(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）の化合物（式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリル）、およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体に関する。式（Ｉ）の化合物は、ＦＸＲ作用薬として有用である。
2004519492.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物であって、
【化１】
2004519492.tif 000008
式中、Ｒがエチル、プロピルまたはアリルである化合物、およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体。
【請求項２】
３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体。
【請求項３】
３α，７α−ジヒドロキシ−６α−プロピル−５β−コラン−２４−酸およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体。
【請求項４】
３α，７α−ジヒドロキシ−６α−アリル−５β−コラン−２４−酸およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体。
【請求項５】
式（Ｉ）の化合物のグリシン抱合体であって、
【化２】
2004519492.tif 000009
式中、Ｒがエチル、プロピルまたはアリルである化合物のグリシン抱合体。
【請求項６】
式（Ｉ）の化合物のタウリン抱合体であって、
【化３】
2004519492.tif 000010
式中、Ｒがエチル、プロピルまたはアリルである化合物のタウリン抱合体。
【請求項７】
前記化合物がＦＸＲ作用薬である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１に記載の化合物および薬剤として許容される担体または希釈剤を含む製剤。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物を治療有効量投与することを含む、ＦＸＲが媒介する疾患または症状の予防法または治療法。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物を治療有効量投与することを含む、心血管疾患の予防法または治療法。
【請求項１１】
前記心血管疾患がアテローム性動脈硬化症である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の化合物を治療有効量投与することを含む、ＨＤＬコレステロールを増加させる方法。
【請求項１３】
請求項１に記載の化合物を治療有効量投与することを含む、中性脂肪を減少させる方法。
【請求項１４】
請求項１に記載の化合物を治療有効量投与することを含む、胆汁うっ滞性肝疾患の予防法または治療法。
【請求項１５】
請求項１に記載の放射標識化合物。
【請求項１６】
前記化合物がトリチウム化されている、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
ＦＸＲが媒介する疾患または症状を予防または治療する医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項１８】
心血管疾患を予防または治療する医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項１９】
アテローム性動脈硬化症を予防または治療する医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２０】
ＨＤＬコレステロールを増加させる医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２１】
中性脂肪を減少させる医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２２】
胆汁うっ滞性肝疾患を予防または治療する医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２３】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化４】
2004519492.tif 000011
式中、Ｒがエチル、プロピルまたはアリルである化合物、およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体を調製する方法であって、
ａ）３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を３，４−ジヒドロピランと反応させて、３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を調製するステップと、
ｂ）３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を、式Ｒ−Ｂｒ（式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリル）の臭化アルキルと反応させて、式（ＩＩ）の化合物を調製するステップと、
【化５】
2004519492.tif 000012
ｃ）式（ＩＩ）の化合物を水素化ホウ素ナトリウムと反応させて、式（ＩＩＩ）の化合物を調製するステップと、
【化６】
2004519492.tif 000013
ｄ）式（ＩＩＩ）の化合物を水酸化ナトリウムと反応させて、式（Ｉ）の化合物を調製するステップとを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）に関する。より詳細には、本発明は、ＦＸＲに対する作用薬として有用な化合物、こうした化合物を含む製剤、およびその治療上の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）は、最初にラットの肝臓のｃＤＮＡライブラリ（ＢＭ．Ｆｏｒｍａｎ等、Ｃｅｌｌ、８１：６８７〜６９３（１９９５））から同定された、昆虫脱皮ホルモン受容体と最も密接な関係があるオーファン核内受容体である。ＦＸＲは、ステロイド、レチノイド、および甲状腺ホルモンの受容体を含むリガンド活性化転写因子の核内受容体ファミリーに属している（ＤＪ．Ｍａｎｇｅｌｓｄｏｒｆ等、Ｃｅｌｌ、８３：８４１〜８５０（１９９５））。ノーザン分析およびその場（ｉｎ  ｓｉｔｕ）分析によれば、ＦＸＲが肝臓、腸、腎臓、および副腎で最も大量に発現することが示されている（ＢＭ．Ｆｏｒｍａｎ等、Ｃｅｌｌ、８１：６８７〜６９３（１９９５）、およびＷ．Ｓｅｏｌ等、Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｎｏｌ．、９：７２〜８５（１９９５））。ＦＸＲは、９−シスレチノイン酸受容体（ＲＸＲ）とのヘテロ二量体としてＤＮＡに結合する。ＦＸＲ／ＲＸＲヘテロ二量体は、逆向き反復配列として組織化され、一塩基で隔てられたコンセンサスＡＧ（Ｇ／Ｔ）ＴＣＡ（ＩＲ−１モチーフ）の２つの核内受容体半部位から構成される応答因子に優先的に結合する（ＢＭ．Ｆｏｒｍａｎ等、Ｃｅｌｌ、８１：６８７〜６９３（１９９５））。初期の報告で、ラットのＦＸＲがファルネソールや幼若ホルモンなどマイクロモル濃度のファルネソイドによって活性化されることが示された（ＢＭ．Ｆｏｒｍａｎ等、Ｃｅｌｌ、８１：６８７〜６９３（１９９５））。しかし、これらの化合物はマウスおよびヒトのＦＸＲを活性化せず、内因性ＦＸＲリガンドの性質は不明なままである。数種の自然に存在する胆汁酸は、生理的濃度でＦＸＲに結合し、それを活性化させる（ＰＣＴ  ＷＯ００／３７０７７号、２０００年６月２９日公開）。この中で論じたように、ＦＸＲリガンドとして働く胆汁酸には、ケノデオキシコール酸（ＣＤＣＡ）、デオキシコール酸（ＤＣＡ）、リトコール酸（ＬＣＡ）、およびこれらの胆汁酸とのタウリンおよびグリシン抱合体などがある。
【０００３】
胆汁酸は、肝臓で生成され、腸の十二指腸内に分泌されるコレステロール代謝産物であり、そこで食事性脂質(dietary lipids)およびビタミンの可溶化と吸収において重要な役割を果たす。ほとんどの胆汁酸（〜９５％）は、続いて回腸内で再吸収され、腸肝循環系によって肝臓に戻される。肝臓内でのコレステロールの胆汁酸への変換は、フィードバック調節に基づいている。すなわち、胆汁酸は、胆汁酸の生合成における律速段階を触媒する酵素をコードするチトクロムＰ４５０  ７ａ（ＣＹＰ７ａ）の転写を下方調節する。正確なメカニズムははっきりしないが、ＦＸＲが胆汁酸によるＣＹＰ７ａ発現の抑制に関与することを示唆するデータがある（ＤＷ．Ｒｕｓｓｅｌｌ、Ｃｅｌｌ、９７：５３９〜５４２（１９９９））。回腸では、胆汁酸は、胆汁酸と高い親和性で結合し、それらの細胞取り込みおよび輸送に関与しているかもしれない細胞質蛋白である腸内胆汁酸結合蛋白（ＩＢＡＢＰ）の発現を誘導する。現在２つのグループが、胆汁酸が、ヒト、ラット、およびマウスのＩＢＡＢＰ遺伝子プロモーター（１４；１７）に保存されているＩＲ−１型応答因子に結合するＦＸＲの活性化によって、ＩＢＡＢＰ発現に対するその効果を媒介することを実証している。したがって、ＦＸＲは、胆汁酸およびコレステロールの恒常性に関与する標的遺伝子の刺激（ＩＢＡＢＰ）と抑制（ＣＹＰ７ａ）のどちらにも関与している。
【０００４】
１９９２年５月５日に公報発行のＧｉｕｌｉａｎａ  Ｓ．ｐ．Ａ．に対する欧州特許第０  ３１２  ８６７号は、ウルソデオキシコール酸、ウルソコール酸、ケノデオキシコール酸、コール酸など天然の胆汁酸の６−メチル誘導体を記載している。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
第１の態様によれば、本発明は、式Ｉの化合物、およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体を提供する。
【０００６】
【化１】
2004519492.tif 000003
【０００７】
式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリルである。好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、グリシンまたはタウリン抱合体の形である。
【０００８】
別の態様では、本発明は、３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体を提供する。
【０００９】
別の態様では、本発明は、３α，７α−ジヒドロキシ−６α−プロピル−５β−コラン−２４−酸およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体を提供する。
【００１０】
別の態様では、本発明は、３α，７α−ジヒドロキシ−６α−アリル−５β−コラン−２４−酸およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体を提供する。
【００１１】
別の態様では、本発明は、ＦＸＲ作用薬である化合物を提供する。
【００１２】
別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物および薬剤として許容される担体または希釈剤を含む製剤を提供する。
【００１３】
別の態様では、本発明は、ＦＸＲが媒介する疾患または症状の予防法または治療法を提供する。この方法は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量投与することを含む。本発明はまた、ＦＸＲが媒介する疾患または症状を予防または治療する医薬品を調製するための式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【００１４】
別の態様では、本発明は、心血管疾患の予防法または治療法を提供する。この方法は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量投与することを含む。本発明はまた、心血管疾患を予防または治療する医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用を提供する。一実施形態では、心血管疾患はアテローム動脈硬化症である。
【００１５】
別の態様では、本発明は、ＨＤＬコレステロールを増加させる方法を提供する。この方法は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量投与することを含む。本発明はまた、ＨＤＬコレステロールを増加させる医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用を提供する。
【００１６】
別の態様では、本発明は、中性脂肪を減少させる方法を提供する。この方法は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量投与することを含む。本発明はまた、中性脂肪を減少させる医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用を提供する。
【００１７】
別の態様では、本発明は、胆汁うっ滞性肝疾患の予防法または治療法を提供する。この方法は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量投与することを含む。本発明はまた、胆汁うっ滞性肝疾患を予防または治療する医薬品を調製するための請求項１に記載の化合物の使用を提供する。
【００１８】
別の態様では、本発明は、放射標識した式（Ｉ）の化合物を提供する。一実施形態では、式（Ｉ）の化合物はトリチウム化されている。
【００１９】
別の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体を調製する方法を提供する。この方法は、以下のステップを含む。
【００２０】
ａ）３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を３，４−ジヒドロピランと反応させて、３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を調製する。
【００２１】
ｂ）３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を、式Ｒ−Ｂｒ（式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリル）の臭化アルキルと反応させて、式（ＩＩ）の化合物を調製する。
【００２２】
【化２】
2004519492.tif 000004
【００２３】
式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリルである。
【００２４】
ｃ）式（ＩＩ）の化合物をホウ水素化ナトリウムと反応させて、式（ＩＩＩ）の化合物を調製する。
【００２５】
【化３】
2004519492.tif 000005
【００２６】
ｄ）式（ＩＩＩ）の化合物を水酸化ナトリウムと反応させて、式（Ｉ）の化合物を調製する。
【００２７】
本発明のさらなる態様は、以下の本発明の詳細な説明、実施例、および特許請求の範囲に記載されている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２８】
本発明は、式（Ｉ）の化合物、およびその薬剤として許容される塩、溶媒和物またはアミノ酸抱合体を提供する。
【００２９】
【化４】
2004519492.tif 000006
【００３０】
式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリルである。
【００３１】
本発明による適当な薬剤として許容される塩は、当業者によって容易に決定でき、例えば、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、および亜鉛から作られた金属塩またはＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、およびプロカインから作られた有機塩などの塩基性塩を含む。例えば、適切な塩基を式（Ｉ）の化合物と反応させることにより、式（Ｉ）の化合物から、従来技術を用いて式（Ｉ）の化合物のこうした塩を調製できる。
【００３２】
医薬品に使用する場合は、式（Ｉ）の化合物の塩は薬剤として許容されるものでなければならないが、薬剤として許容されない塩を使って、好都合には対応する遊離塩基またはその薬剤として許容される塩を調製することができる。
【００３３】
本明細書では、「溶媒和物」という用語は、式（Ｉ）の化合物またはその薬剤として許容される塩および化学量論量または非化学量論量の溶媒を含む結晶形態である。例を挙げると、溶媒としては、水、メタノール、エタノール、または酢酸などがある。以下、式（Ｉ）の化合物への言及は、その塩または溶媒和物など特定の形態に特に規定がなければ、その化合物の任意の物理的形態を指すものとする。
【００３４】
本明細書では、「アミノ酸抱合体」という用語は、式（Ｉ）の化合物と任意の適当なアミノ酸との抱合体を意味する。好ましくは、こうした適当な式（Ｉ）の化合物のアミノ酸抱合体は、胆液または腸液中での安定性の向上という追加の利点を有する。適当なアミノ酸には、グリシンおよびタウリンなどを含むが、これらに限定されるものではない。したがって、本発明は、式（Ｉ）のいずれかの化合物のグリシンおよびタウリン抱合体を包含する。
【００３５】
式（Ｉ）の好ましい化合物としては、３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸、３α，７α−ジヒドロキシ−６α−プロピル−５β−コラン−２４−酸および３α，７α−ジヒドロキシ−６α−アリル−５β−コラン−２４−酸からなる群から選択された化合物、ならびにそれらの薬剤として許容される塩、その溶媒和物またはアミノ酸抱合体などがある。
【００３６】
以下、「式（Ｉ）の化合物」への言及はすべて、上記の式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの薬剤として許容される塩、その溶媒和物またはアミノ酸抱合体を意味する。
【００３７】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物はＦＸＲ作用薬である。本明細書では、「作用薬」という用語は、その主題が全体として参照により本明細書に組み込まれた、２０００年６月２９日に公報発行のＧｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄに対するＰＣＴ公開ＷＯ  ００／３７０７７号に記載されている検定法において適切な正の対照であるＣＤＣＡに対してＦＸＲを少なくとも５０％活性化させる化合物を意味する。より好ましくは、本発明の化合物は、ＰＣＴ公開ＷＯ  ００／３７０７７号に記載されているように、シンチレーション近接アッセイまたはＨＴＲＦアッセイでＦＸＲを１００％活性化させる。
【００３８】
式（Ｉ）の化合物は、様々な薬用目的に有用である。式（Ｉ）の化合物は、ＦＸＲが媒介する疾患または症状の予防法または治療法に使用することができる。ＦＸＲが媒介する疾患または症状には、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、過コレステリン血症、および高脂血症を含む心血管疾患などがある。特に、式（Ｉ）の化合物は、アテローム性動脈硬化症や過コレステリン血症を含む心血管疾患の治療と予防に有用である。式（Ｉ）の化合物はまた、ＨＤＬコレステロールを増加させ、かつ中性脂肪を減少させるのに有用である。
【００３９】
さらに、本発明の化合物は、胆汁うっ滞性肝疾患の予防と治療に有用である。本発明の化合物は、胆汁酸の流れを増大させる。胆汁酸の増大した流れは、肝臓から腸への胆汁酸の流動を向上させる。Ｃ．Ｓｉｎａｌ、Ｃｅｌｌ、１０２：７３１〜７４４（２０００）を参照のこと。基本的に、ＦＸＲゼロのマウスで、ＦＸＲが、胆汁酸の恒常性において中心的な役割を果たしており、従って、脂質の異化作用および排泄にとって決定的に重要な酵素および輸送体を調節するので、脂質の恒常性にとって決定的に重要であることが実証されている。したがって、ＦＸＲは、いくつかの胆汁うっ滞性肝疾患および他の脂質関連疾患や症状の治療の重要な標的である。
【００４０】
本発明の方法は、哺乳動物、一般におよび特にヒトの治療に有用である。
【００４１】
本発明の方法は、式（Ｉ）の化合物を治療有効量投与するステップを含む。本明細書では、「治療有効量」という用語は、規定された効果を得るのに十分な式（Ｉ）の化合物の量を意味する。したがって、ＦＸＲが媒介する疾患または症状の予防法または治療法に使用する式（Ｉ）の化合物の治療有効量は、ＦＸＲが媒介する疾患または症状を予防または治療するのに十分な量である。同様に、胆汁うっ滞性肝疾患の予防法または治療法あるいは胆汁の流れを増大させるのに用いる式（Ｉ）の化合物の治療有効量は、腸への胆汁の流れを増大させるのに十分な量である。
【００４２】
所望の生物学的効果を得るために必要な式（Ｉ）の化合物あるいはその薬剤として許容される塩または溶媒和物の量は、対象とする使用、投与の手段、およびレシピエントなどいくつかの要因によって決まり、最終的に、担当の医師または獣医師の判断による。一般に、ＦＸＲが媒介する疾患または症状の治療に対する通常の１日の投与量は、例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの範囲内にあると予想される。この用量は、１回単位量として、または数回に分けた単位量として、または連続注入として投与できる。同様の投与量を、他の疾患、症状の治療および胆汁うっ滞性肝疾患の予防と治療を含む療法に適用できる。
【００４３】
したがって、さらなる態様では、本発明は、活性成分として、式（Ｉ）の化合物またはその薬剤として許容される塩または溶媒和物を、少なくとも１つの薬剤用担体または希釈剤と共に含む薬剤組成物を提供する。これらの薬剤組成物は、前述の疾患や症状の予防と治療および上記の心血管療法に使用することができる。
【００４４】
担体は、薬剤として許容されるものでなければならず、組成物の他の成分に対して適合性がある、すなわち悪影響がないことが必要である。この担体は、固体でも液体でもよく、例えば、活性成分を０．０５〜９５重量％含む錠剤など、１回分の製剤として調製することが好ましい。望むなら、本発明の薬剤組成物に他の生理学的に活性な成分を取り込んでもよい。
【００４５】
可能な製剤には、経口、舌下、口腔、非経口（例えば皮下、筋肉内、または静脈内）、直腸、経皮を含む局所、鼻腔および吸入投与に適したものなどがある。個々の患者に対する最も適当な投与方法は、治療中の疾患または症状の性質と重さあるいは使用中の療法の性質ならびに活性な化合物の性質によって決まるが、可能なら、ＦＸＲが媒介する疾患や症状の予防と治療には経口投与が好ましい。
【００４６】
経口投与に適した製剤は、それぞれ活性な化合物を所定量含む錠剤、カプセル剤、カシェ剤、トローチ剤など別々の単位で、粉末または顆粒で、水性または非水性液体の液剤または懸濁剤で、あるいは水中油または油中水の乳剤で与えることができる。
【００４７】
舌下または口腔投与に適した製剤には、活性な化合物と一般に糖およびアラビアゴムまたはトラガカントゴムなど味付きの基剤を含むトローチ剤、ならびにゼラチンおよびグリセリンまたはショ糖アラビアゴムなど不活性な基剤中に活性な化合物を含むトローチ(pastilles)などがある。
【００４８】
非経口投与に適した製剤は、一般に活性な化合物を所定濃度含む無菌の水溶液を含み、その溶液は所期のレシピエントの血液と等張であることが好ましい。非経口投与に適した別の製剤には、界面活性剤やシクロデキストリンなど生理学的に適した補助溶剤および／または錯化剤を含む製剤などがある。水中油の乳剤も、非経口製剤に適した製剤である。こうした溶液は、静脈内に投与することが好ましいが、皮下または筋肉内注射によって投与してもよい。
【００４９】
直腸投与に適した製剤は、例えば、ココアバターなど坐剤基剤を形成する１種以上の固体担体中に活性成分を含む１回分の坐剤として与えることが好ましい。
【００５０】
局所または鼻腔内適用に適した製剤には、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、パスタ剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾール剤および油剤などがある。こうした製剤に適した担体には、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール類、アルコール類、およびその組み合わせなどがある。
【００５１】
本発明の製剤は、どんな適当な方法によっても調製でき、一般に、活性な化合物と液体または微粉砕した固体担体あるいはその両方を必要な割合で均等にかつ均質に混合し、次いで必要なら、得られた混合物を所望の形状に成形することによって調製することができる。
【００５２】
例えば、錠剤は、活性成分の粉末もしくは顆粒と結合剤、滑剤、不活性な希釈剤、または表面活性分散剤など１種以上の任意の成分を含む均質混合物を圧縮することによって、あるいは粉末活性成分と不活性な液状希釈剤の均質混合物を成形することによって調製できる。
【００５３】
吸入による投与に適した製剤には、様々なタイプの定量加圧型のエアロゾール剤、ネビュライザー、または吹入器を用いて発生させることができる微粒子ダストまたはミストなどがある。
【００５４】
口を経由する肺投与では、気管支樹へ確実に送達するように、粉末または液滴の粒径は、一般に０．５〜１０μｍ、好ましくは１〜５μｍである。経鼻投与では、鼻腔で確実に保持されるように、１０〜５００μｍの粒径が好ましい。
【００５５】
定量噴霧式吸入器は、一般に液化噴射剤中に活性成分の懸濁剤または液剤を含む加圧型エアロゾールディスペンサーである。使用中に、これらの装置は、一般に１０〜１５０μｌの一定ボリュームを送達するように適合されたバルブを通して製剤を吐出し、活性成分を含む微粒子スプレーを生成する。適した噴射剤には、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンおよびその混合物などある種のクロロフルオロカーボンがある。この製剤は、例えば、エタノールなどの１種以上の補助溶剤、オレイン酸またはトリオレイン酸ソルビタンなどの界面活性剤、抗酸化剤および適当な矯味剤などをさらに含んでもよい。
【００５６】
ネビュライザーは、狭いベンチュリオリフィスを通して一般に空気または酸素などの圧縮ガスを加速させることによって、あるいは超音波攪拌によって、活性成分の液剤または懸濁剤を治療エアロゾールミストに変換する市販の装置である。ネビュライザーで用いるのに適した製剤は、液体担体中に溶かした活性成分からなり、活性成分が製剤の４０％ｗ／ｗ以下、好ましくは２０％ｗ／ｗ未満を占める。この担体は、一般に水または水性希アルコール溶液であり、好ましくは例えば、塩化ナトリウムを加えることによって体液と等張にする。任意の添加剤には、製剤が無菌に調製されない場合、例えば、ヒドロキシ安息香酸メチル、抗酸化剤、矯味剤、精油、緩衝剤および界面活性剤などの保存料(preservatives)が含まれる。
【００５７】
吹入による投与に適した製剤には、吹入器を用いて送達されるあるいは鼻から吸い込むように鼻腔中に取り入れられる微粉砕した粉末などがある。吹入器では、粉末は、一般にゼラチンまたはプラスチックで作られたカプセルまたはカートリッジに含まれており、その場でそれらに穴をあけてあるいは開いて、吸入によってあるいは手動ポンプを用いて装置中に吸い込んだ空気で粉末が送達される。吹入器で使用する粉末は、活性成分単独あるいは活性成分と、乳糖などの適当な粉末希釈剤、および任意で界面活性剤を含む粉末ブレンドからなる。活性成分は、一般に製剤の０．１〜１００ｗ／ｗを占める。
【００５８】
特に上述した成分に加えて、本発明の製剤は、問題の製剤のタイプを考慮して、製薬分野の当業者に周知の他の薬剤を含んでもよい。例えば、経口投与に適した製剤は矯味剤を含んでもよく、鼻腔内投与に適した製剤は香料を含んでもよい。
【００５９】
したがって、本発明のさらなる態様によれば、ＦＸＲが媒介する疾患または症状の予防または治療のための医薬品の調製における式（Ｉ）の化合物の使用が提供される。
【００６０】
本発明の化合物は、有機化学のどんな適当な方法によっても調製することができる。１つの方法によれば、式（Ｉ）の化合物は、スキーム１に示した合成方法を用いて調製される。
【００６１】
【化５】
2004519492.tif 000007
【００６２】
式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリルである。
【００６３】
一般に、本発明の式（Ｉ）の化合物は、ａ）３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を３，４−ジヒドロピランと反応させて、３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を調製すること、ｂ）３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を、式Ｒ−Ｂｒ（式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリル）の臭化アルキルと反応させて、式（ＩＩ）の化合物を調製すること、ｃ）式（ＩＩ）の化合物をホウ水素化ナトリウムと反応させて、式（ＩＩＩ）の化合物を調製すること、およびｄ）式（ＩＩＩ）の化合物を水酸化ナトリウムと反応させて、式（Ｉ）の化合物を調製することを含む方法で調製できる。
【００６４】
より具体的には、式（Ｉ）の化合物は、好都合には式（ＩＩＩ）の化合物を、常温で適当な溶媒中で水酸化ナトリウムと反応させて調製する。適当な溶媒には、エタノールなどの低級アルコールなどがある。反応混合物は、任意で塩酸などの適切な酸を用いて酸性にしてもよい。
【００６５】
式（ＩＩＩ）の化合物は、好都合には式（ＩＩ）の化合物を、常温で適当な溶媒中でホウ水素化ナトリウムと反応させて調製する。適当な溶媒には、エタノールなどの低級アルコールなどがある。
【００６６】
式（ＩＩ）の化合物は、好都合には３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸を、適当な溶媒中でｎ−ブチルリチウムおよびＨＭＰＡのジイソプロピルアミン溶液存在下で式Ｒ−Ｂｒ（式中、Ｒはエチル、プロピルまたはアリル）の臭化アルキルと反応させて調製する。テトラヒドロフランなどの極性溶媒が、反応を行うのに有用である。この反応は、例えば約−７０〜−８０℃の低温で実施することが好ましい。
【００６７】
３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸は、好都合にはｐ−トルエンスルホン酸中で３，４−ジヒドロピランと反応させることによって３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸から調製できる。
【００６８】
式（Ｉ）の化合物の薬剤として許容される塩、溶媒和物およびアミノ酸抱合体は、当業者に周知の方法を用いて遊離塩基から調製できる。
【００６９】
本発明はまた、式（Ｉ）の放射標識化合物を提供する。式（Ｉ）の放射標識化合物は、従来技術を用いて調製できる。例えば、式（Ｉ）の放射標識化合物は、式（Ｉ）の放射標識化合物を生成するのに適した触媒の存在下で式（Ｉ）の化合物をトリチウムガスと反応させることによって調製できる。好ましい一実施形態では、式（Ｉ）の化合物はトリチウム化されている。
【００７０】
式（Ｉ）の放射標識化合物は、すでに本明細書に組み込まれているＰＣＴ公開ＷＯ  ００／３７０７７号に記載されているものなど、ＦＸＲと相互に作用する化合物を同定するための検定に有用である。
【００７１】
以下の実施例は、例示のためのものにすぎず、決して本発明の範囲を限定するものではなく、本発明は、特許請求の範囲によって定義される。
【実施例】
【００７２】
３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸（６αＥｔ−ＣＤＣＡ）の合成
３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸
ｐ−トルエンスルホン酸（６．０ｇ、３．２ｍｍｏｌ）および３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（４．６ｇ、５４ｍｍｏｌ）を、３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸（１）（６．０ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）のジオキサン１２０ｍｌ中溶液に加えた。この反応混合物を室温で１５分攪拌し、次いでｐＨが約８〜９に達するまでアンモニアで飽和させたメタノールで処理した。真空下で溶媒を除去し、残留物をクロロホルム（２００ｍｌ）で抽出し、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２×５０ｍｌ）で洗浄した。無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で蒸発させた後、シリカゲルクロマトグラフィーで残留物を精製した。ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（９０：１０）を用いた溶出によって、化合物２を白色固体（ｍｐ：１５７〜１５９℃）で５．４ｇ（１０．４ｍｍｏｌ、収率７４％）得た。
【００７３】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．５８（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3−１８）；０．８８（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ3−２１）；１．１４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3−１９）；３．３〜３．７（ｍ，３Ｈ，ｐｙｒ）；３．７５〜３．９５（ｍ，１Ｈ，ｐｙｒ）；４．６４〜４．７１（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−３）。
【００７４】
３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−５β−コラン−２４−酸エチル
ｎ−ブチルリチウム（２１．１ｍｌ、１．６Ｍヘキサン溶液）およびＨＭＰＡ（４．３ｍｌ）を、ジイソプロピルアミン（４．１ｍｌ、３３．７ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ２５０ｍｌ中溶液に−７８℃で滴下して加えた。この系をさらに３０分間−７８℃に維持し、次いで乾燥ＴＨＦ５０ｍｌに溶解させた３α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン−２４−酸（２）（５ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を−７８℃に冷却し、混合物に滴下して加えた。２０分後、ＴＨＦ（２０ｍｌ）に溶解させた臭化エチル（７．８ｍｌ、１０５ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、混合物を一夜の間に室温に到達させた。真空下で溶媒を除去し、１０％ＨＣｌで酸性にし、酢酸エチル（５×２００ｍｌ）で抽出し、飽和ＮａＣｌ溶液（１×２００ｍｌ）で洗浄した。無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で蒸発させた後、粗製残留物を２Ｎ  ＨＣｌのＥｔＯＨ（５０ｍｌ）溶液で１２時間還流させた。真空下でこの残留物を蒸発させ、酢酸エチル（３００ｍｌ）で抽出し、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２×１００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で蒸発させた。シリカゲルクロマトグラフィーで残留物を精製し、軽油：酢酸エチル（７０：３０）で溶出して、３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−５β−コラン−２４−酸エチル（３）を０．５７ｇ（１．２７ｍｍｏｌ、収率１２％）非晶質固体として得た。
【００７５】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．５０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3−１８）；０．６９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ2−ＣＨ3）；０．８２（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ3−２１）；１．０６〜１．１８（ｍ，８Ｈ，ＣＯ2ＣＨ2ＣＨ3＋ＣＨ2−ＣＨ3＋ＣＨ3−１９）；３．３６〜３．４２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−ＯＨ）、４．０１（ｑ，Ｊ＝７．２，Ｈｚ  ２Ｈ，ＣＯ2ＣＨ2ＣＨ3）。
【００７６】
３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸エチル
３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−５β−コラン−２４−酸エチル（３）（０．１８５ｇ、０．４ｍｍｏｌ）を９６％ＥｔＯＨ３０ｍｌに溶解させ、ＮａＢＨ4（３０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を、室温で２時間攪拌した。次いで水（１０ｍｌ）を加え、真空下でこの混合物を部分的に濃縮し、酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。有機画分を合わせて飽和ＮａＣｌ溶液（１×５０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で蒸発させた。３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸エチル（４）（０．１５ｇ、０．３３ｍｍｏｌ、収率８１％）を白色固体（ｍｐ：５５〜５７℃）で得た。
【００７７】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．６２（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3−１８）；０．８４〜０．９２（ｍ，９Ｈ，ＣＨ2−ＣＨ3＋ＣＨ3−１９＋ＣＨ3−２１）；１．２２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＣＯ2  ＣＨ2ＣＨ3）；３．３０〜３．４７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−３）、３．６６（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＨ−７）；４．０８（ｑ，Ｊ＝７．２，Ｈｚ  ２Ｈ，ＣＯ2ＣＨ2ＣＨ3）。
【００７８】
３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸
３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン−２４−酸エチル（４）（０．１０ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を９６％ＥｔＯＨ１５ｍｌに溶解させ、１０％ＮａＯＨの９６％ＥｔＯＨ溶液（２ｍｌ、５ｍｍｏｌ）に加えた。この混合物を４時間還流させた。この混合物を３Ｎ  ＨＣｌで酸性にし、酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。有機画分を合わせて飽和ＮａＣｌ溶液（１×５０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、真空下で蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムでクロマトグラフィーによって分離し、ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ（９５：５）で溶出して、３α，７α−ジヒドロキシ−６α−メチル−５β−コラン−２４−酸（６）（０．０４ｇ、０．０９５ｍｍｏｌ、収率４３％）を得た。
【００７９】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：０．６７（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3−１８）；０．９０〜０．９６（ｍ，９Ｈ，ＣＨ2−ＣＨ3＋ＣＨ3−１９＋ＣＨ3−２１）；２．２２〜２．４６（２ｍ，２Ｈ，ＣＨ2−２３）；３．３９〜３．４７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ−３）、３．７２（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＨ−７）。
【００８０】
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ：１１．６５、ＣＨ2ＣＨ3−６；１１．８０、Ｃ−１８；１８．２５、Ｃ−２１、２０．７６、Ｃ−１１；２２．２３、ＣＨ2ＣＨ3−６；２３．１４、Ｃ−１９；２３．６９、Ｃ−１５；２８．１７、Ｃ−１６；３０．５３、Ｃ−２；３０．８１、Ｃ−２２；３０．９５、Ｃ−２３；３３．２３、Ｃ−９；３３．９０、Ｃ−１０；３５．３８、Ｃ−２０；３５．５２、Ｃ−１；３５．７０、Ｃ−４；３９．６０、Ｃ−１２；４０．０３、Ｃ−５；４１．１９、Ｃ−６；４２．７７、Ｃ−１３；４５．１９、Ｃ−８；５０．４９、Ｃ−１４；５５．８０、Ｃ−１７；７０．９７、Ｃ−７；７２．３８、Ｃ−３；１７９．１９、Ｃ−２４。
【国際公開パンフレット】
2004519492.tif 000014
2004519492.tif 000015
2004519492.tif 000016
2004519492.tif 000017
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【国際調査報告】
2004519492.tif 000036
2004519492.tif 000037