(57)【要約】本発明は、ケモカイン、インターロイキン−８（ＩＬ−８）により介在される疾患の治療に有用な、式（Ｉ）の新規な化合物およびその組成物に関する。
2004504270.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2004504270.tif 000006
［式中：
Ｒｂは、独立して、水素、ＮＲ６Ｒ７、ＯＨ、ＯＲａ、Ｃ１−５アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールＣ２−４アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルＣ１−５アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリールＣ２−４アルケニル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキルおよびヘテロサイクリックＣ２−４アルケニル基からなる群から選択され、すべての基は、ハロゲン、ニトロ、ハロ置換されているＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキル、アミノ、モノおよびジ−Ｃ１−４アルキル置換されているアミン、ＯＲａ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、ヒドロキシ、ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｓ（Ｏ）ｍ’Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、Ｓ（Ｏ）２ＮＲ６Ｒ７およびＮＨＳ（Ｏ）２Ｒａからなる群から選択される置換基により、独立して、１ないし３回置換されていてもよく；または２つのＲｂ置換基が結合して、不飽和または飽和している置換されていてもよい３ないし１０員環を形成し、それは炭素に加えて、ＮＲａ、Ｏ、Ｓ、ＳＯおよびＳＯ２基からなる群から、独立して、選択される１ないし３つの置換基を含有していてもよく；
Ｒａはアルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、へテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリック、ＣＯＯＲａおよびヘテロサイクリックＣ１−４アルキル基からなる群から選択され、すべての基は置換されていてもよく；
ｍは１ないし３の整数であって；
ｍ’は０、または１または２の整数であって；
ｎは１ないし３の整数であって；
ｑは０、または１ないし１０の整数であって；
ｔは０、または１ないし２の整数であって；
ｓは１ないし３の整数であって；
Ｒ１は、独立して、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、Ｃ１−１０アルキル、ハロ置換されているＣ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ヒドロキシ置換されているＣ１−１０アルコキシ、アジド、Ｓ（Ｏ）ｔＲ４、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲ４、ヒドロキシ、ハロ置換されているＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールＣ２−１０アルケニル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ４）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ５）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１３および（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択されるか；または、２つのＲ１基は一緒になってＯ−（ＣＨ２）ＳＯ、または５ないし６員の飽和不飽和環を形成し、ここで、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロサイクリック基は置換されていてもよく；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換されていてもよいＣ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックおよびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択されるか、またはＲ４およびＲ５はそれらが結合している窒素と一緒になって、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択される付加的なヘテロ原子を含んでいてもよい５ないし７員環を形成し；
Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、ヘテロアリール、アリール、アルキルアリールおよびアルキルＣ１−４へテロアリールからなる群から選択されるか、またはＲ６およびＲ７はそれらが結合している窒素と一緒になって、酸素、窒素および硫黄からなる群から選択される付加的なヘテロ原子を含有していてもよく、置換されていてもよい５ないし７員環を形成し；
Ｙは水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、ハロ置換されているＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ハロ置換されているＣ１−１０アルコキシ、アジド、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲａ、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＲａ、ヒドロキシ、ヒドロキシ置換されているＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、アリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクイックＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１３、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（ＮＲ４）ＮＲ４Ｒ５および（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ５）Ｒ１１からなる群から選択されるか、または２つのＹ基は一緒になって、Ｏ−（ＣＨ２）Ｓ−Ｏ、または５ないし６員の飽和または不飽和環を形成し、ここで、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックアルキル基は置換されていてもよく；
Ｒ８は水素またはＣ１−４アルキルであって；
Ｒ９は水素またはＣ１−４アルキルであって；
Ｒ１０はＣ１−１０アルキルＣ（Ｏ）２Ｒ８であって；
Ｒ１１は水素、置換されていてもよいＣ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロサイクリックおよび置換されていてもよいヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択され；および
Ｒ１３はＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックおよびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択される］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１が電子求引基により４位で置換されている請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がハロゲン、シアノまたはニトロである請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がハロゲンである請求項３記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が、独立して、フッ素、塩素または臭素である請求項４記載の化合物。
【請求項６】
Ｙが単環式環の２’−位または３’−位で一置換されているか、または２’−または３’−位で二置換されている請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｙがハロゲンである請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Ｙが、独立して、フッ素、塩素または臭素である請求項４記載の化合物。
【請求項９】
Ｒｂが水素、Ｃ１−４アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＨまたはＣ（Ｏ）ＯＲａで置換されているＣ１−４アルキルである請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙがハロゲンであって、ｎが１または２であって、Ｒ１がハロゲンであって、ｍが１または２であって、Ｒｂは、独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＨまたはＣＯ（Ｏ）Ｒａで置換されているＣ１−４アルキルである請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｒ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｒ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−イソオキサゾリジニルアミノスルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−イソオキサゾリジニルアミノスルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシカルボニル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；および
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（チオモルホリノ）スルホニルフェニル］チオ尿素
からなる群より選択される請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項１２】
請求項１ないし１１いずれか一項記載の化合物および医薬上許容される担体または希釈体からなる医薬組成物。
【請求項１３】
哺乳動物において、ケモカインがＩＬ−８ａまたはｂ受容体に結合するところのケモカイン介在疾患を治療する方法であって、前記した哺乳動物に、有効量の請求項１ないし１１いずれか一項記載の化合物を投与することを特徴とする方法。
【請求項１４】
哺乳動物が、乾癬、アトピー性皮膚炎、変形性関節炎、リウマチ様関節炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患、成人型呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、卒中、敗血症性ショック、多発性硬化症、内毒素性ショック、グラム陰性敗血症、毒性ショック症候群、心臓および腎性再潅流障害、糸球体腎炎、血栓症、移植片対宿主反応、アルツハイマー疾患、同種移植片拒絶反応、マラリア、再狭窄、血管新生、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、歯肉炎および望ましくない造血幹細胞放出、呼吸器ウィルス、ヘルペスウィルスおよび肝炎ウィルスに起因する疾患、髄膜炎、嚢胞性線維症、早産、咳、掻痒、多器官機能不全、外傷、挫傷、捻挫、打撲傷、乾癬性関節炎、ヘルペス、脳炎、ＣＮＳ血管炎、外傷性脳障害、ＣＮＳ腫瘍、クモ膜下出血、術後損傷、間質性肺炎、過敏症、結晶誘導関節炎、急性および慢性膵臓炎、急性アルコール性肝炎、壊死性腸炎、慢性副鼻腔炎、ブドウ膜炎、多発性筋炎、血管炎、挫創、胃および十二指腸潰瘍、セリアック病、食道炎、舌炎、気流閉塞症、気道過敏症、閉塞性細気管支炎器質化肺炎、気管支拡張炎、気管支炎、気管支閉塞、慢性気管支炎、肺性心、呼吸困難、気腫、高炭酸血症、過膨張、低酸素血症、低酸素低酸素により誘導される炎症、低酸素症、手術による肺容量減少、肺線維症、肺高血圧症、右心室肥大、サルコイドーシス、小気道疾患、換気血流不適合症、喘鳴、風邪および狼瘡からなる群から選択されるケモカイン介在疾患に罹患しているところの請求項１３記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、新規なスルホンアミド置換のジフェニルチオ尿素化合物、医薬組成物、その製造方法、およびＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２およびＥＮＡ−７８が介在する疾患の治療におけるその使用に関する。
【０００２】
（発明の背景）
インターロイキン−８（ＩＬ−８）には、例えば、好中球誘引因子／活性化タンパク質−１（ＮＡＰ−１）、単球由来の好中球化学走化性因子（ＭＤＮＣＦ）、好中球活性化因子（ＮＡＦ）およびＴ細胞リンパ球化学走化性因子といった多くの異なる名称が与えられている。インターロイキン−８は好中球、好塩基球およびＴ細胞のサブセットに対する化学誘引因子である。それは、ＴＮＦ、ＩＬ−１α、ＩＬ−１βまたはＬＰＳに曝露されたマクロファージ、線維芽細胞、内皮および上皮細胞を含む多数の有核細胞により、およびＬＰＳまたはＦＭＬＰといった化学走化性因子に曝された場合、好中球自身により産生される（Ｍ． Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉら、Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ８４， １０４５ （１９８９）； Ｊ． Ｓｃｈｒｏｄｅｒら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３９， ３４７４ （１９８７）およびＪ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４４， ２２２３ （１９９０） ； Ｓｔｒｉｅｔｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４３， １４６７ （１９８９）およびＪ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６４， １０６２１ （１９８９）； Ｃａｓｓａｔｅｌｌａら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４８， ３２１６ （１９９２））。
【０００３】
また、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２はケモカインファミリーに属している。また、ＩＬ−８と同様に、これらのケモカインも異なる名称により呼ばれている。例えば、ＧＲＯα、β、γはそれぞれＭＧＳＡα、βおよびγ（黒色腫増殖促進活性）と言われている（Ｒｉｃｈｍｏｎｄ ら、Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ １２９， ３７５ （１９８６） およびＣｈａｎｇら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ １４８， ４５１ （１９９２）を参照）。ＣＸＣモチーフの直前にＥＬＲモチーフを有するα−ファミリーのケモカインのすべてはＩＬ−８Ｂ受容体（ＣＸＣＲ２）に結合する。
【０００４】
ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２およびＥＮＡ−７８はインビトロで多数の機能を刺激する。それらは、すべて、好中球に対する化学誘引特性を有することが明らかにされているが、ＩＬ−８およびＧＲＯαはＴ−リンパ球および好塩基性化学走化活性を示している。加えて、ＩＬ−８は正常およびアトピー性個体由来の好中球からのヒスタミンの放出を誘発することができる。ＧＲＯ−αおよびＩＬ−８は、加えて、好中球からリソソーム酵素放出および呼吸バーストを誘発することができる。また、ＩＬ−８は新たなタンパク質を合成することなく、好中球上のＭａｃ−１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）の表面発現を増加させることも示されている。これは血管内皮細胞への好中球の付着を増加させる一因となる。多くの周知の疾患は大量の好中球浸潤により特徴付けられる。ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２は好中球の蓄積および活性化を促進するため、これらのケモカインは、乾癬およびリウマチ様関節炎を含む幅広い急性および慢性炎症性疾患に関与している（Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉら、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ． ３０７， ９７ （１９９２）； Ｍｉｌｌｅｒら、Ｃｒｉｔ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １２， １７ （１９９２）； Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍら、Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ９， ６１７ （１９９１）； Ｓｅｉｔｚら、Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． ８７， ４６３ （１９９１）； Ｍｉｌｌｅｒら、Ａｍ． Ｒｅｖ． Ｒｅｓｐｉｒ． Ｄｉｓ． １４６， ４２７ （１９９２）； Ｄｏｎｎｅｌｙら、Ｌａｎｃｅｔ ３４１， ６４３ （１９９３））。加えて、ＥＬＲケモカイン（ＣＸＣモチーフの直前にアミノ酸ＥＬＲモチーフを含有するもの）は止血に関係する（Ｓｔｒｉｅｔｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５８， １７９８ （１９９２））。
【０００５】
インビトロで、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２は、７回膜貫通型のＧタンパク質結合ファミリーの受容体に結合し、活性化させることにより、詳しくは、ＩＬ−８受容体、さらに特に、ＩＬ−８β受容体（ＣＸＣＲ２）に結合することにより好中球の形態変化、走化性、顆粒球放出および呼吸バーストを誘発する（Ｔｈｏｍａｓら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６６， １４８３９ （１９９１）；およびＨｏｌｍｅｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５３， １２７８ （１９９１））。この受容体ファミリーに対する非ペプチド小分子アンタゴニストの開発が進められている。参考のために、Ｒ． Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒ著のＰｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， Ｖｏｌ． ４０， ｐｐ． ３３−９８， Ｂｉｒｋｈａｕｓｅｒ Ｖｅｒｌａｇ， Ｂａｓｅｌ １９９３を参照。それゆえ、該ＩＬ−８受容体は新規な抗炎症剤を開発するための有力な標的である。
【０００６】
２つの高い親和性のヒトＩＬ−８受容体（７７％相同性）が特徴付けられており、高い親和性でＩＬ−８のみと結合するＩＬ−８Ｒαと、ＩＬ−８と同様にＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγおよびＮＡＰ−２と高い親和性を有するＩＬ−８Ｒβとである（Ｈｏｌｍｅｓら、ｓｕｐｒａ；Ｍｕｒｐｈｙら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５３， １２８０ （１９９１）；Ｌｅｅら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６７， １６２８３ （１９９２）；ＬａＲｏｓａら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６７， ２５４０２ （１９９２）；およびＧａｙｌｅら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６８， ７２８３ （１９９３）参照）。
【０００７】
当該分野で、治療用の、ＩＬ−８αまたはβ受容体に結合する能力を有する化合物の必要性が残っている。それゆえ、ＩＬ−８産生増加に付随する症状（炎症部位への好中球およびＴ−細胞サブセットの化学走化性を引き起こす）はＩＬ−８受容体結合の阻害剤である化合物により恩恵を受ける。
【０００８】
（発明の開示）
本発明は、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体と結合する物質であるところのケモカイン介在疾患の治療法および有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを特徴とする方法を提供する。詳しくは、ケモカインはＩＬ−８である。
また、本発明はＩＬ−８とその受容体との結合を阻害することを必要とする哺乳動物において、該結合を阻害する方法であって、該哺乳動物に、有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することを特徴とする方法に関する。
また、本発明は、新規な式（Ｉ）の化合物および式（Ｉ）の化合物および医薬担体または希釈体を含む医薬組成物を提供する。
【０００９】
本発明に有用な式（Ｉ）の化合物は
【化２】
2004504270.tif 000003
［式中：
Ｒｂは、独立して、水素、ＮＲ６Ｒ７、ＯＨ、ＯＲａ、Ｃ１−５アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールＣ２−４アルケニル、シクロアルキル、シクロアルキルＣ１−５アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリールＣ２−４アルケニル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキルおよびヘテロサイクリックＣ２−４アルケニル基からなる群から選択され、すべての基は、ハロゲン、ニトロ、ハロ置換されているＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキル、アミノ、モノおよびジ−Ｃ１−４アルキル置換されているアミン、ＯＲａ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、ヒドロキシ、ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｓ（Ｏ）ｔＲａ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、Ｓ（Ｏ）ｔＮＲ６Ｒ７およびＮＨＳ（Ｏ）ｔＲａからなる群から選択される置換基により、独立して、１ないし３回置換されていてもよく；または２つのＲｂ置換基が結合して、不飽和または飽和している置換されていてもよい３ないし１０員環を形成し、それは置換されていてもよいＣ１−９アルキルに加えて、ＮＲａ、Ｃ（Ｏ）、Ｏ、Ｓ、ＳＯおよびＳＯ２基からなる群から、独立して、選択される０ないし３つの置換基を含有していてもよく；
【００１０】
Ｒａはアルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、へテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリック、ＣＯＯＲａおよびヘテロサイクリックＣ１−４アルキル基からなる群から選択され、すべての基は選択されていてもよく；
ｍは１ないし３の整数であって；
ｍ’は０、または１または２の整数であって；
ｎは１ないし３の整数であって；
ｑは０、または１ないし１０の整数であって；
ｔは０、または１ないし２の整数であって；
ｓは１ないし３の整数であって；
Ｒ１は、独立して、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、Ｃ１−１０アルキル、ハロ置換されているＣ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ハロ置換されているＣ１−１０アルコキシ、アジド、Ｓ（Ｏ）ｔＲ４、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲ４、ヒドロキシ、ヒドロキシ置換されているＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールＣ２−１０アルケニル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ４）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ５）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１３および（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択されるか、または、２つのＲ１基は一緒になって、Ｏ−（ＣＨ２）ＳＯ、または５ないし６員の飽和または不飽和環を形成し、ここで、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロサイクリック基は置換されていてもよく；
【００１１】
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換されていてもよいＣ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックおよびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択されるか、またはＲ４およびＲ５はそれらが結合している窒素と一緒になって、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択される付加的なヘテロ原子を含んでいてもよく５ないし７員環を形成し；
Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、ヘテロアリール、アリール、アルキルアリールおよびアルキルＣ１−４へテロアルキルからなる群から選択されるか、またはＲ６およびＲ７はそれらが結合している窒素と一緒になって、酸素、窒素および硫黄からなる群から選択される付加的なヘテロ原子を含有していてもよく、置換されていてもよい５ないし７員環を形成し；
【００１２】
Ｙは水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、ハロ置換されているＣ１−１０アルキル、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、ハロ置換されているＣ１−１０アルコキシ、アジド、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲａ、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＲａ、ヒドロキシ、ヒドロキシ置換されているＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールオキシ、アリールＣ１−４アルキルオキシ、アリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ、ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクイックＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０、Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）ｔＲ１３、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＮＲ４Ｒ５、（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（ＮＲ４）ＮＲ４Ｒ５および（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ５）Ｒ１１からなる群から選択されるか、または２つのＹ基は一緒になって、Ｏ−（ＣＨ２）Ｓ−Ｏ、または５ないし６員の飽和または不飽和環を形成し、ここで、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックアルキル基は置換されていてもよく；
【００１３】
Ｒ８は水素またはＣ１−４アルキルであって；
Ｒ９は水素またはＣ１−４アルキルであって；
Ｒ１０はＣ１−１０アルキルＣ（Ｏ）２Ｒ８であって；
Ｒ１１は水素、置換されていてもよいＣ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロサイクリックおよび置換されていてもよいヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択され；および
Ｒ１３はＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックおよびヘテロサイクリックＣ１−４アルキルからなる群から選択される］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩により示される。
【００１４】
（発明の詳説）
また、式（Ｉ）の化合物は、ＩＬ−８αおよびβ受容体に結合するＩＬ−８または別のケモカインの阻害を必要とするヒト以外の哺乳動物の獣医学的治療に関して用いられる。哺乳動物において、治療的または予防的に処理するためのケモカイン介在疾患は、本明細書の治療方法の項に記載されている病状を包含する。
【００１５】
適当には、Ｒｂは、独立して、水素、ＮＲ６Ｒ７、ＯＨ、ＯＲａ、Ｃ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、アリールＣ２−４アルケニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリールＣ２−４アルケニル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキルであって、すべての基はハロゲン、ニトロ、ハロ置換されているＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキル、アミノ、モノまたはジ−Ｃ１−４アルキル置換されているアミン、シクロアルキル、シクロアルキルＣ１−５アルキル、ＯＲａ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、アリールオキシ、アリールＣ１−４オキシ、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｓ（Ｏ）ｍ’Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、Ｓ（Ｏ）ｔＮＲ６Ｒ７、ＮＨＳ（Ｏ）ｔＲａより１ないし３回、独立して、置換されていてもよい。別法として、２つのＲｂ置換基が結合して、置換されていてもよく、それは炭素に加えて、独立して、置換していてもよい１ないし３つの所望により置換させることができるＮＲ９、Ｏ、Ｓ、ＳＯまたはＳＯ２基を含む３ないし１０員環を形成することができる。
適当には、Ｒａはアルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックまたはヘテロサイクリックＣ１−４アルキル基であって、すべての基は置換されていてもよい。
【００１６】
適当には、Ｒ１は、独立して、水素；ハロゲン；ニトロ；シアノ；ＣＦ３といったハロ置換されているＣ１−１０アルキル；メチル、エチル、イソプロピルまたはｎ−プロピルといったＣ１−１０アルキル；Ｃ２−１０アルケニル；メトキシまたはエトキシといったＣ１−１０アルコキシ；トリフルオロメトキシといったハロ置換されているＣ１−１０アルコキシ；アジド；ｔが０、１または２である（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲ４；ヒドロキシ、メタノールまたはエタノールといったヒドロキシＣ１−４アルキル；フェニルまたはナフチルといったアリール；ベンジルといったアリールＣ１−４アルキル；フェノキシといったアリールオキシ；ベンジルオキシといったアリールＣ１−４アルキルオキシ；ヘテロアリール；ヘテロアリールアルキル；ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ；アリールＣ２−１０アルケニル；ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル；ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５；Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０；Ｓ（Ｏ）３Ｈ；Ｓ（Ｏ）３Ｒ８；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１；Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）Ｒ１１；Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（ＮＲ４）ＮＲ４Ｒ５；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ５）Ｒ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）ｔＲ１３；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＮＲ４Ｒ５から選択される。アリール、ヘテロアリールおよびヘテロサイクリックを含む基はすべて上記のように、置換されていてもよい。
【００１７】
本明細書の用語「アリール、ヘテロアリールおよびヘテロサイクリックを含む基」は環およびアリール、アリールアルキルおよびアリールアルケニル環などのアルキル環、または含まれるとすれば、アルケニル環の両方を言う。用語「基」および「環」は全体を通して互換的に用いられる。
【００１８】
適当には、Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換されていてもよいＣ１−４アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ１−４アルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリック、ヘテロサイクリックＣ１−４アルキルであるか、またはＲ４およびＲ５はそれらが結合している窒素と一緒になって、Ｏ／Ｎ／Ｓから選択される付加的なヘテロ原子を含んでいてもよい５ないし７員環を形成する。
適当には、Ｒ８は、独立して、水素またはＣ１−４アルキルである。
適当には、Ｒ９は水素またはＣ１−４アルキルである。
適当には、ｑは０、または１ないし１０の整数である。
適当には、Ｒ１０はＣ１−１０アルキルＣ（Ｏ）２Ｒ８、例えば、ＣＨ２Ｃ（Ｏ）２ＨまたはＣＨ２Ｃ（Ｏ）２ＣＨ３である。
適当には、Ｒ１１は水素、Ｃ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックまたはへテロサイクリックＣ１−４アルキルである。
適当には、Ｒ１２は水素、Ｃ１−１０アルキル、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいアリールアルキルである。
適当には、Ｒ１３はＣ１−４アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックまたはヘテロサイクリックＣ１−４アルキルであって、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロサイクリックを含む基はすべて置換されていてもよい。
【００１９】
適当には、Ｙは、独立して、水素；ハロゲン；ニトロ；シアノ；ハロ置換されているＣ１−１０アルキル；Ｃ１−１０アルキル；Ｃ２−１０アルケニル；Ｃ１−１０アルコキシ；ハロ置換されているＣ１−１０アルコキシ；アジド；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＲａ；ヒドロキシ；ヒドロキシＣ１−４アルキル；アリール；アリールＣ１−４アルキル；アリールオキシ；アリールＣ１−４アルキルオキシ；ヘテロアリール；ヘテロアリールアルキル；ヘテロアリールＣ１−４アルキルオキシ；ヘテロサイクリック；ヘテロサイクリックＣ１−４アルキル；アリールＣ２−１０アルケニル；ヘテロアリールＣ２−１０アルケニル；ヘテロサイクリックＣ２−１０アルケニル；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｒ５；Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ１０；Ｓ（Ｏ）３Ｒ８；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）Ｒ１１；Ｃ２−１０アルケニルＣ（Ｏ）ＯＲ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（Ｏ）ＯＲ１２；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＯＣ（Ｏ）Ｒ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＣ（ＮＲ４）ＮＲ４Ｒ５；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（ＮＲ５）Ｒ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ１１；（ＣＲ８Ｒ８）ｑＮＨＳ（Ｏ）ｔＲ１３または（ＣＲ８Ｒ８）ｑＳ（Ｏ）ｔＮＲ４Ｒ５から選択されるか、または２つのＹ基は一緒になって、Ｏ−（ＣＨ２）Ｓ−Ｏまたは５ないし６員の飽和または不飽和環を形成していてもよい。アリール、ヘテロアリールおよびヘテロサイクリックを含む基は、前記した通り、すべて置換されていてもよい。
【００２０】
適当には、ｓは１ないし３の整数である。
Ｙがジオキシブリッジを形成する場合、ｓは１が好ましい。Ｙが付加的な不飽和環を形成する場合、ナフチレン環系をもたらす６員環が好ましい。これらの環系は、前記した通り、別のＹ基により１ないし３回置換されていてもよい。
適当には、Ｒａはアルキル、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックまたはヘテロサイクリックＣ１−４アルキルであって、これらの基のすべてが置換されていてもよい。
Ｙはハロゲン、置換されていてもよいアリール、Ｃ１−４アルコキシ、置換されていてもよいアリールオキシまたはアリールアルコキシ、メチレンジオキシ、ＮＲ４Ｒ５、チオＣ１−４アルキル、チオアリール、ハロ置換されているアルコキシ、置換されていてもよいＣ１−４アルキルまたはヒドロキシアルキルが好ましい。Ｙは一置換されているハロゲン、二置換されているハロゲン、一置換されているアルコキシ、二置換されているアルコキシ、メチレンジオキシ、アリールまたはアルキルが好ましく、より好ましいこれらの基は、２’位または２’、３’位で一または二置換されている。
【００２１】
Ｙはいずれの環位置を置換していてもよいが、ｎは１であることが好ましい。Ｒ１およびＹの両方を水素とすることもできるが、少なくとも１つの環は置換されているものが好ましく、どちらの環も置換されているのが好ましい。
本明細書で用いられる、「置換されていてもよい」は、特に明記のない限り、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素といった、ハロゲン；ヒドロキシ；ヒドロキシ置換されているＣ１−１０アルキル；（Ｃ８Ｒ８）ｑＯＲ４；メトキシまたはエトキシといった、Ｃ１−１０アルコキシ；２つの置換基が一緒になって、Ｏ−（ＣＨ２）ｓ−Ｏを形成していてもよく；ｍ’が０、１または２であるＳ（Ｏ）ｍ’Ｃ１−１０アルキル、例えば、メチルチオ、メチルスルフィニルまたはメチルスルホニル；アミノ、ＮＲ４Ｒ５基といった、モノおよびジ−置換されているアミノ；ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ４；Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５；Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５；Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、Ｓ（Ｏ）ｔＮＲ４Ｒ５；ＮＨＳ（Ｏ）ｔＲ２０；メチル、エチル、プロピル、イソプロピルまたはｔ−ブチルといった、Ｃ１−１０アルキル；ＣＦ３といった、ハロ置換されているＣ１−１０アルキル； フェニルといった、置換されていてもよいアリール、ベンジルまたはフェネチルといった、置換されていてもよいアリールアルキル、置換されていてもよいヘテロサイクリック、置換されていてもよいヘテロサイクリックアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールアルキル、ここに、これらのアリール、ヘテロアリールまたはヘテロサイクリック基は１ないし２回ハロゲンにより置換されていてもよく；ヒドロキシ；アルキル置換されているヒドロキシ；Ｃ１−１０アルコキシ；Ｓ（Ｏ）ｍ’Ｃ１−１０アルキル；アミノ、ＮＲ４Ｒ５基といったモノおよびジ−置換されているアルキルアミノ；Ｃ１−１０アルキル、またはＣＦ３といったハロ置換されているＣ１−１０アルキルを意味する。
【００２２】
適当には、Ｒ２０はＣ１−４アルキル、アリール、アリールＣ１−４アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ１−４アルキル、ヘテロサイクリックまたはヘテロサイクリックＣ１−４アルキルである。
適当な医薬上許容される塩は、当業者に周知であって、塩酸、塩化臭素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酢酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸およびマンデル酸といった無機酸および有機酸の塩基性塩を包含する。加えて、式（Ｉ）の化合物の医薬上許容される塩は、医薬上許容される陽イオンで形成されていてもよい。適当な医薬上許容される陽イオンは、当業者に周知であって、アルカリ、アルカリ土類、アンモニウムおよび第四アンモニウム陽イオンを包含する。
【００２３】
本明細書で用いられる以下の用語を次のように説明する：
・「ハロ」−すべてのハロゲン、すなわち、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードである。
・「Ｃ１−１０アルキル」または「アルキル」−鎖長を限定しない限り、１ないし１０つの炭素原子の直鎖および枝分かれ鎖の両方で、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル等を包含する。
・本明細書で用いる「シクロアルキル」なる語は、好ましくは、３ないし８つの炭素からなる環状基を意味し、限定するものではないが、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよび類似物を包含する。
・本明細書で用いる「アルケニル」なる語は、鎖長を限定しない限り、２ないし１０つの炭素原子の直または枝分かれ鎖を意味し、限定するものではないが、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル等を包含する。
・「アリール」−フェニルおよびナフチルである。
・「ヘテロアリール」（それ自体、または「ヘテロアリールオキシ」または「ヘテロアリールアルキル」といったいずれかの組み合わせで）−１つ以上の環がＮ、ＯまたはＳからなる群から選択される１つ以上のヘテロ原子を含む、５ないし１０員の芳香環であって、限定するものではないが、ピロール、ピラゾール、フラン、チオフェン、キノリン、イソキノリン、キナゾリニル、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、テトラゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾールまたはベンズイミダゾールを含む。
・「ヘテロサイクリック」（それ自体、または「ヘテロサイクリックアルキル」といったいずれかの組み合わせで）−１つ以上の環がＮ、ＯまたはＳからなる群から選択される１つ以上のヘテロ原子を含む、飽和しているか、または部分的に不飽和である４ないし１０員の環系であって、限定するものではないが、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロピラン、チオモルホリンまたはイミダゾリジンを包含する。さらには、硫黄を酸化して、スルホンまたはスルホキシドにしてもよい。
・本明細書で用いる「アリールアルキル」または「ヘテロアリールアルキル」または「ヘテロサイクリックアルキル」なる語は、特に明示のない限り、前記したアリール、ヘテロアリールまたはヘテロサイクリック基に結合しているＣ１−１０アルキルを意味する。
・「スルフィニル」−対応する硫化物のＳ（Ｏ）酸化物、「チオ」なる語は硫化物を意味し、「スルホニル」なる語は完全酸化されているＳ（Ｏ）２基を意味する。
・本明細書で用いられている「２つのＲ１基（または２つのＹ基）が一緒になって、５または６員の飽和または不飽和環を形成する」はナフチレンといった芳香環系を形成することを意味するか、またはヘキセンといったＣ６シクロアルケニル、またはシクロペンテンといったＣ５シクロアルケニル基などの６員の部分的に飽和しているか、または不飽和である環を有するフェニル基である。
【００２４】
実例となる式（Ｉ）の化合物は：
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｒ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｒ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−イソオキサゾリジニルアミノスルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−イソオキサゾリジニルアミノスルホニルフェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素；
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシカルボニル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素；および
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（チオモルホリニノ）スルホニルフェニル］チオ尿素；
または医薬上許容される塩を包含する。
【００２５】
（調製法）
式（Ｉ）の化合物を以下のスキームに示す合成法を利用することにより得ることができる。これらのスキームに示される合成法は、適宜に保護されている任意の置換基を利用し、本明細書にそった反応との適合性を得るために、反応する種々の異なるＲ、Ｒ１およびＺ基を有する式（Ｉ）の化合物を生成するために用いることができる。次いで、この場合、続いて脱保護し、一般に開示されている性質の化合物を得る。一度、尿素核が確立され、さらに、当該分野で周知の官能基相互変換のための標準的な方法を適用することにより、これらの式の化合物を調製してもよい。
【００２６】
【化３】
2004504270.tif 000004
【００２７】
スキーム１に詳説されている操作を用いて、市販されている２，６−ジクロロチオフェノールから、所望の４−クロロ−Ｎ−（３−スルホンアミド−２−ヒドロキシフェニル）−Ｎ”−フェニルチオ尿素を合成することができる。アルコール、酢酸または水といったプロトン性溶媒存在下で、ＮＣＳ、ＮＢＳ、塩素または臭素といったハロゲン化剤を用いて、チオールをスルホニルハロゲン化物に酸化することができる。水酸化リチウムまたはカリウムといった水酸化金属を用いることにより、スルホニルハロゲン化物を加水分解し、対応するスルホン酸塩を形成することができる。次いで、硫酸などの強酸の溶媒中の硝酸といったニトロ化条件下で、スルホン酸塩をニトロ化し、ニトロフェニルスルホン酸３−スキーム１を形成することができる。水酸化カリウム、水素化ナトリウムまたは炭酸ナトリウムといった塩基を用いて金属塩を形成し、４−スキーム１を形成することを含む、３つの工程の操作を用いて、スルホン酸３−スキーム１をスルホンアミド５−スキーム１に変換することができる。そのスルホン酸塩は溶媒としてのＰＯＣｌ３と共にＰＣｌ５を用いて塩化スルホニルに変換される。次いで、−７８℃ないし２５℃の範囲の温度で、トリエチルアミン中の所望のアミンを用いて、塩化スルホニルを対応するスルホンアミドに変換し、対応するスルホンアミド５−スキーム１を形成することができる。室温で、ＴＨＦ中の水素化ナトリウムおよび水を用いて、ニトロ基のオルト位にある塩素を選択的に加水分解し、フェノールを形成することができる。水素および炭素上のパラジウムといった当該分野で周知の条件により、該ニトロを還元し、対応するアニリン６−スキーム１を形成することができる。次いで、該アニリンを市販されているチオイソシアナートとカップリングさせ、所望のチオ尿素を形成することができる。
【００２８】
【化４】
2004504270.tif 000005
【００２９】
所望のヒドロキシアニリン６−スキーム１が市販されていないのであれば、スキーム２にしたがって調製することができる。当該分野で周知の標準的な条件、例えば、塩化メチレンといった適当な有機溶媒中の塩化ピバボリルおよびトリエチルアミンを用いて、市販の置換されている３−クロロアニリン１をアミド２に変換することができる。還元反応温度（−２０℃ないし−４０℃）で、ＴＨＦといった適当な有機溶媒中の過剰量の強塩基、例えば、ブチルリチウムを用い、該アミド２をベンゾオキサゾール３に変換し、続いて、亜硫酸ガスで反応をクエンチし、当業者に周知な標準条件、例えば、塩化メチレンといった適当な有機溶媒中の塩化スルフリルを用い、得られたスルフィン酸塩を塩化スルホニル３に変換することができる。当業者に周知な標準的な条件を用い、適当な有機溶媒、例えば、塩化メチレン中のトリエチルアミンといった適当なアミン塩基存在下で、塩化スルホニル３をＨＮ（Ｒｂ）２と反応させることにより、塩化スルホニル３をスルホンアミド４に変換することができる。当該分野で周知の標準的な加水分解条件、例えば、水中の硫酸を用い、８５℃に加熱して、ベンゾオキサゾール４から所望のフェノールアニリン５を得ることができる。
【００３０】
（合成例）
以下の実施例は、単に説明しているだけであって、本発明の範囲を限定するものではない。特に明記しない限り、すべての温度は摂氏で示され、すべての溶媒は最高純度のものであって、すべての反応はアルゴン雰囲気下の無水条件下で行なうものとする。
実施例において、すべての温度は摂氏（℃）である。特に明記しない限り、マススペクトルは、高速原子衝撃を用いてＶＧ　Ｚａｂマススペクトロメーターで行った。１Ｈ−ＮＭＲ（以下、「ＮＭＲ」）スペクトラをブルカーＡＭ２５０またはＡｍ４００スペクトロメーターを用いて、２５０ＭＨｚで記録した。表示した多重度はｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線であって、ｂｒは幅広いシグナルを示す。Ｓａｔ．は飽和溶液を示し、ｅｑは主な反応物に対する試薬のモル当量割合を示す。
【００３１】
実施例１および２
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル）フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）チオ尿素およびＮ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素の製造
【００３２】
２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホン酸
ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）中の２，６−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（３５ｇ、０．１４６ｍｏｌ）の溶液に、水酸化リチウム水和物（８．９６ｇ、０．２１４ｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１６時間攪拌した。該反応混合物を濾過し、懸濁した固体を除去して、次いで、濃縮した。得られた固体を一晩減圧下で乾燥させ、残りのＭｅＯＨを除去した。次いで、該固体をＨ２ＳＯ４（３００ｍＬ）に溶かし、氷浴中で冷却した。Ｈ２ＳＯ４（３５ｍＬ）およびＨＮＯ３（７０％、１０．７ｍＬ）の溶液を、９０分にわたってゆっくり該反応物に加えた。該反応物を一晩で室温にまで加温し、次いで、ゆっくり氷水（１２００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮したところ、二水和物として、２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホン酸（３７．３８ｇ、９６％）を得た。ＥＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２７０（Ｍ−）。
【００３３】
２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド
ＭｅＯＨ（５００ｍＬ）中の２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホン酸二水和物（３７．３８ｇ、０．１３７ｍｏｌ）の溶液に、水酸化カリウム（１１．５４ｇ、０．２０６ｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１４時間攪拌した。該反応混合物を濃縮し、得られた固体を一晩減圧下で乾燥させた。これに、ＰＣｌ５（２９．６０ｇ、０．１４２ｍｏｌ）、続いてＰＯＣｌ３（４００ｍＬ）を加え、混合物を一晩還流した。次いで、該反応液を室温に冷却し、濃縮した。得られた混合液を酢酸エチル中に溶かし、氷浴で冷却した。該反応混合液に、氷の塊をゆっくり加え、残りのＰＣｌ５をクエンチした。泡立ちがおさまると、水を加え、反応混合液を酢酸エチルで抽出した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮したところ、２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（３１．４ｇ、７９％）を得た。１Ｈ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８８（ｄ、１Ｈ）、７．７５（ｄ、１Ｈ）。
【００３４】
以下は、スルホンアミド形成のための一般的な操作である。
Ｎ，Ｎ−ジメチル−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
−７８℃で、１５ｍＬのジクロロメタン中の２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（２００ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）の溶液に、１０ｍＬのジクロロメタン中のジメチルアミン（ＭｅＯＨ中２．０Ｍ、０．３４５ｍＬ、０．６９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１４ｍＬ、１．０４ｍｍｏｌ）を滴下した。該混合液を室温に加温し、１６時間攪拌した。該混合液を１Ｎ塩酸水溶液でｐＨ＞１に酸性化し、次いで酢酸エチルで抽出した。次いで、合わせた有機層を濃縮したところ、粗物質を得た。酢酸エチル／ヘキサン（３０／７０、ｖ／ｖ）で溶出するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより、所望の物質を得た（２４０ｍｇ、７０％）。ＥＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２９８（Ｍ−）。
【００３５】
以下は、ジクロロスルホンアミドを加水分解し、フェノールにするための一般的な操作である。
Ｎ，Ｎ−ジメチル−６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
Ｎ，Ｎ−ジメチル−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（２．６４ｇ、８．８３ｍｍｏｌ）、６０％水素化ナトリウム（１．０６ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）および水（１９１ｍｇ、１０．６ｍｍｏｌ）の混合液を、アルゴン雰囲気を保ちながら、３５℃で１６時間加温した。１Ｈ　ＮＭＲにより反応が略完了したことがわかれば、該溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ塩酸水溶液で洗浄した。該溶媒を濃縮したところ、粗物質を得た。酢酸エチル／ヘキサン／酢酸（４０／５８／２、ｖ／ｖ／ｖ）で溶出するシリカ上のカラムクロマトグラフィーにより、所望の産生物を得た（２．３ｇ、９３％）。ＥＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２７９．５（Ｍ−）。
【００３６】
以下は、ニトロ化合物を水素添加し、アニリンにするための一般的な操作である。
Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド
酢酸エチル中のＮ，Ｎ−ジメチル−６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（２．３ｇ、８．２ｍｏｌ）の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（２．０ｇ）を加えた。該混合液をアルゴンでフラッシュし、次いで、水素雰囲気下、バルーン圧で、室温で３時間攪拌した。該混合液をセライトを通して濾過し、該セライトをメタノールで洗浄した。該溶媒を蒸発させて、所望の産生物を得た（２．０ｇ、９７％）。ＥＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２４９．５（Ｍ−）。
【００３７】
以下は、チオ尿素形成のための一般的な操作である。
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル］フェニル］−Ｎ’−（２，３−ジクロロフェニル）チオ尿素
１．０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中のＮ，Ｎ−ジメチル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド（３５６ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）および２，３−ジクロロフェニルチオイソシアナート（３１８ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で３時間攪拌した。酢酸エチル／ヘキサン（３０／７０、ｖ／ｖ）で溶出するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製したところ、所望の産生物を得た（４４０ｍｇ、６８％）。ＥＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４５５．５（Ｍ＋）。
【００３８】
Ｎ−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｎ”，Ｎ”−ジメチルアミノスルホニル］フェニル］−Ｎ’−（２−ブロモフェニル）チオ尿素
０．５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中のＮ，Ｎ−ジメチル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド（５０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）および２−ブロモフェニルチオイソシアナート（４３ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）の溶液を室温で３時間攪拌した。酢酸エチル／ヘキサン（３０／７０、ｖ／ｖ）で溶出するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製したところ、所望の産生物を得た（６６ｍｇ、７４％）。ＥＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４５５．５（Ｍ＋）。
【００３９】
Ｎ−（３，４−ジクロロフェニル）２，２−ジメチル−プロピオンアミドの製造
ＴＢＭＥ（１Ｌ）中の３，４−ジクロロアニリン（１５０ｇ）を１０ないし１５℃に冷却した。３０％ＮａＯＨ水溶液（１４１ｇ、１．１４当量）を加え、オーバーヘッド式機械攪拌器で該溶液を激しく攪拌した。内部温度を３０℃以下に維持する速度で、トリメチルアセチルクロライド（“ＰｉｖＣｌ”、１２６ｍＬ）を加えた。この添加の間に、該混合溶液は白色固体産生物で濁るようになる。添加が完了すると（１０ないし１５分）、該混合液を３０ないし３５℃で一時間加熱し、次いで、冷却した。該反応混合液を−５℃で（一晩）保ち、次いで、濾過し、まず、９０：１０の水／ＭｅＯＨ（６００ｍＬ）で洗浄し、次いで、水（９００ｍＬ）で洗浄した。減圧下で乾燥させたところ、オフホワイトの結晶として、１９５ｇ（８６％）産生物を得た。ＬＣＭＳ　ｍ／ｚ　２４６（Ｍ−Ｈ）＋。
【００４０】
２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−クロロ−ベンゾオキサゾール−７−スルホニルクロライドの製造
乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のＮ−（３，４−ジクロロ−フェニル）−２，２−ジメチル−プロピオンアミド（１０ｇ、４１ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴン下で−７２℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ、６４ｍＬ、１０２ｍｍｏｌ）を滴下した。該溶液を約−５０℃で４５分にわたって加温し、次いで、−２５ないし−１０℃の範囲で２時間維持した。次いで、該溶液を−７８℃に再び冷却し、亜硫酸ガスを該溶液に３０分間通気した。次いで、該溶液を室温で２時間加温し、加温している間に過剰の亜硫酸ガスを脱気できるようにガス出口をつけて、アルゴン流を該溶液に通気した。ＴＨＦ溶液を氷浴で冷却し、塩化スルフリル（３．５８ｍＬ、４４．８ｍｍｏｌ）を滴下した。数分後、該溶液を室温で一晩加温した。該混合液を濃縮し、酢酸エチルで希釈して、水で洗浄した。脱色炭を加え、該混合液を濾過した。得られた溶液を乾燥させ（硫酸ナトリウム）、濾過して、濃縮したところ、標記化合物（１２．４ｇ、９８％）を得た。１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．９２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．５７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、１．５７（Ｓ、９Ｈ）。
【００４１】
７−スルホンアミドベンゾオキサゾールの合成のための一般的な操作
２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−クロロ−７−（４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル）−ベンゾオキサゾール
ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−クロロ−ベンゾオキサゾール−７−スルホニルクロライド（２．６９ｇ、８．７３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．４４ｍＬ、１７．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、１−メチルピペラジン（０．９８ｍＬ、８．８３ｍｍｏｌ）を加えた。該反応液を室温に加温し、一晩攪拌した。該溶液を濃縮し、次いで、水で希釈して、酢酸エチルで抽出した（３回）。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、濃縮した。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（８０％酢酸エチル／２０％エタノール）により、標記化合物（２．４５ｇ、７６％）を得た。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３７２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００４２】
ベンゾオキサゾールを加水分解して、所望のアニリンにするための一般的な操作
６−アミノ−３−クロロ−２−（４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル）−フェノール
１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）中の２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−クロロ−７−（４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル）−ベンゾオキサゾール（２．４４ｇ、６．５６ｍｍｏｌ）の溶液を、水（４ｍＬ）および濃縮Ｈ２ＳＯ４（４ｍＬ）で処理した。該混合液を８５℃で１４時間加熱した。該反応液を室温に冷却し、次いで、２５％ＮａＯＨ水溶液でｐＨ＝１４に塩基性化し、洗浄した。該混合液を酢酸エチルで抽出（３回）し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮したところ、標記化合物（１．３５ｇ、６８％）を得た。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３０６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００４３】
実施例３および４
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素およびＮ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素
Ｓ−（＋）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示すスルホンアミド形成のための一般的な操作に従って、６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（１．０ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−（＋）−２（メトキシメチル）ピロリジン（０．４７６ｍＬ、４．１３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．７２ｍＬ、５．１６ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物を形成した（１．１５ｇ、９１％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３６８（Ｍ−）。
【００４４】
Ｓ−（＋）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−６−ヒドロキシ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示す一般的な加水分解操作に従って、Ｓ−（＋）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（１．１５ｇ、３．１２ｍｍｏｌ）、６０％水素化ナトリウム（３７４ｍｇ、９．３６ｍｍｏｌ）および水（７３ｍｇ、４．０２ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物（１．０ｇ、９１％）を形成した。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３４９．１（Ｍ）。
【００４５】
Ｓ−（＋）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド
実施例１に示す一般的な水素添加操作に従って、Ｓ−（＋）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（１．０ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）を水素およびＰｄ／Ｃ（６００ｍｇ）で還元し、所望の産生物（０．９ｇ、９８％）を形成した。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３１９．１（Ｍ−）。
【００４６】
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素
実施例１に示すチオ尿素を形成するための一般的な操作に従って、Ｓ−（＋）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド（２６０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）および２−ブロモフェニルチオイソシアナート（１８２ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、所望のチオ尿素を形成した（２３１ｍｇ、５３％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　５３５．１（Ｍ＋）。
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｓ−（＋）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素。
実施例１に示すチオ尿素を形成するための一般的な操作に従って、Ｓ−（＋）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド（４０７ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）および２，３−ジクロロフェニルチオイソシアナート（２８５ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、所望のチオ尿素（３０７ｍｇ、５７％）を形成した。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　５２５．１（Ｍ＋）。
【００４７】
実施例５および６
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｒ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素およびＮ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［Ｒ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素
Ｒ−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示すスルホンアミドを形成するための一般的な操作に従って、６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（２．０ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−２−（メトキシメチル）ピロリジン（０．７８３ｍＬ、８．２７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．４４ｍＬ、１０．３４ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物を形成した（１．６９ｇ、６６％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３６８（Ｍ−）。
【００４８】
Ｒ−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示す一般的な加水分解操作に従って、（Ｒ）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（２．１６ｇ、５．８５ｍｍｏｌ）、６０％水素化ナトリウム（７０２ｍｇ、１７．５５ｍｍｏｌ）および水（１３７ｍｇ、７．６ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物を形成した（２．０ｇ、９７％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３４９．１（Ｍ−）。
【００４９】
（Ｒ）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド。
実施例１に示す一般的な水素添加操作に従って、（Ｒ）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−６−クロロ−２−ヒドロキシ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（２．０ｇ、４．４４ｍｍｏｌ）を水素およびＰｄ／Ｃ（１．５ｇ）で還元し、所望の産生物を形成した（１．７５ｇ、９６％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３１９．１（Ｍ＋）。
【００５０】
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（Ｒ）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素
実施例１に示すチオ尿素を形成するための操作に従って、（Ｒ）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド（３９０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）および２−ブロモフェニルチオイソシアナート（２８６ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、所望のチオ尿素を形成した（４６２ｍｇ、７１％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　５３５．１（Ｍ＋）。
【００５１】
Ｎ−（２，３−ジクロロフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−［（Ｒ）−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル］スルホニルフェニル］チオ尿素
実施例１に示すチオ尿素を形成するための一般的な操作に従って、（Ｒ）−Ｎ−（２−メトキシメチル）ピロリジン−１−イル−３−アミノ−６−クロロ−２−ヒドロキシベンゼンスルホンアミド（３６０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）および２，３−ジクロロフェニルチオイソシアナート（２５１ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、所望のチオ尿素を形成した（４１０ｍｇ、７０％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　５２５．１（Ｍ＋）。
【００５２】
実施例７
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−イソオキサゾリジニルアミノスルホニルフェニル］チオ尿素
Ｎ−（エトキシカルボニル）イソオキサゾリジン
エタノール（５０ｍＬ）中のＫＯＨ（６．４ｇ、０．１１ｍｏｌ）およびヒドロキシウレタン（１２ｇ、０．１１ｍｏｌ）の溶液に、１，３−ジブロモプロパン（５．８ｍＬ、０．０５７ｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を還流温度で１時間加熱した。該混合液を室温に冷却した後、さらなるＫＯＨ（３．２ｇ、０．０５５ｍｏｌ）およびジブロモプロパン（２．９ｍＬ，０．０２８ｍｏｌ）を加えた。次いで、該混合液を１時間還流し、室温に冷却して、溶媒を蒸発させた。該残渣を３倍の熱エーテル中に懸濁させ、濾過した。合わせた濾液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、蒸発させた。粗産生物の一部の３ｇをフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン、勾配溶出）により精製して、１．１８ｇのＮ−（エトキシカルボニル）イソオキサゾリジンを得た。１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１５（ｔ、３Ｈ）、２．１５（ｑ、２Ｈ）、３．５５（ｔ、２Ｈ）、３．８（ｔ、２Ｈ）、４．１（ｑ、２Ｈ）。
【００５３】
塩酸イソオキサゾリジン
Ｎ−（エトキシカルボニル）イソオキサゾリジン（１．１８ｇ、９．１ｍｍｏｌ）を水性ＨＣｌ（６Ｎ、７ｍＬ）中に溶かし、還流温度で２時間加熱した。室温に冷却した後、この溶液をエーテル（３×）で洗浄し、次いで、蒸発させて、粗塩酸イソオキサゾリジンを産生し、エタノール／エーテルから再結晶したところ、０．７９ｇ（８０％）の塩酸イソオキサゾリジンを得た。１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３；ＣＨ３ＯＤ）、δ２．５（ｑ、２Ｈ）、３．５５（ｔ、２Ｈ）、４．２（ｔ、２Ｈ）。
【００５４】
（Ｎ−イソオキサゾリジニル）−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示すスルホンアミドを形成する一般的な操作に従って、２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（１．５ｇ、５．２ｍｍｏｌ）、塩酸イソオキサゾリジン（０．５６ｇ、５．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．２ｍＬ、１５．５ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物（１．２ｇ、７１％）を得た。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３２７（Ｍ＋）。
【００５５】
（Ｎ−イソオキサゾリジニル）−２−ヒドロキシ−６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示す一般的な加水分解操作に従って、（Ｎ−イソオキサゾリジニル）−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（１．０８ｇ、３．３ｍｍｏｌ）、８０％水素化ナトリウム（０．３ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）および水（７２ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物を形成した（０．７９ｇ、７７％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３０９（Ｍ＋）。
【００５６】
（Ｎ−イソオキサゾリジニル）−２−ヒドロキシ−３−アミノ−６−ジクロロ−ベンゼンスルホンアミド
実施例１に示す一般的な水素添加操作に従って、（Ｎ−イソオキサゾリジニル）−２−ヒドロキシ−６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（０．８４ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を水素およびＰｄ／Ｃ（８４０ｍｇ）で還元し、所望の産生物を形成した（０．７５ｇ　粗）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　２７９（Ｍ＋）。
【００５７】
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−イソオキサゾリジニルアミノスルホニルフェニル］チオ尿素
実施例１に示すチオ尿素を形成するための一般的な操作に従って、（Ｎ−イソオキサゾリジニル）−２−ヒドロキシ−３−アミノ−６−ジクロロ−ベンゼンスルホンアミド（６２４ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）および２−ブロモフェニルチオイソシアナート（５２８ｍｇ、２．４６ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、所望のチオ尿素を形成した（６２０ｍｇ、５６％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　４９３（Ｍ＋）。
【００５８】
実施例８
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素
Ｎ−（エトキシカルボニル）テトラヒドロイソオキサジン
エタノール（２５ｍＬ）中のＫＯＨ（３．３４ｇ、５９．６ｍｍｏｌ）およびヒドロキシウレタン（６．１ｇ、５８．５ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４−ジブロモブタン（３．５ｍＬ、２９．３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を還流温度で１時間加熱した。混合液を室温に冷却した後、さらなるＫＯＨ（１．６５ｇ、２９．４ｍｍｏｌ）およびジブロモプロパン（１．８ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、該混合液を１時間還流し、室温に冷却して、溶媒を蒸発させた。該残渣を３倍の熱エーテル中に懸濁させて、濾過した。合わせた濾液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、蒸発させた。粗産生物の一部の４ｇをフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン、勾配溶出）により精製し、１．８５ｇのＮ−（エトキシカルボニル）テトラヒドロイソオキサジンを得た。１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．０５（ｑ、３Ｈ）、１．４５（ｄｄ、２Ｈ）、１．５５（ｄｄ、２Ｈ）、３．４（ｔ、２Ｈ）、３．７（ｔ、２Ｈ）、３．９５（ｑ、２Ｈ）。
【００５９】
塩酸テトラヒドロイソオキサジン
Ｎ−（エトキシカルボニル）テトラヒドロイソキサジン（１．８５ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）を水性ＨＣｌ（６Ｎ、７．８ｍＬ）に溶かし、還流温度で７時間加熱した。室温に冷却した後、この溶液をエーテルで洗浄し（３×）、次いで、蒸発させて、粗塩酸テトライソオキサジンを得、それをエタノール／エーテルで再結晶して、０．７４ｇ（５２％）の塩酸テトラヒドロイソオキサジンを得た。１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＨ３ＯＤ）δ１．８５（ｄｄ、２Ｈ）、１．９５（ｄｄ、２Ｈ）、３．４（ｔ、２Ｈ）、４．２５（ｔ、２Ｈ）。
【００６０】
（Ｎ−テトラヒドロイソオキサジニル）−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示すスルホンアミドを形成するための一般的な操作に従って、２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（１．７５ｇ、６．０ｍｍｏｌ）、塩酸テトラヒドロイソオキサジン（０．６３ｇ、５．１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．２ｍＬ、１５．５ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物をを形成した（１．３２ｇ、７５％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３４１（Ｍ＋）。
【００６１】
（Ｎ−テトラヒドロイソオキサジニル）−２−ヒドロキシ−６−クロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示す一般的な加水分解操作に従って、（Ｎ−テトラヒドロイソオキサジニル）−２，６−ジクロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（０．１ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、８０％水素化ナトリウム（２６ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）および水（６．３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物を形成した（５０ｍｇ、５３％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　３２３（Ｍ＋）。
【００６２】
（Ｎ−テトラヒドロイソオキサジニル）−２−ヒドロキシ−３−アミノ−６−クロロベンゼンスルホンアミド
実施例１に示す一般的な水素添加操作に従って、（Ｎ−テトラヒドロイソオキサジニル）−２−ヒドロキシ−６−クロロ−３−ニトロベンゼンスルホンアミド（０．７６ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）を水素およびＰｄ／Ｃ（７６０ｍｇ）で還元し、所望の産生物を形成した（８９０ｍｇ、粗）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　２９３（Ｍ＋）。
【００６３】
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素
実施例１に示すチオ尿素を形成するための一般的な操作に従って、（Ｎ−テトラヒドロイソオキサジニル）−２−ヒドロキシ−３−アミノ−６−クロロベンゼンスルホンアミド（６２０ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）および２−ブロモフェニルイソシアナート（５００ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、所望のチオ尿素を形成した（６２７ｍｇ、５８％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　５０７（Ｍ＋）。
【００６４】
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素
実施例１に示す保護されたフェニルチオ尿素を形成するための一般的な操作に従って、Ｎ−（２−ブロモフェニル）−Ｎ’−［４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−（Ｎ”−テトラヒドロイソオキサジルアミノスルホニル）フェニル］チオ尿素（６２７ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライド（９３４ｍｇ、６．２ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（１６９ｍｇ、２．４８ｍｍｏｌ）を反応させ、所望の産生物をを形成した（３５０ｍｇ、４５％）。ＥＩ−ＭＳ　ｍ／ｚ　６２２（Ｍ＋）。
【００６５】
（治療方法）
式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩は、ヒトまたは別の哺乳動物における、かかる哺乳動物の細胞による過剰な、または制御されていないＩＬ−８サイトカイン、例えば、限定するものではないが、単球および／またはマクロファージ、またはＩ型またはＩＩ型受容体と呼ばれる、ＩＬ−８αまたはβ受容体に結合する別のサイトカイン産生により悪化するか、または起因されるいかなる疾患の予防的または治療的な処置のための薬剤の製造に使用することができる。
【００６６】
従って、本発明は、ケモカインがＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するものであるところのサイトカインが介在する疾患を治療する方法、および有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。特に、該サイトカインはＩＬ−８、ＧＲＰα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８である。
【００６７】
サイトカインの機能、特に、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８を阻害するために式（Ｉ）の化合物を十分な量で投与し、その機能を生理的機能の標準レベルにまで、または場合によっては正常以下のレベルにまで生物学的にダウンレギュレートし、病状を改善させる。例えば、本発明に関連して、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８ の異常なレベルは（ｉ）１ｍＬあたり１ピコグラムより低いか、または等しい遊離しているＩＬ−８のレベル、（ｉｉ）正常な生理学的レベルよりも高い付着のＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８のレベル、または（ｉｉｉ）それぞれのＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８を生成する細胞または組織における基底レベル以上のＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８の存在、からなる。
【００６８】
一般的には、式（Ｉ）の化合物をより長いｔ１／２を有することを示し、ＷＯ９６／２５１５７およびＷＯ９７／２９７４３（出典明示により本明細書の一部とする）に記載されている化合物に対して経口生体利用率が向上している。
【００６９】
過剰または制御されていないＩＬ−８産生により疾患が悪化する、および／または原因となる病状がたくさんある。ケモカイン介在疾患は、乾癬、アトピー性皮膚炎、変形性関節炎、リウマチ性関節炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患、成人型呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、卒中、敗血症性ショック、多発性硬化症、内毒素性ショック、グラム陰性敗血症、毒性ショック症候群、心臓および腎性再潅流障害、糸球体腎炎、血栓症、移植片対宿主反応、アルツハイマー疾患、同種移植片拒絶反応、マラリア、再狭窄、血管新生、アテローム性動脈硬化症、骨粗鬆症、歯肉炎および望ましくない造血幹細胞放出、呼吸器ウィルス、ヘルペスウィルスおよび肝炎ウィルスに起因する疾患、髄膜炎、嚢胞性線維症、早産、咳、掻痒、多器官機能不全、外傷、挫傷、捻挫、打撲傷、乾癬性関節炎、ヘルペス、脳炎、ＣＮＳ血管炎、外傷性脳障害、ＣＮＳ腫瘍、クモ膜下出血、術後損傷、間質性肺炎、過敏症、結晶誘導関節炎、急性および慢性膵臓炎、急性アルコール性肝炎、壊死性腸炎、慢性副鼻腔炎、ブドウ膜炎、多発性筋炎、血管炎、挫創、胃および十二指腸潰瘍、セリアック病、食道炎、舌炎、気流閉塞症、気道過敏症、気管支閉塞器質化肺炎、気管支拡張炎、気管支炎、気管支閉塞、慢性気管支炎、肺性心、呼吸困難、気腫、高炭酸血症、過膨張、低酸素血症、低酸素低酸素により誘導される炎症、低酸素症、手術による肺容量減少、肺線維症、肺高血圧症、右心室肥大、サルコイドーシス、小気道疾患、換気血流不適合症、喘鳴、風邪および狼瘡を包含する。
【００７０】
これらの疾患は多量の好中球浸潤、Ｔ−細胞浸潤または新生脈管成長により特徴付けられ、ならびに炎症部位への好中球の走化性または内皮細胞の方向性のある成長を引き起こす高いＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８産生に関連している。別の炎症性サイトカイン（ＩＬ−１、ＴＮＦおよびＩＬ−６）に対して、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８は、好中球走化性、酵素放出（限定するものではないが、エラスターゼ放出を含む）、ならびにスーパーオキシド産生および活性化を促進する特有の性質を有する。ＩＬ−８のＩまたはＩＩ型受容体を介してα−ケモカイン、詳しくは、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８は、内皮細胞の方向性のある増殖を促進することにより、腫瘍の血管新生を促進することができる。それゆえ、ＩＬ−８誘発の走化性または活性化の阻害は好中球浸潤の直接的な減少をもたらす。
【００７１】
また、現在の証拠は、ＨＩＶ感染の治療においてケモカインの役割を示している（Ｌｉｔｔｌｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．、Ｎａｔｕｒｅ ３８１、ｐｐ． ６６１ （１９９６）およびＫｏｕｐ ｅｔ ａｌ．、Ｎａｔｕｒｅ ３８１、ｐｐ． ６６７ （１９９６））。
また、現在の証拠は、アテローム性動脈硬化症の治療におけるＩＬ−８阻害剤の使用を示す。第１の文献として、Ｂｏｉｓｖｅｒｔ ｅｔ ａｌ．、Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ、１９９８、１０１：３５３−３６３を示し、骨髄移植による幹細胞（および、単球／マクロファージ）上ＩＬ−８受容体の欠如は、ＬＤＬ受容体欠損マウスにおけるアテローム斑の発達の減少をもたらす。さらなる支持的文献は、Ａｐｏｓｔｏｌｏｐｏｕｌｏｓ、ｅｔ ａｌ．、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ． Ｔｈｒｏｍｂ． Ｖａｓｃ． Ｂｉｏｌ． １９９６、１６：１００７−１０１２； Ｌｉｕ、ｅｔ ａｌ．、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ． Ｔｈｒｏｍｂ． Ｖａｓｃ． Ｂｉｏｌ、１９９７、１７：３１７−３２３； Ｒｕｓ、ｅｔ ａｌ．、Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ． １９９６、１２７：２６３−２７１．； Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． １９９６、２７１：８８３７−８８４２；　Ｙｕｅ、ｅｔ ａｌ．、Ｅｕｒ． Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． １９９３、２４０：８１−８４； Ｋｏｃｈ、ｅｔ ａｌ．、Ａｍ． Ｊ． Ｐａｔｈｏｌ．、１９９３、１４２：１４２３−１４３１．； Ｌｅｅ、ｅｔ ａｌ．、Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｌｅｔｔ．、１９９６、５３、１０９−１１３．；およびＴｅｒｋｅｌｔａｕｂ ｅｔ ａｌ．、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ． Ｔｈｒｏｍｂ．、１９９４、１４：４７−５３である。
【００７２】
また、本発明は、式（Ｉ）のケモカイン受容体アンタゴニスト化合物によるＣＮＳ損傷に感受性があると考えられている個体において、急性の場合での治療法、ならびに予防法を提供する。
本明細書定義のＣＮＳ損傷は、例えば、外科処置による開放性または貫通性頭部外傷のどちらも、または、例えば、頭部損傷による非開放性頭部外傷を包含する。また、この定義内には虚血性脳卒中、特に、脳の領域における虚血性脳卒中も含まれる。
虚血性脳卒中は、特に脳領域への血液供給が不充分な結果、塞栓、血栓または血管の局所的なアテローム閉鎖の結果として生じる巣状の神経疾患として定義してもよい。この領域における炎症性サイトカインの役割は明らかになっており、本発明はこれらの外傷の可能な治療法を提供する。これらのような急性の外傷に対して相対的に利用可能な処置はほとんどなかった。
【００７３】
ＴＮＦ−αは、内皮白血球接着分子発現を包含する炎症性作用を有するサイトカインである。白血球は虚血性脳障害部位に浸潤しており、それゆえ、ＴＮＦのレベルを阻害または減少させる化合物は虚血性脳損傷に有用であろう。Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．、Ｓｔｒｏｋｅ、Ｖｏｌ． ２５．、Ｎｏ． ７、ｐｐ． １４８１−８８ （１９９４）（出典明示により本発明の一部とする）を参照。
非開放性頭部外傷のモデルおよび５−ＬＯ／ＣＯ混合剤での治療が、Ｓｈｏｈａｍｉ ｅｔ ａｌ．、Ｊ． ｏｆ Ｖａｉｓｃ ＆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙおよびＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ． ３、Ｎｏ． ２、ｐｐ． ９９−１０７ （１９９２）（出典明示により本発明の一部とする）で述べられている。浮腫形成を減少させる治療は、動物治療における機能を改善することがわかった。
【００７４】
式（Ｉ）の化合物は、好中球走化性および活性化の減少により証明されるように、ＩＬ−８アルファまたはベータ受容体に結合するＩＬ−８をそれら受容体の結合から阻害するに十分な量で投与される。式（Ｉ）の化合物がＩＬ−８結合の阻害剤であることの知見は、本明細書に記載されるインビトロでの受容体結合分析における式（Ｉ）の化合物の効果に基づくものである。式（Ｉ）の化合物は、ＩＩ型ＩＬ−８受容体の阻害剤であることが明らかにされている。
本明細書で用いられる「ＩＬ−８介在疾患または病状」なる語は、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８自体の産生により、または、限定するものではないが、ＩＬ−１、ＩＬ−６またはＴＮＦのような放出させる他のモノカイン生じるＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８により、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８が役割を果たす、いずれかおよび全ての病状を意味する。したがって、例えば、ＩＬ−１が主な要素であり、その産生または作用がＩＬ−８に応答して悪化されるかまたは分泌される病状は、ＩＬ−８により介される病状と考えられる。
【００７５】
本明細書で用いられる「ケモカイン介在疾患または病状」なる語は、限定するものではないが、ＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２またはＥＮＡ−７８のようなＩＬ−８αまたはβ受容体に結合するケモカインが役割を果たす、いずれかおよび全ての病状を意味する。これは、ＩＬ−８自体の産生により、または、限定するものではないが、ＩＬ−１、ＩＬ−６またはＴＮＦのような放出される他のモノカインを生じるＩＬ−８により、ＩＬ−８が役割を果たす病状を含む。したがって、例えば、ＩＬ−１が主な要素であり、その産生または作用がＩＬ−８に応答して悪化されるかまたは分泌される病状は、ＩＬ−８により介される病状と考えられる。
本明細書で用いられる「サイトカイン」なる語は、細胞の機能に影響し、免疫、炎症または造血応答において、細胞間の相互作用を調節する分子である分泌ポリペプチドを意味する。サイトカインは、いずれの細胞が産生するかと関係なく、モノカインおよびリンフォカインを含むが、これらに限定されるものではない。例えば、モノカインは、一般的に、マクロファージおよび／または単球のような単核細胞により産生され分泌されると言われている。しかしながら、また、多くの他の細胞も、ナチュラルキラー細胞、線維芽細胞、好塩基球、好中球、内皮細胞、脳星状細胞、骨髄間質細胞、表皮ケラチノサイトおよびＢ−リンパ球のような、モノカインを産生する。リンフォカインは、一般に、リンパ球細胞により産生されるものであると言われている。サイトカインの例は、限定するものではないが、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）および腫瘍壊死因子ベータ（ＴＮＦ−β）を含む。
【００７６】
本明細書で用いられる「ケモカイン」なる語は、上記の用語「サイトカイン」と同様に、細胞の機能に影響を及ぼし、免疫、炎症または造血応答において細胞間の相互作用を調節する分子である分泌ポリペプチドを意味する。ケモカインは、主に、細胞トランスメンブランを通して分泌され、特異的な白血球および白血球、好中球、単球、マクロファージ、Ｔ−細胞、Ｂ−細胞、内皮細胞および平滑筋細胞の走化性および活性化を生じる。ケモカインの例は、限定するものではないが、ＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＧＲＯ−β、ＧＲＯ−γ、ＮＡＰ−２、ＥＮＡ−７８、ＩＰ−１０、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−β、ＰＦ４およびＭＣＰ１、２および３を含む。
治療において式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を使用するために、通常、標準的な製薬手順に従って医薬組成物に処方される。したがって、また、本発明は、有効で非毒性量の式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体または希釈剤からなる医薬組成物に関する。
式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩およびこれらからなる医薬組成物は、有利には、例えば、経口、局所、非経口または吸入で、薬剤投与のために従来使用される経路のいずれかにより投与できる。式（Ｉ）の化合物は、従来の方法に従って、式（Ｉ）の化合物と標準的な医薬担体とを組み合わせることにより調製される従来の剤形で投与できる。式（Ｉ）の化合物は、また、公知の第２の治療的に活性な化合物と組み合わせて従来の剤形で投与されてもよい。これらの方法は、所望の製剤に適するように活性成分を混合、顆粒化、および打錠または溶解することを含みうる。医薬上許容される担体または希釈剤の形態および特性は、組み合わされる活性成分の量、投与経路および他のよく知られた変数により決定されることが認識されるであろう。担体（複数でも可）は、製剤の別の成分と適合でき、その受容者に有害でないという意味で「許容され」なければならない。
【００７７】
使用される医薬担体は、例えば、固体または液体であってもよい。固体担体の例は、ラクトース、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸等である。液体担体の例は、シロップ、落花生油、オリーブ油、水等である。同様に、担体または希釈剤は、単独のまたはワックスと混合したモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルのような当該分野でよく知られた時間遅延物質を含んでもよい。
種々の製薬形態を使用することができる。したがって、固体担体を使用する場合、製剤は、錠剤化でき、粉末またはペレットの形態でハードゼラチンカプセル中に入れることができ、またはトローチまたはロゼンジの形態であり得る。固体担体の量は、広範囲であるが、好ましくは、約２５ｍｇないし約１ｇである。液体担体を使用する場合、製剤はシロップ、乳濁液、ソフトゼラチンカプセル、アンプルまたは非水性液体懸濁液のような滅菌注射用液の形態である。
式（Ｉ）の化合物は、局所的に、すなわち、非全身的投与により投与できる。これは、式（Ｉ）の化合物が血流中に有意に入らないように、該化合物の表皮または口腔内への外的な適用および該化合物の耳、目および鼻への吸入を含む。対照的に、全身投与は、経口、静脈内、腹腔内および筋肉内投与を意味する。
【００７８】
局所投与に適している処方は、リニメント、ローション、クリーム、軟膏またはペーストのような炎症部位に皮膚を通しての処方に適している液体または半液体処方、および目、耳または鼻への投与に適している点滴剤を含む。活性成分は、局所投与で、処方の重量で０．００１％ないし１０％ｗ／ｗ、例えば、１％から２％含まれる。しかし、処方の１０％ｗ／ｗ程度含むことができるが、好ましくは、５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは０．１％ないし１％ｗ／ｗ含んでいてもよい。
本発明記載のローションは、皮膚または眼への適用に適当なものを含む。目薬は、所望により殺菌剤を含んでいてもよい滅菌水溶液を含んでいてもよく、点滴剤の製造方法と同様の方法により製造できる。皮膚への適用のためのローションまたはリニメントは、アルコールまたはアセトンのように乾燥を速め、皮膚を冷却する製剤および／またはグリセロールのような保湿剤またはヒマシ油もしくは落花生油のようなオイルを含んでもいてもよい。
【００７９】
本発明記載のクリーム、軟膏またはペーストは、外的な適用のための活性成分の半固体処方である。これらは、油性または非油性基剤と、適当な機械の補助で、単独または水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液中で細分割または粉末形態で活性成分とを混合することにより製造できる。基剤は、ハードパラフィン、ソフトパラフィンまたは流動パラフィン、グリセロール、蜜蝋、金属石鹸のような炭化水素；粘滑剤；扁桃油、トウモロコシ油、落花生油、ヒマシ油またはオリーブ油のような天然油；羊毛脂またはその誘導体またはプロピレングリコールまたはマクロゲルのようなアルコールと一緒になるステアリン酸またはオレイン酸のような脂肪酸を含んでいてもよい。処方はソルビタンエステルまたはそのポリオキシエチレン誘導体等のアニオン、カチオンまたは非イオン性界面活性剤のような適当な界面活性剤を含んでもいてもよい。また、懸濁化剤、例えば天然ガム、セルロース誘導体、またはケイ酸含有シリカのような無機物質およびラノリンのような他の成分を含んでいてもよい。
本発明記載の滴剤は、無菌の水性または油性溶液または懸濁液を含んでいてもよく、殺菌剤および／または殺真菌類剤および／または他の適切な保存剤の、好ましくは界面活性剤を含んでいる適切な水溶液に活性成分を溶解させることにより製造できる。次いで、得られた溶液を濾過により洗浄し、適当な容器に移し、次いで、シールし、オートクレーブ処理するか、または、９８ないし１００℃で１時間半維持することにより滅菌する。別法としては、溶液を濾過滅菌し、無菌技術により容器に移してもよい。点滴剤に含ませるのに適する殺菌剤および殺真菌剤の例は、硝酸フェニル水銀または酢酸フェニル水銀（０．００２％）、塩化ベンザルコニウム（０．０１％）および酢酸クロルヘキシジン（０．０１％）である。油性溶液の製剤用の適切な溶媒としては、グリセロール、希アルコールおよびプロピレングリコールが挙げられる。
【００８０】
式（Ｉ）の化合物は、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、鼻腔内投与、直腸内投与、膣内投与または腹腔内投与により、非経口的に投与できる。非経口投与の皮下および筋肉内形態が一般的に好ましい。該投与用の適当な剤形は、従来の技術により製造できる。式（Ｉ）の化合物は、また、鼻腔内吸入投与および経口吸入投与による吸入により投与できる。エアロゾル処方または計量付き吸入器ののような該投与用の適当な剤形は、従来の技術により製造できる。
式（Ｉ）の化合物に関して本明細書で記載した全ての使用方法について、１日の経口投与量は、好ましくは、全体重の約０．０１ないし約８０ｍｇ／ｋｇである。１日の非経口投与量は、全体重の約０．００１ないし約８０ｍｇ／ｋｇである。１日の局所投与量は、好ましくは、０．１ｍｇないし１５０ｍｇであり、１日１ないし４回、好ましくは２または３回投与される。１日の吸入投与量は、好ましくは、１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇないし約１ｍｇ／ｋｇである。式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩の個々の投与の最適な量および間隔は、治療する症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、および治療される特定の患者により決定され、最適値は従来の技術により決定することができることは、当業者により理解されるであろう。治療の最適な方法、すなわち、決められた日数の間に１日当たりに与えられる式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩の投与回数は、従来の治療方法決定試験を用いて当業者により確認することができることも当業者により理解されるだろう。
【００８１】
本発明は、以下の生物学的実施例の参照により記載されているが、これは単に説明であって本発明の範囲を何ら限定するものではない。
生物学的実施例
以下のインビボでの分析により本発明の化合物のＩＬ−８およびＧＲＯ−αケモカイン阻害効果を測定した。
【００８２】
受容体結合分析：
［１２５Ｉ］ＩＬ−８（ヒト組換体）を、比活性２０００Ｃｉ／ｍｍｏｌで、Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｃｏｒｐ．、Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ Ｈｅｉｇｈｔｓ、ＩＬから得た。ＧＲＯ−αをＮＥＮ−Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒから入手した。全ての他の化学薬品は分析用であった。チャイニーズハムスター卵巣細胞で、高レベルの組換えヒトＩＬ−８αおよびβ型受容体を、各々、以前に記載されるように発現させた（Ｈｏｌｍｅｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９１， ２５３， １２７８）。以前に記載される手順に従って、チャイニーズハムスター卵巣膜を均質化した（Ｈａｏｕｒら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．， ２４９ ｐｐ ２１９５−２２０５ （１９７４））。ただし、均質化緩衝液を、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ、１ｍＭ ＭｇＳＯ４、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）、１ｍＭ ＰＭＳＦ（α−トルエンスルホニルフルオリド）、０．５ｍｇ／Ｌ ロイペプチン、ｐＨ７．５に変更する。ウシ血清アルブミンを標体として用い、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｏ．ミクロ分析キットを用いて、膜タンパク濃度を測定する。全ての分析は、９６−ウェルマイクロプレート様式で行う。各反応混合物は、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ４、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、２５ｍＭ Ｎａおよび０．０３％ ＣＨＡＰＳを含む２０ｍＭ Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓプロパンおよび０．４ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ８．０）中１２５Ｉ ＩＬ−８（０．２５ｎＭ）または１２５Ｉ ＧＲＯ−αおよび０．５μｇ／ｍＬのＩＬ−８Ｒαまたは１．０μｇ／ｍＬのＩＬ−８Ｒβ膜を含んでいる。加えて、最終濃度が０．０１ｎＭと１００ｕＭの間になるように、前もってＤＭＳＯ中に溶解させた関連の薬剤または化合物を加える。分析を、１２５Ｉ−ＩＬ−８の添加により開始する。室温で１時間後、Ｔｏｍｔｅｃ９６−ウェルハーベスターを使用して、１％ポリエチレンイミン／０．５％ ＢＳＡでブロックしたガラス繊維フィルターマット上にプレートを取り入れ、２５ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ、１ｍＭ ＭｇＳＯ４、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０３％ ＣＨＡＰＳ（Ｈ７．４）で３回洗浄する。次いで、フィルターを乾燥させ、Ｂｅｔａｐｌａｔｅ液体シンチレーションカウンターで計数する。また、本明細書では、組換えＩＬ−８Ｒα（またはＩ型）受容体は、非許容受容体を意味し、組換えＩＬ−８Ｒβ（またはＩＩ型）受容体は許容受容体を意味する。
式（Ｉ）、実施例１ないし１０６の代表的な化合物はこのアッセイにおいて、ＩＣ５０レベル＜３０μＭで正の阻害活性を示す。
【００８３】
走化性分析：
インビトロでのこれらの化合物の阻害特性は、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， ｖｏｌ Ｉ， Ｓｕｐｐｌ １， Ｕｎｉｔ ６．１２．３．（出典明示により本明細書の一部とする）に記載のように好中球走化性分析で測定した。好中球をＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ Ｉ， Ｓｕｐｐｌ １ Ｕｎｉｔ ７．２３．１（出典明示により本明細書の一部とする）に記載のようにヒト血液から単離した。化学誘引物質ＩＬ−８、ＧＲＯ−α、ＧＲＯ−β、ＧＲＯ−γおよびＮＡＰ−２を、０．１および１００ｎＭの間の濃度で、４８マルチウェルチャンバー（Ｎｅｕｒｏ Ｐｒｏｂｅ， Ｃａｂｉｎ Ｊｏｈｎ， ＭＤ）の底部チャンバーに入れる。２つのチャンバーは５μＭポリカーボネートフィルターで分けられる。本発明の化合物を試験する場合、これらを、上部チャンバーへ細胞を添加する直前に、細胞（０．００１−１０００ｎＭ）と混合する。インキュベーションは、約４５と９０分の間で、約３７℃で、５％ＣＯ２を有する加湿インキュベータ中で進行させる。インキュベーション期間の最後に、ポリカーボネート膜を取り出し、上面を洗浄し、次いで膜を、Ｄｉｆｆ Ｑｕｉｃｋ染色法（Ｂａｘｔｅｒ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、ＭｃＧａｗ Ｐａｒｋ， ＩＬ， ＵＳＡ）を使用して染色する。ケモカインに対して走化性を有する細胞を、顕微鏡を使用して視覚的に計数する。一般に、４つのフィールドを、各サンプルに対して計数し、これらの数を平均して、移動した細胞の平均数を得る。各サンプルを三重反復して試験し、各化合物を少なくとも４回繰り返す。ある種の細胞（正の対照細胞）に化合物を加えず、これらの細胞は、細胞の最大走化性応答を意味する。負の対照（刺激しない）を所望する場合、底部チャンバーにケモカインを加えない。正の対照と負の対照の違いは、細胞の走化性活性を意味する。
【００８４】
エラスターゼ放出分析：
本発明の化合物を、ヒト好中球からのエラスターゼ放出を防止する能力について分析する。好中球は、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ １， Ｓｕｐｐｌ １ Ｕｎｉｔ ７．２３．１．記載のようにヒト血液から単離する。リンゲル溶液（ＮａＣｌ １１８、ＫＣｌ、４．５６、ＮａＨＣＯ３ ２５、ＫＨ２ＰＯ４ １．０３、グルコース １１．１、ＨＥＰＥＳ ５ｍＭ、ｐＨ７．４）中に懸濁したＰＭＮ ０．８８×１０６個の細胞を、５０μｌの容量の９６ウェルプレートの各々のウェルに置く。このプレートに、５０μｌの容量の試験化合物（０．００１ないし１０００ｎＭ）、５０μｌ（２０μｇ／ｍｌ）の体積のシトカラシンＢおよび５０μｌの容量のリンゲル緩衝液を加える。これらの細胞を、最終濃度０．０１ないし１０００ｎＭでＩＬ−８、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγまたはＮＡＰ−２を添加する前に、５分間加温する（３７℃、５％ ＣＯ２、９５％ ＲＨ）。反応を、９６ウェルプレートを遠心分離（８００×ｇ ５分）に付し、ならびに１００μｌの上清を除去する前に、４５分間進行させる。この上清を第２の９６ウェルプレートに加え、次いで、最終濃度６μｇ／ｍｌで、人造エラスターゼ基質（ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＡＭＣ、Ｎｏｖａ Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｌａ Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）をリン酸緩衝生理食塩水に溶かす。すぐに、プレートを、蛍光９６−ウェルプレート読み取り器（Ｃｙｔｏｆｌｕｏｒ ２３５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ， Ｂｅｄｆｏｒｄ、ＭＡ）に置き、Ｎａｋａｊｉｍａらの方法（Ｊ． Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２５４ ４０２７ （１９７９））にしたがって、３分間隔でデータを収集する。ＰＭＮから放出されたエラスターゼ量を、ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＡＭＣ分解速度を測定することにより計算する。
【００８５】
外傷性障害分析のＴＮＦ−α
本分析は、ラットの実験的に誘発した側液衝撃外傷性脳傷害（ＴＢＩ）に続く、特定の脳領域での腫瘍壊死因子ｍＲＮＡの発現の試験を提供する。成体スプレ−グ−ドーリーラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ　ｒａｔ）（ｎ＝４２）を、ペントバルビタールナトリウム（６０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）で麻酔し、左側頭頂皮質（ｎ＝１８）上に集中させた適度な強度（２．４ａｔｍ）の側液衝撃脳傷害を与え、または「疑似」治療（傷害なしで、麻酔および手術をする、ｎ＝１８）に付す。動物を、傷害後１、６および２４時間で、断頭術により殺し、脳を取りだし、左（損傷）頭頂皮質（ＬＣ）、対応する対側性右皮質（ＲＣ）の領域、損傷を受けた頭頂皮質に隣接する皮質（ＬＡ）、対応する右皮質の隣接領域（ＲＡ）、左海馬（ＬＨ）および右海馬（ＲＨ）の組織サンプルを製造する。全ＲＮＡを単離し、ノーザンブロットハイブリジゼーション（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）を行い、ＴＮＦ−α正対照ＲＮＡに対して定量した（マクロファージ＝１００％）。ＴＮＦ−αｍＲＮＡ発現の著しい増加が、損傷後１時間で、外傷を受けた半球のＬＨ（正対照の１０４±１７％、疑似に比較してｐ＜０．０５）、ＬＣ（１０５±２１％、ｐ＜０．０５）およびＬＡ（６９±８％、ｐ＜０．０１）で観察される。また、ＬＨ（４６±８％、ｐ＜０．０５）、ＬＣ（３０±３％、ｐ＜０．０１）およびＬＡ（３２±３％、ｐ＜０．０１）で、損傷後６時間で増加したＴＮＦ−αｍＲＮＡ発現の増加が観測され、これは損傷後２４時間で消滅する。対側性半球では、ＴＮＦ−αｍＲＮＡの発現は、損傷後１時間で、ＲＨ（４６±２％、ｐ＜０．０１）、ＲＣ（４±３％）およびＲＡ（２２±８％）で増加し、６時間で、ＲＨ（２８±１１％）、ＲＣ（７±５％）およびＲＡ（２６±６％、ｐ＜０．０５）で増加するが、２４時間後には増加しない。疑似（損傷なしの手術）または未処理の動物で、ＴＮＦ−αｍＲＮＡの発現における一貫した変化は、半球の６つの脳領域のいずれにおいても、いずれの時点でも、観察されない。これらの結果は、副矢状液衝撃脳傷害後、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡの一時的発現が、外傷を受けていない半球部分を含む特定の脳領域で変化することを示す。ＴＮＦ−αは神経成長因子（ＮＧＦ）を誘導でき、活性化星状細胞からの他のサイトカインの放出を促進するので、ＴＮＦ−αの遺伝子発現での外傷後の変化は、ＣＮＳ外傷に対する急性および再生性応答の両方で、重要な役割を演じる。
【００８６】
ＩＬ−１β ｍＲＮＡに対するＣＮＳ傷害モデル
この分析は、ラットの実験的側液衝撃外傷性脳障害（ＴＢＩ）後の、特定の脳領域でのインターロイキン−１β（ＩＬ−１β）ｍＲＮＡの局所的発現を特徴付ける。成体スプレ−グ−ドーリーラット（ｎ＝４２）を、ペントバルビタールナトリウム（６０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）で麻酔し、左側頭頂皮質（ｎ＝１８）に集中させた適度な強度（２．４気圧）の側液衝撃脳傷害を与え、または「疑似」治療（傷害なしで麻酔および手術をする）に付す。動物を、傷害後１、６および２４時間で殺し、脳を取り出し、左（損傷）頭頂皮質（ＬＣ）、対応する対側性右皮質（ＲＣ）の領域、損傷を受けた頭頂皮質に隣接する皮質（ＬＡ）、対応する右皮質の隣接領域（ＲＡ）、左海馬（ＬＨ）および右海馬（ＲＨ）の組織サンプルを製造する。全ＲＮＡを単離し、ノーザンブロットハイブリジゼーションを行い、脳組織ＩＬ−１βｍＲＮＡの量を、同ゲル上に付着したＩＬ−１β正マクロファージＲＮＡの相対的放射活性パーセンテージとして表す。脳損傷後１時間で、外傷を受けた半球で、ＩＬ−１βｍＲＮＡ発現の著しいおよび有意な増加が、ＬＣ（正対照の２０．０±０．７％、ｎ＝６、疑似動物に比較してｐ＜０．０５）、ＬＨ（２４．５±０．９％、ｐ＜０．０５）およびＬＡ（２１．５±３．１％、ｐ＜０．０５）において観察され、これは傷害の６時間後まで、ＬＣ（４．０±０．４％、ｎ＝６、ｐ＜０．０５）およびＬＨ（５．０±１．３％、ｐ＜０．０５）で高いままである。疑似または未処理の動物では、ＩＬ−１β ｍＲＮＡの発現は、各々の脳領域のいずれでも観察されない。これらの結果は、ＴＢＩの後に、ＩＬ−１β ｍＲＮＡの一時的発現が、脳の特定の領域において局部的に促進されることを示す。ＩＬ−１βのようなサイトカインの局部的変化は、脳傷害後に重要な役割を演じる。
【００８７】
本明細書で引用した、限定するものではないが、特許および特許出願を含む全ての刊行物は、出典明示により本明細書に組み入れる。
上記記載は、その好ましい具体例を含む本発明を完全に開示する。本明細書中に詳しくで開示されている具体例の修飾および改良は、上記した特許請求の範囲の範囲内にある。さらに工夫することなく、当業者は上記の記載を使用して本発明を最大限利用することができると考えられる。したがって、本明細書の実施例は、単なる説明であり、いかなる点でも本発明の範囲を制限するものでないと考えられる。排他的性質または優先権を主張する本発明の具体例は、特許請求の範囲に記載するように定められる。
【国際公開パンフレット】
2004504270.tif 000007
2004504270.tif 000008
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004504270.tif 000046
【国際調査報告】
2004504270.tif 000047
2004504270.tif 000048