(57)【要約】本発明は、細胞再生及び／又は細胞分化促進用組成物、特に医薬組成物の調製のための少なくとも１種の吸収剤と非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた少なくとも１種の化合物との組み合わせの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞再生及び／又は細胞分化促進用組成物、特に医薬組成物の調製のための、少なくとも１種の吸収剤と、非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた少なくとも１種の化合物との組み合わせの使用。
【請求項２】
前記組成物が、皮膚組織又は皮下組織の皺又は欠損を美容整形の目的で整形するための注入可能な形態であることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項３】
特に脊髄損傷後の神経組織の再生用、インターベンション若しくは損傷による骨組織欠損後の骨の再生用、又は変性系疾病若しくは外科的インターベンションに関連した欠損後の軟骨の再生用の組成物、特に医薬組成物の調製のための請求項１に記載の使用。
【請求項４】
特に火傷の手当及び治療用の組成物、特に医薬組成物の調製のための請求項１に記載の使用。
【請求項５】
特に褥瘡の予防用若しくは症状軽減用の組成物、特に医薬組成物の調製のための請求項４に記載の使用。
【請求項６】
特に固形状腫瘍の治療用の組成物、特に医薬組成物の調製のための請求項１に記載の使用。
【請求項７】
特に細胞培養プレートの底部を細胞の付着、分化、移動及び生育を促進する目的で処理するための組成物、特に医薬組成物の調製のための請求項１に記載の使用。
【請求項８】
非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた前記化合物が、キシロース、アラビノース、ラムノース、フコース、マニトール及びソルビトールからなる群から選ばれていることを特徴とする請求項１〜７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
非代謝性糖類がキシロース又はアラビノースであることを特徴とする請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
非代謝性糖類がキシロースであることを特徴とする請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
吸収剤が高分子化合物であることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２】
吸収剤がポリアクリレート、ポリメタクリレート、デキストラン、カルボキシビニルポリマー又はアルギン酸塩であることを特徴とする請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
吸収剤がアルギン酸ナトリウム、グアーガム、ポリアクリル酸、カルボキシビニルポリマー又はカルボキシメチルセルロースであることを特徴とする請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
吸収剤がカルボキシビニルポリマーであることを特徴とする請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記組成物が粉末の形態で提供されることを特徴とする請求項１、３〜１４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１６】
前記組成物が、抗生物質、殺菌剤及びコルチコステロイドからなる群から選ばれた１種以上の薬剤を含有することを特徴とする請求項１〜１５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１７】
前記吸収剤と、非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた前記化合物が、同時に投与されるもの、別々に投与されるもの、又は時間をずらして投与されるものであることを特徴とする請求項１〜１６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１８】
前記組成物が、非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた１種以上の前記化合物５０〜９５wt％と、前記吸収剤５〜５０wt％とを含有することを特徴とする請求項１〜１７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１９】
前記組成物が、非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた１種以上の前記化合物８０〜９５wt％と、前記吸収剤５〜２０wt％とを含有することを特徴とする請求項１〜１８のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、少なくとも１種の吸収剤と非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた少なくとも１種の化合物との組み合わせの使用、特に細胞再生及び／又は細胞分化の促進、就中、治癒の促進、好ましくは褥瘡治癒の促進用の組成物、特に医薬組成物の調製のための該組み合わせの使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
先行技術として、糖類を褥瘡の治療、特に細菌感染対策に使用できることが報じられている。また、褥瘡患部からの滲出物を吸収させる目的で親水性高分子を褥瘡の治療に使用し得ることを指摘した先行技術も見出される。
【０００３】
以下に紹介する先行技術は、下記非特許文献１からの抜粋である。
【非特許文献１】
バルロア、コラン及びデスジョベール（B. Barrois, D. Colin, S. Desjobert）共著，「褥瘡−病状の評価と手当て（L'escarre - evaluation et prise en charge ）」，（仏国），フリゾン・ロシュ（FRISON-ROCHE）出版
【０００４】
褥瘡は、皮下組織の局所虚血による局部的な組織壊死領域である。褥瘡発生の主な理由は、骨質の隆起部と体外表面との間で柔らかい組織が長期間に亘って圧迫されることにある。
【０００５】
一般に、褥瘡の発生は、上記のような体外表面の長時間の圧迫が皮膚と皮下組織に加わるということによって、或いはこれによって引き起こされる組織の酸素欠乏症ないし無酸素症という現象によって説明されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかるに、褥瘡には幅広い臨床的な異質混交性が存在すること、また患者の一部、例えば高齢者や脊髄損傷を受けた者、或いは昏睡性の患者などでは、褥瘡の発現を単に看護不足と組織圧迫増加との重なりの結果と見なすことはできないという知見が得られた。例えば、一部の患者、特に集中治療室に入っている患者においては、圧迫部位以外の領域に局部的な褥瘡が発現することがしばしば認められた。
【０００７】
圧迫以外に、他の内因的な因子が役割を演じていることも知られている。これらの因子としては、古典的には剪断、浸軟、感染、及び栄養欠乏がある。
【０００８】
剪断は、主として長期間に亘って半ば座った姿勢のままでいる患者に見られるもので、高血圧と擦れによる接線方向の力との重なりで引き起こされる。
【０００９】
浸軟はしばしば高体温の結果として引き起こされ、過度の不感発汗や発汗作用の増加をもたらし、時には括約筋の失調を伴うこともある。
【００１０】
病原菌の感染も役割を演じており、これは、患者が免疫欠損に陥る場合があるので、更に決定的な因子となり得る。
【００１１】
栄養欠乏は、組織の蛋白質再生、組織へのエネルギー基質補給、及びビタミンや微量栄養素の欠乏に発現する。内因性悪液質の発現、特に糖尿病の発現は、こうしたあらかじめ存在する情況を悪化させ得るものに過ぎない。
【００１２】
褥瘡を治療するために種々の製品及び技術が提案されており、主なものを以下に示す。
【００１３】
フィルム状の手当用品は薄く透明でしなやかな伸展可能シートであり、非滲出性の褥瘡の手当に使用される。
【００１４】
油脂含浸型手当用品はチュールやガーゼにワセリンを含浸して作られ、更に抗生物質、殺菌剤、或いはコルチコステロイドを含有する場合もある。これら油脂含浸型手当用品の最大の欠点は、滲出物を制御する効果に乏しいことである。
【００１５】
これに対して親水性コロイドは滲出物を吸収し、ゲル化する一方で湿潤な環境を維持する。この種の製品が抱えている問題は、滲出物に接触するとコロイドが崩壊を起こし、悪臭を発生することである。
【００１６】
アルギン酸塩は強い吸収力を有し、褥瘡に伴う傷の滲出物が非常に多い場合に有用である。
【００１７】
ヒドロゲルは吸収力がアルギン酸塩には及ばないが、その保湿力は治癒段階の前の壊死領域浄化段階には極めて有用である。欠点は高価なことである。
【００１８】
ヒドロセル発泡体（hydrocellulaires）は極めて吸収性に富み、しかも系の崩壊なしに滲出物を制御する。但し造粒が必要である。
【００１９】
また糖類を滲出物吸収の目的で褥瘡に施用することは治療法としても用いられてきた。しかしながら、この治療法には特に患者が糖尿病を患っている場合には欠点があり、それは、患者の血糖濃度が上昇することの他に、これらの患者においては治癒に悪影響があることが認められているからである。これらの患者の褥瘡に伴う傷に糖類を施用すると、結果として傷の治癒過程で上記の悪影響が増幅されることになるものと考えられる。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
驚くべきことに、培養細胞を使用して行ったインビトロ試験において、１種以上の吸収剤と非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた１種以上の化合物とを含む組み合わせが極めて強力に細胞の分化ならびに組織の再生を促進し、しかも前述の欠点を一切示さないことを実証することができた。
【００２１】
従って本発明では、細胞再生及び／又は細胞分化促進用組成物、特に医薬組成物の調製のための１種以上の吸収剤と非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた１種以上の化合物とを含む組み合わせの使用を提案するものである。
【００２２】
この組成物とは、まず第１に医療用品、より具体的には包帯に類する手当用品たるべく意図されたものである。本発明に関する限りにおいて、「非代謝性の糖質」なる語は、そのままではエネルギー源として人体で利用され得ない糖質を意味する。
【００２３】
特に本発明は、１種以上の吸収剤と非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた１種以上の化合物とを含む組み合わせを、組成物、特にヒト若しくは獣を対象とする医学における組織再生用の医薬組成物の調製に使用することを提案するものである。このような組成物の応用例を挙げれば以下の通りである。
【００２４】
・美容整形の目的で皮膚組織又は皮下組織の皺や欠損を補うための注入。
・神経組織の再生：脊髄損傷治療。
・骨の再生：インターベンション（介入）処置若しくは損傷後の骨組織欠損の治療。
・軟骨の再生：変性系疾病又は外科的インターベンションに関連して生じた欠損の治療。
・火傷の手当。
・治療一般、特に褥瘡の予防及び手当。
【００２５】
本発明はまた、１種以上の吸収剤と非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた１種以上の化合物とを含む組み合わせを、組成物、特に医学若しくは実験生物学における細胞分化促進用の医薬組成物の調製に使用することも提案するものであり、このような組成物の応用例としては以下に挙げるものがある。
【００２６】
・固形状腫瘍の治療。
・細胞培養プレートの底部の処理：細胞の付着、分化、移動及び生育の促進を目的とし、同一目的に供せられるが使用するには遙かに高価で且つ万能性に劣るマトリックス（例えばコラーゲン、フィブロネクチン、ポリリシン又はラミニン、或いは市販されているこれら物質の種々の配合品）を代替するもの。
・褥瘡の手当と予防を含む治療一般。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
本発明において、非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれる化合物としては、キシロース、アラビノース、ラムノース、フコース、マニトール及びソルビトールからなる群から選ぶことが好ましい。更に好ましくは該化合物はキシロース又はアラビノースであり、砂糖代用品としてヒト用の食餌に広く使用され、無害であることが実証されているキシロースが特に有利である。
【００２８】
吸収剤は好ましくは高分子化合物であり、特にポリアクリレート類、ポリメタクリレート類、デキストラン類、アルギン酸塩類、及びカルボキシビニルポリマーのうちから選ぶことができる。
【００２９】
高分子化合物としてはアクリル系ポリマーが有利である。
【００３０】
特に、吸収剤として用いられる高分子化合物は、カルボキシビニルポリマー（いわゆるカルボマー）、アルギン酸ナトリウム、グアーガム、ポリアクリル酸、カルボキシメチルセルロース、寒天、アガロース、キサンタンガム、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ポリ（メタクリル酸メチル）、及びアクリルアミド・アクリル酸共重合物のうちから選ぶことができる。これらのうち、カルボキシビニルポリマー（カルボマー）、アルギン酸ナトリウム、及びカルボキシメチルセルロースのうちから選ぶのが特に有利である。
【００３１】
この高分子化合物は、カルボキシビニルポリマー（カルボマー）とすると更に有利である。
【００３２】
本発明による組成物は、粉末形態で提供することが好ましい。このように粉末の形態で製剤すると、先行技術に基づく各種製剤の施用よりも容易に施用することができ、しかも施用に伴う痛みが少ないという長所が得られる。また、粉末形態で本発明により提供される組成物は、細菌の生存に不可欠な水分を奪ってしまうことと、滲出物の適切な吸収が可能であることと、更には大きな浸透圧が得られるという複合効果によって強力な消毒性を示すという長所ももつことになる。
【００３３】
本発明による組成物は、５０〜９５wt％、好適には８０〜９５wt％の範囲の非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた１種以上の化合物と、５〜５０wt％、好適には５〜２０wt％の範囲の吸収剤とを構成要素として含むことが好ましい。
【００３４】
またこの組成物は、抗生物質、殺菌剤、コルチコステロイド等から選ばれる付加的な薬剤を含有することもできる。
【００３５】
以上に述べた他に、本発明による組成物の効能は、吸収剤と、非代謝性糖類及びポリオール類のうちから選ばれた化合物とを同時に投与するか、別々に投与するか、或いは投与時期をずらして投与するかを問わず一定であることも確認されている。
【００３６】
以下に示す各実施例は例示であり、本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００３７】
継代培養細胞系に由来するメラニン形成細胞（melanocytes）の移動（migration）、付着（fixation）及び細胞分化に対してカルボキシビニルポリマー（カルボマー 914）とキシロースとの配合物が及ぼす効果の実証試験
【００３８】
カルボマー 914とキシロースとの1：9（重量比）混合物に蒸留水を加え、１wt％に希釈したものをベースとする水性ゲルによって６個のウェルを持つ培養プレートをコーティングした。水性ゲルは予め形成されたものを１Ｎの水酸化ナトリウム溶液でｐＨ7.00に中和し、120℃のオートクレーブ内で20分間、滅菌処理した。
【００３９】
得られた滅菌ゲルを、34μg/mLのゲンタマイシンを添加したリン酸緩衝生理食塩水（PBS buffer）により無菌的な態様で１／３に希釈した。この希釈ゲルを１mLずつ各ウェルに注加し、無菌空気の層流下で１夜放置して乾燥した。
【００４０】
次いで接種は、M4Beu細胞系（ヤクボビッチ、カルビラ、ゲリエール、バイリー及びドーレ（R.Jacubovich, H.Cabrillat, D.Gerlier, M.Bailly et J.F.Dore）共著，「活性抗腫瘍メカニズムによるヌードマウス確定法におけるヒト・メラノーマ細胞系の腫瘍形成形質（Tumourigenic phenotypes of human melanoma cell lines in nude mice determine by an active antitumor mechanism）」，ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・カンサー（Br. J. of Cancer）発行(英国)1985年，Vol.51，335〜345頁参照）から得たメラニン形成細胞50,000個を、10％の子牛血清、１％のビタミン溶液（シグマ社製Ｍ6895）、１％のピルビン酸ナトリウム溶液（シグマ社製Ｍ8636）、１％のアミノ酸溶液（Ｍ7145）、及び50μg/mLのゲンタマイシンを含有するMEM培地３mLに懸濁させた液を用いて実行した。
【００４１】
培養は37℃でCO2 濃度５％の恒温器内で行った。その後、培養細胞の成長を観察した。
【００４２】
対照試験は、各ウェルの底部にコーティングを施さないで同様に実施した。
【００４３】
カルボキシビニルポリマーとキシロースの混合物の場合は顕著な細胞分化が観察され、この分化に伴って組織の形成を連想させるような細胞塊の形成が見られた。
【００４４】
またアルギン酸ナトリウムとカルボキシメチルセルロースについては、それらだけで用いる場合にも、或いはキシロースとの組み合わせで用いる場合にも、かなり良好な分化が観察された。更にキシロースの代わりにアラビノースを使用しても好結果が得られた。
【００４５】
これらの結果は細胞の形態に基づいて視覚化可能であるが、メラニン形成細胞によるメラニン合成で細胞分化の良好なマーカーが与えられるので、この合成によっても検証される。
【実施例２】
【００４６】
褥瘡の手当におけるポリアクリレートとキシロースから成る配合物の効果の実証試験
【００４７】
この試験は20名の患者で行われ、患者のうちの４名は踵部分に褥瘡ができており、残り16名は仙骨部分に褥瘡ができていた。
【００４８】
踵に生じた褥瘡は、治療開始時で直径１〜３cmの大きさであった。仙骨部分の褥瘡は直径４〜12cmの大きさであった。仙骨部分の褥瘡のうちの２例は、病変の底部に仙骨が見えるほどのものであった。これらの褥瘡は、全て滲出物の多い症状を呈していた。
【００４９】
手当は、いずれも90wt％のキシロースと10wt％のポリアクリレートを含有する１種類の粉末状配合物を用い、朝夕の１回ずつ病変の内側の表面全体を約２mm厚の粉末層で被覆するかたちで施用する方法とした。
【００５０】
治療開始から１週間後、患者全員に例外なく、褥瘡直径が75〜100％縮小し、痛みの完全な消失も観察された。
【００５１】
踵に生じていた褥瘡は10日以内に完全に消失し、痛みや痒みを伴わない僅かな炎症の所見を残したのみであった。
【００５２】
深さが最小の仙骨部褥瘡の１１例はいずれも直径４〜６cmのものであったが、これら褥瘡は２週間以内に殆ど完全に治癒し、そのうち３例は有るか無しかの炎症を伴う僅かな窪みが残っただけであり、残りの８例の褥瘡に至っては炎症さえ一切認められなかった。
【００５３】
仙骨部褥瘡のうち最も重症の５例は完全に消失こそしなかったが、傷の内側における上皮形成は２週間以内に完了した。最終的な傷跡が規則的又は不規則的或いは目立つものや目立たないものなど、さまざま形状で仕方なく残ったが、治療開始時に見られた患部組織の欠損よりは遙かに小さな窪みであり、病変部の直径は75〜85％も縮小することが認められた。
【国際公開パンフレット】
2004523521.tif 000002
2004523521.tif 000003
2004523521.tif 000004
2004523521.tif 000005
2004523521.tif 000006
2004523521.tif 000007
2004523521.tif 000008
2004523521.tif 000009
2004523521.tif 000010
2004523521.tif 000011
2004523521.tif 000012
2004523521.tif 000013
2004523521.tif 000014
2004523521.tif 000015
2004523521.tif 000016
2004523521.tif 000017
【手続補正書】
【提出日】平成15年9月16日(2003.9.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
細胞再生及び／又は細胞分化促進用組成物、特に医薬組成物の調製のための、少なくとも１種の吸収剤と、非代謝性糖類のうちから選ばれた少なくとも１種の化合物との組み合わせの使用。
【国際調査報告】
2004523521.tif 000018
2004523521.tif 000019
2004523521.tif 000020
2004523521.tif 000021
2004523521.tif 000022
2004523521.tif 000023