(57)【要約】本発明は、製剤が分散体として存在し、分散体中に存在する粒子がある電荷分布を有し、粒子の少なくとも一部分をイオン交換体の助けによりまたは電気泳動分離プロセスにより分離する、製剤またはその中間生成物を製造する新規な方法に関する。さらに、この方法を実施する装置が開示される。また、この方法に従い得ることができる製剤ならびにそれらの使用が記載される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
製剤またはその中間生成物を製造する方法において、当該製剤が分散体として存在し、分散体中に存在する粒子がある電荷分布を有し、粒子の少なくとも一部分がイオン交換体の助けによりまたは電気泳動分離プロセスにより分離されることを特徴とする方法。
【請求項２】
前記粒子が磁気粒子であることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前記粒子がガス充填粒子であることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
【請求項４】
前記粒子が崩壊性外来粒子であることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
選択すべき粒子の粒度が10 μmより小さいことを特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
【請求項６】
イオン交換体を含有し、そして入口および出口を有する分離チャンバーから成る、請求項1に記載の方法を実施するための装置。
【請求項７】
前記イオン交換体が強または弱アニオン交換体および／またはカチオン交換体であることを特徴とする、請求項6に記載の装置。
【請求項８】
前記イオン交換体が触手 (tentacle) イオン交換体であることを特徴とする、請求項6または7に記載の装置。
【請求項９】
前記イオン交換体がイオン交換膜であることを特徴とする、請求項6〜8のいずれか1項に記載の装置。
【請求項１０】
生理学的に適合性の対イオンを有するイオン交換体が従来記載されており、あるいは吸着されたイオンの置換を生理学的に適合性の塩を使用して実施することを特徴とする、請求項6〜9のいずれか1項に記載の装置。
【請求項１１】
注射または注入器具の中に統合されていることを特徴とする、請求項6〜10のいずれか1項に記載の装置。
【請求項１２】
注射または注入器具用付属フィルターの形態で設計されていることを特徴とする、請求項6〜10のいずれか1項に記載の装置。
【請求項１３】
無菌であることを特徴とする、請求項6〜12のいずれか1項に記載の装置。
【請求項１４】
請求項1に記載の方法により得ることができる製剤。
【請求項１５】
請求項1に記載の方法に従い磁気粒子の懸濁液を処理することによって得ることができる、磁気共鳴診断用造影剤。
【請求項１６】
請求項1に記載の方法に従い超音波造影剤の懸濁液を処理することによって得ることができる、超音波診断用造影剤。
【請求項１７】
造影剤としての請求項14に記載の製剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、製剤が分散体として存在し、分散体中に存在する粒子がある電荷分布を有し、粒子の少なくとも一部分をイオン交換体の助けによりまたは電気泳動分離プロセスにより分離する、製剤またはその中間生成物を製造する新規な方法に関する。さらに、この方法を実施する装置が開示される。また、この方法に従い得ることができる製剤ならびにそれらの使用が記載される。
【０００２】
製剤は分散体の形態で、例えば、非経口的脂肪乳剤または結晶懸濁液として存在することができる。核共鳴断層放射線写真において、磁鉄鉱分散体を造影剤として使用する (例えば、下記文献を参照のこと、EP 186 616、米国特許第5,328,681号、米国特許第5,424,419号、米国特許第5,766,572号)。国際特許出願WO 98／05430において、製剤から磁気物質を分離する方法ならびにこの方法に従い製造される物質が記載されている。ある種の磁気粒子が選択される磁鉄鉱分散体は、磁気共鳴血管造影法に特に十分に適することが示されている。
【０００３】
さらに、高分子量の生体分子、例えば、タンパク質までのイオンはイオン交換法または電気泳動法により分離できることはこの分野において既に知られている (Schwedt、Analytische Chemie、Thieme Verlag、1995、301 ff + 365 ff)。
【０００４】
しかしながら、操作において、無機質、汚染物質、価値のある生成物、およびその他を静電的または電気泳動的に分離するために、粒子をイオン衝撃、容量性誘導または接触帯電により前もって帯電させる (Bronkala、Ullman’s Encyclopedia of Industrial Chemistry (第5版) B2、20−1、VCH Weinheim 1990)。マイクロメートル範囲の粒子の分離は乾式で実施されるが、ナノメートル範囲において分離は湿式で実施される。しかしながら、誘導泳動法では、原理的にすべての化合物は、非帯電であってさえ、分離可能である。なぜなら、それらの化合物は電気定常場ならびに交代場において分極性を有するからである。
【０００５】
特別の応用のために、製剤と関連してイオン交換体を使用することが提案される。こうして、pH感受性薬学的溶液のpHをそれらの貯蔵pHから適当な投与pHに変化させるために、別々の容器中のイオン交換体が提案されている (WO 9823375)。さらに、活性成分、例えば、薬剤を遅延放出するために、活性成分を装填され、また反対に帯電したポリマーでカバーされまたはそれを装填されたイオン交換樹脂が提案された (DE 19619313)。
【０００６】
本発明の目的は、分散体から製剤製造の達成を促進する他の方法を提供することである。
この目的は、請求項1に記載の製剤の新規な製造方法により達成される。
この新規な方法は磁気フィルターの助けによらず、むしろイオン交換体の助けによるか、あるいは電気泳動法により分散体を分離する。
WO 98／05430から知られている方法と対照的に、本発明による方法における分散体は磁力により分離せず、むしろ静電力により分離する。したがって、この方法はWO 98／05430に記載されている方法のように磁気物質に限定されない。しかしながら、本発明による方法は、選択すべき粒子を静電的に帯電させることを必要とする。
【０００７】
粒子の電荷は分散体の安定化に寄与し、したがってほとんどの場合において存在するか、あるいは必要な作用である。電荷は結合したまたは吸着されたイオン、アミノ酸、タンパク質、脂質、リポタンパク質、ヌクレオチド、リボ核酸、デオキシリボ核酸、炭水化物、糖タンパク質、天然または合成のポリマーならびにそれらの誘導体、活性化炭素、ケイ素化合物および／または表面活性物質、例えば、界面活性剤に由来する。
【０００８】
粒子を組合わせるか、あるいはまた粒子を部分的に安定化作用を有する構造特異的物質と組合わせる。このような構造特異的物質、なかでも、抗体、抗体フラグメント、レセプターの特異的に結合するアゴニスト、例えば、サイトカイン、リンホカイン、エンドセリンまたはそれらのアゴニスト、他の特異的ペプチドまたはタンパク質、レセプター、酵素、酵素基質、ヌクレオチド、リボ核酸、デオキシリボ核酸、炭水化物またはリポタンパク質である。構造特異的物質として、結合定数が105〜1015 l/molの範囲であるものは好ましい。構造特異的物質をよく知られている方法により粒子で標識化することができる。別法は粒子の表面に対して向けられた、例えば、外殻物質に対して向けられた抗体を介する結合である。
【０００９】
生化学的分子、例えば、タンパク質と対照的に、タンパク質のすべての分子が同一条件下に同一電荷を有する場合、分散体の形態の製剤、例えば、磁鉄鉱分散体または超音波媒質の分散体中の粒子は電荷分布を有する、すなわち、異なる数の素電荷 (単一、二重、三重帯電、およびその他) を有するイオンが分散体の中に並んで存在する。したがって、本発明の方法によるこのような分散体の分離は、電荷分布が変更した新しい製剤を生ずる。ヒトまたは動物の単球性食細胞系 (MPS) または体の他の部分中に非経口的に導入される粒子の受容は、なかでも、電荷に依存するので、電荷に従う分離により、また、製剤のin vivo 薬物速度論的性質に対する調節に影響を及ぼすことができる。
【００１０】
磁鉄鉱気分散体中の粒子は磁性であり、そして超音波造影剤分散体は一般にガスが充填されている。
選択すべき粒子は好都合には10 μmより小さい粒度を有する。1〜100 nmの粒度は特に好ましい。
【００１１】
本発明による方法を実施するために適当な装置は分離チャンバーから成り、このチャンバーはイオン交換体を含有し、入口および出口を有する。このような装置の特別の態様は第1図に示されている。この場合において、(1) は分離チャンバーを表し、(2) はイオン交換粒子を表し、(3) はイオン交換膜を表し、(4) はフリットまたはフィルターを表し、そして各場合において、(5) は接続を表し、(6) は入口を表し、そして (7) は出口を表す。
第2図は、注入器具において統合された装置を線図的に示す。この場合において、(8) は注入容器を表す。
また、装置は注入または注射用付属フィルターとして設計することができる。
【００１２】
イオン交換体として、すべての標準的な商業的に入手可能なイオン交換体が考えられる。最も普通のイオン交換体はゲル様であり、ここでイオンはゲルを通して、例えば、3 nmの多孔度を有する交換体グループに拡散しなくてはならない。また、約100 nmの範囲の孔を有する、マクロ多孔質イオン交換体を使用することができる。交換体グループが触手 (tentacles) 上に位置する、イオン交換体は好ましい。さらに、イオン交換膜を使用することもできる。弱／強イオン交換体が提供される。弱いイオン交換体は弱い酸または塩基の基、例えば、R−COOHを含有する；強いイオン交換体は強い酸または塩基の基、例えば、R−SO3-を含有する。すべての帯電した化合物を除去するために、アニオンおよびカチオン交換体を使用することが必要である。
【００１３】
分離のために特別にpHを調節することは、好都合であることがある。さらに、イオンおよび塩が生理学的に適合性でありかつ生成物中に残留できるような方法で、イオン交換体の対イオンおよび置換塩または必要に応じて使用する電気泳動緩衝剤を選択することが好都合である。
電気泳動的分離法を使用するとき、電気泳動法は遊離電気泳動法または担体電気泳動法、例えば、ゲルおよび紙電気泳動法として実施することができる。
【００１４】
本発明による方法は、造影剤分散体、例えば、磁気共鳴または超音波造影剤分散体を製造するために特に適する。この場合において、既に存在する磁気共鳴分散体を本発明に従う方法により処理する。ある種の粒子を選択することによって、造影剤分散体の物理的性質を変更する。こうして変更された分散体は、ある種の診断的問題 (例えば、核共鳴血管造影法) について使用することができる。
また、製剤から崩壊性外来粒子を分離する方法はさらに適当である。
【００１５】
下記の実施例により、本発明を説明する。これらの実施例は本発明を限定しない。
当業者は、それ以上苦心しないで、上記説明から、本発明をその完全な程度に利用できると考えられる。したがって、下記の好ましい特定の態様は、単に例示であり、開示の残部をいかなる方法においても限定しない。
【実施例】
【００１６】
上記および下記の実施例において、特記しない限り、すべての温度は未補正セ氏度であり、そしてすべての部および百分率は重量による。
実施例１．電気泳動法による帯電粒子分散体からの帯電粒子の分離
10 mmolの酢酸ナトリウム緩衝液pH 5中の限外濾過した磁鉄鉱懸濁液 (米国特許第4,101,435号、実施例7に従い調製した) [ゼータ電位：−27 mV、70 nmの粒子直径 (フォトン相関スペクトロスコピー (PSC))、r1：20 l/mmolのFe/s、r2：160 l/mmolのFe/s (磁気共鳴 (MR))、5 mT/molのFe (DE 19503364に従う磁気緩和測定 (MRX)、固体)、1.1 mT/molのFe (液体MRX)]を、向きがアノードからそれているMacherey−Nagel紙MN 866上に滴下する。20 V/cmにおいて、粒子の一部分はアノードに対して偏向されるので、移動距離の終わりにおいて、粒子を異なる出口において収集することができる。ほとんど偏向しない画分 (−23 mV、60 nm、5.1/0.7 mT/mol) ならびにアノードに対して偏向される画分 (−25 mV、60 nm、5.4/0.8 mT/mol) が得られる。
【００１７】
実施例２．強いイオン交換体を使用する帯電粒子分散体からの帯電粒子の分離
1 mlのメルク (Merck) による脱塩した強い触手アニオン交換体Fractogel EMD TMAE 650 Sを5 mlの限外濾過した磁鉄鉱懸濁液 [ゼータ電位：−34 mV、70 nmの粒子直径(PSC)、r1：20 l/mmol/s、r2：160 l/mmol/s (MR)、5 mT/molの(固体MRX)、1.1 mT/mol (液体MRX)] に添加し、蒸留水で希釈し、1時間震蘯する。この懸濁液を透析する (−35 mV、76 nm、22/167 l/mmol/s、5.2/1.1 mT/mol)。交換体ビーズを一夜1M NaClとともに震蘯し、この懸濁液を透析する (−16 mV、67 nm、18/69 l/mmol/s、1.2/0.3 mT/mol)。
【００１８】
実施例３．イオン交換付属装置
2つの接続および少なくとも1つのフィルターフリットを有する容器の中に (第1図参照)、適当なイオン交換体を充填する。イオン交換体が塩溶液中に懸濁して存在する場合、この溶液を水でフラッシュすることによって置換する。
【００１９】
実施例４．イオン交換付属装置による分散体からの帯電粒子の分離
PCS上で、10 mlの中の蒸留水中の50 μlの負に帯電したラテックス懸濁液は、615 kCpsの計数速度を生成する。この溶液の2 mlを実施例3に従うイオン交換付属装置に添加し、1 mlのメルク (Merck) による弱い触手アニオン交換体Fractogel EMD TMAE 650 Sを充填し、蒸留水でフラッシュする。この通過はなおわずかに0.4 kCpsの計数速度を有する。これは帯電粒子の分離を反映する。
【００２０】
実施例５．イオン交換付属装置を使用する帯電粒子分散体からの帯電粒子の分離
1 mlの磁鉄鉱懸濁液 [ゼータ電位：−31 mV、66 nmの粒子直径(PSC)、r1：20 l/mmol/s、r2：160 l/mmol/s (MR)、5 mT/molの(固体MRX)、1.1 mT/mol (液体MRX)] を、実施例4に従うイオン交換付属装置に添加する。次いで、収集された排出物がもはや褐色でなくなるまで、それを蒸留水でフラッシュする。排出物を透析する (−30 mV、66 nm、24/170 l/mmol/s、7/1.7 mT/mol)。
【００２１】
次いで、それを10 mlのNaOH (pH 12) でフラッシュし、排出物を収集する。後者をHClで中和し、透析する (−21 mV、52 nm、19/80 l/mmol/s、1.9/0.3 mT/mol)。
本明細書において引用する、すべての出願、特許および刊行物の全開示、および対応するドイツ国優先権出願No. 101 375 12.8、提出2001年7月26日および米国仮出願No. 60／309,206、提出2001年8月2日の全開示は、引用することによって本明細書の一部とされる。
【００２２】
一般的にまたは特別に記載した反応物を置換しおよび／または前の実施例において使用した反応物について本発明の条件を操作することによって、先行する実施例を反復して、同様な成功を収めることができる。
前述の説明から、当業者は本発明の必須の特徴を容易に確認することができ、本発明の範囲および精神から逸脱しないで、本発明の種々の変更および変化を種々の用途および条件に適合させることができる。
【国際公開パンフレット】
2004535907.tif 000002
2004535907.tif 000003
2004535907.tif 000004
2004535907.tif 000005
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2004535907.tif 000007
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2004535907.tif 000009
2004535907.tif 000010
2004535907.tif 000011
2004535907.tif 000012
2004535907.tif 000013
2004535907.tif 000014
【国際調査報告】
2004535907.tif 000015
2004535907.tif 000016
2004535907.tif 000017
2004535907.tif 000018
2004535907.tif 000019
2004535907.tif 000020
2004535907.tif 000021
2004535907.tif 000022