(57)【要約】本発明は新規の７−アザインドール、ホスホジエステラーゼ４インヒビターとしてのその使用及びその製造のための方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１
【化１】
2004512337.tif 000024
［式中、
ｎ＝１又は２であってよく、かつ
Ｒ１は分枝鎖状又は非分枝鎖状の、非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、単環式、二環式又は三環式の３〜１４個の環員を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の炭素環、単環式、二環式又は三環式の５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の複素環（その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び炭素環式及び複素環式の置換基は非置換又はＲ４で一置換又は多置換されていてよい）で一置換又は多置換されている−Ｃ１〜Ｃ１０−アルキル、
一不飽和又は多不飽和の、直鎖状又は分枝鎖状の、非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、単環式、二環式又は三環式の３〜１４個の環員を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の炭素環、単環式、二環式又は三環式の５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の複素環（その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び炭素環式及び複素環式の置換基は非置換又はＲ４で一置換又は多置換されていてよい）で一置換又は多置換されている−Ｃ２〜Ｃ１０−アルケニルを表し、
Ｒ２及びＲ３は同一又は異なってよく、その際、両者のうち１つだけが水素を表してよく、かつＲ２及びＲ３は更に非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−フェニル、−ピリジルで一置換又は多置換されている−Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、
非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３−アルキル）２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルで一置換又は多置換された−フェニル、
非置換又は−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルで一置換又は多置換された−ピリジル、並びに
【化２】
2004512337.tif 000025
を意味してよく、
更に基−ＮＲ２Ｒ３は一緒になって
【化３】
2004512337.tif 000026
を表してよく、かつ
Ｒ４は−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−（ＣＳ）Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキルを表す］で表される７−アザインドール。
【請求項２】
無機酸又は有機酸での塩基の中和もしくは無機塩基又は有機塩基での酸の中和もしくは第三級アミンの第四級アンモニウム塩への第四級化による、請求項１記載の式１の化合物の生理学的に認容性の塩。
【請求項３】
１つの不斉炭素原子をＤ形、Ｌ形又はＤ，Ｌ形で有するか、又は複数の不斉炭素原子の場合にはジアステレオマー形で有する、請求項１又は２記載の式１の化合物。
【請求項４】
以下の化合物：
Ｎ−（４−ピリジルメチル）−１−シクロプロピルメチル−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１−イソブチル−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１−ヘキシル−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１−シクロプロピルメチル−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
Ｎ−（４−ピリジルメチル）−１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１−（４−メトキシベンジル）−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
Ｎ−（４−ピリジルメチル）−１−（４−クロロベンジル）−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド、
１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−カルボン酸モルホリド、
Ｎ−（２，６−ジクロロフェニル）−１−（２−メチルプロペン−３−イル）−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド及び
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−１−（４−ピリジルメチル）−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド
から選択される、ｎ＝１である請求項１から３までのいずれか１項記載の式１の化合物。
【請求項５】
以下の化合物：
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（３−メトキシベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（４−ピリジル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド塩酸塩、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（４−ピリジル）−［１−（４−クロロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド塩酸塩、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（４−クロロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（４−メトキシベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（２，６−ジクロロフェニル）−［１−（４−クロロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（４−カルボキシフェニル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（４−エトキシカルボニルフェニル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，４−ジメトキシフェニル）−［１−（４−フルオロベンジル−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（４−メチルベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（４−ヒドロキシベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（３−ヒドロキシベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−（１−シクロプロピルメチル−７−アザインドール−３−イル）−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−（１−ヘキシル−７−アザインドール−３−イル）−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−（１−イソブチル−７−アザインドール−３−イル）−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（２−メチルプロペン−３−イル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（２−メトキシエチル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（１−ナフチルメチル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（４−ピリジルメチル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イルメチル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸モルホリド、
［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸−（Ｓ，Ｓ−ジオキソチオモルホリド）、
［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸（４−メチルピペラジド）、
Ｎ−（６−メチルウラシル−５−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（３，６−ジメチルウラシル−５−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド、
Ｎ−（１，３，６−トリメチルウラシル−５−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド及び
Ｎ−（１，２，４−４Ｈ−トリアゾール−３−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド
から選択される、ｎ＝２である請求項１から３までのいずれか１項記載の式１の化合物。
【請求項６】
７−アザインドール−３−カルボン酸を酸塩化物によって類似の７−アザインドール−３−カルボン酸塩化物に変換し、かつ引き続き第一級又は第二級のアミンとの反応によってｎ＝１である式１の本発明による化合物に変換する、請求項１から４までのいずれか１項記載のｎ＝１である式１の化合物の製造方法。
【請求項７】
７−アザインドール−３−カルボン酸塩化物の合成のために酸塩化物としてチオニル塩化物又はオキサリル塩化物を使用する、請求項６記載の方法による式１の化合物の製造方法。
【請求項８】
７−アザインドール−３−カルボン酸塩化物と第一級又は第二級アミンとを補助塩基の存在下、有利には過剰の反応パートナーとして使用されるアミン、第三級アミン、例えばピリジン又はトリエチルアミン並びに無機塩基、有利にはアルカリ金属水酸化物又はアルカリ金属水素化物の存在下で反応させる、請求項６又は７記載の方法による式１の化合物の製造方法。
【請求項９】
７−アザインドールをオキサリル塩化物によって類似の７−アザインドール−３−イル−グリオキシル酸塩化物に変換し、かつ引き続き第一級又は第二級のアミンとの反応によってｎ＝２である式１の化合物に変換する、請求項１から３又は５のいずれか１項記載のｎ＝２である式１の化合物の製造方法。
【請求項１０】
７−アザインドール−３−イル−グリオキシル酸塩化物と第一級又は第二級のアミンとを補助塩基の存在下、有利には過剰の反応パートナーとして使用されるアミン、第三級アミン、例えばピリジン又はトリエチルアミン並びに無機塩基、有利にはアルカリ金属水酸化物又はアルカリ金属水素化物の存在下に反応させる、請求項９記載の方法による式１の化合物の製造方法。
【請求項１１】
ＴＮＦαの阻害が治療的に有用である疾患の治療のための医薬品の製造のための、治療的作用物質としての請求項１から５までのいずれか１項記載の式１の化合物の使用。
【請求項１２】
ホスホジエステラーゼ４の阻害が治療的に有用である疾患の治療のための医薬品の製造のための、治療的作用物質としての請求項１から５までのいずれか１項記載の式１の化合物の使用。
【請求項１３】
好酸球の作用に関連する疾患の治療のための医薬品の製造のための、治療的作用物質としての請求項１から５までのいずれか１項記載の式１の化合物の使用。
【請求項１４】
好中球の作用に関連する疾患の治療のための医薬品の製造のための、治療的作用物質としての請求項１から５までのいずれか１項記載の式１の化合物の使用。
【請求項１５】
ＴＮＦαの阻害が有用である疾患、特に関節の炎症、関節炎、リウマチ様関節炎、関節性疾患、リウマチ様脊椎炎、変形性関節炎、骨粗鬆症、敗血症、敗血症性ショック、グラム陰性敗血症、トキシックショック症候群、呼吸困難症候群、喘息、慢性肺疾患、骨吸収疾患、移植片−拒絶反応、自己免疫疾患、紅斑性狼瘡、多発性動脈硬化症、糸球体腎炎、ブドウ膜炎、インスリン依存性糖尿病、慢性髄鞘脱落、ウイルス疾患、ウイルス感染、寄生虫感染、マラリア、リーシュマニア症、感染に限定される発熱、感染に限定される筋肉痛、ＡＩＤＳ、悪液質、ホスホジエステラーゼ４の阻害により治療できる疾患、喘息、好酸球が原因である疾患、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、湿疹、アレルギー性血管炎、好酸球によって媒介される炎症、好酸球性筋膜炎、レフレル症候群、ＰＩＥ症候群、蕁麻疹、潰瘍性結腸炎、クローン病、増殖性皮膚疾患、乾癬、角化症、慢性閉塞性肺疾患、神経保護によって治療できる疾患、老人性痴呆、アルツハイマー、記憶減退、パーキンソン、鬱病、卒中発作、間欠跛行、前立腺疾患、良性前立腺肥大、頻尿、夜間頻尿、失禁、疝痛、尿結石によって引き起こされる疝痛、男性又は女性の性障害の治療及び／又は予防のための医薬品の製造のための作用物質としての、並びに気管支拡張薬としての、薬物依存の発生の抑制のための、並びに耐性発生の抑制のための、請求項１から５までのいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項１６】
慣用の生理学的に認容性の賦形剤及び／又は希釈剤もしくは助剤の他に、請求項１から５までのいずれか１項記載の１つ以上の化合物を含有する医薬品。
【請求項１７】
請求項１から５までのいずれか１項記載の１つ以上の化合物が市販の製薬学的な担体物質及び／又は希釈剤もしくはその他の助剤で医薬品調剤に加工し、及び／又は治療的に使用可能な形にする、請求項１６記載の医薬品の製造方法。
【請求項１８】
請求項１から５までのいずれか１項記載の一般式１の化合物及び／又は請求項１６又は１７記載の医薬品調剤の、単独又は互いの組み合わせの、又は担体物質及び／又は希釈剤もしくはその他の助剤との組合せの使用。
【請求項１９】
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（４−フルオロベンジル）−７−アザインドール−３−イル］グリオキシル酸アミドである、請求項１から３までのいずれか１項記載の式１の化合物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
技術分野
本発明は一般式１
【０００２】
【化４】
2004512337.tif 000002
【０００３】
の置換された７−アザインドール、その製造方法、前記の化合物を含有する医薬品調剤並びに免疫能力のある細胞（例えばマクロファージ及びリンパ球）において本発明による化合物によるホスホジエステラーゼ４活性の阻害で影響されるべき疾患の治療のための作用物質としての、ホスホジエステラーゼ４のインヒビターである前記化合物の製薬学的使用に関する。
【０００４】
先行技術
細胞膜受容体の伝達物質による活性化は“セカンドメッセンジャー”系の活性化をもたらす。アデニル酸シクラーゼはＡＭＰ及びＧＭＰから有用なサイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）もしくはサイクリックＧＭＰ（ｃＧＭＰ）を合成する。これらは、例えば平滑筋細胞において弛緩をもたらし、もしくは炎症細胞においてはメディエーター遊離もしくは合成の阻害をもたらす。“セカンドメッセンジャー”ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの合成はホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）によって行われる。今までに１１ファミリーのＰＤＥ酵素（ＰＤＥ１〜１１）が知られており、これらはその基質特異性（ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ又は両者）及び別の基質の依存性（例えばカルモジュリン）によって区別される。これらのイソ酵素は身体に異なる機能を示し、かつ幾つかの細胞種において異なって顕現する（Ｂｅａｖｏ ＪＡ， Ｃｏｎｔｉ Ｍ ａｎｄ Ｈｅａｓｌｉｐ ＲＪ． Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｙｃｌｉｃ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅｓ． Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． １９９４， ４６：３９９−４０５； Ｈａｌｌ ＩＰ． Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ： ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｕｓｅｓ， Ｂｒ． Ｊ． ｃｌｉｎ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． １９９３， ３５：１−７）。種々のＰＤＥイソ酵素型の阻害によって細胞中にｃＡＭＰもしくはｃＧＭＰの蓄積が生じ、これは治療に用いることができる（Ｔｏｒｐｈｙ ＴＪ， Ｌｉｖｉ ＧＰ， Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ ＳＢ． Ｎｏｖｅｌ Ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ａｓｔｈｍａ， Ｄｒｕｇ Ｎｅｗｓ ａｎｄ Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ １９９３， ６：２０３−２１４）。
【０００５】
アレルギー性炎症のために重要な細胞（リンパ球、マスト細胞、好酸性顆粒球、マクロファージ）において、主流のＰＤＥイソ酵素はタイプ４（Ｔｏｒｐｈｙ， ＪＴ． ａｎｄ Ｕｎｄｅｍ， Ｂ．Ｊ． Ｐｈｏｓｐｈｏｒｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ： ｎｅｗ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｓｔｈｍａ． Ｔｈｏｒａｘ １９９１， ４６：５１２−５２３）である。従って適当なインヒビターによるＰＤＥ４の阻害は多くのアレルギーにより誘発される疾患のための重要な評価とみなされる（Ｓｃｈｕｄｔ Ｃｈ， Ｄｅｎｔ Ｇ， Ｒａｂｅ Ｋ Ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｌｏｎｄｏｎ １９９６）。
【０００６】
ホスホジエステラーゼ４インヒビターの重要な特性は炎症細胞からの腫瘍壊死因子ａ（ＴＮＦａ）の遊離の阻害である。ＴＮＦａは、多くの生物学的プロセスに影響を及ぼす重要な前炎症性サイトカインである。ＴＮＦａは、例えば活性化されたマクロファージ、活性化されたＴリンパ球、マスト細胞、好塩基球、繊維芽細胞、内皮細胞及び星状細胞から脳において遊離される。好中球、好酸球、繊維芽細胞及び内皮細胞に自己活性化作用を及ぼし、それによって種々の組織破壊性メディエーターが遊離される。単球、マクロファージ及びＴリンパ球においてＴＮＦａは他の前炎症性サイトカイン、例えばＧＭ−ＣＳＦ（顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子）又はインターロイキン−８の生産の増加をもたらす。その炎症促進作用及び異化作用に基づいてＴＮＦａは多くの疾患、例えば気道の炎症、関節の炎症、内毒素性ショック、組織拒絶、ＡＩＤＳ及び多数の別の免疫学的疾患において中心的な役割を有する。ＴＮＦａに関連するかかる疾患の治療のためには従ってホスホジエステラーゼ４のインヒビターが適当である。
【０００７】
慢性閉塞性肺疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｄｉｓｅａｓｅｓ， ＣＯＰＤ）は人口に広く蔓延しており、かつ大きな経済的意義をも有する。そのためＣＯＰＤ疾患は先進国の全ての病気費用の約１０〜１５％を費やし、かつ米国での死亡例の約２５％は前記の原因に起因するものであるが（Ｎｏｒｍａｎ Ｐ．：ＣＯＰＤ： Ｎｅｗ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ， Ｄｒｕｇ Ｎｅｗｓ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ． １１（７）， ４３１−４３７， １９９８）、死亡時点で患者は殆どが５５歳より高齢である（Ｎｏｌｔｅ Ｄ．： Ｃｈｒｏｎｉｓｃｈｅ Ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ − ｅｉｎｅ Ｖｏｌｋｓｋｒａｎｋｈｅｉｔ ｍｕｌｔｉｆａｋｔｏｒｉｅｌｌｅｒ Ｇｅｎｅｓｅ． Ａｔｅｍｗ．−Ｌｕｎｇｅｎｋｒｋｈ． ２０（５）， ２６０−２６７， １９９４）。ＷＨＯは、ＣＯＰＤが次の２０年以内に第３の最も頻繁な死因になると見積もっている。
【０００８】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の病像としては、咳及び喀痰並びに肺機能（特に呼息に関する）の進行する及び不可逆的な悪化を伴う慢性気管支炎の種々の病像にまとめられる。該疾患の過程はシュープ状であり、かつしばしば細菌感染によって複雑になる（Ｒｅｎｎａｒｄ Ｓ． Ｉ．： ＣＯＰＤ： Ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ， Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ， ａｎｄ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｉｔｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ． Ｃｈｅｓｔ， １１３ （４） Ｓｕｐｐｌ．， ２３５Ｓ−２４１Ｓ， １９９８）。疾患の過程において肺機能は連続的に低下し、肺はますます気腫性になり、かつ患者の呼吸困難は明らかになる。この疾患は患者の生存度を明らかに損ない（息切れ、低い負荷容量）、かつ患者の余命を大幅に短縮する。環境因子の他の主要危険因子は喫煙であり（Ｋｕｍｍｅｒ Ｆ．： Ａｓｔｈｍａ ｕｎｄ ＣＯＰＤ． Ａｔｅｍｗ．−Ｌｕｎｇｅｎｋｒｋｈ． ２０ （５）， ２９９−３０２， １９９４； Ｒｅｎｎａｒｄ Ｓ． Ｉ．： ＣＯＰＤ： Ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ， Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ， ａｎｄ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｉｔｓ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ． Ｃｈｅｓｔ， １１３ （４） Ｓｕｐｐｌ．， ２３５Ｓ−２４１Ｓ， １９９８）、かつ従って男性が女性よりも頻繁に明らかに該当する。しかしながら生活習慣の変化及び喫煙者数の増加によって前記の病像は将来的に変化する。
【０００９】
現在の治療は症候の軽減のみを目的としており、疾患の進行において原因に関与していない。長期に作用するβ２−アゴニスト（例えばサルメテロール）を場合によりムスカリン作動性アンタゴニスト（例えばイプラトロピウム）と組み合わせて使用すると肺機能は気管支拡張によって改善し、かつ通常通り使用される（Ｎｏｒｍａｎ Ｐ．： ＣＯＰＤ： Ｎｅｗ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ， Ｄｒｕｇ Ｎｅｗｓ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ． １１ （７）， ４３１−４３７， １９９８）。ＣＯＰＤシュープにおける大きな役割を、抗生物質で治療せねばならない細菌感染が担っている（Ｗｉｌｓｏｎ Ｒ．： Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ＣＯＰＤ， Ｃｈｅｓｔ， １１３ （４） Ｓｕｐｐｌ．， ２４２Ｓ−２４８Ｓ， １９９８； Ｇｒｏｓｓｍａｎ Ｒ． Ｆ．： Ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｅｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＣＯＰＤ． Ｃｈｅｓｔ， １１３ （４） Ｓｕｐｐｌ．， ２４９Ｓ−２５５Ｓ， １９９８）。この疾患の治療は、今まで特に肺機能の恒常的低下に関して依然として不十分であった。炎症メディエーター、プロテアーゼ又は付着分子に作用する新規の治療成分は非常に有望であってよい（Ｂａｒｎｅｓ Ｐ．Ｊ．： Ｃｈｒｏｎｉｃ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅ： ｎｅｗ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ ｆｏｒ ｄｒｕｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， ＴｉＰＳ １０ （１９）， ４１５−４２３， １９９８）。
【００１０】
疾患を複雑化する細菌感染とは無関係に、気管支において好中性顆粒球によって占められる慢性の炎症が見られる。気道において観察される構造的変化（気腫）については、とりわけ好中性顆粒球によって遊離されたメディエーター及び酵素が原因である。従って好中性顆粒球の活性の阻害はＣＯＰＤの進行（肺機能パラメータの悪化）を妨げ又は遅延させる合理的な成分である。顆粒球の活性化のための重要な刺激は前炎症性サイトカインＴＮＦａ（腫瘍壊死因子）である。このようにＴＮＦａは酸素ラジカルの形成を好中性顆粒球によって刺激することは公知である（Ｊｅｒｓｍａｎｎ， Ｈ．Ｐ．Ａ．； Ｒａｔｈｊｅｎ， Ｄ．Ａ． ａｎｄ Ｆｅｒｒａｎｔｅ Ａ．： Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ＬＰＳ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｏｘｙｇｅｎ ｒａｄｉｃａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ＴＮＦａ， Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ， ４， １７４４−１７４７， １９９８）。ＰＤＥ４インヒビターは非常に効果的に、多くの細胞からＴＮＦａの遊離を阻害し、従って好中性顆粒球の活性を抑える。非特異的なＰＤＥインヒビターのペントキシフィリンは、酸素ラジカルの形成も好中性顆粒球の食作用能力もいずれも阻害することができる（Ｗｅｎｉｓｃｈ， Ｃ．； Ｚｅｄｔｗｉｔｚ−Ｌｉｅｂｅｎｓｔｅｉｎ， Ｋ．； Ｐａｒｓｃｈａｌｋ， Ｂ． ａｎｄ Ｇｒａｎｉｎｇｅｒ Ｗ．： Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｅｎｔｏｘｉｆｙｌｌｉｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｏｎ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ ａｂｉｌｉｔｙ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ， Ｃｌｉｎ． Ｄｒｕｇ Ｉｎｖｅｓｔ．， １３ （２）：９９−１０４， １９９７）。
【００１１】
既に種々のＰＤＥ４インヒビターは知られている。主にこれはキサンチン誘導体、ロリプラム類似体又はニトロクアゾン（Ｎｉｔｒａｑｕａｚｏｎ）誘導体（概要：Ｋａｒｌｓｓｏｎ Ｊ−Ａ， Ａｌｄｏｓ Ｄ Ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ ４ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｓｔｈｍａ， Ｅｘｐ． Ｏｐｉｎ． Ｔｈｅｒ． Ｐａｔｅｎｔｓ １９９７， ７： ９８９−１００３）である。前記の化合物のどれも今までは臨床的に使用できなかった。公知のＰＤＥ４インヒビターが種々の副作用、例えば今まで十分に抑制できなかった嘔気及び嘔吐を示すことも確認せねばならなかった。従ってより良好な治療範囲を有する新規のＰＤＥ４インヒビターの発見が必要とされている。
【００１２】
今までは種々の指標についての新規の作用物質の開発における７−アザインドールの使用は比較的僅かな場合においてのみ記載されているに過ぎない。
【００１３】
日本国特許文献ＪＰ１０１２０６８１（Ｆｕｊｉｓａｗａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．）において一般式
【００１４】
【化５】
2004512337.tif 000003
【００１５】
で表される５−アザインドール及び７−アザインドールが特許の保護を請求されており、その際、Ｒ１は水素又は短いアルキル基を表し、Ｒ２は水素、ハロゲン、短いアルキル基、シクロアルキル基、アルキルカルボニル基又はアルカノイル基を意味してよく、Ｒ３はアルカノイル基、保護されたカルボン酸基、シアノ基又は置換されたカルバモイル基を表す。Ｌは短いアルキレン架橋を意味する。Ｑは置換された芳香族化合物及び複素環を表す。Ａ１及びＡ２のうち、一方でＮを表し、かつ他方でＣＨを表す。前記の化合物は、特に置換基Ｒ２及びＲ３に関して、部分的にＲ１及びＡ２において異なる。記載される化合物はｃＧＭＰのインヒビターとして特異的なホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ５）の特許の保護を請求している。使用分野としては、種々の心臓−循環器疾患、気管支炎、喘息、鼻炎、インポテンス、糖尿病合併症及び緑内障が挙げられる。
【００１６】
Ｌ．Ｎ． Ｙａｋｈｏｎｔｏｖ、Ｓ．Ｓ．Ｌｉｂｅｒｍａｎ、Ｄ．Ｍ． Ｋｒａｓｎｏｋｕｔｓｋａｙａ他によってＫｈｉｍ．−Ｆａｒｍ． Ｚｈ． ８ （１１）， １９７４， ５−９において種々の３−アミノアルキル−４−アザインドール及び３−アミノアルキル−７−アザインドールの合成が記載されている。３−（２−アミノエチル）−７−アザインドールに関して抑鬱作用又は抗鬱作用が記載されている。３−アミノメチル−７−アザインドールに関して血圧低下作用が確認された。
【００１７】
Ａ．Ｊ． ＶｅｒｂｉｓｃａｒはＪ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １５（２）， １９７２， １４９−５２において、抗マラリア作用が確定された式
【００１８】
【化６】
2004512337.tif 000004
【００１９】
で表される化合物を記載している。
【００２０】
特許文献ＵＳ６５０２２３号（Ｓｔｅｒｌｉｎｇ Ｄｒｕｇ Ｉｎｃ．）において種々の２−（イミダゾリン−２−イル）−アルキル−７−アザインドールもしくは３−（イミダゾリン−２−イル）−アルキル−７−アザインドールを相応の２−又は３−シアノアルキル−７−アザインドールから合成することを記載しており、かつこの化合物については血管収縮薬としての使用に特許の保護が請求されている。
【００２１】
ＰＤＥ４のインヒビターとしては従来７−アザインドールは全く知られていない。
【００２２】
本発明の記載
本発明は一般式１
【００２３】
【化７】
2004512337.tif 000005
【００２４】
［式中、
ｎ＝１又は２であってよく、かつ
Ｒ１は直鎖状又は分枝鎖状の、場合により−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、３〜１４個の環員を有する単環式、二環式又は三環式の飽和又は一不飽和又は多不飽和の炭素環、５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する単環式、二環式又は三環式の飽和又は一不飽和又は多不飽和の複素環（その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール及び炭素環式及び複素環式の置換基は場合によりＲ４によって一置換又は多置換されていてよい）によって一置換又は多置換された−Ｃ１〜Ｃ１０−アルキル、
一不飽和又は多不飽和の直鎖状又は分枝鎖状の、場合により−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、３〜１４個の環員を有する単環式、二環式又は三環式の飽和又は一不飽和又は多不飽和の炭素環、５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の複素環（その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び炭素環式及び複素環式の置換基は場合によりＲ４により一置換又は多置換されていてよい）によって一置換又は多置換された−Ｃ２〜Ｃ１０−アルケニルを表す］で表される置換された７−アザインドールに関する。
【００２５】
Ｒ２及びＲ３は同一又は異なってよく、その際、両者のうち１つだけが水素を表してよい。Ｒ２及びＲ３は更に
場合により−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−フェニル、−ピリジル、場合により−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３−アルキル）２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルで一置換又は多置換されている−フェニル、場合により−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルで一置換又は多置換されている−ピリジル並びに
【００２６】
【化８】
2004512337.tif 000006
【００２７】
を意味してよい。
【００２８】
基−ＮＲ２Ｒ３は一緒になって
【００２９】
【化９】
2004512337.tif 000007
【００３０】
を表してよい。
【００３１】
Ｒ４は−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−（ＣＳ）Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキルを表す。
【００３２】
本発明による式１の７−アザインドールにおいて、基Ｒ１は有利にはＣ１〜Ｃ１０−アルキル基である。かかるアルキル基は直鎖状、分枝鎖状又は環式であってよく、かつ有利には直鎖状である。１〜６個の炭素原子、更に有利には１〜４個の炭素原子を有するアルキル基が特に有利である。更に有利な実施形において、Ｒ１はＣ２〜Ｃ１０−、特にＣ２〜Ｃ６−、より有利にはＣ２〜Ｃ４−アルケニル基を表す。アルケニル基は一不飽和又は多不飽和、例えば二不飽和又は三不飽和であってよい。アルケニル基は直鎖状、分枝鎖状又は環式の炭化水素基であってよい。特に有利にはアルキル基又はアルケニル基が一置換又は多置換、例えば二置換、三置換、四置換又は五置換されている基Ｒ１である。特に有利には基Ｒ１は置換されたＣ１−アルキル−（従ってメチル−）基である。基Ｒ１のアルキル基もしくはアルケニル基について前記の置換基のうち置換基−ＯＨ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｃ１〜Ｃ４−アルコキシが特に有利である。更に場合により存在するアルキル基が１〜４個の炭素原子を有し、かつ場合により存在するアリール基が６〜１０個の炭素原子を有する置換基が有利である。炭素環のうち、フェニル基、特に有利には−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、Ｃ１〜Ｃ６−アルコキシ又はヒドロキシで置換されている置換されたフェニル基が有利である。複素環のうちＮ、Ｏ又はＳから選択される少なくとも１つのヘテロ原子を有する複素環が有利である。複素環のうちピリジル基並びにイソオキサゾール基、特に３，５−ジメチルイソオキサゾール基が特に有利である。縮合された炭素環式置換基のための例はナフチル基である。
【００３３】
特に有利にはＲ１は環式の炭化水素基を含む基、例えばシクロプロピルメチル、直鎖状の炭化水素、例えばｎ−ヘキシル、アルコキシ基で置換された直鎖状の炭化水素、例えば２−メトキシエチル、分枝鎖状の炭化水素基、例えばイソブチル、不飽和の炭化水素基、例えば２−メチルプロペン−３−イル又は芳香族を有する、場合により置換されていてよい炭化水素基、例えば４−フルオロベンジル、３−メトキシベンジル、４−メトキシベンジル、４−クロロベンジル、４−メチルベンジル、３−ヒドロキシベンジル又は４−ヒドロキシベンジル、複素芳香族炭化水素を有する基、例えば４−ピリジルメチル又は３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−メチル又は縮合された芳香族の炭化水素を有する基、例えば１−ナフチルメチルを表す。
【００３４】
窒素原子上の置換基、Ｒ２及びＲ３は有利な実施形において場合により置換されたＣ１〜Ｃ５−、特にＣ１〜Ｃ３−、特に有利にはＣ１（メチルに相当する）アルキル基を表してよい。
【００３５】
有利には基Ｒ２及び／又はＲ３の１つは複素芳香族の炭化水素を含む基、例えば４−ピリジルメチルを意味し、その際、複素芳香族の炭化水素は更に置換されていてよく、有利にはハロゲンを有し、例えば３，５−ジクロロ−４−ピリジルを意味する。更に有利な実施形において、Ｒ２及び／又はＲ３は基モルホリノである。有利には置換されていてよい、特にハロゲン又はカルボキシを有する芳香族炭化水素を含む基Ｒ２及びＲ３は更に有利には、例えば２，６−ジクロロフェニル、４−カルボキシフェニル、４−エトキシカルボニルフェニル、３，４−ジメトキシフェニルである。更に有利にはＲ２もＲ３もいずれもメトキシエチルを意味する。更に有利な実施形において、Ｒ２又はＲ３は基
【００３６】
【化１０】
2004512337.tif 000008
【００３７】
を表し、又は基−ＮＲ２Ｒ３は一緒になって
【００３８】
【化１１】
2004512337.tif 000009
【００３９】
を表す。
【００４０】
更に本発明は式１による化合物の生理学的に認容性の塩に関する。
【００４１】
生理学的に認容性の塩は通常のように、無機酸又は有機酸による塩基の中和もしくは無機塩基又は有機塩基による酸の中和によって得られる。無機酸としては、例えば塩酸、硫酸、リン酸又は臭化水素酸が該当し、有機酸としては、例えばカルボン酸、スルホ酸又はスルホン酸、例えば酢酸、酒石酸、乳酸、プロピオン酸、グリコール酸、マロン酸、マレイン酸、フマル酸、タンニン酸、コハク酸、アルギン酸、安息香酸、２−フェノキシ安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、クエン酸、リンゴ酸、サリチル酸、３−アミノサリチル酸、アスコルビン酸、エンボン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、シュウ酸、アミノ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸又はナフタリン−２−スルホン酸が該当する。無機塩基としては、例えば水酸化ナトリウム水溶液、水酸化カリウム水溶液、アンモニアが該当し、かつ有機塩基としてはアミンが該当するが、有利には第三級アミン、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、キノリン、イソキノリン、ａ−ピコリン、ｂ−ピコリン、ｇ−ピコリン、キナルジン又はピリミジンが該当する。
【００４２】
更に式１による化合物の生理学的に認容性の塩は、第三級アミノ基を有する誘導体を自体公知のように第四級化剤を用いて相応の第四級化アンモニウム塩に変換することによって得ることができる。第四級化剤としては、例えばアルキルハロゲン化物、例えばヨウ化メチル、臭化エチル及び塩化ｎ−プロピルが該当するが、またアリールアルキルハロゲン化物、例えば塩化ベンジル又は臭化２−フェニルエチルが該当する。
【００４３】
更に不斉炭素原子を有する式１の化合物の発明はＤ形、Ｌ形及びＤ，Ｌ形に関し、かつ複数の不斉炭素原子の場合にはジアステレオマー形に関する。そのような不斉炭素原子を有し、一般にラセミ体として生じる式１の化合物は自体公知のように、例えば光学活性酸によって光学活性異性体に分割できる。しかしながらまた、初めから光学活性の出発物質を使用することもでき、その際、最終生成物として相応の光学活性もしくはジアステレオマー化合物が得られる。
【００４４】
本発明による化合物に関して薬理学的に意義のある治療に用いることができる特性が見出された。
【００４５】
本発明による化合物はＴＮＦａの遊離のインヒビターである。
【００４６】
従って該化合物はＴＮＦａの遊離の阻害のために使用できる。
【００４７】
従って本発明の対象は、式１による化合物及びその塩並びに前記の化合物又はその塩を含有する製薬学的調剤をＴＮＦａの阻害が有用である疾患の治療のために使用できることである。
【００４８】
前記の疾患には、例えば関節の炎症、関節炎、リウマチ様関節炎並びに他の関節性疾患、例えばリウマチ様脊椎炎及び変形性関節炎が該当する。他の使用可能性は、骨粗鬆症（Ｏｓｔｅｏｐｅｒｏｓｅ）、敗血症、敗血症性ショック、グラム陰性敗血症、トキシックショック症候群、呼吸困難症候群、喘息、肺疾患、骨吸収疾患、移植片−拒絶反応、自己免疫疾患、紅斑性狼瘡、多発性動脈硬化症、糸球体腎炎、ブドウ膜炎、インスリン依存性糖尿病、慢性髄鞘脱落を患う患者の治療である。
【００４９】
更に本発明による化合物はまた感染、例えばウイルス感染及び寄生虫感染の治療のための、例えばマラリア、リーシュマニア症、感染に限定される発熱、感染に限定される筋肉痛、ＡＩＤＳ及び悪液質の治療のために使用できる。
【００５０】
本発明による化合物はホスホジエステラーゼ４のインヒビターである。
【００５１】
本発明による化合物は、従ってホスホジエステラーゼ４の阻害のために使用できる。
【００５２】
従って本発明の対象は、式１による化合物及びその塩並びに前記の化合物又はその塩を含有する薬理学的調剤をホスホジエステラーゼ４の阻害が有用である疾患の治療のために使用できることである。
【００５３】
このように本発明による化合物は気管支拡張薬として及び喘息予防のために使用できる。式１による化合物は更に好酸球の蓄積並びにその活性のインヒビターである。結果として、本発明による化合物は好酸球が原因の疾患においても使用できる。前記の疾患には、例えば炎症性気道疾患、例えば喘息、気管支炎、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、湿疹、アレルギー性血管炎、好酸球によって媒介される炎症、好酸球性筋膜炎、ＰＩＥ症候群（好酸球による肺浸潤）、蕁麻疹、潰瘍性結腸炎、クローン病、増殖性皮膚疾患、例えば乾癬、角化症が属する。
【００５４】
本発明の対象は、式１による化合物及びその塩がインビトロでのＴＮＦａの遊離も、ラットにおいてインビボでのＬＰＳに誘発される肺性の好中球浸潤もいずれも阻害できることである。前記の見出された薬理学的に重要な特性の全体は、式１による化合物及びその塩並びに前記化合物又はその塩を含有する医薬品調剤を慢性閉塞性肺疾患の治療のために治療的に用いることができることに裏付けられる。
【００５５】
本発明による化合物は更に神経保護特性を有し、かつ神経保護が有効な疾患の治療のために使用することができる。かかる疾患は、例えば老人性痴呆（アルツハイマー病）、記憶減退、パーキンソン病、鬱病、卒中発作及び間欠跛行である。
【００５６】
本発明による化合物の他の使用可能性は前立腺疾患、例えば良性前立腺肥大症、頻尿、夜間頻尿の予防及び治療並びに失禁、尿結石によって引き起こされる疝痛及び男性及び女性の性障害の治療である。
【００５７】
最後に本発明による化合物は同様に鎮痛薬、例えばモルヒネの繰り返しの使用における薬物依存の発生の抑制のために、並びに前記の鎮痛薬の繰り返しの使用の際の耐性発生の軽減のために使用できる。
【００５８】
医薬品の製造のために、慣用の助剤、担体物質及び添加剤の他に本発明による化合物又はその塩の有効用量を使用する。
【００５９】
作用物質の投与は供給経路、患者の年齢、体重、治療されるべき疾患の種類及び重度及び類似の因子に応じて変化してよい。
【００６０】
日用量は投与されるべき単一用量を１回で又は２以上の日用量に分けて投与してよく、それは一般に０．００１〜１００ｍｇである。
【００６１】
投与形としては、経口、非経口、静脈内、経皮、局所、吸入及び経鼻の調剤が有利である。
【００６２】
通常のガレヌス製剤形、例えば錠剤、糖衣錠、カプセル剤、分散可能な粉末、顆粒剤、水溶液、水性又は油性の懸濁液、シロップ剤、液剤又は点滴薬が使用される。
【００６３】
固体の剤形は不活性の内容物及び賦形剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、デンプン、マンニトール、アルギン酸塩、ゼラチン、ガーゴム、ステアリン酸マグネシウム又はステアリン酸アルミニウム、メチルセルロース、タルク、高分散性ケイ酸、シリコーン油、高分子脂肪酸（例えばステアリン酸）、ゼラチン、寒天又は植物脂又は動物脂及び油、固体の高分子ポリマー（例えばポリエチレングリコール）を含有してよく、経口投与のために適当な調剤は所望には付加的な味覚物質及び／又は甘味物質を含有してよい。
【００６４】
液体の剤形は滅菌されていてよく、かつ／又は場合により助剤、例えば保存剤、安定剤、湿潤剤、浸透剤、乳化剤、延展剤、溶解助剤、塩、糖又は糖アルコールを浸透圧の調節又は緩衝のために含有し、かつ／又は粘度調節剤を含有してよい。
【００６５】
かかる添加剤は、例えば酒石酸緩衝液及びクエン酸緩衝液、エタノール、錯形成剤（例えばエチレンジアミン四酢酸及びその非毒性塩）である。粘度の調節のために、高分子ポリマー、例えば液体のポリエチレンオキシド、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デキストラン又はゼラチンが該当する。固体の賦形剤は、例えばデンプン、ラクトース、マンニトール、メチルセルロース、タルク、高分散性ケイ酸、高分子脂肪酸（例えばステアリン酸）、ゼラチン、寒天、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、動物脂及び植物脂、固体の高分子ポリマー、例えばポリエチレングリコールである。
【００６６】
非経口又は局所的な使用のための油性懸濁液は植物性の合成又は半合成の油、例えばそれぞれ８〜２２個のＣ原子を脂肪酸鎖中に有する液体の脂肪酸エステル、たとえばパルミチン酸、ラウリン酸、トリデシル酸、マルガリン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ミリスチン酸、ベヘン酸、ペンタデシル酸、リノール酸、エライジン酸、ブラシジン酸、エルカ酸又はオレイン酸（これらは１〜６個のＣ原子を有する一価乃至三価のアルコール、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール又はその異性体、グリコール又はグリセロールでエステル化されている）であってよい。かかる脂肪酸エステルは、例えば慣用のミグリオール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、ＰＥＧ６−カプリン酸、飽和脂肪アルコールのカプリル／カプリン酸エステル、ポリオキシエチレングリセロールトリオレイン酸エステル、オレイン酸エチル、蝋状の脂肪酸エステル、例えば人工的なカモ尾腺脂（Ｅｎｔｅｎｂｕｅｒｚｅｌｄｒｕｅｓｅｎｆｅｔｔ）、ヤシ油脂肪酸−イソプロピルエステル、オレイン酸オレイルエステル、オレイン酸デシルエステル、乳酸エチルエステル、フタル酸ジブチル、アジピン酸ジイソプロピルエステル、ポリオール−脂肪酸エステルなどである。同様に種々の粘度のシリコーン油又は脂肪アルコール、例えばイソトリデシルアルコール、２−オクチルドデカノール、セチルステアリル−アルコール又はオレイルアルコール、脂肪酸、例えばオレイン酸が適当である。更に植物性油、例えばひまし油、扁桃油、オリーブ油、ゴマ油、綿実油、落花生油又は大豆油を使用できる。
【００６７】
溶剤、ゲル形成剤及び溶解助剤としては、水又は水と混和可能な溶剤が該当する。例えばアルコール、例えばエタノール又はイソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、２−オクチルドデカノール、ポリエチレングリコール、フタレート、アジペート、プロピレングリコール、グリセリン、ジプロピレングリコール又はトリプロピレングリコール、ワックス、メチルセロソルブ、セロソルブ、エステル、モルホリン、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、シクロヘキサノンなどが適当である。
【００６８】
皮膜形成剤としては、水にも有機溶剤にも可溶もしくは膨潤可能なセルロースエーテル、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース又は可溶性デンプンを使用してよい。
【００６９】
ゲル形成剤及び被膜形成剤の間の混合形は十分に同様に可能である。ここでは、とりわけイオン性巨大分子、例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸及びその塩、ナトリウムアミロペクチン半グリコレート、アルギン酸又はプロピレングリコール−アルギネートをナトリウム塩として、アラビアゴム、キサンタンゴム、ガーゴム又はカラギナンを使用する。
【００７０】
他の配合助剤としては：グリセリン、種々の粘度のパラフィン、トリエタノールアミン、コラーゲン、アラントイン、ノバンチゾール酸（Ｎｏｖａｎｔｉｓｏｌｓａｅｕｒｅ）を使用してよい。また界面活性剤、乳化剤又は湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム、硫酸脂肪酸アルコールエーテル、ジ−Ｎａ−Ｎ−ラウリル−β−イミノジプロピオネート、ポリオキシエチル化されたひまし油又はソルビタン−モノオレエート、ソルビタン−モノステアレート、ポリソルベート（例えばＴｗｅｅｎ）、セチルアルコール、レシチン、グリセリンモノステアレート、ポリオキシエチレンステアレート、アルキルフェノールポリグリコールエーテル、セチルメチルアンモニウム塩化物又はモノ−／ジアルキルポリグリコールエーテル−オルトリン酸−モノエタノールアミン塩の使用も必要なこともある。安定剤、例えばモンモリロナイト又はコロイド状ケイ酸をエマルジョンの安定のため又は活性物質、例えば酸化防止剤、例えばトコフェロール又はブチルヒドロキシアニソールの分解の抑制のために、又は保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルは同様に所望の製剤の調製のために場合により必要なことがある。
【００７１】
非経口投与のための調剤は別個の投与単位形、例えばアンプル又はバイアルであってよい。有利には作用物質の溶液、有利には水溶液、とりわけ等張液、また懸濁液を使用する。前記の注入形は完成調製物として提供されるか、又はまず使用直前に作用化合物、例えば凍結乾燥物と、場合により他の固体の賦形剤、所望の溶剤又は懸濁剤とを混合することによって調製できる。
【００７２】
経鼻調製物は、水溶液又は油溶液もしくは水性又は油性の懸濁液であってよい。これらはまた使用前に適当な溶剤又は懸濁剤と調合される凍結乾燥物であってもよい。
【００７３】
前記の調製物の製造、充填及び密封は通常の抗菌条件及び真空条件下に行われる。
【００７４】
本発明は更に本発明による化合物の製造のための方法に関する。
【００７５】
本発明によれば、前記に示したＲ１、Ｒ２、Ｒ３の意味及びｎ＝１である一般式１
【００７６】
【化１２】
2004512337.tif 000010
【００７７】
の化合物を、同じＲ１の意味を有する式２
【００７８】
【化１３】
2004512337.tif 000011
【００７９】
の７−アザインドール−３−カルボン酸を自体公知のように酸塩化物を用いて、有利にはチオニル塩化物又はオキサリル塩化物と、まず式３
【００８０】
【化１４】
2004512337.tif 000012
【００８１】
の類似の７−アザインドール−３−カルボン酸塩化物に変換させることによって製造する。
【００８２】
単離された式３の７−アザインドール−３−カルボン酸塩化物から、次いで第一級又は第二級のアミンとの反応によって前記のＲ１、Ｒ２、Ｒ３の意味及びｎ＝１である本発明による一般式１の化合物が生じる。該反応は、有利には補助塩基の存在下に進行する。補助塩基としては、反応パートナーとして使用される過剰のアミン、第三級アミン、有利にはピリジン又はトリエチルアミン並びに無機塩基、有利にはアルカリ金属水酸化物又はアルカリ金属水素化物を使用してよい。
【００８３】
本発明によれば、前記のＲ１、Ｒ２、Ｒ３の意味及びｎ＝２である一般式１
【００８４】
【化１５】
2004512337.tif 000013
【００８５】
の化合物を、同じＲ１の意味を有する式４
【００８６】
【化１６】
2004512337.tif 000014
【００８７】
の７−アザインドールを自体公知の方法でオキサリル塩化物によるアシル化によってまず式５
【００８８】
【化１７】
2004512337.tif 000015
【００８９】
の類似の７−アザインドール−３−イル−グリオキシル酸塩化物に変換することによって製造する。
【００９０】
単離された式５の７−アザインドール−３−イル−グリオキシル酸塩化物から、次いで第一級又は第二級のアミンとの反応によって前記のＲ１、Ｒ２、Ｒ３の意味及びｎ＝２である本発明による一般式１の化合物が生じる。該反応は、有利には補助塩基の存在下に進行する。補助塩基としては、反応パートナーとして使用される過剰のアミン、第三級アミン、有利にはピリジン又はトリエチルアミン、並びに無機塩基、有利にはアルカリ金属水酸化物又はアルカリ金属水素化物を使用してよい。
【００９１】
実施例
ｎ＝１である本発明による式１の化合物のための製造方法例：
例１：
Ｎ−（４−ピリジルメチル）−１−シクロプロピルメチル−７−アザインドール−３−カルボン酸アミド
１．８７ｇの１−シクロプロピルメチル−７−アザインドール−３−カルボン酸（８．６ミリモル）を１５ｍｌのジクロロメタン中に懸濁する。水で冷却しながら、１．８ｍｌのオキサリル塩化物（１７．４ミリモル）を添加した。該反応混合物を８時間撹拌した。更に１１−シクロプロピルメチル−７−アザインドール−３−カルボン酸塩化物が晶出する。それを単離し、かつ１８ｍｌのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中に溶解させる。
【００９２】
１．１４ｇの水素化ナトリウム（６０％）を２１ｍｌのＴＨＦ中に懸濁する。約１０℃で撹拌しながら２１ｍｌのＴＨＦ中の０．９３ｇの４−アミノメチルピリジン（８．６ミリモル）の溶液を滴加する。約１５分後に、事前に製造された１−シクロプロピルメチル−７−アザインドール−３−カルボン酸塩化物の溶液を反応混合物に滴加する。次いで全３時間で還流下に沸騰させる。冷却した後に、該反応混合物を３６ｍｌの酢酸エチルエステル及び３６ｍｌの水と混合する。相分離し、かつ有機相を水で洗浄する。溶剤を留去し、かつ残留物をエタノールから晶出させる。
【００９３】
収量：１．３ｇ（理論値の５０％）
融点：１８７〜１８９℃
前記の製造方法を使用して、ｎ＝１である多くの他の式１の化合物を製造し、そのうち以下のものを例として挙げる：
【００９４】
【表１】
2004512337.tif 000016
【００９５】
ｎ＝２である本発明による式１のための製造方法例：
例１２：
Ｎ−（３，５−ジクロロピリジン−４−イル）−［１−（３−メトキシベンジル）−７−アザインドール−３−イル］−グリオキシル酸アミド
３．５７ｇの１−（３−メトキシベンジル）−７−アザインドール（１５ミリモル）を５０ｍｌのｔ−ブチルメチルエーテル中に溶解させる。０℃において撹拌しながら１０ｍｌのｔ−ブチルメチルエーテル中の１．５４ｍｌのオキサリル塩化物（１８ミリモル）の溶液を滴加する。次いで該混合物を２時間還流下に沸騰させる。引き続き溶剤を真空中で留去する。生成する１−（３−メトキシベンジル）−７−アザインドール−３−イル−グリオキシル酸塩化物を固体の残留物として得て、これを５０ｍｌのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中に懸濁する。
【００９６】
２０ｍｌのＴＨＦ中の２ｇの水素化ナトリウムの懸濁液に−５℃において３０ｍｌのＴＨＦ中の２．４ｇの４−アミノ−３，５−ジクロロピリジン（１５ミリモル）の溶液を滴加する。撹拌しながら該混合物を次いで１時間２０℃に加熱する。引き続き、事前に製造した１−（３−メトキシベンジル）−７−アザインドール−３−グリオキシル酸塩化物の懸濁液を約０℃で滴加する。最後に該反応混合物を４時間還流下に沸騰させる。溶剤を真空中で除去する。残留物を５０ｍｌの酢酸エチルエステル及び５０ｍｌの水と一緒に撹拌する。相分離を行う。有機相を水で洗浄する。溶剤を真空中で留去する。残留物をイソプロパノールから再結晶させる。
【００９７】
収量：３．５ｇ（理論値の５１．５％）
融点：１６５〜１６７℃
前記の製造方法を使用して、ｎ＝２である多くの他の式１の化合物を製造し、そのうち以下のものを例として挙げる：
【００９８】
【表２】
2004512337.tif 000017
【００９９】
【表３】
2004512337.tif 000018
【０１００】
【表４】
2004512337.tif 000019
【０１０１】
本発明による化合物はホスホ−ジエステラーゼ４及びＴＮＦａ遊離の強力なインヒビターである。その治療能力はインビボで、例えば喘息の後期反応（好酸球）の阻害並びにアレルゲンに誘発される血管透過性の感化によって活性に感作されたブラウンノルウェーラットにおいて証明される。
【０１０２】
ホスホジエステラーゼの阻害
ＰＤＥ４−活性をヒトの多形核リンパ球（ＰＭＮＬ）からの酵素調製物中で測定し、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３及びＰＤＥ５の活性をヒトの血小板からのＰＤＥによって測定した。ヒトの血液をクエン酸塩で抗凝集させる。７００×ｇでの室温における２０分間の遠心分離によって血小板豊富な血漿を上清中に赤血球及び白血球から分離する。血小板を超音波によって溶解し、かつＰＤＥ３−アッセイ及びＰＤＥ５−アッセイで使用する。ＰＤＥ２活性の測定のためにサイトゾル性血小板フラクションをアニオン交換カラムを介してＮａＣｌ勾配を用いて精製し、かつＰＤＥ２ピークを該アッセイのために得る。ＰＤＥ４測定のためのＰＭＮＬを後続のデキストラン沈降及び引き続いての勾配遠心分離によってＦｉｃｏｌｌパック（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ）を用いて単離する。細胞を２回洗浄した後に、なおも含んでいる血小板を１０ｍｌの低張緩衝液（１５５ｍＭのＮＨ４Ｃｌ、１０ｍＭのＮａＨＣＯ３、０．１ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ＝７．４）を添加することによって４℃で６分以内で溶解させる。なおもインタクトなＰＭＮＬを更に２回ＰＢＳで洗浄し、かつ超音波によって溶解させる。４８０００×ｇにおいて４℃で１時間遠心分離した上清はＰＤＥ４のサイトゾル性のフラクションを含有し、かつこれはＰＤＥ４測定のために使用される。
【０１０３】
ホスホジエステラーゼ活性をＴｈｏｍｐｓｏｎ他により記載される方法に幾らかの変更を加えて測定する（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ， Ｗ．Ｊ．； Ａｐｐｌｅｍａｎ， Ｍ．Ｍ．， Ａｓｓａｙ ｏｆ ｃｙｃｌｉｃ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ ａｎｄ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｆｏｒｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ． Ａｄｖ． Ｃｙｃｌ． Ｎｕｃｌ． Ｒｅｓ． １９７９， １０， ６９−９２）。
【０１０４】
反応混合物は５０ｍＭのトリスＨＣｌ（ｐＨ７．４）、５ｍＭのＭｇＣｌ２、可変濃度のインヒビター、相応の酵素調製物並びに個々のイソ酵素の検出のために必要な他の成分（以下参照）を含有する。基質０．５μＭ［３Ｈ］−ｃＡＭＰ又は［３Ｈ］−ｃＧＭＰ（約６０００ＣＰＭ／試験）の添加によって反応を開始させる。最終容量は１００ｍｌである。試験物質はＤＭＳＯ中の原液として投入する。反応混合物中のＤＭＳＯ濃度は１％ｖ／ｖである。前記のＤＭＳＯ濃度においてＰＤＥ活性は影響されない。基質の添加による反応の開始の後に試料を３０分間３７℃でインキュベートする。試験管を１１０℃で２分間加熱することによって反応を停止する。試料を更に１０分間氷中に保持する。３０μｌの５′−ヌクレオチダーゼ（１ｍｇ／ｍｌ、トウブダイヤガラガラヘビ（Ｃｒｏｔａｌｕｓ ａｄａｍａｎｔｅｕｓ）からのヘビ毒）の添加の後に３７℃で１０分間のインキュベートを行う。これらの試料を氷上で停止させ、それぞれ４００μｌのＤｏｗｅｘ−水−エタノール（１＋１＋１）からの混合物を添加し、よく混合し、かつ再び１５分間氷上でインキュベートする。反応容器を３０００×ｇで２０分間遠心分離する。２００μｌの上清のアリコートを直接シンチレーション容器に移す。３ｍｌのシンチレーターの添加の後に試料をベータカウンター中で測定する。
【０１０５】
ＰＤＥ４、ＰＤＥ３及びＰＤＥ２の活性の測定のために、基質として［３Ｈ］−ｃＡＭＰを使用し、ＰＤＥ５の活性の測定のために［３Ｈ］−ｃＧＭＰを使用する。それぞれ非特異的な酵素活性をＰＤＥ４の場合に１００μＭのロリプラムの存在下に、かつＰＤＥ３及びＰＤＥ５の測定の場合に１００μＭのＩＢＭＸの存在下に測定し、かつ試験値から減算する。ＰＤＥ３アッセイのインキュベーションバッチは１０μＭのロリプラムを、可能な不純物をＰＤＥ４によって阻害するために含有する。ＰＤＥ２をアマシャム社（Ａｍｅｒｓｈａｍ）のＳＰＡアッセイによって試験する。ＰＤＥ２のアクチベーター（５μＭのｃＧＭＰ）の存在下にアッセイを実施する。
【０１０６】
本発明による化合物のためにホスホジエステラーゼ４の阻害に関して１０−９〜１０−５Ｍの範囲でＩＣ５０値を測定した。ＰＤＥ−タイプ２、３及び５に対する選択性は１００〜１００００倍である。
【０１０７】
例として選択された使用例についてＰＤＥ４の阻害に対する結果を以下の表にまとめた：
【０１０８】
【表５】
2004512337.tif 000020
【０１０９】
鼻ポリープの細胞からのＴＮＦａ遊離の阻害
試験構成は実質的にＣａｍｐｂｅｌｌ，Ａ．Ｍ及びＢｏｕｓｑｕｅｔ Ｊ（Ａｎｔｉ−ａｌｌｅｒｇｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｈ１−ｂｌｏｃｋｅｒｓ． Ｉｎｔ． Ａｒｃｈ． Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ．， １９９３， １０１， ３０８−３１０）によって記載された方法に相当する。出発材料は外科的治療を受けた患者の鼻ポリープ（ＯＰマテリアル）である。
【０１１０】
該組織をＲＰＭＩ１６４０で洗浄し、かつ引き続きプロテアーゼ（２．０ｍｇ／ｍｌ）、コラゲナーゼ（１．５ｍｇ／ｍｌ）、ヒアルロニダーゼ（０．７５ｍｇ／ｍｌ）及びＤＮＡアーゼ（０．０５ｍｇ／ｍｌ）で３７℃で２時間にわたり分解させる（酵素を有する４ｍｌのＲＰＭＩ１６４０に対して１ｇの組織）。得られた細胞、上皮細胞、単球、マクロファージ、リンパ球、繊維芽細胞及び顆粒球からの混合物を濾過し、かつ繰り返しの遠心分離によって栄養液で洗浄し、ヒトのＩｇＥの添加によって受動的に感作させ、かつ細胞懸濁液をＲＰＭＩ１６４０（補足的に抗生物質、１０％の仔ウシ血清、２ｍＭのグルタミン及び２５ｍＭのＨｅｐｅｓ）中で２Ｍｉｏ細胞／ｍｌの濃度に調整する。前記の懸濁液を６ウェルの細胞培養プレート（１ｍｌ／ウェル）に分配する。これらの細胞を試験物質と種々の最終濃度において３０分間、前インキュベートし、かつ引き続き抗ＩｇＥ（７．２μｇ／ｍｌ）の添加によってＴＮＦａ遊離を誘起する。栄養培地での最大の遊離は約１８時間後に行われる。前記の時間において細胞を３７℃及び５％のＣＯ２でインキュベートする。栄養培地（上清）を遠心分離（５分、４０００回転／分）によって得て、かつサイトカイン測定のために−７０℃で貯蔵する。ＴＮＦの測定（上清中）をいわゆるサンドウィッチ−ＥＬＩＳＡ（基本材料、Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を用いて行い、それによってサイトカイン濃度は３０〜１００ｐｇ／ｍｌの範囲で検出できた。
【０１１１】
抗ＩｇＥで刺激されていない細胞は決してＴＮＦａを生産せず、刺激された細胞はそれに対して大量のＴＮＦａを分泌し、これは、例えばＰＤＥ４インヒビターによって用量に依存して低下させることができる。試験された物質の種々の濃度でのパーセントでの阻害（抗ＩｇＥで刺激された細胞のＴＮＦａ遊離＝１００％）からＩＣ５０（５０％阻害における濃度）を算出する。
【０１１２】
本発明による化合物についてはＩＣ５０値は１０−７〜１０−５の範囲で測定された。
【０１１３】
例として、選択された使用例についてＴＮＦａ遊離の阻害に対する結果を以下の表にまとめた：
【０１１４】
【表６】
2004512337.tif 000021
【０１１５】
活性に感作されたブラウンノルウェイラットにおける吸入オブアルブミン誘発４８時間後の後期好酸球の阻害
肺の好酸球浸潤の本発明による基質による阻害を、オブアルブミン（ＯＶＡ）に対して活性に感作された雄のブラウンノルウェイラット（２００〜２５０ｇ）について試験する。感作を１０μｇのＯＶＡからのアジュバントとしての２０ｍｇの水酸化アルミニウムと一緒の０．５ｍｌの生理学的食塩溶液中の懸濁液を１動物あたりに１日目、１４日目及び２１日目に皮下注入することによって行う。その他にこれらの動物に同じ時点で百日咳菌ワクチン希釈液を１動物あたりに０．２５ｍｌ腹膜腔内に注射する。２８日目の試験日にこれらの動物を個々に、頭部−鼻部暴露装置と接続されている開放した１ｌのプレキシガラス箱に入れる。これらの動物を１．０％のオブアルブミン懸濁液からのエーロゾルに晒す（アレルゲン誘発）。オブアルブミン−エーロゾルを圧縮空気（０．２ＭＰａ）で動作するネブライザー（Ｂｉｒｄ ｍｉｃｒｏ ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ， ｐａｌｍ Ｓｐｒｉｎｇｓ ＣＡ， ＵＳＡ）によって作成する。暴露時間は１時間であり、その際、標準コントロールは０．９％の食塩溶液で同様に１時間にわたって噴霧する。
【０１１６】
アレルゲン誘発の４８時間後に好酸性顆粒球は動物の肺に激しく移入する。その時点でこれらの動物を過少量のエチルウレタン（１．５ｇ／ｋｇ体重、腹膜腔内）で麻酔し、かつ気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を３×４ｍｌのハンクス平衡溶液で行う。プールされたＢＡＬ液中の全細胞数及び好酸性顆粒球数を引き続き自動細胞分化装置（Ｂａｙｅｒ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｔｅｃｈｎｉｃｏｎ Ｈ１Ｅ）を用いて測定する。各動物についてＢＡＬ中の好酸球（ＥＯＳ）をＭｉｏ／動物で算出する：
ＥＯＳ／μｌ×ＢＡＬ−回収（ｍｌ）＝ＥＯＳ／動物
各試験において２つの対照群（生理学的食塩溶液で噴霧及びＯＶＡ溶液で噴霧）を伴う。
【０１１７】
物質で処理された試験群の好酸球のパーセント阻害を以下の式で算出する：
｛（（ＯＶＡＣ−ＳＣ）−（ＯＶＡＤ）−ＳＣ））／（ＯＶＡＣ−ＳＣ）｝×１００％＝％阻害
（ＳＣ＝ビヒクル処理されかつ０．９％食塩溶液で誘発された対照群；ＯＶＡＣ＝ビヒクル処理されかつ１％のオブアルブミン懸濁液で誘発された対照群；ＯＶＡＤ＝物質で処理されかつ１％のオブアルブミン懸濁液で誘発された試験群）
試験物質を腹膜腔内又は経口で１０％のポリエチレングリコール３００及び０．５％の５−ヒドロキシエチルセルロース中の懸濁液としてアレルゲン誘発の２時間前に適用する。対照群を試験物質の適用形に相応してビヒクルで処理する。
【０１１８】
本発明による化合物は後期好酸球を、１０ｍｇ／ｋｇの腹膜腔内適用の後に３０％〜１００％だけ、かつ３０ｍｇ／ｋｇの経口適用の後に３０〜７５％だけ阻害する。
【０１１９】
本発明による化合物は従って好酸球の作用と関係がある疾患の治療のための医薬品の製造のために特に適当である。
【０１２０】
例として選択された使用例について好酸球の阻害に対する結果を以下の表にまとめた：
【０１２１】
【表７】
2004512337.tif 000022
【０１２２】
ルイスラットにおけるリポ多糖（ＬＰＳ）で誘発された肺−好中球の阻害
肺の好中球浸潤の本発明の物質による阻害を雄のルイスラット（２５０〜３５０ｇ）で調査する。試験日に動物を個々に、頭部−鼻部暴露装置に接続されている開放された１ｌのプレキシガラス箱に入れる。これらの動物をＰＢＳ中のリポ多糖懸濁液（１００μｇのＬＰＳ／０．１％のヒドロキシルアミンの溶液ｍｌ）からのエーロゾルに晒す（ＬＰＳ誘発）。ＬＰＳ／ヒドロキシルアミン−エーロゾルを圧縮空気（０．２ＭＰａ）によって作動するネブライザー（Ｂｉｒｄ ｍｉｃｒｏ ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ， Ｐａｌｍ Ｓｐｒｉｎｇｓ ＣＡ， ＵＳＡ）によって作成する。暴露時間は４０分であり、その際、標準対照をＰＢＳ中の０．１％のヒドロキシルアミン溶液からのエーロゾルで同様に４０分間噴霧する。
【０１２３】
ＬＰＳ誘発の６時間後に好中性顆粒球は動物の肺に激しく移入する。その時点でこれらの動物を過少量のエチルウレタン（１．５ｇ／ｋｇ体重、腹膜腔内）で麻酔し、かつ気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を３×４ｍｌのハンクス平衡溶液で行う。プールされたＢＡＬ液中の全細胞数及び好中性顆粒球数を引き続き自動細胞分化装置（Ｂａｙｅｒ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｔｅｃｈｎｉｃｏｎ Ｈ１Ｅ）を用いて測定する。各動物についてＢＡＬ中の好中球（ＮＥＵＴＲＯ）をＭｉｏ／動物で算出する：
ＮＥＵＴＲＯ／μｌ×ＢＡＬ−回収（ｍｌ）＝ＮＥＵＴＲＯ／動物
各試験において２つの対照群（ＰＢＳ中の０．１％のヒドロキシルアミン溶液で噴霧及び１００μｇのＬＰＳ／ＰＢＳ中の０．１％ヒドロキシルアミンｍｌで噴霧）を伴う。
【０１２４】
物質で処理された試験群の好中球のパーセント阻害を以下の式で算出する：
｛（（ＬＰＳＣ−ＳＣ）−（ＬＰＳＤ−ＳＣ））／（ＬＰＳＣ−ＳＣ）｝×１００％＝％阻害
（ＳＣ＝ビヒクル処理されかつ０．１％ヒドロキシルアミン溶液で誘発された対照群；ＬＰＳＣ＝ビヒクル処理されかつＬＰＳ（１００μｇ／０．１％のヒドロキシルアミン溶液ｍｌ）で誘発された対照群；ＬＰＳＤ＝物質で処理されかつＬＰＳ（１００μｇ／０．１％のヒドロキシルアミン溶液ｍｌ）で誘発された試験群）
試験物質を経口で懸濁液として１０％のポリエチレングリコール３００及び０．５％の５−ヒドロキシエチルセルロース中でＬＰＳ誘発の２時間前に適用する。対照群を試験物質の適用形に相応してビヒクルで処理する。
【０１２５】
本発明による化合物は好中球を、１ｍｇ／ｋｇの経口適用の後に４０〜９０％だけ阻害し、かつ従って好中球の作用と関係がある疾患の治療のための医薬品の製造のために特に適当である。
【０１２６】
例として選択された使用例について好中球の阻害に対する結果を以下の表にまとめた：
【０１２７】
【表８】
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【国際公開パンフレット】
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【手続補正書】
【提出日】平成14年10月7日(2002.10.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
式１
【化１】
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［式中、
ｎ＝１又は２であってよく、かつ
Ｒ１は分枝鎖状又は非分枝鎖状の、非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、単環式、二環式又は三環式の３〜１４個の環員を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の炭素環、単環式、二環式又は三環式の５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の複素環（その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び炭素環式及び複素環式の置換基は非置換又はＲ４で一置換又は多置換されていてよい）で一置換又は多置換されている−Ｃ１〜Ｃ１０−アルキル、
一不飽和又は多不飽和の、直鎖状又は分枝鎖状の、非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＯＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−ＯＳＯ２Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＣＯＯＨ、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、単環式、二環式又は三環式の３〜１４個の環員を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の炭素環、単環式、二環式又は三環式の５〜１５個の環員及び有利にはＮ、Ｏ及びＳである１〜６個のヘテロ原子を有する飽和又は一不飽和又は多不飽和の複素環（その際、Ｃ６〜Ｃ１４−アリール基及び炭素環式及び複素環式の置換基は非置換又はＲ４で一置換又は多置換されていてよい）で一置換又は多置換されている−Ｃ２〜Ｃ１０−アルケニルを表し、
Ｒ２及びＲ３は同一又は異なってよく、その際、両者のうち１つだけが水素を表してよく、かつＲ２及びＲ３は更に非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−フェニル、−ピリジルで一置換又は多置換されている−Ｃ１〜Ｃ５−アルキル、
非置換又は−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ３−アルキル）２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルで一置換又は多置換された−フェニル、
非置換又は−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ３−アルキルで一置換又は多置換された−ピリジル、並びに
【化２】
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を意味してよく、
更に基−ＮＲ２Ｒ３は一緒になって
【化３】
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を表してよく、かつ
Ｒ４は−Ｈ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）２、−ＮＨＣ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｎ（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）２、−Ｎ（Ｃ１〜Ｃ６−アルキル）（Ｃ６〜Ｃ１４−アリール）、−ＮＨＣＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−（ＣＯ）Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−（ＣＳ）Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｏ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｓ−Ｃ６〜Ｃ１４−アリール、−ＳＯＣ１〜Ｃ６−アルキル、−ＳＯ２Ｃ１〜Ｃ６−アルキルを表すが、但し
ｎ＝１の場合には、同時に以下の意味を有さない：
Ｒ１＝−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、
Ｒ２＝−Ｈ又は−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル及び
Ｒ３＝
【化４】
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（式中、
Ｒ、Ｒ′は互いに無関係に、ハロゲンによって一置換又は多置換されていてよい−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ２〜Ｃ６−アルケニル、−Ｃ３〜Ｃ６−シクロアルキルオキシ、−Ｃ３〜Ｃ６−シクロアルキルＣ１〜Ｃ６−アルコキシ、−Ｃ２〜Ｃ６−アルキニル、−Ｃ３〜Ｃ６−シクロアルキル、−Ｃ３〜Ｃ６−シクロアルキルＣ１〜Ｃ６−アルキル、−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルチオ、−Ｃ３〜Ｃ６−シクロアルキルチオ、−Ｃ３〜Ｃ６−シクロアルキルＣ１〜Ｃ６−アルキルチオ、−Ｃ１〜Ｃ６−アルコキシ、ヒドロキシ−、ハロゲン−、ニトロ−、−ＣＦ３、−Ｃ２Ｆ５、−ＯＣＦ３、−ＳＣＦ３、−ＳＯ２ＣＦ３、−ＳＯ２Ｆ、ホルミル−、Ｃ２〜Ｃ６−アルカノイル、シアノ−、置換されていてよいフェニル−又はチエニル−、−ＮＲ′′２、−ＣＯＮＲ′′２、−ＣＯＯＲ′′であるか、又はＲ＋Ｒ′は一緒になって５員の炭素環又は複素環であり、かつ
Ｒ′′＝−Ｈ又は−Ｃ１〜Ｃ６−アルキルである）］で表される７−アザインドール。
【国際調査報告】
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