(57)【要約】本発明は、式（１）：【化１】2004501931.tif 000010［式中、点線の結合は、任意の二重結合を表し；Ｒ６は、Ｈ、＝ＣＨ２、または−ＣＨ３、または−ＣＨ２−ＣＨ３であり；Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−５アルケニルまたはＣ２−５−アルキニルであり、該アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；Ｒ１１はＨ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニルまたはＣ１−４−アルキリデンであり、該アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアルキリデン基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；Ｅは、ステロイド骨格の炭素原子１６および１７と一緒になって、４から７員の環を表わし、該環は、ステロイド骨格に対してαおよびシス配置であり、１個または２個の環内結合を任意に有していてもよい］で示されるステロイド化合物またはそのプロドラッグを開示する。そのような化合物は、治療およびエストロゲン受容体の活性の選択的改質法に使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）：
【化１】
2004501931.tif 000008
［式中、
点線の結合は、任意の二重結合を表し；
Ｒ６は、Ｈ、＝ＣＨ２、または−ＣＨ３、または−ＣＨ２−ＣＨ３であり；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−５アルケニルまたはＣ２−５−アルキニルであり、該アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｒ１１はＨ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニルまたはＣ１−４−アルキリデンであり、該アルキル、アルケニル；アルキニルまたはアルキリデン基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｅは、ステロイド骨格の炭素原子１６および１７と一緒になって、４から７員の環を表わし、該環は、ステロイド骨格に対してシス配置におけるαであり、１個または２個の環内結合を任意に有していてもよい］
で示されるステロイド化合物またはそのプロドラッグ。
【請求項２】
Ｒ７はＨであり、Ｒ７はＣ１−３−アルキルであり、Ｅ環は、Ｓ立体配置において２２位にヒドロキシを有する、二重結合を有さない５または６員の環であることを特徴とする請求項１に記載のステロイド化合物。
【請求項３】
該化合物が、式２：
【化２】
2004501931.tif 000009
で示される（７α，１６β，１７α，２２Ｓ）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７，２２−トリオールであることを特徴とする請求項１または２に記載のステロイド化合物。
【請求項４】
治療に使用される請求項１から３のいずれか一項に記載のステロイド化合物。
【請求項５】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物をエストロゲン受容体に接触させることによる、エストロゲン受容体の活性の選択的改質方法。
【請求項６】
該方法が非医療法であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
該方法が、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物をエストロゲン受容体αに接触させることによる、エストロゲン受容体αの活性の選択的改質であることを特徴とする請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
該方法が、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物をエストロゲン受容体βに接触させることによる、エストロゲン受容体βの活性の選択的改質であることを特徴とする請求項５または６に記載の方法。
【請求項９】
選択的エストロゲン受容体関連治療用の薬剤の製造における、請求項１から３のいずれか一項に記載のステロイド化合物の使用。
【請求項１０】
該選択的エストロゲン受容体関連治療が、閉経期近くおよび閉経後の不定愁訴の予防または治療であることを特徴とする請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
該エストロゲン受容体関連治療が避妊治療であることを特徴とする請求項９に記載の使用。
【請求項１２】
請求項１から３のいずれか一項に記載のステロイド化合物、および医薬適合性のある助剤を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、エストロゲン活性を有する、ステロイド骨格のＤ環に結合した付加的Ｅ環を有するステロイド化合物に関する。
【０００２】
（背景技術）
エストロゲン受容体に親和性を有する新規化合物は、常に関心が持たれている。これは、ＥＲαおよびＥＲβで示される、受容体の２つの明確なサブタイプの発見によるものである（Ｍｏｓｓｅｌｍａｎら、ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　３９２（１９９６）４９−５３、およびＥＰ−Ａ−０７９８３７８参照）。そのような受容体サブタイプに選択的な化合物は、より選択的なエストロゲン受容体関連治療を提供することができる。例えば、ヒト組織における受容体サブタイプの異なる分布から利益が得られる。これは、少ないエストロゲン関連副作用で治療することを可能にする。選択的化合物から利益を得ることができるエストロゲン関連医療の例は、避妊治療、更年期不定愁訴治療、骨粗鬆症治療、およびエストロゲン依存性腫瘍抑制である。
【０００３】
ＥＰ　０８６９１３２において、下記式（１）で示されるエストロゲンステロイド化合物が開示されている：
【０００４】
【化３】
2004501931.tif 000002
［式中、
点線の結合は、任意の二重結合を表し；
Ｒ６は、Ｈ、＝ＣＨ２、または−ＣＨ３、または−ＣＨ２−ＣＨ３であり；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−５アルケニルまたはＣ２−５−アルキニルであり、該アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｒ１１はＨ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニルまたはＣ１−４−アルキリデンであり、該アルキル、アルケニル；アルキニルまたはアルキリデン基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｅは、ステロイド骨格の炭素原子１６および１７と一緒になって、４から７員の環を表わし、該環は、ステロイド骨格に対してシス配置におけるαであり、任意に、１個または２個の環内結合を有し、種々の意義を有するＲＥで置換されていてもよい］。
【０００５】
さらに、ＥＰ　０８６９１３２において、式（１）のステロイド化合物のアルキル、アルケニル、アルキニルおよびアルキリデン基は、分岐鎖であっても非分岐鎖であってもよいことが開示されている。Ｒ６またはＲ１１が、単結合を介してステロイド骨格に結合している場合、ステロイド骨格の置換炭素原子は、水素原子を有するか、または二重炭素−炭素結合に関与している。化合物はキラリティの種々の中心を有してもよく、鏡像異性体およびジアステレオ異性体として存在することができる。ヒドロキシル基を、アシルまたはアルキルのような置換基でキャップして、式（１）の化合物のプロドラッグを得ることができる。
【０００６】
ＲＥがａ´−ヒドロキシル基であることを特徴とする式（１）［記号および用語は前記に定義した通りである］のステロイド化合物またはそのプロドラッグは、高エストロゲンα有効性と組み合わされた、エストロゲン受容体αへの一貫して高い選択性を有することが意外にも見出された。本発明の化合物と以下に称するそのような化合物は、通例、エストロゲン受容体ａ´において極めて低い活性であるだけでなく、事実上、エストロゲン受容体ａ´における一般に拮抗薬であり、これは、エストロゲン受容体αへの極めて高い選択性に寄与し、エストロゲン受容体βの遮断に基づく選択的治療を可能にする。本発明の化合物は、前記の鏡像異性体およびジアステレオ異性体、および他方の鏡像異性体を実質的に含まない、即ち、５％未満、好ましくは２％未満、特に１％未満の他方の鏡像異性体を伴っている各（Ｒ）および（Ｓ）鏡像異性体、および実質的に同じ量の該２つの鏡像異性体を含有するラセミ混合物を包含するそのような鏡像異性体のあらゆる割合の混合物を包含する。
【０００７】
本発明の好ましい実施例は、前記のように定義され、さらに、Ｒ６がＨであり、Ｒ７が分岐鎖または非分岐鎖Ｃ１−３−アルキルであり、Ｅ環が、二重結合を有さず、Ｓ立体配置（該配置は、言い換えれば、立体化学概念において一般的な意味による、ステロイド骨格に対してβである）の２２位にヒドロキシを有する、５または６員の環であることを特徴とする、ステロイド化合物である。
【０００８】
最も好ましい化合物は、コード名Ｏｒｇ　４１６２１を有する式（２）の化合物、（７α，１６β，１７α，２２Ｓ）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７，２２−トリオールである：
【０００９】
【化４】
2004501931.tif 000003
【００１０】
従って、本発明の化合物は、生体におけるエストロゲンαまたはβ受容体の活性の、より指向的な、言い換えれば選択的な改質を可能にする。
【００１１】
プロドラッグは、受容者の体内で、ＲＥがβ−ヒドロキシル基である式１の化合物に変換する化合物として定義される。特に、３，１７位およびＥ−環上のヒドロキシ基を、例えば、エーテル（アルキル＊オキシ）またはエステル、例えばアシル＊オキシ、ホスフェート、スルフェート、スルホネートまたは芳香族カルボキシレートに変換することができる（アステリスク（＊）を付した基の炭素鎖長は厳しく限定されない。）。アシル基は直鎖または分岐鎖アルカン＊から誘導され、芳香族カルボキシレートは一般にフェニル、ピルジニルまたはピリミジルを含む。アルキル基およびアシル基の長さは、プロドラッグの所望の特性に依存して選択され、例えばラウリル鎖またはカプロイル鎖を有する長鎖プロドラッグは、持効性製剤およびデポー製剤に好適である。そのような置換基は、自発的に加水分解するか、または酵素的に加水分解して、化合物の骨格上の遊離ヒドロキシル置換基になることが知られている。そのようなプロドラッグは、該プロドラッグが受容者体内で変換される化合物に匹敵する生物活性を有する。プロドラッグが変換される活性化合物は、親化合物と称される。プロドラッグの作用の開始および作用持続時間ならびに体内における分布は、親化合物のそのような特性とは異なることもあり得る。
【００１２】
新規に見出されたそのような選択的化合物は、医療ならびに生理学的、医学的および薬理学的試験の両方において、極めて必要とされている。本発明の局面において、本発明の化合物は、受容者（ヒトまたは動物、好ましくはヒト）に投与することによって治療に使用することができる。生体の種々の組織におけるαおよびβ受容体の種々の分布は、種々の組織の機能により選択的に干渉する標的を提供する。種依存性エストロゲン受容体αは、主として膣組織および肝組織において発現され、β受容体は、主として、前立腺組織、ラット膀胱の上皮細胞層、血管内皮平滑筋細胞およびある脳領域、例えば、基底前脳（ｂａｓａｌ　ｆｏｒｅｂｒａｉｎ）、新皮質および海馬において発現されることが知られている。両方の受容体が存在する組織は、例えば、下垂体、視床下部、胸腺、子宮、卵巣および骨である。
【００１３】
本発明の化合物のエストロゲン受容体親和性プロフィールは、減少したエストロゲン関連副作用において、該化合物を、増進エストロゲンまたは抗エストロゲンに好適なものにする。従って、本発明は、本発明の化合物をエストロゲン受容体に接触させることによる、エスロゲン受容体の活性の選択的改質法を開示する。そのような方法は、ヒトまたは動物の体の治療法であることができるが、非医療法であることもできる。後者の方法は、試験法、例えば、選択的化合物のアッセイ、または相互作用するエストロゲン受容体または化合物に関する情報を得るためのインビトロ実験法であることができる。好ましくは、これらの化合物は、選択的エストロゲン受容体αまたはβに関連した、避妊、試験または内科治療、例えば、エストロゲン受容体関連疾患、更年期不定愁訴、骨粗鬆症、心臓血管疾患、下垂体ホルモン調節の変更、良性前立腺肥大、エストロゲン依存性腫瘍抑制、結腸癌、子宮内膜症または中枢神経系疾患の治療および予防に使用することができる。これらの選択的方法および治療の重要な共通の特徴は、本発明の化合物をエストロゲン受容体に接触させることを含むことである。
【００１４】
本発明は、選択的エストロゲン受容体関連治療用の薬剤、またはエストロゲン受容体α関連疾患の治療用の薬剤の製造における、本発明の化合物の使用にも関し、該使用は、本発明の化合物（好適な医薬投与形態）を患者に投与することを含む。エストロゲン受容体βにおける本発明の化合物の拮抗作用を考慮して、本発明は、本発明の化合物（好適な医薬投与形態）を患者に投与することを含むエストロゲン受容体β関連疾患の治療用の、薬剤の製造も提供する。
【００１５】
さらに、本発明は、避妊活性を有する薬剤の製造における、本発明の化合物の使用にも関する。従って、本発明は、避妊の医学的指示、即ち、患者、女性または雌動物への、当分野で慣習的なプロゲストゲンおよびエストロゲンの投与を含む避妊法も提供し、該避妊法においてエストロゲンは本発明の化合物（好適な医薬投与形態）である。
【００１６】
最後に、本発明は、選択的エストロゲン活性を有する薬剤の製造における、本発明の化合物の使用に関し、そのような薬剤は一般に、更年期不定愁訴の軽減、特に抗骨粗鬆症活性を有するＨＲＴ（ホルモン補充療法）の分野において好適である。
【００１７】
本発明の化合物の投与量は、エストロゲン関連化合物に一般的な程度、例えば、０．０１から１００ｍｇ／投与の程度である。
【００１８】
この目的のために、前記の治療用量と同程度の量の本発明の化合物を含有する投与単位を製造することができる。従って、本発明は、１つ以上の医薬適合性のある助剤と混合した本発明の化合物を含む医薬組成物にも関する。
【００１９】
本発明の化合物は、一般に有機化学分野、特にステロイド化学分野で既知の種々の方法によって製造することができる。例えば、Ｆｒｉｅｄ，　Ｊ．およびＥｄｗａｒｄｓ，　Ｊ．Ａ．，「Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｓｔｅｒｏｉｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、第Ｉおよび第ＩＩ版、Ｖａｎ　Ｎｏｓｔｒａｎｄ　Ｒｅｉｎｈｏｌｄ　Ｃｏｍｐａｎｙ，　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ，　１９７２、およびＣ．　Ｄｊｅｒａｓｓｉ、「Ｓｔｅｒｏｉｄ　Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ」、Ｈｏｌｄｅｎ−Ｄａｙ，　Ｉｎｃ．，　Ｓａｎ　Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，　１９６３参照。
【００２０】
本発明の化合物の合成において、付加的１６，１７アネレーテッド（ａｎｅｌｌａｔｅｄ）環を有するステロイドを合成しなければならない。その方法は、ＥＰ　０８６９１３２に開示されている。本発明の化合物について、付加的ヒドロキシ官能基をアネレーテッド環に導入しなければならない。この目的のために、例えばルテニウム、モリブデンまたはタングステンから誘導される遷移金属触媒を使用して、１６α，１７α−ビス不飽和フラグメントを不飽和アネレーテッド５または６員環に接近させるよく知られているオレフィン複分解法を使用することによって、好適に配置した二重結合を合成手順から得るようにアネレーション（ａｎｅｌｌａｔｉｏｎ）反応を行うのが有利である。このように合成されたオレフィン環を最初に立体選択的にエポキシ化する。これは一般に、酸化剤（例えば、過酸化水素またはｔ−ブチルヒドロペルオキシド）の存在下に金属錯体を使用し、過酸（好ましくは緩衝媒体中）のような薬剤または触媒系を使用して行うことができる。本発明の場合、過安息香酸および炭酸水素ナトリウム緩衝剤を使用して、良好な結果が一般に得られる。エポキシドを、ほぼ部位選択的に還元的に、水素化物試薬を用いて開いて、必要とするβ−アルコールを得ることができる。ヒドロキシ基は、炭化水素／酸化法を適用することによって容易に合成することができる。α−ヒドロキシ化合物が得られる場合、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕの発明は、目的とするアルコールであるβ−アルコールに容易に誘導することができる。必要であれば、適切なハロゲン化アルキルまたは酸塩化物を使用する反応によって、ヒドロキシ化合物を、プロドラッグ、例えば、アルキルエーテル、アシルエステル、カーボネート、スルホネートまたはホスフェートに変換することができる。
【００２１】
標準参照文献Ｇｅｎｎａｒｏら、Ｒｅｍｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１８版、Ｍａｃｋ　ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ，　１９９０、特にＰａｒｔ８：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　Ｔｈｅｉｒ　Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ参照）に記載されている医薬適合性のある助剤と組み合わせるかまたは組み合わせずに、１つ以上の本発明の化合物を含む医薬組成物を製造することができる。１つ以上の本発明の化合物、および１つ以上の医薬適合性のある助剤の混合物を圧縮して、固体投与単位、例えば丸剤または錠剤にすることができ、または加工処理してカプセル剤または坐剤にすることができる。医薬適合性のある液体によって、化合物を、溶液、懸濁液、乳液の形態の注射製剤、またはスプレー、例えば鼻腔スプレーとして投与することもできる。本発明の化合物は、インプラント、膣リング、パッチ、ゲル、および徐放用のあらゆる他の製剤に含有させることもできる。投与単位、例えば錠剤を形成するために、充填剤または担体、着色剤、ポリマー結合剤などのような一般的な添加剤も使用することができる。一般に、活性化合物の作用を妨げないあらゆる医薬適合性のある添加剤を使用することができる。組成物を投与するのに使用しうる好適な担体は、好適な量で使用されるラクトース、デンプン、セルロース誘導体など、およびそれらの混合物を包含する。
【００２２】
（実施例）
実施例に使用される合成経路を、スキームＩおよびＩＩに示す。化合物を識別するために使用されている数字は、これらのスキームにおける構造式によって規定される。
【００２３】
【化５】
2004501931.tif 000004
2004501931.tif 000005
【００２４】
化合物２
乾燥ＴＨＦ５０ｍＬ中の５．６５ｍＬのビニルトリブチル錫の溶液に、１２ｍＬのヘキサン中１．６Ｍ　ＢｕＬｉを、−５０℃で滴下した。さらに３０分間攪拌した後、２０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の６．２ｇｒの１６α−アリル，７α−エチルエストロン−３−Ｏ−メチルエーテル（１）の溶液を、−５０℃で添加した。さらに３０分間攪拌した後、混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌに注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を濃縮し、次に、シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、４．２ｇの化合物２を油状物として得た。Ｒｆ０．４７（トルエン／酢酸エチル　９５／５、化合物１のＲｆ０．６５）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．８０（ｍ，１，ＣＨ　アリル）、６．０７（ｍ，１，ＣＨ　ビニル）、０．９８（ｓ，ＣＨ３）、０．９３（ｔ，３，エチル）、３．７８（ｓ，３，ＣＨ３）。
【００２５】
化合物３
塩化メチレン８０ｍＬ中の４．２ｇの化合物２の溶液に、０．３２ｇのベンジリデントリシクロヘキシルホスフィノルテニウムジクロリド（Ｇｒｕｂｂｓ複分解触媒）を添加した。１時間攪拌した後、０．３ｇの追加量の触媒を添加した。反応の終了後（２時間）、混合物を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、３．５ｇの化合物３を得た。Ｒｆ０．２９（ヘプタン／酢酸エチル　８／２、化合物２のＲｆ０．５５）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．７２（ｍ，ＣＨ＝）、６．０２（ｍ，１，Ｃ＝）、０．９９（ｓ，３，ＣＨ３）、０．８９（ｔ，３，ＣＨ３）、３．７７（０ＣＨ３）、０．９２（ｍ，３，ＣＨ３）。
【００２６】
化合物４
メチレンクロリド１２ｍＬ中の、０．４ｇのステロイド３および０．５ｇのＮａＨＣＯ３の混合物を、０．３４ｇのｍ−Ｃｌ−過安息香酸で処理した。周囲温度で数時間攪拌した後、反応を水で希釈し、チオ硫酸ナトリウム溶液で処理して、残留過酸化物を分解した。有機物質を酢酸エチルで抽出し、最後にクロマトグラフィーによって精製して、１１０ｍｇの目的とするβ−エポキシド４を得た。Ｒｆ０．５０（トルエン／アセトン　９／１）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．９８（ｔ，３，ＣＨ３）、０．９２（ｔ，３，ＣＨ３）、３．６５＋３．７０（２ｘｍ，エポキシド　ＣＨ’ｓ）。
【００２７】
化合物５
ＴＨＦ３ｍＬ中の８０ｍｇのステロイド４の溶液を、１０ｍｇのＬｉＡｌＨ４を使用して還流した。２時間後、出発物質が消失した。３０μｌの飽和Ｎａ２ＳＯ４溶液および０．２０ｇのＮａ２ＳＯ４を添加することによって、混合物を鎮め、１５分間攪拌し、セライトで濾過した。濾液を濃縮し、残渣を短いシリカカラムに通して、５５ｍｇの化合物５を得た。Ｒｆ０．２４（トルエン／アセトン　９／１）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．０４（ｍ，１，ＣＨＯＨ）、３．７８（ｓ，３，ＯＣＨ３）、２．８５（ｍ，２，Ｃ６におけるＣＨ２）、０．９２（ｓ，３，ＣＨ３）。
【００２８】
化合物６
ＤＭＦ９ｍＬ中のナトリウムエタンチオレート（０．７ｍＬのエタンチオールおよび０．２７ｇの６０％ＮａＨ分散液から製造）の溶液に、１２０ｍｇのステロイド５を添加した。混合物を３時間還流した。次に、反応を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機物質をクロマトグラフィーにかけて、８０ｍｇの化合物６を得た。融点　２２４〜２２６。Ｒｆ０．３０（トルエン／アセトン　８／２）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．００（ｍ，１，ＣＨＯＨ）、７．１２（ａｒ　Ｈ１）、６．２０（ａｒ　Ｈ２）、６．５４（ａｒ　Ｈ４）。
【００２９】
化合物７
塩化メチレン２０ｍＬおよびピリジン３ｍＬ中の、２．７ｇのステロイド３の溶液に、トリメチルシリルクロリド１．９ｍＬを０℃で添加した。３０分間攪拌した後、反応を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、３．３ｇの本質的に純粋なシリルオキシ誘導体７を得た。Ｒｆ０．８（ヘプタン／アセトン　８／２）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．０３（ｓ，９，ＴＭＳ）、５．６８、５．９１（２ｘｓ，ＣＨ　オレフィン）。
【００３０】
化合物８
乾燥ＴＨＦ２５ｍＬ中の３．２ｇの化合物７の溶液を、０℃で、ＴＨＦ２０ｍＬ中のボラン−ジメチルスルフィド錯体２．２ｍＬの溶液で処理した。次に、反応を４５℃で２時間撹拌した。４．５ｍＬの無水エタノール、次に１１ｍＬの２Ｎ　ＮａＯＨおよび７．７ｍＬの３０％過酸化水素を注意深く添加することによって、過剰の試薬を分解した。反応を一晩攪拌し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。このようにして得た粗成生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、１．７ｇの目的とするα−アルコール８を得た。Ｒｆ０．３６（ヘプタン／アセトン　８／２）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．４２（ｍ，１，ＣＨＯＨ）、０．１２（ｓ，９，ＴＭＳ）、０．７９（ｓ，３，ＣＨ３）。
【００３１】
化合物９
トルエン６０ｍＬ中、１．６ｇの化合物８および１．３ｇのトリフェニルホスフィンの溶液を、０℃で、ｐ−ニトロ安臭香酸０．８４ｇおよびジエチルアゾジカルボキシレート０．８ｍＬで処理した。１時間攪拌した後、反応を終了した。混合物をＮａＨＣＯ３飽和水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。クロマトグラフィーによって精製して、β−ニトロベンゾエート２．９ｇを得た。Ｒｆ０．６４（ヘプタン／アセトン　８／２）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．３４（ｍ，１，ＣＨＯＣ（Ｏ）Ａｒ）、０．９１（ｓ，３，ＣＨ３）、０．９５（ｔ，３，ＣＨ３）、３．８０（ｓ，３，ＯＣＨ３）。
この物質を、４０ｍＬのＴＨＦ−メタノール（１／１　ｖ／ｖ）の混合物に溶解し、２Ｎ　ＮａＯＨ溶液４ｍＬで処理した。１５分間攪拌した後、反応を水に注ぎ、生成物を酢酸エチルで抽出した。短いシリカカラムに通した後、１．３ｇのβ−アルコール９を得た。Ｒｆ０．６４（ヘプタン／アセトン　８／２）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．３１（ｍ，１，ＣＨＯＨ）。
【００３２】
化合物１０
アセトン３０ｍＬ中の１．３ｇの化合物９の溶液を、２ｍＬの２Ｎ　ＨＣｌで処理した。１時間後、飽和ＮａＨＣＯ３を添加することによって混合物を中和し、濃縮した。残渣を水で希釈し、酢酸エチルで抽出して、１．０ｇの化合物１０を得た。Ｒｆ０．１０（ヘプタン／アセトン　８／２）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．９０（ｔ，３，ＣＨ３）、０．９５（ｓ，３，ＣＨ３）、４．４８（ｍ，１，ＣＨＯＨ）。
【００３３】
化合物１１
ＤＭＦ９ｍＬ中のナトリウムエタンチオレート（０．７ｍＬのエタンチオールおよび０．３ｇの６０％ＮａＨ分散液から製造）の溶液に、１２０ｍｇのステロイド１０を添加した。混合物を３時間還流した。次に、反応を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機物質をクロマトグラフィーにかけて、８０ｍｇの化合物１１を得た。融点　１４３〜１４５℃（エタノール−水）。Ｒｆ０．４１（トルエン／アセトン　７／３）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．４５（ｍ，１，ＣＨＯＨ）、０．９３（ｓ，３，ＣＨ３）、０．９０（ｔ，３，ＣＨ３）、６．６２＋７．１０（ＡＢ，２，Ｈ１，２）、６．５３（ｄ、１、Ｈ４）。
【００３４】
化合物１３
エーテル中の１Ｍ　アリルマグネシウムブロミド２９ｍＬの溶液に、乾燥ＴＨＦ８０ｍＬを添加した。ＴＨＦ４０ｍＬ中の、１０ｇｒの７ａ´−プロピル，１６ａ´−アリルエストロン−３−Ｏ−ベンジルエーテル１２を、−５０℃で添加した。３０分間攪拌した後、混合物を室温に冷まし、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液３００ｍＬに注いだ。生成物を酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、立体異性体を除去し、７．２ｇの目的とする１６ａ´，１７ａ´−ジアリル誘導体１３を得た。Ｒｆ０．２６（ヘプタン／酢酸エチル　９／１、１７ａ´−アリル異性体のＲＦ０．４５）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．８８（ｔ，３，ＣＨ３）、０．９６（ｓ，３，ＣＨ３）、６．０８（ｍ，１，ＣＨ　アリル）、５．８０（ｍ，１，ＣＨ　アリル）、４．９５−５．２０（ｍ，４，２Ｘ　ＣＨ２　アリル）、５．０２（ＣＨ２ＯＢｚ）。
【００３５】
化合物１４
４０ｍｇのベンジリデントリスシクロヘキシルホスフィノルテニウムジクロリド（Ｇｒｕｂｂｓ複分解触媒）を、塩化メチレン１０ｍＬ中の４５０ｍｇの化合物１３の溶液に添加した。１時間攪拌した後、さらに４００ｍｇの触媒を添加した。２時間後、溶媒を除去し、トルエン２０ｍＬを添加し、混合物を塩基性アルミナ５ｇと一緒に６０℃で攪拌して、触媒を吸収した。セライトで濾過し、トルエンおよび酢酸エチルで洗浄して、４００ｍｇのほぼ純粋な化合物１４を得た。Ｒｆ０．３４（ヘプタン／酢酸エチル　８／２）、化合物１３のＲｆ０．４５。ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．０２（ｓ，２，ＣＨ２Ｏ）、５．９７（ｓ，２，ＣＨ＝ＣＨ）、０．９７（ｓ，３，ＣＨ３）。
【００３６】
化合物１５
塩化メチレン０．５ｍＬ中の３４０ｍｇの化合物１４の溶液に、８ｉ´ｌのピリジン、０．１４ｍＬの３０％Ｈ２Ｏ２水溶液、次に２ｍｇのメチルトリオキソレニウムを添加した。１時間攪拌した後、エポキシ化が終了し、主として、目的とするａ´−エポキシド、ならびにいくらかのα−異性体を得た。混合物を、水および飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。クロマトグラフィーにかけて、２３０ｍｇの化合物１５および８０ｍｇの目的としないａ´−エポキシドを得た。
Ｒｆ０．３６（トルエン／酢酸エチル　９５／５、参考：化合物１４のＲｆ０．３９）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３．３１、３．３８（ｍ，２，ＣＨ（Ｏ）ＣＨ）。
【００３７】
化合物１６
乾燥ＴＨＦ２０ｍＬの中の、４．２ｇの化合物１５および３５０ｍｇのＬｉＡｌＨ４の混合物を、２時間還流した。次に、混合物を冷却し、次に、１ｍＬのＮａ２ＳＯ４飽和水溶液、２８ｍＬの酢酸エチルおよび８ｇのＮａ２ＳＯ４で処理した。周囲温度で３０分間攪拌した後、反応をセライトで濾過し、濾液を濃縮し、クロマトグラフィーにかけて、３．４ｇの化合物１６を得た。融点　１４７〜１４８℃。Ｒｆ０．２０（トルエン／酢酸エチル　８／２、化合物２３のＲｆ０．５５）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．２５（ブロードｓ，１，ＣＨＯＨ）、０．９０（ｓ，３，ＣＨ３）、０．８６（ｔ，３，ＣＨ３）、５．０２（Ｓ，２，ＯＣＨ２Ａｒ）。
【００３８】
化合物１７；（＝７α，１６β，１７α，２２Ｓ）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７，２２−トリオール
エタノール２００ｍＬ中の３．３ｇの化合物１６の溶液を、３００ｍｇの５％Ｐｄ／Ｃの存在下に水素化した。反応の終了後に、触媒をセライトで濾過し、溶媒を濃縮した。残渣を、エーテル、次に水ですりつぶし、１．７ｇの化合物１７を得た。融点　１４６〜１４７℃。Ｒｆ０．５３（トルエン／酢酸エチル　１／１、化合物１６のＲｆ０．６０）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．２６（ブロードｓ，１，ＣＨＯＨ）、７．１４、６．６２（ＡＢ，２，Ｈ１，Ｈ２）、６．５４（ｄ，Ｈ４）。
【００３９】
インビトロエストロゲン活性試験
ヒトエストロゲン受容体αまたはβを使用して、結合アッセイおよび転写促進アッセイにおいて、化合物を、エストロゲン受容体活性について試験する。
【００４０】
組換えチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞からの細胞質ヒトエストロゲン受容体αまたはβへの競合結合を使用して、（１７β）−エストラジオール（Ｅ２）と比較して、ヒトエストロゲン受容体α（ｈＥＲα）またはβ受容体（ｈＥＲβ）で安定にトランスフェクションした組換えＣＨＯ細胞のサイトゾルに存在するエストロゲン受容体αまたはβへの、被験化合物の相対的結合親和性（ＲＢＡ）（効力比率（ｐｏｔｅｎｃｙ　ｒａｔｉｏ））を推定する。
【００４１】
ヒトエストロゲン受容体α（ｈＥＲα）またはβ（ｈＥＲβ）で安定に共トランスフェクションした組換えチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ラットオキシトシンプロモーター（ＲＯ）およびルシフェラーゼリポーター遺伝子（ＬＵＣ）を使用して、化合物のエストロゲンおよび抗エストロゲン活性を、インビトロバイオアッセイにおいて測定する。エストロゲン受容体ｈＥＲαまたはｈＥＲβによって媒介される酵素ルシフェラーゼの転写促進を刺激する被験化合物のエストロゲン作用性転写促進（効力比率）を、標準エストロゲンエストラジオールと比較する。（１７β）−エストラジオールによる、エストロゲン受容体ｈＥＲαまたはｈＥＲβによって媒介される酵素ルシフェラーゼの転写促進を阻害する被験化合物の抗エストロゲン活性（効力比率）を、標準ＩＣＩ　１６４．３８４（（７α，１７β）−Ｎ−ブチル−３，１７−ジヒドロキシ−Ｎ−メチルエストラ−１，３，５（１０）−トリエン−７−ウンデカンアミド）と比較する。
【００４２】
結果
【００４３】
【化６】
2004501931.tif 000006
【００４４】
【表１】
2004501931.tif 000007
【００４５】
化合物１７は、拮抗薬アッセイにおいて、＜０．１／６７のＥｒα／Ｅｒβ選択性比率を有する。
【００４６】
２２−ヒドロキシを有さず、Ｒ７α−プロピル、Ｒ１１水素および６員のＥ環を有する、式３で示される先行技術の化合物（７α，１６β，１７α）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７−ジオールは、結合アッセイにおいて１５／７、作用薬転写促進アッセイにおいて０．３／＜０．１の、ＥＲα／ＥＲβ比率を有する。
【００４７】
ラットにおける卵巣摘出誘発骨減少の予防についての試験（抗骨粗鬆症試験）　概説：
ラットの卵巣摘出は、エストロゲン欠乏を原因とする骨減少を誘発する。エストロゲン化合物の投与は、この作用を予防する。この試験を使用して、子宮摘出（ＯＶＸ）ラットにおける抗骨粗鬆症活性について、化合物を評価する。骨質量における作用は、末梢定量コンピューター連動断層撮影によるか、またはＸ線画像の定量分析によって評価することができる。血漿オステオカルシンおよび尿デオキシピリジノリン、カルシウムおよび燐酸塩は、骨代謝に関する情報を与える。子宮重量の増加、および体重および胸腺重量の減少は、エストロゲン作用を示している。
【００４８】
被験動物：
２２５から２５０ｇの成熟処女ウィスターネズミ。菌株：Ｈｓｄ／Ｃｐｄ：Ｗｕ，ＳＰＦ−　Ｈａｒｌａｎ，　ＣＰＢ，　Ｚｉｅｓｔ，　Ｔｈｅ　Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓによって交配。
【００４９】
実験：
実験の第一日に、ラットの体重を測定し、体重の順にケージに分類し、最も軽い体重のラットは最初のケージに入れ、最も重いラットは最後のケージに入れる。ラットにおける処置を無作為化する。
【００５０】
擬手術および卵巣摘出術をエーテル麻酔下に行う。２４時間以内に麻酔から覚めた後、賦形剤、参照化合物または被験化合物を、４週間にわたって１日に１回または２回投与する。この期間中、ラットの体重を毎週測定する。４週間後に解剖する。解剖時に、ラットにエーテルで麻酔をかけ、腹大動脈から採血する。両大腿骨、脊椎Ｌ１Ｌ２Ｌ３Ｌ４（場合によっては）、子宮、胸腺、肝臓、腎臓、副腎、甲状腺、および下垂体が切開された。右大腿骨の骨無機質密度および形の測定を、解剖の日に、新鮮組織におけるｐＱＣＴによって行う。大腿骨の骨幹端部分の海綿質無機質密度（ＦＢＭＤＤＩＳ　ｍｇ／ｃｍ３）を、ｐＱＣＴ（末梢定量コンピューター連動断層撮影機；ＸＣＴ　９６０Ａ，　Ｓｔｒａｔｅｃ，　Ｂｉｒｋｅｎｆｅｌｄ，　Ｇｅｒｍａｎｙ）で測定する。
【００５１】
結果の説明：
卵巣摘出は、大腿骨の遠位骨密度および海綿質容量を統計的に有意に減少させ、血漿オステオカルシンおよび尿デオキシピリジノリンのレベルを統計的に有意に増加させる（Ｐ＜０．０２、２　ｗａｙ　ＡＮＯＶＡ）。
【００５２】
遠位大腿骨の平均骨密度数値が、卵巣摘出対照群と比較して増加している場合に、被験化合物は活性であると考えられる。尿デオキシピリジノリンレベルにおける化合物の作用は、骨吸収における作用を反映し、血漿オステオカルシンレベルにおける作用は、骨代謝回転における作用を反映し、作用機構の理解を助けることができる。
【００５３】
最少活性用量（ＭＡＤ）は、海綿質無機質密度における等比中項差が４０から６０％に達する用量である。
【００５４】
参考文献：
Ｗｒｏｎｓｋｉ　Ｔ．　Ｊ．およびＹｅｎ　Ｃ．　Ｆ．：閉経後骨減少の動物モデルとしての卵巣摘出ラット。Ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，　Ｓｕｐｐ．　１（１９９１）：６９−７６。
【００５５】
Ｙａｍａｚａｋｉ　Ｉ．およびＹａｍａｇｕｃｈｉ　Ｈ．：卵巣摘出骨減少ラットモデルの特徴。Ｊ．　Ｂｏｎｅ　Ｍｉｎ．　Ｒｅｓ．　４（１９８９）：１２−２２。
【００５６】
Ｅｄｅｒｖｅｅｎ　Ａ．Ｇ．Ｈ．およびＫｌｏｏｓｔｅｒｂｏｅｒ　Ｈ．Ｊ．：Ｔｉｂｏｌｏｎｅ、組織特異性ホルモンプロフィールを有するステロイドは、性的に成熟したラットにおける卵巣摘出誘発骨減少を完全に予防する。Ｊ．　Ｂｏｎｅ　＆　Ｍｉｎｅｒａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｖｏｌ　１４，　ｐｐ　１９６３−１９７０，　１９９９。
【００５７】
結果：
化合物１７（Ｏｒｇ　４１６２１）：骨粗鬆症試験　経口　３０ｉ´ｇ／ｋｇ。
【００５８】
先行技術化合物（７α，１６β，１７α）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７−ジオール：経口　１９０ｉ´ｇ／ｋｇ。
【００５９】
インビボにおけるエストロゲン活性試験
Ｆ．　Ａｌｌｅｎ，　Ｌ．　Ａ．　Ｄｏｉｓｙ，　Ｊ．　Ａｍｅｒ．　Ｍｅｄ．　Ａｓｓｏｃ．，　８１，　８１９−８２１（１９２３）に記載されているＡｌｌｅｎ　Ｄｏｉｓｙ試験によって、インビボエストロゲン活性を測定した。
【００６０】
結果：
化合物１７（Ｏｒｇ　４１６２１）：Ａｌｌｅｎ　Ｄｏｉｓｙ　ｓｃ　５ｉ´ｇ／ｋｇ、経口　３０ｉ´ｇ／ｋｇ。
【００６１】
先行技術化合物（７α，１６β，１７α）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７−ジオール：Ａｌｌｅｎ　Ｄｏｉｓｙ　ｓｃ　２４ｉ´ｇ／ｋｇ、経口　１２５ｉ´ｇ／ｋｇ。
【国際公開パンフレット】
2004501931.tif 000011
2004501931.tif 000012
2004501931.tif 000013
2004501931.tif 000014
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2004501931.tif 000019
2004501931.tif 000020
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2004501931.tif 000022
2004501931.tif 000023
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2004501931.tif 000025
2004501931.tif 000026
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2004501931.tif 000028
2004501931.tif 000029
2004501931.tif 000030
2004501931.tif 000031
【手続補正書】
【提出日】平成14年3月18日(2002.3.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）：
【化１】
2004501931.tif 000032
［式中、
点線の結合は、任意の二重結合を表し；
Ｒ６は、Ｈ、＝ＣＨ２、または−ＣＨ３、または−ＣＨ２−ＣＨ３であり；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−５アルケニルまたはＣ２−５−アルキニルであり、該アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｒ１１はＨ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニルまたはＣ１−４−アルキリデンであり、該アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアルキリデン基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｅは、ステロイド骨格の炭素原子１６および１７と一緒になって、４から７員の環を表わし、該環は、ステロイド骨格に対してシス配置におけるαであり、１個または２個の環内結合を任意に有していてもよい］
で示されるステロイド化合物またはそのプロドラッグ。
【請求項２】
Ｒ７はＨであり、Ｒ７はＣ１−３−アルキルであり、Ｅ環は、Ｓ立体配置において２２位にヒドロキシを有する、二重結合を有さない５または６員の環であることを特徴とする請求項１に記載のステロイド化合物。
【請求項３】
該化合物が、式２：
【化２】
2004501931.tif 000033
で示される（７α，１６β，１７α，２２Ｓ）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７，２２−トリオールであることを特徴とする請求項１または２に記載のステロイド化合物。
【請求項４】
治療に使用される請求項１から３のいずれか一項に記載のステロイド化合物。
【請求項５】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物をエストロゲン受容体に接触させることによる、エストロゲン受容体の活性の選択的改質方法。
【請求項６】
該方法が非医療法であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
該方法が、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物をエストロゲン受容体αに接触させることによる、エストロゲン受容体αの活性の選択的改質であることを特徴とする請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
該方法が、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物をエストロゲン受容体βに接触させることによる、エストロゲン受容体βの活性の選択的改質であることを特徴とする請求項５または６に記載の方法。
【請求項９】
選択的エストロゲン受容体関連治療用の薬剤の製造における、請求項１から３のいずれか一項に記載のステロイド化合物の使用。
【請求項１０】
該選択的エストロゲン受容体関連治療が、閉経期近くおよび閉経後の不定愁訴の予防または治療であることを特徴とする請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
該エストロゲン受容体関連治療が避妊治療であることを特徴とする請求項９に記載の使用。
【請求項１２】
請求項１から３のいずれか一項に記載のステロイド化合物、および医薬適合性のある助剤を含む医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
【化３】
2004501931.tif 000034
［式中、
点線の結合は、任意の二重結合を表し；
Ｒ６は、Ｈ、＝ＣＨ２、または−ＣＨ３、または−ＣＨ２−ＣＨ３であり；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−５アルケニルまたはＣ２−５−アルキニルであり、該アルキル、アルケニルまたはアルキニル基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｒ１１はＨ、Ｃ１−４−アルキル、Ｃ２−４−アルケニル、Ｃ２−４−アルキニルまたはＣ１−４−アルキリデンであり、該アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアルキリデン基は、フッ素原子および塩素原子から成る群から独立に選択される１から３個のハロゲン原子で置換されていてもよく；
Ｅは、ステロイド骨格の炭素原子１６および１７と一緒になって、４から７員の環を表わし、該環は、ステロイド骨格に対してシス配置におけるαであり、任意に、１個または２個の環内結合を有し、種々の意義を有するＲＥで置換されていてもよい］。


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
ＲＥがβ−ヒドロキシル基であることを特徴とする式（１）［記号および用語は前記に定義した通りである］のステロイド化合物またはそのプロドラッグは、高エストロゲンα有効性と組み合わされた、エストロゲン受容体αへの一貫して高い選択性を有することが意外にも見出された。本発明の化合物と以下に称するそのような化合物は、通例、エストロゲン受容体βにおいて極めて低い活性であるだけでなく、事実上、エストロゲン受容体βにおける一般に拮抗薬であり、これは、エストロゲン受容体αへの極めて高い選択性に寄与し、エストロゲン受容体βの遮断に基づく選択的治療を可能にする。本発明の化合物は、前記の鏡像異性体およびジアステレオ異性体、および他方の鏡像異性体を実質的に含まない、即ち、５％未満、好ましくは２％未満、特に１％未満の他方の鏡像異性体と会合している各（Ｒ）および（Ｓ）鏡像異性体、および実質的に同じ量の該２つの鏡像異性体を含有するラセミ混合物を包含するそのような鏡像異性体のあらゆる割合の混合物を包含する。


【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
化合物１３
エーテル中の１Ｍ　アリルマグネシウムブロミド２９ｍＬの溶液に、乾燥ＴＨＦ８０ｍＬを添加した。ＴＨＦ４０ｍＬ中の、１０ｇｒの７α−プロピル，１６α−アリルエストロン−３−Ｏ−ベンジルエーテル１２を、−５０℃で添加した。３０分間攪拌した後、混合物を室温に冷まし、ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液３００ｍＬに注いだ。生成物を酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、立体異性体を除去し、７．２ｇの目的とする１６α，１７α−ジアリル誘導体１３を得た。Ｒｆ０．２６（ヘプタン／酢酸エチル　９／１、１７β−アリル異性体のＲＦ０．４５）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．８８（ｔ，３，ＣＨ３）、０．９６（ｓ，３，ＣＨ３）、６．０８（ｍ，１，ＣＨ　アリル）、５．８０（ｍ，１，ＣＨ　アリル）、４．９５−５．２０（ｍ，４，２Ｘ　ＣＨ２　アリル）、５．０２（ＣＨ２ＯＢｚ）。


【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
化合物１５
塩化メチレン０．５ｍＬ中の３４０ｍｇの化合物１４の溶液に、８μｌのピリジン、０．１４ｍＬの３０％Ｈ２Ｏ２水溶液、次に２ｍｇのメチルトリオキソレニウムを添加した。１時間攪拌した後、エポキシ化が終了し、主として、目的とするβ−エポキシド、ならびにいくらかのα−異性体を得た。混合物を、水および飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。クロマトグラフィーにかけて、２３０ｍｇの化合物１５および８０ｍｇの目的としないα−エポキシドを得た。
Ｒｆ０．３６（トルエン／酢酸エチル　９５／５、参考：化合物１４のＲｆ０．３９）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３．３１、３．３８（ｍ，２，ＣＨ（Ｏ）ＣＨ）。


【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
結果：
化合物１７（Ｏｒｇ　４１６２１）：骨粗鬆症試験　経口　３０μｇ／ｋｇ。


【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
先行技術化合物（７α，１６β，１７α）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７−ジオール：経口　１９０μｇ／ｋｇ。


【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
結果：
化合物１７（Ｏｒｇ　４１６２１）：Ａｌｌｅｎ　Ｄｏｉｓｙ　ｓｃ　５μｇ／ｋｇ、経口　３０μｇ／ｋｇ。


【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６１】
先行技術化合物（７α，１６β，１７α）−７−プロピル−１６，２４−シクロ−１９，２１−ジノルコラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７−ジオール：Ａｌｌｅｎ　Ｄｏｉｓｙ　ｓｃ　２４μｇ／ｋｇ、経口　１２５μｇ／ｋｇ。




【国際調査報告】
2004501931.tif 000035
2004501931.tif 000036
2004501931.tif 000037
2004501931.tif 000038