(57)【要約】酸化窒素を放出する新たな脂質分子を提供する。脂質分子は、（ａ）ホスホグリセリド、（ｂ）スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質、（ｃ）モノアシルグリセロール、（ｄ）ジアシルグリセロール、（ｅ）グリコシルアシルグリセロール、（ｆ）Ｒを炭素原子が８個以上の分岐脂肪族鎖として、構造式（Ｉ）で表されるステロール化合物から選択された脂質分子を有し、脂質分子は、（ａ）（Ｉ）部位、（ｂ）（Ｉ）部位、（ｃ）（Ｉ）部位のいずれかを含む酸化窒素を有する官能基を含む。更に、酸化窒素を放出する脂質分子を形成する脂質分子形成方法を提供する。この酸化窒素を放出する脂質分子を有する様々な薬剤、局所治療用液体、薬物送達システムも開示する。更に、酸化窒素を放出する脂質分子を用いて、患者に酸化窒素を治療的に投与する方法、様々な疾患を治療又は予防する方法、外傷の治癒を促進する方法及びアテローム病巣内に存在する細胞の数を低減する方法を開示する。
2004523520.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
酸化窒素を放出する化合物において、
（ａ）ホスホグリセリド、（ｂ）スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質、（ｃ）モノアシルグリセロール、（ｄ）ジアシルグリセロール、（ｅ）グリコシルアシルグリセロール、（ｆ）Ｒを炭素原子が８個以上の分岐脂肪族鎖として、以下の構造式で表されるステロール化合物から選択された脂質分子を有し、
【化１】
2004523520.tif 000015
上記脂質分子は、（ａ）−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｂ）−Ｏ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｃ）以下に示す部位
【化２】
2004523520.tif 000016
のいずれかを含む酸化窒素を有する官能基を含むことを特徴とする化合物。
【請求項２】
上記脂質分子は、上記スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質であることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項３】
上記スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質は、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンであることを特徴とする請求項２記載の化合物。
【請求項４】
上記スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質は、スフィンゴ脂質であることを特徴とする請求項２記載の化合物。
【請求項５】
上記スフィンゴ脂質は、ガングリオシドであることを特徴とする請求項４記載の化合物。
【請求項６】
上記脂質分子は、上記ホスホグリセリドであることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項７】
上記ホスホグリセリドは、ホスファチジルイノシトール又はホスファチジルコリンであることを特徴とする請求項６記載の化合物。
【請求項８】
上記脂質分子は、上記ステロール化合物であることを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項９】
上記ステロール化合物は、コレステロールであることを特徴とする請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
上記酸化窒素を含む官能基は、−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位を含むことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
上記酸化窒素を含む官能基は、−Ｏ−Ｎ＝Ｏ部位を含むことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
上記酸化窒素を含む官能基は、以下の部位を含むことを特徴とする請求項１記載の化合物。
【化３】
2004523520.tif 000017
【請求項１３】
上記酸化窒素を含む官能基は、以下の部位を含むことを特徴とする請求項１２記載の化合物。
【化４】
2004523520.tif 000018
【請求項１４】
上記酸化窒素を含む官能基は、以下の部位を含むことを特徴とする請求項１３記載の化合物。
【化５】
2004523520.tif 000019
【請求項１５】
請求項１記載の化合物を少なくとも０．００１重量パーセント含む薬剤。
【請求項１６】
請求項１記載の化合物を少なくとも０．０１重量パーセント含む薬剤。
【請求項１７】
請求項１記載の化合物を少なくとも０．１重量パーセント含む薬剤。
【請求項１８】
請求項１記載の化合物を少なくとも１重量パーセント含む薬剤。
【請求項１９】
請求項１記載の化合物を少なくとも１０重量パーセント含む薬剤。
【請求項２０】
請求項１記載の化合物を少なくとも９０重量パーセント含む薬剤。
【請求項２１】
酸化窒素を放出する脂質分子を形成する脂質分子形成方法において、
（ａ）ホスホグリセリド、（ｂ）スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質、（ｃ）モノアシルグリセロール、（ｄ）ジアシルグリセロール、（ｅ）グリコシルアシルグリセロール、（ｆ）Ｒを炭素原子が８個以上の分岐脂肪族鎖として、以下の構造式で表されるステロール化合物から選択された求核性部位を有する脂質分子を準備する工程と、
【化６】
2004523520.tif 000020
上記求核性部位に対応する位置において、上記脂質分子に（ａ）−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｂ）−Ｏ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｃ）以下に示す部位
【化７】
2004523520.tif 000021
のいずれかを含む酸化窒素を有する官能基を結合する工程とを有する脂質分子形成方法。
【請求項２２】
上記脂質分子は、上記スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質であることを特徴とする請求項２１記載の脂質分子形成方法。
【請求項２３】
上記脂質分子は、上記ホスホグリセリドであることを特徴とする請求項２１記載の脂質分子形成方法。
【請求項２４】
上記脂質分子は、上記ステロール化合物であることを特徴とする請求項２１記載の脂質分子形成方法。
【請求項２５】
上記酸化窒素を含む官能基は、−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位を含むことを特徴とする請求項２１記載の脂質分子形成方法。
【請求項２６】
上記酸化窒素を含む官能基は、−Ｏ−Ｎ＝Ｏ部位を含むことを特徴とする請求項２１記載の脂質分子形成方法。
【請求項２７】
上記酸化窒素を含む官能基は、以下の部位を含むことを特徴とする請求項２１記載の脂質分子形成方法。
【化８】
2004523520.tif 000022
【請求項２８】
上記酸化窒素を含む官能基は、以下の部位を含むことを特徴とする請求項２８記載の脂質分子形成方法。
【化９】
2004523520.tif 000023
【請求項２９】
上記脂質分子のアルコール部位は、該脂質分子に上記酸化窒素を有する官能基を結合する前に、チオール部位を含む官能基に置換されることを特徴とする請求項２１記載の脂質分子形成方法。
【請求項３０】
上記チオール部位に対応する位置において、上記脂質分子に−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位が形成されることを特徴とする請求項２９記載の脂質分子形成方法。
【請求項３１】
請求項１記載の化合物を含む局所治療用液体。
【請求項３２】
溶液、分散媒、スプレー、ローション、ジェル、クリーム、軟膏からなるグループから選択され、請求項１記載の化合物を含む局所治療用液体。
【請求項３３】
医療器具及び請求項１記載の化合物を備える薬物送達システム。
【請求項３４】
上記医療器具は、包帯又はパッチであることを特徴とする請求項３３記載の薬物送達システム。
【請求項３５】
上記医療器具は、血管内医療器具であることを特徴とする請求項３３記載の薬物送達システム。
【請求項３６】
上記血管内医療器具は、バルーンカテーテル、注射カテーテル、注入カテーテル、ステント、ステント植皮、末梢保護器具から選択されることを特徴とする請求項３５記載の薬物送達システム。
【請求項３７】
上記請求項１記載の化合物は、ポリママトリックス内に加えられていることを特徴とする請求項３３記載の薬物送達システム。
【請求項３８】
上記ポリママトリックスは、安定なポリママトリックス及び生体分解性ポリママトリックスから選択された生体適合性マトリックスであることを特徴とする請求項３７記載の薬物送達システム。
【請求項３９】
上記請求項１記載の化合物は、溶液内に溶解又は分散されていることを特徴とする請求項３３記載の薬物送達システム。
【請求項４０】
上記請求項１記載の化合物は、上記医療器具の組織に接触する表面に吸収されていることを特徴とする請求項３３記載の薬物送達システム。
【請求項４１】
上記請求項１記載の化合物は、ミセル又はリポソーム内に加えられていることを特徴とする請求項３３記載の薬物送達システム。
【請求項４２】
抗腫瘍作用を有する薬剤、抗増殖作用を有する薬剤、抗腫瘍作用及び抗増殖作用の両方を有する薬剤から選択される、治療的に有効な量の付加的な治療薬を含む請求項３３記載の薬物送達システム。
【請求項４３】
患者に酸化窒素を治療的に投与する投与方法において、
上記患者に請求項１記載の化合物を投与する工程を有することを特徴とする投与方法。
【請求項４４】
上記化合物は、局所的に投与されることを特徴とする請求項４３記載の投与方法。
【請求項４５】
上記化合物は、生体内に投与されることを特徴とする請求項４３記載の投与方法。
【請求項４６】
上記化合物は、インプラントによって投与されることを特徴とする請求項４５記載の投与方法。
【請求項４７】
上記化合物は、血管内送達器具を用いて投与されることを特徴とする請求項４５記載の投与方法。
【請求項４８】
上記血管内送達器具は、バルーンカテーテル、注射カテーテル、注入カテーテル、ステント、ステント植皮、末梢保護器具から選択されることを特徴とする請求項４７記載の投与方法。
【請求項４９】
上記化合物は直接の注射によって投与されることを特徴とする請求項４５記載の投与方法。
【請求項５０】
患者におけるアテローム性動脈硬化症及び心筋梗塞から選択される疾患を治療又は予防する治療／予防方法において、
上記患者に請求項１の化合物を所定量投与して上記疾患を治療又は予防する治療／予防方法。
【請求項５１】
患者における再狭窄を治療又は予防する治療／予防方法において、
上記患者に請求項１の化合物を所定量投与して再狭窄を治療又は予防する治療／予防方法。
【請求項５２】
患者における、末梢血管疾患、脳卒中、インポテンツ、敗血症性ショック、関節炎から選択される疾患を治療又は予防する治療／予防方法において、
上記患者に請求項１の化合物を所定量投与して上記疾患を治療又は予防する治療／予防方法。
【請求項５３】
患者における癌及び細菌感染から選択される疾患を治療又は予防する治療／予防方法において、
上記患者に請求項１の化合物を所定量投与して上記疾患を治療又は予防する治療／予防方法。
【請求項５４】
患者におけるインペチゴ、表皮水疱症、湿疹、神経皮膚炎、乾癬、かゆみ、紅斑、汗腺膿瘍、いぼ、おむつ皮膚炎、たむしから選択される疾患を治療又は予防する治療／予防方法において、
上記患者に請求項１の化合物を所定量投与して上記疾患を治療又は予防する治療／予防方法。
【請求項５５】
患者における外傷の治癒を促進する治癒促進方法において、
上記患者に請求項１の化合物を所定量投与して上記外傷の治癒を促進する治癒促進方法。
【請求項５６】
患者におけるアテローム病巣に存在する細胞の数を低減する細胞数低減方法において、
上記患者に請求項１の化合物を所定量投与して上記アテローム病巣内に存在する細胞の数を低減する細胞数低減方法。
【請求項５７】
請求項１記載の化合物を含むリポソーム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂質をベースとする酸化窒素供与体に関し、詳しくは、（ａ）Ｓ−ニトロソ基、（ｂ）Ｏ−ニトロソ基、（ｃ）Ｎ−ニトロソ基のうちの１以上を含む脂質に関する。
【背景技術】
【０００２】
酸化窒素は、治療を目的として、様々な用途で用いることができる。酸化窒素は、高濃度では細胞毒性を有し、例えば癌細胞、細菌細胞、アテローム病巣に存在する細胞等の様々な望ましくない細胞の数を低減するために用いることができる。また、酸化窒素は、低濃度では、ある種の細胞及び組織の健康を促進する。
【０００３】
Ｓ−ニトロソ基、Ｏ−ニトロソ基、Ｎ−ニトロソ基を含む化合物は、酸化窒素を放出することが知られている。
【０００４】
Ｏ−ニトロソ化合物は、１以上の−Ｏ−ＮＯ基を有し、Ｏ−ニトロシル化化合物又は亜硝酸化合物とも呼ばれる。
【０００５】
Ｓ−ニトロソ化合物は、１以上の−Ｓ−ＮＯ基を有し、ニトロソチオール又はＳ−ニトロシル化化合物とも呼ばれる。−Ｓ−ＮＯ基は、当分野では、亜硝酸スルホニル、チオ亜硝酸エステル、Ｓ−ニトロソチオール、又はチオナイトライトとも呼ばれる。
【０００６】
ここでは、＝Ｎ−ＮＯ基を有する化合物をＮ−ニトロソ化合物と呼ぶ。一般的な化合物としては、−Ｎ−Ｎ２Ｏ２基を有する化合物（後に示す構造式参照）があり、この化合物は、当分野では、ノノエート（nonoate）化合物、詳しくは、Ｎ−ノノエート化合物として知られている。
【０００７】
上述した３つの種類の化合物の具体例については、開示内容全体が引用により本願に援用される米国特許第５，５８３，１０１号及び第５，８１４，６６６号明細書に開示されている。
【０００８】
また、引用により本願に援用される米国特許第５，８２４，６６９号明細書及び国際特許ＷＯ００／４９９９３号明細書には、ニトロソ化された（nitrosated）及びニトロシル化されたステロイドが開示されている。更なる情報については、上述の文献に開示されている。
【０００９】
引用により本願に援用される米国特許第５，７６７，０８９号（以下、「０８９特許」と呼ぶ。）には、他の情報に加えて、ヘモグロビン、アルブミン、免疫グロブリン、リポソームを含むニトロキシドラベルが付された高分子が開示されている。この詳細については、０８９特許の要約書及び第１欄第１３行以下に記載されている。更なる詳細については、０８９特許（及び米国特許第５，８２４，７８１号及び第５，７４１，８９３号明細書）に開示されている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、Ｓ−ニトロシル化脂質分子、Ｎ−ニトロシル化脂質分子、Ｏ−ニトロシル化脂質分子の新たなクラスを提供する。
【００１１】
本発明は、酸化窒素を放出する新たな脂質分子を提供する。この脂質分子は、（ａ）ホスホグリセリド、（ｂ）スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質、（ｃ）モノアシルグリセロール、（ｄ）ジアシルグリセロール、（ｅ）グリコシルアシルグリセロール、（ｆ）Ｒを炭素原子が８個以上の分岐脂肪族鎖として、以下の構造式で表されるステロール化合物から選択された脂質分子を有し、
【００１２】
【化１】
2004523520.tif 000003
【００１３】
脂質分子は、（ａ）−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｂ）−Ｏ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｃ）以下に示す部位
【００１４】
【化２】
2004523520.tif 000004
【００１５】
のいずれかを含む酸化窒素を有する官能基を含む。
【００１６】
スフィンゴシン塩基を骨格として有する好ましい脂質としては、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンや例えばガングリオシド等のスフィンゴ脂質が含まれる。好ましいホスホグリセリドとしては、ホスファチジルイノシトール及びホスファチジルコリンが含まれる。好ましいステロール化合物は、コレステロールである。以下に示す好ましい部位は、
【００１７】
【化３】
2004523520.tif 000005
【００１８】
より好ましくは以下のような構造を有し、
【００１９】
【化４】
2004523520.tif 000006
【００２０】
更に好ましくは以下のような構造を有する。
【００２１】
【化５】
2004523520.tif 000007
【００２２】
本発明に係る酸化窒素を放出する脂質分子を有する薬剤は、様々な量の脂質分子を含み、例えば、上述の脂質分子を少なくとも０．００１重量パーセント、少なくとも０．０１重量パーセント、少なくとも０．１重量パーセント、少なくとも１重量パーセント、少なくとも１０重量パーセント、又は少なくとも９０重量パーセント含む。
【００２３】
本発明の他の具体例においては、酸化窒素を放出する脂質分子を形成する脂質分子形成方法が提供される。この脂質分子形成方法は、（１）（ａ）ホスホグリセリド、（ｂ）スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質、（ｃ）モノアシルグリセロール、（ｄ）ジアシルグリセロール、（ｅ）グリコシルアシルグリセロール、（ｆ）Ｒを炭素原子が８個以上の分岐脂肪族鎖として、以下の構造式で表されるステロール化合物から選択された求核性部位を有する脂質分子を準備する工程と、
【００２４】
【化６】
2004523520.tif 000008
【００２５】
（２）求核性部位に対応する位置において、脂質分子に（ａ）−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｂ）−Ｏ−Ｎ＝Ｏ部位、（ｃ）以下に示す部位
【００２６】
【化７】
2004523520.tif 000009
【００２７】
のいずれかを含む酸化窒素を有する官能基を結合する工程とを有する。
【００２８】
多くの好ましい具体例においては、脂質分子のアルコール部位は、脂質分子に酸化窒素を有する官能基を結合する前に、チオール部位を含む官能基に置換され、この酸化窒素を有する官能基は、例えば、−Ｓ−Ｎ＝Ｏ部位を有する。
【００２９】
いくつかの具体例においては、本発明に基づく酸化窒素を放出する脂質分子は、溶液、分散媒、スプレー、ローション、ジェル、クリーム、軟膏等の局所治療用液体（topical liquid）内に加えられる。
【００３０】
他の具体例においては、本発明は、医療器具と、上述した本発明に基づく酸化窒素を放出する脂質分子とを備える薬物送達システムを提供する。
【００３１】
好ましい医療器具としては、（ａ）包帯又はパッチと、（ｂ）バルーンカテーテル、注射カテーテル、注入カテーテル、ステント、ステント植皮、末梢保護器具（distal protection device）等の血管内医療器具とが含まれる。
【００３２】
この薬物送達システムに関連する酸化窒素を放出する脂質分子は、例えば、（ａ）ポリママトリックス、好ましくは、安定なポリママトリックス及び生体分解性ポリママトリックスから選択された生体適合性マトリックスに加えられ、（ｂ）溶液内に溶解又は分散され、（ｃ）医療器具の組織に接触する表面に吸収され、又は（ｄ）ミセル又はリポソーム内に加えられていてもよい。
【００３３】
いくつかの具体例においては、薬物送達システムは、例えば、抗腫瘍作用を有する薬剤、抗増殖作用を有する薬剤、又は抗腫瘍作用及び抗増殖作用の両方を有する薬剤等の治療的に有効な量の付加的な治療薬を含む。
【００３４】
他の具体例においては、本発明は、患者に酸化窒素を治療的に投与する投与方法を提供する。この投与方法は、本発明に基づく酸化窒素を放出する脂質分子を患者に投与する工程を有する。好ましい投与の経路としては、（ａ）局所的な投与経路、（ｂ）インプラントによって、若しくは血管内送達器具（例えば、バルーンカテーテル、注射カテーテル、注入カテーテル、ステント、ステント植皮、末梢保護器具）又は直接の注射を介して、本発明に基づく酸化窒素を放出する脂質分子を生体内に投与する経路等が含まれる。
【００３５】
他の具体例においては、本発明は、様々な疾患を治療又は予防する治療／予防方法を提供する。これらの治療／予防方法では、疾患を治療又は予防するために効果的な量の本発明に基づく酸化窒素を放出する脂質分子を所定量投与する。具体的な疾患としては、例えば、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、再狭窄、末梢血管疾患、脳卒中、インポテンツ、敗血症性ショック、関節炎、癌、細菌感染、インペチゴ、表皮水疱症、湿疹、神経皮膚炎、乾癬、かゆみ、紅斑、汗腺膿瘍、いぼ、おむつ皮膚炎、たむし等が含まれる。
【００３６】
本発明の他の具体例においては、酸化窒素を放出する脂質分子を用いて、患者の外傷の治癒を促進させ、又はアテローム病巣内に存在する細胞の数を低減させる。
【発明の効果】
【００３７】
本発明の一利点として、本発明により、親油性又は両親媒性の特性を有し、酸化窒素を放出する化合物を提供できる。
【００３８】
本発明の他の利点として、本発明により、脂肪組織に容易に組み込まれ、組織における取り込みを促進し、組織における保持時間を伸ばすことができる酸化窒素を放出する化合物を提供できる。
【００３９】
本発明の他の利点として、本発明により、細胞膜に容易に組み込まれ、細胞における取り込みを促進し、細胞における保持時間を伸ばすことができる酸化窒素を放出する化合物を提供できる。
【００４０】
本発明の実施の形態及び更なる利点は、以下の詳細な説明及び特許請求の範囲により、当業者にとって明らかとなる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４１】
本発明は、１以上の酸化窒素を含む官能基を有する新たなクラスの脂質分子を提供する。酸化窒素を含む官能基は、以下に示す１以上の部位を有する。
（ａ）Ｓ−ニトロソ部位−Ｓ−Ｎ＝Ｏ
（ｂ）Ｏ−ニトロソ部位−Ｏ−Ｎ＝Ｏ
（ｃ）Ｎ−ニトロソ部位
【００４２】
【化８】
2004523520.tif 000010
【００４３】
好ましいＮ−ニトロソ基は、以下のような構造のＮ−ノノエートを含み、
【００４４】
【化９】
2004523520.tif 000011
【００４５】
あるクラスの化合物は、以下のような構造の置換ピペラジンを含む。
【００４６】
【化１０】
2004523520.tif 000012
【００４７】
当業者に周知のように、例えば懸垂型のチオール基、アミン基、アルコール基等から、懸垂型のＳ−ニトロソ基、Ｎ−ニトロソ基、Ｏ−ニトロソ基を生成することもできる。
【００４８】
天然由来の脂質化合物の多くは、チオール基を有していないため、本発明のいくつかの具体例（例えば、Ｓ−ニトロソ部位を形成する具体例）においては、例えばアルコールやアミン等の１以上の懸垂型の求核基を有する脂質化学種から、懸垂型のチオール基を有する脂質化学種を生成することが望ましい。これらの懸垂型の求核基を懸垂型のチオール基に変換する手法については、当業者に周知であり、例えば、引用により本願に援用されるガデル（Gaddell）及びデファイ（Defaye）著、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３０：７８、１９９１年及びロジャス（Rojas）他著、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１７：３３６、１９９５年に開示されている。これらの手法では、第２級アルコールよりも第１級アルコールの方が選択的にチオール化される。
【００４９】
更に、引用により開示内容全体が本願に援用される米国特許第５，７７０，６４５号明細書には、ポリヒドロキシル化された化学種、好ましくはポリヒドロキシル化された化学種の第１級アルコール基と、フリーのチオール又は保護基が付いたチオールを含む部位をアルコールに付加する試薬とを反応させることにより、ポリチオール化された化学種を生成する手法が開示されている。一具体例においては、以下の構造式（Ｉ）に示すように、多糖類をビスイソシアナトアルキルジスルフィドと反応させさらに還元することにより、アルコールを官能化する。
【００５０】
【化１１】
2004523520.tif 000013
【００５１】
この反応の条件は、１９８５年、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ社（John Wiley & Sons）発行、フカモタ（Fukamota）、ヤマダ（Yamada）、トナミ（Tonami）編「セルロース及びその誘導体」第４０章に開示されており、この文献は引用により本願に援用されるものとする。
【００５２】
チオール基をアルコール基から生成する手法は、米国特許第４，４６６，９１４号明細書にも開示されており、この開示内容は、引用により本願に援用されるものとする。
【００５３】
チオール基を有する脂質としては、市販されているものを用いることもできる。一具体例としては、アラバマ州３５００７アラバスタインダストリアルドライブ７００（700 Industrial Drive, Alabaster, AL 35007）アバンチ・ポラー・リピド社（Avanti Polar Lipids）から入手可能なホスファチジルチオエタノールがある。
【００５４】
１以上の懸垂型のチオール基を有する脂質が準備されると、フリーのチオール基をニトロシル化するのに適した条件下において、これらの化合物をニトロシル化剤と反応させる。適切な処理については、例えば、米国特許第５，７７０，６４５号明細書に開示されている。ここで、適切なニトロシル化剤としては、酸性亜硝酸塩、塩化ニトロシル、Ｓ−ニトロソ基を含む化合物（Ｓ−ニトロソ−Ｎ−アセチル−Ｄ，Ｌ−ペニシラミン (SNAP)、Ｓ−ニトロソグルタチオン (SNOG)、Ｎ−アセチル−Ｓ−ニトロソペニシラミニル−Ｓ−ニトロソペニシラミン、Ｓ−ニトロソシステイン、Ｓ−ニトロソチオグリセロール、Ｓ−ニトロソジチオトレイトール、Ｓ−ニトロソメルカプトエタノール）、亜硝酸有機物（例えば、亜硝酸エチル、亜硝酸イソブチル、亜硝酸アミル等）、ペルオキシナイトライト、ニトロソニウム塩（例えば、硫酸水素ニトロシル、オキサジアゾール（例えば、４−フェニル−３−フロキサンカルボニトリル）等がある。詳しい情報は、米国特許第５，７７０，６４５号に開示されている。
【００５５】
Ｎ−ニトロソ基（引用により本願に援用される米国特許第５，１８５，３７６号明細書参照）及びＮ−ｎｏｎａｔｅ（引用により本願に援用される米国特許第５，７２１，３６５,号、第５，６９８，７３８号、第５，５１９，０２０号明細書参照）を含む他の官能基を生成する処理も当分野では周知である。
【００５６】
上述及びこれらの他の処理により、後述するように、本発明に基づいて、適切な前駆体分子から、広範囲に亘るＳ−ニトロソ、Ｎ−ニトロソ、Ｏ−ニトロソ脂質を生成できる。
【００５７】
本発明において利用される適切な前駆体分子としては、スフィンゴシン塩基を骨格として有する脂質が含まれる。なお、「スフィンゴシン塩基」という用語には、スフィンゴシンのみではなく、例えば、ジヒドロスフィンゴシン、フィトスフィンゴシン、４，８−スフィンガジエン等の当分野において知られている関連する塩基も含まれるものとする。
【００５８】
本発明においては、スフィンゴシン塩基自体に加えて、例えば、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシン等、Ｎ−アルキル基で置換されたスフィンゴシン塩基を含む、スフィンゴシン塩基を骨格として有する他の脂質を用いてもよい。Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンは、血小板の活性を阻害する作用が知られている。この作用については、エス・ディー・ケネディ（S.D. Kennedy）、ワイ・イガラシ（Y. Igarashi）、ティー・エス・ケクラー（T.S. Keckler）著、「フローサイトメトリを用いたインビトロにおけるＰセレクチン発現の測定（Measurement of in vitro P selectin expression by flow cytometry）」Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．，１：１０７、１９９７年、ｐｐ．９９〜１０４に開示されている。この文献は、引用により本願に援用される。Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンは、更に、白血球−血管内皮細胞相互作用を抑制し、心筋虚血及び再灌流の後の心筋収縮機能を維持する作用が知られている。この作用については、引用により本願に援用される、ビー・カンプベル（B. Campbell）、ワイ・ケー・シン（Y.K. Shin）、アール・スカリア（R. Scalia）、エー・エム・レファー（A.M. Lefer）著、「隔離灌流率心臓の虚血及び再灌流後におけるＮ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンの有利な効果（Beneficial effects of N,N,N-trimethylsphingosine following ischemia and reperfusion in the isolated perfused rate heart）」、Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．２：３９、１９９８年、ｐｐ．３９３〜４００に開示されている。Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンは、腫瘍の増殖及びプロテインキナーゼＣを阻害する作用を有する。
【００５９】
スフィンゴシン塩基を骨格として有する他の脂質も本発明において好適に用いられ、このような脂質としては、スフィンゴ脂質も含まれる。スフィンゴ脂質は、（１）極性末端基（polar head group）、（２）脂肪酸分子、（３）骨格としてのスフィンゴシン塩基の３つの特徴的な構成部分を含む複合脂質である。本発明を実施するのに適切なスフィンゴ脂質のグループとしては、例えば、スフィンゴミエリン、中性スフィンゴ糖脂質（セレブロシドを含む）、酸性スフィンゴ糖脂質等がある。酸性スフィンゴ糖脂質は、ガングリオシドとしても知られ、神経組織内に存在する。スフィンゴ脂質は、例えば、ニトロシル化のための−ＯＨ基を含み、スフィンゴ糖脂質は、末端基内に糖部位を含むため、−ＯＨ基を豊富に供給できる。
【００６０】
本発明の実施に好適な前駆体分子として、ホスホグリセリドを用いてもよい。好ましいホスホグリセリドとしては、極性末端に１以上の−ＯＨ基を有するホスホグリセリド（例えば、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、カルジオリピン）、極性末端にアミン基を有するホスホグリセリド（例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン）、極性末端に−ＯＨ基とアミン基の両方を有するホスホグリセリド（例えば、３’−Ｏ−リシルホスファチジルグリセロール等がある。これらのうち、ホスファチジルイノシトール（重要な細胞内シグナリング脂質である）及びホスファチジルコリンが最も好ましい。
【００６１】
本発明の実施に好適な更なる前駆体分子として、以下のような構造を有するステロールを用いてもよい。ここで、Ｒは、炭素原子が８個以上の分岐脂肪族鎖を表す。好ましいステロールは、コレステロールである。
【００６２】
【化１２】
2004523520.tif 000014
【００６３】
本発明の実施に好適な更なる前駆体分子として、それぞれが１以上の懸垂−ＯＨ基を有するモノアシルグリセロール（モノグリセリド）、ジアシルセロール（ジグリセリド）、グリコシルアシルグリセロールを用いてもよい。
【００６４】
上述した前駆体は、それぞれ１以上の官能基、多くの場合、アミン基、ヒドロキシル基、及び／又はチオール基を有し、これにより、これらの前駆体は、上述した処理によって、本発明に基づくＳ−ニトロソ化合物、Ｎ−ニトロソ化合物、Ｏ−ニトロソ化合物に転化できる。
【００６５】
特定の具体例においては、Ｓ−ニトロソ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシン分子は、まず、例えば上述した手法を用いて、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンの１以上のヒドロキシル基においてチオール基を形成することにより形成される。チオール化された化合物は、次に、上述したようなニトロシル化剤を用いてニトロシル化される。本発明に基づくＮ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンは、生体内（例えば、血管）に送達されると、酸化窒素を放出する。酸化窒素は、上述したように、多くの有益な治療効果を有している。更に、この化合物は、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシンを含んでいるため、化合物からＮＯを放出した後にも、血小板の形成を阻害し、白血球−血管内皮細胞相互作用を抑制する作用を有する。
【００６６】
本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、Ｏ−ニトロシル化脂質は、他の有機ＮＯ供与体及び無機ＮＯ供与体と比較して、細胞膜を介して容易に取り込まれ、組織における取り込みを促進し、組織における保持時間を伸ばすことができるといった利点を有している。
【００６７】
同様に、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、Ｏ−ニトロシル化脂質は、生体内の脂質堆積物（lipid deposit）、例えばアテローム硬化プラーク内の脂質堆積物に対する親和性を有する。この親和性により、このような領域をターゲットとしたＮＯ放出が可能となる。
【００６８】
他の具体例として、後述するように、本発明に基づく脂質化合物は、細胞膜及び脂質堆積物に効果的に取り込まれるリポソーム内に形成してもよい。特定の具体例においては、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質を含むリポソームに、例えばＤＮＡ又はＲＮＡ等の遺伝物質を封入してもよい。Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質から放出されるＮＯは、毛細血管を拡張するように作用し、組織によるリポソームの取り込みを促進し、細胞膜を介して細胞質に送達されるリポソームの量（したがって、遺伝物質の量）を増加させる。
【００６９】
更に、例えば、細胞表面のタンパク質受容体に対する細胞結合ドメインを更に有する脂質からリポソームを形成することにより、特定の細胞の種類のみをターゲットとすることもできる。
【００７０】
Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、Ｏ−ニトロシル化脂質は、基本的に、治療薬を送達するのに適するいかなるビヒクルを用いて生体に送達してもよい。
【００７１】
例えば、本発明のいくつかの具体例においては、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、単に、ポリマ、金属、又はシリカを基体とする材料の表面に単一層として吸収させてもよい。このような材料としては、ポリマ材料が最も好ましい。材料表面上で、脂質グループを所定の方向（又は逆の方向）に配向させるためには、非常に滑らかな表面が必要となる。このような表面は、例えば、使用する材料をポリッシャ又はグラインダで加工することにより実現できる。
【００７２】
他の具体例においては、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、１以上の親油性及び／又は親水性の溶媒を用いた送達ビヒクルに加えられる。多くの場合、溶媒系は、本発明に基づく脂質を分散又は溶解するよう選択される。
【００７３】
本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、通常、親油性溶媒に可溶性を有する。本発明において好適に用いられる親油性溶媒としては、エタノールに加えて、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、メチルピロリドン、メタノール、イソプロピルアルコール等の生体適合性を有する親油性溶媒がある。なお、親油性溶媒は、ある程度の細胞毒性を共通して有するという短所がある。
【００７４】
本発明においては、親水性溶媒、特に水を用いてもよい。いくつかの具体例においては、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、所望の濃度で、疎水性の溶媒に溶解又は分散するように、十分な両親媒性を有している。
【００７５】
これに代えて、本発明に基づく脂質の溶解／分散を促進するために、分散剤又は界面活性剤を加え、脂質を溶媒系に分散させてもよい。他の具体例においては、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質を含むリポソーム又はミセルを形成する。
【００７６】
ミセルは、当分野において周知のように、脂質が臨界に達する高濃度で溶解した適切な溶媒内で形成される。
【００７７】
例えば、脂質薄膜又は脂質塊が水和し、脂質結晶二重膜（liquid crystalline bilayer）のスタックが流動体となって膨張したとき、リポソーム（脂質小胞）が形成される。水和した脂質シートは、攪拌によって分離し、自己近接によって大きな多重膜小胞（large, multilamellar vesicles：以下、ＬＭＶという。）を形成する。これにより、端部において、水と二重膜の炭化水素コアとが相互作用することが防がれる。一旦これらの粒子が形成されると、これらの粒子のサイズを小さくするためには、音エネルギ（超音波処理）又は機械エネルギ（押し出し成形）の形式でエネルギを加える必要がある。音エネルギ（超音波処理）を用いて、ＬＭＶ懸濁物質を破裂させると、直径が１５〜５０ｎｍの範囲の小さな単膜小胞（small, unilamellar vesicles：以下、ＳＵＶという。）が形成される。脂質押し出し成形は、所定のサイズの小孔を有するフィルタによって脂質懸濁物質をフィルタリングし、使用したフィルタの小孔のサイズに近い直径を有する粒子を得る技術である。このようにしてリポソームを準備し、取り扱う手法は、周知の手法であり、例えば、引用により本願に援用されるアバンチ・ポラー・リビド社（Avanti Polar Lipids, Inc.）、カタログ第４版（http://avantilipids.com参照）にも開示されている。
【００７８】
本発明の他の具体例においては、ポリママトリックスを送達ビヒクルとして準備し、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質をポリママトリックス内に加える。ポリママトリックスは、生体分解性を有していてもよく、生体分解性を有していなくてもよい。
【００７９】
当分野には、多数のマトリックス材料が存在する。好ましいポリマのリストは以下の通りである。すなわち、ＨＹＤＲＯＰＬＵＳ（商標）（マサチューセッツ州、ナティック、ボストンサイエンティフィック社）として入手可能で、参照により本願に援用される米国特許第５，９０１，２０５号に開示されているポリアクリル酸を含むポリカルボキシル酸、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、クロスリンクされたポリビニルピロリドン、無水マレイン酸ポリマを含むポリアンヒドリド、ポリアミド、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニル芳香族、ポリエチレンオキシド、グリコサミノグリカン、多糖類、ポリエチレンテレフタレートを含むポリエステル、ポリアクリルアミド、ポリエーテル、ポリエーテルスルホン、ポリカーボネート、ポリプロピレン、ポリエチレン、高分子量ポリエチレンを含むポリアルキレン、ポリビニルアセテート、ポリテトラフルオロエチレンを含むハロゲン化ポリアルキレン、ポリウレタン、ポリオルトエステル、タンパク質、ポリペプチド、シリコン、シロキサンポリマ、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリカプロラクトン、吉草酸ポリヒドロキシブチレート、ポリウレタン分散媒（ＢＡＹＨＤＲＯＬ（商標）等）等のポリマ分散媒からのコーティング、フィブリン、コラーゲン及びその誘導体、セルロース、デンプン、デキストラン、アルギン酸塩等の多糖類及びその誘導体である酢酸セルロース、硝酸セルロース、ヒアルロン酸等をマトリックス材料として用いることができる。
【００８０】
これらのポリマを含む混合物及びコポリマを用いても本発明を好適に実施できる。コポリマの具体例としては、ＥＶＡ（エチレン−酢酸ビニルコポリマ）等のビニルモノマのコポリマやポリエチレンエポリプロピレングリコールとしても知られるポロキサマ（poloxamer）等がある。
【００８１】
様々な投与経路を用いて、患者の生体にＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質を送達することができる。ここで、患者とは、あらゆる動物を含み、好ましくは哺乳類であり、より好ましくはヒトである。
【００８２】
好ましい投与経路は、局所経路、直接注射経路、血管内経路及びインプラント経路である。
【００８３】
局所的には、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、スプレー、溶液、ローション、ジェル、クリーム、軟膏、及びこれらの他の周知の局所的送達ビヒクルによって投与することもできる。
【００８４】
更に、パッチ又は包帯を用いてもよい。例えば、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質を液状の送達ビヒクル（溶液、分散媒、ローション、ジェル、クリーム、軟膏を含む）に懸濁させ、パッチ又は包帯に塗布してもよい。これに代えて、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質をパッチ又は包帯の表面に直接吸収させてもよく、又はパッチ又は包帯に形成された（例えば、上述した材料を用いた）ポリママトリックス内に脂質を加えてもよい。
【００８５】
上述したスプレー、溶液、ローション、ジェル、クリーム、軟膏、パッチ又は包帯は、傷のない皮膚に投与してもよい（例えば、経皮的な脂質の送達により、血管拡張の結果、皮膚を温めることができる）。また、これらは、傷ついた皮膚に投与してもよい（例えば、傷の治癒を促進することができる）。
【００８６】
Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、移植、血管内送達、直接の注射を含む更なる様々な投与経路を介して生体内に送達することもできる。
【００８７】
例えば、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、局所的に又はシステマチックに脂質を送達するインプラントの形式で投与してもよい。本発明に関連して好適に用いられるインプラント法としては、軟組織内インプラント、骨内インプラント等が含まれる。インプラントは、例えば、全体を上述したようなマトリックス材料から構成してもよく、これらのマトリックス材料により被覆された基体として構成してもよく、又はＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質を吸収した基材として構成してもよい。インプラントは、ＮＯ放出の後に生体吸収性を有するものであることが望ましい。
【００８８】
直接の注射を行う場合、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、溶液又は分散液の形式で提供される。この目的に適する液体媒体は、親油性及び親水性の溶媒系を含み、特に、親水性溶媒系が好ましい。
【００８９】
血管内送達を行う場合、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、例えば、血管カテーテル（例えば、バルーンカテーテル、注射カテーテル（injection catheter）、注入カテーテル（infusion catheters））、ガイドワイヤ、バルーン、フィルタ（例えば、大静脈フィルタ）、ステント、ステント植皮、血管移植片、動脈瘤フィルタコイル（ＧＤＣ（Guglilmi detachable coil）を含む）、血管内ペービング装置等を含む様々な血管内送達器具を用いて提供することができる。
【００９０】
いくつかの具体例においては、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、血管内器具（例えば、ステント、カテーテル等）の表面に直接吸収される。Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質を吸収するのに適する表面は、例えば上述した材料を含む。
【００９１】
他の具体例においては、血管内器具は、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質が加えられたマトリックスを備える。このマトリックスは、例えば、上述したマトリックスの１つであってもよく、ここでは、生体適合性が重要となる。マトリックスが構造的に十分な一体性を有している場合、マトリックスのみにより器具の全体を構成してもよい。これに代えて、マトリックスは、器具の一部のみを構成してもよい（例えば、器具の部品、部品の一部、又は器具のコーティングであってもよい）。
【００９２】
他の具体例においては、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、液体媒体に加えられ、血管内器具から血管壁に注射される。好適な注射媒体は、上述した通りである。血管内注射に好適な器具としては、ニードル注射カテーテル等がある。
【００９３】
更に他の具体例においては、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、血管内器具から液体として注入され、血管壁又は血液に接触する。この目的に適する液体媒体は、親油性及び親水性の溶媒系を含み、特に、親水性溶媒系が好ましい。好適な器具には、注入カテーテルが含まれる。
【００９４】
本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質をインプラント又は血管内医療器具の表面に加える１つの利点は、酸化窒素の放出のために、器具の表面によって血栓が生じにくく（好ましくは、生じなく）なるという点である。更に、これらの器具を用いて、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質を器具又はインプラントの周囲の血液又は組織に局所的に投与することができ、これにより、ここで説明するような１以上の好適な組織効果が得られる。
【００９５】
本発明の他の具体例においては、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質に加えて、付加的な薬剤も投与する。これにより、例えば、「二重の（double-edged）」治療効果が得られる。すなわち、Ｓ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質によって１つの治療効果が得られ、付加的な薬剤によって他の治療効果が得られる。
【００９６】
本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質とともに、遺伝子治療薬、非遺伝子治療薬、細胞を含む広範囲に亘る治療薬を用いることができる。
【００９７】
非遺伝子治療薬としては、以下の薬剤が含まれる。
・ヘパリン、ヘパリン誘導体、ウロキナーゼ、ＰＰａｃｋ（デキストロフェニルアラニンプロリン・アルギニン・クロロメチルケトン）等の抗血栓薬
・デキサメタゾン、プレドニソロン、コルチコステロン、ブデソニド、エストロゲン、スルファサラジン、メサラミン等の抗炎症薬
・パクリタキセル、５−フルオロウラシル、シスプラチン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エポチロン、エンドスタチン、アンギオスタチン、アンギオペプチン、平滑筋細胞増殖を抑制するモノクローナル抗体、チミジンキナーゼ阻害薬等の抗新生／抗増殖／抗縮瞳薬
・リドカイン、ブピバカイン、ロピバカイン等の麻酔薬
・Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇクロロメチルケトン、ＲＧＤペプチド含有化合物、ヘパリン、ヒルジン、抗トロンビン化合物、血小板受容体拮抗薬、抗トロンビン抗体、抗血小板受容体抗体、アスピリン、プロスタグランジン阻害薬、血小板阻害薬、ダニ（tick）由来抗血小板ペプチド等の抗凝血薬
・血小板由来増殖因子を含む増殖因子、転写アクチベータ、転写プロモータ等の血管細胞増殖促進薬
・増殖因子阻害薬、増殖因子受容体拮抗薬、転写リプレッサ、翻訳リプレッサ、複製阻害薬、抑制抗体、増殖因子に向けられた抗体、増殖因子と細胞毒素とからなる二官能基を有する分子、抗体と細胞毒素とからなる二官能基を有する分子等の血管細胞増殖阻害薬
・プロテインキナーゼ及びチロシンキナーゼ（例えば、チロホスチン、ゲニステイン、キノキサリン）
・プロスタサイクリン及びこれに類似する物質
・コレステロール低減薬
・アンギオポエチン
・トリクロサン、セファロスポリン、アミノグリコシド、ニトロフラントイン等の抗菌剤
・細胞障害性薬物、細胞分裂抑制薬、細胞増殖作動薬
・血管拡張薬
・内因性血管作用メカニズムを阻害する薬剤
遺伝子治療薬としては、以下の薬剤が含まれる。
・アンチセンスＤＮＡ及びアンチセンスＲＮＡ
・以下をコードするＤＮＡ
・アンチセンスＲＮＡ
・欠陥又は欠失がある内因性分子を置換するｔＲＮＡ又はｒＲＮＡ
・酸性及び塩基性線維芽細胞増殖因子、血管内皮細胞増殖因子、上皮成長因子、トランスフォーミング増殖因子α及びβ、血小板由来内皮細胞増殖因子、血小板由来増殖因子、腫瘍壊死因子α、肝細胞増殖因子、インシュリン様増殖因子等の増殖因子を含む血管新生因子
・ＣＤ阻害薬を含む細胞周期阻害因子
・チミジンキナーゼ（ＴＫ）及び細胞増殖を阻害する他の薬剤
・ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６（Ｖｇｒ−１）、ＢＭＰ−７（ＯＰ−１）、ＢＭＰ−８、ＢＭＰ−９、ＢＭＰ−１０、ＢＭＰ−１１、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、ＢＭＰ−１４、ＢＭＰ−１５、ＢＭＰ−１６を含む骨形成タンパク質（bone morphogenic protein：ＢＭＰ）。現在、好ましいＢＭＰは、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７のいずれかである。これらの二量体タンパク質は、ホモ二量体であってもよく、ヘテロ二量体であってもよく、これらの組合せであってもよく、単独で提供しても、他の分子とともに提供してもよい。これに代えて、又はこれに加えて、ＢＭＰの上流又はム下流効果を誘導する分子を加えてもよい。このような分子は、あらゆる「ヘッジホッグ」タンパク質、又はこれらをコードするＤＮＡを含む。
・遺伝子治療薬の送達用として注目されている以下のベクタ
・プラスミド
・アデノウイルス（ＡＶ）、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、レンチウイルス等のウイルスベクタ
・脂質、リポソーム、カチオン性脂質
【００９８】
細胞には、幹細胞を含むヒト由来（自己由来又は同種異系）の細胞、又は必要に応じて、所望のタンパク質を送達するために遺伝子工学的に用いられる動物由来（異種）の細胞を含む細胞が含まれる。
【００９９】
本発明に基づく脂質化合物は、酸化窒素の周知の作用に基づいて、以下のような効果を提供するために用いて好適である。
・抗血栓効果。酸化窒素は、血小板活性化を阻害し、血栓の形成を防止する効果が知られている。したがって、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、凝血塊が問題となる末梢血管疾患及び冠状動脈疾患（アテローム性動脈硬化症）の治療に有用である。
・血管拡張効果。酸化窒素は、平滑筋細胞を弛緩させ、動脈又は他の血管を拡張する。これは、心筋梗塞、脳卒中、インポテンツ、末梢血液循環疾患（例えば、糖尿病の合併症として生じる）等において、適正な血流を維持するために重要である。
・抗炎症効果。酸化窒素は、白血球の接着を防ぎ（抗血栓作用もこの効果に貢献する）、したがって、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、乾癬（及び他の皮膚疾患）、敗血症性ショック、関節炎、アテローム性動脈硬化症、脳卒中等の炎症性疾患の治療の有用な候補薬となる。
・細胞毒性効果。酸化窒素は、高濃度では細胞毒性を有し、例えば癌細胞、細菌細胞（米国特許第５，８１４，６６６号明細書参照）、アテローム病巣に存在する細胞等の様々な望ましくない細胞の数を低減するために用いることができる。
【０１００】
酸化窒素は、炎症を抑制し、血液循環を促進する。酸化窒素は、外傷の治癒におけるコラーゲンの形成にも重要な役割を果たす（例えば、エムアール・シャッファ（MR Schaffer）他著、「酸化窒素による外傷治癒の調整（Nitric oxide regulates wound healing）、ＪＳｕｒｇ  Ｒｅｓ、１９９６年６月、６３（１）：２３７−４０参照。この文献は引用により本願に援用される）。酸化窒素合成が阻害されると、外傷において細胞が殆ど増殖せず、コラーゲン形成及び毛細血管形成も殆ど行われず、したがって治癒反応が遅延する（例えば、エムエヌ・アッケイ（MN Ackay）他著、「試験的に誘発させたbum woundに対する酸化窒素シンターゼ阻害薬の効果（Effect of nitric oxide synthase inhibitor on experimentally induced bum wounds）」、Ｊ  Ｔｒａｕｍａ、２０００年８月、４９（２）：３２７−３０参照。この文献は引用により本願に援用される）。
【０１０１】
この結果、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、外傷又は皮膚科学的な疾患部位に酸化窒素を送達する良好な媒体を提供する。対象となる皮膚科学的疾患には、インペチゴ、表皮水疱症、湿疹、神経皮膚炎、乾癬、かゆみ、紅斑、汗腺膿瘍、いぼ、おむつ皮膚炎、たむし、及びこれらの組合せ等がある。なお、この作用については、米国特許第５，８６９，１０４号明細書「インペチゴを含む皮膚科学的疾患の治療法（Method for treating dermatological conditions including impetigo）」及び、国際特許公開番号第ＷＯ００／５３１９３Ａ１号明細書「皮膚虚血を治療するための、窒素源及び酸化剤を含む薬理構成体（Pharmaceutical composition containing nitrate source and an acidifying agent for treating skin ischaemia）」に開示されており、これらの文献は、引用により本願に援用される。
【０１０２】
酸化窒素は、血管形成術後の適正な治癒を促進するためにも好適に用いられる。例えば、低濃度の酸化窒素は、平滑筋細胞を弛緩させ、平滑筋細胞の増殖を抑制し、内皮細胞の健康を促進し、血小板活性化を阻害し、炎症を抑える等の作用を有し、これらの全ての作用は、例えば血管形成術後において、血管の健康と適正な治癒（再狭窄を伴わない治癒）を促進する効果を有する。
【０１０３】
上述のように、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質は、生体内の脂質堆積物、例えばアテローム硬化プラーク内の脂質堆積物に対する親和性を有し、これにより、このような領域をターゲットとしたＮＯ放出が可能となる。本発明に基づく脂質は、リパーゼによって補充してもよい。このリパーゼは、送達されて、動脈壁の脂質代謝を促す（ケー・ヒラタ（K Hirata）他著、「内皮細胞由来リパーゼの発現の調整（Regulated expression of endothelial cell-derived lipase）」Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ、２０００年５月２７日、２７２（１）：９０−３参照。この文献は引用により本願に援用される）。本発明に基づく脂質は、コラゲナーゼ、エラスターゼ及び細胞外マトリックスを分解するこの他の酵素等を含むメタロプロテナーゼ等のプラーク劣化酵素薬（plaque degrading enzymes agent）によっても補充できる。
【０１０４】
逆に、マトリックスの分解は、平滑筋細胞が遊走する際に重要であるため、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質をメタロプロテナーゼの阻害薬（例えば、メタロプロテナーゼ−２の発現及びコラーゲンの発現を阻害するハロフジノン）と組み合わせて用いてもよい。これによって平滑筋細胞の遊走を阻害することにより、血管形成術後の再狭窄を予防することができる。
【０１０５】
ステントの埋め込み又は血管形成術後の再狭窄の治療（及びこの他の目的）のために、本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質をメタロプロテナーゼの阻害薬とともに、様々な追加的な治療薬を供給することができる。これらには、以下の治療薬が含まれる（これらのうちのいくつかは、上述した付加的な薬剤のリストに挙げた薬剤を含む）。
【０１０６】
・他の、非脂質酸化窒素供与体
・血小板由来成長因子受容体アンタゴニスト
・腫瘍壊死因子−α阻害薬
・以下を含むＣａチャンネル遮断薬
・ジルチアゼム及びクレンチアゼム等のベンゾジアゼピン
・ニフェジピン、アムロジピン、ニカルジピン等のジヒドロピリジン
・ベラパミル等のフェニルアルキルアミン
・以下を含むセロトニン経路モジュレータ
・ケタンセリン及びナフチドロフリル（naftidrofuryl）等の５ＨＴ拮抗薬
・フルオキセチン等の５ＨＴ取り込み阻害薬
・以下を含む環状ヌクレオチド経路薬
・シロスタゾール及びジピリダモール等のホスホジエステラーゼ阻害薬
・フォルスコリン等のアデニル酸／グアニル酸シクラーゼ刺激薬
・アデノシン類似薬
・以下を含むカテコラミンモジュレータ
・プラゾシン及びブナゾシン等のα遮断薬
・プロプラノロール等のβ遮断薬
・ラベタロール及びカルベジロール等のα／β遮断薬
・エンドセリン受容体拮抗薬
・以下を含む酸化窒素供与／放出分子
・ニトログリセリン、二硝酸イソソルバイド、亜硝酸アミル等の有機硝酸塩及び有機亜硝酸塩
・ニトロプルシドナトリウム等の無機ニトロソ化合物
・モルシドミン及びリンシドミン等のシドノニミン（sydnonimine）
・ジアゼニウムジオレート及びアルカンジアミンのＮＯ付加物
・低分子化合物（カプトプリル、グルタチオン、Ｎ−アセチルペニシラミンのＳ−ニトロソ誘導体）及び高分子化合物（例えば、タンパク質、ペプチド、オリゴ糖、多糖類、合成ポリマ／低重合体、天然ポリマ／低重合体のＳ−ニトロソ誘導体）を含むＳ−ニトロソ化合物
・Ｃ−ニトロソ化合物、Ｏ−ニトロソ化合物、Ｎ−ニトロソ化合物
・Ｌ−アルギニン
・シラザプリル、フォシノプリル、エナラプリル等のＡＣＥ阻害薬
・サララシン及びロサルタン等のＡＴＩＩ（アンギオテンシン２）受容体拮抗薬
・アルブミン及びポリエチレンオキシド等の血小板接着阻害薬
・以下を含む血小板凝集阻害薬
・アスピリン及びチエノピリジン（チクロピジン及びクロピドグレル）
・アブシキシマブ、エプチフィバタイド、チロフィバン等のＧＰ２ｂ／３ａ阻害薬
・以下を含む凝固経路モジュレータ
・ヘパリン、低分子量ヘパリン、硫酸デキストラン、β−シクロデキストリンテトラデカ硫酸塩等のヘパリノイド
・ヒルジン、ヒルログ、ＰＰＡＣＫ（Ｄ−ｐｈｅ−プロピル−Ｌ−Ａｒｇ−クロロメチルケトン）及びアルガトロバン等のトロンビン阻害薬
・アンチスタチン及びＴＡＰ（ダニ由来抗凝固性ペプチド：tick anticoagulant peptide）等のＦＸａ阻害薬
・ワルファリン等のビタミンＫ阻害薬
・活性プロテインＣ
・アスピリン、イブプロフェン、フルルビプロフェン、インドメタシン、スルフィンピラゾン等のシクロオキシゲナーゼ経路阻害薬
・デキサメタゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン等の天然及び合成コルチコステロイド
・ノルジヒドログアイアレチン酸及びコーヒー酸等のリポキシゲナーゼ経路阻害薬
・ロイコトリエン受容体拮抗薬
・Ｅ−セレクチン及びＰ−セレクチンの拮抗薬
・ＶＣＡＭ−１及びＩＣＡＭ−１の相互作用の阻害薬
・以下を含むプロスタグラジン及びこれに類似する物質
・ＰＧＥ１及びＰＧＥ２等のプロスタグラジン
・シプロステン、エポプロステノール、カルバサイクリン、イロプロスト、ベラプロスト等のプロスタサイクリンに類似する物質
・ビスホスホネートを含むマクロファージ活性抑制薬
・ロバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、シンバスタチン、セリバスタチン等のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬
・魚油及びω−３−脂肪酸
・プロブコル、ビタミンＣ、ビタミンＥ、エブセレン、トランスレチノイン酸、ＳＯＤミミック等のフリーラジカルスカベンジャ／抗酸化剤
・以下を含む様々な増殖因子に影響を与える薬剤
・ｂＦＧＦ抗体及びキメラ融合タンパク質等のＦＧＦ経路薬
・トラピジル等のＰＤＧＦ受容体拮抗薬
・アンギオペプチン及びオクレオチド等のソマトスタチンに類似する物質を含むＩＧＦ経路薬
・ポリアニオン薬（ヘパリン、フコイジン）、デコリン、ＴＧＦ−β抗体等のＴＧＦ−β経路薬
・ＥＧＦ抗体、受容体拮抗薬、キメラ融合タンパク質等のＥＧＦ経路薬
・タリドミド及びこれに類似する物質等のＴＮＦ−α経路薬
・スロトロバン（sulotroban）、バピプロスト（vapiprost）、ダゾキシベン（dazoxiben）、リドグレル（ridogrel）等のトロンボキサンＡ２（ＴＸＡ２）経路モジュレータ
・チロホスチン、ゲニステイン、キノキサリン誘導体等のタンパク質チロシンキナーゼ阻害薬
・マリマスタット、イロマスタット（ilomastat）、メタスタット等のＭＭＰ経路阻害薬
・サイトカラシンＢ等の細胞運動阻害薬
・以下を含む抗増殖／抗腫瘍薬
・プリンに類似する物質（６−メルカプトプリン、チオグアニン等）、ピリミジンに類似する物質（サイタラビン、５−フルオロウラシル等）、メトトレキサート等の代謝拮抗物質
・ナイトロジェンマスタード、アルキルスルホン酸塩、エチレンイミン、抗生物質（例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン等）、ニトロソ尿素、シスプラチン
・微小管機能に影響を与える薬剤（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、コルチシン、パクリタキセル、エポチロン）
・カスパーゼ活性薬
・プロテアソーム阻害薬
・血管新生阻害薬（例えば、エンドスタチン、アンギオスタチン、スクアラミン）
・ラパマイシン、セリバスタチン、フラボピリドール、スラミン
・ハロフジノン又は他のキナゾリノン誘導体及びトラニラスト等のマトリックス沈着／組織経路阻害薬
・ＶＥＧＦ及びＲＧＤペプチド等の内皮化促進薬
・ペントキシフィリン等の血液レオロジーモジュレータ
【０１０７】
本発明に基づくＳ−ニトロシル化脂質、Ｎ−ニトロシル化脂質、及び／又はＯ−ニトロシル化脂質及び付加的な治療薬の投与は、例えば、選択された脂質／治療薬、送達の経路、治療／阻害すべき患部の状態、患者の年齢等に応じて判断される。当分野において通常の技能を有するものであれば、このような判断を行うことができる。
【０１０８】
以上、本発明の様々な特定の具体例を例示的に説明したが、ここに開示された具体例を様々に変形若しくは変更することができ、これらの変形若しくは変更は、本発明の思想及び意図された範囲から逸脱することなく、添付の請求の範囲に包含される。
【国際公開パンフレット】
2004523520.tif 000024
2004523520.tif 000025
2004523520.tif 000026
2004523520.tif 000027
2004523520.tif 000028
2004523520.tif 000029
2004523520.tif 000030
2004523520.tif 000031
2004523520.tif 000032
2004523520.tif 000033
2004523520.tif 000034
2004523520.tif 000035
2004523520.tif 000036
2004523520.tif 000037
2004523520.tif 000038
2004523520.tif 000039
2004523520.tif 000040
2004523520.tif 000041
2004523520.tif 000042
2004523520.tif 000043
2004523520.tif 000044
2004523520.tif 000045
2004523520.tif 000046
2004523520.tif 000047
2004523520.tif 000048
2004523520.tif 000049
2004523520.tif 000050
2004523520.tif 000051
2004523520.tif 000052
2004523520.tif 000053
2004523520.tif 000054
2004523520.tif 000055
2004523520.tif 000056
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004523520.tif 000057
【国際調査報告】
2004523520.tif 000058
2004523520.tif 000059
2004523520.tif 000060
2004523520.tif 000061