(57)【要約】本発明は、Ｓ１Ｐレセプター調節剤として活性を有するＳ１Ｐ類縁化合物およびこのような化合物を不適当なＳ１Ｐレセプター活性に付随する疾病の処置に使用することに関する。これらの化合物は、一般構造（Ｉ）を有する：2004529100.tif 000044式中、Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニルであり、またはＲ12はＯである、もしくはＲ1とＲ12とは一緒になって、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールを形成しており；Ｒ17は、Ｈ、アルキルまたはアルキルアリールであり；Ｒ18は、ＮまたはＣＨであり；Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2およびＯＨからなる群から選択され；ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2であり；Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、チオホスフェートおよびチオホスホネート選択され；およびＲ5は、Ｃ8−Ｃ22−アルケニルである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
2004529100.tif 000031
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ5は、ヒドロキシ、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；および
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択される；
で表わされる化合物。
【請求項２】
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルまたは−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6であり；
ｙは、１であり；
Ｒ17は、Ｈであり；
Ｚは、アリールであり；および
Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルまたはＣ1−Ｃ20アルコキシである；
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式：
2004529100.tif 000032
各式中、
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ1−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
Ｒ4は、ヒドロキシ、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される；
で表わされる化合物。
【請求項４】
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ18アルキルであり；
Ｒ8は、Ｎであり；
ｍは、０であり；および
ｙは、１である；
請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ4がヒドロキシまたはホスフェートである、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物および医薬上で許容される担体を含有する組成物。
【請求項７】
Ｓ１Ｐレセプター調節性化合物であって、この化合物が式：
2004529100.tif 000033
式中、
Ｒ9は、−ＮＨＲ1および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび
2004529100.tif 000034
（式中、Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルおよびＣ1−Ｃ20アルコキシからなる群から選択される）からなる群から選択され；
Ｒ10は、ヒドロキシまたはホスフェートである；
で表わされる化合物である、上記化合物。
【請求項８】
リソ−脂質ホスフェートホスファターゼ耐性Ｓ１Ｐ類縁化合物であって、このアゴニストが、式：
2004529100.tif 000035
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；および
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択される；
で表わされる、上記Ｓ１Ｐ類縁化合物。
【請求項９】
Ｓ１Ｐレセプターの活性を調節する方法であって、上記レセプターを下記一般構造で表わされる化合物と接触させる段階を包含する、上記方法：
2004529100.tif 000036
各式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1Ｒ17および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ11は、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ1−Ｃ18アルケニルおよびＣ1−Ｃ18アルキニルからなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の範囲の整数であり；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択され；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される。
【請求項１０】
Ｒ9は，−ＮＲ1Ｒ17であり；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび
2004529100.tif 000037
（式中、Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルおよびＣ1−Ｃ20アルコキシからなる群から選択される）からなる群から選択され；および
ｙは、１である；
請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
免疫調節を必要とする患者に対し免疫調節性を付与する方法であって、下記一般式で表わされる化合物および医薬上で許容される担体を含有する組成物を当該患者に投与する段階を包含する、上記方法：
2004529100.tif 000038
各式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1Ｒ17および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）および−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリールオキシアリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）からなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2であり；
ｙは、１〜１０の範囲の整数であり；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される。
【請求項１２】
シクロスポリン、タクロリムス、アザチオプリン、プレドニソロンおよびプレドニソンからなる群から選択される第二の免疫調節剤を投与する段階をさらに包含する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
化合物が、一般式：
2004529100.tif 000039
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ここで、ｎは０−１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨおよびＣ1−Ｃ6アルキルからなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも１方は、ＮＨ2であり；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される；
である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
化合物が一般式：
2004529100.tif 000040
各式中、
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される；
を有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
一般構造：
2004529100.tif 000041
式中、
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
Ｒ12は、Ｏであるか、またはＲ1とＲ12とは一緒になって、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールを形成しており；
Ｒ17は、Ｈ、アルキルまたはアルキルアリールであり；
Ｒ18は、ＮまたはＣＨであり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨおよび−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2からなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の整数であり；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される；
を有する化合物またはその医薬として許容される塩および医薬上で許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項１６】
アルブミンをさらに含有する、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ここで、ｎは０−１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ12は、Ｏであり；
Ｒ17は、Ｈ、アルキルまたはアルキルアリールであり；
Ｒ18は、ＮまたはＣＨであり；
ｙは、１または２であり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨおよびＣ1−Ｃ6アルキルからなる群から選択され；および
Ｒ4は、ヒドロキシおよびホスフェートからなる群から選択される；
請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
化合物が、一般構造：
2004529100.tif 000042
各式中、
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される；
を有する、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１９】
一般構造：
2004529100.tif 000043
式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1Ｒ17および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ここで、ｎは０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
およびＲ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）および−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリールオキシアリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）からなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2であり；
ｙは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｒ14は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；および
Ｒ15およびＲ16は独立し、Ｈ、ヒドロキシル、アミノ、ＣＯＯＨ、ハロまたは−ＰＯ3からなる群から選択されるか、またはＲ15およびＲ16は一緒になって、ケト基またはメチレン基を形成している；
を有する脂質ホスフェートホスファターゼ耐性Ｓ１Ｐ類縁化合物。
【請求項２０】
Ｒ9は、−ＮＨＲ1であり；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルまたは−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6であり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、ＨおよびＮＨ2からなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2であり；
ｙは、０または１であり；
Ｒ15およびＲ16は独立し、Ｈまたはヒドロキシルであり；および
Ｒ14は、Ｏである；
請求項１９に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（米国政府の権利）
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈにより承認されたＧｒａｎｔ  Ｎｏ．ＮＩＨ  Ｒ０１  ＧＭ５２７２２およびＮＩＨ  Ｒ０１  ＣＡ８８９９４として米国政府の支持をもつてなされた発明である。米国政府は本発明に一定の権利を有している。
【０００２】
（関連出願）
本出願は、２００１年１月３０日付けで出願された暫定特許出願Ｎｏ．６０／２６４，９２７および２００１年１０月９日付けで出願されたＮｏ．６０／３２７，８１４に対し、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）の下に優先権を主張するものであり、これらの特許の記載をここに組入れる。
【０００３】
（発明の分野）
本発明は、スフィンゴシン−１−ホスフェート類縁化合物を含有する組成物およびこのような類縁化合物をスフィンゴシン−１−ホスフェートレセプター活性のアゴニストまたはアンタゴニストとして使用する方法に関する。スフィンゴシン−１−ホスフェートレセプターにおける選択的アゴニストおよびアンタゴニストは、広く種々のヒト障害に治療的に有用である。
【０００４】
（発明の背景）
スフィンゴシン−１−ホスフェート（Ｓ１Ｐ）は、血小板凝集、細胞増殖、細胞形態学、腫瘍細胞侵襲、内皮細胞化学走性および内皮細胞インビトロ血管形成を生じさせる細胞作用を包含する多くの細胞作用を誘発させることが証明されている。これらの理由で、Ｓ１Ｐレセプターは、治療目的、例えば傷の治癒および腫瘍成長抑制に対する良好な標的である。スフィンゴシン−１−ホスフェートは、部分的に一連のＧタンパク質−結合レセプター、すなわちＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５（以前はそれぞれ、Ｅｄｇ−１、Ｅｄｇ−５、Ｅｄｇ−３、Ｅｄｇ−６およびＥｄｇ−８）を経て細胞に信号を送る。これらのレセプターは、構造的に関連するリソホスファチジル酸（ＬＰＡ）にかかわる３種の別種のレセプター（ＬＰＡ１、ＬＰＡ２およびＬＰＡ３（以前はそれぞれ、Ｅｄｇ−２、Ｅｄｇ−４およびＥｄｇ−７））とのクラスターおよび５０−５５％同一アミノ酸を共通して有する。
【０００５】
配座転換は、そのレセプターに対しリガンドが結合した場合、Ｇ−タンパク質結合レセプター（Ｇ−Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｕｐｌｅｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ）（ＧＰＣＲ）で誘発され、ＧＤＦは関連Ｇ−タンパク質のα−サブユニットにおいてＧＴＰにより置き換えられ、次いでＧ−タンパク質を細胞質中に放出させる。このα−サブユニットは次いで、βγ−サブユニットから解離し、各サブユニットは次いで、エフェクタータンパク質と会合することができる。このエフェクタータンパク質は細胞応答を導く第二のメッセンジャーを活性化する。Ｇ−タンパク質においてＧＴＰがＧＤＰに加水分解され、このＧ−タンパク質のサブユニットは相互に、次いでレセプターと再会合する。増幅は一般的ＧＰＣＲ経路において主要役割を演じる。１個のリガンドの１個のレセプターへの結合は、多くのエフェクタータンパク質の活性化を導き、それぞれの多くのエフェクタータンパク質との会合可能性は、増幅された細胞応答を導く。
【０００６】
Ｓ１Ｐレセプターは、各レセプターが組織特異性および応答特異性の両方を有することから良好な医薬標的である。１種のレセプターに対し選択的であるアゴニストまたはアンタゴニストの発現は当該レセプターを含有する組織に対する細胞応答を局限化し、望ましくない副作用を制限することから、Ｓ１Ｐレセプターの組織特異性は重要である。Ｓ１Ｐレセプターの応答特異性はまた、これが或る種の細胞応答を別の応答に影響を与えることなく開始または抑制するアゴニストまたはアンタゴニストの発現を可能にすることから、重要である。一例として、Ｓ１Ｐレセプターの応答特異性は、細胞形態に影響を及ぼすことなく血小板凝集を開始させる点でＳ１Ｐを偽装することができる。
【０００７】
スフィンゴシン−１−ホスフェートは、そのスフィンゴシンキナーゼとの反応におけるスフィンゴシンの代謝物として生成され、高レベルのスフィンゴシンキナーゼが存在し、スフィンゴシンリアーゼが欠落している場合、血小板の凝集に際し豊富に保存される。Ｓ１Ｐは血小板凝集中に放出され、血清中に蓄積され、また悪性腫瘍腹水中に見出される。Ｓ１Ｐの生体分解は、エクトホスホヒドロラーゼ、特にスフィンゴシン−１−ホスフェートホスホヒドロラーゼによる加水分解を最もなこととして進行させる。
【０００８】
各Ｓ１Ｐレセプターを刺激する生理学的関係は、部分的にレセプタータイプ選択的リガンドの欠落によってほとんど未知である。従って、Ｓ１Ｐレセプターサブタイプにかかわる強力な親和性および高度の選択性を有する化合物が要求される。Ｓ１Ｐレセプターに対する強力なアゴニストまたはアンタゴニスト活性を有するＳ１Ｐ類縁化合物の単離および特徴確認は、Ｓ１Ｐ類縁化合物が溶解性に欠けることに由来する合成の複雑性によって制限されている。本発明は、サイズ、疎水性および立体化学性の観点で変化しており、またＳ１Ｐレセプターにおいて活性である一連の置換アミド化合物に関する。
【０００９】
（発明の要旨）
本発明は、スフィンゴシン−１−ホスフェート類縁化合物を含有する組成物およびこのような類縁化合物をスフィンゴシン−１−ホスフェートレセプター活性のアゴニストまたはアンタゴニストとして使用し、広く種々のヒト障害を処置する方法に関する。本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物は各Ｓ１Ｐレセプターサブタイプにおける種々の程度の選択性を有するアゴニズムおよびＳ１Ｐレセプターにおけるアンタゴニスト活性を有する化合物を包含する或る範囲の活性を有する。さらに特に、本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物は下記構造を有する化合物またはその医薬として許容される塩を包含する：
【００１０】
2004529100.tif 000002
式中、
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
【００１１】
Ｒ12は、Ｏであるか、またはＲ1とＲ12とは一緒になって、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールを形成しており；
Ｒ17は、Ｈ、アルキルまたはアルキルアリールであり；
Ｒ18は、ＮまたはＣＨであり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨおよび−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2からなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の整数であり；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、チオホスフェート、チオホスホネート、他のホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される。
Ｓ１Ｐレセプターにおける選択的アゴニストおよびアンタゴニストは、広く種々のヒト障害に治療的に有用であるものと見なされる。
【００１２】
（図面の簡単な説明）
図１Ａ−１Ｆは、Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０１９およびＶＰＣ２３０３１に対する応答について、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜（種々のＳ１Ｐレセプターを含有する）に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。図１Ａ＝Ｓ１Ｐ１レセプター、図１Ｂ＝Ｓ１Ｐ３レセプター、図１Ｃ＝Ｓ１Ｐ２レセプター、図１Ｄ＝Ｓ１Ｐ４レセプター、図１Ｅ＝Ｓ１Ｐ５レセプター、および図１Ｆ＝Ｓ１Ｐ３レセプター。各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
図２Ａ−２Ｅは、Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０６５およびＶＰＣ２３０６９に対する応答について、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜（種々のＳ１Ｐレセプターを含有する）に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。図２Ａ＝Ｓ１Ｐ１レセプター、図２Ｂ＝Ｓ１Ｐ３レセプター、図２Ｃ＝Ｓ１Ｐ２レセプター、図２Ｄ＝Ｓ１Ｐ４レセプターおよび図２Ｅ＝Ｓ１Ｐ５レセプター。各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【００１３】
図３Ａ−３Ｅは、Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０７５およびＶＰＣ２３０７９に対する応答について、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜（種々のＳ１Ｐレセプターを含有する）に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。図３Ａ＝Ｓ１Ｐ１レセプター、図３Ｂ＝Ｓ１Ｐ３レセプター、図３Ｃ＝Ｓ１Ｐ２レセプター、図３Ｄ＝Ｓ１Ｐ４レセプター、および図３Ｅ＝Ｓ１Ｐ５レセプター。各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
図４Ａ−４Ｅは、Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８９に対する応答について、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜（種々のＳ１Ｐレセプターを含有する）に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。図４Ａ＝Ｓ１Ｐ１レセプター、図４Ｂ＝Ｓ１Ｐ３レセプター、図４Ｃ＝Ｓ１Ｐ２レセプター、図４Ｄ＝Ｓ１Ｐ４レセプター、および図４Ｅ＝Ｓ１Ｐ５レセター。各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【００１４】
図５Ａおよび５Ｂ。図５Ａは、Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８７＋Ｓ１Ｐに対する応答について、Ｓ１Ｐ１レセプターを含有するＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。図５Ｂは、Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８９およびＶＰＣ２３０８９＋Ｓ１Ｐに対する応答について、Ｓ１Ｐ３レセプターを含有するＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【００１５】
（発明の詳細な説明）
定義
本発明の説明および特許請求の範囲において、下記定義に従い下記用語を使用するものとする。
本明細書で使用されているものとして、「精製」の用語および類似用語は、天然または自然環境において当該分子または化合物が通常付随する夾雑物を実質的に含有していない形態で分子または化合物を単離することに関する。
本明細書で使用されているものとして、「処置」の用語は、特定の障害または症状の予防、または特定の障害または症状を伴う症候の軽減および／またはこのような症候の防止または排除を包含する。
【００１６】
本明細書で使用されているものとして、「有効量」の用語は、選択された効果を生じさせるのに充分な量を意味する。一例として、Ｓ１Ｐレセプターアンタゴニストの有効量は、Ｓ１Ｐレセプターの細胞信号発信活性を減少させる量である。
本明細書で使用されているものとして、「ハロゲン」の用語は、Ｃｌ、Ｂｒ、ＦおよびＩを意味する。特に好適なハロゲンは、Ｃｌ、ＢｒおよびＦを包含する。本明細書で使用されているものとして、「ハロアルキル」の用語は、少なくとも１個のハロゲン置換基を有するＣ1−Ｃ4アルキル基、例えばクロロメチル、フルオロエチルまたはトリフルオロメチルなどを表わす。
【００１７】
本明細書で使用されているものとして、「Ｃ1−Ｃnアルキル」（ここで、ｎは整数である）の用語は、１個ないし特定数の炭素原子を有する分枝鎖状または直鎖状アルキル基を表わす。代表的に、Ｃ1−Ｃ6アルキル基は、これらの制限されないものとして、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシルなどを包含する。
本明細書で使用されているものとして、「Ｃ2−Ｃnアルケニル」（ここで、ｎは整数である）の用語は、２個ないし特定数の炭素原子および少なくとも１個の二重結合を有するオレフィン状不飽和分枝鎖状または直鎖状基を表わす。このような基の例は、これらに制限されないものとして、１−プロペニル、２−プロペニル、１，３−ブタンジエニル、１−ブテニル、ヘキセニル、ペンテニルなどを包含する。
【００１８】
「Ｃ2−Ｃnアルキニル」（ここで、ｎは整数である）の用語は、２個ないし特定数の炭素原子および少なくとも１個の三重結合を有する不飽和分枝鎖状または直鎖状アルキル基を表わす。このような基の例は、これらに制限されないものとして、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニルなどを包含する。
「Ｃ3−Ｃnシクロアルキル」（ここで、ｎ＝８）の用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを表わす。
本明細書で使用されているものとして、「置換されていてもよい」の用語は、０〜４個の置換基に関連し、これらの置換基はそれぞれ独立して選択される。独立して選択される置換基は、同一でもよくまたは相互に相違していてもよい。
【００１９】
本明細書で使用されているものとして、「アリール」の用語は、１個または２個の芳香族環を有する一環状または二環状炭素環状環を表わし、これらに制限されないものとして、フェニル、ベンジル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどを包含する。「置換されていてもよいアリール」の用語は、０〜４個の置換基を有するアリール化合物を包含し、また「置換アリール」の用語は、１〜３個の置換基を有するアリール化合物を包含し、この場合、置換基には、アルキル、ハロまたはアミノ置換基が包含される。（Ｃ5−Ｃ8アルキル）アリールの用語は、アルキル基を経て親分子に結合しているアリール基の全部を表わす。
【００２０】
「ヘテロ環状基」の用語は、１〜３個のヘテロ原子を含有する一環状または二環状炭素環状環系を表わし、ここでヘテロ原子は酸素、イオウおよび窒素からなる群から選択される。
本明細書で使用されているものとして、「ヘテロアリール」の用語は、１〜３個のヘテロ原子を含有する１個または２個の芳香族環を有する一環状または二環状炭素環状環系を表わし、これらに制限されないものとして、フリル、チエニル、ピリジルなどを包含する。
「二環状」の用語は、不飽和または飽和の安定な７−員〜１２−員の架橋したまたは縮合した二環状炭素環を表わす。二環状環は、安定な構造を提供するいずれかの炭素原子の部位で結合することができる。この用語には、これらに制限されないものとして、ナフチル、ジシクロヘキシル、ジシクロヘキセニルなどが包含される。
【００２１】
１６：０、１８：０、１８：１、２０：４または２２：６炭化水素の用語は、分枝鎖状または直鎖状アルキルまたはアルケニル基に関連し、ここで最初の数字は当該基中の総炭素数を表わし、また二番目の数字は当該基中の二重結合数を表わす。
本明細書で使用されているものとして、「Ｓ１Ｐ調節剤」の用語は、インビボまたはインビトロにおいてＳ１Ｐレセプター活性に検出可能な変化を生じさせることができる化合物または組成物を表わす（例えば、例２に記載のバイオアッセイなどの指定分析により測定して、Ｓ１Ｐ活性を少なくとも１０％増加または減少させる）。
【００２２】
本明細書で使用されているものとして、「薬剤のＥＣ50」の用語は、スフィンゴシンまたはＳ１Ｐレセプターの他のリガンドの結合性および／またはＳ１Ｐレセプターの官能的活性（例えば、信号発信活性）を包含する一定の活性がＳ１Ｐレセプターに対し最高５０％である薬剤の濃度を表わす。換言すれば、ＥＣ50は、さらにリガンド／アゴニストを添加しても増加しないＳ１Ｐレセプターの活性化量を１００％活性と設定し、また添加リガンド／アゴニストの不存在下における分析における活性化量を０％と設定し、５０％の活性化をもたらす薬剤の濃度である。
【００２３】
本明細書で使用されているものとして、「ホスフェート類縁体」および「ホスホネート類縁体」の用語は、リン原子が＋５酸化状態にあり、またその酸素原子の１個または２個以上が非酸素原子により置き換えられているホスフェートおよびホスホネートの類縁体を包含し、一例として、ホスフェート類縁体ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロセレノエート、ホスホロジセレノエート、ホスホロアニロチオエート、ホスホロアニリデート、ホスホロアミデート、ボロノホスフェートなどが包含され、また対向イオン、例えばＨ、ＮＨ4、Ｎａなどが存在する場合、このような対向イオンを包含する。
本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物は、１個または２個以上の不斉中心を含有する。本発明に従い、立体化学的に指定されていない構造は、種々の光学異性体、ならびにそのラセミ混合物を包含するものと理解されるべきである。
【００２４】
（発明）
本発明は、Ｓ１Ｐレセプター活性のモジュレーターとしての活性を有するＳ１Ｐ類縁化合物に関する。Ｓ１Ｐ活性のモジュレーターには、Ｓ１Ｐレセプターにおけるアゴニスト活性およびアンタゴニスト活性を有する薬剤、および酵素による変性（すなわち、ホスホヒドロラーゼ、スフィンゴシンリアーゼまたはスフィンゴシンキナーゼによる化合物のブロック変性）に抵抗するために修飾されているか、または投与形態からさらに活性な形態に変換するためのスフィンゴシンキナーゼ用の適当な基質を提供する化合物の類縁化合物が包含される。
【００２５】
Ｓ１Ｐの構造は３個の領域、すなわちホスフェート先頭基、リンカー領域および脂肪酸末尾部の組合せとして描写することができる。密接に関連したリソホスホリピド、リソホスファチジン酸（ＬＡＰ）の構造活性関係（ＳＡＲ）により、ホスフェート先頭基の存在がＳ１ＰのＳ１Ｐレセプターへの結合を可能にする重要な特徴であることが証明された。しかしながら、ホスフェート先頭基にかかわる要件には例外がある。特にホスホネート、ヒドロキシル、ホスフェートまたはホスホネート基はＳ１Ｐレセプターにおける活性を保有しながら、ホスフェート先頭基の代わりをすることができる。
ＬＡＰのＳＡＲに基づき、Ｓ１Ｐのリンカー領域は変化を最高に調節することができる分子領域であると予測される。先導としてＬＡＰのＳＡＲをまた使用すると、ホスフェートから離れている水素結合ドナー５結合の存在が結合にとって重要であるものと推定される。後合成（ｒｅｔｒｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ）の観点から、このリンカー領域はＬ−セリンの官能性化された誘導体と見なすことができる。
【００２６】
長い脂肪酸鎖および帯電したホスフェート先頭基によって、Ｓ１Ｐは、これを有機溶媒中で格別に不溶性にする両親媒性物性を有する。脂肪酸鎖の飽和手法は分子の凝集体形成を弱化させることができ、これにより溶解性が増大される。しかしながら、この長鎖の最も重要な点は、その長さにある。さらに完成されたＧＴＰγＳ研究は、Ｓ１Ｐにおける場合と同様に、１８炭素幹鎖が１６および２０炭素幹鎖に比較して最適の活性を示すことが証明された。
Ｃ−２アミンのＳ立体化学は、レセプターから予想されるような結合に対する効果を有することができることが予測される。モデルレセプター上のアルギニンおよびグルタミン酸残基に隣接するホスフェート先頭基とＣ−２アミンとからの水素結合とはＳ１Ｐレセプター結合にとって重要であることが証明された。
【００２７】
一態様において、Ｓ１Ｐレセプター調節性化合物またはその医薬として許容される塩が提供され、この化合物は下記一般構造を有する：
2004529100.tif 000003
【００２８】
式中、
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アルキル（置換されていてもよいシクロアルキル）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
Ｒ12は、Ｏであるか、またはＲ1とＲ12とは一緒になって、置換されていてもよいヘテロアリールを形成しており；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルまたは（ＣＨ2）アリールであり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨおよび−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2からなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の整数であり；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される。
【００２９】
一態様において、式ＩのＲ2およびＲ3置換基の一方は、ＮＨ2である。式（Ｉ）で表わされる化合物の医薬上で許容される塩は、無機酸との塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩および硫酸塩、有機酸との塩、例えば酢酸塩、フマール酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、メタンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩、およびカルボキシル基が存在する場合、金属、例えばナトリウム、カリウム、カルシウムおよびアルミニウムとの塩、アミン、例えばトリエチルアミンとの塩、および二塩基性アミノ酸、例えばリジンとの塩を包含する。本発明による化合物および塩は水和物および溶媒和物形態を包含する。
【００３０】
一態様において、Ｓ１Ｐ調節性化合物は、下記一般構造を有する：
2004529100.tif 000004
【００３１】
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
Ｒ5は、ヒドロキシル、ホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；および
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択される。
【００３２】
一態様において、Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、さらに好ましくはＣ12−Ｃ16アルキルであり；ｙは、１または２であり；およびＲ5は、ヒドロキシ、ホスフェートまたはホスホネートである。別の一態様において、Ｒ1は、−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6であり、ここでｎは０〜４の範囲の整数であり、Ｚはアリールであり；およびＲ6はＣ1−Ｃ10アルキルである；さらに好ましくは、Ｚはフェニルであり、Ｒ5はヒドロキシ、ホスフェートまたはホスホネートであり、およびＲ6はＣ6−Ｃ10アルキルである。
【００３３】
本発明のもう一つの態様において、Ｓ１Ｐ調節性化合物が提供され、この化合物は下記一般構造を有する：
2004529100.tif 000005
【００３４】
各式中、
Ｒ14は、Ｈ、ヒドロキシ、ＮＨ2、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；および
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される。
【００３５】
一態様において、Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニルおよびＣ8−Ｃ22アルキニルからなる群から選択され、Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェートまたはホスホネートであり、ｙは１または２であり、ｍは０または１であり、およびＲ7またはＲ8はどちらかがＮである；さらに好ましくは、Ｒ1は、Ｃ4−Ｃ10アルキルであり、Ｒ4はヒドロキシまたはホスフェートであり、ｙは１であり、ｍは０であり、およびＲ7およびＲ8は両方ともにＮである。
【００３６】
本発明はまた、下記一般構造を有する化合物を包含する：
2004529100.tif 000006
【００３７】
式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび
2004529100.tif 000007
（式中、Ｒ6およびＲ13は独立し、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキルおよびＣ1−Ｃ20アルコキシからなる群から選択される）
からなる群から選択され；
Ｒ10は、ヒドロキシ、ホスホネート、メチレンホスホネートまたはホスフェートである、ただしＲ9が−ＮＲ1である場合、Ｒ10はホスフェートではない。
好適態様の一つにおいて、Ｒ9は−ＮＲ1であり、Ｒ6はＣ1−Ｃ10アルキルであり、Ｒ13はＨであり、およびＲ10はヒドロキシ、ホスホネートまたはメチレンホスホネートである。
【００３８】
各Ｓ１Ｐレセプターの活性化を直接に評価し、これによりＳ１Ｐレセプターアゴニストおよびアンタゴニストの同定を可能にし、また共通系中の各レセプターにおける相対効力および能力を測定するために、ＧＴＰ［γ35Ｓ］結合分析法が開発された。使用された組換えレセプターが外因Ｇタンパク質（ＨＥＫ２９３Ｔ細胞）であるか、または内因Ｇタンパク質（ＲＨ７７７７細胞）であるかに関係なく、同一の結果が得られた。さらに、レセプター（例えば、ＬＡＰおよびＳ１Ｐレセプター）およびＧタンパク質をコードする組換えバクロウイルスに感染させた昆虫Ｓｆ９細胞はまた、ＧＴＰガンマＳ−３５結合分析に使用される破壊された細胞の膜供給源としての役目を果たすことができる。Ｓｆ９細胞およびＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜から、類似の結果が得られた。さらにまた、破壊細胞分析法で測定された活性は、完全細胞分析法で見出される応答を予測させた。従って、化合物の能力および効力の測定に本発明で用いられた主要分析法は、Ｓ１Ｐレセプターにおける活性の効果的な測定方法である。
【００３９】
ＧＴＰ［γ35Ｓ］結合分析法は、本発明による化合物がＳ１Ｐレセプター活性を調節する能力を有することを明らかにした（例２および３参照）。さらに特に、下記一般構造を有する化合物は、Ｓ１Ｐ活性のモジュレーターとして活性を示す：
2004529100.tif 000008
【００４０】
各式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）および−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリールオキシアリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）からなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の整数であり；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される。
【００４１】
一態様において、Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され（ここで、ｎは０〜１０の範囲の整数であり、Ｚはアリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、およびＲ6はＨ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択される）、およびＲ2およびＲ3の少なくとも一方はＮＨ2−である。
【００４２】
例２に記載されているように、下記構造を有する化合物は全部が、被験Ｓ１Ｐレセプター（Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ５）において格別のアゴニスト活性を示すが、Ｓ１Ｐそれ自体と同様の効力を有する化合物はなかった（例２の表１参照）：
2004529100.tif 000009
【００４３】
式中、Ｒ9は、−ＮＲ1および−ＯＲ1からなる群から選択され、Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルであり、Ｒ2およびＲ3は独立し、ＨおよびＮＨ2からなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方はＮＨ2であり、およびＲ4はホスフェートである。しかしながら、１種の化合物（Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、Ｒ4はホスフェートであり、およびＲ9はＮ（ＣＨ2）13ＣＨ3である化合物）は、ヒトＳ１ＰおよびヒトＳ１Ｐ３レセプターの両方においてＳ１Ｐの効力に接近していた。本発明の一態様に従い、化合物ＶＰＣ２２１３５は、ヒトＳ１Ｐ１およびヒトＳ１Ｐ３レセプターの選択的アゴニストとして使用される。不思議なことに、この化合物は非天然（Ｒ）配置のアミノ基を有する。そのエナンチオマーであるＶＰＣ２２０５３は、Ｓ１Ｐ１およびＳ１Ｐ３レセプターの両方において１ｌｏｇ順位以上少ない効力を有していた。
【００４４】
追加の一連の化合物は、Ｓ１Ｐレセプター活性を調節する活性を示した；しかしながら、これらの化合物はまた、或る種のＳ１Ｐレセプターサブタイプに対し選択性を示した（例３および図１−５参照）。これらの化合物（ＶＰＣ２３０１９、２３０３１、２３０６５、２３０６９、２３０８７、２３０８９、２３０７５、２３０７９）はそれぞれ、Ｓ１Ｐ２レセプターにおいて不活性である。化合物ＶＰＣ２３０３１、２３０１９、２３０８９は、逆アゴニスト（Ｓ１Ｐ３のアンタゴニスト）レセプターであるが、この逆拮抗作用は、アルキル鎖長が９炭素である場合（ＶＰＣ２３０７９）または１０炭素である場合（ＶＰＣ２３０６９）、作動性になる。
【００４５】
本発明の一態様に従い、Ｓ１Ｐ活性のアンタゴニストが提供される。特に、下記一般構造を有する化合物はＳ１Ｐ３レセプターにおいてアンタゴニスト活性を有する：
2004529100.tif 000010
式中、Ｒ1はＣ4−Ｃ8アルキルであり、およびＲ4はホスフェートである。
一態様に従い、Ｒ1置換基はフェニル環のオルトまたはメタ位置に位置し、また一態様において、Ｒ1置換基はフェニル環のメタ位置に位置する。
【００４６】
化合物ＶＰＣ２３０６５、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０７５は、一級アルコールである、すなわち式Ｉに存在するＲ4はヒドロキシである。これらの化合物は各種Ｓ１Ｐレセプターにおいて格別のアゴニスト活性を示す。特に、Ｓ１Ｐ４レセプターは、そのホスホリル化化合物のｌｏｇ順位内のＥＤ50をもって一級アルコールＳ１Ｐ類縁化合物に結合する。Ｓ１Ｐ４はリンパ細胞に存在することから、この一級アルコール類縁化合物の使用は免疫抑制に使用することができる。さらに、この一級アルコール化合物のヒドロキシ基はインビボでホスフェートに変換することができるものと仮定される。従って、本発明による一級アルコールＳ１Ｐ類縁化合物はまた、活性Ｓ１Ｐレセプター調節性化合物のプロドラッグ形態として作用することができる。
【００４７】
Ｓ１Ｐは、ホスファターゼ、エステラーゼを包含する種々の予想できる経路で代謝され、または細胞中に移送される。レセプターにおけるＳ１Ｐ信号は、その分解経路がＳ１Ｐ構造類縁化合物によって回避または抑制することができる場合、延長させることができる。一態様に従う場合、本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物は、ホスフォターゼ、エステラーゼ、トランスポーターおよびＳ１Ｐアシルトランスフェラーゼを包含する内因Ｓ１Ｐ代謝経路の抑制または回避に使用することができる。一例として、エステル結合に欠けている式Ｉで表わされるＳ１Ｐ類縁化合物は、内因エステラーゼによる分解に抵抗するものと見なされる。本発明の一態様は、リピドホスフェートホスファターゼ（ＬＰＰｓ）による加水分解に対し耐性であり、またはＬＰＰｓのサブタイプ選択的インヒビターであり、および特にスフィンゴシン−１−ホスフェートホスホヒドロラーゼによる加水分解に対し耐性であるＳ１Ｐレセプターアゴニストおよびアンタゴニストとして機能する化合物に関する。前記Ｓ１Ｐ偽装化合物はホスフェート基を含有し、従ってＬＰＰｓによる加水分解に対し同様に感受性である。
【００４８】
アルファヒドロキシホスホネートは周知のホスフェート偽装化合物である。例えば、骨粗鬆症の処置に臨床的に使用される化合物［パミドロネート（ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ）、アレンドロネート（ａｌｅｎｄｒｏｎａｔｅ）］は、ピロホスフェートの類縁化合物であるアルファヒドロキシビスホスホネート化合物である。そのホスフェート基の代わりに、アルファヒドロキシホスフェートを有するＳ１Ｐ類縁化合物を製造することができる。従って、本発明の一態様は、下記一般構造を有する脂質ホスフェートホスファターゼ耐性Ｓ１Ｐ類縁化合物に関する：
【００４９】
2004529100.tif 000011
式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され、ここでｎは０〜１０の範囲の整数であり、Ｚはアリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、およびＲ6はＨ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；
【００５０】
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）および−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリールオキシアリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）からなる群から選択され；
ｙは、０〜１０の整数であり；
Ｒ14は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；および
Ｒ15およびＲ16は独立し、Ｈ、ヒドロキシル、アミノ、ＣＯＯＨ、ハロ、−ＰＯ3からなる群から選択されるか、またはＲ15およびＲ16は一緒になって、ケト基またはメチレン基を形成している。
【００５１】
好適態様の一つにおいて、Ｒ9は−ＮＲ1であり（ここでＲ1はＣ8−Ｃ22アルキルまたは−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6である）、Ｒ2およびＲ3の一方はＨであり、他方はＮＨ2であり、ｙは０または１であり、Ｒ15およびＲ16は独立し、Ｈまたはヒドロキシルであり、およびＲ14はＯである。
リソホスホリピド  スフィンゴシン−１−ホスフェート（Ｓ１Ｐ）およびリソホスファチジン酸（ＬＰＡ）は、細胞増殖を刺激し、またＧタンパク質結合した内皮分化遺伝子−コード（Ｓ１Ｐ）レセプターにより信号発信されることによって、多くの細胞機能に影響を与える。従って、本発明で開示されたＳ１Ｐレセプターアゴニストは、これらに制限されないものとして、損傷（角膜損傷を包含する）治癒の促進、髄鞘形成（希突起細胞機能）の促進、および免疫調節を包含する種々の臨床処置に有用性を有するものと見なされる。特に、ＬＰＡは、傷閉鎖の促進および新生内皮厚さの増加に対し活性を有するものとして報告されている［Ｂａｌａｚｓ等によるＡｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２００１，２８０（２）：Ｒ４６６−４７２］。
【００５２】
本発明の一態様に従い、１種または２種以上の本発明によるＳ１Ｐレセプターアゴニストを含有する医薬組成物が哺乳動物種（ヒトを包含する）に投与される。これによりこれらの種の免疫応答が増強され、ニューロン機能が改善され、または傷回復が増強される。Ｓ１Ｐは各種臓器における線維症を抑制することがまた、報告されている。従って、本発明によるＳ１Ｐレセプターアゴニストを使用し、臓器の線維症、例えば肺線維症，間質性肺炎、慢性肝炎、肝硬変症、慢性腎不全症または腎臓糸球体硬化症に付随する病気を予防／処置することができる。一態様において、本発明によるＳ１Ｐレセプターアゴニストは、火傷、切り傷、裂傷、外科切開、床ずれ、および糖尿病に見出されるような緩治癒性潰瘍の処置に用いられる。代表的に、この組成物は局所製剤として局所に投与されるが、その他の標準的投与経路もまた、許容される。
【００５３】
別の態様において、本発明によるＳ１Ｐレセプター調節性化合物は対象に投与され、これにより異常細胞増殖および分化による障害、ならびに炎症性疾病が処置または予防される。これらの障害は、これらに制限されないものとして、アルツハイマー病、異常黄体形成症、変形性関節症、骨粗鬆症、無排卵症、パーキンソン病、多発性硬化症、リウマチ性関節炎および癌を包含する。一態様において、Ｓ１Ｐアンタゴニストが患者に投与され、これにより異常成長を伴う疾病が処置される。一態様において、下記構造で表わされる化合物を含有する組成物が投与され、これにより異常細胞増殖を伴う疾病を患う患者が処置される：
【００５４】
2004529100.tif 000012
式中、Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ8アルキルからなる群から選択され、およびＲ2およびＲ3は独立し、ＨおよびＮＨ2からなる群から選択される。
【００５５】
さらに、本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物はリンパ細胞を動員し、また二次リンパ球組織へのそれらの帰還を増加するものと考えられる。従って、本発明による類縁化合物は、移殖臓器（同種移殖片）または健康な細胞［例えば、膵臓の島（Ｉ型糖尿病）ミエリン鞘形成（ｓｈｅａｔｈｉｎｇ）（多発性硬化症）］、もしくは望ましくない免疫応答に付されることがある他の組織から離れたリンパ細胞に直接に用いることができ、これによりこのような組織の免疫系からの損傷を減少させることができる。
【００５６】
一態様において、本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物は、免疫調節に使用される。本明細書で使用されているものとして、免疫調節の用語は免疫系の機能に対し影響を与えることを表わし、免疫応答の増強および免疫応答の抑制の両方を包含する。本発明の一態様において、本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物は免疫調節剤として免疫系の抑制に用いられ、さもなくば自己免疫病でおよび臓器移植で生じる健康な組織に対する損傷を防止する。特に、これらの化合物は膵臓、膵臓島、腎臓、心臓および肺臓移植を包含する臓器移植に付随する処置の一部として、患者に投与することができる。これらのＳ１Ｐ類縁化合物は、単独で、または公知免疫抑制剤、例えばシクロスポリン（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ）、タクロリムス（ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ）、アザチオプリン（ａｚａｔｉｏｐｒｉｎｅ）、デソキシメタソン（ｄｅｓｏｘｙｍｅｔａｓｏｎｅ）、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、コルチゾロ（ｃｏｒｔｉｓｏｌｏ）、コーチゾン（ｃｏｒｔｉｓｏｎｅ）、ベータメタソン（ｂｅｔａｍｅｔａｓｏｎｅ）、ＦＫ５０６（カビマクロライド免疫抑制剤）、デサメタソン（ｄｅｓａｍｅｔａｓｏｎｅ）、フルニソリド（ｆｌｕｎｉｓｏｌｉｄｅ）、プレドニソロン（ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）、プレドニソン（ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ）、アムシノミド  デソニド（ａｍｃｉｎｏｍｉｄｅ  ｄｅｓｏｎｉｄｅ）、メチルプレドニソロン（ｍｅｔｈｙｌｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）、トリアムシノロン（ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ）、アルクロメタソン（ａｌｃｌｏｍｅｔａｓｏｎｅ）およびメトトレキセート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）と組合せて投与することができる。
【００５７】
さらに、本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物は、自己免疫病を患う患者に投与し、このような病気を処置することができる。本質的に自己免疫病であると考えられる病気の例には、Ｉ型糖尿病、全身性赤斑性狼瘡、多発性硬化症、リウマチ性関節炎、炎症性腸疾病（大腸炎およびクローン病を包含する）、糸球体硬化症、ハシモト甲状腺炎、重症筋無力症、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑症、自己免疫性肝炎およびウェグナー（Ｗｅｇｎｅｒ）肉芽腫がある。
【００５８】
一態様に従い、このような治療を要するヒトを包含する哺乳動物の処置用に、免疫調節治療法が提供される。この方法は、有効量のＳ１Ｐ活性のモジュレーターとして活性を示す下記一般式で表わされる化合物を上記哺乳動物に投与する段階を包含する：
2004529100.tif 000013
【００５９】
各式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）および−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリールオキシアリール（Ｃ0−Ｃ4）アルキルからなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の整数であり；
【００６０】
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される。
一態様において、Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され、ここで、ｎは０〜１０の範囲の整数であり、Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、およびＲ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され、およびＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2である。
【００６１】
一態様において、これらの免疫調節性化合物は下記一般構造を有する：
2004529100.tif 000014
式中、Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルからなる群から選択され、およびＲ2およびＲ3は独立し、ＨおよびＮＨ2からなる群から選択され、ただしＲ2とＲ3とは同一ではなく、一態様においては、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2である。
【００６２】
使用される投与量が処置される特定の疾病、ならびに年齢、体重、一般健康状態、症状の重篤度、処置の頻度および追加の組合せ医薬処置があるかないかを包含する追加の因子に依存することは勿論のことである。用量は一般に、数回／日で投与され、好ましくは３回／日で投与される。各活性化合物の量は、当業者に周知の常習的方法によって容易に決定することができる。
Ｓ１Ｐはまた、多くの細胞型において生存因子として作用する。特に、Ｓ１Ｐレセプターアゴニストは、細胞および組織の低酸素状態からの防護に関し活性を有するものと予測される。一態様に従い、本発明によるＳ１Ｐアンタゴニストを、虚血の結果として受けた損傷を包含する低酸素状態にさらされている細胞および組織の処置に使用する。一態様に従い、Ｓ１Ｐレセプターアンタゴニスト活性を示すＳ１Ｐ類縁化合物は、虚血性再灌流型損傷の処置に使用することができる。虚血の用語は、酸素含有血液の組織への供給が妨害されることであると定義される。虚血の作用は進行性であることが知られており、時間が経過すると、細胞生命が劣化し続け、組織は壊死する。組織の酸素灌流が制限される総合的持続性虚血は、細胞死をもたらし、結局、動脈血が再灌流されないかぎり、凝集誘発壊死が生じる。証拠の実体は、虚血を伴う損傷中の多くの部分は虚血組織の再灌流に伴う事象に依るものであること、すなわち再灌流型損傷に依るものであることを示す。
【００６３】
本発明はまた、本発明によるＳ１Ｐレセプター調節化合物を含有する医薬組成物に関する。さらに特に、このようなＳ１Ｐアゴニストおよびアンタゴニストは、当業者にとって公知の標準的な医薬上で許容される担体、充填剤、可溶化剤および安定剤を用いて医薬組成物として調剤することができる。Ｓ１Ｐレセプターアゴニストおよび／またはアンタゴニストを含有する医薬組成物は、これらに制限されないものとして、局所，経口、静脈内、動脈内、骨髄内、膜内、室内、経皮、皮下、腹腔内、鼻内、局所、舌下または直腸を包含する多くのいずれかの経路によって、投与を要する個体に投与することができる。本発明による化合物を必要とする大部分の状態に対し、代表的には経口投与が用いられる。急性の処置には、静脈注射または注入が好適である。治療計画を維持する場合、経口または非経口、例えば筋肉内または皮下経路は好適である。一態様に従い、本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物およびアルブミンを含有する組成物が提供され、さらに特に、この組成物は本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物、医薬上で許容される担体および０．１〜１．０％アルブミンを含有する。アルブミンは組成物の溶解性を改良する緩衝剤として機能する。
【００６４】
本発明はまた、１種または２種以上の本発明による医薬組成物の成分とともに、１種または２種以上の容器を包含する医薬パックまたはキットを提供する。一態様に従い、キットは免疫調節を要する患者の処置に提供される。この態様において、キットは１種または２種以上の本発明によるＳ１Ｐ類縁化合物を含有し、また１種または２種以上の公知免疫調節剤を含有することができる。これらの医薬は種々の容器、例えばバイアル、管、微量滴定用ウエル板、ビンなどに包装することができる。別種の製剤は、分離した容器内に含有させることができ、これによりキット、例えば陽性対照試料、陰性対照試料、緩衝剤、細胞培地などが提供される。好ましくは、このキットはまた、使用指示書を包含する。
【００６５】
本発明はまた、Ｓ１ＰとＳ１Ｐレセプターとの相互反応のアゴニストおよびアンタゴニストの発見方法に関する。このような化合物は、Ｓ１Ｐレセプター活性検出分析法（例えば、［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合分析法）およびＳ１Ｐおよび被験化合物の存在下における活性の分析法を用いることによって同定される。さらに特に、ＴｒａｙｎｏｒおよびＮａｈｏｒｓｋｉにより開示された方法において［Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４７：８４８−８５４（１９９５）］（この記載を引用してここに組入れる）、膜に対するＧ−タンパク質結合は標識付けしたＧＴＰの結合を測定することによって評価することができる。
【００６６】
一例として、Ｓ１Ｐポリペプチドを発現する細胞から分離した膜を含有する試料を、当該ペプチドのリガンド（すなわち、Ｓ１Ｐ）への結合を促進する緩衝剤中で放射性標識付けしたＧＴＰおよび無標識ＧＤＰ（例えば、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ中、ｐＨ７．４、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、および１０ｍＭ  ＭｇＣｌ2、８０ｐＭ  35Ｓ−ＧＴＰγＳおよび３μＭ  ＧＤＰ）の存在下に、候補モジュレーターを用い、および用いることなく、インキュベートすることができる。この分析混合物をレセプターへの結合およびレセプターの活性化に適する期間にわたりインキュベートする（例えば、３０℃で６０分間）。この期間後、未結合の標識付きＧＴＰを分離する（例えば、ＧＦ／Ｂフィルター上での濾過）。結合した標識付きＧＴＰは液体シンチレーション計数により測定することができる。候補モジュレーターを含有する試料中でシンチレーション計数により測定して、モジュレーターを含有していない試料に比較し、標識付きＧＴＰ結合における１０％またはそれ以上の減少は、候補モジュレーターがＳ１Ｐレセプター活性のインヒビターであることを示す。
【００６７】
類似のＧＴＰ結合分析法は、リガンド（すなわち、Ｓ１Ｐ）を存在させることなく行うことができ、これによりアゴニストとして作用する薬剤を同定することができる。この場合、リガンド−刺激したＧＴＰ結合を、標準として用いる。薬剤が１０μＭまたはそれ以下の割合で存在する場合にＳ１Ｐにより誘発されるＧＴＰの結合レベルの少なくとも５０％が抑制された場合、および好ましくは、リガンドにより誘発されるレベルと同一であるか、またはこのレベルよりも高い場合、この薬剤はアゴニストであると考える。
【００６８】
ＧＴＰアーゼ活性は、Ｓ１Ｐレセプター含有細胞膜エキスをγ32Ｐ−ＧＴＰとともにインキュベートすることによって測定することができる。活性ＧＴＰアーゼは、無機ホスフェートとして標識を放出し、これは２０ｍＭ  Ｈ3ＰＯ4中の活性炭の５％懸濁液中における遊離無機ホスフェートを分離し、次いでシンチレーション計数を行うことによって検出することができる。対照は、Ｓ１Ｐレセプターを発現しない細胞（例えば、偽薬−トランスフェクション細胞）から分離した膜エキスを用いる分析法を包含し、これにより候補モジュレーターの可能な非特異的作用を排除することができる。Ｓ１Ｐ調節されたＧＴＰアーゼ活性に対する候補モジュレーターの効果について評価するために、細胞膜試料をモジュレーターの存在または非存在下にリガンド（例えば、Ｓ１Ｐ）とともにインキュベートし、次いでＧＴＰアーゼ分析を上記のとおりに行うことができる。モジュレーターを含有していない試料に対するＧＴＰ結合性またはＧＴＰアーゼ活性レベルの１０％またはそれ以上の変化（増加または減少）は、候補モジュレーターによるＳ１Ｐ調節を示唆する。
【００６９】
同定されたＳ１Ｐレセプターアゴニストおよびアンタゴニストを使用し、種々のヒト疾病および障害を処置することができ、このような疾病および障害は、これらに制限されないものとして、例えば細菌、カビ、原生動物およびウイルス感染、特にＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２により生じる感染；痛み；癌；糖尿病；肥満症；食欲不振症；過食症；喘息；パーキンソン病；急性心不全；高血圧症；低血圧症；尿遅滞症；骨粗鬆症；狭心症；心筋梗塞；発作；潰瘍；喘息；アレルギー症；良性前立腺肥大症；偏頭痛；嘔吐；精神学的障害および神経学的障害（不安症、分裂症、躁鬱病、欝病、せん妄、痴呆、および重篤精神遅滞を包含する）を包含する。
【００７０】
例１
Ｓ１Ｐ類縁化合物の化学合成
Ｓ１Ｐの良好な偽装化合物を開発するために、意図する数種の態様を有する合成経路をデザインした（スキーム１）。第一に、ブトキシカルボニル保護Ｌ−セリンを最初の出発物質として選択した。この理由はＳ１Ｐのリンカー領域に後合成的に類似していることによる。さらに、この出発物質は安価であり、また市販されている保護アミノ酸である。第二に、化学的分岐（ｃｈｅｍｏｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ）を考慮した。長鎖のカプリングは、合成で後の方で行った。これにより、数種の鎖長さを共通中間体から生成させることができる。もう一つの重要な強調点は、最終化合物の圧倒的不溶解性にあった。この不溶解性によって、目標分子はクロマトグラフイまたは結晶化方法によって精製することはできなかった。これらの化合物は単純な仕上げ処理に耐えることはできない。従って、目的化合物のみが定量的に生成され、過剰の反応剤を減圧で分離することができるようにデザインする必要があった。これは、合成経路の最終段階で、トリフルオロ酢酸脱保護を使用することにより達成された。
【００７１】
全部のＳ１Ｐ類縁化合物の合成は、アルミナ（活性Ｉ）を通す濾過により精製される溶媒を用いて行った。全部の反応は不活性雰囲気下で行い、また全部の生成物は２３０−４００メッシュシリカゲルを用いて精製した。各生成物は、薄層クロマトグラフイ（シグナルスポット）および1Ｈ  ＮＭＲ、13Ｃ  ＮＭＲおよび質量分析を包含する分光法により分析した。Ｓ１Ｐ類縁化合物の割り当てられている構造は、得られた全部のスペクトルデータと一致した。全部の最終生成物は、ＴＦＡ塩として得た。
【００７２】
（２Ｓ）Ｓ１Ｐ類縁化合物  ＶＰＣ２２０４１、５１、５３および６３の合成
2004529100.tif 000015
【００７３】
2004529100.tif 000016
【００７４】
Ｎ−Ｂｏｃセリンのベンジル保護：ＤＭＦ（１００ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−（Ｌ）−セリン（４．８７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、炭酸セシウム（５．１１ｍｍｏｌ）を添加し、次いで撹拌を３０分間にわたり継続した。ベンジルブロマイド（５．８４ｍｍｏｌ）を添加し、生成する溶液を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、酢酸エチル（２５ｍｌ）で稀釈し、リチウムブロマイド（３ｘ１５ｍｌ）、重炭酸ナトリウム（２ｘ１５ｍｌ）およびブライン（２ｘ１５ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧下に除去し、生成する黄褐色油状物を、１：１石油エーテル／ジエチルエーテルを用いるフラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物（１００％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．２６（１：１石油エーテル／ジエチルエーテル）。
【００７５】
生成するアルコールのホスホリル化：ホスホリル化用反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（５０ｍｌ）中のベンジル保護セリン（１．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（３．９６ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイト（３．９６ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する反応混合物を１５時間にわたり撹拌した。過酸化水素（７．９２ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を３時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応を停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（１００ｍｌ）により稀釈し、次いで５０％水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5（２ｘ２０ｍｌ）により抽出した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、黄褐色油状物を得た。９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、生成物（９７％）を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．６７（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【００７６】
ホスホリル化セリンの脱ベンジル化：２００プルーフエタノール（２５ｍｌ）中のホスホリル化セリン（１．５５ｍｍｏｌ）の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、セライトプラグに通し、メタノールを用いる溶出により濾過し、次いで溶媒を減圧下に除去し、生成物（９１％）を僅かに黄色の油状物として得た。Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００７７】
長鎖アミンとホスホリル化酸とのカプリング：上記酸（０．２５２ｍｍｏｌ）、触媒量の４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．２７７ｍｍｏｌ）、長鎖アミンまたはアルコール（０．２５２ｍｍｏｌ）およびＣＨ2Ｃｌ2  １５ｍｌの溶液を、撹拌しながら０℃に冷却させた。生成する溶液に、０℃において、ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．２７７ｍｍｏｌ）を添加し、次いでこの混合物を１２時間にわたり継続撹拌しながら室温に戻した。この反応混合物を次いで、０℃に再冷却させ、次いで濾過した。この濾液を重炭酸ナトリウム（３ｘ１０ｍｌ）、アンモニウムクロライド（３ｘ１０ｍｌ）により洗浄し、次いでこの有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧で除去し、生成する黄色油状物をフラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物を得た。
【００７８】
ＶＰＣ２２０４１：３３％、白色固形物、Ｒｆ＝０．７８（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２０５１：４１％、白色固形物、Ｒｆ＝０．８０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２０５３：１５％、白色固形物、Ｒｆ＝０．２０（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２０６１：２６％、白色固形物、Ｒｆ＝０．７９（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００７９】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（１ｍｌ）中の保護されている最終生成物（０．０７２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（１２．９８ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物を得た。
【００８０】
ＶＰＣ２２０４１：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２０５１：９６％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２０５３：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２０６１：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
Ｓ１Ｐ類縁化合物  ＶＰＣ２２０５１の場合、ＰｙＢＯＰカプリング方法（ＶＰＣ２２１３５で用いられたとおりの方法）をＤＣＣカプリングの代わりに使用した。生成物は清明な油状物として１５％の収率で得られた。
【００８１】
（２Ｒ）Ｓ１Ｐ類縁化合物ＶＰＣ２２１３５の合成
2004529100.tif 000017
【００８２】
長鎖アミンと保護セリンとのカプリング：ＣＨ2Ｃｌ2  （２０ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−（Ｄ）−セリン−ＯＢｎ（０．８４７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＰｙＢＯＰ（０．８４７ｍｍｏｌ）を、次いでジイソプロピルエチルアミン（０．８４７ｍｍｏｌ）を添加した。５分間にわたり撹拌した後、１−テトラデシルアミン（０．８４７ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を１時間にわたり継続した後、１−テトラデシルアミン（０．２５４ｍｍｏｌ）をさらに添加した。さらに３時間にわたり撹拌を継続し、次いでこの反応混合物を酢酸エチル（２０ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１５ｍｌ）、アンモニウムクロライド（２ｘ１５ｍｌ）により洗浄し、次いでこの有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧で除去し、清明なゲル状固形物を得た。この生成物を、９５：５ＣＨＣｌ3／メタノールを用いるフラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物（６８％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．７８（９５：５ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００８３】
結合した生成物のベンジル脱保護：２００プルーフエタノール（１５ｍｌ）中の結合した生成物（０．５７９ｍｍｏｌ）の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、セライトプラグに通しメタノール溶出を用いて濾過し、次いで溶媒を減圧で除去し、生成物（８７％）を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．５（９５：５ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００８４】
生成するアルコールのホスホリル化：ホスホリル化反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（２０ｍｌ）中のアルコール（０．４７４ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（０．９４８ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイト（０．９４８ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する反応混合物を１５時間にわたり撹拌した。過酸化水素（１．８９６ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を２４時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応を停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（５０ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（２ｘ１５ｍｌ）、水（１ｘ１５ｍｌ）および最後にブライン（１ｘ１５ｍｌ）により洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、清明な油状物を得た。９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、生成物（１００％）を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．２３（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【００８５】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（１ｍｌ）中の保護されている生成物（０．０７１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（１２．９８ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物（５６％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００８６】
（２Ｒ）Ｓ１Ｐ類縁化合物ＶＰＣ２２１５７、１７３、１９９および２１１の合成
2004529100.tif 000018
【００８７】
2004529100.tif 000019
【００８８】
長鎖アニリンと保護セリンとのカプリング：ＣＨ2Ｃｌ2  （１０ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−（Ｄ）−セリン−ＯＢｎ（０．３３９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＰｙＢＯＰ（０．３３９ｍｍｏｌ）を、次いでジイソプロピルエチルアミン（０．３３９ｍｍｏｌ）を添加した。５分間にわたり撹拌した後、アニリン（０．３３９ｍｍｏｌ）を添加し、次いで撹拌を４時間にわたり継続した。この反応混合物を酢酸エチル（１０ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１０ｍｌ）、アンモニウムクロライド（２ｘ１０ｍｌ）により洗浄し、次いでこの有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧で除去し、清明なゲル状固形物を得た。この生成物を、フラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物を得た。
【００８９】
ＶＰＣ２２１５７：７７％、白色固形物、Ｒｆ＝０．８０（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２１７３：７３％、白色固形物、Ｒｆ＝０．７８（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２１９９：６５％、白色固形物、Ｒｆ＝０．７９（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２２１１：７１％、白色固形物、Ｒｆ＝０．８０（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【００９０】
結合した生成物のベンジル脱保護：２００プルーフエタノール（１０ｍｌ）中の結合した生成物（０．２６０ｍｍｏｌ）の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、セライトプラグに通し、メタノール溶出により濾過し、次いで溶媒を減圧で除去し、生成物を得た。
ＶＰＣ２２１５７：８５％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．５０（９５：５ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２１７３：６０％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．５５（９５：５ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２１９９：７０％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．４８（９５：５ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２２１１：９％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．５３（９５：５ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００９１】
生成するアルコールのホスホリル化：ホスホリル化反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のアルコール（０．２２０ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（０．４００ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイド（０．４００ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する反応混合物を１５時間にわたり撹拌した。過酸化水素（０．８００ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を２４時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（２５ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（２ｘ１０ｍｌ）、水（１ｘ１０ｍｌ）および最後にブライン（１ｘ１０ｍｌ）により洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、清明な油状物を得た。フラッシュクロマトグラフイに付し、生成物を清明な油状物として得た。
【００９２】
ＶＰＣ２２１５７：８４％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．２３（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２１７３：９６％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．３０（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２１９９：８７％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．７２（８０：２０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２２１１：９０％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．５８（８０：２０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００９３】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中の保護されている生成物（０．１６２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（２５．９６ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物を得た。
ＶＰＣ２２１５７：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２１７３：５８％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２１９９：７５％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２２１１：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００９４】
（２Ｓ）Ｓ１Ｐ類縁化合物ＶＰＣ２２１７９および１８１の合成
2004529100.tif 000020
【００９５】
2004529100.tif 000021
【００９６】
Ｎ−Ｂｏｃセリンのベンジル保護：ＤＭＦ（５０ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−（Ｌ）−セリン（２．４４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、炭酸セシウム（２．５６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで撹拌を３０分間、継続した。ベンジルブロマイド（２．９２ｍｍｏｌ）を添加し、生成する溶液を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、酢酸エチル（１５ｍｌ）で稀釈し、リチウムブロマイド（３ｘ１０ｍｌ）、重炭酸ナトリウム（２ｘ１０ｍｌ）およびブライン（２ｘ１０ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧下に除去し、生成する黄褐色油状物を、１：１石油エーテル／ジエチルエーテルを用いるフラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物（１００％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．２６（１：１石油エーテル／ジエチルエーテル）。
【００９７】
生成するアルコールのホスホリル化：ホスホリル化反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のベンジル保護セリン（２．２２ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（４．４３ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイド（４．４３ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する反応混合物を１５時間にわたり撹拌した。過酸化水素（８．８６ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を３時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（１００ｍｌ）により稀釈し、次いで５０％水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5（２ｘ２０ｍｌ）により抽出した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、黄褐色油状物を得た。９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、生成物（９７％）を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．６７（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【００９８】
ホスホリル化セリンの脱ベンジル化：２００プルーフエタノール（２５ｍｌ）中のホスホリル化セリン（１．５５ｍｍｏｌ）の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、セライトプラグに通し、メタノールを用い濾過し、次いで溶媒を減圧下に除去し、生成物（９１％）を僅かに黄色の油状物として得た。Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【００９９】
長鎖アニリンとホスホリル化酸とのカプリング：ＣＨ2Ｃｌ2  （１０ｍｌ）中のホスホリル化酸（０．２５２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＰｙＢＯＰ（０．２５２ｍｍｏｌ）を、次いでジイソプロピルエチルアミン（０．２５２ｍｍｏｌ）を添加した。５分間の撹拌後、アニリン（０．２５２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで撹拌を４時間にわたり継続した。この反応混合物を酢酸エチル（１０ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１０ｍｌ）、アンモニウムクロライド（２ｘ１０ｍｌ）により洗浄し、次いでこの有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧で除去し、生成物を得た。
ＶＰＣ２２１７９：４３％、白色固形物、Ｒｆ＝０．４０（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２２１８１：６０％、白色固形物、Ｒｆ＝０．３５（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１００】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（１．５ｍｌ）中の保護されている最終生成物（０．１１７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（１９．４８ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物を得た。
ＶＰＣ２２１７９：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２２１８１：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【０１０１】
（２Ｒ）Ｓ１Ｐ類縁化合物ＶＰＣ２２２７７の合成
2004529100.tif 000022
【０１０２】
長鎖アニリンのトシル保護：ピリジン（３ｍｌ）中の４−デシルアニリン（０．４２８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、不活性雰囲気下に０℃において、トシルクロライド（０．４２８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温まで加温した。２０分後、この反応混合物を水（１０ｍｌ）および酢酸エチル（１０ｍｌ）により稀釈した。この水性層は廃棄し、有機層は１Ｎ  ＨＣｌ（３ｘ１０ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（３ｘ１０ｍｌ）およびブライン（２ｘ１０ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、生成物（８１％）をピンク色結晶として得た。この生成物はさらに精製する必要はない。Ｒｆ＝０．８２（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１０３】
保護されているアミノ酸の還元：不活性雰囲気下に−１０℃において、Ｎ−Ｂｏｃ−（Ｄ）−Ｓｅｒ−ＯＢｚ（０．６７８ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．６７８ｍｍｏｌ）を、撹拌されているＴＨＦ（３ｍｌ）に添加した。イソブチルクロロホーメート（０．７４５ｍｍｏｌ）を次いで、ゆっくりと添加した。この反応混合物を、沈殿が見出されるまで、１時間かけて撹拌した。この反応混合物を次いで、濾過し、この濾液を−１０℃に再冷却させた。一方で、ホウ素水素化ナトリウム（１．３６ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下に撹拌しながら、水（０．５ｍｌ）に溶解し、次いでこの混合物を−１０℃に冷却させた。元の反応混合物を次いで、カニューレによりホウ素水素化ナトリウム混合物中にゆっくりと添加し、次いで新しく形成された反応混合物を室温にし、次いで１時間にわたり撹拌した。
【０１０４】
この反応混合物をアンモニウムクロライド（５ｍｌ）の添加により反応停止させ、酢酸エチル（１５ｍｌ）により稀釈し、水性層は廃棄した。この有機層を次いで、飽和アンモニウムクロライド（３ｘ１０ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（３ｘ１０ｍｌ）および最後にブライン（１ｘ１０ｍｌ）により洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、粗生成物を白色固形物として生成した。この粗生成物を、８０：２０ＣＨＣｌ3／アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物（４２％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．４８（８０：２０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１０５】
アニリンとアルコールとのカプリング：ＴＨＦ（３ｍｌ）中のアニリン（０．２０９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、不活性雰囲気下に、トリフェニルホスフィン（０．２５４ｍｍｏｌ）、アルコール（０．１０５ｍｍｏｌ）および最後にＤＥＡＤ（０．２０９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１２時間にわたり撹拌し、次いで清明な油状物に濃縮した。この清明な油状物に石油エーテルを添加し、固形トリフェニルホスフィンオキサイドをフラスコの底部に沈降させた。清明な石油エーテル層を次いで、ピペットにより採取し、次いで清明な油状物に濃縮した。この粗生成物を次いで、１：１石油エーテル／エーテルを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物（５０％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．８３（１：１石油エーテル／エーテル）。
【０１０６】
結合した生成物のトシル脱保護：撹拌棒および冷却管を備え、不活性雰囲気下に−７０℃に冷却されている２−頚丸底フラスコにおいて、アンモニア（２０ｍｌ）を濃縮させた。この反応混合物に金属ナトリウム（４．２７ｍｍｏｌ）を、次いでＴＨＦ（８ｍｌ）中のトシル保護アミン（０．４２７ｍｍｏｌ）を添加した。この暗青色反応混合物を、−７０℃で１時間にわたり撹拌し、次いで溶液が清明／白色になるまでエタノールにより冷却させ、この反応混合物を次いで、室温で一夜にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、酢酸エチル（２０ｍｌ）により稀釈し、次いで飽和アンモニウムクロライド（３ｘ２０ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（３ｘ２０ｍｌ）および最後にブライン（１ｘ２０ｍｌ）により洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、粗生成物を清明な油状物として生成した。この粗生成物を、１：１酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物（４０％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．４２（１：１酢酸エチル／ヘキサン）。
【０１０７】
生成するアルコールのホスホリル化：ホスホリル化用反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（５ｍｌ）中のアルコール（０．１３０ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（０．１３０ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイド（０．１３０ｍｍｏｌ）を次いで、添加した。過酸化水素（３０％、０．０４４ｍｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を２４時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（１０ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（２ｘ１０ｍｌ）、水（１ｘ１０ｍｌ）、および最後にブライン（１ｘ１０ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、清明な油状物を得た。１：１酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、生成物（１２％）を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．４１（１：１酢酸エチル／ヘキサン）。
【０１０８】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（０．５ｍｌ）中の保護されている最終生成物（０．０１６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（６．４９ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物（１００％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【０１０９】
（２Ｒ）Ｓ１Ｐ類縁化合物ＶＰＣ２３０３１、１９、６５、６９、７５および７９の合成
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【０１１０】
2004529100.tif 000024
【０１１１】
アリールハライドと末端アルキンとのカプリング：全部の出発材料は、反応以前に、窒素により充分に浄化した。ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のアリールハライド（２．０１ｍｍｏｌ）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０．０４ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（０．１０ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（０．０４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、末端アルキン（２．２１ｍｍｏｌ）を、次いでジイソプロピルエチルアミン（８．０４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を酢酸エチル（１５ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１５ｍｌ）、アンモニウムクロライド（３ｘ１５ｍおよび最後にブライン（１ｘ１５ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を減圧で除去し、黄褐色油状物を得た。フラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物を得た。
【０１１２】
ＶＰＣ２３０３１：２４％、黄色油状物、Ｒｆ＝０．６１（９０：１０ヘキサン／エーテル）。
ＶＰＣ２３０１９：１００％、黄色油状物、Ｒｆ＝０．５５（９０：１０ヘキサン／エーテル）。
ＶＰＣ２３０６５、６９：６６％、黄色油状物、Ｒｆ＝０．７５（９０：１０ヘキサン／エーテル）。
ＶＰＣ２３０７５、７９：３４％、黄色油状物、Ｒｆ＝０７５（９０：１０ヘキサン／エーテル）。
【０１１３】
結合した生成物の還元：２００プルーフエタノール（１０ｍｌ）中の結合した生成物（１．６８ｍｍｏｌ）の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、セライトプラグに通し、メタノールにより溶出して濾過し、次いで溶媒を減圧で除去し、粗生成物を生成した。
ＶＰＣ２３０３１：６６％、黄色固形物、Ｒｆ＝０．５３（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２３０１９：８５％、黄色固形物、Ｒｆ＝０．５５（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２３０６５、６９：８４％、黄色固形物、Ｒｆ＝０．７９（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２３０７５、７９：１００％、黄色固形物、Ｒｆ＝０．８０（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１１４】
長鎖アニリンと保護セリンとのカプリング：ＣＨ2Ｃｌ2  （２０ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−（Ｄ）−セリン−ＯＢｎ（０．７４０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＰｙＢＯＰ（０．７４０ｍｍｏｌ）を、次いでジイソプロピルエチルアミン（０．７４０ｍｍｏｌ）を添加した。５分間の撹拌後、アニリン（０．７４０ｍｍｏｌ）を添加し、次いで撹拌を４時間にわたり継続した。この反応混合物を酢酸エチル（２０ｍｌ）により稀釈し、次いで１Ｎ  ＨＣｌ（３ｘ２０ｍｌ）、重炭酸ナトリウム（３ｘ２０ｍｌ）、および最後にブライン（１ｘ２０ｍｌ）により洗浄し、次いでこの有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧で除去し、清明な油状物を得た。この油状生成物をフラッシュクロマトグラフイにより精製し、生成物を得た。
【０１１５】
ＶＰＣ２３０３１：５２％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．３５（ジクロロメタン）。
ＶＰＣ２３０１９：９０％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．６１（７０：３０ヘキサン／酢酸エチル）。
ＶＰＣ２３０６５、６９：８４％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．８２（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
ＶＰＣ２３０７５、７９：１００％、黄色固形物、Ｒｆ＝０．９２（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１１６】
結合した生成物のベンジル脱保護：２００プルーフエタノール（１５ｍｌ）中の結合した生成物（０．６６７ｍｍｏｌ）の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、セライトプラグに通し、メタノールで溶出して濾過し、次いで溶媒を減圧で除去し、生成物を得た。
ＶＰＣ２３０３１：１００％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．２７（７０：３０ヘキサン／酢酸エチル）。
ＶＰＣ２３０１９：９５％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．２８（７０：３０ヘキサン／酢酸エチル）。
ＶＰＣ２３０６５、６９：８９％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．６２（１：１ヘキサン／酢酸エチル）。
ＶＰＣ２３０７５、７９：２７％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．４３（１：１ヘキサン／酢酸エチル）。
【０１１７】
遊離アルコールを提供する脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ保護アルコール（０．１４３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（２５．９６ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物を得た。
ＶＰＣ２３０６５：１００％、白色固形物、Ｒｆ＝０．２（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２３０７５：９３％、白色固形物、Ｒｆ＝０．２（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【０１１８】
Ｎ−Ｂｏｃ保護アルコールのホスホリル化：ホスホリル化用反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１５ｍｌ）中のアルコール（０．２４７ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（０．４９５ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイト（０．４９５ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する反応混合物を１５時間にわたり撹拌した。過酸化水素（０．９８９ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を２４時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（２５ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１５ｍｌ）、アンモニウムクロライド（３ｘ１５ｍｌ）、および最後にブライン（１ｘ１５ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、清明な油状物を得た。フラッシュクロマトグラフイに付し、生成物を得た。
【０１１９】
ＶＰＣ２３０３１：９０％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．８０（８０：２０エーテル／酢酸エチル）。
ＶＰＣ２３０１９：５６％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．８２（８０：２０エーテル／酢酸エチル）。
ＶＰＣ２３０６９：８９％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．８５（９０：１０エーテル／酢酸エチル）。
ＶＰＣ２３０７９：７７％、清明な油状物、Ｒｆ＝０．８５（９０：１０エーテル／酢酸エチル）。
【０１２０】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中の保護されている生成物（０．１６２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（２５．９６ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物を得た。
ＶＰＣ２３０３１：１００％、清明な油状物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２３０１９：９２％、清明な油状物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２３０６９：８６％、清明な油状物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
ＶＰＣ２３０７９：１００％、清明な油状物、Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【０１２１】
（２Ｒ）Ｓ１Ｐ類縁化合物ＶＰＣ２３０８７および８９の合成
2004529100.tif 000025
【０１２２】
アリールハライドと末端アルキンとのカプリング：全部の出発材料は、反応以前に、窒素により充分に浄化した。ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のアリールハライド（２．０１ｍｍｏｌ）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０．０４ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（０．１０ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（０．０４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、末端アルキン（２．２１ｍｍｏｌ）を、次いでジイソプロピルエチルアミン（８．０４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を酢酸エチル（１５ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１５ｍｌ）、アンモニウムクロライド（３ｘ１５ｍおよび最後にブライン（１ｘ１５ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を減圧で除去し、黄褐色油状物を得た。７０：３０ヘキサン／酢酸エチルを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物（４４％）を黄色固形物として得た。Ｒｆ＝０．７９（７０：３０ヘキサン／酢酸エチル）。
【０１２３】
長鎖アニリンと保護セリンとのカプリング：ＣＨ2Ｃｌ2  （１０ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−（Ｄ）−セリン−ＯＢｎ（０．２８８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＰｙＢＯＰ（０．２８８ｍｍｏｌ）を、次いでジイソプロピルエチルアミン（０．２８８ｍｍｏｌ）を添加した。５分間にわたり撹拌した後、アニリン（０．２８８ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間継続した。この反応混合物を酢酸エチル（１０ｍｌ）により稀釈し、次いで１Ｎ  ＨＣｌ（３ｘ１０ｍｌ）、重炭酸ナトリウム（３ｘ１０ｍｌ）、および最後にブライン（１ｘ１０ｍｌ）により洗浄し、次いでこの有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を次いで、減圧で除去し、清明な油状物を得た。この生成物を、７０：３０ヘキサン／酢酸エチルを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．６４（７０：３０ヘキサン／酢酸エチル）。
【０１２４】
結合した生成物のベンジル脱保護および還元：２００プルーフエタノール（１０ｍｌ）中の結合した生成物（０．１８８ｍｍｏｌ）の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、メタノール溶出を用いセライトプラグに通して濾過し、次いで溶媒を減圧で除去し、粗生成物を清明な油状物として得た。１：１ヘキサン／酢酸エチルを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物（４９％）を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．５１（１：１ヘキサン／酢酸エチル）。
【０１２５】
遊離アルコールを得る脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（１ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ保護アルコール（０．０２５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（１２．９８ｍｍｏｌ）を添加し、次いで撹拌を４時間継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を除去し、褐色油状物を得る。この油状物をエーテルによりすすぎ、次いで溶媒を減圧下に５回、分離し、生成物（１００％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．２（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【０１２６】
Ｎ−Ｂｏｃ保護アルコールのホスホリル化：ホスホリル化用反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のアルコール（０．０９２ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（０．１８３ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイド（０．１８３ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する反応混合物を１５時間にわたり撹拌した。過酸化水素（０．３６７ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を２４時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（１５ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１５ｍｌ）、アンモニウムクロライド（３ｘ１５ｍｌ）、および最後にブライン（１ｘ１５ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、清明な油状物を得た。９０：１０酢酸エチル／エーテルを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物（９３％）を清明な油状物として得た。Ｒｆ＝０．８５（９０：１０酢酸エチル／エーテル）。
【０１２７】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中の保護されている生成物（０．０６３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（２５．９６ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物（１００％）を白色固形物として得た。Ｒｆ＝０（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【０１２８】
（２Ｒ）ベンズイミダゾール化合物の合成
2004529100.tif 000026
【０１２９】
アニリンのアセチル化：無水酢酸（１０ｍｌ）の撹拌溶液に、不活性雰囲気下に、オクチルアニリン（０．７３８ｍｍｏｌ）を添加し、次いで撹拌を１時間継続した。飽和水性重炭酸ナトリウムを次いで添加し、存在する酢酸を中和した。この水性溶液を次いで、酢酸エチル（３ｘ１５ｍｌ）により抽出し、集めた有機抽出液を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで濃縮し、最終生成物（１００％）を黄色固形物として得た。この生成物はさらに精製することなく使用した。Ｒｆ＝０．４８（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１３０】
アセチル化アニリンのニトロ化：酢酸（１．０８ｍｌ）、無水酢酸（０．７３ｍｌ）および硝酸（０．２０ｍｌ）の撹拌溶液に、不活性雰囲気下に−１５℃において、約１ｍｌの酢酸中のアセチル化アニリン（０．９１ｍｍｏｌ）を３時間かけて添加した。この反応混合物を定期的に０℃に加温し、凍結を回避した。この反応混合物をさらに１時間にわたり撹拌し、次いで酢酸エチル（１０ｍｌ）により稀釈し、次いで１Ｍ  ＮａＯＨおよび飽和水性重炭酸ナトリウムを用い中和した。この有機層を分離し、また水性層は酢酸エチル（それぞれ１０ｍｌ）により２回以上、洗浄した。有機層を集め、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで濃縮し、黄色固形物を得た。９５：５ＣＨＣｌ3／アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物（１００％）を黄色固形物として得た。Ｒｆ＝０．６８（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１３１】
アニリンの脱アセチル化：エタノール（２．５ｍｌ）中のニトロ化されたアセチル化アニリン（０．６２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、不活性雰囲気下に、４０％ＫＯＨ（０．１３ｍｌ）を添加した。この反応混合物を次いで、１時間にわたり加熱還流させた。この溶液を次いで、氷冷却させ、次いで濃ＨＣｌを用いｐＨ＝６にした。この混合物を次いで、オレンジ色固形物に濃縮し、次いでエーテル（１０ｍｌ）に再溶解させ、次いで飽和水性重炭酸ナトリウム（２ｘ１０ｍｌ）およびブライン（１ｘ１０ｍｌ）で洗浄した。この有機層を次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで濃縮し、最終生成物（８４％）をオレンジ色固形物として得た。この生成物は、さらに精製することなく使用した。Ｒｆ＝０．８２（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１３２】
ニトロ基の還元：酢酸（５ｍｌ）中のニトロ化アニリン（０．２４８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、触媒量のアエン末を添加し、次いで撹拌を不活性雰囲気下に一夜にわたり継続した。この反応混合物を次いで、エーテルにより稀釈し、次いで不活性雰囲気下にエーテル溶出を用いセライトプラグに通し濾過した。このエーテル溶液は空気にさらされないように注意しなければならない。この溶液を次いで、濃縮し、最終生成物（９２％）を帯赤褐色油状物として得た。この生成物は、さらに精製することなく引続く工程で直接に使用した。Ｒｆ＝０．０５（９５：５ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１３３】
ジアミンと保護セリンとのカプリング：ＣＨ2Ｃｌ2  （２５ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ−（Ｄ）−セリン−ＯＢｎ（０．９９９ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（０．９９９ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．９９９ｍｍｏｌ）の溶液を、不活性雰囲気下に５分間にわたり撹拌し、次いでカニューレを用い、ジアミン（０．９９９ｍｍｏｌ）含有フラスコに導入した。この反応混合物を次いで、１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、酢酸エチル（３０ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ３０ｍｌ）、アンモニウムクロライド（３ｘ３０ｍｌ）、および最後にブライン（１ｘ３０ｍｌ）により洗浄し、次いでこの有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を減圧で除去し、褐色油状物を得た。この油状生成物を、９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフイに付し、最終生成物（１７％）を褐色油状物として得た。Ｒｆ＝０．５２（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１３４】
結合した生成物のベンジル脱保護：２００プルーフエタノール（１０ｍｌ）中の結合した生成物（０．１６７ｍｍｏｌ）および触媒量のギ酸の溶液に、触媒量の活性炭上パラジウムを添加した。生成する溶液に、正圧の水素ガスを適用し、この反応混合物を１２時間にわたり撹拌した。この反応混合物を次いで、セライトプラグに通し、メタノールで溶出して濾過し、次いで溶媒を減圧で除去し、粗生成物を黄褐色油状物として得た。９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトンを用いる調製プレート薄層クロマトグラフイに付し、最終生成物（５７％）を黄褐色／白色固形物として得た。Ｒｆ＝０．０８（９０：１０ＣＨＣｌ3／アセトン）。
【０１３５】
遊離アルコールを提供する脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2（０．５ｍｌ）中のＮ−Ｂｏｃ保護アルコール（０．００８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸（０．５ｍｌ）を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物（１００％）を黄褐色固形物として得た。Ｒｆ＝０．２（９０：１０ＣＨＣｌ3／メタノール）。
【０１３６】
Ｎ−Ｂｏｃ保護アルコールのホスホリル化：ホスホリル化用反応は、光の不存在下に行い、仕上げ処理およびカラムはできるだけ僅かな光を用い完了させた。１：１ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（５ｍｌ）中のアルコール（０．０８５ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラゾール（０．１７０ｍｍｏｌ）を添加し、生成する混合物を３０分間にわたり撹拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジ−イソプロピルホスホルアミダイド（０．１７０ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する反応混合物を１５時間にわたり撹拌した。過酸化水素（０．３４０ｍｍｏｌ）を次いで、添加し、生成する混合物を４時間にわたり撹拌し、０℃に冷却させ、次いで水性Ｎａ2Ｓ2Ｏ5の添加により反応停止させた。生成する溶液を酢酸エチル（１０ｍｌ）により稀釈し、次いで重炭酸ナトリウム（３ｘ１０ｍｌ）、アンモニウムクロライド（３ｘ１０ｍｌ）、および最後にブライン（１ｘ１０ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、次いで溶媒を減圧で除去し、生成物を得た。
【０１３７】
Ｎ−Ｂｏｃおよびホスフェート基の脱保護：ＣＨ2Ｃｌ2中の保護されている生成物の撹拌溶液に、トリフルオロ酢酸を添加し、撹拌を４時間にわたり継続した。減圧下に、溶媒および過剰のトリフルオロ酢酸を分離し、褐色油状物を得た。この油状物をエーテルですすぎ、次いで溶媒を減圧で５回、分離し、生成物を得た。
【０１３８】
例２
Ｓ１Ｐ活性を測定するための［γ−35Ｓ］ＧＴＰ結合性分析
ＨＥＫ２９３Ｔ細胞におけるトランジェント（ｔｒａｎｓｉｅｎｔ）発現
ヒトまたはマウスＳ１Ｐ５ＤＮＡを、等量のラットα２Ｒタンパク質をコードするＤＮＡおよびウシβ１およびγ２タンパク質をコードするＤＮＡと混合し、リン酸カルシウム沈殿法を用いＨＥＫ２９３Ｔ細胞の単層のトランスフェクションに使用した。６０時間後、細胞を採取し、ミクロソームを調製し、分配し、次いで使用時まで−７０℃で保存した。
【０１３９】
［γ−35Ｓ］ＧＴＰ結合性
簡単に説明すると、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を発現するＳ１Ｐからの膜５μｇを、サポニン５μｇ、１０μＭ  ＧＤＰ、０．１ｍＭ  ［γ−35Ｓ］ＧＴＰ（１２００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）および被験脂質を含有する結合緩衝液０．１ｍｌ（ｍＭ単位で、ＨＥＰＥＳ  ５０、ＮａＣｌ  １００、ＭｇＣｌ2 ５）（ｐＨ７．５）中でインキュベートした。３０℃で３０分間のインキュベーション後、結合した放射性核を、Ｂｒａｎｄｅｌ  Ｃｅｌｌ  Ｈａｖｅｓｔｅｒ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）を用いるＷｈａｔｍａｎ  ＧＦ／Ｃペーパーに通して濾過することによって遊離状態から分離した。
【０１４０】
ＲＨ７７７７細胞における安定発現
ラット肝癌ＲＨ７７７７細胞単層を、リン酸カルシウム沈殿法を用いるヒトまたはマウスＳ１Ｐ５／ｐＣＲ３．１ＤＮＡによりトランスフェクションし、次いでネオマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子を発現するクローン集団を、培地へのＧｅ−ネチシン（ｎｅｔｉｃｉｎ）（Ｇ４１８）の添加により選択した。ＲＨ７７７７を、９０％ＭＥＭ、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭグルタミンおよび１ｍＭピルビン酸ナトリウムからなる成長培地において５％ＣＯ2／９５％空気雰囲気で３７℃において単層に成長させた。
【０１４１】
ｃＡＭＰ蓄積の測定
ｃＡＭＰ蓄積分析を、従来開示されているとおりに行った（Ｉｍ等によるＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５，１４２８１−１４２８６（２０００年）、この記載をここに組入れる）。分析は、ホスホジエステラーゼインヒビターであるイソメチルブチルキサンチン（ＩＢＭＸ，１ｍＭ）の存在下に１５分間、１μＭホルスコリン（ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ）で刺激された５ｘ１０3細胞集団で行った。ｃＡＭＰは、自動式放射性免疫検定法により測定した。ＧＴＰγＳ研究は、ゼブラフィッシュＳ１Ｐ１過剰発現ラットＲＨ７７７７およびヒトｈＳ１Ｐ１、ｈＳ１Ｐ２、ｈＳ１Ｐ３およびｈＳ１Ｐ５過剰発現ヒトＨＥＫ２９３細胞を用いて行った。表１は、Ｓ１Ｐレセプター：Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｓ１Ｐ３およびＳ１Ｐ５における各Ｓ１Ｐ類縁化合物にかかわるＥＣ50値を示している。ヒトＳ１Ｐレセプター（ｈＳ１Ｐ１、ｈＳ１Ｐ２、ｈＳ１Ｐ３およびｈＳ１Ｐ５）の試験に加えて、ゼブラフィッシュＳ１Ｐレセプター（ｚＳ１Ｐ１）およびマウスＳ１Ｐ（ｍＳ１Ｐ５）をまた、試験した。
【０１４２】
2004529100.tif 000027
【０１４３】
１〜５５ｎＭのＥＣ50値を有する各レセプターにおいて、Ｓ１ＰはＧＴＰγＳ結合性を増加させる（２−５倍）。合成系は下記一般式で表わされる５種のジヒドロＳ１Ｐからなる：
2004529100.tif 000028
【０１４４】
式中、
ＶＰＣ２２０４１（２Ｓ）：Ｒ1はＮＨ（ＣＨ2）11ＣＨ3であり、Ｒ2はＮＨ2であり、およびＲ3はＨである；
ＶＰＣ２２０５３（２Ｓ）：Ｒ1はＯ（ＣＨ2）13ＣＨ3であり、Ｒ2はＮＨ2であり、およびＲ3はＨである；
ＶＰＣ２２０５１（２Ｓ）：Ｒ1はＮＨ（ＣＨ2）13ＣＨ3であり、Ｒ2はＮＨ2であり、およびＲ3はＨである；
ＶＰＣ２２０６３（２Ｓ）：Ｒ1はＮＨ（ＣＨ2）15ＣＨ3であり、Ｒ2はＮＨ2であり、およびＲ3はＨである；および
ＶＰＣ２２１３５（２Ｒ）：Ｒ1はＮＨ（ＣＨ2）13ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、およびＲ3はＮＨ2である。
【０１４５】
炭素１２（ＶＰＣ２２０４１）、１４（ＶＰＣ２２０５３）、または１６（ＶＰＣ２２０６３）を有するアルキル鎖および２´−アミノ基を含有するアミド含有化合物は、ＶＰＣ２２１３５（この場合、２´−アミノは（Ｒ）配置であった）を除き、天然配置（Ｓ）であった。ＶＰＣ２２０５３およびＶＰＣ２２１３５は、１対のエナンチオマーであり、他方、ＶＰＣ２２０５１はＶＰＣ２２０５３のエステル含有均等化合物である（スキーム４参照）。これらの化合物の全部は、各Ｓ１Ｐレセプターにおいて格別のアゴニスト活性を有していたが、Ｓ１Ｐそれ自体と同様の効力を有するものはなかった（表１参照）。特に、Ｓ１Ｐ５トランスフェクションＨＥＫ２９３細胞において、５種の偽装化合物が約１μＭのＥＣ50値を示した。一方、Ｓ１Ｐそれ自体のＥＣ50は１０ｎＭに近い。
【０１４６】
しかしながら、１種の化合物ＶＰＣ２２１３５は、ヒトＳ１Ｐ１およびヒトＳ１Ｐ３レセプターの両方でＳ１Ｐの効力に達した。この化合物が、非天然（Ｒ）配置でアミノ基を有することは注目される。そのエナンチオマーであるＶＰＣ２２０５３はＳ１Ｐ１およびＳ１Ｐ３レセプターの両方において、１ｌｏｇ順位以上低い効力を有していた。Ｓ１Ｐ１トランスフェクションＲＨ−７７７７細胞について得られた結果は、炭素１６個および２０個の幹鎖を有する偽装化合物に比較し、炭素１８個の幹鎖を有する偽装化合物（Ｓ１Ｐと同一）が結合にかかわる優性を有することを示している。
【０１４７】
例３
合成された偽装化合物の生物学的分析
追加の一連の化合物を、例２およびＩｍ等によるＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５，１４２８１−１４２８６（２０００年）（この記載をここに組入れる）に記載のＧＴＰγＳ結合性分析法を用い試験した。ヒトＳ１Ｐレセプター（ｈＳ１Ｐ１、ｈＳ１Ｐ２、ｈＳ１Ｐ３、ｈＳ１Ｐ４およびｈＳ１Ｐ５）における結合について試験された化合物は下記一般構造を有する：
2004529100.tif 000029
【０１４８】
式中、
ＶＰＣ２３０１９：Ｒ5は（ＣＨ2）7ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はホスフェートである；
ＶＰＣ２３０３１：Ｒ5は（ＣＨ2）7ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はホスフェートである；
ＶＰＣ２３０６５：Ｒ5は（ＣＨ2）9ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はヒドロキシである；
ＶＰＣ２３０６９：Ｒ5は（ＣＨ2）9ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はホスフェートである；
ＶＰＣ２３０７５：Ｒ5は（ＣＨ2）8ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はヒドロキシである；
ＶＰＣ２３０７９：Ｒ5は（ＣＨ2）8ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はホスフェートである。
【０１４９】
または下記一般構造を有する：
2004529100.tif 000030
式中、
ＶＰＣ２３０８７：Ｒ5は（ＣＨ2）7ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はヒドロキシである；
ＶＰＣ２３０８９：Ｒ5は（ＣＨ2）7ＣＨ3であり、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＮＨ2であり、およびＲ4はホスフェートである。
【０１５０】
各被験化合物（ＶＰＣ２３０１９、２３０３１、２３０６５、２３０６９、２３０８７、２３０８９、２３０７５、２３０７９）は、Ｓ１Ｐ２レセプターにおける格別な活性を示すことに失敗した。化合物、ＶＰＣ２３０６５、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０７５は、一級アルコールであり、従ってホスフェート先頭基に欠けていた。さらに、これらの化合物中の数種は、Ｓ１Ｐレセプターにおける活性を示し（図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、３Ａ、３Ｂ、３Ｃおよび４Ｃ参照）、またこれらの化合物はそれぞれ、Ｓ１Ｐ４レセプターにおいて良好なアゴニスト活性を示した。
【０１５１】
ＧＴＰγＳ結合性分析は、ＶＰＣ２３０３１、ＶＰＣ２３０１９、ＶＰＣ２３０８９がＳ１Ｐ３レセプターの逆アゴニスト（アンタゴニスト）であるが（図１Ａおよび４Ａ参照）、この逆アゴニズムは、そのアルキル鎖長が炭素９個（ＶＰＣ２３０７９）または１０個（ＶＰＣ２３０６９）である場合、アゴニズムになる（図２Ａおよび３Ａ参照）ことを示した。
ＶＰＣ２３０８９およびＶＰＣ２３０１９は異性体であり、ＶＰＣ２３０８９化合物はオルトアルキル鎖を有し、またＶＰＣ２３０１９はメタ化合物である；両方の化合物において、そのアルキル鎖は炭素８個を有するが、驚くべきことに、オルトからメタに変化すると、Ｓ１Ｐ１におけるアンタゴニズムが実現される（図１Ａを競合曲線図５Ａと比較する）。
【図面の簡単な説明】
【０１５２】
【図１Ａ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０１９およびＶＰＣ２３０３１に対する応答について、Ｓ１Ｐ１レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。
【図１Ｂ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０１９およびＶＰＣ２３０３１に対する応答について、Ｓ１Ｐ３レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図１Ｃ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０１９およびＶＰＣ２３０３１に対する応答について、Ｓ１Ｐ２レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図１Ｄ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０１９およびＶＰＣ２３０３１に対する応答について、Ｓ１Ｐ４レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図１Ｅ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０１９およびＶＰＣ２３０３１に対する応答について、Ｓ１Ｐ５レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図１Ｆ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０１９およびＶＰＣ２３０３１に対する応答について、Ｓ１Ｐ３レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図２Ａ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０６５およびＶＰＣ２３０６９に対する応答について、Ｓ１Ｐ１レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。
【図２Ｂ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０６５およびＶＰＣ２３０６９に対する応答について、Ｓ１Ｐ３レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図２Ｃ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０６５およびＶＰＣ２３０６９に対する応答について、Ｓ１Ｐ２レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図２Ｄ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０６５およびＶＰＣ２３０６９に対する応答について、Ｓ１Ｐ４レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図２Ｅ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０６５およびＶＰＣ２３０６９に対する応答について、Ｓ１Ｐ５レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図３Ａ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０７５およびＶＰＣ２３０７９に対する応答について、Ｓ１Ｐ１レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。
【図３Ｂ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０７５およびＶＰＣ２３０７９に対する応答について、Ｓ１Ｐ３レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図３Ｃ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０７５およびＶＰＣ２３０７９に対する応答について、Ｓ１Ｐ２レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図３Ｄ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０７５およびＶＰＣ２３０７９に対する応答について、Ｓ１Ｐ４レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図３Ｅ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０７５およびＶＰＣ２３０７９に対する応答について、Ｓ１Ｐ５レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図４Ａ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８９に対する応答について、Ｓ１Ｐ１レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。
【図４Ｂ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８９に対する応答について、Ｓ１Ｐ３レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図４Ｃ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８９に対する応答について、Ｓ１Ｐ２レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図４Ｄ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８９に対する応答について、Ｓ１Ｐ４レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図４Ｅ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８９に対する応答について、Ｓ１Ｐ５レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図５Ａ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８７およびＶＰＣ２３０８７＋Ｓ１Ｐに対する応答について、Ｓ１Ｐ１レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフである。
【図５Ｂ】Ｓ１Ｐ、ＶＰＣ２３０８９およびＶＰＣ２３０８９＋Ｓ１Ｐに対する応答について、Ｓ１Ｐ３レセプター含有ＨＥＫ２９３Ｔ細胞膜に対する［γ−３５Ｓ］ＧＴＰ結合性を示すグラフであり、各データ点は、３回の試験の平均値を表わす。
【図１Ａ】
2004529100.tif 000045
【図１Ｂ】
2004529100.tif 000046
【図１Ｃ】
2004529100.tif 000047
【図１Ｄ】
2004529100.tif 000048
【図１Ｅ】
2004529100.tif 000049
【図１Ｆ】
2004529100.tif 000050
【図２Ａ】
2004529100.tif 000051
【図２Ｂ】
2004529100.tif 000052
【図２Ｃ】
2004529100.tif 000053
【図２Ｄ】
2004529100.tif 000054
【図２Ｅ】
2004529100.tif 000055
【図３Ａ】
2004529100.tif 000056
【図３Ｂ】
2004529100.tif 000057
【図３Ｃ】
2004529100.tif 000058
【図３Ｄ】
2004529100.tif 000059
【図３Ｅ】
2004529100.tif 000060
【図４Ａ】
2004529100.tif 000061
【図４Ｂ】
2004529100.tif 000062
【図４Ｃ】
2004529100.tif 000063
【図４Ｄ】
2004529100.tif 000064
【図４Ｅ】
2004529100.tif 000065
【図５Ａ】
2004529100.tif 000066
【図５Ｂ】
2004529100.tif 000067
【国際公開パンフレット】
2004529100.tif 000068
2004529100.tif 000069
2004529100.tif 000070
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2004529100.tif 000072
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2004529100.tif 000080
2004529100.tif 000081
2004529100.tif 000082
2004529100.tif 000083
2004529100.tif 000084
2004529100.tif 000085
2004529100.tif 000086
2004529100.tif 000087
2004529100.tif 000088
2004529100.tif 000089
2004529100.tif 000090
2004529100.tif 000091
2004529100.tif 000092
2004529100.tif 000093
2004529100.tif 000094
2004529100.tif 000095
2004529100.tif 000096
2004529100.tif 000097
2004529100.tif 000098
2004529100.tif 000099
2004529100.tif 000100
2004529100.tif 000101
2004529100.tif 000102
2004529100.tif 000103
2004529100.tif 000104
2004529100.tif 000105
2004529100.tif 000106
2004529100.tif 000107
2004529100.tif 000108
2004529100.tif 000109
2004529100.tif 000110
2004529100.tif 000111
2004529100.tif 000112
2004529100.tif 000113
2004529100.tif 000114
2004529100.tif 000115
2004529100.tif 000116
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2004529100.tif 000118
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2004529100.tif 000129
2004529100.tif 000130
2004529100.tif 000131
2004529100.tif 000132
2004529100.tif 000133
2004529100.tif 000134
2004529100.tif 000135
2004529100.tif 000136
2004529100.tif 000137
2004529100.tif 000138
2004529100.tif 000139
2004529100.tif 000140
2004529100.tif 000141
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004529100.tif 000142
【手続補正書】
【提出日】平成14年10月1日(2002.10.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
2004529100.tif 000143
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルであり；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ5は、ヒドロキシ、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数である；
で表わされる化合物。
【請求項２】
式：
2004529100.tif 000144
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルまたは−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6であり；
Ｒ5は、ヒドロキシ、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１であり；
Ｒ17は、Ｈであり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールであり；および
Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルまたはＣ1−Ｃ20アルコキシである；
で表わされる化合物。
【請求項３】
Ｒ1は、
2004529100.tif 000145
であり；
Ｒ5は、ヒドロキシであり；
ｎは、０であり；および
Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルである；
請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
式：
2004529100.tif 000146
各式中、
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ1−Ｃ18アルケニル、Ｃ1−Ｃ18アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
Ｒ4は、ヒドロキシ、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される；
で表わされる化合物。
【請求項５】
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ18アルキルであり；
Ｒ8は、Ｎであり；
ｍは、０であり；および
ｙは、１である；
請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ4がヒドロキシまたはホスフェートである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
式：
2004529100.tif 000147
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ5は、ヒドロキシ、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；および
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択される；
で表わされる化合物および医薬上で許容される担体を含有する組成物。
【請求項８】
Ｓ１Ｐレセプター調節性化合物であって、この化合物が式：
2004529100.tif 000148
式中、
Ｒ9は、−ＮＨＲ1および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび
2004529100.tif 000149
（式中、Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルおよびＣ1−Ｃ20アルコキシからなる群から選択される）からなる群から選択され；
Ｒ10は、ヒドロキシまたはホスフェートである；
で表わされる化合物である、上記化合物。
【請求項９】
リソ−脂質ホスフェートホスファターゼ耐性Ｓ１Ｐ類縁化合物であって、このアゴニストが、式：
2004529100.tif 000150
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；および
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択される；
で表わされる、上記Ｓ１Ｐ類縁化合物。
【請求項１０】
Ｓ１Ｐレセプターの活性を調節する方法であって、上記レセプターを下記一般構造で表わされる化合物と接触させる段階を包含する、上記方法：
2004529100.tif 000151
各式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1Ｒ17および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニル、置換されていてもよいアリールおよび置換されていてもよいヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ11は、Ｃ1−Ｃ18アルキル、Ｃ1−Ｃ18アルケニルおよびＣ1−Ｃ18アルキニルからなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の範囲の整数であり；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択され；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される。
【請求項１１】
Ｒ9は、−ＮＲ1Ｒ17であり；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび
2004529100.tif 000152
（式中、Ｒ6は、Ｃ1−Ｃ10アルキルおよびＣ1−Ｃ20アルコキシからなる群から選択される）からなる群から選択され；および
ｙは、１である；
請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
免疫調節を必要とする患者に対し免疫調節性を付与する方法であって、下記一般式で表わされる化合物および医薬上で許容される担体を含有する組成物を当該患者に投与する段階を包含する、上記方法：
2004529100.tif 000153
各式中、
Ｒ9は、−ＮＲ1Ｒ17および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ8−Ｃ22アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）および−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリールオキシアリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）からなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2であり；
ｙは、１〜１０の範囲の整数であり；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｍは、０〜４の範囲の整数であり；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される。
【請求項１３】
シクロスポリン、タクロリムス、アザチオプリン、プレドニソロンおよびプレドニソンからなる群から選択される第二の免疫調節剤を投与する段階をさらに包含する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
化合物が、一般式：
2004529100.tif 000154
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ここで、ｎは０−１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨおよびＣ1−Ｃ6アルキルからなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも１方は、ＮＨ2であり；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される；
である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
化合物が一般式：
2004529100.tif 000155
各式中、
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される；
を有する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
一般構造：
2004529100.tif 000156
式中、
Ｒ1は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキル（置換されていてもよいアリール）、アリールアルキルおよびアリールアルキル（置換されていてもよい）アリールからなる群から選択され；
Ｒ12は、Ｏであるか、またはＲ1とＲ12とは一緒になって、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールを形成しており；
Ｒ17は、Ｈ、アルキルまたはアルキルアリールであり；
Ｒ18は、ＮまたはＣＨであり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨおよび−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＮＨ2からなる群から選択され；
ｙは、１〜１０の整数であり；および
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択される；
を有する化合物またはその医薬として許容される塩および医薬上で許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項１７】
アルブミンをさらに含有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ここで、ｎは０−１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ12は、Ｏであり；
Ｒ17は、Ｈ、アルキルまたはアルキルアリールであり；
Ｒ18は、ＮまたはＣＨであり；
ｙは、１または２であり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨおよびＣ1−Ｃ6アルキルからなる群から選択され；および
Ｒ4は、ヒドロキシおよびホスフェートからなる群から選択される；
請求項１６に記載の組成物。
【請求項１９】
化合物が、一般構造：
2004529100.tif 000157
各式中、
Ｒ1は、Ｃ1−Ｃ12アルキルであり；
Ｒ4は、ヒドロキシル、ホスフェート、ホスホネート、メチレンホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；および
Ｒ7およびＲ8は独立し、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される；
を有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２０】
一般構造：
2004529100.tif 000158
式中
Ｒ9は、−ＮＲ1Ｒ17および−ＯＲ1からなる群から選択され；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
ここで、ｎは０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
およびＲ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ10アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ17は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ4アルキルおよび（ＣＨ2）アリールからなる群から選択され；
Ｒ2およびＲ3は独立し、Ｈ、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ４アルキル）ＮＨ2、−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）および−（Ｃ1−Ｃ4アルキル）アリールオキシアリール（Ｃ0−Ｃ4アルキル）からなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2であり；
ｙは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｒ14は、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択され；および
Ｒ15およびＲ16は独立し、Ｈ、ヒドロキシル、アミノ、ＣＯＯＨ、ハロまたは−ＰＯ3からなる群から選択されるか、またはＲ15およびＲ16は一緒になって、ケト基またはメチレン基を形成している；
を有する脂質ホスフェートホスファターゼ耐性Ｓ１Ｐ類縁化合物。
【請求項２１】
Ｒ9は、−ＮＨＲ1であり；
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキルまたは−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6であり；
Ｒ2およびＲ3は独立し、ＨおよびＮＨ2からなる群から選択され、ただしＲ2およびＲ3の少なくとも一方は、ＮＨ2であり；
ｙは、０または１であり；
Ｒ15およびＲ16は独立に、Ｈまたはヒドロキシルであり；および
Ｒ14は、Ｏである；
請求項２０に記載の化合物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
式中、
Ｒ1は、Ｃ8−Ｃ22アルキル、Ｃ8−Ｃ22アルケニル、Ｃ8−Ｃ22アルキニルおよび−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6からなる群から選択され；
Ｒ5は、ヒドロキシル、ホスホネート、α−置換メチレンホスホネート、ホスフェート類縁体およびホスホネート類縁体からなる群から選択され；
ｙは、１〜４の範囲の整数であり；
ｎは、０〜１０の範囲の整数であり；
Ｚは、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；および
Ｒ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ12アルキル、Ｃ1−Ｃ20アルコキシ、Ｃ1−Ｃ20アルキルチオおよびＣ1−Ｃ20アルキルアミノからなる群から選択される。
もう一つの態様において、Ｒ1はＣ8−Ｃ22アルキルまたは−（ＣＨ2）n−Ｚ−Ｒ6であり、ｙは１であり、Ｒ17はＨであり、Ｚはアリールであり、およびＲ6はＣ1−Ｃ10アルキルまたはＣ1−Ｃ20アルコキシである。


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４３】
１〜５５ｎＭのＥＣ50値を有する各レセプターにおいて、Ｓ１ＰはＧＴＰγＳ結合性を増加させる（２−５倍）。合成系は下記一般式で表わされる５種のジヒドロＳ１Ｐからなる：
2004529100.tif 000159
【国際調査報告】
2004529100.tif 000160
2004529100.tif 000161
2004529100.tif 000162