(57)【要約】本発明は、インスリン、インスリン代謝物、インスリン同族体、インスリン誘導体またはそれらの組み合わせからなる群より選択されるポリペプチド；界面活性剤またはいくつかの界面活性剤の組み合わせ；場合によっては保存剤またはいくつかの保存剤の組み合わせ；ならびに場合によっては等張化剤、緩衝剤または付加的なアジュバントまたはそれらの組み合わせを含有する医薬処方物に関し、その医薬処方は亜鉛を全く含まないか、少量の亜鉛しか含まない。本発明はまた、上記タイプのインスリン製剤の製造に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
インスリン、インスリン同族体、インスリン誘導体、活性インスリン代謝物またはそれらの組み合わせからなる群より選択されるポリペプチド；界面活性剤またはいくつかの界面活性剤の組み合わせ；場合によっては保存剤またはいくつかの保存剤の組み合わせ；ならびに場合によっては等張化剤、緩衝剤またはその他の添加剤またはそれらの組み合わせからなり、この医薬処方物は亜鉛を含有しないか亜鉛含量が低いものである医薬処方物。
【請求項２】
界面活性剤はアルカリ金属石鹸、アミン石鹸、アルカリ土類金属石鹸、アルキル硫酸、アルキルスルホネート、天然の界面活性剤、陽イオン界面活性剤、脂肪アルコール、脂肪酸、多価アルコールの部分および脂肪酸エステルおよびエーテル、グリセロール、ソルビトールおよびスクロース、ポリオールの部分および脂肪酸とエステルおよびエーテルからなる群より選択される請求項１記載の医薬処方物。
【請求項３】
上述の石鹸はステアレート、パルミテート、オレエート、リシノレエートからなる群より選択される請求項２記載の医薬処方物。
【請求項４】
硫酸エステルはラウリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ナトリウム、ステアリル硫酸ナトリウムからなる群より選択される請求項２および３のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項５】
天然の界面活性剤は胆汁酸塩、サポニン、アラビアゴム、レシチンからなる群より選択される請求項２〜４のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項６】
陽イオン界面活性剤はアルコニウムハライド、セチルピリジニウムクロリド、Ｃｅｔｒｉｍｉｄ(R)からなる群より選択される請求項２〜５のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項７】
脂肪アルコールはセチルアルコール、ステアリルアルコール、コレステロールからなる群より選択される請求項２〜６のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項８】
多価アルコールの部分および脂肪酸エステルおよびエーテル、グリセロールおよびソルビトールの部分および脂肪酸エステルおよびエーテルはＳｐａｎ(R)、Ｔｗｅｅｎ(R)（ポリソルベート）、Ｍｙｒｊ(R)、Ｂｒｉｊ(R)、Ｔｒｉｔｏｎ(R)、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ(R)からなる群より選択される請求項２〜７のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項９】
ポリオールはポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポロキサマー、プルロニックス、テトロニックスからなる群より選択される請求項２〜８のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１０】
保存剤はフェノール、クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、パラベンからなる群より選択される請求項１〜９のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１１】
等張化剤はマンニトール、ソルビトール、ラクトース、デキストロース、トレハロース、塩化ナトリウム、グリセロールからなる群より選択される請求項１〜１０のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１２】
添加剤は、緩衝物質たとえばＴＲＩＳ、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、グリシルグリシンまたはその他の物質たとえば酸、アルカリス、塩、プロタミン、アルギニン、Ｓｕｒｆｅｎ(R)からなる群より選択される請求項１〜１１のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１３】
インスリン同族体は、Ｇｌｙ（２１）、Ａｒｇ（Ｂ３１）、Ａｒｇ（Ｂ３２）、ヒトイ
ンスリン、Ｌｙｓ（Ｂ３）、Ｇｌｕ（Ｂ２９）、ヒトインスリン、Ａｓｐ (Ｂ２８)ヒトインスリン、Ｌｙｓ（Ｂ２８）Ｐｒｏ（Ｂ２９）ヒトインスリン、ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンからなる群より選択される請求項１〜１２のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１４】
インスリン誘導体はＢ２９−Ｎ−ミリストイル−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−パルミトイル−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−ミリストイルヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−パルミトイルヒトインスリン、Ｂ２８−Ｎ−ミリストイル−ＬｙｓB28 ＰｒｏB29ヒトインスリン、Ｂ２８−Ｎ−パルミトイル−ＬｙｓB28ＰｒｏB29ヒトインスリン、Ｂ３０−Ｎ−ミリストイル−ＴｈｒB29ＬｙｓB30ヒトインスリン、Ｂ３０−Ｎ−パルミトイル−ＴｈｒB29ＬｙｓB30ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（Ｎ−パルミトイル−γ−グルタミル）−ｄｅｓ（Ｂ３９）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（Ｎ−リトコリル−γ−グルタミル）−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリン、Ｂ２９−Ｎ−（ω−カルボキシヘプタデカノイル）−ｄｅｓ（Ｂ３０）ヒトインスリンおよびＢ２９−Ｎ−（ω−カルボキシヘプタデカノイル）ヒトインスリンからなる群より選択される請求項１〜１３のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１５】
インスリン、インスリン同族体、インスリン誘導体および／またはインスリン代謝物は６０〜６０００ｎｍｏｌ／ｍＬの濃度で存在させる請求項１〜１４のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１６】
インスリン、インスリン同族体、インスリン誘導体および／またはインスリン代謝物は２４０〜３０００ｎｍｏｌ／ｍＬの濃度で存在させる請求項１５記載の医薬処方物。
【請求項１７】
界面活性剤は０.１〜１００００μｇ／ｍＬの濃度で存在させる請求項１〜１６のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項１８】
界面活性剤は１〜１０００μｇ／ｍＬの濃度で存在させる請求項１７記載の医薬処方物。
【請求項１９】
グリセロールおよび／またはマンニトールは１００〜２５０ｍＭの濃度で存在させる請求項１０〜１８のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項２０】
クロライドは１５０ｍＭまでの濃度で存在させる請求項１９記載の医薬処方物。
【請求項２１】
緩衝物質は５〜２５０ｍＭの濃度で存在させる請求項１〜２０のいずれかに記載の医薬処方物。
【請求項２２】
成分は水溶液の形態に一緒に混合し、ついで所望のｐＨに調整し、混合物を水で最終容量に作成する請求項１〜２１のいずれかに記載の医薬処方物の製造方法。
【請求項２３】
最終濃度３.１５ｍｇ／ｍＬのクレゾール、３.５ｍｇ／ｍＬのＨＭＲ１９６４、６.０ｍｇ／ｍＬのトロメタモール、５.０ｍｇ／ｍＬのＮａＣｌおよび０.１ｍｇ／ｍＬのＴｗｅｅｎ(R)２０を達成させる請求項２２記載の医薬処方物の製造方法。
【請求項２４】
請求項２２または２３のいずれかに記載の製造方法で得られる医薬処方物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インスリン（たとえばヒトインスリン、ウシインスリンまたはブタインスリン）、インスリン同族体、インスリン誘導体、活性なインスリン代謝物、またはそれらの組み合わせからなる群より選択されるポリペプチド；界面活性剤またはいくつかの界面活性剤の組み合わせ；場合によっては保存剤またはいくつかの保存剤の組み合わせ；ならびに場合によっては等張化剤、緩衝剤またはその他の添加剤またはそれらの組み合わせからなり、この医薬処方物は亜鉛含量が低いかまたは亜鉛を含有しない医薬処方物に関する。これらの処方物は糖尿病の処置に使用することができ、とくにインスリンポンプ、ペン、インジェクター、インヘイラーにおける使用に採用できるもので、また高い物理学的安定性が必要な処方物のために使用できる。本発明はまた、このような処方物を含有し、糖尿病に使用できる非経口投与用製剤、このような製剤の製造方法、ならびにインスリン製剤の安定性の改善方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
世界中で約１億２千万のヒトが糖尿病に罹患している。これらの中で約１千２百万人が、分泌を欠いた内分泌性インスリンを代替することが、現時点での可能な治療法であるＩ型糖尿病である。この疾患に冒された患者は一生、一般には１日に何回も、インスリンの注射に依存しなければならない。Ｉ型糖尿病に反してII型糖尿病においては、基本的にはインスリンの欠乏はないが、大多数の症例、とくに進行した段階では、場合によっては経口抗糖尿病薬と組み合わせたインスリンによる処置が最も好ましい形の治療法である。
【０００３】
健康人では、膵臓によるインスリンの放出は、血中のグルコース濃度と厳密にカップリングしている。食事後に起こるような血中グルコースレベルの上昇は、相当するインスリン分泌の上昇によって急速に補償される。空腹時には血漿のインスリンレベルは、インスリン感受性の臓器および組織へのグルコースの連続的供給を適当に保証する基底値まで低下し、夜間の肝臓におけるグルコースの産生は低く維持される。内分泌性インスリンの分泌の外因性インスリンによる置換は大部分インスリンの皮下投与によって行われるが、一般には、上述の血中グルコースの生理学的な調節の質を凡そでも達成するものではない。多くの場合に、血中グルコースの上方または下方への逸脱があり、その重篤な形態は生命にかかわることがある。しかしながら、さらに何年もの間初期症状なしに上昇した血中グルコースレベルは健康上かなりの危険がある。米国における大規模なDCCT試験（The Diabetes Control and Complications Trial Research Group (1993) N. Engl. J. Med. 329, 977-986）によれば、慢性的に上昇した血中グルコースレベルが糖尿病の後期合併症の発症に本質的に関与することが明瞭に証明された。糖尿病の後期合併症は、ある種の環境下にレチノパシー、ネフロパシーまたはニューロパシーとして表出され、視力の喪失、腎不全および四肢の喪失を招来し、それにより、さらには心脈管系疾患の危険が増大する微小血管および大血管の障害である。これに由来する糖尿病の改良された治療法は、一次的には、血中グルコースを可能な限り生理学的範囲内近くに維持することを目的にするものである。強化されたインスリン療法の概念によれば、これは毎日、迅速に作用するインスリンおよび遅延作用型インスリン製剤を反復注射することによって達成される。迅速作用型処方物は、血中グルコースの食後の上昇を平坦化するために食事の際に投与される。遅延作用型の基底インスリンは、とくに夜間におけるインスリンの基本的供給を保証して低血糖を招かないようにする。
【０００４】
インスリンは51個のアミノ酸を有するポリペプチドであり、21個のアミノ酸を有するＡ鎖と30個のアミノ酸を有するＢ鎖に分割される。鎖は２つのジスルフィド橋により互いに連結されている。インスリン製剤は長い間、糖尿病の治療に用いられてきた。天然に存在するインスリンのみでなく、最近はインスリン誘導体および同族体も使用されている。
【０００５】
インスリン同族体は天然に存在するインスリン、すなわちヒトインスリンまたは動物インスリンであり、これらは少なくとも１個の天然に存在するアミノ酸の他のアミノ酸残基による置換および／または相当するアミノ酸残基への少なくとも１個のアミノ酸残基の付加もしくはそれからの少なくとも１個のアミノ酸残基の除去で異なり、他の点では天然に存在するアミノ酸と同一である。付加および／または置換されたアミノ酸残基は天然には存在しないアミノ酸残基とすることができる。
【０００６】
インスリン誘導体は天然に存在するインスリンまたはインスリン同族体の誘導体であり、それらの化学的な修飾によって得られる。化学的修飾とは、たとえば１または２個以上のアミノ酸に対する１または２個以上の特殊な化学基の付加によって構成される。
一般に、インスリン誘導体およびインスリン同族体は、ヒトインスリンに比較して何らかの修飾された作用を有する。
【０００７】
加速された作用発現を示すインスリン同族体は、EP 0 214 826、EP 0 375 437およびEP
0 678 522に記載されている。EP 0 124 826はとくにＢ２７およびＢ２８の置換に関するものである。EP 0 678 522には、好ましくは位置Ｂ２９に様々なアミノ酸、好ましくはプロリンを有し、グルタミン酸をもたないインスリン同族体が記載されている。EP 0 375 437には、Ｂ２８にリジンまたはアルギニンを有し、場合によってはＢ３および／またはＡ２１にさらに修飾されていてもよいインスリン同族体が包含される。
EP 0 419 504には、Ｂ３におけるアルギニンおよび位置Ａ５、Ａ１５、Ａ１８またはＡ２１における少なくとも１個のアミノ酸が修飾されている、化学的修飾に対して保護されているインスリン同族体が開示されている。
WO 92/00321には、位置Ｂ１〜Ｂ６の少なくとも１個のアミノ酸がリジンまたはアルギニンで置換されているインスリン同族体が記載されている。WO 92/00321によれば、このタイプのインスリンは長期持続作用を有する。
【０００８】
市販されている天然に存在するインスリンのインスリン製剤は、置換インスリンとその起源（たとえばウシ、ブタ、ヒトインスリン）および組成において異なり、それが作用プロフィル（作用の発現および作用の持続）に影響する。様々なインスリン製剤の組み合わせによって、著しく異なる作用プロフィルが得られ、可能な限り生理学的な値に近い血糖値が確立される。場合により、上述の天然に存在するインスリンのみでなく、修飾された動態を示すインスリン誘導体またはインスリン同族体の製剤も市販されてきた。今日では、組換えDNA技術により、このような修飾インスリンの製造が可能になっている。これらには、迅速な作用発現を示す「モノマーインスリン同族体」、たとえばインスリンLispro、インスリンAspartおよびHMR1964（Lys (B3), Glu (B29) ヒトインスリン）、また長時間持続作用のあるインスリンGlarginが包含される。
【０００９】
作用の持続に加え、患者にとっては製剤の安定性もきわめて重要である。物理的な長期安定性が増強された安定化インスリン処方物が、特定の機械的ストレスまたは比較的高温に暴露される製剤にはとくに必要である。これらには、たとえば、ペン、吸入システム、針を使用しない注射システム、またはインスリンポンプのようなインスリンの投与システムが包含される。インスリンポンプは患者に装着されるかまたは体内に移植される。いずれの場合も、製剤は体温およびその移動ならびにポンプの送達運動、したがって、きわめて高い熱機械的ストレスに暴露される。インスリンペン（使い捨ておよび再利用しうるペン）もまた通常は体に装着され、ここでも同じことがいえる。従来の製剤はこれらの条件下には、限られた安定性しか示さない。
【００１０】
インスリンは中性溶液中に、３個の同じダイマー単位から構成される、安定化亜鉛含有ヘキサマー（Brangeら, Diabetes Care 13:923-954(1990)）の形態にて医薬的濃度で存在する。アミノ酸配列の修飾によりインスリンの会合を低下させることができる。すなわち、インスリン同族体Lisproは主としてモノマーとして存在し、それによってより迅速に吸収され、より短い作用の持続を示す（HPT Ammon & C. Werning: Antidiabetika [Antidiabetics]; 2. Ed.; Wiss. Verl.-Ges. Stuttgart; 2000, p.94 f）。とくに、モノマーまたはダイマーの型で存在する迅速な作用を有するインスリン同族体では、しかしながら、熱および機械的ストレス下における安定性が低下し、凝集傾向が増大する。これはそれ自体、不溶性の凝集体による濁りおよび沈殿によって認めうるものとなる（Bakaysaら, 米国特許5,474,978）。これらの高分子量変換生成物（ダイマー、トリマー、ポリマー）および凝集体は投与されるインスリン用量を低下させるばかりではなく、患者に刺激および免疫反応を誘導することがありうる。その上、このような不溶性の凝集体はポンプのカニューレおよびチュービングに影響し、それを閉塞することがある。亜鉛はインスリンに付加的な安定性をもたらすのでインスリンおよびインスリン同族体の亜鉛フリーまたは低亜鉛製剤は殊に不安定になりやすい。不溶性凝集体の形成はインスリンモノマーを経由して進行するので、とくにきわめて迅速な作用発現を有するモノマーのインスリンはきわめて迅速な凝集傾向および物理学的不安定性を示す。インスリン製剤の質を保証するためには、凝集体の形成を回避する必要がある。
【００１１】
インスリン処方物を安定化するためには様々なアプローチがある。すなわち国際特許出願WO 98/56406では、処方はTRISまたはアルギニン緩衝液により安定化される旨記載されている。米国特許5,866,538には、濃度５〜１００ｍＭのグリセロールおよび塩化ナトリウムを含有するインスリン製剤により安定性は上昇することが記載されている。米国特許5,948,751には、マンニトールまたは類似の糖の添加によって達成される物理学的安定性の上昇したインスリン製剤が記載されている。亜鉛含有インスリン溶液への過剰な亜鉛の添加は同様に安定性を上昇させることができる（J.Brangeら, Diabetic Medicine, 3:532-536, 1986）。インスリン製剤の安定性に対するpHおよび各種添加剤の影響についても詳細に記載されている（J. Brange & L.Langkjaer, Acta Pharm. Nordica 4: 149-158）。
【００１２】
これらの安定化方法は多くの場合、増大する要求（室温または体温で、および機械的ストレス下に保存する能力における改善）または物理学的ストレスに対しとくに影響をうけやすい「モノマー」インスリンもしくは迅速に作用するインスリンに対しては不適当である。しかも、市販のすべてのインスリン製剤には、それを安定化するために加えられる亜鉛を含んでいる。すなわちBakaysaら、米国特許5,474,978には、６つのインスリン同族体モノマー、２つの亜鉛原子および少なくとも３分子のフェノール性保存剤から構成されるインスリン複合体の安定化処方が記載されている。これらの処方物はさらに生理学的に許容される緩衝剤および保存剤を含有してもよい。しかしながら、亜鉛を含まないまたは亜鉛含量の低いインスリン製剤の製造を望む場合には、上述の安定化方法は市販できる製剤のためには適当ではない。たとえば亜鉛を含まないインスリンLisproの製剤を開発することは、不適当な物理学的安定性のために不可能である（Bakaysaら, Protein Science, 1996, 5: 2521-2531）。適当な安定性、とくに物理学的安定性を有する亜鉛含量の低いまたは亜鉛を含まないインスリン製剤は従来技術にはこれまで記載されていない。
【発明の開示】
【００１３】
すなわち、本発明は高い安定性を特徴とする亜鉛を含まないインスリンならびにそれらの誘導体および同族体の製剤の発見に基づくものである。
今回、驚くべきことに、界面活性剤（乳化剤）たとえば、ポロキサマーまたはポリソルベート（Tween(R)）の添加によりインスリン製剤の安定性を劇的に増大させ得ること、したがって、輸液ポンプもしくは他の投与システムに同様に使用可能な優れた安定性を有する、亜鉛を含まない製剤を製造できることが見出された。これらの製剤はとくにストレス条件下に安定性の増大を示す。これはインスリン、インスリン同族体、インスリン誘導体またはそれらの混合物のいずれにも適用できる。
【００１４】
中性の製剤においては、インスリンは亜鉛イオンと複合体を形成する。この場合、適当な亜鉛濃度では、６個のインスリン分子および２個の亜鉛イオンから安定なヘキサマーが形成される。この構造の形成には、インスリンに対して少なくとも0.4％（w/w）の亜鉛濃度が必要である。これは100 IU/mLのインスリン製剤に対して約13μg/mLの亜鉛濃度に相当する。過剰の亜鉛（たとえばヘキサマーあたり４個の亜鉛イオン）は、この場合も、物理学的ストレスに対し製剤を顕著に安定化する（J. Brangeら, Neutral insulin solutions physically stabilized by the addition of Zn2+. Diabetic Med. 3, 532-536(1986)）。これに反して、低い亜鉛濃度（インスリン基づいて＜0.4重量％）の製剤ではヘキサマーの形成は低下する。これは製剤の安定性の劇的な低下を招く（J. Brange & L.Langkjaer；Acta Pharm. Nord, 4:149-158(1992)）。したがって、「亜鉛を含まない」または「亜鉛の含量が低い」の語は、本出願においては製剤中のインスリン含量に基づいて亜鉛が0.4重量％よりも少ない、好ましくはインスリン含量に基づいて0.2重量％よりも少ないことを意味する。１mLあたり100単位（0.6μmol/mL）を含有する慣用のインスリン製剤では、これはインスリンの濃度100単位／mLに基づき、たとえば13μg/mL未満のZn++イオン（0.2μmol/ mL）、好ましくは6.5μg/mL未満のZn++イオンを意味する。亜鉛を含まなくすることは、十分な亜鉛イオンがインスリン／亜鉛ヘキサマー錯体の形成に利用されないように、たとえばクエン酸塩またはEDTAのような亜鉛−錯体化物質の添加によって達成される。
【００１５】
医薬製剤は、インスリン、インスリン代謝物、インスリン同族体またはインスリン誘導体60〜6000nmol/mL、好ましくは240〜3000nmol/mLを含有する。使用できる界面活性剤はとくに非イオン性またはイオン性（陰イオン、陽イオンまたは両性）界面活性剤である。殊に医薬的に慣用される界面活性剤は、たとえばアルカリ金属石鹸、アミン石鹸、アルカリ土類金属石鹸（ステアレート、パルミテート、オレエート、リシノレエート）、アルキル硫酸、アルキルスルホネート（ラウリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ナトリウム、ステアリル硫酸ナトリウム）、天然の界面活性剤（胆汁酸塩、サポニン、アラビアゴム、レシチン）、陽イオン界面活性剤（アルコニウムブロマイド、セチルピリジニウムクロリド、セトリミド）、脂肪アルコール（セチルアルコール、ステアリルアルコール、コレステロール）、ポリヒドロアルコールたとえばグリセロール、ソルビトール等の部分および脂肪酸エステル等（Span(R)、Tween(R)、Myrj(R)、Brij(R)、Cremophor(R)またはポロキサマーが好ましい。界面活性剤は医薬組成物中0.1μg/mL〜10000μg/ mL、好ましくは１μg/mL〜1000μg/mLの濃度で存在させる。
【００１６】
製剤にはさらに保存剤（たとえば、フェノール、クレゾール、パラベン）、等張化剤（たとえば、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、デキストロース、トレハロース、塩化ナトリウム、グリセロール）、緩衝物質、塩、酸およびアルカリ、およびさらに添加剤を含有させることができる。これらの物質は、いずれの場合も個々にまたは混合物として存在させることができる。
【００１７】
グリセロール、デキストロース、ラクトース、ソルビトールおよびマンニトールは、医薬製剤中に慣用的に100〜250mMの濃度で、NaClは150mMまでの濃度で存在させる。緩衝物質たとえばリン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、アルギニン、グリシルグリシンまたはTRIS（すなわち２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−1,3−プロパンジオール）緩衝剤および相当する塩は５〜250mM、好ましくは10〜100mMの濃度で存在させる。
更なる添加剤としては、とくに塩、アルギニン、プロタミン、またはSurfen(R)を挙げることができる。
【００１８】
したがって本発明はインスリン、インスリン同族体、インスリン誘導体、活性インスリン代謝物もしくはそれらの組み合わせから選択されるポリペプチド；界面活性剤もしくはいくつかの界面活性剤の組み合わせ；場合によっては保存剤もしくはいくつかの保存剤の組み合わせ；および場合によっては等張化剤、緩衝物質および／またはその他の添加剤またはそれらの組み合わせからなる医薬処方物であり、その医薬処方物は亜鉛を含有しないか亜鉛含量が低い医薬製剤であり；このような医薬製剤においては、界面活性剤はアルカリ金属石鹸、アミン石鹸、アルカリ土類金属石鹸、アルキル硫酸、アルキルスルホネート、天然の界面活性剤、陽イオン界面活性剤、脂肪アルコール、多価アルコールたとえばグリセロールおよびソルビトール、ポリオールの部分および脂肪酸エステルであり；この場合、上述の石鹸はステアレート、パルミテート、オレエート、リシノレエートからなる群より選択され；アルキル硫酸はラウリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ナトリウム、ステアリル硫酸ナトリウムからなる群より選択され；天然の界面活性剤は胆汁酸塩、サポニン、アラビアゴム、レシチンからなる群より選択され；陽イオン界面活性剤はアルコニウムブロマイド、セチルピリジニウムクロリド、セトリミド(R)からなる群より選択され；脂肪アルコールはセチルアルコール、ステアリルアルコール、コレステロールからなる群より選択され；グリセロールおよびソルビトールの部分および脂肪酸エステルおよびエーテルはSpan(R)、Tween(R)、Myrj(R)、Brij(R)、Cremophor(R)からなる群より選択され；ポリオールはポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポロキサマー、プルロニックス、テトロニックスからなる群より選択され；保存剤はフェノール、クレゾール、パラベンからなる群より選択され；等張化剤はマンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウム、グリセロールからなる群より選択され；添加剤は緩衝物質、酸、アルカリからなる群より選択され；インスリンは天然に存在するインスリンたとえばヒト、ウシまたはブタインスリンであり；インスリン同族体は、Gly (A21)-Arg (B31)-Arg (B32) ヒトインスリン；Lys (B3)-Glu (B29) ヒトインスリン；LysB28ProB29ヒトインスリン、B28 Aspヒトインスリン、ヒトインスリン（この場合、位置B28のプロリンはAsp, Lys, Leu, ValまたはAlaで置換され、位置B29のLysはProで置換されていてもよい）；Ala B26ヒトインスリン；des (B28-30) ヒトインスリン；des (B27) ヒトインスリンまたはdes (B30) ヒトインスリン（この場合、インスリン誘導体はB29-Ｎ-ミリストイル-des (B30) ヒトインスリン、B29-Ｎ-パルミトイル-des-(B30) ヒトインスリン、B29-Ｎ-ミリストイルヒトインスリン、B29-Ｎ-パルミトイルヒトインスリン、B28-Ｎ-ミリストイル-LysB28 ProB29ヒトインスリン、B28-Ｎ-パルミトイル-LysB28ProB29ヒトインスリン、B30-Ｎ-ミリストイル-ThrB29LysB30ヒトインスリン、B30-N-パルミトイル-ThrB29LysB30ヒトインスリン、B29-N-(N-パルミトイル-γ-グルタミル)-des (B30) ヒトインスリン、B29-Ｎ-(Ｎ-リトコリル-γ-グルタミル)-des (B30) ヒトインスリン、B29-Ｎ-(ω-カルボキシヘプタデカノイル)-des (B30) ヒトインスリンおよびB29-Ｎ-(ω-カルボキシヘプタデカノイル)ヒトインスリンから選択される）から選択される医薬処方物に関する。
【００１９】
本発明はさらに、上述の医薬処方物において、インスリン、インスリン同族体、活性なインスリン代謝物および／またはインスリン誘導体が濃度60〜6000 nmol/mL、 好ましくは濃度240〜3000 nmol/mL（これは、ほぼ1.4〜35 mg/mLまたは40〜500単位/mLの濃度に相当する）で存在し、界面活性剤は0.1〜10000μg/mL, 好ましくは１〜1000μg/mLの濃度で存在する医薬組成物に関する。
【００２０】
本発明はさらに、上述の医薬処方物において、グリセロールおよび／またはマンニトールは100〜250 mMの濃度で存在させ、および／またはクロライドは好ましくは150 mMまでの濃度で存在させる医薬組成物に関する。
【００２１】
本発明はさらに、上述の医薬処方物において、緩衝物質を５〜250mMの濃度で存在させる医薬組成物に関する。
本発明はさらに、上述の医薬処方物において、インスリンの放出を遅延させる緩衝物質たとえば塩、プロタミンまたはSurfen(R)のような更なる添加物を含有する医薬組成物に関する。このような処方物と遅延放出インスリンの混合物もまた本発明に包含される。
本発明はさらに、このような医薬処方物の製造方法に関する。同様に、本発明はさらに、糖尿病の処置のためのこのような処方物の投与に関する。
本発明はさらに、インスリン、インスリン同族体もしくはインスリン誘導体、またはそれらの製剤の製造時における安定化剤としての界面活性剤の使用または添加に関する。
【００２２】
インスリン、インスリン同族体、インスリン誘導体、活性なインスリン代謝物またはそれらの組み合わせからなる群より選択される上述の医薬処方物においては、pHは２〜12、好ましくは６〜8.5、とくに好ましくは７〜7.8である。
【００２３】
本出願を以下に、一部の実施例を参照しながら説明するが、それらはいかなる意味においても本発明を限定するものではない。
【００２４】
実施例：
比較検討：インスリン同族体HMR 1964（Lys (B3), Glu (B29), ヒトインスリン）を含有する様々な亜鉛を含有しない製剤を調製する。この目的では、亜鉛を含有しないHMR1964と他の構成成分を注射の目的で水１部に溶解し、塩酸／NaOHでpHを7.3±0.2に調整し、最終容量にする。以下に記載する各実験におけるHMR1964の濃度は3.5mg/mLである（100単位/mLに相当）。第二の製剤も同様に調製するが、さらに特定量の界面活性剤を加える。溶液を５mLまたは10mLのガラス容器（バイアル）に配剤し、クリンプキャップで栓をする。これらの容器をついでストレス条件に暴露する。
１．回転試験：各場合、一つのバッチからの５容器および比較バッチからの５容器を回転試験に付す。この目的では、容器をローテイターに搭載し、37℃において60rpmで頂部から底部に（360度）回転させる。所定の時間後に、容器中に存在する製剤の濁度を標準の濁度と比較するか、または実験室用濁度光量計（比濁計）を用いて、ホルマジン比濁単位（FNU）により測定する。実験はすべての容器について濁度が18FNUを越えるまで実施する。
２．振盪試験：容器をインキュベーター中、実験室用シェーカー上に置き、30℃で100動作／分で振盪する。所定の時間後に、サンプルの濁度を実験室用濁度光量計（比濁計）を用いて、ホルマジン比濁単位（FNU）により測定する。
【実施例１】
【００２５】
回転試験における亜鉛の添加によるHMR 1964の安定化
a）亜鉛を含有しないHMR 1964（最終処方において濃度3.5mg/mLとなるように計算）を水溶液に溶解する。最終処方物中に、m-クレゾール2.7mg/mL、グリセロール20mg/mLおよびトロメタモール（tris）６mg/mLを含有するようにし、pHは１Ｎ塩酸／１Ｎ NaOHを用いて7.2〜7.4に調整する（室温で測定）。溶液を水で最終容量とし、0.2μmフィルターを通して滅菌ろ過する。それをついで５mLの注射バイアルに充填し、キャップを用いてシールする。
b）比較溶液は、水で最終容量に調整する前に、最終処方中の亜鉛含量が15μg/mLになるように、濃度0.1％の塩化亜鉛保存液の相当量を添加するほかは同様にして調製する。
各場合とも、ついで５個のサンプルを回転試験のストレスに付し、様々な時間後に濁度を測定する。結果は以下の表に示す。
【００２６】
【表１】
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亜鉛の添加は溶液中における時間での濁りの生成を著しく遅延することが可能で、HMR 1964は安定化される。亜鉛を添加しないと、製剤は回転試験で8時間後には既に著しい濁りを示す。
【実施例２】
【００２７】
回転試験におけるポリソルベート20（Tween(R)20）の添加によるHMR 1964の安定化
a）亜鉛を含有しないHMR 1964（最終処方において濃度3.5 mg/mLとなるように計算）を水溶液に溶解する。最終処方物中に、m-クレゾール2.7 mg/mL、グリセロール20 mg/mLおよびトロメタモール（tris）６mg/mLを含有するようにし、pHは１Ｎ塩酸／１Ｎ NaOHを用いて7.2〜7.4に調整する（室温で測定）。溶液を水で最終容量とし、0.2μmフィルターを通して滅菌ろ過する。それをついで5 mLの注射バイアルに充填し、キャップを用いてシールする。
b）比較溶液は、水で最終容量に調整する前に、最終処方物中の濃度が10μg/mLになるように、濃度0.1％のポリソルベート20（Tween(R)20）保存液の相当量を添加するほかは同様にして調製する。
各場合とも、ついで５個のサンプルを回転試験のストレスに付し、様々な時間後に濁度を測定する.結果は以下の表に示す。
【００２８】
【表２】
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ポリソルベート20の添加は濁りの出現を著しく遅延させる。
【実施例３】
【００２９】
回転試験におけるポロキサマーの添加によるHMR 1964の安定化
a）亜鉛を含有しないHMR 1964（最終処方において濃度3.5 mg/mLが生成するように計算）を水溶液に溶解する。最終処方物中には、フェノール4.5 mg/mL, NaCl ５mg/mLおよびトロメタモール６mg/mLを含有するようにし、pHは１Ｎ塩酸／１Ｎ NaOHを用いて7.2〜7.4に調整する（室温で測定）。溶液を水で最終容量とし、0.2μmフィルターを通して滅菌ろ過する。それをついで５mLの注射バイアルに充填し、キャップを用いてシールする。
b）比較溶液は、水で最終容量に調整する前に、最終処方中の濃度が10μg/mLになるように、濃度0.1％のポロキサマー171（たとえば、Genapol(R)）保存液の相当量を添加するほかは同様にして調製する。
各場合とも、ついで５個のサンプルを回転試験のストレスに付し、様々な時間後に濁度を測定する。結果は以下の表に示す。
【００３０】
【表３】
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ポロキサマー171の添加は濁りの出現を著しく遅延させ、製剤を安定化する。
【実施例４】
【００３１】
振盪試験におけるポリソルベートまたはポリソルベート80の添加によるHMR 1964の安定化
a）亜鉛を含有しないHMR 1964（最終処方にて濃度3.5 mg/mLが生成するように計算）を水溶液に溶解する。最終処方物中に、m-クレゾール3.15 mg/mL、NaCl ５mg/mLおよびトロメタモール６mg/mLを含有し、pHは１Ｎ塩酸／１Ｎ NaOHを用いて7.2〜7.4に調整する（室温で測定）。溶液を水で最終容量とし、0.2μmフィルターを通して滅菌ろ過する。それをついで５mLの注射バイアルに充填し、キャップを用いてシールする。
b）比較溶液は、水で最終容量に調整する前に、最終処方中の濃度が10μg/mLになるように、濃度0.1％のポリソルベート20（Tween(R)20）保存液の相当量を添加するほかは同様にして調製する。
c）さらに比較溶液を、この場合はポリソルベート20に代えてポリソルベート80（Tween(R)80）を用いるほかは同様にして調製する。
サンプルを実験室用シェーカー（60 rpm）上、30℃で振盪し、所定の時間後に、サンプルの濁度を測定する。結果は以下の表に示す。
【００３２】
【表４】
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ポリソルベート20およびポリソルベート80はいずれも、振盪試験において、HMR 1964に対して安定化作用を有する。
【実施例５】
【００３３】
振盪試験における亜鉛またはポロキサマー（Genapol(R)）の添加によるHMR 1964の安定化
a）亜鉛を含有しないHMR 1964（最終処方にて濃度3.5 mg/mLが生成するように計算）を水溶液に溶解する。最終処方物中に、フェノール3.3 mg/mL, NaCl ５mg/mLおよびトロメタモール６mg/mLを含有するようにし、pHは１Ｎ塩酸／１Ｎ NaOHを用いて7.2〜7.4に調整する（室温で測定）。溶液を水で最終容量として、0.2μmフィルターを通して滅菌ろ過する。それをついで５mLの注射バイアルに充填し、キャップを用いてシールする。
b）比較溶液は、水で最終容量に調整する前に、最終処方物中の濃度が10μg/mLになるように、濃度0.1％のポロキサマー171（Genapol(R)) 保存液の相当量を添加するほかは同様にして調製する。
c）さらに比較溶液を、水で最終容量に調整する前に、濃度0.1％の塩化亜鉛保存溶液を、ポロキサマーに代えるほかはa）と同様にして調製する。したがって、最終処方物における亜鉛の濃度は15μg/mLになる。
【００３４】
【表５】
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亜鉛の添加およびポロキサマーの添加はいずれも振盪試験における濁りの出現を防止する。
【実施例６】
【００３５】
回転試験におけるポロキサマーの添加によるHMR 1964の安定化
a）亜鉛を含有しないHMR 1964（最終処方物にて濃度3.5 mg/mLが生成するように計算）を水溶液に溶解する。最終処方物には、フェノール3.3 mg/mL、NaCl ５mg/mLおよびトロメタモール６mg/mLを含有し、pHは１Ｎ塩酸／１Ｎ NaOHを用いて7.2〜7.4に調整する（室温で測定）。溶液を水で最終容量として、0.2μmフィルターを通して滅菌ろ過する。それをついで５mLの注射バイアルに充填し、キャップを用いてシールする。
b）比較溶液は、水で最終容量に調整する前に、最終処方物中の濃度が100μg/mLになるように、濃度0.1％のポロキサマー171（Genapol(R)) 保存液の相当量を添加するほかは同様にして調製する。
各場合とも、ついで５個のサンプルを回転試験のストレスに付し、様々な時間後に濁度を測定する。結果は以下の表に示す。
【００３６】
【表６】
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ポロキサマー100μg/mLの添加は同様にHMR 1964製剤を著しく安定化する。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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