(57)【要約】本発明は、少なくとも１種の寄生性単細胞生物のスポロキストおよび少なくとも１種の抗凝血剤を含有する製剤に関する。また本発明は、有害な齧歯類を防除するためのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種の単細胞寄生虫のスポロキストおよび少なくとも１種の抗凝血性活性化合物を含んでなる、組成物。
【請求項２】
スポロキストの用量および／または抗凝血剤の用量が、それらがそれら自体ではいかなる致死効果ももたないほど低いことを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
請求項１または２記載の、スポロキストまたは少なくとも１種の抗凝血剤を含んでなる２つの別々な組成物の組み合わせ物。
【請求項４】
有害な齧歯類を防除するための、請求項１または２記載の組成物、または請求項３記載の２つの別々な組成物の組み合わせ物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、病原性単細胞生物体および抗凝血剤を含んでなる組成物、ならびに齧歯類を防除するためのそれらの使用に関する。
【０００２】
インダンジオン誘導体および４−ヒドロキシクマリンは、ビタミンＫの拮抗剤であり、そして血液中のプロトロンビンのレベルを低下させることが知られている。これは血液の凝固性を減少する。さらにまた、これらの化合物は微毛細管の透過性を増大する。特に、齧歯類はこれらの物質に非常に敏感である。したがって、これらの誘導体は、殺齧歯類性の活性化合物として使用される（参照、例えば、ドイツ特許出願公開第２５　０６　７６９号）、日本特許出願公開第４８　０２３　９４２号、スイス特許出願公開第４８１　５８０号、Ｔａｍｍｅｓ　ＰＭＬ　ｅｔ　ａｌ．１９６７　Ａｃｔａ　Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｎｅｅｒ．１４，４２３−４３３，Ｐａｐｏｓｃｉ　Ｌ　１９７４　Ｂｅｉｈｅｆｔｅ　Ｚ．Ａｎｇｅｗ．Ｚｏｏｌ．，１５５，ドイツ特許第２　５０６　７６９号）。
【０００３】
現在、市販されているこの群の活性化合物の急性毒性は、０．２ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇ（ＬＤ５０ラット）である。クマテトラリルでは、例えば、ＬＤ５０は約１６．５ｍｇ／ｋｇである。第２世代の抗凝血剤の急性ＬＤ５０は、０．２ｍｇ／ｋｇ（ブロジファクム）〜２．０ｍｇ／ｋｇ（ブロマジオロン）である。耐性ラットでは、それぞれのＬＤ５０は、１０−１００の因数で、それより高い（すべてのデータは、ラッタス・ノルベギクス（Ｒａｔｔｕｓ　ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）についての急性経口ＬＤ５０を指す）。
【０００４】
また、刺胞子虫類（Ｓａｒｃｏｓｐｏｒｉｄｉａ）の群の原虫類（門・原生動物（Ｐｒｏｔｏｚｏａ）、綱・胞子虫類（Ｓｐｏｒｏｚｏａ）、亜綱・球虫類（Ｃｏｃｃｉｄｉａ）、目・オイコクシジイダ（Ｅｕｃｏｃｃｉｄｉｉｄａ）、亜目・エイメリイナ（Ｅｉｍｅｒｉｉｎａ））は、齧歯類（属・ラッタス、バンジコタ（Ｂａｎｄｉｃｏｔａ）、アルビカンディス（Ａｒｖｉｃａｎｔｈｉｓ）、ノソキア（Ｎｏｓｏｋｉａ）、ムス（Ｍｕｓ））に対して病原性であり、そして高い十分な用量では、動物の死をもたらす（Ｒｚｅｐｃｚｙｋ　１９７４，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｊ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．４，４４７−４４９；Ｂｒｅｈｍ，Ｆｒａｎｋ　１９８０，Ｚ．Ｐａｒａｓｉｔｅｎｋｄ．６２，１５−３０）。多数のラット種に対して特に病原性であるこの群の寄生虫は、サルコシスチス・シンガポレンシス（Ｓａｒｃｏｃｙｓｔｉｓ　ｓｉｎｇａｐｏｒｅｎｓｉｓ）である（Ｚａｍａｎｎ　ｅｔ　ａｌ．１９７５，Ｚ．Ｐａｒａｓｉｔｅｎｋｄ．４７，１６９−１８５）。
【０００５】
寄生虫の最終宿主は食肉動物もしくは雑食動物であり；Ｓ．シンガポレンシスの場合は、最終宿主はヘビ、例えば網状紋（ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅｄ）ニシキヘビである。最終宿主の腸内では、寄生虫はスポロキストを形成する。これらの静止期体は糞とともに排泄される。中間宿主、Ｓ．シンガポレンシスの場合には例えばラットが、これらのスポロキストにより経口的に感染されると、スポロゾイト（種虫）は、ラットの腸内で孵化し、そして腸壁を透過する。血液循環を介して、これらの期には他の臓器に移動し、そこで分裂によって増殖することができる（シゾゴニー（伝播生殖））。
【０００６】
２つのシゾゴニーが例証された、第１のｐ．ｉ．約６日目および第２のｐ．ｉ．約１４−１６日目。シゾント（娘虫）は、肺において特に多数発生し、ここでは、内皮細胞において増殖する。
【０００７】
重い感染のために、肺においてメロゾイトの大量増殖がある場合は、ラットは、寄生虫の第２シゾゴニーｐ．ｉ．約１６日目の間に病気にかかり、そしてほとんどの場合、数時間内に死亡する。
【０００８】
齧歯類が感染の結果として死亡するように、齧歯類に対してこれらの刺胞子虫類のスポロキストを給餌することが可能である。この原理は、齧歯類を防除するために利用することができる（Ｗｏｏｄ　１９８５，Ｊ．Ｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｔｅｃｔ．Ｔｒｏｐ．２，６７−６９）。ラットは、サルコシスチス・シンガポレンシスを用いて、既に成功裏に防除されている（Ｊａｅｋｅｌ　ｅｔ　ａｌ．１９９６，Ｊ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．８２，２８０−２８７）。
【０００９】
２０，０００以上のスポロキストによるラッタス・ラッタス（Ｒａｔｔｕｓ　ｒａｔｔｕｓ）およびノルベギクスの感染は通常致死的である。ｐ．ｉ．１４日目まで、動物は何の症候も示さない。次いで、動物は急速に弱って来て、ｐ．ｉ．約１６日目には感染の結果として死亡する。
【００１０】
ｐ．ｉ．１４日目後でさえも、致死量以下で感染されたラットは、ほとんど病気であるいかなる症候も示さず、そして活力の喪失なしに感染後生き残る。感染後既に数日で、これらの動物は病原体に対する免疫を確立した。かくして、これらの動物は、サルコシスチス・シンガポレンシス調製物を用いるいかなるさらなる防除に対しても非感受性である。
【００１１】
驚くべきことに、致死量以下で感染された動物が抗凝血剤の単回投与によって殺害できることが、ここに見い出された。
【００１２】
ここでは、正常な感受性動物のＬＤ５０よりかなり低い抗凝血剤用量が、この目的のために十分であることが特に注目される（実施例参照）。ＬＤ５０（急性経口）の半量以下が、死亡率１００％を達成するのに要求される。クマテトラリルの場合、例えば６ｍｇ／ｋｇでもラッタス・ノルベギクスには十分である。
【００１３】
通常１回以上摂取された後にのみ有効である抗凝血剤の単回の低用量でさえ、死亡率１００％を達成するのに十分であることを、ここでは特に強調しなければならない。
【００１４】
驚くべきことに、サルコシスチスのスポロキストによる感染の効果は、致死量以下の抗凝血剤量によって相乗的に増強される。これは、有害な齧歯類のかなり有効な防除のための新規な、予期せざる可能性を提供する。
【００１５】
適当な病原性生物は、特に、綱・胞子虫類からのすべての原虫類である。亜綱・球虫類からの種が特に適当である。亜目・エイメリイナが代表的に非常に特に適当である。例としては、限定するものではないが、属サルコシスチスの種、例えばＳ．シンガポレンシスが挙げられてもよい。
【００１６】
本発明によるシステムにおける刺胞子虫類による感染症のための適当な相乗剤は、特に、すべての抗凝血性の殺齧歯類性活性化合物である。本文脈中、言及は、特に抗凝血物質、例えば４−ヒドロキシクマリン誘導体（１−フェニル−２−アセチル）−３−エチル−４−ヒドロキシクマリン（「ワルファリン」）、３−（α−アセトニル−４−クロロベンジル）−４−ヒドロキシクマリン（「クマクロール」）、（３−（４’−ヒドロキシ−３’−クマリニル）−３−フェニル−１−（４’−ブロモ−４’−ビフェニル）−プロパン−１−オール（「ブロマジオロン」）、３−（３’−パラジフェニリル−１’，２’，３’，４’−テトラヒドロ−１’−ナフチル）−４−ヒドロキシクマリン（「ジフェナクム」）、ブロジファクム、フロクマフェンおよび３−（１’，２’，３’，４’−テトラヒドロ−１’−ナフチル）−４−ヒドロキシクマリン（「クマテトラリル」）、インダンジオン誘導体、例えば１，１−ジフェニル−２−アセチル−インダン−１，３−ジオン（「ジファシノン」）および（１’−ｐ−クロロフェニル−１’−フェニル）−２−アセチル−インダン−１，３−ジオン（「クロロジファシノン」）、ならびにヒドロキシ−４−ベンゾチオピラノン、例えばジフェチアロンに対してなされる。
【００１７】
挙げることができる本発明による組成物を製造するために適当なさらなる抗凝血剤は、次の２−アザシクロアルキルメチル置換されるベンズヒドリルケトンおよびカルビノールである：
ドイツ特許出願公開第２　４１７　７８３号に記述される、１−フェニル−３−（２−ピペリジル）−１−（ｐ−トリル）−２−プロパノン、３，３−ジフェニル−１−（２−ピロリジニル）−２−ペンタノン、１，１−ジフェニル−３−［２−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピニル）］−２−プロパノン、１−（４−フルオロフェニル）−１−フェニル−３−（２−ピペリジル）−２−プロパノン、１−（４−メチルチオフェニル）−１−フェニル−３−（５，５−ジメチル−２−ピロリジニル）−２−プロパノン、１−（ｐ−クメニル）−１−フェニル−３−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ピペリジニル）−２−プロパノン、３，３−ジフェニル−１−［２−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピニル）］−２−ブタノン、３−（２，４−ジクロロフェニル）−３−フェニル−１−（２−ピペリジル）−２−ヘプタノン、１，１−ジフェニル−３−（５−メチル−２−ピロリジニル）−２−プロパノン、３，３−ジフェニル−１−（２−ピペリジル）−２−ブタノン、α−（α−メチル−α−フェニルベンジル）−２−ピペリジンエタノール、α−（α−エチル−α−フェニルベンジル）−２−ピロリジンエタノール、（２，５−ジメチル−α−フェニルベンジル）−２−ピペリジンエタノールおよびα−（ジフェニルメチル）−２−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン）エタノールおよびそれらの塩、そしてまた、ドイツ特許出願公開第２　４１８　４８０号に記述される、４’−（フルオロフェニル）−２−（２−ピロリジニル）−アセトフェノン、４’−フェニル−２−（５，５−ジメチル−２−ピロリジニル）−アセトフェノン、４’−［ｐ−（トリフルオロメチル）−フェニル］−２−（２−ピペリジル）−アセトフェノン、４’−（ｐ−ブトキシフェニル）−２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ピペリジル）−アセトフェノン、２’−フェノキシ−２−（２−ピペリジル）−アセトフェノン、４’−（ｐ−フルオロフェノキシ）−２−（５，５−ジメチル−２−ピロリジニル）−アセトフェノン、４’−（ｐ−クロロフェノキシ）−２−（２−ピペリジル）−アセトフェノン、４’−［ｍ−（トリフルオロメチル）−フェノキシ］−２−（２−ピペリジル）−アセトフェノン、４’−（ｐ−ブトキシフェノキシ）−２−（２−ピロリジニル）−アセトフェノン、２−（２−ピペリジル）−４’−（トランス−ｐ−トリルビニレン）−アセトフェノン、２−（２−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピニル）−４’−（トランス−スチリル）−アセトフェノン、４’−（ｍ−メトキシフェニルビニレン）−２−（２−ピロリジニル）−アセトフェノン、２−（２−ピペリジル）−４’−［（ｐ−メチルチオ）−フェニルビニレン］−アセトフェノン、４’−（３−フェノキシプロポキシ）−２−（２−ピペリジル）−アセトフェノン、４’−（４−フェニルブチル）−２−（２−ピペリジル）−アセトフェノン、４’−（α，α−ジメチルベンジル）−２−（ピペリジル）−アセトフェノン、４’−フェニルエチル−２−（３，５−ジエチル−２−ピペリジル）−アセトフェノン、４’−フェニル−２−（２−ピロリジニル）−アセトフェノン、α−［２−（２−フェニル−エトキシ）−フェニル］−２−ピペリジンエタノール、α−（ｐ−フェノキシフェニル）−２−ピロリジンエタノール、α−［４−（４−ブロモフェノキシ）−フェニル］−６−メチル−２−ピペリジンエタノール、α−（ｐ−フェネチル）−フェニル−２−ピロリジンエタノール、α−ｐ−ビスフェニル−２−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン）−エタノール、α−［３−（４−フェノキシブトキシ）−フェニル］−２−ピペリジンエタノールおよびα−（４−ベンジル）−フェニル−２−ピペリジンエタノールおよびそれらの塩。
【００１８】
特に、限定されるものではないが第１世代の活性化合物、クロロファシノン、ワルファリンおよびクマテトラリル、および初期の第２世代の活性化合物、ブロマジオロンおよびジフェナクムが挙げられてもよい。
【００１９】
本発明による組成物は、齧歯類のための食物バイト（ｂａｉｔ）を製造するために、穀物に基づくバイトにおいて、ワックスのペースト、ゲルおよびブロックにおいて、そして穀物および製剤補助剤の押し出し混合物において、慣用的に使用されるすべての処方中に組み入れることができる。さらにまた、水に基づく飲料バイトにおいて病原体を与えることも可能である。本発明によるバイトは、有害な齧歯類を防除するために慣用のバイトのように使用される。それらは、標的種およびバイト部位濃度に応じて、１バイト部位当たり５ｇ〜５００ｇにおいて建物および野外に置かれる。また、それらは、防除されるべき齧歯類の隠れ場所の入り口に置かれてもよい。
【００２０】
バイトにおける病原体の用量は、バイト１ｇ当たり５００〜２００，０００スポロキストであるべきである。好適には、濃度１ｇ当たり２０００〜５０，０００スポロキストが挙げられ、そして１ｇ当たり１０，０００スポロキストが特に好適である。より高い用量もまた可能であるが、通常は必要ではない。１病原体種のみのスポロキストおよび種々の病原体スポロキストの混合物の両方を使用することができる。
【００２１】
抗凝血活性化合物の濃度は、慣用的に使用され、そして／または登録されている濃度の約１０％〜１５０％であるべきであり、例えば次のとおりである：
ワルファリン　　３０−６００ｐｐｍ
クマテトラリル　３０−４００ｐｐｍ
ブロマジオロン　５−６０ｐｐｍ
ジフェナクム　　５−６０ｐｐｍ
ブロジファクム　３−５０ｐｐｍ
フロクマフェン　３−５０ｐｐｍ
ジフェチアロン　３−５０ｐｐｍ。
【００２２】
好適には、慣用的に使用され、そして／または登録されている濃度の１０％〜２５％の範囲において活性化合物を使用することが挙げられる。個々の活性化合物または他に種々の適当な活性化合物の混合物を用いることが、ここでは可能である。
【００２３】
寄生虫および抗凝血性活性化合物もしくは活性化合物混合物は、同時に、または別々のバイトにおいて異なる時間に与えられてもよい。しかしながら、１種のバイト中に両方を混合し、そしてこの組み合わせバイトを用いて有害齧歯類を防除することもまた可能である。１種のバイトにおける組み合わせ物は、特に有用な液剤である。
【００２４】
本発明の目的のために、防除されるべき齧歯類または有害な齧歯類は、目・齧歯類（Ｒｏｄｅｎｔｉａ）の齧歯類である。特に強調されるべきは、属・ラッタス、ムス、バンジコタ、ノソキアおよびミクロタス（Ｍｉｃｒｏｔｕｓ）が挙げられる。非常に特に強調されるべきは、属・ラッタスおよびバンジコタを代表するもの、例えばＲ．ラッタス、Ｒ．ノルベギクス、Ｂ．ベンガレンシス（ｂｅｎｇａｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．インジカ（ｉｎｄｉｃａ）が挙げられる。
【００２５】
本発明によるシステムを使用することによって、使用される抗凝血剤および病原生物体の量を限定することができる。低い濃度の抗凝血剤がバイトにおいて必要とされるだけなので、生物における抗凝血剤の濃度が減少させられる。
【００２６】
本発明によるシステムを使用することによって、最初にわずか致死量以下で感染された有害な齧歯類でさえ、本防除手段において殺害されることが、特に保証される。これらの動物は、最初の感染後に免疫になるであろうから、それらの感染を繰り返すことはもはや不可能であろう。
【００２７】
本発明によるシステムが耐性管理のための有用な手段を提供することは強調されるべきである。種々の作用機構の組み合わせに対する耐性の出現の確率は、個々の作用原理に対する耐性の選択の確率よりもかなり低い。
【００２８】
本発明によるシステムの使用は、本防除手段により生き残るラットの割合が、ただ１つの作用機構が使用される場合よりも低いことを保証する。特に、サルコシスチスを用いる防除に関して、サルコシスチスに対して免疫になった動物のほとんどが本防除手段後に生き残らないことは強調されるべきである。
【００２９】
本発明は、２つの作用原理の相乗効果に基づいている。この組み合わせは、より低い量の活性化合物を使用しながら、したがって環境への衝撃を低減しながら、有害な生物のより有効な防除を達成するという目的をもつ「統合された有害生物管理法」の構成要素である。
【００３０】
実験例は、２つの作用原理の相乗効果を具体的に説明することを意図している。
【００３１】
実施例：
野生の成ブラウンラット（ラッタス・ノルベギクス）を使用する実験
成ラットの３群が、同じ用量の、１）サルコシスチス・シンガポレンシスのスポロキスト、２）抗凝血剤クマテトラリル、および３）スポロキストおよびクマテトラリルの組み合わせ物により処理された。死亡率が測定された。
【００３２】
実験的には、致死効果のための最小スポロキスト用量は１動物当たり２０，０００スポロキストである。非耐性ラットについてのクマテトラリルのＬＤ５０は１６．５ｍｇ／ｋｇである（Ｒａｃｕｍｉｎ，Ｔｅｃｈｎｉｓｃｈｅ　Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　Ｂａｙｅｒ　ＡＧ）。
【００３３】
ラットは、実験室において標準条件下で飼育された。実験および２週の準備の間、それらはＭａｋｒｏｌｏｎ製ケージにおいて個々に維持された。スポロキスト懸濁液およびクマテトラリルは摂食（ｇａｖａｇｅ）によって投与され、そして投与中、動物はジエチルエーテルを用いて軽く麻酔された。
【００３４】
群１（Ｓ）：　１０，０００スポロキスト、２０，０００スポロキスト／ｍｌを含有するポリエチレングリコール３００中の懸濁液０．５ｍｌ中、
群２（Ｃ）：　クマテトラリル６ｍｇ／ｋｇ体重、ポリエチレングリコール３００中活性化合物１％濃度溶液０．０６ｍｌによる、
群３（Ｓ＋Ｃ）：　群１および２と同様に投与された１０，０００スポロキスト＋クマテトラリル６ｍｇ／ｋｇ。
【００３５】
死亡率
ｎ致死／ｎ　　　　％
群（Ｓ）　　　　　０／６　　　　　　０
群（Ｃ）　　　　　１／６　　　　　１７＊
群（Ｓ＋Ｃ）      ６／６        １００
＊ 出血は見いだされなかった
【国際公開パンフレット】
2004504265.tif 000002
2004504265.tif 000003
2004504265.tif 000004
2004504265.tif 000005
2004504265.tif 000006
2004504265.tif 000007
2004504265.tif 000008
2004504265.tif 000009
2004504265.tif 000010
2004504265.tif 000011
2004504265.tif 000012
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004504265.tif 000013
【国際調査報告】
2004504265.tif 000014
2004504265.tif 000015
2004504265.tif 000016
2004504265.tif 000017
2004504265.tif 000018
2004504265.tif 000019