(57)【要約】本発明は、ヒトを含む動物の抗単球活性に対するキンマリーフエキスの使用に関するものであり、この使用は薬学的有効量のキンマリーフエキスを薬学的に許容しうる添加物と共に投与するステップを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬学的有効量のキンマリーフエキス、凍結乾燥したキンマリーフエキス、あるいはキンマリーフエキスを具える組成物を、ヒトを含む動物に投与するステップを具えることを特徴とする、ヒトを含む動物の骨髄性白血病の治療へのキンマリーフエキスの使用方法。
【請求項２】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスまたはキンマリーフエキスを含む組成物は、薬学的に許容し得る添加物と組み合わせて、またはこの添加物と共に投与することを特徴とする使用方法。
【請求項３】
請求項１に記載の使用方法において、前記添加物に、キンマリーフエキスの活性を妨げないものが選択されていることを特徴とする使用方法。
【請求項４】
請求項１に記載の使用方法において、前記添加物は、プロテイン、炭水化物、糖、タルク、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、炭化カルシウム、スターチ−ゼラチンペースト及び／又は薬学的に許容しうるキャリア、賦形剤、希釈剤または溶剤を具える栄養素群から選択されたものであることを特徴とする使用方法。
【請求項５】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスまたはキンマリーフエキスを含有する組成物は、経口あるいは経筋肉で投与されることを特徴とする使用方法。
【請求項６】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスは、カプセル、シロップ、濃縮液、粉状、または粒状で経口投与されることを特徴とする使用方法。
【請求項７】
請求項１に記載の使用方法において、キンマリーフエキスと前記添加物の割合が１−１０：１０−１であることを特徴とする使用方法。
【請求項８】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物が、体重１ｋｇ当たり５〜２０ｍｇの投与レベルで投与することを特徴とする使用方法。
【請求項９】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスまたは当該リーフを含有する組成物が、少なくとも３週間、好ましくは１ヶ月間、隔日で投与されることを特徴とする使用方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物が、単球の生存力（ｖｉａｂｉｌｉｔｙ） を８０％低減するものであることを特徴とする使用方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスを含有する組成物が、血液細胞の抗単球活性を提供するものであることを特徴とする使用方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の使用方法において、前記キンマリーフエキスが：
（Ｉ）乾燥サンプルが暗色の物質であり、水溶性であり、ジメチルサルフォキシドである；
（ＩＩ）活性物質の薄層クロマトグラフィが、ｎ−ブタノール、酢酸および水が９：５：７の割合でなる溶液中で、Ｒｆ０．７５，０．６４，０．５０，０．４０，および０．３３の５点を示す；および
（ＩＩＩ）インターシル（Ｉｎｔｅｒｓｉｌ）ＯＤＳ−３（４．６×２５０ｍｍ）の分析カラム、メタノールと水を４：１の割合で含む溶液、フローレート１．０ｍｌ／分にて、活性物質のＨＰＬＣ分析が、２．６９，４．２７，５．９５，６．９７，７．４９，９．３９，１１．２０，１２．４０，１５．５３，１８．９０，及び２１．４９分の滞留時間で１１のピークに分けて、２１７ｎｍを検出する；という特性を有することを特徴とする方法。
【請求項１３】
ヒトを含む動物の骨髄性白血病の治療に有益な薬学的組成物において、当該組成物が、有効量のキンマリーフエキスあるいは凍結乾燥エキスを薬学的に許容可能な添加物と共に含むことを特徴とする組成物。
【請求項１４】
請求項１３に記載の組成物において、前記選択された添加物が、キンマリーフエキスの活性を妨げないことを特徴とする組成物。
【請求項１５】
請求項１３に記載の組成物において、前記添加物が、プロテイン、炭水化物、糖、タルク、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、炭化カルシウム、スターチ−ゼラチンペースト及び／又は薬学的に許容しうるキャリア、賦形剤、希釈剤または溶剤を具える栄養素群から選択されたものであることを特徴とする組成物。
【請求項１６】
請求項１３に記載の組成物において、前記組成物が経口あるいは経筋肉で投与されるものであることを特徴とする組成物。
【請求項１７】
請求項１３に記載の組成物において、前記キンマリーフエキスは、カプセル、シロップ、濃縮液、粉状、または粒状で経口投与されるものであることを特徴とする組成物。
【請求項１８】
請求項１３に記載の組成物において、前記キンマリーフエキスと前記添加物の割合が１−１０：１０−１であることを特徴とする組成物。
【請求項１９】
請求項１３に記載の組成物において、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物が、体重１ｋｇ当たり５〜２０ｍｇの投与レベルで投与するものであることを特徴とする組成物。
【請求項２０】
請求項１３に記載の組成物において、前記キンマリーフエキスまたは当該リーフを含有する組成物が、少なくとも３週間、好ましくは１ヶ月間、隔日で投与されるものであることを特徴とする組成物。
【請求項２１】
請求項１３に記載の組成物において、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物が、単球の生存力（ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）を８０％低減するものであることを特徴とする組成物。
【請求項２２】
請求項１３に記載の組成物において、前記キンマリーフエキスが：
（Ｉ）乾燥サンプルが暗色の物質であり、水溶性であり、ジメチルサルフォキシドである；
（ＩＩ）活性物質の薄層クロマトグラフィが、ｎ−ブタノール、酢酸および水が９：５：７の割合でなる溶液中で、Ｒｆ０．７５，０．６４，０．５０，０．４０，および０．３３の５スポットを示す；および
（ＩＩＩ）インターシル（Ｉｎｔｅｒｓｉｌ）ＯＤＳ−３（４．６×２５０ｍｍ）の分析カラム、メタノールと水を４：１の割合で含む溶液、フローレート１．０ｍｌ／分にて、活性物質のＨＰＬＣ分析が、２．６９，４．２７，５．９５，６．９７，７．４９，９．３９，１１．２０，１２．４０，１５．５３，１８．９０，及び２１．４９分の滞留時間で１１のピークに分けて分析し、２１７ｎｍを検出する；との特性を有することを特徴とする組成物。
【請求項２３】
キンマリーフエキス、凍結乾燥エキスまたはキンマリーフエキスを含む組成物を用いたヒトを含む動物の骨髄性白血病の治療方法において、当該方法が、薬学的有効量のキンマリーフエキス、凍結乾燥エキスまたはキンマリーフエキスを含む組成物を、骨髄性白血病に罹患しているヒトを含む動物に投与するステップを具えることを特徴とする治療方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の治療方法において、前記キンマリーフエキスを薬学的に受容しうる添加物と共に投与することを特徴とする治療方法。
【請求項２５】
請求項２３に記載の治療方法において、前記添加物に、キンマリーフエキスの活性を妨げないものが選択されていることを特徴とする治療方法。
【請求項２６】
請求項２３に記載の治療方法において、前記添加物が、プロテイン、炭水化物、糖、タルク、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、炭化カルシウム、スターチ−ゼラチンペースト及び／又は薬学的に許容しうるキャリア、賦形剤、希釈剤または溶剤を具える栄養素群から選択されたものであることを特徴とする治療方法。
【請求項２７】
請求項２３に記載の治療方法において、前記組成物を経口あるいは経筋肉で投与することを特徴とする治療方法。
【請求項２８】
請求項２３に記載の治療方法において、前記キンマリーフエキスの投与ルートが、カプセル、シロップ、濃縮液、粉状、または粒状であることを特徴とする治療方法。
【請求項２９】
請求項２３に記載の治療方法において、前記経口投与のルートが、キンマリーフエキスと前記添加物の割合が１−１０：１０−１であることを特徴とする治療方法。
【請求項３０】
請求項２３に記載の治療方法において、前記キンマリーフエキスがキンマリーフを粉砕してあるいは粉砕したリーフを水あるいはアルコール、カーボンテトラクロイド、クロロホルム、アセトン等の有機溶剤で抽出して得ることを特徴とする治療方法。
【請求項３１】
請求項２３に記載の治療方法において、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物を、体重１ｋｇ当たり５〜２０ｍｇの投与レベルで、少なくとも３週間、好ましくは１ヶ月間、隔日投与することを特徴とする治療方法。
【請求項３２】
請求項２３に記載の治療方法において、前記組成物が、単球の生存力（ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）を８０％低減することを特徴とする治療方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の技術分野
本発明はキンマリーフの抗単球活性に関する。骨髄性白血病は致命的であり、通常化学療法が効かず、予後が好ましくない。キンマリーフの抗単球活性は、骨髄性白血病の治療への潜在的な使用を提言するものである。本発明は、また、骨髄精白血病に罹患しているヒトを含む動物に対するキンマリーフエキスを用いた骨髄性白血病の治療法に関する。
【０００２】
発明の背景
キンマリーフは、強い刺激のある香りをもち、どろどろした状態で広く用いられている。通常、成長した葉あるいは、成長が終わり枯れる前の成熟した葉は、咀嚼用（チューイング）に用いられる。咀嚼目的の基本的な製品は、キンマリーフに水和石灰とカテキュを塗ったものに、ビンロウジの実（ａｒｅｃａｎｕｔ）を削ったものを加え；ココナッツを削ったもの、クローブ、カルダモン、フェンネル、かん草の粉、ナツメッグ、たばこなどの香料を、好みに応じて加えて作る。銀箔または金箔を被覆した鍋を用いて作るところもある。どろどろした状態のものには、芳香があり、消化を促進し、刺激性があり、また腸内のガスを排出させるといった様々な特徴がある。医学的には、粘膜の炎症や、肺の感染症の治療に使用される。また、湿布剤としても利用される。ビンロウジの実と、その他の添加物を加えたキンマリーフを咀嚼すると、唾液腺を刺激する、口の粘膜が炎症を起こすなどの効果がある。アルカリ活性下ではビンロウジの実の色素によって、またカテキュによって血色が良くなる。軽い刺激が生じて、暖まり、具合が良くなる一方、快い香りがする。リーフの芳香を決定する最も重要なファクタは、エッセンシャルオイルの量と、特にその性質である。キンマリーフは、地域によって香りと味が異なる。最も刺激の強いのは、サンチ（Ｓａｎｃｈｉ）タイプのリーフであり、最もマイルドで甘いリーフはマドラス産のものである。キンマリーフは、エッセンシャルオイルを含み、オイルの含有量は、リーフによって異なるが、０．７〜２．６％である。このオイルは、フェノールとテルペンを含有している。フェノールオイルの割合が高いほど、高品質となる。チャビベトール（ｃｈａｖｉｂｅｔｏｌ）（キンマフェノール；４−アリル−２−ヒドロキシ−１−メタオキシ  ベンゼン）と呼ばれるユーゲノール異性体が、キンマオイルの特徴的な構成要素であると考えられる。しかしながら、これはインドのサンプルには存在しない。インディアンキンマオイルは、優れたフェノリック成分を含む。キンマオイルは、うがいによる局部的適用、あるいはジフテリアの炎症などの様々な呼吸器カタルの治療に利用されてきた。これは、胃腸内のガスを排出させる効能もある。哺乳動物の中央神経システムには別の作用を示す。致死量を服用すると、昏睡を引き起こし、数時間で死に至らしめる。葉のエッセンシャルオイルとエキスは、ミクロコッカス変異アルブス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ ｖａｒ． ａｌｂｕｓ）、バシラス  サチリスおよびバシラス メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ａｎｄ Ｂ． ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ） 、ディプロコッカス肺炎 （Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ） 、化膿連鎖球菌 （Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ） 、エシェリキアコリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ） 、サルモネラチフォーサ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｏｓａ） 、ビブリオコマ（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｏｍｍａ） 、シゲラダイセンテリア（Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ） 、プロテウスブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ） 、シュードモナス  サラナカエルム（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｏｌａｎａｃａｅｒｕｍ） 、サルチナ  ルテア（Ｓａｒｃｉｎａ ｌｕｔｅａ） 、及びエルビニア  カルトロラ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃａｒｏｔｏｒｏｒａ） 等のグラム陽性、およびグラム陰性のバクテリアに活性を有する。このエッセンシャルオイルあるいはリーフエキスは、アスペリギルス ニガー  およびアスペリギルス オリザ（Ａｓｐｅｒｉｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ａｎｄ Ａ． Ｏｒｙｚａｅ） 、クルブラリア  ルナータ（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ ｌｕｎａｔａ） およびフサリウム  オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ） に対する抗カビ活性を有する。このオイルは、原生動物であるパラマウセウム  カウダツム（Ｐａｒａｍａｅｃｅｕｍ ｃａｕｄａｔｕｍ） （ウエルスオブインディア、Ｖｏｌ．８、ｐｇ８４−９４）を約５分で死に至らしめる。これは、ビブリオコレラ（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ） 、サルモネラチフォーサ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｏｓｕｍ） 、シゲラ  フレキシネリ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｆｌｅｘｎｅｒｉ） およびエシェリキアコリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ） の成長を阻止する。リーフを蒸して蒸留したものはマイコバクテリウム  ツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ） に対する活性を示す。
【０００３】
骨髄性白血病は、二つのグループに分けられる。一つは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）であり、もう一つは、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）である。急性骨髄性白血病は、骨髄内で骨髄細胞の数が増加し、この細胞の成長が抑制されるものであり、頻繁に、造血が不十分になる。米国における、急性骨髄白血病の年間発生率は、１０万人中約２．４人であり、これは年齢と共に増加しており、６５歳以上の大人１０万人中１２．６人をピークとする。治療方法は改善されているが、世界中で急性骨髄性白血病の予後は芳しくない。米国でも、６５歳以下の患者の５年生存率は４０％以下である。この１０年間で、この値は１５％であった。同様に、慢性骨髄性白血病も、臨床薬が発達しているにもかかわらず予後が芳しくない。
【０００４】
発明の開示
本発明の目的とするところは、ヒトを含む動物の骨髄性白血病の治療に、キンマリーフエキスを用いることである。
【０００５】
本発明の他の目的は、骨髄性白血病の治療に有益なキンマリーフを含む組成物を提供することである。
【０００６】
発明の要約
上記目的を達成するために、本発明はキンマリーフエキスの抗単球活性を提供し、この活性をヒトを含む動物の骨髄性白血病の治療に利用する。
【０００７】
発明の詳細な説明
本発明はキンマリーフエキスの新規な利用方法、すなわち抗単球活性を提供するものである。このキンマリーフエキスの抗単球活性は、ヒトを含む動物の骨髄性白血病の治療に用いられる。
【０００８】
本発明の実施例では、骨髄性白血病の治療に有益な薬学的成分が、有効量のキンマリーフエキスと薬学的に許容しうる添加物を具える。
【０００９】
本発明の更なる実施例では、前記添加物に、キンマリーフエキスの活性を阻害しないものが選択される。
【００１０】
本発明の更なる実施例では、前記添加物は、プロテイン、炭水化物、等、タルク、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、炭化カルシウム、スターチ−ゼラチンペースト及び／又は薬学的に許容しうるキャリア、 賦形剤、希釈剤または溶剤を具える栄養素群から選択される。
【００１１】
本発明の更なる実施例では、キンマリーフエキスまたはキンマリーフエキスを含む組成物は、経口あるいは経筋肉によって投与される。
【００１２】
本発明の更なる実施例では、キンマリーフエキスは、カプセル、シロップ、濃縮液、粉状あるいは粒状の形で経口投与される。
【００１３】
本発明の更なる実施例では、前記添加物とキンマリーフエキスの率は、１０対１の範囲内である。
【００１４】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物は、体重１ｋｇあたり５〜２０ｍｇの投与レベルで投与される。
【００１５】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは当該エキスを含む組成物は、少なくとも３週間、好ましくは１ヶ月間、１日おきに投与される。
【００１６】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物は、単球量を８０％削減するものである。
【００１７】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物が骨髄性白血病の治療に使用される。
【００１８】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスが、薬学的に許容されうる添加物と共に投与される。
【００１９】
本発明の更なる実施例では、前記添加物は、前記キンマリーフエキスの活性を阻害しないように選択される。
【００２０】
本発明の更なる実施例では、前記添加物は、プロテイン、炭水化物、等、タルク、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、炭化カルシウム、スターチ−ゼラチンペースト及び／又は薬学的に許容しうるキャリア、賦形剤、希釈剤または溶剤を具える栄養素群から選択される。
【００２１】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキス又は前記組成物は、経口あるいは経筋肉で投与される。
【００２２】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物は、カプセル、シロップ、濃縮液、粉状または粒状にて経口投与される。
【００２３】
本発明の更なる実施例では、前記添加物とキンマリーフエキスの率は、１０対１の範囲内である。
【００２４】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物は、体重１ｋｇあたり５〜２０ｍｇの投与レベルで投与される。
【００２５】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは当該エキスを含む組成物は、少なくとも３週間、好ましくは１ヶ月間、１日おきに投与される。
【００２６】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスまたは前記組成物は、単球量を８０％削減するものである。
【００２７】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフエキスは、キンマリーフを砕いてあるいは、砕いたキンマリーフを水あるいは、アルコール、カーボンテトラクロライド、クロロホルムまたはアセトンなどの有機溶剤で抽出して得る。
【００２８】
本発明の更なる実施例は、キンマリーフエキス剤を以下のステップにて製造する。
１）生のリーフあるいはコショウ科キンマを洗浄し、混合ブレンダにて均質化する
２）超音波バスにて超音波を２〜３回、１回につき１５分間照射し、エキスを濾過する。必要に応じて前記抽出工程を少なくとも１回繰り返し、乾燥させる
３）抽出物を凍結乾燥させて半固体化する。
【００２９】
本発明の更なる実施例では、前記キンマリーフ（コショウ科キンマ）は、野生、蔓性、ベンガルタイプ、スィートタイプのものから選択する。
【００３０】
以下に述べる実験例は本発明の説明のためにのみ記載したものであり、これによって本発明の範囲を減縮するものではない。
【００３１】
実験例１
３４．１４ｇｍのコショウ科キンマの生葉を無菌水で洗浄して、混合ブレンダで１００ｍｌの蒸留水と均質化させた。次いで、超音波バスにて超音波を３回、各１５分間照射した。抽出物をホワットマン１番フィルタ紙（Ｗｈａｔｍａｎ Ｎｏ．１）で濾過して、濾過物を収集した。この抽出工程を３回繰り返した。集めた抽出物を凍結乾燥させて１．１７ｇｍの半固体を得た。次いで、この固体物の生化学活性をテストした。
【００３２】
実験例２
２１．６８ｇｍのコショウ科キンマの生葉を混合ブレンダで蒸留水６０ｍｌで親液化し、超音波バスにて超音波を２回、各１５分間照射した。一晩、あるいは１６時間置いてエキスの抽出を行った。ホワットマン１番フィルタ紙（Ｗｈａｔｍａｎ Ｎｏ．１）で濾過して、水の中で抽出した材料を分離した。この抽出工程を３回繰り返した。集めた抽出物をフラッシュ蒸発器にて、４５℃、減圧下で蒸発させて乾燥状態にした。残留物質を乾燥機で高真空状態にて乾燥させて、０．５９ｇｍの半固体を得、この固体物の生化学活性をテストした。
【００３３】
抽出物の特性：
実験１および２によって得られた生化学的に活性である抽出物は、以下の特性を有する。
１）上記のとおり製造した乾燥半固体は、暗色の水溶性物質であり、ジメチルスルホキシド（ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）である。
２）活性物質の薄層クロマトグラフィは、ｎ−ブタノール、酢酸、水を９：５：７の割合で含む溶液中でＲｆ０．７５，０．６４，０．５０，０．４０，及び０．３３の５点を示す。
３）インターシル（Ｉｎｔｅｒｓｉｌ）ＯＤＳ−３（４．６×２５０ｍｍ）の分析カラムで、メタノールと水を４：１の割合で含む溶液を用い、フローレート１．０ｍｌ／分にて、活性物質のＨＰＬＣ分析を行い、活性物質を、２．６９，４．２７，５．９５，６．９７，７．４９，９．３９，１１．２０，１２．４０，１５．５３，１８．９０，及び２１．４９分の滞留時間で１１のピークに分けて分析し、２１７ｎｍを検出した。
【００３４】
実験例３
１．ヒト抹消血液単核細胞（ＰＢＭＣ）の作成
ヘパリン化全血（通常人から採取）を、フィコルハイパーク（Ｆｉｃｏｌｌ Ｈｙｐａｑｕｅ）密度勾配遠心分離器にかけた。インターフェース内の細胞をリン酸バッファ食塩水（ＰＢＳ：ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）で２度洗浄し、媒質ＲＰＭＩ−１６４０に１０％の胎児ウシ血清（Ｆｅｔａｌ Ｂｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ）を補足したものに再懸濁させた。
【００３５】
２．キンマリーフエキスを用いたｈＰＢＭＣのインキュベーション
ＰＢＭＣ（５．０×１０６セル）を一晩（１８時間）、３７℃で、５％の２酸化炭素雰囲気下で、全体積２．０ｍｌＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳを２４個のウエルプレートで、キンマリーフエキス（最終濃度１２．５ｍｇ／ｍｌ）のあるものと、ないものとを培養した。このインキュベーション期間の最後に、ＰＢＭＣをＰＢＳで２回洗浄し、フロー血球計算を行って単球の破壊度を検出した。
【００３６】
３．フロー血球計算によるリンパ球と単球によって生じた光散乱のモニタリング
ｈＰＢＭＣをキンマリーフでインキュベートし、ＰＢＳで１度洗浄し、１％のパラホルムアルデヒドを含むＰＢＳに再度懸濁させた。細胞をフロー血球計算器（ＦＡＣＳ：Ｃａｌｉｂｕｒ， Ｂｃｔｏｎ Ｋｉｃｋｉｎｓｏｎ）で分析した。
【００３７】
結果
図１Ａに示すとおり、末梢血液単核細胞は、期待した通りの単球（Ｒ１）とリンパ球（Ｒ２）の割合を有していた。逆に、キンマリーフエキス（野生タイプ）で一晩インキュベートしたｈＰＢＭＣは、通常のリンパ球を有していた（Ｆｉｇ． ＩＢ， Ｒ２）が、単球はほとんど完全に消滅していた（Ｆｉｇ． ＩＢ， Ｒ１）。これは、キンマリーフが単球の生存能力を少なくとも８０％低減させたことを示す。
【００３８】
ディスカッション
従って、キンマリーフ抽出物の抗単球特性は、骨髄性白血病の治療に利用しうるとの結論に至った。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、キンマリーフエキスにて培養した後の、ヒト末梢血液単核細胞（ＰＢＭＣ）から得た単球の破壊の様子を示す図である。
【図１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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