(57)【要約】癌を阻害するための、および／または、発癌の初期段階における癌予防効果を提供するための、栄養補助食品の提供および使用。栄養補助食品は、フランス領ポリネシアの純粋な果汁ピューレから再構成したモリンダシトリフォリア果実果汁を含み、天然ブドウ果汁濃縮物、天然ブルーベリー果汁濃縮物、および／または他の天然果汁濃縮物のような、他の天然果汁を含んでもよい。栄養補助食品は、心臓、腎臓、肺、および肝臓のような種々の器官においてＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を減らす。ＤＮＡ付加物の形成は、化学的発癌を促進する。栄養補助食品の使用は、ＳＡＲにより媒介される酸化的修飾から細胞および／または脂質を保護する。したがって、栄養補助食品の使用は、癌の阻害に寄与する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を阻害するために摂取のための栄養補助食品を提供する工程を含み、ここで栄養補助食品はモリンダシトリフォリアの果実からの果汁を含む、
癌を阻害する方法。
【請求項２】
栄養補助食品を摂取してＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を減らすことにより癌が阻害される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＤＭＢＡ−ＤＮＡの削減が化学的発癌を促進する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
栄養補助食品の推奨される使用を提供する工程をさらに含み、ここで推奨される使用が：
１日あたり１液量オンスの栄養補助食品を摂取すること；
１日あたり１液量オンス以上の栄養補助食品を摂取すること；および
１日あたり１液量オンス未満の栄養補助食品を摂取すること；
のうちの１つを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
推奨される使用が食前に栄養補助食品を摂取することをさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
提供する工程が：
モリンダシトリフォリアから果実を収穫すること；
収穫された果実を加工のために準備すること；
準備された果実を加工して栄養補助食品を得ること；および
栄養補助食品を包装すること；
の工程を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
果実が直径１インチ以上１２インチ以下のときに収穫される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
収穫された果実を準備する工程が：
収穫された果実を洗浄すること；
収穫された果実を熟化させること；
収穫された果実から傷のある果実を削除すること；および
収穫された果実を１またはそれ以上のプラスチックでライニングされた容器に置くこと；
の少なくとも１つの工程を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
準備された果実を加工する工程が：
収穫された果実の種；
収穫された果実の皮；および
収穫された果実の果肉；
のうちの少なくとも１つから収穫された果実の果汁を分離すること、
フレーバー化剤；
甘味剤；
栄養成分；
植物抽出物；および
色素；
のうちの少なくとも１つと収穫された果実の果汁を混合すること、および
少なくとも１８１°Ｆの温度に栄養補助食品を加熱すること、
の工程を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
栄養補助食品を包装する工程が、ガラスおよびプラスチックのうちの少なくとも１つを含む容器に栄養補助食品を包装する工程を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を減らす方法であって、
ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を減らすために摂取のための栄養補助食品を提供すること、ここで、栄養補助食品はモリンダシトリフォリアの果実からの果汁を含み；
栄養補助食品の推奨される使用を提供すること；
の工程を含む、方法。
【請求項１２】
ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成の削減が：
腎臓；
心臓；
肺；および
肝臓；
のうちの少なくとも１つの中で起こる、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成の削減が化学的発癌を促進する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
推奨される使用が：
１日あたり１液量オンスの栄養補助食品を摂取すること；
１日あたり１液量オンス以上の栄養補助食品を摂取すること；および
１日あたり１液量オンス未満の栄養補助食品を摂取すること；
のうちの１つを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
推奨される使用が食前に栄養補助食品を摂取することをさらに含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
提供される栄養補助食品がフランス領ポリネシアの純粋な果汁ピューレから再構成されたモリンダシトリフォリアの果実果汁を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
癌を阻害するために用いられる栄養補助食品であって、
モリンダシトリフォリアから得られた果汁、ここで果汁の摂取がＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を減らして癌の阻害を促進し；および
フレーバー化剤；
甘味剤；
栄養成分；
植物抽出物；および
色素；
のうちの少なくとも１つ、
を含む、栄養補助食品。
【請求項１８】
果汁が純粋な果汁ピューレであり、モリンダシトリフォリアがフランス領ポリネシア産である、請求項１７に記載の栄養補助食品。
【請求項１９】
栄養補助食品の摂取が：
脂質ヒドロペルオキシド；および
スーバーオキシドアニオンフリーラジカル；
のうちの少なくとも１つをさらに除去する、請求項１７に記載の栄養補助食品。
【請求項２０】
栄養補助食品の摂取が：
細胞の再生；
栄養を吸収する能力；および
Ｔ細胞の産生；
のうちの少なくとも１つを含む、細胞の機能性をさらに増加させる、請求項１７に記載の栄養補助食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
この出願は、２０００年１２月５日に出願された、「タヒチアンノニ果汁の抗酸化の研究」と題する米国仮特許出願番号６０／２５１，４１７、および２００１年１１月２９日に出願された、「人体における細胞損傷の削減」と題する米国仮特許出願番号＿＿＿＿の優先権を主張するものである。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、癌を阻害することに関連する。特に、本発明は、発癌の初期段階で癌予防効果を提供する栄養補助食品の使用に関連する。
【背景技術】
【０００３】
酸素を用いて一般に「フリーラジカル」と呼ばれる毒を産生する、自然の細胞工程が人体内に存在する。これらのフリーラジカルは、体内の炭水化物、デオキシリボ核酸（「ＤＮＡ」）、酵素、脂質、および／またはタンパク質に結合して攻撃する、高い反応性の酸化物質となりうる。フリーラジカルは、一般的に細胞の機能および再生を妨害し、体内の細胞、組織、および器官の不全および／または死の原因となりうる。
【０００４】
フリーラジカルにより引き起こされる細胞の損傷を減らすための自然の防御機構が存在するが、防御機構は身体が加齢するのに伴いだんだん効果がなくなってくる。したがって、フリーラジカルにより引き起こされる損傷は、アルツハイマー病、癌、糖尿病、心疾患、黄班変成、およびパーキンソン病のようないくつかの加齢に関連した疾患に関係すると考えられてきた。実際、フリーラジカルにより引き起こされる損傷が人体の加齢過程において不可欠な要因でありうるとする提案さえもなされてきた。
【０００５】
体内で産生されるフリーラジカルの量は、一般的に個体がたばこの煙や水銀などの種々の他の毒に暴露されるのに伴い増加する。さらに、運動が体内の酸素の必要性を煽るので、フリーラジカルの産生は運動により一般的に増強される。
【０００６】
フリーラジカルにより引き起こされる細胞の損傷を減らすために現在用いられる１つの技術には、一般に「ビタミンＣ」として知られるアスコルビン酸の摂取が含まれる。ビタミンＣの規則的な摂取が、冠状動脈疾患、糖尿病、高血圧症、高コレステロール症、およびホモシステインの高血中濃度を有する個体に望ましい有益さを提供しうることが、研究により示されてきた。
【０００７】
細胞の損傷を減らすために用いられる他の技術には、カテキン、フェノール酸、プロアン、およびトシアニジンの混合物のような生体フラボノイドの規則的な摂取が含まれる。このような混合物の１つは、フランスの沿岸地方の松の皮から得られるプロアントシアニジンと呼ばれる高い生体活性を有する物質から作られ、製品中の活性成分はピクノゲノール（登録商標）として知られている。いくつかの報告によれば、生体フラボノイドのこの混合物は皮膚に吸収され、７２時間もフリーラジカルを中和するために保持されうる。これは、循環系を改善し、免疫系を強くするであろう。
【０００８】
細胞の損傷を減らすために用いられる他の技術には、ブドウの種の抽出物の摂取が含まれ、これは生体組織を強くし保護すると言われてきた。報告では、ブドウの種の抽出物は血管を強くし、皮膚を改善し、循環を助けうることが示された。さらに、ブドウの種の抽出物は、毛小胞の成長サイクルを妨げるホルモンジヒドロテステロン（「ＤＨＴ」）を破壊し、これにより健康な毛髪成長を刺激する利点がある。
【０００９】
報告では、種々の物質がフリーラジカルにより引き起こされる細胞の損傷を減らすために用いられると訴えてきたが、研究者が答えを探すことを継続すべき矛盾する結果が得られてきた。よって、現在用いられている物質を増やし、または細胞の機能および再生の妨害を阻害する他の物質に置き換え、これにより細胞の不全を阻害することは、この分野における発展となるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
（発明の概要）
本発明は、癌を阻害することに関連する。特に、本発明は、発癌の初期段階で癌予防効果を提供する栄養補助食品の使用に関連する。
【００１１】
本発明の実施は、科学的にモリンダシトリフォリアＬ．として知られるインディアンマルベリー植物（桑）の果実から加工された栄養補助食品と関係して行われる。１つの実施では、栄養補助食品は、フランス領ポリネシアの純粋な果汁ピューレから再構成されたモリンダシトリフォリア果実果汁が含まれる。補助食品には、天然ブドウ果汁濃縮物、天然ブルーベリー果汁濃縮物、および／または他の天然果汁濃縮物のような他の天然果汁を含んでもよい。１つの実施では、栄養補助食品は乾燥したまたは粉末のモリンダシトリフォリアから加工されるのではなく、モリンダシトリフォリアの果実から液体が抽出され、これを用いて栄養補助食品が作られる。栄養補助食品の１つの実施は、「タヒチアンノニ（登録商標）」と呼ばれ、５１５２Ｎ．エッジウッド  Ｄｒ．＃１００，プロボ、ユタ州，８４６０４に事業拠点を置く、モリンダ社より入手できる。
【００１２】
ここに記載された栄養補助食品の使用には、体内の脂質ヒドロペルオキシドおよびスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去することが含まれ、これにより人体における細胞の損傷を減らし、および／または発癌の初期段階で癌予防効果を提供する。栄養補助食品には、細胞の再生および細胞の機能等の体内における細胞のプラスの機能性を増加するために細胞レベルで作用する物質の組み合わせが含まれる。物質の組み合わせは、ビタミンおよびミネラルのような栄養素を吸収し利用する体内の細胞の能力を増加し、免疫系のＴ細胞の産生を刺激する。Ｔ細胞は、体内の感染に対する攻撃を導き、免疫反応を終結させ、および／または、癌細胞および／またはウイルス感染細胞を殺す、リンパ球または白血球の１つの型である。ここで記載された実験結果から、本発明にしたがって実行される発癌性ＤＮＡ付加物の形成の防止および除去が、癌阻害に寄与することが示される。
【００１３】
１つの実施では、人体の自然の細胞工程により産生される毒を減らすために１日あたり１オンスの栄養補助食品が摂取される。あるいは、摂取量には、１日あたり１オンス以上または１日あたり１オンス未満が含まれうる。さらに、栄養補助食品は、午前中および／または食前に投与されうる。
【００１４】
本発明の方法および工程が、体内の脂質ヒドロペルオキシドおよびスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去すること、および／または発癌の初期段階で癌予防効果を提供すること、の範囲において特に有用であると証明されたが、当業者は、本発明の方法および工程が体内の細胞の損傷を減らすために種々の異なる応用および種々の異なる方法でも使用できることを、認識できる。
【００１５】
本発明のこれらおよび他の特徴および利点は、以下の記載および特許請求の範囲に述べられ、またはより完全に明らかとなるであろう。特徴および利点は、特許請求の範囲で指摘した装置および組み合わせにより理解され、得られるであろう。さらに、本発明の特徴および利点は、本発明の実施により理解され、または以下に述べる記載により明らかとなるであろう。
【００１６】
（発明の詳細な記載）
本発明は、癌を阻害し減らすことに関連する。特に、本発明は、発癌の初期段階で癌予防効果を提供する栄養補助食品の使用に関連する。
【００１７】
本発明の以下の開示は、３つの見出し、即ち、「栄養補助食品」、「細胞損傷の削減」、および「癌の阻害」にグループ化される。見出しの利用は、読み手の便宜のためだけであり、いずれに意味においても限定するものと解釈すべきではない。
【００１８】
栄養補助食品
本発明の態様は、科学的にモリンダシトリフォリアＬ．として知られるインディアンマルベリー植物の果実から加工された栄養補助食品と関係して行われる。この植物は、アジア、オーストラリア、および太平洋の島々のような、ひらけた熱帯沿岸地域に一般に見出される常緑の木または低木である。これは、コーヒー科の１種であり、一般にひらけた低地で、しばしば溶岩流の上またはこれに沿って、および森の端にて育成する。まっすぐな幹、大きく緑色の楕円形の葉、白い筒状の花、および卵形の黄色の果実により、モリンダシトリフォリアであることを容易に確認できる。
【００１９】
この植物は、果樹園で栽培でき、また海抜０から１３００フィートの湿ったおよび乾燥した両方の地域で移植されてきた。特に、モリンダシトリフォリアは、フランス領ポリネシアの青々としたよい土地で繁茂し、これにはタヒチが含まれ、ここでは島々が一般的にその原始の状態をとどめており、また理想的な気候および土壌状態であり、フランス領ポリネシアにおいて特に大きく、青々と成長する。成長した植物は、高さ１５から２０フィートに達し、年間を通じて果実を実らせる。
【００２０】
モリンダシトリフォリアは、一般的に断面が角張った粗い枝を持つ。枝は太く、目立った葉痕がついている。葉は、卵形で厚く、深い葉脈があり、葉柄は短く、緑色で、光沢があり、８インチ以上の長さに成長しうる。
【００２１】
モリンダシトリフォリアの小さい白い花は、球形で融合した花頭で生じ、一般的に直径約１インチの花房を形成する。それぞれの花頭が多くの花のつぼみを生成する一方、特定の花頭において所定の期間に一般的に１つか２つのつぼみしか開かない。花は、しばしば長さ約１／３インチの５から７つの裂け目のある花冠を一般的に含む。花は密に詰まっていて、花頭の成長の種々の段階で現れる。例えば、緑のつぼみが特定の花頭の先端近くに存在する一方、花頭の底部近くの古い花は、すでに開き、また閉じているであろう。花頭の先端近くの最後の花が開く前に、小さな黄緑色の果実が花に置き換わる。
【００２２】
モリンダシトリフォリアの果実が熟すと、一般的に数インチの長さとなる。一般的に、果実は細長い形で、不揃いの個々の小さな実の成長パターンによる多角形の輪郭がつくことによるイボ状の外観を含む。花冠からの葉痕として残ったくぼみが、多角形の輪郭のそれぞれの内側に位置する。緑色のうちに摘むと、果実は一般的に腐る。即ち、一般的に摘む前に果実を熟化して熟成させるのがよい。
【００２３】
モリンダシトリフォリアの果実が一旦熟化すると、皮は一般的に白色となり、実は白黄色となる。熟化した果実は、一般的にジャガイモと同様の大きさであり、小さなパンノキの実に似ている。果実が熟成または過熟となると、皮は半透明になり、実は柔らかくなり、悪いにおいおよび／または味となる。果実の種または核は、一般的に三角形であり、赤茶色である。気嚢は、種の１端についており、離れた種が浮くようになっている。
【００２４】
モリンダシトリフォリアは、天然成分に富んでいる。例えば、天然成分には：（葉からは）アラニン、アントラキノン、アルギニン、アスコルビン酸、アスパラギン酸、カルシウム、ベータ−カロチン、システイン、シスチン、グリシン、グルタミン酸、グリコシド、ヒスチジン、鉄、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、ナイアシン、フェニルアラニン、リン、プロリン、レジン、リボフラビン、セリン、ベータ−シトステロール、チアミン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、ウルソル酸、およびバリン；（花からは）アカセチン−７−ｏ−ベータ−ｄ（＋）−グルコピラノシド、５，７−ジメチル−アピゲニン−４’−ｏ−ベータ−ｄ（＋）−ガラクトピラノシド、および６，８−ジメトキシ−３−メチルアントラキノン−１−ｏ−ベータラムノシル−グルコピラノシド；（果実からは）酢酸、アスペルロシド、ブタン酸、安息香酸、ベンジルアルコール、１−ブタノール、カプリル酸、デカン酸、（Ｅ）−６−ドデセノ−ガンマ−ラクトン、（Ｚ，Ｚ，Ｚ）−８，１１，１４−エイコサトリエン酸、エライジン酸、デカン酸エチル、ヘキサン酸エチル、オクタン酸エチル、パルミチン酸エチル、（Ｚ）−６−（エチルチオメチル）ベンゼン、オイゲノール、グルコース、ヘプタン酸、２−ヘプタノン、ヘキサナール、ヘキサナミド、ヘキサン二酸、ヘキサン酸、１−ヘキサノール、３−ヒドロキシ−２−ブタノン、ラウリン酸、リモネン、リノール酸、２−メチルブタン酸、３−メチル−２−ブテン−１−オール、３−メチル−３−ブテン−１−オール、デカン酸メチル、エライジン酸メチル、ヘキサン酸メチル、３−メチルチオ−プロパン酸メチル、オクタン酸メチル、オレイン酸メチル、パルミチン酸メチル、２−メチルプロパン酸、３−メチルチオプロパン酸、ノナン酸、ミリスチン酸、オクタン酸、オレイン酸、パルミチン酸、カリウム、スコポレチン、ウンデカン酸、（Ｚ，Ｚ）−２，５−ウンデカジエン−１−オール、およびボミフォール；（根からは）アントラキノン、アスペルロシド（ルビクロリン酸）、ダムナカンタール、グリコシド、モリンダジオール、モリンジン、モリンドン、粘質物質、ノル−ダムナカンタール、ルビアジン、ルビアジンモノメチルエーテル、レジン、ソランジジオール、ステロールおよびトリヒドロメチルアントラキノン−モノメチルエーテル；（根の皮からは）アリザリン、クロロルビン、グリコシド（ペントース、ヘキソース）、モリンダジオール、モリンダニグリン、モリンジン、モリンドン、樹脂物質、ルビアジンモノメチルエーテルおよびソランジジオール；（樹木からは）アントラガロール−２，３−ジメチルエーテル；（組織培養からは）ダムナカンタール、ルシジン、ルシジン−３−プリメベロシドおよびモリンドン−６ベータ−プリメベロシド；（植物からは）アリザリン、アリザリン−アルファ−メチルエーテル、アントラキノン、アスペルロシド、ヘキサン酸、モリンダジオール、モリンドン、モリンドゲニン、オクタン酸およびウルソル酸；が含まれる。
【００２５】
モリンダシトリフォリアの果実は、例えば、炎症を和らげる、不安感を和らげる、体重管理をサポートする、体内の血液循環を促進するのを助ける、などの健康増進作用のある酵素を含む。モリンダシトリフォリアは、刺激やリラックスの人体の必要性に応えて、バランスのとれた人体システムをサポートする薬用植物である。本発明の態様は、モリンダシトリフォリアから作られる果実果汁を含む栄養補助食品の製造および利用に関係する。
【００２６】
１つの態様として、栄養補助食品はフランス領ポリネシアの純粋な果汁ピューレを再構成したモリンダシトリフォリア果実果汁を含む。補助食品は、天然ブドウ果汁濃縮物、天然ブルーベリー果汁濃縮物、および／または他の天然果汁濃縮物のような他の天然果汁をも含んでもよい。１つの態様として、栄養補助食品は、乾燥または粉末のモリンダシトリフォリアから加工されるのではなく、むしろ、下記で議論するように、モリンダシトリフォリアの果実から液体が抽出され、栄養補助食品の作製に使用される。１つの態様として、栄養補助食品は、「タヒチアンノニ（登録商標）」と呼ばれ、５１５２Ｎ．エッジウッド  Ｄｒ．＃１００，プロボ、ユタ州，８４６０４に事業拠点を置く、モリンダ社より入手できる。
【００２７】
次の議論は、本発明に沿って細胞損傷を減らし、および／または癌を阻害するために用いられる栄養補助食品の製造のための代表的なプロセスを提供し、栄養補助食品に関わる当業者は、本発明に沿って細胞損傷を減少させ、および／または癌を阻害するための栄養補助食品を製造するための下記の開示の替わりに、またはこれに付け加えて、本発明の態様は他の方法および／または工程を包含することができることを理解できるであろう。
【００２８】
１つの態様として、モリンダシトリフォリアの果実は、それが最低１インチの長さのものから直径で１２インチのものまで、手作業または機械装置によって収穫される。この時、果実は、一般的に深緑色から、黄緑色を経由して白色まで、およびこれら濃淡の間の色を有する。果実は、収穫された後、加工前に完全に洗浄される。
【００２９】
熟成した果実が地面に接触しないように、果実は、装置の上に載せられて０から１４日間、熟化または熟成させる。果実は、典型的には、熟成させる間布または網状材料でカバーされるが、カバー無しで成熟させることもできる。次の加工の準備ができたときには、果実の色は、薄緑、薄黄色、白または透明色のような薄い色となっている。果実は、傷のあるものおよび／または過剰に緑で堅いものを見分けるために検査される。傷のあるものおよび堅い緑の実は、許容される成熟したものから分離される。
【００３０】
許容される熟成した果実は、典型的には、さらなる加工と輸送のためにプラスチックでライニングされたコンテナに入れられる。果実のコンテナは０から３０日間保持されるが、一般的には、多くのコンテナは加工前に７から１４日間保存される。コンテナは、任意に、さらなる加工の前に冷蔵環境のもとで保存され得る。
【００３１】
果実は、貯蔵コンテナから取り出され、手動または機械的分離器により加工される。種と皮は、果汁および果肉から分離される。果汁と果肉は貯蔵と輸送のためにコンテナに詰めてもよい。コンテナは、冷蔵、冷凍または室温状態で貯蔵できる。または、果汁は最終の果汁製品に直ちに加工してもよい。
【００３２】
ろ過設備は、果汁から果肉を除去するために用いてもよい。ろ過設備は、遠心分離デカンター、１から２，０００ミクロンのスクリーンフィルター（１つの態様としてより好ましくは、５００ミクロン以下）、フィルタープレス、逆浸透性ろ過および／または他の標準的な商業用フィルター装置が含まれる。フィルターの操作圧力は、０．１ｐｓｉｇから約１０００ｐｓｉｇの範囲がよい。流速は、０．１ｇ．ｐ．ｍ．から１０００ｇ．ｐ．ｍ．の範囲がよく、１つの態様としてより好ましくは、５と５０ｇ．ｐ．ｍ．の間である。湿った果肉は洗浄され、果肉から果汁を除去するため最低一回ろ過される。湿った果肉は、典型的には、１０から４０ｗｔ％の繊維を含み、最低温度１８１°Ｆ（８３℃）で殺菌され、さらなる加工のためにドラムに入れられ、または高繊維製品に加工される。
【００３３】
モリンダシトリフォリアの果汁とピューレは、典型的には、均一に混ぜられ、その後、フレーバー化剤、甘味剤、栄養成分、植物、抽出物および／または色素のような他の成分と混合される。例えば、フレーバー化剤は、これに限定されるものではないが、美味に貢献する人工および／または天然のフレーバー化剤または成分を含み得る。甘味剤の例としては、限定されないが、化学的にまたは酵素的に結晶片、粉末、および／またはシロップに転換される、とうもろこし、てんさい糖、さとうきび、ジャガイモ、タピオカまたは他のスターチ含有源由来の天然の糖分、または、人工若しくは高強度甘味剤であって、そのうちのいくつかは、アスパルテーム、スクラロース、ステビア、サッカリン等の他の甘味剤がある。栄養成分の例としては、ビタミン（例えば、A，B1からB12，C，D，E，葉酸、パントテン酸、ビオチン等）、ミネラル、および／または微量元素（例えば、カルシウム、クロム、銅、コバルト、ホウ素、マグネシウム、鉄、セレン、マンガン、モリブデン、カリウム、ヨウ素、亜鉛および／またはリン）、薬用植物および／または植物抽出物（例えば、アルファルファ草、ミツバチ花粉、クロレラ粉、ドン・クワイ粉、エッチーナシーの根、ギンコ・ビロバ抽出物、ホーステイル薬用植物、しいたけ、スピルリナ海草、および／またはブドウの種の抽出物）、生物活性化学薬品（例えば、カフェイン、エフェドリン、Ｌ−カルニチン、クレアチン、および／またはリコペン）、および／または物質がある。
【００３４】
最終果汁製品は、一般的に最低温度１８１°Ｆ（８３℃）またはそれ以上で、２１２°Ｆ（１００℃）までに加熱され、低温殺菌される。製品は、加工温度に耐えられるプラスチック、ガラスまたは他の適当な材料からなる最終コンテナに充填され、密封される。コンテナは充填温度で維持されるか、または急速冷却され、そして輸送用コンテナに置かれる。輸送用コンテナは、通常は、材料で包装され、最終コンテナにおける製品の温度を維持・管理できるようにされている。
【００３５】
細胞損傷の減少
上記に提示したように、本発明の態様は、人体における細胞損傷を減らすことに関連する。酸素を使用し、「フリーラジカル」として知られる毒を産生する自然の細胞工程が存在する。フリーラジカルは、ペアでない電子を有する化学種であり、体内における炭水化物、デオキシリボ核酸（「ＤＮＡ」）、酵素、脂質、および／またはタンパク質に結合し、かつこれを攻撃する高い反応性酸化物質である。フリーラジカルは、代謝の事故的副生産物として、または例えば、貪食（ファゴサイト−シス）の間ゆっくりと細胞内で継続的に産生される。フリーラジカルは、一般的には細胞の機能および再生を妨害し、体内の細胞、組織および器官の不全および／または死を引き起こす。
【００３６】
フリーラジカルによって引き起こされる細胞損傷を減らす自然防御機構が存在する一方、このような防御機構は人体の加齢にともなってだんだん効果がなくなってくる。即ち、フリーラジカルによって引き起こされる損傷は、アルツハイマー病、癌、糖尿病、心疾患、黄斑変性およびパーキンソン病のようないくつかの加齢に関連する病気において関係してきた。実際、フリーラジカルによって引き起こされた損傷は、人体の加齢過程において不可欠な要因であり得るとする提案さえもなされてきた。
【００３７】
体内で産生されるフリーラジカルの量は、一般的に個体がたばこの煙や水銀などの種々の他の毒に暴露されるのに伴い増加する。さらに、運動が体内の酸素の必要性を煽るので、フリーラジカルの産生は運動により一般的に増強される。
【００３８】
脂質過酸化反応として知られるフリーラジカル媒介の脂肪酸の酸化的変性の過剰な生成によって、細胞構造、酵素および／または組織の損傷がもたらされる。過酸化水素および強度の毒性を有するヒドロキシルラジカルを形成する反応が体内で生じる。スーパーオキシドアニオンは、ヒドロキシルラジカルに変換され、酸化窒素と相互作用して過酸化窒素を形成し、これは、分解してヒドロキシルラジカルを形成する。ぺルオキシラジカルは、ポリ不飽和脂肪酸のような脂質から一般的に水素を取り除き、脂質ヒドロペルオキシドの形成をもたらし、アルキルラジカルの再生によってラジカル経路をされに伝播させる。ヒドロぺルオキシドは、内皮細胞に対して直接的な毒性効果を有し、分解してヒドロキシルラジカルを形成する。ヒドロペルオキシドは、また、マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）のような安定なアルデヒドを形成し、これは、タンパク質の架橋および他の最終製品の形成を容易にすることによって、細胞膜を損傷する。
【００３９】
ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸（ＨＰＥＴＥ）およびより安定なヒドロキシエイコサテトラエン酸（ＨＴＥＴＥ）は、典型的には、血管平滑筋細胞の移動をもたらす。これらリポキシゲナーゼ産物は、多くの経路間の結合を活性化して、タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）、癌遺伝子活性化、および増大した細胞間質の産生を含む、増大した血管および腎臓の疾患をもたらす。特に、これらリポキシゲナーゼ酵素は、ピリジンヌクレオチドにおける酸化によってスーパーオキシドラジカルを生じる。一連のフリーラジカルによって触媒されたアラキドン酸の過酸化物は、イソプロスタンと呼ばれ、シクロオキシゲナーゼに独立した様式で形成され、ホスホリパーゼによって開放されるまで膜のリン脂質と関連してとどまっている。防御機構は、体内の細胞および組織における酸化的ストレスおよびフリーラジカルの究極的な影響にとって極めて重要である。そのような防御機構は、典型的には脂質の過酸化および無機フリーラジカル反応を妨げ、または、形成された反応性の中間体を除去する。
【００４０】
本発明によると、ここに記載する栄養補助食品は、体内における脂質ヒドロペルオキシドおよびスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去するために用いられ、これによって人体における細胞損傷を減らす。栄養補助食品は、細胞の再生および細胞機能を含む体内におけるプラスの細胞の機能性を高めるために細胞レベルで作用する物質の組み合わせを含む。物質の組み合わせは、ビタミンやミネラルのような栄養素を吸収、利用し、体内における細胞の能力を増加させる。この組み合わせは、また、免疫系におけるＴ細胞の産生を刺激する。Ｔ細胞は、体内の感染に対する攻撃を導き、免疫反応を終結させ、および／または、癌細胞および／またはウイルス感染細胞を殺す、リンパ球または白血球の１つの型である。
【００４１】
１つの態様として、人体における自然の細胞工程によって産生された毒を減らすために、１日当り１液量オンス（３０ｍＬ）の栄養補助食品が摂取される。あるいは、他の態様として、１日当り１液量オンス以上または１液量オンス未満の消費を含む。さらなる態様としては、栄養補助食品は胃が通常空である時に、午前中および／または食前に摂取される。
【００４２】
モリンダ社の研究開発研究所で実施された実験において、タヒチアンノニ（登録商標）として知られる栄養補助食品の規則的な摂取は、ビタミンＣ、ピクノゲノール（登録商標）（海岸の松の皮の抽出物）、またはブドウの種の粉末の規則的な摂取より、体内におけるスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去する強い効果をもたらすことが示された。特に、タヒチアンノニ（登録商標）は体内における脂質ヒドロペルオキシドおよびスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去する栄養補助食品として用いることができる。このような実験が実施された例および達成された結果は、「タヒチアンノニ果汁の抗酸化の研究」と題する２０００年１２月５日に出願された米国仮出願番号６０／２５１，４１７号により詳細に記載されており、これは、引用することにより本明細書に取り込まれる。
【００４３】
実験結果は、モリンダシトリフォリアから得られた果汁を含む栄養補助食品は、脂質ヒドロぺルオキシドおよび／またはスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去するために用いられ得ることを示している。さらに、タヒチアンノニ（登録商標）の日常的な摂取は、ビタミンＣ、ピクノゲノール（登録商標）（海岸の松の皮の抽出物）、またはブドウの種の粉末の規則的な摂取より、体内におけるスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去するより強い効果を有する。さらに、タヒチアンノニ（登録商標）が、脂質ヒドロペルオキシドおよび／またはスーパーオキシドアニオンフリーラジカルを除去するために、ビタミンＣ、ピクノゲノール（登録商標）（海岸の松の皮の抽出物）、および／またはブドウの種の粉末と一緒に摂取することもできる。そのうえさらに、本発明に基づいたタヒチアンノニ（登録商標）のような栄養補助食品の利用によって、個体は、遺伝的病気の襲来および、加齢に伴う視力、聴力の減退、記憶喪失およびその他の加齢に伴う生理学的衰弱を免れるか、または、少なくとも遅らせることができる。
【００４４】
癌の阻害
上記に示したように、本発明の態様は、癌を阻害することに関連する。特に、本発明の態様は、発癌の初期段階で癌予防効果を提供する栄養補助食品の使用に関連する。モリンダシトリフォリアからの果汁中で同定された化学物質の１６０以上の中には、テルペン成分、アントラキノン、モリンドン、モリンジン、アスペルロシド、アキュビン、カプリン酸、カプリル酸、ダムナカンタール、スコポレチン、多糖、およびアルカロイド等の種々の成分が含まれる。以下に議論するように、この発明によるモリンダシトリフォリアからの果汁を含む栄養補助食品の規則的な摂取が、発癌性ＤＮＡ付加物の形成を防ぐことにより化学的発癌の初期段階で癌予防効果を提供する。
【００４５】
ｉｎ  ｖｉｖｏにおける７，１２−ジメチルベンザアントラシン（「ＤＭＢＡ」）−ＤＮＡ付加物形成についての本発明による栄養補助食品の使用の予防効果を分析するために、１つの実験を行った。実験では、６週齢の雌のＳＤラットを２つの群に分けた。対照動物には水を与え、他方には本発明による１０％の栄養補助食品を与えた。８日目に、各々の群からの３匹の動物に、コーン油中１％ＤＭＳＯ中２５ｍｇ／ｋｇのＤＭＢＡを胃内に与えた。動物を２４時間後に犠牲死させた。ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物を、Ｐ−ポストラベリングアッセイにより種々の器官について調べた。
【００４６】
栄養補助食品の脂質ハイドロペルオキシド（ＬＰＯ）の消失活性を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにてＬＰＯアッセイにより調べた。ＬＰＯは、ヘモグロビンの存在下でロイコメチレンブルーをメチレンブルーに酸化した。得られた青色は、分光光度計により定量した（６６０ｎｍ）。真性のクメンハイドロペルオキシドを標準試薬として用いて、栄養補助食品のＬＰＯ消失活性をモニターした。栄養補助食品のスーパーオキシドアニオンラジカル（「ＳＡＲ」）除去活性を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにてテトラゾリウムニトロブルー（「ＴＮＢ」）アッセイにて調べた。ＳＡＲは、ＴＮＢをホルマザンブルーに還元し、これは６０２ｎｍで吸光する。ＳＡＲ除去剤は、ＳＡＲと反応することにより吸光度を減少させた。ＮＡＤＨは、好気条件下でＳＡＲを発生させ、ここではフェナジンメトサルフェート（ＰＭＳ）が触媒として用いられた。栄養補助食品の活性は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＵ．Ｓ．ＲＤＡ（米国政府が推奨する日々の許容量）または製造者による推奨される日々の１回あたりの投与量で、ＳＡＲに対する３つの知られた抗酸化剤と比較した。６０ｍｇのビタミンＣ（ロッシュビタミン社、パーシパニー、ニュージャージー州から得た）、６０ｍｇのピクノゲノール（登録商標）（「ＰＹＣ」）（ツインラボラトリーズ社、ロンコンコーマ、ニューヨーク州  １１７７９、から得た）、１００ｍｇのブドウの種の粉末（「ＧＳＰ」）（ＤＮＰインターナショナル社、３０３５レッドハットレーン、ホイッティアー、カリフォルニア州９０６０１、から得た）、および３２ｍｌの栄養補助食品（モリンダ社から得た）を用いて、比較される物質の生物学的濃度を見積もった。計算は、提案された１００％の生物学的利用能に基づいており、比較される物質の各々の推奨される投与量を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける実験濃度として１人あたり４．５リットルの血液で割り、これにより人体における生体濃度と類似することとなる。計算に基づき、ビタミンＣ、ＧＳＰ、ＰＹＣおよび栄養補助食品の濃度は、１ｍｌあたりそれぞれ、１３．３μｇ、２２．２μｇ、１３．３μｇ、および７．１μｌであった。
【００４７】
ＤＭＢＡ誘導のＤＮＡ付加物形成に対する栄養補助食品の予防効果は、雌ＳＤラットにおいて観察された（以下を参照）。ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成は、雌ＳＤラットにおいて１０％の栄養補助食品を飲むことにより減少した。さらに、ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の濃度は、心臓で３０％、肺で４１％、肝臓で４２％、そして腎臓で８０％減った。さらにより顕著な結果が、雄Ｃ５７ＢＬ−６マウスにおいて得られた。１０％の栄養補助食品は、ＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を心臓で６０％、肺で５０％、肝臓で７０％、そして腎臓で９０％防ぐことができた。
【００４８】
【表１】
2004529077.tif 000002
雌ＳＤラットの対照の肝臓（Ａ）および肺（Ｃ）におけるＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の典型的な特徴が誘起された。肝臓（Ｂ）および肺（Ｄ）におけるＤＮＡ付加物の密度および数が、１０％の栄養補助食品群において減少した。対照群と比較すると、ＤＭＢＡ付加物の濃度が、肝臓で４２％、肺で４１％防がれた。フィルムは、−８０℃で３時間暴露した。
【００４９】
【表２】
2004529077.tif 000003
雌ＳＤラットの対照の心臓（Ａ）および腎臓（Ｃ）におけるＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の典型的な特徴が誘起された。心臓（Ｂ）および肝臓（Ｄ）におけるＤＮＡ付加物の密度および数が、１０％の栄養補助食品群において減少した。対照群と比較すると、ＤＭＢＡ付加物の濃度が、心臓で３０％、腎臓で８０％防がれた。フィルムは、−８０℃で３時間暴露した。
【００５０】
栄養補助食品の活性を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにて観察した。ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける栄養補助食品のＳＡＲ除去活性の投与量依存曲線を、ＴＮＢアッセイにより得た（以下を参照）。ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける栄養補助食品のＬＰＯ消失活性の投与量依存曲線を、ＬＰＯアッセイにより得た（以下を参照）。
【００５１】
栄養補助食品のＳＡＲ除去活性を、ビタミンＣ、ブドウの種の粉末（「ＧＳＰ」）、およびピクノゲノール（登録商標）（「ＰＹＣ」）のものと比較した。実験の条件下では、栄養補助食品のＳＡＲ除去活性は、ビタミンＣの２．８倍、ＰＹＣの１．４倍、ＧＳＰの１．１倍を示した。
【００５２】
【表３】
2004529077.tif 000004
ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける栄養補助食品のＬＰＯ消失活性のドーズレスポンス曲線である。栄養補助食品のＬＰＯ消失活性と選択された投与量との間に直線関係が観察された。
（ｙ＝４０．４６５ｘ＋１．６９６２およびＲ2＝０．９９０６）
【００５３】
【表４】
2004529077.tif 000005
ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける栄養補助食品のＬＰＯ除去活性のドーズレスポンス曲線である。栄養補助食品のＳＡＲ除去活性と選択されたものとの間に直線関係が観察された。
（ｙ＝２１．５９６ｘ＋２．４２２４およびＲ2＝０．９９５６）
【００５４】
実験の結果は、１０％の栄養補助食品が雌ＳＤラットおよび雄Ｃ５７ＢＬ−６マウスの異なる器官においてＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を減らしたことを示す。特に付加物は、腎臓において最も減った。ＤＮＡ付加物の形成は化学的発癌の一段階なので、ＤＭＢＡ付加物形成に対する栄養補助食品の予防効果は、栄養補助食品の使用が化学的発癌の初期段階で癌を防ぐことを示す。ＳＡＲおよびＬＰＯに対する栄養補助食品の強い活性が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏのＴＮＢおよびＬＰＯアッセイにより観察された。栄養補助食品が高い活性を示したので、栄養補助食品がＳＡＲにより媒介される酸化的修飾から細胞および脂質を保護することがわかる。発癌性ＤＮＡ付加物の予防および抗酸化特性の両方が、本発明による栄養補助食品の癌予防効果に寄与する。
【００５５】
栄養補助食品がＤＭＢＡ−ＤＮＡ付加物の形成を防ぐ機構は以下の通りである。栄養補助食品が第Ｉ相酵素の活性を阻害する一方、第ＩＩ相酵素およびＤＮＡ修復酵素の活性を増強する。栄養補助食品は、代謝経路を阻止すること、酸素フリーラジカルを除去すること、およびそれにつづくＬＰＯを消失させることにより、発癌物質とそれらの代謝物との間の酸化還元サイクルを遮断する。栄養補助食品はまた、酸化還元感受性シグナル変換経路に影響し、遺伝子の発現を変化させる。したがって、栄養補助食品により発癌物質、酸素フリーラジカル、およびＬＰＯの相互作用が変化する。
【００５６】
このように、ここで検討したように、本発明の態様は癌の阻害を包含する。本発明による栄養補助食品は、化学的発癌の初期段階で癌予防効果を提供する。本発明による栄養補助食品は、癌および他の疾患を阻害するが、全体としての良好な健康を維持する。
【００５７】
本発明は、その趣旨および本質的な特徴から離れない限り、他の特定の型で実施され得る。記載した態様は、単に実例としてすべての点で考慮されるべきであって、限定的に解釈されるべきでない。本発明の範囲は、したがって、上述の記載によってではなく、添付された特許請求の範囲によって提示される。特許請求の範囲の意味および均等の範囲内でのすべての相違は、本発明の範囲に包含される。
【国際公開パンフレット】
2004529077.tif 000006
2004529077.tif 000007
2004529077.tif 000008
2004529077.tif 000009
2004529077.tif 000010
2004529077.tif 000011
2004529077.tif 000012
2004529077.tif 000013
2004529077.tif 000014
2004529077.tif 000015
2004529077.tif 000016
2004529077.tif 000017
2004529077.tif 000018
2004529077.tif 000019
2004529077.tif 000020
2004529077.tif 000021
2004529077.tif 000022
2004529077.tif 000023
2004529077.tif 000024
2004529077.tif 000025
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004529077.tif 000026
【国際調査報告】
2004529077.tif 000027