(57)【要約】本発明は、式１を有する１６α−置換ステロイド化合物であって、式中、点線の環が完全に飽和な環、完全に芳香族性の環またはΔ５−１０二重結合を有する飽和な環であり、Ｒ１が（Ｃ１−Ｃ３）アルキルまたは（Ｃ２−Ｃ３）アルケニルであって、これらの基のそれぞれを１つまたは複数のハロゲンで置換することができ、Ｒ２が（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ２−Ｃ４）アルケニルまたはメチレンであって、これらの基のそれぞれを１つまたは複数のハロゲンで置換することができ、かつＲ３がメチルまたはエチルである化合物、またはそのプロドラッグの利用を可能にするものであって、その化合物はエストロゲン受容体αに選択的な治療用に使用することができる。【化１】2004505093.tif 000006
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１を有する１６α−置換ステロイド化合物であって、
【化１】
2004505093.tif 000005
上式で点線の環が完全に飽和な環、完全に芳香族性の環またはΔ５〜１０二重結合を有する飽和な環であり、
Ｒ１が（Ｃ１−Ｃ３）アルキルまたは（Ｃ２−Ｃ３）アルケニルであって、これらの基のそれぞれを１つまたは複数のハロゲンで置換することができ、
Ｒ２が（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ２−Ｃ４）アルケニルまたはメチレンであって、これらの基のそれぞれを１つまたは複数のハロゲンで置換することができ、
Ｒ３がメチルまたはエチルである化合物。
【請求項２】
Ｒ１およびＲ２中のハロゲンが塩素またはフッ素から選択されることを特徴とする請求項１に記載の１６α−置換ステロイド化合物。
【請求項３】
Ｒ２が（Ｃ１−Ｃ２）アルキルまたはビニルであることを特徴とする請求項１または２に記載の１６α−置換ステロイド化合物。
【請求項４】
医学的治療において使用するための請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
エストロゲン受容体関連の治療用の薬剤を製造するための請求項４に記載の化合物の使用であって、その治療がエストロゲン受容体αに選択的な治療であることを特徴とする使用。
【請求項６】
エストロゲン受容体関連の治療用の薬剤を製造するための請求項４に記載の使用であって、その治療がホルモン補充療法または避妊のための治療であることを特徴とする使用。
【請求項７】
α−サブタイプのエストロゲン受容体を選択的に活性化するための治療法であって、請求項１に記載の化合物の適量を投与することを含む方法。
【請求項８】
ホルモン補充療法または避妊のための治療法であって、請求項１に記載の化合物の適量を投与することを含む方法。
【請求項９】
薬学的に許容される助剤と混合した請求項１に記載の化合物を含む薬剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、１６α−置換ステロイド化合物、このような化合物を用いてエストロゲン受容体を活性化する方法、およびエストロゲン受容体関連の治療用の薬剤を製造するためのこのような化合物の使用に関する。
【０００２】
エストロゲン活性を有するステロイド化合物は、さまざまな医学的徴候の治療、および避妊目的の処方計画において、長期の有用性があることが発見されている。当分野は長い歴史があるにもかかわらず、既存の化合物より効果的かつ安全であり、さらにより経済的である化合物が依然として必要とされている。より長い寿命をもたらす、他分野におけるヘルスケアの発展の観点において、この必要性はより緊急である。このことは特に、閉経期のエストロゲンホルモンの減少が顕著であり、骨強度および心臓血管機能に関して否定的な結果を有している女性にとっての解決課題である。エストロゲン治療に関しては、たとえばＦｅｖｉｇ他の（Ｓｔｅｒｏｉｄｓ５１：ＰＰ４７１−４９７、１９８８）、ＤＥ２７５７１５７、米国特許第３，７０４，２５３号およびＴａｋｉｋａｗａ他（Ｒｅｓ．Ｓｔｅｒｏｉｄｓ　Ｖｏｌ　７、ｐｐ　２９１−２９９、１９７７）中に記載されるように利用可能な、活性の高いエストロゲン１６α置換エストロゲンステロイドが存在する。さらに、７α，１１β−二置換エストロゲンが、Ｔｅｄｅｓｃｏ他（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ　ａｎｄ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、Ｖｏｌ　７、Ｎｏ　２２、ｐｐ　２９１９−２９２４、１９９７）から知られているが、さらなる改良がこの分野ではさらに可能である。エストロゲン受容体のサブタイプの発見、このような受容体のα−サブタイプ（ＥＲα）およびβ−サブタイプ（ＥＲβ）が存在することによって、これら２つの受容体の１つの特定のサブタイプを、内在的により選択的に活性化させることに関する可能性が与えられ、より効果的な治療または副作用の少ない治療をもたらす結果になる。Ｇｏｎｚａｌｅｚ他（Ｓｔｅｒｏｉｄｓ　Ｖｏｌ．４０；１７１−１８７；１９８２）中には１６β−メチル−エストロゲンが詳細に記載されているが、１６β−コンフィギュレーションを有する化合物には一般に、本発明の化合物の好ましい選択的効果がない。
【０００３】
本発明は、α−サブタイプのエストロゲン受容体に対して予想外に選択的な化合物の発見に基づくものである。本発明は、以下の式１を有する１６α置換ステロイド化合物であって、
【０００４】
【化２】
2004505093.tif 000002
上式で点線の環（いわゆるＡ−環）が完全に飽和な環、完全に芳香族性の環またはΔ５−１０二重結合を有する飽和な環であり、
Ｒ１が（Ｃ１−Ｃ３）アルキルまたは（Ｃ２−Ｃ３）アルケニルであり、これらの基のそれぞれを１つまたは複数のハロゲンで置換することができ、
Ｒ２が（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ２−Ｃ４）アルケニルまたはメチレンであり、これらの基のそれぞれを１つまたは複数のハロゲンで置換することができ、
Ｒ３がメチルまたはエチルである化合物を利用可能にする。
【０００５】
式１中で立体化学構造が指定されていない、３位および７位における結合は、ステロイド骨格に関してα位またはβ位中のいずれかに、独立に存在してよい。Ｒ２がメチレンであるときは、１１位における結合がβコンフィギュレーションであることを意味しないことは明らかである。
【０００６】
Ｒ２中の好ましいハロゲンは、塩素またはフッ素である。
【０００７】
Ｒ２に関する好ましい選択は、（Ｃ１−Ｃ２）アルキルまたはビニルである。
【０００８】
当然ながら、本発明は、前に定義した化合物のプロドラッグも利用可能にする。
【０００９】
プロドラッグは、被験者の身体内で式１によって定義した化合物に転換する、化合物として定義する。上式中に示したヒドロキシ基を、たとえばアルコキシ＊、アルケニルオキシ＊、アシルオキシ＊、アロイルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ＊、スルホニル基またはホスフェート基で置換することができるのは明らかであり、星印（＊）で示した基の炭素鎖の長さは正確に定められているとはみなされないが、一方でアロイルは一般に、フェニル、ピリジニルまたはピリミジルを含むであろう。好ましいプロドラッグは、１つまたは両方のヒドロキシル基を有するカルボン酸エステルまたはアルキルエーテルであり、より好ましいプロドラッグは、（イソ）ブタン酸のエステルなどの（Ｃ２−Ｃ６）カルボン酸エステル、または（Ｃ１−Ｃ４）アルキルエーテルである。アルキル、アルケニルおよびアシル基の長さは、プロドラッグの所望の性質に応じて選択され、鎖が長い、たとえばラウリルまたはカプロイル鎖を有するプロドラッグが徐放およびデポ製剤により適している。このような置換体は自然に加水分解するか、あるいは化合物の骨格上で酵素によって遊離ヒドロキシル置換体に加水分解されることは知られている。このようなプロドラッグは、それが被験者の身体内で転換される化合物に匹敵する、生物学的活性を有しているであろう。プロドラッグが転換される活性化合物は、親化合物と呼ばれている。プロドラッグの作用の開始と作用の期間、および身体中での分布は、親化合物のこのような性質とは異なる可能性がある。他のタイプのプロドラッグについては、式１中のヒドロキシル基を、被験者の代謝系の近くの位置に置くことができることを理解すべきである。ヒドロキシル基は、エストロゲン受容体に関する親和性のために不可欠である。したがって、式１によって定義されるが、１つまたは両方のヒドロキシル基が無い化合物も、本発明による化合物として利用可能になり、この化合物はプロドラッグと呼ばれる。
【００１０】
本明細書中で使用する他の用語は、以下の意味を有する：
アルキルは分枝または非分枝アルキル基、たとえばメチル、エチル、プロピル、ブチルまたはｓｅｃ−ブチルであり、
アルケニルは分枝または非分枝アルケニル基、たとえばエテニル、２−ブテニルなどであり、
ハロゲンはフッ素、塩素、臭素およびヨウ素を指し、
アロイルはベンゾイル基などのアリルカルボニルであり、
アリルは単環式または多環式、ホモまたはヘテロ環式芳香族環系であり、
アシルはアルキルカルボニル基である。
【００１１】
接頭語（Ｃ１−Ｃ４）、（Ｃ２−Ｃ４）などは通常の意味を有しており、示した基の意味をそれぞれ１〜４個、２〜４個などの炭素原子を有する基に制限している。
【００１２】
本発明による化合物の選択的なエストロゲン受容体親和特性によって、これらの化合物は治療において使用するのに適したものとなっている。本発明による化合物は、これらは避妊に関する治療などのエストロゲン受容体関連の医学的治療用に、あるいは良性前立腺肥大、心臓血管障害、閉経期病、骨粗しょう症、エストロゲン依存性腫瘍の支配、またはうつ病またはアルツハイマー病などの中枢神経系障害を治療または予防するために使用することができるという意味で、改良型エストロゲンとして適切である。
【００１３】
したがって本発明は、選択的なエストロゲン受容体関連の治療用の薬剤を製造するための、本発明による化合物の使用に関する。選択的なエストロゲン受容体関連の治療は、エストロゲン受容体のα−サブタイプを活性化することによって行われる。このような薬剤は、閉経期周辺および／または閉経期後の病などの、エストロゲン受容体関連の障害の治療用に使用することができ、薬剤はホルモン補充療法（ＨＲＴ）の分野においても一般に適したものになる。この治療は、受容体の両方のサブタイプを有する生物に、本発明による化合物を投与することを含む。したがって本発明は、α−サブタイプのエストロゲン受容体の選択的活性化のための治療法であって、本発明による化合物を被験者に適切な量投与することを含む方法にも関する。このような治療法は、閉経期周辺および／または閉経期後（更年期）の病および骨粗しょう症の医学的徴候に、すなわちホルモン補充療法の分野の治療法に適している。
【００１４】
選択的なエストロゲン治療の被験者となることができる生物は、動物または人間であってよく、通常はエストロゲン治療を必要としているメスの動物または女性であろう。
【００１５】
本発明による化合物の投与は、薬剤組成物を製造することによって大いに助成されるであろう。したがって本発明は、薬学的に許容される助剤と混合させた本発明による化合物を含む薬剤組成物にも関する。
【００１６】
特定の態様において本発明は、避妊活性を有する薬剤の製造における本発明による化合物の使用に関する。したがって本発明は、避妊の医学的徴候に関するものでもあり、すなわち当分野で一般的であるように、女性またはメスの動物であるレシピエントに適切な量の本発明による化合物、プロゲストゲンおよびエストロゲンを投与することを含む避妊の方法であって、かつエストロゲンが本明細書で前に記載したような化合物である（適切な薬剤剤形である）ことを含む方法にも関する。
【００１７】
本発明の化合物は、ステロイドの有機化学の分野において一般に知られている、さまざまな方法によって生成させることができる。１６αメチルまたはエチル基のステロイドへの導入は、有機合成の文献中で知られている方法によって容易に行われる。一般に、位置Ｃ−１６におけるアニオンは、有機第二級アミン（ジイソプロピルアミンまたはヘキサメチルジシラザン）のアルカリ金属塩などの適切な塩基を用いて、Ｃ−１７ケトンを処理することによって形成することができる。ハロゲン化アルキルのようなアルキル化剤を用いてこれらのアニオンを処理することによって、所望の１６α−アルキル化ステロイドがもたらされる。たとえば、Ｃ１７−カルボニルステロイドの対応するヒドラゾンへの転換で始まり、次にＣ１６−アニオンが形成され、アルキル化され、次にヒドラゾンの切断によってカルボニルが遊離するアルキル化の代替法が利用可能である。あるいは、アルカリ金属を用いたΔ１５−エン−１７−オンのステロイドの共役還元によって、位置１６のアニオンが形成される。より詳細には、スキームおよび実施例中に例示した合成の経路を使用することができる。
【００１８】
エステルプロドラッグは、ピリジン中で適切な塩化アシルと反応させることによって、ヒドロキシル基が遊離している化合物をエステル化することにより調製することができる。
【００１９】
薬剤組成物を調製する方法は、標準的な参照文献であるＧｅｎｎａｒｏ他の、Ｒｅｍｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、（１８ｔｈ　ｅｄ．、Ｍａｃｋ　ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０の、特にＰａｒｔ８：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｔｈｅｉｒ　Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅを参照のこと）中に記載されており、たとえばＨａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２ｎｄ　Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｅｄｉｔｏｒｓ　Ａ．　Ｗａｄｅ　ａｎｄ　Ｐ．Ｊ．Ｗｅｌｌｅｒ；Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ；Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ；Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｐｒｅｓｓ；Ｌｏｎｄｏｎ、１９９４）中の適切な助剤が利用可能である。本発明による化合物と薬学的に許容される助剤の混合物は、ピル、錠剤などの固体の投薬単位に圧縮することができ、あるいはカプセルまたは座薬に加工することができる。薬剤として適切な液体によって、本発明による化合物を、溶液、懸濁液、乳濁液の形態の注射用の調製物として、あるいはスプレー、たとえば鼻スプレーとして施用することもできる。投薬単位、たとえば錠剤を作成するために、充填剤、着色剤、ポリマー結合剤などの、従来の添加剤を使用することが企図される。一般には、活性化合物の機能を害さない、薬学的に許容される任意の添加剤を使用することができる。本発明の化合物は、インプラント、膣用リング、パッチ、ゲル、および除放用の任意の他の調製物中に含まれていてもよい。
【００２０】
本発明の化合物と共に投与することができる適切な担体には、ラクトース、デンプン、セルロース誘導体など、または適切な量で使用されるこれらの混合物がある。
【００２１】
本発明による治療法は、本明細書で前述したように（適切な薬剤剤形で）動物または人間に化合物を投与することを含む。本発明の化合物の適切な投与量は、エストロゲン化合物の通常のオーダーで、たとえば投与１回当たり約０．０１〜１００ｍｇであろう。
【００２２】
いくつかの非制限的な例、および言及した対応する式のスキームを参照しながら、本発明を以下にさらに例示する。
【００２３】
実施例
化合物の番号は、スキーム１および２中における対応する構造式を指す。
【００２４】
【化３】
2004505093.tif 000003
【００２５】
ＮＭＲスペクトルはすべて、４００ＭＨｚの分光計中でＣＤＣｌ３溶液として記録した。
【００２６】
化合物２
１３ｍｌのｔ−ブチルジメチルクロロシランを２０ｍｌのジエチルエーテルに溶かした溶液を、ＤＭＦ１５０ｍｌ中の１５ｇの１１β−メチルジエノロン１と１４ｇのイミダゾールの混合物に０℃で一滴ずつ加えた。２時間攪拌した後、反応を終了した。水を加え、酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。このようにして得た物質を、短いシリカカラムに通すことによって精製して、１７ｇの２を得た。Ｒｆ　０．５６（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、ＮＭＲ　δ１．１（ｄ，３，１１βＣＨ３）、０．９１（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、３．５５（ｍ，１，１７αＨ）、５．８０（ｍ，１，Ｈ４）、６．２１（ｓ，２，Ｈ６，Ｈ７）。
【００２７】
化合物３
２０．５ｇのステロイド２および２ｇの酢酸銅（ＩＩ）を５００ｍｌの乾燥ＴＨＦに溶かした溶液に、塩化メチルマグネシウムをＴＨＦに溶かした２２％溶液４０ｍｌを、３／４時間にわたって−３０℃で一滴ずつ加えた。その後反応混合物をさらに１／２時間攪拌し、次いで３０ｍｌの濃縮硫酸を１００ｍｌの水に溶かした溶液に注いだ。この混合物をさらに１６時間攪拌し、次いで１９ｇのＮａＯＡｃを加え、酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。７α異性体をシリカを用いたクロマトグラフィによって精製して、８．５ｇの純粋な３を得た。Ｒｆ　０．４５（ヘプタン／酢酸エチル　１／１）、Ｒｆ　０．４２に７β−異性体；ＮＭＲ　δ１．０７（ｄ，３，１１β−ＣＨ３）、０．８８（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、０．７８（ｄ，３，７α−ＣＨ３）。
【００２８】
化合物４
５．５ｇの３、１５ｍｌのピリジン、４．７ｍｌの無水酢酸および４０ｍｇのＤＭＡＰの混合物を、室温で１時間攪拌した。次いで水を加え、酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。有機層を２ＮのＨＣｌで洗浄してピリジンを取り除き、次いで水で洗浄した。乾燥後に残渣を得て、次のステップと同様の濃度を使用した。Ｒｆ　０．５９（ヘプタン／酢酸エチル　１／１）、ＮＭＲ：δ１．０６（ｄ，３，１１β−ＣＨ３）、０．９２（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、０．７８（ｄ，３，７α−ＣＨ３）、２．０４（ｓ，３，アセテート）、４．５６（ｄｄ，１，Ｈ１７α）５．８４（ブロード　ｓ，１，Ｈ４）。
【００２９】
化合物５
６．２ｇの４を１８０ｍｌの乾燥アセトニトリルに溶かした溶液に、１．６ｇのＬｉＢｒ、次いで８ｇのＣｕＢｒ２を加えた。２時間攪拌した後、芳香族化反応を終了した。混合物を４００ｍｌの水で希釈し、酢酸エチルを用いて抽出した。有機層を水および５％の水性ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、乾燥して濃縮した。クロマトグラフィによる精製によって、４．２ｇの５を得た。Ｒｆ　０．６７（ヘプタン／酢酸エチル　１／１）、ＮＭＲ　δ０．８４（ｄ，３，１１β−ＣＨ３）、０．９３（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、０．８１（ｄ，３，７α−ＣＨ３）、２．０５（ｓ，３，アセテート）、４．６４（ｄｄ，１，Ｈ１７α）６．５２（ｄ，１，Ｈ４）、６．６２（ＡＢ，１，Ｈ２）、７．０３（ＡＢ，１，Ｈ１）。
【００３０】
化合物６
４．２ｇの５を２０ｍｌのＤＭＦに溶かした溶液に、１．７ｇのイミダゾール、次に２．２ｇのＴＢＤＭＳ−Ｃｌを０℃で加えた。この混合物を室温で数時間攪拌し、シリル化が終了した後に、１５０ｍｌの水に注いだ。酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。このようにして得た生成物を、短いシリカカラムを通して４．５ｇの６を得た。Ｒｆ　０．７７（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、ＮＭＲ　δ０．８４（ｄ，３，１１β−ＣＨ３）、０．９４（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、０．８０（ｄ，３，７α−ＣＨ３）、０．９８（ｓ，９，ｔｅｒｔ．Ｃ４Ｈ９Ｓｉ）、０．１８（ｓ，６，Ｓｉ（ＣＨ３）２）、２．０６（ｓ，３，アセテート）、４．６４（ｄｄ，１，Ｈ１７α）６．４９（ｄ，１，Ｈ４）、６．５９（ＡＢ，１，Ｈ２）、７．００（ＡＢ，１，Ｈ１）。
【００３１】
化合物７
５．４ｇの６を１０ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液を、４００ｍｇのＬｉＡｌＨ４を２０ｍｌのＴＨＦに懸濁した攪拌懸濁液に一滴ずつ加えた。１５分間攪拌した後、還元を終了し、混合物を最初に１．１ｍｌの飽和Ｎａ２ＳＯ４で、次いで８ｇのＮａ２ＳＯ４で処理し、次にセライト上で濾過し、濃縮して４．５ｇの７を得た。Ｒｆ　０．５０（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、）、ＮＭＲ　δ０．８５（ｄ，３，１１β−ＣＨ３）、０．９０（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、０．８０（ｄ，３，７α−ＣＨ３）、０．９７（ｓ，９，ｔｅｒｔ．Ｃ４Ｈ９Ｓｉ）、０．１８（ｓ，６，Ｓｉ（ＣＨ３）２）、３．７０（ｄｄ，１，Ｈ１７α）。
【００３２】
化合物８
４．５ｇの７および３．４ｇのＮＭＯを５０ｍｌのアセトンに溶かした溶液に、１００ｍｇのＴＰＡＰを加えた。１時間攪拌した後に、酸化を終了した。反応混合物に５ｇのシリカゲル、次に９０ｍｌのヘプタンを加えた。この混合物を１５分間攪拌し、次いでセライトを通して濾過した。濾過物を濃縮させ、短いシリカパスに通し、３．７ｇの８を得た。Ｒｆ　０．６６（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、ＮＭＲ　δ０．８６（２×ｄ，６，７α＋１１β−ＣＨ３）、１．０１（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、０．９８（ｓ，９，ｔｅｒｔ．Ｃ４Ｈ９Ｓｉ）、０．１９（ｓ，６，Ｓｉ（ＣＨ３）２）６．５３（ｄ，１，Ｈ４）、６．６２（ＡＢ，１，Ｈ２）、７．０１（ＡＢ，１，Ｈ１）。
【００３３】
化合物９ａ
１ｇのステロイド８および０．６４ｍｌのＤＭＰＵを２０ｍｌの乾燥ＴＨＦに溶かした溶液を、２．６６ｍｌの１ＭのＬｉＨＭＤＳを１０ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液に、−４５℃で一滴ずつ加えた。−４５℃でさらに１／２時間攪拌した後、０．２０ｍｌのヨウ化メチルを加え、アルキル化が終了するまで（１／２時間）−２０℃での攪拌を続けた。次いで２００ｍｌの１０％ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。クロマトグラフィによって物質をさらに精製することによって、０．８８ｇの１６αアルキル化物質９ａを得た。Ｒｆ　０．７０（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、ＮＭＲ　δ０．８６（２×ｄ，６，７α＋１１β−ＣＨ３）、１．０５（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、０．９７（ｓ，９　ｔｅｒｔ．Ｃ４Ｈ９Ｓｉ）、０．１９（ｓ，６，Ｓｉ（ＣＨ３）２）１．１４（ｄ，３，１６αＣＨ３）６．５３（ｄ，１，Ｈ４）、６．６２（ＡＢ，１，Ｈ２）、７．０１（ＡＢ，１，Ｈ１）。
【００３４】
化合物９ｂ
９ａに関して記載したのと同様に調製を行ったが、ただし０．２５ｍｌのヨウ化エチルをアルキル化剤として使用した。反応混合物を室温で数時間攪拌して完了させた。クロマトグラフィによって０．８４ｇの９ｂを得た。Ｒｆ　０．７５（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、ＮＭＲ　δ０．８６（２×ｄ，６，７α＋１１β−ＣＨ３）、１．０５（ｓ，３，１９−ＣＨ３）、０．９７（ｓ，９　ｔｅｒｔ．Ｃ４Ｈ９Ｓｉ）、０．９６（ｔ，３，１６α　ＣＨ３ＣＨ２−）、０．１９（ｓ，６，Ｓｉ（ＣＨ３）２）６．５３（ｄ，１，Ｈ４）、６．６２（ＡＢ，１，Ｈ２）、７．０１（ＡＢ，１，Ｈ１）。
【００３５】
化合物１０ａ
１．６ＭのＢｕＬｉ／ヘキサン１０．３ｍｌを、０．６７ｍｌの１，２−ジブロモエタンを２０ｍｌの乾燥ＴＨＦに溶かした溶液に−６０℃で一滴ずつ加えることによって、Ｌｉ−アセチリドの溶液を調製した。さらに１／２時間攪拌した後、０．８８ｇの９ａを５ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液を導入し、反応混合物を室温まで徐々に温めた。１時間攪拌した後、反応を終了させ、混合物を１０％ＮＨ４Ｃｌ水溶液に注いだ。酢酸エチルを用いて生成物を抽出し、クロマトグラフィによって精製して、７９０ｍｇの１０ａを得た。Ｒｆ　０．２３（ヘプタン／酢酸エチル　９／１）、ＮＭＲ　δ０．８０（ｄ，３，７αＣＨ３）、０．８７（ｄ，３，１１βＣＨ３）、１．０５（ｓ，３，１９−ＣＨ３）、０．９７（ｓ，９，ｔｅｒｔ．Ｃ４Ｈ９Ｓｉ）、０．１９（ｓ，６，Ｓｉ（ＣＨ３）２）１．２０（ｄ，３，１６αＣＨ３）２．６８（ｓ，１，アセチレン）。
【００３６】
化合物１０ｂ
０．８４ｇの９ｂを使用して、１０ａに関して記載したのと同様に反応を行い、７１０ｍｇの１０ｂを得た。Ｒｆ　０．２４（ヘプタン／酢酸エチル　９／１）、ＮＭＲ　δ０．７９（ｄ，３，７αＣＨ３）、０．８８（ｄ，３，１１βＣＨ３）、０．９８（ｔ，３，１６α　ＣＨ３ＣＨ２−）、０．９６（ｓ，９　ｔｅｒｔ．Ｃ４Ｈ９Ｓｉ）、０．１９（ｓ，６，Ｓｉ（ＣＨ３）２））、２．６５（ｓ，１，アセチレン）。
【００３７】
化合物１１ａ
７９０ｍｇの１０ａを１ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液に、１ＭのＴＢＡＦのＴＨＦ溶液２．５ｍｌを加えた。１０分間攪拌した後、脱保護を終了した。水を加え、生成物を酢酸エチル中に抽出し、シリカパッドを通過させることによって最終的に精製した。このようにして得た物質を、ヘプタン−ジイソプロピルエーテル（１／１）を用いて粉末にして、４８０ｍｇのほぼ純粋な１１ａを得た。Ｒｆ　０．３１（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、Ｍｐ　２０４〜２０５℃、ＮＭＲ　δ０．８１（ｄ，３，７αＣＨ３）、０．８８（ｄ，３，１１βＣＨ３）、１．０５（ｓ，３，１８−ＣＨ３）、１．２０（ｄ，３，１６αＣＨ３）２．６９（ｓ，１，アセチレン）。
【００３８】
化合物１１ｂ
７１０ｍｇの１０ｂを使用して、１１ａに関して記載したのと同様に化合物１１ｂを調製した。エタノール／水からの最終生成物を沈殿させることによって、４３０ｍｇのほぼ純粋な１１ｂを得た。Ｒｆ　０．３０（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）、）、ＮＭＲ　δ０．８０（ｄ，３，７αＣＨ３）、０．８８（ｄ，３，１１βＣＨ３）、１．００（ｔ，３，１６α　ＣＨ３ＣＨ２−）、１．０６（ｓ，３，１８−ＣＨ３）２．６５（ｓ，１，アセチレン）。
【００３９】
実施例２
化合物（３α，１１β，１６α，１７β）−１６−メチル−１１−（２−プロペニル）−１９−ノルプレグン−５（１０）−エン−２０−イン−３，１７−ジオール（化合物２７）の合成を、スキーム２（次ページ）を参照として記載する。
【００４０】
【化４】
2004505093.tif 000004
【００４１】
化合物１３
１７．３ｇのＣｕＩおよび３．８４ｇのＬｉＣｌを２５０ｍｌの乾燥ＴＨＦに溶かした溶液に、臭化アリルマグネシウムの１Ｍ　ジエチルエーテル溶液９０．６ｍｌを−７０℃で加えた。さらに２０分間攪拌した後、１１．４ｍｌのトリメチルクロロシランを加え、次に７．５ｇのステロイド１２を１００ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液を加えた。反応混合物は、反応中ずっと−６０℃未満に保った。１時間攪拌した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液に注ぐことによって反応を終了した。酢酸エチルを用いて生成物を抽出し、その後カラムクロマトグラフィによって精製して、６．２５ｇの１３を無色の油状物として得た。ＮＭＲ　５．２０（ｍ，ＣＨ　アリル）；５．０（ＣＨ２，アリル）；３．０４（ｍ，Ｈ１１）。
【００４２】
化合物１４
９．６ｇの１３を、８００ｍｇのＮａＯＨを含む１００ｍｌのメタノールと３０ｍｌの塩化メチレンの混合物に溶かした溶液に、０．４ｇの水素化ホウ素ナトリウムを０〜５℃で加えた。１．５時間攪拌した後、反応を終了させ、混合物を２０ｍｌのアセトンで０．５時間処理した。
【００４３】
次いで反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルを用いて抽出して、９．５ｇの１４を得た。ＮＭＲ　３．５９（ｔ，ＣＨＯＨ）；２．９８（ｍ，Ｈ１１）、０．９２（ｓ，ＣＨ３）。
【００４４】
化合物１５
９．５ｇの１４を１００ｍｌのアセトンに溶かした溶液に、８ｍｌの６Ｎ　ＨＣｌを加えた。２時間攪拌した後、ＮａＨＣＯ３を用いて混合物を中和し、小体積に濃縮し、水で希釈し、酢酸エチルを用いて抽出した。これによって、８．２ｇの１５を無色非晶質の物質として得た。ＮＭＲ　５．６８（ｍ，Ｈ４）；３．１０（ｍ，Ｈ１１）；３．６５（ｍ，ＣＨＯＨ）。
【００４５】
化合物１６
８．２ｇの１５を１００ｍｌの乾燥ＴＨＦに溶かした溶液を、５００ｍｌの液体ＮＨ３に−７０℃で加えた。この混合物を、反応混合物の青色が少なくとも１５分間持続するまで、一定量（約５００ｍｇ）のリチウム金属を用いて処理した。若干のＮＨ４Ｃｌを加えることによって、反応を終了させた。
【００４６】
ＮＨ３を蒸発させた後に残った残渣を水で希釈し、酢酸エチルを用いて抽出した。
【００４７】
クロマトグラフィによる精製によって、４．０ｇの１６を無色の油状物として得た。Ｒｆ　０．５５（ヘプタン／酢酸エチル　１／１　ｖ／ｖ）。
ＮＭＲ　２．８０（ａｂ，Ｃ４のＣＨ２）；０．９３（ｓ，ＣＨ３）。
【００４８】
化合物１７
４．０ｇの１６を８０ｍｌのメタノールに溶かした溶液に、６ｍｌのオルトギ酸トリメチルを加え、次に０．８ｇのトルエンスルホン酸を加えた。２時間攪拌した後、ケタール化を終了させた。混合物を６ｍｌのピリジンで処理し、小体積に濃縮した。残留物を水で希釈し、酢酸エチルを用いて抽出した。残渣４．７ｇは、ほぼ純粋な１７からなっていた。；ｔｌｃ、Ｒｆ　０．７８（ヘプタン／酢酸エチル　１／１，ｖ／ｖ）。
ＮＭＲ　３．２２、３．２５（２×ｓ，ＯＣＨ３）。
【００４９】
化合物１８
３３ｇの１７を５０ｍｌのアセトンに溶かした溶液に、６ｇのモレキュラーシーブ（４Ａ）を加え、次に３．２ｇのＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシドおよび１５０ｍｇの過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムを加えた。混合物を１時間攪拌した。この反応混合物に５ｇのシリカゲル、次に５０ｍｌのヘプタンを加え、さらに５分間攪拌した。混合物をｈｙ−ｆｌｏｗで濾過し、一部を濃縮した後、それを酢酸エチル中に溶解し、水で洗浄し、濃縮した。残渣を短いシリカカラムに通して、２．９ｇの１８を得た。Ｒｆ　０．５２（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）。
ＮＭＲ　１．０２（ｓ，ＣＨ３）。
【００５０】
化合物１９
エチニル化のために、リチウムアセチリドをジブロモエテンおよびブチルリチウムから調製した。
【００５１】
０．７４ｍｌの１，２−ジブロモエテンを２０ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液に、ＢｕＬｉの１．６Ｍ　ヘキサン溶液１１ｍｌを−７０℃で加えた。１５分間攪拌した後、８００ｍｇの１８を２ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液を加えた。混合物を１５分間で室温まで昇温し、その後さらに１５分間室温に保ち、水を用いて反応を停止し、酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。濃縮し、次に短いシリカゲルカラムに通すことにより、白色の非晶質物質として８１０ｍｇの１９を得た。Ｒｆ　０．４８（ヘプタン−酢酸エチル　７／３）、Ｒｆ（出発物質）０．５２。ＮＭＲ　２．６１（ｓ，アセチレン）。
【００５２】
化合物２０
３．２ｇの１９を６０ｍｌのエタノールに懸濁させた懸濁液に、０．１６ｇのシュウ酸を１６ｍｌの水に溶かしたものを加えた。この混合物を２．５時間攪拌し、徐々に均質にした。反応混合物をＮａＨＣＯ３を用いて処理し、小体積に濃縮した。次いで水を加え、酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。このようにして単離した粗生成物を短いシリカゲルカラムに通し、ジイソプロピルエーテルから結晶化させて、２．３ｇの２０、融点１３６℃、Ｒｆ０．６６（ヘプタン−酢酸エチル１／１）を得た。ＮＭＲ　２．７８（ａｂ，２，Ｈ４）；２．６１（ｓ，アセチレン）。
【００５３】
化合物２１、２２
１ｇの２０を１２ｍｌのＴＨＦに溶かした溶液に、１．６ｇのリチウムアルミニウムトリ−ｔ−ブトキシヒドリドを加えた。室温で１時間攪拌した後、混合物を水を用いて処理し、２ＮのＨＣｌを加えることによって中和した。酢酸エチルを用いて生成物を抽出し、シリカゲル上でクロマトグラフィを行った（溶離液としてヘプタン／酢酸エチル８／２）。これによって、０．５６ｇの３βアルコール２１（融点１２１〜１２３℃）および０．２４ｇの３αアルコール２２（融点８４〜８７℃）を得た。Ｒｆ　０．５３（２１）および０．４５（２２）、ヘプタン／酢酸エチル　１／１。ＮＭＲ（３αＯＨ）３．８２（ｍ，ＣＨＯＨ）；（３βＯＨ）４．０８（ｍ，ＣＨＯＨ）。
【００５４】
化合物２３
リチウムヘキサメチルジシラジドの溶液（１．６ＭのＢｕＬｉ−ヘキサン溶液１．９ｍｌ、および０．７１ｍｌのヘキサメチルジシラザンを４ｍｌの乾燥ＴＨＦに溶かしたものから調製した）に、１ｇの１８および０．７ｍｌのＤＭＰＵを５ｍｌのＴＨＦに溶かしたものを−４０℃で加えた。混合物を−４０℃で０．５時間攪拌し、次いで２２５ｕｌのＣＨ３Ｉをシリンジによって加えた。−４０℃でさらに０．５時間攪拌した後、反応を終了させた。混合物を水で希釈し、酢酸エチルを用いて抽出した。
【００５５】
このようにして単離した粗生成物のクロマトグラフィによって、１．３ｇの２３を得た。Ｒｆ　０．４３（ヘプタン／酢酸エチル　８／２）。ＮＭＲ　１．１０（ｄ，３，１６αＣＨ３）、１．０６（ｓ，３，ＣＨ３）、３．２３（２×ｓ，６，ＯＣＨ３）、５．０（ｍ，２，アリル　ＣＨ２）、５．７８（ｍ，１，アリル　ＣＨ）。
【００５６】
化合物２４
１９の調製に関して記載した手順に従って、１．３ｇの２３を変換することにより、１．２ｇの所望とする２４を得た。Ｒｆ　０．４６（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）Ｒｆ（２３）０．５５。ＮＭＲ　２．６６（ｓ，１，アセチレン）、１．０６（ｓ，３，ＣＨ３）、１．１７（ｄ，３，１６αＣＨ３）。
【００５７】
化合物２５
８００ｍｇの２４を２０ｍｌのエタノールに溶かした溶液に、８０ｍｇのシュウ酸を５ｍｌの水に溶かした溶液を加えた。この混合物を１時間攪拌し、次いでＮａＨＣＯ３を加えることによって中和した。水で希釈し、酢酸エチルを用いて抽出した後、０．７ｇの２５が結晶性の物質として残った。Ｒｆ　０．４７（ヘプタン／酢酸エチル　７／３）。ＮＭＲ　２．７８（ＡＢ，２，Ｈ４）、１．０８（ｓ，３，ＣＨ３）、１．１８（ｄ，３，１６αＣＨ３）、２．６７（ｓ，１，アセチレン）。
【００５８】
化合物２６、２７
７２５ｍｇの２５を、エタノールとＴＨＦの１：１混合物２０ｍｌに溶かした溶液に、１３０ｍｇの水素化ホウ素ナトリウムを加えた。１時間攪拌した後、２ｍｌのアセトンを加えて、いくぶん過剰な試薬を消滅させた。１５分後に、混合物を水に注ぎ、酢酸エチルを用いて生成物を抽出した。このようにして得た物質を、塩化メチレン−アセトンまたはヘキサン−酢酸エチルのいずれかを溶離剤として使用することによって、シリカゲルでのクロマトグラフィにより精製した。これによって、３００ｍｇの２７（３α−ＯＨ）および７５ｍｇの２６（３β−ＯＨ）を得た。Ｒｆ（２６）０．４７（塩化メチレン／アセトン９５／５）Ｒｆ（２７）０．５４（塩化メチレン／アセトン　９５／５）。ＮＭＲ（２７）３．８２（ｍ，１，３βＨ）、２．７５（ｓ，１，アセチレン）、１．０６（ｓ，３，ＣＨ３）、１．１７（ｄ，３，１６αＣＨ３）；（２６）４．０７（ｍ，１，３βＨ）、２．７６（ｓ，１，アセチレン）、５．０１（ｍ，２，ＣＨ２　アリル）、５．７８（ｍ，１，ＣＨ−アリル）。
【００５９】
実施例３
結合アッセイおよびトランス活性化アッセイにおいて、そのエストロゲン受容体活性について化合物を試験する。
【００６０】
組み換えＣＨＯ細胞からの細胞質性ヒトエストロゲン受容体αまたはβへの拮抗的な結合の決定値を使用して、ヒトエストロゲン受容体α（ｈＥＲα）またはβ受容体（ｈＥＲβ）を安定にトランスフェクトした、組み換えチャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞のサイトソル中に存在する、エストロゲン受容体に対する試験化合物の相対的親和性（効力比）を、エストラジオール（Ｅ２）と比較して評価する。
【００６１】
化合物のエストロゲン活性および抗エストロゲン活性は、ヒトエストロゲン受容体α（ｈＥＲα）またはβ受容体（ｈＥＲβ）、ラットのオキシトシンプロモーター（ＲＯ）およびルシフェラーゼのレポーター遺伝子（ＬＵＣ）を共に安定にトランスフェクトした、組み換えチャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞を用いて、ｉｎ　ｖｉｔｒｏでのバイオアッセイで決定する。エストロゲン受容体ｈＥＲαまたはｈＥＲβによって仲介される酵素ルシフェラーゼのトランス活性化を刺激する試験化合物のエストロゲン活性（効力比）を、標準的なエストロゲンのエストラジオールと比較する。エストロゲン受容体ｈＥＲαまたはｈＥＲβによって仲介される、酵素ルシフェラーゼのエストロゲンのエストラジオールによるトランス活性化を阻害する、試験化合物の抗エストロゲン活性（効力比）を、標準的なＩＣＩ１６４．３８４（＝（７α、１７β）−Ｎ−ブチル−３，１７−ジヒドロキシ−Ｎ−メチルエストラ−１，３，５（１０）−トリエン−７−ウンデカンアミド）と比較する。
【００６２】
結果
アゴニスト選択性に対する定量的なパラメータが、ＥＲαに対するアゴニスト活性のパーセンテージをＥＲβに対するアゴニスト活性のパーセンテージで割ることによって得られる。化合物１１ａは、エストロゲン受容体βよりもエストロゲン受容体αに対して８６倍を超えるアゴニスト選択性を有する。化合物２６は、ＥＲβに対してよりもＥＲαに対して５９倍のアゴニスト選択性を有する。化合物２７は、８８．３倍のアゴニスト選択性を有する。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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2004505093.tif 000028
2004505093.tif 000029
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