(57)【要約】本発明は、以下の構造：【化１】2004538256.tif 000011を有する化合物；及びその製薬品として許容される塩または誘導体、並びにこうした化合物を含む組成物を提供する。本発明はまた、以下を必要とする患者における、本発明の化合物または組成物を投与することによる、（１）疼痛防止、（２）疼痛治療、（３）鎮静誘発、（４）オピエート嗜癖治療、（５）オピエート離脱（禁断症候群）治療、及び／または（６）咳治療の方法を提供する。
2004538256.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式の構造：
【化１】
2004538256.tif 000010
を有する化合物、その製薬品として許容される塩、エーテル誘導体、エステル誘導体、酸誘導体、水溶液、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物、多形体、または溶媒和化合物。
【請求項２】
請求項１に定義される化合物（ａ）を含む組成物。
【請求項３】
（ｂ）補助剤；
（ｃ）抗酸化剤；
（ｄ）緩衝剤；
（ｅ）担体；
（ｆ）着色剤；
（ｇ）希釈剤；
（ｈ）崩壊剤；
（ｉ）賦形剤；
（ｊ）充填剤；
（ｋ）風味剤；
（ｌ）ゲル化剤；
（ｍ）潤滑剤；
（ｎ）中和剤；
（ｏ）保存料；
（ｐ）前記のあらゆるもののあらゆる組み合わせ；
を更に含む、請求項２に定義される組成物。
【請求項４】
前記化合物のオピエートレセプター作動有効量を含む、請求項３に定義される組成物。
【請求項５】
前記オピエートレセプターが、μレセプターである、請求項４に定義される組成物。
【請求項６】
前記化合物の鎮痛性有効量を含む、請求項３に定義される組成物。
【請求項７】
前記化合物の鎮静性有効量を含む、請求項３に定義される組成物。
【請求項８】
前記化合物の咳防止量を含む、請求項３に定義される組成物。
【請求項９】
前記化合物のオピオイド離脱軽減有効量を含む、請求項３に定義される組成物。
【請求項１０】
前記化合物のオピオイド嗜癖軽減有効量を含む、請求項３に定義される組成物。
【請求項１１】
前記化合物を５０重量％以上含む、請求項１に定義される組成物。
【請求項１２】
前記化合物を９０重量％以上含む、請求項１に定義される組成物。
【請求項１３】
前記化合物を９９．９重量％以上含む、請求項１に定義される組成物。
【請求項１４】
前記化合物の約２０pg/ml乃至約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を含む、請求項３に定義される組成物。
【請求項１５】
請求項２に定義される組成物を含む単位投薬形態。
【請求項１６】
錠剤、ピル、カプセル、ボーラス、粉末、粒子、滅菌非経口溶液、滅菌非経口懸濁液、エリキシル剤、チンキ剤、定量エアロゾル、液体スプレー、ドロップ、アンプル、自動注入装置、坐剤、経皮パッチ、及び凍結乾燥組成物からなる群から選択される、請求項１５に定義される単位投薬形態。
【請求項１７】
持続作用性単位投薬形態である、請求項１５に定義される単位投薬形態。
【請求項１８】
前記化合物を５０重量％以上含む、請求項１５に定義される単位投薬形態。
【請求項１９】
前記化合物を９０重量％以上含む、請求項１５に定義される単位投薬形態。
【請求項２０】
前記化合物を９９．９重量％以上含む、請求項１５に定義される単位投薬形態。
【請求項２１】
これを必要とする患者における、μオピエートレセプターの刺激方法であって、前記方法が、請求項２に定義される組成物のμオピエートレセプター作動有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項２２】
前記投与が、経口、静脈内、筋内、皮下、経皮、肺から、眼から、経粘膜、及び口腔投与からなる群より選択される、請求項２１に定義される方法。
【請求項２３】
前記方法が、前記化合物の約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を提供する、請求項２１に定義される方法。
【請求項２４】
これを必要とする患者における、疼痛防止方法であって、請求項２に定義される組成物の鎮痛性有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項２５】
前記投与が、経口、静脈内、筋内、皮下、経皮、肺から、眼から、経粘膜、及び口腔投与からなる群より選択される、請求項２４に定義される方法。
【請求項２６】
前記方法が、前記化合物の約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を提供する、請求項２４に定義される方法。
【請求項２７】
これを必要とする患者における、疼痛防止方法であって、請求項２に定義される組成物の鎮痛性有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項２８】
前記投与が、経口、静脈内、筋内、皮下、経皮、肺から、眼から、経粘膜、及び口腔投与からなる群より選択される、請求項２７に定義される方法。
【請求項２９】
前記方法が、前記化合物の約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を提供する、請求項２７に定義される方法。
【請求項３０】
前記疼痛が、中程度または重篤である、請求項２７に定義される方法。
【請求項３１】
これを必要とする患者の鎮静化方法であって、請求項２に定義される組成物の鎮静性有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項３２】
前記投与が、経口、静脈内、筋内、皮下、経皮、肺から、眼から、経粘膜、及び口腔投与からなる群より選択される、請求項３１に定義される方法。
【請求項３３】
前記方法が、前記化合物の約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を提供する、請求項３１に定義される方法。
【請求項３４】
これを必要とする患者における、咳治療方法であって、請求項２に定義される組成物の咳防止有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項３５】
前記方法が、約２０pg/ml乃至約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を患者に供給する、請求項３４に定義される方法。
【請求項３６】
これを必要とする患者におけるオピオイド離脱（禁断症候群）治療方法であって、請求項２に定義される組成物のオピオイド離脱軽減有効量を前記患者に投与する工程を含む、方法。
【請求項３７】
前記方法が、約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を前記患者に供給する、請求項３６に定義される方法。
【請求項３８】
これを必要とする患者におけるオピオイド嗜癖の治療方法であって、請求項２に定義される組成物の嗜癖軽減有効量を前記患者に投与する工程を含む。方法。
【請求項３９】
前記方法が、約１０ng/mlの最高血液濃度を達成するために十分な量で前記化合物を前記患者に供給する、請求項３８に定義される方法。
【請求項４０】
請求項２に定義される組成物、容器、ラベル、及び使用のための説明書を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、ここに参照のためにその全体を取り込むこととする、２００１年３月２日出願の米国仮出願第６０／２７２，８１９号からの優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、μオピオイドレセプター対δ、κ、及びORL-1レセプターについての著しい選択性を有する化合物；該化合物の組成物及び単位投薬形態；並びにこうした化合物、組成物、及び単位投薬形態を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
オピオイドシステムは、痛覚脱失、ストレス反応、免疫反応、呼吸、及び神経内分泌機能を含む幾つかの生理学的プロセスを調整する（Herz, Opioids 1993, Vol. 1, Springer- Verlag, Berlin）。薬理学的研究及び分子クローニング研究が、これら様々な効果を変調させる、４つのオピオイドレセプタータイプ（ミュー、デルタ、カッパ、及びORL-1）を同定した（Miotto et al., The Pharmacology of Opioid Peptides (Ed. L. Tseng)1995, 57-71, Harwood Acad. Publishers; Kieffer et al., Cell Mol. Neurobiol. 1995, 15:615-35）。オピオイドレセプターは、百日咳毒素感受性G-タンパク質とカップリングして、アデニリルシクラーゼ活性及びカリウム及びカルシウムのチャネル流を変調させることが知られている（Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 104/I: Opioids I (Herz, A; Ed.)1993, Springer- Verlag, Berlin; Duggan and North, Pharm. Rev. 1983, 35: 219-282）。
【０００４】
臨床的に最も使用されているオピエートは、ミュー（μ）レセプターリガンドである。例えばβ-エンドルフィン及びエンケファリンは、μレセプターのための内因性リガンドである。ジノルフィンＡもまたμレセプターに対して高い親和性を有するが、カッパ（κ）レセプターに対してより高い親和性を有する（下記参照）。モルヒネ及び他のモルヒネ様アゴニストは、主としてμレセプターとの相互作用を経て痛覚脱失を起こす。μレセプター活性化と関連する別の生理学的効果には、以下に限定されるものではないが、呼吸低下、縮瞳、胃腸運動性低下、及び多幸症が含まれる（Parternak, Clin. Neuropharmacol 1993, 16:1-18）。原位置ハイブリダイゼーション研究は、μレセプターmRNAが、以下に関連する脳領域に存在することを示した：疼痛知覚（例えば、水道周囲グレイ、三叉神経脊髄路核、楔状束核及び薄束核、並びに視床）、呼吸（例えば、孤束の核、疑核、及び傍小脳脚核）、並びに悪心及び吐き気（例えば、鰓裂前方領域のニューロン）（The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th edition (Eds Hardman, JG and Limbird, LE)1996 McGraw-Hill, New York）。モルヒネ及び鎮痛剤の嗜癖は、μレセプターの機能亢進を経て起こると仮定される。
【０００５】
κレセプターのサブクラスが同定されている。原位置ハイブリダイゼーション研究により、κ1レセプターサブタイプが主に視床下部領域に存在することが示されており、これが神経内分泌系にレセプター効果をもたらす。κ1レセプターサブタイプの脊髄活性化は、動物モデルにおいて痛覚脱失を誘発する。κ3レセプター活性化もまた痛覚脱失と関連するが、これは、その効果を、脊柱上メカニズムを経て生み出すことが示されている（Clark, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 1989, 251:461-468; Paul, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 1991, 257:1-7）。κ2レセプターサブタイプは、バインディング研究に基づいて同定されたが、このレセプターの薬理学的効果は、現在のところ知られていない。選択的κレセプターリガンドは、μレセプター耐性によって衰えない痛覚脱失を誘発しうる。これらのリガンドは、脊髄において観察された大多数の薬理学的及び生理学的効果を生じ、μアゴニストよりも強度の低い呼吸低下を生じる。κレセプターアゴニストはまた、神経内分泌効果及び不快な精神作用効果を生じる（Pheiffer, A. et al., Science 1986, 233:744-746）。
【０００６】
デルタ（δ）レセプターの２つのサブクラス、δ1及びδ2が、主にアンタゴニストに対する様々な感受性に基づいて同定されている。これらレセプターの活性化は、脊髄及び脊柱上メカニズムを経て痛覚脱失効果を生じるが、脊髄メカニズムがより強力であると思われる。これらレセプターはまた、脊柱上部位に正の強化作用を、脊髄部位に熱刺激に対する抗侵害受容を生じる（Pasternak, Clin. Neuropharmacol, 1993, 16:1-18）。原位置ハイブリダイゼーション研究は、δレセプターが、脊髄の背角に局在化していることを示している。
【０００７】
多数の研究が、中枢及び末梢の両方の神経系及び非神経組織における、ORL-1レセプターの生理学的機能の広範な領域を示している。これらの機能には、侵害受容の変調（Meunier et al, Nature 1995, 377:532-5; Reinscheid et al., Science 1995, 270:792-794; Tian, et al., Br J Pharmacol 1998, 124:21-6）、運動活性（Reinscheid et al., Scinence 1995, 270:792-794）、ストレス誘発性痛覚脱失の逆転（Mogil, et al., Neuroscience 1996, 75:333-7）、ストレス反応の減衰作用（Jenck, et al., Proc Natl Acad Sci USA 1997, 94:14854-8）、学習及び記憶の変調（Mamiya, et al., Brain Res. 1998, 783:236-40; Manabe, et al., Nature 1998, 394:577-81; Sandin, et al., Eur J Neurosci 1997, 9:194-7）、神経伝達物質及びホルモン放出の制御（Bryant, et al., Brain Res 1998, 807:228-33; Murphy, et al., Neuroscience 1996, 75:1-4）、腎臓機能の変調（Kapusta, et al., Life Sci 1997, 60:L15-21）及び神経分化における潜在的役割（Buzas, et al., J Neurochem 1999, 72:1882-9; Saito, et al., Biochem Biophys Res Communl 1995, 217:539-45; Saito, et al., J Bio Chem 1996, 271:15615-22）が含まれる。
【０００８】
【非特許文献１】
Herz, Opioids 1993, Vol. 1, Springer- Verlag, Berlin
【非特許文献２】
Miotto et al., The Pharmacology of Opioid Peptides (Ed. L. Tseng)1995, 57-71, Harwood Acad. Publishers
【非特許文献３】
Kieffer et al., Cell Mol. Neurobiol. 1995, 15:615-35
【非特許文献４】
Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 104/I: Opioids I (Herz, A; Ed.)1993, Springer- Verlag, Berlin
【非特許文献５】
Duggan and North, Pharm. Rev. 1983, 35: 219-282
【非特許文献６】
Parternak, Clin. Neuropharmacol 1993, 16:1-18
【非特許文献７】
The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th edition (Eds Hardman, JG and Limbird, LE)1996 McGraw-Hill, New York
【非特許文献８】
Clark, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 1989, 251:461-468
【非特許文献９】
Paul, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 1991, 257:1-7
【非特許文献１０】
Pheiffer, A. et al., Science 1986, 233:744-746
【非特許文献１１】
Pasternak, Clin. Neuropharmacol, 1993, 16:1-18
【非特許文献１２】
Meunier et al, Nature 1995, 377:532-5
【非特許文献１３】
Reinscheid et al., Science 1995, 270:792-794; Tian, et al., Br J Pharmacol 1998, 124:21-6
【非特許文献１４】
Mogil, et al., Neuroscience 1996, 75:333-7
【非特許文献１５】
Jenck, et al., Proc Natl Acad Sci USA 1997, 94:14854-8
【非特許文献１６】
Mamiya, et al., Brain Res. 1998, 783:236-40; Manabe, et al., Nature 1998, 394:577-81
【非特許文献１７】
Sandin, et al., Eur J Neurosci 1997, 9:194-7
【非特許文献１８】
Bryant, et al., Brain Res 1998, 807:228-33
【非特許文献１９】
Murphy, et al., Neuroscience 1996, 75:1-4
【非特許文献２０】
Kapusta, et al., Life Sci 1997, 60:L15-21
【非特許文献２１】
Buzas, et al., J Neurochem 1999, 72:1882-9
【非特許文献２２】
Saito, et al., Biochem Biophys Res Communl 1995, 217:539-45
【非特許文献２３】
Saito, et al., J Bio Chem 1996, 271:15615-22
【非特許文献２４】
"Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaad, Elsevier, 1985
【非特許文献２５】
Duyang et al., Trip Report:222nd American Chemical Society Ntional Meeting, Chicago, I11., Aug. 26-30(2001)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
当分野においては、１つのオピオイドレセプター対他のものついて高度に選択性であるリガンドを開発することが、継続して求められている。こうしたリガンドの開発によれば、これらレセプターの更なる生理学的理解が可能になるであろう。更に、こうした選択的リガンドは、他のオピオイドレセプターとの相互作用による有害な作用を最少化する、疼痛、咳、及び／または嗜癖の治療のための新規な薬剤に相当しうる。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、下式の構造：
【化２】
2004538256.tif 000003
を有する化合物（Ｉ）、その製薬品として許容される塩、エーテル誘導体、エステル誘導体、酸誘導体、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物、多形体、または溶媒和化合物に係る。
【００１１】
本発明はまた、化学式（Ｉ）の構造をもつ化合物または塩またはその誘導体を含む組成物に係る。
【００１２】
本発明は、化学式（Ｉ）の構造をもつ化合物またはその塩または誘導体を含み、補助剤；抗酸化剤；緩衝剤；担体；着色剤；希釈剤；崩壊剤；賦形剤；充填剤；風味剤；ゲル化剤；潤滑剤；中和剤；保存料；前記のあらゆるもののあらゆる組み合わせを更に含む組成物に係る。
【００１３】
本発明は、化学式（Ｉ）の構造をもつ化合物（ａ）またはその塩または誘導体を含み、（ｂ）補助剤；抗酸化剤；緩衝剤；担体；着色剤；希釈剤；崩壊剤；賦形剤；充填剤；風味剤；ゲル化剤；潤滑剤；中和剤；保存料；前記のあらゆるもののあらゆる組み合わせを更に含み、前記化合物がオピオイドレセプター作動有効量で存在する組成物に係る。
【００１４】
本発明は、化学式（Ｉ）の構造をもつ化合物（ａ）またはその塩または誘導体を含み、（ｂ）補助剤；抗酸化剤；緩衝剤；担体；着色剤；希釈剤；崩壊剤；賦形剤；充填剤；風味剤；ゲル化剤；潤滑剤；中和剤；保存料；前記のあらゆるもののあらゆる組み合わせを更に含み、前記化合物がμオピオイドレセプター作動有効量で存在する組成物に係る。
【００１５】
本発明は、（１）鎮痛有効量、（２）鎮静有効量、（３）オピエート嗜癖治療有効量、（４）オピエート離脱軽減有効量、及び／または（５）咳防止有効量の、化学式（Ｉ）の構造をもつ化合物またはその塩または誘導体を含み；補助剤；抗酸化剤；緩衝剤；担体；着色剤；希釈剤；崩壊剤；賦形剤；充填剤；風味剤；ゲル化剤；潤滑剤；中和剤；保存料；前記のあらゆるもののあらゆる組み合わせを更に含む組成物に係る。
【００１６】
本発明は、（１）鎮痛有効量、（２）鎮静有効量、（３）オピエート嗜癖治療有効量、（４）オピエート離脱軽減有効量、及び／または（５）咳防止有効量の、化学式（Ｉ）の構造をもつ化合物またはその塩または誘導体を含み；補助剤；抗酸化剤；緩衝剤；担体；着色剤；希釈剤；崩壊剤；賦形剤；充填剤；風味剤；ゲル化剤；潤滑剤；中和剤；保存料；前記のあらゆるもののあらゆる組み合わせを更に含み、前記化合物が、約0.1mg乃至約1000mgである組成物に係る。或いはまた、前記化合物は、該組成物中に、約２０pg/ml乃至約１０ng/mlの最高血漿濃度を達成するように準備される。
【００１７】
本発明はまた、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩またはその誘導体を含む組成物を含む単位投薬形態に係る。
【００１８】
本発明は、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩またはその誘導体を含む組成物を含む単位投薬形態であって、前記単位投薬形態が、錠剤、ピル、カプセル、ボーラス、粉末、粒子、滅菌非経口溶液、滅菌非経口懸濁液、エリキシル剤、チンキ剤、定量エアロゾル、液体スプレー、ドロップ、アンプル、自動注入装置、坐剤、経皮パッチ、及び凍結乾燥組成物からなる群から選択されるものである単位投薬形態にも関する。
【００１９】
本発明は、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩またはその誘導体を含む組成物を含む単位投薬形態であって、前記単位投薬形態が、持続作用性単位投薬形態である単位投薬形態にも関する。
【００２０】
本発明は、これを必要とする患者における、μオピエートレセプターの刺激方法であって、前記方法が、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩または誘導体を含む組成物のμオピエートレセプター作動有効量を患者に投与する工程を含む方法に係る。
【００２１】
本発明はまた、これを必要とする患者における、μオピエートレセプターの刺激方法であって、前記方法が、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩または誘導体を含む組成物のμオピエートレセプター作動有効量を患者に投与する工程を含む方法であって、前記投与が、経口、静脈内、筋内、皮下、経皮、肺から、眼から、経粘膜、及び口腔投与からなる群より選択される方法に係る。
【００２２】
本発明はまた、以下を必要とする患者における（１）疼痛防止、（２）疼痛治療、（３）鎮静誘発、（４）オピエート嗜癖治療、（５）オピエート離脱（禁断症候群）治療、及び／または（６）咳治療の方法に係り、前記方法は、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩または誘導体を含む組成物の有効量を患者に投与する工程を含む方法に係る。
【００２３】
本発明はまた、以下を必要とする患者における（１）疼痛防止、（２）疼痛治療、（３）鎮静誘発、（４）オピエート嗜癖治療、（５）オピエート離脱（禁断症候群）治療、及び／または（６）咳治療の方法に係り、前記方法は、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩または誘導体を含む組成物の有効量を患者に投与する工程を含み、前記投与が、経口、静脈内、筋内、皮下、経皮、肺から、眼から、経粘膜、硬膜外、髄腔内、及び口腔投与からなる群より選択される方法に係る。
【００２４】
本発明はまた、これを必要とする患者における、疼痛治療方法であって、前記方法が、式（Ｉ）の構造を持つ化合物またはその塩または誘導体を含む組成物の鎮痛有効量を投与する工程を含み、前記疼痛が中程度または重篤である方法に係る。
【００２５】
本発明は、δ、κ、及びORL-1レセプターと比べて、μオピオイドレセプターに対して選択性を有する化合物；該化合物の組成物及び単位投薬形態；及びこうした化合物、組成物、及び単位投薬形態の使用方法に関する。該化合物、Ｎ-ブト-3-エニル-ノルブプレノルフィンは、下記の構造を有する。
【００２６】
【化３】
2004538256.tif 000004
【００２７】
いかなる特定の理論に縛られることも意図しないが、Ｎ-ブト-3-エニル-ノルブプレノルフィン（Ｉ）は、μ、δ、κ、及びORL-1オピオイドレセプターの部分的アゴニストであることが判明している。部分的アゴニストとは、レセプターに結合するが、これを完全には刺激しない剤である。更に、前記剤は、完全アゴニストの結合を防止し、これにより該レセプターから可能な、完全な薬理学的活性を遮断する。
【００２８】
本発明の確かに好ましい実施態様を以下に説明する。記載が本発明の所定の成分を例えば「約」または「およそ」等の近似値で記載する限りは、これらの語は、一般的に、測定の性質または精度があるとすれば、測定した量に対して許容される程度の誤差を意味するであろう。典型的には、模範的誤差の程度は、測定した値または値の範囲の20%以内、好ましくは10%以内、更に好ましくは5%以内である。あるいはまた、特に生物学的系においては、「約」及び「およそ」なる語は、好ましくは得られた値の5倍以内、より好ましくは2倍以内の大きな範囲の値を意味しうる。ここに与えられる数量は、特記のない限り近似値であり、明確に記載されていない場合でも「約」及び「およそ」を推測することができる。
【００２９】
（塩及び誘導体）
該化合物の、製薬品として許容される様々な塩、エーテル誘導体、エステル誘導体、サンユウ導体、及び水溶性変更誘導体もまた、本発明に包含される。本発明は更に、該化合物の全ての個別のエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物、及び別の異性体比を含む。本発明はまた、多形体、または溶媒和化合物、例えばこの化合物の水和物及び有機溶媒で形成されるものを含む。こうした異性体、多形体、及び溶媒和化合物は、ここに記した開示に基づき、当業者に既知の方法、例えば位置特異的及び／またはエナンチオ選択的な合成及び分析によって調製して良い。本願が式（Ｉ）のエーテル誘導体に係る限りにおいては、こうした誘導体は、C1-C6低級アルキルまたはアルケニル、分枝状または非分枝状エーテルであって、最適に１つ以上のヘテロ原子、例えばN、O、S、Si、またはハロゲン置換された低級（C1-C6）アルキル基によって置換されたものを含んで良い。式（Ｉ）のエステル誘導体に関しては、こうした誘導体はC1-C6低級アルキル、分枝状または非分枝状エステルを含んでも良い。
【００３０】
該化合物の適当な塩は、以下に限定されるものではないが、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、過塩素酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、カルボン酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、サリチル酸、p-アミノサリチル酸、2-フェノキシ安息香酸、及び2-アセトキシ安息香酸で生成される酸付加塩；サッカリンで生成される塩；アルカリ金属塩、例えばナトリウム及びカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム及びマグネシウム塩；及び有機または無機のリガンドで生成される塩、例えば第四級アンモニウム塩を含む。
【００３１】
更なる適当な塩には、以下に限定されるものではないが、本発明の化合物の酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、硼酸塩、シュウ酸塩、エデト酸カルシウム、カルシン酸塩、炭酸塩、塩酸塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、ジヒドロ塩酸塩、エデト酸塩、エジシレート、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシネート、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩化水素酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、硝酸メチル、硫酸メチル、ムケート（mucate）、ナプシレート（napsylate）、硝酸塩、N-メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモ酸塩（エンボネート（embonate））、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、亜酢酸塩、スクシン酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレーテ（teoclate）、トシル酸塩、トリエチオジド（triethiodide）及び吉草酸塩が含まれる。
【００３２】
本発明は、本発明の化合物のプロドラッグを含む。プロドラッグは、以下に限定されるものではないが、生体内において本発明の化合物に容易に変換可能な、本発明の化合物の機能性誘導体、例えばアキセチル及びピボキセチルを含む。適当なプロドラッグの選択及び調製のための定法は、例えば、"Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaad, Elsevier, 1985に記載されている。
【００３３】
本願の内容においては、本発明の化合物に言及した場合は、本発明の化合物の塩または誘導体もまた含まれる。
【００３４】
（合成）
本発明の化合物は、当業界において既知のあらゆる定法によって調製されて良い。１つの例としては、α-(1,1-ジメチルエチル)-4,5-エポキシ-18,19-ジヒドロ-3-ヒドロキシ-6-メトキシ  α-メチル、(αS,5α,7α)-6,14-エテノモルフィナン-7-メタノール（ノルブプレノルフィン）（0.2g,0.47mmole；Tasmanian Alkaloids(Tasmania), McFarlan Smith (U. K.)より入手可能；あるいはまた、ノルブプレノルフィンは、http://www.albmolecular.com/features/tekreps/vol26/no58に見出される、Duyang et al., Trip Report:222nd American Chemical Society Ntional Meeting, Chicago, I11., Aug. 26-30(2001)により提案されるスキームを使用してブプレノルフィンから調製することができる。 ）が、塩基及び溶媒の存在下においてハロ-アルケン／アルカンと反応しても良い。該反応は、約0℃乃至還流温度の温度にて、約5乃至48時間に亘り行うことができる。ノルブプレノルフィンのアルケン／アルカンに対する比は、約1:1乃至約1:10であってよく、1:1の比が好ましい。好ましい実施態様においては、ノルブプレノルフィンを、DMF及び重炭酸ナトリウム中で4-ブロモ-1-ブテンと反応させる。更なる実施態様においては、該反応は、95℃にて16時間に亘り行われる。
【００３５】
その後反応混合物を、冷却し、減圧下で濃縮乾燥させ、残渣を無極性溶媒中にとり、水で洗う。使用してよい無極性溶媒の例は、以下に限定されるものではないが、塩化メチレンである。得られる有機相を乾燥（Na2SO4）させ、減圧下で濃縮する。この物質は、当業界において既知のあらゆる方法により精製することができる。好ましい実施態様においては、該生成物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（塩化メチレン中2%のメタノール）で精製する。
【００３６】
（製薬品組成物）
本発明の化合物、塩、誘導体及び／またはプロドラッグは、製薬品組成物に製剤して良い。製薬品組成物はまた、添加剤、例えば製薬品として許容される担体、風味剤、甘味料、保存料、染料、結合剤、懸濁剤、分散剤、着色剤、崩壊剤、賦形剤、希釈剤、潤滑剤、可塑剤、食用油、または前記のあらゆるもののあらゆる組み合わせ等を含んで良い。
【００３７】
製薬品として許容される適当な担体には、以下に限定されるものではないが、エタノール、水、グリセリン、アロエベラゲル、アラントイン、グリセリン、ビタミンＡ及びＥのオイル、鉱物油、PPG2ミリスチルプロピオネート、植物油、及びゾルケタール（solketal）が含まれる。
【００３８】
適当な結合剤には、以下に限定されるものではないが、デンプン、ゼラチン、天然糖類、例えばグルコース、スクロース及びラクトース、コーン甘味料、天然及び合成のゴム、例えばアカシア、トラガカンス、植物ゴム、及びアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス等が含まれる。
【００３９】
適当な崩壊剤には、以下に限定されるものではないが、デンプン、例えばコーンスターチ、またはメチルセルロース、アガー、ベントナイト、キサンタンガム等が含まれる。
【００４０】
適当な潤滑剤には、以下に限定されるものではないが、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、酢酸ナトリウム等が含まれる。
【００４１】
該組成物はまた、適当な保存料、例えば安息香酸ナトリウム、及び該組成物を摂取及びまたは注入により適したものとすることのできる他の添加剤、例えば、調剤の容量オスモル濃度に影響する塩化ナトリウムを含んで良い。
【００４２】
適当な懸濁剤は、以下に限定されるものではないが、ベントナイトである。
【００４３】
適当な分散剤及び懸濁剤には、以下に限定されるものではないが、合成及び天然のゴム、例えば植物ゴム、トラガカンス、アカシア、アルギン酸塩、デキストラン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ポリビニル-ピロリドン、及びゼラチンが含まれる。
【００４４】
適当な食用油には、以下に限定されるものではないが、綿実油、コーン油、ヤシ油、ゴマ油、ココナッツオイル、及びピーナッツオイルが含まれる。
【００４５】
適当な製薬用希釈剤は、以下に限定されるものではないが、水、食塩水、または乳酸加リンガー液である。
【００４６】
さらなる添加剤の例には、以下に限定されるものではないが、ソルビトール、タルク、ステアリン酸、及びリン酸二カルシウムが含まれる。
【００４７】
（単位投薬形態）
前記製薬品組成物は、単位投薬形態、例えば、錠剤、ピル、カプセル、ボーラス、粉末、粒子、滅菌非経口溶液、滅菌非経口懸濁液、滅菌非経口エマルジョン、エリキシル剤、チンキ剤、定量エアロゾルまたは液体スプレー、ドロップ、アンプル、自動注入装置、または坐剤として製剤して良い。単位投薬形態は、経口、非経口、舌下、または直腸投与向けに、あるいは吸入または注入向けに、経皮パッチ、及び凍結乾燥組成物として使用して良い。
【００４８】
固体単位投薬形態は、本発明の化合物、塩、または誘導体を、製薬品として許容される担体及び、上述の他のあらゆる所望の添加剤と混合することによって調製して良い。該混合物は、典型的には本発明の化合物と担体と他のあらゆる所望の添加剤との均一な混合物が生成するまで、即ち、前記化合物が該組成物全体に均一に分散するまで、混合される。
【００４９】
錠剤またはピルをコーティングして、あるいはまた調合して、遅延及び／または持続作用性を有する単位投薬形態、例えばタイムリリース及び持続作用性単位投薬形態を形成することができる。例えば、該錠剤またはピルは、内部投薬及び外部投薬成分を含み、外部投薬成分が内部投薬成分の外包の形態を成すことができる。胃における崩壊に対抗する役割を果たし、内部成分を十二指腸内へと完全な状態で通過させるかまたは、内部成分の放出を遅延させる、腸層によって、前記２つの成分を分離することができる。
【００５０】
該化合物の放出を制御するための生分解性ポリマーには、以下に限定されるものではないが、ポリ乳酸、ポリエプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロ-ピラン、ポリアンヒドリド、ポリシアノアクリレート、ヒドロゲルの架橋した、または両親媒性のブロックコポリマー、セルロース性ポリマー、及びポリアクリレートが含まれる。
【００５１】
液体単位投薬形態には、以下に限定されるものではないが、水溶液、好適に風味付けされたシロップ、水性または油性懸濁液、及び食用油を含む風味付けエマルジョン、並びにエリキシル剤、及び同様の製薬品媒体が含まれる。これらの投薬形態は、本発明の化合物を液体担体中に溶解または懸濁させることによって調製してよい。
【００５２】
局所調剤は、典型的には懸濁剤、及び任意に起泡防止剤を含む。こうした局所調剤は、水薬（liquid drench）、アルコール溶液、局所用クレンザー、クレンジングクリーム、スキンゲル、スキンローション、及びクリームまたはゲル製剤（水性溶液及び懸濁液を含むがこれらに限定されない）としてのシャンプーであってよい。
【００５３】
（投与）
本発明の製薬用組成物または単位投薬形態は、静脈内、気管内、皮下、経口、非経口、口腔、舌下、眼から、肺から、経粘膜、経皮、及び筋内等の様々な経路によって投与してよい。単位投薬形態はまた、当該技術常識をもつ者には既知の経皮スキンパッチの形態のものを使用して経皮経路により、または適当な鼻内媒体の局所使用により、鼻内形態で投与することができる。
【００５４】
本発明の、非経口、特に注射による投与のための製薬品組成物及び単位投薬形態は、典型的には、上述のような製薬品として許容される担体を含む。蓄積形態のための好ましい液体担体は、植物油である。注射は、蓄積送達及び持続性作用の目的のために、例えば、静脈内、硬膜外、髄腔内、筋内、ルーメン内、気管内、または皮下であってよい。
【００５５】
本発明の該化合物、製薬品組成物、または単位投薬形態はまた、リポソーム送達システム、例えば小さな一枚膜媒体、大きな一枚膜媒体、及び多重層媒体等の形態で投与することができる。リポソームは、様々なリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミン、またはホスファチジルコリン等から形成することができる。
【００５６】
本発明の化合物はまた、これに該化合物分子がカップリングする個別の担体としての、モノクローナル抗体の使用によって送達してもよい。本発明の化合物はまた、ターゲットとすることのできる薬剤担体として可溶性ポリマーとカップリングしうる。こうしたポリマーには、以下に限定されるものではないが、ポリビニル-ピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリル-アミドフェノール、ポリヒドロキシ-エチルアスパルタミドフェノール、及びパルミトイル残基で置換されたポリエチル-エネオキシドポリリシンが含まれる。
【００５７】
経皮投薬形態もまた、本発明によって企図される。経皮形態は、流体容器または付着性マトリックスシステム中の薬剤のいずれかを使用する、拡散主導経皮システム（経皮パッチ）であってよい。別の経皮投薬形態には、以下に限定されるものではないが、局所用ゲル、ローション、軟膏、経粘膜システム及び装置、並びにイオン電気導入（電子拡散）送達システムが含まれる。経皮投薬形態は、本発明の化合物の、定時放出及び持続性放出のために使用してよい。
【００５８】
本発明の製薬品組成物または単位投薬形態は、μレセプターの活性を作動及び/または拮抗するためにこれを必要とする動物、好ましくは人間に投与してもよい。該製薬品組成物は、疼痛、咳、オピエート離脱（禁断症候群）及び/または薬剤中毒等の様々な症状を使用するために使用してよい。本発明の化合物、製薬品組成物、または単位投薬形態は、あらゆる潜在的な毒性を最小化する一方でその活性またはμレセプターとの最適な相互作用を得るためにルーチン試験によって定義される適当な投薬量で、単独で投与されてよい。
【００５９】
本発明の一日投薬量は、潜在的な疾患状態、個人の状態、体重、性別、及び年齢、並びに投与方式等の様々な要因によって変化してよい。経口投与のためには、製薬品組成物は、治療しようとする患者に対する投薬量の対症調節のために、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、または50.0ミリグラムの該化合物を含有する、刻み目つきまたは刻み目無しの（scored or unscored）固体単位投薬形態の形態で提供することができる。該化合物、塩、または誘導体の有効量は、一日当たり体重1kg毎に約0.01mg乃至約100mgの投薬量レベルで供給してよい。好ましい実施態様においては、本発明の化合物、塩、または誘導体の有効量は、20pg/ml乃至10ng/mlの血液濃度を達成するために適当なあらゆる方法によって投与される。
【００６０】
好ましい実施態様においては、本発明の化合物、塩、または誘導体の「鎮痛性有効量」が、痛覚脱失治療を必要とする患者に投与される。「鎮痛性有効量」とは、患者によって罹患される疼痛の程度と共に、患者の身長、体重、年齢、及び状態などの要素、並びに該化合物の投与の経路によって決定される、患者において疼痛を軽減または緩和する化合物の量である。
【００６１】
あるいはまた、該化合物の「レセプター作動性有効量」がこれを必要とする患者に投与される。こうした量は、レセプターに結合し、且つレセプター機能を刺激する化合物の量である。
【００６２】
本発明はまた、本発明の化合物、塩、または誘導体の「鎮静性有効量」を利用する方法を提供する。こうした量は、患者に鎮静もしくは落ち着かせる効果を与える量である。鎮静剤は、一般、局部、神経、または脈管用であってよい。
【００６３】
本発明の化合物、塩、または誘導体は、「咳防止量」で投与してよいが、これは、患者の身長、体重、年齢、及び状態、並びに該化合物の投与経路によって決定される、患者において咳を軽減または緩和する該化合物、塩、または誘導体の量である。
【００６４】
最後に、本発明の化合物、塩、または誘導体は、患者のオピエートに対する渇望を軽減する該化合物、塩、または誘導体の量である、「嗜癖軽減有効量」で投与してよい。
あるいはまた、本発明の化合物、塩、または誘導体は、患者の禁断症状の症状を軽減する該化合物、円、または誘導体の量である、「オピオイド離脱軽減有効量」で投与して良い。
【００６５】
本発明の化合物を利用する投薬プログラムは、患者のタイプ、種、年齢、体重、性別、及び医学的状態；治療しようとする状態の深刻度；投与経路；患者の腎臓及び肝臓の機能；並びに使用する特定の化合物を含む様々な要素によって選択される。通常の技術常識をもつ外科医または獣医であれば、該状態の進行を回避、阻止、または抑えるために必要とされる薬剤の有効量を、容易に決定し処方することができる。毒性なしに効力を生む範囲内の薬剤濃度を達成する場合の最適な正確性のためには、ターゲット部位での薬剤利用可能性の速度論に基づくプログラムが必要である。これには、薬剤の吸収、分配、代謝、及び排出を考慮することが含まれる。
【００６６】
製薬品組成物または単位投薬形態は、一日の投薬量を一度に投与しても、または毎日2、3、または4回の分割投薬量として、合計で一日の投薬量を投与してもよい。更に、別の活性剤の共投与または連続投与が所望されてもよい。一つ以上の活性剤とのコンビネーション治療であって、該活性剤が別々の投薬製剤である場合のためには、該活性剤は同時に投与することができ、またはこれら其々を別々に少しずつずらして設定した時間に投与することができる。上述のように別の活性剤と組み合わせる場合には、所望の効果を達成するために投薬量を調整して良い。一方では、これら様々な活性剤の単位投薬形態は、いずれの活性剤が単独で使用された場合よりも病状が一層軽減されるという相乗効果を達成するために、個別に最適化及び組み合わせされてよい。
【００６７】
一般的に、局所調剤は、該局所調剤の総計重量100%に基づいて、約0.01乃至約100重量％の該化合物、塩、または誘導体を含む。好ましい実施態様においては、局所調剤は、約0.1乃至約50重量%の該化合物、塩、または誘導体を、より好ましくは約1.0乃至約25%の該化合物、塩、または誘導体を含む。
【００６８】
一般的に、経皮投薬形態は、全投薬量100%に基づいて約0.01乃至約100重量％の該化合物、塩、または誘導体を含む。好ましい実施形態においては、経皮調剤は、該該化合物、塩、または誘導体を約0.1乃至約50重量％、より好ましくは該化合物、塩、または誘導体を約1.0乃至約25重量％含む。
【００６９】
最後に、本発明の調剤または組成物は、該化合物、塩、または誘導体を活性成分の重量として50％以上、好ましくは活性成分の重量として75％以上、更に好ましくは90％以上、95％以上、99％以上、99.5％以上、あるいは最も好ましくは99.9％含んでよい。
【００７０】
本発明はまた、本発明の化合物または組成物を含むキットを企図する。好ましい実施態様においては、こうしたキットは、該キットの構成成分に適当な容器を含むが、前記構成成分には、以下に限定するものではないが、上述のように意図した使用に適合させた本発明の化合物、塩、または誘導体あるいは組成物の有効量、並びに該キットのためのラベル、及びこれも該キットの意図した使用、例えば疼痛の治療または予防、鎮静状態の誘発、オピエート嗜癖または離脱の治療、及び/または咳の治療のために適合させた本発明の化合物、塩、または誘導体の使用についての印刷された指示書が含まれる。
【実施例】
【００７１】
（実施例1：Ｎ-ブト-3-エニル,  ノルブプレノルフィンの合成）
2ｍLのDMF中のα-(1,1-ジメチルエチル)-4,5-エポキシ-18,19-ジヒドロ-3-ヒドロキシ-6-メトキシ-α-メチル、（αS, 5α,7α）-6,14-エテノモルフィナン-7-メタノール（ノルブプレノルフィン）（0.2g、0.47mmole；Tasmanian Alkaloids (Tasmania)より入手可能）の懸濁液に、炭酸水素ナトリウム（0.146g,1.74mmole）及び4-ブロモ-1-ブテン（0.064g,0.47mmole）を加えた。反応混合物を95℃にて16時間に亘り攪拌した。冷却した反応混合物を減圧下で濃縮乾燥させ、残渣を10mlの塩化メチレン中にとり、10mLの水で3回洗った。得られた有機層を乾燥（Na2SO4）させ、減圧下で濃縮して暗褐色のオイルを得て、これを静置したところ結晶化した。この物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（塩化メチレン中2%のメタノール）で精製し、0.1グラムの所望の生成物を乳白色の結晶固体として得た。FAB高分解能マススペクトル m/z 468.3091[M+1]+、理論値468.3114.
【００７２】
（実施例2：レセプターバインディング研究）
デルタ2バインディングアッセイ：レセプター源は、ヒトの組換え細胞株とした。該研究で使用された放射性リガンドは、[3H]-ナルトリンドールであった。バインディング反応は、5mMのMgCl2を含む50mMのTris-HCl（ｐH=7.4）中で、25℃にて60分間に亘り行った。バインディング反応は、ガラスファイバーフィルター上での迅速な真空濾過によって終了させた。フィルター上に捕捉された放射能を測定し、コントロール値と比較した。
【００７３】
カッパバインディングアッセイ：レセプター源は、ヒトの組換え細胞株とした。該研究で使用された放射性リガンドは、[3H]-ジプレノルフィンであった。バインディング反応は、10mMのMgCl2及び1mMのEDTAを含む50mMのTris-HCl（ｐH=7.4）中で、25℃にて60分間に亘り行った。バインディング反応は、ガラスファイバーフィルター上での迅速な真空濾過によって終了させた。フィルター上に捕捉された放射能を測定し、コントロール値と比較した。
【００７４】
ミューバインディングアッセイ：レセプター源は、ヒトの組換え細胞株とした。該研究で使用された放射性リガンドは、[3H]-ジプレノルフィンであった。バインディング反応は、10mMのMgCl2を含む50mMのTris-HCl（ｐH=7.4）中で、25℃にて60分間に亘り行った。バインディング反応は、ガラスファイバーフィルター上での迅速な真空濾過によって終了させた。フィルター上に捕捉された放射能を測定し、コントロール値と比較した。
【００７５】
ORL-1バインディングアッセイ：レセプター源は、ヒトの組換え細胞株とした。該研究で使用された放射性リガンドは、[3H]- ノシセプチンであった。バインディング反応は、10mMのMgCl2及び1mMのEDTAを含む25mMのHEPES緩衝液（ｐH=7.4）中で、25℃にて60分間に亘り行った。バインディング反応は、ガラスファイバーフィルター上での迅速な真空濾過によって終了させた。フィルター上に捕捉された放射能を測定し、コントロール値と比較した。
【００７６】
Ki値を、Cheng-Prussof等式を使用して決定した。様々なリガンドを使用したバインディング研究の結果を表1に示す。
【００７７】
【表１】
2004538256.tif 000005
【００７８】
N-ブト-3-エニルノルブプレノルフィンについてのバインディングデータは、ミューについては最高の親和性、カッパについては比較的高い親和性、デルタについては中程度の親和性、およびオルファニンについては低い親和性を示す。注目すべきは、ミューレセプターでのこの化合物の活性である-これはブプレノルフィンの6倍高い活性である。デルタ、カッパ、及びオルファニンでのその活性は、ブプレノルフィンよりもそれぞれ60倍、100倍、及び20倍低い。
【００７９】
（実施例3：N-（3’-ブテニル）-ノルブプレノルフィンについてのオピオイドレセプターバインディング及び機能的プロフィール；ミュー、カッパ、デルタ、及びORL-1レセプターでの活性）
この試験管内薬理学的研究は、ブプレノルフィン及びその類似体であるN-（3’-ブテニル）-ノルブプレノルフィンのバインディング及び機能特性を評価するために開始した。ブテ似るブプレノルフィン誘導体は、ブプレノルフィンと比較すると、同様にミューレセプターについて高い親和性を、カッパ、デルタ、及びORL-1レセプターでは低い親和性を有する。N-（3’-ブテニル）-ノルブプレノルフィン化合物の機能的プロフィール解明では、能力の順位は下式の通りであった。
【００８０】
【数１】
2004538256.tif 000006
【００８１】
この化合物は、四つ全てのオピオイドレセプターにおいて部分アゴニストであり、デルタレセプターにおいて効力は最高である。
【００８２】
Ａ．ミューオピオイドレセプターバインディング
放射性リガンド投与-置換アッセイでは、最終体積が500μlのバインディング緩衝液(10mM MgCl2, 1mM EDTA, 5% DMSO, 50mM Trizma base, pH 7.4)中に、0.2nM[3H]-ジプレノルフィン（Perkin Elmer, Boston, MA; 50.0 Ci/mmole）を20μgの膜タンパク質（CKO-K1細胞中に発現した組換えミューオピオイドレセプター;Perkin Elmer）と共に用いた。非標識ナロキソン（Sigma）はアッセイポジティブコントロール（濃度範囲3×10-7乃至1×10-13M）の役割を果たした。全ての反応は、96-深形ウェルポリプロピレンプレート中で2時間に亘り室温にて行われた。バインディング反応は、予め0.5%ポリエチレンイミン（Sigma）中に浸しておいた96-ウェルUnifilter GF/Cフィルタープレート（Packard, Meriden, CT）での迅速な濾過によって終了させた。回収は、96-ウェル組織ハーベスタ（Brandel）を使用し、次いで500μlの氷冷バインディング緩衝液で3回濾過洗浄することにより行った。次に、フィルタープレートを50℃にて2-3時間乾燥させた。1つのウェル毎に50μlのシンチレーションカクテル（BetaScint; Perkin Elmer）を加え、Packard Top-Countで1つのウェル毎に1分間に亘ってプレートをカウントした。
【００８３】
B．カッパオピオイドレセプターバインディング
放射性リガンド投与-置換アッセイでは、最終体積が500μlのバインディング緩衝液(5% DMSO, 50mM Trizma base, pH 7.4)中に、0.40nM[3H]-U69,593（Perkin Elmer;41.4Ci/mmole）を20μgの膜タンパク質（HEK293細胞中に発現した組換えカッパオピオイドレセプター;Perkin Elmer）と共に用いた。非標識ナロキソン（Sigma）はアッセイポジティブコントロール（濃度範囲3×10-6乃至3×10-13M）の役割を果たした。全ての反応は、96-ウェルポリプロピレンプレート中で1時間に亘り室温にて行われた。バインディング反応は、予め0.5%ポリエチレンイミン（Sigma）中に浸しておいた96-ウェルUnifilter GF/Cフィルタープレート（Packard）での迅速な濾過によって終了させた。回収は、96-ウェル組織ハーベスタ（Brandel）を使用し、次いで500μlの氷冷バインディング緩衝液で5回濾過洗浄することにより行った。次に、フィルタープレートを50℃にて2-3時間乾燥させた。1つのウェル毎に50μlのシンチレーションカクテル（BetaScint; Perkin Elmer）を加え、Packard Top-Countで1つのウェル毎に1分間に亘ってプレートをカウントした。
【００８４】
C．デルタオピオイドレセプターバインディング
放射性リガンド投与-置換アッセイでは、最終体積が200μlのバインディング緩衝液(5mM MgCl2, 5% DMSO, 50mM Trizma base, pH 7.4)中に、0.2nM[3H]-ナルトリンドール（Perkin Elmer, 33.0 Ci/mmole）を12.5μgの膜タンパク質（CKO-K1細胞中に発現した組換えデルタオピオイドレセプター;Perkin Elmer）と共に用いた。非標識ナロキソン（Sigma）はアッセイポジティブコントロール（濃度範囲1×10-5乃至1×10-12M）の役割を果たした。全ての反応は、96-ウェルポリプロピレンプレート中で1時間に亘り室温にて行われた。バインディング反応は、予め0.5%ポリエチレンイミン（Sigma）中に浸しておいた96-ウェルUnifilter GF/Cフィルタープレート（Packard, Meriden, CT）での迅速な濾過によって終了させた。回収は、96-ウェル組織ハーベスタ（Brandel）を使用し、次いで200μlの氷冷バインディング緩衝液で5回濾過洗浄することにより行った。次に、フィルタープレートを50℃にて2-3時間乾燥させた。1つのウェル毎に50μlのシンチレーションカクテル（BetaScint; Perkin Elmer）を加え、Packard Top-Countで1つのウェル毎に1分間に亘ってプレートをカウントした。
【００８５】
D.ORL-1オピオイドレセプターバインディング
ヒトオピオイドレセプター様レセプター（ORL-1）（Perkin Elmer）を発現する組換えHEK-293細胞から調製される膜は、細胞を氷冷した低張性緩衝液（2.5mM MgCl2, 50mM HEPES, pH 7.4）（10ml/10cmディッシュ）中に溶菌し、次いで組織グラインダー／テフロン（登録商標）乳棒で均一化することによって調製した。膜を、30,000×gでの遠心分離を15分間、4℃にて行うことにより回収し、ペレットを低張性緩衝液中に再懸濁させて1-3mg/mlの最終濃度とした。タンパク質濃度を、BioRadタンパク質アッセイ試薬を使用し、ウシ血清アルブミンを標準として用いて測定した。ORL-1レセプター膜のアリコートを、−80℃にて保管した。
【００８６】
放射性リガンド投与-置換アッセイでは、最終体積が500μlのバインディング緩衝液(10mM MgCl2, 1mM EDTA, 5% DMSO, 50mM HEPES, pH 7.4)中に、0.1nM[3H]-ノシレプチン（Perkin Elmer, 87.7 Ci/mmole）を20μgの膜タンパク質と共に用いた。非標識ノシセプチン（Sigma）はアッセイポジティブコントロール（濃度範囲2×10-7乃至6×10-13M）の役割を果たした。全ての反応は、96-深形ウェルポリプロピレンプレート中で2時間に亘り室温にて行われた。バインディング反応は、予め0.5%ポリエチレンイミン（Sigma）中に浸しておいた96-ウェルUnifilter GF/Cフィルタープレート（Packard）での迅速な濾過によって終了させた。回収は、96-ウェル組織ハーベスタ（Brandel）を使用し、次いで500μlの氷冷バインディング緩衝液で3回濾過洗浄することにより行った。次に、フィルタープレートを50℃にて2-3時間乾燥させた。1つのウェル毎に50μlのシンチレーションカクテル（BetaScint; Perkin Elmer）を加え、Packard Top-Countで1つのウェル毎に1分間に亘ってプレートをカウントした。
【００８７】
E.オピオイドレセプター[35S]GTPγSバインディング機能的アッセイ
機能的[35S]GTPγSバインディングアッセイを、表示の最終濃度を得るために示した順序で下記の試薬を順に混合することにより実行した；（0.066μg/μlのORL-1, 0.026μg/μlのミュー, 0.020μg/μlのカッパ, または0.012μg/μlのデルタ）膜タンパク質、10μg/mlのサポニン、3μMのGDP、及び0.20nMの[35S]GTPγSを、氷冷したバインディング緩衝液（100mM NaCl, 10mM MgCl2, 20mM HEPES, pH 7.4）に添加。調製した膜溶液（190μl/ウェル）を、DMSO中に調製した化合物の20倍濃縮ストック溶液または適当なコントロールを10μl収容した、96-浅形ウェルポリプロピレンプレートに移した。非標識DAMGO、U-69,593、メト-エンケファリン、及びノシレプチン（全てSigma）は、それぞれミュー、カッパ、デルタ、及びORL-1機能的アッセイについてアッセイポジティブコントロールの役割を果たした。プレートを振とうしつつ30分間に亘り室温にてインキュベートした。反応は、96-ウェルUnifilter GF/Cフィルタープレート（Packard）での迅速な濾過によって終了させ、96-ウェル組織ハーベスタ（Brandel）を使用し、次いで200μlの氷冷バインディング緩衝液(10mM NaH2PO4, 10mM Na2HPO4, pH 7.4)で3回濾過洗浄した。次に、フィルタープレートを50℃にて2-3時間乾燥させた。1つのウェル毎に50μlのシンチレーションカクテル（BetaScint; Perkin Elmer）を加え、Packard Top-Countで1つのウェル毎に1分間に亘ってプレートをカウントした。
【００８８】
バインディングアッセイ及び機能的アッセイの両方からのデータを、GraphPad PRISM(登録商標)、v.3.0.において曲線近似関数を使用して分析した。データを平均±標準誤差として表記した。
【００８９】
F.オピオイドレセプターバインディング結果
（i）ミューオピオイドレセプターバインディング結果
ブプレノルフィン及びそのブテニル誘導体は、このアッセイでは同能力であり、Ki値がそれぞれ0.30及び0.38であった。ミューオピオイドレセプターバインディングの概要を表２に示す。
【００９０】
（ii）カッパオピオイドレセプターバインディング結果
このアッセイのためのナロキソンアッセイコントロールは、3.7nMの、予測通りの平均Ki値を示した。ブプレノルフィンについてのKi値は、0.036nMであり、これは0.34nMのKi値を示すブテニル誘導体のおよそ１０倍高い能力である。カッパオピオイドレセプターバインディングの概要を表２に示す。
【００９１】
（iii）デルタオピオイドレセプターバインディング結果
ナロキソンコントロールは、予測通りの範囲内で作用した。ブプレノルフィン及びブテニルブプレノルフィンについてのバインディング親和性は、それぞれ6.5及び365nMであった。デルタオピオイドレセプターバインディングの概要を表２に示す。
【００９２】
（iv）ORL-1オピオイドレセプターバインディング結果
ノルセプチンアッセイコントロールは、0.30nMの典型的なKi値を示した。ブプレノルフィン及びその誘導体についてのバインディング親和性は、それぞれ40及び1025nMであった。ORL-1オピオイドレセプターバインディングの概要を表２に示す。
【００９３】
【表２】
2004538256.tif 000007
【００９４】
（v）オピオイドレセプター[35S]GTPγSバインディング機能的アッセイ結果
ブテニル誘導体は、機能的アッセイにおいては、レセプターに対してブプレノルフィンほど高い能力を示さなかった。しかしながら、ブテニル誘導体は、ミュー、カッパ、及びORL-1レセプターでは僅かに効力が高かった。いずれの効力値も50%を越えなかった。ミュー、カッパ、デルタ、及びORL-1オピオイドレセプターの機能的概要を表３にまとめる。
【００９５】
【表３】
2004538256.tif 000008
【００９６】
【表４】
2004538256.tif 000009
【００９７】
これらの実験は、N-（3’-ブテニル）-ノルブプレノルフィンがブプレノルフィンコントロールと同じレセプターと結合することを示す。このブテニル化合物は、ブプレノルフィンと比較して、同能力であるミュー以外のレセプター全てについて、より低い結合親和性を有する。ブプレノルフィンはカッパレセプターについて最高の親和性を示し、ミュー、デルタ、及びORL-1が後に続くが、ブテニル誘導体はミュー及びカッパレセプターに同能力で結合し、次いでデルタ、その後にORL-1である。
【００９８】
機能的には、ブプレノルフィン及びブテニル化合物は、同順位の能力でレセプターにアゴニスト効果を有する（ミュー＞カッパ＞デルタ＞ORL-1）。２つの化合物はORL-1レセプターでは同等の能力である一方で、ブプレノルフィンは、ミュー、カッパ、及びデルタレセプターでそれぞれ6-、31-、及び11-倍能力が高い。より高いブプレノルフィン能力は、効力の順位に反映されない。ブテニル誘導体は、ミュー、カッパ、及びデルタレセプターで、僅かに高い効力を有する。これは、デルタレセプターで最も能力が高い（47%）。両方の化合物が部分的アゴニストとして作用するが、いずれの効力もコントロールの50%を越えない。
【００９９】
本発明は、ここに記載した特定の実施態様によって範囲を限定されない。実際、ココに記載されたものに加えて本発明の様々な変形が、前述の記載及び添付の図面から、当業者には明らかになるであろう。こうした変形は、添付のクレームの範囲内に含まれることを意図する。
【０１００】
特許、特許出願、出版物、操作などが、本願全般に挙げられており、これらの開示は、その全体をここに参照のために取り込むこととする。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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