(57)【要約】本発明は、式Ｉ：【化１１】2004509837.tif 000016で示される化合物、そのＲ，Ｒ−及びＳ，Ｓ−鏡像異性体、並びにその薬学的に許容されうる酸付加塩に関する。式Ｉで示される化合物およびそのＲ，Ｒ−及びＳ，Ｓ−鏡像異性体は、発作又は脳外傷により引き起こされる急性型神経変性；アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病又はＡＬＳ（筋萎縮性側索硬化症）のような慢性型神経変性；細菌又はウイルス感染に関連する神経変性、並びに神経分裂病、不安、うつ病及び慢性／急性疼痛のような疾患を含む疾患の処置のための薬剤として使用されてもよい。
2004509837.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2004509837.tif 000012
で示される化合物、そのＲ，Ｒ−及びＳ，Ｓ−鏡像異性体、並びにその薬学的に許容されうる酸付加塩。
【請求項２】
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオールである、請求項１記載の式Ｉで示される化合物。
【請求項３】
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオールである、請求項１記載の式Ｉで示される化合物。
【請求項４】
（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオールである、請求項１記載の式Ｉで示される化合物。
【請求項５】
請求項１〜４記載の化合物を１つ以上及び薬学的に不活性な賦形剤を含有する薬剤。
【請求項６】
発作又は脳外傷により引き起こされる急性型神経変性；アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病又はＡＬＳ（筋萎縮性側索硬化症）のような慢性型神経変性；細菌又はウイルス感染に関連する神経変性、並びに神経分裂病、不安、うつ病及び慢性／急性疼痛のような疾患を含む疾患の処置のための、請求項５記載の薬剤。
【請求項７】
請求項１記載の式Ｉで示される化合物の調製方法であって、下記式：
【化２】
2004509837.tif 000013
で示される化合物を式ＶＩＩＩ（ラセミ体）、式ＸＩ（Ｒ，Ｒ）又は式ＸＶ（Ｓ，Ｓ）：
【化３】
2004509837.tif 000014
で示される化合物と反応させ、ヒドロキシ基を脱保護して、式Ｉ（ラセミ体）、式Ｉ−１（Ｒ，Ｒ）及び式Ｉ−２（Ｓ，Ｓ）：
【化４】
2004509837.tif 000015
で示される化合物を得て、所望であれば、得られる化合物を薬学的に許容されうる酸付加塩に変換することを含む方法。
【請求項８】
請求項７記載の方法又は同等な方法により調製される、請求項１〜４記載の化合物。
【請求項９】
疾患の処置における請求項１〜４記載の式Ｉで示される化合物の使用。
【請求項１０】
治療適応症が、発作又は脳外傷により引き起こされる急性型神経変性；アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病又はＡＬＳ（筋萎縮性側索硬化症）のような慢性型神経変性；細菌又はウイルス感染に関連する神経変性、並びに神経分裂病、不安、うつ病及び慢性／急性疼痛のような疾患を含む、疾患の処置のための薬剤を製造するための、請求項１〜４記載の式Ｉで示される化合物の使用。
【請求項１１】
本明細書に記載する発明。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、式Ｉ：
【０００２】
【化５】
2004509837.tif 000003
【０００３】
で示される化合物、そのＲ，Ｒ−及びＳ，Ｓ−鏡像異性体、並びにその薬学的に許容されうる酸付加塩に関する。
【０００４】
本発明の化合物は、ＮＭＤＡ（Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸塩）レセプターサブタイプ選択的ブロッカーであり、それらは、学習及び記憶形成と機能を含むＣＮＳの発達の基礎を成す仲介作用においてそれらは主要な役割を演じさせる、ニューロンの活動及び可塑性を調節することにおいて主要な機能を有する。
【０００５】
急性及び慢性型神経変性の病理状態において、ＮＭＤＡレセプターの過剰活性が神経細胞死の引き金となる主要な事象である。ＮＭＤＡレセプターは、２個のサブユニットファミリー、すなわち異なる遺伝子に由来するＮＲ−１（８種の異なるスプライス変種）及びＮＲ−２（Ａ〜Ｄ）のメンバーから構成される。２個のサブユニットファミリーのメンバーは、異なる脳領域において明確な分布を示す。ＮＲ−１メンバーの異なるＮＲ−２サブユニットとのヘテロマーの組み合わせがＮＭＤＡレセプターとなり、異なる薬学的特性を示す。ＮＭＤＡレセプターサブタイプ特異的ブロッカーに関して可能な治療適応症には、例えば発作又は脳外傷により引き起こされる急性型神経変性；アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病又はＡＬＳ（筋萎縮性側索硬化症）のような慢性型神経変性；細菌又はウイルス感染に関連する神経変性並びに神経分裂病、不安、うつ病及び慢性／急性疼痛のような疾患が含まれる。
【０００６】
本発明の目的は、式Ｉで示される新規化合物、そのＲ，Ｒ−及びＳ，Ｓ−鏡像異性体、及びその薬学的に許容されうる塩、例えば発作又は脳外傷により引き起こされる急性型神経変性；アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病又はＡＬＳ（筋萎縮性側索硬化症）のような慢性型神経変性；細菌又はウイルス感染に関連する神経変性並びに神経分裂病、不安、うつ病及び慢性／急性疼痛のような疾患を含む、それぞれのＮＭＤＡレセプターサブタイプの過剰活性により引き起こされる疾患の処置又は予防における使用、対応する薬剤を製造するためのこれらの化合物の使用、これらの新規化合物の製造方法、並びにこれらを含有する薬剤である。
【０００７】
用語「薬学的に許容されうる酸付加塩」は、塩酸、硝酸、硫酸、乳酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等のような無機及び有機酸類との塩を包含する。
【０００８】
４−ヒドロキシピペリジン誘導体は、例えばＥＰ ８２４ ０９８に記載されているが、ピペリジン環が４位で１個のヒドロキシ基により置換されている。これらの化合物は、ＮＭＤＡレセプターに対して活性を有することが記載され、例えば発作又は脳外傷により引き起こされる急性型神経変性；アルツハイマー病、パーキンソン病又はＡＬＳ（筋萎縮性側索硬化症）のような慢性型神経変性；細菌又はウイルス感染に関連する神経変性及び慢性／急性疼痛のような疾患の処置において有用である。
【０００９】
これらの化合物が、レセプターを含有するＮＲ２Ｂサブユニットに高い親和性を持ち、レセプターを含有するＮＲ２Ａサブユニットに低い親和性を持つ、良好なＮＭＤＡレセプターサブタイプ特異的ブロッカーであることは、ＥＰ ８２４ ０９８ により既知である。α１−アドレナリン作動性レセプターに対する活性も低く、化合物は、低ｍｇ／ｋｇ範囲でマウスにおける聴原発作に対してインビボで活性である。重要なことには、これらの化合物は、動物発作モデル、いわゆる中大脳動脈の永久閉塞において神経保護的であった。しかし、インビトロ及びインビボでの心臓毒性試験は、これらの化合物がインビトロで心臓活動電位持続時間を延長させ、その結果インビボで“ＱＴ”間隔を延長させる傾向を有し、したがって心臓不整脈を生ずる潜在的不利益を有することを示した。そのような化合物の心臓活動電位を延長させる能力は、ヒト及び他の種における活動電位再分極のために重要であるｈＥＲＧ型カリウムチャンネルにおける作用により存在が同定され、そしてヒトにおいてＱＴ間隔を延長させることが知られている大多数の化合物には、このチャンネルを遮断する活性がある。したがって、従来技術の化合物は、異種由来組換えヒトＥＲＧカリウムチャンネルを遮断する。
【００１０】
驚くべきことに、現在、下記の式Ｉの化合物：
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール、
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール及び
（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオールが、ＮＭＤＡ　ＮＲ２Ｂサブタイプ選択的アンタゴニストであり、従来技術の化合物、例えば１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕−４−（４−メチルベンジル）ピペリジン−４−オール（ＥＰ ８２４ ０９８）の高度な特異的サブタイプ選択的遮断特性を共有し、そしてインビボにおいて神経保護剤であるが、ｈＥＲＧカリウムチャンネルに対するブロッカーとしての活性は乏しく、したがってヒトにおいて不整脈促進活性を有することはほとんどありそうにないことが見出されている。
【００１１】
下記の表において、本発明の化合物の高度な選択性を示す。
【００１２】
【表１】
2004509837.tif 000004
【００１３】
ａ　〔３Ｈ〕−Ｒｏ２５−６９８１結合の阻害は、レセプターを含有するＮＭＤＡ　ＮＲ２Ｂサブユニットへの親和性を示す。
ｂ　〔３Ｈ〕−プラゾシン結合の阻害は、α１−アドレナリン作動性レセプターへの親和性を示す。
ｃ　哺乳動物細胞株（チャイニーズハムスターの卵巣細胞、ＣＨＯ）に発現させた組換えヒトＥＲＧカリウムチャンネルを遮断する潜在力を示す。
【００１４】
式Ｉで示される新規化合物及びその薬学的に許容されうる塩は、当該技術において既知の方法、例えば、下記に記載の方法により調製することができ、その方法は、
下記式：
【００１５】
【化６】
2004509837.tif 000005
【００１６】
で示される化合物を式ＶＩＩＩ（ラセミ体）、ＸＩ（Ｒ，Ｒ）又はＸＶ（Ｓ，Ｓ）：
【００１７】
【化７】
2004509837.tif 000006
【００１８】
で示される化合物と反応させ、ヒドロキシ基を脱保護して、式Ｉ（ラセミ体）、Ｉ−１（Ｒ，Ｒ）及びＩ−２（Ｓ，Ｓ）：
【００１９】
【化８】
2004509837.tif 000007
【００２０】
で示される化合物を得て、所望であれば、得られる化合物を薬学的に許容されうる酸付加塩に変換することを含む。
【００２１】
記載された方法の変形に従って、４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン、（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン又は（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジンを、Ｋ２ＣＯ３の存在下、１−ベンジルオキシ−４−（２−クロロエトキシ）ベンゼンで処理する。反応を約８０〜１００℃で実施する。次にＯ−保護基を従来の方法、例えばＰｄ／Ｃの存在下で水素化して開裂させる。
【００２２】
式Ｉで示される化合物の酸付加塩は、特に薬学的用途のために好適である。
【００２３】
下記のスキーム１及び２は、式Ｉで示される化合物及びその所望の鏡像異性体形態の調製を記載する。式ＩＩＩで示される出発材料及び１−ベンジルオキシ−４−（２−クロロエトキシ）ベンゼンは既知の化合物であるか、又は当該技術において既知の方法により調製できる。
【００２４】
スキーム１及び２において、下記の略号が使用される：
Ｚ−Ｃｌ　　　　　　　ベンジルクロロホルマート
ＭＣＰＢＡ　　　　　　メタクロロ過安息香酸
ＤＭＡＰ　　　　　　　ジメチルアミノピリジン
Ｐｄ／Ｃ　　　　　　　パラジウム担持炭触媒
ＤＭＦ　　　　　　　　ジメチルホルムアミド
Ｂｎ　　　　　　　　　ベンジル
【００２５】
【化９】
2004509837.tif 000008
【００２６】
ここで、“ｈａｌ”はクロロ又はブロモであってよい。
【００２７】
【化１０】
2004509837.tif 000009
【００２８】
上記の方法の詳細な説明は、実施例１〜１７に記載されている。
【００２９】
前述したように、式Ｉで示される化合物及びその薬学的に許容されうる付加塩は、貴重な薬力学的特性を有する。それらは、ＮＭＤＡレセプターサブタイプ選択的ブロッカーであり、学習及び記憶形成ならびにＣＮＳの発達の基礎を成す仲介作用において主要な役割をそれらに演じさせる、ニューロンの活動及び可塑性を調節することにおいて主要な機能を有する。
【００３０】
下記に示した試験に従って化合物を研究した。
【００３１】
方法１
３Ｈ−Ｒｏ２５−６９８１結合（Ｒｏ２５−６９８１は、〔Ｒ−（Ｒ＊，Ｓ＊）〕−α−（４−ヒドロキシフェニル）−β−メチル−４−（フェニルメチル）−１−ピペリジンプロパノールである）
体重１５０〜２００ｇの雄Ｆｕｅｌｌｉｎｓｄｏｒｆ白ネズミを使用した。小脳及び延髄を除いた脳全体を、冷却Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ　５０ｍＭ、ＥＤＴＡ　１０ｍＭ、ｐＨ７．１緩衝剤２５容量中、ポリトロンを用いて均質化（１０，０００ｒｐｍ、３０秒）して膜を調製した。該ホモジネートを４℃で１０分間、４８，０００ｇで遠心分離した。ペレットを同容量の緩衝剤中にポリトロンを使用して再懸濁し、ホモジネートを３７℃で１０分間インキュベートした。遠心分離した後、ペレットを同じ緩衝剤で均質化し、−８０℃で少なくとも１６時間、しかし１０日間以下で凍結させた。結合アッセイでは、ホモジネートを３７℃で融解させ、遠心分離し、ペレットをＴｒｉｓ−ＨＣｌ　５ｍＭ、ｐＨ７．４冷却緩衝剤中、上記と同様にして３回洗浄した。最終ペレットを同じ緩衝剤に再懸濁し、最終濃度２００μｇタンパク質／ｍｌで使用した。
【００３２】
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ　５０ｍＭ、ｐＨ７．４緩衝剤を使用して、３Ｈ−Ｒｏ２５−６９８１結合試験を実施した。置換試験では、３Ｈ−Ｒｏ２５−６９８１　５ｎＭを使用し、非特異的結合を、テトラヒドロイソキノリン１０μＭを使用して測定し、それは、通常、全体の１０％を占める。インキュベーション時間は４℃で２時間であり、アッセイはＷｈａｔｍａｎｎ ＧＦ／Ｂガラス繊維フィルタ（Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ−９６， Ｐａｃｋａｒｄ， チューリッヒ， スイス）で濾過して停止させた。フィルタを冷却緩衝剤で５回洗浄した。ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ４０ （Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｐａｃｋａｒｄ Ｓ．Ａ．， チューリッヒ， スイス）４０ｍＬを加えた後、フィルタ上の放射能をＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐ−ｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーション計数管でカウントした。
【００３３】
最低８つの濃度を使用し、少なくとも１回繰り返して、化合物の効果を測定した。その相対的な上限及び下限の信頼限界９５％を有するＩＣ５０を提示する非直線回帰計算プログラム（ＲＳ１， ＢＢＮ， ＵＳＡ）を使用して、合併正規化値を分析した。
【００３４】
方法２
３Ｈ−プラゾシン結合
体重１５０〜２００ｇの雄Ｆｕｅｌｌｉｎｓｄｏｒｆ白ネズミを使用した。小脳及び延髄を除いた脳全体を、冷却Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ　５０ｍＭ、ＥＤＴＡ　１０ｍＭ、ｐＨ７．１緩衝剤２５容量中、ポリトロンを用いて均質化（１０，０００ｒｐｍ、３０秒）して膜を調製した。該ホモジネートを４℃で１０分間、４８，０００ｇで遠心分離した。ペレットを同容量の緩衝剤中にポリトロンを使用して再懸濁し、ホモジネートを３７℃で１０分間インキュベートした。遠心分離した後、ペレットを同じ緩衝液で均質化し、−８０℃で少なくとも１６時間、しかし１０日間以下で凍結させた。結合アッセイでは、ホモジネートを３７℃で融解させ、遠心分離し、ペレットをＴｒｉｓ−ＨＣｌ　５ｍＭ、ｐＨ７．４冷却緩衝剤中、上記と同様にして３回洗浄した。最終ペレットを同じ緩衝剤に再懸濁し、最終濃度２００ｍｇタンパク質／ｍｌで使用した。
【００３５】
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ　５０ｍＭ、ｐＨ７．４緩衝剤を使用して、３Ｈ−プラゾシン結合試験を実施した。置換試験では、３Ｈ−プラゾシン０．２ｎＭを使用し、非特異的結合をクロロプロマジン１００ｍＭを使用して測定した。インキュベーション時間は室温で３０分間であり、アッセイはＷｈａｔｍａｎｎ ＧＦ／Ｂガラス繊維フィルタ（Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ−９６， Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｐａｃｋａｒｄ Ｓ．Ａ．， チューリッヒ， スイス）で濾過して停止させた。フィルタを冷却緩衝剤で５回洗浄した。ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ４０ （Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｐａｃｋａｒｄ Ｓ．Ａ．， チューリッヒ， スイス）４０ｍｌを加えた後、フィルタ上の放射能をＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐ−ｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーション計数管でカウントした。最低８つの濃度を使用し、少なくとも１回繰り返して、化合物の効果を測定した。その相対的な上限及び下限の信頼限界９５％を有するＩＣ５０を提示する非直線回帰計算プログラム（ＲＳ１， ＢＢＮ， ＵＳＡ）を使用して、合併正規化値を分析した。
【００３６】
このようにして測定した本発明の化合物の活性は、上記表に記載したように０．０３９〜０．０４５（単位μＭ）の範囲であった。
【００３７】
方法３
ｈＥＲＧ　Ｋ＋チャンネルの阻害の試験方法
ＣＨＯ細胞を、選択用のＳＶ４０−ネオカセットを含有するｐｃＤＮＡ３−ｈＥＲＧ発現ベクターにより安定的にトランスフェクトさせた。細胞を３５ｍｍ皿に薄くプレートし、１／２〜３日後に電気生理学的試験に使用した。
【００３８】
試験の間、細胞を、ＮａＣｌ　１５０、ＫＣｌ　１０、ＭｇＣｌ２　１、ＣａＣｌ２　３、ＨＥＰＥＳ　１０（ＮａＯＨの添加によりｐＨ＝７．３）を含有する（単位ｍＭ）細胞外生理食塩水により連続的に過冷却させた。試験化合物の１０ｍＭ原液を純粋なＤＭＳＯから調製した。試験溶液を、原液を細胞外生理食塩水で少なくとも１０００倍に希釈することにより調製した。全細胞のパッチクランプ記録のためのガラスマイクロピペットを、ＫＣｌ　１１０、ＢＡＰＴＡ　１０、ＨＥＰＥＳ　１０、ＭｇＣｌ２　４．５、Ｎａ２ＡＴＰ　４、Ｎａ２−ホスホクレアチン　２０、クレアチンキナーゼ２００μｇ／ｍｌ（ＫＯＨの添加によりｐＨ＝７．３）含有物（単位ｍＭ）により充填した。
【００３９】
パッチクランプ技術の全細胞配置を試験に使用した。細胞を、−８０ｍＶの保持電位にクランプし、２０ｍＶ続いて直ちに持続時間５０ｍｓの過分極で−１２０ｍＶになる１−ｓコンディショニング脱分極からなる電圧パルスパターンにより繰り返し（０．１Ｈｚ）刺激した。化合物を適用する前に、膜電流を少なくとも３分間（刺激１８回）記録（対照）し、次に２つの異なる濃度の化合物の存在下、更に３分間隔で２回記録した。化合物を適用するそれぞれの間隔の終了時の電流振幅（Ｉｔｅｓｔ）を、初期対照期間の平均電流振幅（Ｉｃｏｎｔｒｏｌ）で除し、化合物の効果を計算した。
効果（％）＝（１−Ｉｔｅｓｔ／Ｉｃｏｎｔｒｏｌ）・１００
化合物の濃度を、予想される５０％阻害濃度（ＩＣ５０）辺で１０進ステップ（通常１及び１０μＭ）により選択した。最初の実験の後、ＩＣ５０が、選択された２つの濃度の範囲外にあることが判明した場合、続く実験においてＩＣ５０をくくれるように濃度を変更した。化合物を少なくとも３個の細胞で試験した。次にそのＩＣ５０を、関数：
効果＝１００／（１−ＩＣ５０／濃度）Ｈｉｌｌ
を使用して、非直線回帰により全ての効果値の母集団から推定した。
１０μＭを超える濃度は試験しなかった。１０μＭの化合物が５０％より低い効果を生じた場合、ＩＣ５０を“＞１０μＭ”と示し、化合物を１０μＭで見られる平均的な効果により特徴付けた。
【００４０】
本明細書に記載される式Ｉで示される化合物及びその塩は、薬学的に不活性な賦形剤と一緒になって、通常の医薬補助材料、例えば、水、ゼラチン、乳糖、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ガム、ポリアルキレングリコール類等のような有機又は無機不活性担体物質と共に、例えば、経口又は非経口適用の標準的な医薬投与形態に混和されることができる、固体形態の医薬調製物の例としては、錠剤、座剤、カプセル剤であり、液体形態では、液剤、懸濁剤又は乳剤である。医薬補助材料には、防腐剤、安定剤、湿潤又は乳化剤、浸透圧を変化させる又は緩衝剤として作用する塩が含まれる。医薬調製物は、また、他の治療上活性な物質を含むことができる。
【００４１】
投与される式Ｉで示される化合物の１日量は、使用される特定の化合物、選択される投与経路及びレシピエントにより変更される。式Ｉで示される化合物の投与方法の代表例は、経口及び非経口型投与経路である。式Ｉで示される化合物の経口配合物は、好ましくは１日当たり１ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲の用量で成人に投与される。式Ｉで示される化合の非経口配合物は、好ましくは１日当たり５ｍｇ〜５００ｍｇの範囲の用量で成人に投与される。
【００４２】
【実施例】
下記の実施例において本発明を更に説明する。
【００４３】
実施例１
４−ベンジル−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＣＨ２Ｃｌ２　５０ｍｌ中の４−ヒドロキシベンジルピペリジン５．０ｇ（２６．２ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下、Ｅｔ３Ｎ　５．５ｍｌ（３９．３ｍｍｏｌ）及びベンジルクロロホルマート３．７ｍｌ（２６．２ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した後、１ＮＨＣｌ　１００ｍｌを加え、水相をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、合わせた有機層を水５０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗生成物を得た。シリカゲル上でクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル４：１〜２：１）により精製して、４−ベンジル−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（１１．９ｍｍｏｌ、４８％）を黄色の油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３２６ （Ｍ＋１）
【００４４】
実施例２
４−ベンジル−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＣＨ２Ｃｌ２　２５０ｍｌ中の４−ベンジル−４−ヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル４０．０ｇ（１２３ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン３９．６ｍｌ（４９２ｍｍｏｌ）を加え、０℃でＳＯＣｌ２　１７．８ｍｌ（２４６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、次に（２Ｎ）ＨＣｌ水溶液２５０ｍｌを加えた。水相をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、４−ベンジル−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル３６．３ｇ（１１８ｍｍｏｌ、９６％）を橙色の油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３０８ （Ｍ＋１）
【００４５】
実施例３
（１Ｒ，６Ｓ）及び（１Ｓ，６Ｒ）−６−ベンジル−７−オキサ−３−アザビシクロ〔４．１．０〕ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステル
ＣＨ２Ｃｌ２　２５０ｍｌ中の４−ベンジル−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル３６．０ｇ（１１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭＣＰＢＡ　４０．９ｇ（１６６ｍｍｏｌ、約７０％）を加えた。反応混合物を２時間撹拌し、１ＮＮａＯＨ溶液を加えた。水相をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、合わせた有機層を１ＮＮａＯＨで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、（１Ｒ，６Ｓ）及び（１Ｓ，６Ｒ）−６−ベンジル−７−オキサ−３−アザビシクロ〔４．１．０〕ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステル３７．６ｇ（１１６ｍｍｏｌ、９９％）を油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３２４ （Ｍ＋１）
【００４６】
実施例４
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＴＨＦ　１７０ｍｌ中の（１Ｒ，６Ｓ）及び（１Ｓ，６Ｒ）−６−ベンジル−７−オキサ−３−アザビシクロ〔４．１．０〕ヘプタン−３−カルボン酸ベンジルエステル３７．６ｇ（１１６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ２ＳＯ４（１０％）３７ｍｌを加えた。反応混合物を１６時間撹拌し、次に減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３で抽出した。水相を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル４０．８ｇ（１００％、純度約９５％）を得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３４２ （Ｍ＋１）
【００４７】
実施例５
（３Ｒ，４Ｒ），４−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（（２Ｓ）−トリフルオロアセチルシクロペンタンカルボニルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＣＨ２Ｃｌ２　６００ｍｌ中の（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル４３．０ｇ（１２６ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ　２３．１ｇ（１８９ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下、（Ｓ）−Ｎ−トリフルオロアセチルプロリンクロリド５００ｍｌ（３４０ｍｍｏｌ、０．７０Ｎ）を滴加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次に飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えた。水相をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３及び１ＮＨＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗生成物を得た。シリカゲル上でクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル４：１〜１：１）により精製し、ジエチルエーテルから結晶化して、（３Ｒ，４Ｒ），４−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（（２Ｓ）−トリフルオロアセチルシクロペンタンカルボニルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル１７．９ｇ（３３ｍｍｏｌ、２７％）を得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ５３５ （Ｍ＋１）， （ｃ ＝ １．１１， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００４８】
実施例６
（３Ｓ，４Ｓ），４−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（（２Ｓ）−トリフルオロアセチルシクロペンタンカルボニルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＣＨ２Ｃｌ２　６００ｍｌ中の（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル４３．０ｇ（１２６ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ　２３．１ｇ（１８９ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下、（Ｓ）−Ｎ−トリフルオロアセチルプロリンクロリド５００ｍｌ（３４０ｍｍｏｌ、０．７０Ｎ）を滴加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次に飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えた。水相をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３及び１ＮＨＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、粗生成物を得た。シリカゲル上でクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル４：１〜１：１）により精製し、ジエチルエーテルから結晶化して、（３Ｓ，４Ｓ），４−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（（２Ｓ）−トリフルオロアセチルシクロペンタンカルボニルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル１４．３ｇ（２７ｍｍｏｌ、２１％）を得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ５３５ （Ｍ＋１）， （ｃ ＝ １．１１， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００４９】
実施例７
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＥｔＯＨ　５００ｍｌ中の（３Ｒ），（４Ｒ），４−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（（２Ｓ）−トリフルオロアセチルシクロペンタンカルボニルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル１７．９ｇ（３３．５ｍｍｏｌ）の溶液に、１ＮＮａＯＨ　２５０ｍｌ（２５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１６時間撹拌し、次に水を加えた。水相をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル１１．２ｇ（３２．８ｍｍｏｌ、９８％）を油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３４２．３ （Ｍ＋１）， 〔α〕２０Ｄ ＝ −３６．７５ （ｃ ＝ １．０２， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００５０】
実施例８
（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＥｔＯＨ　５００ｍｌ中の（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（（２Ｓ）−トリフルオロアセチルシクロペンタンカルボニルオキシ）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル１４．３ｇ（２７ｍｍｏｌ）の溶液に、１ＮＮａＯＨ　２５０ｍｌ（２５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１６時間撹拌し、水を加えた。水相をＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル８．４ｇ（２５ｍｍｏｌ、９２％）を油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３４２．３ （Ｍ＋１）， 〔α〕２０Ｄ ＝ ３５．３０ （ｃ ＝ １．０２， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００５１】
実施例９
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル１．４６ｇ（４．３ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ　３０ｍｌに溶解させ、Ｈ２の常圧下、Ｐｄ／Ｃ（１０％）４００ｍｇの存在下で、室温にて水素化した。１６時間後、反応を完了させ、触媒を濾取し、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン７９６ｍｇ（３．８ｍｍｏｌ、８９％）を油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ２０７．１ （Ｍ）
【００５２】
実施例１０
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル１１．０ｇ（３２ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ　２５０ｍｌに溶解させ、Ｈ２の常圧下、Ｐｄ／Ｃ（１０％）１．１ｇの存在下で、室温にて水素化した。１６時間後、反応を完了させ、触媒を濾取し、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン６．６ｇ（３２ｍｍｏｌ、１００％）を油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ２０７．１ （Ｍ）， 〔α〕２０Ｄ ＝ −４２．３ （ｃ ＝ １．００， エタノール）
【００５３】
実施例１１
（３Ｓ），（４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン
（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル８．２ｇ（２４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ　２５０ｍｌに溶解させ、大気圧下、Ｐｄ／Ｃ（１０％）１．１ｇの存在下で、室温にて水素化した。１６時間後、反応を完了させ、触媒を濾取し、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン５．５ｇ（定量、純度約９５％）を油状物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ２０７．１ （Ｍ）， 〔α〕２０Ｄ ＝ ＋４２．５７ （ｃ ＝ １．０５， エタノール）
【００５４】
実施例１２
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール
ＤＭＦ　１０ｍｌ中の（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン０．２ｇ（１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ベンジルオキシ−４−（２−クロロエトキシ）ベンゼン２９７ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３　０．２ｇ（１．５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を９０℃で１６時間加熱した。水を加えた後、水相を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール５５１ｍｇ（１００％、純度約８０％）を固形物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ４３４．５ （Ｍ＋１）
【００５５】
実施例１３
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール
ＤＭＦ　１５０ｍｌ中の（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン５．０ｇ（２４ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ベンジルオキシ−４−（２−クロロエトキシ）ベンゼン７．４ｇ（２４ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３　５．０ｇ（３６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を９０℃で７２時間加熱した。水を加えた後、水相を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール１０．５ｇ（２４ｍｍｏｌ、１００％）を固形物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ４３４．５ （Ｍ＋１）， 〔α〕２０Ｄ ＝ −２７．５ （ｃ ＝ ０．９５， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００５６】
実施例１４
（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール
ＤＭＦ　１５０ｍｌ中の（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−３，４−ジヒドロキシピペリジン５．０ｇ（２４ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ベンジルオキシ−４−（２−クロロエトキシ）ベンゼン７．４ｇ（２４ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３　５．０ｇ（３６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を９０℃で７２時間加熱した。水を加えた後、水相を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール１０．９ｇ（定量、純度約９５％）を固形物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ４３４．５ （Ｍ＋１）， 〔α〕２０Ｄ ＝ ＋２６．２ （ｃ ＝ １．０４， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００５７】
実施例１５
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール
（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール５５０ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ　１０ｍｌに溶解させ、大気圧下、Ｐｄ／Ｃ（１０％）１００ｍｇの存在下で、５０℃にて水素化した。４時間後、反応を完了させ、触媒を濾取し、溶媒を減圧下で除去して粗生成物を得た。クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ　９：１）により精製して、（３Ｒ，４Ｒ）及び（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール２４９ｍｇ（０．７３ｍｍｏｌ、５６％）を固形物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３４４．４ （Ｍ＋１）
【００５８】
実施例１６
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール
（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール１０．３ｇ（２４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ　３００ｍｌに溶解させ、大気圧下、Ｐｄ／Ｃ（１０％）１．１ｇの存在下で、５０℃にて水素化した。４時間後、反応を完了させ、触媒を濾取し、溶媒を減圧下で除去して粗生成物を得た。クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ　１０：１）により精製し、酢酸エチル及びヘキサンから結晶化して、（３Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール４．６ｇ（１０．６ｍｍｏｌ、４５％）を固形物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３４４．４ （Ｍ＋１）， 〔α〕２０Ｄ ＝ −３６．２ （ｃ ＝ １．０３， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００５９】
実施例１７
（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール
（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ベンジルオキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール１０．３ｇ（２４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ　３００ｍｌに溶解させ、大気圧下、Ｐｄ／Ｃ（１０％）１．１ｇの存在下で、５０℃にて水素化した。４時間後、反応を完了させ、触媒を濾取し、溶媒を減圧下で除去して粗生成物を得た。クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ　１０：１）により精製し、酢酸エチル及びヘキサンから結晶化して、（３Ｓ，４Ｓ）−４−ベンジル−１−〔２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル〕ピペリジン−３，４−ジオール５．７ｇ（１６．６ｍｍｏｌ、６９％）を固形物として得た。
ＭＳ： ｍ／ｅ ＝ ３４４．３ （Ｍ＋１）， 〔α〕２０Ｄ ＝ ＋３７．１ （ｃ ＝ １．０４， ＣＨ２Ｃｌ２）
【００６０】
実施例Ａ
錠剤の処方（湿式顆粒化）
2004509837.tif 000010
製造手順：
１．項目１、２、３及び４を混合し、精製水で顆粒化する。
２．顆粒を５０℃で乾燥させる。
３．顆粒を適切な微粉砕装置に通す。
４．項目５を加え、３分間混合し、適切な成形機で圧縮する。
【００６１】
カプセル剤の処方
2004509837.tif 000011
製造手順：
１．項目１、２及び３を適切なミキサーで３０分間混合する。
２．項目４及び５を加え、３分間混合する。
３．適切なカプセルに充填する。
【国際公開パンフレット】
2004509837.tif 000017
2004509837.tif 000018
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2004509837.tif 000034
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2004509837.tif 000036
2004509837.tif 000037
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004509837.tif 000038
【国際調査報告】
2004509837.tif 000039
2004509837.tif 000040
2004509837.tif 000041