(57)【要約】本発明は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール及びその医薬的使用を開示する。この化合物は、未分化細胞の増殖を阻止し、そしてその単球への分化を誘導する著しい活性を示し、これは抗癌剤としての、そして乾癬のような皮膚の疾病、並びに皺、たるんだ皮膚、乾燥皮膚及び不充分な皮脂の分泌のような皮膚の症状の治療に対する使用を証明する。この化合物は、更にあったとしてもわずかなカルシウム血症活性を有し、そして従って、ヒトの免疫性疾患、並びに腎性骨異栄養症を治療するために使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
乾癬を持つ患者に、有効な量の以下の式：
【化１】
2004512276.tif 000006
を有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールを投与することを含んでなる乾癬を治療する方法。
【請求項２】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経口的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、非経口的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経皮的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、局所的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
白血病、大腸癌、乳癌又は前立腺癌からなる群から選択される疾病を治療する方法であって、前記疾病を持つ患者に、有効な量の以下の式：
【化２】
2004512276.tif 000007
を有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールを投与することを含んでなる、前記方法。
【請求項８】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経口的に投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、非経口的に投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経皮的に投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
多発性硬化症、ルピス（ｌｕｐｉｓ）、真性糖尿病、宿主対移植片反応、及び器官移植の拒絶反応からなる群から選択される自己免疫性疾病を治療する方法であって、前記疾病を持つ患者に、有効な量の以下の式：
【化３】
2004512276.tif 000008
を有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールを投与することを含んでなる、前記方法。
【請求項１３】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経口的に投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、非経口的に投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経皮的に投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１７】
慢性関節リウマチ、喘息、及び炎症性腸疾病からなる群から選択される炎症性疾病を治療する方法であって、前記疾病を持つ患者に、有効な量の以下の式：
【化４】
2004512276.tif 000009
を有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールを投与することを含んでなる、前記方法。
【請求項１８】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経口的に投与される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、非経口的に投与される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経皮的に投与される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
以下の式：
【化５】
2004512276.tif 000010
を有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール。
【請求項２３】
皺、充分な皮膚の堅牢性の欠如、充分な皮膚の水和の欠如及び不充分な皮脂の分泌からなる群から選択される皮膚の症状を治療する方法であって、前記皮膚の症状を持つ患者に、有効な量の以下の式：
【化６】
2004512276.tif 000011
を有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールを投与することを含んでなる、前記方法。
【請求項２４】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経口的に投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、非経口的に投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経皮的に投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、局所的に投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
腎性骨異栄養症を持つ患者に、有効な量の以下の式：
【化７】
2004512276.tif 000012
を有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールを投与することを含んでなる、腎性骨異栄養症を治療する方法。
【請求項３０】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経口的に投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、非経口的に投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、経皮的に投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールが、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与される、請求項２９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
本発明は、ビタミンＤ化合物、そして更に特に１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール及びその医薬的使用に関する。
【０００２】
天然のホルモン、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及びそのエルゴステロール系列の類似体、即ち１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ２は、動物及びヒトのカルシウム恒常性の高度に強力な制御剤として知られ、そして更に細胞分化におけるこれらの活性、Ｏｓｔｒｅｍ　ｅｔ　ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８４，２６１０（１９８７）、が確立されている。これらの代謝産物の多くの構造的類似体は、１α−ヒドロキシビタミンＤ３、１α−ヒドロキシビタミンＤ２、各種の側鎖ホモログ化ビタミン及びフッ素化類似体を含み調製され、そして試験されている。これらの化合物のいくつかは、細胞分化及びカルシウム制御において興味ある活性の分離を示す。この活性の差は、腎性骨異栄養症、ビタミンＤ抵抗性くる病、骨粗鬆症、乾癬、及びある種の悪性腫瘍のような各種の疾病の治療において有用であることができる。
【０００３】
最近になって、ビタミンＤ類似体の新しい部類、即ちいわゆる１９−ノル−ビタミンＤ化合物が発見され、これらは、ビタミンＤ系の典型におけるＡ−環の環外メチレン基（炭素１９）の二つの水素原子による置き換えによって特徴付けられる。このような１９−ノル−類似体（例えば、１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノル−ビタミンＤ３）の生物学的試験は、細胞分化を誘導することにおける高い効力を伴なう選択的活性の特性、及び非常に低いカルシウム移動活性を明らかにした。従って、これらの化合物は、悪性腫瘍の治療、又は各種の皮膚疾患の治療に対する療法剤として潜在的に有用である。このような１９−ノル−ビタミンＤ類似体の二つの異なった合成方法が記載されている（Ｐｅｒｌｍａｎ　ｅｔ　ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ．３１，１８２３（１９９０）；Ｐｅｒｌｍａｎ　ｅｔ　ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ．３２，７６６３（１９９１）、及びＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｌ．，米国特許第５，０８６，１９１号）。
【０００４】
米国特許第４，６６６，６３４号において、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の２β−ヒドロキシ及びアルコキシ（例えば、ＥＤ−７１）類似体が、骨粗鬆症に対する潜在的薬物として、そして抗腫瘍剤として、Ｃｈｕｇａｉグループによって記載され、そして試験されている。更にＯｋａｎｏ　ｅｔ　ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１６３，１４４４（１９８９）を参照されたい。１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の他の２−置換（ヒドロキシアルキルで、例えばＥＤ−１２０、及びフルオロアルキル基で）Ａ−環類似体も更に調製され、そして試験されている（Ｍｉｙａｍｏｔｏ　ｅｔ　ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４１，１１１１（１９９３）；Ｎｉｓｈｉｉ　ｅｔ　ａｌ．，Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ　Ｉｎｔ．Ｓｕｐｐｌ．１，１９０（１９９３）；Ｐｏｓｎｅｒ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５９，７８５５（１９９４）、ａｎｄ　Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６０，４６１７（１９９５））。
【０００５】
最近になって、１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノルビタミンＤ３の２−置換類似体、即ち２位においてヒドロキシ又はアルコキシ基（ＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｌ．，米国特許第５，５３６，７１３号）で、２−アルキル基（ＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｌ．，米国特許第５，９４５，４１０号）で、及び２−アルキリデン基（ＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｌ．，米国特許第５，８４３，９２８号）で置換された化合物が更に合成され、これらは興味ある、そして選択的活性の特性を示している。全てのこれらの研究は、ビタミンＤ受容体の結合部位が、合成されたビタミンＤ類似体のＣ−２における異なった置換基を受け入れることができることを示す。
【０００６】
薬理学的に重要なビタミンＤ化合物の１９−ノル部類を開発するための継続した努力において、炭素２（Ｃ−２）におけるメチレン置換基の存在によって特徴付けられる類似体が、合成され、そして試験されている。特に興味あるものは、炭素１におけるヒドロキシル基及び炭素２０に接続した短縮された側鎖によって特徴付けられる類似体、即ち１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールである。このビタミンＤ類似体は、Ｃ−２における比較的小さいメチレン基がビタミンＤ受容体を妨害しない筈であるために、興味ある目標と見受けられる。更に、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ビタミンのモデルについて行われた分子機構研究は、このような分子の修飾が、シクロヘキサンジオール環Ａの配位を実質的に変化しないことを示す。然しながら、１９−ノル−ビタミンＤ炭素骨格への２−メチレン基の導入は、その１α−及び３β−Ａ−環ヒドロキシルの特質を変化する。これらは、いまや両方とも、天然のホルモン、１α，２５−（ＯＨ）２Ｄ３の分子中の１α−ヒドロキシル基（生物学的活性に対して非常に重要）と同様にアリル的位置にある。
【０００７】
発明の概要
本発明は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール、その生物学的活性、及びこの化合物の各種の医薬的使用を指向する。
【０００８】
構造的には、この１９−ノル類似体は、以下に示す一般式Ｉ：
【０００９】
【化８】
2004512276.tif 000002
【００１０】
によって特徴付けられる。
上記の化合物は、所望する、そして高度に好都合な生物学的活性の特性を示す。この化合物は、比較的高いビタミンＤ受容体への結合、しかし１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３のそれと比較して非常に低い腸内カルシウム移動活性によって特徴付けられ、そして１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して、骨からカルシウムを移動する非常に低い能力を有する。従って、この化合物は、あったとしてもわずかなカルシウム血症活性を有することで特徴付けられる。然しながら、更に副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）の生産を抑制するその明白な能力は、この化合物を、腎性骨異栄養症の治療のための療法剤としての使用のための理想的な候補者とする。
【００１１】
本発明の化合物は、更に免疫系の不均衡によって特徴付けられるヒトの疾患、例えば多発性硬化症、ルピス（ｌｕｐｉｓ）、真性糖尿病、宿主対移植片反応、及び器官移植の拒絶反応を含む自己免疫性疾病の治療及び予防のために；そして更に慢性関節リウマチ、喘息、並びに小児脂肪便症及びクローン（ｃｒｏａｎｓ）病のような炎症性腸疾病のような炎症性疾病の治療、並びに骨折の治癒の改良及び改良された骨移植片のために特に適していることが見出されている。にきび、脱毛症及び高血圧は、本発明の化合物により治療することができる他の症状である。
【００１２】
上記の化合物は、更に比較的高い細胞分化活性によって特徴付けられる。従って、この化合物は、更に乾癬の治療、又は特に白血病、大腸癌、乳癌及び前立腺癌に対する抗癌剤としての療法剤を提供する。更に、その比較的高い細胞分化活性のために、この化合物は、皺、充分な皮膚の水和の欠如、即ち乾燥皮膚、充分な皮膚の堅牢性の欠如、即ちたるんだ皮膚、及び不充分な皮脂の分泌を含む各種の皮膚の症状の治療のための療法剤を提供する。従ってこの化合物の使用は、皮膚の加湿だけではなく、更に皮膚の障壁性機能を改良する。
【００１３】
化合物は、先に記載した疾病及び疾患を治療するための組成物中に、組成物二対して約０．０１μｇ／ｇｍないし約１００μｇ／ｇｍの量で存在することができ、そして局所的、経皮的、経口的又は非経口的に約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与することができる。
【００１４】
発明の詳細な説明
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール（本明細書中では２ＭＨＰと呼ぶ）を合成し、そして試験した。構造的には、この１９−ノル類似体は、本明細書中で先に示した一般式Ｉによって特徴付けられる。
【００１５】
基本的構造Ｉを有する１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの調製は、普通の一般的方法、即ち二環式Ｗｉｎｄａｕｓ−Ｇｒｕｎｄｍａｎｎ型ケトンＩＩのアリル的ホスフィンオキシドＩＩＩとの、対応する２−メチレン−１９−ノル−ビタミンＤ類似体ＩＶへの縮合、それに続く後者の化合物のＣ−１及びＣ−３における脱保護によって達成することができ：
【００１６】
【化９】
2004512276.tif 000003
【００１７】
構造式ＩＩ、ＩＩＩ、及びＩＶにおいて、Ｙ１及びＹ２基はヒドロキシ保護基であり、縮合反応に不安定であるか、又はそれを妨害するいかなる官能基も当該技術分野において公知のように適切に保護されることは更に了解されることである。上記に示した方法は、ビタミンＤ化合物の調製のために効果的に適用されてきた収斂的合成概念の適用を表す。［例えばＬｙｔｈｇｏｅ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ　Ｔｒａｎｓ．Ｉ，５９０（１９７８）；Ｌｙｔｈｇｏｅ，Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．９，４４９（１９８３）；Ｔｏｈ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４８，１４１４（１９８３）；Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１，３０９８（１９８６）；Ｓａｒｄｉｎａ　ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１，１２６４（１９８６）；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５１，１２６９（１９８６）；ＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｌ．，米国特許第５，０８６，１９１号；ＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｌ．，米国特許第５，５３６，７１３号］。
【００１８】
一般構造式ＩＩのヒドロインダノンは既知であるか、又は既知の方法によって調製することができる。
一般構造式ＩＩＩの必要とするホスフィンオキシドの調製に対して、Ｐｅｒｌｍａｎ　ｅｔ　ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ．３２，７６６３（１９９１）及びＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｌ．，米国特許第５，０８６，１９１号によって記載されているような商業的な（１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−（−）−キナ酸から容易に得られる、キナ酸メチル誘導体から出発する新規な合成経路が開発されている。
【００１９】
化合物Ｉの合成の全体的な方法は、１９９９年８月１０日に出願された“２−Ａｌｋｙｌｉｄｅｎｅ−１９−Ｎｏｒ−Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”と題する出願一連番号０９／３７０，９６６中に例示され、そして更に完全に記載されており、その明細書は、特定的に本明細書中に参考文献として援用される。
【００２０】
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの生物学的活性
１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの２位へのメチレン基の導入は、ブタ腸管ビタミンＤ受容体への結合に１α，２５−ジヒドロビタミンＤ３と比較して、僅かな影響か、又は影響を持たなかった。この化合物は、標準的１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３と比較してブタの受容体に同等に良好に結合した（図１）。これらの結果から、この化合物が同等の生物学的活性を有するものであることを期待することができた。然しながら、驚くべきことに、２メチレン置換は、独特な生物学的活性を伴なう高度に選択的な類似体を生産した。
【００２１】
表１及び図２は、２ＭＨＰが、腸内カルシウム輸送を刺激することにおいて、天然のホルモン１，２５−ジヒドロキシＤ３（１，２５（ＯＨ）２Ｄ３）のそれと比較して非常にわずかな活性を有することを示す。
【００２２】
表１及び図３は、２ＭＨＰが、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と比較して非常にわずかな骨カルシウム移動活性を有することを証明する。
従って図２及び３は、２ＭＨＰが、あったとしてもわずかなカルシウム血性活性を有するものとして特徴付けることができることを例示する。
【００２３】
図４は、２ＭＨＰが、ＨＬ−６０分化において１，２５（ＯＨ）２Ｄ３と殆んど同様に強力であり、乾癬及び癌、特に白血病、大腸癌、乳癌及び前立腺癌に対する治療のための優れた候補者とすることを例示する。更に、その比較的高い細胞分化活性のために、この化合物は、皺、充分な皮膚の水和の欠如、即ち乾燥皮膚、充分な皮膚の堅牢性の欠如、即ちたるんだ皮膚、及び不充分な皮脂の分泌を含む各種の皮膚の症状の治療のための療法剤を提供する。従ってこの化合物の使用は、皮膚の湿潤化だけではなく、更に皮膚の障壁機能を改良する。
【００２４】
図５は、２ＭＨＰが、骨細胞において転写活性を有することを例示し、一方、図６は、２ＭＨＰが、腎細胞において転写活性を有することを例示する。これらのデータは、図１のＶＤＲ結合データに対して更なる支持を与える。転写活性は、二つの異なった細胞系で測定された。ＲＯＳ　１７／２．８（骨）又はＬＬＣ（腎）細胞を、２４−ヒドロキシラーゼ（２４ＯＨアーゼ）遺伝子プロモータでルシフェラーゼレポータ遺伝子の上流で安定的にトランスフェクトした（Ａｒｂｏｕｒ　ｅｔ　ａｌ，１９９８）。細胞に、ある範囲の投与量を与えた。投与の１６時間後、細胞を回収し、そしてルシフェラーゼ活性を照度計を使用して測定した。１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールのＥＣ５０は、骨細胞において腎細胞より約１０倍低い。腎細胞において、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールは、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３より大きいか又は同等である。図５及び６のグラフは、４ないし５回の独立の実験の代表である。図５及び６において、ＲＬＵは相対的ルシフェラーゼ単位を意味する。
【００２５】
表２及び図７は、ラットの２ＭＨＰの一回投与の投与前及び後の両方の血清カルシウムの分析を示す。これらのデータは、図３のデータに対して更なる支持を与える。
【００２６】
類似体のブタ腸管受容体に対する競合的結合は、Ｄａｍｅ　ｅｔ　ａｌ（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２５，４５２３−４５３４，１９８６）によって記載された方法によって行った。
【００２７】
ＨＬ−６０前骨髄球の単球への分化は、Ｏｓｔｒｅｍ　ｅｔ　ａｌ（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２，１４１６４−１４１７１，１９８７）によって記載されたように決定した。
【００２８】
データの解釈
カルシウムがゼロの規定食によるラットの血清カルシウムを決定するためのｉｎ　ｖｉｖｏ試験は、２ＭＨＰの骨芽細胞又は骨活性に対する一つの洞察を与える。容量反応曲線は、２ＭＨＰが、骨芽細胞の刺激により血漿中のカルシウムを上昇することにおいて、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３より有意に強力ではないことを示す（図３及び図７）。同時に、腸内カルシウム輸送における２ＭＨＰの活性は、１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３のそれより更に有意に少ない（図２）。従って、これらのデータは、２ＭＨＰが、あったとしてもわずかな骨に対する活性を有することを示す。
【００２９】
２ＭＨＰは、ビタミンＤ受容体に結合することにおいて１，２５（ＯＨ）２Ｄ３よりわずかに活性が低く（図１）、そして骨細胞（図５）及び腎細胞（図６）中の両方で有意な転写活性を有する。然しながら、これは、更に前骨髄球ＨＬ−６０の単球への分化を起こすことにおいて、１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３よりごくわずか低い活性である（図４）。この結果は、細胞分化を起こし、そして細胞増殖を抑制することにおいて直接の細胞活性を有するために、乾癬において２ＭＨＰが非常に有効であるものであることを示唆する。これは、更に抗癌剤として、特に白血病、大腸癌、乳癌及び前立腺癌に対して、並びに乾燥皮膚（皮膚の水和の欠如）、過度の皮膚のたるみ（不充分な皮膚の堅牢性）、不充分な皮脂の分泌及び皺のような皮膚の症状に対して有意な活性を有するものであることを示す。
【００３０】
これらの結果は、２ＭＨＰが、多くのヒトの療法に対する優れた候補者であり、そしてこれが、自己免疫性疾病、癌、及び乾癬のような多くの状況において有用であることができることを例示する。２ＭＨＰが、ビタミンＤ受容体への有意な結合活性を有するが、しかし血液血清カルシウムを上昇するわずかな活性を有し、そしてなおＰＴＨの生産を抑制する能力を有するために、これは、更に腎性骨異栄養症の治療のために有用であることができる。
【００３１】
オスの離乳したＳｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットをＤｉｅｔ　１１（０．４７％Ｃａ）規定食＋ＡＥＫで１１日間、続いてＤｉｅｔ　１１（０．０２％Ｃａ）＋ＡＥＫで３１日間飼った。投与（腹膜内）は、犠牲の７日前に開始した。投与は２４時間離して毎日基準で与えた。腸の最初の１０ｃｍを腸内輸送研究のために収集し、そして血清を骨Ｃａ移動分析のために収集した。結果を表１に報告し、そして図２のグラフに例示する。
【００３２】
【表１】
2004512276.tif 000004
【００３３】
離乳したオスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（６匹／群）を、ビタミンＤ−欠損規定食で合計５週間飼った。最初の３週間、ラットに正常カルシウム規定食（Ｄｉｅｔ　１１＋０．４７％Ｃａ＋ＡＥＫ補充剤）を給餌し、そして最後の２週間、ラットに低カルシウム規定食（Ｄｉｅｔ　１１＋０．０２％Ｃａ＋ＡＥＫ補充剤）を給餌した。犠牲の概略２４時間前に、ラットを尾部から採血し、そして次いで１ｎｍｏｌのそれぞれの化合物を投与した。投与は、胃管によって１００マイクロリットルの植物油中で経口的に放出された。血清を投与後概略２４時間に収集し、そしてこれを、投与前の血清と共に原子吸光分光分析を使用した全カルシウム分析にかけた。これらのデータは、以下の表２に報告し、そして図７のグラフに例示する。
【００３４】
【表２】
2004512276.tif 000005
【００３５】
治療の目的に対して、式Ｉによって定義される本発明の化合物は、無害の溶媒中の溶液として、或いは適した溶媒又は担体中の乳液、懸濁液又は分散物として、或いは固体の担体といっしょに丸薬、錠剤又はカプセルとして、当該技術分野において既知の慣用的な方法によって医薬的適用のために調剤することができる。いかなるこのような製剤も、更に安定剤、抗酸化剤、結合剤、着色剤、又は乳化剤或いは味覚改良剤のような他の医薬的に受容可能な、そして非毒性の賦形剤を含有することができる。
【００３６】
化合物は、経口的、局所的、非経口的又は経皮的に投与することができる。化合物は、注射によって、又は静脈内注入、或いは適した滅菌溶液、或いは消化管を経由する液体又は固体投与の形態で、又はクリーム、軟膏、貼布の形態で、又は経皮適用に適した同様なベヒクルで都合よく投与される。一日当たり０．０１μｇないし１００μｇの化合物の投与量が治療目的には適当であり、このような投与量は、治療される疾病、その重篤度及び対象の反応によって当該技術分野において充分に了解されているように調節される。化合物が作用の特異性を示すために、それぞれは、異なった程度の骨の無機物の移動及びカルシウム輸送の刺激が好都合であると見出される状況においては、単独で、又はもう一つの活性なビタミンＤ化合物−−例えば１α−ヒドロキシビタミンＤ２又はＤ３、或いは１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３−−の段階的な投与量といっしょに、適したように投与することができる。
【００３７】
先に記載した治療に使用される組成物は、活性成分として、有効な量の上記の式Ｉによって定義した通りの１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール及び適した担体を含んでなる。本発明によって使用されるこのような化合物の有効な量は、組成物のｇｍ当たり約０．０１μｇないし約１００μｇであり、そして局所的、経皮的、経口的又は非経口的に、約０．０１μｇ／日ないし約１００μｇ／日の投与量で投与することができる。
【００３８】
化合物は、クリーム、ローション、軟膏、局所貼布、丸薬、カプセル又は錠剤として、或いは医薬的に無害な、そして受容可能な溶媒又は油中の溶液、乳剤、分散物、又は懸濁液のような液体の形態で調剤することができ、そしてこのような製剤は、更に安定剤、抗酸化剤、乳化剤、着色剤、結合剤又は味覚改良剤のような他の医薬的に無害な又は有益な成分を含有することができる。
【００３９】
化合物は、前骨髄球の正常なマクロファージへの分化に影響するために充分な量で好都合に投与される。先に記載した投与量は適しているが、与えられた量は、当該技術分野において充分に了解されているように、疾病の重篤度、並びに対象の症状及び反応によって調節されることは了解されることである。
【００４０】
本発明の製剤は、活性成分を、医薬的に受容可能なその担体及び所望により他の療法的成分と共に含んでなる。担体は、製剤の他の成分と相溶性であり、そしてその受容者にとって有害ではないと言う意味において“受容可能”でなければならない。
【００４１】
経口投与に適した本発明の製剤は、それぞれが所定の量の活性成分を含有するカプセル、サッシェ、錠剤又はロザンジのような個別の単位の形態；散剤又は粒剤の形態；水性液体又は非水性液体中の溶液又は懸濁液の形態；或いは水中油乳剤又は油中水乳剤の形態であることができる。
【００４２】
直腸投与の製剤は、活性成分及びココアバターのような担体を組み込んだ座薬の形態、又は浣腸の形態であることができる。
非経口投与に適した製剤は、好ましくは受容者の血液と等張である活性成分の滅菌の油性又は水性の製剤を、都合よくは含んでなる。
【００４３】
局所投与に適した製剤は、塗布剤、ローション、膏薬（ａｐｐｌｉｃａｎｔ）、クリーム、軟膏又はペーストのような水中油又は油中水乳剤のような液体又は半液体の製剤；点滴薬のような溶液又は懸濁液；或いは噴霧薬のような製剤を含む。
【００４４】
喘息の治療に対しては、噴霧缶、ネブライザー又はアトマイザーで投薬される散剤の吸入、自己噴射又は噴霧製剤を使用することができる。投薬される場合、製剤は、好ましくは１０ないし１００μの範囲の粒子の大きさを有する。
【００４５】
製剤は、都合よくは投与量単位形態で与えることができ、そして製薬技術において公知の方法のいずれによっても調製することができる。“投与量単位”の用語は、患者に活性成分そのまま、或いはその固体又は液体の医薬的希釈剤若しくは担体との混合物のいずれかとして含んでなる、物理的及び化学的に安定な単位投与量として投与されることが可能な単位の、即ち一回の投与量を意味する。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、［３Ｈ］−１，２５−（ＯＨ）２−Ｄ３のビタミンＤブタ腸管核受容体への結合に競合する、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール及び１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の相体的活性を例示するグラフであり；
【図２】図２は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの腸内カルシウム輸送活性を、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して例示するグラフであり；
【図３】図３は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの骨カルシウム移動活性を、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して例示するグラフであり；
【図４】図４は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロール及び１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の濃度の関数としての、ＨＬ−６０細胞分化のパーセントを例示するグラフであり；
【図５】図５は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの骨細胞中の転写活性を、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及び１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して例示するグラフであり；
【図６】図６は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの腎細胞中の転写活性を、２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及び１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して例示するグラフであり；そして
【図７】図７は、１α−ヒドロキシ−２−メチレン−１９−ノル−ホモプレグナカルシフェロールの一回投与による治療後のオスのラットの血液血清カルシウム水準を、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３及び２−メチレン−１９−ノル−２０（Ｓ）−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３と比較して例示する棒グラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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