(57)【要約】本発明においては、エストロゲン−欠乏性−誘発された疾病の治療のための新規薬剤が記載されている。これは、ＥＲβ−選択的エストロゲン及びＥＲα−選択的抗エストロゲン又はＳＥＲＭ（選択的エストロゲン受容体モジュレーター）から成る組合せ製剤である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）エストロゲン受容体β（ＥＲβ）に対して選択的である少なくとも１つのアゴニスト、及び
（ｂ）少なくとも、抗エストロゲン及び／又は少なくとも１つの選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）を含んで成る医薬組合せ製剤。
【請求項２】
成分（ａ）及び（ｂ）を、通常の分散形で含む請求項１記載の製剤。
【請求項３】
成分（ａ）及び（ｂ）を、個々の場合、異なる分散形で含む請求項１記載の製剤。
【請求項４】
前記ＥＲβアンタゴニスト（ａ）が、３，１６−ジヒドロキシエストラ−１，３，５（１０）−トリエン誘導体、８α−Ｈ， ９β−Ｈ， １０α−Ｈ， １３α−Ｈ， １４β−Ｈ−ゴナン誘導体、好ましくはエント−１３−アルキルゴナンから誘導されたそれらの誘導体、８β−置換されたエストラ−１， ３， ５ （１０）−トリエン誘導体及びゴナ−１， ３， ５ （１０）−トリエン誘導体から選択される請求項１〜３のいずれか１項記載の製剤。
【請求項５】
成分（ｂ）が、エストロゲン受容体α（ＥＲα）に対して選択的であるアンタゴニスト、特に末梢選択的ＥＲα−選択的アンタゴニストを含む請求項１〜４のいずれか１項記載の製剤。
【請求項６】
成分（ｂ）が、ＥＲαに対して選択的であるＳＥＲＭを含む請求項１〜４のいずれか１項記載の製剤。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項記載の組合せ製剤の組織−選択的又は器官−選択的エストロゲン治療のためへの使用。
【請求項８】
閉経近く及び閉経後症状の予防又は処理、ホルモン置換、特に卵巣機能不全の場合、ホルモン−欠乏性−誘発された症状の予防又は処理、ホルモン−欠乏性−誘発された骨質量損失及びオステオポローシスの予防及び処理、心血管及び血管疾患の予防及び処理、ホルモンー欠乏性−誘発された及び神経変性疾患の予防及び処理、ホルモン−欠乏性−誘発された記憶及び学習能力の障害の予防及び処理、及び免疫系の疾病の予防及び処理のためである請求項７記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ＥＲβ−特異的アゴニスト及び抗エストロゲン又はＳＥＲＭ、特にＥＲα−選択的抗エストロゲン、特に末梢選択的ＥＲα−選択的抗エストロゲン及び／又はＥＲα−選択的ＳＥＲＭを含んで成る組合せ製剤に関する。
【０００２】
ホルモン−欠乏性−誘発された症状、例えばエストロゲン標的器官ののぼせ及びアトピーの処理、及び閉経近くの女性及び閉経後の女性における骨質量の損失の防止のためのエストロゲンの効率は容易に確かめられ、そして一般的に受け入れられている。閉経後の女性又はいくつかの他の手段により引き起こされる卵巣機能不全の女性におけるエストロゲン置換療法が、非エストロゲン−処理された女性に比較して、心血管疾患の危険性を低めることはまた、十分に記録されている（Ｇｒａｄｙなど． （１９９２）， Ａｎｎ． Ｉｎｔｅｒｎ． Ｍｅｄ． １１７， １０１６−１０３７）。
【０００３】
より最近の研究はさらに、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病に対するエストロゲンの保護作用（Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ （１９９７）， Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ４８ （Ｓｕｐｐｌ ７）， ｐ．２７−３５； Ｂｉｒｇｅ （１９９７）， Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ４８ （Ｓｕｐｐｌ ７）， ｐ．３６−４１）、脳機能、例えば記憶及び学習能力に関する保護作用（ＭｃＥｗｅｎなど． （１９９７）， Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ４８ （Ｓｕｐｐｌ ７）， ｐ．８−１５； Ｓｈｅｒｗｉｎ （１９９７）， Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ４８ （Ｓｕｐｐｌ ７）， ｐ．２１−２６）、及びホルモン−欠乏性−誘発された気分変動に対する保護作用（Ｈａｌｂｒｅｉｃｈ （１９９７）， Ｎｅｕｌｏｇｙ ４８ （Ｓｕｐｐｌ １７）， ｐ．１６−２０）を確かめている。
【０００４】
従来のエストロゲン又はホルモン置換療法においては、標準のエストロゲン、たとえばエストラジオール、及びウマ尿から成る接合されたエストロゲンが、単独で又はゲスターゲンと組合して使用される。
【０００５】
子宮内膜癌の高められた危険性をもたらす、子宮内膜に対する標準エストロゲンの刺激的作用のために（Ｈａｒｌａｐ， Ｓ． （１９９２）， Ａｍ． Ｊ． Ｏｂｓｔｅｔ． Ｇｙｎｅｃｏｌ． １６６， １９８６−１９９２）、主にエストロゲン／ゲスターゲン組合せ製剤がホルモン置換療法に使用される。そのエストロゲン／ゲスターゲン組合せ製剤は、子宮内膜の肥大を回避するが、しかし所望しない循環内月経出血の発生がまた、その組合せと連結される。
【０００６】
脳、骨及び血管システムに対してエストロゲン様効果を有するが、しかし子宮内膜に対する増殖効果を有さない物質であるエストロゲンは、エストロゲン／ゲスターゲン組合せ製剤に変わるものを提供する。
【０００７】
選択的エストロゲンの所望するプロフィールを部分的に満たす種類の物質は、いわゆる選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）である（Ｒ． Ｆ． Ｋａｕｆｆｍａｎｎ， Ｈ．Ｕ． Ｂｒｙａｎｔ （１９９５）， ＤＮ＠Ｐ ８ （９）， ５３１−５３９）。この場合、エストロゲン受容体サブタイプＥＲαの部分的アゴニスト／部分的アンタゴニストが存在する。それらのＳＥＲＭは、純粋なアンタゴニストとしてＥＲβに対して作用する（ＭｃＩｎｎｅｒｎｅｙなど． （１９９８）， Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ． １３９， ４５１３−４５２２）。それらの抗エストロゲン性質のために、ＳＥＲＭＳは、急性閉経後症状、例えばのぼせの治療に対して無効果である。
【０００８】
エストロゲンは、受容体タンパク質、すなわちエストロゲン受容体（ＥＲ）を通してそれらの生理学的作用を発揮する。この場合、これは、リガンドにより活性化され得る核−位置転写因子である。数年前までは、エストロゲンは単一の受容体を通してそれらの作用を発揮すると思われていた。しかしながら、最近、ＥＲβは、第２サブタイプのエストロゲン受容体として発見されている（Ｋｕｉｐｅｒなど． （１９９６）， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ９３， ５９２５−５９３０； Ｍｏｓｓｅｌｍａｎ， Ｄｉｊｋｅｍａ （１９９６）， Ｆｅｂｓ Ｌｅｔｔｅｒｓ ３９２， ４９−５３； Ｔｒｅｍｂｌａｙなど． （１９９７）， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １１， ３５３−３６５）。
【０００９】
ＥＲβ発現パターンは、ＥＲαのそのパターンとは異なる（Ｋｕｉｐｅｒなど． （１９９６）、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８， ８６３−８７０）。従って、ＥＲβは、ＥＲαよりもラット前立腺において卓越し（Ｃｈａｎｇ， Ｐｒｉｎｓ （１９９９），Ｔｈｅ Ｐｒｏｓｔａｔｅ ４０， １１５−１２４）、ところがＥＲαはラット子宮において卓越する。脳においては、個々の場合、２種のＥＲ−サブタイプの１つのみが発現される領域が同定されている（Ｓｈｕｇｒｕｅなど． （１９９６）， Ｓｔｅｒｏｉｄｓ ６１， ６７８−６８１； Ｌｉなど． （１９９７）， Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ６６， ６３−６７）。ＥＲβは、認識工程及び“気分”のために重要であると思われる領域において発現される（Ｓｈｕｇｒｕｅなど． （１９９７）， Ｊ． Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ３８８， ５０７−５２５）。
【００１０】
ＥＲβを優先的に発現する他の器官は、胃腸管（Ｃａｍｐｂｅｌｌ−Ｔｈａｍｓｏｎ （１９９７）， Ｂｉｏｃｈ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍ． ２４０， ４７８−４８３）、尿生殖器（Ｋｕｉｐｅｒなど． （１９９６）， Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８， ８６３−８７０）、卵巣の顆粒層（Ｂｙｅｒｓなど． （１９９７）， Ｍｏｌ． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ． １７２−１８２）、及び心筋（Ｇｕｓｔａｆｓｓｏｎ （Ｎｉｃｅ， Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ １９９９））である。しかしながら、ＥＲαは、肝臓、腎臓及び下垂体において優先的に発現される（Ｓｈｕｇｒｕｅなど． （１９９８）， Ｓｔｅｒｏｉｄｓ ６３， ４９８−５０４）。ＥＲαは子宮において優先する（Ｗａｎｇなど． （１９９９）， Ｂｉｏｌ． ｏｆ Ｒｅｐｒｏｄ． ６１， ９５５−９６４）。
【００１１】
骨（Ｋｕｉｐｅｒなど． （１９９８）， Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １９， ２５３−２８６）及び血管においては、ＥＲα及びＥＲβの両者が発現される（Ｌａｆｒａｔｉなど． （１９９７）， Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ． ３， ５４５−４８）。
【００１２】
ＥＲは、リガンド−活性化された転写因子としてそれらの作用を発揮する。ホルモンの結合の後、受容体ニ量体化が行われる。細胞におけるＥＲα及び／又はＥＲβの発現に基づいて、ホモダイマー又はへテロダイマーＥＲα及びＥＲβが形成される（Ｃｏｗｌｅｙなど． （１９９７）， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７２， １９８５８−１９８６２）。ダイマーは、標的遺伝子のプロモーターにおける特定の配列、すなわち“エストロゲン応答要素”ＥＲＥに結合する（Ｋｕｍａｒ， Ｃｈａｍｂｏｎ （１９８８）， Ｃｅｌｌ ５５， １４５−１５６； Ｋｌｏｉｎ−Ｈｉｔｐｏｓｓなど． （１９８６）， Ｃｅｌｌ ４６， １０５３−１０６１）。ＥＲＥへの受容体ダイマーの結合は、必須転写因子の補充及び転写の開始を引き起こす。
【００１３】
興味あることには、ＥＲα及びＥＲβの両者を発現する細胞においては、エストラジオール−誘発された転写活性化が、ＥＲαのみを発現する細胞に比較して低められる。そのような細胞においては、ＥＲβは、ＥＲα−刺激されたトランス活性化のリプレッサーとして作用する（Ｈａｌｌ， ＭｃＤｏｎｎｅｌｌ （１９９９）， Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４０， ５５６６−５５７８）。ＥＲβ−ノックアウトマウスにおいて、子宮におけるエストロゲン投与に対する応答が野生型マウスにおいてよりも、より強く明白であることは、トランス活性化に関してＥＲαのモジュレーターとしてのＥＲβのこの機能に寄与する（Ｇｕｓｔａｆｓｓｏｎ， Ｓｔｅａｍｂｏａｔ Ｓｐｒｉｎｇｓ （Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０００））。
【００１４】
転写体の活性化因子としてのＥＲの作用の他に、それらは、他の転写因子によるそれらの活性化を阻害することによって、他の因子の発現に対する制御を発揮する。従って、エストロゲンがサイトカインインターロイキン−６（ＩＬ−６）の発現を阻害することは示されている（Ｐｏｔｔｒａｔｚなど． （１９９３）， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ９３， ９４４−９５０； Ｓｔｅｉｎ， Ｙｏｕｎｇ （１９９５）， Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ． １５， ４９７１−４９７９）。他の炎症−誘発された遺伝子はまた、エストロゲン、例えばラットの血管におけるＣＯＸＩＩ−発現により阻害される（Ｆｒｉｔｚｅｍｅｉｅｒ， Ｈｅｇｅｌｅ−Ｈａｒｔｕｎｇ （１９９９）， Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， Ｏｅｔｔｅｌ， Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇｅｒ Ｅｄｉｔｏｒｓ， １３５／１１， ２１， １−９４）。
【００１５】
ＩＬ−６は、免疫及び炎症反応、並びに破骨細胞形成の中心メディエーターとして考慮される（Ｓｅｈｇａｌ （１９９２）， Ｒｅｓ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ７２４−７３４； Ｊｏｎｅｓ （１９９４）， Ｃｌｉｎ． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ． ４０， ７０３−７１３）。エストロゲンは、骨髄の破骨細胞及び支質細胞によるＩＬ−６生成を制御する。ＩＬ−６は破骨細胞補充及び成熟を刺激するので、エストロゲンはＩＬ−６生成を阻害することによって、この工程に対する阻害効果を有する。
【００１６】
ＩＬ−６生成のこの阻害は、ＩＬ−６遺伝子の発現を阻害することによって行われる（Ｐｏｔｔｒａｔｚなど． （１９９３）， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓ． ９２， ９４４−９５０； Ｓｔｅｉｎ， Ｙｏｕｎｇ （１９９５）， Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １５， ４９７１−４９７９）。エストロゲンのＥＲ−介在性阻害作用は、転写因子ＮＦκＢの活性の阻害により誘発される。この転写因子は、炎症シグナルにより活性化される（Ｔｈａｎｏｓ， Ｍａｎｉａｔｉｓ （１９９５）， Ｃｅｌｌ ８０， ５２９−５３２； Ｄｉｄｏｎａｔｏなど． （１９９７）， Ｎａｔｕｒｅ ３８８， ５４８−５５４）。ＥＲがＮＦκＢと直接的に相互作用し、そして炎症誘発された遺伝子、例えばＩＬ−６のプロモーターにおけるＮＦκＢ結合部位へのその結合を阻止することが予測される（Ｒａｙなど． （１９９７）， ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ． ４０９， ７９−８５）。
【００１７】
ＩＬ−６レポーター遺伝子アッセイは、Ｐｏｔｔｒａｔｚなど． （１９９３）， 前記により記載されている。リガンド−活性化されたＥＲは、種々の細胞系において、プロモーターにおけるＩＬ−６遺伝子のＮＦκＢ−結合部位を含むレポーター遺伝子の活性を阻害した（ＰｏｔｔｒａｔｚなどＪ．Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ９３， ９４４−９５０）。
これまでのエストロゲン治療の欠点はしばしば、低い器官選択性にある。本発明の基本的な目的は、従来技術の欠点が少なくとも部分的に排除されるエストロゲン治療のための製剤の開発から成る。
【００１８】
驚くべきことには、器官−選択的エストロゲン治療は、ＥＲβ−選択的アゴニスト及び抗エストロゲン又は選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）を含む組合せ製剤の投与により可能であることが見出された。その組合せ製剤は、エストロゲン−欠乏性−誘発された疾病の治療又は予防のために適切である。製剤中の２種の成分は、通常の分散形（例えば、２種の成分を有する製剤）で、又はそれぞれ別々の分散形（個々の場合、１つの成分を有する２種の製剤）で、投与され得る。
【００１９】
本発明の組合せ製剤は、器官−選択的エストロゲン治療のために非常に適切であり、そして存在する治療よりも明らかに卓越している。
本発明の好ましい態様においては、ＥＲα−選択的アンタゴニスト、特に末梢−選択的ＥＲα−選択的アンタゴニストは、抗エストロゲンとして使用される。もう１つの好ましい態様においては、ＥＲα−選択的ＳＥＲＭが使用される。
薬剤によれば、器官系又は組織、例えば骨、血管系、脳機能及び免疫システムの成分に対する少なくとも非常に完全なエストロゲン作用が達成されるが、ところが器官系、例えば子宮、肝臓、乳腺及び下垂体に対するエストロゲン作用はほとんどが又はまったく誘発されない。
【００２０】
この新規薬剤は、子宮に対する低められた作用及び出血の回避を通して、エストロゲン又はエストロゲン／ゲスターゲン組み合わせによる従来のエストロゲン又はホルモン置換療法よりも卓越している。この薬剤は、エストロゲン−欠乏性−誘発された骨質量損失からのより完全な保護を通して、ＳＥＲＭ又はＥＲβリガンドによる単一療法よりも卓越している。本明細書に記載される薬剤は、改良された“治療窓”（骨−保護用量と及び子宮−刺激用量との間の明白な解離）を通して、純粋な抗エストロゲンと“標準の”エストロゲン、例えばエストラジオールとの組み合わせにより卓越している。
【００２１】
ＥＲβ−選択的エストロゲンとＥＲα−選択的抗エストロゲン又はＳＥＲＭとの特定の組み合わせにより、ＥＲβを独占的に又は優性的に発現する細胞及び器官系、例えば脳においては、ＥＲβ−依存性エストロゲン作用が、製剤中のＥＲβ−選択的エストロゲン成分を通して誘発されることが達成される。ＥＲαがＥＲβよりも優先している子宮においては、ＥＲα−選択的ＳＥＲＭ又は抗エストロゲン及びＥＲβ−アゴニストは同じ方向に抗増殖作用を有する。ＥＲα及びＥＲβの両者が発現される器官、例えば骨においては、ＥＲα−選択的ＳＥＲＭ又は抗エストロゲン及びＥＲβエストロゲンがエストロゲン−欠乏性−誘発された骨質量の損失に対する保護に関しての追加の作用を有する。また、血管系におけるＥＲα−選択的ＳＥＲＭ又は抗エストロゲン及びＥＲβアゴニストは同じ方向に抗増殖及び抗炎症作用を発揮し、そして従って、血管疾患、例えば動脈硬化症に対する保護に関して、相乗作用を有する。
【００２２】
本発明は、新規選択的エストロゲン、ＥＲβ−選択的エストロゲン及び抗エストロゲン、好ましくはいわゆるＳＥＲＭ（Ｓ．Ｒ． Ｋａｕｆｆｍａｎ， Ｈ．Ｕ． Ｂｒｙａｎｔ （１９９５）， ＤＮ＠Ｐ８（９），５３１−５３９）から成る組合せ製剤、その生成、治療的適用及び医薬的分散形に関する。ＥＲβ−選択的エストロゲンとＳＥＲＭ、又はラット前立腺受容体に比較して、ラット子宮受容体に対して、又はＥＲβ、特に末梢−選択的活性であるそれらの化合物に比較して、ＥＲαに対して高い親和性を有し、すなわち血液−脳バリヤーを通過しない抗エストロゲンとの組み合わせが特に好ましい。
【００２３】
ＥＲα−選択的ＳＥＲＭの例は、本出願のために請求されるラロキシフェン（ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ）（Ｂａｒｋｈｅｌｍなど． （１９９８）， Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ５４， １０５−１１２）である。末梢選択的抗エストロゲンの例は、ＺＭ１８２７８０、すなわち１１β−フルオロ−７α−（１４， １４， １５， １５， １５−ペンタフルオロ−６−メチル−１０−チア−６−アザペンタデシル）−エストラ−１， ３， ５ （１０）−トリエン−３， １７βジオール、及び他の７α−アルキル−エストラトリエン（ＰＣＴ／ＥＰ９７／０４５５１７号）、及び１１β−フルオロ−７α−（１３， １３， １４， １４， １５， １５， １６， １６， １６−ノナフルオロ−６−メチル−６−アザヘキサデシル）−エストラ−１， ３， ５（１０）−トリエン−３， １７β−ジオールである。
【００２４】
末梢選択的ＳＥＲＭの例は、５−（４−｛４［（ＲＳ）−（４， ４， ５， ５， ５−ペンタフルオロペンチル）スルフェニル］ペンチルオキシ｝フェニル）−６−フェニル−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−ベンゾシクロヘプテン−２−オールである。末梢選択的エストロゲン及びＳＥＲＭは、本明細書に記載される薬剤の成分であり、そして本出願のために請求されている。
【００２５】
また、他のＳＥＲＭ、例えば１４α，１７α−エタノール−１１β−｛４−［５−（２−ピリジンメチルスルホニル）ペンチルオキシ］フェニル｝−１，３，５（１０）エストラトリエン−３，１７β−ジオール（１１β−置換されたステロイド）、ＴＳＥ４２４及び他の２−フェニルインドール（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｈｏｍｅ），ＥＭ６５２、ＥＭ８００、ＥＰ３３６１５６（ランソホキシフェン、Ｐｆｉｚｅｒ；Ｈｕａなど． （２０００）， Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４１， １３３８−１３４４）は、組合せ製剤の成分であり得、そして本出願のために請求されている。
【００２６】
組合せ製剤の成分として、ＥＲβ−選択的エストロゲンは、本発明の対象であり、そしてラット子宮に比較してラット前立腺のエストロゲン受容体への高い親和性、又はＥＲαに比較してＥＲβへの高い親和性により区別される。これは、初期特許出願に記載される物質、すなわち“ＥＳＲβ−アフィン内（ａｆｆｉｎｅ ｅｎｔ）−ステロイド；１６−ＯＨ−ステロイド；ノルステロイド；８−β−置換されたステロイド”を含んで成る。
【００２７】
本出願はまた、組合せ製剤の可能な成分として、種々の特許出願に記載される次の他の選択的エストロゲンを含んで成る：例えば、ａ）ＡＳＴＲＡ、新規エストロゲン、ＷＯ９７／０８１８８号、９５０２９２１−１号、ＰＣＴ／ＳＥ９６／０１０２８号；ｂ）Ｓｕｍｉｔｏｍｏ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ．， ＪＰ １１２９２８７２号；ｃ）アンドロステンジオール及びそのプロドラッグ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ ｆｏｒ Ａｎｄｒｏｓｔｅｎｅ ３β、１７β−Ｄｉｏｌ， ＷＯ９９／６３９７３号及びｄ）ＥＲαに比較してＥＲβに対して高い親和性を有するフィトエストロゲン。
【００２８】
ＥＲβ−アンアゴニストは好ましくは、３，１６−ジヒドロキシエストラ−１，３，５（１０）−トリエン誘導体、８α−Ｈ， ９β−Ｈ， １０α−Ｈ， １３α−Ｈ， １４β−Ｈ−ゴナン誘導体、好ましくはエント−１３−アルキルゴナンから誘導されたそれらの誘導体、８β−置換されたエストラ−１， ３， ５ （１０）−トリエン誘導体及びゴナ−１， ３， ５ （１０）−トリエン誘導体から選択される。特に好ましいＥＲβアンタゴニストの例は、ＰＣＲ／ＥＰ００／０１０７３号、ＤＥ１９９１７９３０．１号、ＤＥ１９９４１１０５．１号及びＤＥ１００１９１６７．３号に記載されている。特に、本明細書に示される一般構造式及び好ましい個々の化合物に関して、それらの特許の開示を参照のこと。
【００２９】
本発明の製剤の選択的エストロゲン作用は、サブタイプ−特異的リガンドによるＥＲα及びＥＲβの異なった組織分布に基づいて達成され得る。インビトロ受容体結合試験において、ＥＲαに比較して、ＥＲβに対する選択性を有する物質は、Ｋｕｉｐｅｒなど． （１９９６）， Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８， ８６３−８７０）により記載されている。次に、フィトエストロゲン　ゲニスチン及びＤＨＥＡ−代謝物アンドロステンジオールは、ＥＲβ−選択性を有する。次の他のＥＲβ−選択的エストロゲンが種々の特許に記載されている：ＥＲβ−アフィン　エント−ステロイド；１６−ＯＨステロイド；ノルステロイド；８−β−置換されたステロイド。
【００３０】
本出願は、製剤の可能な成分として、種々の特許出願に記載される次の他の選択的エストロゲン及びプロドラッグを含んで成る：例えば、ａ）ＡＳＴＲＡ、新規エストロゲン、ＷＯ９７／０８１８８号、９５０２９２１−１号、ＰＣＴ／ＳＥ９６／０１０２８号；ｂ）Ｓｕｍｉｔｏｍｏ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ．， ＪＰ １１２９２８７２号；ｃ）アンドロステンジオール及びそのプロドラッグ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ ｆｏｒ Ａｎｄｒｏｓｔｅｎｅ ３β、１７β−Ｄｉｏｌ， ＷＯ９９／６３９７３号及びｄ）ＥＲα、例えばゲニステインに比較してＥＲβに対して高い親和性を有するフィトエストロゲン。
【００３１】
Ｗｅｓｔｅｒｎｌｉｎｄなど． （１９９８） は、一方では、骨に対する、及び他方では、雌ラットの生殖器官に対する１６α−ヒドロキシエストロンの特異的作用を記載する（Ｗｅｓｔｅｒｌｉｎｄなど． （１９９８）， Ｊ． Ｂｏｎｅ ａｎｄ Ｍｉｎｅｒａｌ Ｒｅｓ． １３， １０２３−１０３１）。
【００３２】
本発明者の研究は、１６α−ヒドロキシエストロンがヒトエストロゲン受容体β（ＥＲβ）に対してよりも、ヒトエストロゲン受容体α（ＥＲα）に対して３倍以上結合する事実を提供した。ラット前立腺エストロゲン受容体におけるその物質のＲＢＡ価は、ラット子宮エストロゲン受容体におけるその物質のＲＢＡ値よりも５倍良好である。Ｗｅｓｔｅｒｌｉｎｄにより記載される物質の解離は、本発明者の発見によれば、ＥＲαに比較して、ＥＲβに対するその選択性に寄与する。１６α−ヒドロキエストロンは、本明細書に記載され、そして本出願に請求される製剤の可能性ある成分である。
【００３３】
本発明の組合せ製剤は特に、組織−選択的又は器官−選択的エストロゲン治療、例えば閉経近く及び閉経後症状の予防又は処理、ホルモン置換、特に卵巣機能不全の場合、ホルモン−欠乏性−誘発された症状の予防又は処理、ホルモン−欠乏性−誘発された骨質量損失及びオステオポローシスの予防及び処理、心血管及び血管疾患の予防及び処理、ホルモンー欠乏性−誘発された及び神経変性疾患の予防及び処理、ホルモン−欠乏性−誘発された記憶及び学習能力の障害の予防及び処理、及び免疫系の疾病の予防及び処理のために適切である。
【００３４】
新規薬剤は特に、閉経近く及び閉経後症状、特にのぼせ、睡眠障害、被刺激性、気分変動、失禁、膣アトピー及びホルモン−欠乏性―誘発された精神的疾病の処理のために適切である。製剤はまた、ホルモン置換、及び他の場合に引き起こされる手術的、医薬的又は卵巣機能不全におけるホルモン−欠乏性−誘発された症状の治療のために適切である。
【００３５】
さらに、製剤は、ホルモン−欠乏性−誘発された骨質量損失及びオステオポローシスを妨げるために、心血管疾患、特に血管疾患、例えば動脈硬化症を妨げるために、及びホルモン−欠乏性−誘発された神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、及び記憶及び学習能力のホルモン−欠乏性−誘発された障害を妨げるために使用され得る。
さらに、製剤は、免疫系の炎症性疾患、特に自己免疫疾患、例えばリュウマチ様関節炎の処理のために使用され得る。
【００３６】
薬剤は、女性及び男性の両者のエストロゲン−欠乏性−誘発された疾病の治療及び予防のために適切である。
男性においては、薬剤は、ホルモン−欠乏性−誘発された骨質量損失及びオステオポローシスの治療、心血管疾患、特に血管疾患、例えば動脈硬化症の予防、ホルモン−欠乏性−誘発された神経変性疾病、例えばアルツハイマー病、及び記憶及び学習能力のホルモン−欠乏性−誘発された障害の予防、及び前立腺過形成の治療のために特に適切である。
さらに、薬剤は、炎症性疾患及び免疫系の疾患、特に自己免疫疾患、例えばリウマチ様関節炎を処理するために使用され得る。
【００３７】
本発明をもたらす研究によれば、ＥＲβがＮＦκｂ−制御された受容体遺伝子を阻害できることが決定された。ＮＦκｂ−制御された受容体遺伝子を用いてのレポーター遺伝子アッセイにおいては、ＳＥＲＭが、それがＥＲαを通してそれらの作用を発揮する場合、部分的アンタゴニストとしてのそれらの価値を証明しており、すなわちそれらは、レポーター遺伝子活性のエストロゲン様阻害を生成し、そしてエストラジオールの存在下でアンタゴニスト（活性トランス抑制に関する）作用を発揮する（図１）。この作用は、抗吸収（骨−保護）作用によりインビボで影響される。
【００３８】
しかしながら、ＳＥＲＭがＥＲβを通して作用する場合、それらは、ＮＦκｂ−制御されたレポーター遺伝子に対していずれのアゴニスト作用も発揮しない（図２）。ＥＲα及びＥＲβの同時トランスフェクションにおいては、ＥＲβはＳＥＲＭのＥＲα−介在性アゴニスト作用を阻害する（図３）。従って、エストロゲン−欠乏性−誘発された骨質量損失に対する完全な保護は、ＥＲα及びＥＲαが骨において発現されるので、インビボにおいては、ＳＥＲＭのみによっては達成され得ない。しかしながらＮＦκｂ−制御されたプロモーターの完全な制御は、ＥＲα及びＥＲβが試験細胞に同時−突き刺される場合、ＳＥＲＭ及びＥＲβ−特異的エストロゲンの同時投与により、驚くべきには達成される。
【００３９】
ＥＲα及びＥＲβを発現する、培養された細胞におけるＳＥＲＭ及びＥＲβ−選択的エストロゲンのＮＦκｂ−制御されたプロモーターの阻害に関する付加作用は、骨細胞はまた、損なわれていない生物においてＥＲα及びＥＲβの両者を発現するので、インビボにおいては、付加的抗吸収（骨保護）作用を包含する。さらに、インビボでのＥＲβ−特異的エストロゲン及びＳＥＲＭの組み合わせが、標的器官の細胞がＥＲα及びＥＲβの両者を発現する場合、炎症−誘発された遺伝子の阻害に対して、付加的に又は相乗的に作用することになっている。これは、例えば心血管系に関して、真実である。
【００４０】
さらに、ＳＥＲＭ、特にＥＲα−選択的にＳＥＲＭは、それらがエストロゲン−欠乏性−誘発された骨質量損傷を阻害し、そしてこの場合、子宮成長の刺激をほとんど又は全く誘発しないので、この場合、選択的エストロゲン治療を可能にする。それらの骨−保護（抗吸収）作用は、破骨細胞−刺激性サイトカインの発現の阻害に基づかれている。それらは、骨細胞におけるＥＲαを通しての作用を発揮する（ＮＦκｂの阻害）。ＳＥＲＭは、抗エストロゲンとして子宮に対して作用し；それらは、子宮のエストロゲン−刺激された成長、特に上皮の増殖を阻害する。
【００４１】
それらは、ＥＲαを通してこの作用を発揮する。ＳＥＲＭはまた、乳癌細胞に対して抗エストロゲン−及び増殖−阻害作用を発揮する。さらに、末梢選択的でないＳＥＲＭは、脳におけるエストロゲン−誘発された遺伝子に対して抗エストロゲン作用を示す。ＥＲβ−選択的アゴニストとの組合せにおいては、これは器官−選択的又は組織−選択的作用をもたらす。従って、例えば、保護エストロゲン様作用は、予測される乳房及び子宮に対して所望しない増殖効果を与えないで、達成される。
【００４２】
投与されるべき本発明の医薬組合せ製剤中の成分（ａ）及び（ｂ）の量は、所望する効果が達成される量であり得る。処理されるべき状態及び投与の型に基づいて、投与されるべき成分（ａ）の量は好ましくは、１日当たり、０．０１μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、特に好ましくは、０．０４μｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。ヒトにおいては、これは、例えば毎日、０．８μｇ〜３００ｍｇ、好ましくは３．２μｇ〜８０ｍｇに対応する。投与されるべき成分（ｂ）の量は、好ましくは、１日当たり０．０１μｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、特に好ましくは０．０４μｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇである。本発明の医薬組合せ製剤の用量単位は好ましくは、成分（ａ）及び（ｂ）のそれぞれを、０．８μｇ〜８００ｍｇ、好ましくは０．６μｇ〜２００ｍｇ含む。
【００４３】
本発明の組合せ製剤における２種の成分（ａ）：（ｂ）の比は、広い範囲で変化し、そして好ましくは１：９９〜９９：１（重量）、特に好ましくは１０：９０〜２０：１０（重量）である。所望する刺激に基づいて、投与されるべき活性成分の量を、上記に示された量範囲の上限〜下限から選択することが好都合である。結果的に、活性成分の選択性はさらに高められ得る。
【００４４】
成分（ａ）及び（ｂ）の投与は、同時に又は連続的に行われ得る。特に、活性成分を交互に投与することが可能である。適切な投与プロトコールは例えば、皮下投与又は経口投与である。活性成分は１日数回、例えば１日当たり１〜１０回、及び数日間にわたって、例えば１〜６０日間、好ましくは１〜３０日間、投与され得る。
医薬組合せ製剤は、任意には、薬理学的に共通するビークル、アジュバンド又は稀釈剤、及び任意には他の薬理学的又は医薬的活性物質、例えばゲスタゲンと混合して活性成分を含む。医薬剤の生成は既知の手段で行われる。
【００４５】
ビークル及びアジュバンドとして、医薬、化粧及び関連する分野におけるアジュバンドとして次の引用文献において推薦されるか又は示されるそれらが適切である：Ｕｌｌｍａｎｎ’ｓ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｖｏｌｕｍｅ ４ （１９５３）， ｐ． １〜３９； Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｖｏｌｕｍｅ ５２ （１９６３）， ｐ．９１８， Ｃｚｃｔｓｃｈ−Ｌｉｎｄｅｎｗａｌｄにより発行される、Ａｄｊｕｒａｎｔ， ｆｏｒ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｆｉｅｌｄ； Ｐｈａｒｍ． Ｉｎｄ．， Ｈｏ．２ （１９６１）， ｐ．７２， 及びＤｒ． Ｈ． Ｐ． Ｆｉｅｄｌｅｒ， Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ａｄｊｕｒａｎｔｓ ｆｏｒ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ， Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｆｉｅｌｄｓ， Ｃａｎｔｏｒ ＫＧ， Ａｕｌｅｒｄｏｒｆ ｉｎ Ｗｕｒｔｔｅｍｂｅｒｇ １９７１。
【００４６】
化合物は、経口又は非経口、例えば腹腔内、筋肉内、皮下又は経皮内投与され得る。化合物はまた、組織に移植され得る。
経口は投与に関しては、カプセル、ピル、被覆された錠剤、等が適切である。活性成分の他に、用量単位は、医薬的に適合できるビークル、例えばスターチ、糖、ソルビトール、ゼラチン、保湿剤、珪酸、タルク、等を含むことができる。
非経口投与に関しては、活性成分は医薬的に適合できる稀釈剤に溶解されるか、又は懸濁され得る。稀釈剤として、油が、溶解剤、界面活性剤、沈殿防止剤又は乳化剤の添加を伴なって又はそれを伴わないで、非常にしばしば使用される。使用される油の例は、オリーブ油、ピーナツ油、綿花種子油、大豆油、ヒマシ油及びゴマ油である。
【００４７】
化合物はまた、活性成分の遅延された開放性が可能にされるよう配合され得るデポット注射又は移植片製剤の形で使用され得る。
移植片は、不活性材料として、例えば生分解性ポリマー又は合成シリコーン、例えばゴム状物質を含むことができる。さらに、活性成分は、例えば経皮投与のための軟膏剤中に導入され得る。
【００４８】
局部投与のために活性成分と共に充填される膣内リング（例、膣リング）又は子宮内システム（例えば、ペッサリー、コイル、ＩＵＤ、Ｍｉｒｅｎａ（商標））の製造に関しては、種々のポリマー、例えば珪素ポリマー、エチレン酢酸ビニル、ポリエチレン又はポリプロピレンが適切である。
活性成分の良好な生物利用性を達成するためには、化合物はまた、シクロデキストリン包接体として配合され得る。このためには、化合物は、α−、β−、又はγ−シクロデキストリン又はその誘導体と反応せしめられる（ＰＣＴ／ＥＰ９５／０２６５６号）。
本発明によれば、活性成分はまた、リポソームにより封入され得る。
【００４９】
実施例．
方法論：
インビトロでの抗エストロゲン性：
ＳＥＲＭの抗エストロゲン作用を、ＭＶＬＮ細胞におけるトランス活性化試験により決定する。この場合、それらは、Ｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎ−ＥＲＥ−ルシフェラーゼレポーター遺伝子と共に適切な態様で突き刺されたＭＣＦ−７乳癌細胞である（Ｄｅｍｉｒｐｅｎｃｅなど． （１９９３）， Ｊ． Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｍｏ． Ｂｉｏｌ． ４６， ３５５−３６４）。
【００５０】
エストロゲン受容体結合研究：
新規選択的エストロゲン（ＥＲβ−リガンド）及びＳＥＲＭの結合親和性を、ラット前立腺及びラット子宮のエストロゲン受容体調製におけるリガンドとしての３Ｈ−エストラジオールの使用による競争実験において試験した。前立腺シトソールの調製、及び前記前立腺シトソールによるエストロゲン受容体試験を、Ｔｅｓｔａｓなど．（１９８１）（Ｔｅｓｔａｓ， Ｊ． など． （１９８１）， Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １０９， １２８７−１２８９） による記載のようにして行った。
【００５１】
ラット子宮シトソールの調製、及びＥＲ−包含シトソールによる受容体試験を、基本的に、Ｆｕｈｒｍａｎｎなど． （１９９５）（Ｆｕｈｒｍａｎｎ， Ｕ． など．（１９９５）， Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ ５１， ４５−５２） による記載のようないくらかの改良点を伴なって、Ｓｔａｃｋ ａｎｄ Ｇｏｒｓｋｉ， １９８５ （Ｓｔａｃｋ， Ｇｏｒｓｋｉ １９８５， Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １１７， ２０２４−２０３２） による記載のようにして行った。
【００５２】
組合せ製剤への適用のための本特許に請求されるＥＲβ−リガンドは、ラット子宮よりもラット前立腺のエストロゲン受容体に対する高い結合親和性を有する。この場合、ＥＲβはＥＲαよりもラット前立腺において優先し、そしてＥＲαはＥＲβよりもラット子宮において優先すると思われる。これによれば、本発明者は、前立腺及び子宮受容体への結合の割合がヒトＥＲβ及びラットＥＲαへの相対的結合親和性（ＲＢＡ）の比率に定量的に対応することを見出している（Ｋｕｉｐｅｒなど． （１９９６）， Ｅｎｄｏｔｒｉｎｏｌｏｇｙ １３８， ９６３−８７０に従って）。
さらに、組織−選択的作用に関する“前立腺−ＥＲ対子宮−ＥＲ−試験システム”の予測を、インビボ研究において確かめた。前立腺−ＥＲを好む物質は、骨及び子宮作用に関して、インビボで解離される。
【００５３】
ＪＦκｂ−誘発されたプロモーターの抑制：
レポーター遺伝子アッセイを、Ｆｒｉｔｚｅｍｅｉｅｒ， ｈｅｇｅｌｅ−Ｈａｒｔｕｎｇ （１９９９）， Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．， Ｏｅｔｔｅｌ， Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇｅｒ Ｅｄｉｔｏｒｓ １３５／ＩＩ， ２１ ， １−９４により記載のようにして、Ｕ２−ＯＳヒト骨肉腫細胞において行った。細胞を、ＮＦκｂ−結合部位を含むプロモーターの制御下に存在するレポーター遺伝子により瞬間的態様で突き刺した。さらに、細胞を、ｈＥＲα及び／又はｈＥＲβのための発現ベクターにより突き刺した。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、ＥＲα−陽性細胞におけるＮＦκｂ−制御されたレポーター遺伝子の発現に対する試験物質の作用を示す。
【図２】
図２は、ＥＲβ−陽性細胞におけるＮＦκｂ−制御されたレポーター遺伝子の発現に対する試験物質の作用を示す。
【図３】
図３は、ＥＲα−陽性細胞及びＥＲβ−陽性細胞におけるＮＦκｂ−制御された遺伝子の発現に対する試験物質又は試験物質の組合せの作用を示す。
【図４】
図４は、ＥＲα−陽性細胞及びＥＲβ−陽性細胞におけるＮＦκｂ−制御された遺伝子の発現に対する試験物質又は試験物質の組合せの作用を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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