(57)【要約】本発明は、哺乳動物におけるプリオン関連疾患、例えば伝染性海綿状脳症（ＴＳＥ）の、罹患哺乳動物へカオトロピック剤を投与すること、または罹患動物において高体温状態を誘発することによる処置に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物におけるプリオン疾患を処置するための方法であって、プリオンタンパク質変性有効量のカオトロピック剤を該哺乳動物に投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
剤が、グアニジン塩、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム、尿素またはこれらの組み合わせである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
剤が、グアニジン塩酸塩である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
投与量が、１日１ｋｇあたり約５ｍｇ〜約４０ｍｇである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
剤が、ヨウ化カリウムである、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
投与量が、１日１ｋｇあたり１３０〜２６０ｍｇである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
剤が、尿素である、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
投与量が、１日１ｋｇあたり１〜２ｇである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
プリオン疾患が、スクレイピー、ミンク伝染性脳症、慢性消耗病、ウシ海綿状脳症、エキゾチック反すう動物の海綿状脳症、ネコ海綿状脳症、クールー、クロイツフェルト−ヤコブ病（ＣＪＤ）、致死性家族性不眠症、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群または新変異型のクロイツフェルト−ヤコブ病（ｎｖＣＪＤ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
哺乳動物が、ヒト、ウシ、ヒツジ、ミンクまたはネコである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
プリオン疾患が、ウシ海綿状脳症である、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
哺乳動物が、ウシである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
プリオン疾患が、ＣＪＤまたはｎｖＣＪＤである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
哺乳動物が、ヒトである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
さらに、処置の単位の間に、哺乳動物において高体温を誘発することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
高体温が、マイクロ波エネルギーを加えることにより生じる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
高体温が、発熱性物質を哺乳動物に投与することにより誘発される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
発熱性物質が、不活性化された細菌毒素の混合物である、請求項１７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カオトロピック剤を罹患哺乳動物に投与することによる、哺乳動物におけるプリオン関連疾患、例えば伝染性海綿状脳症（ＴＳＥ）の処置に関する。
【背景技術】
【０００２】
用語「プリオン」は、１９８２年に、Stanley Prusinerにより、伝染性海綿状脳症の原因物質：すべての核酸を欠いているタンパク質性感染性粒子に関する彼の発見を記載している際に創作された。これらの物質は、医学において、全く新規な機構により致死的な神経変性障害を生じる感染性病原体として、真に前例のないものである。プリオンは、感染性、遺伝性または特発性疾患として存在し得るが、これらはすべて、すべての哺乳動物細胞の正常な構成成分であるプリオンタンパク質（ＰｒＰ）への生化学的改変の直接的な結果として発生する(Prusiner, S.B., Proc. Natl. Acad. Sci, USA 95 13363-13383 (1998))。
【０００３】
スクレイピーの病因論の最も初期の研究は、疾患が、１の哺乳動物から他の哺乳動物に直接伝染し得ることを例証した。スクレイピー病原体は、最初は、ウイルスであると考えられたが、これは、既知の動物またはすべての他の種類のウイルスとは異なり、多くの独特の特徴、例えば疾患に対する異常に長い潜伏期間、脳において進行する非炎症性の変性性の異常および古典的なウイルス学的手法によるすべての例証可能なビリオン粒子の欠如を有する。スクレイピー病原体の長い潜伏期間により、これらは、ほとんどのウイルス感染から区別される。検出可能な免疫応答の完全な欠如は、不可解であるが、これは、現在では、この病原体が、改変された宿主タンパク質であり得るという事実により、説明することができる。ＰｒＰは、ユニークな宿主遺伝子の単一のエクソンによりコードされた、宿主特異的なタンパク質である。ＰｒＰは、多種多様の生物において見出される高度に保存された遺伝子の産物であり、重要であるが、未だ知られていない機能を有すると考えられる、膜結合タンパク質である。
【０００４】
スクレイピーに感染したハムスターの脳は、２種の形態のＰｒＰ：細胞性ＰｒＰ（ＰｒＰＣ）およびイソ型のスクレイピーＰｒＰ（ＰｒＰＳｃ）を含む。両方のタンパク質は、３３〜３５kＤの質量を有するが、これらは、異なる物理的特性を有する。ＰｒＰＣは、細胞表面に固定されており、イオン性洗浄剤で可溶化することができ、およびタンパク質分解剤に対して感受性である。対照的に、ＰｒＰＳｃは、イオン性洗浄剤により可溶化することができず、タンパク質分解剤に対してアミノ末端ペプチドのみを失って、ＰｒＰ２７〜３０と呼ばれる２７〜３０kＤの質量のタンパク質を生成する(Prusiner et al. Cell 38:127-140 (1994))。
【０００５】
ＰｒＰ２７〜３０は、海綿状脳症を有する多くの宿主の脳中に見出される、特徴的なアミロイドプラークの主要な構成成分である。この新規なタンパク質の量は、脳におけるプリオン感染性の力価と相関していた。さらに、ＰｒＰ２７〜３０は、感染していない脳には存在せず、ＰｒＰ２７〜３０を変性させ、加水分解し、または改変した種々の手順が、またプリオン感染性を不活性化させたことが見出された。
【０００６】
ＰｒＰＣおよびＰｒＰＳｃの一次構造（即ちアミノ酸配列）において、差異が検出されず、構造またはコピー数に関して、正常な脳および感染した脳からのＰｒＰ遺伝子またはｍＲＮＡの間には、差異が見出されなかった。従って、物理的差異、例えば２種のタンパク質の間の三次元構造は、翻訳後の化学的修飾に起因するものとされた。一般的に、ＰｒＰＣのＰｒＰＳｃへの再折り畳みの間に、いくつかの正常なαらせんタンパク質構造は、部分的にβシートに変換される。
【０００７】
スクレイピー病原体の性質を説明するために、２つの仮説が提案された：１）プリオン粒子が核酸を完全に欠いている、「タンパク質のみ」仮説；および２）プリオンが小さい核酸および宿主によりコードされたタンパク質からなる、「核タンパク質またはビリノ(virino)」仮説である。Sparrerらの実験により、タンパク質のみ仮説が、酵母プリオン様システムを用いることにより正しいことが示唆された(Sparrer H.E. et al. Science 289, 595 (2000))。
【０００８】
ウシの海綿状脳症の最近の病因論研究により、実験的に感染した畜牛が、この神経疾患の前に、回腸（小腸）においてプリオン感染性を示し得ることが示された(Collee et al., Lancet 349:636-640 (1997))。疫学的なデータは、現在、多くの動物プリオン疾患の突発における経口経路による伝染を支持しているが、ヒトにおける突発性のプリオン疾患、例えばクロイツフェルト−ヤコブ病がいかにして発生するかは、なお未知のままである。しかし、罹患した宿主からの脳組織が、疾患を、罹患していないレシピエントに伝達し得るという事実は（特にこのような物質が、当該レシピエントの脳中に直接接種される場合に）、現在、すべてのプリオン疾患の決定的な特徴の１つとして有効である。さらに、スクレイピーが、末梢（皮下、腹腔内および経口）または脳内接種のいずれかの後に、げっ歯動物において疾患を誘発し得ることが明らかになった。
【０００９】
プリオン神経侵入(neuroinvasion)は、Ｂリンパ球を必要とすることが報告された(Klein MA et al. Nature 390:687-690 (1997))。ほとんど逆説的に言えば、正常なＰｒＰ発現は、Ｂ細胞が疾患を脳に伝達するために必要とされず、このことは、成熟がＢ細胞もしくはその生成物に依存している１もしくは２以上の他の細胞のタイプ（例えば小胞樹状細胞）が、神経侵入を促進し得るか、または、Ｂ細胞が、プリオンを、神経系に、ＰｒＰ非依存性の方式で運搬することを示唆する(Klein MA et al., Nature Med 4:1429-1433 (1998))。
【００１０】
最初の実験において、１の種におけるプリオン疾患が、他の種に伝達され得ることが例証された。しかし、異種間の伝染におけるその後の試行は矛盾した。最近、種間のプリオンの好首尾な移行が、ほとんど常に、新たな宿主における最初の移行の間の長い潜伏期間により特徴づけられることが明らかになった。
【００１１】
この時間的な遅延は、しばしば、プリオンの「種間障壁」と呼ばれる。しかし、同族の宿主中への次の移行の際に、潜伏期間は短縮され、当該種におけるすべてのその後の移行について非常に一定していた。種間障壁は、実験的に接種された宿主における新規に合成された新たなプリオンが、宿主ＰｒＰから生じ、従ってそのタンパク質配列を反映し、接種物中のＰｒＰＳｃ分子のものを反映しないために発生する(Bockman JM et al. Ann Neurol. 21:589-595 (1987))。従って、プリオンドナーは、プリオンが移行し、このＰｒＰ配列がプリオンの「種」を表す最後の哺乳動物である。
【００１２】
プリオンの種は、情報が発生期のＰｒＰＳｃのコンホメーションにおいて暗号化されると見られるプリオンの「系統」とは異なる。種および系統は、共に、異種の宿主における症候性疾患を生じさせる所定のプリオンの能力に影響する。種間障壁の概念は、ヒトが、スクレイピーに感染した子羊の肉またはウシの海綿状脳症に感染した牛肉を消費した後に、プリオン疾患を発症し得るという危険を評価するにあたり、実際的に重要である。
【００１３】
酵母菌において、２種の顕著なプリオン様決定因子［ＵＲＥ３］および［ＰＳＩ］が、記載された(Reed B. Wickner, Science 264, 566-569 (1994); Wickner et al., J. Biol. Chem 274(2), 555-558 (1999))。興味深いことに、酵母菌プリオンの異なる種族が、同定された。酵母菌におけるプリオン様［ＰＳＩ］状態への変換は、分子シャペロンＨｓｐ１０４を必要とする；しかし、Ｈｓｐ１０４の相同体は、哺乳動物において見出されなかった(Patino, M.M et al., Science 273, 622-626 (1996))。酵母菌における［ＵＲＥ３］および［ＰＳＩ］表現型の原因であるＵｒｅ２ｐおよびＳｕｐ３５のＮＨ２末端プリオンドメインが同定された。ＧＰＩ固定膜タンパク質であるＰｒＰとは対照的に、Ｕｒｅ２ｐおよびＳｕｐ３５は、共に、細胞質ゾルタンパク質である(Reed B. Wickner, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 10012-10014 (1997))。
【００１４】
プリオン疾患の処置を提供するための努力がなされた。例えば、Tomiyama et al.は、ナフトヒドロキノンまたはナフトキノン構造を有する、抗生物質であるリファンピシンおよびこの誘導体が、Ａβ１−４０凝集および神経毒性を、濃度依存的に阻害したことを開示している。ヒドロキノン、ｐ−ベンゾキノンおよび１，４−ジヒドロキシナフタレンはまた、Ａβ１−４０凝集および神経毒性を、リファンピシンに匹敵するモル濃度において阻害する(Tomiyama et al. JBC 271(12): 6839-6844 (1996))。
【００１５】
Caspi et al.は、陰イオン、例えばコンゴレッド（ＣＲ）が、プリオンに永久的に感染した神経芽細胞腫細胞系におけるＰｒＰＳｃの蓄積を減少させ、および予防的に投与された際に、げっ歯動物における疾患の開始を遅延させることを示した。(Sigal Caspi et al., The Anti-prion Activity of Congo Red, The Journal of Biological Chemistry, 273(6), 3484-3489 (1998))。
【００１６】
DE 4229805には、ＰｒＰＳｃおよびこのペプチドフラグメントにより示された毒性効果が、メマンチンなどの、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）レセプターチャネルのアンタゴニストにより遮断され得ることが開示されている。すでに臨床的に用いられている、非オピオイド鎮痛薬であるフルピルチン(Flupirtine)は、ＰｒＰＣまたはＰｒＰ１０６〜１２６で処理したニューロンに対する強力な細胞保護効果を、インビトロで示すことが見出された。
【００１７】
ＷＩＰＯ国際特許公開第WO 0009111号には、テトラピロール、例えばフタロシアニン、ジュウテロポルフィリンおよびメソ置換プロフィンを投与することによる、プロテアーゼ感受性ＰｒＰ（ＰｒＰ−ｓｅｎ）のプロテアーゼ耐性ＰｒＰ（ＰｒＰ−ｒｅｓ）への変換に関連する、アミロイド形成性疾患およびプリオン疾患の処置が開示されている。
【００１８】
DE 4330388には、Ｌ−トリプトファン、インドール、３−インドリル酢酸またはインドメタシンを用いて、インドールレベルを増大させることによる、ＡＩＤＳまたは狂牛病の治療または予防が開示されている。
【００１９】
Vitek らのUSP 5,935,927には、終末糖化産物を用いて、冒された組織および器官からのアミロイド沈着物の認識および除去における体内のスカベンジャー細胞の活性を増大させる、アミロイド生成性疾患におけるアミロイド除去を刺激するための方法が教示されている。
【００２０】
PrusinerのUSP 6,020,537には、プリオン検出のための基準物質として用いるためのプリオンタンパク質標準物質およびプリオンタンパク質標準物質の製造方法が開示されている。PrusinerのUSP 5,962,669には、プリオン複製における補助因子である、プリオンタンパク質調節因子（ＰＰＭＦ）と呼ばれるタンパク質が記載されている。
【００２１】
USP 5,750,361には、ＰｒＰＳｃがＰｒＰＣに比べて、増大したβシート含量、減少した水溶性、およびタンパク質分解に対する耐性を有するという事実に基づいた、ＰｒＰＳｃのＰｒＰペプチドへの結合を阻害する化合物のスクリーニングの方法が開示されている。
【００２２】
Soto-Jara らによるUSP 5,948,763には、アミロイドまたはアミロイド様沈着物の形成のためのタンパク質またはペプチドに対する疎水性構造決定因子と相互作用して、タンパク質およびペプチドのアミロイドまたはアミロイド様沈着への異常な折り畳みを阻害し、構造的に遮断することができるペプチドが開示されている。
【００２３】
当該技術分野におけるプリオン疾患の処置の参考文献は少ない。最近、BohrらのUSP 6,060,293には、０．０１〜１００ＧＨｚの範囲内の最大周波数を有する高周波数エネルギーを、このようなタンパク質を含む流体系に適用することにより、タンパク質の三次元構造の官能性を変化させることにより、プリオン関連疾患を処置することが提案されている。しかし、'293特許からは、このような疾患を患っている哺乳動物の処置にいかにして着手するかは、明らかではない。
【００２４】
従って、プリオン疾患、例えばＣＪＤおよび狂牛病を処置する必要性が、なお存在する。
【００２５】
発明の概要
本発明は、タンパク質変性剤またはカオトロピック剤を、罹患哺乳動物に投与することによる、プリオン疾患の処置に関する。プリオン疾患は、ヒトを含む種々の哺乳動物に感染することが知られている任意の伝染性海綿状脳症であることができる。
【００２６】
発明の詳説
本発明は、以下の観察に基づく。ある種の神経変性性疾患、例えばクロイツフェルト−ヤコブ病（ヒトにおける）、狂牛病（乳牛における）およびスクレイピー（ヒツジにおける）を含む、亜急性海綿状脳症（または伝染性海綿状脳症）が、プリオンタンパク質（ＰｒＰＳｃ）のためであるという証拠は、科学的団体が受容するのにある時間を要した。疾患と関連するプリオンタンパク質は、正常な細胞性プリオンタンパク質（ＰｒＰＣ）よりもプロテイナーゼ耐性であると見られる。これらのタンパク質のプロテイナーゼ耐性および病原的側面が、疾患関連プリオンタンパク質（ＰｒＰＳｃ）における異常な構造的コンホメーションのためであるという証拠がある。疾患を有する組織および感染性物質中に見出されたＰｒＰＳｃは、ＰｒＰＣのＰｒＰＳｃへの変換と関連すると見られる。ＰｒＰＳｃを「感染性」とするのは、この作用である。
【００２７】
正常な細胞組織が、プリオンタンパク質（ＰｒＰＣ）を含み、タンパク質の異常な形態が、異常な構造的コンホメーションのためであると仮定すると、正常な構造的コンホメーション（ＰｒＰＣ）が、病原状態（ＰｒＰＳｃ）よりも低いエネルギー状態にあることを、推測することができる。さもなければ、我々はすべて、亜急性海綿状脳症に冒されているであろうが、我々はそうではない。
【００２８】
プリオンタンパク質（ＰｒＰＣ）中には、海綿状脳症の早い発症に関連する既知の突然変異がある。これらの場合において、プリオン形成のためのエネルギー状態は、正常な状態より低いかまたはこれに一層近いことができる。これが、正常な状態より低いとすると、胚形成の間の死が予測されるであろう。しかし、これらの突然変異はまれである。正常な構造的コンホメーション（ＰｒＰＣ）が、病原状態（ＰｒＰＳｃ）よりも低いエネルギー状態にあるという推測が正しければ、ＰｒＰＳｃプリオンタンパク質の異常な構造的コンホメーションを混乱させることが可能であり、従って、これらは、正常な細胞プリオンタンパク質（ＰｒＰＣ）の一層低いエネルギーレベルに低下し、従ってプリオンタンパク質の異常な形態に関連する疾患状態を治療することができる。
【００２９】
このような混乱は、非共有結合に干渉し、これを破壊する、カオトロピック剤の作用により生じさせることができる。同様に、カオトロピックイオン、例えばＩ−およびＢｒ−は、タンパク質の表面付近の疎水性結合を崩壊させることにより作用する。
【００３０】
この点に関しては、無制限に増殖することができ、コンホメーション的に変化したタンパク質により生じる、酵母菌における後成的に遺伝するタンパク質状態を、グアニジン含有培地上で一時的に増殖させることにより、「治療する」ことができることを指摘するのは、興味深い(Helmut E. Sparrer, Alex Santoso, Francis C. Szoka Jr., およびJonathan S. Weissman (2000) Evidence for the Prion Hypothesis: Induction of the Yeast [PSI+] Factor by in Vitro-Converted Sup35 Protein, Science 289: 595-599)。
【００３１】
従って、本発明は、哺乳動物におけるプリオン疾患を処置するための方法であって、プリオンタンパク質変性有効量のカオトロピック剤を該哺乳動物に投与することを含む、前記方法に関する。「変性」とは、剤が、ＰｒＰＳｃを正常な細胞性の形態であるＰｒＰＣに変換するか、またはＰｒＰＣのＰｒＰＳｃへの変換を防止することを意味する。
【００３２】
本出願において、用語「細胞型のプリオンタンパク質ＰｒＰＣ」または「ＰｒＰＣ」は、正常な状態にあるプリオンを示すために用い、天然に存在するものおよびこの変種を含む。用語「スクレイピー型のプリオンタンパク質ＰｒＰＳｃ」または「ＰｒＰＳｃ」は、三次元構造変化を受けて、この正常な状態と比較した際に、増大したβシート構造、減少した溶解性およびタンパク質分解耐性を有するようになった、細胞型タンパク質を意味する。用語「プリオンタンパク質凝集体」は、ＰｒＰＣとＰｒＰＳｃとの間に形成された複合体を意味する。
【００３３】
「プリオン疾患」とは、ＰｒＰＣのＰｒＰＳｃへの変換もしくはその結果として生じるプリオンタンパク質の凝集に関連するか、またはこれにより生じる疾患を意味する。これは、時々、本明細書中で、ＴＳＥ（伝染性海綿状脳症）または海綿状脳症と交換可能に用いられる。本発明において意図するプリオン疾患の例には、以下のものが含まれる：スクレイピー（ヒツジおよびヤギ）；ミンク伝染性脳症；慢性消耗病（ミュールジカおよびオオジカ）；ウシ海綿状脳症（ＢＳＥ）；外来(exotic)反すう動物の海綿状脳症（ニヤラ(nyala)、ゲムズボック、アラビア・オリックス、エランド、クドゥ(kudu)、シロオリックス、アンコール(ankole)およびバイソン）；ネコ海綿状脳症（家猫、ピューマ、チータ、オセロット、トラ）；クールー；突発性、家族性または医原性であることができるクロイツフェルト−ヤコブ病、またはＣＪＤ；致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）；ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー（ＧＳＳ）症候群；並びに新変異型クロイツフェルト−ヤコブ病（ｎｖＣＪＤ）。
【００３４】
本発明の第１の観点においては、カオトロピック剤を、疾患を有する哺乳動物に投与する。「投与」とは、カオトロピック剤の冒された組織への適用または送達を達成する投与のすべての手段を意味し、経口、経鼻、非経口などを含む。
【００３５】
「カオトロピック物質」とは、タンパク質および核酸の二次、三次および／または四次構造を変化させるが、少なくとも一次構造を不変のままに残すことができるすべての物質を意味する。哺乳動物により耐容されるすべてのカオトロピック剤を用いることができる一方、好ましい例は、グアニジン塩、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム、尿素またはこれらの組み合わせである。一層好ましいのは、グアニジン塩酸塩、ヨウ化カリウムおよび尿素またはこれらの組み合わせである。最も好ましいのは、ＬＥＭＳの療法において用いられている、グアニジン塩酸塩（またカルバミジン塩酸塩およびイミノウレア塩酸塩として知られている）である。
【００３６】
用語「処置(treatment)」または「処置する(treating)」などは、本明細書中では、一般的に、所望の薬理学的および／または生理学的効果を得ることを意味するために用いる。効果は、この疾患または症候を完全に、もしくは部分的に防止する観点において、予防的であることができ、および／または、疾患および／または疾患に起因する悪影響を部分的に、もしくは完全に治療する観点において、治療的であることができる。従って、例えば、（１）ＰｒＰＣのＰｒＰＳｃへの変換もしくはその結果として生ずるプリオンタンパク質の凝集に関連するか、またはこれにより生じる疾患のすべての症候が、本発明の剤の投与により減少するかもしくは緩和されること；または（２）ＰｒＰＳｃが、ＰｒＰＣに、本発明の剤の投与により変換されることを示すことができる。
【００３７】
用語「有効量」は、このような処置が必要である哺乳動物に投与した際に、プリオンタンパク質の凝集と関連する疾患についての処置を行うのに十分である、剤の量を意味するものとする。従って、例えば、プリオンタンパク質変性剤、例えばグアニジン塩酸塩の治療的に有効な量とは、ＰｒＰＣのＰｒＰＳｃへの変換もしくはその結果として生ずるプリオンタンパク質の凝集を調節、制御もしくは阻害するか、または、ＰｒＰＳｃのＰｒＰＣへの変換を促進するか、もしくはプリオンタンパク質凝集体を崩壊させるのに十分な量である。用語「変性」は、ＰｒＰＳｃのＰｒＰＣへの変換またはその結果として生ずるプリオンタンパク質凝集体の崩壊を意味する。
【００３８】
グアニジン塩酸塩は、すでに、ランバート−イートン筋無力症症候群（ＬＥＭＳ）と呼ばれる神経筋症状の処置において用いられている。ＬＥＭＳは、免疫系が、アセチルコリンが放出される神経終末に対して抗体を生成し、変動する筋肉弱体化を生じる疾患である。以前は多くの医師により、慣用の使用にはあまりにも毒性が強いと考えられていたグアニジン塩酸塩は、神経終末からのアセチルコリンの分泌を増大させ、従ってＬＥＭＳの処置において用いるのに有用である。この薬剤の副作用は、骨髄抑制、腎障害から心不整脈にわたるが、これは尚、常に致死的であるプリオン疾患を処置するのに有用である。即ち、療法の利点は、危険にまさる。
【００３９】
グアニジン塩酸塩の正確な投与量および投与計画は、熟練した医師により個体レベルで決定できる；しかし、ＬＥＭＳの処置についてすでに利用可能なガイドラインを用いることができる。即ち、５〜１５ｍｇ／ｋｇ／日（１日あたり３または４用量に分ける）の初期用量を、プリオン疾患を患っている患者または哺乳動物に経口的に投与する。用量を、臨床的応答に依存して、約４０ｍｇ／ｋｇ／日程度まで増大させることができる。処置は、完全な回復または疾患もしくはさらなる病状の発症の遅延である、臨床的に正の結果を達成するのに必要である限り継続する。
【００４０】
ヨウ化カリウムは、１８４０年代において、梅毒の処置のための用いられており、疾患の後期の段階の患者においてさえも驚異的に有効であった。さらに、ヨウ化カリウムおよびヨウ化ナトリウムは、栄養補助食品として、および放射活性ヨウ素による甲状腺に対する損傷を回避するために用いられる。これらは、経口的に、または非経口的に摂取することができる。投与量は、年齢および体重に依存する。ヨウ化ナトリウムについて、通常の日常的に推奨される摂取量は、約４０μｇ（乳児および小児について）ないし授乳期の女性について約２００μｇである。www.nlm.nih.gov/medlineplus/druginfo/Sodiumiodidesystemic202621.html参照。ＴＳＥの処置について、投与量は、一層高く、臨床的実態に基づいて熟練した医師により決定できることが予測される。
【００４１】
はるかに高い用量が、放射能事故の場合における予防のために慣用的に用いられ、毎日約１３０ｍｇのヨウ化カリウムが、経口的に摂取される。www.ki4u.com、Potassium Iodide Anti-Radiation Pill FAQ (4/6/01)参照。２倍の量でさえも、低い副作用反応率を有する。従って、プリオン疾患の処置のためのヨウ化カリウムの投与量は、１日あたり約１３０〜約２６０ｍｇであることが予測される。通常の投与単位は、放射線損傷を防止するためには１０日間である；しかし、ＴＳＥを患っている患者における処置、処置単位は、臨床的結果に依存して、顕著に長くおそらく患者の寿命に及ぶことが予測される。
【００４２】
尿素はまた、ヒトにおいて利尿薬として用いられている。通常の投与量は、約１〜２ｇ／ｋｇ／日であり、注射されるかまたは、一層典型的には注入される。プリオン疾患の処置について、最大耐容量は、最も有効であると予測されるが、これは、熟練した医師により、ケースごとに決定することができる。
【００４３】
グアニジン塩酸塩、ヨウ化ナトリウムおよびヨウ化カリウム並びに尿素は、本発明のプリオン関連疾患の処置のための好ましいカオトロピック剤である。その理由は、主に、ヒトおよび動物におけるこれらの使用が、確立されているからである。しかし、投与のために安全である他のカオトロピック剤もまた、本発明のために意図される。また、これらの化合物は、これらのタンパク質変性能力について選択され、これらが現在医薬として用いられている疾患および症状について選択されるものではない。従って、投与および処置計画は、現在用いられているものとは異なり得、ＰｒＰＳｃに対する変性効果について、最大耐容量は、最終的に、疾患を処置するにあたり最も有用であることが意図される。
【００４４】
本発明のプリオン関連疾患の処置は、体温を上昇させることにより増強することができる。このことは、高体温または「熱療法」を用いることにより達成することができる。「高体温」とは、外部の装置、例えば防寒用毛布、レーザー、マイクロ波などによる熱の適用を意味する。「熱療法」とは、内部の熱療法、即ち哺乳動物への熱を生じさせる物質または発熱性物質の注入によるものを意味する。例えば、１９世紀の後期において、William B. Coleyは、細菌毒素を用いて、骨肉腫患者において熱を誘発し、これにより、手術不能な患者について驚異的な治癒率をもたらした。Coley, William B, "A preliminary note on the treatment of inoperable sarcoma by the toxic product of erysipelas." Post-Graduate*:278-286 (1893)およびColey, William B., "The cancer symposium at Lake Mohonk." Amer. J. Surg. （新編）1:222-225 (1926)参照。
【００４５】
最近、高体温および熱療法は、癌の治療のための放射線と組み合わせて用いられている。熱療法は、哺乳動物に、「混合細菌毒素」（コレー(Coley)の毒素）と呼ばれるものを注入することにより行われる。Havas et al. Cancer Res. 18:141-148 (1958)参照。これを、本明細書中に、参照により組み込む。しかし、一層好ましい手段は、マイクロ波装置を用いて、患者を内部から、開業医により個体レベルで決定できる期間にわたり、受け入れられるレベルまで加熱することである。このようなマイクロ波装置は、ＭＲＩ機器または他の給源であることができる。１または２以上のカオトロピック剤の投与と組み合わせて用いられるこの熱療法は、カオトロピック物質の作用を増強し、これにより療法の長さを短縮するか、または剤の投与量を減少させると考えられる。カオトロピック剤は、一般的に、熱が加えられた場合に、タンパク質を変性させるにあたり、一層良好に作用する。
【００４６】
本発明を、以下に述べる例により、さらに例示する。例は、本発明の理解を補助するべきものであるが、特許請求の範囲に述べた発明を、いかなる方法によっても限定することを意図せず、このように解釈するべきではない。
【００４７】
例
例１：マウススクレイピーモデルにおけるグアニジン塩酸塩処置
この実験を、特に、Mabbott et al., Nature Medicine 7(4):485-487 （２００１年４月）に記載されたように、モデル系としてＣ５７ＢＬマウスおよびスクレイピー系統ＭＥ７を用いて実施した。Ｃ５７ＢＬマウスを、６つの群に分ける：（ａ）対照群、ＭＥ７を接種しない（ｎ＝６）；（ｂ）対照群、ＭＥ７を接種し、処置しない（ｎ＝６）；（ｃ）対照群、ＭＥ７を接種せず、グアニジン塩酸塩で処置する（ｎ＝６）；（ｄ）試験群、ＭＥ７を接種し、グアニジン塩酸塩で処置する（ｎ＝６）；（ｅ）対照群、ＭＥ７を接種せず、グアニジン塩酸塩で接種の１日後に処置する；および（ｆ）試験群、ＭＥ７を接種し、グアニジン塩酸塩で接種の１日後に処置する。すべてのマウスは、６〜８週齢である。群ｂ、ｄおよびｆに、ＭＥ７スクレイピー感染マウスからの遠心分離していない脳ホモジネートの１．０％（重量／容量）懸濁液２０μｌを腹腔内接種する。群ａ、ｃおよびｅのマウスに、対照としてＰＢＳの腹腔内注射を施す。
【００４８】
感染の７０日後に、高レベルの感染物質およびＰｒＰＳｃが、リンパ組織中に蓄積したことが知られることが観察された。Mabbott et al., 上記参照。従って、感染後７０日において、処置を、群ｃおよびｄのマウスに対して開始する。同時に、各々の群からの２匹のマウスを絶命させ、感染性のレベルおよびＰｒＰＳｃのレベルを、既知の方法で決定する（Mabbott et al., 上記、これを本明細書中に参照により組み込む）。
【００４９】
群ｅおよびｆのマウスにおいて、処置を、接種の１日後に開始して、グアニジン塩酸塩が、予防的効果を示すか否か、即ちこれが、ＰｒＰＳｃの力価が、最初の接種物よりも高くなるのを防止するか否かを決定する。
【００５０】
処置計画は、グアニジン塩酸塩でのＬＥＭＳの処置と同一であった。即ち、１５ｍｇ／ｋｇ／日の初期の用量（水性溶液中で１日あたり３用量に分ける）を、処置群中のマウスに、経口的に投与する。７日後、用量を、生命の残りについて、４０ｍｇ／ｋｇ／日に増大させる。マウスは、疾患の臨床的徴候について観察され、感染後の日数を記録した。観察されるべき第２の終点は、すべてのマウスの死の時点である。この時点において、脾臓における感染性のレベルおよびＰｒＰＳｃのレベルを決定する。
【００５１】
ＰｒＰＳｃの力価および感染性が、統計学的に、接種後７０日において群ｂとほぼ同様であっても、群ｄのマウスが、群ａのマウスと、統計学的程度に同様の長さで生存することが予測される。また、群ｄが、研究の最終的終点において、群ｂよりも低い感染性および低いＰｒＰＳｃ力価を有することが予測される。さらに、群ｆにおけるＰｒＰＳｃの力価が、無視できるかまたは最初の接種において提供されたよりもはるかに高くないことが予測され、これは、グアニジン塩酸塩が、一層高い力価の感染性物質、ＰｒＰＳｃが発生するのを防止するのに有効であることを示す。全体の結果は、グアニジン塩酸塩が、スクレイピーの処置において有効であることを示す。
【００５２】
本発明は、前記の例により限定されることを意図せず、添付した特許請求の範囲およびこれらの均等物により定義される。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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