(57)【要約】本発明は遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態での(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての次の構造式【化１】2004528375.tif 000020［式中、Ｘ、ＹおよびＺは独立してＣまたはＮであり；Ａは直接結合、CH2またはNHであり；Ｂは直接結合またはNHであり；ｎ＝０〜２であり；R1はＨ、場合により置換されたC1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリールまたはアルキルアリールであり；R2はＨ、C1-4アルキルまたはアルコキシC1-4アルキルである；またはR1およびR2は一緒になってピリドンと縮合した６−員の不飽和芳香環または１または２個のヘテロ原子を含有する複素環を形成し；R3は直接結合、Ｈ、C1-4アルキル、置換C1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールであり；R4は直接結合またはＨであり；R5はC1-4アルキルまたはアリールであり；R6およびR7は独立してＨまたはC1-4アルキルであり；R8およびR9は独立してＨ、C1-4アルキルまたはｔ−ブトキシカルボニルである；またはR8およびR9はそれらが結合している窒素と一緒になって１または２個のヘテロ原子を含有する５−、６−、７−員の場合により未置換の、置換された、縮合したまたは不飽和の複素環を形成し、前記置換基はヒドロキシル、ヒドロキシメチル、カルボキシメチル、カルボキシ、メトキシおよびｔ−ブトキシからなる群より選択される］を有する式(1)、(2)または(3)の化合物に関する。
2004528375.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態での(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての次の構造式
【化１】
2004528375.tif 000017
［式中、Ｘ、ＹおよびＺは独立してＣまたはＮであり；
Ａは直接結合、CH2またはNHであり；
Ｂは直接結合またはNHであり；
ｎ＝０〜２であり；
R1はＨ、場合により置換されたC1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリールまたはアルキルアリールであり；
R2はＨ、C1-4アルキルまたはアルコキシC1-4アルキルであるか；
または
R1およびR2は一緒になってピリドンと縮合した６−員の不飽和芳香環または１もしくは２個のヘテロ原子を含有する複素環を形成し；
R3は直接結合、Ｈ、C1-4アルキル、置換C1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールであり；
R4は直接結合またはＨであり；
R5はC1-4アルキルまたはアリールであり；
R6およびR7は独立してＨまたはC1-4アルキルであり；
R8およびR9は独立してＨ、C1-4アルキルまたはｔ−ブトキシカルボニルであるか；
または
R8およびR9はそれらが結合している窒素と一緒になって１または２個のヘテロ原子を含有する５−、６−、７−員の場合により未置換の、置換された、縮合したまたは不飽和の複素環を形成し、その置換基はヒドロキシル、ヒドロキシメチル、カルボキシメチル、カルボキシ、メトキシおよびｔ−ブトキシからなる群より選択される］を有する式(1)の化合物、
または
次の構造式
【化２】
2004528375.tif 000018
［式中、Ａ、Ｂ、ｘ、ｙ、ｚ、ｎ、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8およびR9は上記で定義された通りである］を有する式(2)の化合物、
または
次の構造式
【化３】
2004528375.tif 000019
［式中、Ａ、Ｂ、ｘ、ｙ、ｚ、ｎ、R1、R2、R3、R4、R5、R8およびR9は上記で定義された通りである］を有する式(3)の化合物。
【請求項２】
Ｘ、ＹおよびＺがＣである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ｎ＝０である請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
R6およびR7がＨである請求項１〜３の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５】
活性成分として治療的に有効な量の遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態でのエナンチオマーまたはラセミ化合物としての請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物を場合により希釈剤、賦形剤または不活性担体と一緒に含有する医薬処方物。
【請求項６】
治療に使用される請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項７】
化合物が鎮痛剤、抗炎症剤、利尿剤、鎮咳薬、麻酔薬もしくは神経保護剤、または卒中もしくは機能性腸疾患を治療するための薬剤として使用される、薬剤の製造における請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は新規ピリジノンおよび関連した複素環誘導体、並びにそれらを含有する医薬組成物、それらの製造法およびそれらの薬剤としての使用に関する。これらの化合物および医薬組成物はκ−オピオイド受容体に対して有意なアゴニスト活性を示し、そのため鎮痛剤、抗炎症剤、利尿剤、鎮咳薬、麻酔薬、神経保護剤、あるいは哺乳動物の患者、特にヒトの卒中または機能性腸疾患を治療するための薬剤として有用である。
【背景技術】
【０００２】
カッパオピオイド受容体はミュー(μ)、デルタ(δ)、カッパ(κ)およびシグマ(σ)受容体、並びに最近開発されたORL−1またはノシセプチン受容体を含む関連したオピオイド受容体群の一員であり、それらはすべてヒトを含む多くの種の中枢および末梢神経系に存在すると思われる。オピオイド受容体は疼痛伝達および侵害受容に関与するすべての７−トランスメンブランＧ−プロテイン結合受容体である。非特異的μ−オピオイド受容体活性化により作用する臨床的に使用されるモルヒネ様鎮痛剤は呼吸抑制、便秘および身体的依存障害などのよく知られている副作用を有する。κ−オピオイド受容体アゴニストである化合物はモルヒネ様鎮痛剤に伴なう深刻な副作用がないという利点を有する鎮痛剤として作用することが知られている。抗侵害受容の働きをする他に、脳に侵入するκ−オピオイド受容体アゴニストは卒中の治療において、あるいは利尿剤、鎮咳薬または神経保護剤として有用であることがわかっている。CNSでのオピオイドのよく特性決定された作用の他に、末梢部でのオピオイド受容体の役割が明らかである。現在、κ−オピオイド受容体は一次求心性ニューロンの末梢終末に存在し、これらの部位の活性化は例えば関節痛のラットモデルの痛覚過敏を軽減することがわかっている。したがって、血液脳関門（BBB）に侵入する能力が制限されたκ−オピオイド受容体アゴニストは疼痛および／または炎症の症状が重要な役割を果たす疾患を治療するのに効果的である。このような治療は脳に侵入するκ−オピオイド受容体アゴニストが原因となるCNS関連の副作用がない。
【発明の開示】
【０００３】
本発明はκ−オピオイド受容体アゴニスト活性を有する化合物を提供する。その化合物の観点から、本発明は遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態の(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての式(1)、(2)または(3)の化合物を提供する。
【０００４】
式(1)の化合物は遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態での(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての次の構造式
【化１】
2004528375.tif 000003
［式中、Ｘ、ＹおよびＺは独立してＣまたはＮであり、好ましくはＣであり；
Ａは直接結合、CH2またはNHであり；
Ｂは直接結合またはNHであり；
ｎ＝０〜２であり、好ましくはｎ＝０であり；
R1はＨ、場合により置換されたC1-6アルキル、C3-7シクロアルキル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリールまたはアルキルアリールであり；
R2はＨ、C1-6アルキルまたはアルコキシC1-6アルキルである；
または
R1およびR2は一緒になってピリドンと縮合した６−員の不飽和芳香環または１または２個のヘテロ原子を含有する複素環を形成し；
R3は直接結合、Ｈ、C1-6アルキル、置換C1-6アルキル、C3-7シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールであり；
R4は直接結合またはＨであり；
R5はC1-6アルキルまたはアリールであり；
R6およびR7は独立してＨまたはC1-6アルキルであり、好ましくはＨであり；
R8およびR9は独立してＨ、C1-6アルキルまたはｔ−ブトキシカルボニルである；
または
R8およびR9はそれらが結合している窒素と一緒になって１または２個のヘテロ原子を含有する５−、６−、７−員の場合により未置換の、置換された、縮合したまたは不飽和の複素環を形成し、前記置換基はヒドロキシル、ヒドロキシメチル、カルボキシメチル、カルボキシ、メトキシおよびt-ブトキシからなる群より選択される］を有する。
【０００５】
式(2)の化合物は遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態での(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての次の構造式
【化２】
2004528375.tif 000004
［式中、Ａ、Ｂ、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ｎ、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8およびR9は上記で定義された通りである］を有する。
【０００６】
式(3)の化合物は遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態での(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての次の構造式
【化３】
2004528375.tif 000005
［式中、Ａ、Ｂ、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ｎ、R1、R2、R3、R4、R5、R8およびR9は上記で定義された通りである］を有する。
【０００７】
本明細書において、「ハロゲン」はフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードである。
【０００８】
本明細書において、「アルキル」は１〜６個の炭素原子を含有する直鎖状または分枝状の非環式または環式不飽和または飽和脂肪族炭化水素である。代表的な直鎖状飽和アルキルはメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどであり、分枝状飽和アルキルはイソプロピル、sec−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、イソペンチルなどである。代表的な環式飽和アルキルはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどであり、環式不飽和アルキルはシクロペンテニルおよびシクロヘキセニルなどである。シクロアルキルは３〜７個の炭素原子を含有する飽和または不飽和の（芳香族ではない）炭素環式環、例えばシクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロヘキセンなどである。不飽和アルキルは隣接する炭素原子間で少なくとも１個の二重または三重結合を含有する（それぞれ「アルケニル」または「アルキニル」と呼ばれる）。代表的な直鎖状および分枝状アルケニルはエチレニル、プロピレニル、1−ブテニル、2−ブテニル、イソブチレニル、1−ペンテニル、2−ペンテニル、3−メチル−1−ブテニル、2−メチル−2−ブテニル、2,3−ジメチル−2−ブテニルなどであり、代表的な直鎖状および分枝状アルキニルはアセチレニル、プロピニル、1−ブチニル、2−ブチニル、1−ペンチニル、2−ペンチニル、3−メチル−1−ブチニルなどである。
【０００９】
本明細書において、「アルコキシ」は酸素架橋を通して結合するアルキル部分(すなわち−Ｏ−アルキル)、例えばメトキシ、エトキシなどである。
【００１０】
本明細書において、「アルキルチオ」は硫黄架橋を通して結合するアルキル部分(すなわち−Ｓ−アルキル)、例えばメチルチオ、エチルチオなどである。
【００１１】
本明細書において、「ジアルキルアミノ」は２個のアルキルで置換されたアミノである。
【００１２】
本明細書で使用される「置換された」なる用語は少なくとも１個の水素原子がある置換基で置換された上記基の何れかを意味する。置換される場合、本発明の範囲内の「置換基」にはハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ハロアルキル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、複素環、置換複素環、複素環アルキル、置換複素環アルキル、−NRaRb、−NRaC(=O)Rb、−NRaC(=O)NRaNRb、−NRaC(=O)ORb、−NRaSO2Rb、−ORa、−C(=O)Ra、−C(=O)ORa、−C(=O)NRaRb、−OC(=O)NRaRb、SH、−SRa、−SORa、−S(=O)Ra、−OS(=O)Ra、−S(=O)ORaがあるが、ここでRaおよびRbは同一であるか、または異なり、独立して水素、アルキル、ハロアルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換ヘテロアリールアルキル、複素環、置換複素環、複素環アルキルまたは置換複素環アルキルである。
【００１３】
本明細書において、「アリール」は未置換の、あるいはモノ−、ジ−、トリ−、テトラ−またはペンタ−置換フェニルであり、前記置換基はハロゲン、場合により置換されるC1-4アルキル、C2-4アルキル、C1-4アルコキシ−C1-4アルキル、置換C1-4アルコキシ−C1-4アルキル、C1-4アルキルチオC1-4アルキル、ヒドロキシC1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、アルキルまたはアリールアミド、カルボキシ−C1-4アルキル、アルキルまたはアリールスルホンアミド、アセチル、ホルミル、カルボキシ、シアノ、ニトロおよびアミノ；あるいは場合により置換されるフェニル、アルコキシフェニル、チオフェニル、フリル、ナフチル、3,4−メチレンジオキシフェニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、チアナフチル、1−チアントレニル、1−ベンジル−2−ベンズイミダゾリルおよびフェロセニルからなる群より選択される。
【００１４】
本明細書において、「アルキルアリール」は未置換の、あるいはモノ−、ジ−またはトリ−置換C1-4アルキルフェニルであり、前記置換基はハロゲン、C1-4アルキル、置換C1-4アルキル、C2-4アルケニル、C1-4アルコキシ−C1-4アルキル、置換C1-4アルコキシ−C1-4アルキル、C1-4アルキルチオC1-4アルキル、ヒドロキシC1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、シアノ、ニトロおよびアミノ；あるいは場合により置換される3,4−メチレンジオキシベンジルからなる群より選択される。
【００１５】
好ましい本発明の化合物は：
1−[2−(4−モルホリニル)−1−フェニルエチル]−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン、
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン、
4−フェニル−2−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−3(2H)−ピリダジノン、
1−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン)、
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−ブロモ−2(1H)−ピリジノン、
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−5−ブロモ−2(1H)−ピリジノン、
5−ブロモ−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−4(3H)−ピリミジノン、
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−(3,4−ジクロロフェニル)−2(1H)−ピリジノン、
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−5−(3,4−ジクロロフェニル)−2(1H)−ピリジノン、
5−(3,4−ジクロロフェニル)−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−4(3H)−ピリミジノン、
3−[(4−メチルフェニル)アミノ]−1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−2(1H)−ピリジノン
である。
【００１６】
最も好ましい本発明の化合物は：
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−(3,4−ジクロロフェニル)−2(1H)−ピリジノン、
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン、
1−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン
である。
【００１７】
有機酸および無機酸を使用して非毒性の本発明の化合物の薬学的に許容しうる酸付加塩を生成することができる。代表的な酸は硫酸、硝酸、リン酸、シュウ酸、塩酸、ギ酸、臭化水素酸、クエン酸、酢酸、乳酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジアセチル酒石酸、パルモ酸、エタンジスルホン酸、スルファミン酸、コハク酸、プロピオン酸、グリコール酸、リンゴ酸、グルコン酸、ピルビン酸、フェニル酢酸、4−アミノ安息香酸、アントラニル酸、サリチル酸、4−アミノサリチル酸、4−ヒドロキシ安息香酸、3,4−ジヒドロキシ安息香酸、3,5−ジヒドロキシ安息香酸、3−ヒドロキシ−2−ナフトエ酸、ニコチン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、スルファニル酸、ナフタレンスルホン酸、アスコルビン酸、シクロヘキシルスルファミン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸である。これらの塩は当該技術分野で知られている方法により容易に製造される。
【００１８】
本発明の化合物の好ましい溶媒和物は水和物である。
【００１９】
医薬製剤
第二の見地において、本発明は活性成分として治療的に有効な量の遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態でのエナンチオマーまたはラセミ化合物としての式１の化合物を場合により希釈剤、賦形剤または不活性担体と一緒に含有する医薬製剤を提供する。
【００２０】
本発明によれば、本発明の化合物は一般に薬学的に許容しうる投与形態として遊離塩基またはその薬学的に許容しうる非毒性酸付加塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、乳酸塩、酢酸塩、リン酸塩、硫酸塩、スルファミン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩などのような活性成分を含有する医薬製剤の形態で経口的に、経腸的に、または注射により投与される。投与形態は固体、半固体または液体の製剤である。通常、活性物質は注射用製剤については製剤の0.1〜99重量％、特に0.5〜20重量％、また経口投与に適した製剤については0.2〜50重量％を構成する。
【００２１】
経口的に使用される投与単位形態の本発明の化合物を含有する医薬製剤の製造では、選択した化合物を固体状賦形剤、例えばラクトース、サッカロース、ソルビトール、マンニトール；ポテトスターチ、コーンスターチまたはアミロペクチンのようなスターチ、セルロース誘導体；ゼラチンまたはポリビニルピロリドンのような結合剤、およびステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ポリエチレングリコール、ろう、パラフィンなどのような潤滑剤と混合し、次に圧縮して錠剤にすることができる。コーティング錠が必要な場合、上記のようにして製造したコアーを例えばアラビアゴム、ゼラチン、タルカム、二酸化チタンなどを含有する濃縮糖溶液で被覆することができる。別法として、錠剤は容易に揮発する有機溶媒または有機溶媒の混合物中に溶解した当業者に知られているポリマーで被覆することができる。種々の活性物質または様々な量の活性化合物を含有する錠剤を容易に識別するために、これらのコーティングに染料を加えることができる。
【００２２】
軟質ゼラチンカプセル剤の製造では、活性物質を例えば植物油またはポリエチレングリコールと混合することができる。硬質ゼラチンカプセル剤は上記の錠剤用賦形剤、例えばラクトース、サッカロース、ソルビトール、マンニトール、スターチ（例えばポテトスターチ、コーンスターチまたはアミロペクチン）、セルロース誘導体またはゼラチンを使用して活性物質の顆粒を含有することができる。さらに、液体または半固体の薬剤を硬質ゼラチンカプセル剤に充填することができる。
【００２３】
経腸的に使用される投与単位は液剤もしくは懸濁剤、または活性物質を中性脂肪基剤と混合して含有する坐剤、もしくは活性物質を植物油もしくはパラフィン油と混合して含有するゼラチン経腸カプセル剤の形態とすることができる。経口的に使用される液状製剤はシロップ剤または懸濁剤の形態、例えば約0.1重量％〜約20重量％の上記活性物質を含有し、残りは糖とエタノール、水、グリセロールおよびプロピレングリコールの混合物からなる液剤である。場合により、このような液状製剤は着色剤、芳香剤、サッカリンおよび増粘剤としてのカルボキシメチル−セルロースまたは当業者に知られている他の賦形剤を含有することができる。
【００２４】
非経口的に使用される注射用液剤は好ましくは約0.1〜約10重量％の濃度の活性物質の水溶性の薬学的に許容しうる塩の水溶液として製造することができる。これらの液剤は安定剤および／または緩衝剤を含有することもでき、好都合には様々な投与単位のアンプル剤として提供することができる。
【００２５】
ヒトの治療的処置における本発明の化合物の適当な１日量は経口投与で約0.01〜100mg／kg体重であり、非経口投与で0.001〜100mg／kg体重である。
【００２６】
医療および製薬上の使用
本発明の式(1)、(2)および(3)のピリジノンに関連した複素環誘導体はκ−オピオイド受容体に対して有意なアゴニスト活性を示し、そのため鎮痛剤、抗炎症剤、利尿剤、鎮咳薬、麻酔薬、もしくは神経保護剤としてまたは哺乳動物の患者、特にヒトの卒中もしくは機能性腸疾患を治療するための薬剤として有用である。
【００２７】
一般合成
本発明の式(1)のκ−オピオイド受容体アゴニストは様々な合成法により製造することができる。
【００２８】
式(1)の化合物は製造法Ａ−Ｉに記載のようにして複素環式アミド化合物(2)を還元し、次に場合によりR5、R8およびR9で使用された保護基を脱保護することにより製造することができる。
【００２９】
製造法Ａ−Ｉ
【化４】
2004528375.tif 000006
【００３０】
製造法Ａ−Ｉでは、当業者に知られている還元法を使用することができる。例えば、複素環式アミド化合物(3)をボランジメチルスルフィドで還元することができる。反応は乾燥テトラヒドロフランのような適当な不活性反応溶媒中、０℃〜25℃の温度、好ましくは25℃で１時間〜24時間行なわれる。別法として、複素環式アミド化合物(3)の還元はローソン試薬を使用し、次にラネーニッケルで還元してアミド化合物(3)を相当するチオアミドに変換することにより行なわれる。この方法の条件は当業者により適当に選択される。
【００３１】
R5、R8またはR9で保護基が使用される場合、保護基は選択された特定の保護基に適した方法により除去される。典型的な保護基はｔ−ブチルジメチルシリルである。これは例えばフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム、水性フッ化水素または三フッ化ホウ素、好ましくはフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムからのフッ化物イオンで処理することにより除去することができる。他の使用される保護基はメチル−およびｔ−ブチル−エステルである。メチルエステルは塩基が触媒する加水分解により除去することができる。適当な塩基触媒は水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、水酸化バリウムまたはカリウムヘキサメチルシラノエート、好ましくは水酸化リチウムである。ｔ−ブチルエステルは酸が触媒する加水分解により除去することができる。適当な酸触媒はギ酸、トリフルオロ酢酸、酢酸、臭化水素またはｐ−トルエンスルホン酸、好ましくはトリフルオロ酢酸である。
【００３２】
別法として、式(1)の化合物は製造法Ａ−IIに従って複素環式アミド化合物(4)をミツノブ反応条件または塩基性条件下でアルキル化し、次に場合によりR5、R8またはR9で使用された保護基を除去することにより得られる。
【００３３】
式(2)の化合物もまた製造法Ａ−IIに記載のミツノブ反応条件下で複素環式アミド化合物(4)をアルキル化することにより得られる。
【００３４】
製造法Ａ−II
【化５】
2004528375.tif 000007
【００３５】
複素環式アミド化合物(4)をミツノブ反応条件下でアルキル化することができ、アミド化合物(4)とアルキルアルコール(5)（式中、R5、R6、R7、R8およびR9は前記で定義された通りである）、トリフェニルホスフィンまたはトリブチルホスフィン、およびジエチルアゾジカルボキシラート、ジイソプロピルアゾジカルボキシラートまたは1,1'−アゾビス(N,N−ジメチルホルムアミド)、好ましくはトリブチルホスフィンおよび1,1'−アゾビス(N,N−ジメチルホルムアミド)との反応は適当な不活性反応溶媒中で行なわれる。適当な不活性反応溶媒は例えばテトラヒドロフラン、ジメトキシエタン、ジエチルエーテルまたはヘキサンである。反応は０℃〜25℃の温度、好ましくは25℃で30分間〜24時間行なわれる。最後に、R5、R8またはR9で保護基が使用される場合、保護基は製造法Ａ−Ｉに記載の反応条件を使用して選択された特定の保護基に適した方法により除去される。
【００３６】
式(2)の化合物は製造法Ａ−IIに記載のミツノブ反応条件下で複素環式アミド化合物(4)をアルキル化することにより得られる。アミド化合物(4)およびアルキルアルコール(5)の構造に応じて、式(1)のＮ−アルキル化生成物および式(2)のＯ−アルキル化生成物が100：１〜10：１の比で得られる。トリフェニルホスフィンおよびジエチルアゾジカルボキシラートの使用による式(2)のＯ−アルキル化生成物の生成が好ましい。
【００３７】
さらに、複素環式アミド化合物(4)は塩基性条件下でアルキル化することにより得られる。例えば、式(1)の化合物はアミド化合物(4)をハロゲン化アルキル(6)（式中、R5、R6、R7、R8およびR9は前記で定義された通りである）でアルキル化することにより得られる。典型的な方法では、アミド化合物(4)をナトリウム、水素化ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウムまたはカリウムヘキサメチルジシラザン、好ましくは水素化ナトリウムのような塩基、次に不活性反応溶媒中でハロゲン化アルキル(4)と反応させる。適当な不活性反応溶媒は例えばジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトニトリルまたはテトラヒドロフランである。反応は０℃〜150℃の温度、好ましくは０℃〜80℃で30分間〜48時間行なわれる。
【００３８】
アミド化合物(4)は商業的に入手できる既知化合物であり、また文献、例えばJ. Chem. Soc., PerkinTrans., 1, 1627(1985年)；J. Med. Chem., 24, 1475(1981年)；J. Heteroc yclic Chem., 23, 1071(1986年)に記載されているような既知方法に従って製造することができる。
【００３９】
さらに、式(1)の化合物は製造法Ａ−IIIに従って複素環式臭化物化合物(7)または(8)とアリールボロン酸とのパラジウムが触媒するカップリング反応により得られる。
【００４０】
製造法Ａ−III
【化６】
2004528375.tif 000008
【００４１】
典型的な方法では、臭化物化合物(7)または(8)をそれぞれアリールボロン酸R1B(OH)2またはR3B(OH)2（式中、R1およびR3は前記で定義された通りである）と適当なパラジウム源および塩基の存在下で反応させる。適当なパラジウム源はPd(OAc)2、Pd(PPh3)4、PdCl2(PPh3)2、Pd2(dba)3またはPdCl2(dppf)、好ましくはPd(OAc)2またはPd(PPh3)4である。様々な塩基、例えば水性の炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化バリウム、フッ化セシウムまたはリン酸カリウムを使用することができる。非水性条件下でも多くの塩基、例えばリン酸カリウム、炭酸セシウム、フッ化セシウム、フッ化カリウム、トリエチルアミンおよびジイソプロピルエチルアミンを使用することができる。好ましくは水性炭酸カリウムが使用される。反応は不活性雰囲気下、不活性反応溶媒、例えばジオキサン、アセトン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、トルエンまたはジメチルホルムアミド、好ましくはアセトン中、25℃〜120℃の温度、好ましくは50℃〜110℃で１時間〜48時間行なわれる。
【００４２】
臭化物化合物(7)および(8)は文献、例えば「有機合成」, Wiley:NewYork, コレクション第V巻, 346(1973年)；J. Am. Chem. Soc., 104, 4141(1982年)；J. Org. Chem., 50, 3073(1985年)；およびJ. Chem. Soc., 3478(1955年)に記載の方法に従って商業的に入手できる2−ヒドロキシピリジンまたは3H−ピリミジン−4−オンから合成される。この後、アルキルアルコール化合物(5)またはハロゲン化アルキル化合物(6)による、すなわち製造法Ａ−IIに記載の反応条件を使用するアルキル化が行なわれる。
【００４３】
ＡがNHである式(1)の化合物は製造法Ａ−IVに従って複素環式臭化物化合物(7)のパラジウムが触媒するアミノ化により得られる。この製造法を使用して複素環式臭化物化合物(8)から出発してＢがNHである式(1)の化合物を得ることができる。
【００４４】
製造法Ａ−IV
【化７】
2004528375.tif 000009
【００４５】
典型的な方法では、複素環式臭化物化合物(7)または(8)をそれぞれアミンR1NH2またはR3NH2（式中、R1およびR3は前記で定義された通りである）と適当なパラジウム源、キレート化リガンドおよび塩基の存在下で反応させる。当業者はこの方法に使用される条件を適切に選択する。好ましくは、パラジウム源としてPd(OAc)2またはPd2(dba)3が使用され、キレート化剤としてBINAPが使用され、そして塩基としてカリウムt−ブトキシドまたは炭酸セシウムが使用される。反応は不活性雰囲気下、不活性反応溶媒、例えばジオキサン、アセトン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、トルエンまたはジメチルホルムアミド、好ましくはジオキサン中、25℃〜120℃の温度、好ましくは50℃〜85℃で１時間〜48時間行なわれる。臭化物化合物(7)および(8)は上記の製造法Ａ−IIIと同様にして得られる。
【００４６】
R6およびR7がＨであり、R8およびR9が窒素と一緒になって場合によりヒドロキシ基で置換される５、６または７−員の複素環を形成する式(1)の化合物は製造法Ａ−Ｖ、パートＩ〜IVに記載のような固相反応工程により得られる。
【００４７】
製造法Ａ−Ｖ(パートＩ)
【化８】
2004528375.tif 000010
【００４８】
製造法Ａ−Ｖでは、当業者に知られている固相化学の一般法が使用される。典型的な方法では、アルコール化合物をブチルジエチルシランリンカーにより固体支持体に結合させる（パートＩ）。好ましくは、固体支持体はRhCl(PPh3)3を使用してNMPのような適当な不活性反応溶媒中、アルコール化合物で処理される。反応は25℃〜60℃の温度、好ましくは60℃で30分間〜12時間行なわれる。次に、支持体に結合したアミン(9)をエポキシド化合物と反応させて支持体に結合したアルコール(10)を得る。反応はエポキシド化合物だけと、または適当な不活性反応溶媒、例えばジメチルホルムアミドまたはNMP中、25℃〜100℃の温度、好ましくは60℃〜80℃で１時間〜12時間行なわれる。
【００４９】
製造法Ａ−Ｖ(パートII)
【化９】
2004528375.tif 000011
【００５０】
支持体に結合したアルコール(10)を製造法Ａ−IIIに記載のミツノブ反応条件下、複素環式臭化物化合物(13)または(14)でアルキル化して、それぞれ相当する支持体に結合した複素環式臭化物(11)または(12)を得る(パートII)。
【００５１】
製造法Ａ−Ｖ(パートIII)
【化１０】
2004528375.tif 000012
【００５２】
支持体に結合した複素環式臭化物化合物(11)および(12)とアリールボロン酸R1B(OH)2またはR3B(OH)2（式中、R1およびR3は前記で定義された通りである）のパラジウムが触媒する結合は製造法Ａ−IIに記載の条件下で行なうことができる。好ましくは、Pd(PPh3)4がパラジウム源として、また炭酸カリウムが塩基として使用される。最後に、式(1)の化合物を例えばピリジンとMeOSiMe3中のフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムからのフッ化物イオンにより、または好ましくはテトラヒドロフランおよび水中で酢酸を使用する酸触媒加水分解により固体支持体から分解することができる。
【００５３】
製造法Ａ−Ｖ(パートIV)
【化１１】
2004528375.tif 000013
【００５４】
さらに、支持体に結合した臭化物化合物(11)および(12)のパラジウムが触媒するアミン化合物R1NH2またはR3NH2（式中、R1およびR3は前記で定義された通りである）によるアミノ化は製造法Ａ−IVに記載の条件下で行なうことができる（パートIV）。最後に、式(1)の化合物を上記の製造法Ａ−Ｖ、パートIIIに記載のようにして固体支持体から分解することができる。
【００５５】
本発明において、製造法Ａ−Ｉで使用される式(3)の化合物は製造法Ｂ−Ｉに記載のようにして複素環式アミド化合物(4)をアルキル化し、保護基Ｐを除去し、相当するカルボン酸化合物(15)をアミンと結合させることにより得られる。
【００５６】
製造法Ｂ−Ｉ
【化１２】
2004528375.tif 000014
【００５７】
この方法では、当業者に知られている標準アルキル化法を使用して式(4)の複素環式アミド化合物をアルキル化剤でアルキル化する。好ましくは、上記の製造法Ａ−IIのアルキル化条件が使用される。保護基Ｐは選択された特定の保護基に適した方法により除去される。典型的な保護基はメチルまたはエチルである。これらは塩基触媒加水分解により除去することができる。適当な塩基触媒は水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、水酸化バリウムまたはカリウムヘキサメチルシラノエート、好ましくは水酸化リチウムである。次に、当業者に知られている標準カップリング法を使用してカルボン酸化合物(16)をアミンと反応させる。この方法では、カルボン酸化合物(16)をカップリング試薬、次に場合により塩基の存在下でアミンと反応させる。適当なカップリング試薬はTBTU、PyBOP、DCC、HOAtまたはHATUである。適当な不活性反応溶媒は例えばジメチルホルムアミドまたはジクロロメタンである。反応は−10℃〜100℃の温度、好ましくは0℃〜25℃で２時間〜45時間行なわれる。式(3)の化合物はまた、カルボン酸化合物(16)から他の方法により、例えば相当する酸塩化物に変換し、さらにアミンと反応させることにより得られる。この方法の条件は当業者により適当に選択される。アミド化合物(4)は上記の製造法Ａ−IIと同様にして得られる。
【００５８】
本発明において、製造法Ａ−IIで使用されるアルキルアルコール化合物(5)およびハロゲン化アルキル化合物(6)は次の製造法Ｃ−Ｉにより得られる。
【００５９】
製造法Ｃ−Ｉ
【化１３】
2004528375.tif 000015
【００６０】
この方法において、アルキルアルコール化合物(5)は相当するエポキシドからアミン化合物HNR8R9（式中、R8およびR9は前記で定義された通りである）と反応させることにより得られる。反応はアミン化合物だけと、または適当な不活性反応溶媒中、25℃〜100℃の温度、好ましくは60℃〜80℃で１時間〜12時間行なわれる。適当な不活性反応溶媒は例えばメタノール、エタノール、プロパノールまたはアセトニトリルである。ハロゲン化アルキル化合物(6)は当業者に知られている標準条件下で塩素化することにより得られる。エポキシド化合物は商業的に入手できる既知化合物であり、また文献に記載されているような既知方法に従って製造することができる。
【００６１】
別法として、アルキルアルコール化合物(5)は製造法Ｃ−IIに従ってα−ハロケトン化合物を置換し、次に還元することにより得られる。
【００６２】
製造法Ｃ−II
【化１４】
2004528375.tif 000016
【００６３】
典型的な方法では、α−ハロケトンを適当な不活性反応溶媒、例えばテトラヒドロフラン中でアミンHNR8R9（式中、R8およびR9は前記で定義された通りである）と反応させ、次にメタノールまたはエタノールのような適当な溶媒中で還元剤としてNaBH4を使用して還元する。この反応は０℃〜25℃の温度で30分間〜24時間行なわれる。
【００６４】
α−ハロケトン化合物は商業的に入手できる既知化合物であり、また文献に記載されているような既知方法に従って製造することができる。
【００６５】
上記の製造法で示した式(1)、(2)および(3)の化合物と中間体は再結晶またはクロマトグラフィー精製のような慣用の方法により単離および精製される。
【００６６】
本発明の化合物は少なくとも２個の不斉中心を有するので、これらは種々の立体異性体または配置で存在することができる。したがって、本化合物は個々の(＋)−および(−)−光学活性体、並びにこれらの混合物として存在することができる。このような形態はすべて本発明の範囲に包含される。個々の異性体は既知方法により、例えば最終生成物またはその中間体の製造において立体選択的反応またはクロマトグラフィー分離法により得られる。
【００６７】
〔実施例〕
次の実施例により本発明を詳しく説明する。しかしながら、本発明はこれらの実施例の詳細に制限されないことは理解されよう。1Hおよび13C核磁気共鳴スペクトル（NMR）はBruker NMR分光光度計によりCDCl3、DMSO−d6またはMEOH−d4中で測定し、特に断りがなければピーク位置はテトラメチルシランからダウンフィールドの百万分率(PPM)で表す。ピークを次のように表示する：ｓ、一重項；ｄ、二重項；ｔ、三重項；ｍ、多重項；Br、幅広い。カラムクロマトグラフィーはシリカゲル60（0.040〜0.063mm、Merk）を使用して行なった。
【００６８】
〔製造例〕
製造例１
3−(4−トリフルオロメチルフェニル)ピリジン
乾燥THF(40ml)中における4−ブロモ−(トリフルオロメチル)ベンゼン(12ｇ、54ミリモル)の溶液にマグネシウム削り屑(1.19ｇ、49ミリモル)を加え、混合物を窒素雰囲気下、マグネシウムがなくなるまで加熱還流した。室温まで冷却し、反応混合物を氷−水浴で冷却した乾燥THF(60ml)中における3−ブロモピリジン(7.11ｇ、45ミリモル)およびビス(トリフェニルホスフィン)ニッケル(II)クロライド(0.52ｇ、１ミリモル)の溶液に加えた。添加の間、温度を10℃以下に維持した。添加が終了した後、反応混合物を室温にし、36時間攪拌した。得られた混合物を水性HCl(１M)に注ぎ、エーテルで洗浄した。水性部分を水性NaOHで中和し、EtOAcで２回抽出した。合一した有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥(MgSO4)し、濃縮した。生成物をカラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン；１：３)により精製して3−(4−トリフルオロメチルフェニル)ピリジン(3.1ｇ、30％)をふわふわした白色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ7.13 (ddd, J=7.7, 4.7, 0.7 Hz, 1 H), 7.73 (dd, J=16.8,8.7, 4 H), 7.91 (m, 1 H), 8.67 (dd, J=5.0, 1.7 Hz, 1 H), 8.88 (d, J=1.7 Hz, 1 H)。
【００６９】
製造例２
3−(4−トリフルオロメチルフェニル)ピリジン1−オキシド
3−(4−トリフルオロメチルフェニル)ピリジン(3.0ｇ、13ミリモル)、酢酸(30ml)および35％過酸化水素(３ml)の混合物を70〜80℃で18時間攪拌した。混合物を冷却し、濃縮した。残留物をトルエンと一緒に２回共沸させ、Et2Oおよびヘプタンから結晶させることにより精製して3−(4−トリフルオロメチルフェニル)ピリジン1−オキシド(2.2ｇ、68％)を白色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ7.44 (dd, J=7.8, 6.3 Hz, 1 H), 7.56 (d, J=8.3 Hz, 1 H),7.69 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.79 (d, J=8.3 Hz, 2 H), 8.33 (d, J=6.3 Hz, 1 H), 8.60(t, J=1.5 Hz, 1 H)。
【００７０】
製造例３
3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン
3−(4−トリフルオロメチルフェニル)ピリジン1−オキシド(2.0ｇ、8.3ミリモル)を無水酢酸(100ml)に取り、還流温度で４時間加熱した。混合物を冷却し、濃縮し、残留する油状物をエタノール(50ml)に取り、脱色木炭で処理し、セライトを通してろ過した。混合物を部分的に蒸発させて結晶させた。得られた白色の結晶の3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン(0.97ｇ、49％)をろ過により集めた。追加の生成物(0.16ｇ、８％)をEtOHおよびEt2Oからの結晶化により得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ6.32 (t, J=6.7 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J=6.4, 2.0 Hz, 1 H), 7.74 (m, 3 H), 7.95 (d, J=8.1 Hz, 2 H), 11.90 (b, 1 H)。
【００７１】
製造例４
5−エトキシジヒドロ−3−フェニル−2(3H)−フラノン
THF(50ml)中におけるジイソプロピルアミン(6.7ml、49.0ミリモル)の混合物にｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液(100ml、1.6M)を−78℃で加えた。−78℃で10分間攪拌した後、THF(20ml)中におけるフェニル酢酸(5.95ｇ、44.0ミリモル)の溶液を加えた。冷却浴を取り外し、反応混合物を40分間にわたって室温にした後、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタール(13.4ml、89.0ミリモル)を加え、反応混合物を一晩加熱還流した。反応混合物を冷却し、水(400ml)に注ぎ、Et2O(50ml)で抽出した。水性部分を濃HClで酸性にし、EtOAc(100ml)で２回抽出した。合一したEtOAc抽出物を乾燥(Na2SO4)し、濃縮した。得られた褐色の油状物を減圧(高真空ポンプ、沸点110〜115℃)下で蒸留した。結晶化をこれらの条件下で行なって所望の生成物を得た。混合物をEtOAcに取り、飽和NaHCO3およびブラインで洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、濃縮して純粋な5−エトキシジヒドロ−3−フェニル−2(3H)−フラノン(3.16ｇ、35％)を淡黄色の油状物として得た。
【００７２】
製造例５
4,5−ジヒドロ−4−フェニル−3(2H)−ピリダジノン
酢酸(10ml)および水(7ml)中における5−エトキシジヒドロ−3−フェニル−2(3H)−フラノン(3.1ｇ、15.0ミリモル)の混合物にヒドラジン水和物(2.1ml、43.0ミリモル)を加え、混合物を２時間加熱還流した。混合物を室温まで冷却し、部分的に濃縮してAcOHを除去し、次に飽和NaHCO3に注ぎ、EtOAcで２回抽出した。合一した有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥(Na2SO4)し、濃縮して黄色の固体を得た。EtOAcおよびヘプタンから結晶化させて4,5−ジヒドロ−4−フェニル−3(2H)−ピリダジノン(1.43ｇ、55％)を淡黄色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ2.74-2.95 (m, 4 H), 3.74 (t, J=8.8 Hz, 1 H), 7.34 (m, 5 H), 8.64 (b, 1 H)。
【００７３】
製造例６
4−フェニル−3(2H)−ピリダジノン
DMSO(12.5ml)および水(0.5ml)中における4,5−ジヒドロ−4−フェニル−3(2H)−ピリダジノン(0.55ｇ、3.0ミリモル)の混合物にNBS(1.50ｇ、8.0ミリモル)を0℃で加えた。反応混合物を室温にし、得られたオレンジ色の混合物を室温でさらに２時間攪拌した後、飽和NaHCO3に注いだ。生成物をEtOAcで２回抽出し、合一した抽出物をブラインで洗浄し、乾燥(MgSO4)し、濃縮した。カラムクロマトグラフィーにより精製して4−フェニル−3(2H)−ピリダジノン(0.065ｇ、12％)を白色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ7.45 (m, 3 H), 7.54 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 7.80 (m, 2 H), 7.96 (d, J=3.9 Hz, 1 H)。
【００７４】
製造例７
3−ブロモ−2(1H)−ピリジノン
水性KBr(１M、200ml)中における2−ヒドロキシピリジン(12.8ｇ、135.0ミリモル)の混合物に水性KBr(１M、300ml)中における臭素(21.5ｇ、135.0ミリモル)の溶液を10分間にわたって加えた。室温で24時間攪拌した後、この混合物から緑色の沈殿物の3,5−ジブロモ−2(1H)−ピリジノンが析出し、それをろ過により除去した。得られた溶液を半分の容量まで濃縮して所望の生成物を沈殿させた。灰色の沈殿物をろ過により集め、アセトニトリルから再結晶して3−ブロモ−2(1H)−ピリジノン(5.1ｇ、22％)を僅かに黄色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ6.13 (t, J=6.0 Hz, 1 H), 7.44 (dd, J=6.0, 1.2 Hz, 1 H), 7.88 (dd, J=6.0, 1.2 Hz, 1 H), 12.5 (b, 1 H)。
【００７５】
製造例８
5−ブロモ−2(1H)−ピリジノン
酢酸(50ml)中における2−ヒドロキシピリジン(4.8ｇ、50.0ミリモル)の混合物を室温でNBS(9.4ｇ、53.0ミリモル)により４時間処理した。混合物を濃縮し、エタノールと一緒に２回共沸させた後、得られた固体を温エタノール(100ml)に取った。室温まで冷却した後、沈殿物をろ過により除去し、エタノールから再結晶して5−ブロモ−2(1H)−ピリジノン(5.1ｇ、59％)を淡褐色の結晶性固体として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ6.34 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 7.51(dd, J=9.0, 2.4 Hz, 1 H), 7.54 (d, J=2.4 Hz, 1 H)。
【００７６】
製造例９
5−ブロモ−4(3H)−ピリミジノン
5−ブロモ−ピリミジン(7.9ｇ、50.0ミリモル)を室温で還流凝縮器を備えたフラスコ中のアセトン(50ml)に取った。過酢酸(20.8mlの32％酢酸溶液)および濃硫酸(2.8ml)の混合物を加え、その混合物を室温で攪拌した。反応混合物は熱くなり、２〜３分後に還流し始めた。熱を加えず、反応混合物を周囲温度で２時間攪拌した。この間に混合物は冷め、白色の沈殿が生成した。混合物を氷−水浴で冷却し、生成物(7.7ｇ、70％；ヘミ硫酸塩として)をろ過により集めた。ヘミ硫酸塩を水に取り、５M NaOHでpH ７まで中和した。混合物を４℃まで１時間冷却し、得られた沈殿物をろ過により集め、冷水で洗浄して5−ブロモ−4(3H)−ピリミジノン(4.5ｇ、52％)を白色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.20 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 13.10 (b, 1 H)。
【実施例１】
【００７７】
2−オキソ−α−フェニル−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−1(2H)−ピリジン酢酸エチルエステル
乾燥DMF(10ml)中における3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン(450mg、1.9ミリモル)の混合物を０℃で水素化ナトリウム(90mg、3.7ミリモル)により処理した。直ちに冷却浴を取り外した。室温で45分間攪拌した後、エチルα−ブロモフェニルアセテート(550mg、2.3ミリモル)を加え、混合物を室温で一晩攪拌した。混合物をEtOAcおよび１M HClに分配し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥(MgSO4)し、濃縮した。混合物をカラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン；１：２)により精製して黄色の固体を得、それをEtOAcおよびヘプタンから結晶させて2−オキソ−α−フェニル−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−1(2H)−ピリジン酢酸エチルエステル(588mg、78％)を得た。
1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ1.29 (t, J=7.3 Hz, 3 H), 4.32 (q, J=7.3 Hz, 2 H), 6.24 (t, J=7.3 Hz, 1 H), 6.76 (s, 1 H), 7.12 (dd, J=7.3, 2.0 Hz,1 H), 7.36-7.51 (m, 5H), 7.54 (dd, J=6.8, 2.0 Hz, 1 H), 7.67 (d, J=8.3 Hz, 2 H), 7.84 (d, J=8.3 Hz, 2 H)。
【実施例２】
【００７８】
2−オキソ−α−フェニル−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−1(2H)−ピリジン酢酸
ジオキサン(６ml)および水(１ml)中における2−オキソ−α−フェニル−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−1(2H)−ピリジン酢酸エチルエステル(557mg、1.4ミリモル)の混合物に水酸化リチウム(65mgの一水和物、2.0ミリモル)を40℃で加えた。混合物を40℃でさらに１時間攪拌した後、追加分の水(３ml)を加え、攪拌を室温で一晩続けた。混合物を濃縮し、２M HClで酸性にし、得られた濁った混合物をEtOAcで２回抽出した。合一した有機層をブラインで洗浄し、乾燥(MgSO4)し、濃縮した。EtOAcおよびヘプタンから結晶化させて2−オキソ−α−フェニル−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−1(2H)−ピリジン酢酸(0.465ｇ、90％)を無色の固体として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ6.30 (t, J=7.0 Hz, 1 H), 6.63 (s, 1 H), 7.09 (dd, J=7.0, 2.0Hz, 1 H), 7.30-7.50 (m, 5 H), 7.56 (dd, J=13.0, 2.0 Hz, 1 H), 7.65 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 7.78 (d, J=8.1 Hz, 2 H)。
【実施例３】
【００７９】
1−[2−(4−モルホリニル)−2−オキソ−フェニルエチル]−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン
DMF(4ml)中における2−オキソ−α−フェニル−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−1(2H)−ピリジン酢酸(125mg、0.33ミリモル)の混合物をTBTU(118mg、3.7ミリモル)、次に4−モルホリン(0.146ｇ、1.7ミリモル)で処理し、混合物を室温で62時間攪拌した。混合物をEtOAcで希釈し、飽和NaHCO3およびブラインで連続して洗浄し、乾燥(MgSO4)し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン；２：１)により精製して1−[2−(4−モルホリニル)−2−オキソ−フェニルエチル]−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン(100mg、68％)を無色の油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ3.30-3.39 (m, 2 H), 3.56-3.72 (m, 4 H), 3.74-3.86 (m, 2 H), 6.24 (t, J=6.8 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J=7.3, 2.0 Hz,1 H), 7.38-7.54 (m, 6 H),7.66 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.82 (d, J=8.3 Hz, 2 H)。
【実施例４】
【００８０】
1−[2−(4−モルホリニル)−1−フェニルエチル]−3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン
1−[2−(4−モルホリニル)−2−オキソ−フェニルエチル]−3−フェニル−2(1H)−ピリジノン(0.100ｇ、0.23ミリモル)を乾燥THF(4.0ml)に溶解し、ボラン−ジメチルスルフィド複合体(２mlの２Mエーテル溶液、4.0ミリモル)を窒素雰囲気下、室温で加えた。室温で一晩攪拌した後、混合物をメタノールおよび２M HClで処理した。混合物を濃縮し、エタノールと一緒に２回共沸させた後、それをカラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン：アンモニア；60：40：１〜80：20：１)により精製して生成物を無色の油状物として得た。純粋な生成物をEt2Oに取り、HCl気体を溶液中で泡立たせた。水からろ過し、凍結乾燥して1−[2−(4−モルホリニル)−1−フェニルエチル]−3−フェニル−2(1H)−ピリジノン(29mg、28％)を相当するHCl塩として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ2.52 (m, 2 H), 2.69 (m, 2 H), 2.97 (s, 1 H), 3.05 (m, 1 H), 3.58-3.68 (m, 4 H), 6.28 (t, J=6.8 Hz, 1 H), 6.60 (t, J=6.8 Hz, 1 H), 7.26-7.40 (m, 6 H), 7.66 (m, 2 H), 7.86 (m, 2 H)。
【実施例５】
【００８１】
1−(2−ヒドロキシ−2−フェニルエチル)−ピロリジン
酸化スチレン(24ｇ、0.2モル)およびピロリジン(21.3ｇ、0.3モル)を一緒に還流温度で３時間加熱した。次に、混合物を蒸留して黄色の油状物を得、それを放置して固化した。生成物をヘプタンから結晶化させることにより精製して1−(2−ヒドロキシ−2−フェニルエチル)−ピロリジン(21.6ｇ、57％)を無色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.84 (m, 4 H), 2.55 (m, 3H), 2.80 (m, 3 H), 4.74 (dd, J=10.3, 2.9 Hz, 1 H), 7.26-7.44 (m, 5 H)。
【実施例６】
【００８２】
1−(2−クロロ−2−フェニルエチル)−ピロリジン
０℃でEt2O(30ml)中における塩化チオニル(3.6ｇ、30ミリモル)の激しく攪拌した溶液にEt2O(30ml)中のα−フェニル−1−ピロリジンエタノール(4.8ｇ、25ミリモル)を滴加した。冷却浴を取り外し、攪拌を室温で２時間続けた。得られた淡褐色の沈殿物をろ過し、Et2Oでよく洗浄した。生成物をアセトニトリルから再結晶により精製し(5.4ｇ、87％)、純粋な生成物をEtOAcおよび飽和NaHCO3に分配した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥(MgSO4)し、濃縮して清浄な遊離1−(2−ブロモ−2−フェニルエチル)−ピロリジンを得、それを次の工程で直接使用した。
1H NMR 400 MHz, CDCl3) δ1 80 (m, 4 H), 2.60 (m, 4 H), 2.92 (dd, J=13.2, 5.9 Hz,1 H), 3.23 (dd, J=13.2, 8.3 Hz, 1 H), 4.96 (dd, J=8.3, 5.9 Hz, 1 H), 7.30-7.46 (m, 5 H)。
【実施例７】
【００８３】
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン
実施例１に記載の方法と同様にして3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノンおよび1−(2−クロロ−2−フェニルエチル)−ピロリジンから本化合物を製造した。生成物をカラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン：アンモニア；50：50：0.5)により精製して生成物を無色の油状物として得、それをEt2Oに取り、Et2O中のHClの飽和溶液で滴加処理して1−[2−(1−ピロリジニル)−1−フェニルエチル]−3−(4−トリクロロフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノンを相当するHCl塩(0.26ｇ、58％)として得た。
1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ1.70 (m, 4 H), 2.60 (m, 2 H), 2.66 (m, 2H), 3.10 (dd, 1H), 3.24 (dd, 1 H), 6.24 (t, 1 H), 6.50 (dd, 1 H), 7.22-7.44 (m, 6 H), 7.50 (dd, 1 H), 7.68 (d, 2H), 7.86 (d, 2 H)。
【実施例８】
【００８４】
4−フェニル−2−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−3(2H)−ピリダジノン
実施例１に記載の方法と同様にして4−フェニル−3(2H)−ピリダジノンおよび1−(2−クロロ−2−フェニルエチル)−ピロリジンから本化合物を製造した。生成物をカラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン：アンモニア；50：50：0.5)により精製して生成物を無色の油状物として得、それをEt2Oに取り、Et2O中のHClの飽和溶液で滴加処理して4−フェニル−2−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−3(2H)−ピリダジノンを相当するHCl塩(0.028ｇ、19％)として得た。
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ1.73 (m, 4 H), 2.56 (m, 2 H), 2.70(m, 2 H), 2.95 (dd, J=12.4, 5.0 Hz, 1 H), 3.37 (dd, J=12.4, 10.0 Hz, 1 H), 6.55 (dd, J=9.7, 5.0 Hz, 1 H), 7.70-7.58 (m, 9 H), 7.78 (m, 2 H), 7.90 (d, J=4.0 Hz, 1 H)。
【実施例９】
【００８５】
1−[2−ヒドロキシ−2−(2−メトキシ−フェニル)−エチル]ピロリジン
THF(20ml)中におけるピロリジン(6.3ml、75ミリモル)の混合物を室温でTHF(20ml)中における2−ブロモ−2'−メトキシアセトフェノン(3.4ｇ、15ミリモル)の溶液に滴加した。室温で２時間攪拌した後、反応混合物を濃縮し、MeOH(40ml)に再び溶解した後、ホウ水素化ナトリウム(1.13ｇ、30ミリモル)を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、濃縮し、最後にCH2Cl2および水に分配した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥(MgSO4)し、濃縮して清浄な遊離1−[2−ヒドロキシ−2−(2−メトキシ−フェニル)−エチル]ピロリジン(2.26ｇ、68％)を得、それを次の工程で直接使用した。
1H NMR
【実施例１０】
【００８６】
1−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン)および2−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−ピリジン
乾燥THF(1.5ml)中における3−(4−トリフルオロメチルフェニル)−2(1H)−ピリジノン(28.7mg、0.12ミリモル)、トリブチルホスフィン(26.3mg、0.13ミリモル)および1−[2−ヒドロキシ−2−(2−メトキシ−フェニル)−エチル]ピロリジン(22.1mg、0.10ミリモル)の混合物に室温で乾燥THF(0.5ml)中における1,1'−アゾビス−(N,N−ジメチルホルムアミド) (22.4mg、0.13ミリモル)の溶液をゆっくりと加えた。混合物を室温で14時間攪拌し、次にろ過して反応中に生成したトリブチルホスフィンオキシドを除去した。Ｎ−およびＯ−アルキル化生成物の混合物をisolute SCX−SPEカラム(THF、CH2Cl2、MeOH〜NH3で飽和させたMeOH)を使用して精製した。２つの生成物を分取用HPLCにより分離して1−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン) (0.020ｇ、45％)および2−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−ピリジン(2.7mg、５％)を得た。
【００８７】
1−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−2(1H)−ピリジノン)：1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.72 (m, 4 H),2.61 (m, 2 H), 2.70 (m, 2H), 3.13 (dd, J=13.7, 6.8 Hz, 1 H), 3.28 (dd, J=13.7, 8.2 Hz, 1 H), 3.82 (s, 3 H), 6.25  (t, J=6.8 Hz, 1 H), 6.51 (t, J=4.2 Hz, 1 H), 6.89 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 6.97 (t, J=4.2 Hz, 1 H), 7.40-7.50 (m, 4 H), 7.62 (d, J=8.3 Hz, 2 H), 7.82 (d, J=8.3 Hz, 2 H)。
【００８８】
2−[1−(2−メトキシフェニル)−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−[4−(トリフルオロメチル)フェニル]−ピリジン：1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ1.56 (m, 4 H), 2.50 (m, 2H), 2.60 (m, 2 H), 3.67 (s, 3 H), 4.23 (dd, J=6.8, 5.2 Hz, 1 H), 4.61 (J=10.2, 7.3 Hz, 1 H), 4.76 (dd, J=9.5, 4.9 Hz, 1 H), 6.85-6.98 (m, 4 H), 7.30-7.58 (m, 6H), 8.17 (m, 1 H)。
【実施例１１】
【００８９】
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−ブロモ−2(1H)−ピリジノン
実施例１に記載の方法と同様にして3−ブロモ−2(1H)−ピリジノンおよび1−(2−クロロ−2−フェニルエチル)−ピロリジンから本化合物を製造した。生成物をカラムクロマトグラフィー(CH2Cl2：MeOH：アンモニア；100：１：0.5)により精製して生成物を黄色の固体として得、それを最初にEtOAcおよびヘプタンから結晶化させ、次にEt2Oに取り、Et2O中のHClの飽和溶液で滴加処理して1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−ブロモ−2(1H)−ピリジノンを相当するHCl塩(2.95ｇ、59％)として得た。
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ1.67 (m, 4 H), 2.46 (, 2 H), 2.60 (m, 2 H), 3.00 (dd, J=10.5, 7.0 Hz,1 H), 3.20 (dd, J=14.0, 7.0 Hz, 1 H), 6.02 (t, J=7.3 Hz, 1H), 6.36 (dd, J=10.5, 5.0 Hz, 1 H), 7.20-7.35 (m, 6 H), 7.62 (dd, J=7 5, 2.5 Hz, 1 H)。
【実施例１２】
【００９０】
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−(3,4−ジクロロフェニル)−2(1H)−ピリジノン
アセトン：水の１：１混合物(４ml)中における1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−ブロモ−2(1H)−ピリジノン(0.060g、0.17ミリモル)、3,4−ジクロロボロン酸(1mlの50％ THF：H2O溶液、0.26ミリモル)および炭酸カリウム(0.060ｇ、0.43ミリモル)の混合物にPdOAc2(0.8mlの８mMアセトン溶液、0.006ミリモル)を加えた。反応混合物を70℃で１時間加熱した後、それを冷却し、濃縮してアセトンを除去した。残留する混合物を飽和NaHCO3で希釈し、EtOAcで抽出した。EtOAc抽出物をブラインで洗浄し、乾燥し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン：アンモニア；60：40：0.5〜75：25：0.5)により精製して生成物を無色の油状物として得た。生成物をEt2Oに取り、Et2O中のHClの飽和溶液で滴加処理して1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−(3,4−ジクロロフェニル)−2(1H)−ピリジノンを相当するHCl塩(0.042ｇ、54％)として得た。
1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ1.78 (m, 4 H), 2.78 (m, 2 H), 2.89 (m, 2 H), 3.26 (dd, J=12.7, 5.4 Hz, 1 H), 3.46 (dd, J=12.7, 8.8 Hz, 1 H), 6.24 (t, J=6.8 Hz, 1 H), 6.43 (dd, J=9.3, 5.9 Hz, 1 H), 7.21- 7.54 (m, 9 H), 7.82 (d, J=2.0 Hz, 1 H)。
【実施例１３】
【００９１】
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−5−ブロモ−2(1H)−ピリジノン
実施例１に記載の方法と同様にして5−ブロモ−2(1H)−ピリジノンおよび1−(2−クロロ−2−フェニルエチル)−ピロリジンから42％の収率で本化合物を製造した。
1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ1.70 (m, 4 H), 2.52 (m, 2 H), 2.64 (m, 2 H), 3.02 (dd, J=13.2, 6.3 Hz, 1 h), 3.21 (dd, J=13.2, 9.8 Hz,1 H), 6.33 (dd, J=9.3, 5.9 Hz,1 H), 6.50 (d, J=9.8 Hz, 1 H), 7.24-7.38 (m, 7 H)。
【実施例１４】
【００９２】
1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−5−(3,4−ジクロロフェニル)−2(1H)−ピリジノン
THF：飽和NaHCO3の１：１混合物(４ml)中における1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−5−ブロモ−2(1H)−ピリジノン(0.080ｇ、0.23ミリモル)、4−クロロボロン酸(0.046ｇ、0.29ミリモル)の混合物にPd(PPh3)4(0.008g、0.007ミリモル)を加えた。反応混合物を4.5時間加熱還流した後、それを飽和ブラインおよびEtOAcに分配した。有機層を乾燥(Na2SO4)し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン：アンモニア；75：25：１)により精製して生成物を無色の油状物として得た。生成物をEt2Oに取り、Et2O中のHClの飽和溶液で滴加処理して1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−5−(4−クロロフェニル)−2(1H)−ピリジノンを相当するHCl塩(0.043ｇ、45％)として得た。
1H NMR (MHz,)。
【実施例１５】
【００９３】
5−ブロモ−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−4(3H)−ピリミジノン
実施例１に記載の方法と同様にして5−ブロモ−4(3H)−ピリミジノンおよび1−(2−クロロ−2−フェニルエチル)−ピロリジンから本化合物を製造した。生成物をカラムクロマトグラフィー(CH2Cl2：MeOH：アンモニア；100：１：0.5)により精製して5−ブロモ−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−4(3H)−ピリミジノン(0.26ｇ、67％)を無色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.72 (m, 4 H), 2.51 (m, 2 H), 2.61 (m, 2 H), 2.95 (dd,J=13.2, 5.4 Hz,1 H), 3.39 (dd, J=13.2, 10.7 Hz, 1 H), 6.11 (dd, J=10.3, 5.4 Hz,1 H), 7.12 (m, 5 H), 8.16 (s, 1 H), 6.17 (s, 1 H)。
【実施例１６】
【００９４】
5−(3,4−ジクロロフェニル)−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−4(3H)−ピリミジノン
実施例１３に記載の方法と同様にして5−ブロモ−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−4(3H)−ピリミジノンおよび3,4−ジクロロフェニルボロン酸から本化合物を製造した。生成物をカラムクロマトグラフィー(CH2Cl2、MeOH：アンモニア；75：25：１)により精製して生成物を無色の油状物として得、それをEt2Oに取り、Et2O中のHClの飽和溶液で滴加処理して5−(3,4−ジクロロフェニル)−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−4(3H)−ピリミジノンを相当するHCl塩(0.068ｇ、66％)として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ1.74 (m, 4 H), 2.56 (m, 2 H), 2.65 (m, 2H), 3.00 (dd, J=13.2, 5.4 Hz,1 H), 3.41 (dd, J=13.2, 10.7 Hz,1 H), 6.20 (dd, J=10.7, 5.4 Hz, 1H), 7.30- 7.73 (m, 7 H), 7.75 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 8.05 (s, 1H), 8.26 (s, 1 H).
【実施例１７】
【００９５】
3−[(4−メチルフェニル)アミノ]−1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−2(1H)−ピリジノン
オーブン乾燥したフラスコをアルゴン雰囲気下で室温まで冷却し、1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)−エチル]−3−ブロモ−2(1H)−ピリジノン(0.20ｇ、0.58ミリモル)、トルイジン(0.075ｇ、0.70ミリモル)、Pd2(dba)3(0.003ｇ、0.003ミリモル)、R−BINAP (0.005ｇ、0.008ミリモル)およびカリウムt−ブトキシド(0.077ｇ、0.80ミリモル)、次に乾燥ジオキサン(2.0ml)を入れた。反応混合物をアルゴン雰囲気下、90℃で18時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却し、EtOAcで希釈し、ろ過し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー(EtOAc：ヘプタン：NH4OH；10：10：0.3)により精製して生成物を僅かに緑色の固体として得た。生成物をEt2Oに取り、ジオキサン中の４Ｍ HCl溶液で滴加処理して3−[(4−メチルフェニル)アミノ]−1−[1−フェニル−2−(1−ピロリジニル)エチル]−2(1H)−ピリジノンを相当するHCl塩(0.16ｇ、66％)として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 1.75 (m, 4 H), 2.33 (s, 3H), 2.59 (m, 2 H), 2.67 (m, 2H), 3.12-3.27 (m, 2 H), 6.13 (t, J=7.3 Hz, 1 H), 6.47 (dd, J=7.3, 5.8 Hz, 1 H), 6.78 (dd, J=6.8, 1.5 Hz,1H), 6.94 (dd, J=7.3, 1.5 Hz, 1 H), 7.10-7.16 (m, 4 H), 7.26-7.42 (m, 5 H)。
【００９６】
化合物１の固相合成の一般法
丸底フラスコにアルゴン雰囲気下でポリスチレン−ジエチルシラン(PS−DES)樹脂(4.0g、1.35ミリモル／ｇ)、次に乾燥NMP(10ml／ｇ)中における2−ヒドロキシピロリジン(0.15M)およびRhCl(PPh3)3(3.0mM)の溶液を加えた。60℃で２時間振騰した後、樹脂をろ過により単離し、NMP(×３)、CH2Cl2(×３)およびTHF(×３)で洗浄した。次に、樹脂をスチレンオキシド(30ml)と60℃で６時間反応させた後、それをろ過により単離し、DMF(×３)、CH2Cl2(×３)およびMeOH(×３)で洗浄した。次の工程で樹脂を乾燥THF(48ml)中における3−ブロモ−2(1H)−ピリジノン(0.06M)、トリブチルホスフィン(0.065M)の混合物、次に乾燥THF(16ml)中における1,1'−アゾビス−(N,N−ジメチルホルムアミド) (0.065M)の溶液で処理し、得られた混合物を室温で14時間振騰した。樹脂をろ過により単離し、THF(×３)、DMF(×３)、CH2Cl2(×３)およびMeOH(×３)で洗浄した。樹脂(0.035ｇ、1.35ミリモル／ｇ)をDMF(14ml／１ｇの樹脂)に溶解し、K2CO3(0.5M)、Pd(PPh3)4(0.005M)およびアリールボロン酸(0.2M)を加えた。85℃で24時間振騰した後、樹脂をろ過により集め、CH2Cl2(×３)、DMF(×３)、H2O(×３)、THF(×３)およびEt2O(×３)で洗浄した。所望の生成物を80℃で14時間AcOH：THF：H2O(６：６：１) (0.5ml)により処理して樹脂から分離した。溶液をろ過して樹脂を除去し、ろ液を濃縮して粗生成物を得、それを分取用HPLCにより精製して純粋な化合物１を得た。
【００９７】
受容体結合
上記の一般法を使用して製造した本発明の化合物は当業者によく知られている標準法を使用してヒトカッパオピオイド受容体と結合する能力について試験することができる。
【００９８】
標準法の例を下記に示す。
96−ウェルフォーマットでのカッパオピオイド受容体をトランスフェクトさせた細胞膜の結合アッセイ
原理：μ、δおよびκ受容体に対する新規化合物の親和性を定量するために設計された受容体結合実験をどのように実施し、解釈するかを手順により説明する。全結合および非特異的結合を選択的オピオイド受容体放射性標識リガンドの不在および存在下で定量する。
【００９９】
カッパオピオイド受容体についての手順：
全結合および非特異的結合を１μMのアシマドリンの不在および存在下で定量し、96ウェルプレートの各ウェルに多チャンネルピペットで加える(表１参照)。
１ウェルあたり30000−50000CPMを含有する放射性リガンド125Ｉ−(D−プロ)−ダイノルフィンＡ(１−11)を加える。
膜を室温で解凍し、アッセイ緩衝液で適当な量のタンパク質となるまで希釈し、グラス／グラスで５〜10回均質化し、96ウェルプレートに加える。
プレートを１分間ボルテックスし、室温で60〜75分間インキュベートし、１分間ボルテックスし、迅速なろ過（マイクロ96ハーベスター、Skatron計器社、ノルウェー）により反応を終了させて結合体を遊離リガンドから分離する。使用するフィルター（フィルターマットＡまたはＢ、Wallac社、フィンランド）を予め0.1％ポリエチレンイミン（PEI）中に10分間浸漬し、50℃で１時間乾燥する。ろ過後、フィルターを乾燥し、シンチレーターシート（メルチレックスＡまたはＢ／HB、Wallac社、フィンランド）をフィルター（マイクロシーラー1495−021、Wallac社、フィンランド）の上で溶融する。
β−液体シンチレーションカウンター（1450マイクロベータTRILUX、Wallac社、フィンランド）でβ−線についてカウントすることにより結合したリガンドの量を測定する。その結果を１分あたりの分解数（DPM）として表す。
２つの標準、０％および100％阻害から各ウェルについて阻害率を計算する。
【０１００】
溶液：アッセイ緩衝液：
結合緩衝液（50mMのトリス、３mMのMgCl2)を＋４℃で保存する。
実験当日に0.1％BSAで新しく作る。
膜：
既知小量の膜を−70℃で保存し、緩衝液で希釈して最終濃度の10μg／試料とする。
リガンド：
アシマドリン、200μM、DMSO中。
放射性リガンド：
125Ｉ−(D−プロ10)−ダイノルフィンＡ(１−11)
物質−プレート：
純粋なDMSOに溶解した80の物質を96ウェルプレートフォーマットで保持する。残りの24ウェル、すなわちカラムNo１および12は純粋なDMSOを含有し、アッセイ標準および対照ウェルとして使用する。ストック化合物濃度は10または３mMである。試験中に、本化合物を200倍に希釈して10μMのアッセイ濃度とする。
これは0.5％のDMSO濃度を与える。0.5％以上のDMSO濃度を使用すると、DMSOアッセイで効果が生じる。
標準および対照ウェル：
カラム１および12のウェルをアッセイ対照として、また阻害率の計算のために使用する：
標準１、０％阻害、全活性。全結合を１μMのアシマドリンの不在下で定量する。
標準２、100％阻害、非特異的結合を１μMのアシマドリンの存在下で定量する。
対照（約50％阻害を与える）はDMSOに溶解した既知阻害剤（アシマドリン、IC50値約４〜10nM)である。
【０１０１】
カウンター：WallacTRILUXマイクロベータ
【０１０２】
アッセイプレート：Nunc(登録商標)ブランド製品、Nalge Nuncインターナショナル、96ウェル試料プレート
【０１０３】
化学物質：リガンド：アシマドリン
放射性リガンド：125Ｉ−(D−プロ10)−ダイノルフィンＡ(１−11)。ユーロダイアグノスティカAB（スウェーデン)
酵素：HEK293S KOR細胞からの膜標本はABLにより調製された。−70℃で保存。
緩衝液：Trizma塩基（トリス[ヒドロキシメチル]アミノメタン)
分子量121.1（シグマ#T−8404)
塩化マグネシウム６水和物p.a.  分子量20330（メルク#1.05833)
BSA（フラクションＶ、シグマ#A−6793)
DMSOp.a.（メルク#1.6069−1)
【０１０４】
96−ウェルフォーマットでのカッパオピオイド受容体をトランスフェクトさせた細胞膜のSPA結合アッセイ
原理：カッパオピオイド受容体を含有する膜をSPAビーズと結合させ、試験化合物の放射性リガンドタンパク質アゴニストダイノルフィン(125Ｉ−(D−プロ10)−ダイノルフィンＡ(１−11))を転位させる能力を定量する。ビーズに近接した部分、すなわちビーズと結合した膜に結合する放射能だけを測定する。
【０１０５】
手順：
全結合および非特異的結合を0.5μMのダイノルフィンの不在および存在下で定量し、１ウェルあたり15000−20000CPMを含有する放射性リガンドを加える。
膜およびSPAビーズを予め振騰プラットフォームにおいて回転運動させながらアッセイ緩衝液中、室温で一晩（18〜22時間）結合させる。膜およびビーズの混合物をアッセイ緩衝液、薬剤および放射性リガンドと一緒に96−ウェルマイクロタイタープレートにピペットで移す。
プレートを室温で１時間インキュベートし、WallacTRILUXマイクロベータでカウントする。
２つの標準、０％および100％阻害から各ウェルについて阻害率を計算する。
【０１０６】
溶液：アッセイ緩衝液：
結合緩衝液（50mMのトリス、３mMのMgCl2）を＋４℃で保存する。
実験当日に0.1％BSAで新しく作る。
膜：
既知小量の膜を−70℃で保存し、緩衝液で希釈して最終濃度の10μg／試料とする。
SPAビーズ：
SPAビーズを蒸留水で再構成して100mg／mlの濃度とする。この溶液は４℃で１週間まで保存することができる。使用前に、ビーズをアッセイ緩衝液で希釈して最終量を１ウェルあたり0.1mgのビーズとする。
ビーズと膜の予備結合：
同量のビーズおよび細胞膜懸濁液を室温で18〜22時間穏やかに攪拌してから実験を開始する。
リガンド：
BSAを含まない結合緩衝液中のダイノルフィンＡ(１−17)(ブタ)*8AcOH*8H2O(200μM)を既知小量で−20℃で保存する。
各実験で最終濃度に希釈する（新しい）。
放射性リガンド：125Ｉ−(D−プロ10)−ダイノルフィンＡ(１−11)
物質−プレート：
純粋なDMSOに溶解した80の物質を96ウェルプレートフォーマットで保持する。残りの24ウェル、すなわちカラムNo１および12は純粋なDMSOを含有し、アッセイ標準および対照ウェルとして使用する。ストック化合物濃度は0.6mMである。試験中に、本化合物を200倍に希釈して３μMのアッセイ濃度とする。
これは1.4％のDMSO濃度を与える。0.5％以上のDMSO濃度を使用すると、DMSOアッセイで効果が生じる。
標準および対照ウェル：
カラム１および12のウェルをアッセイ対照として、また阻害率の計算のために使用する：
標準１、０％阻害、全活性。全結合を0.5μMのダイノルフィンの不在下で定量する。
標準２、100％阻害、非特異的結合を0.5μMのダイノルフィンの存在下で定量する。
対照（約50％阻害を与える）はDMSOに溶解した既知阻害剤（アシマドリン、IC50値約４nM）である。
特別に設計されたトラフを使用して標準１、標準２および対照の分注を別々に維持する。
【０１０７】
ロボットシステム：SAIGAN(登録商標)コアシステム、Beckman Coulter社製
分注システム：Multimek、200μlの分注ヘッドおよび50μlのロビンス−チップ
カウンター：WallacTRILUXマイクロベータ
【０１０８】
アッセイプレート：Isoplate(登録商標)ポリスチレン(ps)ウェル、1450マイクロベータで使用される96ウェルの固定試料プレート。
【０１０９】
化学物質：リガンド：ダイノルフィンＡ(１−17)(ブタ)*8AcOH*8H2O
Bachem Feinchemikalien（スイス)
放射性リガンド：125Ｉ−(D−プロ10)−ダイノルフィンＡ(１−11)
ユーロダイアグノスティカAB（スウェーデン)
酵素：HEK293S KOR細胞からの膜標本はABLにより調製された。−70℃で保存。
緩衝液：Trizma塩基（トリス[ヒドロキシメチル]アミノメタン)
分子量121.1（シグマ#T−8404)
塩化マグネシウム６水和物p.a.  分子量20330（メルク#1.05833)
BSA（フラクションＶ、シグマ#A−6793)
DMSOp.a.（メルク#1.6069−1)
SPAビーズ：コムギ胚凝集素SPAビーズRPNQ0001（Amershamライフサイエンス)
【国際公開パンフレット】
2004528375.tif 000021
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【手続補正書】
【提出日】平成14年9月2日(2002.9.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
式(1)の化合物は遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態での(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての次の構造式
【化１】
2004528375.tif 000067
[式中、Ｘ、ＹおよびＺは独立してＣまたはＮであり、好ましくはＣであり；
Ａは直接結合、CH2またはNHであり；
Ｂは直接結合またはNHであり；
ｎ＝０〜２であり、好ましくはｎ＝０であり；
R1はＨ、場合により置換されたC1-6アルキル、C3-7シクロアルキル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリールまたはアルキルアリールであり；
R2はＨ、C1-6アルキルまたはアルコキシC1-6アルキルであるか；
または
R1およびR2は一緒になってピリドンと縮合した６−員の不飽和芳香環または１または２個のヘテロ原子を含有する複素環を形成し；
R3はＨ、C1-6アルキル、置換C1-6アルキル、C3-7シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールであり；
R4はＨであり；
R5はC1-6アルキルまたはアリールであり；
R6およびR7は独立してＨまたはC1-6アルキルであり、好ましくはＨであり；
R8およびR9は独立してＨ、C1-6アルキルまたはｔ−ブトキシカルボニルであるか；
または
R8およびR9はそれらが結合している窒素と一緒になって１または２個のヘテロ原子を含有する５−、６−、７−員の場合により未置換の、置換された、縮合したまたは不飽和の複素環を形成し、その置換基はヒドロキシル、ヒドロキシメチル、カルボキシメチル、カルボキシ、メトキシおよびｔ−ブトキシからなる群より選択される］を有する。




【手続補正書】
【提出日】平成15年6月13日(2003.6.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態での(Ｒ)−エナンチオマー、(Ｓ)−エナンチオマーまたはラセミ化合物としての次の構造式
【化１】
2004528375.tif 000068
［式中、ＸおよびＹは独立してＣまたはＮであり；
Ａは直接結合、CH2またはNHであり；
Ｂは直接結合またはNHであり；
ｎ＝０〜２であり；
R1はＨ、場合により置換されたC1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリールまたはアルキルアリールであり；
R2はＨ、C1-4アルキルまたはアルコキシC1-4アルキルであるか；
または
R1およびR2は一緒になってピリドンと縮合した１または２個のヘテロ原子を含有する不飽和複素環を形成し；
R3はＨ、C1-4アルキル、置換C1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、アリールまたはアルキルアリールであり；
R4はＨであり；
R5はC1-4アルキルまたはアリールであり；
R6およびR7は独立してＨまたはC1-4アルキルであり；
R8およびR9は独立してＨ、C1-4アルキルまたはｔ‐ブトキシカルボニルであるか；
または
R8およびR9はそれらが結合している窒素と一緒になって１または２個のヘテロ原子を含有する５−、６−、７−員の場合により未置換の、置換された、縮合したまたは不飽和の複素環を形成し、その置換基はヒドロキシル、ヒドロキシメチル、カルボキシメチル、カルボキシ、メトキシおよびｔ−ブトキシからなる群より選択される］を有する式(1)の化合物、
または
次の構造式
【化２】
2004528375.tif 000069
［式中、Ａ、Ｂ、ｎ、R3、R4、R5、R6、R7、R8およびR9は上記で定義された通りであり；
R1はＨ、場合により置換されるC1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリールまたはアルキルアリールであり；
R2はＨ、C1-4アルキルまたはアルコキシC1-4アルキルであるか；
または
R1およびR2は一緒になってピリドンと縮合した６−員の不飽和芳香環または１または２個のヘテロ原子を含有する複素環を形成する］を有する式(2)の化合物、
または
次の構造式
【化３】
2004528375.tif 000070
［式中、Ａ、Ｂ、Ｘ、Ｙ、ｎ、R1、R2、R3、R4、R5、R8およびR9は上記で定義された通りであり；
R1はＨ、場合により置換されるC1-4アルキル、C3-7シクロアルキル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリールまたはアルキルアリールであり；
R2はＨ、C1-4アルキルまたはアルコキシC1-4アルキルであるか；
または
R1およびR2は一緒になってピリドンと縮合した６−員の不飽和芳香環または１または２個のヘテロ原子を含有する複素環を形成する］を有する式(3)の化合物。
【請求項２】
ＸおよびＹがＣである請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ｎ＝０である請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
R6およびR7がＨである請求項１〜３の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５】
活性成分として治療的に有効な量の遊離塩基またはその薬学的に許容しうる塩または溶媒和物の形態でのエナンチオマーまたはラセミ化合物としての請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物を場合により希釈剤、賦形剤または不活性担体と一緒に含有する医薬処方物。
【請求項６】
治療に使用される請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項７】
化合物が鎮痛剤、抗炎症剤、利尿剤、鎮咳薬、麻酔薬もしくは神経保護剤、または卒中もしくは機能性腸疾患を治療するための薬剤として使用される、薬剤の製造における請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物の使用。
【国際調査報告】
2004528375.tif 000071
2004528375.tif 000072
2004528375.tif 000073