(57)【要約】式ＩＩ：【化１】2004504405.tif 000040［式中、Ｐｇ及びＲ１は明細書中で定義される］の化合物又はその塩の脱保護を含んでなる、５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アルギニル−（Ｓ）−アラニル−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（配列番号：１）の塩の調製のための方法。更に特許請求されるものは、この方法に使用される中間体及び中間体の調製のための方法である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式Ｉ：
【化１】
2004504405.tif 000020
の化合物の塩の製造のための方法であって、以下の式ＩＩ：
【化２】
2004504405.tif 000021
［式中：
それぞれのＰｇは、独立にアルギニン保護基であり；そして
Ｒ１は、水素又はアセトアミド部分のアミノ基に対する保護基である；］
の化合物又はその塩の脱保護を含んでなる、前記方法。
【請求項２】
前記二つのアルギニル残基上の前記保護基Ｐｇが、同一である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
両方の保護基Ｐｇがニトロであり、そしてＲ１が水素である、請求項１又は２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４】
前記式ＩＩ中の前記アルギニル残基を保護する前記ニトロ基が化学的還元によって除去される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記化学的還元が、溶媒又は溶媒の混合物の存在中で行われる接触水素化である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記接触水素化が、酢酸より強い第２の酸を含有する酢酸水溶液中で行われる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記式ＩＩの化合物又はその塩が、以下の式ＩＩＩ：
【化３】
2004504405.tif 000022
のカルボン酸又はその塩を、以下の式ＩＶ：
【化４】
2004504405.tif 000023
のアミンとカップリングすることを含んでなる方法によって製造される、請求項１ないし６のいずれか１項に記載の方法［式中、Ｒ１及びそれぞれのＰｇは、請求項１において定義された通りである］。
【請求項８】
前記式ＩＶの化合物が、以下の式Ｖ：
【化５】
2004504405.tif 000024
［式中：
Ｐｇ及びＲ１は、請求項１で定義した通りであり；そして
Ｐｇ１は、Ｐｇ及びＲ１の存在中で、後者が水素以外である場合に選択的に除去することができるアミノ保護基である；］
の化合物からのアミノ保護基Ｐｇ１の除去を含んでなる方法によって調製される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記式Ｖの化合物が、Ｐｇ及びＲ１が請求項１で定義した通りである以下の式ＶＩＩ：
【化６】
2004504405.tif 000025
の化合物を、Ｐｇ１がアミノ保護基である以下の式ＶＩＩＩ：
【化７】
2004504405.tif 000026
のカルボン酸又はその塩とカップリングすることを含んでなる方法によって調製される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記式ＶＩＩの化合物が、以下の式ＩＸ：
【化８】
2004504405.tif 000027
［式中：
Ｐｇ及びＲ１は、請求項９で定義した通りであり；そして
Ｐｇ２は、Ｐｇ及びＲ１の存在中で、後者が水素以外である場合に選択的に除去することができるアミノ保護基である；］
の化合物からアミノ保護基Ｐｇ２を選択的に除去することを含んでなる方法によって調製される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記式ＩＸの化合物が：
（ａ）Ｐｇ及びＰｇ２が、請求項１０で定義した通りであり、そしてＲが、アルキル又はアラルキルである、以下の式Ｘ：
【化９】
2004504405.tif 000028
の化合物のエステル官能基を加水分解して、カルボン酸基を形成する工程；及び
（ｂ）工程（ａ）の生成物を、Ｒ１が、水素又はアセトアミド部分のアミノ基に対する保護基である以下の式ＸＩＩ：
【化１０】
2004504405.tif 000029
の化合物とカップリングさせる工程；
を含んでなる方法によって調製される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記式（Ｖ）の化合物が、Ｐｇ及びＰｇ１が、請求項８で定義した通りである以下の式ＸＩ：
【化１１】
2004504405.tif 000030
の化合物を、Ｒ１が水素又は保護基である以下の式ＸＩＩ：
【化１２】
2004504405.tif 000031
の化合物とカップリングさせることを含んでなる方法によって調製される、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
前記式ＸＩの化合物が、以下の式ＸＩＩＩ：
【化１３】
2004504405.tif 000032
［式中：
Ｒは、アルキル又はアラルキルであり；
Ｐｇ１は、Ｐｇ及びＲ１の存在中で、後者が水素以外である場合に選択的に除去することができるアミノ保護基であり；そして
Ｐｇは、アルギニン保護基である；］
のエステルの加水分解を含んでなる方法によって調製される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記式ＸＩＩＩの化合物が、請求項１１で定義された通りの式Ｘの化合物から：
（ａ）式Ｘの化合物からＰｇ２を除去する工程；及び
（ｂ）工程（ａ）の生成物を請求項９で定義した通りの式ＶＩＩＩの化合物とカップリングする工程；
を含んでなる方法によって得られる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
式ＩＩＩの化合物又はその塩が、以下の式ＶＩ：
【化１４】
2004504405.tif 000033
［式中：
Ｒは、アルキル又はアラルキルであり；そして
Ｐｇは、請求項７で定義した通りである；］
のエステルの加水分解を含んでなる方法によって調製される、請求項７に記載の方法。
【請求項１６】
前記式ＶＩの化合物が：
（ａ）請求項１１で定義した通りの式Ｘの化合物からＰｇ２を除去する工程；及び
（ｂ）工程（ａ）の生成物を５−フェニルペンタン酸とカップリングさせる工程；
を含んでなる方法によって調製される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記式ＩＩＩの化合物及び前記式ＩＶの化合物が、両方とも請求項１１で定義した通りの式Ｘの化合物から誘導される、請求項７に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１で定義した通りの式ＩＩの化合物。
【請求項１９】
請求項７で定義した通りの式ＩＩＩの化合物。
【請求項２０】
請求項７で定義した通りの式ＩＶの化合物。
【請求項２１】
請求項８で定義した通りの式Ｖの化合物。
【請求項２２】
請求項１５で定義した通りの式ＶＩの化合物。
【請求項２３】
請求項９で定義した通りの式ＶＩＩの化合物。
【請求項２４】
化合物（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオン酸。
【請求項２５】
請求項１０で定義した通りの式ＩＸの化合物。
【請求項２６】
請求項１１で定義した通りの式Ｘの化合物。
【請求項２７】
請求項１２で定義した通りの式ＸＩの化合物。
【請求項２８】
Ｒ１が、アセトアミド部分のアミノ基に対する保護基であり；そしてＺ１が、Ｈ又はアミノ保護基である以下の式ＸＩＩａ：
【化１５】
2004504405.tif 000034
の化合物。
【請求項２９】
請求項１３で定義した通りの式ＸＩＩＩの化合物。
【請求項３０】
以下の式ＸＩＶ：
【化１６】
2004504405.tif 000035
［式中：
Ｐｇ３は、Ｐｇの存在中で選択的に除去することができるアミノ保護基であり；
Ｐｇ２は、アミノ保護基であり；
Ｐｇは、アルギニン保護基であり；そして
Ｒは、アルキル又はアラルキルである；］
の化合物からのＰｇ３の選択的除去、Ｐｇ２で保護された（Ｓ）−アラニンによる、そしてそれとのカップリングを含んでなる、請求項１１で定義した通りの式Ｘの化合物を調製するための方法。
【請求項３１】
前記式ＸＩＶの化合物が、以下の式ＸＶの化合物又はその塩、及び以下の式ＸＶＩの化合物又はその塩：
【化１７】
2004504405.tif 000036
とのカップリングを含んでなる方法によって調製される、請求項３０に記載の方法［ここにおいてＰｇ、Ｐｇ３及びＲは、請求項３０で定義した通りである］。
【請求項３２】
Ｐｇ１が請求項９で定義した通りであり；そしてＲがアルキル又はアラルキルである以下の式ＶＩＩＩａ：
【化１８】
2004504405.tif 000037
のエステルの加水分解を含んでなる、請求項９で定義した式ＶＩＩＩの化合物の調製のための方法。
【請求項３３】
前記加水分解が、水性の塩基性条件下で、水酸化リチウムを塩基として使用して行われる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
（ｉ）４−アミノフェニル酢酸の、適したアルコールによる、硫酸の存在中におけるエステル化により、４−アミノフェニル酢酸エステル硫酸水素塩を得る工程；及び
（ｉｉ）工程（ｉ）の生成物をアンモニアと反応させる工程；
を含んでなる４−アミノフェニルアセトアミドの調製のための方法。
【請求項３５】
以下の式ＩＩＩ：
【化１９】
2004504405.tif 000038
のカルボン酸又はその塩を、以下の式ＩＶ：
【化２０】
2004504405.tif 000039
のアミンとカップリングすることを含んでなる、請求項１で定義した式ＩＩの化合物又はその塩の製造のための方法［ここにおいてＰｇ及びＲ１は、請求項１で定義した通りである］。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、新規な化学的方法に関し、そして更に特定的には、以下の式Ｉ：
【０００２】
【化２１】
2004504405.tif 000002
【０００３】
（配列番号：１）の５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル−（Ｓ）−アラニル−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミドの塩の製造のための新規な化学的方法に関する。
【０００４】
式Ｉの化合物の医薬的に受容可能な塩は、国際特許出願公開ＷＯ９７／３１０２３において開示されており、そして慢性関節リウマチ及び他のＭＨＣクラスＩＩ依存Ｔ−細胞仲介疾病のような自己免疫性疾病又は医療的状態の治療における使用に対して薬理学的に有用な特性を保有する。ＷＯ９７／３１０２３は、固相合成を使用するその調製を開示し、これは、高分子支持体を使用して、分子を構築し、そしてその後支持体から分子を切断する。然しながら、固相合成方法論の使用は、大規模な製造が必要な場合、不都合であり、そして困難である。従って固相合成を回避し、そして純粋な形態の塩の、好都合な、そして経済的な製造を可能にする別の手順を見出す必要性が存在する。大規模な製造に対して、純粋な形態で、そして良好な収率で容易に単離することを可能にする物理的特質を保有する出発物質及び中間体を伴なう手順を見出すことも更に特に好ましい。
【０００５】
固相合成を伴なわず、そして式Ｉの化合物の塩の製造に対して特に好都合な方法がいまや発見された。
一つの態様において、本発明は、以下の式ＩＩ：
【０００６】
【化２２】
2004504405.tif 000003
【０００７】
の化合物又はその塩の脱保護を含んでなる式Ｉの化合物の塩の製造のための方法に関し、式中：それぞれのＰｇは、独立にアルギニン保護基であり；そしてＲ１は、水素又はアセトアミド部分のアミノ基に対する保護基である。
【０００８】
この方法によって得られる塩であって医薬的に受容可能ではないものは、然しながらその後の塩交換手順を行うことによる、医薬的に受容可能な塩への転換に対して有用であることは認識されるであろう。このような塩交換手順は、当技術において公知である。適した塩交換の手順は、例えばイオン交換技術、所望によりそれに続く得られた生成物の精製（例えば逆相液体クロマトグラフィー又は逆浸透による）を含む。好ましくはこの方法は、所望する医薬的に受容可能な塩が、その後の塩交換の手順を必要とせず、直接得られるように行われる。
【０００９】
Ｐｇは、アルギニル残基中のグアニジノ基の保護に対して有用である、当技術において既知のいかなる保護基でもあることができる。Ｒ１が、アセトアミド部分のアミノ基に対する保護基である場合、これは、このような基の保護に対して有用である、当技術において既知のいかなる保護基でもあることができる。保護基Ｐｇ及びＲ１の適した例並びにこれらの除去のための条件は、例えば、Ｊ　Ｊｏｎｅｓ，Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｃｌａｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，１９９４；Ｔ　Ｇｒｅｅｖｅ，Ｐ　Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊ　Ｗｙｌｅｙ　＆　Ｓｏｎｓ，３ｒｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９９；及びＢｏｄａｎｓｚｋｙ　ａｎｄ　Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，Ｔｈｅ　Ｐｒａｃｔｉｃｅ　ｏｆ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，２ｎｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９４に開示されており、これらの開示は、本明細書中に参考文献として援用される。二つのアルギニル残基の保護基Ｐｇが、好ましくはこれらは同一であるが、同一又は異なっていることができることは認識されるであろう。Ｐｇに対する特に好ましい意義は、ニトロである。Ｒ１に対する特定の意義は、これが保護基である場合、例えばベンジルである。好ましくは両方のＰｇはニトロであり、そしてＲ１は水素である。両方のＰｇがニトロであり、そしてＲ１が水素である式ＩＩの化合物の使用することの特別な利益は、この化合物が非晶質ではあるが、再沈殿によって、例えばＤＭＦ中の化合物の溶液に対するアセトン水溶液の添加によって、高い純度の状態で得ることができることである。この特定の式ＩＩの化合物の使用の更なる利益は、これが、それ自体が良好な収率で、そして純粋な形態で単離することが可能な中間体を使用して得ることができることである。
【００１０】
両方のＰｇ基がニトロであり、そしてＲ１が水素である場合、アルギニル残基を保護しているニトロ基は、好ましくは化学的還元、例えば接触水素化、接触転移水素化又は亜鉛／酢酸若しくはスズ／酢酸のような溶解金属還元を使用することによって除去される。接触水素化が特に好ましい。接触水素化のために適した触媒は、例えば木炭上のパラジウム、酸化白金、パラジウム黒及び酢酸Ｐｄ（ＩＩ）のようなパラジウム塩を含む。接触水素化は、溶媒又は溶媒の混合物の存在中で都合よく行われる。溶媒及び溶媒の混合物の精選は、式Ｉの化合物の特定の塩が所望されるか否かに依存する。適した溶媒は、例えば、酢酸水溶液、トリフルオロ酢酸水溶液、ギ酸水溶液又は無機酸水溶液を含み、そして特に酢酸水溶液である。酢酸水溶液（好ましくは酢酸と水の２５：１ないし３：１体積／体積、更に好ましくは２０：１ないし３：１体積／体積の比、又は別の方法で酢酸と水の１：３ないし３：１体積／体積、例えば１：２体積／体積の比で）の使用が、式Ｉの化合物の二酢酸塩が直接形成され、これが特に好ましい塩であるために、特に有用である。好ましい態様において、溶媒は、酢酸水溶液及び酢酸より強い第２の酸を含んでなる。第２の酸は、酢酸のそれより低いｐＫａを有する。適した第２の酸は、無機酸又は更に好ましくはフッ素化酢酸、例えばジ−又はトリ−フルオロ酢酸のような有機酸を含む。好ましくは第２の酸に対して過剰の酢酸（例えば酢酸と第２の酸の２：１ないし４０：１体積／体積、更に好ましくは５：１ないし３０：１体積／体積の比）が存在する。この態様において、第２の酸は、好ましくは式ＩＩの化合物に対して等モルで、又は更に好ましくはモル過剰で、例えば式ＩＩの化合物に対して１ないし１０、更に好ましくは２ないし８モル当量の第２の酸が存在する。特に有用な溶媒は、例えば式ＩＩの化合物の当量当たり５当量のトリフルオロ酢酸を含有する酢酸水溶液を含む。接触水素化のための特に好ましい触媒は、木炭上の３−２０％のパラジウム、例えば木炭上の５−１０％のパラジウム、或いはゼオライト又はシリカ上のパラジウムを含む。触媒は、好ましくは式ＩＩの化合物又はその塩当たり０．３ないし１．２重量／重量％のパラジウムが存在するような量で使用される。水素化は、好ましくはゲージ圧０−１００バール、そして好ましくはゲージ圧０−１０バール、そして特にゲージ圧１ないし５バールの水素圧で行われる。都合よくは接触水素化は、例えば１０−７０℃、好ましくは２０−５０℃の範囲の温度で行われる。
【００１１】
医薬的に受容可能な塩は、例えば、無機酸、例えばハロゲン化水素（塩化水素及び臭化水素のような）、スルホン酸及びホスホン酸、並びに酢酸、シュウ酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸トリフルオロ酢酸等のような有機酸との塩のような生理学的に受容可能なアニオンを形成する酸との塩を含む。
【００１２】
第２の態様において、本発明は、式ＩＩの化合物又はその塩の製造のための方法に関し、これは、Ｐｇが上記で定義した通りである（そして好ましくはニトロである）以下の式ＩＩＩ：
【００１３】
【化２３】
2004504405.tif 000004
【００１４】
のカルボン酸又はその塩を、Ｐｇ及びＲ１が上記で定義した通りである（そして好ましくはＰｇがニトロであり、そしてＲ１が水素である）以下の式ＩＶ：
【００１５】
【化２４】
2004504405.tif 000005
【００１６】
のアミンとカップリングすることを含んでなる。
カップリング反応は、酸をアミンとカップリングして、アミドを形成するための、当技術において既知のいかなる標準的方法を使用しても行われる。このような手順は、例えばＢｏｄａｎｓｋｙ　ａｎｄ　Ｂｏｄａｎｓｋｙ（前出）中に記載されており、その開示は、本明細書中に参考文献として援用される。特に、例えば、カップリングは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）又はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）のような有機溶媒中で、カップリング剤の存在中で適切に行われる。典型的なカップリング剤は、例えば、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在中の、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣＩ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）又は１−（３−ジメチルアミノプロピル−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）、或いはＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）又はジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）のような第三アミン塩基の存在中のテトラフルオロホウ酸２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムを含む。好ましくはＮＭＭの存在中のＥＤＣＩ及びＨＯＢｔが使用される。ＥＤＣＩがカップリング剤として使用される場合、これは、好ましくは塩酸付加塩の形態である。カップリングがＨＯＢｔの存在中で行われる場合、ＨＯＢｔは、好ましくはその一水塩の形態で使用される。
【００１７】
典型的には、カップリングは、最初に低温、例えば−５℃ないし＋５℃の範囲で行われ、そして反応混合物を周囲温度に到達させることを可能にすることができる。好ましい態様において、カップリングは、ＤＭＦ又はＮＭＰ中で、０℃より低い温度で、例えば０ないし−５℃の範囲で行われる。カップリングがＤＭＦ中で０ないし−５℃の範囲の温度で行われることが特に好ましい。本発明の更なる態様は、上記で定義した通りの式ＩＩＩのカルボン酸又はその塩を、上記で定義した通りの式ＩＶのアミンとカップリングさせて、式ＩＩの化合物又はその塩を形成し、それに続いてＰｇがアルギニン保護基であり、そしてＲ１が水素又はアセトアミド部分のアミノ基に対する保護基（例えばベンジル）である、式ＩＩの化合物又はその塩を脱保護して、式Ｉの化合物の塩を形成することを含んでなる、式Ｉの化合物の塩の製造のための方法である。好ましくはこの方法において、Ｐｇはニトロであり、そしてＲ１は水素である。
【００１８】
好ましくは式ＩＶの化合物は、その保護された形態から、例えばＰｇが上記で定義した通りであり（そして好ましくはニトロである）、Ｒ１が上記で定義した通りであり（そして好ましくは水素である）、そしてＰｇ１がアミノ保護基である、以下の式Ｖ：
【００１９】
【化２５】
2004504405.tif 000006
【００２０】
の化合物を使用することによって生成される。Ｐｇ１が、Ｐｇ及びＲ１の存在中で、後者が水素以外である場合に、選択的に除去することができるように精選されることが重要である。Ｐｇがニトロであり、そしてＲ１が水素又はベンジルである場合、保護基Ｐｇ１は、好ましくはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）基のような酸性の条件下で容易に除去することができるものである。次いでこの保護基は、例えば塩化水素ガス又はアリールスルホン酸を使用して除去することができる。適したアリールスルホン酸は、例えばトルエンスルホン酸又は、更に好ましくは、ベンゼンスルホン酸を含む。Ｐｇ１がＢｏｃである場合、これを除去するためにベンゼンスルホン酸が使用されることが特に好ましい。Ｐｇ１の除去は、好ましくは不活性溶媒中で行われる。適した不活性溶媒は、例えばジクロロメタン、テトラヒドロフラン又は酢酸エチルを含む。所望する場合、形成された式ＩＶの化合物を更に精製せずカップリング反応を行うために、それにに先立って、溶媒をＤＭＦ又はＮＭＰのようなもう一つの溶媒に交換することができる。Ｐｇ及びＲ１の存在中で、後者が水素以外である場合、Ｐｇ１の選択的除去を可能にするＰｇ、Ｒ１及びＰｇ１に対する他の適した意義は、当技術において公知である。
【００２１】
従って、本発明の好ましい側面は、
（１）上記で定義した通りの式ＩＶのアミノ化合物を形成するための、Ｐｇ及びＲ１が上記で定義した通り（好ましくはＰｇがニトロであり、そしてＲ１が好ましくは水素又はベンジル、そして特に水素である）である式Ｖの化合物からのアミノ保護基Ｐｇ１（好ましくはＰｇ１はＢｏｃである）の選択的除去；
（２）上記で定義した通りの式ＩＩの化合物又はその塩を形成するための、式ＩＶのアミノ化合物の、上記で定義した通りの式ＩＩＩのカルボン酸又はその塩とのカップリング；そして
（３）式Ｉの化合物の塩を形成するための、Ｐｇがアルギニン保護基であり、そしてＲ１が水素又はアセトアミド部分のアミノ基に対する保護基（ベンジルのような）である式ＩＩの化合物又はその塩の脱保護；
の工程を含んでなる式Ｉの化合物の塩の製造のための方法を含んでなる。好ましくはこの方法において、Ｐｇはニトロであり、そしてＲ１は水素である。
【００２２】
好ましくは上記で定義した通りの式ＩＩＩの化合物又はその塩は、以下の式ＶＩ：
【００２３】
【化２６】
2004504405.tif 000007
【００２４】
のエステルの加水分解によって調製され、式中、Ｒは、アルキル、例えば（１−６Ｃ）アルキル、又はアラルキル（例えばベンジルのようなフェニル（１−６Ｃ）アルキル）であり、そしてＰｇは、上記で定義した通り（好ましくはニトロ）である。典型的には加水分解は、水性の塩基条件下で、例えばアルキル金属水酸化物（水酸化ナトリウム又は水酸化リチウムのような）の水溶液及び適した有機溶媒（アセトニトリルのような）を使用して行われる。加水分解は、周囲温度で都合よく行われる。反応混合物は、その後例えば塩酸を使用して酸性化して、遊離の酸を与える。Ｒがメチルであり、そしてＰｇがニトロである式ＶＩの化合物を使用することが、この化合物が結晶質の形態で得ることができることが見出されているために特に好都合である。この発見は、式Ｉの化合物の塩を純粋な、そして均質な形態で得ることを大いに補助するために特に好都合である。式ＶＩの化合物は、式ＶＩの化合物の過飽和溶液を達成することによって結晶化することができる。過飽和溶液の形成は、既知の技術を使用して、例えば適した溶媒中の化合物の溶液を冷却するか、化合物の溶液から溶媒を蒸発することによって、又は式ＶＩの化合物の溶液に反溶媒を添加することによって達成することができ、ここにおいて反溶媒は、式ＩＶの化合物が不溶であるか又は控えめに可溶な溶媒の一つである。式ＶＩの化合物の結晶化に対して適した溶媒は、アセトニトリル、ブチロニトリル、イソブタノール又は酢酸エチルを含む。好ましくは、Ｐｇがニトロであり、そしてＲがメチルである式ＶＩの化合物は、アセトニトリルから結晶化される。
【００２５】
従って本発明の更に好ましい側面は、工程（２）において使用される式ＩＩＩの化合物が、Ｒが上記で定義された通り（好ましくはメチル）であり、そしてＰｇが上記で定義された通り（好ましくはニトロ）である式ＶＩの化合物の加水分解によって得られる、上記の工程（１）、（２）及び（３）において定義された方法を含んでなる。
【００２６】
式Ｖの化合物は、Ｐｇ及びＲ１が、上記で定義された通り（好ましくはＰｇがニトロであり、そしてＲ１が水素である）である以下の式ＶＩＩ：
【００２７】
【化２７】
2004504405.tif 000008
【００２８】
の化合物の、Ｐｇ１がアミノ保護基、好ましくはＢｏｃである、以下の式ＶＩＩＩ：
【００２９】
【化２８】
2004504405.tif 000009
【００３０】
のカルボン酸又はその塩とのカップリングによって得られる。
このカップリング反応を行うための条件は、式ＩＩＩ及びＩＶの化合物のカップリングに対して先に記載したそれと類似である。アセトニトリル及びＤＭＦの混合物は、このカップリング反応における使用に対する好ましい溶媒混合物である。好ましくはこのカップリング反応中の温度は０℃より低く、更に好ましくは０ないし−１０℃、そして特に０ないし−５℃である。
【００３１】
別の方法として、式Ｖの化合物は、Ｐｇ及びＰｇ１が上記で定義した通り（好ましくはＰｇはニトロであり、そしてＰｇ１はＢｏｃである）である、以下の式ＸＩ：
【００３２】
【化２９】
2004504405.tif 000010
【００３３】
の化合物を、Ｒ１が水素又は保護基、例えばベンジルである、以下の式ＸＩＩ：
【００３４】
【化３０】
2004504405.tif 000011
【００３５】
の化合物とカップリングさせることによって得られる。
従って本発明の更なる側面は、工程（１）において使用される式Ｖの化合物が、Ｐｇ及びＲ１が、上記で定義された通り（好ましくはＰｇはニトロであり、そしてＲ１は水素である）である式ＶＩＩの化合物を、Ｐｇ１が、Ｐｇ及びＲ１の存在中で選択的に除去されることが可能なアミノ保護基、好ましくはＢｏｃである、式ＶＩＩＩのカルボン酸又はその塩とカップリングさせることによって得られる、上記の工程（１）、（２）及び（３）で定義された方法を含んでなる。
【００３６】
本発明の更なる側面は、工程（１）において使用される式Ｖの化合物が、Ｒ１が上記で定義した通り（好ましくは水素又はベンジル）である式ＸＩＩの化合物を、Ｐｇ及びＰｇ１が上記で定義した通り（好ましくはＰｇはニトロであり、そしてＰｇ１はＢｏｃである）である式ＸＩの化合物とカップリングさせることによって得られる、上記の工程（１）、（２）及び（３）で定義された方法を含んでなる。
【００３７】
式ＶＩＩの化合物は、好ましくは以下の式ＩＸ：
【００３８】
【化３１】
2004504405.tif 000012
【００３９】
の化合物からアミノ保護基Ｐｇ２を選択的に除去することによって得られ、式中Ｐｇ及びＲ１は上記で定義した通り（好ましくはＰｇはニトロであり、そしてＲ１は水素又はベンジル、好ましくは水素）であり、そしてＰｇ２は、Ｐｇ及びＲ１の存在中で、後者が水素以外である場合、選択的に除去することができるアミノ保護基である。Ｐｇ２は、好ましくはＰｇ１に対して先に記述した好ましいアミノ保護基の一つであり、更に好ましくはＰｇ２は、先に記載したような穏和な酸性の条件下で除去することができるＢｏｃである。Ｐｇ２がＢｏｃである場合、これは、好ましくはトルエンスルホン酸又は更に好ましくはベンゼンスルホン酸を使用して除去される。
【００４０】
Ｐｇ１がＢｏｃである式ＶＩＩＩの化合物は、本明細書中で以下で実施例において記載されるように得ることができ、そして他の式ＶＩＩＩの化合物は、それらと類似の方法によって製造することができる。式ＶＩＩＩの化合物を調製するために適した方法は、例えば以下の式ＶＩＩＩａ：
【００４１】
【化３２】
2004504405.tif 000013
【００４２】
のエステルの加水分解を含んでなり、式中、Ｐｇ１は、上記で定義した通り（好ましくはＢｏｃ）であり、そしてＲは、アルキル、例えば（１−６Ｃ）アルキル、又はアラルキル（例えばベンジルのようなフェニル（１−６Ｃ）アルキル）（１−６Ｃ）アルキルである。好ましくはＲは、（１−６Ｃ）アルキル、更に好ましくは（１−４Ｃ）アルキル、そして特にメチルである。
【００４３】
加水分解は、典型的には式ＶＩの化合物の加水分解に対して先に記載したものと同様な条件を使用して行うことができる。
好ましい態様において、式ＶＩＩＩａの化合物の加水分解は、水性の塩基性条件下で、水酸化リチウムを塩基として使用して行われる。加水分解は、好ましくは０ないし１０℃、更に好ましくは０ないし５℃の範囲の温度で行われる。
【００４４】
式ＶＩＩＩａの化合物は、例えば国際特許出願公開ＷＯ９７／３１０２３の実施例１に記載されているような既知の方法を使用して、又はＷＯ９９／５５６６９に記載されている方法によって調製することができる。別の方法として、本出願人は、式ＶＩＩＩａの化合物が、先に記載したものと類似の方法によって、しかし別のメチル化剤、例えば硫酸ジメチルを使用して調製することができることを見出した。
【００４５】
式ＸＩの化合物は、例えば以下の式ＸＩＩＩ：
【００４６】
【化３３】
2004504405.tif 000014
【００４７】
の対応するエステルの加水分解によって得ることができ、式中、Ｐｇ及びＰｇ１は、上記で定義した通りであり、そしてＲは、アルキル（例えば（１−６Ｃ）アルキル、又は好ましくは（１−４Ｃ）アルキル）又はアラルキル（例えばベンジルのようなフェニル（１−６Ｃ）アルキル）である。加水分解は、典型的には式ＶＩの化合物の加水分解に対して先に記載したものと同様な条件を使用して行うことができる。
【００４８】
式Ｉの化合物を製造するための先に記載した方法において、式ＩＸ又はＸＩの化合物、及び式ＶＩの化合物を使用することの特別な利益は、これらの化合物が以下の式Ｘ：
【００４９】
【化３４】
2004504405.tif 000015
【００５０】
の同じ出発物質から得ることができることであり、式中、Ｐｇ、Ｐｇ２及びＲは、上記で定義した通りである。このことは、式Ｉの化合物を調製するために必要な方法の段階の数を減少する利益を有する。
【００５１】
好ましくは式Ｘにおいて、Ｐｇはニトロであり、Ｐｇ２はＢｏｃであり、そしてＲはメチルであるこの化合物が、驚くべきことに結晶質であり、そして従って純粋な形態で調製することができることが見出された。この化合物は、式ＶＩの化合物の結晶化に対して先に記載したものと類似の方法を使用して、適した溶媒から結晶化することができる。この化合物の結晶化のために適した溶媒は、例えばアセトニトリルを含む。
【００５２】
式ＶＩの化合物は、Ｐｇ２の除去及び５−フェニルペンタン酸とのカップリングによって、式Ｘの化合物から得ることができる。好ましい態様において、カップリングは、メタノール、更に好ましくはメタノール及びＤＣＭの混合物の存在中で行われる。好ましくは式ＶＩの化合物は、先に記載したように結晶質の形態で単離される。
【００５３】
式ＩＸの化合物は、式Ｘの化合物から、カルボン酸基を形成するためのエステル官能基の加水分解、及びこのようにして形成された化合物を式ＸＩＩの化合物とカップリングさせることによって得ることができる。加水分解及びカプリング反応は、先に記載したものと類似の方法を使用して行うことができる。加水分解及びカップリング反応に対する好ましい溶媒はＴＨＦである。
【００５４】
式ＸＩの化合物は、式Ｘの化合物から、Ｐｇ２の除去、式ＶＩＩＩの化合物とのカップリング及びカルボン酸を形成するためのエステル官能基の加水分解によって得ることができる。加水分解は、典型的には式ＶＩの化合物の加水分解に対して先に記載したものと同様の条件を使用して行うことができる。
【００５５】
４−アミノフェニルアセトアミド（式ＸＩＩ、Ｒ１がＨである）は、例えば本明細書中で以下の実施例において記載されるように得ることができる。４−アミノフェニルアセトアミドの調製のための好ましい方法は：
（ｉ）４−アミノフェニル酢酸エステルの硫酸一水素塩を得るための、４−アミノフェニル酢酸の、適したアルコールによる硫酸の存在中のエステル化；及び　（ｉｉ）工程（ｉ）の生成物のアンモニアとの反応；
の工程を含んでなる。工程（ｉ）で使用されるアルコールは、好ましくは（１−４Ｃ）アルカノール、例えばエタノール又は、更に好ましくはメタノールである。工程（ｉ）に対する適した反応温度は、３０℃より低く、更に好ましくは２５℃より低い。この方法の工程（ｉｉ）は、好ましくは水性媒体中で、更に好ましくは溶解した塩化ナトリウムを含有する水中で行われる。好ましくは工程（ｉ）の生成物の水溶液にアンモニア水溶液が加えられる。好ましくは、工程（ｉ）の生成物は、この方法の工程（ｉｉ）に先立って結晶質の形態で単離される。工程（ｉ）の生成物は、適した溶媒から、例えばメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルから結晶化することができる。本出願人は、この好ましい方法が４−アミノフェニルアセトアミドを高収率で、そして純粋な形態で与えることを見出した。この好ましい方法は、本発明の更なる側面である。
【００５６】
Ｒ１がベンジルのような保護基である式ＸＩＩの化合物は、例えば、Ｚが本明細書中でＰｇ１に対して先に定義した通りのアミン保護基（例えばＢｏｃ）である、以下の式ＸＩＩａ：
【００５７】
【化３５】
2004504405.tif 000016
【００５８】
の化合物からのアミノ保護基Ｚの除去によって得ることができ、式中、Ｒ１は、本明細書中で先に定義した通りである。保護基Ｚは、Ｐｇ１の除去に対して先に記載したものと類似の方法を使用して除去することができる。
【００５９】
式ＸＩＩａの化合物は、例えば以下の式ＸＩＩｂ：
【００６０】
【化３６】
2004504405.tif 000017
【００６１】
の化合物を、Ｒ１が本明細書中で先に定義した通りの式Ｒ１ＮＨ２の化合物とカップリングさせることによって調製することができ、式中Ｚは先に定義した通りである。
【００６２】
例えば、式ＸＩＩの化合物中のＲ１がベンジルである場合、この化合物は、４−（ブトキシカルボニルアミノ）フェニル酢酸のベンジルアミンとのカップリング、それに続く酸性の条件下のＢｏｃ基の除去によって調製することができる。式ＩＩＩ及びＩＶの化合物のカップリングに対して先に記載したものと類似のカップリング条件を、これらの場合に使用することができる。このカップリング反応に対して適した溶媒は、例えばテトラヒドロフランを含む。
【００６３】
式Ｘの化合物は、以下の式ＸＩＶ：
【００６４】
【化３７】
2004504405.tif 000018
【００６５】
の化合物から、Ｐｇ２で保護された（Ｓ）アラニンによって、そしてそれとカップリングさせるＰｇ３の選択的除去によって得ることができ、式中、Ｐｇ３は、Ｐｇの存在中で選択的に除去することができる適したアミノ保護基であり；そしてＲ、Ｐｇ及びＰｇ２は、本明細書中で先に定義した通りである。Ｐｇ３によって表される適した基は、Ｐｇ２に対して本明細書中で先に定義した通りであり、好ましくはＢｏｃである。好ましくは式ＸＩＶにおいて、Ｐｇはニトロであり、そしてＰｇ３はＢｏｃである。了解されるものであるように、Ｐｇ２で保護された（Ｓ）−アラニン中のＰｇ２は、（Ｓ）−アラニン中のアミンに対する保護基である。好ましくはＰｇ２及びＰｇ３は同一であり、更に好ましくはＰｇ２及びＰｇ３は、両方ともＢｏｃである。Ｒは、好ましくは（１−４Ｃ）アルキル、更に好ましくはメチルである。
【００６６】
Ｐｇ３の除去のための条件は、式Ｖの化合物からのＰｇ１の除去に対して先に記載したものと類似である。式ＸＩＶの化合物からのＰｇ３の除去に続くＰｇ２で保護された（Ｓ）−アラニンとのカップリングに対する条件は、式ＩＩＩ及びＩＶの化合物のカップリングに対して先に記載したものと類似である。Ｐｇ３がＢｏｃである場合、これは、好ましくはアリールスルホン酸、更に好ましくはトルエンスルホン酸又は、特にベンゼンスルホン酸を使用して除去される。
【００６７】
好ましくは式Ｘの化合物は、先に記載したように結晶質の形態で単離される。
式ＸＩＶの化合物は、以下の式ＸＶの化合物又はその塩及び以下の式ＸＶＩの化合物又はその塩：
【００６８】
【化３８】
2004504405.tif 000019
【００６９】
のカップリングから得ることができ、式中、Ｐｇ、Ｐｇ３及びＲは、本明細書中で先に定義した通り（好ましくはＰｇはニトロであり、Ｐｇ３はＢｏｃであり、そしてＲはメチルである）である。式ＸＶ及びＸＶＩの化合物のカップリングに対して適した条件は、式ＩＩＩ及びＩＶの化合物のカップリングに対して使用したものと類似である。
【００７０】
好ましくは式ＸＶの化合物は、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−ＯＨである。好ましくは式ＸＶＩの化合物は、アラニン（１−６Ｃ）アルキルエステル塩酸塩、更に好ましくはアラニンメチルエステル塩酸塩である。
【００７１】
本出願人は、Ｐｇがニトロであり、Ｐｇ３がＢｏｃであり、そしてＲがメチルである場合、式ＸＩＶの化合物が結晶質であることを驚くべきことに見出した。この化合物は、酢酸（１−６Ｃ）アルキル、例えば酢酸プロピル又は酢酸ｎ−ブチルのような適した溶媒から結晶化することによって、結晶質の形態で単離することができる。
【００７２】
式ＸＩＶの化合物が、式Ｘの化合物を形成するための、Ｐｇ２で保護された（Ｓ）−アラニンとのカップリングに先立って、結晶質の形態で単離されることが好ましく、これが所望しない不純物の形成を最小化するためである。然しながら、所望する場合、式ＸＶ及びＸＶＩの化合物のカップリング、それに続くＰｇ２で保護された（Ｓ）−アラニンとのカップリングを、いっしょにはめ込むことができる。
【００７３】
式ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ及びＸＩＩＩのある種の中間体は新規であり、そして本発明の更なる独立の側面である。本発明の更なる独立の側面は、新規な中間体を調製するための本明細書中に記載される方法である。
【００７４】
本発明は、ここに以下の非制約的実施例によって例示されるものであり、ここにおいて、他に記述されない限り：
（ｉ）濃縮及び蒸発は、真空中の回転蒸発によって行われた；
（ｉｉ）操作は、室温で行われ、これは１８−２６℃の範囲であった；
（ｉｉｉ）収率は、与えられた場合当業者を補助するためのみを意図し、そして必ずしも入念な操作の展開によって得られる最大値ではない；
（ｉｖ）１Ｈ　ＮＭＲスペクトルは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を内部標準として使用して決定され、そして主要ピークの呼称に対して慣用的な略語：ｓ、単一線；ｄ、二重線；ｍ、多重線；ｔ、三重線；ｂｒ、幅広線を使用して、ＴＭＳに対するパーツパーミリオンの化学シフト（デルタ値）として表示される。
【００７５】
実施例１
（式Ｉの化合物（配列番号：１）のトリフルオロ酢酸塩の式ＩＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝Ｈ））からの調製
５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＩ；Ｐｇ＝ニトロ）（配列番号：２）（０．７５ｇ）及び炭素上の５％パラジウム（６０％水の湿潤ペースト、乾燥固体と水６：４の０．０８３ｇ）を、酢酸（６ｍｌ）、水（２ｍｌ）及びトリフルオロ酢酸（０．２４ｍｌ）のガラス製圧力容器中の混合物に加え、そして混合物を４バールの圧力のアルゴンで３回置換した。混合物を５０℃に加熱し、そして次いで４バールの圧力で水素で置換した。混合物を５０℃及び５．５バールの圧力で３．２５時間撹拌した。次いで圧力容器を４バールの圧力のアルゴンで３回置換した。反応混合物を、水で濡らした珪藻土のパッドを通して熱いまま濾過した。容器及びケークを水（２×４ｍｌ）で洗浄した。混合した濾液を蒸発によって濃縮して、無色の油状物を得た。油状物をメタノール（２５ｍｌ）中に溶解し、そして混合物を蒸発によって濃縮した。この手順を数回繰り返して、無色の油状物（０．９２ｇ）を得た。油状物を熱メタノール（５ｍｌ）中に溶解し、そして酢酸エチル（２０ｍｌ）を加えて、白色の固体を沈殿させた。固体を真空濾過によって収集し、そして酢酸エチル（５ｍｌ）で洗浄して、式Ｉの５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル−（Ｓ）−アラニル−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（配列番号：１）を、ジトリフルオロ酢酸塩（０．７８ｇ）として得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２０（ｍ，６Ｈ），１，２５（ｄ，３Ｈ），　１．２８（ｄ，３Ｈ），１．３２（ｄ，３Ｈ），１．５１（ｍ，１０Ｈ），１．７０（ｍ，３Ｈ），２．１４（ｍ，２Ｈ），２．２９（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｔ，２Ｈ），３．０９（ｍ，４Ｈ），３．３６（ｍ，４Ｈ），４．２６（ｍ，５Ｈ），４．３８（ｍ，２Ｈ），４．６０（ｄｄ，１Ｈ），７．１３−７．３０（ｍ，７Ｈ），７．５０（ｄ，２Ｈ）。
式Ｉの化合物のジトリフルオロ酢酸塩は、ジトリフルオロ酢酸塩の溶液をイオン交換カラムを酢酸アンモニウムの存在中で通過させることによって、二酢酸塩に転換することができる。次いで得られた生成物を逆相液体クロマトグラフィーを使用して精製することができる。
【００７６】
実施例２
（式ＩＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝Ｈ）（配列番号：２）の式ＩＩＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ）及び式ＩＶの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝Ｈ）からの調製）
｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＶ；Ｐｇ＝ニトロ）（５．８ｇ）を、ＤＭＦ（２５ｍｌ）中に撹拌しながら２１℃で溶解した。溶液を−３℃ないし−４℃に冷却し、そしてＮ−メチルモルホリン（１．５ｍｌ）を、混合物の温度を−１℃ないし−４℃間に維持しながらゆっくりと加えた。白色の固体が沈殿した。添加が完了した時点で、混合物を撹拌し、そして２１℃に温めて、透明な溶液を得た。５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニン（式ＩＩＩ；Ｐｇ＝ニトロ）（３．２７ｇ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（０．６３ｇ）を加え、そして混合物を透明な溶液が得られるまで２１℃で撹拌した。次いで溶液を−４℃に冷却し、そして１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１．４８ｇ）を一度に加えた。反応混合物を−４℃で４．７５時間撹拌した。冷却を止め、そして水（４８ｍｌ）を７分かけて滴下により加えた。アセトン（４８ｍｌ）及び水（４８ｍｌ）の混合物を１０分かけて滴下により加え、そして反応混合物を１６時間２１℃ないし２５℃で撹拌した。沈殿した固体を真空濾過によって収集し、そして水（９０ｍｌ）、次いでアセトン（２×９０ｍｌ）で洗浄して、５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＩ；Ｐｇ＝ニトロ）（配列番号：２）（６．０ｇ）を得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１８（ｄ，３Ｈ），１．２０（ｄ，３Ｈ），　１．２３（ｄ，３Ｈ），１．２７（ｄ，３Ｈ），１．３１（ｄ，３Ｈ），１．５２（ｍ，１０Ｈ），１．７０（ｍ，３Ｈ），２．１３（ｔ，３Ｈ），２．２９（ｍ，１Ｈ），２．５６（ｔ，３Ｈ），３．１５（ｍ，４Ｈ），３．３３（ｍ，４Ｈ），４．２７（ｍ，５Ｈ），４．３８（ｍ，２Ｈ），４．６０（ｄｄ，１Ｈ），７．１３−７．２９（ｍ，７Ｈ），７．５１（ｄ，２Ｈ）。
【００７７】
式ＩＶの化合物の調製
｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式Ｖ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）（５．０ｇ）を、酢酸エチル中の塩化水素の飽和溶液（９０ｍｌ）中で、２２℃ないし２４℃で３時間撹拌した。次いでアルゴンを３０分間反応混合物を通して泡状で流した。次いで反応混合物を真空下で濃縮した。得られた固体を酢酸エチルで摩砕し、そしてこれを蒸発し、そして濾過によって収集して、｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＶ；Ｐｇ＝ニトロ）（５．９２ｇ）を得た。
【００７８】
実施例３
（式Ｖの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｒ１＝Ｈ）の式ＶＩＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝Ｈ）及び式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）からの調製）
（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＶＩＩ；Ｐｇ＝ニトロ）（４４．５ｇ）、（Ｓ）−２−［（３Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオン酸（式ＶＩＩＩ、Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）（２１．１４ｇ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（５．９３ｇ）を、アセトニトリル（８６３ｍｌ）及びＤＭＦ（１２８ｍｌ）の混合物に加えた。撹拌した混合物を−２℃に冷却し、そしてＮ−メチルモルホリン（２０．２ｍｌ）をゆっくりと加えた。混合物の温度を約０℃に上げた。混合物を−３℃に再冷却し、そして１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１４．１６ｇ）を撹拌しながら加えた。混合物を２０時間−３℃ないし−５℃で撹拌し、そして次いで濃縮して、微細な白色の沈殿物を含有する油状物を得た。固体を濾過によって除去し、固体をアセトニトリルで洗浄した。洗浄液及び濾液を混合し、そして高真空下で濃縮して、油状物（１３２ｇ）を得た。イソブタノール（８６０ｍｌ）を油状物に加え、そして混合物を１０％の塩化ナトリウム水溶液、１．０Ｍの硫酸水素ナトリウム溶液、炭酸ナトリウム水溶液、そして再び１０％の塩化ナトリウム水溶液で連続して洗浄した。この洗浄手順を、塩化ナトリウム水溶液による最後の洗浄液のｐＨが７になるまで繰り返した。有機相を、イソブタノールを時々加えながら、蒸留器の頂部温度が１０７℃に達するまで蒸留した。次いで溶液を、ジャケット付き濾過器中の珪藻土のパッドを通して濾過した（ジャケット温度６５℃）。濾過した溶液を還流で再加熱して、透明な溶液を得た。溶液を撹拌しながら６６℃まで冷却させ、この時点で撹拌を止め、そして混合物を周囲温度まで冷却させた。沈殿した固体を濾過によって収集し、イソブタノールで洗浄し、そして４５℃の真空オーブン中で一定重量まで乾燥した。このようにして−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−［Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオニル｝−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式Ｖ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）（４８．５ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２３（ｄ，３Ｈ），１．２７（ｄ，３Ｈ），１．３２（ｄ，３Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ），１．５３（ｍ，３Ｈ），１．７３（ｍ，２Ｈ），２．２３（ｍ，１Ｈ），３．１６（ｍ，２Ｈ），３．３１（ｍ，４Ｈ），４．１１（ｍ，１Ｈ），４．２５（ｍ，２Ｈ），４．３８（ｍ，１Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），７．１８（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｍ，２Ｈ）。
【００７９】
式ＶＩＩの化合物の調製
塩化水素の酢酸エチル中の溶液（３３５ｍｌ）を、氷水浴中で冷却されたｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＸ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ）（４３．２ｇ）に加えた。混合物を冷却しながら１０分間撹拌し、次いで周囲温度まで上昇させた。７．５時間後、混合物を濾過し、そして単離された固体を酢酸エチル（４×１２５ｍｌ）で洗浄した。次いで固体を真空下の周囲温度で１６時間乾燥して、（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＶＩＩ；Ｐｇ＝ニトロ）（４４．５ｇ）を得て、これを更なる精製なしに使用した。
【００８０】
式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）の調製
水酸化ナトリウム溶液（１．８８Ｍ；１５０ｍｌ）を、（Ｒ）−メチオニン（２５．０ｇ；０．１６６モル）に加え、そしてｔｅｒｔ−ブタノール（１００ｍｌ）を加えた。混合物を０−５℃に冷却し、そしてジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４１．１ｇ）を一度に加えた。反応混合物を２０℃に温め、そして４時間撹拌した。混合物を０−５℃に冷却し、そして２Ｍのクエン酸水溶液（１２８ｍｌ）を、温度を５℃より低く維持しながら加えた。ジクロロメタン（２５０ｍｌ）を加え、そして混合物を２０℃で１５分間撹拌した。上部の水相を分離し、そして有機相を確保した。水相をジクロロメタン（１２５ｍｌ）で抽出し、そして抽出物を確保した有機相と混合した。混合した有機相を水（２５０ｍｌ）で洗浄し、そして２５０ｍｌの体積が確保されるまで常圧で蒸留した。溶液（Ｂｏｃ−（Ｒ）−メチオニンを含有する）を０−５℃に冷却し、そして（Ｓ）−アラニンメチルエステル塩酸塩（２５．７ｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（２４．６ｇ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３５．６ｇ）及びＮ−メチル−モルホリン（３５．６ｇ）を、混合物の温度を５℃より低く維持しながら加えた。次いで混合物を２０℃に温め、そしてこの温度で５時間撹拌した。混合物を０−５℃に冷却し、そして水（１００ｍｌ）を、温度を５℃より低く維持しながら加え、そして混合物を１５分間撹拌した。有機相を分離し、そして水（１５０ｍｌ）、２Ｍクエン酸水溶液（１００ｍｌ）、２０％重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）及び食塩水（１００ｍｌ）で連続して洗浄した。ジクロロメタン（４５０ｍｌ）を有機相に加え、そして混合物を１００ｍｌの留出物が収集されるまで常圧で蒸留した。混合物（Ｂｏｃ−（Ｒ）−Ｍｅｔ−（Ｓ）−Ａｌａ−ＯＭｅを含有する）を、０−５℃に冷却し、そしてテトラフルオロホウ酸トリメチルオキソニウム（２５．１ｇ；０．１６６モル）を、温度を０−５℃に保ちながら一度に加えた。混合物を２０℃に３０分かけて温まらせ、そして次いで更に４時間撹拌した。粉末の炭酸カリウム（３２５メッシュ；７１．９ｇ）を加え、そして混合物を１２時間還流した。混合物を０−５℃に冷却し、そして水（３００ｍｌ）を加えた。混合物を１５分間２０℃で撹拌し、そして焼結漏斗（多孔度３）を通して濾過した。濾液の下部の有機相を分離し、そして水（３００ｍｌ）で洗浄した。溶液を３２０ｍｌの留出物が収集されるまで常圧で蒸留し、そして酢酸ｎ−ブチル（２００ｍｌ）を加えた。溶液を８０ｍｌの濃縮物が残るまで減圧下の７０−７５℃で濃縮した。濃縮物を４０℃に冷却し、そしてイソヘキサン（８０ｍｌ）を加えた。混合物を２０℃に冷却し、次いで４０℃に加熱し、そして更なるイソヘキサン（３２０ｍｌ）を１時間かけてゆっくりと加えた。混合物を更に３０分間４０℃で撹拌し、そして次いで０−５℃に冷却し、そして１時間撹拌した。懸濁した結晶質の固体を濾過によって収集し、冷イソヘキサン（２×５０ｍｌ）で洗浄し、そして真空オーブン中で５０℃で８時間乾燥して、（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル���プロピオン酸メチル（３６．５ｇ）を得た。水（１９５ｍｌ）中の生成物（２５ｇ）を０−５℃に冷却し、そして水中の水酸化ナトリウム（４７重量／重量％；５．４５ｍｌ）を撹拌しながら１時間かけて加えた。添加が完了した時点で、反応混合物を更に９０分間０−５℃で撹拌し、そして次いで硫酸水素カリウム（１３．６７ｇ）の水（５０ｍｌ）中の溶液を、冷却された混合物に２時間かけて加えた。更に１時間後、冷却された混合物を濾過した。収集した固体を少体積の水で洗浄し、そして真空下の４０℃で乾燥して、（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオン酸（２１．８ｇ）を得た。
【００８１】
式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）の別の方法による調製：
６．１３重量／重量％の水酸化ナトリウム水溶液（１８４．１ｇ）を、（Ｒ）−メチオニン（２５．０ｇ；０．１６６モル）に加え、そしてｔｅｒｔ−ブタノール（９２．５ｍｌ）を加えた。混合物を０−５℃に冷却し、そして二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４２．２ｇ）を４分割して４５分かけて加えた。反応混合物を２０℃に温め、そして４時間撹拌した。混合物を０−５℃に冷却し、そして３０重量／重量％のクエン酸水溶液（１６４ｇ）を、温度を５℃より低く維持しながら加えた。ジクロロメタン（２５０ｍｌ）を加え、そして混合物を２０℃で１５分間撹拌した。上部の水相を分離し、そして有機相を確保した。水相をジクロロメタン（１２５ｍｌ）で抽出し、そして抽出物を確保された有機相と混合した。混合した有機相を水（２５０ｍｌ）で、次いで１７重量／重量％の塩化ナトリウム水溶液（３００ｇ）で洗浄した。有機相を２５０ｍｌの体積が残るまで常圧で蒸留した。溶液（Ｂｏｃ−（Ｒ）−メチオニンを含有する）を、−５ないし０℃に冷却し、そしてＮ−メチル−モルホリン（３５．７ｇ）を、温度を−５ないし０℃に維持しながら加えた。（Ｓ）−アラニンメチルエステル塩酸塩（２５．８ｇ）を、続いて１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（２４．７ｇ）を加えた。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３６．１ｇ）を、４分割して１時間かけて加えた。混合物を−５ないし０℃で５時間撹拌した。水（１００ｍｌ）を、温度を５℃より低く維持しながら加え、そして混合物を１５分間撹拌した。有機相を分離し、そして水（１００ｍｌ）、３０重量／重量％のクエン酸水溶液（１３２ｇ）、９．１重量／重量％の重炭酸ナトリウム水溶液（１１０ｇ）及び１６．７重量／重量％の塩化ナトリウム水溶液（１２０ｇ）で連続して洗浄した。ジクロロメタン（４５０ｍｌ）を有機相に加え、そして混合物を５００ｍｌの体積が残るまで常圧で蒸留した。混合物（Ｂｏｃ−（Ｒ）−Ｍｅｔ−（Ｓ）−Ａｌａ−ＯＭｅを含有する）を、０−５℃に冷却し、そしてテトラフルオロホウ酸トリメチルオキソニウム（２４．７ｇ）を、温度を０−５℃に保ちながら一度に加えた。混合物を２０℃に３０分かけて温まらせ、そして次いで更に４時間撹拌した。炭酸カリウム（９６ｇ）を３分割して加え、そして混合物を合計２０時間還流した。水（４００ｍｌ）を温度を＜５℃に維持しながら加えた。混合物を１５分間２０℃で撹拌し、そしてセライトのパッド（５．０ｇ）を通して濾過した。濾液の下部の有機相を分離し、そして水（３００ｍｌ）で洗浄した。溶液を１２０ｍｌの体積が残るまで常圧で蒸留した。酢酸ｎ−ブチル（３８５ｍｌ）を加え、そして溶液を、２０５ｍｌの体積が残るまで１００ミリバールの減圧下で濃縮した。濃縮物を６０℃に冷却し、そしてイソヘキサン（６１４ｍｌ）を、温度を≧５５℃に維持しながら加えた。混合物を０℃に冷却し、そして１時間撹拌した。懸濁した結晶質の固体を濾過によって収集し、冷酢酸ｎ−ブチル：イソヘキサン（３２ｍｌ：１０１ｍｌ）で、続いて冷イソヘキサン（１３５ｍｌ）で洗浄し、次いで５０℃の真空オーブン中で１７時間乾燥して、（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオン酸メチル（２３．７ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３０（ｄ，３Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ），１．８０（ｍ，１Ｈ），２．２５（ｍ，１Ｈ），３．２０（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｔ，１Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），４．６５（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｄ，１Ｈ）。
水（５９５ｍｌ）中の生成物（７０ｇ）を、０−５℃に冷却し、そして水（１０５ｍｌ）中の水酸化リチウム一水塩（１１．１５ｇ）を、撹拌しながら１時間かけて加えた。反応混合物を更に２時間０−５℃で撹拌し、そして次いで硫酸水素カリウム（３７．８４ｇ）の水（１４０ｍｌ）中の溶液を、冷却された混合物に２時間かけて加えた。更に１時間後、冷却された混合物を濾過した。収集した固体を少体積の水で洗浄し、そして真空下の４０℃で乾燥して、（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオン酸（２１．８ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．３３（ｍ，３Ｈ），１．７９（ｍ，１Ｈ），２．２７（ｍ，１Ｈ），３．２８（ｍ，２Ｈ），４．０６（ｑ，１Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），７．０９（ｄ，１Ｈ）。
【００８２】
（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオン酸メチル（式ＶＩＩＩａの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ、Ｒ＝メチル）の別の方法による調製）
工程１．１　Ｄ−メチオニンのＢｏｃ保護
Ｄ−メチオニン（２５．００ｇ、０．１６８ｍｍｏｌ）に、６．１３重量／重量％の水酸化ナトリウム溶液（１７６ｍｌ、相対体積７．０）を加えた。ｔ−ブタノール（８５．０ｍｌ）を反応混合物に入れ、これを４℃に冷却した。Ｂｏｃ無水物（４２．１８ｇ、１８３ｍｍｏｌ、１．１２モル当量）を、反応物の温度を４℃より低く維持しながら４等分して４５分かけて入れた。反応混合物を周囲（２２℃）まで温め、そして一晩撹拌した。反応混合物を３℃に冷却し、３０重量／重量％のクエン酸水溶液（４９．０５ｇのクエン酸、１．５２モル当量、１１５ｍｌの水に溶解）を、温度を５℃より低く維持しながら入れた。更なるクエン酸（１５．００ｇ、７１．４ｍｍｏｌ）を、ｐＨを３より低く減少するために入れた。ジクロロメタン（２５０ｍｌ）を入れ、そして反応物を周囲温度（２２℃）まで温めた。反応物を１５分間撹拌した後、反応物を１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして確保した。水層をジクロロメタン（１２５ｍｌ）で抽出した。これを２０℃で１５分間保持し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして最初の有機層と混合した。水（２５０ｍｌ）を混合した有機相に入れた。混合物を２０℃で１５分間撹拌し、そして次いで１５分間静置させた。下部の有機相を分離し、そして食塩水（５０ｇの塩化ナトリウム、相対重量２、２５０ｍｌ、２５０ｇ、相対体積１０．０の水に溶解）を加えた。反応物を２０℃で１５分間撹拌し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして次いで６２℃の浴の常圧蒸留で、４４０ｍｌから２５０ｍｌに濃縮した。更なるジクロロメタン（４００ｍｌ）を入れ、そして有機相を常圧蒸留によって１４０ｍｌに濃縮した。水分含有率は０．０６重量／重量％であった。
【００８３】
工程１．２：Ｂｏｃ−Ｄ−メチオニン及びアラニンメチルエステルのカップリング
工程１．１からの反応混合物を４℃に冷却し、そして４−メチルモルホリン（３８．８ｍｌ、３４９ｍｍｏｌ、２．１０モル当量）を、温度を＜５℃に維持しながら３０分かけて均等に加えた。アラニンメチルエステル塩酸塩（２５．８０ｇ、１８３ｍｍｏｌ、１．１０モル当量）を、続いてＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（２４．７１ｇ、１６１ｍｍｏｌ、０．９６モル当量）を入れた。ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（３６．０７ｇ、１８８ｍｍｏｌ、１．１２モル当量）を、温度を＜５℃に維持しながら１時間かけて４等分して入れた。反応混合物を＜５℃で約５時間撹拌し、そして２０℃にゆっくりと一晩温まらせた。４℃に冷却した後、水（１００ｍｌ）を入れた。混合物を１５分間＜１０℃で撹拌し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして水（１００ｍｌ）を温度を＜１０℃に維持しながら加えた。混合物を１５分間撹拌し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして３０重量／重量％のクエン酸水溶液（３８．５０ｇのクエン酸、１．２０モル当量、９３ｍｌの水に溶解）を温度を＜１０℃に維持しながら入れた。反応混合物を１５分間撹拌し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして９．１０重量／重量％の炭酸水素ナトリウム（１０．０ｇの炭酸水素ナトリウム、０．７１モル当量、１００ｍｌの水とで調製）を、温度を＜１０℃に維持しながら入れた。反応混合物を＜１０℃で１５分間撹拌し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして１６．７重量／重量％の食塩水（１００ｍｌの水に溶解された２０．００ｇの塩化ナトリウム）を入れた。反応混合物を１５分間＜１０℃で撹拌し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、ジクロロメタン（４５０ｍｌ）を加え、そして４３０ｍｌまで常圧蒸留によって濃縮した。水の水準は０．０５重量／重量％であった。
【００８４】
工程１．３：　Ｂｏｃ−Ｄ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−ＯＭｅのＳ−メチル化
工程１．２からの反応溶液に、ジクロロメタン（７０ｍｌ）を加え、この溶液の半量を先に持ち越した。フラスコをアルゴン置換し、そして硫酸ジメチル（７．９ｍｌ、８２．５ｍｍｏｌ、ジペプチドに基づいて１．２０モル当量）を入れた。反応混合物を還流（４２℃）まで加熱し、そして２７時間撹拌した。
【００８５】
工程１．４　環化
工程１．３からの反応混合物を含有する反応フラスコを、逆Ｄｅａｎ　ａｎｄ　Ｓｔａｒｋ装置及び漂白トラップに接続した。炭酸カリウム（１９．０２ｇ、１３８ｍｍｏｌ、２．０モル当量）を入れて、スラリーを生成した。反応混合物を還流（４２℃）まで加熱し、そして更なる炭酸カリウム（９．５１ｇ、６９ｍｍｏｌ、１．０モル当量）を、４．２５及び２０時間後に入れた。反応混合物を３℃に冷却し、そして水（２００ｍｌ）を温度を５℃より低く維持しながら加えた。反応混合物を２０℃に温め、１５分間撹拌し、そして１５分間静置させた。下部の有機層を分離し、そして水（１５０ｍｌ、相対体積３．３）を加えた。２０℃で１５分間撹拌し、そして１５分間静置させた後、下部の有機層を分離し、そして確保した。
【００８６】
工程１．５　結晶化及び単離
酢酸ｎ−ブチル（１７６ｍｌ）を、工程１．４からの有機溶液に入れ、そして有機相を高真空蒸留（浴温度７５℃、圧力＜１００ミリバール）によって９０ｍｌまで濃縮した。イソ−ヘキサン（２８２ｍｌ）を、温度を≧４５℃に保ちながら入れた。ある程度の白色の固体が形成され、これは反応混合物を還流（６２℃）まで加熱した時点で、事実上全て溶解した。反応物を５０℃まで２０分かけて冷却し、そして５０℃で３０分保持して、結晶質の形態の表題生成物の懸濁液を得た。反応物を４℃まで３０分かけて冷却し、そしてスラリーを濾過し、そして脱液させた。生成物のケークを、予備冷却（４℃）した酢酸ｎ−ブチル及びイソ−ヘキサン（１９ｍｌ：５１ｍｌ）の溶液で置換洗浄し、そしてイソ−ヘキサン（６８ｍｌ）で洗浄した。生成物を５０℃の真空オーブンで乾燥して、（Ｓ）−２−［（Ｒ）−３−（Ｎ−［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル］アミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル］プロピオン酸メチル（１００％濃度での収量＝１６．０１ｇ（６７％））を得た。
生成物をＨＰＬＣ及び１Ｈ−ＮＭＲによって分析した。
【００８７】
実施例４
（式ＩＸの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ）の式Ｘの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル）からの調製）
ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式Ｘ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル）（６４．９ｇ）及びアセトニトリル（３８０ｍｌ）の混合物を、１６℃に冷却し、そして１．０Ｎの水酸化ナトリウム溶液（１４６．５ｍｌ）を２分かけて加えた。混合物を９−１２℃に９０分間維持し、次いで１８℃に温まらせ、そして１．０Ｍの硫酸水素ナトリウム（１９５ｍｌ）を加えた。固体の塩化ナトリウム（６４．６ｇ）を加え、そして有機層を分離し、そして水相をアセトニトリルで洗浄した。有機相を混合し、ＤＭＦ（４０ｍｌ）を加え、そして混合物を０−５℃に冷却した。４−アミノフェニルアセトアミド（１９．９５ｇ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（１２．８３ｇ）を、続いて１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２８．０ｇ）を次いで加えた。混合物を冷却しながら１６時間撹拌し、そして次いで周囲温度まで温まらせた。反応混合物を濃縮して、油状物を得た。イソブタノール（４２０ｍｌ）を加え、そして溶液を濾過した。１０％のクエン酸水溶液（１９５ｍｌ）を、続いて固体の塩化ナトリウム（５０ｇ）濾液に加えた。有機相を分離し、そして飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、そして１０５ｍｌの留出物が収集されるまで蒸留した。混合物を周囲温度まで冷却させ、そして固体を濾過によって収集し、そして真空下の４５℃で乾燥して、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＸ、Ｐｇ２＝Ｂｏｃ）（６５．３５ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２３（ｄ，３Ｈ），１．３８（ｄ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．５９（ｍ，３Ｈ），１．７７（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，２Ｈ），４．０３（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｍ，１Ｈ），４．４６（ｍ，１Ｈ），７．２４（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｍ，２Ｈ）。
【００８８】
４−アミノフェニルアセトアミドの調製：
（ｉ）４−アミノフェニル酢酸（２２．０ｇ）を、無水の塩化水素のメタノール中の２．０−２．５Ｍの冷溶液（１３２ｍｌ）中に、分割して１５分かけて撹拌しながら、混合物の温度を０−１０℃に維持しながら加えた。次いで混合物を１時間還流し、そして常圧の蒸留によって濃縮し、７２．６ｍｌの留出物を収集した。次いで混合物を５０℃に冷却し、そしてメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１７６ｍｌ）を、温度を３５℃より高く維持しながら加えた。次いで混合物を２．５℃まで徐々に冷却し、そしてこの温度で１時間保持した。得られた結晶質の生成物を濾過によって単離し、そしてメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２×２０ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の５０℃で乾燥して、４−アミノフェニル酢酸メチル塩酸塩（２８ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６０（３Ｈ），３．７０（２Ｈ），７．３６（４Ｈ）。
【００８９】
（ｉｉ）４−アミノフェニル酢酸メチル塩酸塩（２８ｇ）を、撹拌しながら、混合物の温度を１５−２５℃に維持しながら分割して１５分かけて冷アンモニア水（密度０．９１ｇ／ｍｌ；８４ｍｌ）に加えた。次いで混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。混合物を０−５℃に冷却し、そしてこの温度で１時間保持した。得られた結晶質の生成物を濾過によって単離し、水及びアセトニトリルで連続して洗浄し、そして真空下の５０℃で乾燥して、４−アミノフェニルアセトアミド（１６．７ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．１６（２Ｈ），４．８５（２Ｈ），６．４９（２Ｈ），６．９０（２Ｈ）。
【００９０】
実施例５
（式ＩＩＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ）の式ＶＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）からの調製）
１．０Ｍの水酸化ナトリウム溶液（１８０ｍｌ）を、アセトニトリル（１８０ｍｌ）中の、５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式ＶＩ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）（１７．７５ｇ）に撹拌しながら１０分かけて加えた。混合物を３時間撹拌し、０−５℃に冷却し、そして濃塩酸（３．５ｍｌ）をゆっくりと加えて、混合物のｐＨを２−３に調節した。混合物を周囲温度になるまで冷却させ、次いで穏やかな還流まで加熱し、そして５０℃に冷却させた。有機相を分離し、そしてアセトニトリルを時々加えながら、蒸留装置の頂部温度が８１℃になるまで、揮発性物質を蒸留によって除去した。反応混合物を周囲温度まで２時間かけて撹拌しながら冷却させた。混合物を１０℃に冷却し、そして沈殿した固体を濾過によって収集し、アセトニトリル（２×１５ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の４５℃で乾燥した。固体（２１．８ｇ）、水（１００ｍｌ）及びアセトニトリル（１００ｍｌ）の混合物を還流まで加熱し、そしてゆっくりと冷却させた。混合物を１４℃に冷却し、そして沈殿した固体を濾過によって収集し、アセトニトリル（２×１５ｍｌ）で洗浄し、そして乾燥して、５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニン（１７．３ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１８（ｄ，３Ｈ），１．２７（ｄ，３Ｈ），１．５２（ｍ，７Ｈ），１．７０（ｍ，１Ｈ），２．１３（ｔ，２Ｈ），２．５５（ｔ，２Ｈ），３．１３（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｍ，１Ｈ），４．２６（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｍ，３Ｈ），７．２７（ｍ，２Ｈ）。
【００９１】
実施例６
（式ＶＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）の式Ｘの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル）からの調製）
Ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式Ｘ、Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）（７９．６ｇ）のジクロロメタン（６６８ｍｌ）中の混合物を、撹拌しながら０−５℃に冷却し、そして無水の塩化水素を混合物を通して９０分間泡状で流した。次いで混合物を周囲温度まで温まらせた。次いで混合物をアルゴンで９０分間置換した。混合物を０−５℃に冷却し、そしてＮ−メチルモルホリン（１０１．４ｇ）、５−フェニルペンタン酸（２７．４ｇ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（２７．２ｇ）を、撹拌しながら連続して加えた。次いで１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３２．４ｇ）を加え、そして混合物の温度を０−５℃に１５分間維持し、次いで周囲温度まで上昇させた。混合物を１６時間撹拌させ、イソブタノール（４１７ｍｌ）を加え、そして混合物を１．０Ｍの硫酸水素ナトリウム溶液（３×２３０ｍｌ）、炭酸ナトリウム溶液（２×２１０ｍｌ）及び飽和塩化ナトリウム溶液（４×２００ｍｌ）で洗浄した。有機相を濃縮し、酢酸エチル（５５０ｍｌ）を加え、そして混合物を再び濃縮した。更なる酢酸エチル（５５０ｍｌ）を加え、そして混合物を温め、そして次いで冷却させ、その時点で固体が結晶した。混合物を氷水浴中で冷却し、そして結晶質の固体を濾過によって単離し、酢酸エチル（２×１００ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の５０℃乾燥して、５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式ＶＩ、Ｒ＝メチル）（７５．５ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１８（ｄ，３Ｈ），１．２８（ｄ，３Ｈ），１．５２（ｍ，７Ｈ），１．６９（ｍ，１Ｈ），２．１３（ｔ，２Ｈ），２．５５（ｔ，２Ｈ），３．１６（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｍ，３Ｈ），７．１７（ｍ，３Ｈ），７．２７（ｍ，２Ｈ）。
【００９２】
Ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式Ｘ（Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル））の調製：
Ｎ−メチルモルホリン（３４．０９ｇ）を、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−ＯＨ（６１．９８ｇ）、アラニンメチルエステル塩酸塩（２０．９３ｇ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１０．１３ｇ）のジクロロメタン（７５０ｍｌ）中の混合物に、撹拌しながら加えた。混合物を０−５℃に冷却し、そして１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３６．０ｇ）を加えた。混合物を０−５℃で３時間、次いで２２℃で３０分間撹拌した。次いで混合物を０−５℃に冷却し、そして次いで無水の塩化水素を、温度を１５℃より低く保ちながら、混合物を通して泡状で流した。５０分後、混合物を２２℃に温め、そして窒素で置換した。混合物を０−５℃に冷却し、そして次いでＮ−メチルモルホリン（９２．９ｇ）を撹拌しながら、反応混合物の温度を２０℃より低く維持しながら１０分かけて加えた。反応混合物を１０℃に冷却し、そして次いでｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニン（２８．３５ｇ）を、続いて１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２８．８ｇ）を加えた。混合物を１５時間撹拌し、そして次いで濾過し、濾過ケークをジクロロメタン（５０ｍｌ）で洗浄した。濾液を１Ｍの硫酸水素ナトリウム（３×１５０ｍｌ）で、続いて炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、無水の硫酸マグネシウムで乾燥し、そして蒸発によって濃縮して、淡黄色の固体を得た。固体をアセトニトリル（１６９ｍｌ）中に、還流まで加熱することによって溶解し、そして溶液を冷却させた。結晶した生成物を濾過によって収集し、そして冷アセトニトリル（２×５５ｍｌ）で洗浄して、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（５９．３ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１７（ｄ，３Ｈ），１．２９（ｄ，３Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ），１．５２（ｍ，３Ｈ），１．６８（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｍ，２Ｈ）。
【００９３】
実施例７
（式Ｖの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝ベンジル）の式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）からの式ＸＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ）を経由する調製）
（１）１Ｍの水酸化ナトリウムの溶液（２０ｍｌ）を、式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）（１．０ｇ）のアセトニトリル（１５ｍｌ）中のスラリーに一度に加え、そして混合物を１６時間撹拌した。固体の塩化ナトリウム（０．５ｇ）を一度に加え、そして混合物を１Ｍの塩酸（２．４ｍｌ）の滴下による添加によってｐＨ２に酸性化した。アセトニトリル（５ｍｌ）を加え、そして有機相を分離した。水相をアセトニトリル（２×１０ｍｌ）で抽出し、そして有機相を混合して、式ＸＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ）の溶液を得た。ヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（０．２３６ｇ）を一度に加え、そして混合物を０−５℃に冷却した。
【００９４】
（２）ジオキサン中の４Ｍの塩化水素の溶液（７ｍｌ）を、Ｎ−ベンジル−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルアセトアミド（０．５６ｇ）に一度に加え、そして混合物を２時間撹拌した。混合物を濃縮し、そして残留物を真空下で２時間維持した。アセトニトリル（２ｍｌ）を残留物に加え、そしてスラリーを０−５℃に冷却した。Ｎ−メチルモルホリン（０．８ｍｌ）を１分かけて滴下により加え、そして混合物を５分間撹拌した。
【００９５】
（３）工程（１）からの冷却した混合物を、工程（２）の混合物に加え、そして水（０．５ｍｌ）を加えて、完全な溶液を得た。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（０．４６５ｇ）を一度に加え、そして得られた混合物を０−５℃で２時間、そして次いで周囲温度で１６時間撹拌した。炭酸カリウム溶液（１０重量／重量％；２０ｍｌ）を加え、そして有機相を分離した。水相をアセトニトリル（２×１０ｍｌ）で抽出し、そして混合した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液（２０ｍｌ）で洗浄し、そして次いで濃縮して、淡黄色の泡状物を得て、これは静置により固化した。このようにして式Ｖの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝ベンジル）（１．０７ｇ）を得た。
【００９６】
式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）の調製
式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）を、実施例６に記載したものと類似の手順を使用して、式Ｘの化合物から（しかし５−フェニルペンタン酸の代わりに式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）を使用して得た。式Ｘの化合物（Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）（１０．８１ｇ）を、ジクロロメタン中の無水の塩化水素を使用して脱保護した。混合物を窒素で１６時間置換し、そして得られた固体をアセトニトリル（３００ｍｌ）中でスラリー化した。混合物を０−５℃に冷却し、そしてＮ−メチルモルホリン（８ｍｌ）を１分かけて滴下により加え、そして撹拌を３０分間継続した。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（２．８４ｇ）及び式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ）（６．８９ｇ）を加え、そして混合物を５分間撹拌した。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（４．４３ｇ）を加え、そして得られた混合物を０−５℃で２時間、そして次いで周囲温度で１２時間撹拌した。炭酸カリウム水溶液（１０重量／体積％；３００ｍｌ）を加え、そして混合物を１０分間撹拌した。水層をアセトニトリル（２×１０ｍｌ）で抽出し、そして混合した有機相を飽和塩化ナトリウム溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、そして次いで約５０ｍｌまで濃縮した。アセトニトリル（１００ｍｌ）を加え、そして混合物を還流まで加熱し、そして周囲温度まで冷却した。混合物を減圧下で濾過し、そして濾過ケークをアセトニトリル（２×３０ｍｌ）で洗浄した。固体を真空下の４０℃で乾燥して、式ＶＩＩＩの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）（１０．６ｇ）を得た。
【００９７】
Ｎ−ベンジル−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルアセトアミドの調製
トリエチルアミン（６．６７ｍｌ）を、テトラヒドロフラン２００ｍｌ）中の、４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニル酢酸（１０．０ｇ）及びヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（０．２３６ｇ）に、２分間かけて加えた。混合物を０−５℃に冷却し、そして１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（９．１７ｇ）を加えた。混合物を３分間撹拌し、そしてベンジルアミン（４．５６ｍｌ）を混合物に滴下により加えた。得られた混合物を０−５℃で１時間、そして次いで周囲温度で４８時間撹拌した。炭酸カリウム水溶液（１０重量／体積％、２００ｍｌ）を混合物に加え、次いで分離した水層をＴＨＦ（１００ｍｌ）で抽出し、そして混合した有機抽出物を食塩水（２×１００ｍｌ）で洗浄し、そして次いで概略５０ｍｌの有機抽出物が残るまで真空蒸留によって濃縮した。トルエン（２００ｍｌ）を加え、そして得られた混合物を真空蒸留によって乾燥状態まで蒸発して、固体を残した。トルエン（２５０ｍｌ）を固体に加え、そして混合物を還流まで加熱し、そして周囲温度まで冷却させた。混合物を氷中で冷却し、そして次いで濾過した。単離された固体をトルエン（２×５０ｍｌ）で洗浄し、そして次いで真空下の４０℃で乾燥して、Ｎ−ベンジル−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルアセトアミド（８．０ｇ）を得た。
【００９８】
実施例８
式ＩＸの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ）の式Ｘの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル）からの調製［ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＸ、Ｐｇ２＝Ｂｏｃ）の別の合成法］
ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式Ｘ　Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル）（１０１ｇ）、水（２５ｍｌ）及びテトラヒドロフラン（９０５ｍｌ）の１８℃の混合物に、水酸化ナトリウム（９．５７ｇ）の水（３７５ｍｌ）中の溶液を、１０分かけて加えた。混合物を周囲温度で１８時間静置した。硫酸水素ナトリウム水和物（４２ｇ）の水（３２３ｍｌ）中の溶液を加えた。塩化ナトリウム（９７ｇ）を加え、有機相を分離し、そして５℃に冷却した。４−アミノフェニルアセトアミド（３３．０６ｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水塩（１８．３７ｇ）及び３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（４４．６ｇ）を加えた。混合物を５℃で４０分間撹拌し、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３．０ｇ）を加え、そして撹拌を１０ないし１６℃で２時間継続した。塩化ナトリウム（１６０ｇ）及び水（６５０ｍｌ）を加えた。有機相を分離した。テトラヒドロフラン（４５０ｍｌ）を加え、次いで常圧の蒸留によって７５０ｍｌの留出物を収集した。テトラヒドロフラン（２５０ｍｌ）及びアセトン（７００ｍｌ）を６０℃で加えた。混合物を周囲温度まで冷却させ、次いでアセトン（３００ｍｌ）を加えた。固体を濾過によって収集し、アセトン（３×１００ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の４２℃で乾燥して、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニル−４−アミノフェニルアセトアミド（式ＩＸ、Ｐｇ２＝Ｂｏｃ）（６０．０ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２３（ｄ，３Ｈ），１．３８（ｄ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．５９（ｍ，３Ｈ），１．７７（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｓ，２Ｈ），４．０３（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｍ，１Ｈ），４．４６（ｍ，１Ｈ），７．２４（ｍ，２Ｈ），７．５８（ｍ，２Ｈ）。
【００９９】
４−アミノフェニルアセトアミドの調製：
この実施例中で使用された４−アミノフェニルアセトアミドは、以下のように得られた：
（ｉ）メタノール（２００ｍｌ）を、４−アミノフェニル酢酸（２５．０ｇ）に入れた。硫酸（１８．０ｍｌ）を、温度を＜２０℃に維持しながら加えた。次いで混合物を１時間還流し、そして常圧の蒸留によって１３５ｍｌの体積まで濃縮した。次いで混合物を５０℃に冷却し、そしてメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２７５ｍｌ）を、温度を４５℃より高く維持しながら加えた。次いで混合物を０−５℃に徐々に冷却し、そしてこの温度で１時間保持した。得られた結晶質の生成物を濾過によって単離し、そして冷メタノール：メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２０ｍｌ：５５ｍｌ）、及び冷メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（７５ｍｌ）で洗浄し、次いで真空下の４５℃で乾燥して、４−アミノフェニル酢酸メチル硫酸水素塩（４０．１ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．６１（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｓ，２Ｈ），７．２５（ｍ，２Ｈ），７．３５（ｍ，２Ｈ）。
【０１００】
（ｉｉ）４−アミノフェニル酢酸メチル硫酸水素塩（２０ｇ）を、２０重量／重量％の塩化ナトリウム水溶液（３７．５ｇ）に加えた。溶解した塩化ナトリウム（７．５ｇ）を含有するアンモニア水（密度０．８８ｇ／ｍｌ　５０ｍｌ）を、温度を１５−２５℃に維持しながら加えた。次いで混合物を１６時間２２℃で撹拌した。混合物を０−５℃に冷却し、そしてこの温度で１時間保持した。得られた結晶質の生成物を濾過によって単離し、水（２×２０ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の４５℃で乾燥して、４−アミノフェニルアセトアミド（７．２ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：３．１６（２Ｈ），４．８５（２Ｈ），６．４９（２Ｈ），６．９０（２Ｈ）。
【０１０１】
実施例９
（式ＶＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）の式Ｘの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル）からの調製）
５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式ＶＩ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）を、以下のように得た：
Ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（６０．０ｇ）を、ベンゼンスルホン酸（３３．８９ｇ）及びジクロロメタン（６００ｍｌ）の無水の溶液に加えた。メタノール（１５０ｍｌ）を加え、そして撹拌された混合物を還流で２１時間加熱した。混合物を−５℃に冷却し、そしてＮＭＭ（２８．０ｍｌ）を、続いて５−フェニルペンタン酸（３０．２６ｇ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（９．８９ｇ）を、温度を−５℃に維持しながら加えた。メタノール（６０ｍｌ）中の１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３３．７４ｇ）の溶液を、温度を−５℃に維持しながら加え、そして次いで混合物を−５℃で１２時間撹拌した。混合物を２０℃に加熱し、そして塩化ナトリウム（１０．３ｇ）の水（２０６ｍｌ）中の溶液で洗浄した。分離した有機相を塩化ナトリウム（１０．３ｇ）の水（２０６ｍｌ）中の溶液及びメタノール（８２ｍｌ）で洗浄した。分離した有機相を還流まで加熱し、そして３５０ｍｌの留出物を収集した。アセトニトリル（６７５ｍｌ）を加え、そして溶液を還流まで加熱し、そして４００ｍｌの留出物を収集し、次いで混合物を冷却させ、そして結晶質の固体を濾過によって単離し、アセトニトリル（７０ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の４０℃で乾燥して、５−フェニルペンタノイル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（５３．２５ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１８（ｄ，３Ｈ），１．２８（ｄ，３Ｈ），１．５２（ｍ，７Ｈ），１．６９（ｍ，１Ｈ），２．１３（ｔ，２Ｈ），２．５５（ｔ，２Ｈ），３．１６（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｍ，３Ｈ），７．１７（ｍ，３Ｈ），７．２７（ｍ，２Ｈ）。
【０１０２】
Ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式Ｘ、Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）の調製：
Ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式ＸＩＶ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ３＝Ｂｏｃ；Ｒ＝メチル）（４６．９１ｇ）を、ベンゼンスルホン酸（２２．１５ｇ）及びジクロロメタン（７５０ｍｌ）の無水の溶液に加えた。撹拌した混合物を還流で６時間加熱した。混合物を−５℃に冷却し、そしてＮＭＭ（１９．３ｍｌ）を、続いてｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニン（２１．９５ｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（７．２９ｇ）及び１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２４．５４ｇ）を、温度を−５℃に維持しながら加えた。混合物を−５℃で１２時間撹拌し、次いで２０℃に加熱し、そして塩化ナトリウム（８．４ｇ）の水（１６８ｍｌ）中の溶液で２回洗浄した。分離した有機相を還流まで加熱し、そして６６０ｍｌの留出物を収集した。アセトニトリル（５４０ｍｌ）を加え、そして溶液を還流まで加熱し、そして２８０ｍｌの留出物を収集し、次いで混合物を冷却させ、そして結晶質の固体を濾過によって単離し、アセトニトリル（５０ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の５０℃で乾燥して、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アラニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（４５．０９ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１７（ｄ，３Ｈ），１．２９（ｄ，３Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ），１．５２（ｍ，３Ｈ），１．６８（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｍ，２Ｈ）。
【０１０３】
Ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（式（ＸＩＶ）Ｐｇ２＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ＝メチル）の調製：
アラニンメチルエステル塩酸塩（３０．６１ｇ）のジクロロメタン（９５０ｍｌ）中の撹拌された混合物を、−５℃に冷却し、そしてＮＭＭ（５４．２ｍｌ）を、温度を−５℃に維持しながら加えた。Ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−ＯＨ（式ＸＶ、Ｐｇ＝ニトロ；Ｐｇ３＝Ｂｏｃ）（７０．０ｇ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１６．７８ｇ）及び１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（５２．６１ｇ）を、温度を−５℃に維持しながら加えた。混合物を−５℃で１２時間撹拌し、次いで２０℃に加熱し、そして酢酸ｎ−ブチル（１２．６ｍｌ）を加えた。混合物を水（２２５ｍｌ）で２回洗浄し、そして分離した有機相を、６００ｍｌの留出物が収集されるまで還流で加熱した。酢酸ｎ−ブチル（７００ｍｌ）を加え、そして溶液を、減圧下で５３０ｍｌの留出物が収集されるまで蒸留した。混合物を２２℃に冷却させ、そして結晶質の固体を濾過によって単離し、酢酸ｎ−ブチル（１４０ｍｌ）で洗浄し、そして真空下の４０℃で乾燥して、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｓ）−アルギニル（ＮＯ２）−（Ｓ）−アラニンメチルエステル（８０．１ｇ）を得た；
１Ｈ　ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．２９（ｄ，３Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ），１．５２（ｍ，３Ｈ），１．６３（ｍ，１Ｈ），３．１５（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），４．２７（ｍ，１Ｈ）。
【０１０４】
実施例１０（式Ｉの化合物の式Ｖの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝ベンジル）からの調製）
実施例７によって調製された式Ｖの化合物（Ｐｇ１＝Ｂｏｃ；Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝ベンジル）は、式ＩＶの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝ベンジル）に転換し、そして実施例２に記載したものと類似の方法を使用して、式ＩＩＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ）とカップリングすることができる。次いで得られた式ＩＩの化合物（Ｐｇ＝ニトロ；Ｒ１＝ベンジル）は、実施例１に記載したものと類似の方法を使用して、Ｐｄ／Ｃ触媒の存在中の接触水素化によって、式Ｉの化合物の塩に転換することができる。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004504405.tif 000086
【国際調査報告】
2004504405.tif 000087
2004504405.tif 000088
2004504405.tif 000089