(57)【要約】本発明は、抗腫瘍化合物、組成物および方法に関する。特に本発明は、トポイソメラーゼＩ活性を阻害する、以下の一般式（Ｉ）および（ＩＩ）のインドロカルバゾールアナログに関する。
2004515554.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式Ｉで表された化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【化１】
2004515554.tif 000056
（ここで、式中、Ｒ１およびＲ２は独立してＨ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなり、ここで、アリールもしくは複素環は、１つ以上のＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよく、またはＲ１およびＲ２は、メチレンジオキシ基、エチレンジオキシ基、プロピレンジオキシ基もしくはブチレンジオキシ基を形成するように結合し、ここで、１つ以上の炭素原子はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環で置換されてもよく、
Ｒ３はＸまたはＣＯ−Ｘまたは（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＸまたはＮＸ２またはＮＨ（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＣＯＸまたはＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６−Ｘからなり、ここで、ＸはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＨＯ、２−ヒドロキシブチル、３−スルホラン、２−ヒドロキシメチル−３−ヒドロキシプロピル、スルホニル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜８アルキル、（Ｃ１〜８）アルキル、Ｃ１〜８アルコキシ、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルコキシ、ジヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、アリールオキシ、アリール、複素環、グルコニル、マンノニル、グロニル、グルクロニル、グルロニル、マンヌロニル、エチルモルホリニルからなり、
Ｒ４はＨ、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなる。）
【請求項２】
Ｒ１およびＲ２がメチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２がエチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１およびＲ２がイソプロピレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１およびＲ２の両方がＣＨ３であることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１およびＲ２の両方がＨであることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
以下の一般式ＩＩで表された化合物またはその薬学的に受容可能な塩。
【化２】
2004515554.tif 000057
（ここで、式中、Ｒ１およびＲ２は独立してＨ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環を含んでなり、ここで、アリールもしくは複素環は、１つ以上のＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよく、またはＲ１およびＲ２は、メチレンジオキシ基、エチレンジオキシ基、プロピレンジオキシ基もしくはブチレンジオキシ基を形成するように結合し、ここで、１つ以上の炭素原子はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環で置換されてもよく、
Ｒ３はＸまたはＣＯ−Ｘまたは（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＸまたはＮＸ２またはＮＨ（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＣＯＸまたはＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６−Ｘからなり、ここで、ＸはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＨＯ、２−ヒドロキシブチル、３−スルホラン、２−ヒドロキシメチル−３−ヒドロキシプロピル、スルホニル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜８アルキル、（Ｃ１〜８）アルキル、Ｃ１〜８アルコキシ、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルコキシ、ジヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、アリールオキシ、アリール、複素環、グリコニル、マンノニル、グロニル、グリクロニル、グルロニル、マンヌロニル、エチルモルホリニルから構成され、
Ｒ４はＨ、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなる。）
【請求項８】
Ｒ１およびＲ２がメチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１およびＲ２がエチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１およびＲ２がイソプロピレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項７に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１およびＲ２が両方ＣＨ３であることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項７に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１およびＲ２が両方Ｈであることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項７に記載の化合物。
【請求項１３】
トポイソメラーゼＩ活性の阻害を必要とする哺乳動物に少なくとも１つ以下の一般式Ｉで表されたインドロカルバゾールアナログの有効量、もしくは、その薬学的に受容可能な塩を単独またはキャリアと組み合わせて投与するステップを含んでなる、トポイソメラーゼＩ活性の阻害方法。
【化３】
2004515554.tif 000058
（ここで、式中、Ｒ１およびＲ２は独立してＨ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなり、ここで、アリールもしくは複素環は、１つ以上のＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよく、あるいはＲ１およびＲ２は、メチレンジオキシ基、エチレンジオキシ基、プロピレンジオキシ基もしくはブチレンジオキシ基を形成するように結合し、ここで、１つ以上の炭素原子はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環で置換されてもよく、
Ｒ３はＸまたはＣＯ−Ｘまたは（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＸまたはＮＸ２またはＮＨ（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＣＯＸまたはＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６−Ｘからなり、ここで、ＸはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＨＯ、２−ヒドロキシブチル、３−スルホラン、２−ヒドロキシメチル−３−ヒドロキシプロピル、スルホニル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜８アルキル、（Ｃ１〜８）アルキル、Ｃ１〜８アルコキシ、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルコキシ、ジヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、アリールオキシ、アリール、複素環、グリコニル、マンノニル、グロニル、グリクロニル、グルロニル、マンヌロニル、エチルモルホリニルからなり、
Ｒ４はＨ、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなる。）
【請求項１４】
Ｒ１およびＲ２がメチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ１およびＲ２がエチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒ１およびＲ２がイソプロピレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ１およびＲ２が両方ＣＨ３であることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ１およびＲ２が両方Ｈであることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
トポイソメラーゼＩ活性の阻害を必要とする哺乳動物に少なくとも１つ以下の一般式ＩＩで表されたインドロカルバゾールアナログの有効量、もしくは、その薬学的に受容可能な塩を単独またはキャリアと組み合わせて投与するステップを含んでなる、トポイソメラーゼＩ活性の阻害方法。
【化４】
2004515554.tif 000059
（ここで、式中、Ｒ１およびＲ２は独立してＨ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなり、ここで、アリールもしくは複素環は、１つ以上のＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよく、あるいはＲ１およびＲ２は、メチレンジオキシ基、エチレンジオキシ基、プロピレンジオキシ基もしくはブチレンジオキシ基を形成するように結合し、ここで、１つ以上の炭素原子はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環で置換されてもよく、
Ｒ３はＸまたはＣＯ−Ｘまたは（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＸまたはＮＸ２またはＮＨ（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＣＯＸまたはＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６−Ｘからなり、ここで、ＸはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＨＯ、２−ヒドロキシブチル、３−スルホラン、２−ヒドロキシメチル−３−ヒドロキシプロピル、スルホニル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜８アルキル、（Ｃ１〜８）アルキル、Ｃ１〜８アルコキシ、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルコキシ、ジヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、アリールオキシ、アリール、複素環、グリコニル、マンノニル、グロニル、グリクロニル、グルロニル、マンヌロニル、エチルモルホリニルからなり、
Ｒ４はＨ、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなる。）
【請求項２０】
Ｒ１およびＲ２がメチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
Ｒ１およびＲ２がエチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
Ｒ１およびＲ２がイソプロピレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
Ｒ１およびＲ２が両方ＣＨ３であることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
Ｒ１およびＲ２が両方Ｈであることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項１９に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも一つの以下の一般式Ｉで表された化合物の有効量、または、その薬学的に受容可能な塩をキャリアまたは薬学的アジュバントあるいは付加物質と組み合わせて含んでなる、トポイソメラーゼＩ活性を阻害するための組成物。
【化５】
2004515554.tif 000060
（ここで、式中、Ｒ１およびＲ２は独立してＨ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなり、ここで、アリールもしくは複素環は、１つ以上のＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよく、あるいはＲ１およびＲ２は、メチレンジオキシ基、エチレンジオキシ基、プロピレンジオキシ基もしくはブチレンジオキシ基を形成するように結合し、ここで、１つ以上の炭素原子はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環で置換されてもよく、
Ｒ３はＸまたはＣＯ−Ｘまたは（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＸまたはＮＸ２またはＮＨ（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＣＯＸまたはＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６−Ｘからなり、ここで、ＸはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＨＯ、２−ヒドロキシブチル、３−スルホラン、２−ヒドロキシメチル−３−ヒドロキシプロピル、スルホニル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜８アルキル、（Ｃ１〜８）アルキル、Ｃ１〜８アルコキシ、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルコキシ、ジヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、アリールオキシ、アリール、複素環、グルコニルを含んでなるグリコニル、マンノニル、グロニル、グルクロニルを含んでなるグリクロニル、グルロニル、マンヌロニル、エチルモルホリニルからなり、
Ｒ４はＨ、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなる。）
【請求項２６】
Ｒ１およびＲ２がメチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
Ｒ１およびＲ２がエチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項２５に記載の組成物。
【請求項２８】
Ｒ１およびＲ２がイソプロピレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項２５に記載の組成物。
【請求項２９】
Ｒ１およびＲ２が両方ＣＨ３であることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項２５に記載の組成物。
【請求項３０】
Ｒ１およびＲ２が両方Ｈであることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項２５に記載の組成物。
【請求項３１】
少なくとも１つの以下の一般式ＩＩで表された化合物の有効量、または、その薬学的に受容可能な塩をキャリアまたは薬学的アジュバントあるいは付加物質と組み合わせて含んでなる、トポイソメラーゼＩ活性を阻害するための組成物。
【化６】
2004515554.tif 000061
（ここで、式中、Ｒ１およびＲ２は独立してＨ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなり、ここで、アリールもしくは複素環は、１つ以上のＣ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよく、あるいは、Ｒ１およびＲ２は、メチレンジオキシ基、エチレンジオキシ基、プロピレンジオキシ基もしくはブチレンジオキシ基を形成するように結合し、ここで、１つ以上の炭素原子はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環で置換されてもよく、
Ｒ３はＸまたはＣＯ−Ｘまたは（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＸまたはＮＸ２またはＮＨ（ＣＨ２）１〜６−ＸまたはＮＨＣＯＸまたはＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜６−Ｘからなり、ここで、ＸはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＨＯ、２−ヒドロキシブチル、３−スルホラン、２−ヒドロキシメチル−３−ヒドロキシプロピル、スルホニル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜８アルキル、（Ｃ１〜８）アルキル、Ｃ１〜８アルコキシ、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルコキシ、ジヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、アリールオキシ、アリール、複素環、グリコニル、マンノニル、グロニル、グリクロニル、グルロニル、マンヌロニル、エチルモルホリニルからなり、
Ｒ４はＨ、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、アリールまたは複素環からなる。）
【請求項３２】
Ｒ１およびＲ２がメチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
Ｒ１およびＲ２がエチレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項３１に記載の組成物。
【請求項３４】
Ｒ１およびＲ２がイソプロピレンジオキシ環を形成するように結合することと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項３１に記載の組成物。
【請求項３５】
Ｒ１およびＲ２が両方ＣＨ３であることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項３１に記載の組成物。
【請求項３６】
Ｒ１およびＲ２が両方Ｈであることと、Ｒ３がＨであることと、Ｒ４がＯＨであることと、を特徴とする請求項３１に記載の組成物。
【請求項３７】
前記アリールがフェニル、ナフチル、フェナントラセニルまたはインダニルからなり、各々が１つ以上のＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで置換されなくてもされてもよいことを特徴とする請求項１または７に記載される化合物。
【請求項３８】
前記複素環がピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラニル、チオフェニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン；４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、１，４−ジメチルピペラジン−２−ホルミル、ピペリジン、モルホリン、イソインドリル、イソベンゾチオフェニルまたはイソベンゾフラニル、５−メトキシピリミジニル、（１，２，４）トリアジン−３，５−ジオン−６−イル、６−メルカプトピリミジン−４イル、４−メチルピペラジニル、ピラニル、１−メチルピロール−２−イル、２−メチルチアゾール−４−イル、フラン−２−イル、チオフェン−２−イル、チオフェン−３−イルまたは３’−メトキシチオフェン−３−イル、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン、ピペリジン、４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１イル）、１，４−ジメチルピペラジン、４−メチルピペラジニル、モルホリニルからなり、各々が１つ以上のＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで置換されなくてもされてもよいことを特徴とする請求項１または７に記載される化合物。
【請求項３９】
前記アリールがフェニル、ナフチル、フェナントラセニルまたはインダニルからなり、各々が１つ以上のＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで置換されなくてもされてもよいことを特徴とする請求項１３または１９に記載される方法。
【請求項４０】
前記複素環がピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラニル、チオフェニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン；４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、１，４−ジメチルピペラジン−２−ホルミル、ピペリジン、モルホリン、イソインドリル、イソベンゾチオフェニルまたはイソベンゾフラニル、５−メトキシピリミジニル、（１，２，４）トリアジン−３，５−ジオン−６−イル、６−メルカプトピリミジン−４イル、４−メチルピペラジニル、ピラニル、１−メチルピロール−２−イル、２−メチルチアゾール−４−イル、フラン−２−イル、チオフェン−２−イル、チオフェン−３−イルまたは３’−メトキシチオフェン−３−イル、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン、ピペリジン、４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１イル）、１，４−ジメチルピペラジン、４−メチルピペラジニル、モルホリニルからなり、各々が１つ以上のＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで置換されなくてもされてもよいことを特徴とする請求項１３または１９に記載される方法。
【請求項４１】
前記アリールがフェニル、ナフチル、フェナントラセニルまたはインダニルからなり、各々が１つ以上のＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで置換されなくてもされてもよいことを特徴とする請求項２５に記載される組成物。
【請求項４２】
前記複素環がピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラニル、チオフェニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン；４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、１，４−ジメチルピペラジン−２−ホルミル、ピペリジン、モルホリン、イソインドリル、イソベンゾチオフェニルまたはイソベンゾフラニル、５−メトキシピリミジニル、（１，２，４）トリアジン−３，５−ジオン−６−イル、６−メルカプトピリミジン−４イル、４−メチルピペラジニル、ピラニル、１−メチルピロール−２−イル、２−メチルチアゾール−４−イル、フラン−２−イル、チオフェン−２−イル、チオフェン−３−イルまたは３’−メトキシチオフェン−３−イル、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン、ピペリジン、４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１イル）、１，４−ジメチルピペラジン、４−メチルピペラジニル、モルホリニルからなり、各々が１つ以上のＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで置換されなくてもされてもよいことを特徴とする請求項２５または３１に記載される組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、合成インドロカルバゾールアナログおよびその使用に関する。特に、２，３，９−トリヒドロキシパターン（特に、２−ヒドロキシ位および３−ヒドロキシ位において環状エーテルおよび非環状エーテル）からなる置換を含む中心的構造、１２−（β―Ｄ−グルコピラノシル（ｇｌｕｏｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−α］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオンの改変に関する。本発明はまた、トポイソメラーゼＩ活性の阻害に対するこのようなインドロカルバゾールアナログを使用する組成物および方法に関する。
【０００２】
（発明の背景）
ヒトトポイソメラーゼＩ（トポＩ）は細胞機能の生存能力に重要な酵素であり、これは抗癌治療の設計および開発に対する興味深い標的である。現在癌の臨床処置に対して食品医薬品局によって認可される２つの抗癌剤：トポテカン（Ｈｙｃａｍｔｉｎ）およびＣＰＴ−１１（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）が存在し、これらの両方は天然物カンプトテシンの構造アナログである。
【０００３】
トポＩは１つのリンキング数の増加量で、二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）の位相状態の変化を触媒する１００ｋＤのモノマータンパク質である１。ヒトトポＩの３次元構造が報告されている２。トポＩが作用するメカニズムは、開裂可能な複合体と言われる（これらの複合体は変性剤またはアルカリを用いた処理の際にＤＮＡ破壊として検出されるため、そのように呼ばれる）共有結合性のタンパク質−ＤＮＡ付加物の形成を介したｄｓＤＮＡにおける一過性の一本鎖破壊の誘導を通じて進行すると考えられる。この開裂可能な複合体はヒトトポＩ上の活性部位、チロシン７２３残基によるＤＮＡホスホジエステル結合のエステル交換反応の際に形成され、この酵素と破壊されるＤＮＡ鎖の３’ホスホリル末端との間にエステル結合をもたらす。これは、インタクトな相補的ＤＮＡ鎖を中心とした破壊ＤＮＡ鎖のタンパク質に結合した３’末端の自由回転を可能にし、１つのリンキング数の増加量でこの二重鎖の緩和をもたらす。破壊鎖の再ライゲーション（第二のエステル交換反応を介する）およびトポイソメラーゼＩの引き続く解離がこの触媒サイクルを完了する。
【０００４】
トポイソメラーゼＩ毒物は、薬物、トポイソメラーゼＩおよびＤＮＡからなる三元複合体の形成によって媒介される開裂可能な複合体の安定化を介して作用する３。カンプトテシン（原型のトポイソメラーゼＩ毒物）のような因子はＤＮＡに直接結合せずまたトポイソメラーゼＩ単独にも結合しないが、ＤＮＡと複合体化したトポイソメラーゼＩにのみ結合する。安定化ＤＮＡ−タンパク質−薬物複合体が進行中の複製フォークとの衝突の際に致命的なＤＮＡ鎖破壊を引き起こすことが仮定されている。このメカニズムによって、トポイソメラーゼＩ毒物は酵素をＤＮＡ損傷因子に転換し、ＤＮＡ複製の崩壊そしてついに細胞死をもたらす。この仮説はカンプトテシンが高度に段階特異的であり、Ｓ期の細胞のみ殺傷するという事実によって支持される。
【０００５】
カンプトテシンに加えてインドロカルバゾールはまた、トポイソメラーゼＩ活性の毒作用を介して強力な抗腫瘍活性を実証し４〜７、最も注目に値するのは、ＥＤ−１１０８、ＮＢ−５０６９およびＪ−１０７０８８１０である。３，９−ジヒドロキシ置換パターンを保有するインドロカルバゾールアナログは他の「対称性の」ジヒドロキシル化位置異性体（ｒｅｇｉｏｉｓｏｍｅｒ）と比較して、優れたトポイソメラーゼＩ毒作用能ならびに優れたインビトロ抗腫瘍活性を有することが見出された１１。この３，９−ジヒドロキシアナログはまたヌードマウスに異種移植されたＤＵ−１４５ヒト前立腺腫瘍系統に対して見事なインビボ抗腫瘍活性を示した。
【０００６】
（発明の要旨）
本発明はトポイソメラーゼＩ活性の阻害についての化合物、組成物および方法に関する。
【０００７】
従って、本発明の１つの目的は以下の一般式ＩおよびＩＩ、
【化７】
2004515554.tif 000003
【化８】
2004515554.tif 000004
［式中、Ｒ１およびＲ２は独立してＨ、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化（ｍｏｎｏ−  ｏｒ  ｐｏｌｙｆｌｕｏｒｉｎａｔｅｄ）Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、
またはアリール（ここでこのアリールは６員の芳香族炭素環化合物（例えばフェニル）もしくは多環式芳香族炭化水素（例えばナフチル、フェナントラセニル、インダニル）から構成される）
または複素環（ここでこの複素環は６員の芳香族複素環（例えばピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピペラジニル）もしくは５員の芳香族複素環（例えばピロリル、ピラゾール、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラニル、チオフェニル）もしくは二環系（ｂｙｃｙｃｌｉｃ  ｓｙｓｔｅｍｓ）（例えばインドリル、ベンゾチオフェニル（ｂｅｎｚｔｈｉｏｐｈｅｎｅｙｌ）、ベンゾフラニル、イソインドリル、イソベンゾチオフェニル、イソベンゾフラニル）から構成される）であり；ここでこのアリールもしくは複素環は１つ以上の以下：Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよいか；
あるいはＲ１およびＲ２は合計の環サイズが５（Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ２）〜９（Ｒ１＝Ｒ２＝（ＣＨ２）５）にわたる環を形成するように結合し、ここで１つ以上のメチレン（ＣＨ２）水素原子がハロゲン、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、
またはアリール（ここでこのアリールは任意の６員の芳香族炭素環化合物（例えばフェニル）もしくは多環式芳香族炭化水素（例えばナフチル、フェナントラセニル、インダニル）から構成される）
または複素環（ここでこの複素環は６員の芳香族複素環（例えばピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピペラジニル）もしくは５員の芳香族複素環（例えばピロリル、ピラゾール、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラニル、チオフェニル）もしくは二環系（例えばインドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、イソインドリル、イソベンゾチオフェニル、イソベンゾフラニル）から構成される）で置換されてもよく；ここでこのアリールもしくは複素環は１つ以上の以下：Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよく；
Ｒ３はＨ
またはＮＨ２、式−ＮＨ−アルキル−ＣＮのニトリロ（Ｃ１〜６）アルキルアミン、２−ピロリジニルエチル−１−アミン、ベンジルアミン、２−ナフチルアミン、２−ベンゾチアゾールアミン、βフェネチルアミン、１−ピペラジンアミン、４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−アミン、ピペリジン−１−アミン、アニリン、２−ヒドロキシブチルアミン、３−スルホランアミン、４−メチル２，３ジヒドロイソシトシン、（Ｃ１〜６）アルキルスルホンアミジル、２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１イル）アセトアミジル、１，４−ジメチルピペラジン−２−ホルムアミジル、フェノキシホルムアミジル、グルコンアミジル、マノンアミジル（ｍａｎｏｎａｍｉｄｙｌ）、グロンアミジル、
または式−ＮＨ−ＣＯ−Ａｒのアリールカルバマート（ここでこのアリールは６員の芳香族炭素環化合物（フェニル、ヒドロキシフェニル、ジヒドロキシフェニル、トリヒドロキシフェニルを含む）もしくは多環式芳香族炭化水素（例えばナフチル、フェナントラセニル、インダニル）から構成される）、
または式−ＮＨ−ＣＯ−複素環の複素環カルバマート（ここでこの複素環は６員の芳香族複素環（ピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、５−メトキシピリミジニル、ピロリジニル、（１，２，４）トリアジン−３，５−ジオン−６−イル、６−メルカプトピリミジン−４−イルを含む）もしくは６員の非芳香族複素環（ピペラジニル、４−メチルピペラジニル、ピラニルを含む）もしくは５員の芳香族複素環（ピロリル、１−メチルピロール−２−イル、ピラゾリル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、２−メチルチアゾール−４−イル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラン−２−イル、チオフェン−２−イル、チオフェン−３−イル、３’−メトキシチオフェン−３−イルを含む）もしくは二環系（例えばインドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、イソインドリル、イソベンゾチオフェニル、イソベンゾフラニル）を含んでなる）
または式−ＮＨ−ＣＯ−アルカンのアルキルカルバマート（ここでこのアルカンは（Ｃ１〜６）アルキル、４−メチルピペラジニルメチルを含んでなる）、
またはモルホリノ（Ｃ１〜６）アルキル、ピペラジノ（Ｃ１〜６）アルキル、
またはニトリロ（Ｃ１〜６）アシル、
またはアリール（ここでこのアリールは任意の６員の芳香族炭素環化合物（例えばフェニル）もしくは多環式芳香族炭化水素（例えばナフチル、フェナントラセニル、インダニル）から構成される）
または複素環（ここでこの複素環は６員の芳香族複素環（例えばピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピペラジニル）もしくは５員の芳香族複素環（ピロリル、ピラゾール、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラニル、チオフェニルを含む）もしくは二環系（インドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、イソインドリル、イソベンゾチオフェニル、イソベンゾフラニルを含む）から構成される）を含んでなり；ここでこのアリールもしくは複素環は１つ以上の以下：Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル；
またはＣ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキル、ジヒドロキシ（Ｃ１〜６）アルキルで各々置換されなくてもされてもよく、
Ｒ４はＨ、ＮＨ２、Ｃ１〜６アルキル、アリール−Ｃ１〜６アルキル、一もしくは多フッ素化Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキル、シクロ（Ｃ３〜６）アルキル、
またはアリール（ここでこのアリールは任意の６員の芳香族炭素環化合物（例えばフェニル）もしくは多環式芳香族炭化水素（例えばナフチル、フェナントラセニル、インダニル）から構成される）
または複素環（ここでこの複素環は６員の芳香族複素環（例えばピリジル、ジアジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピペラジニル）もしくは５員の芳香族複素環（例えばピロリル、ピラゾール、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾレニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリジニル、チアゾリニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリニル、フラニル、チオフェニル）もしくは二環系（例えばインドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、イソインドリル、イソベンゾチオフェニル、イソベンゾフラニル）から構成される）を含んでなり；ここでアリールもしくは複素環は１つ以上の以下：Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ、Ｃ１〜８アルキルアミノ−Ｃ１〜８アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノ−Ｃ１〜８アルキルで各々置換されなくてもされてもよい］を特徴とする化合物またはその薬学的に受容可能な塩を提供することである。
【０００８】
好ましい化合物は、Ｒ１およびＲ２がメチレンジオキシ環を形成するように結合する場合にＲ３がＨでありそしてＲ４がＯＨであるか；または
Ｒ１およびＲ２がエチレンジオキシ環を形成するように結合する場合にＲ３がＨでありそしてＲ４がＯＨであるか；または
Ｒ１およびＲ２がイソプロピレンジオキシ環を形成するように結合する場合にＲ３がＨでありそしてＲ４がＯＨであるか；あるいは
Ｒ１およびＲ２が両方ＣＨ３である場合にＲ３がＨでありそしてＲ４がＯＨであるか；または
Ｒ１およびＲ２が両方Ｈである場合にＲ３がＨでありそしてＲ４がＯＨである。
【０００９】
本発明の別の目的は、哺乳動物においてトポイソメラーゼＩ活性を阻害する方法を提供することであり、この方法はトポイソメラーゼＩ活性の阻害を必要とする哺乳動物に有効量の式ＩまたはＩＩの化合物を投与するステップを包含する。
【００１０】
本発明のなお別の目的は、トポイソメラーゼＩ活性の阻害を必要とする哺乳動物においてトポイソメラーゼＩ活性を阻害するための組成物を提供することであって、これは、有効量の少なくとも１つの式ＩおよびＩＩの化合物を含んでなる。
【００１１】
本発明のこれらの目的および他の目的は以下の詳細な説明に鑑みて明らかになる。
【００１２】
（発明の詳細な説明）
本発明に開示される化合物は、単独またはキャリアと一緒のいずれかにおいて癌の処置または予防のための抗腫瘍因子として有用である。細胞傷害性因子は、しばしば抗癌因子として利用されて腫瘍を制御または根絶する。トポＩ毒物は有用な細胞傷害性因子であり、そしてカンプトテシン、ＣａｍｐｔｏｓａｒおよびＨｙｃａｍｔｉｎ（トポテカン）に関連する２つのトポＩ毒物が現在腫瘍の処置について臨床的に使用される。インドロカルバゾールは、腫瘍の処置についての有用な因子を象徴する異なるクラスのトポＩ毒物である。特に本発明に開示されるトポＩ毒作用化合物は、ヒト卵巣腫瘍細胞およびヒト前立腺腫瘍細胞に対して高度に細胞傷害性であることを示した。
【００１３】
本発明のインドロカルバゾールアナログは、非経口投与のための凍結乾燥粉末の溶液として処方され得る。粉末は、使用前に適切な希釈剤または他の薬学的に受容可能なキャリアの添加によって再構成され得る。この液体処方物は、一般的に緩衝化された等張の水溶液である。適切な希釈剤の例は、正常な等張生理食塩水溶液、水中あるいは緩衝化酢酸ナトリウム溶液または緩衝化酢酸アンモニウム溶液中の標準的な５％デキストロースである。このような処方物は特に非経口投与に適切であるが、経口投与についてもまた使用され得る。賦形剤（例えばポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マンニトール、塩化ナトリウムまたは酢酸ナトリウム）を添加することが望ましくあり得る。
【００１４】
あるいは本発明の化合物は、経口投与のためにカプセル化され得るか、錠剤化され得るか、あるいは乳剤（水中油形または油中水形）シロップに取り込まれ得る。薬学処方分野において一般的に公知である薬学的に受容可能な固形キャリアまたは液体キャリアが添加されて、組成物を増強または安定化し得るか、あるいはこの組成物の調製を容易にし得る。固形キャリアとしては、デンプン（トウモロコシもしくはジャガイモ）、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、クロスカルメロースナトリウム（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天、ゼラチン、マルトデキストリンおよび微結晶性セルロースあるいはコロイド状二酸化ケイ素が挙げられる。液体キャリアとしては、シロップ、落花生油、オリーブ油、トウモロコシ油、ゴマ油、生理食塩水および水が挙げられる。このキャリアはまた、単独または蝋とともに徐放性物質（例えば、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリル）を含み得る。固形キャリアの量は変化するが、好ましくは１投薬単位当たりおよそ１０ｍｇとおよそ１ｇとの間である。
【００１５】
本発明に開示されるインドロカルバゾールアナログの投与についての投薬範囲は、所望の効果（ａｆｆｅｃｔ）を生じる範囲である。この投薬量は一般的に、年齢、体重、疾患の程度およびもしあれば禁忌によって変化する。この投薬量はまた、この化合物に付随し得る任意の有害な副作用の存在によって決定される。可能であろうがなかろうが、有害な副作用を最小限に保つことが常に望ましい。当業者は個々の患者において所望の有効な濃度を達成するために使用されている組成物の正確な処方について、適切な投薬量、スケジューリングおよび投与方法を容易に決定し得る。しかしこの投薬量は、およそ１ｍｇ／ｋｇ／日とおよそ５００ｍｇ／ｋｇ／日との間、そして好ましくはおよそ１ｍｇ／ｋｇ／日とおよそ５０ｍｇ／ｋｇ／日との間で変化し得る。
【００１６】
当業者は本発明の趣旨または範囲から逸脱することなく変更が本発明においてなされ得ることを認識する。本発明は以下の実施例（これは本明細書中に記載される特定の手順または組成物に対する趣旨または範囲において本発明を限定するように解釈されるべきではない）によってさらに例示される。
【００１７】
（標的分子の合成）
（スキームＡ）
【化９】
2004515554.tif 000005
必要とされる５，６−インドロジオキサンおよび５，６−インドロジオキソール前駆物質を、５，６−エチレンジオキシインドール（４）についてのスキームＡに例示されるように４−メチルカテコールから出発して調製し得る。オルト−ジヒドロキシ官能基の保護を、それぞれ１，２−ジブロモエタン、ジクロロメタンおよびアセトンを用いて達成した。発煙硝酸を用いたニトロ化、その後のＢａｔｃｈｏ−Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒプロトコル１２を用いたインドール形成は、所望のインドールを与えた。
【００１８】
インドロカルバゾールアナログの構成は、ＩａについてのスキームＢに例示されるように行われ得る。Ｎ−ベンジルオキシメチル−３，４−ジブロモマレイミドを以前に記載されるように１３調製した。適切なインドール（これは有機金属、好ましくは、限定されないがハロゲン化メチルマグネシウムまたはリチウムヘキサメチルジシラジドを用いてあらかじめ処理されている）を用いた反応は、５によって表されるブロモインドロマレイミド中間体を与えた。インドール窒素でのグルコシド化を、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件１４（グルコース、ＰＰｈ３およびジイソプロピルアゾジカルボキシラート（ＤＩＡＤ）の各々３当量）下で２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコースを用いて達成し、その後逆相精製して６を与えた。第二のインドール単位の導入を第一のインドール単位の導入と類似の条件下で行い、これは７によって表されるビス−インドリルマレイミドを与えた。ビス−インドリルマレイミドの酸化的環化を、ＤＭＦにおけるトリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）または光化学環化を介してのいずれかを用いて達成し、これは８によって表されるインドロカルバゾールを与えた。他者１４は代替試薬（例えば、ＣｕＣｌ２およびＰｄＣｌ２）を用いた酸化的環化を報告したが、これらは本発明者らの技量において反応を触媒できなかった。保護基の水素化分解（水酸化パラジウム、ＨＯＡｃ）は、９によって表される６−Ｎ−ヒドロキシメチル誘導体を与え、これはメタノール中の酢酸アンモニウムを用いて、Ｉａによって表される所望の最終生成物に容易に転換された。すべての化合物は、標的構造と一致したスペクトル特性および分析特性（１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、ＭＳおよび元素分析）を与えた。
【００１９】
（スキームＢ）
【化１０】
2004515554.tif 000006
以下の実施例は本発明の例示であるが、その範囲の限定を満たさない。
【００２０】
（実施例１）
（２，３−エチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉａ）の合成）
【化１１】
2004515554.tif 000007
（ステップＡ：６−メチル−１，４−ベンゾジオキサン（１）の調製）
【化１２】
2004515554.tif 000008
エチレングリコール（５００ｍＬ）における４−メチルカテコール（３３．０４ｇ、２６６．１ｍｍｏｌ）、１，２−ジブロモエタン（１００ｇ、５３２．３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（７５．４ｇ、５４５．５ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（０．２ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）の混合物を、５時間窒素下で１３０℃まで加熱した。この溶液を周囲温度まで冷却し、そして一晩撹拌した。この混合物をセライトを通じて濾過した後、この溶液をブライン（８００ｍＬ）で希釈し、そして有機溶媒を用いて抽出した（ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン／ＥｔＯＡｃ：１：３：１、３×５００ｍＬ）。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して粗油状物（ｃｒｕｄｅ ｏｉｌ）を与えた。エーテル／ヘキサン（８：２）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュ（ｆｌａｓｈ）シリカゲルクロマトグラフィーは、無色油２０．０ｇ（５０％）として表題中間体を与えた。
【００２１】
（ステップＢ：６−メチル−７−ニトロ−１，４−ベンゾジオキサン（２）の調製）
【化１３】
2004515554.tif 000009
酢酸（１３５ｍＬ）における１（２０．０ｇ、１３３．３ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸（５０ｍＬ）における発煙性ＨＮＯ３（１０ｍＬ）の溶液を３０分間にわたって滴下によって添加した。この混合物を周囲温度で１０分間撹拌し、次いで氷を含むビーカーに注いで結晶性沈殿物を与え、この沈殿物を真空濾過によって収集し、そして水で洗浄してオフホワイトの固体として生成物（２５．８ｇ、９９．２％）を与えた。
【００２２】
（ステップＣ：（Ｅ）−４，５−エチレンジオキシ−２−ニトロ−１−ピロリジノスチレン（３）の調製）
【化１４】
2004515554.tif 000010
２（１９．５ｇ、１００ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（２３．６３ｇ、１９８．３ｍｍｏｌ）およびピロリジン（１４．１ｇ、１９８．３ｍｍｏｌ）の溶液を１１０℃まで加熱し、そして窒素下で２４時間撹拌した。この反応混合物を冷却し、そして２５０ｍＬの無水メタノールを添加した。この生成物は鮮赤固体として結晶化した。吸引濾過による回収は生成物（２４．３ｇ、８８．０％）を与えた。
【００２３】
（ステップＤ：４，５−エチレンジオキシインドール（４）の調製）
【化１５】
2004515554.tif 000011
メタノールおよびＴＨＦ（２４０ｍＬ、１：１）における３（２４．０ｇ、８７．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ラネーニッケル（２．０ｍＬ）およびヒドラジン一水和物（３×３．６ｍＬ、３４８ｍｍｏｌ）を窒素下、周囲温度で３０分毎に添加した。次いでこの溶液を４５℃で２時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、そして触媒をセライト床を通じた濾過によって除去し、そして塩化メチレンで３回洗浄した。この濾液を蒸発させ、そしてこの残渣をトルエン（１００ｍＬ）を用いた蒸発によって乾燥して粗油状物を与えた。酢酸エチル／ヘキサン（４０／６０％）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラム精製は、オフホワイトの固体（７．０ｇ、４６．１％）として表題中間体を与えた。
【００２４】
（ステップＥ：２−ブロモ−３−（５−ベンジルオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（５）の調製）
【化１６】
2004515554.tif 000012
ベンゼン（１５０ｍＬ）における５−ベンジルオキシインドール（８．９３ｇ、４０ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化メチルマグネシウム（１４．７ｍＬ、４４．０ｍｍｏｌ、エーテルにおいて３Ｍ）を０℃で添加した。この溶液を１時間撹拌し、次いでベンゼン（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（１００ｍＬ）におけるＮ−ベンジルオキシメチル−３，４−ジブロモマレイミド（１５．０ｇ、４０ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで室温まで温め、そして１時間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣＬ（１５０ｍＬ、０．３Ｎ）、ＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。メタノールを用いた粗油状物の結晶化は、黄色固体（１２．５０ｇ、６６．０％）として表題中間体を与えた。
【００２５】
（ステップＦ：２−ブロモ−３−［５−ベンジルオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（６）の調製）
【化１７】
2004515554.tif 000013
ＴＨＦ（８００ｍＬ）における５（１５．０ｇ、２９．０ｍｍｏｌ）、２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノース（４７．０２ｇ、８７．０ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２２．８ｇ、８７．０ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃まで冷却した。ジイソプロピルアゾジカルボキシラート（１７．１４ｍＬ、８７．０ｍｍｏｌ）を滴下によって添加し、温度を−７８℃に維持し、次いで３時間撹拌した。この溶液を氷水浴の助けによって０℃まで温め、そして撹拌を２時間継続した。この混合物をＥｔＯＡｃ（１２００ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。この未精製混合物を逆相Ｂｉｏｔａｇｅカートリッジにかけ、そしてＣＨ３ＣＮ（１００％）に対するＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（５０／５０）勾配を用いて溶出し、これは黄色固体２２．３ｇ（７４．０％）として表題中間体を与えた。
【００２６】
（ステップＧ：３−（４，５−エチレンジオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［５−ベンジルオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（７）の調製）
【化１８】
2004515554.tif 000014
ＴＨＦ（３５ｍＬ）における４（３０３．２ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ、３．４６ｍＬ、３．４６ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおいて１Ｍ）を０℃で添加し、そして得られる溶液を４０分間撹拌した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）における６の溶液を上記の混合物に徐々に添加し、その後０℃で２０分間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ（２Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して未精製混合物を与えた。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（４０／６０）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、赤色固体１．２０ｇ（７３．２％）として表題中間体を与えた。
【００２７】
（ステップＨ：２，３−エチレンジオキシ−６−ベンジルオキシメチル−９−ベンジルオキシ−１２−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（８）の調製）
【化１９】
2004515554.tif 000015
ＤＭＦ（２８ｍＬ）における８（５５０ｍｇ、０．４８５ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）（３３８．５ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）を添加し、そして８０℃で１時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（２８０ｍＬ）で希釈し、そしてＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブライン（１５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３×１２０ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体として４０４ｍｇ（７３．６％）を与えた。
【００２８】
（ステップＩ：２，３−エチレンジオキシ−６−ヒドロキシメチル−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（９）の調製）
【化２０】
2004515554.tif 000016
ＨＯＡｃ（２５ｍＬ）における８（１４０ｍｇ、０．１２３６ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化パラジウム［Ｐｄ（ＯＨ）２、１４０ｍｇ］を添加した。この反応物を周囲温度で６３時間、水素雰囲気下（５０ｐｓｉ）で振盪した。この混合物をＡｃｒｏｄｉｓｃシリンジフィルターを通じて濾過し、そして真空中で濃縮して未精製固体を与えた。ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュクロマトグラフィーは、黄色固体として４２．０ｍｇ（５７．５％）を与えた。
【００２９】
（ステップＪ：２，３−エチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉａ）の合成）
【化２１】
2004515554.tif 000017
ＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）における９（５．０ｍｇ、０．００８４５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＨ４ＯＨ（１．５ｍＬ）を添加した。この混合物を周囲温度で３時間撹拌し、次いで真空中で濃縮して未精製固体を与えた。ＭｅＯＨ／ヘキサン／ＣＨＣｌ３を用いた再結晶化は、黄色固体として４．３ｍｇ（９０．５％）を与えた。
【００３０】
（実施例２）
（２，３−メチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉｂ）の合成）
（１６頁上）
【化２２】
2004515554.tif 000018
（ステップＡ：３，４−メチレンジオキシトルエン（１０）の調製）
【化２３】
2004515554.tif 000019
ＣＨ２Ｃｌ２（４０．０ｍＬ）における４−メチルカテコール（２６．０ｇ、２０９．４ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（１８．４ｇ、４６１．０ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素下で２時間１００℃まで加熱した。この溶液を周囲温度まで冷却し、そして酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈した。この混合物をＮａＨＣＯ３（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２×２００ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して粗油状物を与えた。エーテル／ヘキサン（１：１）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュクロマトグラフィーは、無色油２０．５ｇ（７１．９％）として表題中間体を与えた。
【００３１】
（ステップＢ：２−ニトロ−４，５−メチレンジオキシトルエン（１１）の調製）
【化２４】
2004515554.tif 000020
酢酸（１８０ｍＬ）における１０（１９．０ｇ、１３９．６ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸（７０ｍＬ）における発煙性ＨＮＯ３（１０ｍＬ）の溶液を３０分間にわたって滴下によって添加した。この混合物を周囲温度で１０分間撹拌し、次いで氷を含むビーカーに注いで結晶性沈殿物を与え、この沈殿物を真空濾過によって収集し、そして水で洗浄して未精製生成物を与えた。ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンからの再結晶を介したさらなる精製は純粋な生成物（１６．３ｇ、６４．４％）を与えた。
【００３２】
（ステップＣ：（Ｅ）−４，５−メチレンジオキシ−２−ニトロ−１−ピロリジノスチレン（１２）の調製）
【化２５】
2004515554.tif 000021
１１（１５．７ｇ、８６．７４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１５．５ｇ、１３０．１ｍｍｏｌ）およびピロリジン（９．２５ｇ、１３０．１ｍｍｏｌ）の溶液を１１０℃まで加熱し、そして窒素下で３時間撹拌した。この反応混合物を冷却し、そして無水メタノールおよびエタノール（１：１；２５０ｍＬ）の混合物を添加した。この生成物は鮮赤固体として結晶化した。吸引濾過による回収は生成物（１６．２ｇ、７１．４％）を与えた。
【００３３】
（ステップＤ：５，６−メチレンジオキシインドール（１３）の調製）
【化２６】
2004515554.tif 000022
メタノールおよびＴＨＦ（２００ｍＬ、１：１）における１２（１５．７ｇ、５９．９２ｍｍｏｌ）の溶液に、ラネーニッケル（１．５ｍＬ）およびヒドラジン一水和物（３×２．５６ｍＬ、２４０ｍｍｏｌ）を３等分で窒素下、周囲温度で３０分毎に添加した。次いでこの溶液を４５℃で２時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、そして触媒をセライト床を通じた濾過によって除去し、次いで塩化メチレンで３回洗浄した。この濾液を蒸発させ、そしてこの残渣をトルエン（１００ｍＬ）を用いた共沸によって乾燥して粗油状物を与えた。酢酸エチル／ヘキサン（３０／７０％）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、オフホワイトの固体（５．１ｇ、５２．９％）として表題中間体を与えた。
【００３４】
（ステップＥ：２−（４，５−メチレンジオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−３−［５−ベンジルオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（１４）の調製）
【化２７】
2004515554.tif 000023
ＴＨＦ（３５．０ｍＬ）における１３（２７９．０ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ、３．４６ｍＬ、３．４６ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおいて１Ｍ）を０℃で添加し、そして４０分間撹拌した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）における６の溶液を上記の混合物に徐々に添加し、その後０℃で２０分間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して未精製混合物を与えた。酢酸エチル／ヘキサン（４０／６０％）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、赤色固体０．７３ｇ（４５．３％）として表題中間体を与えた。
【００３５】
（ステップＦ：２，３−メチレンジオキシ−６−ベンジルオキシメチル−９−ベンジルオキシ−１２−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（１５）の調製）
【化２８】
2004515554.tif 000024
ＤＭＦ（３６ｍＬ）における１４（６５０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）（４０５ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応物を８０℃で１時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、そしてＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブライン（１５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、黄色固体として２４８ｍｇ（３８．２％）を与えた。
【００３６】
（ステップＧ：２，３−メチレンジオキシ−６−ヒドロキシメチル−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（１６）の調製）
【化２９】
2004515554.tif 000025
ＨＯＡｃ（１０ｍＬ）における１５（１５０ｍｇ、０．１３４１ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化パラジウム（１５０ｍｇ）を添加した。この反応物を周囲温度で６０時間、Ｈ２雰囲気下（５０ｐｓｉ）で振盪した。この混合物をＡｃｒｏｄｉｓｃシリンジフィルターを通じて濾過し、そして真空中で濃縮して未精製固体を与えた。ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、黄色固体として５６．２ｍｇ（７６．７％）を与えた。
【００３７】
（２，３−メチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉｂ）の合成）
【化３０】
2004515554.tif 000026
ＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）における１６（３０．０ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＨ４ＯＨ（４．０ｍＬ）を添加した。この混合物を周囲温度で３時間撹拌し、次いで真空中で濃縮して未精製固体を与えた。ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、黄色固体として２６．１ｍｇ（９１．１％）を与えた。
【００３８】
（実施例３）
（２，３−イソプロピレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１３−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉｃ）の合成）
【化３１】
2004515554.tif 000027
（ステップＡ：４−メチル−２’，２’−ジメチル−１，３−ベンゾジオキソール（１７）の調製）
【化３２】
2004515554.tif 000028
アセトン（２００ｍＬ）およびトルエン（２００ｍＬ）における４−メチルカテコール（７５．０ｇ、６０４．２ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）、五酸化リン（８５．８ｇ、３０２．３ｍｍｏｌ）の混合物を窒素下で５０時間還流した。この溶液を周囲温度まで冷却し、そしてエーテル（５００ｍＬ）で希釈した。この混合物を２Ｍ  ＮａＯＨ（２×２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２×２００ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して粗油状物を与えた。エーテル／ヘキサン（１：１）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュクロマトグラフィーは、無色油（８２．０ｇ、８２．７％）として表題中間体を与えた。
【００３９】
（ステップＢ：４−メチル−５−ニトロ−２’，２’ジメチル−１，３−ベンゾジオキソール（１８）の調製）
【化３３】
2004515554.tif 000029
ＨＯＡｃ（４５０ｍＬ）における１７（６５．０ｇ、３９５．９ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸（１００ｍＬ）における発煙性ＨＮＯ３（３５ｍＬ）の溶液を３０分間にわたって添加した。この混合物を周囲温度で１０分間撹拌し、次いで氷を含むビーカーに注いで結晶性沈殿物を与え、この沈殿物を真空濾過によって収集し、そして水で洗浄して未精製生成物（７７．１ｇ、９３．８％）を与えた。
【００４０】
（ステップＣ：（Ｅ）−４，５−（イソプロピレンジオキシ）−２−ニトロ−１−ピロリジノスチレン（１９）の調製）
【化３４】
2004515554.tif 000030
１８（４５ｇ、２１５．１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（３８．４５ｇ、３２２．７ｍｍｏｌ）およびピロリジン（２２．９５ｇ、３２２．７ｍｍｏｌ）の溶液を１１０℃まで加熱し、そして窒素下で１６時間撹拌した。この反応混合物を冷却し、そして無水メタノールおよびエタノール（１：１；６００ｍＬ）の混合物を添加した。この生成物は鮮赤固体として結晶化した。吸引濾過による回収は生成物（５１．０ｇ、８１．５％）を与えた。
【００４１】
（ステップＤ：５，６−（イソプロピレンジオキシ）インドール（２０）の調製）
【化３５】
2004515554.tif 000031
メタノールおよびＴＨＦ（４００ｍＬ、１：１）における１９（５０．０ｇ、１７１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ラネーニッケル（４．０ｍＬ）およびヒドラジン一水和物（３×７．１３ｍＬ、６８６．６ｍｍｏｌ）を３等分で窒素下、周囲温度で３０分毎に添加した。この溶液を４５℃で２時間加熱した。この混合物を室温まで冷却し、そして触媒をセライト床を通じた濾過によって除去し、次いで塩化メチレンで３回洗浄した。この濾液を蒸発させ、そしてこの残渣をトルエン（１００ｍＬ）を用いた共沸によって乾燥して粗油状物を与えた。酢酸エチル／ヘキサン（３０／７０％）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、オフホワイトの固体として表題中間体を与え、これをベンゼン／石油エーテル（２：８）を用いた再結晶を介してさらに精製して、純粋な生成物（１５．１ｇ、４６．２％）を与えた。
【００４２】
（ステップＥ：３−［（４，５−イソプロピレンジオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）］−４−［５−ベンジルオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（２１）の調製）
【化３６】
2004515554.tif 000032
ＴＨＦ（１５０ｍＬ）における２０（２．２７ｍｇ、１２．０２ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ、１２．０２ｍＬ、１２．０２ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおいて１Ｍ）を０℃で添加し、そしてこの溶液を４０分間撹拌した。ＴＨＦ（５０ｍＬ）における６（５．０ｇ、４．８１ｍｍｏｌ）の溶液を上記の混合物に徐々に添加し、その後０℃で２０分間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して未精製混合物を与えた。酢酸エチル／ヘキサン（４０／６０％）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、赤色固体（３．０２ｇ、５４．７１％）として表題中間体を与えた。
【００４３】
（ステップＦ：２，３−イソプロピレンジオキシ−６−ベンジルオキシメチル−９−ベンジルオキシ−１２−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（２２）の調製）
【化３７】
2004515554.tif 000033
ＤＭＦ（８５ｍＬ）における２１（１．６０ｇ、１．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）（６５７ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を８０℃で２時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、そしてＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブライン（１５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、黄色固体として１．０２ｇ（６３．７％）を与えた。
【００４４】
（ステップＧ：２，３−イソプロピレンジオキシ−６−ヒドロキシメチル−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（２３）の調製）
【化３８】
2004515554.tif 000034
ＨＯＡｃ（１２ｍＬ）における２２（２８０ｍｇ、０．２４４ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化パラジウム（１００ｍｇ）を添加した。この反応物を周囲温度で６０時間、Ｈ２雰囲気下（５０ｐｓｉ）で振盪した。この混合物をＡｃｒｏｄｉｓｃシリンジフィルターを通じて濾過し、そして真空中で濃縮して未精製固体を与えた。ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、黄色固体として１３５ｍｇ（９１．４％）を与えた。
【００４５】
（ステップＨ：２，３−イソプロピレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉｃ）の合成）
【化３９】
2004515554.tif 000035
ＭｅＯＨ（７．０ｍＬ）における２３（１００．０ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＨ４ＯＨ（６．０ｍＬ）を添加した。この混合物を周囲温度で２時間撹拌し、次いで真空中で濃縮して未精製固体を与えた。ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、黄色固体として８１．０ｍｇ（８５．３％）を与えた。
【００４６】
（実施例４）
（２，３−ジメトキシ−９−ヒドロキシ−１３−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉｄ）の合成）
【化４０】
2004515554.tif 000036
（ステップＡ：３−［（４，５−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）］−４−［５−ベンジルオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（２４）の調製）
【化４１】
2004515554.tif 000037
ＴＨＦ（５０ｍＬ）における５，６−ジメトキシインドール（４４１ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ、４．９８ｍＬ、４．９８ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおいて１Ｍ）を０℃で添加し、そしてこの溶液を４０分間撹拌した。ＴＨＦ（３０ｍＬ）における６（２．２５ｇ、２．１６ｍｍｏｌ）の溶液を上記の混合物に徐々に添加し、その後０℃で２０分間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して未精製混合物を与えた。酢酸エチル／ヘキサン（６０／４０％）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、赤色固体（２．７９ｇ、９８．６％）として表題中間体を与えた。
【００４７】
（ステップＢ：２，３−ジメトキシ−６−ベンジルオキシメチル−９−ベンジルオキシ−１２−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（２５）の調製）
【化４２】
2004515554.tif 000038
ＤＭＦ（６０ｍＬ）における２４（１．５０ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）（９２３ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を８０℃で２時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、そしてＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブライン（１５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーは、黄色固体として７６９ｍｇ（５１．４％）を与えた。
【００４８】
（ステップＣ：２，３−イソプロピレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（Ｉｄ）の合成）
【化４３】
2004515554.tif 000039
ＨＯＡｃ（２５ｍＬ）における２５（６００ｍｇ、０．５２９ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化パラジウム（６００ｍｇ）を添加した。この反応物を周囲温度で６０時間、ＰａｒｒシェーカーにおいてＨ２雰囲気下（５０ｐｓｉ）で振盪した。この溶液をＡｃｒｏｄｉｓｃシリンジフィルターを通じて濾過し、そして真空中で濃縮して固体を与えた。この固体をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）および水性ＮＨ４ＯＨ（５０ｍＬ）に溶解した。この混合物を周囲温度で１．５時間撹拌し、次いで真空中で濃縮して未精製生成物を与えた。ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体として１６６ｍｇ（６０．０％）の所望の生成物を与えた。
【００４９】
（実施例５）
（２，３−エチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１３−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（ＩＩａ）の合成）
【化４４】
2004515554.tif 000040
（ステップＡ：  ３−ブロモ−４−（４，５−エチレンジオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（２６）の調製）
【化４５】
2004515554.tif 000041
ベンゼン（１００ｍＬ）における４（２．１ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化メチルマグネシウム（４．４ｍＬ、１３．１９ｍｍｏｌ、エーテルにおいて３Ｍ）を０℃で添加した。１時間の撹拌後、ベンゼン（３０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）におけるＮ−ベンジルオキシメチル−３，４−ジブロモマレイミド（４．５ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）の溶液を徐々に添加した。この反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで１時間室温まで温めた。この混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣＬ（１００ｍＬ、０．３Ｍ）、ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：２）に対するヘキサン勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体（２．８３ｇ、５０．５％）として表題中間体を与えた。
【００５０】
（ステップＢ：３−ブロモ−４−［４，５−エチレンジオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（２７）の調製）
【化４６】
2004515554.tif 000042
−７８℃でのＴＨＦ（１５０ｍＬ）における２６（２．７ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）、２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノース（９．３３ｇ、１７．２６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４．５３ｇ、１７．２６ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシラート（ＤＩＡＤ）（３．４ｍＬ、１７．２６ｍｍｏｌ）を滴下によって添加した。撹拌を−７８℃で３時間継続し、次いでこの溶液を氷水浴の助けによって０℃まで温め、そして撹拌を２時間継続した。この混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣＬ、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。トルエン／ＥｔＯＡｃ（２５：１）に対するトルエン勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体３．１５ｇ（５５．３％）として表題中間体を与えた。
【００５１】
（ステップＣ：３−（５−ベンジルオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［４，５−エチレンジオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（２８）の調製）
【化４７】
2004515554.tif 000043
ＴＨＦ（７０．０ｍＬ）における５−ベンジルオキシインドール（１．５２ｇ、６．８ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ、６．８ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおいて１Ｍ）を０℃で添加し、そしてこの溶液を３０分間撹拌した。ＴＨＦ（８０ｍＬ）における２７の溶液を上記の混合物に徐々に添加し、その後０℃で３０分間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して未精製生成物を与えた。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２：３）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、赤色固体１．６２ｇ（５２．６％）として表題中間体を与えた。
【００５２】
（ステップＤ：２，３−エチレンジオキシ−６−ベンジルオキシメチル−９−ベンジルオキシ−１３−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（２９）の調製）
【化４８】
2004515554.tif 000044
ＤＭＦ（５０ｍＬ）における２８（１．０ｇ、０．８８２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）（６１５．４ｍｇ、１．８５ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を８０℃で１時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブライン（１５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体として４７１．０ｇ（４７．２％）の所望の生成物を与えた。
【００５３】
（ステップＥ：２，３−エチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１３−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（ＩＩａ）の合成）
【化４９】
2004515554.tif 000045
ＨＯＡｃ（１２ｍＬ）における２９（３５０ｍｇ、０．３０９ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化パラジウム（３５０ｍｇ）を添加した。この反応物を周囲温度で６２時間、ＰａｒｒシェーカーにおいてＨ２雰囲気下（５０ｐｓｉ）で振盪した。この溶液をＡｃｒｏｄｉｓｃシリンジフィルターを通じて濾過し、そして真空中で濃縮して固体を与えた。この固体をＭｅＯＨ（２００ｍＬ）および水性ＮＨ４ＯＨ（１０ｍＬ）に溶解した。この混合物を周囲温度で３時間撹拌し、次いで真空中で濃縮して未精製生成物を与えた。ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体として１６４ｍｇ（９４．５％）の所望の生成物を与えた。
【００５４】
（実施例６）
（２，３−メチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１３−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（ＩＩｂ）の合成）
【化５０】
2004515554.tif 000046
（ステップＡ：  ３−ブロモ−４−（５，６−メチレンジオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（３０）の調製）
【化５１】
2004515554.tif 000047
ベンゼン（１００ｍＬ）における１３（２．７ｇ、１６．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化メチルマグネシウム（６．１４ｍＬ、１８．４２ｍｍｏｌ、エーテルにおいて３Ｍ）を０℃で添加した。この溶液を１時間撹拌し、次いでベンゼン（３０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）におけるＮ−ベンジルオキシメチル−３，４−ジブロモマレイミド（６．２８ｇ、１６．７５ｍｍｏｌ）の溶液を徐々に添加した。この反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで室温まで温め、そして１時間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣＬ（１００ｍＬ、０．３Ｍ）、ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＭｅＯＨを用いた粗油状物の結晶化は、黄色固体（２．９２ｇ、３８．２％）として表題中間体を与えた。
【００５５】
（ステップＢ：３−ブロモ−４−［５，６−メチレンジオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（３１）の調製）
【化５２】
2004515554.tif 000048
−７８℃でのＴＨＦ（１５０ｍＬ）における３０（２．３ｇ、５．０５ｍｍｏｌ）、２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノース（８．２ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４．０ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシラート（ＤＩＡＤ）（２．９８ｍＬ、１５．２ｍｍｏｌ）を滴下によって添加した。この溶液を−７８℃で３時間撹拌し、次いで０℃まで温め、そしてさらに２時間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。トルエン／ＥｔＯＡｃ（２５：１）に対するトルエン勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体３．０５ｇ（６１．８％）として表題中間体を与えた。
【００５６】
（ステップＣ：３−（５−ベンジルオキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［５，６−メチレンジオキシ−１−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−１Ｈ−インドール−３−イル］−Ｎ−ベンジルオキシメチルマレイミド（３２）の調製）
【化５３】
2004515554.tif 000049
ＴＨＦ（３５ｍＬ）における５−ベンジルオキシインドール（８２２．０ｍｇ、３．６８ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ、３．６８ｍＬ、３．６８ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおいて１Ｍ）を０℃で添加し、そしてこの得られる溶液を４０分間撹拌した。ＴＨＦ（２０ｍＬ）における３１の溶液を上記の混合物に徐々に添加し、その後０℃で２０分間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブラインおよびＨ２Ｏで洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮して未精製生成物を与えた。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２：３）に対するヘキサン（１００％）勾配を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、赤色固体（１．５６ｇ、９１．２％）として表題中間体を与えた。
【００５７】
（ステップＤ：２，３−メチレンジオキシ−６−ベンジルオキシメチル−９−ベンジルオキシ−１３−（２，３，４，５−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（３３）の調製）
【化５４】
2004515554.tif 000050
ＤＭＦ（７５ｍＬ）における３２（１．４５ｇ、１．２９４ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）（９０４ｍｇ、２．７２ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの溶液を８０℃で１時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、そしてＥｔＯＡｃ（３５０ｍＬ）で希釈し、次いでＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ３、ブラインおよびＨ２Ｏ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、そして濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体として１．０５ｇ（７２．６％）の所望の生成物を与えた。
【００５８】
（ステップＥ：２，３−メチレンジオキシ−９−ヒドロキシ−１３−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン（ＩＩｂ）の合成）
【化５５】
2004515554.tif 000051
ＨＯＡｃ（１４ｍＬ）における３３（３００ｍｇ、０．２６８ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化パラジウム（３００ｍｇ）を添加した。この反応物を周囲温度で６０時間、ＰａｒｒシェーカーにおいてＨ２雰囲気下（５０ｐｓｉ）で振盪した。この溶液をＡｃｒｏｄｉｓｃシリンジフィルターを通じて濾過し、そして真空中で濃縮して固体として未精製生成物を与えた。この固体をＭｅＯＨ（２０．０ｍＬ）および水性ＮＨ４ＯＨ（３０．０ｍＬ）に溶解し、周囲温度で２時間撹拌し、次いで真空中で濃縮して未精製生成物を与えた。ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ／ＥｔＯＡｃ（１２／１／８７）を用いて溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーは、黄色固体として９２．０ｍｇ（６２．７％）を与えた。
【００５９】
（実施例７）
（以下の一般式：
【化５６】
2004515554.tif 000052
を有する化合物の合成のための代表的な実験手順）
ＤＭＦ（１．８ｍＬ）における無水物ＹＰＸ−２−２１（３２ｍｇ、０．０５８３４ｍｍｏｌ）の溶液に、適切なヒドラジドまたはアミン［０．５８３４ｍｍｏｌ］（表１を参照のこと）を添加した。この反応物を９５℃で２時間窒素雰囲気下に配置した。この混合物を水（１２ｍＬ）で希釈し、そして０℃で２時間撹拌した。この沈殿物を濾過し、そして水およびエチルエーテルで洗浄して生成物を得た（収率については表１を参照のこと）。
【００６０】
【表１】
2004515554.tif 000053
（実施例８）
（生物学的評価）
ａ．）トポイソメラーゼＩ活性。反応緩衝液（１０．３μＬ  Ｈ２Ｏ、２．０μＬ  １０×緩衝液、１．５μＬ  １００μＭ  ＭｇＣｌ２および３．２μＬ  ５００ｍＭ  ＫＣｌ）を調製し、そして氷上で維持した。１０×緩衝液を、２ｍＬ  ２Ｍ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、１５．３μＬ  １０％  ＤＴＴ、１００μＬ  ０．５Ｍ  ＥＤＴＡ、７５μＬ  ２０ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡおよび７．９３５μＬ  Ｈ２Ｏの混合によって調製した。試験毒物を、最終インキュベーション混合物が５％  ＤＭＳＯであるような濃度でＤＭＳＯにおいて調製した。ＤＮＡ混合物を、５５ｍＬのｐＨＯＴ１  ＤＮＡ溶液（０．２５μｇ／μＬ）を７１５μＬ  反応緩衝液で溶解することによって調製した。トポＩ混合物を、１４μＬのトポＩ溶液（２単位／μＬ）を２６６μＬの反応緩衝液と混合することによって調製した。プロテイナーゼＫ溶液を、１％  ＳＤＳにおいて１０ｍｇ／ｍＬとして新たに調製した。ゲルローディング緩衝液を、１ｍｇ  ブロモフェノールブルーを１００μＬ  Ｈ２Ｏに溶解することによって調製し、次いで９００μＬ  ５０％グリセロールを添加した。トポテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）および３，９−ジヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン１１（ＡＬＳ−００７）をポジティブコントロールとして使用した。
【００６１】
このアッセイを以下の通りに行った。ＤＮＡ混合物（１４μＬ）を、１μＬの試験毒物溶液を含むサンプルチューブに添加し、そして氷上で保存した。次に、５μＬのトポＩ混合物を添加し、この溶液をピペッターで混合し、次いで３７℃の水浴において３０分間穏やかにゆすりながらインキュベートした。この反応物を、２μＬのプロテイナーゼＫ溶液の添加を介して停止し、そしてインキュベーションをさらに３０分間継続し、次いで氷上に配置した。２．２μＬの５Ｍ  ＮａＣｌおよび７５μＬのＥｔＯＨをチューブに添加し、このチューブを簡単にボルテックス（ｖｏｒｔｅｘ）し、次いでドライアイス上に１時間配置した。このＤＮＡを、４℃で１０分間の１６，０００×ｇでの遠心分離によってペレット化した。ＥｔＯＨを、ゲルローディングピペットチップを用いて各々のチューブから除去し、そしてこのＤＮＡペレットを、１８μＬの反応緩衝液および２μＬのゲルローディング緩衝液に再懸濁した。このサンプルを簡単にボルテックスし、次いで微小遠心分離機において１５秒間回転させて、すべての液体をチューブの底に落とした。このサンプルを、２μｇ／ｍＬ  クロロキンを含む１×ＴＢＥを用いて作製される１％アガロースゲル上にロードした。このゲルを、１×ＴＢＥにおいて３５Ｖで１５時間流した。ゲルを、１×ＴＢＥにおける０．５μｇ／ｍＬ  臭化エチジウムで１時間染色し、次いでＨ２Ｏにおいて３０分間脱色した。ゲルをデジタルカメラで撮影し、そしてこのデジタル化画像を、ＮＩＨソフトウェアを用いて分析した。ＩＣ５０値を、超らせんＤＮＡバンド密度（トポＩ混合物の代わりに５μＬ  反応緩衝液を含むネガティブコントロール）を試験サンプルに残留する超らせんＤＮＡバンドと比較することによって決定した。
【００６２】
【表２】
2004515554.tif 000054
ｂ．）インビトロ細胞傷害性アッセイ。９６ウェル組織培養クラスタープレートを、１００μＬの細胞懸濁液（５×１０３細胞／ｍＬ）で播種し、そして細胞足場および順化のために一晩インキュベートした。細胞を、１０％  ウシ胎仔血清、２ｍＭ  Ｌ−グルタミンおよび重炭酸ナトリウムを含むＲＰＭＩ  １６４０またはＤＭＥＭ（完全培地）において無菌条件下で増殖させ、そして３７℃でインキュベートした。この試験化合物をＤＭＳＯにおいて調製し、次いで完全培地で希釈した。８つの濃度範囲を細胞傷害性を確立するために各々の試験薬物について使用し、各々の濃度について８回反復した。すべての投薬をＢｉｏｍｅｋ  ２０００自動操縦液体ハンドラーを用いて行った。このプレートを５％  ＣＯ２および９５％  相対湿度で３７℃でインキュベートした。このデータを、処理の開始後にＭＴＳアッセイを用いて３〜５日間（細胞系統の増殖速度に依存する）、細胞傷害性について分析した。ＭＴＳ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム）は、生存可能細胞によって可溶性ホルマザンに生還元（ｂｉｏ−ｒｅｄｕｃｅｄ）され、このホルマザンは、生存可能細胞の簡便な分光光度計測定を可能にする４９０ｎｍで吸収する。トポテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）および３，９−ジヒドロキシ−１２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−６，７，１２，１３−テトラヒドロインドロ［２，３−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５，７−ジオン１１（ＡＬＳ−００７）をポジティブコントロールとして使用した。
【００６３】
ｃ．）ＭＴＳアッセイ。４０μｌのＭＴＳ／ＰＥＳ溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから購入）を各々のウェルに添加し、そして１〜４時間インキュベートした。各々の単一層におけるホルマザンの吸光度を、Ｃｏｕｌｔｅｒマイクロプレートリーダー上で４９０ｎｍで測定した。このデータをスプレッドシートプログラムにおいて処理して、ＩＣ５０の決定を可能にする用量反応曲線を提供した。
【００６４】
【表３】
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表２における結果によって例示されるように、並列比較において、本発明に開示される化合物は、ヒトトポＩに対してコントロール化合物であるトポテカン（臨床使用されるトポＩ毒物／抗腫瘍因子）およびＡＬＳ−００７（以前に開示される１１実験的インドロカルバゾール）よりも強い毒作用効果を提供する。さらに並列比較において、本発明に開示される化合物は、２つのコントロール化合物と同様に、一連の３つのヒト腫瘍細胞系統に対してインビトロ細胞傷害性プロフィールを示す（表２）。
（引用）
（１）Ｃｈａｍｐｏｕｘ，Ｊ．Ｊ．  Ａｄｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４、２９Ａ、７１〜８２
（２）Ｒｅｄｉｎｂｏ，Ｍ．Ｒ．；Ｓｔｅｗａｒｔ，Ｌ．；Ｋｕｈｎ，Ｐ．；Ｃｈａｍｐｏｕｘ，Ｊ．Ｊ．；Ｈｏｌ，Ｗ．Ｇ．Ｊ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９８、２７９、１５０４〜１５１３
（３）Ｐｏｍｍｉｅｒ，Ｙ．；Ｔａｎｉｚａｗａ，Ａ．；Ｋｏｈｎ，Ｋ．Ｗ．  Ａｄｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９４、２９Ｂ、７３〜９２
（４）Ｋｏｊｉｒｉ，Ｋ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｈ．；Ａｒａｋａｗａ，Ｈ．；Ｏｈｋｕｂｏ，Ｍ．；Ｓｕｄａ，Ｈ．米国特許第５，５９１，８４２号、１９９７年１月７日
（５）Ｋｏｊｉｒｉ，Ｋ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｈ．；Ａｒａｋａｗａ，Ｈ．；Ｏｈｋｕｂｏ，Ｍ．；Ｓｕｄａ，Ｈ．米国特許第５，９２２，８６０号、１９９９年７月１３日
（６）Ｋｏｊｉｒｉ，Ｋ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｈ．；Ａｒａｋａｗａ，Ｈ．；Ｏｈｋｕｂｏ，Ｍ．；Ｓｕｄａ，Ｈ．米国特許第５，６６８，２７１号、１９９７年９月１６日
（７）Ｋｏｊｉｒｉ，Ｋ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｈ．；Ａｒａｋａｗａ，Ｈ．；Ｏｈｋｕｂｏ，Ｍ．；Ｓｕｄａ，Ｈ．米国特許第５，８０４，５６４号、１９９８年９月８日
（８）Ａｒａｋａｗａ，Ｈ．；Ｉｇｕｃｈｉ，Ｔ．；Ｙｏｓｈｉｎａｒｉ，Ｋ．；Ｋｏｊｉｒｉ，Ｋ．；Ｓｕｄａ，Ｈ．；Ｏｋｕｒａ，Ａ．  Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９３、８４、５７４〜５８１
（９）Ａｒａｋａｗａ，Ｈ．；Ｔｏｍｏｋｏ，Ｉ．；Ｍａｓａｓｈｉ，Ｍ．；Ｙｏｓｈｉｎａｒｉ，Ｔ．；Ｋａｔｓｕｈｉｓａ，Ｋ．；Ｈｉｒｏｙｕｋｉ，Ｓ．；Ｏｋｕｒａ，Ａ．；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｓ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９５、５５、１３１６〜１３２０
（１０）Ｙｏｓｈｉｎａｒｉ，Ｔ．；Ｏｈｋｕｂｏ，Ｍ．；Ｆｕｋａｓａｗａ，Ｋ．；Ｅｇａｓｈｉｒａ，Ｓ．；Ｈａｒａ，Ｙ．；Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ，Ｍ．；Ｎａｋａｉ，Ｋ．；Ａｒａｋａｗａ，Ｈ．；Ｍｏｒｉｓｈｉｍａ，Ｈ．；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｓ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９９、５９、４２７１〜４２７５
（１１）Ｚｅｍｂｏｗｅｒ，Ｄ．Ｅ．；Ｚｈａｎｇ，Ｈ．；Ｌｉｎｅｓｗａｌａ，Ｊ．Ｐ．；Ｋｕｆｆｅｌ，Ｍ．Ｊ．；Ａｙｔｅｓ，Ｓ．Ａ．；Ａｍｅｓ，Ｍ．Ｍ．  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１９９９、９、１４５〜１５０
（１２）Ｂａｔｃｈｏ，Ａ．Ｄ．；Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，Ｗ．  Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｌｌ．第ＶＩＩ巻  １９９０、３４〜４１
（１３）Ｋａｎｅｋｏ，Ｔ．；Ｗｏｎｇ，Ｈ．；Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｋ．Ｔ．；Ｃｌａｒｄｙ，Ｊ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９８５、２６、４０１５〜４０１８
（１４）Ｏｈｋｕｂｏ，Ｍ．；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｔ．；Ｊｏｎａ，Ｈ．；Ｈｏｎｍａ，Ｔ．；Ｉｔｏ，Ｓ．；Ｍｏｒｉｓｈｉｍａ，Ｈ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９７、５３、５９３７〜５９５０
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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