(57)【要約】ジスタマイシンＡそのものから出発することによって、抗腫瘍活性を有するジスタマイシン誘導体を合成するための方法が記載される。本発明の方法は、式（ＩＩＩ）の新規な中間体を合成することを含む。【化１】2004502673.tif 000033
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）：
【化１】
2004502673.tif 000017
（式中、Ｐは水素原子または好適なアミノ保護基である）
のポリピロールアミド誘導体を合成するための方法であって、
ａ）下記式（ＩＩ）：
【化２】
2004502673.tif 000018
（式中、Ｐは好適なアミノ保護基である）
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基性条件下で加水分解し、得られたアミノ基を適正に保護する工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【化３】
2004502673.tif 000019
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）と反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）：
【化４】
2004502673.tif 000020
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｄ）下記式（Ｖ）：
【化５】
2004502673.tif 000021
（式中、Ｐ１およびＰ２は同一で、水素原子であるか、またはＰ１およびＰ２が水素原子以外であるときには、Ｐと同じアミノ保護基もしくはＰとは異なるアミノ保護基である）
の誘導体が得られるように、式（ＩＶ）の化合物を好適なグアニル化剤と反応させる工程；
ｅ）式（Ｉ）の誘導体が得られるように、グアニジノ基およびアミノ基を脱保護する工程
を含む方法。
【請求項２】
アミノ保護基のＰ、Ｐ１およびＰ２が、ホルミル、ベンジルおよびｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
アミノ保護基がｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
工程（ｄ）において、好適なグアニル化剤が、Ｓ−メチルイソチオウレア、Ｏ−メチルイソウレア、３，５−ジメチルピラゾール−１−カルボキサミジン、または下記式（ＶＩ）：
【化６】
2004502673.tif 000022
のＮ−Ｎ’−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’’−トリフリルグアニジンからなる群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
下記式（ＩＩＩ）：
【化７】
2004502673.tif 000023
（式中、Ｐは水素または好適なアミノ保護基である）
の化合物。
【請求項６】
Ｐが、ホルミル、ベンジルまたはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｐがｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
ジスタマイシン誘導体の合成における、請求項５に記載される式（ＩＩＩ）の化合物の使用。
【請求項９】
下記式（ＶＩＩ）：
【化８】
2004502673.tif 000024
（式中、Ｒは、下記の式からなる群より選択され、
【化９】
2004502673.tif 000025
これらの式中、
Ｒ１およびＲ２は塩素原子または臭素原子であり；
Ｒ３は、水素、塩素または臭素であり；
ＸおよびＹは同一または異なって、窒素またはＣＨ基から選択され；
Ｗはフェニレンであるか、またはＮ、ＯもしくはＳから選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を有するベンゾ縮合した５員複素環もしくは６員複素環であり、それらはともに、場合により、低級アルキル基によりさらに置換される）のジスタマイシン−グアニジンまたはその薬学的に許容される塩を合成するための方法であって、
ａ）下記式：
【化１０】
2004502673.tif 000026
（式中、Ｐは好適なアミノ保護基である）
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基性条件下で加水分解し、得られたアミノ基を適正に保護する工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【化１１】
2004502673.tif 000027
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）と反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）：
【化１２】
2004502673.tif 000028
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｄ）下記式（Ｖ）：
【化１３】
2004502673.tif 000029
（式中、Ｐ１およびＰ２は同一で、水素原子であるか、またはＰ１およびＰ２が水素原子以外であるときには、Ｐと同じアミノ保護基もしくはＰとは異なるアミノ保護基である）
の誘導体が得られるように、式（ＩＶ）の化合物を好適なグアニル化剤と反応させる工程；
ｅ）下記式（Ｉ）：
【化１４】
2004502673.tif 000030
（式中、Ｐは水素である）
の誘導体が得られるように、グアニジノ基およびアミノ基を脱保護する工程；
ｆ）式（ＶＩＩ）の化合物が得られるように、式（Ｉ）の化合物を、下記式：
Ｒ−ＣＯＺ　　　　　　（ＶＩＩＩ）
（式中、Ｒは上記に示される意味を有し、Ｚはヒドロキシまたは好適な脱離基である）
のカルボン酸誘導体でアシル化し、所望であれば、式（ＶＩＩ）の化合物を薬学的に許容される塩に転換する工程
を含む方法。
【請求項１０】
式（ＶＩＩＩ）の化合物におけるＺが、ヒドロキシ、臭素または塩素から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
下記式（ＶＩＩ）：
【化１５】
2004502673.tif 000031
（式中、Ｒは、下記式の基であり：
【化１６】
2004502673.tif 000032
（ここで、
Ｒ１は塩素原子または臭素原子であり；
ＸおよびＹは同一または異なって、窒素またはＣＨ基から選択される）
の化合物またはその薬学的に許容される塩を合成するための請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
下記の化合物：
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド（内部コードＰＮＵ１６６１９６）；
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−クロロアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド；
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド；
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−３−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−（｛［４−（｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゾイル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル］カルボニル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド；
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−３−（｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゾイル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；および
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（｛４−［（−３−｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］フェニル｝−２−プロペノイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド
からなる群より選択され、場合により薬学的に許容される塩の形態にある化合物を合成するための請求項９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ジスタマイシン誘導体の合成方法に関し、より詳細には、末端グアニジノ基を有する様々なジスタマイシン誘導体を合成する際の重要な中間体を合成するための方法に関する。
【０００２】
ジスタマイシンＡは、下記の式：
【０００３】
【化１７】
2004502673.tif 000002
によって示されるが、ピロールアミジン抗生物質のファミリーに属し、ＤＮＡ−ＡＴ配列と可逆的かつ選択的に相互作用し、そうすることで複製および転写の両方を妨げることが報告されている。参考文献については、Ｎａｔｕｒｅ、２０３、１０６４（１９６４）；ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、７（１９７０）９０；Ｐｒｏｇ．　Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ．　Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１５、２８５（１９７５）を参照のこと。
【０００４】
ジスタマイシンのいくつかの類似体が抗腫瘍剤としてこの分野では知られている。
【０００５】
一例として、本出願人自身の名義での国際特許出願公開ＷＯ９８／０４５２４には、抗腫瘍剤として有益な生物学的特性を有する新規なジスタマイシン誘導体が開示されており、その中で、ジスタマイシンのホルミル基はアクリロイル基によって置換され、そしてアミジノ基は、何種かの窒素含有末端基によって置換されており、グアニジノがその１つである。
【０００６】
このような後者の化合物を以降、ジスタマイシン−グアニジンと簡略化して示すが、これらはまた下記の特許出願明細書にも開示される：国際特許出願公開ＷＯ９７／２８１２３、同ＷＯ９７／４３２５８、同ＷＯ９９／５０２６５、同ＷＯ９９／５０２６６、同ＷＯ９９／６４４１３および同ＷＯ０１／４０１８１（これは英国特許出願第９９２８７０３．９号から優先権を主張する）、これらはすべて、本出願人自身の名義であり、そして参考として本明細書に組み込まれる。
【０００７】
このクラスの化合物の代表的なものは、場合により薬学的に許容される塩の形態にあるが、例えば、下記がある：
１．　Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド（内部コードＰＮＵ１６６１９６）；
２．　Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−クロロアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド；
３．　Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミド；
４．　Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−３−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
５．　Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−（｛［４−（｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゾイル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル］カルボニル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド；
５．　Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−３−（｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゾイル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド；
７．　Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（｛４−［（−３−｛４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］フェニル｝−２−プロペノイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド。
【０００８】
これらの化合物のすべておよびそれらの類似体は、公知の化学的手法に従って合成され、そのような方法には、適正に活性化されたカルボン酸誘導体と、所望するグアニジノ基を有するポリピロールアミド骨格との縮合反応が含まれることが必須である。この後者のグアニジノ中間体を合成するには、対応するニトロ誘導体の還元によって得られる２−カルボキシ−４−アミノピロール類に、実質的に数回連続してアシル化反応を行うかなり面倒な段階毎の手順を踏む。
【０００９】
ジスタマイシン−グアニジンを合成するための上記方法に対する一般的な参考文献については、例えば、上記の国際特許出願公開ＷＯ９８／０４５２４を参照のこと。
【００１０】
この点に関して、本発明者らは、驚くべきことに、前記のジスタマイシン−グアニジンが、ジスタマイシンＡそのものから出発することにより、所望する生成物を高収率かつ高純度で、そして限られた数の工程に従って得ることが可能な方法によって有利に合成され得ることを見出した。
【００１１】
従って、本発明の第一の目的は、下記式：
【００１２】
【化１８】
2004502673.tif 000003
（式中、Ｐは水素原子または好適なアミノ保護基である）
のポリピロールアミド誘導体を合成するための方法である。この方法は、
ａ）下記式（ＩＩ）：
【００１３】
【化１９】
2004502673.tif 000004
（式中、Ｐは好適なアミノ保護基である）
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基性条件下で加水分解し、得られたアミノ基を適正に保護する工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【００１４】
【化２０】
2004502673.tif 000005
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）と反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）：
【００１５】
【化２１】
2004502673.tif 000006
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｄ）下記式（Ｖ）：
【００１６】
【化２２】
2004502673.tif 000007
（式中、Ｐ１およびＰ２は同一で、水素原子であるか、またはＰ１およびＰ２が水素原子以外であるときには、Ｐと同じアミノ保護基もしくはＰとは異なるアミノ保護基である）
の誘導体が得られるように、式（ＩＶ）の化合物を好適なグアニル化剤と反応させる工程；
ｅ）式（Ｉ）の誘導体が得られるように、グアニジノ基およびアミノ基を脱保護する工程
を含む。
【００１７】
本発明の目的であるこの方法により、式（Ｉ）の化合物を、様々なジスタマイシン−グアニジンの合成における有用な中間体として、穏和な条件のもとで、高収率かつ高純度で得ることができる。
【００１８】
さらに、本発明の方法により、いくつかの工程を行う必要がなく、かつ／または望ましくない副生成物をもたらし得る中間体のアミノ誘導体を単離する必要がなく上記化合物を合成することが可能になる。
【００１９】
本明細書において、別途示されない限り、アミノ保護基Ｐ、Ｐ１およびＰ２の用語は、望ましくない副反応を行う可能性のあるフリーなアミノ官能基を保護するために、有機合成において従来から使用されている任意の保護基を意味している。
【００２０】
アミノ保護基の典型的な例には、例えば、ホルミル、ベンジルおよびｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルがある。
【００２１】
特に好ましいものとして、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルがある。
【００２２】
前記から、アミノ基の保護／脱保護を含む上記の反応工程は、いずれも従来の技術に従って実施されることが当業者には明らかである。
【００２３】
一例として、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノのアミノへの脱保護を、有機溶媒、例えば、ジクロロメタン、エタノール、メタノールまたはそれらの混合物中酸性条件下において、例えば、塩酸またはトリフルオロ酢酸の存在下において、約２０℃から約４０℃の範囲の温度で行うことができる。
【００２４】
工程（ａ）におけるジスタマイシンＡの加水分解は、低級アルコールなどの有機溶媒中において、好ましくはメタノール中において、通常の塩基性条件下で、例えば、水酸化ナトリウムを用いて行うことができる。
【００２５】
反応温度は約２０℃から約１００℃まで変化させることができ、そして反応時間は約１２時間から約７２時間まで変化させることができる。工程（ａ）において、式（ＩＩ）の保護されたアミノ基が、この分野で知られている通常の方法に従って得られる。
【００２６】
一例として、Ｐがホルミル基であるとき、反応は、ホルムアミドおよびギ酸エチルを用いて行われる。反応温度は、約１時間〜約２４時間の範囲の期間にわたって、約２０℃から約１２０℃まで変化させることができる。
【００２７】
Ｐがｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルであるとき、反応は、有機溶媒中において、例えば、ジクロロメタン（ＤＣＭ）や、テトラヒドロフラン、または好ましくはジメチルホルムアミド中、有機塩基、例えば、ジイソプロピルエチルアミンまたはトリエチルアミンの存在下、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートを用いて行われる。
【００２８】
反応温度は約２０℃から約１００℃まで、反応時間は約１時間から約２４時間まで変化させることができる。
【００２９】
工程（ｂ）において、式（ＩＩＩ）の化合物は、有機溶媒、例えば、ＴＨＦ、アセトニトリルまたはジメチルホルムアミド、好ましくはジメチルホルムアミド中において、過剰な例えば、１当量〜２当量の有機塩基、例えば、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）またはピリジンまたはより好ましくはトリエチルアミン（ＴＥＡ）の存在下、式（ＩＩ）の化合物を少し過剰な、例えば、１当量から２当量のジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）と反応させることによって得られる。
【００３０】
反応温度は約２０℃から約１００℃まで、反応時間は約１時間から約２４時間まで変化させることができる。
【００３１】
工程（ｃ）において、化合物（ＩＩＩ）の加水分解反応は、水／有機溶媒（例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、アセトニトリルまたはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）など）の混合物中において、塩基性条件下で、好ましくは、通常の水酸化物、例えば水酸化ナトリウムの存在下で行われる。水／ＤＭＦ混和物が好ましい。
【００３２】
反応は約０℃から約７０℃の範囲の温度で約１時間〜約２４時間にわたって行われる。
【００３３】
工程（ｄ）において、好適なグアニル化剤は市販のグアニル化剤であるか、または公知の方法に従って容易に合成されるグアニル化剤であり、例えば、Ｓ−メチルイソチオウレア、Ｏ−メチルイソウレア、３，５−ジメチルピラゾール−１−カルボキサミジン、または下記の式（ＶＩ）のＮ−Ｎ’−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’’−トリフリルグアニジンが挙げられる：
【００３４】
【化２３】
2004502673.tif 000008
この方法において使用されるグアニル化剤に従って、式（Ｖ）の化合物中のＰ１基およびＰ２基が、水素原子またはアミノ保護基から選択され得る。
【００３５】
一例として、式（ＶＩ）の上記グアニル化剤が使用されるとき、Ｐ１およびＰ２はともにｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を表す。
【００３６】
工程（ｄ）の反応は、有機溶媒中において、好ましくはメタノール中において、過剰な有機塩基の存在下、例えば、２当量から４当量のジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）またはより好ましくはトリエチルアミン（ＴＥＡ）の存在下、−２０℃から約１００℃よりなる温度範囲で行われる。
【００３７】
本発明の方法の試薬はすべて市販されているか、または公知の方法に従って容易に合成することができる。
【００３８】
一例として、式（ＶＩ）の上記化合物Ｎ−Ｎ’−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’’−トリフリルグアニジンは、Ｊ．　Ｏｒｇ．　Ｃｈｅｍ．１９９８、６３−３８０４−５に報告されるようにして合成することができる。
【００３９】
同様に、出発物質のジスタマイシンＡは、例えば、ＡｒｃａｍｏｎｅらによりＮａｔｕｒｅ、２０３、１０６４（１９６４）に記載されるような微生物学的プロセスに従って合成することができる。
【００４０】
本発明の方法のさらなる局面によれば、下記式（ＩＩＩ）：
【００４１】
【化２４】
2004502673.tif 000009
（式中、Ｐは水素または好適なアミノ保護基であり、好ましくは、ホルミル、ベンジルまたはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである）
の中間体化合物は新規であり、従って、本発明のさらなる目的である。
【００４２】
上記に記されるように、式（Ｉ）の化合物は、抗腫瘍活性を有するジスタマイシン−グアニジン合成における有用な中間体である。
【００４３】
従って、本発明のさらなる目的は、下記式のジスタマイシン−グアニジンまたはその薬学的に許容される塩を合成するための方法である：
【００４４】
【化２５】
2004502673.tif 000010
（式中、Ｒは、下記の式からなる群より選択され、
【００４５】
【化２６】
2004502673.tif 000011
これらの式中、
Ｒ１およびＲ２は塩素原子または臭素原子であり；
Ｒ３は、水素、塩素または臭素であり；
ＸおよびＹは同一または異なって、窒素原子またはＣＨ基から選択され；
Ｗはフェニレンであるか、またはＮ、ＯもしくはＳから選択される１個もしくは２個のヘテロ原子を有するベンゾ縮合した５員複素環もしくは６員複素環であり、それらはともに、場合により、低級アルキル基によりさらに置換される）。
【００４６】
この方法は、
ａ）下記式（ＩＩ）：
【００４７】
【化２７】
2004502673.tif 000012
（式中、Ｐは好適なアミノ保護基である）
の化合物が得られるように、ジスタマイシンＡを塩基性条件下で加水分解し、得られたアミノ基を適正に保護する工程；
ｂ）下記式（ＩＩＩ）：
【００４８】
【化２８】
2004502673.tif 000013
の化合物が得られるように、式（ＩＩ）の化合物をジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）と反応させる工程；
ｃ）下記式（ＩＶ）：
【００４９】
【化２９】
2004502673.tif 000014
の誘導体が得られるように、式（ＩＩＩ）の化合物を塩基性条件下で加水分解する工程；
ｄ）下記式（Ｖ）：
【００５０】
【化３０】
2004502673.tif 000015
（式中、Ｐ１およびＰ２は同一で、水素原子であるか、またはＰ１およびＰ２が水素原子以外であるときには、Ｐと同じアミノ保護基もしくはＰとは異なるアミノ保護基である）
の誘導体が得られるように、式（ＩＶ）の化合物を好適なグアニル化剤と反応させる工程；
ｅ）下記式（Ｉ）：
【００５１】
【化３１】
2004502673.tif 000016
（式中、Ｐは水素である）
の誘導体が得られるように、グアニジノ基およびアミノ基を脱保護する工程；
ｆ）式（ＶＩＩ）の化合物が得られるように、式（Ｉ）の化合物を、下記式：
Ｒ−ＣＯＺ　　　　　　（ＶＩＩＩ）
（式中、Ｒは上記に示される意味を有し、Ｚはヒドロキシまたは好適な脱離基である）
のカルボン酸誘導体でアシル化し、所望であれば、式（ＶＩＩ）の化合物を薬学的に許容される塩に転換する工程
を含む。
【００５２】
工程（ｆ）によるアシル化反応は従来の技術に従って行われる。
【００５３】
一例として、式（Ｉ）の化合物と、Ｚがヒドロキシである式（ＶＩＩＩ）の化合物との反応は、好ましくは有機溶媒、例えばジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、エタノール、ベンゼンまたはピリジン中において、有機塩基または無機塩基、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムもしくは重炭酸カリウムの存在下および縮合剤、例えばＮ−エチル−Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび／またはヒドロキシベンゾトリアゾール水和物の存在下で行われる。
【００５４】
反応温度は、約１時間から約２４時間の時間にわたって、約−１０℃から約１００℃まで変化させることができる。
【００５５】
Ｚがハロゲン原子、好ましくは塩素または臭素である式（ＶＩＩＩ）の化合物が使用されるときには、類似した操作条件が適用される。
【００５６】
この反応は、具体的には、ジメチルホルムアミド、ジオキサン、ピリジン、ベンゼン、テトラヒドロフランなどの有機溶媒中またはその水性混和物中で、場合により塩基の存在下で行われる。
【００５７】
反応は、約２時間から約４８時間の範囲の時間にわたって、約０℃から約１００℃の範囲の温度で行われる。
【００５８】
式（ＶＩＩ）の化合物をその薬学的に許容される塩へと場合によって転換するには、従来の方法を用いることができる。
【００５９】
式（ＶＩＩＩ）の中間体化合物は公知であるか、または例えば、上記の特許出願に報告されるような公知の方法に従って容易に合成される。
【００６０】
本発明のこの後者の局面によれば、そのようにして得られる好ましいジスタマイシン−グアニジンは、Ｒ基にα−ブロモアクリロイル基またはα−クロロアクリロイル基を含むものである。特に好ましいものとして、上記のα−ブロモアクリロイル−ジスタマイシン誘導体のＰＮＵ１６６１９６が挙げられる。
【００６１】
ＰＮＵ１６６１９６を合成するための本発明の好ましい実施形態によれば、適量のジスタマイシンＡが、対応するアミノ誘導体が得られるように塩基性条件下で加水分解され、その後、アミノ誘導体は、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ誘導体（ＩＩ）として通常的に保護される。この後者を、その後適量の、例えば少し過剰なＤＰＰＡと反応させて、式（ＩＩＩ）の新規な誘導体を得る。式（ＩＩＩ）の化合物は、その後、塩基性条件下で式（ＩＶ）の化合物へと加水分解され、式（ＩＶ）の化合物は通常の方法に従って適正に脱保護され、その後、所望する化合物が得られるように、好適な量、例えば１：１〜１：２からなる（Ｉ）：（ＶＩＩ）のモル比で式（ＶＩＩ）の１−メチル−４−（α−ブロモアクリロイルアミド）ピロール−２−カルボニル塩化物と反応させられる。
【００６２】
何ら限定することなく本発明をよりよく説明するために、下記の実施例を本明細書に示す。
【００６３】
実施例１
Ｎ−［（４−｛［（４−｛［（４−アミノ−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）カルボニル］アミノ｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）カルボニル］−β−アラニン塩酸塩の合成
メタノール（４００ｍｌ）中、ジスタマイシンＡ（１０ｇ）の溶液に２０％のＮａＯＨ（４０ｍｌ）を加えた。反応液を２４時間還流し、その後、３７％のＨＣｌで酸性化した。有機溶媒を真空下で除き、淡褐色の沈殿物を得て、これを冷水（１００ｍｌ）で洗浄した。固体を真空下で乾燥して、表題化合物（９ｇ；収率９５％）を褐色の粉末として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　４５６（ｌ００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．１０（ｓ、１Ｈ）、９．９４（ｂｓ、４Ｈ）、８．０５（ｂｔ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．４０〜３．２０（ｍ、２Ｈ）、２．４８〜２．４１（ｍ、２Ｈ）。
【００６４】
実施例２
Ｎ−｛［４−（｛［４−（｛［４−（ホルミルアミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル］カルボニル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル］カルボニル｝アミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル］カルボニル｝−β−アラニンの合成
実施例１で得られた化合物（４ｇ）、ホルムアミド（１２ｍｌ）およびギ酸エチル（１２ｍｌ）からなる溶液を９０℃で５時間撹拌した。有機溶媒を真空下で除き、褐色の残渣を水（１００ｍｌ）で処理して、懸濁液を１時間撹拌した。懸濁液をろ過し、固体を冷水（２０ｍｌ）で洗浄して、４０℃で真空乾燥した後、表題化合物（６．８ｇ；収率９０％）を褐色の粉末として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　４８２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）；３５９（１５、［Ｍ＋Ｈ−ＮＨ２（ＣＨ２）２ＣＯＯＨ］＋）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．１０（ｓ、１Ｈ）、９．９５（ｓ、１Ｈ）、９．９２（ｓ、１Ｈ）、８．１３（ｓ、１Ｈ）、８．０５（ｂｔ、Ｊ＝５．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０４（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．９２（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．４０〜３．２０（ｍ、２Ｈ）、２．４６〜２．４２（ｍ、２Ｈ）。
【００６５】
実施例３
Ｎ−（｛４−［（｛４−［（｛４−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル｝カルボニル）−β−アラニンの合成
乾燥ＤＭＦ（１５０ｍｌ）中、実施例１の化合物（７ｇ）の溶液に、ＴＥＡ（４ｍｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（６．２ｇ）を加えた。３時間後、水（１００ｍｌ）を加え、溶液をさらに３０分間撹拌した。ＤＭＦを真空下で除き、水相を１％のＣＨ３ＣＯＯＨでｐＨ＝４に酸性化して、懸濁液を約１時間撹拌した。懸濁液をろ過し、固体を水（１００ｍｌ）で洗浄して、４０℃で真空乾燥した後、表題化合物（６．８ｇ；収率９０％）を褐色の粉末として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　５５６（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）；５００（１５、［Ｍ＋Ｈ−（ＣＨ３）２−ＣＨ−ＣＨ２］＋）；４５６（３５、［Ｍ＋Ｈ−（ＣＨ３）２−ＣＨ−ＣＨ２−ＣＯ２］＋）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．８４（ｓ、１Ｈ）、９．８２（ｓ、１Ｈ）、９．０５（ｓ、１Ｈ）、７．９８（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０１（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｂｓ、１Ｈ）、６．８３（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｂｓ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｓ、３Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）、３．３９〜３．３２（ｍ、２Ｈ）、２．４３〜２．４８（ｍ、２Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【００６６】
実施例４
１−メチル−５−［（｛１−メチル−５−［（｛１−メチル−５−［（２−オキソ−１−イミダゾリジニル）カルボニル］−１Ｈ−ピロール−３−イル｝アミノ）カルボニル］−１Ｈ−ピロール−３−イル｝アミノ）カルボニル］−１Ｈ−ピロール−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
乾燥ＤＭＦ（１００ｍｌ）中、実施例３の化合物（６．５ｇ）の溶液を８０℃に加熱し、これにＴＥＡ（１．８ｍｌ）およびＤＰＰＡ（２．７７ｍｌ）を滴下して加えた。この溶液を８０℃で５時間撹拌した。溶液を真空下で濃縮して、２％ＣＨ３ＣＯＯＨ溶液（２００ｍｌ）を加えた。懸濁液を１時間撹拌し、水相をろ過により除き、沈殿物を水（１００ｍｌ）で洗浄した。５０℃で真空乾燥することにより、表題化合物（４．２ｇ；収率６５％）を淡褐色の粉末として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　５５３（６０、［Ｍ＋Ｈ］＋）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．８７（ｓ、１Ｈ）、９．８３（ｓ、１Ｈ）、９．０５（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｂｓ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｂｓ、１Ｈ）、６．８１（ｂｓ、１Ｈ）、６．７２（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５〜３．８０（ｍ、２Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｓ、３Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．３２〜３．３７（ｍ、２Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【００６７】
類似の手順によって、そして適切な出発物質を使用することによって、下記の化合物を得た：
１−メチル−Ｎ−｛１−メチル−５−［（｛１−メチル−５−［（２−オキソ−１−イミダゾリジニル）カルボニル］−１Ｈ−ピロール−３−イル｝アミノ）カルボニル］−１Ｈ−ピロール−３−イル｝−４−（２−オキソエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　４８１（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．０５（ｓ、１Ｈ）、９．９３（ｓ、１Ｈ）、９．９２（ｓ、１Ｈ）、８．１４（ｍ、１Ｈ）、７．５５（ｂｓ、１Ｈ）、７．３９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．９２（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．７８（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．８８〜３．８２（ｍ、２Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．７４（ｓ、３Ｈ）、３．３８〜３．４２（ｍ、２Ｈ）。
【００６８】
実施例５
５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−アミノエチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル＝トリフルオロ酢酸塩の合成
乾燥ＤＭＦ（５０ｍｌ）中、実施例４の化合物（３ｇ）の溶液に１ＮのＮａＯＨ（７．５ｍｌ）および水（３ｍｌ）を加えて、溶液を室温で２時間撹拌した。有機溶媒を真空下で除き、水（６０ｍｌ）を加えた。その後、混合物を酢酸エチル（３×１５０ｍｌ）で抽出し、有機相を合わせて、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、トリフルオロ酢酸で酸性化し、そして真空下で濃縮して、表題化合物（１．７ｇ、収率５４％）を黄色の粉末として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　５２７（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４７１（３５）、４２７（５５）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：９．８５（ｓ、１Ｈ）、９．８２（ｓ、１Ｈ）、９．０５（ｓ、１Ｈ）、８．０１（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｂｓ、１Ｈ）、６．８２（ｂｓ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｓ、３Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）、３．２６〜３．２０（ｍ、２Ｈ）、２．７４（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）。
【００６９】
類似の手順によって、そして適切な出発物質を使用することによって、下記の化合物を得た：
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−アミノエチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−（ホルミルアミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド＝トリフルオロ酢酸塩
実施例６
５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［ｔ−ブトキシカルボニルアミノ（ｔ−ブトキシカルボニルイミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
実施例６の化合物（２ｇ）と、ＴＥＡ（８６０μｌ）とをＥｔＯＨ（３０ｍｌ）中に含む溶液に、Ｊ．　Ｏｒｇ．　Ｃｈｅｍ．１９９８、６３、３８０４〜３８０５に報告されるようにして合成されたＮ，Ｎ’−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ’’−トリフリルグアニジン（１ｇ）を加えた。この混合物を４０℃で３時間撹拌して、溶媒を真空下で蒸発させ、そして残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ−メタノール、９：１）によって精製して、表題化合物（１．６ｇ、収率９０％）を象牙色の粉末として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　７６９（４０、［Ｍ＋Ｈ］＋）、６６９（２０）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１１．４７（ｓ、１Ｈ）、９．８４（ｓ、１Ｈ）、９．８２（ｓ、１Ｈ）、９．０５（ｂｓ、１Ｈ）、８．３９（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．０８（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１５（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０１（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｍ、２Ｈ）、６．８２（ｂｓ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｓ、３Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）、３．４８〜３．４０（ｍ、２Ｈ）、３．３３（ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．４５（ｓ、９Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）、１．３８（ｓ、９Ｈ）。
【００７０】
類似の手順によって、そして適切な出発物質を使用することによって、下記の化合物を得た：
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［ｔ−ブトキシカルボニルアミノ（ｔ−ブトキシカルボニルイミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−（ホルミルアミノ）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド
実施例７
４−アミノ−Ｎ−（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド＝二塩酸塩の合成
実施例６の化合物（１．５ｇ）をＨＣｌ／ＥｔＯＨ溶液（２０ｍｌ）に溶解して、室温で１２時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させて、表題化合物（９５０ｍｇ、収率９０％）を褐色の粉末として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　４６９（１５、［Ｍ＋Ｈ］＋）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．３８〜１０．１１（ｂ．ｓ．、４Ｈ）、９．９８（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｂ．ｓ．、１Ｈ）、８．１９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３（ｂ．ｓ．、１Ｈ）、７．６３（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０〜７．００（ｂ．ｓ．、４Ｈ）、７．２８（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．２０（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．９２（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．２８（ｍ、４Ｈ）。
【００７１】
実施例８
Ｎ−（５−｛［（５−｛［（５−｛［（２−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝エチル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）アミノ］カルボニル｝−１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−４−［（２−ブロモアクリロイル）アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド（内部コードＰＮＵ１６６１９６）
国際特許出願公開ＷＯ９８／０４５２４に報告されるようにして合成した１−メチル−４−（α−ブロモアクリルアミド）ピロール−２−カルボキシル塩化物を５００ｍｇ含むベンゼン１５ｍｌの溶液を、実施例６の化合物（５００ｍｇ）および１６４ｍｇのＮａＨＣＯ３を含む５ｍｌのＨ２Ｏ溶液に加えた。溶液を室温で激しく８時間撹拌し、その後、真空下で蒸発させて、粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール：８／２）によって精製して、４４０ｍｇの表題化合物を黄色の固体として得た。
ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ　７２３（３２、［Ｍ＋Ｈ］＋）。
ＰＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．３０（ｓ、１Ｈ）、９．９５（ｓ、１Ｈ）、９．９２（ｓ、１Ｈ）、９．９０（ｓ、１Ｈ）、８．１０（ｔ、Ｊ＝５．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．５６（ｔ、Ｊ＝５．９、１Ｈ）、７．２（ｂ．ｓ．、４Ｈ）、６．９〜７．３（ｍ、８Ｈ）、６．６８（ｄ、Ｊ＝２．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．２１（ｄ、Ｊ＝２．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｂ．ｓ．、４Ｈ）。
【国際公開パンフレット】
2004502673.tif 000034
2004502673.tif 000035
2004502673.tif 000036
2004502673.tif 000037
2004502673.tif 000038
2004502673.tif 000039
2004502673.tif 000040
2004502673.tif 000041
2004502673.tif 000042
2004502673.tif 000043
2004502673.tif 000044
2004502673.tif 000045
2004502673.tif 000046
2004502673.tif 000047
2004502673.tif 000048
2004502673.tif 000049
2004502673.tif 000050
2004502673.tif 000051
2004502673.tif 000052
2004502673.tif 000053
2004502673.tif 000054
2004502673.tif 000055
2004502673.tif 000056
2004502673.tif 000057
2004502673.tif 000058
2004502673.tif 000059
2004502673.tif 000060
2004502673.tif 000061
2004502673.tif 000062
【国際調査報告】
2004502673.tif 000063
2004502673.tif 000064
2004502673.tif 000065