(57)【要約】本発明は、ビオチンまたはビオチン誘導体との少なくとも一つの共有結合を有し、抗血栓活性を有する新規な合成ポリサッカライド、およびこのポリサッカライドを中和するためのアビジンまたはストレプトアビジンを使用する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビオチンまたはビオチン誘導体と少なくとも一つの共有結合を示すことを特徴とする、抗血栓活性を有する合成ポリサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩。
【請求項２】
式：
【化１】
2004509902.tif 000051
［式中：
−　波線はピラノース環の平面図形の下側または上側に位置する結合を意味し、
【化２】
2004509902.tif 000052
Ｐｏは、ｎ個の同一または異なったモノサッカライドユニットを含み、そのアノマー炭素を介してＰｅに結合しているポリサッカライドを意味し、
【化３】
2004509902.tif 000053
は、ヘキソース類、ペントース類および対応するデオキシ糖類から選択されるピラノース構造を有するモノサッカライドユニットの図式による表示であり、このユニットはそのアノマー炭素を介してもう一つのモノサッカライドユニットに結合していて、このユニットのヒドロキシ基はＲ１基により置換されており、Ｒ１は以下の定義するとおりであり、
−　Ｐｅは構造：
【化４】
2004509902.tif 000054
のペンタサッカライドを表し、
−　ｈは１または２に等しく、
−　ｎは整数であり、０〜２５のいずれかの値をとることができ、
−　Ｒ１は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３　−基を表し、
−　Ｒ２は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３　−基を表し、
−　Ｒ３は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結または（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表し、
−　Ｒ４は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表すか、あるいはＲ４は−Ｏ−ＣＨ２−架橋を構成し、−ＣＨ２−基は同じ環のカルボキシ官能基を有する炭素原子に結合しており；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４置換基の少なくとも一つは−Ｔ−Ｂｉｏｔ基を表すものと理解され、
−　Ｗは酸素原子またはメチレン基を表し、
−　Ｔは：
ＮＨ、
【化５】
2004509902.tif 000055
または、
【化６】
2004509902.tif 000056
［式中、ｊおよびｋは同一または異なって、１〜１０のいずれかの値をとり得る整数である］
から選択される連結の一つを表し；
−Ｂｉｏｔは基：
【化７】
2004509902.tif 000057
を表す］
の請求項１に記載のポリサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩。
【請求項３】
式（Ｉ．１）：
【化８】
2004509902.tif 000058
［式中：
【化９】
2004509902.tif 000059
は（Ｉ）で定義したようにそれらのアノマー炭素を介してＰｅに結合しているポリサッカライド類Ｐｏの具体的な群を意味し、
【化１０】
2004509902.tif 000060
は（Ｉ）で定義したとおりであり、
−　Ｒ１基は（Ｉ）について定義したとおりであり、同じモノサッカライドに対しては同一でも異なっていてもよく、
−　［ ］ｍの中にあるモノサッカライドはｍ回繰り返され、［ ］ｔの中にあるモノサッカライドはｔ回繰り返され、［ ］ｐの中にあるモノサッカライドはｐ回繰り返され、
−　ｍは１から５まで変化する整数であり、ｔは０から２４まで変化する整数であり、ｐは０から２４まで変化する整数であり、１≦ｍ＋ｔ＋ｐ≦２５であると理解される］
の請求項１または２のいずれかに記載のポリサッカライドおよびそれらの医薬的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４置換基の一つだけが−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結を表し、ＴおよびＢｉｏｔは（Ｉ）で定義したとおりである、請求項３に記載のポリサッカライド類。
【請求項５】
式（Ｉ．２）：
【化１１】
2004509902.tif 000061
［式中：
−　Ｔは：
ＮＨ、
【化１２】
2004509902.tif 000062
または
【化１３】
2004509902.tif 000063
［式中、ｊおよびｋは同一または異なって、１〜１０のいずれかの値をとり得る整数である］
から選択される連結を表し；
−　Ｂｉｏｔは基：
【化１４】
2004509902.tif 000064
を表し、
−　Ｐｅは構造：
【化１５】
2004509902.tif 000065
［式中：
−　Ｒ１は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ３は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表し、
−　Ｒ４は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表すか、あるい　はＲ４は−Ｏ−ＣＨ２−架橋を構成し、−ＣＨ２−基は同じ環のカルボキシ官　能基を有する炭素原子に結合しており、
−　Ｗは酸素原子またはメチレン基を表す］
のペンタサッカライドを表す］
の請求項１〜４のいずれか一つに記載のヘキサデカサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩。
【請求項６】
式（Ｉ．３）：
【化１６】
2004509902.tif 000066
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＷは（Ｉ）で定義したとおりである］
の請求項１および２のいずれか一つに記載のペンタサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４置換基の一つだけが（Ｉ）で定義したとおりのＴおよびＢｉｏｔを有する−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結を表すことを特徴とする請求項６に記載のペンタサッカライド類。
【請求項８】
式（Ｉ．４）：
【化１７】
2004509902.tif 000067
［式中：
−　Ｔは：
ＮＨ、
【化１８】
2004509902.tif 000068
または
【化１９】
2004509902.tif 000069
［式中、ｊおよびｋは同一または異なって、１〜１０のいずれかの値をとり得る整数である］
から選択される一つの連結を表し；
−　Ｂｉｏｔは基：
【化２０】
2004509902.tif 000070
を表し、
−　Ｒ１は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ３は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表し、
−　Ｒ４は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表すか、あるいはＲ４は−Ｏ−ＣＨ２−架橋を構成し、その−ＣＨ２−基は同じ環のカルボキシ官能基を有する炭素原子に結合しており、
−　Ｗは酸素原子またはメチレン基を表す］
の請求項６および７のいずれか一つに記載のペンタサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩。
【請求項９】
次の：
−　メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−ビオチンアミド−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
−　メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−［６−（ビオチンアミド）ヘキサミド］−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
−　メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−［６−（６−ビオチンアミド−ヘキサミド）ヘキサミド］−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
−　メチル （２−ビオチンアミド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
−　メチル （２−［Ｎ−（６−ビオチンアミドヘキサノイル）］−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
−　メチル （２−［６−（６−ビオチンアミドヘキサミド）ヘキサミド］−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩
から選択される、請求項１および２のいずれかに記載のポリサッカライド類。
【請求項１０】
任意に１以上の不活性で適当な賦形剤との組合せで、請求項１〜９のいずれか一つに記載のポリサッカライドを有効成分として含む医薬組成物。
【請求項１１】
不安定狭心症、脳出血、血管形成術後再狭窄、動脈内膜除去または血管内人工装具の挿入を含むアテローム性動脈硬化症および糖尿病に関連する血栓塞栓症障害、あるいは血栓崩壊後再血栓症、梗塞形成、虚血性起源の痴呆、末梢性動脈疾患、血液透析または心房性細動に関連する血栓塞栓症障害、あるいは肺塞栓のような、静脈起源の血栓塞栓症病状の治療または予防のために用いられ、観察された血栓症合併症、例えば次の外科的手術、腫瘍の成長または細菌性、ウィルス性もしくは酵素性活性剤により誘発される凝固妨害を治療または予防するための大動脈冠動脈バイパス用の脈管用人工装具の使用中のような、とりわけ、心臓血管疾患および脳血管系の障害の間に見られる凝固系のホメオスタシスの変異に起因する病状における請求項１０に記載の医薬組成物の使用。
【請求項１２】
人工装具をカバーするための請求項１〜９のいずれか一つに記載のポリサッカライドの使用。
【請求項１３】
ポーラスなバルーンを用いて行われる動脈内膜除去術の間の補助剤としての、請求項１〜９のいずれか一つに記載のポリサッカライドの使用。
【請求項１４】
請求項１〜９のいずれか一つに記載のポリサッカライド類を中和することを可能にならしめることを特徴とする、アビジンまたはストレプトアビジンを用いる方法。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか一つに記載のポリサッカライド類の中和を意図した医薬の製造におけるアビジンまたはストレプトアビジンの使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ビオチンまたはビオチン誘導体と少なくとも一つの共有結合を示し、ヘパリンの抗凝固および抗血栓薬理活性を有する新規な合成オリゴ−およびポリサッカライド類に関する。
ヘパリンは、血液凝固カスケードに含まれる２つの酵素、すなわち因子Ｘａおよび因子ＩＩａ（またはトロンビン）の阻害に、とりわけ、抗トロンビンＩＩＩ（ＡＴＩＩＩ）を介して触媒作用を及ぼす。低分子量ヘパリン類（ＬＭＷＨｓ）を含む製剤は、４〜３０のモノサッカライド類を形成する連鎖を含み、トロンビンに関してよりも因子Ｘａに関して、より選択的な作用特性を有する。
【０００２】
因子Ｘａの阻害は、抗トロンビン−結合ドメイン（ドメイン−Ａ）を介するヘパリンのＡＴ ＩＩＩへの付着を必要とし、因子ＩＩａ（トロンビン）の阻害はドメイン−Ａを介するＡＴ ＩＩＩへの付着、および十分に確立していない結合ドメイン（ドメイン−Ｔ）を介するトロンビンへの付着を必要とする。
ヘパリンのドメイン−Ａドメインに対応する合成オリゴサッカライド類は公知である。それらは、例えば、ＥＰ８４９９９およびＥＰ５２９７１５特許、ＷＯ９９／３６４２８として公開された特許出願、ならびに刊行物Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９８， ６， １５０９−１５１６に開示されている。これらの合成オリゴサッカライド類は抗トロンビンＩＩＩを介して、トロンビンに関してどんな作用も有さない凝固因子Ｘａを選択的に阻害する特性を有する。それらは静脈血栓症における抗血栓活性を発揮する。
【０００３】
ＡＴ ＩＩＩの活性化を介してトロンビンおよび因子Ｘａを阻害することができる合成オリゴサッカライド類は、ＷＯ９８／０３５５４およびＷＯ９９／３６４４３として公開された特許出願に開示されている。
新規な生物学的に活性な硫酸化およびアルキル化ポリサッカライド誘導体は、これらの特許出願に開示されている。それらは特に抗凝固剤であり、抗血栓剤である。とりわけ、これらの硫酸化およびアルキル化ポリサッカライドは、糖質基幹により保持されているアルキル基および硫酸基の配置に依存して、強力な抗血栓および抗凝固剤であり得ることを示した。より一般的には、ポリサッカライドシークエンスを調製することにより、ヘパリンの抗凝固および抗血栓薬理学的特性を示す非常に活性な物質を得るために、ＧＡＧｓタイプの活性を正確に調節することが可能であることが見出された。ヘパリンと比較すれば、それらは特異的な構造を有し、血小板因子４、ヘパリンの血小板減少効果の原因と反応しない特長を示す。
【０００４】
しかしながら、ＷＯ９８／０３５５４およびＷＯ９９／３６４４３として公開された特許出願ならびにＥＰ５２９７１５特許に開示されているいくつかの物質のヒトの治療における使用は、特にこれらの物質が長い半減期を有すれば、問題であることを明らかにしている。上記の物質を用いる血栓症の予防または治療の分野で、もたらされる出血を予防する間、血液の流動性は再度確立されるか、または維持されなければならない。
これは出血が、治療中である患者においてどんな偶発的な原因でも引き起こされ得ることが周知だからである。抗血栓治療中の患者に外科的に介在する必要もある。さらに、抗凝固剤は、いくつかの外科的処置の間に血液凝固を防ぐために、高投与量で用いられてもよく、手術の終了時にはそれらを無効にする必要がある。したがって、いかなるときでも抗血栓剤の活性を停止するために、中和され得る抗血栓剤を有することは有利である。実際に、上記の公知の合成オリゴサッカライド類は、硫酸プロタミンを含むヘパリンまたはＬＭＷＨｓ用の公知の解毒剤により容易に中和され得ない。
【０００５】
本発明は、ＷＯ９８／０３５５４およびＷＯ９９／３６４４３として公開された特許出願ならびにＥＰ５２９７１５特許に開示されている化合物の構造と類似の構造を有する新規な合成ポリサッカライド類に関する：本発明の主題である合成オリゴサッカライド類の構造は、ビオチン（ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−ペンタン酸）またはビオチン誘導体と共有結合を示すという意味において修飾されている。驚くべきことに、ビオチンまたはビオチン誘導体の導入は、ポリサッカライド類の薬理学的活性を変更しないと思われる。実際に、本発明の主題である新規なポリサッカライド類は、先行技術のオリゴサッカライド類のものと比較でき得る抗血栓活性を有する。しかしながら、その上、それらは緊急事態において特異的な解毒剤により速やかに中和され得る利点を有する。この特異的な解毒剤は、アビジン（メルクインデックス、第１２版、１９９６、Ｍ．Ｎ． ９２０、１５１−１５２頁）またはストレプトアビジン（ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ）であり、約６６０００および６００００ Ｄａに等しいそれぞれの質量を有する２つの４量体蛋白は、ビオチンに対して非常に高い親和性を有する。
一般に、本発明は、ビオチンまたはビオチン誘導体と少なくとも一つの共有結合を有し、抗血栓活性を有する合成ポリサッカライド類に関する。
【０００６】
ビオチン誘導体としては、ピアスカタログ（Ｐｉｅｒｃｅ ｃａｔａｌｏｇｕｅ）、１９９９−２０００、６２〜８１頁に示されているビオチン誘導体、例えば、６−ビオチンアミドヘキサノエート、
【化２１】
2004509902.tif 000002
または６−［６−ビオチンアミドヘキサミド］ヘキサノエート、
【化２２】
2004509902.tif 000003
【０００７】
または２−ビオチンアミドエタンチオール、
【化２３】
2004509902.tif 000004
【０００８】
または次の式：
【化２４】
2004509902.tif 000005
【０００９】
【化２５】
2004509902.tif 000006
【００１０】
【化２６】
2004509902.tif 000007
【００１１】
【化２７】
2004509902.tif 000008
【００１２】
【化２８】
2004509902.tif 000009
【００１３】
【化２９】
2004509902.tif 000010
【００１４】
【化３０】
2004509902.tif 000011
の化合物が挙げられる。
【００１５】
とりわけ、本発明の主題は、式（Ｉ）：
【化３１】
2004509902.tif 000012
［式中：
−　波線はピラノース環の平面図形の下側または上側に位置する結合を意味し、
【化３２】
2004509902.tif 000013
【００１６】
Ｐｏは、ｎ個の同一または異なったモノサッカライドユニットを含み、そのアノマー炭素を介してＰｅに結合しているポリサッカライドを意味し、
【化３３】
2004509902.tif 000014
は、ヘキソース類、ペントース類および対応するデオキシ糖類から選択されるピラノース構造を有するモノサッカライドユニットの図式による表示であり、このユニットはそのアノマー炭素を介してもう一つのモノサッカライドユニットに結合していて、このユニットのヒドロキシ基は同一または異なったＲ１基により置換されており、Ｒ１は以下の定義するとおりであり、
【００１７】
−　Ｐｅは構造：
【化３４】
2004509902.tif 000015
のペンタサッカライドを表し、
−　ｈは１または２に等しく、
−　ｎは整数であり、０〜２５のいずれかの値をとることができ、
−　Ｒ１は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ２は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ３は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結または（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表し、
−　Ｒ４は−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表すか、あるいはＲ４は−Ｏ−ＣＨ２−架橋を構成し、−ＣＨ２−基は同じ環のカルボキシ官能基を有する炭素原子に結合しており；
【００１８】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４置換基の少なくとも一つは−Ｔ−Ｂｉｏｔ基を表すものと理解され、
−　Ｗは酸素原子またはメチレン基を表し、
−　Ｔは：
ＮＨ、
【化３５】
2004509902.tif 000016
または
【化３６】
2004509902.tif 000017
［式中、ｊおよびｋは同一または異なって、１〜１０のいずれかの値をとり得る整数である］
から選択される連結の一つを表し；
【００１９】
−Ｂｉｏｔは基：
【化３７】
2004509902.tif 000018
を表す］
のポリサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩である。
【００２０】
上記のように、一般に本明細書中において、波線はピラノース環の平面図形の下側または上側に位置する結合を意味することに注意すべきである。
Ｐｏの中にあるモノサッカライド類は、互いに同一または異なっていてもよく、グリコシド間の結合はαまたはβタイプであり得る。
これらのモノサッカライド類は、ＤもしくはＬ六単糖類 アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ガロース、イドース、ガラクトースまたはタロース（この場合、ｈ ＝ ２）、あるいはＤもしくはＬ五単糖類 リボース、アラビノース、キシロースまたはリキソース（この場合、ｈ ＝ ２）から有利に選択される。例えば、デオキシ糖類のような、その他のモノサッカライド類も用いられ得る（ｈ ＝ １ および／または−ＣＨ２Ｒ１ ＝ ＣＨ３）。
【００２１】
ポリサッカライド部分Ｐｏは、０〜２５のアルキル化およびジ−またはトリスルホン化モノサッカライド単位から構成され得る。
ポリサッカライド部分Ｐｏは、０〜２５のアルキル化およびモノ−またはジスルホン化モノサッカライド単位からも構成され得る。
ポリサッカライド部分Ｐｏは、０〜２５の荷電していないおよび／または部分的に荷電したおよび／または完全に荷電した、アルキル化モノサッカライド単位から構成され得る。
荷電したまたは荷電していないユニットは、連鎖またはその他の結合に沿って分散されることができ、一方、それらは荷電した、または荷電していないサッカライドドメインにグループ化され得る。
【００２２】
ユニット間の結合は、１、２； １、３； １、４； １、５； １、６であり、αまたはβタイプであり得る。
本発明において、選択はＬ−イズロン酸については１Ｃ４コンフォメーションそしてＤ−グルクロン酸については４Ｃ１コンフォメーションを表すようになされているが、一般に、モノサッカライド単位の溶液におけるコンフォメーションが変動することは周知である。
したがって、Ｌ−イズロン酸は、１Ｃ４、２Ｓ０または４Ｃ１コンフォメーションを有し得る。
【００２３】
その観点の一つによれば、本発明は、式（Ｉ．１）：
【化３８】
2004509902.tif 000019
［式中：
【化３９】
2004509902.tif 000020
は、（Ｉ）で定義したようにそれらのアノマー炭素を介してＰｅに結合しているポリサッカライド類Ｐｏの具体的な群を意味し、
【００２４】
【化４０】
2004509902.tif 000021
は、（Ｉ）で定義したとおりであり、
−　Ｒ１基は（Ｉ）で定義したとおりであり、同じモノサッカライドについては同一でも異なっていてもよい、
−　［ ］ｍの中にあるモノサッカライドはｍ回繰り返され、［ ］ｔの中にあるモノサッカライドはｔ回繰り返され、［ ］ｐの中にあるモノサッカライドはｐ回繰り返され、
−　ｍは１から５まで変化する整数であり、ｔは０から２４まで変化する整数であり、ｐは０から２４まで変化する整数であり、１≦ｍ＋ｔ＋ｐ≦２５であると理解される］
のポリサッカライド、およびそれらの医薬的に許容される塩に関する。
【００２５】
これらの式（Ｉ．１）のポリサッカライド類の中で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４置換基の一つだけが、（Ｉ）で定義したとおりのＴおよびＢｉｏｔを有する−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結を表すポリサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩は、本発明のもう一つの観点を構成する。
【００２６】
特別な観点によれば、本発明は、式（Ｉ．２）：
【化４１】
2004509902.tif 000022
［式中：
−　Ｔは：
ＮＨ、
【化４２】
2004509902.tif 000023
【００２７】
または
【化４３】
2004509902.tif 000024
［式中、ｊおよびｋは同一または異なって、１〜１０のいずれかの値をとり得る整数である］
から選択される連結を表し；
−　Ｂｉｏｔは基：
【化４４】
2004509902.tif 000025
を表し、
【００２８】
−　Ｐｅは構造：
【化４５】
2004509902.tif 000026
［式中：
−　Ｒ１は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ３は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表し、
−　Ｒ４は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表すか、あるいはＲ４は−Ｏ−ＣＨ２−架橋を構成し、その−ＣＨ２−基は同じ環のカルボキシ官能基を有する炭素原子に結合しており、
−　Ｗは酸素原子またはメチレン基を表す］
のペンタサッカライドを表す］
のヘキサデカサッカライド類、およびそれらの医薬的に許容される塩に関する。
【００２９】
もう一つの観点によれば、本発明は、式（Ｉ．３）：
【化４６】
2004509902.tif 000027
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＷは（Ｉ）で定義したとおりである］
のペンタサッカライド類、およびそれらの医薬的に許容される塩に関する。
式（Ｉ．３）のこれらのペンタサッカライド類の中で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４置換基の一つだけが、（Ｉ）で定義したとおりのＴおよびＢｉｏｔを有する−Ｔ−Ｂｉｏｔ連結を表すペンタサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩は、本発明のもう一つの観点を構成する。
【００３０】
式（Ｉ．３）のこれらのペンタサッカライド類の中で、本発明のもう一つの主題は、式（Ｉ．４）：
【化４７】
2004509902.tif 000028
［式中：
−　Ｔは：
ＮＨ、
【化４８】
2004509902.tif 000029
または
【化４９】
2004509902.tif 000030
［式中、ｊおよびｋは同一または異なって、１〜１０のいずれかの値をとり得る整数である］
から選択される一つの連結を表し；
【００３１】
−　Ｂｉｏｔは基：
【化５０】
2004509902.tif 000031
−　Ｒ１は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表し、
−　Ｒ３は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基を表し、
−　Ｒ４は（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ基または−ＯＳＯ３−基を表すか、あるいはＲ４は−Ｏ−ＣＨ２−架橋を構成し、その−ＣＨ２−基は同じ環のカルボキシ官能基を有する炭素原子に結合しており、
−　Ｗは酸素原子またはメチレン基を表す］
のペンタサッカライド類およびそれらの医薬的に許容される塩である。
【００３２】
もう一つの観点によれば、本発明は次のポリサッカライド類に関する：
−　メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−ビオチンアミド−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
【００３３】
−　メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−［６−（ビオチンアミド）ヘキサミド］−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
【００３４】
−　メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−［６−（６−ビオチンアミドヘキサミド）ヘキサミド］−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
【００３５】
−　メチル （２−ビオチンアミド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
【００３６】
−　メチル （２−［Ｎ−（６−ビオチンアミドヘキサノイル）］−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩、
【００３７】
−　メチル （２−［６−（６−ビオチンアミドヘキサミド）ヘキサミド］−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩。
【００３８】
本発明は、それらの酸の形態、またはそれらの医薬的に許容される塩のいずれか一つの形態にあるポリサッカライド類を包含する。酸の形態では、−ＣＯＯ−および−ＳＯ３−官能基はそれぞれ−ＣＯＯＨおよび−ＳＯ３Ｈの形態にある。
用語「本発明のポリサッカライド類の医薬的に許容される塩」は、−ＣＯＯ−および／または−ＳＯ３−官能基の一以上が、医薬的に許容されるカチオンにイオン的に結合しているポリサッカライドを意味する。
本発明による好ましい塩は、カチオンがアルカリ金属のカチオンから選択されるものであり、よりいっそう好ましくは、カチオンがＮａ＋またはＫ＋であるものである。
【００３９】
上記の式（Ｉ）の化合物は、一以上の水素または炭素原子がそれらの放射性同位元素、例えばトリチウムまたは炭素−１４により置換されたものも含む。そのような標識化合物は、研究、代謝または薬物動態研究および生化学的アッセイにおいて、リガンドとして用いられるものである。
本発明による化合物の製造方法の原理は、文献中に上記のように調製されたジ−またはオリゴサッカライド塩基シントン（ｓｙｎｔｈｏｎ）の使用を含む。とりわけ、特許または特許出願、ＥＰ３０００９９、ＥＰ５２９７１５、ＥＰ６２１２８２およびＥＰ６４９８５４ならびに文献 Ｃ． ｖａｎ Ｂｏｅｃｋｅｌ， Ｍ． Ｐｅｔｉｔｏｕ， Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． Ｅｎｇｌ．， １９９３， ３２， １６７１−１６９０が参照される。引き続きこれらのシントンは、発明によるポリサッカライドの完全に保護された等価物を提供するために、互いに結合させられる。この保護された等価物は、引き続き本発明による化合物に変換される。
【００４０】
上記の塩基シントンの一つは、その後のビオチンまたはビオチン誘導体の導入を可能にする特別の保護された官能基、例えばアジド基の形態にあるかまたはＮ−フタルイミド基の形態に保護された、潜在的なアミン官能基を含む。
上記のカップリング反応において、アノマー性の炭素において活性化された「供与体」ジ−またはオリゴサッカライドは、遊離のヒドロキシを有する「受容体」ジ−またはオリゴサッカライドと反応する。
【００４１】
本発明は：
第１工程において、硫酸化ポリサッカライドＰｏの保護された前駆体により、その非還元性末端で延長されたＰｅドメインの保護された前駆体を含む所望のポリサッカライド（Ｉ）の完全に保護された等価物が合成され、これらの前駆体の一つは、とりわけ、ビオチンまたはビオチン誘導体のその後の導入のために好適に保護されたアミン官能基を含む；
第２工程において、マイナスに帯電している基を導入しおよび／または覆いを取る；
第３工程において、アミン官能基を脱保護し、次いでビオチンまたはビオチン誘導体を導入することを特徴とする、式（Ｉ）の化合物の製造方法に関する。
【００４２】
Ｐｅの合成は、とりわけ、ＷＯ９８／０３５５４およびＷＯ９９／３６４４３として公開された特許出願ならびに文献（上記）に記載の方法に従って行われる。
Ｐｏの前駆体であるポリサッカライド部分は、オリゴサッカライド類の合成方法（Ｇ．Ｊ． Ｂｏｏｎｓ， ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ， １９９６， ５２， １０９５−１１２１、ＷＯ９８／０３５５４およびＷＯ９９／３６４４３）を用いて、当業者に公知の反応に従って合成されるか、またはグリコシド結合供与体であるオリゴサッカライドが、グリコシド結合受容体であるオリゴサッカライドと結合してもう一つのオリゴサッカライドを得る場合には、オリゴサッカライドの大きさは、２つの反応性種の大きさの和に等しい。このシークエンスは式（Ｉ）の所望の化合物が得られるまで繰り返される。所望の最終化合物の電荷の特質およびプロフィールは、当業者に周知の規則に従って、合成の種々の工程で用いられる化学的な構成要素の特質を決定する。例えば、Ｃ． ｖａｎ ＢｏｅｃｋｅｌおよびＭ． Ｐｅｔｉｔｏｕ， Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． Ｅｎｇｌ．， １９９３， ３２， １６７１−１６９０， またはＨ． Ｐａｕｌｓｅｎ， “Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｘ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ”， Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． Ｅｎｇｌ．， ２１， １５５−１７３ （１９８２）を参照することができる。
【００４３】
本発明の化合物は、次の一連の反応を用いることにより、完全に保護されたポリサッカライド前駆体から得られる：
−　Ｏ−スルホ基に変換されるべきアルコール官能基およびカルボン酸は、基幹の調製の間に用いられる保護基を除去することにより脱保護され、次いで、
−　引き続きスルホ基を導入し、
−　ビオチンまたはビオチン誘導体の導入を可能にするアミン官能基を脱保護し　、
−　ビオチンまたはビオチン誘導体を従来のアミノ酸カップリング反応により導入する。
本発明の化合物は、オリゴサッカライドの合成に対する当該技術分野の熟達者に公知の種々の方法を用いることにより当然調製され得る。
【００４４】
上記の方法は、本発明の好ましい方法である。しかしながら、式（Ｉ）の化合物は、例えばＭｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ， ｔｈｅｉｒ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｎａｔｕｒａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ， Ｐ．Ｍ． ＣｏｌｌｉｎｓおよびＲ．Ｊ． Ｆｅｒｒｉｅｒ， Ｊ． Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， １９９５、およびＧ．Ｊ． Ｂｏｏｎｓ， ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ， １９９６， ５２， １０９５−１１２１に記載されている、糖化学において周知のその他の方法により調製され得る。
したがって、ペンタサッカライド類Ｐｅは、Ｃ． ｖａｎ ＢｏｅｃｋｅｌおよびＭ． Ｐｅｔｉｔｏｕによる刊行物、Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． Ｅｎｇｌ．， １９９３， ３２， １６７１−１６９０に記載の方法のジサッカライドシントンから得ることができる。
【００４５】
化合物（Ｉ）の調製のための方法で用いられる保護基は、例えばＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｔ．Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９８１にあるような、糖化学で通常用いられるものである。
保護基は、例えばアセチル、ハロメチル、ベンゾイル、レブリニル、ベンジル、置換ベンジル、任意に置換されたトリチル、テトラヒドロピラニル、アリル、ペンテニル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ｔＢＤＭＳ）またはトリメチルシリルエチル基から有利に選択される。
【００４６】
活性基は、例えばＧ．Ｊ． Ｂｏｏｎｓ， ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ， １９９６， ５２， １０９５−１１２１に従って糖化学で通常用いられているものである。これらの活性基は、例えばイミデート、チオグリコシド、ペンテニルグリコシド、キサンテート、ホスファイトまたはハライドから選択される。
ビオチンがオリゴサッカライドに結合される方法およびビオチン誘導体の特性に関して、化学文献は、当業者に周知の保護基の一組で利用されうるその他の可能性を提案している。活性化エステル、マレイミド、ヨードアセチルまたは一級アミンタイプの反応性の基を含むビオチン誘導体と反応するアミン官能基、またはチオール官能基、またはカルボン酸官能基、またはアルデヒド官能基が使用され、反応は、文献（Ｓａｖａｇｅら、Ａｖｉｄｉｎ−Ｂｉｏｔｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ： Ａ Ｈａｎｄｂｏｏｋ； Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ， １９９２を参照されたし）に記載の条件に従って起こる。
【００４７】
上記の方法は、塩の形態にある本発明の化合物を得ることを可能にする。
対応する酸を得るためには、塩の形態にある本発明の化合物を、酸型のカチオン交換樹脂と接触させる。
所望の塩を得るために、酸の形態にある本発明の化合物を引き続き塩基で中和することができる。式（Ｉ）の化合物と医薬的に許容される塩を生じるどんな無機または有機塩基でも、式（Ｉ）の化合物の塩の調製のために使用され得る。
水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムまたは水酸化マグネシウムは塩基として好んで用いられる。式（Ｉ）の化合物のナトリウムおよびカルシウム塩は好ましい塩である。
【００４８】
本発明による化合物は、生化学および薬理学的研究の主題を形成した。
これらの物質およびそれらの中和の包括的な抗血栓活性は、Ｊ．−Ｍ． Ｈｅｒｂｅｒｔら（Ｂｌｏｏｄ， １９９８， ９１， ４１９７−４２０５）により記載されているように、組織因子の注射、次いでラットの大静脈の血行停止を含む静脈血栓症モデルにおいて研究された。このモデルにおいて、化合物０．１〜３０ ｍｍｏｌ／ｋｇの静脈内注射後に、抗血栓の６０％阻害が得られた。
モル比１〜１０００でのアビジンの注射は、これらの化合物の抗血栓活性を顕著に減少し、得られる減少は５０％より大きいこともあり得る。同様に、化合物の前出血性活性は、上記の投与量でのアビジンの注射により中和される。それに加えて、抗Ｘａ活性および／または抗ＩＩａ活性により測定されるオリゴサッカライド類の循環活性は、アビジンの注射により中和される。
【００４９】
したがって、本発明のもう一つの主題は、本発明によるポリサッカライド類を中和することを可能にすることを特徴とする、アビジンまたはストレプトアビジンを用いる方法である。アビジンまたはストレプトアビジンは本発明によるポリサッカライド類を中和することを意図する医薬品の製造用に用いられ得る。
それらの生化学的および薬理学的活性の特長によれば、本発明のオリゴサッカライド類は、きわめて有利な医薬品を構成する。それらの毒性は、この用途と完全に適合できる。それらは非常に安定でもあり、したがって特許された医薬物質の有効成分を構成するのに特に好適である。
【００５０】
それらは、アテローム性動脈硬化症および糖尿病、例えば不安定狭心症、脳出血、血管形成術後再狭窄、動脈内膜除去または血管内人工装具の挿入に関連する血栓塞栓症障害；あるいは血栓崩壊後再血栓症、梗塞形成、虚血性起源の痴呆、末梢性動脈疾患、血液透析または心房性細動に関連する血栓塞栓症障害、あるいは大動脈冠動脈バイパス用の脈管用人工装具の使用中のような、とりわけ、心臓血管疾患および脳血管系の障害の間に見られる凝固系のホメオスタシスの変異に起因する種々の病状において用いられ得る。その上、これらの物質は、肺塞栓のような静脈起源の血栓塞栓症病状の治療または予防用に用いられ得る。それらは、観察された血栓症合併症、例えば次の外科的手術、腫瘍の成長または細菌性、ウィルス性もしくは酵素性活性剤により誘発される凝固妨害を予防または治療するために用いられ得る。人工装具の挿入の間のそれらの使用の場合において、本発明の化合物は人工装具を覆うことができ、したがって、それらに血液適合性を与える。とりわけ、それらは血管内の人工装具（ステント）に接着され得る。この場合において、それらは、ＥＰ６４９８５４により開示されているように、適当なウデの非還元性または還元性末端基における導入により、化学的に任意に修飾され得る。
【００５１】
本発明の化合物は、ポーラスなバルーンで動脈内膜除去術を行なう間の補助剤としても用いられ得る。
本発明による化合物は、上記の疾病を意図する医薬品の製造において用いられ得る。
したがって、もう一つの観点によれば、本発明の主題は、一以上の不活性で、適当な賦形剤との任意に組み合わせ中に、本発明による合成ポリサッカライドまたはその医薬的に許容される塩の一つを有効成分として含む医薬組成物である。
【００５２】
上記の賦形剤は、所望の医薬形態および所望の投与方法（経口、舌下、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、経粘膜、局所または直腸）に従って選択される。
有効成分はシクロデキストリン、例えばα−、β−またはγ−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンまたはメチル−β−シクロデキストリンとの複合体の形態中にも存在し得る。
有効成分は、それを含むバルーンにより、または血管内に挿入された血管内伸長器によっても放出され得る。したがって、有効成分の薬理学的有効性は影響を受けない。
各投与量単位において、有効成分は、所望の予防または治療効果を得るために思い描かれる１日投与量に適した量で存在する。
【００５３】
各投与量単位は、有効成分０．１〜１００ｍｇ、好ましくは０．５〜５０ｍｇから成り得る。これらの抗凝固化合物の投与は、ｉｖ（静脈内）注射、丸薬または輸液による１〜１０００ｍｇを範囲とするアビジンまたはストレプトアビジンの投与量により、中和されるかもしれない。
本発明による化合物は、所望の療法で有用な、例えば抗血栓薬、抗凝固剤、例えばジピリダモール、アスピリン、チクロピジンまたはクロピドグレルのような血小板凝集阻害剤、あるいはグリコプロテインＩＩｂ／ＩＩＩａ複合アンタゴニストのような、一以上のその他の有効成分との組合せにおいても用いられ得る。
【００５４】
次の方法、製造およびスキームは、本発明によるポリサッカライドの製造に有益な種々の中間体の合成を説明する。
次の略語が用いられる：
Ｂｎ： ベンジル； Ｂｚ： ベンゾイル； ＴＬＣ： 薄層クロマトグラフィー； Ｔｓ： トシル； Ｌｅｖ： レブリニル； Ｅｔ： エチル； Ｐｈ： フェニル； Ｍｅ： メチル； Ａｃ： アセチル； ＳＥ： トリメチルシリルエチル； ＥＳＩ： エレクトロンスプレーイオン化； ビオチン： ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−ペンタン酸； Ｚ： ベンジルオキシカルボニル。
引き続いて、本発明の化合物の合成例をイラストを用いて詳細に説明する。
スキーム １ −　トリサッカライド ９の合成
【００５５】
【化５１】
2004509902.tif 000032
【００５６】
製造例 １
２−（トリメチルシリル）エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２）
水素化ナトリウム（１８ ｇ）を、０℃で、化合物１ （１５．８ ｇ、４２．８ ｍｍｏｌ） （Ｋ． Ｊａｎｓｓｏｎら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ．， １９８８， ５３， ５６２９−５６４７にしたがって調製した）およびヨウ化メチル（２０ ｍｌ、３１９ ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３５０ ｍｌ）溶液に少しづつ加える。反応混合物室温で４時間撹拌する。過剰の水素化ナトリウムをメタノールで分解し、反応混合物を氷水（１．５ ｌ）に注ぐ。酢酸エチルで抽出後に、有機相を食塩の飽和溶液および水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで真空下に濃縮する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル １５／１ （ｖ／ｖ））により精製し、１６．８ ｇの化合物２を得る。
［α］Ｄ ＝ −４１° （Ｃ ＝ ０．６９、ジクロロメタン）。
【００５７】
製造例 ２
２−（トリメチルシリル）エチル ６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （３）
化合物２ （１６ ｇ、４０．３ ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６００ ｍｌ）溶液に、順次、３Åモレキュラーシーブ粉末（８２ ｇ）、メチルオレンジ（変色指示薬）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３４ ｇ、５２６ ｍｍｏｌ）を加え、次いで塩化水素酸のジエチルエーテル飽和溶液を、ピンクの着色が得られるまで滴下する。ろ過後に酢酸エチルで抽出し、有機相を炭酸水素ナトリウムの飽和溶液および水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで真空下に濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／酢酸エチル ３／１ （ｖ／ｖ））により、１２．５ ｇの化合物３を得ることが可能である。
［α］Ｄ ＝ −４２° （Ｃ ＝ １．２、ジクロロメタン）。
【００５８】
製造例 ３
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （５）
トルエン （３００ ｍｌ）中のチオグリコシド４ （１６．５２ ｇ、１６．６０ ｍｍｏｌ） （ＷＯ ９９／３６４４３として公開された特許出願の製造例１に従って得られた）、化合物３ （６．０ ｇ、１５．０５ ｍｍｏｌ）および４Åモレキュラーシーブ粉末（１６．７ ｇ）の混合物を、アルゴン雰囲気下に、室温で１時間撹拌する。次いで、混合物を−２０℃に冷却する。ジクロロメタン／ジオキサン混液（１／１ （ｖ／ｖ）、８６ ｍｌ）中のＮ−ヨードコハク酸イミド（３．９ ｇ、１７．４ ｍｍｏｌ）およびトリフルオロメタンスルホン酸（０．１７ ｍｌ、１．９７ ｍｍｏｌ）の溶液を反応混合物に滴下する。１０分後に、反応混合物をろ過し、ジクロロメタンで希釈し、１Ｍチオ硫酸ナトリウム溶液、１０％炭酸水素ナトリウム溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで真空下に濃縮する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／酢酸エチル ６／１ （ｖ／ｖ））により精製し、１８．８ ｇのトリサッカライド ５を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋３４° （Ｃ ＝ １．２６、ジクロロメタン）。
【００５９】
製造例 ４
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （６）
カリウム ｔｅｒｔ−ブトキサイド（３．１５ ｇ）を、メタノール／ジオキサン混液（１／１ （ｖ／ｖ）、１４０ ｍｌ）中の化合物５ （１８．７ ｇ、１４ ｍｍｏｌ）の溶液に加える。反応混合物を室温で２時間撹拌する。それをダウエックス（商標） ５０ＷＸ４ Ｈ＋樹脂で中和し、ろ過し、真空下に濃縮する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（ジクロロメタン／メタノール ２０／１ （ｖ／ｖ））により精製し、１０．０ ｇの化合物６を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋２９° （Ｃ ＝ １．１１、ジクロロメタン）。
【００６０】
製造例 ５
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （７）　水素化ナトリウム（５．２ ｇ、２１６ ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下に、無水テトラヒドロフラン（１００ ｍｌ）中の化合物６ （９．９３ ｇ、１２．２４ ｍｍｏｌ）およびヨウ化メチル（９．０ ｍｌ、１３８ ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）混合物に、少しずつ加える。混合物を室温で２０時間撹拌する。過剰の水素化ナトリウムをメタノールで分解し、反応混合物を氷水（５００ ｍｌ）に注ぐ。酢酸エチルで抽出後に、有機相を食塩の飽和溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで真空下に濃縮し、１１ ｇの化合物７を得、精製せずに次の工程で用いる。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３８、シリカゲル、トルエン／酢酸エチル ３／２ （ｖ／ｖ）。
【００６１】
製造例 ６
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （８）
化合物７ （１１ ｇ）を６０％ 酢酸 （１８０ ｍｌ）に溶解し、８０℃で１時間３０分撹拌する。混合物を濃縮し、トルエンと共に蒸発させる。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／アセトン ２／１ （ｖ／ｖ））により精製し、８．４６ ｇの化合物８を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３６、シリカゲル、トルエン／アセトン １／１ （ｖ／ｖ）。
【００６２】
製造例 ７
２−（トリメチルシリル）エチル （６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （９）
１−ベンゾイルオキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾ−ル（５．３６ ｇ、２２．４ ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３．３２ ｍｌ）を、化合物８ （８．４１ ｇ、１０．６ ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１１０ ｍｌ）溶液に加える。混合物を室温で２０時間撹拌し、次いでジクロロメタンで希釈し、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液および水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで真空下に濃縮する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール ５／０．５／０．２５ （ｖ／ｖ／ｖ））により精製し、８．４０ ｇの化合物９を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋１５° （Ｃ ＝ ２、ジクロロメタン）。
スキーム ２ −　ペンタサッカライド１４の合成
【００６３】
【化５２】
2004509902.tif 000033
【００６４】
製造例 ８
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１０）
化合物９を製造例３に記載の方法に従って化合物１０に変換する。
［α］Ｄ ＝ ＋４２° （Ｃ ＝ ２、ジクロロメタン）。
【００６５】
製造例 ９
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１１）
化合物１０を製造例４に記載の方法に従って化合物１１に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３５、シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール １０／１ （ｖ／ｖ）。
【００６６】
製造例 １０
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１２）
化合物１１を製造例５に記載の方法に従って化合物１２に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．１１、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル １／２ （ｖ／ｖ）。
【００６７】
製造例 １１
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１３）
化合物１２を製造例６に記載の方法に従って化合物１３に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３３、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール ２／０．５／０．５ （ｖ／ｖ／ｖ）。
【００６８】
製造例 １２
２−（トリメチルシリル）エチル （６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１４）
化合物１３を製造例７に記載の方法に従って化合物１４に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．１６、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール３／０．５／０．５ （ｖ／ｖ／ｖ）。
スキーム ３ −　ヘプタサッカライド１９の合成
【００６９】
【化５３】
2004509902.tif 000034
【００７０】
製造例 １３
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１５）
製造例３に記載の方法に従って、化合物１４とジサッカライド４とのカップリング反応を行い、化合物１５を与える。
［α］Ｄ ＝ ＋５２° （Ｃ ＝ １．１、ジクロロメタン）。
【００７１】
製造例 １４
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１６）
製造例 ４に記載の方法に従って化合物１５を化合物１６に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３１、シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール １０／１ （ｖ／ｖ）。
【００７２】
製造例 １５
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］２−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１７）
製造例 ５に記載の方法に従って化合物１６を化合物１７に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．４６、シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール １０／１ （ｖ／ｖ）。
【００７３】
製造例 １６
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１８）
製造例 ６に記載の方法に従って化合物１７を化合物１８に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．４２、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール１／０．５／０．５ （ｖ／ｖ／ｖ）。
【００７４】
製造例 １７
２−（トリメチルシリル）エチル （６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （１９）
製造例 ７に記載の方法に従って化合物１８を化合物１９に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．２５、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール３／０．５／０．５ （ｖ／ｖ／ｖ）。
スキーム ４ −　ノナサッカライド ２３の合成
【００７５】
【化５４】
2004509902.tif 000035
【００７６】
製造例 １８
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−Ｏ−ベンゾイル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］２−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２０）
トルエン中のチオグリコシド４ （５．２ ｇ、５．２３ ｍｍｏｌ）、ヘプタサッカライド１９ （４．７２ ｇ、２．７５ ｍｍｏｌ）および４Å モレキュラーシーブ粉末の混合物を、アルゴン雰囲気下に、１時間撹拌する。Ｎ−ヨードコハク酸イミド（１．３６ ｇ、５．８５ ｍｍｏｌ）およびトリフルオロメタンスルホン酸（０．１４０ ｍｌ、１．５６ ｍｍｏｌ）のジクロロメタン／ジオキサン（１／１ （ｖ／ｖ）、３２ ｍｌ）溶液を、次いで０℃で滴下する。１５分後に、反応混合物をろ過し、ジクロロメタンで希釈し、１Ｍチオ硫酸ナトリウム溶液、１０％炭酸水素ナトリウム溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下に濃縮する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール ３／０．５／０．５ （ｖ／ｖ／ｖ））により精製し、７．１３ ｇの化合物２０を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋６５° （Ｃ ＝ １．４、ジクロロメタン）。
【００７７】
製造例 １９
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］２−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２１）
製造例４に記載の方法に従って化合物２０を化合物２１に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．２７、シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール １０／１ （ｖ／ｖ）。
【００７８】
製造例 ２０
２−（トリメチルシリル）エチル （４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２２）
製造例 ５に記載の方法に従って化合物２１を化合物２２に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３１、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール５／１／１ （ｖ／ｖ／ｖ）。
【００７９】
製造例 ２１
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２３）
製造例 ６に記載の方法に従って化合物２２を化合物２３に変換する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３５、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール２／１／１ （ｖ／ｖ／ｖ）。
スキーム ５ −　モノサッカライド２９の合成
【００８０】
【化５５】
2004509902.tif 000036
【００８１】
製造例 ２２
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−トシル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２４）
化合物２３ （１．０９ ｇ）をアルゴン雰囲気下に、ピリジン（１０ ｍｌ）に溶解し、次いでトシルクロライド（１．０３ ｇ）を加える。撹拌２時間後に、反応混合物をジクロロメタン（１００ ｍｌ）で希釈する。有機相を１０％硫酸水素カリウム溶液、次いで水で順次洗浄し、乾燥し、蒸発乾固させる。シリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／アセトン ２．３／２ （ｖ／ｖ））後に、１．７７ ｇの化合物２４を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．５、シリカゲル、シクロヘキサン／酢酸エチル／エタノール ３／１／１ （ｖ／ｖ／ｖ）。
【００８２】
製造例 ２３
２−（トリメチルシリル）エチル （６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２５）
フタルイミドカリウム（２２５ ｍｇ、１．３８ ｍｍｏｌ）、次いで１８−クラウン−６クラウンエーテル（１２１．５ ｍｇ、０．４６ ｍｍｏｌ）を、４Å モレキュラーシーブ粉末を含む化合物２４ （５００ ｍｇ、０．２３ ｍｍｏｌ）の無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１１ ｍｌ）溶液に加える。混合物を８０℃で４時間撹拌する。冷却後に、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、セライトろ過し、濃縮する。残渣をセファデックス（商標）ＬＨ２０ゲルクロマトグラフィー（３ （ １００ ｃｍ） （ジクロロメタン／エタノール １／１ （ｖ／ｖ））、次いでシリカゲルカラムクロマトグライフィー（１１／２ （ｖ／ｖ） トルエン／エタノール）により精製し、４１７．４ ｍｇの化合物２５を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３８、シリカゲル、トルエン／エタノール １１／２ （ｖ／ｖ）。
【００８３】
製造例 ２４
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−ベンジル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２７）
トルエン （３３ ｍｌ）中のチオグリコシド２６ （１．５１５ ｇ、１．５６４ ｍｍｏｌ） （特許ＷＯ ９９／３６４４３の製造例３６の化合物４１に従って製造した）、受容体２５ （８４０ ｍｇ、０．３９１ ｍｍｏｌ）および４Å モレキュラーシーブ粉末（２．１５ ｇ）の混合物を、アルゴン雰囲気下に、１時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、Ｎ−ヨードコハク酸イミド（３８７ ｍｇ）およびトリフルオロメタンスルホン酸（５５．４μｌ）のジクロロメタン／ジオキサン（１／１ （ｖ／ｖ）、７ ｍｌ）溶液をそこへ加える。１０分後に混合物をろ過し、トルエンで希釈し、１Ｍチオ硫酸ナトリウム溶液、１０％炭酸水素ナトリウム溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで真空下に濃縮する。残渣をセファデックス（商標）ＬＨ２０ゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン／エタノール １／１ （ｖ／ｖ））、次いでシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／アセトン ５／４ （ｖ／ｖ））により精製し、８８７ ｍｇの化合物２７を結果として得る。
［α］Ｄ ＝ ＋７０° （Ｃ ＝ ０．３５、ジクロロメタン）。
【００８４】
製造例 ２５
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２８）
化合物２７ （７５０ ｍｇ、０．２４５ ｍｍｏｌ）の酢酸（３７ ｍｌ）溶液を、１０％パラジウム−炭素（７５０ ｍｇ） の存在下に、水素圧（５ ｂａｒ）下に、２時間３０分処理する。ろ過後に、溶液を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／エタノール ６／１ （ｖ／ｖ））により精製し、７２８ ｍｇの化合物２８を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３２、シリカゲル、トルエン／エタノール ／１ （ｖ／ｖ）。
【００８５】
製造例 ２６
２−（トリメチルシリル）エチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシド （２９）
トリエチルアミン（５１．１μｌ、０．３６８ ｍｍｏｌ）、無水酢酸（３２．５μｌ、０．３４４ ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（６．０ ｍｇ、０．０４９ ｍｍｏｌ）を、化合物２８ （７２８ ｍｇ、０．２４５ ｍｍｏｌ）のジクロロメタン （１０ ｍｌ）溶液に加える。１時間撹拌後に、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１０％硫酸水素カリウム溶液、水、炭酸水素ナトリウムの飽和溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下に濃縮する。残渣の精製を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより行い、０．６１８ ｍｇの化合物２９を得ることができる。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３７、シリカゲル、トルエン／エタノール ６／１ （ｖ／ｖ）。
スキーム ６ −　オリゴサッカライド３１の合成
【００８６】
【化５６】
2004509902.tif 000037
【００８７】
製造例 ２７
（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコピラノース （３０）
トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン混液（２／１ （ｖ／ｖ）、１１．５ ｍｌ）中の化合物２９ （５７９ ｍｇ、０．１９２ ｍｍｏｌ）の溶液を１時間撹拌する。反応混合物をトルエン／酢酸ｎ−プロピル混液（２／１ （ｖ／ｖ）、６９ ｍｌ）で希釈し、濃縮し、トルエンと共に蒸発させる。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／エタノール ５／１ （ｖ／ｖ））により精製し、５２３ ｍｇの化合物３０を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３１、シリカゲル、トルエン／エタノール ５／１ （ｖ／ｖ）。
【００８８】
製造例 ２８
（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコピラノース トリクロロアセトイミデート （３１）
トリクロロアセトニトリル（６５．５μｌ、０．８５ ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（８８．４ ｍｇ、０．２７ ｍｍｏｌ）を、化合物３０のジクロロメタン（３ ｍｌ）溶液に加える。２時間撹拌後に、混合物をろ過し、濃縮する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／エタノール ６／１ （ｖ／ｖ） ＋ ０．１％トリエチルアミン）により精製し、４７７ ｍｇの化合物３１を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３５、シリカゲル、トルエン／エタノール ６／１ （ｖ／ｖ）。
【００８９】
【化５７】
2004509902.tif 000038
【００９０】
製造例 ２９
メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（ベンジル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（ベンジル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド （３３）
イミド体３１ （３７０ ｍｇ、０．１２１ ｍｍｏｌ）および化合物３２ （３３６ ｍｇ、０．２４２ ｍｍｏｌ） （Ｐ． Ｗｅｓｔｅｒｄｕｉｎら、ＢｉｏＯｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９４、２、１２６７に従って得られた）を、ジクロロメタン／ジエチルエーテル混液（１／２ （ｖ／ｖ）、５．５ ｍｌ）に溶解した。４Å モレキュラーシーブ粉末を加えた後、混合物を−２０℃に冷却し、トリメチルシリル トリフルオロメタンスルホネートの０．１Ｍジクロロメタン（１８１．５μｌ）溶液を加える。２５分後に、混合物を固形の炭酸水素ナトリウムを加えて中和する。ろ過および濃縮後に、残渣をセファデックス（登録商標）ＬＨ２０ゲルクロマトグラフィー、次いでシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／アセトン ６／５ （ｖ／ｖ））により精製し、３０２ ｍｇの化合物３３を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋８６° （Ｃ ＝ １、ジクロロメタン）。
【００９１】
製造例 ３０
メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−アセチル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシド （３４）
化合物３３ （１０４ ｍｇ、０．０２４ ｍｍｏｌ）の酢酸 （５ ｍｌ）溶液を、１０％パラジウム−炭素（１０４ ｍｇ）の存在下、水素圧（４ ｂａｒ）下に、４時間処理する。ろ過後に、溶液を凍結乾燥し、化合物３４ （８７ ｍｇ）を得、それを精製せずに次の工程で用いる。
【００９２】
製造例 ３１
メチル （α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシド （３５）
ナトリウムメトキサイドの１モルメタノール（１４０μｌ）溶液を、３Å モレキュラーシーブ粉末（８７５ ｍｇ）の存在下に、化合物３４ （８０ ｍｇ、０．０２１ ｍｍｏｌ）の無水メタノール（６．９ ｍｌ）溶液に加える。室温で２０時間後に、反応混合物をろ過し、ろ液を酢酸で中和する。溶液を半分に濃縮し、セファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラム（３ （ ９２ ｃｍ）に沈着させる。水による溶出および凍結乾燥後に化合物３５ （６６ ｍｇ）を得る。
【００９３】
【化５８】
2004509902.tif 000039
【００９４】
製造例 ３２
メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−６−フタルイミド−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩 （３６）
ポリオール ３５ （６６．４ ｍｇ、０．０２１ ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．８ ｍｌ）に溶解する。三酸化硫黄−トリエチルアミン複合体（３２０ ｍｇ、１．７７ ｍｍｏｌ）を加え、混合物を５５℃で２０時間撹拌する。溶液をセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラム（３ （ ９２ ｃｍ）に沈着させ、０．２Ｍ塩化ナトリウム溶液で溶出する。生成物を含む画分を濃縮し、水で溶出する同じカラムを用いて脱塩する。凍結乾燥後に、８３ ｍｇの化合物３６を得る。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ ４９６８．９２； 実測質量 ＝ ４９６６．５２±０．１６原子質量単位。
【００９５】
製造例 ３３
メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−アミノ−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩 （３７）
化合物３６ （８３ ｍｇ、０．０１７ ｍｍｏｌ）を、エタノール／水混液（２／１ （ｖ／ｖ）、１．６７ ｍｌ）に溶解する。ヒドラジン水和物（８１．２μｌ、１．６７ ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０時間還流させる。溶液をカラムセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）（３ （ ９２ ｃｍ）に沈着させ、水で溶出する。生成物を含む画分を濃縮後に、残渣をエタノール／水（２／１ （ｖ／ｖ）、５．００ ｍｌ）に溶解し、ヒドラジン水和物（８１．２μｌ）を用いる先の条件下で再び処理し、７１ ｍｇの化合物３７を得る。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ ４８３８．３２； 実測質量 ＝ ４８１４．６±０．７０原子質量単位。
スキーム ９ −　ペンタサッカライド３９の合成
【００９６】
【化５９】
2004509902.tif 000040
【００９７】
製造例 ３４
メチル （６−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（ベンジル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−２−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（ベンジル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド （３９）
６−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−α、β−Ｄ−グルコピラノース トリクロロアセトイミデート化合物３８ （２６５ ｍｇ、０．６３１ ｍｍｏｌ） （Ｊ． Ｂａｓｔｅｎら、ＢｉｏＯｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． （１９９２）， ２（９）， ９０１に従って得られた）および化合物３２ （５８４ ｍｇ、０．４２０ ｍｍｏｌ） （Ｐ． Ｗｅｓｔｅｒｄｕｉｎら、ＢｉｏＯｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９４， ２， １２６７に従って得られた）を、ジクロロメタン／ジエチルエーテル混液（１／２ （ｖ／ｖ）、２８．５ ｍｌ）に溶解する。４Å モレキュラーシーブ粉末を加えた後に、混合物を−２０℃に冷却し、トリメチルシリル トリフルオロメタンスルホネートの０．１Ｍジクロロメタン（９４．６ μｌ）溶液を加える。１０分後に、イミデート（５３．８ ｍｇ）、次いでトリメチルシリル トリフルオロメタンスルホネートの０．１Ｍジクロロメタン（１９．２μｌ）溶液を再び加える。１０分後に混合物を、固形の炭酸水素ナトリウムの添加により中和する。ろ過および濃縮後に、残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／酢酸エチル ３／１ （ｖ／ｖ））により精製し、４９９ ｍｇの化合物３９を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋６６° （Ｃ ＝ １．０７、ジクロロメタン）。
スキーム １０ −　ペンタサッカライド４４の合成
方法Ｉ
【００９８】
【化６０】
2004509902.tif 000041
【００９９】
製造例 ３５
メチル （６−Ｏ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシド （４０）
ｔｅｒｔ−ブタノール／酢酸エチル混液（５／１ （ｖ／ｖ）、１６ ｍｌ）中の化合物３９ （５５２．６ ｍｇ、０．３３５ ｍｍｏｌ）の溶液を、１０％パラジウム−炭素（１．１０ ｇ）および１Ｍ塩酸（０．３３６ ｍｌ）の存在下、水素圧（１０ ｂａｒ）下に、４時間３０分間処理する。ろ過後に、溶液を濃縮し、化合物４０を得、それを精製せずに次の工程で用いる。
【０１００】
製造例 ３６
メチル （２−アミノ−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシド （４１）
化合物４０ （３２４ ｍｇ、０．３００ ｍｍｏｌ）をメタノール（８．８ ｍｌ）に溶解する。５Ｍ水酸化ナトリウム溶液（２．２ ｍｌ）を加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌する。それをダウエックス（商標） ５０ Ｈ＋樹脂で中和し、ろ過する。その溶液を、水で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラムに通す。生成物を含む画分を濃縮し、２５４．２ ｍｇの化合物４１を得る。この工程において、保護基（ベンジルおよびアセチル基）が除去されたことをＮＭＲで確認する。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．２６、シリカゲル、酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ５／５／１／３ （ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）。
【０１０１】
製造例 ３７
メチル （２−（ベンジルオキシカルボニル）アミノ−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシド （４２）
化合物４１ （２４１．１ ｍｇ、０．２５３ ｍｍｏｌ）を水（１２．４ ｍｌ）に溶解し、炭酸水素ナトリウム（６３．７ ｍｇ）を加え、次にベンジル クロロホルメート（４１μｌ）を滴下する。１２時間撹拌後に、反応混合物を、水で溶出するカラムセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラムを通す。生成物を含む画分を濃縮する。シリカゲルカラムクロマトグライフィー（酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ２１／１７／３．６／１０ ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）による生成で、２２１ ｍｇの化合物４２を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．６３、シリカゲル、酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ５／５／１／３ （ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）。
【０１０２】
製造例 ３８
メチル （２−（ベンジルオキシカルボニル）アミノ−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩 （４３）
ポリオール ４２ （１９．６ ｍｇ、０．０１８ ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．６２ ｍｌ）に溶解する。三酸化硫黄−トリエチルアミン複合体（１１４ ｍｇ）を加え、混合物を、光を遮蔽して５５℃で２０時間撹拌する。溶液を０．２Ｍ塩化ナトリウム溶液で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラムに沈着させる。生成物を含む画分を濃縮し、水で溶出する同じカラムを用いて脱塩する。凍結乾燥後に、２８．５ ｍｇの化合物４３を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋４８° （Ｃ ＝ ２．７５、水）。
【０１０３】
製造例 ３９
メチル （２−アミノ−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩 （４４）
ｔｅｒｔ−ブタノール（３３３μｌ）／水 （５００μｌ）混液中の化合物４３ （２７．５ ｍｇ、０．０１５ ｍｍｏｌ）の溶液を、１０％パラジウム−炭素（８．２５ ｍｇ）の存在下、水素圧（５ ｂａｒ）下に１６時間処理する。ろ過後に、溶液を濃縮し、残渣をセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラム（３ （ ９２ ｃｍ）に沈着させる。水による溶出および凍結乾燥後に、２３．７ ｍｇの化合物４４を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋５８° （Ｃ ＝ １、水）。
スキーム １１ −　テトラサッカライド４８の合成
【０１０４】
【化６１】
2004509902.tif 000042
【０１０５】
製造例 ４０
メチル （４−Ｏ−レブリニル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（３，６−ジ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシド （４６）
酢酸エチル／ｔｅｒｔ−ブタノール（７２ ｍｌ、１／１、ｖ／ｖ）混液中の化合物４５ （４．５０ ｇ、３．０２ ｍｍｏｌ） （Ｐ． Ｗｅｓｔｅｒｄｕｉｎら、ＢｉｏＯｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９４， ２， １２６７に従って得る）の溶液を、１０％パラジウム−炭素（９．０ ｇ）の存在下、水素圧（４ ｂａｒ）下に６時間処理する。ろ過および濃縮後に、得られた化合物４６を精製せずに次の工程で直接用いる。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．５４、酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ２６／２２／４．６／１７ ｖ／ｖ／ｖ／ｖ。
【０１０６】
製造例 ４１
メチル （メチル ４−Ｏ−レブリニル−２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（メチル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシド （４７）
炭酸水素カリウム（２．７１ ｇ）、次いでヨウ化メチル（３．４ ｍｌ）を、化合物４６ （２．５７ ｇ、２．７１ ｍｍｏｌ）の無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３５ ｍｌ）溶液に０℃で加える。室温で１６時間撹拌後に、反応混合物を０℃に冷却する。ジメチルアミノピリジン（１３２ ｍｇ）、次いで無水酢酸（１．５ ｍｌ）を順次連続して加える。混合物を１６時間撹拌する。過剰の無水酢酸を中和した後に、混合物を酢酸エチルで希釈する。有機相を１０％硫酸水素カリウム溶液、水、次いで炭酸水素ナトリウムの飽和溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、次いで蒸発乾固する。残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー［シクロヘキサン／（酢酸エチル／エタノール １／１） ９／５］により精製し、２．５１ ｇの化合物４７を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．４１、トルエン／アセトン ２／１ ｖ／ｖ。
【０１０７】
製造例 ４２
メチル （メチル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（メチル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシド （４８）
化合物４７ （２．５ ｇ、２．５６ ｍｍｏｌ）をトルエン／エタノール混液（１／１ ｖ／ｖ、５００ ｍｌ）に溶解する。ヒドラジン酢酸塩（１．０１ ｇ）を加える。室温で２時間撹拌後に、反応混合物を濃縮乾固する。残渣をジクロロメタンに溶解する。有機相を２％炭酸水素ナトリウム溶液および水で順次洗浄すし、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、次いで蒸発乾固させる。シリカゲルカラムクロマトグライフィー（トルエン／酢酸エチル １／４ ｖ／ｖ）後に、２．０１ ｇの化合物４８を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．３７、トルエン／アセトン ２／１ ｖ／ｖ。
スキーム １２　ペンタサッカライド４９の合成
【０１０８】
【化６２】
2004509902.tif 000043
【０１０９】
製造例 ４３
メチル （６−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（メチル ２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（メチル ２，３，−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシド （４９）
イミデート３８ （１．１８ ｇ、２．８１ ｍｍｏｌ） （Ｊ． Ｂａｓｔｅｎ ら、ＢｉｏＯｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． （１９９２）， ２（９）， ９０１に従って得られた）および化合物４８ （１．８３ ｇ、１．７５ ｍｍｏｌ）をジクロロメタン／ジエチルエーテル混液（１／２ （ｖ／ｖ）、１２６ ｍｌ）に溶解する。４Å モレキュラーシーブ粉末の添加後に、混合物を−２０℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル トリフルオロメタンスルホネートの１Ｍジクロロメタン溶液（４２１μｌ）を加える。３０分後にイミデート（２６６ ｍｇ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル トリフルオロメタンスルホネートの１Ｍジクロロメタン溶液（１６８μｌ）の更なる量を加える。１０分後に、混合物を固形の炭酸水素ナトリウムの添加により中和して、ろ過する。その溶液をジクロロメタンで覆い、２％炭酸水素ナトリウム溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで真空下に濃縮する。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグライフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル ４／３次いで１／１ ｖ／ｖ）により精製し、１．８１４ ｇの化合物４９を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．５７、トルエン／酢酸エチル ３／１ ｖ／ｖ。
［α］Ｄ ＝ ＋９３° （Ｃ ＝ １．１５、ジクロロメタン）。
スキーム １３−　ペンタサッカライド４４の合成
方法 ＩＩ
【０１１０】
【化６３】
2004509902.tif 000044
【０１１１】
製造例 ４４
メチル （２−アジド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシド （５０）
３０％過酸化水素水（４２ ｍｌ）を、−５℃で、化合物４９ （８４５．３ ｍｇ）のテトラヒドロフラン（１０４ ｍｌ）溶液に加える。５分間撹拌後に、水酸化リチウムの０．７Ｍ溶液（１９．２
ｍｌ）を滴下する。
反応混合物を−５℃で１時間、次いで０℃で４時間、最後に室温で１６時間撹拌する。１Ｍ塩酸でそれを中和する。
その溶液を、水で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラム（５ × １ ０００ ｃｍ）に沈着させる。所期の化合物を含む画分を合わせ、濃縮し、ダウエックスＡＧ ５０ ＷＸ４ Ｈ＋樹脂（５０ ｍｌ）のカラムに沈着させる。化合物を０℃で収集し、濃縮し、６１８ ｍｇの化合物５０を生成させる。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．５６、酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ２６／２２／４．６／１７ ｖ／ｖ／ｖ／ｖ。
【０１１２】
製造例 ４５
メチル （２−アジド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロネート）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩 （５１）
化合物５０を用いる直前に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ × ２９ ｍｌ）と共に蒸留する。三酸化硫黄−トリエチルアミン複合体（３．８４ ｇ）を、化合物５０ （６１２ ｍｇ、０．６２４ ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５８ ｍｌ）溶液に加える。混合物を光を遮断して、５５℃で１６時間撹拌する。混合物を０℃に冷却し、炭酸水素ナトリウム（５．３３ ｇ）の水（２００ ｍｌ）溶液に滴下する。混合物を室温で１６時間撹拌し、濃縮乾固させる。
残渣を水に溶解し、その溶液を０．２Ｍ塩化ナトリウム溶液で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラムに沈着させる。生成物を含む画分を濃縮し、水で溶出する同じカラムを用いて脱塩する。凍結乾燥後に、１．０６ ｇの化合物５１を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．５、酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ３／５／１／３ ｖ／ｖ／ｖ／ｖ。
【０１１３】
製造例 ４６
メチル （２−アミノ−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２、３、−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩 （４４）
この加水素分解を２回、そのたびごとに５３４．４ ｍｇの化合物５１について行う。
ｔｅｒｔ−ブタノール（６．７ ｍｌ、１２．６ ｍｌ／ｇ）／水（１０ ｍｌ、１９ ｍｌ／ｇ）混液中の化合物５１（５３４．４ ｍｇ）の溶液を、１０％パラジウム−炭素（１６０ ｍｇ）の存在下、水素圧（５ ｂａｒ）下に、４０℃で４時間処理する。ろ過（ミリポア（商標）ＬＳＷＰ ５μｍろ紙）後に、溶液を濃縮乾固し、５３０ ｍｇの化合物４４を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．４９、酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ３／５／１／３ ｖ／ｖ／ｖ／ｖ。
【０１１４】
【化６４】
2004509902.tif 000045
【０１１５】
【化６５】
2004509902.tif 000046
【０１１６】
【化６６】
2004509902.tif 000047
【０１１７】
【化６７】
2004509902.tif 000048
【０１１８】
【化６８】
2004509902.tif 000049
【０１１９】
【化６９】
2004509902.tif 000050
【０１２０】
実施例 １
メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−ビオチンアミド−６−デスオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩
ビオチン スルホスクシンイミド（１６．５ ｍｇ）を０．５％炭酸水素ナトリウム（１．５ ｍｌ）溶液中の化合物３７ （１８ ｍｇ、３．７２μｍｏｌ）の溶液に加える。
室温で１６時間撹拌後に、反応混合物を、食塩で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラムに沈着させる。
生成物を含む画分を濃縮し、水で溶出する同じカラムで脱塩する。
凍結乾燥後に、１５．９ ｍｇの実施例１の化合物を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋５９° （Ｃ ＝ ０．７８、水）。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ ５０６５．１２； 実測質量 ＝ ５０６４．１８±１．０４原子質量単位。
【０１２１】
実施例 ２
メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（６−［６−（ビオチンアミド）ヘキサミド］−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩
６−（ビオチンアミド）ヘキサノエート（１６．５ ｍｇ）を０．５％炭酸水素ナトリウム（１．５ ｍｌ）溶液中の化合物３７ （１８ ｍｇ、３．７２μｍｏｌ）の溶液に加える。室温で１６時間撹拌後に、反応混合物を、食塩で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラムに沈着させる。
生成物を含む画分を濃縮し、水で溶出する同じカラムで脱塩する。
凍結乾燥後に、１７．９ ｍｇの実施例２の化合物を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋６０° （Ｃ ＝ １．０、水）。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ ５１７８．２８； 実測質量 ＝ ５１７６．３±０．７７原子質量単位。
【０１２２】
実施例 ３
メチル （２，３，４，６−テトラ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［６−（６−ビオチンアミドヘキサミド）ヘキサミド］−６−デオキシ−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−［（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−Ｏ−（２，３，６−トリ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）］３−（６−Ｏ−スルホナート−２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩
スルホスクシンイミジル ６−（６−ビオチンアミドヘキサミド）ヘキサノエート（２３．６ ｍｇ）を、０．５％炭酸水素ナトリウム（１．４ ｍｌ）溶液中の化合物３７ （１７ ｍｇ、３．５１μｍｏｌ）の溶液に加える。
撹拌後１６時間室温で、反応混合物を食塩で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラムに沈着させる。生成物を含む画分を濃縮し、水で溶出する同じカラムで脱塩する。
凍結乾燥後に、１７．４ ｍｇの実施例３の化合物を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋６４° （Ｃ ＝ １．０、水）。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ ５２９１．４４； 実測質量 ＝ ５２９２．１±０．８３原子質量単位。
【０１２３】
実施例 ４
メチル （２−ビオチンアミド−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩
ビオチン Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（４２ ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７５０μｌ）溶液を、化合物４４ （２１．２ ｍｇ、０．０１２ ｍｍｏｌ）の０．５％炭酸水素ナトリウム（７５０μｌ）溶液に加える。室温で１６時間撹拌後に、反応混合物をセファデックス（登録商標） Ｇ−２５ （微細）カラムに沈着させる。
水による溶出および凍結乾燥後に、２２．３ ｍｇの実施例４の化合物を得る。
［α］Ｄ ＝ ＋３８° （Ｃ ＝ ０．１５、水）。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ １９３８．４８； 実測質量 ＝ １９３７．４８±０．１１原子質量単位。
【０１２４】
実施例 ５
メチル （２−［Ｎ−（６−ビオチンアミドヘキサノイル）］−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩
この反応を、２回、そのたびごとに４９４．５ ｍｇの化合物４４に対して行う。
化合物４４ （４９４．５ ｍｇ、０．２８９ ｍｍｏｌ）を炭酸水素ナトリウムの０．５％溶液（１１６ ｍｌ）に溶解する。
炭酸水素ナトリウムの０．５％溶液（１２ ｍｌ）中のスルホスクシンイミジル ６−ビオチンアミドヘキサノエート（１．４６ ｇ、２．６３ ｍｍｏｌ）の溶液を、そこへ滴下する。室温で１６時間撹拌後に、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液を加え、混合物を１時間撹拌する。反応混合物をセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラム（５ （ １ ０００ ｃｍ）に沈着させ、食塩で溶出する。
生成物を含む画分をおよび２回の反応に由来するものを合わせる。
凍結乾燥後に、９９９．２ ｍｇの実施例５の化合物を得る。
ＴＬＣ： Ｒｆ ＝ ０．４２、酢酸エチル／ピリジン／酢酸／水 ３／５／１／３ ｖ／ｖ／ｖ／ｖ。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ ２０５１．６４； 実測質量： ２０５１．６０ ± ０．４３原子質量単位。
【０１２５】
実施例 ６
メチル （２−［６−（６−ビオチンアミドヘキサミド）ヘキサミド］−２−デオキシ−３，４−ジ−Ｏ−メチル−６−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロン酸）−（１→４）−（２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシル）−（１→４）−（２，３−ジ−Ｏ−メチル−α−Ｌ−ヨードピラノシルウロン酸）−（１→４）−２，３，６−トリ−Ｏ−スルホナート−α−Ｄ−グルコピラノシド ナトリウム塩
化合物４４ （３０．１ ｍｇ、１７．６ μｍｏｌ）を炭酸水素ナトリウムの０．５％溶液（７ ｍｌ）に溶解する。炭酸水素ナトリウムの０．５％溶液（１ ｍｌ）中のスルホスクシンイミジル ６−（６−ビオチンアミドヘキサミド）ヘキサノエート（１１８ ｍｇ、１７６ μｍｏｌ） の溶液を、そこへ滴下する。室温で１６時間撹拌後に、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液を加え、混合物を１時間撹拌する。反応混合物をセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラム（２ （ ８５ ｃｍ）に沈着させ、食塩で溶出する。
生成物を含む画分を合わせ、濃縮し、水で溶出するセファデックス（登録商標）Ｇ−２５（微細）カラム（２ （ ８５ ｃｍ）で脱塩する。
凍結乾燥後に、２６．５ ｍｇの実施例６の化合物を得る。
質量：ＥＳＩ法、ネガティブモード：化学的質量 ＝ ２１６４．４８； 実測質量： ２１６４．２９±０．３８原子質量単位。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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