(57)【要約】本発明は、１７−メチレンアンドロスタン−３α−オールアナログは、鋤鼻器官に投与する場合に、副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン（ＣＲＨ）インヒビターとして、特に抗うつ病薬として有用であることを提供する。本発明はまた、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールの改善された製造法をも提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患っているヒトにおけるＣＲＨの抑制によって処置可能な疾患を処置するための、有効な量の式Ｉ：
【化１】
2004528364.tif 000006
［式中、
Ｒ１は、水素またはメチルである。
Ｒ２は水素、アルキルまたはＲ’ＣＯであって、Ｒ’はアルキルまたはフェニルである。
破線は任意の二重結合を示し、そして、
波線は、ＺまたはＥ異性体を示す］
の化合物を含有する薬物の製造における、式（Ｉ）の化合物の使用であって、
該薬物は個体の鋤鼻器官への投与のために適応させる、該使用。
【請求項２】
疾患はうつ病である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
化合物は１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールである、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
化合物はプレグナ−１７(２０)Ｚ−エン−３α−オールである、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
有効な量は２０ｐｇ〜２０ｎｇである、請求項１に記載の使用。
【請求項６】
有効な量は２００ｐｇ〜２ｎｇである、請求項４に記載の使用。
【請求項７】
患っているヒトにおけるＣＲＨの抑制によって処置可能な疾患の処置のための薬物産物であって、
標識化されているかまたは該薬物産物が該疾患の処置のためのものであることを示す標識を伴う、容器を含有し、該容器は鋤鼻器官投与のための１つ以上の用量単位を含有し、各々活性成分として式Ｉ：
【化２】
2004528364.tif 000007
［式中、
Ｒ１は、水素またはメチルである。
Ｒ２は水素、アルキルまたはＲ’ＣＯであって、Ｒ’はアルキルまたはフェニルである。
破線は任意の二重結合を示し、そして、
波線は、ＺまたはＥ異性体を示す］
の化合物を含有する、該薬物産物。
【請求項８】
疾患はうつ病である、請求項７に記載の薬物産物。
【請求項９】
化合物は１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールである、請求項７に記載の薬物産物。
【請求項１０】
化合物はプレグナ−１７(２０)Ｚ−エン−３α−オールである、請求項７に記載の薬物産物。
【請求項１１】
有効な量は２０ｐｇ〜２０ｎｇである、請求項７に記載の薬物産物。
【請求項１２】
有効な量は２００ｐｇ〜２ｎｇである、請求項１１に記載の薬物産物。
【請求項１３】
１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールの製造法であって、
（ａ）１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３β−オールを光延反応条件下で処理して１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールのエステルを得て；そして、
（ｂ）該エステルを加水分解して、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールを得る、
ことを含む、該製造法。
【請求項１４】
１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３β−オールを、
（ａ）デヒドロエピアンドロステロンをウィッティヒ反応条件下で処理して、１７−メチレンアンドロスタ−５−エン−３β−オールを得て；
（ｂ）該１７−メチレンアンドロスタ−５−エン−３−β−オールを酸化および単離して、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３−オンを得て；そして、該１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３−オンを還元して１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３−β−オールを得る、
ことによって製造する、請求項１３に記載の製造法。
【請求項１５】
１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３−オンを、セリウム（ＩＩＩ）塩の存在下で水素化ホウ素ナトリウムを用いて還元する、請求項１４に記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
(技術分野)
本発明は、副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン（ＣＲＨ）インヒビターとしての、特に抗うつ病薬としての、ある１７−メチレンアンドロスタン−３α−オールアナログの使用に関する。
【０００２】
（背景技術）
米国特許第5,969,168号は、ボメロフェリン(vomeropherins)、すなわちヒトの鋤鼻器官に作用して視床下部機能または自律神経性機能を改変する化合物である、多数のアンドロスタン（これは、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３−α−オールなどの１７−メチレンアンドロスタノールを含む）を開示している。
【０００３】
米国特許第5,563,131号および第6,057,439号は、ボメロフェリンとしての多数のプレグナン誘導体（これは、プレグナ−１７(２０)Ｚ−エン−３α−オールおよびプレグナ−４,１７(２０)Ｚ−ジエン−３α−オールなどのプレグナ−１７−エン−３−オールを含む）を開示している。
【０００４】
副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン（ＣＲＨ）（これはまた、コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）としても知られる）は、下垂体前葉由来の副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）の産生を刺激し、その結果視床下部−下垂体−副腎皮質系（ＨＰＡ）の機能を調節する視床下部放出ホルモンである。視床下部外脳領域において、ＣＲＨは、ストレスの自律神経上の影響、免疫上の影響または行動上の影響の主な生理学的制御因子であると考えられる。ＣＲＨは、主要うつ病を有する患者において分泌過多であると考えられる。この示唆を支持する証拠としては、（１）脳脊髄液ＣＲＨは、薬物なしのうつ病患者において増大し；（２）死後の脳組織の分析は、うつ病患者の視床下部においてＣＲＨを発現する細胞数の増大を示し；（３）前頭皮質におけるＣＲＨ受容体部位の数は、コントロールと比べてうつ病の自殺犠牲者において減少し、このことはＣＲＨ分泌過多の結果であるようであり；そして、（４）おそらくＣＲＨ受容体の下方制御が原因で、ＣＲＨに対するＡＣＴＨ応答はうつ病患者において鈍る、ことを含む。実験動物において、ＣＲＨはうつ病原性性質および不安原性性質の両方を有すると考えられる。これらの発見に基づいて、ＣＲＨ拮抗薬は新規なクラスの抗うつ病薬で且つ抗不安薬の化合物を含み得ると仮定した。
【０００５】
脳におけるＣＲＨの分泌過多は、例えばうつ病、不安関連異常症および神経性食欲不振などの神経精神医学的な異常症においてみられる総体症状(symptomatology)に寄与し得る。ＣＲＨの過剰産生はまた、例えば滑膜性の連結(synovial joints)などの部位における末梢性炎症を引き起こし得て、このものは自己免疫疾患（例えば、慢性関節リウマチ）に寄与する。
【０００６】
動物において最近公開されたデータは、ストレスを媒介する際のＣＲＨと、ストレスに対する応答とを関連付けている（例えば、過敏性大腸症候群）。高コルチゾール症が情動性の変化を誘起し得たり、また副腎皮質ステロイドの濃縮または受容体活性の低下がうつ病の処置の１方法であろうという長年にわたる仮説が存在しており、そしていくつかの研究はそれらの可能性を支持している。
【０００７】
最後に、ＣＲＨおよび副腎皮質ステロイドは、睡眠に影響を有すると報告されている。コルチゾールは、徐波睡眠（ＳＷＳ）を増大させ、そして急速眼球運動（ＲＥＭ）睡眠を抑制する。ＣＲＨ分泌を制御することは、睡眠の質に重要な影響（これは、例えばうつ病および不安関連異常症において一般的である深い睡眠障害を処置することを含む）を有し得る。
【０００８】
（発明の概要）
第１の態様において、本発明は、患っているヒトにおけるＣＲＨの抑制によって処置可能な疾患の処置法であって、該方法は有効な量の式Ｉ：
【化１】
2004528364.tif 000002
［式中、
Ｒ1は、水素またはメチルであり；
Ｒ2は水素、アルキルまたはＲ'ＣＯであって、Ｒ'はアルキルまたはフェニルであり；
破線は任意の二重結合を示し；そして、
波線は、ＺまたはＥ異性体を示す］
の化合物をヒトの鋤鼻器官へ投与することを含む。
【０００９】
第２の態様において、本発明は患っているヒトにおけるＣＲＨの抑制によって処置可能な疾患、特にうつ病を処置するための組成物であって、該組成物は医薬的に許容し得る賦形剤および治療学的に有効な量の少なくとも１つの式Ｉの化合物を含有する。
【００１０】
第３の態様において、本発明は患っているヒトにおけるＣＲＨの抑制によって処置可能な疾患を処置するための薬物製品であって、該薬物製品は標識化されているかまたは該薬物製品が該疾患の処置のためであることを示す標識を伴った容器（ここで、該容器は鋤鼻投与のための用量単位を１つ以上含有する）を含有し、それぞれ活性成分として少なくとも１つの式Ｉの化合物を含有する。
【００１１】
第４番目の態様において、本発明は１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールの改善された製造法である。
【００１２】
（好ましい態様の詳細な記載）
（定義）
「アルキル」とは、炭素数が１〜４の炭化水素基、または炭素数が３〜４の分枝もしくは環状の炭化水素基を意味する。アルキル基は例えば、メチル、エチル、イソプロピル、シクロプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびシクロプロピルメチルを含む。
【００１３】
「医薬的に許容し得る賦形剤」とは、通常安全で非毒性で且つ所望し得る医薬組成物を製造するのに有用である賦形剤を意味する。該賦形剤は、固体、液体、半固体、またはエアロゾル組成物の場合にはガスであり得る。
【００１４】
「治療学的に有効な量」とは、疾患（例えば、うつ病）を患っているヒトの鋤鼻器官に投与する場合に、該疾患に対する処置を有効とするのに十分な量を意味するが、該量は循環への吸収によって該疾患において全身性の効果を有するのには不十分である。
【００１５】
疾患（例えば、うつ病）の「処置する」または「処置」とは、疾患の素因であり得るが、未だ該疾患の症状を受けたりまたは示していないヒトにおいて該疾患が生じることを防止すること（予防的処置）、該疾患を抑制すること（その発症を遅らせたりまたは抑止すること）、該疾患の症状からの軽減を提供すること（これは、待期的(palliative)処置を含む）および該疾患を軽減すること（これは、該疾患の後退を生じる）を含む。
【００１６】
本発明の化合物は、１つ以上のキラル中心を有し得て、従って出発物質の個々の立体異性体または該立体異性体の混合物のいずれを使用するかにより、個々の立体異性体としてまたは該立体異性体の混合物として製造することができる。特に断らなければ、化合物または化合物の群についての記載または命名は、個々の立体異性体または該立体異性体の混合物（ラセミ体またはその他）の両方を含むと意図する。立体化学の決定および立体異性体の分離についての方法は、当該分野の当業者にとってよく知られる（例えば、MarchによるAdvanced Organic Chemistry, 4章, 4版, John Wiley and Sons, New York, NY, 1992の記載を参照）。
【００１７】
便宜で、該式から内在する水素原子を省略するが、このものは存在すると理解すべきである。
【００１８】
（本発明の好ましい化合物）
本発明の最も広い定義は本発明の概要中に記載するが、本発明のある化合物が特に(presently)好ましい。
【００１９】
好ましい化合物は、
（１）Ｒ1がメチルである場合には、該化合物はＺ−異性体であって；そして、
（２）Ｒ2は水素である、
化合物である。
【００２０】
本発明に有用な特に好ましい化合物は、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールおよびプレグナ−１７(２０)Ｚ−エン−３α−オールを含む。
【００２１】
（薬理学および有用性）
本発明の化合物は、ＶＮＯに投与する場合に、ＣＲＨインヒビターである。インビボでのＣＲＨインヒビターとしてのそれらの活性は、実施例に記載する通り、ＣＲＨの抑制の測定によって直接的に、または他のホルモン（例えば、ＡＣＴＨおよびＣＲＨに関係するステロイド（例えば、コルチゾール）の測定によって間接的に、測定することができる。
【００２２】
ＣＲＨインヒビターとしてのそれらの活性のために、本発明の化合物は、ＣＲＨの抑制が治療となる疾患の処置において有用性を示した。例えば、生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）ニューロンシステムは成人で６０〜１００分の間の周期現象を有する拍動性様式でＧｎＲＨを放出するが、末梢投与したＣＲＨはＧｎＲＨパルス発生装置(generator)の活性を抑制する。該ＶＮＯへの本発明の化合物の運搬は、ＣＲＨのレベルを低下させ、従ってＧｎＲＨパルス発生装置の活性を増大させ、このことにより、引き続いて下垂体−生殖腺の機能を活性化するであろう。従って処置可能な疾患としては、例えば思春期の遅れ、睾丸停留、機能的(functional)視床下部性無月経、性的ドライブの欠乏、オルガスムの欠乏、早熟思春期、子宮内膜症およびホルモン依存性腫瘍（例えば、子宮平滑筋腫、乳がんおよび前立腺がん）を含む。
【００２３】
本発明の化合物は、抗うつ病薬として特に有用性を有する。特に、それらは通常の抗うつ病薬を超える以下の利点を有すると期待される。
（１）該化合物の鋤鼻器官受容体への直接的な局所運搬およびその結果の作用が理由の、作用の早い開始。現行の抗うつ病薬（典型的に経口投与される）は、得られる治療学的な有効性のために数日から典型的に数週間、摂取することが知られる。
（２）使用する非常に低い（ピコグラム〜ナノグラム）用量および投与の局所経路が理由の、全身性の効果または毒性の欠乏。
（３）ＣＲＨ抑制はＧｎＲＨの増大およびその結果による下垂体生殖腺刺激ホルモンの放出の増大ことが理由の、性行動の抑制の欠乏。ほとんどの現行の抗うつ病薬は性行動に負の影響を及ぼす（性的ドライブ、勃起機能およびオルガスムの低下）。
【００２４】
（医薬組成物および投与）
通常、本発明の化合物は、単独でまたは少なくとも１つの本発明の他の化合物と組み合わせて、治療学的に有効な量で鋤鼻器官に投与される。治療学的に有効な量は、疾患およびその激しさ、処置するヒトの年齢および相対的な健康、該化合物の効力、並びに他の因子によって、広く変わり得る。本発明の化合物の治療学的に有効な量は、約２０ピコグラム(ｐｇ）〜２０ナノグラム（ｎｇ）の範囲にわたり；鋤鼻器官に直接的に投与する場合には、２００ｐｇ〜２ｎｇである。該化合物を通常の鼻吸入によって投与したり、軟膏、クリーム剤もしくはゲル剤による鼻経路によって適用したり、またはパッド上に浸透させる場合に、対応する高用量を使用することができる。該技術および本開示に関心を有する当該分野の当業者は、過度の実験を行なうことなく、ある疾患に対する本発明の化合物の治療学的に有効な量を決定することが可能となるであろう。
【００２５】
通常、本発明の化合物は、鋤鼻経路によって（すなわち、該投与する用量の少なくとも一部が該鋤鼻器官と接触するように鼻腔内投与によって）、医薬組成物として投与する。組成物は、液剤、懸濁剤、エアロゾル剤、またはいずれかの他の適当な組成物の形態をとることができ；そして、少なくとも１つの本発明の化合物を少なくとも１つの医薬的に許容し得る賦形剤と組み合わせて含むことができる。適当な賦形剤は、当該分野の当業者にとってよく知られており、そしてそれらおよび該製剤化の方法は、例えばアルホンソ(Alfonso)によるRemington's Pharmaceutical Sciences, 17版, Mack Publishing Company, Easton PA, 1985などの標準的な刊行物において知ることができる。該組成物中の本発明の化合物の量は、該組成物の種類、単位用量のサイズ、賦形剤の種類および当該分野の当業者にとってよく知られる他の因子に依存して広範囲に変えることができる。通常、最終組成物は、本発明の化合物の０．０００００１重量％（％Ｗ）〜〜１０％Ｗ（好ましくは０．００００１％Ｗ〜１％Ｗ）を含み得て、残りは賦形剤である。
【００２６】
本発明の化合物または組成物はまた、処置する疾患の処置のために有用な少なくとも１つの他の薬物（例えば、別の抗うつ病薬、または該疾患を処置する際に本発明の化合物の効果を増強したりもしくはそれ以外には調節する薬物）と一緒に投与することができる。それら他の薬物は、別のボメロフェリンであり得て、このものは本発明の化合物と一緒に同時投与したり、またはより通常の使用（例えば、経口または非経口）によって投与する薬物であり得る。
【００２７】
本発明の化合物の製造
これらの化合物を製造するのに使用する出発物質および試薬は、商業主（例えば、アルドリッチ社(Aldrich Chemical Company)（Milwaukee, WI）およびステロイド社(Steraloids, Inc.)（Newport, RI））から入手することができたり、または刊行物（例えば、Fieser and Fieserによる, Reagents for Organic Synthesis, vols. 1-17, John Wiley and Sons, New York, NY, 1991; Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, vols. 1-5 および補遺, Elsevier Science Publishers, 1989; Organic Reactions, vols. 1-40, John Wiley and Sons, New York, NY, 1991; MarchによるAdvanced Organic Chemistry, 4版, John Wiley and Sons, New York, NY, 1992; 並びに、LarockによるComprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, 1989）中に記載の方法に従って、当該分野の当業者にとってよく知られる方法によって製造する。これらの反応式は、本発明の化合物を製造することができるいくつかの方法の単なる例示であって、そしてこれらの反応式についての様々な改変は実施することができ、またこの開示に関心を有する当該分野の当業者にとって支持されるであろう。
【００２８】
本発明の出発物質、中間体および化合物を、通常の方法（例えば、ろ過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィー法などを含む）を用いて単離および精製することができる。それらは、、例えば物理定数およびスペクトルデータを含めて、通常の方法を用いて確認することができる。
【００２９】
反対に特に断らなければ、本明細書に記載の反応は、温度範囲が約０〜１２５℃の間で常圧下、起こる。
【００３０】
本発明の化合物は、以下に記載したりまた実施例に示す方法によって製造することができる。
【００３１】
２つの一般的な反応式を、以下に示す。反応式１は、Ｒ1がＨである化合物を製造し、そして３−ヒドロキシ基の反転を示す。また、反応式２は、Ｒ1がメチルであって、３−ヒドロキシ基の反転を伴わない化合物を製造する。該２つの反応式を２つの商業的に入手可能な出発物質と組み合わせて使用することにより、本発明の化合物の製造が可能となる。
【化２】
2004528364.tif 000003
【００３２】
反応式１において、デヒドロエピアンドロステロンは、ウィッティヒ反応条件下で処理して、１７−メチレンアンドロスタ−５−エン−３β−オールを与える。次いで、このものを酸化しそして異性化して、１７−メチレンアンドロスタ−５−エン−３−オンを得る。還元（セリウム(ＩＩＩ)塩を水素化ホウ素ナトリウムと一緒に使用することは、この工程において特に有益である）する。場合により、精製のためにエステルに変換して、次いで再び加水分解して、３β−ヒドロキシ化合物（これは、反応式中に示す）を得て、次いで光延反応条件下で処理して、３β−ヒドロキシ化合物をエピマー化して、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールのエステルを得て、このものを次いで加水分解して１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールそのものを得る。
【００３３】
【化３】
2004528364.tif 000004
反応式２において、アンドロステロンをウィッティヒ反応条件下で処理して、プレグナ−１７(２０)Ｚ−エン−３α−オールを、副生成物として入手可能なプレグナ−１７(２０)Ｅ−エン−３α−オールと一緒に得る。
【００３４】
３−ヒドロキシ化合物のエーテルおよびエステルは、当該分野の当業者にとってよく知られる標準的な方法によって容易に製造することができる。
【００３５】
該知識、本開示および本明細書中に引用する刊行物に関心を有する当該分野の当業者は、過度の実験を行なうことなく、本発明の所望の化合物を製造することができるであろう。
【００３６】
（実施例）
以下の実施例は、本発明を例示するものであって、限定するものではない。全ての商業的に入手可能な物質は、入手したままで使用した。
【００３７】
実施例１．１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オール
工程１．１７−メチレン−５−アンドロスタ−５−エン−３β−オール：
無水ジメチルスルホキシド（１７５ｍＬ）を、メチルトリフェニルホスホニウムブロミド（５４．７６ｇ、０．１５３３ｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブトキシカリウム（１７．２０ｇ、０．１５３３ｍｏｌ）にアルゴン下で加え、そして該混合物を７９〜８５℃の浴中に１時間置いて、橙色懸濁液を得た。次いで、デヒドロエピアンドロステロン（８．８４ｇ、３０．６ｍｍｏｌ）の無水ジメチルスルホキシド（８０ｍＬ）溶液を加えた。更に９０分間撹拌後に、該混合物を氷−ブライン（４４０ｍＬ）中に注ぎ、そしてヘプタン（２２０ｍＬ部）を用いて３回抽出した。該抽出液を合わせてアセトニトリル（２２０ｍＬ）で洗浄し、次いでセライト（登録商標）５０３ろ過剤を通してろ過した。該残渣をヘプタン（２５ｍＬ）で洗浄し、そして該ろ液を合わせて減圧下で濃縮した。得られた固体のメタノールからの結晶化により、白色粉末（４．６８ｇ、１６．３ｍｍｏｌ）を得た。ｍ．ｐ．１３４−１３５℃。（文献値：ｍ．ｐ．１３４−１３５℃、MacdonaldらによるSteroids,18, 753-766 (1971))。このものは、ＴＬＣ（シリカゲル、２５％酢酸エチル／ヘキサン；生成物：Ｒf  ０．３１；標準試料：Ｒf  ０．３２）について均一であった。
【００３８】
工程２．１７−メチレン−アンドロスタ−４−エン−３−オン：
１７−メチレンアンドロスタ−５−エン−３β−オール（６．２７ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）をトルエン（４５０ｍＬ）および１−メチル−４−ピペリドン（３２ｍＬ、０．２６ｍｏｌ）に懸濁した。溶媒（７５ｍＬ）を留去後に、アルミニウムイソ−プロポキシド（５．３６ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）を加え、そして該混合物を５時間還流した。次いで、該冷却混合物を０．５Ｍクエン酸（３００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で洗浄し、そしてセライト（登録商標）５０３ろ過剤を通してろ過した。該残渣をトルエン（２５ｍＬ）で洗浄し、そして該ろ液を合わせて減圧下で濃縮して、黄色固体（６．１８ｇ、２１．７ｍｍｏｌ、９９％）を得た。このものは、ＴＬＣ（シリカゲル、２５％酢酸エチル／ヘキサン；Ｒf  ０．４５）により、微量の出発物質（Ｒf  ０．３０）およびより極性の混入物（Ｒf  ０．０１）が混入していることを示した。
【００３９】
工程３．１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３β−イルベンゾエート：
１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３−オン（３．０６ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）および塩化セリウム・７水和物（４０．８ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）のメタノール（２７０、Ｌ）溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（０．６１ｇ、１６ｍｍｏｌ）を加えた。２０分間撹拌後に、該反応液を１Ｎ  ＨＣｌ（１５ｍＬ）を用いてクエンチし、そしてメタノールを減圧下で除去した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、そして得られた懸濁液をジクロロメタン（５０ｍＬ部）を用いて３回抽出した。該抽出物を合わせて、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、そしてセライト（登録商標）５０３ろ過剤を通してろ過した。該残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）で洗浄し、そして該ろ液を合わせて減圧下で濃縮した。該残渣の白色固体を無水ピリジン（１７ｍＬ、０．２１ｍｏｌ）に溶かし、塩化ベンゾイル（６．２ｍＬ、５３ｍｍｏｌ）を加え、そして該混合物を１６時間撹拌した。該混合物を１Ｎ  ＨＣｌ（２００ｍＬ）中に注ぎ、次いでジクロロメタン（５０ｍＬ部）中に３回抽出した。該抽出液を合わせて１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、そしてセライト（登録商標）５０３ろ過剤を通してろ過した。該残渣をジクロロメタン（２５ｍＬ）で洗浄し、そして該ろ液を合わせて減圧下で濃縮した。該残渣を無水エタノールから２回再結晶を行ない、第１回目に活性炭(charcoal)処理することにより、微細で白色の針状晶（２．５９ｇ、６．６３ｍｍｏｌ、６１％）を得た。ｍ．ｐ．  １５４−１５５℃。このものは、ＴＬＣ（シリカゲル、５％酢酸エチル／ヘキサンを使用；生成物：Ｒf  ０．５２；１,３,５(１０),１６−エストラテトラエン−３−イルメチルエーテル：Ｒf  ０．５７）により均一であった。
【００４０】
工程４：１７−メチレン−アンドロスタ−４−エン−３β−オール：
水酸化ナトリウム水溶液（１５重量％、１６ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を、メタノール（３２０ｍＬ）中に懸濁した１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３β−イルベンゾエート（２．４７ｇ、６．３２ｍｍｏｌ）に加えた。１時間還流後に、水（１６０ｍＬ）を加え、そして該混合物を終夜冷却した。得られた懸濁液をろ過し、そして該残渣を水（３５ｍＬアリコート）で３回洗浄し、次いで終夜乾燥して非常に微細な白色板状晶(platelets)（１．７０ｇ、５．９３ｍｍｏｌ、９４％）を得た。ｍ．ｐ．  １２０−１２１℃。このものは、ＴＬＣ（シリカゲル、２０％酢酸エチル／ヘキサンを使用；生成物：Ｒf  ０．３１；１７−メチレンアンドロスタ−５−エン−３β−オール：Ｒf  ０．２７）により均一であった。
【００４１】
工程５：１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−イルベンゾエート
アゾ二カルボン酸ジエチル（１．１ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）を、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３β−オール（１．００ｇ、３．４９ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（０．８５ｇ、７．０ｍｍｏｌ）および安息香酸（１．８３ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（７ｍＬ）溶液に２分間かけて加えた。１時間撹拌後に、溶媒を減圧下で除去し、そして該残渣をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１５０ｍＬ）中に溶かした。該混合物を飽和炭酸水素ナトリウム（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、そしてセライト(登録商標)５０３ろ過剤を通してろ過した。該残渣をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１０ｍＬ）で洗浄し、そして該ろ液を合わせて減圧下で濃縮した。該残留固体についてシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（１％酢酸エチル／ヘキサンを使用）精製を行ない、続いて２回再結晶（無水エタノールから）を行ない、第１回目に活性炭処理することにより、白色針状晶（３１１．２ｍｇ、０．７９７ｍｍｏｌ、２３％）を得た。ｍ．ｐ．  １１７−１１８℃。このものは、ＴＬＣ（シリカゲル、５％酢酸エチル／ヘキサンを使用；生成物：Ｒf  ０．５０；１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−イルベンゾエート：Ｒf  ０．５３）により均一であった。
【００４２】
工程６：６,１７−メチレン−４−アンドロステン−３α−オール
水酸化ナトリウム水溶液（１５重量％、２．０ｍＬ、７．５ｍｍｏｌ）を、メタノール（４０ｍｌ）中に懸濁した１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−イルベンゾエート（２９５．０ｍｇ、０．７５５３ｍｍｏｌ）に加えた。２時間還流後に、水（１０ｍＬ）を該混合物に加え、メタノールを減圧下で除去し、そして該残渣をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１０ｍＬ部）中に３回抽出した。該抽出液を合わせてブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、そしてセライト（登録商標）５０３ろ過剤を通してろ過した。該残渣をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５ｍＬ）で洗浄し、そして該ろ液を合わせて減圧下で濃縮して白色結晶性固体（２１０．５ｍｇ、０．７３４８ｍｍｏｌ、９７％）を得た。ｍ．ｐ．  １０４−１０５℃。このものは、ＴＬＣ（シリカゲル、２０％酢酸エチル／ヘキサンを使用；生成物：Ｒf  ０．３６；１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オール：Ｒf  ０．３０）により均一であった。
【００４３】
実施例２．１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールの研究
１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オール（４００ｐｇ）またはプラセボは、測定する量を（プロピレングリコール中の該活性成分の１０-8Ｍ溶液またはプロピレングリコール単独の２つの２秒「パフ(puffs)」）、該鋤鼻器官の開口部(opening)へ該化合物を運搬する運搬装置を用いて、正常な成人の雄性および雌性のヒトボランティアの鋤鼻器官に投与した。該研究の評価は、睡眠の客観的な評価および主観的な評価、被験者の脳波のパワー(power)分光分析、および該被験者の有効な状態についての鉛筆と紙の(pencil-and paper)自己申告目録（ＤＡＢＳ−７０）を含めた。
【００４４】
これらの研究からの結果は、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールが抗うつ病性質を有することを支持する。
【００４５】
以下の表は、市販の抗うつ病薬であるパロキセチン(パキシル(Paxil)（登録商標））の効果についての文献報告との、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールに関する研究からの結果の比較を提示する。ここで、睡眠の変数はプラセボに対して、増大（↑））、低下（↓）または変化なし（＝）として示す。
【００４６】
正常な被験者の就寝時刻前に与えた、鋤鼻器官に投与した１７−メチレン−４−アンドロステン−３α−オール（４００ｐｇ）およびパロキセチン（３０ｍｇ）の比較効果：雄性および雌性における組合せ効果
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*サレツ(Saletu)らによる「Sleep Laboratory studies on the single-dose effects of the serotonin reuptake inhibitors paroxetine and flouxetine on human sleep and awakening qualities」, Sleep, 14(5), 439-447 (1991)由来。
【００４７】
該表は、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールおよびパロキセチンを用いて処置した被験者の睡眠プロフィルにおける大きな類似性を示す。ＲＥＭ潜伏期の増大および総ＲＥＭ睡眠時間の減少は、うつ病における潜在的な利点の典型的な指標である；実際、主要うつ病と診断された多数の患者は、年齢および性別が合致する正常者と比べて、ＲＥＭ睡眠潜伏期の減少およびＲＥＭ睡眠の量の増大を示し得る。
【００４８】
この研究に基づいて、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールは、パロキセチンおよび他の選択的なセロトニン再取り込みインヒビターである抗うつ病薬と一緒に、抗うつ病薬性質および刺激薬性質を有する。１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールの抗うつ病活性はまた、我々のＥＥＧ測定（これは、β−およびθ−波の活性の増大を示す）によって支持され；同様な変化は、三環性抗うつ病薬であるアミトリプチリン(amitriptyline)およびイミプラミンによって生じる。１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールはまた、Ｓ３およびＳ４非ＲＥＭ睡眠期におけるδ−周波数活性の増大を生じ、このことは、そのものが雌性よりも雄性においてより大きな効果を有し得ることを示唆する。
【００４９】
１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールはまた、ＡＣＴＨおよびコルチゾールの血漿中濃度を低下させ、そしてまた尿中のコルチゾール濃度を低下させる。そのものはまた、プラセボと比べて、血中の神経伝達物質であるノルエピネフリンおよびセロトニンの濃度、並びに尿中のそれらの代謝産物の濃度を増大させる。これらの結果は更に、１７−メチレンアンドロスタ−４−エン−３α−オールの鋤鼻器官への運搬により、標準的な抗うつ病の効果と同様な効果を得るという示唆を支持する。
【００５０】
プレグナ−１７(２０)Ｚ−エン−３α−オールおよび本発明の他の化合物は、同様な結果を示す。
【００５１】
本発明をある実施態様および実施例と組み合わせて記載するが、本開示に関心を有する当該分野の当業者にとって、具体的に開示する物質および方法の均等物もまた本発明に利用することができ；そして、該均等物は特許請求の範囲内に含まれると意図することは、明白であろう。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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