(57)【要約】Ｅ−コンブレタスタチン  Ａ−１（２ｂ）の高収率合成が、キーステップとしてＭＯＭ防御とＷａｄｓｗｏｒｔｈ−Ｅｍｍｏｎｓ反応を用いて達成された。次に、（Ｅ）−スチルベン１５は、適当な合成によって（Ｓ，Ｓ）−及び（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン９ａ及び１０ａに変換された。Ｓｈａｒｐｌｅｓｓのアシンメトリクジヒドロキシル反応が、中間体（Ｓ，Ｓ）−１６及び（Ｒ，Ｒ）−１７の製造に用いられた。この（４Ｓ，５Ｓ）−４−（２’，３’−ジヒドロキシ−４’−メトキシフェニル）−５−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−１，３−ジオキソレーン（９ａ）は、微小管アセンブリ（ＩＣ５００．５９μＭ）の強力な抑制剤であることがわかり、“ジオキソスタチン”と命名された。ナトリュウムリン酸塩２１（Ｐ３８８リンパ性白血病細胞ラインＥＤ５００．２μｇ／ｍＬ）への変換は、極めて有用な水溶性プロドラッグを与えた。
2004515452.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の構造式を有するジオキソスタチンと称する化合物。
【化１】
2004515452.tif 000011
【請求項２】
薬理学的に受容可能なキャリアにおいて活性成分ジオキソスタチンの有効量を投与することから成る新生物病に冒された細胞を処理する方法。
【請求項３】
該キャリアは水溶液から成る請求項２の方法。
【請求項４】
薬理学的に受容可能なキャリアにおいて活性成分ジオキソスタチンの有効量にさらすことから成る微小管アセンブリを抑制する方法。
【請求項５】
該キャリアは水溶液から成る請求項４の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（序論）
本発明は、一般的に化学治療の分野に関する。更に詳しくは、“ジオキソスタチン”と称する微小管アセンブリ（ＩＣ５００．５９μＭ）の新しい抑制剤の回収と構造的説明に関する。
【０００２】
この研究は、Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＤＨＨＳによって与えられたＯｕｔｓｔａｎｄｉｎｇ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  Ｇｒａｎｔ  ＣＡ  ４４３４４−０１−１１によって行われた。従って、米国政府はこの発明に対し権利を有する。
【０００３】
（発明の背景）
アフリカ潅木ヤナギＣｏｍｂｒｅｔｕｍ  ｃａｆｆｒｕｍからの医薬品の説明と分離は、１９９１年２月２６日Ｇ．Ｒ．Ｐｅｔｉｔに付与された米国特許４，９９６，２３７に記載されたコンブレタスタチンＡ−４に一致する。これらの特許の各々からの一般的背景資料はこの文献によってここに組み込まれる。
【０００４】
有力なガン細胞生長とチュウブリンアセンブリ抑制剤コンブレタスタチンＡ−４は、もともと１９８５年アフリカの樹木Ｃｏｍｂｒｅｔｕｍ  ｃａｆｆｒｕｍ（Ｃｏｍｂｒｅｔａｃｃａｅ）から分離され、その時から臨床前の開発が行われてきた。しかしながら、フェノールとそのアルカリ金属塩の極めて限定された水溶性のため、薬品生成の企画は不満足な結果であった。
【０００５】
アフリカヤナギの木Ｃｏｍｂｒｅｔｕｍ  ｃａｆｆｒｕｍ  Ｋｕｎｔｚｏ（Ｃｏｍｂｒｅｔａｃｅａ）はガン細胞成長（ｍｕｒｉｎｅＰ３８８  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）抑制のスチルベン類、ビベンジル類及びフェナントレン類の非常な生産源であることが分かった。１９７９年以来、三つの最も活性（ガン細胞成長の抑制及びチュウブリンの重合（１ｄ））な成分、即ちコンブレタスタチンＡ−１（１ａ）及びＡ−４（１ｂ）（１ｄ）に集中された有望な情報が追及された（図１を参照）。これらのうち、コンブレタスタチンＡ−４（１ｂ）はきわめて可溶性のプロドラッグ１ｄとして臨床前開発の最も進んだ段階に達した。一方、他の研究グループもまたコンブレタスタチンと関連したスチルベン類の間に構造／活性関係（以下「ＳＡＲ」と称する）にさらに拡張された。
【０００６】
夫々１９８７年と１９８９年に、抗有糸分列性細胞成長抑制剤コルヒチンとポロフィロトキシンと構造的に類似し、Ｃ．ｃａｆｆｒｕｍの最も有望なアンチネオプラスチック成分の２つを代表するコンブレタスタチンＡ−１（１ａ）とコンブレタスタチンＡ−４（１ｂ）が報告された。このモノフェノール１ｂは微小管アセンブリ（ＩＣ５０２〜３μＭ）の有力な抑制剤であることを示し、ミュリンＰ３８８リュウケミア細胞ラインに対しＥＤ５００．０００３μｇ／ｍＬを示し、ジフェノールは、微小管アセンブリ（ＩＣ５０２〜３μＭ）の抑制剤として等しく有効であったが、Ｐ３８８細胞成長の抑制剤としては著しく低かった（ＥＤ５００．２μｇ／ｍＬ）。
【０００７】
ジフェノールによって示されたガン細胞に対する細胞毒性の減少は、容易に１，２−キノンに容易に酸化できる近隣のフェノール基の存在による。このような解釈は、チューブリン重合とコルキシン結合のインビトロ抑制を著しく減少しながら、ヒドロキシル基のアセチル化が細胞毒性を１０倍増強した事実によって支持された。これらの表面的なネガチブの態様にもかかわらず、ジフェノール１ａによって示されたある生物学的性質はそれを魅力的にする。例えば、ジフェノール１ａは、等しい濃度においてほとんど９９％の抑制を有し、知られたコルキシン結合の最も有力な拮抗薬である。さらに、ジフェノール１ａはＭＤＲ（マルチドラッグレジスタンツ）ガン細胞ラインにおける細胞内ダウノルビシン濃度を増大する能力においてモノフェノール１ｂよりもっと有力であることが分かった。最も重要には、チューブリン結合スチルベン１ａ及び１ｂは固体腫瘍内で不可逆の血管の停止を選択的に引き出す。リダクションの程度は１ａで５０％から１ｂで７０％の範囲であるが、一方コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（１ｄ），モノフェノール１ｂの燐酸ナトリューム誘導体、は最大許容量の十分の一の量において転移的腫瘍内に完全な血管閉鎖を誘導する。それらの有望な結果は、コンブレスタチンスチルベンのＡシリーズはその抗血管性とその他の抗ガン性に関しさらに調査されるべきであることを示した。それ故、ジフェノール１ａの構造活性関係（ＳＡＲ）研究が、コンブレスタチンＡ−４プロドラッグ（１ｄ）の長期の調査に平行して始められた。
【０００８】
“脈管形成”（新血管形成）として知られる新しい血管の形成は、種々のサイトカイン（例えば、ＩＬ−１）及び成長要素（例えば、ＧＭ−ＣＳＦ）からセリンプロテナーゼ（例えば、ウロキナーゼ）にわたる多数の血管由来の要素を含む、極めて複雑な生化学的相互作用によって制御される。一般に、正常な脈管形成は、既に形成された血管から新しい箇所への内皮細胞の活性化と移送を包含する。正常には、この移送は、傷の治療の場合及び雌の生殖生態のある段階を除いて３ヶ月から１年を要する。血管由来の制御機構が欠如する時、その結果は、ガン乾癬、血管腫、アテローム性動脈硬化性血小板、糖尿病の及び斑点性の網膜症、血管新生緑内障、及び外科に伴う血管の凝着のごとき広範な人の疾患に及ぶ。
【０００９】
アフッリカブッシュヤナギ（Ｃｏｍｂｒｅｔｕｍ  ｃａｆｆｒｕｍ）成分のため、コンブレタスタチンＡ−１（１ａ）及びＡ−４（１ｂ）が遊離され、極めて有望な抗新生物薬、ガン抗狭心性、及びその他重要な生物学的活性を発揮したその燐酸プロドラッグ誘導体（１ｃ，ｄ）が示された。最近、これらのｃｉｓ−スチルベンのＳＡＲ調査が行われた。事実、コンブレタスタチンＡ−４プロドラッグ（１ｄ）は１９９８年１１月以来一連のフェースＩひとガンの臨床試験が行われてきた。
【００１０】
コンブレタスタチンＡ−４シリーズの以前のＳＡＲ分析は、スチルベンユニットのｃｉｓ構成がガン細胞成長の抑制及びチューブリンアセンブリを抑制するための最も重要なファクターであることを示した。対応する（Ｅ）−スチルベンでは、ガン細胞成長抑制及びアンチチューブリン活性は対応する（Ｚ）−異性体によって示されるものから著しく減少している。最近、ｔｒａｎｓ−異性体２ｂ及び２ｄの両者はガン細胞成長抑制剤として適度に活性であることが発見された。ｔｒａｎｓ−スチルベン２ｄを用いた後日の研究は、ジメチルスルフォキシド中に新たに製造された溶液は不活性であることを示し、ｔｒａｎｓ異性体が徐々にｃｉｓ活性異性体に変換することを示唆する。
【００１１】
従って、本発明の主要な目的は、ここに“ジオキソスタチン”と称するコンブレタスタチンの誘導体の合成と構造決定による微小管アセンブリと細胞成長の新しいそして予期しないほど活性の抑制剤を提供することである。
本発明の他の目的は、リュウケミア及びＮＣＩ  Ｐ３８８ラインに対しポジチブな結果と関連する他のガン性疾患の処理に有効な水溶性化学療法剤の形成である。
これら及びその他の目的は、その模範的具体例の詳細な記載から容易に認められるごとく、顕著に予期しない態様において本発明によって容易にかなえられる。
【００１２】
（好ましい具体例の記載）
最近、コンブレタスタチンＡ−４（２ｄ）の（Ｅ）異性体が対掌性ｄｉｏｌｓ（Ｒ，Ｒ）−３ａ及び（Ｓ，Ｓ）−４ａに変換された。但し（Ｅ）オレフィンユニットは自由に回転するｓｐ３−ハイブリダイズ化対掌性エタンジオールによって置換された。これらの実験は、対掌性ジオール（Ｒ，Ｒ）−３ｂ及び（Ｓ，Ｓ）−４ｂを発生するコンブレタスタチンＡ−１の（Ｅ）異性体を含むように拡張された。非対称ジヒドロキシ化（参照：Ｋｏｌｂ，Ｈ．Ｃ．；ＶａｎＮｉｃｕｗｅｎｈｚｅ，Ｍ．Ｓ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，９４，２４８３−２５４７）；及びＡＤ−ｍｉｘ−α  ａｆｆｏｒｄｅｄ（Ｓ，Ｓ）−ｄｉｏ１５．（Ｅ）スチルベンの光異性化はアルミニウムホイルで包んだ反応容器を用いて防止した。
【００１３】
ジオール（Ｒ，Ｒ）−３ｂ及び（Ｓ，Ｓ）−４ｂの製造において正確な対掌性が導入されていたかのチェックとして、ＡＤ−混合反応において形成された中間体シリル保護生成物の１つについて単一結晶Ｘ−線構造決定が行われた。かくして、ｔｒａｎｓ−スチルベン２ａのＡＤ−混合−α生成ジオール５での処理は１Ｓ，２Ｓ絶対立体化学を有することが期待された。この生成物（固体状態において半水化物として存在）のＸ−線構造決定は期待された１Ｓ，２Ｓ立体化学を確認した。このシリレイト化ジオール５のコンピューター作成図を図２に示す。絶対立体化学５は確実（フラックχ絶対構造パラメータ＝０．１０８０，ｅｓｄ＝０．０４９２）であったけれども、ユニットセルに存在する原子の数に対する多数の割れの発生によって明らかなごとく、この化合物の固体状態にはかなりの不規則が存在したことは明らかであった。これは、この構造決定に対して得られたやや乏しい標準クリスタログラフィック残差（０．１４９６のＲ１）に帰する。本発明の主な目的は絶対立体化学を確認することにあるので、更に分子を精製する企画はない。
【００１４】
保護されたジオール（Ｓ，Ｓ）−５は次にテトラブチルアムモニウムフルオライド（ＴＢＡＦ）でデシリレイト化して適度の収率（５２％）でテトラオール（Ｓ，Ｓ）−ジオール４を得た。シリルエーテル（Ｓ，Ｓ）−ジオール５の無水酢酸との反応は（Ｓ，Ｓ）−ジアセテイト７を与えた。（Ｓ，Ｓ）−ジアセテイト７のＴＢＡＦでの選択的デシリレイト化は困難で、僅かの生成物を生じ同時酸化を示唆した。デシリレイト化の他の方法（参照：Ｓｉｎｈａｂａｂｕ，Ａ．Ｋ．；Ｋａｗａｓｅ，Ｍ．；Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ，Ｒ．Ｔ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ１９８８，７１０−７１１；Ｎｅｌｓｏｎ，Ｔ．Ｄ．；Ｃｒｏｕｃｈ，Ｄ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９９６，１０３１−１０６９）が調査されたが、その有効な反応時間（ｃａ．２０分）に基づいて選ばれるデシリレイト化剤としてＴＢＡＦに代われるものは無かった。この（Ｒ，Ｒ）−ジオールスシリルエーテル６、ジアセテート８及びテトラオール３ｂはＡＤ−ミックス−βを用いて同じように製造した。関連構造を図式１で説明する。
【００１５】
【図式１】
2004515452.tif 000003
Ｒ＝Ｓ（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２  Ｒ１＝Ｃ（Ｏ）ＣＨ３
試薬と条件：（ａ）ＡＤ−ｍｂｃ−β，ＣＨ３ＳＯ２ＮＨ２，γＢｕＯＨ−Ｈ２Ｏ，Ｏ４Ｃ；
（ｂ）ＡＤ−ｍｂｃ−α，ＣＨ３ＳＯ２ＮＨ２，γＢｕＯＨ−Ｈ２Ｏ，Ｏ４Ｃ；
（ｃ）ＴＤＡＦ，ＴＨＦ；
（ｄ）Ａｃ２Ｏ，ピリジン，ＤＭＡＰ，ＤＭＦ
【００１６】
（Ｅ）−オレフィン２Ａから生成したジオールの比較は、コンブレタスタチンＡ−１（１ａ）のそれからガン細胞成長抑制における減少を明らかにした。それは、コンブレタスタチンＡ−４の（Ｅ）異性体から製造されたパラレルセットのジオールから得られた結果と一致する。（Ｓ，Ｓ）−ジオール４ａ、コンブレタスタチンＡ−４のｔａｎｓ−異性体の誘導体は、使用したガン細胞ラインにおいて、（Ｒ，Ｒ）−ジオール３ａより著しくより活性であると言う事実は注目すべきである（表Ｉ）。他方、コンブレタスタチンＡ−１シリーズにおいては、ガン細胞ライン抑制において注目される差異は認められない。（Ｓ，Ｓ）−ジオール４ｂ及び（Ｒ，Ｒ）−ジオール３ｂの両者は、Ａ−４シリーズからの（Ｓ，Ｓ）−ジオール４ａより実質的に活性が少ない。
【００１７】
【表Ｉ】
2004515452.tif 000004
【００１８】
【表ＩＩ】
2004515452.tif 000005
表ＩＩの補足説明
重合実験において、チューブリン濃度は１０μＭであった。コルヒチン結合実験において、チューブリン濃度は１．０μＭであり、そして〔３Ｈ〕コルヒチン濃度は５．０μＭであった。Ｖｅｒｄｉｅｒ−Ｐｉｎａｒｄ，Ｐ．；Ｌａｉ，Ｊ−Ｙ．；Ｙｏｏ，Ｈ−Ｄ．；Ｙｕ，Ｊ．；Ｍａｒｑｕｅｚ，Ｂ．；Ｎａｇｌｅ，Ｄ．Ｇ．；Ｎａｍｂｕ，Ｍ．；Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｄ．；Ｆａｌｃｋ，Ｊ．Ｒ．；Ｇｅｒｗｉｃｋ，Ｗ．Ｈ．；Ｄａｙ，Ｂ．Ｗ．；Ｈａｍｅｌ，Ｅ．Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９８，３３，６２−７６を参照。１ａでの全てのデータは、実験が終わる直前に作られた溶液で得られた。
【００１９】
表ＩＩに示したデーターは、四つの全てのジオールは、人のガン細胞ラインに対しての著しく減少した細胞毒性と一致して、チュブリン重合の抑制剤として１ａ及び１ｂよりも著しく力がない。類似の（Ｒ，Ｒ）−ジオール３ａ及び３ｂに対比して（Ｓ，Ｓ）−ジオール４ａ及び４ｂに対する優越性は明らかである。（Ｓ，Ｓ）−光学異性体は（Ｒ，Ｒ）−光学異性体の少なくとも２倍の抑制力がある。コンブレタスタチンＢリングの第２ヒドロキシル基の重要性の問題に具体的に対処すると、（Ｒ，Ｒ）ペアと（Ｓ，Ｓ）ペアの両者での結果は、コンブレタスタチンのチュブリンとの相互作用の力は追加のヒドロキシル分の存在によって増強されると言う考えを支持する。珍しくも、このヒドロキシルの追加は、（Ｒ，Ｒ）−ジオールのチュブリンとの相互作用を、（Ｓ，Ｓ）−ジオール（４ｂが４ａより僅か４０％のみ活性）のより幾分（３ｂは３ａより少なくとも３倍活性）増強する。チュブリンとの相互作用における３ｂと４ｂ間より３ａと４ａ間のより大きい差は、細胞毒性の結果における後者より前者のペア間の大きい差によるとも見なされる。しかしながら、チュブリンに対する４つのジオールの相対的親和性は、４ａが４つの化合物中最も細胞毒性であるという観察を説明するものではない。
【００２０】
更に、表ＩＩのデータは、１ａ及び１ｂの以前に観察された相対的活性を確認する。１ａはコルヒチン結合の抑制剤としてより活性であるように見える。
微生物パネルに対して、コンブレタスタチンＡ−１の（Ｅ）−異性体は、おそらく活性ｃｉｓ−異性体の光学異性化により、最も活性な化合物である（表ＩＩＩ）。親化合物１ａ及び１ｂとそのジオール誘導体との間の抗菌活性の差は顕著でない（表ＩＩ）。
【００２１】
【表ＩＩＩ】
2004515452.tif 000006
2004515452.tif 000007
【００２２】
ガン細胞ライン不活性（Ｅ）−異性体２ａ及び２ｂのより活性な化合物への変換において目的とされるさらに構造的な修正が次のごとく述べられた。Ｔｒａｎｓ−スチルベン２ａから合成されたジオール３ｂ及び４ｂは、自由回転を限定するために、脂肪族ヒドロキシル基の修正によってさらに変形された。そのメチレンジオキシ誘導体（ｃｆ，９及び１０）は、その立体的に小さく比較的安定な性質のため、選択のリジットリングであった。ジフェノール１ａ誘導体の前の変化中、スチルベン２ａの化学性を調査の間、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）基は、ジフェノールの酸化的分解、続いてテトラブチルアンモニウムフルオライド（ＴＢＡＦ）でのデシリル化のため、障害となった。出来たデシリル化ジフェノールの遊離は明らかに困難で低収率であった。従って、そのメトキシメチル（ＭＯＭ）基は、その一般的安定性（参照：Ｙａｒｄｌｅｙ，Ｊ．Ｐ．；Ｆｌｅｔｃｈｅｒ，Ｈ．ＩＩＩ．Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  Ｅｔｈｅｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１７９５，２４４）と希酸による容易分解のため、１ａの対応する（Ｅ）−異性体の合成に用いられた。
【００２３】
ベンズアルデヒド１１のＭＯＭプロテクションはＭＯＭＣｌで高収率で達成された。（参照：Ｙａｒｄｌｅｙ，Ｊ．Ｐ．；Ｆｌｅｔｃｈｅｒ，Ｈ．ＩＩＩ．Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  Ｅｔｈｅｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９７５，２４４）。Ａ  Ｗａｄｓｗｏｒｔｈ−Ｅｍｍｏｎｓ；（参照：Ｂａｋｅｒ，Ｒ；Ｓｉｍｓ，Ｒ．Ｊ．Ａ  Ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｗａｄｓｗｏｒｔｈ−Ｅｍｍｏｎｓ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  Ｏｌｅｆｉｎ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｕｓｉｎｇ  ａ  Ｃｒｏｗｎ  Ｅｔｈｅｒ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９８１，１１７），反応は（Ｅ）−スチルベンの形成に好ましい従来のウィッチング反応が優先的に用いられた。かくして、ホスホン酸塩１４は、ベンジルブロマイド１３とトリエチルホスファイトとの反応によって合成された。水素化ナトリュームと１５−クロウン−５の存在におけるプロテクテッドアルデヒド１２とホスホン酸塩１４との縮合は、７０％の収率で（Ｅ）−スチルベンを与えた。（Ｅ）−オレフィン１５のＡＤ−ミックス−αでのジヒドロキシ化は対掌性のジオール（Ｓ，Ｓ）−１６を与えた。このジオールの対掌性は、Ｘ線結晶構造測定が完了しさらに光学回転データによって支持された時、対応するＴＢＤＭＳ誘導体への関係によって確立された（図２を見よ）。（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン１８の合成（参照：Ｙａｒｄｌｅｙ，Ｊ．Ｐ．；Ｆｌｅｔｃｈｅｒ，Ｈ，ＩＩＩ．Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｍｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  Ｅｔｈｅｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９７５，２４４）は、相転移触媒の存在において水素化ナトリューム５０％水溶液、ジブロモメタン及びジクロロメタンを用いて行われた（参照：Ｋｉｍ，Ｋ．Ｓ．；Ｓａｒｅｋ，Ｗ．Ａ．Ｍｅｔｈｙｌｅｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ  ｕｓｉｎｇ  Ｐｈａｓｅ−Ｔｒａｎｓｆｅｒ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ１９７８，４８−５０．Ｎｏｒｍａｎ，Ｄ．Ｇ．；Ｒｅｅｓｅ，Ｃ．Ｂ．；Ｓｅｒａｆｉｎｏｗｓｋａ，Ｈ．Ｔ．２’，３’−Ｏ−ＭｅｔｈｙｌｅｎｅＤｅｒｉｖａｔｉｖｅ  ｏｆ  Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ１９８５，７５１−７５４）。このＭＯＭエーテルの除去は、室温において２−プロパノール−テトラヒドロフラン中６Ｎ塩酸と１８を攪拌することによって達成され、後にジオキソスタチンと命名される（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ａが得られた。
（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン１０ａはＡＤ−ミックス−βを用いて類似に（１５→１９）に合成された。当該の構造は下記の図式２において説明する。
【００２４】
【図式２】
2004515452.tif 000008
試薬と条件：（ａ）ＭＯＭＣｌ，ＰＩＰＥＡ，ＤＭＦ；（ｂ）Ｐ（ＯＥＩ）３，トルエン，ｂ，２ｄ；（ｃ）ＮａＨ，１６−クラウン−５，ＴＨＦ；（ｄ）ＡＤ−ｍｉｘ−β，ＣＨ３ＳＯ２ＮＨ２，γ−ＢｕＯＨ−Ｈ２Ｏ，Ｏ４Ｃ；（ｅ）ＡＤ−ｍｉｘ−α，ＣＨ３ＳＯ２ＮＨ２；  γ−ＢｕＯＨ−Ｈ２Ｏ、Ｏ４Ｃ；（ｆ）ＣＨ２Ｂｒ２，ＮａＯＨ（ａｑ），ｃｏｌｙｔｌｉｍｏｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ，ＤＣＭ；（ｇ）８Ｎ  ＨＣｌ（ａｑ），ＩＰＡ，γＨＦ
【００２５】
Ｐ３８８リンフォサイチックロイケミア細胞ラインを使用するジオキソレーンズ（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ａと（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン１０ａ（表Ｉ）の生物学的鑑定は、このシステムにおいて、それらが同程度の活性（夫々ＥＤ５０１．５μｇ／ｍＬ及びＥＤ５０１．６μｇ／ｍＬ）を有することを示した。しかしながら、人の腫瘍細胞ラインのデータは、一貫して（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ａがより活性であることを示し、ジキソレーン９ａ中に存在する（Ｓ，Ｓ）一対掌性がその光学異性体１０ａにおけるそれよりも有利であることを示唆する。（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ａの生物学的活性は、（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ａが（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン１０ａ（０．９５±０．１及び５．７±０．８μＭ）よりそれぞれ１０倍強力であるため、チューブリンアセムブリの抑制が評価された時、より十分に評価された（表ＩＶ）。事実、コンブレタスタチンＡ−１（１ａ）及びＡ−４（１ｂ）より毒性は少ないけれども、９ａはチューブリンアセンブリの抑制剤として（Ｚ）−スチルベンの２倍の効果があった。その活性はコルヒチンのそれを超え、有力な抗有糸分裂性のペプチドドラスタチン１０のそれに匹敵した（表ＩＶ）。
【００２６】
【表ＩＶ】
2004515452.tif 000009
【００２７】
最近、コンブレタスタチンシリーズのジオキソレーン９ｂ，ｃと１０ｂ，ｃがＳｈｉｒａｉ及び共同研究者によって合成され、生物学的に評価された。
これらの組織的に限定されたコンブレタスタチン類縁物質での最初の研究は、アリルＢ−リング｛（Ｓ，Ｓ）−９ｂ及び（Ｒ，Ｒ）−１０ｂ｝にフェノール基を欠いた１，３−ジオキソレーンの合成を処理した。このものは生物学的活性には不可欠とは考えられない担体であった。（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン１０ｂは１００μＭより大きいＩＣ５０を示すのに不活性であったが、（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ｂは１８μＭのＩＣ５０で豚の脳のチューブリン重合を抑制することが分かった。最終的に、Ｓｈｉｒａｉ及び共同研究者は、Ｂアリルリングの３位がフェノール基［（Ｓ，Ｓ）−９及び（Ｒ，Ｒ）−１０ｃ］を含んだ１，３−ジオキソレーンのシリーズを評価した。彼らは、（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン１０ｃが５０μＭより大きいＩＣ５０を示すのに不活性であることを再び発見したが、（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ｃが４−６μＭのＩＣ５０のジド（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ｂよりも大きい性能を示したことを発見した。これらのデータは、９ｂ及び９ｃに存在する（Ｓ，Ｓ）−１，３−基はチューブリン結合に好ましい構造を決定するが、（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン１０ａ及び１０ｂはそうでないことを示した。さらに、コンブレタスタチンＡ−４から誘導された最も活性な成分、（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ｃは０．００２μｇ／ｍＬのＧＩ５０においてＰＣ−６及びＰＣ−１２（多剤耐性）ガン細胞ラインのｉｎ  ｖｉｔｒｏ成長を抑制した。
【００２８】
（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ｂ及び９ｃの両者に比較する時、ジオキソスタチン（９ａ）によって示されるより大きい効能は、Ｂリングの２−及び３−位における近隣の水酸基がチューブリン重合の有効な抑制に対して重要であることを示す。９ｃに比較して９ａのチューブリンとの明らかにより大きい活性は、コンブレタスタチンＡ−１とコンブレタスタチンＡ−４が比較される時に一般に観察される小さいが再生可能な差異を拡大するように見える（表ＩＶ）。（最も直接的比較において、この２つの（Ｚ）−スチルベンはチューブリンアセンブリに類似の効果を有するが、コンブレタスタチンＡ−１はコルキシン結合の抑制剤として僅かにより有力である。）（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオキソレーン１０ａが（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーン９ｃと類似の活性を示す事実もまた興味がある（しかしながら反応条件及び蛋白製剤の異なった５．７μＭのＩＣ５０と４．６μＭのＩＣ５０が用いられた）。それは更にＢリングの２位及び３位における近隣の水酸基がこれらの化合物とチューブリンとの相互作用を増強するという結論を支持する。
【００２９】
真核細胞の微小管システムは抗ガン剤の開発に対する重要な目標である。ジオキソスタチン（９ａ）はチューブリンアセンブリの抑制において大きな進歩を示すので、臨床前開発の目標となった。その目的に向かって、（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーンプロドラッグ２１の合成が開始された。２リン酸化（見よ：Ｐｅｔｉｔ，Ｇ．Ｒ．；Ｒｈｏｄｅｓ，Ｍ．Ｒ．Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  ３８９）。Ｎｅｗ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ  Ａ−４  Ｐｒｕｇ．Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．１９９８，１３，１８３−１９１；Ｐｅｔｉｔ，Ｇ．Ｒ．；ａｎｄ  Ｌｉｐｐｅｒｔ，Ｊ．Ｗ．ＩＩＩ．Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  ４２９．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ  Ａ−１  ａｎｄ  Ｃｏｍｂｒｅｔｓｔａｔｉｎ  Ｂ−１  Ｐｒｏｄｒｕｇ．Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．２０００，（ａｃｃｅｐｔｅｄ）；ａｎｄ  Ｓｉｌｖｅｒｂｅｒｇ，Ｌ．Ｊ．；ａｎｄ  Ｖｅｍｉｓｈｅｔｉ，Ｐ．Ａ  Ｓｉｍｐｌｅ，Ｒａｐｉｄ  ａｎｄ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｅｎｏｌｓ  ｗｉｔｈ  Ｄｉｂｅｎｚｙｌ  Ｐｈｏｓｐｈｉｔｅ．Ｔｅｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９６，３７，７７１−７７４）。ジオキソスタチン（９ａ）はジベンジルフォスファイトで行われジフォスフェイト２０を生成した。僅かにプラスの水素圧でのベンジル基の水素化分解続いて無水メタノール中２リン酸のナトリュームメトキシドとの反応はテトラナトリュームフォスフェイトプロドラッグ（Ｓ，Ｓ）−２１を好収率で与えた。ジフォスフェイト誘導体はホスファターゼと好ましい水溶性によるそのビオラビリチーのため選ばれた。フォスフェイトプロドラッグは、ある種の抗ガン剤及びコンブレタスタチンＡ−１及びＡ−４、パンクラチスタチン、チロシン含有ペプチド及びエトポサイドの如き他のタイプの薬剤と配する時、価値のある改良があることが証明された。該当する構造は下記の図式３で説明する。
【００３０】
【図式３】
2004515452.tif 000010
試薬と条件：
（ａ）ＨＰ（Ｏ）（ＯＢｎ）２，ＤＭＡＰ，ＤＩＰＥＡ，ＣＣｌ４，ＣＨ３ＣＮ，−１０℃；
（ｂ）Ｈ２，１０％Ｐｄ／Ｃ，ＥｔＯＨ；
（ｃ）ＮａＯＣＨ３，無水ＭｅＯＨ
【００３１】
（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオキソレーンプロドラッグ（２１）は、ネズミＰ３８８リンパ線白血病細胞ラインに対し、活性において親化合物ジオキソスタチン９ａの１０倍増の０．２μｇ／ｍＬのＥＤ５０を示すことが発見された。また、ジフォスフェイト２１は３５ｍｇ／ｍＬ以上の水溶性を有することが示された。プロドラッグ２１はチューブリンアセンブリの抑制剤としては不活性であり、そしてこの族の化合物における全ての他のリン酸化誘導体でのケースであった。
【００３２】
（実験部分）
（一般的実験手段）
酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、ヘキサン，及びジクロロメタン（ＤＣＭ）は再蒸留した。ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、及びジブロモメタンはＦｉｓｈｅｒ−Ａｃｒｏｓ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ．から、メトキシメチルクロライド（ＭＯＭＣｌ）を含むその他全ての試薬はＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙからであった。水溶液の溶媒抽出物は無水硫酸ナトリュームで乾燥した。カラムクロマトグラフィはフラッシュシリカゲル（２３０−４００ｍｅｓｈＡＳＴＭ）かグラビチーシリカゲル（７０−２３０ｍｅｓｈＡＳＴＭ）のいづれかを用いて行われた。アナルテックシリカゲルＧＨＬＦ板がＴＬＣのため用いられた。化合物は蛍光の短波光（２５４ｎｍ）でビジブルあった。
【００３３】
融点はＥｌｅｃｔｒｏｔｈｅｒａｍａｌ９１００装置を用いて測定したが不正確である。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルはＶａｒｉａｎＶＸＲ−３００ＭＨＺ又はＵｎｉｔｙ５００ＭＨｚ装置を用いて作り、国内標準としてＴＭＳを参照した。質量分析のデータは、Ｖａｒｉａｎ  ＭＡＴ３１２機器（ＥＩＭＳ）、又はＬａｓｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ窒素レーザ（マトリックスとして４−ヒドロキシベンジリデンマロノニトリル及びカリブレイシヨン目的に対する形式的標準としてシトクロムＣを有する３ｎｓデユレイシヨンの３３７ｎｍライトプルス（ＴＯＦＭＳ））を有するＶｅｓｔｅｃ  Ｌａｓｅｒｔｅｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈマススペクトルメータを用いて記録した（参照：Ｂｒｕｎｅ，Ｄ．Ｃ．；Ｃｈｅｕｎｇ，Ｊ．４−ヒドロキシベンジリデンマロノニトル：水不溶性検体のＭＡＬＤＩに対する有用なマトリックス．Ｐｒｏｃ．４５ｔｈＡＳＭＳ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ  ａｎｄ  Ａｌｌｉｅｄ  Ｔｏｐｉｃｓ．Ｐａｌｍ  Ｓｐｒｉｎｇｓ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｊｕｎｅ  １−５，１９９７）。このＩＲスペクトラはＭａｔｔｏｎｓｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ２０２０  Ｇａｌａｘｙ  Ｓｅｒｉｅｓ  ＦＩＴＲ機器で得られた。ＵＶスペクトラはＨｉｔａｃｈｉ  Ｕ−２０００ＵＶ／ＶＩＳスペクトロフォトメータを用いて得られた。光学回転値はＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ２４１ポラリメータを用いて記録された。元素分析はＧａｌｂｒａｉｔｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ，ＴＮによって定められた。
【００３４】
（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシ−１−〔２’，３’−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−４’−メトキシフェニル〕−２−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−エタン（６）。磁気攪拌棒を含む１００ｍｌのホイルラップした丸底フラスコに、蒸留水（１４ｍｌ），ｔｅｒｔ−ブチルアルコール（１４ｍｌ），ＡＤ混合−β（３．８ｇ；１．４０ｇ／ｍｍｏｌ）及びメタンスルフォンアミド（０．２７ｇ：２．８５ｍｏｌ）を加えた。０℃に冷却する前に混合物は数分間室温で攪拌した。化合物が沈殿し始め、２’，３’−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−３．４．４’，５−テトラメトキシ−（Ｅ）−スチルベン（２ａ）（１．４ｇ；２．５４ｍｍｌ）を直ちに加えた（参照：Ｐｅｔｉｔ，Ｇ．Ｒ．；Ｌｉｐｐｅｒｔ，ＩＩＩ，Ｊ．Ｗ．；Ｐｅｔｉｔ，Ｒ．Ｋ．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ｉｎ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ），そしてスラリーを０℃で８時間、室温で２４時間激しく攪拌した。亜硫酸ナトリューム（３．９ｇ；３０．９ｍｍｏｌ；１２ｅｑ）を加え、混合物を更に０．５時間攪拌した。生成物をＥｔＯＡｃ（４ｘ５０ｍＬ）で抽出し，結合有機相を２ＮＫＯＨ（ａｑ）で洗い乾燥した。溶媒をｉｎ  ｖａｃｕｏで蒸発させて脱黄色の固体を得た。これをシリカゲルに吸収させ、フラッシュコラムクロマトグラフ（溶離剤成分ヘキサン：ＥｔＯＡｃ９：１〜１：１）にかけて透明な油を得た。これをヘキサンから結晶させて無色のふわふわした固体（０．９４ｇ；２ａ０．２３ｇに基づき７４％）を得た：ｍ．ｐ．１２２−１２３℃；Ｒｆ０．５０（１：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；〔α〕Ｄ２５＋４６°（ｃ１，２，ＣＨＣｌ３）；ＩＲ（ｎｕｊｏｌ）Ｖｍａｘ３５２６，１５９５，１２５１，１１２４，１０９７，８３１，７８１ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ−０．１６（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），−０．０５０（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），０．０４０（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），０．１７（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），０．８９（９Ｈ，ｓ，Ｃ４Ｈ９），２．４５（１Ｈ，ｄ，ｊ＝１．７Ｈｚ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ置換），２．８９（１Ｈ，ｄ，ｊ＝１．２Ｈｚ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ置換），３．７２（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），３．７５（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．７６（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．６６（１Ｈ，ｄｄ，ｊ＝７．５Ｈｚ，ｊ＝２．４Ｈｚ，ＣＨ），５．０６（１Ｈ，ｄｄ，ｊ＝７．８ｚ，ｊ＝３．３Ｈｚ，ＣＨ），６．３３（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．５９（１Ｈ，ｄ，ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｈ−５’），７．０５（１Ｈ，ｄ，ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−６’）；ＥＩＭＳｍ／ｚ５９４（Ｍ＋，５），５１９（９５），３９７（１００），３３９（１０），１９８（９５）；Ｃ５９．７０％，Ｈ８．５０％；Ｃ３０Ｈ５０Ｏ８Ｓｉ２ｅｌ／２Ｈ２Ｏに対する計算値Ｃ５９．８０％，Ｈ８．５０％。
【００３５】
（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシ−１−（２’，３’−ジヒドロキシ−４’−メトキシフェニル）−２−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−エタン（３ｂ）。
無水のＴＨＦ（４ｍＬ）中の（Ｒ，Ｒ）−ジオル−６（０．２４ｇ；０．３９７ｍｍｏｌ）の溶液にＴＢＡＦ（０．８４ＴＢＡＦＬ；０．８４ｍｏｍｌ；２．１ｅｑ；ＴＨＦｓｏｌｎ  １Ｍ）を予め炎乾燥しておいたフラスコの中で加えた。２０分後反応を氷温の６Ｎ  ＨＣＬで終わらせ、ＥｔＯＡｃ（４ｘ２０ｍＬ）で抽出した。この結合有機相を飽和ＮａＣｌ（ａｑ）で洗い乾燥した。有機溶剤を除去し黒っぽい油を得た。これをコラムクロマトグラフ（６６：３３：１ＥｔＯＡｃ−ヘキサン−ＡｃＯＨ）にかけてあめ色の油を得た。これをＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶させて無色の固体（７５ｍｇ；５２％）を得た：
ｍ．ｐ．６４−６６℃；Ｒｆ０．３６（６６：３３：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ−ＡｃＯＨ）；〔α〕Ｄ２５＋５６°（ｃ１，１，ＣＨＣｌ３）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）Ｖｍａｘ３４２５，２９３９，１５９３，１４５４，１３２７，１２３４，１１４５ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．７０（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），３．７９（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８０（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，ＣＨ），４．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ），６．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−５’），６．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’），６．３３（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”）；ＥＩＭＳｍ／ｚ３４８（Ｍ＋−Ｈ２Ｏ，６０），３１９（９５），１９６（１００），１６７（１０），１５３（２５）；Ｃ５７．５９％，Ｈ６．１８％；Ｃ１８Ｈ２２Ｏ８・１／２Ｈ２Ｏに対する計算値Ｃ５７．４１％，Ｈ６．２５％。
【００３６】
（１Ｓ，２Ｓ）−１，２−ジヒドロキシ−１−〔２’，３’−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−４’−メトキシフェニル〕−２−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−エタン（５）。
（Ｒ，Ｒ）−ジオール６の製造のため上述した不斉ジヒドロキシ化反応条件をＡＤ−ｍｉｘ−αを用いて（Ｅ）−オレフィン２ａ（１．５６ｇ；２．７８ｍｍｏｌ）に適用しふわふわした無色の固体（１．２ｇ；７５％）（Ｓ，Ｓ）−ジオールを得た。ｍ．ｐ．１２２−１２３℃；Ｒｆ０．５０（１：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）〔α〕Ｄ２５−４６°（ｃ１，３，ＣＨＣｌ３）；ＩＲ（ｎｕｊｏｌ）Ｖｍａｘ３５２４，２３６１，１５９３，１２５１，１１２４，１０９７，９５４，８３１ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ−０．１６（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），−０．０５（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），０．０４（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），０．１７（３Ｈ，ｓ，ＳｉＣＨ３），０．８９（９Ｈ，ｓ，Ｃ４Ｈ９），１．０１（９Ｈ，ｓ，Ｃ４Ｈ９），２．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ置換）、２．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ置換），３．７２（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），３．７５（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．７６（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，ＣＨ），５．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，ＣＨ），６．３３（２Ｈ，ｓＨ−２”，Ｈ−６”），６．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７ＨＺ，Ｈ−５’），７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−６Ｈ’）；ＥＩＭＳｍ／ｚ５９４（Ｍ＋，１０），５１９（９５），３９７（１００），３３９（２０），１９８（１００），Ｃ５９．７０％，Ｈ８．５０％；Ｃ３０Ｈ５０Ｏ８Ｓｉ２・１／２Ｈ２Ｏに対する計算値Ｃ５９．６６％，Ｈ８．６１％。
【００３７】
（１Ｓ，２Ｓ）−１，２−ジヒドロキシ−１−［２’，３’−ビス−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニロキシ）−４’−メトキシ−フェニル］−２−（３”−４”，５”−トリメトキシ−フェニル）−エタン  ヘミハイドレイト（５）のＸ−線結晶構造。
メタノール−ヘキサン溶液から得られた０．４０ｘ０．４０ｘ０．０６ｍｍの薄板をＳｕｐｅｒ  Ｇｌｕｅでグラスファイバーの先に乗せた。データ収集を単斜晶系に対して２７”１Ｅで行い、全ての反射がω／２θスキャンテクニックを用いて計られる完全なクオドラント（２θ〈１３０°）にほぼ合致した。フリーデル反射も独自の反射のつどすみやかにできるかぎり集めた。次にＸＰＲＥＰを使用する完全反射データセットの統計的分析（参照：ＳＨＥＬＸＴＬ−ＰＣ，バージョン５．１，１９９７，回析データから結晶構造を測定するための統合的ソフトシステム、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ−ｒａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ  ５３７１９）。このパッケージは、例えば、ＸＰＲＥＰ，自動空間群測定プログラム；ＸＳ，測定データからＸ−線結晶構造を知るＢｒｕｋｅｒ  ＳＨＥＬＸＬ溶液用モジュール；ＸＬ，結晶構造用Ｂｒｕｋｅｒ  ＳＨＥＬＸＬモジュール；ＸＰ，結晶構造用Ｂｒｕｋｅｒ現場画像ディスプレイ  モジュール）プログラムを用いた完全な反射データの測定分析は空間群がＰ２１であることを示した。細胞の各不斉単位体は、水の２分子のように、親分子の４個の独立した分子を含むことが発見された。細胞データ：Ｃ３０Ｈ５０Ｏ８・１／２Ｈ２Ｏ，ａ＝１３．３０３（２），ｂ＝３２．４７５（７），ｃ＝１９．９６０（４），Å，Ｖ＝７１９３（３）Å３，λ（Ｃｕ  Ｋα）＝１．５４１７８Å，Ｚ＝８及びＦ．Ｗ．＝６０３．８９のためのｐｃ＝１．１１７ｇｃｍ−３，Ｆ（ＯＯＯ）＝２６１６。ローレンツ及び偏光補正の後、システマティク  アブセンスの反射と除去を同値に結合させ、１９０１７に独特な反射（Ｒ（ｉｎｔ）＝０．１１９５）を残させた。そのなかで、１３４３３は実際の（Ｉｏ〉  ２ｏ（Ｉｏ））と考えられ、構成溶液の適従と純化に使用された。リニア及び異方性減衰補正は実験に基づいたアブソープション補正（ｐｓｉ−スキャン級数に基づく）と同様にインテンシティーデータを適用する（参照Ｌｉｎ，Ｃ．Ｍ．；Ｓｉｇｇｈ，Ｓ．Ｂ．；ｃｈｕ，Ｐ．Ｓ．；Ｄｅｍｐｃｙ，Ｒ．Ｏ．；Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｊ．Ｍ．；Ｐｅｔｔｉｔ，Ｇ．Ｒ．；Ｈａｍｌ，Ｅ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｔｕｂｕｌｉｎ  ｗｉｔｈ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ａｎａｌｏｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｎｔｉｍｉｔｏｔｉｃ  Ａｇｅｎｔ  Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ：Ａ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｓｔｕｄｙ．Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９８，３４，２００−２０８；Ｐｅｔｔｉｔ，ＧＲ．；Ｓｉｎｇｈ，ＳＢ．；Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｊ．Ｍ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎｓ  Ｂ−３  ａｎｄ  Ｂ−４  ｆｒｏｍ  Ｃｏｍｂｒｅｔｕｍｃａｆｆｒｕｍ．Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９８８，５１，５１７−５２７；Ｎａｎｄｙ，Ｐ．；Ｓａｍｉｔｅｎｄｕ，Ｂ．；Ｇａｏ，Ｈ．；Ｈｕｉ，Ｍ．Ｂ．Ｖ．；Ｌｉｅｎ，Ｅ．Ｊ．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎｓ：Ａｃｌａｓｓ  ｏｆ  Ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉｍｉｔｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１９９１，８，７７６−７８１；Ｒｏｂｅｒｓｏｎ，Ｒ．Ｗ．；Ｔｕｃｋｅｒ，Ｂ．；Ｐｅｔｔｉｔ，Ｇ．Ｒ．Ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ  ｄｅｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  Ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔｕｓ  ｂｙ  Ｔｈｒｅｅ  Ｎｅｗ  Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ｄｒｕｇｓ：Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ  Ａ−４，Ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ  １０，及びＨａｌｉｃｈｅｎｄｒｉｎ  Ｂ．Ｍｙｃｏｌ．Ｒｅｓ．１９９８，１０２，３７８−３８２；Ｉｗａｓｉｔａ，Ｓ．Ａｎｔｉｍｉｔｏｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｕｂｕｌｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ．Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｖ．１９９３，１３，１８３−１９８）．構造測定はＳＨＥＬＸＳで達成された（参照：ＳＨＥＬＸＴＬ−ＰＣ，バージョン５．１，１９９７，回析データから結晶構造を測定するための一体化ソフト  システム、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ−ｒａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ  ５３７１９。このパッケージは、例えば、ＸＰＲＥＰ，自動空間群測定プログラム；ＸＳ，測定データからＸ−線結晶構造を知るＢｒｕｋｅｒ  ＳＨＥＬＸＬ溶液用モジュール；ＸＬ，結晶構造用Ｂｒｕｋｅｒ  ＳＨＥＬＸＬモジュール；ＸＰ，結晶構造用Ｂｒｕｋｅｒ現場画像ディスプレイモジュール）。水溶液原子を含む５に対するすべての非−水素原子をプログラムのデフォルト設定に使うことにした。残った水素原子の位置を最適状態で予測した。後者の原子をそれらが配置している原子のＵｉｓｏ値１．２或いは１．５（構成原子のタイプに依って）に等しくサーマル変数を割り当てた。その結果、コーディネート及びサーマル値は原子がリファインメントの最終サークルの中に無理やり乗っていることがわかった。すべての非−水素原子をＳＨＥＬＸＴＬ−ＰＣソフト  パッケージのＳＨＥＬＸＬ（参照：ＳＨＥＬＸＴＬ−ＰＣ，バージョン５．１，１９９７，回析データから結晶構造を測定するための統合ソフト  システム、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ−ｒａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ５３７１９。このパッケージは、例えば、ＸＰＲＥＰ，自動空間群測定プログラム；ＸＳ，測定データからＸ−線結晶構造を知るＢｒｕｋｅｒ  ＳＨＥＬＸＬ溶液用モジュール；ＸＬ，結晶構造用Ｂｒｕｋｅｒ  ＳＨＥＬＸＬモジュール；ＸＰ，結晶構造用Ｂｒｕｋｅｒ現場画像ディスプレイモジュール）でフルマトリックス最小自乗リファインメント方法における異方性から不純物を除いた。図１で示したこのモデルの最終基準残差Ｒ値は測定値（１３４３３反射）で０．１４８４そして全データ（１９０１７反射）で０．１８５０だった。これに該当するシェルドレイクＲ値はそれぞれ０．３７０６及び０．４０３１のｗＲ２であった。フラック絶対構造パラメータχは図１で描かれたモデルに於いて０．０５（５）であった。従って、５に示され（そして期待されている）絶対原子の空間的配置は正しく、すなわち１Ｓ，２Ｓであることを表している。フーリエマップの最終差は残りの電子密度がシリコン原子によるものであると考えを示した。最も大きな凸と凹はそれぞれ０．６１及び−０．５５ｅ／Å３である。最終結合の距離と角度はすべて許容範囲内にあった。
【００３８】
（１Ｓ，２Ｓ）−１，２−ジヒドロキシ−１−（２’３’−ジヒドロキシ−４’−メトキシフェニル）−２−（３”，４”５”−トリメトキシフェニル）−エタン（４ｂ）。シリル  エーテル（Ｓ，Ｓ）−ジオール（０．３６ｇ；０．６１０ｍｍｏｌ）を（Ｒ，Ｒ）−ジオールの合成のために上述したように取り除いて無色の固体（０．１３ｇ；５９％）（Ｓ，Ｓ）−ジオール４ｂが得られた：ｍ．ｐ．６４−６６℃．Ｒｆ０．３６（６６：３３：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ−ＡｃＯＨ）；［α］Ｄ２５−５２°（ｃ０．９９，ＣＨＣｌ３）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）Ｖｍａｘ３４１８，２９３９，１５９３，１５１０，１４６２，１３２７１２９０，１２３４，１１２４ｃｍ−１１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ  ３．７３（６Ｈ，ｓ，２ｘ  ＯＣＨ３），３．８１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８３（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｈ−６’），６．３７（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”）；ＥＩＭＳｍ／ｚ３４８（Ｍ＋−Ｈ２Ｏ，２０），３１９（１５），１９６（１００），１６８（２０），１５３（１０）；Ｃ５７．５９％，Ｈ６．１８％，Ｃ１８Ｈ２２Ｏ８・１／２Ｈ２Ｏに対する計算値Ｃ５７．６１％，Ｈ６．２８％。
【００３９】
（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−ジアセトキシ１−［２’，３’−ｄｉ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−４’−メトキシフェニル］−２−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−エタン（８）。（Ｒ，Ｒ）−ジオル６（０．２１ｇ；０．３５１ｍｍｏｌ）溶液にするために無水ＤＣＭ（２ｍＬ）の中に無水酢酸（２６ｍＬ；２．７ｍｍｏｌ；７．８ｅｑ），ピリジン（０．２０ｍＬ；２．３５ｍｍｏｌ；６．７ｅｑ），及びＤＭＡＰ（５ｍｇ）の触媒量を加えた。３時間後、この反応を氷水で終わらせＥｔＯＡｃ（４ｘ２５ｍｌ）で抽出した。結合有機相を２Ｎ  ＨＣｌ次いで１０％ＮａＨＣＯ３（ａｑ）で洗い乾燥した。溶媒の除去（減圧）で透明な油が生じ、これをフラッシュコラムクロマトグラフ（１：１−ＥｔＯＡｃ）にかけて粗雑な生成物に分け、ヘキサンから結晶させて無色の固体（０．２４ｇ；９９％）を得た。
ｍ．ｐ．１２８−１２９℃．Ｒｆ０．６３（２：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；［α］Ｄ２５−２２°（ｃ１．４，ＣＨＣｌ３）；ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ６７８（Ｍ＋，５），６２１（４０），４３９（６０），３９７（１００），７３（３０）；Ｃ６０．１４％，Ｈ８．０１，Ｃ３４Ｈ５４Ｏ１０Ｓｉ２に対する計算値  Ｃ６０．３８％，Ｈ８．０９％。
【００４０】
（１Ｓ，２Ｓ）−１，２−ジアセチオキシ−［２’，３’−ｊジ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリロキシ）−４’−メトキシフェニル］−２−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−（７）。シリル  エーテル（Ｓ，Ｓ）−ジオル（０．２５ｇ；０．２４ｍｍｏｌ）を（Ｒ，Ｒ）−ジアセテート８の合成のために上述したようにアシル化して無色の固体（０．２８ｇ；９８％）を得た：
ｍ．ｐ．１２８−１２９℃．Ｒｆ０．６３（２：１ヘキサン−ＥｔＯＡＣ）；［α］Ｄ２５−２０°（ｃ１．３，ＣＨＣｌ３）；ＴＯＦＭＳ  ｍ／ｚ  ７１７，（Ｍ＋Ｋ）＋；Ｃ６０．１４％，Ｈ８．０１，Ｃ３４Ｈ５４Ｏ１０Ｓｉ２に対する計算値Ｃ６０．０８％，Ｈ８．０８％。
【００４１】
４−メトキシ−２，３−ジ（メトキシメトキシ）−ベンズアルデヒド（１２）。ＤＩＰＥＡ（７．９ｍＬ；４５ｍｍｏｌ；３ｅｑ）を２，３−ジヒドロキシ−４−メトキシ−ベンズアルデヒド（１１）（２．５ｇ；１５ｍｍｏｌ）の溶液にするため０℃でＤＭＦ（２０ｍＬ）の中に注射器で加えた。５分後、ＭＯＭＣＩ（２．６ｇ；３３ｍｍｏｌ；２．５ｅｑ）を１０分間に渡って加え０℃で１時間つづけて攪拌した。この反応は氷水で終わらせた。ついで、混合物をＥｔＯＡｃ（４ｘ５０ｍＬ）で抽出し、有機相を１０％ＮａＨＣＯ３（ａｑ）で洗い乾燥した。溶媒を蒸発させ（減圧）褐色の油を得た。これをシリカゲルに吸収させ、フラッシュコラムクロマトグラフ（５：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）にかけて透明な油を得た：ｂ．ｐ．１６４−１６５℃／（０．１１ｍｍＨｇ）；Ｒｆ０．５１（３：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ２５６（Ｍ＋，５％），２１１（１０％），１８０（１５％），１５１（１０％），４６（１００％）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ２９４５，１６８９，１５８７，１４９４，１４５４，１３８３，１２８１，１１５９，１０８０，８０８ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．５７（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．６１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．９３（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），５．１３（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．２７（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），６．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−５），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−６），１０．２９（１Ｈ，ｓ，ＣＨＯ）．Ｃ１２Ｈ１６Ｏ６・１／４Ｈ２Ｏに対する計算値Ｃ５６．２８％，Ｈ６．４６％。
実測  Ｃ５６．２９％，Ｈ６．２４％。
【００４２】
ジエチル３，４，５−トリメトキシベンジルホソホン酸塩（１４）。トルエン（１００ｍＬ）中にトリエチル  亜リン酸塩（２８ｍＬ；１６３ｍｍｏｌ；１ｅｑ）の溶液を加え，トルエン（１００ｍＬ）中に３，４，５−トリメトキシベンジル  ブロマイド（１３，４３ｇ；１６２ｍｍｏｌ）の溶液も加え攪拌し、その混合物を１８時間リフレックスで温めＲＴで６時間攪拌した。溶媒を蒸発させ（ｉｎｖａｃｕｏ）粗製油を得、蒸留した（３４ｇ；６６％）：ｂ．ｐ．２１２−２１４℃／（水流吸引機）；Ｒｆ０．１４（２：１，ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）；ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ３１８（Ｍ＋，１００％），３０３（２５％），１９５（１０％），１８１（９５％），１６７（２０％）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ３４６２，２９８２，１５９１，１５０４，１４５４，１３３４，１２４４，１１２４，１０２６，９６４ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．２７（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２ｘＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２１Ｈｚ，Ｐｈ−ＣＨ２），３．８３（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８５（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），４．０５（４Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２ｘＯＣＨ２ＯＣＨ３），６．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，Ｈ−２，Ｈ−６），．Ｃ１４Ｈ２３Ｏ６Ｐ・１／４Ｈ２Ｏに対する計算値Ｃ５２．０９％，Ｈ７．３３％。実測：Ｃ５２．３０％，Ｈ７．３２％。
【００４３】
３，４，５−テトラメトキシ２’，３’−（メトキシメトキシ）−（Ｅ）−スチルベン（１５）。無水のＴＨＦ（５０ｍＬ）の中にプロテクトされたアルデヒド１２（９．３ｇ；３６．３ｍｍｏｌ；１ｅｑ）の溶液及びホスホン酸塩１４（１２ｇ，３８．０ｍｍｏｌ；１ｅｑ）を加えＮａＨ（１．５ｇ；３８．０ｍｍｏｌ，６０％鉱油の中に分散；１ｅｑ）懸濁液と攪拌し、そして０℃で無水のＴＨＦ（５０ｍＬ）の中に１５−クラウン−５（０．２２ｍＬ；１．１１ｍｍｏｌ；０．３３ｅｑ）を加えた。１２時間攪拌した後、反応をＨ２Ｏで止めた。この反応混合物を次いでＥｔＯＡｃ（４ｘ１００ｍＬ），で抽出し、有機相をｓａｔ．ＮａＣｌ（ａｑ），及び１０％ＮａＨＳＯ４（ａｑ）で洗い乾燥した。減圧で溶媒を除去し黄色い油を得た。これをフラッシュコラムクロマトグラフ（５：１−ＥｔＯＡｃ）にかけて透明な油を得た。これをＥｔＯＡｃ−ヘキサン（１１ｇ；７０％）から結晶させた：ｍ．ｐ．９６−９７℃；Ｒｆ０．３８（３：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ４２０（Ｍ＋，１００％），３７５（５０％），３４４（１００％），３２９（１００％），１８１（４０％）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ２９４１，１５８１，１５０４，１４６４，１２４０，１１２６，１０１０，９７０，９２７，８２１ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．５６（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．６２（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．８７（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８８（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．９０（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），５．１４（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．１８（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），６．７４（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５’），６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，−ＣＨ＝ＣＨ−），７．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，−ＣＨ＝ＣＨ−），７．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−６’），Ｃ２２Ｈ２８Ｏ８に対する計算値Ｃ６２．８５％，Ｈ６．７１％。実測  Ｃ６２．９５％，Ｈ６．７１％。
【００４４】
（１Ｓ，２Ｓ）−１，２−ジヒドロキシ−１−［４’−メトキシ−２’，３’−ジ（メトキシメトキシ）−フェニル］−２−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−エタン（１６）。（Ｒ，Ｒ）−ジオール１７を含んでいる非対称ジヒドロキシ化反応状態は後述するが（Ｅ）−オレフィン１５（１．４ｇ，３．３ｍｍｏｌ）を用いＡＤ−ｍｉｘ−αにかけて無色のふわふわした軽い固体を得た。これをヘキサン（１．３ｇ；８２％）から結晶させた。ｍ．ｐ．１２２−１２３℃；Ｒｆ０．３７（２：１，ヘキサン−ＥｔｏＡｃ）；［α］Ｄ２５−８３°（ｃ＝０．７９，ＣＨＣｌ３），ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ４３６（Ｍ＋，−Ｈ２Ｏ，５％），３３１（１０％），２５７（１０％），１９７（２０％），１８１（６０％）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ３４５４，２９４１，１５９３，１４９８，１４５６，１２３６，１１５７，９７０，９２７ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．５３（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．５６（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．７３（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），３．７８（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），４．９８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．０  Ｊ＝２．０Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．０６（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，ＣＨ），５．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＣＨ），６．４２（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−６’）。Ｃ２２Ｈ３０Ｏ１０に対する計算値Ｃ５８．１４％，Ｈ６．６５％。実測  Ｃ５８．２４％，Ｈ６．６５％。
【００４５】
（１Ｒ，２Ｒ）−１，２−ジヒドロキシ−１−［４’−メトキシ−２’，３’−ジ（メトキシメトキシ）フェニル］−２−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−エタン（１７）。磁気攪拌棒を含む５０ｍｌのホイルラップした丸底フラスコに蒸留水（２０ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール（２０ｍＬ）、ＡＤ・混合・β（５ｇ，１．４０ｇ／ｍｍｏｌ）及びメタンスルフォンアミド（０．３４ｇ，２．９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を数分間室温で攪拌し０℃に冷やした。するとすぐに、いくらかの塩が沈殿した。直ちに、スチルベン１５（１．４ｇ；３．３ｍｍｏｌ）を加え、この懸濁液を０℃で８時間そして室温で２４時間激しく攪拌した。亜硫酸ナトリューム（３．９ｇ；３１ｍｍｏｌ；１２ｅｑ）を加え混合物を更に０．５時間攪拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（４ｘ２５ｍＬ）で抽出し、結合有機相を２Ｎ  ＫＯＨ（ａｑ）で洗い乾燥した。溶媒をｉｎ  ｖａｃｕｏで蒸発させ淡黄色の固体を得た。これをフラッシュコラムクロマトグラフ（溶離剤成分ヘキサン：ＥｔＯＡｃ３：１〜１：４）にかけヘキサン（１．４ｇ；８９％）から再結晶させて無色のふわふわした固体（Ｒ，Ｒ）−ジオール１７を得た；ｍ．ｐ．１２２−１２３℃；Ｒｆ０．３７（２：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；［α］Ｄ２５＋８５°（ｃ＝０．８７，ＣＨＣｌ３），ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ４５４（Ｍ＋，５％），２５７（２０％），２４２（２０％），１９８（４０％），１８１（８５％）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ３４４５，２９４１，１５９３，１４９８，１４５６，１２３６，１１５７，１１２６，９７２，９２７ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．５３（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．５５（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．７３（６Ｈ，ｓ，２ｘ  ＯＣＨ３），３．７８（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８２（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），４．９７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５  Ｊ＝２．１Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．０６（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＣＨ），５．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，ＣＨ），６．４２（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−５’），６．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−６’）。Ｃ２２Ｈ３０Ｏ１０に対する計算値Ｃ５８．１４％，Ｈ６．６５％。実測Ｃ５８．１７％，Ｈ６．７９％。
【００４６】
（４Ｓ，５Ｓ）−４−［４’−メトキシ−２’，３’−ジ（メトキシメトキシ）フェニル］−５−（３”，４”，５”−）−１，３−ジオクソラン（１８）。表題の化合物は（Ｒ，Ｒ）−１，３−ジオクソラン１９の合成で述べたのと同じ反応条件で製造されるが、（Ｓ，Ｓ）−ジオール１６（２．１ｇ；４．７ｍｍｏｌ）は（Ｓ，Ｓ）−１，３−ジオクソラン１８を用いて透明な油（１．８ｇ；７９％）を得た。
Ｒｆ０．５４（２：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；［α］Ｄ２５＋１００°（ｃ＝０．４６，ＣＨＣｌ３）；ＴＯＦＭＳｍ／ｚ４８９（Ｍ＋Ｎａ）＋；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ２９４１，１５９３，１４９８，１４６０，１４２１，１１５７，１１２８，１０８９，９６８，９２５ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．３１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．５５（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．８２（９Ｈ，ｓ，３ｘＯＣＨ３），３．８７（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ＣＨ），４．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＣＨ），５．３９（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），５．４４（１Ｈ，ｓ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，ＣＨ架橋），６．５７（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−５’），７．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’）。Ｃ２３Ｈ３０Ｏ１０に対する計算値Ｃ５９．２２％，Ｈ６．４８％。実測  Ｃ５９．３０％，Ｈ６．３１％。
【００４７】
（４Ｒ，５Ｒ）−４−［４’−メトキシ−２’，３’−ジ（メトキシメトキシ）フェニル］−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−１，３−ジオクソラン（１９）。ＮａＯＨ（９．２ｇ；２３０ｍｍｏｌ；７５ｅｑ）のＨ２Ｏ（１０ｍＬ）溶液をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中の（Ｒ，Ｒ）−ジオール１７（１．４ｇ；３．１ｍｍｏｌ）、ジブロモメタン（６．５ｍＬ；９２ｍｍｏｌ；３０ｅｑ），トリメチルアンモニウムブロマイド（０．１１ｇ；０．２９ｍｍｏｌ；０．０９ｅｑ）溶液に攪拌しながら１０分間以上にわたってゆっくり注ぎ込んで加える。４．５時間後、この淡黄色の溶液をＣＨ２Ｃｌ２（４ｘ２５ｍＬ）で抽出し、抽出したもの全てをＨ２Ｏで洗い乾燥した。溶媒をｉｎ  ｖａｃｕｏで濃縮して黄色い油を得た。これをフラッシュコラムクロマトグラフ（溶離剤  ２：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で分離し透明な油（０．９８ｇ；６９％）のジオクソラン１９を得た：Ｒｆ０．５１（２：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；［α］Ｄ２５＋９１°（ｃ＝０．６３，ＣＨＣｌ３）；ＴＯＦＭＳ  ｍ／ｚ  ４８８（Ｍ＋Ｎａ）＋；  ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ２９４１，１５９３，１４９８，１４５６，１４１９，１１５７，１１２６，１０８７，９６６，９２３ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．３１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．５５（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），３．８２（９Ｈ，ｓ，３ｘＯＣＨ３），３．８７（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，ＣＨ），４．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，ＯＣＨ２ＯＣＨ３），５．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＣＨ），５．３９（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），５．４４（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），６．５８（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−５’），７．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’）。Ｃ２３Ｈ３０Ｏ１０に対する計算値Ｃ５９．２２％，Ｈ６．４８％。実測  Ｃ５９．１９％，Ｈ６．６０％。
【００４８】
（４Ｓ，５Ｓ）−４−（２’，３’−４’−メトキシフェニル）−５−（３”−，４”，５”−トリメチルフェニル）−１−３−ジオクソラン［ジオクソｓッタチン］（９ａ）。ＴＦＴ（１０ｍＬ）及びＩＰＡ（４ｍＬ）中の締めトキシメチルエーテル１８（１．７ｇ；３．６４ｍｍｏｌ）の溶液を攪拌して６Ｎ  ＨＣＬ（６ｍＬ；３６ｍｍｏｌ；９ｅｑ）に加えた。１６時間後、この淡黄色混合物をＣＨ２Ｃ１２（４ｘ２０ｍＬ）で抽出し、結合有機抽出物を塩水で洗い乾燥した。溶媒をｉｎ  ｖａｃｕｅで濃縮して淡茶色の油を得た。これをコラムクロマトグラフ［重力コラム（遊離剤４９：５０：１ヘキサン−ＥｔＯＡｃ−ＡｃＯＨ）にかけて無色なふわふわした固体を得た。これをＥｔＯＡｃ−ヘキサン（０．８２ｇ；５９％）から再結晶した。ｍ．ｐ．１５１−１５２℃；Ｒｆ０．８４（６６：３３：１，ＥｔＯＡｃ−ヘキサン−ＡｃＯＨ）；［α］Ｄ２５−６８°（ｃ＝１．１６，ＣＨＣｌ３）；ＴＯＦＭＳ  ｍ／ｚ  ３９９（Ｍ＋Ｎａ）＋；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ３４５２，３２８８，１５９３，１４６４，１３２７，１２９２，１２３６，１１２４，１０９３ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．８１（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），３．８４（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８９（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．９１（２Ｈ，ｓ，２ｘＣＨ），５．４０（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），５．４６（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ，置換），５．４９（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），６．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｈ−５’），６．４７（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ置換），６．５３（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’）。Ｃ１９Ｈ２２Ｏ８・１／４Ｈ２Ｏに対する計算値Ｃ５９．６０％，Ｈ５．９２％。実測  Ｃ５９．８１％，Ｈ６．２３％。
【００４９】
（４Ｒ，５Ｒ）−４＝（２’，３’−ジヒドロキシ−４’−メトキシフェニル）−５−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−１，３−ジオクソラン（１０ａ）。ジメトキシメチル  エーテル１９（０．９０ｇ，１．９ｍｍｏｌ）を再準備して（ジフェノール９ａを含む上述した如く）再使用して無色のふわふわした固体を得た：ｍ．ｐ．１５１−１５２℃；Ｒｆ０．８９（６６：３３：１，ＥｔＯＡｃ−ヘキサン−ＡｃＯＨ）；［α］Ｄ２５＋７１°（ｃ＝１．１３，ＣＨＣｌ３）；ＴＯＦＭＳ  ｍ／ｚ３９９（Ｍ＋Ｎａ）＋；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ３４４７，３２８４，１５９３，１５１０，１４６４，１３２９，１２９６，１２３６，１１２６，１０９５ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３，８１（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），３．８４（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．８９（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．９１（２Ｈ，ｓ，２ｘＣＨ），５．３９（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），５．４６（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ，置換），５．４９（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），６．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｈ−５’），６．４７（１Ｈ，ｂｒｓ，ＯＨ，Ｄ２Ｏ置換），６．５３（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，Ｈ−６’）。Ｃ１９Ｈ２２Ｏ８に対する計算値Ｃ６０．３１％，Ｈ５．８６％。実測  Ｃ５９．９６％，Ｈ６．１５％。
【００５０】
（４Ｓ，５Ｓ）−４−（２’，３’−Ｏ−ジ［ビス（ベンジル）ホテホリル］−４’−メトキシフェニル）−５−（３”，４”，５”−トリメトキシフェニル）−１，３−ジオクソラン（２０）。アセトニトリル（１０ｍＬ）中のジフェノル９ａ（０．２ｇ；０．５３ｍｍｏｌ）の溶液を−２０℃で冷やした。四塩化炭素（０．６ｍＬ；５．３ｍｍｏｌ；１０ｅｑ）を加えた。ここで出来た溶液をＤＩＰＥＡ（０．４ｍＬ；２．２ｍｍｏｌ；４．２ｅｑ，注射器により）及びＤＭＡＰ（１５ｍｇ；０．１１ｍｍｏｌ；０．２ｅｑ）を加える前に１０分間攪拌した。約１分後、ジベンジル亜リン酸塩（０．３４ｍＬ；１．５ｍｍｏｌ；２．９ｅｑ）をゆっくり（点滴）加え、反応速度を−２０℃以下に保ちながら行った。４５分間攪拌した後、０．５Ｍ  ＫＨ２ＰＯ４（ａｑ）を加え、反応混合物を室温で温めた。この混合物をＥｔＯＡｃ（４ｘ１５ｍＬ）で抽出した、そして結合有機相を続いて飽和ＮａＣｌ（ａｑ）、水で洗い乾燥させた。減圧して溶媒を除去し黄色い油を得た、これをフラッシュコラムクロマタグラフ（３：２ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）で分け透明な油０．４３ｇ（９０％）を得た：Ｒｆ０．２４（１：１，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）；［α］Ｄ２５−５５°（ｃ＝０．８３，ＣＨＣｌ３）；ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ８９８（５％，Ｍ＋，７７８（１０％），５４６（５％），１８１（２０％），９１（１００％）；ＩＲ（ｆｉｌｍ）ｖｍａｘ２９４４，１５９３，１５０６，１４５８，１２９６，１１２６，１０９９，１０１４，８９８，７４０ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．７０（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．７６（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），３．８１（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），４．７５−５．１１（８Ｈ，ｍ，  ４ｘＣＨ２−Ｐｈ），５．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＣＨ），５．２９（１Ｈ，ｓ，ＣＨ置換），５．４１（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），５．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，ＣＨ），６．５７（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，Ｈ−５’），７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，Ｈ−６’），７．０７−７．２５（１５Ｈ，ｍ，４ｘＣ６Ｈ５），７．３０（５Ｈ，ｍ，Ｃ６Ｈ５）；  １３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  １５３．２９，１５２．１３，１３７．５３，１３５．７４，１３５．３５，１３３．５４，１２８．３６，１２７．８４，１２７．６９，１２７．６１，１２４．４８，１２３．６５，１１０．０６，１０２．９４，９５．９０，８４．６９，７８．７３，７７．６２，７０．０４，６９．６７，６０．６１，５６．２４，５６．０１；  ３１ＰＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ−４．７９，−４．８６．Ｃ４７Ｈ４８Ｏ１４Ｐ２に対する計算値Ｃ６２．８１％，Ｈ５．３８％。実測  Ｃ６２．７２％，Ｈ５．３４％。
【００５１】
テトラソジウム−（４Ｓ，５Ｓ）−４−（２’，３’−Ｏ−ジホスノン酸塩−４’−メトキシフェニル）−５−（３”−４”−５”−トリメトキシフェニル）−１，３−ジオクソラン（２１）。ＥｔＯＨ（フラスコの中で水素化  ５ｍＬ）にテトラベンジルジホスホン酸溶液を１０％Ｐｄ／Ｃ（０．１４ｇ）を加える。このフラスコを空にし２時間水素の空気に曝した。（バルーン）。カリタに通して溶液を濾し、次いで溶媒を蒸発させ（ｉｎ  ｖａｃｕｏ）透明な油を得た。無水のＭｅＯＨ（５ｍＬ）を粗リン酸その後にＮａＯＣＨ３（０．１１ｇ；１．９ｍｍｏｌ；４ｅｑ）に加えた。この混合物を１２時間攪拌し、添加時点でＭｅＯＨを生成物が溶けるまで加えた。
ＭｅＯＨ中の生成物を集め（濾過）、次いで、ｉｎ  ｖａｃｕｅで蒸発させ粗い無色の固体を得た。これをＨ２Ｏ／ＥｔＯＨで再沈殿させて無色の粉（０．２２ｇ，７２％）を得た：ｍ．ｐ．１６６−１６８℃  ｄｅｃ．；［α］Ｄ２５−６８°（ｃ＝１．０５，Ｈ２Ｏ）；ＵＶλｍａｘ（Ｈ２Ｏ）２８５ｎｍ（ｌｏｇε，３．１７）；ＩＲ（ＫＢｒ）ｖｍａｘ３３７５，２９３９，１５９１，１４９６，１４５４，１２９６，１１６８，１０２０，１０９５，９８５ｃｍ−１；１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ３．５９（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．６８（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３），３．７１（６Ｈ，ｓ，２ｘＯＣＨ３），５．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，ＣＨ），５．１５（１Ｈ，ｓ，ＣＨ架橋），５．１８（１Ｈ，ｓ，架橋），５．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，ＣＨ），６．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ−５’），６．７１（２Ｈ，ｓ，Ｈ−２”，Ｈ−６”），７．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ−６’），  １３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ／ＣＤ３ＯＤ）δ  １５４．６９，１５３．７０，１４７．４２，１３７．６９，１３５．８６，１２４．１５，１２２．０９，１０８．２６，１０５．５３，９５．５５，８３．１９，７９．７５，６１．６８，５７．１７，５６．７４．３１Ｐ  ＮＭＲ（２０２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）  δ１．７９，１．９７．ＬＲＦＡＢ  ＭＳ  ｍ／ｚ６０３［（アニオン＋３Ｎａ）−，２５％］，５８１［（アニオン＋２Ｎａ＋Ｈ）−，７０％］，５５９［（アニオン＋Ｎａ＋２Ｎ）−，１００％］。
【００５２】
（チューブリンアッセイ）
既に述べたように、チュブリン重合及びコルヒチン  ビンディング実験を行った（参照：Ｖｅｒｄｉｅｒ−Ｐｉｎａｒｄ，Ｐ．；Ｌａｉ，Ｊ−Ｙ．；Ｙｏｏ，Ｈ−Ｄ．；Ｙｕ，Ｊ．；Ｍａｒｑｕｅｚ，Ｂ．；Ｎａｇｌｅ，Ｄ．Ｇ．；Ｎａｍｂｕ，Ｍ．；Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｄ．；Ｆａｌｃｋ，Ｊ．Ｒ．；Ｇｅｒｗｉｃｋ，Ｗ．Ｈ．；Ｄａｙ，Ｂ．Ｗ．；Ｈａｍｅｌ，Ｅ．Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ１９９８，５３，６２−７６）．重合分析に用いられるＢｅｃｋｍａｎ  ＤＵ７４００／７５００分光測光器は温度コントローラーが使われている“高性能”が装備されていた。以前使われていたマニュアルでコントロール可能なＧｉｌｆｏｒｄ分光測光器と違って、このＢｅｃｋｍａｎの機器はマイクロプロセッサー制御であり、分析に必要とされるプログラムはＭＤＢ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ａｓｓｃｉａｔｓ，Ｓｏｕｔｈ  Ｐｌａｉｎｆｉｅｌｄ，ＮＪ．から供給された。しかしながら、Ｂｅｃｋｍａｎの機器は０ＥＣを保つことができず、分析の低い温度で２及び４ＥＣの間で変動した。また一方、温度変化ではより激しく、約２０秒そして１００秒には逆ジャンプをとりながら３０ＥＣまでジャンプした。
【００５３】
（抗微生物感受性試験）
化合物を確立されているディスク感受性検査プロトコルにより、次のバクテリアすなわちＳｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ  ｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ，Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｌｕｔｅｕｓ，Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ，Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ，Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ，Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ，Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，Ｎｅｔｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ，ならびに次の菌類すなわちＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓおよび  Ｃｒｉｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓについてスクリーニングを行った。（参照：Ｏｓｂｕｍｉ，Ｋ．；Ｎａｋａｇａｗａ，Ｒ．；Ｙｕｍｉｋｏ，Ｆ．；Ｈａｔａｎａｋａ，Ｔ．；Ｍｏｒｉｎａｇａ，Ｙ．；Ｎｉｈｅｉ，Ｙ．；Ｏｂｉｓｈｉ，Ｄ；Ｓｕｇａ，Ｙ．；Ａｋｉｙａｍａ，Ｙ．；Ｔｓｕｊｉ，Ｔ．Ｎｏｖｅｌ  Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ  Ａｎａｌｏｇｕｃｓ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ
Ａｇａｉｎｓｔ  Ｍｕｒｉｎｅ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ：Ｄｅｓｉｇｎａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ．Ｊ．．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９８，４１，３０２２−３０３２；Ｍａｄａｒｄｅ，Ｍ．；Ｒａｍｏｓ，ａ．；
Ｃａｂａｌｌｅｒｏ，Ｅ．；Ｐｅｌａｅｚ−Ｌａｍａｍｉｅｄｅ
Ｃｌａｉｒａｃ，Ｒ，；Ｌｏｐｅｚ，Ｊ．Ｌ．；Ｇｒａｖａｌｏｓ，Ｄ．Ｇ．；Ｆｅｌｉｃｉａｎｏ，Ａ．Ｓ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄ  Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ
Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ｈｅｔｅｒｏｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎｓ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９８，３３，７１−７７）。
【００５４】
（投与について）
投与される用量は、新生物疾患の主体性、年齢や健康や体重を含めた患者のタイプ、同時治療をもし行っていればその種類、処置頻度や治療比率、などに依存するであろう。
具体的には、投与する活性成分の用量レベルは患者の体重あたりでは、静脈内投与では０．１約２００ｍｇ／ｋｇ、筋肉内投与では１から約５００ｍｇ／ｋｇ、経口投与５から約１０００ｍｇ／ｋｇ、経鼻投与では５から約１０００ｍｇ／ｋｇ、そしてエアゾールでは５から約１０００ｍｇ／ｋｇである。
【００５５】
濃度を用いて表すと、経皮、経鼻、経喉、経気管支、経膣、経直腸または経眼についての本発明組成物中に存在する活性成分は組成物の約０．０１から約５０％ｗ／ｗの濃度であり、好ましくは組成物の約１から約２０％ｗ／ｗの濃度であり；そして非経口投与のためには、組成物の約０．０５から約５０％ｗ／ｖであり、好ましくは組成物の約５から約２０％ｗ／ｖである。
好ましくは本発明の組成物はヒトや動物に対して、活性成分の適量を含む単位投与形態、たとえば錠剤、カプセル、ピル、粉末、顆粒、坐薬、滅菌非経口溶液または懸濁液、滅菌非非経口溶液または懸濁液などとして投与するために提供される。
【００５６】
経口投与のためには、固体または液体の投与形態が製造される。
粉末は、活性成分を適当に細かい大きさに粉砕し、そして同じように粉砕した希釈剤と混合することによって極めて簡単に製造される。希釈剤は、たとえば乳糖やデンプンのような可食性の炭水化物材料であってよい。有利には、香料油と同様に甘味剤や砂糖が存在している。
【００５７】
カプセル剤は、上述のようにして粉末混合物を作り、そして形成されたゼラチンの鞘の中へ充填して製造される。有利には充填作業前に、補助剤として、たとえばタルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、などのような潤滑剤を粉末混合物に加える。
軟ゼラチンカプセル剤は、活性成分のスラリーを、許容可能な植物油、液体軽油またはその他の不活性油やトリグリセライドと共に機械的カプセル化により製造される。
【００５８】
錠剤は、粉末混合剤を作製し、顆粒またはスラグとし、潤滑剤を添加し、そして打錠して製造される。粉末混合物は、適当に粉砕した活性成分を、たとえばデンプン、乳糖、カオリン、リン酸ジカルシウムのような希釈剤や基剤と混合して製造される。粉末混合物は、たとえばコーンシロップ、ゼラチン溶液、メチルセルロース溶液またはアラビアゴム粘液のような結合剤で湿らせ、そしてスクリーンを強制通過させて顆粒化させる。顆粒化の別法として、粉末混合物をスラグ化、すなわち打錠機を通過させ、得られた不完全な形の錠剤を粉砕（スラグ）とする。このスラグにステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱物油を添加することによって製錠用の型への付着を防ぐため潤滑化することができる。ついで潤滑化した混合物を圧縮して錠剤とする。
有利には錠剤は、シェラックの密閉被膜または腸溶性被膜から成る保護被覆、砂糖とメチルセルロースの被覆、およびカルナウバ蝋の研磨被覆をすることができる。
【００５９】
シロップ、エリキシル及び懸濁液のような経口投与のための液体単位投与形態は、組成物の一匙分が投与のための活性成分の一定量を含むように製造することができる。この水溶液の形態のものは、砂糖、香料および保存剤と共に水性のビヒクルに溶解してシロップとすることができる。エリキシルは、香料と共に適当な甘味料を水性アルコールのビヒクルを使って製造する。懸濁剤は、アラビアゴム、トラガカント、メチルセルロースなどのような懸濁用剤を補助剤として適当なビヒクルと共に不溶性の形態として製造することができる。
【００６０】
非経口投与のために、液体単位投与形態は、活性成分と滅菌ビヒクル（水が好ましい）を用いて製造される。形態と使用濃度により、活性成分はビヒクルに懸濁または溶解することができる。溶液を製造するときは、水溶性の活性成分は注射用水に溶解し、そして適当なビヒクルまたはアンプルに充填して、密封する前に滅菌濾過する。有利には、たとえば局所麻酔剤、保存剤および緩衝剤のような補助剤をビヒクルに溶解することができる。活性成分をビヒクルに溶解せずに懸濁させ滅菌は濾過によって行わない、ということ以外は実質的に上記と同様にして非経口剤を製造する。滅菌ビヒクルに懸濁する前にエチレンオキサイドに曝露させることで、活性成分を滅菌することができる。有利には、界面活性剤または湿潤剤を組成物に包含させて、活性成分を均一に分布させる。
【００６１】
経口および非経口投与に加えて、直腸や膣の経由もまた用いられる。活性成分は坐薬という手段で投与することができる。おおむね体温での融点をもつビヒクルまたは容易に溶けるビヒクルを用いることができる。たとえば、カカオ脂や種々のポリエチレングリコール（カウナウバワックス）がビヒクルとして用いられる。
【００６２】
経鼻滴下のために、液体単位投与形態を、活性成分と適当な医薬用ビヒクル、好ましくはＰ．Ｆ．水を用いて製造する。吸入剤が好ましい投与であるときは乾燥粉末が処方される。
【００６３】
エアゾルとしての使用のために活性成分は、必要または所望に応じてたとえば供溶媒や湿潤剤のような通常の補助剤と共に、たとえばジクロロジフルロメタン、二酸化炭素、窒素、プロパンなどのような気体や液体の噴射剤と一緒に加圧エアゾル容器に詰めることができる。
【００６４】
本明細書や請求の範囲で用いる「単位用量形態」という用語は、ヒトや動物の対象のための単位用量として適当な物理的に分離された単位であって、各々の単位は、必要な医薬用希釈剤、担体またはビークルと共に所望の治療効果を生じるように計算した一定量の活性剤を含むものである。本発明の新規な単位投与形態の明細は記載されそして、（ａ）活性成分のユニークな特性および得られるべき特定の治療効果、そして（ｂ）本発明の特徴である本明細書に開示のヒトにおける治療的使用のためのそのような活性材料の配合技術に本質的な限定に直接に依存する。本発明における適当な単位投与形態の例は、錠剤、カプセル、トローチ、坐薬、粉末のパケット、ウエハース、カシェ剤、小さじ用剤、大さじ用剤、滴剤、アンプル、バイアル、上記の適当な組み合わせ、およびここに記載のその他の形態である。
【００６５】
抗新生物剤として用いられる活性成分は、それ自体が当該技術で入手可能であり確立された方法で製造可能な医薬材料を用いて容易に上記の単位用量形態にすることができる。次の製法は本発明の単位用量形態の製造説明であって限定するものではない。本発明の態様として種々の投与形態を製造した。それらは以下の例に示されており、「活性成分」という用語はジオキシスタチン（９ａ）及び／またはジオキシスタチン  プロドラッグまたはここに記載した他の組成物を意味する。
【００６６】
組成物  Ａ  硬ゼラチンカプセル剤
各々のカプセルが２００ｍｇの活性成分を含有する１０００個の経口用二部分型硬ゼラチンカプセル剤を、次のタイプと量の成分から製造した。
活性成分、微粉末化            ２００ｇ
コーンスターチ                  ２０ｇ
タルク                          ２０ｇ
ステアリン酸マグネシュウム        ２ｇ
空気微粉砕機で細かく粉砕した活性成分を別に微粉砕した成分に加え、完全に混合し、ついで常法によりカプセルに封入した。
上記のカプセル剤は、日に１ないし４回、１ないし２カプセルの経口投与により、新生物患者の治療に有用である。
上の方法を用いて、上記の２００ｇの活性成分を５０ｇ、２５０ｇおよび５００ｇに代えて５０、２５０および５００ｍｇの活性成分を含有するカプセル剤を同様にして製造する。
【００６７】
組成物  Ｂ  軟ゼラチンカプセル剤
まず、０．５ｍｌのトウモロコシ油に化合物を懸濁し材料をカプセル化可能とし次いで上記のようにしてカプセル充填して、空気微粉砕機で細かく粉砕した活性成分を各２００ｍｇ含有する経口用の一体型軟ゼラチンカプセル剤を製造する。
上記のカプセル剤は日に１ないし４回、１ないし２カプセルの経口投与により、新生物疾患の治療に有用である。
【００６８】
組成物  Ｃ  錠剤
各々の錠剤が２００ｍｇの活性成分を含有する１０００個の錠剤を、次のタイプと量の成分から製造した。
活性成分、微粉化              ２００ｇ
乳糖                          ３００ｇ
コーンスターチ                  ５０ｇ
ステアリン酸マグネシウム          ４ｇ
軽油                              ５ｇ
空気微粉砕機で細かく粉砕した活性成分を別に微粉砕した成分に加え、ついで完全に混合しスラグとする。スラグを１６号スクリーンを通し力を加えて破砕する。得られた顆粒を打錠して、各錠剤が２００ｍｇの活性成分を含有するようにする。
上記の錠剤は、日に１ないし４回、１ないし２錠の経口投与により、新生物疾患の治療に有用である。
上の方法を用いて、上記の２００ｇの活性成分を２５０ｇおよび１００ｇに代えて２５０ｍｇおよび１００ｍｇの活性成分を含有する錠剤を同様に製造する。
【００６９】
組成物  Ｄ  経口用懸濁剤
各小さじ（５ｍｌ）用量が５０ｍｇの活性成分を含有する経口用の水性懸濁剤１リットルを、次のタイプと量の成分から製造する。
活性成分、微粉末              １０ｇ
クエン酸                        ２ｇ
安息香酸                        １ｇ
しょ糖                      ７９０ｇ
トラガカントガム                ５ｇ
レモン油                        ２ｇ
脱イオン水、適量  １０００ｍｌ
クエン酸、安息香酸、しょ糖、トラガントガム、およびレモン油を充分な量の水に分散して８５０ｍｌの懸濁液とする。微粉末機で細かく粉砕した活性成分を、均一に分布したシロップ単位の中へ攪拌する。充分な量の水を加えて１０００ｍｌとする。
このようにして製造した組成物は、日に３回、小さじ１杯（１５ｍｌ）の用量で新生物疾患の治療に有用である。
【００７０】
組成物  Ｅ  非経口製品
新生物疾患治療のための１ｍｌあたり３０ｍｇの活性成分含有の非経口注射のための滅菌水性懸濁剤を、次のタイプと量の成分から製造する。
活性成分、微粉化                    ３０ｇ
ポリソルベート８０                    ５ｇ
メチルパラベン                        ２．５ｇ
プロピルパラベン                      ０．１７ｇ
注射用水、適量  １０００ｍｌ
活性成分以外のすべての成分を水に溶かし、その溶液を濾過により滅菌する。この滅菌溶液に、微粉砕機で細かく粉砕した滅菌活性成分を加え、そして最終懸濁液を滅菌バイアルに充填し、バイアルを密封する。
このようにして製造した組成物は、日に３回１ミリリットル（１ｍｌ）の用量で新生物疾患の治療に有用である。
【００７１】
組成物  Ｆ  坐薬、直腸および膣
新生物疾患治療のための、各々が２．５ｇの重量であり２００ｍｇの活性成分を含有する１０００個の坐薬を、次のタイプと量の成分から製造する。
活性成分、微粉化                            １５ｇ
プロピレングリコール                      １５０ｇ
ポリエチレングリコール＃４０００  適量  ２５００ｇ
活性成分を空気微粉砕機で細かく粉砕し、プロピレングリコールに添加し、混合物が均一に分散されるまでコロイドミルを通過させる。ポリエチレングリコールを溶融し、プロピレングリコール分散液を攪拌しながらゆっくりと添加する。この懸濁液を、非冷却の型へ４０℃で注ぐ。組成物を放冷固化させ、ついで型から外し、各々の座剤をホイルで包む。
上記の座剤を、新生物疾患の治療のために直腸または膣に挿入する。
【００７２】
組成物  Ｇ  経鼻用懸濁剤
１ｍｌあたり２０ｍｇの活性成分を含む経鼻滴下のための滅菌水性懸濁液１リットルを次のタイプの量と成分から製造する。
活性成分、微粉化                １５ｇ
ポリソルベート８０                ５ｇ
メチルパラベン                    ２．５ｇ
プロピルパラベン                  ０．１７ｇ
脱イオン水  適量  １０００ｍｌ
活性成分以外のすべての成分を水に溶かし、その溶液を濾過により滅菌する。この滅菌溶液に、微粉砕機で細かく粉砕した滅菌活性成分を加え、そして最終懸濁液を無菌的に滅菌容器に充填する。このようにして製造した組成物は、日に１ないし４回、０．２から０．５ｍｌの経鼻滴下により新生物治療に有用である。
活性成分はまた、経皮、経鼻、経咽頭、経気管支または経口での局所的使用のために非希釈の純粋な形態でも与えることができる。
【００７３】
組成物  Ｈ  粉末
バルク形態の活性成分５ｇを空気微粉砕機で細かく粉砕する。この微粉砕した粉末をシェイカー式の容器に入れる。
上記の組成物は日に１ないし４回、粉末を局所部位に適用することにより新生物疾患の治療に有用である。
【００７４】
組成物  Ｉ  経口用粉末
バルク型の活性成分１００ｇを空気微粉砕機で細かく粉砕する。この微粉砕化した粉末を、２００ｍｇの各々の用量に分けて包装する。
上記の組成物は日に１ないし４回、コップ一杯の水で１ないし２包装を経口投与することにより新生物疾患の治療に有用である。
【００７５】
組成物  Ｊ  吸入剤
バルク型の活性成分１００ｇを空気微粉砕機で細かく粉砕する。
上記の組成物は日に１ないし４回、３００ｍｇを吸入することにより新生物疾患の治療に有用である。
【００７６】
上述したところから、それに基づく新規で有用な抗新生物薬剤および新規で有用な抗新生物製剤がここに記載され説明されており、それは上記の目的のすべてを極めて予期しない態様で満たしている。この開示に直面する当業者において容易に起こるその修整、変更および適用は、本発明の精神の範囲内にあると意図されることは当然理解される。
【図面の簡単な説明】
【図１】
１９７９年以来ガン細胞の最も活性な成長抑制成分であるコンブレタスタチンＡ−１（１ａ）及びＡ−４（１ｂ），（１ｄ）の化学式（
【０００５】参照）。
【図２】
（Ｓ，Ｓ）−ジオール（５）の結晶構造（水素を除く）。
【図１】
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【図２】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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