(57)【要約】衣類に生息するコイガ（Tineola bisselliella）（Ｈｕｍｍｅｌ）（麟翅目：ヒロズコガ科）の行動を操作するための組成物および方法に関する。より詳細には、本発明は、コイガの行動を操作するための特定の情報化学物質および音声信号の使用に関する。コイガの行動を操作するための化学物質組成物は、１）（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール、２）（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール、３）ヘキサデカノン酸メチルエステル、４）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、５）ノナナール、６）ゲラニルアセトン、７）オクタナール、８）デカナール、９）ノネナール、１０）オクテナール、および１１）デセナールのうちから選択される２種以上の化学物質を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
コイガ(Tineola bisselliella)の行動を操作するための化学物質組成物であって、１）（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール、２）（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール、３）ヘキサデカノン酸メチルエステル、４）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、５）ノナナール、６）ゲラニルアセトン、７）オクタナール、８）デカナール、９）ノネナール、１０）オクテナール、および１１）デセナールのうちから選択される２種以上の化学物質を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む化学物質組成物。
【請求項２】
コイガ(Tineola bisselliella)の行動を操作するための音声信号であって、１）５０＋／−１０Ｈｚ、２）１１０＋／−２０Ｈｚ、３）７０＋／−１０Ｈｚ、４）１４０＋／−１０Ｈｚ、５）１６５＋／−３０Ｈｚ、６）２２０＋／−４０Ｈｚ、および７）２８０＋／−４０Ｈｚのうちから選択される１個以上の周波数を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む音声信号。
【請求項３】
コイガ(Tineola bisselliella)の行動を操作するための化学物質と音声信号との組み合わせであって、１）（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール、２）（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール、３）ヘキサデカノン酸メチルエステル、４）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、５）ノナナール、６）ゲラニルアセトン、７）オクタナール、８）デカナール、９）ノネナール、１０）オクテナール、および１１）デセナールのうちから選択される２種以上の化学物質を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む組成物と、１）５０＋／−１０Ｈｚ、２）１１０＋／−２０Ｈｚ、３）７０＋／−１０Ｈｚ、４）１４０＋／−１０Ｈｚ、５）１６５＋／−３０Ｈｚ、６）２２０＋／−４０Ｈｚ、および７）２８０＋／−４０Ｈｚのうちから選択される１個以上の周波数を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む音声信号とを備えた組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、衣類に生息するコイガ（Tineola bisselliella)）（Ｈｕｍｍｅｌ）（麟翅目：ヒロズコガ科）の行動を操作するための組成物および方法に関する。より詳細には、本発明は、コイガの行動を操作するための、特定の情報化学物質および音声信号の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
衣類に生息するコイガ（麟翅目：ヒロズコガ科）は、世界中の家屋、繊維および毛皮の倉庫、ならびに博物館内に侵入して損害を与えている。温帯地域において、この損害は経済的に重大であり、北アメリカにおいては毎年何百万ドルもの損害が生じている。
【０００３】
コイガは、直射日光の照射しない、十分に保護された鳥類の巣、乾燥した死体、獣類の巣に生息する。コイガの成虫は、痕跡口器（vestigial  mouthpart）を有し、損害を与えないが、幼虫は、年中、角質を含む木製品、毛髪、毛皮、および他の動物由来の製品、例えば衣類、敷物、調度品等を食害する。実験により、合成繊維もまたコイガによる被害を受けることが明らかになった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
コイガの幼虫の繁殖を抑制または防止する際には、殺虫剤が使用される。コイガの幼虫を物理的に駆除するには、潜在的なコイガの幼虫の繁殖場所の真空化、冷却および加熱の反復、または清浄がある。コイガの駆除に、天然産出の化学物質を使用することが近年益々好まれている。このような化学物質には、摂食阻害物質、防虫剤、植物由来の殺虫剤等がある。しかし、コイガの幼虫の初期繁殖を探知する適切な方法は知られていない。
【０００５】
コイガをその幼虫の生育場所へ誘引するための情報化学物質（メッセージ保有化学物質）と、コイガ種内の性的交信信号についての研究は、現在まで殆ど為されていない。コイガの幼虫および成虫は、魚粉、魚油、乾燥肉類に誘引される。コイガの雌は、雌の体内の刺激物質または揮発性物質に基づいて産卵場所を選択する。Ｅ２，Ｚ１３−オクタデカジエナールおよびＥ２−オクタデセナールは、コイガの性フェロモン成分であることが報告されている。しかし、これらの化合物の誘引力は弱いために、コイガの駆除において確実なものではない。
【０００６】
T.bisselliella（衣類に生息するコイガの科学的種名）をキーワードとする多数の特許が、特許データベースに列挙されている。これらの殆どは殺虫剤に関するものであり、コイガを含む昆虫類を、活性成分によって殺傷することが報告されている。これらの活性成分は、本特許出願にて報告する誘引性を有する情報化学物質とは非常に異なるものである。例えば、米国特許第４，４８４，３１５号「超音波害虫駆除装置（Ultrasonic Pest Control Device）」、または米国特許第４，６１６，３５１号「害虫駆除装置（Pest Control Apparatus)」等の別の特許は、害虫駆除装置に関する。これらの特許において、コイガを含む害虫の駆除に超音波を使用することが報告されている。本特許出願では、コイガの誘引および駆除に必要な超音波周波数は、可聴低周波帯内に属する。その他の特許は、角質を食べるコイガを含む害虫を忌避する化学物質に関するものである。ジフェニルウレアおよび合成ピレスロイドの一種（米国特許第５，０５７，５３９号）、イソボルネオール（米国特許第４，８４５，１３１号）、ピリジルオキシトリフロロメタンスルホンアニリド（米国特許第４，７３１，０９０号）、５−ピリジルオキシ−またはチオセニルカルバモイルバルビツール酸（米国特許第４，６０２，９１２号）、５−フェニルカルバモイルバルビツール酸（米国特許第４，２８３，４４４号）、Ｎ’−アルキル−Ｎ’−（３，５−ジメチルベンゾイル）−Ｎ−（置換ベンゾイル）−ヒドラジン（米国特許第５，３５８，９６７号）、フェノキシトリフロロメタンスルホアニリド（米国特許第４，６６４，６７３号）、および複数の衣料品ハンガー装置に関連した芳香杉（incense  cedar）（米国特許第５，５８２，３３４号）は、全て、角質を食べる昆虫の攻撃から、角質材料を防護することが報告されている。これらの防虫剤の全ては、本特許出願の誘引性を有する情報化学物質とは非常に異なっている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本願では、コイガの雄および雌を誘引するための、単独の、または組み合わせによる刺激物質を開示する。この刺激物質は、１．雄および雌を誘引する、幼虫の生育場所由来の情報化学物質（主として、ノナナールおよびゲラニルアセトン）、２．雄を誘引する、雌コイガにより生成された性フェロモン成分[（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノールおよび（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール]、３．雄および雌を誘引する、雄により生成された性フェロモン成分（ヘキサデカノン酸メチルエステルおよびＺ９−ヘキサデセノン酸メチルエステル）、４．雄および雌を誘引する、雄により生成された音声信号（主周波数：５０＋／−１０Ｈｚ、７０＋／−１０Ｈｚ、１１０＋／−２０Ｈｚ、１４０＋／−２０Ｈｚ、およびこれらの調波）を含む。本願ではさらに、コイガの雄および雌に対して最も誘引性の高い餌となる音声信号の組み合わせを開示する。
【０００８】
本発明の主な目的は、これらの刺激物質を調製し、かつ実行することによってコイガの行動を操作することである。刺激物質は、全ての可能な組み合わせおよび比率において使用され得る。刺激物質の組成物は、徐放器または音声マイクロチップの内部に収容されて、そこから放出され得る。徐放器はトラップ内に保持されて、誘引された雄および雌のコイガを捕獲し得る。本発明は、毛皮、布、および他の角質製品を食べる昆虫が駆除されたか否かと、駆除された時間とを確実にする手助けをする診断ツールとして、および毛皮、布、ならびに他の角質製品を保護する手段として使用され得る。
【０００９】
本発明は、コイガの行動を操作するための化学物質組成物に関し、同組成物は、１）（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール、２）（Ｅ,Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール、３）ヘキサデカノン酸メチルエステル、４）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、５）ノナナール、６）ゲラニルアセトン、７）オクタナール、８）デカナール、９）ノネナール、１０）オクテナール、および１１）デセナールのうちから選択される２種以上の化学物質を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む。
【００１０】
本発明は、コイガの行動を操作するための音声信号にも関し、同信号は、１）５０＋／−１０Ｈｚ、２）１１０＋／−２０Ｈｚ、３）７０＋／−１０Ｈｚ、４）１４０＋／−１０Ｈｚ、５）１６５＋／−３０Ｈｚ、６）２２０＋／−４０Ｈｚ、および７）２８０＋／−４０Ｈｚのうちから選択される１個以上の周波数を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む。
【００１１】
本発明は、コイガの行動を操作するための化学物質と音声信号との組み合わせにも関し、同組み合わせは、１）（Ｅ,Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール、２）（Ｅ,Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール、３）ヘキサデカノン酸メチルエステル、４）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、５）ノナナール、６）ゲラニルアセトン、７）オクタナール、８）デカナール、９）ノネナール、１０）オクテナール、および１１）デセナールのうちから選択される２種以上の化学物質を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む組成物と、１）５０＋／−１０Ｈｚ、２）１１０＋／−２０Ｈｚ、３）７０＋／−１０Ｈｚ、４）１４０＋／−１０Ｈｚ、５）１６５＋／−３０Ｈｚ、６）２２０＋／−４０Ｈｚ、および７）２８０＋／−４０Ｈｚのうちから選択される１個以上の周波数を、全ての可能な組み合わせおよび比率にて含む音声信号との組み合わせを含む。
【００１２】
本発明の組成物は、徐放体内に収容されるか、または徐放体から放散され得る。本発明の組成物は、誘引されたコイガを捕獲するトラップ内に収容されて、そこから放散され得る。
【００１３】
音声信号は、誘引されたコイガを捕獲するトラップ内に収容されるか、またはトラップと関連する、音声装置により生成され得る。音声装置は、電気的に作動される音声マイクロチップであり得る。
【００１４】
本発明は、コイガを誘引するための装置にも関し、同装置は、１）（Ｅ,Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール、２）（Ｅ,Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール、３）ヘキサデカン酸メチルエステル、４）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、５）ノナナール、６）ゲラニルアセトン、７）オクタナール、８）デカナール、９）ノネナール、１０）オクテナール、および１１）デセナールのうちから選択される２種以上の化学物質を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む組成物を収容する。
【００１５】
本発明の装置は、コイガの行動を操作するための音声信号を放出し、同音声信号は、１）５０＋／−１０Ｈｚ、２）１１０＋／−２０Ｈｚ、３）７０＋／−１０Ｈｚ、４）１４０＋／−１０Ｈｚ、５）１６５＋／−３０Ｈｚ、６）２２０＋／−４０Ｈｚ、および７）２８０＋／−４０Ｈｚのうちから選択される１個以上の周波数を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む。
【００１６】
コイガを誘引する装置は、コイガの行動を操作する化学物質と音声信号との組み合わせを収容し得、同組み合わせは、１）（Ｅ,Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール、２）（Ｅ,Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール、３）ヘキサデカノン酸メチルエステル、４）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、５）ノナナール、６）ゲラニルアセトン、７）オクタナール、８）デカナール、９）ノネナール、１０）オクテナール、および１１）デセナールのうちから選択される２種以上の化学物質を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む組成物と、１）５０＋／−１０Ｈｚ、２）１１０＋／−２０Ｈｚ、３）７０＋／−１０Ｈｚ、４）１４０＋／−１０Ｈｚ、５）１６５＋／−３０Ｈｚ、６）２２０＋／−４０Ｈｚ、および７）２８０＋／−４０Ｈｚのうちから選択される１個以上の周波数を、全ての可能な組み合わせおよび比率において含む音声信号との組み合わせを含む。本発明による装置は、昆虫捕獲用の接着物を収容し得る。
【００１７】
本発明は、毛皮、布、または他の角質を食べる昆虫の餌を含む、毛皮、布、または他の角質製品が備えられた領域内に配置される餌およびトラップにも関する。餌は、本発明による化学物質組成物、または音声信号、もしくは化学物質組成物と音声信号との組み合わせを内蔵したものであり、トラップは、昆虫がトラップに入り込むことを可能にする開口部と、トラップからの昆虫の脱出を防止し得る防御物または保持材を備え得る。
【００１８】
本発明はまた、毛皮、布、および他の角質製品を食べる昆虫の行動を操作するための方法にも関し、同方法は、角質製品を食べる昆虫を、本発明による１種以上の化学物質または音声信号に晒す工程を含む。
【００１９】
本発明はまた、毛皮、布、または他の角質製品が確実に保護されているか否かを診断する方法にも関し、毛皮、布、または他の角質製品を、本発明による１種以上の情報化学物質組成物または音声信号に晒して、毛皮、布、または角質製品を消費する昆虫が、情報化学物質組成物または音声信号に誘引されるか否かを判定する工程とからなる。
【００２０】
本発明は、毛皮、布、または他の角質製品を、毛皮、布、または他の角質製品を消費する昆虫の攻撃から防護するための方法を含み、同方法は、毛皮、布、または他の角質製品に近接した位置に、本発明の情報化学物質組成物または音声信号を配置する工程を含む。
【００２１】
図面は、本発明の特定の実施態様を示すものであり、本発明の趣旨または範囲をいかようにも制限するものと解釈されるべきではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
以下の説明を通して、本発明をより完全に理解するように特定の詳細事項について記述する。しかしながら、本発明は、これらの特定事項を使用しなくとも実施され得る。他の場合において、本発明の不必要な不明瞭化を避けるために、公知の要素は詳細に開示または説明していない。従って、明細書および図面は、本発明を限定するものではなく、解説するものと見なすべきである。
１．幼虫生育場所へのコイガの雄および雌の誘引
天然の幼虫生育場所の選択実験において、羊毛（刈り取り直後、または刈り取り後１年が経過した）、カブトガニ標本（乾燥ホルムアルデヒドにて保存された）、なめしていない、乾燥した獣類毛皮試料（１００ｃｍ２）について試験した。
【００２３】
幼虫の生育場所から発生する揮発性物質に対するコイガの戦略応答（tactic  response）を、円筒形状のプレキシグラス（Ｐｌｅｘｉｇｌａｓ）製容器（直径１２５ｃｍ、高さ６０ｃｍ）内にて評価した。上面をタングルフット（Ｔａｎｇｌｅｆｏｏｔ）にて被覆されたボール紙製の薄いディスク（直径１０ｃｍ）を、アリーナ床上に各々８０ｃｍずつ離間して配置した。タングルフットで被覆されたディスクの上方に懸垂した乗せ台は、ランダムに割り当てられた試験刺激物質または対照標準刺激物質を支持する。ボール紙製の対照標準刺激物質の輪郭は、試験刺激物質と視覚的に類似している。各実験において、２５匹の成虫コイガを用いて１０回ずつ再現した。３０分間の環境順化の後、暗期中に、アリーナ床の中心にあるペトリ皿からコイガを解放した。実験開始から１２時間経過後、粘着性のディスク上に捕獲されたコイガ（図１）を応答者（responder）として記録し、統計的に分析した。
【００２４】
図１に、幼虫の生育場所を餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガと雄コイガのグラフデータを示す。棒グラフ上の星印は、顕著な相違を示す。[２標本Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定（ｐ＜０．０５）]
２．生育場所由来の刺激物質による、捕獲数、分析およびバイオアッセイ
獣類毛皮（１５０ｃｍ２）のサンプルを、円筒形状のＰｙｒｅｘ（登録商標）ガラス製のチャンバ内で、１週間通気した。水流吸引器を使用して、活性炭で濾過した吸湿空気を、２Ｌ／分で、チャンバと、Ｐｏｒａｐａｋ  Ｑ．（登録商標）で充填されたガラスカラム（１４ｃｍ×１３ｍｍＯ．Ｄ．）とを介して吸引した。Ｐｏｒａｐａｋ  Ｑにより捕集された揮発性物質を、５ｍｌの再蒸留ペンタンを使用して溶離して、溶離液を３０ｃｍのＤｕｆｔｏｎカラム内にて蒸留して、２ｍｌに濃縮した。２μｌが５個分の毛皮／分（ｐｅｌｔ−ｍｉｎ）の揮発性収集物と等しくなるように、揮発性抽出物を調整した。Ｐｏｒａｐａｋ  Ｑにより捕集された揮発性抽出物の２．５個分の毛皮／分（ｐｅｌｔ−ｍｉｎ）に相当する部分標本を、ガスクロマトグラフ・エレクトロアンテノグラフ検出器（ＧＣ−ＥＡＤ）（２８）により分析した（図２）。
【００２５】
図２に、リス毛皮の５個分の毛皮／分（ｐｅｌｔ−ｍｉｎ）の揮発性抽出物に対する、水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）およびエレクトロアンテノグラフ検出器（ＥＡＤ♂：雄コイガのアンテナ、ＥＡＤ♀：妊娠した雌コイガのアンテナ）の応答を示す。
【００２６】
クロマトグラフィー：ＤＢ−５を被覆された融合シリカカラム（３０ｍ×０．２５ｍｍＩＤ）を備えた、ヒューレットパッカード社製ガスクロマトグラフィー装置５８９０Ａ；キャリヤーガスの線流速：３５ｃｍ／秒；インジェクタおよびＦＩＤ検出器の温度：２４０℃；温度プログラム：５０℃で１分間、２０℃／分で７０℃まで、その後７．５℃／分で２８０℃まで。（Ｊ＆Ｗ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製、Ｆｏｌｓｏｍ，ＣＡ９５６３０）。Ｖａｒｉａｎ  Ｓａｔｕｒｎ（登録商標）ＩＩ  Ｉｏｎ  Ｔｒａｐ  ＧＣ−ＭＳおよびＨＰ５９８５ＢのＧＣ−ＭＳを使用して、フルスキャン電子衝撃イオン化（ＥＩ）および化学的イオン化（イソブタン）（ＣＩ）モードにて、ＥＡＤ活性化合物をＧＣ−質量分光測定（ＭＳ）により同定した。アンテナ活性（antennaly-active）化合物を、以下のように同定した。１．ヘキサナール（２０．０）、２．ヘプタナール（３５．０）、３．オクタナール（５５．０）、４．ノナナール（８０．０）、５．デカナール（２０．０）、６．ドデカナール（４．０）、７．トリデカナール（６．０）、８．テトラデカナール（５．０）、９．ペンタデカナール（０．８）、１０．ヘキサデカナール（１．０）、１１．ヘプタデカナール（０．７）、１２．オクタデカナール（０．１）、１３．ヘプタノール（１０．０）、１４．ノナノール（１０．０）、１５．デカノール（１２．０）、１６．ウンデカノール（２００．０）、１７．ドデカノール（１０．０）、１８．トリデカノール（７０．０）、１９．テトラデカノール（３．０）、２０．ペンタデカノール（２．０）、２１．ヘキサデカノール（０．３）、２２．ヘプタデカノール（０．５）、２３．オクタデカノール（０．１）、２４．デトラデカン（２０．０）、２５．ペンタデカン（１００．０）、２６．ヘキサデカン（１００．０）、２７．エイコサン（２０．０）、２８．ウンエイコサン、２９．２−ウンデカナール（４．０）、３０．Ｅ２−ノネナール（９．０）、３１．Ｅ２−デセナール（１１．０）、３２．ゲラニルアセトン（１．０）。括弧内の数字は、乾燥した、なめしていない獣類毛皮（１５０ｃｍ２）の１５個の毛皮／分（ｐｅｌｔ−ｍｉｎ）を通気した中に存在するナノグラム量を示す。
【００２７】
アリーナバイオアッセイ実験（４ページ、１５〜２５行目）に説明した一般的規則に従って）において、雄コイガおよび妊娠した雌コイガは、ペンタン対照標準よりも、赤リス毛皮のＰｏｒａｐａｋ  Ｑの揮発性抽出物を好み（実験例１６，１７）、ペンタンによる対照標準よりも、２９の人工リス毛皮の揮発性物質の混合物（ＳＢ−１）を好んだ（実験例１８，１９）（図３）。
【００２８】
図３に、赤リス毛皮（７５個分の毛皮／分（ｐｅｌｔ−ｍｉｎ））のＰｏｒａｐａｋ  Ｑによる揮発性抽出物、人工毛皮の揮発性物質の混合物（ＳＢ−１）、ペンタン溶媒の対照標準を餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガと雄コイガのグラフデータを示す。ＳＢ−１に含まれる化合物は、ノナナール（４００．０）、デカナール（１００．０）、６．ドデカナール（２０．０）、７．トリデカナール（２４．０）、８．テトラデカナール（２５．０）、９．ペンタデカナール（４．０）、１０．ヘキサデカナール（５．０）、１１．ヘプタデカナール（３．５）、１２．オクタデカナール（０．５）、１３．ヘプタノール（５０．０）、１４．ノナノール（５０．０）、１５．デカノール（６０．０）、１６．ウンデカノール（１０００．０）、１７．ドデカノール（１００．０）、１８．トリデカノール（３５０．０）、１９．テトラデカノール（１５．０）、２０．ペンタデカノール（１０．０）、２１．ヘキサデカノール（１．５）、２２．ヘプタデカノール（１．５）、２３．オクタデカノール（０．５）、２４．テトラデカン（１００．０）、２５．ペンタデカン（５００．０）、２６．ヘキサデカン（５００．０）、２７．エイコサン（１００．０）、２８．ウンエイコサン（３．５）、２９．２−ウンデカナール（２０．０）、３０．Ｅ２−ノネナール（４５．０）、３１．Ｅ２−デセナール（５５．０）、３２．ゲラニルアセトン（５．０）からなる。括弧内の数字は、ナノグラム量を示す。各反復実験において、トラップ内の試験刺激物質はワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ  ＃１）の濾紙から供給された。棒グラフ上の星印は、顕著な相違を示す。[２標本Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定（Ｐ＜０．０１）]
天然の赤リス毛皮の揮発性物質と、人工毛皮の揮発性物質（ＳＢ−１）とは類似する誘引性を有し、ＳＢ−１内に全ての主要な揮発性物質が存在することを示す。ＳＢ−１混合物内の２種の化合物、即ちノナナールとゲラニルアセトンは、等量にて実験した結果、天然の（マスクラット）毛皮よりも高い誘引性を有した（図４）。
【００２９】
図４に、人工のゲラニルアセトン（４４ｎｇ）とノナナール（３．５μｇ）、または乾燥したマスクラット毛皮を餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガと雄コイガのグラフデータを示す[２標本Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定（Ｐ＜０．０１）]。
３．コイガの交配系の分析
性的交信信号を発信する性と、同信号に応答する性とを判定するために、相互接続された３個の同一チャンバ（各チャンバ：直径１０ｃｍ、高さ２ｃｍ、通路の内側直径０．５ｃｍ、通路の長さ２．５ｃｍ）を使用して、バイオアッセイによる４個の実験を行った（２９）。各反復実験において、内部にバージンのコイガを収容した穿孔を有する２個のゼラチンカプセル[（２．５×０．９ｃｍ）、両端部に７個の穿孔（０．３ｍｍ）を有する]の餌を、側面のチャンバ内の羊毛上にランダムに配置した。その一方、他方の側面のチャンバ内の羊毛上に、穿孔を有する２個の空のゼラチンカプセルを収容した。日没の１時間前、バージンの成虫コイガを中央のチャンバ内へ個別に解放して、１６時間後（夜明けの１時間後）にその位置を記録した。側面のチャンバ内のコイガを統計分析に使用した。各反復実験にて、新しい装置、羊毛布、およびバージンのコイガを使用した。
【００３０】
バージンの雌コイガとバージンの雄コイガの双方が、雄コイガのカプセルを収容するチャンバを好んだ（実験例２４，２５）。バージンの雌は他の雌を回避し、バージンの雄はバージンの雌に誘引されなかったが（実験例２７）（図５）、バージンの雌を収容するカプセルに接触すると興奮的行動を示した。
【００３１】
図５に、２つの密閉されたバージンの成虫コイガ対する成虫コイガの応答を示す、二選択バイオアッセイによるグラフデータを示す。棒グラフの横の小括弧内に、各刺激物質に応答した個体数を示す。棒グラフ上の星印は、特定の処置に対して顕著な好みが見られたことを示す[Ｆｉｓｈｅｒ  Ｅｘａｃｔ試験（Ｐ＜０．０５）]。
【００３２】
これらの結果により、雄コイガは雄および雌を誘引する信号を生成し、雌コイガは、非常に近接範囲内のみにて雄を興奮させる信号を生成することが示された。
４．雄コイガが生成するフェロモン成分の分析およびバイオアッセイ
生後２４〜４８時間のバージンの雄コイガ２００匹の体を、メタノールで１５分間抽出した。この抽出物を、ガスクロマトグラフ・エレクトロアンテノグラフ検出器（ＧＣ−ＥＡＤ）により分析したところ、３個のアンテナ活性を有する化合物（３  antennally-active compounds)（図６）が明らかとなり、ＧＣ質量分光測定により、１）ヘキサデカノン酸メチルエステル、２）（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、および３）オクタデカノン三メチルエステルであることが同定された。
【００３３】
図６に、雄コイガの抽出物に相当する１匹の雄に対する、水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）とエレクトロアンテノグラフ検出器（ＥＡＤ：雄のコイガアンテナ）の応答を示す。ＥＡＤ活性の化合物１〜３は、ＧＣ質量分光測定により、１．ヘキサデカノン酸メチルエステル、２．（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル、３．オクタデカノン酸メチルエステルであることが同定された。雌のアンテナについて同様の応答が観察された。クロマトグラフィー：ＤＢ−２３（Ｊ＆Ｗ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製、Ｆｏｌｓｏｍ，ＣＡ９５６３０）を被覆された融合シリカカラム（３０ｍ×０．２５ｍｍＩＤ）を備えた、ヒューレットパッカード社製ガスクロマトグラフィー装置５８９０Ａ；キャリヤーガスの線流速：３５ｃｍ／秒；インジェクタおよびＦＩＤ検出器の温度：２４０℃；温度プログラム：５０℃で１分間、１０℃／分で２００℃まで。Ｖａｒｉａｎ  Ｓａｔｕｒｎ（登録商標）ＩＩ  Ｉｏｎ  Ｔｒａｐ  ＧＣ−ＭＳを使用して、フルスキャン電子衝撃イオン化（ＥＩ）モードにて、ＥＡＤ活性化合物をＧＣ−質量分光測定（ＭＳ）により同定した。
【００３４】
アリーナバイオアッセイ実験２９〜３１（４ページ、１５〜２５行目に説明した一般的規則に従って）において、ヘキサデカノン酸メチルエステルおよび（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステルは、コイガの雄および雌の双方を誘引する性フェロモン成分であることが判明した（図７）。
【００３５】
図７に、ヘキサデカノン酸メチルエステル（１６：エステル、４８０ｎｇ）および（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル（Ｚ９−１６：エステル、８４０ｎｇ）、またはオクタデセノン酸メチルエステル（１８：エステル、８４０ｎｇ）を餌とするトラップ内に捕獲された、雄コイガ、妊娠した雌コイガ、バージンの雌コイガのグラフデータを示す。各反復実験において、トラップ内の試験刺激物質は、ワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ  ＃１）の濾紙から供給された。棒グラフ上の星印は、顕著な相違を示す。[２標本Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定（Ｐ＜０．０１）]
５．雄のコイガが発生する音声信号の分析およびバイオアッセイ
雄の個体または群が発生した音声を、高速データ取得ボード（ＤＡＱ、ＮＩ；ＰＣＩ−ＭＩＯ−１６ＸＥ−１０；１６ビット、最大サンプリング速度１００ｋＨｚ）が塔載されたＰｅｎｔｉｕｍ（登録商標）１６６コンピュータを使用してハードディスクに記録した。約１．２７ｃｍ（１／２インチ）コンデンサマイク（ＡＫＧ  Ｃ  ４６０  Ｂ  ｃｏｍｂ−ＵＬＳ／６１）、ファンタム電源（Ａｔｕｓ  Ａｕｄｉｏ  Ｔｅｃｈｎｉｃａ  ＣＰ  ８５０８  ２４  Ｖ）、差動増幅器（ＮＩ；ＳＣ−２０４０）および４３．２ｋＨｚのサンプリング周波数を備える２００倍信号増幅器を用いて記録した。雄コイガより記録された音声信号は、５０＋／−１０Ｈｚと１１０＋／−２０Ｈｚにおいて２個の主周波数を有し、他のコイガがシグナラーから＞５ｃｍの範囲に存在するときに、時折１〜２個の調波（１６５＋／−３０：２２０＋／−４０）を認めた。他のコイガがシグナラーから＜５ｃｍの範囲に存在するときに、主周波数は、７０＋／−１０Ｈｚと１４０＋／−２０Ｈｚにあり、２〜３個の付加的な調波（２１０＋／−３０Ｈｚ、２８０＋／−４０Ｈｚ）を認めた（図８）。
【００３６】
図８に、雄コイガより記録された音声信号の、波形（ａ）、周波数（ｂ）、および時間対周波数による音声強度（ｃ）を示す。上：他のコイガから＞５ｃｍだけ離れた、音声を発する雄、下：他のコイガから＜５ｃｍだけ離れた、音声を発する雄。グラフｃの影部が濃厚になると、信号の周波数成分がより緊密となる。
【００３７】
アリーナバイオアッセイ実験（４ページ、１５〜２５行目に説明した一般的規則に従って）において、雄コイガの再生音声は、雄コイガ、妊娠した雌コイガ、およびバージンの雌コイガを誘引した（図９）。
【００３８】
図９に、雄コイガから記録された音声信号、または白色ガウス雑音を餌とするトラップ内に捕獲された、雄コイガ、妊娠した雌コイガ、バージンの雌コイガのグラフデータを示す。棒グラフ上の星印は、顕著な相違を示す[２標本Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定（Ｐ＜０．０５）]。音声記録は、ＤＡＱボードについてＬａｂＶＩＥＷ（ＮＩ）において開発されたプログラムを使用して、Ｓｅｎｎｈｅｉｓｓｅｒ  ＨＶ  ７０ヘッドフォンスピーカを通して、生物的に妥当なレベル（２．５ｃｍで５５ｄＢ）で再生された。音声記録は、１２時間のバイオアッセイ中、２６分ごとに自動的に再生された。
６．雌コイガが生成する性フェロモン成分の分析およびバイオアッセイ
生後１２〜４８時間の１００匹のバージンの雌コイガのフェロモン腺の腹節後部を切断し、ヘキサンで５〜１５分間抽出した。ＧＣ−ＥＡＤ分析により、水素炎イオン化検出器の検出閾値の下方に出現した２個のＥＡＤ活性成分が明らかとなった（図１０）。
【００３９】
図１０に、雌コイガの抽出物に相当する１匹の雌に対する、水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）とエレクトロアンテノグラフ検出器（ＥＡＤ：雄のコイガアンテナ）の応答を示す。ＥＡＤ活性の化合物１〜３は、１．（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール（Ｅ２，Ｚ１３−１８：ＯＨ）、２．（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（Ｅ２，Ｚ１３−１８：Ａｌｄ）であることが同定された。クロマトグラフィー：ＤＢ−２３（Ｊ＆Ｗ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製、Ｆｏｌｓｏｍ，ＣＡ９５６３０）を被覆された融合シリカカラム（３０ｍ×０．２５ｍｍＩＤ）を備えた、ヒューレットパッカード社製ガスクロマトグラフィー装置５８９０Ａ；キャリヤーガスの線流速：３５ｃｍ／秒；インジェクタおよびＦＩＤ検出器の温度：２４０℃；温度プログラム：５０℃で１分間、１０℃／分で２００℃まで。
【００４０】
ＥＡＤ活性成分１，２の、ＤＢ−５，ＤＢ−２１０，ＤＢ−２３で被覆された融合シリカカラムによるリテンションインデックス計算によれば、化合物は、各々、Ｅ２，Ｚ１３−１８：ＯＨ、Ｅ２，Ｚ１３−１８：Ａｌｄであることが示唆された。フェロモン腺抽出物に相当する量の合成化合物のＧＣ−ＥＡＤ分析によれば、雌生成の成分と合成成分とのアンテナ応答（antennal  responses）のリテンションタイムが同一であり、合成成分の構造的割当が確認された。
【００４１】
アリーナバイオアッセイ実験３４〜３７（４ページ、１５〜２５行目に説明した一般的規則に従って）において、合成Ｅ２，Ｚ１３−１８：ＯＨおよびＥ２，Ｚ１３−１８：Ａｌｄは、雄コイガを誘引した性フェロモン成分であることが判明した。この２成分の混合物は、非常に少量であっても、ナイロンメッシュ製の籠内に密閉された２匹のバージンの雌と比較して、より多数の雄コイガを誘引した（実験３７）（図１１）。
【００４２】
図１１に、様々な比率における（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール（Ｅ２，Ｚ１３−１８：ＯＨ）と（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（Ｅ２，Ｚ１３−１８：Ａｌｄ）、溶媒、またはバージンの雌コイガを餌とするトラップ内に捕獲された、雄コイガのグラフデータを示す。合成化学物質は、ワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ  ＃１）の濾紙から供給された。雌はナイロンメッシュ製の籠内に密閉された。異なる文字が付された棒グラフは、顕著な相違を示す[２標本Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定（Ｐ＜０．０５）、またはＴｕｋｅｙ型ノンンパラメトリック多重比較によるＫｒｕｓｋａｌ  Ｗａｌｌｉｓ検定]。
７．コイガの雄および雌を誘引する最適な餌の開発
ａ）人工雄フェロモン成分１６：エステルおよびＺ９−１６：エステル（図６，７参照）、ｂ）雄コイガより記録された音声信号（図８，９参照）、ｃ）人工雌フェロモン成分Ｅ２，Ｚ１３−１８：ＯＨおよびＥ２，Ｚ１３−１８：Ａｌｄ（図１０，１１参照）、ｄ）獣類毛皮（＝天然の幼虫生育場所、図１参照）、ｅ）合成情報化学物質であるノナナールとゲラニルアセトン（図２，３，４参照）との混合物が含まれる刺激物質を、単独で、および組み合わせて試験した。全てのバイオアッセイ実験は４ページ、１５〜２５行目に説明した一般的規則を使用して行った。
実験例１
実験４１，４２において、人工雄フェロモン成分（１６：エステルおよびＺ９−１６：エステル）と雄コイガの再生音声信号との組み合わせは、いずれの単独の刺激物質と比較しても、より多数の妊娠した雌コイガおよび雄コイガを誘引した（図１２）。
【００４３】
図１２に、以下のような様々な刺激物質を、単独で、および組み合わせて餌とするトラップ内に捕獲された、雄コイガと妊娠した雌コイガのグラフデータを示す。♂Ｐ＝人工雄フェロモン成分：ヘキサデカノン酸メチルエステル（４８０ｎｇ）と（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル（８４０ｎｇ）の混合物、♀Ｐ＝人工雌フェロモン成分：（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール（１ｎｇ）と（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（２ｎｇ）の混合物、音声＝雄コイガから記録された音声信号（図８参照）。異なる文字が付された棒グラフは、顕著な相違を示す[Tukey型多重比較による分散分析(Ｐ＜０．０５）]。
【００４４】
実験４４において、人工雄フェロモンと人工雌フェロモンとの組み合わせは、雄フェロモンまたは雌フェロモン単独と比較して、より多数の雄を誘引した（図１２）。実験４５，４６において、雌フェロモンおよび雄フェロモンと、雄の再生音声信号との組み合わせは、フェロモンまたは音声信号単独と比較して、より多数の妊娠した雌コイガおよび雄コイガを誘引した（図１２）。
実験例２
実験４７，４８において、獣類毛皮（ＮａＳ）は、人工雌フェロモンと人工雄フェロモン（♀Ｐ＋♂Ｐ）との混合物と比較して、より多数の妊娠した雌コイガおよび雄コイガを誘引した。獣類毛皮と雄フェロモンおよび雌フェロモンの組み合わせが、最も誘引力が高かった（図１３）。
【００４５】
図１３に、以下のような様々な刺激物質を、単独で、および組み合わせて餌とするトラップ内に捕獲された、雄コイガと妊娠した雌コイガのグラフデータを示す。♀Ｐ＝人工雌フェロモン成分：（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール（１ｎｇ）と（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（２ｎｇ）との混合物、♂Ｐ＝人工雄フェロモン成分：ヘキサデカノン酸メチルエステル（４８０ｎｇ）と（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル（８４０ｎｇ）との混合物、ＮａＳ＝天然の情報化学物質：乾燥したマスクラット毛皮（５０ｃｍ２）。異なる文字が付された棒グラフは、顕著な相違を示す[アークサイン変換を行った比率のTukey型多重比較による分散分析(α＝０．０５）]。
実験例３
実験４９，５０，５１において、獣類毛皮（ＮａＳ）は、雌フェロモン（♀Ｐ）と、雄フェロモン（♂Ｐ）と、雄コイガの再生音声信号との組み合わせと比較して、より多数のバージンの雌コイガ、妊娠した雌コイガ、および雄コイガを誘引した。全ての刺激物質の組み合わせ（♀Ｐ＋♂Ｐ＋音声＋ＮａＳ）は、最も誘引力が高かった（図１４）。
【００４６】
図１４に、以下のような様々な刺激物質を、単独で、および組み合わせて餌とするトラップ内に捕獲された、雄コイガと妊娠した雌コイガのグラフデータを示す。♀Ｐ＝人工雌フェロモン成分：（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール（１ｎｇ）と（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（２ｎｇ）の混合物、♂Ｐ＝人工雄フェロモン成分：ヘキサデカノン酸メチルエステル（４８０ｎｇ）と（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル（８４０ｎｇ）の混合物、ＮａＳ＝天然の情報化学物質：乾燥したマスクラット毛皮（５０ｃｍ２）。異なる文字が付された棒グラフは、顕著な相違を示す[アークサイン変換を行った比率のTukey型多重比較による分散分析(α＝０．０５）]。
【００４７】
同様に、実験５２，５３，５４において、全ての刺激物質の組み合わせ（♀Ｐ＋♂Ｐ＋音声＋ＮａＳ）は、化学物質の刺激物質（♀Ｐ＋♂Ｐ＋ＮａＳ）の組み合わせ、または雄コイガの再生音声信号（音声）と比較して、より多数のバージンの雌コイガ、妊娠した雌コイガ、および雄コイガを誘引した（図１４）。
実験例４
実験５５，５６において、人工雌フェロモン（♀Ｐ）と、人工雄フェロモン（♂Ｐ）と、合成情報化学物質（ＳＳ：獣類毛皮から同定された、図４参照）と、雄コイガの再生音声信号（音声）との組み合わせは、化学物質（♀Ｐ＋♂Ｐ＋ＳＳ）または音声信号単独と比較して、より多数の妊娠した雌コイガおよび雄コイガを誘引した。
【００４８】
図１５に、以下のような様々な刺激物質を、単独で、および組み合わせて餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガと雌コイガのグラフデータを示す。♀Ｐ＝人工雌フェロモン成分：（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール（１ｎｇ）と（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（２ｎｇ）の混合物、♂Ｐ＝人工雄フェロモン成分：ヘキサデカノン酸メチルエステル（４８０ｎｇ）と（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル（８４０ｎｇ）の混合物、ＳＳ＝合成情報化学物質：ゲラニルアセトン（４４ｇ）およびノナナール（３．５μｇ）（図４参照）。異なる文字が付された棒グラフは、顕著な相違を示す[アークサイン変換を行った比率のTukey型多重比較による分散分析(α＝０．０５）]。
実験例５
実験５７において、人工雄フェロモン（♂Ｐ）と、人工雌フェロモン（♀Ｐ）と、幼虫の成育場所から同定された合成情報化学物質（ＳＳ）との組み合わせは、市販の疑似餌と比較して、より多数の雌コイガおよび雄コイガを誘引した。市販の疑似餌は、溶媒（ヘキサン）対照標準の刺激物質よりも誘引力が低かった（図１６）。
【００４９】
図１６に、以下のような様々な刺激物質を餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガと雄コイガのグラフデータを示す。♀Ｐ＝人工雌フェロモン成分：（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエノール（１ｎｇ）と（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（２ｎｇ）の混合物、♂Ｐ＝人工雄フェロモン成分：ヘキサデカノン酸メチルエステル（４８０ｎｇ）と（Ｚ）−９−ヘキサデセノン酸メチルエステル（８４０ｎｇ）の混合物、ＳＳ＝合成情報化学物質：合成ゲラニルアセトン（４４ｎｇ）およびノナナール（３．５μｇ）（図４参照）。市販の疑似餌は、（Ｅ，Ｚ）−２，１３−オクタデカジエナール（２ｎｇ）と（Ｅ）−２−オクタデカナール（１ｎｇ）の混合物から構成される。ヘキサンは、溶媒対照標準である。全ての化学物質は、ワットマン（Ｗｈａｔｍａｎ  ＃１）の濾紙から供給された。異なる文字が付された棒グラフは、顕著な相違を示す[アークサイン変換を行った比率のTukey型多重比較による分散分析  (α＝＜０．０５）]。
【００５０】
前述の開示から明らかなように、本発明を実施するにおいて、本発明の趣旨または範囲から逸脱せずに、多数の変更および改良が可能である。従って、本発明の範囲は、特許請求の範囲により定義された物質により解釈するべきである。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】潜在的な幼虫の生育場所を餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガと雄コイガのグラフデータ。
【図２】リス毛皮の５個分の毛皮／分（ｐｅｌｔ−ｍｉｎ）の揮発性抽出物に対する、水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）およびエレクトロアンテノグラフ検出器（ＥＡＤ♂：雄コイガアンテナ、ＥＡＤ♀：妊娠した雌コイガアンテナ）の応答を示すグラフ。
【図３】幼虫の生育場所からの天然揮発性物質または人工揮発性物質を餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガと雄コイガのグラフデータ。
【図４】合成化学物質であるゲラニルアセトンおよびノナナール、または乾燥したマスクラット毛皮を餌とするトラップ内に捕獲された、雌コイガおよび雄コイガのグラフデータ。
【図５】バージンの雄コイガまたはバージンの雌コイガに対する、成虫コイガの応答を示すグラフデータ。
【図６】雄コイガの体（body）に相当する、一匹の雄に対する水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）とエレクトロアンテノグラフ検出器（ＥＡＤ：雄コイガアンテナ）の応答を示すグラフ。
【図７】人工雄フェロモン成分を餌とする、トラップ内に捕獲された雄コイガ、妊娠した雌コイガ、バージンの雌コイガのグラフデータ。
【図８】雄コイガから記録された、羽音により生成された音声信号の、波形（ａ）、周波数（ｂ）、時間−周波数音声強度（ｃ）を示すグラフ。
【図９】雄コイガから記録された音声信号を餌とする、または白色雑音を餌とする、トラップ内に捕獲された、雄コイガ、妊娠した雌コイガ、バージンの雌コイガのグラフデータ。
【図１０】雌コイガフェロモン腺抽出物に相当する一匹の雌に対する、水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）とエレクトロアンテノグラフ検出器（ＥＡＤ：雄コイガアンテナ）との応答を示すグラフ。
【図１１】人工雌フェロモン成分を餌とする、トラップ内に捕獲された雄コイガのグラフデータ。
【図１２】様々な試験的刺激物質を単独で、または複合して餌として、トラップ内に捕獲された、雄コイガ、妊娠した雌コイガのグラフデータ。
【図１３】様々な試験的刺激物質を単独で、または複合して餌として、トラップ内に捕獲された、雄コイガ、妊娠した雌コイガのグラフデータ。
【図１４】様々な試験的刺激物質を単独で、または複合して餌として、トラップ内に捕獲された、バージンの雌コイガ、妊娠した雌コイガ、雄コイガのグラフデータ。
【図１５】様々な試験的刺激物質を単独で、または複合して餌として、トラップ内に捕獲された、妊娠した雌コイガ、雄コイガのグラフデータ。
【図１６】新たに同定された人工誘引物質、市販の餌、または溶媒対照標準を餌とするトラップ内に捕獲された、妊娠した雌コイガ、雄コイガのグラフデータ。
【図１７】音声放出マイクロチップおよび情報化学物質供給装置を餌とする、可能なトラップのデザインを示す斜視図。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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2004538286.tif 000053
2004538286.tif 000054
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