(57)【要約】本発明は一般的に肝臓又は胃の組織で少なくとも発現し且つディファレンシャル・ディスプレイ又はマクロアレイ技術を用いて、又は異なる生理的条件下で核酸分子の異なる発現を検出できる他の技術を用いて同定される核酸分子に関する。本発明の核酸分子から得られる発現産物は、健康状態、肥満、食欲不振、体重維持、低下した筋肉の発達、糖尿病及び／又は代謝エネルギーのレベル及び／又は変更されり生理的条件の一つ以上と関連し或いはそれらのマーカーとして作用する。本核酸分子及びそれらの発現産物及び／又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体の同定は、治療薬及び診断薬として有用であり、或いは肥満、食欲不振、体重維持、低下した筋肉の発達、糖尿病及び／又は代謝エネルギーのレベル及び／又は他の生理的諸条件と関連する生理的過程のモジュレータ若しくはモニターとして作用する薬剤に対する標的として有用であると提唱される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ある分子をコードする配列をコードするヌクレオチド配列又はコードする配列に相補的なヌクレオチド配列又はそれらの誘導体若しくは同族体を含む単離された核酸分子であって、痩身動物と比較して肥満動物の又は絶食動物と比較して給餌動物の肝臓若しくは胃の組織の一方若しくは両方においてより大量に又はより少量で発現する核酸分子。
【請求項２】
配列番号：１に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項３】
配列番号：２に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：２若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項４】
配列番号：３に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項５】
配列番号：４に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：４若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項６】
配列番号：５に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：５若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項７】
配列番号：６に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：６若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項８】
配列番号：７に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：７若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項９】
配列番号：８に示されるヌクレオチド配列又はそれに少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：８若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１０】
配列番号：１に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１１】
配列番号：２に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１２】
配列番号：３に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１３】
配列番号：４に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１４】
配列番号：５に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１５】
配列番号：６に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１６】
配列番号：７に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１７】
配列番号：８に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１８】
配列番号：２８に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項１９】
配列番号：３２に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項２０】
配列番号：３３に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項２１】
配列番号：３５に示されるヌクレオチド配列を含む、請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項２２】
痩身動物と比較して肥満動物の又は絶食動物と比較して給餌動物の肝臓若しくは胃の組織の一方若しくは両方においてより大量に又はより少量で発現する核酸分子によりコードされるヌクレオチド又はアミノ酸の配列を含む単離された分子。
【請求項２３】
配列番号：１に示される核酸分子又は配列番号：１に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項２４】
配列番号：２に示される核酸分子又は配列番号：２に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：２若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項２５】
配列番号：３に示される核酸分子又は配列番号：３に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項２６】
配列番号：４に示される核酸分子又は配列番号：４に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：４若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項２７】
配列番号：５に示される核酸分子又は配列番号：５に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：５若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項２８】
配列番号：６に示される核酸分子又は配列番号：６に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：６若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項２９】
配列番号：７に示される核酸分子又は配列番号：７に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：７若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項３０】
配列番号：８に示される核酸分子又は配列番号：８に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：８若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項３１】
配列番号：２８に示される核酸分子又は配列番号：２８に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：２８若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項３２】
配列番号：３２に示される核酸分子又は配列番号：３２に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３２若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項３３】
配列番号：３３に示される核酸分子又は配列番号：３３に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３３若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項３４】
配列番号：３５に示される核酸分子又は配列番号：３５に少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列又は低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３５若しくはその相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる請求項２２記載の単離された分子。
【請求項３５】
該分子がタンパク質である、請求項２３又は請求項２４又は請求項２５又は請求項２６又は請求項２７又は請求項２８又は請求項２９又は請求項３０又は請求項３１又は請求項３２又は請求項３３又は請求項３４記載の単離された分子。
【請求項３６】
該分子がＲＮＡである、請求項２３又は請求項２４又は請求項２５又は請求項２６又は請求項２７又は請求項２８又は請求項２９又は請求項３０又は請求項３１又は請求項３２又は請求項３３又は請求項３４記載の単離された分子。
【請求項３７】
配列番号：１に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項３８】
配列番号：２に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項３９】
配列番号：３に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４０】
配列番号：４に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４１】
配列番号：５に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４２】
配列番号：６に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４３】
配列番号：７に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４４】
配列番号：８に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４５】
配列番号：２８に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４６】
配列番号：３２に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４７】
配列番号：３３に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４８】
配列番号：３５に示されるヌクレオチド配列によりコードされる請求項３４記載の単離されたタンパク質。
【請求項４９】
(i)    痩身動物と比べ肥満動物の胃組織で異なって発現する核酸分子によりコードされるタンパク質又はその誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(ii)    絶食動物と比べ給餌動物の肝臓組織で異なって発現する核酸分子によりコードされるタンパク質又はその誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(iii)  配列番号：１に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体、又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(iv)    配列番号：２に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(v)    配列番号：３に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(vi)    配列番号：４に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(vii)  配列番号：５に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(viii)  配列番号：６に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(ix)    配列番号：７に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(x)    配列番号：８に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xi)    配列番号：２８に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xii)  配列番号：３２に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xiii)  配列番号：３３に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xiv)  配列番号：３５に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xv)    低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xvi)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：２に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xvii)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xviii)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：４に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xix)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：５に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xx)    低ストリンジェンシー条件下で配列番号：６に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxi)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：７に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxii)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：８に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxiii)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：２８に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxiv)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３２に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxv)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３３に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxvi)  低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３５に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体にハイブリッド形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxvii) 段落（i)から段落(xxvi)の任意の一つで定義されるホモ二量体形のタンパク質、並びに
(xxviii)  段落(i)から段落(xxvi)の任意の一つで定義されるヘテロ二量体形のタンパク質、
から成るリストから選択される単離されたタンパク質。
【請求項５０】
哺乳動物におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の一つ以上の発現を調節する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現を高レベル調節又は低レベル調節又は他の方法で調節するのに十分な時間及び条件の下で、遺伝子ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８と、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現のモジュレーターの有効量とを接触させる工程を含む方法。
【請求項５１】
哺乳動物におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性を調節する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性を増加又は減少させるのに十分な時間及び条件の下である分子の調節に有効な量を該哺乳動物に投与する工程を含む方法。
【請求項５２】
肥満、食欲不振、糖尿病及び／又はエネルギー不均衡の一つ以上の徴候により特徴付けられる状態を患う哺乳動物を治療する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現を調節するのに十分な又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の活性を調節するのに十分な時間及び条件の下で有効量の薬物を該哺乳動物に投与する工程を含む方法。
【請求項５３】
肥満、食欲不振、糖尿病又はエネルギー不均衡の一つ以上の徴候により特徴付けられる疾病状態を患う哺乳動物を治療する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８、又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の有効量を該哺乳動物に投与する工程を含む方法。
【請求項５４】
肥満、食欲不振、糖尿病及び／又はエネルギー不均衡により特徴付けられる状態を治療するための医薬の製造における、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体若しくは類似体の発現を調節できる薬物の使用。
【請求項５５】
肥満、食欲不振、糖尿病及び／又はエネルギー不均衡により特徴付けられる状態を治療するための医薬の製造における、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体の活性を調節できる薬物の使用。
【請求項５６】
肥満、食欲不振、糖尿病及び／又はエネルギー不均衡により特徴付けられる状態を治療するための医薬の製造における、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体若しくは類似体、又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体の使用。
【請求項５７】
ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現、又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性のモジュレーター並びに一つ以上の薬学的に許容しうる担体及び／又は希釈剤を含む組成物。
【請求項５８】
被験者からの生体試料中のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はその誘導体若しくは同族体を検出する方法であって、複合体が形成するのに十分な時間及び条件の下で、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１１９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの抗原性誘導体若しくは抗原性同族体に特異的な抗体と該生体試料とを接触させる工程、及び次いで該複合体を検出する工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般的に肝臓又は胃の組織で少なくとも発現し且つディファレンシャル・ディスプレイ又はマクロアレイ技術を用いて、又は異なる生理的条件下で核酸分子の異なる発現を検出できる他の技術を用いて同定される核酸分子に関する。本発明の核酸分子から得られる発現産物は、健康状態、肥満、食欲不振、体重維持、低下した筋肉の発達、糖尿病及び／又は代謝エネルギーのレベル及び／又は変更されり生理的条件の一つ以上と関連し或いはそれらのマーカーとして作用する。本核酸分子及びそれらの発現産物及び／又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体の同定は、治療薬及び診断薬として有用であり、或いは肥満、食欲不振、体重維持、低下した筋肉の発達、糖尿病及び／又は代謝エネルギーのレベル及び／又は他の生理的諸条件と関連する生理的過程のモジュレータ若しくはモニターとして作用する薬剤に対する標的として有用であると提唱される。
【背景技術】
【０００２】
本明細書における如何なる先行技術についての言及も、この先行技術がどの国においても一般的常識の一部をなすという認識又は如何なる形の示唆でもなく且つそのように解釈されるべきではない。
【０００３】
組換えＤＮＡ技術のの高度化の進展は獣医学及び同類のヒト及び動物の健康分野における研究及び開発を非常に促進している。これは一定の病的状態の病因に関与する遺伝的基礎の研究において特にそうである。疾病率及び死亡率の観点から特に深刻な一つの状態は肥満並びに２型糖尿病（以前はインスリン非依存性糖尿病即ちＮＩＤＤＭ）及び心血管疾患とのその関連性である。
【０００４】
肥満は、体脂肪の病的過剰と定義され、持続期間中のエネルギー摂取とエネルギー消費の間の不均衡の結果である。肥満は裕福な国に見られる最も一般的な代謝病である。これらの国々における肥満の罹患率は憂慮すべきほど高く、ある部分集団においては１０％から５０％を上回る範囲にある（非特許文献１を参照）。特に懸念されることは、肥満の罹患率が裕福な社会で一貫して上昇しているようであること並びにそれほど裕福ではない国々においてはより裕福になるにつれ及び／又はより裕福な国々から文化的慣習を取り入れるにつれ今や急速に増大しているという事実である（非特許文献２を参照）。
【０００５】
１９５５年にオーストラリアでは、例えば、成人集団の１９％が肥満（ＢＭＩ＞３０）であった。平均して、１９９５年に女性は１９８０年の対応値より４．８ｋｇ重くなり、一方、男性は３．６ｋｇ重くなった（オーストラリアン・インスティチュート・オブ・ヘルス・アンド・ウェルフェア(AIHW)、心臓、卒中及び血管の病気、Australian facts. AIHWカタログ番号CVD 7 キャンベラ：AIHW及びザ・ハート・ファンデーション・オブ・オーストラリア、1999）。より最近では、１９９９年から２０００年に実施したザ・オースディアブ(AusDiab)の研究は、２５〜６４歳の男性の６５％及び女性の４５％が体重超過であると考えられることを示した（デ・ローパーとブハッティア、Australian's Health Trends 2001.オーストラリアン・インスティチュート・オブ・ヘルス・アンド・ウェルフェア(AIHW)、カタログ番号PHE 24.キャンベラ：AIHW、2001）。米国における肥満の罹患率も１９９１年から１９９８年の間に実質的に増加し、この期間中のアメリカ人の１２％から１８％に上昇した（モックダッドら、JAMA. 282(16): 1519-22、1999）。
【０００６】
高く且つ増大する肥満の罹患率は総じて個人及び社会の両方に重大な健康上の影響をもたらす。肥満は、複雑な混成の疾患であり、肥満は２型糖尿病及び心疾患を含む幾つかの他の代謝状態の危険性を増加させるため、予防可能な罹患率及び死亡率の重要な危険指標として特定された（非特許文献３、非特許文献４を参照）。肥満と平行して、糖尿病の罹患率は急速に増加し続けている。１９９５年のオーストラリアでは約700,000人の糖尿病患者がいたと見積もられているが、一方、米国では、糖尿病の罹患率は１９９０年の４．９％から１９９９年の６．９％まで増加した（モックダッド、Diabetes Care 24(2):412, 2001）。オーストラリアでは、糖尿病及び他の疾患状態と関連する肥満の年間経費は１９９２年〜１９９３年で８億1000万オーストラリア＄と内輪に見積もられている（ナショナル・ヘルス・アンド・メディカル・リサーチ・カウンシル、オーストラリアの体重に従って：体重超過及び肥満の予防戦略。キャンベラ：ナショナル・ヘルス・アンド・メディカル・リサーチ・カウンシル、1996）。米国においては、ザ・ナショナル・ヘルス・インタビュー・サーベイ(NHIS)が１９９５年の肥満の経済費用は約990億米国＄と見積もっており、これは、その時点での米国の総医療費の５．７％に相当する（ヴォルフとコルディッツ、Obes Res. 6: 97-106, 1998）。
【０００７】
肥満の病理学についての遺伝的基礎は、とりわけ双子の研究、養子の研究及び集団に基づく分析から示され、これらの分析は一般集団における体重の変動の２５〜８０％については遺伝的影響が原因であることを示唆する（非特許文献１、コペルマンら，Int J Obesity 18: 188-191, 1994、ラヴシン，Metabolism 44（増補3）：12-14, 1995）。遺伝子が個人の許される体重範囲を決定し、次いで該個人が所与の時に身を置く環境がこの範囲内での値に影響を及ぼすと考えられる（非特許文献１）。しかしながら、肥満の病因に関与すると考えられる遺伝子についての多数の研究にもかかわらず、この分野での重要な発見は驚くほど少ないものであった。更に、様々な集団群におけるゲノム全体のスキャンは、肥満に主要な影響を及ぼす染色体領域を明確に証明しなかった。
【０００８】
幾つかの器官／組織が肥満及び２型糖尿病の病態生理学に関与しており、格別の関心は視床下部にある。視床下部はエネルギー摂取の調節に重要な脳の領域として長く認識されてきた（非特許文献５を参照）。現在では、視床下部は、視床下部により生産される及び／又は視床下部に作用する多数の因子を統合し協調させるエネルギー恒常性における中心的役割を担うと広く容認されている。
【０００９】
胃も重要な器官である。食物摂取の調節における胃の役割は二つの型のシグナル、即ち胃の膨張の程度及び胃壁又は腸壁中の化学受容体の活性化を含むと考えられる（クープマンズ、食物摂取の制御についての実験研究。肥満のハンドブック、ジイエイ・ブレイ、シイ・ボウチャード、ダブリュピイティ・ジェームズ編、273〜312頁、1998）。腸は身体における最大の内分泌器官であり、食後多数の胃腸ホルモンが放出される。幾つかの例を挙げれば、ガストリン、ソマトスタチン、コレシストキニン、胃抑制ポリペプチド及びニューロテンシンである。胃が一回の食事における食物摂取を制限するシグナルの役割を提供するという一般的合意にもかかわらず、このシグナルの性質又はそれがどのようにして脳に伝達されるのかは依然究明されていない。胃の膨張の程度又は胃腸壁における栄養物の存在に関する情報は神経又はホルモンのいずれかを介して脳へ伝達される可能性が高い。食物摂取の調節において現在までに同定された腸ホルモンの役割は依然曖昧なままに留まっている。
【００１０】
肝臓も幾つかの重要な生理学的経路において重要な役割を果たしている。肝臓はグルコース、アミノ酸及び脂肪の代謝の調節において主要な役割を有する。更に、肝臓は大量の摂取された食物と直接接触する唯一の器官（腸以外）であるため、肝臓は身体に入る栄養物のレベル、特にタンパク質及び炭水化物の量を「感知」又は監視できる。肝臓は腸からの栄養吸収及び全身の代謝変化について脳に情報を中継する未同定シグナルの伝達を通じて食物摂取の調節にも役割を有しうる（非特許文献６、クープマンズ，1998上掲を参照）。肝臓は糖新生及びグリコゲン分解などの経路を調節することにより血中グルコース濃度の維持においても重大な役割を果たしている。グルコース恒常性の変化は糖耐性異常の病態生理学及び２型真正糖尿病の進行における重要な因子である。
【非特許文献１】
ボウチャード，The genetics of obesity. Boca Raton: CRC Press, 1994）
【非特許文献２】
チメット，Diabetes Care 15(2): 232-247, 1992
【非特許文献３】
マストら，JAMA. 282(16): 1523-1529, 1999
【非特許文献４】
コペルマン，Nature 404: 635-643, 2000
【非特許文献５】
ステラー，Psychol Rev 61: 5-22, 1954
【非特許文献６】
ルセック，Nature 200: 176, 1963
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、一つ以上の健康状態、肥満、食欲不振、体重維持、低下した筋肉の発達、糖尿病及び／又は代謝エネルギーのレベル及び／又は変わる生理条件と関連する又はそれらのマーカーとして作用する発現産物をコードする核酸分子を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明に従って、本発明者らは痩身動物及び肥満動物で又は給餌されなかった動物と比較して給餌された動物で異なって発現する遺伝子配列を同定しようと努力した。ディファレンシャル・ディスプレイ分析などの技術を用いて、本発明者らは、健康状態又は肥満、食欲不振、体重維持、糖尿病、筋肉の発達及び／若しくは代謝エネルギーのレベル及び／若しくは他の変わる生理条件（これらに限定されないが）などの病的状態と連結する一つ以上の生物機能と関連すると提唱される遺伝子を同定した。遺伝子配列は実質上分子マーカーであり、その発現は被験者の全身的健康状態の指標を提供し、治療及び診断の適用の標識として作用できる。
【００１３】
発明の概要
本明細書を通して、文脈が他の意味を要求しない限り、「含む(comprise)」という単語、又は「含む(comprises)」若しくは「含む(comprising)」などの変形は、明記した要素若しくは整数又は要素若しくは整数の群の包含を意味するが、任意の他の要素若しくは整数又は要素若しくは整数の群の排除を意味するわけではないと理解すべきである。
【００１４】
ヌクレオチド配列及びアミノ酸配列は配列識別子番号（配列番号：）により言及される。配列番号：は配列識別子＜４００＞１（配列番号：１）、＜４００＞２（配列番号：２）等に数により対応付けられる。配列表は請求の範囲の後に示す。
【００１５】
肝臓又は胃の組織から得られる遺伝物質のディファレンシャル・ディスプレイ分析を含む技術を用いて、健康状態又は肥満、食欲不振、体重維持、糖尿病、筋肉の発達及び／若しくは代謝エネルギーのレベルなどの生理的状態と関連する候補遺伝子配列を同定した。イスラエル砂ラット（プサモミス・オベサス(Psammomys obesus)）を含む動物モデルを用いた。下記のような代謝表現型に基づいてＡ群、Ｂ群及びＣ群と名付けた三群の動物を用る。
Ａ群：痩身動物；
Ｂ群：肥満、非糖尿病の動物；及び
Ｃ群：肥満、糖尿病の動物。
【００１６】
動物は給餌条件下若しくは非給餌条件下で又は高い若しくは低いグルコース若しくはインスリンの条件下で維持し、遺伝配列はディファレンシャル・ディスプレイ技術により分析した。これらの技術を用いた好ましい実施態様では、本明細書でＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、及びＡＧＴ−１９９と名付けられた（それぞれ配列番号：１、配列番号：２及び配列番号：３の配列識別子をもつ）異なって発現すると想定される配列が肝臓細胞から同定された。他の遺伝子配列は以下の通りに胃組織で同定された：それぞれ配列番号：４、配列番号：５、配列番号：６、配列番号：７及び配列番号：８の配列識別子をもつＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５、及びＡＧＴ−１０８である。
【００１７】
異なる発現とは、一組みの条件の下での遺伝子配列の発現レベルを他の組みの条件と比較したときの上昇を意味する。一つの際立った実施態様において、ＡＧＴ−１１７の発現は絶食条件下の動物のプールでは減少した。痩身動物では、ＡＧＴ−１１７は給餌状態の肥満した糖尿病動物と比べてより高いレベルで発現することが見出された。ＡＧＴ−１１７の発現は対数血漿インスリンレベルと負に相関した。ＡＧＴ−１１０は絶食条件下の動物のプールでは低いレベルで発現する。ＡＧＴ−１９９の発現は痩身動物及び肥満−糖尿病動物において絶食条件下で減少した。プールされた結果は、ＡＧＴ−１９９が絶食条件下においてより低レベルで発現することを示した。ＡＧＴ−１０７は給餌条件と比べて絶食条件下でより高レベルで発現した。この遺伝子の発現は血漿インスリンのレベルと負に相関した。ＡＧＴ−１１４の発現は給餌された動物でより高く、発現は胃の重量と負に相関した。ＡＧＴ−１１６の発現は給餌された動物で増加し、インスリンのレベルと連関していた。ＡＧＴ−１１５の遺伝子発現は給餌された動物でより高く、一方、ＡＧＴ−１０８は給餌された動物と比べ絶食動物でより高かった。ＡＧＴ配列の概要は表１に示す。
【００１８】
これらの変動して発現する配列の同定すれば、発現産物と拮抗又はアゴナイズできる分子の合理的な設計及び／若しくは選択が可能となり、及び／又はスクリーニング検定の開発が可能になる。このスクリーニング検定には、例えば特定の被験者の生理的状態の評価が含まれる。
【００１９】
従って、本発明の一側面は、タンパク質をコードする配列をコードする又は該配列に相補的なヌクレオチドの配列又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体を含む核酸分子を提供する。該核酸分子は肥満動物の肝臓又は胃の組織において痩身動物と比べてより大量に又はより少量で発現する。その代わり又はそれに加えて、該核酸分子は給餌された動物の肝臓又は胃の組織において絶食動物と比べてより大量に又はより少量で発現する。再び給餌された絶食動物又は給餌動物は「再給餌された」動物と呼ばれる。
【００２０】
好ましい実施態様において、該核酸分子は、配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５に実質的に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５の全体又は一部に対して少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列、及び／又は４２℃の低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５又はそれらの相補形の一つ以上とハイブリッドを形成できるヌクレオチド配列を含む。
【００２１】
本発明の別の一側面は、肥満動物の肝臓若しくは胃の組織において痩身動物と比較してより大量に若しくはより少量で生産される及び／又は給餌された動物の肝臓若しくは胃の組織で絶食動物と比較してより大量に若しくはより少量で生産される単離された分子又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体を提供する。
【００２２】
該分子は一般的にタンパク質であるが、ｍＲＮＡ、イントロン又はエキソンであってもよい。
【００２３】
該分子は、配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５に実質的に示されるヌクレオチド配列、又は配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５の全体又は一部に対して少なくとも３０％の類似性を有するヌクレオチド配列、及び／又は４２℃の低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５とハイブリッドを形成できるヌクレオチド配列によりコードされる。
【００２４】
この点において、該分子は当該ヌクレオチド配列の発現産物と考えてよい。
【００２５】
本発明の好ましい遺伝子配列は、本明細書中でＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８と呼ばれる。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８によりコードされる発現産物は本明細書中でそれぞれＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８と呼ばれる。好ましい発現産物はタンパク質である。
【００２６】
本発明の更なる側面は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８により定義されるタンパク質などの発現産物又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８のアゴニスト若しくはアンタゴニストを一つ以上の薬学的に許容しうる担体及び／若しくは希釈剤とともに含む組成物に関する。
【００２７】
更に、本発明は、治療に有効な量のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体又はそれらをコードする遺伝子配列又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８のアゴニスト若しくはアンタゴニスト又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の遺伝子発現のアゴニスト若しくはアンタゴニストを、治療を達成するのに十分な時間及び条件の下で、被験者に投与する工程を含む被験者を治療する方法を意図する。
【００２８】
本発明のこの側面及び他の側面に従って、本明細書で意図される治療には、肥満、食欲不振、体重維持、エネルギー不均衡及び糖尿病が含まれるが、これらに限定されない。治療は遺伝子治療を通じた医薬組成物又は遺伝子配列の投与によるものであってよい。治療はヒトの被験者並びに畜産業に重要な動物などの動物に対して意図される。
【００２９】
本発明の更なる別の一側面は、肥満、食欲不振、体重維持、エネルギー不均衡及び／又は糖尿病などの状態（これらに限定されないが）を監視又は診断する際に用いられる診断薬に向けられる。該診断薬は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体に対する抗体、並びに他の技術、中でもＰＣＲ、ハイブリダイゼーション、ＲＥＬＰに有用な遺伝子配列から選択される。
【００３０】
本明細書を通して用いられる配列識別子の概要を表２に示す。
【００３１】
【表１】
2004535183.tif 000002
当該明細書を通して用いられる配列識別子の概要は下記に示す。
【００３２】
【表２】
2004535183.tif 000003
【００３３】
【表２−１】
2004535183.tif 000004
【００３４】
好ましい実施態様の詳細な説明
本発明はエネルギー均衡、肥満及び糖尿病及び／又は筋肉の発達の調節ととりわけ関連する新規な遺伝子の同定に一部基礎を置くものである。これらの遺伝子は痩身動物と肥満動物の間及び／又は給餌された動物と絶食動物の間での肝臓又は胃のｍＲＮＡのディファレンシャル・スクリーニングを含む幾つかの手法により同定された。
【００３５】
「ディファレンシャル」・アレイという用語はその最も広い意味で用いられ、同じ動物又は異なる動物における他の型の組織と比較した一つの型の組織での核酸配列の発現を含む。「異なる」動物と言うときは、同じ動物を含むが給餌された状態又は給餌されていない状態などの異なる食(gastronomical)状態にある動物を含む。
【００３６】
従って、本発明の一側面は、発現産物をコードする配列をコードするヌクレオチド配列若しくはコードする配列に相補的なヌクレオチド配列又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体を含む核酸分子であって、肥満動物の肝臓又は胃の組織において痩身動物と比較してより大量に又はより少量で発現する核酸分子を提供する。
【００３７】
関連する実施態様においては、発現産物をコードするヌクレオチド配列若しくはコードする配列に相補的なヌクレオチド配列又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体を含む核酸分子であって、給餌された動物の肝臓又は胃の組織において絶食動物と比較してより大量に又はより少量で発現する核酸分子が提供される。
【００３８】
該発現産物はタンパク質若しくはｍＲＮＡであってもよく又は例えばＲＮＡ構築物からスプライシングされたエキソン若しくはイントロンであってもよい。
【００３９】
「痩身」及び「肥満」という用語はそれらの最も一般的な意味で用いられるが肥満を判断するための標準的基準と比べて考慮されるべきである。一般的に、ヒトの被験者については、肥満の定義はＢＭＩ＞３０である（危険因子罹患研究管理委員会(Risk Factor Prevalence Study Management Committee)。危険因子罹患の研究：第三調査、1989年。キャンベラ：ナショナル・ハート・ファンデーション・オブ・オーストラリア・アンド・オーストラリアン・インスティチュート・オブ・ヘルス、1990年；ウォーターズとベネット、心疾患の危険因子：オーストラリア人のデータの概要。キャンベラ：オーストラリアン・インスティチュート・オブ・ヘルス・アンド・ウェルフェア、1995）。
【００４０】
好都合なことに、肥満動物及び痩身動物の影響を研究するために動物モデルを利用しうる。特に、本発明は食餌誘発性の肥満及びＮＩＤＤＭのプサモミス・オベサス（イスラエル砂ラット）という動物モデルを用いて例証される。その自然の砂漠の生息地において、活動的な生活様式及びソルトブッシュ(saltbush)の食餌が痩身且つ血糖正常であり続けることを保証する（シャフリルとグートマン、J Basic Clin Physiol Pharm 4: 83-99, 1993）。しかしながら、（多数の他の動物種が健常でいられる）無制限の食事という実験環境において、ある範囲の病態生理学的応答が見られる（バーネットら、Diabetologia 37: 671-676, 1994ａ；バーネットら、Int. J. Obesity 18: 789-794, 1994b、バーネットら、Diabete Nutr Metab 8: 42-47, 1995）。１６週齢までに、半数以上の該動物が肥満になり約三分の一がＮＩＤＤＭを発症する。過食の動物のみが続いて高血糖を発症し、これはプサモミス・オベサスの肥満及びＮＩＤＤＭの病態生理学における過剰なエネルギー摂取の重要性を浮き彫りにしている（コリアーら、Ann New York Acad Sci 827: 50-63, 1997a；ヴォルダーら、Obesity Res 5: 193-200, 1997a）。見出された他の表現型には高インスリン血症、脂血症障害（dyslipidemia）及び糖耐性異常が含まれる（コリアーら、1997a；前出；コリアーら、Exp Clin Endocrinol Diabetes 105: 36-37, 1997b）。プサモミス・オベサスはある範囲の体重及び血中グルコース濃度及び血中インスリン濃度を示し、これはヒトの集団で見出されるパターンと極めて類似する連続曲線を形成し、この曲線には「膵臓のスターリング曲線」として知られる血中グルコースレベルと血中インスリンレベルの間の逆Ｕ字型関係が含まれる（バーネットら、1994a；前出）。プサモミス・オベサスの表現型応答の異質性こそがプサモミス・オベサスを肥満及びＮＩＤＤＭの病因及び病態生理を研究するための理想的なモデルとする。
【００４１】
プサモミス・オベサス動物は便宜上三群に分ける。即ち、痩身、血糖正常及びインスリン正常(normoinsulinemic)であるＡ群動物、肥満、正常血糖及び高インスリン血症であるＢ群動物、並びに肥満、高血糖及び高インスリン血症であるＣ群動物。
【００４２】
本発明の別の一側面は、発現産物をコードするヌクレオチド配列若しくはコードする配列に相補的なヌクレオチド配列又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体を含む核酸分子であって、該ヌクレオチド配列が配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５に実質的に示されるヌクレオチド配列、配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５の全体又は一部に対して少なくとも約３０％の類似性を有するヌクレオチド配列、及び／又は４２℃の低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５又はそれらの相補形の一つ以上とハイブリッドを形成できるヌクレオチド配列であり、該核酸分子が痩身動物と比較した肥満動物の肝臓若しくは胃の組織において及び／又は絶食動物と比較した給仕された動物においてより大量に又はより少量で発現するものである核酸分子を提供する。
【００４３】
本明細書における類似性と言うときは、一般的に少なくとも１５個の連続した若しくは実質的に連続したヌクレオチド又は少なくとも５個の連続した若しくは実質的に連続したアミノ酸残基の比較のレベルについてである。好ましい類似パーセントは少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％及び少なくとも約９０％以上を有する。
【００４４】
本明細書で用いられるように、「類似」という用語はヌクレオチド又はアミノ酸のレベルで比較された配列の間での正確な同一を含む。ヌクレオチドのレベルで非同一が存在する場合、「類似」は、異なるアミノ酸を生じるがそれにも関わらず構造、機能、生化学及び／又はコンフォメーションのレベルで互いに関連する配列の間の相違を含む。アミノ酸のレベルで非同一が存在する場合、「類似」はそれにも関わらず構造、機能、生化学及び／又はコンフォメーションのレベルで互いに関連するアミノ酸を含む。特に好ましい実施態様では、ヌクレオチドの比較及び配列の比較は類似性ではなく同一性のレベルでなされる。
【００４５】
二つ以上のポリヌクレオチド間又はポリペプチド間の配列関係を記載するために用いられる用語には、「参照配列」、「比較窓」、「配列類似」、「配列同一」、「配列類似パーセント」、「配列同一パーセント」、「実質的に類似する」及び「実質的同一性」が含まれる。「参照配列」の長さはヌクレオチド及びアミノ酸残基を含めて少なくとも１２個であるが度々１５個から１８個でありしばしば３０個の単量体単位などの少なくとも２５以上である。二つのポリヌクレオチドは(1)二つのポリヌクレオチド間で類似する配列（即ち完全なポリヌクレオチド配列の一部分のみ）並びに(2)二つのポリヌクレオチド間で相違する配列をそれぞれ含みうるため、二つ（以上の）ポリヌクレオチド間の配列の比較は通常「比較窓」の上で二つのポリヌクレオチド配列を比較し配列類似の局部領域を特定し比較することにより実施される。「比較窓」とは、参照配列と比較される通常１２個の連続した残基の概念上のセグメントを指す。比較窓は二配列の最適な整列について参照配列（付加又は欠失を含まない）と比較した場合、約２０％以下の付加又は欠失（即ちギャップ）を含みうる。比較窓を整列するための配列の最適な整列は、コンピュータ化されたアルゴリズム（ウィスコンシン・ジェネティックス・ソフトウェア・パッケージ・リリース７．０、ジェネティックス・コンピュータ・グループ、575サイエンス・ドライブ・マディソン、ウィスコンシン州、米国のＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ）の実行により又は観察により最適整列を探すことにより及び選択される種々の方法のいずれかにより作成される最適整列（即ち比較窓の上で最高のパーセンテージの相同性を生ずるもの）により実施されうる。例えばアルチュルら（Nucl. Acids Res. 25: 3389, 1997）により開示されたプログラムのＢＬＡＳＴファミリーも参照しうる。配列分析の詳細な論議はオーズベルら（「分子生物学の最新プロトコル」、ジョン・ウィレー＆ソンズ社、1994-1998、15章）の１９．３単元で見つけることができる。
【００４６】
本明細書で用いられるとき、「配列類似」及び「配列同一」という用語は、配列が比較窓の上でヌクレオチドごと又はアミノ酸ごとに同一である程度又は機能上若しくは構造上類似している程度を指す。従って、例えば「配列同一パーセンテージ」は、比較窓の上で最適に整列した二つの配列を比較し、同一の核酸塩基（例えばＡ、Ｔ、Ｃ、Ｇ、Ｉ）又は同一のアミノ酸残基（例えば、Ala、Pro、Ser、Thr、Gly、Val、Leu、Ile、Phe、Tyr、Trp、Lys、Arg、His、Asp、Glu、Asn、Gln、Cys及びMet）が両配列に存在する位置の数を決定して適合位置の数を求め、適合位置の数を比較窓における位置の総数（即ち窓のサイズ）で割り、その結果に１００を乗じて配列同一パーセンテージを得ることにより算出される。本発明の目的上、「配列同一」は、該ソフトウェアを添付する参照マニュアルで用いられているように標準デフォルトを用いてＤＮＡＳＩＳコンピュータ・プログラム（ウィンドウズ（登録商標）用２．５版；米国カリフォルニア州南サンフランシスコのヒタチ・ソフトウェア・エンジニアリング社から入手できる）により計算される「適合パーセンテージ」を意味すると理解する。同様な注釈は配列類似に関しても適用する。
【００４７】
本明細書中、低ストリンジェンシーについての言及は、ハイブリダイゼーションについては少なくとも約０％ｖ／ｖから少なくとも約１５％ｖ／ｖまでのホルムアミド及び少なくとも約１Ｍから少なくとも約２Ｍまでの塩、並びに洗浄条件については少なくとも約１Ｍから少なくとも約２Ｍまでの塩を含み包含する。一般的に、低ストリンジェンシーは約２５〜３０℃から約４２℃までである。該温度は変更されうる。より高い温度はホルムアミドを交換するために及び／又は代替のストリンジェンシー条件を与えるために用いられる。中ストリンジェンシー等の代替のストリンジェンシー条件は必要な場合に適用されうる。中ストリンジェンシーは、ハイブリダイゼーションについては少なくとも約１６％ｖ／ｖから少なくとも約３０％ｖ／ｖまでのホルムアミド及び少なくとも約０．５Ｍから少なくとも約０．９Ｍまでの塩、並びに洗浄条件については少なくとも約０．５Ｍから少なくとも約０．９Ｍまでの塩含み包含する。或いは、高ストリンジェンシーは、ハイブリダイゼーションについては少なくとも約３１％ｖ／ｖから少なくとも約５０％ｖ／ｖまでのホルムアミド及び少なくとも約０．０１Ｍから少なくとも約０．１５Ｍまでの塩、並びに洗浄条件については少なくとも約０．０１Ｍから少なくとも約０．１５Ｍまでの塩を含み包含する。一般的に、洗浄はＴｍ＝６９．３＋０．４１（Ｇ＋Ｃ）％（マーマーとドーティ、J. Mol. Biol. 5: 109, 1962）で実施される。しかしながら、二本鎖ＤＮＡのＴｍは不適合塩基対の数が１％増加する毎に１℃ずつ低下する（ボンネルとラスキー、Eur. J. Biochem. 46: 83, 1974）。ホルムアミドはこれらのハイブリダイゼーション条件において任意選択的である。従って、ストリンジェンシーの特に好ましいレベルは以下のように定義される。即ち、低ストリンジェンシーは２５〜４２℃で６×ＳＳＣ緩衝液、０．１％ｗ／ｖＳＤＳであり、中ストリンジェンシーは２０℃から６５℃の範囲の温度で２×ＳＳＣ緩衝液、０．１％ｗ／ｖＳＤＳであり、高ストリンジェンシーは少なくとも６５℃の温度で０．１×ＳＳＣ緩衝液、０．１％ｗ／ｖＳＤＳである。
【００４８】
本発明のヌクレオチド配列又はアミノ酸配列は天然に存在する遺伝子（若しくは対応するｃＤＮＡ）又はタンパク質の同一配列に正確に対応しうるが、一つ以上のヌクレオチド又はアミノ酸の置換、付加及び／又は欠失を有してもよい。配列番号：１、配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５に示されるヌクレオチド配列はそれぞれ本明細書中でＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８と呼ばれる。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８と呼ばれる遺伝子と対応する。対応するタンパク質はそれぞれＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８と呼ばれる。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８である。本明細書におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８についての言及は、適切な場合、ゲノム遺伝子又はｃＤＮＡ並びに天然に存在する任意の誘導体又は誘発された誘導体についての言及を含む。ヌクレオチド配列への置換、欠失及び／又は付加の他に、本発明はさらにＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８に対応するヌクレオチド配列の突然変異体、断片、一部及び部分を包含する。
【００４９】
特に糖尿病、肥満及び／又はエネルギー代謝の一つ以上の調節における関与を示すために、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現様式を決定した。痩身動物対肥満動物及び給餌動物対絶食動物の肝臓又は胃の組織におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現が異なることに加えて、これらの遺伝子は視床下部、小脳又は肩甲下脂肪（subscapular fat)又は副腎を含む他の組織（決してこれらに限定されないが）でも発現しうる。これらの核酸分子はｃＤＮＡ配列又はゲノム配列などのデオキシリボ核酸の配列であることが好ましい。ゲノム配列はエキソン及びイントロンを含んでもよい。ゲノム配列はプロモーター領域又は他の調節領域を含んでもよい。しかしながら、本発明は、タンパク質に翻訳されるか否かを問わず、遺伝ネットワークにも関与しうるｍＲＮＡ、イントロン及びエキソンに及ぶ。
【００５０】
同族体は他の動物種から得られるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５又はＡＧＴ−１０８の遺伝子であると考えられる。プサモミス・オベサスの肝臓又は胃から得られるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５又はＡＧＴ−１０８の遺伝子が本明細書で例示される。しかしながら、本発明は、ヒト、霊長類、家畜動物（例えばウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、サル）、実験用試験動物（例えばマウス、モルモット、ハムスター、ウサギ）、愛玩動物（例えばネコ、イヌ）及び捕獲された野生動物（例えばげっ歯動物、キツネ、シカ、カンガルー）から得られる、ヌクレオチドの配列及び／又は機能からみて相同な遺伝子に及ぶ。
【００５１】
本発明の核酸そしてとりわけＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８並びにその誘導体及び同族体は、単離された形若しくは精製された形でもよく、及び／又は発現ベクターなどのベクターに連結されてもよい。発現は真核細胞系統（例えば哺乳動物、昆虫若しくは酵母細胞）中でも又は微生物細胞（例えば大腸菌）中でも又はこれら両方中でもよい。
【００５２】
本発明の核酸分子の誘導体には、オリゴヌクレオチド、ＰＣＲプライマー、アンチセンス分子、共抑制での使用に適した分子及び融合核酸分子が含まれる。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそのｍＲＮＡに向けられたリボザイム及びＤＮＡ酵素も本発明によって意図される。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の誘導体及び同族体は、便宜上４２℃の低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列に包含される。
【００５３】
本発明はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８という発現産物に及ぶ。好ましい発現産物はタンパク質又はそれらの突然変異体、誘導体、同族体若しくは類似体である。
【００５４】
誘導体は天然、合成又は融合タンパク質を含む組換え体の起源に由来する断片、一部、部分、突然変異体、変異体及び擬似体を含む。一部又は断片は例えばＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５又はＡＧＴ−１０８の活性領域を含む。誘導体はアミノ酸の挿入、欠失又は置換から派生しうる。アミノ酸挿入誘導体は一個又は複数のアミノ酸の配列内挿入だけでなく、アミノ末端及び／又はカルボキシル末端への融合をも含む。挿入アミノ酸配列変異体は一つ以上のアミノ酸残基がタンパク質の所定部位に導入されたものであるが、得られる産物の適切なスクリーニングによって無差別な挿入も可能である。欠失変異体は該配列からの一つ以上のアミノ酸の除去により特徴付けられる。置換アミノ酸変異体は該配列の少なくとも一残基が除去され異なる残基がその部位に挿入されたものである。置換アミノ酸変異体の一例は同類アミノ酸置換である。同類アミノ酸置換は通常下記のグループ内での置換を含む。即ち、グリシンとアラニン、バリンとイソロイシン及びロイシン、アスパラギン酸とグルタミン酸、アスパラギンとグルタミン、セリンとスレオニン、リシンとアルギニン、及びフェニルアラニンとチロシンである。アミノ酸配列への付加は他のペプチド、ポリペプチド又はタンパク質との融合を含む。
【００５５】
ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５又はＡＧＴ−１０８の化学的及び機能的な等価物は、これらの分子の一つ以上の機能的活性を示す分子として理解されるべきであり、化学合成されたもの又は天然産物のスクリーニング等のスクリーニング工程を経て同定されたものなどの任意の起源に由来するものであってもよい。
【００５６】
該誘導体はペプチド、ポリペプチド又は他のタンパク質性若しくは非タンパク質性の分子に融合したタンパク質全体の特定のエピトープ又は一部を有する断片を含む。
【００５７】
本発明の別の一側面は、痩身動物と比べた肥満動物及び／又は絶食動物と比べた給餌動物の肝臓又は胃の組織でより大量に生産される、単離されたタンパク質又はその誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体を提供する。
【００５８】
本発明のより好ましい側面において、単離されたタンパク質又はその誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体であって、該タンパク質が配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５に示されるヌクレオチド配列により実質的にコードされるアミノ酸配列又はその全体若しくは一部に少なくとも３０％の類似性を有するアミノ酸配列を含むものであり、該タンパク質が痩身動物と比べた肥満動物及び／又は絶食動物と比べた給餌動物の肝臓又は胃の組織でより大量に又はより少量で生産されるものであるタンパク質が提供される。。この場合、給餌動物は再給餌された動物を含む。
【００５９】
本発明の更なる側面は、単離されたタンパク質又はその誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体であって、配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５に実質的に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５の全体若しくは一部に少なくとも３０％の類似性を有するヌクレオチド配列及び／又は４２℃の低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５又はそれらの相補形とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされるタンパク質に向けられる。
【００６０】
本明細書中で、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８についての言及は、単離又は精製された天然に存在するＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８のタンパク質分子並びにそれらの任意の誘導体、同族体、類似体及び擬似体についての言及を含む。誘導体はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の一部、断片及び部分並びにＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８への一個及び複数のアミノ酸の置換、欠失及び／若しくは付加を含む。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の誘導体は、便宜上４２℃の低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１若しくは配列番号：２若しくは配列番号：３若しくは配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５とハイブリッド形成できるヌクレオチド配列によりコードされる分子に包含される。
【００６１】
ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の他の誘導体は化学類似体を含む。本明細書で意図されるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の類似体は、ペプチド、ポリペプチド又はタンパク質の合成過程での側鎖への修飾、非天然アミノ酸及び／又はそれらの誘導体の導入並びに架橋剤の使用及びタンパク質性分子若しくはそれらの類似体にコンフォメーション上の制約を課す他の方法を含むが、これらに限定されない。
【００６２】
本発明により意図される側鎖修飾の例は、アルデヒドとの反応後ＮａＢＨ4 での還元による還元的アルキル化、メチルアセチミデートを用いたアミド化、無水酢酸を用いたアシル化、シアン酸塩でのアミノ基のカルバモイル化、２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）を用いたアミノ基のトリニトロベンジル化、無水コハク酸及び無水テトラヒドロフタル酸を用いたアミノ基のアシル化、及びピリドキサール−５−リン酸を用いたリシンのピリドキシル化後ＮａＢＨ4 での還元などのアミノ基の修飾を含む。
【００６３】
アルギニン残基のグアニジン基は２，３−ブタンジオン、フェニルグリオキサール及びグリオキサールなどの試薬を用いた複素環縮合産物の形成により修飾されうる。
【００６４】
カルボキシル基はＯ−アシルイソウレアの形成を経たカルボジイミドの活性化後続いて例えば対応するアミドへの誘導化により修飾されうる。
【００６５】
スルフヒドリル基は、ヨード酢酸又はヨードアセトアミドを用いたカルボキシメチル化、システイン酸への過ギ酸酸化、他のチオール化合物との混合ジスルフィドの形成、マレイミド、無水マレイン酸若しくは他の置換されたマレイミドとの反応、４−クロロメルクリベンゾエート、４−クロロメルクリフェニルスルホン酸、フェニルメルクリクロライド、２−クロロメルクリ−４−ニトロフェノール及び他の水銀剤を用いた水銀誘導体の形成、アルカリｐＨでシアン酸塩を用いたカルバモイル化などの方法により修飾されうる。
【００６６】
トリプトファン残基は例えばＮ−ブロモスクシンイミドを用いた酸化又は２−ヒドロキシ−５−ニトロベンジルブロマイド若しくはハロゲン化スルフェニルを用いたインドール環のアルキル化により修飾されうる。
【００６７】
ヒスチジン残基のイミダゾール環の修飾はヨード酢酸誘導体を用いたアルキル化又はジエチルピロカルボネートを用いたＮ−カルベトキシレーションにより達成されうる。
【００６８】
ペプチド合成中に非天然のアミノ酸及び誘導体を取込む例は、ノルロイシン、４−アミノ酪酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ−５−フェニルペンタン酸、６−アミノヘキサン酸、ｔ−ブチルグリシン、ノルバリン、フェニルグリシン、オルニチン、サルコシン、４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸、２−チエニルアラニン及び／又はアミノ酸のＤ−異性体の使用を含むが、これらに限定されない。本明細書で意図される非天然アミノ酸の一覧表は表３に示す。
【００６９】
【表３】
2004535183.tif 000005
【００７０】
【表３−１】
2004535183.tif 000006
【００７１】
【表３−２】
2004535183.tif 000007
架橋剤は、例えば、ｎ＝１からｎ＝６の（ＣＨ2 ）ｎスペーサー基を有する二官能性イミドエステル、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルなどのホモ二官能性架橋剤並びにＮ−ヒドロキシスクシンイミド等のアミノ反応性部分とマレイミド又はジチオ部分（ＳＨ）又はカルボジイミド（ＣＯＯＨ）等の別の基に特異的な反応性部分を通常含むへテロ二官能性試薬を用いて、３Ｄコンフォメーションを安定化するために使用され得る。その上、ペプチドは、例えばＣα−及びＮα−メチルアミノ酸の取込み、アミノ酸のＣα原子とＮα原子間の二重結合の導入並びにＮ末端とＣ末端間、二側鎖間又は一つの側鎖とＮ末端間若しくはＣ末端間にアミド結合を形成するなどの共有結合の導入による環状ペプチド又は類似体の形成によりコンフォメーションを制約できる。
【００７２】
このような修飾は全て、インビボ投与計画において又は診断目的用に使用されるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の分子を安定化させるのにも役立ちうる。
【００７３】
本発明の核酸分子は単離された形態である又は発現ベクターなどのベクターに連結されることが好ましい。「単離された」とは少なくとも一つの精製工程を受けた核酸分子を意味し、これは、分子量、コードする活性、ヌクレオチド配列、塩基組成又は他の簡便な手段により決定された場合、他の構成要素に対して例えば少なくとも約１０％の当該核酸分子、好ましくは少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約３０％、更により好ましくは少なくとも約４０％〜５０％、更により好ましくは少なくとも約６０％〜７０％、更により好ましくは８０％〜９０％以上の当該核酸分子を含む組成物により便宜上定義される。本発明の核酸分子は好ましい実施態様において生物学的に純粋であるとも考えてもよい。
【００７４】
「タンパク質」という用語は、ペプチド、ポリペプチド及びタンパク質を包含すると理解されるべきである。タンパク質はグリコシル化されてもグリコシル化されていなくてもよく、及び／又は該タンパク質に融合した、連結した、結合した若しくは他の方法で結び付いた、アミノ酸、脂質、炭水化物若しくは他のペプチド、ポリペプチド若しくはタンパク質などのある範囲の他分子を含んでもよい。以下「タンパク質」についての言及は、アミノ酸の配列を含むタンパク質並びにアミノ酸、脂質、炭水化物又は他のペプチド、ポリペプチド若しくはタンパク質などの他分子と結び付いたタンパク質を含む。
【００７５】
特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１７に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：１に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：１に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００７６】
他の特に好ましい実施態様では、ＡＧＴ−１１０に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：２に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：２に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００７７】
更に他の特に好ましい実施態様では、ＡＧＴ−１９９に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：３に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：３に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００７８】
更に特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１０７に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：４に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：４に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００７９】
更に特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１４に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：５に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：５に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８０】
更に他の特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１６に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：６に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：６に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８１】
更に他の特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１５に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：７に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：７に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８２】
更に特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１０８に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：８に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：８に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８３】
他の特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１０に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：２８に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：２８に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８４】
更に他の特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１４に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：３２に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：３２に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８５】
更に特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１６に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：３３に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：３３に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８６】
他の特に好ましい実施態様において、ＡＧＴ−１１４に対応するヌクレオチド配列は、配列番号：３５に示されるヌクレオチド配列又は配列番号：３５に類似するヌクレオチド配列を含むその誘導体、同族体若しくは類似体を含むｃＤＮＡ配列である。
【００８７】
該核酸分子は原核細胞（例えば大腸菌）又は真核細胞（例えば酵母細胞、真菌細胞、昆虫細胞、哺乳動物細胞又は植物細胞）で発現できる発現ベクターに連結してもよい。該核酸分子は例えばシグナルペプチドなどの別の実体をコードする核酸分子と連結若しくは融合若しくは他の方法で結び付いてもよい。該分子は３’末端部分若しくは５’末端部分のいずれかで又は３’末端部分及び５’末端部分の両方で融合、連結又は他の方法で結び付いた更なるヌクレオチド配列情報も含みうる。該核酸分子は発現ベクターなどのベクターの一部であってもよい。後者の実施態様はスフィンゴシン・キナーゼの組換え形の生産を促進する。この形態は本発明により包含される。
【００８８】
本発明はこれまで規定したように核酸分子の発現産物に及ぶ。この発現産物はタンパク質が好ましいが、ｍＲＮＡ、ＲＮＡ、イントロン及びエキソンに及ぶ。
【００８９】
上記の発現産物は、配列番号：１、配列番号：２、配列番号：３、配列番号：４若しくは配列番号：５若しくは配列番号：６若しくは配列番号：７若しくは配列番号：８若しくは配列番号：２８若しくは配列番号：３２若しくは配列番号：３３若しくは配列番号：３５によりそれぞれコードされるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８であり、又はそれらの誘導体、類似体、同族体、化学的同等物若しくは擬似体であることが好ましい。
【００９０】
本発明の別の一側面は、
(i)痩身動物と比較して肥満動物の肝臓又は胃の組織で異なって発現する核酸分子によりコードされるタンパク質又はその誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(ii)絶食動物と比較して給餌動物の肝臓又は胃の組織で異なって発現する核酸分子によりコードされるタンパク質又はその誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(iii)配列番号：１に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(iv)配列番号：２に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(v)配列番号：３に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(vi)配列番号：４に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(vii)配列番号：５に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(viii)配列番号：６に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(ix)配列番号：７に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(x)配列番号：８に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xi)配列番号：２８に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xii)配列番号：３２に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xiii)配列番号：３３に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xiv)配列番号：３５に実質的に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体又はこの配列に少なくとも約３０％の類似性を有するアミノ酸配列をコードする配列によりコードされるタンパク質又は該タンパク質の誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体、
(xv)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：１に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xvi)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：２に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xvii)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xviii)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：４に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xix)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：５に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xx)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：６に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxi)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：７に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxii)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：８に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxiii)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：２８に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxiv)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３２に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxv)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３３に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxvi)低ストリンジェンシー条件下で配列番号：３５に示されるヌクレオチド配列又はその誘導体、同族体若しくは類似体とハイブリッドを形成できる核酸分子によりコードされるタンパク質、
(xxvii) 段落(i) から段落(xxvi)の任意の一つで定義されたホモ二量体形のタンパク質；並びに
(xxviii)段落(i)から段落(xxvi)の任意の一つで定義されたヘテロ二量体形のタンパク質、
から構成されるリストから選択される単離されたタンパク質に向けられる。
【００９１】
本発明のタンパク質は単離された形態が好ましい。「単離された」とは少なくとも一つの精製工程を受けたタンパク質を意味し、これは、分子量、アミノ酸配列又は他の簡便な手段により決定されたとき、他の構成要素に対して、例えば少なくとも約１０％の当該タンパク質、好ましくは少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約３０％、更により好ましくは少なくとも約４０％〜５０％、更により好ましくは少なくとも約６０％〜７０％、更により好ましくは８０％〜９０％以上の当該タンパク質を含む組成物により定義するのが便利である。本発明のタンパク質は、好ましい実施態様において生物学的に純粋であるとも考えられうる。
【００９２】
本発明の理論又は作用様式を限定することなく、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現は、体重及び血中トリグリセリドに関係すると考えられる。これらの遺伝子発現の調節はエネルギー摂取に及ぼす効果及び炭水化物／脂肪代謝にも及ぼす効果を介して特にエネルギー均衡を調節すると考えられる。これらの遺伝子の発現は絶食及び給餌によっても調節されうるため、これらの遺伝子又はそれらの発現産物の発現及び／又は活性を調節することは、炭水化物代謝及び脂肪代謝を含む体重及びエネルギー代謝の両方を調節する機構を提供できるであろう。
【００９３】
ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８を同定すれば、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現を調節できる又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性を調節できるある範囲の治療分子の作製が可能になる。本発明が意図するモジュレーターはＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８発現のアゴニスト及びアンタゴニストを含む。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現のアンタゴニストは、アンチセンス分子、リボザイム及び共抑制分子を含む。アゴニストには、プロモーターの活性を増大させる又は負の調節機構を妨害する分子が含まれる。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８のアンタゴニストは抗体及び阻害剤のペプチド断片を含む。このような分子は全て、まず該分子が細胞膜を貫通できるよう改変される必要があることがある。或いは、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現を調節するために、ウイルス物質を使用して遺伝因子を導入してもよい。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８がレプチンをコードするｏｂ遺伝子などの他の遺伝子と一緒に作用する限りにおいては、該治療用の分子はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８並びにｏｂ遺伝子又はそれらの翻訳産物を標的としうる。
【００９４】
従って、本発明は、哺乳動物におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の一つ以上の発現を調節する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現を高レベル調節又は低レベル調節又は他の方法で調節するのに十分な時間及び条件の下で、遺伝子ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８とＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現のモジュレーターの有効量とを接触させる工程を含む方法を意図する。例えば、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８をコードする核酸分子又はその誘導体若しくは同族体を細胞に導入して、該細胞のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８を生産する能力を増強してもよく、逆に、オリゴヌクレオチドなどのＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８のアンチセンス配列を導入して、分子ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の生体利用性を低減させてもよい。
【００９５】
本発明の別の一側面は、哺乳動物におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性を調節する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性を増加又は減少させるのに十分な時間及び条件の下である分子の調節に有効な量を該哺乳動物に投与する工程を含む方法を意図する。この分子はタンパク質性分子又は化学物質であってもよく、そしてＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の誘導体又はそのリガンドであってもよい。
【００９６】
ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現のレベルを調節することは、肥満、食欲不振、エネルギー不均衡、糖尿病、代謝症候群、脂血症障害、高血圧、インスリン耐性及び筋肉の発達状態などのある範囲の状態の治療に重要である。それは農産業においてより痩身の動物、又は必要な場合はより肥満の動物の作製を助けるためにも有用でありうる。従って、本発明により意図される哺乳動物はヒト、霊長類、家畜動物（例えば、ブタ、ヒツジ、ウシ、ウマ、サル）、実験用試験動物（例えば、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウサギ）、愛玩動物（例えば、イヌ、ネコ）及び捕獲された野生動物（例えば、キツネ、カンガルー、シカ）を含むが、これらに限定されない。特に好ましい宿主はヒト、霊長類又は家畜動物である。
【００９７】
従って、本発明は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８のアゴニスト物質及びアンタゴニスト物質に加えて、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８のアミノ酸分子及び核酸分子の治療のための使用及び予防のための使用を意図する。
【００９８】
従って、本発明は哺乳動物におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現を調節する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現を高レベル調節、低レベル調節又は他の方法で調節するのに十分な時間及び条件の下で、遺伝子ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８とある薬剤の有効量とを接触させる工程を含む方法を意図する。例えばオリゴヌクレオチドなどのアンチセンス配列を利用してもよい。或いは、共抑制及び／又はＲＮＡｉを誘発するためにセンス分子を使用してもよい。
【００９９】
逆に、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８をコードする核酸分子又はその誘導体を導入して、一つ以上の特定の機能的活性を高レベル調節してもよい。
【０１００】
本発明の別の一側面は、被験者におけるＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の活性を調節する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の活性を増加又は減少させるのに十分な時間及び条件の下である薬物の調節に有効な量を該被験者に投与する工程を含む方法を意図する。
【０１０１】
哺乳動物への薬物の投与による該活性の調節は、
(i)   ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現を調節する、
(ii)  ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８のアンタゴニストとして機能する、
(iii) ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８のアゴニストとして機能する、
上記の機能を有するタンパク質性分子又は非タンパク質性分子を該哺乳動物中に導入する工程を含む（決してこれらに限定されないが）、幾つかの技術の一つにより達成できる。
【０１０２】
該タンパク質性分子は融合タンパク質又は例えば天然産物スクリーニング後のものを含む天然起源又は組換え起源に由来しうる。該非タンパク質性分子は、例えば核酸分子であってもよく、又は天然起源、例えば天然産物スクリーニングなどに由来してもよく、又は化学的に合成してもよい。本発明はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の化学類似体又はアゴニスト若しくはアンタゴニストとして作用できる小分子を意図する。化学アゴニストは必ずしもＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８に由来するとは限らず、一定のコンフォメーション上の類似性を共有すればよい。或いは、化学アゴニストは一定の物理化学特性を模倣するよう特別に設計してもよい。アンタゴニストはＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８がそれらの正常な生物機能を実行することを遮断し、阻害し又は他の方法で妨害することのできる任意の化合物でありうる。アンタゴニストには、哺乳動物細胞における遺伝子ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそのｍＲＮＡの転写又は翻訳を妨げるモノクローナル抗体やアンチセンス核酸が含まれる。発現の調節は抗原、ＲＮＡ、リボソーム、ＤＮＡザイム、ＲＮＡアプタマー又は抗体を利用しても達成しうる。
【０１０３】
タンパク質性又は非タンパク質性の分子は、直接的か或いは間接的に作用して、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の活性を調節しうる。該分子は、発現又は活性を調節するためにＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８と結び付く場合、それは直接的に作用する。該分子は、他分子がＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現又は活性を直接的か或いは間接的に調節するＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８以外の分子と結び付く場合、それは間接的に作用する。従って、本発明の方法は調節工程のカスケードの誘発を介するＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現又は活性の調節を包含する。
【０１０４】
本発明に従って哺乳動物に投与されうる分子は、これらの分子を標的細胞に特異的に送達するモノクローナル抗体などの標的に向かう手段にも連結されてもよい。
【０１０５】
本発明の更なる側面は、哺乳動物の病的状態に対する本発明の使用に関する。例えば、本発明は肥満、食欲不振、糖尿病又はエネルギー不均衡の治療的処置又は予防的処置における使用にとりわけ有用であるが、決してこれらに限定されない。
【０１０６】
従って、本発明の別の一側面は、肥満、食欲不振、糖尿病及び／又はエネルギー不均衡の一つ以上の徴候を特徴とする状態を患う哺乳動物を治療する方法であって、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の発現を調節するのに十分な又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の活性を調節するのに十分な時間及び条件の下である薬物の有効量を該哺乳動物に投与する工程を含む方法に関する。
【０１０７】
別の一側面において、本発明は肥満、食欲不振、糖尿病又はエネルギー不均衡の一つ以上の徴候を特徴とする病的状態を患う哺乳動物を治療する方法であって、有効量のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８を該哺乳動物に投与する工程を含む方法に関する。
【０１０８】
「有効量」とは、望ましい免疫反応を少なくとも部分的に得るため又は発症を遅らせるため又は進行を阻害するため又は治療されるべき個体の分類群、所望する防御の程度、ワクチンの製剤、医療状況の評価、及び他の関連因子などの治療されるべき個体の特有な状態の発症若しくは進行を完全に止めるために必要な量を意味する。該量は機械的試験により決定できる比較的広い範囲に入ることが予想される。
【０１０９】
これらの方法に従って、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又は該分子の発現若しくは活性を調節できる物質を、一つ以上の他の化合物又は他の分子と共に投与してもよい。「共に投与される」とは、同じ製剤中で同時投与、又は同じ若しくは異なる経路による二つの異なる製剤での投与、又は同じ若しくは異なる経路による逐次投与を意味する。「逐次」投与とは二種類の分子の投与の間で、秒、分、時間又は日の時間差があることを意味する。これらの分子は任意の順序で投与されうる。
【０１１０】
更なる別の一側面において、本発明は、肥満、食欲不振、糖尿病及び／又はエネルギー不均衡を特徴とする状態を治療するための医薬の製造における、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体若しくは類似体の発現を調節できる物質の使用に関する。
【０１１１】
更なる別の一側面において、本発明は、肥満、食欲不振、糖尿病及び／又はエネルギー不均衡を特徴とする状態を治療するための医薬の製造における、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体の活性を調節できる物質の使用に関する。
【０１１２】
本発明の更なる側面は、肥満、食欲不振、糖尿病、低下した筋肉の発達及び／又はエネルギー不均衡を特徴とする状態を治療するための医薬の製造における、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体若しくは類似体又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体の使用に関する。
【０１１３】
本発明の更なる他の側面はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体若しくは類似体の発現を調節する際に使用する物質に関する。
【０１１４】
更なる側面はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８の活性を調節する際に使用する物質又はそれらの誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体に関する。
【０１１５】
本発明の更なる別の一側面は、肥満、食欲不振、糖尿病、低下した筋肉の発達及び／又はエネルギー不均衡の一つ以上の徴候を特徴とする状態を治療する際に使用するＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体若しくは類似体又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及び／又はＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体、化学的同等物若しくは擬似体に関する。
【０１１６】
本発明の関連する側面において、治療を受ける哺乳動物は治療的又は予防的な処置の必要性があるヒト又は動物でありうる。
【０１１７】
従って、本発明は一つの実施態様において、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性のモジュレーター並びに一つ以上の薬学的に許容しうる担体及び／又は希釈剤を含む組成物を意図する。別の一実施態様では、該組成物は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体、同族体、類似体若しくは擬似体並びに一つ以上の薬学的に許容しうる担体及び／又は希釈剤を含む。該組成物はレプチン又はレプチン活性若しくはｏｂ発現のモジュレーションも含みうる。
【０１１８】
簡潔にするため、このような組成物の全ての該構成要素を「活性成分」と呼ぶ。
【０１１９】
注射用途に適した剤形での活性成分の組成物は滅菌水溶液（水溶性の場合）及び滅菌注射溶液の即時調製用の滅菌粉末を含む。あらゆる場合において、該剤形は滅菌されていなければならず容易に注射器を通過する程度まで流動的でなければならない。製造及び貯蔵の条件下で安定でなければならず、細菌及び菌類などの微生物の汚染作用から保護されなければならない。
【０１２０】
担体は、例えば水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール等）を含む溶媒又は他の媒体、それらの適当な混合物、並びに植物油であり得る。
【０１２１】
微生物の作用は種々の抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサール等により防止できる。多くの場合、等張剤、例えば糖類又は塩化ナトリウムを含むことが好ましい。注射用組成物の持続性吸収は、吸収を遅らせる物質、例えばモノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを組成物中に使用することにより達成できる。
【０１２２】
滅菌注射溶液は、適切な溶媒中に必要量の活性成分を、必要ならば任意選択的に他成分と共に、溶解した後、例えば濾過滅菌、照射又は他の簡便な手段による滅菌により調製される。滅菌注射溶液の調製用の滅菌粉末の場合、調製の好ましい方法は真空乾燥及び凍結乾燥の技術である。これらの方法により、予め滅菌濾過された溶液から活性成分に任意の補足的な望ましい成分を加えた粉末が得られる。
【０１２３】
ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８自体を含むＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８が適切に保護される場合、例えば不活性希釈剤若しくは同化食用担体とともに経口投与されうるし、又は殻の硬い若しくは軟らかいゼラチンカプセルに封入されうるし又は錠剤に圧縮されうるし又は食事の食物とともに直接取込まれうる。経口による治療投与のため、該活性化合物は賦形剤とともに取込まれ摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウエハー等の剤形で用いられうる。このような組成物及び調製物は少なくとも１重量％の活性化合物を含むべきである。該組成物及び調製物のパーセンテージは無論変更してよく、便宜上単位剤形の重量の約５％から約８０％の間でありうる。このような治療に役立つ組成物中の活性化合物の量は、適切な用量が得られるような量である。本発明の好ましい組成物又は調製物は、経口投与単位剤形が約０．１μｇから２０００ｍｇの間の活性化合物を含むように調製される。
【０１２４】
錠剤、トローチ、丸薬、カプセル等は下記のものを含んでもよい。即ち、トラガカントガム、アカシア、コーンスターチ若しくはゼラチンなどの結合剤、リン酸二カルシウムなどの賦形剤、コーンスターチ、片栗粉、アルギン酸等などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、スクロース、ラクトース若しくはサッカリンなどの甘味料又はペパーミント、冬緑油、若しくはサクランボの風味などの香料である。投与単位剤形がカプセルの場合、それは上記のタイプの物質に加えて、液体担体を含みうる。被覆剤として又は他の方法で投与単位の物理的形態を改変するため種々の他の物質が存在しうる。例えば、錠剤、丸薬、又はカプセルはセラック、糖又は両方で被覆されうる。シロップ又はエリキシルは、活性化合物、甘味料などのスクロース、保存剤としてメチルパラベン及びプロピルパラベン、着色料及びサクランボ若しくはオレンジの風味などの香料を含みうる。無論、任意の投与単位剤形を調製する際に用いられるいずれの物質も薬学的に純粋であり使用量において実質的に無毒であるべきである。その上、該活性化合物は徐放性の調製物及び製剤に導入されうる。
【０１２５】
薬学的に許容しうる担体及び／又は希釈剤は、任意のあらゆる溶媒、分散媒体、被覆剤、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤並びに吸収遅延剤等を含む。医薬活性物質のためのこのような媒体及び物質の使用は当分野で周知である。任意の従来の媒体又は物質が該活性成分と配合禁忌である場合を除いて、治療用組成物におけるそれらの使用が意図される。補足的な活性成分も該組成物に組み込むことができる。
【０１２６】
投与の容易性及び用量の均一性のため投与単位剤形に非経口組成物を製剤化することはとりわけ有利である。本明細書で用いられる投与単位剤形とは、治療されるべき哺乳動物の被験体にとって単位用量として適した物理的に個別の単位を指す。各単位は望ましい治療効果を生じるように計算された所定量の活性物質を必要な薬学的担体と一緒に含む。本発明の新規な投与単位剤形についての仕様は、(a)活性物質の固有の特徴及び達成されるべき特定の治療効果、及び(b)本明細書で詳細に開示されたような身体的健康が損なわれた疾病状態を有する生被験者の病気治療用に該活性物質を調合する技術に内在する制限により決定され且つ直接的に依存する。
【０１２７】
主要な活性要素は、簡便且つ有効な投与のため、薬学的に許容しうる適切な担体とともに十分量で単位投与剤形に調合される。単位投与剤形は例えば０．５μｇから約２０００ｍｇにわたる量の主活性成分を含むことができる。割合で表すと、該活性化合物は一般的に担体１ｍｌ中に約０．５μｇから約２０００ｍｇ存在する。補足活性成分を含む組成物の場合、用量は該成分の通常の用量及び投与様式を参照して決定される。
【０１２８】
一般用語において、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の有効量は、０．０１ｎｇ／ｋｇ体重から１０，０００ｍｇ／ｋｇ体重を上回る範囲である。代替量の範囲は0.1ng/kg/体重から1000mg/kg/体重を上回る。ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８は治療状態に応じて分、時間、日、週、月又は年毎に投与されうる。投与経路は変更されてよく、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、鼻腔内、座薬を介して、輸液を介して、点滴を介して、経口で又は他の簡便な手段を介しての投与を含む。
【０１２９】
該医薬組成物は、ベクターがＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の発現又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の活性を調節できる核酸分子を保持する場合、標的細胞をトランスフェクトできるベクターのような遺伝分子も含みうる。該ベクターは例えばウイルスベクターであってよい。
【０１３０】
本発明の更なる別の一側面は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８並びにそれらの誘導体及び同族体に対する抗体である。このような抗体はモノクローナルであっても又はポリクローナルであってもよく、そしてＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８に対して天然で存在する抗体から選択してもよく、又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８若しくはそれらの誘導体若しくは同族体に対して特異的に形成させてもよい。後者の場合、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体若しくは同族体はまず担体分子と結び付ける必要がありうる。本発明の抗体及び／又は組換えのＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体は治療剤又は診断剤としてとりわけ有用である。
【０１３１】
例えば、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８並びにそれらの誘導体は、一定の自己免疫疾患で生じうる又は細胞死が起こった場合に生じうる、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８に対して天然に生ずる抗体をスクリーニングするために用いることができる。これらは例えば一部の自己免疫疾患で生じうる。或いは、特異的な抗体を用いて、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８をスクリーニングするたとができる。このような検定技術は当分野で周知であり、例えばサンドウィッチ検定やＥＬＩＳＡが含まれる。
【０１３２】
本発明のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８に対する抗体は、モノクローナル又はポリクローナルであってよく、そしてＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８に対して天然で生じる抗体から選択してもよく、又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８若しくはそれらの誘導体に対して特異的に形成させてもよい。後者の場合、タンパク質ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８はまず担体分子と結び付く必要がありうる。或いは、Ｆａｂ断片などの抗体の断片を用いてもよい。さらに、本発明は組換え及び合成の抗体並びに抗体ハイブリッドに及ぶ。「合成抗体」は本明細書において抗体の断片及びハイブリッドを含むと考えられる。本発明のこの側面の抗体は免疫治療にとりわけ有用であり、診断道具として又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８を精製する手段としても用いてもよい。
【０１３３】
例えば、特異的な抗体はタンパク質ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８をスクリーニングするために用いることができる。後者は例えば細胞抽出物若しくは他の体液中のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８のレベルをスクリーニングする手段として、又は組換え手段により作製されたＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８を培養上清液から精製する手段として重要である。本明細書で意図される検定技術は当分野で知られており例えばサンドウィッチ検定及びＥＬＩＳＡが含まれる。
【０１３４】
上で論じられ最初に言及された抗体に対する任意の二次抗体（モノクローナル、ポリクローナル又は抗体の断片）を含めることは本発明の範囲内である。一次抗体及び二次抗体の両方を検出検定で用いてもよいし、又は一次抗体を市販の抗免疫グロブリン抗体とともに用いてもよい。本明細書で意図される抗体は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の任意の領域に特異的なあらゆる抗体を含む。
【０１３５】
ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体は両方共、酵素又はタンパク質を用いた免疫化により得られ、いずれのタイプも免疫検定に利用できる。両方の型の血清を得る方法は当分野で周知である。ポリクローナル血清はあまり好ましくないが、有効量のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はその抗原部分を用いて適切な実験動物に注射し、該動物から血清を回収し、そして既知の免疫吸着技術のいずれかにより特異的な血清を単離することにより比較的容易に調製される。この方法により生産される抗体は事実上いずれの型の免疫検定においても利用できるが、該抗体はこの産物の潜在的な不均一性のため一般的にはあまり好まれない。
【０１３６】
免疫検定におけるモノクローナル抗体の使用は、大量に生産できること及び該産物の均一性のためとりわけ好ましい。不死細胞系統と免疫原調製物に対して感作されたリンパ球とを融合することにより得られるモノクローナル抗体の生産のためのハイブリドーマ細胞系統の調製は当業者に周知の技術により実施できる。（例えば、ドウイラードとホフマン，ハイブリドーマについての基本的事実，免疫学の概論，II巻，シュヴァルツ編，1981、コーラーとミルスタイン，Nature 256: 495-499, 1975、コーラーとミルスタイン，European Journal of Immunology 6: 511-519, 1976を参照）。
【０１３７】
本発明の別の一側面は、被験者から得た生体試料中のＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はその誘導体若しくは同族体を検出する方法であって、複合体が形成するのに十分な時間及び条件の下で、該生体試料とＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの抗原性の誘導体若しくは同族体に特異的な抗体とを接触させる工程、次いで該複合体を検出する工程を含む方法を意図する。
【０１３８】
この複合体の存在は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の存在を示すものである。この検定は肥満若しくは他の状態を発症する傾向を決定するため又は治療計画を監視するために定量化又は半定量化されうる。
【０１３９】
ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の存在は、ウェスタンブロッティング及びＥＬＩＳＡの手法などの幾つかの方法で確認しうる。米国特許第４，０１６，０４３号、第４，４２４，２７９号及び第４，０１８，６５３号を参照して分かるように広範囲の免疫検定技術が利用できる。無論、これらは非競合型の一部位及び二部位検定の両方又は「サンドウィッチ」検定並びに従来の競合結合検定を含む。これらの検定は標的に対する標識抗体の直接的結合も含む。
【０１４０】
サンドウィッチ検定は最も有用で一般的に用いられる検定である。サンドウィッチ検定技術の幾つかの変法が存在し、それらの全てが本発明により包含されるものと意図される。簡単に述べれば、典型的なフォワード検定においては、無標識抗体を固体基体上に固定し、試験試料を該結合分子と接触させる。抗体−ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８複合体を形成できるのに十分な時間の適切なインキュベーション期間の後、次に、検出可能なシグナルを形成できるレポーター分子で標識され且つＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８に特異的な二次抗体を添加し、抗体−ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８−標識抗体の別の複合体を形成させるのに十分な時間インキュベートする。未反応物質はいずれも洗い流し、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の存在をレポーター分子が形成するシグナルを観察することにより決定する。その結果は可視シグナルの単純な観察による定性的であってもよく或いは既知量のハプテンを含む対照試料と比較することにより定量化してもよい。フォワード検定の変法は試料及び標識抗体の両方が結合した抗体に同時に添加される同時検定を含む。これらの技術は当業者に周知であり、容易に明らかなように任意の僅かな変形を含む。本発明によれば、該試料は、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８を含むかも知れないものであり、細胞抽出物、組織生検又はおそらくは血清、唾液、粘膜分泌物、リンパ液、組織液及び呼吸液を含む。従って、該試料は一般的に体液を含む生物試料であるが発酵液及び細胞培養からなどの上清液にも及ぶ。
【０１４１】
該固体表面は通常ガラス又はポリマーであり、最も一般的に使用されるポリマーはセルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル又はポリプロピレンである。固体支持体は、管、ビーズ、マイクロプレートの円盤、又は免疫検定を実施するのに適した任意の他の表面の形態でありうる。結合工程は当分野で周知であり、一般的に架橋共有結合又は物理的な吸着から成り、ポリマー−抗体複合体は試験試料の調製の際に洗浄される。次に試験試料の一部を該固相複合体に添加し、十分な時間（例えば２〜４０分又はより好都合なら一晩）及び適切な条件（例えば室温から約３７℃）下でインキュベートし、該抗体中に存在する任意のサブユニットと結合させる。インキュベーション時間の後、該抗体サブユニット固相を洗浄し、乾燥し、ＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８の一部に特異的な二次抗体と共にインキュベートする。該二次抗体はレポーター分子と連結されており、これはＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８に対する二次抗体の結合を示すために用いられる。
【０１４２】
代替的方法は生物試料中の標的分子を固定する工程及び次いでレポーター分子で標識され又は標識されていない特異的抗体に対して固定された標的を曝す工程を含む。標的の量及びレポーター分子のシグナル強度に応じて、結合した標的は該抗体で直接標識化することにより検出可能となる。或いは、一次抗体に特異的な二次標識抗体を標的−一次抗体複合体に曝し、標的−一次抗体−二次抗体の三元複合体を形成させる。この複合体はレポーター分子が放出するシグナルにより検出される。
【０１４３】
本明細書で用いられる「レポーター分子」は、その化学的性質により、分析的に同定可能なシグナルを発して抗原に結合した抗体を検出させる分子を意味する。検出は定性的又は定量的のいずれでもよい。この型の検定において最も一般的に使用されるレポーター分子は酵素、蛍光団又は放射性核種を含む分子（即ち放射性同位元素）及び化学発光分子のいずれかである。
【０１４４】
酵素免疫検定の場合、酵素は一般的にグルタルアルデヒド又は過ヨウ素酸塩により二次抗体と結合させる。しかしながら、容易に認識されるように、当業者に容易に利用できる多種多様の異なる結合技術が存在する。一般的に使用される酵素には、とりわけホースラディッシュペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、β-ガラクトシダーゼ及びアルカリホスファターゼが含まれる。特異的酵素とともに使用される基質は、対応する酵素により加水分解された際に検出可能な色の変化が生じることにより選択されるのが一般的である。適切な酵素の例としては、アルカリホスファターゼ及びペルオキシダーゼが挙げられる。上記の発色基質ではなく蛍光産物を生じる蛍光発生基質を使用することも可能である。全ての場合において、酵素で標識した抗体を一次抗体ハプテン複合体に添加し、結合させ、過剰の試薬を洗い流す。次に、適切な基質を含む溶液を抗体−抗原−抗体の複合体に添加する。該基質は二次抗体に連結した酵素と反応し、定性的な可視シグナルを発する。該シグナルはさらに通常分光光度法で定量化され、試料中に存在したハプテンの量の指標を与える。「レポーター分子」はラテックスビーズ上の赤血球細胞などの細胞凝集又は凝集の阻害の使用にも及ぶ。
【０１４５】
または、フルオレセイン及びローダミンなどの蛍光化合物をそれらの結合能を改変することなく抗体に化学的に結合してもよい。特定波長の光での照射により活性化されると、蛍光色素で標識された抗体は光エネルギーを吸着し、分子中で励起状態を誘発した後、光学顕微鏡を用いて可視的に検出できる特徴的な色の光を放出する。ＥＩＡと同様に、蛍光標識抗体を一次抗体−ハプテン複合体に結合させる。未結合試薬を洗い流した後、次いで残留する三元複合体を適切な波長の光に曝し、観察される蛍光は目的のハプテンの存在を示す。免疫蛍光及びＥＩＡの技術は共に当分野で非常によく確立されており、本方法にとりわけ好ましい。しかしながら、放射性同位元素、化学発光分子又は生物発光分子などの他のレポーター分子を使用してもよい。
【０１４６】
本発明はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はそれらの誘導体を検出するためにＰＣＲ分析を含む遺伝子検定法も意図する。
【０１４７】
本発明の検定法はｏｂ又はレプチンと一緒にＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８又はＡＧＴ−１１７、ＡＧＴ−１１０、ＡＧＴ−１９９、ＡＧＴ−１０７、ＡＧＴ−１１４、ＡＧＴ−１１６、ＡＧＴ−１１５及びＡＧＴ−１０８を測定する工程にも及びうる。
【０１４８】
本発明は下記の非限定的実施例により更に説明する。
【実施例１】
【０１４９】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１１７の部分配列
ＡＧＴ−１１７は給餌及び絶食の糖尿病及び非糖尿病のプサモミス・オベサスの肝臓ｃＤＮＡ異なるディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
部分的なヌクレオチド配列は下記の通りである。
（外１）
2004535183.tif 000008
【実施例２】
【０１５０】
ＡＧＴ−１１７遺伝子の発現
Ａ、Ｂ、及びＣの給餌及び絶食の動物から得た肝臓ｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色実時間（ＲＴ）−ＰＣＲは、ＡＧＴ−１１７の発現が給餌の対照動物と比較してＡ（p＜0.001)、Ｂ（p＜0.001)及びＣ（p＜0.001)の動物で絶食により有意に増加することを示した（各群においてｎは５以上の動物、図１）。
【０１５１】
給餌状態において、ＡとＢ(p=0.013) 及びＡとＣ（p=0.037)の間で発現が有意に減少したがＢとＣの給餌動物間では有意差はなかった（図１）。絶食状態において、唯一の有意差はＡとＣ（p=0.047)の動物間であった。動物群がプールされた場合、絶食でＡＧＴ−１１７の発現が有意に減少した（p＜0.001、図２）。ＡＧＴ−１１７の発現は対数血漿インスリンと負に相関した（全動物、p=0.005、図３）が、体重又は血漿グルコースと相関しなかった。
【実施例３】
【０１５２】
ＡＧＴ−１１７遺伝子の相同性
ＡＧＴ−１１７の部分配列を用いたブラスト検索は、クローン601668821F1 NCI-CGAP-IMAGE:3968741 5'のｍＲＮＡ配列から得たマウスのｃＤＮＡ配列と９３％の相同性を示し、イズロン酸−２−スルファターゼ遺伝子を含むＸ染色体のマウスBAC-146N21，即ち完全配列のBAC cDNAクローンと90%の相同性を示した。ＡＧＴ−１１７は現在より長い配列を得るためにＲＡＣＥ・ＰＣＲを受けている。
【実施例４】
【０１５３】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１１０の部分配列
ＡＧＴ−１１０は給餌及び絶食の糖尿病及び非糖尿病のプサモミス・オベサスの肝臓ｃＤＮＡのディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
部分的なヌクレオチド配列は下記の通りである。
（外２）
2004535183.tif 000009
【実施例５】
【０１５４】
ＡＧＴ−１１０遺伝子の発現
Ａ、Ｂ、及びＣの給餌及び絶食の動物から得た肝臓ｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色ＲＴ−ＰＣＲは、給餌又は絶食の状態のいずれにおいてもＡ群、Ｂ群又はＣ群の間で有意差はないことを示した（各群においてｎは５以上の動物、図４）。動物群がプールされた場合、絶食でＡＧＴ−１１０の発現は有意に減少した（p=0.003、図５）。ＡＧＴ−１１０の発現は対数血漿インスリンと正に相関した（全動物、p=0.008、図６）が、体重又は血漿グルコースとは相関しなかった。ＡＧＴ−１１０は主に肝臓で発現し、小脳、肩甲下脂肪及び副腎で少量検出された。
【０１５５】
プサモミス・オベサスに由来する種々の組織の実時間ＰＣＲは、ＡＧＴ−１１０が主に肝臓で発現することが見出されたが、小脳、肩甲下脂肪及び副腎で少量検出された。
【実施例６】
【０１５６】
ＡＧＴ−１１０遺伝子の相同性
ＡＧＴ−１１０のヌクレオチド配列はマウス、ラット及びヒトのヘプシジン抗微生物ペプチド（ＨＡＭＰ）に対して強い相同性を有する。ヒトのヘプシジン（ＡＧＴ−１１０）は長さ３９１塩基対であり長さ８４アミノ酸のタンパク質をコードする。ヘプシジン抗微生物ペプチドは抗微生物活性を示すジスルフィド結合したペプチドである。ヘプシジンは鉄恒常性の維持に関与するシグナル分子として作用し、その抗微生物活性とは異なる付加的機能を有しうる（ピジョンら、J. Biol. Chem. 276(11): 7811-7819, 2001）。ヘプシジンのレベル又は活性の如何なる変化もグルコース、脂肪及びアミノ酸の代謝における肝臓の役割に影響を及ぼすことがあり、そして肥満及び２型糖尿病の進行に寄与しうる。
【０１５７】
ヘプシジンは８３アミノ酸を含むプロペプチドの形態で肝臓で合成され、そして20、22及び25個のアミノ酸の成熟ペプチドに転換される（パークら、J. Biol. Chem. 276: 7806-7610, 2001）。ネズミの前駆体タンパク質であるプロヘプシジンは専ら核内に局在し、得られるタンパク質は細胞質で見出される（ピジョンら、2001、上掲）。
【０１５８】
ヘプシジンは鉄過剰に特定の役割を果たしうる。これは実験的に（カルボニル鉄及び鉄−デキストラン処理されたマウス）及び自然発生的に（β2−ミクログロブリン・ノックアウト・マウス）鉄過剰とされたマウスの肝臓で過剰発現する（ピジョンら、2001、前出）。ネズミのヘプシジンはそのＣ末端領域でヒトのヘプシジンと強い相同性を有する。マウス及びヒトの遺伝子は両者とも三つのエキソン及び二つのイントロンを有し、第７染色体及び第１９染色体上にそれぞれ位置する（ピジョンら、2001、前出）。ヘプシジンのｍＲＮＡはマウス及びヒトの肝臓で主に発現する。ヘプシジンはヒトの血液の限外濾過液から及び尿から精製された（パークら、2001、前出；クラウゼら、FEBS Lett. 480: 147-150, 2000）。
【０１５９】
生物情報分析は、この配列のシグナルペプチドを切断部位が24番目と25番目のアミノ酸の間である可能性が極めて高いと予測した（TSG-SV）。一つのＥＲ膜保有シグナル（Ｃ末端のＸＸＲＲ様モチーフ：ＭＣＣＫ）及び一つのプレニル化モチーフ（Ｃ末端近くのＣＣモチーフ：ＣＣＫＴ）も予測された。一つの可能なセリン・リン酸化部位（４８）及び一つのスレオニン部位（６１）が見出された。６６〜８２アミノ酸からシステインが豊富なドメインが見出された。
【０１６０】
ヒトのヘプシジンは第１９染色体上に位置し、区間１９ｑ１３．１に位置付けられた。この領域に幾つかの既知のヒト肥満ＱＴＬが存在する。
１９ｑ１３．１−ｑ１３．２：    ＬＩＰＥリパーゼ、ホルモン感受性、表現型：肥満（マグレら，Diabetes 47: 284-286, 1998）
１９ｑ１３．３：      ＩＮＳＲインスリン受容体、表現型：高血圧の肥満（ＢＭＩ＞２６）（ジーら，J. Hypertension 12: S13-S22, 1994）
１９ｑ１３．２：      ＬＤＬＲ低密度リポタンパク質受容体、表現型：高血圧のＢＭＩ（ジーら，Biochem Biophys Res Commun. 189: 965-971, 1992、ジーら，Clin Genet. 47: 118-121, 1995、グリフィスら，Clin Exp Pharmacol Physiol. 22: 496-498, 1995）及び肥満（ＢＭＩ＞２６）（ラザフォードら，Int J Obes. 21: 1032-1037, 1997）。
【実施例７】
【０１６１】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１９９の部分配列
ＡＧＴ−１９９は給餌及び絶食の糖尿病及び非糖尿病のプサモミス・オベサスの肝臓cDNAのディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
部分的なヌクレオチド配列は下記の通りである。
（外３）
2004535183.tif 000010
【実施例８】
【０１６２】
ＡＧＴ−１９９遺伝子の発現
Ａ、Ｂ、及びＣの給餌及び絶食の動物から得た肝臓ｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色ＲＴ−ＰＣＲは、ＡＧＴ−１９９の発現がＡ動物(p=0.001)及びＣ動物(p=0.001)の絶食で有意に増加したが、一方、Ｂ群(p=0.065)の絶食で発現が減少する強い傾向があることを示した（各群においてｎは５以上の動物、図７）。給餌状態又は絶食状態のいずれでもＡ群、Ｂ群又はＣ群に有意差はなかった。動物群がプールされた場合、絶食でＡＧＴ−１９９の発現が有意に減少した（p=0.001、図８）。ＡＧＴ−１９９の発現は対数血漿インスリンと正に相関した（全動物、p=0.009、図９）が、体重又は血漿グルコースとは相関しなかった。
【実施例９】
【０１６３】
ＡＧＴ−１９９遺伝子の相同性
ＡＧＴ−１９９の部分配列を用いたＢＬＡＳＴ検索はいずれのＥＳＴ又は既知遺伝子をも同定しなかった。ＡＧＴ−１９９は現在より長い配列を得るためＲＡＣＥ・ＯＣＲを受けている。
【実施例１０】
【０１６４】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１０７の部分配列
ＡＧＴ−１０７はプサモミス・オベサスから得た絶食、給餌及び再給餌された胃のｃＤＮＡのディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
その部分的なヌクレオチド配列は下記の通りである。
（外４）
2004535183.tif 000011
【実施例１１】
【０１６５】
ＡＧＴ−１０７遺伝子の発現
絶食、給餌及び再給餌された動物から得た胃のｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色ＲＴ−ＰＣＲは、遺伝子発現が給餌動物と比較して絶食で有意に高かったことを示した（p=0.003、図１０、各群においてｎは１３以上）。ＡＧＴ−１０７は血漿インスリンと負に相関した（p=0.022、図１１）。ＡＧＴ−１０７と体重、血漿グルコース、胃の内容物又は胃の重量（内容物は除いたもの）の間に相関関係は見出されなかった。
【実施例１２】
【０１６６】
ＡＧＴ−１０７遺伝子の相同性
ＡＧＴ−１０７の部分配列を用いたＢＬＡＳＴ検索により、マウスのペルオキシゾームΔ3，Δ2−エノイル−ＣｏＡイソメラーゼｍＲＮＡと８３％のヌクレオチド相同性が示された。
【０１６７】
β−酸化の経路は脂肪酸の完全な代謝のため、不飽和脂肪酸のβ−酸化に必須なペルオキシゾームΔ3、Δ2−エノイル−ＣｏＡイソメラーゼ(PECI)を含む更なる補助的な酵素を必要とする（ゲイスブレットら，J. Biol. Chem. 274: 21797-21803, 1999、ゲイスブレットら，J. Biol. Chem. 273: 33184-33191, 1998、グルヴィッツら，J. Biol. Chem. 273: 31366-31374, 1998）。ＰＥＣＩは酵母のΔ3、Δ2−エノイル−ＣｏＡイソメラーゼ（Ｅｃｉｌｉｐ）（１）に相同的な、偏在して発現される哺乳動物のΔ3、Δ2−エノイル−ＣｏＡイソメラーゼである。
【０１６８】
ヒトの多組織ノーザン・ブロット（クローンテック社）では、ＰＥＣＩｍＲＮＡは１５の組織（心臓、脳、胎盤、肺、肝臓、骨格筋、腎臓、膵臓、脾臓、胸腺、平伏(prostrate)、精巣、卵巣、小腸、結腸）で検出されたが、心臓、骨格筋、腎臓、膵臓及び肝臓で最も豊富であるように見えた（ゲイスブレットら、1999、前出）。
【０１６９】
先に特性決定されたΔ3、Δ2−エノイル−ＣｏＡイソメラーゼはアシル−ＣｏＡ結合タンパク質のヒドラターゼ／イソメラーゼ・スーパーファミリーに分類され（ムラー−ニュヴェンら、Eur. J. Biochem. 228: 68-73, 1995）、フィンガープリント配列のＶＳＸＩＮＧＸ3 ＡＧＧＸＬＸ4 ＣＤＹを含む。しかしながら、ヒトのＰＥＣＩはこのモチーフを欠如する（ゲイスブレットら、1998、前出）が、スーパーファミリーには存在しない保存された（マウスのＰＥＣＩ及び酵母のＥｃｉｌｉｐ）ＮＧＰＡ（Ｖ／Ｉ）Ｇ（Ｉ／Ｌ）Ｓモチーフ（ゲイスブレットら、1999、前出）を含む。これらの構造上の差異の意義はまだ確定されていない。
【０１７０】
ＰＥＣＩは脂肪酸化に関与するため、ＰＥＣＩのレベル又は活性における何らかの障害は肥満及び糖尿病を発生させる可能性があるであろう。
【実施例１３】
【０１７１】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１１４の部分配列
ＡＧＴ−１１４はプサモミス・オベサスから得た絶食、給餌及び再給餌された胃のｃＤＮＡのディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
ＡＧＴ−１１４の部分配列は下記の通りである。
（外５）
2004535183.tif 000012
より完全な配列は以下に示す。
（外６）
2004535183.tif 000013
配列番号：３５の３４番目から５５１番目までのヌクレオチドの翻訳から下記のアミノ酸配列を得る。
（外７）
2004535183.tif 000014
対応する類似の配列はヒト及びネズミで同定され下記の通りである。
（外８）
2004535183.tif 000015
（外９）
2004535183.tif 000016
対応するヒトのＡＧＴ−１１４のヌクレオチド配列は配列番号：３２に示される。
（外１０）
2004535183.tif 000017
【実施例１４】
【０１７２】
ＡＧＴ−１１４遺伝子の発現
絶食、給餌及び再給餌された動物から得た胃のｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色ＲＴ−ＰＣＲは、遺伝子発現が絶食動物と比較した場合再給餌で有意に高いことを示した（p=0.037）が、給餌された動物とは比較しなかった（各群においてｎは１３以上、図１２）。ＡＧＴ−１１４の発現は胃の重量（内容物は除去）と負に相関した（p=0.036、図１３）。ＡＧＴ−１１４の発現と胃の内容物、体重、血漿グルコース又はインスリンとの間に相関関係は見出されなかった。
【実施例１５】
【０１７３】
ＡＧＴ−１１４遺伝子の相同性
プサモミス・オベサスの配列を用いたＢｌａｓｔ検索は、推定４０９アミノ酸のタンパク質産物である登録番号AK006553のマウスの精巣ｃＤＮＡとの合致を見出した。
【実施例１６】
【０１７４】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１１６の部分配列
ＡＧＴ−１１６はプサモミス・オベサスから得た絶食、給餌及び再給餌された胃のｃＤＮＡのディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
ＡＧＴ−１１６の部分配列は下記の通りである。
（外１１）
2004535183.tif 000018
ＡＧＴ−１１６のより完全な配列は以下の配列番号：３３に示す。
（外１２）
2004535183.tif 000019
更により完全なヌクレオチド配列は配列番号：３４に示す。
（外１３）
2004535183.tif 000020
【実施例１７】
【０１７５】
ＡＧＴ−１１６遺伝子の発現
絶食、給餌及び再給餌された動物から得た胃のｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色ＲＴ−ＰＣＲは、遺伝子発現が群の間で有意に異ならないが、給餌動物で発現が増加する傾向があることを示した（各群においてｎは１３以上、図１４）。ＡＧＴ−１１６の発現は血漿インスリン濃度と正に相関した（p=0.007、図１５）が、体重、胃の重量（内容物は除去）、胃の内容物又は血漿グルコースとは相関しなかった。
【実施例１８】
【０１７６】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１１５の部分配列
ＡＧＴ−１１５はプサモミス・オベサスから得た絶食、給餌及び再給餌された胃のｃＤＮＡのディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
部分的なヌクレオチド配列は下記の通りである。
（外１４）
2004535183.tif 000021
【実施例１９】
【０１７７】
ＡＧＴ−１１５遺伝子の発現
絶食、給餌及び再給餌された動物から得た胃のｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色ＲＴ−ＰＣＲは、絶食動物と比較した場合に遺伝子発現が給餌（p=0.019）及び再給餌（p=0.01）で有意に高いことを示した（各群においてｎは１３以上、図１６）。ＡＧＴ−１１５の発現（対数）は胃の内容物と正に相関し（p=0.011、図１７）、胃の重量（内容物は除去）と負に相関した（p=0.011、図１８）が、体重、血漿グルコース又はインスリンとは相関しなかった。
【実施例２０】
【０１７８】
ＡＧＴ−１１５遺伝子の相同性
Ｂｌａｓｔ検索はいずれのＥＳＴ又は既知遺伝子とも相同性を同定しなかった。ＡＧＴ−１１５は現在より長い配列を得るためＲＡＣＥ・ＰＣＲを受けている。
【実施例２１】
【０１７９】
プサモミス・オベサスのＡＧＴ−１０８の部分配列
ＡＧＴ−１０８はプサモミス・オベサスから得た絶食、給餌及び再給餌された胃のｃＤＮＡのディファレンシャル・ディスプレイにより同定された。
部分的なヌクレオチド配列は下記の通りである。
（外１５）
2004535183.tif 000022
【実施例２２】
【０１８０】
ＡＧＴ−１０８遺伝子の発現
絶食、給餌及び再給餌された動物から得た胃のｃＤＮＡについてのＳＹＢＲ緑色ＲＴ−ＰＣＲは、ＡＧＴ−１０８の発現が再給餌動物と比較して絶食で有意に高いことを示した（p=0.022）が、給餌動物とは比較しなかった（各群においてｎは１３以上、図１９）。ＡＧＴ−１０８の発現は胃の重量、胃の内容物、体重、グルコース後又はインスリン後とは有意に相関しなかった。
【実施例２３】
【０１８１】
ＡＧＴ−１０８の相同性
ＡＧＴ−１０８の部分配列を用いたＢｌａｓｔ検索は、染色体６ｑ２４．２−２５．３のクローンＲＰ１−１３０Ｅ４から得たヒトのＤＮＡ配列と９２％の相同性を示した。エストロゲン受容体１のＥＳＲ１遺伝子の３′末端、ＫＩＡＡ０７９６遺伝子の３′末端を含む。
【０１８２】
脳で発現する新規な遺伝子を同定する企画の一部として見出されたヒトのｃＤＮＡであるＫＩＡＡ０７９６を用いた調査は、Ｓｙｎｅ−１Ｂと高い相同性（８２％）を示し、ヒトのオーソログであると考えられる。
【０１８３】
シナプス核膜のＳｙｎｅ−１は酵母２ハイブリッド系を用いて同定され、ＭｕＳＫの細胞質Ｃドメインに結合することが見出された（アペルら，J. Biol. Chem. 275: 31986-31995, 2000）。ＭｕＳＫはシナプス後(post-synaptic)の分化（機能的な神経筋接合部の発生に重要な筋細胞におけるシナプス核の転写の特化を含む）のすべての局面に重要な神経由来のプロテオグリカン・シグナルであるアグリン(agrin)の受容体の重要な構成要素である。Ｓｙｎｅ−１のイソ型であるＳｙｎｅ−１Ｂは骨格筋、心筋及び平滑筋の細胞の核膜と結合している（アペルら、2000、前出）。Ｓｙｎｅ−１のイソ型はシナプス核と選択的に結合している（アペルら、2000、前出）。これはその局在化及び構造により神経筋接合部での核凝集の形成又は維持に関与しうることが示唆されてきた。
【０１８４】
Ｓｙｎｅ−１Ｂの発現は成人の脳、心臓、腎臓、肝臓、肺、膵臓、骨格筋で示されたが胎盤では示されていない（アペルら、2000、前出）。ヒトの胎児の組織では、脳、心臓、腎臓、肝臓、肺、骨格筋、脾臓で発現が確認されたが、胸腺では確認されなかった（アペルら、2000、前出）。Ｓｙｎｅ−１は筋細胞の核膜と結合し且つ筋内細動脈と結合するが小静脈と結合しないことが示された（アペルら、2000、前出）。Ｓｙｎｅ−１は筋芽細胞でより筋管で優勢であるらしい（アペルら、2000、前出）。骨格筋線維の筋核(myonuclei)に存在するが、レベルはシナプス後膜で最も高い（アペルら、2000、前出）。
【０１８５】
Ｓｙｎｅ−１Ａ及びＳｙｎｅ−１Ｂは共通の３′配列を有するが異なる５′配列を有し、代替的スプライシングを経て又は個々のプロモーターから生じ、それぞれ約４．７ｋｂ及び約１０ｋｂの配列を生ずると考えられる。Ｓｙｎｅ−１Ｂは約１０ｋｂの固有配列に加えてＳｙｎｅ−１Ａと共通配列の９１９アミノ酸を有する（アペルら、2000、前出）。Ｓｙｎｅ−１Ｂの配列は１５個の「スペクトリン反復」を含み、これらの１００アミノ酸の長さのドメインは最初に細胞骨格タンパク質のスペクトリンで記載され、細胞骨格の構成要素である又は細胞骨格と関連する多数の棒状タンパク質でも見出されてきた。ヒトのＤＮＡ配列は染色体６ｑ２４．２−２５．３に位置する（ナガセら，DNA Res. 5: 277-286, 1998）。
【０１８６】
Ｓｙｎｅ−１Ｂは細胞骨格及び神経筋接合部と結合するため、胃壁の伸張程度に直接影響を受け神経筋接合部を介してＣＮＳの食欲中枢と情報伝達できるであろう。胃におけるＳｙｎｅ−１Ｂの生産又は作用の遮断は食欲を抑制できるであろう。
【実施例２４】
【０１８７】
遺伝子発現の研究
各ｃＤＮＡ試料の遺伝子発現はＡＢＩプリズム７７００配列検出器（ＰＥアプライド・バイオシステムズ社、フォスター・シティー、カリフォルニア州）でタックマンＰＣＲ技術を用いて定量した。β−アクチンは反応液に添加されるｃＤＮＡの量を規格化するために内部対照として用いられた。ＰＣＲの条件は、５０℃で２分、９５℃で１０分、続いて９５℃で１５秒及び６０℃で１分の４０サイクルであった。全ての試料は二連で検定した。β−アクチンについては、５′末端に付着したレポーター色素のＦＡＭ及び３′末端に付着した消光色素のＴＡＭＲＡを有する蛍光発生プローブをタックマン・ユニバーサルＰＣＲマスター・ミックス（アプライド・バイオシステムズ社）とともに用いた。試験した他の全遺伝子については、プローブを用いずに、代わりにＳＹＢＲ緑色マスター・ミックス（アプライド・バイオシステムズ社）を用いた。「ハウスキーピング遺伝子」であるβ−アクチンの発現レベルは各群で調べられ：試験した実験条件のいずれでも変わらないことを確認した。
【０１８８】
プライマー配列及びプローブ配列は下記の通りであった。
（外１６）
2004535183.tif 000023
（外１７）
2004535183.tif 000024
【実施例２５】
【０１８９】
統計分析
全てのデータは平均値±Ｓ．Ｅ．Ｍ．として表す。最小有意差又はゲームズ−ハウエル・ポストホック(post hoc)試験のいずれかと組み合わせた一元配置分散分析を３以上の群の間の平均値を比較するために用い、適切な場合、Ｔ試験を用いた。遺伝子発現と表現型測定との関係を分析するために両側ピアソン相関を実施し、全ての変数は使用前に正常性について試験した。変数が正常に分布しなかった場合、それらは対数変換され正常な分布に近似させた。全ての場合に、p＜0.05の有意値を用いた。
当業者は、本明細書に記載された本発明が具体的に記載されたもの以外の変形及び修飾を受け入れる余地があることを理解するはずである。本発明はこのようなあらゆる変形及び修飾を包含すると理解されるべきである。本発明は、この明細書中で個別に又は集合的に言及し又は示した工程、特徴、組成物及び化合物の全てを包含し、そして任意の二つ以上の該工程若しくは特徴の任意の組合わせ又はあらゆる組合わせをも包含する。
【図面の簡単な説明】
【０１９０】
【図１】図１は給餌された（給餌）状態又は絶食（絶食）状態のいずれかでの３群のイスラエル砂ラット（Ａ群、Ｂ群＆Ｃ群、詳細については１８頁を参照）の給餌された肝臓及び絶食の肝臓におけるＡＧＴ−１１７の発現値のグラフ表示である。
【図２】図２は試験された全てのイスラエル砂ラットの給餌された肝臓又は絶食の肝臓におけるＡＧＴ−１１７の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態又は絶食（絶食）状態。
【図３】図３は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１１７の発現値のＬＧ１０対インスリン濃度のＬＧ１０のグラフ表示である。
【図４】図４は給餌された（給餌）状態又は絶食（絶食）状態のいずれかでの３群のイスラエル砂ラット（Ａ群、Ｂ群＆Ｃ群、詳細については１８頁を参照）の給餌された肝臓及び絶食の肝臓におけるＡＧＴ−１１０の発現値のグラフ表示である。
【図５】図５は試験された全てのイスラエル砂ラットの給餌された肝臓又は絶食の肝臓におけるＡＧＴ−１１０の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態又は絶食（絶食）状態。
【図６】図６は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１１０の発現値対インスリン濃度のＬＧ１０のグラフ表示である。
【図７】図７は給餌された（給餌）状態又は絶食（絶食）状態のいずれかでの３群のイスラエル砂ラット（Ａ群、Ｂ群＆Ｃ群、詳細については18頁を参照）の給餌された肝臓及び絶食の肝臓におけるＡＧＴ−１９９の発現値のグラフ表示である。
【図８】図８は試験された全てのイスラエル砂ラットの給餌された肝臓又は絶食の肝臓におけるＡＧＴ−１９９の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態又は絶食（絶食）状態。
【図９】図９は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１９９の発現値対インスリンのＬＧ１０のグラフ表示である。
【図１０】図１０はイスラエル砂ラットの給餌された胃、絶食の胃又は再給餌された胃の組織におけるＡＧＴ−１０７の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態、絶食（絶食）状態、再給餌された（再給餌）状態。各試験条件に対してｎ≧１３。
【図１１】図１１は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１０７の発現値対インスリンのグラフ表示である。
【図１２】図１２はイスラエル砂ラットの給餌された胃、絶食の胃又は再給餌された胃の組織におけるＡＧＴ−１１４の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態、絶食（絶食）状態、再給餌された（再給餌）状態。各試験条件に対してｎ≧１３。
【図１３】図１３は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１１４の発現値対胃の重量のグラフ表示である。
【図１４】図１４はイスラエル砂ラットの給餌された胃、絶食の胃又は再給餌された胃の組織におけるＡＧＴ−１１６の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態、絶食（絶食）状態、再給餌された（再給餌）状態。各試験条件に対してｎ≧１３。
【図１５】図１５は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１１６の発現値対インスリンのＬＧ１０のグラフ表示である。
【図１６】図１６はイスラエル砂ラットの給餌された胃、絶食の胃又は再給餌された胃の組織におけるＡＧＴ−１１５の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態、絶食（絶食）状態、再給餌された（再給餌）状態。各試験条件に対してｎ≧１３。
【図１７】図１７は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１１５の発現値のＬＧ１０対胃の含量のグラフ表示である。
【図１８】図１８は試験された全てのイスラエル砂ラットにおけるＡＧＴ−１１５の発現値のＬＧ１０対胃の重量のグラフ表示である。
【図１９】図１９はイスラエル砂ラットの給餌された胃、絶食の胃又は再給餌された胃の組織におけるAGT-108の平均発現値のグラフ表示である。給餌された（給餌）状態、絶食（絶食）状態、再給餌された（再給餌）状態。各試験条件に対してｎ≧１３。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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2004535183.tif 000157
2004535183.tif 000158