(57)【要約】本発明は新規キノロンおよびウロテンシンアンタゴニストとしてのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2004515507.tif 000006
［式中：
Ｒ１はフェニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンズヒドリル、キサンテニル、ナフチルまたはインドリルであり、そのすべては、ハロゲン、−ＣＮ、ＣＨ３ＣＯ−、（Ｃ１−６）アルキル、モノ〜ペルフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ５−１０）アリールオキシ、フェニルＣ（１−６）アルコキシ、−ＯＨ、−ＮＨ２、モノ−またはジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６）アルキル、−Ｓ（Ｃ１−６）アルキル、−ＳＯ２（Ｃ１−６）アルキル、Ｈ２ＮＳＯ２−、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２（Ｃ５−１０）アリールまたは−ＣＯ２Ｎ｛（Ｃ１−６）アルキル｝２から選択される１つまたは２つの置換基により置換されているか、または非置換であり；
Ｒ２は水素またはＭｅであり；
Ｒ３は水素、Ｉ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−ＯＨまたは−ＣＮであり；
Ｘは−ＣＨ（Ｒ４）−であり；
Ｒ４は水素、ＣＯ、Ｃ１−６アルキルまたはフェニルであり；
Ｙは−ＣＨ２Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）ＣＨ２−であり；
Ｒ５は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジルまたはフェニルであり、ここにベンジルまたはフェニル基は１つまたは２つのカルボキシ、シアノ、ＯＨまたはハロ基により置換されているか、または非置換であってもよく；
Ｒ６はベンジル、Ｃ３−６シクロアルキルまたはフェニルであり、ここにベンジルまたはフェニル基は１つまたは２つのカルボキシ、シアノ、ＯＨまたはハロ基により置換されているか、または非置換であってもよく；
または、Ｒ５およびＲ６は結合している炭素原子で一緒になって、Ｃ３−７シクロアルキル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１が置換フェニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンズヒドリルまたはインドリルであり；Ｒ２が水素であり；Ｒ３が水素、ハロまたはアルキルであり；ＸがＣＨ２であり；およびＹがＣＨ２ＣＲ５Ｒ６ＣＨ２である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が１−ベンジル−３−インドリル、４，６−ジクロロ−２−インドリル、３−トリフルオロメチルチオフェニル、２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、４，６−ジクロロ−３−メチル−２−インドリル、６−メトキシ−４−トリフルオロメチル−２−インドリル、３，４−ジクロロフェニル、３，５−ジブロモフェニルであり；Ｒ２が水素であり；Ｒ３が水素、ＣｌまたはＭｅであり；ＸがＣＨ２であり；およびＹがＣＨ２ＣＲ５Ｒ６ＣＨ２である請求項２記載の化合物。
【請求項４】
２−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−２−フェニル−プロピルアミノ｝−１Ｈ−キノリン−４−オン；および２−［（１−｛［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−メチル｝−シクロヘキシルメチル）−アミノ］−１Ｈ−キノリン−４−オンから選択される請求項１記載の化合物。
【請求項５】
請求項１の式（Ｉ）で示される化合物および医薬上許容される担体または賦形剤を含有する医薬組成物。
【請求項６】
ウロテンシン−ＩＩ受容体を拮抗することによるウロテンシン−ＩＩ不均衡に付随する疾患の治療方法であって、該治療を必要とする患者に請求項１の式Ｉで示される化合物を投与することを含む方法。
【請求項７】
疾患が鬱血性心不全、卒中、虚血性心疾患、狭心症、心筋虚血、心臓不整脈、本態性高血圧、肺高血圧、ＣＯＰＤ、再狭窄、喘息、神経性炎症、代謝血管傷害、中毒、統合失調症、衝動、不安症、ストレス、鬱病、神経筋機能または糖尿病である請求項６記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、一般的には、新規キノロン、およびウロテンシンＩＩのアンタゴニストとしてのそれらの使用に関する。
【０００２】
（背景技術）
心血管恒常性の完全な制御は、直接神経制御および全身性神経ホルモン活性化の両方の組み合わせを介してなされる。収縮および弛緩因子の両方の結果として起こる放出は、通常、ストリンジェントな調節下にあるが、この現状の逸脱により、病理学的結果を伴う心臓血流力学的機能不全が生じうる。
この神経液性軸を含む主な哺乳類の血管作用因子、すなわちアンギオテンシン−ＩＩ、エンドセリン−１、ノルエピネフリンは、すべて特異的なＧ−タンパク質結合受容体（ＧＰＣＲ）との相互作用を介して機能する。ウロテンシン−ＩＩはこの神経液性軸の新規な一員である。
【０００３】
魚において、このペプチドは種々の終末器官系および組織において、有意な血流力学的作用および内分泌作用を有する：
・平滑筋収縮
原因としての血管および非血管の両方は、胃腸管および尿生殖路からの平滑筋調製物を含む。昇圧剤および降圧剤の両方の活性が、外因性ペプチドの全身性投与で記載されている。
・浸透圧調節：
経上皮イオン（Ｎａ＋、Ｃｌ−）トランスポートの調節を含む効果。利尿効果が記載されているが、該効果は直接的な腎血管性効果（高いＧＦＲ）に二次的であると仮定される。
・代謝：
ウロテンシン−ＩＩは、魚において、プロラクチン分泌に影響を及ぼし、脂肪分解効果を示す（トリアシルグリセロ−ルリパ−ゼを活性化することにより、非エステル化遊離脂肪酸の移動を生じされる）。
（Ｐｅａｒｓｏｎら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．（Ｕ．Ｓ．Ａ．）１９８０、７７、５０２１；Ｃｏｎｌｏｎら、Ｊ． Ｅｘｐ． Ｚｏｏｌ． １９９６、２７５、２２６．）
【０００４】
ヒトウロテンシン−ＩＩの研究において、それは：
・極めて強力かつ有効な血管収縮剤であり、
・流出に対して極めて耐性のある持続性収縮活性を示し、
・心臓能力に有害な影響（心筋収縮性）を有する
ことが見出された。
【０００５】
ヒトウロテンシン−ＩＩは、ラット単離大動脈における収縮活性に関して評価され、今日まで同定されているもっとも強力な収縮アゴニストであることが示された。ヒトウロテンシン−ＩＩのインビトロ薬理学およびインビボ血流力学的プロフィールに基いて、それは過度のまたは異常な血管収縮および心筋機能障害により特徴付けられる心血管疾患において病理学的役割を果たす（Ａｍｅｓら Ｎａｔｕｒｅ １９９９、４０１、２８２）。
ウロテンシン−ＩＩ受容体を拮抗する化合物は鬱血性心不全、卒中、虚血性心疾患 （狭心症、心筋虚血）、心臓不整脈、高血圧（本態性および肺）、ＣＯＰＤ、再狭窄、喘息、（Ｈａｙ ＤＷＰ、Ｌｕｔｔｍａｎｎ ＭＡ、Ｄｏｕｇｌａｓ ＳＡ： ２０００、Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ：印刷中）神経性炎症および代謝性血管症の治療に有用であり、そのすべての疾患は異常な血管収縮および／または心筋機能障害よって特徴付けられる。Ｕ−ＩＩおよびＧＰＲ１４は、両方とも哺乳類のＣＮＳ内で発現するので（Ａｍｅｓら Ｎａｔｕｒｅ １９９９、４０１、２８２）、また、それらは中毒、統合失調症、衝動、不安症、ストレス、鬱病および神経筋機能の治療に有用でありうる。機能的Ｕ−ＩＩ受容体は、横紋筋肉腫細胞系において発現し、したがって、腫瘍適用性を有しうる。また、ウロテンシンは糖尿病のような種々の代謝性疾患に関係しうる（Ａｍｅｓら Ｎａｔｕｒｅ １９９９、４０１、２８２、Ｎｏｔｈａｃｋｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １：３８３−３８５、１９９９）。
【０００６】
（発明の開示）
一の態様において本発明はキノロンおよびそれらを含む医薬組成物を提供する。
第２の態様において、本発明はウロテンシン−ＩＩのアンタゴニストとしての、およびウロテンシン−ＩＩの阻害剤としてのキノロンの使用を提供する。
他の態様において、本発明はウロテンシン−ＩＩ不均衡に付随する症状を治療するためのキノロンの使用を提供する。
さらなる他の態様において、本発明は鬱血性心不全、卒中、虚血性心疾患 （狭心症、心筋虚血）、心臓不整脈、高血圧（本態性および肺）、ＣＯＰＤ、再狭窄、喘息、神経性炎症および代謝性血管症、中毒、統合失調症、衝動、不安症、ストレス、鬱病および神経筋機能および糖尿病の治療のためのこれらのキノロンアナログの使用を提供する。
【０００７】
ウロテンシンアンタゴニストを単独で、またはエンドセリン受容体アンタゴニスト、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、バソペプチダ−ゼ阻害剤、利尿薬、ジゴキシン、ならびに二重非選択的β−アドレナリン受容体およびα１−アドレナリン受容体アンタゴニストから成る群から選択される１つ以上の治療剤とともに投与することができる。
本発明の他の態様および利点を以下の本発明の好ましい具体例の詳細な説明でさらに記載する。
【０００８】
（発明の詳細な説明）
本発明は式Ｉ：
【化２】
2004515507.tif 000002
［式中：
Ｒ１はフェニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンズヒドリル、キサンテニル、ナフチルまたはインドリルであり、これらの全ては非置換であるか、またはハロゲン、−ＣＮ、ＣＨ３ＣＯ−、（Ｃ１−６）アルキル、モノ〜ペルフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ５−１０）アリールオキシ、フェニルＣ（１−６）アルコキシ、−ＯＨ、−ＮＨ２、モノ−またはジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６）アルキル、−Ｓ（Ｃ１−６）アルキル、−ＳＯ２（Ｃ１−６）アルキル、Ｈ２ＮＳＯ２−、−ＣＯＮＨ２、−ＳＯ２（Ｃ５−１０）アリールまたは−ＣＯ２Ｎ｛（Ｃ１−６）アルキル｝２から成る群から選択される１つまたは２つの置換基により置換されており；
Ｒ２は水素またはＭｅであり；
Ｒ３は水素、Ｉ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−ＯＨまたは−ＣＮであり；
Ｘは−ＣＨ（Ｒ４）−であり；
Ｒ４は水素、ＣＯ、Ｃ１−６アルキルまたはフェニルであり；
Ｙは−ＣＨ２Ｃ（Ｒ５）（Ｒ６）ＣＨ２−であり；
Ｒ５は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、ベンジルまたはフェニルであり、ここにベンジルまたはフェニル基は、カルボキシ、シアノ、ＯＨまたはハロ基から選択される１つまたは２つにより置換されているか、または非置換であってもよく；
Ｒ６はベンジル、Ｃ３−６シクロアルキルまたはフェニルであり、ここにベンジルまたはフェニル基は、非置換であるか、またはカルボキシ、シアノ、ＯＨまたはハロ基から選択される１つまたは２つにより置換されていてもよく；
または、Ｒ５およびＲ６は、それらが結合している炭素で一緒になって、Ｃ３−７シクロアルキル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩を提供する。
【０００９】
本明細書において用いられる場合、「アルキル」および「アルコキシ」のような同様の用語は、全ての直鎖および分枝鎖異性体を含む。その代表的な例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルが挙げられる。
本明細書において用いられる場合、「ハロゲン」および「ハロ」成る用語は、各々、フッ素、塩素、ブロモおよびヨウ素、およびフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨウドを含む。
本明細書において用いられる「アリール」なる用語は、特記しない限り、サイクリックまたはポリサイクリック芳香族Ｃ５−Ｃ１２環を意味する。例としてはフェニルおよびナフチルが挙げられる。
【００１０】
本発明の化合物は、１つ以上の不斉炭素原子を含んでいてもよく、ラセミ体および光学活性形態で存在できる。これらの化合物およびこれらのジアステレオマーの全ては、本発明の範囲内に含まれる。
好ましくは、Ｒ１は置換フェニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンズヒドリルまたはインドリルである。より好ましくは、Ｒ１は１−ベンジル−３−インドリル、４，６−ジクロロ−２−インドリル、３−トリフルオロメチルチオフェニル、２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル、４，６−ジクロロ−３−メチル−２−インドリル、６−メトキシ−４−トリフルオロメチル−２−インドリルまたは３，４−ジクロロフェニル、３，５−ジブロモフェニルである。
好ましくは、Ｒ２は水素である。
好ましくは、Ｒ３は水素、ハロまたはアルキルであり、より好ましくは、Ｒ３は水素、ＣｌまたはＭｅである。
好ましくは、ＸはＣＨ２である。
好ましい化合物は：
２−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−２−フェニル−プロピルアミノ｝−１Ｈ−キノリン−４−オン；および２−［（１−｛［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−メチル｝−シクロヘキシルメチル）−アミノ］−１Ｈ−キノリン−４−オンである。
【００１１】
式（Ｉ）で示される化合物は、以下のスキームに説明するように調製できる：
【化３】
2004515507.tif 000003
【００１２】
スキーム１に概説するように、２，４−ジヒドロキシキノリン（１）を硫酸ジメチルでメチル化し、ついでトリフルオロ酢酸無水物で処理して中間体２を得た（ＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＥＰ９９／０２６４８を参照のこと）。２−フェニル−プロパン−１，３−ジアミンをモノ保護して（Ｗｅｉｎｈａｒｄｔら、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９８５， ２８， ６９４）アミン３を得た。還流温度のアセトニトリル中で２とアミン３をカップリングしてウレタン４を得た。ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を除去し、同時に還流温度で濃塩酸でキノリンをキノロンに変換し、ついで得られたアミンを種々のアルデヒドで還元アルキル化して目標の化合物５を得た。
別法として、スキーム２に概説するように、２を種々のアミノプロピルアミドとカップリングすることもできる。アミドカルボニルをボラン−テトラヒドロフランで還元し、ついで、酸性条件下でキノリンをキノロンに変換してアミン１１を得た。
【００１３】
【化４】
2004515507.tif 000004
【００１４】
１−シアノ−シクロヘキサンカルボン酸エチルエステル（Ｊｕｌｉａら、Ｂｕｌｌ． Ｓｏｃ． Ｃｈｉｍ． Ｆｒ． １９６９， ２４２７）を対応するアミドにアンモニアガスを用いて変換し、ついで水素化してアミド７を得た。２を還流温度でアセトニトリル中でアミド７でカップリングしてウレタン８を得、ついでボラン還元してアミン９を得た。キノリンを還流温度で濃塩酸でキノロンに変換し、ついで得られたアミンを種々のアルデヒドで還元アルキル化して目標の化合物１１を得た。
【００１５】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩をヒトおよび他の哺乳類の治療用に使用するために、該化合物は、通常、標準的な製薬慣習に従って医薬組成物として処方される。
式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの医薬上許容される塩は、示した疾患の治療に関する標準的方法で、例えば、経口、非経口、舌下、経皮、直腸、吸入またはバッカル投与で投与することができる。
【００１６】
経口投与した場合に活性である、式（Ｉ）で示される化合物およびそれらの医薬上許容される塩は、シロップ、錠剤、カプセルおよびロゼンジとして処方することができる。シロップ処方は、一般には、香料または着色剤を含む、液体担体、例えば、エタノール、ピーナッツ油、オリーブ油、グリセリンまたは水中の該化合物または塩の懸濁液もしくは溶液から成るだろう。組成物が錠剤の形態である場合、固体処方の調製に慣用的に用いられるいずれの医薬担体も使用することができる。該担体の例として、ステアリン酸マグネシウム、テラアルバ、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸、デンプン、ラクトースおよびシュークロースが挙げられる。組成物がカプセルの形態である場合、例えば、上記の担体をハードゼラチンカプセル殻中に用いる、いずれの慣用的なカプセル化が適当である。組成物がソフトゼラチン殻カプセルの形態である場合、分散液または懸濁液を調製するために慣用的に用いられるいずれの医薬担体、例えば、水性ガム、セルロース、ケイ酸塩または油が考えられ、ソフトゼラチンカプセル殻に組み入れる。
【００１７】
典型的な非経口組成物は、所望により、非経口的に許容される油、例えば、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、ラッカセイ油またはごま油を含んでいてもよい滅菌水性または非水性担体中の化合物または塩の溶液または懸濁液から成る。
【００１８】
吸入用の典型的な組成物は乾燥粉末として投与することができる溶液、懸濁液またはエマルジョンの形態、または慣用的な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタンまたはトリクロロフルオロメタンを用いるエアロゾルの形態である。
典型的な坐剤処方は、この方法で投与する場合に活性である、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を、結合剤および／または滑沢剤、例えば高分子グリコール、ゼラチン、カカオ脂または他の低融点植物性ワックスまたはそれらの合成類似物と一緒に含む。
典型的な経皮処方は、慣用的な水性または非水性ビヒクル、例えば、クリーム、軟膏、ロ−ションまたはペーストを含むか、または薬用の硬膏、パッチまたは膜の形態である。
【００１９】
好ましくは組成物は単位投与形態、例えば錠剤、カプセルまたは定量エアロゾルであり、したがって、患者は自身の単回投与量を投与することができる。
経口投与に関する各々の投与量単位は、適当には、０．１ｍｇ〜５００ｍｇ／Ｋｇ、好ましくは１ｍｇ〜１００ｍｇ／Ｋｇの式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算した）を含有し、非経口投与に関する各々の投与量単位は適当には０．１ｍｇ〜１００ｍｇを含有する。鼻腔内投与に関する各々の投与量単位は、適当には人あたり１〜４００ｍｇ、および好ましくは１０〜２００ｍｇを含有する。局所処方は、適当には、０．０１〜１．０％の式（Ｉ）で示される化合物を含有する。
経口投与に関する１日の投与量は、適当には、約０．０１ｍｇ／Ｋｇ〜４０ｍｇ／Ｋｇの式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算した）である。非経口投与に関する１日の投与量は、適当には、約０．００１ｍｇ／Ｋｇ〜４０ｍｇ／Ｋｇの式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩（遊離酸として計算した）である。鼻腔内投与および経口吸入に関する１日の投与量は、適当には、約１０〜約５００ｍｇ／人である。活性成分は、所望の活性を示すのに十分であるように１日１〜６回投与することができる。
【００２０】
これらのキノロンは、鬱血性心不全、卒中、虚血性心疾患（狭心症、心筋虚血）、心臓不整脈、高血圧（本態性および肺）、ＣＯＰＤ、再狭窄、喘息、神経性炎症および代謝血管傷害、中毒、統合失調症、衝動、不安症、ストレス、鬱病、神経筋機能および糖尿病の治療に使用されうる。
本発明の化合物を本発明に従って投与する場合、許容できない毒物学的効果は考えられない。
【００２１】
式（Ｉ）で示される化合物の生物学的活性を次の試験により測定する：
【００２２】
放射性リガンド結合：
安定なクロ−ン化ヒトおよびラットＧＰＲ−１４（２０μｇ／アッセイ）を含む、ＨＥＫ−２９３細胞膜を、２００ｐＭ［１２５Ｉ］ｈ−Ｕ−ＩＩ（２００Ｃｉ／ｍｍｏｌ−１）と一緒に、ＤＭＳＯ中で増加する濃度（０．１ｎＭ〜１０μＭ）の試験化合物の存在下、最終インキュベーション容量２００μｌ（２０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、５ｍＭのＭｇＣｌ２）でインキュベートした。インキュベーションを室温で３０分間行い、ついで、ブランデルセルハーベスターを用いてＧＦ／Ｂフィルターで濾過した。１２５Ｉで標識化したＵ−ＩＩ結合を、ガンマ計数により定量した。非特異性結合は、１００ｎＭの非標識ヒトＵ−ＩＩの存在下で、１２５ＩＵ−ＩＩ結合により定義した。デ−タ解析を非線形最小２乗法フィッティングにより行った。
【００２３】
Ｃａ２＋移動：
マイクロタイタープレート基盤Ｃａ２＋移動ＦＬＩＰＲアッセイ（モレキュラデバイス、Ｓｕｎｎｙｃａｌｅ、ＣＡ）を、（安定な）組換えＧＰＲ−１４を発現するＨＥＫ−２９３細胞を活性化するリガンドの機能的同定に用いた。トランスフェクションの次の日、細胞をポリ−Ｄ−リジンコートされた９６ウェル黒色／透明プレートにて平板培養した。１８〜２４時間後、培地を吸引し、Ｆｌｕｏ３ＡＭ−負荷細胞を種々の濃度（１０ｎＭ〜３０μＭ）の試験化合物に曝し、ついでｈ−Ｕ−ＩＩに曝した。アッセイを開始した後、蛍光を１分間は毎秒、ついで次の１分間は３秒毎に読み取った。５０％の阻害濃度（ＩＣ５０）を種々の試験化合物について計算した。
【００２４】
イノシトールリン酸アッセイ：
Ｔ１５０フラスコ中のＨＥＫ−２９３−ＧＰＲ１４細胞を、イノシトール不含ダルベッコ修飾イーグル培地の１ｍｌあたり１μＣｉ ｍｙｏ−［３Ｈ］イノシトールで一晩予備標識した。標識後、細胞をダルベッコリン酸緩衝液生理食塩水（ＤＰＢＳ）で２回洗浄し、ついで、１０ｍＭのＬｉＣｌを含むＤＰＢＳ中で、３７℃で１０分間インキュベートした。実験を試験化合物の不在下および３種類の異なる濃度（０．３、１および１０μＭ）の試験化合物存在下で、増加する濃度のｈ−Ｕ−ＩＩ（１ｐＭ〜１μＭ）を添加することにより開始し、インキュベーションを３７℃でさらに５分間続け、その後、１０％（最終濃度）のトリクロロ酢酸を添加し、遠心分離することにより反応を停止した。上清を１００μｌの１Ｍのトリズマ（Ｔｒｉｚｍａ）塩基で中和し、イノシトールリン酸をギ酸塩相においてＡＧ１−Ｘ８カラム（０．８ｍｌ充填、１００〜２００メッシュ）で分離した。イノシトール一リン酸を、８ｍｌの２００ｍＭのギ酸アンモニウムで溶出した。合したイノシトール二および三リン酸を４ｍｌの１Ｍのギ酸アンモニウム／０．１Ｍギ酸で溶出した。溶出したフラクションをベータシンチレーションカウンターで計数した。対照曲線からのシフトに基づいてＫＢを計算した。
本発明の化合物の活性は、８ｎＭ〜１μＭの範囲である。
以下の実施例は、本発明の化合物を説明するものであって、限定するものではない。
【００２５】
実施例１
２−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−２−フェニル−プロピルアミノ｝−１Ｈ−キノリン−４−オンの調製
ａ）２−ヒドロキシ−４−メトキシキノリン
アセトン（８００ｍｌ）中の２，４−ジヒドロキシキノリン（２０．７ｇ、０．１３ｍｏｌ）、炭酸カリウム（３５．５ｇ、０．２６ｍｏｌ）および硫酸ジメチル（１４．６ｍｌ、０．１５ｍｏｌ）のスラリーを３日間加熱還流した。反応物を外界温度まで冷却し、ついで減圧下で蒸発させた。残渣を、１時間、水（１０００ｍｌ）および酢酸エチル（５００ｍｌ）系に懸濁させた。固体を回収し、ついで水（３×２５０ｍｌ）およびエチルエーテル（３×２５０ｍｌ）で洗浄した。五酸化リンで減圧乾燥して２−ヒドロキシ−４−メトキシキノリン（１６．３ｇ、７２％）を黄褐色粉末として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋１７６、Ｍ＋ＣＨ３ＣＮ＝２１７。
【００２６】
ｂ）１，１，１−トリフルオロメタンスルホン酸４−メトキシキノリン−２−イルエステル
ピリジン（７５ｍｌ）中の２−ヒドロキシ−４−メトキシキノリン（１３．４ｇ、７６．６ｍｍｏｌ）のスラリーを、アルゴン雰囲気下で、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１５．５ｍｌ、９１．２ｍｍｏｌ）でゆっくりと処理した。反応物を外界温度で撹拌した。４日後、反応物を減圧下で蒸発させて油とし、これをトルエン（２×２００ｍｌ）と共沸させて褐色固体として粗生成物を得た。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（溶出液として１：１の酢酸エチル／ヘキサン）に付して、１，１，１−トリフルオロメタンスルホン酸４−メトキシキノリン−２−イルエステル（２０．４ｇ、８７％）を黄色の油として得、これを放置して固体とした。［Ｍ＋Ｈ］＋３０８、Ｍ＋ＣＨ３ＣＮ＝３４９。
【００２７】
ｃ）（３−アミノ−２−フェニル−プロピル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
乾燥テトラヒドロフラン（７０ｍＬ）中の２−フェニル−プロパン−１，３−ジアミン（２．２０ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却し、３０分間テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の重炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．３３当量、４．８８ｍｍｏｌ、１．１０ｇ）の溶液で処理した。混合物を室温に加温し、一晩撹拌した。ついで、粘性のあるスラリーを濃縮して白色残渣を得、これを酢酸エチル中に抽出した。有機抽出物をブライン（２×）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して無色の油（１．１６ｇ、９５％）として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋２５１。
【００２８】
ｄ）［３−（４−メトキシキノリン−２−イルアミノ）−２−フェニル−プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
無水アセトニトリル（１０ｍｌ）中の１，１，１−トリフルオロメタンスルホン酸４−メトキシキノリン−２−イルエステル（１．０８ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）、（３−アミノ−２−フェニル−プロピル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０当量、３．５２ｍｍｏｌ、０．８８ｇ）およびジイソプロピルエチルアミン（２．５当量、８．８０ｍｍｏｌ、１．５３ｍＬ）の溶液を３日間加熱還流した。溶液を外界温度に冷却し、ついで減圧下で蒸発させて、黄色残渣を得た。これを水（３５ｍｌ）中に溶解し、ついで酢酸エチル中に抽出した。抽出液を乾燥（硫酸ナトリウム）し、ついで濃縮して橙色油を得た。シリカゲルのカラムクロマトグラフィー（１：３の酢酸エチル／ヘキサン〜１：２の酢酸エチル／ヘキサンの勾配）に付して生成物（０．５４ｇ、３８％）を白色泡沫固体として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋４０８。
【００２９】
ｅ）２−（３−アミノ−２−フェニル−プロピルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジヒドロクロライド
濃塩酸（２５ｍＬ）中の［３−（４−メトキシキノリン−２−イルアミノ）−２−フェニル−プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．２１ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液を２４時間加熱還流した。減圧下で蒸発させ、トルエンと共沸して生成物を得、これを直接次の工程に用いた。
【００３０】
ｆ）２−｛３−［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−２−フェニル−プロピルアミノ｝−１Ｈ−キノリン−４−オン
メタノール（５０ｍｌ）中の２−（３−アミノ−２−フェニル−プロピルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジヒドロクロライド（工程１ｅ、粗）の溶液を、氷酢酸（２０滴）およびナトリウムメトキシド（９５％、５５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）、ついでメタノール（５．０ｍｌ）中の１−ベンジル−３−インドールカルボキシアルデヒド（１２０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。反応物を外界温度で２４時間撹拌し、ついでメタノール（５．０ｍｌ）中のシアノホウ化水素ナトリウム（６４ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を外界温度で２４時間撹拌した。溶液を減圧下で蒸発させて残渣を得、これを飽和塩化ナトリウム水溶液（３０ｍｌ）および１０％の水酸化ナトリウム水溶液（３０ｍｌ）の混合物中に溶解した。これを酢酸エチルに抽出し、抽出液を乾燥（硫酸ナトリウム）し、ついで濃縮して白色残渣を得た。シリカゲルのカラムクロマトグラフィー（９５／５のジクロロメタン／メタノール性アンモニア）に付して標題化合物（１２４ｍｇ、４７％）を白色固体として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋５１３。
【００３１】
実施例２
２−［（１−｛［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−メチル｝−シクロヘキシルメチル）−アミノ］−１Ｈ−キノリン−４−オンの調製
ａ）１−シアノ−シクロヘキサンカルボン酸アミド
１−シアノ−シクロヘキサンカルボン酸エチルエステル（１１．４ｇ、６３．０ｍｍｏｌ）をガラスの圧力容器中に入れ、−７８℃に冷却した。これをニードルを通して総容量が２倍になるまでアンモニアで満たした。容器をシールし、室温で２０時間撹拌した。溶媒を蒸発させて、得られたスラリーを酢酸エチルでトリチュレートした。固体を濾過により回収し、ついでシリカ漏斗（５０ｇのシリカ）を通して濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮して生成物（２．５１ｇ、２６％）を白色固体として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋１５３。
【００３２】
ｂ）１−アミノメチル−シクロヘキサンカルボン酸アミド塩酸塩
エタノール（５０ｍＬ）中の１−シアノ−シクロヘキサンカルボン酸アミド（２．３４ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の溶液を濃ＨＣｌ（３ｍＬ）および１０％の炭素担持デグッサパラジウム（０．５０ｇ）で処理した。混合物を水素条件（５０ｐｓｉ）に２４時間付し、ついでセライトを通して濾過した。濾液を濃縮し、ついでメタノールと共沸させて粘性油を得た。ついで、油を再び水素条件下にさらに２０時間付した。これを濾過し、上記のように濃縮して生成物を（３．８５ｇ、１００％）白色固体として得た［Ｍ＋Ｈ］＋１５７。
【００３３】
ｃ）１−［（４−メトキシ−キノリン−２イル−アミノ）−メチル］−シクロヘキサンカルボン酸アミド
（３−アミノ−２−フェニル−プロピル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりに１−アミノメチル−シクロヘキサンカルボン酸アミド塩酸塩を用いること以外は、実施例１ｄの方法に従って、生成物（２．１１ｇ、５９％）を白色固体として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋３１４。
【００３４】
ｄ）１−（アミノメチル−シクロヘキシルメチル）−（４−メトキシ−キノリン−２−イル）−アミンジヒドロクロライド
無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の１−［（４−メトキシ−キノリン−２イル−アミノ）−メチル］−シクロヘキサンカルボン酸アミド（１．８１ｇ、５．７９ｍｍｏｌ）の溶液を２４時間加熱還流した。これを室温に冷却し、濃塩酸（１．５ｍＬ）でゆっくりと処理した。混合物をさらに１時間撹拌し、ついで濃縮して湿った残渣を得た。これを１０％の水酸化ナトリウム（３５ｍＬ）およびブライン（３５ｍＬ）中に溶解し、酢酸エチル中に抽出した。橙色有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥Ｎａ２ＳＯ４し、濾過し、濃縮した。得られた黄色の油を塩化メチレン（２０ｍＬ）中に溶解し、ジオキサン（３ｍＬ）中の４ＮのＨＣｌで処理した。これを濃縮して生成物（２．１０ｇ、９７％）を黄色固体として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋３００。
【００３５】
ｅ）２−［（１−アミノメチル−シクロヘキシルメチル）−アミノ］−１Ｈ−キノリン−４−オンジヒドロクロライド
１−（アミノメチル−シクロヘキシルメチル）−（４−メトキシ−キノリン−２−イル）−アミンジヒドロクロライド（１．１９ｇ、３．２０ｍｍｏｌ）を濃塩酸（３５ｍＬ）中に溶解し、２０時間加熱還流した。これを室温に冷却し、濃縮した。湿った残渣をトルエンと共沸させ、生成物（１．１５ｇ、１００％）を黄褐色粉末として得た。［Ｍ＋Ｈ］＋２８６。
【００３６】
ｆ）２−［（１−｛［（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−アミノ］−メチル｝−シクロヘキシルメチル）−アミノ］−１Ｈ−キノリン−４−オン
２−（３−アミノ−２−フェニル−プロピルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンの代わりに２−［（１−アミノメチル−シクロヘキシルメチル）−アミノ］−１Ｈ−キノリン−４−オンジヒドロクロライドを用いること以外は、実施例１ｆの方法に従って標題化合物（０．０９８ｇ、２５％）を無色の油として得、これを静置して固体とした。［Ｍ＋Ｈ］＋５０５。
【００３７】
実施例３
本発明の化合物を組み入れた医薬的に用いるための処方は、多くの賦形剤と共に種々の形態に調製できる。該処方の例を以下に挙げる。
【００３８】
吸入処方
式Ｉの化合物（１ｍｇ〜１００ｍｇ）を定量吸入器量でエアロゾル化し、望ましい量の使用量をデリバリーする。
【００３９】
【表１】
2004515507.tif 000005
【００４０】
錠剤の製造法：
工程１：適当な混合器／撹拌器中で成分Ｎｏ．１、Ｎｏ．２、Ｎｏ．３およびＮｏ．４を混合する工程。
工程２：各々の添加後に混合しながら、十分な水を工程１からの混合物に注意深く分割して添加する。ついで、塊が粘性となり、湿った顆粒に変換することが可能になるまで水を添加し、混合する工程。
工程３：湿った塊をＮｏ．８メッシュ（２．３８ｍｍ）スクリーンを用いる振動顆粒化装置に通すことにより顆粒に変換する工程。
工程４：ついで、湿った顆粒を１４０°Ｆ（６０℃）のオーブンで乾燥する工程。
工程５：乾燥顆粒を成分Ｎｏ．５で潤滑する工程。
工程６：潤滑した顆粒を適当な錠剤圧縮器で圧搾する工程。
【００４１】
非経口処方
非経口投与用の医薬組成物を、ポリエチレングリコール中に適量の式（Ｉ）で示される化合物を加熱して溶解することにより調製する。ついで、この溶液を注射用（ヨーロッパ薬局方）の水（１００ｍｌまで）で希釈する。ついで、溶液を０．２２ミクロン膜フィルターを通して濾過することにより滅菌し、滅菌容器中にシールする。
【００４２】
上記明細書および実施例は、本発明の化合物の製造法および使用法を完全に開示する。しかしながら、本発明は、上記した特定の具体例に限定されるものではなく、上記特許請求の範囲の範囲内のすべてのその修飾物を含む。本明細書に示した雑誌、特許および他の刊行物は、出典明示により本明細書に組み入れる。
【国際公開パンフレット】
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2004515507.tif 000008
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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