(57)【要約】本発明は、水産養殖における水の体積中の細菌およびウイルスレベルを減少させるための方法に関する。この方法は、（ａ）飼育された水生生物またはその卵を放流すべき水の体積を供給し、（ｂ）放流前に、水中にグルタルアルデヒドが０．１〜２ｐｐｍの量で提供される程度に、水にグルタルアルデヒドを装入し、（ｃ）飼育された水生生物またはその卵を、グルタルアルデヒドの濃度が０．１〜２ｐｐｍになった時点で水に放流し、（ｄ）飼育された水生生物またはその卵を生育させ、かつ、（ｅ）場合によっては生育期間中において、グルタルアルデヒド水溶液の他の回分を装入することによって、グルタルアルデヒドの濃度を０．１〜２ｐｐｍの程度の量で維持する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
水産養殖における水の体積中の細菌およびウイルスのレベルを減少させるための方法において、
（ａ）飼育された水生生物またはその卵を放流すべき水の体積を供給し、
（ｂ）放流前に、水中０．１〜２ｐｐｍのグルタルアルデヒドを提供する程度の量で、水にグルタルアルデヒド水溶液を装入し、
（ｃ）飼育された水生生物またはその卵を、グルタルアルデヒドの濃度が０．１〜２ｐｐｍになった時点で水に放流し、
（ｄ）飼育された水生生物またはその卵を生育させ、かつ、
（ｅ）場合によっては生育期間中において、グルタルアルデヒドの濃度を０．１〜２ｐｐｍで維持する程度の量で、水に少なくとも一つのグルタルアルデヒド水溶液のさらなる回分を装入することを特徴とする、水産養殖における水の体積中の細菌およびウイルスのレベルを減少させるための方法。
【請求項２】
それぞれ工程（ｂ）、（ｃ）および（ｅ）中のグルタルアルデヒドの濃度が０．５〜１．５ｐｐｍの範囲内である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ビブリオ種の細菌に適用する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ビブリオ種の細菌が、Ｖｉｂｒｉｏ　ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓおよびＶｉｂｒｉｏ　ｈａｒｖｅｙｉから選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
白斑点病症候群バキュロウイルス（ＷＳＢＶ）複合体、イエローヘッドウイルスおよびタウラ　シンドロームウイルスから選択されたウイルスに適用する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
ウイルスが、ＨＡＢＶ、ＲＶ−ＪＰおよびＳＥＭＢＶから選択されたＷＳＢＶ複合体である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
飼育される水生生物またはその卵が甲殻類またはその卵である、請求項１から６までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
甲殻類またはその卵が小エビ、クルマエビまたはその卵である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
甲殻類が、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｖａｎｎａｍｅｉ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｓｅｔｉｆｅｒｕｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｓｔｙｌｉｒｏｓｔｒｉｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ａｚｔｅｃｕｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｄｕｏｒａｒｕｍ、Ｐｅｎａｅｕｓ　ｍｏｎｏｄｏｎおよびＰｅｎａｅｕｓ　ｖａｎｎａｍｅｉから選択される、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の工程（ｅ）を含む、請求項１から９までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
グルタルアルデヒドの少なくとも２つの回分を、水に装入し、その際、これらの添加の間隔がそれぞれ５〜１０日である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
工程（ｅ）に加えてさらに、もはやグルタルアルデヒドが添加されない最終的な生育期間が付加されることを含む、請求項１から１１までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記のさらなる最終的な期間が、少なくとも３０日間である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
封鎖され通気された池を用いておこなう、請求項１から１３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
海洋環境中でおこなう、請求項１から１４までのいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、水産養殖、特に小エビの養殖における水の体積中の細菌およびウイルスのレベルを減少させるための方法に関する。
【０００２】
特に、この脅威は、伝染性の治療困難なウイルス、たとえば、タウラ　シンドロームウイルス（Ｔａｕｒａ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ Ｖｉｒｕｓ）（ＴＳＶ）、イエローヘッドウイルス（Ｙｅｌｌｏｗ Ｈｅａｄ Ｖｉｒｕｓ）（ＹＨＶ）および白斑点病症候群バキュロウイルス（ＷＳＢＶ）に由来するものである。また、小エビは、ビブリオ　パラヘモライチクス（Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）（腸炎ビブリオ）のような細菌によって引き起こされる疾病になり易い傾向にある。
【０００３】
前記のウイルスはすべて、養殖中の生育段階において影響する。典型的にＴＳＶは、生育のための池に放流する２〜４週間の間のその幼形段階（０．１〜５．０ｇ体重）の、小エビ　Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｖａｎｎａｍｅｉに影響する。ＹＨＶは、典型的には、幼形段階後期（５〜１５ｇ　体重）において小エビに影響を及ぼす。ＷＳＢＶは、特に伝染性が高く、しばしば早期の後幼生段階（ｐｏｓｔ ｌａｒｖａｌ ｓｔａｇｅ）に影響を及ぼすが、しかしながら同様に、養殖の後期段階においても影響を及ぼす可能性がある。これらのウイルスは、極めて特徴的な病原体の例である。多くのウイルス性病原体は、小エビの収穫量において打撃を与えることが示されている。
【０００４】
水槽中での小エビの養殖中において、外部寄生菌（原生動物）の増殖を制御するために、水槽に２．５ｐｐｍのグルタルアルデヒドを添加することが知られている。これは、Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　ｐａｐｅｒ、８ｔｈ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｃｏｍｐｒｅｓｓ、Ｆａｃｕｌｔｙ　ｏｆ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ａｓｓｕｉｔ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、Ｅｇｙｐｔ，１５〜１７　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ、１９９８からも明かである。しかしながら、この論文においては、ホルマリンの使用が好ましいとされている。
【０００５】
フィッツパトリックら（Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ ｅｔ ａｌ．）、Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ　Ｆｉｓｈ−Ｃｕｌｔｕｒｉｓｔ（１９９５）、５７、１５３−１５５では、成形のスプリングキングサーモン（ｓｐｒｉｎｇ ｃｈｉｎｏｏｋ ｓａｌｍｏｎ）を処置するための、グルタルアルデヒドを含む３つの候補となる殺菌剤が評価されており、この場合、これは、それぞれ３１．２および６．２ｍｇ／ｌの量で、流動系中で適用させている。グルタルアルデヒドでの処置は予想通りであったが、もう一つの選択肢として、過酸化水素が好ましいとされた。
【０００６】
ザルベッセンら（Ｓａｌｖｅｓｅｎ ｅｔ ａｌ．）、Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（１９９７）、５、２４９−２５８およびオルセンら（Ｏｌｓｅｎ ｅｔ ａｌ．）、Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ（１９９９）、１７６、３〜１３のそれぞれの論文において、４００〜１２００ｍｇ／ｌのグルタルアルデヒドを用いてのアトランティックハリバット（Ａｔｌａｎｔｉｃ ｈａｌｉｂｕｔ）およびターボット（ｔｕｒｂｏｔ）の卵の殺菌法が開示されている。しかしながら、このような高いレベルにおいて、グルタルアルデヒドは水生生物の特定の形において毒性でありえ、また、フィッツパトリックらによると、６２ｍｇ／ｌと低いレベルであってもスプリングキングサーモンにとって毒性であるとしている。
【０００７】
驚くべきことに、水生生物にとって、特に小エビに対して有害なウイルスおよび細菌の双方の高く効果的な減少が、養殖される水生生物およびその卵を成長させる池に、極めて低い濃度のグルタルアルデヒドを適用させることによって得られることが見出された。
【０００８】
したがって、本発明は、水産養殖中における水の体積中の細菌およびウイルスのレベルを減少させるための方法を提供し、この場合、この方法は、
（ａ）飼育された水生生物またはその卵を放流すべき水の体積を提供し、
（ｂ）放流前に、水中０．１〜２ｐｐｍのグルタルアルデヒド濃度が提供される程度の量で、グルタルアルデヒド水溶液を水に装入し、
（ｃ）飼育された水生生物またはその卵を、グルタルアルデヒドの濃度が０．１〜２ｐｐｍの濃度になった時点で水に放流し、
（ｄ）飼育された水生生物またはその卵を生育させ、かつ、
（ｅ）場合によっては生育期間中において、グルタルアルデヒドの少なくとも一つの他の回分を、グルタルアルデヒドの濃度が０．１〜２ｐｐｍに維持される程度の量で水に装入する。
【０００９】
好ましくは、それぞれ工程（ｂ）、（ｃ）および（ｅ）で使用されたグルタルアルデヒドの濃度は、０．５〜１．５ｐｐｍの範囲である。
【００１０】
方法は、特に細菌、殊にビブリオ種の細菌、詳細にはＶｉｂｒｉｏ　ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓおよびＶｉｂｒｉｏ　ｈａｒｖｅｙｉのレベルを減少させるのに適している。
【００１１】
さらに方法は、白斑点病症候群バキュロウイルス（ＷＳＢＶ）複合体（またＣｈｉｎａ　Ｖｉｒｕｓとして公知）、たとえば、ＨＨＮＢＶ；ＲＶ−ＰＪおよびＳＥＭＢＶ　イエローヘッドウイルス（Ｙｅｌｌｏｗ Ｈｅａｄ Ｖｉｒｕｓ）（またＨｕｅ　Ｌｅｕｎｇとして公知）およびタウラシンドロームウイルス（Ｔａｕｒａ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ Ｖｉｒｕｓ）のレベルを減少させるのに特に適している。
【００１２】
本発明による方法は、特に甲殻類、殊に小エビまたはクルマエビ、それらの卵、たとえば、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　Ｖａｎｎａｍｅｉ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｓｅｔｉｆｅｒｕｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｓｔｙｌｉｒｏｓｔｒｉｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ａｚｔｅｃｕｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ、Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ　ｄｕｏｒａｒｕｍ、Ｐａｎａｅｕｓ　ｍｏｎｏｄｏｎおよび特にはＰａｎａｅｕｓ　ｖａｎｎａｍｅｉ（ブラックタイガーエビ）の養殖のために適している。
【００１３】
好ましくは、生育期間において、０．１〜２ｐｐｍのグルタルアルデヒドの濃度を維持する程度の量で、水に少なくとも一つの他の回分のグルタルアルデヒド水溶液を装入する。
【００１４】
より好ましくは、グルタルアルデヒドの少なくとも２つの回分を、水に装入し、その際、これらを添加する間隔はそれぞれ５〜１０日間である。
【００１５】
工程（ｅ）の他に、生育のための最終的な期間、好ましくは少なくとも３０日間を提供し、この間にさらにグルタルアルデヒドを添加しないことが好ましい。
【００１６】
水産養殖は、最も好ましくは、封鎖され通気した池を用いておこなわれ、かつさらに好ましくは海洋環境でおこなう。
【００１７】
したがって、生育のための池の水を、０．１〜２ｐｐｍのグルタルアルデヒドで処理することによって、存在する任意の日和見病原体が制御され、かつ小エビまたは車エビの養殖作業が、以下に示したようにかなり改善された。同様に、他の甲殻類、貝類および魚類の養殖においてこの方法を使用することも可能である。
【００１８】
グルタルアルデヒドは、好ましくは、商業的に入手可能な、水中の５０％溶液として適用される。
【００１９】
池は、放流前にグルタルアルデヒドで処理される。使用すべきグルタルアルデヒドの量は、その大きさおよび深さに依存してその池毎に異なる。５０％グルタルアルデヒド水溶液　２０ｋｇを深さ１ｍ当たり１ヘクタール（ｈａ）当たりで添加することが推奨される（すなわち、グルタルアルデヒド濃度１ｐｐｍ）。
【００２０】
生成物の正確な量は、適した分散手段を用いて、池中に均等に分配されなければならない。分散前に、水中５０％水溶液の前希釈液を作成することも許容される。
【００２１】
池が準備されると直ぐに、グルタルアルデヒドを、２０ｋｇ／ｈａ／深さｍで、週に一回、最大では週に二回添加してもよい。
【００２２】
好ましくは、処理は、小エビの収穫前３０日で停止させる。
【００２３】
前記の推奨は、一般的なガイドとして使用することができる。局所的な条件、たとえば海の温度、気候および池の水組成は、効率に影響を及ぼす。
【００２４】
小エビの健康状態を、規則的に調査し、副作用がないかを確認することが推奨される。
【００２５】
本発明の好ましい実施態様は、以下の実施例を引用してより詳細に記載される。
【００２６】
実施例
２個の池は、極東地域（Ｆａｒ Ｅａｓｔ）において選択された。
【００２７】
番号１の池は６０００ｍ２の面積および１ｍの深さを有していた。３０個体　後幼生／ｍ２の程度で放流し、したがって、擬似的な集約的養殖（ｓｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ ｆａｒｍｉｎｇ）としてみなす。
【００２８】
番号２の池は７０００ｍ２の面積および１ｍの深さを有していた。１０個体　後幼生／ｍ２の程度で放流し、したがって、半−集約的養殖（ｓｅｍｉ−ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ ｆａｒｍｉｎｇ）の典型的なものとしてみなす。
【００２９】
活性成分としての５０％のグルタルアルデヒド水溶液を、放流前にそれぞれの池に添加し、収穫前の１０７日間中３０日間において処理した。
【００３０】
それぞれの処理に関して目標とされる投与量は、１．０〜１．４ｐｐｍの水溶液（すなわち、０．５〜０．７ｐｐｍ　グルタルアルデヒド）であり、この場合、これは、１０〜１４ｋｇ　水溶液／ｈａ／深さ　ｍ（１ｈａ＝１０，０００ｍ２）に達した。この方法においては、収穫前の少なくとも３０日間を除き、グルタルアルデヒドの濃度を０．５〜０．７ｐｐｍの範囲で維持した。
【００３１】
この研究の結果は、以下の第１表に示した。
【００３２】
結果
【００３３】
【表１】
2004504858.tif 000002
【００３４】
池１（集約的）からの収穫量は、６０００ｍ２で１０７日間に亘って４．２トンであり、収率は７トン／ヘクタールに相当する。
【００３５】
池２（半集約的）からの収穫量は、７０００ｍ２で１０７日間に亘って０．９５トンであり、この場合、これは１．３６トン／ヘクタールに相当する。
【００３６】
備考：ベトナムにおける半集約規模の養殖における通常の収穫量は約０．７トン／ヘクタールである。
【００３７】
これらの研究から、０．５〜０．７ｐｐｍ程度の低い濃度であっても、グルタルアルデヒド（活性成分として）は、処理において高い効果を示し、かつ、小エビの養殖における有害な疾病にから水を保護することを示した。
【００３８】
本発明による方法は池の管理に効果的であり、この場合、これは、清浄な放流されていない池において、グルタルアルデヒドで処理することによって開始し、疾病の危険性を減少させる。グルタルアルデヒドを用いての衛生的な水の処理は、小エビを後幼生段階へ導くための水の調整するのに役立ってもよい。これは、小エビに対して有害ではないレベルに、病原体を制御するのに使用することができる。
【００３９】
方法を用いて、池の微生物数を、成育シーズンを通して確実に制御することが可能である。これは、微生物が養殖工程における機械に潜伏しているかまたはこれによって導かれうることからも好ましい。本発明の方法は、季節を通して安全に使用することが可能であり、これらの危険性を減少させることができる。
【００４０】
正確に使用する場合には、本発明による方法は消費者の安全のための優れた利益を提供しながらも小エビに対して有害なものではない。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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