(57)【要約】本発明は、式Ｉ（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４およびＹは明細書および請求項で定義するとおりである）の化合物およびダイマー形および／または薬学的に許容されるそのエステル、および／またはその塩に関する。化合物はたとえば亜鉛プロテアーゼ、特に亜鉛ヒドロラーゼなどの金属プロテアーゼの阻害剤として有用であり、血管収縮の発生増加に関連する疾患状態の治療に有効である。
2004504317.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉ
【化１】
2004504317.tif 000016
（式中、
Ｒ１は、水素、アルキルカルボニルまたはアリールカルボニルであり；
Ｒ２は、アルキル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルアルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルコキシアルキル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールアミノカルボニル、ジアリールアルキル、アリール（カルボキシアルキル）アミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルアルキルであるか、または基ＹＲ２はヘテロシクリルであり；
Ｒ３およびＲ４は、水素、アルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルチオ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、カルバモイル、カルボキシ、カルボキシアルキル、シアノ、アミノ、モノ−およびジ−アルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルキル（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールカルボニルアルキル、アリールアルケニル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールオキシ、ハロゲン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、トリメチルシラニルエチニルまたはトリフルオロメチルからなる群より独立に選択され；
Ｒ５は、水素、アルキル、アリール、アリールアルキルオキシカルボニル、またはアルキルカルボニルであり；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、ＣＨまたはＮであり（ただしＸ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の２個までの基のみがＮである）；
Ｙは−Ｏ−または−ＮＲ５である）の化合物、ならびに
そのダイマー形、および／または薬学的に許容されるそのエステル、および／または薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
一般式ＩＩ
【化２】
2004504317.tif 000017
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４およびＹは、請求項１で定義したとおりである）の請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が水素またはアルキルカルボニルである、請求項１〜２のいずれか記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が水素またはアセチルである、請求項１〜３のいずれか記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が水素である、請求項１〜４のいずれか記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２がアルキル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルアルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルコキシアルキル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールカルバモイル、ジアリールアルキル、アリール（カルボキシアルキル）アミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはヘテロシクリルアルキルである、請求項１〜５のいずれか記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２がアリール、アリールアルキル、アリールアルコキシアルキル、アリールアミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルキルアルキルまたはヘテロアリールアルキルである、請求項１〜６のいずれか記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２がアリール、アリールアルキル、アリールカルバモイル、アリールカルボニル、アリールスルホニルまたはヘテロアリールアルキルである、請求項１〜７のいずれか記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２がアリールアルキルである、請求項１〜８のいずれか記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２が、場合により２〜３個のハロゲン原子によって置換されたフェニルアルキルである、請求項１〜９のいずれか記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ３およびＲ４が水素、アルキル、アルキルチオ、アルケニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アミノ、アリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキルアミノ、アリールオキシ、モノ−およびジ−アルキルアミノ、カルバモイル、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、トリメチルシラニルエチニルならびにトリフルオロメチルからなる群より独立に選択される、請求項１〜１０のいずれか記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ３およびＲ４が水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、チオフェニル、アミノ、モノ−およびジアルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、トリメチルシラニルエチニル、フェニルアルキルアミノ、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、フェニルおよびフェノキシ（該アリールおよびヘテロアリール基が場合によりアルキル、アルコキシ、カルボキシまたはハロゲンによって置換される）からなる群より独立に選択される、請求項１〜１１のいずれか記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ３が水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、チオフェニル、アミノ、モノ−もしくはジ−アルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、トリメチルシラニルエチニル、フェニルアルキルアミノ、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、フェニルまたはフェノキシ（該アリールおよびヘテロアリール基が場合によりアルキル、アルコキシ、カルボキシまたはハロゲンによって置換される）であり、Ｒ４が水素である、請求項１〜１２のいずれか記載の化合物。
【請求項１４】
Ｙが−ＮＲ５−である、請求項１〜１３のいずれか記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ５が水素またはアルキルである、請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ５が水素である、請求項１５記載の化合物。
【請求項１７】
Ｙが−Ｏ−である、請求項１〜１３のいずれか記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘ１がＮであり、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＣＨである、請求項１〜１７のいずれか記載の化合物。
【請求項１９】
Ｘ２がＮであり、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＣＨである、請求項１〜１７のいずれか記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘ３がＮであり、Ｘ１、Ｘ２およびＸ４がＣＨである、請求項１〜１７のいずれか記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＣＨである、請求項１〜１７のいずれか記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ１が水素またはアルキルカルボニルであり、
Ｒ２が２〜３個のハロゲンで置換されたフェニルアルキルであり；
Ｒ３が水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、チオフェニル、アミノ、モノ−もしくはジ−アルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、トリメチルシラニルエチニル、フェニルアルキルアミノ、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、フェニルまたはフェノキシ（該アリールおよびヘテロアリール基が場合によりアルキル、アルコキシ、カルボキシまたはハロゲンによって置換される）であり；
Ｒ４が水素であり；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＣＨまたはＮであり（ただしＸ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の２個までの基のみがＮである）；
Ｙが−ＮＨ−または−Ｏ−である、
請求項１〜２１のいずれか記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ１が水素またはアセチルであり、Ｒ２がジフルオロベンジルまたはトリフルオロベンジルである、請求項１〜２２のいずれか記載の化合物。
【請求項２４】
ａ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピリミジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｂ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（４，６−ジメトキシ−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｃ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（４−アミノ−５−フルオロ−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｄ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ニコチノニトリル；
ｅ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（６−フェニル−ピリダジン−３−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｆ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ニコチン酸；
ｇ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−６−メチル−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル；
ｈ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
ｉ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピラジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）ピロリジン−３−チオール〕；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｊ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ニコチンアミド；
ｋ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，５−ジフルオロ−４−メトキシ−ベンジルオキシメチル）−１−（２−メトキシ−ピリミジン−４−イル）−ピロリジン−３−チオール；
ｌ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−クロロ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｍ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−エチル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｎ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｏ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（４−トリフルオロメチル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｐ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｑ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピリジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｒ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−６−メチル−ピリミジン−４−カルボン酸；
ｓ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メトキシ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｔ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−フェニルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｕ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−ベンジルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｖ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｗ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−ブチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｘ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）ピロリジン−３−チオール；
ｙ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−フェノキシ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｚ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−フェニル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ａａ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−２−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｂｂ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−４−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｃｃ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−チオフェン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｄｄ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−〔５−（４−メトキシ−フェニル）−ピリミジン−２−イル〕−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｅｅ）（２Ｓ，４Ｒ）−４−｛２−〔４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン−５−イル｝−安息香酸；
ｆｆ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−アリル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｇｇ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；および
ｈｈ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（５−トリメチルシラニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオール
からなる群より選択される、請求項１〜２３のいずれか記載の化合物。
【請求項２５】
ａ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピリミジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｂ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（６−フェニル−ピリダジン−３−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｃ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピラジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｄ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−エチル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｅ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｆ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｇ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−フェニル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｈ）（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−イル〕エステル；
ｉ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−２−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｊ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−４−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｋ）１−（５−チオフェン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｌ）１−（５−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｍ）（２Ｓ，４Ｒ）−５−〔（２，５−ジフルオロ−ベンジルアミノ）−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオール；および
ｎ）（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔５−〔（２，５−ジフルオロ−ベンジルアミノ）−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イル〕エステル
からなる群より選択される、請求項１〜２４のいずれか記載の化合物。
【請求項２６】
請求項１〜２５のいずれか記載の化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む、薬学的組成物。
【請求項２７】
治療に使用するための、請求項１〜２５のいずれか一項記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項２８】
エンドセリン変換酵素（ＥＣＥ）活性によって引き起こされる障害、特に心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安動脈炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症の予防および治療のための、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のための、請求項１〜２５のいずれか記載の化合物を含む薬物の製造における活性成分としての、請求項１〜２５記載の化合物の使用。
【請求項２９】
心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安動脈炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症に関連する疾患の治療または予防のための、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のための、請求項１〜２５のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項３０】
心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安動脈炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症などの、特に亜鉛ヒドロラーゼ活性と関連した疾患に関連して、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のために、治療活性物質として使用する請求項１〜２５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３１】
心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安動脈炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症の治療および／または予防処置の、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のための方法であって、請求項１〜２５のいずれか記載の化合物をヒトまたは動物に投与することを含む方法。
【請求項３２】
請求項１〜２５のいずれか記載の化合物を調製する方法であって、式ＩＩＩ
【化３】
2004504317.tif 000018
（式中、ＡはＨＳ−であり、ＰはＮＨ−保護基である）の化合物を
ａ）　−ＯＲ２基の導入のためにＲ２−ハロゲン化物と反応させ、続いてＰ−脱保護およびヘテロアロマートの導入を行うこと：または
ｂ）　最初に式（ＩＩＩ）のＰ−脱保護を行い、請求項１記載のヘテロアロマートの導入を行い、続いて−ＯＨ、−ＮＨ２置換およびＲ２を導入するための還元的アミノ化を行うこと；
場合により続いて請求項１に記載の基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４の異なる基への変換および／または脱保護および／またはチオール遊離を行うこと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項３３】
請求項３２記載の方法によって調製される化合物。
【請求項３４】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、たとえば亜鉛プロテアーゼ、特に亜鉛ヒドロラーゼなどの金属プロテアーゼの阻害剤として有用であって、血管収縮の発生増加に関連する疾患状態の予防および治療に有効である化合物に関する。そのような障害の例は、高血圧、冠動脈障害、心不全、腎および心筋虚血、腎不全、透析、大脳虚血、心筋梗塞、偏頭痛、くも膜下出血、レイノー症候群および肺性高血圧である。さらに該化合物は、移植片拒絶阻害のため、臓器保護のため、および眼疾患の治療のための細胞増殖抑制および脳保護剤として有用である。
【０００２】
エンドセリンは、それぞれ異なる遺伝子によってコードされる３種類のアイソフォーム、ＥＴ−１、ＥＴ−２およびＥＴ−３として存在するペプチドである。これらは当初、１９８８年に Ｙａｎａｇｉｓａｗａによって（Ｙａｎａｇｉｓａｗａ Ｍ； Ｋｕｒｉｈａｒａ Ｈ； Ｋｉｍｕｒａ Ｓ； Ｔｏｍｏｂｅ Ｙ； Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｍ； Ｍｉｔｓｕｉ Ｙ； Ｙａｚａｋｉ Ｙ； Ｇｏｔｏ Ｋ； Ｍａｓａｋｉ Ｔ： Ａ ｎｏｖｅｌ ｐｏｔｅｎｔ ｖａｓｏｃｏｎｓｔｒｉｃｔｏｒ ｐｅｐｔｉｄｅ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ〔コメントを参照〕。ＮＡＴＵＲＥ （１９９８ Ｍａｒ ３１）， ３３２ （６１６３）， ４１１〜５）、ブタ血管内皮細胞の条件培地で発見された。活性ＥＴは、２個の分子内ジスルフィド架橋を持つ２１個のアミノ酸によるペプチドである。それらはフリン（ｆｕｒｉｎ）様のエンドペプチダーゼによって、２０３〜２１２個のアミノ酸のプレプロプロテインから、生物学的に不活性なビッグエンドセリン（ビッグＥＴ）に処理される。ビッグＥＴは特に、それぞれＴｒｐ２１−Ｖａｌ２２（ビッグＥＴ−１、ビッグＥＴ−２）およびビッグＥＴ−３のＴｒｐ２１−Ｉｌｅ２２であるアミノ酸２１および２２の間の加水分解開裂によって、成熟ＥＴに処理される。すでに１９８８年に、特定の金属プロテアーゼがこの特異性開裂の原因であることが仮定されていた。１９９４年に、ＥＣＥ−１（エンドセリン変換酵素−１）が、ウシ副腎から精製およびクローニングされた（Ｘｕ Ｄ， Ｅｍｏｔｏ Ｎ， Ｇｉａｉｄ Ａ， Ｓｌａｕｇｈｔｅｒ Ｃ， Ｋａｗ Ｓ， ｄｅ Ｗｉｔｔ Ｄ， Ｙａｎａｇｉｓａｗａ Ｍ： ＥＣＥ−１： ａ ｍｅｍｂｒａｎｅ−ｂｏｕｎｄ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ ｔｈａｔ ｃａｔａｌｙｚｅｓ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｇ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ−１． Ｃｅｌｌ （１９９４） ７８： ４７３〜４８５）。
【０００３】
ＥＣＥ−１は、中性ｐＨが最適であり、亜鉛結合モチーフＨＥｘｘＨｘ（＞２０）Ｅを持つ、膜結合タイプＩＩ亜鉛エンドペプチダーゼである。ＥＣＥ−１はサブファミリＭ１３に属し、活性部位を含む大型の６８１のアミノ酸外部ドメインを持つ。Ｍ１３ファミリの他のメンバは、ＮＥＰ２４．１１（中性エンドペプチダーゼ）、ＰＥＸ、リン酸調節中性エンドペプチダーゼ、および最近、ビッグＥＴ−３処理酵素として説明されているＫｅｌｌ血液グループタンパク質である。ヒト起源のＭ１３ファミリのメンバは、高い分子量（＞８０ｋＤａ）、多数の保存ジスルフィド架橋および複合グリコシル化パターンを特徴とする。ＮＥＰの構造は最近、解明されている（Ｏｅｆｎｅｒら、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２０００， ２９６， ３４１〜３４９）。ＥＣＥの触媒ドメインおよび関連するヒトＭ１３プロテイナーゼは、マトリクス金属プロテアーゼ（ＭＭＰ）のメンバよりも著しく大きい（＞６５０のアミノ酸）。メトジンシン（ｍｅｔｚｉｎｃｉｎｓ）に属し、典型的なＨＥｘｘＨｘｘＧｘｘＨパターンを示すＭＭＰのファミリとは異なり、Ｍ１３ファミリのメンバは、ＨＥｘｘＨｘ（＞２０）Ｅパターンを含むグルジンシン（ｇｌｕｚｉｎｃｉｎｓ）である。これらの２つのファミリは、触媒ドメインのサイズ、構造およびリガンドの亜鉛配位パターンが明らかに異なっている。２つのファミリの活性部位は、阻害剤のタイプおよび潜在的な選択性に明確な影響を及ぼす明らかな相違を示す。
【０００４】
本発明の１つの側面は、式（Ｉ）
【０００５】
【化４】
2004504317.tif 000003
【０００６】
（式中、
Ｒ１は、水素、アルキルカルボニルまたはアリールカルボニルであり；
Ｒ２は、アルキル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルアルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルコキシアルキル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールアミノカルボニル、ジアリールアルキル、アリール（カルボキシアルキル）アミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルアルキルであるか、または基ＹＲ２はヘテロシクリルであり；
Ｒ３およびＲ４は、水素、アルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルチオ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、カルバモイル、カルボキシ、カルボキシアルキル、シアノ、アミノ、モノ−およびジ−アルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルキル（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールカルボニルアルキル、アリールアルケニル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールオキシ、ハロゲン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、トリメチルシラニルエチニルまたはトリフルオロメチルからなる群より独立に選択され；
Ｒ５は、水素、アルキル、アリール、アリールアルキルオキシカルボニル、またはアルキルカルボニルであり；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、ＣＨまたはＮであり（ただしＸ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の２個までの基のみがＮである）；
Ｙは−Ｏ−または−ＮＲ５である）の化合物、および
そのダイマー形、および／または薬学的に許容されるそのエステル、および／または薬学的に許容されるその塩に関する。
【０００７】
「アルキル」という語は単独でまたは組み合わされて、最大７個の、好ましくは最大４個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖アルキル基、たとえばメチル、エチル、ｎ−プロピル、２−メチルプロピル（イソ−ブチル）、１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ｎ−ブチル、および１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）を意味する。
【０００８】
「カルボキシ」という語は、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ基を指す。
【０００９】
「カルバモイル」という語は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２基を指す。
【００１０】
「カルボニル」という語は、−Ｃ（Ｏ）−基を指す。
【００１１】
「ハロゲン」という語は、フルオロ、ブロモ、クロロおよびヨード基を指す。
【００１２】
「スルホニル」という語は、−Ｓ（Ｏ２）−基を指す。
【００１３】
「アルケニル」という語は、少なくとも１個のオレフィン二重結合を含むアルキル（たとえばビニル、アリールおよびブテニルを含む）として定義される炭化水素鎖を指す。
【００１４】
「アルキニル」という語は、少なくとも１個のオレフィン三重結合を含むアルキル（たとえばプロピニル、ブチン−（１）−イルなどを含む）として定義される炭化水素鎖を指す。
【００１５】
「アルコキシ」という語は単独でまたは組み合わせて、「アルキル」という語が上述した意味を持つアルキルエーテル基、たとえばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどを意味する。
【００１６】
「アルコキシカルボニル」という語は、式−Ｃ（Ｏ）Ｒｃ（式中、Ｒｃは上記で定義したようにアルコキシである）の基を指す。
【００１７】
「ヒドロキシ」という語は、−ＯＨ基を指し、「シアノ」という語は−ＣＮ基を指す。
【００１８】
「ヒドロキシアルキル」という語は、ヒドロキシ基で置換された、上記で定義したアルキル基を意味する。
【００１９】
「チオアルキル」および「シアノアルキル」という語は、−ＳＨ基または−ＣＮ基でそれぞれ置換された、上記で定義したアルキル基を指す。
【００２０】
「カルボキシアルキル」は、ＨＯＯＣ−基によって置換された、上記で定義した低級アルキルを意味する。
【００２１】
「アルキルカルボニル」という語は、単独でまたは組み合わされて、アルカンカルボン酸より由来するアシル基、すなわち、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、４−メチルバレリルなどのアルキル−Ｃ（Ｏ）−を意味する。
【００２２】
「シクロアルキル」という語は、３〜８個の、好ましくは３〜６個の炭素原子を持つ飽和環状炭化水素基、すなわちシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルなどを意味する。
【００２３】
「アミノ」という語は、−ＮＨ２基を指す。
【００２４】
Ｒ２の「アリール」という語は、単独でまたは組み合わされて、たとえばフェニル、ナフチルまたはテトラヒドロナフチル、好ましくはフェニルまたはナフチル、最も好ましくはフェニルである、芳香族炭素環式ラジカル、すなわち６または１０員芳香環または部分芳香環を指す。アリール部分は場合により、ハロゲン（好ましくはフルオロ）、アルコキシカルボニル（たとえばメチルカルボニル）、カルボキシ、シアノ、アルキル、アルコキシ、フェニル、フェノキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、１，３−ジオキソリルまたは１，４−ジオキソリル、さらに好ましくはフルオロ、アルコキシカルボニル、アルキル、トリフルオロメチルおよびトリフルオロメトキシ、最も好ましくはフルオロ、より独立に選択される１個以上の基で置換される。最も好ましい芳香基は、２，５−ジフルオロベンジルおよび２，４，５−トリフルオロベンジルである。
【００２５】
Ｒ３およびＲ４の「アリール」という語は、単独でまたは組み合わされて、たとえばフェニル、ナフチルまたはテトラヒドロナフチル、好ましくはフェニルまたはナフチル、最も好ましくはフェニルである、芳香族炭素環式ラジカル、すなわち６または１０員芳香環または部分芳香環を指す。アリール部分は場合により、ハロゲン、アルコキシカルボニル（たとえばメチルカルボニル）、カルボキシ、シアノ、アルキル、アルコキシ、フェニル、フェノキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、１，３−ジオキソリルまたは１，４−ジオキソリル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、アルキルアミド（たとえばアセトアミド）、ニトロ、アルキルスルホニル（たとえばメチルスルホニル）、さらに好ましくはフルオロ、クロロ、ブロモ、アルコキシ、カルボキシ、１，４−ジオキソリル、アルコキシカルボニルより独立に選択される１個以上の基で置換される。Ｒ３およびＲ４に最も好ましい芳香基は、フェニルおよびフェノキシである。
【００２６】
Ｒ５の「アリール」という語は、場合によりアルキル、アルコキシまたはハロゲンで置換されたフェニルを指す。
【００２７】
「アリールオキシ」という語は、オキシラジカルによって親構造に結合した、上記で定義したアリール基、すなわちアリール−Ｏ−を指す。
【００２８】
Ｒ２の「ヘテロアリール」という語は、単独でまたは組み合わされて、たとえば窒素、酸素または硫黄より独立に選択される１〜３個のヘテロ原子、好ましくは１個のヘテロ原子を含む、５〜１０個の、好ましくは５〜６個の環原子を持つ、芳香族単環または二環ラジカルを指す。ヘテロアリール基の例は、チオフェニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、ピリジニル、ピロリル、イミダゾリル、テトラゾリル、好ましくはピリジニル、イソオキサゾリルおよびチアゾリルである。ヘテロアリール基は、場合により、フェニル、アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルアルキル、好ましくはアルキルによって、独立にモノ−、ジ−またはトリ−置換されうる。
【００２９】
Ｒ３およびＲ４の「ヘテロアリール」という語は、単独でまたは組み合わされて、たとえば窒素、酸素または硫黄より独立に選択される１〜３個のヘテロ原子、好ましくは１個のヘテロ原子を含む、５〜１０個の、好ましくは５〜６個の環原子を持つ、芳香族単環または二環ラジカルを指す。ヘテロアリール基の例は、ピリジニル、チオフェニル、イソオキサゾリル、イソキノリル、キノリル、および１Ｈ−ベンゾ〔ｄ〕〔１，３〕オキサジン−２，４−ジオンならびにインドリル、ピリミジン、ピリダジン、およびピラリジン、好ましくはピリジニルおよびチオフェニルである。ヘテロアリール基は、場合により、アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシ、アルコキシカルボニルアルキル、好ましくはアルキルによって、独立にモノ−、ジ−またはトリ−置換されうる。
【００３０】
「ヘテロシクリル」という語は、単独でまたは組み合わされて、たとえば窒素、酸素または硫黄より独立に選択される１〜３個のヘテロ原子、好ましくは１個のヘテロ原子を含む、５〜１０個の、好ましくは５〜６個の環原子を持つ、非芳香族単環または二環ラジカルを指す。ヘテロシクリルは場合により、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、オキソカルボキシ、アルコキシカルボニルなどより独立に選択される基によって、および／またはアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルにより２級窒素原子（すなわち−ＮＨ−）上で、またはオキシドにより３級窒素原子（すなわち＝Ｎ−）上で置換されうる。ヘテロシクリル基の例は、モルホリニル、ピロリジニル、ピペリジルなどである。
【００３１】
「ダイマー形」という語は、同一の２個の式Ｉの化合物のＲ１基２個が、共通の単結合で置換されているか、あるいはＲ１がグルタチオン−Ｓ−もしくはシステイン−Ｓ−またはそれらのエステルおよび／もしくはアルキルカルボニルもしくはアリールカルボニル誘導体、たとえばアセチルシステイン−Ｓ−またはベンゾイルシステイン−Ｓ−、好ましくはグルタチオン−Ｓ−、システイン−Ｓ−、アセチルシステイン−Ｓ−またはベンゾイルシステイン−Ｓ−である、化合物を意味する。
【００３２】
「薬学的に許容される塩」という語は、生物学的にまたはそれ以外でも許容される、遊離塩基または遊離酸の生物学的有効性および特性を保持する塩を指す。塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、および酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、Ｎ−アセチルシステインなどの有機酸によって形成される。さらにこれらの塩は、遊離酸に無機塩基または有機塩基を加えて調製されうる。無機塩基から誘導される塩は、これに限定されるわけではないが、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム塩などである。有機塩基から誘導される塩は、これに限定されるわけではないが、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、リジン、アルギニン、Ｎ−エチルピペリジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂などの、１級、２級および３級アミン、天然型置換アミンを含む置換アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂を含む。
【００３３】
「薬学的に許容されるエステル」は、インビボで親化合物に逆変換可能な誘導体を提供するために、一般式（Ｉ）の化合物を官能基で誘導体化することを意味する。そのような化合物の例は、メトキシメチルエステル、メチルチオメチルエステルおよびピバロイルオキシメチルエステルなどの、生理学的に許容され、かつ代謝的に不安定なエステル誘導体を含む。加えて、インビボで一般式（Ｉ）の親化合物を生成できる、代謝的に不安定なエステルに類似した一般式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容される同等物はすべて本発明の範囲内である。
【００３４】
式（Ｉ）の化合物は、哺乳類の金属プロテアーゼ活性、特に亜鉛ヒドロラーゼ活性を阻害するのに有用である。さらに詳細には、式（Ｉ）の化合物は、エンドセリン変換酵素（ＥＣＥ）活性によって引き起こされる疾患に関連する障害の治療および予防のための薬物として有用である。この酵素を阻害することは、心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安関節炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症の治療に、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障に有用である。さらに本化合物は、移植片拒絶防止、臓器保護および眼疾患の治療のための細胞増殖抑制および脳保護剤として有用である。
【００３５】
さらに詳細には、本発明は式（Ｉ）
【００３６】
【化５】
2004504317.tif 000004
【００３７】
（式中、
Ｒ１は、水素、アルキルカルボニルまたはアリールカルボニルであり；
Ｒ２は、アルキル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルアルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルコキシアルキル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールアミノカルボニル、ジアリールアルキル、アリール（カルボキシアルキル）アミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルアルキルであるか、または基ＹＲ２はヘテロシクリルであり；
Ｒ３およびＲ４は、水素、アルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルチオ、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、カルバモイル、カルボキシ、カルボキシアルキル、シアノ、アミノ、モノ−ならびにジアルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルキル（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールカルボニルアルキル、アリールアルケニル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールオキシ、ハロゲン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、トリメチルシラニルエチニルまたはトリフルオロメチルからなる群より独立に選択され；
Ｒ５は、水素、アルキル、アリール、アリールアルキルオキシカルボニル、またはアルキルカルボニルであり；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は、ＣＨまたはＮであり（ただし、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の２個までの基のみがＮである）；
Ｙは−Ｏ−または−ＮＲ５である）の化合物、ならびに
そのダイマー形、および／または薬学的に許容されるそのエステル、および／または薬学的に許容されるその塩、好ましくは薬学的に許容されるそのエステル、および／または薬学的に許容されるその塩、そして最も好ましくは薬学的に許容されるその塩に関する。
【００３８】
本発明は特に一般式（ＩＩ）
【００３９】
【化６】
2004504317.tif 000005
【００４０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４およびＹは、請求項１で定義したとおりである）の化合物を指す。
【００４１】
本発明の好ましい態様において、Ｒ１は水素またはアルキルカルボニルより、好ましくは水素またはアセチルより選択され、最も好ましくは、Ｒ１は水素である。
【００４２】
上記の化合物において、Ｒ２は好ましくはアルキル、アルキニル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルアルキル、アルキルシクロアルキル、アルキルシクロアルキルアルキル、アルキルスルホニル、アリール、アリールアルキル、アリールアルコキシアルキル、アリール（アルコキシカルボニル）アルキル、アリールカルバモイル、ジアリールアルキル、アリール（カルボキシアルキル）アミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルまたはヘテロシクリルアルキルであり、さらに好ましくは、Ｒ２はアリール、アリールアルキル、アリールアルコキシアルキル、アリールアミノカルボニル、アリールカルボニル、アリールスルホニル、シクロアルキル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルキルアルキルまたはヘテロアリールアルキルであり、なおさらに好ましくは、Ｒ２はアリール、アリールアルキル、アリールカルバモイル、アリールカルボニル、アリールスルホニルまたはヘテロアリールアルキルであり、最も好ましくは、Ｒ２はアリールアルキルである。本発明の特に好ましい態様において、Ｒ２は、場合により２〜３個のハロゲン原子、好ましくはフッ素原子によって置換されたフェニルアルキルである。
【００４３】
上記で定義した化合物において好ましくは、Ｒ３およびＲ４は、水素、アルキル、アルキルチオ、アルケニル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アミノ、アリール、アリールアルキル、アリールアルケニル、アリールアルキルアミノ、アリールオキシ、モノ−およびジ−アルキルアミノ、カルバモイル、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、トリメチルシラニルエチニルおよびトリフルオロメチルからなる群より独立に選択され、さらに好ましくは、Ｒ３およびＲ４は、水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、チオフェニル、アミノ、モノ−およびジ−アルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、トリメチルシラニルエチニル、フェニルアルキルアミノ、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、フェニルおよびフェノキシ（該アリールおよびヘテロアリール基は、場合によりアルキル、アルコキシ、カルボキシまたはハロゲンによって置換される）からなる群より独立に選択される。本発明の最も好ましい態様において、Ｒ３は、水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、チオフェニル、アミノ、モノ−およびジ−アルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、トリメチルシラニルエチニル、フェニルアルキルアミノ、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、フェニルおよびフェノキシ（該アリールおよびヘテロアリール基は場合によりアルキル、アルコキシ、カルボキシまたはハロゲンによって置換される）であり、Ｒ４は水素である。
【００４４】
本発明のさらに好ましい態様において、Ｙは−ＮＲ５（式中、Ｒ５は水素またはアルキル、さらに好ましくは水素である）である。
【００４５】
本発明の別の好ましい態様において、Ｙは−Ｏ−である。
【００４６】
本発明は、Ｘ１がＮであり、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４がＣＨである、またはＸ２がＮであり、Ｘ１、Ｘ３およびＸ４がＣＨである、またはＸ３がＮであり、Ｘ１、Ｘ２およびＸ４がＣＨである、またはＸ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４はＣＨである、上記で定義した化合物にも関する。
【００４７】
好ましい態様において本発明は、Ｒ１が水素またはアルキルカルボニルであり、Ｒ２が２〜３個のハロゲンで置換されたフェニルアルキルであり；Ｒ３が水素、アルキル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、チオフェニル、アミノ、モノ−およびジ−アルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ハロゲン、トリメチルシラニルエチニル、フェニルアルキルアミノ、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、フェニルまたフェノキシ（該アリールおよびヘテロアリール基は、場合によりアルキル、アルコキシ、カルボキシまたはハロゲンによって置換される）より選択され；Ｒ４が水素であり；Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４が、ＣＨまたはＮであり（ただし、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の２個までの基のみがＮである）；Ｙが−ＮＨ−または−Ｏ−である、上記で定義した化合物を含む。好ましい態様において、上記で定義した化合物では、Ｒ１は水素またはアセチルであり、Ｒ２はジフルオロベンジルまたはトリフルオロベンジルである。
【００４８】
本発明の好ましい態様は、実施例に例示する化合物である。特に本発明は
ａ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピリミジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｂ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（４，６−ジメトキシ−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｃ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（４−アミノ−５−フルオロ−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｄ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ニコチノニトリル；
ｅ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（６−フェニル−ピリダジン−３−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｆ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ニコチン酸；
ｇ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−６−メチル−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル；
ｈ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル；
ｉ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピラジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）ピロリジン−３−チオール〕；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｊ）２−〔（２Ｓ，４Ｒ）−４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ニコチンアミド；
ｋ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，５−ジフルオロ−４−メトキシ−ベンジルオキシメチル）−１−（２−メトキシ−ピリミジン−４−イル）−ピロリジン−３−チオール；
ｌ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−クロロ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｍ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−エチル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｎ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｏ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（４−トリフルオロメチル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｐ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｑ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピリジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｒ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−６−メチル−ピリミジン−４−カルボン酸；
ｓ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メトキシ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｔ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−フェニルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｕ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−ベンジルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｖ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｗ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−ブチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｘ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）ピロリジン−３−チオール；
ｙ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−フェノキシ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｚ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−フェニル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ａａ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−２−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｂｂ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−４−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｃｃ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−チオフェン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｄｄ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−〔５−（４−メトキシ−フェニル）−ピリミジン−２−イル〕−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｅｅ）（２Ｓ，４Ｒ）−４−｛２−〔４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン−５−イル｝−安息香酸；
ｆｆ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−アリル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｇｇ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；および
ｈｈ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（５−トリメチルシラニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオール
からなる群より選択される化合物を含む。
【００４９】
これらの化合物は、ラジオイムノアッセイ（ＥＣＥ阻害に対するＥ、下記参照）で約０．５ｎＭ〜１００ｎＭのＩＣ５０値を示す。
【００５０】
式（Ｉ）によって定義される、特に好ましい化合物は
ａ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピリミジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｂ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（６−フェニル−ピリダジン−３−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｃ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピラジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｄ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−エチル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｅ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｆ）（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）；
ｇ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−フェニル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｈ）（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−イル〕エステル；
ｉ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−２−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ酢酸との化合物；
ｊ）（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−４−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｋ）１−（５−チオフェン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｌ）１−（５−ピリジン−３−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；
ｍ）（２Ｓ，４Ｒ）−５−〔（２，５−ジフルオロ−ベンジルアミノ）−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオール；および
ｎ）（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔５−〔（２，５−ジフルオロ−ベンジルアミノ）−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イル〕エステル
からなる群より選択される化合物である。
【００５１】
本発明は、上記で定義した化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物にも関する。
【００５２】
本発明のさらなる態様は、エンドセリン変換酵素（ＥＣＥ）活性によって引き起こされる疾患に関連する障害、特に心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安関節炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症の治療および予防のための、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のための、上記で定義した化合物を含む薬物の製造における、上記で定義した化合物の活性成分としての使用に関する。
【００５３】
さらに本発明は、心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安関節炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症の治療および予防のための、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のための、上記で定義した化合物の使用に関する。
【００５４】
さらに本発明は、心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安関節炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症のような、特に亜鉛ヒドロラーゼ活性と関連した疾患に関連する、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のために、治療活性物質として使用するための、上述の化合物を含む。
【００５５】
本発明は、心筋虚血、うっ血性心不全、不整脈、高血圧、肺性高血圧、喘息、脳血管痙攣、くも膜下出血、子癇前症、腎臓病、アテローム性動脈硬化、バージャー病、高安関節炎、糖尿病性合併症、肺癌、前立腺癌、胃腸障害、エンドトキシンショックおよび敗血症の治療および／または予防処置の、そして創傷治癒ならびに月経制御、緑内障、移植片拒絶、細胞増殖抑制性の眼および脳保護適応に関する疾患、および臓器保護のための方法であって、上記で定義した化合物をヒトまたは動物に投与することを含む方法も含む。
【００５６】
本発明は、亜鉛ヒドロラーゼ活性を阻害するための、上記で定義した化合物の使用にも関する。
【００５７】
本発明はまた、以下で述べる方法によって製造される場合は必ず、上記の化合物に関する。
【００５８】
式（Ｉ）の化合物は、当技術分野において周知の、または以下で述べる方法によって調製され得る。別途表示しない限り、下記に示すＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４およびＹは、上記で定義したとおりである。
【００５９】
上記で定義した化合物の調製方法は、式ＩＩＩ
【００６０】
【化７】
2004504317.tif 000006
【００６１】
（式中、ＡはＨＳ−であり、Ｐは次の節で述べるようにＮＨ−保護基である）の化合物を
ａ）　−ＯＲ２基の導入のためにＲ２−ハロゲン化物と反応させ、続いてＰ−脱保護およびヘテロアロマートの導入を行うこと：または
ｂ）　最初に式（ＩＩＩ）のＰ−脱保護を行い、上記のヘテロアロマートの導入を行い、続いて−ＯＨ／−ＮＨ２置換およびＲ２を導入するための還元的アミノ化を行うこと；
場合により、続いて上記のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４基の異なる基への変換および／または脱保護および／またはチオール遊離を行うこと、
を含むことを特徴とする。
【００６２】
式（Ｉ）の化合物の調製では、スキームＩの反応経路を経て進むことができる：出発材料は市販されているか、当技術分野において周知であり、たとえば ”Ｔｈｅ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”， Ｍ． Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ ａｎｄ Ａ． Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ， Ｂｅｒｌｉｎ， １９８４に述べられている方法によって、ヒドロキシプロリンから合成される。
【００６３】
合成は、該当するメシラートの調製による（たとえば室温〜８０℃におけるトルエン中でのＭｅＳＯ３Ｈ／Ｐｈ３Ｐ／ＤＩＡＤとの反応）、塩化物による（たとえば３℃〜室温におけるＣＨ２Ｃｌ２中でのＰｈ３Ｐ／ＣＣｌ４との反応）、または臭化物による（たとえば４℃〜室温におけるＴＨＦ中でのＬｉＢｒ／ＤＥＡＤ／Ｐｈ３Ｐとの反応）、立体構造の反転で開始する。立体構造を保持するために、該当する反応は０℃〜室温において、ＭｅＳＯ２Ｃｌ／ピリジン／ＤＭＡＰによって実施されてもよい。
【００６４】
スキーム１の工程ｂは、たとえばトリフェニルメタンチオールまたは４−メトキシベンジルメルカプタンとの反応による、保護チオ部分の導入を示す（Ｃｌの場合：０℃、Ｂｒの場合：０℃〜室温、Ｍｅｓの場合：室温〜１００℃におけるＤＭＦ中のＫ−Ｏｔ−Ｂｕ）。
【００６５】
スキーム１の工程ｃの反応は、方法Ａ（−２０℃におけるＴＨＦ中のＬＡＨ）または方法Ｂ（−５０℃におけるトルエン／ＴＨＦ中のＲｅｄ−Ａｌ）によって実施され得る。
【００６６】
工程ｄの反応（Ｙ＝−Ｏ−の場合）は、
１．０℃〜室温におけるＤＭＦ中のＮａＨ／Ｒ２Ｂｒ（Ｏ−アルキル化）
２．−２０〜室温におけるＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡ（ＢＯＣ脱保護）
３．方法Ａ：２−クロロ−ヘテロ−アロマート／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン、３時間、８０℃、
方法Ｂ：（パラレル合成）：ジオキサンまたはＤＭＦ中の２−クロロ−ヘテロ−アロマート／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン、１６時間〜２日、８０〜１３０℃、
方法Ｃ：（より反応性の低い化合物の場合）：２−クロロ−ヘテロ−アロマート／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン／ＣｕＩ、１０時間、８０℃、
によって実施され得る。
フェノールエーテル化合物の調製では、該当する反応は、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件（ＴＨＦ中のＤＥＡＤ／Ｐｈ３Ｐ／ＰｈＯＨまたはＰｈＳＨ）下で実施され得る。
【００６７】
ＹがＮＲ２またはＮ−へテロ環である場合、メシル化反応はたとえば：
１．１．１当量ＭｅＳＯ２Ｃｌ／１．５ピリジン／１当量ＤＭＡＰ（メシル化）；
２．ＹＲ２がたとえばピロール、イミダゾールであり、または、０℃〜室温、ＤＭＦ中の１当量ＮａＩ、ＮａＨ
３．ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２またはＣＨ３ＣＮ中のｉＰｒ３ＳｉＨ（トリチル−チオール脱保護の場合）
によって実施され得る。
【００６８】
チオール遊離は、室温で、ＣＨ２Ｃｌ２またはＣＨ３ＣＮ中のＴＦＡ／ｉＰｒ３ＳｉＨによって実施され得る。
【００６９】
ＹがＮである化合物を調製する別の経路は：最初に脱保護（Ｐ＝ＢＯＣである場合、−２０℃〜室温でＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡ）を行い、続いて２−クロロ−ヘテロ−アロマート／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン／ＣｕＩとの反応を８０℃で１０時間行い（工程ｆ）、次に以下を行う。
１．０〜８０℃におけるＴＨＦ中のフタルイミド、ＤＥＡＤ／Ｐｈ３Ｐ（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件下でのフタルイミド導入）
２．ヒドラジン水和物、ＥｔＯＨ、室温（フタルイミド脱保護）、続いて該当物との反応。
３．アルデヒド、ＳｎＣｌ２、ＮａＢＨ３ＣＮ、ＭｅＯＨ（還元的アミノ化）（工程ｇ）
【００７０】
必要ならば、Ｒ５を
４．アセトニトリル中のＲ５Ｂｒ／Ｋ２ＣＯ３、室温、続いて以下との反応
５．ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２またはＣＨ３ＣＮ中のｉＰｒ３ＳｉＨ（トリチル−チオール脱保護の場合）
による反応で導入できる。
【００７１】
【化８】
2004504317.tif 000007
【００７２】
スキーム２に、式（Ｉ）の化合物の調製の特殊反応経路をまとめる：
【００７３】
スキーム２のＡは、スキーム１（工程ｅ）で述べたように、２，４−ジクロロピリミジンを用いて合成された出発材料としてのＣｌ−誘導体に関する：
１．ＸＲ３がＯＭｅである場合、反応は３当量ＭｅＯＨ／ＮａＨを用いて、室温、ＤＭＦ中で実施され得る（ＹＲ２＝２，４，５−トリフルオロベンジルオキシエーテル誘導体において、４−フルオロ置換が生じる）。
２．ＸＲ３がＯＰｈである場合、反応は１０当量ＰｈＯＨ／ＮａＨを用いて、７０℃、ＤＭＦ中、８時間で実施され得る。
３．ＸＲ３がＯＭｅである場合、反応は２．２当量ＭｅＯＮａを用いて、室温〜７５℃（１０時間）、ＭｅＯＨ中で実施され得る（ＹＲ２＝２，４，５−トリフルオロベンジルオキシエーテル誘導体において、４−フルオロ置換が生じない）。
４．ＸＲ３がＳＭｅである場合、反応は２．２当量ＭｅＳＮａ／ＮａＩを用いて、ＴＨＦ中、室温〜７０℃、２８時間で実施され得る。
５．ＸＲ３がＮＨＲ３である場合、反応は７．５〜３０当量Ｈ２ＮＲ３／ｉＰｒ２ＥｔＮを用いて、ジオキサン中、９０〜１０５℃、４８時間で実施され得る。
【００７４】
次にチオール遊離は、室温、ＣＨ２Ｃｌ２またはＣＨ３ＣＮ中でＴＦＡ／ｉＰｒ３ＳｉＨを用いて実施され得る（工程ｂ）。
【００７５】
スキーム２のＢの反応経路はさらに、式（Ｉ）の化合物の合成経路を示す：
工程ｃ）の反応は以下の方法を用いて実施され得る：
１．ジメトキシエタン／ＥｔＯＨおよび２Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３中、９０℃、２時間での、アリールＢ（ＯＨ）２／Ｐｄ（ＰｈＰ）４との Ｓｕｚｕｋｉカップリング；または
２．ジオキサンおよび２Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３中、８０℃、２４〜４８時間での、アリールＢ（ＯＨ）２／ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）との反応；または
３．ｉ．ＤＭＦ中、８０℃でのビス（ピナコラート）ジボロン／ＫＯＡｃ／ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）との反応による、ボロンエステル（たとえば４，４，５，５−テトラメチル−２−フェニル−〔１，３，２〕ジオキサボロラン誘導体）の合成、および
ｉｉ．８０℃、１６時間で、ブロモアロマート／ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）／２Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３との反応；または
４．Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａ−Ｈａｇｉｈａｒａカップリング：ＤＭＦ中、８０℃でのエチニルトリメチルシラン／Ｅｔ３Ｎ／ＰｄＣｌ２（Ｐｈ３Ｐ）２／ＣｕＩとの反応。
【００７６】
【化９】
2004504317.tif 000008
2004504317.tif 000009
【００７７】
式（Ｉ）の化合物のさらなる誘導体化をスキーム３に示す：
【００７８】
Ｙが窒素である場合、工程ａの反応は、ＲＣＯＣｌ、ｉＰｒ２ＮＥｔ、ポリマー担持された４−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルアミノ）ピリジン、ＣＨ２Ｃｌ２を用いて実施され（Ｎ−アシル化）、次にｉＰｒ３ＳｉＨ、ＴＦＡ、ＣＨ２Ｃｌ２との反応（チオール遊離）を行う。Ｙが保護された窒素または酸素である場合、遊離チオールとの反応は工程ｃに従って、０℃〜室温、ピリジン中でＲＣＯＣｌを用いて、またはＤＭＦ／０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．２）中でＢＯＣ−Ｃｙｓ（Ｎｐｙｓ）−ＯＨ（＝２−（ＢＯＣ−Ｃｙｓ）ジスルファニル−３−ニトロピリジン）を用いて、実施され得る。Ｙがベンジルオキシ保護された窒素である場合、酢酸中、０℃〜室温での３３％ＨＢｒを用いた選択的脱保護が可能である。
【００７９】
金属プロテアーゼ活性、特に亜鉛ヒドロラーゼ活性を阻害するその能力に基づいて、式Ｉの化合物を、血管収縮の発生増加に関連する疾患状態の予防および治療に有効である薬物として使用できる。そのような障害の例は、高血圧、冠動脈障害、心不全、腎ならびに心筋虚血、腎不全、透析、大脳虚血、心筋梗塞、偏頭痛、くも膜下出血、レイノー症候群および肺性高血圧である。それらはアテローム性動脈硬化、バルーン誘発性血管膨張後の再狭窄の防止、炎症、胃潰瘍ならびに十二指腸潰瘍、下腿潰瘍、グラム陰性菌敗血症、ショック、糸球体腎炎、腎疝痛、緑内障、喘息、糖尿病性合併症およびシクロスポリン投与での合併症はもちろんのこと、エンドセリン活性に関連する他の障害の治療または予防においても使用され得る。
【００８０】
式（Ｉ）の化合物が金属プロテアーゼ活性、特に亜鉛ヒドロラーゼを阻害する能力は、当業者に周知の各種のインビトロおよびインビボアッセイによって証明され得る。
【００８１】
Ａ）細胞培養
安定なヒト臍静脈内皮細胞系（ＥＣＶ３０４）を、記載されているような「細胞工場」でコンフルエントまで培養した（Ｓｃｈｗｅｉｚｅｒら、１９９７， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｊ． ３２８： ８７１〜８７８）。コンフルエントにおいて、細胞をトリプシン／ＥＤＴＡ溶液によって分解し、低速遠心分離によって収集した。細胞ペレットをｐＨ７．０のリン酸緩衝生理的食塩水で１度洗浄し、使用するまで−８０℃で保存した。
【００８２】
Ｂ）ＥＣＶ３０４細胞からのＥＣＥの可溶化
別途記載しない限り、すべての手順を０〜４℃で実施した。１×１０９細胞の細胞ペレットを５０ｍｌの緩衝液Ａ（５ｍＭのＭｇＣｌ２、１００μＭ　ＰＭＳＦ、２０μＭ　Ｅ６４、２０μＭ　ロイペプチンを含む２０ｍＭ　Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ７．５）中で懸濁させ、超音波処理した。得られた細胞ホモジェネートを平均１００，０００ｇで６０分間遠心分離した。上清を捨てて、得られた膜ペレットを５０ｍｌの緩衝液Ａ中で均質化して、記載されたとおりに遠心分離した。緩衝液Ａ中で膜画分の洗浄を２回繰り返した。最終膜調製物は５０ｍｌの緩衝液Ｂ（緩衝液Ａ＋０．５％　Ｔｗｅｅｎ２０（ｖ／ｖ）、０．５％　ＣＨＡＰＳ（ｗ／ｖ）、０．５％　Ｄｉｇｉｔｏｎｉｎ（ｗ／ｖ））中で均質化して、４℃で２時間撹拌した。その後、残りの膜断片を説明されたとおりに沈殿させた。可溶化ＥＣＥを含む得られた澄んだ上清は、１．０ｍｌの分割量で−１２０℃で使用するまで保存した。
【００８３】
Ｃ）ＥＣＥアッセイ
アッセイは、ヒトビッグＥＴ−１からのＥＴ−１の生成を測定した。多数のサンプルを測定するために、９６ウェルプレートで実施するアッセイを考案した。生成したＥＴ−１の酵素反応および放射性免疫検出は、特別に開発および最適化したコーティング技法を用いて、同一のウェルで実施した。
【００８４】
Ｄ）プレートのコーティング
Ｆｌｕｏｒｏｎｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐ Ｗｈｉｔｅ（コード ４３７７９６）９６ウェルプレートは、ＵＶ Ｓｔｒａｔａｌｉｎｋｅｒ ２４００（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）内で１ジュールで３０分間照射された。次に９６ウェルプレートを、１ウェルあたり３００μｌのタンパク質Ａ（０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３中に２μｇ／ｍｌ、ｐＨ９．５）溶液で満たし、４℃で４８時間インキュベートした。コーティングしたプレートは使用するまで、４℃で最高３週間保存できる。
【００８５】
使用前にタンパク質Ａ溶液を捨て、プレートをｐＨ９．５の０．１Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３中で０．５％ＢＳＡを用いて、４℃で２時間ブロックする。
【００８６】
プレートを２回蒸留した水で洗浄し、ＥＣＥアッセイの実施に備えた。
【００８７】
Ｅ）スクリーニングアッセイ
試験化合物はＤＭＳＯで溶解および希釈する。１０μｌのＤＭＳＯをウェルに入れ、次に、２００ｎｇのビッグＥＴ−１を含む１２５μｌのアッセイ緩衝液（５０ｍＭ　Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ７．０、１μＭ　チオルファン、０．１％　ＮａＮ３、０．１％　ＢＳＡ）を加えた。酵素反応を、５０μｌの可溶化ＥＣＥ（アッセイ緩衝液で１：３０〜１：６０倍（ｖ／ｖ）に希釈）の添加により開始させた。酵素反応は３７℃で３０分間実施した。酵素反応を、１０μｌの１５０ｍＭ　ＥＴＤＡ、ｐＨ７．０の添加により停止させた。
【００８８】
ラジオイムノアッセイ：
ＥＴ−１　ＲＩＡを基本的に前記に説明されたように実施した（Ｌｏｅｆｆｌｅｒ， Ｂ．−Ｍ． ａｎｄ Ｍａｉｒｅ， Ｊ．−Ｐ． １９９４， Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ １： ２７３〜２８６）。酵素反応を停止させたＥＤＴＡを含むプレートに、２００００ｃｐｍ（３−（１２５Ｉ）Ｔｙｒ）−エンドセリン−１を含む２５μｌのアッセイ緩衝液と、２５μｌのＥＴ特異性抗血清ＡＳ−３（アッセイ緩衝液で希釈　１：１０００）の混合物を加えた。プレートを４℃で撹拌しながら一晩インキュベートした。その後、液相をプレートウォッシャーで吸い取り、プレートを２回蒸留した水で１回洗浄した。洗浄したプレートに２００μｌのシンチレーションカクテル（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ４０ ＬＳＣ−Ｃｏｃｋｔａｉｌ， Ｐａｃｋａｒｄ ｃｏｄｅ ６０１３６４１）を加え、プレートをＴｏｐｃｏｕｎｔでウェル当たり２分間カウントした。
【００８９】
標準曲線は、ウェル当たり０〜３０００ｐｇ　ＥＴ−１の最終濃度で合成ＥＴ−１を含むプレートで作成した。すべてのプレートにおいて、最大ＥＣＥ活性（１０μｌ　ＤＭＳＯの存在下で）およびＥＴ−１免疫反応性のバックグラウンド生成（１０ｍＭ　ＥＤＴＡまたは１００μＭ　ホスホラミドンの存在下で）の対照も実施した。アッセイを３通り実施した。
【００９０】
Ｆ）反応速度アッセイ
説明されたアッセイ形式は、アッセイで使用した基質濃度の変化によって、使用したＥＣＥ調製物はもちろんのこと異なるＥＣＥ阻害剤の速度反応特性（すなわちＫｍ、Ｋｉ）を測定するために使用され得る。
【００９１】
Ｇ）細胞ベースのＥＣＥアッセイ
ヒトＥＣＥ−１ｃを、記載されたようにＭＤＣＫ細胞中で安定に発現した（Ｓｃｈｗｅｉｚｅｒら、１９９７， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｊ． ３２８： ８７１〜８７８）。細胞を、２４ウェルプレートの１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、０．８ｍｇ／ｍｌ　ジェネティシン、１００ｉ．ｕ．／ｍｌ　ペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌ　ストレプトマイシンを添加したダルベッコ変法イーグル培地中（ＤＭＥＭ）で、湿潤空気／ＣＯ２（１９：１）雰囲気下でコンフルエントまで培養した。ＥＣＥアッセイの前に培地を、０．５ｍｌ　ＤＭＥＭ−ＨＢＳＳ　１：１、０．１％（ｗ／ｖ）ＢＳＡを添加した１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ　ｐＨ７．０と交換した。阻害剤は最終濃度が１％となるようＤＭＳＯに添加した。酵素反応を０．４２μＭ　ヒトビッグＥＴ−１の添加によって開始し、インキュベータ内で３７℃で１．５時間実施した。インキュベーション終了時に、インキュベーション培地を迅速に除去し、上述したように生成したＥＴ−１について分割量をラジオイムノアッセイで分析した。
【００９２】
ＥＣＥスクリーニングアッセイは、ホスホラミドン（ＩＣ５０　０．８±０．２μＭ）およびＣＧＳ　３１４４４７（ＩＣ５０　２０±４ｎＭ）の特徴的な阻害定数の測定によって検証した〔Ｄｅ Ｌｏｍｂａｅｒｔ， Ｓｔｅｐｈａｎｅ； Ｓｔａｍｆｏｒｄ， Ｌｉｓａ Ｂ．； Ｂｌａｎｃｈａｒｄ， Ｌｏｕｉｓ； Ｔａｎ， Ｊｅｎｎｙ； Ｈｏｙｅｒ， Ｄｅｎｔｏｎ； Ｄｉｅｆｅｎｂａｃｈｅｒ， Ｃｌｉｖｅ Ｇ．； Ｗｅｉ， Ｄｏｎｇｃｈｕ； Ｗａｌｌａｃｅ， Ｅｌｉ Ｍ．； Ｍｏｓｋａｌ， Ｍｉｃｈａｅｌ Ａ．；ら、Ｐｏｔｅｎｔ ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｉｃ ｄｕａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ−ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ａｎｄ ｎｅｕｔｒａｌ ｅｎｄｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ ２４．１１． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． （１９９７）， ７（８）， １０５９〜１０６４〕。２つの阻害剤は、異なるアッセイプロトコルによって測定されたが、文献で述べられているＩＣ５０値と有意差がないＩＣ５０値によって測定された。細胞ベースのアッセイにおいて、ホスホラミドンは４μＭのＩＣ５０を示した。このアッセイは、たとえばＥＣＥが正常な原形質膜環境に埋め込まれているような、さらに生理的な条件下での阻害剤の阻害能に関する追加情報を与える。ＮＥＰ２４．１１の作用による潜在的なビッグＥＴ−１の分解を阻害するために、スクリーニングアッセイを１μＭ　チオルファンの存在下で実施したことを述べることは重要である。チオルファンの存在時または不在時にＥＴ−１生成を測定した場合、予備実験ではＭＤＣＫ−ＥＣＥ−１ｃ形質移入細胞にＮＥＰ活性はなかった。次の実験では、インキュベーション培地にチオルファンを添加しなかった。
【００９３】
上記の方法により、本発明の化合物はラジオイムノアッセイにおいて、約０．５ｎＭ〜約１００μＭのＩＣ５０値（ＥＣＥ阻害に対するＥ）を示す。好ましい化合物は０．５ｎＭ〜１００ｎＭ値を示した。
【００９４】
前に指摘したように、式Ｉの化合物を含む薬剤も、そのような薬物の製造方法と同様に本発明の目的であり、該方法は１以上の式Ｉの化合物および望ましい場合には、１以上の他の治療上有用な物質を生薬投与形にすることを含む。
【００９５】
薬学的組成物はたとえば錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬質または軟質ゼラチンカプセル、溶液、エマルジョンまたは懸濁液の形で経口投与され得る。投与はたとえば座薬を用いて直腸により；たとえば軟膏、クリーム、ゲルまたは溶液を用いて局所的にまたは経皮的に；あるいはたとえば注入溶液を用いて非経口的にも行われ得る。
【００９６】
錠剤、コーティング錠、糖衣錠または硬質ゼラチンカプセルの調製では、本発明の化合物を薬学的に不活性な無機または有機賦形剤と混合することができる。錠剤、糖衣錠または硬質ゼラチンカプセルの適切な賦形剤の例はラクトース、トウモロコシ澱粉またはその誘導体、タルクあるいはステアリン酸またはその塩を含む。
【００９７】
軟質ゼラチンカプセルでの使用に適した賦形剤はたとえば植物油、ワックス、脂質、半固体または液体ポリオールなどを含む；しかし活性成分の性質により、軟質ゼラチンカプセルでは賦形剤がまったく必要ない場合もある。
【００９８】
溶液およびシロップを調製する場合、使用される賦形剤はたとえば水、ポリオール、サッカロース、転化糖およびグルコースを含む。
【００９９】
注入溶液では、使用される賦形剤はたとえば水、アルコール、ポリオール、グリセリンおよび植物油を含む。
【０１００】
座薬、および局所または経皮用途では、使用される賦形剤はたとえば天然油または硬化油、ワックス、脂質および半固体または液体ポリオールを含む。
【０１０１】
薬学的組成物は保存料、抗酸化剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、着臭剤、浸透圧を変化させるための塩、緩衝剤、コーティング剤または抗酸化剤も含むことがある。これらは他の治療的に有用な薬剤を含むこともある。
【０１０２】
式Ｉの化合物を有効量で投与する用量は、具体的な活性成分の性質、患者の年齢ならびに要件、および用途の方式による。一般に１日当たり０．１〜１００ｍｇ／体重１ｋｇの用量を考慮するが、必要なことが示されている場合は、見積った上限を超える場合もありうる。
【０１０３】
以下の具体的な実施例は、本発明の実施において役立つ指針として与えられ、本発明の範囲を制限するものではない。
【０１０４】
【実施例】
反応は全て、アルゴン下で行った。
Ａ）略語：
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル、ＥｔＯＨ：エタノール、ＴＨＦ：テトラヒドロフラン、Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル、ＭｅＯＨ：メタノール、ＣＨ２Ｃｌ２：ジクロロメタン、ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド、ＢＯＣ：ｔ−ブチルオキシカルボニル、ＬＡＨ：水素化アルミニウムリチウム、ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド、ＤＥＡＤ：アゾジカルボン酸ジエチル、ＤＩＡＤ：アゾジカルボン酸ジイソプロピル、ＤＭＡＰ：４−ジメチルアミノピリジン、ｉＰｒ２ＮＥｔ：Ｎ−エチルジイソプロピルアミン、Ｐｈ３Ｐ：トリフェニルホスフィン、Ｒｅｄ−Ａｌ溶液：ナトリウム水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウム溶液、Ｅｔ３Ｎ：トリエチルアミン、アリールＢ（ＯＨ）２＝アリール−、ヘテロアリール−、アルファ−アルケニルボロン酸、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）：（１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）ジクロロパラジウム（ＩＩ）。ＣＨ２Ｃｌ２（１：１）、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４：テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、ｉＰｒ３ＳｉＨ：トリイソプロピルシラン、ＰｄＣｌ２（Ｐｈ３Ｐ）２：ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド、Ｅｔ３ＳｉＨ：トリエチルシラン、ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸。
【０１０５】
Ｂ）選択的ＢＯＣ−脱保護の一般的方法：
Ｎ−ＢＯＣ−Ｓ−トリチル化合物１５．１ｍｍｏｌのＣＨ２Ｃｌ２　３０ｍｌ溶液を、−２０℃でＴＦＡ　３４ｍｌを用いて処理し、５．５時間かけて室温に暖めた。反応を蒸発させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液／ＥｔＯＡｃで処理し（３×）、遊離アミノトリチルスルファニルを得た。
【０１０６】
Ｃ）エステル加水分解の一般的方法：
カルボン酸メチルエステル５．３８ｍｍｏｌの溶液を、ＥｔＯＨ　１５０ｍｌに溶解し、室温で１Ｎ　ＮａＯＨ水溶液１０．８ｍｌ（１０．８ｍｍｏｌ）を用いて処理した。３時間後、反応を蒸発させ、１０％ＫＨＳＯ４水溶液／ＥｔＯＡｃに注いだ（３×）。有機相を、１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、カルボン酸を得た。
【０１０７】
Ｄ）Ｓ−脱保護の一般的方法：
トリイソプロピルシランを用いたトリチル脱保護：トリチル保護した化合物２．８４ｍｍｏｌのＣＨ２Ｃｌ２　３０ｍｌ溶液を、０℃で、ＴＦＡ　８ｍｌおよびトリイソプロピルシラン５．８２ｍｌ（２８ｍｍｏｌ）を用いて処理した。室温で３０分後、溶液を完全に蒸発させ、化合物を、Ｅｔ２Ｏ／ペンタンから２回沈殿、またはシクロヘキサン、シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ　９：１〜１：１を溶離剤として用いてシリカゲルで精製し、チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）を無色の油状物として得た。
【０１０８】
Ｅ）Ｓ−脱保護の一般的方法の変法：
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ／ｍｍｏｌ）中のトリチル化した抽出物１当量を、０℃でトリイソプロピルシラン１０〜２０当量およびＴＦＡ　１０〜２０当量で処理した。溶液を、抽出物が検出されなくなるまで０℃で撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合せた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。
【０１０９】
実施例１：出発物質
出発物質：本発明の化合物を合成するための（２Ｓ，４Ｒ）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステルは、当該の技術において公知であり、例えば、国際特許出願ＷＯ９８／２０００１およびヨーロッパ特許出願公開番号ＥＰ−Ａ−６９６５９３に記載されている。
【０１１０】
１．１　（２Ｓ，４Ｓ）−４−クロロ−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステル３７４ｇ（１．４８ｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２　１．６Ｌ溶液を、トリフェニルホスフィン６８０ｇ（２．６ｍｏｌ）で処理し、３〜５℃に冷却し、ＣＣｌ４　１．２４Ｌ（１２．８ｍｏｌ）で１０分間処理し、この温度冷却を２時間後に中止し、２時間の間に反応を３５℃に上げた。これを２０℃に冷却し、更に４５分間撹拌した。ｎ−ヘプタン　４Ｌを加えた後、反応を蒸発させて２．９Ｌにし、０℃に冷却し、濾過し、残渣を同じ方法で２回処理し、３回目は再びＣＨ２Ｃｌ２　２Ｌ中に残渣を溶解して、処理した。溶媒を蒸発させ、ヘキサン／ｔｅｒｔ−ブチル−メチルエーテル　９：１を溶出剤として用いて、シリカゲルを通して濾過した。溶媒を蒸発させて、（２Ｓ，４Ｓ）−４−クロロ−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステル　３４７ｇ（８９％）を得た、ＭＳ：２４６（ＭＨ＋）。
【０１１１】
１．２　（２Ｓ，４Ｒ）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステル
カリウム−ｔｅｒｔ−ブチラート７６ｇ（０．６８ｍｏｌ）のＤＭＦ　１．５Ｌ溶液を冷却し（−３℃）、ＤＭＦ　０．８Ｌ中のトリフェニルメタンチオール２０２ｇ（０．７３ｍｏｌ）を用いてゆっくり（１．５時間）処理した（最高１℃で）。０℃で２．５時間の後、（２Ｓ，４Ｓ）−４−クロロ−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステル１６１ｇ（０．６１ｍｏｌ）ＤＭＦ　０．３５Ｌの溶液を加えた。反応を２℃で一晩撹拌し、蒸発させ、ＥｔＯＡｃ　１．５Ｌに溶解し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液２．７Ｌに注ぎ、ＥｔＯＡｃを用いて抽出した（２×）。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（９５：５〜７：３）を用いてシリカゲル上でカラムクロマトグラフィーに付し、（２Ｓ，４Ｒ）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステル２６８ｇ（８７％）を得た、ＭＳ：５０４（ＭＨ＋）。
【０１１２】
１．３　エステル還元
Ａ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−ヒドロキシメチル−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル２−メチルエステル３５ｇ（６９ｍｍｏｌ）のトルエン３８０ｍｌ／ＴＨＦ　６０ｍｌ溶液を、−４７℃〜−５０℃で、ナトリウム水素化ビス（２−メトキシ−エトキシ）アルミニウム７０％トルエン溶液（トルエン中３．５Ｍ　Ｒｅｄ−Ａｌ）４４ｇ（１５２ｍｍｏｌ）で処理した。−５０℃で３時間、−３０℃で１時間の後、溶液をクエン酸４０ｇを含む水（１Ｌ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した（２×）。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（７：３）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフィーに付し、（２Ｓ，４Ｒ）−２−ヒドロキシメチル−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル２３．０ｇ（６９％）を得た、ＭＳ：４７６（ＭＨ＋）。
【０１１３】
Ｂ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
０℃で、（２Ｓ，４Ｒ）−２−ヒドロキシメチル−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１５．５ｇ（３２．５９ｍｍｏｌ）および２，４，５−トリフルオロベンジルブロミド２４．７ｇ（１０９．７７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　７００ｍｌ溶液を、５５％ＮａＨ　２．２８ｇ（５２．１４ｍｍｏｌ）を４回に分けて処理し、７時間室温に暖めた。反応を０℃に冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液５００ｍｌで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した（３×）。有機相を１０％ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（９：１〜８．５：１．５）を用いてシリカゲル上でフラッシュカラムクロマトグラフィーに付し、（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル９．３７ｇ（４６％）を得た、ＭＳ：６２０（ＭＨ＋）。
【０１１４】
Ｃ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル９．３７ｇ（１５．１１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２　３０ｍｌ溶液を、−２０℃でＴＦＡ　３４ｍｌで処理し、５．５時間室温に暖めた。反応を蒸発させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液／ＥｔＯＡｃで処理し（３×）、（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン７．７７ｇ（定量）を得た、ＭＳ：５２０（Ｍ）。
【０１１５】
実施例２：Ｎ−ピロリジン誘導体（スキーム２）
２．１　方法Ａ：（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン２．０８ｇ（４ｍｍｏｌ）、２−クロロピリミジン０．６８７ｇ（６ｍｍｏｌ）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン１．１６ｍｌ（６．８ｍｍｏｌ）の混合物を、８０℃で３時間加熱した。反応を冷却し、Ｈ２Ｏ／Ｅｔ２Ｏ（３×３００）に分配した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液と１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＮａＳＯ４）、蒸発させた。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ　９７．５：２．５）に付して、（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン１．７ｇ（７１％）を得た、ＭＳ：５９８（ＭＨ＋）。
【０１１６】
同様に：
ａ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジンおよび２，４−ジクロロピリミジンから、（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンを得た、ＭＳ：６３２（ＭＨ＋）、
ｂ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジンおよび２，５−ジブロモ−ピリミジン〔Ｂｒｏｗｎ， Ｄｅｓｍｏｎｄ Ｊ．； Ａｒａｎｔｚ， Ｂ． Ｗ．， Ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ． ＸＸＩＩ． Ｒｅｌａｔｉｖｅ ｒｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｃｈｌｏｒｏ−， ｂｒｏｍｏ−． ａｎｄ ｉｏｄｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅｓ ｉｎ ａｍｉｎｏｌｙｓｉｓ． Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｃ （１９７１）， Ｉｓｓｕｅ １０， １８８９〜９１〕から、（２Ｓ，４Ｒ）−５−ブロモ−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンを得た、ＭＳ：６７６（ＭＨ＋、１Ｂｒ）。
ｃ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジンおよびメチル−２−クロロ−６−メチルピリミジンから、（２Ｓ，４Ｒ）−６−メチル−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステルを得た、ＭＳ：６７０（ＭＨ＋）、
ｄ）（２Ｓ，４Ｒ）−６−メチル−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン−４−カルボン酸メチルエステルを、続いてエステル加水分解の一般的方法（ＥＴＯＨ／ジオキサン）に従って加水分解し、（２Ｓ，４Ｒ）−６−メチル−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン−４−カルボン酸を得た、ＭＳ：６５６（ＭＨ＋）。
【０１１７】
２．２　Ｓ−脱保護、方法Ｄ）：（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン１．７ｇ（２．８４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２　３０ｍｌ溶液を、０℃で、ＴＦＡ　８ｍｌとトリイソプロピルシラン５．８２ｍｌ（２８ｍｍｏｌ）で処理した。室温で３０分後、溶液を完全に蒸発させ、化合物をＥｔ２Ｏ／ペンタンから２度沈殿させ、（３Ｒ，５Ｓ）−１−ピリミジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）１．０６ｇ（８０％）を無色の油状物として得た、ＭＳ：３５６（ＭＨ＋）。
【０１１８】
同様に：
ａ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンから、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−クロロ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−酢酸との化合物を得た、ＭＳ：３９０（ＭＨ＋）、
ｂ）（２Ｓ，４Ｒ）−５−ブロモ−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンから、（２Ｓ，４Ｒ）−１−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールを得た、ＭＳ：４３４（ＭＨ＋，１Ｂｒ）。（前表には記載していない）、
ｃ）（２Ｓ，４Ｒ）−６−メチル−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン−４−カルボン酸から、（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔４−メルカプト−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−１−イル〕−６−メチル−ピリミジン−４−カルボン酸を得た、ＭＳ：４１４（ＭＨ＋）。
【０１１９】
２．３　方法Ｂ（パラレル合成）：ジオキサン１ｍｌまたはＤＭＦ　０．１ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン０．４５ｍｍｏｌ、２−クロロ−ヘテロ−アロマ−ト２．２５ｍｍｏｌ、およびＮ−エチルジイソプロピルアミン２．２５ｍｍｏｌの溶液を８０〜１３０℃で１６時間〜２日間加熱した（表１を参照）。反応は、分取ＨＰＬＣ（ＲＰ−１８、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、ＵＶ　２３０ｎｍ）により精製した。
【０１２０】
上述のＴＦＡ／トリイソプロピルシラン脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）によって、遊離チオールを得た。
【０１２１】
２．４　方法Ｃ：（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン２ｇ（３．８５ｍｍｏｌ）、２−クロロ−５−ｎ−プロピルピリミジン１．２ｇ（７．７ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン１．９８ｍｌ（１１．５５ｍｍｏｌ）、および触媒量のヨウ化銅（Ｉ）の混合物を、８０℃で１０時間加熱した。反応を冷却し、Ｈ２Ｏ／Ｅｔ２Ｏに分配した（３×３００）。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液と１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＮａＳＯ４）、蒸発させた。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（トルエン／Ｅｔ２Ｏ　９９：１）に付して、（２Ｓ，４Ｒ）−５−プロピル−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン２ｇ（８１％）を得た、ＭＳ：６４０（ＭＨ＋）。
【０１２２】
上述のＴＦＡ／トリイソプロピルシラン脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）によって、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）を得た、ＭＳ：３９８（ＭＨ＋）。
【０１２３】
同様の方法にしたがって、以下の化合物を、（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジンと、以下の表１に記載の２．抽出物との反応を通して調製した。
【０１２４】
【表１】
2004504317.tif 000010
2004504317.tif 000011
【０１２５】
実施例３：２−クロロピリミジン上での置換
３．１　ＤＭＦ中での反応：（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン０．２４（０．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　８ｍｌ溶液を、０℃で、ＭｅＯＨ　０．０５ｍｌ（１．２ｍｍｏｌ）と５５％ＮａＨ　０．０５４ｇ（１．２４ｍｍｏｌ）で処理した。反応をこの温度に保ち（６時間）、一晩かけて室温に暖めた。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液／Ｅｔ２Ｏで抽出（３×）した後、有機相を１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ　９５：５）に付して、（２Ｓ，４Ｒ）−４−〔２−（２，５−ジフルオロ−４−メトキシ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−２−メトキシ−ピリミジン０．１４ｇ（５４％）を得た、ＭＳ：６４０（ＭＨ＋）。
【０１２６】
ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）によって、（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，５−ジフルオロ−４−メトキシ−ベンジルオキシメチル）−１−（２−メトキシ−ピリミジン−４−イル）−ピロリジン−３−チオールを得た、ＭＳ：３９８（ＭＨ＋）。
【０１２７】
同様に：
ａ）（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンおよびフェノール／ＮａＨ　１０当量から、７０℃で８時間後、２−フェノキシ−４−〔（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンを得た、ＭＳ：６９０（ＭＨ＋）：それを脱保護し（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−フェノキシ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールを得た、ＭＳ：４４８（ＭＨ＋）。
【０１２８】
３．２　他の溶媒中での反応：（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン０．２４（０．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ　１ｍｌ溶液を、０℃で、ナトリウムメチラート（ＭｅＯＨ中５．５Ｍ）０．１６ｍｌ（０．８８ｍｍｏｌ）で処理し、この温度を保ち（２時間）、暖め、７５℃で１０時間加熱した。蒸発および、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液／Ｅｔ２Ｏでの抽出（３×）の後、有機相を１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、２−メトキシ−４−〔（２Ｓ，４Ｒ）−２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン０．１９ｇ（７７％）を得た、ＭＳ：６２８（ＭＨ＋）、これを脱保護し（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メトキシ−ピリミジン−４−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールを得た、ＭＳ：３８６（ＭＨ＋）。
【０１２９】
同様に：
ａ）ＴＨＦ中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンおよびナトリウムメタンチオラート２．２当量／ヨウ化ナトリウム２当量（７０℃で２８時間）から、脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）の後、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールを得た、ＭＳ：４０２（ＭＨ＋）、
ｂ）ジオキサン中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンおよびアニリン１０当量／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン３．５当量（１０５℃で４８時間）から、脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）した後、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−フェニルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールトリフルオロ−アセタート（１：１）を得た、ＭＳ：４４７（ＭＨ＋）、
ｃ）ジオキサン中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンおよびベンジルアミン７．５当量／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン３．５当量（９０℃で４８時間）から、脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）の後、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−ベンジルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）を得た、ＭＳ：４６１（ＭＨ＋）、
ｄ）ジオキサン中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンおよびブチルアミン７．５当量／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン３．５当量（９０℃で４８時間）から、脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）の後、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−ブチルアミノ−ピリミジン−４−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）を得た、ＭＳ：４２７（ＭＨ＋）、
ｅ）ジオキサン中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−クロロ−４−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンおよびメチルアミン溶液（ＥｔＯＨ中８．０３Ｍ）３０当量／Ｎ−エチルジイソプロピルアミン３．５当量（９０℃で４８時間）から、脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）した後、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−アセタート（１：１）を得た、ＭＳ：３８５（ＭＨ＋）。
【０１３０】
実施例４：Ｓｕｚｕｋｉ型反応
一般に、反応はビアリール合成のＳｔａｎｆｏｒｔｈ， Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｐ． 触媒交差カップリング反応にしたがって行われた。Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ （１９９８）， ５４ （３／４）， ２６３−３０３。
【０１３１】
４．１　方法Ａ（溶媒をアルゴンで１０分間脱気した）：（２Ｓ，４Ｒ）−５−ブロモ−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン１．３５ｇ（２ｍｍｏｌ）のジメトキシエタン１２ｍｌ溶液を、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム０．１１６ｇ（０．１ｍｍｏｌ）のジメトキシエタン１．４ｍｌ懸濁液に加え、１５分間攪拌した。次に、ＥｔＯＨ　３．４ｍｌ中のフェニルボロン酸０．２９ｇ（２．４ｍｍｏｌ）を加え、１０分後、２Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液８．８ｍｌを加えた。反応を９０℃で２時間加熱し、蒸発させ、Ｈ２Ｏ／Ｅｔ２Ｏで抽出した（３×）。有機相を１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（トルエン）を用いて精製し、（２Ｓ，４Ｒ）−５−フェニル−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン０．４８ｇ（３６％）を得た、ＭＳ：６７４（ＭＨ＋）。
【０１３２】
ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）によって、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−フェニル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４−５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオールを得た、ＭＳ：４３２（ＭＨ＋）。
【０１３３】
４．２　方法Ｂ（溶媒をアルゴンで１０分間脱気した）；パラレル合成：（２Ｓ，４Ｒ）−５−ブロモ−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン０．１３ｍｍｏｌ、ボロン酸またはボロン酸エステル０．１９５ｍｍｏｌ、およびＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）０．００４ｍｍｏｌのジオキサン２ｍｌと２Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３　０．４ｍｌ溶液を、８０℃で４８時間加熱した。濾過した後、混合物を分取ＨＰＬＣ（ＲＰ１８、アセトニトリル５０％〜９５％）によって、精製した。
【０１３４】
ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）によって、遊離チオールを得た。
【０１３５】
４．３　方法Ｃ：（溶媒をアルゴンで１０分間脱気した）〔Ｇｉｒｏｕｘ， Ａｎｄｒｅ； Ｈａｎ， Ｙｏｎｇｘｉｎ； Ｐｒａｓｉｔ， Ｐｅｔｐｉｂｏｏｎ． Ｏｎｅ ｐｏｔ ｂｉａｒｙｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｖｉａ ｉｎ ｓｉｔｕ ｂｏｒｏｎａｔｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． （１９９７）， ３８ （２２）， ３８４１−３８４４〕。（２Ｓ，４Ｒ）−５−ブロモ−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン０．６８ｇ（１ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン０．２８ｇ（１．１ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム０．２９ｇ（３ｍｍｏｌ、１００℃、０．１Ｔｏｒｒで２時間乾燥）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）０．０２４ｇ（０．０３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ １２ｍｌ溶液を、８０℃で４．５時間攪拌した。反応を冷却し、２−ブロモピリジン０．１９５ｍｌ（２ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）０．０２４ｇ（０．０３ｍｍｏｌ）、および２Ｍ　Ｎａ２ＣＯ３水溶液２．５ｍｌで処理し、８０℃で１６時間加熱した。反応を蒸発させ（６０℃／０．１ｔｏｒｒ）、水／Ｅｔ２Ｏに分配した（３×）。有機相を、１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（トルエン／ＥｔＯＡｃ　９７．５：２．５）を用いて精製し、（２Ｓ，４Ｒ）−５−ピリジン−２−イル−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジン０．１２５ｇを得た、ＭＳ：６７５（ＭＨ＋）。
【０１３６】
ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）によって、（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−ピリジン−２−イル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール；トリフルオロ−酢酸との化合物を得た、ＭＳ：４３３（ＭＨ＋）。
【０１３７】
４．４　方法Ｄ（溶媒をアルゴンで１０分間脱気した）：（２Ｓ，４Ｒ）−５−ブロモ−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル
〕−ピリミジン０．６８ｇ（１ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド１５ｍｇ（０．０２２ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）９．５ｍｇのＤＭＦ　０．４ｍｌ溶液を、エチニルトリメチルシラン０．３５ｍｌ（２．５ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ　１．８７ｍｌのＤＭＦ　１．５ｍｌ溶液で、８０℃で１時間処理した。同じ溶液を１時間かけて再び加え、４時間後、ペンタン（３×）／Ｈ２Ｏ（２×）で抽出した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させ、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（トルエン）を用いて精製し、（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン １−イル〕−５−トリメチルシラニルエチニル−ピリミジン０．０６３ｇ（９％）を得た、ＭＳ：６９４（ＭＨ＋）。
【０１３８】
ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン脱保護（Ｓ−脱保護の一般的方法、方法Ｄを参照）によって、（３Ｒ，５Ｓ）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−１−（５−トリメチルシラニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールを得た、ＭＳ：４５２（ＭＨ＋）。
【０１３９】
同様の方法にしたがって、以下の化合物を、（２Ｓ，４Ｒ）−５−ブロモ−２−〔２−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−イル〕−ピリミジンと以下の表２に記載の２．抽出物との反応を通して調製した。
【０１４０】
【表２】
2004504317.tif 000012
【０１４１】
実施例５：Ｓ−アセチル−誘導体化
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−チオール（トリフルオロ−アセタート塩を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液／ＥｔＯＡｃで抽出した）３９７ｍｇ（１ｍｍｏｌ）のピリジン６ｍｌ溶液を、塩化アセチル０．１４ｍｌ（２ｍｍｏｌ）で０℃で処理し、室温で５時間攪拌した。反応を氷水に注ぎ、Ｅｔ２Ｏで抽出した（３×）。有機相を、１Ｎ　ＨＣｌおよび１０％ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／Ｅｔ２Ｏ　１００：０〜９５：５）に付して、（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−５−（２，４，５−トリフルオロ−ベンジルオキシメチル）−ピロリジン−３−イル〕エステル３８３ｍｇ（８７％）を得た、ＭＳ：４４０（ＭＨ＋）。
【０１４２】
実施例６：アミン類
ａ）ＣＨ２Ｃｌ２　８０ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−ヒドロキシメチル−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル２５．０ｇ（５２．５６ｍｍｏｌ）に、０℃でＴＦＡ　４０ｍｌを加え、その溶液を室温で一晩攪拌した。溶液を真空で濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃに再び溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。（２Ｓ，４Ｒ）−（４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イル）メタノール２１．９８ｇ（定量）を明褐色の泡状物として単離した。
【０１４３】
ｂ）粗生成物を、２−クロロ−５−ｎ−プロピルピリミジン１６．４６ｇ（１０５．１ｍｍｏｌ、２当量）およびＮ−エチルジイソプロピルアミン３０ｍｌ（１７５ｍｍｏｌ、３．３当量）中で懸濁させ、混合物を８０℃に加熱した。すべてが溶解した後、ヨウ化銅３５０ｍｇ（１．８４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を一晩８０℃に保った。室温に冷却した後、混合物をＥｔＯＡｃ／Ｈ２Ｏで希釈し、水溶液をＥｔＯＡｃで抽出した。合せた有機層を、１Ｍ　ＫＨＳＯ４、１Ｍ　ＨＣｌ、およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（１：４〜１：１）を用いてフラッシュクロマトグラフィーで精製し、（２Ｓ，４Ｒ）−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イル〕−メタノール１９．１ｇ（７４％）を明黄色の泡状物として得た、ＭＳ：４９６（ＭＨ＋）。
【０１４４】
ｃ）ＴＨＦ　１５ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イル〕−メタノール）１．０ｇ（２．０ｍｍｏｌ）を、トリフェニルホスフィン７６４ｍｇ（２．８２ｍｍｏｌ）およびフタルイミド４２０ｍｇ（２．８２ｍｍｏｌ）を用いて室温で処理した。溶液を０℃に冷却し、ＴＨＦ　３ｍｌ中のジエチルアゾジカルボキシラート６１５μｌ（３．８３ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で一晩攪拌し、Ｈ２Ｏを加え、無機層をＥｔＯＡｃで抽出した。合せた層を、１Ｍ　ＮａＯＨ、飽和ＮａＨＣＯ３溶液、およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。ＥｔＯＡｃ：ヘキサン　１：２を溶出剤として用いたカラムクロマトグラフィーに付して、（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−イソインドール−１，３−ジオン１．２０ｇ（９５％）を白色の固形として得た、ＭＳ：６２５（ＭＨ＋）。
【０１４５】
ｄ）エタノール９５ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−２−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルチル〕−イソインドール−１，３−ジオン９６０ｍｇ（１．５２ｍｍｏｌ）を、ヒドラジン水和物２．４ｍｌ（４９．４ｍｍｏｌ）で還流下処理した。室温に冷却した後、溶液を濾過し、濃縮し、粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ　９０：１０：０．２５を用いたフラッシュクロマトグラフィーで精製し、（２Ｓ，４Ｒ）−Ｃ−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イル〕−メチルアミン６５９ｍｇ（８８％）を白色の泡状物として得た、ＭＳ：４９５（ＭＨ＋）。
【０１４６】
ｅ）メタノール３ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−Ｃ−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イル〕−メチルアミン６４３ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）に、２，５−ジフルオロベンズアルデヒド１５８μｌ（１．４３ｍｍｏｌ）と、部分的に化合物を再溶解するためメタノール５ｍｌを加えた。続いて、塩化亜鉛１０８ｍｇ（０．７８ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ３ＣＮ　１０９ｍｇ（１．５６ｍｍｏｌ）のメタノール３ｍｌ溶液を加えた。溶液を一晩攪拌し、濃縮し、ＥｔＯＡｃ／飽和ＮａＨＣＯ３溶液に溶解した。無機層をＥｔＯＡｃで抽出し、合せた有機層をＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。カラムクロマトグラフィーで精製し、（２Ｓ，４Ｒ）−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−アミン７５０ｍｇ（９３％）を明黄色のガム状物として得た、ＭＳ：６２１（ＭＨ＋）。
【０１４７】
ｆ）ピリジン２ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−アミン１６０ｍｇ（０．２５８ｍｍｏｌ）を、０℃で、塩化アセチル３７μｌ（０．５２ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を室温で１．５時間攪拌し、氷水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合せた有機層を、１Ｎ　ＨＣｌおよびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。ＥｔＯＡｃ：ヘキサン　１：２〜１：１を用いたカラムクロマトグラフィーに付して、（２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−Ｎ−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−アセトアミド１７０ｍｇ（定量）を白色の泡状物として得た。
【０１４８】
ｇ）（２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−Ｎ−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−アセトアミドから、一般手順Ｅと同様に、（２Ｓ，４Ｒ）−Ｎ−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−Ｎ−〔４−メルカプト−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−２−イルメチル〕−アセトアミドを無色のガム状物として調製した、ＭＳ：４２１（ＭＨ＋）。
【０１４９】
ｈ）（２Ｓ，４Ｒ）−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−アミンから、一般手順Ｅと同様に、（２Ｓ，４Ｒ）−５−〔２，５−ジフルオロ−ベンジルアミノ〕−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオールを無色のガム状物として調製した、ＭＳ：３７９（ＭＨ＋）。
【０１５０】
ｉ）ピリジン１ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−５−〔（２，５−ジフルオロ−ベンジルアミノ）−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−チオール５０ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ）を、０℃で、塩化アセチル２８μｌ（０．３９ｍｍｏｌ）で処理した。溶液を室温で１．５時間攪拌し、氷水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合せた有機層を、１Ｎ　ＨＣｌおよびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。ＥｔＯＡｃ：ヘキサン　１：１〜２：１を用いたカラムクロマトグラフィーに付して、（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔５−〔〔アセチル−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−アミノ〕−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イル〕エステル５４ｍｇ（８８％）をオフホワイト色のガム状物として得た、ＭＳ：４６３（ＭＨ＋）。
【０１５１】
ｊ）ＣＨ２Ｃｌ２　６．５ｍｌ中の（２Ｓ，４Ｒ）−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−アミン２２０ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）を、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン７４μｌ（０．４３ｍｍｏｌ）、クロロベンジルホルマート６３μｌ（０．４３ｍｍｏｌ）、および結合ＤＭＡＰポリマー２６．６ｍｇ（０．０４３ｍｍｏｌ）で０℃で５分、室温で１時間処理した。ポリマー結合トリスアミン２１２ｍｇ（０．２１２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を一晩振とうした。濾過および濃縮により、（２Ｓ，４Ｒ）−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−〔１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−４−トリチルスルファニル−ピロリジン−２−イルメチル〕−カルバミン酸ベンジルエステル３３１ｍｇ（定量）を白色の泡状物として得、それを手順Ｅにしたがって処理し、（２Ｓ，４Ｒ）−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−〔４−メルカプト−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−２−イルメチル〕−カルバミン酸ベンジルエステルを無色の泡状物として得た、ＭＳ：５１３（ＭＨ＋）。
【０１５２】
ｋ）（２Ｓ，４Ｒ）−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−〔４−メルカプト−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−２−イルメチル〕−カルバミン酸ベンジルエステルから、実施例６ｇと同様に、（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔５−〔〔ベンジルオキシカルボニル−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−アミノ〕−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イル〕エステルを調製した。
【０１５３】
ｌ）ＥＥ　５ｍｌ中の（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔５−〔〔ベンジルオキシカルボニル−（２，５−ジフルオロ−ベンジル）−アミノ〕−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イル〕−エステル１３７ｍｇ（２．５ｍｍｏｌ）に、酢酸中の３３％ＨＢｒ　３２０μｌを０℃で加えた。溶液を室温で１２時間攪拌し、ＮａＨＣＯ３に注ぎ、無機相をＥｔＯＡｃで抽出した。合せた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。ＥｔＯＡｃを溶出剤として用いたカラムクロマトグラフィーで精製し、（３Ｒ，５Ｓ）−チオ酢酸Ｓ−〔５−〔（２，５−ジフルオロ−ベンジルアミノ）−メチル〕−１−（５−プロピル−ピリミジン−２−イル）−ピロリジン−３−イル〕エステル６５ｍｇ（６３％）を無色の油状物として得た、ＭＳ：４２１（ＭＨ＋）。（表には記載していない）。
【０１５４】
実施例Ａ
以下の成分を含む錠剤を、従来の方法で製造できた：
【０１５５】
【表３】
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【０１５６】
実施例Ｂ
以下の成分を含むカプセルを、従来の方法で製造できた：
【０１５７】
【表４】
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【０１５８】
実施例Ｃ
注入溶液を、以下の組成にすることができた：
【０１５９】
【表５】
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【０１６０】
実施例Ｄ
式Ｉの化合物５００ｍｇを、マイグリオール（Ｍｙｇｌｙｏｌ）８１２　３．５ｍｌおよびベンジルアルコール０．０８ｇ中で懸濁させた。この懸濁液を、薬用量バルブを備えた容器に満たした。圧力下のフレオン（ｆｒｅｏｎ）１２　５．０ｇを、バルブを通して容器に満たした。フレオンを、マイグリオール−ベンジルアルコール混合物に振とうすることによって溶解した。このスプレー容器は、個々に適用できる約１００の単回用量分を有する。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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