(57)【要約】本発明は、ＨＣＶプロテアーゼ阻害活性を有する新規ペプチド化合物および該化合物の製造方法を開示する。別の実施態様において、本発明は、該ペプチドを含む医薬組成物およびＨＣＶプロテアーゼに関連した障害の処置におけるそれらの使用方法を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2004515465.tif 000185
［式中、
ＺはＯ、ＮＨまたはＮＲ１２であり；
Ｘは、アルキルスルホニル、ヘテロシクリルスルホニル、ヘテロシクリルアルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、アルコキシカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ヘテロアリールオキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ヘテロシクリルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、またはヘテロアリールアミノカルボニル部分であり、所望によりＸはさらにＲ１２またはＲ１３で置換されてもよく；
Ｘ１は、Ｈ；Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ４分枝鎖アルキル；またはＣＨ２−アリール（置換または非置換）であり；
Ｒ１２はアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル部分であり、所望によりＲ１２はさらにＲ１３で置換されてもよく；
Ｒ１３はヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミド、カルボキシ、カルボアルコキシ、カルボキシアミド、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルオキシ、アルキルウレイド、アリールウレイド、ハロゲン、シアノまたはニトロ部分であり、アルキル、アルコキシおよびアリールは所望によりＲ１３から独立して選択される部分でさらに置換されてもよく；
Ｐ１ａ、Ｐ１ｂ、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５およびＰ６は独立して：
Ｈ；Ｃ１−Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル；Ｃ２−Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルケニル；
Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ８複素環；（シクロアルキル）アルキルまたは（ヘテロシクリル）アルキル（ここでシクロアルキルは３〜８個の炭素原子、および０〜６個の酸素、窒素、硫黄またはリン原子を含み、アルキルは１〜６個の炭素原子を含む）；
アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル（ここでアルキルは１〜６個の炭素原子を含む）；であり
ここでアルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル；（シクロアルキル）アルキルおよび（ヘテロシクリル）アルキル部分は所望によりＲ１３で置換されてもよく、さらにＰ１ａおよびＰ１ｂは所望により互いに連結されてスピロ環式環またはスピロ複素環式環を形成してもよく、該スピロ環式環またはスピロ複素環式環は０〜６個の酸素、窒素、硫黄またはリン原子を含み、所望によりＲ１３でさらに置換されてもよく；
Ｐ１’はＨ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−アルキル、アリール、アリール−アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキルであり；Ｐ１’は所望によりＲ１３でさらに置換されてもよい］
で示される一般構造を有する化合物であって、該化合物の鏡像異性体、立体異性体、回転異性体および互変異性体、ならびに該化合物の医薬上許容される塩、溶媒和物または誘導体を含む、化合物。
【請求項２】
Ｘが以下からなる群より選択される、請求項１記載の化合物：
【化２】
2004515465.tif 000186
［式中、アルキルはＣ１〜Ｃ４の直鎖または分枝鎖であり、アリールはフェニルまたは置換フェニルである］。
【請求項３】
ＸがＣＯ−ＣＨ３である、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｘが−ＣＯ−フェニル、請求項２記載の化合物。
【請求項５】
Ｐ５およびＰ６が同じであり、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ｎ＝１〜４であり、Ｒ１がＯＨ、Ｏ−ｔ−Ｂｕ、ＯＲ３、ＮＨＲ３、ＮＨ−フェニルまたはＮＨ−トリチルであり、Ｒ３がＨ、Ｃ１−Ｃ４直鎖または分枝鎖アルキルから選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ｐ５およびＰ６が異なり、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ｎ＝１〜４であり、Ｒ１がＯＨ、Ｏ−ｔ−Ｂｕ、ＯＲ３、ＮＨＲ３、ＮＨ−フェニルまたはＮＨ−トリチルであり、Ｒ３がＨ、Ｃ１−Ｃ４直鎖または分枝鎖アルキルから選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｐ５およびＰ６が−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ３）３または−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＯＨである、請求項５記載の化合物。
【請求項８】
Ｐ５およびＰ６が独立して−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ３）３または−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＯＨから選択される、請求項６記載の化合物。
【請求項９】
Ｐ３およびＰ４が同じである、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
Ｐ３およびＰ４が異なる、請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
Ｐ３およびＰ４が独立して以下からなる群より選択される、請求項１記載の化合物：
【化３】
2004515465.tif 000187
【請求項１２】
Ｐ２が以下からなる群より選択される、請求項１記載の化合物：
【化４】
2004515465.tif 000188
［式中、ｎは０、１、２または３である］。
【請求項１３】
Ｐ１ａおよびＰ１ｂが独立して以下からなる群より選択される、請求項１記載の化合物：
【化５】
2004515465.tif 000189
【請求項１４】
Ｐ１’が以下からなる群より選択される、請求項１記載の化合物：
【化６】
2004515465.tif 000190
【請求項１５】
ＺがＮＨであり、Ｘ１がＨである、請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
式ＩＩ：
【化７】
2004515465.tif 000191
［式中、
ＺはＯ、ＮＨまたはＮＲ１２であり；
Ｘは、アルキルスルホニル、ヘテロシクリルスルホニル、ヘテロシクリルアルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、アルコキシカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ヘテロアリールオキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ヘテロシクリルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、またはヘテロアリールアミノカルボニル部分であり、所望によりＸはさらにＲ１２またはＲ１３で置換されてもよく；
Ｒ１２はアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル部分であり、所望によりＲ１２はさらにＲ１３で置換されてもよく；
Ｒ１３はヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミド、カルボキシ、カルボアルコキシ、カルボキシアミド、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルオキシ、アルキルウレイド、アリールウレイド、ハロゲン、シアノまたはニトロ部分であり、アルキル、アルコキシおよびアリールは所望によりＲ１３から独立して選択される部分でさらに置換されてもよく；
Ｐ１ａ、Ｐ１ｂ、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５およびＰ６は独立して：
Ｈ；Ｃ１−Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル；Ｃ２−Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルケニル；
Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ８複素環；（シクロアルキル）アルキルまたは（ヘテロシクリル）アルキル（ここでシクロアルキルは３〜８個の炭素原子、および０〜６個の酸素、窒素、硫黄またはリン原子を含み、アルキルは１〜６個の炭素原子を含む）；あるいは
アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル（ここでアルキルは１〜６個の炭素原子を含む）；であり
ここでアルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル；（シクロアルキル）アルキルおよび（ヘテロシクリル）アルキル部分は所望によりＲ１３で置換されてもよく、さらにＰ１は所望によりスピロ環式環またはスピロ複素環式環であってもよく、該スピロ環式環またはスピロ複素環式環は０〜６個の酸素、窒素、硫黄またはリン原子を含み、所望によりＲ１３でさらに置換されてもよく；
Ｐ１’はＨ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−アルキル、アリール、アリール−アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキルであり；Ｐ１’は所望によりＲ１３でさらに置換されてもよく；
【化８】
2004515465.tif 000192
は環式環構造を示し、該環式環構造は環式環の一部としてカルボニル基を含まない］
で示される一般構造を有する化合物であって、該化合物の鏡像異性体、立体異性体、回転異性体および互変異性体、ならびに該化合物の医薬上許容される塩または溶媒和物を含む、化合物。
【請求項１７】
【化９】
2004515465.tif 000193
が５員環を示す、請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
【化１０】
2004515465.tif 000194
が６員環を示す、請求項１６記載の化合物。
【請求項１９】
Ｘが以下からなる群より選択される、請求項１６記載の化合物：
【化１１】
2004515465.tif 000195
［式中、アルキルはＣ１〜Ｃ４の直鎖または分枝鎖であり、アリールはフェニルまたは置換フェニルである］。
【請求項２０】
ＸがＣＯ−ＣＨ３である、請求項１９記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘが−ＣＯ−フェニル、請求項１９記載の化合物。
【請求項２２】
Ｐ５およびＰ６が同じであり、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ｎ＝１〜４であり、Ｒ１がＯＨ、Ｏ−ｔ−Ｂｕ、ＯＲ３、ＮＨＲ３、ＮＨ−フェニルまたはＮＨ−トリチルであり、Ｒ３がＨ、Ｃ１−Ｃ４直鎖または分枝鎖アルキルから選択される、請求項１６記載の化合物。
【請求項２３】
Ｐ５およびＰ６が異なり、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１であり、ｎ＝１〜４であり、Ｒ１がＯＨ、Ｏ−ｔ−Ｂｕ、ＯＲ３、ＮＨＲ３、ＮＨ−フェニルまたはＮＨ−トリチルであり、Ｒ３がＨ、Ｃ１−Ｃ４直鎖または分枝鎖アルキルから選択される、請求項１６記載の化合物。
【請求項２４】
Ｐ５およびＰ６が−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ３）３または−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＯＨである、請求項２２記載の化合物。
【請求項２５】
Ｐ５およびＰ６が独立して−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ３）３または−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＯＨから選択される、請求項２３記載の化合物。
【請求項２６】
Ｐ３およびＰ４が同じである、請求項１６記載の化合物。
【請求項２７】
Ｐ３およびＰ４が異なる、請求項１６記載の化合物。
【請求項２８】
Ｐ３およびＰ４が独立して以下からなる群より選択される、請求項１６記載の化合物：
【化１２】
2004515465.tif 000196
【請求項２９】
Ｐ２が以下からなる群より選択される、請求項１６記載の化合物：
【化１３】
2004515465.tif 000197
【化１４】
2004515465.tif 000198
［式中、
ｎ＝０、１、２または３、
Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ；Ｒ２＝Ｃ１−Ｃ６直鎖アルキルまたはシクロアルキル；Ｒ３＝Ｈ
Ｒ４＝ＣＯアルキル（直鎖または環式、Ｃ１−Ｃ６）；ＣＯアリール；ＣＯＯアルキル；ＣＯＯアリール
Ｒ５＝Ｈ；Ｒ６＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）；Ｒ６＝Ｈ；Ｒ５＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）
Ｒ７＝Ｈ；Ｒ８＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）、ＣＨ２ＯＨ；Ｒ８＝Ｈ；Ｒ７＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）、ＣＨ２ＯＨ；Ｒ７＝Ｒ８＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）、ＣＨ２ＯＨ
Ｒ９＝Ｒ１０＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）；Ｒ９＝Ｈ、Ｒ１０＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）、ＣＯＯＭｅ、ＣＯＯＨ、ＣＨ２ＯＨ；Ｒ１０＝Ｈ、Ｒ９＝アルキル（Ｃ１−Ｃ３）、ＣＯＯＭｅ、ＣＯＯＨ、ＣＨ２ＯＨ；
Ｒ１１＝アルキル（Ｃ１−Ｃ６直鎖、分枝鎖または環式）、ＣＨ２アリール（置換されてもよい）
Ｚ１＝Ｚ２＝Ｓ、Ｏ；Ｚ１＝Ｓ、Ｚ２＝Ｏ；Ｚ１＝Ｏ、Ｚ２＝Ｓ；Ｚ１＝ＣＨ２、Ｚ２＝Ｏ；Ｚ１＝Ｏ、Ｚ２＝ＣＨ２；Ｚ１＝Ｓ、Ｚ２＝ＣＨ２；Ｚ１＝ＣＨ２、Ｚ２＝Ｓ
Ｚ３＝ＣＨ２、Ｓ、ＳＯ２、ＮＨ、ＮＲ４
Ｚ４＝Ｚ５＝Ｓ、Ｏ］。
【請求項３０】
Ｐ１ａおよびＰ１ｂが独立して以下からなる群より選択される、請求項１６記載の化合物：
【化１５】
2004515465.tif 000199
【請求項３１】
Ｐ１’が以下からなる群より選択される、請求項１６記載の化合物：
【化１６】
2004515465.tif 000200
【請求項３２】
ＺがＮＨである、請求項１６記載の化合物。
【請求項３３】
有効成分として請求項１または１６記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項３４】
Ｃ型肝炎ウイルスに関連した障害の処置に使用される、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３５】
さらに医薬上許容される担体を含む、請求項３２記載の医薬組成物。
【請求項３６】
ＨＣＶプロテアーゼに関連した障害の処置方法であって、請求項１または１６記載の化合物の治療有効量を含む医薬組成物を、処置を必要とする患者に投与する工程を包含する方法。
【請求項３７】
投与が皮下投与による、請求項３５記載の方法。
【請求項３８】
ＨＣＶプロテアーゼに関連した障害を処置するための医薬の製造のための、請求項１または１６記載の化合物の使用。
【請求項３９】
ＨＣＶプロテアーゼに関連した障害を処置するための医薬組成物の製造方法であって、請求項１または１６記載の化合物および医薬上許容される担体を緊密に接触させる工程を包含する方法。
【請求項４０】
ＨＣＶプロテアーゼ阻害活性を示す化合物であって、該化合物の鏡像異性体、立体異性体、回転異性体および互変異性体、ならびに該化合物の医薬上許容される塩または溶媒和物を包含し、下記に列挙した構造を有する化合物の群から選択される化合物：
【化１７】
2004515465.tif 000201
【化１８】
2004515465.tif 000202
【化１９】
2004515465.tif 000203
【化２０】
2004515465.tif 000204
【化２１】
2004515465.tif 000205
【化２２】
2004515465.tif 000206
【化２３】
2004515465.tif 000207
【化２４】
2004515465.tif 000208
【化２５】
2004515465.tif 000209
【化２６】
2004515465.tif 000210
【化２７】
2004515465.tif 000211
【化２８】
2004515465.tif 000212
【化２９】
2004515465.tif 000213
【化３０】
2004515465.tif 000214
【化３１】
2004515465.tif 000215
【化３２】
2004515465.tif 000216
【化３３】
2004515465.tif 000217
【化３４】
2004515465.tif 000218
【化３５】
2004515465.tif 000219
【化３６】
2004515465.tif 000220
【化３７】
2004515465.tif 000221
【化３８】
2004515465.tif 000222
【化３９】
2004515465.tif 000223
【化４０】
2004515465.tif 000224
【化４１】
2004515465.tif 000225
【化４２】
2004515465.tif 000226
【化４３】
2004515465.tif 000227
【化４４】
2004515465.tif 000228
【化４５】
2004515465.tif 000229
【化４６】
2004515465.tif 000230
【化４７】
2004515465.tif 000231
【化４８】
2004515465.tif 000232
【化４９】
2004515465.tif 000233
【化５０】
2004515465.tif 000234
【化５１】
2004515465.tif 000235
【化５２】
2004515465.tif 000236
【化５３】
2004515465.tif 000237
【化５４】
2004515465.tif 000238
【化５５】
2004515465.tif 000239
【化５６】
2004515465.tif 000240
【化５７】
2004515465.tif 000241
【化５８】
2004515465.tif 000242
【化５９】
2004515465.tif 000243
【化６０】
2004515465.tif 000244
【化６１】
2004515465.tif 000245
【化６２】
2004515465.tif 000246
【化６３】
2004515465.tif 000247
【化６４】
2004515465.tif 000248
【化６５】
2004515465.tif 000249
【化６６】
2004515465.tif 000250
【化６７】
2004515465.tif 000251
【化６８】
2004515465.tif 000252
【化６９】
2004515465.tif 000253
【化７０】
2004515465.tif 000254
【請求項４１】
ＨＣＶプロテアーゼに関連した障害を処置するための医薬組成物であって、請求項３９記載の１種以上の化合物の治療有効量および医薬上許容される担体を含む組成物。
【請求項４２】
さらに抗ウイルス剤を含む、請求項４０記載の医薬組成物。
【請求項４３】
さらに追加的にインターフェロンを含む、請求項４０または４１記載の医薬組成物。
【請求項４４】
抗ウイルス剤がリバビリンであり、インターフェロンがα−インターフェロンである、請求項４２記載の医薬組成物。
【請求項４５】
以下からなる群より選択される化合物：
【化７１】
2004515465.tif 000255
【化７２】
2004515465.tif 000256
【化７３】
2004515465.tif 000257
【化７４】
2004515465.tif 000258
【化７５】
2004515465.tif 000259
【化７６】
2004515465.tif 000260
【化７７】
2004515465.tif 000261
【化７８】
2004515465.tif 000262
【化７９】
2004515465.tif 000263
または、その鏡像異性体、立体異性体、回転異性体もしくは互変異性体、またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物であって、ＨＣＶ阻害活性を示す化合物。
【請求項４６】
請求項４４記載の化合物の１種以上を含む、医薬組成物。
【請求項４７】
Ｃ型肝炎ウイルス関連障害の処置方法であって、請求項４４記載の化合物の１種以上の有効量を投与する工程を包含する方法。
【請求項４８】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）プロテアーゼの活性の調節方法であって、ＨＣＶプロテアーゼを請求項４４記載の化合物の１種以上と接触させる工程を包含する方法。
【請求項４９】
Ｃ型肝炎の１個以上の症状の処置、防止または改善方法であって、請求項４４記載の化合物の１種以上の有効量を投与する工程を包含する方法。
【請求項５０】
ＨＣＶプロテアーゼがＮＳ３／ＮＳ４ａプロテアーゼである、請求項４７記載の方法。
【請求項５１】
化合物がＨＣＶ  ＮＳ３／ＮＳ４ａプロテアーゼを阻害する、請求項４９記載の方法。
【請求項５２】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ポリペプチドのプロセシングの調節方法であって、ＨＣＶポリペプチドを含有する組成物を、該ポリペプチドがプロセシングされる条件下で請求項４４記載の化合物の１種以上と接触させる工程を包含する方法。
【請求項５３】
Ｐ２が以下からなる群より選択される請求項１７記載の化合物：
【化８０】
2004515465.tif 000264
［式中、
ｎは０、１、２または３であり；
Ｒ２０はアルキレン−ＣＯＯＨであり；
Ｒ２１はＣ（Ｏ）アルキル、ＣＯ２アルキル、Ｃ（Ｏ）アリール、ＣＯ２アリール、ＳＯ２アルキル、ＳＯ２アリール、ＣＯＮＨアルキル、またはＣＯＮＨアリールであり；
Ｒ２２はアルキルまたはアルキレン−ＣＯＯＨであり；
Ｒ２３はアルキルである］。
【請求項５４】
Ｒ２０がＣＨ２ＣＯＯＨであり；
Ｒ２１がＣＯ２Ｐｈ、ＣＯＰｈ、ＣＯ２ＣＨ２−９−フルオレニル、ＣＯ−（３−フェノキシフェニル）、ＳＯ２ＰｈまたはＣＯＮＨＰｈであり；
Ｒ２２がメチルまたはＣＨ２ＣＯＯＨであり；
Ｒ２３がメチルである、請求項５２記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、新規Ｃ型肝炎ウイルス（「ＨＣＶ」）プロテアーゼ阻害剤、１種以上の該阻害剤を含有する医薬組成物、該阻害剤の製造方法ならびにＣ型肝炎および関連障害を処置するための該阻害剤の使用方法に関する。詳細には、本発明は、ＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼの阻害剤としての新規ペプチド化合物を開示する。
【０００２】
（背景技術）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、非Ａ非Ｂ型肝炎（ＮＡＮＢＨ）、特に血液関連ＮＡＮＢＨ（ＢＢ−ＮＡＮＢＨ）の主たる病原体として関連付けられている（＋）−センス一本鎖ＲＮＡウイルスである（国際公開第ＷＯ８９／０４６６９号および欧州特許出願公開第ＥＰ３８１２１６号参照）。ＮＡＮＢＨは、他の型のウイルス誘発性肝臓疾患、例えばＡ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、デルタ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）およびエプスタイン−バールウイルス（ＥＢＶ）に誘発されるもの、ならびに他の形態の肝臓疾患、例えばアルコール中毒および原発性胆汁性肝硬変とは区別される。
【０００３】
近年、ポリペプチドプロセシングおよびウイルス複製に必要なＨＣＶプロテアーゼが同定され、クローン化され、発現された（例、米国特許第５７１２１４５号参照）。この約３０００アミノ酸のポリタンパク質は、アミノ末端からカルボキシ末端へ、ヌクレオキャプシドタンパク質（Ｃ）、エンベロープタンパク質（Ｅ１およびＥ２）ならびにいくつかの非構造タンパク質（ＮＳ１、２、３、４ａ、５ａおよび５ｂ）を含む。ＮＳ３は、ＨＣＶゲノムの約１８９３ヌクレオチドによりコードされる、約６８ｋｄａのタンパク質であり、２つの異なるドメイン：（ａ）Ｎ末端アミノ酸の約２００個からなるセリンプロテアーゼドメイン；および（ｂ）タンパク質のＣ末端のＲＮＡ依存性ＡＴＰａｓｅドメインを有する。ＮＳ３プロテアーゼは、タンパク質配列、全体的三次元構造および触媒機構が類似していることから、キモトリプシンファミリーのメンバーであると考えられている。他のキモトリプシン様酵素は、エラスターゼ、第Ｘａ因子、トロンビン、トリプシン、プラスミン、ウロキナーゼ、ｔＰＡおよびＰＳＡである。ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼは、ＮＳ３／ＮＳ４ａ、ＮＳ４ａ／ＮＳ４ｂ、ＮＳ４ｂ／ＮＳ５ａおよびＮＳ５ａ／ＮＳ５ｂ連結部におけるポリペプチド（ポリタンパク質）のタンパク質分解を担っており、従ってウイルス複製中の４種のウイルスタンパク質の生成を担っている。このため、ＨＣＶ ＮＳ３セリンプロテアーゼは抗ウイルス化学療法にとって魅力的な標的となっている。
【０００４】
約６ｋｄａのポリペプチドであるＮＳ４ａタンパク質がＮＳ３のセリンプロテアーゼ活性の補因子であることが決定されている。ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼによるＮＳ３／ＮＳ４ａ連結部の自己切断は分子内（すなわち、シス）で生じ、他の切断部位は分子間（すなわち、トランス）でプロセシングされる。
【０００５】
ＨＣＶプロテアーゼの天然の切断部位の分析により、Ｐ１におけるシステインおよびＰ１’におけるセリンの存在ならびにこれらの残基がＮＳ４ａ／ＮＳ４ｂ、ＮＳ４ｂ／ＮＳ５ａおよびＮＳ５ａ／ＮＳ５ｂ連結部で厳密に保存されていることが明らかにされた。ＮＳ３／ＮＳ４ａ連結部は、Ｐ１においてスレオニンを、Ｐ１’においてセリンを含む。ＮＳ３／ＮＳ４ａでのＣｙｓ→Ｔｈｒの置換は、この連結部におけるトランスではなくシスのプロセシングの要件の説明となると想定されている。例えば、Ｐｉｚｚｉ ｅｔ ａｌ． （１９９４） Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ （ＵＳＡ）  ９１：８８８−８９２、 Ｆａｉｌｌａ  ｅｔ ａｌ． （１９９６） Ｆｏｌｄｉｎｇ ＆ Ｄｅｓｉｇｎ １：３５−４２参照。ＮＳ３／ＮＳ４ａ切断部位はまた、他の部位よりも突然変異誘発に寛容性である。例えば、Ｋｏｌｌｙｋｈａｌｏｖ ｅｔ ａｌ． （１９９４） Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ６８：７５２５−７５３３参照。また、切断部位の上流領域における酸性残基が効率的な切断に必要とされることが見出されている。例えば、Ｋｏｍｏｄａ ｅｔ ａｌ． （１９９４） Ｊ． Ｖｉｒｏｌ． ６８：７３５１−７３５７参照。
【０００６】
報告されたＨＣＶプロテアーゼの阻害剤としては、抗酸化剤（国際公開第ＷＯ９８／１４１８１号参照）、特定のペプチドおよびペプチドアナログ（国際公開第ＷＯ９８／１７６７９号、Ｌａｎｄｒｏ ｅｔ ａｌ． （１９９７） Ｂｉｏｃｈｅｍ． ３６：９３４０−９３４８、Ｉｎｇａｌｌｉｎｅｌｌａ ｅｔ ａｌ． （１９９８） Ｂｉｏｃｈｅｍ． ３７：８９０６−８９１４、Ｌｌｉｎａｓ−Ｂｒｕｎｅｔ ｅｔ ａｌ． （１９９８） Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ８：１７１３−１７１８参照）、７０アミノ酸のポリペプチドであるエグリンｃに基いた阻害剤（Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ． （１９９８） Ｂｉｏｃｈｅｍ． ３７：１１４５９−１１４６８）、ヒト膵臓分泌性トリプシンインヒビター（ｈＰＳＴＩ−Ｃ３）およびミニボディーレパートリー（ＭＢｉｐ）から親和性選択された阻害剤（Ｄｉｍａｓｉ ｅｔ ａｌ． （１９９７） Ｊ．Ｖｉｒｏｌ． ７１：７４６１−７４６９）、ＣＶＨＥ２（「キャメライズした（ｃａｍｅｌｉｚｅｄ）」可変領域抗体フラグメント）（Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９７） Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ． １０：６０７−６１４）およびα１−アンチキモトリプシン（ＡＣＴ）（Ｅｌｚｏｕｋｉ ｅｔ ａｌ． （１９９７） Ｊ． Ｈｅｐａｔ． ２７：４２−２８）が挙げられる。Ｃ型肝炎ウイルスＲＮＡを選択的に破壊するように設計されたリボザイムが近年開示された（ＢｉｏＷｏｒｌｄ Ｔｏｄａｙ ９（２１７）： ４（１９９８年１１月１０日）参照）。
【０００７】
また、ＰＣＴ公開、第ＷＯ９８／１７６７９号（１９９８年４月３０日公開、ヴァーテックス・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド（Ｖｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ））、第ＷＯ９８／２２４９６号（１９９８年５月２８日公開、エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチエンゲセルシャフト（Ｆ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ ＡＧ））、および第ＷＯ９９／０７７３４号（１９９９年２月１８日公開、ベーリンガー・インゲルハイム・カナダ・リミテッド（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｃａｎａｄａ Ｌｔｄ．））も参照のこと。
【０００８】
ＨＣＶは、肝硬変および肝細胞癌の誘発に関連付けられている。ＨＣＶ感染に罹患した患者の予後は、現時点では芳しくない。ＨＣＶ感染は、ＨＣＶ感染に伴う免疫または緩解の欠如のために、他の形態の肝炎よりも処置が困難である。最新データは、硬変診断後４年目での生存率が５０％未満であることを示している。切除可能な限局性肝細胞癌と診断された患者が１０〜３０％の５年生存率を有するのに対し、切除不能な限局性肝細胞癌の患者は５年生存率が１％未満である。
【０００９】
ＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼの阻害剤の二環式アナログの合成を記載するＡ． Ｍａｒｃｈｅｔｔｉ ｅｔ ａｌ， Ｓｙｎｌｅｔｔ， Ｓ１， １０００−１００２ （１９９９）を参照のこと。そこに記載される化合物は以下の式を有する：
【化８１】
2004515465.tif 000002
【００１０】
また、式：
【化８２】
2004515465.tif 000003
で示されるペプチド誘導体を開示する第ＷＯ００／０９５５８号（譲受人：ベーリンガー・インゲルハイム・リミテッド（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｌｉｍｉｔｅｄ）、２０００年２月２４日公開）（上式における種々の要素はそこに定義されている）も参照のこと。下式はその系列の化合物の例示である：
【化８３】
2004515465.tif 000004
【００１１】
また、式：
【化８４】
2004515465.tif 000005
で示されるペプチド誘導体を開示する第ＷＯ００／０９５４３号（譲受人：ベーリンガー・インゲルハイム・リミテッド、２０００年２月２４日公開）（上式における種々の要素はそこに定義されている）も参照のこと。下式はその系列の化合物の例示である：
【化８５】
2004515465.tif 000006
【００１２】
Ｃ型肝炎の現行治療法としては、インターフェロン−α（ＩＮＦα）およびリバビリンとインターフェロンとの併用療法が挙げられる。例えば、Ｂｅｒｅｍｇｕｅｒ ｅｔ ａｌ． （１９９８） Ｐｒｏｃ． Ａｓｓｏｃ． Ａｍ． Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ １１０（２）：９８−１１２参照。これらの治療法には、低い持続応答率および頻繁な副作用という問題点がある。例えば、Ｈｏｏｆｎａｇｌｅ ｅｔ ａｌ． （１９９７） Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３３６：３４７参照。現時点では、ＨＣＶ感染に利用可能なワクチンは無い。
【００１３】
継続および同時継続中の米国特許出願第６０／２２０，１１０号（２０００年７月２１日出願）、同第６０／２２０，１０７号（２０００年７月２１日出願）、同第６０／２２０，１０８号（２０００年７月２１日出願）、同第６０／２２０，１０１号（２０００年７月２１日出願）、同第６０／２５４，８６９号（２０００年１２月１２日出願）、同第６０／１９４，６０７号（２０００年４月５日出願）および同第６０／１９８，２０４号（２０００年４月１９日出願）は、Ｃ型肝炎ウイルスのＮＳ−３セリンプロテアーゼの阻害剤としての種々の型のペプチドを開示している。
【００１４】
ＨＣＶ感染のための新たな処置および治療法が要望されている。従って、本発明の目的は、Ｃ型肝炎の１つ以上の症状を処置または予防または改善するのに有用な化合物を提供することである。
【００１５】
本発明のさらなる目的は、Ｃ型肝炎の１つ以上の症状を処置または予防または改善する方法を提供することである。
【００１６】
本発明のさらなる目的は、本明細書に提供される化合物を用いて、セリンプロテアーゼ、特にＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼの活性を調節する方法を提供することである。
【００１７】
本発明の別の目的は、本明細書に提供される化合物を用いてＨＣＶポリペプチドのプロセシングを調節する方法を提供することである。
【００１８】
（発明の概要）
本発明は、その多くの実施態様において、新規クラスのＨＣＶプロテアーゼの阻害剤、１種以上の該化合物を含有する医薬組成物、１種以上の該化合物を含有する医薬処方物の製造方法、およびＣ型肝炎の症状の１つ以上を処置、予防または改善する方法を提供する。また、ＨＣＶポリペプチドとＨＣＶプロテアーゼとの相互作用を調節する方法も提供する。本明細書中に提供される化合物の中で、ＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼ活性を阻害する化合物が好ましい。本明細書に開示する化合物は一般に約４個以上、約１２個未満のアミノ酸残基を含む。詳細には、本願は下記でさらに規定するペプチド化合物を開示する。
【００１９】
その第一の実施態様において、本発明は、式Ｉ：
【化８６】
2004515465.tif 000007
式Ｉ
［式中、
ＺはＯ、ＮＨまたはＮＲ１２であり；
Ｘは、アルキルスルホニル、ヘテロシクリルスルホニル、ヘテロシクリルアルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、アルコキシカルボニル、ヘテロシクリルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ヘテロアリールオキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ヘテロシクリルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、またはヘテロアリールアミノカルボニル部分であり、所望によりＸはさらにＲ１２またはＲ１３で置換されてもよく；
Ｘ１は、Ｈ；Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ４分枝鎖アルキル；またはＣＨ２−アリール（置換または非置換）であり；
Ｒ１２はアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル部分であり、所望によりＲ１２はさらにＲ１３で置換されてもよく；
Ｒ１３はヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホンアミド、アリールスルホンアミド、カルボキシ、カルボアルコキシ、カルボキシアミド、アルコキシカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルオキシ、アルキルウレイド、アリールウレイド、ハロゲン、シアノまたはニトロ部分であり、アルキル、アルコキシおよびアリールは所望によりＲ１３から独立して選択される部分でさらに置換されてもよく；
Ｐ１ａ、Ｐ１ｂ、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５およびＰ６は独立して：
Ｈ；Ｃ１−Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルキル；Ｃ２−Ｃ１０直鎖または分枝鎖アルケニル；
Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ８複素環；（シクロアルキル）アルキルまたは（ヘテロシクリル）アルキル（ここでシクロアルキルは３〜８個の炭素原子、および０〜６個の酸素、窒素、硫黄またはリン原子を含み、アルキルは１〜６個の炭素原子を含む）；
アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル（ここでアルキルは１〜６個の炭素原子を含む）；であり
ここで全ての上記アルキル、アルケニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル；（シクロアルキル）アルキルおよび（ヘテロシクリル）アルキル部分は所望によりＲ１３で置換されてもよく、さらにＰ１ａおよびＰ１ｂの原子は互いに連結されてスピロ環式環またはスピロ複素環式環を形成してもよく、該スピロ環式環またはスピロ複素環式環は０〜６個の酸素、窒素、硫黄またはリン原子を含み、所望によりＲ１３で置換されてもよく；
Ｐ１’はＨ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−アルキル、アリール、アリール−アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリール−アルキルであり；Ｐ１’は所望によりＲ１３でさらに置換されてもよい］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物もしくは誘導体を提供する。
【００２０】
Ｘ、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｐ１ａ、Ｐ１ｂ、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｐ５およびＰ１’についての上記定義のうち、種々の部分についての好ましい基は以下のとおりである。
【００２１】
Ｘについての好ましい部分は以下のとおりである：
【化８７】
2004515465.tif 000008
式中、アルキルはＣ１〜Ｃ４の直鎖または分枝鎖であり、アリールはフェニルまたは置換フェニルである。
【００２２】
Ｐ６についての好ましい部分は以下のとおりである：
【化８８】
2004515465.tif 000009
ｎは１〜４である。
【００２３】
Ｐ５についての好ましい部分は以下のとおりである：
【化８９】
2004515465.tif 000010
ｎは１〜４であり；Ｐ６およびＰ５は同じでもよく、または異なってもよい。
【００２４】
Ｒ１についての好ましい部分はＯＨ、Ｏ−ｔ−Ｂｕ、ＯＲ３、ＮＨＲ３、ＮＨ−フェニルまたはＮＨ−トリチルである。
【００２５】
Ｒ３についての好ましい部分はＨ、Ｃ１−Ｃ４直鎖または分枝鎖アルキルである。
【００２６】
Ｐ３およびＰ４は同じでもよく、または異なってもよく、Ｐ３およびＰ４についての好ましい部分は以下のとおりである：
【化９０】
2004515465.tif 000011
【００２７】
Ｐ２についての好ましい部分は以下のとおりである：
【化９１】
2004515465.tif 000012
式中、ｎ＝０、１、２または３である。
【００２８】
Ｐ１ａおよびＰ１ｂについての好ましい部分は以下のとおりである：
【化９２】
2004515465.tif 000013
【００２９】
Ｐ１’についての好ましい部分は以下のとおりである：
【化９３】
2004515465.tif 000014
【００３０】
別の実施態様において、本発明は、式ＩＩ：
【化９４】
2004515465.tif 000015
式ＩＩ
［式中、Ｘ、Ｐ６、Ｐ５、Ｐ４、Ｐ３、Ｐ２、Ｐ１ａ、Ｐ１ｂおよびＰ１’は上記で定義したとおりである］で示される化合物を提供する。ＺはＯ、ＮＨまたはＮＲ１２であり、Ｒ１２は上記で定義した。式ＩＩにおいて、それが結合するＣ原子に隣接するＮ原子に結合する場合、Ｐ２は環式環を形成し、該環式環は環式環構造の一部としてカルボニル基を含まない。Ｐ２、Ｐ２が結合する炭素原子および該炭素原子に隣接する窒素原子から構成される環式環部分は、上記で以下のように示され、これは５員環または６員環構造を示し得る：
【化９５】
2004515465.tif 000016
【００３１】
環式環構造についての好ましい代表例は以下から選択される：
【化９６】
2004515465.tif 000017
【化９７】
2004515465.tif 000018
［式中、
Ｒ２およびＲ３は同じでもよく、または異なってもよく、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６直鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ６分枝鎖アルキルまたはシクロアルキルから選択され；
Ｒ４はＣＯ−アルキル（アルキルはＣ１−Ｃ６直鎖もしくは分枝鎖またはシクロアルキルである）；ＣＯ−アリール；ＣＯＯ−アルキルまたはＣＯＯ−アリールであり；
Ｒ５およびＲ６は同じでもよく、または異なってもよく、Ｈ；Ｃ１−Ｃ３直鎖アルキル；またはＣ１−Ｃ３分枝鎖アルキルから選択され；
Ｒ７およびＲ８は同じでもよく、または異なってもよく、Ｈ；Ｃ１−Ｃ３直鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ３分枝鎖アルキルまたはＣＨ２ＯＨから選択され；
Ｒ９およびＲ１０は同じでもよく、または異なってもよく、Ｈ；Ｃ１−Ｃ３直鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ３分枝鎖アルキル；ＣＯＯＭｅ；ＣＯＯＨまたはＣＨ２ＯＨから選択され；
Ｒ１１はＣ１−Ｃ６直鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ６分枝鎖アルキル；シクロアルキル；またはＣＨ２−アリール（置換または非置換）であり；
Ｚ１およびＺ２は同じでもよく、または異なってもよく、Ｓ；Ｏ；またはＣＨ２から選択され；
Ｚ３はＣＨ２；Ｓ、ＳＯ２；ＮＨまたはＮＲ４であり；
Ｚ４およびＺ５は同じでもよく、または異なってもよく、Ｓ；ＯまたはＣＨ２から選択される。
【００３２】
さらに別の実施態様において、本発明は式ＩＩＩ：
【化９８】
2004515465.tif 000019
式ＩＩＩ
［式中、種々の要素は上記で定義したとおりである］で示される化合物を開示する。
【００３３】
特記しない場合、本明細書において用いる技術用語および科学用語は全て、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解しているのと同じ意味を有する。従って、例えば、用語アルキル（アルコキシのアルキル部分を含む）は、１〜８個、好ましくは１〜６個の炭素原子を有する、単一原子の除去により直鎖または分枝鎖飽和炭化水素から誘導される１価の基をいう。
【００３４】
アリール  −  ６〜１４個の炭素原子を有し、少なくとも１個のベンゼノイド環を有する炭素環式基を表し、炭素環式基の全ての利用可能な置換可能芳香族炭素原子が可能な結合点として意図される。好ましいアリール基としては、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチルおよびインダニル、特にフェニルおよび置換フェニルが挙げられる。
【００３５】
アラルキル  −  低級アルキルを介して結合したアリール基を含む部分を表す。
【００３６】
アルキルアリール  −  アリール基を介して結合した低級アルキルを含む部分を表す。
【００３７】
シクロアルキル  −  所望により置換されてもよい、３〜８個、好ましくは５または６個の炭素原子を有する飽和炭素環式環を表す。
【００３８】
複素環  −  下記で定義するヘテロアリール基に加えて、１個の環または２個の縮合した環からなる炭素環式環構造を中断する少なくとも１個のＯ、Ｓおよび／またはＮ原子を有する飽和および不飽和環式有機基であって、各環が５、６または７員環であり、非局在化パイ電子を欠く二重結合を有してもよく有しなくてもよく、環構造が２〜８個、好ましくは３〜６個の炭素原子を有する、例えば２−もしくは３−ピペリジニル、２−もしくは３−ピペラジニル、２−もしくは３−モルホリニル、または２−もしくは３−チオモルホリニルである基を表す。
【００３９】
ハロゲン  −  フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を表す。
【００４０】
ヘテロアリール  −  炭素環式環構造を中断する少なくとも１個のＯ、Ｓおよび／またはＮ原子を有し、芳香族特性を与えるのに十分な数の非局在化パイ電子を有する環式有機基であって、芳香族複素環式基が２〜１４個、好ましくは４または５個の炭素原子を有し、例えば２−、３−もしくは４−ピリジル、２−もしくは３−フリル、２−もしくは３−チエニル、２−、４−もしくは５−チアゾリル、２−もしくは４−イミダゾリル、２−、４−もしくは５−ピリミジニル、２−ピラジニル、または３−もしくは４−ピリダジニル等である基を表す。好ましいヘテロアリール基は、２−、３−および４−ピリジルである。そのようなヘテロアリール基はまた所望により置換されてもよい。
【００４１】
また、式Ｉ、式ＩＩおよび式ＩＩＩで示される化合物の互変異性体、回転異性体、鏡像異性体および他の光学異性体、ならびにその医薬上許容される塩、溶媒和物および誘導体も本発明に包含される。
【００４２】
本発明のさらなる特徴は、医薬上許容される担体または賦形剤と一緒に有効成分として式Ｉ、式ＩＩまたは式ＩＩＩで示される化合物（またはその塩、溶媒和物もしくは異性体）を含有する医薬組成物である。
【００４３】
本発明はまた、式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩで示される化合物の製造方法、ならびに例えばＨＣＶおよび関連障害のような疾患の処置方法を提供する。これらの処置方法は、上記疾患（単数または複数）に罹患している患者に治療有効量の式Ｉ、ＩＩもしくはＩＩＩで示される化合物、または式Ｉ、ＩＩもしくはＩＩＩで示される化合物を含有する医薬組成物を投与する工程を包含する。
【００４４】
また、ＨＣＶおよび関連障害処置用医薬の製造における式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩで示される化合物の使用も開示する。
【００４５】
（好ましい実施態様の詳細な説明）
１つの実施態様において、本発明は、ＨＣＶプロテアーゼ、特にＨＣＶ  ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼの阻害剤としての式Ｉで示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を開示する（式中、種々の定義は上記のとおりである）。
【００４６】
別の実施態様において、本発明は、ＨＣＶプロテアーゼ、特にＨＣＶ  ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼの阻害剤としての式ＩＩで示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を開示する（式中、種々の定義は上記のとおりである）。
【００４７】
別の実施態様において、本発明は、ＨＣＶプロテアーゼ、特にＨＣＶ  ＮＳ３／ＮＳ４ａセリンプロテアーゼの阻害剤としての式ＩＩＩで示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を開示する（式中、種々の定義は上記のとおりである）。
【００４８】
優れたＨＣＶプロテアーゼ阻害活性を示す本発明の代表的な化合物を、その活性（ｎＭでのＫｉ＊値の範囲）とともに表１に列挙する。
【００４９】
表１：化合物およびＨＣＶプロテアーゼ連続アッセイ結果
【表１】
2004515465.tif 000020
【表２】
2004515465.tif 000021
【表３】
2004515465.tif 000022
ＨＣＶ連続アッセイＫｉ＊範囲：
カテゴリー  ａ＝０〜１００ｎＭ；カテゴリーｂ＝１０１〜９９９ｎＭ；カテゴリーｃ＝１０００〜１０，０００。
【００５０】
いくつかの型の本発明の化合物並びに式Ｉおよび式ＩＩの両方で示される種々の型の本発明の化合物の合成方法を以下に記載し、概説し、例示的な実施例を記載する。
【００５１】
【化９９】
2004515465.tif 000023
【化１００】
2004515465.tif 000024
【化１０１】
2004515465.tif 000025
【化１０２】
2004515465.tif 000026
【化１０３】
2004515465.tif 000027
【化１０４】
2004515465.tif 000028
【化１０５】
2004515465.tif 000029
【化１０６】
2004515465.tif 000030
【化１０７】
2004515465.tif 000031
【００５２】
構造に依存して、本発明の化合物は、有機もしくは無機酸、または有機もしくは無機塩基と医薬上許容される塩を形成し得る。そのような塩の形成に適切な酸の例としては、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、クエン酸、マロン酸、サリチル酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、アスコルビン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸ならびに当業者に周知の他の鉱酸およびカルボン酸が挙げられる。塩基との塩の形成については、適切な塩基は、例えば、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＮＨ４ＯＨ、テトラアルキルアンモニウムヒドロキシドなどである。
【００５３】
別の実施態様において、本発明は、本発明のペプチドを有効成分として含有する医薬組成物を提供する。医薬組成物は、一般にさらに医薬上許容される担体希釈剤、賦形剤または担体（本明細書において担体物質と総称する）を含む。それらのＨＣＶ阻害活性のために、そのような医薬組成物は、Ｃ型肝炎および関連障害の処置において有用性を有する。
【００５４】
さらに別の実施態様において、本発明は、有効成分として本発明の化合物を含む医薬組成物の製造方法を開示する。本発明の医薬組成物および方法において、有効成分は、代表的には意図される投与形態、すなわち経口錠剤、カプセル（固体充填、半固体充填または液体充填）、構成用散剤、経口ゲル、エリキシル、分散性顆粒、シロップ、懸濁液などに関連して適切に選択され、通常の薬学の慣例に合致した適切な担体物質と混合して投与される。例えば、錠剤またはカプセル形態での経口投与については、活性薬物成分を、いずれかの経口用の非毒性の医薬上許容される不活性担体、例えばラクトース、デンプン、スクロース、セルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、滑石、マンニトール、エチルアルコール（液体形態）などと組み合わせてもよい。さらに、所望または要求される場合、適切な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤を混合物に組み入れてもよい。散剤および錠剤は、本発明の組成物を約５〜約９５％含み得る。適切な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖、コーン甘味料、天然および合成ゴム、例えばアカシア、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールおよびロウが挙げられる。滑沢剤の中で、これらの投与形態に用いられるものとしては、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどに言及し得る。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、グアーガムなどが挙げられる。
【００５５】
甘味料および着香料ならびに保存剤もまた、適切であれば含めてもよい。上記の用語のいくつか、すなわち崩壊剤、希釈剤、滑沢剤、結合剤などについては以下でより詳細に記載する。
【００５６】
さらに、本発明の組成物を、いずれかの構成成分または有効成分の１種以上の速度制御放出を提供して、治療効果、すなわちＨＣＶ阻害活性などを最適化するように、持続放出形態で製剤化してもよい。持続放出に適切な投与形態としては、種々の崩壊速度の層または有効成分を含浸させた制御放出ポリマーマトリックスを含有し錠剤形態に成形された層状錠剤、またはそのような含浸または被包された多孔質ポリマーマトリックスを含有するカプセルが挙げられる。
【００５７】
液体形態調製物としては、溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。例として、非経口注射用の、または経口溶液、懸濁液およびエマルジョンの甘味料および鎮静物の添加用の水または水−プロピレングリコール溶液に言及し得る。液体形態調製物はまた、鼻腔内投与用溶液を包含し得る。
【００５８】
吸入に適切なエーロゾル調製物は、溶液および粉末形態の固体を包含し得、これを不活性圧縮気体（例えば、窒素）のような医薬上許容される担体と組合せてもよい。
【００５９】
坐剤の製造については、まず低融点ロウ、例えば脂肪酸グリセリドの混合物（例えば、ココアバター）を溶解し、そして攪拌または同様な混合によりそこに有効成分を均一に分散させる。次いで、融解した均一の混合物を好適な大きさの鋳型中に注ぎ、放冷することにより固化させる。
【００６０】
また、使用直前に経口または非経口投与用液体形態調製物に変換することを意図した固体形態調製物も含まれる。そのような液体形態としては、溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。
【００６１】
本発明の化合物はまた、経皮送達可能であり得る。経皮組成物は、クリーム、ローション、エーロゾルおよび／またはエマルジョンの形態を取り得、この目的で当該分野において慣習的であるように、マトリックスまたはレザーバー型の経皮パッチに含めることができる。
【００６２】
好ましくは、化合物は経口、静脈内または皮下投与される。
【００６３】
好ましくは、医薬調製物は単位投与形態をとる。そのような形態では、調製物は、適量、例えば所望の目的を達成するのに有効な量の有効成分を含有する適切なサイズの単位用量に小分けされる。
【００６４】
単位用量の調製物中の本発明の活性組成物の量は、特定の適用に従い、一般的には約１．０ミリグラムから約１０００ミリグラム、好ましくは約１．０から約９５０ミリグラム、より好ましくは約１．０〜約５００ミリグラム、そして代表的には約１〜約２５０ミリグラムの範囲で変動または調整し得る。用いられる実際の投与量は、患者の年齢、性別、体重および処置される病状の重篤さに依存して変動し得る。そのような技術は当業者に周知である。
【００６５】
一般的に、有効成分を含有するヒト経口投与形態を、１日当たり１または２回投与し得る。投与の量および頻度は、主治医の判断に従って調節される。経口投与用に一般的に推奨される一日投与養生法は、単回または分割用量で、一日当たり約１．０ミリグラムから約１０００ミリグラムの範囲であり得る。
【００６６】
いくつかの有用な用語を以下に記載する。
【００６７】
カプセル  −  有効成分を含む組成物を保持または含有させるための、メチルセルロース、ポリビニルアルコール、または変性ゼラチンもしくはデンプンで作製された特殊な容器または封入物をいう。代表的には、硬カプセルは比較的高いゲル強度の骨およびブタ皮膚ゼラチンの混合物から作製される。カプセルそれ自体は小量の色素、不透明化剤、可塑剤および保存剤を含んでもよい。
【００６８】
錠剤  −  適切な希釈剤と共に有効成分を含有する圧縮または成形された固体投与形態をいう。錠剤は、湿式造粒、乾式造粒または圧縮により得られた混合物または造粒物の圧縮により製造することができる。
【００６９】
経口ゲル  −  親水性半固体マトリックス中に分散または可溶化された有効成分をいう。
【００７０】
構成用散剤は、水またはジュース中に懸濁し得る有効成分および適切な希釈剤を含有する粉末混合物をいう。
【００７１】
希釈剤  −  組成物または投与形態の主な部分を通常構成する物質をいう。適切な希釈剤としては、糖類（例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトール）；コムギ、トウモロコシ、イネおよびジャガイモ由来のデンプン；ならびにセルロース（例えば、微晶性セルロース）が挙げられる。組成物中の希釈剤の量は、全組成物重量に対し約１０〜約９０重量％、好ましくは約２５〜約７５重量％、より好ましくは約３０〜約６０重量％、よりさらに好ましくは約１２〜約６０重量％の範囲であり得る。
【００７２】
崩壊剤  −  組成物に添加して、その分解（崩壊）を補助し、医薬を放出させる物質をいう。適切な崩壊剤としては、デンプン；「冷水可溶性」修飾デンプン（例えば、カルボキシメチルデンプンナトリウム）；天然および合成ゴム（例えば、イナゴマメ、カラヤ、グアー、トラガカントおよび寒天）；セルロース誘導体（例えば、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム）；微晶性セルロースおよび架橋微晶性セルロース（例えば、クロスカルメロースナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ））；アルギネート（例えば、アルギン酸およびアルギン酸ナトリウム）；粘土（例えば、ベントナイト）；ならびに発泡性混合物が挙げられる。組成物中の崩壊剤の量は、組成物重量に対し約２〜約１５重量％、より好ましくは約４〜約１０重量％の範囲であり得る。
【００７３】
結合剤  −  粉末を一緒に結合または「接着」させ、処方物中で顆粒を形成させ、従って「接着剤」として作用することによりそれらを粘着性にする物質をいう。結合剤は、既に希釈剤または増量剤において得られる粘着強度を追加する。適切な結合剤としては、糖類（例えば、スクロース）；コムギ、トウモロコシ、イネおよびジャガイモ由来のデンプン；天然ゴム（例えば、アカシア、ゼラチンおよびトラガカント）；海藻誘導体（例えば、アルギン酸、アルギン酸ナトリウムおよびアルギン酸カルシウムアンモニウム）；セルロース物質（例えば、メチルセルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウムおよびヒドロキシプロピルメチルセルロース）；ポリビニルピロリドン；ならびに無機物（例えば、ケイ酸アルミニウムマグネシウム）が挙げられる。組成物中の結合剤の量は、組成物重量に対して約２〜約２０重量％、より好ましくは約３〜約１０重量％、さらに好ましくは約３〜約６重量％の範囲であり得る。
【００７４】
滑沢剤  −  投与形態に添加して、圧縮後に、摩擦または摩損を低下させることにより、錠剤、顆粒などの鋳型またはダイからの放出を可能にする物質をいう。適切な滑沢剤としては、金属ステアレート（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはステアリン酸カリウム）；ステアリン酸；高融点ロウ；ならびに水溶性滑沢剤（例えば、塩化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、ポリエチレングリコールおよびｄ’ｌ−ロイシン）が挙げられる。滑沢剤は、顆粒の表面およびそれらの中間ならびにタブレット成形機のパーツに存在しなければならないので、通常は圧縮前の最終工程で加えられる。組成物中の滑沢剤の量は、組成物重量に対して約０．２〜約５重量％、好ましくは約０．５〜約２重量％、より好ましくは約０．３〜約１．５重量％の範囲であり得る。
【００７５】
滑剤  −  流れが円滑かつ一様になるように、ケーキングを防止し、造粒物の流動特性を改善する物質。適切な滑剤としては、二酸化珪素および滑石が挙げられる。組成物中の滑剤の量は、全組成物重量に対して約０．１〜約５重量％、好ましくは約０．５〜約２重量％の範囲であり得る。
【００７６】
着色剤  −  組成物または投与形態に彩色を施す賦形剤。そのような賦形剤は、食品用色素、および適切な吸着剤（例えば、粘土または酸化アルミニウム）に吸着させた食品用色素を包含し得る。着色剤の量は、組成物重量に対して約０．１〜約５重量％、好ましくは約０．１〜約１重量％の範囲で変動し得る。
【００７７】
生物学的利用能  −  標準または対照と比較した場合の、活性薬物成分または治療的部分が投与された投与形態から全身的循環に吸収される速度および程度をいう。
【００７８】
慣習的な錠剤の製造方法は公知である。そのような方法としては、乾式方法（例えば、直接圧縮および圧縮により生成された造粒物の圧縮）、または湿式方法もしくは他の特殊な手順が挙げられる。例えばカプセル、坐剤などの他の投与形態の慣習的な製造方法もまた周知である。
【００７９】
本発明の別の実施態様は、例えばＣ型肝炎などの疾患の処置のための、上記医薬組成物の使用を開示する。この方法は、そのような疾患を有するかまたはそのような処置を必要とする患者に治療有効量の本発明の医薬組成物を投与する工程を包含する。
【００８０】
さらに別の実施態様において、本発明の化合物をヒトにおけるＨＣＶの処置のために、単独療法様式または併用療法様式（例えば、リバビリンのような抗ウイルス剤および／またはα−インターフェロンのようなインターフェロンとの組合せなど）で使用し得る。
【００８１】
上記のように、本発明はまた、化合物の互変異性体、回転異性体、鏡像異性体および他の立体異性体を包含する。すなわち、当業者には理解されるように、本発明の化合物のいくつかは適切な異性体形態で存在し得る。そのような変形が本発明の範囲内にあることが意図される。
【００８２】
本発明の別の実施態様は、本明細書に開示される化合物の製造方法を開示する。これらの化合物は、当該分野において公知のいくつかの技術により製造され得る。代表的な例示的な手順を下記反応スキームで概説する。下記の例示的なスキームには、いくつかの代表的な本発明の化合物の製造が記載されているが、天然および非天然の両方のアミノ酸のいずれかの適切な置換により、そのような置換に基いた所望の化合物が形成されることを理解すべきである。そのような変形が本発明の範囲内にあることが意図される。
【００８３】
下記のスキーム、製造および実施例の記載で使用される略語は以下の通りである：
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＡｃＯＨ：酢酸
ＨＯＯＢｔ：３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン
ＥＤＣｌ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＡＤＤＰ：１，１’−（アゾジカルボニル）ジピペリジン
ＤＥＡＤ：ジエチルアゾジカルボキシレート
ＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＨＯＢｔ：Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＴＥＭＰＯ：２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ  フリーラジカル
ＴＢＴＵ：２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾル−１−イル）−１，１，３，３，−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
ＰＡＭ：４−ヒドロキシメチルフェニルアセトアミドメチル
ＤＴＴ：ジチオトレイトール
Ｈｕｅｎｉｇｓ塩基（ＤＩＰＥＡまたはＤＩＥＡ）：ジイソプロピルエチルアミン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＭｅＯＨ：メタノール
ＥｔＯＨ：エタノール
Ｅｔ２Ｏ：ジエチルエーテル
ＰｙＢｒＯＰ：ブロモ−トリス−ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
Ｔｒｉ：トリチル
ＰＭＢ：パラ−メトキシベンジル
Ｂｚｌ＝Ｂｎ：ベンジル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｃｂｚ：ベンジルオキシカルボニル
Ｃｐ：シクロペンチルジエニル
Ｔｓ：ｐ−トルエンスルホニル
Ｍｅ：メチル
【００８４】
一般的製造スキーム
以下のスキームは中間体ビルディングブロックの合成方法を記載する：
スキーム１
【化１０８】
2004515465.tif 000032
【００８５】
スキーム２
【化１０９】
2004515465.tif 000033
【００８６】
スキーム３
【化１１０】
2004515465.tif 000034
【００８７】
スキーム４
（式中ａｌｌｙｌはアリルを表す。以下同様）
【化１１１】
2004515465.tif 000035
【００８８】
中間体の製造：
アミノ酸をＮ−Ｂｏｃ、Ｎ−Ｃｂｚ、ＣＯＯＢｚｌ、ＣＯＯＢｕｔ、Ｏｂｚｌ、Ｏｂｕｔ、ＣＯＯＭｅで修飾（種々の組み合わせで互いの存在下での取り付け、取り外しの両方）する手順は一般に当業者に周知である。公知の手順からのいずれもの改変も本明細書中に示される。
【００８９】
種々の本発明の化合物の製造においてＰ２ユニットとして使用される以下のアミノ酸は市販されており、公知の手順を使用し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートを用いてそれらをそのＮ−Ｂｏｃ誘導体に変換した。
【化１１２】
2004515465.tif 000036
【００９０】
Ｐ２ユニットとして使用される以下のＮ−Ｂｏｃアミノ酸は市販されている。
【化１１３】
2004515465.tif 000037
【００９１】
Ｐ２ユニットとして使用される以下のＮ−Ｂｏｃアミノ酸は市販されている。カルボン酸をカップリングした後、次のカップリングの前にＦｍｏｃをピペリジンでの公知の処理によって除去する。
【化１１４】
2004515465.tif 000038
【００９２】
市販されていない特定の中間体を、必要に応じて下記の手順に従って合成した：
１．
【化１１５】
2004515465.tif 000039
【００９３】
Ａ．メシラート：
トリフェニルホスフィン（８．７ｇ）、トルエン（２００ｍＬ）およびメタンスルホン酸（２．０７ｍＬ）の混合物を１５℃で撹拌し、その間、ジエチルアジドジカルボキシレート（７．１８ｇ）を添加して、温度を３５℃より低く維持した。混合物を２０℃に冷却し、Ｎ−Ｂｏｃアミノ酸（７．４ｇ、Ｂａｃｈｅｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｉｎｃ．）およびＥｔ３Ｎ（１．４５ｍＬ）を添加し、次いで混合物を７０℃で５時間撹拌した。混合物を５℃に冷却し、有機上清をデカントし、溶媒を真空下でそこから除去した。残渣をＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）とともに沈殿が生じるまで撹拌し、混合物を濾過し、エーテル溶液をシリカゲルのクロマトグラフィーに供して（５：９５〜２０：８０  ＥｔＯＡｃ−Ｅｔ２Ｏ）、生成物を得（９．３ｇ）これを次の工程に使用した。
【００９４】
Ｂ．アジド
アジ化ナトリウム（１．９８ｇ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）中の上記工程の生成物（９．３ｇ）の溶液に添加し、混合物を７０℃で８時間撹拌した。混合物を冷却し、５％ＮａＨＣＯ３水溶液中に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。混合物を濾過し、濾液を真空下で蒸発させて、生成物（６．２ｇ）を得、これを次の工程に使用した。
【００９５】
Ｃ．Ｎ−Ｃｂｚ（４−Ｎ−Ｂｏｃ）−ＰｒＯ−ＯＭｅ
ジオキサン（４０ｍＬ）中の上記工程の生成物（０．６ｇ）の溶液を、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（０．８ｇ）、１０％Ｐｄ−Ｃ（０．０３ｇ）および１気圧の水素で１８時間処理した。混合物を濾過し、濾液を真空下で蒸発させ、残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーに供して（１：１〜２：１  Ｅｔ２Ｏ−ヘキサン）、生成物を得た。
【００９６】
Ｄ．Ｎ−Ｃｂｚ（４−Ｎ−Ｂｏｃ）−ＰｒＯ−ＯＨを、ＬｉＯＨを使用する公知のエステル加水分解を使用して製造した。
【００９７】
２．酸化によるスルホン：
【化１１６】
2004515465.tif 000040
【００９８】
これらを、Ｕ． Ｌａｒｓｓｏｎ， ｅｔ ａｌ．， Ａｃｔａ Ｃｈｅｍ． Ｓｃａｎ．， （１９９４）， ４８（６）， ５１７−５２５の手順に従って製造した。水（１１０ｍＬ）中のオキソン（ｏｘｏｎｅ（Ｒ））（２０．２ｇ、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．）の溶液をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中のスルフィド（７．２ｇ、Ｂａｃｈｅｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｉｎｃ．）の０℃の溶液に徐々に添加した。冷浴をはずし、混合物を４時間撹拌した。混合物をロータリーエバポレーターで１／２容量に濃縮し、冷水（１００ｍＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃで抽出し、抽出物をブラインで洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。混合物を濾過し、濾液を真空下で蒸発させて、生成物を白色固体として得た（７．７ｇ）。一部を（ｉ−Ｐｒ）２Ｏから結晶化させて、分析試料を得た。［α］Ｄ  ＋８．６（ｃ  ０．８、ＣＨＣｌ３）。同じ手順を使用して、示す他のスルフィドをスルホンに酸化して目的物に誘導した。
【００９９】
製造例１：Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−ＯＨ（１．６）の製造（スキーム１）
工程Ａ  化合物（１．１）
−２０℃のＡｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（２．０ｇ）、Ｈ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＭｅ・ＨＣｌ（２．０ｇ）、ＨＯＯＢｔ（１．３４ｇ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．８７ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（７０ｍＬ）の混合物にＥＤＣｌ（２．５０ｇ）を添加し、４８時間撹拌した。反応混合物を５％ＫＨ２ＰＯ４水溶液（５００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した（２×１５０ｍＬ）。合した有機相を冷５％Ｋ２ＣＯ３水溶液、次いで５％ＫＨ２ＰＯ４水溶液、次いでブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥した。混合物を濾過し、真空下で蒸発させた。残渣をヘキサン（２００ｍＬ）を用いて粉砕し、濾過して、表題化合物を得た（３．４ｇ、９６％収率）、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ）Ｒｆ＝０．７。
【０１００】
工程Ｂ  化合物（１．２）
工程Ａからの化合物（１．１）（３．４ｇ）、ＭｅＯＨ（１２５ｍＬ）および１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（７．２５ｍＬ）の溶液を室温で１８時間撹拌した。混合物を濃縮し、冷０．５Ｎ  ＨＣｌ（２５０ｍＬ）で処理し、酢酸エチルで抽出した（２×１５０ｍＬ）。合した有機相を冷水、次いでブラインで洗浄した。混合物を真空下で蒸発させ、Ｅｔ２Ｏ−ヘキサンを用いて粉砕し、濾過して、表題化合物を得た（２．８ｇ、８５％収率）。
【０１０１】
工程Ｃ  化合物（１．３）
本質的に工程Ａと同様にし、Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＨの代わりに工程Ｂの生成物である化合物（１．２）を、Ｈ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｏｍｅの代わりにＨ−Ｖａｌ−ＯＭｅ・ＨＣｌをそれぞれ比例した量で使用して、表題化合物を製造した（８０％、収率）。
【０１０２】
工程Ｄ  化合物（１．４）
本質的に工程Ｂと同様にし、工程Ａの生成物である化合物（１．１）の代わりに工程Ｃの生成物である化合物（１．３）の比例した量を使用して、表題化合物を製造した（４１％、収率）；Ｃ２５Ｈ４３Ｎ３Ｏ９（５２９．６４）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝５３０．３；［α］Ｄ  −２４．６（ｃ＝０．７、ＭｅＯＨ）。
【０１０３】
工程Ｅ  化合物（１．５）
本質的に工程Ａと同様にし、Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−ＯＨの代わりに工程Ｄの生成物である化合物（１．４）を、Ｈ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｏｍｅの代わりにＨ−Ｖａｌ−ＯＢｚｌ・ＨＣｌをそれぞれ比例した量で使用して、表題化合物を製造した（８６％、収率）。Ｃ３７Ｈ５８Ｎ４Ｏ１０（７１８．９０）質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝７１９．３。
【０１０４】
工程Ｆ  化合物（１．６）
工程Ｅの生成物である化合物（１．５）（２．６ｇ）、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．２ｇ）およびＥｔＯＨ−ジオキサン（１：１、２４０ｍＬ）の混合物を１気圧Ｈ２下１８時間撹拌した。混合物を濾過し、真空下で蒸発乾固して、表題化合物（２．１ｇ、９３％収率）を得た。Ｃ３０Ｈ５２Ｎ４Ｏ１０（６２８．７７）質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝６２９．５。
【０１０５】
製造例２：
工程Ａ  化合物（２．２）
【化１１７】
2004515465.tif 000041
【０１０６】
ポット中でＮ−Ｃｂｚ−ヒドロキシプロリンメチルエステル（Ｂａｃｈｅｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ， Ｋｉｎｇ ｏｆ Ｐｒｕｓｓｉａ， Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａから入手可能）、化合物（２．１）（３．０ｇ）、トルエン（３０ｍＬ）および酢酸エチル（３０ｍＬ）を合した。混合物を激しく撹拌し、次いで、ＮａＢｒ／水（１．２８ｇ／５ｍＬ）の溶液を添加した。これに、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ  フリーラジカル（ＴＥＭＰＯ、１７ｍｇ、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ， Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ， Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ）を添加した。撹拌中の混合物を５℃に冷却し、次いで酸化剤の調製した溶液［市販の漂白剤、ＣｌｏｒｏｘＲ（１８ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（２．７５ｇ）および水で４０ｍＬにした］を０．５時間にわたって滴下した。これに、２−プロパノール（０．２ｍＬ）を添加した。有機相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合し、２％チオ硫酸ナトリウム、次いで飽和ブラインで洗浄した。有機溶液を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濾液を真空下で蒸発させて、次の反応に適切な淡黄色ゴムを得た（２．９ｇ、９７％収率）。Ｃ１４Ｈ１５ＮＯ５（２７７．２８）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝２７８．１。
【０１０７】
工程Ｂ  化合物（２．３）
【化１１８】
2004515465.tif 000042
【０１０８】
上記工程Ａからの化合物（２．２）（７．８ｇ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）中に溶解し、１５℃に冷却した。この混合物に、まず１，３−プロパンジチオール（３．１ｍＬ）、次いで新たに蒸留した三フッ化ホウ素エーテル錯化合物（３．７ｍＬ）を添加した。混合物を室温で１８時間撹拌した。激しく撹拌しながら、Ｋ２ＣＯ３／水（２ｇ／３０ｍＬ）の溶液を慎重に添加し、次いで飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）を添加した。有機相を水相（ｐＨ約７．４）から分離し、水（１０ｍＬ）、次いでブラインで洗浄した。有機溶液を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーに供し、トルエン、次いでヘキサン−Ｅｔ２Ｏのグラジエント（２：３〜０：１）で溶出して、褐色油状物を得た（７．０ｇ、６８％収率）。Ｃ１７Ｈ２１ＮＯ４Ｓ２（３６７．４８）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝３６８．１。
【０１０９】
工程Ｃ  化合物（２．４）
【化１１９】
2004515465.tif 000043
【０１１０】
２０℃のアセトニトリル（８００ｍＬ）中の上記工程Ｂからの化合物（２．３）（４５ｇ）の溶液を、新たに蒸留したヨードトリメチルシラン（５３ｍＬ）ですぐに処理した。反応物を３０分間撹拌し、次いで新たに調製したジ−ｔ−ブチルジカーボネート（１０７ｇ）、エチルエーテル（１５０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（６６．５ｍＬ）の溶液中に注いだ。混合物をさらに３０分間撹拌し、ヘキサンで洗浄した（２×５００ｍＬ）。酢酸エチル（１０００ｍＬ）をアセトニトリル下相に添加し、次いで相を１０％ＫＨ２ＰＯ４水溶液（２×７００ｍＬ）およびブラインで洗浄した。濾液を２５℃水浴中真空下で蒸発させ、新たな酢酸エチル（１０００ｍＬ）中に取り出し、連続的に０．１Ｎ  ＨＣｌ、０．１Ｎ  ＮａＯＨ、１０％ＫＨ２ＰＯ４水溶液およびブラインで洗浄した。有機溶液を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させた。残渣（６６ｇ）をシリカゲル（２ｋｇ）のクロマトグラフィーに供し、ヘキサン（２Ｌ）、次いでＥｔ２Ｏ／ヘキサン（５５：４５、２Ｌ）、次いでＥｔ２Ｏ（２Ｌ）で溶出して、橙色ゴムを得、これを放置して徐々に結晶化させた（２８ｇ、６９％収率）。Ｃ１４Ｈ２３ＮＯ４Ｓ２（３３３．４６）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝３３４．１。
【０１１１】
工程Ｄ  化合物（２．５）
【化１２０】
2004515465.tif 000044
【０１１２】
２０℃のジオキサン（１５０ｍＬ）中の上記工程Ｃからの化合物（２．４）（１１ｇ）の溶液を１Ｎ  ＬｉＯＨ水溶液（４７ｍＬ）で処理し、３０時間撹拌した。混合物を３０℃水浴中真空下で半分の容量に濃縮した。残留物を水（３００ｍＬ）で希釈し、Ｅｔ２Ｏで抽出した（２×２００ｍＬ）。水相を１２Ｎ  ＨＣｌ（３〜４ｍＬ）を用いてｐＨ約４まで酸性にし、酢酸エチルで抽出し、ブラインで洗浄した。有機溶液を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させて、表題化合物を得た（８．１ｇ、７８％）。Ｃ１３Ｈ２１ＮＯ４Ｓ２（３１９．４４）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝３２０．１。
【０１１３】
工程Ｅ  化合物（２．６）
【化１２１】
2004515465.tif 000045
【０１１４】
ジオキサン（５ｍＬ）中の上記工程Ｃからの化合物（２．４）（１ｇ）の溶液に、４Ｎ  ＨＣｌ−ジオキサン溶液（５０ｍＬ）を添加した。混合物を激しく１時間撹拌した。混合物を２５℃水浴中真空下で蒸発させた。残渣をＥｔ２Ｏを用いて粉砕し、濾過して、表題化合物を得た（０．７６ｇ、９３％収率）。Ｃ９Ｈ１５ＮＯ２Ｓ２・ＨＣｌ（２６９．８１）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝２３４．０。
【０１１５】
工程Ｆ  化合物（２．７）
【化１２２】
2004515465.tif 000046
【０１１６】
上記工程Ｅからの化合物（２．６）（１．１２ｇ）、Ｎ−Ｂｏｃ−シクロヘキシルグリシン（１．０ｇ、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ， Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）、ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）およびＰｙＢｒＯＰカップリング試薬（２．１ｇ）の混合物を５℃に冷却した。これに、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡまたはＤＩＰＥＡ、２．８ｍＬ）を添加した。混合物を冷却して１分間撹拌し、次いで室温で６時間撹拌した。反応混合物を冷５％Ｈ３ＰＯ４水溶液（１５０ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した（２×１５０ｍＬ）。合した有機相を冷５％Ｋ２ＣＯ３水溶液、次いで５％ＫＨ２ＰＯ４水溶液、次いでブラインで洗浄した。有機溶液を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡｃ−ＣＨ２Ｃｌ２で溶出して、白色固体を得た（０．８ｇ、５０％収率）。Ｃ２２Ｈ３６Ｎ２Ｏ５Ｓ２（４７２．６６）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝４７３．２。
【０１１７】
工程Ｇ  化合物（２．８）
【化１２３】
2004515465.tif 000047
【０１１８】
本質的に上記工程Ｄと同じ手順に従い、出発材料として化合物（２．７）（０．８ｇ）を使用して、化合物（２．８）（０．７ｇ）を得た。Ｃ２１Ｈ３４Ｎ２Ｏ５Ｓ２（４５８．６４）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝４５９．２。
【０１１９】
工程Ｈ  化合物（２．９）
【化１２４】
2004515465.tif 000048
【０１２０】
本質的に上記工程Ｅと同じ手順に従い、出発材料として化合物（２．８）を使用して、化合物（２．９）を得た。Ｃ１７Ｈ２８Ｎ２Ｏ３Ｓ２・ＨＣｌ（４０９．０１）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝３７３．２。
【０１２１】
製造例３：
工程Ａ  化合物（３．１）
【化１２５】
2004515465.tif 000049
【０１２２】
本質的に製造例２、工程Ｂと同じ手順に従い、プロパンジチオールの代わりにエタンジチオールを使用して、化合物（３．１）を得た。
【０１２３】
工程Ｂ  化合物（３．２）
【化１２６】
2004515465.tif 000050
【０１２４】
本質的に製造例２、工程Ｃと同じ手順に従い、化合物（２．３）の代わりに化合物（３．１）を使用して、生成物として化合物（３．２）を得た。
【０１２５】
工程Ｃ  化合物（３．３）
【化１２７】
2004515465.tif 000051
【０１２６】
本質的に製造例２、工程Ｄと同じ手順に従い、化合物（２．４）の代わりに化合物（３．２）を使用して、生成物として化合物（３．３）を得た。
【０１２７】
工程Ｄ  化合物（３．４）
【化１２８】
2004515465.tif 000052
【０１２８】
本質的に製造例２、工程Ｅと同じ手順に従い、化合物（２．４）の代わりに化合物（３．２）を使用して、生成物として化合物（３．４）を得た。
【０１２９】
工程Ｅ  化合物（３．５）
【化１２９】
2004515465.tif 000053
【０１３０】
本質的に製造例２、工程Ｆと同じ手順に従い、化合物（２．６）の代わりに化合物（３．４）を使用して、生成物として化合物（３．５）を得た。
【０１３１】
工程Ｆ  化合物（３．６）
【化１３０】
2004515465.tif 000054
【０１３２】
本質的に製造例２、工程Ｇと同じ手順に従い、化合物（２．７）の代わりに化合物（３．５）を使用して、生成物として化合物（３．６）を得た。
【０１３３】
工程Ｇ  化合物（３．７）
【化１３１】
2004515465.tif 000055
【０１３４】
本質的に製造例２、工程Ｈと同じ手順に従い、化合物（２．７）の代わりに化合物（３．５）を使用して、生成物として化合物（３．７）を得た。
【０１３５】
製造例４：
工程Ａ  化合物（４．１）
【化１３２】
2004515465.tif 000056
【０１３６】
−２０℃で撹拌中のＤＭＦ（１５ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中の化合物（４．０１）（３．００ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）（Ｓ． Ｌ． Ｈａｒｂｅｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ． ３７ （１８）， ２９１８−２９２９ （１９９４）に従って製造した）の溶液に、ＨＯＯＢｔ（１．９７ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（４．０ｍＬ、３６．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣｌ（２．７９ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１０分間撹拌し、次いでＨＣｌ・Ｈ２Ｎ−Ｇｌｙ−Ｏアリル（２．５６ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を−２０℃で２時間撹拌し、次いで冷蔵庫中で一晩維持した。溶液を濃縮乾固し、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈した。次いで、ＥｔＯＡｃ溶液を２回飽和ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏ、５％Ｈ３ＰＯ４およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮乾固して、生成物（４．１）を得た。ＬＲＭＳ  ｍ／ｚ  ＭＨ＋＝３４５．２。
【０１３７】
工程Ｂ  化合物（４．２）
【化１３３】
2004515465.tif 000057
（式中、ａｌｌｙｌはアリルを表す。以下同様）
【０１３８】
本質的に製造例２、工程Ｅと同じ手順に従い、出発材料として上記工程Ａからの化合物（４．１）を使用して、化合物（４．２）を得た。Ｃ１１Ｈ２０ＮＯ４・ＨＣｌ（２８０．７５）。
【０１３９】
工程Ｃ  化合物（４．３）
【化１３４】
2004515465.tif 000058
【０１４０】
本質的に製造例１、工程Ａと同じ手順に従い、上記工程Ｂからの化合物（４．２）を製造例３、工程Ｃからの化合物（３．３）と反応させて、化合物（４．３）を得た。Ｃ２８Ｈ３７Ｎ３Ｏ７Ｓ２（５３１．６９）。
【０１４１】
工程Ｄ  化合物（４．４）
【化１３５】
2004515465.tif 000059
【０１４２】
本質的に製造例２、工程Ｅと同じ手順に従い、出発材料として上記工程Ｃからの化合物（４．３）を使用して、化合物（４．４）を得た。Ｃ１８Ｈ３０Ｎ４Ｏ５Ｓ２・ＨＣｌ（４８３．０５）。
【０１４３】
工程Ｅ  化合物（４．５）
【化１３６】
2004515465.tif 000060
【０１４４】
本質的に製造例１、工程Ａと同じ手順に従い、上記工程Ｄからの化合物（４．４）をＮ−Ｂｏｃ−シクロヘキシルグリシンと反応させて、化合物（４．５）を得た。Ｃ３１Ｈ５０Ｎ４Ｏ８Ｓ２（６７０．８８）。
【０１４５】
工程Ｆ  化合物（４．６）
【化１３７】
2004515465.tif 000061
【０１４６】
本質的に製造例２、工程Ｅと同じ手順に従い、出発材料として上記工程Ｅからの化合物（４．５）を使用して、化合物（４．６）を得た。Ｃ２６Ｈ４２Ｎ４Ｏ６Ｓ２・ＨＣｌ（６０７．２３）。
【０１４７】
工程Ｇ  化合物（４．７）
【化１３８】
2004515465.tif 000062
【０１４８】
本質的に製造例１、工程Ａと同じ手順に従い、上記工程Ｆからの化合物（４．６）を製造例１、工程Ｄからの化合物（１．４）と反応して、化合物（４．７）を得た。Ｃ５１Ｈ８３Ｎ７Ｏ１４Ｓ２（１０８２．３８）。
【０１４９】
工程Ｈ  化合物（４．８）
【化１３９】
2004515465.tif 000063
【０１５０】
上記工程Ｇからの化合物（４．７）（０．４７ｇ）、ジクロロメタン（２０ｍＬ）、メチルスルホキシド（０．９ｍＬ）および２，２−ジクロロ酢酸（０．１４２ｍＬ）の混合物を５℃で撹拌した。これに、ＣＨ２Ｃｌ２（９．６ｍＬ）中１Ｍジシクロヘキシルカルボジイミドの溶液を添加し、得られた混合物を冷却して５分間、室温で３時間撹拌した。メタノール（３ｍＬ）中のシュウ酸（０．３５ｇ）の溶液を添加して、過剰の酸化剤を破壊し、１５分間撹拌し、次いで濾過して、沈殿した尿素を除去した。濾液を過剰の酢酸エチルで希釈し、冷０．１Ｎ  ＮａＯＨ、次いで冷０．２Ｎ  Ｈ３ＰＯ４、次いでブラインで洗浄した。有機溶液を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空下で蒸発させ、残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２のグラジエント（１：９９〜５：９５）で溶出して、表題化合物（４．８）を得た（０．２５ｇ、５３％収率）。Ｃ５１Ｈ８１Ｎ７Ｏ１４Ｓ２（１０８０．３６）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝１０８０．６。
【０１５１】
工程Ｉ  化合物（４．９）
【化１４０】
2004515465.tif 000064
【０１５２】
本質的に製造例２、工程Ｄと同じ手順に従い、出発材料として上記工程Ｈからの化合物（４．８）を使用して、化合物（４．９）を得た。Ｃ４８Ｈ７３Ｎ７Ｏ１４Ｓ２（１０３６．２６）質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝１０３６．６。
【０１５３】
工程Ｊ  化合物（８６）
【化１４１】
2004515465.tif 000065
【０１５４】
上記工程Ｉからの化合物（４．９）（０．１０ｇ）を、無水トリフルオロ酢酸−ジクロロメタン（１：１、１０ｍＬ）の溶液で２時間処理した。溶液をキシレン（５０ｍＬ）で希釈し、真空下で蒸発させた。残渣をＥｔ２Ｏを用いて粉砕し、濾過して、表題化合物（８６）を得た（０．０４ｇ）。Ｃ４０Ｈ６１Ｎ７Ｏ１４Ｓ２（９２８．０８）、質量スペクトル（ＦＡＢ）Ｍ＋１＝９２８．４。
【０１５５】
実施例
製造例１、工程Ａおよび製造例２、工程Ｆ（カップリング）；製造例１、工程Ｂ、製造例１、工程Ｆ、製造例２、工程Ｄおよび製造例４、工程Ｊ（エステル脱保護）；製造例２、工程Ｅおよび製造例４、工程Ｊ（アミン脱保護）；ならびに製造例４、工程Ｈ（ヒドロキシアミドのケトアミドへの酸化）の手順を、上記実施例または市販または文献記載のα−アミノ酸とともに、必要な種々の組合せで使用して、以下の表２の化合物を製造した。
【０１５６】
表２
【表４】
2004515465.tif 000066
【表５】
2004515465.tif 000067
【表６】
2004515465.tif 000068
【表７】
2004515465.tif 000069
【表８】
2004515465.tif 000070
【表９】
2004515465.tif 000071
【表１０】
2004515465.tif 000072
【表１１】
2004515465.tif 000073
【表１２】
2004515465.tif 000074
【表１３】
2004515465.tif 000075
【表１４】
2004515465.tif 000076
【表１５】
2004515465.tif 000077
【表１６】
2004515465.tif 000078
【表１７】
2004515465.tif 000079
【表１８】
2004515465.tif 000080
【表１９】
2004515465.tif 000081
【表２０】
2004515465.tif 000082
【表２１】
2004515465.tif 000083
【表２２】
2004515465.tif 000084
【表２３】
2004515465.tif 000085
【表２４】
2004515465.tif 000086
【表２５】
2004515465.tif 000087
【表２６】
2004515465.tif 000088
【表２７】
2004515465.tif 000089
【表２８】
2004515465.tif 000090
【表２９】
2004515465.tif 000091
【表３０】
2004515465.tif 000092
【表３１】
2004515465.tif 000093
【表３２】
2004515465.tif 000094
【表３３】
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【表３４】
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【表３５】
2004515465.tif 000097
【表３６】
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【表３７】
2004515465.tif 000099
【表３８】
2004515465.tif 000100
【表３９】
2004515465.tif 000101
【表４０】
2004515465.tif 000102
【表４１】
2004515465.tif 000103
【表４２】
2004515465.tif 000104
【表４３】
2004515465.tif 000105
【表４４】
2004515465.tif 000106
【表４５】
2004515465.tif 000107
【表４６】
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【表４７】
2004515465.tif 000109
【０１５７】
さらなる化合物を以下の手順および実施例によって製造した。化合物を実施例直後の表に列挙する。そのように製造した化合物の多くの構造およびその活性を添付の表３に示す。
【０１５８】
表３の化合物の一般的製造手順：
固相合成は本発明の特定の化合物の小量生産に有用である。従来のペプチドの固相合成に関して、ペプチジルアルギニナールの固相合成用の反応器は、溶媒および溶解された試薬に対しては透過性であるが、選択したメッシュサイズの合成樹脂に対しては透過性ではない少なくとも１つの表面を有する反応容器から構成される。そのような反応器としては、焼結ガラスフリットを有するガラス固相反応容器、フリットを有するポリプロピレンチューブもしくはカラム、またはＩｒｏｒｉ Ｉｎｃ．， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ ＣＡ製の反応器ＫａｎｓＴＭが挙げられる。選択する反応器の型は必要とされる固相樹脂の容量に依存し、合成の異なる段階において異なる型の反応器を使用し得る。
【０１５９】
４−アルキルプロリン（合成において使用する中間体）の一般的合成手順（下記工程１〜４）
工程１
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−ピログルタメート
【化１４２】
2004515465.tif 000110
【０１６０】
酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．３Ｌ）中のＬ−ピログルタミン酸（１００ｇ、７７５ｍｍｏｌ）の溶液に、７０％過塩素酸水溶液（２５ｍＬ）を添加した。ゴム隔壁で密封した３リットル丸底フラスコ中で１８時間撹拌した後、反応混合物を慎重に飽和重炭酸ナトリウム水溶液（８００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した（１Ｌ、次いで３００ｍＬ）。合した有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチルＬ−ピログルタメートを得た（１００．５ｇ、７０％質量回収）。ｔｅｒｔ−ブチルＬ−ピログルタメートを４−ジメチルアミノピリジン（６．０ｇ、４９．１ｍｍｏｌ）を含むアセトニトリル（１．５Ｌ）に溶解し、０℃に冷却した。アセトニトリル（１５０ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（１５４ｇ、７０５ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間にわたって添加し、さらに３０分後に冷却浴をはずした。室温で４８時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。残渣をエーテル（１Ｌ）およびヘキサン（１Ｌ）に溶解し、次いで飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２×１００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。溶液を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮して、黄色油状物を得た（１４０ｇ）。残渣をヘキサン（８００ｍＬ）および酢酸エチル（２５ｍＬ）からの再結晶化によって精製し、母液をヘキサン（３００ｍＬ）および酢酸エチル（１０ｍＬ）から再結晶化して、２塊の表題化合物（１２２ｇ、４２８ｍｍｏｌ、５５％）を白色固体として得た。ＮＭＲデータは以前に報告された物質と一致した：Ｒ． Ａ． Ａｕｇｕｓｔ ｅｔ ａｌ， Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ． １ （１９９６） ５０７−５１４。
【０１６１】
工程２
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−４−アルキル−Ｌ−ピログルタメート
【化１４３】
2004515465.tif 000111
【０１６２】
−７８℃で撹拌中のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の工程１の化合物（１．１５ｇ、４．０ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（４．４ｍＬ、４．４ｍｍｏｌ）中のリチウムヘキサメチルジシラジドの１Ｍ溶液を５分間にわたって滴下した。４０分後、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中の臭化アルキル（４．８ｍｍｏｌ）を添加した。−７８℃での２時間の後に、冷却浴をはずし、飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を添加した。溶液を２０分間撹拌し、次いで５０％エーテル／酢酸エチルで抽出した（３×７０ｍＬ）。合した有機相をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーおよび／または再結晶化によって精製して、表題化合物を得た。
【０１６３】
【表４８】
2004515465.tif 000112
【０１６４】
工程３
４−アルキル−プロリン
【化１４４】
2004515465.tif 000113
【０１６５】
（公知の手順（Ｃ． Ｐｅｄｒｅｇａｌ ｅｔ ａｌ， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ３５ （１３） （１９９４） ３５（１３） ２０５３−２０５６．）の改変）−７８℃で撹拌中のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−アルキルピログルタメート（２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（２．４ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）中のリチウムトリエチルボロヒドリドの１Ｍ溶液を５分間にわたって滴下した。３０分後、冷却浴をはずし、飽和塩化重炭酸ナトリウム水溶液（５ｍＬ）を添加した。反応混合物を氷／水浴に沈め、３０％過酸化水素水溶液（１０滴）を添加した。溶液を２０分間０℃で撹拌し、次いで反応混合物を真空下で濃縮して、テトラヒドロフランを除去した。水溶液を水（１０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタンで抽出した（３×４０ｍＬ）。有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（２０ｍＬ）およびトリエチルシラン（３１０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）に溶解し、次いで−７８℃に冷却し、三フッ化ホウ素エーテル錯化合物（２７０μＬ、２．１３ｍｍｏｌ）を滴下した。撹拌を３０分間継続し、その時点でさらにトリエチルシラン（３１０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）および三フッ化ホウ素エーテル錯化合物（２７０μＬ、２．１３ｍｍｏｌ）を添加した。−７８℃でさらに２時間撹拌した後、冷却浴をはずし、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（４ｍＬ）を添加した。５分後に混合物をジクロロメタンで抽出した（３×４０ｍＬ）。有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）に溶解し、雰囲気温度で５時間撹拌した。溶液を濃縮し、次いで高真空下で乾燥して、表題化合物を得た。
【０１６６】
【表４９】
2004515465.tif 000114
【０１６７】
工程４
Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−４−アルキル−プロリン
【化１４５】
2004515465.tif 000115
【０１６８】
ジオキサン（７ｍＬ）、アセトニトリル（１２ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（７００μＬ、４ｍｍｏｌ）中の４−アルキルプロリントリフルオロ酢酸塩（１．５ｍｍｏｌ）の溶液に、アセトニトリル（５ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（４７５ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１２時間撹拌した後、溶液を真空下で濃縮し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）に溶解し、エーテルで洗浄した（３×４０ｍＬ）。水相をクエン酸を用いてｐＨ３まで酸性にし、次いでジクロロメタンで抽出した（３×４０ｍＬ）。合した有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮して、表題化合物を得た。これはさらに精製せずに使用するに十分な純度であった。
【０１６９】
【表５０】
2004515465.tif 000116
【０１７０】
他の中間体の合成：
４−メチルスルフィニル−２Ｓ−フルオレニルメチルオキシカルボアミノ酪酸（Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ（Ｏ２）−ＯＨ：
【化１４６】
2004515465.tif 000117
【０１７１】
０℃のクロロホルム（２２５ｍＬ）中のＮ−α−フルオレニルメチルオキシカルボニル−メチオニン（３．７２ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に、５６〜８７％ｍ−クロロ過安息香酸（２０〜３１ｍｍｏｌ）を小分けして１０分間にわたって添加した。冷浴をはずし、反応物を１８時間撹拌した。固体（４．０９ｇ）を濾過によって採集し（濾液は捨てた）、熱メタノール（９０ｍＬ）に溶解し、放冷し、次いで濾過し、濃縮した。粗生成物を酢酸エチルおよびヘキサンから再結晶化して、表題化合物を得た（２．５７７ｇ、６．３９ｍｍｏｌ、６４％）。
【０１７２】
Ｎ−α−フルオレニルメチルオキシカルボニル−３−メチルスルフィニルアラニン（Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（０２，Ｍｅ）−ＯＨ：
【化１４７】
2004515465.tif 000118
【０１７３】
０℃のクロロホルム（５０ｍＬ）中のＮ−α−フルオレニルメチルオキシカルボニル−Ｓ−メチルシステイン（８９３ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液に、５６〜８７％ｍ−クロロ過安息香酸（１．５５５ｇ、５．０〜７．８ｍｍｏｌ、≧２当量）を小分けして１０分間にわたって添加した。冷浴をはずし、反応物を１８時間撹拌した。固体を濾過によって採集し（濾液は捨てた）、真空下で乾燥し、熱酢酸エチル（１５０ｍＬ）に溶解し、濾過し、濃縮した。固体を最少量の熱メタノールに溶解し、次いでイソプロピルエーテル、続いてヘキサン中１０％酢酸エチルを添加することによって結晶化した。固体（６５８．６ｍｇ）を採集し、再度再結晶化して、表題化合物を得た（５２０ｍｇ、１．３３５ｍｍｏｌ、５３％）。
【０１７４】
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−４−（Ｎ−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−Ｌ−プロリン（Ｂｏｃ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＦｍｏｃ））の合成：（下記工程１〜３）：
工程１
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｃｉｓ−４−クロロ−Ｌ−プロリンベンジルエステル
【化１４８】
2004515465.tif 000119
【０１７５】
Ｎ−  −ｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシ−プロリン（８．７９ｇ、３８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１３．０ｇ、９４ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（４．５ｍｌ、３８ｍｍｏｌ）およびジメチルホルムアミド（１５０ｍＬ）の混合物を１８時間撹拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加し、次いで濾過した。白濁濾液を１Ｍ  ＨＣｌ（１００ｍＬ）を添加することによって澄明にした。相を分離し、水相をさらなる酢酸エチルで抽出した（２×１００ｍＬ）。合した有機相を水で洗浄し（２×５０ｍＬ）、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。トルエンを粗ベンジルエステルに添加し、溶液を濾過し、再濃縮した。ジクロロメタン（７０ｍＬ）および四塩化炭素（７０ｍＬ）、続いてトリフェニルホスフィン（２１．１１ｇ、８０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１０時間撹拌し、エタノール（７ｍＬ）でクエンチングし、さらに５時間撹拌した。溶液を約１００ｍｌに濃縮し、次いでジクロロメタン（４０ｍＬ）を添加し、続いて撹拌しながらエーテル（２００ｍＬ）を添加した。溶液を４時間冷却し、濾過し、濃縮して、黄褐色油状物を得た。これをエーテル／ヘキサン／ジクロロメタン  ２：２：１を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（９．１３ｇ、２６．９ｍｍｏｌ、７１％）を白色固体として得た。
【０１７６】
工程２
Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−４−アジド−Ｌ−プロリンベンジルエステル
【化１４９】
2004515465.tif 000120
【０１７７】
ジメチルホルムアミド（２７０ｍＬ）中の上記工程１の化合物（９．０ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（７．３６ｇ、１１３ｍｍｏｌ）の溶液を７５℃で２日間加熱した。水（１００ｍＬ）を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した（３×１００ｍＬ）。合した有機相を水で洗浄し（３×５０ｍＬ）、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。油状物を酢酸エチル／ヘキサン  １：１を使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を得た（８．５９ｇ、２４．８ｍｍｏｌ、９４％）。
【０１７８】
工程３
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−４−（Ｎ−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−Ｌ−プロリン
【化１５０】
2004515465.tif 000121
【０１７９】
エタノール（５００ｍＬ）中の上記工程２の化合物（８．５９ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素（９００ｍｇ）の混合物をパー（Ｐａｒｒ）水素化装置を使用して５０ｐｓｉで１４時間水素化した。混合物を濾過し、濃縮し、メタノール（６０ｍＬ）に溶解し、再濾過し、濃縮して、無色油状物を得た。油状物を炭酸ナトリウム（５．３１ｇ、５０．１ｍｍｏｌ）を含有する水（５３ｍＬ）に溶解し、ジオキサン（６０ｍＬ）中のフルオレニルメチルスクシニルカーボネート（８．３７ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）の溶液を４０分間にわたって添加した。反応混合物を室温で１７時間撹拌し、次いで濃縮してジオキサンを除去し、水（２００ｍＬ）で希釈した。溶液をエーテルで洗浄した（３×１００ｍＬ）。水溶液のｐＨをクエン酸（注意、泡立つ）および水（１００ｍＬ）を添加することによって２に調整した。混合物をジクロロメタンで抽出し（４００ｍＬ、１００ｍＬ、１００ｍＬ）、合した有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮して、表題化合物を得た。
【０１８０】
Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−４−ｔｒａｎｓ−（Ｎ−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノメチル）−Ｌ−プロリン（Ｂｏｃ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＭｅＮＨＦｍｏｃ）−ＯＨ）（下記工程１〜４）：
工程１
Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニルｃｉｓ−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンベンジルエステル
【化１５１】
2004515465.tif 000122
【０１８１】
ベンゼン（４５ｍＬ）およびベンジルアルコール（４５ｍＬ）中のｃｉｓ−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（５ｇ、３８．１ｍｍｏｌ）の混合物に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（７．６ｇ、４０．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１２５℃で２０時間加熱し、その間、水（２ｍｌ）をディーン−スタークトラップ（Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ ｔｒａｐ）を使用して除去した。溶液を熱いうちに濾過し、次いでエーテル（１５０ｍＬ）を添加した。溶液を３時間室温で、次いで３時間４℃で冷却した。得られた個体を採集し、エーテルで洗浄し（１００ｍＬ）、真空下で１時間乾燥して、１３．５ｇの白色固体を得た。固体をジオキサン（４０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（７．６ｍＬ）に溶解し、次いでジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（１０ｇ、４５．８ｍｍｏｌ）を５分間にわたって添加し、その間、氷浴を使用して一定の反応温度を維持した。室温での１０時間の後に、反応混合物冷水（２００ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した（３×２００ｍＬ）。合した有機相を水（３×１００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。粗生成物をヘキサン中４０〜６０％酢酸エチルを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を得た（１０．０４ｇ、３１．２４ｍｍｏｌ、８２％）。
【０１８２】
工程２
Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニルｃｉｓ−４−メシルオキシ−Ｌ−プロリンベンジルエステル
【化１５２】
2004515465.tif 000123
【０１８３】
０℃のピリジン（６５ｍＬ）中の上記工程２の化合物（８．４５ｍｍｏｌ、２６．３ｍｍｏｌ）の溶液に、メタンスルホニルクロリド（３．４ｍＬ、４４ｍｍｏｌ）を７分間にわたって滴下した。反応混合物を２時間にわたって室温に加温し、次いで一晩撹拌した。ピリジン（２０ｍＬ）中１０％水の溶液を１５分間にわたって添加し、反応混合物を濃縮した。残渣を水に溶解し、酢酸エチルで抽出した（２×２００ｍＬ）。合した有機相を水（２×５０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。得られた残渣をトルエン（１００ｍＬ）に溶解し、濃縮して微量のピリジンを除去した。残渣を真空下で３０分間乾燥して、表題化合物を得た（１０．７ｇ、１０２％）。これを精製せずに次の工程に使用した。
【０１８４】
工程３
Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ｔｒａｎｓ−４−（Ｒ）−シアノ−Ｌ−プロリンベンジルエステル：
【化１５３】
2004515465.tif 000124
【０１８５】
ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中の上記工程３の化合物（１０．７ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムシアニド（１５．０ｇ、５６ｍｍｏｌ）の溶液を油浴中５５℃で２８時間加熱した。冷却後、水（１５０ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した（３×２００ｍＬ）。合した有機相を水（３×１００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１：１  エーテル／ヘキサン）によって精製し、次いで酢酸エチル／ヘキサンから再結晶化して、表題化合物を得た（２．４０ｇ、７．２６ｍｍｏｌ、２８％）。
【０１８６】
工程４
Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−４−ｔｒａｎｓ−（Ｎ−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノメチル）−Ｌ−プロリン：
【化１５４】
2004515465.tif 000125
【０１８７】
上記工程３の化合物（２．３１ｇ、７ｍｍｏｌ）、水（１０ｍＬ）、メタノール（８５ｍＬ）および１０％パラジウム炭素（７００ｍｇ）の混合物をパー（Ｐａｒｒ）水素化装置を使用して５０ｐｓｉで１１時間水素化した。混合物を濾過し、濃縮した。水（１５ｍＬ）および炭酸ナトリウム（１．５ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）を残渣に添加した。ジオキサン（１７ｍＬ）中のフルオレニルメチルスクシニルカーボネート（２．３６ｇ、７．０ｍｍｏｌ）の溶液を５分間にわたって添加し、撹拌を２８時間室温で継続した。反応物を真空下で１５ｍＬ容量に濃縮し、水（１００ｍＬ）を添加した。溶液をエーテルで洗浄した（３×７５ｍＬ）。水溶液のｐＨをクエン酸（約２０ｇ、注意、泡立つ）および水（１００ｍＬ）を添加することによって２に調整した。混合物をジクロロメタンで抽出し（４×１００ｍＬ）、合した有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。粗生成物は多くの不純物を含有しており、そのために３工程の精製を必要とした。粗生成物をジクロロメタン（５０ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）に溶解し、５時間撹拌し、その後濃縮した。残渣を調製用逆相ＨＰＬＣによって精製した。純粋な４−（Ｎ−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノメチル）プロリントリフルオロ酢酸塩（１．８８７ｇ、３．９３ｍｍｏｌ）をジオキサン（１０ｍＬ）、アセトニトリル（２０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ、８ｍｍｏｌ）に溶解した。反応混合物に、ジオキサン（５ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．１ｇ、５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。１８時間撹拌した後、溶液のｐＨをクエン酸（注意、泡立つ）および水（１００ｍＬ）を添加することによって２に調整した。混合物を酢酸エチルで抽出し（３×１５０ｍＬ）、合した有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮した。粗生成物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）に溶解し、エーテルで洗浄した（３×７５ｍＬ）。水相のｐＨをクエン酸を添加することによって３に調整し、次いでジクロロメタンで抽出した（４×１００ｍＬ）。合した有機相を乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、濃縮して、表題化合物を得た（１．３７３ｇ、２．９４ｍｍｏｌ、４２％）。
【０１８８】
本発明の化合物の合成手順：
手順Ａ：カップリング反応：ＤＭＦに懸濁した樹脂（１０〜１５ｍＬ／ｇ樹脂）をＦｍｏｃ−アミノ酸（１当量）、ＨＯＢｔ（１当量）、ＴＢＴＵ（１当量）およびＤＩＥＡ（１当量）に添加した。混合物を４〜４８時間反応した。反応物を排出し、樹脂を連続的にジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、メタノール、ジクロロメタンおよびジエチルエーテル（１０〜１５ｍＬ溶媒／ｇ樹脂使用）で洗浄した。次いで、樹脂を真空下で乾燥した。
【０１８９】
手順Ｂ：カップリング反応：Ｎ−メチルピロリジン（ＮＭＰ）（１０〜１５ｍＬ／ｇ樹脂）中に懸濁した樹脂に、Ｆｍｏｃ−アミノ酸（２当量）、ＨＯＡｔ（２当量）、ＨＡＴＵ（２当量）およびジイソプロピルエチルアミン（４当量）を添加した。混合物を４〜４８時間反応した。反応物を排出し、樹脂を連続的にジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、メタノール、ジクロロメタンおよびジエチルエーテル（１０〜１５ｍＬ溶媒／ｇ樹脂使用）で洗浄した。次いで、樹脂を真空下で乾燥した。
【０１９０】
手順Ｃ：Ｆｍｏｃ脱保護：Ｆｍｏｃ保護樹脂をジメチルホルムアミド中２０％ピペリジン（１０ｍＬ試薬／ｇ樹脂）で３０分間処理した。試薬を排出し、樹脂を連続的にジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、メタノール、ジクロロメタンおよびジエチルエーテル（１０ｍＬ溶媒／ｇ樹脂使用）で洗浄した。
【０１９１】
手順Ｄ：Ｂｏｃ脱保護：Ｂｏｃ保護樹脂をジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸の１：１混合物で２０〜６０分間処理した（１０ｍＬ溶媒／ｇ樹脂）。試薬を排出し、樹脂を連続的にジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルホルムアミド中５％ジイソプロピルエチルアミン、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタンおよびジメチルホルムアミド（１０ｍＬ溶媒／ｇ樹脂）で洗浄した。
【０１９２】
手順Ｅ：無水酢酸でのアセチル化：樹脂をジメチルホルムアミドに懸濁した。アセチル化試薬（５ｍｍｏｌ（０．４７ｍＬ）の無水酢酸および５ｍｍｏｌ（０．７０ｍＬ）のトリエチルアミンを１５ｍＬのジメチルホルムアミドに添加することによって調製）を樹脂に添加し、樹脂を３０分間撹拌した。樹脂を連続的にジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、メタノール、ジクロロメタンおよびジエチルエーテル（１０ｍＬ溶媒／ｇ樹脂）で洗浄した。
【０１９３】
手順Ｆ：セミカルバゾン加水分解：樹脂をトリフルオロ酢酸：ピルビン酸：ジクロロメタン：水  ９：２：２：１からなる切断混合物（１０ｍＬ／ｇ樹脂）中に２時間懸濁した。反応物を排出し、手順をさらに３回反復した。樹脂を連続的にジクロロメタン、水およびジクロロメタンで洗浄し、真空下で乾燥した。
【０１９４】
手順Ｇ：ＨＦ切断：乾燥したペプチド−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇ−Ｏ−ＰＡＭ樹脂（５０ｍｇ）を、小さなスターバーを含むＨＦ容器中に入れた。アニソール（総容量の１０％）を捕捉剤として添加した。グルタミン酸およびシステインアミノ酸の存在下、チオアニソール（１０％）および１，２−エタンジチオール（０．２％）も添加した。次いで、ＨＦ容器をＨＦ装置（Ｉｍｍｕｎｏ Ｄｙｎａｍｉｃｓ， Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ）に取り付け、システムを窒素で５分間フラッシュした。次いで、これをドライアイス／イソプロパノール浴を用いて−７０℃に冷却した。２０分後、ＨＦを所望の容量まで蒸留した（１０ｍＬ  ＨＦ／ｇ樹脂）。反応を１．５時間０℃で進行させた。ワークアップ（ｗｏｒｋ ｕｐ）は窒素を使用する全てのＨＦの除去からなった。次いで、ジクロロメタンを樹脂に添加し、混合物を５分間撹拌した。次いで、水中２０％酢酸（４ｍＬ）を添加した。２０分間撹拌後、樹脂をガラス濾過器を使用して濾過し、ジクロロメタンを減圧下で除去した。残渣にヘキサンを添加し、混合物を撹拌し、相を分離した（これを２回反復して、捕捉剤を除去した）。一方、樹脂を１ｍＬのメタノールに浸した。水相（２０％ＨＯＡｃ）を樹脂に添加し、混合物を５分間撹拌し、次いで濾過した。メタノールを減圧下で除去し、水相を凍結乾燥した。次いで、ペプチドを１０〜２５％メタノール（０．１％トリフルオロ酢酸含有）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。
【０１９５】
手順Ｈ：ＨＦピリジン切断：１／２インチフットボールスターバーを含むＨＤＰＥ  ２０ｍＬシンチレーションバイアル中の乾燥ペプチド−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇ−Ｏ−ＰＡＭ樹脂（５０ｍｇ）にチオアニソール（１００μＬ）をピペットマンを使用してを添加した。市販の７０％ＨＦ／ピリジンの溶液（１ｍＬ）を添加した。バイアルを直ちにポリエチレンで裏打ちされたキャップで密封し、穏やかに撹拌しながら氷浴中に入れた。０℃浴中で１時間撹拌した後、浴をはずし、混合物を室温で１時間撹拌した。２時間の切断プロセスの間に、バイアルを定期的に検査し、必要であればフラスコの側面に集まった樹脂をＨＦ溶液中に分散した。バイアルを０℃に冷却し、そのキャップを慎重にはずした。次いで、塩／氷浴を使用してバイアルを−１５℃に冷却した。２３ゲージ針を備えた１０ｍＬ  Ｂ−Ｄシリンジボディをバイアルの上に保持した。このシリンジボディにメトキシトリメチルシラン（２ｍＬ）を反復自動ピペットを使用して添加した。滴下してシリンジボディが空になった後、ＨＦが中和されるまでさらなるメトキシトリメチルシラン（２×２ｍＬ、３ｍＬ（計９ｍＬ））を添加した。バイアルを５分間撹拌し、次いで浴からはずし、２０分間撹拌した。バイアルをスピードバック（ｓｐｅｅｄ ｖａｃ）にかけて濃縮した。塩化メチレン（５ｍＬ）を添加し、樹脂を１０分間撹拌し、１６×１００ｍｍ試験管中に５ｍＬディスポーザブルカラムを使用して濾過した。塩化メチレン濾液を濃縮した。樹脂をさらに水中２０％ＡｃＯＨ（２×３ｍＬ）およびジエチルエーテル（２ｍＬ）で上記試験管中に洗い込んだ。混合物を撹拌して油状物を溶解した。次いでエーテル相を除去し、水相を凍結乾燥した。次いで、ペプチドを１０〜２５％メタノール（０．１％トリフルオロ酢酸含有）に溶解し、逆相ＨＰＬＣによって精製した。
【０１９６】
実施例Ｉ：Ａｃ−ＥＥＶＶＰ−ｎＶ（ＣＯ）−Ｇ−ＯＨの固相合成
【化１５５】
2004515465.tif 000126
工程Ｉ  Ｈ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１５６】
2004515465.tif 000127
ａ）Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリノールの製造
【化１５７】
2004515465.tif 000128
【０１９７】
０℃に冷却したテトラヒドロフラン（４６１ｍＬ）中のＮ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリン（２５．０ｇ、０．１１５ｍｏｌ）の溶液に、ボラン／テトラヒドロフラン錯体（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液４６１ｍＬ）を滴下した。０℃での１時間の後に、溶液を１．５時間にわたって室温に加温した。ＴＬＣによって反応の完了が示された。メタノールを添加して反応をクエンチングした。溶液を濃縮して、表題化合物（２２．５６ｇ、９６％）を泡沫状シロップとして得た。生成物のＴＬＣによって十分な純度が示された。Ｒｆ＝０．３４（４０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０１９８】
ｂ）Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリンヒドロキシｔ−ブチルアミドの製造
【化１５８】
2004515465.tif 000129
【０１９９】
パートＩ：無水ジメチルスルホキシド（１５３ｍＬ）およびトルエン（１５３ｍＬ）中の工程１ａの化合物（７．７７ｇ、３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣ（７３．３２ｇ、３８２ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を０℃に冷却した後、ジクロロ酢酸（１５．８ｍＬ、１９１ｍｍｏｌ）を滴下した。添加が完了した後、反応物を１５分間撹拌した。２時間にわたって溶液を室温に加温した。反応混合物を濃縮してトルエンを除去し、次いで酢酸エチルに溶解した。溶液を連続的に１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで濃縮して、粗Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリナールを得、これを直接次の工程に使用した。Ｒｆ＝０．８４（４０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０２００】
パートＩＩ：ジクロロメタン（１５３ｍＬ）中の粗Ｎ−  −ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリナールの溶液に、ｔ−ブチルイソシアニド（５．１９ｍＬ、４６ｍｍｏｌ）および２，４，６−コリジン（２０．２ｍＬ、１５３ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を０℃に冷却した後、トリフルオロ酢酸（７．６４ｍＬ、７６ｍｍｏｌ）を滴下した。１時間撹拌した後、溶液を室温で３日間撹拌し、その間蓋のない溶液中で溶媒を反応混合物から雰囲気条件下で蒸発させた。反応混合物を濃縮してトルエンを除去し、次いで酢酸エチルに溶解した。溶液を連続的に１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、１０〜４０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出して、８．１２ｇの表題化合物（７０％収率）を黄色シロップとして得た。Ｒｆ＝０．４４（４０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０２０１】
ｃ）エチル３−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−２−ヒドロキシ−ヘキサノエートの製造
【化１５９】
2004515465.tif 000130
【０２０２】
上記工程Ｉｂの化合物（２２．７ｇ、７５ｍｍｏｌ）を６Ｎ  ＨＣｌ（４８０ｍＬ）中で４時間還流した。反応混合物を室温に放冷し、次いでジクロロメタンで洗浄した（３×１００ｍＬ）。水相を濃縮乾固した。残渣をトルエン／ｎ−ヘプタンを用いて粉砕し（３×）、真空下で乾燥して、粗３−アミノ−２−ヒドロキシ−ヘキサン酸を得た。この粗３−アミノ−２−ヒドロキシ−ヘキサン酸を塩化水素飽和エタノール（４０ｍＬ）に溶解した。４時間後、溶液を減圧下で濃縮した。残渣をｎ−ヘプタンを用いて粉砕し（３×）、次いで真空下で乾燥して、粗エチル３−アミノ−２−ヒドロキシ−ヘキサノエートを得た。水（１５０ｍＬ）中のこの粗エチル３−アミノ−２−ヒドロキシ−ヘキサノエートに、炭酸カリウム（３７．３２ｇ、２７０ｍｍｏｌ）を添加した。溶解が完了した後、ジオキサン（１５０ｍＬ）、次いでジ−ｔ−ブチルジカーボネート（１７．７ｇ、８１．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩撹拌し、次いで減圧下で濃縮して、ジオキサンを除去した。溶液をエーテルで抽出し（３×）、次いで１Ｎ  重硫酸ナトリウムを用いてｐＨ２〜３まで酸性にした。溶液を酢酸エチルで抽出し（３×２００ｍＬ）、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を真空下で除去して、１３．２１ｇの表題化合物を７１％収率で得た。
【０２０３】
ｄ）エチルＮ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリルカルボキシレートジフェニルメチルセミカルバゾンの製造（下記パートＩ〜パートＩＩＩ）
【化１６０】
2004515465.tif 000131
パートＩ：１−ｔ−ブトキシカルボニル−セミカルバジド−４−イルジフェニルメタンの合成
【化１６１】
2004515465.tif 000132
【０２０４】
２２５ｍＬのジメチルホルムアミド中のカルボニルジイミダゾール（１６．２ｇ、０．１０ｍｏｌｅ）の溶液を室温で調製し、窒素下で撹拌した。次いで、２２５ｍＬのＤＭＦ中のｔ−ブチルカルバゼート（１３．２ｇ、０．１００ｍｏｌ）の溶液を３０分間にわたって滴下した。次いで、ジフェニルメチルアミン（１８．３ｇ、０．１０ｍｏｌ）を３０分間にわたって添加した。反応物を室温、窒素下で１時間撹拌した。水（１０ｍＬ）を添加し、混合物を減圧下で約１５０ｍＬに濃縮した。この溶液を５００ｍＬの水中に注ぎ、４００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル相を２回それぞれ７５ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌ、Ｈ２Ｏ、飽和重炭酸ナトリウム溶液および塩化ナトリウムで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥した。混合物を濾過し、溶液を濃縮して、２９．５ｇ（８５％収率）の白色泡沫を得た。この物質は酢酸エチル／ヘキサンからの再結晶化によって精製可能であったが、直接次の工程に使用するに十分な純度であった：融点１４２−１４３℃。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ１．４５（ｓ、９Ｈ）、６．１０（ｄｄ、２Ｈ）、６．４２（ｓ、１Ｈ）、６．６７（ｂｓ、１Ｈ）、７．２１−７．３１（ｍ、１０Ｈ）。分析値：Ｃ１９Ｈ２３Ｎ３Ｏ３についての計算値：Ｃ、６６．８４；Ｈ、６．７９；Ｎ、１２．３１。実測値：Ｃ、６６．４６；Ｈ、６．７５；Ｎ；１２．９０。
【０２０５】
パートＩＩ）：ジフェニルメチルセミカルバジド（ｄｐｓｃ）トリフルオロ酢酸塩の合成
【化１６２】
2004515465.tif 000133
【０２０６】
１２．５ｍＬのジクロロメタン中のパートＩ（上記）において得た生成物（３．４３ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１２．５ｍＬのトリフルオロ酢酸で処理し、３０分間撹拌した。溶液を７５ｍＬのエーテルに滴下し、生じた沈殿（２．７ｇ、８０％）をガラス漏斗で濾過した：融点１８２−１８４℃。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３Ｄ）ｄ  ６．０５（ｓ、１Ｈ）、７．２１−７．３５（ｍ、１０Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）ｄ  ５７．６、１１８．３（ｑ、ＣＦ３）、１２６．７、１２７．９、１４１．６、１５６．９、１６０．９（ｑ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）。
【０２０７】
パートＩＩＩ）：エチルＮ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリルカルボキシレートジフェニルメチルセミカルバゾンの製造
ジメチルスルホキシド（２０ｍＬ）およびトルエン（２０ｍＬ）中の上記工程Ｉｃの化合物（１３．２１ｇ、４８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（９２．１ｇ、０．４８ｍｏｌ）の冷却（０℃）溶液に、ジクロロ酢酸（２０．６ｍＬ、０．２４ｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を１５分間撹拌し、次いで２時間にわたって室温に加温した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いで酢酸エチルでで希釈し、連続的に１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を真空下で除去して、粗エチルＮ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリルカルボキシレートを得た。エチルＮ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリルカルボキシレートをエタノール（１８０ｍＬ）に溶解し、水（６０ｍＬ）、ジフェニルメチルセミカルバジド（上記パートＩＩで得た）（３４．１２ｇ、９６ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（４．７３ｇ、５７．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩還流し、次いで室温に放冷した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いで酢酸エチルで希釈した。有機相を連続的に１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を真空下で除去した。残渣を２０〜３０％酢酸エチル／ヘキサンを溶離剤として使用するフラッシュシリカゲルでのクロマトグラフィーに供して、４．０２ｇの表題化合物を１７％収率で白色粉末として得た。Ｒｆ＝０．６０（４０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０２０８】
ｅ）Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−ノルバリルカルボン酸の製造
ジフェニルメチルセミカルバゾン（Ｂｏｃ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−ＯＨ）
【化１６３】
2004515465.tif 000134
【０２０９】
エタノール（４０．５ｍＬ）中の上記工程Ｉｄの化合物（４．０２ｇ、８．１ｍｍｏｌ）に、１Ｎ水酸化リチウム（６４．８ｍＬ、６４．８ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。３時間後、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−４００イオン交換樹脂を、溶液のｐＨが４に達するまで添加し、混合物を５分間撹拌した。混合物を濾過し、メタノールで洗浄し、濃縮した。溶液を水で希釈し、エーテルで洗浄した。水溶液を真空下で濃縮した。生じた固体をトルエンを用いて粉砕し、次いで真空下で乾燥して、１．４４ｇの表題化合物（３８％）を白色固体として得た。
ＨＰＬＣ：Ｒｔ＝１６．２および１７．７分、０．１％水性ＴＦＡ緩衝液中３０％〜９０％アセトニトリルグラジエント、４．６×２５０ｍｍ、５ｍＭ粒子、１００Åポア、Ｃ１８カラム、流速１．０ｍＬ／分。
【０２１０】
ｆ）Ｈ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１６４】
2004515465.tif 000135
【０２１１】
市販のＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂（５ｇ、３．３５ｍｍｏｌ）を手順Ｄに従って、窒素入口を備えた２５０ｍＬフリット化固相反応容器中で脱保護した。次いで、これを手順Ａに従ってＢｏｃ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−ＯＨ（上記工程Ｉｅ）（２．８１ｇ、６ｍｍｏｌ）にカップリングした。次いで、樹脂を手順Ｄに従ってＢｏｃ脱保護に供した。
【０２１２】
工程ＩＩ  Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
工程Ｉにおいて得た樹脂（３．５ｇ、１．８０ｍｍｏｌ）を、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（４．５ｍｍｏｌ、１．５２ｇ）と手順Ａに従って反応させた。１８時間後、定性的ニンヒドリン分析によって無色のビーズおよび溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２１３】
工程ＩＩＩ  Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程ＩＩの化合物（１００ｍｇ）をフリット化ポリプロピレンチューブに移し、手順Ｃに従って脱保護した。少量のアリコートに対するニンヒドリンアッセイによって、濃青色の樹脂および溶液が得られ、高収率の脱保護が示された。樹脂をＤＭＦ（１ｍＬ）中に再懸濁し、手順Ａに従ってＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（５１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）にカップリングした。少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび濃赤色溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２１４】
工程ＩＶ  Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を手順Ｃに従って脱保護した。少量のアリコートに対するニンヒドリンアッセイによって濃青色の樹脂および溶液が得られ、高収率の脱保護が示された。樹脂をＤＭＦ（１ｍＬ）中に再懸濁し、手順Ａに従って２０時間Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（５１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）にカップリングした。少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２１５】
工程Ｖ  Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を手順Ｃに従って脱保護した。少量のアリコートに対するニンヒドリンアッセイによって濃青色の樹脂および溶液が得られ、高収率の脱保護が示された。樹脂をＤＭＦ（１ｍＬ）中に再懸濁し、手順Ａに従って５時間Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（６４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）にカップリングした。少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２１６】
工程ＶＩ  Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を手順Ｃに従って脱保護した。少量のアリコートに対するニンヒドリンアッセイによって濃青色の樹脂および溶液が得られ、高収率の脱保護が示された。樹脂をＤＭＦ（１ｍＬ）中に再懸濁し、手順Ａに従って５時間Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（６４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）にカップリングした。少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２１７】
工程ＶＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｅに従ってアシル化した。樹脂を真空乾燥し、少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２１８】
工程ＶＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ−（ＣＯ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を、セミカルバゾン加水分解手順Ｆに供した。
【０２１９】
工程ＩＸ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ−（ＣＯ）−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
上記工程の樹脂（１００ｍｇ）をＨＦ切断条件（手順Ｇ）に供して、所望の粗生成物を得た。この物質を、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する２．２×２５ｃｍ逆相カラムを使用し、水中５〜２５％アセトニトリルを使用するグラジエントで溶出するＨＰＬＣによって精製した。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜２５％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）で溶出する分析用ＨＰＬＣによって、１７．５分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ７９８．５）。
【０２２０】
実施例Ｉに従って合成した化合物の表
【表５１】
2004515465.tif 000136
【表５２】
2004515465.tif 000137
【０２２１】
実施例ＩＩ：Ａｃ−ＥＥＶＶＰ−ｎＶ−（ＣＯ）−Ｇ−アリルＡｍの液相合成
【化１６５】
2004515465.tif 000138
工程Ｉ  Ｂｏｃ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−ＯＥｔの合成
【化１６６】
2004515465.tif 000139
【０２２２】
トリフルオロ酢酸（４．１５ｍＬ、４１．５４ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（８３ｍＬ）中のＢｏｃ−ｎＶａｌ−アルデヒド（４．１８ｇ、２０．７７ｍｍｏｌ）（実施例Ｉ、工程Ｉｂ（パートＩ）で得た）、エチルイソシアノアセテート（２．７２ｍＬ、２４．９３ｍｍｏｌ）およびピリジン（６．７２ｍＬ、８３．０９ｍｍｏｌ）の冷却溶液（０℃）に滴下した。２時間後、反応物を室温にし、キャップをせずに４８時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、酢酸エチル（８０ｍＬ）に溶解した。次いで、これを３回それぞれ１０ｍＬの１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで抽出した。有機相を乾燥し、濃縮し、残渣を、１：４酢酸エチル：ヘキサン、次いで２：３酢酸エチル：ヘキサンでのフラッシュカラムクロマトグラフィーを使用する精製に供した。所望の画分を分取し、濃縮して黄色フレークを得た（２４．５ｇ、７８．６％）。２：３酢酸エチル：ヘキサンでの薄層クロマトグラフィーによって０．１６のＲｆを有する１つのスポットが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（Ｍ＋Ｎａ＋  ４８９）。
【０２２３】
工程ＩＩ  ＨＣｌ・Ｈ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−ＯＥｔの合成
上記工程Ｉにおいて得た生成物（１．１２ｇ、３．３８ｍｍｏｌ）をエタノール中無水ＨＣｌの飽和溶液１０ｍＬで１時間処理した。次いで、これを濃縮し、ｎ−ヘプタンを用いて粉砕して、固体を得た（０．９ｇ、９９．２％）。
【０２２４】
工程ＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＯＨの合成（下記工程ａ〜ｆ）
ａ）Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−２ＣｌＴｒｔ樹脂の合成
窒素入口を備えた１Ｌ固相反応容器中で、２５ｇのＰｒｏ−２ＣｌＴｒｔ樹脂（２００〜４００メッシュ、０．６４ｍｍｏｌ／ｇ置換）をジメチルホルムアミド（２１３ｍＬ）に懸濁した。Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（１．５ｇ、３２ｍｍｏｌ）を手順Ａに従って４時間カップリングした。少量のアリコートを比色ニンヒドリン分析用に取り、表題化合物の生成における９９．５％のカップリング効率が示された。
【０２２５】
ｂ）Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−２ＣｌＴｒｔ樹脂の合成
上記工程からの樹脂（０．５３ｍｍｏｌ／ｇ）を手順Ｃに従って脱保護した。次いで、これを手順Ａに従って９９．５％の効率でＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（１０．８５ｇ、３２ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２２６】
ｃ）Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−２ＣｌＴｒｔ樹脂の合成
上記工程からの樹脂（０．５０４ｍｍｏｌ／ｇ）を手順Ｃに従って脱保護した。次いで、これを手順Ａに従って９９．４％の効率でＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（１３．６３ｇ、３２ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２２７】
ｄ）Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−２ＣｌＴｒｔ樹脂の合成
上記工程からの樹脂（０．４６１ｍｍｏｌ／ｇ）を手順Ｃに従って脱保護した。次いで、これを手順Ａに従って９９．２％の効率でＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（１３．６３ｇ、３２ｍｍｏｌ）にカップリングして、表題化合物を得た。
【０２２８】
ｅ）Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−２ＣｌＴｒｔ樹脂の合成
上記工程からの樹脂（０．４２ｍｍｏｌ／ｇ）を手順Ｃに従って脱保護した。ついで、Ｎ末端を手順Ｄに従ってキャッピングして、所望の化合物を９９．７％の効率で得た。
【０２２９】
ｆ）Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＯＨの合成
上記工程からの樹脂を１Ｌプラスチックボトルに移し、酢酸：トリフルオロエタノール：ジクロロメタン（１：１：３）の溶液５２５ｍｌの存在下、激しく振盪しながら２時間切断した。樹脂をガラス漏斗を使用して濾過し、ジクロロメタンで洗浄した（３×５０ｍＬ）。赤褐色濾液を濃縮して油状物を得、次いでこれを３回ジクロロメタン：ｎ−ヘプタンの１：１混合物５０ｍｌで処理した。次いで、粗オフホワイト色粉末（１３ｇ）を最小量のメタノールに溶解し、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する２．２×２５ｃｍ逆相カラムを使用し、水中１５〜５５％の範囲のアセトニトリルのグラジエントで溶出するＨＰＬＣによって精製した。純粋な画分を分取し、濃縮して、綿毛状白色生成物を得た（７．５ｇ、６５％）。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）を流す分析用ＨＰＬＣによって、２０．５分の保持時間を有する１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ７２６．５）。
【０２３０】
工程ＩＶ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−ＯＥｔの合成
上記工程ＩＩＩの化合物（Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ）（０．７２ｇ、１ｍｍｏｌ）を、上記工程ＩＩの化合物（ＨＣｌ・Ｈ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−ＯＥｔ）（０．２７ｇ、１ｍｍｏｌ）に、ＤＭＦ中のＨＯＡｔ（０．２０４ｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．４１８ｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．８７ｍＬ、５ｍｍｏｌ）を使用して室温でカップリングした。１８時間後、反応混合物を濃縮した。残渣を酢酸エチル中に取り、３回それぞれ１０ｍＬの１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。次いで、これを硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、堅い黄色生成物を得た。これをさらに精製せずに次の工程に使用した（０．９８ｇ）。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）で溶出する分析用ＨＰＬＣによって、それぞれ２１分および２１．５分の保持時間を有する２：１の比率のジアステレオマーが示された。
【０２３１】
工程Ｖ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
エタノール（１５ｍＬ）中の上記工程ＩＶにおいて得た化合物（０．９４ｇ、１ｍｍｏｌ）に、１Ｎ水酸化リチウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で２時間撹拌した。反応を十分量のＤｏｗｅｘイオン交換樹脂（５０Ｘ８−４００）を添加することによって停止して、酸性溶液（ｐＨ〜３）を得た。１５分間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物を３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する５．５×３０ｃｍ逆相カラムを使用し、水中５〜３０％アセトニトリルを使用する３０分間のグラジエントで溶出するＨＰＬＣ精製に供した。所望の画分を分取し、濃縮して、白色固体を得た（２３８ｍｇ、２６％）。
【０２３２】
工程ＶＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−アリルアミドの合成
上記工程Ｖの化合物（１２９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を、アリルアミン（１３  ｌ、０．１７ｍｍｏｌ）に、ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中のＨＯＢｔ（５８．５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（５４．３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１２４  ｌ、０．７１ｍｍｏｌ）の存在下でカップリングした。１８時間後、反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル中に取り、３回それぞれ５ｍＬの１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、有機相を濃縮して、白色沈殿を得た。これをさらに精製せずに次の工程に使用した（１１５ｍｇ、８５％）。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）で溶出する分析用ＨＰＬＣによって、それぞれ１５．９分および１６．５分の保持時間を有する２つのジアステレオマーピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（Ｍ＋Ｎａ＋  ９７３．５）。
【０２３３】
工程ＶＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇｌｙ−アリルアミドの合成
窒素気流下、上記工程ＶＩの生成物（１１５．２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（５ｍＬ）およびトルエン（５ｍＬ）に溶解した。次いで、水溶性カルボジイミド（ＥＤＣ、２３２．２ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を１バッチで添加した。反応混合物を０℃に冷却し、ジクロロ酢酸（５２  ｌ、０．６０ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃での撹拌を１５分間継続した。氷浴をはずし、反応を２時間室温で継続した。トルエンを減圧下で除去した。残存する溶液を酢酸エチルで希釈し、３回それぞれ５ｍＬの１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。次いで、これを濃縮して、黄色泡沫を得た（８５．５ｍｇ、７４．４％）。
【０２３４】
工程ＶＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇｌｙ−アリルアミドの合成
上記工程ＶＩＩの生成物（０．８６ｇ、０．９１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン：トリフルオロ酢酸の１：１混合物（２０ｍｌ）で１時間処理した。次いで、反応混合物を濃縮し、残渣を、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する２．２×２５ｃｍ逆相ＨＰＬＣカラムを使用し、水中１０〜２５％アセトニトリルを使用する３０分間のグラジエントで溶出して精製した。精製画分を分取し、凍結乾燥して、白色粉末を得た（２１．５ｍｇ、２８．５％）。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜７５％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）で溶出する分析用ＨＰＬＣによって、９．５分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ８３７．５）。
【０２３５】
実施例ＩＩに従って合成した化合物の表
【表５３】
2004515465.tif 000140
【０２３６】
実施例ＩＩＩ：Ａｃ−ＥＥＶＶＰ−ｎＶ−（ＣＯ）−Ｇ（Ｏアリル）の液相合成
【化１６７】
2004515465.tif 000141
工程Ｉ  Ｆｍｏｃ−ｎＶａｌ−Ｇｌｙ−Ｏアリルの合成（下記工程ａ〜ｃ）
【化１６８】
2004515465.tif 000142
【０２３７】
ａ）アリルイソシアノアセテートの合成
ａ１）エチルイソシアノアセテート（９６．６ｍＬ、０．８８ｍｏｌ）を、エタノール（１．５Ｌ）および水酸化カリウム（５９．５２ｇ、１．０ｍｏｌ）の冷却溶液に滴下した。反応物を徐々に室温に加温した。２時間後に、沈殿生成物をガラス漏斗で濾過し、冷却エタノールで数回洗浄した。このようにして得られたイソシアノ酢酸のカリウム塩を真空下で乾燥して、金褐色固体を得た（９９．９２ｇ、９１．８％）。
【０２３８】
ａ２）アセトニトリル（８１０ｍＬ）に溶解した工程ａ１の生成物（９９．９２ｇ、０．８１ｍｏｌ）に、臭化アリル（９２ｍＬ、１．０５ｍｏｌ）を添加した。４時間還流した後、濃褐色溶液を得た。反応混合物を濃縮し、残渣をエーテル（１．５Ｌ）中に取り、３回水（５００ｍｌ）で洗浄した。有機相を乾燥し、濃縮して、濃褐色シロップを得た。粗生成物を７ｍｍＨｇ（９８℃）の真空蒸留によって精製して、透明油状物を得た（７８．９２ｇ、７７．７％）。ＮＭＲ  δ  ｐｐｍ（ＣＤＣｌ３）：５．９（ｍ，１Ｈ）、５．３（ｍ，２Ｈ）、４．７（ｄ，２Ｈ）、４．２５（ｓ，２Ｈ）。
【０２３９】
ｂ）９−フルオレニルメトキシカルボニル−ノルバリナールの合成（下記工程ｂ１〜ｂ３）
ｂ１）９−フルオレニルメトキシカルボニル−ノルバリンメチルエステルの合成：
無水メタノール（４６９ｍＬ）中のＦｍｏｃ−ノルバリン（２５ｇ、７３．７５ｍｍｏｌ）の冷却溶液に、塩化チオニル（５３．７６ｍＬ、０．７４ｍｏｌ）を１時間にわたって添加した。１時間後に取った酢酸エチルでの薄層クロマトグラフィーによって反応の完了が確認された（Ｒｆ＝０．８５）。反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル中に取った。有機相を３回２００ｍｌの飽和重炭酸ナトリウム、続いてブラインで洗浄した。有機相を乾燥し、濃縮して、表題化合物を白色固体として（２６．０３ｇ）定量的収率で得た。ＮＭＲ  δｐｐｍ（ＣＤ３ＯＤ）：７．７（ｍ，２Ｈ）、７．６（ｍ，２Ｈ）、７．４（ｍ，２Ｈ）、７．３（ｍ，２Ｈ）、４．３（ｍ，２Ｈ）、４．１（ｍ，２Ｈ）、３．７（ｓ，３Ｈ）、１．７（ｍ，１Ｈ）、１．６（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｍ，２Ｈ）、０．９５（ｔ，３Ｈ）。
【０２４０】
ｂ２）９−フルオレニルメトキシカルボニル−ノルバリノールの合成：
テトラヒドロフラン（１２３ｍＬ）およびメタノール（２４６ｍＬ）中の工程ｂ１の生成物（２６．０３ｇ、７３．７５ｍｍｏｌ）に、塩化カルシウム（１６．３７ｇ、１４７．４９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃に冷却し、ホウ水素ナトリウム（１１．１６ｇ、０．３ｍｏｌ）を数バッチで添加した。得られた濃ペーストにメタノール（５００ｍＬ）を添加し、反応物を室温で９０分間撹拌した。２：３酢酸エチル：ヘキサンでの薄層クロマトグラフィーによって、反応の完了が確認された（Ｒｆ＝０．２５）。反応を１００ｍＬの水を０℃で徐々に添加することによってクエンチングした。メタノールを減圧下で除去し、残存する水相を酢酸エチルで希釈した（５００ｍＬ）。有機相を３回それぞれ５００ｍｌの水、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、白色固体を得た（２１．７０ｇ、９０．５％）。ＮＭＲ  δｐｐｍ（ＣＤ３ＯＤ）：７．８（ｍ，２Ｈ）、７．７（ｍ，２Ｈ）、７．４（ｍ，２Ｈ）、７．３（ｍ，２Ｈ）、４．３−４．５（ｍ，２Ｈ）、４．２（ｍ，１Ｈ）、３．６（ｓ，１Ｈ）、３．５（ｓ，２Ｈ）、１．５（ｍ，１Ｈ）、１．３−１．４（ｍ，３Ｈ）、０．９９（ｍ，３Ｈ）。
【０２４１】
ｂ３）９−フルオレニルメトキシカルボニル−ノルバリナールの合成：
ジクロロメタン（６６８ｍＬ）中の工程ｂ２の生成物（２１．７０ｇ、６６．７７ｍｍｏｌ）に、トリエチルアミン（３７．２３ｍＬ、２６７．０８ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を０℃に冷却した。ジメチルスルホキシド（９６ｍＬ）中のピリジン三酸化イオウ錯体（４２．５１ｇ、２６７．０８ｍｍｏｌ）の懸濁液を、冷却した溶液に添加した。１時間後、２：３酢酸エチル：ヘキサンでの薄層クロマトグラフィーによって反応の完了が確認された。ジクロロメタンを減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル中に取り、数回５０ｍＬの水、１Ｎ飽和重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。有機相を濃縮して、白色固体を得た。理論収率（２１．５７ｇ）を想定し、反応物をさらに精製せずに次の工程に使用した。
【０２４２】
ｃ）Ｆｍｏｃ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−Ｏアリルの合成
【化１６９】
2004515465.tif 000143
【０２４３】
ジクロロメタン（１７０ｍＬ）中の工程ｂ３から得た９−フルオレニルメトキシカルボニル−ノルバリナール（５．４７ｇ、１６．９０ｍｍｏｌ）の溶液に、アリルイソシアノアセテート（上記工程Ｉａ２）（２．４６ｍＬ、２０．２８ｍｍｏｌ）およびピリジン（５．４７ｍＬ、６７．６１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃に冷却し、トリフルオロ酢酸（３．３８ｍＬ、３３．８０ｍｍｏｌ）を滴下した。反応物を０℃で１時間、次いで室温で４８時間撹拌した。酢酸エチルで取った薄層クロマトグラフィーによって反応の完了が確認された。反応混合物を濃縮し、２０：８０酢酸エチル：ヘキサン〜７０：３０酢酸エチル：ヘキサンから構成されるグラジエントを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーに供した。所望の生成物を含有する画分をプールし、濃縮して、白色泡沫を得た（６．８８ｇ、８７．３％）。５０：５０酢酸エチルでのＴＬＣによって１つのスポットが示された（Ｒｆ＝０．３７）。ＮＭＲ  δｐｐｍ（ＣＤ３ＯＤ）：７．８（ｍ，２Ｈ）、７．６５（ｍ，２Ｈ）、７．４（ｍ，２Ｈ）、７．３（ｍ，２Ｈ）、５．９（ｍ，１Ｈ）、５．１−５．４（ｍ，２Ｈ）、４．５５−４．６５（ｍ，２Ｈ）、４．３−４．４（ｍ，２Ｈ）、４．１５−４．２５（ｍ，１Ｈ）、４．０１（ｓ，１Ｈ）、３．９−４．０（ｍ，３Ｈ）、１．５−１．６（ｍ，２Ｈ）、１．３５−１．４５（ｍ，３Ｈ）、０．９（ｍ，３Ｈ）。
【０２４４】
工程ＩＩ  Ｈ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−Ｏアリルの合成
テトラヒドロフラン（５．８ｍＬ）に溶解したＦｍｏｃ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−Ｏアリル（３００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）（上記工程Ｉｃで得た）に、ジエチルアミン（０．６４ｍＬ）を添加し、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残存する固体を１：４エーテル：ヘキサン混合物を用いて粉砕した。生成物をガラス漏斗に採集し、数回１：１エーテル：ヘキサン混合物で洗浄した（９３．７ｍｇ、５７％）。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ２４５．０）。
【０２４５】
工程ＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−Ｇｌｙ−Ｏアリルの合成
上記工程ＩＩから得た生成物（２８．２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中のＨＯＡｔ（２３．６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４８．４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（１００．８μｌ、０．５８ｍｍｏｌ）の存在下、室温で４時間、Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ（実施例ＩＩ、工程ＩＩＩ）（８４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）にカップリングした。ＤＭＦを減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル中に取り、１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、有機相を濃縮して、白色固体を得た（１００．３ｍｇ、９１％）。これをさらに精製せずに次の工程に使用した。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（Ｍ＋Ｎａ＋  ９７４．５）。
【０２４６】
工程ＩＶ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇｌｙ−Ｏアリルの合成
窒素気流下、上記工程の生成物（５１．５ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（１．２ｍＬ）およびトルエン（１．２ｍＬ）に溶解した。次いで、水溶性カルボジイミド（ＥＤＣ、１０３．８ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を１バッチで添加した。反応混合物を０℃に冷却し、ジクロロ酢酸（２２．３  ｌ、０．２７ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃での撹拌を１５分間継続した。氷浴をはずし、反応物を徐々に室温にした。反応を９０分後に停止した。トルエンを減圧下で除去した。反応物を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。次いで、これを濃縮して、黄色泡沫を得た（４０．４ｍｇ、７９％）。これをさらに精製せずに次の工程に使用した。
【０２４７】
工程Ｖ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇｌｙ−Ｏアリルの合成
上記工程の生成物（４０．４ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン：トリフルオロ酢酸の１：１混合物（４ｍＬ）で２時間処理した。次いで、反応混合物を濃縮し、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する１×２５ｃｍ逆相ＨＰＬＣカラムで精製し、水中１０〜３０％アセトニトリルを使用する３０分間のグラジエントで溶出した。所望の画分を分取し、濃縮して、白色粉末を得た（８．５ｍｇ、２４％）。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）を流す分析用ＨＰＬＣによって、１５分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ８３８．０）。
【０２４８】
表：実施例ＩＩＩに従って合成した化合物
【表５４】
2004515465.tif 000144
【０２４９】
実施例ＩＶ：Ａｃ−ＥＥＶＶ−Ｇ（Ｎ−Ｂｕ（４ＮＨ２，４−ＣＯ２Ｈ））−ｎＶ−（ＣＯ）−Ｇ−ＯＨの固相合成
【化１７０】
2004515465.tif 000145
工程Ｉ  ブロモアセチル−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１７１】
2004515465.tif 000146
【０２５０】
固相容器中で、ブロモ酢酸（１．２９ｇ、９．２７ｍｍｏｌ）を、ジイソプロピルカルボジイミド（１．２７ｇ、１０．０４ｍｍｏｌ）およびジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）の存在下で５時間、実施例Ｉ（工程Ｉｆ）で得た樹脂（１．５ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）にカップリングした。試薬を濾過し、反応をもう一度１８時間反復した。この時点で定性的ニンヒドリン試験によって無色のビーズおよび溶液が示され、反応が完了したことが示された。全ての試薬を排出し、樹脂を十分に１５ｍＬのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで洗浄した。
【０２５１】
工程ＩＩ  Ｇｌｙ（Ｎ−Ｂｕ（４ＮＨ−Ｂｏｃ，４−ＣＯＯｔＢｕ）−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１７２】
2004515465.tif 000147
【０２５２】
上記工程の生成物（０．１２ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）をジイソプロピルエチルアミン（０．０５ｍＬ、０．３１ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（１．２ｍＬ）の存在下で１８時間、Ｂｏｃ−Ｏｒｎ−ＯｔＢｕ．ＡｃＯＨ（０．８６ｇ、２．４７ｍｍｏｌ）で処理した。試薬を排出し、新鮮な試薬を使用して手順を５時間反復した。全ての試薬を排出し、樹脂を十分に２ｍＬのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで洗浄した。
【０２５３】
工程ＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ（Ｎ−Ｂｕ（４ＮＨ２，４−ＣＯＯＨ）−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
以下の工程を連続的に実施した：
ａ）Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を、手順Ｂに従って上記工程ＩＩの生成物（０．１２ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）に二重カップリングした。
【０２５４】
ｂ）樹脂を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｂに従ってＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２５５】
ｃ）樹脂を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｂに従ってＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２５６】
ｄ）樹脂を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｂに従ってＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２５７】
ｅ）樹脂を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｅに従ってＮ末端でアシル化した。
【０２５８】
ｆ）工程ｅにおいて得た生成物のセミカルバゾン基を手順Ｆに従って加水分解し、生成物を手順Ｇに従ってＨＦ切断に供した。粗物質を、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する１×２５ｃｍ逆相カラムを使用し、水中１０〜４０％アセトニトリルを使用する３０分間のグラジエントで溶出するＨＰＬＣ精製に供した。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜７５％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）で溶出する分析用ＨＰＬＣによって、８分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の生成物の存在が確認された（ＭＨ＋  ８７３．５）。
【０２５９】
実施例ＩＶに従って合成した化合物の表
【表５５】
2004515465.tif 000148
【０２６０】
実施例Ｖ：Ａｃ−ＥＥＶＶ−Ｇ（Ｎ−Ｅｔ（ＮＨＢｚ））−ｎＶ−（ＣＯ）−Ｇ−ＯＨの固相合成
【化１７３】
2004515465.tif 000149
【０２６１】
工程Ｉ  Ｇｌｙ（Ｎ−Ｅｔ（ＮＨ−Ｂｏｃ））−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１７４】
2004515465.tif 000150
【０２６２】
実施例ＩＶ（工程Ｉ）において得た樹脂（０．２４ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を、ジイソプロピルエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．６２ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（２．４ｍＬ）の存在下で１８時間、ｔ−ブチルＮ−（２−アミノエチル）−カルバメート（０．７８ｍＬ、４．９４ｍｍｏｌ）で処理した。試薬を排出し、新鮮な試薬を使用して手順を５時間反復した。全ての試薬を歳出し、樹脂を十分に２ｍＬのジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで洗浄した。
【０２６３】
工程ＩＩ  Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ（Ｎ−Ｅｔ（ＮＨ−Ｂｏｃ））−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１７５】
2004515465.tif 000151
【０２６４】
Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（０．０７ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、手順Ｂに従って上記工程Ｉの生成物（０．２４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）に二重カップリングした。
【０２６５】
工程ＩＩＩ  Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ（Ｎ−Ｅｔ（ＮＨＢｚ））−ｎＶａｌ（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１７６】
2004515465.tif 000152
【０２６６】
上記工程ＩＩから得た生成物（０．１２ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を、手順Ｄに従ってトリフルオロ酢酸：ジクロロメタンの１：１混合物で処理した。次いで、生じた遊離アミンを、Ｎ−メチルピロリジン（１．２４ｍＬ）中のジイソプロピルエチルアミン（０．０６ｍＬ、０．３７ｍｍｏｌ）の存在下で、塩化ベンゾイル（０．０２ｍＬ、０．１９ｍｍｏｌ）を添加することによってキャッピングした。
【０２６７】
工程ＩＶ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ（Ｎ−Ｅｔ（ＮＨＢｚ））−ｎＶａｌ（ＣＯ）−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
以下の工程を連続的に実施した：
ａ）上記工程ＩＩＩにおいて得た樹脂を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｂに従ってＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２６８】
ｂ）上記工程において得た樹脂を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｂに従ってＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２６９】
ｃ）上記工程において得た樹脂を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｂに従ってＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２７０】
ｄ）上記工程において得た樹脂（０．１２ｇ）を手順Ｃに従って脱保護し、手順Ｅに従ってＮ末端でアシル化した。
【０２７１】
ｅ）工程ｄにおいて得た生成物のセミカルバゾン基を手順Ｆに従って加水分解し、生成物を手順Ｇに従ってＨＦ切断に供した。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）を流す分析用ＨＰＬＣによって、１４分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の生成物の存在が確認された（ＭＨ＋  ９０５．５）。
【０２７２】
実施例Ｖに従って合成した化合物の表
【表５６】
2004515465.tif 000153
【０２７３】
実施例ＶＩ：Ａｃ−ＥＥＶＶＰ−ｎＶ（ＣＯ）−Ａｍの固相合成
【化１７７】
2004515465.tif 000154
【０２７４】
工程Ｉ  ＨＯＢｔアンモニウム塩の形成
水酸化アンモニウム（０．５ｍＬ）を、水（５ｍＬ）中のＨＯＢｔ（２ｇ、１３．０７ｍｍｏｌ）のスラリーに滴下した。透明な溶液が得られるまで混合物を室温で撹拌した。生成物をアセトン（５０ｍＬ）を徐々に添加することによって沈殿させた。次いで、これをガラス漏斗で濾過し、十分に冷アセトンで洗浄した（白色粉末、２．２３ｇ、７８％；融点１７７−１８１℃）。
【０２７５】
工程ＩＩ  ＨＣｌ・Ｈ−ｎＶａｌ−（ＣＨＯＨ）−ＣＯＮＨ２の合成
【化１７８】
2004515465.tif 000155
【０２７６】
Ｂｏｃ−ｎＶａｌ−（ＣＨＯＨ）−ＣＯＯＨ（２９５ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）（実施例Ｖ、工程ＩＩ）を、ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中のＥＤＣ（３４２ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）の存在下、室温で１８時間、上記工程の生成物（３６２ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）と反応させた。反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（５ｍＬ）中に取り、３回それぞれ５ｍＬの１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、白色固体を得た（１７０ｍｇ、５８％）。真空下で乾燥した後、生成物を酢酸エチル中５Ｎ無水ＨＣｌ（５ｍＬ）で１時間処理し、濃縮した（１２０ｍｇ、９４％）。
【０２７７】
工程ＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ−（ＣＨＯＨ）−ＣＯＮＨ２の合成
上記工程ＩＩから得た生成物（１９ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中のＨＯＡｔ（１４．１ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴｕ（２８．８ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（６０μｌ、０．３４５ｍｍｏｌ）の存在下、室温で４時間、Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ（実施例ＩＩ、工程ＩＩＩｆ）（５０ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）にカップリングした。ＤＭＦを減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル中に取り、１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濃縮して、白色固体を得た（４０ｍｇ、６８％）。これをさらに精製せずに次の工程に使用した。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（Ｍ＋Ｎａ＋  ８７６．５）。
【０２７８】
工程ＩＶ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ−（ＣＯ）−ＣＯＮＨ２の合成
窒素気流下、上記工程の生成物（４０ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（４ｍＬ）およびトルエン（４ｍＬ）に溶解した。次いで、水溶性カルボジイミド（ＥＤＣ、８９．８ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を１バッチで添加した。反応混合物を０℃に冷却し、ジクロロ酢酸（２０  ｌ、０．２３ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃での撹拌を１５分間継続した。氷浴をはずし、反応物を徐々に室温にした。反応を９０分後に停止した。トルエンを減圧下で除去した。反応物を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ重硫酸ナトリウム、飽和重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄した。次いで、これを濃縮して、黄色泡沫を得た（４０ｍｇ、５３％）。これをさらに精製せずに次の工程に使用した。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（Ｍ＋Ｎａ＋  ８５２．５）。
【０２７９】
工程Ｖ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ−（ＣＯ）−ＣＯＮＨ２の合成
上記工程の生成物（３９．９ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン：トリフルオロ酢酸の１：１混合物（１０ｍｌ）で２時間処理した。反応混合物を濃縮し、残渣を、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する１×２５ｃｍ逆相カラムを使用し、水中５〜２５％アセトニトリルを使用する３０分間のグラジエントで溶出するＨＰＬＣ精製に供した。精製画分を分取し、凍結乾燥して、白色粉末を得た（３．６ｍｇ、１０％）。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ７４０．０）。
【０２８０】
実施例ＶＩに従って合成した化合物の表
【表５７】
2004515465.tif 000156
【０２８１】
実施例ＶＩＩ：Ａｃ−ＥＥＶＶ−Ｐ（４ｔ−ＭｅＮＨＢｚｌ（３−ＯＰｈ））−ｎＶ−（ＣＯ）−Ｇ−ＯＨの固相合成
【化１７９】
2004515465.tif 000157
工程Ｉ  Ｈ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＭｅＮＨＦｍｏｃ）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１８０】
2004515465.tif 000158
【０２８２】
実施例Ｉ（工程Ｉ）から得た樹脂（０．７０ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を、手順Ｂに従って１８時間９９．９８％の効率でＢｏｃ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＭｅＮＨＦｍｏｃ）−ＯＨにカップリングした。次いで、樹脂を手順Ｄに従って脱保護に供して、表題生成物を得た。
【０２８３】
工程ＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ  −Ｐｒｏ（４ｔ−ＭｅＮＨＦｍｏｃ）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程から得た樹脂（０．７ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を、手順Ｂに従ってＡｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−ＯＨ（０．４５ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）（Ｈ−Ｖａｌ−２ＣｌＴｒｔ−樹脂から出発して実施例ＩＩ（工程ＩＩＩ）と同様にして得た）に二重カップリングした。
【０２８４】
工程ＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＭｅＮＨ２）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１８１】
2004515465.tif 000159
【０２８５】
上記工程から得た生成物のＦｍｏｃ側鎖保護基を手順Ｃに従って除去して、表題化合物を得た。
【０２８６】
工程ＩＶ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ  −Ｐｒｏ（４ｔ−ＭｅＮＨＢｚｌ（３−ＯＰｈ））−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程から得た樹脂（０．１５ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を手順Ｂに従って９９．９７％の効率で３−フェノキシ安息香酸（０．０２ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２８７】
工程Ｖ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＭｅＮＨＢｚｌ（３−ＯＰｈ））−ｎＶａｌ−（ＣＯ）−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
上記工程から得た樹脂を手順Ｆに従ってセミカルバゾン加水分解に供し、続いて手順Ｈに従ってＨＦ切断に供して、粗生成物を得た。この物質を、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する１×２５ｃｍ逆相カラムを使用し、水中１０〜３５％の範囲のアセトニトリルの３０分間のグラジエントで溶出するＨＰＬＣ精製に供した。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜７５％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）で溶出する分析用ＨＰＬＣによって、１４．５分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の生成物の存在が確認された（ＭＨ＋  １０４９．５）。
【０２８８】
実施例ＶＩＩに従って合成した化合物の表
【表５８】
2004515465.tif 000160
【０２８９】
実施例ＶＩＩＩ：Ａｃ−ＥＥＶＶ−Ｐ（４ｔ−ＮＨＢＺｌ）−ｎＶ−（ＣＯ）−Ｇ−ＯＨの固相合成
【化１８２】
2004515465.tif 000161
工程Ｉ  Ｂｏｃ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨ２）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１８３】
2004515465.tif 000162
【０２９０】
実施例Ｉ（工程Ｉ）で得た樹脂（１．３ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を、手順Ｂに従って１８時間Ｂｏｃ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＦｍｏｃ）−ＯＨ（０．６１ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）にカップリングした。この時点で定性的ニンヒドリン試験によって反応の完了が示された。次いで、樹脂を手順Ｃに従って脱保護に供して、表題生成物を得た。
【０２９１】
工程ＩＩ  Ｂｏｃ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＢｚｌ）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
【化１８４】
2004515465.tif 000163
【０２９２】
上記工程から得た樹脂（０．１３ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をフリット化ポリプロピレンチューブに移し、Ｎ−メチルピロリジン（１．５ｍＬ）に懸濁した。次いで、これをジイソプロピルエチルアミン（０．０５ｍＬ、０．３２ｍｍｏｌ）の存在下で４時間、塩化ベンゾイル（０．０２ｍＬ、０．１６ｍｍｏｌ）を用いてキャッピングして、表題生成物を得た。
【０２９３】
工程ＩＩＩ  Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＢｚｌ）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を手順Ｄに従って脱保護した。少量のアリコートに対するニンヒドリンアッセイによって濃青色の樹脂および溶液が得られ、高収率の脱保護が示された。樹脂をＮ−メチルピロリジン（１．４７ｍＬ）に再懸濁し、手順Ｂに従ってＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（０．０３ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび濃赤色溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２９４】
工程ＩＶ  Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＢｚｌ）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を手順Ｄに従って脱保護した。少量のアリコートに対するニンヒドリンアッセイによって濃青色の樹脂および溶液が得られ、高収率の脱保護が示された。樹脂をＮ−メチルピロリジン（１．４７ｍＬ）に再懸濁し、工程ＩＩＩと同様にしてＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ（０．０３、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２９５】
工程Ｖ  Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＢｚｌ）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を手順Ｄに従って脱保護した。少量のアリコートに対するニンヒドリンアッセイによって濃青色の樹脂および溶液が得られ、高収率の脱保護が示された。樹脂をＮ−メチルピロリジン（１．４７ｍＬ）に再懸濁し、手順Ｂに従って５時間Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび溶液が示され、高収率のカップリングが示された。
【０２９６】
工程ＶＩ  Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＢｚｌ）−ｎＶａｌ−（ｄｐｓｃ）−Ｇｌｙ−ＰＡＭ樹脂の合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を手順Ｄに従って脱保護し、同様にＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（０．０４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）にカップリングした。
【０２９７】
工程ＶＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ（４ｔ−ＮＨＢｚｌ）−ｎＶａｌ−（ＣＯ）−Ｇｌｙ−ＯＨの合成
上記工程の化合物（１００ｍｇ）を手順Ｄに従って脱保護し、手順Ｅに従ってアシル化した。樹脂を真空乾燥し、少量のアリコートを定性的ニンヒドリン分析用に取り、無色のビーズおよび溶液が示され、高収率のカップリングが示された。次いで、樹脂を、それぞれ手順ＦおよびＨに従ってセミカルバゾン加水分解、続いてＨＦ切断反応に供した。粗生成物を、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する１×２５ｃｍ逆相カラムを使用し、水中１０〜４０％アセトニトリルを使用する３０分間のグラジエントで溶出するＨＰＬＣ精製に供した。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）を流す分析用ＨＰＬＣによって、１３分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の生成物の存在が確認された（ＭＨ＋  ９１７．５）。
【０２９８】
実施例ＶＩＩＩに従って合成した化合物の表
【表５９】
2004515465.tif 000164
【０２９９】
実施例ＩＸ：Ａｃ−ＥＥＶＶＰ−ｎＶ−（ＣＯ）−ＯＨの液相合成
【化１８５】
2004515465.tif 000165
工程Ｉ  エチル（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−アミノヘキサノエートヒドロクロリドの合成
【化１８６】
2004515465.tif 000166
【０３００】
実施例Ｉ（工程Ｉｂ）において得た生成物（１．９９ｇ、６．５９ｍｍｏｌ）を６Ｎ  ＨＣｌ（４２ｍＬ）中で４時間還流した。室温に冷却した後、反応混合物をジクロロメタンで抽出し（３×３０ｍＬ）、水相を濃縮乾固した（１．６５ｇ、粗）。得られた生成物の一部（０．８８ｇ、４．８ｍｍｏｌ）をエタノール中の無水ＨＣｌの飽和溶液２０ｍＬ中で９０分間撹拌した。混合物濃縮して、白色固体を得た（０．９５、９３％）。
【０３０１】
工程ＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−ＯＥｔの合成
上記工程から得た生成物（８８ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中のＨＯＡｔ（５６．３ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴｕ（１１５．３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（２４０  ｌ、１．３７ｍｍｏｌ）の存在下、室温で１８時間、Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ（実施例ＩＩ、工程ＩＩＩｆ）（２００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）にカップリングした。ＤＭＦを減圧下で除去し、残渣を３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する２．２×２５ｃｍ逆相カラムを使用し、水中１５〜５０％の範囲のアセトニトリルの３０分間のグラジエントで溶出するＨＰＬＣ精製に供した。所望の画分を分取し、濃縮して、固体を得た（６７ｍｇ、２７．５％）。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）で溶出する分析用ＨＰＬＣによって、２３．５分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ８８３．５）。
【０３０２】
工程ＩＩＩ  Ａｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−カルボン酸の合成
エタノール（３．８ｍＬ）に溶解した上記工程において得た生成物（６７ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）に、１Ｎ水酸化リチウム（３０４ｌ、０．３０４ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で９０分間撹拌した。反応を十分量のＤｏｗｅｘイオン交換樹脂（５０Ｘ８−４００）を添加することによって停止して、酸性溶液（ｐＨ〜３）を得た。１５分間撹拌した後、反応混合物を濾過し、濃縮して、白色固体を得た（５３．４ｍｇ、８２．２％）。
【０３０３】
工程ＩＶ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＨＯＨ）−カルボン酸の合成
上記工程において得た生成物（５３．１ｍｇ）を、トリフルオロ酢酸：ジクロロメタンの１：１混合物（１０ｍＬ）中で９０分間撹拌した。反応混合物を濃縮して、黄色固体を得た（５０ｍｇ）。これをさらに精製せずに次の工程に使用した。
【０３０４】
工程Ｖ  Ａｃ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−ｎＶａｌ（ＣＯ）−カルボン酸の合成
上記工程において得た生成物（５５．７ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（８ｍＬ）およびジメチルスルホキシド（２ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（１２５．５  ｌ、０．９０１ｍｍｏｌ）、続いてピリジン三酸化イオウ（１４３．４ｍｇ、０．９０１ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で２時間撹拌した。ジクロロメタンを減圧下で除去し、残渣をメタノール（０．１％ＴＦＡ含有）で希釈し、３００オングストロームポアサイズの１０ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する逆相ＨＰＬＣカラム（１×２５ｃｍ）で精製し、水中５〜１５％アセトニトリルを使用する３０分間のグラジエントで溶出した。所望の画分を分取し、濃縮して、油状物を得た（１５．２ｍｇ、２７．４％）。３００オングストロームポアサイズの５ミクロンサイズのゲル粒子から構成されるＣ−１８樹脂を含有する４．６×２５０ｍｍ逆相カラムを使用し、５〜５０％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸含有）を流す分析用ＨＰＬＣによって、１１分に１つのピークが示された。低解像度質量スペクトルによって所望の質量が確認された（ＭＨ＋  ７４１．０）。
【０３０５】
実施例ＩＸに従って合成した化合物の表
【表６０】
2004515465.tif 000167
【０３０６】
ＨＣＶプロテアーゼ阻害活性のアッセイ：
分光光度アッセイ：ＨＣＶセリンプロテアーゼの分光光度アッセイを、Ｒ． Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ， Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２７０ （１９９９） ２６８−２７５（出典明示で援用する）に記載の手順に従うことにより本発明の化合物に対して実施した。この色素原性エステル基質のタンパク質分解に基いたアッセイは、ＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ活性の連続的モニターに適切である。基質をＮＳ５Ａ−ＮＳ５Ｂ連結配列（Ａｃ−ＤＴＥＤＶＶＸ（Ｎｖａ）、式中、Ｘ＝ＡまたはＰ）のＰ側から誘導し、そのＣ末端カルボキシル基を４種の異なる発色団アルコール（３−もしくは４−ニトロフェノール、７−ヒドロキシ−４−メチル−クマリンまたは４−フェニルアゾフェノール）のうちの１種によりエステル化した。これらの新規分光光度エステル基質の合成、特徴付けおよび高スループットスクリーニングへの適用ならびにＨＣＶ ＮＳ３プロテアーゼ阻害剤の詳細な反応速度評価を以下に示す。
【０３０７】
材料および方法：
材料：アッセイ関連バッファー用化学試薬を、シグマ・ケミカル・カンパニー（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ）（セントルイス、ミズーリ）から入手した。ペプチド合成用試薬を、アドリッチ・ケミカルズ（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）、ノヴァバイオケム（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）（サンディエゴ、カリフォルニア）、アプライド・バイオシステムズ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）（フォスター・シティー、カリフォルニア）およびパーセプティブ・バイオシステムズ（Ｐｅｒｓｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）（フラミンガム、マサチューセッツ）から入手した。ペプチドを、手動でまたは自動ＡＢＩモデル４３１Ａ合成装置（アプライド・バイオシステムズ）で合成した。ＵＶ／ＶＩＳ分光光度計モデルＬＡＭＢＤＡ１２を、パーキン・エルマー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）（ノーウォーク、コネティカット）から入手し、９６ウェルＵＶプレートを、コーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）（コーニング、ニューヨーク）から入手した。予加温ブロックを、ＵＳＡサイエンティフィック（ＵＳＡ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）（オカラ、フロリダ）から入手し、９６ウェルプレートボルテクサーを、ラブリン・インスツルメンツ（Ｌａｂｌｉｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）（メルローズ・パーク、イリノイ）から入手した。モノクロメータを備えたスペクトラマックスプラス（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ Ｐｌｕｓ）マイクロタイタープレートリーダーを、モレキュラー・デヴァイス（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）（サニーヴェイル、カリフォルニア）から入手した。
【０３０８】
酵素の調製：組換えヘテロ二量体ＨＣＶ ＮＳ３／ＮＳ４Ａプロテアーゼ（１ａ株）を、以前に公開された手順（Ｄ． Ｌ． Ｓａｌｉ ｅｔ ａｌ， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ３７ （１９９８） ３３９２−３４０１）を用いることにより調製した。タンパク質濃度を、アミノ酸分析により事前に定量された組換えＨＣＶプロテアーゼ標準品を用いてバイオラド（Ｂｉｏｒａｄ）色素法により測定した。アッセイ開始前に、酵素貯蔵バッファー（５０ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ８．０、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０％グリセロール、０．０５％ラウリルマルトシドおよび１０ｍＭ  ＤＴＴ）を、バイオラドバイオ−スピンＰ−６プレパックカラム（Ｂｉｏｒａｄ Ｂｉｏ−Ｓｐｉｎ Ｐ−６ ｐｒｅｐａｃｋｅｄ ｃｏｌｕｍｎ）を利用して、アッセイバッファー（２５ｍＭ  ＭＯＰＳ ｐＨ６．５、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０％グリセロール、０．０５％ラウリルマルトシド、５μＭ  ＥＤＴＡおよび５μＭ  ＤＴＴ）に交換した。
【０３０９】
基質の合成および精製：基質の合成を、Ｒ．Ｚｈａｎｇら（前出）により報告されたように行い、標準プロトコル（Ｋ． Ｂａｒｌｏｓ ｅｔ ａｌ， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｅｐｔ． Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．， ３７ （１９９１）， ５１３−５２０）を用いたＦｍｏｃ−Ｎｖａ−ＯＨの２−クロロトリチルクロリド樹脂への固定により開始した。次いで、ペプチドをＦｍｏｃ化学反応を用いて手動でまたは自動ＡＢＩモデル４３１ペプチド合成装置で組立てた。Ｎ−アセチル化し完全に保護したペプチドフラグメントを、３０分間ジクロロメタン（ＤＣＭ）中の１０％酢酸（ＨＯＡｃ）および１０％トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）により、または１０分間ＤＣＭ中の２％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）により樹脂から切断した。濾液およびＤＣＭ洗浄液を合し、共沸蒸発（またはＮａ２ＣＯ３水溶液により反復抽出）して、切断に使用した酸を除去した。ＤＣＭ相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。
【０３１０】
標準的な酸−アルコールカップリング手順（Ｋ． Ｈｏｌｍｂｅｒ ｅｔ ａｌ， Ａｃｔａ Ｃｈｅｍ． Ｓｃａｎｄ．， Ｂ３３ （１９７９） ４１０−４１２）を用いてエステル基質を組立てた。ペプチドフラグメントを無水ピリジン（３０〜６０ｍｇ／ｍｌ）に溶解し、そこに１０モル当量の発色団および触媒量（０．１当量）のパラ−トルエンスルホン酸（ｐＴＳＡ）を添加した。ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、３当量）を添加して、カップリング反応を開始した。生成物の形成をＨＰＬＣによりモニターし、室温で１２〜７２時間反応した後に完了することが見出された。ピリジン溶媒を真空下で蒸発させ、さらにトルエンとの共沸蒸発により除去した。ペプチドエステルを２時間ＤＣＭ中の９５％ＴＦＡにより脱保護し、無水エチルエーテルで３回抽出して、過剰の発色団を除去した。３０％〜６０％のアセトニトリル勾配（６カラム容量を使用）を用いるＣ３またはＣ８カラムでの逆相ＨＰＬＣにより脱保護した基質を精製した。ＨＰＬＣ精製後の全体収率は約２０〜３０％であった。電子スプレイイオン化質量分光法により分子量を確認した。基質を乾燥下乾燥粉末形態で貯蔵した。
【０３１１】
基質および生成物のスペクトル：基質および対応する発色団生成物のスペクトルを、ｐＨ６．５アッセイバッファー中に得た。複数の希釈液を用いて１ｃｍキュベット中での最適オフピーク波長（３−ＮｐおよびＨＭＣについては３４０ｎｍ、ＰＡＰについては３７０ｎｍ、および４−Ｎｐについては４００ｎｍ）における吸光係数を決定した。最適オフピーク波長を、基質と生成物との間の吸光度差の分数の最大値（生成物ＯＤ−基質ＯＤ）／基質ＯＤ）を生じる波長として定義した。
【０３１２】
プロテアーゼアッセイ：ＨＣＶプロテアーゼアッセイを、９６ウェルマイクロタイタープレート中で２００μｌの反応混合物を用いて３０℃で実施した。アッセイバッファー条件（２５ｍＭ  ＭＯＰＳ ｐＨ６．５、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０％グリセロール、０．０５％ラウリルマルトシド、５μＭ  ＥＤＴＡおよび５μＭ  ＤＴＴ）を、ＮＳ３／ＮＳ４Ａヘテロ二量体用に最適化した（Ｄ．Ｌ．Ｓａｌｉ ｅｔ ａｌ．、前出）。代表的には、バッファー、基質および阻害剤の混合物１５０μｌをウェルに入れ（ＤＭＳＯの終濃度 ４％（ｖ／ｖ））、約３分間３０℃でプレインキュベートした。次いで、予加温したアッセイバッファー中のプロテアーゼ（１２ｎＭ、３０℃）５０μｌを使用して、反応を開始した（最終容量２００μｌ）。モノクロメータを備えたスペクトロマックスプラスマイクロタイタープレートリーダーを用いて（カットオフフィルターを利用するプレートリーダーを用いて許容される結果を得ることができる）、適切な波長（３−ＮｐおよびＨＭＣについては３４０ｎｍ、ＰＡＰについては３７０ｎｍ、および４−Ｎｐについては４００ｎｍ）における吸光度の変化についてアッセイ期間（６０分間）にわたってプレートをモニターした。Ｎｖａと発色団との間のエステル結合のタンパク質分解切断を、非酵素的加水分解についてのコントロールとしての無酵素ブランクに対し適切な波長でモニターした。基質反応速度パラメーターの評価を、３０倍の基質濃度範囲（約６〜２００μＭ）にわたって実施した。線形回帰を用いて初速度を測定し、非線形回帰分析（Ｍａｃ Ｃｕｒｖｅ Ｆｉｔ １．１、Ｋ．Ｒａｎｅｒ）を用いてミカエリス−メンテンの式にデータを適合させることにより反応速度定数を得た。酵素が完全に活性であると想定して代謝回転数（ｋｃａｔ）を計算した。
【０３１３】
阻害剤および不活化剤の評価：競合阻害剤Ａｃ−Ｄ−（Ｄ−Ｇｌａ）−Ｌ−Ｉ−（Ｃｈａ）−Ｃ−ＯＨ（２７）、Ａｃ−ＤＴＥＤＶＶＡ（Ｎｖａ）−ＯＨおよびＡｃ−ＤＴＥＤＶＶＰ（Ｎｖａ）−ＯＨについての阻害定数（Ｋｉ）を、競合阻害反応速度用に再調整したミカエリス−メンテンの式：ｖ０／ｖｉ＝１＋［Ｉ］０／（Ｋｉ（１＋［Ｓ］０／Ｋｍ））（式中、ｖ０は非阻害初速度であり、ｖｉはいずれかの所定の阻害剤濃度（［Ｉ］０）における阻害剤の存在下における初速度であり、［Ｓ］０は使用した基質濃度である）に従ってｖ０／ｖｉ対阻害剤濃度（［Ｉ］０）をプロットすることにより、酵素および基質の固定濃度において実験的に決定した。得られたデータを線形回帰を用いて適合させ、得られた傾き、１／（Ｋｉ（１＋［Ｓ］０／Ｋｍ）を用いてＫｉ＊値を計算した。
【０３１４】
本発明の種々の化合物について得られたＫｉ＊値を表に示す。表中、化合物はＫｉ＊値の範囲の順に配列されている。これらの試験結果から、当業者にとって、本発明の化合物がＮＳ３−セリンプロテアーゼ阻害剤として優れた有用性を有することは明らかである。
【０３１５】
本発明を上記の特定の実施態様に関して記載したが、その多くの改変、変形およびその他の変更は当業者にとって明白である。そのような全ての改変、変形および変更は、本発明の精神および範囲内に含まれるものとする。
【０３１６】
表３
【表６１】
2004515465.tif 000168
表３
【表６２】
2004515465.tif 000169
表３
【表６３】
2004515465.tif 000170
表３
【表６４】
2004515465.tif 000171
表３
【表６５】
2004515465.tif 000172
表３
【表６６】
2004515465.tif 000173
表３
【表６７】
2004515465.tif 000174
表３
【表６８】
2004515465.tif 000175
表３
【表６９】
2004515465.tif 000176
表３
【表７０】
2004515465.tif 000177
表３
【表７１】
2004515465.tif 000178
表３
【表７２】
2004515465.tif 000179
表３
【表７３】
2004515465.tif 000180
表３
【表７４】
2004515465.tif 000181
表３
【表７５】
2004515465.tif 000182
表３
【表７６】
2004515465.tif 000183
表３
【表７７】
2004515465.tif 000184
【国際公開パンフレット】
2004515465.tif 000265
2004515465.tif 000266
2004515465.tif 000267
2004515465.tif 000268
2004515465.tif 000269
2004515465.tif 000270
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2004515465.tif 000272
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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