(57)【要約】１週間に１回または１週間で２回投与されるリファラジルでの細菌感染の処置方法。Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓにより引き起こされる結核、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ複合体により引き起こされる感染、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅにより引き起こされる感染およびＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉにより引き起こされる感染を、細菌感染に罹患している患者に１週間に１回または１週間に２回、１〜１００ｍｇのリファラジルを投与することにより処置する方法。この用量レジメにおいて、この処置は迅速かつ有効であり、そして１〜５０ｍｇのリファラジルの日用量で観察される、望ましくない二次的症状を排除する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
約１〜約１００ｍｇの投薬量で、１週間に１回または１週間に２回のリファラジルの投与により、細菌感染を処置するための方法。
【請求項２】
前記リファラジルの投薬量が、５〜５０ｍｇであり、１週間に１回または１週間に２回投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記リファラジルの投薬量が、１０〜２５ｍｇであり、１週間に１回または１週間に２回投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記細菌感染が、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ複合体、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅまたはＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉにより引き起こされる感染である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染が結核である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記結核が、１週間に１回または１週間に２回の４〜６２週間にわたるリファラジルの投与により処置される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
さらに、前記リファラジルが、イソニアジド、エタンブトール、ピラジナミド、ストレプトマイシン、カプレオマイシン、エチオナミド、サイクロセリン、カナマイシン、トブラマイシンまたはアミカシンとの組み合わせで投与される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記結核が８週間にわたり処置される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記結核が１６〜２６週間にわたり処置される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記感染が、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅにより引き起こされる、請求項４に記載の方法。
【請求項１１】
前記Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染が、１〜約５０ｍｇの用量における１週間に１回または１週間に２回の用量のリファラジルで経口的に処置される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記感染が、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ複合体により引き起こされる、請求項４に記載の方法。
【請求項１３】
前記感染が、１〜５０ｍｇリファラジル単独で、またはアジスロマイシンもしくはクラリスロマイシンとの組み合わせで、１週間に１回または１週間に２回の用量で処置される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記リファラジルが、経口的に、経皮的に、非経口的に、局所的にまたは坐剤により投与される、請求項４に記載の方法。
【請求項１５】
前記局所的投与が、吸入、口腔内、または経皮的、および坐剤によってであり、前記非経口投与が、静脈内、腹腔内、皮下または筋肉内である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記薬物が、錠剤、カプセル剤、散剤または徐放性マイクロカプセル剤において投与される、請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の背景）
（発明の分野）
本発明は、１週間に１回または１週間に２回投与されるリファラジル（ｒｉｆａｌａｚｉｌ）で細菌感染を処置する方法に関する。詳細には、本発明は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓにより引き起こされる結核、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ複合体により引き起こされる感染、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅにより引き起こされる感染およびＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉにより引き起こされる感染を、細菌感染に罹患している患者に１週間に１回または１週間に２回リファラジルを投与することにより処置する方法に関する。この用量レジメにおいて、この処置は迅速かつ有効であり、そして１〜５０ｍｇのリファラジルの日用量で観察される、望ましくない二次的症状を排除する。
【０００２】
（背景および関連開示）
Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種により引き起こされる細菌感染、およびＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅまたはＨ．ｐｙｌｏｒｉにより引き起こされる類似の細菌感染は、米国においてそして全世界的に重篤な健康上の問題を引き起こす。例えば、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓにより引き起こされる結核は、発展途上国の域を超えて最も重篤な感染性疾患のうちの１つであり、全世界で１０億人を超える人々が感染している。全世界的な感染率により、毎年８００万人の活動性結核症例を生じ、そして１年あたり２００万人を超える人々が死亡している。米国では、２６，０００の活動性結核の新たな症例が１９９４年に報告された。ＡＩＤＳ患者の増加および発展途上国からの移民の増加のために、米国における活動性症例の数は多い。さらに、多剤耐性結核および播種性のＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ複合体感染の増加が報告されている。
【０００３】
さらに、非運動性で、細菌が細胞内に存在するＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅにより引き起こされる伝染性クラミジア症が増加している。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅは、呼吸器感染（例えば、肺炎、気管支炎、咽頭炎および副鼻腔炎）を引き起こし、そして集団感染（ｃｏｍｕｎｉｔｙ−ａｑｕｉｒｅｄ）肺炎の約１０％と関連している。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染は、地理的に広範に蔓延している。普及した抗体による研究により、多くの人々が、かつてまたは新たな機会にＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに感染していることが示された。
【０００４】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染は、胃腸管の感染である。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉは、ヒトの胃および腸に存在するグラム陰性マイクロフィリック（ｍｉｃｒｏｐｈｉｌｉｃ）生物であり、これは、急性胃炎および粘膜層の炎症の発生と密接に関連する。急性胃炎は、上腹部の疼痛、悪心および嘔吐と関連する。この生物は、処置が困難であり、回復が遅いことは頻繁であり、そして処置は、複数の抗生物質レジメを含む。
【０００５】
従って、新たな型の抗生物質を用いて上記の疾患を処置する方法を提供することは非常に有利である。この新たな型の抗生物質は、所望でない二次的症状かつ有害反応を生じる、複雑な抗生物質処置およびレジメを利用する必要なしに、これらの疾患を引き起こす細菌または生物を有効に処置ならびに／または根絶させ得る。
【０００６】
従って、本発明の目的は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種感染、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染およびＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染を、アンサマイシンとよばれる抗生物質のクラスに属する、比較的新しい抗生物質であるリファラジルの１週間に１回または１週間に２回の投与で処置する方法を提供する。リファラジルは、リファブチンまたはリファンピン（同じクラスの他の２つの抗生物質）のいずれかと同じか、またはそれより良好な活性を有し、そして１〜５０ｍｇの用量でわずか１週間に１回または１週間に２回投与される場合、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ種、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＨ．ｐｙｌｏｒｉの増殖を能動的に阻害する。以前は、リファラジルは、基本的に毎日投与されていたが、重篤であり二次的な有害反応のために、結核および他の感染を処置するための薬物としては中止された。新たに発見された１週間に１回または１週間に２回のレジメは、毎日の投与と同じ有効性を有し、そしてなお、有害反応を排除または有意に低減する。
【０００７】
リファラジル化合物は、その抗菌活性が開示された米国特許第４，９８３，６０２号に記載される。インビトロおよびマウス動物モデルで記載された投薬量は、成人については１０ｍｇ〜１０ｇ／日の用量に対応する。しかし、抗生物質のこれらの用量での治験により毎日投与されたとき、多くの有害反応が生じ、そしてリファラジルでの処置は中止された。
【０００８】
本明細書中に記載される全ての特許、特許出願、および刊行物は、本明細書により参考として援用される。
【０００９】
（発明の要旨）
本発明の１つの局面は、１週間に１回または１週間に２回のリファラジルの投与で細菌感染を処置するための方法である。
【００１０】
本発明の別の局面は、１週間に１回または１週間に２回のリファラジルの投与で結核を処置するための方法である。
【００１１】
本発明のさらに別の局面は、１週間に１回または１週間に２回のリファラジルの投与でＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ複合感染を処置するための方法である。
【００１２】
本発明のさらに別の局面は、１週間に１回または１週間に２回のリファラジルの投与でＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染を処置するための方法である。
【００１３】
本発明のなお別の局面は、１週間に１回または１週間に２回のリファラジルの投与でＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染を処置するための方法である。
【００１４】
（定義）
「リファラジル」は、３’−ヒドロキシ−５’−（４−イソブチル−１−ピペラジニル）ベンゾキサシノリファマイシンを意味し、ＫＲＭ−１６４８としても公知である。
【００１５】
「ＡＮＣ」は、絶対好中球数を意味する。
【００１６】
「ＡＲＳ」は、有害反応を意味する。
【００１７】
「ＡＵＣ０〜２４」は、０〜２４時間の濃度時間曲線下部の面積を意味する。
【００１８】
「ＡＵＣ０〜∞」は、０時間〜無限大のＡＵＣを意味する。
【００１９】
「ＡＺＴ」は、アジドデオキシチミジンを意味する。
【００２０】
「ＢＩＤ」は、１日に２回を意味する。
【００２１】
「ＢＩＷ」は、１週間に２回を意味する。
【００２２】
「ＢＵＮ」は、血液尿素窒素を意味する。
【００２３】
「ＣＦＵ」は、コロニー形成単位を意味する。
【００２４】
「Ｃｍａｘ」は、最大濃度を意味する。
【００２５】
「ＣＬ／Ｆ」は、クリアランス（バイオアベイラビリティーについては補正されていない）を意味する。
【００２６】
「ＣＯＳＴＡＲＴ」は、有害反応条件のシソーラスについてのコード符号（Ｃｏｄｉｎｇ  Ｓｙｍｂｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｓａｕｒｕｓ  ｏｆ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｔｅｒｍｓ）を意味する。
【００２７】
「ＣＵＭ」は、立方マイクロメートルを意味する。
【００２８】
「ＣＹＰ」は、シトクロームＰ４５０を意味する。
【００２９】
「ｄｄＣ」は、ジデオキシシチジンを示す。
【００３０】
「ＥＢＡ」は、初期の殺菌活性を意味する。
【００３１】
「ＥＫＧ」は、心電図を意味する。
【００３２】
「ＥＭＢ」は、エタンブトールを意味する。
【００３３】
「Ｇ６ＰＤ」は、５グルコース−６−ホスフェートデヒドロゲナーゼを意味する。
【００３４】
「ＧＧＴ」は、γグルタミルトランスペプチダーゼを意味する。
【００３５】
「ＩＮＤ」は、調査中の新薬を意味する。
【００３６】
「ＩＮＨ」は、イソニアジドを意味する。
【００３７】
「ＩＰ」は、腹腔内を意味する。
【００３８】
「ＩＲＢ」は、施設内審査委員会を意味する。
【００３９】
「ＩＶ」または「ｉ．ｖ．」は、静脈内投与を意味する。
【００４０】
「Ｋｅ」は、終点速度定数を意味する。
【００４１】
「Ｋａ」は、吸収速度定数を意味する。
【００４２】
「Ｋ／ＣＵ  ＭＭ」は、１立方ミリメートルあたり数千を意味する。
【００４３】
「ＬＤＨ」は、乳酸デヒドロゲナーゼを意味する。
【００４４】
「ＬＥＶ」は、ロキサシンのレベルを意味する。
【００４５】
「Ｍ／ＣＵ  ＭＭ」は、１立方ミリメートルあたり数百万を意味する。
【００４６】
「ＭＡＣ」は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ複合体を意味する。
【００４７】
「ＭＢＣ」は、最小殺菌濃度を意味する。
【００４８】
「ＭＩＣ」は、最小阻止濃度を意味する。
【００４９】
「ＭＴＢ」は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓを意味する。
【００５０】
「トリ種Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ複合体」は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍａｒｉｎｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｋａｎｓａｓｉｉ、およびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｃｒｏｆｕｌａｃｅｕｍを意味する。
【００５１】
「ＮＡＤＰＨ」は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（還元型）を意味する。
【００５２】
「ＰＴ」は、プロトロンビン時間を意味する。
【００５３】
「ＰＴＴ」は、部分トロンボプラスチン時間を意味する。
【００５４】
「ＰＺＡ」は、ピラジナミドを意味する。
【００５５】
「ＲＢＴ」は、リファブチンを意味する。
【００５６】
「Ｒｉｆ」または「ＲＭＰ」は、リファンピンを意味する。
【００５７】
「ＱＩＤ」は、１日に１回を意味する。
【００５８】
「ＱＩＷ」は、１週間に１回を意味する。
【００５９】
「ＳＤ」は、標準偏差を意味する。
【００６０】
「ＳＧＯＴ（ＡＳＴ）」は、グルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ（アスパラギン酸トランスフェラーゼ）を意味する。
【００６１】
「ＳＧＰＴ（ＡＬＴ）」は、血清グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（アラニントランスフェラーゼ）を意味する。
【００６２】
「ＴＢ」は、結核を意味する。
【００６３】
「Ｔｍａｘ」は、最大濃度までの時間を表す。
【００６４】
「ｔ１／２」は、半減期を表す。
【００６５】
「ｔ１／２ ａｂｓ」は、吸収半減期を表す。
【００６６】
「ＵＵＧ」は、μ−μｇを意味する。
【００６７】
「Ｖβ／Ｆ」は、最終期と関連する容積を意味する（バイオアベイラビリティーについては補正されていない）。
【００６８】
「Ｖｓｓ／Ｆ」は、定常状態における分布容量を意味する（バイオアベイラビリティーについては補正されていない）。
【００６９】
「ＷＢＣ」は、白血球を意味する。
【００７０】
（発明の詳細な説明）
本発明は、インビトロ、インビボおよび１〜１００ｍｇ、好ましくは１〜５０ｍｇのリファラジルの１週間に１回または１週間に２回の用量が、この薬物の毎日の投与で観察された、有害反応および望まれない二次的症状なしに、有効に細菌感染を処置する治験における知見および確認に基づく。
【００７１】
リファラジルは、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種に対して有効であることが見出されたが、有効な抗菌活性のためには日用量レジメが必要であると考えられており、リファラジルは重篤な有害反応および二次的症状を引き起こすために、マイコバクテリアによる疾患の処置のための治療剤としては未だ使われたことがなかった。この有害反応としては、重篤な頭痛、倦怠感、発熱、背中の疼痛、筋肉痛、悪寒、眩暈感、悪心、嘔吐、身体の疼痛（ｂｏｄｙ  ｐａｉｎ）および虚弱などを伴うインフルエンザ様症状が挙げられる。さらに、リファラジルの毎日の投与は、血球数の変化（特に白血球数の減少（白血球減少症）、絶対好中球数の減少および血小板数の減少ならびに血中ヘモグロビン減少）を生じる。これらの理由のために、リファラジルの毎日の投薬を含む治験は中止された。
【００７２】
１週間に１回または多くても１週間に２回の投薬レジメでのリファラジルは、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、トリ種Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ複合体、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉの根絶、ならびに結核、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ感染、オウム病、性病性リンパ肉芽腫、トラコーマ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅによって引き起こされる封入体結膜炎およびＨ．ｐｙｌｏｒｉにより引き起こされる胃炎の処置のために有効であることが今や見出され、そして、これが本発明の目的である。
【００７３】
（Ｉ．動物モデルでのインビトロおよびインビボ研究）
リファラジルならびにその関連薬物であるリファンピンおよびリファブチンは、全てがリファマイシンとしてまとめて記載される群に属し、インビトロ、インビボの動物モデルにおいて、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ種に対して抗菌活性を示すことが公知であった。
【００７４】
（Ａ．リファラジルの物理学的、化学的および薬学的特性）
リファラジルは、以下の化学構造：
【００７５】
【化１】
2004538236.tif 000002
の３’−ヒドロキシ−５’−（４−イソブチル−１−ピペラジニル）ベンゾキサシノリファマイシンである。
【００７６】
「リファラジル」は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ亜種に対して抗菌活性を示す、本来はＮｏｃａｒｄｉａ  ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉから単離された抗生物質の複雑な群であるリファマイシンのメンバーである。リファマイシンは、アンサマイシンとよばれる抗生物質のクラスに属し、これは、芳香族系の非隣接（ａｎｓａ）位置を横切る大環状のラクタム架橋を含む。
【００７７】
リファラジルは、安定かつ水に本質的に不溶性の非極性分子である。２つの化学的に関連する薬物物質であるリファンピンおよびリファブチンは、類似の生物学的活性を有することが公知である。
【００７８】
リファラジル合成は、米国特許第４，９８３，６０２号に開示され、本明細書中でその全体が参考として援用される。インビトロおよびインビボでのその公知の活性は、Ｒｅｃｅｎｔ  Ｒｅｓ．Ｄｅｖｅｌ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，２：３７（１９９７）に記載され、本明細書中に参考として援用される。これらの研究により、インビボおよびインビトロでのリファラジルの抗菌活性が確認されるが、このような活性は、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに感染したマウスに対して２．５および５ｍｇの薬物を毎日投与する（約１７５または３５０ｍｇリファラジル用量／日／７０ｋｇのヒトに対応する）ことに基づく。
【００７９】
さらに、インビボ研究を行い、そこでは治療的有効用量のリファラジルおよびリファンピンを種々の間隔で与えた。１０ｍｇ／ｋｇの用量（７０ｋｇのヒトあたり７００ｍｇに対応する）を週に６回投与して、マウスに誘導されたＭ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染を処置したときには、肺において病変は観察されず、そしてこのような処置が、肺におけるｌｏｇ  ＣＦＵの約８０％の減少をもたらした。週に２回または週に１回の投与により、細菌の約３５％の減少がもたらされた。そして、これらの非常に高投薬量の週に１回の投与により、ＣＦＵの約４２％の減少がもたらされた。しかし、使用され、かつ記録されたその用量は、極端であり、そして高すぎて生理学的ではなかった。ヒトにとって、３００ｍｇを超えるリファラジルの日用量は、非生理学的であり、そして５０ｍｇのリファラジルでさえ、毎日ヒトに投与されれば、重篤な有害反応を引き起こす。
【００８０】
（Ｂ．非臨床的研究）
リファラジルを、インビトロで、および動物モデルにおいてインビボで重点的に試験し、そして他のアンサマイシン、リファンピン、およびリファブチンと比較した。以下は、これらの研究の簡単な説明および要旨である。
【００８１】
（１．作用機構）
インビトロ研究は、リファラジルが、細菌のＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼに作用し、そして好気性および嫌気性のグラム陽性細菌の増殖を阻害することを示す。しかし、リファラジルは、グラム陰性細菌に対して比較的不活性である。この活性のスペクトルは、リファンピンおよびリファブチン（２つの関連する薬物）に類似している。
【００８２】
リファラジルは、多くのｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ亜種（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ（ＭＴＢ）およびＭ．ａｖｉｕｍ複合体（ＭＡＣ）を含む）、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、およびＨ．ｐｙｌｏｒｉの強力なインヒビターである。ＭＴＢに対するリファンピンの最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、リファンピンに対する耐性の程度に依存して、＜０．００２〜４．０μｇ／ｍＬの範囲である。同じ株に対して隣合わせで試験した場合、リファラジルのインビトロでの活性は、一貫して、リファブチンまたはリファンピンのいずれかよりも大きい。最小殺菌濃度（ＭＢＣ）は、代表的には、ＭＩＣよりも２〜４倍高い。
【００８３】
リファラジルの効力は、マクロファージにおいて、および動物モデルにおいてインビボで試験されている。リファラジルは、ヒトマクロファージにおいて容易に蓄積し、そしてインビトロで確立されたＭＢＣに等価な濃度において殺菌性である。ＭＴＢ感染の動物モデルにおいて、リファラジルは、脾臓および肺において生物に対して最も活性な単一薬剤であったが、リファラジルとイソニアジド（ＩＮＨ）の組み合わせまたはリファラジルとピラジナミド（ＰＺＡ）の組み合わせは、いずれかの薬物単独の場合よりも、肺において生物に対してより効果的であった（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，４０：２９８（１９９６））。
【００８４】
リファラジルの治療効果はまた、長期間持続する。例えば、Ｍ．ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅに感染させたマウスにおいて、リファラジルは、４週間および８週間の処置の後の器官におけるコロニー形成単位（ＣＦＵ）の数を有意に減少させ、そしてその程度は、リファブチンまたはリファンピンによるよりも大きかった。Ｍ．ａｖｉｕｍ感染のウサギモデルにおいて、リファラジルはまた、コントロールに比較して器官に対する細菌の負荷を減少させた。マウスにおけるリファラジルおよびＩＮＨでの１２週間にわたるＭＴＢ感染の処置は、完全に、感染させた動物の肺および脾臓を滅菌し、そして生物の再増殖を処置後６ヶ月間ほど、排除した。
【００８５】
イヌおよびラットにおける慢性的研究において、有害な効果が観察されないレベルは、１０００ｍｇ／ｋｇであった。３ｍｇ／ｋｇの用量でのラットにおける１４Ｃ−リファラジルの絶対バイオアベイラビリティーは、３０〜４０％であったが、より高い用量では減少した。リファラジルは、血液からゆっくりと排除され（平均最終半減期（ｍｅａｎ  ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｈａｌｆ−ｌｉｆｅ）１２．５時間）、平均の全身的クリアランス（ＣＬ／Ｆ）は、雄のラットで０．１８４Ｌ／時間／ｋｇであり、雌のラットで０．２１７Ｌ／時間／ｋｇであった。血液の有構造（ｆｏｒｍｅｄ）要素への薬物関連放射能の有意な分配が観察された。排除の主要な経路は、肝臓の代謝であるようであり、放射能の大部分（８４％）が糞便から回収された。その尿は少量（５．５％）の放射能を含有していた。
【００８６】
（２．インビトロでのリファラジル抗菌活性）
リファラジルの抗菌活性を、種々の細菌種に対してインビトロで測定した。インビトロ研究は、リファラジルが好気性および嫌気性のグラム陽性細菌の細菌増殖を阻害するが、グラム陰性細菌に対して比較的不活性であることを示す。リファラジルは、多くのＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ亜種の増殖を阻害し（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、３５：５４２（１９９１））、特により増殖の遅いマイコバクテリア（例えば、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍ．ａｖｉｕｍ、およびＭ．ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ）の増殖を阻害する。ＭＩＣ９０比較に基づいて、表１に見られるように、リファラジルは、リファンピンよりも活性であった。
【００８７】
【表１】
2004538236.tif 000003
Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに対するリファラジルのインビトロ活性は、種々の臨床単離株および参照株についての最小阻止濃度（ＭＩＣ）を測定することによって決定されている。これらの研究の結果を、表２に要約する。
【００８８】
【表２】
2004538236.tif 000004
参考文献１：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ，  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，３９：２２９５（１９９５）；参考文献２〜５：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ，  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，３９：４４０（１９９５）、参考文献７および８：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ，  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，３５：５４２（１９９１）。
【００８９】
表２に見られるように、リファラジルは、ＭＩＣ９０比較に基づいて、２５リファンピンより活性であるが、その抗菌活性のスペクトルは、リファンピンと類似している。
【００９０】
Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに対するリファラジルのインビトロ活性は、種々の臨床分離株および標準株についての最小阻止濃度（ＭＩＣ）を測定することによって決定されている。これらの研究の結果を、表３に要約する。
【００９１】
Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、３９：２２９５（１９９５）に記載される研究により、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓの３０個の臨床分離株および２個のストックカルチャー（Ｈ３７ＲｖおよびＫｕｒｏｎｏ）に対するリファラジルのＭＩＣが決定された（表３）。
【００９２】
【表３】
2004538236.tif 000005
表３は、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓの臨床単離株および２個の標準株についてのリファラジル、リファブチン、およびリファンピンの最小阻止濃度（ＭＩＣ）を示す。
【００９３】
表３に見られるように、リファラジルは、ＭＩＣ５０およびＭＩＣ９０の比較に基づいて、リファンピンよりも６４倍大きい活性、およびリファブチンよりも４倍大きい活性を有していた。リファラジルのこの増大した活性はまた、標準株についても観察された。３０個の分離株の個々のＭＩＣの試験は、リファラジルが、３０全ての分離株においてリファンピンよりも活性であり、そして２８個の分離株においてリファブチンよりも活性であったことを示す。
【００９４】
株Ｈ３７Ｒｖ、Ｅｒｄｍａｎ、およびＡｔｅｎｃｉｏを使用しての、ヒトマクロファージにおける細胞外Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓおよびＭ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに対するリファラジルのＭＩＣおよびＭＢＣは、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、４０９：１４８２（１９９６）において記載された。細胞外および細胞内の細菌を、種々の濃度のリファラジルに７または８日間曝露し、マクロファージを、該当する場合には、溶解し、次いで、寒天上にプレーティングすることによってＣＦＵを決定した。ＭＩＣを、薬物とのインキュベーション期間の後に、９９％より多くの増殖を阻害したリファラジルの最低濃度として規定した。ＭＢＣを、薬物とのインキュベーション期間の後に、９９％より多くの細菌を殺傷したリファラジルの最低の濃度として規定した。その研究の結果は、リファラジルのＭＩＣおよびＭＢＣが、細胞内および細胞外の細菌の両方についてのリファンピンよりも少なくとも１０倍低いことを示す（表４）。
【００９５】
【表４】
2004538236.tif 000006
３．インビボでのリファラジル抗菌活性
リファラジルの治療効果を、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓに感染させ、引き続きリファラジルまたはリファンピンで８週間にわたり処置したマウスにおける明らかな肺病変、細菌負荷、および生存時間を測定することによって試験した（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ，Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，３９：２２９５（１９９５））。これらの試験の各々において、リファラジルは、リファンピンよりも疾患の処置において優れていた。
【００９６】
リファンピン感受性Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ株Ｅｒｄｍａｎ（ＭＩＣｒｉｆ＝０．０６ｋｇ／ｍＬ）に感染させたマウスにおける単独および他の薬物との組み合わせでのリファラジルの活性を試験し、そして結果を、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、３８：２２４５（１９９４）に記載する。処置を、感染の１週間後に開始し、そして薬物を、週に５回、４週間にわたり投与した。コントロールマウスを、処置の開始時（初期コントロール）および４週間後（後期コントロール）に屠殺した。
【００９７】
最初の実験は、リファラジル、リファブチン、またはリファンピン（全て２０ｍｇ／ｋｇで）が、未処置マウスに比較して、感染マウスの肺および脾臓において細菌負荷を減少させる能力を比較した。リファラジルは、細菌負荷を、他の２つの薬物よりも有意に大きな程度まで減少させた（Ｐ＜０．０１）。リファブチンとリファンピンとの間では有意差が観察されなかった（Ｐ＞０．０５）。
【００９８】
さらなる実験により、リファラジル（２０ｍｇ／ｋｇ）単独およびＩＮＨ（イソニアジド、ｍｇ／ｋｇ）、ＰＺＡ（ピラジナミド、１５０ｍｇ／ｋｇ）、ＥＭＢ（エタンブトール、１２５ｍｇ／ｋｇ）、またはＬＥＶ（ロキサシンのレベル、２００ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせたリファラジルが、感染マウスの肺および脾臓における細菌負荷を減少させる能力を試験した。
【００９９】
全ての薬物での処置は、ＰＺＡを除いて、コントロールと比較して脾臓におけるＣＦＵを有意に減少させた。ＰＺＡは、コントロールと比較してＣＦＵを有意に減少しなかった。リファラジルは、脾臓における生物に対して最も活性な単一薬剤であった。リファラジルおよびＰＺＡの組み合わせのみが、リファラジル単独よりも活性であった。
【０１００】
肺において、リファラジルまたはＩＮＨでの処置は、初期コントロールに比較して、肺における細胞数を有意に減少させた。後期コントロールに比較して、リファラジル、ＩＮＨ、ＥＭＢ、またはＬＥＶでの処置は、肺における細胞数を減少させた。リファラジルは、最も活性な単一薬剤であった。リファラジルおよびＩＮＨ、またはリファラジルおよびＰＺＡの組み合わせは、リファラジル単独での処置よりも、肺における生物に対して活性であった。
【０１０１】
引き続く研究において、処置期間は、４週間から１２週間まで延長され、そして脾臓および肺における生物の再増殖は、処置後２４週間測定された。リファラジル（２０ｍｇ／ｋｇ）およびＩＮＨ（２５ｍｇ／ｋｇ）の組み合わせは、リファラジル単独（２０ｍｇ／ｋｇ）、ＩＮＨ単独（２５ｍｇ／ｋｇ）、リファンピン単独（２０ｍｇ／ｋｇ）、およびリファンピンとＩＮＨとの組み合わせ（それぞれ、２０ｍｇ／ｋｇおよび２５ｍｇ／ｋｇ）と比較して、マウスの脾臓および肺におけるＣＦＵの数を減少させることにおいて、有意により有効であった。
【０１０２】
４．他の細菌に対するインビトロおよびインビボ活性
リファラジル活性をまた、他の細菌および生物に対して試験した。リファラジルは、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅに対して、およびＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉに対して強力な抗菌活性を示す。
【０１０３】
感受性試験を、細胞培養物においてＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ株ＴＷ−１  ８３に対して、リファラジル、クラリスロマイシン（ｃｌａｎｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）、またはアジスロマイシンを使用して行った。これらの研究において、リファラジルは、クラリスロマイシンよりも３００倍強力であり、そしてエリスロマイシンよりも１５００倍強力であった。リファラジルのインビボ試験は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ株ＡＲ−３９に感染させたマウスモデルを使用した。その結果は、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅが、１ｍｇ／ｋｇ  ＱＩＤでの３日間にわたるリファラジルの腹腔内注射によるリファラジル処置の終了後５日目に、動物の肺から検出可能ではなかったことを示した。全てのコントロール動物は感染したままであった。
【０１０４】
リファラジル殺菌活性をまた、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉの２４個の株に対してインビトロで評価した。これらの研究において、リファラジルは、アモキシシリンおよびリファンピンよりも、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉに対してより強力な抗菌活性を示した。Ａｂｓｔｒａｃｔ、４ｔｈ  Ｊａｐａｎ−Ｋｏｒｅａ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  ｏｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、Ｔａｋａｓｈｉｍａｙａ，Ｊａｐａｎ、Ｏｃｔｏｂｅｒ  ２２−２３（１９９８）に記載される時間殺傷（ｔｉｍｅ−ｋｉｌｌ）研究は、０．０４ｍｇ／ｍＬのリファラジルを含むブロス培地における２４時間でのＣＦＵが、ゼロ時間でのコントロールよりも４．５  ｌｏｇを超えてより低いことを明らかにし、リファラジルの強力な細菌活性を示した。同じ条件下で、０．３１ｍｇ／ｍＬのアモキシリンは、２４時間後、ＣＦＵ／ｍＬにおけるわずか１  ｌｏｇの減少を生じたに過ぎなかった。
【０１０５】
上記の結果は、リファラジルが非常に良好な抗菌活性を有し、そしてＣｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉによって引き起こされる細菌感染の処置のための薬物のより良い選択であることを示す。
【０１０６】
（５．リファラジルの薬理学）
薬理学的研究を、マウス、ラット、およびイヌ、ならびに単離されたモルモット回腸において行った。その前臨床薬理学データは、リファラジルが、重要な中枢神経系／自律神経系、呼吸器系、心血管系、消化系、または腎の薬理学的効果を有さないことを示した。
【０１０７】
リファラジルは、１００、３００、または１，０００ｍｇ／ｋｇの経口投与後、マウスの臨床的徴候または全体的な行動に対してほとんど効果がなかった。リファラジルは、１００および３００ｍｇ／ｋｇで、マウスの自発的歩行運動活動に対して効果を有さなかった。１０００ｍｇ／ｋｇで、リファラジルは、１時間、自発的歩行運動活動の増大を引き起こした。
【０１０８】
（６．リファラジルの薬物動態学）
薬物動態学パラメータを、ラットおよびイヌにおいて単回用量および複数回用量に続いて決定した。ラットおよびイヌにおける用量は、単回および複数回用量の毒性学研究において利用されるものに基づいていた。さらに、リファラジルの吸収、分配、代謝、および排除を、ラットおよびイヌにおいて研究した。これらの研究は、リファラジルでの処置に対する感受性および応答性に関して、種の差異が存在するという以前の知見を確認する。
【０１０９】
ラットおよびイヌにおける前臨床的薬物動態学データは、全血からのリファラジルの消失および／または代謝が、ゆっくりであり、そして有意な全血濃度が、反復的な経口投与後に達成され得ることを示した。反復された投与に際して、リファラジルＣｍａｘおよびＡＵＣ値におけるわずかな増加が、ラットおよびイヌにおいて観察された。このような増加は、薬物蓄積と一致した。イヌおよびラットの両方における脱アセチル化を介してのリファラジルの有意な代謝、ならびにイヌのみにおける水酸化は、単回用量および複数回用量研究の両方において生じた。さらに、両方の代謝物の有意な蓄積が、イヌにおける反復的リファラジル投与に続いて観察された。
【０１１０】
（７．リファラジルの毒性学）
単回用量および複数回用量の経口毒性学研究を、マウス、ラット、およびイヌにおいて行った。さらに、全身的曝露を最大にするために、単回用量の静脈内（ＩＶ）および腹腔内（ＩＰ）研究を、ラットおよびマウスにおいて行った。イヌおよびラットにおける４週および１３週の経口研究、ならびにラットにおける２６週の経口研究には、標準的な臨床測定ならびに生理学的および病理学的評価が含まれていた。
【０１１１】
これらの研究の条件下で、リファラジルは、単回用量および複数回用量の経口投与の後、動物モデルにおいて比較的十分に寛容性であった。血液学的な変化を、ラットおよびイヌの両方において、＞３０ｍｇ／ｋｇの用量での複数回用量の経口投与後に記録した。１，０００ｍｇ／ｋｇでのイヌにおける肝臓の重量のわずかな増加とは別に、ｍｇ／ｋｇベースで最高の見積もられた臨床的用量よりも約１００倍高い用量でのイヌおよびラットにおける毎日の投与の４週間後に、いかなる有意な全身的標的器官の変化の証拠も存在しなかった。
【０１１２】
２６週研究において、＞３０ｍｇ／ｋｇ／日で投与されたラットの脾臓における用量に関連するリンパ球枯渇が観察された。これらの動物におけるより低い絶対脾臓重量および相対脾臓重量は、この見かけのリンパ球損失と相関していた。処置動物の脾臓におけるリンパ系の枯渇および減少した末梢血リンパ球数は、特定の濃度で、リファラジルが、有害反応を引き起こすことを示す。しかし、日和見感染が観察されなかったので、この研究におけるその動物が、免疫抑制されたという証拠はない。
【０１１３】
リファラジルの、イヌへの毎日の経口投与の１３週研究は、「観察された有害な効果のないレベル」が、イヌについて３００ｍｇ／ｋｇであることが考えられたことを示した。より低いリンパ球数は、処置後４週間以内に逆転されず、それゆえ、イヌにおけるこの効果の長期的結果は、未知である。
【０１１４】
マウスにおけるこれらおよび他の知見は、動物とヒトとの間で有害反応応答において、明確な種の差異が存在することを示す。マウス、ラット、およびイヌにおいて、３００ｍｇ／ｋｇを超えるリファラジル投薬量は、長期の研究において十分に寛容性であったが、一方、このような寛容性はヒトのボランティアにおいては見出されなかった。用量３００ｍｇ／日は、重篤な有害反応を引き起こし、そしてこのレベルでの毎日の投与を、継続できなかった。２５、５０、および１００ｍｇ／日の用量はまた、ヒトボランティアにおいて重篤な有害反応を引き起こした。
【０１１５】
従って、動物とヒトとの間の種の差異は、十分に記録されており、そして研究室動物において得られた実験結果を、ヒトにおいて推定することはできないことを示す。
【０１１６】
（ＩＩ．臨床研究）
臨床研究を、健常ボランティアおよび結核と診断された患者の両方に対して行った。
【０１１７】
（Ａ．健常ボランティアにおけるリファラジルの安全性、薬物動態学、および毒性学）
（１．臨床研究設計）
合計４回の治験を、ヒトにおけるリファラジルの効果を研究するために行った。２つの単回用量の第１相治験（００１）および（００２）により、正常な、健常な、絶食した被験体において、リファラジルの安全性および薬物動態学を評価した。００１治験において、３００ｍｇの単回用量のリファラジルを、６名の被験体に投与した。００２治験において、３０ｍｇまたは１００ｍｇの単回用量を、各々８名の被験体に投与した。これらの研究の結果は、３０ｍｇまたは１００ｍｇ用量と比較して、３００ｍｇ用量で、実質的により高い有害反応の発生数を示した。
【０１１８】
第３（００３）および第４（００４）の第１相治験は、複数用量の研究であった。動物試験からの証拠は、リファラジルが食品と共に投与された場合に増大したバイオアベイラビリティを示したので、摂食した被験体、正常被験体、健常被験体におけるリファラジルの安全性および薬物動態学をさらに評価するように、治験を設計した。
【０１１９】
第３の治験（００３）は、無作為化され、上昇性（ｒｉｓｉｎｇ）の、二重盲検で、複数用量のプラシーボ制御された研究であった。ここで、被験体は、０、５、および２５ｍｇ／日での薬物投与の連続した１４日間、および薬物適用を伴わない、さらなる１４日間の間観察された。すべての被験体は、標準化された朝食の食後３０分以内にこの用量を受けた。被験体を２群に分けた。群１において、毎日２５ｍｇ用量のリファラジルに対して８名の被験体を無作為化し、そしてプラシーボに対して４名の被験体を無作為化した。２５ｍｇ用量を数日間投薬した後で、多くの有害反応が現れ始め、２５ｍｇの日用量が安全ではないこと明らかとなった。従って、安全性のデータを再考した後、群２においては５ｍｇの低用量で進めるように研究プロトコールを修正した。群２は、毎日５ｍｇ用量のリファラジルに対して無作為化された８名の被験体、およびプラシーボに対して無作為化された４名の被験体からなった。
【０１２０】
第４の治験（００４）もまた、無作為化され、上昇性（ｒｉｓｉｎｇ）の、二重盲検で、複数用量のプラシーボ制御された研究であった。この治験において、毎週用量のプラシーボまたはリファラジル（２５ｍｇまたは５０ｍｇ）を、合計４週間の間、被験体に投与した。すべての被験体は、標準化された朝食の食後３０分以内にこの用量を受け、そして最後の投薬後のさらなる１４日間の間モニターされた。プラシーボに対して４名の被験体を無作為化し、２５ｍｇのリファラジルに対して６名の被験体を無作為化し、そして５０ｍｇのリファラジルに対して８名の被験体を無作為化した。
【０１２１】
第３および第４の第１相研究の両方は、有害反応の数および重篤度、ならびに分解までの時間を観察するために、最後の投薬後に、投薬を伴わない１４日間を含めた。安全性を、身体検査、生命徴候および心臓機能のモニタリング、血液、血清、および尿中の臨床的検査値の測定、ならびに有害反応を考証することによって評価した。全身的な薬物レベルを、各用量群において測定した。
【０１２２】
（２．リファラジル投与後に健常被験体に観察された有害反応）
４つすべての第１相研究における有害反応の大半は、試験薬物と関連すると考えられた。すべての試験において最も一般的な有害反応は、頭痛であった。他の一般に報告された有害反応（これは、「インフルエンザ様」の症状を集合的に含む）は、熱、背痛、悪寒、眩暈感、悪心、嘔吐、体の痛み、および衰弱を含んだ。これらの「インフルエンザ様」の症状はまた、２つの他の関連のあるリファマイシン（リファンピンおよびリファブチン）について記載されている。
【０１２３】
生命徴候および身体的評価は、正常なパラメータの範囲内であり、そして試験全体を通して変化はなかった。すべてのＥＫＧの知見は、臨床的に重要でないものとしてコードされ、それらは正常、正常付近、または正常の境界であった。
【０１２４】
（３．単回用量研究−治験００１および００２）
第１（００１）および第２（００２）の治験において、有害反応、検査パラメータにおける変化、およびリファラジルの薬物動態学を、３０ｍｇ、１００ｍｇ、および３００ｍｇのリファラジルの投薬を受けている健常ボランティアにおいて観察した。
【０１２５】
結果は、表５において示される。表５は、治験００１および００２において観察された、特有の有害反応を報告する被験体の数の比較に関するまとめを示す。表５においてみられるように、３０ｍｇ用量および１００ｍｇ用量と比較して、実質的により多数の被験体が３００ｍｇ用量で有害反応を報告した。
【０１２６】
【表５】
2004538236.tif 000007
得られた有害反応を、表６においてみられるように、重篤度（すなわち、軽度の有害反応、中程度の有害反応、および重篤な有害反応）によって評価した場合に、薬物と関連した有害反応の数および重篤度は、ともに、用量に伴って増加することが見出された。用量とはかかわりなく、すべての有害反応は、薬物中断の２週間以内に解決された。
【０１２７】
【表６】
2004538236.tif 000008
表６においてみられるように、３００ｍｇ用量のリファラジルは、４１の軽度の有害反応、８の中程度の有害反応、および４の重篤な有害反応を生じた。対照的に、プラシーボ、３０ｍｇ用量または１００ｍｇ用量は、それぞれ２、４、または５の軽度の有害反応、ならびに０、０、および２の中程度の有害反応を生じた。プラシーボおよび３０ｍｇ用量および１００ｍｇ用量の両方の群について、重篤な有害反応は観察されなかった。
【０１２８】
治験００１および００２において、すべての患者を臨床検査に供した。この治験では、血液病学、血清化学、および尿検査を、投薬の前、投薬の間、および薬物投与の休止後少なくとも１４日間試験した。
【０１２９】
これらの２つの治験において、白血球（ＷＢＣ）数、絶対好中球数（ＡＮＣ）、血小板数、および血液ヘモグロビンは、用量依存様式で減少した。これらのパラメータは、リファラジルの最後の投与の１４日以内に正常範囲に戻った。これは、他のリファマイシンによって生成される効果と類似であることが注目された。
【０１３０】
これらの２つの治験における全血中のリファラジルの薬物動態学は、血漿中のリファラジルの薬物動態学と類似であった。動物試験から得られたデータとは逆に、ヒト被験体は、より高い血漿対血液比率（１．６：１）を示した。従って、今後の薬物動態学の分析は、血漿中のリファラジル濃度に集中された。表７は、これらの研究において３０ｍｇ、１００ｍｇ、または３００ｍｇのリファラジルの単回用量を投与した後の、絶食した被験体中の血漿濃度に由来する非区分性のパラメータをまとめる。
【０１３１】
【表７】
2004538236.tif 000009
（４．複数用量研究−治験００３および００４）
第３（００３）および第４（００４）の治験において、有害反応、検査パラメータにおける変化、およびリファラジルの薬物動態学が観察された。
【０１３２】
治験００３および００４において観察された特有の有害反応を報告する被験体数の比較に関するまとめは、表８において見られる。
【０１３３】
【表８】
2004538236.tif 000010
表８においてみられるように、より多くの被験体が、より高い用量および／またはより短い投薬間隔のレジメで有害反応を報告した。また、特有な有害反応のより頻繁な発症が、より高い投薬レジメで現れた。
【０１３４】
表９は、最も頻繁に報告された有害反応（これは、００３治験および００４治験のいずれかの試験で、８回以上報告された）を示す。すべてのこれらの有害反応は、「インフルエンザ様」の症状と考えられる。
【０１３５】
【表９】
2004538236.tif 000011
表９において示されるように、毎日の複数用量の００３治験、および１週間に１回の複数用量の００４治験の両方について、有害反応は用量依存であり、そして熱、頭痛、および背痛の最高の発生率は、薬物が毎日投与された治験００３において観察された。複数用量のリファラジル２５ｍｇ／週が投与される場合、同じ用量レジメ（２５ｍｇ）における有害反応の数は、熱について１３から８へ、頭痛について１９から１１へ、そして背痛について１４から５へと実質的に減少した。
【０１３６】
これらの結果は、１週間に１回の用量のリファラジルが、はるかにより低い有害反応の発生数を有することを明らかに示す。
【０１３７】
表８および表９において、毎日投薬量のリファラジルと関連する有害反応に関して、治験００３を治験００４と比較する。表１０および表１１において、毎日投薬量と関連する薬物関連有害反応の数およびこれらの反応の重篤度を、００３治験について、各被験体および各用量に関して示す。
【０１３８】
【表１０】
2004538236.tif 000012
表１０においてみられるように、２５ｍｇのリファラジルを用いる毎日投薬量では、被験体は合計で１１２の有害反応を経験したが、５ｍｇの毎日用量では、８名の被験体が合計で５２の有害反応を経験した。プラシーボ群は、各々わずか１つの有害反応を経験した。この研究は、複数用量のリファラジルが用量依存であり、比較的低投薬量の毎日５ｍｇのリファラジルでさえ、プラシーボと比較して有害反応において実質的な増加を引き起こすことを明らかに示す。
【０１３９】
表１１は、００３治験において観察された、薬物関連有害反応の数および重篤度を示す。
【０１４０】
【表１１】
2004538236.tif 000013
表１１においてみられるように、有害反応の重篤度はまた用量依存であった。２５ｍｇまたは５ｍｇの投薬量のリファラジルを毎日投与された場合、１０２および４６の軽度の有害反応が観察され、そして１０および６の中程度の有害反応が観察された。より高い２５ｍｇ／日の投薬量を用いると、有害反応の数は、軽度の反応については２倍よりも多く、そして中程度の反応についてはほぼ２倍であった。
【０１４１】
表１０および表１１においてみられるように、群２においては（５ｍｇ／日）、４名のプラシーボ被験体のうちの１名と比較して、薬物を受けている８名すべての被験体が、少なくとも１つの有害反応を報告した。７日目までに、５名の被験体がリファラジルの受容を続けたが、３名の被験体は、有害反応が理由で研究から外した。１０日目までに、１名の被験体のみがなお薬物を受容した。投薬は、現場の研究者（ｓｉｔｅ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ）によって１１日後に休止された。従って、毎日のリファラジルの投与は、被験体に受容されないことが見い出され、そしてこのような毎日の投与は、中断される必要がある。
【０１４２】
００３治験において観察された大半の有害反応は、表１１においてみられるように中程度として評価された１６の事象（１６／１６６、すなわち９．６％）を除いて、軽度として分類された。これらの中程度の事象のうちの１０は、群１（２５ｍｇ／日）における２名の被験体の間で生じた。薬物を受容する８名の被験体のうちの７名は、「インフルエンザ様」の症状に起因して、この研究を中断された。これらの被験体のうちの５名はまた、白血球数（ＷＢＣ）において、一致して臨床的に有意な減少を有した。
【０１４３】
群２において（５ｍｇ／日）、４名のプラシーボ被験体のうちの１名と比較して、薬物を受けている８名のすべての被験体が、少なくとも１つの有害反応を報告した（表１０）。報告された有害反応の合計数は、群１の発生数の半分であった。さらに、経験した特有の有害反応の患者あたりの数もまた、群２対群１における数のほぼ半分であった。リファラジルを受容している８名の被験体のうちの５名が、この研究を完了した。３名の被験体は、有害反応のために外した。１名の被験体は、群２について記録されたすべての有害反応のうちの半分を経験した（２６／５２、表１０を参照のこと）。この被験体はまた、群２における重篤度において中程度に格付けされた６つの有害反応のすべてを経験した（表１１）。リファラジルを受容している８名の被験体のうちの３名は、軽度の「インフルエンザ様」の症状を報告したが、これらの被験体のうちのわずか１名が、この研究を早期に中断した。「インフルエンザ様」の症状を経験する３名すべての被験体は、ＷＢＣにおいて、一致して、臨床的に有意な減少を有した。
【０１４４】
治験００４において、詳細には、毎週のリファラジルの投薬に関連する有害反応は、表８および表９において列挙され、そして００３治験の結果と比較される。表１２および表１３は、１週間に１回のリファラジルの投与と関連した薬物関連有害反応の数および重篤度を、００４治験において各被験体および各用量に関して示す。
【０１４５】
【表１２】
2004538236.tif 000014
表１２に見られるように、健常ボランティアへのリファラジルの週１回の投与後に観察される有害反応の数は、投与されたリファラジルの投薬量に直接関連した。投薬量が２５ｍｇ／週であった場合、４６の有害反応が存在した。投薬量が５０ｍｇ／週であった場合、１１５の有害反応（ほぼ２．５倍）が存在した。
【０１４６】
表１３は、００４治験において観察された薬物関連有害反応の数および重篤度を示す。
【０１４７】
【表１３】
2004538236.tif 000015
有害反応の詳細は、表８、９、１２および１３において見られるリファラジルの週間投薬に関連した。１８名の全被験体が、００４治験を完了した。５０ｍｇの群に対して、２５ｍｇの群における被験体について、より少ない固有の有害反応が報告された。さらに、有害反応の用量関連発生数が存在するようである。２５ｍｇの群と比較した場合に、５０ｍｇの群における被験体によって、２倍より多い数の有害反応が報告された（表１２）。７つの有害反応が、プラシーボを受けた被験体によって報告された。２５ｍｇの群中の１名の患者は、有害反応を報告しなかった。報告された有害反応のクラスターは、他の研究と類似のままであった。表１３に見られるように、ほとんどの有害反応（１４０／１６８、８３％）を、重篤度において軽度と分類した。５０ｍｇの群における２１の中度の有害反応および１つの重度な有害反応と比較して、わずか６つの有害反応が、２５ｍｇの群において中度と評価された。５０ｍｇの群における１名の患者は、３０の有害反応を経験し、そのうちの２０が軽度、９つが中度、そして１つが重度と等級付けされた。
【０１４８】
００３治験および００４治験のための実験用試験レジメは、００１治験および００２治験と同じであった。
【０１４９】
異常な実験値を、３つの血液学的パラメータにおいて（血小板数において、白血球（ＷＢＣ）数において、および絶対好中球数（ＡＮＣ）において）００３治験および００４治験の両方の間に、種々の回数で観察した。血清化学データは、血清グルコース、および最初の調査に基づいて臨床的に関連すると考えられていなかった肝機能試験（ＳＧＯＴ、ＳＧＰＴ、ＧＧＴ、およびＬＤＨ））において、少しの異常性を現わした。００３治験においてプラシーボを受ける２名の被験体において上昇した肝機能試験結果を除いては、全ての他の実験用測定値は，正常の確立された範囲内のままであった。治験００３において、１日あたり２５ｍｇのリファラジルを受ける群１の全被験体は、この研究を初期に中止した。
【０１５０】
血液学的パラメータにおける減少の発生および規模は、この用量に関連するようであった。これらのパラメータにおいて低下および引き続く回復をより良好に可視化するために、このデータをグラフ化してこれらの最終投薬に対して被験体を同期化した。００１治験および００２治験から得られた結果を、図１〜７に示す。
【０１５１】
図１は、毎日投与された投薬量０ｍｇ、５ｍｇおよび２５ｍｇのリファラジルを受けた健常ボランティアの白血球（ＷＢＣ）数の平均プロットを示す。正常な範囲の白血球数（図１において「Ｌ」および「Ｈ」の線で示される）は、４．５〜１１Ｋ／ＣＵ  ＭＭである。図１に見られるように、両方の群におけるＷＢＣの平均濃度の減少の発生は、−８日目に投薬を開始して約４日後に現れ、最終投薬の約１〜２日後に最下点に達した。ＷＢＣ数は、４．５Ｋ／ＣＵ  ＭＭの正常範囲をかなり下回って減少した。
【０１５２】
図２は、１４日間毎日２５ｍｇのリファラジルを受けた健常ボランティア（群１）における個々の白血球数を示す。図２において見られるように、群１中の被験体は、ＷＢＣ数において、より大きな低下を経験したが、わずか１名の被験体が、危険なレベルに近づきつつあるレベルである２．０×１０３／ｍｍ３未満に低下するＷＢＣ数を有した。
【０１５３】
図３は、１４日間毎日５ｍｇのリファラジルを受けた健常ボランティア（群２）における個々の白血球数を示す。図３に見られるように、群２中の被験体は、ＷＢＣ数においてより低い減少を経験し、このことは、有害反応の数および重篤度が用量依存性であるという知見と一致する。
【０１５４】
図４は、２４名の健常ボランティアにおける、１４日間毎日０ｍｇ、５ｍｇおよび２５ｍｇのリファラジルの投与後の平均絶対好中球数を示す。図４において見られるように、絶対好中球数の結果は、各群の真の最下点を確立することを困難にする、あまり一貫しないパターンを示した。
【０１５５】
図５および６は、それぞれ、１４日間毎日２５ｍｇのリファラジルを受けた群１における個々の絶対好中球数、および１４日間毎日５ｍｇのリファラジルを受けた群２における個々の絶対好中球数を示す。図５において見られる群１中の４名の被験体（２５ｍｇのリファラジルを受けた）、および図６において見られる群２中の３名の被験体（５ｍｇのリファラジルを受けた）は、ＡＮＣ値＜２．０×１０３／ｍｍ３を経験したが、しかし、いずれの個々の被験体も、＜１．０×１０３ｍｍ３未満に低下したＡＮＣ値を有さなかった。
【０１５６】
血小板数は、図７において示されるように、プラシーボと比較して小さな変化を示し、５ｍｇのリファラジルを受けた群に対しては、２５ｍｇのリファラジルを受けた群において、より小さな変化を生じた。全ての血液学的パラメータは、最終用量の投与後１４日以内に正常に戻った。
【０１５７】
健常ボランティアが、１週間に１用量のみを４週間にわたり受けた場合の００４治験において得られた結果が、図８〜１０に見られる。００１および００２治験における観察の前に一貫して、全体的に、この研究は、毎日の複数用量治験００３と比較して、血液学的パラメータのはるかに小さな規模の変化を生じた。
【０１５８】
図８は、４週間にわたる、０ｍｇ（コントロール）、２５ｍｇおよび５０ｍｇのリファラジルの１週間に１回の投薬量についての平均白血球プロットを示す。この被験体の血液学的パラメータは、さらに２週間、３６日まで続いた。
【０１５９】
図８（１週間に１回の５０ｍｇおよび２５ｍｇのリファラジルの投与）において見られる結果を、図１（１日に１回の５ｍｇおよび２５ｍｇのリファラジルの投与）において見られる結果と比較する場合、ＷＢＣ数における差異が、容易に観察される。図１において、５０および２５投薬量の両方は、およそ２．０ｋ／ＣＵＭＭに対するＷＢＣ数における連続的な低下を示す。一方、図８において、ＷＢＣ数は、全体的に、４．５〜１１．０ｋ／ＣＵＭＭの正常な範囲内にとどまった。
【０１６０】
図９は、１週間に１回、４週間にわたり投与された、０ｍｇ（コントロール）、２５ｍｇおよび５０ｍｇのリファラジルについての平均絶対白血球数を示す。上記のように、被験体のＡＮＣを、３６日目まで追跡した。２５ｍｇの群中の３名の被験体および５０ｍｇの群中の４名の被験体は、ＡＮＣにおいて２．０×１０３／ｍｍ３未満の減少を示した（データは示さず）。しかし、ＡＮＣにおいて、危険であるとみなされる１．０×１０３／ｍｍ３未満の低下を経験した被験体は存在しなかった。
【０１６１】
図１０は、３６日目まで追跡した、１週間に１回、４週間にわたる０ｍｇ（コントロール）、２５ｍｇおよび５０ｍｇのリファラジルの投薬についての平均血小板プロットを示す。図１０において見られるように、血小板に対しては、リファラジルの１週間に１回の投薬は、１５０〜４５０Ｋ／ＣＵ  ＭＭの正常な範囲から外れた検出可能な変化を全く有することなく平凡であった。
【０１６２】
全ての血液学的パラメータは、最終投薬の１４日後に正常に戻った。
【０１６３】
薬物動態学分析は、高速液体クロマトグラフィーを使用して、４つの第１相研究に関与した被験体の血漿および／または全血中のリファラジルの濃度の測定を含む治験に関連づけた。これらの研究において導出されたほとんどの薬物動態学的パラメータは、異なる投薬スケジュール、および状態（例えば、絶食した被験体または摂食した被験体）を反映し、従って、研究を超えて直接的には比較できない。
【０１６４】
００１治験および００２治験についての結果を表７に示し、００３治験についての結果を表１４に示し、そして００４治験についての結果を表１５に示す。いくつかの薬物動態学的パターンを、一貫して観察した。リファラジルは、ゆっくりと吸収され、広範に分布され、そして複数相の過程を介してゆっくりと解毒されるようである。患者間の可変性を実証した。
【０１６５】
尿において測定された非常に低レベルのリファラジルに起因して、リファラジルの解毒は腎臓ではなく、そしておそらく糞便の経路によって生じるようである。さらに、リファラジルの低レベルの酸化的代謝を血漿において見出した。これはさらに、薬物が、変化していない形態においてかまたは親薬物の結合体としてのいずれかで、糞便中に排出されることを示唆する。
【０１６６】
直線状の３コンパートメントモデル、および酵素の誘導を組み込む３コンパートメントモデルを使用する複数用量の薬物動態学を分析するための試みがなされた。しかし、いずれのマルチコンパートメントモデルも、全被験体において薬物動態学的パラメータを正確に特徴付けなかった。有害反応に起因する毎日の投薬および関連した初期の終了、バイオアベイラビリティにおける食物効果からの差異、および非結合用量の投与はさらに、これらの分析を複雑にした。従って、ノンコンパートメントモデルの薬物動態学的パラメータのみが、治験００３および００４について導かれた。
【０１６７】
【表１４】
2004538236.tif 000016
表１４は、００３治験における１４日までの毎日の投薬に由来するノンコンパートメントモデルの薬物動態学的パラメータを示す。
【０１６８】
００４治験において、この複数用量研究の薬物動態学的分析を、第１の投薬（１日目）データ対第４の（最終）投薬（２２日目）から得られたノンコンパートメントモデルでのパラメータの比較に限定した。第４の投薬後の広範なサンプリングのために、この研究によって、複数用量レジメにおいて与えられるリファラジルの最終的な解毒についての最も完全なデータを得た。結果を表１５に示す。
【０１６９】
【表１５】
2004538236.tif 000017
表１５において示されるように、Ｃｍａｘ値およびＡＵＣ値は、用量に比例する増大を実証する。第４の投薬（２２日）からのＣｍａｘは、２５ｍｇ用量の群において約４４ｎｇ／ｍＬであり、そして５０ｍｇ用量の群において約７９ｎｇ／ｍＬであった。１日目での値と２２日目での値との間の変化は、統計学的に有意ではなかった。見かけの平均最終半減期は、２５ｍｇ投薬後に約６１時間であり、そして５０ｍｇ投薬後に約１１０時間であったが、その範囲は完全に可変性であった（それぞれ、２９．５〜１０６．８時間および６５．９〜１４８時間）。ＡＵＣ（０−２４）は、１日目のＡＵＣ値に対して、２２日目において、２５ｍｇ用量について約１７％、および５０ｍｇ用量について約２７％増加した。類似のノンコンパートメントモデルでの薬物動態学的パラメータは、００３治験および００４治験の両方において、２５ｍｇ投薬後に実証された。
【０１７０】
（４．第１相治験００１〜００４の要約および結論）
４つの第１相治験を、健常な男性被験体において安全なプロフィールおよび薬物動態学を調査し、続いて、単回用量（３００ｍｇ、１００ｍｇ、３０ｍｇ）、１４日間投与される日用量（２５ｍｇ、５ｍｇ）、および４週間にわたり投与される毎週１回の用量（５０ｍｇ、２５ｍｇ）としてリファラジルを投与した。結果は、有害反応の数および重篤度における明白な用量関連発生率を実証した。優勢な有害反応は、「インフルエンザ様」症状を含んだ。この症状は、リファンピンおよびリファブチン（同じ薬物動態学的クラスの他の薬剤）で提示されることもまた公知である。この症状は、一般的に軽度であり、そしてまれに、より低くかつより少ない頻度の用量レジメで薬物の中止を生じる。しかし、毎日の投薬レジメに関しては、この症状はより著しくなり、そして数名の患者が、この研究を中止した。
【０１７１】
血液学的パラメータにおける変化もまた、用量に関連しているようである。ＷＢＣ値およびＡＮＣ値における正常の範囲未満への減少が生じるが、これらは、投薬終了の２週間以内に正常レベルに戻った。毎日１回から１週間に１回への投与の変化による投薬間隔の増加は、有害反応の数および重篤度の両方、ならびにまた、血液学的パラメータにおける低下を減少させた。頻度および重篤度に関して、健常な被験体に１週間与えられる２５ｍｇまたは５０ｍｇの用量によって、許容性の安全なプロフィールを得た。
【０１７２】
薬物動態学的分析は、リファラジルを伴った食物の投与が吸収を遅延し、そして用量に比例する様式においてＣｍａｘおよびＡＵＣを増大することを明白に実証してきた。２５ｍｇ用量で見られる平均最終半減期は、約６１時間であった。健常な被験体に対して、４週間にわたって、１週間に１回与えられる２５ｍｇ用量または５０ｍｇ用量のいずれかに伴うリファラジルの蓄積が、最小のようである。
【０１７３】
２５ｍｇの用量の投与後、達成した平均Ｃｍａｘは、約４４ｎｇ／ｍＬであり、これは、リファンピン感受性Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ（１５．６ｎｇ／ｍＬ）のＭＩＣ９０の２〜３倍であった。さらに、リファラジルのマクロファージへの分配のために、リファラジルの治療学的に有利な濃度は、血漿においてよりもマクロファージにおいて、より長く持続することが予測される。従って、投薬間隔の間のＭＩＣ９０未満に低下する血漿濃度は、疾患の処置において臨床的に無意味であり得る。なぜなら、この薬物は、マクロファージに貯蔵され得るからである。
【０１７４】
（Ｂ．ＴＢ患者におけるリファラジル処置の有効性−治験００５）
健常ボランティアに対して実施された研究に続いて、治験００５を、毎日投与されるイソニアジド（ＩＮＨ）単独、または両方毎日投与されるリファンピンと合わせたイゾニアジド、あるいは毎週投与される１０ｍｇもしくは２５ｍｇいずれかのリファンピンと共に毎日投与されるイソニアジドでの結核患者の処置について開始した。
【０１７５】
イソニアジドおよびリファンピンの投薬量を、患者の体重に対して調整した。患者の体重が３５ｋｇ未満である場合、イソニアジドを１０ｍｇ／ｋｇ／用量（最大用量３００ｍｇ）で投与し、そしてリファンピンを１０ｍｇ／ｋｇ／用量（最大用量４５０ｍｇ／用量）で投与した。患者の体重が３５〜４５ｋｇである場合、イソニアジドを３００ｍｇ／用量で、そしてリファンピンを４５０ｍｇ／用量で投与した。患者の体重が４５ｋｇを超える場合、イソニアジドを６００ｍｇ／用量として投与した。
【０１７６】
これらの研究において、以下の試験を実施し、そして表１６〜２１に提示する。微生物学的に評価可能な患者の痰１ｍＬあたりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）のＬｏｇ１０における変化を、表１６に示す。ＩＮＨ処置した患者におけるＷＢＣ数、ＡＮＣ数および血小板数を、表１７に示す。ＩＮＨおよびリファンピンで処置した患者におけるＷＢＣ数、ＡＮＣ数および血小板数を、表１８に示す。毎日ＩＮＨおよび毎週１０／２５ｍｇで処置した患者におけるＷＢＣ数、ＡＮＣ数および血小板数を、それぞれ、表１９および表２０に示す。ＩＮＨおよび１０ｍｇまたは２５ｍｇのリファラジルで処置した患者におけるリファラジル濃度を、表２１に示す。処置の有効性の明確な診断および評価は、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓの存在についての痰の直接的な試験を必要とする。Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染の程度を、コロニーを形成し得る最近の数によって決定し、そしてコロニー形成単位として表す。コロニー形成単位（ＣＦＵ）の数が高い場合、感染は妨害されていない。ＣＦＵが減少する場合、活性なＭ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ細菌の数が減少する。ＣＦＵは、代表的にｌｏｇ１０として表され、従ってこれは、重要な診断的値および処置の評価可能な値を有する。
【０１７７】
結核についての新たな診断および処置の効果が測定のために長期間必要とされることを評価するための１つのチャレンジは、ＣＦＵレベルおよび観察可能な臨床的改善において減少する。すなわち、結核の処置は、長期間（代表的に、少なくとも６ヶ月）でり、そして治療の数ヶ月後の結果としてのみ、臨床的利点が達成されるか否かを決定することが可能である。従って、臨床的研究を、新たな結核治療の初期殺菌活性（ＥＢＡ）を評価するために設計した。治療のＥＢＡを、処置の初期相（例えば、最初の１〜２週間）の間に観察される活性として定義し得る。ＥＢＡ分析を取り込む臨床的研究は、ＥＢＡが数ヶ月後に観察される最終的な治療的利点の良好な指標であるという点に基づく。
【０１７８】
表１６は、微生物学的に評価可能な患者の痰のＬｏｇ１０ＣＦＵ／ｍＬにおける１５日目までの痰の基底を示し、これは、治療の最初の２週間にわたって４つの異なる患者の群についてのコロニー形成単位（ＣＦＵ）における減少を比較する。４つの群の患者を、以下のように処置した：群１は、１４日間ＩＮＨを毎日受け、群２は、１４日間ＩＮＨを毎日、かつリファンピンを毎日受け、群３は、１４日間ＩＮＨを毎日、かつ１４日間にわたって１週間に１回リファラジル（１日目および８日目に１０ｍｇ）を受け、そして群４は、１４日間ＩＮＨを毎日、かつ１４日間にわたって１週間に１回リファラジル（１日目および８日目に２５ｍｇ）を受けた。イソニアジドおよびリファンピンの投薬量は、患者の体重に依存し、そして上記のとおりであった。各研究群における患者の数を、Ｎ値として表す。
【０１７９】
１〜４群の患者数は、それぞれ６名、４名、６名および６名であった。これらの処置後の痰中のＣＦＵの平均の変化をまた、示す。ＣＦＵの変化は、２群および４群について最大であった。これらの群では、毎日のリファンピンの投与と組み合わせた毎日のＩＮＨでの処置（２群）を受けるか、または２５ｍｇ投薬量の週１回のリファラジル投与と組み合わせて毎日、ＩＮＨを投与（４群）された。これらのデータは、比較的ごく低投薬量の１０ｍｇまたは２５ｍｇでの週に１回または週に２回投与されるリファラジルが、結核の慣用的な治療においてリファンピン（６００ｍｇ／日、毎日投与）の有効な代替物であることを示す。
【０１８０】
【表１６】
2004538236.tif 000018
これらの結果は、週１回のＩＮＨ−リファラジルの１０ｍｇまたは特に２５ｍｇ用量の投与が、ＩＮＨリファンピンの毎日の処置と同じくらい結核の有効な処置であることを明白に示す。
【０１８１】
１７〜２０の４つの表は、群１〜４による別々の血液学データを示す。群の処置は、表１６において見られる処置に対応する。これらのデータは、有害反応に関する安全性情報を提供する。なぜなら、血液学的動揺（ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ）は、リファマイシン型薬物による処置と関連する臨床的に最も重要な有害反応のうちの１つと考えられるからである。特に、ＡＮＣ値は、非常に意味のある安全性係数であると考えられる。なぜなら、これは感染と戦う患者の能力に直接関係するからである。
【０１８２】
表１７〜２０に示すように、上の節において、白血球数は、処置の間すべての群において基底値の後、わずかに減少したが危機的に低いレベルには達しなかった。毎日投与された４００ｍｇ以下のＩＮＨと組み合わせた１０ｍｇのリファラジルでの週１回の処置は、ＷＢＣの減少を導かなかった。
【０１８３】
１、２、３および４群のＡＮＣ値の比較（表１７〜２０）の際、ＡＮＣの低下が群２〜４については、基底値後に観察された。しかし、より低いＡＮＣ値は、それが１．０Ｋ／ＣＵ  ＭＭよりも低下しない限り、大きな問題ではない。そのレベルには、ＩＮＨおよびリファラジル１０ｍｇで処置された３群における患者の１名でのみ達したが、その患者は開始時から低いＡＮＣ値を有していた。
【０１８４】
血小板レベルは、どのような処置によっても影響されず、したがって安全性の問題は関与しない。
【０１８５】
血液学的データから導かれる重要な結論は、リファラジルが、ＴＢの処置に慣用的に用いられているリファンピンよりも大きいレベルの血液学的障害（安全性問題）を誘発しないということである。従って、リファラジルは、リファンピンと同じくらい安全であり、そしてより少なくかつ、より頻繁でない投与量で同じくらい有効である。
【０１８６】
【表１７】
2004538236.tif 000019
【０１８７】
【表１８】
2004538236.tif 000020
【０１８８】
【表１９】
2004538236.tif 000021
【０１８９】
【表２０】
2004538236.tif 000022
表２１は、０時間時点でリファラジルを投与された患者において測定されたリファラジルの血漿濃度データをまとめる。このデータは２つの群に分けられ、そしてＩＮＨ＋１０ｍｇリファラジル（３群）およびＩＮＨ＋２５ｍｇリファラジル（４群）とされる。血漿中のリファラジルの濃度は、ｎｇ／ｍＬで表され、そして経時的（時間および日）に示される。ここで値は、研究の２週間にわたって何度か測定される。
【０１９０】
【表２１】
2004538236.tif 000023
観察されたリファラジルの血漿レベルは、健常ボランティアで見られた濃度と類似であった。表２１は、リファラジルの血漿濃度が、１０ｍｇのリファラジルについては０レベルから９．７ｎｇ／ｍＬまで、そして３時間で１５．９３ｎｇ／ｍＬまで増加し、薬物投与後６時間で血漿中の薬物の最大濃度を示す（１０ｍｇリファラジルについて１２．６８ｎｇ／ｍＬ、および２５ｍｇリファラジルについて２８．４７ｎｇ／ｍＬ）ことを示す。血漿中の薬物濃度は徐々に減少するが、７２時間（３日）での血漿中の薬物量は依然として測定可能である。８日での２回目の投与後、両群における薬物濃度は、初回の投与後よりも高いことが見出された。
【０１９１】
ＴＢ患者において得られたデータは、毎週１回または２回投与されるリファラジルが結核の処置に有効であり、そして現在利用可能な他の処置よりも有害反応が少ないことを示す。さらにこれらのデータは、ヒトと動物との間での薬物動態学的データとの間の予期されない差異を再度示す。
【０１９２】
（Ｃ．リファンピンおよびリファブチンを伴うリファラジル処置の比較）
２つの他の現在、ＦＤＡが承認しているリファマイシン、リファンピンおよびリファブチンを用いて同様の研究を行った場合、以下の有害反応がリファンピンおよびリファブチンの代表的な日用量で観察された。
【０１９３】
毎日投与される代表的なリファンピンの日用量＞６００ｍｇは、以下の有害反応を生じ、これらの有害反応としては、「インフルエンザ様」症状（例えば、発熱、頭痛、悪寒、倦怠感）、および造血反応における他の上記に列挙された他の反応（例えば、白血球減少症、血小板減少症、急性溶血性貧血および皮膚反応、胃腸管系（ＧＩ）反応および肝反応、息切れ、ショックならびに腎不全）が挙げられる。
【０１９４】
ＧＩ反応は、胸やけ、上腹部痛、食欲不振、悪心、嘔吐、ガス、けいれん、下痢、口および舌のただれ（ｓｏｒｅ  ｍｏｕｔｈ  ａｎｄ  ｔｏｎｇｕｅ）、偽膜性大腸炎、膵炎を含み、そしてこれは被験体の１％〜２％に経験された。
【０１９５】
肝反応は、肝酵素の無症候性上昇（１４％まで）および肝炎（＜１％）を含んだ。肝臓関連のショック様の症候群の様な他の反応は存在したがまれであった。異常な肝機能検査価、肝機能検査における一過性異常（例えば、血清ビリルビン、ＢＳＰ、アルカリホスファターゼ、血清トランスアミナーゼの上昇）も観察された。
【０１９６】
皮膚科の反応は、被験体の１％〜５％に観察された発疹、かゆみ、蕁麻疹、類天疱瘡反応、紅潮を含んでいた。
【０１９７】
ＣＮＳ反応は、頭痛、傾眠、疲労、眩暈、集中力の不能、精神錯乱、全身性しびれ感、行動変化、およびまれには眼筋疾患を含んでいた。
【０１９８】
血液学的反応は、好酸球増加症、一過性白血球減少症、溶血性貧血、ヘモグロビン減少、溶血および血小板減少症を含んでいた。
【０１９９】
筋骨格系応答は、失調症、筋肉弱化、末端疼痛、骨軟化症および筋疾患を含んでいた。
【０２００】
眼科系の反応は、視覚障害および滲出性結膜炎を含んでいた。
【０２０１】
腎の反応としては、ヘモグロビン尿症、血尿症；腎不全および急性腎不全が含まれていた。
【０２０２】
リファンピンに関連する他の雑多な有害反応は、月経障害、発熱、ＢＵＮの上昇および血清尿酸上昇、可能性のある免疫抑制、肺腫瘍の異常増殖の単独の報告、２５−ヒドロキシコレカルシフェノールレベルの減少、顔面および末端の浮腫、息切れ、喘鳴、血圧低下ならびにショックを含んでいた。
【０２０３】
リファブチン（１５０〜３００ｍｇの単回用量）はまた有害反応を起こしたが、一般にリファンピンよりも良好に許容される。リファブチンを投与された患者の１６％（これに対して、プラシーボでは８０％）において、有害事象に起因する治療の中止が必要であった。中止の主な理由は、インフルエンザ様症状、肝炎、溶血、関節痛、筋炎、呼吸困難を伴う胸部圧迫または疼痛、皮膚変色（＜１％）、痙攣、感覚異常、失語症、錯乱、および心電図上の非特異的Ｔ波変化を含んだ性急な有害反応であった。リファブチンが１０５０〜２４００ｍｇ／日の用量で投与された場合、全身性の関節痛およびブドウ膜炎が起こった。リファブチンが中止された場合、これらの経験は止んだ。
【０２０４】
リファブチンで処置された患者における好中球減少症の発生数は、プラシーボで処置された患者における頻度よりも有意に大きかった。血小板減少症は、リファブチン処置患者のなかで有意に、より一般的ではなく、リファブチンが血小板減少症と明白に関係していたのはまれな例であった。１名の患者がリファブチンに起因した血栓性血小板減少性紫斑病を発症した。
【０２０５】
リファンピンおよびリファブチン両方は、結核の処置のためのＦＤＡ承認の薬物である。Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓを抑制するために必要な高投薬量を考慮し、そしてこれらの薬物の投与に関連する重篤かつ多くの有害反応を考慮すれば、結核の処置の新しい薬物および方法の必要性が明白に存在する。
【０２０６】
リファラジルは、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉおよび他の細菌に対する抗菌活性を有することが示されている。治験００１−００４に記載された有害反応にかかわらず、週１回または２回のリファラジル投与を用いる結核の処置のための新規な方法は、選択されるべき方法である。この方法は、４〜６２週間の間、１週に１回または２回、十分許容される用量（１０ｍｇ／用量および２５ｍｇ／用量）で投与された場合、ＴＢ患者におけるＣＦＵを有効に低下させる。これらの投薬量で、有害反応は、せいぜい軽度かまたは観察不能である。
【０２０７】
動物研究およびヒトボランティアでの研究は、ともに、リファラジルがリファンピンおよびリファブチンより少ない副作用を有し、そして特にＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅおよびＨ．ｐｙｌｏｒｉに対して、より高い高菌活性を有することを示唆する。
【０２０８】
（ＩＩＩ．投与および処方）
薬物製品は、全身的にかまたは非経口的に、すなわち、経口的に、静脈内に、エアロゾルにより、坐剤により、または任意の他の受容可能な薬学的形態で投与される。
【０２０９】
リファラジルは、種々の薬学的に受容可能な添加物および賦形剤とともに単剤としてか、またはイソニアジド、エタンブトール、ストレプトマイシン、ピロラジナミド、カプレオマイシン、エチオナミド、シクロセリン、カナマイシン、トブラマイシンまたはアミカシンのような他の薬物、他のリファマイシンと組み合わせて処方および投与され得る。すなわち、リファラジルは、リファンピンまたはリファブチンと、他の抗菌剤、鎮痛剤、鎮咳剤などとも組み合わせられ得る。互いに対するこれらの薬物の種々の比は、意図した使用に、患者の症状および疾患の重篤度に依存する。互いに対する薬物の種々の組み合わせおよび比は、リファラジルまたは他の薬物とリファラジルの組み合わせを処方する薬剤師の技術の範囲内である。
【０２１０】
代表的に、薬剤製品は、リファラジル、マンニトール（ＵＳＰ）；ヒドロキシプロピルセルロース（ＮＦ）；コロイド性二酸化ケイ素（ＮＦ）；ステアリン酸マグネシウム（ＮＦ）；ポリソルベート８０（ＮＦ）；および水（カプセル充填装置内の材料の流れを可能にする比率で）を含む。例えば、リファラジルは、Ｎｏ．３硬性ゼラチンの暗青色不透明スナップフィットカプセル（Ｎｏ．３  ｈａｒｄ  ｇｅｌａｔｉｎ  ｄａｒｋ  ｂｌｕｅ  ｏｐａｑｕｅ  ｓｎａｐ  ｆｉｔ  ｃａｐｓｕｌｅ）または、錠剤、注射用剤、坐剤などとして調製される。
【０２１１】
上記の治験のために、リファラジルカプセルは、いくつかの異なる強度；５ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇおよび１００ｍｇで調製された。５ｍｇおよび５０ｍｇの強度のカプセルの薬物は、カプセルが等しい重量で、従って、１００ｍｇのカプセルおよびプラシーボカプセルと識別不能であるように、さらなるマンニトール（プラシーボ）と混合され、適切にパッケージされそしてラベルされた。この薬物は室温で貯蔵された。
【０２１２】
（実施例１）
（臨床研究デザイン−健常ボランティア）
本実施例は、上記の臨床研究に用いられたデザインを記載する。このデザインは、代表的なデザインである。投薬量および薬物投与レジメを、研究の目的に従って変化させた。
【０２１３】
（研究デザイン）
オープンラベル試験における被験体に、５、２５、５０、または３００ｍｇ用量のリファラジルの単回または複数の投与を与えた。この研究は、最大の安全投薬レジメを決定するために設計された、無作為化、二重盲検、プラシーボコントロールの間欠用量研究であった。
【０２１４】
被験体の集団は、２つの処置群（それぞれ、６名の被験体からなる）に分割された。それぞれの群における被験体は、４週の間、週に１回プラシーボまたはリファラジルのいずれかを投与されるよう無作為化し、その後２週間の追跡期間を設けた。２つの処置群は、安全性データを検討するに十分な時間となるよう少なくとも２週間あけた。全ての群における被験体に、標準の６０％脂肪の朝食をとって３０分内に薬物またはプラシーボを投与した。
【０２１５】
処置群１における被験体を、４週の間の総量で週１回（ｑ．ｗ．）の２５ｍｇ用量（ｎ＝６）、５０ｍｇ用量（ｎ＝６）、またはプラシーボ（ｎ＝６）のいずれかを投与するように無作為化した。
【０２１６】
（無作為化および盲検化（ｂｌｉｎｄｉｎｇ））
被験体を処置群に無作為に割り当て、そして処置群内で無作為に割り当てた。すべての研究は盲検または二重盲検であった。
【０２１７】
（患者の選択）
本研究を大集団から募集された健常成人ボランティアで実行した。
【０２１８】
（用量の選択）
本研究のための用量選択は、３つの先行する安全性研究および薬物動態学的（ＰＫ）研究から得たリファラジルの安全性プロフィールに基づいていた。これらの研究の結果は、有害反応の発生数が毎日投与の後には、単回投与のあとよりも大きいこと、およびその有害反応が毎日投与の後には、より延長したことを示した。さらに、有害反応の発生数には用量依存性の傾向があるようであった。単回の３００ｍｇの用量は、３０ｍｇまたは１００ｍｇの単回用量のいずれかよりも、より有害反応を生じた。同様に、約２倍程度多い有害反応が５ｍｇの毎日投与群でよりも、２５ｍｇの毎日投与群（００３治験）について記録され、そして有害反応は、単回用量後よりもより延長された。
【０２１９】
（薬物処方）
リファラジルおよび適合するプラシーボをＮｏ．３硬性ゼラチンの暗青色不透明スナップフィットカプセルに調製した。リファラジルカプセルを、４つの異なる強度である、５ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇおよび１００ｍｇに調製した。５ｍｇ、２５ｍｇおよび５０ｍｇ強度のカプセルのリファラジルを、カプセルが同じ重量であり、従ってプラシーボから識別不能であるように、さらなるマンニトール（プラシーボ）と混合した。
【０２２０】
（投薬量および投与）
すべてのカプセルを水とともに経口的に投与した。コンプライアンスを、投与および投与後の口腔の視覚検査により検査した。
【０２２１】
（実施例２）
（結核患者のための臨床研究デザイン）
本実施例は、結核患者で実行された臨床研究に用いるためのデザインを記載する。
【０２２２】
全体的な臨床研究および条件は、実施例１に記載したものと類似していた。倫理的な観点から、本研究にはプラシーボ（コントロール）患者は存在しなかった。すべての患者を、毎日、４００ｍｇのイソニアジド（代表的で、かつＦＤＡ承認のＴＢ処置）を用いるか、または毎日、６００ｍｇのリファンピンと組み合わせた４００ｍｇイソニアジド（これも代表的で、かつＦＤＡ承認のＴＢ処置）を用いるか、または毎日、４００ｍｇのイソニアジドおよび週１回の１０ｍｇリファラジルを用いるか、または毎日４００ｍｇのイソニアジドおよび週１回の２５ｍｇのリファラジルのいずれかを用いて処置した。両方の最近のレジメは、実験であるか、またはＦＤＡのＩＮＤ認可のもとで実行された。
【０２２３】
結核患者に対する治験００５の結果を、上記ＩＩ．Ｂ節に記載する。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、ヒトボランティアに対する治験において使用された毎日の投薬レジメでの白血球数の減少を示す。この治験では、リファラジルの日用量は、プラシーボを与えたコントロール群と比較して、５または２５ｍｇであった。
【図２】
図２は、ヒトボランティアに対する治験において使用された毎日の投薬レジメでの白血球数の減少を示す。この治験では、リファラジルの日用量は、２５ｍｇであった。
【図３】
図３は、ヒトボランティアに対する治験において使用された毎日の投薬レジメでの白血球数の減少を示す。この治験では、リファラジルの日用量は、５ｍｇであった。
【図４】
図４は、ヒトボランティアに対する治験において使用された毎日の投薬レジメでの絶対好中球数の変化を示す。この治験では、日用量は、リファラジルなしのプラシーボを与えたコントロール群と比較して、５または２５ｍｇであった。
【図５】
図５は、ヒトボランティアに対する治験において使用された毎日の投薬レジメでの絶対好中球数の減少を示す。この治験では、リファラジルの日用量は、２５ｍｇであった。
【図６】
図６は、ヒトボランティアに対する治験において使用された毎日の投薬レジメでの絶対好中球数の減少を示す。この治験では、リファラジルの日用量は、５ｍｇであった。
【図７】
図７は、治験における健常ボランティアに対する５および２５ｍｇのリファラジルの、２０回の毎日投与した後の血小板数変化を、プラシーボを与えたコントロール群と比較して示す。
【図８】
図８は、治験における健常ボランティアに対する１週間に１回の２５または５０ｍｇの５週間にわたる投与の後の白血球数変化を、プラシーボを与えたコントロール群と比較して示す。
【図９】
図９は、治験における健常ボランティアに対する１週間に１回の２５または５０ｍｇの５週間にわたる投与の後の、絶対好中球数の変化を、プラシーボを与えたコントロール群と比較して示す。
【図１０】
図１０は、治験における健常ボランティアに対する１週間に１回の２５または５０ｍｇの５週間にわたる投与の後の血小板数変化を、プラシーボのみを与えたコントロール群と比較して示す。
【図１】
2004538236.tif 000024
【図２】
2004538236.tif 000025
【図３】
2004538236.tif 000026
【図４】
2004538236.tif 000027
【図５】
2004538236.tif 000028
【図６】
2004538236.tif 000029
【図７】
2004538236.tif 000030
【図８】
2004538236.tif 000031
【図９】
2004538236.tif 000032
【図１０】
2004538236.tif 000033
【国際公開パンフレット】
2004538236.tif 000034
2004538236.tif 000035
2004538236.tif 000036
2004538236.tif 000037
2004538236.tif 000038
2004538236.tif 000039
2004538236.tif 000040
2004538236.tif 000041
2004538236.tif 000042
2004538236.tif 000043
2004538236.tif 000044
2004538236.tif 000045
2004538236.tif 000046
2004538236.tif 000047
2004538236.tif 000048
2004538236.tif 000049
2004538236.tif 000050
2004538236.tif 000051
2004538236.tif 000052
2004538236.tif 000053
2004538236.tif 000054
2004538236.tif 000055
2004538236.tif 000056
2004538236.tif 000057
2004538236.tif 000058
2004538236.tif 000059
2004538236.tif 000060
2004538236.tif 000061
2004538236.tif 000062
2004538236.tif 000063
2004538236.tif 000064
2004538236.tif 000065
2004538236.tif 000066
2004538236.tif 000067
2004538236.tif 000068
2004538236.tif 000069
2004538236.tif 000070
2004538236.tif 000071
2004538236.tif 000072
2004538236.tif 000073
2004538236.tif 000074
2004538236.tif 000075
2004538236.tif 000076
2004538236.tif 000077
2004538236.tif 000078
2004538236.tif 000079
2004538236.tif 000080
2004538236.tif 000081
2004538236.tif 000082
2004538236.tif 000083
2004538236.tif 000084
2004538236.tif 000085
2004538236.tif 000086
2004538236.tif 000087
2004538236.tif 000088
2004538236.tif 000089
2004538236.tif 000090
2004538236.tif 000091
2004538236.tif 000092
2004538236.tif 000093
2004538236.tif 000094
2004538236.tif 000095
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004538236.tif 000096
2004538236.tif 000097
【国際調査報告】
2004538236.tif 000098
2004538236.tif 000099
2004538236.tif 000100