(57)【要約】式（Ｉ）の化合物、またはその溶媒和化合物、水和物もしくは薬学的に許容される塩を含む、フェニルアセトアミド化合物が記載される：式中、Ｒ３〜Ｒ６、Ｒ１１、Ｂ、ＹおよびＷは本明細書中に記載されている。本発明の化合物はプロテアーゼ、特に、トロンビンおよび第Ｘａ因子などのトリプシン様セリンプロテアーゼの強力な阻害剤である。血小板の損失を阻害するため、血小板凝集体の形成を阻害するため、フィブリンの生成を阻害するため、血栓形成を阻害するため、および塞栓形成を阻害するための組成物が記載される。本発明の化合物のその他の使用とは、カテーテル、血液透析機、採血シリンジおよびチューブ、輸血管ならびにステントなどの、採血、血液循環、および血液保存において用いられる装置の製造時に用いられる物質中に埋め込まれるかまたは物理的に連結された、抗凝血物質としての使用である。加えて、化合物を検出可能に標識し、血栓に関するインビボ撮像のために用いることができる。【化１】2004510759.tif 000197
2004510759.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式Ｉの化合物、またはその溶媒和化合物、水和物もしくは薬学的に許容される塩：
【化１】
2004510759.tif 000187
式中、
Ｗは水素、Ｒ１、Ｒ１ＯＣ（Ｏ）、Ｒ１Ｃ（Ｏ）、Ｒ１（ＣＨ２）ｓＮＨＣ（Ｏ）、Ｒ１Ｓ（Ｏ）２、または（Ｒ１）２ＣＨ（ＣＨ２）ｓＮＨＣ（Ｏ）（ただしｓは０〜４である）であり；
Ｒ１は
Ｒ２、
Ｒ２（ＣＨ２）ｔＣ（Ｒ１２）２（ただしｔは０〜３であり、かつＲ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよい）、
（Ｒ２）（ＯＲ１２）ＣＨ（ＣＨ２）ｐ（ただしｐは１〜４である）、
（Ｒ２）２（ＯＲ１２）Ｃ（ＣＨ２）ｐ（ただしｐは１〜４である）、
Ｒ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｔ（ただしｔは０〜３であり、Ｒ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ１２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキルで表される環を形成してもよい）、
Ｒ２ＣＦ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｑ（ただしｑは０〜２であり、Ｒ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ１２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキルで表される環を形成してもよい）、
Ｒ２ＣＨ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｑ（ただしｑは０〜２であり、Ｒ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ１２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキルで表される環を形成してもよい）、
（Ｒ２）２ＣＨ（ＣＨ２）ｒ（ただしｒは０〜４であり、Ｒ２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ２）２はＣＨと共にＣ３〜９シクロアルキル、Ｃ７〜１２二環式アルキル、Ｃ１０〜１６三環式アルキル、または、飽和でも不飽和でもよく、かつＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から３個のヘテロ原子を含む、５員から７員単環式もしくは二環式の複素環で表される環を形成してもよい）、
Ｒ２Ｏ（ＣＨ２）ｐ（ただしｐは２〜４である）、
（Ｒ２）２ＣＦ（ＣＨ２）ｒ（ただしｒは０〜４であり、Ｒ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ１２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキル、Ｃ７〜１２二環式アルキル、Ｃ１０〜１６三環式アルキル、または、飽和でも不飽和でもよく、かつＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から３個のヘテロ原子を含む、５員から７員単環式もしくは二環式の複素環で表される環を形成してもよい）、
【化２】
2004510759.tif 000188
、
【化３】
2004510759.tif 000189
（ただしｓは０または１である）、または
Ｒ２ＣＦ２Ｃ（Ｒ１２）２であり；
Ｒ２は
フェニル、ナフチル、もしくはビフェニル（ただしそれぞれ無置換または一つもしくは複数のＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、もしくはＳＯ２ＮＨ２で置換されている）、
５員から７員単環式もしくは９員から１０員二環式複素環もしくは非複素環（ただし飽和でも不飽和でもよく、複素環はＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から４個のヘテロ原子を含み、かつ複素環または非複素環は無置換またはハロゲンもしくはヒドロキシで置換されている）、
Ｃ１〜１２アルキル（ただし無置換または一つもしくは複数のヒドロキシ、ＣＯＯＨ、アミノ、任意にＣ１〜３アルキル置換されたアリール、Ｃ３〜９シクロアルキル、ＣＦ３、Ｎ（ＣＨ３）２、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルで置換されている）、
ＣＦ３、
Ｃ３〜９シクロアルキル（ただし無置換またはアリールで置換されている）、
Ｃ７〜１２二環式アルキル、または
Ｃ１０〜１６三環式アルキルであり；
Ｙは−ＮＨ−または−Ｏ−であり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立して水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアラルキル、任意に置換されたヘテロアリール、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロゲン、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、−ＣＯ２Ｒｘ、−ＣＨ２ＯＲｘまたは−ＯＲｘであり
（ただしＲｘはそれぞれの場合に独立して水素、Ｃ１〜１２アルキルまたはＣ３〜９シクロアルキルの一つでであり、該Ｃ１〜１２アルキル基またはＣ３〜９シクロアルキル基は一つまたは複数の不飽和を任意に有していてもよい）；
Ｒ１１は水素、アルキル、またはアルケニルであり；
Ｒ１２は
水素もしくはハロゲン、
フェニル、ナフチル、もしくはビフェニル（ただしそれぞれ無置換または一つもしくは複数のＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＯＯＨ、もしくはＣＯＮＨ２で置換されている）、
５員から７員単環式もしくは９員から１０員二環式複素環（ただし飽和でも不飽和でもよく、かつＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から４個のヘテロ原子を含む）、
Ｃ１〜１２アルキル（ただし無置換または一つもしくは複数のヒドロキシ、ＣＯＯＨ、アミノ、Ｃ６〜１４アリール、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルで置換されている）、
ＣＦ３、
Ｃ３〜９シクロアルキル、
Ｃ７〜１２二環式アルキル、または
Ｃ１０〜１６三環式アルキルであり；
Ｂは
【化４】
2004510759.tif 000190
または
【化５】
2004510759.tif 000191
からなる群より選択され、
ただし
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は独立して水素、アルキル、アラルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、モノアルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキルもしくはカルボキシアルキルであり；
またはＲ７およびＲ８は共に−（ＣＨ２）ｕ−を形成し（ただしｕは２から７、好ましくは２から５であり、Ｒ９およびＲ１０は前述のように定義される）；
またはＲ９およびＲ１０は共に−（ＣＨ２）ｖ−を形成し（ただしｖは２から７、好ましくは２から５であり、Ｒ７およびＲ８は前述のように定義される）；
またはＲ７およびＲ９は共に−（ＣＨ２）ｙ−を形成し（ただしｙは０（結合）または１から７、好ましくは０〜４であり、Ｒ８およびＲ１０は前述のように定義される）；
Ｘは−Ｏ−、−ＮＲ１８−、または−ＣＨ＝Ｎ−（ただしＮはＮＲ１３に結合されており、Ｒ１８は水素、アルキル、シクロアルキルまたはアリールであり、該アルキル、シクロアルキルまたはアリールはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アリール、ヘテロアリール、アシルアミノ、シアノまたはトリフルオロメチルで任意に置換されている）であり；
Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは独立して水素、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アルコキシカルボニルオキシ、シアノまたは−ＣＯ２Ｒｗ（ただしＲｗはＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキル、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、
【化６】
2004510759.tif 000192
または
【化７】
2004510759.tif 000193
、ただしＲｅおよびＲｆは独立して水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルまたはＣ６〜１４アリールであり、Ｒｇは水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルまたはＣ６〜１４アリールであり、Ｒｈは水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルまたはＣ６〜１４アリールであり、かつＲｉはＣ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキルまたはＣ１〜６アルキルである）であり；
ｎは０から８であり；かつ
ｍは０から６であり；
Ｒ１３は水素、アルキル、アルケニル、アラルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、モノアルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキルまたはカルボキシアルキルであり；
Ｒ１４およびＲ１５は独立して水素、アルキル、シクロアルキル、ハロゲンまたはアルコキシであり；かつ
Ｒ１６およびＲ１７は独立して水素、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アルコキシカルボニル、シアノまたは−ＣＯ２Ｒｊ（ただしＲｊはＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキル、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、ハロ（Ｃ１〜１２）アルキルまたは
【化８】
2004510759.tif 000194
、ただしＲｅ、ＲｆおよびＲｇは独立して水素またはＣ１〜１２アルキルである）である。
【請求項２】
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が独立して水素、Ｃ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキル、ハロゲン、Ｃ２〜２０アルケニル、Ｃ２〜２０アルキニル、任意に置換されたＣ６〜１４アリール、任意に置換されたＣ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、ハロ（Ｃ１〜１２）アルキル、Ｃ１〜１２アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロ（Ｃ１〜２０）アルコキシまたはヒドロキシ（Ｃ１〜１２）アルキルであり；
Ｒ１１が水素、Ｃ１〜１２アルキルまたはＣ２〜２０アルケニルであり；
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が独立して水素、Ｃ１〜１２アルキル、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、Ｃ６〜１４アリール、ヒドロキシ（Ｃ１〜１２）アルキル、アミノ（Ｃ１〜１２）アルキル、モノ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ（Ｃ１〜１２）アルキル、ジ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ（Ｃ１〜１２）アルキル、またはカルボキシ（Ｃ１〜１２）アルキルであり；
Ｒ１８がＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキルまたはＣ６〜１４アリール（ただしそれぞれは、アミノ、モノ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ、Ｃ１〜２０アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシ、Ｃ１〜２０アルコキシカルボニル、Ｃ６〜１４アリールオキシカルボニル、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜２０）アルコキシカルボニル、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ５〜１０ヘテロアリール、アシルアミノ、シアノまたはトリフルオロメチルで任意に置換されている）であり；
Ｒａ、ＲｂおよびＲｃが独立してＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜２０アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシ、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜２０）アルコキシ、またはＣ１〜２０アルコキシカルボニルオキシであり；
Ｒ１３がＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜２０アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシまたはＣ１〜２０アルコキシカルボニルであり；
Ｒ１４およびＲ１５が独立してＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキルまたはＣ１〜２０アルコキシであり；かつ
Ｒ１６およびＲ１７が独立してＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜２０アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシまたはＣ１〜２０アルコキシカルボニルである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｂが
【化９】
2004510759.tif 000195
である、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｂが
【化１０】
2004510759.tif 000196
である、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｙが−ＮＨ−である、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
ＷがＲ１またはＲ１Ｓ（Ｏ）２（ただしＲ１はＲ２であり、Ｒ２は任意に置換されたアリールまたはアリールで置換されたＣ１〜７アルキルのいずれかである）である、請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７】
ＷがＲ１（ただしＲ１はＲ２またはＲ２ＣＦ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｑであり、かつＲ２は任意に置換されたアリールまたはアリールで置換されたＣ１〜７アルキルのいずれかであり；Ｒ１２は水素であり；かつｑは０である）である、請求項１〜５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ６がＣ１〜６アルキルまたはハロゲンである、請求項１および３〜７のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ６がメチル、クロロまたはフルオロである、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ６がクロロであり、Ｒ３がフルオロまたはヒドロキシである、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１１が水素である、請求項１および３〜１０のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒａ、Ｒｂ、ＲｃおよびＲ１３がそれぞれ水素である、請求項１、３および５〜１１のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０のそれぞれが水素である、請求項１および３〜１２のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１４】
以下の一つ、またはその溶媒和化合物、水和物もしくは薬学的に許容される塩である、請求項１記載の化合物：
Ｎ−［２−アミジノアミノオキシ）エチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミド；
Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミド；
Ｎ−（６−アミノ−２，４−ジメチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル｝アセトアミド；
Ｎ−［２−（アミジノアミノオキシ）エチル］−２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセトアミド；
Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセトアミド；
Ｎ−２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（３−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−クロロ−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−メチル−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド；
Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド；または
Ｎ−（｛Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］カルバモイル｝メチル）−２−ヒドロキシ−４−メチルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか一項記載の化合物および薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項１６】
抗凝血物質、抗血小板物質または血栓溶解物質の少なくとも一つをさらに含む、請求項１５記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
化合物が約０．１ｍｇから約５００ｍｇの間の量で存在する、請求項１５記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
阻害または治療を必要とする哺乳動物において異常タンパク質分解、血栓症、虚血、卒中、再狭窄または炎症を阻害または治療する方法であって、該哺乳動物に請求項１〜１４のいずれか一項記載の化合物の有効量を投与する段階を含む方法。
【請求項１９】
治療または予防を必要とする哺乳動物においてトロンビンの産生または作用のいずれかを伴う異常な静脈または動脈の血栓症によって特徴づけられる状態を治療または予防する方法であって、該哺乳動物に請求項１５記載の組成物を投与する段階を含む方法。
【請求項２０】
採血、血液保存、または血液循環において用いられる医療用具であって、該医療用具に埋め込まれるか、または物理的に連結された、請求項１〜１４のいずれか一項記載の化合物を含む医療用具。
【請求項２１】
カテーテル、ステント、血液透析機、採血シリンジもしくはチューブ、または輸血管である、請求項２０記載の医療用具。
【請求項２２】
タンパク質分解酵素の作用を阻害する方法であって、該酵素を請求項１〜１４のいずれか一項記載の化合物と接触させる段階を含む方法。
【請求項２３】
酵素が、白血球好中球エラスターゼ、キモトリプシン、トリプシン、ウロキナーゼ、プラスミノゲン活性化因子、膵エラスターゼ、カテプシンＧ、トロンビンまたは第Ｘａ因子である、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
経口投与に適合化された、請求項１４〜１６のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
発明の分野
本発明は、タンパク質分解酵素阻害剤として機能する新規化合物、特に新しい種類のトロンビン阻害剤に関する。
【０００２】
関連技術
プロテアーゼは単一の特定のペプチド結合でタンパク質を切断する酵素である。プロテアーゼは、セリン、チオールまたはシステイニル、酸性またはアスパルチル、および金属プロテアーゼの四つの一般的な種類に分類することができる（Ｃｕｙｐｅｒｓら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２５７：７０８６（１９８２））。プロテアーゼは、消化、血餅の形成および溶解、生殖、ならびに外来細胞および生物に対する免疫反応などの様々な生物活性にとって必要不可欠である。異常なタンパク質分解は、ヒトおよび他の哺乳動物におけるいくつかの疾患状態に関連している。ヒト好中球プロテアーゼ、エラスターゼおよびカテプシンＧは、組織破壊によって特徴付けられる疾患状態の原因であるとされている。これらの疾患状態には、気腫、慢性関節リウマチ、角膜潰瘍、および糸球体腎炎が含まれる。（Ｂａｒｒｅｔ、「薬物としての酵素阻害剤（Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｓ Ｄｒｕｇｓ）」、Ｓａｎｄｌｅｒ編、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐａｒｋ Ｐｒｅｓｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、（１９８０））。プラスミン、Ｃ−１エステラーゼ、Ｃ−３コンバターゼ、ウロキナーゼ、プラスミノゲン活性化因子、アクロシン、およびカリクレインなどの他のプロテアーゼは哺乳動物の正常な正常な生体機能において主要な役割を果たしている。多くの場合、哺乳動物の治療経過において一つまたは複数のタンパク質分解酵素の機能を妨害することは有益である。
【０００３】
セリンプロテアーゼには、エラスターゼ（ヒト白血球）、カテプシンＧ、プラスミン、Ｃ−１エステラーゼ、Ｃ−３コンバターゼ、ウロキナーゼ、プラスミノゲン活性化因子、アクロシン、キモトリプシン、トリプシン、トロンビン、第Ｘａ因子、およびカリクレインなどの酵素が含まれる。
【０００４】
ヒト白血球エラスターゼは炎症部位で多形核白血球によって放出され、したがっていくつかの疾患状態の原因である。カテプシンＧはもう一つのヒト好中球セリンプロテアーゼである。これらの酵素の活性を阻害する能力を有する化合物は、痛風、慢性関節リウマチ、および他の炎症性疾患の治療、ならびに気腫の治療において有用な抗炎症作用を有すると考えられる。キモトリプシンおよびトリプシンは消化酵素である。これらの酵素の阻害剤は膵炎の治療において有用である。ウロキナーゼおよびプラスミノゲン活性化因子の阻害剤は、良性前立腺肥大症、前立腺癌、および乾癬などの過剰細胞増殖疾患状態の治療において有用である。
【０００５】
セリンプロテアーゼトロンビンは、止血および血栓症における中心的役割を果たし、かつ多元的タンパク質として、血小板、内皮細胞、平滑筋細胞、白血球、心臓、およびニューロンへのいくつかの作用を誘導する。内因性経路（接触活性化）または外因性経路（血漿の非内皮表面への曝露、血管壁への損傷または組織因子放出による活性化）のいずれかを通じての凝固カスケードの活性化により、トロンビンに集中する一連の生化学的事象が引き起こされる。トロンビンはフィブリノゲンを切断して、最終的には止血栓を生じ（血餅形成）、細胞表面トロンビン受容体の独特なタンパク質分解切断を通じて血小板を強力に活性化し（Ｃｏｕｇｈｌｉｎ、Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ３１（４）：２７０〜２７７（１９９４））、かつフィードバック機構を通じてそれ自体の産生を自己増幅する。したがって、トロンビン機能の阻害剤は心血管および非心血管疾患の宿主において治療の可能性を有する。
【０００６】
第Ｘａ因子は凝固経路におけるもう一つのセリンプロテアーゼである。第Ｘａ因子は第Ｖａ因子およびリン脂質膜上のカルシウムと結合し、それによりプロトロンビナーゼ複合体を形成する。このプロトロンビナーゼ複合体は次いで、プロトロンビンをトロンビンに変換する（Ｃｌａｅｓｏｎ、Ｂｌｏｏｄ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ ５：４１１〜４３６（１９９４）；Ｈａｒｋｅｒ、Ｂｌｏｏｄ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ ５ （別冊１）：Ｓ４７〜Ｓ５８（１９９４））。直接のトロンビン阻害剤では新しいトロンビンがまだかなり生成されるため、第Ｘａ因子の阻害剤はトロンビンを直接阻害する物質よりも有利であると考えられる（ＬｅｆｋｏｖｉｔｓおよびＴｏｐｏｌ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９０（３）：１５２２〜１５３６（１９９４）；Ｈａｒｋｅｒ、Ｂｌｏｏｄ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｓｉｓ ５ （別冊１）：Ｓ４７〜Ｓ５８（１９９４））。
【０００７】
血管内血栓のインビボ診断撮像法が報告されている。これらの撮像法は、放射性原子または常磁性原子で検出可能に標識された化合物を用いる。例えば、γ線放射体Ｉｎ−１１１で標識された血小板を血栓を検出するための造影剤として用いることができる（Ｔｈａｋｕｒ， Ｍ．Ｌ．ら、Ｔｈｒｏｍｂ Ｒｅｓ． ９：３４５（１９７６）；Ｐｏｗｅｒｓら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ３２：９３８（１９８２））。Ｔｃ−９９ｍで標識された血栓溶解酵素ストレプトキナーゼが造影剤として提唱されている（Ｗｏｎｇ、米国特許第４，４１８，０５２号（１９８３））。γ線放射体Ｉ−１２５およびＩ−１３１で標識された黄色ブドウ球菌のフィブリン結合ドメイン由来タンパク質Ａが造影剤として提唱されている（Ｐａｎｇ、米国特許第５，０１１，６８６号（１９９１））。フィブリンに特異性を有し（フィブリノーゲンに比べて）、Ｔｃ−９９ｍで標識されたモノクローナル抗体が造影剤として提唱されている（Ｂｅｒｇｅｒら、米国特許第５，０２４，８２９号（１９９１）；Ｄｅａｎら、米国特許第４，９８０，１４８号（１９９０））。血栓溶解により急性心筋梗塞の治療を受けた患者の磁気共鳴撮像法における常磁性造影剤、ジエチレントリアミンペンタ酢酸ガドリニウムの使用が報告されている（Ｄｅ Ｒｏｏｓ， Ａ．ら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｒｄ． Ｉｍａｇｉｎｇ ７：１３３（１９９１））。放射性同位体標識および常磁性体標識されたα−ケトアミド誘導体も、血栓造影剤として提唱されている（Ａｂｅｌｍａｎら、米国特許第５，６５６，６００号）。
【０００８】
強力かつ選択的プロテアーゼ阻害剤であり、かつ現在利用可能なプロテアーゼ阻害剤よりも生物学的利用能が大きく、副作用が少ないような非ペプチド化合物が、まだ必要とされている。したがって、強力な阻害能力および哺乳動物への低毒性によって特徴付けられる、新しい種類の強力なプロテアーゼ阻害剤が、いくつかの哺乳動物タンパク質分解性疾患状態の治療を含む、様々な状態に対する有用な治療薬としての可能性を有している。
【０００９】
発明の概要
本発明は、式Ｉ（下記）を有する新規アミノピリジニル、アミノグアニジニル、およびアルコキシグアニジニル置換フェニルアセトアミドを目的とする。同様に、式Ｉの化合物の調製法も提供される。本発明の新規化合物はプロテアーゼ、特にキモトリプシン、トリプシン、トロンビン、プラスミンおよび第Ｘａ因子などのトリプシン様セリンプロテアーゼの強力な阻害剤である。特定の化合物は、トロンビンの直接的で、選択的な阻害による抗血栓活性を示すか、または抗血栓活性を有する化合物を生成するために有用な中間体である。同様に、式Ｉの化合物の有効量を投与することにより、哺乳動物の異常タンパク質分解を阻害または治療する方法、および哺乳動物の血栓症、虚血、卒中、再狭窄または炎症を治療する方法も提供される。
【００１０】
本発明は、哺乳動物において血小板の損失を阻害するため、血小板凝集体の形成を阻害するため、フィブリンの生成を阻害するため、血栓形成を阻害するため、および塞栓形成を阻害するための組成物であって、薬学的に許容される担体中に式Ｉの化合物を含む組成物を含む。これらの組成物は、抗凝血物質、抗血小板物質、および血栓溶解物質を任意に含んでいてもよい。所望の阻害を行うために、血液、血液製剤、または哺乳動物臓器に組成物を加えることもできる。
【００１１】
同様に、哺乳動物の異常タンパク質分解を阻害または治療する方法、ならびに心筋梗塞；不安定狭心症；卒中；再狭窄；深在静脈血栓症；外傷、敗血症または腫瘍転移が原因の播種性血管内凝固；血液透析；心肺バイパス手術；成人呼吸障害症候群；内毒素性ショック；慢性関節リウマチ；潰瘍性大腸炎；硬化；転移；化学療法中の凝固性亢進；アルツハイマー病；ダウン症候群；眼内のフィブリン生成；および創傷治癒を治療する方法も提供される。本発明の化合物の他の使用とは、カテーテル、血液透析機、採血シリンジおよびチューブ、輸血管ならびにステントなどの採血、血液循環、および血液保存において用いられる装置の製造時に用いられる物質中に埋め込まれるまたは物理的に連結された、抗凝血物質としての使用である。
【００１２】
本発明は、本発明の化合物を共有または非共有結合で哺乳動物の表面に結合することにより、表面の血栓形成性を低下させる方法も含む。
【００１３】
もう一つの局面において、本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な組成物であって、体外で検出可能な本発明の化合物を含む組成物を含む。本発明の化合物および放射性原子または常磁性原子などの検出可能な標識を含む組成物が好ましい。
【００１４】
もう一つの局面において、本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な診断用組成物であって、薬学的に許容される担体および本発明の化合物または組成物の診断上有効な量を含む組成物を提供する。
【００１５】
もう一つの局面において、本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な方法を含む。
【００１６】
好ましい態様の詳細な説明
本発明の化合物は、下記の式Ｉの化合物：
【化１１】
2004510759.tif 000003
またはその溶媒和化合物、水和物もしくは薬学的に許容される塩を含む；
式中：
Ｗは水素、Ｒ１、Ｒ１ＯＣ（Ｏ）、Ｒ１Ｃ（Ｏ）、Ｒ１（ＣＨ２）ｓＮＨＣ（Ｏ）、Ｒ１Ｓ（Ｏ）２、または（Ｒ１）２ＣＨ（ＣＨ２）ｓＮＨＣ（Ｏ）（ただしｓは０〜４である）であり；
Ｒ１は
Ｒ２、
Ｒ２（ＣＨ２）ｔＣ（Ｒ１２）２（ただしｔは０〜３であり、かつＲ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよい）、
（Ｒ２）（ＯＲ１２）ＣＨ（ＣＨ２）ｐ（ただしｐは１〜４である）、
（Ｒ２）２（ＯＲ１２）Ｃ（ＣＨ２）ｐ（ただしｐは１〜４である）、
Ｒ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｔ（ただしｔは０〜３であり、Ｒ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ１２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキルで表される環を形成してもよい）、
Ｒ２ＣＦ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｑ（ただしｑは０〜２であり、Ｒ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ１２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキルで表される環を形成してもよい）、
Ｒ２ＣＨ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｑ（ただしｑは０〜２であり、Ｒ１２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ１２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキルで表される環を形成してもよい）、
（Ｒ２）２ＣＨ（ＣＨ２）ｒ（ただしｒは０〜４であり、Ｒ２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、かつ（Ｒ２）２はＣＨと共にＣ３〜９シクロアルキル、Ｃ７〜１２二環式アルキル、Ｃ１０〜１６三環式アルキル、または飽和でも不飽和でもよく、かつＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から３個のヘテロ原子を含む、５員から７員単環式もしくは二環式の複素環で表される環を形成してもよい）、
Ｒ２Ｏ（ＣＨ２）ｐ（ただしｐは２〜４である）、
（Ｒ２）２ＣＦ（ＣＨ２）ｒ（ただしｒは０〜４であり、かつＲ２はそれぞれ同じでも異なっていてもよく、また（Ｒ２）２はＣと共にＣ３〜９シクロアルキル、Ｃ７〜１２二環式アルキル、Ｃ１０〜１６三環式アルキル、または飽和でも不飽和でもよく、かつＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から３個のヘテロ原子を含む、５員から７員単環式もしくは二環式の複素環で表される環を形成してもよい）、
【化１２】
2004510759.tif 000004
、
【化１３】
2004510759.tif 000005
（ただしｓは０または１である）、または
Ｒ２ＣＦ２Ｃ（Ｒ１２）２であり；
Ｒ２は
フェニル、ナフチル、もしくはビフェニル（ただしそれぞれ無置換または一つもしくは複数のＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ２、もしくはＳＯ２ＮＨ２で置換されている）、
５員から７員単環式もしくは９員から１０員二環式複素環もしくは非複素環（ただし飽和でも不飽和でもよく、複素環はＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から４個のヘテロ原子を含み、かつ複素環または非複素環は無置換またはハロゲンもしくはヒドロキシで置換されている）、
Ｃ１〜１２アルキル（ただし無置換または一つもしくは複数のヒドロキシ、ＣＯＯＨ、アミノ、任意にＣ１〜３アルキル置換されたアリール、Ｃ３〜９シクロアルキル、ＣＦ３、Ｎ（ＣＨ３）２、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルで置換されている）、
ＣＦ３、
Ｃ３〜９シクロアルキル（ただし無置換またはアリールで置換されている）、
Ｃ７〜１２二環式アルキル、または
Ｃ１０〜１６三環式アルキルであり；
Ｙは−ＮＨ−または−Ｏ−であり；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立して水素、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアラルキル、任意に置換されたヘテロアリール、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロゲン、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、−ＣＯ２Ｒｘ、−ＣＨ２ＯＲｘまたは−ＯＲｘであり
（ただしＲｘはそれぞれの場合に独立して水素、Ｃ１〜１２アルキルまたはＣ３〜９シクロアルキルの一つであり、該Ｃ１〜１２アルキル基またはＣ３〜９シクロアルキル基は一つまたは複数の不飽和を任意に有していてもよい）；
Ｒ１１は水素、アルキル、またはアルケニルであり；
Ｒ１２は
水素もしくはハロゲン、
フェニル、ナフチル、もしくはビフェニル（ただしそれぞれ無置換または一つもしくは複数のＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＯＯＨ、もしくはＣＯＮＨ２で置換されている）、
５員から７員単環式もしくは９員から１０員二環式複素環（ただし飽和でも不飽和でもよく、かつＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１個から４個のヘテロ原子を含む）、
Ｃ１〜１２アルキル（ただし無置換または一つもしくは複数のヒドロキシ、ＣＯＯＨ、アミノ、Ｃ６〜１４アリール、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクロアルキルで置換されている）、
ＣＦ３、
Ｃ３〜９シクロアルキル、
Ｃ７〜１２二環式アルキル、または
Ｃ１０〜１６三環式アルキルであり；
Ｂは
【化１４】
2004510759.tif 000006
または
【化１５】
2004510759.tif 000007
からなる群より選択され、
ただし
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０は独立して水素、アルキル、アラルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、モノアルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキルもしくはカルボキシアルキルであり；
またはＲ７およびＲ８は共に−（ＣＨ２）ｕ−を形成し（ただしｕは２から７、好ましくは２から５であり、Ｒ９およびＲ１０は前述のように定義される）；
またはＲ９およびＲ１０は共に−（ＣＨ２）ｖ−を形成し（ただしｖは２から７、好ましくは２から５であり、Ｒ７およびＲ８は前述のように定義される）；
またはＲ７およびＲ９は共に−（ＣＨ２）ｙ−を形成し（ただしｙは０（結合）または１から７、好ましくは０〜４であり、Ｒ８およびＲ１０は前述のように定義される）；
Ｘは−Ｏ−、−ＮＲ１８−、または−ＣＨ＝Ｎ−（ただしＮはＮＲ１３に結合されており、Ｒ１８は水素、アルキル、シクロアルキルまたはアリールであり、該アルキル、シクロアルキルまたはアリールはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アリール、ヘテロアリール、アシルアミノ、シアノまたはトリフルオロメチルで任意に置換されている）であり；
Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは独立して水素、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アルコキシカルボニルオキシ、シアノまたは−ＣＯ２Ｒｗ（ただしＲｗはＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキル、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、
【化１６】
2004510759.tif 000008
または
【化１７】
2004510759.tif 000009
で、ただしＲｅおよびＲｆは独立して水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルまたはＣ６〜１４アリールであり、Ｒｇは水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルまたはＣ６〜１４アリールであり、Ｒｈは水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニルまたはＣ６〜１４アリールであり、かつＲｉはＣ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキルまたはＣ１〜１２アルキルである）であり；
ｎは０から８であり；かつ
ｍは０から６であり；
Ｒ１３は水素、アルキル、アルケニル、アラルキル、アリール、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、モノアルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキルまたはカルボキシアルキルであり；
Ｒ１４およびＲ１５は独立して水素、アルキル、シクロアルキル、ハロゲンまたはアルコキシであり；かつ
Ｒ１６およびＲ１７は独立して水素、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アルコキシカルボニル、シアノまたは−ＣＯ２Ｒｊ（ただしＲｊはＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキル、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、ハロ（Ｃ１〜１２）アルキルまたは
【化１８】
2004510759.tif 000010
、ただしＲｅ、ＲｆおよびＲｇは独立して水素またはＣ１〜１２アルキルである）である。
【００１７】
本発明の範囲内の化合物は、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立して水素、Ｃ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキル、ハロゲン、Ｃ２〜２０アルケニル、Ｃ２〜２０アルキニル、任意に置換されたＣ６〜１４アリール、任意に置換されたＣ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、ハロ（Ｃ１〜１２）アルキル、Ｃ１〜１２アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロ（Ｃ１〜２０）アルコキシまたはヒドロキシ（Ｃ１〜１２）アルキルであり；
Ｒ１１は水素、Ｃ１〜１２アルキルまたはＣ２〜２０アルケニルであり；
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は独立して水素、Ｃ１〜１２アルキル、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜１２）アルキル、Ｃ６〜１４アリール、ヒドロキシ（Ｃ１〜１２）アルキル、アミノ（Ｃ１〜１２）アルキル、モノ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ（Ｃ１〜１２）アルキル、ジ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ（Ｃ１〜１２）アルキル、またはカルボキシ（Ｃ１〜１２）アルキルであり；
Ｒ１８はＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキルまたはＣ６〜１４アリール（ただしそれぞれは、アミノ、モノ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜１２）アルキルアミノ、Ｃ１〜２０アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシ、Ｃ１〜２０アルコキシカルボニル、Ｃ６〜１４アリールオキシカルボニル、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜２０）アルコキシカルボニル、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ５〜１０ヘテロアリール、アシルアミノ、シアノまたはトリフルオロメチルで任意に置換されている）であり；
Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは独立してＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜２０アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシ、Ｃ６〜１４アル（Ｃ１〜２０）アルコキシ、またはＣ１〜２０アルコキシカルボニルオキシであり；
Ｒ１３はＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜２０アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシまたはＣ１〜２０アルコキシカルボニルであり；
Ｒ１４およびＲ１５は独立してＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜９シクロアルキルまたはＣ１〜２０アルコキシであり；かつ
Ｒ１６およびＲ１７は独立してＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜２０アルコキシ、Ｃ６〜１４アリールオキシまたはＣ１〜２０アルコキシカルボニルである化合物を含む。
【００１８】
前述の式Ｉの好ましい化合物は、Ｙが−ＮＨ−または−ＳＯ２ＮＨ−である化合物である。
【００１９】
前述の式Ｉの化合物の好ましい亜属は、Ｂが
【化１９】
2004510759.tif 000011
（ただし、Ｒ７〜Ｒ１０、Ｒ１３およびＲａ〜Ｒｃは前述のように定義される）である化合物である。
【００２０】
前述の式Ｉの化合物のもう一つの好ましい亜属は、Ｂが
【化２０】
2004510759.tif 000012
（ただしＲ９、Ｒ１０およびＲ１４〜Ｒ１７は前述のように定義される）である化合物である。
【００２１】
前述の式Ｉの好ましい化合物は、ＷがＲ１（ただしＲ１はＲ２であり、Ｒ２は任意に置換されたフェニル、任意に置換されたナフチルまたはアリールで置換されたＣ１〜７アルキルのいずれかである）である化合物である。
【００２２】
前述の式Ｉの好ましい化合物は、Ｒ１がＲ２ＣＦ２Ｃ（Ｒ１２）２（ＣＨ２）ｑである化合物である。
【００２３】
前述の式Ｉの好ましい化合物は、Ｒ６がＣ１〜６アルキルまたはハロゲンである化合物である。第三の好ましい亜属内のより好ましい化合物は、Ｒ６がクロロであり、Ｒ３がフルオロである化合物を含む、Ｒ６がメチルまたはクロロである化合物である。
【００２４】
前述の式Ｉの好ましい化合物は、Ｒ１１が水素である化合物である。
【００２５】
式ＩのＲａ、ＲｂおよびＲｃの好ましい値は独立して水素、ヒドロキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、シアノまたは−ＣＯ２Ｒｗで、ただしそれぞれの場合にＲｗはＣ１〜４アルキル、Ｃ４〜７シクロアルキルまたはベンジルオキシカルボニルの一つであることが好ましい。Ｒａ、ＲｂおよびＲｃの適当な値には、水素、メチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、シアノ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ３および−ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３が含まれる。最も好ましい態様において、Ｒａ、ＲｂおよびＲｃはそれぞれ水素である。
【００２６】
またＲａ、ＲｂおよびＲｃにおいては、Ｒｗが
【化２１】
2004510759.tif 000013
または
【化２２】
2004510759.tif 000014
の一つである−ＣＯ２Ｒｗ基が好ましく、ただしＲｅ〜Ｒｊは前述のように定義される。Ｒａ、ＲｂおよびＲｃが−ＣＯ２ＲｗでありかつＲｗがこれらの部分の一つの一つである場合、得られる化合物は望ましい製剤および生物学的利用能上の特徴を有するプロドラッグである。Ｒｅ、ＲｆおよびＲｈのそれぞれの好ましい値は水素であり、Ｒｇはメチルであり、かつＲｉの好ましい値にはベンジルおよびｔｅｒｔ−ブチルが含まれる。
【００２７】
好ましい化合物は式Ｉの化合物であり、ここでＲ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が独立して水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アル（Ｃ１〜６）アルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ２〜１０ヒドロキシアルキルまたはＣ２〜７カルボキシアルキルの一つである。Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０の有用な値としては、水素、メチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ベンジル、フェニルエチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、４−ヒドロキシブチル、２−カルボキシメチル、３−カルボキシエチルおよび４−カルボキシプロピルが含まれる。他の好ましい化合物は、Ｒ７およびＲ８またはＲ９およびＲ１０が共に−（ＣＨ２）ｙ−（ここでｙが２である）を形成する化合物である。
【００２８】
ＸがＮＲ１８である場合の好ましい化合物は、Ｒ１８が水素またはアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、ヒドロキシ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、カルボアルコキシ、フェニル、シアノ、トリフルオロメチル、アセチルアミノ、ピリジル、チオフェニル、フリル、ピロリルもしくはイミダゾリルの一つ、二つもしくは三つ、好ましくは一つで任意に置換されたＣ１〜６アルキルである化合物である。
【００２９】
Ｒ１８の適当な値には水素、メチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ベンジル、フェネチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、４−ヒドロキシブチル、カルボキシメチルおよびカルボキシエチルが含まれる。
【００３０】
最も好ましい化合物は、Ｘが酸素である化合物である。
【００３１】
Ｒ６は水素、Ｃ１〜３アルキル、ハロゲン、またはＣ１〜２アルコキシを表してもよい。Ｒ６は好ましくはＣ１〜３アルキル、例えばメチル、またはハロゲン、例えば塩素、臭素もしくはフッ素である。
【００３２】
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立して、水素、ヒドロキシ、Ｃ１〜３アルキル、ハロゲン、またはＣ１〜２アルコキシを表してもよい。好ましくはＲ３はフッ素およびヒドロキシである。
【００３３】
式Ｉのｎの好ましい値には、０から６、より好ましくは０から４、最も好ましくは０、１または２が含まれる。ｍの好ましい値には、０から４、より好ましくは０、１、２または３が含まれる。
【００３４】
本発明は、本発明の一連の選択された化合物における構造上の不斉性の結果生じる立体異性体および光学異性体、例えば鏡像異性体の混合物ならびに個々の鏡像異性体およびジアステレオマーを含むと考えられることも理解されるべきである。本発明の化合物は多形結晶形を有していてもよく、すべての多形結晶形は本発明に含まれる。
【００３５】
式Ｉの化合物は溶媒和、特に水和されていてもよい。水和は化合物または化合物を含む組成物の製造中に起こりうり、または水和は化合物の吸湿性によって経時的に起こることもある。
【００３６】
式Ｉの範囲内の特定の化合物は、プロドラッグと呼ばれる誘導体である。「プロドラッグ」という用語は、既知の直接作用薬物の誘導体であって、その薬物に比べて送達特性および治療的価値が増強されており、酵素的または化学的な方法によって活性薬物に変換される誘導体を意味する。有用なプロドラッグとは、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃおよび／またはＲｄが−ＣＯ２Ｒｗ（ここでＲｗが前述のように定義される）であるようなプロドラッグである。米国特許第５，４６６，８１１号およびサウルニアー（Ｓａｕｌｎｉｅｒ）ら、Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ４：１９８５〜１９９０（１９９４）参照。
【００３７】
任意の構成要素または式Ｉにおいて任意の変量が複数回出現する場合、それぞれの出現時の定義は、他のすべての出現時の定義とは無関係である。また、置換基および／または変量の組み合わせは、そのような組み合わせによって安定な化合物が得られる場合にのみ許容される。
【００３８】
もう一つの局面において、本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な組成物であって、体外で検出可能な本発明の化合物を含む組成物を含む。好ましい組成物は、本発明の化合物および放射性原子または常磁性原子などの検出可能な標識を含む組成物である。
【００３９】
もう一つの局面において、本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために用いられる診断用組成物であって、薬学的に許容される担体および本発明の化合物または組成物の診断上有効な量を含む組成物を提供する。
【００４０】
もう一つの局面において、本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な方法を含む。
【００４１】
好ましい局面によると、有用な化合物は、Ｒ１置換基がＩ−１２５、Ｉ−１３１またはＩ−１２３などの放射性ヨウ素原子などの検出可能な標識で置換されている化合物である。この局面において、Ｒ１は好ましくはパラＩ−１２３置換、パラＩ−１２５置換もしくはパラＩ−１３１置換を有するフェニル、またはメタＩ−１２３置換、メタＩ−１２５置換もしくはメタＩ−１３１置換を有するベンジルである。
【００４２】
検出可能な標識は、適当な配位子（Ｌ）が、直接または二価の連結基Ａ’’を介してＲ１置換基に結合されている、放射性または常磁性キレートであってもよい。または、−Ａ’’−Ｌ基が式ＩのＷ基の代わりとなる。適当な配位子とは、放射性または常磁性金属イオンをキレート化することができる有機部分を意味する。
【００４３】
これらの化合物において、二価の連結基Ａ’’は、遊離アミノ基およびキレート手段に共有結合することができる基を含む。例えば、Ａ’’は、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝ＮＨ）−（ＣＨ２）６−Ｃ（＝ＮＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）６−Ｃ（＝Ｏ）−、
【化２３】
2004510759.tif 000015
などであってもよい。
【００４４】
同様に、式Ｉで表される化合物において、キレート配位子（ｌｉｇａｎｄ）Ｌは、放射性原子または常磁性原子のいずれかに共有結合または非共有結合することができる基を含む。キレート手段とは、放射性原子または常磁性原子と錯体を形成するために通常用いられるものを含む。これらには、３個から１２個、好ましくは３個から８個のメチレンホスホン酸基、メチレンカルボヒドロキサム酸基、カルボキシエチリデン基、または特にカルボキシメチレン基を含むキレート手段が含まれ、これらの基は窒素原子に結合される。酸基の一つまたは二つだけが窒素原子に結合されている場合、その窒素はそのような基を有するもう一つの窒素に、任意に置換されたエチレン基または窒素もしくは酸素もしくは硫黄原子で分離された四つまでの別々のエチレン単位で結合される。完成手段としては、ジエチレントリアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’−五酢酸（ＤＴＰＡ）が好ましい。ＤＴＰＡは当技術分野において放射性原子インジウム−１１１（Ｉｎ−１１１）、テクネチウム−９９ｍ（Ｔｃ−９９ｍ）、および常磁性原子ガドリニウム（Ｇｄ）のキレート手段として公知である。カウ（Ｋｈａｗ）ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０９：２９５（１９８０）；パイク（Ｐａｉｋ）Ｃ．Ｈ．ら、米国特許第４，６５２，４４０号（１９８７）；グリース（Ｇｒｉｅｓ），Ｈ．ら、米国特許第４，９５７，９３９号（１９９０）。好ましいキレート配位子Ｌは、１−（ｐ−アミノベンジル）−ジエチレントリアミン五酢酸である。キレート手段としては、スルフヒドリルまたはアミン部分を含む化合物も含まれ、任意の組み合わせにおけるその総数は少なくとも四つである。これらのスルフヒドリルまたはアミン部分は、少なくとも二つの原子（炭素、窒素、酸素、または硫黄であってもよい）によって互いに分離されている。キレート手段Ｌにとって特に好ましいのは、当技術分野においてＴｃ−９９ｍのキレート手段として公知のメタロチオネインである。
【００４５】
本明細書においてそれ自体で、または他の基の一部として用いられる「アルキル」という用語は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルなどの炭素１２個までの直鎖および分枝鎖両方の基を意味する。好ましくはアルキルは１個から６個の炭素原子である。
【００４６】
「アルケニル」という用語は本明細書において、鎖長がそれに限定されるわけではないが、炭素原子２個〜２０個の直鎖または分枝鎖基であって、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニルなどを含むが、これらに限定されるわけではない基を意味するために用いられる。好ましくは、アルケニル鎖は炭素原子２個から１０個の長さで、より好ましくは炭素原子２個から８個、最も好ましくは炭素原子２個から４個の長さである。
【００４７】
「アルキニル」という用語は本明細書において、鎖長がそれに限定されるわけではないが、炭素原子２個〜２０個の直鎖または分枝鎖基であって、鎖内に二つの炭素原子間の三重結合が少なくとも一つあり、アセチレン、１−プロピレン、２−プロピレンなどを含むがこれらに限定されるわけではない基を意味するために用いられる。好ましくは、アルキニル鎖は炭素原子２個から１０個の長さで、より好ましくは炭素原子２個から８個、最も好ましくは炭素原子２個から４個の長さである。
【００４８】
置換基としてアルケニル部分またはアルキニル部分がある、本明細書のすべての場合において、不飽和結合、すなわちビニレンまたはアセチレン結合は、好ましくは窒素、酸素または窒素部分に直接結合されていない。
【００４９】
「アルコキシ」という用語は本明細書において、鎖長がそれに限定されるわけではないが、酸素原子に結合された、炭素原子１個〜２０個の直鎖または分枝鎖基であって、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシなどを含むがこれらに限定されるわけではない基を意味するために用いられる。好ましくは、アルコキシ鎖は炭素原子１個から１０個の長さで、より好ましくは炭素原子１個から８個の長さである。
【００５０】
本明細書においてそれ自体で、または他の基の一部として用いられる「アリール」という用語は、フェニル、ナフチルまたはテトラヒドロナフチルなどの、環部分に６個から１４個の炭素、好ましくは環部分に６個〜１０個の炭素を含む単環式または二環式芳香族基を意味する。
【００５１】
本明細書において用いられる「ヘテロアリール」という用語は、５個から１４個の環原子；環の配列中に共有される６個、１０個または１４個のπ電子を有し；かつ炭素原子と、１個、２個または３個の酸素、窒素または硫黄ヘテロ原子とを含む基を意味する（ヘテロアリール基の例は、チエニル、ベンゾ［ｂ］チエニル、ナフト［２，３−ｂ］チエニル、チアントラニル、フリル、ピラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾキサゾリル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサチイニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、インドリル、インダゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、イソキノリル、キノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キナゾリニル、シンノリニル、プテリジニル、４αＨ−カルバゾリル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、ペリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、イソチアゾリル、フェノチアジニル、イソキサゾリル、フラザニルおよびフェノキサジニル基である）。
【００５２】
本明細書においてそれ自体で、または他の基の一部として用いられる「アラルキル」または「アリールアルキル」という用語は、ベンジル、フェニルエチルまたは２−ナフチルメチルなどの、アリール置換基を有する前述のＣ１〜１２アルキル、好ましくはＣ１〜６アルキル基を意味する。
【００５３】
本明細書においてそれ自体で、または他の基の一部として用いられる「シクロアルキル」という用語は、３個から９個の炭素原子、好ましくは３個から７個の炭素原子を含むシクロアルキル基を意味する。典型的な例はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルおよびシクロノニルである。
【００５４】
「Ｃ７〜１２二環式アルキル」という用語は、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル（ノルボルニル）、ビシクロ［２．２．２］オクチル、１，１，３−トリメチルビシクロ［２．２．１］ヘプチル（ボルニル）などを含むことが意図される。
【００５５】
「Ｃ１０〜１６三環式アルキル」という用語は、トリシクロ［５，２，１，０２，６］デシル、アダマンチルなどを含むことが意図される。
【００５６】
本明細書においてそれ自体で、または他の基の一部として用いられる「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、塩素、臭素、フッ素またはヨウ素を意味し、塩素およびフッ素が好ましい。
【００５７】
本明細書においてそれ自体で、または他の基の一部として用いられる「モノアルキルアミン」という用語は、１個から１２個、好ましくは１個から６個の炭素原子を有する一つのアルキル基で置換されたアミノ基を意味する。
【００５８】
本明細書においてそれ自体で、または他の基の一部として用いられる「ジアルキルアミン」という用語は、それぞれ１個から１２個、好ましくは１個から６個の炭素原子を有する二つのアルキル基で置換されたアミノ基を意味する。
【００５９】
本明細書において用いられる「ヒドロキシアルキル」という用語は、一つまたは複数のヒドロキシル部分で置換された、前述のアルキル基のいずれかを意味する。
【００６０】
本明細書において用いられる「カルボキシアルキル」という用語は、一つまたは複数のカルボン酸部分で置換された、前述のアルキル基のいずれかを意味する。
【００６１】
本明細書において用いられる「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ）」または「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ ｒｉｎｇ）」という用語は、特に記載のある場合を除き、安定な５員から７員単環式もしくは二環式または安定な７員から１０員二環式の複素環構造であって、そのいかなる環も飽和でも不飽和でもよく、かつ炭素原子と、Ｎ、ＯおよびＳからなる群より選択される一つから三つのヘテロ原子とからなり、ただし窒素および硫黄ヘテロ原子は任意に酸化されていてもよく、かつ窒素ヘテロ原子は任意に三級化されていてもよく、また、前述の定義の任意の複素環がベンゼン環に縮合されている任意の二環式の基を含む複素環構造を意味する。特に有用なものは、一つの酸素もしくは硫黄、一つから三つの窒素原子、または一つの酸素もしくは硫黄と一つまたは二つの窒素原子の組み合わせを含む環である。複素環は、安定な構造を作るいかなるヘテロ原子または炭素原子で結合されていてもよい。そのような複素環の例には、ピペリジニル、ピペラジニル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロロジニル、２−オキソアゼピニル、アゼピニル、ピロリル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソキサゾリル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌクリジニル、イソチアゾリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、チアジアゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾキサゾリル、フリル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、チエニル、ベンゾチエニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホン、およびオキサジアゾリルが含まれる。モルホリノはモルホリニルと同じである。
【００６２】
「ヘテロ原子」という用語は、本明細書において酸素原子（「Ｏ」）、硫黄原子（「Ｓ」）または窒素原子（「Ｎ」）を意味するために用いられる。ヘテロ原子が窒素である場合、これはＮＲａＲｂ部分を形成することができ、ただしＲａおよびＲｂは互いに独立して水素もしくはＣ１からＣ８アルキルであるか、またはそれらが結合している窒素と一緒になって飽和もしくは不飽和５員環、６員環、もしくは７員環を形成することが理解されると考えられる。
【００６３】
スキーム１〜スキーム８は、式Ｉの化合物の合成系路の概略を示している。
【００６４】
【化２４】
スキーム１
2004510759.tif 000016
【００６５】
スキーム１において、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）などの適当な溶媒中、１，２，３−トリフルオロ−４−ニトロベンゼンなどのフッ化ニトロベンゼン１と、マロン酸ジエチルなどの置換または無置換マロン酸エステルの金属塩との反応の後、酸加水分解に続いて加熱による脱カルボン酸を行うことにより、ベンゼン環に酢酸側鎖を導入して、化合物２を生成する（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、欧州特許公開出願第０４７０５７８Ａ１号（１９９１））。ＴＨＦなどの適当な溶媒中、ボラン（ＢＨ３）−ＴＨＦ錯体および水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４）などの典型的な還元条件下で、２のカルボキシル基をヒドロキシル基に変換して、アルコール３を得る（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、上記）。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）およびトルエンなどの適当な溶媒中で還流しながら、化合物３のフッ素を、ｔｅｒｔ−ブチルアミンなどの適当な求核剤で芳香族求核置換することにより、環のニトロ基のパラ位に適当な官能基を導入して、化合物４を得る（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、上記）。化合物４のｔｅｒｔ−ブチルなどの窒素保護基を、還流濃塩酸（ＨＣｌ）などの標準的条件下で除去して、化合物５を生成する（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、上記）。トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）などの塩基存在下、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中の塩化アセチルなどの当技術分野において公知の標準的条件下で、化合物５のヒドロキシル基をアセチルなどの適当な保護基（Ｇｒｅｅｎｅ， Ｔ．Ｗ．、およびＷｕｔｓ， Ｐ．Ｇ．Ｍ．、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第２版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ．、ニューヨーク（１９９１））で遮蔽して、化合物６を得る。ＤＣＭなどの適当な溶媒中、活性化カルボニル化合物ＡＣＯＣｌと化合物６とのカップリングにより、化合物７を生成する。
【００６６】
【化２５】
スキーム２
2004510759.tif 000017
【００６７】
スキーム２において、エタノールまたはメタノール中、活性炭担持パラジウム存在下、水素による接触水素添加などの典型的な条件下でのアリールニトロ化合物７の還元により、アリールアミン８を得る。メタノール中、炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）水溶液などの塩基性条件下での加水分解により、化合物８のアセチル保護基を除去して（アミノ基操作の前に化合物の溶解性を高めるため）、化合物９を得る。亜硝酸ナトリウム（ＮａＮＯ２）およびＨＣｌの後、塩化第一銅（Ｉ）（ＣｕＣｌ）などの適当な試薬によるザントマイヤー型反応（（ａ）Ｇｕｎｓｔｏｎｅ， Ｆ．Ｄ．ら、Ｏｒｇ． Ｓｙｎ． Ｃｏｌｌｅｃｔ Ｖｏｌ． １、Ｗｉｌｅｙ、ニューヨーク州ニューヨーク（１９４１）、ｐ．１７０；（ｂ）Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、欧州特許公開出願第０４７０５７８Ａ１号（１９９１））、または亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（ｔ−ＢｕＯＮＯ）および塩化第二銅（ＩＩ）（ＣｕＣｌ２）などの適当な試薬による置換脱アミノ（Ｄｏｙｌｅ， Ｍ．Ｐ．ら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ４２：２４２６（１９７７））によって、化合物９の中心骨格に所望のＲ６を導入して、化合物１０を得る。アリールアミン９のアミノ基は、アレンジアゾニウム塩中間体からパラジウム触媒存在下、炭素−炭素カップリング条件下でメチル基に変換することができる（Ｋｉｋｕｋａｗａ， Ｋ．ら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ４８：１３３３（１９８３））。次に化合物１０を、ＢＨ３などの適当な還元剤で還元して、Ｙが−ＮＨ−である化合物１１の所望の断片ＷＹを生成する。ＤＣＭ中、三酸化硫黄ピリジン錯体（ＳＯ３・ピリジン）などの酸化剤により１１を酸化して、アルデヒド１２を生じる。標的化合物の中心および左断片の構築は、リン酸二水素ナトリウム（ＮａＨ２ＰＯ４）およびＤＭＳＯ存在下、亜塩素酸ナトリウム（ＮａＣｌＯ２）などの適当な酸化条件下でのアルデヒド１２のカルボン酸１３へのさらなる酸化によって最終的に達成される（Ｄａｌｃａｎａｌｅ， Ｅ．ら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５１：５６７（１９８６））。
【００６８】
【化２６】
スキーム３
2004510759.tif 000018
【００６９】
スキーム３において、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの適当な溶媒中、カストロ試薬（ＢＯＰ）などの典型的なペプチドカップリング試薬およびＤＩＥＡなどの塩基存在下で、酸１３を保護Ｏ−グアニジルアミン（Ｔｉａｎｂａｏ Ｌｕら、国際公開公報第９９／２６９２６号（１９９９））またはアミノピリジニルアミン（Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｐ．Ｅ．ら、国際公開公報第９７／０１３３８号（１９９７））などの適当なアミン１４とカップリングさせ、アミド１５を生成する。任意に、ＢがＯ−グアニジンの場合はトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）のＤＣＭ溶液、またはＢがアミノピリジンの場合はＨＣｌの１，４−ジオキサン溶液などの、典型的な脱保護条件下でｔｅｒｔ−（ブトキシ）カルボニル（Ｂｏｃ）などの保護基を除去して、それぞれ遊離のＯ−グアニジンまたはアミノピリジンを生成することができる。
【００７０】
【化２７】
スキーム４
2004510759.tif 000019
【００７１】
スキーム４において、濃硫酸中９６％硝酸などの標準的条件を用い、フェニル酢酸誘導体１６をベンゼン環のメタ位でニトロ化して（Ｓｉｎｄｅｌａｒら、Ｃｏｌｌ． Ｃｚｅｃｈｏｓｌｏｖ． Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ． ４２：２２３１（１９７７））、ニトロ化合物１７を得る。次いで、化合物１７のカルボン酸基を、塩化オキサリルと、続くアルコールＰＯＨとの反応によるエステルへの変換などの、当技術分野において公知の標準的条件（Ｇｒｅｅｎｅ， Ｔ．Ｗ．、およびＷｕｔｓ， Ｐ．Ｇ．Ｍ．、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第２版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、ニューヨーク（１９９１））を用いて保護し、エステル１８（Ｐは典型的なカルボン酸保護基）を得る。エタノールなどの適当な溶媒中、塩化第一スズ（ＩＩ）などの適当な試薬を用いて、ニトロ基の還元を行い、得られたアミン１９をＤＣＭなどの溶媒中、アシル化剤（Ｗ＝Ｒ１Ｃ（Ｏ））または塩化ベンジルスルホニルなどのスルホニル化剤（Ｗ＝Ｒ１Ｓ（Ｏ）２）およびＮ−メチルモルホリンなどの適当な塩基と反応させて、Ｎ置換−アミノフェニル酢酸エステル２０（Ｙ＝−ＮＨ−）を生成する。水性水酸化物による加水分解などの、当技術分野において公知の標準的条件（Ｇｒｅｅｎｅ， Ｔ．Ｗ．、およびＷｕｔｓ， Ｐ．Ｇ．Ｍ．、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第２版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、ニューヨーク（１９９１））を用いてカルボン酸基を脱保護し、酸１３（Ｙ＝−ＮＨ−）を得る。次いでこれをスキーム３のとおりにアミン１４とカップリングさせ、脱保護して、フェニルアセトアミド１５（Ｙ＝ＮＨ）を生成する。
【００７２】
【化２８】
スキーム５
2004510759.tif 000020
【００７３】
スキーム５において、スキーム３の方法などの標準的ペプチドカップリング法を用い、ニトロフェニル酢酸１７をエタノールアミンなどのアミノアルコール２１にカップリングさせて、アルコール２２を得る。ＴＨＦなどの適当な溶媒中、トリフェニルホスフィンおよびジエチルアゾジカルボン酸塩などの標準的試薬（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ， Ｏ．、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １：１（１９８１））を用いてＮ−ヒドロキシフタルイミドにカップリングさせることにより、アルコールを保護アルコキシアミンに変換して化合物２３を得、これを次いでエタノールなどの適当な溶媒中、炭素担持パラジウム（０）による水素添加などの典型的還元条件下でアニリン２４に変換する。次いで、スキーム４のとおりにアミンをアシル化またはスルホニル化して中間体２５を得、エタノール／ＴＨＦ中の水性メチルアミンなどの当技術分野において公知の標準的条件（Ｇｒｅｅｎｅ， Ｔ．Ｗ．、およびＷｕｔｓ， Ｐ．Ｇ．Ｍ．、「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第２版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、ニューヨーク（１９９１））を用いてアルコキシアミンを脱保護する。Ｎ，Ｎ’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｓ−メチルチオ尿素（Ｂｅｒｇｅｒｏｎ， Ｒ．Ｊ．およびＭｃＭａｎｉｓ， Ｊ．Ｓ．、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５２：１７００（１９８７））またはＮ−Ｒａ−Ｎ’−Ｒｂ，Ｒｃ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン（Ｂｅｒｎａｔｏｗｉｃｚ， Ｍ．Ｓ．ら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． ３４：３３８９（１９９３））などの標準的グアニジニル化試薬により、得られたアルコキシアミン２６のグアニジニル化を行い、グアニジンを任意にスキーム３のとおりに脱保護して、最終標的２７を得る。
【００７４】
【化２９】
スキーム６
2004510759.tif 000021
【００７５】
スキーム６において、ケトン、アルデヒド（Ｒ１１＝Ｈ）、またはカルボン酸（Ｒ１１＝ＯＨ）出発物質２８を、ボラン−ＴＨＦなどの適当な試薬で還元してアルコール２９を得、次いでこれをＤＣＭなどの適当な溶媒中、塩化メタンスルホニルなどの塩化スルホニルとの反応によって、よりよい脱離基に変換し、化合物３０を生成する。還流アセトニトリル中のシアン化カリウムなどの標準的条件下でスルホン酸エステルをシアン化物で置換してニトリル３１を得、次いでこれを水性水酸化物などの典型的な試薬で加水分解する。得られた酸１７とアミン１４とのカップリングをスキーム３のとおりに行って中間体３２を得、ニトロ基をスキーム４または５のとおりに還元してアニリン３３を得る。これをスキーム４のとおりにアシル化またはスルホン化し、グアニジンをスキーム３のとおりに任意に脱保護して、最終標的１５（Ｙ＝ＮＨ）を得る。
【００７６】
【化３０】
スキーム７
2004510759.tif 000022
【００７７】
スキーム７において、ニトロフェノール３４を、ＤＭＦなどの極性非プロトン溶媒中、ハロゲン化アリル３５および炭酸セシウムなどの適当な塩基でアルキル化して中間体３６を得、次いでこれを加熱による芳香族クライゼン転移により化合物３７に変換する。ＤＭＦなどの溶媒中、臭化ベンジルおよび炭酸セシウムなどの典型的試薬を用いてフェノールを保護し、３８（Ｐは典型的なヒドロキシル保護基）を得、ニトロ基をスキーム４または５のとおりに還元してアニリン３９を生成する。アニリン３９をスキーム４のとおりに中間体４０に変換し、アルケンを、ジオキサン／水中、過ヨウ素酸ナトリウムおよび四酸化オスミウムに続き、ジョーンズ試薬などの標準的条件を用いて酸化的に切断し、酸４１を得る。次いでこれをアミン１４にカップリングさせ、グアニジンを任意にスキーム３のとおりに脱保護し、フェノール基を、エタノールなどの適当な溶媒中、炭素担持パラジウム（０）による水素添加などの標準的条件を用いて任意に脱保護し、標的化合物４２を生成する。
【００７８】
【化３１】
スキーム８
2004510759.tif 000023
【００７９】
スキーム８において、モノ保護カテコール４３を、ＤＣＭなどの溶媒中、トリエチルアミンなどの塩基存在下、塩化メタ−トルエンスルホニルなどの試薬Ｗ−Ｃｌでスルホニル化して、化合物４４を得る。ＤＣＭ中三臭化ボロンなどの標準的条件を用いて保護基を除去し、得られたフェノール４５をハロゲン化アリル３５でアルキル化して４６を得、フェノール４７に転移させ、スキーム７のとおりに保護して中間体４８を得る。アルケンを、アセトニトリル／水中、過ヨウ素酸ナトリウムおよび塩化ルテニウム（ＩＩＩ）（Ａｓｈｂｙ， Ｅ．Ｃ．およびＧｏｅｌ， Ａ．Ｂ．、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ４６：３９３６（１９８１））に続き、ジョーンズ試薬などの標準的条件を用いて酸化的に切断し、酸４９を得、次いでこれをアミン１４にカップリングさせ、任意にスキーム３および７のとおりに脱保護して、標的化合物５０を生成する。
【００８０】
式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩（水もしくは脂溶性または分散性生成物の形）には、通常の非毒性塩または、例えば、無機もしくは有機酸もしくは塩基から形成される四級アンモニウム塩が含まれる。そのような酸付加塩の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、トリフルオロ酢酸塩、およびウンデカン酸塩が含まれる。塩基性塩には、アンモニウム塩、ナトリウムおよびカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンなどの有機塩基との塩、ならびにグアニジニル部分との塩を含む、アルギニン、リシンなどのアミノ酸との塩が含まれる。同様に、塩基性窒素含有基を、塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、プロピル、およびブチルなどのハロゲン化低級アルキル；硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミルなどの硫酸ジアルキル；塩化、臭化およびヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルなどの長鎖ハロゲン化物；臭化ベンジルおよびフェネチルなどのハロゲン化アラルキルならびにその他などの物質で四級化することもできる。酸付加塩を形成するために好ましい酸には、ＨＣｌ、酢酸およびトリフルオロ酢酸が含まれる。
【００８１】
本発明の化合物は、金属、酸性、チオールおよびセリンプロテアーゼの新しい種類の強力な阻害剤である。本発明の範囲内の化合物によって阻害されるセリンプロテアーゼの例には、気腫の病因に関係するとされているタンパク質分解酵素、白血球好中球エラスターゼ；消化酵素、キモトリプシンおよびトリプシン；白血球に関与するキモトリプシン様プロテアーゼ、膵エラスターゼおよびカテプシンＧ；血液凝固経路のタンパク質分解酵素、トロンビンおよび第Ｘａ因子が含まれる。金属プロテアーゼ、サーモリシンおよび酸性プロテアーゼ、ペプシンの阻害も、本発明の化合物の企図された使用である。本発明の化合物は、好ましくは、トリプシン様プロテアーゼを阻害するために用いられる。
【００８２】
それらの最終使用適用のために、本発明の化合物の酵素阻害特性の効力および他の生化学的パラメーターは、当業者には公知の標準的生化学法により容易に確認される。例えば、キモトリプシンおよびトリプシンを阻害する化合物の最終使用適用は、膵炎の治療においてである。それらの特定の最終使用適用のための実際の用量範囲は、当然のことながら、治療を受ける患者または動物の、担当診断医が調べた疾患状態の性質および重症度に応じて異なる。有効な治療効果のための有用な用量範囲は、一日に１ｋｇあたり約０．０１ｍｇから１０ｍｇであると予想される。
【００８３】
トロンビンを阻害する能力によって特徴づけられる本発明の化合物は、いくつかの治療目的のために用いることができる。トロンビン阻害剤として、本発明の化合物はトロンビン産生を阻害する。したがって、これらの化合物は、トロンビンの産生または作用のいずれかに関与する異常な静脈または動脈血栓症によって特徴づけられる状態の治療または予防のために有用である。これらの状態には、深在静脈血栓症；敗血症性ショック、ウイルス感染症および癌の間に生じる播種性血管内凝固障害；心筋梗塞；卒中；冠動脈バイパス；眼内のフィブリン生成；股関節置換；および血栓溶解療法または経皮的冠動脈形成術（ＰＣＴＡ）のいずれかから生じた血栓形成が含まれるが、これらに限定されるわけではない。他の使用には、カテーテル、血液透析機、採血シリンジおよびチューブ、ならびに輸血管などの採血、血液循環、および血液保存において用いられる装置の製造時に用いられる物質中に埋め込まれるか、または物理的に連結された抗凝血物質としての前記トロンビン阻害剤の使用が含まれる。本発明の化合物は、体外血液循環における抗凝血物質として用いることもできる。
【００８４】
ステントは、再狭窄を減少させるが、血栓形成性であることが明らかにされている。ステントの血栓形成性を低下させる戦略は、ステント表面にトロンビン阻害物質をコーティング、埋め込み、吸着、または共有結合することである。本発明の化合物をこの目的のために用いることができる。本発明の化合物を、ステント材料としての可溶性および／または生物分解性ポリマーに結合させる、またはその中に埋め込む、ならびにその後にステント材料上にコーティングすることができる。そのようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルタミド−フェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシン、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーが含まれうる。欧州特許出願第７６１２５１号、欧州特許出願第６０４，０２２号、カナダ特許第２，１６４，６８４号ならびに国際公開公報第９６／１１６６８号、国際公開公報第９６／３２１４３号および国際公開公報第９６／３８１３６号参照。
【００８５】
平滑筋細胞、内皮細胞および好中球などの細胞型の受容者に対するトロンビンの効果によって、本発明の化合物は、成人呼吸障害症候群；炎症反応；創傷治癒；再灌流損傷；アテローム性動脈硬化症；ならびにバルーン血管形成術、粥腫切除、および動脈ステント設置後の再狭窄の治療または予防においてさらに用いられる。
【００８６】
本発明の化合物は、新生物および転移ならびにアルツハイマー病およびパーキンソン病などの神経変性疾患の治療において有用でありうる。
【００８７】
トロンビン阻害剤として用いる場合、本発明の化合物を、一日一回または２回〜４回の分割した用量での投与法で、体重１ｋｇあたり約０．１ｍｇから約５００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇから１０ｍｇの間の用量範囲内の有効量で投与することができる。
【００８８】
トロンビン阻害剤として用いる場合、本発明の化合物は、組織プラスミノゲン活性化因子、ストレプトキナーゼ、およびウロキナーゼなどの血栓溶解剤との組み合わせで用いることもできる。加えて、本発明の化合物は、フィブリノーゲンアンタゴニストおよびトロンボキサン受容体アンタゴニストなどであるが、これらに限定されるわけではない、他の抗血栓剤または抗凝血剤との組み合わせで用いることもできる。
【００８９】
トロンビン阻害剤は、標的指向可能な薬物担体としての可溶性ポリマーと結合させることもできる。そのようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシ−プロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルタミド−フェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシンが含まれる。さらに、トロンビン阻害剤は、薬物の制御放出を達成するのに有用な類の生物分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーにカップリングさせることもできる。
【００９０】
ヒト白血球エラスターゼは、炎症部位で多形核白血球によって放出され、したがっていくつかの疾患状態の原因である。本発明の化合物は、痛風、慢性関節リウマチ、および他の炎症性疾患の治療、ならびに気腫の治療において有用な抗炎症作用を有すると予想される。本発明の化合物の白血球エラスターゼ阻害特性は、以下に記載の方法によって評価される。カテプシンＧも、関節炎、痛風および気腫、加えて糸球体腎炎および肺の感染症が原因の肺侵襲の疾患状態に関係づけられている。その最終使用適用において、式Ｉの化合物の酵素阻害特性は当技術分野において公知の標準的生化学法により容易に確認される。
【００９１】
本発明の範囲内の化合物のカテプシンＧ阻害特性は、下記の方法によって評価される。部分的に精製されたヒトカテプシンＧの調製物はバウ（Ｂａｕｇｈ）ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １５：８３６（１９７９）の方法によって得られる。白血球顆粒は白血球エラスターゼおよびカテプシンＧ（キモトリプシン様活性）の調製物の主な原料である。白血球を溶解し、顆粒を分離する。白血球顆粒を０．２０Ｍ酢酸ナトリウム（ｐＨ４．０）で抽出し、抽出物を０．０５Ｍ ＮａＣｌを含む０．０５Ｍトリス緩衝液（ｐＨ８．０）、４℃で一晩透析する。タンパク質画分が透析中に沈殿し、これを遠心沈降によって分離する。この画分は白血球顆粒のキモトリプシン様活性の大部分を含む。各酵素に対し特異的な基質、すなわちＮ−Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐ−ニトロアニリドおよびＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリドを調製する。後者は白血球エラスターゼでは加水分解されない。酵素調製物を０．５０Ｍ ＮａＣｌ、１０％ジメチルスルホキシド、および基質としての０．００２０Ｍ Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリドを含む０．１０Ｍ Ｈｅｐｅｓ緩衝液（ｐＨ７．５）２．００ｍＬ中でアッセイする。ｐ−ニトロアニリド基質の加水分解を４０５ｎｍ、２５℃でモニターする。
【００９２】
本発明の化合物の好中球エラスターゼ阻害剤として、およびカテプシンＧ阻害剤としての適用のために有用な用量範囲は、担当診断医が調べた疾患状態の性質および重症度に応じて異なり、一日に体重１ｋｇあたり０．０１ｍｇから１０ｍｇの範囲が前述の疾患状態に対して有用である。
【００９３】
ウロキナーゼまたはプラスミノゲン活性化因子を阻害する本発明の化合物は、過剰細胞増殖疾患状態の治療において有用である可能性がある。したがって、本発明の化合物は良性前立腺肥大症および前立腺癌の治療、乾癬の治療、ならびに堕胎薬としても有用であり得る。それらの最終使用適用のために、本発明の化合物の酵素阻害特性の効力および他の生化学的パラメーターは、当技術分野において公知の標準的生化学法により容易に確認される。この適用のための実際の用量範囲は、治療を受ける患者または動物の、担当診断医が調べた疾患状態の性質および重症度に応じて異なる。有効な治療効果のための一般的用量範囲は、一日に１ｋｇあたり約０．０１ｍｇから１０ｍｇであると予想される。
【００９４】
本発明の化合物のその他の使用には、市販の試薬酵素の作用部位濃度についての分析が含まれる。例えば、キモトリプシンは、膵液および糞便中のキモトリプシン活性の臨床定量において用いるための標準的試薬として供給される。そのようなアッセイは、胃腸および膵疾患の診断用である。膵エラスターゼも、血漿中のα１−アンチトリプシン定量のための試薬として市販されている。血漿α１−アンチトリプシンの濃度はいくつかの炎症性疾患の経過中に上昇し、α１−アンチトリプシン欠乏は肺疾患の発生率上昇に関与している。本発明の化合物は、試薬として市販されているエラスターゼの滴定標準化によるこれらのアッセイの精度および再現性を高めるために用いることができる。米国特許第４，４９９，０８２号参照。
【００９５】
特定のタンパク質精製中の特定のタンパク質抽出物中のプロテアーゼ活性は、タンパク質分離法の結果を複雑にし、損なう可能性がある、繰り返し起こる問題である。そのような抽出物中に存在する特定のタンパク質は、様々なタンパク質分解酵素に堅く結合する本発明の化合物によって精製段階中に阻害することができる。
【００９６】
本発明の薬学的組成物は、本発明の化合物の有益な効果を経験しうるいかなる動物にも投与することができる。そのような動物の中で主要なものはヒトであるが、本発明はそのように限定されることを意図していない。
【００９７】
本発明の薬学的組成物は、それらの所期の目的を達成するいかなる手段によっても投与することができる。例えば、投与は非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、経皮、口腔内、または眼内の経路によるものでありうる。代わりに、または同時に、投与は経口経路によるものでありうる。投与される用量は受容者の年齢、健康、および体重、同時に治療を行っていればその種類、治療の頻度、および所期の効果の性質によって異なる。
【００９８】
薬理活性のある化合物に加えて、新しい薬学的調製物は、活性化合物を薬学的に用いうる調製物に加工することを助ける賦形剤および補助剤を含む、適当な薬学的に許容される担体を含むことができる。
【００９９】
本発明の薬学的調製物は、それ自体が公知の、例えば、通常の混合、造粒、糖衣錠形成、溶解、または凍結乾燥法による様式で製造される。したがって、経口で用いるための薬学的調製物は、活性化合物を固体賦形剤と組み合わせ、得られた混合物を任意に粉砕し、かつ錠剤または糖衣錠の核を得るために望まれるか、または必要であれば適当な補助剤を加えた後に、顆粒混合物を加工することによって得ることができる。
【０１００】
ヒトへの投与に適した本発明の組成物のために、「賦形剤」という用語は、その全体が本明細書に参照として組み込まれる、「薬学的賦形剤のハンドブック（Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ）」、米国薬剤師会、第二版（１９９４）記載の賦形剤を含むことが意図されるが、これらに限定されるわけではない。適当な賦形剤は、特に、糖類、例えば、乳糖もしくはショ糖、マンニトールもしくはソルビトール、セルロース調製物および／またはリン酸カルシウム、例えば、リン酸三カルシウムもしくはリン酸水素カルシウムなどの充填剤、ならびに例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドンを用いたデンプンペーストなどの結合剤である。望まれる場合は、前述のデンプンおよびカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムなどのその塩などの崩壊剤を加えることもできる。補助剤は、特に、流動調節剤および滑沢剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸またはステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カルシウムなどのその塩、および／あるいはポリエチレングリコールである。糖衣錠の核は、望まれる場合には、胃液に抵抗性の適当なコーティングを施して提供される。この目的のために、濃縮糖溶液を用いることができ、これは任意にアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに適当な有機溶媒または溶媒混合物を含んでいてもよい。胃液に抵抗性のコーティングを生成するために、酢酸フタル酸セルロースまたはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートなどの適当なセルロース調製物の溶液が用いられる。例えば、特定のため、または活性化合物用量の組み合わせを特徴づけるために、錠剤または糖衣錠コーティングに染料または色素を加えることもできる。
【０１０１】
経口で用いることができる他の薬学的調製物には、ゼラチン製の押し込みばめ（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセル、ならびにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤で作られた密封軟カプセルが含まれる。押し込みばめカプセルは活性化合物を顆粒の形で含むことができ、活性化合物を乳糖などの充填剤、澱粉などの結合剤、および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、ならびに任意に安定化剤と混合することもできる。軟カプセルでは、活性化合物は好ましくは、脂肪油または流動パラフィンなどの適当な液体中に溶解または懸濁される。加えて、安定化剤を加えることもできる。
【０１０２】
非経口投与に適した製剤には、水溶性型、例えば、水溶性の塩、塩基性溶液およびシクロデキストリン封入複合体での活性化合物の水溶液が含まれる。特に好ましい塩基性塩は、例えば、トリス、水酸化コリン、ビス−トリスプロパン、Ｎ−メチルグルカミン、またはアルギニンと調製されたアンモニウム塩である。一つまたは複数の修飾または非修飾シクロデキストリンを用いて、本発明の化合物を安定化し、かつその水溶性を高めることができる。この目的のために有用なシクロデキストリンは、米国特許第４，７２７，０６４号、第４，７６４，６０４号、および第５，０２４，９９８号に開示されている。
【０１０３】
加えて、適当な油性注射用懸濁液としての活性化合物の懸濁液を投与することもできる。適当な親油性溶媒または媒体には、脂肪油、例えばゴマ油、または合成脂肪酸エステル、例えばオレイン酸エチルもしくはトリグリセリド、あるいはポリエチレングリコール−４００（化合物はＰＥＧ−４００に可溶性である）が含まれる。水性注射用懸濁液は、懸濁液の粘度を高める物質、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、および／またはデキストランを含むこともできる。任意に、懸濁液は安定化剤を含んでいてもよい。
【０１０４】
式Ｉの化合物は、交換反応を用いて放射性ヨウ素で標識することができる。放射性ヨウ素の非放射性ヨウ素との交換は当技術分野において公知である。または、放射性ヨウ素標識化合物を対応するブロモ化合物からトリブチルスズ中間体を介して調製することもできる。米国特許第５，１２２，３６１号を参照されたく、この開示は参照として本明細書に組み込まれる。
【０１０５】
本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な組成物であって、放射性原子と複合体形成した式Ｉの化合物からなる組成物も含む。
【０１０６】
式Ｉの化合物に対して、適当な放射性原子にはＣｏ−５７、Ｃｕ−６７、Ｇａ−６７、Ｇａ−６８、Ｒｕ−９７、Ｔｃ−９９ｍ、Ｉｎ−１１１、Ｉｎ−１１３ｍ、Ｈｇ−１９７、Ａｕ−１９８、およびＰｂ−２０３が含まれる。いくつかの放射性原子は放射化学撮像法で用いるために優れた性質を有している。特に、テクネチウム−９９ｍ（Ｔｃ−９９ｍ）は、その核の性質のために、理想的な撮像用放射性原子である。レニウム−１８６および−１８８も、撮像を可能にするγ放射を有している。好ましい組成物は放射性原子、Ｔｃ−９９ｍを含む。
【０１０７】
式Ｉの化合物は、本発明の組成物を提供するために、当技術分野において公知の多くの技術のいずれを用いても標識することができる。例えば、これらの化合物は、ジエチレン−トリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）またはメタロチオネインなどのキレート剤によって標識することができ、これらのキレート剤はいずれも式Ｉの化合物に共有結合することができる。
【０１０８】
一般に、テクネチウム−９９ｍを含む本発明の組成物は、テクネチウム−９９ｍと還元剤および水溶性配位子との水性混合物を生成し、次いでこの混合物を式Ｉで表される本発明の化合物と接触させることにより調製される。例えば、本発明の造影剤化合物は、テクネチウム−９９ｍ（酸化状態）をキレート手段を有する本発明の化合物と、還元剤存在下で反応させて、還元状態（ＩＶ価またはＶ価の状態）のテクネチウム−９９ｍとの安定な複合体を形成することによって調製される。
【０１０９】
本発明の組成物の一つの態様は、ＤＴＰＡキレート手段を有する式Ｉの化合物をテクネチウム−９９ｍで標識することによって調製される。これは、本発明の化合物の所定の量（５μｇから０．５ｍｇ）を、クエン酸緩衝液およびスズ還元剤を含む水溶液と合わせ、次いで新しく溶解した、所定のレベルの放射能（１５ｍＣｉ）を含む過テクネチウム酸ナトリウムを加えることによって達成することができる。混合物を室温でインキュベートした後、反応混合物を滅菌フィルター（０．２ミクロン〜０．２２ミクロン）を通して遮蔽シリンジに充填し、次いで望まれる場合には注射用に０．９％生理食塩水中に供給する。
【０１１０】
本発明の組成物のもう一つの態様は、メタロチオネインキレート手段を有する式Ｉの化合物をテクネチウム−９９ｍで標識することによって調製される。これは、水性過テクネチウム酸ナトリウム−９９ｍを水性グルコヘプトン酸スズと合わせてテクネチウム−９９ｍ（還元状態）と二つのグルコヘプトン酸塩分子との可溶性複合体を形成し、次いでこの溶液を、それに結合されたメタロチオネインを有する式Ｉの化合物と合わせることによって達成することができる。混合物を、グルコヘプトン酸塩複合体からのテクネチウム−９９ｍを式Ｉの化合物のメタロチオネインと交換することが可能な条件下で一定期間インキュベートした後、本発明のテクネチウム標識組成物が形成される。
【０１１１】
この方法で用いるための還元剤は、テクネチウム−９９ｍをその酸化状態からＩＶ価もしくはＶ価の状態に還元するため、またはレニウムをその酸化状態から還元するために生理学的に許容される。用いることができる還元剤は、塩化スズ、フッ化スズ、グルコヘプトン酸スズ、酒石酸スズ、および亜ジチオン酸ナトリウムである。好ましい還元剤はスズ還元剤、特に塩化スズまたはグルコヘプトン酸スズである。還元剤の量は、テクネチウム−９９ｍを還元状態で式Ｉの化合物のキレート手段に結合させるために、この放射性同位体を還元するのに必要な量である。例えば、塩化スズ（ＳｎＣｌ２）が還元剤で、１μｇ／ｍＬ〜１，０００μｇ／ｍＬの範囲で用いることができる。
【０１１２】
クエン酸複合体はテクネチウム−９９ｍと、安定なテクネチウム−９９ｍ−クエン酸複合体を速やかに形成する。式Ｉの化合物と接触すると、クエン酸複合体からのテクネチウム−９９ｍの式Ｉの化合物のキレート手段への、実質的に定量的な転移が迅速かつ緩和な条件下で達成される。クエン酸（クエン酸ナトリウムとして）の量は、約０．５ｍｇ／ｍｌから媒質に溶解できる最大量までの範囲でありうる。クエン酸の好ましい量は１５μｇ／ｍｌから３０μｇ／ｍｌの範囲である。
【０１１３】
キレート手段を有する式Ｉの化合物の量は、０．００１ｍｇ／ｍＬから約３ｍｇ／ｍＬの範囲、好ましくは約０．０１７ｍｇ／ｍＬから約０．１５ｍｇ／ｍＬの範囲でありうる。最後に、過テクネチウム酸塩の形のテクネチウム−９９ｍは好ましくは約１ｍＣｉ〜５０ｍＣｉの量で用いることができる。本発明の化合物１ｍｇあたりのｍＣｉの量は好ましくは約３０〜１５０である。
【０１１４】
式Ｉの化合物と金属イオン−転移配位子複合体との間の反応は、好ましくは水溶液中、式Ｉの化合物が安定であるｐＨで実施される。「安定」とは、化合物が可溶性を維持し、そのα−トロンビンに対する阻害活性を保持していることを意味する。通常、反応のｐＨは約５から９で、６〜８を上回るｐＨが好ましい。テクネチウム−９９ｍ−クエン酸複合体および式Ｉの化合物を、好ましくは約２０℃から約６０℃、最も好ましくは約２０℃から約３７℃の温度で、金属イオンがクエン酸複合体から式Ｉの化合物のキレート手段に転移することができる十分な時間インキュベートする。一般に、これらの条件下で転移反応を完了するには、１時間未満で十分である。
【０１１５】
本発明の別の組成物には、Ｉｎ−１１１標識された本発明の化合物が含まれる。
【０１１６】
本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な本発明の化合物の組成物であって、常磁性原子と複合体形成した式Ｉで表される化合物からなる組成物も含む。
【０１１７】
好ましい常磁性原子は、原子番号２１から２９、４２、４４および５８から７０の元素の二価または三価のイオンである。適当なイオンには、クロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩ）、コバルト（ＩＩ）、ニッケル（ＩＩ）、銅（ＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）およびイッテルビウム（ＩＩＩ）が含まれる。非常に強い磁気モーメントのため、ガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジソプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、およびエルビウム（ＩＩＩ）が好ましい。常磁性原子として特に好ましいのはガドリニウム（ＩＩＩ）である。
【０１１８】
本発明の組成物を、式Ｉの化合物を常磁性原子と合わせることによって調製することができる。例えば、適当な常磁性原子の金属酸化物または金属塩（例えば、硝酸塩、塩化物または硫酸塩）を水およびメチル、エチルまたはイソプロピルアルコールなどのアルコールからなる媒質に溶解または懸濁する。この混合物を等モル量の式Ｉの化合物の同様の水性媒質溶液に加え、撹拌する。反応混合物を、反応が完了するまで中等度に加熱してもよい。生成した不溶性組成物はろ過によって単離することができ、一方、可溶性組成物は溶媒の蒸発によって単離することができる。本発明の組成物にキレート手段上の酸基がまだ存在する場合は、無機または有機塩基、およびアミノ酸をも加えて、酸性複合体を中性複合体に変換し、均質な組成物の単離または精製を助けることができる。有機塩基または塩基性アミノ酸、ならびにナトリウム、カリウムまたはリチウムの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩を中和剤として用いることができる。
【０１１９】
本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のために有用な診断用組成物であって、薬学的に許容される担体および式Ｉの化合物由来の組成物の診断上有効な量を含む組成物も含む。
【０１２０】
一回の用量として必要とされる組成物の「診断上有効な量」とは、投与経路、治療中の哺乳動物の種類、および考慮中の特定の哺乳動物の身体的特徴に応じて異なる。この用量を決定するためのこれらの因子およびその関係は、医学診断分野の技術者には公知である。同様に、診断上有効な量および投与法は、最適な効果を得るために調整することができるが、医学分野の技術者であれば認識していると考えられる、体重、食事、併用薬物療法および他の因子に応じて異なる。いずれにしても、撮像のための用量は問題の血栓部位で造影剤の存在を検出するために十分でなければならない。典型的には、放射線撮像では、本発明の薬学的組成物位置によって提供される用量が約５μＣｉから２０μＣｉ、好ましくは約１０μＣｉである必要があると考えられる。磁気共鳴撮像では、提供される用量が常磁性原子と複合体形成した式Ｉの化合物約０．００１ｍｍｏｌ／ｋｇから５ｍｍｏｌ／ｋｇ、好ましくは約０．００５ｍｍｏｌ／ｋｇから０．５ｍｍｏｌ／ｋｇである必要があると考えられる。いずれの場合にも、実際の用量が血栓の位置に応じて異なることは、当技術分野において公知である。
【０１２１】
インビボでの使用のための「薬学的に許容される担体」とは薬学的技術分野において公知で、例えば、「レミントンの薬科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ）」、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編１９８５）に記載されている。本発明の薬学的組成物を薬学的に許容される担体と調合して、注射投与用の滅菌溶液または懸濁液を提供することができる。特に、注射剤は、液剤もしくは懸濁剤、注射前に液剤もしくは懸濁剤とするのに適した固体剤形、または乳剤のいずれかとしての通常の剤形で調製することができる。適当な賦形剤は、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、マンニトール、乳糖、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウム、システイン塩酸塩などである。加えて、望まれる場合には、注射用薬学的組成物は少量の湿潤剤、ｐＨ緩衝剤などの非毒性補助剤を含んでいてもよい。望まれる場合には、吸収促進調製物（例えば、リポソーム）を用いることもできる。
【０１２２】
本発明は、保存または投与のために調製された診断用組成物も含む。これらは、保存剤、安定化剤および色素をさらに含む。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸およびｐ−ヒドロキシ安息香酸を保存剤として加えることができる。同上、１４４９。加えて、抗酸化剤および懸濁化剤を用いてもよい。
【０１２３】
本発明のインビボ撮像法は、血栓の有無、サイズ、退縮または増大を検出またはモニターするための以前の撮像技術を上まわるいくつかの利点も提供する。特に、本発明は、血栓に関連するトロンビンに堅く結合された化合物、組成物および診断用組成物を提供し、それにより、結合していない造影剤から生じる循環放射能または常磁性による「バックグラウンド」を低下させる。さらに、本発明の化合物、組成物および診断用組成物の冠動脈内投与によるインビボ撮像は、これらの造影剤は血栓に結合されたトロンビンをただちに飽和させると考えられるため、ほぼ即時的であると予想される。
【０１２４】
したがって、本発明は、哺乳動物の血栓のインビボ撮像のための方法であって、以下の段階を含む方法も含む：
（１）哺乳動物に本発明の化合物、組成物、または診断用組成物の診断上許容できる量を投与する段階；および
（２）血管内の血栓を検出する段階。
【０１２５】
本明細書において用いられる「インビボ撮像」という用語は、哺乳動物の血栓の検出法、ならびに哺乳動物の血栓のサイズ、位置および数、ならびに血栓の溶解または成長のモニタリングに関する。
【０１２６】
この方法により化合物、組成物、または診断用組成物をインビボで使用する際に、「投与」とは全身または局所のいずれかを標的とする様式で、非経口的に達成される。全身投与は、本発明の診断用組成物による化合物、組成物を便利かつ到達可能な静脈または動脈に注射することによって達成される。これには、前肘（ａｎｋｅｃｕｂｕｔａｌ）静脈による投与が含まれるが、これに限定されることはない。局所を標的とする投与は、本発明の化合物、組成物、または診断用組成物を、注射部位の遠位に血栓を含むことが疑われる静脈または動脈の近位の血流中に注射することにより達成される。これには、冠動脈血栓を撮像するための冠動脈血管系、脳血管系の血栓を撮像するための頚動脈、または脚の深在静脈血栓を撮像するための足静脈への直接注射が含まれるが、これらに限定されるわけではない。
【０１２７】
同様に、本発明の組成物の血栓部位への送達様式は、「投与」という用語の範囲内であると考えられる。例えば、哺乳動物に、それに結合されたキレート手段を有する式Ｉによって表される化合物と、その後に放射性原子を注射し、それにより放射性原子と複合体形成した式の化合物を含む組成物を血栓部位でインビボ形成することができる。または、放射性原子と複合体形成した式の化合物を含む組成物を哺乳動物に注射することもできる。
【０１２８】
本発明の方法で用いられる化合物、組成物、または診断用組成物の「診断上有効な量」とは、前述のとおり、投与経路、治療中の哺乳動物の種類、および治療中の特定の哺乳動物の身体的特徴に応じて異なる。この用量を決定するためのこれらの因子およびその関係は、医学診断分野の技術者には公知である。いずれにしても、インビボ撮像のための用量は問題の血栓部位で造影剤の存在を検出するために十分でなければならない。典型的には、放射線撮像では、本発明の診断用組成物によって提供される用量が約５μＣｉから２０μＣｉ、好ましくは約１０μＣｉである必要があると考えられる。磁気共鳴撮像では、診断組成物によって提供される用量が常磁性原子と複合体形成した式Ｉの化合物約０．００１ｍｍｏｌ／ｋｇから５ｍｍｏｌ／ｋｇ、好ましくは約０．００５ｍｍｏｌ／ｋｇから０．５ｍｍｏｌ／ｋｇである必要があると考えられる。いずれの場合にも、実際の用量が血栓の位置に応じて異なることは、当技術分野において公知である。
【０１２９】
撮像による血栓の検出は、そのような血栓に局在化する放射性原子または常磁性原子の存在によって可能となる。
【０１３０】
本発明の組成物および診断用組成物に結合された放射性原子は、好ましくはガンマカメラなどのγ放射線を検出することができる放射線検出手段を用いて撮像される。典型的には、放射線撮像カメラは変換媒質（高エネルギーγ線が吸収されて電子に置き換わり、電子はそれが軌道状態に戻るときに光子を放出する）、空間検出室に配列された光電検出器（放出された光子の位置を調べるため）、および検出室内で検出された光子を分析し、画像を作成する回路を用いる。
【０１３１】
本発明の組成物および診断用組成物に結合された常磁性原子は、磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）装置で検出される。そのような装置では、患者体内の原子の核スピンベクトルをアラインするために強磁場を用いる。磁場は血栓に局在する常磁性原子の存在によって妨害され、患者の像を核の平衡アライメントへの回復として読み取る。
【０１３２】
下記の実施例は、本発明の方法および組成物の例示であって、限定的なものではない。当業者に通常起こりうりかつ明らかである様々な条件およびパラメーターの、その他の適当な改変および適合化は、本発明の精神および範囲の内である。
【０１３３】
実施例
実施例１
Ｎ−［２−（アミジノアミノオキシ）エチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化３２】
2004510759.tif 000024
１．　２，２−ジフルオロ−２−フェニル酢酸エチル（Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ， Ｗ．ら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ４２：２８８３（１９８０））。
ＰｈＣＦ２ＣＯ２Ｅｔ
ベンゾイルギ酸エチル（１２．５ｇ、７０．０ｍｍｏｌ）およびジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（ＤＡＳＴ、１８．５ｍＬ、１４０ｍｍｏｌ）の混合物を外界温度で４８時間撹拌し、次いで氷上に注いだ。生成したオイルを、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中に取り、Ｈ２Ｏで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルの短いカラムで、５０％ＤＣＭ／ヘキサン溶出によりろ過した。ろ液を濃縮して、表題化合物を褐色の液体として得た（１２．３ｇ、収率８８％）。
2004510759.tif 000025
【０１３４】
２．　２，２−ジフルオロ−２−フェニル酢酸
ＰｈＣＦ２ＣＯ２Ｈ
前段階で調製した２，２−ジフルオロ−２−フェニル酢酸エチル（６．０ｇ、３０ｍｍｏｌ）の１Ｎ ＮａＯＨ（３６ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）懸濁液を外界温度で撹拌した。３６時間後、反応混合物はほぼ均質になった。混合物を１Ｎ ＨＣｌ（３６ｍＬ）で酸性化し、ＤＣＭで二回抽出した。抽出物を合わせ、Ｈ２Ｏで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、表題化合物を淡黄色固体として得た（３．８５ｇ、収率８１％）。これをそれ以上精製することなく用いた。
【０１３５】
３．　２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセチルクロリド
ＰｈＣＦ２ＣＯＣｌ
前段階で調製した２，２−ジフルオロ−２−フェニル酢酸（０．８ｇ、５．０６ｍｍｏｌ）を加えたフラスコに、氷浴中、アルゴン雰囲気下で塩化オキサリル（５ｍＬ）を加え、反応混合物を１５分間撹拌した。ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（３７ｍｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（０．５ｍＬ）を加えた。２時間後、氷浴をはずし、混合物を１時間撹拌し続けた。溶媒を蒸発させ、ＤＣＭを加え、次いで減圧下で蒸発させて表題化合物を得た（０．８８ｇ、収率９８％）。これをそれ以上精製することなく、ただちに用いた。
【０１３６】
４．　２−（２，３−ジフルオロ−６−ニトロフェニル）酢酸（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、１９９１、欧州特許第０４７０５７８Ａ１号）
【化３３】
2004510759.tif 000026
氷浴中のＮａＨ（１１．３ｇ、６０％油分散物、２８２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（３５ｍＬ）懸濁液にマロン酸ジエチル（４５．２ｇ、４２．９ｍＬ、２８２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（７０ｍＬ）を、反応温度が２０℃未満に維持されるように１時間かけて加えた。添加中に白色固体がいくらか沈殿した。前述の反応混合物に１，２，３−トリフルオロ−４−ニトロベンゼン（２５．０ｇ、１４１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３５ｍＬ）を、反応温度が１０℃未満に維持されるように１時間かけて加えた。氷浴をはずし、混合物を外界温度で２時間撹拌した。反応溶液に酢酸（１８ｍＬ）を加え、ＴＨＦを減圧下で蒸発させた。クロロホルム（２００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２５０ｍＬ）、および濃ＨＣｌ（１８ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、濃縮し、４Ｎ ＨＣｌ（４５ｍＬ）および酢酸（３５ｍＬ）と混合し、１４時間還流させた。反応混合物を室温まで冷却した。冷却時に沈殿した固体をろ去し、ジイソプロピルエーテルで洗浄し、ＭｅＯＨ（７０ｍＬ）に溶解した。活性炭で処理した後、溶媒を蒸発させ、結晶性残渣をイソプロピルエーテルで洗浄し、ろ過して、表題化合物を白色固体として得た（１７．６ｇ、収率５８％）。
2004510759.tif 000027
【０１３７】
５．　２−（２，３−ジフルオロ−６−ニトロフェニル）エタノール（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、欧州特許第０４７０５７８Ａ１号（１９９１））
【化３４】
2004510759.tif 000028
０℃未満に冷却したＴＨＦ（１２ｍＬ）中のＮａＢＨ４（３．６０ｇ、９５．４ｍｍｏｌ）の混合物に、前段階で調製した２−（２，３−ジフルオロ−６−ニトロフェニル）酢酸（１０．９ｇ、５０．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（４ｍＬ）を１時間かけて加えた。この混合物に三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート錯体（１６．５ｍＬ、１３１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２４ｍＬ）を、反応温度を１０℃未満に維持しながら１時間かけて加えた。添加後、反応混合物を氷上で１５分間、次いで外界温度で２０分間撹拌し続けた。ＤＣＭ（１８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１４０ｍＬ）の混合物にＮａＨＣＯ３（１５ｇ、１７９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を前述のＮａＨＣＯ３溶液にゆっくり加え、一晩撹拌した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、表題化合物を淡褐色オイルとして得た（１０．１ｇ、収率９９％）。
2004510759.tif 000029
【０１３８】
６．　２−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブチル）アミノ］−２−フルオロ−６−ニトロフェニル｝エタノール（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、欧州特許第０４７０５７８Ａ１号（１９９１））
【化３５】
2004510759.tif 000030
前段階で調製した２−（２，３−ジフルオロ−６−ニトロフェニル）エタノール（６．００ｇ、２９．６ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（１８．６ｍＬ、１．７７ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（３０ｍＬ）、およびトルエン（５ｍＬ）の混合物を１６時間加熱還流させた。外界温度まで冷却後、褐色溶液をＨ２Ｏ（３００ｍＬ）に注ぎ、沈積した黄色結晶をろ過し、Ｈ２Ｏで二回洗浄した。黄色固体をＣＨＣｌ３（７０ｍＬ）に溶解し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでヘキサンから結晶化させて、表題化合物を黄色固体として得た（４．７０ｇ、収率６２％）。
2004510759.tif 000031
【０１３９】
７．　２−（３−アミノ−２−フルオロ−６−ニトロフェニル）エタノール（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、欧州特許第０４７０５７８Ａ１号（１９９１））
【化３６】
2004510759.tif 000032
前段階で調製した２−｛３−［（ｔｅｒｔ−ブチル）アミノ］−２−フルオロ−６−ニトロフェニル｝エタノール（３．９ｇ、１５ｍｍｏｌ）の濃ＨＣｌ溶液（４０ｍＬ）を２時間還流させた。室温まで冷却後、混合物を酢酸エチル（６×５０ｍＬ）で抽出した。抽出物を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３（二回）および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して粗生成物を固体として得た。固体をヘキサン中で粉砕し、ろ過し、高減圧下で乾燥して、表題化合物を黄色固体として得た（２．８ｇ、収率９３％）。
2004510759.tif 000033
【０１４０】
８．　２−（３−アミノ−２−フルオロ−６−ニトロフェニル）エチルアセテート
【化３７】
2004510759.tif 000034
氷浴中のＤＩＥＡ（１．８０ｍＬ、１０．６ｍｍｏｌ）および前段階で調製した２−（３−アミノ−２−フルオロ−６−ニトロフェニル）エタノール（０．８８ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１０ｍＬ）に、塩化アセチル（３１９μＬ、４．４９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（５ｍＬ）を加えた。１．５時間撹拌後、氷浴をはずし、混合物を外界温度で一晩撹拌し続けた。塩化アセチル（６３μＬ、０．８８ｍｍｏｌ）を追加し、混合物をさらに１６時間撹拌した。溶媒を除去し、混合物をＤＣＭおよびＨ２Ｏの間で分配した。有機層を分離し、水層をＤＣＭで逆抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏで（二回）洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（０％、１％、２％、および５％）で溶出して、表題化合物を黄色固体として得た（０．７３ｇ、収率６９％）。
2004510759.tif 000035
【０１４１】
９．　２−［３−（２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセチルアミノ）−２−フルオロ−６−ニトロフェニル］エチルアセテート
【化３８】
2004510759.tif 000036
ＤＩＥＡ（１．４９ｍＬ、８．５５ｍｍｏｌ）および前段階で調製した２−（３−アミノ−２−フルオロ−６−ニトロフェニル）エチルアセテート（６９０ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（６ｍＬ）に、実施例１の段階３の方法に従って調製した２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセチルクロリド（０．９９ｇ、５．２０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（３ｍＬ）を加えた。２４時間撹拌後、混合物を濃縮し、ＤＣＭおよびＨ２Ｏの間で分配した。有機層を分離し、水層をＤＣＭで抽出した。有機層を合わせ、Ｈ２Ｏおよび生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（０％、２．５％、および５％）で溶出して、表題化合物を橙色オイルとして得た（１．０４ｇ、収率９２％）。
2004510759.tif 000037
【０１４２】
１０．　２−［２−アミノ−５−（２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセチルアミノ）−６−フルオロフェニル］エチルアセテート
【化３９】
2004510759.tif 000038
エタノール（１７ｍＬ）中、前段階で調製した２−［３−（２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセチルアミノ）−２−フルオロ−６−ニトロフェニル］エチルアセテート（０．８４ｇ、２．１２ｍｍｏｌ）およびパラジウム触媒（２２６ｍｇ、１０％／活性炭、０．２１２ｍｍｏｌ）の混合物を、水素バルーン下で３．５時間水素添加した。混合物をセライト（珪藻土）によりろ過し、ＭｅＯＨで洗浄した。ろ液および洗液を合わせて濃縮し、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（５％、１０％、および２０％）で溶出して、表題化合物を白色固体として得た（０．７１３ｇ、収率９２％）。
2004510759.tif 000039
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ１８Ｈ１８Ｆ３Ｎ２Ｏ３の計算値（Ｍ＋Ｈ）：３６７．１。実測値：３６７．１。
【０１４３】
１１．　Ｎ−［４−アミノ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセトアミド
【化４０】
2004510759.tif 000040
前段階で調製した２−［２−アミノ−５−（２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセチルアミノ）−６−フルオロフェニル］エチルアセテート（０．６７ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ溶液（１９ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（２８０ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）の水溶液（４．８ｍＬ）を滴下した。混合物を４５分間撹拌し、次いで１Ｎ ＨＣｌで中和した。ＭｅＯＨを蒸発させ、混合物をＥｔＯＡｃで二回抽出した。抽出物を合わせ、Ｈ２Ｏで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．５５ｇ、収率９２％）。
2004510759.tif 000041
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ１６Ｈ１６Ｆ３Ｎ２Ｏ２の計算値（Ｍ＋Ｈ）：３２５．１。実測値：３２５．３。
【０１４４】
１２．　Ｎ−［４−クロロ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセトアミド（Ｙｏｋｏｍｏｔｏ， Ｍ，Ｗ．ら、１９９１、欧州特許第０４７０５７８Ａ１号）
【化４１】
2004510759.tif 000042
６Ｎ ＨＣｌ（９ｍＬ）中、前段階の方法に従って調製したＮ−［４−アミノ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセトアミド（１．６３ｇ、５．００ｍｍｏｌ）の懸濁液を氷浴中で冷却し、次いでＮａＮＯ２（４３４ｍｇ、６．３０ｍｍｏｌ）の水溶液（２．４ｍＬ）を５分間かけて加えた。３０分後、酢酸（２．９ｍＬ）および濃ＨＣｌ（２．９ｍＬ）を加え、反応混合物を１時間撹拌した。この混合物にＣｕＣｌ（８４８ｍｇ、８．５５ｍｍｏｌ）の濃ＨＣｌ溶液（５ｍＬ）を２０分間かけて加えた。氷浴中で３時間撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×３）で抽出した。抽出物を合わせ、Ｈ２Ｏ（二回）および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（０％、２．５％、および５％）で溶出して、表題化合物を淡橙色オイルとして得た（０．８４５ｇ、収率４８％）。
2004510759.tif 000043
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ１６Ｈ１４ＣｌＦ３ＮＯ２の計算値（Ｍ＋Ｈ）：３４４．１。実測値：３４４．２。
【０１４５】
１３．　２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝エタノール
【化４２】
2004510759.tif 000044
前段階の方法に従って調製したＮ−［４−クロロ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−フェニルアセトアミド（１．０５ｇ、３．０６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１２ｍＬ）に、０℃、アルゴン雰囲気下でボラン−ＴＨＦ錯体のＴＨＦ溶液（１２．３ｍＬ、１２．３ｍｍｏｌ、１．０Ｍ）を１０分間かけて加え、反応混合物を氷浴がなくなる（ｅｘｐｉｒｅｄ）まで撹拌し続けた。反応混合物を２０時間加熱還流させ、室温まで冷却した。Ｋ２ＣＯ３（１．７ｇ、１２ｍｍｏｌ）の水溶液（１２ｍＬ）を加え、ＴＨＦを減圧除去し、混合物をＤＣＭで（三回）抽出した。抽出物を合わせ、生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡＣ／ＤＣＭ（０％および２．５％）で溶出して、表題化合物を無色オイルとして得た（８１５ｍｇ、収率８１％）。
2004510759.tif 000045
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ１６Ｈ１６ＣｌＦ３ＮＯの計算値（Ｍ＋Ｈ）：３３０．１。実測値：３３０．３。
【０１４６】
１４．　２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝エタナール
【化４３】
2004510759.tif 000046
氷浴中のＤＣＭ（１４０ｍＬ）中、ＤＭＳＯ（１．０３ｍＬ、１４．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１．９９ｍＬ、１１．４ｍｍｏｌ）、および前段階の方法に従って調製した２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝エタノール（１．４５ｇ、４．４ｍｍｏｌ）の溶液に、三酸化硫黄ピリジン錯体（１．８２ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を加え、同じ温度で３．５時間撹拌した。混合物をＤＣＭ（３００ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸（三回）、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、表題化合物を橙色オイルとして得（１．４３ｇ、収率９９％）、これをそれ以上精製することなく用いた。
【０１４７】
１５．　２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝酢酸（Ｄａｌｃａｎａｌｅ， Ｅ．ら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ．、５１：５６７（１９８６）））
【化４４】
2004510759.tif 000047
前段階で調製した２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝エタナール（１．４３ｇ、４．３７ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ溶液（４．５ｍＬ）およびＮａＨ２ＰＯ４（１４１ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）の水溶液（１．７ｍＬ）の混合物を撹拌しながら、これに塩化ナトリウム（６９２ｍｇ、６．１１ｍｍｏｌ）の水溶液（６．１ｍＬ）を３０分間かけて加えた。添加後、混合物を外界温度で一晩撹拌し、１０Ｍ ＨＣｌでｐＨ１まで酸性化し、ＤＣＭで（三回）抽出した。抽出物を合わせ、Ｈ２Ｏおよび生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０％、２％、および４％）で溶出して、表題化合物を淡褐色固体として得た（０．７７ｇ、収率５１％）。
2004510759.tif 000048
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ１６Ｈ１４ＣｌＦ３ＮＯ２の計算値（Ｍ＋Ｈ）：３４４．１。実測値：３４４．４。
【０１４８】
１６．　２−アザ−３−｛［２−（２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセチルアミノ）エトキシ］アミノ｝−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパ−２−エン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化４５】
2004510759.tif 000049
氷浴中の前段階で調製した２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝酢酸（２８ｍｇ、８２μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．３ｍＬ）にＢＯＰ（５８ｍｇ、１３０μｍｏｌ）、［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−２−アミノエトキシグアニジンのＨＣｌ塩（３６ｍｇ、１０２μｍｏｌ）（Ｔｉａｎｂａｏ Ｌｕら、国際公開公報第９９／２６９２６号（１９９９））、およびＤＩＥＡ（４２ｍｇ、３３μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．１ｍＬ）を加えた。氷浴がなくなった後、反応混合物を外界温度で一晩撹拌し続けた。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を飽和ＮａＨＣＯ３およびＤＣＭの間で分配した。水相をＤＣＭで抽出し、有機層を合わせ、１０％ＫＨＳＯ４、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（１％）で溶出して、表題化合物を無色オイルとして得た（４４ｍｇ、収率８３％）。
2004510759.tif 000050
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３８ＣｌＦ３Ｎ５Ｏ６の計算値（Ｍ＋Ｈ）：６４４．２。実測値：６４４．１。
【０１４９】
１７．　Ｎ−［２−（アミジノアミノオキシ）エチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化４６】
2004510759.tif 000051
前段階で調製した２−アザ−３−｛［２−（２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセチルアミノ）エトキシ］アミノ｝−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパ−２−エン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４４ｍｇ、６８μｍｏｌ）のＴＦＡ／ＤＣＭ溶液（２ｍＬ、２／３）を室温で４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ中０．０５％ＴＦＡ（５％および１０％）で溶出して、表題化合物を白色固体として得た（３７ｍｇ、収率９８％）。
2004510759.tif 000052
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ１９Ｈ２２ＣｌＦ３Ｎ５Ｏ２の計算値（Ｍ＋Ｈ）：４４４．１。実測値：４４４．２。
【０１５０】
実施例２
Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミド塩酸塩
【化４７】
2004510759.tif 000053
１．　２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝−Ｎ−（｛６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−２−メチル（３−ピリジル）｝メチル）アセトアミド
【化４８】
2004510759.tif 000054
実施例１の段階１５で調製した２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝酢酸（５１６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（８．０ｍＬ）に、Ｎ−［５−（アミノメチル）−６−メチル（２−ピリジル）］（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボキサミド（４９８ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）（Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｐ．Ｅ．ら、国際公開公報第９７／０１３３８号（１９９７））、ＢＯＰ（１．０６ｇ、２．４ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（０．７８ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ）を加えた。１８時間撹拌後、アミン（１０７ｍｇ、４５０μｍｏｌ）を追加し、混合物を１８時間撹拌し続けた。溶媒を蒸発させ、反応混合物をＤＣＭおよび飽和ＮａＨＣＯ３の間で分配した。有機層を分離し、水層をＤＣＭで抽出した。有機層を合わせ、１０％ＫＨＳＯ４（二回）、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０％、１．５％、および２．５％）で溶出して、表題化合物を淡褐色の泡として得た（７７０ｍｇ、収率９１％）。
2004510759.tif 000055
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２８Ｈ３１ＣｌＦ３Ｎ４Ｏ３の計算値（Ｍ＋Ｈ）：５６３．２。実測値：５６２．９。
【０１５１】
２．　Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミド塩酸塩
【化４９】
2004510759.tif 000056
前段階で調製した２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝−Ｎ−（｛６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−２−メチル（３−ピリジル）｝メチル）アセトアミド（７７０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を加えたフラスコに、ＨＣｌの１，４−ジオキサン溶液（５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ、４．０Ｍ）を加えた。外界温度で１．５時間撹拌後、固体がいくらか沈殿した。ＭｅＯＨ（１ｍＬ）のＤＣＭ溶液（３ｍＬ）を加えて固体を溶解し、混合物をさらに４時間撹拌した。溶媒を除去し、得られた残渣をＤＣＭ（５ｍＬ×２）、エーテル（８ｍＬ×２）で洗浄し、高減圧下で乾燥して、表題化合物を淡褐色固体として得た（６２０ｍｇ、収率９１％）。
2004510759.tif 000057
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２３Ｈ２３ＣｌＦ３Ｎ４Ｏの計算値（Ｍ＋Ｈ）：４６３．１。実測値：４６３．７。
【０１５２】
実施例３
Ｎ−［（６−アミノ−２，４−ジメチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミド塩酸塩
【化５０】
2004510759.tif 000058
１．　２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝−Ｎ−（｛６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−２，４−ジメチル（３−ピリジル）｝メチル）アセトアミド
【化５１】
2004510759.tif 000059
実施例１の段階１５で調製した２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝酢酸（２５ｍｇ、７３μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．２５ｍＬ）に、ＢＯＰ（５２ｍｇ、１１６μｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（３８ｍｇ、２９５ｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．１ｍＬ）、およびＮ−［５−（アミノメチル）−４，６−ジメチル（２−ピリジル）］（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボキサミド（２３ｍｇ、９１μｍｏｌ）（Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｐ．Ｅ．ら、国際公開公報第９７／０１３３８号（１９９７））を加えた。外界温度で２日間撹拌後、アミン（７ｍｇ、２８μｍｏｌ）、ＢＯＰ（１６ｍｇ、３６μｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（９ｍｇ、７０μｍｏｌ）を追加し、混合物をさらに１６時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を飽和ＮａＨＣＯ３およびＤＣＭの間で分配した。有機層を分離し、水層をＤＣＭで抽出した。有機層を合わせ、１０％クエン酸、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０％、１％、２％）で溶出して、表題化合物を淡褐色固体として得た（１８．５ｍｇ、収率４４％）。
2004510759.tif 000060
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３３ＣｌＦ３Ｎ４Ｏ３の計算値（Ｍ＋Ｈ）：５７７．０。実測値：５７７．１。
【０１５３】
２．　Ｎ−［（６−アミノ−２，４−ジメチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミド塩酸塩
【化５２】
2004510759.tif 000061
前段階で調製した２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝−Ｎ−（｛６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−２，４−ジメチル（３−ピリジル）｝メチル）アセトアミド（１８．５ｍｇ、３２μｍｏｌ）に、ＨＣｌの１，４−ジオキサン溶液（４．０Ｍ、０．５ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を加えた。外界温度で３時間撹拌後、固体が沈殿した。ＭｅＯＨ（０．１ｍＬ）のＤＣＭ溶液（１ｍＬ）を加えて固体を溶解した。さらに２時間撹拌後、反応混合物を濃縮して褐色の固体を得、これをエーテルおよびＤＣＭで洗浄し、減圧下で乾燥して、表題化合物を淡褐色固体として得た（１６．２ｍｇ、収率７７％）。
2004510759.tif 000062
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ２５ＣｌＦ３Ｎ４Ｏの計算値（Ｍ＋Ｈ）：４７７．２。実測値：４７７．５。
【０１５４】
実施例４
Ｎ−［２−（アミジノアミノオキシ）エチル］−２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化５３】
2004510759.tif 000063
１．　２−（４−フルオロナフチル）−２−オキソ酢酸エチル
【化５４】
2004510759.tif 000064
ｎ−ブチルリチウムの溶液（ＴＨＦ中で２．５Ｍ、２０ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を−７８℃に冷却し、１−ブロモ−４−フルオロナフタレン（１１．２５ｇ、５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（４０ｍＬ）をゆっくり加え、混合物を１時間撹拌した。反応混合物を−２０℃に加温し、次いで−７８℃のシュウ酸ジエチル（２９．２ｇ、２００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（４０ｍＬ）に加えた。室温までゆっくり加温した後、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）、１０％ＨＣｌ（５０ｍＬ）、および水（５０ｍＬ）を加え、相を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせ、生理食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒および過剰のシュウ酸ジエチルを高減圧下で蒸発させた後、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ヘキサン＝１：１）で精製して、表題化合物を白色固体として得た（９．４ｇ、収率７６％）。
2004510759.tif 000065
【０１５５】
２．　２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）酢酸エチル
【化５５】
2004510759.tif 000066
前段階で調製した２−（４−フルオロナフチル）−２−オキソ酢酸エチル（９．４ｇ、３８．２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（６０ｍＬ）に、ＤＡＳＴ（１６．１ｇ、１００ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、氷にゆっくり注ぎ、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた後、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ヘキサン＝１：１）で精製して、表題化合物を淡褐色オイルとして得た（９．７ｇ、収率９５％）。
2004510759.tif 000067
【０１５６】
３．　２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）酢酸
【化５６】
2004510759.tif 000068
前段階で調製した２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）酢酸エチル（９．６ｇ、３５．８ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（２０ｍＬ）およびＴＨＦ溶液（２０ｍＬ）に、ＮａＯＨ（２．０ｇ、５０ｍｍｏｌ）の水溶液（４０ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。メタノールおよびＴＨＦを減圧下で蒸発させた後、水相を１０％ＨＣｌを用いてｐＨ２まで酸性化し、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。抽出物を合わせ、生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、表題化合物を灰白色固体として得た（８．１ｇ、収率９４％）。
2004510759.tif 000069
【０１５７】
４．　２−｛３−［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセチルアミノ］−２−フルオロ−６−ニトロフェニル｝エチルアセテート
【化５７】
2004510759.tif 000070
ＤＩＥＡ（７．８ｍＬ）および実施例１の段階８のとおりに調製した２−（３−アミノ−２−フルオロ−６−ニトロフェニル）エチルアセテート（４．６ｇ、１９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（６０ｍＬ）に、２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセチルクロリド（前段階で調製した２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）酢酸を塩化オキサリルと還流させることにより調製）（７．８ｇ、３０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（４０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。ＤＣＭ（１００ｍＬ）を追加し、得られた混合物を１０％クエン酸（３×４０ｍＬ）および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた後、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりＤＣＭで溶出して精製し、表題化合物を黄色オイルとして得た（５．３ｇ、収率６１％）。
2004510759.tif 000071
【０１５８】
５．　２−｛２−アミノ−５−［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセチルアミノ］−６−フルオロフェニル｝エチルアセテート
【化５８】
2004510759.tif 000072
エタノール（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）中、前段階で調製した２−｛３−［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセチルアミノ］−２−フルオロ−６−ニトロフェニル｝エチルアセテート（４．９ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５００ｍｇ）の混合物を、水素雰囲気下で５時間撹拌した。反応混合物をセライトによりろ過し、ＴＨＦおよびＭｅＯＨで洗浄した。ろ液および洗液を合わせて減圧濃縮し、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（０％から２０％）で溶出して、表題化合物を灰白色固体として得た（３．８ｇ、収率８３％）。
2004510759.tif 000073
【０１５９】
６．　Ｎ−［４−アミノ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセトアミド
【化５９】
2004510759.tif 000074
前段階で調製した２−｛２−アミノ−５−［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセチルアミノ］−６−フルオロフェニル｝エチルアセテート（３．８ｇ、８．８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４０ｍＬ）およびＴＨＦ溶液（２０ｍＬ）に、Ｋ２ＣＯ３（１．６８ｇ、１２ｍｍｏｌ）の水溶液（３０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。水（５０ｍＬ）を追加し、得られた混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。抽出物を合わせ、生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮して、表題化合物を灰白色固体として得た（３．３ｇ、収率９６％）。
2004510759.tif 000075
【０１６０】
７．　Ｎ−［４−クロロ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセトアミド（Ｄｏｙｌｅ， Ｍ．Ｐ．ら、Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ４２：２４２６（１９７７））
【化６０】
2004510759.tif 000076
塩化第二銅（１．８４ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）を加えたフラスコに、亜硝酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．４６ｇ、１２．８ｍｍｏｌ、９０％、Ａｌｄｒｉｃｈ）のアセトニトリル溶液（３５ｍＬ）をアルゴン雰囲気下で加えた。得られた緑色反応混合物を氷浴中で０℃に冷却し、前段階の方法に従って調製したＮ−［４−アミノ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセトアミド（３．５８ｇ、９．１３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（６０ｍＬ）を４５分間かけて加えた。０℃でさらに６時間撹拌後、得られた褐色混合物を外界温度まで戻し、次いで２０％ＨＣｌ水溶液（１６０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭで（三回）抽出した。抽出物を合わせ、２０％ＨＣｌ、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ（０％から２．５％）で溶出して、表題化合物を白色固体として得た（２．１ｇ、収率５６％）。
2004510759.tif 000077
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２０Ｈ１５ＣｌＦ４ＮＯ２の計算値（Ｍ＋Ｈ）：４１２．１。実測値：４１２．６。
【０１６１】
８．　２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）エタノール
【化６１】
2004510759.tif 000078
前段階の方法に従って調製したＮ−［４−クロロ−２−フルオロ−３−（２−ヒドロキシエチル）フェニル］−２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）アセトアミド（１．９ｇ、４．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１９ｍＬ）に、０℃でＢＨ３・ＴＨＦ錯体の溶液（１９．４ｍＬ、１９．４ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中で１．０Ｍ）を２０分間かけて滴下し、反応混合物を氷浴がなくなるまで撹拌し続けた。次いで、反応混合物を７５℃から８０℃の油浴中で３時間加熱還流させ、外界温度で一晩撹拌を続けた。ＮａＨＣＯ３（１．６３ｇ、１９．４ｍｍｏｌ）の水溶液（２０ｍＬ）を加え、ＴＨＦを蒸発させ、得られた混合物をＤＣＭで二回抽出した。抽出物を合わせ、Ｈ２Ｏおよび生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＥｔＯＡＣ／ＤＣＭ（０％、１％、１．５％）で溶出して、表題化合物を白色固体として得た（８０５ｍｇ、収率４４％）。
2004510759.tif 000079
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２０Ｈ１７ＣｌＦ４ＮＯの計算値（Ｍ＋Ｈ）：３９８．１。実測値：３９８．３。
【０１６２】
９．　２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）エタナール
【化６２】
2004510759.tif 000080
氷浴中のＤＣＭ（５５ｍＬ）中、ＤＭＳＯ（４７０ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（８２３μＬ、４．７４ｍｍｏｌ）、および前段階で調製した２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）エタノール（７２３ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、三酸化硫黄ピリジン錯体（７５４ｍｇ、４．７４ｍｍｏｌ）を加えた。３．５時間撹拌後、反応混合物をＤＣＭ（１１０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、１０％クエン酸（三回）、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、表題化合物を橙色オイルとして得た（７２２ｍｇ、定量的収率）。
2004510759.tif 000081
【０１６３】
１０．　２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）酢酸
【化６３】
2004510759.tif 000082
前段階で調製した２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）エタナール（７２２ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ溶液（３．６ｍＬ）およびＮａＨ２ＰＯ４（７４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の水溶液（０．９ｍＬ）の混合物を撹拌しながら、これに塩化ナトリウム（３０９ｍｇ、２．７３ｍｍｏｌ、８０％）の水溶液（３．０ｍＬ）を３０分間かけて滴下した。添加後、混合物を外界温度で４８時間撹拌し、１０Ｍ ＨＣｌでｐＨ１まで酸性化し、ＤＣＭで（三回）抽出した。抽出物を合わせ、Ｈ２Ｏおよび生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０％、１％、１．５％、および２％）で溶出して、出発物質アルデヒド２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）エタナール（１６５ｍｇ、収率２３％）および表題化合物（５７０ｍｇ、収率７６％）を固体として得た。
2004510759.tif 000083
【０１６４】
１１．　２−アザ−３−（｛２−［２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセチルアミノ］エトキシ｝アミノ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパ−２−エン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化６４】
2004510759.tif 000084
氷浴中の、前段階で調製した２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）酢酸（５７０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（７．５ｍＬ）に、ＢＯＰ（９８１ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）、［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−２−アミノエトキシグアニジンのＨＣｌ塩（６８９ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ溶液（０．９６ｍＬ、５．５５ｍｍｏｌ）を加えた。氷浴がなくなった後、混合物を外界温度で一晩撹拌し続けた。ＢＯＰ（１２３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）および［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−２−アミノエトキシグアニジンのＨＣｌ塩（９８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を追加し、反応混合物を２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を飽和ＮａＨＣＯ３およびＤＣＭの間で分配した。有機層を分離し、水層をＤＣＭで抽出した。有機層を合わせ、１０％ＫＨＳＯ４、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０％、０．５％、および１％）で溶出して、表題化合物を白色の泡として得た（７２０ｍｇ、収率７３％）。
2004510759.tif 000085
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ３３Ｈ３９ＣｌＦ４Ｎ５Ｏ６の計算値（Ｍ＋Ｈ）：７１２．２。実測値：７１２．３。
【０１６５】
１２．　Ｎ−［２−（アミジノアミノオキシ）エチル］−２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化６５】
2004510759.tif 000086
前段階で調製した２−アザ−３−（｛２−［２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセチルアミノ］エトキシ｝アミノ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］プロパ−２−エン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７２０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）のＴＦＡ／ＤＣＭ溶液（２：３、３０ｍＬ）を外界温度で４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ中０．０５％ＴＦＡ（５％および１０％）で溶出して、表題化合物を淡褐色の泡として得た（６２６ｍｇ、収率９９％）。
2004510759.tif 000087
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２３Ｈ２３ＣｌＦ４Ｎ５Ｏ２の計算値（Ｍ＋Ｈ）：５１２．１。実測値：５１２．２。
【０１６６】
実施例５
Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセトアミド塩酸塩
【化６６】
2004510759.tif 000088
１．　２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）−Ｎ−（｛６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−２−メチル（３−ピリジル）｝メチル）アセトアミド
【化６７】
2004510759.tif 000089
実施例４の段階１０の方法に従って調製した２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）酢酸（１５ｍｇ、３７μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．３ｍＬ）に、ＢＯＰ（２６ｍｇ、５８μｍｏｌ）、Ｎ−［５−（アミノメチル）−６−メチル（２−ピリジル）］（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボキサミド（１２ｍｇ、５１μｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（１９ｍｇ、１４６μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．１ｍＬ）を加えた（Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｐ．Ｅ．ら、国際公開公報第９７／０１３３８号（１９９７））。混合物を一晩撹拌し、溶媒を蒸発させ、得られた混合物を飽和ＮａＨＣＯ３およびＤＣＭの間で分配した。有機層を分離し、水層をＤＣＭで抽出した。有機層を合わせ、１０％ＫＨＳＯ４、Ｈ２Ｏ、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、次いでシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０．３％、０．６％、および１％）で溶出して、表題化合物を白色固体として得た（１１ｍｇ、収率４９％）。
2004510759.tif 000090
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ３２Ｈ３２ＣｌＦ４Ｎ４Ｏ３の計算値（Ｍ＋Ｈ）：６３１．２。実測値：６３１．１。
【０１６７】
２．　Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）アセトアミド塩酸塩
【化６８】
2004510759.tif 000091
前段階で調製した２−（３−｛［２，２−ジフルオロ−２−（４−フルオロナフチル）エチル］アミノ｝−６−クロロ−２−フルオロフェニル）−Ｎ−（｛６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボニルアミノ］−２−メチル（３−ピリジル）｝メチル）アセトアミド（１０ｍｇ、１６μｍｏｌ）のＨＣｌ溶液（０．５ｍＬ、１，４−ジオキサン中で４．０Ｍ）を外界温度で２時間撹拌した。ＭｅＯＨ／ＤＣＭ溶液（２５％、０．４ｍＬ）を加え、混合物を一晩撹拌し続けた。溶媒を蒸発させ、得られた褐色残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーに供し、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（２．５％、５％、および１０％）で溶出して、固体生成物を得た。これをＤＣＭ（０．５ｍＬ）中、ＨＣｌ溶液（０．０１ｍＬ、１，４−ジオキサン中で４．０Ｍ、４０μｍｏｌ）と５分間撹拌して処理し、溶媒を蒸発させて、表題化合物を白色固体として得た（６．２ｍｇ、収率６９％）。
2004510759.tif 000092
質量分析（ＬＣＭＳ、ＥＳＩ）Ｃ２７Ｈ２４ＣｌＦ４Ｎ４Ｏの計算値（Ｍ＋Ｈ）：５３１．１。実測値：５３１．６。
【０１６８】
実施例６
Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（３−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化６９】
2004510759.tif 000093
１．　Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−２−（３−ニトロフェニル）アセトアミド
【化７０】
2004510759.tif 000094
３−ニトロフェニル酢酸（３．２１ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）、エタノールアミン（２．８ｇ、４６ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（３．０ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ溶液（１１０ｍＬ）に、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、９．３７ｇ、１８．０ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ溶液（８０ｍＬ）を加えた。外界温度（窒素雰囲気下）で１６時間撹拌した後、反応混合物を減圧濃縮し、ＤＣＭに溶解してろ過した。ろ液を１０％クエン酸水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、ｐＨ７緩衝液、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してろ過した。ろ液を蒸発させ、次いでフラッシュクロマトグラフィー（１０％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を淡黄色固体として得た（１．０２ｇ、２６％）。
2004510759.tif 000095
【０１６９】
２．　Ｎ−［２−（Ｎ’−フタルイミジル）ヒドロキシエチル］−２−（３−ニトロフェニル）アセトアミド
【化７１】
2004510759.tif 000096
前段階の生成物（１．０２ｇ、４．５５ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（０．７６ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）、およびトリフェニルホスフィン（１．２２ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）の、無水ＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）に、アザジカルボン酸ジエチル（０．７５ｍＬ、４．７７ｍｍｏｌ）をシリンジから加えた。外界温度（窒素雰囲気下）で一晩撹拌した後、反応混合物を減圧濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（４０％酢酸エチル／ＤＣＭ）で精製して、不純生成物を得て、これをＤＣＭに溶解し、冷却してろ過した。ろ液を蒸発させ、次いでフラッシュクロマトグラフィー（６６％〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、表題化合物を白色固体として得た（０．８６ｇ、５１％）。
2004510759.tif 000097
【０１７０】
３．　Ｎ−［２−（Ｎ’−フタルイミジル）ヒドロキシエチル］−２−（３−アミノフェニル）アセトアミド
【化７２】
2004510759.tif 000098
前段階の生成物（０．６６ｇ、１．８０ｍｍｏｌ）および炭素担持１０％パラジウム（１５ｍｇ）のエタノール：ＴＨＦ脱気溶液（１：１、４０ｍＬ）を、水素雰囲気下、外界温度で撹拌した。６時間後、反応混合物をセライトによりろ過し、ろ液を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（５％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を黄色固体として得た（０．２０ｇ、３３％）。
2004510759.tif 000099
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、α−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸マトリクス）Ｃ１８Ｈ１７Ｎ３Ｏ４の計算値：３６２．１（Ｍ＋Ｎａ）、３４０．１（Ｍ＋Ｈ）。実測値：３６２．２、３４０．３。
【０１７１】
４．　Ｎ−［２−（Ｎ’−フタルイミジル）ヒドロキシエチル］−２−（３−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド
【化７３】
2004510759.tif 000100
前段階の生成物（０．２０ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の氷冷無水ＤＣＭ溶液（５０ｍＬ）に、塩化α−トルエンスルホニル（０．１１ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ溶液（２０ｍＬ）および、続いてＮ−メチルモルホリン（０．１０ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を加えた。外界温度で１６時間撹拌した後、さらに塩化α−トルエンスルホニル（０．０７ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（０．１０ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を追加し、反応混合物をさらに４時間撹拌して、減圧下で蒸発させた。残渣をＤＣＭに溶解し、１０％クエン酸水溶液、ｐＨ７緩衝液および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、ろ液を蒸発させて、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．２０ｇ、６９％）。
2004510759.tif 000101
【０１７２】
５．　Ｎ−［２−（アミノオキシ）エチル］−２−（３−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド
【化７４】
2004510759.tif 000102
前段階の生成物（０．１９ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）をエタノール：ＴＨＦ（１：１、２０ｍＬ）に溶解し、４０％メチルアミン水溶液（１０ｍＬ）と外界温度で１時間反応させた。反応混合物を減圧下で蒸発させ、Ｗａｔｅｒｓ Ｓｅｐ−Ｐａｋ（５ｇシリカ、ＤＣＭ：酢酸エチル＝１：１）で精製して、不純黄色固体を得た。次いでこれを調製用薄層クロマトグラフィー（１０％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を白色固体として得た（０．１０ｇ、７２％）。
2004510759.tif 000103
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、α−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸マトリクス）Ｃ１７Ｈ２１Ｎ３Ｏ４Ｓの計算値：３８６．１（Ｍ＋Ｎａ）。実測値：３８６．６。
【０１７３】
６．　Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］−２−（３−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド
【化７５】
2004510759.tif 000104
前段階の生成物（８９ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）および［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］アミジノピラゾール（８６ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）を外界温度で４日間撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（５％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、不純黄色オイルを得た。次いでこれを調製用薄層クロマトグラフィー（５％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を無色固体として得た（７２ｍｇ、４９％）。
2004510759.tif 000105
【０１７４】
７．　Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（３−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化７６】
2004510759.tif 000106
前段階の生成物（７２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）と外界温度で４時間反応させた。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を調製用薄層クロマトグラフィー（２０％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を淡黄色ワックスとして得た（４４ｍｇ、７１％）。
2004510759.tif 000107
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、α−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸マトリクス）Ｃ１８Ｈ２３Ｎ５Ｏ４Ｓの計算値：４２８．１（Ｍ＋Ｎａ）、４０６．２（Ｍ＋Ｈ）。実測値：４２８．４、４０６．４。
【０１７５】
実施例７
Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−クロロ−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化７７】
2004510759.tif 000108
１．　２−クロロ−５−ニトロフェニル酢酸一水和物
【化７８】
2004510759.tif 000109
２−クロロフェニル酢酸（１０．０ｇ、５８．６ｍｍｏｌ）の濃硫酸溶液（４０ｍＬ）を−１０℃に冷却し、発煙硝酸（２．８０ｍＬ、６６．７ｍｍｏｌ）の濃硫酸溶液（７．２ｍＬ）とゆっくり反応させた。２．５時間後、反応混合物を氷水（４００ｍＬ）上にゆっくり注ぎ、粗いフィルターフリットによりろ過し、冷水で一回洗浄し、フリット上で一晩乾燥して、表題化合物を白色固体として得た（１３．５ｇ、９８％）。プロトンＮＭＲスペクトルの積分により、生成物が約０．２当量の２−クロロフェニル酢酸を含むことが判明したが、薄層クロマトグラフィーによりこれは生成物から分離不可能であることが示された。
2004510759.tif 000110
【０１７６】
２．　２−（３−アミノ−６−クロロフェニル）酢酸エチル
【化７９】
2004510759.tif 000111
前段階の生成物（４．１４ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（７０ｍＬ）に懸濁させ、塩化オキサリル（４．０ｍＬ、４６ｍｍｏｌ）および数滴のＤＭＦと反応させた。外界温度で１時間撹拌して反応物を均質にし、試薬等級のエタノール（３０ｍＬ）を加え、反応混合物をさらに３０分間撹拌した。粗生成物を減圧下で蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（１０％から１５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、表題化合物を淡黄色オイルとして得た（４．６ｇ）。プロトンＮＭＲにより生成物が約０．８当量のシュウ酸ジエチルを含むことが判明したが、これは薄層クロマトグラフィーでは特定することができなかった。
2004510759.tif 000112
【０１７７】
３．　２−（３−アミノ−６−クロロフェニル）酢酸エチル
【化８０】
2004510759.tif 000113
前段階の生成物（２．００ｇ、８．２１ｍｍｏｌ）の試薬等級（ｒｅａｇｅｎｔ ｇｒａｄｅ）エタノール溶液（５０ｍＬ）を、塩化スズ（ＩＩ）二水和物（９．４０ｇ、４１．７ｍｍｏｌ）と外界温度で反応させた。１６時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、ＤＣＭに溶解し、ろ過した。ろ液を水および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を蒸発させ、次いでフラッシュクロマトグラフィー（４０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、表題化合物を淡黄色オイルとして得た（０．５３ｇ、３０％）。
2004510759.tif 000114
【０１７８】
４．　２−（２−クロロ−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）酢酸エチル
【化８１】
2004510759.tif 000115
前段階の生成物（０．５０ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）および塩化α−トルエンスルホニル（０．７４ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（４０ｍＬ）と、Ｎ−メチルモルホリン（０．８０ｍＬ、７．３ｍｍｏｌ）を外界温度で３時間撹拌し、希ＨＣｌ、水、および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．６９３ｇ、８１％）。
2004510759.tif 000116
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、α−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸マトリクス）Ｃ１７Ｈ１８ＮＯ４ＳＣｌの計算値：３９０．１（Ｍ＋Ｎａ）。実測値：３９０．７。
【０１７９】
５．　２−（２−クロロ−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）酢酸
【化８２】
2004510759.tif 000117
前段階の生成物（０．６９ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）の水：ＴＨＦ溶液（１：１、２０ｍＬ）を、水酸化カリウム（０．５２ｇ、９．３２ｍｍｏｌ）と外界温度で２０時間反応させた。ＴＨＦを減圧下で蒸発させた後、残った水層を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ３まで酸性化し、ＤＣＭおよびエーテルで抽出した。合わせた有機層を生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。次いで、ろ液を減圧下で蒸発させて、表題化合物を白色固体として得た（０．５８６ｇ、９２％）。
2004510759.tif 000118
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、α−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸マトリクス）Ｃ１５Ｈ１４ＮＯ４ＳＣｌの計算値：３７８．０（Ｍ＋Ｎａ）、３６２．０（Ｍ＋Ｈ）。実測値：３７８．８、３６２．９。
【０１８０】
６．　Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−クロロ−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド
【化８３】
2004510759.tif 000119
前段階の生成物（０．２１ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）および［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−２−アミノエトキシグアニジン（Ｔｉａｎｂａｏ Ｌｕら、国際公開公報第９９／２６９２６号（１９９９））（０．１９ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液（５０ｍＬ）を、ＢＯＰ（０．３３ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）と外界温度で１６時間反応させた。反応物を減圧下で蒸発させ、ＤＣＭに溶解し、ｐＨ７緩衝液および生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過した。ろ液を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（５％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を橙色固体として得た（０．３８０ｇ、９８％）。
2004510759.tif 000120
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、ゲンチジン酸マトリクス）Ｃ２８Ｈ３８Ｎ５Ｏ８ＳＣｌの計算値：６６２．２（Ｍ＋Ｎａ）、４４０．１（Ｍ−２Ｂｏｃ＋Ｈ）。実測値：６６１．７、４３９．９。
【０１８１】
７．　Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−クロロ−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化８４】
2004510759.tif 000121
前段階の生成物（０．３７５ｇ、０．５８６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（１０ｍＬ）を、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）と外界温度で１６時間反応させた。反応混合物を減圧下で蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（２０％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．３２６ｇ、１００％）。
2004510759.tif 000122
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、α−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮酸マトリクス）Ｃ１８Ｈ２２Ｎ５Ｏ４ＳＣｌの計算値：４６２．１（Ｍ＋Ｎａ）、４４０．１（Ｍ＋Ｈ）。実測値：４６１．９、４３９．９。
【０１８２】
実施例８
Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−メチル−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化８５】
2004510759.tif 000123
１．　（２−メチル−５−ニトロフェニル）メタノール
【化８６】
2004510759.tif 000124
２−メチル−５−ニトロ安息香酸（２．００ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加温し、無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解し、ボランのＴＨＦ中１Ｎ溶液（１６．５ｍＬ）で処理した。外界温度で１８時間撹拌した後、炭酸カリウム（１．８ｇ、１３ｍｍｏｌ）の水溶液（５０ｍＬ）で反応停止し、ＴＨＦを減圧下で除去した。残った水溶液をＤＣＭで抽出し、有機層をｐＨ７緩衝液および生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を蒸発させて、表題化合物を淡黄色固体として得た（１．７６ｇ、９５％）。
2004510759.tif 000125
【０１８３】
２．　（２−メチル−５−ニトロフェニル）メチルメチルスルホネート
【化８７】
2004510759.tif 000126
前段階の生成物（１．７４ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（５０ｍＬ）を０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（０．９０ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．７５ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ）で処理した。３０分間撹拌した後、反応混合物を外界温度まで加温し、さらに３０分間撹拌し、ｐＨ７緩衝液上に注いだ。相を分離し、有機層を生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を蒸発させて、表題化合物を淡黄色オイルとして得た（２．５３ｇ、９９％）。
2004510759.tif 000127
【０１８４】
３．　２−（２−メチル−５−ニトロフェニル）エタンニトリル
【化８８】
2004510759.tif 000128
前段階の生成物（２．４８ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）およびシアン化カリウム（２．００ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１００ｍＬ）中で８時間還流させ、次いで外界温度まで冷却して、一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で蒸発させ、ＤＣＭに溶解し、ろ過した。ろ液をｐＨ７緩衝液および生理食塩水で洗浄し、蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１溶離剤）で精製して、表題化合物を黄色固体として得た（１．２７ｇ、７１％）。
2004510759.tif 000129
【０１８５】
４．　２−（２−メチル−５−ニトロフェニル）酢酸
【化８９】
2004510759.tif 000130
前段階の生成物（１．２７ｇ、７．２１ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（３０ｍＬ）に、水酸化カリウム（４．０６ｇ、７２．４ｍｍｏｌ）の水溶液（３０ｍＬ）を加えた。反応混合物を一晩加熱還流させ、メタノールを減圧下で除去した。残った水層を３Ｎ ＨＣｌで酸性化してろ過し、固体をジエチルエーテルで洗浄し、ろ液を分離した。水層をＤＣＭおよびジエチルエーテルで洗浄し、合わせた有機層を生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を蒸発させて、表題化合物を橙色固体として得た（０．８４ｇ、６０％）。
2004510759.tif 000131
【０１８６】
５．　Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−メチル−５−ニトロフェニル）アセトアミド
【化９０】
2004510759.tif 000132
前段階の生成物（０．２７ｇ、１．４０ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ（０．７０ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．５０ｍＬ、３．６０ｍｍｏｌ）、および［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］２−アミノエトキシグアニジン（Ｔｉａｎｂａｏ Ｌｕら、国際公開公報第９９／２６９２６号（１９９９））（０．４４ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ溶液を、外界温度で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％メタノール／ＤＣＭ溶離剤）で精製して、表題化合物を淡橙色固体として得た（０．６３ｇ、９２％）。
2004510759.tif 000133
【０１８７】
６．　Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］−２−（３−アミノ−６−メチルニトロフェニル）アセトアミド
【化９１】
2004510759.tif 000134
前段階の生成物（０．２９ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）および炭素担持１０％パラジウム（０）（０．０６ｇ）を試薬エタノール（５０ｍＬ）に溶解し、窒素および減圧で脱気し、水素バルーン（ｂａｌｌｏｏｎ）下、外界温度で撹拌した。４時間後、反応混合物をセライトによりろ過し、フリットをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧下で蒸発させて、表題化合物を得た（０．２７ｇ、１００％）。
2004510759.tif 000135
【０１８８】
７．　Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−メチル−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド
【化９２】
2004510759.tif 000136
前段階の生成物（０．２７ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、塩化α−トルエンスルホニル（０．１８ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）、およびＮ−メチルモルホリン（０．２０ｍＬ、１．８２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）中、外界温度で撹拌した。２時間後、反応混合物を追加のＤＣＭで希釈し、希ＨＣｌ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、ｐＨ７緩衝液および生理食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．３５ｇ、９７％）。
2004510759.tif 000137
【０１８９】
８．　Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−メチル−５−｛［ベンジルスルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミドトリフルオロ酢酸塩
【化９３】
2004510759.tif 000138
前段階の生成物（０．３５ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、外界温度でトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）処理した。１６時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を１０ｇのウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）シリカＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）（５％から２０％メタノール／ＤＣＭ勾配溶出）で精製して、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．２７ｇ、８９％）。
2004510759.tif 000139
質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、ゲンチジン酸マトリクス）Ｃ１９Ｈ２５Ｎ５Ｏ４Ｓの計算値：４４２．２（Ｍ＋Ｎａ）、４２０．２（Ｍ＋Ｈ）。実測値：４４２．５、４２０．６。
【０１９０】
実施例９
Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド塩酸塩
【化９４】
2004510759.tif 000140
１．　４−メチル−１−ニトロ−２−プロパ−２−エニルオキシベンゼン
【化９５】
2004510759.tif 000141
５−メチル−２−ニトロフェノール（２．００ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）、臭化アリル（１．３０ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（５．５ｇ、１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）を外界温度で撹拌した。２０時間後、反応混合物をろ過し、フリットをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧下、５０℃で蒸発させた。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１次いで２：１の溶離剤）で精製して、表題化合物を黄色オイルとして得た（２．３９ｇ、９５％）。これは３日間外界温度で放置後に結晶化した。
2004510759.tif 000142
【０１９１】
２．　３−メチル−６−ニトロ−２−プロパ−２−エニルフェノール
【化９６】
2004510759.tif 000143
前段階のとおりに調製した４−メチル−１−ニトロ−２−プロパ−２−エニルオキシベンゼン（７．１１ｇ、３６．８ｍｍｏｌ）をニートで２００℃、窒素雰囲気下で３時間加熱し、外界温度まで冷却し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＤＣＭ＝１：１溶離剤）で精製して、表題化合物を橙色オイルとして得た（５．０４ｇ、７１％）。
2004510759.tif 000144
【０１９２】
３．　１−メチル−４−ニトロ−３−（フェニルメトキシ）−２−プロパ−２−エニルベンゼン
【化９７】
2004510759.tif 000145
前段階の生成物（５．０２ｇ、２６．０ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（３．４０ｍＬ、２８．６ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（１７．２ｇ、５２．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１００ｍＬ）を外界温度で２０時間撹拌した。溶液をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、粗生成物をシリカに吸着させた。これを短いシリカ床上に注ぎ、ＤＣＭで溶出し、溶出液を蒸発させて、表題化合物を黄色オイルとして得た（７．２０ｇ、９８％）。
2004510759.tif 000146
【０１９３】
４．　４−メチル−２−（フェニルメトキシ）−３−プロパ−２−エニルフェニルアミン
【化９８】
2004510759.tif 000147
前段階の生成物（０．５５ｇ、１．９４ｍｍｏｌ）および塩化スズ（ＩＩ）二水和物（２．８９ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）を試薬等級エタノール（４０ｍＬ）中、外界温度で撹拌した。２０時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を飽和重炭酸ナトリウムおよびＤＣＭの間で分配した。得られた乳濁液をろ過し、固体および水層を追加のＤＣＭで洗浄し、合わせた有機層を生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。次いでろ液を蒸発させ、表題化合物を橙色オイルとして得た（０．５１ｇ、９０％）。
2004510759.tif 000148
【０１９４】
５．　［４−メチル−２−（フェニルメトキシ）−３−プロパ−２−エニルフェニル］［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミン
【化９９】
2004510759.tif 000149
前段階の生成物（０．４９ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、外界温度で塩化ｍ−トルエンスルホニル（０．３７ｇ、１．９６ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（０．２５ｍＬ、２．２７ｍｍｏｌ）処理した。１８時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ溶離剤）で精製して、表題化合物を淡黄色オイルとして得た（０．７２ｇ、９２％）。
2004510759.tif 000150
【０１９５】
６．　２−（６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−（フェニルメトキシ）フェニル）エタノール
【化１００】
2004510759.tif 000151
前段階の生成物（０．７１ｇ、１．７４ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）に溶解し、過ヨウ素酸ナトリウム（１．５０ｇ、７．０１ｍｍｏｌ）の水溶液（１２ｍＬ）および２−メチル−２−プロパノール中、四酸化オスミウムの２．５重量％溶液（０．２５ｍＬ、０．０２ｍｍｏｌ）で処理した。外界温度で４時間撹拌した後、反応物をＤＣＭで希釈し、５％重亜硫酸ナトリウム水溶液、水、および生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して黄色オイルを得、これをそれ以上精製することなく用いた。
【０１９６】
７．　２−（６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−（フェニルメトキシ）フェニル）酢酸
【化１０１】
2004510759.tif 000152
前段階の生成物のアセトン溶液（２５ｍＬ）に、二クロム酸ナトリウム（０．７９ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）および濃硫酸（１．５ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）の水溶液（２５ｍＬ）を加え、反応混合物を外界温度で３日間撹拌した。メタノール（３ｍＬ）を加えて、さらに１５分間撹拌した後、有機溶媒を減圧下で除去し、残った水層をＤＣＭで抽出した。ＤＣＭ層を生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、次いでろ液を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１０％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．５１ｇ、段階５から６９％）。
2004510759.tif 000153
質量分析（ＬＣＭＳ、正ＥＳＩ）Ｃ２３Ｈ２３ＮＯ５Ｓの計算値：４４８．１（Ｍ＋Ｎａ）、４２５．１（Ｍ＋Ｈ）。実測値：４４８．１、４２５．９。
【０１９７】
８．　Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］−２−（６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−（フェニルメトキシ）フェニル）アセトアミド
【化１０２】
2004510759.tif 000154
前段階の生成物（０．３２ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ（０．３４ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８０ｍｍｏｌ）、および［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−２−アミノエトキシグアニジン（Ｔｉａｎｂａｏ Ｌｕら、国際公開公報第９９／２６９２６号（１９９９））（０．２７ｇ、０．７６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１５ｍＬ）を、外界温度で一晩撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、残渣をＤＣＭに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム、水、および生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（７％メタノール／ＤＣＭ溶離剤）で精製して、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．４１ｇ、７６％）。
2004510759.tif 000155
【０１９８】
９．　Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド
【化１０３】
2004510759.tif 000156
前段階の生成物（０．４１ｇ、０．５７ｍｍｏｌ）および炭素担持１０％パラジウム（０）（６０ｍｇ）を試薬等級エタノール（２０ｍＬ）に溶解し、窒素および減圧で脱気し、水素バルーン下、外界温度で４時間撹拌した。反応混合物をセライトによりろ過し、フリットをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧下で蒸発させ、残渣を調製用薄層クロマトグラフィー（５％メタノール／ＤＣＭ溶離剤）で精製して、表題化合物を淡黄色固体として得た（１３．０ｍｇ、４％）。
2004510759.tif 000157
【０１９９】
１０．　Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］−２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド塩酸塩
【化１０４】
2004510759.tif 000158
前段階の生成物（１３．０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解し、外界温度でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）処理した。１６時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を調製用薄層クロマトグラフィー（１２％メタノール／ＤＣＭ溶離剤、アンモニアで飽和）で精製した。得られた生成物をエタノール中の４Ｎ ＨＣｌで処理し、ろ過し、ろ液を蒸発させ、次いで固体をジエチルエーテルで洗浄し、減圧乾燥して、表題化合物を黄褐色固体として得た（５．０ｍｇ、５２％）。
2004510759.tif 000159
質量分析（ＬＣＭＳ、正ＥＳＩ）Ｃ１９Ｈ２５Ｎ５Ｏ５Ｓの計算値：４３６．１（Ｍ＋Ｈ）。実測値：４３６．２。
【０２００】
実施例１０
Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド塩酸塩
【化１０５】
2004510759.tif 000160
１．　Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−（６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−（フェニルメトキシ）フェニル）アセトアミド
【化１０６】
2004510759.tif 000161
実施例９、段階７の生成物（０．１８ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ（０．２１ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８０ｍｍｏｌ）、および２−アミノ−５−アミノメチル−６−メチルピリジン二塩酸塩（Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｐ．Ｅ．ら、国際公開公報第９７／０１３３８号（１９９７））（０．１０ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、外界温度で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（勾配溶出：１０％から１５％のメタノール／ＤＣＭ）で精製して不純生成物を得、これをＤＣＭに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム、水、および生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して、ろ過した。ろ液を蒸発させて、表題化合物を淡黄色固体として得た（０．２３ｇ、９９％）。
2004510759.tif 000162
質量分析（ＬＣＭＳ、正ＥＳＩ）Ｃ３０Ｈ３２Ｎ４Ｏ４Ｓの計算値：５４５．２（Ｍ＋Ｈ）。実測値：５４５．２。
【０２０１】
２．　Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−（２−ヒドロキシ−６−メチル−３−｛［（３−メチルフェニル）スルホニル］アミノ｝フェニル）アセトアミド塩酸塩
【化１０７】
2004510759.tif 000163
前段階の生成物（０．２２ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）および炭素担持１０％パラジウム（０）（０．０３ｇ）をエタノール：ＴＨＦ（２：１、３０ｍＬ）に溶解し、窒素および減圧で脱気し、水素バルーン下、外界温度で撹拌した。７時間後、反応混合物をセライトによりろ過し、フリットをメタノールで洗浄し、ろ液を減圧下で濃縮した。残渣をエタノール中４Ｎ ＨＣｌ（約３ｍＬ）で処理し、高減圧下で蒸発させ、ＤＣＭに溶解し、ろ過し、ろ液を再度高減圧下で蒸発させて、表題化合物を淡ベージュ色固体として得た（０．１４ｇ、７１％）。
2004510759.tif 000164
質量分析（ＬＣＭＳ、正ＥＳＩ）Ｃ２３Ｈ２６Ｎ４Ｏ４Ｓの計算値：４５５．２（Ｍ＋Ｈ）。実測値：４５５．２。
【０２０２】
実施例１１
３−（｛Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］カルバモイル｝メチル）−２−ヒドロキシ−４−メチルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート塩酸塩
【化１０８】
2004510759.tif 000165
１．　２−メトキシ−４−メチルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート
【化１０９】
2004510759.tif 000166
塩化ｍ−トルエンスルホニル（０．５３ｇ、２．７８ｍｍｏｌ）および２−メトキシ−４−メチルフェノール（０．３８ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液（１０ｍＬ）を、トリエチルアミン（０．５ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）で処理し、外界温度で撹拌した。１８時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をヘキサン：ＤＣＭ＝１：１に溶解し、ろ過し、ろ液を高減圧下で蒸発させて、表題化合物を白色固体として得た（０．７９ｇ、９９％）。
2004510759.tif 000167
【０２０３】
２．　２−ヒドロキシ−４−メチルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート
【化１１０】
2004510759.tif 000168
前段階の生成物（０．７９ｇ、２．７２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、−７８℃に冷却し、窒素雰囲気下、ＤＣＭ中１Ｎ三臭化ホウ素（３．０ｍＬ）で処理した。１０分後、ドライアイス浴をはずし、反応混合物を外界温度まで加温しながらさらに１時間撹拌した。水でゆっくり反応停止した後、反応混合物を追加のＤＣＭで希釈し、生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（勾配溶出：５０％〜３３％〜０％のヘキサン／ＤＣＭ）で精製して、表題化合物を白色結晶性固体として得た（０．５１ｇ、６８％）。
2004510759.tif 000169
【０２０４】
３．　４−メチル−２−プロパ−２−エニルオキシフェニル３−メチルベンゼンスルホネート
【化１１１】
2004510759.tif 000170
前段階の生成物（０．５１ｇ、１．８３ｍｍｏｌ）、臭化アリル（０．２０ｍＬ、２．３０ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（０．７７ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（２５ｍＬ）を外界温度で１６時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をＤＣＭに溶解し、ろ過し、ろ液を１Ｎ ＫＯＨ水溶液、水、及び生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を蒸発させて、表題化合物を黄色オイルとして得た（０．５４ｇ、９３％）。
2004510759.tif 000171
【０２０５】
４．　２−ヒドロキシ−４−メチル−３−プロパ−２−エニルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート
【化１１２】
2004510759.tif 000172
前段階の生成物（０．５４ｇ、１．７０ｍｍｏｌ）をニートで２００℃、６時間加熱し、外界温度まで冷却し、フラッシュカラムクロマトグラフィーで二回（まず、ＤＣＭ：ヘキサン＝２：１、次いでヘキサン：酢酸エチル＝４：１溶離剤）精製して、表題化合物を無色オイルとして得た（８４ｍｇ、１６％）。
2004510759.tif 000173
【０２０６】
５．　４−メチル−２−（フェニルメトキシ）−３−プロパ−２−エニルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート
【化１１３】
2004510759.tif 000174
前段階の生成物（６８ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．１９ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、外界温度で臭化ベンジル（０．０５ｍＬ、０．４２ｍｍｏｌ）処理した。３日後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ溶離剤）で精製して、表題化合物を黄色オイルとして得た（５０ｍｇ、５８％）。
2004510759.tif 000175
【０２０７】
６．　４−メチル−３−（２−オキソエチル）−２−（フェニルメトキシ）フェニル−３−メチルベンゼンスルホネート
【化１１４】
2004510759.tif 000176
前段階の生成物（５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）および過ヨウ素酸ナトリウム（０．１２ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル：水溶液（５：１、１２ｍＬ）に、塩化ルテニウム（ＩＩＩ）水和物（８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を外界温度で６時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、５％重亜硫酸ナトリウム水溶液、水、および生理食塩水で洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ろ液を蒸発させて表題化合物を粗オイルとして得、これをそれ以上精製することなく用いた。
【０２０８】
７．　２−｛６−メチル−３−［（３−メチルフェニル）スルホニルオキシ］−２−（フェニルメトキシ）フェニル｝酢酸
【化１１５】
2004510759.tif 000177
前段階の生成物をアセトン（５ｍＬ）に溶解し、外界温度で二クロム酸ナトリウム（６５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）および濃硫酸（１ｍＬ）の水溶液（４ｍＬ）で処理した。３日間撹拌した後、アセトンを減圧下で除去し、残った水層をＤＣＭで抽出した。有機相を生理食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、次いでろ液を蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（８％メタノール／ＤＣＭ溶離剤）で精製して、表題化合物を白色固体として得た（４５ｍｇ、段階５から８８％）。
2004510759.tif 000178
【０２０９】
８．　３−（｛Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］カルバモイル｝メチル）−４−メチル−２−（フェニルメトキシ）フェニル３−メチルベンゼンスルホネート
【化１１６】
2004510759.tif 000179
前段階の生成物（４５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ（４８ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、および［Ｎ，Ｎ’−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）］−２−アミノエトキシグアニジン（Ｔｉａｎｂａｏ Ｌｕら、国際公開公報第９９／２６９２６号（１９９９））（３９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（５ｍＬ）に、トリエチルアミン（０．２ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）を加えた。外界温度で１８時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：酢酸エチル＝３：１溶離剤）で精製して、表題化合物を無色オイルとして得た（６１ｍｇ、７９％）。
2004510759.tif 000180
【０２１０】
９．　３−（｛Ｎ−［２−（｛Ｎ，Ｎ’−ジ−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］｝グアニジノオキシ）エチル］カルバモイル｝メチル）−２−ヒドロキシ−４−メチルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート
【化１１７】
2004510759.tif 000181
前段階の生成物（６１ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）および炭素担持１０％パラジウム（ｏ）（２０ｍｇ）をＴＨＦ、メタノール、および水（１：１：１、５０ｍＬ）に溶解し、窒素および減圧で脱気し、水素バルーン下、外界温度で激しく撹拌した。１８時間後、反応混合物をセライトによりろ過し、フリットをメタノールで洗浄し、ろ液を蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１０％酢酸エチル／ＤＣＭ溶離剤）で精製して、表題化合物を無色固体として得た（４０ｍｇ、７４％）。
2004510759.tif 000182
【０２１１】
１０．　３−（｛Ｎ−［２−（グアニジノオキシ）エチル］カルバモイル｝メチル）−２−ヒドロキシ−４−メチルフェニル３−メチルベンゼンスルホネート塩酸塩
【化１１８】
2004510759.tif 000183
前段階の生成物（４０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４ｍＬ）に溶解し、外界温度でニートのトリフルオロ酢酸（１．５ｍＬ）で処理した。３時間後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を調製用薄層クロマトグラフィー（溶離剤としてアンモニアガスで飽和させた２０％メタノール／ＤＣＭ）で精製し、エタノール中の４Ｎ ＨＣｌで処理し、ろ過した。ろ液を蒸発させ、ジエチルエーテルで洗浄し、高減圧下で乾燥して、表題化合物を淡黄色固体として得た（１７ｍｇ、５７％）。
2004510759.tif 000184
質量分析（ＬＣＭＳ、正ＥＳＩ）Ｃ１９Ｈ２４Ｎ４Ｏ６Ｓの計算値：４３７．１（Ｍ＋Ｈ）。実測値：４３７．３。
【０２１２】
実施例１２
錠剤調製
下記の活性化合物をそれぞれ２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇ、および１００．０ｍｇ含む錠剤を、下記のとおりに調製する：
ａ．Ｎ−［２−（アミジノアミノオキシ）エチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミドトリフルオロ酢酸塩；および
ｂ．Ｎ−［（６−アミノ−２−メチル（３−ピリジル））メチル］−２−｛３−［（２，２−ジフルオロ−２−フェニルエチル）アミノ］−６−クロロ−２−フルオロフェニル｝アセトアミド塩酸塩。
2004510759.tif 000185
【０２１３】
すべての活性化合物、セルロース、およびトウモロコシデンプンの一部を混合し、造粒して１０％トウモロコシデンプンペーストとする。得られた顆粒をふるい分け、乾燥し、残りのトウモロコシデンプンおよびステアリン酸マグネシウムと混合する。得られた顆粒を次いで圧縮して、一錠中に活性成分をそれぞれ２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇ、および１００．０ｍｇ含む錠剤とする。
【０２１４】
実施例１３
静脈内投与液剤調製
前述の実施例１および実施例２の活性化合物の静脈内投与剤形を下記のとおりに調製する。
2004510759.tif 000186
【０２１５】
上記の量を用いて、あらかじめ調製した塩化ナトリウム、クエン酸、およびクエン酸ナトリウムの注射用蒸留水（ｗａｔｅｒ ｆｏｒ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）溶液（米国薬局方／国民医薬品集１９９５年版、ＵＳＰ、Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ， Ｉｎｃ．発行、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、Ｍａｒｙｌａｎｄ（１９９４））の１６３６ページを参照されたい）に活性化合物を室温で溶解させる。
【０２１６】
実施例１４
精製酵素のインビトロ阻害
試薬：
すべての緩衝塩はシグマケミカル社（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ）（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）から入手し、入手可能な最高純度のものであった。酵素基質、Ｎ−ベンゾイル−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（Ｓｉｇｍａ Ｂ７６３２）、Ｎ−ベンゾイル−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド塩酸塩（Ｓｉｇｍａ Ｂ２２９１）、Ｎ−ｐ−トシル−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−ｐ−ニトロアニリド（Ｓｉｇｍａ Ｔ６１４０）、Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリド（Ｓｉｇｍａ Ｓ７３８８）およびＮ−ＣＢＺ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（Ｓｉｇｍａ Ｃ７２７１）はＳｉｇｍａから入手した。Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（ＢＡＣＨＥＭＬ−１７２０）およびＮ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐ−ニトロアニリド（ＢＡＣＨＥＭ Ｌ−１７７０）はバッチェム（ＢＡＣＨＥＭ）（Ｋｉｎｇ ｏｆ Ｐｒｕｓｉａ、ＰＡ）から入手した。
【０２１７】
ヒトα−トロンビン、ヒト第Ｘａ因子およびヒトプラスミンはエンザイムリサーチラボラトリーズ（Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）（Ｓｏｕｔｈ Ｂｅｎｄ、Ｉｎｄｉａｎａ）から入手した。ウシα−キモトリプシン（Ｓｉｇｍａ Ｃ４１２９）、ウシトリプシン（Ｓｉｇｍａ Ｔ８６４２）およびヒト腎細胞ウロキナーゼ（Ｓｉｇｍａ Ｕ５００４）はシグマ（Ｓｉｇｍａ）から入手した。ヒト白血球エラスターゼはエラスチンプロダクツ（Ｅｌａｓｔｉｎ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）（Ｐａｃｉｆｉｃ、ＭＯ）から入手した。
【０２１８】
Ｋｉ測定：
すべてのアッセイは被験化合物がペプチドｐ−ニトロアニリド基質の酵素触媒加水分解を阻害する能力に基づいている。典型的Ｋｉ測定において、基質をＤＭＳＯ中で調製し、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ ＮａＣｌからなるアッセイ緩衝液（ｐＨ７．５）で希釈する。各基質の最終濃度を以下に示す。一般に、基質濃度は実験的に求めたＫｍ値よりも低い。被験化合物を１．０ｍｇ／ｍｌのＤＭＳＯ溶液として調製する。希釈液はＤＭＳＯ中で調製し、２００倍の濃度範囲を含む８段階の最終濃度を作る。酵素溶液はアッセイ緩衝液中、下記の濃度で調製する。
【０２１９】
典型的Ｋｉ測定において、９６穴プレートの各ウェルに基質溶液２８０μＬ、被験化合物溶液１０μＬをピペットで加え、プレートをＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓプレートリーダー中で＞１５分間、温度３７℃で平衡化させる。１０ｍＬアリコートの酵素を加えることにより反応を開始し、４０５ｎｍの吸光度増加を１５分間記録する。全基質加水分解の１０％未満に対応するデータを計算に用いた。被験化合物を含まない試料の速度（時間の関数としての吸光度変化率）の比を、被験化合物を含む試料の速度で除し、被験化合物濃度の関数としてプロットする。データを線形回帰に適合させ、直線の傾きの値を計算する。傾きの逆数が実験的に求めたＫｉ値である。
【０２２０】
トロンビン：
トロンビン活性を、基質Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する能力として評価した。基質溶液を、アッセイ緩衝液中、３２ｍＭ（３２ｍＭ＜＜Ｋｍ＝１８０ｍＭ）の濃度で調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は４．３％であった。精製ヒトα−トロンビンをアッセイ緩衝液で１５ｎＭの濃度に希釈した。最終試薬濃度は次のとおりであった：［トロンビン］＝０．５ｎＭ、［基質Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド］＝３２ｍＭ。
【０２２１】
第Ｘ因子［ＦＸａ］：
ＦＸａ活性を、基質Ｎ−ベンゾイル−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド塩酸塩を加水分解する能力として評価した。基質溶液をアッセイ緩衝液中、５１ｍＭ（５１＜＜Ｋｍ＝１．３ｍＭ）の濃度で調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は４．３％であった。精製ヒト第Ｘ因子をアッセイ緩衝液で３００ｎＭの濃度に希釈した。最終試薬濃度は次のとおりであった：［ＦＸａ］＝１０ｎＭ、［Ｎ−ベンゾイル−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド塩酸塩］＝５１ｍＭ。
【０２２２】
プラスミン：
プラスミン活性を、Ｎ−ｐ−トシル−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する能力として評価した。基質溶液をアッセイ緩衝液中、３７ｍＭ（３７ｍＭ＜＜Ｋｍ＝２４３ｍＭ）の濃度で調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は４．３％であった。精製ヒトプラスミンをアッセイ緩衝液で２４０ｎＭの濃度に希釈した。最終試薬濃度は次のとおりであった：［プラスミン］＝８ｎＭ、［Ｎ−ｐ−トシル−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−ｐ−ニトロアニリド］＝３７ｍＭ。
【０２２３】
キモトリプシン：
キモトリプシン活性を、Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する能力として評価した。基質溶液をアッセイ緩衝液中、１４ｍＭ（１４ｍＭ＜＜Ｋｍ＝６２ｍＭ）の濃度で調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は４．３％であった。精製ウシキモトリプシンをアッセイ緩衝液で８１ｎＭの濃度に希釈した。最終試薬濃度は次のとおりであった：［キモトリプシン］＝２．７ｎＭ、［Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐ−ニトロアニリド］＝１４ｍＭ。
【０２２４】
トリプシン：
トリプシン活性を、Ｎ−ベンゾイル−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する能力として評価した。基質溶液をアッセイ緩衝液中、１３ｍＭ（１３ｍＭ＜＜Ｋｍ＝２９１ｍＭ）の濃度で調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は４．３％であった。精製ウシトリプシンをアッセイ緩衝液で１２０ｎＭの濃度に希釈した。最終試薬濃度は次のとおりであった：［トリプシン］＝４ｎＭ、［Ｎ−ベンゾイル−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド］＝１３ｍＭ。
【０２２５】
エラスターゼ：
エラスターゼ活性を、Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する能力として評価した。基質溶液をアッセイ緩衝液中、１９ｍＭ（１９ｍＭ＜＜Ｋｍ＝８９ｍＭ）の濃度で調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は４．３％であった。精製ヒト白血球エラスターゼをアッセイ緩衝液で７５０ｎＭの濃度に希釈した。最終試薬濃度は次のとおりであった：［エラスターゼ］＝２５ｎＭ、［Ｎ−スクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐ−ニトロアニリド］＝１９ｍＭ。
【０２２６】
ウロキナーゼ：
ウロキナーゼ活性を、Ｎ−ＣＢＺ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリドを加水分解する能力として評価した。基質溶液をアッセイ緩衝液中、１００ｍＭ（１００ｍＭ＜Ｋｍ＝１．２ｍＭ）の濃度で調製した。最終ＤＭＳＯ濃度は４．３％であった。精製ヒト腎ウロキナーゼをアッセイ緩衝液で１．２ｍＭの濃度に希釈した。最終試薬濃度は次のとおりであった：［ウロキナーゼ］＝４０ｎＭ、［Ｎ−ＣＢＺ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド］＝１００ｍＭ。
【０２２７】
結果より、実施例１から実施例１１の化合物は０．００２８μＭから２０μＭの間のヒトトロンビンに関するＫｉ値を有することが判明した。実施例５の化合物は０．００２８μＭのＫｉを有する。
【０２２８】
本発明を詳細に説明してきたが、本発明またはその任意の態様の範囲に影響することなく、条件、製剤、および他のパラメーターの広範かつ同等の範囲内で同じことを実施可能であることが、当業者により理解されると考えられる。本明細書において引用されるすべての特許および出版物は、その全体が参照として本明細書に完全に組み込まれる。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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