(57)【要約】４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリル、ベンゼンスルホン酸塩が提供され、この化合物は、不整脈、特に心房性及び心室性不整脈の予防において、そして治療において有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリル、ベンゼンスルホン酸塩。
【請求項２】
４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリル、ベンゼンスルホン酸塩一水和物。
【請求項３】
請求項１又は請求項２において定義した通りの化合物を、製剤上許容されるアジュバント、希釈剤又は担体との混合物とともに含む医薬製剤。
【請求項４】
請求項１又は請求項２において定義した通りの化合物を含んでなる、不整脈の予防又は治療において使用するための医薬製剤。
【請求項５】
医薬として使用されるための請求項１又は請求項２において定義した通りの化合物。
【請求項６】
不整脈の予防又は治療における使用のための請求項１又は請求項２において定義した通りの化合物。
【請求項７】
不整脈の予防又は治療における使用のための医薬の製造のための活性成分としての請求項１又は請求項２において定義した通りの化合物の使用。
【請求項８】
前記不整脈が、心房性又は心室性不整脈である、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
不整脈の予防又は治療の方法であって、このような症状を病んでいるか又はこのような症状を受けやすいヒトに対する、治療上有効な量の請求項１又は請求項２において定義した通りの化合物の投与を含んでなる、前記方法。
【請求項１０】
（ａ）ベンゼンスルホン酸の、４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−ル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリルとの反応；又は
（ｂ）ベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピルの、３，３−ジメチル−１−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−イル）−２−ブタノンとの反応；
を含んでなる、請求項１又は請求項２において定義した通りの化合物の調製のための方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規な医薬的に有用な化合物、特に心臓の不整脈（ｃａｒｄｉａｃ　ａｒｒｈｙｔｈｍｉａｓ）の治療において有用である化合物に関する。
【０００２】
背景及び従来の技術
心臓の不整脈は、心拍数、規則性、又は心衝動の起始点部位の異常、或いは活性化の異常な配列を起こす伝導の障害として定義することができる。不整脈は、仮定された起始点部位（即ち心房及び房室を含む上室性不整脈並びに心室性不整脈）及び／又は心拍数（徐脈性不整脈（遅い）及び頻拍性不整脈（速い））によって臨床的に分類することができる。
【０００３】
心臓の不整脈の治療において、主として伝導速度を遅くすることによって作用する“伝統的”抗不整脈剤（クラスＩ抗不整脈剤）による臨床試行における否定的結果（例えば、Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，３２１，４０６（１９８９）に報告されているＣａｒｄｉａｃ　Ａｒｒｈｙｔｈｍｉａ　Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ｔｒｉａｌ（ＣＡＳＴ）の結果を参照）は、選択的に心臓の再分極を遅延し、従ってＱＴ時間を延長する化合物に対する薬物の開発を促した。クラスＩＩＩ抗不整脈剤は、経膜的作用の潜在時間（これは外向きのＫ＋電流の遮断によって、又は内向きのイオン電流の増加から起こることができる）及び不応性を心伝導に影響することなく延長する薬剤として定義することができる。
【０００４】
再分極を遅延することによって作用する従来の既知の薬剤（クラスＩＩＩ又は他の）の重要な不利益の一つは、これらが全て時折致命的であることができるトルサードドポアン（ｔｏｒｓａｄｅｓ　ｄｅ　ｐｏｉｎｔｅｓ）（点の回転（ｔｕｒｎｉｎｇ　ｏｆ　ｐｏｉｎｔｓ））として知られる前不整脈の独特の形態を示すことが知られていることである。安全の観点から、この現象（フェノチアジン、三環式抗鬱剤、抗ヒスタミン剤及び抗生物質のような非心臓薬物の投与の結果としても示されることが明らかにされている）の最小化が、有効な抗不整脈剤の提供において解決されるべき重要な問題である。
【０００５】
ビスピジン（３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノナン類）に基づく抗不整脈剤は、特に国際特許出願ＷＯ９１／０７４０５、ＷＯ９９／３１１００、ＷＯ００／７６９９７、ＷＯ００／７６９９８、ＷＯ００／７６９９９及びＷＯ００／７７０００、欧州特許出願３０６　８７１、３０８　８４３及び６５５　２２８並びに米国特許第３，９６２，４４９、４，５５６，６６２、４，５５０，１１２、４，４５９，３０１及び５，４６８，８５８号、並びに特にＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３９，２５５９，（１９９６）、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．　Ｒｅｓ．，２４，１４９（１９９１）、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，９０，２０３２（１９９４）及びＡｎａｌ．Ｓｃｉ．９，４２９，（１９９３）を含む定期刊行誌の論文により知られている。オキサビスピジン化合物は、これらの文献のいずれにおいても開示又は示唆されていない。
【０００６】
ある種のオキサビスピジン化合物は、化学的に珍奇なもの（ｃｕｒｉｏｓｉｔｉｅｓ）としてＣｈｅｍ．Ｂｅｒ．，９６，２８２７（１９６３）に開示されている。
【０００７】
本出願人等は、特定のオキサビスピジン基剤の化合物が電気生理学的活性を、好ましくはクラスＩＩＩ電気生理学的活性を示し、そして従って心臓の不整脈の治療において有用であることが期待されることを驚くべきことに見出した。
【０００８】
発明の開示
本発明によれば、以下の式：
【０００９】
【化１】
2004510775.tif 000002
【００１０】
の４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリル、ベンゼンスルホン酸塩が提供され、この化合物は、本明細書中において以下“化合物Ａ”と呼ばれる。
【００１１】
化合物Ａが、一水和物（ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ）の形態で与えられることが好ましい。
【００１２】
調製
本発明によれば、更に化合物Ａの調製のための方法が提供され、この方法は：
（ａ）ベンゼンスルホン酸の、４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリル（即ち遊離塩基化合物）との、例えば室温での又はその近辺での、適した有機溶媒（例えば酢酸イソプロピル）の存在中の反応、或いは酸の水溶液を、遊離塩基のエタノール溶液に加えることによる反応；
（ｂ）以下の式：
【００１３】
【化２】
2004510775.tif 000003
【００１４】
のベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピルの、以下の式：
【００１５】
【化３】
2004510775.tif 000004
【００１６】
の３，３−ジメチル−１−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル）−２−ブタノンの、例えば室温ないし使用される溶媒の還流温度間のような周囲温度又はそれより高い温度（例えば１０ないし１００℃間で、適した溶媒系（例えばＤＭＦ、Ｎ−メチル−ピロリジノン又はアセトニトリル）又は好ましくは低級アルキルアルコール（例えばエタノールのようなＣ１−４アルコール）のようなヒドロキシル系溶媒及び／又は水の存在中）での反応；
を含んでなる。
【００１７】
４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリルは：
（ｉ）Ｌ１が、ハロ、アルカンスルホン酸（例えばメシラート）、ペルフルオロアルカンスルホン酸又はアレーンスルホン酸（例えば２−又は４−ニトロベンゼンスルホン酸又は、特にトルエンスルホン酸）のような脱離基を表す以下の式Ｉ：
【００１８】
【化４】
2004510775.tif 000005
【００１９】
の化合物の、３，３−ジメチル−１−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル）−２−ブタノンとの、例えば上昇された温度（例えば３５℃ないし還流温度間）における、所望により適した塩基（例えばトリエチルアミン又は炭酸カリウム）及び適当な有機溶媒（例えばアセトニトリル、ジクロロメタン、クロロホルム、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、低級アルキルアルコール（例えばエタノール）、酢酸イソプロピル又はこれらの混合物）の存在中の反応、当てはまる場合適宜にそれに続く適当な反応条件下の後処理によって対イオンを除去することによって；或いは
（ｉｉ）以下の式：
【００２０】
【化５】
2004510775.tif 000006
【００２１】
の４−｛［３−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−イル）プロピル］−アミノ｝ベンゾニトリルの、Ｌ２が、ハロ（特に塩素）、アルカンスルホン酸、ペルフルオロアルカンスルホン酸、アレーンスルホン酸、イミダゾール又はＲ２３Ｏ−（ここにおいてＲ２３は、例えばＣ１−１０アルキル又はアリールを表し、これらの基は一つ又はそれより多いハロ若しくはニトロ基によって所望により置換されている）のような脱離基を表す以下の式ＩＩ：
【００２２】
【化６】
2004510775.tif 000007
【００２３】
の化合物との、例えば室温ないし還流温度間における適した塩基（例えばトリエチルアミン、炭酸カリウム又は重炭酸ナトリウムのような重炭酸塩）及び適当な溶媒（例えばジクロロメタン、クロロホルム、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ＴＨＦ、トルエン、水、低級アルキルアルコール（例えばエタノール）又はこれらの混合物）の存在中の反応によって；
調製することができる。
【００２４】
３，３−ジメチル−１−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル）−２−ブタノンは、以下の式：
【００２５】
【化７】
2004510775.tif 000008
【００２６】
の９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノナン又はモノ保護（例えばモノ−ベンジル保護）されたその誘導体の、本明細書中で先に定義された式ＩＩの化合物との、４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリルの調製に対して本明細書中で先に記載したもの（方法（ｉｉ））と同様な条件下の反応、それに続く得られた中間体の標準的な条件下の脱保護（当てはまる場合）によって調製することができる。
【００２７】
４−｛［３−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−イル）プロピル］−アミノ｝ベンゾニトリルは、本明細書中で先に定義した通りの式Ｉの化合物の、９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノナン又はモノ保護（例えばモノ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護）されたその誘導体との、例えば４−（｛３−［７−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノン−３−イル］プロピル｝アミノ）ベンゾニトリル（方法（ｉ））、及び／又は化合物Ａの調製に対して本明細書中で先に記載したものと同様な条件下の反応、それに続く得られた中間体の標準的条件下の脱保護（当てはまる場合）によって調製することができる。
【００２８】
式Ｉ及びＩＩの化合物、並びにベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピル及び９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］−ノナン（及びその保護された誘導体）は、本明細書中で以下に記載されるように調製することができる。
【００２９】
本明細書中で先に記載した化合物Ａ及び中間体は、その反応混合物から慣用的な技術を使用して単離することができる。更に、化合物Ａは、その後再結晶のような慣用的技術によって精製することができる。再結晶の手順のために適した溶媒は、低級アルキルアルコール（例えばエタノールのようなＣ１−４アルコール）、水及びこれらの混合物を含む。好ましい再結晶用溶媒は、エタノール／水である。
【００３０】
先に記載した方法において、中間体化合物の官能基は、保護基によって保護してもよいし、或いは保護する必要があるかもしれないことは当業者によって認識されるものである。
【００３１】
保護されることが所望される官能基はアミノを含む。アミノに対する適した保護基は、ベンジル、スルホンアミド（例えばベンゼンスルホンアミド）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、９−フルオレニル−メトキシカルボニル又はベンジルオキシカルボニルを含む。
【００３２】
官能基の保護及び脱保護は、本明細書中で先に記載した反応工程のいずれもの前又は後で行うことができる。
【００３３】
保護基は、当業者にとって公知であり、そして本明細書中で以下に記載される技術によって除去することができる。
【００３４】
保護基の使用は、“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”ｅｄｉｔｅｄ　ｂｙ　Ｊ．Ｗ．Ｆ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ（１９７３）及び“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，３ｒｄ　ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ　＆　Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｚ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（１９９９）中に充分に記載されている。
【００３５】
当業者は、化合物Ａを別の方法で、そしてある場合には更に好都合な様式で得るために、本明細書中で記載した個々の方法の工程を、異なった順序で行うことができ、及び／又は個々の反応を全体の経路の異なった段階で行うことができる（即ち本明細書中の特定の反応に伴なったものとは異なった中間体に、置換基を加え、及び／又はそれの化学的転換を行うことができる）ことを認識するものである。これは、特に特定の基質中に存在する他の官能基、重要な中間体の入手の可能性及び適応される保護基戦略（もしあれば）のような要素に依存するものである。明らかなことに、関係する化学反応の種類は、前記の合成工程で使用される試薬の精選、使用される保護基の必要性及び種類、並びに合成を達成するための順序に影響を与えるものである。
【００３６】
医学的及び薬剤学的使用
化合物Ａは、その薬理学的活性を保有するために有用である。従ってこれは、医薬として望ましい。
【００３７】
従って、本発明の更なる側面によれば、医薬として使用するための化合物Ａが提供される。
【００３８】
特に、化合物Ａは、例えば以下に記載される試験において証明されるような心筋の電気生理学的活性を示す。
【００３９】
従って化合物Ａは、不整脈、そして特に心房性及び心室性不整脈の予防及び治療の両方において有用であることが期待される。
【００４０】
従って化合物Ａは、心臓疾病、或いは虚血性心臓疾病、急性心臓発作、心筋梗塞、心不全、心臓手術及び血栓塞栓性的事象を含む不整脈が主要な役割を演じると信じられる心臓疾病に関係する徴候の治療又は予防において指示される。
【００４１】
不整脈の治療において、化合物Ａは、選択的に心臓の再分極化（ｒｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）を遅延し、従ってＱＴ時間（ＱＴ　ｉｎｔｅｒｖａｌ）を延長し、そして特にクラスＩＩＩ活性を示すことが見出されている。化合物Ａが特に不整脈の治療においてクラスＩＩＩ活性を示すことが見出されているが、その活性の様式は、必ずしもこのクラスに限定されない。
【００４２】
本発明の更なる側面によれば、不整脈を治療するための方法が提供され、この方法は、このような症状を病んでいる又は感受性なヒトに対して治療上有効な量の化合物Ａの投与を含んでなる。
【００４３】
医薬的製剤
化合物Ａは、通常経口的に、皮下的に、静脈内的に、動脈内的に、経皮的に、鼻腔的に、吸入によって又はいかなる他の非経口的経路によっても、活性成分を製剤上許容される投与剤形で含んでなる医薬製剤の形態で投与されるものである。疾患及び治療される患者、並びに投与の経路によって、化合物Ａは、種々の薬用量で投与することができる。
【００４４】
好ましい医薬製剤は、化合物Ａ及び製剤上許容される担体及び／又は他の手段を含んでなる改変放出医薬組成物を含み、これらの担体及び手段（当てはまる場合）は、活性成分の改変された放出を与え、そしてこれは経口投与に適応される。
【００４５】
適した製剤は、化合物Ａがポリマー基剤に固定されたものを含む。（例えば親水性ゲル化成分及び活性成分を含んでなるゲル化基剤改変放出系（ｇｅｌｌｉｎｇ　ｍａｔｒｉｘ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｒｅｌｅａｓｅ　ｓｙｓｔｅｍ）の形態で）。
【００４６】
適した親水性ゲル化成分は、キサンタン、ヒドロキシプロピルセルロース、バクガデキストリン、スクレログルカン、カルボキシポリメチレン、ポリ（エチレンオキシド）、ヒドロキシエチルセルロース及びヒドロキシプロピルメチルセルロースを含む。このような製剤は、標準的技術によって調製することができる。
【００４７】
化合物Ａは、更に不整脈及び／又は他の心臓疾患の治療において有用ないかなる他の薬物とも組み合わせることができる。
【００４８】
従って本発明の更なる側面によれば、化合物Ａを製剤上許容されるアジュバント、希釈剤又は担体との混合物中に含む医薬製剤が提供される。
【００４９】
ヒトの療法的治療における化合物Ａの適した毎日の投与量は、経口投与において約０．００５ないし２５．０ｍｇ／ｋｇ体重であり、そして非経口投与において約０．００５ないし１０．０ｍｇ／ｋｇ体重である。ヒトの療法的治療における化合物Ａの毎日の投与量の好ましい範囲は、経口投与において約０．００５ないし１０．０ｍｇ／ｋｇ体重であり、そして非経口投与において約０．００５ないし５．０ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００５０】
化合物Ａの典型的な毎日の投与量は、その日中に投与される組成物（例えば錠剤）の数に関係なく、１０ないし２０００ｍｇ、２５（例えば３０）ないし１２００ｍｇの範囲の遊離塩基（即ち対イオンの存在によるいかなる重量も除外して）である。好ましい毎日の投与量は、１００ないし５００ｍｇのような５０ないし１０００ｍｇの範囲である。従って個々の組成物（例えば錠剤）中の典型的な投与量は、１５ないし５００ｍｇ、例えば４０ないし４００ｍｇの範囲である。
【００５１】
化合物Ａは、これが心臓の不整脈に対して有効であるという利益を有する。
【００５２】
化合物Ａは、更にこれが、従来の技術において既知の化合物より、より有効であり、より毒性が低く、より広い活性の範囲（クラスＩ、クラスＩＩ、クラスＩＩＩ及び／又はクラスＩＶ活性のいずれもの組み合わせ（特にクラスＩＩＩの活性に加えてクラスＩ及び／又はクラスＩＶ活性）を示すことを含む）を有し、より強力であり、より長く作用し、より少ない副作用（より低いトルサードドポワンのような前不整脈の発生を含む）を生じ、より容易に吸収され、又はこれが他の有用な薬理学的特性を有することができるという利益を有する。
【００５３】
生物学的試験
試験Ａ
麻酔されたモルモットにおける一次電気生理学的効果
体重６６０ないし１１００ｇのモルモットを使用した。モルモットを実験の前少なくとも１週間飼育し、そしてこの期間食餌及び水道水に自由に接近させた。
【００５４】
麻酔をペントバルビタール（４０ないし５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により誘導し、そしてカテーテルを片方の頚動脈に（血圧の記録及び血液試料採取のため）、そして片方の頚静脈に（薬物注入のため）導入した。針状電極をＥＣＧ（誘導（ｌｅａｄ）ＩＩ）の記録のために四肢に置いた。サーミスタを直腸に入れ、そしてモルモットを３７．５ないし３８．５℃間の直腸温度に設定された加熱パッド上に置いた。
【００５５】
気管切開を行い、そしてモルモットを、血中ガスをこの種の正常な範囲に保つように設定された小動物ベンチレーターの使用によって室内空気で人工的に換気した。自律的影響を減少するために両方の迷走神経を頸部で切断し、そして０．５ｍｇ／ｋｇのプロプラノロールを実験開始の１５分前に静脈内に投与した。
【００５６】
左の心室心外膜を左側開胸術によって暴露し、そして単相活動電位（ＭＡＰ）の記録のために特別に設計された吸入電極を左心室自由壁に適用した。電極を受容可能なシグナルが記録される限りはその位置に保ち、さもなければこれを新しい位置に移動した。ペーシング（ｐａｃｉｎｇ）のための双極電極を左心房にクリップ留めした。ペーシング（２ミリ秒の時間、心拡張期閾値の二倍）を、特別製の定電流シミュレーターで行った。心臓は、正常な洞拍数（ｓｉｎｕｓ　ｒａｔｅ）よりわずか上の周波数で、研究中を通して５分毎に１分間歩調取りされた。
【００５７】
血圧、ＭＡＰシグナル及び誘導ＩＩ　ＥＣＧをＭｉｎｇｏｇｒａｐｈインクジェット記録器（Ｓｉｅｍｅｎｓ−Ｅｌｅｍａ，Ｓｗｅｄｅｎ）で記録した。全てのシグナルを、それぞれのペーシングシーケンスの最後の１０秒間、及び洞リズムに続く１分の最後の１０秒間、ＰＣに収集（試料採取周波数１０００Ｈｚ）した。シグナルを、実験動物で測定された生理学的シグナルの取得及び分析のために開発された特別製のプログラム（Ａｘｅｎｂｏｒｇ　ａｎｄ　Ｈｉｒｓｃｈ，Ｃｏｍｐｕｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｐｒｏｇｒａｍｓ　Ｂｉｏｍｅｄ．４１，５５（１９９３）を参照）を使用して加工した。
【００５８】
試験の手順は、５分離れたペーシング及び洞リズムの両方の間の二つの基底対照記録を得ることからなっていた。第２の対照の記録後、試験物質の第１の投与量を、０．２ｍＬの容積で頚静脈のカテーテルに３０秒間で注入した。３分後、ペーシングを開始し、そして新しい記録を取った。先の投与の５分後、試験物質の次の投与量を投与した。６ないし１０回の連続した投与量をそれぞれの実験中に与えた。
【００５９】
データ分析
この分析において測定された多くの変数のうち、活性化合物の比較及び選択のために最も重要なものとして、三つが選択された。選択された三つの変数は、ペーシング中の７５パーセント再分極におけるＭＡＰ期間、ペーシング中の房室（ＡＶ）伝導時間（心房歩調取りパルス及び心室ＭＡＰの開始間の間隔として定義される）、及び心拍数（洞リズム中のＲＲ間隔として定義される）であった。心収縮期及び心拡張期血圧を、麻酔されたモルモットの血行力学状態を判定するために測定した。更に、ＥＧＣを不整脈及び／又は形態学的変化に対して確認した。
【００６０】
二つの対照記録の平均をゼロに設定し、そして試験物質の連続した投与後に記録された効果を、この値からの変化のパーセントとして表示した。これらのパーセント値を、それぞれの記録の前に投与された累積投与量に対してプロットすることによって、容量−反応曲線を構築することが可能であった。この方法において、それぞれの実験により、一つはＭＡＰ期間に対する、一つはＡＶ−伝導時間に対する、そして一つは洞周波数（ＲＲ間隔）に対する三つの容量−反応曲線を得た。試験物質によって行われた全ての実験の平均曲線を計算し、そして平均曲線から力価（ｐｏｔｅｎｃｙ　ｖａｌｕｅｓ）を誘導した。これらの実験の全ての容量−反応曲線は、得られたデータ点の線形接続によって構築された。ＭＡＰ期間を基線から１０％延長した累積投与量を、調査中の薬剤のクラスＩＩＩ電気生理学的効力を評価する指針として使用した（Ｄ１０）。
【００６１】
試験Ｂ
遅延整流体Ｋ電流（ｄｅｌａｙｅｄ　ｒｅｃｔｏｆｉｅｒ　Ｋ　ｃｕｒｒｅｎｔ）の遮断剤を検出するためのモデルとしてのグルココルチコイド処理されたマウスの線維芽細胞
Ｋチャンネル遮断に対するＩＣ５０を、グルココルチコイド処理されたマウスの線維芽細胞の膜電位差の変化に基づいてマイクロタイタープレートに基づくスクリーニング法を使用して決定した。グルココルチコイド処理されたマウスの線維芽細胞の膜電位差を、ビスオキソノール染料ＤｉＢａｃ４（３）の蛍光を使用して測定し、これは、蛍光レーザー映像化プレートリーダー（ＦＬＩＰＲ）を使用して信頼性を持って検出することができた。遅延整流体カリウムチャンネルの発現を、グルココルチコイドデキサメハゾン（ｄｅｘａｍｅｈａｓｏｎｅ）（５μＭ）に２４時間暴露することによってマウスの線維芽細胞中に誘導した。これらのカリウムチャンネルの遮断は、線維芽細胞を脱分極し、ＤｉＢａｃ４（３）の蛍光の増加となる。
【００６２】
マウスの１ｔｋ線維芽細胞（Ｌ−細胞）を、Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａ，ＶＡ）から購入し、そして胎児ウシ血清（５％容積／容積）、ペニシリン（５００単位／ｍＬ）、ストレプトマイシン（５００μｇ／ｍＬ）及びＬ−アラニン−Ｌ−グルタミン（０．８６２ｍｇ／ｍＬ）で補充した、Ｄｕｌｂｅｃｃｏｓの改質イーグル培地中で培養した。細胞を、３−４日毎にトリプシン（カルシウムを含まないリン酸緩衝生理食塩水中の０．５ｍｇ／ｍＬ、Ｇｉｂｃｏ　ＢＲＬ）を使用して継代した。実験の３日前に、細胞懸濁液を、透明な底の黒のプラスチックの９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ）に、２５　０００細胞／ウェルの割合でピペットで移した。
【００６３】
蛍光プローブＤｉＢａｃ４（３）（ＤｉＢａｃ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒプローブ）を膜電位差を測定するために使用した。ＤｉＢａｃ４（３）は、４８８ｎＭで最大に吸収し、そして５１３ｎＭで放射する。ＤｉＢａｃ４（３）は、ビスオキソノールであり、従ってｐＨ７において負に荷電している。その負の電荷のために、膜を通してのＤｉＢａｃ４（３）の分布は、経膜的電位差に依存し；細胞が脱分極している（即ち細胞内部が、細胞外部に対してより少なく負になる）場合、細胞の内側のＤｉＢａｃ４（３）濃度は、静電力のために増加する。細胞の内側に入った時点で、ＤｉＢａｃ４（３）分子は、脂質及びタンパク質と結合することができ、これは蛍光放出の増加を起こす。従って、脱分極は、ＤｉＢａｃ４（３）蛍光の増加によって反映される。ＤｉＢａｃ４（３）蛍光の変化は、ＦＬＩＰＲによって検出される。
【００６４】
それぞれの実験に先立って、細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で４回洗浄して、全ての培養培地を除去した。次いで細胞を、５μＭのＤｉＢａｃ４（３）（１８０μＬのＰＢＳ中）で３５℃で処理した。安定な蛍光に達した時点で（通常１０分後）、２０μＬの試験物質を、ＦＬＩＰＲの内部９６ウェルピペット装置を使用して加えた。次いで蛍光の測定を２０秒毎に更に１０分間採取した。遅延整流体カリウムチャンネルの伝導性及びＤｉＢａｃ４（３）蛍光の両方が高温感受性であるために、全ての実験は３５℃で行った。試験物質を、第２の９６ウェルプレート中で、５μＭのＤｉＢａｃ４（３）を含有するＰＢＳ中で調製した。実験中の物質の添加中に更なる１：１０の希釈が起こるために、調製された物質の濃度は、実験中の所望の濃度の１０倍であった。Ｄｏｆｅｔｉｌｉｄｅ（１０μＭ）を正の対照として、即ち蛍光の最大の増加を決定するために使用した。
【００６５】
ＩＣ５０値を決定するために使用された曲線当てはめは、Ｇｒａｐｈｐａｄ　Ｐｒｉｓｍプログラム（Ｇｒａｐｈｐａｄ　Ｓｏｆｔｗａｒｅ　Ｉｎｃ．，Ｓａｎ　Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて行った。
【００６６】
試験Ｃ
試験化合物の代謝安定性
Ｉｎ　ｖｉｔｒｏのスクリーニングを、化合物Ａの代謝安定性を決定するために設定した。
【００６７】
補因子としてのＮＡＤＰＨを有する、イヌ、ヒト、ウサギ及びラット由来の肝臓のＳ−９画分を使用した。アッセイの条件は、次の通り：Ｓ−９（３ｍｇ／ｍＬ）、ＮＡＤＰＨ（０．８３ｍＭ）、ｐＨ７．４のＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（５０ｍＭ）及び１０μＭの試験化合物であった。
【００６８】
反応は、試験化合物の添加によって開始され、そして試料のｐＨを１０より高く上昇する（ＮａＯＨ；１ｍＭ）ことによって、０、１、５、１５及び３０分後に終結した。溶媒抽出後、試験化合物の濃度をＬＣ（蛍光／ＵＶ検出）によって内部標準に対して測定した。
【００６９】
３０分後に残存した試験化合物のパーセント（そして従ってｔ１／２）を計算し、そして代謝安定性に対する測定値として使用した。
【００７０】
本発明は、以下の実施例によって例示される。
【００７１】
実施例
一般的な実験手順
質量スペクトルは、次の計器の一つによって記録された：エレクトロスプレーによるＷａｔｅｒｓ　ＺＭＤ単一四重極型（Ｓ／Ｎ　ｍｃ３５０）；Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ　ＳｃｉＸ　ＡＰＩ　１５０ｅｘ分光計；ＶＧ　Ｑｕａｔｔｒｏ　ＩＩ三重四重極型；ＶＧ　Ｐｌａｔｆｏｒｍ　ＩＩ単一四重極型；又はＭｉｃｒｏｍａｓｓ　Ｐｌａｔｆｏｒｍ　ＬＣＺ単一四重極型質量分光計（最後の三つの計器は、空気圧により（ｐｎｅｕｍａｔｉｃａｌｌｙ）補助されたエレクトロスプレーインターフェース（ＬＣ−ＭＳ）を備えていた）。１Ｈ　ＮＭＲ及び１３Ｃ　ＮＭＲ測定は、ＢＲＵＫＥＲ　ＡＣＰ　３００並びにそれぞれ３００、４００及び５００ＭＨｚの１Ｈ周波数で、そしてそれぞれ７５．５、１００．６及び１２５．７ＭＨｚの１３Ｃ周波数で操作される、Ｖａｒｉａｎ　３００、４００及び５００分光計で行った。別の方法として、１３Ｃ　ＮＭＲ測定は、５０．３ＭＨｚの周波数で、ＢＲＵＫＥＲ　ＡＣＥ　２００分光計で行った。
【００７２】
ロータマーは、スペクトルの解釈の容易さによって、スペクトル中に表示することができるかもしれないし、あるいはできないかもしれない。他に記載されない限り、化学シフトは、内部標準としての溶媒とともにｐｐｍで与えられている。
【００７３】
実施例１
（ｉ）４−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］ベンゾニトリル
選択肢（ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ）１　４−フルオロベンゾニトリル（１２．０ｇ、９９．１ｍｍｏｌ）及び３−アミノ−１−プロパノール（５９．６ｇ、７９３ｍｍｏｌ）の混合物を、８０℃の不活性雰囲気下で３時間撹拌してから、水（１５０ｍＬ）を加えた。混合物を室温まで冷却させ、そして次いでジエチルエーテルで抽出した。有機層を分離し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮して、１７ｇ（９７％）の副標題化合物を、油状物として得て、これは静置により結晶化した。
【００７４】
選択肢２　４−フルオロベンゾニトリル（２４．６ｇ、０．２０３ｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ　９９％）を、３−アミノ−１−プロパノール（１２２．０ｇ、１．６２５ｍｏｌ、８当量、Ａｌｄｒｉｃｈ　９９％）に加え、そして混合物を８０℃で５時間窒素下で加熱した。溶液を２２℃まで冷却させ、そして水（３００ｍＬ）を加えた。濁った溶液を塩化メチレンで２回（３００ｍＬ及び２００ｍＬ）抽出し、そして混合した塩化メチレン抽出物を水で洗浄した（３００ｍＬ；有機層のＧＣ分析は、約１．０面積％のアミノプロパノールの残存を与えた）。
【００７５】
選択肢３　４−フルオロベンゾニトリル（３０．２９ｇ、２４７．７ｍｍｏｌ、１．０当量）に、３−アミノ−１−プロパノール（１５０ｍＬ、１４８．８ｇ、１９８１．５ｍｍｏｌ、８．０当量）を加えた。混合物を窒素下の室温（２７℃）で、全ての固体が溶解するまで撹拌した。溶液を７７℃に加熱（油浴）し、そしてこの温度を７時間保ってから、周囲温度で一晩（１４時間）撹拌した。水（３６５ｍＬ）を加え、そして得られた濁った溶液をジクロロメタン（３６５ｍＬ次いで２４５ｍＬ）で抽出した。混合した有機層を水（３６５ｍＬ）で洗浄した。生成物のＤＣＭ溶液を蒸留によって乾燥し：溶媒（２００ｍＬ）を除去し、そして新しいＤＣＭ（２００ｍＬ）で置き換えた。更に溶媒（２５０ｍＬ）を除去して、全体の溶媒の容積を３６５ｍＬとした。
【００７６】
（ｉｉ）４−メチルベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピル
選択肢Ｉ　４−［（３−ヒドロキシプロピル）−アミノ］ベンゾニトリル（上記工程（ｉ）（選択肢１）から；１７ｇ、９６．５ｍｍｏｌ）の乾燥ＭｅＣＮ（１９５ｍＬ）中の冷却（０℃）された溶液を、トリエチルアミン（９．８ｇ、９６．５ｍｍｏｌ）、そして次いで塩化ｐ−トルエンスルホニル（２０．２ｇ、１０６ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を０℃で９０分間撹拌してから、真空中で濃縮した。水（２００ｍＬ）を残留物に加え、そして水溶液をＤＣＭで抽出した。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、そして真空中で濃縮した。得られた残留物をイソ−プロパノールからの結晶化によって精製して、２４．６ｇ（７７％）の表題化合物を得た。
【００７７】
選択肢ＩＩ　粗製４−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］−ベンゾニトリルの溶液（上記工程（ｉ）（選択肢２）から）を、蒸留によって３００ｍＬの容積まで濃縮し、そして更に２００ｍＬの塩化メチレンを加え、そして３００ｍＬまで再蒸留した（カールフィッシャーによる０．０７％の溶液の水）。トリエチルアミン（２０．５５ｇ、０．２０３ｍｍｏｌ）、続いて４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル−アミノ）ピリジン（２４８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を加え、そして溶液を０℃に冷却した。塩化トシル（３８．７ｇ、０．２０３ｍｏｌ）の塩化メチレン（１５０ｍＬ）中の溶液を約３０分かけて、冷却し、そしてよく撹拌し、温度を５℃まで上昇させながら加えた。反応物を２３時間、３ないし５℃の範囲で窒素下で撹拌した。（５時間後、トリエチルアミン塩酸塩の沈殿が起こった。ＴＬＣは、２０−２３時間においてあったとしても非常にわずかな残留シアノアルコールの更なる転換を示した。）水（３００ｍＬ）を加え、そして層を１５分間激しく撹拌した。有機溶液を３５ないし４０℃での蒸留によって約６０ないし７０ｍＬの容積まで濃縮した。イソプロパノール（１００ｍＬ）を５分かけて加えた。（この段階で、イソプロパノールの添加に先立って、ある程度の生成物の粒状の沈殿が起こった。イソプロパノールの添加により、結晶化が急速に起こった。）真空を使用して蒸留を継続して、最後の塩化メチレンを除去した。（更に約３０ｍＬを除去し、そして留出物を塩化メチレンが存在しないことをＧＣによって確認した。）結晶のスラリーを０ないし５℃に、約１時間かけてゆっくりと撹拌しながら冷却し、そして０−５℃に１時間保持した。結晶を中度の焼結濾過器（ｍｅｄｉｕｍ　ｓｉｎｔｅｒ）で濾過し、そして圧縮した湿った濾過ケークを冷（０℃）イソプロパノール（８０ｍＬ）で注意深く洗浄した。濾過ケークを真空及び窒素の流れ下で一晩乾燥した。収量：５２．６ｇ、７８．４モル％；ＨＰＬＣ：９９．６４面積％。
微量分析：実測値（理論値）：％Ｃ：６１．６０（６１．６７）；％Ｈ：５．４１（５．４９）；％Ｎ：８．４４（８．４７）；％Ｓ：９．７１（９．７０）。
【００７８】
（ｉｉｉ）Ｎ，Ｎ−ビス（２−オキシラニルメチル）ベンゼンスルホンアミド
水（２．５Ｌ、１０容積）続いてエピクロロヒドリン（５００ｍＬ、４当量）を、ベンゼンスルホンアミド（２５０ｇ、１当量）に加えた。反応物を４０℃に加熱した。水酸化ナトリウム水溶液（２７５ｍＬの水中の１３０ｇ）を、反応物の温度が４０ないし４３℃間に維持されるように加えた。これは概略２時間を要した。（水酸化ナトリウムの添加の速度は、記載した温度範囲内に保つために、添加の開始において最後よりゆっくりである必要がある。）水酸化ナトリウムの添加が完了した後、反応物を４０℃で２時間、次いで周囲温度で一晩撹拌した。過剰のエピクロロヒドリンを、水との共沸物として真空蒸留（約４０ミリバール、内部温度３０℃）によって、エピクロロヒドリンが更に蒸留されなくなるまで除去した。ジクロロメタン（１Ｌ）を加え、そして混合物を１５分間急速に撹拌した。層を分離させた（これは１０分を要したが、完全に透明な相は、一晩静置した後得られた）。相を分離し、そして以下のその後の工程においてこのジクロロメタン溶液を使用した。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ　２．５５−２．６５（２Ｈ，ｍ），２．７９（２Ｈ，ｔ，Ｊ４．４），３．１０−３．２２（４Ｈ，ｍ），３．５８−３．７３（２Ｈ，ｍ），７．５０−７．５６（２Ｈ，ｍ），７．５８−７．６３（１Ｈ，ｍ），７．８３−７．８７（２Ｈ，ｍ）。
【００７９】
（ｉｖ）５−ベンジル−３，７−ジヒドロキシ−１−フェニルスルホニル−１，５−ジアザシクロオクタン
ＩＭＳ（２．５Ｌ、１０容積）を、上記工程（ｉｉｉ）からのジクロロメタン溶液に加えた。溶液を内部温度が７０℃に達するまで蒸留した。概略１２５０ｍＬの溶媒を収集した。更にＩＭＳ（２．５Ｌ、１０容積）を、続いてベンジルアミン（１２０ｍＬ、０．７当量）を一度に加え（発熱は見られず）、そして反応物を還流で６時間加熱した（２時間目の試料採取時点から変化無し）。更にベンジルアミン（１５ｍＬ）を加え、そして溶液を更に２時間加熱した。ＩＭＳを蒸留して除去し（約３．２５Ｌ）、そしてトルエン（２．５Ｌ）を加えた。更に溶媒を蒸留し（約２．４Ｌ）、そして次いで更にトルエン（１Ｌ）を加えた。頂部温度は、この時点で１１０℃であった。更に２５０ｍＬの溶媒を１１０℃で収集した。理論的には、これにより１１０℃で、約２．４Ｌのトルエン中に生成物が残された。この溶液を次の工程において使用した。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ　７．８３−７．８０（４Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．６３−７．５１（６Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．３０−７．２１（１０Ｈ，ＡｒＨ），３．８９−３．８０（４Ｈ，ｍ，ＣＨ（ａ）＋ＣＨ（ｂ）），３．７３（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２Ｐｈ（ａ）），３．７０（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２Ｐｈ（ｂ）），３．５９（２Ｈ，ｄｄ，ＣＨＨＮＳＯ２Ａｒ（ａ）），３．５４（２Ｈ，ｄｄ，ＣＨＨＮＳＯ２Ａｒ（ｂ）），３．４０（２Ｈ，ｄｄ，ＣＨＨＮＳＯ２Ａｒ（ｂ）），３．２３（２Ｈ，ｄｄ，ＣＨＨＮＳＯ２Ａｒ（ａ）），３．０９−２．９７（４Ｈ，ｍ，ＣＨＨＮＢｎ（ａ）＋ＣＨＨＮＢｎ（ｂ）），２．８３（２Ｈ，ｄｄ，ＣＨＨＮＢｎ（ｂ）），２．７１（２Ｈ，ｄｄ，ＣＨＨＮＢｎ（ａ））
（データは、ｔｒａｎｓ−（ａ）、及びｃｉｓ−ジオール（ｂ）の１：１混合物を含んでなる精製した物質から得られた）。
【００８０】
（ｖ）３−ベンジル−７−（フェニルスルホニル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノナン
上記の先の工程（ｉｖ）からのトルエン溶液を５０℃に冷却した。無水のメタンスルホン酸（０．２Ｌ）を加えた。これは５０℃から６４℃への温度上昇を起こした。１０分後、メタンスルホン酸（１Ｌ）を加え、そして反応物を１１０℃で５時間加熱した。次いでトルエンを反応物から蒸留し；１．２３Ｌを収集した。（内部温度は、いかなる段階でも１１０℃より高くさせるべきではなく、さもなければ収率が減少するものであることに注意。）次いで反応物を５０℃に冷却し、そして真空を適用して、残りのトルエンを除去した。１１０℃への加熱及び６５０ミリバールは、更に０．５３Ｌの除去を可能にした。（トルエンがより低い温度及び圧力で除去することができる場合、これは利益をもたらす。）次いで反応物を３０℃まで放冷し、そして脱イオン水（２５０ｍＬ）を加えた。これは３０℃から４５℃への温度の上昇を起こした。更に水（２．１５Ｌ）を、温度が５４℃より低くなるように合計３０分の時間をかけて加えた。溶液を３０℃に冷却し、そして次いでジクロロメタン（２Ｌ）を加えた。外部冷却及び急速な撹拌をしながら、反応混合物を水酸化ナトリウム水溶液（１０Ｍ、２Ｌ）を内部温度を３８℃より低く保つ速度で加えることによって塩基性化した。これは８０分を要した。撹拌を停止し、そして相を３分で分離した。層を分配した。ＩＭＳ（２Ｌ）をジクロロメタン溶液に加え、そして蒸留を開始した。溶媒（２．４４Ｌ）を、頂部温度が７０℃に達するまでに収集した。理論的には、これは１．５６ＬのＩＭＳ中の生成物を残す。次いで溶液をゆっくりと撹拌しながら一晩で周囲温度まで冷却させた。沈殿した固体の生成物を濾過し、そしてＩＭＳ（０．５Ｌ）で洗浄して、淡黄褐色の生成物を得て、これを５０℃で真空中で乾燥して、５０．８ｇ（３工程で８．９％）を得た。２０．０ｇのこの生成物をアセトニトリル（１００ｍＬ）中に還流で溶解して、淡黄色の溶液を得た。周囲温度まで冷却した後、形成した結晶を濾過により収集し、そしてアセトニトリル（１００ｍＬ）で洗浄した。生成物を真空中の４０℃で１時間乾燥して、１７．５ｇ（８７％）の副標題化合物を得た。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ　７．１８−７．２３（１０Ｈ，ｍ），３．８６−３．８４（２Ｈ，ｍ），３．６７（２Ｈ，ｄ），３．４６（２Ｈ，ｓ），２．９１（２Ｈ，ｄ），２．８５（２Ｈ，ｄｄ），２．５６（２Ｈ，ｄｄ）。
【００８１】
（ｖｉ）３−ベンジル−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノナン×２ＨＣｌ
濃臭化水素酸（１．２Ｌ、３相対容積（３　ｒｅｌ．ｖｏｌ．））を、固体の３−ベンジル−７−（フェニルスルホニル）−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノナン（４００ｇ、上記（ｖ）参照）に加え、そして混合物を窒素雰囲気下の還流で加熱した。固体は９５℃で酸に溶解した。反応物を８時間加熱した後、ＨＰＬＣ分析は反応が完結したことを示した。内容物を室温まで冷却した。トルエン（１．２Ｌ、３相対容積）を加え、そして混合物を激しく１５分間撹拌した。撹拌を停止し、そして相を分配した。トルエン相を少量の界面の物質と共に廃棄した。酸性の相を元の反応容器に戻し、そして水酸化ナトリウム（１０Ｍ、１．４Ｌ、３．５相対容積）を一度に加えた。内部温度は３０℃から８０℃に上昇した。ｐＨを確認して、これが＞１４であることを確実にした。トルエン（１．６Ｌ、４相対容積）を加え、そして温度は８０℃から６０℃に低下した。３０分間激しく撹拌した後、相を分配した。水相を少量の界面の物質と共に廃棄した。トルエン相を元の反応容器に戻し、そして２−プロパノール（４Ｌ、１０相対容積）を加えた。温度を４０℃ないし４５℃に調節した。濃塩酸（２００ｍＬ）を、温度が４０℃ないし４５℃間のままであるように４５分かけて加えた。白色の沈殿物が形成した。混合物を３０分間撹拌し、そして次いで７℃に冷却した。生成物を濾過によって収集し、２−プロパノール（０．８Ｌ、２相対容積）で洗浄し、吸引によって乾燥し、そして次いで４０℃の真空オーブンで更に乾燥した。
収量＝２９７ｇ（９１％）。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ＋４滴のＤ２Ｏ）：δ　２．７０（ｂｒ　ｄ，２Ｈ），３．０９（ｄ，２Ｈ），３．４７（ｂｒ　ｓ，４Ｈ），３．６０（ｓ，２Ｈ），４．１２（ｂｒ　ｓ，２Ｈ），７．３０−７．４５（ｍ，５Ｈ）
ＡＰＩ　ＭＳ：ｍ／ｚ＝２１９［Ｃ１３Ｈ１８Ｎ２Ｏ＋Ｈ］＋。
【００８２】
（ｖｉｉ）３，３−ジメチル−１−［９−オキサ−７−（フェニルメチル）−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−イル］−２−ブタノン
水（５００ｍＬ、５容積）続いて１クロロピナコロン（４５．８ｍＬ、１当量）を、重炭酸ナトリウム（１１４．２ｇ、４当量）に加えた。３−ベンジル−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノナン×２ＨＣｌ（１００．０ｇ；上記工程（ｖｉ）参照）の水（３００ｍＬ、３容積）中の溶液に、二酸化炭素の放出が制御されるようにゆっくりと加えた（２０分）。反応混合物を６５ないし７０℃で４時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、ジクロロメタン（４００ｍＬ、４容積）を加え、そして１５分間撹拌した後、相を分離した。水相をジクロロメタン（４００ｍＬ、４容積）で洗浄し、そして有機抽出物を混合した。溶液を蒸留し、そして溶媒を収集した（５５０ｍＬ）。エタノール（１Ｌ）を加え、そして蒸留を継続した。更に溶媒を収集した（６００ｍＬ）。エタノール（１Ｌ）を加え、そして蒸留を継続した。更に溶媒を収集した（５００ｍＬ）（頂部温度はこの時点で７７℃であった）。この溶液（理論的に１１５０ｍＬのエタノールを含有する）を次の工程で直接使用した。
１Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ　１．２１（９Ｈ，ｓ），２．０１−２．５９（２Ｈ，ｍ），２．６１−２．６５（２Ｈ，ｍ），２．８７−２．９８（４Ｈ，ｍ），３．３０（２Ｈ，ｓ），３．５２（２Ｈ，ｓ），３．８７（２Ｈ，ｂｒ　ｓ），７．２６（２Ｈ，ｄ，Ｊ７．６），７．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ７．６，７．６），７．４７（２Ｈ，ｄ，Ｊ７．６）。
【００８３】
（ｖｉｉｉ）３，３−ジメチル−１−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−イル）−２−ブタノン
木炭上のパラジウム（４４ｇ、０．４重量当量の６１％湿潤触媒、Ｊｏｈｎｓｏｎ　Ｍａｔｔｈｅｙ　Ｔｙｐｅ　４４０Ｌ）を、上記の先の工程（ｖｉｉ）からのエタノール溶液に加えた。混合物を４バールで水素化した。反応は５時間後に完結したと考えられた。触媒を濾過によって除去し、そしてエタノール（２００ｍＬ）で洗浄した。混合したエタノールの濾液を以下の工程（ｉｘ）で使用した。溶液の分析は、エタノール（理論的に１．３５Ｌ；実測値１．６５Ｌ）中の６１．８ｇの表題化合物を与えた。生成物の一部を単離し、そして精製した。分析は、精製した生成物に対して行った。
１Ｈ　ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ　１．１７（９Ｈ，ｓ），２．６９（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ１１．４，２．４），２．９３（２Ｈ，ｄ，Ｊ１０．８），３．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ１３．８），３．２６（２Ｈ，ｓ），３．３２（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ１４．１），３．６１（２Ｈ，ｂｒ　ｓ）。
【００８４】
この反応は、触媒とベンジル化出発物質のより低い重量比を使用して行うこともできる。これは、いくつかの異なった方法で、例えば異なった触媒（上記で使用したＴｙｐｅ　４４０Ｌ触媒におけるものとは異なった金属付加を持つＰｄ／Ｃ、又はＲｈ／Ｃのような）を使用することによって、及び／又は反応混合物の物質移動特性を改良する（改良された物質移動が、例えば上記の反応で記載したものより大きい規模で水素化を行うことによって得られることを当業者は認識するものである）ことによって達成することができる。そのような技術を使用して、触媒と出発物質の重量比は４：１０より低く（例えば４：１０ないし１：２０間に）減少することができる。
【００８５】
（ｉｘ）化合物Ａ
炭酸カリウム（５６．６ｇ、１．５当量）及び４−メチルベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピル（上記工程（ｉｉ）参照、９０．３ｇ、１当量）を、３，３−ジメチル−１−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−イル）−２−ブタノンのエタノール溶液（上記工程（ｖｉｉｉ）参照；分析から１．６５Ｌ中の６１．８ｇ）に加えた。反応物を８０℃で４時間加熱した。分析はある程度の反応物（８．３ｇ）が残存していることを示し、従って更に４−メチルベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピル（１２．２ｇ）を加え、そして得られたものを８０℃で４時間加熱した。溶媒（１．３５Ｌ）を蒸留し、次いで酢酸イソプロピル（２．５Ｌ）を加えた。溶媒（２．５１Ｌ）を除去した。酢酸イソプロピル（２．５Ｌ）を加えた。溶媒（０．７２５Ｌ）を除去した。内部温度はこの時点で８８℃であった。溶媒（０．８２５Ｌ）を除去し、生成物は酢酸イソプロピル溶液（理論的に２．０４Ｌ中）として残った。３４℃に冷却した後、水（０．５Ｌ）を加えた。恐らくはＰｄの黒色の懸濁物が混合物中にあった。水相のｐＨは１１であった。水酸化ナトリウム（１Ｍ、０．３１Ｌ）を温度が２５℃より低くなるようにして加え、そして混合物を激しく５分間撹拌した。水相のｐＨは１２であった。相を分離し、そして水相を廃棄した。更に水（０．５Ｌ）を加え、そして相を分離した。水相を廃棄した。残ったエステル溶液を濾過して、懸濁した粒子を除去し、そして次いで濾液を正確に２Ｌにした。次いで溶液を２×１Ｌの部分に分割した。
【００８６】
（高パラジウム含有率を含んでなる副標題生成物を製造することを避けるために、次の処理を行うことができる：Ｄｅｌｏｘａｎ（登録商標）樹脂（１２．５ｇ、２５重量％）を遊離塩基の溶液（１Ｌ）に加え、そして混合物を還流で激しく撹拌しながら５時間加熱した。次いで溶液を室温まで冷却し、そして２日間撹拌した。樹脂を濾過によって除去した）。
【００８７】
ベンゼンスルホン酸塩を製造するために必要なベンゼンスルホン酸の量を計算するために分析を行った。
【００８８】
ベンゼンスルホン酸（２０．０４ｇ、１当量、酸が純粋な一水和物であると仮定）の酢酸イソプロピル（２００ｍＬ）中の溶液を、遊離塩基の溶液（１Ｌ）に、激しく撹拌しながら５分かけて加え（可能ならば更にゆっくりの方が更に良い）、そして淡黄色の沈殿物が形成した。温度は１８℃から２２℃に上昇した。１０分後、混合物を１０℃に冷却し、そして生成物を濾過によって収集した。生成物を酢酸イソプロピル（２５０ｍＬ）で洗浄し、濾過器上で吸引乾燥し、次いで真空下の４０℃で２日間乾燥して、５９．０ｇ（３−ベンジル−９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノナン×２ＨＣｌから６１％）を得た。
【００８９】
（粗製ベンゼンスルホン酸塩は、別の方法として、ベンゼンスルホン酸の７０％（重量／重量）水溶液を、遊離塩基のエタノール溶液に加えることによって調製した）。
【００９０】
粗製副標題生成物を、一水和物として単離した。
【００９１】
エタノール（５００ｍＬ）及び水（２５０ｍＬ）を、粗製副標題化合物（５０．０ｇ）に加えた。溶液を７５℃に加熱した。物質は５５℃で全て溶解した。溶液を７５℃で５分間保持し、次いで５℃に１時間かけて冷却した。沈殿は１８℃で始まった。冷却された溶液を濾過し、そして濾液（ｆｉｌｔｒａｔｅ）をエタノール：水（２：１；１５０ｍＬ）で洗浄し、濾過器上で吸引乾燥し、そして次いで真空中の４０℃で乾燥して、純粋な副標題生成物（４１．２ｇ、８２％）を得た。
【００９２】
（この再結晶化は、必要な場合、反応容器に適合する、より大きい容積の溶媒により行うことができ、例えば
ＥｔＯＨ：水２：１、４５容積（６２％回収率が得られる）
ＥｔＯＨ：水６：１、３５容積（７０％回収率が得られる））。
【００９３】
副標題生成物を、再結晶化に続いて一水和物として単離した（単結晶Ｘ線回折によって決定した）。
【００９４】
実施例２
（ｉ）ベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピル
４−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］ベンゾニトリル（上記実施例１（ｉ）、選択肢３から、４３．６５ｇと仮定、２４７．７ｍｍｏｌ、１．０当量）のジクロロメタン中の溶液（全溶液の容積３６０ｍＬ）に、トリエチルアミン（５２ｍＬ、３７．６０ｇ、３７１．５５ｍｍｏｌ、１．５当量）、そしてトリエチルアミン塩酸塩（１１．８９ｇ、１２３．８５ｍｍｏｌ、０．５当量）を一度に連続して加えた。黄色の溶液を−２０℃に冷却（アセトン／ドライアイス浴又は冷却板を使用して）し、そして塩化ベンゼンスルホニル（３２ｍＬ、４３．７４ｇ、２４７．７ｍｍｏｌ、１．０当量）のジクロロメタン（２２０ｍＬ、シアノアルコールに対して５容積）中の溶液で均圧滴下漏斗（ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｅｑｕａｌｉｓｉｎｇ　ｄｒｏｐｐｉｎｇ　ｆｕｎｎｅｌ）を経由して処理した。溶液を内部温度が−１４℃を超えないように分割して加えた。添加が完了するまで２５分を要した。次いで混合物を−１５ないし−１０℃間で３５分撹拌した。水（３６５ｍＬ）を加え、そして温度を１０℃に上昇した。混合物を０℃に冷却し直し、そして１５分間激しく撹拌した。有機層（容積５７０ｍＬ）を収集し、そして常圧で蒸留して、ＤＣＭを除去した（４５０ｍＬ、ポット温度４０−４２℃、蒸留器頂部（ｓｔｉｌｌ−ｈｅａｄ）温度３８−３９℃）。エタノール（２５０ｍＬ）を加え、そして溶液を３０℃より低くまで冷却させてから、真空に切り替えた。更に溶媒を除去（４０ｍＬを収集、圧力５．２ｋＰａ（５２ミリバール）、ポット及び蒸留器頂部温度は、２１−２３℃であった）し、そして生成物が徐々に溶液から出てきた。蒸留をこの時点で停止し、そして更にエタノール（５０ｍＬ）を加えた。混合物を４０℃に温め（５０℃の湯浴）て、全ての固体を溶解し、そして水（９０ｍＬ）を滴下漏斗を経由してゆっくりと加えた。溶液を室温（２０℃）で一晩（１５時間）ゆっくりと撹拌し、この時点である程度の生成物が結晶化した。混合物を−５℃（氷／メタノール浴）に冷却し、そしてこの温度で２０分間撹拌してから、淡黄色の固体を濾過によって収集した。固体をエタノール／水混合物（４２ｍＬのＥｔＯＨ、８ｍＬのＨ２Ｏ）で洗浄し、そして３０分間吸引乾燥してから、真空オーブンで定重量まで乾燥（４０℃、７２時間）した。得られた粗製生成物の質量は４７．４２ｇ（１４９．９ｍｍｏｌ、６０％）であった。エタノール（１６０ｍＬ、８容積）を粗製生成物（２０．００ｇ、６３．２２ｍｍｏｌ、１．０当量）に加えた。混合物を窒素下で撹拌し、そして湯浴を使用して４０℃に温めた。この温度に達した時点で、全ての固体は溶解して、透明な黄色の溶液を得た。水（６０ｍＬ、３容積）を１０分の時間をかけて滴下により加え、この間内部温度を３８−４１℃の範囲に維持した。湯浴を取り除き、そして溶液を４０分かけて２５℃に冷却させ、この時点で結晶化が始まった。混合物を１０分間かけて−５℃に冷却し、次いでこの温度を更に１０分間保持した。淡黄色の固体を濾過により収集し、１０分間吸引乾燥し、次いで真空オーブンで定重量まで乾燥（４０℃、１５時間）した。得られた表題化合物の質量は、１８．５１ｇ（５８．５１ｍｍｏｌ、９３％（粗製生成物から））であった。
【００９５】
（ｉｉ）化合物Ａ
３，３−ジメチル−１−（９−オキサ−３，７−ジアザビシクロ［３．３．１］ノン−３−イル）−２−ブタノン（３４．９７ｇと仮定（分析により確認）、１５４．５ｍｍｏｌ、１．０当量；上記実施例１（ｖｉｉｉ）参照）のエタノール溶液（全容積７７０ｍＬ、アミンに対して概略２０容積）に、ベンゼンスルホン酸３−（４−シアノアニリノ）プロピル（４９．０５ｇ、１５４．５２ｍｍｏｌ、１．０当量；上記工程（ｉ）参照）を一度に加えた。得られた混合物を７４℃で６時間加熱し、次いで室温（２０℃）で６５時間撹拌した（週末にかけて（ｏｖｅｒ　ｔｈｅ　ｗｅｅｋｅｎｄ）；反応がこの室温における長期の撹拌がなくとも更に成功するものであることは、当業者は認識するものである）。エタノール（３７０ｍＬ）を除去し、そして水（２００ｍＬ）を加えた（これは２：１のＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏの混合物を与えた、全容積６００ｍＬ）。水の添加により、ポット温度は８０℃から６１℃に低下した。溶液を７０℃の再加熱し、次いで周囲温度まで一晩（１９時間）で自然に冷却させ、この間ゆっくりと撹拌した。固体がこの時点で観察された。混合物を０℃に冷却し、そして次いでこの温度で１５分間撹拌してから、オフホワイト色の固体を濾過によって収集した。固体をエタノール：水の２：１の冷混合物（１５０ｍＬ）で洗浄し、１．２５時間吸引乾燥し、次いでオーブン乾燥（４０℃、２０時間）した。得られた粗製生成物の質量は、５７．９１ｇ（１０３．３ｍｍｏｌ、６０％）であった。
【００９６】
粗製生成物は、９８．４７％の純度であることが見出され（ＨＰＣＬ分析により決定した）、そして再結晶化して（以下に詳細に記載される手順を使用して）、表題化合物を９９．７５％（８４％回収率）の純度で得た。
【００９７】
再結晶化の手順
エタノール（５６２ｍＬ）及び水（２８１ｍＬ）を、上記で得られた粗製生成物（５６．２ｇ）に加えた。溶液を７５℃に加熱した。全ての物質は５５℃で溶解した。溶液を７５℃で５分間保持してから、１．５時間かけて５℃に冷却した。沈殿は３５℃で始まった。冷却した溶液を濾過し、そして収集した沈殿物をエタノール：水（２：１、１６８ｍＬ）で洗浄した。固体物質を濾過器上で吸引乾燥してから、真空中の４０℃で乾燥して、生成物（４７．１ｇ、８４％）を得た。（この再結晶化の手順は、更に半分の溶媒からも行われ、生成物の回収率の８４％から９４％への増加が得られた）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ　１．０６（９Ｈ，ｓ），２．２−２．３（２Ｈ，ｍ），２．８９（２Ｈ，ｄ），３．１１（２Ｈ，ｄｄ），３．２７（２Ｈ，ｔ），３．３−３．４（４Ｈ，ｍ），３．７０（２Ｈ，ｓ），４．１−４．１５（４Ｈ，ｍ），６．３６（１Ｈ，ｔ），６．４４（２Ｈ，ｄ），７．２５−７．３（２Ｈ，ｍ），７．３３−７．４（３Ｈ，ｍ），７．８−７．９（２Ｈ，ｍ）。
【００９８】
化合物Ａは、上記の試験Ａで試験され、そして６．７のＤ１０値を示すことが見出された。
【００９９】
略語
ＡＰＩ　　＝常圧イオン化（ＭＳに関して）
ｂｒ　　　＝ブロード（ＮＭＲに関して）
ｄ　　　　＝二重線（ＮＭＲに関して）
ＤＣＭ　　＝ジクロロメタン
ｄｄ　　　＝二重線の二重線（ＮＭＲに関して）
ＤＭＦ　　＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ｅｑ．　　＝当量
Ｅｔ　　　＝エチル
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＥｔＯＨ　＝エタノール
ｈ　　　　＝時間
ＨＣｌ　　＝塩酸
ＨＰＬＣ　＝高性能液体クロマトグラフィー
ＩＭＳ　　＝工業用メタノール変性アルコール
ｍ　　　　＝多重線（ＮＭＲに関して）
Ｍｅ　　　＝メチル
ＭｅＣＮ　＝アセトニトリル
ｍｉｎ．　＝分
ＭＳ　　　＝質量スペクトル
ＮＡＤＰＨ＝ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、還元型
ＯＡｃ　　＝酢酸塩
Ｐｄ／Ｃ　＝炭素上のパラジウム
ｑ　　　　＝四重線（ＮＭＲに関して）
ｒｔ　　　＝室温
ｓ　　　　＝単一線（ＮＭＲに関して）
ｔ　　　　＝三重線（ＮＭＲに関して）
ＴＨＦ　　＝テトラヒドロフラン
ＴＬＣ　　＝薄層クロマトグラフィー
接頭辞ｎ−、ｓ−、ｉ−、ｔ−及びｔｅｒｔ−は、その通常の意味：ノルマル、第二、イソ、及び第三、を有する。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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