(57)【要約】本発明は、均一な球状形態および極めて小さいサイズ分布を有するマイクロスフェアー状クリスタライトを製造するための方法に関する。前記クリスタライトは、全体的または部分的に、直鎖の水−不溶性ポリサッカリド、好ましくは１，４−α−Ｄ−ポリグルカンから成り、＞８０％の結晶化度を有し、そしてさらなるポリマーおよび／または活性成分（これは、特に生物分解性である）を含み得る。それらは特に、活性成分の放出の制御に適している。それらは、１，４−α−Ｄ−ポリグルカンまたはポリサッカリドを水中に融解し、その融解生成物を沈殿へ導き、その混合物を冷却し、そして形成された粒子を分離することによって、製造される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
全体的にまたは部分的に、直鎖且つ水−不溶性のポリサッカリドから成るマイクロスフェアー状クリスタライトの製造方法であって、（ｉ）＞１３０℃にて、該直鎖ポリサッカリドを水中で融解すること、および
（ｉｉ）＜９０℃にて、沈殿剤中における沈殿によって、該マイクロスフェアー状クリスタライトを製造すること、
（ここで、該ポリサッカリドは、ＤＡＢの溶解度クラス４〜７、好ましくは溶解度クラス５−７、特に好ましくは溶解度クラス６−７、非常に特に好ましくは溶解度クラス７に相当し、そしてここで、直鎖は分岐度が２．５％を越えないことを意味する）を包含する、方法。
【請求項２】
１，４−α−Ｄ−ポリグリカンが、マイクロスフェアー状クリスタライトの形成の前に、水中における溶融、沈殿剤中における沈殿、該上清からの該沈殿物の分離、該上清の廃棄、および適切な場合水を用いる該沈殿物の洗浄を１回より多く受ける、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記融解が１３０℃−２００℃の温度にて行われ、そして前記沈殿が０−９０℃、好ましくは２０−７０℃の温度にて行われる、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記ポリサッカリドの融解および前記マイクロクリスタライトの形成が、閉鎖容器中で水蒸気の過剰な圧力を用いて行われる、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
水または水性媒体が沈殿剤として使用される、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記融解生成物が１つ以上のポリマー（特に、生分解性ポリマー）、および／または１つ以上の活性物質の存在下において製造される、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
使用される該ポリサッカリドが発酵または酵素的方法によって製造される、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記融解生成物が少なくとも１つの水溶性セルロース誘導体の存在下において製造される、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
使用される前記酵素が：ポリサッカリドシンターゼ、スターチシンターゼ、グリコシルトランスフェラーゼ、α−１，４−グルカントランスフェラーゼ、グリコーゲンシンターゼ、アミロスクラーゼおよびホスホリラーゼから成る群より選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記ポリサッカリドがポリ−１，４−α−Ｄ−グルカンを含む、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記ポリサッカリドが排他的にポリ−１，４−α−Ｄ−グルカンである、先の請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
先の請求項のいずれかに記載のように製造されるマイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項１３】
１ｎｍ〜１００μｍの平均直径を有する請求項１２に記載のマイクロスフェアー状クリスタライトであって、該粒子が１．０〜１０．０の範囲における分散度を有し且つ別々に存在する、マイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項１４】
好ましくは＞８０％の、特に好ましくは＞９０％の、非常に特に好ましくは＞９５％の、そして最も好ましくは＞９８％の結晶化度を有する、請求項１２〜１３のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項１５】
それらを製造するために使用される前記直鎖ポリサッカリドが、分岐されたまたは高度に分岐されたポリサッカリドの酵素的処理によって製造されたものである、請求項１２−１４のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項１６】
５０ｎｍ〜１０μｍ、好ましくは１００ｎｍ〜３μｍの平均直径を有する請求項１２−１５のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項１７】
１．５〜５．０、特に２．０〜２．６の粒子直径の分散度ｄｗ対ｄｎを有する、請求項１２−１６のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項１８】
さらに１つ以上の（好ましくは生分解性）ポリマー（単数または複数）を含む、請求項１２−１７のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項１９】
さらに１つ以上の活性物質を含む、請求項１２−１８のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライト。
【請求項２０】
化粧品調製物における、請求項１２−１９のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライトの、使用。
【請求項２１】
食品調製物における、請求項１２−２０のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライトの、使用。
【請求項２２】
薬学的調製物における、請求項１２−２１のいずれかに記載のマイクロスフェアー状クリスタライトの、使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、直鎖ポリサッカリドを含むマイクロスフェアー状クリスタライト（ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｉｃａｌ　ｃｒｙｓｔａｌｌｉｔｅ）の新規製造方法、これらのマイクロスフェアー状クリスタライト、およびその使用に関する。
【０００２】
広範囲な応用のためにポリマー（例えば、ポリサッカリドのような）から粒子（特に、微粒子）を製造するための方法は、しかしながら、種々のパラメーターを伴う正確なコンプライアンス（ｃｏｍｐｌｉａｎｃｅ）を必要とする複雑な方法である。特に、多くの方法はまた、少ない収率しか導かず、そして非常に広範囲な粒子分布を導く。特に噴霧乾燥、界面凝縮およびエマルジョン法（例えば、ＷＯ法＝油中水型エマルジョン（ｗａｔｅｒ　−ｉｎ−ｏｉｌ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ）およびＷＯＷ＝水中油中水型エマルジョン（ｗａｔｅｒ　−ｉｎ−ｏｉｌ−ｉｎ−ｗａｔｅｒ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ）、コアセルベーション、相分離、分散）がこのコンテクストにおいて、言及されるべきである。特にエマルジョン法は、２相系からの噴霧乾燥もまた、非常に正確な手順および、ほとんどの場合、補助剤（乳化剤）の使用を必要とする。安定なエマルジョンはしばしば、多大な費用をかけて且つ多数のパラメーター（温度、攪拌速度など）の正確な制御を伴ってのみ製造され得、またこの粒子の包括的な除去は問題を伴う。粒子の収率はしばしば非常に低く、そして特に捕捉される活性物質の割合は不十分である。これは、高価な薬学的活性物質の場合における技術の適用を妨げ得る局面である。
【０００３】
ＵＳ−Ａ　５　３９１　６９６に従って、エチルスターチまたは他のポリサッカリドをまた含み得る球状微粒子（その他には、酒石酸−含有重縮合物）が得られたが、一方で噴霧乾燥法によって、大きな困難を伴ってのみ粒子サイズおよび特にサイズ分布が制御され得る。この特許に記載される別の可能性は、溶媒または溶媒の混合物中にポリマーを溶解すること、および微粒子の形成を伴いながらこの溶液を一滴ずつ（ｄｒｏｐｗｉｓｅ）冷却液化ガス（例えば、液体窒素）へ添加することである。次いでこの微粒子を水中へ導入し得、これは同時に、ポリマーを沈殿し、そして溶媒を抽出する。この方法は、時間がかかり、高価および非経済的である。粒子寸法の均一性もまた不満足である。
【０００４】
ＥＰ−Ｂ１−０　２５１　４７６は、ポリラクチドからの微粒子の調製（これにおいて、マクロ分子ポリペプチドが分散される）を記載する。この場合においてもまた、広く多種多様なパラメーターの強い制御が必要である。均一な球状粒子は得られない。
【０００５】
活性物質および気体を含む微粒子がＷＯ９５／０７０７２に記載される。製造は手の込んだエマルジョン法によって行われ、さらに粒子のサイズ分布は非常に不均一である。
【０００６】
Ｙｕ　ＪｉｕｇａｏおよびＬｉｕ　Ｊｉｅは、ｓｔａｒｃｈ／ｓｔａｒｋｅ　４６（７），　２５２−５，　（１９９４）中に、デンプン微粒子のサイズに関する懸濁架橋反応条件の効果について報告している。架橋は３段階で生じる；その媒質は油中水型懸濁液であり、そしてピーナッツオイル／トルエン混合物が油相として使用される。予めゼラチン化されたデンプンが、さらに水酸化ナトリウムおよびエチレンジアミンテトラ酢酸を含む水溶液として添加される。表面−活性剤または安定化剤の存在もまた必要である。
【０００７】
それらに記載される方法の欠点は、その結果が多数のファクター、すなわち、水性および油性相両方の密度、粘度、および濃度比、安定化剤、および攪拌速度に依存することであり、そしてさらに安定化剤の存在が欠点である。さらに、与えられる多数のパラメーターを制御することが困難であり、その結果再現性が不満足である。
【０００８】
高分子活性物質を負荷され且つ水−不溶性ポリマー（ポリ乳酸またはエチルセルロースのような）から成る粒子は、ＥＰ−ＢＩ−０　２０４　４７６の開示に従って、このポリマーのアセトン溶液中に粒子状活性物質を懸濁すること、さらにその溶媒を室温にて気化させることによって、得られる。この場合に生じる粒子は必要な薬理学的効果を依然として示さず、それゆえ、いわゆるペレットへのさらなるプロセッシングが必要である。
【０００９】
公報ＧＢ　２２４７２４２は、酵素ＣＧＴａｓｅ（ＥＣ　２．４．１．１９）および（適切な場合）シクロデキストリンおよび／またはデンプン上のデンプン−枝切り酵素（ｓｔａｒｃｈ−ｄｅｂｒａｎｃｈｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ）の作用に起因して、水溶性材料から微粒子を製造するための方法を開示する。
【００１０】
本出願人の公報ＤＥ　１９７　３７　４８１．６は、直鎖の水−不溶性ポリサッカリドから成るマイクロスフェアー状クリスタライトを開示する。これらのマイクロスフェアー状クリスタライトは、上に列挙した欠点を克服するのに適している。特に、これらのマイクロスフェアー状クリスタライトは、均等に構造化され、比較的大きな均一性を有し、そして様々な可能性の用途を有する。この公報はまた、これらのマイクロスフェアー状クリスタライトの製造方法を記載する。
【００１１】
これらのマイクロスフェアー状クリスタライトを製造するための対応する方法は、とりわけＤＭＳＯ中に直鎖ポリサッカリドを溶解すること、および水中での沈殿によってマイクロスフェアー状クリスタライトを形成することによって、特徴付けられる（ｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈｅｄ）。これの欠点は、ＤＭＳＯの使用のために製造コストが比較的高いこと、そしてＤＭＳＯ−含有廃液が特別な廃棄物として廃棄されなければならないこと、そしてＤＭＳＯが例えば化粧品を製造するために使用されてはならないことから、例えば薬物、化粧品または食品分野においてそれらが使用される場合、マイクロスフェアー状クリスタライトの適切な精製が必要であること、である（Ｇｅｒｍａｎ　ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ，Ａｎｎｅｘ１，Ｎｏ．３３８を参照のこと）。
【００１２】
従って、本発明の目的は、前述の欠点を克服し、そしてより低価格且つＤＭＳＯを使用しないより環境に優しい方法（これはまた、それらを薬物、食品および化粧品分野における使用によりふさわしいものにする）においてＤＥ　１９７　３７　４８１．６に開示されるマイクロスフェアー状クリスタライトに似たクリスタライトを製造することを可能にする、新規製造方法を提供することである。
【００１３】
驚くべきことに現在では、非常に均一なマイクロスフェアー状クリスタライトが、大量に、非常に簡単な方法によって、水−不溶性直鎖ポリサッカリドから、クリスタライト形態で、製造され得ることが見出され、この量は、ＤＥ　１９７　３７　４８１．６に記載されるように、それらを製造するためのＤＭＳＯを使用する必要性を伴うことなく同様の市販のポリサッカリド（例えば、アミロースまたはデンプン）を用いては得られない。
【００１４】
驚くべきことに、さらに、この方法において得ることができるマイクロクリスタライトは少なくとも８０％の結晶化度を有することが見いだされている。
【００１５】
それゆえ本発明は、全体的または部分的に直鎖ポリサッカリド（特に、１，４−α−Ｄ−ポリグルカン）からなるマイクロスフェアー状クリスタライトの製造方法に関し、これは、
（ｉ）１３０−２００℃にて、圧力ｐ＞１ｂａｒの下、水中に直鎖ポリサッカリド（単数または複数）を融解すること、および
（ｉｉ）２０−９０℃にて、沈殿剤（ｐｒｅｃｉｐｉｔａｎｔ）中において、沈殿によってマイクロスフェアー状クリスタライトを製造すること、
を包含する。
【００１６】
本発明はさらに、上記の方法によって得ることができるマイクロスフェアー状クリスタライトに関し、その全体構造に基づくクリスタライト構造の割合（結晶化度の程度）は、本発明に従って、少なくとも８０％、好ましくは少なくとも９０％、特に好ましくは少なくとも９５％、そして非常に特に好ましくは９８％超である。
【００１７】
クリスタライトの結晶化度は、例えばＸ−線構造分析によって、またはそれ自体公知である方法において粒子の密度を介して、測定され得る。この結晶化度は、特に好ましくは広角Ｘ−線散乱を介して測定される。
【００１８】
ＡおよびＢ型のデンプンはそれらの結晶構造を通じて異なり、Ａ型デンプンはより高密度にパックされ（ｐａｃｋｅｄ）且つより低い水含有率を有する。
【００１９】
用語「融解している（ｍｅｌｔｉｎｇ）」および「融解生成物（ｍｅｌｔ）」は、それぞれ本発明に従って、水中のポリグルカンの濁った分散から透明溶液が得られるプロセスおよびプロセスの終点を意味する。このような透明溶液が得られる温度は、ポリグルカン／水混合物中の水含有率に依存する。
【００２０】
マイクロスフェアー状クリスタライトは、ほぼ球状形状を有するクリスタライトを意味する。球体は、共通の起点から始まり、空間へ方向付けられ、そして空間中の全ての方向に球体の半径の境界を画定する（ｄｅｆｉｎｅ）等しい長さの軸によって描かれ、１％〜４０％の理想的球状状態からの軸の長さの偏差が、このマイクロスフェアー状クリスタライトについて起こり得る。生じるマイクロスフェアー状クリスタライトは、好ましくは２５％まで、特に好ましくは１５％までの偏差を有する。マイクロスフェアー状クリスタライトの表面は、ラズベリーのものと顕微鏡的に比較され得、そして「くぼみ（ｒｅｃｅｓｓｅｓ）」または「へこみ（ｉｎｄｅｎｔａｔｉｏｎｓ）」の深さは、マイクロスフェアー状クリスタライトの平均直径の２０％以下であるべきである。
【００２１】
本発明の目的のための直鎖ポリサッカリドは、個々の構成単位がいつも同じ方法で連結されるように、単量体構成単位と同様のモノサッカリドから成る。このように定義される各々の基本単位または構成単位は、あるモノマーから別のモノマーへの各々の場合において、正確に２つの結合を有する。これに対する例外は単に、ポリサッカリドの開始および末端を形成する２つの基本単位である。これらは、別のモノマーへたった１つの結合を有し、そして直鎖ポリサッカリドの末端基を形成する。
【００２２】
もしこの基本単位が３つ以上の結合を有する場合、その分岐が存在すると言える。いわゆる分岐度（ｄｅｇｒｅｅ　ｏｆ　ｂｒａｎｃｈｉｎｇ）は、直鎖ポリマー骨格の構造に関係せず且つ分岐を形成する１００基本単位当たりのヒドロキシル基の数に由来する。
【００２３】
直鎖水−不溶性ポリサッカリドは、本発明に従って、２．５％（すなわち、１０００モノマー当たり２５分岐）を越えない分岐度を有する。
【００２４】
好ましいポリサッカリドは、１％より小さい、好ましくは０．５％以下である、６位における分岐度を有し、また他の位置においては（例えば、２または３位においては）、好ましくはそれぞれの場合において２％以下、そして特に１％以下である。
【００２５】
６位における分岐度が０．５％より小さいポリサッカリドはまた、特に好ましい。
【００２６】
本発明に特に適するポリサッカリドは、分岐鎖を有さないものである。
【００２７】
例外的な場合において、それらの分岐度は、慣用的な方法によってもはや検出されない程、非常に小さいかも知れない。
【００２８】
用語「水−不溶性ポリサッカリド」は、ドイツ薬局方（Ｇｅｒｍａｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）（ＤＡＢ　＝　Ｄｅｕｔｓｃｈｅｓ　Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｂｕｃｈ，　Ｗｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｌｉｃｈｅ　Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ　ｍｂＨ，　Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，　Ｇｏｖｉ−Ｖｅｒｌａｇ　ＧｍｂＨ，　Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ，　９ｔｈ　ｅｄｉｔｉｏｎ，　１９８７）において定義されるような「やや溶けにくい」、「溶けにくい」、「極めて溶けにくい」および「ほとんど溶けない」化合物のカテゴリー（クラス４〜７に相当する）に分けられる本発明の化合物を意味する。
【００２９】
それゆえ、本発明に従う好ましいポリサッカリドは、ＤＡＢのクラス４（すなわち、室温および大気圧におけるポリサッカリドの飽和溶液が、物質の質量部当たり約３０〜１００容量部の溶媒（すなわち、水）を含む（３０−１００ｍｌの水当たり１ｇの物質））に割り当てられ得る。本発明に従うさらに好ましいポリサッカリドは、ＤＡＢのクラス５（すなわち、室温および大気圧におけるポリサッカリドの飽和溶液が、物質の質量部当たり約１００〜１０００容量部の溶媒（すなわち、水）を含む（１００−１０００ｍｌの水当たり１ｇの物質））に割り当てられ得る。本発明に従うよりさらに好ましいポリサッカリドは、ＤＡＢのクラス６（すなわち、室温および大気圧におけるポリサッカリドの飽和溶液が、物質の質量部当たり約１０００〜１００００容量部の溶媒（すなわち、水）を含む（１０００−１００００ｍｌの水当たり１ｇの物質）に割り当てられ得る。本発明に従う最も好ましいポリサッカリドは、ＤＡＢのクラス７（すなわち、室温および大気圧におけるポリサッカリドの飽和溶液が、物質の質量部当たり約１００００〜１０００００容量部の溶媒（すなわち、水）を含む（１００００−１０００００ｍｌの水当たり１ｇの物質）に割り当てられ得る。
【００３０】
本発明のポリサッカリドの平均的な重合度（ＤＰ）は、２０−４００、好ましくは３０−１５０、特に好ましくは４４−１００、そして非常に特に好ましくは５０−７０である。特定の好ましいポリ−α−１，４−Ｄ−グルカンの場合において、ＤＰは、個々の単位の分子量（約１６２）によるＭｎの（すなわち、数平均分子量の）簡単な除算によって見出され得る。
【００３１】
好ましくは、バイオテクノロジー的（特に、生体触媒的またはバイオトランスフォーメーション的（ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ））、または発酵プロセスにおいて製造された直鎖の水−不溶性ポリサッカリドが、本発明の範囲内である。
【００３２】
本発明の範囲内の生体触媒作用（また：バイオトランスフォーメーション）によって製造される直鎖ポリサッカリドは、直鎖ポリサッカリドが適切な条件下においていわゆる生物触媒（通常、酵素）を使用することにより、単量体基本構成単位（オリゴマーサッカリド（例えば、モノ−および／またはジサッカリド）のような）の触媒反応によって製造されることを意味する。
【００３３】
発酵からの直鎖ポリサッカリドは、本発明の用語において、天然に存在する生物（真菌類、藻類またはバクテリアのような）を使用するか、または非−天然に存在するが一般的に定義されるような遺伝子操作法によって改変された天然生物の助けを借りている生物（真菌類、藻類またはバクテリアのような）を使用する発酵プロセスによって得られるか、あるいは発酵プロセスの関与および補助を用いて得られ得る直鎖ポリサッカリドである。
【００３４】
本発明に従う直鎖ポリマーはまた、好ましい１，４−α−Ｄ−ポリグルカンに加え、他のポリグルカンまたは他の直鎖ポリサッカリド（例えば、ペクチン、マンナンまたはポリフラクタン（ｐｏｌｙｆｒｕｃｔａｎｓ）のような）であり得る。
【００３５】
さらに、分岐の開裂が生じるような方法において分岐を含む非直鎖ポリサッカリドを酵素で処理することによる他の非直鎖ポリサッカリドの反応（その結果、それらの除去の後に直鎖ポリサッカリドが存在する）からもまた、本発明に記載されるマイクロスフェアー状クリスタライトを製造するための直鎖ポリマーを得ることが可能である。これらの酵素は、例えば、アミラーゼ、イソアミラーゼ、グルコノヒドロラーゼ、またはプルラナーゼであり得る。
【００３６】
本発明の特に有益な実施形態において、このマイクロスフェアー状クリスタライトは、全体的または部分的に、１，４−α−Ｄ−ポリグルカンから成る。１，４−α−Ｄ−ポリグルカンは、好ましくは、ポリサッカリドシンターゼ、スターチシンターゼ、グリコシルトランスフェラーゼ、α−１，４−グルカントランスフェラーゼ、グリコーゲンシンターゼ、アミロスクラーゼまたはホスホリラーゼを用いる生物触媒（バイオトランスフォーメーション）プロセスによって製造される。
【００３７】
さらに有益な実施形態において、直鎖の水−不溶性ポリサッカリド（特に、１，４−α−Ｄ−ポリグルカン）は、分岐されたまたは高度に分岐されたポリサッカリドの酵素的処理によって製造される。
【００３８】
水は、本発明に従って、直鎖ポリサッカリドの融解のために、排他的に使用される。
【００３９】
水は好ましい沈殿剤である；このプロセスは、全体的または部分的に水に取って代わり得る他の溶媒（例えば、ジクロロメタン（これは、とりわけ沈殿プロセスの継続時間およびその粒子表面のテクスチャを制御し得る））を使用することによって影響され得る。
【００４０】
アルコール（例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール）との水の混合物もまた、プロセスパラメーターおよび粒子の特性に影響を及ぼすための沈殿剤として適している。
【００４１】
沈殿プロセスの間の温度は、好ましくは約２０℃であるが、より高いまたはより低い温度もまた使用され得る。
【００４２】
水中で繰り返される融解および沈殿によってマイクロスフェアー状クリスタライトを成長（ｇｒｏｗｉｎｇ）させる前に、使用されるポリサッカリド（特に１，４−α−Ｄ−ポリグルカン）を精製することが特に好ましいことが明らかにされてきた。マイクロスフェアー状クリスタライトを成長させる前のこの繰り返される溶解および沈殿プロセスは、低分子量サッカリドもタンパク質または核酸も検出され得ないポリサッカリド画分を導く。
【００４３】
それゆえ本発明の好ましい実施形態は、水−不溶性直鎖ポリサッカリド（好ましくは１，４−α−Ｄ−ポリグルカン）が、マイクロスフェアー状クリスタライトの形成前に、水中において１回超融解および沈殿される方法である。
【００４４】
マイクロスフェアー状クリスタライトの成長は、本発明に従って、上記のように精製されたポリサッカリド（好ましくは精製１，４−α−Ｄ−ポリグルカン）を、自己圧力（ａｕｔｏｇｅｎｏｕｓ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ）および１３０−２００℃の温度の下で水中に融解すること、さらに続いて≦９０℃にて沈殿することによって、起こる。
【００４５】
さらに、結晶を成長させるためのさらなる補助剤を添加することによって、プロセス制御および粒子の特性（サイズ、サイズ分布および表面の特徴−平滑なまたは粗い−）に影響を及ぼすことが可能である。
【００４６】
温または冷水−溶性デンプンに加えて、使用され得る適切な補助剤は、例えば、表面活性物質（ドデシル硫酸ナトリウム、Ｎ−メチルグルコナミド、ポリソルベート（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標））、アルキルポリグリコールエーテル、エチレンオキシド／プロピレンオキシドブロックコポリマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標））、アルキルポリグリコールエーテルサルフェート、一般的には、アルキルサルフェートおよび脂肪酸グリコールエステル、糖類（例えば、フルクトース、スクロース、グルコース、および水溶性セルロース誘導体））である。
【００４７】
表面活性物質は、性質において、アニオン性、カチオン性または非イオン性であり得る。
【００４８】
水溶性セルロース誘導体を添加することによって、特に平坦な（すなわち平滑な）表面を得ることができる。沈殿補助剤として適切である限り、水溶性セルロース誘導体を使用することが原理的に可能である。この点について、全ての型の化学的に修飾されたセルロースが可能性がある。例は、セルロースエステルおよびセルロースエーテルおよびそれらの混合形態である。特定の代表の例は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースブチレート、セルロースプロピオネート、セルロースアセトブチレート、セルロースアセトプロピオネート、セルロースニトレート、エチルセルロース、ベンジルセルロース、メチルセルロースなどである。
【００４９】
異なる水溶性セルロース誘導体の混合物を使用することもまた可能である。
【００５０】
この粒子は、１ｎｍ〜１００μｍ、好ましくは５０ｎｍ〜１０μｍ、特に好ましくは１００ｎｍ〜５μｍのような平均直径（数平均）を有し得る。
【００５１】
この粒子は、１．０〜１０．０、好ましくは１．５〜５．０、特に好ましくは２．０〜２．６の直径比ｄｗ対ｄｎ（分散度）を示し、ここで：
ｄｎ＝数平均直径
ｄｗ＝重量平均直径
である。
【００５２】
本明細書中で使用される平均は、以下のように定義される：
ｄｎ＝Σｎｉ×ｄｉ／Σｎｉ＝数平均、
ｄｗΣｎｉ×ｄｉ２／Σｎｉ×ｄｉ＝重量平均、
ｎｉ＝直径ｄｉを有する粒子の数、
ｄｉ＝粒子直径、
ｉ＝シリアルパラメーター。
【００５３】
この場合、用語「重量（ｗｅｉｇｈｔ）」は質量（ｍａｓｓ）を表すのではなく、加重平均（ｗｅｉｇｈｔｅｄ　ｍｅａｎ）を表す。
【００５４】
より大きな直径は、より大きな重要性を与えられる；二乗は、より大きな粒子の直径により大きな重み（ｗｅｉｇｈｔｉｎｇ）を与える。
【００５５】
粒子の直径の分布の分散度は以下のように定義される：
Ｄ＝ｄｗ／ｄｎ
直径の分布の不均一性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ）は、以下のように定義される：
Ｕ＝ｄｗ／ｄｎ−１＝Ｄ−１
「０」に近い不均一性値は、その粒子がそれらのサイズ分布に関してより均一に形作られていることを意味する。
【００５６】
このマイクロスフェアー状クリスタライトは、特にまたその均一な形状およびサイズゆえに、様々な適用において、純粋形態におけるものとしてまたは最も広い概念において活性物質を閉じ込めることによって、従って例えば、
−軟膏、粉剤、クリーム、ペーストなどにおける化粧品のための添加物として、
−薬学的および他の適用における活性物質の担体として、
−平滑剤（例えば、孔を閉じる、または傷を平滑にするための）として、
−食品添加物（例えば、増量成分としての、または流動学的特性を改善するための）として、
−例えばエマルジョンポリマーを改善するための添加物として、
−分離補助剤（例えば、不純物の除去における）として、
−カプセル化物質として、
−磁気粒子のための担体として、
−特性を制御するための生分解性ポリマーまたは工業的ポリマーのための充填剤（ｆｉｌｌｅｒ）として、
−結晶化を促進させる、または合成バルクプラスチック（ｂｕｌｋ　ｐｌａｓｔｉｃｓ）において結晶含量を高めるための核形成補助剤として、
−特性（例えば、多孔性、重量、色）を制御するための添加物として、
−未知物質の粒子サイズの較正または測定のための粒子標準として、
有益に使用され得る。
【００５７】
個々の活性物質または活性物質コンビネーションは、例えば以下のリスト中に見いだされ得る：薬学的活性物質、薬、医薬物質、ペプチド、タンパク質、核酸、ワクチン、抗体、ステロイド、オリゴヌクレオチド、矯味・矯臭剤、香料、肥料、農業工業的活性物質（駆除剤、除草剤、殺虫剤、殺菌剤のような）、特定の特性を有する化学物質（発光物質、乳化剤、界面活性剤、顔料、酸化剤、還元剤、フラーレン、磁気複合体（例えば、常磁性化合物）。
【００５８】
従って、本発明はまた、活性物質の送達の制御（例えば、遅延）のための上記マイクロスフェアー状クリスタライトの使用に関する。
【００５９】
本発明の方法は、非常に簡単な手順を含む。粒子を製造するためのパラメーターは、広い範囲（沈殿剤に対する溶媒の比、沈殿プロセスの間の温度、溶液の濃度、沈殿剤に対する溶液の添加速度のような）において特定され得る。
【００６０】
この粒子は、それらのサイズおよびそれらの直径分布の点における大きな均一性によって区別される。
【００６１】
水中における＜１００℃での１，４−α−Ｄ−ポリグルカンの不溶性（これは、本発明に従って好ましい）は、特に有益な適用（これは、水中におけるマイクロスフェアー状クリスタライトの急速な崩壊を助けず、それゆえまたさらなる成分として存在する水中の産物において特に有益に使用され得る）を実行することを可能にする。
【００６２】
マイクロスフェアー状クリスタライトは、高い機械的ストレスアビリティー（ｓｔｒｅｓｓａｂｉｌｉｔｙ）に暴露される能力によって区別される。
【００６３】
特に、それらの形態学および均一性ゆえに、この粒子は、例えば孔に及ぼす平滑化効果を有する。
【００６４】
好ましく使用される１，４−α−Ｄ−ポリグルカンは、様々な方法において製造され得る。非常に有益な方法は、ＷＯ９５／３１５５３に記載される。この公報における開示は、本明細書中において参考として援用される。
【００６５】
以下の図面は、本発明をより詳細に説明する：
本発明は、以下の実施例の方法によってより詳細に説明される。この実施例は例示するのに役立ち、限定する意味を有さない。
実施例：
実施例１
１，４−α−Ｄ−ポリグルカンからのマイクロスフェアー状クリスタライトの製造：
１ｇの１，４−α−Ｄ−ポリグルカンを５ｍｌの水中に融解し、１４０℃にてオートクレーブする。その融解生成物をオートクレーブ中で８０℃まで冷却し、そしてこの温度にて１５分保つ。次いで、この懸濁液を凍結乾燥する。８５０ｍｇの無色１，４−ａ−Ｄ−ポリグリカン粒子を得る。これは、８５％の収率に相当する。この粒子の特徴付けを走査型電子顕微鏡写真（ＳＥＭ，Ｃａｍｓｃａｎ　Ｓ−４）によって行う。この粒子を図１に示す。この画像の縁の長さは２３．０μｍである。
実施例２および３：
各々の場合において、１００ｍｇの１，４−α−Ｄ−ポリグルカンおよび表１における濃度データに相当するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ，Ｅ５Ｐｒｅｍ．，Ｄｏｗ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）量を、オートクレーブ中で、１４０℃にて、５ｍｌの水中で融解する。この融解生成物を９０℃まで冷却し、そしてこの温度にて１５分間保つ。
【００６６】
生じる懸濁液を凍結および凍結乾燥する（ｆｒｅｅｚｅ　ｄｒｙｉｎｇ　Ｃｈｒｉｓｔ　Ｄｅｌｔａ　１−２４ＫＤ）。
【００６７】
この結果を下の表１において列挙する。
【００６８】
【表１】
2004512405.tif 000002
【００６９】
この粒子を、走査型電子顕微鏡写真（ＳＥＭ，Ｃａｍｓｃａｎ　Ｓ−４）によって特徴付けた。
【００７０】
この結果を下の表２において列挙する。
【００７１】
【表２】
2004512405.tif 000003
【００７２】
実施例４および５：
粒子の特徴に及ぼすセルロース誘導体の分子量の影響
異なる分子量のＨＰＭＣを使用したこと以外は、本質的に実施例１および２と同様に実験を行い、Ｅ５Ｐｒｅｍは性質上より低い分子量であり、従ってＫ１５Ｐｒｅｍよりも低い粘度のものであった（同様にＤｏｗ　Ｃｈｅｍｉｃａｌより）。
【００７３】
この結果からの証明のように、生じる粒子は同様の質を有する。結果的に、使用されるセルロース誘導体の分子量は、粒子の特性に及ぼす無視できる影響を有する。
【００７４】
結果は、下の表３に従う。
【００７５】
【表３】
2004512405.tif 000004
【００７６】
実施例６：
４０ｇの１，４−ａ−Ｄ−ポリグルカンを、１８０℃にて、オートクレーブ中において、１００ｍｌの水中に融解する。その融解生成物を閉ざされたオートクレーブ中で８０℃まで冷却し、この温度にて１５分保つ。得られた懸濁液を凍結および凍結乾燥する。乾燥マイクロスフェアー状クリスタライトの収率は、９０％である。このマイクロスフェアー状クリスタライトは、１００ｎｍのｄＷおよび９０ｎｍのｄＮ平均直径を有する。図２を走査電子顕微鏡において撮った。この画像の縁の長さは４．６５μｍである。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、実施例１におけるように製造されるマイクロスフェアー状クリスタライトを示す。この画像の縁の長さは２３．２８μｍである。
【図２】
図２は、実施例１におけるように製造されるマイクロスフェアー状クリスタライトを示す。この画像の縁の長さは２３．３μｍである。
【図３】
図３は、実施例６におけるように製造されるマイクロスフェアー状クリスタライトを示す。この画像の縁の長さは４６．２μｍである。
【図４】
図４は、１，４−α−Ｄ−ポリグルカン（本発明の微粒子の形態をとるＡ型）の広角散乱測定を示す。結晶化度の程度は＞９５％である。
【図５】
図５は、このような非−微粒子形態をとるＢ型のネオアミロースの広角散乱測定を示す。結晶化度の程度は＜５０％である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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