助するために）および／または標的化部分（例えば、特定の標的細胞上のレセプターに対するリガンドをコードする遺伝子）に対する遺伝子を転写するか取り込み、ベクターを標的特異的にし得る。標的化はまた、当業者に公知の方法によって、抗体を用いることによって達成され得る。治療目的のポリヌクレオチドのための他の処方は、コロイド分散系（例えば、高分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズ、および脂質ベースの系（水中油型エマルジョン、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含む））を含む。インビトロおよびインビボでの送達ビヒクルとして使用するための好ましいコロイド系は、リポソームである（すなわち、人工膜ビヒクル）。このような系の調製および使用は、当該分野で周知である。
【０１０６】
さらに、またはあるいは、上記のように、調節剤は、デスモソームのカドヘリンＣＡＲ配列特異的に結合する抗体またはこれの抗原結合フラグメントのような物質を含み得る。本明細書に記載される場合、物質がデスモソームのカドヘリンＣＡＲ配列を含むペプチドと検出可能なレベルで反応し、かつ異なるＣＡＲ配列あるいはカドヘリンＣＡＲ配列および／または隣接する配列におけるアミノ酸残基の順序が変化した配列を含むペプチドと検出可能に反応しない場合、物質は、（隣接するアミノ酸を伴ってか、伴わずに）配列に「特異的に結合」するといわれる。このような抗体結合特性は、一般にＥＬＩＳＡ（これは、当業者によって容易に実施され得ることが、例えば、Ｎｅｗｔｏｎら、Ｄｅｖｅｌｏｐ．Ｄｙｎａｍｉｃｓ　１９７：１〜１３、１９９３に記載される）を用いて、評価され得る。
【０１０７】
ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体は、慣用的な技術を用いて、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に対して惹起され得る。例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、１９８８を参照のこと。１つのこのような技術において、ＣＡＲ配列を含む免疫原は、最初に広範な種々の哺乳動物のいずれか（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、またはヤギ）に注入される。より小さい免疫原（すなわち、約２０アミノ酸未満）は、キャリアタンパク質（例えば、ウシ血清アルブミンまたはキーホールリンペットヘモシアニン）に結合されるべきである。１回以上の注入に続いて、動物は定期的に採血される。次いで、ＣＡＲ配列に特異的なポリクローナル抗体は、このような抗血清から、例えば、適切な固体支持体に結合した調節剤またはこれの抗原部分を用いたアフィニティークロマトグラフィーによって精製され得る。
【０１０８】
デスモソームのカドヘリン配列に対して特異的なモノクローナル抗体を、例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：５１１〜５１９、１９７６の技術、ならびにこれの改善を用いて調製し得る。簡潔には、これらの方法は、上記のような免疫された動物から得られる脾臓細胞由来の所望の特異性を有する抗体を産生し得る不死化細胞株の調製を含む。脾臓細胞は、例えば、（好ましくは、免疫された動物に同質遺伝的である）骨髄腫細胞融合パートナーと融合させることによって不死化する。単一のコロニーを選択し、そしてこれらの培養上清を、調節剤またはこれの抗原部位に対する結合活性について試験する。高い反応性および特異性を有するハイブリドーマが好ましい。
【０１０９】
モノクローナル抗体は、増殖しているハイブリドーマのコロニーの上清から、収率を上げるための当該分野で公知の種々の技術を使用してか、または使用せずに、単離され得る。混入物は、慣用的技術（例えば、クロマトグラフィー、ゲル濾過、沈降、および抽出）によって抗体から除去され得る。所望の活性を有する抗体は、一般に、組織片、細胞または標的カドヘリンが局在する他のサンプルの免疫蛍光分析を用いて同定され得る。
【０１１０】
特定の実施形態で、抗体の抗原結合フラグメントの使用は、好ましくあり得る。このようなフラグメントは、Ｆａｂフラグメントを含み、これは、標準的技術を用いて調製され得る。簡潔には、免疫グロブリンは、プロテインＡビーズカラムにおけるアフィニティークロマトグラフィーによって、ウサギ血清から精製され得（ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、１９８８；特に３０９頁を参考のこと）、そしてパパインで消化してＦａｂおよびＦｃフラグメントを産生し得る。ＦａｂおよびＦｃフラグメントは、プロテインＡビーズカラムにおけるアフィニティークロマトグラフィーによって、分離され得る（ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ、１９８８、６２８〜２９頁）。
【０１１１】
（調節剤活性の評価）
上記の調節剤は、１つ以上のデスモソームのカドヘリン媒介機能を改変し得る。このような活性の最初のスクリーニングは、当業者に公知の任意の結合アッセイを用いて、デスモソームのカドヘリンに結合する調節剤の能力を評価することによって実施され得る。例えば、Ｊｏｎｓｓｏｎら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　１１：５２０〜２７、１９９１において議論されるように、Ｐｈａｒｍａｃｉａ　Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ機器を用い得る。例えば、調節剤は、デスモソームのカドヘリンに結合するＣＡＲ配列を含み得る。分子とペプチドの相互作用を測定する技術の特定の例は、Ｗｉｌｌｉａｍｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２、２２３４９〜２２３５４、１９９７において見出され得る。あるいは、リアルタイムＢＩＡ（Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　Ａｎａｌｙｓｉｓ）は、光学現象である表面プラズモン共鳴を用いて、生体分子の相互作用をモニターする。検出は、生物特異的界面での高分子の質量濃度における変化に依存し、これは同様に、バイオセンサーチップの表面への試験分子またはペプチド（リガンドとされる）の固定化に依存し、これに続いて、相互作用する分子（分析物とされる）のリガンドへの結合が起こる。チップへの結合は，リアルタイムに共鳴の任意の単位（ＲＵ）で測定される。
【０１１２】
例としては、表面プラズモン共鳴実験は、ＢＩＡｃｏｒｅ　ＸＴＭバイオセンサー（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　Ｌｔｄ、ＢｉＡｃｏｒｅ、Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を用いて実施され得る。ＣＭ５センサーチップの並列フローセルは、１０ｍＭ酢酸ナトリウム（ｐＨ４．０）中のストレプトアビジン（２００μｇ／ｍｌ）で製造者のプロトコールにしたがって、アミンカップリング方法を用いて誘導体化され得る。リガンドの約２１００〜２６００共鳴単位（ＲＵ）は、固定化され、約２．１〜２．６ｎｇ／ｍｍ２の濃度に相当する。次いでチップは、ビオチンに誘導体化したデスモソームのカドヘリンを用いて、被覆され得る。任意の非特異的結合タンパク質は、除去される。
【０１１３】
結合を決定するため、試験分析物（例えば、デスモソームのカドヘリンＣＡＲ配列を含むペプチド）は、ランニング緩衝液中に入れられ、試験用フローセルおよびコントロール用フローセルに同時に流される。一定期間の遊離緩衝液流後に、表面に結合したままの任意の分析物は、例えば、０．１％ＳＤＳのパルスで除去され得、シグナルをベースラインまでもどす。誘導化されたセンサーチップに対する特異的な結合は、反応からコントロール用フローセルの試験用フローセルの反応を差し引くことによって、この系により自動で決定され得る。一般に、このようなアッセイにおいて、調節剤は、デスモソームのカドヘリンに、検出可能なレベルで結合する。結合のレベルは、好ましくは少なくとも、同様の条件下で全長のデスモソームのカドヘリンに対して観察されるレベルである。
【０１１４】
デスモソームのカドヘリン媒介機能を調節する能力は、一般にデスモソームのカドヘリンによって媒介される応答におけるペプチドの影響を測定するために設計された種々のインビトロアッセイのいずれかを用いて評価され得る。上記のように、調節剤は、デスモソームのカドヘリン媒介機能を増大または阻害可能であり得る。
【０１１５】
特定のデスモソームのカドヘリンは、特定の細胞型（例えば、上皮細胞）の接着に関する。細胞接着を調節する因子の能力は、一般にインビトロで、適切な細胞間での接着の影響をアッセイすることにより評価され得る。一般に、調節剤と試験細胞との接触が認識可能な細胞接着の崩壊を生じる場合、調節剤は、細胞接着のインヒビターである。これらが細胞接着を促進し得る場合（支持材料（例えば、組織培養プラスチック）に接着した調節剤に対する細胞接着を評価するプレートアッセイによって判断されるように）、細胞接着を増大する調節剤（例えば、複数のデスモソームのカドヘリンＣＡＲ配列および／または支持材料に結合したデスモソームのカドヘリンＣＡＲ配列を含む因子）は、細胞接着の調節剤として考えられる。
【０１１６】
特定の細胞接着アッセイで、デスモソームのカドヘリンを発現する細胞への調節剤の添加は、細胞接着の崩壊を生じる。本明細書で用いられる「デスモソームのカドヘリン発現細胞」は、免疫細胞化学プロトコールのような標準技術を用いて検出可能なレベルでデスモソームのカドヘリンを発現する細胞の任意の型であり得る（例えば、ＢｌａｓｃｈｕｋおよびＦａｒｏｏｋｈｉ、Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．１３６：５６４〜５６７、１９８９）。例えば、このような細胞は、調節剤の非存在下で、細胞接着を可能にする標準条件下でプレーティングされ得る。調節剤の存在下（例えば、１ｍｇ／ｍＬ）で、細胞接着の崩壊は、２４時間で可視的に（互いからおよび基層からの細胞の退縮を観察することによって）決定され得る。
【０１１７】
このようなアッセイで用いるための適切な細胞は、目的のデスモソームのカドヘリンを発現する種々の細胞のいずれかであり得る。特定の細胞は、１つ以上のカドヘリンを内在的に発現する。一般に、ＭＤＣＫ細胞またはケラチノサイトを用いて、デスモコリンまたはデスモグレイン媒介の細胞接着を評価し得る。他の細胞もまた、このようなアッセイで用いられ、目的のデスモソームのカドヘリンを発現する細胞を提供し得ることが明らかである。
【０１１８】
あるいは、カドヘリンを天然に発現しない細胞は、このようなアッセイで用いられ得る。このような細胞は、１つ以上の目的のカドヘリンをコードするポリヌクレオチド（例えば、ｃＤＮＡ）で安定にトランスフェクトされ得、その結果、カドヘリンは、細胞表面に発現される。例えば、上記のように、デスモグレインおよびデスモコリンの両方は、最適な細胞接着に必要とされ得、そしてこのようなアッセイは、これらのデスモソームのカドヘリンの両方をコードするポリヌクレオチドで形質転換された細胞を用いて実施され得る。カドヘリンの発現は、目的のカドヘリンに対して指向された抗体を用いた免疫細胞化学的技術の組み合せでトランスフェクトされた細胞の接着を評価することによって確認され得る。光学顕微鏡で判断されるように、形質転換後に凝集した安定にトランスフェクトされた細胞は、デスモソームのカドヘリンを十分なレベルで発現する。このようなアッセイでの使用に好ましい細胞は、Ｌ細胞を含み、これは、検出可能に接着せず、いずれのカドヘリンも発現しない（Ｎａｇａｆｕｃｈｉら、Ｎａｔｕｒｅ　３２９：３４１〜３４３、１９８７）。１つ以上のカドヘリンをコードするｃＤＮＡでのＬ細胞の形質転換後に、凝集が観察される。このような凝集を検出可能に阻害する調節剤を用いて、カドヘリンによって媒介される機能を調節し得る。このようなアッセイは、多くの非古典的カドヘリン（ＯＢ−カドヘリン（Ｏｋａｚａｋｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：１２０９２〜９８、１９９４）、カドヘリン−５（Ｂｒｅｉｅｒら、Ｂｌｏｏｄ　８７：６３０〜６４１、１９９６）、カドヘリン−６（Ｍｂａｌａｖｉｅｌｅら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１４１：１４６７〜１４７６、１９９８）、カドヘリン−８（Ｋｉｄｏら、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ　４８：１８６〜１９４、１９９８）、カドヘリン−１５（Ｓｈｉｍｏｙａｍａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３：１００１１〜１００１８、１９９８）、ＰＢ−カドヘリン（Ｓｕｇｉｍｏｔｏら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：１１５４８〜１１５５６、１９９６）、ＬＩ−カドヘリン（Ｋｒｅｆｔら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１３６：１１０９〜１１２１、１９９７）、プロトカドヘリン　４２および４３（Ｓａｎｏら、ＥＭＢＯ　Ｊ．１２：２２４９〜２２５６、１９９３）、ならびにデスモソームカドヘリン（Ｍａｒｃｏｚｚｉら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．１１１：４９５〜５０９、１９９８；Ｔｓｅｌｅｐｉｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　９５：８０６４〜８０６９、１９９８）を含む）に対して用いられてきた。アッセイが、他のカドヘリンに対して同様の様式で実施され得ることは、当業者に明らかである。
【０１１９】
細胞接着アッセイに使用するための細胞のトランスフェクションは、標準技術および公開されたカドヘリン配列を用いて実施され得る。例えば、デスモソームカドヘリン配列は、本明細書中に列挙された参考文献中およびＧｅｎＢａｎｋデータベースにおいて見出され得る。特定のデスモソームカドヘリンに関するＧｅｎＢａｎｋ受託番号としては、以下が挙げられる：Ｘ５６６５４（ヒト　デスモグレイン　１（ｈｕｍａｎ　ｄｅｓｍｏｇｌｅｉｎ　１））；Ｚ２６３１７およびＳ６４２７３（ヒト　デスモグレイン　２）；Ｘ７２９２５（ヒト　デスモコリン　１（ｈｕｍａｎ　ｄｅｓｍｏｃｏｌｌｉｎ　１））；Ｘ５６８０７（ヒト　デスモコリン　２）；Ｘ８３９２９（ヒト　デスモコリン　３）；ならびにＤ１７４２７（ヒト　デスモコリン　４）。
【０１２０】
例として、デスモソームカドヘリン媒介機能を阻害する能力について調節剤を評価するためのアッセイは、細胞の単層を横切る電気抵抗に対する調節剤の影響を評価し得る。例えば、Ｍａｄｉｎ　Ｄａｒｂｙのイヌの腎臓（ＭＤＣＫ）細胞は、培地に溶解した調節剤（例えば、２４時間の０．５ｍｇ／ｍｌの最終濃度）に曝され得る。電気抵抗に対する影響は、標準技術を用いて測定され得る。このアッセイは、上皮細胞における密接な接合部形成に対する調節剤の影響を評価する。一般に、５００μｇ／ｍＬの調節剤の存在が、２４時間後の統計学的に有意な電気抵抗の減少を生じる。
【０１２１】
他のアッセイは、標準技術を用いた、細胞接着の視覚的評価に関する。一般的に、特定のデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列由来の調節剤（すなわち、このようなＣＡＲ配列、またはそのアナログもしくは模倣物、あるいはこのようなＣＡＲ配列を特異的に認識する抗体）、および類似のデスモソームカドヘリンを発現する細胞の接着を検出可能に調節する調節剤は、デスモソームカドヘリンによって媒介される機能を調節すると考えられる。
【０１２２】
他のアッセイを使用して、特異的なデスモソームカドヘリン媒介機能に対する調節剤の影響を評価し得る。例えば、デスモグレインとデスモコリンとの相互作用を阻害する調節剤は、皮膚透過性を増大させ得る。この能力は、例えば、接着上皮細胞層および／または接着内皮細胞層（例えば、ヒトの皮膚）の透過性に対する調節剤の影響を評価することによって、評価され得る。このような皮膚は、天然の供給源由来であり得るか、または合成の供給源由来であり得る。このようなアッセイに使用するためのヒトの腹部の皮膚は、一般的に、死から２４時間以内に検死解剖されたヒトから獲得され得る。簡潔には、調節剤（例えば、５００μｇ／ｍｌ）および試験マーカー（例えば、蛍光マーカーＯｒｅｇｏｎ　ＧｒｅｅｎＴＭおよびＲｈｏｄａｍｉｎｅ　ＧｒｅｅｎＴＭ　Ｄｅｘｔｒａｎ）は、滅菌緩衝液（例えば、ホスフェート緩衝液、ｐＨ７．２）中に溶解され得、そして皮膚を通ってレセプター流体内（例えば、リン酸緩衝液）に浸透するマーカーの能力が、Ｆｒａｎｚ　Ｃｅｌｌ装置を使用して測定され得る（Ｆｒａｎｚ，Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｂ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．７：５８〜６８，１９７８；Ｆｒａｎｚ，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．６４：１９０〜１９５，１９７５）。皮膚を通るマーカーの透過は、例えば、実験開始から６時間、１２時間、２４時間、３６時間または４８時間後に評価され得る。一般的に、ヒトの皮膚の透過性を増大させる調節剤は、５００μｇ／ｍＬの調節剤の存在下で６〜４８時間後のレセプター画分におけるマーカー量を統計学的に有意に増加させる。
【０１２３】
（調節剤修飾および処方物）
本明細書中に記載されるような調節剤は、１つ以上のさらなる分子に連結し得るが、その必要はない。詳細には、以下で議論されるように、複数の調節剤（これらは、同一であり得るが、その必要はない）を、支持体物質（例えば、単分子（例えば、キーホールカサガイヘモシニアン））、あるいは固体支持体（例えば、重合体マトリクス（これは、超薄膜のような膜または微細構造として処方され得る）、容器表面（例えば、組織培養プレート表面または生物反応器の内部表面）、あるいはビーズまたは他の粒子（これは、ガラス、プラスチックまたはセラミックを含む種々の物質から調製され得る）に連結することは、特定の適用のために有益であり得る。特定の適用について、生分解性支持体物質は、例えば、セルロースおよびその誘導体、コラーゲン、クモ糸状絹（ｓｐｉｄｅｒ　ｓｉｌｋ）または種々のポリエステル（例えば、ヒドロキシ酸および／またはラクトン由来のポリエステル）のいずれか、あるいは縫合糸（米国特許第５，２４５，０１２号を参照のこと）が好ましい。特定の実施形態内において、調節剤および他のＣＡＲ配列を含む分子（例えば、ＨＡＶもしくはＲＧＤ配列、または上記のようなＯＢ−カドヘリンもしくはカドヘリン−５　ＣＡＲ配列）は、好ましくは代替のパターンにおいて、重合体マトリクスのような支持体に連結され得る。
【０１２４】
調節剤を支持体物質に結合する適切な方法は、この支持体の組成および意図される用途に依存し、そして当業者に容易に明らかである。連結は、一般に、非共有会合（例えば、吸着または親和力）を介してか、または好ましくは、共有連結（これは、調節剤と支持体の官能基との間の直接結合であるか、または架橋剤による連結であり得る）を介して達成され得る。吸着による調節剤の結合は、適切な緩衝液中で、適切な時間、固体支持体と接触させることによって達成され得る。この接触時間は、温度に伴って変化するが、一般には、約５秒と１日との間であり、そして代表的には、約１０秒と１時間との間である。
【０１２５】
分子または固体支持体への調節剤の共有連結は、一般には、支持体物質と二官能性試薬（これは、調節剤のヒドロキシル基またはアミノ基のような官能基ともまた反応する）とを最初に反応させることによって達成され得る。例えば、調節剤は、ポリマー支持体のアルデヒド基と調節剤のアミンおよび活性水素との縮合によってか、または支持体のアミノ基と調節剤のカルボン酸との縮合によって、ベンゾキノンを用いてポリマー支持体またはコーティングに結合され得る。連結を生じさせる好ましい方法は、グルタルアルデヒドを用いてアミノ基を介す。調節剤は、エステル結合を介してセルロースに連結され得る。同様に、アミド結合は、キーホールカサガイヘモシニアンのような他の分子または他の支持体物質に連結するのに適切であり得る。複数の調節剤および／または他のＣＡＲ配列を含む分子は、例えば、ランダムなカップリング（ここで、このような等モル量の分子が、マトリクス支持体と混合され、そしてランダムに結合するのを可能にする）によって結合され得る。
【０１２６】
本明細書中に記載されるような調節剤は、優先的に、特定の組織または細胞に結合し得、従って、インビボでの所望の部位を標的化するのに十分であり得るが、特定の適用のために、さらなる標的化剤を含むことが有益であり得る。従って、標的化剤はまた、またはあるいは、調節剤に結合して、１つ以上の特定の組織を標的化するのを容易にし得る。本明細書中で使用される場合、「標的化剤」は、調節剤に結合する場合に、調節剤の標的細胞への輸送を増大し、それによってこの調節剤の局所濃度を増加させる任意の物質（例えば、化合物または細胞）であり得る。標的化剤としては、抗体またはそれらのフラグメント、レセプター、リガンドおよび標的組織の細胞に結合するか、または標的組織の近傍に結合する他の分子が挙げられる。公知の標的化剤としては、血清ホルモン、細胞表面抗原に対する抗体、レクチン、接着分子、腫瘍細胞表面結合リガンド、ステロイド、コレステロール、リンホカイン、線維素溶解性酵素ならびに所望の標的部位に結合するそれらの薬物およびタンパク質が挙げられる。多数のモノクローナル抗体の中で、標的化剤として作用し得るモノクローナル抗体は、抗ＴＡＣ、または他のインターロイキン−２レセプター抗体；９．２．２７およびＮＲ−ＭＬ−０５（２５０キロダルトンのヒト黒色腫に関連するプロテオグリカンと反応的である）；ならびにＮＲ−ＬＵ−１０（汎癌（ｐａｎｃａｒｃｉｎｏｍａ）糖タンパク質と反応的である）である。抗体標的化剤は、インタクトな（全ての）分子、そのフラグメントまたはその機能的等価物であり得る。抗体フラグメントの例は、Ｆ（ａｂ’）２、−Ｆａｂ’、ＦａｂおよびＦ［ｖ］フラグメントであり、これらは、従来の方法によってか、またはゲノム工学もしくはタンパク質工学によって生成され得る。結合は、一般的に、共有結合であり、そして例えば、直接的な縮合もしくは他の反応によってか、または二官能性リンカーもしくは多官能性リンカーによって達成され得る。
【０１２７】
特定の実施形態について、薬物を調節剤に連結することがまた、またはあるいは有益であり得る。本明細書中で使用される場合、用語「薬物」は、哺乳動物に投与して、疾患または他の望ましくない状態を防止または処置することが意図される、任意の生物活性剤をいう。薬物としては、ホルモン、増殖因子、タンパク質、ペプチドおよび他の化合物が挙げられる。本発明の文脈中のある特定の薬物の使用が、以下で議論される。
【０１２８】
本明細書中に記載されるような調節剤は、薬学的組成物中に存在し得る。薬学的組成物は、１つ以上の薬学的に受容可能なキャリアまたは生理学的に受容可能なキャリア、希釈剤または賦形剤と組み合わせて、１つ以上の調節剤を含有する。このような組成物は、緩衝液（例えば、中性緩衝化生理食塩水またはリン酸緩衝化生理食塩水）、炭水化物（例えば、グルコース、マンノース、スクロースまたはデキストラン）、マンニトール、タンパク質、ポリペプチドまたはグリシンのようなアミノ酸、酸化防止剤、ＥＤＴＡまたはグルタチオンのようなキレート化剤、アジュバント（例えば、水酸化アルミニウム）および／あるいは保存剤、を含有し得る。なお他の実施形態内において、本発明の組成物は、凍結乾燥物として処方され得る。１つ以上の調節剤（単独でか、または標的化剤および／もしくは薬剤と組み合わせて）は、周知の技術を使用して、リポソーム内にカプセル化され得るが、その必要はない。本発明の組成物は、任意の適切な投与様式（例えば、局所的投与、経口投与、鼻内投与、静脈内投与、頭蓋内投与、腹腔内投与、皮下投与または筋肉内投与）で処方され得る。
【０１２９】
特定の実施形態について、以下に記載されるように、薬学的組成物は、特定のデスモソームカドヘリン以外の、１つ以上の分子によって媒介される細胞接着の修飾因子をさらに含有し得る。このような修飾因子は、一般に、１つ以上のＣＡＲ配列および／またはそれに対する抗体を使用して、上記のように調製され得る。このような組成物は、複数の細胞接着分子（例えば、古典的カドヘリン（例えば、Ｎ−カドヘリンおよびＥ−カドヘリン）；非古典的カドヘリン、インテグリン；オクルディン；クラウディン；Ｎ−ＣＡＭおよび／または細胞外マトリクスタンパク質（例えば、ラミニン、フィブロネクチン、コラーゲン、ビトロネクチン、エンタクチンおよびテネイシン）のようなカドヘリン遺伝子スーパーファミリーの他のメンバー）によって媒介される細胞接着を阻害することが望まれる状況で、特に有用である。
【０１３０】
薬学的組成物はまた、またはあるいは、１つ以上の薬物を含み得、この薬物は、調節剤に連結し得るか、またはこの組成物内で遊離状態であり得る。実質的に、任意の薬物は、以下に記載されるような種々の目的のために、本明細書中に記載されるような調節剤と組み合わせて投与され得る。調節剤と共に投与され得る薬物型の例としては、以下が挙げられる：鎮痛薬、麻酔薬、抗狭心症薬、抗真菌薬、抗生物質、抗癌剤（例えば、タキソールまたはマイトマイシンＣ）、抗炎症薬（例えば、イブプロフェンおよびインドメタシン）、駆虫薬、抗鬱薬、解毒薬、制吐剤、抗ヒスタミン薬、抗高血圧薬、抗マラリア薬、微小管阻害薬（例えば、コルヒチンまたはビンカアルカロイド類）、抗片頭痛剤（ａｎｔｉｍｉｇｒａｉｎｅ　ａｇｅｎｔ）、抗菌剤、抗精神病薬（ａｎｔｉｐｈｓｙｃｈｏｔｉｃ）、解熱剤、防腐薬、抗シグナル送達剤（ａｎｔｉ−ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ａｇｅｎｔ）（例えば、タンパク質キナーゼＣインヒビターまたは細胞内カルシウム動員のインヒビター）、抗関節炎薬、抗トロンビン剤、抗結核薬、鎮咳薬、抗ウイルス剤、食欲抑制剤、心臓作用薬、化学依存性剤（ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｙ　ｄｒｕｇ）、瀉下薬、化学療法薬剤、冠動脈、大脳または末梢神経の血管拡張薬、避妊薬、抑制剤、利尿薬、去痰薬、増殖因子、ホルモン剤、催眠薬、免疫抑制剤、麻薬拮抗薬、副交感神経作動薬、鎮痛剤、興奮剤、交感神経模倣薬、毒素（例えば、コレラ毒素）、精神安定薬および尿抗感染薬（ｕｒｉｎａｒｙ　ａｎｔｉｉｎｆｅｃｔｉｖｅ）。
【０１３１】
画像化目的のために、種々の診断剤のいずれかが、調節剤に連結されるかまたはこの組成内で遊離状態のいずれかで薬学的組成物に組み込まれ得る。診断剤としては、患者内部の生理学的機能を解明するために投与されるが、他の生理学的機能を、一般的に無影響のままにする任意の物質が挙げられる。診断剤としては、以下が挙げられる：金属、放射活性同位体および放射線不透物質（ｒａｄｉｏｏｐａｑｕｅ　ａｇｅｎｔ（例えば、ガリウム、テクネチウム、インジウム、ストロンチウム、ヨウ素、バリウム、臭素およびリン含有化合物）、放射線透過剤、造影剤、色素（例えば、蛍光色素および発色団）および比色定量反応または蛍光定量反応に触媒作用を及ぼす酵素。一般に、このような因子は、上記のような種々の技術を使用して結合され得、そして任意の配向で存在し得る。
【０１３２】
本明細書中に記載される組成物は、徐放性処方物（すなわち、投与後に調節剤の緩やかな放出をもたらすカプセルまたはスポンジのような処方物）の一部として投与され得る。このような処方物は、一般的に、周知の技術を用いて調製され得、そして例えば、経口移植、直腸移植もしくは皮下移植によってか、または所望の標的部位での移植によって投与され得る。除放性処方物は、キャリアマトリクス中に分散され、そして／または律速膜によって囲まれたレザバ中に含まれた調節剤を含み得る（例えば欧州特許出願７１０，４９１　Ａを参照のこと）。このような処方物内で使用するためのキャリアは、生体適合性であり、そしてまた生体分解性でもあり得る；好ましくは、この処方物は、調節剤の比較的一定の放出レベルを提供する。除放性処方物内に含まれる調節剤の量は、移植部位、放出速度および放出の予測される持続時間、ならびに処置または防止されるべき状態の性質に依存する。
【０１３３】
本発明の薬学的組成物は、処置（または予防）されるべき疾患に適切な様式で投与され得る。適切な投与量および適した持続時間ならびに投与の頻度は、その患者の状態、その患者の疾患の型および重症度ならびに投与の方法のような要素によって決定され得る。一般に、適切な投与量および処置レジメンは、治療的および／または予防的利益を提供するのに十分な量で調節剤を提供する。本発明の特に好ましい実施形態において、本明細書中に記載されるような調節剤または薬学的組成物は、毎日の単回投与または複数回投与のレジメンにおける、０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の投与量、好ましくは０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の投与量で投与され得る。局所投与について、クリームは、代表的に０．００００１％〜１％、好ましくは０．０００１％〜０．００２％の範囲の量の調節剤を含む。流体組成物は、代表的に、約１０ｎｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、好ましくは約１０μｇ〜２ｍｇ／ｍＬの調節剤を含む。適切な投与量は、一般に、実験モデルおよび／または臨床試験を使用して決定される。一般に、効果的な治療を提供するのに十分な、最低投与量の使用が好ましい。患者は、一般に処置または予防される状態のために適したアッセイを使用して治療効果についてモニターされ得、これは当業者に公知である。
【０１３４】
（調節剤の方法の使用）
一般に、本明細書中に記載される調節剤および組成物は、デスモソームカドヘリン発現細胞の、細胞接着のような機能を調節するために使用され得る。このような調節は、インビボおよび／またはインビトロで、好ましくはヒトのような哺乳動物で、この調節剤とデスモソームカドヘリン発現細胞とを接触させる任意の方法を使用して実行され得る。上述のように、デスモソームカドヘリン介在細胞接着の破壊に関する目的のための調節剤は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列、複数デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を密接して近位に、および／またはデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を認識する物質（例えば、それらの抗体または抗原結合フラグメント）を含み得る。他の接着分子によって介在される細胞接着を破壊することがまた望ましい場合、調節剤はさらに、このような接着分子により結合される１つ以上のＣＡＲ配列（および／またはこのような配列に結合する、それらの抗体またはフラグメント）を含み得、好ましくは、リンカーによってお互いに分離し、そしてデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列から分離される、１つ以上のＣＡＲ配列を含み得る。上述のように、このようなリンカーは、１つ以上のアミノ酸を含んでも良いし、含まなくても良い。細胞接着を増強するために、調節剤は、１つ以上のデスモソームカドヘリンまたは抗体（もしくはフラグメント）に由来する複数のデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列、好ましくはリンカーによって分離されるデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含み得、そして／または単分子か、または上記のような支持材料に結合され得る。他の接着分子によって介在される細胞接着を増強することがまた所望される場合、調節剤は、このような接着分子によって結合される１つ以上のＣＡＲ配列（および／またはこれらの配列に結合する、それらの抗体またはフラグメント）、好ましくは、お互いに分離され、そしてリンカーによってデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列から分離されるＣＡＲ配列をさらに含み得る。
【０１３５】
本明細書中に記載されるような細胞接着の破壊を含む特定の方法は、腫瘍細胞接着を遮断することにおいて先行技術を越える利点を有する。以下により詳細に記載されるように、本明細書中に記載されるような調節剤はまた、種々の他の文脈において、細胞接着を破壊または増強するために使用され得る。本明細書中に記載されるそれぞれの方法において、１つ以上の調節剤は一般に、単独で投与されても良いし、または薬学的組成物中で投与されても良い。本明細書中に記載されるそれぞれの特異的な方法において、上記のように、標的因子が使用されて、その標的部位で調節剤の局所濃度を増加させ得る。
【０１３６】
１つの局面において、細胞接着が減少される方法が提供される。このような１つの局面において、本発明は、本明細書中に記載されるような調節剤を投与することによって、哺乳動物において望まない細胞接着を減少するための方法を提供する。望まない細胞接着は、例えば、腫瘍細胞との間か、腫瘍細胞と正常細胞との間か、あるいは手術、損傷、化学療法、疾患、炎症、または細胞成長度もしくは機能を危機にする他の状態の結果としての正常細胞との間で生じ得る。１つの特に好ましい実施形態において、調節剤はさらに、複数の接着分子によって介在される細胞接着を破壊し得る。このような因子には、１つ以上のデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に加えて、古典的なカドヘリンＣＡＲ配列ＨＡＶ配列のようなＣＡＲ配列、ＲＧＤ配列が挙げられ得、これは、インテグリン、ＯＢ−カドヘリンまたは上記のようなカドヘリン−５ＣＡＲ配列、咬合ＣＡＲ配列ＬＹＨＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：＿）および／またはクラウディン（ｃｌａｕｄｉｎ）ＣＡＲ配列ＩＹＳＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：＿）により結合され、好ましくはリンカーを介してデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列から分離される。あるいは、他の接着分子によって介在される細胞接着の分離修飾因子は、調節剤と結合して、同じ薬学的組成物と一緒にかまたは別々のいずれかで投与され得る。
【０１３７】
調節剤の局所的な投与は一般に好ましいが、しかし他の手段もまた使用され得る。好ましくは、局所投与のための流体組成物（例えば、生理学的な生理食塩水を含む）は、上記の量の調節剤を含み、そしてより好ましくは、１０μｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬの量を含む。クリームは、一般に上記のように処方され得る。手術領域における局所投与は、創傷の潅水すなわち、手術後に外科的なドレインを伴う断続的もしくは連続的な潅水によってか、または手術が実行される必要のない場合、炎症の領域、損傷もしくは疾患において特異的に挿入されるドレインの使用によって、手術の目的で１度に与えられ得る。あるいは、非経口的または経皮的な投与もまた、同様の結果を達成するために使用され得る。
【０１３８】
本明細書中で提供されるような特定の調節剤を使用して、経皮的な薬物送達を促進し得る。薬物の経皮的な送達は、薬物の相対的な定常血液レベルを維持するために使用され得る簡便でかつ非侵襲性方法である。一般に、皮膚を介する薬物送達を促進するために、上皮細胞（ケラチノサイト）と微小血管の内皮細胞との間の接着をかき乱す必要がある。現在利用可能な技術を使用して、小さく、非荷電の分子のみが、インビボで皮膚を横切って送達され得る。本明細書中に記載される方法は、同程度の限定に供されない。従って、種々広範の薬物は、全身性または局所的投与のために、皮膚の上皮細胞層および内皮細胞層を横切って輸送され得る。このような薬物は、黒色腫に送達されても良いし、または身体中のほかの部位に送達するために哺乳動物の血流中に入れられても良い。
【０１３９】
皮膚を通る薬物の送達を増強するために、本明細書中に記載されるような調節剤および薬物が、皮膚表面と接触される。複数の非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列を含む多機能な調節剤（例えば、ＯＢ−カドヘリンまたはカドヘリン−５に由来するＣＡＲ配列との組み合わせにおけるデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列）もまた、使用され得る。このような調節剤はまた、もしくはあるいは、古典的カドヘリンＣＡＲ配列ＨＡＶ、フィブロネクチンＣＡＲ配列ＲＧＤを含み得、これはインテグリン、および／または咬合ＣＡＲ配列ＬＹＨＹ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：＿）によって認識され得る。あるいは、細胞接着の分離修飾因子は、調節剤と組み合わせて、同じ薬学的組成物でかまたは別々にかのいずれかで、投与され得る。
【０１４０】
接触は、調節剤の直接的な適用によって、一般にクリームもしくはゲルとして処方される組成物中で、または経皮適用のための種々の皮膚接触デバイス（欧州特許出願第５６６，８１６Ａ号；米国特許第５，６１３，９５８号；米国特許第５，５０５，９５６号に記載されるようなデバイス）のいずれかを使用して、達成され得る。皮膚パッチは、投与の簡便な方法（特に徐放性処方のため）を提供する。このようなパッチは、薬物が拡散する皮膚を通る膜によって、この皮膚から分離される調節剤および薬物の貯蔵庫を含み得る。他のパッチの設計において、この調節剤および薬物は、ポリマーまたは接着性マトリクス中に溶解または懸濁され得、このポリマーまたは接着性マトリクスは次いで、患者の皮膚と直接接触して配置される。次いで、この調節剤および薬物は、マトリクスから皮膚中に拡散し得る。調節剤および薬物は、同じ組成物もしくは皮膚パッチ中に含まれていても良いし、または別々に投与されても良いが、同時でかつ同じ部位での投与が好ましい。一般に、皮膚を介して投与される調節剤の量は、処置または予防され得る状態の性質で変化するが、上記のように変化し得る。このようなレベルは、使用されるデバイスに対する適切な調整によってか、または上記のように処方されるクリームを適用することによって達成され得る。皮膚を横切り標的組織への薬物の伝達は、例えば、Ｆｒａｎｚ細胞装置を使用するインビトロ研究に基づいて予想され得、そして当該分野で明らかである適切な手段によってインビボで評価され得る。例として、時間経過にわたって投与された薬物の血清レベルをモニターすることは、皮膚を横切る薬物の容易な伝達の測定を提供する。
【０１４１】
本明細書中に記載される経皮的な薬物の伝達は、薬物伝達の一定の速度が所望される場合、薬物の血液レベルの変動を避けるために特に有用である。例えば、モルヒネは、通常は手術後直ちに使用される鎮痛薬である。非経口的形態（筋肉内、静脈内）で断続的に与えられる場合、患者は通常、最初の１時間の間眠気を感じ、続く２時間の間は良くなり、そして最後の時間の間は痛みである。なぜなら血液レベルが注射後に急激に上昇し、そして再注射が達成されるための４時間の間隔の前に、所望されるレベル未満まで減少するからである。本明細書中に記載される経皮的な投与は、長時間（例えば、日）の一定レベルの維持を可能にし、これは適切な痛みのコントロールおよび同時に精神的な敏捷性を可能にする。インスリンは、別のこのような例を提供する。多くの糖尿病患者が、インスリンの一定の基底レベルの維持を必要とし、このインスリンレベルは食事の時間でその必要性が異なる。この基底レベルは、本明細書中に記載されるように、インスリンの経皮投与を使用して維持され得る。抗生物質はまた、一定速度で投与され得、適切な細菌血液レベルを維持し、一方毒性についてしばしば応答する高レベル（例えば、代表的に腎臓毒性を生じるあまりに高いゲンタマイシンのレベル）を避ける。
【０１４２】
本発明の方法による薬物伝達はまた、薬物投与のより簡便な方法を提供する。例えば、非経口的な薬物を、新生児および乳児に投与することは、カテーテルを入れる受容可能な口径の血管を探すことに関する困難性に起因して、しばしば特に難しい。しかし、新生児および乳児はしばしば、大人と比較して比較的広い皮膚面積を有する。経皮的薬剤伝達は、このような患者のより簡単な管理を可能にし、そして現在病院でのみ与えられ得るケアの特定の型を、家で与えることを可能にする。代表的に、静脈にカテーテルを入れることに同様の困難性を有する患者は、化学療法を受ける患者または透析を受ける患者である。さらに、長期治療を受ける患者について、本明細書中に記載されるような経皮的な投与は、非経口的な投与よりも、より簡便である。
【０１４３】
本明細書中に記載の経皮的投与はまた、非経口的な使用が実用的でない状況において、胃腸管が回避されることを可能にする。例えば、治療的小ペプチドおよび治療的タンパク質（これらは、代表的には胃腸管で消化される）の投与に適した方法に対する要求が増している。本明細書中に記載の方法は、このような化合物の投与を可能にし、そして長期間に及ぶ容易な投与を可能にする。薬物摂取を制限する長期間の腸閉塞または特定の胃腸管疾患に起因するそれらの胃腸管からの吸収に関する問題を有する患者はまた、本明細書中に記載の経皮的適用のために処方された薬物からの利益を得得る。
【０１４４】
さらに、コンプライアンスを維持することが困難な多くの臨床的な状況が存在する。例えば、精神的問題を抱えた患者（例えば、アルツハイマー疾患または精神病の患者）は、１日の特定の時間に彼らの医薬品を摂取する能力に依存する必要はなく薬物の定常的な送達速度が提供される場合に、より容易に管理される。処方された薬物を摂取することを単に忘れる患者はまた、周期的（例えば、３日おき）に皮膚用パッチ剤を単に身につけ無ければならない場合、より忘れにくくなる。高血圧患者のような症状がない疾患を抱えた患者は特に、彼らに処方された医薬品を摂取することを忘れる恐れがある。
【０１４５】
複数の薬物を摂取する患者にとって、皮膚用パッチ剤のような経皮的適用に対するデバイスは、頻繁に一緒に使用される薬物の組合せで処方され得る。例えば、多くの心不全患者は、ジゴキシンをフロセミドと組み合せて与えられる。単一の皮膚用パッチ剤中への両方の薬物の組合せは、投与を促進して、誤用による危険を減少させ（適切な時間に正しい丸剤を摂取することはしばしば、老人にとって困惑することである）、「大変多くの丸剤」を摂取するという心理的緊張を減少し、不規則な活動に起因して投薬量を抜かしてしまうことを減少し、そしてコンプライアンスを改善する。
【０１４６】
本明細書中に記載の方法は、特にヒトに対して適用可能であるが、しかしまた、様々な獣医学的な使用もある（例えば、（例えば、受胎制限のため）動物への成長因子またはホルモンの投与）。
【０１４７】
上記のように、広範な種々の薬物が本明細書中に提供された方法に従って、投与され得る。経皮的に投与され得る薬物カテゴリーのいくつかの例は、（例えば、関節炎および他の状況における）抗炎症薬剤（例えば、全てのＮＳＡＩＤ、インドメタシン、プレドニゾン等）；モルヒネ、コデイン、Ｄｅｍｅｒｏｌ、アセトアミノフェン（ａｃｅｔｏａｍｉｎｏｐｈｅｎ）およびこれらの組み合わせ（例えば、コデインにアセトアミノフェンに加えたもの）を含む鎮痛薬（特に経口吸収が可能でない場合（例えば、手術後）、および非経口投与が簡便でないかまたは所望されない場合）；抗生物質（例えば、バンコマイシン（これはＧＩ管によって吸収されず、そしてしばしば静脈内に与えられる）または（例えば、結核に対する）ＩＮＨとリファンピシンとの組合せ）；抗凝固薬（例えば、ヘパリン（これは、ＧＩ管に十分に吸収されず、一般に非経口的に与えられ、高レベルにおける出血の危険性の増大および低レベルにおける無効能の危険性を伴う血液レベルにおける変動を生じる）およびワルファリン（これは、ＧＩ管によって吸収されるが、外科手術の手順後の正常な腸閉塞のために腹部の外科手術直後に投与され得ない））；（例えば、コンプライアンスがアルツハイマー疾患におけるように重要な問題である状況においてか、または安定な血液レベルを維持することが抗コリン作用副作用の有意な減少および患者における良好な耐性を生じるような場合における）抗うつ薬（例えば、アミトリプチリン（ａｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎ）、イミプラミン、プロザック（ｐｒｏｚａｃ）等）；（例えば、コプライアンスを改善し、そして血液レベルの変動に関する副作用を減少するための）抗高血圧薬（例えば、利尿薬およびβブロッカー（これは同じパッチで投与され得る；例えば、フロセミドおよびプロパノールオール（ｐｒｏｐａｎｏｌｏｌ）））；（例えば、コンプライアンスを促進し、介護者および家族の構成員が、この薬物が投与されたことを確認することを容易にするための）抗精神病薬（例えば、ハロペリドール（ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ）およびクロルプロマジン）；ならびに（例えば、経口投与後の高い血液レベルに関連する機敏性の減少を避けるための、および治療レベルを一定に維持することによって１日を通して連続的な利益を可能にするための）抗不安薬または鎮静薬。
【０１４８】
天然に存在するホルモンおよび合成ホルモン、増殖因子、タンパク質およびペプチドを含む多くの他の薬物を本明細書中に記載のように投与し得る。例えば、インシュリンおよびヒト成長ホルモン、エリトロポイエチンのような増殖因子、インターロイキンならびにインターフェロンが、皮膚を介して送達され得る。
【０１４９】
哺乳類の皮膚を介する薬物の投与のためのキットはまた、本発明において提供される。このようなキットは、１つ以上の調節剤と組合せてかまたは１つ以上の調節剤を染み込ませた、経皮投与のためのデバイス（例えば、皮膚用パッチ剤）を一般的に含む。薬物がさらにこのようのキットに含まれ得る。
【０１５０】
関連する局面において、本明細書中に記載のされたを調節剤は内皮細胞層および上皮細胞層の透過性を増大するために使用され得、これらによって受動的な拡散による血液画分のサンプリングを促進する。このような方法は、血液中を循環する特定分子のレベルの検出および／または測定を可能にする。一般に、血液画分をサンプリングするために、微小血管の、上皮細胞（ケラチノサイト）と内皮細胞との間の付着に摂動を与えることが必要である。現在利用可能な技術を用いて、小さい、非荷電分子のみがインビボの皮膚を通して検出され得る。本明細書中に記載の方法は、同程度の限界に供さない。従って、広範な種々の血液成分が上皮細胞層と内皮細胞層とを通してサンプリングされ得る。このようなサンプリングは、任意のこのような細胞層（例えば、皮膚および歯肉を含む）を通して達成され得る。
【０１５１】
例えば、本明細書中に記載の皮膚用パッチ剤を通して、１つ以上の調節剤を皮膚に塗布することが、このパッチが血清の代表的なサンプルを含む少量の流体を蓄積するスポンジのように機能することを可能にする。次いで、このパッチは、特定時間後に取り除かれ、そして目的の化合物（例えば、医薬品、ホルモン、増殖因子、代謝産物またはマーカー）に対して適切な技術によって分析される。あるいは、パッチは特定の物質（例えば、酵素）が検出された場合に変色することを可能にする試薬を染み込ませ得る。このような様式で検出され得る物質としては、コカインのような違法薬物、ＨＩＶ酵素、グルコースおよびＰＳＡが挙げられるが、これらに限定されない。この技術は、在宅試験キットに対して特に利益がある。
【０１５２】
患者の血液のサンプリングを容易にするために、薬物伝達を増強するための上記のような調節剤が皮膚表面と接触される。調節剤および血液成分をアッセイするための試薬が（必要ではないが）、同じ組成物または皮膚用パッチ剤中に含まれ得る。一般に皮膚を介して投与される調節剤の量は、上記のように変化し得る。このようなレベルが、用いられるデバイスに対する適切な調整または上記のように処方されたクリームの塗布によって達成され得る。皮膚を通しての血液成分の移動は、例えば、フランツ（Ｆｒａｎｚ）細胞装置を使用してインビトロ研究に基づいて予想され得、そして当業者にとって明らかである適切な手段によってインビボで評価される。
【０１５３】
例えば、哺乳動物の皮膚または歯肉を介しての血液成分サンプリングのためのキットはまた、本発明として提供される。このようなキットとしては、一般に、１つ以上の調節剤と組合せたかまたは１つ以上の調節剤を染み込ませた、経皮投与のためのデバイス（すなわち、皮膚用パッチ剤）が一般的に挙げられる。血液成分の検出のための試薬は、さらにこのようなキット中に含まれ得る。
【０１５４】
さらなる局面において、哺乳動物の腫瘍に対する薬物の送達の増強のための方法が、提供され、この方法は、腫瘍を保有する哺乳動物に薬物と組み合わせた調節剤を投与する工程を包含する。このような調節薬剤はデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列のみを含むか、あるいは１つ以上の他の非古典的または古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（例えば、ＯＢカドヘリン、カドヘリン−５、カドヘリン−６、Ｅ−カドヘリンおよび／またはＮ−カドヘリン（例えば、ＨＡＶ、ＳＨＡＶＳＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：＿）、ＡＨＡＶＤＩ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：＿）またはこのような配列のアナログ）に由来するＣＡＲ配列）をさらに含み得る。デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列に対してリンカーを介して連結した、隣接Ｅ−カドヘリン特異的配列または隣接Ｎ−カドヘリン特異的配列のいずれかを伴ったデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含む二官能性調節剤もまた、好ましい。好ましくは、調節剤のペプチド部分は、６〜１６個のアミノ酸を含む。なぜなら、より長いペプチドは、水溶液に溶解することが難しく、そしてペプチダーゼにより分解され得るからである。
【０１５５】
１つの特に好ましい実施形態において、調節剤は、複数の接着分子によって媒介される細胞接着を崩壊し得る。例えば、単一の分枝した調節剤（または、単一の分子または支持材料に結合された複数の因子）は、デスモソームカドヘリンによって媒介される接着ならびにＥ−カドヘリン、Ｎ−カドヘリン、オクルディン、クラウディンおよびインテグリン媒介細胞接着を崩壊し得る。このような因子は、細胞接着の多機能ディスラプターとして役立つ。あるいは、別のモジュレーターは、同じ薬学的組成物内かまたは別々にかのいずれかで、調節剤と組み合わせて投与され得る。好ましい抗体調節剤は、上記のような、非古典的または古典的なカドヘリンＣＡＲ配列に対して指向されるＦａｂフラグメントを含む。Ｆａｂフラグメントは、調節剤に組み込まれ得るかまたは同時に投与される別のモジュレーター内に存在し得る。
【０１５６】
好ましくは、調節剤および薬剤は、投与される前に、同じ組成物または薬剤送達デバイスにおいて処方される。一般に、調節剤は、任意の腫瘍（例えば、乳癌、胃腫瘍、卵巣腫瘍または腎臓腫瘍）への薬剤送達を増大し得、そして投与の方法は、標的の腫瘍の型に基づいて選択され得る。例えば、上記のような注射または局所投与は、黒色腫および他のアクセス可能な腫瘍にとって好ましいものであり得る（例えば、原発性卵巣腫瘍からの転移は、組成物を用いる腹腔のフラッシングによって処置され得る）。他の腫瘍（例えば、乳癌）は、腫瘍の部位への調節剤および薬剤（例えば、マイトマイシンＣ）の注射によって処置され得る。他の例において、この組成物は、全身に投与され得、そして種々の特定の標的因子のいずれかを使用して腫瘍を標的とし得る。適切な薬剤は、処置されるべき癌の型に基づいて同業者によって同定され得る（例えば、乳癌に対するタキソール）。一般に、投与される調節剤の量は、投与方法および腫瘍の性質と共に変化し、上で提供される古典的な範囲内で、好ましくは約１μｇ／ｍＬ〜約２ｍｇ／ｍＬおよびさらに好ましくは約１０μｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの範囲内である。標的腫瘍への薬剤の移動は、当業者に明白な適切な手段によって評価され得る。薬物はまた、標識化されて（例えば、放射性核種を使用して）、標準的な画像化技術を使用して標的腫瘍への移動の直接観察を可能にし得る。
【０１５７】
関連する局面において、本発明は、哺乳動物における癌を処置するための方法を提供する。このような調節剤は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列のみを含み得、または１つ以上の他の非古典的かまたは古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（例えば、ＯＢ−カドヘリン、カドヘリン−５、カドヘリン−６、Ｅ−カドヘリンおよび／またはＮ−カドヘリン由来のＣＡＲ配列）をさらに含み得る。インテングリン媒介細胞接着に関連するＣＡＲ配列（例えば、ＲＧＤ）はまた、使用され得る。例えば、このような調節剤は、ＨＡＶ、ＳＨＡＶＳＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）、ＡＨＡＶＤＩ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）、ＲＧＤ、ＹＩＧＳＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）またはこのような配列の誘導体のような配列をさらに含み得る。好ましくは、このような調節剤のペプチド部分は、６〜１６個のアミノ酸を含む。好ましい抗体調節剤は、非古典的または古典的なカドヘリンＣＡＲ配列に対して指向されるＦａｂフラグメントを含む。Ｆａｂフラグメントは、調節剤に組み込まれ得るかまたは同時に投与される別のモジュレーター内に存在し得るかのいずれかである。
【０１５８】
調節剤は、単独（例えば、皮膚を介して）かまたは薬学的組成物内において投与され得る。黒色腫および他の特定のアクセス可能な腫瘍に関して、注射または上記のような局所投与が、好まれ得る。他の腫瘍（例えば、膀胱腫瘍、気管支腫瘍または気管腫瘍）は、腔への調節剤の注射によって処置され得る。他の例において、組成物は、全身に投与され得、そして上記のような、種々の特定の標的因子のいずれかを使用して腫瘍を標的にされ得る。好ましくは、腫瘍は、乳癌、胃腫瘍または腎臓腫瘍である。一般に、投与される調節剤の量は、投与の方法および癌の性質に依存して変化するが、上で同定される範囲内で変化し得る。癌処置の有効性は、周知の臨床的な観察（例えば、血清腫瘍マーカー（例えば、ＣＥＡまたはＰＳＡ）のレベルをモニタする）を使用して評価され得る。
【０１５９】
特に投与が、全身性である場合、上記のような標的薬剤を追加することは、有益であり得る。適切な投与の形態および用量は、予防または処置されるべき状態に依存するが、一般に、注射による投与が適切である。用量は、上記されるように変化し得る。阻害の有効性は、腫瘍が、増殖を維持することができないことを評価することによっておおまかに評価され得、そして腫瘍の末梢における神経の非存在を観察することによって微視的に評価され得る。
【０１６０】
なお別の関連する局面において、本発明は、デスモソームカドヘリン発現細胞におけるアポトーシスを誘導するための方法を提供する。このような調節剤は、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列のみを含み得るか、または１つ以上の他の非古典的かまたは古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（例えば、ＨＡＶ、ＳＨＡＶＳＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）、ＡＨＡＶＤＩ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）、ＲＧＤ、ＹＩＧＳＲ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）またはこのような配列のアナログ）をさらに含み得る。好ましくは、このような調節剤のペプチド部分は、６〜１６個のアミノ酸を含む。好ましい抗体調節剤は、非古典的または古典的なカドヘリンＣＡＲ配列に対して指向されるＦａｂフラグメントを含む。Ｆａｂフラグメントは、調節剤に組み込まれ得るかまたは同時に投与される別のモジュレーター内に存在し得るかのいずれかである。投与は、局所的、注射を介してまたは他の手段によってであり得、そして特に投与が、全身性である場合、標的薬剤の追加は、有益であり得る。適切な投与の形態および用量は、アポトーシスの誘導が、所望される細胞の位置および性質に依存するが、一般に、用量は、上記のように変化し得る。生検は、アポトーシスの誘導のレベルを評価するために実施され得る。
【０１６１】
特定の他の局面において、本発明は、デスモソームカドヘリン発現細胞の接着を増大する方法を提供する。特定の実施形態において、調節剤は、固体支持体に結合し得、複数の調節剤を含むマトリクスを生じる。１つのこのような実施形態において、この支持体は、重合体のマトリクスであり、他のＣＡＲ配列を含む調節剤および分子は、重合体マトリクスに結合する（例えば、ＨＡＶ配列またはＲＧＤ配列のいずれかを含む調節剤および分子は、同じマトリクスに、好ましくは交互のパターンにおいて結合され得る）。このようなマトリクスは、複数の細胞接着分子によって媒介される接着を増大することが所望される前後関係において使用され得る。あるいは、調節剤自身は、上記のようにリンカーによって分離された、複数のデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列または抗体（もしくはそのフラグメント）を含み得る。いずれかの方法で、調節剤は、種々の前後関係において複数のデスモソームカドヘリン発現細胞に結合する「生物学的な接着剤」として機能する。
【０１６２】
１つのこのような局面において、デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列調節剤を含むおよび／または単一の分子もしくは支持体材料に結合される複数の調節薬剤は、哺乳動物において創傷治癒を促進するためおよび／または瘢痕組織を軽減することに使用され得る。このような調節剤は、１つのデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含み得るか、または複数のこのような配列（例えば、デスモグレインＣＡＲ配列およびデスモコリンＣＡＲ配列）を含み得る。必要に応じて、調節剤は、１つ以上の他の非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（例えば、ＯＢ−カドヘリンもしくはカドヘリン−５由来のＣＡＲ配列および／または１以上の古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（ＨＡＶ、ＳＨＡＶＳＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）、ＡＨＡＶＤＩ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）を含む）またはこのような配列のアナログ）を含む。好ましい抗体調節剤は、非古典的なカドヘリンまたはＥ−カドヘリンＣＡＲ配列のいずれかに対して指向されるＦａｂフラグメントを含む。セルロースまたはコラーゲンのような生体適合性および生体分解性マトリクスに結合される調節剤は、特に好ましい。このような方法における使用に関して、調節剤は、遊離のアミノ基またはヒドロキシル基を有するべきである。調節剤は、一般的に、創傷に局所的に投与され、この創傷において、この調節剤は、創傷の閉鎖を促進し得、そして縫合を強化し得、または取って代わりさえし得る。同様に、マトリクス結合化調節剤の投与は、皮膚移植片および人工器官の移植における細胞接着を促進し得、そしてコラーゲン注射の持続時間および有用性を延長し得る。一般に、創傷、移植片または移植部位に投与されるマトリクス結合化調節剤の量は、創傷の重症度および／または創傷、移植片（ｇｒａｆｔ）もしくは移植片（ｉｍｐｌａｎｔ）の性質と共に変化するが、上記されるように変化し得る。デスモソームカドヘリン配列、古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（ＨＡＶ）および特定のインテグリン（ＲＧＤ）によって結合されるＣＡＲ配列を含む多機能調節剤はまた、創傷治癒の強力な刺激物質としておよび／または瘢痕組織を減少するために使用され得る。あるいは、古典的なカドヘリン媒介細胞接着または古典的なインテグリン媒介細胞接着の１つまたそれより多い別のモジュレーターは、同じ薬学的組成物においてかまたは別のいずれかで、調節剤を組み合わせて投与され得る。
【０１６３】
さらなる局面において、調節剤は、自己免疫性水泡形成障害（例えば、尋常天疱瘡、落葉状天疱瘡および細胞間ＩｇＡ皮膚病）の処置に使用され得る。これらの障害は、１つ以上のデスモソームカドヘリンに対する抗体を患者が発達させ始める病理学的な状態である。その結果、皮膚細胞の接着は、失敗し始め、種々の種類の水泡形成を生じる。デスモソームカドヘリン媒介細胞接着を増大するための調節剤の使用は、このような障害の症状を緩和し得る。必要に応じて、このような方法は、抗カドヘリン抗体を除去するための方法と組み合わせて実施される。このような治療における使用のための調節剤は、１つのデスモソームカドヘリンＣＡＲ配列を含み得るか、または好ましくは、デスモグレインＣＡＲ配列およびデスモコリンＣＡＲ配列を含み得る。必要に応じて、調節剤は、１つよりも多い他の非古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（例えば、ＯＢ−カドヘリンまたはカドヘリン−５由来のＣＡＲ配列および／または１以上の古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（ＨＡＶ、ＳＨＡＶＳＳ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）、ＡＨＡＶＤＩ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ＿）を含む）またはこのような配列のアナログ）をさらに含む。好ましい抗体調節剤は、非古典的なカドヘリンまたはＥ−カドヘリンＣＡＲ配列のいずれかに対する指向されるＦａｂフラグメントを含む。セルロースまたはコラーゲンのような生体適合性および生体分解性マトリクスに結合される調節剤は、特に好ましい。このような方法における使用に関して、調節剤は、遊離のアミノ基またはヒドロキシル基を有するべきである。調節剤は、一般的に、水泡部位に局所的に投与される。一般的に、水泡部位に投与されるマトリクス結合化調節剤の量は、状態の重症度と共に変化し、そして一般に的に上で議論されるような範囲である。１つ以上のデスモソームカドヘリン配列、古典的なカドヘリンＣＡＲ配列（ＨＡＶ）および特定のインテグリン（ＲＧＤ）によって結合されるＣＡＲ配列を含む多機能調節剤もまた使用され得る。あるいは、古典的なカドヘリン媒介細胞接着またはインテグリン媒介細胞接着に結合される１つ以上のモジュレーターが、同じ薬学的組成物おいてかまたは別のいずれかで、調節剤を組み合わせて投与され得る。
【０１６４】
別の局面において、１つ以上の調節剤は、例えば、バイオリアクタにおける使用に関して、組織培養プレートまたは他の細胞培養支持体の内側表面に結合し得る。このような結合は、上記されるように任意の適切な技術によって実施され得る。この形式において結合される調節剤は、一般に、カドヘリン発現細胞を固定化するために使用され得る。例えば、１つ以上の調節剤でコートされたディッシュまたはプレートは、種々のアッセイおよびスクリーニングにおいてカドヘリン発現細胞を固定化するために使用され得る。バイオリアクタ内において（すなわち、細胞またはオルガノイドの大規模生産のための系）、調節剤は、一般に、細胞付着を改善し、そして細胞増殖を安定化するために使用され得る。調節剤はまた、バイオリアクタ内で使用されて、例えば、胎性の哺乳動物細胞の散在する集団由来の高度に分化したオルガノイドの形成および機能を支持し得る。調節剤のバイオマトリクスを含むバイオリアクタはまた、特定のタンパク質の生産を促進するために使用され得る。
【０１６５】
本明細書に記載されるような調節剤は、種々のバイオリアクター配置内で使用され得る。一般に、バイオリアクターは、多数の付着する細胞を支持するに十分な内部表面積を有して設計される。この表面積は、膜、チューブ、マイクロタイターウェル、カラム、中空線維、ローラー瓶、プレート、皿、ビーズ、またはこれらの組み合わせを使用して提供され得る。バイオリアクターは、区画分けされ得る。バイオリアクター内の支持体材料は、当該分野で公知の任意の適切な材料であり得る；好ましくは、この支持体材料は、水中で不溶かまたは膨張しない。好ましい支持体材料としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：合成ポリマー（例えば、アクリル、ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン、ナイロン、ポリウレタン、ポリアミド、ポリスルホンおよびポリ（エチレンテレフタラート））；セラミック；ガラスならびにシリカ。
【０１６６】
本発明の他の局面は、診断およびアッセイの目的でデスモソームのＣＡＲ配列に対して惹起される抗体を使用する方法を提供する。アッセイは、代表的には、デスモソームカドヘリン（遊離または細胞表面上の）の存在もしくは非存在、または適切な生物学的サンプル（例えば、患者から得られる腫瘍もしくは正常な組織生検、血液、リンパ節、血清もしくは尿サンプル、または他の組織、ホモジネート、あるいはこれらの抽出物）における１以上のＥＣドメインを含むタンパク質溶解フラグメントを検出するための抗体の使用を含む。
【０１６７】
サンプルにおける標的分子を検出するための抗体を使用する、当業者に公知の種々のアッセイ様式が存在する。例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、１９８８を参照のこと。例えば、このアッセイは、ウェスタンブロット様式で実行され、ここで、生物学的サンプル由来のタンパク質調製物は、ゲル電気泳動にかけられ、適切な膜に転移されて抗体と反応させられる。次いで、膜上の抗体の存在は、以下に記載のような適切な検出試薬を使用して検出され得る。
【０１６８】
別の実施形態において、このアッセイは、標的カドヘリン、または細胞外ドメインを含み、かつＣＡＲ配列を含むタンパク分解フラグメントに結合するための、固体支持体上に固定された抗体の使用に関し、そしてサンプルの残りから抗体を除去する。次いで、結合したカドヘリンは、レポーター基を含む第二の抗体または試薬を使用して検出され得る。あるいは、競合アッセイが使用され得、ここで、カドヘリンがレポーター基で標識され、そしてサンプルとの抗体のインキュベーション後に固定された抗体に結合することが可能になる。サンプルの成分が抗体に対する標識カドヘリンの結合を阻害する程度は、固定された抗体とのサンプルの反応性を示し、そして結果として、サンプルにおけるカドヘリンのレベルを示す。
【０１６９】
抗体が付着され得る固体支持体は、当業者に公知の任意の材料であり得る（例えば、マイクロタイタープレート中の試験ウェル、ニトロセルロースフィルター、または別の適切な膜）。あるいは、この支持体は、ビーズまたはディスク（例えば、ガラス、繊維ガラス、ラテックスまたはプラスチック（例えば、ポリスチレンもしくはポリ塩化ビニル））であり得る。この抗体は、当業者に公知の種々の技術を使用して固体支持体上に固定化され得、これらの技術は、特許および科学文献中に十分に記載されている。
【０１７０】
特定の実施形態において、サンプル中のデスモソームカドヘリンを検出するためのアッセイは、２抗体サンドイッチアッセイである。このアッセイは、まず固体支持体（一般には、マイクロタイタープレートのウェル）上に固定された抗体を生物学的サンプルに接触させることによって実行され得、それによってサンプル内のデスモソームカドヘリンは、固定された抗体に結合できる（室温で３０分のインキュベーションが、一般に十分である）。次いで、非結合サンプルを、固定されたカドヘリン−抗体複合体から除去し、そしてカドヘリン上の異なる部位に結合し得る第二の抗体（酵素、色素、放射性核種、発光基、蛍光基またはビオチンのようなレポーター基を含む）が、添加される。次いで、固体支持体上への結合を保持する第二の抗体の量が、特異的なレポーター基に適切な方法を使用して、決定される。レポーター基を検出するために使用される方法は、レポーター基の性質に依存する。放射性核種基の場合、シンチレーション計数またはオートラジオグラフィー法が一般に適する。分光学的方法が使用されて、色素、発光基および蛍光基が検出され得る。ビオチンは、アビジンを使用して検出され、異なるレポーター基（一般には、放射性基もしくは蛍光基または酵素）に連結され得る。酵素レポーター基は、一般に、基質の添加、続いて反応産物の分光学的分析または他の分析によって（一般には特定の期間で）検出され得る。周知の技術を使用する基準および標準的な添加を使用して、サンプル中のカドヘリンのレベルを検出し得る。
【０１７１】
例えば、このようなイムノアッセイを使用して、異常なデスモソームカドヘリン発現に関連する状態を診断し、かつモニターし得る。上記のように、このような状態としては、自己免疫水疱形成障害（例えば、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡）および細胞間ＩｇＡ皮膚病が挙げられる。一般に、患者におけるこのような状態の存在または非存在は、以下によって検出され得る：（ａ）患者から得られた生物学的サンプルを抗体またはその抗原結合フラグメントに接触させる工程；（ｂ）抗体またはそのフラグメントに結合した、サンプル中のポリペプチドのレベルまたはパターンを検出する工程；ならびに（ｃ）ペプチドのレベルまたはパターンを予め決定されたカットオフ値または正常なパターンと比較する工程。一般に、これらの疾患は、デスモソームカドヘリンに対する自己免疫応答に関連し、この自己免疫応答は、これらのカドヘリンの内在化を生じる。このような内在化は、病変および病変周囲のケラチノサイトの染色生検切片における斑点状の細胞質顆粒として可視化され得る（Ｉｗａｔｓｕｋｉら、Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１４０：３５−４３を参照のこと）。これらの顆粒は、正常な患者においては検出されない。
【０１７２】
イムノアッセイはさらに、良性の皮膚病変（例えば、角化棘細胞腫）と扁平上皮癌との間を区別するために使用され得る。特に、デスモグレイン（ｄｅｓｍｏｇｌｅｉｎ）染色の位置を使用して、角化棘細胞腫と癌腫との間を区別し得る（Ｋｒｕｎｉｃら、Ａｃｔａ　Ｄｅｒｍ．Ｖｅｎｅｒｅｏｌ．７６：３９４−３９８、１９９６を参照のこと）。一般に、広範囲の細胞周囲の染色は、角化棘細胞腫を示す。局所的な細胞周囲の染色は、角化棘細胞腫または十分分化した扁平上皮癌を示す。非染色または傍核（ｊｕｘｔａｎｕｃｌｅａｒ）染色は、あまり分化していない扁平上皮癌を示す。従って、細胞周囲の染色の減少（視覚的にまたは定量的に決定されるように、５０％の減少として）は、扁平上皮癌を示す。
【０１７３】
本発明はまた、このようなイムノアッセイにおける使用のためのキットを提供する。このようなキットは、一般に、上記のような１以上の抗体を含む。さらに、キットの１以上のさらなる区画または容器は、一般に、イムノアッセイにおいて使用されるべき構成要素（例えば、試薬、緩衝液および／または洗浄溶液）を同封する。
【０１７４】
さらなる局面において、調節剤もしくは抗体（またはこれらのフラグメント）は、細胞の同定およびインビトロの分類またはインビボの画像処理を容易にするために使用され得、デスモソームカドヘリン（または異なるデスモソームカドヘリンレベル）を発現する細胞の選択を可能にする。好ましくは、このような方法における使用のための調節剤または抗体は、検出可能なマーカーに連結され得る。適切なマーカーは、当該分野で周知であり、これらとしては、放射性核種、発光基、蛍光基、酵素、色素、免疫グロブリン定常ドメインおよびビオチンが挙げられる。１つの好ましい実施形態において、フルオレセインのような蛍光マーカーに連結された調節剤は、細胞に接触され、次いで、この細胞は、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）によって分析される。
【０１７５】
抗体またはそのフラグメントはまた、デスモソームカドヘリン媒介細胞接着を改変し得る他の化合物を同定するために、組み合わせのライブラリーまたは他の非ペプチドベースのライブラリーのスクリーニングにおいて使用され得る。このようなスクリーニングは、一般に、ＥＬＩＳＡ、または調節剤の形状および構造に類似の形状および構造を有する化合物を検出する、当業者に周知の他の方法を使用して実行され得る。一般に、このようなスクリーニングは、試験化合物を生成する発現ライブラリーを抗体に接触させる工程、および候補化合物に結合した抗体のレベルを検出する工程を包含する。抗体が高い親和性を有する化合物はさらに、ＯＢ−カドヘリン媒介細胞接着を改変する能力を評価するために、本明細書に記載のように特徴付けられ得る。
【０１７６】
以下の実施例は、例示のために提供され、限定のためではない。
【０１７７】
（実施例）
（代表的な調節剤の調製）
この実施例は、代表的なペプチド調節剤の固相合成を例示する。
【０１７８】
これらのペプチドを、４３１Ａ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓペプチド合成機上で、ｐ−ヒドロキシメチルフェノキシメチルポリスチレン（ＨＭＰ）樹脂および標準的なＦｍｏｃ化学を使用して合成した。合成および脱保護の後、これらのペプチドを、Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ−１０カラムで脱塩し、そして凍結乾燥した。これらのペプチドを、精製のために分析的ＨＰＬＣによって分析し、そして各場合において、単一のピークを観察した。ペプチドを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）または水中に１０〜２５ｍｇ／ｍＬのストック溶液として作製し、そして使用前は−２０℃で貯蔵した。
【０１７９】
上記から、本発明の特定の実施形態が、例示の目的で本明細書中に記載されてきたが、種々の改変が本発明の精神および範囲から逸脱することなくなされ得ることが、明らかである。従って、本発明は、添付の特許請求の範囲によって限定される以外は、限定されない。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１Ａ〜１ＡＡは、古典的なカドヘリン（図１Ａ）および非古典的なカドヘリン（図１Ｂ〜１ＡＡ）の構造を示す図である。細胞外ドメインは、大部分のカドヘリンについてＥＣ１〜ＥＣ５と示され；プロトカドヘリンおよびｃｎｒについてＥＣ１〜ＥＣ６と示される。形質膜（ＰＭ）を横切る疎水性ドメインは、ＴＭによって表され、そして種々の数の細胞質ドメインがＣＰによって表される。古典的カドヘリンについてのカルシウム結合モチーフは、ＤＸＮＤＮ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１）、ＤＸＤ、ＬＤＲＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２）、ＤＸＥ、およびＤＶＮＥ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３４１）により図１Ａに示され、そして他のカドヘリンのカルシウム結合モチーフはまた、細胞外ドメイン上に示される。細胞外ドメインの下に、９個のアミノ酸ＣＡＲ配列が示される。
【図２】
図２は、示される（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４−４３）ように、代表的な哺乳動物非古典的なカドヘリン細胞外ドメインのアミノ酸配列を提供する。カルシウム結合モチーフは、ボールドで示され、そして代表的なＣＡＲ配列がボールドおよび下線で示される。
【図３】
図３は、示されるように、代表的な哺乳動物デスモソームカドヘリンＥＣ１ドメインのアミノ酸配列を提供する。アミノ酸は、それらのＩＵＰＡＣコードによって表され、−はギャップを表す。デスモソームカドヘリンＣＡＲ配列が、ボールドで示される。
【図４】
図４は、代表的な環式ペプチド調節剤の構造を示す。
【図１】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004504809.tif 000185
2004504809.tif 000186
【国際調査報告】
2004504809.tif 000187
2004504809.tif 000188
2004504809.tif 000189
2004504809.tif 000190
2004504809.tif 000191