(57)【要約】優れた抗血管形成特性を有する多くのサリドマイド代謝産物が、現在単離・同定されている。さらに、単離・同定された活性サリドマイド代謝産物の効果を模倣するサリドマイド類似体、およびそのようなサリドマイド類似体の変種が開発されている。そのようなサリドマイド類似体化合物では、サリドマイド投与による望ましくない効果を伴わずに、望ましくない血管形成を阻害する効能が増大された。【特許請求の範囲】
【請求項１】
本質的には以下の化合物、およびそれらの混合物、または薬学的に許容されるそれらの塩からなる群から選択される、1つまたは複数の化合物を被験者に投与する工程を含む、血管形成を阻害する方法：
【化１】
2004523561.tif 000026
（式中、R2がメチルアルコール、分枝あるいは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸、アミノ酸、アルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルもしくはフェニルアルキルである場合、R1は水素であり、またはR2が水素、メチルアルコール、アルキル酸、アミノ酸、アルキルアミノ、置換シクロアルキル、置換フェニルアルキルもしくはアルキルフェニルである場合、R1はヒドロキシル基、置換あるいは非置換シクロアルキルアリールもしくはヘテロアリールである）、
【化２】
2004523561.tif 000027
（式中、R4からR7は独立してハロゲンであり、R4からR7は同じまたは異なるハロゲンを含んでもよく、またはR5およびR6は水素であり、かつR4およびR7はメチル基であるか、または式中、R4からR7はイソインドール環上に置換基を含み、4-ニトロ、5,6-ジクロロ、4-メチル、5-メチル、もしくは5,6-ジメチルが得られるか、または式中、イソインドール環はスクシンイミドもしくはマレイミドで置換されるか、または式中、フェニル環上の1つもしくは複数のフッ化物は異なるハロゲンにより置換される）、および
【化３】
2004523561.tif 000028
（式中、R8からR11は水素であり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、R14はアルキル、シクロアルキル、置換フェニルまたは環状アルキルであり、または式中、R8からR11は独立してハロゲンであり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、R14はベンゼンであり、または式中R8からR11は独立してハロゲンであり、かつR12からR14は水素であり、および式中、N-HはR15により置換してもよく、ここでR15はアルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルもしくはフェニルアルキル、メチルアルコール、分枝もしくは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸またはアミノ酸である）。
【請求項２】
1つまたは複数の化合物が、本質的には以下の化合物、およびそれらの混合物、または薬学的に許容されるそれらの塩からなる群から選択される、請求項1記載の方法：
【化４】
2004523561.tif 000029
（式中、R2がメチルアルコール、分枝あるいは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸、アミノ酸、アルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルもしくはフェニルアルキルである場合、R1は水素であり、またはR2が水素、メチルアルコール、アルキル酸、アミノ酸、アルキルアミノ、置換シクロアルキル、置換フェニルアルキルもしくはアルキルフェニルである場合、R1はヒドロキシル基、置換あるいは非置換シクロアルキルアリールもしくはヘテロアリールである）。
【請求項３】
化合物が、
【化５】
2004523561.tif 000030
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項1記載の方法。
【請求項４】
化合物が、
【化６】
2004523561.tif 000031
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項1記載の方法。
【請求項５】
1つまたは複数の化合物が、本質的には以下の化合物、およびそれらの混合物、または薬学的に許容されるそれらの塩からなる群から選択される、請求項1記載の方法：
【化７】
2004523561.tif 000032
（式中、R4からR7は独立してハロゲンであり、R4からR7は同じまたは異なるハロゲンを含んでもよく、またはR5およびR6は水素であり、かつR4およびR7はメチル基であり、または式中、R4からR7はイソインドール環上に官能基を含み、4-ニトロ、5,6-ジクロロ、4-メチル、5-メチル、もしくは5,6-ジメチルが得られ、または式中、イソインドール環はスクシンイミドもしくはマレイミドで置換され、または式中、フェニル環上の1つもしくは複数のフッ化物は異なるハロゲンにより置換される）。
【請求項６】
化合物が、
【化８】
2004523561.tif 000033
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項1記載の方法。
【請求項７】
化合物が、
【化９】
2004523561.tif 000034
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項1記載の方法。
【請求項８】
1つまたは複数の化合物が、本質的には以下の化合物、およびそれらの混合物、または薬学的に許容されるそれらの塩からなる群から選択される、請求項1記載の方法：
【化１０】
2004523561.tif 000035
（式中、R8からR11は水素であり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はアルキル、シクロアルキル、置換フェニルもしくは環状アルキルであり、または式中、R8からR11は独立してハロゲンであり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はベンゼンであり、または式中R8からR11は独立してハロゲンでありかつR12からR14は水素であり、および式中、N-HはR15により置換してもよく、ここでR15はアルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルあるいはフェニルアルキル、メチルアルコール、分枝あるいは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸もしくはアミノ酸である）。
【請求項９】
化合物が、
【化１１】
2004523561.tif 000036
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
化合物が、
【化１２】
2004523561.tif 000037
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
化合物が、
【化１３】
2004523561.tif 000038
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
治療上有効な量の化合物を被験者に投与する、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
投与した化合物が被験者において直接、血管形成の阻害を担う、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
有効量投与すると被験者において血管形成を阻害する組成物であって、以下の式を有する1つもしくは複数の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む組成物：
【化１４】
2004523561.tif 000039
（式中、R2がメチルアルコール、分枝あるいは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸、アミノ酸、アルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルもしくはフェニルアルキルである場合、R1は水素であり、またはR2が水素、メチルアルコール、アルキル酸、アミノ酸、アルキルアミノ、置換シクロアルキル、置換フェニルアルキルもしくアルキルフェニルである場合、R1はヒドロキシル基、置換あるいは非置換シクロアルキルアリールもしくはヘテロアリールである）、
【化１５】
2004523561.tif 000040
（式中、R4からR7は独立してハロゲンであり、R4からR7は同じもしくは異なるハロゲンを含んでもよく、またはR5およびR6は水素であり、かつR4およびR7はメチル基であり、または式中、R4からR7はイソインドール環上に官能基を含み、4-ニトロ、5,6-ジクロロ、4-メチル、5-メチル、もしくは5,6-ジメチルが得られ、または式中、イソインドール環はスクシンイミドもしくはマレイミドで置換され、または式中、フェニル環上の1つもしくは複数のフッ化物は異なるハロゲンにより置換される）、または
【化１６】
2004523561.tif 000041
（式中、R8からR11は水素であり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はアルキル、シクロアルキル、置換フェニルもしくは環状アルキルであり、または式中、R8からR11は独立してハロゲンであり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はベンゼンであり、または式中R8からR11は独立してハロゲンであり、かつR12からR14は水素であり、および式中、N-HはR15により置換してもよく、ここでR15はアルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルもしくはフェニルアルキル、メチルアルコール、分枝もしくは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸もしくはアミノ酸である）。
【請求項１５】
1つまたは複数の化合物が式：
【化１７】
2004523561.tif 000042
（式中、R2がメチルアルコール、もしくは分枝あるいは非分枝アルキルアルコールである場合、R1は水素であり、またはR2が水素である場合、R1はヒドロキシル基、もしくは置換あるいは非置換シクロアルキルアリールもしくはヘテロアリールである）
を満たすか、または薬学的に許容されるそれらの塩である、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
化合物が、
【化１８】
2004523561.tif 000043
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項14記載の方法。
【請求項１７】
化合物が、
【化１９】
2004523561.tif 000044
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項14記載の方法。
【請求項１８】
1つまたは複数の化合物が式：
【化２０】
2004523561.tif 000045
（式中、R4からR7は独立してハロゲンであり、R4からR7は同じもしくは異なるハロゲンを含んでもよく、またはR5およびR6は水素であり、かつR4およびR7はメチル基であり、または式中、R4からR7はイソインドール環上に官能基を含み、4-ニトロ、5,6-ジクロロ、4-メチル、5-メチル、もしくは5,6-ジメチルが得られ、または式中、イソインドール環はスクシンイミドもしくはマレイミドで置換され、または式中、フェニル環上の1つもしくは複数のフッ化物は異なるハロゲンにより置換される）
を満たすか、または薬学的に許容されるそれらの塩である、請求項14記載の方法。
【請求項１９】
化合物が、
2004523561.tif 000046
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項14記載の方法。
【請求項２０】
化合物が、
2004523561.tif 000047
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項14記載の方法。
【請求項２１】
1つまたは複数の化合物が式：
【化２１】
2004523561.tif 000048
（式中、R8からR11は水素であり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はアルキル、シクロアルキル、置換フェニルもしくは環状アルキルであり、または式中、R8からR11は独立してハロゲンであり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はベンゼンであり、または式中R8からR11は独立してハロゲンでありR12からR14は水素であり、および式中、N-HはR15により置換してもよく、ここでR15はアルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルもしくはフェニルアルキル、メチルアルコール、分枝もしくは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸またはアミノ酸である）
を満たす、または薬学的に許容されるそれらの塩である、請求項14記載の方法。
【請求項２２】
化合物が、
【化２２】
2004523561.tif 000049
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項14記載の方法。
【請求項２３】
化合物が、
【化２３】
2004523561.tif 000050
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項14記載の方法。
【請求項２４】
化合物が、
【化２４】
2004523561.tif 000051
または、薬学的に許容されるその塩である、請求項14記載の方法。
【請求項２５】
以下の式を有する化合物、または以下の化合物の薬学的に許容される塩：
【化２５】
2004523561.tif 000052
【請求項２６】
以下の式を有する化合物、または以下の化合物の薬学的に許容される塩：
【化２６】
2004523561.tif 000053
【請求項２７】
以下の式を有する化合物、または以下の化合物の薬学的に許容される塩：
【化２７】
2004523561.tif 000054
【請求項２８】
以下の式を有する化合物、または以下の化合物の薬学的に許容される塩：
【化２８】
2004523561.tif 000055
【請求項２９】
請求項15記載の化合物、または薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３０】
請求項18記載の化合物、または薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３１】
請求項21記載の化合物、または薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３２】
請求項25記載の化合物、または薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３３】
請求項26記載の化合物、または薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３４】
請求項27記載の化合物、または薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３５】
請求項28記載の化合物、または薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の技術分野
本発明は抗血管形成組成物および方法、特にヒトおよび動物において血管形成を積極的に阻害するサリドマイド類似体に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
血管形成は先在する血管からの新規血管の形成である。血管形成は固形腫瘍形成および転移において顕著である。腫瘍は、成長し続けるための栄養および酸素の供給を維持するために血管網の形成を必要とする。血管形成が重要な腫瘍には、聴神経腫、神経繊維腫、トラコーマおよび化膿性肉芽腫などのほとんどの固形腫瘍および良性腫瘍が含まれる。血管形成の防止により、これらの腫瘍の成長、および腫瘍の存在による損傷が阻止できる。
【０００３】
腫瘍微細血管密度と転移の発生との間には直接的な相関があることがわかっている。腫瘍細胞はそれ自体で、内皮細胞の増殖および新規毛細血管の成長を刺激する因子を産生することができる。血管形成は腫瘍転移の2つの段階で重要である。血管形成刺激が重要な第一の段階は、腫瘍の血管新生であり、これにより腫瘍細胞は血流に入り身体中を循環することができる。腫瘍細胞が一次部位を離れ、二次転移部位に定着した後、新規腫瘍の成長および拡大の前に、血管形成が起こらなくてはならない。そのため、血管形成の防止は腫瘍転移の防止をもたらし、おそらく一次部位での新生物成長を含むことができる。これらの観察により、様々な癌に対する可能な治療選択として、抗血管形成剤の調査に至った。
【０００４】
1950年代、サリドマイドは欧州において鎮静剤として販売されたが、強力な催奇形物質であることがわかり、市場から除外された。最近では、サリドマイドは血管形成の可能な阻害剤として販売が促進されている。しかしながら、研究によりサリドマイド自体は、血管形成を阻害するのに十分な活性を有さないことが示されている。それよりも、以前サリドマイドにあるとされた抗血管形成活性または効果は、サリドマイドの代謝活性化後にのみ存在する化合物により得られる効果である（すなわち、「活性」サリドマイド代謝産物）。D'Amato, R.；Loughman Flymn, E.；Folkman, J., 「血管形成阻害剤としてのサリドマイド（Thalidomide as an Inhibitor of Angiogenesis.）」Proc. Nat'l. Acad. Sci., 1994, 91, 4082-4085；M.；Bauer, K.；Dixon, S.；Figg, W.「サリドマイドによる血管形成の阻害では代謝活性が必要であり、これは種に依存する（Inhibition of Angiogenesis by Thalidomide Requires Metabolic Activation, Which Is Species-dependent.）」Biochem. Pharmacology, 1998, 55, 1827-1834. したがって、サリドマイド自体ではなくサリドマイドのある代謝産物が、その抗血管形成特性を担うと考えられている。しかしながら、抗血管形成特性を担う特定のサリドマイド代謝産物は、いまだ単離・同定されていない。
【０００５】
サリドマイドの代謝の結果形成される化合物、およびサリドマイドの加水分解化合物の活性代謝産物は、何千ではないとしても、何百も存在する。サリドマイド代謝産物の多くは不活性および／または不安定である。どの代謝産物が優れた抗血管形成特性を有するかを予測する方法はない。このように、優れた抗血管形成特性を有する「活性」サリドマイド代謝産物（または「活性」サリドマイド類似体）はいまだ入手できない。
【０００６】
抗血管形成活性が1つまたは少数のサリドマイド代謝産物によるものであり、それらの代謝産物が単離・同定されたならば、活性サリドマイド類似体を合成して、血管形成効果を阻害する非常に効果的な化合物を提供することができる。これは、サリドマイドを「活性」サリドマイド類似体と比較すると、とりわけ真実となる。サリドマイドからそのような活性化合物を得るためには、サリドマイドをまず代謝により活性化しなければならない；非常に少量のサリドマイドのみが、実際に1つまたは複数の「活性」代謝産物に代謝される。さらに、より少量のそのような「活性」サリドマイド類似体を投与し、さらに所望の抗血管形成効果を達成することは可能である。さらに、そのような「活性」サリドマイド類似体は、例えば催奇性または神経毒性などの望ましくない副作用を避けるという点でサリドマイドより安全であり、サリドマイド-サリドマイドが望ましくない生物活性のホストを有するよりも腫瘍血管形成に対しより特異的とすることができる。
【０００７】
したがって、優れた抗血管形成特性を有するサリドマイド代謝産物の単離および同定が必要である。さらに、そのような抗血管形成活性を示す、単離・同定したサリドマイド代謝産物の効果を模倣できる、精製サリドマイド類似体の合成が必要である。さらに、そのような活性サリドマイド類似体を使用して望ましくない血管形成を治療するための方法が必要である。
【発明の開示】
【０００８】
発明の概要
本発明は優れた抗血管形成特性を有する化合物を提供する。より詳細には、優れた抗血管形成特性を有する多くのサリドマイド代謝産物が現在、単離・同定されている。したがって、本発明は単離・同定された活性サリドマイド代謝産物の効果を模倣する活性サリドマイド類似体、およびそのようなサリドマイド類似体の変種を提供する。本発明のそのようなサリドマイド類似体化合物は、望ましくない血管形成の阻害において向上した効能を示す。
【０００９】
本発明はさらに、望ましくない血管形成がなされているヒトまたは動物に本発明の活性サリドマイド類似体の有効量を含む組成物を投与することにより、ヒトまたは動物において望ましくない血管形成を阻害するための方法を提供する。とりわけ、本発明は望ましくない血管形成を有する集団を、血管形成を阻害する量の1つまたは複数の本発明のサリドマイド類似体（およびそれらの変種）またはそのような化合物の薬学的に許容される塩に暴露することにより、血管形成を阻害する方法を含む。ここで、そのようなサリドマイド類似体（およびそれらの変種）は以下の一般式（式A）を有する：
【化１】
2004523561.tif 000002
（式中、R2がメチルアルコール、分枝あるいは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸あるいはアミノ酸、アルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニル、もしくはフェニルアルキルである場合、R1は水素であり、またはR2が水素、メチルアルコール、分枝アルキルアルコール、アルキル酸、アミノ酸、アルキルアミノ、置換シクロアルキル、置換フェニルアルキルもしくはアルキルフェニルである場合、R1はヒドロキシル基、置換あるいは非置換シクロアルキルアリールもしくはヘテロアリールである）。さらに、フタルイミド部分はビシクロ[2,2,1]ヘプテン-イカルボキシリシックイミドにより置換してもよい。
【００１０】
他の態様では、サリドマイド類似体（およびその変種）は以下の一般式（式B）を有する：
【化２】
2004523561.tif 000003
（式中、R4からR7はフッ化物または他のハロゲンであり、R4からR7は同じまたは異なるハロゲンを含んでもよく、またはR5およびR6は水素であり、かつR4およびR7はメチル基である）。またはイソインドール環上に置換基があってもよく、例えばR4からR7はイソインドール環上に異なる官能基を含み、4-クロロ；4-ニトロ；5,6-ジクロロ；4-メチル；5-メチル；5,6-ジメチル；および4,5,6,7-テトラクロロを得てもよい。さらに、イソインドール環はスクシンイミドまたはマレイミドで置換してもよい。加えて、他のハロゲンはフェニル環の置換基であり得る。例えば、2,4-フルオロではなく、以下の官能基はフェニル環上の置換基としてもよい：2,3-ジフルオロ；2,5-ジフルオロ；2,6-ジフルオロ；3,4-ジフルオロ；3,5-ジフルオロ；2,3-ジクロロ；2,4-ジクロロ；2,5-ジクロロ；2,6-ジクロロ；2,4-ジブロモ；2,5-ジブロモ；2,6-ジブロモ；2-フルオロ；3-フルオロ；4-フルオロ；2-クロロ；3-クロロ；4-クロロ；2-ブロモ；3-ブロモ；4-ブロモ；2,3,4-トリフルオロ。さらに、フタルイミド部分はビシクロ[2,2,1]ヘプテン-イカルボキシリックイミドにより置換してもよい。
【００１１】
本発明の他の局面では、サリドマイド類似体（およびその変種）は以下の一般式（式C）を有する：
【化３】
2004523561.tif 000004
（式中、R8からR11は水素であり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はアルキル、シクロアルキル、置換フェニルもしくはシクロヘキサンなどの環状アルキルであり、または式中、R8からR11はフッ化物もしくは1つもしくは複数の他のハロゲンであり、R12はアルキル残基であり、R13は二重結合酸素、硫黄もしくは窒素であり、かつR14はベンゼンであり、または式中R8からR11はフッ化物もしくは1つあるいは複数の他のハロゲンであり、かつR12からR14は水素である）。さらに、N-HはR15により置換してもよく、R15はアルキルアミン、置換シクロアルキル、置換アルシルフェニルもしくはフェニルアルキル、メチルアルコール、分枝もしくは非分枝アルキルアルコール、アルキル酸またはアミノ酸である。
【００１２】
本発明はまた、1つもしくは複数の本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物を含む。さらに、化合物は本発明の一部として上記式A〜Cで一般に示される化合物を含んでいたが、そのような一般式により記述された属のメンバーである他の全ての化合物を含むことを理解すべきである。
【００１３】
本発明の式Aの属のメンバーである、一対の特定のサリドマイド類似体化合物（優れた抗血管形成活性を有する）の例は、
【化４】
2004523561.tif 000005
すなわち、2-(5-ヒドロキシ-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1H-イソインドール-1,3-[2H]-ジオン、および
【化５】
2004523561.tif 000006
すなわち、2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-2H-イソインドール-1,3-ジオンである。
【００１４】
本発明の式Bの属のメンバーであるいくつかの特定のサリチルアミド類似体化合物（優れた抗血管形成活性を有する）の例は、
【化６】
2004523561.tif 000007
すなわち、2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,7-ジメチル-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン、および
【化７】
2004523561.tif 000008
すなわち、2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオンである。
【００１５】
本発明の式Cの属のメンバーである特定のサリドマイド類似体化合物（優れた抗血管形成活性を有する）の例は、
【化８】
2004523561.tif 000009
すなわち、1-シクロヘキシル-5-エチル-フタルイミドバルビツール酸、および
【化９】
2004523561.tif 000010
すなわち、5-エチル-1-フェニル-5-(テトラフルオロフタルイミド）バルビツール酸、および
【化１０】
2004523561.tif 000011
すなわち、5-(テトラフルオロフタルイミド)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオンである。
【００１６】
本発明はまた、1つまたは複数の上記化合物を含む薬学的組成物を含む。
【００１７】
本発明の前述および他の目的、特徴および利点は、添付の図面を参照して進行する特別な実施例の、以下の詳細な説明からより明らかになるであろう。
【００１８】
特定の実施例の詳細な説明
定義
「ハロゲン」という用語はフルオロ、ブロモ、クロロおよびヨード置換基を示す。
【００１９】
「薬剤」または「薬物」は、被験者に適切に投与すると、所望の治療効果または予防効果を誘起することができる化学化合物または組成物を示す。
【００２０】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩としては、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、亜鉛などの陽イオンから、およびアンモニア、エチレンジアミン、N-メチル-グルタミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、N-ベンジルフェネチルアミン、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、およびテトラメチルアンモニウムヒドロキシドなどの塩基から形成されるものが含まれる。これらの塩は標準的な手順により、例えば遊離酸を適した有機または無機塩基と共に反応させることにより調製してもよい。または本明細書で記述した化学化合物はいずれも、薬学的に許容されるその塩として投与してもよい。
【００２１】
化学化合物はすべて(+)および(-)立体異性体の両方、および(+)または(-)立体異性体のいずれかを含む。
【００２２】
本明細書で使用されるように、サリドマイド「類似体」は、バックボーンとしてサリドマイド構造を使用する合成化学化合物である（すなわち、側鎖基が付加され、またはそのような官能基が親構造から削除される）。類似体はサリドマイドおよびその代謝化合物とは、例えばアルキル鎖、分子断片の長さの違いにより、1つまたは複数の官能基により、またはイオン化の変化により構造が異なる。サリドマイド類似体は一般に天然化合物ではない。すなわち、サリドマイド類似体は一般にサリドマイドを投与することにより、体内で酵素的にまたは非酵素的に形成することはできない。
【００２３】
サリドマイド「代謝産物」は酵素の作用により形成されるサリドマイド誘導体、すなわち体内でのサリドマイドの代謝産物である。代謝産物は一相反応（例えば、酸化、還元および加水分解）により、または二相反応（例えば、共役）により形成される。サリドマイド代謝産物は酵素反応の誘起を必要とする。
【００２４】
「血管形成」は血管の発達を示す。したがって、「抗血管形成」は血管形成の阻止および／または完全休止を示す。
【００２５】
「腫瘍」は過剰な細胞増殖に由来する細胞の塊である。
【００２６】
「ハロゲン」という用語はフルオロ、ブロモ、クロロおよびヨード置換基である。
【００２７】
「アルコール」という用語は、炭化水素の水素原子が水酸基(-OH)で置換されている有機化合物のクラスのいずれかのメンバーを示す。特に記載が無ければ、そのようなアルコールは1から12個の炭素原子を含む。
【００２８】
「酸」という用語は水素原子を溶液中で転移することができる化合物を示す。
【００２９】
「アルキル」という用語は、炭素および水素のみを含む、環状、分枝または直鎖アルキル基を示し、特に記載がなければ、1から12個の炭素原子を含む。さらにこの用語の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソブチル、t-ブチル、ペンチル、ピバリル、ヘプチル、アダマンチルおよびシクロペンチルが挙げられる。アルキル基は非置換であるか、または1つもしくは複数の置換基、例えばハロゲン、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、トリフルオロメチル、アシルオキシ、ヒドロキシ、メルカプト、カルボキシ、アリールオキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジノ、ピロリジン-1-イル、ピペラジン-1-イル、もしくは他の官能基で置換することができる。
【００３０】
「アミノ酸」という用語は、1つまたは複数の塩基性アミノ基(-NH2)および1つまたは複数の酸性カルボキシル基(-COOH)を含み、かつ重合されてペプチドおよびタンパク質を形成する任意の有機化合物を示す。
【００３１】
「アリール」という用語は、単環（例えばフェニル）または複数の縮合環（例えば、ナフチルまたはアントリル）を有する、一価の不飽和芳香族炭素環基を示し、これは選択的に非置換であるか、または例えばハロゲン、アルキル、アルコキシ、メルカプト(-SH)、アルキルチオ、トリフルオロメチル、アシルオキシ、ヒドロキシ、メルカプト、カルボキシ、アリールオキシ、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジノ、ピロリジン-1-イル、ピペラジン-1-イル、もしくは他の官能基で置換できる。
【００３２】
「アルキル残基」という用語は、炭素および水素のみを含む分枝または直鎖アルキル基を示し、特に記載がなければ、1から12個の炭素原子を含む。さらに、この用語の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソブチル、ペンチル、ピバリルおよびヘプチル基が挙げられる。アルキル基は置換することができ、または非置換とすることができる。
【００３３】
本明細書内の他の化学用語は、「The McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms」(1985)、「The Condensed Chemical Dictionary」(1981)、および「Dorland's Illustrated Medical Dictionary」(1974)により典型的に示されているように、当技術分野における従来の使用に従って使用される。
【００３４】
「哺乳動物」は、ヒトおよびヒトではない哺乳動物の両方を含む。同様に、「被験者」という用語はヒトおよび獣医学の対象の両方を含む。
【００３５】
「動物」は、生きている多細胞の脊椎生物であり、例えば哺乳動物および鳥類を含むカテゴリーである。
【００３６】
「サリドマイド」またはN-(2,6-ジオキソピペリジン-3-イル)フタルイミドは以下の化学構造を有する：
【化１１】
2004523561.tif 000012
【００３７】
材料および方法
必要な場合、推奨する手順に従い溶媒を乾燥させ、精製した。有機溶液はNaSO4上で乾燥させた。蒸発とは、約200mbarから約15mbarの減圧下、バキューブランド（Vacuubrand）回転蒸発器での溶剤の除去を示す。融点はボエチウス（Boetius）装置を用いて決定し、校正はしていない。内部標準としてテトラメチルシランを用い、バリアンジェミニ(Varian Gemini)300分光計で1H NMRスペクトル(300 Mhz)、13C NMRスペクトル(75 MHz)、および19Fスペクトル(188 MHz)を記録した；化学シフト（δ）の値はppmで表され、カップリング定数(J)はHzで表される。質量スペクトルデータは、バリアン(Varian) MAT CH6分光計およびHP-MSエンジン5989Aにより、70eVでの直接挿入により決定した。収率は精製生成物を示し、最適化していない。
【００３８】
化合物参照番号
化合物は太字英数字を用いてこの詳細な説明全体を通して識別される。これは発明の概要および以下の実施例で記述した化合物の同定に対応する。
【００３９】
実施例1
2-(5-ヒドロキシ-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1H-イソインドール-1,3[2H]-ジオン(CPS3)の合成および分析結果
この実施例は、約274.2の分子量を有する2-(5-ヒドロキシ-2,ジオキソ-ピペリジン-3(2H)-ジオン)の調製について説明する。Teubert,U.ら、Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem.、1998、331、7（参照により本明細書に組み入れられる）に従い調製した約1.0g（約3.2mmol）の酢酸5-(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル-エステル（単一ジアステレオマー）、および約0.3g(約1.6mmol)のp-トリエンスルホン酸を約30mlのメタノール中で約5時間還流した。溶液を大体室温まで冷却させた。冷却後、沈澱生成物を濾過し、（沸点が約60℃から約80℃の）アセトン／石油エーテルから再結晶化した。また、濾過した沈澱生成物をアセトニトリルから再結晶化した。約0.52gの収率（収率60%）で約195℃から約230℃の融点をもつ2-(5-ヒドロキシ-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1H-イソインドール-1,3[2H]-ジオンが得られた。
【００４０】
1H NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000013
13C NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000014
質量分析解析(EI)結果では、m/z（相対強度）、274(13)[M+]が得られた。
【００４１】
実施例2
2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオン(CPS11)の合成および分析結果
この実施例は約288.25の分子量を有する、2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオンの調製および分析について説明する。
【００４２】
約100mLの約35%のホルムアルデヒド水溶液中の約12.9g（約50mmol）のrac-サリドマイドの懸濁液を溶解するまで還流した。その後、溶液を室温まで冷却させた。約24時間後、濾過により沈澱を回収し、約3%のホルムアルデヒド水溶液で洗浄し、Na2SO4により乾燥させた。約10.1gの収率（約70%の収率）で、約165℃の融点をもつ2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオンが得られた。
【００４３】
1H NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000015
化合物C14H12N2O5に対する分析値は炭素約58.27%、水素約4.09%、および窒素約9.52%であった。
【００４４】
実施例3
2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,7-ジメチル-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(CPS42)の合成および分析結果
この実施例は、正確な質量287.08、分子量約287.6（炭素約66.90%、水素約3.86%、フッ化物約13.23%、窒素約4.88%、および酸素約11.14%）の2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,7-ジメチル-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオンの調製および分析について説明する。
【００４５】
2,4-ジフルオロアニリン約2g（約15.5mmol）、3,6-ジメチル無水フタル酸約2.46g（約14mmol）、および氷酢酸約100mLの混合物を約3.5時間還流させた。3,6-ジメチル無水フタル酸はNewman,M.S.；Lord,B.T.、J. Am. Chem. Soc., 1944、66、733（参照により明細書に組み入れられる）に従い調製した。
【００４６】
溶媒を約200 mbarから約15 mbarの減圧下で蒸発させ乾燥させた。残渣を約150mLのCH2Cl2に溶解した。溶液を約50mLの約0.1M HClで3度洗浄し、約50mLのH2Oで2度洗浄し、その後Na2SO4を用いて乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣をエチルアルコールから再結晶化し、約212℃から約212.5℃の融点を有する2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,7-ジメチル-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオンを約1.27g(32%)得た。
【００４７】
1H NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000016
13C NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000017
質量分析解析(EI)結果では、m/z（相対強度）、287（M+、100）、259(81c)が得られた。化合物C16H11NO2F2に対する分析計算値は、炭素66.90%、水素3.86%、および窒素4.88%であった。NMRおよび質量分析から決定されるように、化合物C16H11NO2F2に対する分析結果値は、炭素約67.20%、水素約3.77%、および窒素約4.59%であった。
【００４８】
実施例4
1-シクロヘキシル-5-エチル-5-フタルイミドバルビツール酸(CPS44)の合成および分析結果
この実施例は、正確な質量283.15および分子量約383.4（炭素約62.65%、水素約5.52%、窒素約10.96%、および酸素約20.87%）を有する、1-シクロヘキシル-5-エチル-5-フタルイミドバルビツール酸(C20H21N3O5)の調製および分析について説明する。同じ化合物はまた、例えば1-シクロヘキシル-5-(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-5-エチル-ピリミジン-2,4,6-(1H,3H,5H)-トリオン、または1-シクロヘキシル-5-(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-5-エチル-ピリミジン-2,4,6-トリオンと命名されるかもしれない。
【００４９】
Guetschow、M.ら、Synthesis、1999、410-414（参照により明細書に組み入れられる）において説明されているように5-アジド-1-シクロヘキシル-5-エチルバルビツール酸から得られる、約500mg(約2mmol)の5-アミノ-1-シクロヘキシル-5-エチルバルビツール酸、、および約300mgの無水フタル酸、および約20mLの氷酢酸の混合物を約5時間、還流させた。混合物を室温まで冷却し、沈澱を濾過して除去した。次に沈澱をH2Oで洗浄し乾燥させると、約470mgの1-シクロヘキシル-5-エチル-5-フタルイミドバルビツール酸（約61%の収率）が得られた。1-シクロヘキシル-5-エチル-5-フタルイミドバルビツール酸の融点は約248℃から約253℃であった。
【００５０】
1H NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000018
13C NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000019
質量スペクトル(EI)解析結果は以下の通りであった：m/z（相対強度）、383（M+、5）、302（M+、100）、105(52)。化合物C20H21N3O5に対する分析計算値は、炭素62.65%、水素5.52%、および窒素10.96%であった。NMRおよび質量分析から決定されるように、化合物C20H21N3O5に対する分析結果値は、炭素約62.30%、水素約5.85%、窒素約10.89%および酸素約20.87%であった。
【００５１】
実施例5
5-エチル-1-フェニル-5-(テトラフルオロフタルイミド)バルビツール酸(CPS45)の合成および分析結果
この実施例は、正確な質量377.10および分子量約377.4（炭素約63.66%、水素約4.01%、窒素約11.14%、および酸素約21.20%）を有する、5-エチル-1-フェニル-5-(テトラフルオロフタルイミド)バルビツール酸(C20H11N3O5F4)の調製および分析について説明する。同じ化合物はまた、例えば5-(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-4,5,6,7-テトラフルオロ-イソインドール-2-イル)-5-エチル-1-フェニル-ピリミジン-2,4,6-(1H,3H,5H)-トリオンと命名されるかもしれない。
【００５２】
約250mg(約1mmol)の5-アミノ-5-エチル-1-フェニルバルビツール酸、および約260mg（約1.2mmol）のテトラフルオロ無水フタル酸、および約7mLの氷酢酸の混合物を約3時間、還流させた。溶媒を約200から約15 mbarの減圧下で蒸発させ乾燥させた。残渣をエチルアルコールから再結晶化し、約218℃から約220℃の融点を有する5-エチル-1-フェニル-5-(テトラフルオロフタルイミド)バルビツール酸を約270g得た（収率60%）。
【００５３】
1H NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000020
13C NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000021
質量スペクトル(EI)解析結果は以下の通りであった：m/z（相対強度）、449（M+、62）、421（M+、20）、230(39)、176(70)、119(100)。化合物C20H11N3O5F4に対する分析計算値は、炭素53.46%、水素2.47%、および窒素9.35%であった。NMRおよび質量分析から決定されるように、化合物C20H11N3O5F4に対する分析結果値は、炭素約53.26%、水素約2.78%、酸素約21.20%、および窒素約9.04%であった。
【００５４】
実施例6
5-(テトラフルオロフタルイミド)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン(CPS48)の合成および分析結果
この実施例は、正確な質量329.01および分子量約329.2（炭素約43.79%、水素約0.92%、フッ化物約23.09%、窒素約12.7%、および酸素約19.44%）の5-(テトラフルオロフタルイミド)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン(C12H3F4N3O4)の調製および分析について説明する。同じ化合物はまた、例えば2-(2,4-ジオキソ-1,2,3,4-テトラヒドロ-ピリミジン-5-イル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオンと命名されるかもしれない。
【００５５】
約440mg（約2mmol）のテトラフルオロ無水フタル酸、約254mg(約2mmol)の5-アミノウラシル、および約50mLの氷酢酸の混合物を約6時間、還流させた。溶液を大体室温まで冷却させた。冷却後、沈澱生成物を濾過し、水で洗浄し、Na2SO4により乾燥させ、約350℃から約355℃の融点を有する、約260mg（約40%）の5-(テトラフルオロフタルイミド)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオンを得た。
【００５６】
1H NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000022
19F NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000023
質量スペクトル(EI)解析結果は以下の通りであった：m/z（相対強度）、329（M+、50）、176(100)。化合物C12H3F4N3O4に対する分析計算結果は、炭素約43.79%、水素約0.92%、および窒素12.77%であった。NMRおよび質量分析から決定されるように、化合物C12H3F4N3O4に対する結果値は、炭素約43.60%、水素約1.16%、窒素約12.50%であった。
【００５７】
実施例7
(CPS49)2-(2,4-ジフルオロ-フェニル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3-(2H)-ジオンの合成および分析結果
この実施例は、正確な質量331.01および分子量約331.2（炭素約50.77%、水素約0.91%、フッ化物約34.42%、窒素約4.23%、および酸素約9.66%）の2-(2,4-ジフルオロ-フェニル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(C14H3F6NO2)の調製および分析について説明する。
【００５８】
約1g（約7.75mmol）の2,4-ジフルオロアニリン、約1.54g（約7mmol）のテトラフルオロ無水フタル酸、および約50mLの氷酢酸の混合物を約3.5時間、還流させた。溶媒を約200 mbarから約15 mbarの減圧下で蒸発させ乾燥させた。残渣を約75mLのCH2Cl2に溶解した。溶液を約0.1MのHCl、約25mlで3度、約25mLの水で2度洗浄した。残渣をNa2SO4により乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣をエチルアルコールから再結晶化し、約145℃から約146℃の融点を有する2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン、約980mg（約42%）を得た。
【００５９】
1H NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000024
19F NMRスペクトル解析結果は以下の通りであった：
2004523561.tif 000025
質量スペクトル(EI)解析結果は以下の通りであった：m/z（相対強度）、331（M+、65）、287(68)、148(100)。化合物C14H3NO2F6に対する分析計算値は、炭素約50.78%、水素約0.91%、および窒素4.23%であった。NMRおよび質量分析から決定されるように、化合物C14H3NO2F6に対する結果値は炭素約50.60%、水素約0.83%、窒素約3.95%であった。
【００６０】
実施例8
選択した本発明のサリドマイド類似体に対するHUVEC MTTアッセイ法
本発明の選択したサリドマイド類似体に対しHUVEC MTTアッセイ法を実施し、血管形成阻害におけるそのような化合物の効果を概算した。MTTアッセイ法では、1ウェルあたり1.0〜2.5×103の細胞を、96ウェルプレートにおいて0.1mlの培地に3連で置いた。24時間後、細胞を5日間の処置に暴露した。PBSに溶解した5mg/ml MTT溶液（ミズーリ州セントルイスのSigmaから入手可能）の20μLを各ウェルに4時間添加することにより、1プレートの分析を24時間毎に実施した。MTT溶液を吸引し、170μLのDMSOを各ウェルに添加し、ホルマザン結晶を溶解した。バイオキネティクス（Biokinetics）プレート読み取り装置（バーモント州ウィヌースキのバイオテックインスツルメンツ(Bio-Tek Instruments)から入手可能）を用いて、540 nmでの吸光度を測定した。3連のウェルを各条件に対しアッセイした。本明細書に記述したアッセイプロトコルはKrugerらの、「プロテインキナーゼC阻害剤は内皮細胞増殖および血管形成低酸素応答を阻害する」Invasion and Metastasis、18(4)：209-218（参照により本明細書に組み入れられる）に由来する。
【００６１】
選択した化合物に対する以下の結果は、MTTアッセイ法を用いて対照ウェルと処置ウェルとを比較する、増殖曲線を使用して測定し決定したものである。
【００６２】
2-(5-ヒドロキシ-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1H-イソインドール-1,3[2H]-ジオン(CPS3)
100μMまたは10μMのいずれにおいても細胞増殖抑制活性は認められなかった。
【００６３】
2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオン(CPS11)
約100μMで強力な阻害（＞90%）が約72時間で見られた。約60%の阻害が約10μMで見られ、約72時間で認められた。
【００６４】
2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,7-ジメチル-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(CPS42)
約44%の阻害が100μMで見られたが、そのような活性は約10μMのレベルでは見られなかった。
【００６５】
1-シクロヘキシル-5-エチル-5-フタルイミドバルビツール酸(CPS44)
約50%の阻害が100μMで見られたが、そのような活性は約10μMのレベルでは見られなかった。
【００６６】
5-エチル-1-フェニル-5-(テトラフルオロフタルイミド)バルビツール酸(CPS45)
100μMおよび10μMで強力な阻害（＞90%）が認められた。
【００６７】
5-(テトラフルオロフタルイミド)ピリミジン-2,4(1H,3H)
ジオン(CPS48)-100μMおよび10μMで強力な阻害（＞85%）が認められた。
【００６８】
2-(2,4-ジフルオロ-フェニル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(CPS49)
約90%の強力な阻害が100μMで見られたが、そのような活性は約10μMのレベルでは見られなかった。
【００６９】
実施例9
ラットの大動脈環を用いて測定した、選択した本発明のサリドマイド類似体に対する抗血管形成活性分析結果
本発明の選択したサリドマイド類似体の効力を、その類似体の用量を変えて（Charles River研究所から入手可能なSDラットを用いて）、ラットの大動脈環を5日間処置することにより研究した。DMSO対照を使用した（図1）。（NIM画像ソフトウエアを使用して）対照環と処置環とを比較する画像解析を使用して決定した、研究の結果は以下の通りである。
【００７０】
2-(5-ヒドロキシ-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1H-イソインドール-1,3[2H]-ジオン(CPS3)-1日の用量、100μMで50%の血管形成阻害活性が見られた（図2）。
【００７１】
2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオン(CPS11)
100μMの1日用量で強力な90%の血管形成阻害活性が見られた（図3〜5）。
【００７２】
1-シクロヘキシル-5-エチル-5-フタルイミドバルビツール酸(CPS44)
100μMでは血管形成阻害は見られなかった（図6）。
【００７３】
5-エチル-1-フェニル-5-(テトラフルオロフタルイミド)バルビツール酸(CPS45)
100μMの1日用量では、強力な90%の血管形成阻害活性が見られた（図7）。
【００７４】
5-(テトラフルオロフタルイミド)ピリミジン-2,4(1H,3H)-ジオン(CPS48)
100μMの1日用量では、強力な90%の血管形成阻害活性が見られた（図8）。
【００７５】
2-(2,4-ジフルオロ-フェニル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(CPS49)
100μMの1日用量では、大規模な血管形成阻害活性が見られた（図9）。
【００７６】
実施例10
ヒト伏在静脈を使用して測定した、2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオン(CPS11)の抗血管形成活性分析結果
2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオン(CPS11)の効力を、100μMの用量の類似体を用いる、（IRB認定プロトコルSurgery Brand NCIにより得られた）ヒト伏在静脈の14日処置により研究した。CAI、カルボキシアミド-トリアゾール、12μg/ml対照を使用した。上述した画像解析を用いたそのような研究結果により、100μMの2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-2H-イソインドール-1,3-ジオン(CPS11)の1日用量では、強力な90%の血管形成阻害活性レベルが見られることが示された。
【００７７】
実施例11
選択した本発明のサリドマイド類似体の毒性スクリーン分析結果
本発明のサリドマイド類似体に対し毒性スクリーン試験を実施した。選択したサリドマイド類似体に対するそのような毒性スクリーニング試験の結果は、以下の通りであった。
【００７８】
2-(1-ヒドロキシメチル-2,6-ジオキソ-ピペリジン-3-イル)-1,3-ジヒドロ-２H-イソインドール-1,3-ジオン(CPS11)
処置は10mg/kgおよび100mg/kg、腹腔内、単一用量の用量レベルでは安全であった。いくらかの鎮静が認められた。
【００７９】
2-(2,4-ジフルオロフェニル)-4,7-ジメチル-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(CPS42)
処置は200mg/kg、腹腔内、単一用量の用量レベルでは安全であった。注入15以内にわずかな鎮静が認められた。
【００８０】
5-エチル-1-フェニル-5-(テトラフルオロフタルイミド)バルビツール酸(CPS45)
200mg/kg、腹腔内、単一用量の用量は致死用量であった。そのような投与処置を行った動物は処置後2.5時間以内に死亡した。
【００８１】
2-(2,4-ジフルオロ-フェニル)-4,5,6,7-テトラフルオロ-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(CPS49)
200mg/kg、腹腔内、単一用量の用量は致死用量であった。そのような投与処置を行った動物は処置後18時間以内に死亡した。
【００８２】
実施例12
処置方法
本発明は動物、例えばラットまたはヒトなどの被験者における、望ましくない血管形成および血管形成に依存するまたはそれに関係する疾患に対する治療を含む。方法は、1つもしくは複数の本発明の化合物、または1つもしくは複数の化合物と1つもしくは複数の他の薬剤との組み合わせを、薬学的に相溶性のある担体と共に被験者に投与する工程を含む。投与は、血管形成の発生または進行およびそれに関連する疾患を阻害するのに有効な量で行う。処置は、そのような疾患に対しかなりの危険性のある人工統計群における任意の患者において、予防的に使用することができるが、またより特異的な基準、例えば症状の決定的な診断を用いて被験者を選択することができる。
【００８３】
薬物を送達する賦形剤は、当業者に周知の方法を用いて、薬学的に許容される薬物組成物を含むことができる。滅菌塩水またはブドウ糖溶液などの任意の一般的な担体を、本発明により提供された薬物と共に使用することができる。投与経路には、経口経路および非経口経路、例えば静脈内投与、腹膜内投与、直腸投与、局所投与、眼投与、鼻投与および経皮投与が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００８４】
薬物は現在周知の、またはより最近開発された適した様式で、例えば、経口でまたは非経口で、任意の従来の媒質中において投与してもよい。例えば、静脈内注射は塩水溶液媒質によってもよい。媒質はまた、例えば浸透圧を調節するための薬学的に許容される塩、シクロデキストリンなどの脂質担体、血清アルブミンなどのタンパク質、メチルセルロースなどの親水性作用物質、界面活性剤、緩衝剤、保存剤などの従来の薬学的添加物質を含んでもよい。非経口薬学的担体のより完全な説明は「Remington：The Science and Practice of Pharmacy」(第19版、1995)、95章において見出すことができる。
【００８５】
他の薬学的組成物の態様は、当業者に周知のように、従来の薬学的に許容される担体、アジュバントおよび対イオンを用いて調製することができる。組成物は好ましくは、錠剤、ピル、粉末、液体溶液または懸濁液などの固体、半固体および液体剤形の単位用量形態とする。
【００８６】
本発明の化合物は理想的には、望ましくない血管形成が検出された後、できるだけ早く投与される。例えば、いったん望ましくない血管形成が確認されるか、または腫瘍の存在が同定されると、治療上有効な量の薬物を投与する。用量は経口で、または頻繁なボーラス投与により与えることができる。
【００８７】
本発明の化合物の治療上有効な用量は当業者であれば、前述の実施例で説明したような抗血管形成の望ましいレベルを達成するために、決定することができる。化合物の相対毒性により様々な用量範囲で投与することができる。そのような用量範囲の一例は、体重1 kgあたり約0.5 mgから約50 mgを1度または数回に分けて経口投与するものである。用量範囲の他の例は、体重1kgあたり約0.5 mgから約50 mgを1度または数回に分けて経口投与するものである。経口投与では、組成物は例えば、処置する被験者への用量の症候に基づく調節のため、例えば約25 mgから約500 mgの活性成分、特に100 mgの活性成分を含む錠剤形態で提供される。
【００８８】
任意の特別な被験者に対し特定の用量レベルおよび投与頻度は変動させても良く、例えば特定の化合物の活性、現在の血管形成活性の程度、年齢、体重、身体全体の健康、性別、食物、投与様式および時間、排泄速度、薬物の併用、および治療を受けているホストの症状の重篤度を含む様々な因子に依存する。
【００８９】
薬学的組成物は血管形成により媒介される様々な疾患の治療に使用することができる。そのような疾患の例としては、全ての型の癌、眼新生血管疾患、固形腫瘍形成ならびに固形腫瘍における転移、例えば横紋筋肉腫、網膜芽腫、ユーイング肉腫、神経芽腫、骨肉腫、結腸、前立腺、頭および首、胸、膀胱、肝臓、膵臓、肺、CNS、ならびに白血病などの血液由来の腫瘍、および血管腫、潰瘍性大腸炎、クローン病、糖尿病性網膜症、黄斑部変性、鎌状赤血球貧血、類肉腫、梅毒、弾性線維偽黄色腫、パジェット病、静脈閉塞、動脈閉塞、頸動脈閉塞性疾患、慢性ブドウ膜炎／硝子体炎（vitritis）、ミコバクテリウム感染、ライム病、全身性紅斑性狼瘡、早熟の網膜症、イエール病、ベーチェット病、網膜炎または脈絡膜炎を引き起こす感染、推定眼ヒストプラズマ症、ベスト病、近視、眼小窩、スターガート病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘稠度症候群、トキソプラズマ症、外傷およびレーザ後合併症などが含まれる。他の疾病にては、ルベオーシス（角のある新血管新生）に関連する疾患、および全ての形態の増殖性硝子体網膜症を含む維管束組織または線維組織の異常な増殖により引き起こされる疾患が含まれるが、それらに限定されない。
【００９０】
実施例13
併用治療
本発明はまた、本発明のサリドマイド類似体の組み合わせ、および／またはそのサリドマイド類似体と他の抗血管形成阻害剤化合物との組み合わせを含む。例えば、本発明の化合物は有効用量の他の抗血管形成剤と組み合わせて投与してもよい。「投与」という用語は、活性剤の同時投与および逐次投与の両方を示す。本発明のサリドマイド類似体と組み合わせて使用することができる抗血管形成作用物質の例は、TNP-470、炭酸脱水酵素阻害剤、エンドスタチン、アンジオスタチン、2-メトキシエストラジオール、IMiD(免疫調節阻害薬)CC5013、マトリクスメタロプロテイナーゼ阻害剤、およびCOL-3である。さらに、本発明のサリドマイド類似体は他の形態の癌治療、例えば化学療法、放射線治療、ホルモン治療と共に使用してもよい。
【００９１】
本発明の原理を適用することができる多くの可能な態様を鑑みて、例示した態様は本発明の好ましい実施例にすぎず、本発明の範囲を限定するものであると考えるべきではないことを理解すべきである。むしろ、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲により規定される。そのため、本発明者らは、これらの特許請求の範囲の範囲および趣旨内にあるもの全てを本発明として主張する。
【図面の簡単な説明】
【００９２】
【図１】DMSOを用いて処置したラット大動脈環を含む対照の顕微鏡写真である。
【図２】CPS3を用いて処置したラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図３】約100μM のCPS11を用いて処置した、ラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図４】約100μM のCPS11を用いて処置した、他のラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図５】約100μM のCPS11を用いて処置した、他のラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図６】約100μM のCPS44を用いて処置した、ラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図７】約100μM のCPS45を用いて処置した、ラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図８】約100μM のCPS48を用いて処置した、他のラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図９】約100μM のCPS49を用いて処置した、他のラット大動脈環の顕微鏡写真である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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