(57)【要約】本発明は、経口投与されたエポチロン類の生物学的利用能を増大させる方法に関する。本発明の方法によって投与されたエポチロン類は、薬理学的効果を発揮するのに十分な生物学的利用能を持つ。さらに本発明は、本発明の方法で使用される医薬組成物、医薬剤形、およびキットに関する。
2004528287.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
経口投与されたエポチロン類の生物学的利用能を増大させる方法であって、式：
【化１】
2004528287.tif 000020
［式中、
Gは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクロ、
【化２】
2004528287.tif 000021
からなる群より選択され、
Wは、OまたはNR16であり、
Xは、O；S；CHR17；またはH,R18であり、
Yは、O；H,H；H,OR22；OR23,OR23；NOR24；H,NOR25；H,HNR26R27；NHNR28R29；H,NHNR30R31またはCHR32（ここにOR23,OR23は環状ケタールであってもよい）からなる群より選択され、
B1およびB2は、H、OR33、OCOR34、OCONR35R36、NR37R38、またはNR39CONR40R41からなる群より選択され、
Dは、NR42R43またはヘテロシクロからなる群より選択され、
R1、R2、R3、R4、およびR5は、H、低級アルキルから選択され、
R8、R9、R10およびR11は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロまたは置換ヘテロシクロからなる群より選択され、
R17、R18、R22、およびR23は、H、アルキル、および置換アルキルからなる群より選択され、
R24、R25、R26、R28、R30、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R39、R40、R41、R42、R51、R52、R53、およびR61は、H、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールの群から選択され、
R12、R16、R27、R29、R31、R38、およびR43は、H、アルキル、置換アルキル、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロ、R51C＝O、R52OC＝O、R53SO2、ヒドロキシ、およびO-アルキルまたはO-置換アルキルからなる群より選択される］
で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを経口投与し、次いで1つまたは複数の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を経口投与することから成る増大法。
【請求項２】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤がエポチロン類と同時に投与される、請求項１の方法。
【請求項３】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤がエポチロン類の前に投与される、請求項１の方法。
【請求項４】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤がエポチロン類の前、約1時間以内に投与される、請求項３の方法。
【請求項５】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤がエポチロン類の後に投与される、請求項１の方法。
【請求項６】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤がエポチロン類の後、約1時間以内に投与される、請求項５の方法。
【請求項７】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤がエポチロン類の前および後に投与される、請求項１の方法。
【請求項８】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が、エポチロン類が投与される前、約1時間以内、およびエポチロンが投与された後、約1時間以内に投与される、請求項７の方法。
【請求項９】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が、少なくとも約20ミリ当量の酸中和容量を放出するのに十分な量で投与される、請求項１の方法。
【請求項１０】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が約5〜9のpHを持つ水溶液として投与される、請求項１の方法。
【請求項１１】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が、無水第二リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム二水和物、および無水クエン酸を含む水溶液として投与される、請求項１の方法。
【請求項１２】
水溶液のpHが約7である、請求項１１の方法。
【請求項１３】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの生物学的利用能が少なくとも約20パーセントである、請求項１の方法。
【請求項１４】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグが、プロピレングリコールおよびエタノール中の溶液として経口投与され、プロピレングリコール：エタノールの比が約80：20である、請求項１の方法。
【請求項１５】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグが約0.05〜約200mg/kg/日の総量で投与される、請求項１の方法。
【請求項１６】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグが約2〜4回に分割して投与される、請求項１５の方法。
【請求項１７】
エポチロン類が[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾリル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオンである、請求項１の方法。
【請求項１８】
（a）無水第二リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム二水和物、および無水クエン酸を含む医薬的に許容できる酸中和緩衝剤の水溶液を経口投与し、
（b）1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物、もしくはプロドラッグをプロピレングリコールの溶液として経口投与し、次いで
（c）無水第二リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム二水和物、および無水クエン酸を含む医薬的に許容できる酸中和緩衝剤の水溶液を経口投与する
ことから成る、請求項１の方法。
【請求項１９】
エポチロン類が[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾリル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオンである、請求項１８の方法。
【請求項２０】
経口投与されたエポチロン類の生物学的利用能を増大させる方法に使用するためのキットであって、
（i）式：
【化３】
2004528287.tif 000022
［式中、
Gは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクロ、
【化４】
2004528287.tif 000023
からなる群より選択され、
Wは、OまたはNR16であり、
Xは、O；S；CHR17；またはH,R18であり、
Yは、O；H,H；H,OR22；OR23,OR23；NOR24；H,NOR25；H,HNR26R27；NHNR28R29；H,NHNR30R31またはCHR32（ここにOR23,OR23は環状ケタールであってもよい）からなる群より選択され、
B1およびB2は、H、OR33、OCOR34、OCONR35R36、NR37R38、またはNR39CONR40R41からなる群より選択され、
Dは、NR42R43またはヘテロシクロからなる群より選択され、
R1、R2、R3、R4、およびR5は、H、低級アルキルから選択され、
R8、R9、R10およびR11は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロまたは置換ヘテロシクロからなる群より選択され、
R17、R18、R22、およびR23は、H、アルキル、および置換アルキルからなる群より選択され、
R24、R25、R26、R28、R30、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R39、R40、R41、R42、R51、R52、R53、およびR61は、H、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールの群から選択され、
R12、R16、R27、R29、R31、R38、およびR43は、H、アルキル、置換アルキル、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロ、R51C＝O、R52OC＝O、R53SO2、ヒドロキシ、およびO-アルキルまたはO-置換アルキルからなる群より選択される］
で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを含む第1成分、および
（ii）医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を含む第2成分、
を含み、第1成分および第2成分が経口剤形として、または溶媒で再構成させて液体経口剤にすることができる医薬組成物として供給されるキット。
【請求項２１】
第1成分または第2成分の少なくとも1つが固形経口剤形として供給される、請求項２０のキット。
【請求項２２】
第1成分または第2成分の少なくとも1つが無水である、請求項２１のキット。
【請求項２３】
第1成分または第2成分の少なくとも1つが、溶媒で再構成させて液体経口剤形にすることができる医薬組成物として供給される、請求項２０のキット。
【請求項２４】
第1成分または第2成分の少なくとも1つが錠剤として供給される、請求項２３のキット。
【請求項２５】
第1成分または第2成分の少なくとも1つが無水である、請求項２３のキット。
【請求項２６】
第1成分または第2成分を再構成させるための溶媒をさらに含む、請求項２３のキット。
【請求項２７】
第1成分を再構成させるための溶媒がプロピレングリコールとエタノールとの混合物である、請求項２６のキット。
【請求項２８】
哺乳動物への経口投与に適した医薬組成物であって、
（i）固体状の式：
【化５】
2004528287.tif 000024
［式中、
Gは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクロ、
【化６】
2004528287.tif 000025
からなる群より選択され、
Wは、OまたはNR16であり、
Xは、O；S；CHR17；またはH,R18であり、
Yは、O；H,H；H,OR22；OR23,OR23；NOR24；H,NOR25；H,HNR26R27；NHNR28R29；H,NHNR30R31またはCHR32（ここにOR23,OR23は環状ケタールであってもよい）からなる群より選択され、
B1およびB2は、H、OR33、OCOR34、OCONR35R36、NR37R38、またはNR39CONR40R41からなる群より選択され、
Dは、NR42R43またはヘテロシクロからなる群より選択され、
R1、R2、R3、R4、およびR5は、H、低級アルキルから選択され、
R8、R9、R10およびR11は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロまたは置換ヘテロシクロからなる群より選択され、
R17、R18、R22、およびR23は、H、アルキル、および置換アルキルからなる群より選択され、
R24、R25、R26、R28、R30、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R39、R40、R41、R42、R51、R52、R53、およびR61は、H、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールの群から選択され、
R12、R16、R27、R29、R31、R38、およびR43は、H、アルキル、置換アルキル、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロ、R51C＝O、R52OC＝O、R53SO2、ヒドロキシ、およびO-アルキルまたはO-置換アルキルからなる群より選択される］
で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグ、および
（ii）前記医薬組成物を溶媒で再構成させて液体経口剤形にした場合に、前記1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解を減少させるのに十分な量の、固形の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤、
を含む医薬組成物。
【請求項２９】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が約5〜9のpHを持つ液体経口剤形を与える、請求項２８の医薬組成物。
【請求項３０】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が少なくも約20ミリ当量の酸中和容量を与えるのに十分な量で存在する、請求項２８の医薬組成物。
【請求項３１】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が第二リン酸塩-クエン酸-クエン酸塩緩衝剤である、請求項２８の医薬組成物。
【請求項３２】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグが約0.05〜200mgの量で存在する、請求項２８の医薬組成物。
【請求項３３】
エポチロン類が[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾイル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオンである、請求項２８の医薬組成物。
【請求項３４】
請求項２８の医薬組成物および前記医薬組成物を再構成させて経口剤形にするための溶媒を含むキット。
【請求項３５】
溶媒がプロピレングリコール、エタノール、およびリン酸塩緩衝液（1M、pH8）を含む、請求項３４のキット。
【請求項３６】
プロピレングリコール：エタノール：リン酸塩緩衝液の比が約58：12：30である、請求項３５のキット。
【請求項３７】
（i）式：
【化７】
2004528287.tif 000026
［式中、
Gは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクロ、
【化８】
2004528287.tif 000027
からなる群より選択され、
Wは、OまたはNR16であり、
Xは、O；S；CHR17；またはH,R18であり、
Yは、O；H,H；H,OR22；OR23,OR23；NOR24；H,NOR25；H,HNR26R27；NHNR28R29；H,NHNR30R31またはCHR32（ここにOR23,OR23は環状ケタールであってもよい）からなる群より選択され、
B1およびB2は、H、OR33、OCOR34、OCONR35R36、NR37R38、またはNR39CONR40R41からなる群より選択され、
Dは、NR42R43またはヘテロシクロからなる群より選択され、
R1、R2、R3、R4、およびR5は、H、低級アルキルから選択され、
R8、R9、R10およびR11は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロまたは置換ヘテロシクロからなる群より選択され、
R17、R18、R22、およびR23は、H、アルキル、および置換アルキルからなる群より選択され、
R24、R25、R26、R28、R30、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R39、R40、R41、R42、R51、R52、R53、およびR61は、H、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールの群から選択され、
R12、R16、R27、R29、R31、R38、およびR43は、H、アルキル、置換アルキル、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロ、R51C＝O、R52OC＝O、R53SO2、ヒドロキシ、およびO-アルキルまたはO-置換アルキルからなる群より選択される］
で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグ、および
（ii）医薬的に許容できる液体担体、
を含む、哺乳動物への経口投与に適した液体経口剤形。
【請求項３８】
エポチロン類が[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾリル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオンである、請求項４１の液体経口剤形。
【請求項３９】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解を、当該緩衝剤を含まない医薬組成物と比較して減少させるのに十分な量の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤をさらに含む、請求項３７の液体経口剤形。
【請求項４０】
液体経口剤形のpHが約5〜9である、請求項３９の液体経口剤形。
【請求項４１】
緩衝剤が少なくとも約20ミリ当量の酸中和容量を与えるのに十分な量で存在する、請求項３９の液体経口剤形。
【請求項４２】
溶媒がプロピレングリコール、エタノール、およびリン酸塩緩衝剤でpH約8に緩衝処理された水である、請求項３７の液体経口剤形。
【請求項４３】
プロピレングリコール、エタノール、リン酸塩緩衝剤で緩衝処理された水が、約58：12：30の比で存在する、請求項４２の液体経口剤形。
【請求項４４】
エポチロン類が[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾリル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオンである、請求項４２の液体経口剤形。
【請求項４５】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグが約0.05〜200mgの量で存在する、請求項３７の液体経口剤形。
【請求項４６】
緩衝剤が第二リン酸塩-クエン酸-クエン酸塩緩衝剤である、請求項３９の液体経口剤形。
【請求項４７】
（a）液体または固体医薬の運搬に適した封印可能な容器、
（b）1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグ、および
（c）前記エポチロン類を経口的に放出するのに適した医薬的に許容できる担体、
を含む製品。
【請求項４８】
（i）式：
【化９】
2004528287.tif 000028
［式中、
Gは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクロ、
【化１０】
2004528287.tif 000029
からなる群より選択され、
Wは、OまたはNR16であり、
Xは、O；S；CHR17；またはH,R18であり、
Yは、O；H,H；H,OR22；OR23,OR23；NOR24；H,NOR25；H,HNR26R27；NHNR28R29；H,NHNR30R31またはCHR32（ここにOR23,OR23は環状ケタールであってもよい）からなる群より選択され、
B1およびB2は、H、OR33、OCOR34、OCONR35R36、NR37R38、またはNR39CONR40R41からなる群より選択され、
Dは、NR42R43またはヘテロシクロからなる群より選択され、
R1、R2、R3、R4、およびR5は、H、低級アルキルから選択され、
R8、R9、R10およびR11は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロまたは置換ヘテロシクロからなる群より選択され、
R17、R18、R22、およびR23は、H、アルキル、および置換アルキルからなる群より選択され、
R24、R25、R26、R28、R30、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R39、R40、R41、R42、R51、R52、R53、およびR61は、H、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールの群から選択され、
R12、R16、R27、R29、R31、R38、およびR43は、H、アルキル、置換アルキル、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロ、R51C＝O、R52OC＝O、R53SO2、ヒドロキシ、およびO-アルキルまたはO-置換アルキルからなる群より選択される］
で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグ、および
（ii）前記エポチロン類を吸収させるのに十分な時間、胃液を中和しておくのに適した緩衝剤成分、
を含む、分散可能な緩衝錠剤。
【請求項４９】
第1成分および第2成分が液体経口剤形として供給される、請求項２０のキット。
【請求項５０】
1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグが約0.05〜200mgの量で存在し、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が少なくも約20ミリ当量の酸中和容量を与えるのに十分な量で存在する、請求項４９のキット。
【請求項５１】
第1成分および第2成分が、溶媒で再構成させて液体経口剤形にすることができる医薬組成物として供給され、1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物、もしくはプロドラッグが約0.05〜200mgの量で存在し、かつ医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が少なくも約20ミリ当量の酸中和容量を与えるのに十分な量で存在する、請求項２０のキット。
【請求項５２】
エポチロン類が[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾイル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオンであり、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が第二リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、および無水クエン酸を含む、請求項２０のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の説明
本願は、仮特許出願第60/264,228号（2001年1月25日出願）および第60/290,019号（2001年5月11日出願）に基づく優先権を主張し、その全文を本願明細書に援用する。
【０００２】
本発明は生物学的利用能が増大するような形で患者にエポチロン類を経口投与する方法に関する。さらに本発明は、医薬組成物、医薬剤形、および本発明の方法に使用するキットに関する。特に本発明は、エポチロン類の固体経口剤形に関する。
【背景技術】
【０００３】
エポチロン類は医薬分野で有用な16員環状マクロライド分子である。例えばエポチロンAおよびBは、ある種の微生物から単離することができる天然化合物であるが、これら2つの化合物は次の構造を持っている。
【化１】
2004528287.tif 000003
エポチロンA  R＝H
エポチロンB  R＝Me
当技術分野にエポチロン類が紹介されて以来、多くのグループが、有用な医薬を開発しようとして、天然エポチロン類の類似体を設計し、合成し、試験してきた（例えばD.Schinzerら,Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 1997,36 No.3,523-524、K.C.Nicolaouら,J.Amer.Chem.Soc., 1997,119,7974-7991、K.C.Nicaloauら,Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 1996,35,No.20,2399-2401、A.Balogら,Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 1996,35,No.23/24,2801-2803などを参照されたい）。
【０００４】
既知のエポチロン類はTaxol（登録商標）と同様の微小管安定化効果を発揮し、それゆえに、癌および他の過剰増殖性細胞疾患で見られるような急速に増殖する細胞に対して細胞傷害活性を示す（Angew.Chem.Int.Ed.Engl., Vol.35,No.13/14,1996およびD.M.Bollag,Exp.Opin.Invest.Drugs, 6(7):867-873,1997を参照されたい）。
【０００５】
しかし、エポチロン類を使って患者の疾患を処置できるようにするには、まず、患者に投与することが可能な医薬組成物、例えば経口投与、経粘膜投与（例えば鼻腔、舌下、膣、口腔粘膜、または直腸投与）、非経口投与（例えば皮下、静脈内、ボーラス注射、筋肉内、または動脈内投与）、または経皮投与に適した剤形に、エポチロン類を製剤化しなければならない。経口投与用の製剤は他の製剤よりも便利で、投与が容易なので、経口投与用製剤は特に好ましい。また、経口投与経路により、非経口投与に伴う痛みおよび不快感が回避される。したがって、経口投与用製剤は患者に好まれ、その結果、患者による服薬スケジュールの遵守率が向上する。
【０００６】
しかし、経口製剤が有効であるためには、活性剤が生物学的利用能を持つ必要がある。経口投与された薬物の生物学的利用能は、例えば胃腸路全体での薬物吸収性、胃腸路における薬物の安定性、および初回通過効果など、様々な要因の影響を受ける。したがって、活性剤の効果的な経口送達には、活性剤が、胃および腸の内腔で、腸壁を通過するのに十分な安定性を持つことが必要である。しかし多くの薬物は、腸管内で迅速に分解するか、または腸管での吸収性が低い傾向を持つため、それらの薬物を投与する方法としては、経口投与は効果的な方法ではない。
【０００７】
経口投与用の医薬組成物は通例、固体剤形（例えば錠剤）または液体製剤（例えば溶液剤、懸濁剤、またはエリキシル剤）である。しかし、一部の患者集団は固体経口剤形の嚥下が肉体的または心理的に困難であるため、固体剤形では活性剤の医薬的使用に制限が加わる場合がある。もし液体剤形を利用できるのであれば、飲むことが可能な経口液体製剤の形で投与されることにより、または例えば経鼻胃管などによって投与されることにより、これらの患者は必要量の活性成分を、より容易に摂取することができるだろう。したがって液体経口剤形は望ましい。
【０００８】
液体経口医薬組成物には、活性剤を溶解または分散させて組成物を患者に投与できるようにするために、適切な溶媒系または担体系が必要である。溶媒系は活性剤に適合し、かつ患者にとって無毒性でなければならない。通例、液体経口製剤用の溶媒は水性溶媒である。
【０００９】
一部のエポチロン類は酸不安定性であるか、または経口溶液剤用の第1選択媒質である水性溶媒への可溶性に乏しいか、またはその両方の特徴を示すので、一部のエポチロン類では、その製剤化に際して、通常の障害の他にも課題が生じる。しかし、本発明はこれらの課題を克服し、エポチロン類が薬理学的効果を示すのに十分な生物学的利用能を持つような形でエポチロン類を経口投与するための方法および医薬製剤を提供するものである。
【００１０】
発明の概要
本発明は、胃腸系による（特に胃での胃液による）エポチロン類の分解（degradation/decomposition）または失活を低減または回避しつつ、哺乳動物にエポチロン類を経口的に放出（deliver）する方法を包含する。ある態様では、本方法は、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤に入れて、または医薬的に許容できる酸中和緩衝剤と共に、エポチロン類を投与することを包含する。好ましい一態様として、投与には、二つの溶液剤が使用され、その一方は活性エポチロン類を単独で含むかまたは医薬的に許容できる担体中に含み、他方は医薬的に許容できる中和緩衝剤を含む。
【００１１】
したがって本発明は、エポチロン類を、医薬的に許容できる溶液剤に構成または再構成（凍結乾燥した場合）させるのに適した固体の形で含むか、または既製の溶液剤として含む、医薬組成物を包含する。また本発明は、医薬的に許容できる中和緩衝剤を、医薬的に許容できる溶液剤に構成または再構成（凍結乾燥した場合）させるのに適した固体の形で含むか、または既製の溶液剤として含む、医薬組成物も包含する。
【００１２】
さらに具体的な一態様として、本発明は、経口投与されたエポチロン類の生物学的利用能を増大させる方法を対象とする。この方法では、式：
【化２】
2004528287.tif 000004
［式中、
Gは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクロ、
【化３】
2004528287.tif 000005
からなる群より選択され、
Wは、OまたはNR16であり、
Xは、O；S；CHR17；またはH,R18であり、
Yは、O；H,H；H,OR22；OR23,OR23；NOR24；H,NOR25；H,HNR26R27；NHNR28R29；H,NHNR30R31またはCHR32（ここにOR23,OR23は環状ケタールであってもよい）からなる群より選択され、
B1およびB2は、H、OR33、OCOR34、OCONR35R36、NR37R38、またはNR39CONR40R41からなる群より選択され、
Dは、NR42R43またはヘテロシクロからなる群より選択され、
R1、R2、R3、R4、およびR5は、H、低級アルキルから選択され、
R8、R9、R10およびR11は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロまたは置換ヘテロシクロからなる群より選択され、
R17、R18、R22、およびR23は、H、アルキル、および置換アルキルからなる群より選択され、
R24、R25、R26、R28、R30、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R39、R40、R41、R42、R51、R52、R53、およびR61は、H、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールの群から選択され、
R12、R16、R27、R29、R31、R38、およびR43は、H、アルキル、置換アルキル、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロ、R51C＝O、R52OC＝O、R53SO2、ヒドロキシ、およびO-アルキルまたはO-置換アルキルからなる群より選択される］
で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、水和物、包接体もしくはプロドラッグを経口投与し、次いで1つまたは複数の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を経口投与する。
【００１３】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、1つまたは複数のエポチロン類の投与と同時に、またはその投与前、投与後、もしくは投与前と投与後の両方に、投与することができる。活性エポチロン類の前に投与する場合は、エポチロン類を投与する前、1時間以内に、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を投与する。活性エポチロン類の後に投与する場合は、エポチロン類を投与した後、1時間以内に、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を投与する。
【００１４】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤溶液は、液体製剤であることができ、投与直前に構成させることができるが、これには、酸性溶液、特に胃液を一定期間中和する能力を持つ1つまたは複数の成分が含まれる。緩衝剤成分としては、例えば医薬的に許容できる弱酸、弱塩基、またはその混合物などが挙げられるが、これらに限るわけではない。緩衝剤成分は、好ましくは、リン酸、酒石酸、乳酸、コハク酸、クエン酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、塩酸、硫酸、グルタミン酸、およびその塩などの水溶性物質である。
【００１５】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、胃内の胃液を中和して、胃腸系によって吸収されるエポチロン類の量を増加させるのに十分な量で投与される。医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、約5〜9のpHを持つ水溶液として投与することができる。医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、無水第二リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム二水和物、および無水クエン酸の水溶液として投与することができる。
【００１６】
本発明は、経口投与されたエポチロン類の生物学的利用能を、中和緩衝剤なしで経口投与されたエポチロン類の生物学的利用能よりも、かなり高く増大させる。一態様として、1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの生物学的利用能は、少なくとも20パーセントである。1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグは、プロピレングリコール：エタノールの比が例えば約80：20であるプロピレングリコールおよびエタノール溶液として、経口投与することができる。
【００１７】
好ましいエポチロン類は、[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾイル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオンである。
【００１８】
本発明は、所望のエポチロン類および可溶性緩衝剤組成物を含むキットも包含する。本発明は、（a）経口投与に適したエポチロン類を含む医薬組成物、および（b）経口投与に適した酸中和緩衝剤を含む医薬組成物、を含むキットを包含する。
【００１９】
一態様として、キットは、
（i）式：
【化４】
2004528287.tif 000006
［式中、G、W、X、Y、B1、B2、D、R1、R2、R3、R4、R5、R8、R9、R10、R11、R12、R16、R17、R18、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40、R41、R42、R43、R51、R52、R53、およびR61は、上記の定義に従う］
で表される1つまたは複数のエポチロン類を含む第1成分と、
（ii）医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を含む第2成分、
とを含み、第1成分および第2成分は液体経口剤形として供給されるか、または溶媒で構成もしくは再構成させて液体経口剤にすることができる固体医薬組成物として供給される。
【００２０】
溶媒で再構成される医薬組成物は錠剤として供給することができる。第1成分または第2成分は無水であることができる。キットは所望により、第1成分または第2成分を再構成するための溶媒を含んでもよい。第1成分を再構成するための溶媒は、プロピレングリコール：エタノールの比が約80：20であるプロピレングリコールとエタノールとの混合物であることができる。
【００２１】
さらに本発明は、
（i）固体状の式：
【化５】
2004528287.tif 000007
［式中、G、W、X、Y、B1、B2、D、R1、R2、R3、R4、R5、R8、R9、R10、R11、R12、R16、R17、R18、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40、R41、R42、R43、R51、R52、R53、およびR61は、上記の定義に従う］
で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと、
（ii）当該医薬組成物を溶媒で再構成させて液体経口剤形にした場合に、前記1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解を減少させるのに十分な量の、固形の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤、
とを含む医薬組成物を対象とする。
【００２２】
詳細な説明
エポチロン類には薬理学上の利点があることから、これらの化合物を、それらが薬理学的効果を発揮するのに十分な生物学的利用能を持つような形で投与するための剤形および方法が必要とされている。具体的には、疾患を処置するのに十分な量のエポチロン類を送達することができる経口剤形、特に液体経口剤形が必要とされている。本発明は、一つには、式（Ia）または（Ib）：
【化６】
2004528287.tif 000008
［式中、
Gは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロシクロ、
【化７】
2004528287.tif 000009
からなる群より選択され、
Wは、OまたはNR16であり、
Xは、O；S；CHR17；またはH,R18であり、
Yは、O；H,H；H,OR22；OR23,OR23；NOR24；H,NOR25；H,HNR26R27；NHNR28R29；H,NHNR30R31またはCHR32（ここにOR23,OR23は環状ケタールであってもよい）からなる群より選択され、
B1およびB2は、H、OR33、OCOR34、OCONR35R36、NR37R38、またはNR39CONR40R41からなる群より選択され、
Dは、NR42R43またはヘテロシクロからなる群より選択され、
R1、R2、R3、R4、およびR5は、H、低級アルキルから選択され、
R8、R9、R10およびR11は、H、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロまたは置換ヘテロシクロからなる群より選択され、
R17、R18、R22、およびR23は、H、アルキル、および置換アルキルからなる群より選択され、
R24、R25、R26、R28、R30、R32、R33、R34、R35、R36、R37、R39、R40、R41、R42、R51、R52、R53、およびR61は、H、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールの群から選択され、
R12、R16、R27、R29、R31、R38、およびR43は、H、アルキル、置換アルキル、置換アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロ、R51C＝O、R52OC＝O、R53SO2、ヒドロキシ、およびO-アルキルまたはO-置換アルキルからなる群より選択される］
で表されるエポチロン類および医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、水和物、包接体またはプロドラッグが、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤と組み合わせて経口投与した場合に、薬理学的効果を発揮するのに十分な生物学的利用能を持つという発見に基づいている。したがって本発明は、式（Ia）もしくは（Ib）で表される1つまたは複数のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを経口投与すると共に、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を経口投与することによって、経口投与された式（Ia）または（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの生物学的利用能を増大させる方法を対象とする。また本発明は、本発明の方法で使用される医薬組成物、医薬剤形、およびキットに関する。
【００２３】
本発明の方法、組成物、および剤形に使用される好ましいエポチロン類は、下記式の[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾイル)エテニル]-17-オキサ-4-アザビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオン（「化合物(A)」）である。
【化８】
2004528287.tif 000010
【００２４】
定義
以下に本発明の説明に使用する様々な用語の定義を記載する。これらの定義は、個別に別段の表示がない限り、本明細書で使用される用語に適用される。
【００２５】
本明細書で使用する「アルキル」という用語は、炭素原子数1〜20、好ましくは炭素原子数1〜7の直鎖または分枝鎖無置換炭化水素基を表す。
【００２６】
本明細書で使用する「置換アルキル」という用語は、例えば、1〜4個の置換基、例えばハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ヒドロキシ、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロオキシ、オキソ、アルカノイル、アリールオキシ、アルカノイルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、ヘテロシクロアミノ、2つのアミノ置換基がアルキル、アリールまたはアラルキルから選択される二置換アミン、アルカノイルアミノ、アロイルアミノ、アラルカノイルアミノ、置換アルカノイルアミノ、置換アリールアミノ、置換アラルカノイルアミノ、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、アラルキルチオ、シクロアルキルチオ、ヘテロシクロチオ、アルキルチオノ、アリールチオノ、アラルキルチオノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アラルキルスルホニル、スルホンアミド（例えばSO2NH2）、置換スルホンアミド、ニトロ、シアノ、カルボキシ、カルバミル（例えばCONH2）、置換カルバミル（例えばCONHアルキル、CONHアリール、CONHアラルキル、または窒素上にアルキル、アリールまたはアラルキルから選択される2つの置換基が存在する場合）、アルコキシカルボニル、アリール、置換アリール、グアニジノおよびヘテロシクロ類、例えばインドリル、イミダゾリル、フリル、チエニル、チアゾリル、ピロリジニル、ピリジル、およびピリミジルなどで置換されたアルキル基を表す。上記の説明で置換基がさらに置換されているとした場合、それはハロゲン、アルキル、アルコキシ、アリールまたはアラルキルによる置換だろう。
【００２７】
本明細書で使用する「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を表す。
【００２８】
本明細書で使用する「アリール」という用語は、環部分に6〜12個の炭素原子を持つ単環式または二環式芳香族炭化水素基、例えばそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ナフチル、ビフェニルおよびジフェニル基などを表す。
【００２９】
本明細書で使用する「アラルキル」という用語は、アルキル基を介して直接結合しているアリール基、例えばベンジルなどを表す。
【００３０】
本明細書で使用する「置換アリール」という用語は、例えば、1〜4個の置換基、例えばアルキル、置換アルキル、フェニル、置換フェニル、ヘテロシクロ、ハロ、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロオキシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アラルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、ヘテロシクロアミノ、ジアルキルアミノ、アルカノイルアミノ、チオール、アルキルチオ、シクロアルキルチオ、ヘテロシクロチオ、ウレイド、ニトロ、シアノ、カルボキシ、カルボキシアルキル、カルバミル、アルコキシカルボニル、アルキルチオノ、アリールチオノ、アルキルスルホニル、スルホンアミド、およびアリールオキシなどで置換されたアリール基を表す。置換基は、ハロ、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、アリール、置換アリール、置換アルキルまたはアラルキルでさらに置換されていてもよい。
【００３１】
本明細書で使用する「シクロアルキル」という用語は、所望により置換されていてもよい飽和環式炭化水素環系を表し、好ましくは1〜3個の環と環1つにつき3〜7個の環炭素とを含み、それらの環はさらに不飽和C3〜C7炭素環式環と縮合していてもよい。代表的な基には、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシル、シクロドデシル、およびアダマンチルなどがある。代表的な置換基として、1つもしくは複数の上記アルキル基、またはアルキル置換基として上述した1つもしくは複数の基などが挙げられる。
【００３２】
本明細書で使用する「複素環」、「複素環式」および「ヘテロシクロ」という用語は、少なくとも1つの炭素原子含有環中に少なくとも1つのヘテロ原子を持つ、所望により置換されていてもよい完全飽和または不飽和芳香族または非芳香族環式基、例えば4〜15員系、または4〜7員単環式、7〜11員二環式、もしくは10〜15員三環式環系などを表す。ヘテロ原子を含む複素環式基の各環は、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選択される1、2または3個のヘテロ原子を持つことができ、その窒素および硫黄ヘテロ原子は所望により酸化されていてもよく、窒素ヘテロ原子は所望により4級化されていてもよい。複素環式基は任意のヘテロ原子または炭素原子に結合することができる。
【００３３】
代表的な単環式複素環基には、例えばピロリジニル、ピロリル、インドリル、ピラゾリル、オキセタニル、ピラゾリニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、フリル、テトラヒドロフリル、チエニル、オキサジアゾリル、ピペリジニル、ピペラジニル、2-オキソピペラジニル、2-オキソピペリジニル、2-オキソピロリジニル、2-オキサゼピニル、アゼピニル、4-ピペリドニル、ピリジル、N-オキソピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロチオピラニルスルホン、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、チオモルホリニルスルホン、1,3-ジオキソランおよびテトラヒドロ-1,1-ジオキソチエニル、ジオキサニル、イソチアゾリジニル、チエタニル、チイラニル、トリアジニル、およびトリアゾリルなどがあるが、これらに限るわけではない。
【００３４】
代表的な二環式基には、例えばベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチエニル、キヌクリジニル、キノリニル、キノリニル-N-オキシド、テトラヒドロイソキノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾピラニル、インドリジニル、ベンゾフリル、クロモニル、クマリニル、シノリニル、キノキサリニル、インダゾリル、ピロロピリジル、フロピリジニル（フロ[2,3-c]ピリジニル、フロ[3,1-b]ピリジニルまたはフロ[2,3-b]ピリジニルなど）、ジヒドロイソインドリル、ジヒドロキナゾリニル（3,4-ジヒドロ-4-オキソキナゾリニルなど）、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾジアジニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオピラニル、ベントリアゾリル、ベンズピラゾリル（benzpyrazolyl）、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、ジヒドロベンゾピラニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、ナフチリジニル、フタラジニル、ピペロニル、プリニル、ピリドピリジル、キナゾリニル、テトラヒドロキノリニル、チエノフリル、チエノピリジル、およびチエノチエニルなどがあるが、これらに限るわけではない。
【００３５】
代表的な置換基として、1つもしくは複数の上記アルキル基、またはアルキル置換基として上述した1つもしくは複数の基などが挙げられるが、これらに限るわけではない。さらに小さいヘテロシクロ、例えばエポキシおよびアジリジンなども含まれる。
【００３６】
本明細書で使用する「ヘテロ原子」という用語は、酸素、硫黄および窒素を包含するものとする。
【００３７】
本明細書で使用する「低級」という接頭辞は、7個以下、好ましくは4個以下の炭素原子を含む部分を意味する。
【００３８】
本明細書で使用する「生物学的利用能を持つ」という用語は、薬物が生体系に吸収され、その生体系の循環血液中で利用可能になる程度を意味する。薬物の生物学的利用能を決定する方法は当業者にはよく知られている。
【００３９】
本明細書で使用する「薬理学的効果を示すのに十分な生物学的利用能を持つ」という表現は、エポチロン類が20％を超える生物学的利用能、好ましくは30％を超える生物学的利用能、より好ましくは50％を超える生物学的利用能を持つことを意味する。
【００４０】
本明細書で使用する「医薬的に許容できる塩」という用語は、アミンなどの塩基性官能基を持つ式（Ia）または（Ib）のエポチロン類から、医薬的に許容できる無毒性の無機または有機酸を使って製造される塩を表す。適切な無毒性の酸には、例えば酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、およびp-トルエンスルホン酸などがあるが、これらに限るわけではない。酸によって形成される塩は、塩基性官能基を持つ式（Ia）または（Ib）のエポチロン類と、等量の無毒性の酸とを使って、酸付加塩を得ることによって得ることができる。この反応は、典型的には酸付加塩が沈殿するような媒質中で行なわれるか、または水性媒質中で行なった後、媒質を蒸発させる。「医薬的に許容できる塩」とう用語は、カルボン酸官能基などの酸性官能基を持つ式（Ia）または（Ib）のエポチロン類と医薬的に許容できる無毒性の無機または有機塩基とから製造される塩も表す。適切な無毒性の塩基としては、例えばナトリウム、カリウムおよびリチウムなどのアルカリ金属の水酸化物、カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物、アルミニウムおよび亜鉛などの他の金属の水酸化物、アンモニア、ならびに無置換またはヒドロキシ置換モノ-、ジ-またはトリ-アルキルアミンなどの有機アミン、ジシクロヘキシルアミン、トリブチルアミン、N-メチル,N-エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、モノ-、ビス-またはトリス-(2-ヒドロキシ低級アルキルアミン)、例えばモノ-、ビス-またはトリス(2-ヒドロキシエチル)アミン、2-ヒドロキシ-tert-ブチルアミン、またはトリス(ヒドロキシメチル)メチルアミン、N,N-ジ低級アルキル-N-(ヒドロキシ低級アルキル)アミン、例えばN,N-ジメチル-N-(2-ヒドロキシエチル)アミン、またはトリ(2-ヒドロキシエチル)アミン、N-メチル-D-グルカミン、ならびにアルギニン、リジンなどのアミノ酸が挙げられる。塩基によって形成される塩は、例えば酸性官能基を持つ式（Ia）または（Ib）のエポチロン類と、等量の無毒性の塩基とを使って得ることができる。この反応は典型的には塩が沈殿するような媒質中で行なわれるか、または水性媒質中で行なった後、媒質を蒸発させる。
【００４１】
本発明は双性イオンも包含する。
【００４２】
本明細書で使用する「医薬的に許容できる酸中和緩衝剤」という用語は、それを溶液に添加することにより、その溶液に酸またはアルカリを加えた場合に、pHの変化に対して緩衝剤を含まない溶液よりも高い抵抗性を持つ溶液が得られるような、医薬的に許容できる無毒性の酸と、酸の医薬的に許容できる無毒性塩との組合せを表す。また、「医薬的に許容できる酸中和緩衝剤」という用語は、酸性溶液に加えた場合に酸を中和し、その溶液のpHを上昇させる化合物、例えば塩基性化合物も包含する。
【００４３】
本明細書で使用する「包接体」という用語は、数分子の「ホスト」化合物が組み合わされて形成されるカゴ状の中空空間に「ゲスト」化合物の分子が包み込まれることによって形成される包接化合物を意味する。
【００４４】
本明細書で使用する「プロドラッグ」という用語は、生物学的条件下に（インビトロまたはインビボで）加水分解、酸化、またはその他の反応を起こして、式（Ia）または（Ib）のエポチロン化合物を与えることができる、化合物の誘導体を意味する。例えばカルボン酸エステルはカルボン酸官能基をエステル化することによって都合よく形成され、式（Ia）または（Ib）のエポチロン類が酸官能基を含む場合は、これをエステル化してプロドラッグとすることができる。当技術分野では様々なプロドラッグがよく知られている（プロドラッグの例については、H.Bundgaard編「Design of Prodrugs」Elsevier,1985；K.Widderら編「Methods in Enzymology」vol.42,p.309-396,Academic Press,1985；Krosgaard-LarsenおよびH.Bundgaard編「A Textbook of Drug Design and Development」の第5章、H.Bundgaard著「Design and Application of Prodrugs」p.113-191,1991；H.Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8,1-38,1992；H.Bundgaardら, Journal of Pharmaceutical Sciences, 77,285,1988；およびN.Kakeyaら, Chem.Phar.Bull., 32,692,1984を参照されたい）。
【００４５】
本明細書で使用する「酸中和容量」という表現は、米国薬局方301に定義されているとおり、pH3.5にすることができる1N HClの量（ミリ当量で表した量）を意味する。
【００４６】
本明細書で使用する「溶液剤」という用語は、溶媒に溶解した1つまたは複数の可溶性活性成分を含む液体製剤を意味する。
【００４７】
本明細書で使用する「懸濁剤」という用語は、溶媒に懸濁した微細な溶解していない活性成分を意味する。
【００４８】
本明細書で使用する「エリキシル剤」という用語は、活性成分が水およびアルコールを含む溶媒に溶解している溶液剤を意味する。
【００４９】
本明細書で使用する「シロップ剤」という用語は、ショ糖などの糖が水または他の水性液体に溶解している濃縮溶液剤を意味し、糖の結晶化を遅らせるためまたは添加された成分の可溶性を増加させるために、所望により、グリセリンまたはソルビトールなどのポリオールを含んでもよい。
【００５０】
本発明の方法、組成物、および剤形に有用なエポチロン類
本発明の方法、組成物、および剤形には、任意のエポチロン類を使用することができる。好ましくは、エポチロン類は酸不安定性であり、水溶性に乏しく、経口経路では容易には生物学的利用能を持たない。具体的一態様では、式（Ia）または（Ib）のエポチロン類を本発明の方法、組成物、および剤形に使用する。式（Ia）または（Ib）のエポチロン類は、本願出願人による同時係属中の特許出願第09/280,191号（1999年3月29日出願）および本願出願人による同時係属中の特許出願第09/170,482号（1998年10月13日出願）に開示されている方法によって製造することができ、その内容は参照文献として特に本願明細書に組み込まれるものとする。また、式（Ia）または（Ib）のエポチロン類は、例えばK.C.Nicolauら,「オレフィンメタセシスに基づくエポチロンへのアプローチ（An Approach to Epothilones Based on Olefin Metathesis）」, Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 35(20):2399-2401(1996)；K.C.Nicolauら,「エポチロンAの全合成：大環状ラクトン化アプローチ（The Total Synthesis of Epothilone A: The Macrolactonization Approach）」, Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 36(5):525-527(1997)；K.C.Nicolauら,「設計されたエポチロン類：コンビナトリアル合成、チューブリン集合性、およびタキソール耐性腫瘍細胞に対する細胞傷害作用（Designed Epothilones: Combinatorial Synthesis, Tubulin Assembly Properties, and Cytoxic Action Against Taxol Resistant Tumor Cells）」, Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 36(19):2097-2103(1997)；K.C.Nicolaouら,「エポチロンAおよびその類似体へのオレフィンメタセシスアプローチ（The Olefin Metathesis Approach to Epothilone A and its Analogues）」, J.Am.Chem.Soc., 119(34):7960-7973(1997)；K.C.Nicolaouら,「大環状ラクトン化に基づく戦略によるエポチロンAおよびBの全合成（Total Syntheses of Epothillones A and B via a Macrolactonization-Based Strategy）」, J.Am.Chem.Soc., 119(34):7974-7991(1997)；K.C.Nicolaouら,「固相および液相でのエポチロンAおよびBの合成（Synthesis of Epothilones A and B in Solid and Solution Phase）」, Nature, 387:268-272(1997)；ならびにD.Mengら,「環形成オレフィンメタセシスによるマクロライド形成における遠隔効果：完全に活性なエポチロン同族体の合成への応用（Remote Effects in Macrolide Formation Through Ring-Forming Olefin Metathesis: An Application to the Synthesis of Fully Active Epothilone Congeners）」, J.Am.Chem.Soc., Vol.119,No.11,2733-2734(1997)に開示されている方法の適切な変法によって製造することができることも、当業者には理解されるだろう。
【００５１】
エポチロン類は、好ましくは、結晶性および無水である。エポチロン類は、所望により、本発明の組成物に使用する前に滅菌される。
【００５２】
エポチロン類またはその組成物の有用性および用途
本発明のエポチロン類は微小管安定化剤であり、したがって、様々な癌、または細胞が異常に増殖する他の疾患を処置するために使用することができる。本発明の方法は、1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類、または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物、もしくはプロドラッグを、癌または他の過剰増殖性細胞疾患を患っている患者に投与するのに、特に有用である。本明細書で使用する「癌」という用語は、固形腫瘍および血液系腫瘍を包含するが、これらに限るわけではない。癌という用語は、皮膚、組織、器官、骨、軟骨、血液および血管の疾患を表す。「癌」という用語はさらに原発性癌および転移性癌を包含する。本発明の方法で処置することができる癌の例には、癌腫、例えば膀胱癌、乳癌、大腸癌、腎癌、肺癌、卵巣癌、膵癌、胃癌、子宮頚癌、甲状腺癌、および扁平上皮癌を含む皮膚癌など；リンパ系の造血系腫瘍、例えば白血病、急性リンパ性白血病、急性リンパ芽球性白血病、B細胞性リンパ腫、T細胞性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ヘアリー細胞リンパ腫、およびバーキットリンパ腫など；骨髄系の造血系腫瘍、例えば急性および慢性骨髄性白血病ならびに前骨髄球性白血病など；間葉由来の腫瘍、例えば線維肉腫、横紋筋肉腫、および骨肉腫など；その他の腫瘍、例えば黒色腫、精上皮腫、奇形癌、神経芽細胞腫、および神経膠腫など；中枢神経系および末梢神経系の腫瘍、例えば星状細胞種、神経芽細胞種、神経膠腫、およびシュワン細胞腫など；ならびに他の腫瘍、例えば色素性乾皮症、角化性棘細胞腫、甲状腺濾胞癌、および奇形癌などがある。
【００５３】
本発明の方法は、癌の処置を受けたことのある患者の処置にも、癌の処置を受けたことのない患者の処置にも役立つ。実際、本発明の方法と組成物は、癌の第一治療および第二治療に使用することができる。
【００５４】
本発明の方法は、放射線照射などの既知の抗癌処置と併用しても有用である。本発明の方法は、G2-M期にその効果を発揮する式（Ia）または（Ib）のエポチロン類とは異なる細胞周期の時期（例えばS期）に作用する第2薬物の投与を含む抗癌処置と併用すると、特に有用である。
【００５５】
式（Ia）または（Ib）のエポチロン類は腫瘍血管新生を阻害し、よって異常な細胞増殖にも影響を及ぼしうる。したがって本発明の方法は、網膜血管形成に関係する失明、関節炎、特に炎症性関節炎、多発性硬化症、再狭窄、および乾癬の一定の型の処置にも有用だろう。
【００５６】
式（Ia）または（Ib）のエポチロン類は、正常な発生および恒常性にとって不可欠な生理学的細胞死過程であるアポトーシスも誘導または阻害しうる。アポトーシス経路の改変は様々なヒト疾患の一因となっている。したがって本発明の方法は、アポトーシスの異常を伴う様々なヒト疾患の処置、例えば癌（特に濾胞性リンパ腫、p53突然変異を伴う癌腫、乳房、前立腺および卵巣のホルモン依存性腫瘍、ならびに家族性大腸腺腫などの前癌病変であるが、これらに限るわけではない）、ウイルス感染（例えばヘルペスウイルス、ポックスウイルス、エプシュタイン・バーウイルス、シンドビスウイルスおよびアデノウイルスなど）、自己免疫疾患（例えば全身性エリテマトーデス、免疫性糸球体腎炎、慢性関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患、および自己免疫性糖尿病など）、神経変性障害（例えばアルツハイマー病、AIDS関連痴呆、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、色素性網膜炎、脊髄性筋萎縮症および小脳変性症など）、AIDS、骨髄異形成症候群、再生不良性貧血、虚血傷害関連心筋梗塞、脳卒中および再灌流傷害、不整脈、アテローム性動脈硬化、毒素誘発性またはアルコール誘発性肝疾患、血液病（例えば慢性貧血および再生不良性貧血など）、筋骨格系の変性疾患（例えば骨粗鬆症および関節炎など）、アスピリン感受性鼻副鼻腔炎、嚢胞性線維症、多発性硬化症、腎臓疾患、および癌痛の処置に役立つだろう。
【００５７】
式（Ia）または（Ib）のエポチロン類を、上記の状態に関係する治療を施すのに特に有用であるという理由で選択される他の治療剤と共に製剤化するか、または同時投与することもできる。例えば式IおよびIIの各化合物は、悪心、過敏症、および胃の刺激を防止するための薬剤、例えば制吐薬、ならびにH1およびH2抗ヒスタミン薬などと共に製剤化することができる。式（Ia）または（Ib）のエポチロン類と併用する場合、上記治療薬は、医師用医薬品便覧（Physician's Desk Reference）（PDR）に示されている量で、または当業者が他の方法で決定した量で使用することができる。
【００５８】
本発明の方法、組成物、および剤形に有用な緩衝剤
本発明の方法における緩衝剤の目的は、胃液を一時的に中和し、よって患者の胃におけるエポチロン類の分解を減少させることである。また、1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを含む水性または部分的に水性の液体経口製剤において、緩衝剤は式（Ia）または（Ib）のエポチロン類の分解を減少させる。出願人らは、驚くべきことに、1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと緩衝剤とを含む液体経口剤形が、緩衝剤を含まない液体経口剤形よりも安定であることを見いだした。
【００５９】
本発明の方法、組成物、および剤形に有用な緩衝剤は、1つまたは複数の酸と、1つまたは複数の酸の塩とを、水溶液に溶解した時に約5〜9のpHを持つ溶液が得られるような比率で混合することによって、容易に製造することができる。典型的には、前記1つまたは複数の酸は約4〜10のpKaを持つだろう。所望のpH値を持つ溶液を与える緩衝剤を製造する方法は、当業者にはすぐにわかるだろう。また本発明では、酸性溶液に添加するとその溶液のpHを上昇させる緩衝剤化合物（塩基性化合物など）としての使用も考えられる。
【００６０】
本発明の方法、組成物、および剤形に使用することができる様々な緩衝剤は、当業者にはすぐにわかるだろう。典型的な緩衝剤には、例えば医薬的に許容できる弱酸、弱塩基、またはその混合物などがあるが、これらに限るわけではない。緩衝剤成分は、好ましくは、リン酸、酒石酸、乳酸、コハク酸、クエン酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、およびその塩などの水溶性物質である。医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、好ましくは、第二リン酸塩-第一リン酸緩衝剤または第二リン酸塩緩衝剤-クエン酸-クエン酸塩緩衝剤である。これらの緩衝剤は市販されているか、または当業者であれば、上述したような市販の緩衝剤を使って、容易に製造することができる。
【００６１】
式（Ia）または（Ib）の酸不安定性エポチロン類を経口投与する方法
本発明は、式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを経口投与し、かつ医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を経口投与することによって、経口投与されたエポチロン類の生物学的利用能を増大させる方法を包含する。本発明は、酸不安定性のエポチロン類にはとりわけよく適しているが、アルカリ性条件下で加水分解を受けやすいエポチロン類および加水分解を受けにくいエポチロン類にも使用することができる。さらに本発明は、水性媒質への溶解性に乏しいエポチロン類にも使用することができる。
【００６２】
本発明のエポチロン類は非経口投与することができ、そうすることによって胃腸系を回避し、生物学的利用能に関するあらゆる懸念を克服することができることは、理解すべきである。しかしそのような投与は患者にとって不便かつ不快であり、他にも潜在的に有害な効果を持ちうる。本発明の組成物および方法は、経口投与経路を利用することができるようにするものであり、これはとりわけヒト患者にとっては著しい利益である。
【００６３】
1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤と共に投与すると、前記1つまたは複数の式（Ia）または（Ib）のエポチロン類の生物学的利用能が増大する。理論に縛られるものではないが、生物学的利用能の増大は、少なくともかなりの部分は、胃の酸性環境における式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解速度を、緩衝剤が低下させるためであると考えられる。一定のエポチロン類は、好ましいエポチロンである化合物（A）を含めて、酸性水性環境では不安定であり、おそらくはエポキシド環の酸触媒加水分解的開環によって分解する。例えば、化合物（A）の水溶液の場合、37℃で5％の薬物損失が起こるまでの時間（t95）は、pH7.4では約38分であるが、pH2.5ではわずかに約0.2分である。したがって、式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを経口投与した場合、それらは患者の胃で分解し、胃腸路ではごくわずかしか吸収されないか、または全く吸収されない。
【００６４】
しかし、1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを医薬的に許容できる酸中和緩衝剤と組み合わせて患者に投与すると、緩衝剤は患者の胃内の酸を中和し、前記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解速度を十分に低下させるので、前記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグは、吸収されるのに十分な時間、胃腸路内に保持される。
【００６５】
本発明のもう一つの態様では、制酸剤、例えばアルミニウムおよびマグネシウムの水酸化物、炭酸ナトリウムおよび炭酸カルシウムなどの炭酸塩、ケイ酸塩、ならびにリン酸塩などを使って、エポチロン類の投与前、投与中または投与後に、胃内の酸を中和することができる。
【００６６】
本発明の方法に従って経口投与した場合、式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグは、少なくとも約20％の生物学的利用能、好ましくは少なくとも約40％の生物学的利用能、より好ましくは少なくとも約50％の生物学的利用能を持つ。
【００６７】
本発明の一態様では、上記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物、もしくはプロドラッグと、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤とが、単一の経口剤形に入れて供給され、同時に投与される。1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤との組合せを含む単一の組成物は、固体経口剤形（例えば錠剤、カプセル剤、もしくは散剤）または液体経口剤形（例えば溶液剤、懸濁剤、またはエリキシル剤）として投与することができる。溶液剤または懸濁剤は、投与直前に適当な溶媒または共溶媒を使ってエポチロン類成分と緩衝剤成分とを溶解することにより、構成させることができる。
【００６８】
例えば、1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤とは、それぞれ約58：12：30の比率のポリエチレングリコール：エタノール：リン酸塩緩衝液（例えば1M、約pH8）を含む液体に溶解した式（Ia）または（Ib）のエポチロン類の溶液として同時に投与することができる。
【００６９】
本発明のもう一つの態様では、式（Ia）または（Ib）のエポチロン類と医薬的に許容できる酸中和緩衝剤とを、独立した別個の医薬組成物として用意し、別々に投与する。これらの医薬組成物はそれぞれ固体経口剤形として、または液体経口剤形として投与される。
【００７０】
1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤とを別々に投与する場合は、式（Ia）または（Ib）の所望のエポチロン類を投与する前、投与した後、または投与する前と投与した後の両方に、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を経口投与することができる。医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、好ましくは、式（Ia）または（Ib）の所望のエポチロン類を経口投与する前と経口投与した後の両方に、胃酸を中和するのに十分な量で投与される。前記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの前に医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を投与する場合は、式（Ia）または（Ib）の所望のエポチロン類を投与する前、約5時間以内、好ましくは約3時間以内、より好ましくは約1時間以内、最も好ましくは約10分以内に投与する。式（Ia）または（Ib）の所望のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの後で医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を投与する場合は、式（Ia）または（Ib）の所望のエポチロン類を投与した後、約5時間以内、好ましくは約3時間以内、より好ましくは約1時間以内、最も好ましくは約10分以内に投与する。
【００７１】
もう一つの態様では、医薬的に有効な酸中和緩衝剤が投与されるまで、エポチロン類の放出を遅延されるために、式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを、腸溶性の丸剤またはカプセル剤として投与する。腸溶性の錠剤およびカプセル剤は、胃液での溶解は阻止するが、腸では崩壊する物質でコーティングされたカプセルである。
【００７２】
ある態様では、緩衝剤を分散性錠剤として投与する。
【００７３】
式（Ia）もしくは（Ib）の所望のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの治療量の大小は、通例、処置される疾患およびその重症度によって変動する。用量、そして場合により、投与頻度は、患者の年齢、体重、反応、および既往症によっても変動しうる。当業者はこのような因子を正当に考慮して、適切な用法を容易に選択することができる。式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグは、典型的には、約0.05〜約200mg/kg/日、好ましくは約5〜約100mg/kg/日、より好ましくは約100mg/kg/日未満の総量を、単回投与で、または約2〜4回の分割投与で、経口投与される。
【００７４】
本発明は、5mg/単位、10mg/単位、15mg/単位、20mg/単位、25mg/単位、50mg/単位、および100mg/単位を含む所望のエポチロン類の医薬単位剤形を包含する。同様に、本発明に包含される液体1回量には、2.5mg/mLおよび10mg/mLが含まれるが、これらに限るわけではない。
【００７５】
2以上の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグが単位剤形中に含まれるか、患者に投与される場合、本明細書で使用する「総量」という用語は、式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの合わせた量を意味する。
【００７６】
さらに、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、少なくとも約20ミリ当量の酸中和容量、好ましくは少なくとも30ミリ当量の酸中和容量、より好ましくは少なくとも40ミリ当量の酸中和容量、最も好ましくは少なくとも約50ミリ当量の酸中和容量を送達するのに十分な量で投与される。
【００７７】
本発明は、約50〜300mLの溶媒、好ましくは約100〜200mLの溶媒、より好ましくは約150mLの溶媒に溶解した約5〜100mg/単位、好ましくは約22.5mg/単位、より好ましくは約22.5mg/単位を含む所望の緩衝剤の医薬単位剤形も包含する。
【００７８】
医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、典型的には、約5〜9、好ましくは約6〜8.5、より好ましくは約7〜8のpHを持つ水溶液として投与される。本発明では、所望の範囲のpHを持つ溶液を与える任意の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を使用することができる。医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、好ましくは、第二リン酸塩-第一リン酸塩緩衝剤または第二リン酸塩緩衝剤-クエン酸-クエン酸塩緩衝剤である。
【００７９】
本発明の一態様では、まず患者に、無水第二リン酸ナトリウム（約0.2M）、クエン酸ナトリウム二水和物（約0.07M）、および無水クエン酸（約0.008M）を含むpH約7.4の水溶液剤約150mLとして、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を投与し、次に1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを、約80：20の比率を持つプロピレングリコール：エタノール系の液体剤形として経口投与し、次に無水第二リン酸ナトリウム（約0.2M）、クエン酸ナトリウム二水和物（約0.07M）、および無水クエン酸（約0.008M）を含むpH約7.4の水溶液剤をさらに約150mL経口投与する。
【００８０】
組成物、単位剤形、およびキット
本発明は、1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを含む第1成分と、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を含む第2成分とを含むキットも対象とする。第1成分および第2成分は、個別に投与されることを想定して、独立した別個の医薬組成物として提供される。第1成分および第2成分は、経口投与に適した医薬剤形として、または液体を使って構成または再構成させて液体経口剤形にすることができる固体医薬組成物として提供される。式（Ia）または（Ib）のエポチロン類は、好ましくは、遮光性バイアルに充填される。
【００８１】
経口投与に適した医薬組成物および剤形は、例えば錠剤（咀嚼錠など）、カプレット剤、カプセル剤、分包散剤、腸溶性錠剤、腸溶性ビーズ剤、腸溶性ソフトゲルカプセル剤、および液体（例えば着香シロップ）など（ただしこれらに限らない）の不連続な剤形として提供することができる。そのような剤形は所定の量の活性成分を含み、当業者に周知の薬学的方法によって製造することができる（例えば「Remington's Pharmaceutical Sciences」第18版, Mack Publishing, ペンシルバニア州イースン（1990）を参照されたい）。
【００８２】
典型的な経口剤形は、従来の医薬配合技術を使って、活性成分を少なくとも1つの賦形剤とよく混和することによって製造される。賦形剤は、投与しようとする製剤の形態に依存して、多種多様な形態を取ることができる。例えば、固体経口剤形（散剤、錠剤、カプセル剤、およびカプレット剤など）に適した賦形剤には、デンプン、糖類、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、および崩壊剤などがあるが、これらに限るわけではない。経口液体剤形に適した賦形剤の例には、水、グリコール、油、アルコール類、着香剤、保存剤、および着色剤などがあるが、これらに限るわけではない。
【００８３】
錠剤およびカプセル剤は便利な医薬組成物および経口剤形であり、この場合は固体賦形剤を使用する。所望により、錠剤を標準的な水性法または非水性法でコーティングすることができる。そのような剤形は任意の薬学的方法によって製造することができる。一般に、医薬組成物および剤形は、活性成分を液体担体、微細固体担体またはその両方と均一に混和した後、所望によりその生成物を所望の形状に付形することによって製造される。
【００８４】
例えば、錠剤は圧縮または成形によって製造することができる。圧縮錠は、所望により賦形剤と混合した粉末または顆粒などの流動体である活性成分を適当な機械で圧縮することによって製造することができる。すりこみ錠剤は、不活性液体希釈剤でしめらせた粉末状化合物の混合物を適当な機械で成型することによって製造することができる。
【００８５】
本発明の経口剤形に使用することができる賦形剤の例には、結合剤、充填剤、崩壊剤、および潤滑剤などがあるが、これらに限るわけではない。医薬組成物および剤形での使用に適した結合剤には、例えばトウモロコシデンプン、バレイショデンプン、または他のデンプン、ゼラチン、アラビアゴムなどの天然および合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギン酸塩、トラガカント粉末、グアーゴム、セルロースおよびその誘導体（例えばエチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、アルファ化デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（例えば2208、2906、2910）、微結晶セルロース、およびそれらの混合物などがある。
【００８６】
適切な形態の微結晶セルロースには、例えばAVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105（FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales（ペンシルバニア州マーカスフック）から入手可能）およびそれらの混合物が挙げられる。結合剤の一具体例は、AVICEL RC-581として販売されている微結晶セルロースとカルボキシメチルセルロースナトリウムとの混合物である。適切な無水または低水分賦形剤または添加剤には、例えばAVICEL-PH-103（商標）およびStarch 1500 LMなどがある。
【００８７】
本明細書に開示する医薬組成物および剤形での使用に適した充填剤の例には、タルク、炭酸カルシウム（例えば顆粒または粉末）、微結晶セルロース、セルロース粉末、デキストレート（dextrates）、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、アルファ化デンプン、およびそれらの混合物などがある。本発明の医薬組成物および剤形中の結合剤または充填剤は、典型的には、その医薬組成物または剤形の約50〜約90重量％の量で存在する。
【００８８】
崩壊剤は、水性環境にさらされると崩壊する錠剤を得るために、本発明の医薬組成物および剤形に使用される。崩壊剤の含有量が多すぎる錠剤は貯蔵中に崩壊する可能性があり、崩壊剤の含有量が少なすぎる錠剤は所望の速度でまたは所望の条件で崩壊しない可能性がある。したがって、活性成分の放出を不利益に変化させるほど多すぎることも少なすぎることもない十分量の崩壊剤を使用して、本発明の医薬組成物および固体経口剤形を形成させるべきである。崩壊剤の使用量は製剤のタイプによって異なり、当業者には容易に識別することができる。典型的な医薬組成物および剤形は、約0.5〜約15重量％の崩壊剤、好ましくは約1〜約5重量％の崩壊剤を含む。
【００８９】
本発明の医薬組成物および剤形で使用することができる崩壊剤には、例えば寒天、アルギン酸、炭酸カルシウム、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、バレイショまたはタピオカデンプン、他のデンプン、アルファ化デンプン、他のデンプン、粘土、他のアルギン、他のセルロース、ゴム、およびそれらの混合物などがあるが、これらに限るわけではない。
【００９０】
本発明の医薬組成物および剤形に使用することができる潤滑剤には、例えばステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱油、軽油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、他のグリコール類、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水素化植物油（例えばラッカセイ油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、およびダイズ油）、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、寒天、およびそれらの混合物などがあるが、これらに限るわけではない。他の潤滑剤には、例えばシロイド（syloid）シリカゲル（W.R.Grace Co.（メリーランド州バルチモア）製のAEROSIL 200）、合成シリカの凝固エアロゾル（Degussa Co.（テキサス州プレーノー）製）、CAB-O-SIL（Cabot Co.（マサチューセッツ州ボストン）が販売している発熱性二酸化ケイ素製品）、およびそれらの混合物などがある。潤滑剤を使用する場合には、典型的には、潤滑剤を添加する医薬組成物または剤形の約1重量％未満の量で使用する。
【００９１】
本医薬組成物および剤形は、活性成分の分解速度を低下させる1つまたは複数の化合物をさらに含んでもよい。本明細書で「安定剤」と呼ぶそのような化合物には、例えばアスコルビン酸などの酸化防止剤および塩緩衝剤などがあるが、これらに限るわけではない。
【００９２】
経口投与用溶液剤はもう一つの便利な経口剤形であり、この場合は溶媒を使用する。液体経口剤形は、活性成分を適切な溶媒に混合してその液体中に活性成分の溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、またはエリキシル剤を形成させることにより、製造される。
【００９３】
溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、およびエリキシル剤は所望により他の添加剤、例えばグリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、糖類、着香剤、および安定剤など（ただしこれらに限らない）を含んでもよい。
【００９４】
本発明のキットは、第1および/または第2成分を、すぐに投与できる既製の液体経口剤形として含んでもよいし、溶媒で再構成させて液体経口剤形にすることができる固体医薬組成物として含んでもよい。キットが、第1および/または第2成分を、溶媒で再構成させて液体経口剤形にすることができる固体医薬組成物として含む場合、キットは、所望により、再構成溶媒を含んでもよい。
【００９５】
構成または再構成溶媒は、活性成分と混合されて、活性成分の液体経口剤形を与える。好ましくは、活性成分は、その溶媒に可溶であり、溶液を形成する。溶媒は水、非水性液体、または非水性成分と水性成分の組合せであることができる。適切な非水性成分には、例えば油、エタノールなどのアルコール類、グリセリン、ならびにポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールなどのグリコールなどがあるが、これらに限るわけではない。
【００９６】
本発明の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、好ましくは水溶性である。したがって、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤用の好ましい溶媒は、水または水性系、例えば食塩溶液またはデキストロース溶液などである。
【００９７】
式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグは、水には比較的不溶性である。したがって、式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグには、非水性液体、または混和性水性成分と非水性成分との組合せである液体が最も好ましい。
【００９８】
式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグ用の好ましい非水性液体は、好ましくは約80：20の比率の、プロピレングリコールなどの界面活性剤およびエタノールである。適切な非水性液体または界面活性剤には、例えばポリエチレングリコール、ポリソルベート、プロピレングリコール、グリセリルエステル、Cremophor、脂肪酸エステル、脂肪アルコール、ポリオキシエチレン、ならびに脂肪アルコールエステルおよびエーテルなどがあるが、これらに限るわけではない。
【００９９】
式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグ用の溶媒が水性成分を含む場合、その水性成分は、式（Ia）または（Ib）のエポチロン類の分解が減少するように、緩衝剤を含むことが好ましい。水性溶媒または一部水性溶媒中に1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグを含む液体経口剤形は、緩衝剤を含まない液体経口剤形よりも安定な液体経口剤形となる。具体的に述べると、緩衝液体経口製剤における1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解速度は、非緩衝液体経口製剤における分解速度よりも低いことが、見いだされた。理論に縛られることは望まないが、式（Ia）または（Ib）のエポチロン類は、おそらくはエポキシド環の酸または塩基触媒加水分解的開環の結果として、酸性および塩基性媒質中では不安定であると考えられる。しかし、液体経口製剤を緩衝処理することにより、式（Ia）または（Ib）のエポチロン類が患者への投与前に分解しないほど十分に式（Ia）または（Ib）のエポチロン類の分解速度が遅くなるような値に、液体経口製剤のpHを保つことができる。水性または一部水性液体経口剤形は、好ましくは、約5〜9、好ましくは約6〜8.5、より好ましくは約7〜8のpHに緩衝処理される。
【０１００】
活性成分が、溶媒で構成または再構成させて液体経口剤形にする固体医薬組成物として供給される場合は、典型的には粉末状で供給され、患者への投与のすぐ前に、液体で構成される。粉末状医薬組成物は、例えばバイアルなどに充填され、そこに溶媒が加えられる。あるいは、別の容器で、バイアルの内容物を溶媒に加えてもよい。本発明の粉末状活性成分は、開封してその内容物を溶媒に添加することができる箔包装材などの小袋に充填してもよい。本発明の粉末状活性成分は、溶媒に加えると溶解する錠剤として製剤化することもできる。多くの場合、錠剤には、錠剤の溶解を容易にする崩壊剤が含まれる。
【０１０１】
本発明は、固体状の1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物、もしくはプロドラッグと、当該医薬組成物を溶媒で再構成させて液体経口剤形にした場合に、前記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解を減少させるのに十分な量の、固形の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤とを含む医薬組成物も対象とする。
【０１０２】
本発明の医薬組成物は、より安定な液体経口剤形を与えるだけでなく、患者に経口投与した時のエポチロン類の生物学的利用能が高い液体経口剤形も与える。したがって本発明は、溶媒に溶解または分散した1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと医薬的に許容できる酸中和緩衝剤とを含む液体経口剤形も対象とする。前記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと、固形の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤とを、液体に溶解して溶液剤とする。
【０１０３】
好ましくは、緩衝剤は、約5〜9、好ましくは約6〜8.5、より好ましくは約7〜8のpHを持つ液体経口製剤が得られるように、医薬組成物中に存在する。通例、医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、液体で再構成させて液体経口剤形にした場合に少なくとも約20ミリ当量の酸中和容量、好ましくは少なくとも30ミリ当量の酸中和容量、より好ましくは少なくとも40ミリ当量の酸中和容量、最も好ましくは少なくとも約50ミリ当量の酸中和容量を送達するのに十分な量で存在する。本発明の組成物には、この範囲のpHを与えることができる医薬的に許容できる酸中和緩衝剤であれば、どれでも使用することができる。医薬的に許容できる酸中和緩衝剤は、好ましくは、第二リン酸塩-第一リン酸塩緩衝剤または第二リン酸塩緩衝剤-クエン酸-クエン酸塩緩衝剤である。
【０１０４】
通例、本発明の医薬組成物は、上記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物、もしくはプロドラッグを、約0.05〜約200mg、好ましくは約5〜約100mg、より好ましくは約10〜50mgの総量で含む。
【０１０５】
さらに本発明は、（i）固体状の1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグと、固形の医薬的に許容できる酸中和緩衝剤との組合せ、および（ii）当該医薬組成物を再構成させて液体経口剤形にするための溶媒、を含み、前記医薬的に許容できる酸中和緩衝剤が、前記の組合せを溶媒で再構成させて液体経口剤形にした場合に、前記1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグの分解を減少させるのに十分な量で存在する医薬組成物を含むキットに関する。
【０１０６】
再構成溶媒を活性成分と混合すると、活性成分の液体経口剤形が得られる。液体経口剤形は溶液剤または懸濁剤であることができる。好ましくは、活性成分は溶媒に可溶であり、溶液剤を形成する。溶媒は水、非水性液体、または非水性成分と水性成分の組合せである液体であることができる。適切な非水性成分には、例えば油、エタノールなどのアルコール類、グリセリン、ならびにポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールなどのグリコールなどがあるが、これらに限るわけではない。本発明のキットでの使用に適した溶媒は、約58：12：30の比率のプロピレングリコール：エタノール：リン酸塩緩衝液（1M、pH8）である。
【０１０７】
溶媒は、液体経口剤形の口あたりを改善するために、1つまたは複数の他の添加剤、例えばグリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、着香剤、および保存剤など（ただしこれらに限らない）をさらに含んでもよい。
【０１０８】
本発明はさらに、活性成分すなわち1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物もしくはプロドラッグおよび/または医薬的に許容できる酸中和緩衝剤を含む、無水医薬組成物および剤形も包含する。水は一部の化合物の分解を促進しうるので、無水医薬組成物および剤形は有利である。例えば、水（例えば5％）の添加は、貯蔵寿命または製剤の経時的な安定性などの特徴を決定するために、長期保存をシミュレーションする手段として、医薬技術分野では、広く受入れられている（例えばJens T.Carstensen,「Drug Stability: Principles & Practice」第2版, Marcel Dekker, ニューヨーク州ニューヨーク, 1995, p.379-80を参照されたい）。実際、水および熱は一部の化合物の分解を加速する。したがって、製剤に対する水の影響は、大きな意味を持つ場合がある。というのも、製剤の製造、取り扱い、包装、貯蔵、輸送、および使用の際に水分および/または湿気に触れることはよくあることだからである。無水医薬組成物および剤形は、1つまたは複数の式（Ia）もしくは（Ib）のエポチロン類または医薬的に許容できるその塩、溶媒和物、包接体、水和物、もしくはプロドラッグを含む医薬組成物および剤形にはとりわけ有利である。というのも、これらの化合物は水分に対して感受性を持つからである。
【０１０９】
無水医薬組成物および剤形は、その無水性が維持されるような方法で、製造され、保存されるべきである。本発明の無水医薬組成物および剤形は、無水成分または低水分含有成分および低水分または低湿度条件を使って製造することができる。無水医薬組成物および剤形は、適切な処方キットに含めることができるように、好ましくは、水への曝露を防ぐことが知られている材料を使って包装される。適切な包装の例には、密封された箔、プラスチック、一回量容器（例えばバイアル）、ブリスター包装、およびストリップ包装などがあるが、これらに限るわけではない。
【０１１０】
実施例
本発明のいくつかの態様および本発明のいくつかの利点を、限定を目的としない以下の実施例によって例示する。
【０１１１】
実施例1：マウス、ラットおよびイヌにおける化合物（A）の薬物動態および薬力学試験
1.1  試料分析：薬物動態/薬力学試験で採取した血漿試料は、LC/MS/MS（液体クロマトグラフィー/質量分析/質量分析）測定法を使用し、マウスでの試験には5〜20,000ng/mL（10〜40,000nM）、ラットおよびイヌでの試験には2〜1000ng/mL（4〜2000nM）の標準曲線範囲で、化合物（A）の濃度について分析した。薬物動態試験では、LC/MS/MS測定法を使用し、5〜20,000ng/mL（10〜40,000nM）の標準曲線範囲で、マウス血漿中の化合物（A）の濃度を決定した。LC/MS/MS測定法を使って、保存/投薬溶液中に、またはインビボでラットおよびイヌ血漿中に形成される化合物（A）の分解産物である化合物（B）の濃度も決定した。化合物（B）の構造は：
【化９】
2004528287.tif 000011
（化合物B）
である。
【０１１２】
試料は、0.2mLの試料に内部標準を添加し、アセトンで沈殿させた後、上清を1-クロロブタンで抽出することによって分析した。有機層を取り出し、蒸発乾固した。残渣を再構成させ、LC/MS/MSシステムに注入した。ヒト血漿の場合、クロマトグラフィー分離は、YMC ODS-AQカラム（4.6×50mm、3mm）で、アセトニトリル：0.01M酢酸アンモニウム pH5.0（65：35）の移動相を使って、無勾配的に行なった。イヌ血漿の場合、クロマトグラフィー分離は、40℃に保ったZorbax Stable Bond C18カラム（2.1×150mm、5mm）で、0.1M酢酸アンモニウム（pH5）およびアセトニトリルの移動相を使って、無勾配的に行なった。ラット血漿の場合、クロマトグラフィー分離は、40℃に保ったStable Bond C18カラム（2.1×150mm、5mm）で、アセトニトリル：0.1M酢酸アンモニウム pH5（1：1）の移動相を使って、無勾配的に行なった。検出はネガティブエレクトロスプレータンデム質量分析によって行なった。標準曲線はどの分析物についても2〜500ng/mLの範囲とし、1/x加重二次回帰モデルにあてはめた。
【０１１３】
化合物（A）および化合物（B）は、分析作業のための処理前にラットおよびイヌEDTA（エチレンジアミン四酢酸）血漿中、室温で少なくとも4時間、処理後はオートサンプラー中、4℃で少なくとも24時間、ラットおよびイヌ血漿中、-20℃以下で少なくとも5週間は安定であり、また、少なくとも3回の凍結-融解サイクルを経ても安定であることがわかった。さらに、どちらの分析物も、新鮮ラットおよびイヌEDTA全血中、室温で少なくとも0.5時間は安定であることがわかった。
【０１１４】
1.2  マウスにおける薬物動態：雌CDF1マウスに化合物（A）を静脈内投与（5mg/kg）および経口投与（48mg/kg）した。IV経路の場合は、化合物（A）を20％エタノール溶液に溶解して、ボーラス投与した。経口経路の場合は、化合物（A）の溶液剤をエタノール：リン酸緩衝食塩水（0.25M、pH8.0）の3：7混合物として調製し、胃管によって投与した。IV投与の5、15および45分後、ならびに2、4および6時間後、また経口投与の15および45分後、ならびに2、4および6時間後に、3匹の隔離したマウスから、化合物（A）の濃度を決定するための血漿試料を採取した。
【０１１５】
IV投与後は、化合物（A）の全身クリアランス（CLT）は68mL/分/kgで、これは肝血流量（90mL/分/kg）の76％に相当した。またマウスの体内総水分量は約0.7L/kgなので、6.3L/kgという定常状態分布容積（VSS）から、広範な脈管外分布が示唆された（B.DaviesおよびT.Morris,「実験動物およびヒトの生理学的パラメータ（Physiological Parameters in Laboratory Animals and Humans）」,Pharmaceutical Research, 1993:10(7),1093-1095を参照されたい）。終末消失半減期（terminal elimination half-life）（T-HALF）は約3時間だった。
【０１１６】
化合物（A）の経口投与後の最高血漿中濃度（CMAX）は5983ng/mL、CMAX到達時間（TMAX）は投与後0.25時間であったことから、化合物（A）の吸収は迅速であることが示唆される。化合物（A）の絶対経口生物学的利用能は31％だった。
【０１１７】
1.3  ラットにおける薬物動態：絶食雄Sprague Dawleyラット（n＝3〜6/群）に、化合物（A）を単回動脈内投与（2mg/kg；10分注入）、経口投与（8mg/kg）、および十二指腸内投与（8mg/kg）した。投薬溶液剤はすべて20％エタノール中に調製した。投与後24時間にわたって血漿試料を採取し、LC/MS/MS測定法を使って化合物（A）の濃度を決定した。
【０１１８】
動脈内投与後の血漿中濃度-時間プロファイルは投与後2時間までの急速な低下と遅い終末相とからなる二相性を示した。化合物（A）のCLT（平均値＝56mL/分/kg）は肝血流量（56mL/分/kg）の100％に相当した。また、ラットの体内総水分量は約0.7L/kgなので、VSS（平均値＝23L/kg）から広範な脈管外分布が示唆された（B.DaviesおよびT.Morris,「実験動物およびヒトの生理学的パラメータ（Physiological Parameters in Laboratory Animals and Humans）」,Pharmaceutical Research, 1993:10(7),1093-1095を参照されたい）。平均T-HALF値は9.6時間だった。
【０１１９】
経口投与および十二指腸内投与後の平均CMAX値はそれぞれ228および642ng/mLだった。TMAX値はそれぞれ0.17時間および0.08時間だったことから、化合物（A）の吸収は迅速であることが示唆された。ラットにおける経口投与および十二指腸内投与後の化合物（A）の絶対経口生物学的利用能は、それぞれ7.5％および27％だった。
【０１２０】
もう一つの試験では、胆管カニューレを施したSprague Dawleyラット（n＝2/群）に、化合物（A）の単回動脈内投与（10mg/kg）または経口投与（20mg/kg）を行い、投与後9時間にわたって胆汁、尿、および血漿試料を集めた。胆汁への無傷の化合物（A）の排出は無視できる量だった（投与量のC1％）。尿には検出しうる量の化合物（A）が存在したが、尿中の化合物（A）に関する安定性データがないので、実際の濃度は定量しなかった。尿および血漿中の薬物関連化合物をLC/MSによって試験的に同定した。これには異性体（M+0）および加水分解産物（M+18）が含まれていた。また、代謝産物（M-2）が血漿中に検出された。
【０１２１】
1.4  イヌにおける薬物動態：雄ビーグル犬（n＝3）に、0.5mg/kgの化合物（A）を10分間のIV注入で投与した（10％エタノール溶液剤として投与）。投与後32時間にわたって血漿試料を採取して、化合物（A）の血漿中濃度を決定した。血漿中濃度-時間曲線は多相性を示し、投与後2時間にわたって濃度の急速な初期低下を示した後、遅い終末消失相を示す。化合物（A）のCLT（平均値＝17.3mL/分/kg）は肝血流量（30.9mL/分/kg）の約56％に相当した。またイヌの体内総水分量は0.6L/kgなので、25.2L/kgという平均VSSから、広範な脈管外分布が示唆された。T-HALFは約24時間であると見積もられた。
【０１２２】
化合物（A）の動態を単回投与IV毒性試験の一部としても評価した。化合物（A）をIV注入（約15分間）として0.5および5mg/kgの用量でイヌ2頭/性別/用量に投与した。化合物（A）の投薬溶液剤は、投薬の前日に、40％プロピレングリコール、5％Cremophor EL（登録商標）、5％エタノールおよび50％リン酸塩緩衝液（50mM、pH7.4）中に調製した。投与後48時間にわたって血液試料を採取し、化合物（A）および化合物（B）の血漿中濃度を、LC/MS/MS測定法を使用して、どちらの分析物についても2〜500ng/mLの標準曲線範囲で決定した。0.5mg/kgおよび5mg/kgの化合物（A）の投与量に関して、両性別を合わせた、化合物（A）の平均CMAX値は、それぞれ218および5118ng/mLであり、平均AUC値はそれぞれ316および6925時間・ng/mLだった。1：10という投与量の比に対して、化合物（A）の平均CMAX値およびAUC値はそれぞれ1：23および1：27であったことから、化合物（A）の動態は0.5〜5mg/kgの用量範囲で非線形であることが示唆された。T-HALF、MRT(INF)、CLT、およびVSSは、試験に使用した試料採取が不足していたので決定しなかった。
【０１２３】
化合物（B）については、平均CMAX値は0.5mg/kgおよび5mg/kg用量群についてそれぞれ95.6および984ng/mLであり、平均AUC値はそれぞれ55.0および1109時間・ng/mLだった。化合物（B）の場合、平均CMAXおよびAUC値はそれぞれ比率が1：10および1：20だった。試料サイズが小さいので、化合物（A）の動態に対する性別の影響については決定的な評価を下せなかったが、動態は両性間でかなり似ているようだった。
【０１２４】
この試験は、化合物（A）に対する全身曝露の用量関連性の増加が観察され、その増加は、用量の増加に比例する量よりも大きいことを示している。さらに、化合物（B）に対する全身曝露の用量関連性の増加も観察された。
【０１２５】
実施例2：ラットにおける毒物動態
化合物（A）の毒物動態をラットにおける単回投与IV毒物試験で評価した。化合物（A）の投薬溶液剤は、投薬の前日に、50％プロピレングリコール、10％Cremophor EL、および30％リン酸塩緩衝液（50mM、pH7.4）中に調製した。ラット3匹/性別/用量に、化合物（A）を10、25、および30mg/kgの用量で、IV注入（約3分間）として投与した。投薬後24時間にわたって連続血液試料を採取し、化合物（A）および化合物（B）の血漿中濃度を、LC/MS/MS測定法を使用して、どちらの分析物についても2〜500ng/mLの標準曲線範囲で決定した。10、25、および30mg/kgの用量では、雄ラットにおける化合物（A）の平均CMAX値はそれぞれ6422、19066、および24414ng/mLであり、雌ラットでの平均CMAX値はそれぞれ8384、20524、および25054ng/mLだった。10、25、30mg/kg用量群での濃度時間曲線下面積（AUC）の平均値は、雄ラットでは3864、11980、および19269時間・ng/mLであり、雌ラットでの値は、それぞれ8156、28476、および34563時間・ng/mLだった。用量の比が1：2.5：3であるのに対して、化合物（A）の平均CMAX値は雄および雌についてそれぞれ1：3.0：3.8および1：2.5：3.0の比であり、AUC値はそれぞれ1：3.1：4.9および1：3.5：4.2の比だった。T-HALF、時間0〜無限大までの平均滞留時間MRT(INF)、全身クリアランス（CLT）、およびVSSは、この試験に使用した試料採取が不足していたので決定しなかった。
【０１２６】
化合物（B）については、CMAXおよびAUC値は、全性別および用量群で、それぞれ499〜1787ng/ntおよび222〜2003時間・ng/mLの範囲だった。雄および雌における化合物（B）のCMAX値はそれぞれ1：2.6：3.6および1：3.0：2.8の比であり、AUC値はそれぞれ1：3.4：7.0および1：4.3：5.5の比だった。化合物（A）および化合物（B）のAUC値は、雄ラットよりも雌ラットの方が、それぞれ1.8〜2.4倍および1.3〜2.0倍高かった。
【０１２７】
この試験は、化合物（A）に対する全身曝露の用量関連性の増加が存在し、その増加は、用量の増加に比例する量よりも大きく、また雌ラットは雄ラットよりも曝露量が高いことを示している。さらに、化合物（B）に対する全身曝露の用量関連性の増加も観察された。
【０１２８】
実施例3：化合物（A）の薬物力学的試験
皮下ヒト卵巣癌（Pat-7腫瘍）を持つヌード雌マウスに10時間にわたってIV注入として投与した化合物（A）の抗癌活性を評価するために一連の実験を行なった。化合物（A）は、10％エタノール中の溶液として、3〜150mg/kgの用量で投与した。これらの実験で得られた結果から、3〜6mg/kgの範囲の化合物（A）の用量は、最小有効量（0.5log cell killに相当する活性をもたらすのに必要な用量と定義される）であると考えられることが示唆された。一連の並行実験では、マウスにおける化合物（A）の見かけの定常状態濃度を、3〜150mg/kgの10時間IV注入投薬後に決定した。化合物（A）の血漿中濃度を注入開始の2、4、および6時間後に決定したところ、各用量レベルについてどの時点でも同等であったことから、定常状態には2時間までに到達することが示唆される。したがって2、4、および6時間での濃度を平均して、見かけの定常状態濃度を決定した。見かけの定常状態濃度の用量関連性の増加は、3〜150mg/kgの全用量範囲にわたって観察された。3〜6mg/kgの最小有効IV注入量によって達成される見かけの定常状態濃度と定義される最小有効濃度は、15〜45ng/mL（約30〜90nM）の範囲に観察された。
【０１２９】
実施例4：化合物の代謝に関するインビトロ試験
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（NADPH）を添加したマウス、ラット、イヌ、およびヒト肝ミクロソームと共に化合物（A）（40:M）をインキュベートした場合、化合物（A）の酸化的代謝速度は、それぞれ2.1、0.7、1.2、および1.3nmol/分/mgタンパク質だった。さらに、代謝産物分布は、全ての種で類似していた（代謝産物質量にはいくつかのM+6およびM-2化合物が含まれていた）。ラットまたはヒト肝細胞と共にインキュベートした後の化合物（A）の代謝産物の生成は、定性的には、ミクロソームとのインキュベーションと比較して似ているようだった。化合物（A）の化学的分解によって生じる生成物と似た生成物が、肝細胞インキュベーションにおける主生成物であるようだった。
【０１３０】
薬物の代謝を担う主要ヒトシトクロムP450（CYP）類を阻害する化合物（A）の能力を、組換えヒトCYPアイソフォームを使ってインビトロで評価した。3-シアノ-7-エトキシクマリンの脱エチル化（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、およびCYP2D6）の阻害ならびにベンゾイルレゾルフィンの脱アルキル化（CYP3A4）の阻害に関するIC50値を決定した。化合物（A）はヒトCYP3A4の弱い阻害剤であり、その平均IC50値は7.3p.M（3.7p.g/mL）だった。この化合物はCYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、およびCYP2D6を阻害しなかった。これらのインビトロ結果は、CYP3A4によって著しく代謝される薬物の代謝クリアランスを化合物（A）が変化させる可能性はごくわずかであると考えうること、そしてCYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、およびCYP2D6によって代謝される薬物の代謝クリアランスを化合物（A）が有意に変化させるとは思われないことを示唆している。
【０１３１】
化合物（A）を、ヒト肝ミクロソーム、ならびに薬物代謝に一般的に関与する個々のシトクロムP450を特異的に阻害する化合物と共にインキュベートした。使用した阻害剤は、フラフィリン（CYP1A2）、8-メトキシソラレン（CYP2A6）、オルフェナドリン（CYP2B6）、スルファフェナゾール（CYP2C9）、トラニルシプロミン（CYP2C19）、キニジン（CYP2D6）、トロレアンドマイシン（CYP3A4）およびケトコナゾール（CYP3A4）である。有意な阻害はCYP3A4阻害剤だけに観察され、それらはどちらも化合物（A）の生物変換を完全に阻害した。したがってヒトでは、化合物（A）はCYP3A4の基質になりうる。
【０１３２】
化合物（A）の透過係数（Pc）を、ヒト腸吸収のインビトロモデルであるCaco-2細胞培養系で試験した。10、30、および100pM（それぞれ約5、15、および50pg/mL）での化合物（A）のPcは、それぞれ94、105、および128nm/秒だった。ヒトでの生物学的利用能が知られているいくつかのモデル化合物のPcも同じ実験で決定した。これらの化合物には、サリチル酸、アセトアミノフェン、イブプロフェン、およびプロプラノロールを含めたが、それらは全て200nm/秒を超えるPcを持ち、少なくとも90％が吸収される。94〜128nm/秒という化合物（A）のPc値は、化合物（A）がヒトでは良く吸収される可能性を持つことを示唆している。
【０１３３】
実施例5：化合物（A）の様々な製剤のビーグル犬における薬物動態および絶対経口生物学的利用能
雄ビーグル成犬（n＝4）における化合物（A）の様々な製剤の絶対経口生物学的利用能を評価した。化合物（A）は、10分間の静脈内（IV）注入（0.5mg/kg）、緩衝経口溶液剤（2mg/kg）、および緩衝経口懸濁剤（1mg/kg）として投与した。
【０１３４】
5.1  実験計画：この試験のための実験計画を表１に記載する。
【０１３５】
【表１】
2004528287.tif 000012
aこの投与量は、毒性のために、1mg/kgに減らした。
bペンタガストリン投与（6:g/kg；筋肉内投与）の15分前に処置。
c評価できる製剤がなかったのでこの処置は施さなかった。
d該当事項なし。
【０１３６】
この計画は単回投与4群4期非無作為化交叉法とした。化合物（A）を、10分間のIV注入（0.5mg/kg）、緩衝経口溶液剤（2mg/kg）、または緩衝経口懸濁剤（2mg/kg）として、4頭の雄ビーグル成犬に投与した。IV投与の場合は、40％プロピレングリコール、5％エタノール、および55％リン酸塩緩衝液（50mM、pH＝7.4）中の溶液剤（力価約0.375mg/mL）として化合物（A）を製剤化した。化合物（A）の経口溶液剤（力価約1.5mg/mL）は、58％プロピレングリコール、12％エタノール、および30％リン酸塩緩衝液（1M、pH8.0）をビヒクルとして調製した。経口懸濁剤の場合は、リン酸塩緩衝液（2M）およびクエン酸（85mM）を含む1％Avicel（登録商標）RCS91中に、化合物（A）を懸濁した。再構成時の緩衝懸濁剤のpHは約8.0であり、力価は約0.75mg/mLだった。第3処置期に計画していた経口懸濁剤の用量は、蓄積毒性のために、2mg/kgから1mg/kgに減らした。さらに、第4処置は、評価可能な製剤がなかったので施さなかった。処置間の洗い流し期間は少なくとも7日間とした。連続血液試料を投与後24時間にわたって集め、化合物（A）および化合物（B）の濃度を、LC/MS/MS測定法を使って、どちらの分析物についても2〜500ng/mLの標準曲線範囲で決定した。LC/MS/MS測定法は実施例1で使用したものと同じとした。
【０１３７】
分析作業は、標品、品質管理（QC）、および試験試料からなった。分析に使用した血漿体積は0.2mLであり、標準曲線範囲はどちらの分析物についても2〜500ng/mLであり、それぞれを定量下限（LLQ）および定量上限（ULQ）とした。試験試料の予測濃度が最低標品濃度よりも低い場合は、予測濃度の値を＜LLQと記録した。予測濃度が最高標品濃度よりも高い場合は、分析結果を＞ULQと記録し、その試料の適当な体積をブランク血漿で希釈して、再分析した。
【０１３８】
5.2  動物の準備、取り扱い、および投薬：この試験には、薬物投与および採血用の静脈アクセスを持つ4頭の雄成犬を選択した。これらのイヌを試験開始前に少なくとも1週間は環境に順応させ、個別のスチール製ケージで飼育した。動物は固有の番号とケージに付けた札で識別した。イヌには水を自由に摂取させ、標準イヌ飼料を1日1回与えたが、例外として投薬前は一晩（約12時間）絶食させ、この絶食は投薬の4時間後まで続けた。緩衝経口懸濁剤を投与する15分前に、イヌをペンタガストリン（6:g/kg；筋肉内）で前処置した。ペンタガストリン前処置は経口懸濁剤区間だけに使用した。IV投与は較正済み注入ポンプを使って定速注入として10分間かけて行なった。経口溶液剤および懸濁剤の投与は胃管によって行い、胃管を20mLの水ですすいだ。
【０１３９】
5.3  試料の収集と取り扱い：連続血液試料（3mL）を投薬前と、投薬の1時間後、1.5時間後、2時間後、4時間後、6時間後、8時間後、12時間後、および24時間後に収集した。血液試料は、抗凝固剤としてK3-EDTAを含むVacutainer（登録商標）チューブに集め、チューブを穏やかに反転させることによって、各チューブの内容物を混合した。その後直ちに、血液試料を、砕いた氷上に置いた。収集から30分以内に、チューブを4℃、2000×gで5分間遠心分離することによって血漿を得た。血漿試料は化合物（A）および化合物（B）の濃度を分析するまで−20℃以下に保存した。
【０１４０】
血漿中の化合物（A）および化合物（B）の分析に関して、各分析作業には、経験的に、以下の合格基準を適用した。全較正標品の少なくとも3/4は予測濃度が個々の名目濃度の15％（LLQについては20％）以内にあるものとする。また、標準曲線中の最低濃度の少なくとも1つは、その名目濃度の20％以内にあって、そのレベルをLLQと認定するものとし、全QC試料の少なくとも3/4は予測濃度が個々の名目濃度の15％以内にあるものとする。
【０１４１】
5.4  薬物動態解析：最高血漿中濃度（CMAX）および最高濃度到達時間（TMAX）は実験的観察から直接記録した。時刻0からTまでの血漿中濃度時間曲線下面積（AUC(0-T)）（Tは測定可能な最後の血漿中濃度の時間である）は、台形公式を使って計算した（M.Gibaldiら,「Pharmacokinetics」第2版, ニューヨーク州ニューヨーク, Marcel Decker, p445-9, 1982参照）。この試験で使用した終末相試料採取が不足していたため、T-HALFは決定しなかった。
【０１４２】
化合物（A）および化合物（B）の平均血漿中濃度時間データを表2に示す。対応するグラフ表示を、化合物（A）および化合物（B）について、それぞれ図1および図2に示す。
【０１４３】
【表２】
2004528287.tif 000013
a名目収集時間を表す。名目収集時間からのわずかな変動は結果の総合的解釈に有意な影響を持たないと考えた。
b緩衝経口懸濁剤の濃度は全て＜LLQ（2ng/mL）で、この表には記載していない。平均（SD）計算に際してLLQ未満の値は0とみなした。ある時点で全てのイヌで濃度が＜LLQであった場合には、平均を0と表す。
cn＝3。一頭のイヌに関する血漿中濃度プロファイルは、観察されたTMAXが1.0時間だったので、10分間のIV注入とは矛盾した。このイヌは平均の計算から除いた。
dn＝3。一頭のイヌは投薬後まもなく嘔吐したので、平均の計算から除いた。
e試料収集の予定がなかった。
f不注意により試料を収集しなかった。この逸脱はこの試験の総合的結論に影響しないと考えられる。
【０１４４】
化合物（A）および化合物（B）に関する平均薬物動態パラメータをそれぞれ表3および表4に示す。
【０１４５】
【表３】
2004528287.tif 000014
an＝3。一頭のイヌに関する血漿中濃度プロファイルは、観察されたTMAXが1.0時間だったので、10分間のIV注入とは矛盾した。このイヌは薬物動態解析に関して評価できないとみなした。
bn＝3。一頭のイヌは投薬後まもなく嘔吐した。このイヌは薬物動態解析に関して評価できないとみなした。
c中央値（最小,最大）
dT＝24時間
【０１４６】
【表４】
2004528287.tif 000015
an＝3。一頭のイヌに関する化合物（A）血漿中濃度時間プロファイルは、観察されたTMAXが1.0時間だったので、10分間のIV注入とは矛盾した。このイヌは化合物（A）および化合物（B）の薬物動態解析に関して評価できないとみなした。
bn＝3。一頭のイヌは投薬後まもなく嘔吐した。このイヌは化合物（A）および化合物（B）の薬物動態解析に関して評価できないとみなした。
c中央値（最小,最大）
dT＝24時間
【０１４７】
一頭のイヌに関するIV投与後の血漿中濃度時間プロファイルは、観察されたTMAXが1.0時間だったので、10分間の注入投与とは矛盾した。このイヌは薬物動態に関して評価することができないとみなした。化合物（A）のIV投与後の平均(SD)［n＝3］CMAXおよびAUC(0-T)値は、それぞれ1120（189）ng/mLおよび420（36.8）時間・ng/ntだった。この試験で得たIV投与後のAUC値は、イヌにおける0.5mg/kg投薬後の予備的IV薬物動態試験で観察されたAUC値（平均(SD)；483（34）時間・ng/mL）にかなり似ている。
【０１４８】
経口緩衝溶液剤の投与後に、一頭のイヌは投薬後まもなく嘔吐したので、このイヌから得たデータは、薬物動態に関して評価することができないとみなした。化合物（A）の緩衝経口溶液剤を投与した後の平均（SD）［n＝3］CMAXおよびAUC(0-T)値は、それぞれ365（40.9）ng/mLおよび560（159）時間・ng/mLだった。経口溶液剤後にこの試験で得られた平均AUC値は、イヌにおける単回投与経口毒性試験で得た用量標準化平均AUC値（257時間・ng/mL）と比較して約2倍高い。どちらの試験でも経口製剤は同一であったが、本試験で投与した経口溶液の総体積が約1.3mL/kgであったのに対して、毒性試験では0.4mL/kgだった。したがって、本試験で送達された緩衝剤のミリ当量は、毒性試験で投与された量より約3倍高かったことになり、そのために、本試験では胃pHがよりよく中和されただろう。化合物（A）は酸不安定性薬物である。したがって、毒性試験と比較して本試験の方が経口溶液剤投与後の曝露量が高いのは、胃酸分解からのよりよい保護に関係していると思われる。IVおよび経口溶液剤の投与後に薬物動態パラメータデータを得た2頭のイヌでは、絶対経口生物学的利用能はそれぞれ48.3％および30.6％だった（平均値＝39.5％）。
【０１４９】
化合物（B）に関するCMAXおよびAUC(0-T)値は、イヌがIVおよび経口溶液剤の投与後に化合物（B）に曝露されたこと、そして経口懸濁剤の投薬後は化合物（B）に曝露されなかったことを示している。経口投与後の化合物（B）への全身曝露はIV投与後の全身曝露より著しく高かった。
【０１５０】
これらの結果は、IVおよび経口薬物動態パラメータデータを得た2頭のイヌでは、絶対経口生物学的利用能が、それぞれ48.3％および30.6％（平均値＝39.5％）だったことを示している。
【０１５１】
実施例6：医薬的に許容できる酸中和緩衝剤の液体経口製剤
以下の組成を持つ緩衝剤を製剤化した。
【表５】
2004528287.tif 000016
【０１５２】
緩衝剤は140mLの水で構成させて、150mLの液体経口剤形にした。この液体経口剤形は7.43±0.07（6回測定）のpHを持つ。5つの液体経口剤形の平均酸中和容量は49.7（標準偏差0.17、相対標準偏差0.34％）だった。
【０１５３】
実施例7：化合物（A）の液体製剤の安定性
25mgの化合物（A）を80:20のプロピレングリコール：エタノールで再構成させて、濃度が2.5mg/mL〜12.5mg/mLの液体経口剤形にすることにより、80：20のプロピレングリコール：エタノールにおける化合物（A）の安定性を評価した。得られた液体経口剤形を室内照明下に周囲温度（20℃〜25℃）で、また冷蔵温度（2℃〜8℃）で、最高20時間まで貯蔵した。
【０１５４】
どちらの貯蔵条件でも、液体経口剤形の外観に、初期との変化は観察されなかった。
総不純物/分解物量の増加および効力の減少が、室内照明下に周囲温度で20時間の貯蔵後に観察された。総不純物/分解物量のわずかな増加が冷蔵温度で20時間の貯蔵後に観察された。総不純物量の変化は、
【化１０】
2004528287.tif 000017
の構造を持つオキサジン不純物/分解物が増加するためである。試料は75mm×4.6mm（内径）、粒径3.5:mのWaters Symmetry Shield RP8カラムと240nmのUV検出器とを使ったHPLCによって分析した。10:Lの注入量を使用し、カラムは周囲温度に保ち、流量は1mL/分にした。分析時間は1時間とし、水の移動相（0.05％酢酸）（移動相A）とアセトニトリルの移動相（0.05％酢酸）とを使った勾配溶出によって、試料を溶出させた。溶出プロファイルを以下の表に示す。
【０１５５】
【表６】
2004528287.tif 000018
【０１５６】
これらの結果は、本液体経口剤形が、2.5mg/mL〜12.5mg/mLの濃度で、周囲温度では6時間まで、冷蔵温度では20時間まで貯蔵できることを証明している。
【０１５７】
実施例8：化合物Aの合成
[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾリル)エテニル]-4-アザ-17-オキサビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオン
化合物1：(3S,6R,7S,8S,12R,13S,15S)-15-アジド-12,13-エポキシ-4,4,6,8,12,16-ヘキサメチル-7-ヒドロキシ-17-(2-メチル-4-チアゾリル)-5-オキソ-16-ヘプタデセン酸
エポチロンB（0.35g、0.69mmol）の脱気THF（4.5mL）溶液を触媒量（80mg、69mmol）のテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)で処理し、その懸濁液をAr下に25℃で30分間撹拌した。得られた明黄色均一溶液を一度に全て、アジ化ナトリウム（54mg、0.83mmol）の脱気H2O（2.2mL）溶液で処理した。反応混合物を45℃に1時間温め、H2O（5mL）で希釈し、EtOAc（7mL×4）で抽出した。有機抽出物を飽和NaCl（15mL）で洗浄し、乾燥し（Na2SO4）、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、3.0×15cm、95：5.0：0.5 CHCl3-MeOH-AcOH）で精製することにより、化合物1（0.23g、61％）を無色の油状物として得た。MS（ESI+)：551(M+H)+；MS(ESI-)：549(M-H)-。
【０１５８】
化合物2：(3S,6R,7S,8S,12R,13S,15S)-15-アミノ-12,13-エポキシ-4,4,6,8,12,16-ヘキサメチル-7-ヒドロキシ-17-(2-メチル-4-チアゾリル)-5-オキソ-16-ヘプタデセン酸
化合物1（0.23g、0.42mmol）のTHF（4.0mL）溶液を、25℃で、H2O（23mL、1.25mmol）およびポリマー担持型トリフェニルホスフィン（Aldrich、2％DVBで架橋されたポリスチレン、0.28g、0.84mmol）で処理した。得られた懸濁液をAr下に25℃で撹拌し（32時間）、セライトパッドを通して濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、1.5×10cm、95：5.0：0.5から90：10：1.0までのCHCl3-MeOH-AcOH）で精製することにより、化合物2（96mg、44％）を無色の油状物として得た。MS（ESI+)：525.2(M+H)+；MS(ESI-)：523.4(M-H)-。
【０１５９】
別法として、化合物1（0.26g、0.47mmol）およびPtO2（0.13g、50重量％）を投入した25mL丸底フラスコに、Ar下で無水エタノールを加えた。得られた黒色混合物を1気圧のH2下で10時間撹拌した後、系をN2でパージし、PtO2（65mg、25重量％）を追加した。再び反応混合物をH2雰囲気下で10時間撹拌した。次に、系をN2でパージし、セライトパッドを通して反応混合物を濾過し、CH2Cl2（25mL×3）で溶出させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を上述のように精製して、化合物2（0.19、75％）を得た。
【０１６０】
別法として、化合物1（20mg、36mmol）のTHF（0.4mL）溶液をAr下にトリフェニルホスフィン（19mg、73mmol）で処理した。反応混合物を45℃に温め、14時間撹拌し、25℃に冷却した。得られたイミノホスホランを水酸化アンモニウム（28％、0.1mL）で処理し、再び反応混合物を45℃に温めた。4時間後に、揮発性物質を減圧下で除去し、残渣を上述のように精製して、化合物2（13mg、70％）を得た。
【０１６１】
化合物A：[1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-ジヒドロキシ-8,8,10,12,16-ペンタメチル-3-[1-メチル-2-(2-メチル-4-チアゾリル)エテニル]-4-アザ-17-オキサビシクロ[14.1.0]ヘプタデカン-5,9-ジオン
化合物2（0.33g、0.63mmol）の脱気DMF（250mL）溶液を、Ar下に0℃で、NaHCO3固体（0.42g、5.0mmol）およびアジ化ジフェニルホスホリル（0.54mL、2.5mmol）で処理した。得られた懸濁液を4℃で24時間撹拌し、0℃のリン酸塩緩衝液（250mL、pH＝7）で希釈し、EtOAc（100mL×5）で抽出した。有機抽出物を10％LiCl水溶液（125mL×2）で洗浄し、乾燥し（Na2SO4）、減圧下で濃縮した。残渣をまずフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、2.0×10cm、2〜5％MeOH-CHCl3勾配溶出）で精製し、次にChromatotron（2mm SiO2、GFローター、2〜5％MeOH-CHCl3勾配溶出）で再精製して、標題の化合物（0.13g、40％）を無色の油状物として得た。1H NMR（CDCl3、400MHz）δ6.98(s，1H)、6.71(d，1H，NH，J＝8.1Hz)、6.56(s，1H)、4.69-4.62(m，1H)、4.18-4.12(m，1H)、4.01-3.96(m，1H)、3.86(s，1H)、3.38-3.34(m，1H)、2.82(dd，1H，J＝5.6, 6.0Hz)、2.71(s，3H)、2.58(s，1H)、2.43(dd，1H，J＝9.0, 14.5Hz)、3.34(dd，1H，J＝3.0, 14.5Hz)、2.14(s，3H)、2.05-1.92(m，2H)、1.82-1.41(一連の多重線，7H)、1.35(s，3H)、1.28(s，3H)、1.18(d，3H，J＝6.8Hz)、1.14(s，3H)、1.00(d，3H，J＝6.8Hz)；MS(ESI+)：507.2(M+H)+；MS(ESI-)：505.4(M-H)-。
【０１６２】
実施例9：癌患者に経口投与された化合物Aの薬物動態
進行悪性腫瘍を持つ患者に、30分間の注入として、毎週、化合物Aを投与した（1クール＝週1回の静脈内投与を3回）。患者には、1、2.5、5、10、20、25、または30mg/m2の用量を投与した。第1クール前に、化合物Aの絶対経口生物学的利用能を評価するために、20mg/m2の用量レベルから開始して、80％プロピレングリコールおよび20％エタノール（v/v）のビヒクルに入れた化合物Aを、第6日に単回経口投与し、続いてクエン酸塩/リン酸塩緩衝剤（22.5g）を投与した。第6日に投与した経口化合物Aの用量は、第1日に投与したIV化合物Aの用量と一致させた。連続血漿試料採取を第6日と第1クールの第1日に行なって、LC/MS/MSによって薬物動態を評価した。このLC/MS/MS測定法は実施例1で使用したものと同じである。
【０１６３】
経口投与用の化合物A（25mg/バイアル）は「瓶入り薬（drug in bottle）」として供給された。化合物A（25mg/バイアル）の構成用のビヒクル（緩衝剤）は80％プロピレングリコールおよび20％エタノール（v/v）の混合液とした。このプロピレングリコール/エタノール混合液は、80容量部のプロピレングリコールと20容量部のエタノールとを適切な溶液で混合し、溶液が完全に混合するまで容器を穏やかに旋回させることによって調製した。
【０１６４】
化合物A後に経口投与するためのクエン酸塩/リン酸塩緩衝剤は独立した瓶に入れて供給された。化合物Aと共に使用する緩衝剤は注射用水（WFI）で構成させる。
【０１６５】
患者に投与すべき量に応じて、25mg/バイアルの化合物Aを含む20ccバイアルに適切な注射器を使って2.5、5、または10mLのプロピレングリコール/エタノール混合物を注入して、濃度をそれぞれ10、5、または2.5mg/mLにすることにより、化合物Aを患者に投与するための準備をした。注射器を取り除き、バイアルを10秒間激しく振とうした。バイアルを超音波処理槽に入れ、溶液が透明になるまで超音波処理した。容量に応じてバイアルをプールした。
【０１６６】
化合物Aと共に投与する緩衝剤は、8オンス透明ガラス瓶に入れて供給され、注射用水（WFI）で構成させた。チャイルドプルーフキャップを緩衝剤の瓶から外し、約140mLの注射用水（WFI）を加えた。透明な溶液が得られるまで、瓶を激しく振とうするか、断続的に振とうしながら超音波処理した。
【０１６７】
第6日の経口投与に続いて、抗凝固剤としてK3EDTAを含むBecton Dickinson Vacutainerチューブ（ラベンダー色）に、以下のスケジュールに従って7mLの血液試料を収集した（経口投与開始時点からの時間：分として表す）：投薬前、00:15、00:30、00:45、1:00、1:30、2:00、3:00、4:00、6:00、8:00、24:00、48:00、および72:00。第1日のIV投与に続いて、抗凝固剤としてK3EDTAを含むBecton Dickinson Vacutainerチューブ（ラベンダー色）に、以下のスケジュールに従って7mLの血液試料を収集した（IV注入開始時点からの時間：分として表す）：投薬前、00:15、00:30（注入終了）、00:45、1:00、1:30、2:00、3:00、4:00、6:00、8:00、24:00、48:00、および72:00。
【０１６８】
血液収集後直ちに、Vacutainerチューブを数回上下反転させて抗凝固剤と間違いなく混合させた後、直ちに砕いた氷上に置いた。収集後30分以内に、試料を約2000×gおよび0〜5℃で5分間遠心分離した。次に血漿を別のラベル付スクリューキャップポリプロピレンチューブに移し、バイオ分析まで−70℃で保存した。化合物Aの血漿中濃度を、実施例1に記載のLC/MS/MS測定法を使って分析した。
【０１６９】
血漿中濃度対時間データを非コンパートメント法で解析した。化合物Aに関して決定される薬物動態パラメーターには、最大観測血漿中濃度（Cmax）、Cmax到達時間（Tmax）、時刻0から最後の試料採取時刻Tまでの血漿中濃度時間曲線下面積（AUC(0-T)）を含めた。
【０１７０】
合計18人の患者に、経口化合物Aを第6日に溶液剤として、また第1日にIVによって投与した。これらの患者から得た薬物動態結果を表7に要約する。
【０１７１】
【表７】
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a平均(SD)
b中央値(最小,最大)
cAUC(0-T)を表す
【０１７２】
上述した本発明の態様は単なる典型例であり、当業者には、具体的な化合物、材料、および手法の数多くの等価物が分かるか、または日常的な実験を行なうだけでそれらを確認することができるだろう。そのような等価物は全て本発明の範囲に含まれるとみなされ、本願特許請求の範囲に包含されるものとする。
【図面の簡単な説明】
【０１７３】
【図１】0.5mg/kgのIV投与後（-○-）および溶液剤2mg/kgの経口投与後（-□-）のイヌにおける時間に対する化合物(A)の平均血漿中濃度プロファイル。縦線は標準偏差を表し、記号のサイズより大きい場合に表示している。
【図２】0.5mg/kgのIV投与後（-○-）および溶液剤2mg/kgの経口投与後（-□-）のイヌにおける時間に対する化合物(B)の平均血漿中濃度プロファイル。縦線は標準偏差を表し、記号のサイズより大きい場合に表示している。
【図１】
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【図２】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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