(57)【要約】新規排卵誘発方法は、治療の全段階における、ＦＳＨと組合されたｈＣＧの投与を含み、この場合、排卵刺激を最適化し合併症を最小限度に抑えるためにＦＳＨ：ｈＣＧの比が調節される。種々のＦＳＨ：ｈＣＧ比により特徴づけられる組成物の使用は、実施者が治療計画を容易に工夫し種々の治療目的および性腺刺激ホルモン投与に対する個々の患者の応答を適合させるのを可能にする。
2006526609.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの医薬上許容される担体中、ＦＳＨおよびｈＣＧを必須としてなる医薬組成物であって、ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、該組成物の投与により、卵巣過剰刺激を伴うことなく卵胞形成および卵胞成熟を促すものである医薬組成物。
【請求項２】
哺乳動物由来のいずれの他のタンパク質をも含有しない、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１】
2006526609.tif 000012
よりなる群から選ばれる、請求項１記載の組成物。
【請求項４】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化２】
2006526609.tif 000013
2006526609.tif 000014
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化３】
2006526609.tif 000015
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項６】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化４】
2006526609.tif 000016
2006526609.tif 000017
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項７】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化５】
2006526609.tif 000018
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項８】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化６】
2006526609.tif 000019
である、請求項７記載の医薬組成物。
【請求項９】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化７】
2006526609.tif 000020
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化８】
2006526609.tif 000021
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ＦＳＨがヒト由来ＦＳＨである、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１２】
凍結乾燥形態である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
単位投与形である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１４】
固体剤形である、請求項１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
固体剤形が、カプセル剤、錠剤、坐剤、丸剤、散剤および顆粒剤よりなる群から選ばれる、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
液体形態である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１７】
液体形態がバイアル中で供給される、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
液体形態が、充填済みシリンジまたはカートリッジ中で供給される、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１９】
第１バイアルと第２バイアルとを含んでなり、それらのバイアルのそれぞれが請求項１記載の医薬組成物を含有し、ＦＳＨ：ｈＣＧの比が第１バイアルと第２バイアルとで異なる組合せ体。
【請求項２０】
第１および第２バイアル中に含有される組成物を投与する時機に関する説明書を更に含む、請求項１９記載の組合せ体。
【請求項２１】
（Ａ）
【化９】
2006526609.tif 000022
2006526609.tif 000023
よりなる群から選ばれるＦＳＨ：ｈＣＧの比により特徴づけられる少なくとも１つの医薬組成物を投与し、
（Ｂ）血清ホルモンレベル、卵胞サイズおよび卵胞数をモニターし、ついで
（Ｃ）ｈＣＧボーラスの投与により排卵を誘発することを含んでなる排卵誘発方法。
【請求項２２】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１０】
2006526609.tif 000024
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１１】
2006526609.tif 000025
2006526609.tif 000026
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１２】
2006526609.tif 000027
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２５】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１３】
2006526609.tif 000028
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２６】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１４】
2006526609.tif 000029
である、請求項２１記載の方法。
【請求項２７】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１５】
2006526609.tif 000030
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２８】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１６】
2006526609.tif 000031
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２９】
工程（Ａ）が、前記群から選ばれるＦＳＨ：ｈＣＧの比により特徴づけられ、該比に関して同じ又は異なる少なくとも２つの医薬組成物を連続的に投与することを含む、請求項２１記載の方法。
【請求項３０】
連続投与におけるそれぞれの後続組成物が、該連続投与における前組成物に対して増加したｈＣＧを含有する、請求項２１記載の方法。
【請求項３１】
連続投与の組成物の間の時間が、１時間、５時間、１０時間、１２時間、２４時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日および１５日よりなる群から選ばれる、請求項２９記載の方法。
【請求項３２】
組成物が、純粋なＦＳＨを更に含む、請求項２１記載の方法。
【請求項３３】
組成物が、純粋なｈＣＧを更に含む、請求項２１記載の方法。
【請求項３４】
調節性排卵刺激プロトコール中に第１医薬組成物と第２医薬組成物とが一緒に又は別々に投与される、ＦＳＨを含む第１医薬組成物と、ｈＣＧを含む第２医薬組成物とを含んでなる製品。
【請求項３５】
別々の投与が連続的である、請求項３４記載の製品。
【請求項３６】
第１医薬組成物と第２医薬組成物とを使用するための説明書を更に含む、請求項３４記載の製品。
【請求項３７】
第１医薬組成物と第２医薬組成物とを投与するための手段を更に含む、請求項３４記載の製品。
【請求項３８】
不妊治療のためのＦＳＨを含む医薬組成物と共に使用する医薬組成物を製造するための、ｈＣＧの使用。
【請求項３９】
不妊治療のためのｈＣＧを含む医薬組成物と共に使用する医薬組成物を製造するための、ＦＳＨの使用。
【請求項４０】
卵胞形成または排卵を刺激するための、請求項３８または３９記載の使用。
【請求項４１】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、卵巣過剰刺激を伴うことなく卵胞形成および卵胞成熟を促すものである、請求項３８記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は新規性腺刺激ホルモン製剤に関する。より詳しくは、本発明は、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）およびヒト絨毛性性腺刺激ホルモン（ｈＣＧ）の両方が存在する、卵巣刺激に有用な医薬製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
生殖補助技術（ＡＲＴ）は、典型的には、卵胞の成長および成熟を刺激するための外因性性腺刺激ホルモンでの治療を要する。無排卵女性を治療するために性腺刺激ホルモンを使用する場合、その目的は、排卵の誘発の前に１個の首席卵胞が成熟する正常な月経周期を反復させることである。一方、体外受精（ＩＶＦ）を受けている女性の場合には、いくつかの卵胞の成長および成熟を刺激するために調節性卵胞刺激（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｏｖａｒｉａｎ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ）（ＣＯＳ）を行って複数の卵母細胞を生成させ、ついでそれらをＩＶＦ法での使用のために回収する。
【０００３】
ＡＲＴにおける最近の進歩にもかかわらず、外因性性腺刺激ホルモンによる卵巣刺激は一貫して成功しているわけではない。その１つの理由として、性腺刺激ホルモンでの治療に対する個々の応答にばらつきがあることが挙げられる。このばらつきは患者に対する処置を複雑にし、多胎出産および潜在的に生命を脅かす合併症を引き起こしうる。
【０００４】
性腺刺激ホルモンは、視床下部性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）の制御下で下垂体により分泌される。卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）および黄体形成ホルモン（ＬＨ）は、卵胞成熟（卵胞形成）および黄体化に必須の下垂体ホルモンである。ＦＳＨは自然月経周期の開始時の卵胞の補強（ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ）（すなわち、卵巣の初期成長）に要求され、それは中期および後期の卵胞形成をも補助する。
【０００５】
ＦＳＨは、無排卵女性およびＣＯＳを受けている女性において卵胞形成を誘発するために治療用に投与される。伝統的な排卵刺激法においては、卵母細胞が回復するまで治療の全体にわたってＦＳＨが投与される。ＦＳＨによるこの継続的刺激は多重受胎および潜在的に致死性の状態（卵巣過剰刺激症候群（ＯＨＳＳ））を招きうる。ＦＳＨの投与量の減少はＯＨＳＳのリスクを低下させうるが、低いＦＳＨ投与量は不適当な卵胞量を与え、したがって生殖補助における成功の確率を低下させる。
【０００６】
ＬＨは、正常な月経周期の全段階において働く。ＬＨは卵胞の莢膜細胞を刺激してアンドロゲン基質を産生し、これは顆粒膜細胞内のアロマターゼ系によりエストロゲンに変換される。卵胞成熟の後期の、排卵の約５〜７日前に、大きな卵胞が顆粒膜細胞内でＬＨ受容体を発現し始め、これは、継続的な成熟および発生において、それらの卵胞をＬＨに対して応答性にする（Ｈｉｌｌｉｅｒら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１００：５１（１９９４），Ｃａｍｐｂｅｌｌら  Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ．１１７：２４４（１９９９））。つぎに、正常な月経周期においては、ＬＨの中期サージが卵胞成熟および排卵の最終段階を誘発する。中期ＬＨサージの後、２４〜４８時間以内に排卵が生じる。最後に、月経周期の第２段階である黄体期において、ＬＨ刺激による卵巣の黄体におけるエストロゲンおよびプロゲステロンの産生が、子宮に着床および妊娠の準備をさせる。
【０００７】
卵巣刺激法においては、ｈＣＧがＬＨ活性源として働きうる。なぜなら、ｈＣＧおよびＬＨは同じ受容体を介して作用するからである（Ｆｉｌｉｃｏｒｉら  Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｐｒｏｄ．１７：２００９（２００２ａ）；Ｍａｒｔｉｎら，Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．７６：Ｏ−４９（２００２））。この文献はｈＣＧとＬＨとを代替可能なものとして扱う傾向にあるが、ＬＨと比較して、ｈＣＧは長い半減期を有し、したがってＬＨより強力である。実際、科学文献は、一般には、天然由来性腺刺激ホルモン製剤におけるＬＨ活性源の確定を記載していない。しかし、Ｆｉｌｉｃｏｒｉら，Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｐｒｏｄ．Ｕｐｄａｔｅ  ８：５４３，５５２（２００２ｂ）を参照されたい（「おそらく、［特定の］ｈＭＧ製剤中のｈＣＧ含量は〜５ＩＵ／アンプル」であると推定され、「このｈＭＧ製剤に含まれるＬＨ効力の７５ＩＵのうちの約３０ＩＵはｈＣＧによってもたらされる」）。
【０００８】
この文献は、排卵刺激の全体にわたるＦＳＨと組合されたＬＨ活性または低用量のｈＣＧの使用を開示しているが、ＬＨ活性補足の有効量および時機に関する指針を欠いている。例えば、Ｍａｒｔｉｎら，Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．７６：Ｏ−４９（２００２）の抄録は、排卵刺激中に２．５μｇの組換えｈＣＧを毎日投与する（血清ｈＣＧレベルを１〜３ｍＩＵ／ｍＬに維持する）ことを開示している。Ｇｏｒｄｏｎらは、０、１、２５および７５  ＩＵのＬＨ活性と共に７５  ＩＵのＦＳＨを投与することを開示している（Ｈｕｍａｎ  Ｒｅｐｒｏｄ．１２（Ｓｕｐｐｌ．１）：５２（１９９７ａ）；同誌：５３（１９９７ｂ））。
【０００９】
公開されている研究は、刺激の全体にわたり、１５０：０、１５０：３７．５、１５０：７５および１５０：１５０のＦＳＨ：ＬＨ比でＬＨ活性を投与することを開示している（Ｆｉｌｉｃｏｒｉら（２００２ａ））。さらに、文献は、ＦＳＨ刺激を５０  ＩＵ／日のｈＣＧで補足すること（Ｆｉｌｉｃｏｒｉら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．＆  Ｍｅｔａｂｏｌ．８４：２６５９（１９９９））、および１５０  ＩＵのＦＳＨを７日間投与し次いで１５０：０、５０：５０、２５：１００および０：２００のＦＳＨ：ｈＣＧ比で処理するプロトコールを記載している（同誌，８７：１１５６（２００２ｃ））。
【００１０】
文献は、ＦＳＨとＬＨとの両方の活性を含有する他の組成物、およびＬＨ活性と組合されたＦＳＨの使用を記載している。例えば、２０００年１１月１６日付け公開のＰＣＴ出願ＷＯ  ００／６７７７８は、無排卵女性における卵胞形成を誘発するための、ＦＳＨと組合されたＬＨまたは同等量のｈＣＧの使用に関するものである。より詳しくは、該’７７８出願は、ＬＨまたは「その生物学的に活性な類似体」を１００〜１５００  ＩＵ／日の用量（４頁２６〜２９行）および１：１．５〜１：２０の範囲のＦＳＨ：ＬＨ比で投与することを開示している（同誌，１６〜１８行）。
【００１１】
米国特許第５，９２９，０２８号は、１以上の天然または組換え性腺刺激ホルモン（ＦＳＨ、ＬＨおよびｈＣＧを含む）を含有する液体製剤に関するものである。該’０２８特許は、ＦＳＨおよびＬＨ活性を約１：１の比で有するヒト閉経期性腺刺激ホルモン（ｈＭＧ）の天然由来組成物を考察しているが、市販のｈＭＧ製剤の１：１比以外のＦＳＨ：ＬＨ活性の比を記載していない。
【００１２】
また、ＦＳＨおよびＬＨの両方を含有する市販の製剤が存在する。７５  ＩＵのＬＨ活性と共に７５  ＩＵのＦＳＨを、および２５または３５  ＩＵ  ＬＨ活性と共に７５  ＩＵのＦＳＨを含有するヒト由来製剤が入手可能である（ＮｏｒｍｅｇｏｎおよびＰｅｒｇｏｇｒｅｅｎ）。
【００１３】
しかし、疾患によっては「過剰」なＬＨレベルは、卵胞閉鎖、顆粒膜細胞増殖の抑制および早期黄体化を引き起こすことが一般に知られている。全般的には、Ｆｉｌｉｃｏｒｉ，Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．７９：２５３（２００３）を参照されたい。最近の研究はそうではないことを示唆しているが、ＬＨ活性レベルは或る範囲内でなければならず、「ＬＨシーリング（ＬＨ  ｃｅｉｌｉｎｇ）」を下回る又は上回るレベルは正常な卵胞発生を損なうという見解が当分野には根強く残っている（Ｓｈｏｈａｍ，Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．７０：１１７０（２００２））。
【００１４】
要約すると、排卵誘発中にＦＳＨをＬＨ活性で補足すると、適切な卵胞発生を達成するための治療期間および性腺刺激ホルモンの使用量が少なくて済むという証拠が公開されている（Ｆｉｌｉｃｏｒｉら  （１９９９），（２００２ｂ））。一方、「高いＬＨ活性レベル」は卵胞発生に負の影響を及ぼすという見解が根強く残っている。
【００１５】
その見解は、調節性卵巣刺激の全体にわたるＦＳＨの投与を伴う通常の卵巣刺激法を導いた。外因性ＬＨ活性は卵胞発生の初期ないし中期には不必要であり更には有害であるとみなされている。したがって、卵巣刺激の伝統的な手段は、典型的には７５  ＩＵ／日のＦＳＨのみでの治療を含む。この伝統的な方法においては、卵胞が或る発生段階に達して初めて、排卵を誘発するためにＬＨ活性を投与する。治療の全体にわたってＬＨ活性が投与されるようになったのは最近のことであり、この場合に有効なＬＨ活性の最適な量および時機は依然として議論の的となっている。
【発明の開示】
【００１６】
発明の概要
排卵刺激の通常の方法は、卵胞発生を最適化する選択的治療には適応していない。さらに、入手可能な性腺刺激ホルモン製剤は種々の治療目的に容易には適合しない。したがって、ＦＳＨおよびｈＣＧの両方を種々の比で含有していることにより実施者が性腺刺激ホルモン治療方法を個々の患者の要求に適応させうる組成物が必要とされている。無排卵女性において及びＡＲＴ法の場合に卵胞形成を刺激するためにそのような組成物を使用するための方法も必要とされている。
【００１７】
とりわけ、これらの目的のために、本発明は、ＦＳＨおよびｈＣＧを種々の量および種々のＦＳＨ：ｈＣＧ比で含有する、単一の製剤として供給される医薬組成物を提供する。これらの化合物は、既に入手可能な製剤では不可能な柔軟な様態で実施者が排卵刺激を最適化するのを可能にする。
【００１８】
本発明はまた、種々のＦＳＨ：ｈＣＧ比を伴う組成物を使用することによる、排卵を誘発するためのアプローチを含む。本発明の方法は、より安全な且つより成功しうる排卵刺激をもたらす、卵胞形成の段階または患者の応答におけるばらつきに応じた、ＦＳＨ：ｈＣＧ比における漸増的調節を可能にする。
【００１９】
本発明の１つの実施形態は、医薬上許容される担体中、ＦＳＨおよびｈＣＧを必須としてなる医薬組成物である。本発明においては、そのような組成物におけるＦＳＨ：ｈＣＧの比は、該組成物が投与されると、卵巣過剰刺激を伴うことなく卵胞形成および卵胞成熟を促す。この場合、「を必須としてなる」なる語は、該組成物が、他の構成要素を有する可能性はあるものの、卵胞形成または卵胞成熟に関する該組成物の有益な特性を抑制し又は損なういずれの成分をも含まないことを意味する。
【００２０】
本発明のもう１つの実施形態は、第１バイアルと第２バイアルとを含んでなる組合せであり、それらのバイアルのそれぞれは、医薬上許容される担体中、ＦＳＨおよびｈＣＧを必須としてなる医薬組成物を含有し、ＦＳＨ：ｈＣＧの比は、該組成物が投与されると、卵巣過剰刺激を伴うことなく卵胞形成および卵胞成熟を促すものである。ＦＳＨ：ｈＣＧの比は、第１バイアルと第２バイアルとで異なる。
【００２１】
本発明のもう１つの実施形態は、
【００２２】
【化１７】
2006526609.tif 000003
よりなる群から選ばれるＦＳＨ：ヒトｈＣＧの比により特徴づけられる少なくとも１つの医薬組成物を投与し、血清ホルモンレベル、卵胞サイズおよび卵胞数をモニターし、ついでｈＣＧボーラスの投与により排卵を誘発することを含んでなる、排卵の誘発方法である。
【００２３】
本発明の他の特徴、目的および利点は、以下の詳細な説明から明らかである。しかし、その詳細な説明は、本発明の好ましい実施形態を示すものであり、単なる例示として記載されているに過ぎず、限定的なものではないと理解されるべきである。本発明の精神および範囲内の種々の変更および修飾が、以下の詳細な説明から当業者に明らかとなるであろう。
【００２４】
好ましい実施形態の詳細な説明
本発明は、治療の全段階においてＦＳＨと組合されたｈＣＧの投与により及び排卵刺激を最適化するためのＦＳＨ：ｈＣＧ比の調節により特徴づけられる新規治療方法のための組成物および方法を提供する。この方法は、実質的には通常のアプローチから出発し、典型的には７５〜３００  ＩＵ／日でＦＳＨを単独で投与し、中期にＬＨ活性のボーラスを投与して排卵を誘発する。
【００２５】
本発明は、広範なＦＳＨ：ｈＣＧ比を伴う医薬組成物を提供する。本発明の組成物および方法は、与えられた患者の状況に治療を医師が容易に適合させるのを可能にし、種々の卵胞形成段階に基づいて及び性腺刺激ホルモンに対する患者の種々の応答に基づいてＦＳＨ：ｈＣＧが微調節されるのを可能にする。さらに、高レベルのｈＣＧを含有する治療用組成物を包含する或る範囲の治療用組成物が入手可能となることは、種々のＡＲＴ法の治療要件を医師が容易に適合させることを可能にする。この柔軟性は現在の性腺刺激ホルモン製剤では得られない。
【００２６】
本発明の組成物は、広範なＦＳＨ：ｈＣＧ比を有するため、本発明は、とりわけ無排卵性不妊性の治療、体外受精（ＩＶＦ）、卵細胞質内精子注入法（ＩＣＳＩ）、卵管内配偶子移植（ＧＩＦＴ）、卵管内接合体移植（ＺＩＦＴ）、凍結保存胚移植、子宮内授精（ＩＵＩ）、ドナー卵母細胞移植、ドナー卵母細胞からの凍結保存胚移植および宿主子宮移植のためのＡＲＴ周期を含む任意の排卵誘発およびＡＲＴ法における卵胞形成および排卵を刺激するために容易に使用することが可能である。本発明の組成物および方法は、無排卵患者ならびに低性腺刺激ホルモン性性機能低下および多房性卵巣症候群の患者を治療するためにも使用することが可能である。
【００２７】
本発明の組成物においては、ＬＨ活性源としてｈＣＧを使用する。ｈＣＧはＬＨ受容体に結合し、該受容体を介してその生物学的作用を発揮する。独立したｈＣＧ受容体は存在しない。本発明におけるｈＣＧの使用は、ＬＨの使用に対する有意な利点を有する。例えば、ヒト由来ｈＣＧはヒト由来または組換えＦＳＨほど高価ではない。したがって、コストの観点からは、該刺激法において使用するＦＳＨの量を最小にすることが好ましい。さらに、本発明の医薬組成物におけるｈＣＧの使用は、より生理的に及び有効に、ＣＯＳ中の大きな成熟卵胞の成熟の最終段階を補助し、卵巣中および血中エストロゲンレベルを上昇させ、卵母細胞および胚の質を改善し、ＦＳＨ投与の量および期間を減少させ、多重受胎およびＯＨＳＳのようなＦＳＨ関連合併症のリスクを減少させる。
【００２８】
要約すると、本発明の組成物および方法は、より高い成功率を達成し合併症のリスクを減少させ実施が容易であり通常の実施より低コストである治療計画を可能にする。
【００２９】
特に示さない限り、すべての科学技術用語は、一般的な専門的用法に従って用いられる。一般に、この説明および記載されている実験方法の用語法はよく知られており、当技術分野で一般に用いられている。組換え核酸法、微生物培養、細胞培養、組織培養、形質転換、分析化学、有機合成化学、化学合成、化学分析ならびに医薬の製剤化および運搬には、標準的な技術を用いる。一般に、酵素反応ならびに精製および／または単離工程は製造業者の説明に従って行う。例外であることが示されていない限り、問題となっている技術および方法は、例えばＳａｍｂｒｏｏｋら，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＬＯＮＩＮＧ  Ａ  ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ  ＭＡＮＵＡＬ，２ｄ  ｅｄ．（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，１９８９）およびＣＵＲＲＥＮＴ  ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ  ＩＮ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９８９に開示されている通常の方法により行う。
【００３０】
ＦＳＨおよびｈＣＧの一体的組合せ
本発明は、哺乳動物において卵巣刺激を誘発するのに有用な新規医薬組成物を提供する。「哺乳動物」は、ヒト、非ヒト霊長類、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ロバ、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、イヌ、ネコまたは捕獲野生動物を意味する。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【００３１】
該医薬組成物は、１〜４００  ＩＵのヒト由来ｈＣＧと共に５０〜２００  ＩＵのＦＳＨを含有する（図１Ａを参照されたい）。好ましくは、該組成物はＦＳＨおよびｈＣＧを以下の比で含有する。
【００３２】
【化１８】
2006526609.tif 000004
より好ましくは、該組成物は、ＦＳＨおよびｈＣＧを以下の比で含有する。
【００３３】
【化１９】
2006526609.tif 000005
より好ましい実施形態においては、該組成物は、
【００３４】
【化２０】
2006526609.tif 000006
を含有する。これらの比は、複数回投与を要する治療方法において有用である。なぜなら、１より多いアンプルが容易に投与されうるからである。
【００３５】
もう１つの、より好ましい実施形態においては、該組成物は、
【００３６】
【化２１】
2006526609.tif 000007
を含有する。これらの比は、より高い用量のＦＳＨを含有する組成物を医師が選択するのを可能にする。これらの組成物は、より高い用量のＦＳＨが望まれうる治療開始時に特に有用でありうる。
【００３７】
もう１つの、より好ましい実施形態においては、該組成物は、
【００３８】
【化２２】
2006526609.tif 000008
を含有する。そのような組成物は、治療開始時に有利でありうる、より低い用量のｈＣＧを提供する。
【００３９】
精製ＦＳＨは、当技術分野で公知の任意の方法により得ることが可能である。本明細書中で用いるＦＳＨは、ヒト由来および組換えＦＳＨ、ＦＳＨ類似体ならびに脱グリコシル化、非グリコシル化および修飾グリコシル化形態を含む。
【００４０】
ヒト由来ＦＳＨは、尿、下垂体および胎盤のような天然源から、当技術分野で公知の任意の手段により精製することが可能である。ヒト由来ＦＳＨを単離するための方法は、例えば、Ｆｅｖｏｌｄら，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２６：９９９（１９４０），Ｆｒａｅｎｋｅｌ−Ｃｏｎｒａｔら，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．４５：６２７（１９４０），ＭｃＳｈａｎおよびＭｅｙｅｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１３５：４７３（１９４０），Ｇｒｅｅｐら，同誌  １３３：２８９（１９４０），Ｌｉら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  １０９：４４５（１９４９）ならびにＲｏｏｓおよびＧｅｍｚｅｌｌ，ＣＩＢＲＡ  ＦＯＵＮＤＡＴＩＯＮ  ＳＴＵＤＹ  ＧＲＯＵＰ，Ｎｏ．２２（Ｌｉｔｔｌｅ，Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ，１９６５）に記載されている。
【００４１】
精製ヒト由来ＦＳＨは商業的に入手可能であり、商品名Ｆｏｓｔｉｍｏｎ（登録商標）（ＡＭＳＡ／ＩＢＳＡ）、Ｍｅｔｒｏｄｉｎ  ＨＰ（登録商標）（Ｓｅｒｏｎｏ）およびＢｒａｖｅｌｌｅ（Ｆｅｒｒｉｎｇ）で販売されている。組換えＦＳＨは、いくつかの公知手段のいずれかにより得ることが可能である。例えば、Ｋｅｅｎｅら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６：４７６９（１９８９）およびＷＯ  ８６／０４５８９は、げっ歯類細胞における生物学的に活性なヒトＦＳＨの発現および精製を記載している。
【００４２】
組換えＦＳＨは商品名Ｆｏｌｌｉｓｔｉｍ（登録商標）（Ｏｒｇａｎｏｎ）、Ｐｕｒｅｇｏｎ（登録商標）（Ｏｒｇａｎｏｎ）およびＧｏｎａｌ−Ｆ（登録商標）（Ｓｅｒｏｎｏ．）としても商業的に入手可能である。
【００４３】
翻訳後修飾の度合において異なるＦＳＨアイソフォームを使用することが有利でありうる。異なる修飾により、該アイソフォームは、全体的な荷電、シアル酸（末端糖）またはスルファート取り込みの度合、受容体結合アフィニティーおよび血漿中半減期における相違を示す（Ｃｈａｐｐｅｌら，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ４：１７９（１９８３）；Ｓｎｙｄｅｒら．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．５４：１１５（１９８７））。これらの形態は、それらの全体的な荷電に基づいてお互いから分離可能であり、すべてのアイソフォームが生物活性を示す。より大きな実効負電荷を示すアイソフォームは、より顕著にシアル酸化されており、より長い代謝クリアランス速度を示し、それらの延長された血漿中生存時間により、より大きな生物活性を示す。
【００４４】
ｈＣＧは、当技術分野で公知の任意の手段により得ることが可能である。本明細書中で用いるｈＣＧはヒト由来および組換えｈＣＧを含む。ヒト由来ｈＣＧは、当技術分野で公知の任意の方法、例えば、ＺｏｎｄｅｋおよびＡｓｃｈｈｅｉｍ，Ｋｌｉｎ．Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒ．７：９３１（１９２８）、Ｋａｔｚｍａｎら，同誌  １４８：５０１（１９４３）ならびにＣｌａｅｓｓｏｎら，Ａｃｔａ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１：１（１９４８）に開示されている方法により、任意の適当な起源（例えば、尿および胎盤）から単離することが可能である。精製ヒトｈＣＧは商業的に入手可能であり、Ｐｒｏｆａｓｉ  ＨＰ（登録商標）（Ｓｅｒｏｎｏ）、Ｇｏｎａｓｉ（登録商標）（ＡＭＳＡ／ＩＢＳＡ）およびＣｈｏｒａｇｏｎ，Ｎｏｖａｒｅｌｉｎ（Ｆｅｒｒｉｎｇ）なる名称で販売されている。組換えｈＣＧを発現および精製するための方法は当技術分野で公知であり、例えばＧｕｐｔａおよびＤｉｇｈｅ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２２：２７３（１９９９）に開示されている。
【００４５】
組換えｈＣＧは、ヒト由来ｈＣＧと比べて重量比で約２５倍大きな活性を有する。例えば、Ｃｈａｎｇら，Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．７６：６７（２００１）；Ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ  Ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｈｉｎ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ，Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．７５：１１１１（２００１）を参照されたい。したがって、該組成物中で組換えｈＣＧを使用する場合には、それに応じて、所望の国際単位のｈＣＧ活性を得るためにｈＣＧの量を調節することが可能である。図１Ａの値に基づく、この線に沿った調節を図１Ｂに示す。
【００４６】
ＦＳＨおよびｈＣＧ活性の量は、当技術分野で公知のアッセイ方法を用いて測定することが可能である。薬局方Ｖａｎ  Ｈｅｌｌバイオアッセイ（Ｖａｎ  Ｈｅｌｌら，Ａｃｔａ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．４７：４０９（１９６４））においては、１  ＩＵのｈＣＧは５〜７  ＩＵのＬＨと同等である。組成物中のｈＣＧ活性は、Ｖａｎ  Ｈｅｌｌバイオアッセイ、ラジオレセプターアッセイ（例えば、Ｄｉｇｈｅ  ＆  Ｍｏｕｄｇａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２２５：４９０（１９８３）に記載されているもの）、全動物バイオアッセイ、卵巣アスコルビン酸枯渇アッセイおよびＭＡ１０  Ｌｅｙｄｉｇ細胞バイオアッセイ（Ａｓｃｏｌｉ，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １０８：８８（１９８１）に開示されているもの）を含む任意のアッセイ方法を用いて測定することが可能である。同様に、ＦＳＨ活性は、受容体結合アッセイおよび全動物バイオアッセイを用いて測定することが可能である。
【００４７】
与えられた組成物中のＦＳＨおよびｈＣＧタンパク質の量は、固体化合物の重量、タンパク質アッセイ、例えばＢｒａｄｆｏｒｄおよびＬｏｗｒｙアッセイ、ならびにイムノアッセイ技術、例えばＥＬＩＳＡおよびウエスタンブロット法により測定することが可能である。
【００４８】
ＦＳＨ：ｈＣＧ組成物は、水溶液中、精製ＦＳＨおよびｈＣＧ産物を、所望のＦＳＨ：ｈＣＧ比が得られるようバッチ法調節を行いながら混合し、ついで滅菌濾過、滅菌充填および所望により、凍結乾燥することにより製剤化することが可能である。また、ＦＳＨ：ｈＣＧ組成物は、まず第１に所望のＦＳＨ：ｈＣＧ比を与える精製条件が確立されている方法を用いて（すなわち、それら自体を混合することなく）製剤化することも可能である。
【００４９】
本発明の医薬組成物は、任意の薬物投与経路（例えば、経口、直腸、非経口（静脈内、筋肉内または皮下）、槽内、膣内、腹腔内、局所（散剤、軟膏剤または滴剤））のためのよく知られた組成物に又はバッカル剤もしくは鼻噴霧剤として製剤化することが可能である。そのような目的のための典型的な組成物は、とりわけＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ，１５ｔｈ  Ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９７５），ｐ．１４０５−１２および１４６１−８７ならびにＴＨＥ  ＮＡＴＩＯＮＡＬ  ＦＯＲＭＵＬＡＲＹ  ＸＩＶ，１４ｔｈ  Ｅｄ．（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，１９７５）に記載されているとおりの医薬上許容される担体、例えば水溶液、無毒性賦形剤（塩、保存剤、緩衝剤などを含む）を含む。
【００５０】
適当な水性および非水性の担体、希釈剤、溶剤またはビヒクルの具体例には、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、ポロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、カルボキシメチルセルロースおよびそれらの適当な混合物、植物油（例えば、オリーブ油）および注射用有機エステル、例えばオレイン酸エチルが含まれる。
【００５１】
本発明の組成物は、限定的なものではないが保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のような添加剤をも含有しうる。微生物の増殖を防ぐために抗細菌および抗真菌剤を加えることが可能であり、それらには、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などが含まれる。さらに、糖、塩化ナトリウムなどのような等張化剤を加えることが望ましいかもしれない。
【００５２】
場合によっては、持続的作用を得るために、皮下または筋肉内注射からのＦＳＨおよびｈＣＧの吸収を遅延させるのが望ましい。これは、低い水溶性を有する結晶性または非晶性物質の液体懸濁液を使用することにより達成することが可能である。その場合、ＦＳＨおよびｈＣＧの吸収速度はその解離速度に左右され、そしてこれは結晶サイズおよび結晶形態に左右されうる。あるいは、非経口投与されたＦＳＨとｈＣＧとの組合せ形態の遅延吸収は、ＦＳＨおよびｈＣＧ組合せ体を油ビヒクルに溶解または懸濁させることにより達成される。
【００５３】
注射用デポ形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドのような生分解性高分子においてＦＳＨおよびｈＣＧ組合せ体のマイクロカプセル化マトリックスを形成させることにより製造することが可能である。高分子に対するＦＳＨおよびｈＣＧ組合せ体の比ならびに使用する個々の高分子の性質に応じて、ＦＳＨおよびｈＣＧ組合せ体の放出速度を制御することが可能である。他の生分解性高分子の具体例には、ポリ（オルソエステル）およびポリ（酸無水物）が含まれる。また、デポ注射剤は、ＦＳＨおよびｈＣＧ組合せ体を、身体組織に適合しうるリポソームまたはマイクロエマルション内に捕捉させることによっても製造される。
【００５４】
注射剤は、例えば、細菌保持フィルターでの濾過により、または使用直前に無菌水または他の無菌注射用媒体に溶解もしくは分散されうる無菌固体組成物の形態の滅菌剤を加えることにより、滅菌することが可能である。注射剤は、任意の適当な容器（例えばバイアル、充填済みシリンジ、注射用カートリッジなど）中で供給されうる。
【００５５】
注射剤は、別々の又は一緒の投与に適した、ＦＳＨまたはｈＣＧのいずれかを含有する医薬組成物を有する製品として供給されうる。別々に投与する場合には、投与は連続的でありうる。該製品は任意の適当なパッケージ中で供給されうる。例えば、製品は、ＦＳＨ、ｈＣＧまたはＦＳＨとｈＣＧとの両方の組合せを含有する幾つかの充填済みシリンジを含有することが可能であり、該シリンジは、ブリスタパックまたは無菌性を維持するための他の手段としてパッケージされうる。製品は、場合によっては、ＦＨＳおよびｈＣＧ製剤を使用するための説明書を含有しうる。
【００５６】
該医薬組成物の種々の成分のｐＨおよび厳密な濃度は、当技術分野における通常のプラクティスに従い調節される。ＧＯＯＤＭＡＮ  ＡＮＤ  ＧＩＬＭＡＮ’Ｓ  ＴＨＥ  ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＢＡＳＩＳ  ＦＯＲ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，７ｔｈ  ｅｄ．を参照されたい。
【００５７】
好ましい実施形態においては、本発明の組成物は非経口投与用の組成物として供給される。該非経口製剤の製造のための一般的な方法は当技術分野で公知であり、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ，前掲，ｐ．７８０−８２０に記載されている。該非経口組成物は、液体製剤中で、または投与直前に無菌注射用媒体と混合される固体として供給されうる。特に好ましい実施形態においては、該非経口組成物は、投与の容易さ及び投与量の均一性のため、単位投与形として供給される。
【００５８】
本明細書中の「単位投与形」は、治療すべき哺乳動物対象に対する一体的投与として適した物理的に分離した単位を意味し、各単位は、必要な医薬担体と共に所望の治療効果をもたらすよう計算された所定量の活性物質を含有する。本発明の新規単位投与形の仕様は、活性物質および達成すべき個々の治療効果の特有の特性、ならびに哺乳動物対象における使用のための活性物質の製剤化の当技術分野における固有の限界によって決定され直接的に左右される。
【００５９】
単位投与形は、例えば、１、５、１０、２５、５０、７５、１００、２００、３００および４００  ＩＵのｈＣＧと組合された５０、７５、１００、１５０および２００  ＩＵのＦＳＨを含有しうる。割合で表した場合、ＦＳＨおよびｈＣＧはそれぞれ、一般には、約０．１μｇ〜約２００ｍｇ／ｍｌで存在する。
【００６０】
懸濁剤は、レオロジー修飾剤、例えばエトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微晶質セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガカントならびにそれらの混合物を含有しうる。
【００６１】
ＦＳＨおよびｈＣＧの有効量ならびにＦＳＨ：ｈＣＧの適切な比は実験的に決定されうると当業者は理解するであろう。該組成物は、１以上の医薬上許容される賦形剤と組合された医薬組成物として、卵巣刺激を要する対象に投与することが可能である。ヒトへの投与の場合には、本発明の物質または組成物の合計１日使用量は、妥当な医学的判断の範囲内で担当医師により決定されると理解されるであろう。任意の個々の患者に対する具体的な治療的に有効な用量レベルは種々の要因、すなわち、達成すべき応答のタイプおよび度合；使用する具体的な物質または組成物の活性；使用する具体的な物質または組成物；患者の年齢、体重、全身健康状態、性別および食事；投与の時間、投与経路および該物質の排泄速度；治療期間；ならびに医学分野でよく知られた同様の要因に左右されるであろう。
【００６２】
排卵刺激におけるＦＳＨとｈＣＧとの「単一バイアル」組合せ体の使用
治療目的に基づき、適切なＦＳＨ：ｈＣＧ比を有する組成物を選択することが可能であり、該組成物または一連の組成物を卵巣刺激の期間の全体にわたって投与することが可能である。医師は、１つの比から刺激を開始し、ついで、該周期の全体にわたってＦＳＨ：ｈＣＧの比を調節することが可能である。治療中に行う調節は、該周期中の投与の時機に基づいたもの、あるいは卵胞形成またはステロイド産生（ｓｔｅｒｏｉｄｏｇｅｎｅｔｉｃ）指標、例えば卵胞の数およびサイズならびに患者のホルモンレベルに応答したものでありうる。
【００６３】
例えば、低性腺刺激ホルモン性無月経により特徴づけられる無排卵女性の治療においては、正常な月経周期中に生じるＦＳＨおよびＬＨ活性のレベルを模擬するよう本発明の組成物を選択し投与することが可能である。最初は、１００：５のＦＳＨ：ｈＣＧの比を有する組成物を毎日投与することになるであろう。例えば第６日から、血清中エストラジオールのレベルならびに卵胞の数およびサイズをモニターすることになるであろう。１２ｍｍより大きな少なくとも２個の卵胞および２００ｐｇ／ｍＬより高いエストラジオールレベルが見出されたら、５０：２００のＦＳＨ：ｈＣＧ比を有する組成物を使用して治療を継続し、１７ｍｍより大きな少なくとも１個の卵胞および４００ｐｇ／ｍＬより高いエストラジオールレベルの最終成熟パラメーターが得られるまで、それを投与する。該最終成熟パラメーターに達したら、１０，０００  ＩＵのｈＣＧで排卵を誘発する。
【００６４】
ＣＯＳ中には、大きな成熟卵胞の数が最大となり小さな潜在的に有害な卵胞の数が最小となるよう組成物を選択する。最初は、２５０：１０のＦＳＨ：ｈＣＧ比を有する組成物を毎日投与することになるであろう。第６日から、血清中エストラジオールのレベルならびに卵胞の数およびサイズをモニターすることになるであろう。１２ｍｍより大きな少なくとも４個の卵胞および６００ｐｇ／ｍＬより高いエストラジオールレベルが見出されたら、５０：２００のＦＳＨ：ｈＣＧ比を有する組成物を、１７ｍｍより大きな少なくとも５個の卵胞および１，５００ｐｇ／ｍＬより高いエストラジオールレベルの最終成熟パラメーターが得られるまで投与する。ついで、１０，０００  ＩＵのｈＣＧで排卵を誘発することになるであろう。
【００６５】
予備臨床研究は排卵誘発前のｈＣＧ投与の正の効果を示している。１つの研究の結果を表１に示す。ＣＯＳ周期の最初の８日間にわたり、４群の女性に２５０  ＩＵ／日のＦＳＨを投与した。およそ第９日から開始しおよそ第１２日まで継続して、群Ｉには２５０  ＩＵ／日のＦＨＳを投与し続け、群ＩＩには５０  ＩＵ／日のＦＳＨおよび１００  ＩＵ／日のｈＣＧを投与し、群ＩＩＩには５０  ＩＵ／日のＦＳＨおよび２００  ＩＵ／日のｈＣＧを投与し、群ＩＶには５０  ＩＵ／日のＦＳＨおよび４００  ＩＵ／日のｈＣＧを投与した。排卵前超音波検査は、ｈＣＧ投与群において、大きな卵胞（＞１４ｍｍ）の数の増加を示した。さらに、それぞれ１００  ＩＵ／日のｈＣＧおよび２００  ＩＵ／日のｈＣＧを投与した群ＩＩおよびＩＩＩでは、排卵後に約２倍多くの卵母細胞が回収された。受精率および良質な胚の数は全群において同様であったが、妊娠数は、１００  ＩＵ／日のｈＣＧを投与した群では、ＦＳＨのみを投与した群より約３倍高かった。この研究は、排卵誘発の後期におけるＦＳＨおよびｈＣＧの併用が、発生中の大きな卵胞の数を増加させ、回収される卵母細胞の数を増加させ、妊娠率を改善しうることを示している。
【００６６】
該医薬組成物は、１以上の他の化合物または分子と共に共投与することが可能である。「共投与」は、同一製剤中または２つの異なる製剤中での同時投与を意味する。
【００６７】
本発明の組成物は、ＧｎＲＨアゴニストおよびアンタゴニストと共に又はそれらの後で投与することが可能である。ＧｎＲＨアゴニストおよびアンタゴニストは、性腺刺激ホルモン投与中の自然排卵を防ぐために排卵誘発法で使用される。ＧｎＲＨアンタゴニストは内因性ＬＨ活性を損なって、生存可能な卵母細胞の数を減少させる。したがって、本発明の組成物は、治療の開始時に、卵胞発生および卵母細胞成熟を刺激するのに十分なＬＨ活性レベルを得るためにＧｎＲＨアンタゴニストと共に投与することが可能である。
【００６８】
更なる応用性を付与するために、本発明の組成物は、現在入手可能な性腺刺激ホルモン製剤、例えば純粋なＦＳＨ、純粋なｈＣＧ、純粋なＬＨおよびｈＭＧ製剤と共に共投与することが可能である。例えば、ＦＳＨ  ７５  ＩＵおよびｈＣＧ  ２００  ＩＵを有するＦＳＨ：ｈＣＧ組合せ組成物の１アンプルを、ＦＳＨ  ７５  ＩＵを含有する高精製ＦＳＨの１アンプルと共に共投与して、結果的に、１５０  ＩＵのＦＳＨおよび２００  ＩＵのｈＣＧの投与とすることが可能である。
【００６９】
ＦＳＨ：ｈＣＧ組成物は、卵巣刺激の全体にわたって連続的に投与する。「連続的」投与は、組成物の投与の間に数秒、数分、数時間または数日の時間的相違があることを意味する。それぞれの後続の連続的投与は、前投与と同じ又は異なるＦＳＨ：ｈＣＧ比を有する組成物を含みうる。好ましい実施形態においては、連続的投与は、ＦＳＨ：ｈＣＧ比において異なるＦＳＨ：ｈＣＧ組成物で行う。より好ましい実施形態においては、それぞれの後の組成物は、その一連の投与における前組成物より大量のｈＣＧを含有する。特に好ましい実施形態においては、図２に示すとおり、ＦＳＨ：ｈＣＧ比を漸増的に変化させる。
【００７０】
最も好ましい実施形態においては、卵胞形成およびステロイド産生マーカーにより示されるＦＳＨ：ｈＣＧ組成物に対する患者の反応に応じて、一連の投与の全体にわたってＦＳＨ：ｈＣＧ比を調節する。２〜４個の中間的な卵胞（１２〜１４ｍｍ）が形成され、２００〜６００ｐｇ／ｍＬのエストラジオールレベルが得られたら、これは、ＦＳＨに富む製剤により適当な卵胞形成が達成されたことを示すものであり、ｈＣＧに富む製剤に変換するのが適当である。
【００７１】
卵胞形成およびステロイド産生は、当技術分野で公知の任意の手段により卵巣刺激の全体にわたってモニターすべきである。ホルモンレベルおよび卵胞サイズのモニターは治療計画中の卵巣応答に関する情報を提供し、治療中にＦＳＨ：ｈＣＧ比を医師が調節するのを可能にする。卵胞サイズは、例えば、経膣骨盤超音波検査を用いて測定することが可能である。卵胞は、大きい（＞１４ｍｍ）、中間的（１０〜１４ｍｍ）または小さい（＜１０ｍｍ）として分類される。経膣骨盤超音波検査は、排卵前ｈＣＧ投与まで、頻繁に、例えば治療第０、６、８、１０、１２、１４、１６、１８および２０日に行うことが可能である。
【００７２】
エストラジオールのレベルは、当技術分野で公知の任意の手段を用いて、イムノアッセイまたは化学発光アッセイにより、任意の適当な体液（例えば、血液、尿および唾液）から測定することが可能である。
【実施例】
【００７３】
以下の実施例は本発明を例示するものである。しかし、本発明は、これらの実施例に記載されている特定の条件または詳細に限定されるものではないと理解されるべきである。
【００７４】
体外受精のための調節性排卵刺激
ＧｎＲＨアゴニストを投与する場合には、自然月経周期の中期黄体期に治療を開始する。自然月経の後、１〜２週間後に排卵誘発を開始する。あるいは、卵巣刺激の第６日から、ＧｎＲＨアンタゴニストを投与する。第１日から２００  ＩＵ  ＦＳＨ：１０  ＩＵ  ｈＣＧの注射を患者に毎日行い、＞１１ｍｍの少なくとも４個の卵胞が出現し＞６００ｐｇ／ｍＬの血清エストラジオールレベルが得られるまで継続する。この日から治療の終了まで、５０  ＩＵ  ＦＳＨ：２００  ＩＵ  ｈＣＧの投与を患者に毎日行う。
【００７５】
ＦＳＨ：ｈＣＧ投与の全体にわたって治療のモニターを行う。毎日、０８００−０９００の間に血液サンプルを採取し、血清サンプルを標準的な方法により調製する。エストラジオールレベルを測定する。ＦＳＨ：ｈＣＧ治療中、排卵前ｈＣＧ投与の直前まで、経膣超音波検査を頻繁に行う。化学発光アッセイ（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＡＣＳ  １８０，Ｍｉｌａｎ，Ｉｔａｌｙ）によりエストラジオールレベルをモニターする。
【００７６】
最終成熟パラメーター（＞１４ｍｍの４個の卵胞および８００〜１５００ｐｇ／ｍＬの１７β−エストラジオールレベル）が達成されたら、ｈＣＧのボーラス、例えば１０，０００  ＩＵのｈＣＧを投与して排卵を誘発し、卵母細胞を回収する。
【００７７】
【表１】
2006526609.tif 000009
2006526609.tif 000010
2006526609.tif 000011
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】図１は、有用なＦＳＨ：ｈＣＧ比の値を示し、ここで、ＦＳＨ量は国際単位（ＩＵ）で表されており、ｈＣＧ量はＩＵ（図１Ａ）およびマイクログラム（図１Ｂ）で表されている。
【図２】図２は、前記のＦＳＨ：ｈＣＧ組成物を使用する、本発明の提示されている治療方法を示す棒グラフである。
【図１】
2006526609.tif 000032
【図２】
2006526609.tif 000033
【手続補正書】
【提出日】平成16年10月4日(2004.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの医薬上許容される担体中、ＦＳＨおよびｈＣＧを必須としてなる医薬組成物であって、ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、該組成物の投与により、卵巣過剰刺激を伴うことなく卵胞形成および卵胞成熟を促すものである医薬組成物。
【請求項２】
哺乳動物由来のいずれの他のタンパク質をも含有しない、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１】
2006526609.tif 000034
よりなる群から選ばれる、請求項１記載の組成物。
【請求項４】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化２】
2006526609.tif 000035
2006526609.tif 000036
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化３】
2006526609.tif 000037
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項６】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化４】
2006526609.tif 000038
2006526609.tif 000039
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項７】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化５】
2006526609.tif 000040
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項８】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化６】
2006526609.tif 000041
である、請求項７記載の医薬組成物。
【請求項９】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化７】
2006526609.tif 000042
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化８】
2006526609.tif 000043
よりなる群から選ばれる、請求項３記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ＦＳＨがヒト由来ＦＳＨである、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１２】
凍結乾燥形態である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
単位投与形である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１４】
固体剤形である、請求項１３記載の医薬組成物。
【請求項１５】
固体剤形が、カプセル剤、錠剤、坐剤、丸剤、散剤および顆粒剤よりなる群から選ばれる、請求項１４記載の医薬組成物。
【請求項１６】
液体形態である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項１７】
液体形態がバイアル中で供給される、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
液体形態が、充填済みシリンジまたはカートリッジ中で供給される、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１９】
第１バイアルと第２バイアルとを含んでなり、それらのバイアルのそれぞれが請求項１記載の医薬組成物を含有し、ＦＳＨ：ｈＣＧの比が第１バイアルと第２バイアルとで異なる組合せ体。
【請求項２０】
第１および第２バイアル中に含有される組成物を投与する時機に関する説明書を更に含む、請求項１９記載の組合せ体。
【請求項２１】
（Ａ）
【化９】
2006526609.tif 000044
2006526609.tif 000045
よりなる群から選ばれるＦＳＨ：ｈＣＧの比により特徴づけられる少なくとも１つの医薬組成物を投与し、
（Ｂ）血清ホルモンレベル、卵胞サイズおよび卵胞数をモニターし、ついで
（Ｃ）ｈＣＧボーラスの投与により排卵を誘発することを含んでなる排卵誘発方法。
【請求項２２】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１０】
2006526609.tif 000046
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１１】
2006526609.tif 000047
2006526609.tif 000048
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１２】
2006526609.tif 000049
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２５】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１３】
2006526609.tif 000050
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２６】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１４】
2006526609.tif 000051
である、請求項２１記載の方法。
【請求項２７】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１５】
2006526609.tif 000052
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２８】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、
【化１６】
2006526609.tif 000053
よりなる群から選ばれる、請求項２１記載の方法。
【請求項２９】
工程（Ａ）が、前記群から選ばれるＦＳＨ：ｈＣＧの比により特徴づけられ、該比に関して同じ又は異なる少なくとも２つの医薬組成物を連続的に投与することを含む、請求項２１記載の方法。
【請求項３０】
連続投与におけるそれぞれの後続組成物が、該連続投与における前組成物に対して増加したｈＣＧを含有する、請求項２１記載の方法。
【請求項３１】
連続投与の組成物の間の時間が、１時間、５時間、１０時間、１２時間、２４時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日および１５日よりなる群から選ばれる、請求項２９記載の方法。
【請求項３２】
組成物が、純粋なＦＳＨを更に含む、請求項２１記載の方法。
【請求項３３】
組成物が、純粋なｈＣＧを更に含む、請求項２１記載の方法。
【請求項３４】
調節性排卵刺激プロトコール中に第１医薬組成物と第２医薬組成物とが一緒に又は別々に投与される、ＦＳＨを含む第１医薬組成物と、ｈＣＧを含む第２医薬組成物とを含んでなる製品。
【請求項３５】
別々の投与が連続的である、請求項３４記載の製品。
【請求項３６】
第１医薬組成物と第２医薬組成物とを使用するための説明書を更に含む、請求項３４記載の製品。
【請求項３７】
第１医薬組成物と第２医薬組成物とを投与するための手段を更に含む、請求項３４記載の製品。
【請求項３８】
不妊治療のためのＦＳＨを含む医薬組成物と共に使用する医薬組成物を製造するための、ｈＣＧの使用。
【請求項３９】
不妊治療のためのｈＣＧを含む医薬組成物と共に使用する医薬組成物を製造するための、ＦＳＨの使用。
【請求項４０】
卵胞形成または排卵を刺激するための、請求項３８または３９記載の使用。
【請求項４１】
ＦＳＨ：ｈＣＧの比が、卵巣過剰刺激を伴うことなく卵胞形成および卵胞成熟を促すものである、請求項４０記載の使用。
【国際調査報告】
2006526609.tif 000054
2006526609.tif 000055
2006526609.tif 000056