(57)【要約】本発明は、遷移金属または亜鉛の安定な酸化状態から誘導される金属陽イオンを有するピペラジンＮＯＮＯエート残基の存在を特徴とするリガンド錯体に関する。これらの錯体は酸化窒素供与体であり、冠動脈領域に内皮保護効果を及ぼし、再内皮化および血管形成過程を刺激する。本発明は、前記化合物の調製方法およびその治療上の使用を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式のピペラジンＮＯＮＯエート誘導体の金属錯体。
【化１】
2004518757.tif 000011
［上式で、
ａ）Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に、
水素、またはヒドロキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルチオ、アミノ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノ、カルボキシ、カルボ（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールチオから選択される１〜２個の基で置換されていてもよい直鎖または分枝（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルを表し、
あるいは、
ｂ）Ｒ１およびＲ２は、一緒になって以下の基の１つ、すなわち、
＝ＣＲ３−アリール（Ｒ３は水素、またはヒドロキシ、カルボキシ、アリールから選択される１〜２個の基で置換されていてもよい（Ｃ１〜Ｃ４）直鎖または分枝鎖アルキルである）を表し、
ｎは、２〜４の整数、好ましくは２または３を表し、
Ｍ＋は、遷移金属または亜鉛の陽イオンを表し、
ｘは、１〜３の整数であり、遷移金属または亜鉛の、その安定な酸化状態に対する陽イオンの電荷数を表し、
Ａ−は、ＮＯＮＯエート金属錯体と安定な塩を形成する無機または有機陰イオンを表し、
ｙは、１〜３の整数であり、陰イオンの電荷数を表し、
ｍは、０を含む整数または分数であり、ＮＯＮＯエート金属錯体の陽イオンの電荷をバランスするのに必要な陰イオンの数を表し、次式によってｘ、ｙ、ｋ、およびｗの値と関係付けられ、
【数１】
2004518757.tif 000012
ｗは、ＮＯＮＯエートリガンド基質に存在する、可能な別の陰イオン電荷数であり、ｋは、可能な別の陽イオン電荷数である。］
【請求項２】
陽イオンがＺｎ２＋、ＴｉＯ２＋、ＶＯ２＋、Ｃｒ３＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ｃｏ３＋、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｐｄ２＋、Ｒｕ３＋、Ｐｔ２＋、およびＡｕ３＋から選択される、請求項１に記載の金属錯体。
【請求項３】
ｍの値が０であり、あるいはｍの値が０以外の場合、陰イオン［Ａｙ−］が塩酸、臭化水素酸、硫酸、過塩素酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、アスコルビン酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、コール酸、ムチン酸、樟脳酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、およびトリフルオロメタンスルホン酸から選択される酸から誘導される陰イオンである、請求項１および２のいずれか一項に記載の金属錯体。
【請求項４】
Ｒ１およびＲ２がどちらも水素を表すか、または一緒になってＲ３が水素である＝ＣＲ３−アリール基を表し、「アリール」という用語は、好ましくはイオン化された陰イオン型のヒドロキシまたはメルカプト基で置換されていてもよいベンゼン環またはピリジン環、あるいは窒素原子上を（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル基で、また炭素環部分をオキソまたはチオオキソ基で置換されていてもよい、一部水素化されたピリジン環を表し、ｎは、数字２または３、好ましくは２を表す、請求項１から３のいずれか一項に記載の金属錯体。
【請求項５】
Ｒ１およびＲ２がどちらも水素を表すか、または一緒になって以下の基
【化２】
2004518757.tif 000013
を表し、陽イオンＭｘ＋がＣｕ２＋およびＮｉ２＋から選択される、請求項４に記載の金属錯体。
【請求項６】
以下の式の化合物から選択される、請求項５に記載の金属錯体。
【化３】
2004518757.tif 000014
【請求項７】
次式のリガンド
【化４】
2004518757.tif 000015
［式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は請求項１の式（Ｉ）におけるのと同じ意味を持つ］の化学量論量を遷移金属または亜鉛の塩と、不活性な有機溶媒中、当量のアルカリ性塩基の存在下で反応させることを含む、請求項１の式（Ｉ）のピペラジンＮＯＮＯエートの金属錯体を調製する方法。
【請求項８】
式（ＩＩＩ）の４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω−アミノアルキル）ピペラジン
【化５】
2004518757.tif 000016
［式中、ｎは請求項１の式（Ｉ）におけるのと同じ意味を持つ］の化学量論量を、式Ｏ＝ＣＲ３−アリール（Ｒ３は請求項１におけるのと同じ意味を持つ）のカルボニル化合物、および遷移金属または亜鉛の塩と、不活性な有機溶媒中、当量のアルカリ性塩基の存在下で反応させることを含む、請求項１の式（Ｉ）［式中、Ｒ１およびＲ２はｂ）群の意味を持ち、他の全ての記号は請求項１におけるのと同じ意味を持つ］のピペラジンＮＯＮＯエートの金属錯体を調製する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
不活性な有機溶媒がエタノールまたはメタノールであり、反応が周囲温度またはより低い温度で実施される、請求項７および８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
医薬品として使用するための、請求項１から６のいずれか一項に記載のピペラジンＮＯＮＯエート誘導体の金属錯体。
【請求項１１】
心臓血管系、女性の生殖系、男性の生殖系、中枢神経系、炎症性プロセス、内臓機能、皮膚系、および／または腫瘍の増大あるいは拡散に関連する疾患および／または機能不全の治療用医薬品を調製するための、請求項１から６のいずれか一項に記載のピペラジンＮＯＮＯエート誘導体の金属錯体の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、配位ピペラジンＮＯＮＯエート残基の存在、ならびに冠動脈領域に内皮保護効果を及ぼすための、また再内皮化および血管形成過程を刺激するための血管弛緩を誘発することができる薬剤として使用することを特徴とする、酸化窒素（ＮＯ）を放出する金属錯体のクラスに関する。
【０００２】
本発明はまた、前記化合物を調製する方法に関する。
【０００３】
本発明はさらに、前記化合物のうちの１種または複数種を含む薬剤組成物に関する。
【０００４】
本発明の化合物の薬理学的活性は、ノルアドレナリンで事前に萎縮させた血管試料（ウサギの大動脈輪）中での弛緩誘発効果によって評価されている（Ａｍｅｒｉｎｉ他、Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２８：８２〜８８、１９６６）。この化合物の内皮保護効果および血管形成促進効果も、微小循環系の内皮細胞の増殖および移動の研究で評価されている（Ｍ．Ｚｉｃｈｅ他、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、９４：２０３６〜２０４４、１９４４）。
【０００５】
酸化窒素は、さまざまな生物学的および生理学的方法において血管拡張剤、神経伝達物質、生体調節物質として重要な役割を果たしており、防御免疫系に関与している（Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ａｃｔｉｏｎ、Ｊ．Ｌａｎｃａｓｔｅｒ  Ｊｒ．編集、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ、１９９６）。酸化窒素は生体内でアミノ酸であるＬ−アルギニンから、さまざまなイソ型で存在するＮＯ合成酵素により酵素的に生産される（Ｒ．Ｉｙｅｎｇａｒ，Ｄ．Ｊ．ＳｔｕｅｈｒおよびＭ．Ａ．Ｍａｒｌｅｔｔａ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８４、６３６９、１９８７）。酸化窒素の作用は、酵素グアニル酸シクラーゼを活性化させ、このようにして環状ＧＭＰの生産を誘発する能力に依存する。ＮＯ合成酵素を構成するイソ型は主に内皮細胞レベルで存在し、脈管トーンの制御を担っている。活性化したマクロファージ中および他の細胞中で誘発される別のタイプのＮＯ合成酵素は、がん細胞および微生物に対するサイクロトクシック剤としてＮＯを合成する。
【０００６】
ＮＯの生産が不十分であると数々の病的状態が招来されるので、この分子を外部から投与しなければならない。しかし、ＮＯは比較的短命なラジカル分子なので、それ自体ではなく、前駆物質を介して投与される。前駆物質には、ニトログリセリン、ニトロプルシドナトリウム、硝酸イソアミル、四硝酸ペンタエリトリトールなど従来のニトロ血管拡張薬があり、これらはしばらく使用されてきたが、ＮＯ放出の速度および程度の制御、ならびに副作用の発生に関して様々な問題を起こしている。したがって、生理的により適切な濃度でＮＯを放出し、副作用がより少ない分子が得られるならば、治療上の重要な利点となるはずである。
【０００７】
本発明の化合物は、ピペラジンＮＯＮＯエート残基を含むリガンドを有する金属錯体のファミリーであり、溶液中ではＮＯを放出し、その基準塩基は、元の方法に手を加えた手順によって調製した、公知化合物である４−（ヒドロキシ−ニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミン（Ｊ．Ａ．Ｈｒａｂｉｅ、Ｊ．Ｒ．Ｋｌｏｓｅ、Ｄ．Ａ．ＷｉｎｋおよびＬ．Ｋ．Ｋｅｅｆｅｒ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５８、１４７２、１９９３）である。本明細書中で特許請求するＮＯＮＯエートから誘導した錯体は、様々な構造、電荷、物理的化学的特性、およびＮＯ放出活性を可能にする。これらは、次の一般的構造を有する化合物である。
【０００８】
【化６】
2004518757.tif 000002
［上式で、
ａ）Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に、
水素、またはヒドロキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルチオ、アミノ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノ、カルボキシ、カルボ（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アリールチオから選択される１〜２個の基で置換されていてもよい直鎖または分枝（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルを表し、
あるいは、
ｂ）Ｒ１およびＲ２は、一緒になって以下の基の１つ、すなわち、
＝ＣＲ３−アリール（Ｒ３は水素、またはヒドロキシ、カルボキシ、アリールから選択される１〜２個の基で置換されていてもよい直鎖または分枝（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである）を表し、
ｎは、２〜４の整数、好ましくは２または３を表し、
Ｍ＋は、遷移金属または亜鉛の陽イオンを表し、
ｘは、１〜３の整数であり、遷移金属または亜鉛の、その安定酸化状態に対する陽イオンの電荷数を表し、
Ａ−は、ＮＯＮＯエート金属錯体と安定な塩を形成する無機または有機陰イオンを表し、
ｙは、１〜３の整数であり、陰イオンの電荷数を表し、
ｍは、０を含む整数または分数であり、ＮＯＮＯエート金属錯体の陽イオンの電荷をバランスするのに必要な陰イオンの数を表し、次式によってｘ、ｙ、ｋ、およびｗの値と関係付けられ、
【０００９】
【数２】
2004518757.tif 000003
ｗは、ＮＯＮＯエートリガンド基質に存在する、可能な別の陰イオン電荷数であり、ｋは、可能な別の陽イオン電荷数である。］。
【００１０】
本明細書および特許請求の範囲では、「アリール」という用語は、（Ｃｌ〜Ｃ４）アルキル、ヒドロキシ、アミノ、（Ｃｌ〜Ｃ４）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノ、カルボキシ、カルボ（Ｃｌ〜Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、ニトロ、シアノ、ハロ、フェノキシ、メルカプト、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルチオから選択される１〜３個の基で置換されていてもよいベンゼン環またはナフタレン環、あるいは上記のように置換されていてもよい、Ｎ、Ｓ、Ｏから選択される１または２個のヘテロ原子を含む５〜６員複素環、およびオキソまたはチオオキソ基で置換されていてもよい、完全にまたは一部水素化されたそれらの誘導体を表す。
【００１１】
１または２個のヘテロ原子を含む５〜６員複素環の例は、上記のように置換されていてもよいピロール、フラン、ピラゾール、イミダゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラン、１，４−オキサジン、１，４−チアジン、ならびに炭素環部分でオキソまたはチオオキソ基で置換されていてもよい、あるいは窒素原子が存在するならばその窒素原子上で（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルで置換されていてもよい、たとえば１−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−２（１Ｈ）ピリジノンまたは１−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−２（１Ｈ）ピリジンチオンなど、完全にまたは一部水素化されたそれらの誘導体である。
【００１２】
「遷移金属の陽イオン」という用語は、Ｔｉ、Ｖ、Ｃｒ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｐｄ、Ｒｕ、Ｐｔ、Ａｕから選択される金属から誘導される陽イオンを表す。そのような陽イオンの例は、Ｚｎ２＋、ＴｉＯ２＋、ＶＯ２＋、Ｃｒ３＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ３＋、Ｃｏ３＋、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｐｄ２＋、Ｒｕ３＋、Ｐｔ２＋、Ａｕ３＋である。
【００１３】
「（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル」という用語、および別の基に含まれるその相当物（たとえば、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミンなど）は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどの直鎖または分枝アルキル鎖を表す。
【００１４】
ＮＯＮＯエートのリガンド基質に存在する可能性のある陰イオン電荷単位は、酸型の基、たとえばカルボキシ、ヒドロキシ、メルカプトのイオン化に由来するものでよく、一般式（Ｉ）中の基Ｒ１および／またはＲ２および／またはＲ３で表される基における置換基として存在してもよい。この場合、前記置換基はそれぞれの陰イオン型も含む。一般に、ｗの値は、０〜３の間の整数、好ましくは０〜２の間、より好ましくは０または１である。
【００１５】
ＮＯＮＯエートのリガンド基質に存在する可能性のある陽イオン単位は、一般式（Ｉ）の塩基部分であるＲ１Ｒ２Ｎ−のプロトン化、および塩基性基、たとえばアミノ、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノ、ジ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノのプロトン化に由来するものでよく、基Ｒ１および／またはＲ２および／またはＲ３で表される基における置換基として存在していてもよい。一般に、ｋの値は、０〜３の間の整数、好ましくは０〜２の間、より好ましくは０または１である。
【００１６】
ＮＯＮＯエート錯体と安定な塩を形成する無機または有機陽イオンは、一般の無機または有機酸から誘導することができる。好ましいのは、薬学的に許容できる酸、たとえば塩酸、臭化水素酸、硫酸、過塩素酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、アスコルビン酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、コール酸、ムチン酸、樟脳酸、グルタル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、ケイ皮酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、およびトリフルオロメタンスルホン酸との塩である。
【００１７】
和（ｘ＋ｋ）の値が和（ｌ＋ｗ）に等しいとき、ｍは０の値をとり、したがって、式（Ｉ）の化合物中の陰イオン［Ａｙ−］はもはや存在しなくなる。実際、ＮＯＮＯエート金属錯体中に存在する陽イオン電荷数（ｘ＋ｋ）は内部の陰イオン電荷数（ｌ＋ｗ）によって完全に相殺されるので、その存在はもはや必要でなくなる。
【００１８】
一般に、出発物質として使用される次式の１−（ω−アミノアルキル）ピペラジン
【００１９】
【化７】
2004518757.tif 000004
［式中、ｎ＝２〜４］は、対応するω−ブロモアルキルフタルイミドをピペラジンと反応させ、その後フタルイミド基を加水分解することによって調製することができる。
【００２０】
４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミンは、５気圧の圧力で周囲温度でＮＯを使用する、Ｊ．Ａ．Ｈｒａｂｉｅ他が報告した前記方法によって、またはおそらくはより簡単で同等の効果のある、ＮＯを１気圧で使用し反応を−２５℃の低温槽で行う、本明細書中で使用した方法によって、１−（２−アミノエチル）ピペラジンをＮＯと反応させることにより、調製することができる。式（ＩＩＩ）の４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω−アミノアルキル）ピペラジン同族体は、
【００２１】
【化８】
2004518757.tif 000005
［式中、ｎは３または４］対応する１−（ω−アミノアルキル）ピペラジンおよびＮＯから出発して、類似の方法で調製することができる。
【００２２】
Ｒ１および／またはＲ２がａ）群の水素以外の意味を持つ、式（Ｉ）の金属錯体を得るのに必要である４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（モノ−またはジ−アルキル−ω−アミノアルキル）ピペラジンの前駆体は、ピペラジン環の４位の第二窒素原子が選択的に保護されている対応する１−（ω−アミノアルキル）ピペラジンから、導入すべき（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル基に対応する適切なカルボニル誘導体を、そのアルキル鎖内にある第一アミノ基と（カルボニル化合物の反応性に応じて、アルコール中で単純に加熱すること、または水を共沸除去しながらベンゼン中で還流することによって）縮合させ、その後（たとえば水素化ホウ素ナトリウムまたはＰｄ／Ｃ上の水素で）穏やかな条件下で還元し、場合によってはその後前記ａ）群に記載されているように置換されていてもよい第二（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル基をω−アミノ基に導入することによって、得ることができる。この導入は、一般のアルキル化方法によって達成することができる。対応する４−ヒドロキシニトロソアミノ誘導体は、その後、ピペラジン環の４位の第二窒素を保護している基を除去したのち、Ｒ１およびＲ２のどちらもが水素である対応する化合物について前に記載した条件に類似した条件でＮＯと反応させることによって得られる。
【００２３】
Ｒ１およびＲ２が一緒になって前記ｂ）群の意味を持つ、一般式（Ｉ）の錯体を得るのに必要であるシッフ塩基を生成するためには、ｎが３または４を表す式（ＩＩＩ）の４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミンまたは４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω−アミノアルキル）−ピペラジンを、Ｒ３が上記と同じ意味を持つ式Ｏ＝ＣＲ３−アリールのカルボニル化合物と縮合させる。
【００２４】
ｂ）群の金属錯体を得るのに必要である４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（アミノアルキル）ピペラジンのシッフ塩基は、その調製にはピペラジン残基がＮＯを失うかもしれない条件が必要となるので、一般には単離しない。シッフ塩基を調製するのに使用するカルボニル化合物は、市販の製品であり、または文献に記載の方法によって得ることができる。たとえば、環の１位に様々なアルキル置換基を含む３−ホルミル−１−イソプロピル−２（１Ｈ）−ピリジンチオンおよび類似の誘導体は、Ｊ．ＢｅｃｈｅｒおよびＥ．Ｇ．Ｆｒａｎｄｓｅｎの文献、Ａｃｔａ  Ｃｈｅｍ．Ｓｃａｎｄ．、Ｓｅｒ．Ｂ３０、８６３、１９７６に報告されている方法によって得ることができる。
【００２５】
本発明の好ましい金属錯体群は、Ｒ１およびＲ２がどちらも水素を表すか、または一緒になってＲ３が水素である＝ＣＲ３−アリール基を表す式（Ｉ）の化合物からなり、「アリール」という用語は、好ましくはイオン化された陰イオン型のヒドロキシまたはメルカプト基で置換されていてもよい、あるいは一部水素化され、窒素原子上で（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル基で、また炭素環部分でオキソまたはチオオキソ基で置換されていてもよい、ベンゼン環またはピリジン環を表し、ｎは、数字２または３、好ましくは２を表す。
【００２６】
本発明に従って調製した金属錯体の例は以下のとおりである。
＊［Ｃｕ（ＰｉｐＮＯＮＯ）］［ＣｌＯ４］として同定され、パークロレートを対イオンとする、一般式（Ｉ）に対応し、４−（ヒドロキシ−ニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミンの陰イオンとの銅（ＩＩ）の錯体。
【００２７】
【化９】
2004518757.tif 000006
上式で、
Ｒ１＝Ｒ２＝水素であり、Ｍｘ＋＝Ｃｕ２＋であり、Ａｙ−＝ＣｌＯ４−であり、（ｘ＋ｋ）＝２であり、（ｌ＋ｗ）＝１であり、ｙ＝１であり、ｍ＝１である。
＊［Ｎｉ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］として同定され、一般式（Ｉ）に対応する、ニッケル（ＩＩ）のサリチルアルデヒドと４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミンから形成したシッフ塩基の２価陰イオンとの錯体。
【００２８】
【化１０】
2004518757.tif 000007
上式で、
Ｒ１＋Ｒ２＝［＝ＣＨ−（２−（−Ｏ）Ｃ６Ｈ４）］であり、Ｍｘ＋＝Ｎｉ２＋であり、（ｘ＋ｋ）＝２であり、（ｌ＋ｗ）＝２であり、ｍ＝０である。
＊［Ｃｕ（ＰｉｔＰｉｐＮＯＮＯ）］［ＣｌＯ４］として同定され、一般式（Ｉ）に対応し、パークロレートを対イオンとする、銅（ＩＩ）の３−ホルミル−１−イソプロピル−２（１Ｈ）−ピリジンチオンを４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミンと縮合して誘導したシッフ塩基の陰イオンとの錯体。
【００２９】
【化１１】
2004518757.tif 000008
上式で、
Ｒ１＋Ｒ２＝［＝ＣＨ−（１−（２−プロピル）−２（１Ｈ）−チオオキソ−３−ピリジル）］であり、Ｍｘ＋＝Ｃｕ２＋であり、Ａｙ−＝ＣｌＯ４−であり、（ｘ＋ｋ）＝２であり、（ｌ＋ｗ）＝１であり、ｙ＝１であり、ｍ＝１である。＊［Ｎｉ（ＰｉａＰｉｐＮＯＮＯ）］［ＣＬＯ４］として同定され、一般式（Ｉ）に対応し、パークロレートを対イオンとする、ニッケル（ＩＩ）の２−ホルミルピリジンを４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミンと縮合して誘導したシッフ塩基の陰イオンとの錯体。
【００３０】
【化１２】
2004518757.tif 000009
上式で、
Ｒ１＋Ｒ２＝［＝ＣＨ−（２−ピリジル）］であり、Ｍｘ＋＝Ｎｉ２＋であり、Ａｙ−＝ＣｌＯ４−であり、（ｘ＋ｋ）＝２であり、（ｌ＋ｗ）＝１であり、ｙ＝１であり、ｍ＝１である。
【００３１】
本発明によって、４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−（アミノアルキル）−ピペラジンまたはそのシッフ塩基から誘導される金属錯体を調製する方法は、以下の一般的方法および反応に基づいている。
【００３２】
４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω−アミノアルキル）−ピペラジンと式（Ｉ）のａ）群に属する金属イオンの錯体は、式（ＩＶ）のリガンドの化学量論量を、遷移金属または亜鉛の塩と、不活性な有機溶媒中、当量のアルカリ性塩基の存在下で反応させることによって調製する。
【００３３】
【化１３】
2004518757.tif 000010
【００３４】
上式で、Ｒ１およびＲ２は式（Ｉ）のａ）群におけるのと同じ意味を持ち、ｎは２〜４の整数、好ましくは２または３を表す。一般に使用する不活性な有機溶媒は、１〜４個の炭素原子の低級アルカノール、好ましくはエタノールおよびメタノールである。使用する遷移金属または亜鉛は、好ましくは式（Ｉ）の錯体を与えるのと同じ陰イオン［Ａｙ−］である。［Ａｙ−］が特定の陰イオンを表す式（Ｉ）の錯体は、いずれにせよ、簡単なイオン交換反応によって、［Ａｙ−］が異なる陰イオンを表す式（Ｉ）の別の錯体に転換することができる。その結果得られる錯体は、一般に低級アルカノール、特にメタノールに非常に溶けやすく、単離するには、好ましくは低温度条件下で、反応溶液にジエチルエーテルを加える必要があるかもしれない。生成物は濾過または遠心分離によって単離し、少量ずつの冷たいメタノール−ジエチルエーテル混合物または単にジエチルエーテルで洗浄することによって精製する。前記手順を適用して、Ｒ１およびＲ２が一緒になってＲ３が上記の意味をもつ＝ＣＲ３−アリール基を表す式（Ｉ）のｂ）群の錯体を得ることもできる。その場合、使用するリガンドは、Ｒ１およびＲ２が式（Ｉ）のｂ）群におけるのと同じ意味を持ち、ｎが２〜４の整数、好ましくは２または３を表す、式（ＩＶ）の生成物で表される。前記リガンドは、ｎが２〜４の整数、好ましくは２または３を表す前記式（ＩＩＩ）の４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω―アミノアルキル）−ピペラジンを、Ｒ３が式（Ｉ）のｂ）群におけるのと同じ意味を持つ式Ｏ＝ＣＲ３−アリールのカルボニル化合物と縮合させることによって調製することができる。
【００３５】
カルボニル化合物と式（ＩＩＩ）の４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω−アミノアルキル）−ピペラジンとの縮合は、金属イオンが存在している場合には、よく知られている鋳型効果により、カルボニル化合物、４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω−アミノアルキル）−ピペラジン、および遷移金属または亜鉛の塩を当量のアルカリ性塩基の存在下、不活性な有機溶媒、好ましくはエタノールまたはメタノール中、周囲温度またはより低い温度で処理することによって、穏やかな条件下でこれらのイミノ誘導体の錯体が都合よく得られる程度までに、相当加速される。この錯体は一般に、このような条件下で少なくとも部分的に沈殿する。エチルエーテルを加えると完全に沈殿させることができる。沈殿物は濾過または遠心分離し、その溶解性に応じて、少量ずつの冷たいメタノール−エチルエーテル混合物または単にエチルエーテルで洗浄する。
【００３６】
金属錯体を元素分析（Ｃ、Ｈ、Ｎ）、ＩＲ、ＵＶ−Ｖｉｓ分光分析、および（反磁性錯体については）ＮＭＲによって特徴付けた。
【００３７】
以下の実施例は本発明を例示するが、限定するものではない。
【００３８】
実施例１：錯体［Ｃｕ（ＰｉｐＮＯＮＯ）］［ＣｌＯ４］の合成
５０ｍｇの４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミン（０．２６ミリモル）を等モル量のＮａＯＨを含む５ｍｌのメタノール溶液に溶解する。数ｍｌのメタノールに溶解した当量のＣｕ（ＣｌＯ４）２・６Ｈ２Ｏをこの溶液に加える。攪拌しながら溶液を冷たく保つ間に青紫色生成物が沈殿するのが観察され、それを遠心分離によって分離し、少量ずつの冷エーテルで何度も洗浄する。生成物をその後、真空下で乾燥させる（収率３３％）。分析データはその組成を確証している。
【００３９】
実施例２：錯体［Ｎｉ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］の合成
５０ｍｇの４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−ピペラジンエタンアミン（０．２６ミリモル）を等モル量のＮａＯＨを含む５ｍｌのメタノール溶液に溶解する。マイクロピペットを使って２７．６μｌのサリチルアルデヒド（０．２６ミリモル）を上記溶液に加えると直ちに黄色い着色溶液が得られる。次に、３４．２ｍｇの冷ＮｉＣｌ２を攪拌下で加える。冷ジエチルエーテルを加えることによって、黄緑色の、シッフ塩基を有する錯体が沈殿する。それをその後遠心分離し、少量ずつの冷ジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させる（収率４３％）。分析データはその組成を確証している。
【００４０】
この化合物からのＮＯの放出活性を特徴付ける薬理学的試験は、ノルアドレナリンで事前に萎縮させたウサギの大動脈の弛緩である（Ａｍｅｒｉｎｉ他、Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、２８、８２〜８８、１９９６）。ＥＤ５０の量のノルアドレナリンで事前に萎縮させた血管試料を、研究中の錯体で、投与量を増やしながら処理する（１ｎＭ〜１００μＭ）。その血管弛緩効果を、ニトロプルシドナトリウムやスペルミンＮＯＮＯエートなど従来のＮＯ供与体の効果と比較する。
【００４１】
本発明による４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（アミノアルキル）−ピペラジンから誘導した錯体は全て、強力な血管弛緩を誘発することができる。たとえば、ニトロプルシドナトリウムと比較した［Ｎｉ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］、［Ｃｕ（ＰｉｐＮＯＮＯ）］［ＣｌＯ４］、［Ｃｕ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］の能力の桁数は、以下のＥＤ５０値のとおり様々である。すなわち、［Ｎｉ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］３０ｎＭ、［Ｃｕ（ＰｉｐＮＯＮＯ）］［ＣｌＯ４］１００ｎＭ、［Ｃｕ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］およびニトロプルシドナトリウム３μＭである。スペルミンＮＯＮＯエートは、ピペラジンＮＯＮＯエート錯体よりずっと能力が低い。錯体の生物学的効果の反乱の動態および継続時間は、ニトロプルシドナトリウムで得たものに重ね合わせることができる。
【００４２】
ピペラジン核に結合しているＮＯＮＯエート残基を含まない、［Ｎｉ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］錯体の類似体を研究することによって大動脈弛緩効果が特異的でありＮＯの放出に関連していることを実証する対照試験を行った。類似体は完全に不活性であることが分かった。さらに、グアニル酸シクラーゼの選択的阻害剤であるＯＤＱ｛１Ｈ−［１，２，４］オキサジアゾロ［４，３−ａ］キノキサリン−１−オン｝が存在すると、［Ｎｉ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］の弛緩効果が完全になくなる。
【００４３】
化合物の内皮保護および血管形成促進効果も、微小循環系の内皮細胞に対する成長促進および移動効果を測定することにより、他のＮＯ供与体と比較して評価した。細胞移動は、ボイデンチェンバー、および研究中の物質に４８時間暴露した後の全細胞数の増殖によって評価した（Ｍ．Ｚｉｃｈｅ他、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、９４：２０３６〜２０４４、１９９４）。
【００４４】
本発明による４−（ヒドロキシニトロソアミノ）−１−（ω−アミノアルキル）−ピペラジンから誘導された錯体は、内皮細胞の増殖および移動を誘発することができる。移動に対する影響は投与量に依存し（１ｎＭ〜１μＭ）、１００ｎＭおよび１μＭで最大の活性になる。これらの錯体も同様に活性があり、ニトロプルシドナトリウムより能力が高く、１００μＭの濃度で最大活性を示し、一方、スペルミンＮＯＮＯエートは活性が低く、他のＮＯ供与体で観察される最大効果を生じない。化合物濃度を増やしながら（１ｎＭ〜１μＭ）増殖に対する効果を試験した。１０および１００ｎＭの投与量で細胞増殖の増加が観察され、少ない投与量の方がより大きな効果がある。１μＭで、細胞数は対照の細胞数と同じである。最も活性のある錯体はやはり［Ｎｉ（ＳａｌＰｉｐＮＯＮＯ）］である。ピペラジン核に結合しているＮＯＮＯエート残基を含まない、この化合物の類似体は完全に不活性であることが分かった。この場合も、グアニル酸シクラーゼの選択的阻害剤であるＯＤＱが存在すると、錯体による増殖促進が完全になくなる。
【００４５】
ＮＯ放出活性を有する化合物は、その一部を例として以下に引用した学術文献および／または特許文献の多くの引例によって明らかであるように、多くの治療分野で使用されている。
【００４６】
米国特許第６，１０３，２７５号
米国特許第６，１３３，３２０号
Ｂａｕｅｒ  ＪＡ
Ｈｙｄｒｏｘｏｃｏｂａｌａｍｉｎｓ  ａｓ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ  ｄｏｎｏｒｓ  ｏｆ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｉｍｐｌｉｃａｔｅｄ  ｉｎ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｗｏｕｎｄ  ｈｅａｌｉｎｇ．
Ｍｅｄ  Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ，１９９８  Ｊｕｌ；５１（１）：６５−７
Ｄｕｓｔｉｎｇ  ＧＪ，Ｆｅｎｎｅｓｓｙ  Ｐ．，Ｙｉｎ  ＺＬ，Ｇｕｒｅｖｉｃｈ  Ｖ，
Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｉｎ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：ｖａｓｃｕｌａｒ  ｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ｏｒ  ｖｉｌｌａｉｎ？
Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｓｕｐｐ．１９９８  Ｎｏｖ．２５；Ｓ３４−４１．
Ｗｅｉｓ  Ｍ，Ｍｅｉｓｅｒ  ＢＭ，Ｒｅｉｃｈａｒｔ  Ｂ，ｖｏｎ  Ｓｃｈｅｉｄｔ  Ｗ
Ｔｈｅ  ｃｏｎｔｉｎｕｉｎｇ  ｃｈａｌｌｅｎｇｅ  ｏｆ  ｃａｒｄｉａｃ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．
Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｉａ，１９９８  Ａｕｇｕｓｔ；４３（８）；７７７−８７Ｓｍｉｔｈ  ＧＮ，Ｂｒｅｉｎ  ＪＦ
Ｕｓｅ  ｏｆ  ｎｉｔｒｏｇｌｙｃｅｒｉｎ  ｆｏｒ  ｕｔｅｒｉｎｅ  ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ
Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  Ｓｕｒｖ．１９９８  Ｓｅｐ；５３（９）；５５９−６５
ＭｃＣｕｒｒｙ  Ｋｒ，Ｋｅｅｎａｎ  ＲＪ．
Ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ  ｐｅｒｉｏｐｅｒａｔｉｖｅ  ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ  ａｎｄ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ａｆｔｅｒ  ｌｕｎｇ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ
Ｓｅｍｉｎ  Ｔｈｏｒａｃ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｓｕｒｇ．１９９８  Ａｐｒ；１０（２）：１３９−４３
Ｔｈｏｍｓｅｎ  ＬＬ，Ｏｌｅｓｅｎ  Ｊ
Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｔｈｅｏｒｙ  ｏｆ  ｍｉｇｒａｉｎｅ
Ｃｌｉｎ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１９９８；５（１）：２８−３３
Ｍｏｔｗａｎｉ  ＪＧ，Ｔｏｐｏｌ  ＥＪ
Ａｏｒｔｏｃｏｒｏｎａｒｙ  ｓａｐｈｅｎｏｕｓ  ｖｅｉｎ  ｇｒａｆｔ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｐｒｅｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ
Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１９９８  Ｍａｒ  １０；９７（９）：９１６−３１Ｂｚｅｉｚｉ  ＫＪ，Ｊａｌａｎ  Ｒ，Ｐｌｅｖｒｉｓ  ＪＮ，Ｈａｙｅｓ  ＰＣ
Ｐｒｉｍａｒｙ  ｇｒａｆｔ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｆｔｅｒ  ｌｉｖｅｒ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ｆｒｏｍ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｔｏ  ｐｒｅｖｅｎｔ
Ｌｉｖｅｒ  Ｔｒａｎｓｐｌ  Ｓｕｒｇ．１９９７  Ｍａｒ；３（２）：１３７−４８
Ｍｅｌｉｓ  ＭＲ，Ａｒｇｉｏｌａｓ  Ａ
Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃｅｎｔｒａｌ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｐｅｎｉｌｅ  ｅｒｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｙａｗｎｉｎｇ．
Ｐｒｏｇ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｂｉｏｌ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，１９９７  Ａｕｇｕｓｔ；２１（６）：８９９−９２２
Ｓｃｈｕｌｔｈｅｉｓｓ  Ｄ，Ｓｔｉｅｆ  ＣＧ，Ｔｒｕｓｓ  ＭＣ，Ｊｏｎａｓ  Ｕ
Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｅｒｅｃｔｉｌｅ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ−ｃｕｒｒｅｎｔ  ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ａｎｄ  ｎｅｗ  ｖｉｅｗ
Ｗｉｅｎ  Ｍｅｄ  Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒ，１９９７；１４７（４−５）：１０２−４
Ｌｅｆｅｒ  ＡＭ，Ｌｅｆｅｒ  ＤＪ
Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ａｎｄ  ｃｅｌｌ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｍｉｃｒｏｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｉｓｃｈａｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ
Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｒｅｓ．１９９６  Ｏｃｔ；３２（４）：７４３−５１Ｋｕ  ＤＤ
Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ−ａｎｄ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｄｏｎｏｒ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ
Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１９９６；２６９：１０７−１９
Ｚｉｃｈｅ  Ｍ，Ｍｏｒｂｉｄｅｌｌｉ  Ｌ，Ｍａｓｉｎｉ  Ｅ，Ａｍｅｒｉｎｉ  Ｓ，Ｇｒａｎｇｅｒ  ＨＪ，Ｍａｇｇｉ  ＣＡ，Ｇｅｐｐｅｔｔｉ  Ｐ，Ｌｅｄｄａ  Ｆ，Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｎｄ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐｒｏｍｏｔｅｄ  ｂｙ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ  Ｐ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ  １９９４；９４（５）：２０３６−４４．
Ｚｉｃｈｅ  Ｍ，Ｍｏｒｂｉｄｅｌｌｉ  Ｌ，Ｍａｓｉｎｉ  Ｅ，Ｇｒａｎｇｅｒ  Ｈ，Ｇｅｐｐｅｔｔｉ  Ｐ，Ｌｅｄｄａ  Ｆ，．Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ＤＮＡ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｃｙｃｌｉｃ  ＧＭＰ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｐｏｓｔｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｖｅｎｕｌｅｓ．
Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９９３；１９２（３）：１１９８−２０３．
【００４７】
したがって、本発明による化合物は、以下のものに関連する疾患および／または機能不全の治療に使用することができる。
ａ）高血圧症、アンギナ、アテローム性動脈硬化症、心筋層の虚血など心臓血管系
ｂ）不妊症、月経困難症、早産、内分泌機能不全、骨粗鬆症など女性の生殖系、
ｃ）インポテンス、男性更年期症候群、内分泌機能不全、前立腺肥大など男性の生殖系、
ｄ）神経系および行動性障害、てんかん、アルツハイマー病など中枢神経系、
ｅ）自己免疫および免疫疾患、急性炎症、関節炎、移植拒絶反応など炎症性プロセス、
ｆ）腎臓（たとえば高血圧症、腎動脈の狭窄）、膵臓（たとえば糖尿病）、および膀胱（たとえば失禁）など内臓機能、
ｇ）湿疹、座瘡、傷および火傷など皮膚系、
ｈ）腫瘍の増大および拡散。
【００４８】
本発明による化合物はそれ自体で使用し、または他の薬剤と組み合わせて処方することができる（たとえば、非ステロイド系抗炎症薬、Ｄｅｌ  Ｓｏｌｄａｔｏ他、ＴｉＰＳ、２０：３１９〜３２３、１９９９）。
【００４９】
投与量は病気に関する患者の年齢、投与方法、および状態に応じて変わり得る。
一般に、効果的な投与量は、その患者の状態、病気および投与方法に応じて、患者の体重１ｋｇあたり０．０１５μｇから１．５０ｍｇまで数桁の範囲で変わり得る。
【００５０】
本発明の化合物は舌下投与、経粘膜投与、吸入投与、経口投与、筋肉内投与、静脈内投与、経皮投与、または局所投与によって投与することができる。
【００５１】
薬剤の剤形は投与の種類に応じて変わり、それは一般に当技術分野で公知の方法によって調製される。
【国際公開パンフレット】
2004518757.tif 000017
2004518757.tif 000018
2004518757.tif 000019
2004518757.tif 000020
2004518757.tif 000021
2004518757.tif 000022
2004518757.tif 000023
2004518757.tif 000024
2004518757.tif 000025
2004518757.tif 000026
2004518757.tif 000027
2004518757.tif 000028
2004518757.tif 000029
2004518757.tif 000030
2004518757.tif 000031
2004518757.tif 000032
2004518757.tif 000033
2004518757.tif 000034
【国際調査報告】
2004518757.tif 000035
2004518757.tif 000036
2004518757.tif 000037