(57)【要約】【課題】この発明は、サイクロフィリン（ＣｙＰ）型イムノフィリン蛋白に親和性を有する新規な、非ペプチド性小有機化合物と一以上のこの化合物よりなる薬剤組生物を提供する。【解決手段】本発明の化合物は下記の一般式を有し、【化１】2004532187.tif 000058式中、Ｖは４，５，又は６位に結合したＣ1−Ｃ4のアルキルオキシ、Ｃ1−Ｃ4のアルキル等、ＸとＹは【化２】2004532187.tif 000059等でＺはＯ又はＳでｎ’は０−３である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式の化合物
【化１】
2004532187.tif 000051
及び薬剤として許容できるその誘導体
式中、Ｖは４、５又は６位に結合され、そしてＣ1−Ｃ4アルキルオ
キシ、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｑで置換されていてもよいＣ2−Ｃ4アルケニルオキシ、Ｃ1−Ｃ4アルコキシカルボニル、アミノ又はＣ1−Ｃ4アルコキシカルボニルアミノで置換されていてもよいＣ1−Ｃ6アルキルカルバモイル、ジ−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）カルバモイル、Ｃ1−Ｃ4アルカノイル、Ｑ置換Ｃ1−Ｃ6アルキル、アルケニル又はアルキニル、ＣＯ−Ｗ及び−（ＣＨ2）n−Ｗよりなる群から選ばれたものであり、
そこでは、ＷはＱ、−Ｚ’−（ＣＨ2）m−Ｑ、−Ｎ＝ＣＨ−（ＣＨ2）m−Ｑ、ＣＯＯＣＨ3、ＣＯＣＨ3、ヒドロキシル、メルカプチル、アミノ、ニトロ、ハロ、カルキボシ、トリフルオロメチル、又はアミノもしくはＣ1−Ｃ4アルコキシカルボニルアミノであり、
ｎとｍは独立に０−４であり、
ｎ’は０−３であり、
Ｚ’はＯ、Ｓ、ＮＨ又はＮＲであり、
そこでは、ＸとＹは同一又は異なって、そして独立に、
【化２】
2004532187.tif 000052
そして、そこではＹはさらに、Ｑ、
【化３】
2004532187.tif 000053
もしくは、一もしくはいくつかの位置がＱで置換され、そしてさらに一もしくはいくつかの位置がヒドロキシル、メルカプチル、もしくはカルボニル酸素で置換されていてもよい、Ｃ1−Ｃ6連鎖もしくは分岐鎖のアルキル、アルケニルもしくはアルキニルであって、
ＺはＯもしくはＳであり、
そして、Ｒは独立に、
Ｑ、
もしくは、一もしくはいくつかの位置がＱで置換され、そしてさらに一もしくはいくつかの位置がヒドロキシル、メルカプチル、もしくはカルボニル酸素で置換されていてもよい、Ｃ1−Ｃ6連鎖もしくは分岐鎖の低級アルキル、アルケニルもしくはアルキニルであって、そして一以上の炭素原子がＯ、Ｎ、ＮＨ、Ｓ、ＳＯ、もしくはＳＯ２で置換されていてもよく、
そして、そこでは、Ｑは飽和、部分飽和もしくは芳香族の単環、二環もしくは三環の炭素環もしくは複素環であって、個々の環のサイズは５−６員環であり、もし存在するのであれば、Ｏ、Ｎ及びＳよりなる群から独立に選ばれた１−４個の異種原子を如何なる化学的に安定な順序及び酸化状態で含んでおり、
そして、Ｑは一もしくはいくつかの位置が、ハロ、ヒドロキシル、メルカプチル、ニトロ、トリフルオロメチル、アミノカルボニル、アリールがハロゲン化されそしてトリフルオロメチルもしくはシアノで置換されていてもよいアリールアミノカルボニル、Ｃ1−Ｃ4アルキルスルホニル、Ｃ1−Ｃ4アルキルチオ、オキソ、シアノ、カルボキシ、Ｃ1−Ｃ4アルキルもしくはアルケニル、Ｃ1−Ｃ4アルコキシ、Ｃ1−Ｃ5アルコキシカルボニル、Ｃ1−Ｃ4アルケニルオキシ、フェノキシ、フェニル、シアノフェニル、ベンジルオキシ、ベンジル、アミノ、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、ジ−（Ｃ1−Ｃ4）アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ4アルキルカルバモイル、ジ−（Ｃ1−Ｃ4）アルキルカルバモイルもしくはこれらの組合せでよく、
但し、ＸとＹが
【化４】
2004532187.tif 000054
又は、これらの組合せであって、
ｎ’が０で、
ｎが０で、
Ｖがハロ、ヒドロキシル、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ1−Ｃ4アルコキシもしくはアルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、アミノもしくはＱである場合には、
ＲはＱ又はＱで置換されたＣ1−Ｃ3分岐もしくは直鎖アルキルではない。
【請求項２】
ＶがＣ1−Ｃ4アルキルオキシ、Ｑで置換されていてもよいＣ2−Ｃ4アルケニルオキシ、Ｃ1−Ｃ4アルコキシカルボニル、アミノもしくはＣ1−Ｃ4アルコキシカルバモイルアミノで置換されていてもよいＣ1−Ｃ6アルキルカルバモイル、ジ−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）カルバモイル、Ｃ1−Ｃ4アルカノイル、Ｑ置換Ｃ1−Ｃ6直鎖もしくは分岐鎖アルキル、アルケニルもしくはアルキニル、−ＣＯ−Ｗ及び−（ＣＨ2）n−Ｗよりなる群から選ばれたものであり、
ＸとＹは独立に、
【化５】
2004532187.tif 000055
そして、Ｙはさらに、Ｑ、
【化６】
2004532187.tif 000056
もしくは、一もしくはいくつかの位置がＱで置換され、そしてさらに一もしくはいくつかの位置がヒドロキシル、メルカプチル、もしくはカルボニル酸素で置換されていてもよい、Ｃ1−Ｃ6連鎖もしくは分岐鎖のアルキル、アルニケルもしくはアルキニルであって、
そして、そこでは、Ｑは飽和、部分飽和もしくは芳香族の単環、二環もしくは三環の炭素環もしくは複素環であって、個々の環のサイズは５−６員環であり、もし存在するのであれば、Ｏ、Ｎ及びＳよりなる群から独立に選ばれた１−６個の異種原子を如何なる化学的に安定な順序及び酸化状態で含んでおり、
そして、Ｑは一もしくはいくつかの位置が、ハロ、ヒドロキシル、メルカプチル、ニトロ、トリフルオロメチル、アセチル、アミノカルボニル、ハロゲン化され、そしてトリフルオロメチルもしくはシアノで置換されていてもよいアリールアミノカルボニル、メチルスルホニル、メチルチオ、オキソ、シアノ、カルボキシ、Ｃ1−Ｃ6直鎖もしくは分岐鎖アルキルもしくはアルケニル、Ｃ1−Ｃ4アルコキシ、Ｃ1−Ｃ4アルケニルオキシ、フェノキシ、フェニル、シアノフェニル、ベンジルオキシ、ベンジル、アミノ、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、ジ−（Ｃ1−Ｃ4）アルキルアミノ又はこれらの組合せである請求項１による化合物
【請求項３】
Ｖが−（ＣＨ2）n−Ｗであり、ｎが０であり、そしてＷがハロである請求項１による化合物
【請求項４】
Ｖが５位に結合している請求項１の化合物
【請求項５】
Ｖが−（ＣＨ2）n−Ｗであって、Ｗが−Ｚ’−（ＣＨ2）m−Ｑである請求項４の化合物
【請求項６】
ｎが１であり、ｍが０であって、Ｚ’がＯである請求項５の化合物
【請求項７】
ｎが０であり、ｍが１であって、Ｚ’がＯである請求項５の化合物
【請求項８】
ｎとｍが０であり、Ｚ’がＮＨである請求項５の化合物
【請求項９】
ＶがＱ置換Ｃ1−Ｃ6直鎖もしくは分岐鎖のアルキル又はＱ置換Ｃ２−Ｃ６直鎖もしくは分岐鎖アルケニルである請求項４の化合物
【請求項１０】
ｎ’が０であり、ＸとＹが独立に、
【化７】
2004532187.tif 000057
である請求項１による化合物
【請求項１１】
各Ｒが独立にＱ又はＱ置換Ｃ1−Ｃ6アルキルである請求項１０の化合物
【請求項１２】
Ｖが５位に結合している請求項１１の化合物
【請求項１３】
Ｖが−（ＣＨ2）n−Ｗであって、Ｗが−Ｚ’−（ＣＨ2）m−Ｑである請求項１２の化合物
【請求項１４】
ｎが１であり、ｍが０であって、Ｚ’がＯである請求項１３の化合物
【請求項１５】
ｎが０であり、ｍが１であって、Ｚ’がＯである請求項１３の化合物
【請求項１６】
ｎとｍが０であり、Ｚ’がＮＨである請求項１３の化合物
【請求項１７】
ＶがＱ置換Ｃ1−Ｃ6直鎖もしくは分岐鎖のアルキル又はＱ置換Ｃ2−Ｃ6直鎖もしくは分岐鎖アルケニルである請求項１２の化合物
【請求項１８】
化合物が次の群から選ばれたものである請求項１による化合物
化合物１：３−｛３，５−ビス−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−ウレイド］−フェニル｝プロピオン酸メチルエステル；
化合物２：５−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ’−ビス−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−イソフタルアミド；
化合物３：５−ナフタレン−１−イル−Ｎ，Ｎ’−ビス−（３−トリフルオロメチル−フェニル）イソフタルアミド；
化合物４：｛６−［３−（３，５−ジクロロ−フェニル）−ウレイド］−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−ベンゾイルアミノ］ヘキシル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル；
化合物５：３−｛３，５−ビス−［３−（３，５−ジクロロフェニル）ウレイド］−フェニル）メチルエステル；
化合物６：１，３−（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−［５−（３，４−ジクロロフェノキシメチル）フェニル］アミド；
化合物７：１，３−（１−ナフタレン）−Ｎ−［５−（３，４−ジクロロ−フェノキシメチル）−フェニル］−スルホナミド；
化合物８：３，５−ジ（ベンジルオキシ）−３’−（トリフルオロメチル）ベンスアニリド；
化合物９：Ｎ−（５−｛［２−アザ−２−［３，５−ジクロロフェニル）−１−メチルチオビニル］アミノ｝−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ｝フェニル）（３，５−ジクロロフェニル）ホルムアミド；
化合物１０：（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−［５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ｝フェニル］ホルムアミド；
化合物１１：［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチルアミノ）−５−［（４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物１２：Ｎ−（５−［（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）メチル］−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝フェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物１３：［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−５−（２−ピリジルアミノ）フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物１４：Ｎ−（５−｛［（ナフチルメチル）アミノ］メチル｝−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボニル−アミノ｝フェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物１５：１−ベンゾイル−２−｛３−［（３−トリフルオロメチル）フェニル］カルボニルアミノ−５−ヒドロキシ｝ベンゾイルヒドラジン；
化合物１６：（３−（２−（４−ピリジル）ビニル）−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド）。
化合物１６：（３−（２−（４−ピリジル）ビニル）−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物１７：（５−（２−ナフチルオキシ）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物１７：（５−（２−ナフチルオキシ）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物１８：（５−（２−ナフチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物１８：（５−（２−ナフチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物１９：１−［（３，４−ジクロロフェニル）オキシメチル］−３，５−ビス−｛［２−（３，４−ジクロロフェニル）エチル］アミノカルボニル｝ベンゼン；
化合物２０：１−［（３，４−ジクロロフェニル）オキシメチル］−３，５−ビス−［（３，５−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］ベンゼン；
化合物２１：１−［４−（２−シアノフェニル）ベンジル］オキシ−３，５−ビス｛２−［（３，４−ジクロロフェニル）エチル］アミノカルボニル｝ベンゼン；
化合物２２：１−［４−（２−シアノフェニル）ベンジル］オキシ−３，５−ビス−［（３−シアノフェニル）アミノカルボニル］ベンゼン；
化合物２３：（５−（２−（２−５，６，７，８−テトラヒドロナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物２３：（５−（２−（２−５，６，７，８−テトラヒドロナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物２４：（５−（２−（２−ナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物２４：（５−（２−（２−ナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物２５：（５−（２−（２−ナフチル）ビニル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物２５：（５−（２−（２−ナフチル）ビニル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物２６：（３−ブロモ−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物２７：２−｛［３，５−ビス（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）フェニル］メチル｝イソ−インドリン−１，３−ジオン；
化合物２８：１−（３，５−ジクロロフェニル）−３−［３−（３，５−ジクロロベンジルオキシ）−４−メトキシフェニル］ウレア；
化合物２９：Ｎ−（３−｛ビス［（３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−４−ブロモフェニル）［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］ホルムアミド；
化合物３０：ビス［（３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］（３−｛ビス［（３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ）−４−ブロモフェニル）アミン；
化合物３１：２−｛［３−アミノ−５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）フェニル］メチル｝イソインドリン−１，３−ジオン；
化合物３２：１−（３，４−ジクロロベンジルオキシ）−３，５−ビス−［（３，４，５−トリクロロフェニル）アミノカルボニル］ベンゼン；
化合物３３：［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［２−ブロモ−５−（ナフチルメトキシ）フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物３４：Ｎ−［２−ブロモ−５−（ナフチルメトキシ）フェニル］［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；
化合物３５：［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチルアミノ）−２−｛［４−（ジメチルアミノ）フェニル］アミノ｝フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物３６：［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソ−メチル｝アミノ−４−［（４−クロロフェニル）アミノ］フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物３７：３−｛［（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）アミノカルボニル］ベンジルオキシ｝−１，５−ビス−［（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）アミノカルボニル］ベンゼン；
化合物３８：３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］ベンジルオキシ｝−１，５−ビス−［（３，４−ジクロロ−フェニル）アミノカルボニル］ベンゼン；
化合物３９：［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソ−メチル｝アミノ）−４−（３，５−ジメチルピラゾリル）フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物４０：［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−４−［（４−フェノキシフェニル）アミノ］フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物４１：｛２−ブロモ−５−［Ｎ−（３−ニトロフェニル）カルバモイル］フェニル｝−Ｎ−（３−ニトロフェニル）ホルムアミド；
化合物４２：１，３−ビス［（３−トリフルオロメチルフェニル）アミノカルボニル］−５−［（２−ナフチル）メチルオキシ］ベンゼン；
化合物４３：１，３−ビス−［３，４−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］−５−（ベンジルオキシ）ベンゼン；
化合物４４：［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチルアミノ）−２−ピペリジルフェニル］アミノ｝メタン−１−チオン；
化合物４５：１−［３−（３，５−ジクロロフェノキシ）メチル−４−メトキシフェニル］−３−（３，５−ジクロロフェニル）チオウレア；
化合物４６：１−［３−（３，５−ジクロロフェノキシ）メチル−４−メトキシフェニル］−３−ベンゾイルチオウレア；
化合物４７：Ｎ−［４−メトキシ−３−（ナフチルメトキシ）フェニル］ナフチルホルムアミド；
化合物４８：Ｎ−［４−メトキシ−３−（ナフチルメトキシ）フェニル］−２−ナフチルエタナミド；
化合物４９：Ｎ−［４−メトキシ−３−（ナフチルメトキシ）フェニル］−２，２−ジフェニルエタナミド；
化合物５０：［４−メトキシ−３−（２−ナフチルエトキシ）フェニル］（ナフチルスルホニル）アミン；
化合物５１：（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−［４−クロロ−３−（フェニルカルボニル）フェニル］ホルムアミド；
化合物５２：（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−（５−｛［（ジフェニルメチル）アミノ］スルホニル｝−２−クロロフェニル）ホルムアミド；及び
化合物５３：１−｛３−［（５−フェニル）バレロイルアミノ］−５−ブロモベンゾイル｝−４−（３，４−ジクロロフェニル）チオセミカルバジド。
【請求項１９】
（ｉ）      請求項１で定められた式Ｉの化合物、及び
（ｉｉ）   薬剤として許容できる基剤、希釈剤又は賦形剤からなる薬剤組成物
【請求項２０】
さらに毛髪成長促進剤、脱毛抑制剤、抗生物質、ふけ症防止剤、抗炎症剤、殺シラミ剤、止痒剤、麻酔薬、角質溶解剤、抗脂漏剤、抗坐瘡剤及び毛染剤からなる群から選ばれた添加剤を含む請求項１９の薬剤組成物
【請求項２１】
化合物をサイクロフィリン型イムノフィリンに接触させることよりなり、該化合物が請求項１記載の式Iのものである。サイクロフィリン型イムノフィリン蛋白へ結合させる化合物の使用方法
【請求項２２】
該化合物のサイクロフィリン型イムノフィリンへの接触がインビトロで起こる請求項２１の方法
【請求項２３】
該化合物のサイクロフィリン型イムノフィリンへの接触がインビボで起こる請求項２１の方法
【請求項２４】
該化合物のサイクロフィリン型イムノフィリンへの接触が動物に投与後に起こる請求項２３の方法
【請求項２５】
該化合物のサイクロフィリン型イムノフィリンへの接触が細胞内で起こる請求項２２の方法
【請求項２６】
該化合物のサイクロフィリン型イムノフィリンへの接触が細胞のない製剤内で起こる請求項２２の方法
【請求項２７】
請求項１の式Iの化合物とサイクロフィリン型イムノフィリンの複合体
【請求項２８】
サイクロフィリン型イムノフィリンがヒトである請求項２７の複合体
【請求項２９】
請求項１の式Iの化合物の薬剤的に有効な量を動物に投与することによりなる、請求項１の式Iの化合物の使用方法
【請求項３０】
動物が神経性疾患があると診断され、それに罹りやすい状態にあり、あるいはそれがあると疑われるものである請求項２９の方法
【請求項３１】
神経性疾患を有する患者に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の治療に有効な量を投与することによりなり、該神経性疾患が神経変性疾患、神経障害疾患、神経血管疾患、脳、脊髄もしくは末梢神経系の外傷性損傷、中枢もしくは末梢神経系の脱髄疾患、中枢もしくは末梢神経系の代謝もしくは遺伝性代謝障害又は中枢もしくは末梢神経の毒素誘発性もしくは栄養関連疾患である、神経性疾患を有する患者の治療方法
【請求項３２】
神経変性疾患がパーキンソン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチンソン病、小脳性失調症又は多系統萎縮症である請求項３１の方法
【請求項３３】
脱髄疾患が多発性硬化症、ギラニーバレー症候群又は慢性炎症性脱髄多発性根神経症である請求項３１の方法
【請求項３４】
神経血管疾患が全脳虚血症、脊髄虚血症、虚血性発作、心原性脳塞検症、出血性発作、小窩性梗塞、又は多発性梗塞症候群である請求項３１の方法
【請求項３５】
中枢又は末梢神経系の外傷性損傷が震盪症、挫傷、びまん性軸索症、浮腫、頭蓋脳又は脊髄の外傷に関連する血腫、末梢神経もしくは叢の裂傷、圧迫、引伸し、もしくは剥離に関連する軸索もしくは神経鞘の損傷、又は手術中に起こる神経組織の損傷である請求項３１の方法
【請求項３６】
手術が前立腺の手術であり、神経組織の損傷が骨盤の神経節の大部分又は海綿状神経に対するものである請求項３５の方法
【請求項３７】
神経障害疾患が、糖尿病性神経障害、尿毒症性神経障害、薬治療関連の神経障害又はウイルス感染症関連の神経障害である請求項３１の方法
【請求項３８】
代謝障害がてんかん重積持続状態、低血糖による昏睡又はウイルソン病である請求項３１の方法
【請求項３９】
請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の薬剤としての有効量を動物に投与することによりなる神経性疾患の予防方法
【請求項４０】
請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の有効量を哺乳動物に投与することによりなる、哺乳動物の毛髪の成長を刺激し、脱毛を防止しあるいは脱毛を抑制する方法
【請求項４１】
前記哺乳動物が癌の化学治療法剤の治療を受けている請求項４０の方法
【請求項４２】
前記の癌の化学療法剤がシスプラチン、カーボプラチン、サイクロホスホアミド、ダクチノマイシン、エトポシド、ヘキサメタメラミン、アイホスファミド、タキソール、ビンクリスチン、ブレオマイシン又は５−フルオロウラシルである請求項４１の方法
【請求項４３】
前記哺乳動物の放射線治療を受けている請求項４０の方法
【請求項４４】
前記哺乳動物が円形脱毛症、雄性脱毛症／男性型脱毛症、毛髪成長期の臭気、抜毛癖、牽引脱毛又は毛髪休止期の臭気に罹っている請求項４０の方法
【請求項４５】
前記哺乳動物がメトトレキセート、非ステロイド性抗炎症剤又はベーターブロッカーによる治療を受けている請求項４０の方法
【請求項４６】
ミトコンドリアを請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体をミトコンドリアと接触させることよりなる、ミトコンドリアの透過転移孔のブロック方法
【請求項４７】
酸化性ストレスを受けている細胞を請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体をミトコンドリアと接触させることよりなる、酸化性ストレスを受けている細胞のミトコンドリア代謝の破壊を抑制する方法
【請求項４８】
カルシウムの過負荷を受けている細胞を請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体をミトコンドリアと接触させることよりなる、カルシウムの過負荷を受けている細胞の細胞死を防止しあるいは遅らせる方法
【請求項４９】
細胞、組織又は臓器に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体を接触させることよりなる、興奮毒性又は低血糖症の該細胞、組織又は臓器への傷付を予防し、緩和し又は遅らせる方法
【請求項５０】
細胞に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体を接触させることよりなる、プログラム細胞死の生理的誘発をもたらす哺乳動物の細胞のエネルギー代謝の破壊と細胞死を抑制する方法
【請求項５１】
細胞に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体を接触させることよりなる、大規模又は営業規模での細胞培養における培養細胞の死を防止しあるいは遅らせる方法
【請求項５２】
哺乳動物に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の有効量を投与することよりなる、該哺乳動物の虚血性疾患又は虚血症／再灌流疾患の治療又は予防方法
【請求項５３】
前記虚血性疾患又は虚血症／再灌流疾患が腸間膜梗塞、結腸虚血症、肝臓梗塞、腎臓梗塞、脾臓梗塞又は虚血性心臓病である請求項５２の方法
【請求項５４】
前記虚血性心臓病がうっ血性心不全、心筋虚血症、又は冠状動脈性心疾患である請求項５３の方法
【請求項５５】
哺乳動物に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の治療に有効な量を投与することよりなる、哺乳動物の眼の疾患の治療方法
【請求項５６】
前記眼の疾患が緑内障、虚血性網膜症、血管性網膜症又は光受容体細胞層の退化である請求項５５の方法
【請求項５７】
ライ症候群患者に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の治療に有効な量を投与することよりなる、ライ症候群患者の治療方法
【請求項５８】
臓器移植手術に用いられる臓器に、請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体を接触させることよりなる、臓器移植手術に用いられる臓器の組織の損傷を防止しあるいは減少させる方法
【請求項５９】
病原性原生動物又は蠕虫である寄生虫に請求項１の式Iの化合物を接触させることよりなる、病原性原正動物又は蠕虫である寄生虫の感染又は侵入の治療方法
【請求項６０】
動物に請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の治療に有効な量を投与することよりなる、該動物への病原性原生動物又は蠕虫である寄生虫の感染の治療方法
【請求項６１】
前記の感染がマラリア、回旋糸状虫症、リンパ腺糸状虫症、腸線虫感染、サナダムシ感染、蟯虫感染、トキソプラズマ症、リーシュマニア症、トリパノソーマ症、又は住血吸虫である請求項６０の方法
【請求項６２】
哺乳動物に、請求項１の式Iの化合物又は薬剤として許容できるその誘導体の治療に有効な量を投与することによりなる、哺乳動物のウイルス感染の治療方法
【請求項６３】
前記のウイルス感染がヒト免疫不全症ウイルス感染である請求項６２の方法
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サイクロフィリン（ＣｙＰ）型イムノフィリン蛋白に対して親和性を有する、新規な非ペプチド性小分子有機化合物に関する。本発明は、さらに、ＣｙＰ型蛋白に結合し、それらのペプチジル−プロリルイソメラーゼ活性を抑制し、そして、多種類の医療における研究、開発、治療への応用へのこれらの化合物の用途に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
イムノフィリンは、ある種の免疫抑制剤に結合する能力によって機能的に特徴づけられた蛋白のグループである。イムノフィリンは、構造と薬理から、ＦＫ５０６結合性蛋白（ＦＫＢＰｓ）とサイクロフィリン（ＣｙＰ）蛋白の２つのクラスに分けられる。これらの２つの蛋白グループの基本型であるＦＫＢＰ１２とサイクロフィリンＡはいずれも免疫抑制を媒介する細胞機構に含まれるものであるが、それらはマクロライド抗生物質であるＦＫ５０６とラパマイシンに結合するＦＫＢＰグループのメンバーと、一方サイクリックウンデカペプチドであるサイクロスポリンＡ（ＣｓＡ）に結合するＣｙＰグループのメンバー、という全く異なるタイプの免疫抑制剤に対して選択的な親和性を発揮する。
【０００３】
全ての免疫抑制剤に共通なのは、免疫システムの細胞における細胞内シグナルカスケードを阻害する能力である。ＦＫ５０６とＣｓＡの場合には、これらの医薬のそれぞれのレセプター蛋白であるＦＫＢＰ１２とサイクロフィリンＡへの結合は、細胞内ホスファターゼカルシニューリンの医薬レセプター複合体への架橋をもたらす。このカルシニューリンの失活は、最終的にはシグナル蛋白であるＮＦＡＴ（活性化Ｔ細胞の核因子）を含むリン酸化カルシニューリン基質の蓄積を導く。ＮＦＡＴは、免疫応答のＴ細胞活性化プロングに含まれる遺伝子の調節と転写の活性化において重要な役割を果たす。カルシニューリン活性がないと、Ｔ細胞活性化カスケ−ドは、リン酸化状態にあるＮＦＡＴが細胞核に転座できないので阻止される。
【０００４】
免疫系におけるその効果は別にして、ＣｓＡは中枢神経系において生物学的な活性があることを示した。脳卒中のきっ歯動物モデル実験では、ＣｓＡの組織への治療によって内側大脳動脈の梗塞の前後を問わず梗塞サイズの減少をもたらしている［Ｔ．Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ及びＢ．Ｋ．Ｓｉｅｓｊｏ，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，８３９，ｐｐ２８３−９１（１９９９）］。ＣｓＡはまた、一過性の全体的な前脳虚血症の後の海馬形成にみられるアセチルコリン受容体の疾患から保護し［Ｙ．Ｋｏｎｄｏら，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，Ｒｅｓ．，２４，ｐｐ９−１３（１９９９）］、インシュリンが誘発する低血糖による昏睡［Ｈ．Ｆｒｉｂｅｒｇら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１８，ｐｐ５１５１−９（１９９８）］、外傷性脳障害［Ｐ．Ｇ．Ｓｕｌｌｉｖａｎら，Ｅｘｐ，Ｎｅｕｒｏｌ．，２０００Ｆｅｂ；１６１，６３１−７（２０００）］、及びドパミンニューロン変性実験［Ｋ．Ｍａｔｓｕｕｒａら，Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１４６，５２６−３５１（１９９７）］、の動物モデルにおいてニューロン保護効果が明らかにされている。ＣｓＡが神経の障害の後に保護効果を発揮するためには、傷害の部位に取入れ可能でなければならない。しかしながら、血脳関門のために、ＣｓＡは組織に投与されたときに脳へはごく限られた量が入りうるだけであり、それが最も効果を発揮するのは血脳関門に欠陥があらわれたときである［Ｈ．Ｕｃｈｉｎｏら，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，８１２，ｐｐ２１６−２６（１９９８）；Ｐ．Ｇ．Ｓｕｌｌｉｖａｎら，Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１６１，ｐｐ６３１−７（２０００）］。
【０００５】
一方、本発明は特定の理論に縛られるものではなく、少なくとも神経系細胞へのＣｓＡの何らかの効果がカルシニューリン抑制と独立して起こるものと思われる。本発明者のある者が、カルシニューリン結合領域が欠如しているＣｓＡの非免疫抑制性ペプチド類縁体が神経細胞培養において神経親和活性を発揮し、これがＣｓＡのものと同じであることを見出した［Ｊ．Ｐ．Ｓｔｅｉｎｅｒら，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，３，ｐｐ４２１−８（１９９７）］。
【０００６】
サイクロフィリンＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びサイクロフィリン−４０という多くの種類の哺乳動物のサイクロフィリンが同定され、クローン化された［Ｓｎｙｄｅｒ及びＳａｂａｔｉｎｉ，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．ｌｉ３２−３７（１９９５）；Ｆｒｉｅｄｍａｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９０：６８１５−６８１９（１９９３）］。サイクロフィリンＢは、当該細胞の小胞体への転座を指図するＮ末端シグナル配列を有している。２３ｋＤのサイクロフィリンＣは細胞の細胞質ゾル内に見出される。１８ｋＤのサイクロフィリンＤはミトコンドリアにおけるその作用をターゲットとしているように思われ、そして、サイクロフィリン−４０は不活性型グルココルチコイド受容体の成分である。サイクロフィリンＡは各種の細胞に多量に発現される１９ｋＤの蛋白である。他のサイクロフィリンと同様に、サイクロフィリンＡも免疫抑制剤であるＣｓＡに結合するばかりでなく、ペプチジル−プロリルーシス−トランスイソメラーゼ（ＰＰＩａｓｅ）と蛋白抱持又は“シャペロン”活性を有している。ＰＰＩａｓｅ活性は蛋白におけるプロリン残基のシスからトランス配座への転換を触媒する［Ｆｉｓｃｈｅｒ，ら，Ｂｉｏｍｅｄ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ａｃｔａ４３：１１０１−１１１２（１９８４）］。
【０００７】
サイクロフィリンＡはＣｓＡのレセプターとして最初に同定されたので、ＣｓＡ：サイクロフィリン相互作用の効果は充分に証明されている。サイクロスポリンＡはサイクロフィリンＡに、親和性を表わす値としては比較的高い１０-8ｍｏｌ／Ｌの範囲の解離定数で結合する［Ｈａｎｄｓｃｈｕｍａｃｈｅｒら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２６：５４４（１９８４）］。医薬と蛋白との相互作用に関する知識によって多くの医薬を発見する努力がなされてきた。最初は、投与量を制限する副作用がないがＣｓＡに効果が似ている新規な免疫抑制薬の同定に焦点があてられた。
【０００８】
しかしながら、この分野では、中枢神経系及び身体の他の部分を含む病状、傷害及び他の異常な状態を治療するためのサイクロフィリン結合性化合物の有用性の評価が欠けている。中枢神経系の疾患の治療に用いるためには、例えば、サイクロフィリンに結合性化合物が血流から脳に入り込んでサクロフィリンに結合し、生物化学的な効果を発揮する必要がある。しかし、サイクロスポリンＡは一般に組織への投与後中枢神経系へ入り込みにくく、それ故、もし血脳関門が無傷ならばＣＮＳへ適用できる治療能力は低いものにすぎない。前記のＵｃｈｉｎｏら；Ｓｕｌｌｉｖａｎら参照。それ故、サイクロフィリン結合性化合物を用いることによって中枢神経系及び他の臓器を含む病状、傷害及び他の異常な状態を治療するための安全で効果のある組成物及び方法論の必要性が存在している。これらの必要性は本発明が開発されるまで未解決のものであった。
【０００９】
研究者たちは、また、ＨＩＶウイルスのＧａｇ蛋白に対するサイクロフィリンＡの機能性会合に注目してきた［Ｔｈａｌｉら，Ｎａｔｕｒｅ，３７２：３６３−３６５（１９９４）］。これは新しい方向での医薬開発の取組みを得たものである（例えば、米国特許第５，７６７，０６９号明細書参照）。多くの研究者が、ＨＩＶライフサイクルを破壊するためにサイクロフィリンＡとＧａｇの間の相互作用をターゲットとする医薬の開発を模索している［Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ，ＢｉｏＷｏｒｌｄ
Ｔｏｄａｙ  ７：１（１９９６）］。
【発明の開示】
【００１０】
発明の目的
本発明の焦点は、サイクロフィリン蛋白と相互作用し、親和性を有し、そして結合する非ペプチド性小分子化合物に合わされている。サイクロフィリンとＣｓＡとが結合する相互作用の研究によって、本発明者らはサイクロフィリンと相互作用する多数の新規な小分子有機化合物を設計し、かつ確認し、それに基づいて本発明者らは同様な活性のある化合物の群を迅速に同定するスクリーニング方法を開発し、利用することができた。これらの化合物は、神経系の細胞の成長と再生に効果を示し、そしてこの細胞をそうでなければ死に至らせる化学的な障害から保護することが実験で明確に示された。これらの化合物は、神経学上の障害を含む各種の医療状態への治療、研究及び開発への応用を含む数多くの方法に用いることができる。
【００１１】
この発明は、こうしてＣｙＰ蛋白と結合する化合物を提供するものである。この発明の化合物は、好ましくは、免疫系を抑制せず、そして、好ましくは、ＦＫＢＰへの結合を含んでいない。すなわち、これらの化合物は５００ｎＭより大きいＩＣ50でＦＫＢＰのペプチジルプロリルイソメラーゼ活性を抑制するものである。ＣｙＰへの結合を決定する多数の方法とこの結合をインビトロ及びインビボで利用するやり方の方法と用途が提供される。好ましい化合物は、神経細胞の成長を促進しあるいはそれに影響を与え、障害を受けあるいは病気になったニューロンを再生し、あるいはニューロンもしくは神経細胞の障害に続く死や変性から保護する機能を発揮する。さらに、本発明の態様は、ほかのＣｙＰ結合性化合物を同定しそして単離する方法や、この化合物のほかの用途に用いることができる。
【００１２】
本発明はまた、これらの化合物をイムノフィリン蛋白と接触させることよりなる用途を含む数多くの用途を提供するものでもある。この方法は各種の変更を工夫することができる。特に、これらの化合物は、培養されているあるいは動物の体内の神経細胞の成長あるいは有害な刺激への抵抗力へ影響を与えるのに用いることができる。
発明の要約
【００１３】
一つの態様では、本発明は、下記に示す式Ｉの化合物を提供するものである。
【化１】
2004532187.tif 000002
【００１４】
式中、Ｖは４、５又は６位に結合され、そしてＣ1−Ｃ4アルキルオ
キシ、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｑで置換されていてもよいＣ2−Ｃ4アルケニルオキシ、Ｃ1−Ｃ4アルコキシカルボニル、アミノ又はＣ1−Ｃ4アルコキシカルボニルアミノで置換されていてもよいＣ1−Ｃ6アルキルカルバモイル、ジ−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）カルバモイル、Ｃ1−Ｃ4アルカノイル、Ｑ置換Ｃ1−Ｃ6アルキル、アルケニル又はアルキニル、ＣＯ−Ｗ及び−（ＣＨ2）n−Ｗよりなる群から選ばれたものであり、
そこでは、ＷはＱ、−Ｚ’−（ＣＨ2）m−Ｑ、−Ｎ＝ＣＨ−（ＣＨ2）m−Ｑ、ＣＯＯＣＨ3、ＣＯＣＨ3、ヒドロキシル、メルカプチル、アミノ、ニトロ、ハロ、カルキボシ、トリフルオロメチル、又はアミノもしくはＣ1−Ｃ4アルコキシカルボニルアミノであり、
ｎとｍは独立に０−４であり、
ｎ’は０−３であり、
Ｚ’はＯ、Ｓ、ＮＨ又はＮＲであり、
【００１５】
そこでは、ＸとＹは同一又は異なって、そして独立に、
【化２】
2004532187.tif 000003
【００１６】
そして、そこではＹはさらに、Q、
【化３】
2004532187.tif 000004
【００１７】
もしくは、一もしくはいくつかの位置がＱで置換され、そしてさらに一もしくはいくつかの位置がヒドロキシル、メルカプチル、もしくはカルボニル酸素で置換されていてもよい、Ｃ1−Ｃ6連鎖もしくは分岐鎖のアルキル、アルケニルもしくはアルキニルであって、
ＺはＯもしくはＳであり、
そして、Ｒは独立に、
Ｑ、
【００１８】
もしくは、一もしくはいくつかの位置がＱで置換され、そしてさらに一もしくはいくつかの位置がヒドロキシル、メルカプチル、もしくはカルボニル酸素で置換されていてもよい、Ｃ1−Ｃ6連鎖もしくは分岐鎖の低級アルキル、アルケニルもしくはアルキニルであって、そして一以上の炭素原子がＯ、Ｎ、ＮＨ、Ｓ、ＳＯ、もしくはＳＯ２で置換されていてもよく、
【００１９】
そして、そこでは、Ｑは飽和、部分飽和もしくは芳香族の単環、二環もしくは三環の炭素環もしくは複素環であって、個々の環のサイズは５−６員環であり、もし存在するのであれば、Ｏ、Ｎ及びＳよりなる群から独立に選ばれた１−４個の異種原子を如何なる化学的に安定な順序及び酸化状態で含んでおり、
【００２０】
そして、Ｑは一もしくはいくつかの位置が、ハロ、ヒドロキシル、メルカプチル、ニトロ、トリフルオロメチル、アミノカルボニル、アリールがハロゲン化されそしてトリフルオロメチルもしくはシアノで置換されていてもよいアリールアミノカルボニル、Ｃ1−Ｃ4アルキルスルホニル、Ｃ1−Ｃ4アルキルチオ、オキソ、シアノ、カルボキシ、Ｃ1−Ｃ4アルキルもしくはアルケニル、Ｃ1−Ｃ4アルコキシ、Ｃ1−Ｃ5アルコキシカルボニル、Ｃ1−Ｃ4アルケニルオキシ、フェノキシ、フェニル、シアノフェニル、ベンジルオキシ、ベンジル、アミノ、Ｃ1−Ｃ4アルキルアミノ、ジ−（Ｃ1−Ｃ4）アルキルアミノ、Ｃ1−Ｃ4アルキルカルバモイル、ジ−（Ｃ1−Ｃ4）アルキルカルバモイルもしくはこれらの組合せでよく、
【００２１】
但し、XとYが
【化４】
2004532187.tif 000005
又は、これらの組合せであって、
ｎ’が０で、
ｎが０で、
Ｖがハロ、ヒドロキシル、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ1−Ｃ4アルコキシもしくはアルケニルオキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、アミノもしくはＱである場合には、
【００２２】
ＲはＱ又はＱで置換されたＣ1−Ｃ3分岐もしくは直鎖アルキルではない。
【００２３】
本発明のこの態様における好ましい化合物は５位がＶで置換されたものである。好ましくは、Ｖは−（ＣＨ2）n−Ｚ’−（ＣＨ2）m−Ｑ
又はＱ置換Ｃ1−Ｃ6直鎖又は分岐鎖のアルキル又はアルケニルである。
【００２４】
好ましい化合物はさらに、ｎ’が0であって、ＸとＹが独立に、
【化５】
2004532187.tif 000006
であるものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
本発明の化合物は式Ｉから選択して用いることができる。特定の化合物か出発して、Ｒ、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｚ’、Ｑ、Ｖの個々の可変基とｎ、ｎ’及びｍの値のいずれも選択することができ、一方、一以上の他の可変基を変えることができる。例えば、式Ｉにおいて、Ｖを５位に結合させてこれを−（ＣＨ2）n−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｑとし、この化合物のカブグループとして、少なくともＱ基の一つがアミン結合を介して結合している、共通の１，３，５−置換パターンを有しているものを選択することができる。
【００２６】
こうして求められたサブグループはいずれも、許されるＸとＹの組合せによって、そして、ＸとＹが互いに似ておりあるいは異なることの要求によって、そして、例えばＲがＱであること、あるいはＲがＱ置換のアルキル、アルケニル又はアルキニルであること、そして、全てのＱ置換基が同じでありあるいは異なっていることの要求によって、さらに化合物を別のサブグループに分けることができる。このプロセスは、これらの可変基のいずれかあるいはその組合せを用いることによって繰返すことができる。この方法では、当業者は本発明の範囲内の全ての関連化合物のグループを、あるいは個々の化合物であっても、選択しそして使用することができる。後で多くの例が示されるが、それらは単に可能な変更と修飾の範囲の代表例にすぎない。当業者は式Iの記述からだけでも多くの別の化合物を工夫することができる。
【００２７】
この明細書における、一般的用語である“アルキル”、“アルケニル”又は“アルキニル”は、直鎖と分岐鎖の飽和又は不飽和基の両方を含んでいる。“アリールアミノカルボニル”などの用語における“アリール”は一般にフェニル、ナフチル、ピロリル、ピロリジニル、ピリジニル、ピリミジニル、プリニル、フリル、イミダゾリル、キノリニル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル及びチエニルを意味している。“アルキルオキシ”又は“アルコキシ”は、例えばメトキシやエトキシのような基を指しており、“アルコキシカルボニル”は、例えばメチルエステルやブチルエスエルのような基を指しており、“Ｃ1−Ｃ6アルキルカルバモイル”と“ジ（Ｃ1−Ｃ4）アルキルカルバモイル”は、例えばエチルカルバモイルやジエチルカルボモイルのようなアミド結合を経由して飽和又は不飽和の炭素鎖に結合していることを指しており、“Ｃ1−Ｃ4アルコキシカルボニルアミノ”は例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ（Ｃ4Ｈ９）−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−などの基を接しており、“アリールアミノカルボニル”はフェニルアミノカルボニル（Ｃ6Ｈ5）−ＮＨ−ＣＯ−のような基を指しており、“Ｃ1−Ｃ4アルカノイル”は、例えばホルミルやアセチルのような基を指しており、“Ｃ6アルキルアミノ”は、例えばヘキシルアミノのような基を指している。
【００２８】
式Ｉの化合物は、医薬及び組織又は細胞培養への用途を含むいくつかの用途に塩又は誘導体として調製しあるいは処方してもよい。ここに用いられている本発明のＣｙＰ結合性化合物は薬剤として許容できる誘導体を含むことが定められている。“薬剤として許容できる誘導体”とは、本発明の化合物あるいは他のいかなる化合物の薬剤として許容できる塩、エステル、チオエステルあるいはこのエステル又はチオエステルの塩であって、動物又はヒトの患者への投与時に、この発明の化合物、又はＣｙＰに結合する能力及び／又は病気の治療又は予防の有効性によって特徴づけられたその代謝産物あるいは残基を提供できるものを表わしている。本発明のこの態様の範囲内の病気の例を後で示す。本発明の化合物はまた、式Ｉの１以上の化合物よりなる組成物の一部であることができる。
【００２９】
本発明の化合物は、異性体又はラセミ混合物として、あるいは光学的に純粋な化合物として製造することができる。この業界で知られている立体異性体の分離方法を、混合物に含まれる1以上の化合物の量を豊富にするために用いることもできる。本発明の組成物も同様に、立体異性体の混合物、１以上の立体異性体の混合物、又は１以上の立体異性体を豊富にしたものを含んでいてもよい。これらの形態は全てこの発明に明確に含まれており、そして特許請求の範囲に含まれるものであることが意図されている。
【００３０】
式Ｉの好ましい化合物は、例えばＣｙＰのペプチジルプロリルシス−トランスイソメラーゼ酵素活性（ＰＰＩａｓｅ）の測定可能な阻害によって検出されるＣｙＰに選択的に結合するものである。“ＣｙＰに選択的に結合する”とは、その化合物がＦＫＢＰに対し有意な結合親和性を有しておらず、及び／又はＦＫＢＰへの結合に関係する生物学的な活性を有していないことを意味する。例えば、ＦＫＢＰに対するＩＣ50は５００ｎＭ以上である。当業者はＣｙＰとＦＫＢＰにおけるロタマーゼ阻害の検出方法をよく知っている。さらに、ＣｙＰへの結合を検出する多数の方法を後述する。
【００３１】
式Ｉから容易に明らかであるように、少なくとも２つの炭素環又は複素環基が直鎖又は分岐鎖の組合せによって中央の三置換フェニル環に結合しているという共通の置換パターンが存在する。この共通のパターンは、以前に他のイムノフィリン結合性化合物や医薬の同定で取られたアプローチとは異なっている。例えば、Ｈｏｌｔら（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ，４：３１５−３２０（１９９４））はＦＫＢＫに結合する基本構造を含むものとしてピペコレートや1−（１，２−ジオキソ）２−カルボキシレートピペリジンについて論じている。同様に、本発明者らの以前の研究では、ＦＫＢＰに結合する構造を含むものとして、１−（１，２−ジオキソ）２−ピロリジンの関連性を確立した（Ｓｔｅｉｎｅｒら，ＰＮＡＳ９４：２０１９−２０２４（１９９７））。多分、これらの構造はペプチジルプロリルイソメラーゼ（ＰＰＩａｓｅ）活性に対する自然の基質である蛋白のプロリン含有フラグメントに似せたものである。蛋白では、アミノ酸のプロリンが１，２−置換ピロリジン構造に相当する。以前の研究では一般はこの構造が組込まれていた。しかしながら、式Ｉは１，２−置換ピロリジン構造に対応していない。さらに、ここに示す如く、この式の化合物は重要な生物活性そして生化学作用を有している。
【００３２】
研究の主体は、本発明の化合物が従来の研究とさらに隔たりのあるサイクロスポリンＡ、ＦＫ−５０６及びラパマイシンの類縁体に関するものであった。（例えば、米国特許第５，７６７，０６９号、第５，２８４，８２６号、第４，７０３，０３３号、及び第５，１２２，５１１号各明細書参照。）これらの類縁体は一般に環状ペプチド構造を有している。
【００３３】
別の態様では、本発明は、非ペプチド性化合物をサイクロフィリン型イムノフィリンに結合させる方法に関する。一方、本発明は、この理論に縛られるものではなく、結合がＰＰＩａｓｅ阻害剤のインビボでの免疫抑制と神経栄養の活性における活性剤であると考えられる“イムノフィリン：医薬”複合体をもたらすという仮説に立っている（Ｈａｍｉｌｔｏｎ及びＳｔｅｉｎｅｒ，Ｊ．ｏｆ Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．４１：５１１９−５１４３（１９９８）；Ｇｏｌｄ，Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．１５：２８５−３０６（１９９７））。この複合体がこれらのＰＰＩase阻害剤の治療作用のいずれかあるいは全てに働くか否かは、イムノフィリン：医薬相互作用へ向けられた焦点が多数の新しい医薬組成物の発見につながるか否かにかかっている。従って、式Ｉのような化合物を用いてイムノフィリン：化合物複合体あるいはＣｙＰ：化合物複合体を生み出す方法はこの発明の重要な態様をもたらす。この態様は、例えばこの化合物もしくは１以上の本発明の化合物よりなる混合物又は１以上の本発明の化合物よりなる薬剤組成物を培養物内の細胞あるいは動物に投与する方法に利用できる。
【００３４】
一方、このイムノフィリン：化合物複合体は培養細胞にインビボ及びインビトロでの有益な効果を有しており、この化合物をイムノフィリンに結合させる多くの他の用途がある。例えば、この化合物を担持したアフィニティークロマトグラフィーのカラムやマトリックスはＣｙＰと反応し、ＣｙＰを含む細胞や組織の抽出物はこのカラムやマトリックスを通過するであろうことから、さらに、インビトロでの結合実験を、細胞のない環境でのイムノフィリン複合体と相互作用する細胞成分の同定や精製に用いることができる。
【００３５】
こうして、本発明はまた、イムノフィリン：化合物又はＣｙＰ：化合物複合体自身はもとより、これらの複合体を形成する方法を提供するものでもある。これらの複合体を形成するには、該化合物をインビボで、細胞又は組織培養で、あるいは無細胞製剤中で、イムノフィリン又はＣｙＰ蛋白と接触させればよい。好ましい態様では、この化合物をＣｙＰＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ又は−４０の１以上のようなヒトＣｙＰ蛋白と接触させる。このＣｙＰ蛋白は、天然の細胞もしくは生物、リコンビナントＤＮＡを経由して製造され、導入された遺伝子物質を含む他の操作によって製造され、あるいは合成手段で製造されたものでよい。さらに、イムノフィリンリガンドに結合する機能を有するイムノフィリン領域を有するキメラ蛋白もまた蛋白：化合物複合体を形成させるのに使用することができる。このＣｙＰ：化合物、イムノフィリン：化合物又は蛋白：化合物複合体は不可逆的である必要はない。
【００３６】
化合物のＣｙＰへの結合は、ＰＰＩａｓｅ阻害アッセイ、アフィニティークロマトグラフィー、インビボでのニューロン保護又はニューロン再生活性アッセイ、インビトロでの神経栄養活性アッセイ、又は後述する、実施例に、あるいは引用した参考文献に記載された、神経系の神経細胞あるいは細胞での何らかの活性による、等を含む多くの手段で検出することができる。
【００３７】
この発明はまた、式Ｉの少なくとも１つの化合物よりなる組成物を提供する。この組成物は、薬剤として許容できる１以上の基剤、賦形剤又は希釈剤を含んでいてもよい。これらの組成物、又は化合物自身、又は上記の化合物あるいは組成物の混合物は動物に投与することができる。投与は、この化合物を動物の内部でＣｙＰと接触させる方法でよい。当業者が認識している各種のルートでの投与が可能である。このルートの例は後に詳細な記述がある。
【００３８】
式Ｉの化合物、又はそれらを含む組成物は、神経細胞を再生し、神経突起の派生を促進し、そしてそうでなければ損傷を生じる処理や状態から神経を保護する機能を発揮することができる。こうして、本発明の化合物と組成物は、ヒトを含む動物の神経性状態の診断、治療、緩和、治療あるいは予防に、そして、神経変性剤にさらされているあるいは神経系細胞が損傷を受けている動物（ヒトを含む）に有用である。このような状態や疾患は、ヒトを含む動物に存在しているときには、神経変性疾患、神経障害患者、神経血管疾患、脳、脊髄もしくは末梢神経系の外傷性損傷、中枢もしくは末梢神経系の脱髄疾患、中枢もしくは末梢神経系の代謝もしくは遺伝性代謝障害又は中枢もしくは末梢神経の毒素誘発性もしくは栄養関連疾患でありうる。ヒトに存在している場合には、神経変性疾患はパーキンソン病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチンソン病、小脳性失調症又は、例えばオリープ橋小脳変性疾患、線条体黒質変性疾患、進行性核上麻痺、シャイードレーガー症候群、脊髄小脳変性疾患及び皮質基底変性疾患を含む多系統萎縮症でありうる。脱髄疾患は、例えば、多発性硬化症、ギラニーバレー症候群又は慢性炎症性脱髄多発性根神経症であることができる。神経血管疾患は、例えば、全脳虚血症、脊髄虚血症、虚血性発作、心原性脳塞検症、出血性発作、小窩性梗塞、多発性梗塞による痴呆を含む多発性梗塞症候群あるいは中枢神経系の虚血症あるいは虚血症      ／再灌流傷害に基づくいかなる疾患であることができる。中枢又は末梢神経系の外傷性損傷が、例えば震盪、挫傷、びまん性軸索症、浮腫、及び頭蓋脳又は脊髄の外傷に関連する血腫、又は、末梢神経もしくは叢の裂傷、圧迫、引伸し、もしくは剥離に関連する軸索もしくは神経鞘の損傷であることができ、さらに手術例えば前立腺の手術中に起こる神経の損傷が含まれる。神経障害疾患は、糖尿病性神経障害、尿毒症性神経障害、治療関連の神経障害、例えばフェニトイン、スーラミン、タキソール、サリドマイド、ビンクリスチン又はビンブラスチンによるもの、又は感染症関連の神経障害／脳障害、例えばＨＩＶ、ルベラウイルス、イプスタインバーウイルス、単純ヘルペスウイルス、トキソプラズマ症、プリオン感染症に関連する脳障害等であることができる。代謝障害は、例えばてんかん重積持続状態、低血糖による昏睡又はウイルソン病であることができる。
【００３９】
次の詳細な記述は本発明の範囲を制限するものではなく、与えられた全ての実施態様及び実施例は単に本発明を説明しているに過ぎないものである。本発明のさらなる態様は、この開示全体と、明細書を通じて及びその末尾に引用され、表にされた、あるいは当業者の知っている参考文献の組合せから工夫することができる。引用され、表にされた参考文献は全て本発明のさらなる態様をつくりそして用いるのにそれらの全体を利用することができる。
【実施態様の詳細な説明】
【００４０】
当業者は、ここで論じられる公知の技術あるいはそれと同等の技術の詳細な説明を一般文献の原文に求めることができる。これらの原文には、Current Protocols in Molecular Biology ［Ausubel，ら，eds.,
John Wiley & Sons, N.Y., 及び２００１年５月までの増補版］、Current Protocols in Immunology ［Coliganら, eds., John Wiley and Sons, N.Y., 及び２００１年５月までの増補版］，and Current Protocols in Pharmacology ［Ennaら，eds., John Wiley & Sons, N.Y., 及び２００１年５月までの増補版］，例えば、それら全体のなかに特に参考文献として組込まれているものが含まれる。これらの原文もまた、本発明の態様をつくり、用いるのに参照することができる。
【００４１】
前述のように、サイクロスポリンＡはＣｙＰと結合することが明らかにされた最初の化合物である。サイクロスポリンＡの環状構造に基づいて、多くの大きな、通常は環状のペプチドがＣｙＰに結合する免疫抑制化合物として開発された。今や、本発明者らは神経細胞においてＣｙＰに結合する活性を有する非ペプチドクラスの化合物を見出した。次の化合物はそれらのテストを行った代表的なものである。
【００４２】
【化６】
2004532187.tif 000007
【００４３】
【化７】
2004532187.tif 000008
【００４４】
【化８】
2004532187.tif 000009
【００４５】
【化９】
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【００４６】
【化１０】
2004532187.tif 000011
【００４７】
【化１１】
2004532187.tif 000012
【００４８】
【化１２】
2004532187.tif 000013
【００４９】
【化１３】
2004532187.tif 000014
【００５０】
【化１４】
2004532187.tif 000015
【００５１】
【化１５】
2004532187.tif 000016
【００５２】
【化１６】
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【００５３】
【化１７】
2004532187.tif 000018
【００５４】
【化１８】
2004532187.tif 000019
【００５５】
本発明の化合物の作製
本発明の化合物は多くの合成経路によって作製することができる。以下の実施例は反応体系I−XIと個々の化合物の調製を詳細に説明するものである。しかしながら、当業者は、この実施例や反応体系における工程、反応物、反応条件を変更することによって、本発明の化合物の多数の例に到達することができる。さらに、特定の立体異性体や混合物を所望であれば、それに従ってこの作製体系における出発物質及び／又は反応物を選択して用いることができる。その代わりにあるいはそれに加えて、特定の中間体をクロマトグラフィーもしくは酵素的方法、又は反応条件の操作もしくは選択的な晶析によって精製しあるいは豊富として最終産物又は混合物を得ることができる。当業者は、所望の立体異性体又は混合物を選択的に生成させあるいは豊富化する沢山の方法をよく知っている。中間体を含む実施例の化合物は全て明らかに本発明の化合物に含まれるものであり、そして、本発明の方法に使用することができるものである。
【００５６】
この発明の化合物として有用な合成中間体の具体例には、化合物例１０の調製に用いられるＮ−（３−アミノ−５｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ｝フェニル）（３，５−ジクロロフェニル）ホルムアミド；化合物例１４の調製に用いられるＮ−（５−（２−アザ−３−ナフチルプロピ−２−エニル）−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝フェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；化合物例２３−２５の調製に用いられる（３−ブロモ−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド；化合物例１５の調製に用いられる１−｛３−［（２−ナフチル）メトキシ］−５−ニトロベンゾイル｝−２−ベンゾイルヒドラジン；並びに化合物例８の合成に用いられる３，５−ビス（ベンジルオキシ）安息香酸；３，５−ビス（ベンジルオキシ）安息香酸、及び３，５−ビス（ベンジルオキシ）安息香酸クロライドが含まれる。
【００５７】
本発明の化合物は塩あるいは誘導体として作製してもよい。この分野では各種の塩と誘導体が知られており、制限なく選択しうるものには、酸塩：酢酸塩、アジビン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、略酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコエナント酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、エナント酸塩、カプロン酸塩、塩酸塩、臭素酸塩、ヨウ素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、蓚酸塩、メシレート、ジメシレート、パモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアネート、トシレート及びウンデカン酸塩を含む。塩基の塩には、アミン塩、アンモニウム塩、ナトリウムや、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウムやマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン塩やＮ−メチル−Ｄ−グルコサミン等の有機塩基との塩、アルギニンやリジン等のアミノ酸との塩を含むことができる。化合物の窒素含有基は、アルキルハライド、例えば塩化、臭化又はヨウ化メチル、エチル、プロピル及びブチル等、ジアルキル硫酸塩、例えばジメチル、ジエチル、ジブチル及びジアミル硫酸塩等、長鎖ハライド、例えば、塩化、臭化又はヨウ化デシル、ドデシル、ラウリル、ミリスチル又はステアリル、アラルキルハライド、例えば臭化、塩化又はヨウ化ベンジル及びフェネチル等のような試薬で４級化することができる。当業者は如何なる塩あるいは誘導体を作製し試験する方法をよく知っている。（例えば、ここで特に参考文献として取入れられているＲｅｍｉｎｇｔｏｎ‘ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｎｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｙｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，第１８版参照）
【００５８】
ニューロン又は神経系細胞での活性
一般に、特定の化合物の神経系での活性は、神経突起の派生促進、化学処理による損傷からニューロンの保護、ニューロン又はニューロン細胞の成長促進、神経系又は再生ニューロンと関連する、失われあるいは損傷を受けた運動、機能あるいは認識能力の回復能力をアッセイすることで同定できる。これらの活性は、前述の神経状態、細胞及び視神経の傷害、聴神経障害及び前立腺手術中の神経損傷に関連する勃起機能不全を限定されることなく含む人間の多くの病状を治療し，診断し、予測するのに有用でありうる。
【００５９】
沢山の動物モデルアッセイと細胞培養アッセイが開発され、上記のヒトの病気を含む病気の治療への医療関連に利用することができる。次の引例の各々がこれらのアッセイの情報源として用いることができ、そして、それらは全てこの目的のためにそれらの全体が参考資料としてここに特に組入れられている：スタイナーら，ＰＮＡＳ９４：２０１９−２０２４（１９９７）；ハミルトンら，Ｂｉｏｏｒｇａｎ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．７：１７８５−１７９０（１９９７）；マックマホンら，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．５：６１６−６２４（１９９５）；ガッシュら，Ｎａｔｕｒｅ  ３８０：２５２−２５５（１９９６）；ゲーラッハら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．−Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０８：２７３−２８６（１９９１）；アプフェルら，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．６３４：７−１２（１９９４）；ワングら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．２８２：１０８４−１０９３（１９９７）；ホッファーら，Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ  Ｔｒａｎｓｍ．［Ｓｕｐｐｌ．］４９：１−１０（１９９７）；リヨンら，ＰＮＡＳ  ９１：３１９１−３１９５（１９９４）；ヨシモト及びシースジョー，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，８３９,ｐｐ．２８３−９１（１９９９）；コンドーら，Ｎａｕｒｏｃｈｅｍ  Ｒｅｓ．，２４．，ｐｐ．９−１３（１９９９）；フリーベルグら，Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１８，ｐｐ．５１５１−９（１９９８）；ケリバンら，Ｅｘｐ  Ｎｅｕｒｏｌ．，２０００  Ｆｅｖ；１６１，６３１−７（２０００）．
【００６０】
ニューロン活性を検出する好ましい方法には、例えば化合物のグルタメート神経毒に基づく処理を保護する能力を調べる、例えば脊髄の有機典型薄片培養などのニューロン保護アッセイブ含まれる。脊髄神経節（ＤＲＧ）の感覚ニューロン培養もまた神経突起の派生をアルセイする神経栄養アッセイでありうる。
【００６１】
培養細胞は本発明の化合物で処理してから新しい神経突起ファイバーの存在のアッセイがなされる。この化合物は、新たに分離したラット肝臓のミトコンドリアのミトコンドリア膨脹の大きな振幅を分光測光法で測定することにより、ミトコンドリア透過性の変化を阻止する該化合物の能力を調べることもできる［ブロエケマイヤーら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４：７８２６−７８３０（１９８９）］。
【００６２】
本発明の化合物はさらに、神経変性障害の普通のマウスモデルを使って、そのインビボでの力価と効能をアッセイすることもできる。マウスは、本発明の化合物で例えば経口あるいは皮下注射で処理し、次いで、ＭＰＴＰ処理が行われる。ＭＰＴＰ（Ｎ−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン）は、前脳突起はもとより中脳前部のドーパミン作動性ニューロンを選択的に破壊する浸透性神経毒である。当業者は、この発明の化合物で処理された、ＭＰＴＰ障害マウスの中脳−前脳突起の完全無欠性を評価する方法をよく知っており、そして、神経繊維、神経末端あるいは中脳前部のドーパミン作動性細胞体の相対的保存は、本発明の化合物の相対的な神経保護能力の指標となるものであろう。ここで説明するアッセイでは、免疫組織化学が神経突起、末端及び細胞体を視覚化し定量することを援助することができる。
【００６３】
本発明の化合物はまた、組織あるいは細胞培養の確立あるいは維持の促進に用いることもできる。ニューロン細胞成長の促進への使用と同様に、この化合物はまた、一次の、形質転換されたあるいは確立された細胞培養に添加することもできる。特にニューロン細胞の場合には、この化合物は、細胞の培養物中での成長を誘発しそして培養生存期間を延長することができる。
【００６４】
ＣｙＰへの結合とその他の用途
この化合物のサイクロフィリンへの親和性を評価する認められた方法はロタマーゼ阻害アッセイである。この目的で、次の参考文献が特に言及され、そして、ロタマーゼ阻害アッセイを組立てるのに利用することができる：フィッシャーら，Ｂｉｏｍｅｄ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ａｃｔａ  ４３：１１０１−１１１２（１９８４）；コフロンら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０：６１２７−６１３４（１９９１）；コフロンら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１４：２６７０−２６７５（１９９２）；ハリソンら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．２９：３８１３−３８１６（１９９０）；ラングら，Ｎａｔｕｒｅ  ３２９：２６８−２７０（１９８７）；マッケら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３１：７８４８−７８５４（１９９２）；ションブルンナーら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６：３６３０−３６３５（１９９１）；ヒュースら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１２：６７４５−６７４７（１９９０）；とジャスティスら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍmｕｎ．１７１：４４５−４５０（１９９０）。
【００６５】
この化合物の別の用途も、ＣｙＰ結合と関連するものであってもなくてもよいが、本発明の方法に含まれる。例えば、この化合物は、毛髪の成長と脱毛の遅延又は阻止に有用である。ヒトの単発の毛髪卵胞退行あるいはヒトの化学療法誘発脱毛に似ているねずみのモデルにおいては、ＣｓＡの局所塗布によって毛髪成長が誘発され、維持されることが見出され、そして、ＣｓＡの局所又は全身塗布によって、癌の化学療法剤によって引き起こされる脱毛から保護されることが見出された（例えば、マウラーら，Ａｎ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５０（４）：１４３３−４１（１９９７）；パウスら，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４４，７１９−３４（１９９４）参照）。ＣｓＡによる毛髪成長の開始は免疫抑制とは関係がないことが推測された（イワブチら，Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｃｉ．９，６４−６９（１９９５））。本発明の化合物は、ドキソルビシン、カルボプラチン、シスプラチン、サイクロホスファミド、ダクチノマイシン、エトポサイド、ヘキサメタメラミン、アイホスファミド、タキソール、ビンクリスチン、プレオマイシン、５−フルオロウラシル、及び癌の治療に有用な他の薬剤で治療されている患者の脱毛を防止しあるいは遅らせるのに有用である。本発明の化合物はさらに、上記の化学療法剤の一つ又は組合せに基づいて脱毛した患者の毛髪の成長を促進するのに有用である。本発明の化合物はさらに、放射線治療を受けている患者、及び円形脱毛症、雄性脱毛症／男性型脱毛症、毛髪成長期の臭気、抜毛癖、牽引脱毛、毛髪・休止期の臭気に罹っている患者の脱毛の防止と毛髪・成長の促進、並びにメトトレキセート、非ステロイド性抗炎症剤、又はベーターブロッカーのような医薬によって誘起される脱毛の防止にも有用である。
【００６６】
これらの目的のために、化合物は薬剤又は化粧品組成物の一部として、単独で、本発明の他の化合物と組合せて、他の毛髪成長促進もしくは脱毛防止剤と組合せて、又は一もしくはいくつかの他の活性剤、例えば抗生物質、ふけ症防止剤及び抗炎症剤と組合せて投与することができる。
【００６７】
本発明の化合物はまた、ミトコンドリア障害、代謝障害、糖尿病、失明の治療又は影響を支えるのにも有用である。ミトコンドリアは、低酸素症、虚血症、及び化学毒性での細胞死の重要な媒介者として増加が認識されている。ミトコンドリアの経膜ポテンシャルの破壊が細胞死（例えば、活性酸素種あるいはマクレオゾーム間のＤＮＡ分裂“はしご化”）の他の特徴が検出されるようになる前に観察される。これは、細胞死を誘起する沢山の異なるモデル、例えば、培養交感ニューロンのＮＧＦ欠乏状態、デキサメタゾン誘発リンパ球壊死、プログラムされたリンパ球死、Ｔ細胞ハイブリドーマの活性化誘発プログラム化細胞死、及びリンパ腫細胞の腫瘍壊死因子誘発死などに適用される［マルチェティ，Ｐ．ら，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４，１９９６，１１５５−１１６０］。細胞死前状態の細胞におけるミトコンドリア経膜ボテンシャルの破壊は、内部ミトコンドリア膜の水分子溶質に対する透過性を増大させる非特異高伝導性チャンネル、すなわちミトコンドリア透過性トランジション孔の形成に寄与する。ミトコンドリア内イオンの放出の確保、溶質の流出、酸化性リン酸化の脱共役、及び代謝中間体の喪失は、ミトコンドリア膨張の大きな振幅と細胞エネルギー貯蔵の涸渇を伴う［例えば、レマスターズ，Ｊ．Ｊら，Ｍｏｌ．ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１７４（１９９７）１５９−１６５参照］。重要なことは、ＣｓＡと非免疫抑制ペプチドＣｓＡ類縁体がポアの伝導性を強力にブロックし、ミトコンドリアの透過性変化の開始を阻害することが開示されていることである［ブロエケマイヤー，Ｋ．Ｍ．ら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４（１９８９）７８２６−７８３０；ザムザミ，Ｍら，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３８４（１９９６）５３−７］。ミトコンドリア透過性トランジション孔は、虚血症／再灌流傷害などで起こるカルシウム過負荷状態で形成され、ＣｓＡ及び／又は非免疫抑制ペプチドＣｓＡ類縁体の投与が、この透過性トランジション孔のブロックによって、脳発作［Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ，Ｓら，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．１９（１９９９）７３６−４１］、心臓虚血症［グリフィス，Ｅ．Ｊ．及びハレストラップ，Ａ．Ｐ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ．２５（１９９３）１４６１−１４６９］、及び肝臓虚血症／再灌流傷害［レデューク，Ｎ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３３６（１９９８）５０１−６］の実験モデルで有意に保護することが見出された。本発明の化合物は、ミトコンドリア透過性トランジション孔のブロッキング、インビトロ及びインビボの両方での酸化ストレス、カルシウム透負荷、興奮毒性又は低血糖傷害で起こる細胞内でのミトコンドリア代謝の破壊の抑制、ミトコンドリア膨張の抑制、腫瘍壊死因子などのシグナル分子を通じてのプログラムされた細胞死の生理学的誘発あるは低酸素症、低血糖症、興奮性発作あるいはカルシウム過負荷に続く哺乳動物細胞のエネルギー代謝破壊と細胞死のインビボとインビトロの両方での抑制に有用である。本発明の化合物は大規模／営業規模での細胞培養において細胞死を防止しあるいは遅らせるのに有用である。本発明の化合物はさらに腸間膜梗塞、結腸虚血症、肝臓梗塞もしくは虚血症���再灌流傷害、腎臓梗塞、脾臓梗塞、又は心臓虚血症もしくは例えば狭心症、うっ血性心不全、心筋梗塞などに関連する虚血症／再灌流傷害などの虚血傷害又は虚血症／再灌流傷害の診断、治癒、緩和、治療あるいは予防に有用である。本発明の化合物の用途には、さらにライ症候群、眼疾患、例えば緑内障、虚血性又は欠管性網膜症、光受容体細胞層の退化など、の診断、治癒、緩和、治療あるいは予防への適用が含まれる。本発明はまた、式Ｉの化合物を臓器に接触させることよりなる臓器移植手術に用いられる臓器の組織損傷を防止しあるいは減少させる方法も提供するものである。
【００６８】
ＣｓＡ及びその非免疫抑制ペプチド類縁体はまた、クリプトスポリジウム・パルバム、プラスモジウム・ファルシパラム、プラスモジウム・ビバックス、シストゾーマ種、及びトキソプラズマ・ゴンディイなどの病原性原生動物の寄生虫の成長を強力に抑制することも見出された［パーキンスら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４２：８４３−８４８（１９９８）］、抗原生動物活性は免疫抑制あるいはＰＰＩａｓｅ抑制活性とは関係がないように思われるが［ベルら，Ｂｉｏｃｈｅｍ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４８：４９５−５０３（１９９４）：カタブら，Ｅｘｐ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．９０：１０３−１０９（１９９８）］、ＣｓＡ又はその非免疫抑制類縁体と複合体を形成する原生動物のサイクロフィリンはペプチド性サイクロフィリンリガンドの抗寄生虫効果を仲介する役割を発揮することが提示された［ベリマン及びフェアラム，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３３４：４３７−４４５（１９９８）］。ＣｙＡとその非免疫抑制類縁体もまた、それらの免疫抑制活性及びプラスモジウムに対する活性と関係なくフィラリア寄生虫の再生をインビボで強力に抑制し［ザーナー及びシュルセイス，Ｊ．Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｌ．６１：２８２−９０（１９８７）］、そして、直接駆虫効果を発揮することが示された［マクラウチランら，Ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ  １２１：６６１−７０（２０００）］。
【００６９】
本発明の化合物はまた、ヒトを含む動物の病原性原生動物又は寄生虫の感染を診断し、治癒させ、緩和し、治療し、あるいは予防するのに有用である。ヒトでは、この化合物は、例えばマラリア、回旋糸状虫症、リンパ腺糸状虫症、腸腺虫感染、サナダムシ感染、蟯虫感染、トキソプラズマ症、リーシュマニア症、トリパノソーマ症、及び住血吸虫の病状の治療への適用が見出される。
【００７０】
本発明の化合物はまた、ＨＩＶウイルスのウイルス複製プロセスに影響を与えるのに有用である。ＨＩＶウイルスの感染力は、ウイルスのＧａｇ蛋白カプシド複合体の宿主サイクロフィリンＡとの相互作用に決定的に依存していると信じられている。［ストレブロウら，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  １９９８：２４５，１９７−２０２；リーら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０００：４３，１７７０−９］。この発明の化合物は、ヒト宿主ＣｙＰＡのＨＩＶ−１Ｇａｇ蛋白との相互作用を抑制しあるいは破壊して、ＨＩＶ−１ウイルスの感染力を減少させあるいは除去し、ヒトのＨＩＶ−１ウイルスの感染を治療しあるいは予防し、そして、ＨＩＶ−１感染関連の後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）を治療しあるいは予防する機能を発揮することができる。この発明の化合物はさらに、ＨＩＶ−１以外のヒト免疫不全ウイルスの種族の感染及び他の病原性ウイルス、例えばインフルエンザウイルスによる感染を診断し、治療し、治癒し、緩和しあるいは予防するのにも有用である。
【００７１】
製剤処方と投与ルート
本発明の化合物は、各種の神経性の、虚血性のそして炎症性の疾患を治療し予防するための、そして、各種のインビドロそして細胞培養処理のための薬剤組成物に有用である。この化合物はまた、ＨＩＶ感染の予防と治療、毛髪成長促進、免疫抑制、ミトコンドリア障害、神経組織の外傷性傷害あるいは網膜及び視神経損傷関連状態のための薬剤組成物にも有用である。本発明の化合物は、前述のように、塩又は誘導体として作製してもよい。
【００７２】
本発明の化合物は、それ自身で、あるいは適当な基剤又は賦形剤を混合した薬剤組成物にして、各種の病状を治療しあるいは改善する投与量を動物又はヒトに投与することができる。本発明による化合物は、充分な安定性、効能、選択性、溶解性及び安全な入手可能性を有していて、中枢神経系、末梢神経及び他の臓器の病気、傷害及び他の異常状態あるいは発作を治療するのに有効である。治療に有効な投与量とは、神経もしくはニューロン細胞の活性に影響を及ぼし、細胞もしくは生物に検出できる変化を生じさせ、又はヒトもしくは他の哺乳動物の障害を治療するのに充分な化合物の量を意味する。本発明との関係で使用される各種の文法上の形態での“治療”の語は、病状、病気の進行、傷害、創傷、虚血症、病原体（例えば細菌、原生動物、寄生虫、かび、ウイルス、ウイロイド及び／又はプリオン）、外科処置又は他の異常なもくしは損傷状態（これらは全て、当業者にそのように理解されるので、まとめて“障害”という。）の心身に有害な作用を予防し、治療し、逆転させ、弱め、緩和し、極小化し、抑制し、改善し、あるいは停止させることを意味する。本発明による化合物の“治療に有効な量”とは、有効な治療を達成することができる量であり、この量は当業者による現在の教示に従って決定することができる。
【００７３】
本発明の方法は、(ｉ) 式Ｉの化合物の投与であって、そこではこの化合物はそれ自身目的とする医療状態の治療に有効であるか、(ii) 式Ｉの化合物のプロドラッグの投与であって、そこではこのプロドラッグが投与後に式Ｉの化合物に代謝変換しうるものであるか、(iii) 式の化合物の投与であって、そこではこの化合物は投与後に代謝産物に代謝変換しうるものであって、この代謝産物は目的とする医療状態の治療に有効であるか、あるいは(iv) 式Ｉの化合物の代謝産物の投与であって、そこではこの代謝産物は目的とする医療状態の治療に有効であることよりなる。こうして、本発明の方法における式Iの化合物の使用は明らかにこの化合物自身の使用ばかりでなくこの節で論じたii，iii及びivの態様も含んでおり、この状態は全て明らかに次のクレームの範囲内であることが意図されている。
【００７４】
治療に有効な投与量は、単独で投与してもよく、あるいは他の治療と組合せた補助的な治療として投与してもよい。この用途の化合物の処方と投与の技術はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｎｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，第１８版（１９９０）に見出すことができる。
【００７５】
投与の適当なルートには、例えば、経口、直腸、経粘膜、頬又は小腸投与、筋肉、皮下、髄内注射を含む非経口投与、鞘内、直接心室内、静脈、腹膜内、鼻腔内、又は眼球内注射、そして必要により、デポー又は徐放性構成が含まれる。さらに、本発明の薬剤を、目的とする医薬送込みシステム、例えば抗体で被覆したリポゾームで投与してもよい。このリポゾームは、適当な抗原を発現している細胞をターゲットとし、選択的に取り入れられるであろう。
【００７６】
本発明の薬剤組成物は、それ自身公知の方法、例えば、常法の混合、溶解、乳化、カプセル化、閉込、あるいは凍結乾燥工程で製造することができる。本発明によって使用される薬剤組成物は、活性化合物を薬剤として利用しうるようにする製剤化を容易にする賦形剤、助剤などの生理学的に受容できる１以上の基剤を用いて常法で処方することができる。
【００７７】
注射用には、本発明の薬剤は、水溶液、好ましくは生理学的に適合性のあるバッファー、例えばハンク液、リンゲル液あるいは生理食塩バッファーなどで調製することができる。経粘膜又は頬投与用には、バリヤーを透過しうる適当な浸透剤を調製に用いることができる。この浸透剤は当業界で公知である。
【００７８】
経口投与用には、この活性化合物に薬剤として許容できる業界でよく知られている基剤を組合せることによって容易に調製できる。この基剤によって、本発明の化合物を、治療される患者による経口摂取用の錠剤、丸薬、カプセル、液、速溶性剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液にしうる。本発明の化合物の経口用薬剤調製物は、固形の賦形剤を用い、得られた混合物は粉砕してもよく、そして、所望により適当な助剤を加えてからこの粒体混合物を加工して錠剤にすることによって得ることができる。賦形剤の適当なものは、特に、乳糖、蔗糖、マニトール、あるいはソルビトールを含む糖などの増量剤、トウモロコシ、デンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム塩等のセルロース調製物及び／又はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）である。
【００７９】
一般に、薬剤組成物はまた、適当な固形又はゲル状の基剤又は賦形剤よりなるものであってもよい。この基剤又は賦形剤の例には、特に限定されないが、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、各種の糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、及びポリエチレングリコール等のポリマーが含まれる。必要ならば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、又はアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウム等のその塩、又は沢山の他の崩壊剤（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，第１８版（１９９０）参照）などの崩壊剤を加えることができる。
【００８０】
吸入による投与用には、本発明による用途のための化合物を、適当な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、加圧空気、あるいは他の適当なガスや混合物などを使用した加圧パック又は噴霧器からエアーゾル噴霧の形で投与するのが簡便である。加圧エアーゾルの場合には、弁を設けて計量された量を送り込むことによって投与量を定めることができる。吸入器や吹入器で用いられるゼラチンなどのカブセルやカートリッジは、化合物と乳糖やデンプンなどの適当な粉末ベースの粉末混合物を含ませて処方することができる。
【００８１】
化合物を注射による非経口投与、例えばボーラス注射や連続注入等用に処方することもできる。非経口投与用の薬剤処方には、水溶性の形の活性化合物の水溶液が含まれる。さらに、活性化合物の懸濁液を適当な油性注射懸濁液として調製してもよい。適当な親油性溶媒又はべヒクルには、ゴマ油などの脂肪油、あるいはオレイン酸エチルやトリグリセライドなどの脂肪酸エステル、あるいはリポソームが含まれる。水性注入懸濁液には、懸濁液の粘性を増す物質、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム塩、ソルビトール、あるいはデキストランなどを含むことができる。この懸濁液はまた、化合物の溶解度を増加させて高濃度溶液を調製させる適当な安定剤を含むこともできる。代わりに、活性成分は、使用前に適当なべヒクル例えばパイロジェンのない滅菌水で復元するための粉末形態のものであってもよい。
【００８２】
化合物はまた、例えばココアバターや他のグリセリドのような通常の坐薬基剤を含む坐薬などの直腸組成物に処方してもよい。以前に述べた処方に加えて、この化合物はまた、デポー製剤として処方することもできる。このような長期間にわたって作用する処方は移植（例えば皮下あるいは筋肉内に）あるいは筋肉注入によって投与することができる。こうして、例えば、化合物は適当なポリマー又は疎水性物質（例えば受容可能なオイルでの乳濁液として）あるいはイオン交換樹脂と、あるいは例えばやや溶けにくい塩などのやや溶けにくい誘導体として、処方することができる。
【００８３】
本発明の化合物は、さらに、水性、アルコール性、水性／アルコール性もしくは油性溶液、水相中脂肪相（Ｏ／Ｗ）又は逆（Ｗ／Ｏ）の分散液で得られた、ローションもしくは乳清型分散液又はミルク型の液体もしくは半液体の硬度を有する乳濁液、マイクロカプセルもしくは微粒子の水性もしくは無水のゲル、フォーム又はクリーム型の柔かい硬度の懸濁液又は乳濁液、あるいはイオン及び／又は非イオン型の小胞分散液の形態で皮フに局所塗布する薬剤又は化粧品組成物に処方することもでき、あるいはさらに加圧噴射剤よりなるエアーゾルの形態で投与することもできる。本発明の化合物はまた、毛髪ケア用、特に、シャンプー、毛髪をセットするローション、トリートメントローション、スタイリングクリーム又はゲル、毛染組成物（特に酸化染剤）、それらはカラー強化シャンプー、毛髪再構築ローション、パーマネントウェーブ組成物等であってもよい、の各種の組成物に処方することもできる。本発明の化合物よりなる薬剤又は化粧品組成物はまた、ゲル化剤、保存剤、酸化防止剤、溶剤、香料、増量剤、遮蔽剤、脱臭剤、着色剤などの化粧品分野で通常の添加剤やアジェバントを含むことができる。これらの異なる添加剤及びアジェバントの量は化粧品分野で用いられている一般的な量と範囲であり、例えば組成物全重量の０．０１％―２０％、好ましくは０．１％−１０％、より好ましくは０．５％−５％である。本発明の１つあるいはいくつかの化合物に加えて、局所塗布用組成物はさらに、この業界で毛髪の成長を促進しあるいは脱毛を予防もしくは遅らせることが既に知られている薬剤、例えば、特に限定されないが、トコフェロールニコチネート、ベンジルニコチネート又は２，４−ジアミノー６−ピペリジノピリミジン３−オキシドをさらに含むことができ、あるいは、他の活性剤、例えば抗菌剤、抗寄生虫剤、抗カビ剤、抗ウイルス剤、抗炎症剤、抗痒疹剤、麻酔薬、角質溶解剤、抗脂漏剤、ふけ症防止剤、抗坐瘡剤を含むこともできる。本発明による化粧品又は薬剤組成物は個々の頭皮及び皮フの脱毛部位に局所的に塗布することができ、それは長時間接触を維持してもよくあるいはすすぎ落としてもよい。例えば、本発明の少なくとも１つの化合物の有効量を含む組成物を夕方に塗布し、一夜この組成物を接触させ、そして任意で朝シャンプーすることもできる。これらの塗布は各個体によって１ヶ月あるいは多数ヶ月間毎日繰返すことができる。
【００８４】
リポソームと乳濁液は疎水性医薬を送り込むためのべヒクル又はキャリヤーの周知例である。ジメチルスルホキシドなどのある有機溶剤もまた用いることができる。さらに、この化合物は徐放性システム、例えば治療剤を含む固形の疎水性ポリマーの半透過性マトリックスなどを用いて送り込むこともできる。各種の徐放性物質が確立されており、当業者によく知られている。徐放性カブセルは、その化学的性質により化合物を数週間から１００日以上までの間放出しうる。治療剤の化学的性質と生物学的安定性により，安定化のための手段をさらに用いることができる。
【００８５】
本発明における用途に適する薬剤組成物は、活性成分を、その意図する目的を達成し、治療の利益をもたらし、あるいは細胞、組織もしくは臓器の機能に検出できる変化をもたらすのに有効な量を含む組成物を含んでいる。より具体的には、治療に有効な量とは、治療される患者の症状の進行を阻止しあるいは症状を緩和するのに有効な量を意味する。この有効な量の認定は、当業者の能力、特にここでの詳細な開示に照らしての範囲内で充分である。
【００８６】
この化合物あるいは組成物の毒性と治療の効きめは、細胞培養あるいは実験動物の標準の薬剤、薬、理学及び毒物学上の方法で決定することができる。例えば、ＬＤ50（個体数の５０％の致死投与量）及びＥＤ50（個体数の５０％の治療有効投与量）を決定する沢山の方法が存在している。この毒性と治療効果の投与量の比率はＬＤ50とＥＤ50との比で表わされる治療指数である。化合物と組成物は高い治療指数を発揮するものが好ましい。細胞培養アッセイあるいは動物研究から得られるデータはヒトに用いる投与量の範囲を定めるのに用いることができる。［例えば、フィングルら，ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ｃｈ．１  ｐ．１（１９７５）参照］
【００８７】
本発明の化合物は、１回投与、多数回投与あるいは連続注入で投与できる。この化合物は、好ましくは非ペプチド性で、易拡散性でそして比較的安定なので、連続注入に充分に適合させることができる。
【００８８】
活性成分の約０．１ｍｇから約１０，０００ｍｇの桁の投与レベルを前記の症状の治療に有用であり、約０．１ｍｇから約１，０００ｍｇが好ましいレベルである。特定の患者への具体的な投与レベル、すなわち治療に有効な量は、用いられる具体的な化合物の活性及びその医薬作用部位の生物学的利用可能性、年令、体重、一般的な健康度、患者の性と食事、投与時期、排泄率、薬の組合せ、治療される具体的病気の重さ、並びに投与の形態を含む各種の因子に基いて変わる。一般的には、インビトロでの投与結果から、患者への投与の適当な量のガイダンスがもたらされる。動物モデルでの研究もまた有益である。適当な投与レベルの決定するためにどうするかは当業者から入手できる。
【００８９】
ある化合物は凍結乾燥の形態で投与することができる。この場合、１−１０００ｍｇの本発明の化合物をマニトールやリン酸ナトリウム等の基剤やバッファーとともに個々のバイアルに入れて凍結乾燥すればよい。この化合物は投与前に、バイアル内で靜菌水で復元できる。
【００９０】
全身又は局部的虚血症に基づく神経障害の治療では、本発明の化合物は、少なくとも１日に１−６回、経口、直腸、非経口又は局所投与することが好ましく、これは初期の高濃度でのボーラス投与に続いて実施しうるものである。
【００９１】
本発明の化合物、方法及び用途のために、医薬の送込みの時期と順序を規制する如何なる投与方式も治療を有効にするのに必要なように用い、繰返すことができる。この方式には、他の治療剤での前治療及び／又は併用投与を含んでいてもよい。
【実施例】
【００９２】
本発明の実施例化合物を製造する合成ルート
実施例１
化合物例２，３，１６，１７，１８，１９，２０，２１，２２，２３，２４，２５，２６，３２，３７，３８，４１，４２及び４３の合成
化合物例２，３，１６，１７，１８，１９，２０，２１，２２，２３，２４，２５，２６，３２，３７，３８，４１，４２及び４３などの対称ビスアミドは、対応するエステルから得られるアリールビスカルボン酸又はクロライドを適当なアミンと反応機構Ｉのように反応させて作製することができる。
【００９３】
【化１９】
2004532187.tif 000020
【００９４】
１，３−ビス−［３，４−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］−５−（ベンジルオキシ）ベンゼン（化合物例４３の合成）
５−フェノキシメチル−イソフタル酸ジメチルエステル
５−ハイドロキシイソフタル酸ジメチルエステル（７００ｍｇ，３．３３ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（６３５ｍｇ，３．７０ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（５１０ｍｇ，３．７ｍｍｏｌ）をアセトンに入れた混合物を一夜還流した。冷却後、この混合物を水と酢酸エチルで分配した。この層を分離し、水層を酢酸エチルでさらに２回抽出し、これらを合わせた有機物の部分をブラインで洗浄し、乾燥し、濃縮して粗製の固体を得た。これを酢酸エチル／ヘキサンで再結晶して白色結晶生成物を得た。融点９５−９７℃、1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ）；ｄ３．９４（ｓ，６Ｈ）；５．１５（ｓ，２Ｈ）；７．４２（ｍ，５Ｈ）；７．８４（ｓ，２Ｈ）；８．２９（ｓ，１Ｈ）。
【００９５】
５−フェニキシメチルイソフタル酸
５−フェノキシメチル−イソフタル酸ジメチルエステル（５．５ｇ，１２．３ｍｍｏｌ）及び２０％エタノール水酸化カリウム（２５０ｍＬ）を一夜還流した。冷却し、濃縮してから、残渣を水に溶かし、２ＮＨＣｌで酸性にして、生成物を酢酸エチルで抽出した。この有機物抽出物をブラインで洗い、乾燥し、濃縮して４．８ｇの二酸を白色粉末として得た。
【００９６】
１，３−ビス−［３，４−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］−５−（ベンジルオキシ）ベンゼン（化合物例４３）
上記の二酸の塩化チオニル溶液（５０ｍＬ）を一夜還流した。揮発物を真空中で除いて、ビス酸クロライド（５００ｍｇ）を得、これを直ちにジメチルアセトアミド（１０ｍＬ）に溶解して、３，５−ジクロロアニリン（５２０ｍｇ，３．２３ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２ｍｌ）で処理した。この混合物を一夜攪拌後、氷の上に注ぎ、得られた固体を濾過して集め、水洗し、乾燥した。これをアセトンで再結晶して生成物を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．６４（ｓ，２Ｈ）；８．１７−８．１３（ｍ，３Ｈ）；７．８３−７．７６（ｍ，４Ｈ）；７．６５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．５２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．４４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．４０−７．３５（ｍ，１Ｈ）；５．２９（ｓ，２Ｈ）。分析値：計算値：Ｃ，５７．８８；Ｈ，３．２４；Ｎ，５。実測値：Ｃ，５７．６６；Ｈ，３．３７；Ｎ，４．９３。
【００９７】
５−ハイドロキシ−Ｎ，Ｎ’−ビス−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−イソフタルアミド（化合物例２）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ）δ１０．０１（ｓ，２Ｈ），８．３４（ｓ，２Ｈ），８．１８（ｄ，２Ｈ），８．１２（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｓ，２Ｈ），７．５７（ｔ，２Ｈ），７．４２（ｄ，２Ｈ）。分析値：計算値：Ｃ，５６．４２；Ｈ，３．０１：Ｎ，５．９８。実測値：Ｃ，５６．３１；Ｈ，３．２９；Ｎ，６．１１。
【００９８】
５−ナフタレン−１−イル−Ｎ，Ｎ’−ビス−（３−トリフルオロメチルフェニル）イソフタルアミド（化合物例３）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ１０．７７（ｓ，２Ｈ），８．７３９（ｓ，１Ｈ），８．３６（ｓ，２Ｈ），８．２６９（ｓ，２Ｈ），８．０６（ｍ，４Ｈ），７．８６（ｔ，１Ｈ），７．４６−７．６１（ｍ，８Ｈ）。
【００９９】
（３−（２−（４−ピリジル）ビニル）−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１６）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ）９．９８（ｓ，２Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｓ，２Ｈ０，８．２２９ｓ，１Ｈ），７．７８（ｄ，２Ｈ），７．７０（ｄ，２Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），７．３２−７．４１（ｍ，９Ｈ）。分析値：計算値：Ｃ，６１．８８；Ｈ，３．５２；Ｎ，７．７３。実測値：Ｃ，６１．７８；Ｈ，３．７６；Ｎ，７．６８。
【０１００】
（５−（２−ナフチルオキシ）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１７）。1Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６，４００  ＭＨｚ）９．８７（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．２８（ｓ，１Ｈ），８．１４９（ｓ，２Ｈ），７．９３（ｄ，２Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｓ，２Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．４８（ｔ，２Ｈ），７．４０（ｔ，１Ｈ），７．３６（ｔ，１Ｈ０，７．３０９（ｄ，２Ｈ），７．２２９ｄ，１Ｈ）。分析値：計算値：Ｃ，６４．６５；Ｈ，３．５７；Ｎ，４．６８。
【０１０１】
（５−（２−ナフチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１８）。1Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６，４００ＭＨｚ）１０．３５（ｓ，ＮＨ，２Ｈ），８．６３（ｓ，２Ｈ），８．５７（ｓ，１Ｈ）、８．４５（ｍ，３Ｈ），８．１５（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．０３（ｄ，１Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．６１（ｔ，１Ｈ），７．５２（ｄ，２）。分析値：計算値：Ｃ，６６．４４；Ｈ，３．４８；Ｎ，４．８４。実測値：Ｃ，６６．８６；Ｈ，３．６４；Ｎ，４．９７。
【０１０２】
１−［（３，４−ジクロロフェニル）オキシメチル］−３，５−ビス−｛［２−（３，５−ジクロロフェニル）エチル］アミノカルボニル］ベンゼン（化合物例１９）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）８．７０（ｓ，２Ｈ）；８．１９（ｓ，１Ｈ）；７．９８（ｓ，２Ｈ）；７．５２−７．４９（ｍ，５Ｈ）；７．３６（ｓ，１Ｈ）；７．２３（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）；７．０７（ｄ，Ｊ＝９．０，１Ｈ）；５．２２（ｓ，２Ｈ）；３．５２−３．４９（ｍ，４Ｈ）；２．８９−２．８４（ｍ，４Ｈ）。分析値：計算値：Ｃ，５４．３４；Ｈ，３．５３；Ｎ，４．０９；Ｃｌ，３１．０４。実測値：Ｃ，５４．２３；Ｈ，３．６２；Ｎ，４．０２；Ｃｌ，３０．９８。
【０１０３】
１−［（３，４−ジクロロフェニル）オキシメチル］−３，５−ビス−［（３，５−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］ベンゼン（化合物例２０）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．８２（ｓ，２Ｈ）；８．５５（ｓ，１Ｈ）；８．２４（ｓ，２Ｈ）；７．９３（ｓ，４Ｈ）；７．５８（ｄ，Ｊ＝９．０，１Ｈ）；７．４２（ｓ，１Ｈ）；７．３８（ｓ，２Ｈ）；７．１２（ｄ，Ｊ＝９．０，１Ｈ）；５．３４（ｓ，２Ｈ）。分析値：計算値：Ｃ，５１．５４；Ｈ，２．５６；Ｎ，４．４５。実測値：Ｃ，５１．７４；Ｈ，３．０３；Ｎ，４．６４。
【０１０４】
１−［４−（２−シアノフェニル）ベンジルオキシ］−３，５−ビス−｛２−［（３，４−ジクロロフェニル）エチル］アミノカルボニル｝ベンゼン（化合物例２１）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）８．６５（ｔ，Ｊ＝５．５，２Ｈ）；７．９７（ｄ，Ｊ＝７．５，１Ｈ）；７．８７（ｓ，１Ｈ）；７．８１（ｔ，Ｊ＝７．５，１Ｈ）；７．６９−７．５０（ｍ，１２Ｈ）；７．２３（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）；５．２８（ｓ，２Ｈ）；３．５１（ｑ，Ｊ＝６．５，４Ｈ）；２．８７（ｔ，Ｊ＝７．０，４Ｈ）。分析値：計算値：Ｃ，６３．６１；Ｈ，４．０７；Ｎ、５．８６；Ｃｌ、１９．７７。実測値Ｃ，６３．５１；Ｈ，４．１８；Ｎ，５．８０；Ｃｌ，１９．６６。
【０１０５】
１−［４−（２−シアノフェニル）ベンジル］オキシ−３，５−ビス−［（３−シアノフェニル］アミノカルボニル］ベンゼン（化合物例２２）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．７６（ｓ，Ｈ）；８．２９（ｓ，２Ｈ）；８．２２（ｓ，１Ｈ）；８．１４−８．０７（ｍ，２Ｈ）。７．９８（ｄ，Ｊ＝７．５，１Ｈ）；７．８９（ｓ，２Ｈ）；７．８１（ｔ，Ｊ＝８．０，１Ｈ）；７．７２−７．５６（ｍ，１０Ｈ）；５．４０（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，７３．０９；Ｈ，４．２６；Ｎ，１１．８４。実測値：Ｃ，７３．１７；Ｈ，４．２７；Ｎ，１１．８２。
（５−（２−（２−５，６，７，８−テトラヒドラナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）］フェニル］ホルムアミド（化合物例２３）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００  ＭＨｚ）１０．０４９（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．４９９（ｓ，１Ｈ），８．３８（ｓ，２Ｈ），８．１３（ｍ，４Ｈ），７．６５（ｄ，２Ｈ），７．５５（ｄ，２Ｈ），７．１１（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄ，２Ｈ），３．１８（ｔ，２Ｈ），３．０３（ｔ，２Ｈ），２．７５（ｍ，４Ｈ），１．８４（ｍ，４Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，６６．８８；Ｈ，４．６２；Ｎ，４．５９。実測値：Ｃ，６６．５０；Ｈ，４．８１；Ｎ，４．４９。
【０１０６】
（５−（２−（２−ナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２４）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００  ＭＨｚ）９．８８（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．３０（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，２Ｈ），８．０６（ｓ，２Ｈ），７．９４（ｄ，２Ｈ），７．７１（ｄ，２Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｔ，２Ｈ），３．１１（ｓ，４Ｈ）。分析：計算値。Ｃ，６７．３２；Ｈ，３．９９；Ｎ，４．６２。実測値：Ｃ，６７．０４；Ｈ，４．０６；Ｎ，４．６０。
【０１０７】
（５−（２−（２−ナフチル）ビニル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２５）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．８１（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．５（ｓ，３Ｈ），８．２８（ｓ，２Ｈ），８．１５（ｄ，２Ｈ），８．１２（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｓ，２Ｈ）、７．９３（ｔ，２Ｈ）、７．６４（ｍ，４Ｈ）、７．５２（ｍ，４Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，６５．２２；Ｈ，３．９３；Ｎ，４．４７。実測値Ｃ，６５．２０；Ｈ，３．６７；Ｎ，４．７３。
【０１０８】
（３−ブロモ−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２６）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6＋Ｄ２０，４００  ＭＨｚ）１０．６（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．６４（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｓ，２Ｈ），８．５３（ｓ，２Ｈ），８．２２（ｄ，２Ｈ），７．７６（ｔ，２Ｈ），７．６２（ｄ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，４９．７４；Ｈ，２．４７；Ｎ，５．２７。実測値：Ｃ，４９．５６；Ｈ，２．４０；Ｈ，２．４０；Ｎ，５．２９。
【０１０９】
１−（３，４−ジクロロベンジルオキシ）−３，５−ビス−［３，４，５−トリクロロフェニル］アミノカルボニル）ベンゼン（化合物例３２）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．６９（ｓ，２Ｈ）；８．１６（ｓ，１Ｈ）；８．１１（ｓ，４Ｈ）；７．８２−７．７７（ｍ，３Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．２８（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，４６．４６；Ｈ，２．０２；Ｎ，４．０１。実測値：Ｃ，４６．３８；Ｈ，２．１７；Ｎ，３．９４。
【０１１０】
３−｛［（３−トリフルオロメチル］−４−クロロフェニル）アミノカルボニル］ベンジルオキシ｝−１，５−ビス−［（３−トリフルオロメチル４−クロロフェニル）アミノカルボニル］ベンゼン（化合物例３７）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．８０（ｓ，２Ｈ）；１０．７１（ｓ，１Ｈ）；８．３７（ｓ，３Ｈ）；８．２３（ｓ，１Ｈ）；８．３０−８．０７（ｍ，４Ｈ）；７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．８９（ｓ，２Ｈ）；７．８２−７．７１（ｍ，４Ｈ）；７．６３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．４１（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，５２．３５；Ｈ、２．４９；Ｎ，４．９５。実測値：Ｃ，５２．３６；Ｈ，２．５４；Ｎ，５．０９。
【０１１１】
３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］ベンジルオキシ｝−１，５−ビス−［（３，４−ジクロロフェニル）アミノカルボニル］ベンゼン（化合物例３８）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．６５（ｓ，２Ｈ）；１０．５７（ｓ，１Ｈ）；８．１６（ｓ，４Ｈ）；８．１０（ｓ，１Ｈ）；７．９７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．８５（ｓ，２Ｈ）；７．８３−７．７７（ｍ，４Ｈ）；７．６９−７．５１（ｍ，４Ｈ）；５．３９（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，５３．２９；Ｈ，３．０３；Ｎ，５．４８。実測値：Ｃ，５３．２０；Ｈ，２．８７；Ｎ，５．５２。
【０１１２】
｛２−ブロモ−５−［Ｎ−（３−ニトロフェニル）カルバモイル］フェニル｝−Ｎ−（３−ニトロフェニル）ホルムアミデ（化合物例４１）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）７．６８（ｑ，２Ｈ）；７．９５−８．０７（ｍ，５Ｈ）；８．２１（ｔ，２Ｈ）；８．７８（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，４９．５９；Ｈ，２．８２；Ｎ，１１．３４。実測値：Ｃ，４９．７５；Ｈ，２．８６；Ｎ，１１．３８。
【０１１３】
１，３−ビス［（３−トリフルオロメチルフェニル）アミノカルボニル］−５−［（２−ナフチル）メチルオキシ］ベンゼン（化合物例４２）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．７３（ｓ，２Ｈ）；８．２６（ｓ，２Ｈ）；８．２３（ｓ，１Ｈ）；８．１２−８．０５（ｍ，３Ｈ）；８．０２−７．９２（ｍ，３Ｈ）；７．９１（ｓ，２Ｈ）；７．６６−７．６１（ｍ，３Ｈ）；７．５７−７．５２（ｍ，２Ｈ）；７.４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）；５．４８（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，６５．１３；Ｈ，３．６４；Ｎ，４．６０。実測値：Ｃ，６４．８８；Ｈ，３．８０；Ｎ，４．６９
【０１１４】
化合物例４２、３２、２２と２１と化合物例１９と２０の中間体の二酸をそれぞれ反応機構Ｉ−ＡとＩ−Ｂに示すように合成した。
【０１１５】
ジメチル３−（３，４−ジクロロベンジルオキシ）イソフタレート
５−ハイドロキシイソフタル酸ジメチルエステル（４．６２ｇ，２０ｍｍｏｌ），（３，４―ジクロロ）ベンジル）ブロマイド（２．７７ｍＬ，２０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．１５ｇ，３０ｍｍｏｌ）及びジクロロヘキサノ−１８−クラウン−６（８０ｍｇ）をアセトン（１００ｍＬ）に入れた混合物を一夜攪拌還流し、室温に冷却して、氷水（２００ｇ）に注いだ。生成した沈殿物を濾過し、水（５×５０ｍＬ）で洗って空気乾燥して、この置換ジエステル６．９４ｇ（９４％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ），δ：８．３１（ｓ，１Ｈ）；７．８１（ｓ，２Ｈ）；７．５５（ｓ，１Ｈ）；７．４７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．２７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．１０（ｓ，２Ｈ）；３．９５（ｓ，６Ｈ）。
【０１１６】
【化２０】
2004532187.tif 000021
【０１１７】
３−（３，４−ジクロロベンジルオキシ）イソフタル酸
ジメチル３−（３，４−ジクロロベンジルオキシ）イソフタレート（６．９４ｇ，１８．８ｍｍｏｌ）をＫＯＨ（１５％ａｑ，５０ｍＬ）とＥｔＯＨ（１００ｍＬ）の混合物に入れた懸濁物を０．５時間還流し、室温に冷却し、一夜攪拌した。この形成された溶液を濃ＨＣｌで酸性に（ｐＨ２に）し、生成した嵩張る沈殿物を濾過して空気乾燥した。白色固体：収量５．６６ｇ（８８％）。
【０１１８】
上記の二酸を反応機構Ｉの方法によって最終生成物（化合物例４２）にした。
【０１１９】
反応機構Ｉ−Ａの順序に従って、化合物例２１、２２及び３２に必要な中間体を作製し、反応機構Ｉの方法によって最終生成物に変えた。
【０１２０】
３，５−ビス（エトキシカルボニル）ベンジルブロマイド
３，５−ビス（エトキシカルボニル）ベンジルアルコール（２．５３ｇ，１０ｍｍｏｌ）とＰＢr3（０．９５ｍＬ，１０ｍｍｏｌ）をクロロホルム（５０ｍＬ）に溶かした溶液を室温で一夜攪拌した。黄色の溶液を水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機物層を分離し、Ｎａ2ＳＯ4無水物で乾燥して、真空中で蒸発させ、臭化ベンジルを白色固体として得た。収量３．１０ｇ（９８％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ），δ：８．６１（ｓ，１Ｈ）；８．２５（ｓ，２Ｈ）；４．５５（ｓ，２Ｈ）；４．４２（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，４Ｈ）；１．４３（ｔ，Ｊ＝７．０，Ｈｚ，６Ｈ）。
【０１２１】
【化２１】
2004532187.tif 000022
【０１２２】
ジメチル５−［（３，４−ジクロロフェニル）オキシメチル］イソフタレート
主題の化合物を、３，４−ジクロロフェニルと３，５−ビス−（エトキシカルボニル）ベンジルブロマイドからジメチル３−（３，４−ジクロロベンジルオキシ）イソフタレート（反応機構Ｉ−Ａ）に記載されたものと同様のやり方で作製した。収率９０％。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ），δ：８．５３（ｓ，１Ｈ）；８．２７（ｓ，２Ｈ）；７．５３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．３８（ｓ，１Ｈ）；７．０８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；５．３２（ｓ，２Ｈ）；４．４６（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，４Ｈ）；１．４５（ｔ，Ｊ＝７．０，Ｈｚ，６Ｈ）。
【０１２３】
５−［（３，４−ジクロロフェニル）オキシメチル］イソフタル酸
主題の化合物を反応機構Ｉ−Ａに記載されているようにしてジエステルを二酸に加水分解して作製した。白色微細結晶、収率９６％。
【０１２４】
上記の二酸を反応機構Ｉの方法によって化合物例１９と２０に変えた。
【０１２５】
下記の反応機構Ｉ−Ｃの方法を用いて化合物例１６を作製した。
【化２２】
2004532187.tif 000023
【０１２６】
（３−（２−（４−ピリジル）ビニル）−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１６の合成）
５−（２−ピリジン−４−イル−ビニル）−イソフタル酸ジメチルエステル
【０１２７】
５−ブロモイソフタリック酸ジメチルエステル（５４２ｍｇ，２ｍｍｏｌ）と４−ビニルピリジン（２０６ｍｇ，２ｍｍｏｌ），Ｐｄ（ＯＡｃ）2（８ｍｇ），トリ−Ｏ−トリルホスフィン（３０ｍｇ）を５ｍＬＥｔ3Ｎ（５ｍＬ）に溶かした溶液を８０℃で一夜攪拌した。この反応混合物をシリカゲルカラムを用いてヘキサン中５０％ＥｔＯＡｃで溶出して精製し、この生成物を得た。（６５％収率）。ＭＳ＋＝２９７。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ），８．６４（ｓ，１Ｈ）；８．６１（ｄ，２Ｈ）；８．３８（ｄ，２Ｈ），７．４０（ｍ，２Ｈ），７．３５（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｓ，６Ｈ）。
【０１２８】
５−（２−ピリジン−４−イル−ビニル）−イソフタリック
ＬｉＯＨ（２．５ｍｍｏｌ）を水（１ｍＬ）に溶かした溶液を５−（２−ピリジン−４−イル−ビニル）−イソフタリック酸ジメチルエステル（２９７ｍｇ，１ｍｍｏｌ）を５ｍｌエタノールに懸濁した液に加えた。この混合物を室温で攪拌した。この反応は完結するまでＴＬＣで追跡した。次いで２．５ｍＬの１ＭＨＣｌ溶液を加え、この混合物を蒸発乾燥した。この生成物はさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０１２９】
（３−（２−（４−ピリジル）ビニル）−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１６）
ＥＤＣ（２８７ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶かした溶液を前工程からの生成物、ＨＯＢｔ（２７０ｍｇ，２ｍｍｏｌ）及び３−トリフルオロメチルアニリン（３２２ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬ  ＤＭＦに溶かした混合物溶液に室温でゆっくり加えた。一夜攪拌後、この反応混合物を水とヘキサンに分配した。この反応混合物を２×１００ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。有機物相を乾燥し、濃縮して、シリカゲルカラム（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、ｇ（５５％）の所望の生成物を得た。Ｒｆ＝０．３０（１：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃ），1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，４００  ＭＨｚ）９．９８（ｓ，２Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｓ，２Ｈ０，８．２２９ｓ，１Ｈ），７．７８（ｄ，２Ｈ），７．７０（ｄ，２Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），７．３２−７．４１（ｍ，９Ｈ）。実測値：Ｃ，６１．７８；Ｈ，３．７６；Ｎ，７．６８。
【０１３０】
化合物例１７を下記の反応機構Ｉ−Ｄに示すようにして作製した。
【化２３】
2004532187.tif 000024
【０１３１】
（５−（２−ナフチルオキシ）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］ホルムアミド（化合物例１７の合成）
５−（ナフタレン−２−イルオキシ）−イソフタリック酸ジメチルエステル
５−ハイドロキシソフタリック酸ジメチルエステル（２０８ｍｇ，１ｍｍｏｌ）と２−ナフタレンホウ酸（１７２ｍｇ，１ｍｍｏｌ），Ｃｕ（ＯＡｃ）2（６１ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ），Ｅｔ3Ｎ（０．１６ｍＬ，１．２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのメチレンクロライドに溶かした溶液を一夜還流した。この反応混合物をシリカゲルカラムでヘキサン中１５％Ｔｅａｃで溶出して精製して生成物を得た。（７６％収率）。1Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６，４００  ＭＨｚ）８．２５（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，１Ｈ），７．９７（ｄ，１Ｈ），７．８９（ｄ，１Ｈ），７．７３（ｓ，２Ｈ），７．５４（ｔ，１Ｈ），７．５１（ｔ，１Ｈ），７．３７（ｄ，１Ｈ），４．０１（ｓ，６Ｈ）。
【０１３２】
５−（ナフタレン−２−イルオキシ）−イソフタル酸
ＬｉＯＨ（１．５ｍｍｏｌ）を水（１ｍＬ）に溶かした溶液を５ｍＬ  ＥｔＯＨに懸濁した５−（ナフタレン−２−イルオキシ）−イソフタル酸ジメチルエステル（０．５ｍｍｏｌ）に加えた。この混合物を室温で攪拌した。反応は完結するまでＴＬＣで追跡した。２．５ｍＬの１ＭＨＣｌ溶液を加え、沈殿物を集めた。この生成物をさらに精製することなく次の工程で用いた。
【０１３３】
（５−（２−ナフチルオキシ）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１７）
ＥＤＣ（２８７ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶かした溶液を５−（ナフタレン−２−イルオキシ）−イソフタル酸、ＨＯＢＡ（１３５ｍｇ，１ｍｍｏｌ）及び３−トリフルオロメチル−アニリン（１６１ｍｇ，１ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬのＤＭＦに溶かした混合物溶液に室温でゆっくり加えた。一夜攪拌後、この反応混合物を水とヘキサンに分配した。この混合物を２×１００ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。有機物相を乾燥し、濃縮して、シリカゲルカラム（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、ｇ（５５％）の所望の生成物を得た。Ｒｆ＝０．７０（４：１Ｈｅｘ：ＥｔＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６，４００  ＭＨｚ）９．８７（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．２８（ｓ，１Ｈ），８．１４９ｓ，２Ｈ），７．９３（ｄ，２Ｈ），７．８４（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｓ，２Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．８４（ｔ，２Ｈ），７．４０（ｔ，１Ｈ），７．３６（ｔ，１Ｈ０，７．３０９ｄ，２Ｈ），７．２９９ｄ，１Ｈ）。実測値；Ｃ，６４．８８；Ｈ，３．５７；Ｎ，４．６８。
【０１３４】
化合物例１８を下記の反応機構Ｉ−Ｅに従って作製した。
【０１３５】
（５−（２−ナフチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１８）の合成
【化２４】
2004532187.tif 000025
【０１３６】
５−（ナフタレン−２−イル）−イソフタリック酸ジメチルエステル
５−ブロモイソフタリック酸ジメチルエステル（５４４ｍｇ，２ｍｍｏｌ），２−ナフタレンホウ酸（３４２ｍｇ，２ｍｍｏｌ），Ｐｄ（ＯＡｃ）2（８ｍｇ），トリ−Ｏ−トリルホスティン（３０ｍｇ）と５ｍｌＥｔ3Ｎ（５ｍＬ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶かした溶液を１００℃で一夜攪拌した。この反応混合物をシリカゲルカラムでヘキサン中２０％ＥｔＡｃで溶出して精製し、生成物を得た（収率：７５％）1Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６，４００  ＭＨｚ），８．５５（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｓ，２Ｈ），８．１７（ｄ，１Ｈ），７．９１（ｄ，１Ｈ），７．８８（ｄ，１Ｈ），７．７７（ｔ，１Ｈ），７．６７（ｔ，１Ｈ），７．３８（ｍ，２Ｈ），４．０３（ｓ，６Ｈ）。
【０１３７】
５−（ナフタレン−２−イル）−イソフタル酸
ＬｉＯＨ（１．５ｍｍｏｌ）を水（１ｍＬ）に溶かした溶液を５ｍＬ  ＥｔＯＨに懸濁した５−（ナフタレン−２−イル）−イソフタル酸ジメチルエステル（１６０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）に加えた。この混合物を室温で攪拌した。反応は完結するまでＴＬＣで追跡した。１．５ｍＬの１ＭＨＣｌ溶液を加え、沈殿を集めた。生成物はさらに精製することなく次の工程で用いた。
【０１３８】
（５−（２−ナフチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１８）
ＥＤＣ（２８７ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶かした溶液を１０ｍＬ  ＤＭＦに溶かした前工程からの生成物（０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１３５ｍｇ，１ｍｍｏｌ）及び３−トリフルオロメチルアニリン（１６１ｍｇ，１ｍｍｏｌ）を含む混合物溶液に室温でゆっくり加えた。一夜攪拌後、反応混合物を水と酢酸エチルに分配した。得られた混合物を２×１００ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。有機物相を乾燥し、濃縮して、シリカゲルカラム（５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、ｇ（５５％）の所望の生成物を白色固体として得た。Ｒｆ＝０．４０（３：１Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）、1Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．３５（ｓ，ＮＨ，２Ｈ），８．６３（ｓ，２Ｈ），８．５７（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｍ，３Ｈ），８．１５（ｄ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ），８．０３（ｄ，１Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．６５（ｔ，１Ｈ），７．５６（ｔ，１Ｈ），７．５２（ｄ，２）。実測値：Ｃ，６６．８６；Ｈ，３．６４；Ｎ，４．９７。
【０１３９】
化合物２３−２５を下記の反応機Ｉ−Ｆに従って作製した。
【化２５】
2004532187.tif 000026
【０１４０】
（５−（２−（２−ナフチル）ビニル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２５）の合成
（３−ブロモ−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド。ＥＤＣ（５７３ｍｇ，３ｍｍｏｌ）を５ｍＬ  ＤＭＦに溶かした溶液を５−ブロモイソフタル酸（２４５ｍｇ，１ｍｍｏｌ），ＨＯＢｔ（２７０ｍｇ，２ｍｍｏｌ）と３−トリフルオロメチルアニリン（３２２ｍｇ，２ｍｍｏｌ）と３−トリフルオロメチルアニリン（３２２ｍｇ，２ｍｍｏｌ）を１５ｍＬ  ＤＭＦに加えた混合物に室温でゆっくり加えた。一夜攪拌後、この反応混合物を水と酢酸エチルに分配した。この混合物を２×１００ｍＬの酢酸エチルで抽出し、有機物相を乾燥し、濃縮して、シリカゲルカラム（２０％へキサン／へキサン）で精製して９７５ｍｇ（９２％）の所望の生成物を白色固体として得た。Ｒｆ＝０．５０（５：１Ｈｅｘ：ＥｔＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６＋Ｄ２０，４００  ＭＨｚ）１０．６（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．６４（ｓ，１Ｈ），８．８１９ｓ，２Ｈ，８．５３（ｓ，２Ｈ），７．７６（ｔ，２Ｈ），７．６２（ｄ，２Ｈ）。実測値：Ｃ，４９．５６；Ｈ，２．４０；Ｎ，５．２９。
【０１４１】
（５−（２−（２−ナフチル）ビニル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２５）
（３−ブロモ−５−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（２６５ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）と２−ビニルナフタレン（０．５ｍｍｏｌ），Ｐｄ（ＯＡｃ）2（７ｍｇ），２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノビフェニル（３０ｍｇ）及びＥｔ3Ｎ（５ｍＬ）を１０ｍＬ  ＤＭＦに溶かした溶液を１００℃で一夜加熱した。それから、この混合物を水に注ぎ、沈殿を集めてメチレンクロライドから再結晶して白色固体の生成物を得た。（収率７６％）。Ｒｆ＝０．６０（６：１Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．８１（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．５（ｓ，３Ｈ），８，２８（ｓ，２Ｈ），８．１５（ｄ，２Ｈ），８．１２（ｓ，１Ｈ），７．９７９ｓ，２Ｈ），７．９３（ｔ，２Ｈ），７．６４（ｍ，４Ｈ），７．５２９ｍ，４Ｈ）Ｃ，６５．２２；Ｈ，３．９３；Ｎ，４．４７。実測値：Ｃ，６５．２０；Ｈ，３．６７；Ｎ，４．７３。
【０１４２】
（５−（２−（２−ナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２４）と（５−（２−（２−５，６，７，８−テトラハイドロナフチル）エチル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２３）の合成
５−（２−（２−ナフチル）ビニル）−３−｛Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝フェニル）−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例２５）（２００ｍｇ）と触媒量の１０％Ｐｄ／Ｃの２０ｍＬ  ＥｔＯＨ溶液を５０psiで一夜水素化した。解媒を濾過し、溶媒を濃縮した後、残渣をシリカゲルで精製し、両方の表題化合物を白色固体として得た（合計収率：９７％）。
【０１４３】
化合物例２４：1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）９．８８（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．３０（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，２Ｈ），８．０６（ｓ，２Ｈ），７．９４（ｄ，２Ｈ），７．７１（ｄ，２Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｔ，２Ｈ），７．３５（ｍ，４Ｈ），３．１１（ｓ，４Ｈ）。実測値：Ｃ，６７．０４；Ｈ，４．０６；Ｎ，４．６０。
【０１４４】
化合物例２３：1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．０４（ｓ，２Ｈ，ＮＨ），８．４９９ｓ，１Ｈ），８．３８（ｓ，２Ｈ），８．１３（ｍ，４Ｈ），７．６５（ｔ，２Ｈ），７．５５（ｄ，２Ｈ），７．１１（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄ，２Ｈ），３．１８（ｔ，２Ｈ），３．０３（ｔ，２Ｈ），２．７５（ｍ，４Ｈ），１．８４（ｍ，４Ｈ）。実測値：Ｃ，６６．５０；Ｈ，４．８１；Ｎ，４．４９。
【０１４５】
化合物例３７と３８を下記の反応機構Ｉ−Ｇに従って作製した。
【０１４６】
ジメチル５−［３−（メトキシカルボニル）ベンシルオキシ］イソフタレート
【０１４７】
５−ハイドロキシ−イソフタル酸ジメチルエステル（３．４７ｇ，１６．５ｍｍｏｌ），３−ブロモメチル安息香酸メチルエステル（３．４４ｇ，１５ｍｍｏｌ），炭酸カリウム（３．１１ｇ，２２．５ｍｍｏｌ），及びジクロロへキサノ−１８−クラウン−６（５０ｍｇ）をアセトン（１５０ｍＬ）に入れた混合物を一夜攪拌と還流を行い、室温に冷却し、氷水（２００ｇ）上に注いだ。生成した沈殿物を濾過し、水（５×５０ｍＬ）で洗い、空気乾燥して６．３６ｇ（１００％）のトリエステルを得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）δ：８．０９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．９４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．８３−７．７６（ｍ，３Ｈ）；７．５８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．３５（ｓ，２Ｈ）；３．８９（ｓ，６Ｈ）；３．８７（ｓ，３Ｈ）。
【０１４８】
５−［３−（カルボキシ）ベンジルオキシ］イソフタル酸
ジメチル５−［３−（メトキシカルボニル）ベンジルオキシ］イソフタレイト（６．３６ｇ，１６．５ｍｍｏｌ）をＫＯＨ（１５％ａｑ．，４５ｍＬ）とＥｔＯＨ（１００ｍＬ）の混合物に入れた懸濁物を０．５時間還流し、それから室温に冷却して一夜攪拌した。生成した溶液をジクロロメタン（５０ｍＬ）で抽出した。水層を分離して濃ＨＣｌで酸性（ｐＨ２）にし、生成した嵩張った沈殿物を濾過して空気乾燥した。白色微結晶。収量４．７１ｇ（９７％）。
【０１４９】
【化２６】
2004532187.tif 000027
【０１５０】
５−［３−（カルボキシ）ベンジルオキシ］イソフタル酸トリクロライド
５−［３−（カルボキシ）ベンジルオキシ］イソフタル酸（４．７１ｇ，１４．９ｍｍｏｌ）をジオキサン（５０ｍＬ）に入れて攪拌している懸濁物にＳＯＣｌ2（４．３４ｍＬ，５９．４ｍｍｏｌ）を一度に加えた。その全体を一夜攪拌し還流した。得られた透明溶液を室温に冷却し、僅かに生じた固体を識別して、濾液を真空中で濃縮して５．２５ｇ（９５％）のクリーム白色固体を得、これを直ちに反応機構Ｉの方法による化合物３７と３８の合成に用いた。
【０１５１】
実施例２
化合物例６，９，１０，１１，１２，１３，１４，２７，３１，３５，３６，３９，４０及び４４の合成
化合物例６，９，１０，１１，１２，１３，１４，２７，３１，３５，３６，３９，４０及び４４を下記の反応機構ＩＩに示すようにして、適当に置換された１，３−ジニトロ芳香族前駆体から作製した。
【０１５２】
Ｎ−（５−［（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）メチル］−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボニル−アミノ｝フェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１２）の合成
【化２７】
2004532187.tif 000028
【０１５３】
２−［（３，５−ジニトロフェニル）メチル］イソインドリン−１，３−ジオン
３，５−ジニトロベンジル  クロライド（２．２ｇ，１０ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（４０ｍＬ）に溶かした溶液をフタルイミドカリウム（１．９ｇ，１０ｍｍｏｌ）で処理し、この混合物を１２時間撹拌した。この混合物を次いで濃縮し、固体残渣を酢酸エチルで洗って乾燥し、水洗して乾燥して２．５ｇ（７６％）の実質的に純粋な付加物を白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ５．０６（ｓ，２Ｈ）；７．８２−７．９７（ｍ，４Ｈ）；８．６２（ｓ，２Ｈ）；８．７４（ｓ，１Ｈ）。
【０１５４】
Ｎ−（５−［（１，３−ジオキソイソインドリン−２−イル）メチル］−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝フェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１２）
２−［（３，５−ジニトロフェニル）メチル］イソインドリン−１，３−ジオン（１．５ｇ，４．６ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍＬ）に溶かした溶液を１０％パラジウム／炭素（３００ｍｇ）で処理し、この混合物を５０ｐｓｉ  Ｈ2の下で１時間撹拌した。この混合物を濾過して濾液をトリエチルアミン（１．０ｇ，１０ｍｍｏｌ）、続いて３−トリフルオロメチルベンゾイウルクロライド（２．０ｇ，９．６ｍｍｏｌ）で処理し、１２時間撹拌した。それから、反応混合物を濃縮し、生成物をヘキサン：酢酸エチル１：１を溶離剤として用いてシリカで精製し、２．１ｇ（７５％）の例１２の化合物を白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ４．８０（ｓ，２Ｈ）；７．４９（ｓ，２Ｈ）；７．７８（ｔ，Ｊ=８．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．８６−７．９１（ｍ，２Ｈ）；７．９２−８．００（ｍ，４Ｈ）；８．２６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；８．２９（ｓ，２Ｈ）；８．３６（ｓ，１Ｈ）；１０．５６（ｓ，２Ｈ）；分析：計算値：Ｃ31Ｈ19Ｎ3Ｏ4Ｆ6：Ｃ，６０．８９；Ｈ，３．１３；Ｎ，６．８７。実測値：Ｃ，６０．８４；Ｈ，３．００；Ｎ，６．９１。
【０１５５】
同様にして次の化合物を作製した。
【０１５６】
［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノチオキソメチル｝アミノ）−２−｛［４−ジメチルアミノ）フェニル］｝メタン−１−チオン（化合物例３５）
1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ２．８５（ｓ，６Ｈ）；６．７３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８）；６．９４−６．９８（ｍ，３Ｈ）；７．０６−７．０８（ｍ，２Ｈ）；７．２８（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ＝２，４）；７．４３（ｓ，１Ｈ）；７．５３（ｓ，２Ｈ）；７．５８（ｓ，２Ｈ）；９．５０（ｓ，１Ｈ）；９．５７（ｓ，１Ｈ）；９．８３（ｓ，１Ｈ）；１０．０１（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ28Ｈ24Ｎ6Ｓ2Ｃｌ4（０．２５ＥｔＯＡｃ）：Ｃ，５１．７９；Ｈ，３．９０；Ｎ，１２．５０；Ｓ，９．５４。実測値：Ｃ，５１．７０；Ｈ，４．０２；Ｎ，１２．１６；Ｓ，９．３７。
【０１５７】
２−｛［（３，５−ビス（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）フェニル］メチル｝イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例２７）。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ４．７６（ｓ，２Ｈ）；７．１６（ｓ，２Ｈ）；７．３０（ｓ，２Ｈ）；７．５４（ｓ，４Ｈ）；７．６５（ｓ，１Ｈ）；７．８５−７．９５（ｍ，４Ｈ）；９．９１（ｓ，２Ｈ）；１０．２０（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ29Ｈ19Ｎ5Ｓ2Ｃｌ4Ｏ2（１．０Ｈ2Ｏ）：Ｃ，５０．２３；Ｈ，３．０５；Ｎ，１０．１０；Ｓ，９．２５。実測値：Ｃ，４９．９０；Ｈ，３．０８；Ｎ，１０．０４；Ｓ，９．３１。
【０１５８】
２−｛［（３−アミノ−５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）フェニル］メチル｝イソインドリン−１，３−ジオン（化合物例３１）。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ４．６０（ｓ，２Ｈ）；５．２５（ｓ，２Ｈ）；６．３１（ｓ，１Ｈ）；６．４４（ｓ，１Ｈ）；６．５７（ｓ，１Ｈ）；７．２８（ｓ，２Ｈ）；７．５８（ｓ，２Ｈ）；７．８３−７．９１（ｍ，４Ｈ）；９．７５（ｓ，１Ｈ）；９．９４（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ22Ｈ16Ｎ4Ｓ1Ｃｌ2Ｏ2：Ｃ，５６．０６；Ｈ，３．４２；Ｎ，１１．８９；Ｓ，６．８０；Ｃｌ，１５．０４。実測値：Ｃ，５５．７８；Ｈ，３．５５；Ｎ，１１．７４；Ｓ，６．７６；Ｃｌ，１５．３０。
【０１５９】
１，３−（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−［５−（３，４−ジクロロフェノキシメチル）−フェニル］アミド（化合物例６）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）５．１９（ｓ，２Ｈ）；７．０６（ｑ，１Ｈ）；７．３５（ｄ，１Ｈ）；７．５５（ｄ，１Ｈ）；７．６１（ｄ，２Ｈ）；７．８９（ｔ，２Ｈ）；８．００（ｄ，４Ｈ）；８．３２（ｔ，１Ｈ）；１０．５６（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，５１．５４；Ｈ，２．５６；Ｎ，４．４５。実測値：Ｃ，５１．２８；Ｈ，２．７４；Ｎ，４．３５。
【０１６０】
アミノ置換ジニトロアリール化合物を、対応するジニトロアリールアニリンを銅触媒でアリールホウ酸と結合させるか（反応機構ＩＩ−Ａ）、あるいは対応するジニトロアリールハライドをパラジウム触媒でアリールハライドと結合させることにより（反応機構ＩＩ−Ｂ）作製される。いずれの場合にも、得られる置換アリールジニトロ中間体を還元して対応するジアミンとし、これを反応機構Ｉに記載されている最終生成物に変える。
【０１６１】
【化２８】
2004532187.tif 000029
【０１６２】
チオキソメチル［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−５−［（４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン（化合物例１１）の合成
（３，５−ジニトロフェニル）（４−ブロモフェニル）アミノ
ジニトロアニリン（１．３ｇ，７．１ｍｍｏｌ），酢酸銅（１．２９ｇ，７．１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２．２ｇ，２１ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）に入れた混合物を撹拌しながら４−ブロモフェニルボロニック  アシッド（５．８ｇ，２１ｍｍｏｌ）を１ｇづつ４時間かけて加え、この混合物を一夜撹拌した。この反応混合物を濃縮し、この生成物をヘキサン：酢酸エチル３：１を溶離剤として用いたシリカゲルで精製し、０．８０ｇ（３３％）の当該アミノ置換芳香族化合物を橙色固体として得た。低分解能Ｍｓ．Ｃ12Ｈ8Ｎ3Ｏ4Ｂｒとしての計算値３３８．実測値３３８．
【０１６３】
（３，５−ジアミノフェニル）（４−ブロモフェニル）アミン
（３，５−ジニトロフェニル）（４−ブロモフェニル）アミン（０．３４ｇ，１．０ｍｍｏｌ）をエタノール（１０ｍＬ）に溶かした溶液にインジウム（２．０ｇ，１７ｍｍｏｌ）を加え、さらに飽和塩化アンモニウム溶液（３ｍＬ）を加えて、この混合物を１２時間撹拌した。その時、ＴＬＣは反応が完結したことを示した。この反応混合物をセライトで濾過し、濃縮して、残渣を５０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2に溶解した。この有機物溶液を５０ｍＬの水、次いで５０ｍＬのブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過して０．２６ｇ（９３％）の褐色オイル、Ｒf０．１（ヘキサン：酢酸エチル１：１）を次の工程に送った。
【０１６４】
［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−５−［（４−ブロモフェニル）アミノ］フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン（化合物例１１）
（３，５−ジアミノフェニル）（４−ブロモフェニル）アミン（０．２５ｇ，０．９０ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）に溶かした溶液に３，５−ジクロロフェニルイソチオシアネート（０．３９ｇ，１．９ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を一夜撹拌した。固体沈殿物を濾過し、冷ＣＨ2Ｃｌ2で洗浄し、乾燥して０．２８ｇ（４５％）の例１１の化合物を白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ６．９７（ｓ，１Ｈ）；７．０２（ｓ，２Ｈ）；７．０９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．３１（ｓ，２Ｈ）；７．３５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．５７（ｓ，４Ｈ）；８．５４（ｓ，１Ｈ）；９．９２（ｓ，２Ｈ）；１０．２０（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ26Ｈ16Ｎ5Ｓ2Ｃｌ4Ｂｒ1（０．１Ｈ2Ｏ）：Ｃ，４５．３８；Ｈ，２．６７；Ｎ，１０．１８；Ｓ，９．３２。実測値：Ｃ，４４．９９；Ｈ，２．６８；Ｎ，９．９７；Ｓ，９．３１。
【０１６５】
化合物例３６，３９，４０及び４４をこの方法で作製した。
【０１６６】
化合物例３６：［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソ−メチル｝アミノ）−４−［（４−クロロフェニル）アミノ］フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣ１３，４００ＭＨｚ）８．２８（ｂｒ，ＮＨ，１Ｈ）；８．２１（ｂｒ，ＮＨ，２Ｈ）；７．８９（ｂｒ，ＮＨ，１Ｈ）；７．７２（ｓ，１Ｈ）；７．３６（ｓ，２Ｈ）；７．１２−７．２１（ｍ，７Ｈ）；７．０１（ｄ，１Ｈ）；６．８４（ｄ，２Ｈ）；６．０（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，４８．６５；Ｈ，２．８３；Ｎ，１０．９１；Ｓ，９．９９；Ｃｌ，２７．６２。実測値：Ｃ，４８．９１；Ｈ，３．１１；Ｎ，１０．４３；Ｓ，９．２４；Ｃｌ，２７．０１。
【０１６７】
化合物例３９：［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソ−メチル｝アミノ）−４−（３，５−ジメチルピラゾリル）フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣ１３，４００ＭＨｚ）９．５６（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；８．７２（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；８．４２（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；８．２６（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；７．５３（ｓ，２Ｈ）；７．２７（ｄ，１Ｈ）；７．２５（ｓ，１Ｈ）；７．２１（ｄ，＄Ｈ）；７．０９（ｄ，１Ｈ）；６．９７（ｓ，１Ｈ）；２．２５（ｓ，３Ｈ）；２．１２（ｓ，３Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，４８．３４；Ｈ，３．４４；Ｎ，１３．５３；Ｓ，１０．３２。実測値：Ｃ，４８．４０；Ｈ，３．４４；Ｎ，１３．７７；Ｓ，１０．４１。
【０１６８】
化合物例４０：［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［３−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−４−［（４−フェノキシフェニル）アミノ］フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン：1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣ１３，４００ＭＨｚ）８．２４（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；８．１５（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；８．１０（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；７．９３（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）；７．５６（ｄ，２Ｈ）；７．３８（ｄ，２Ｈ）；７．２６−７．３６（ｍ，５Ｈ）；７．２１（ｄ，２Ｈ）；７．１１（ｓ，１Ｈ，７．０５（ｄ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ）；６．９７（ｓ，１Ｈ）；６．９４（ｓ，４Ｈ）；５．９５（ｓ，ＮＨ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，５４．１１；Ｈ，３．４３；Ｎ，９．８６；Ｓ，９．０３。実測値：Ｃ，５４．４７；Ｈ，３．６７；Ｎ，９．５８；Ｓ，８．６３。
【０１６９】
化合物例４４：［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［５−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチルアミノ）−２−ピペリジルフェニル］アミノ｝メタン−１−チオン：1Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６，４００ＭＨｚ）９．３５（ｂｒ，ＮＨ，１Ｈ）；９．０２（ｂｒ，ＮＨ，３Ｈ）；７．６７（ｓ，２Ｈ）；７．６５（ｓ，２Ｈ）；７．５３（ｓ，１Ｈ）；７．２３（ｄ，１Ｈ）；７．２２（ｓ，１Ｈ）；７．２１（ｓ，１Ｈ）；６．９３（ｄ，1Ｈ）；２．０６（ｍ，４Ｈ）；１．９７（ｍ，６Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，４９．５０；Ｈ，３．９５；Ｎ，１１．５４；Ｓ，１０．５７；Ｃｌ，２３．３８。実測値：Ｃ，４９．１５；Ｈ，３．８０；Ｎ，１１．７５；Ｓ，１０．６７；Ｃｌ，２３．５６。
【０１７０】
【化２９】
2004532187.tif 000030
【０１７１】
（３，５−ジニトロフェニル）−２−ピリジルアミン
３，５−ジニトロアニリン（１．３ｇ，７．１ｍｍｏｌ），２−プロモピリジン（１．１ｇ，７．１ｍｍｏｌ），酢酸パラジウム（０．１３ｇ，０．５７ｍｍｏｌ）及び２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニル（０．２８ｇ，０．７１ｍｍｏｌ）をトルエン（２０ｍＬ）に入れた混合物に固体のｔｅｒｔ−ブトキシドナトリウム（０．７５ｇ，７．８ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を３日間還流温度に加熱した。この反応混合物を次いで濃縮し、生成物を、溶離剤としてヘキサン：酢酸エチル２：１を用いてシリカゲルで精製し、０．３０ｇ（１６％）のピリジン置換化合物を赤色固体として得た。低分解能ＭＳ計算値Ｃ11Ｈ8Ｎ4Ｏ4：２６０．実測値２６０．
【０１７２】
［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［５−（｛［３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−５−（２−ピリジルアミノ）フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン（化合物例１３）。前述のようにして、（３，５−ジニトロフェニル）−２−ピリジルアミンをジアミノ化合物で還元し、２当量の３，５−ジクロロイソチオシアネートと反応させて、化合物例13を得た。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ６．７３−６．７９（ｍ，１Ｈ）；６．８９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．１１（ｓ，１Ｈ）；７．３０（ｓ，２Ｈ）；７．５３−７．６９（ｍ，７Ｈ）；８．１１（ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ）；９．２４（ｓ，１Ｈ）；９．８３（ｓ，２Ｈ）；１０．２４（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ25Ｈ18Ｎ6Ｓ2Ｃｌ4：Ｃ，４９．３５；Ｈ，２．９８；Ｎ，１３．８１；Ｓ，１０．５４；Ｃｌ，２３．３１。実測値：Ｃ，４９．３４；Ｈ，３．１９；Ｎ，１３．８８；Ｓ，１０．３０；Ｃｌ，２３．３０。
【０１７３】
ジアミノアリール中間体の３，５−ジクロロベンゾイル  クロライド次いで３，５−ジクロロイソチオシアネートとの逐次反応による化合物例１０の取得：（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−［５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ｝フェニル］ホルムアミド（化合物例１０）の合成。
【０１７４】
Ｎ−（３−アミノ−５−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アイミノ｝フェニル）（３，５−ジクロロフェニル）ホルムアミド。
【０１７５】
以前に述べたホウ酸との結合を経由して作製された（３，５−ジクロロフェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミン（０．５０ｇ，１．５ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（７ｍＬ）に溶かした溶液を１０％パラジウム／炭素（１００ｍｇ）で処理し、この混合物を５０ｐｓｉＨ2下で1時間撹拌した。この溶液を濾過し、濾液をトリエチルアミン（０．１５ｇ，１．５ｍｍｏｌ）次いで３，５−ジクロロベンゾイルクロライド（０．２９ｇ，１．４ｍｍｏｌ）で処理し、一夜撹拌した。この反応混合物を濃縮し、生成物を、溶離剤としてヘキサン：酢酸エチル２：１を用いてシリカゲルで精製し、０．５４ｇ（８０％）の所望の生成物を白色固体として得た。：1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ５．１７（ｓ，２Ｈ）；６．１６（ｓ，１Ｈ）；６．６９（ｓ，１Ｈ）；６．８２（ｓ，１Ｈ）；７．０５（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６−７．４４（ｍ，４Ｈ）；７．９４（ｓ，２Ｈ）；８．３０（ｓ，１Ｈ）；１０．０８（ｓ，１Ｈ）。
【０１７６】
（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−［５−（｛［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］チオキソメチル｝アミノ）−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ｝フェニル］ホルムアミド（化合物例１０）
Ｎ−（３−アミノ−５−｛［（３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ｝フェニル（３，５−ジクロロフェニル）ホルムアミド（０．５４ｇ，１．２ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（１０ｍＬ）に溶かした溶液に３，５−ジクロロフェニルイソチオシアネート（０．３０ｇ，１．５ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を一夜撹拌した。この反応混合物を次いで濃縮し、生成物を、溶離剤として、ヘキサン：酢酸エチル２：１を用いてシリカゲルで精製し、０．７０ｇ（８９％）の化合物例１０をオフホワイトの固体として得た。：1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ７．１０−７．１６（ｍ，２Ｈ）；７．３１−７．３４（ｍ，１Ｈ）；７．３５−７．３９（ｍ，２Ｈ）；７．３９−７．４５（ｍ，２Ｈ）；７．４７（ｓ，１Ｈ）；７．６５（ｄ＝，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．８７−７．８９（ｍ，１Ｈ）；７．９７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）；８．４７（ｓ，１Ｈ）；１０．０２（ｓ，１Ｈ）；１０．２２（ｓ，１Ｈ）；１０．４４（ｓ，１Ｈ）：分析：計算値：Ｃ27Ｈ17Ｎ4Ｓ1Ｃｌ4Ｏ1Ｆ3：Ｃ，５０．３３；Ｈ，２．６６；Ｎ，８．７０；Ｓ，４．９８；Ｃｌ，２２．０１。実測値：Ｃ，５０．１０；Ｈ，２．７５；Ｎ，８．６０；Ｓ，５．００；Ｃｌ，２２．２１。
【０１７７】
化合物例９を化合物例１０から反応機構ＩＩ−Ｃに示すようにして作製した。
【化３０】
2004532187.tif 000031
【０１７８】
Ｎ−（５−｛［２−アザ−２−（３，５−ジクロロフェニル）−１−メチルチオビニル］アミノ｝−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ｝フェニル）（３，５−ジクロロフェニル）ホルムアミド（混合物例９）
例１０（０．５０ｇ，０．７８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３ｍＬ）に溶かした溶液を７ｍＬのエタノールで希釈し、ヨードメタン（０．５５ｇ，３．９ｍｍｏｌ）で処理して一夜撹拌した。この反応混合物を次いで濃縮し、生成物を、溶離剤としてヘキサン：酢酸エチル３：１を用いてシリカゲルで精製し０．４３ｇ（８５％）の化合物例９を白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ２．４１−２．４７（ｍ，３Ｈ）；６．８８（ｓ，２Ｈ）；７．０６−７．２０（ｍ，２Ｈ）；７．２７−７．５７（ｍ，５Ｈ）；７．７９（ｓ，１Ｈ）；７．８７（ｓ，１Ｈ）；７．９３−７．９９（ｍ，２Ｈ）；８．６２（ｓ，１Ｈ）；９．０３（ｓ，１Ｈ）；１０．３４（ｓ，１Ｈ）：分析：計算値：Ｃ28Ｈ19Ｎ4Ｓ1Ｃｌ4Ｏ1Ｆ3：Ｃ，５０．０８；Ｈ，２．９１；Ｎ，８．５１；Ｓ，４．８７；Ｃｌ，２１．５４。実測値：Ｃ，５１．２１；Ｈ，３．０９；Ｎ，８．４９；Ｓ，４．７３；Ｃｌ，２１．６０。
【０１７９】
化合物例１４を化合物例１２から下記の反応機構ＩＩ−Ｄに示すようにして作製した。
【化３１】
2004532187.tif 000032
【０１８０】
Ｎ−（５−（２−アザ−３−ナフチル−２−プロペニル）−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝フェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド
化合物例１２（２．０ｇ，３．３ｍｍｏｌ）をメタノール（２５ｍＬ）に溶かした溶液にヒドラジン（１．０ｇ，３３ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を還流温度に一夜加熱した。この混合物を次いで冷却し、濾液して、濾過を濃縮し、褐色の固体残渣を得た。この残渣を１−ナフトアルデヒド（０．５６ｇ，３６ｍｍｏｌ）を６０ｍＬトルエンに溶かした溶液に入れて８０℃に加熱し、３滴のＨＣｌで処理してＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを用いて１２時間還流温度に加熱し、反応物から蒸発する水分を集めた。この反応物を次いで濃縮し、生成物をヘキサン／酢酸エチルで再結晶精製し０．３５ｇ（１８％）のこのイミンを淡黄色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ４．９６（ｓ，２Ｈ）；７．５７−７．６８（ｍ，６Ｈ）；７．７９（ｄｄ，Ｊ＝７．５，８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．９７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．００−８．１０（ｍ，４Ｈ）；８．２８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；８．３０−８．３５（ｍ，４Ｈ）；９．１５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；９．２３（ｓ，１Ｈ）；１０．５８（ｓ，２Ｈ）：分析：計算値：Ｃ34Ｈ23Ｎ3Ｏ2Ｆ6：Ｃ，６５．９１；Ｈ，３．７４；Ｎ，６．７８。実測値：Ｃ，６５．８２；Ｈ，３．９１；Ｎ，６．８０。
【０１８１】
Ｎ−（５−｛［ナフチルメチル）アミノ］メチル｝−３−｛［３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルボニルアミノ｝フェニル）［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルムアミド（化合物例１４）
前の工程からのこのイミン（４０ｍｇ，０．０６ｍｍｏｌ）をエタノール（３ｍＬ）に溶かした溶液にシアノボロハイドライドナトリウム（１０ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を一夜撹拌した。この反応混合物を次いで濃縮し、生成物をヘキサン：酢酸エチル２：１を溶離剤として用いてシリカゲルで精製し３０ｍｇ（７５％）の化合物例１４を白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ  ４００  ＭＨｚ（ＤＭＳＯ）δ３．７８（ｓ，２Ｈ）；４．１９（ｓ，２Ｈ）；７．２６（ｓ，１Ｈ）；７．３４−７．５０（ｍ，８Ｈ）；７．６６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．７４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．８３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．８９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；８．０２（ｓ，２Ｈ）；８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；８．５３（ｓ，２Ｈ）：分析：計算値：Ｃ34Ｈ25Ｎ3Ｏ2Ｆ6：Ｃ，６５．７０；Ｈ，４．０５；Ｎ，６．７６。実測値：Ｃ，６５．７９；Ｈ，３．７８；Ｎ，６．７０。
【０１８２】
化合物例６の中間体であるジアミンを下記の反応機構ＩＩ−Ｅに従って作製した。
【０１８３】
５−（３，４−ジクロロフェノキシメチル）−１，３−ジニトロベンゼン
０．５ｍｍｏｌ  ３，４−ジクロロ−フェノールと１ｍｍｏｌＫＩを０．５ｍｍｏｌ  １−クロロメチル−３，５−ジニトロ−ベンゼンを２．５ｍｌ  １−ブタノールに溶かした溶液に加えた。この混合物を一夜還流しつつ撹拌した。１−ブタノールを留去させてから、残渣を２×１０ｍＬ  １Ｎ  ＨＣｌと２×１０ｍＬ  ＥｔＯＡｃで洗い、乾燥させた。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6，４００  ＭＨｚ）５．４４（ｓ，２Ｈ）；７．１４（ｄ，１Ｈ）；７．４３（ｓ，１Ｈ）；７．５８（ｄ，１Ｈ）；８．７３（ｓ，２Ｈ）；８．８１（ｓ，１Ｈ）。
【０１８４】
【化３２】
2004532187.tif 000033
【０１８５】
５−（３，４−ジクロロフェノキシメチル）ベンゼン−１，３−ジアミン
５ｍＬ  ＭｅＯＨに溶かした５−（３，４−ジクロロフェノキシメチル）−１，３−ジニトロベンゼンを１０ｍＬの２．５ｍｍｏｌヒドラジン１水和物と触媒量のＲａ−Ｎｉを含む溶液に加えた。この混合物を還流しつつ３０分間撹拌し、次いで室温に冷却した。ＧＣ−ＭＳは還元された生成物のピークを与えた。この溶液をセライトで濾過し、メタノールをロータリーエバポレーターで蒸発させた。この残渣をさらに精製することなく直接次の工程に用いた。
【０１８６】
実施例３
化合物例１，５と４の合成
化合物例１は下記の反応機構ＩＩＩ−Ａの方法で合成した。
【０１８７】
３−｛３，５−ビス−［３−（３，５−ジクロロ−フェニル）−ウレイド］−フェニル｝−プロオピオン酸メチルエステル（化合物例１）の合成
【０１８８】
３−（３，５−ジニオトロフェニル）アクリル酸メチルエステル
ヨードジニトロベンゼン（１０ｍｍｏｌ）とアクリレートメチルエステル（５０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）2（８０ｍｇ）、トリ−ｏ−トリルホスフィン（３００ｍｇ）と３０ｍＬ  Ｅｔ3Ｎの溶液を８０℃で一夜撹拌した。この反応混合物をヘキサン中３０％ＥｔＡｃでシリカゲルカラムから溶出して精製し、生成物（収率５６％）を白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣ１３，４００  ＭＨｚ）９．０４（ｓ，１Ｈ）；８．６７（ｓ，２Ｈ）；７．７１（ｄ，１Ｈ），６．７７（ｄ，１Ｈ）；３．８９（ｓ，３Ｈ）。
【０１８９】
【化３３】
2004532187.tif 000034
【０１９０】
３−｛３，５−ビス−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−ウレイド］−フェニル｝プロピオン酸メチルエステル（化合物例１）
３−（３，５−ジニトロフェニル）アクリル酸メチルエステル（２ｍｍｏｌ）とメチレンクロライド２０ｍＬの触媒量の１０％Ｐｄ／Ｃを含む溶液を５０ｐｓｉで２０分間水素化した。このパラジウム触媒を濾過した。次いで、ジクロロフェニルイソシアネート（４ｍｍｏｌ）を濾液に加え、この混合物を室温で一夜撹拌した。沈殿を濾過して集め、メチレンクロライドで２回洗った。この粗製生成物をアセトンから再結晶して純粋な生成物（収率９１％）を白色固体として得た。Ｒｆ＝０．６０（２：１ヘキサン：ＥｔＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）８．９６（ｓ，２Ｈ）；８．８８（ｓ，２Ｈ）；７．５３（ｓ，５Ｈ），７．１６（ｓ，２Ｈ）；６．９８（ｓ，２Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，２Ｈ），２，６２（ｔ，２Ｈ）。実測値：Ｃ，５０．４５；Ｈ，３．６７；Ｎ，９．９８。
【０１９１】
化合物例５を下記の反応機構ＩＩＩ−Ｂに従って作製した。
【０１９２】
３−｛３，５−ビス−［３−（３，５−ジクロロフェニル）ウレイド］−フェニル｝プロピオン酸メチルエステル（化合物例５）の合成
３−（３，５−ジクロロフェニル）アクリル酸メチルエステル。ヨードジニトロベンゼン（１０ｍｍｏｌ）とアクリル酸メチルエステル（５０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）2（８０ｍｇ）、トリ−ｏ−トリルホスフィン（３００ｍｇ）及び３０ｍＬ  Ｅｔ3Ｎの溶液を８０℃で一夜撹拌した。この反応混合物をシリカゲルカラムブヘキサン中３０％ＥｔＡｃで溶出して精製し、生成物（収率５６％）を白色固体として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣ１３，４００  ＭＨｚ）９．０４（ｓ，１Ｈ）；８．６７（ｓ，２Ｈ）；７．７１（ｄ，１Ｈ），６．７７（ｄ，１Ｈ）；３．８９（ｓ，３Ｈ）。
【０１９３】
【化３４】
2004532187.tif 000035
【０１９４】
３−｛３，５−ビス−［３−（３，５−ジクロロフェニル）ウレイド］−フェニル｝プロピオン酸メチルエステル（化合物例５）
３−（３，５−ジニトロフェニル）アクリル酸メチルエステル（２ｍｍｏｌ）及び２０ｍＬメチレンクロライド中触媒量の１０％  Ｐｄ／Ｃを含む溶液を５０ｐｓｉ下で２０分間水素化した。このパラジウム触媒を濾過した。次いで、ジクロロフェニルイソシアネート（４ｍｍｏｌ）を濾液に加え、この混合物を室温で一夜撹拌した。沈殿を濾過して集め、メチレンクロライドで２回洗浄した。この粗精生成物をアセトンから再結晶し、純粋な生成物（収率９１％）を白色固体として得た。Ｒｆ＝０．６０（２：１ヘキサン：ＥｔＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）８．９６（ｓ，２Ｈ）；８．８８（ｓ，２Ｈ）；７．５３（ｓ，５Ｈ），７．１６（ｓ，２Ｈ）；６．９８（ｓ，２Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，２Ｈ），２，６２（ｔ，２Ｈ）。実測値：Ｃ，５０．４５；Ｈ，３．６７；Ｎ，９．９８。
【０１９５】
化合物例４を化合物例５：｛６−［３−［３−（３，５−ジクロロ−フェニル）−ウレイド］−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−ベンゾイルアミノ］ヘキシル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから作製した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）１０．７１（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；９．２８（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；９．１６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；8．５４（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）；８．２６（ｓ，１Ｈ）；８．１４（ｓ，１Ｈ）；８．１０（ｍ，３Ｈ）；７．６８（ｔ，１Ｈ）；７．５５（ｓ，２Ｈ）；７．４７（ｄ，１Ｈ），７．１８（ｓ，１Ｈ）；６．７５（ｓ，１Ｈ），３．２６（ｔ，２Ｈ），２．９１（ｔ，２Ｈ），１．３２−１．５７（ｍ，１７Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，５４．５５；Ｈ，４．９９；Ｎ，９．６４。実測値：Ｃ，５４．３４；Ｈ，４．８９；Ｎ，９．８８。
【０１９６】
実施例４
化合物例７，２９及び３０の合成
化合物例７を下記の反応機構ＩＶ−Ａに従って作製した。
【０１９７】
【化３５】
2004532187.tif 000036
【０１９８】
１，３−（１−ナフタレン）−Ｎ−［５−（３，４−ジクロロ−フェノキシメチル）−フェニル］−スルホナミド（化合物例７）の合成
５−（３，４−ジクロロフェノキシメチル）ベンゼン−１，３−ジアミン（反応機構ＩＩ−Ｅの方法によって作製した。）を５ｍＬのＤＭＡに溶解した。２ｍｍｏｌのＴＥＡと１ｍｍｏｌのナフタレン−１−スルホニルクロライドをこの溶液に加えた。この混合物を室温で一夜撹拌し、ＧＣ−ＭＳが出発物質の消失を示してから氷水に注ぎ入れた。沈殿物を濾過し、ヘキサン／酢酸エチルから再結晶した。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）４．８２（ｓ，２Ｈ）；６．６０（ｓ，２Ｈ）；６．７９（ｑ，１Ｈ）；６．９０（ｓ，１Ｈ）；７．１０（ｄ，１Ｈ）；７．４７（ｑ，３Ｈ）；７．６６（ｍ，４Ｈ）；８．０５（ｔ，４Ｈ）；８．１７（ｄ，２Ｈ）；８．６２（ｄ，２Ｈ）；１０．７６（ｓ，２Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，５８．１５；Ｈ，３．８４；Ｎ，４．１１；Ｓ，９．４１。実測値：Ｃ，５７．９８；Ｈ，３．７６；Ｎ，４．２３；Ｓ，９．２３。
【０１９９】
化合物例２９と３０の合成を下記の反応機構ＩＶ−Ｂに従って行った。
【０２００】
ビス［（３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］（３−｛ビス［３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ）−４−ブロモフェニル）アミン（化合物例３０）の合成
【化３６】
2004532187.tif 000037
【０２０１】
３−｛ビス［３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］｝アミノ−４−ブロモニトロベンゼン
０．５ｍｍｏｌ  ２−ブロモ−５−ニトロ−フェニルアミンを４ｍＬのＴＨＦビリジン（１：１）混合物に溶かした溶液に、１ｍＬ  ＴＨＦに入れた１．２ｍｍｏｌ  ３，５−ジクロロ−ベンゼンスルホニル  クロライドを加えた。この混合物を還流しつつ一夜撹拌した。室温まで冷却後生じた沈殿物を濾過し、酢酸エチルで洗浄した。ＧＣ−ＭＳはこの物質を所望の生成物であると同定した。
【０２０２】
３−｛ビス［（３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］｝アミノ−４−ブロモアニリン
工程１からの沈殿物を２ｍＬ  ＭｅＯＨと０．６ｍＬ飽和ＮＨ4Ｃｌに溶解し、０．４ｇのインジウム粉末を加えた。この混合物を還流しつつ一夜撹拌した。反応の完結をＧＣ−ＭＳで判断し、冷却した反応混合物を水で希釈してセライトで濾過した。この水性の濾液を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機物層を合わせて乾燥（ＭｇＳＯ4）し、真空中で濃縮した。この精製生成物を直接次の工程に用いた。
【０２０３】
ビス［（３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］（３−｛ビス［３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ）−４−ブロモフェニル）アミン（化合物例３０）
工程からの化合物を５ｍＬのジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）に溶かし、２ｍｍｏｌのトリエチルアミンと１ｍｍｏｌの３，５−ジクロロ−ベンゼンスルホニルクロライドをこの溶液に加えた。この混合物を室温で一夜撹拌し、ＧＣ−ＭＳが出発物質の消失を示してから氷水に注ぎ入れた。沈殿物を濾過し、ヘキサン酢酸エチルから再結晶して例３０の化合物を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）７．１９（ｄ，１Ｈ）；７．５５（ｑ，１Ｈ）；７．８９（ｄ，４Ｈ）；７．９４（ｄ，４Ｈ）；８．０３（ｄ，１Ｈ）；８．１６（ｍ，４Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，３６．０１；Ｈ，１．７９；Ｎ，２．６２；Ｓ，１２．０２。実測値：Ｃ，３６．２４；Ｈ，１．９１；Ｎ，２．８１；Ｓ，１２．１７。
【０２０４】
Ｎ−（３−｛ビス［（３，５−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−４−ブロモフェニル）［（３，５−ジクロロフェニル）アミノ］ホルムアミド（化合物例２９）
１，３−ジクロロ−５−イソシアナート−ベンゼンを下記の反応機構ＩＶ−Ｃによる第３工程で開いた外は例３０で記載したのと同じ方法を例２９の作製に用いた。
【０２０５】
化合物例２９：1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００  ＭＨｚ）７．１１（ｔ，１Ｈ）；７．４０（ｑ，１Ｈ）；７．６７（ｍ，３Ｈ）；７．８２（ｄ，１Ｈ）；７．９３（ｄ，４Ｈ）；８．１５（ｔ，２Ｈ）；９．１９（ｓ，１Ｈ）；９．３２（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ，３８．３１；Ｈ，１．９８；Ｎ，５．１５；Ｓ，７．８７。実測値：Ｃ，３８．４５；Ｈ，２．０２；Ｎ，５．３７；Ｓ，８．１０。
【０２０６】
【化３７】
2004532187.tif 000038
【０２０７】
実施例５
化合物例８の合成
化合物例８を下記の反応機構Ｖに従って作製した。
【０２０８】
３，５−ビス（ベンジロキシ）安息香酸
表題化合物をメチル３，５−ビス（ベンジルオキシ）ベンゾエート（１．７４ｇ，５ｍｍｏｌ）から出発して反応機構Ｉ−Ａの方法に従って作製した。白色固体、収量１．４４ｇ（８６％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ７．４７−７．３０（ｍ，１０Ｈ）；７．１５（ｓ，２Ｈ）；６．９２（ｓ，１Ｈ）；５．１５（ｓ，２Ｈ）。
【０２０９】
３，５−ビス（ベンジルオキシ）安息香酸クロライド
表題化合物を酸３，５−ビス（ベンジルオキシ）安息香酸（１．３２ｇ，４．０ｍｍｏｌ）から出発して反応機構Ｉ−Ａの方法に従って作製した。オフホワイト固体、収量１．３８ｇ（９９％）。直ちに、化合物例８の作製に用いた。
【０２１０】
【化３８】
2004532187.tif 000039
【０２１１】
３，５−ジ（ベンジルオキシ）−３’−（トリフルオロメチル）ベンズアニリド（化合物例１８）
表題化合物を３，５−ビス（ベンジルオキシ）安息香酸クロライドと３−（トリフルオロメチル）アニリンのＴＨＦ溶液から出発して反応機構Ｉ−Ａの方法に従って作製した。白色固体、収量０．２５０ｇ（６９％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ-ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ１０．４７（ｓ，１Ｈ）；８．２４（ｓ，１Ｈ）；８．０６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．６０（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．５１−７．３２（ｍ，１１Ｈ）；７．２５（ｓ，２Ｈ）；６．９５（ｓ，１Ｈ）；５．１８（ｓ，４Ｈ）。分析：計算値：Ｃ28Ｈ22Ｆ3ＮＯ3：７０．４３；Ｈ，４．６４；Ｎ，２．９３。実測値：Ｃ，７０．５８；Ｈ，４．６７；Ｎ，２．９１。
【０２１２】
実施例６
化合物例１５の合成
化合物例１５を下記の反応機構ＶＩに従って作製した。
【０２１３】
【化３９】
2004532187.tif 000040
【０２１４】
メチル３−ヒドロキシ−５−ニトロベンゾエート
３−ヒドロキシ−５−ニトロ安息香酸（２．００ｇ，１１ｍｍｏｌ）と濃硫酸（０．５ｍＬ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）溶液を一夜還流し、室温まで冷却して、Ｎａ2ＣＯ3（飽和溶液２５ｍＬ）、水（１５０ｍＬ）及び氷（５０ｇ）の混合物に注ぎ入れた。生じた沈殿物を濾過し、水洗（３×３０ｍＬ）して空気乾燥した。黄色微結晶、収量１．３７ｇ（６３％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ-ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ１０．９４（ｓ，１Ｈ）；８．０９（ｓ，１Ｈ）；７．７８（ｓ，１Ｈ）；７．
７１（ｓ，１Ｈ）；３．９０（ｓ，３Ｈ）。
【０２１５】
メチル３−［（２−ナフチル）メトキシ］−５−ニトロベンゾエート
メチル３−ヒドロキシ−５−ニトロベンゾエート（０．６８５ｇ，３．５ｍｍｏｌ）とアセトン（７５ｍＬ）に溶解した。炭酸カリウム（１．４３ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）と２−ブロモメチルナフタレン（０．７７ｇ，３．５ｍｍｏｌ）を加えた。還流下で５時間撹拌後、この混合物を室温まで冷却し、塩基性の（ＮａＯＨ，ｐＨ１０−１１）水に注ぎ入れた。１時間後、沈殿した固体を濾過し、水（３×２５ｍＬ）で洗い、空気乾燥した。オフホワイト結晶、収量０．９７０ｇ（８２％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ-ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ８．２４（ｓ，１Ｈ）；８．１４（ｓ，１Ｈ）；８．０５（ｓ，１Ｈ）；７．９９−７.９０（ｍ，４Ｈ）；７．６３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５７−７．５０（ｍ，２Ｈ）；５．５１（ｍ，２Ｈ）；３．９２（ｓ，３Ｈ）。
【０２１６】
３−［（２−ナフチル）メトキシ］−５−ニトロベンズヒドラジド
メチル３−［（２−ナフチル）メトキシ］−５−ニトロベンゾエート（０．９７ｇ，２．８７ｍｍｏｌ）とヒドラジン水和物（０．５６ｍｌ，１１．５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶かした溶液を還流下で一夜撹拌した。沸騰混合物からの固体のヒドラジトの生成が朝観察された。混合物を冷却し、固体を濾過して空気乾燥した。緑っぽい白色板、収量０．６０ｇ（６２％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ-ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ１０．１５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）；８．２７（ｓ，１Ｈ）；８．０５−７．９１（ｍ，６Ｈ）；７．６３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．５９−７．５２（ｍ，２Ｈ）；５．４８（ｓ，２Ｈ）；４．６６（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）。
【０２１７】
１−｛３−［（２−ナフチル）メトキシ］−５−ニトロベンゾイル｝−２−ベンゾイルヒドラジン
３−［（２−ナフチル）メトキシ］−５−ニトロベンズヒドラジド（０．３０ｇ，０．８９ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（０．１４ｍＬ，０．９８ｍｍｏｌ）のＤＭＡ（２５ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながらベンゾイルブロマイド（０．１１ｍＬ，０．８９ｍｍｏｌ）を加え、一夜撹拌を続けた。黄味がかった溶液を氷水（５０ｇ）上に注ぎ２４時間置いた。生成した沈殿物を濾過し、水洗し、空気乾燥した。オフオワイト固体収量０．３４ｇ（８７％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ-ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ１０．９２（ｓ，１Ｈ）；１０．６６（ｓ，１Ｈ）；８．１２−７．８９（ｍ，８Ｈ）；７．６７−７．５０（ｍ，６Ｈ）；５．５３（ｓ，２Ｈ）。
【０２１８】
１−（３−ヒドロキシ−５−アミノベンゾイル）−２−ベンゾイルヒドラジン
１−｛３−［（２−ナフチル）メトキシ］−５−ニトロベンゾイル｝−２−ベンゾイルハイドラジン（０．３４ｇ，０．７７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（１０％，０．３５ｇ）、ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）の混合物をＰａｒｒ装置（Ｈ2圧力―３０ｐｓｉ）中で室温で１．５時間水素化した。触媒を濾制し、濾液を真空中で濃縮して白色針状物のスラリーを得、これを濾過してＥｔＯＨ（３×２４ｍＬ）で洗浄した。収量０．２０ｇ（９６％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ-ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ１０．３７（ｓ，１Ｈ）；１０．１２（ｓ，１Ｈ）；９．２０（ｓ，１Ｈ）；７．９１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．６２−７．４８（ｍ，３Ｈ）；６．５４（ｓ，１Ｈ）；５．４６（ｓ，１Ｈ）；６．１９（ｓ，１Ｈ）；５．１８（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）。
【０２１９】
１−ベンゾイル−２−｛３−［（３−トリフルオロメチル）フェニル］カルボニルアミノ−５−ヒドロキシ｝ベンゾイルヒドラジン（化合物例１５）
表題の化合物を反応機構Ｉの方法に従って３−（トリフルオロメチル）ベンゾイルクロライドと上記のアミンのＤＭＡ溶液から作製した。白色固体、収量０．１７５ｇ（５９％）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ-ｄ6，４００  ＭＨｚ），δ：１０．５５（ｓ，１Ｈ）；１０．４８（ｓ，１Ｈ）；１０．４１（ｓ，１Ｈ）；９．８８（ｓ，１Ｈ）；８．３２（ｓ，１Ｈ）；８．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．９８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）,７．９３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．８０（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．６９（ｓ，１Ｈ）；７．６６−７．４８（ｍ，３Ｈ）；７．０８（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ22Ｈ16Ｆ3Ｎ3Ｏ4（０．４Ｈ2Ｏ）：Ｃ，５８．６４；Ｈ，３．７６；Ｎ，９．３３。実測値：Ｃ，５８．６２；Ｈ，３．７５；Ｎ，９．３１。
【０２２０】
実施例７
化合物例３３と３４の合成
化合物例３３と３４を下記の反応機構ＶＩＩに従って作製した。
【０２２１】
４−ブロモ−３−ニトロフェノール
１−ブロモ−４−メトキシ−２−ニトロベンゼン（２．３２ｇ，１０ｍｍｏｌ）の７５ｍＬジクロロメタン水溶液を０℃で攪拌しながらＢＢｒ3溶液（ＤＣＭ中  １Ｍ，１２ｍＬ，１２ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この溶液を室温に温め１６時間攪拌した。ＧＣ／ＭＳが出発物質がまだ残っていることを示したので１２ｍＬのＢＢｒ3溶液をさらに加え、この反応混合物を４時間還流した。この反応混合物を氷で冷却し、水で急冷した。飽和ＮａＨＣＯ3（aq）とブラインで連続して洗浄後、有機物層をＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残った黄色団体をフラッシュクロマトグラフィー（２５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）し、１．５ｇの生成物を（６９％）収率で淡黄色団体として得た。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ２１８（Ｍ+）。
【０２２２】
１−ブロモ−４−（２−ナフチルメトキシ）−２−ニトロベンジン
４−ブロモ−３−ニトロフェノール（１．５ｇ、６．９ｍｍｏｌ）、１−（クロロメチル）ナフチレン（１．３４ｇ、７．６ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（１．０５ｇ、７．６ｍｍｏｌ）を５０ｍＬの乾燥ＤＭＦ溶液を８０℃で１６時間窒素下で加熱した。この混合物を冷却し、濾過し、蒸発させた。残渣を酢酸エテル（〜７５ｍＬ）に取り、水とブラインで連続的に洗浄した。この有機物相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発させた。ブラッシュクロマトグラフィー（２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で２．０ｇの生成物を収率（８１％）で淡黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ３５８（Ｍ+）。
【０２２３】
【化４０】
2004532187.tif 000041
【０２２４】
２−ブロモ−５−（ナフチルメトキシ）フェニルアミン
ニトロエーテル（１．０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの絶対エタノールに溶かした溶液に飽和ＮＨ4Ｃｌ(aq)（３ｍＬ）とインジウム粉末（２．０ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を還流下で４時間激しく攪拌した。この反応混合物を熱いうちにセライトで濾過し、このセライトを酢酸エチルで充分に洗浄した。有機物相を水とブラインで洗って、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（２５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を行って０．７ｇの生成物を収率（７６％）で淡黄色固体として行った。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ３２８（Ｍ+）。
【０２２５】
Ｎ−［２−ブロモ−５（ナフチルメトキシ）フェニル］［３−（トリフルオロメチル）フェニル］ホルミアミドマミド（化合物例３４）
２−ブロモ−５（２−ナフチルメトキシ）フェニルアミン（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及び、３−（トリフルオロメチル）ベンゾイルクロライド（６３ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン（０．５ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬのジメチルアセトアミドに溶かした溶液を１６時間攪拌し、酢酸エチル／へキサシから再結晶して５．２ｍｇの化合物例３４を白色針状物として得た。ｍｐ１２５−１２７℃。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、Ｍｅ2ＳＯ−ｄ6）δ５．５９（ｓ、２Ｈ）；７．０５−８．３３（ｍ、１４Ｈ）；１０．３５（ｓ、１Ｈ）分析：計算値Ｃ25Ｈ17ＢｒＦ3ＮＯ2：Ｃ、６０．０２；Ｈ、３．４２；Ｎ、２．８０実測値Ｃ、６０．１５；Ｈ、３．５２；Ｎ、２．７３。
【０２２６】
［（３、５−ジクロロフェニル）アミノ］｛［２−ブロモ−５−（ナフチルメトキシ）フェニル］アミノ｝メタン−１−チオン（化合物例３３）
２−ブロモ−５−（２−ナフチルメトキシ）フェニルアミン（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）と３，５−ジクロロフェニルイソチオシアネート（６０ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶かした溶液を室温で１６時間攪拌した。この反応混合物を蒸発乾燥して、残渣を酢酸エチル／ヘキサンから再結晶して６０ｍｇの生成物を収率（３８％）で白色固体として得た。ｍｐ１４９−１５１℃。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，Ｍｅ2ＳＯ−ｄ6）δ５．５６（ｓ，２Ｈ）；７．０２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０，８．９）；７．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０）；７．３５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．８）；７．４９−７．６９（ｍ，７Ｈ）；７．９３−７．９９（ｍ，２Ｈ）；８．０７−８．１０（ｍ，１Ｈ）９．７８（ｓ，１Ｈ）；１０．１０（ｓ，１Ｈ）分析：計算値：Ｃ24Ｈ17ＢｒＣｌ２Ｎ2ＯＳ：Ｃ，５４．１６；Ｈ，３．２２；Ｎ，５．２６；Ｓ，６．０２；Ｃｌ，１３．３２；Ｂｒ，１５．０１。実測値：Ｃ、５４．１７；Ｈ、３．３２；Ｎ、５．２８；Ｓ、６．１０；Ｃｌ，１３．３１；Ｂｒ，１５．００。
【０２２７】
実施例８
化合物例４５と４６の作製
化合物例４５と４６を下記の反応機構ＶＩＩＩに従って作製した。
【０２２８】
３−［（３，５−ジクロロフェノキシ）メチル］−４−メトキシフェニルアミン塩酸塩
【０２２９】
２−ブロモメチル−１−メトキシ−４−ニトロベンゼン（２．４６ｇ，０．０１  Ｍ）、３，５−ジクロロフェニル（１．７９ｇ，０．０１１  Ｍ）及び炭酸カリウム（２．０７ｇ，０．０１５  Ｍ）をアセトン（１５０ｍＬ）に入れた混合物を５分間激しく攪拌し、次いでジシクロヘキサノ−１８−クラウン−６（８０ｍｇ）を加えて、全体を攪拌しつつ還流した。４時間後、この混合物を室温に冷却し、一夜攪拌を続けた。溶媒を真空中で蒸発させた。黄色がかった白色の固体を水（２００ｍＬ）でこねて３０分間攪拌した。液体を逆濾過を用いてフラスコから除き、残った固体をＥｔＯＨ（７５ｍＬ）で希釈した。この懸濁液に湿ラネーニッケル（２．０ｇ）を加えて、全体を６０℃まで加熱した。ヒトラジン水和物（１００％，２．０ｍＬ）をＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶かした溶液を攪拌しながら３０分以内に滴下して加えた。混合物が透明になったらできるだけ早く還流し１時間攪拌しながらこれを続けた。この溶液を室温まで冷却し、触媒を傾浮して、真空中で濃縮した。油状残渣をＭｅＯＨ（３０ｍＬ）に溶解して濃ＨＣｌ（１２ｍＬ）で処理した。生成した懸濁液をフリーザー内に一夜置き、次いで濾過した。微細結晶、収量１．５５ｇ濾液は真空中で濃縮し、生成した沈殿物を濾過して、さらに生成物（０．４１０ｇ）を得た。表題化合物の合計収量は１．９６０ｇ（５９％）となった。
【０２３０】
【化４１】
2004532187.tif 000042
【０２３１】
１−［３−（３，５−ジクロロフェノキシ）メチル−４−メトキシフェニル］−３−ベンゾイルチオウレア（化合物例４６）
上記のアミシ塩酸塩（０．１６７ｇ，０．５ｍｍｏｌ）（３０ｍＬ）に懸濁させた懸濁液をトリエチルアミン（０．０７６ｍＬ，０．５５ｍｍｏｌ）で室温で処理し短時間（１０ｍｉｎ）攪拌し、次いでベンゾイルイソチオシアネート（０．０６７ｍＬ，０．５ｍｍｏｌ）を生成した溶液に一度に加えた。一夜攪拌を続けた。水（５０ｍＬ）をこの混合物に加え、抽出と有機物層の分離を行ってから溶媒を真空中で蒸発させ、得られた固体をジメチルエーテル：へキサン混合物でこね、濾過した。収量０．１３０ｇ（５６％）。黄色結晶，ｍ．ｐ．１６７−１６９℃。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6，４００ＭＨｚ）δ：１２．４５（ｓ，１Ｈ）；１１．５３（ｓ，１Ｈ）；７．９８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．６９−７．６１（ｍ，３Ｈ）；７．５６−７．５１（ｍ，２Ｈ）；７．１８−７．０９（ｍ，４Ｈ）；５．１２（ｓ，２Ｈ）；３．８６（ｓ，３Ｈ）。分析：計算値：Ｃ22Ｈ18Ｃｌ2Ｎ2Ｏ3Ｓ：Ｃ，５７．２７；Ｈ，３．９３；Ｎ，６．０７。実測値：Ｃ，５６．９０；Ｈ，４．０１；Ｎ，６．１３
【０２３２】
１−［３−（３，５−ジクロロフェノキシ）メチル−４−メトキシフェニル］−３−（３，５−ジクロロフェニル）チオウレア（混合物例４５）
工程１からのアミン塩酸塩（０．１６７ｇ，０．５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）懸濁液をトリエチルアミン（０．０７６ｍＬ，０．５５ｍｍｏｌ）で室温で処理し、短時間（１０ｍｉｎ）攪拌し、次いで３，５−ジクロロフェニルイソチオシアネート（０．１０２ｇ，０．５ｍｍｏｌ）を生成した溶液に一度に加えた。攪拌を一夜続けた。水（５０ｍＬ）をこの混物に加え、抽出と有機物層の分離を行ってから溶媒を真空中で蒸発させ、得られた固体をジエチルエーテル：へキサン混合物でこねて、濾過した。収量０．１４５ｇ（５７％）。ピンク色微組結晶，ｍ．ｐ．１７２−１７３℃（ｄｅｃ．）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6，４００ＭＨｚ）δ：９．９７（ｓ，１Ｈ）；９．８５（ｓ，１Ｈ）；７．６０（ｓ，２Ｈ）；７．４０−７．３５（ｍ，２Ｈ）；７．３０（ｓ，１Ｈ）；７．１４（ｓ，１Ｈ）；７．１１（ｓ，２Ｈ）；７．０９−７．０４（ｍ，１Ｈ）；５．１０（ｓ，２Ｈ）；３．８３（ｓ，３Ｈ）。分析：計算値：Ｃ21Ｈ16Ｃｌ4Ｎ2Ｏ2Ｓ：Ｃ，５０．２２；Ｈ，３．２１；Ｎ，５．５８。実測値：Ｃ，５０．２９；Ｈ，３．２９；Ｎ，５．４９
【０２３３】
実施例９
化合物例２８の作製
化合物例２８を下記の反応機構ＩＸに従って作製した。
【０２３４】
【化４２】
2004532187.tif 000043
【０２３５】
３−［（３，５−ジクロロフェニル）メトキシ］−４−メトキシフェニルアミネン
表題化合物を３−ニトロ−５−メキシフェニルと３，５−ジクロロベンジルクロライドから出発して反応機構ＶＩＩＩの方法に従って作製した。
【０２３６】
１−（３，５−ジクロロフェニル）−３−［３−（３，５−ジクロロベンジルオキシ）−４−メトキシフェニル］ウレア（化合物例２８）
３−［（３，５−ジクロロフェニル）メトキシ］−４−メトキシフェニルアミン（０．５９６ｇ，２ｍｍｏｌ）をジクロロメタル（３０ｍＬ）に溶かした水溶液を攪拌しながら３，５−ジクロロフェニルイソチオシアネート（０．４０８ｇ，２ｍｍｏｌ）を一度に加えた。攪拌を一夜続けた。水（１００ｍＬ）をこの混合物に加え、抽出と有機物層の分離を行ってから、溶媒を真空中で蒸発させ、得られた固体をジエチルエーテル：へキサン混合物でこねて濾過した。収率０．２７３ｇ（２７％）。白色微細結晶，ｍ．ｐ．１５４−１５５℃（ｄｅｃ．）；1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6，４００ＭＨｚ）９．６７（ｓ，１Ｈ）；９．７４（ｓ，１Ｈ）；７．５９（ｓ，２Ｈ）；７．５３（ｓ，１Ｈ）；７．４８（ｓ，２Ｈ）；７．３０（ｓ，１Ｈ）；７．１１（ｓ，１Ｈ）；７．００（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；６．９２（ｄｄ、Ｊ＝９．０及び２．５Ｈｚ，１Ｈ）；５．１０（ｓ，２Ｈ）；３．７９（ｓ，３Ｈ）分析：計算値：Ｃ，５０．２２；Ｈ，３．２１；Ｎ，５．５８。実測値：Ｃ，５０．５０；Ｈ，３．４５；Ｎ，５．５６。
【０２３７】
実施例１０
化合物例５２の作製
化合物例５２を下記の反応機構に従って作製した。
【０２３８】
【化４３】
2004532187.tif 000044
【０２３９】
（ジフェニル）［（４−クロロ−３−ニトロフェニル）スルホニル］アミン
アミノジフェニルメタン（１．９ｇ，１１ｍｍｏｌ）と４−クロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（２．５６ｇ、１０ｍｍｏｌ）を７５ｍＬのジクロロメタンに溶かした溶液を攪拌しつつトリエチルアミン（２ｍＬ，１４．４ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を１６時間攪拌した。この反応混合物を１Ｍ  ＨＣｌとブラインで連続して濾過した。有機物層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過して蒸発させた。
得られた黄色個体を酢酸エチル／へキサンから再結晶して２．９８ｇの生成物を（７４％）収率で淡黄色結晶として得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ５．３４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、５．７３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）；７．１１−７．１４（ｍ，４Ｈ）；７．２３−７．２６（ｍ，６Ｈ）；７．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）；７．６７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０，８．５Ｈｚ）；７．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）。
【０２４０】
［（３−アミノ−４−クロロフェニル）スルホニル］（ジフェニルメチル）アミン
工程１からのニトロ化合物（２．０ｇ，５ｍｍｏｌ）とＳｎ（ＩＩ）Ｃｌ2水和物（５．５ｇ、２４．４ｍｍｏｌ）を５０ｍＬの絶対エタノールに溶かした溶液を窒素の下で１時間還流した。この反応混合物を氷上に注ぎ、固体のＮａＨＣＯ3で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機物相をブラインで洗い、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過して蒸発させ、１．７ｇの生成物（９２％）を白色結晶性固体として得、これをさらに精製することはしなかった。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３７２（Ｍ＋）。
【０２４１】
（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−（５−｛［（ジフェニルメチル）アミノ］スルホニル｝−２−クロロフェニル）ホルムアミド（混合物例５２）
（５７０ｍｇ，１．５３ｍｍｏｌ）と３，５−ジクロロベンゾイルクロライド（３４０ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジメチルアセトアミドに溶かした溶液にトリエチルアミン（１ｍＬ，７．１７ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を室温で１６時間攪拌した。この反応混合物を次いで氷上に注ぎ、生成した沈殿物を濾過して集めた。水で充分に洗浄し、乾燥後、この固体を酢酸エチル／ヘキサンから再結晶して６００ｍｇの生成物を（７１％）の収率で淡橙色結晶として得た。ｍ．ｐ．１９６−１９８℃。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ５．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）；５．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；７．１４−７．２４（ｍ，１０Ｈ）；７．３３−７．３９（ｍ，２Ｈ）；７．６１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）；７．７５（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）；８．２２（ｂｓ，１Ｈ）；８．８４（ｄ，１Ｈ，２．０Ｈｚ）。分析：計算値：Ｃ26Ｈ19Ｃｌ3Ｎ2Ｏ3Ｓ：Ｃ、５７．２１；Ｈ，３．５１；Ｎ，５．１３；Ｃｌ，１９．４８；Ｓ，５．８７。実測値：Ｃ，５７．３９；Ｈ，３．５４；Ｎ，５．１６；Ｃｌ，１９．４０；Ｓ，５．７４。
【０２４２】
実施例１１
化合物例５１の合成
化合物例５１を下記の反応機構ＸＩに記載したようにして作製した。
【０２４３】
３−アミノ−６−クロロフェニル  フェニル  ケトン
２−クロロ−５−ニトロフェニルケトン（５．５ｇ，２１．０ｍｍｏｌ）とＳｎ（ＩＩ）Ｃｌ2２水和物（２３．７ｇ，１０７ｍｍｏｌ）を２００ｍＬの絶対エタノールに入れて２時間還流し、４．９ｇの生成物を（１００％）の収率で橙色オイルとして得た。この物質をさらに精製することなく用いた。ＭＳ（Ｅｌ）ｍ／ｚ  ２３１（Ｍ＋）。
【０２４４】
【化４４】
2004532187.tif 000045
【０２４５】
（３，５−ジクロロフェニル）−Ｎ−［４−クロロ−３−（フェニルカーボナル）フェニル］ホルムアミド（化合物例５１）を化合物例５２の作製に用いたのと同じ実験条件（上記の反応機構ＸＩ）を用いて作製した。
【０２４６】
３−アミノ−６−クロロフェニル  フェニル  ケトン（１．６２ｇ，７ｍｍｏｌ）と３，５−ジクロロベンゾイルクロライド（１．５ｇ，７．２ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン（２ｍＬ，１４．４ｍｍｏｌ）を含む２５ｍＬのジトチルアセトアミドに入れて１６時間攪拌し、酢酸エチルアセテテート／へキサンから再結晶して２．１ｇの生成物を（収率：７４％）を綿状の白色針状物として得た。ｍ．ｐ．１７１−１７３℃。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４５−７．６４（ｍ，６Ｈ）；７．７３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）；７．８２−７．８５（ｍ，３Ｈ）；７．９５（ｂｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ20Ｈ12Ｃｌ3ＮＯ2：Ｃ，５９．３６；Ｈ，２．９９；Ｎ，３．４６；Ｃｌ，２６．２８。実測値：Ｃ，５９．５５；Ｈ，３．０６；Ｎ，３．５０；Ｃｌ，２６．１１。
【０２４７】
実施例１２
化合物例５０の作製
化合物例５０を下記の反応機構ＸＩＩに従って作製した。
【０２４８】
１−メトキシ−２−（２−ナフチルエトキン）−４−ニトロベンゼン
Ｐｈ3Ｐ（９．３ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）と１−ナフチレンエタノール（６．１ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）を２５０ｍＬのＴＨＦに溶かした溶液を攪拌し冷却（氷中）しながらＤＥＡＤ（６．１８ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのＴＨＦに溶かした溶液を滴下して加えた。この水溶液を０．５時間攪拌し、２−メトキシ−５−ニトロフェノール（５．０ｇ，２９．６ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのＴＨＦに溶かした溶液を滴下して加えた。この反応混合物を室温に温め、４８時間攪拌した。この反応混合物を蒸発させて得た褐色のオイルをエーテル（２００ｍＬ）にとり僅かに曇るまでヘキサンを加えた。この混合物を晶析が起こるまで室温に保ち、一夜冷蔵庫に入れた。得られた固体を濾過し、エーテル／ヘキサン（１：２）に洗浄し、乾燥して〜１８ｇの淡褐色固体を得た。ＧＣ／ＭＳはこの固体が生成物のみを含んでおり、これがトリフェニルホスフィンオキサイドであることを示した。この固体を〜１５０ｍLの熱酢酸エチルに溶かし、室温まで冷却してから、シリカゲル（〜３００ｇ）で吸引濾過し、酢酸エチル／ヘキサン（１：５）で溶出した。約〜ｌＬの溶媒を集めた後、蒸発させて４．８０ｇの生成物を（５０％）の収率で淡黄色粉末として得た。ＭＳ（Ｅｌ）ｍ／ｚ  ３２３（Ｍ＋）。
【０２４９】
【化４５】
2004532187.tif 000046
【０２５０】
４−メキトシ−３−（２−ナフチルエトキシ）フェニルラミネ
上記のニトロ化合物（２．０ｇ，６．１８ｍｍｏｌ）とヒトラジン水和物（１．５ｍＬ，３０．９ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのメタノールに溶かした溶液を還流近くまで温めた。スパチュラ先端一杯のラネーニッケル解媒（５０％水中に懸渇）を加え、この溶液を直ちに泡立たせた。この混合物を０．５時間還流した。反応が進行し、色が黄色から無色に変った。この反応混合物を冷却し、セライトで濾過し、蒸発させた。得られた残渣を酢酸エチルに再溶解し、ブラインで洗い、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発させて１．５ｇの生成物（８８％）を淡褐色オイルとして得、そのまま置いて結晶化させた。この固体はさらに精製はしなかった。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ３．３８（ｂｓ，２Ｈ）；３．６４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；３．７９（ｓ，３Ｈ），４．２９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．２２−６．２８（ｍ，２Ｈ）；６．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０）,７．４０−７．５４（ｍ，４Ｈ）,７．７４−７．７７（ｍ，１Ｈ）,７．８６−７．８８（ｍ，１Ｈ），８．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ２９３（Ｍ+）。
【０２５１】
［４−メトキシ−３−（２−ナフチルエトキシ）フェニル］（ナフチルスルホニル）アミン（化合物例５０）
工程２からのアニリン（２５０ｍｇ，０．８５ｍｍｏｌ）と１−ナフチレンスルホニルクロライド（１９０ｍｇ，０．８５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジメチルアセトアミドに溶かした溶液を撹拌しながらトリエチルアミン（１ｍＬ，７．１７ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を室温で１６時間撹拌した。この反応混合物を次いで氷上に注いだ。得られたオイルを酢酸エチルで抽出し、１Ｍ  ＨＣｌ，飽和ＮａＨＣＯ3（aq）そしてブラインで連続的に洗った。有機物相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発させて白色の泡を得た。この泡をエーテル／ヘキサンに入れ、激しく撹拌して晶析させた。得られた個体を酢酸エチル／ヘキサンから再結晶して３３０ｍｇの生成物（８０％）の収率でベージュ結晶として得た。ｍｐ１２７−１３１℃。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、Ｍｅ2ＳＯ−ｄ6）δ３．３６（ｔ，２Ｈ，Ｊ=７．１）；３．５７（ｓ，３Ｈ）；３．９２（ｔ，２Ｈ、Ｊ＝７．１）；６．４８−６．５０（ｍ，２Ｈ）；６．７０−６．７２（ｍ，１Ｈ）；７．３４−８．０７（ｍ，１３Ｈ）；８．６８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６）；１０．２１（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ29Ｈ25ＮＯ4Ｓ：Ｃ，７２．０３；Ｈ，５．２１，Ｎ，２．９０；ｓ，６．６３。実測値：Ｃ，７１．３９；Ｈ，５．２３；Ｎ，２．８８；Ｓ，６．６２。
【０２５２】
実施例１３
化合物例４７、４８及び４９の作製
化合物４７、４８と４９を下記の反応機構XIIIに従って作製した。
【０２５３】
１−メトキシ−２−（ナフチルエトキシ）−４−ニトロベンゼン
ニトロエーテルを反応機構XIIIに記載されているのと同じ実験条件を用いて作製した。２−メトキシ−５−ニトロフェニル（５．０ｇ，２９．６ｍｍｏｌ）、１−ナフチレンメタノール（５．６２ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）、Ｐｈ3Ｐ（９．３ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）及びＤＥＡＤ（６．１８ｇ，３５．５ｍｍｏｌ）を２５０ｍＬのＴＨＦに入れて室温で４８時間攪拌し、１０．４ｇの粗製生成物を分離した。この固体を酢酸エチルから再結晶して３．８ｇの生成物質を（４２％）の収率で淡黄色針状物として得た。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ３０９（Ｍ＋）。
【０２５４】
【化４６】
2004532187.tif 000047
【０２５５】
４−メトキシ−３−（２−ナフチルエトキシ）フェニルアミンを反応機構VIIに記載したのと同じ実験条件を用いて作製した。１−メトキシ−２−（ナフチルメトキシ）−４−ニトロベンゼン（３．８ｇ，１２．３ｍｍｏｌ）、ヒドラジン水和物（３．１ｇ，６１．４ｍｍｏｌ）及び触媒量のラネーニッケルを１００ｍＬのメタノールに加え０．５時間還流して３．５ｇの生成物を（１００％）の収率で褐色オイルとして得、これを放置して結晶化させた。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ  ２７９（Ｍ＋）。
【０２５６】
Ｎ−［４−メトキシ−３−（ナフチルメトキシ）フェニル］−２，２−ジフェルエタナミド（化合物例４９）を例５２の作製（反応機構Ｘ）で用いたのと同じ実験条件で作製した。４−メトキシ−３−（２−ナフチルエトキシ）フェニルアミン（３５０ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）とジフェニルアセチルクロライド（２９０ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン（１ｍＬ，７．１７ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬのジメチルアセトアミドに入れて室温で１６時間攪拌し、酢酸エチル／ヘキサンから再結晶して３７５ｍｇの生成物を（６４％）の収率で白色固体を得た。ｍｐ１７０−１７２℃。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，Ｍｅ2ＳＯ−ｄ6）δ３．６９（ｓ，３Ｈ）；５．１３（ｓ，１Ｈ）；５．４６（ｓ，２Ｈ）；６．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７）；７．２０−７．３７（ｍ，１０Ｈ）；７．５０−７．６５（ｍ，５Ｈ）；７．９４−８．０９（ｍ，３Ｈ）；１０．２８（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ32Ｈ27ＮＯ3：Ｃ，８１．１６；Ｈ，５．７５；Ｎ，２．９６。実測値：Ｃ，８０．９５；Ｈ，５．７６；Ｎ，３．０３。
【０２５７】
Ｎ−［４−メトキシ−３−（ナフチルメトキシ）フェニル］−２−ナフチルエタナミド（化合物例４８）を化合物例５２（上記の反応機構Ｘ）の作製に用いたのと同じ実験条件を用いて作製した。４−メトキシ−３−（２−ナフチルエトキシ）フェニルアミン（３５０ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）と１−ナフチルアセチルクロライド（２６０ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン（１ｍＬ，７．１７ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬのジメチルアセトアミドに入れて室温で１６時間撹拌して３７０ｍｇの生成物を（６６％）の収率でオフホワイトの針状物として得た。ｍｐ１６１−１６３℃。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，Ｍｅ2ＳＯ−ｄ6）δ３．６９（ｓ，３Ｈ）；４．１１（ｓ，２Ｈ）；５．４５（ｓ，２Ｈ）；６．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８）；７．１８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３，８．７）；７．４６−７．６４（ｍ，９Ｈ）；７．８２−８．１５（ｍ，６Ｈ）；１０．２０（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ30Ｈ25ＮＯ3：Ｃ，８０．５１；Ｈ，５．６３；Ｎ，３．１３。実測値：Ｃ，８０．３８；Ｈ，５．７０；Ｎ，３．１２。
【０２５８】
Ｎ−［４−メトキシ−３−（ナフチルメトキシ）フェニル］ナフチルホルムアミド（化合物例４７）を化合物例５２（上記の反応機構Ｘ）の作製に用いたのと同じ実験条件を用いて作製した。４−メトキシ−３−（２−ナフチルエトキシ）フェニルアミン（３５０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）と１−ナフトイルクロライド（２４０ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）をトリエチルアミン（１ｍＬ，７．１７ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬのジメチルアセトアミドを室温で１６時間攪拌し、酢酸エチル／へキサンから再結晶して２８０ｍｇの生成物を（５２％）の収率で白色針状物として得た。ｍｐ  １６１−１６３℃，1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、Ｍｅ2ＳＯ−ｄ6）δ３．７４（ｓ，２Ｈ）；７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８）；７．４３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３，８．７）；７．５１−７．７４（ｍ，９Ｈ）；７．９４−８．２１（ｍ，６Ｈ）；１０．４３（ｓ，１Ｈ）。分析：計算値：Ｃ29Ｈ23ＮＯ3：Ｃ，８０．３５；Ｈ；５．３５；Ｎ，３．２３。実測値：８０．２５；Ｈ，５．３９；Ｎ，３．１９。
【０２５９】
実施例１４
化合物例５３
化合物例５３を下記の反応機構XIVの方法に従って作製した。
【０２６０】
【化４７】
2004532187.tif 000048
【０２６１】
３−（アクリルアミノ）−５−ブロモ安息香酸メチルエステル（反応機構XIV）
２ａ対応する酸１ａ（５ｍｍｏｌ）、メチル３−アミノ−５−ブロモベンソエート（５ｍｍｏｌ）及び１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ，５．７ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）に入れた混合物を室温で２０時攪拌する。その全体を氷水混合物（１００ｇ）上に注ぎ、２時間放置する。生成物をメチレンクロライド（７５ｍＬ）で抽出する。有機物質を分離し、乾燥（Ｎａ2ＳＯ4無水物）して、溶媒を真空中で蒸発させる。生成物の外観によって、そのまま（固体）用い、あるいはＥｔＯＡｃ：へキサン１：２を溶出素とするシリカゲルを用いた。カラムクロマトグラフィーにさらにかける（オイル）。
【０２６２】
３−（アシルアミノ）−５−ブロモ安息香酸ヒドラジト（反応機構XIV，３ａ）。対応するエステル２ａ（５ｍｍｏｌ）ヒドラジン水和物（８ｍＬ）をプロパノール−２又はエタノール（１００ｍＬ）と水（１ｍＬ）の混合物に溶かした溶液を２０時間攪拌と還流を行う。溶媒を真空中で蒸発させてエタノールの最小量（５−８ｍＬ）でこね、濾過し、空気乾燥して黄色がかった白色の固体を得る。
【０２６３】
１−｛３−［（５−フェノル）バレロイルアミノ］−５−ブロモベンゾイル｝−４−（３、４−ジクロロフェニル）チオセミカルボジド（化合物例５３；反応機構XIVの５ａ）ヒドラジド３ａ（０．３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４ｍＬ）とＤＭＡ（１ｍＬ）の混合物に溶かした溶液を攪拌しつつイソチオシアネート４ａ（０．０４３ｍＬ，０．３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１ｍＬ）に溶かした溶液を一度に加える。全体を１８時間攪拌し、氷水に注ぐ。生成した残渣を濾過し、ＥｔＯＨ水溶液から再結晶して化合物５３を得る。
【０２６４】
実施例１５
ロタマーゼ（プロリルペプチジル  シス−トランスイソメラーゼ）活性阻害の測定
この分野では沢山のロタマーゼ基質が知られ、また公知のそれらから導き出すことができる。一般的には、基質をロタマーゼ活性を有する蛋白を含む試料と接触させ、この基質の変化を一定時間後に検出する。この基質の変化を検出する方法は選択した個々の基質によって変わるであろう。１つの方法はＫｉテストと命名されている（ハードリングら，Ｎａｔｕｒｅ，３４１：７５８−７６０（１９８９）及びホルトら、Ｊ．Ａｍ．（Ｌｅｍ．Ｓｏｃ．１１５：９９２３−９９３８参照）。モデル基質、Ｎ−サクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリド及びホルトら、Ｊ，Ａｍ．（ｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１５：９９２３−９９３８）中のアラニン−プロリン結合のシス−トランス異性化を、キモトリプシン結合アッセイで分光測光法で追跡する。キモトリプシンの作用は基質のトランス型からのみｐ−ニトロアニリンを放出する。ｐ−ニトロアニリンの量は、例えば、分光光度計で追跡することができる。ｐ−ニトロアニリンの存在を検出する他の方法を用いることもできる。阻害剤の異なる濃度ごとのこの反応の阻害度を求め、そのデータは阻害剤の濃度を関数として、Ｋｉ値を生みだす一次反応速度定数の変化として解析される。
【０２６５】
９５０ｍＬの氷冷アッセイ緩衝液（２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．８，１００ｍＭ  ＮａＣｌ）、１０μｌのＣｙＰＡ（２．５μＭ，１０ｍＭトリス塩酸ｐＨ７．５，１００ｍＭ  ＮａＣｌ，１ｍＭジチオスレイトール中）、２５μｌのキモトリプシン（５０ｍｇ／ｍｌ，１ｍＭ  ＨＣｌ中）、及び各種濃度でジメチルスルホキシドに溶かしたテスト化合物１０μｌをプラスチック製キュベットに入れた。これに５μｌの基質（５ｍｇ／ｍｌのサクシニル−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−パラニトロアニリド、トリフルオロエタノールに溶かした４７０ｍＭ  ＬｉＣｌに溶解）を加えて反応を開始させた。３９０ｎｍでの吸光度の時間変化を分光光度計を用いて９０秒間追跡し、反応速度定数を吸光度と時間のデータファイルから求めた。
【０２６６】
下記の表Ａ中の代表的化合物で得られたＩＣ50値は試料中のロタマーゼ活性の５０％を抑制する濃度を意味する。
【０２６７】
【表１】
2004532187.tif 000049
【０２６８】
値が低い程、化合物はＣｙＰと結合しあるいは相互作用する活性が大きい。用いられたサイクロフィリンはヒトリコンビナントＣｙＰＡであった。［ヨーら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２６９（１９９７）７８０−９５］。星印は、化合物がリコンビナンラットＣｙＰＡ−ＧＳＴ融合蛋白を用いて評価されたものであることを示している。ＣｙＰＡは標準のＰＣＲ法を用いて、次の配列：５’ＣＣＣ  ＣＣＣ  ＧＧＧ  ＡＧＴ  ＣＡＡ  ＣＣＣ  ＣＡＣ  ＣＧＴ  ＧＴＴ  ＣＴＴ  ＣＧＡ  ３’及び５’ＧＧＡ  ＧＡＴ  ＣＴＡ  ＧＡＧ  ＴＴＧ  ＴＣＣ  ＡＣＡ  ＧＴＣ  ＧＧＡ  ＧＡＴ  ＧＧＴ  ３’で初めて抗原刺激を受けたラット脳ｃＤＮＡから拡大されたものである。得られたフラグメント（５７３塩基対）はｐＣＲＩＩにクローン化し、拡大した。このＣｙＰ配列はＳｍａ１とＥｃｏＲ１で切り出し、ｐＧＥＸ２ＴＫ（ファルマシア社製）のＳｍａ１／ＥｃｏＲ１部位にクローン化した。このプラスミドＧＳＴ−ＣｙＰＡ融合蛋白を発現するＢＬ２１  Ｅ．ｃｏｌｉ細胞中に形質転換した。
【０２６９】
実施例１６
ロタマーゼ活性阻害の半自動化アッセイ
ロタマーゼ抑制を、上述のアッセイを改良した半自動化したマイクロタイタープレートアッセイを用いて定量した［キュラレッツら，Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．４４，５０２−５０８（１９９８）参照］。ＣｙＰＡ、ペプチド基質及びキモトリプシンの希釈は全て氷冷３５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衝液で行った。５０μｌのＣｙＰＡ溶液を、（ヒトリコンビナントＣｙＰの濃度が、ＣｙＰＡとテスト化合物がなく、ペプチド基質がキモトリプシンのみによって分解される、触媒作用のない対照反応と比較して反応速度が３倍になるように調整されている。）ガラス製のマイクロタイターウエルプレート内の５０μｌのペプチド基質溶液（Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリド，０．１６ｍｇ／ｍｌ）に加える。Ｂａｃｋｍａｎ  Ｍｕｌｔｉｍｅｋ  ９６（商標名）自動化９６−チャンネルピペッターを用いて、５μｌのテスト化合物溶液あるいはＤＭＳＯブランクを各々のウエルに加え、４℃で３０分間プレインキュベーションした。１００μｌのキモトリプシン溶液（１ｍｇ／ｍｌ）を各ウエルに加え、３９０ｎｍの吸光度の経時変化を４℃に維持したＢｉｏ  Ｒａｄ  Ｕｌｔｒａｍａｒｋ  プレートリーダーで９−１０分間追跡し、反応速度定数を吸光度と時間のデータファイルから決定した。
【０２７０】
代表的な化合物について得られたＩＣ50値を下記の表Ｂに示す。用いたサイクロフィリンはヒトリコンビナートＣｙＰＡであった。星印は、化合物がリコンビナントラットＣｙＰＡ−ＧＳＴ融合蛋白を用いて評価されたものであることを示している。（前の実施例１５参照）。
【０２７１】
【表２】
2004532187.tif 000050
【０２７２】
一方、ＣｙＰＡがこれらの実施例で使用されたが、他のＣｙＰ蛋白と替えることもできる。同様の方法を、ＦＫＢＰなどの他のイムノフィリンに用いてＦＫＢＰ結合活性の有無を実証するのに用いることができる。
【０２７３】
本発明の化合物の神経活性の測定
前述のように、本発明の化合物の生物学的活性のアッセイに用いることができる。これらのアッセイはインビボあるいはインビトロの方法であってもよい。以下の実施例は、有毒な取扱いからの神経細胞を保護する化合物の能力と、神経細胞の成長、再生あるいは神経突起の伸長を誘発する化合物の能力のアッセイを示すものである。
【０２７４】
実施例１７
脊髄神経節調製における免疫染色と神経突起派生の定量化
成年マウスから脊髄神経節（ＤＲＧ）を顕微解剖により分取できる。成年マウス（１５−２０ｇ）からのＤＲＧを取付けた脊髄を取除いた。脊髄神経を顕微解剖ばさみで切放し、ＤＲＧが自由になるまで余計な物質を切取る。鋭い顕微解剖ばさみで末梢神経に横方向に１−２ｍｍを残して切れ目を入れ、外植片をペトリ皿に入れ、植付培地で覆う。全てのＤＲＧの採取が終ったら、脊髄神経を約１ｍｍの長さに整える。この外植片を円形カバーグラス上の３０μｌの縮退成長因子マトリゲル中に埋込み、３５ｍｍ培養皿内に置く。この感覚神経節外植片を次いで２ｍｌの培地で覆う。化合物、医薬又は対照液を１０×株から加え、３７℃、５％ＣＯ2、温度９５％で４８時間インキュベートする。培養物をＰＢＳで２回洗い、１０％ホルマリンで３０分間固定する。固定された培養物をＰＢＳで２回洗い、染色及び分析まで冷蔵されているＰＢＳ中に保存する。
【０２７５】
染色のために、培養物を、４℃で回転させながらブロック緩衝液（５％馬血清、５％ヤギ血清、１％トリトンＸ、ＰＢＳ  ｐＨ＝７．４）中で一夜インキュベートする。ベータチューブリン（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）に対する１次抗体をブロック緩衝液で希釈し、培養物を４℃で一夜インキュベートする。調製物をＰＢＳで５回洗って、ブロック緩衡液で希釈した２次抗体（Ａｌｅｘａ  ４８８  ヤギ抗マウス）を４℃で一夜接触させる。調製物をＰＢＳで５回洗って、４℃で一夜放置する。培養物にカバーグラスをかけ、付着させた脊髄神経の端部からの神経突起の全長を市販の顕微鏡録画像解析ソフトウェアを用いて測定する。全神経突起の長さを測って、ベヒクルで処理した対照ＤＲＧにあるそれらと比較する。本発明の化合物は、ベヒクルで処理した対照の調製物と比較して神経突起の数及び／又は平均長がかなり増加している。
【０２７６】
実施例１８
脊髄スライス調製物での神経保護アッセイ
全ての培養物は、市販のマックイルワイン組織切断器を用いて調製した、生後８日（Ｐδ）のスパークドーリー種ラットの３２５ミクロンの厚さの腰部脊髄スライスから得られたものである。各実験は、ウエル毎に４つの異なる動物からのスライスを入れた２枚の６ウエルプレートからなっている。培地の交換は３−４日毎に行った。培養物は、培養１週間後に化合物（１０μＭ）を加えた２００μＭのＴＨＡ［Ｌ（−）−スレオ−３−ヒドロキシアスパラギン酸、Ｔｏｃｒｉｓ  Ｃｏｏｋｓｏｎ  Ｉｎｃ．，ボールウィン，ミズーリ州］で処理した。対照物は、０．１％  ＤＭＳＯをベヒクルとする未処理試料であった。ＴＨＡ対照は０．１％ＤＭＳＯをベヒクルとするＴＨＡ処理試料であった。２つのウエルは条件によって用いた。新しいＴＨＡと化合物での培地交換は１回行った。実験は６−８日で停止して、薬物処理（インビトロで全日数１３−１５，ＤＩＶ）し、４％パラホルムアルデヒド／０．１Ｍ  リン酸緩衝液で３０分間処理して固定し、障害の程度を目視評価した。
【０２７７】
スライスは冷１００％メタノールで１０分間処理して滲透可能にし、次いで、０．１Ｍリン酸緩衡液で３回洗浄して染色ウエルに移した。このスライスを１０％ウマ血清／０．０５Ｍトリス緩衡生理食塩溶液でブロックした。１次抗体を２％ＨＳ／ＴＢＳ中で１：５０００で抗神経フィラメントＨ（非リン酸化）（ＳＭＩ−３２）抗体と４℃で一夜インキュベートした。ラット吸収抗マウス２次抗体とスライス染色用色原体としてのジアミノベンジジン（ＤＡＢ）を用いたベクタスタインＡＢＣエリートキットを用いた。スライスをスライド上に取付け、カバーグラスをＤＰＸ固定液でシールした。
【０２７８】
生存ニューロンの定量をツアイスアキシオバート顕微鏡で行った。ニューロンの生存は、各半球体中の中心管の腹側を処理して無傷のニューロン細胞体を観察して決定した。これはVII、VIII及びIX層に相当している。各半球体は個々に数えた。統計は、条件の異なる３つの実験の最小値に基いてスタービュー（商標名）ソフトウエアで行い、有意差はＴＨＡ対照と比較して決定した。保護のパーセントは、次の式によって生存ニューロンの平均数から決定した。（薬剤処理したもの−ＴＨＡ対照／未処理対照−ＴＨＡ対照）。
【０２７９】
未処理対照培養物は、培養間隔の末端での脊髄スライスの腹側半球体ごとのＳＭＩ−３２免疫活性ニューロンの平均値が２６．４±４．２（平均±標準誤差）であり、一方、ＴＨＡ処理対照培養物は細胞数が１８．９７±２．０４で有意な減少を示した。化合物例４３をＴＨＡ処理培養物に加えることによって、ＴＨＡの誘発する細胞死（２８．１４±２．４細胞数／腹側半球体）から完全に保護される。この発明の他の化合物も等しく対照培養物との比較で生存ニューロン数をかなり増加させることが期待される。
【０２８０】
実施例１９
分光測定法による大振幅ミトコンドリア膨脹アッセイにおけるミトコンドリア透過性変化の阻害
スプラークドーリーラットの雄からブロエッケマイヤーら，Ｊ．Ｂｒｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：１０５−１１３（１９８５）に記載のようにして新鮮なラット肝臓ミトコンドリアを調製する。１０ｍＭコハク酸ナトリウム、３ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、５μＭロテノン、０．５μｇ／ｍＬオリゴマイシン、１０μＭ  ＣａＣｌ2及び３：１の比のマンニトール／シュクロースを含むアッセイ緩衡液中で室温でインキュベートし、３００ミリオスモルの浸透強度を得る。５μｌの単離したミトコンドリア調製物と５μｌの化合物又はベヒクル溶液を各種濃度で加え、５４０ｎｍでの光学密度（ＯＤ）を１分間読取ってベースラインを得る。１０μｌのルテニウムレッド溶液を加えて最終濃度を１μＭとし、ＯＤ540をさらに１分間追跡する。２５μｌのフルオロカルボニルシアナイド溶液を加えて最終濃度を４μＭとし、ＯＤ540をさらに４−５分間追跡する。ミトコンドリア透過性変化が、ミトコンドリアの膨脹として正味の吸光度の漸進的落下として顕在化される。本発明の化合物のミトコンドリア透過性変化と膨脹を抑制する能力はＩＣ50値として表わすことができる。この発明の化合物はＯＤ540における正味の吸光度の漸進的落下を有意に抑制し、投与量依存のやり方でのミトコンドリア透過性変化を抑制する。
【０２８１】
実施例２０
脳卒中の動物モデルでのインビボでの保護効果
体重２６０−２９０ｇの雄のスプラークドーリー種ラットを、虚血症で誘発される脳損傷に対する本発明の化合物の保護効果の定量に用いる。この化合物を５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衡生理含塩溶液又は他の生理学的に許容できるベヒクルに溶かし、ｐＨを投与前に７．４に調整する。化合物を静脈投与して６０分後のボーラス投与、例えば１００ｍｇ／ｋｇでの実験的な大脳動脈内閉塞（ＭＣＡＯ）後直ちに２０ｍｇ／ｋｇ／ｈｒの注入速度で４時間投与する。一過性ＭＣＡＯの管膣内繊維モデルはこの業界では充分に確立されている［例えば、リューら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４０８：２３３−２３９（２０００）参照］。概略は、１．５％ハロタン麻酔して、ラットの通常の頸動脈を内、外頸動脈分岐部のレベルで露出する。この外頸動脈（ＥＣＡ）とその分枝を焼灼し、切断する。先端の鈍い３−０単繊維ナイロン縫合糸片を、ＥＣＡ断部に最も近い端部から内頸動脈（ＩＣＡ）内に導入する。この縫合糸を頸動脈管内をＭＣＡの基部まで前進させ、血流全体をブロックする。２時間の閉塞が終って、ラットを再麻酔し、縫合糸をＥＣＡ断端まで注意深く引戻し再灌流させる。この手術の間、動物の体温は加熱毛布を用いて３７．０℃に維持する。この実験動物を２２時間の再灌流後にと殺する。脳を摘出して７個の２ｍｍの厚さの冠状スライスに切断し、１％  ２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロリド（ＴＴＣ）で染色し、次いでコンピューター補助デジタル画像解析システムを用いて画像化する。虚血障害を、ＴＴＣ染色が完全に欠如している梗塞組織の体積に基づいて定量する。各ラットの全梗塞体質並びに皮質及び皮質下の部分の梗塞体積を統計的解析に用いる。平均偏差の１因子解析を処理効果の比較に用いることができる。グループ間の差は統計学的にｐ＜０．０５で有意であると考えられる。この発明の化合物の投与によって、ベヒクル処理動物に比べて梗塞体積は有意に減少する。
【０２８２】
実施例２１
心筋梗塞の動物モデルにおけるインビボでの保護効果
実験で心筋梗塞を誘発する外科的手順をプロトコルはこの業界で充分に確立されている［例えば、ククレジャら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９５：１２３−１３１（１９９９）参照］。概略は、雄のスプラークドーリー種ラット（２２５−３００ｇ）を６５ｍｇ／ｋｇのペントバルビタールナトリウム塩の腹膜内投与で麻酔する。気管を切開し、動物を３５％Ｏ2／６５％Ｎ2を１ストロークの体積が２ｍｌの通気装置を用いて５０ストローク／分で機械的に通気し、加熱毛布で３７．０℃に保つ。心電計の導線を皮下電極に取付けて肢I、II又はIIIの導線をモニターする。右頸動脈にカニューレを挿入し、実験の間を通じて動脈圧をモニターする圧力変換器に接続し、右静脈にはカニューレを挿入して本発明の化合物の静脈投与ができるようにする。化合物は５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衡生理食塩溶液又は他の生理学的に許容できるべヒクルで溶解し、投与前にｐＨを７．４に調整する。化合物は、例えば１００ｍｇ／ｋｇのボーラス投与での実験的な冠状動脈閉塞の２０分前に静脈投与し、ボーラス投与後直ちに２０ｍｇ／ｋｇ／ｈｒの注入速度で１４０分間投与する。左胸の開胸手術を施して第４番目の助間スペースと心臓の間を露出する。外傷性針に通した５−０絹縫合糸を房室間の溝と頂の間の左冠動脈の途中あたりまで通し、この縫合糸の端部をビニルチューブ片を通してスネアを形成する。冠状動脈はこのスネアで堅く結んで固定されることによって一時的に閉塞される。心筋虚血は、露出した心臓の局部的チアノーゼ、心筋の運動機能低下、あるいは心電図でのＳ−Ｔ部分の上昇／下降もしくはＴ波の逆転を目で見ることによって確認できる。スネアは３０分後に開放し、再灌流は、心筋のチアノーゼが起こった部分の充血や血圧の血流力学的改善を目で見ることによって確認される。９０分間の再灌流後スネアを再び堅く縛り、頸静脈カテーテルに約１ｍｌのエバンスブルー染料をボーラスバイアルとして注入する。この動物を直ちにと殺し、心臓を摘出して冷凍し、頂部から底部に２ｍｍの厚さの６−８枚の横断スライスに切断する。損傷のおそれのある部分はエバンスブルーの染色がないことによって決定される。このスライスは次いで１％ＴＴＣ溶液でインキュベートすることによって生存組織が目に見えるようにすることができる。梗塞のおそれがある体積と面積は市販の画像解析システムを用いて定量する。この発明の化合物を投与することによって、ベヒクルのみで処理された動物に比べて梗塞体積が投与量に応じて有意な減少をもたらす。
【０２８３】
実施例２２
黒質と線状体を結ぶドーパミン作動性繊維による除神経線状体のインビボでの神経機能回復
パーキンソン病のＭＰＴＰ障害マウスモデルを本発明の化合物のインビボでの効能を示すのに用いた。ＭＰＴＰ（Ｎ−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン）は黒質と線状体を結ぶドーパミン作動性ニューロン、すなわち、ヒトパーキンソン病において退化する細胞に特異的な全身にまわる神経毒である。ＭＰＴＰをマウスに投与すると、中終脳のドーパミン作動性突起の選択的部分破壊と、中脳ドーパミン作動性ニューロンの主要前脳ターゲットである体の線状体におけるドーパミンとドーパミン作動性繊維の喪失がなされる。
【０２８４】
若い成年の雄であるＣＤ１アルビ／マウス（ハーラン・スプラークドーリー種：２２−２５ｇ）に、生理含塩水にフリーベースで３．４ｍｇ／ｍｌの濃度に溶かしたドーパミン細胞特異性細胞毒である４−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ塩酸塩、フリーベース計算で３４ｍｇ／ｋｇ）を毎日１回１−５日間腹膜内に投与した。
【０２８５】
実験化合物は、ＭＰＴＰの投与の１時間前に、毎日１回１−５日間（イントラリピッド中１０ｍｇ／ｋｇ、皮下）投与した。
【０２８６】
７日目に動物を１０％中性に緩衝したホルマリンで心臓を通して灌流した。線条体組織の矢状縫合部を冷凍したミクロトーム上で２０μｍの厚さに切断し、ポリクローナルＴＨ抗体を用いて、遊離チロシンヒドロラーゼ免疫細胞化学用に加工し（ペルフリーズ，１：２５００，４夜冷凍）、アビジン：ビオチンパーオキシダーゼ法（ベクターエリートキット）でさらに加工し、ジアミノベンジジン（ＤＡＢ−ＨＣｌ，ポリサイエンス）で可視化した。
【０２８７】
中央線条体内のＴＨ繊維密度の盲検を６３０×倍で実施した。各マウスの線条体に対し、中央線条体における５つの代表的な１００μｍ×１００μｍの範囲をデジタルビデオカメラを用いて写真撮影した。ＴＨ陽性突起と末端によって覆われた試料の範囲の割合を画像解析プログラムを用いて計算した（“Ｓｉｍｐｌｅ”，Ｃｏｍｐｉｘ  Ｉｎｃ．，ピッツバーグ，ＰＡ）。線状体の神経支配の平均を各グループについて計算した。ＨＰＴＰ障害に基づく線条体の求心路遮断の倍率を、ＭＰＴＰ／べヒクル処理ケースで得られた線条体の神経支配の実測値をベヒクル／ベヒクルグループでの線条体の神経支配の平均値で割って評価し、損失％で表わす。本発明の化合物の相対的効力は、線条体の神経支配の保護％、すなわち、障害のみの動物で観察された損失を越える、障害／化合物処理動物の線条体におけるＴＨ陽性繊維の密度に対する程度として表わしたものである。
【０２８８】
上記のプロトコルに従って本発明の化合物例４２で処理された実験動物では、線条体のチロシンヒドロラーゼ−免疫反応性繊維の４４．１％を保護した。化合物例４４の処理では、対照動物に関し、線条体のチロシンヒドロラーゼ−免疫反応性繊維の７２．４％の保護をもたらした。この発明の化合物のＭＰＴＰ障害の黒質と線状体を結ぶドーパミン作動性繊維の再生をひき起こす能力を評価するために、マウスを１−５日の間毎日１回ＭＰＴＰで処理し、そして、化合物例４２を８−１２日の間毎日１回投与した。マウスを１８日目に潅流し、脳組織を前記のように処理し、分析した。障害を受けた／化合物で治療した動物の線状体におけるＴＨ陽性繊維の密度は障害を受けただけの動物で見られた紛失を８８％超えていた。この発明の他の化合物の投与も、神経毒による障害から線状体のドーパミン作動性神経支配密度の有意な保護をもたらすことが期待される。
【０２８９】
実施例２３
インビボでの発毛
本化合物が癌の化学療法で引き起こされた脱毛症から保護する能力の評価に有用な実験方法はこの業界で確立されている［例えばマウラーら，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５０（４）：１４３３−４１（１９９７）参照］。さらに、男性型脱毛症患者での脱毛頭皮での毛髪成長を誘発する化合物の能力を評価するのに有用な実験モデルも報告されている［シントフら，Ｉｎｔ．］．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１９４：１２５−１３４（２０００）。実験化合物の毛髪をよみがえらせる性質を評価する簡単な方法は以前に本発明者らによって開示されている。例えば米国特許第６，１９４，４４０Ｂ１号明細書参照。ここで引用しているこれらの、そして他の出版物は、式I又はIIの化合物の毛髪成長促進と脱毛遅延性の評価に利用することができる。次の方法が示されている。
【０２９０】
７−８週令のＣ５７Ｂ１／６株のマウスを個別に小屋に入れる。軽くエーテル麻酔して、後４半部の下部約２ｃｍ×２ｃｍの範囲をカミソリで全ての毛を取除く。この皮膚が引掻かれたり、切られたり、こすられたりしないよう注意する。皮膚がピンク色にあることは全ての動物の毛髪成長サイクルが休止期にあることを示している。１０匹の動物のグループを２０％プロピレングリコールベヒクル又は濃度をべヒクルｍｌ当り０．１μＭから１００μＭまで変えた本発明の化合物で局所的に処理する。化合物は局所的に週３回投与し、毛の成長を盲目の観察者によって０（成長なし）から５（カミソリで剃った部位全体の毛の完全な成長）まで毎週評価する。本発明の化合物は、投与量に応じて毛の成長を誘発し、べヒクルで処理した動物のカミソリで剃った部分と比べてカミソリで剃った部分が毛で覆われるまでの時間が有意に短くする。
【０２９１】
前述のように、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものと解されるべきでない。むしろ、これらの実施例は、当業者がこの発明の全体の開示から理解するであろう単なる例示の態様にすぎない。このように記述されてきた本発明は、多くのやり方で変更しうることが明らかであろう。このような変更は、本発明の精神と範囲から出発されるものと考えるべきでなく、全てのこのような変更は特許請求の範囲に含まれる。
【０２９２】
引用文献
以下のあるいは上述の本文に引用されている文献はこの発明の如何なる態様を作り、用いるのに利用することができる。一方、特定の用途と文献は前述で論じており、これは如何なる特定の文献の使用を限定としてとらえるべきではない。全ての文献はその全体が、言及されている本明細書に含まれるものである。
Ａｐｆｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．６３４：７−１２（１９９４）；
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Ｂｅｌｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４８：４９５−５０３（１９９４）；
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Ｅｎｎａ，ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎ．Ｙ．，（及び２０００年１２月までの増補版）；
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Ｉｗａｂｕｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｃｉ．９：６４−６９（１９９５）；
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Ｋｏｆｒｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０：６１２７−６１３４（１９９１）；
Ｋｏｆｒｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１４：２６７０−２６７５（１９９２）；
Ｋｕｋｒｅｊａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９５：１２３−１３１（１９９９）；
Ｋｕｌｌｅｒｔｚ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．４４：５０２−５０８（１９９８）；
Ｌａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２９：２６８−２７０（１９８７）；
Ｌｅｄｕｃｑ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３３６：５０１−５０６（１９９８）；
Ｌｅｍａｓｔｅｒｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１７４：１５９−１６５（１９９７）；
Ｌｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３：１７７０−９（２０００）；
Ｌｕ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４０８：２３３−２３９（２０００）；
Ｌｙｏｎｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９１：３１９１−３１９５（１９９４）；
Ｍａｒｃｈｅｔｔｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４：１１５５−１１６０（１９９６）；
Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ  Ｆｌｏｗ  Ｍｅｔａｂ．１９：７３６−４１（１９９９）；
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ＭｃＭａｈｈｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．５：６１６−６２４（１９９５）；
Ｍｕｃｋｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３１：７８４８−７８５４（１９９２）；
Ｐａｌａｃｉｏｓ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２８：３３７（１９８２）；Ｐａｕｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４４：７１９−３４（１９９４）；
Ｐｅｒｋｉｎｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４２：８４３−８４８（１９９８）
Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１８th  ｅｄｉｔｉｏｎ（１９９０）；
Ｓｃｈｏｎｂｒｕｎｎｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６：３６３０−３６３５（１９９１）；
Ｓｉｎｔｏｖ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１９４：１２５−１３４（２０００）；
Ｓｎｙｄｅｒ，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１：３２−３７（１９９５）；
Ｓｔｅｉｎｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９４：２０１９−２０２４（１９９７）；
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Ｙａｍａｍｏｔｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１０２（１９９４）１６０−１６４；
Ｙｏｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２６９：７８０−７９５（１９９７）；
Ｚａｈｎｅｒ  ａｎｄ  Ｓｃｈｕｌｔｈｅｏｉｓｓ，Ｊ．Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｌ．６１：２８２−９０（１９８７）；
Ｚａｍｚａｍｉ，ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．３８４：５３−５７（１９９６）。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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