(57)【要約】Ａｒが式ａ）またはｂ）で示される新規化合物（Ｉ）およびそれらの医薬としての使用、特に、神経外傷性疾患、癌、慢性神経変性、痛み、偏頭痛および心臓肥大を治療するためのＲａｆ阻害剤としての使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2004509882.tif 000032
［式中、ＸはＯ、ＣＨ２、ＣＯ、ＳまたはＮＨであるか、あるいは部分Ｘ−Ｒ１は水素であり；
Ｙ１およびＹ２は独立してＮまたはＣＨであり；
Ｒ１は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、それらはいずれも置換されていてもよく；さらにＸがＣＨ２である場合にはＲ１は置換されていてもよいヒドロキシまたはＣ１−６アルコキシであってもよく；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ５−７シクロアルケニル、ヘテロサイクリル、アリールまたはヘテロアリールであり、それらはいずれも置換されていてもよく；
Ａｒは式ａ）またはｂ）：
【化２】
2004509882.tif 000033
ａ）　　　　　　　　　　　　　　　　 ｂ）
（式中、ＡはＯ、ＳおよびＮＲ５から選択される２個までの異種原子を含んでいてもよい縮合した５ないし７員環であり、ここにＲ５は水素またはＣ１−６アルキルであり、該環はハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシまたはケトから選択される２個までの置換基により置換されていてもよい）で示される基であり；
Ｒ３およびＲ４は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、アジド、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アシルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルスルフィニルまたはＣ１−６アルキルスルホニルから選択され；
Ｒ１５はＯまたはＮ−ＯＨであり；
Ｘ１およびＸ２の一方はＮであり、他方はＮＲ６であり、ここにＲ６は水素またはＣ１−６アルキルである］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
ＸがＮＨであるか、あるいはＸ−Ｒ１が水素である請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
Ｒ１５がＮ−ＯＨである請求項１または２記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
Ｒ２基が
ｉ）−ＣＲ７Ｒ８−ＣＨ２−Ｚ、−ＣＨ２−Ｚおよびヘテロサイクリルであり、ここにＲ７およびＲ８は独立して置換されていてもよいＣ１−６アルキルであるか、あるいはＲ７およびＲ８はそれらが結合している炭素原子と一緒になって置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキルまたはＣ５−７シクロアルケニル環を形成し；ＺはＮＲ９Ｒ１０、ＮＲ９Ｃ（Ｑ）ＮＲ９Ｒ１０、ＮＲ９ＣＯＯＲ１０、ＮＲ９ＳＯ２Ｒ１０、ＮＲ９Ｃ（Ｑ）Ｒ１０またはヘテロサイクリルであり、ここにＲ９およびＲ１０は独立して水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロリールおよびヘテロアリールＣ１−６アルキルから選択され、それらはいずれも置換されていてもよく、あるいはＮＲ９Ｒ１０として存在する場合にはＲ９およびＲ１０は一緒になってヘテロサイクリック基を形成し；ＱはＯまたはＳ、好ましくはＯであり；Ｒ２またはＺがヘテロサイクリル、例えばピペリジル、ピペラジンまたはモルホリンである場合には、ヘテロサイクリル基は置換されていてもよい；あるいは
ｉｉ）置換されていてもよいフェニル、ピリジル、ピリミジルおよびフラニルである前記いずれかの請求項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が水素である前記いずれかの請求項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
Ｒ４が水素である前記いずれかの請求項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項７】
Ｒ６が水素である前記いずれかの請求項に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項８】
実施例１ないし２３のいずれかに記載の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項９】
請求項１ないし８のいずれか１項に記載の記載の化合物またはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１０】
神経外傷イベントにより悪化させられあるいは引き起こされる、ヒトまたは他の哺乳動物におけるいずれかの疾病状態の予防的または治療的処置のための医薬の製造における請求項１ないし８のいずれか１項に記載の記載の化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項１１】
癌の予防的または治療的処置のための医薬の製造における請求項１ないし８のいずれか１項に記載の記載の化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項１２】
慢性神経生成、痛み、偏頭痛および心臓肥大の予防的または治療的処置のための医薬の製造における請求項１ないし８のいずれか１項に記載の記載の化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、新規化合物、ならびに特に神経外傷性疾患、癌、慢性神経変性、痛み、偏頭痛および心臓肥大を治療するためのＲａｆキナーゼ阻害剤としてのそれらの使用に関する。
【０００２】
Ｒａｆ蛋白キナーゼは、特別な細胞外刺激が哺乳動物細胞において正確な細胞応答を誘発するためのシグナルトランスダクション経路の重要成分である。活性化された細胞表面受容体は原形質膜の内面でｒａｓ／ｒａｐ蛋白を活性化させ、次いで、Ｒａｆ蛋白を動員し活性化させる。活性化されたＲａｆ蛋白は細胞内蛋白キナーゼＭＥＫ１およびＭＥＫ２をリン酸化し、活性化させる。次いで、活性化されたＭＥＫｓはｐ４２／ｐ４４マイトジェン−活性化蛋白キナーゼ（ＭＡＰＫ）のリン酸化および活性化を触媒する。活性化されたＭＡＰＫの種々の細胞質および核での基質が知られており、それらは環境変化に対する細胞の応答に直接的または間接的に関与している。Ｒａｆ蛋白をコードする３種の異なる遺伝子が哺乳動物において同定されている。ｍＲＮＡの異なるスプライシングにより生じるＡ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＣ−Ｒａｆ（Ｒａｆ−１としても知られる）ならびにイソフォーム変種が知られている。
【０００３】
Ｒａｆキナーゼの阻害剤は、腫瘍細胞の破壊における使用が示唆されており、それゆえ、癌、例えば組織球リンパ腫、肺腺癌、小胞肺癌ならびに膵臓および乳癌の治療における使用；また、心停止後の脳虚血、卒中および多梗塞性痴呆（ｍｕｌｔｉ−ｉｎｆａｒｃｔ ｄｅｍｅｎｔｉａ）包含する虚血イベントから生じる神経変性に関連する疾患、ならびに頭部傷害、外科手術および／または出産中のごとき脳虚血イベント後の神経変性に関連する疾患における使用、さらにはアルツハイマー病およびパーキンソン病のごとき慢性神経変性における使用、そして、痛み、偏頭痛および心臓肥大における神経変性に関連した疾患の治療における使用が示唆されている。
【０００４】
我々は、Ｒａｆキナーゼの阻害剤、詳細にはＢ−Ｒａｆキナーゼの阻害剤である新規化合物のグループを、今回見出した。
本発明によれば、式（Ｉ）：
【化３】
2004509882.tif 000002
（Ｉ）
［式中、ＸはＯ、ＣＨ２、ＣＯ、ＳまたはＮＨであるか、あるいは部分Ｘ−Ｒ１は水素であり；
Ｙ１およびＹ２は独立してＮまたはＣＨであり；
Ｒ１は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、それらはいずれも置換されていてもよく；さらにＸがＣＨ２である場合にはＲ１は置換されていてもよいヒドロキシまたはＣ１−６アルコキシであってもよく；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ５−７シクロアルケニル、ヘテロサイクリル、アリールまたはヘテロアリールであり、それらはいずれも置換されていてもよく；
Ａｒは式ａ）またはｂ）：
【化４】
2004509882.tif 000003
ａ）　　　　　　　　　　　　　　　　 ｂ）
（式中、ＡはＯ、ＳおよびＮＲ５から選択される２個までの異種原子を含んでいてもよい縮合した５ないし７員環であり、ここにＲ５は水素またはＣ１−６アルキルであり、該環はハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシまたはケトから選択される２個までの置換基により置換されていてもよい）で示される基であり；
Ｒ３およびＲ４は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、アジド、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アシルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルスルフィニルまたはＣ１−６アルキルスルホニルから選択され；
Ｒ１５はＯまたはＮ−ＯＨであり；
Ｘ１およびＸ２の一方はＮであり、他方はＮＲ６であり、ここにＲ６は水素またはＣ１−６アルキルである］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩が提供される。
【０００５】
本明細書において、式（Ｉ）の点線により示される二重結合は化合物の存在しうる互変異性の環の形態を示し、それは本発明の範囲内である。二重結合は未置換窒素に対するものであることが理解されよう。
【０００６】
オキシム部分は基ａ）およびｂ）中の非芳香族環のいずれの炭素原子上にあってもよい。
【０００７】
本明細書中のアルキルおよびアルケニル基は、個々に、あるいはより大きな基、例えばアルコキシの一部として、６個までの炭素原子を含む直鎖状または分枝状の基であってよい。
【０００８】
本明細書中のシクロアルキルおよびシクロアルケニル基は、それぞれ、３個ないし７個および５個ないし７個の環の炭素原子を有する基を包含する。
【０００９】
アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびシクロアルケニル基に関して存在してもよい置換基は、アリール、ヘテロアリール、ヘテロサイクリル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、アリールＣ１−６アルコキシ、アリールＣ１−６アルキルチオ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アミノスルホニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、カルボキシおよびそのエステル、アミド、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、Ｃ１−６アシルオキシ、ヒドロキシ、およびハロゲンまたはそれらのいずれかの組み合わせを包含する。さらなる置換基はシアノでありうる。
【００１０】
好ましくは、存在していてもよい置換基は水可溶化基を含む。適当な可溶化部分は当業者に明らかであろうし、ヒドロキシおよびアミノ基を包含する。さらに好ましくは、存在していてもよい置換基はアミノ、モノまたはジ−Ｃ１−６アルキル、アミノ、ヘテロサイクリルを含むアミノまたはヒドロキシまたはそれらのいずれかの組み合わせを包含する。
【００１１】
本明細書の用語「アリール」は、適当には４ないし７個、好ましくは５または６個の環の原子を各環に含む単一環または縮合環を意味し、該環は未置換であってもよく、あるいは例えば３個までの置換基により置換されていてもよい。縮合環システムは脂肪族環を含んでもよく、唯１個の芳香族環を含む必要がある。適当なアリール基はフェニルおよび１−ナフチルまたは２−ナフチルのごときナフチルを包含する。
【００１２】
適当には、本明細書の用語「ヘテロサイクリル」は、特記しない限り、適当には一方または両方の環に４個までの異種原子を含む、非芳香族の、飽和または不飽和の、単一および縮合環を包含し、各異種原子はＯ、ＮおよびＳから選択され、該環は未置換であってもよく、あるいは例えば３個までの置換基により置換されていてもよい。各複素環は適当には４ないし７個、好ましくは５または６個の環の原子を有する。縮合複素環システムは炭素環式の環を含んでもよく、唯１個の複素環を含む必要がある。ヘテロサイクリル基の例はピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、イミダゾリジンおよびピラゾリジンを包含する。ヘテロサイクリル基の好ましい例はピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、イミダゾリジンおよびピラゾリジンを包含する。
【００１３】
本明細書の用語「ヘテロアリール」は、適当には、特記しない限り、Ｏ、ＮおよびＳからそれぞれ選択される４個までの、好ましくは１個または２個の異種原子を含む単環式および二環式のヘテロ芳香族環システムを包含する。各環は４ないし７個、好ましくは５個または６個の環の原子を有していてもよい。二環式ヘテロ芳香族環システムは炭素環式の環を含んでもよい。ヘテロアリール基の例はピロール、キノリン、イソキノリン、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾールおよびベンズイミダゾールを包含する。
【００１４】
適当には、アリール、ヘテロサイクリルおよびヘテロアリール基は、好ましくは、３個までの置換基により置換されていてもよい。適当な置換基はハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルコキシ、ニトロ、シアノ、アジド、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アシルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、ウレア、カルバメート、アシル、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルスルフィニル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキルおよびヘテロアリールＣ１−６アルキル、またはそれらのいすれかの組み合わせを包含する。さらに、２個の環の炭素原子が結合して二環式のシステムを形成してもよい。
【００１５】
本明細書においてハロゲンはフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
【００１６】
式（Ｉ）の化合物において、
好ましくは、ＸはＯ、ＣＨ２、ＳまたはＮＨであるか、あるいは部分Ｘ−Ｒ１は水素である。
より好ましくは、ＸはＣＨ２またはＮＨであるか、あるいはＸ−Ｒ１は水素であり、最も好ましくは、ＸはＮＨであるか、あるいはＸ−Ｒ１は水素である。
好ましくは、Ｙ１はＣＨであり、Ｙ２はＮまたはＣＨである。
好ましくは、Ｒ１５はＮ−ＯＨである。
【００１７】
あるいはまた、Ｒ１は水素、Ｃ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ１−６アルキルであり、それらはいずれも置換されていてもよく、さらにＸがＣＨ２である場合にはＲ１は置換されていてもよいヒドロキシまたはＣ１−６アルコキシであってもよい。
【００１８】
Ｒ２はＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ｃ５−７シクロアルケニルまたはヘテロサイクリルであり得、それらはいずれも置換されていてもよい。
あるいはまた、Ｒ２はアリールまたはヘテロアリールであり、それらのいずれが置換されていてもよい。
【００１９】
好ましくは、Ａｒはａ）またはｂ）：
【化５】
2004509882.tif 000004
ａ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ｂ）
で示される基である。
Ｒ４は式（Ｉ）の化合物に関して定義されたものと同じであり、ｎは１、２または３であり、Ｒ１５はＯまたはＮ−ＯＨである。
【００２０】
より好ましくは、Ａｒはａ）またはｂ）：
【化６】
2004509882.tif 000005
ａ）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ｂ）
で示される基であり、式中、Ｒ４は式（Ｉ）の化合物に関して定義されたものと同じであり、ｎは１、２または３である。好ましくは、ｎは１である。
好ましくは、Ａｒはインドン基である。
【００２１】
Ｒ２に関する適当な存在していてもよい置換基は、アリール、ヘテロアリール、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、アリールＣ１−６アルコキシ、アリールＣ１−６アルキルチオ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アミノスルホニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、カルボキシおよびそのエステル、アミド、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、Ｃ１−６アシルオキシ、ヒドロキシ、およびハロゲン、あるいはそれらのいずれかの組み合わせからなる群より選択される１またはそれ以上の基を包含する。あるいはまた、該置換基はＣ１−６アルキルアリールであり得る。
【００２２】
好ましくは、Ｒ２は可溶化部分を含む基であり、適当な可溶化部分は当業者に明らかであり、塩基性の基を包含するであろう。列挙されうる特別な可溶化基はアミンおよびヒドロキシ基を包含する。例えば、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、ヘテロサイクリル含有アミンまたはヒドロキシ基あるいはそれらの組み合わせが挙げられる。
【００２３】
列挙されうる特別なＲ２基は−ＣＲ７Ｒ８−ＣＨ２−Ｚ、−ＣＨ２−Ｚおよびヘテロサイクリルを包含し、ここにＲ７およびＲ８は独立して置換されていてもよいＣ１−６アルキルであるか、あるいはＲ７およびＲ８はそれらが結合している炭素原子と一緒になって置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキルまたはＣ５−７シクロアルケニル環を形成し；ＺはＮＲ９Ｒ１０、ＮＲ９Ｃ（Ｑ）ＮＲ９Ｒ１０、ＮＲ９ＣＯＯＲ１０、ＮＲ９ＳＯ２Ｒ１０、ＮＲ９Ｃ（Ｑ）Ｒ１０またはヘテロサイクリルであり、ここにＲ９およびＲ１０は独立して水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、ヘテロリールおよびヘテロアリールＣ１−６アルキルから選択され、それらはいずれも置換されていてもよく、あるいはＮＲ９Ｒ１０として存在する場合にはＲ９およびＲ１０は一緒になってヘテロサイクリック基を形成し；ＱはＯまたはＳ、好ましくはＯであり；Ｒ２またはＺがヘテロサイクリル、例えばピペリジル、ピペラジンまたはモルホリンである場合には、ヘテロサイクリル基は置換されていてもよい。
列挙されうる特別なＲ２基は置換されていてもよいフェニル、ピリジル、ピリミジルおよびフラニルを包含する。
列挙されうるさらなる特別なＲ２基は、基−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１８Ｒ１９または−（ＣＨ２）ｍ−ＮＲ１８Ｒ１９により置換されたフェニルを包含し、ここにｍは１ないし６の整数、例えば、２または３であり、Ｒ１８およびＲ１９は独立して水素、Ｃ１−６アルキルであるか、あるいはＲ１８およびＲ１９はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、ＮＲ２０およびＯから選択されるさらなる異種原子を含んでいてもよい、置換されていてもよい５ないし７員環を形成し、ここにＲ２０は水素またはＣ１−６アルキル、例えばモルホリニルである。
【００２４】
あるいはまた、Ｒ７またはＲ８は水素でありうる。
好ましくは、Ｒ３は水素である。
好ましくは、Ｒ４は水素である。
好ましくは、Ｒ６は水素である。
【００２５】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は８００未満の分子量を有する。
【００２６】
本発明は式（Ｉ）の化合物の医薬上許容される誘導体を包含し、これらは本発明の範囲内に含まれることが理解されよう。
【００２７】
本発明の特別な化合物は実施例で述べる化合物およびそれらの医薬上許容される塩を包含する。本明細書の用語「医薬上許容される誘導体」は式（Ｉ）の化合物の医薬上許容される塩、エステルまたはかかるエステルの塩を包含し、受容者に投与されると式（Ｉ）の化合物またはその活性のある代謝物または残部を提供（直接的または間接的に）するものである。
好ましくは、誘導体は塩である。
【００２８】
本発明の特別な化合物は実施例で述べる化合物およびそれらの医薬上許容される塩を包含する。
医薬における使用には、式（Ｉ）の化合物の塩は医薬上許容されるものであるべきであることが理解されよう。適当な医薬上許容される塩は当業者に明らかであろうし、Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ．， １９７７， ６６， １−９に記載されたもの、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸のような無機酸とともに形成される酸付加塩；ならびに例えば、コハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸のような有機酸とともに形成される酸付加塩を包含する。他の塩、例えばシュウ酸塩を、例えば式（Ｉ）の化合物の単離に使用してもよく、本発明の範囲内に含まれる。
【００２９】
本発明の化合物は結晶形態または非結晶形態であってよく、結晶形態の場合、水和または溶媒和されていてもよい。本発明はその範囲内に化学量論的水和物ならびに種々の量の水を含有する化合物を包含する。
【００３０】
本発明は、立体異性体および幾何異性体を包含する、式（Ｉ）の化合物のすべての異性体を包含し、エナンチオマーおよびそれらの混合物、例えばラセミ体を包含する。異なる異性体を慣用的な方法により互いに分離または分割してもよく、あるいは慣用的な合成法または立体特異的もしくは不斉合成により異性体を得てもよい。
【００３１】
式（Ｉ）の化合物は医薬組成物中における使用が意図されるので、好ましくはそれぞれが実質的に純粋な形態で、例えば少なくとも純度６０％、より適当には少なくとも純度７５％、好ましくは少なくとも純度８５％、特別には少なくとも純度９８％（％は重量対重量による）で提供されることが容易に理解されよう。化合物の純粋でない調合物を、医薬組成物に使用されるより純粋な形態の製造に使用してもよい。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物は、当業者によく知られ、例えば、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｅｄｉｔｏｒｓ Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ ａｎｄ Ｒｅｅｓ， Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ， １９８４， ５， ４５７−４９７に記載されている方法を用いて容易に製造されうるイミダゾール誘導体であり、市販の出発物質から、あるいはよく知られた方法に類似した方法により製造されうる。
【００３３】
本発明の化合物の製造方法の例をスキーム１および２に概説する。スキームは、−Ｘ−Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が水素、Ｘ１がＮＨ、Ｙ１およびＹ２がＣＨであり、Ａｒが式ａ）（ｎが１）である化合物の製造を説明するが、その方法はすべての式（Ｉ）の化合物の製造に適用される。かかるプロセスの最初のもの（スキーム１）において、４−ピリジン−メタノールのＯ−保護誘導体のアニオンと適当に保護された縮合二環式アリール−アルデヒドとの反応によりα−ジケトンを調製する。ここにＰＧはオキシム保護基、例えば＝Ｎ−ＯＲ１１であり、Ｒ１１は置換されていてもよいＣ１−６アルキル、例えば、メチル、置換されていてもよいアリールまたはシリルであるか、あるいはＰＧはケトン保護基である。Ｏ−脱保護の後に中間体ジオールの酸化を行なって上記α−ジケトンを得る。溶媒中、例えば酢酸、メトキシｔブチルエーテル、またはメタノール中でのジケトンと適当なアルデヒドおよび酢酸アンモニウムとの反応は、イミダゾール核へのアクセスを可能にする。その後、慣用的な官能基相互変換法を用いて基Ｒ２を別の基Ｒ２に変換してもよく、基ＰＧをオキシミノ基（＝Ｎ−ＯＨ）に変換してもよい。
【００３４】
【化７】
2004509882.tif 000006
【００３５】
かかるプロセスの第２のものはＬｉｖｅｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ （Ｌ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９９， ４２， ２１８０）に記載されたものと類似している。このアプローチにおいて、２−ブロモ−１−ピリジン−４−イル−エタノンを適当なアミジンと反応させて、中心のイミダゾール核を形成する。感受性のあるイミダゾール水素の保護を行ない（典型的な保護基であるＰＧ’は２−トリメチルシリル−エトキシメチル−、ＳＥＭ、およびメトキシメチル−、ＭＯＭである）、次いで、イミダゾール環を金属化させる。次いで、金属化イミダゾールと、適当に保護され、ハロゲンまたはスルホネートエステルで置換された縮合二環式芳香族システムとの遷移金属により触媒されるクロス−カップリングにより残りの置換基の導入を行なうことができる。ここにＰＧは＝Ｏまたは上記スキーム１において定義したのと同じ保護基である。かかる遷移金属カップリング法は当業者によく知られており、例えば、Ｄ． Ｗ． Ｋｎｉｇｈｔ ｉｎ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， ｖｏｌｕｍｅ ４， ｐａｇｅ ４８１， ｅｄｉｔｏｒｓ Ｂ． Ｍ． Ｔｒｏｓｔ ａｎｄ Ｉ． Ｆｌｅｍｉｎｇ， Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ， １９９１に記載されている。その後、慣用的な官能基相互変換法を用いて基Ｒ２を別の基Ｒ２に変換し、保護基ＰＧ’を除去し、基ＰＧをオキシミノ基（＝Ｎ−ＯＨ）に変換してもよい。クロス−カップリング法を逆行させると、ハロゲン化イミダゾールが適当に保護された金属化縮合二環式芳香族システムとカップリングされることも理解されよう。
【００３６】
【化８】
2004509882.tif 000007
【００３７】
Ｌｉｖｅｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ （Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９９， ４２， ２１８０）により記載されたのと類似の方法により、式（ＩＩ）の化合物のアルキル化、次いで、保護基ＰＧ’の除去により、Ｒ６がＣ１−６アルキルである式（Ｉ）の化合物を製造してもよい。得られた異性体をクロマトグラフィー法により分離してもよい。
【００３８】
式（Ｉ）の化合物の合成の途中で、中間体化合物中の感受性のある官能基、例えばヒドロキシ、カルボキシおよびアミノ基を保護してもよい。種々の感受性のある官能基を保護しうる方法ならびに得られた保護誘導体を開裂させる方法に関するわかりやすい議論は、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｔ． Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ． Ｗｕｔｓ， （Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ２ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ， １９９１）にある。
【００３９】
式（Ｉ）の化合物を単独のものとして製造してもよく、あるいは少なくとも２種、例えば５ないし１０００種、より好ましくは１０ないし１００種の式（Ｉ）の化合物を含む化合物ライブラリーとして製造してもよい。コンビナトリアル「スプリット・アンド・ミックス」アプローチにより、あるいは溶液相または固相いずれかの化学を用いる複数のパラレルな合成により、あるいは当業者に知られた方法により、式（Ｉ）の化合物のライブラリーを製造してもよい。
【００４０】
かくして本発明のさらなる態様によれば、少なくとも２種の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を含む化合物ライブラリーが提供される。
【００４１】
慣用的には、適当な酸または酸誘導体との反応により、医薬上許容される塩を製造してもよい。
【００４２】
式（Ｉ）の化合物の製造に使用される種々の中間体は新規なものであり、かくして、本発明のさらなる態様によれば、ＰＧが＝Ｏまたは保護基であり、ＰＧ’が保護基である式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物が提供される。適当な保護基は上記のものを包含する。
【００４３】
上で示したように、式（Ｉ）の化合物およびそれらの医薬上許容される誘導体は、Ｒａｆキナーゼ、詳細にはＢ−Ｒａｆキナーゼが関与している疾病の治療および／または予防に有用である。
本発明のさらなる態様によれば、式（Ｉ）の化合物およびそれらの医薬上許容される誘導体の、Ｂ−Ｒａｆキナーゼの阻害剤としての使用が提供される。
上で示したように、式（Ｉ）の化合物およびそれらの医薬上許容される誘導体は、虚血イベントから生じる神経変性に関連した疾病ならびに慢性の神経変性、痛み、偏頭痛および心臓肥大の治療および／または予防に有用である。
【００４４】
本発明のさらなる態様によれば、神経外傷性疾患の治療または予防が必要な哺乳動物における神経外傷性疾患の治療または予防方法が提供され、該方法は、該哺乳動物に有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与することを特徴とする。
【００４５】
本発明のさらなる態様によれば、ヒトまたは他の哺乳動物における神経外傷性イベントにより悪化させられるあるいは引き起こされる疾病状態の予防的または治療的処置のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用が提供される。
【００４６】
本明細書で定義される神経外傷性疾患／イベントは、外科手術により引き起こされるような開放性または貫通性の頭部外傷、あるいは頭部領域への傷害により引き起こされるような閉鎖性の頭部外傷性障害を包含する。虚血性卒中、特に脳領域に対するもの、冠状バイパス後の一時的な虚血発作および他の一時的な虚血状態後の認識低下もこの定義に包含される。
虚血性卒中は、通常には血管の塞栓、血栓または局所的なアテロームの閉鎖の結果としての、特定の脳領域への不十分な血液供給により生じる局所的な神経学的疾患であると定義される。この領域におけるストレス刺激（無酸素症のごとき）、レドックス傷害、過剰な神経興奮性刺激および炎症サイトカインの役割が明らかになっており、本発明は、これらの傷害の可能性のある治療手段を提供する。これらのような急性傷害に対する治療はこれまでほとんど無い。
【００４７】
本発明の化合物を癌の治療または予防に使用してもよい。
本発明のさらなる態様によれば、癌の治療または予防を必要とする哺乳動物における癌の治療または予防方法が提供され、該方法は、該哺乳動物に有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与することを特徴とする。
【００４８】
本発明のさらなる態様によれば、癌の予防的または治療的処置のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用が提供される。
【００４９】
本発明のさらなる態様によれば、慢性の神経変性、痛み、偏頭痛および心臓肥大の治療または予防を必要とする哺乳動物における、それらの疾病の治療または予防方法が提供され、該方法は、該哺乳動物に有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与することを特徴とする。
【００５０】
本発明のさらなる態様によれば、慢性の神経変性、痛み、偏頭痛および心臓肥大の予防的または治療的処置のための医薬の製造における式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用が提供される。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物を治療に使用するためには、通常には、標準的な製薬慣習に従ってそれらを医薬組成物として処方する。
本発明のさらなる態様によれば、式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される誘導体および医薬上許容される担体を含む医薬組成物が提供される。
【００５２】
都合よくは、式（Ｉ）の化合物を薬剤投与に慣用的に使用されるいずれかの経路により投与することができ、例えば、非経口的、経口的、局所的に、あるいは吸入により投与することができる。慣用的な方法により式（Ｉ）の化合物を標準的な医薬担体と混合することにより調製される慣用的な剤形として式（Ｉ）の化合物を投与してもよい。式（Ｉ）の化合物を、既知の第２の治療活性化合物と組み合わせて慣用的な量で投与してもよい。これらの手順は、成分を適宜混合、顆粒化および打錠または溶解して所望調合物とすることを包含しうる。医薬上許容される担体の形態および特性は、組み合わされる式（Ｉ）の化合物の量、投与経路および他のよく知られた変数により決定されることが理解されよう。担体（複数も可）は、処方中の他の成分に適合し、その受容者に有害でないという意味で「許容される」ものでなくてはならない。
【００５３】
使用される医薬担体は、例えば、固体または液体のいずれであってもよい。固体担体の例は、ラクトース、白陶土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸等である。液体担体の例は、糖蜜、ピーナッツ油、オリーブ油、水等である。同様に、担体または希釈剤は、グリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレート単独またはロウとの混合物のごとき当該分野でよく知られた時間遅延材料を含んでいてもよい。
【００５４】
広範な医薬形態を用いることができる。したがって、固体担体を用いる場合、調合物を錠剤化し、粉末として硬ゼラチンカプセル中に入れ、あるいはペレット形態とし、あるいはトローチまたはロゼンジの形態とすることができる。固体担体の量は広範に変化させられるが、好ましくは、約２５ｍｇないし約１ｇであろう。液体担体を用いる場合、調合物はシロップ、エマルジョン、軟ゼラチンカプセル、アンプルまたは非水性液体懸濁物のごとき滅菌済み注射可能液体の形態であろう。
【００５５】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物を非経口的に、すなわち静脈内、筋肉内、皮下、舌下、鼻腔内、直腸内、膣内または腹腔内投与する。静脈内形態の非経口投与が一般的に好ましい。化合物をボーラスとして、あるいは連続輸液として、例えば６時間から３日までの連続輸液として投与してもよい。かかる投与に適した剤形を慣用的な方法により製造してもよい。
【００５６】
式（Ｉ）の化合物を経口投与してもよい。かかる投与に適した剤形を慣用的な方法により製造してもよい。
式（Ｉ）の化合物を吸入により、すなわち鼻腔内および経口吸入により投与してもよい。エアロゾル処方のごときかかる投与に適した剤形を慣用的な方法により製造してもよい。
式（Ｉ）の化合物を局所投与、すなわち非全身的に投与してもよい。これは阻害剤を表皮または口腔の外部から適用し、あるいはかかる化合物を耳、目および鼻に滴下して、化合物が有意に血流中に入らないようにすることを包含する。
【００５７】
本明細書に開示したすべての使用方法に関し、１日の経口投与規則は、好ましくは、体重１ｋｇに対して約０．１ないし約２００ｍｇ、好ましくは、約０．２ないし３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５ないし１５ｍｇ／ｋｇであろう。１日の非経口投与規則は、体重１ｋｇに対して約０．１ないし約２００ｍｇ、好ましくは、約０．２ないし３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５ないし１５ｍｇ／ｋｇであろう。１日の局所投与規則は、好ましくは、０．１ｍｇないし１５０ｍｇを１日１ないし４回、好ましくは１日２または３回であろう。１日の吸入投与規則は、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇないし約１ｍｇ／ｋｇであろう。阻害剤の最適量および個々の投与間隔は治療すべき症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、ならびに治療すべき個々の患者により決定され、かかる最適値は慣用的な方法により決定されうることも当業者により認識されるであろう。最適治療コース、すなわち一定日数における１日あたりの阻害剤の投与回数を、当業者は慣用的な治療決定試験のコースを用いて確認できることも当業者により理解されるであろう。医薬上許容される塩の場合、上記値は式（Ｉ）の親化合物として計算される。
式（Ｉ）の化合物を上記用量範囲で投与する場合、毒物学的効果は示されず／予想されない。
【００５８】
本願明細書において引用された特許および特許出願（これらに限らない）を包含するすべての刊行物を、参照によりそれぞれが十分に本明細書に記載されているものとする。
【００５９】
下記実施例は本発明の薬理学的に活性のある化合物の製造を説明する。
本明細書に使用される略号は以下のごとし：
ＴＨＦはテトラヒドロフランを意味する。
ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
ＴＢＡＦはフッ化テトラブチルアンモニウムを意味する。
ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを意味する。
ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドを意味する。
【００６０】
実施例１
５−［２−（２−アミノ−１，１−ジメチル−エチル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化９】
2004509882.tif 000008
【００６１】
工程１：５−ブロモ−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
アルゴン雰囲気下においてエタノール（６５０ｍｌ）中の５−ブロモ−インダノン（１００ｇ，０．４７４ｍｏｌ）の溶液に塩酸メトキシルアミン（１９８ｇ，２．３８ｍｏｌ）およびピリジン（１２５ｍｌ）を添加した。混合物を２．５時間還流させ、室温まで冷却し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液中に注いだ。ついで、混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ついで、減圧濃縮した。粗物質をイソプロパノールから再結晶させて標記化合物（１１０ｇ，９７％）を褐色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）　７．５２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ８．３Ｈｚ）， ７．４３ （１Ｈ， ｄ， Ｊ １Ｈｚ）， ７．３５ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ８．３， １Ｈｚ）， ３．９７ （３Ｈ， ｓ）， ２．９９ （２Ｈ， ｍ）， ２．９９ （２Ｈ， ｍ）， ２．８５ （２Ｈ， ｍ）。
【００６２】
工程２：１−メトキシイミノ−インダン−５−カルボアルデヒド
アルゴン雰囲気下、−６０℃において、ＴＨＦ（１５００ｍｌ）中の工程１の生成物（１１２ｇ，０．４６ｍｏｌ）の溶液にｎ−ＢｕＬｉ（３２５ｍｌ，０．５２ｍｏｌ）を１時間かけて添加した。−６０℃で１時間撹拌後、ＴＨＦ（５０ｍｌ）中のＤＭＦ（３９．７ｍｌ）の溶液を１時間かけて滴下した。反応物を−６０℃で１時間撹拌し、ついで、放置して室温まで温めた。１時間後、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で反応を不活性化させ、酢酸エチル中に抽出した。ついで、有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧濃縮し、残さをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して標記化合物（５７ｇ，６５％）を黄色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） １０．０ （１Ｈ， ｓ）， ７．８３−７．７３ （３Ｈ， ｍ）， ４．０２ （３Ｈ， ｓ）， ３．１０ （２Ｈ， ｍ）， ２．９２ （２Ｈ， ｍ）。
【００６３】
工程３：５−（１，２−ジヒドロキシ−２−ピリジン−４−イル−エチル）−インダン−１−オン−Ｏ−メチル−オキシム
アルゴン雰囲気下、−８０℃においてＴＨＦ（８００ｍｌ）中の４−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−ピリジン［Ｔ．Ｆ． Ｇａｌｌａｇｈｅｒ ｅｔ ａｌ， Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９７， ５， ４９］（７１．５ｇ，０．３２ｍｏｌ）の溶液にＬＤＡ（１６２ｍｌ，ヘプタン／ＴＨＦ／エチルベンゼン中２Ｍ，０．３２４ｍｏｌ）を１時間かけて添加した。混合物を−４０℃でさらに１時間撹拌し、ついで、ＴＨＦ（６００ｍｌ）中の工程２の生成物（５５ｇ，０．２９ｍｏｌ）の溶液を１時間かけて添加した。ついで、反応物をを一晩放置して室温まで温め、その後、炭酸水素ナトリウム飽和溶液を添加することにより反応を不活性化させ、ついで、酢酸エチル中に抽出した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧濃縮して褐色油状物質（１２５ｇ）を得た。
ついで、油状物質をＴＨＦ（１５００ｍｌ）中に溶解し、ＴＢＡＦ（３５６ｍｌ，０．３５６ｍｏｌ）で処理し、１時間撹拌した。ついで、反応混合物を蒸発させ、残さを水および酢酸エチル間に分配させた。そして、有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して標記化合物（５７ｇ，６４％）をうす黄色固体として得て、これをさらに精製せずに使用した。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） ８．３８ （２Ｈ， ｍ）， ７．５７ （１Ｈ， ｍ）， ７．１２−６．９９ （４Ｈ， ｍ）， ４．８８ （１Ｈ， ｍ）， ４．６６ （１Ｈ， ｍ）， ３．９６ （３Ｈ， ｓ）， ２．９３ （２Ｈ， ｍ）， ２．８５ （２Ｈ， ｍ）。
【００６４】
工程４：１−（１−メトキシイミノ−インダン−５−イル）−２−ピリジン−４−イル−エタン−１，２−ジオン
アルゴン雰囲気下、−７０℃において、ＤＭＳＯ（４３ｍｌ，０．５６ｍｏｌ）およびジクロロメタン（８００ｍｌ）の混合物に塩化オキサリル（７１．４ｇ）を添加し、ついで、ジクロロメタン／ＤＭＳＯ（１０００ｍｌ／６００ｍｌ）混合物中の工程３の生成物（５５ｇ，０．１８５ｍｏｌ）の溶液を−６０℃において２時間かけて添加した。−６０℃で２時間撹拌後、トリエチルアミン（１５４ｍｌ）を滴下し、ついで、混合物を一晩放置して室温まで温めた。その後、反応混合物を水で不活性化させ、ついで、有機相を分離し、水洗し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して標記化合物（５１ｇ，９４％）を黄色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） ８．８７ （２Ｈ， ｄ）， ７．８９−７．７７ （５Ｈ， ｍ）， ４．０３ （３Ｈ， ｓ）， ３．０９ （２Ｈ， ｍ）， ２．９３ （２Ｈ， ｍ）。
【００６５】
工程５：｛２−［４−（１−メトキシイミノ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−２−メチル−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＭｅＯＨ（１５ｍｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３０ｍｌ）中の工程４の生成物（１．０２ｇ，３．４７ｍｍｏｌ）、（２，２−ジメチル−３−オキソ−プロピル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．８４ｇ，４．１６ｍｏｌ）［Ｙ． Ｇｕｉｎｄｏｎ ｅｔ ａｌ， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， １９９７， １１９， ９２８９］および酢酸アンモニウム（１．３４ｇ，１７．４ｍｍｏｌ）の混合物を室温で２時間撹拌した。ついで、反応物を水中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。そして有機抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、減圧濃縮し、酢酸エチルで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより粗物質を精製して標記化合物（０．４５０ｇ，２７％）を無色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４７７ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６６】
工程６：５−［２−（２−アミノ−１，１−ジメチル−エチル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オン
ジオキサン（４ｍｌ）中の工程５の生成物（０．４００ｇ，０．８３９ｍｍｏｌ）および５Ｍ ＨＣｌ（２ｍｌ）の混合物を１００℃で１時間加熱した。ついで、アセトン（１０滴）を添加し、さらに１時間加熱を続け、その後混合物を室温まで冷却し、減圧濃縮した。０．８８アンモニア溶液：メタノール：酢酸エチル ２：１８：８０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより残さを精製して標記化合物（０．１８ｇ，６２％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３４８ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６７】
工程７：５−［２−（２−アミノ−１，１−ジメチル−エチル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンオキシム
８０℃のエタノール（５ｍｌ）中の工程６の生成物（０．１２ｇ，０．３５０ｍｍｏｌ）の溶液にヒドロキシルアミン水溶液（０．０７ｇ，１．０４ｍｍｏｌ，水中５０％）を添加した。３０分後、混合物を室温まで冷却し、減圧濃縮して標記化合物（０．１２４ｇ，１００％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３６２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６８】
実施例２
Ｎ−｛２−［５−（１−ヒドロキシイミノ−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−２−メチル−プロピル｝−メタンスルホンアミド
【化１０】
2004509882.tif 000009
【００６９】
工程１：Ｎ−｛２−メチル−２−［５−（１−オキソ−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−プロピル｝−メタンスルホンアミド
ジクロロメタン（３ｍｌ）中の実施例１、工程６の生成物（０．１ｇ，０．２９ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（０．０２３ｍｌ，０．３ｍｍｏｌ）の混合物を室温で２時間撹拌した。ついで、反応物を酢酸エチル中に注ぎ、水および炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、減圧濃縮した。０．８８アンモニア溶液：メタノール：ジクロロメタン １：９：９０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより粗残さを精製して標記化合物（０．０７５ｇ，６１％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４２５ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７０】
工程２：Ｎ−｛２−［５−（１−ヒドロキシイミノ−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−２−メチル−プロピル｝−メンタンスルホンアミド
実施例１、工程７に記載したようにして、工程１の生成物から標記化合物（０．０６ｇ，９０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４４０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７１】
実施例３
１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸｛２−［５−（１−ヒドロキシイミノ−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−２−メチル−プロピル｝−アミド
【化１１】
2004509882.tif 000010
【００７２】
工程１：１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸｛２−メチル−２−［５−（１−オキソ−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−プロピル｝−アミド
ジクロロメタンおよびＤＭＦの１：１混合物（４ｍｌ）中の実施例１、工程６の生成物（０．１ｇ，０．２９ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０６ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）およびポリマー結合１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．４ｇ，０．６ｍｍｏｌ，１．５２ｍｍｏｌ／ｇ）の混合物を室温で３０分撹拌した。ついで、ＤＭＦ（２ｍｌ）中の塩酸１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸［ＷＯ９７／２５３０９］（０．０９８ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。ついで、反応混合物を濾過し、溶媒を減圧除去し、０．８８アンモニア溶液：メタノール：ジクロロメタン １：９：９０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより粗残さを精製して標記化合物（０．１２ｇ，８０％）を黄色油状物質として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ５１６ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７３】
工程２：１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸｛２−［５−（１−ヒドロキシイミノ−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−２−メチル−プロピル｝−アミド
実施例１、工程７に記載したようにして、工程１の生成物から標記化合物（０．０７ｇ，７０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ５３１［Ｍ＋Ｈ］＋
【００７４】
実施例４
５−（２−ピペリジン−４−イル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化１２】
2004509882.tif 000011
【００７５】
工程１．４−［４−（１−メトキシイミノ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例１、工程５に記載したようにして、実施例１、工程４の生成物および４−ホルミル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｓ．Ｉ． Ｋｌｅｉｎ ｅｔ ａｌ； Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９８， ４１， ２４９２）から標記化合物を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４８８ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７６】
工程２．５−（２−ピペリジン−４−イル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
実施例１、工程６に記載したようにして、工程１の生成物から標記化合物（０．５５ｇ，９０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３５９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７７】
工程３．５−（２−ピペリジン−４−イル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
実施例１、工程７に記載したようにして、ついで、０．８８アンモニア溶液：メタノール：ジクロロメタン混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製することにより、工程２の生成物から標記化合物（０．３５ｇ，９０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３７４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７８】
実施例５
５−［２−（１−｛１−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イル］−メタノイル｝−ピペリジン−４−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化１３】
2004509882.tif 000012
実施例３、工程１に記載したようにして実施例４の生成物および塩酸１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸［ＷＯ９７／２５３０９］から標記化合物（０．０２８ｇ，２８％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ５４３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７９】
実施例６
５−［２−（１−フラン−３−イルメチル−ピペリジン−４−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化１４】
2004509882.tif 000013
【００８０】
酢酸（０．１ｍｌ）を含有するメタノール（３ｍｌ）中の実施例４の生成物（０．０９３ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、３−フルアルデヒド（０．０２４ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）およびポリマー結合トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（０．１２５ｇ，０．５ｍｍｏｌ，４ｍｍｏｌ／ｇ）の混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物をＳＣＸカラムの頂上に注ぎ、０．８８０アンモニア溶液：メタノール混合物（０−１０％）で溶離し、ついで、０．８８０アンモニア溶液：エタノール：ジクロロメタン １：９：９０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーによりさらに精製して標記化合物（０．０７０ｇ，６２％）を固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４５４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８１】
実施例７
５−｛２−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化１５】
2004509882.tif 000014
【００８２】
工程１．１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボアルデヒド
−７８℃のトルエン（４０ｍｌ）中の１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル［ＷＯ９７／２５３０９］（２．０ｇ，９．３ｍｍｏｌ）の溶液に水素化ジイソブチルアルミニウム（１０．２ｍｌ，テトラヒドロフラン中１Ｍ溶液、１０．２ｍｍｏｌ）を１時間かけて添加した。１時間後、反応混合物をメタノール（５ｍｌ）および酢酸アンモニウム飽和溶液（５ｍｌ）で不活性化させた。混合物を室温で１時間撹拌し、ついで、濾過した。濾液を濃縮して標記化合物（１．１ｇ，６９％）を黄色油状物質として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ １７２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８３】
工程２．５−｛２−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−ル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
実施例１、工程５に記載したようにして、工程１の生成物および実施例１、工程４の生成物から標記化合物（０．２７ｇ，３２％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４４６ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８４】
工程３．５−｛２−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オン
実施例１、工程６に記載したようにして、工程２の生成物から標記化合物（０．１９３ｇ，９３％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４１７ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８５】
工程４．５−｛２−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
実施例４、工程３に記載したようにして、工程３の生成物から標記化合物（０．１０５ｇ，６８％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４３２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８６】
実施例８
５−（２−アミノメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化１６】
2004509882.tif 000015
【００８７】
工程１．［４−（１−メトキシイミノ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例、工程５に記載したようにして、実施例１、工程４の生成物および（２−オキソ−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから標記化合物（１．０４ｇ，７０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４３４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８８】
工程２．５−（２−アミノメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
実施例１、工程６に記載したようにして、工程１の生成物から標記化合物（０．２１ｇ，３０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３０５ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８９】
工程３．５−（２−アミノメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
実施例４、工程３に記載したようにして、工程２の生成物から標記化合物（０．０６４ｇ，８０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３２０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９０】
実施例９
１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸［４−（１−ヒドロキシイミノ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル］−アミド
【化１７】
2004509882.tif 000016
【００９１】
工程１．１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸［４−（１−オキソ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル］−アミド
実施例３、工程１に記載したように、実施例８、工程２の生成物および塩酸１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸［ＷＯ９７／２５３０９］から標記化合物（０．０９５ｇ，６７％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４７４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９２】
工程２．１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−カルボン酸［４−（１−ヒドロキシイミノ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル］−アミド
実施例４、工程３に記載したように、工程１の生成物から標記化合物（０．０４１ｇ，４２％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ５３１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９３】
実施例１０
５−（２−ピペリジン−１−イルメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化１８】
2004509882.tif 000017
【００９４】
工程１．５−［２−（１，１−ジメトキシ−メチル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンＯ−メチルオキシム
実施例１、工程５に記載したようにして、実施例１、工程４の生成物およびジメトキシ−アセトアルデヒド（ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル中４５％溶液）から標記化合物（１．０５ｇ，７９％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３７９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９５】
工程２．４−（１−オキソ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボアルデヒド
実施例１、工程６に記載したようにして、工程１の生成物から標記化合物（０．９２ｇ，９０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３０３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９６】
工程３．５−（２−ピペリジン−１−イルメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
実施例６に記載したようにして、工程２の生成物およびピペリジンから標記化合物（０．１１ｇ，４４％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３７３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９７】
工程４．５−（２−ピペリジン−１−イルメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
実施例４、工程３に記載したようにして、工程３の生成物から標記化合物（０．５５ｇ，５３％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３８７ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９８】
実施例１１
５−（２−モルホリン−４−イルメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化１９】
2004509882.tif 000018
実施例１０、工程３および４に記載に従って、実施例１０、工程２の生成物およびモルホリンから標記化合物（０．０３４ｇ，１３％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３９０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９９】
実施例１２
５−（５−ピリジン−４−イル−２−（２，３，５，６−テトラヒドロ−［１，２’］ビピラジン−４−イルメチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化２０】
2004509882.tif 000019
実施例１０、工程３および４の記載に従って、実施例１０、工程２の生成物および３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−［１，２’］ビピラジニルから標記化合物（０．０３８ｇ，１７％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４６７ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１００】
実施例１３
５−（２−ピペラジン−１−イルメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化２１】
2004509882.tif 000020
【０１０１】
工程１．４−［４−（１−オキソ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−２−メチル］ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例６に記載したように、実施例１０、工程２の生成物およびピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルから標記化合物（０．３５ｇ，７４％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４７４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０２】
工程２．５−（２−ピペラジン−１−イルメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
ジクロロメタン（１０ｍｌ）およびトリフルオロ酢酸（５ｍｌ）中の工程１の生成物（０．３５０ｇ，０．７４ｍｍｏｌ）の溶液を室温で３時間撹拌した。溶液を濃縮し、残さをジクロロメタンとともに共蒸発させた。残さを水（１０ｍｌ）に溶解し、溶液を炭酸ナトリウム溶液で中和した。溶媒を減圧除去し、得られた固体を五酸化リンで乾燥して標記化合物を得て、これを次工程に使用した。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３７４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０３】
工程３．５−（２−ピペラジン−１−イルメチル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オンオキシム
実施例４、工程３に記載したように、工程２の生成物から標記化合物（０．０５ｇ，３７％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３８９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０４】
実施例１４
５−｛２−［４−（３−ジメチルアミノ−プロピルオキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オン
【化２２】
2004509882.tif 000021
【０１０５】
工程１：５−ブロモ−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
アルゴン雰囲気下においてエタノール（６５０ｍｌ）中の５−ブロモ−インダノン（１００ｇ，０．４７４ｍｏｌ）の溶液に塩酸メトキシルアミン（１９８ｇ，２．３８ｍｏｌ）およびピリジン（１２５ｍｌ）を添加した。混合物を２．５時間還流させ、室温まで冷却し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液中に注いだ。ついで、混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相を乾燥させ（硫酸ナトリウムで）、減圧濃縮した。粗物質をイソプロパノールから再結晶させて標記化合物（１１０ｇ，９７％）を褐色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）　７．５２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ８．３Ｈｚ）， ７．４３ （１Ｈ， ｄ， Ｊ １Ｈｚ）， ７．３５ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ８．３， １Ｈｚ）， ３．９７ （３Ｈ， ｓ）， ２．９９ （２Ｈ， ｍ）， ２．９９ （２Ｈ， ｍ）， ２．８５ （２Ｈ， ｍ）。
【０１０６】
工程２：１−メトキシイミノ−インダン−５−カルボアルデヒド
アルゴン雰囲気下、−６０℃において、ＴＨＦ（１５００ｍｌ）中の工程１の生成物（１１２ｇ，０．４６ｍｏｌ）の溶液にｎ−ＢｕＬｉ（３２５ｍｌ，０．５２ｍｏｌ）を１時間かけて添加した。−６０℃で１時間撹拌後、ＴＨＦ（５０ｍｌ）中のＤＭＦ（３９．７ｍｌ）の溶液を１時間かけて滴下した。反応物を−６０℃で１時間撹拌し、ついで、放置して室温まで温めた。１時間後、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液で反応を不活性化させ、酢酸エチルで抽出した。ついで、有機相を乾燥させ（硫酸ナトリウムで）、減圧濃縮し、残さをシリカゲルクロマトグラフィーによと精製して標記化合物（５７ｇ，６５％）を黄色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） １０．０ （１Ｈ， ｓ）， ７．８３−７．７３ （３Ｈ， ｍ）， ４．０２ （３Ｈ， ｓ）， ３．１０ （２Ｈ， ｍ）， ２．９２ （２Ｈ， ｍ）。
【０１０７】
工程３：５−（１，２−ジヒドロキシ−２−ピリジン−４−イル−エチル）−インダン−１−オン−Ｏ−メチル−オキシム
アルゴン雰囲気下、−５０℃において、ＴＨＦ（８００ｍｌ）中の４−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル）−ピリジン［Ｔ．Ｆ． Ｇａｌｌａｇｈｅｒ ｅｔ ａｌ； Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９７， ５， ４９］（７１．５ｇ，０．３２ｍｏｌ）の溶液にＬＤＡ（１６２ｍｌ，ヘプタン／ＴＨＦ／エチルベンゼン中２Ｍ，０．３２４ｍｏｌ）を１時間かけて添加した。混合物を−４０℃でさらに１時間撹拌し、ついで、ＴＨＦ（６００ｍｌ）中の工程２の生成物（５５ｇ，０．２９ｍｏｌ）の溶液を１時間かけて添加した。ついで、反応物を一晩放置して室温まで温め、その後炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を添加することにより反応を不活性化させ、ついで、酢酸エチル中に抽出した。有機相を乾燥させ（硫酸ナトリウムで）、減圧濃縮して褐色油状物質（１２５ｇ）を得た。
ついで、油状物質をＴＨＦ（１５００ｍｌ）に溶解し、ＴＢＡＦ（３５６ｍｌ，０．３５６ｍｏｌ）で処理し、１時間撹拌した。その後、反応混合物を蒸発させ、残さを水および酢酸エチル間に分配させた。そして有機相を乾燥させ（硫酸ナトリウムで）、濃縮して標記化合物（５７ｇ，６４％）をうす黄色固体として得て、これをさらに精製せずに使用した。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） ８．３８（２Ｈ， ｍ）， ７．５７（１Ｈ， ｍ）， ７．１２−６．９９ （４Ｈ， ｍ）， ４．８８ （１Ｈ， ｍ）， ４．６６ （１Ｈ， ｍ）， ３．９６ （３Ｈ， ｓ）， ２．９３ （２Ｈ， ｍ）， ２．８５ （２Ｈ， ｍ）。
【０１０８】
工程４：１−（１−メトキシイミノ−インダン−５−イル）−２−ピリジン−４−イル−エタン−１，２−ジオン
アルゴン雰囲気下、−７０℃において、ＤＭＳＯ（４３ｍｌ，０．５６ｍｏｌ）およびジクロロメタン（８００ｍｌ）の混合物に塩化オキサリル（４３．２ｇ）を添加し、ついで、−６０℃においてジクロロメタン／ＤＭＳＯ（１０００ｍｌ／６０ｍｌ）の混合物中の工程３の生成物（５５ｇ，０．１８５ｍｏｌ）を２時間かけて添加した。−６０℃で２時間撹拌後、トリエチルアミン（１５４ｍｌ）を滴下し、ついで、混合物を一晩放置して室温まで温めた。その後反応混合物を水で不活性化させ、有機相を分離し、水洗し、乾燥させ（硫酸ナトリウムで）、濃縮して標記化合物（５１ｇ，９４％）を黄色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３） ８．８７ （２Ｈ， ｄ）， ７．８９−７．７７ （５Ｈ， ｍ）， ４．０３ （３Ｈ， ｓ）， ３．０９ （２Ｈ， ｍ）， ２．９３ （２Ｈ， ｍ）。
【０１０９】
工程５：５−｛２−［４−（３−ジメチルアミノ−プロピルオキシ）−フェニル］−５−フェニル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
酢酸（１０ｍｌ）中の工程４の生成物（０．３ｇ，１．０２ｍｍｏｌ）、４−（３−ジメチルアミノ−プロピルオキシ）−ベンズアルデヒド（０．２７ｍｌ，１．３３ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニウム（０．７８５ｇ，１０．２ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で１時間加熱した。ついで、反応物を室温まで冷却し、氷／０．８８０アンモニア溶液中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。その後、有機抽出物を乾燥させ（硫酸マグネシウムで）、減圧濃縮し、０．８８アンモニア溶液：メタノール：酢酸エチル １：９：９０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより粗物質を精製して標記化合物（０．０８ｇ，１６％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４８３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１０】
工程６：５−｛２−［４−（３−ジメチルアミノ−プロピルオキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オン
ジオキサン（３ｍｌ）中の工程５の生成物（０．０７ｇ，０．１４６ｍｍｏｌ）および５Ｍ ＨＣｌ（４ｍｌ）の混合物を１００℃で１時間加熱した。ついで、アセトン（３ｍｌ）を添加し、加熱をさらに１．５時間継続し、ついで、混合物を室温まで冷却し、１Ｍ水酸化ナトリウム溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。ついで、有機抽出物を水洗し、乾燥させ（硫酸マグシウムで）、減圧濃縮し、０．８８アンモニア溶液：メタノール：酢酸エチル ２：１８：８０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより粗物質を精製して標記化合物（０．０３５ｇ，５３％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４５３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１１】
実施例１５
５−｛２−［４−（３−ジメチルアミノ−プロピルオキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化２３】
2004509882.tif 000022
【０１１２】
工程１：５−｛２−［４−（３−ジメチルアミノ−プロピルオキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
８０℃においてエタノール（３ｍｌ）中の実施例１４、工程６の生成物（０．０７ｇ，０．１５５ｍｍｏｌ）の溶液にヒドロキシルアミン水溶液（１．５ｍｌ，水中５０％）を添加した。３０分後、混合物を室温まで冷却し、減圧濃縮して標記化合物（０．０７２ｇ，１００％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４６８ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１３】
実施例１６
５−｛２−［４−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−１−インダノン
【化２４】
2004509882.tif 000023
【０１１４】
工程１：５−｛２−［４−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オン−Ｏ−メチル−オキシム
実施例１４、工程５に記載したように、実施例１４、工程４の生成物および４−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−ベンズアルデヒド［ＷＯ９９／１９２９３］から標記化合物（０．１９ｇ，３０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４６８ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１５】
工程２：５−｛２−［４−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−１−インダノン
実施例１４、工程６に記載したように、工程１の生成物から標記化合物（０．３１３ｇ，５６％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４３９ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１６】
実施例１７
５−｛２−［４−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化２５】
2004509882.tif 000024
【０１１７】
工程１　５−｛２−［４−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
実施例１５、工程１に記載したように、実施例１６、工程２の生成物から標記化合物（０．３２１ｇ，１００％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４５４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１８】
実施例１８
５−｛２−［４−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オン
【化２６】
2004509882.tif 000025
【０１１９】
工程１：５−｛２−［４−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オン−Ｏ−メチル−オキシム
実施例１４、工程５に記載したように、実施例１４、工程４の生成物および４−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−ベンズアルデヒド［ＷＯ９６／２８４４８］から標記化合物（０．１５ｇ，２０％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ５１０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２０】
工程２：５−｛２−［４−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オン
実施例１４、工程６に記載したように、工程１の生成物から標記化合物（０．０４８ｇ，３６％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４８１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２１】
実施例１９
５−｛２−［４−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化２７】
2004509882.tif 000026
【０１２２】
工程１：５−｛２−［４−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−フェニル］−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
実施例１５、工程１に記載したように、実施例１８、工程２の生成物から標記化合物（０．０４８ｇ，９７％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４９６ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２３】
実施例２０
５−（５−ピリジン−４−イル−２−ピリジン−３−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
【化２８】
2004509882.tif 000027
【０１２４】
工程１：５−（５−ピリジン−４−イル−２−ピリジン−３−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン−Ｏ−メチル−オキシム
実施例１４、工程５に記載したように、実施例１４、工程４の生成物およびピリジン−３−カルボアルデヒドから標記化合物（０．１１ｇ，２８％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３８２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２５】
工程２：５−（５−ピリジン−４−イル−２−ピリジン−３−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
実施例１４、工程６に記載したように、工程１の生成物から標記化合物（０．０２５ｇ，２５％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３５３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２６】
実施例２１
５−（５−ピリジン−４−イル−２−ピリジン−３−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化２９】
2004509882.tif 000028
【０１２７】
工程１：５−（５−ピリジン−４−イル−２−ピリジン−３−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル｝−インダン−１−オンオキシム
実施例１５、工程１に記載したように、実施例２０、工程２の生成物から標記化合物（０．０７５ｇ，７６％）を得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３６８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２８】
実施例２２
５−（２−フェニル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
【化３０】
2004509882.tif 000029
【０１２９】
工程１：４−［２−フェニル−１−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン
４−（２−フェニル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン［Ｎ． Ｊ． Ｌｉｖｅｒｔｏｎ ｅｔ．ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， １９９９， ４２， ２１８０］（１７．８ｇ，８０．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５０ｍｌ）に溶解し、０℃まで冷却した。ついで、溶液を水素化ナトリウム（３．５４ｇ，６０％分散物，８８．６ｍｍｏｌ）で処理し、温度を０℃に維持しながら２５分間撹拌した。
その後、塩化２−（トリメチルシリル）エトキシメチル（１４．７７ｇ，８８．６ｍｍｏｌ）を５分かけて滴下し、混合物を一晩室温まで温めた。ついで、反応物を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液に注ぎ、ジエチルエーテルで数回抽出した。そして、一緒にしたエーテル抽出物を乾燥させ（硫酸ナトリウムで）、減圧濃縮し、酢酸エチルで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより残さを精製して標記化合物（１６．８ｇ，５９％）をうす黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３５３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３０】
工程２：４−［５−ブロモ−２−フェニル−１−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン
室温においてジクロロメタン（３００ｍｌ）中の工程１の生成物（１５ｇ，４２．６ｍｍｏｌ）の溶液に、臭素（６．８１ｇ，２．３８ｍｌ，４６．５ｍｍｏｌ）、ついで炭酸ナトリウム飽和溶液（１５０ｍｌ）を添加した。混合物を４０分間撹拌し、ついで、分離させ、有機層を水、ついでブラインで洗浄した。そして有機層を乾燥させ（硫酸マグネシウムで）、減圧濃縮して標記化合物（１８．１ｇ，９９％）を褐色粘性油状物質として得て、これをさらに精製せずに使用した。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４３１／４３３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３１】
工程３：４−［２−フェニル−５−トリブチルスタンニル−１−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン
−７８℃のＴＨＦ（２００ｍｌ）中の工程２の生成物（１３．４ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）の溶液にｔＢｕＬｉ（２２ｍｌ，１．７Ｍ，３８ｍｍｏｌ）を滴下した。２５分後、塩化トリブチルすず（１２．３７ｇ，１０．３ｍｌ，３８ｍｍｏｌ）を滴下し、ついで、混合物を一晩放置して室温とした。そして反応物を炭酸水素ナトリウム飽和溶液に注ぎ、ジエチルエーテルで数回洗浄した。一緒にした有機層を乾燥させ（硫酸マグネシウムで）、減圧濃縮し、０．８８アンモニア溶液：メタノール：ヘキサン：ジエチルエーテル ０．５：４．５：４５：５０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより残さを精製して標記化合物（１８．５ｇ，９３％）を褐色粘性油状物質としてた。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ６４１／６４３／６４４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３２】
工程４：５−［２−フェニル−５−ピリジン−４−イル−３−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−インダン−１−オン
酢酸パラジウム（０．０２５ｇ，０．１１ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（０．０６ｇ，０．２２ｍｍｏｌ）をトルエン（１ｍｌ）に懸濁した。
ついで、５−ブロモインダノン（２４０ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で５分間加熱した。ついで、溶液を、トルエン（１ｍｌ）中の工程３の生成物（０．６ｇ，０．９４ｍｍｏｌ）の溶液で処理し、１００℃で１８時間撹拌した。冷却後、溶媒を減圧除去し、酢酸エチルで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより残さを精製して標記化合物（０．２５ｇ，５５％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ４８２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３３】
工程５：５−（２−フェニル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オン
工程４の生成物（０．３２ｇ，０．６６ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍｌ）に溶解し、５Ｍ塩酸水溶液（３ｍｌ）を添加し、混合物を３０分間還流させた。冷却後、溶媒を減圧除去して標記化合物を黄色固体として得た（０．２７ｇ，９６％）。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３５２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３４】
実施例２３
５−（２−フェニル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化３１】
2004509882.tif 000030
【０１３５】
工程１：５−（２−フェニル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−インダン−１−オンオキシム
４０％水酸化ナトリウム水溶液（２ｍｌ）およびエタノール（３ｍｌ）中の実施例２２、工程５の生成物（０．０６ｇ，０．１７ｍｍｏｌ）および塩酸ヒドロキシルアミン（０．０３５ｇ，０．５ｍｍｏｌ）の溶液を３０分間加熱して還流させた。冷却後、混合物を２Ｍ塩酸水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウムで）、減圧濃縮した。０．８８アンモニア溶液：メタノール：ジクロロメタン １：９：９０の混合物で溶離するシリカゲルクロマトグラフィーにより残さを精製して標記化合物（０．０５ｇ，８０％）を黄色固体として得た。ＭＳ（ＡＰ＋） ｍ／ｅ ３６７ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３６】
生物学的実施例
Ｂ−Ｒａｆ阻害剤としての式（Ｉ）の化合物の活性を下記のインビトロアッセイにより調べてもよい：
【０１３７】
蛍光異方性キナーゼ結合アッセイ
キナーゼ酵素、蛍光リガンドおよび種々の濃度の試験化合物を一緒にしてインキュベーションして、試験化合物不存在下で蛍光リガンドが有意に（＞５０％）酵素に結合し、十分な濃度（＞１０ｘＫｉ）の強力な阻害剤の存在下で未結合蛍光リガンドの異方性が結合値とは測定可能に異なるような条件下で熱力学的平衡に達せしめる。
好ましくは、キナーゼ酵素の濃度は≧１ｘＫｆとすべきである。必要な蛍光リガンドの濃度は使用する装置、蛍光および物理化学的特性に依存するであろう。その使用濃度はキナーゼ酵素濃度よりも低くなくてはならず、好ましくは、キナーゼ酵素濃度の半分未満である。典型的なプロトコルは：
すべての成分を、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ ７．５，１ｍＭ ＣＨＡＰＳ，１０ｍＭ ＭｇＣｌ２の組成のバッファーに溶解する。
Ｂ−Ｒａｆ酵素濃度：１ｎＭ
蛍光リガンド濃度：０．５ｎＭ
試験化合物濃度：０．１ｎＭ〜１００μＭ
平衡に達するまで、ＬＪＬ ＨＥ ３８４タイプＢ黒色マイクロタイタープレート上で１０μｌの最終体積中で成分をインキュベーションする。
蛍光異方性をＬＪＬ Ａｃｑｕｅｓｔにて読む。
定義：Ｋｉ＝阻害剤結合に関する解離定数
Ｋｆ＝蛍光リガンド結合に関する解離定数
蛍光リガンドは下記の化合物であり：
【化３２】
2004509882.tif 000031
これは５−［２−（４−アミノメチルフェニル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−２−クロロフェノールおよびローダミングリーンに由来するものである。
【０１３８】
Ｒａｆキナーゼアッセイ
Ｂ−Ｒａｆの既知基質である組換え型ＭＡＰキナーゼ（ＭＥＫ）への放射性標識ホスフェートの取りこみをアッセイすることにより、ヒト組換え型Ｂ−Ｒａｆ蛋白の活性を評価した。ヒトＢ−Ｒａｆ組換え型バキュロウイルス発現ベクターに感染したｓｆ９昆虫細胞から精製することにより、触媒的に活性のあるヒト組換え型Ｂ−Ｒａｆ蛋白を得た。すべての基質のリン酸化がＢ−Ｒａｆ活性により生じることを確実にするために、触媒的に不活性な形態のＭＥＫを使用した。この蛋白は、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼとの融合蛋白（ＧＳＴ−ｋｄＭＥＫ）として変異不活性ＭＥＫを発現する細菌細胞から精製された。
【０１３９】
方法：Ｂ−Ｒａｆ触媒活性の標準的なアッセイ条件は、全反応体積３０μｌ中に３μｇのＧＳＴ−ｋｄＭＥＫ，１０ｕＭ ＡＴＰおよび２ｕＣｉ ３３Ｐ−ＡＴＰ，５０ｍＭ ＭＯＰＳ，０．１ｍＭ ＥＤＴＡ，０．１Ｍ ショ糖，１０ｍＭ ＭｇＣｌ２プラス０．１％ ジメチルスルホキシド（適宜、化合物を含む）を用いるものであった。反応物を２５℃で９０分インキュベーションし、ＥＤＴＡを添加して最終濃度５０μＭとすることにより反応を停止させた。１０μｌの反応物をＰ３０ホスホセルロースペーパー上にスポットし、風乾した。氷冷１０％トリクロロ酢酸、０．５％リン酸で４回洗浄した後、ペーパーを風乾してから液体シンチラントを添加し、シンチレーションカウンターにて放射活性を測定した。
【０１４０】
結果：実施例の化合物は、Ｂ−Ｒａｆにより媒介されるＧＳＴ−ｋｄＭＥＫ基質のリン酸化を阻害することにおいて有効であることがわかり、３μＭ未満のＩＣ５０を有していた。
【０１４１】
Ｒａｆ阻害剤としての化合物の活性を、ＷＯ ９９／１０３２５； ＭｃＤｏｎａｌｄ， Ｏ．Ｂ．， Ｃｈｅｎ， Ｗ．Ｊ．， Ｅｌｌｉｓ， Ｂ．， Ｈｏｆｆｍａｎ， Ｃ．， Ｏｖｅｒｔｏｎ， Ｌ．， Ｒｉｎｋ， Ｍ．， Ｓｍｉｔｈ， Ａ．， Ｍａｒｓｈａｌｌ， Ｃ．Ｊ． ａｎｄ Ｗｏｏｄ， Ｅ．Ｒ． （１９９９） Ａ ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｐｒｏｘｉｍｉｔｙ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ ｋｉｎａｓｅ ｃａｓｃａｄｅ： ｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． ２６８： ３１８−３２９ ａｎｄ ＡＡＣＲ ｍｅｅｔｉｎｇ Ｎｅｗ Ｏｒｌｅａｎｓ １９９８ Ｐｏｓｔｅｒ ３７９３に記載されたアッセイにより調べてもよい。
【０１４２】
Ｂ−Ｒａｆ阻害剤の神経保護特性を下記のインビトロアッセイにより調べてもよい：
ラット海馬スライス培養物におけるＢ−Ｒａｆ阻害剤の神経保護特性
器官型培養物は、解離した神経細胞培養物と酸素およびグルコース枯渇（ＯＧＤ）のインビボモデルとの中間物を提供するものである。大部分のグリア−ニューロン相互作用およびニューロン回路部品は培養海馬スライスにおいて維持されており、それゆえ、インビボ状態に類似したモデルにおいて異なる細胞タイプ間の死滅パターンを調べることが容易である。これらの培養物は、遅延細胞ダメージおよび傷害から２４時間後またはそれ以上たってからの死滅を研究することを可能にし、培養条件の長期にわたる変更の結果の評価を可能にする。多くの研究室が、海馬の器官型培養物におけるＯＧＤに対する応答の際の遅延神経ダメージを報告している（Ｖｏｒｎｏｖ ｅｔ ａｌ．， Ｓｔｒｏｋｅ， １９９４， ２５， ５７−４６５； Ｎｅｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．， １９９５， ６７６， ３８−４４）。ＥＡＡアンタゴニスト（Ｓｔｒａｓｓｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．， １９９５， ６８７， １６７−１７４）、Ｎａチャンネルブロッカー（Ｔａｓｋｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．， １９９２， １２， ９８−４３０８）およびＣａチャンネルブロッカー（Ｐｒｉｎｇｌｅ ｅｔ ａｌ．， Ｓｔｒｏｋｅ， １９９６， ７， ２１２４−２１３０）を包含するいくつかのクラスの化合物は、このモデルにおいて保護作用を示すことが示されている。現在に至るまで、このモデルにおいて神経細胞の死滅における細胞内キナーゼにより媒介されるシグナリング経路の役割はあまり解明されていない。
【０１４３】
方法：Ｓｔｏｐｐｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ． Ｍｅｔｈｏｄｓ， １９９５， ３７， １７３−１８２の方法を用いて器官型海馬スライス培養物を調製した。簡単に説明すると、生後７〜８日目のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットの海馬から調製した４００ミクロンの切片を半多孔性膜上で９〜１２日間培養する。ついで、嫌気性チャンバー内で血清およびグルコース不含培地中で４５分間インキュベーションすることによりＯＧＤを誘発する。その後、培養物を空気／ＣＯ２に２３時間戻し、ついで、分析を行なう。ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）を細胞死滅のインジケーターとして使用する。ＰＩはニューロンに対して無毒であり、細胞生存能力を確認するために多くの研究において用いられている。ＰＩはダメージを受けたニューロンに侵入し、核酸に結合する。結合したＰＩは、５４０ｎｍにおいて励起されると６３５ｎｍのエミッションが増加する。１のＰＩ蛍光イメージおよび１の白色光イメージを得て、細胞死滅の割合を分析する。白色光イメージから領域ＣＡ１の面積を決定し、ＰＩイメージに重ね合わせる。ＰＩシグナルは閾値であり、ＰＩダメージの面積はＣＡ１面積のパーセンテージとして表される。ＰＩ蛍光と組織学的に確認される細胞死滅との間の相関関係は、クレシルファストバイオレットを用いたＮｉｓｓｉ染色によってすでに確認されている（Ｎｅｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．， １９９５， １５， ７７０２−７７１１）。
【０１４４】
本明細書および特許請求の範囲の全体において、特記しない限り、用語「含む」ならびにその単数形および現在分詞等は、記述された数または工程または数値群を包含することを意味するが、他の数または工程または数値もしくは工程の群を排除するものではない。
【０１４５】
本願明細書およびクレームを後の出願の優先権主張の基礎として用いてもよい。そのような後の出願のクレームは本明細書に記載されたいずれかの特徴またはその組み合わせに指向されてもよい。それらは組成物、製法、または使用の形態であってもよく、例えば、本願のクレームを含んでいてもよいが、それらに限定されない。
【国際公開パンフレット】
2004509882.tif 000034
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2004509882.tif 000036
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【国際調査報告】
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