(57)【要約】ＡＩＮＳ及びプリンを、混合して、又は共有原子価により結合して、組み合わせて使用することは、興味深い薬理学的効果、特に再狭窄阻害を含む抗血栓及び抗炎症効果を得ることを可能にする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
血栓症を抑えるための薬剤の調製において活性成分としてのプリン活性及びＡＩＮＳ活性の組み合わせた使用。
【請求項２】
前記薬剤は、血管形成後に誘発される再狭窄を抑えるためである請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記プリン活性は、Ｐ１型プリン作動性受容体作動薬又はＰ２型プリン作動性受容体拮抗薬によってもたらされる請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記プリン活性は、アデノシン、グアノシン、イノシン又は対応するヌクレオチドによってもたらされる請求項１又は２に記載の使用。
【請求項５】
前記プリン活性は、アデノシン又はＡＭＰによってもたらされる請求項１から４のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
前記プリン活性は、ＡＭＰによってもたらされる請求項１から５のいずれかに記載の使用。
【請求項７】
前記ＡＩＮＳ活性は、アミノアリールカルボン酸、アリール酢酸、アリール酪酸、アリールカルボン酸、アリールプロピオン酸、サリチル酸誘導体、ピラゾール又はピラゾロン誘導体及びチアジンカルボキサミド誘導体、並びに硝酸エステル及びＡＩＮＳのニトロ及びニトロソ誘導体から選択される抗炎症生成物によってもたらされる請求項１から６のいずれかに記載の使用。
【請求項８】
前記ＡＩＮＳ活性は、アセチルサリチル酸、サリチル酸、イブプロフェン、ナプロキセン、ジクロフェナク、スリンダク、セレコキシブ、ロフェコキシブ、ナブメトン、又はそれらの塩によってもたらされる請求項１から７のいずれかに記載の使用。
【請求項９】
前記ＡＩＮＳ活性は、サリチル酸又はサリチル酸誘導体によってもたらされる請求項１から８のいずれかに記載の使用。
【請求項１０】
前記ＡＩＮＳ活性は、アスピリンによってもたらされる請求項１から９のいずれかに記載の使用。
【請求項１１】
前記薬剤は、１日当りプリン１０〜１０００ｍｇ及びＡＩＮＳ１０〜３０００ｍｇを投与することを可能にする製剤形状で提供される
請求項１から１０のいずれかに記載の使用。
【請求項１２】
前記薬剤は、以下の特徴：
−　前記薬剤は、別々に、同一の包装中に前記活性成分を含むこと、
−　前記薬剤は、２つの活性成分を含む唯一の製剤形状で提供されること、
−　前記薬剤は、カプセル、内服用溶液又は乳液、細粒、ゲル、クリーム、粉末、タブレット、錠剤、軟膏、注射可能な溶液又は懸濁液、凍結乾燥粉末、経皮装置、坐薬、経鼻又は肺内投与用の場合によっては加圧フラスコの溶液の形で提供されること、の少なくとも１つを有する請求項１から１１のいずれかに記載の使用。
【請求項１３】
前記薬剤は、１つ又は幾つかのプリン又はプリン類似体分子が、場合により少なくとも１つのスペーサアームを介して１つ又は幾つかのＡＩＮＳ分子に共有原子価により結合される生成物である請求項１から１２のいずれかに記載の使用。
【請求項１４】
以下の特徴：
−　共有原子価による前記結合を確実に行う化学基は、カルボン酸エステル、カルボン酸アミド、チオカルボン酸エステル、又はチオカルボン酸アミド基から選択されること、
−　前記薬剤は、カルボキシル基を有するＡＩＮＳによってプリンのアミン基をアミド化、又はプリンの１つ又は幾つかのアルコール基をエステル化することにより生じること、
−　前記ＡＩＮＳは、アセチルサリチル酸、サリチル酸、ジクロフェナク、ナプロキセン、イブプロフェン、スリンダク及びメフェナム酸から選択されること、の少なくとも１つを有する請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記薬剤は、カルボキシル基を有するＡＩＮＳによってアデノシン又はＡＭＰのアミド化から生じる請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記生成物は、式Ｉ：
（Ａ−）ｍ（Ｘ）ｐ（−Ｂ）ｎ　　　　　　　　　　　　　　　　（Ｉ）
（式中、ＡはＡＩＮＳの分子の残余であり、Ｂは、プリンの残余であり、かつＸはＡ及びＢの間の共有結合か、少なくとも１つのＡ残余を少なくとも１つのＢ残余に結合するスペーサアームを示し、前記スペーサアームと前記Ａ及びＢ残余との間の結合は、共有結合であり、ｍは１から３に至り得る整数であり、ｎは１から３に至り得る整数であり、かつｐはゼロか、又は数ｍ及びｎの大きい方に多くとも等しい整数を示す）に対応するか、又は前記生成物は、式Ｉに対応する生成物の塩である請求項１３、１４又は１５に記載の使用。
【請求項１７】
Ａ及びＢの間に、又はＡ及びＸの間に若しくはＸ及びＢの間に結合を作る化学基は、カルボン酸エステル、カルボン酸アミド、チオカルボン酸エステル、又はチオカルボン酸アミド基である請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
ＡＩＮＳは、アスピリン、サリチル酸、イブプロフェン、ナプロキセン、ジクロフェナク及びスリンダクから選択される請求項１６又は１７に記載の使用。
【請求項１９】
前記ＡＩＮＳは、アスピリン又はサリチル酸であり、かつ前記プリンは、アデノシン又はＡＭＰである請求項１３から１８のいずれかに記載の使用。
【請求項２０】
１つ又は幾つかのプリン分子が、場合により少なくとも１つのスペーサアームを介して１つ又は幾つかのＡＩＮＳ分子に共有原子価により結合され、かつ共有原子価による前記結合が、カルボン酸エステル基により確実に行われるとき、プリンはアデノシンである生成物。
【請求項２１】
前記ＡＩＮＳは、カルボキシル基を有するＡＩＮＳである請求項２０に記載の生成物。
【請求項２２】
以下の特徴：
−　ＡＩＮＳ分子は、硝酸エステル又はＡＩＮＳのニトロ若しくはニトロソ誘導体であること、
−　前記プリンは、アデノシン及びＡＭＰから選択されること、の少なくとも１つを有する請求項２０又は２１に記載の生成物。
【請求項２３】
共有原子価による結合は、カルボン酸アミド、チオカルボン酸エステル、又はチオカルボン酸アミド基によって確実に行われる請求項２０から２２のいずれかに記載の生成物。
【請求項２４】
共有原子価による結合は、カルボン酸エステル基によって確実に行われる請求項２０から２２のいずれかに記載の生成物。
【請求項２５】
一般式Ｉ：
（Ａ−）ｍ（Ｘ）ｐ（−Ｂ）ｎ　　　　　　　　　　　　　　　　（Ｉ）
（式中、ＡはＡＩＮＳの分子の残余であり、Ｂは、プリンの残余であり、かつＸはＡ及びＢの間の共有結合か、少なくとも１つのＡ残余を少なくとも１つのＢ残余に結合するスペーサアームを示し、前記スペーサアームと前記Ａ及びＢ残余との間の結合は、共有結合であり、ｍは１から３に至り得る整数であり、ｎは１から３に至り得る整数であり、かつｐはゼロか、又は数ｍ及びｎの大きい方に多くとも等しい整数を示す）を有する請求項２０から２４のいずれかに記載の生成物、又はかかる生成物の塩。
【請求項２６】
Ａ及びＢの間、又はＡ及びＸの間、若しくはＸ及びＢの間の結合は、カルボン酸エステル、カルボン酸アミド、チオカルボン酸エステル、又はチオカルボン酸アミド基によって確実に行われる請求項２５に記載の生成物。
【請求項２７】
サリチル酸、アセチルサリチル酸、メフェナム酸、ジクロフェナク、ナプロキセン、イブプロフェン若しくはスリンダク、又は硝酸エステル、これらの生成物のニトロ若しくはニトロソ誘導体によるアデノシン又はＡＭＰのアミド化生成物から選択される請求項２５及び２６のいずれかに記載の生成物。
【請求項２８】
サリチル酸、アセチルサリチル酸、メフェナム酸、ジクロフェナク、ナプロキセン、イブプロフェン若しくはスリンダク、又は硝酸エステル、これらの生成物のニトロ若しくはニトロソ誘導体によるアデノシンのエステル化生成物から選択される請求項２５及び２６のいずれかに記載の生成物。
【請求項２９】
−　アセチルサリチル酸によるＡＭＰのアミド化生成物、−　サリチル酸によるＡＭＰのアミド化生成物、
−　サリチル酸によるアデノシンのアミド化生成物から選択される生成物。
【請求項３０】
塩の形の請求項２５から２９のいずれかに記載の生成物。
【請求項３１】
炎症を抑えるための薬剤の調製において活性成分としての請求項２０から３０のいずれかに定義されたような生成物の使用。
【請求項３２】
請求項２０から３０のいずれかに定義されたような生成物を含む薬剤。
【請求項３３】
カプセル、内服用溶液又は乳液、細粒、ゲル、クリーム、粉末、タブレット、錠剤、軟膏、注射可能な溶液又は懸濁液、凍結乾燥粉末、経皮装置、坐薬、経鼻又は肺内投与用の場合によっては加圧フラスコの溶液の形で提供される請求項３２に記載の薬剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、抗血栓及び／又は抗炎症剤として使用するための薬剤の調製においてプリン活性及び非ステロイド系抗炎症剤（ＡＩＮＳ）活性の組み合わせた使用を対象とする。
【０００２】
血管の損傷により、凝固系の活性化及び血小板（又は栓球）の凝集に至ることは知られている。その結果、血小板が中に閉じ込められるフィブリン線維から構成される凝塊が形成される。この凝塊は、傷口を塞ぎ、このことにより、出血停止及び最終的に正常な血液循環に戻ることが可能になる。
【０００３】
凝塊（又は血栓）が、必要もなく血液中で形成されることも起こる。しばしば動脈アテローム硬化性斑のレベルで堆積する、血小板凝集体から構成される、かかる凝塊は、心筋、脳、又はその他の梗塞、あるいは腕又は脚の動脈の急性虚血をその場合引き起こし得る。低い血流量は、特に下肢の静脈網において血栓が出現する危険を増大させ、かつこの血栓から切り離された凝塊は、肺動脈に向かって送られ得、肺動脈を詰まらせ、このようにして肺塞栓を引き起こす。
【０００４】
血栓症の予防において、抗凝固剤を使用することができるが、血小板凝集阻害剤も使用することができる。シクロオキシゲナーゼ阻害剤は、特に、凝集及び血液収縮特性を同時に有するトロンボキサンＡ２の合成を阻害し得る。従って、シクロオキシゲナーゼ阻害剤は、興味深い抗血栓薬剤を構成する可能性がある。現在、この適応において低分量のアスピリンが使用される。
【０００５】
ヌクレオチドが、血管緊張、心臓収縮及び血小板凝集を含む、多数の生理学的プロセスに関連することも知られている。
【０００６】
特に、ＡＤＰがある種の血小板受容体Ｐ２、特に受容体Ｐ２Ｘ１、Ｐ２Ｙ１及びＰ２Ｔを介して血小板凝集の誘発において決定的に重要な役割を果たすことが知られている。ＡＭＰは、特に受容体Ｐ１（特に受容体Ｐ１Ａ２ａ）を介して作用する。
【０００７】
プリン活性及び非ステロイド系抗炎症剤（ＡＩＮＳ）活性を組み合わせることにより、血小板凝集阻害における相乗強化効果を得ることが可能になることが今般発見された。この組み合わせは、プリン作動性受容体に対し作用する生成物及びＡＩＮＳの投与によるか、場合により少なくとも１つのスペーサアームを介して、１つ又は幾つかのプリン分子が１つ又は幾つかのＡＩＮＳ分子に共有原子価により結合される生成物の投与によって行われ得る。かかる生成物は、特に以下に記載する式Ｉの生成物である。
【０００８】
プリン活性の例として、血小板凝集阻害に関連し、かつＡＭＰ及び／又はアデノシン（例えばＰ１型受容体）を天然リガンドに関して有する受容体に対する作動活性か、血小板凝集に関連し（凝集誘発性（ｐｒｏ−ａｇｒｅｇａｎｔｓ）受容体）、かつＡＤＰ（例えばＰ２型受容体）を天然リガンドに関して有する受容体に対する拮抗活性にここで言及することができる。
【０００９】
更に、単独で使用されるＡＭＰは、抗凝集活性を有し、かつＡＭＰも、抗凝集薬剤の調製において活性成分として使用され得ることが発見された。
【００１０】
その上、炎症は、局所的損傷（外傷、感染、化学製品による刺激等）への血管を有する生きた組織の反応であることが知られている。組織の炎症は、赤み、膨れ、苦痛のような症状によって特に現れる。損傷は、血管透過性の増大を伴う血管拡張を最初に引き起こし、白血球の損傷部位への移動を容易にする。種々の化学伝達物質が、炎症反応に参加するが、その中でも特にアラキドン酸（ＡＡ）代謝物が挙げられる。これらの代謝物質は、血管及び損傷部位に対して局所的に作用し、次に急速に破壊される。アラキドン酸は、細胞膜のリン脂質の成分である。種々の刺激作用で、膜性ホスホリパーゼは、ＡＡを放出し、ＡＡはその場合、代謝転換の対象になり、その中で最も重要な２つは、シクロオキシゲナーゼ（又はＣｏｘ）及びリポオキシゲナーゼ（又はＬｉｐｏｘ）に関する基質として使用の際に結合される。炎症反応中にＡＡを生成する細胞は、主に白血球及び血小板である。
【００１１】
シクロオキシゲナーゼの方法は、それらを生成する細胞次第であり得る、多数の生物活性を有するプロスタグランジン及びトロンボキサンの生成に至らせる。これらの生物活性の中で、血管拡張、血管透過性増大、痛覚増大、熱誘発等が挙げられる。
【００１２】
リポオキシゲナーゼの方法は、リウマチ性関節炎、喘息、乾癬、痛風等のような、種々の疾患における炎症の原因となる、ロイコトリエンに至らせる。
【００１３】
現在最も有効な公知の抗炎症物質は、アラキドン酸の代謝に対して作用する：すなわち、ステロイド系抗炎症剤は、ホスホリパーゼを阻害し、他方で非ステロイド系抗炎症剤（ＡＩＮＳ）は、シクロオキシゲナーゼを阻害し、かつ従ってプロスタグランジン及びトロンボキサンの形成を阻害する。
【００１４】
シクロオキシゲナーゼの２つのイソ酵素、すなわち、特に胃の中で常に発現するＣｏｘ−１、及び炎症反応中にしか発現しない誘発可能な形のＣｏｘ−２が存在することが知られている。Ｃｏｘ−１は、周囲酸度に対して胃粘膜を保護することを機能とするプロスタグランジンを胃の中で生成する。大部分のＡＩＮＳは、Ｃｏｘ−１及びＣｏｘ−２を同時に阻害し、かつその結果、出血又は潰瘍形成の危険を伴う胃粘膜変質のような厄介な副次的効果が生じる。Ｃｏｘ−２の特殊な阻害剤であるので、この不都合を有さないＡＩＮＳ（例えばロフェコキシブ及びセレコキシブ）が今では知られている。
【００１５】
幾つかのプリン、例えばアデノシン及びＡＭＰが抗炎症剤であることも同様に知られている。例えば、（内因性又は外因性）アデノシンは、幾つかの酸化遊離基に対して細胞を保護し、かつ好中球性白血球を阻害する。ＡＭＰは、炎症の際に白血球の移動を阻害する。更に、アデノシンは、リウマチ性関節炎の治療に使用されるメトトレキセート及びスルファサラジンの作用メカニズムにおいて介在する。アデノシンは、ヒトにおいてＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２、ＴＮＦのような種々の炎症誘発性サイトカインの放出も阻害する。
【００１６】
プリン活性及びＡＩＮＳ活性を組み合わせることにより、炎症反応の阻害において、相乗強化効果を得ることが可能になることが今般発見された。この組み合わせは、プリン及びＡＩＮＳを投与することによりか、場合により少なくとも１つのスペーサアームを介して、１つ又は幾つかのプリン分子が１つ又は幾つかのＡＩＮＳ分子に共有原子価により結合される生成物の投与によって行われ得る。かかる生成物は、特に以下に記載する式Ｉの生成物である。
【００１７】
従って、本発明は、血栓症及び／又は炎症を抑えるための薬剤の調製において活性成分として、プリン活性及びＡＩＮＳ活性の組み合わせた使用を対象とする。
【００１８】
本出願において、「プリン」とは、特にプリン塩基を有するヌクレオシド及びヌクレオチド、かつ特にアデノシン、並びに対応する燐酸塩、特にＡＭＰ、ＡＤＰ及びＡＴＰ、グアノシン、ＧＭＰ、ＧＤＰ、ＧＴＰ、イノシン並びにその一、二及び三燐酸塩、及びそれらの誘導体又は類似体、特に薬学上許容し得るそれらの塩（例えばアミン基を有する塩酸ヌクレオシド又はヌクレオチド、又はヌクレオチドのアルカリ塩）を意味する。より一般的には、「プリン」とは、プリン作動性受容体とも呼ばれる、プリン受容体（特にＡＭＰ及びアデノシンを感知するＰ１受容体、並びにＡＤＰ及びＡＴＰを感知するＰ２受容体）に対して作用することが可能なあらゆる物質を同様に意味する。かかる物質は、公知であるか、公知の方法により研究され得る。プリン活性は、定義してきたようなプリンの存在によって得られる活性である。プリン類似体の中で、特に抗凝集薬剤を調製する場合において、Ｐ１型受容体作動薬及びＰ２型受容体拮抗薬が特に挙げられる。かかる作動又は拮抗生成物は、公知である；例えばサイトｗｗｗ．ｓｉｇｍａ−ａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍ、ＲＢＩ欄を参照。更に、かかる作動薬又は拮抗薬の研究は、型どおりの簡単な実験によって公知の方法に従い行われ得る。当然に、プリン及びＡＩＮＳの組み合わせによる抗凝集薬剤の調製において、活性成分としてＡＤＰを（その作動薬も）使用しない。
【００１９】
本出願において一般的に、活性生成物の原子若しくは原子団、又は化学官能の変更によって得られ、かつ活性生成物と同一型の生理学的活性を有するあらゆる生成物を「誘導体」と呼ぶ。例として、酸基を有する活性生成物の誘導体は、特に塩（例えばナトリウム塩若しくは他のアルカリ金属塩、又はアミンにより形成される塩、例えばピペラジン塩若しくはリシン塩）、又はアルコールと前記酸により形成されるエステル、又はアミンとこれらの酸により形成されるアミドであり得る；アミン基を有する活性生成物の誘導体は、特に酸とこれらのアミンによって形成される付加塩及びアミドである；アルコール基を有する活性生成物の誘導体は、特に酸と前記アルコールによって形成されたエステルである。
【００２０】
非ステロイド系抗炎症薬又はＡＩＮＳは、共同で幾つかの特性、かつ最初に、プロスタグランジン合成を阻害する能力を与えるシクロオキシゲナーゼの阻害活性を有する、抗炎症薬の公知の分類を構成する。ＡＩＮＳは、共同で他の特性、及び特に、酸化的燐酸化デカップリング、カルシウムイオンの細胞内運動の変更、誘導可能なＮＯシンターゼの合成の活性化、カッパ核因子に対する作用等を有する。これらの特性の１つ又は幾つかが、プリンに対するＡＩＮＳの強化効果の原因であることは、あり得るが、公知又は公知でない他の特性が含まれることも同様にあり得る。
【００２１】
非ステロイド系抗炎症薬の中で、例えば以下のものが挙げられる（特にＴＨＥ　ＭＥＲＣＫ　ＩＮＤＥＸ、第１２版、Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　Ｃａｔｅｇｏｒｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　Ｉｎｄｅｘ参照）：　−　エンフェナム酸、エトフェナム酸、フルフェナム酸、イソニキシン、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ニフルム酸、タルニフルメート、テロフェナメート、トルフェナム酸のような、アミノアリールカルボン酸誘導体；
−　アセクロフェナク、アセメタシン、アルクロフェナク、アンフェナク、アムトルメチングアシル、ブロムフェナク、ブフェキサマク、シンメタシン、クロピラク、ジクロフェナク、エトドラク、フェルビナク、フェンクロジン酸（ａｃｉｄｅ　ｆｅｎｃｌｏｚｉｑｕｅ）、フェンチアザク、グルカメタシン、イブフェナク、インドメタシン、イソフェゾラク、イソキセパク、ロナゾラク、メチアジン酸、モフェゾラク、オキサメタシン、ピラゾラク、プログルメタシン、スリンダク、チアラミド、トルメチン、トロペシン、ゾメピラクのような、アリール酢酸誘導体；
−　ブマジゾン、ブチブフェン、フェンブフェン、キセンブシンのようなアリール酪酸誘導体；
−　クリダナク、ケトロラク、チノジリンのような、アリールカルボン酸誘導体；
−　アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ベルモプロフェン、ブクロキシン酸（ａｃｉｄｅ　ｂｕｃｌｏｘｉｑｕｅ）、カルプロフェン、フェノプロフェン、フルノキサプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、イブプロキサム、インドプロフェン、ケトプロフェン、ロキソプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピケトプロフェン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、プロチジン酸、メチアジン酸、スプロフェン、チアプロフェン酸、キシモプロフェン、ザルトプロフェン、マプロキセンのようなアリールプロピオン酸誘導体；
−　アセトアミノサロール、アスピリン、ベノリレート、ブロモサリゲニン、アセチルサリチル酸カルシウム、ジフルニサル、エテルサレート、フェンドサル（ｆｅｎｄｏｓａｌ）、ゲンチシン酸、サリチル酸グリコール、サリチル酸イミダゾール、アセチルサリチル酸リシン、メサラミン、サリチル酸モルホリン、サリチル酸１−ナフチル、オルサラジン、パルサルミド、アセチルサリチル酸フェニル、サリチル酸メチル、サリチル酸フェニル、サラセトアミド、［２−（アミノカルボニル）フェノキシ］酢酸、サリチル硫酸、サルサレート、スルファサラジン、アスパラトンのようなサリチル酸誘導体；並びに２−アセトキシ安息香酸２−（２−ニトロキシ）−ブチル及び２−アセトキシ安息香酸２（２−ニトロキシメチル）フェニルのような、アスピリン又はサリチル酸塩の硝酸エステル；
−　ε−アセトアミドカプロン酸、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸のようなその他のカルボン酸誘導体；
−　ジフェナミゾール、エピリゾール、アパゾン、ベンズピペリロン、フェプラゾン、スキシブゾン、ブマジゾン、クロフェゾン、ケブゾン、モフェブタゾン、プロキシフェゾン、モラゾン、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、ピペブタゾン、プロピフェナゾン、ピラジノフェナゾン、ラミフェナゾン、チアゾリノブタゾン、トルメチン、アンチピリン、ノルアミドピリン、ジピロン、アザプロパゾン、セレコキシブのようなピラゾール又はピラゾロン誘導体；
−　アンピロキシカム、ドロキシカム、イソキシカム、ロルノキシカム、ピロキシカム、テノキシカムのようなチアジンカルボキサミド誘導体；
−　Ｓ−アデノシルメチオニン、アミキセトリン、ベンダザック、ベンジダミン、α−ビサボロール、ブコローム、ジフェンピラミド、ジタゾール、エモルファゾン、フェプラジノール、グアヤズレン、ナブメトン、ニメスリド、オキサセプロール、パラニリン、ペリソキサール、プロクアゾン（ｐｒｏｑｕａｚｏｎｅ）、テニダプ、ジレウトン（ｚｉｌｅｕｔｏｎ）、ロフェコキシブのようなその他の抗炎症薬；
並びに、参考として内容を本明細書に加える、特許及び特許願ＥＰ０６７０８２５、ＵＳ５７００９４７、ＷＯ９５／３０６４１、ＵＳ５７０３０７３、ＵＳ６０４３２３２及びＵＳ６０４３２３３に記載された、ニトロ又はニトロソ誘導体、及び硝酸エステルのようなＡＩＮＳから誘導された一酸化窒素供与体。
【００２２】
前出のＡＩＮＳのリストにおいて、国際一般名は、塩基性活性成分も、薬学上使用可能なその直接の誘導体も指す（例えば酸、及びその塩）。
【００２３】
カルボキシル基を有するＡＩＮＳを含むＡＩＮＳは、特に、参考として（ＡＩＮＳに関するデータ及び参考文献を含む）内容を本明細書に加える、ＴＨＥ　ＭＥＲＣＫ　ＩＮＤＥＸ第１２版に記載された、公知な生成物である。
【００２４】
使用可能な抗炎症薬の中で、Ｃｏｘ−２（例えばロフェコキシブ、セレコキシブ、ナブメトン）を選択的又は優先的に阻害する生成物を選択することは、興味深いかもしれない。
【００２５】
本発明に従って得られる薬剤の活性成分は、各々適切な製剤形状で、別々に提供され、かつ同一の包装中に集められ得る。
【００２６】
しかし、活性成分の同時投与を容易にするために、２つの活性成分を含む唯一の製剤形状で薬剤、並びに場合により適切な製剤賦形剤を調製することが一般的に好まれる。
【００２７】
当然に、プリン活性及びＡＩＮＳ活性を同時に有する生成物は、２つの型の活性を有する化合物をそれだけで構成しているとみなされるべきであり、かつ従って、唯一の活性成分として、本発明により使用され得る。例えば、プリン及びＡＩＮＳは、２つの分子間に化学結合を作って組み合わされ得る。特に、例えばアセチルサリチル酸、メフェナム酸、ジクロフェナク、ナプロキセン、イブプロフェン、スリンダク等のようなカルボキシル基を有するＡＩＮＳ中に存在する酸基でプリンのアミン基をアミド化、又はプリン活性を有する生成物の１つ又は幾つかのアルコール基をエステル化することができる。プリンのプリン塩基のアミン基を特にアミド化、又はプリン（ヌクレオシド又はヌクレオチド）の単糖類の１つ又は幾つかのアルコール基をエステル化することができる。このようにしてプリン活性及びＡＩＮＳ活性を同時に有するアミド化生成物が得られる。かかる生成物の例は、下記に記載する式Ｉの生成物である。
【００２８】
本発明により得られる薬剤は、経口、舌下、経鼻、肺内、直腸内、非経口（例えば血管内、筋肉内、経皮、関節内）により投与され得る。
【００２９】
このために、薬剤は、経口（特にカプセル、内服用溶液又は乳液、粉末、ゲル、細粒、タブレット又は錠剤の形で）、経鼻（例えば滴又は噴霧の形で投与する溶液）、肺内（エアゾール用加圧フラスコの溶液）、直腸内（坐薬）、皮膚（例えばクリーム、軟膏又はシール若しくはパッチとも呼ばれる経皮装置）、注射（注射可能な溶液、注射可能な溶液を再生させることを可能にする凍結乾燥粉末）、又は例えば舌下（加圧フラスコの溶液、又は口腔内崩壊性の錠剤）のような経粘液での投与を可能にするあらゆる形で提供され得る。
【００３０】
これらの製剤形状は、通常どおりに調製され、かつ適切な従来の賦形剤及びビヒクルを含み得る。
【００３１】
本発明の薬剤は、かかる薬剤を必要とする患者、例えばヒト患者に、１日当り１０〜１０００ｍｇのプリンを投与することを可能にし、かつ更に十分な分量のＡＩＮＳ、例えば１日当り１０〜３０００ｍｇの分量のＡＩＮＳを投与することを可能にする製剤の形で例えば調製され得る。
【００３２】
例として、ヒト成人においてＡＭＰ５０〜５００ｍｇ及びアスピリン１日当り１０〜１０００ｍｇの分量を投与することができる。ＡＭＰは、特に等しい量のアデノシンに代えることができる。ＡＭＰの代わりに他のプリンを及び／又はアスピリンの代わりに他のＡＩＮＳを用いることを望むのなら、一定分量のＡＭＰを等しい分量の他のプリンに代えて、及び／又は一定分量のアスピリンを等しい分量の他のＡＩＮＳに代えて、前述の分量の範囲を容易に適合させることができる。かかる等しい分量は、例えば従来のあらゆる抗炎症テストを用いて決定され得る。一定のＡＭＰ分量に等しいプリン分量は、例えば、以下の実験の部に記載したテストで比較し得る抗凝集効果を得ることが可能な分量である。
【００３３】
当然に、特に治療される患者の体重に応じて薬量を適応させることができる。
【００３４】
本発明により得られる薬剤は、特に下肢の循環不全の狭心症の治療、アテローム性動脈硬化症に苦しむ患者の梗塞を予防する目的、及びまた特に心筋及び脳梗塞の再発を避ける目的において、抗血栓及び抗凝集剤として投与され得る。
【００３５】
本発明により得られる薬剤は、特に関節症、リウマチ性関節炎、腱炎、通風の発作、腸炎症性疾患、月経困難、外傷後水腫、強直性脊椎炎の治療、並びに苦痛及び熱と闘うことを望むあらゆる場合において、炎症反応を阻害又は制限すべきあらゆる疾患において抗炎症剤として同様に投与され得る。
【００３６】
その上、血液形成後、バルーンによる強制的な動脈拡張は、自動の細胞修復メカニズムを開始する、壁側及び内皮外傷（内皮は、動脈の内部被覆である）と等しいことが知られている。内皮の下にある平滑筋細胞は、その理由で重要なプロモータの役割を有する種々の増殖因子を分泌する。それ自体が異常な領域に対する炎症型反応による壁側反応過剰から、危険が生じ、血管壁が厚くなり、癒着過剰により、新規な狭窄（又は再狭窄）の再構成を引き起こす。その結果約３０％の血管形成が、６ヵ月後には再狭窄するということになる。その場合再度拡張するか、外科に頼らねばならない。種々の方法が再狭窄の発生率を減少させ得るように見える：すなわち、金属ステント（血管を開いて保ち、かつ拡張後に置かれるばね）の使用、原位置の放射線治療、再狭窄を阻害する抗炎症物質の部位への放出又は注入である。後者の方法は、壁側反応の開始が、拡張の外傷に直ちに続く現象であることにより正当化される。
【００３７】
血管形成後、直ちに投与されるプリン及びＡＩＮＳの組み合わせ（例えばアスピリン−アデノシン又はスリンダク−アデノシンの組み合わせ）は、再狭窄を阻害又は減少させ得る。
【００３８】
以上に示したように、プリン及びＡＩＮＳの組み合わせを、プリン又はプリン類似体が、例えば以下に記載するような式Ｉの生成物である、ＡＩＮＳに共有原子価により結合される単一の生成物に代えることができる。
【００３９】
本発明は、ＡＩＮＳ及び場合により少なくとも１つのスペーサアームを介して前記ＡＩＮＳに共有原子価により結合されるプリンを含む新規な生成物を同様に対象とする。
【００４０】
これらの生成物は、特に式（Ｉ）：
（式中、ＡはＡＩＮＳの分子の残余であり、Ｂは、プリンの残余であり、かつＸはＡ及びＢの間の共有結合か、少なくとも１つのＡ残余を少なくとも１つのＢ残余に結合するスペーサアームを示し、ｍは１から３に至り得る整数であり、ｎは１から３に至り得る整数であり、かつｐはゼロか、又は数ｍ及びｎの大きい方に多くとも等しい整数を示す）に対応する生成物である。実際、場合により、単一のスペーサアームに対して１つ又は幾つかのＡ及び／又はＢ残余を付け加えるか、１つのＢ残余に対して１つ又は幾つかのＡ−Ｘ−基を付け加えるか（かつその場合、ｍ＝ｐかつｎ＝１）、１つのＡ残余に対して１つ又は幾つかの−Ｘ−Ｂ基を付け加える（かつその場合、ｎ＝ｐかつｍ＝１）ことができる。ｐ＝ゼロのとき、１つ又は幾つかのＡ残余が１つのＢ残余に結合される（かつｎ＝１）か、１つ又は幾つかのＢ残余が１つのＡ残余に結合される（かつｍ＝１）。
【００４１】
【数１】
2004505921.tif 000002
【００４２】
式Ｉの生成物は、塩の形、特にナトリウム又はカリウム塩のようなアルカリ金属塩の形で使用され得る；これらの塩は例えば、存在するならば、燐酸基、フェノール基（サリチル酸の場合）等のそれである。式Ｉの生成物がアミン基を含むとき、必要な場合、式Ｉの生成物を付加塩の形で（例えば塩酸塩の形で）同様に使用できる。
【００４３】
スペーサアーム及びＡ及びＢ残余の間の結合は、共有結合である。（ｐ＝ゼロのとき）Ａ及びＢの間に、又は（ｐがゼロと異なるとき）Ａ及びＸの間に若しくはＸ及びＢの間に結合を作る化学基は、例えばカルボン酸エステル、カルボン酸アミド、チオカルボン酸エステル、又はチオカルボン酸アミド基である。
【００４４】
式Ｉにおいて、Ａは、カルボキシル基を有するＡＩＮＳのアシル残余を特に示すことができ（従ってＡＩＮＳは、Ａ−ＯＨを式とする）、かつＢは、プリン塩基の第１アミンの窒素を介して及び／又はプリン塩基を有するヌクレオシド又はヌクレオチドのヒドロキシル基の酸素を介して（スペーサアームがない場合に）Ａに結合されたか、Ｘに結合されたプリン塩基を有するヌクレオシド又はヌクレオチドの残余を示すことができる；例えば、１つ又は幾つかの基Ａ又はＡ−Ｘ−が、前記ヌクレオシドの第１アルコールの酸素を介して及び／又は前記ヌクレオチドの少なくとも１つの第２アルコールの酸素を介して、Ｂに結合され得る。これらの場合、Ｂが誘導されるプリンは、明らかにＢＨを式とする。
【００４５】
式Ｉにおいて、前記ヌクレオシド又はヌクレオチドは、特にリボヌクレオシド又はリボヌクレオチドである。プリンは、アデノシン、グアノシン及びイノシン、並びに対応する５’−一燐酸、二燐酸、及び三燐酸から選択され得る。
【００４６】
スペーサアームは、特に２官能脂肪族化合物（すなわちＡ及びＢとの共有結合を形成することを各々が可能にする反応性官能基を各端部に有する化合物）の２価残余であり得る。これらの化合物は、例えば、アミノ基及びカルボキシル（又はチオカルボキシル）基を同時に有する化合物、又はアミノ基及びヒドロキシル基を同時に有する化合物であり得る。
【００４７】
式Ｉにおいて、基Ｘ（端部のその官能基は考慮に入れない）は、１つ又は幾つかのヘテロ原子−Ｏ−若しくは−Ｓ−、又は１つ又は幾つかのヘテロ原子基−ＮＨ−若しくは−ＣＯ−ＮＨ−により、場合によって中断される２価脂肪族基を特に示す。
【００４８】
スペーサ作用物質、すなわち式Ｉ（式中、Ａ及びＢは、スペーサアームによって結合される）の生成物をプリン及びＡＩＮＳとの反応の後に与えることが可能な化合物は、例えば、アルカンカルボキシルα−、β−又はγ−アミノ酸、特にグリシン、アラニン、バリン若しくはロイシン、又はペプチド、特にジペプチド若しくはトリペプチドのような天然のα−アミノ酸である。
【００４９】
スペーサ作用物質は同様に、ヒドロキシカルボン酸、例えば乳酸、グリコール酸、アルドン酸（グルコン酸、マンノン酸、ガラクトン酸、リボン（ｒｉｂｏｎｉｑｕｅ）酸、アラビノン酸、キシロン酸、及びエリトロン酸）、並びに対応するラクトン又はジラクトン（例えばラクチド、グリコリド、δ−グルコロナクトン（ｇｌｕｃｏｌｏｎａｃｔｏｎｅ）、δ−バレロナクトン（ｖａｌｅｒｏｎａｃｔｏｎｅ））、又はアルダン酸でも良い。
【００５０】
場合によりスペーサアームに存在し、かつ要素Ａ又はＢとの結合中に含まれない官能基は、ｍ及び／又はｎが１より大きい式Ｉの化合物を得るように他の残余Ａ及び／又はＢを付け加えるために使用され得る。例えばヒドロキシ酸のヒドロキシル基、カルボン２酸アミノ酸の第２カルボキシル基、ジアミノアミノ酸の第２アミノ基、ヒドロキシルアミノ酸のヒドロキシル基等には、それが当てはまる。
【００５１】
式Ｉの化合物を調製するために、従来の有機合成法を使用する。例えば、アミド又はエステルを調製するためには、カルボキシル化合物（ＡＩＮＳ又はスペーサ作用物質）を、ハロゲン化カルボン（又はチオカルボン）酸の形で、又は混成無水物の形で、又は活性化エステル、例えばｐ−ニトロフェニルエステルの形で反応させることができる。ジシクロヘキシルカルボジイミドのようなカップリング剤を用いて酸を活性化させることも同様にできる。
【００５２】
式Ｉの化合物が、ヌクレオシド又はヌクレオチドの残余を含むので、例えば内容を、参考として本明細書に加えるＫｏｃｈｅｔｋｏｃ及びＢｕｄｏｖｓｋｉｉの著作物，Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ，Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ，１９７１（２巻）に記載された、核酸化学において公知の方法を特に使用してそれらを調製することができる。
【００５３】
当然に、式ＩのＡ、Ｂ又はＸが誘導される化合物が、反応することが可能な幾つかの官能基を含むとき、（反応させたいと思うＡ及び／又はＢの前駆生成物の数に応じた）化学量論的比率で反応体を使用するか、反応することを望まない反応性官能基を一時的に保護するかして、作業すべきである。そのために、前記反応性官能基を一時的に保護する方法を使用する。これらの一時的に保護する方法は、特にペプチド合成に関する研究の際に開発されたものが著名である。例えば、−ＮＨ２基は、カルボベンゾキシ、フタロイル、ｔ−ブトキシカルボニル、トリフルオロアセチル、トルエンスルホニル基によって保護され得る；カルボキシル基は、ベンジルエステル、テトラヒドロピラニルエステル、又はｔ−ブチルエステルの形で保護され得る；アルコールは、エステル（例えばアセテート）の形で、テトラヒドロピラニルエーテル、ベンジルエーテル若しくはトリチルエーテルの形で、又は（近接グリコールの場合にアセトニドの形を含む）アセタールの形で保護され得る。種々の化学基の保護及び場合によって起こり得る保護取消の反応は、公知であり、かつ例えば著作物Ａｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ　ａｎｄ　Ｒｅｓｕｌｔｓ，Ｖｏｌ．３，Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（１９６３）１５９ページ以下、及び１９１ページ以下、並びにＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎの著作物，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ（１９９１）に記載されている。これらの著作物の内容は、参考として本明細書に加える。
【００５４】
ヌクレオチド又はヌクレオシドの第１アルコールの燐酸処理又は脱燐酸処理の反応は、天然酵素（例えばホスファターゼ、ホスホキナーゼ）を使用して実施され得る。
【００５５】
式Ｉの生成物の中で、式（Ｉａ）：
（式中、Ａ及びＢは、前述のように定義され、Ａはカルボキシル基を有するＡＩＮＳのアシル残余を特に示し、Ｂとの結合は、例えば、式がＢＨであるプリンのそれぞれアミン又はアルコール基によるアミド又はエステルの形成によってなされる）に対応するものを特に挙げる。
【００５６】
【数２】
2004505921.tif 000003
【００５７】
式Ｉ又はＩａの生成物の中で、特にサリチル酸、アセチルサリチル酸、ジクロフェナク、イブプロフェン、ナプロキセン又はスリンダクのＡアシル残余により、かつアデノシン又はＡＭＰから誘導されたＢ残余によって形成されたアミド及びエステルを挙げる。
【００５８】
当然に、式Ｉの生成物の中から、そのプリン及びＡＩＮＳ成分に対して相乗強化効果を有するものを選択することは、特に興味深い。かかる生成物は、型どおりの簡単な実験によって選択され得る。
【００５９】
更に、式Ｉ又はＩａの生成物が一般的に、それらが誘導されるＡＩＮＳに対して改善された胃耐性を有することに注目した。
【００６０】
式Ｉ又はＩａの生成物は、以上に記載されたものと同一の製剤形状で、かつ考慮される式Ｉ又はＩａの生成物中のプリン及びＡＩＮＳから誘導される分子のそれぞれの比率を斟酌して等しい分量で投与される。投与される分量は、抗炎症活性又は抗凝集活性を研究する公知のテストを使用して、型どおりの実験によって決定され得る。
【００６１】
式Ｉ又はＩａの生成物のために与えられた、前出の情報は、一般的に、場合により少なくとも１つのスペーサアームを介して、共有原子価により結合されるＡＩＮＳ及びプリンを含むあらゆる生成物に同様に応用される。
【００６２】
本出願が対象とする発明は、本明細書に添付した特許請求の範囲により、同様に定義される。
【００６３】
以下の実施例は、本発明を例証する。
【００６４】
【実施例１】
式Ａ−ＮＨ−Ｙ（式中、Ａは、アセチルサリチル酸のアシルの残余であり、かつＹは、その第１アミンの切断されたＡＭＰの残余であり、式のＮＨ基は、ＡＭＰの前記第１アミンの残余を示す）の生成物の調製。
【００６５】
従って、アセチルサリチル酸によるＡＭＰのアミド化生成物が問題である。
【００６６】
出発生成物は、アセチルサリチル酸（出所：ＳＩＧＭＡ）、及びＡＭＰ（又はアデノシン（５’−Ｏ−燐酸））、ナトリウム塩（出所：ＳＩＧＭＡ）である。
【００６７】
室温で、水１４ｍｌ中にＡＭＰ０．５ｇを溶解させる。炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）０．１７ｇを加え、かつ塩化２−アセチルベンゾイル０．２５ｇ、次に後者を可溶化するためにジオキサン３ｍｌを加える。室温で１２時間、混合物を撹拌し、次に溶剤を蒸発させる。
【００６８】
透析により、塩化物を除去するか、又は１：１：１の酢酸エチル／水／イソプロパノール混合物により溶離して、シリカゲル上でクロマトグラフィーによって得られる生成物を精製する。
【００６９】
燐酸基は、ナトリウム及びカリウムイオンによって塩化される。
【００７０】
陽子及び燐３１ＰのＲＭＮスペクトルは、示される構造と一致している。
【００７１】
似たように作業を行うが、炭酸カリウムを炭酸ナトリウムに代えると、燐酸基が、ナトリウムイオンによって塩化された対応するアミドが得られた。
【００７２】
【実施例２】
式Ａ−ＮＨ−Ｙ（式中、Ａは、サリチリルの残余であり、Ｙは、（その第１アミンの切断された）ＡＭＰの残余を示し、式のＮＨ基は、ＡＭＰの前記第１アミンの残余である）の生成物の調製。
【００７３】
従って、サリチル酸によるＡＭＰのアミド化生成物が問題である。
【００７４】
出発生成物は、実施例１の生成物であり、それに基礎培地で脱アセチル化を受けさせる。この生成物を水中で溶解させ、かつ室温で、炭酸カリウムＫ２ＣＯ３３等量を加える。室温で１２時間の反応時間の後、この実施例の表題に示した生成物が得られる。
【００７５】
実施例１のように、シリカゲル上でクロマトグラフィーによって脱アセチル化される生成物を精製する。
【００７６】
この生成物の燐酸及びフェノレート基は、ナトリウム及びカリウムイオンによって塩化される。
【００７７】
炭酸カリウムをナトリウムに代えると、燐酸及びフェノレート基が、ナトリウムイオンによって塩化された示された生成物が得られる。
【００７８】
【実施例３】
式Ａ−ＮＨ−Ｙ（式中、Ａは、サリチリル基を示し、Ｙは、その第１アミンの切断されたアデノシンの残余を示し、式のＮＨ基は、アデノシンの前記第１アミンの残余を示す）の生成物の調製。
【００７９】
従って、サリチル酸によるアデノシンのアミド化生成物が問題である。
【００８０】
ａ）アデノシン２’，３’，５’，Ｏ−三酢酸：
無水ピリジン２５ｍｌ中で溶解した無水酢酸１１．４ｍｌ及びアデノシン５．３４ｇを混合する。室温で１２時間撹拌し、次に溶剤を蒸発させる。残渣は、次に数回エタノールで取られる。白色の結晶６．９７ｇが得られる。
【００８１】
ｂ）Ｎ−（２−アセチルサリチリル）アデノシン２’，３’，５’，Ｏ−三酢酸：
ａ）で得られた生成物２．４５７ｇをジクロロメタン２６ｍｌ及びトリエチルアミン０．９５ｍｌ中で溶解させ、次に温度０℃でアセチルサリチル酸の塩化物０．４０２ｇを加える。反応混合物を室温まで温めさせ、次に１２時間撹拌する。混合物は、ＮａＣｌで飽和した水溶液によって抽出され、次にこのように処理された有機相は、ＭｇＳＯ４上で乾燥させられる。溶剤は、蒸発させられ、かつ残渣は、９８：２のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合物により溶離して、シリカゲル上でクロマトグラフィーによって分離される。予告された化合物（１．４１ｇ）が白色の固体の形で得られる。
【００８２】
ｃ）Ｎ−サリチリルアデノシン
ｂ）で得られた化合物０．２３０ｇを７：３のメタノール／水混合物１０ｍｌ中で、室温で溶解させ、次にＫ２ＣＯ３０．２３２ｇを加える。１時間後、混合物は、ジクロロメタンで数回洗浄され、かつ水相は、濃縮される。黄色の固体０．１５６ｇが得られる。
【００８３】
ＲＭＮスペクトルは、示される構造と一致している。
【００８４】
血小板凝集に対する、ＡＩＮＳ単独、及びアデノシン又はＡＭＰに組み合わせた効果の調査
いかなる治療も受けていないラット又は採取に先立つ２週間にいかなる治療も受けていないヒトにおいて、クエン酸緩衝剤に集められた血液を採取する。公知の方法に従った遠心分離によって血小板に富んだ血漿を調製する。
【００８５】
測定は、「Ｃｈｒｏｎｏ−ｌｏｇ」という名称で市販されている血小板凝集計により行われ、かつ、取得システム「ＭＰ３０　Ｂｉｏｐａｃ」によって処理及びディジタル化される。
【００８６】
ａ）ラットの血小板凝集に対するＡＭＰ及びアデノシンの効果
ＡＤＰ（２０μＭ）により刺激されたラットの血小板で、急速かつ著しい凝集（８０％）が観察される。
【００８７】
ＡＭＰ２．５ｍＭ又は５．０ｍＭの存在下で、ＡＤＰが同一の濃度で加えられるとき、自然発生的な離解が後に続く、部分的凝集（それぞれ４０％及び２０％）しか観察されない。従って、ＡＭＰの作用は、分量次第である。
【００８８】
ＡＭＰ（５ｍＭ）をアデノシン（４ｍＭ）に代えると、比較し得る結果が得られる。
【００８９】
ラットの血小板をＡＤＰ（２０μＭ）により刺激し、次に３０秒後にＡＭＰ（１０ｍＭ）を加えると、即時の離解が観察される。
【００９０】
結論として、アデノシン及びＡＭＰは、ＡＤＰによって誘発された血小板の凝集を阻害し、かつ逆行させることができる。
【００９１】
ｂ）ラットの血小板凝集に対するＡＩＮＳ単独及びＡＭＰに組み合わせた効果
サリチル酸ナトリウム（７．５ｍＭ）を血漿に加え、次にＡＤＰ（２０μＭ）を加えると、血小板凝集の著しい阻害は観察されない。
【００９２】
サリチル酸ナトリウム（７．５ｍＭ）及びＡＭＰ（２．５ｍＭ）の存在下、ＡＤＰ（２０μＭ）を加えると、事実上、もはやいかなる血小板凝集も観察されない。
【００９３】
従って、ＡＭＰ及びサリチル酸ナトリウムの組み合わせは、相乗強化効果を提供する。
【００９４】
サリチル酸ナトリウムをアスピリン（７．５ｍＭ）又はインドメタシン（０．０５ｍＭ）に代えると、類似した結果が得られる。
【００９５】
ｃ）ラットの血小板凝集に対するアスピリン＋ＡＭＰの組み合わせの効果
血小板は、アスピリン（２ｍｇ／ｋｇ）及びＡＭＰ（１ｍｇ／ｋｇ）の静脈内注射によって１時間前に処理されたラットにおいて採取された血液から調製される。
【００９６】
ＡＤＰ（１０及び２０μＭ）によって血小板を刺激する。
【００９７】
（いかなる予めの処理も受けなかった）対照動物において、ＡＤＰ１０及び２０μＭの分量で、ＡＤＰを加えた３分後に、５０％を超える血小板凝集が観察される。
【００９８】
アスピリン及びＡＭＰによって予め処理された動物において、僅かな凝集（約２０％）が観察され、それは約３分後に逆行する。
【００９９】
ｄ）ラットの血小板凝集に対する実施例１の生成物の効果
実施例１の生成物（０．３ｍＭ）の存在下、ＡＤＰ（２０μＭ）によって刺激する。
【０１００】
予め処理されていない血漿により、最大凝集は、５５％に達し、曲線の最初の勾配が０．９９である。（ＡＤＰを加える直前に加えられた）実施例１の生成物の存在下、最大凝集は、３９％であり、最初の勾配は、０．８４である。行われた試験の結果、これらの実験条件において、凝集の減少は、３０〜５０％であるということになる。
【０１０１】
実施例１の生成物が、ＡＤＰによる刺激の２５分前に血漿に加えられると、最大凝集は、３０％未満である。
【０１０２】
ｅ）ラットの血小板凝集に対する実施例１の生成物の効果；ＡＭＰ＋アスピリンの組み合わせとの比較
実施例１の生成物（０．３ｍＭ）の存在下、又はアスピリン（２０ｍＭ）＋ＡＭＰ（０．２５ｍＭ）の存在下、血小板は、ＡＤＰ（２０μＭ）によって刺激される。
【０１０３】
対照動物において、ＡＤＰによる刺激は、５０％の血小板凝集を誘発する。
【０１０４】
実施例１の生成物によって処理される血漿の場合、最大凝集は３０％に達し、次に逆行する。
【０１０５】
アスピリン及びＡＭＰを受けた血漿の場合、凝集は、４０％に達し、次に逆行する。
【０１０６】
これらの結果は、実施例１の生成物が、アスピリン及びＡＭＰの単なる組み合わせよりも活性であることを証明する。
【０１０７】
ｆ）ヒトの血小板に対する実施例１の生成物の効果
実施例１の生成物（０．５ｍＭ）の存在下、ＡＤＰ（２０μＭ）によって刺激されるヒトの血小板の反応を調査する。対照において、ＡＤＰは、８０％に達する最大血小板凝集を引き起こす。実施例１の生成物の存在下でＡＤＰを加える場合、最大凝集は、３５％を超えず、かつ３〜４分後に逆行を始める。
【０１０８】
血小板がアラキドン酸（２０μＭ）によって刺激される場合、７０％の凝集が観察される。アラキドン酸が、実施例１の生成物（０．００５ｍＭ）の存在下で加えられると、血小板凝集は、完全に阻害される。
【０１０９】
ｇ）コラーゲンによって刺激されたヒトの血小板の反応
コラーゲン（０．１９ｍｇ／ｍ１、Ｂｉｏｄａｔａ）によって刺激されたヒトの血小板の反応を調査する。２つのパラメータが考慮される：潜伏時間（血小板のコラーゲンとの接触及び凝集開始の間の期間）及び凝集の最大幅である。
【０１１０】
最大反応の点においてコラーゲンへの反応は、アスピリン（０．６ｍＭ）によっても、サリチル酸ナトリウム（２ｍＭ）によっても、ＡＭＰ（０．６ｍＭ）によっても、実施例１の生成物（０．５ｍＭ）によっても、サリチル酸ナトリウム（２ｍＭ）及びＡＭＰ（０．６ｍＭ）の組み合わせによっても変更されない。
【０１１１】
それに反して、示された分量では、実施例１の生成物は、コラーゲンとの血小板の接触に続く潜伏時間を２倍にする。ＡＭＰ（０．６ｍＭ）＋サリチル酸ナトリウム（２ｍＭ）の組み合わせは、実施例１の生成物（０．５ｍＭ）と比較し得る効果を有する。サリチル酸ナトリウム（２ｍＭ）は、潜伏時間に関して効果がない。ＡＭＰ（０．６ｍＭ）の場合、潜伏時間は、約１．５が乗じられる。
【０１１２】
抗炎症効果の調査
テストは、体重２０ｇの雄のマウスに対して行われる。この実験計画は５日間続く。Ｊ１の日に空気３ｃｍ３を背部に皮下注射する。得られた空気ポケットは、Ｊ２、Ｊ３及びＪ４で空気１ｃｍ３によって再度膨らませる。Ｊ３、Ｊ４及びＪ５に、炎症誘発の１時間前に、胃強制栄養によって、水０．１ｍｌ（対照、ｎ＝１４）か、アスピリン（１００ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝５）か、実施例１の生成物（１００ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝４）か、実施例３の生成物（１００ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝５）が投与される。空気ポケット中に緩衝剤ＰＢＳにカラゲナン２％（重量／体積）の懸濁液１ｍｌの注射により炎症を誘発する。４時間後、ポケットはＰＢＳ２ｍｌで洗浄され、かつ滲出液は集められる。アリコートは、緩衝剤ＰＢＳ中のメチレンブルー０．０１％の溶液により、１：１まで希釈される。次に蓄積が炎症によって引き起こされる（主に好中球の）細胞の計算を行う。
【０１１３】
結果を表１に要約する。結果は、実施例１及び３の生成物が、対照及びアスピリン単独に対して炎症性滲出液中に集積される白血球の数を著しく減少させることを証明する。
【０１１４】
【表１】
2004505921.tif 000004
【０１１５】
胃毒性の調査
このテストは、ラットＳｐｒａｇｕｅ　Ｄａｗｌｅｙ（ＩＦＦＡ　ＣＲＥＤＯ、ラルブレスル、フランス）に対して行われる。ラットは、実験前日に何も食べない状態に置かれる（但し、任意で飲み物の水は自由できる）。ラットは、インドメタシン（２０ｍｇ／ｋｇ）で皮下から、又はアスピリン１００ｍｇ／ｋｇ、又は実施例１の化合された生成物、若しくは実施例３の生成物で強制栄養によって処理された。３時間後、ラットは致死量のペントバルビタールにより、犠牲にされる。胃が採取され、長い湾曲に沿って開かれ、かつ水ですすがれた。胃粘膜は、ソフトウェア（ＮＩＨ、米国）及びビデオカード（Ｓｃｉｏｎ、米国）を備えたマイクロコンピュータＭａｃｉｎｔｏｓｈ　Ｇ３を用いて、写真を取られ、かつディジタル化される。胃は、パラフィン封入体のための従来の組織学的技術により処理されるために、緩衝ホルマリンに固定される。次に断面（５μｍ）は、ヘマトキシリン−エオジン−サフランで着色される。
【０１１６】
２つの観察が行われ得る：肉眼的（採取後、顕微鏡で）及び組織学的である。
【０１１７】
インドメタシンによって処理されたラットの胃は、組織学的調査によって裏付けられた、肉眼的に大きな潰瘍を有する。この分量でアスピリンによって処理されたラットの胃は、点状出血の形の損傷又は微小潰瘍を有する。この調査は、実施例１及び３の生成物が、アスピリン及びインドメタシンと比較して、ラットのこの生体内モデルにおいて、胃壁の変質を誘発しないことを証明する。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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