(57)【要約】本発明は眼の過免疫反応を処置するための方法および組成物を含んでなり且つ使用する。ガンマインターフェロンに対する抗体を単独でおよび別の薬品と組み合わせて含んでなる組成物が記載される。インターフェロンガンマ抗体を含んでなる組成物を眼に局所的に適用して例えば移植拒絶反応のような過免疫反応、眼の自己免疫疾病、および自己免疫疾病を起こしやすいかまたはそれに関連する眼の疾病を処置する方法も本発明で開示されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物の眼にインターフェロンガンマに対する抗体を含んでなる組成物を投与することを含んでなる、哺乳動物における眼に関連する組織または器官移植の拒絶反応の処置方法。
【請求項２】
該組成物が該眼に局所投与される、請求項１の方法。
【請求項３】
該哺乳動物が人間である、請求項１の方法。
【請求項４】
該移植が角膜移植である、請求項１の方法。
【請求項５】
該抗体がポリクローナル抗体である、請求項１の方法。
【請求項６】
該抗体がモノクローナル抗体である、請求項１の方法。
【請求項７】
該抗体がヒト化された抗体である、請求項１の方法。
【請求項８】
該抗体がインターフェロンガンマに対する抗体の生物学的に活性な断片である、請求項１の方法。
【請求項９】
該組成物が製薬学的に許容可能な担体中に懸濁されている、請求項１の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
「自己」対「非自己」抗原を認識する哺乳動物免疫系の能力は侵襲性微生物に対する好結果の宿主防御にとって極めて重要である。「自己」抗原は動物自身の成分と検出しうる程度に異ならないものであるが、「非自己」抗原は哺乳動物の成分と検出しうる程度に異なるすなわち異質であるものである。正常な哺乳動物免疫系は「非自己抗原」を認識し且つそれらを攻撃しそして破壊するために機能する。免疫系が「自己」抗原を「非自己」であると同定し、それにより哺乳動物自身の身体成分（すなわち、器官および／または組織）に対して免疫応答を開始する場合に、自己免疫障害、例えば、慢性関節リューマチ、インシュリン−非依存性真性糖尿病、後天性免疫不全症候群（エイズ）、多発性硬化症など、が起きる。これは哺乳動物の器官および／または組織を損傷し、そして重篤な病気または死亡をもたらしうる。
【０００２】
自己免疫疾病に対する哺乳動物の素因は大部分遺伝子によるが、例えばウイルス、細菌、または化学剤のような外因性因子も役割を演じうる。自己免疫は、例えば神経組織および眼（特に水晶体または角膜）のようなリンパ球に通常は露出されない組織の中でも起きうる。通常はリンパ球に露出されない組織がこれらの細胞に露出されるようになる場合には、リンパ球がこれらの組織の表面抗原を「非自己」と認識することがありそして後から免疫応答が起きる。自己免疫は宿主の自己抗原に敏感な抗原の動物への導入の結果としても生じうる。哺乳動物自身の組織中の抗原と同様であるかまたはそれと交差反応する抗原はリンパ球をして「自己」および「非自己」抗原の両者を認識しそして破壊せしめる。
【０００３】
自己免疫疾病の病因はインターフェロン類およびしばしばインターフェロン類から誘導される他のサイトカイン類の合成における混乱に関連することが示唆された（スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、ネーチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、１９７４年、２１７：５５１−５５２；スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、アナルス・オブ・アレルギー（Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ）、１９７５年、３５：３５６；スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、Ｊ・インターフェロン・リス（Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｒｅｓ．）、１９９２年、１２、Ｓｕｐｐｌ．１：Ｓ１１０；スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、メド・ヒポス（Ｍｅｄ．Ｈｙｐｏｔｈ．）、１９９３年、４１：１７７−１８５；スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、メド・ヒポス（Ｍｅｄ．Ｈｙｐｏｔｈ．）、１９９４年、４２：２７−３５；グリンゲリ（Ｇｒｉｎｇｅｒｉ）他著、セル・モル・バイオル（Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、１９９５年、４１（３）：３８１−３８７；グリンゲリ（Ｇｒｉｎｇｅｒｉ）他著、Ｊ・アクイアー・イミュン・デフィス・シンドロ（Ｊ．Ａｃｑｕｉｒ．Ｉｍｍｕｎ．Ｄｅｆｉｃ．Ｓｙｎｄｒ．）、１９９６年、１３：５５−６７）（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３、非特許文献４、非特許文献５、非特許文献６、非特許文献７参照）。特に、インターフェロン（ＩＦＮ）ガンマは自己免疫機能不全において有意な病因役割を演ずる。ＩＦＮガンマは細胞を刺激して高められた水準のＨＬＡ種ＩＩ抗原を生成する（フェルドマン（Ｆｅｌｄｍａｎ）他著、「インターフェロンズ・アンド・オートイミュニティ」（“Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ  ａｎｄ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ”）、ＩＦＮγ、アカデミック・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）、１９８７年、ｐ．７５）（非特許文献８参照）。ＩＦＮガンマが腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の生成に関与することが知られており、そしてＴＮＦも自己抗体の生成の刺激において役割を演ずることも知られている。これに関すると、これらのサイトカイン類を調節する療法が開発された。ＩＦＮガンマに対する抗体を用いる数種の自己免疫疾病の処置における臨床的成功が報告された（スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、米国特許第５，８８８，５１１号）（特許文献１参照）。
【０００４】
しかしながら、自己免疫応答は例えば多発性硬化症および慢性関節リューマチのような疾病において典型的であると考えられるが、自己免疫または過免疫応答の処置が充分に探査されていないある医療分野は移植療法の分野である。移植拒絶反応から生ずる自己免疫は移植被験者において特徴的である。移植の拒絶反応は侵襲性異質抗原に対する生物の正常な反応である。特に、例えば通常はリンパ球に露出されない眼、皮膚、心臓、腎臓、肝臓、骨髄、および他の器官のような組織または器官の移植は高い割合の拒絶反応があり、その拒絶反応は大部分過免疫反応の結果である。
【０００５】
眼内の組織移植の拒絶反応を包含する過免疫反応は相当重要である。角膜移植片、水晶体代替品などは、人間被験者内に移植される場合には、しばしば拒絶反応がある。さらに、眼の他の疾病、例えば、乾性角結膜炎（ドライアイ症候群）、上強膜炎、強膜炎、モーレン潰瘍、眼球瘢痕性類天疱瘡、眼窩偽腫瘍、虹彩炎、中心性漿液性網膜症、グレーヴズ眼症、脈絡網膜炎、シェーグレン症候群、およびスティーヴェンス−ジョンソン症候群、も眼内の過免疫反応の結果でありうる。全身的感染症、例えば結核、梅毒、エイズ、トキソプラスマ感染症、およびサイトメガロウイルス網膜炎もまた、ブドウ膜炎、眼球陥没症、網膜炎、脈絡膜炎、および網膜壊死を包含するがそれらに限定されない眼の疾病を引き起こしうる。これらのタイプの過免疫反応は典型的にはぼやけた視力をもたらしそしてついには失明をもたらす。そのような過免疫応答を処置するための最近の療法は、デキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）を包含するコルチコステロイド処置および抗炎症性調剤を用いる処置を包含する。現在まで、哺乳動物の眼および他の器官内の過免疫反応を有効に処置するための好結果を収めるかもしくは長期にわたる方法または組成物はない。本発明はそのような方法および組成物を提供する。
【特許文献１】
米国特許第５，８８８，５１１号明細書
【非特許文献１】
スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、ネーチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、１９７４年、２１７：５５１−５５２：Ｓ１１０
【非特許文献２】
スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、アナルス・オブ・アレルギー（Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ）、１９７５年、３５：３５６
【非特許文献３】
スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、Ｊ・インターフェロン・リス（Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｒｅｓ．）、１９９２年、１２、Ｓｕｐｐｌ．１
【非特許文献４】
スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、メド・ヒポス（Ｍｅｄ．Ｈｙｐｏｔｈ．）、１９９３年、４１：１７７−１８５
【非特許文献５】
スクルコビッチ（Ｓｋｕｒｋｏｖｉｃｈ）他著、メド・ヒポス（Ｍｅｄ．Ｈｙｐｏｔｈ．）、１９９４年、４２：２７−３５
【非特許文献６】
グリンゲリ（Ｇｒｉｎｇｅｒｉ）他著、セル・モル・バイオル（Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、１９９５年、４１（３）：３８１−３８７
【非特許文献７】
グリンゲリ（Ｇｒｉｎｇｅｒｉ）他著、Ｊ・アクイアー・イミュン・デフィス・シンドロ（Ｊ．Ａｃｑｕｉｒ．Ｉｍｍｕｎ．Ｄｅｆｉｃ．Ｓｙｎｄｒ．）、１９９６年、１３：５５−６７
【非特許文献８】
フェルドマン（Ｆｅｌｄｍａｎ）他著、「インターフェロンズ・アンド・オートイミュニティ」（“Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ  ａｎｄ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ”）、ＩＦＮγ、アカデミック・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）、１９８７年、ｐ．７５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、哺乳動物における眼に関連する組織または器官の拒絶反応を処置する方法に関する。この方法は、哺乳動物の眼にインターフェロンガンマに対する抗体を含んでなる組成物を投与することを含んでなる。
【０００７】
一面では、この組成物は哺乳動物の眼に局所投与される。
【０００８】
他の面では、哺乳動物は人間である。
【０００９】
さらに他の面では、移植は角膜移植である。
【００１０】
本発明のさらに他の面では、抗体はポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化された（ｈｕｍａｎｉｚｅｄ）抗体、またはインターフェロンガンマに対する抗体の生物学的に活性な断片である。
【００１１】
さらに他の面では、組成物は製薬学的に許容可能な担体中に懸濁される。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、眼内に自己免疫反応を有する動物へのインターフェロン（ＩＦＮ）ガンマに対する抗体の投与が自己免疫反応の軽減または排除において有用であるという発見を含んでなり且つそれを利用する。眼内のそのような自己免疫反応は、眼組織の移植片並びにシェーグレン症候群、多発性硬化症、サルコイドーシス、強直性脊椎炎、乾性角結膜炎（ドライアイ症候群）、上強膜炎、強膜炎、モーレン潰瘍、眼球瘢痕性類天疱瘡、眼窩偽腫瘍、虹彩炎、中心性漿液性網膜症、グレーヴズ眼症、脈絡網膜炎、スティーヴェンス−ジョンソン症候群、ブドウ膜炎、眼球陥没症、網膜炎、脈絡膜炎、および網膜壊死を包含するがそれらに限定されない眼の疾病の結果として起こりうる。眼内の自己免疫反応は、エイズ、梅毒、トキソプラスマ感染症、および結核を包含するがそれらに限定されない感染性疾病の結果としても起こりうる。自己免疫は眼内への組織の移植の結果としても起こりうる。
【００１３】
ＩＦＮガンマに対する抗体が眼内の出血および滲出液集合により特徴づけられる眼の疾病の処置にも有用であることは、ここに開示された実施例からすぐ明らかになる。出血および／または滲出液は眼の前方室内で集めることができ、そしてそれらは炎症反応の特徴的な結果である。典型的には、これらの徴候は移植拒絶反応（すなわち、過免疫応答）中に起きる。しかしながら、現在知られていない哺乳動物の眼の自己免疫疾病が知られた時点で本発明の方法の使用で処置可能でありうるため、本発明はここに示されている実施例だけに限定されるものではない。
【００１４】
本発明は、哺乳動物の眼内の過免疫応答により特徴づけられる眼の疾病の処置方法を含む。簡単に述べると、この方法は冒された眼にインターフェロンガンマに対する抗体を直接適用することを含んでなる。この方法を使用して哺乳動物の自己免疫性眼疾病を処置することができるが、好ましくは哺乳動物は人間である。
【００１５】
本発明の方法で有用なインターフェロンガンマに対する抗体はポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、合成抗体、例えばインターフェロンガンマに対する抗体の生物学的に活性な断片であることができ、或いはそれらはヒト化されたモノクローナル抗体であってもよい。本発明の方法で有用なタイプの抗体の各々の製造および使用方法をここに記載する。さらに、人間ドナーから得られるインターフェロンガンマに対するヒトの抗体を本発明で使用することもできる。
【００１６】
本発明の方法で使用される抗体がポリクローナル抗体（ＩｇＧ）である場合には、適当な動物にインターフェロンガンマまたはその断片を接種することにより抗体が生成される。インターフェロンガンマに特異的に結合する接種された動物で製造される抗体を次に動物から得られた流体から単離する。インターフェロンガンマ抗体をこの方法で、例えば山羊、羊、馬、ウサギ、およびロバを包含するがそれらに限定されない数種の非人間哺乳動物内で生成することができる。ポリクローナル抗体を生成する方法は当該技術で既知であり、そして例えばハルロウ（Ｈａｒｌｏｗ）他（アンチボディーズ（Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）、ア・ラボラトリー・マニュアル（Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ）、ニューヨーク（Ｎ．Ｙ．）、コールド・スプリング・ハーバー（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ）、１９８８年）に記載されている。これらの方法は抗体技術で一般的に使用されているため、ここでは繰り返さない。
【００１７】
本発明の方法で使用される抗体がモノクローナル抗体である場合には、抗体は例えばハルロウ他（上記参照）およびツズンスキー（Ｔｕｓｚｙｎｓｋｉ）他（ブラッド（Ｂｌｏｏｄ）、１９８８年、７２：１０９−１１５）に記載されているような既知のモノクローナル抗体製造工程を用いて生成される。これらの方法は当該技術で既知であるため、それらはここでは繰り返さない。一般的に、所望する抗原に対して指定されたモノクローナル抗体はここに引用されるような標準的工程を用いて抗原で免疫感作させたマウスから生成される。インターフェロンガンマの全長またはペプチド断片に対して指定されたモノクローナル抗体はハルロウ他（上記参照）に記載された技術を用いて製造することができる。
【００１８】
本発明の方法で使用される抗体がインターフェロンガンマに対する抗体に対応する生物学的に活性な断片または合成抗体である場合には、抗体は以下の通りにして製造される：所望する抗体またはその断片をコードする核酸を適当なベクター中にクローン化する。ベクターを大量の抗体またはその断片の生成用に適する細胞内にトランスフェクトする。所望する抗体をコードするＤＮＡを次に細胞内で発現させ、それにより抗体を製造する。所望するペプチドをコードする核酸を、当該技術で利用できそして例えばライト（Ｗｒｉｇｈｔ）他（クリティカル・レブ・イン・イミュノル（Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｒｅｖ．ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．）、１９９２年、１２（３，４）：１２５−１６８）およびその中に引用されている参考文献に記載されている技術を用いてクローン化しそしてシークエンシングすることができる。或いは、所望する抗体またはその断片を化学合成技術を用いて合成することもできる。抗体のアミノ酸配列が既知である場合には、所望する抗体を当該技術で既知の方法を用いて化学的に合成することができる。
【００１９】
本発明は、ＩＦＮガンマエピトープと特異的に反応性であるヒト化された抗体も包含する。これらの抗体はヒトＩＦＮガンマを中和可能である。本発明のヒト化された抗体はヒトのフレームワークを有しそしてＩＦＮガンマと特異的に反応性である抗体、典型的にはマウス抗体、からの１つもしくはそれ以上の相補性決定部位（ＣＲＤ）を有する。それ故、本発明のヒト化されたガンマＩＦＮ抗体はインターフェロンガンマの過剰生成を含む自己免疫反応により特徴づけられる眼の疾病および他の器官の疾病の処置において有用である。
【００２０】
本発明で使用される抗体がヒト化される場合には、抗体はクイーン（Ｑｕｅｅｎ）他（米国特許第６，１８０，３７０号）、ライト（Ｗｒｉｇｈｔ）他（上記参照）およびそこに引用される参考文献、またはグー（Ｇｕ）他（スロンボシス・アンド・ヘマトシスト（Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｈｅｍａｔｏｃｙｓｔ）、１９９７年、７７（４）：７５５−７５９）に記載されている通りにして生成することができる。クイーン他に開示されている方法は、ある部分、受容体ヒトフレームワーク部位をコードするＤＮＡ部分に結合された例えばヒトＩＦＮガンマのような所望する抗原に結合可能なドナー免疫グロブリンからの重鎖および軽鎖相補性決定部位（ＣＤＲ）をコードする組み換えＤＮＡ部分を発現することにより製造される所望するヒト化された免疫グロブリン類に向けられている。一般的に述べると、クイーンの特許における発明は実質的にいずれかのヒト化された免疫グロブリンの設計に向けられた適用性を有する。クイーンは、ＤＮＡ部分が典型的には自然集合または異種プロモーター部位を包含するヒト化された免疫グロブリンコード配列に操作的に結合される発現調節ＤＮＡ配列を含むであろう。発現調節配列は真核宿主細胞を形質転換もしくはトランスフェクトしうるベクター中の真核細胞プロモーター系であることができ、または発現調節配列は原核宿主細胞を形質転換もしくはトランスフェクトしうるベクター中の原核細胞プロモーター系であることもできる。ベクターが適当な宿主に導入されたら、宿主は導入されたヌクレオチド配列の高水準発現に適する条件下に保たれ、そして所望するならヒト化された軽鎖、重鎖、軽鎖／重鎖二量体または無傷抗体、結合断片或いは他の免疫グロブリン形態の集合および精製を行なうことができる（ここに引用することにより本発明の内容となるベイチョク（Ｂｅｙｃｈｏｋ）著、セルズ・オブ・イミュノグロブリン・シンセシス（Ｃｅｌｌｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）、ニューヨーク（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）、アカデミック・プレス（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）、１９７９年）。
【００２１】
種々のヒト細胞からのヒト定常部（ＣＤＲ）ＤＮＡ配列を既知の工程に従い単離することができる。好ましくは、ヒト定常部ＤＮＡ配列は国際公開第８７／０２６７１号に記載されているように不死化されたＢ細胞から単離される。本発明の抗体の製造において有用なＣＤＲは同様にヒトＩＦＮガンマに結合可能なモノクローナル抗体をコードするＤＮＡから誘導することができる。そのようなヒト化された抗体は既知の方法を用いて、マウス、ラット、ウサギまたは他の脊椎動物を包含するがそれらに限定されない抗体を生成可能ないずれかの普遍的な哺乳動物源で生成することができる。定常部およびフレームワークＤＮＡ配列用に適する細胞並びに抗体が発現され且つ分泌される宿主細胞はメリーランド州、ロックビルのアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）のような多くの出所から得ることができる。
【００２２】
以上で論じたヒト化されたＩＦＮガンマの他に、本来のＩＦＮガンマ抗体配列に対する別の「実質的に相同性である」修飾を当業者に既知である種々の組み換えＤＮＡ技術を用いて容易に設計しそして製造することができる。さらに、種々の異なるヒトフレームワーク部位を単独でまたは組み合わせてＩＦＮガンマに指定された抗体をヒト化するための基礎として使用することができる。一般的に、遺伝子の修飾は種々の既知の技術、例えば部位指定突然変異（グリマン（Ｇｉｌｌｍａｎ）およびスミス（Ｓｍｉｔｈ）著、ジーン（Ｇｅｎｅ）、１９７９年、８、８１−９７；ロバーツ（Ｒｏｂｅｒｔｓ）他著、ネーチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、１９８７年、３２８、７３１−７３４）、を用いて容易に行なうことができる。
【００２３】
ＩＦＮガンマ抗体配列と実質的に相同性である配列は、参照ＩＦＮガンマ免疫グロブリン蛋白質との少なくとも約８５％の相同性、普通は少なくとも約９０％のそして好ましくは少なくとも約９５％の相同性を示すものである。
【００２４】
或いは、主要抗体構造の一部だけを含んでなるポリペプチド断片を製造することもでき、それらの断片はＩＦＮガンマ抗体の１つもしくはそれ以上の機能を有する。これらのポリペプチド断片は当該技術で既知の方法を使用する無傷の抗体の蛋白質分解により生成することができ、或いは断片を含んでなるベクター中の所望する位置に部位指定突然変異を用いて停止コドンを挿入することによりそれらを生成することもできる。
【００２５】
ＩＦＮガンマに対する抗体をコードするＤＮＡは、抗体をコードするＤＮＡに操作的に結合される適当なプロモーター調節配列により誘導される宿主細胞の中で発現される。典型的には、抗体をコードするＤＮＡを適当な発現ベクター中に、抗体をコードする配列がプロモーター／調節配列に操作的に結合されるような方法で、クローン化する。そのような発現ベクターは典型的には宿主生物内でエピソームとしてのまたは宿主染色体ＤＮＡの一体部分としての複製コンピテントである。普通、発現ベクターは検出可能なマーカー蛋白質をコードするＤＮＡ、例えばテトラシクリンまたはネオマイシン耐性をコードする遺伝子、を含んでおり、所望するＤＮＡ配列で形質転換された細胞の検出を可能にするであろう（米国特許第４，７０４，３６２号）。
【００２６】
大腸菌が、本発明の抗体をコードするＤＮＡ配列の発現に特に有用な原核細胞宿主の一例である。使用に適する他の微生物宿主は枯草菌並びに他の腸内細菌、例えばサルモネラ、セラチア、および種々のシュードモナス種の選択される構成員、を包含するがそれらに限定されない。ベクターが典型的には宿主細胞と相容性であるような発現調節配列を含んでなるであろう所望する宿主細胞に適する発現ベクターを作成することが可能である。ラクトースプロモーター系、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、ベータ−ラクタマーゼプロモーター系、またはファージラムダから誘導されるプロモーター系を包含するがそれらに限定されない種々のプロモーター／調節配列がこれらの細胞内で遺伝子の発現用に有用である。プロモーターは典型的には、抗体のＤＮＡ配列がそれに操作的に結合されている抗体の発現を調節するであろうし、このプロモーターはオペレーター配列と場合により結合されておりそして一般的には所望する抗体の転写および翻訳を開始しそして完了させるためのＲＮＡポリメラーゼおよびリボソーム結合部位配列などを含んでなる。
【００２７】
酵母が、本発明の抗体をコードするＤＮＡ配列をクローン化するのに有用な真核細胞宿主の一例である。サッカロミセスが好ましい真核細胞宿主である。真核細胞中の核酸の発現を誘発するプロモーター／調節配列は３−ホスホグリセラートキナーゼプロモーター／調節剤配列および他の糖分解酵素をコードする核酸の発現を誘発するプロモーター／調節配列を包含するがそれらに限定されない。
【００２８】
微生物の他に、本発明の抗体を発現しそして製造するために哺乳動物組織細胞培養物を使用することができる（ウィンナッカー（Ｗｉｎｎａｃｋｅｒ）、「フロム・ジーンズ・ツー・クローンズ」（“Ｆｒｏｍ  Ｇｅｎｅｓ  ｔｏ  Ｃｌｏｎｅｓ，”、ニューヨーク（Ｎ．Ｙ．）、ＶＣＨ・パブリッシャーズ・ニューヨーク（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）、１９８７年）。真核細胞が抗体の発現に好ましく、そしてチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、種々のＣＯＳ細胞系統、ＨｅＬａ細胞、好ましくは骨髄腫細胞系統、および形質転換されたＢ細胞またはハイブリドーマを包含するがそれらに限定されない多くの適当な宿主細胞系統が当該技術で開発されてきた。これらの細胞中で所望する配列を発現する発現ベクターは発現調節配列、例えばＤＮＡ複製の出所、プロモーター、エンハンサー（クイーン（Ｑｕｅｅｎ）他著、イミュノル・レヴ（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．）、１９８６年、８９、４９−６８）、並びに必須プロセシング配列部位、例えばリボソーム結合部位、ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位、並びに転写開始および終結配列を包含しうる。好ましい発現調節配列は、免疫グロブリン遺伝子、シミアンウイルス（ＳＶ）４０、アデノウイルス、シトメガロウイルス、牛パピロマウイルスなどから誘導されるプロモーターである。
【００２９】
当該ＤＮＡ部分を含有するベクターは既知の方法により宿主細胞中に伝達することができ、それは細胞宿主のタイプに依存して変動する。例えば、塩化カルシウムトランスフェクションは一般的に原核細胞用に利用され、燐酸カルシウム処理または電気穿孔は他の細胞宿主用に使用することができる。（サンブルック（Ｓａｍｂｒｏｏｋ）他著、モレキュラー・クローニング（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ）、ア・ラボラトリー・マニュアル（Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ）、ニューヨーク（ＮＹ）、コールド・スプリング・ハーバー（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ）、１９８９）。
【００３０】
発現されると、抗体全体、それらから誘導される二量体、個別の軽鎖および重鎖、または他の形態の抗体を当該技術で既知である標準的方法に従い精製することができる。そのような工程は硫酸アンモニウム沈澱、親和性カラムの使用、普通のカラムクロマトグラフィー、ゲル電気泳動などを包含するがそれらに限定されない（一般的には、Ｒ・スコーペス（Ｒ．Ｓｃｏｐｅｓ）著、「プロテイン・ビューリフィケーション（“Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ”）、ニューヨーク（Ｎ．Ｙ．）、スプリンゲル−フェルラグ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、１９８２年参照）。少なくとも約９０％〜９５％の同一性の実質的に純粋な抗体が好ましく、そして少なくとも９８％〜９９％もしくはそれ以上の同一性を有する抗体が薬剤用途にとって最も好ましい。精製されたら、抗体を次に治療用に使用することができる。
【００３１】
本発明の抗体は治療環境で製薬学的に許容可能な担体中で単独で使用することができ、或いはそれらを化学療法剤、例えば非ステロイド抗炎症薬、コルチコステロイド、または免疫抑制剤、と一緒に使用することができる。抗体またはそれらから誘導される複合体は投与方式に依存して変動する製薬学的に許容される薬用量形態で製造することができる。
【００３２】
それ故、本発明は眼の疾病の処置における使用のためのＩＦＮガンマと結合する抗体を含んでなる新規な組成物を包含する。上記のように、抗体はモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ヒト化されたモノクローナル抗体、もしくはモノクローナルキメラ抗体、またはここに引用された抗体のいずれかのタイプの生物学的に活性な断片でありうる。各々のタイプの抗体の作成はここで論じられておりそして本発明の新規な方法における使用のための抗体の作成に適用される。一般的に、モノクローナルヒト化抗体は非免疫原性でありそしてその結果として免疫応答を誘発しないため、それらを使用することが好ましい。しかしながら、いずれのタイプの抗体でも本発明で使用することができる。
【００３３】
本発明の方法はＩＦＮガンマの抗体の使用に限定されることを意図しない。ＩＦＮガンマに対する抑制剤も本発明の方法で有用である。そのような抑制剤はＩＦＮガンマの機能を阻止するペプチド類、ＩＦＮガンマ受容体、ＩＦＮガンマ受容体に対する抗体、ＩＦＮベータ、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、およびそれらのいずれかの組み合わせを包含するがそれらに限定されない。
【００３４】
本発明を実施にするために有用な薬剤組成物は１日当たり１キログラム当たり１マイクログラム〜１日あたり１キログラム当たり１００ミリグラムの間の薬用量を送達するように投与することができる。
【００３５】
本発明の方法で有用な薬剤組成物は眼用調剤、注射調剤、または他の同様な調剤状で局所的にまたは全身的に投与することができる。ＩＦＮガンマに対する抗体の他に、そのような薬剤組成物は製薬学的に許容可能な担体並びに薬品投与を強め且つ促進することが知られる他の成分を含有することができる。本発明の方法に従いガンマＩＦＮ抗体を投与するために、他の可能な調剤、例えばナノ粒子、リポソーム、再密閉した赤血球、および免疫学をベースにした系を使用することもできる。
【００３６】
製薬学的に調合され且つ眼内の自己免疫反応の処置のために動物に投与することができるＩＦＮガンマに対する抗体を含んでなる化合物をここに記載する。
【００３７】
本発明は、活性成分としてＩＦＮガンマに対する抗体を含んでなる薬剤組成物の製造および使用を包括する。そのような薬剤組成物は被験者への投与に適する形態で活性成分だけから構成されていてもよく、或いは薬剤組成物が活性成分および１種もしくはそれ以上の製薬学的に許容可能な担体、１種もしくはそれ以上の追加成分、またはこれらの数種の組み合わせを含んでなることもできる。当該技術で既知であるように、活性成分は薬剤組成物中に生理的に許容可能なエステルまたは塩の形態で、例えば生理的に許容可能なカチオンまたはアニオンと組み合わせて、存在することができる。
【００３８】
ここで使用される用語「製薬学的に許容可能な担体」は、活性成分がそれと組み合わされておりそして組み合わせ後に活性成分を被験者に投与するために使用できる化学的組成物を意味する。
【００３９】
ここで使用される用語「生理的に許容可能な」エステルまたは塩は、薬剤組成物のいずれの他の成分とも相容性であり、組成物を投与する被験者にとって有害でない活性成分のエステルまたは塩形態を意味する。
【００４０】
ここに記載された薬剤組成物の調剤は、薬理学技術で既知であるかまたは今後開発されるいずれかの方法により製造することができる。一般的に、そのような製造方法は活性成分を担体または１種もしくはそれ以上の他の修飾成分と一緒に結合し、そして次に、必要ならまたは望まれるなら、製品を所望する単一または複数の薬用量単位に成形または包装する段階を包含する。
【００４１】
ここで提供される薬剤組成物の記述は原則的に人間に対する医療用投与に適する薬剤組成物に向けられているが、そのような組成物は全ての種類の動物に対する投与に一般的に適することは当業者は理解するであろう。組成物を種々の動物に対する投与に適合させるための人間に対する投与に適する薬剤組成物の改変は良く理解されており、そして通常の専門的な動物薬理学者は通常実験だけでそのような改変を設定しそして実施することができる。
【００４２】
本発明の薬剤組成物は、ばらで、単一単位薬用量として、または複数の単一単位薬用量として、製造、包装または販売することができる。ここで使用される「単位薬用量」は予め決められた量の活性成分を含んでなる薬剤組成物の個別量である。活性成分の量は一般的に、被験者に投与されるであろう活性成分の薬用量またはそのような薬用量の使いやすい部分、例えばそのような薬用量の１／２もしくは１／３、に相当する。
【００４３】
本発明の薬剤組成物中の活性成分、製薬学的に許容可能な担体、およびいずれかの追加成分の相対量は、処置される被験者の特性、大きさ、および状態に依存してそしてさらに組成物を投与する方式に依存して、変動するであろう。例えば、組成物は０．１％〜１００％（ｗ／ｗ）の間の活性成分を含んでなることができる。
【００４４】
活性成分の他に、本発明の薬剤組成物は１種もしくはそれ以上の追加の製薬学的活性剤をさらに含んでなることができる。特に意図する追加剤はＩＦＮガンマ受容体、ＩＦＮガンマ受容体に対する抗体、ＩＦＮベータ、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、およびそれらのいずれかの組み合わせを包含する。
【００４５】
本発明の薬剤組成物の調節放出性または持続放出性調剤は従来技術を用いて製造することができる。
【００４６】
局所投与に適する調剤は、液体または半液体調剤、例えばリニメント剤、ローション剤、水中油滴型もしくは油中水滴型エマルジョン、例えばクリーム剤、軟膏剤もしくはペースト剤、および液剤または懸濁剤、を包含するがそれらに限定されない。局所投与可能な調剤は、例えば、約１％〜約１０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含んでなることができ、活性成分の濃度は溶媒中の活性成分の溶解度限度ほどに高くすることもできる。局所投与用調剤は１種もしくはそれ以上のここに記載された追加成分をさらに含んでなることができる。本発明の薬剤組成物のイオン泳動投与がここでは局所投与の一形態であると考えられる。
【００４７】
薬剤組成物は殺菌性の注射可能な水性もしくは油状の懸濁剤または液剤の形態で製造、包装または販売することができる。この懸濁剤または液剤は既知の技術に従い調合することができ、そして活性成分の他に追加成分、例えばここに記載された分散剤、湿潤剤、または懸濁化剤、を含んでなることができる。そのような殺菌性の注射可能な調剤は、無毒の非経口的に許容可能な希釈剤または溶媒、例えば水または１，３−ブタンジオール、を用いて製造することができる。他の許容可能な希釈剤および溶媒はリンゲル液、生理食塩液、および不揮発性油、例えば合成モノ−もしくはジ−グリセリド類、を包含するがそれらに限定されない。使用できる他の非経口投与可能調剤は、活性成分を微結晶形態で、リポソーム調剤で、または生体内分解性重合体系の成分として含んでなるものを包含する。持続放出または移植用の組成物は製薬学的に許容可能な重合体状または疎水性の物質、例えばエマルジョン、イオン交換樹脂、微溶性重合体、または微溶性塩、を含んでなることができる。
【００４８】
本発明の薬剤組成物は眼に対する投与に適する調剤に製造、包装または販売することができる。そのような調剤は、例えば、水性または油状の液体担体中の活性成分の０．１％〜１．０％（ｗ／ｗ）溶液または懸濁液を包含する眼用滴剤の形態でありうる。そのような滴剤はさらに緩衝剤、塩類、または１種もしくはそれ以上のここに記載された追加成分を含んでなることができる。使用できる他の投与可能調剤は、活性成分を微結晶形態でまたはリポソーム調剤中に含んでなるものを包含する。
【００４９】
ここで使用される「追加成分」は１種もしくはそれ以上の下記のものを包含するがそれらに限定されない：賦形剤、界面活性剤、分散剤、不活性希釈剤、造粒剤および崩壊剤、結合剤、潤滑剤、甘味剤、香味剤、着色剤、防腐剤、生理的に崩壊可能な組成物、例えばゼラチン、水性賦形剤および溶媒、油状賦形剤および溶媒、懸濁化剤、分散または湿潤剤、乳化剤、解乳化剤、緩衝剤、塩類、濃稠化剤、充填剤、乳化剤、酸化防止剤、抗生物質、抗カビ・菌剤、安定剤、および製薬学的に許容可能な重合体状または疎水性の物質。本発明の薬剤組成物中に含むことができる他の「追加成分」は当業界で既知でありそして例えば引用することにより本発明の内容となるゲナロ（Ｇｅｎａｒｏ）編集、レミントンズ・ファーマシューティカル・サイエンセス（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ペンシルバニア州（ＰＡ）、イーストン（  Ｅａｓｔｏｎ）、マック・パブリッシング・カンパニー（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．）、１９８５年に記載されている。
【００５０】
この化合物は動物に対して１日に数回の頻度で投与することができ、或いはそれをそれより頻繁でなく、例えば１日に１回、１週間に１回、２週間に１回、１月に１回またはそれより頻繁でなく、例えば数ヶ月に１回もしくは１年に１回以下で、投与することもできる。投与頻度は当業者に容易に明らかになりそして多くの因子、例えば、それらに限定されないが処置しようとする疾病のタイプおよび重篤度、動物のタイプおよび年齢など、に依存するであろう。
【００５１】
好ましくは、本発明の組成物は局所投与される。組成物は下瞼に軟膏剤として投与することができる。好ましくは、組成物は眼用滴剤の形態で投与される。しかしながら、ＩＦＮ−ガンマに対する抗体を含んでなる組成物を非経口的に投与することもできる。
【００５２】
ＩＦＮ−ガンマに対する抗体は冒された眼に投与される組成物の中である範囲の濃度で存在することができる。
【００５３】
ＩＦＮガンマに対する抗体を含んでなる組成物は冒された眼に１日に数回投与することができる。好ましくは、組成物は１日に１〜５回投与され、そしてより好ましくは組成物は１日に１〜３回投与される。１日当たり３回の組成物の投与が最も好ましい。
【００５４】
ＩＦＮガンマ抗体は被験者の冒された眼に対して自己免疫反応の影響を治癒するのに必要な長さにわたり投与することができる。好ましくは、被験者は約５〜約１０日間にわたり処置を受ける。より好ましくは、被験者は約５〜約７日間にわたり処置を受ける。ＩＦＮガンマ抗体を投与する全処置を繰り返すことができる。
【００５５】
実施例により証明されるように、本発明は眼に関連する組織または器官の移植の拒絶反応から生ずる過免疫応答の処置において特に有用である。本発明はまた、本発明の組成物が移植手術の約１日前、手術中、および手術直後に投与される場合の移植された組織または器官の予期される拒絶反応の予防においても有用である。好ましい処置期間は約７日間である。
【００５６】
冒された眼に対するＩＦＮガンマ抗体の投与は、ＩＦＮガンマの過剰生成により引き起こされる眼および眼の神経細胞の損傷に対しても有効である。ＩＦＮガンマの過剰生成も眼内の自己免疫応答を誘発しうる。それ故、ＩＦＮガンマの過剰生成を引き起こす疾病に罹った眼に対するＩＦＮガンマ抗体の投与も本発明の範囲内である。
定義
不定冠詞はここでは１つもしくは１つより多い（すなわち少なくとも１つの）その冠詞の文法上の対象をさす。例えば、「要素」は１つの要素または１つより多い要素を意味する。
【００５７】
ここで使用される用語「抗体」は、抗原上で特異的エピトープの特異的に結合しうる免疫グロブリン分子をさす。抗体は天然出所からまたは組み換え出所から誘導される無傷の免疫グロブリン類であることができそして無傷の免疫グロブリン類の免疫反応性部分であることができる。抗体は典型的には免疫グロブリン分子の四量体である。本発明における抗体は、例えばポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、Ｆｖ、ＦａｂおよびＦ（ａｂ）２、並びに単鎖抗体およびヒト化された抗体を包含する多種の形態で存在することができる（ハルロウ（Ｈａｒｌｏｗ）他著、ユージング・アンチボディーズ（Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）、ア・ラボラトリー・マニュアル（Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ）、ニューヨーク（ＮＹ）、コールド・スプリング・ハーバー・ラボラトリー・プレス（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ）、１９９９年；ハルロウ（Ｈａｒｌｏｗ）他著、ユージング・アンチボディーズ（Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）、ア・ラボラトリー・マニュアル（Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ）、ニューヨーク（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）、コールド・スプリング・ハーバー・ラボラトリー・プレス（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ）、１９８９年；ハウストン（Ｈｏｕｓｔｏｎ）他著、プロセ・ナトル・アカデ・サイ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ）、米国（ＵＳＡ）、１９８８年、８５：５８７９−５８８３；バード（Ｂｉｒｄ）他著、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、１９８８年、  ２４２：４２３−４２６）。
【００５８】
ここで使用される用語「合成抗体」は、組み換えＤＮＡ技術を用いて生成される抗体、例えば、ここに記載されたバクテリオファージにより発現される抗体、を意味する。この用語は、抗体をコードするＤＮＡ分子の合成により生成されそしてそのＤＮＡ分子が抗体蛋白質または抗体を特異化するアミノ酸配列を発現する抗体を意味するとも解釈すべきであり、ここでＤＮＡまたはアミノ酸配列は当該技術で利用でき且つ既知である合成ＤＮＡまたはアミノ酸配列技術を用いて得られる。
【００５９】
用語「生物学的に活性な抗体断片」は、ＩＦＮガンマに特異的に結合する能力を保有する抗体の断片を意味する。
【００６０】
「疾病」は、動物がホメオスタシスを保つことができず且つ疾病が緩和された場合に動物の健康が劣化し続ける動物の健康状態である。本出願中のこの疾病という用語の使用は疾病、障害、および症状の用語を包括することを意味する。
【００６１】
疾病の「処置」は、疾病の徴候の重篤度、そのような徴候が被験者により体験される頻度、または両者が減じられるかまたは排除される時に発生する。「処置」は予期される疾病状態の予防も包括する。例えば、移植拒絶反応の処置は拒絶反応がすでに起きた後のおよび予期される拒絶反応を予防するために移植手術後のある期間内でのＩＦＮガンマに対する抗体を含んでなる組成物の使用を包含する。好ましい手術後期間は約７日間である。
【００６２】
ここで使用される用語「特異的に結合する」は、ＩＦＮガンマを認識し且つ結合するが試料中の他の分子は実質的に認識または結合しない抗体を意味する。
【００６３】
「自己免疫応答」は、疾病状態中に高まった免疫応答が宿主に有害であるような免疫系における変化をさす。典型的には、免疫系または他の免疫系成分、例えば宿主により製造される抗体、の細胞は「自己」抗原を外来抗原として認識する。
【００６４】
「過免疫応答」は免疫系の１つもしくはそれ以上のサイトカイン類の過剰発現により特徴づけられる自己免疫応答をさす。
【００６５】
ここで使用される「眼に関連する組織または器官」は眼を構成する組織および器官をさす。これらは解剖学教本、例えばウィリアムズ（Ｗｉｌｌｉａｍｓ）他編集、グレイズ・アナトミー（Ｇｒａｙ‘ｓ  Ａｎａｔｏｍｙ）、フィラデルフィア、１９８０年、３６版、Ｗ．Ｂ．サウダーズ・カンパニー（Ｓａｕｄｅｒｓ  Ｃｏ．）で分類される眼の全部分を包含する。
【００６６】
「角膜移植」は哺乳動物の眼内への角膜の挿入をさし、ここで挿入される角膜は哺乳動物の天然角膜でない。挿入される角膜は死体からであってよい。
【００６７】
薬剤組成物が冒された領域に直接適用される場合には、それは「局所投与される」と言われる。例えば、眼用滴剤はクリーム剤および軟膏剤と同様に局所投与される。イオン泳動も局所投与の形態として包含される。
【００６８】
「組み換えＤＮＡ」は天然では一緒にされない配列を有するポリヌクレオチドをさす。増加または集合させた組み換えポリヌクレオチドを適当なベクター中に含ませることもでき、そしてベクターを使用して適当な宿主細胞を形質転換させることもできる。組み換えＤＮＡポリヌクレオチドは非コード機能（例えばプロモーター、複製の出所、リボソーム結合部位など）を行なうこともできる。
【実施例】
【００６９】
本発明を以下の実験例を参照して詳細にさらに記載する。これらの実施例は説明目的だけに示されており、そして特に断らない限り限定しようとするものではない。それ故、本発明は以下の実施例に何ら限定されるべきでなく、むしろ、ここに示されている教示の結果として明らかになるいずれかのそして全ての変更を包括すべきである。
【００７０】
以下で報告される試験の各々で、抗体のＦａｂ２断片の濃度は５０ｍｇ／ｍｌの蛋白質であった。エライサ（ＥＬＩＳＡ）により測定される場合の抗ＩＦＮガンマ活性は１：１０，０００の希釈度で有意なシグナルを示した。断片は液体形態であった。抗体断片の液体調合物を１つの眼当たり２〜３滴、１日当たり３回、７〜１０日間にわたり投与した。視力における改良および他の徴候を滴剤の添加後第二または第三日毎に頻繁に観察した。
【００７１】
最近角膜移植手術を受けた３人の被験者で臨床試験を行なった。５３歳の男性被験者Ｇは円錐角膜を処置するために角膜移植を受けた。手術は白濁部の摘出および人工水晶体の移植を含んでいた。被験者Ｇはその後、視力の劣化および角膜移植片の混濁により同定される移植拒絶反応を受けた。被験者Ｇを標準療法で処置されたが、治療効果はなかった。標準療法は、局所的に、滴剤もしくは軟膏剤の形態で、または静脈内に、結膜下注射により、経口的に、そして筋肉内に投与される、ステロイド類、抗炎症剤、抗生物質、もしくはビタミン類、またはいずれかの組み合わせでありうる。山羊抗ヒトインターフェロンガンマ抗体の断片が冒された眼に眼用滴剤の形態で外来被験者基準で投与された。滴剤は１日２滴を３回、７日間の期間にわたり投与された。被験者Ｇは２日間の処置後に視力の有意な改良を示した。さらに、角膜移植片は混濁状態からほとんど完全な透明状態に戻りそして角膜の周辺領域も有意により透明になった。
【００７２】
３９歳の男性被験者Ｐは１９９９年に円錐角膜を処置するために角膜移植を受けた。９ヶ月後に、被験者Ｐは移植拒絶反応と診断されそして静脈内および眼用滴剤の両方によるデキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）の２５回投与で処置した。被験者Ｐは別のタイプの療法も受け、そして外来被験者基準で処置を続けた。一次移植拒絶反応から６ヶ月後に、被験者Ｐは二次移植拒絶反応と診断された。被験者Ｐは外来被験者基準で一次拒絶反応用に使用されたものと同じ療法で処置された。１ヶ月後に、被験者Ｐの以前の療法が停止されそして眼用滴剤の形態のインターフェロンガンマに対する抗体を用いる処置を開始した。１日後に、被験者Ｐは視力の改良を体験しそして移植された角膜の周辺領域でより透明になった。処置の次の２日間にわたり、被験者Ｐは完全な角膜透明性および視力の劇的な改良を示した。
【００７３】
５３歳の女性被験者Ｆは化膿性角膜潰瘍および帯状疱疹を処置するために角膜移植および白濁部の摘出を受けた。１０日後に、移植片の拒絶反応があった。被験者Ｆは一次移植の拒絶反応から１３日後に別の角膜移植を受けた。被験者Ｆは複数の抗生物質、ステロイド類、抗炎症性調剤、およびアトロピン（ａｔｒｏｐｉｎｅ）を用いる療法を受けた。行なわれた全ての療法にもかかわらず、被験者Ｆは依然として移植片の周りで化膿した輪を示し、移植片自体が曇っており、そして眼室前方が出血し且つ滲出液で満たされていた。被験者Ｆの冒された眼を、２滴ずつ毎日３回投与される眼用滴剤の形態のインターフェロンガンマに対する抗体を用いて処置した。投与から３日後に、被験者Ｆの症状が改良した。移植片の周りの化膿した輪が有意に除かれ且つ白くなり、そして角膜が有意にさらに透明になった。室前方の滲出液および出血が完全に消え、そして冒された眼は有意に正常にみえた。
【００７４】
開示された実験結果は、ＩＦＮガンマに対する抗体を用いる眼の過免疫疾病の処置が有効であることを立証している。
【００７５】
ここに引用されている各々のおよび全ての特許、特許出願、および文献の開示はそれら全体が引用することにより本発明の内容となる。
【００７６】
本発明を具体的な態様を参照して開示してきたが、発明の真の精神および範囲から逸脱せずに本発明の別の態様および変更を当業者により工夫できることは明らかである。添付された請求項は全てのそのような態様および同等な変更を包含することを意図する。
【国際公開パンフレット】
2004532885.tif 000002
2004532885.tif 000003
2004532885.tif 000004
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2004532885.tif 000011
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2004532885.tif 000013
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2004532885.tif 000018
2004532885.tif 000019
2004532885.tif 000020
【国際調査報告】
2004532885.tif 000021