(57)【要約】式(I)：【化１】2004537518.tif 000024［ここで、LおよびKはOまたはSであり、Qはリンカー、例えば-O-、-S-、C(=O)などであり、R1はアリールまたはヘテロアリール基であり、R3、R4a、R4c、Z、r、s、およびtは明細書中の記載と同意義である。]で示されるウラゾール化合物またはその医薬的に許容される塩は抗炎症剤または免疫抑制剤として有効である。
2004537518.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2004537518.tif 000021
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩
［式中、LおよびKは独立してOまたはSである;
Qは、-0-、-NR2-、-S-、-C(=O)-、-CO2-、-OC(=O)、-NR2C(=O)-、-C(=O)NR2-、-NR2CO2-、C1-4アルキレン、C1-4置換アルキレン、C1-4アルケニレン、C1-4置換アルケニレン、または所望により置換された二価C1-4アルコキシ、C1-4アルキルチオ、C1-4アミノアルキル、C0-4スルホニル、C0-4スルホンアミド、C1-4アシル、またはC1-4アルコキシカルボニル;
ZはNまたはCR4bである;
R1は、-(CH2)nアリールおよび-(CH2)ヘテロアリールから選ばれる(ここで、アリールおよびヘテロアリール基は所望により置換される。);
R2は水素またはC1-4アルキルである;
R3は環Aのあらゆる利用な炭素原子と結合し、それぞれ独立してハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、ニトロ、S(O)qR8、NR8SO2R9、SO2NR8R9、A1-CN、A1-OR8、A1-NR8R9、A1-C(=O)R8、A1-OC(=O)R8、A1-OC(=O)NR8R9、A1-NR8C(=O)R9、A1-NR8C(=O)OR9、A2-CO2R8、およびA2-C(=O)NR8R9から選ばれるか、またはR3がQ-R1置換炭素原子以外の炭素原子と結合している場合はR3はオキソ(=O)であってよい;
A1は、結合、-C1-4アルキレン-、-NHC(=O)-、または-NHC(=O)C1-4アルキレン-である;
A2は、結合、-C1-4アルキレン-、-NHC(=O)-、-NHC(=O)C1-4アルキレン-、-C(=O)-、または-C(=O)C1-4アルキレン-である;
R4a、R4b、およびR4cは、独立して水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、ニトロ、シアノ、OR6、NR6R7、NR6C(=O)R7、CO2R6、C(=O)R6、-C(=O)NR6R7、および所望により置換されたアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロアリールである;
R6およびR7は、(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、アミノアルキル、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか、または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成する;
R8およびR9は(i)それぞれ独立して選ばれ水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルコキシ、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか(ただし、R8はS(=O)R8またはS(O)2R8のようにスルホニル基と結合しているときは水素ではない。)、または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成する;
nは、0、1、2、3、または4である;
qは、0、1、または2である;
rおよびsは0、1、または2である(ただし、rおよびsは環Aが4〜7員の飽和モノサイクリックヘテロシクロとなるように、両方が0であることはない。)；
tは0、1,または2である。]。
【請求項２】
R3がQ-R1置換炭素原子と結合し；
Qが-0-、-NH-、-S-、-OC(=O)、-NHC(=O)-、または-NHCO2-であり;
A1およびA2は結合およびC1-4アルキレンから選ばれる請求項1記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
R4aおよびR4cが共にハロゲンである請求項2記載の化合物。
【請求項４】
R1が非置換アリール、またはハロゲン、アルキル、ハロアルキル、ニトロ、シアノ、OR10、NR10R11、CO2R10、C(=O)R10、C(=O)NR10R11、NR10C(=O)R11、NR10C(=O)OR11、S(O)pR10、NR10SO2R11、SO2NR10R11、アリール、シクロアルキル、およびヘテロアリールから選ばれる1または2個の置換基を有するアリールであり;
R10およびR11が(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか、または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成し;
pが0、1、または2である請求項1記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
R4aおよびR4cがハロゲンであり、ZがCHである請求項1記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
Qが-OC(=O)-または-O(CH2)1-2-であり、R1がハロゲン、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシ、C1-4アルコキシ、-CO2H、-C(=O)H、アミノ、およびC1-4アミノアルキルから選ばれる1または2個の置換基で所望により置換されたフェニルである請求項1記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
式：
【化２】
2004537518.tif 000022
［式中、R4aおよびR4cはハロゲンである。R5は水素、ハロゲン、アルキル、トリフルオロメチル、OCF3、ニトロまたはシアノである。rは0または1である。］
で示される請求項3記載の化合物。
【請求項８】
(i) 6-[(4-ブロモフェニル)メトキシ]-2-(3,5-ジクロロフェニル)-ジヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-1,3-ジオン;
4-ブロモ安息香酸 2-(3,5-ジクロロフェニル)-1,3-ジオキソ-テトラヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-6-イル エステル;
6-[(4-シアノフェニル)メトキシ]-2-(3,5-ジクロロフェニル)-ジヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-1,3-ジオン;
4-シアノ安息香酸 2-(3,5-ジクロロフェニル)-1,3-ジオキソ-テトラヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-6-イル エステルから選ばれる請求項1記載の化合物、および
(ii)その医薬的に許容される塩。
【請求項９】
式：
【化３】
2004537518.tif 000023
で示される化合物、またはその医薬的に許容される塩
［式中、Qは-O-、-OC(=O)、または所望により置換された二価C1-4アルコキシである;
ZはNまたはCR4bである;
R1は、水素、アルキルシリル、またはハロゲン、C1-4アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、シアノ、およびニトロから選ばれる1または2個の置換基で所望により置換されたフェニルである;
R4a、R4b、およびR4cは、独立してハロゲン、C1-4アルキル、ハロアルキル、ハロアルコキシ、シアノ、およびニトロから選ばれる。］。
【請求項１０】
(a)少なくとも1つの請求項1記載の化合物またはその医薬的に許容される塩、および(b)医薬的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１１】
(i)少なくとも1つの請求項1の化合物またはその医薬的に許容される塩、(ii)1またはそれ以上の、炎症性疾患または免疫疾患の治療に有効な第二化合物、および(iii)医薬的に許容される担体を含む炎症性疾患または免疫疾患治療用の医薬組成物。
【請求項１２】
哺乳動物に治療的有効量の請求項1の化合物を投与することを含む哺乳動物のLFA-1/ICAM相互作用を阻害する方法。
【請求項１３】
哺乳動物の炎症性疾患または免疫疾患を治療するための請求項17記載の医薬組成物の使用。
【請求項１４】
炎症性疾患または免疫疾患が、性腺機能低下症、フレイルティー(frailty)、骨粗鬆症、性機能障害、消耗、貧血、乳房、脳、皮膚、卵巣、子宮内膜、膀胱、前立腺、肺、結腸、リンパ系、肝臓、および腎臓の癌、多毛症、アルツハイマー病、インスリン非依存性糖尿病、座瘡、脂漏症、脱毛症、類繊維腫、ハイパーピロシティー(hyperpilosity)、悪液質、多嚢胞性卵巣症候群、拒食症、避妊、薬物離脱症候群、妊娠中絶、および良性前立腺肥厚から選ばれる請求項13記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウラゾール化合物、それを含む医薬組成物、および該化合物を炎症性疾患または免疫疾患の治療に用いる方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞は種々の生物学的機能に重要な特異的な調節されたプロセスを介して物質および他の細胞に付着する。免疫系の正しい機能は付着性相補作用と細胞の遊走に依存する。免疫反応における鍵となる事象は、疾患部位への白血球の遊走を伴う。炎症反応中に、白血球は損傷部位に集まり、細胞-細胞および細胞-物質付着を含む一連の細胞相互作用により遊出する。
【０００３】
重要な付着機能を担う分子の1ファミリーにインテグリンがある。インテグリンは細胞表面に発現し、細胞-細胞および細胞-物質付着に働く。インテグリンはα-βヘテロダイマーであり、各インテグリンはベータ(β)サブユニットと非共有結合したアルファ(α)サブユニットを有する。活性化するとインテグリンは細胞外リガンドと結合し、付着を誘導する(インテグリンが細胞表面で発現するだけでは付着に不十分であり、活性化して付着性になる必要がある。)。インテグリン活性化状態は一過性であり、細胞移動に重要な付着状態と非付着状態の急速な絶え間ない変化があり、細胞は種々の細胞表面およびマトリックスに速やかに付着し、細胞および組織間を遊走する能力を与えられる。
【０００４】
CD11/CD18インテグリンサブファミリー、すなわちリンパ球機能関連抗原1(LFA-1)(CD11a/CD18またはαLβ2); マクロファージ抗原1(Mac-1)(CD11b/CD18またはαMβ2)；p150,95(CD11c/CD18または(αXβ2);およびαDβ2を含むβ2またはCD18サブユニットを有する4つのインテグリンが知られている。インテグリンのCD11/CD18ファミリーは、種々の白血球細胞の表面に発現し、多くの炎症関連細胞相互作用をもたらすのでロイコインテグリンとも呼ばれる。Diamondら、「The Dynamic Regulation of Integrin Adhesiveness」、Current Biology、Vol.4(1994)、pp.506-532参照。
【０００５】
LFA-1およびMac-1に対するリガンドは、細胞間付着分子(ICAM)ICAM-1を含む。初期CD11/CD18インテグリンのLFA-1はICAM-2およびICAM-3にも結合する。ICAMは、内皮細胞、白血球、および他の細胞種上にみられ、そのCD11/CD18インテグリンとの相互作用は免疫系の機能に重要である。CD18インテグリン、特にLFA-1およびICAM間の相互作用は、抗原提示、T細胞増殖、および白血球が循環系から組織内に遊走するのに必要な内皮と活性化白血球の付着をもたらす。「白血球付着不全」と呼ばれる病状は、CD18インテグリンの重度の不全を有する患者に確認された。この患者は、正常な炎症反応または免疫反応を生じることができず、感染の再発、創傷治癒の不良、顆粒球増多症、進行性歯周炎、および臍帯分離といった障害に罹患する。Andersonら、「Leukocyte LFA-1、OKMI、p150、95 Deficiency Syndrome: Functional and Biosynthesis Studies of Three Kindreds」、Fed. Proc.、Vol.44(1985)、pp. 2671-2677参照。
【０００６】
正常な免疫反応をもたらすにはICAMと相互作用する十分なレベルのCD18インテグリンが必要であるが、有意な細胞および組織損傷は白血球の疾患部位への不適切な流入がある慢性炎症状態を生じうる。慢性炎症状態におけるような白血球の血管から炎症組織への連続的補充は、組織損傷を持続させ、過剰な繊維性修復と自己免疫疾患をもたらす。すなわち、LFA-1および/またはMac-1とそのICAMとの相互作用の阻害は、炎症性疾患または免疫疾患の治療に有利でありうる。例えば、リウマチ性関節炎、炎症性腸疾患、および肺の炎症(例えば喘息)の動物モデルにおいて、ICAMまたはLFA-1をモノクローナル抗体でブロックすると白血球の組織内への遊走、次いで炎症性疾患の発現を抑制することがわかった。ICAM不全ノックアウトマウスは、誘導性関節炎、虚血損傷対する感受性の低下、肺炎症反応の低下、および移植(例えば心臓移植)に対するトレランスの増大を示す。Anderson(上記)参照。ICAM-LFA-1相互作用をブロックする抗体は、動物モデルで心臓同種(異系)移植拒絶およびアイレット細胞異種移植拒絶を抑制することが報告された。Gorski、「The Role of Cell Adhesion Molecules in Immunopathology」、Immunology Today、Vol.15(1994)、pp. 251-255参照。
【０００７】
CD18インテグリン、ICAM、および/またはLFA-1:ICAM相互作用を阻害する化合物は、炎症性疾患または免疫疾患の治療に広範囲の有用性が示される可能性がある。LFA-1のブロッキングは皮膚、腹膜、滑膜、肺、腎臓、および心臓を含むほとんどすべての系における白血球の流入を阻害し、ICAM-1のブロッキングは同様の効果を有すると予想される。また、多くの炎症性疾患または免疫疾患に対する現在の療法には欠点がある。効果が増大し、副作用が少ない薬剤を消費者に提供することは重要である。例えば、現在の喘息治療法は、β2-アゴニスト、吸入コルチコステロイド、およびLTD4アンタゴニストを含む。しかしながら、β2-アゴニストは効果が限られており、吸入コルチコステロイドは安全性の問題がある。乾癬を治療するための現在の療法には、PUVA、メトトレキセート、シクロスポリンA、および局所治療が含まれる。それら療法のうち最初の3つは長期(6-9カ月)使用にわたる毒性問題が生じ、局所治療は効果が限られている。さらに、典型的にはこれら治療は、突発に応じてのみ適用し、予防対策としては適用されない。
【０００８】
したがって、ロイコインテグリンまたはICAM抗体およびロイコインテグリンおよび/またはICAMのアンタゴニストの開発は大いに重要性がある。抗炎症剤として用いるLFA-1/ICAMを阻害することが報告されている化合物には、チアジアゾールベースの化合物(WO 99/20,618、「Thiadiazole Amides Useful as AntiInflammatory Agents」、出願人：Pharmacia & Upjohn Co.;およびWO 99/20,617、出願人：PharmaciaおよびUpjohn参照)；フェニルおよびピラゾール環と結合したチアゾール化合物(Sanfilippoら、「Novel Thiazole Based Heterocycles as Inhibitors of LFA-1/ICAM-1 Mediated Cell Adhesion」、J. Med. Chem. Vol.38(1995)、pp.1057-1059)が含まれる。ICAMとCD18インテグリンとの結合に対するアンタゴニストであることが報告されている低分子には、ベンジルアミンおよび2-ブロモベンゾイルトリプトファン化合物(WO 99/49,856、「Antagonists for Treatment of CD11/CD18 Adhesion Receptor Mediated Disorders」、出願人：Genentech、Inc.)、および1-(3,5-ジクロロフェニル)イミダゾリジン(W098/39303、「Small Molecules Useful in the Treatment of Inflammatory Disease」、出願人：Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals、Inc参照。Boehringerの特許出願、WO 01/07052、WO 01/07048、WO 01/07044、WO 01/06984、およびWO 01/07440も参照。)が含まれる。LFA-1/ICAMアンタゴニストとして有効なヒダントイン化合物は、米国特許出願60/250,486および60/250,653(出願日：2000年12月1日、本願と同じ発明者が出願し、本願の譲受人に譲渡)に記載されている。ヒダントイン化合物は、WO 01/30781 A2（公開日：2001年3月3日、出願人：Tanabe Seiyaku Co. Ltd、「Inhibitors of αLβ2 Mediated Cell Adhesion」）にも開示されている。
【０００９】
認識されるであろうように、医薬研究分野の当業者は、ロイコインテグリンおよび/またはICAMの阻害剤のような炎症性疾患または免疫疾患治療用の新規化合物および組成物を求め続けている。特に免疫反応の領域において、多くの個体は異なる薬剤に対する反応が異なる。すなわち、消費者に効果の増大と副作用の低下を示す医薬化合物および組成物、ならびに消費者に選択肢を与える異なる構造または作用機序を提供することに重要性がある。本発明はロイコインテグリンおよび/またはICAMのアンタゴニストとして有効なウラゾール化合物を指向する。除草剤として用いるウラゾール化合物はWO 00/13508（出願人：Ishihara Sangyo Kaisha、Ltd、公開日：2000年3月16日)に開示されている。WO 00/01700および米国特許5,109,014(除草剤または殺虫剤として有用なウラゾール化合物を開示)も参照のこと。
【００１０】
上記および下記の各特許、特許出願、および公開特許公報は本明細書の一部を構成する。
【００１１】
(発明の要約)
本発明は、式(I)：
【化１】
2004537518.tif 000003
で示される炎症性疾患または免疫疾患の治療に有用な化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する
［式中、LおよびKは独立してOまたはSである;
Qは、-0-、-NR2-、-S-、-C(=O)-、-CO2-、-OC(=O)、-NR2C(=O)-、-C(=O)NR2-、-NR2CO2-、C1-4アルキレン、C1-4置換アルキレン、C1-4アルケニレン、C1-4置換アルケニレン、または所望により置換された二価C1-4アルコキシ、C1-4アルキルチオ、C1-4アミノアルキル、C0-4スルホニル、C0-4スルホンアミド、C1-4アシル、またはC1-4アルコキシカルボニルである;
ZはNまたはCR4bである;
R1は、-(CH2)nアリールおよび-(CH2)ヘテロアリールから選ばれる(ここで、アリールおよびヘテロアリール基は所望により置換される。);
R2は水素またはC1-4アルキルである;
R3は環Aのあらゆる利用な炭素原子と結合し、それぞれ独立してハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、ニトロ、S(O)qR8、NR8SO2R9、SO2NR8R9、A1-CN、A1-OR8、A1-NR8R9、A1-C(=O)R8、A1-OC(=O)R8、A1-OC(=O)NR8R9、A1-NR8C(=O)R9、A1-NR8C(=O)OR9、A2-CO2R8、およびA2-C(=O)NR8R9から選ばれるか、またはR3がQ-R1置換炭素原子以外の炭素原子と結合している場合はR3はオキソ(=O)であってよい;
A1は、結合、-C1-4アルキレン-、-NHC(=O)-、または-NHC(=O)C1-4アルキレン-である;
A2は、結合、-C1-4アルキレン-、-NHC(=O)-、-NHC(=O)C1-4アルキレン-、-C(=O)-、または-C(=O)C1-4アルキレン-である;
R4a、R4b、およびR4cは、独立して水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、ニトロ、シアノ、OR6、NR6R7、NR6C(=O)R7、CO2R6、C(=O)R6、-C(=O)NR6R7、および所望により置換されたアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロアリールである;
R6およびR7は、(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、アミノアルキル、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか、または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成する;
R8およびR9は、(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルコキシ、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか、または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成する;
nは、0、1、2、3、または4である;
qは、0、1、または2である;
rおよびsは0、1、または2である(ただし、rおよびsは環Aが4〜7員の飽和モノサイクリックヘテロシクロとなるように、両方が0であることはない。)；
tは0、1,または2である。]。
【００１２】
本発明は、式(I)の化合物またはその医薬的に許容される塩、および医薬的に許容される担体もしくは希釈剤を含む免疫疾患または炎症性疾患の治療に有用な医薬組成物も指向する。本発明は、治療を必要とする患者に治療的有効量の式(I)の化合物を投与することを含む免疫疾患または炎症性疾患の治療方法も指向する。
【００１３】
(発明の詳細な説明)
以下は本明細書および添付の特許請求の範囲で用いる定義である。本明細書で基または用語について与えた最初の定義は、特記しない限り、個々にかまたは別の基の部分として、本明細書および特許請求の範囲全体の基および用語に適用する。
【００１４】
用語「アルキル」は、炭素数1〜12、好ましくは炭素数1〜8の直鎖および分岐鎖炭化水素基を表す。低級アルキル基、すなわち、炭素数1〜4個のアルキル基が最も好ましい。記号「C」の後に下付の番号がある場合は、下付き文字は特定の基が含む炭素原子数をより具体的に定義する。例えば、「C1-6アルキル」は炭素数1〜6の直鎖または分岐鎖アルキル基、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、n-ペンチルなどを表す。
【００１５】
用語「置換アルキル」は、以下からなる群から選ばれる1、2、または3個の置換基を有する上記アルキル基を表す：ハロ(例えば、トリフルオロメチル)、アルケニル、アルキニル、ニトロ、シアノ、アミノ、オキソ(=O)、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、-NH(アルキル)、-NH(シクロアルキル)、-N(アルキル)2、-NHSO2、-N(アルキル)SO2、-NHSO2(アルキル)、-NHSO2(アリール)、-N(アルキル)SO2(アルキル)、-N(アルキル)SO2(アリール)、-SO2(アルキル)、-SO2(アリール)、-SO2N(アリール)(アルキル)、-SO2N(アルキル)2、-CO2H、-C(=O)H、-CO2-アルキル、-C(=O)アルキル、-C(=O)アリール、-C(=O)NH2、-C(=O)NH(アルキル)、-C(=O)NH(シクロアルキル)、-C(=O)N(アルキル)2、-NH-CH2-CO2H-NH-CH(アルキル)-CO2H、-NH-CH2-CO2-アルキル、-NH-CH(アルキル)-CO2-アルキル、=N-OH、=N-O-アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキル(フェニル、ベンジル、フェニルエチル、フェニルオキシ、およびフェニルチオを含む)。置換アルキルがアリール、ヘテロシクロ、またはヘテロアリール置換基を含む場合は、該環系は以下のように定義され、下記のように0、1、2、または3個の置換基を有してよい。
【００１６】
用語「アルキル」を「アリールアルキル」のように別の基と一緒に用いる場合、この結合は置換アルキルを含むであろう少なくとも1個の置換基をより具体的に定義する。例えば、「アリールアルキル」は、置換基の1つがベンジルのようなアリールである上記置換アルキル基を表す。
【００１７】
用語「アルケニル」は、少なくとも1個の二重結合を有する炭素数2〜12の直鎖または分岐鎖炭化水素基を表す。1個の二重結合を有する炭素数2〜6のアルケニル基が最も好ましい。
【００１８】
用語「アルキニル」は、少なくとも1個の三重結合を有する炭素数2〜12の直鎖または分岐鎖炭化水素基を表す。1個の三重結合を有する炭素数2〜6のアルケニル基が最も好ましい。
【００１９】
用語「アルコキシ」は、アルキル鎖中に1、2、または3個の酸素原子(-O-)を有する上記アルキルまたは置換アルキルを表す。例えば、用語「アルコキシ」は、基-O-C1-12アルキル、-C1-6アルキレン-O-C1-6アルキル、-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキル、O-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキルなどを含む。
【００２０】
用語「チオアルキル」または「アルキルチオ」は、1またはそれ以上の硫黄(-S-)原子を介して結合した上記アルキルまたは置換アルキルを表す。例えば、用語「チオアルキル」または「アルキルチオ」は、基-S-C1-12アルキル、-S-C1-6アルキレン-S-C1-6アルキルなどを含む。
【００２１】
用語「アミノアルキル」は、1またはそれ以上の窒素(-NR-)原子を介して結合した上記アルキルまたは置換アルキル基を表す。例えば、用語「アミノアルキル」は、基-NR-C1-12アルキル、-NR-C1-6アルキレン-NR-C1-6アルキルなどを含む。(ここで、Rは水素が好ましいが、上記アルキルまたは置換アルキルを含んでいてよい。)アルコキシ、チオアルキル、またはアミノアルキルについて下付き文字を用いる場合は、下付き文字は該基がヘテロ原子に加えて含む炭素原子の数を表す。すなわち、例えば、一価C1-2アミノアルキルは、基-CH2-NH2、-NH-CH3、-(CH2)2-NH2、-NH-CH2-CH3、-CH2-NH2-CH3、および-N-(CH2)2を含む。低級アミノアルキルは、炭素数1〜4のアミノアルキルを含む。「アミノ」は基NH2を表す。
【００２２】
アルコキシ、チオアルキル、またはアミノアルキル基は一価または二価であってよい。「一価」は基の結合価(すなわち、別の基と結合する力)が1であることを意味し、「二価」は基の結合価が2であることを意味する。すなわち、例えば、一価アルコキシは、-O-C1-12アルキル、-C1-6アルキレン-O-C1-6アルキル、-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキルのような基を含み、二価アルコキシは-O-C1-12アルキレン-、-C1-6アルキレン-O-C1-6アルキレン-、-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキレン-O-C1-4アルキレン-などを含む。
【００２３】
用語「アシル」は、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、アミノアルキル、置換アルキル、置換アルケニル、または置換アルキニルを含む有機ラジカルと結合したカルボニル基(-C(=O)-)を表す。カルボニル基と結合した有機ラジカルは一価(例えば、-C(=O)-アルキル)、または二価(例えば、-C(=O)アルキレンなど)であってよい。
【００２４】
用語「アルコキシカルボニル」は、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、アミノアルキル、置換アルキル、置換アルケニル、置換アルキニル、または置換アミノアルキル基を含む有機ラジカルと結合したカルボキシまたはエステル基(-C(=O)-O-)を表す。カルボニル基が結合した有機ラジカルは一価(例えば、-CO2-アルキル)、または二価(例えば、-CO2-アルキレンなど)であってよい。
【００２５】
用語「スルホニル」は、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、アミノアルキル、置換アルキル、置換アルケニル、置換アルキニル、または置換アミノアルキルを含む有機ラジカルと結合したスルホキシド基(すなわち、-S(O)1-2-)を表す。スルホキシド基が結合した有機ラジカルは、一価(例えば、-SO2-アルキル)、または二価(例えば、-SO2-アルキレンなど)であってよい。-C0-スルホニルは、基-S(O)1-2-を表し、-C1-スルホニルは-CH2S(O)1-2-および-S(O)1-2CH2-を表し、-C2-スルホニルは-CH2S(O)1-2CH2-、-S(O)1-2CH2CH2-、-S(O)1-2CH=CH-などを表す。
【００２６】
用語「スルホンアミド」は、基-S(O)2NRaRbを表す(ここで、RaおよびRbは、水素、もしくは上記アルキル、アルケニル、アルキニル、アミノアルキル、置換アルキル、置換アルケニル、置換アルキニル、または置換アミノアルキル基を表す。RaおよびRbは一価または二価(例えば、-SO2-NH-アルキレンなど)であってよい。-C0-4-スルホンアミドのように下付き文字をスルホンアミドと用いる場合は、スルホニルについて先に記載したのと類似の意味を有する。
【００２７】
用語「シクロアルキル」は、炭素数3〜9、好ましくは3〜7の完全飽和および部分不飽和炭化水素環を表す。用語「シクロアルキル」は、以下からなる群から選ばれる0、1、2、または3個の置換基を有するそのような基を含む：ハロ、アルキル、置換アルキル(例えば、トリフルオロメチル)、アルケニル、アルキニル、ニトロ、シアノ、アミノ、オキソ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、-NH(アルキル)、-NH(シクロアルキル)、-N(アルキル)2、-NHSO2、-N(アルキル)SO2、-NHSO2(アルキル)、-NHSO2(アリール)、-N(アルキル)SO2(アルキル)、-N(アルキル)SO2(アリール)、-SO2(アルキル)、-SO2(アリール)、-SO2N(アリール)(アルキル)、-SO2N(アルキル)2、-CO2H、-C(=O)H、CO2-アルキル、-C(=O)アルキル、-C(=O)NH2、-C(=O)NH(アルキル)、-C(=O)NH(シクロアルキル)、-C(=O)N(アルキル)2、-NH-CH2-CO2H、-NH-CH(アルキル)-CO2H、-NH-CH2-CO2-アルキル、-NH-CH(アルキル)-CO2-アルキル、=N-OH、=N-O-アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロ、および5または6員のケタール、例えば、1,3-ジオキソランまたは1,3-ジオキサン。
【００２８】
用語「ハロ」または「ハロゲン」は、クロロ、ブロモ、フルオロ、およびヨードを表す。
用語「ハロアルキル」は、1またはそれ以上の置換基を有する置換アルキルを意味する。例えば、「ハロアルキル」は、モノ、ビ、およびトリフルオロメチルを含む。
【００２９】
用語「ハロアルコキシ」は、1またはそれ以上のハロ置換基を有するアルコキシ基を意味する。例えば、「ハロアルコキシ」はOCF3を含む。
【００３０】
用語「アリール」は、フェニル、ビフェニル、1-ナフチルおよび2-ナフチルを表し、フェニルが好ましい。用語「アリール」は、以下からなる群から選ばれる0、1、2、または3個の置換基を有するそのような基を含む：ハロ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、ニトロ、シアノ、アミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、-NH(アルキル)、-NH(シクロアルキル)、-N(アルキル)2、-NHSO2、-N(アルキル)SO2、-NHSO2(アルキル)、-NHSO2(アリール)、-N(アルキル)SO2(アルキル)、-N(アルキル)SO2(アリール)、-SO2(アルキル)、-SO2(アリール)、-SO2N(アリール)(アルキル)、-SO2N(アルキル)2、-CO2H、-C(=O)H、CO2-アルキル、-C(=O)アルキル、-C(=O)NH2、-C(=O)NH(アルキル)、-C(=O)NH(シクロアルキル)、-C(=O)N(アルキル)2、-NH-CH2-CO2H、-NH-CH(アルキル)-CO2H、-NH-CH2-CO2-アルキル、-NH-CH(アルキル)-CO2-アルキル、フェニル、ベンジル、ナプチル、フェニルエチル、フェニルオキシ、フェニルチオ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクロ、およびヘテロアリール。さらに、本明細書においてR1、R4a R4bおよびR4cについての選択として所望により置換されたアリール基を参照するときは、そのようなアリール基は前記置換基に加えてORc、NRcRd、CO2Rc、C(=O)Rc、C(=O)NRcRd、NRcC(=O)Rd、NRcC(=O)ORd、S(O)0-2Rc、NRcSO2Rd、SO2NRcRd、-NHCH(アルキル)CO2Rcから選ばれる1またはそれ以上の置換基を含んでよい(ここで、RcおよびRdは、(i)互いに独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか、または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成する(すなわち、下記のように所望により置換されていてよい)。
【００３１】
用語「ヘテロシクロ」は、置換および非置換の非芳香族の、3〜7員のモノサイクリック基、7〜11員のビサイクリック基、および10〜15員のトリサイクリック基(環の少なくとも1個は少なくとも1個のヘテロ原子(O、S、またはNを有する。)を表す。ヘテロ原子を含むヘテロシクロ基の各環は、1または2個の酸素または硫黄原子および/または1〜4個のの窒素原子を含みうる(ただし、各環のヘテロ原子の総数は4またはそれ以下であり、さらに環は少なくとも1個の炭素原子を有する。)。ビサイクリックおよびトリサイクリック基を備える融合環は、炭素原子のみを含んでよく、また飽和、部分飽和、または不飽和であってよい。窒素および硫黄原子は、所望により酸化されていてよく、窒素原子は所望により四級化していてよい。ヘテロシクロ基は、あらゆる利用可能な窒素または炭素原子と結合していてよい。ヘテロシクロ環は以下からなる群から選ばれる0、1、2、または3個の置換基を含んでいてよい：ハロ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、ニトロ、シアノ、アミノ、オキソ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、-NH(アルキル)、-NH(シクロアルキル)、-N(アルキル)2、-NHSO2、-N(アルキル)SO2、-NHSO2(アルキル)、-NHSO2(アリール)、-N(アルキル)SO2(アルキル)、-N(アルキル)SO2(アリール)、-SO2(アルキル)、-SO2(アリール)、-SO2N(アリール)(アルキル)、-SO2N(アルキル)2、-CO2H、-C(=O)H、CO2-アルキル、-C(=O)アルキル、-C(=O)アリール、-C(=O)NH2、-C(=O)NH(アルキル)、-C(=O)NH(シクロアルキル)、-C(=O)N(アルキル)2、-NH-CH2)-CO2H、-NH-CH2-CO2-アルキル、-NHCH(C1-4アルキル)-CO2H、-NHCH(C1-4アルキル)CO2-アルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロ、=N-OH、=N-O-アルキル、および5または6員のケタール、例えば1,3-ジオキソランまたは1,3-ジオキサン。
【００３２】
モノサイクリック基の例には、アザチジニル、ピロリジニル、オキセタニル、イミダゾリニル、オキサゾリジニル、イソキサゾリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、2-オキソピペラジニル、2-オキソピペリジニル、2-オキソピロロジニル、2-オキソアゼピニル、アゼピニル、4-ピペリドニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアモルホリニルスルホン、1,3-ジオキソランおよびテトラヒドロ-1,1-ジオキソチエニルなどが含まれる。ビサイクリックヘテロシクロ基の例にはキヌクリジニルが含まれる。
【００３３】
用語「ヘテロアリール」は、環の少なくとも1つに少なくとも1個のヘテロ原子(O、S、またはN)を有する置換および非置換芳香族の、5または6員のモノサイクリック基、9または10員のビサイクリック基、および11〜14員のトリサイクリック基を表す。ヘテロ原子を含むヘテロアリール基の各環は、1または2個の酸素もしくは硫黄原子、および/または1〜4個の窒素原子を含み得る(ただし、各環のヘテロ原子の総数は4またはそれ以下であり、各環は少なくとも1個の炭素原子を有する。)。ビサイクリックおよびトリサイクリック基を備える融合環は、飽和、部分飽和、または不飽和であってよい。窒素および硫黄原子は所望により酸化されていてよく、窒素原子は所望により四級化していてよい。ビサイクリックまたはトリサイクリックであるヘテロアリール基は少なくとも1個の完全な芳香族環を含んでいなければならず、他の融合環または環(複数)は芳香族または非芳香族であってよい。ヘテロアリール基は、あらゆる環のあらゆる利用可能な窒素原子または炭素原子と結合していてよい。ヘテロアリール環系は、以下からなる群から選ばれる0、1、2、または3個の置換基を含んでいてよい：ハロ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、ニトロ、シアノ、アミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオ、-NH(アルキル)、-NH(シクロアルキル)、-N(アルキル)2、-NHSO2、-N(アルキル)SO2、-NHSO2(アルキル)、-NHSO2(アリール)、-N(アルキル)SO2(アルキル)、-N(アルキル)SO2(アリール)、-SO2(アルキル)、-SO2(アリール)、-SO2N(アリール)(アルキル)、-SO2N(アルキル)2、-CO2H、-C(=O)H、CO2-アルキル、-C(=O)アルキル、-C(=O)NH2、-C(=O)NH(アルキル)、-C(=O)NH(シクロアルキル)、-C(=O)N(アルキル)2、-NH-CH2-CO2H、-NH-CH(アルキル)-CO2H、-NH-CH2-CO2-アルキル、-NH-CH(アルキル)-CO2-アルキル、フェニル、ベンジル、フェニルエチル、フェニルオキシ、フェニルチオ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクロ、およびヘテロアリール。さらに、本明細書においてR1、R4a、R4bおよびR4cについての選択として所望により置換されたヘテロアリール基に言及するときは、そのようなヘテロアリール基は、前記置換基に加えてORc、NRcRd、CO2Rc、C(=O)Rc、C(=O)NRcRd、NRcC(=O)Rd、NRcC(=O)ORd、S(O)0-2Rc、NRcSO2Rd、SO2NRcRd、-NHCH(アルキル)CO2Rcを含んでいてよい(ここで、RcおよびRdは、(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか(ただし、S(O)RcまたはS(O)2Rcのようにスルホニル基と結合している場合はRcは水素ではない。)、または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成する(すなわち、下記のごとく所望により置換されていてよい。))。
【００３４】
モノサイクリックヘテロアリール基の例には、ピロリル、ピラゾリル、ピラゾリニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、トリアジニルなどが含まれる。
【００３５】
ビサイクリックヘテロアリール基の例には、インドリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾキサゾリル、ベンゾチエニル、キノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラニル、インドリジニル、ベンゾフラニル、クロモニル、クマリニル、ベンゾピラニル、シンノリニル、キノキサリニル、インダゾリル、ピロロピリジル、フロピリジニル、ジヒドロイソインドリル、テトラヒドロキノリニルなどが含まれる。
【００３６】
トリサイクリックヘテロアリール基の例には、カルバゾリル、ベンジドリル、フェナントロリニル(phenanthrollinyl)、アクリジニル、フェナントリジニル、キサンテニルなどが含まれる。
【００３７】
本明細書を通して、基およびその置換基は安定な部分および化合物を得るために当業者が選ぶことができよう。例えば、下記式(I)：
【化２】
2004537518.tif 000004
で示される化合物において、置換R3は、基Q-R1と結合している炭素原子を含む、「A」環のあらゆる利用可能な炭素原子と結合していてよい。簡単に参照できるように、この炭素原子(C-*)は「Q-R1置換炭素原子」と呼ぶことにする(例えば、「r」および「s」は共に1である場合は6位の炭素原子が「Q-R1置換炭素原子」であろう)。Qが環Aと直接結合しているヘテロ原子を含むときは、好都合にはQ-R1置換炭素原子と結合したあらゆるR3基は環Aと直接結合したヘテロ原子を含まない(逆も同様)。
【００３８】
式(I)の化合物は本発明の範囲内でもある塩を形成する。特記しない限り、本発明化合物に対する言及は、その塩に対する言及も含むものと理解される。用語「塩」は無機および/または有機酸および塩基を用いて形成される酸性塩および/または塩基性塩を表す。さらに、用語「塩」は、例えば式(I)の化合物がアミンまたはピリジンもしくはイミダゾール環のような塩基性部分とカルボン酸のような酸性部分の両方を含む時は両性イオン(内部塩)を含んでよい。例えばカチオンが塩の毒性や生物活性の有意な一因とならない許容される金属およびアミン塩のような医薬的に許容される(すなわち、無毒性、生理学的に許容される)塩が好ましい。しかしながら、他の塩は、例えば製造時に用いることができる単離または精製工程に有用であるかもしれないので、本発明の範囲内に予期される。式(I)の化合物の塩は、例えば式(I)の化合物とある量(例えば等量)の酸または塩基と塩が沈殿するような媒質または水性媒質中で反応させて形成し、次いで凍結乾燥してよい。
【００３９】
酸付加塩の例には、酢酸塩(例えば酢酸またはトリハロ酢酸、例えばトリフルオロ酢酸を用いて形成されるもの)、アジピン酸塩、アルギン酸、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホネート、シクロペンタンプロピオネート、ジグルコネート、ドデシルサルフェート、エタンスルホネート、フマル酸塩、グルコペプタノエート、グリセロホスフェート、ヘミサルフェート、ヘプタノエート、塩酸塩(塩化水素を用いて形成)、臭化水素酸塩(臭化水素を用いて形成)、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシエタンスルホネート、乳酸塩、マレイン酸塩(マレイン酸を用いて形成)、メタンスルホン酸塩(メタンスルホン酸を用いて形成)、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチネート、硝酸塩、シュウ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3-フェニルプロピン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバレート、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩(例えば、硫酸を用いて形成)、スルホン酸塩(スルホネート)(例えば、本明細書に記載のもののような)、酒石酸塩、チオシアネート、トルエンスルホネート、例えばトシレート、ウンデカノエートなどが含まれる。
【００４０】
塩基性塩の例には、アンモニア塩、アルカリ金属塩、例えばナトリウム、リチウム、およびカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムおよびマグネシウム塩；バリウム、亜鉛、およびアルミニウム塩；トリアルキルアミン、例えばトリエチルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、N-ベンジル-β-フェネチルアミン、1-エフェナミン、N,N'-ジベンジルエチレンジアミン、デヒドロアビエチルアミン、N-エチルピペリジン、ベンジルアミン、ジシクロヘキシルアミンまたは同様の医薬的に許容されるアミンのような有機塩基(例えば有機アミン)との塩、およびアミノ酸、例えばアルギニン、リジンなどとの塩が含まれる。塩基性窒素含有基は、低級アルキルハリド(例えば、メチル、エチル、プロピル、およびブチルクロリド、ブロミド、およびヨード)、ジアルキルサルフェート(例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミルサルフェート)、長鎖ハリド(ハロゲン化物)(例えば、デシル、ラウリル、ミリスチル、およびステアリールクロリド、ブロミド、およびヨード)、アルアルキルハリド(例えば、ベンジルおよびフェネエチルブロミド)、その他のような物質で四級化されてよい。好ましい塩には、モノ塩酸塩、硫酸水素塩、メタンスルホネート、リン酸塩(ホスフェート)、または硝酸塩が含まれる。
【００４１】
本発明化合物のプロドラッグおよび溶媒和物も予期される。用語「プロドラッグ」は、対象に投与すると代謝的または化学的プロセスにより化学的変換を受けて式(I)の化合物および/またはその塩および/または溶媒和物を生じる化合物を表す。例えば、カルボキシ基を含む化合物は、体内で加水分解されて式(I)の化合物そのものを生じるプロドラッグとしての役割を果たす生理学的に加水分解しうるエステルを形成することができる。多くの場合加水分解は主として消化酵素の影響下で起きるので、そのようなプロドラッグは経口投与するのが好ましい。エステル自体が活性であるか、または血液中で加水分解が起きる場合には非経口投与を用いてよい。式(I)の化合物の生理学的に加水分解しうるエステルの例には、C1-6アルキルベンジル、4-メトキシベンジル、インダニル、フタリル、メトキシメチル、C1-6アルカノイルオキシ-C1-6アルキル、例えばアセトキシメチル、ピバロイルオキシメチル、またはプロピオニルオキシメチル、C1-6アルコキシカルボニルオキシ-C1-6アルキル、例えばメトキシカルボニル-オキシメチル、またはエトキシカルボニルオキシメチル、グリシルオキシメチル、フェニルグリシルオキシメチル、(5-メチル-2-オキソ-1,3-ジオキソレン-4-イル)-メチル、および例えばペニシリンおよびセファロスポリンの分野で用いる他のよく知られた生理学的に加水分解しうるエステルが含まれる。そのようなエステルは、当該分野で知られた常套的技術により製造することができよう。
【００４２】
式(I)の化合物およびその塩は、水素原子が分子の他の部分に転移し、その結果、分子の原子間の化学結合の配置が変わる互変異性体型で存在してよい。すべての互変異性体型はそれが存在する範囲で本発明内に含まれると理解すべきである。さらに、本発明化合物はトランス(trans)およびシス(cis)異性体を有し、1またはそれ以上のキラル中心を含んでよく、したがってエナンチオマーおよびジアステレオマー形で存在してよい。本発明は、すべてのそのような異性体、およびシスおよびトランス異性体、ジアステレオマー混合物、およびエナンチオマー(光学異性体)のラセミ混合物を含む。化合物(または不斉炭素)の配置(シス、トランス、またはRまたはS)を特記しない場合は、異性体のいずれか1つ、または2以上の異性体の混合物を意味する。製造方法には、出発物質としてラセメート、エナンチオマー、またはジアステレオマーを用いることができる。エナンチオマーまたはジアステレオマー生成物を製造する場合は、常套的方法、例えばクロマトグラフィーまたは分画結晶化によりそれらを分離することができる。本発明化合物は遊離形または水和物であってよい。
【００４３】
製造方法
本発明化合物は、下記反応式A〜Eに記載の典型的方法により製造することができよう。これら反応用の典型的試薬および方法を以下に示す。出発物質は市販されているか、または当業者が容易に製造することができる。すべての反応式について、基Z、Q、K、L、R1、R3、R4a、R4b、およびR4cは、特記しない限り式(I)の化合物について本明細書に記載する通りである。R、X、およびYで示す基、および溶媒、温度、圧、所望の基を有する出発物質、および他の反応条件は、当業者が容易に適切に選ぶことができよう。
【００４４】
反応式A
【化３】
2004537518.tif 000005
【００４５】
イソシアネート1aをアルキルカルバゼートと反応させてアルコキシカルボニルセミカルバジド2aを得、これを塩基、例えば炭酸カリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、またはナトリウムエチレートで環化してウラゾール3aを得る(例えば、Guzikowskiら、J. Ore. Chem.、Vol.48 [1983]、p.2654、参照)。この化合物をその塩(例えばナトリウム塩)に変換し、2つの脱離基XおよびYを有する化合物4と反応させて式(Ib)の所望の化合物を得る(例えば、Mitsubishi Chemical Industries、特許DE 2526358参照)。同じ条件下でイソチオシアネート1bから2bを得、これを中間体アルコキシカルボニルチオセミカルバジド3bを介してチオキソトリアゾロン(1c)に変換する(例えば、Tislerら、Arch. Pharm.(Weinheim)、Vol.292 [1959] p.90、参照)。
【００４６】
反応式B
【化４】
2004537518.tif 000006
【００４７】
6員の環状化合物も反応式Bに記載のごとく得ることができる。ウラゾール3aを、酢酸エチルのような溶媒中のtert-ブチル次亜塩素酸塩のような試薬で酸化し、トリアゾールジオン5を得る(例えば、Hansenら、J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1、Vol.22 [1999]、p.3323参照)。次いで、この化合物をヘテロDiels Alder反応にて適切に置換されたジエン6と縮合させて化合物7を得る(例えば、Bermabeuら、Tetrahedron Lett.、Vol.37 [1996]、p.3595参照)。メタノールまたは酢酸のような溶媒中の触媒、例えばプラチナまたはパラジウムにより例えば水素を用いて還元し、式(Id)の所望の化合物を得る(例えば、Adamsら、Synth. Commun.、Vol.18 [1988]、p.2225参照)。
【００４８】
反応式C
【化５】
2004537518.tif 000007
【００４９】
あるいはまた、式(Ib)の化合物を下記方法を用いてサイクリックヒドラジン8から得ることもできる：ヒドラジンを芳香族イソシアネート1aで縮合して9を得、カルボニルジイミダゾールまたはエチルクロロホルメートのような試薬を用いて環化する(例えば、Capuanoら、Liebigs Ann. Chem.、[1981]、p.1361参照)。
【００５０】
反応式D :
【化６】
2004537518.tif 000008
【００５１】
式(Ie)のトリアゾールジチオンおよび式(Ic)のチオキソトリアゾロンを同様の方法を用いてサイクリックヒドラジン8から得る。すなわち、ヒドラジン8をアリールイソチオシアネート1bと反応させて化合物10を得る。後者をチオカルボニルジイミダゾール、チオホスゲン、またはメチルイソチオシアネートのような試薬を用いて環化し、式(Ie)の所望のトリアゾールジチオンを得ることができる(例えば、Morgensternら、Pharmazie、Vol.46 [1991]、p.418-422、またはPharmazie、Vol.49 [1994]、p.489-492参照)。あるいはまた、10をクロロホルメート、カルボニルジイミダゾール、ホスゲン、またはホスゲン等価物のような試薬と反応させて式(Ic)の所望のチオキソトリアゾロンを得る(例えば、Klemannら、Pharmazie、Vol.46 [1991]、p.573-575参照)。
【００５２】
反応式E
【化７】
2004537518.tif 000009
【００５３】
式(Ie)の[1,2,4]トリアゾール-1,3-ジチオンを、式(Ib)のウラゾールからトルエンまたはジオキサンのような溶媒中のP2S5またはLawesson試薬と反応させることにより得ることもできる。
【００５４】
好ましい化合物
本発明の好ましい化合物は、式(Ia)：
【化８】
2004537518.tif 000010
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩である
［式中、KおよびLは独立してOまたはSである;
Qは-O-、-NH-、-S-、-CO2-、-C(=O)-、-OC(=O)、-NHC(=O)-、-C(=O)NH-、-NHCO2-、C1-4アルキレン、C1-4置換アルキレン、C1-4アルケニレン、C1-4置換アルケニレン、または所望により置換された二価C1-4アルコキシ、C1-4アルキルチオ、C1-4アミノアルキル、C0-4スルホニル、C0-4スルホンアミド、C1-4アシル、またはC1-4アルコキシカルボニルである;
ZはNまたはCR4bである;
R1は、所望によりハロゲン、アルキル、置換アルキル、ニトロ、シアノ、OR10、NR10R11、CO2R10、C(=O)R10、-C(=O)NR10R11、NR10C(=O)R11、NR10C(=O)OR11、S(O)pR10、NR10SO2R11、SO2NR10R11、-NHCH(アルキル)CO2R10、アリール、シクロアルキル、およびヘテロアリールから選ばれる1または2個の置換基で置換されたアリールまたはヘテロアリールである;
R3は、環Aのあらゆる利用可能な炭素原子と結合し、それぞれ独立してハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、ニトロ、S(O)qR8、NR8SO2R9、SO2NR8R9、A1-CN、A1-OR8、A1-NR8R9、A1-C(=O)R8、A1-OC(=O)R8、A1-OC(=O)NR8R9、A1-NR8C(=O)R9、A1-NR8C(=O)OR9、A2-CO2R8、およびA2-C(=O)NR8R9から選ばれるか；またはR3がQ-R1置換炭素原子以外の炭素原子と結合している場合はR3はオキソ(=O)であってよい;
A1は結合、-C1-4アルキレン-、-NHC(=O)-、または-NHC(=O)C1-4アルキレン-である;
A2は結合、C1-4アルキレン-、-NHC(=O)-、-NHC(=O)C1-4アルキレン-、-C(=O)-、または-C(=O)C1-4アルキレン-である;
R4aおよびR4cは、ハロゲン、アルキル、シアノ、トリフルオロメチル、またはニトロである;
R4bは、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、アルコキシ、フェニルオキシ、-CO2H、-C(=O)H、アミノ、NH(アルキル)、N(アルキル)2、CO2アルキル、C(=O)アルキル、アルキルチオ、-C(=O)NH(CH2)1-4CO2H、-C(=O)NH(CH2)1-4CO2(アルキル)、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロサイクルである(ここで、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロサイクル基はそれぞれ所望により1または2個のハロゲン、C1-4アルキル、OMe、CF3、CN、OCF3、CO2H、-C(=O)H、CO2アルキル、またはC(=O)アルキルで置換されている。)；
R6およびR7は、(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか; または(ii)一緒になってヘテロシクロ環を形成する;
R8およびR9は、(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか; または(ii)一緒になってヘテロシクロ環を形成する;
R10およびR11は、(i)それぞれ独立して選ばれる水素、アルキル、置換アルキル、置換アルケニル、アルコキシ、または所望により置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクロであるか; または(ii)一緒になってヘテロシクロを形成する;
pおよびgは、独立して0、1、または2である;
rは1または2である;そして
tは0、1または2である。]。
【００５５】
さらに、R4aおよびR4cがハロゲン、ニトロ、ハロアルキル、またはハロアルコキシ、最も好ましくはハロゲンであり、R4cが水素である上記式(Ia)の化合物またはその医薬的に許容される塩が好ましい。好都合には、Qは-O-C(=O)-または二価アルコキシ、好ましくは-O-CH2-であり、R1は、所望によりハロゲン、シアノ、ニトロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、低級アルキル、-CO2H、-C(=O)H、CO2アルキル、および-C(=O)アルキルから選ばれる1または2個の置換基で置換されたフェニルである。
【００５６】
Qが-OC(=O)または所望により置換された二価C1-4アルコキシであり、
R1が、所望によりハロゲン、C1-4アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、シアノ、ニトロ、-CO2H、-C(=O)H、CO2アルキル、および-C(=O)アルキルから選ばれる1または2個の置換で置換されたフェニルであり、
R4aおよびR44cがハロゲン、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、およびOCF3から選ばれる、式(Ib)：
【化９】
2004537518.tif 000011
で示される化合物またはその医薬的に許容される塩がより好ましい。
【００５７】
R4aおよびR4cがハロゲン(最も好ましくはクロロ)であり、
R1が
【化１０】
2004537518.tif 000012
であり、
R5がハロゲン、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、またはOCF3であり、
R16が水素、ハロゲン、C1-4アルキル、シアノ、ニトロ、-CO2H、-C(=O)H、CO2アルキル、または-C(=O)アルキルが最も好ましい。
上記式(Ib)の化合物である。
【００５８】
有用性
本発明の化合物および組成物は、LFA-1、Mac-1、および/またはICAMのアンタゴニストである。すなわち、それらはLFA1-l、Mac-l、および/またはICAM、特にLFA-1:ICAM-1の作用と関連がある種々の炎症性疾患および障害の治療に有用である。本明細書において用語「ロイコインテグリン/ICAM関連性病状」は、簡単に参照できるように、LFA-1、Mac-1および/またはICAM-1、ICAM-2、またはICAM-3の作用またはレベルと関連があるそれら疾患または障害を表す。本明細書において用語「治療(処置)する(treating)」は、予防的使用と治療的使用を含み、患者の特定の障害の症状の軽減、特定の障害に関連する確認可能な測定値の改善、または特定の免疫反応(例えば移植片拒絶)の予防を表す。用語「患者」は哺乳動物、好ましくはヒトを表す。
【００５９】
LFA-1および/またはICAMの作用は、皮膚、腹膜、滑膜、肺、腎臓、および心臓を含むほとんどすべての系における白血球の流入に関連するので、本発明の化合物および組成物は広範囲の病状の治療に有用である。本発明化合物は患者の特異的免疫系または非特異的免疫系の反応から生じる病状を治療するのに用いることができよう。そのような病状には、例えば移植片対宿主反応および移植片拒絶(例えば、腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓、骨髄、隔膜、小腸、皮膚同種(異系)移植片、皮膚同種移植片および異種移植片など); 乾癬、臓器-組織自己免疫疾患(例えば、レイノー症候群)、自己免疫甲状腺炎、皮膚炎、多発性硬化症、リウマチ性関節炎、インスリン依存性糖尿病、ブドウ膜炎、炎症性腸疾患(クローン病および潰瘍性大腸炎を含む)、全身性エリテマトーデス、成人呼吸窮迫症候群、ショック、酸素毒性、敗血症に続く多臓器損傷症候群、外傷に続く多臓器損傷症候群、心肺バイパス、心筋梗塞または血栓溶解剤の使用による再還流傷害、急性糸球体腎炎、脈管炎、反応性関節炎、急性炎症性成分による皮膚炎、卒中、熱傷害、血液透析、白血球除去血輸血、潰瘍性大腸炎、壊死性腸炎、および顆粒球輸血関連症候群、肺繊維症、アテローム性動脈硬化症、髄膜炎、脳炎、実験的自己免疫性脳脊髄炎、シェーグレン症候群、および若年性糖尿病が含まれる。本発明化合物は、湿疹および喘息のようなアレルギー性病状の治療に、または癌治療におけるサイトカイン療法の毒性を最小限にする添加剤として用いることもできよう。それらの阻害活性により該化合物は、T細胞の浸潤および慢性炎症性反応を含む炎症性の病状、過敏反応、例えば皮膚過敏反応(ツタウルシおよびウルシを含む)、サイトカインおよびTリンパ球介在性遅延型過敏症に関連する免疫反応、および転移の治療に用いることができよう。
【００６０】
さらに本発明化合物は、性腺機能低下症、フレイルティー、骨粗鬆症、性機能不全、消耗、例えば癌およびAIDS関連性の消耗性症候群、および貧血の治療に有用性を有する。さらに該化合物は、限定されるものではないが乳房、脳、皮膚、卵巣、子宮内膜、膀胱、前立腺、肺、結腸、リンパ系、肝臓、および腎臓を含む癌の治療に有用性を有する。本発明化合物は、本発明化合物は、多毛症、アルツハイマー病、インスリン非依存性糖尿病、座瘡、脂漏症、脱毛症、類繊維腫(fibroid)、ハイパーピロシティー(hyperpilosity)、悪液質、多嚢胞性卵巣症候群、拒食症、避妊、薬物離脱症候群、妊娠中絶、および良性前立腺肥厚のような病状に対して有用である。該化合物はさらに抗血管新生剤として有用である。
抗炎症剤として用いるときは、該化合物を炎症の発現前、または炎症が始まった時もしくは始まった後に投与することができよう。予防的に用いるときは、化合物はあらゆる炎症反応または症状の前に(例えば、臓器または組織移植の前、移植時もしくはその直後の、いかなる症状または臓器拒絶に先だって)投与するのが好ましい。該化合物の投与は炎症反応または症状を予防または軽減することができよう。
【００６１】
すなわち本発明は、治療を要する対象に有効量の、少なくとも1つの式(I)の化合物またはその塩を投与することを含む上記のような病状の治療方法を提供する。下記のような他の治療剤を式(I)の化合物と組み合わせて用いてよい。本発明の方法において、そのような他の治療剤は本発明化合物の投与と同時にか、または投与の前もしくは後に投与してよい。
【００６２】
本発明は、ロイコインテグリン/ICAM関連病状および上記疾患および障害を治療することができる医薬組成物も提供する。本発明組成物は他の治療剤を含んでよく、例えば、医薬製剤の分野の当業者によく知られたような技術に従って所望の投与方法に適した種類の常套的な固体もしくは液体ビークルまたは希釈剤、および医薬添加剤(例えば賦形剤、結合剤、保存料、安定化剤、香味料など)を用いることにより製剤化することができよう。
【００６３】
式(I)の化合物は、部位特異的治療の必要性または送達すべき薬剤の量に応じて治療する病状に適したあらゆる方法により投与することができよう。他の送達方法も予期されるが、一般に皮膚関連疾患には局所投与が好ましく、癌または前癌病状には全身投与が好ましい。例えば、該化合物は例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉末剤、またはシロップを含む液体性製剤の形で経口的に；溶液剤、サスペンジョン剤、ゲル剤、または軟膏の形で局所的に；舌下に；バッカルで；例えば皮下、静脈内、筋肉内、または胸骨内注射または注入技術(例えば、無菌注射用水性または非水性溶液またはサスペンジョン剤として)により非経口的に；例えば吸入スプレーにより鼻内に；例えばクリームまたは軟膏の形で局所的に；例えば坐剤の形で直腸内に；またはリポソームで送達することができよう。無毒性の医薬的に許容されるビークルまたは希釈剤を含む用量単位製剤を投与することができよう。該化合物は急速放出または長期(extended)放出に適した形で投与することができよう。急速放出または長期放出は適切な医薬組成物を用いるか、または特に長期放出の場合は皮下インプラントまたは浸透圧ポンプのような用具を用いて達成することができよう。
【００６４】
局所投与用組成物の例には、PLASTIBASE(登録商標)(ポリエチレンでゲル化した鉱油)のような局所用担体が含まれる。
【００６５】
経口投与用組成物の例には、例えば容積を与えるための微晶質セルロース、懸濁化剤としてアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウム、増粘剤としてメチルセルロース、および当該分野で知られた甘味料もしくは香味料を含んでいてよいサスペンジョン剤、および例えば微晶質セルロース、リン酸2カルシウム、デンプン、ステアリン酸マグネシウムおよび/または乳糖、および/または当該分野で知られているような他の賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、希釈剤、および潤滑剤を含んでいてよい急速放出錠剤が含まれる。本発明化合物は、例えば成形、圧縮、または凍結乾燥錠剤を用いる舌下および/またはバッカル投与により経口的に送達することもできよう。典型的組成物には、即溶解性希釈剤、例えばマンニトール、乳糖、ショ糖、および/またはシクロデキストリンが含まれよう。そのような製剤は高分子量の賦形剤、例えばセルロース(AVICEL(登録商標)またはポリエチレングリコール(PEG)、粘膜への付着を助ける賦形剤、例えばヒドロキシプロピルセルロース(HPC)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、ナトリウムカルボキシメチルセルロース(SCMC)、および/または無水マレイン酸共重合体(例えば、GANTREZ(登録商標))、および放出を制御する物質、例えばポリアクリル酸共重合体(例えばCARBOPOL 934(登録商標))も含んでよい。潤滑剤、流動促進剤、香味料、着色料、および安定化剤も成形および使用しやすいように加えてよい。
【００６６】
鼻内エアロゾルまたは吸入投与用の組成物の例には、例えばベンジルアルコールまたは他の適切な保存料、吸収および/またはバイオアベイラビリティを増すための吸収促進剤、および/または当該分野で知られているような他の可溶化剤または分散剤を含んでいてよい溶液剤が含まれる。
【００６７】
非経口投与用の組成物の例には、例えば適切な無毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒、例えばマンニトール、1,3-ブタンジオール、水、リンゲル溶液、等張塩化ナトリウム溶液、または他の適切な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁化剤(合成モノまたはジグリセリドを含む)、および脂肪酸(オレイン酸を含む)を含んでよい注射用(注射可能な)溶液剤またはサスペンジョン剤が含まれる。
【００６８】
直腸内投与用の組成物の例には、例えば、通常の温度では固体であるが直腸腔内で液化および/または溶解して薬剤を放出する適切な非刺激性賦形剤、例えばココアバター、合成グリセリドエステル、またはポリエチレングリコールを含んでよい坐剤が含まれる。
【００６９】
本発明化合物の有効量は当業者が決定してよく、1日あたり活性成分約0.05〜100mg/kg体重の患者に対する典型的用量を含み、これを単回用量または個々に分割した用量(例えば1〜4回/日)の形で投与してよい。あらゆる特定の対象のための具体的用量レベルおよび投与頻度は変化してよく、用いる特定の化合物の活性、該化合物の代謝安定性および作用の長さ、対象の種、年齢、体重、一般健康状態、性別、および食生活、投与方法および時期、排出速度、薬剤の組み合わせ、および治療すべき特定の病状、およびその重症度を含む種々の因子に依存すると理解されよう。好ましい治療対象には、ロイコインテグリン/ICAM関連の病状および/またはあらゆる上記疾患および障害に罹りやすい動物、最も好ましくは哺乳動物種、例えばヒトおよび家畜、例えばイヌ、ネコ、ウマなどが含まれる。
【００７０】
本発明化合物および組成物は、単独で、または互いにおよび/またはロイコインテグリン/ICAM関連の病状および上記疾患および障害の治療に有用な他の適切な治療剤と組み合わせて用いることができよう。そのような他の治療剤の例には、コルチコステロイド、シクロスポリン、メトトレキセート、CELLCEPT(登録商標)(ミコフェノレート モフェチル)、共刺激阻害剤、成長ホルモン、および成長ホルモン分泌促進剤が含まれる。さらに、本発明化合物は、単独で、または抗癌剤および細胞毒性剤および癌または他の増殖性疾患の治療に有用な治療(例えば、第二の薬剤は本発明化合物と同じまたは異なる作用機序を有する)と組み合わせて投与することができよう。本発明化合物と組み合わせて有用な抗ガン剤および細胞毒性剤のクラスの例には、限定されるものではないが、アルキル化剤、例えばニトロゲンマスタード、アルキルホスホネート、ニトロソウレア、エチレンイミン、およびトリアゼン；抗代謝薬、例えば葉酸(folate)アンタゴニスト、プリン類似体、およびピリジミン類似体；抗生物質、例えばアントラサイクリン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ダクチノマイシン、およびピリカマイシン；酵素、例えばL-アスパラギナーゼ；ファルネシル-タンパク質転移酵素阻害剤；ホルモン剤、例えば、グルココルチコイド、エストロゲン/抗エストロゲン、アンドロゲン/抗アンドロゲン、プロゲスチンおよび黄体形成ホルモン放出ホルモンアンタゴニスト、酢酸オクトレオチド；微小管攪乱物質、例えばエクテイナスシジン(ecteinascidin)またはその類似体および誘導体；微小管安定化剤、例えばタキサン、例えばパクリタキセル(Taxol(登録商標))、ドセタキセル(Taxotere(登録商標))、およびその類似体、およびエポチロン、例えばエポチロンA-Fおよびその類似体、植物由来生成物、例えばビンカアルカロイドおよびエピポドフィロトキシン;トポイソメラーゼ阻害剤；プレニル-タンパク質転移酵素阻害剤；および種々の物質、例えばヒドロキシウレア、プロカルバジン、マイトタン(mitotane)、ヘキサメチルメラミン、プラチナ配位複合体、例えばシスプラチンおよびカルボプラチン;および生物反応修飾物質、成長因子のような抗癌剤および細胞毒性剤として用いる他の物質；免疫調節物質、およびモノクローナル抗体が含まれる。本発明化合物は放射線療法と共に用いることができよう。
【００７１】
本発明化合物と組み合わせて用いてよい抗癌剤および細胞毒性剤のこれらグラスの代表例には、限定されるものではないが、パクリタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、ドキソルビシン、カルミノマイシン、ダウノルビシン、イダルビシン、アミノプテリン、メトトレキセート、メトプテリン、マイトマイシンC、エクテイナスシジン743、ポルフィロマイシン、5-フルオロフラシル、6-メルカプトプリン、ゲムシタビン、シトシンアラビノシド、ポドフィロトキシン、またはポドフィロトキシン誘導体、例えばエトポシド、エトポシドホスフェートまたはテニポシド、メルファラン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ロイコシジン、ビンデシン、およびリューロシン(leurosine)、メクロレタミン塩酸、シクロホスファミド、クロラムブシル、イフォスファミド、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ステプトゾシン、チオテパ、ダカルバジン、メトトレキセート、チオグアニン、フルダラビン、ペンタスタチン、クラドリビン、シタラビン、ブレオマイシン、マイトマイシンC、アクチノマイシンD、サフラシン、サフラマイシン、キノカルシン、ジスコデルモリド、ビノレルビン、タモキシフェン、エストラムスチン、フルタミド、ブセレリン、ロイプロリド、プテリジン、ジイン(diyne)、レバミゾール、アフラコン、インターフェロン、インターロイキン、アルデスロイキン、フィルグラスチム、サルグラモスチム、リツキシマブ(rituximab)、BCG、トレチノイン、イリノテカン、ベタメサゾン、アルトレタミン、およびトポテカン、ならびにそのあらゆる類似体または誘導体が含まれる。
【００７２】
本発明化合物と組み合わせて用いてよい抗癌剤および他の細胞毒性剤の例には以下のものが含まれる：ドイツ特許4138042.8、WO 97/19086、WO 98/22461、WO 98/25929、WO 98/38192、WO 99/01124、WO 99/02224、WO 99/02514、WO 99/03848、WO 99/07692、WO 99/27890、WO 99/28324、WO 99/43653、WO 99/54330、WO 99/54318、WO 99/54319、WO 99/65913、WO 99/67252、WO 99/67253およびWO 00/00485に記載のエポチロン誘導体； WO 99/24416に記載のサイクリン依存性キナーゼ阻害剤；およびWO 97/30992およびWO 98/54966に記載のプレニル-タンパク質転移酵素阻害剤。
【００７３】
上記他の治療剤を本発明化合物と組み合わせて用いる時は、例えばPhysicians' Desk Reference(PDR)に記載の量、または別の方法で当業者が決定した量を用いることができよう。
【００７４】
本発明化合物を細胞-細胞アッセイを用いて試験し、LFA-1および/またはICAM-1の阻害と一致した活性を証明した。
【００７５】
アッセイ
H1-HeLa付着アッセイ
H1-Hela細胞を、ベルセン(Gibco、Grand Island、NY)を用いて増殖フラスコから離した。遠心後、細胞を増殖培地: DMEM(Gibco)、10%ウシ胎児血清(Hyclone、Logan、UT)、1%Pen-Strep(Gibco)、および1% L-グルタミン(Gibco)に再浮遊させ、および96ウェルプレートに細胞5,000個/ウェルを接種し増殖させた。
【００７６】
翌日、HSB-2細胞を増殖培地：RPMI 1640(Gibco)、10% FCS、1% Pen-Strep、および1% L-グルタミンで2x105/mlに分けた。翌日(第3日)、細胞を534xGで8分間遠心し、洗浄し、HBSSに5x107/mlで再懸濁した。Calcein-AM、10μM(Molecular Probes、Eugene、OR)および100nMホルボールミリステートアセテート(SIGMA、St. Louis、MO)を標識および活性化混合物に加えた。37℃で30分間インキュベーション後、10mlのHBSSを加え、細胞を上記のごとく遠心した。次に、細胞ペレットを再浮遊させ、カウントした。
【００７７】
HSB-2細胞を標識する間に、培地をH1-HeLa細胞から吸引し、プレートをHBSSで1回洗浄し、次いでさらにHBSS 50μlを加えた。次に、化合物溶液、DMSO、または抗CD18抗体を含むHBSS 50μlをさらに各ウェルに加えた。H1-HeLa細胞に、100μl中のHSB-2細胞200,000個/ウェルを加え、次いで遮光して30分間インキュベーションした。次に、ウェルを3回洗浄し、非結合細胞を除去した。次に、蛍光プレートリーダーを用いて結合HSB-2細胞数を測定した。化合物による阻害率(パーセント)をビークルコントロールを阻害0%とし、抗体でブロックした付着を阻害100%として計算した。
【００７８】
HUVEC付着アッセイ
第1日にヒト臍静脈内皮細胞(HUVEC)(継代3回、Clonetics、San Diego、CA)を増殖用にEGM Bulletkit培地(Clonetics)を含むT-75フラスコに入れた。
HUVECが90%コンフルエント(典型的には第4日)になったら96ウェル組織培養プレートを0.1M酢酸で希釈した2.5μg/mlのマウスIV型コラーゲン(Gibco)100μl/ウェルでコートした。少なくとも3時間インキュベーション後、コラーゲンを除去し、プレートをHBSS(Gibco)で3回洗浄した。HUVECフラスコをトリプシン処理し、HUVECを4日後に用いるために細胞1250個/200μl/ウェルをコラーゲンコートしたウェルに播いた。使用する20時間前に、培地を除去し、細胞をEGM中の1μg/mlリポ多糖(LPS、Sigma、St. Louis、MO)200μlで刺激した。細胞が90%コンフルエント(典型的には第8日)になった時にLPS含有培地を除去し、ウェルをHBSSで洗浄し、HBSS 50μLをウェルに加えた。次に、化合物溶液、DMSO、またはブロッキング用抗CD18を含む50μLをさらに各ウェルに加えた。
【００７９】
次に、第7日にHSB-2細胞を、RPMI 1640(Gibco)、10% FCS(Hyclone、Logan、UT)、1% Pen-Strep(Gibco)、および1% L-グルタミン(Gibco)中で2x105/mlに分けた。翌日、細胞を534xGで8分間遠心し、洗浄し、HBSSに5x107/mlで再浮遊させた。活性化および標識のために、calcein-AM、10μM(Molecular Probes、Eugene、OR)および100nMホルボールミリステートアセテート(Sigma、St. Louis、MO)を加え、細胞を37℃で30分間インキュベーションした。HBSS 10mLを添加後、細胞を遠心し、再浮遊させ、カウントした。
【００８０】
HUVEC細胞に、標識し、活性化したHSB-2細胞200,000個/ウェル(100μL)を加え、次いで遮光して30分間インキュベーションした。非結合細胞を除去するため、ウェルをHBSSで3回洗浄した。蛍光プレートリーダーを用いて結合HSB-2細胞数を測定した。化合物による阻害率(パーセント)をビークルコントロールを阻害0%とし、抗体でブロックした付着を阻害100%として計算した。
【００８１】
下記実施例は本発明の態様の例示であって、特許請求の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００８２】
下記実施例は本発明化合物および出発物質の態様を例示するものであって、特許請求の範囲を限定するものではない。参照しやすいように、以下の略語を本明細書で用いる。
【００８３】
(略語)
Me = メチル
MeOH = メタノール
Et = エチル
EtOH = エタノール
Bn = ベンジル
t-Bu = tert-ブチル
Boc = tert-ブトキシカルボニル
CBZ = カルボベンジルオキシ
CDI = 1,1'-カルボニルジイミダゾール
DCC= ジシクロヘキシルカルボジイミド
DCM = ジクロロメタン
DEAD = ジエチルアゾジカルボキシレート
DIAD = ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
DMAP = ジメチルアミノピリジン
DMF = ジメチルホルムアミド
EDC(またはEDC.HCI)またはEDCI(またはEDCI.HCI)またはEDAC = 3-エチル-3'-(ジメチルアミノ)プロピル-カルボジイミド 塩酸(または1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド 塩酸)
EtOAc = 酢酸エチル
FMOC = 9-フルオレニルメチルカルバメート
HOBT = 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
KOH = 水酸化カリウム
KHMDS = カリウムビス(トリメチルシリル)アミド
LDA = リチウムジイソプロピルアミド
LiHMDS = リチウムヘキサメチルジシラザン
NaBH(OAc)3 = ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド
Pet. = 石油
Ph = フェニル
Ph3P = トリフェニルホスフィン
TEA = トリエチルアミン
TFA = トリフルオロ酢酸
THF = テトラヒドロフラン
L = リッター
mL = ミリリッター
μL = マイクロリッター
g = グラム
mg = ミリグラム
RT = 室温
bp = 沸点
HPLC = 高速液体クロマトグラフィ
Mp = 融点。
【００８４】
製造例1
1-ブロモ-4-(2-ブロモ-1-クロロメチル-エトキシメチル)-ベンゼン
【化１１】
2004537518.tif 000013
【００８５】
4-ブロモベンジルブロミド(90g、0.36 mol)、エピクロルヒドリン(34g、0.37 mol)、および塩化第2水銀(0.05g、0.18mmol)の混合物を11時間155℃に加熱した。冷却後、得られた油状物を減圧下で蒸留し、無色油状の上記化合物を得た(68.7g、bp = 180℃(2mm Hg))。1H NMR(CDCl3): 7.45-7.55 (2H, d, J = 8.8Hz)、7.2-7.3 (2H, d, J = 8.8Hz)、4.55 (2H, s)、3.65-3.95 (3H, m)、3.5-3.6 (2H, m)。
【００８６】
製造例2
4-(3,5-ジクロロフェニル)-1-(メトキシカルボニル)セミカルバジド
【化１２】
2004537518.tif 000014
【００８７】
3,5-ジクロロフェニルイソシアネート(25g、133mmol)を乾燥トルエン(250ml)中のメチルヒドラジノカルボキシレート(12g、133mmol)の冷溶液に、添加中の反応フラスコの温度を10℃以下に維持しながら滴加した。RTで28時間後、沈殿物をろ過し、トルエンおよびイソプロピルエーテルで洗浄し、次いで乾燥し、白色固体の上記化合物を得た(30.3g、mp = 246℃)。
【００８８】
製造例3
4-(3,5-ジクロロフェニル)-[1,2,4]トリアゾリジン-3,5-ジオン
【化１３】
2004537518.tif 000015
【００８９】
KOH (54.5ml、4M)中の4-(3,5-ジクロロフェニル)-1-(メトキシカルボニル)セミカルバジド(30.3g、109mmol) (製造例2)の懸濁液を1時間加熱還流した。RTに冷却後、不溶性物質を捨て、濾液をpH1-2に酸性化した。沈殿物をろ過し、水およびペンタンで洗浄し、次いでオーブンで乾燥して白色固体の上記化合物を得た(27g、mp = 260℃)。1H NMR(DMSO-d6): 10.80 (2H, s)、7.66 (3H, m)。
【００９０】
製造例4
4-(3,5-ジクロロフェニル)-[1,2,4]トリアゾリジン-3,5-ジオン 2ナトリウム塩
【化１４】
2004537518.tif 000016
【００９１】
ナトリウムメチレート[ナトリウム(5.05g、220mmol)をMeOH(300ml)に加えて製造]の溶液に4-(3,5-ジクロロフェニル)-[1,2,4]トリアゾリジン-3,5-ジオン(27g、110mmol)(製造例3)を加えた。RTで2時間後、溶媒を蒸発させて白色固体の上記2ナトリウム塩を得た(31.1g、mp ＞ 250℃)。
【００９２】
製造例5
6-(tert-ブチル-ジメチルシリルオキシ)-2-(3,5-ジクロロフェニル)-ジヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-1,3-ジオン
【化１５】
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【００９３】
DMF(160ml)中の、4-(3,5-ジクロロフェニル)-[1,2,4]トリアゾリジン-3,5-ジオンの2ナトリウム塩(7.65g、26.4mmol)(製造例4)および1,3-ジブロモ-2-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)プロパン[11.7g、35.2mmol; Axenrodら、J. Org. Chem.、Vol.60 (1995)、pp.1959-64に従って製造]の混合物を2時間45分加熱還流した。次に、溶媒を減圧下で除去し、得られた固体をシリカゲルクロマトグラフィ(CH2Cl2)にかけて、白色固体の上記化合物を得た(2g、mp = 129℃)。1H NMR(CDCl3): 7.51 (2H, m)、7.35 (1H, m)、4.52 (1H, br s)、3.95 (2H, d, J = 11.6Hz)、3.49 (2H, dd, J1 = 11.6Hz, J2 = 2Hz)、0.81 (9H, s)、0.09 (6H, s)。
【００９４】
製造例6
2-(3,5-ジクロロフェニル)-6-ヒドロキシ-ジヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-1,3-ジオン
【化１６】
2004537518.tif 000018
【００９５】
50%フッ化水素酸(2ml)およびアセトニトリル(80ml)の混合物中の6-(tert-ブチル-ジメチルシリルオキシ)-2-(3,5-ジクロロフェニル)-ジヒドロピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-1,3-ジオン(1.9g、4.56mmol)(製造例5)を、テフロンフラスコ中で7時間50-60℃に加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をジエチルエーテル中で結晶させて白色固体の上記化合物を得た(1.1g、mp = 160℃)。1H NMR(CDCl3): 7.49 (2H, m)、7.38 (1H, m)、4.54 (1H, br s)、3.98 (2H、d、J= 12Hz)、3.49 (2H, dd, J1 = 12 Hz, J2 = 2.1Hz)、3.10 (1H, br s)。
【００９６】
実施例1
6-[(4-ブロモフェニル)メトキシ]-2-(3,5-ジクロロフェニル)-ジヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-1,3-ジオン
【化１７】
2004537518.tif 000019
【００９７】
DMF(25ml)中の、4-(3,5-ジクロロフェニル)-[1,2,4]トリアゾリジン-3,5-ジオン 2ナトリウム塩(1.5g、5.17mmol)(製造例4)および1-ブロモ-4-(2-ブロモ-1-クロロメチル-エトキシメチル)-ベンゼン(1.95g、5.69mmol)(製造例1)の混合物を2時間30分加熱還流した。溶媒を減圧下で除去し、得られた物質に水を加えた。沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、シリカゲルクロマトグラフィ(CH2Cl2)にかけて白色固体の上記化合物を得た(366mg、mp = 142℃)。1H NMR(CDCl3): 7.44 (2H, d, J = 8.3Hz)、7.3-7.4 (3H, m)、7.09 (2H, d, J = 8.3Hz)、4.43 (2H, s)、4.15-4.35 (3H, m)、3.49 (2H, dd, J1 = 12.2 Hz, J2 = 2.2Hz)。
【００９８】
実施例2
4-ブロモ安息香酸 2-(3,5-ジクロロフェニル)-1,3-ジオキソ-テトラヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-6-イル エステル
【化１８】
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【００９９】
EDCI,HCl (70mg、0.37mmol)およびDMAP (4mg、0.03mmol)を、DCM(2ml)中の、2-(3,5-ジクロロフェニル)-6-ヒドロキシ-ジヒドロ-ピラゾロ[1,2-a][1,2,4]トリアゾール-1,3-ジオン(100mg、0.33mmol)(製造例6)、TEA(92μl、0.66mmol)および4-ブロモ安息香酸(73mg、0.36mmol)の溶液に加えた。RTで72時間後、反応混合物をクエン酸溶液(0.5M)および重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、次いで濃縮した。残渣をプレパラティブHPLCで精製して上記化合物を得た(20mg)。1H NMR(CDCl3): 7.71 (2H, d, J = 7Hz)、7.55 (2H, d, J = 7Hz)、7.40 (3H, m)、5.67 (1H, m)、4.34 (2H, d, J = 12.7Hz)、3.80 (2H, dd, J1= 12.7Hz, J2 = 2.8Hz)。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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