(57)【要約】本発明は、エラスターゼ、すなわち腫瘍組織において特に見られ得る酵素によって選択的に切断することができる好ましい連結単位によるαｖβ３インテグリン拮抗薬との連結の結果として、腫瘍特異的な作用を有する細胞分裂停止薬に関する。本発明はまた、該好ましい連結単位が、生物学的な液体中での細胞分裂停止剤およびαｖβ３インテグリン拮抗薬の接合体の十分な安定性、および同時に該細胞分裂停止薬の放出を伴うその特異的な酵素によるかまたは加水分解による切断可能性の結果として腫瘍細胞中での所望の細胞内作用を与えることに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：ＣＴ−ＬＩ−Ｓｐx−ＬＡ      （Ｉ）
の接合体およびその立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
［式中、
ＣＴは、細胞毒性基、細胞分裂停止基および細胞分裂停止誘導体の基の群から選ばれる一価の基であって、このものは各々更にヒドロキシル、カルボキシルまたはアミノ基を有し得る。
ＬＩは、式：−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４q−      （ＩＩＩ）
の二価のペプチド基であって、ここで
ＡＡ１〜ＡＡ４基は互いに独立してＤ−またはＬ−立体配置であるアミノ酸残基であり、これらは各々場合により保護基を有し得て、そしてｑは０または１である。
Ｓｐは、カルボニル基またはチカルボニル基である。
ｘは、０または１である。
ＬＡは、αvβ3インテグリン受容体に向く一価の非ペプチド性基であって、このものは式：
【化１】
2004529118.tif 000064
に相当する基である。
上記式中、
基（ＩＩ）と、Ｓｐ（ｘが１である場合）またはＬＩ（ｘが０である場合）との間の結合は、
ａ）式（ＩＩ）において十字で示す炭素原子による基（ＩＩ）とＬＩとの間の結合、
ｂ）（ｉｉｉ）Ｙによるか（ｐが１である場合にのみ可能）
（ｉｉ）Ｒ10が結合している炭素原子によるか、または好ましくは
（ｉｉｉ）Ｒ10による
基（ＩＩ）とＳＰまたはＬＩとの間の結合
の変形の一つとして位置する。
式（ＩＩ）中、
Ｒ7は、
ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシ、置換もしくは非置換のシクロアルコキシ、置換もしくは非置換のアリールオキシ、または飽和もしくは不飽和で場合により置換されたヘテロサイクリルオキシであるか；あるいは、
基（ＩＩ）が十字で示される炭素原子によって直接に該接合体の残りと結合する場合には単結合である。
Ｒ8は、
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルコキシ、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｒ9および（ｉｉ）Ｒ8と結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の炭素環またはヘテロ環を形成する。
Ｒ9は、
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルコキシ、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｒ8と、および（ｉｉ）Ｒ9が結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の炭素環またはヘテロ環を形成する。
Ｒ10は、
ａ）基（ＩＩ）が十字で示される炭素原子によるかまたはＹによって直接に該接合体の残りと結合する場合には、−ＳＯ2Ｒ101、−ＣＯ−Ｒ101、−ＣＯ−ＯＲ102、−ＣＯ−ＮＲ101Ｒ103、−ＣＳ−ＮＲ101Ｒ103の一価の基の１つであるか；
ｂ）基（ＩＩ）がＲ10によって該接合体の残りと結合する場合には、−ＳＯ2Ｒ101、−ＣＯ−Ｒ101、−ＣＯＯＲ102、−ＣＯ−ＮＲ101Ｒ103、−ＣＳ−ＮＲ101Ｒ103の二価の基の１つであるか；あるいは、
ｃ）基（ＩＩ）が、Ｒ11が結合している窒素原子によって該接合体の残りと結合する場合には、単結合である。
Ｒ101は、
ａ）基（ＩＩ）がＲ101によって該接合体の残りと結合しない場合には、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであり；あるいは、
ｂ）基（ＩＩ）がＲ101によって該接合体の残りと結合する場合には、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリレン、および飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロシクロ−ジイルから選ばれる二価の基である。
Ｒ102は、
ａ）基（ＩＩ）がＲ102によって該接合体の残りと結合しない場合には、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであり；あるいは、
ｂ）基（ＩＩ）がＲ102によって該接合体の残りと結合する場合には、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリレン、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロシクロ−ジイルから選ばれる二価の基である。
Ｒ103は、水素またはＲ101の定義の１つである。
Ｒ11は、（ｉ）水素、（ｉｉ）置換もしくは非置換のアルキル、（ｉｉｉ）１分子当たり４個までのヘテロ原子を含むことができる飽和もしくは不飽和（非芳香族性もしくは芳香族性）の環状化合物の基、または（ｉｖ）上記の群（ｉｉｉ）の基で置換されたアルキルである。
Ｌは、−(ＣＨ2)nＮＨＳＯ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＳＯ2ＮＨ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＮＨ−ＣＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＯＮＨ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＯＣＨ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2Ｏ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＯＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＯＯＣ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2ＣＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＯＣＨ2(ＣＨ2)O−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−(ＣＨ2)nＳＣＨ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2Ｓ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2ＳＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＳＯＣＨ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2ＳＯ2(ＣＨ2)O−または−(ＣＨ2)nＳＯ2ＣＨ2(ＣＨ2)O−であって、ここでｎおよびｏは０または１であり、ｎ＋ｏは１以下である。
Ｒ12は、
水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ13またはＲ14と、および（ｉｉ）Ｒ12が結合する窒素原子と一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換のヘテロサイクリルを形成する。
Ｘは、Ｎ、ＯまたはＳである。
ｙは、ＸがＯまたはＳである場合には０であり、またＸがＮである場合には１である。
Ｒ13は、水素、置換もしく非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、シアノ、ニトロ、−ＣＯ−Ｒ104または−ＣＯ−ＯＲ105であるか；あるいは、
（ｉ）Ｘと、および（ｉｉ）Ｒ12、Ｒ14またはＲ15のうちの１つと一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る置換もしくは非置換のヘテロシクロサイクリルを形成する。
Ｒ104は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または更にヘテロ原子を含み得る飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルである。
Ｒ105は、水素またはＲ104の定義の１つである。
Ｙは、ＮまたはＳである。
Ｒ14は、
（ｉ）水素、（ｉｉ）置換または非置換のアルキル、（ｉｉｉ）１分子当たり４個までのヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和（非芳香族性または芳香族性）の環状化合物の基、（ｉｖ）上記の群（ｉｉｉ）で置換されたアルキルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ12またはＲ13の１つと一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換のヘテロサイクリルを形成する。
ｚは、ＹがＳである場合には０であり、またＹがＮである場合には１である。
ｐは、０または１である。
Ｒ15は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであるか；
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ14（ｐおよびｚが１である場合）、Ｒ12またはＲ13の１つと一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換のヘテロサイクリルを形成するか；あるいは、
基（ＩＩ）がＹによって該接合体の残りと結合する場合には、単結合である。
Ｒ16〜Ｒ19は各々独立して、シアノ、ハロゲン、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルコキシ、または置換もしくは非置換のシクロアルキルである。そして、
ｇ、ｈ、ｉおよびｋは各々独立して、０または１である］
【請求項２】
ＬＩは、式：−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４q−      (ＩＩＩ)
の基である、請求項１に記載の接合体、およびその立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物であって、ここで
ＡＡ１は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、セリン、リシン、オルニチンおよびフェニルアラニンから選ばれるＤ−またはＬ−立体配置である天然に存在するアミノ酸の残基であり；
ＡＡ２は、アラニン、バリン、フェニルアラニン、チロシン、トレオニン、セリン、イソロイシン、リシン、グルタミン酸塩、ヒスチジン、グリシン、アルギニン、アスパラギン、グルタミン、Ｓ−メチルシステイン、メチオニン、アスパラギン酸、トリプトファン、プロリン、オルニチンおよびロイシンから選ばれるＤ−またはＬ−の立体配置である天然に存在するアミノ酸の残基であり；
ＡＡ３およびＡＡ４（ｑが１である場合）は各々独立して、アラニン、バリン、フェニルアラニン、チロシン、セリン、イソロイシン、リシン、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、グリシン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、トリプトファン、プロリン、オルニチン、メチオニン、Ｓ−メチルシステイン、ノルバリンおよびロイシンから選ばれるＤ−またはＬ−の立体配置である天然に存在するアミノ酸の残基であり；
ｑは、０または１であり；そして、
基：ＣＴ、ＳｐおよびＬＡは、請求項１において定義する通りである。
【請求項３】
ＬＩは、式：−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４q−      （ＩＩＩ）の基であって、ここで
ＡＡ１は、バリン、ロイシンまたはイソロイシンの二価の残基であり；
ＡＡ２は、二価のプロリン残基であり；
ＡＡ３／ＡＡ４は各々独立して、アラニン、ノルバリン、ヒスチジン、グリシン、アスパラギンまたはアスパラギン酸塩の二価の残基であり；
ｑは、０または１であり；そして、
基：ＣＴ、ＳｐおよびＬＡは、請求項１または２のいずれかにおいて定義する通りである、
請求項１または２のいずれかの１つに記載の接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
【請求項４】
ＣＴは、カンプトテシンまたはカンプトテシン誘導体の基であって、このものはＣ20炭素原子上のヒドロキシル基から、またはアミノもしくはヒドロキシ基などの該分子に存在する官能基から水素原子を引き抜くことによって形式的に形成され；
ＬＩおよびＳＰは、請求項１〜３のいずれか１つにおいて定義する通りであり；
ＬＡは、αvβ3インテグリン受容体に向く式（ＩＩ）の非ペプチド基であり；そして、
Ｒ7は、
メトキシ、エトキシ、プロピキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ネオペントキシ、ヘキシオキシ、シクロプロポキシ、シクロプロピルメトキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ、シクロヘキシオキシ、フェノキシ、トリルオキシ、ベンジルオキシまたはそれらの置換誘導体であり、あるいは、
好ましくはヒドロキシルまたは単結合（基（ＩＩ）が十字で示される炭素原子によって該接合体の残りと結合する場合）であり；
Ｒ8は、
水素、ヒドロキシル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシ、ヘキシオキシ、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジル、ベンジルオキシまたはそれらの置換誘導体であるか、あるいは、
（ｉ）Ｒ9と、および（ｉｉ）Ｒ8が結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の３〜６員の炭素環またはヘテロ環を形成し；
Ｒ9は、
水素、ヒドロキシル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシ、ヘキシオキシ、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体であるか、あるいは、
（ｉ）Ｒ8と、および（ｉｉ）Ｒ9が結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の３〜６員の炭素環またはヘテロ環を形成し；
Ｒ10は、請求項１〜３のいずれか１つにおいて定義する通りであり；
Ｒ101は、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルもしくはそれらの誘導体、−Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、−Ｃ6(ＣＨ3)5、−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２,３−ジクロロフェニル、２,４−ジクロロフェニル、３,４−ジクロロフェニル、２,５−ジクロロフェニル、３,５−ジクロロフェニル、２,６−ジクロロフェニル、４−クロロフェニルメチル、２,４−ジクロロフェニルメチル、２,６−ジクロロフェニルメチル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、４−カルボキシフェニル、２−メトキシカルボニルフェニルメチル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニル、４−トリフルオロメトキシフェニル、ベンジル、２−アセトアミド−４−メチルチアゾール−５−イル、フェニルエチル、１−フェニルプロピル、(Ｓ)−(＋)−カンファー１０−イル、(Ｒ)−(−)−カンファ−１０−イル、２−チオフェニル、４−メトキシフェニル、３,５−ジメトキシフェニル、３−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル、４−プロピルフェニル、２,５−ジメチルフェニル、２−メトキシ−５−メチルフェニル、２,３,５,６−テトラメチルフェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−フルオロフェニル、２,４−ジフルオロフェニル、２−クロロ−６−メチルフェニル、２−クロロ−４−フルオロフェニル、２,５−ジメトキシフェニル、３,４−ジメトキシフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、２−トリフルオロメチルフェニル、２−アルキルスルホニルフェニル、２−アリールスルホニルフェニル、３−(Ｎ−アセチル−６−メトキシ)アニリノ、４−アセトアミドフェニル、２,２,２−トリフルオロエチル、５−クロロ−３−メチルベンゾチアゾール−２−イル、Ｎ−メトキシカルボニルピペリジン−３−イル、チオフェン−２−イル、イソオキサゾール−５−イル、エトキシ、２−クロロピペリジン−３−イル、ピリジン−３−イル、ベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イル、１−アダマンチル、４−クロロフェノキシメチル、２−クロロピリジン−５−メチル、５,７−ジメチル−１,３,４−トリアザインドリジン−２−イル、(Ｓ)−カンファン−１−イル、(Ｒ)−カンファン−１−イルまたは８−キノリニルから選ばれる一価の基であるか、あるいは、
上記の一価のＲ101基から水素を引き抜くことによって形式的に得られる二価の基であって、それによって（二価の基の）基（ＩＩ）は該接合体の残りと結合し得て；
Ｒ102は、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、−Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、−Ｃ6(ＣＨ3)5、−ＣＨ2Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２,３−ジクロロフェニル、２,４−ジクロロフェニル、３,４−ジクロロフェニル、２,５−ジクロロフェニル、３,５−ジクロロフェニル、２,６−ジクロロフェニル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、４−クロロフェニルメチル、２,４−ジクロロフェニルメチル、２,６−ジクロロフェニルメチル、２−メトキシカルボニルフェニルメチル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニル、４−トリフルオロメトキシフェニル、２−アセトアミド−４−メチルチアゾール−５−イル、フェニルエチル、１−フェニルプロピル、(Ｓ)−(＋)−カンファ−１０−イル、(Ｒ)−(−)−カンファ−１０−イル、２−フェニルエテニル、２−チオフェニル、４−メトキシフェニル、３,５−ジメトキシフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル、４−プロピルフェニル、２,５−ジメチルフェニル、２−メトキシ−５−メチルフェニル、２,３,５,６−テトラメチルフェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−フルオロフェニル、２,４−ジフルオロフェニル、２−クロロ−６−メチルフェニル、２−クロロ−４−フルオロフェニル、２,５−ジメトキシフェニル、３,４−ジメトキシフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、２−トリフルオロメチルフェニル、２−アルキルスルホニルフェニル、２−アリールスルホニルフェニル、３−(Ｎ−アセチル−６−メトキシ)アニリン、４−アセトアミドフェニル、２,２,２−トリフルオロエチル、５−クロロ−３−メチルベンゾチアゾール−２−イル、Ｎ−メトキシカルボニルピペリジン−３−イル、チオフェン−２−イル、イソオキサゾール−５−イル、エトキシ、２−クロロピリジン−３−イル、ピリジン−３−イル、ベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イル、１−アダマンチル、４−クロロフェノキシメチル、２,２−ジメチルエテニル、２−クロロピリジン−５−メチル、５,７−ジメチル−１,３,４−トリアザインドリジン−２−イル、(Ｓ)−カンファン−１−イル、(Ｒ)−カンファン−１−イルまたは８−キノリニルから選ばれる一価の基であるか、あるいは、
上記の一価のＲ102基から水素を引き抜くことによって形質的に得られる二価の基であって、それによって（二価の基の）基（ＩＩ）は該接合体の残りと結合することができ；
Ｒ103は、水素またはＲ101の定義の１つであり、それによってＲ103基が二価である場合には基（ＩＩ）は該接合体の残りと結合することができ；
Ｒ11は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、あるいは以下の基：
【化２】
2004529118.tif 000065
の１つであり；
Ｌは、−ＮＨＳＯ2−、−ＣＨ2ＮＨＳＯ2−、−ＮＨＳＯ2ＣＨ2−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＣＨ2ＳＯ2ＮＨ−、−ＳＯ2ＮＨＣＨ2−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＨ2ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨＣＯＣＨ2−、−ＣＯＮＨ−、−ＣＨ2ＣＯＮＨ−、−ＣＯＮＨＣＨ2−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ2ＯＣＨ2、−ＯＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2Ｏ−または−ＣＨ2ＣＨ2Ｏ−であり；
Ｒ12は、
水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、フェニル、トリル、ベンジルもしくはそれらの置換誘導体、または基：（ａ１）〜（ａ２８）のいずれか１つであるか、あるいは、
（ｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ13もしくはＲ14の１つと、および（ｉｉ）Ｒ12が結合する窒素原子と一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る置換または非置換の飽和または不飽和の４〜６員のヘテロ環基を形成し；
Ｘは、Ｎ、ＯまたはＳであり；
ｐは、０または１であり；
Ｒ13は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ニトロ、シアノ、−ＣＯＲ104、−ＣＯ−ＯＲ105であるか、あるいは
（ｉ）Ｘと、および（ｉｉ）Ｒ12、Ｒ14またはＲ15の１つと一緒になって更にヘテロ原子を含み得る置換または非置換の４〜６員のヘテロ環を形成し；
Ｒ104は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シキロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体であり；
Ｒ105は、水素またはＲ104の定義の１つであり；
Ｙは、ＮまたはＳであり；
Ｒ14は、
水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4−ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、（ａ１）〜（ａ２８）の基の１つであるか、あるいは、
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ12またはＲ13と一緒になって更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換の４〜６員のヘテロ環基を形成し；そして、
Ｒ15は、
水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、（ａ１）〜（ａ２８）基の１つであるか、
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ14（ｐおよびｚが１である場合）、Ｒ12またはＲ13と一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換の４〜６員のヘテロ環基を形成するか、あるいは、
基（ＩＩ）がＹによって該接合体の残りの部分と結合する場合には単結合であり；そして、
他の基は、請求項１〜３のいずれか１つにおいて定義する通りである、
請求項１〜３のいずれか１つに記載の接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
【請求項５】
Ｒ7は単結合であって、
基（ＩＩ）は十字で示される炭素原子によって直接に該接合体の残りの部分と結合し、そして
式（ＩＩ）の他の基は請求項４において定義する通りである、
請求項４に記載の接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
【請求項６】
Ｒ15は単結合であって、それによって基（ＩＩ）は該接合体の残りと結合し、そして
式（ＩＩ）の他の基は、請求項４において定義する通りである、
請求項４に記載の接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
【請求項７】
基（ＩＩ）が、Ｒ10によって該接合体の残りと結合し、そして
式（ＩＩ）の他の基は請求項４において定義する通りである、
請求項４に記載の接合体およびそれらの立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
【請求項８】
ＣＴは、カンプトテシンまたはカンプトテシン誘導体の基であって、これはそのＣ20−炭素原子上のヒドロキシル基からまたは該分子に存在する例えばアミノもしくはヒドロキシ基などの官能基から水素原子を引き抜くことによって形式的に生成し；
ＬＩは、請求項３において定義する通りであり；
Ｓｐは、カルボニル基またはチオカルボニル基であり；
ＬＡは、基（ＩＩ）であって、ここで、
Ｒ7はヒドロキシルであり；
Ｒ8、Ｒ9、Ｒ12、Ｒ14およびＲ16〜Ｒ19は水素であり；
Ｒ10は−ＣＯ−ＮＨ−Ｐｈ−*ＮＨ−であって、該基（ＩＩ）は星印で示される窒素原子によって該接合体の残りと結合し；
Ｌは、隣接するフェニレン単位ＡおよびＢと結合する−ＮＨ−ＳＯ2であって、その結果、これらフェニレン単位の各々は１,３−置換であり；そして、
式（ＩＩ）の他の基は、請求項４において定義する通りである、
請求項４に記載の接合体、およびその立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
【請求項９】
実施例１〜１２に記載の化合物から選ばれる接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１つに記載の接合体の製造法であって、
［Ａ］（ｘが０である接合体（Ｉ）の場合）遊離のまたは活性化されたカルボキシル官能基を有する基（ＩＩ）を含有する部分と、遊離な１級または２級のアミノ基を有する単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分との反応；
［Ｂ］遊離な１級または２級のアミノ官能基を有する基（ＩＩ）を含有する部分と、例えばホスゲン、チオホスゲンまたはクロロギ酸エステルなどのカルボン酸誘導体との反応、および続く遊離な１級または２級のアミノ基を有する単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分との反応；または、
［Ｃ］遊離な１級または２級のアミノ官能基を含む基（ＩＩ）を含有する部分と、遊離のまたは活性化されたカルボキシル官能基を含む単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分との反応
を含み、
ここで［Ａ］〜［Ｃ］の全ての基は請求項１に記載の式（Ｉ）の定義を有する、
該製造法。
【請求項１１】
癌と闘う、請求項１〜９のいずれかに記載の接合体。
【請求項１２】
活性成分として有効な量の請求項１〜９のいずれか１つに記載の接合体の少なくとも１つおよび少なくとも１つの薬理学的に許容し得る製剤化剤を含む、医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１〜９のいずれか１つに記載の接合体の少なくとも１つと、薬理学的に許容し得る製剤化剤の少なくとも１つを組み合わせることによる、医薬組成物の製造法。
【請求項１４】
活性成分として請求項１〜９のいずれか１つに記載の接合体の少なくとも１つ、および請求項１〜９のいずれか１つに記載の該接合体とは異なる医薬的に活性な成分の少なくとも１つを含む、医薬組成物。
【請求項１５】
有効な量の請求項１〜９のいずれか１つに記載の接合体と不活性な医薬的な担体とを含む、単位用量形態の薬物。
【請求項１６】
癌の治療のための医薬組成物の製造における、請求項１〜９のいずれか１つに記載の接合体の使用。
【請求項１７】
有効な量の請求項１〜９のいずれか１つに記載の接合体の少なくとも１つを単独でもしくは希釈物と混合してまたは医薬の形態で投与することを含む、哺乳動物における癌の処置法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エラスターゼ、すなわち腫瘍組織において特に見られ得る酵素によって選択的に切断することができる好ましい連結単位によるαvβ3インテグリン拮抗薬との連結の結果として、腫瘍特異的な作用を有する細胞分裂停止薬に関する。該好ましい連結単位は、生物学的な媒体、例えば培地または血清中での細胞分裂停止薬およびαvβ3インテグリン拮抗薬の接合体の十分な安定性、および同時に該細胞分裂停止薬の放出を伴うその特異的な酵素によるかまたは加水分解による切断可能性の結果として腫瘍組織中での所望の細胞内作用を与える。
【０００２】
癌における化学療法は、腫瘍組織よりも他の組織タイプの増殖性細胞に及ぼす化学療法薬の毒性作用に帰する激しい副作用を通常伴う。長年にわたって、科学者は使用する活性化合物の選択性を改善する問題に彼等自身、取り組んできた。よく続けられている研究は、例えばｐＨの変化によるか（ＤＥ−Ａ第４２,２９,９０３号）、酵素によるか（例えば、グルクロニダーゼ；ＥＰ−Ａ第５１１,９１７号および第５９５,１３３号）、または抗体−酵素の接合体によって（ＷＯ８８／０７３７号；米国特許第４,９７５,２７８号；ＥＰ−Ａ第５９５,１３３号）、標的組織中でより多くまたはより少なく選択的に放出されるプロドラッグの製造である。これらの研究における問題は、とりわけ、他の組織および器官における該接合体の安定性の欠落、並びに特に活性化合物の遍在性の分布、それに続く腫瘍組織中での活性化合物の細胞外放出である。
【０００３】
腫瘍細胞表面での著しいレクチンパターン（GabiusによるOnkologie12, 175 (1989)）は、適当な炭水化物単位と細胞分裂停止薬との連結によって腫瘍細胞上でこれらに特異的に向く(addressing)という基本的な可能性を開く。この期待は、他の組織、特に肝臓中でさえも、同様な炭水化物特異性（ガラクトース、ラクトース、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン、フコースなど）を有するレクチンが生じるという事実によって制限される（AshwellらによるAnnu. Rev. Biochem.46, 531 (1982); StahlらによるProc. Natl. Acad. Sci. USA74, 1521 (1977); HaltiwangerらによるJ. Biol. Chem.261, 7433-7439 (1986); JansenらによるJ. Biol. Chem.266, 3343 (1991)）。従って、肝臓および他のレクチンが多い器官中での著しい濃度のグリコ接合体を含有する活性化合物を、腫瘍組織に対する選択性を確立するための特定の改変をせずに使用する。
【０００４】
該ヘテロ環アミンベトラサイクリン（１）は、様々な胃癌モデルにおける良好な抗腫瘍作用を示す（米国特許第４,７５７,０７２号）。
【化１】
2004529118.tif 000002
【０００５】
良好なインビトロ作用およびより好ましい溶解性質を有する（１）のペプチド接合体（米国特許第４,９８０,３４３号）は、動物実験において遊離なベトラサイクリンよりも耐用性が乏しい。ＥＰ−Ａ第５０１,２５０号に記載されているベトラサイクリン（１）のフコース接合体は、肝臓において非常に強く濃縮されるには不都合である。
【０００６】
キノロン−ａ（２）、７−[(３ａ−Ｒ,Ｓ,４−Ｒ,Ｓ,７ａ−Ｓ,Ｒ)−４−アミノ−１,３,３ａ,４,７,７ａ−ヘキサヒドロイソインドール−２−イル]−８−クロロ−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１,４−ジヒドロ−４−オキソ−３−キノリンカルボン酸はまた、顕著な抗菌活性に加えて、様々な腫瘍セルラインに対する非常に良好な活性を示す（ＥＰ−Ａ第５２０,２４０号、ＪＰ−Ａ第０４,２５３,９７３号）。しかしながら、かなりの毒物学的な問題（例えば、遺伝毒性、骨髄毒性、インビボでの高い急性毒性など）がそれに対抗する。
【化２】
2004529118.tif 000003
【０００７】
２０(Ｓ)−カンプトテシンは、Wallら（J. Am. Chem. Soc.88, 3888 (1966)）によって１９９６年に単離された５員環性のアルカロイドである。そのものは、多くのインビトロおよびインビボ試験において高い活性な抗腫瘍潜在能力を有する。しかしながら、不幸な事に、毒性および溶解性の問題のために、臨床的な研究フェーズにおける将来有望な潜在能力の現実化は失敗している。
【０００８】
Ｅ環のラクトンの開環およびそのナトリウム塩の形成によって、閉環形態とのｐＨ依存性の平衡にある水溶性化合物が得られた。ここで、臨床的な研究は未だ成功に到っていない。
【化３】
2004529118.tif 000004
【０００９】
約２０年後、その生物学的な活性がトポイソメラーゼＩの酵素抑制の一因であることが分かった。次いで、その後、より可溶性であって且つより耐用性であって、そしてインビボ活性であるカンプトテシン誘導体を見つけるための研究活動が再び増加している。
【００１０】
水溶性の改善のために、Ａ−環およびＢ−環を修飾したカンプトテシン誘導体の塩、並びにイオン化可能な基を有する２０−Ｏ−アシル誘導体の塩が記載されている（米国特許第４,９４３,５７９号）。該後者のプロドラッグの概念は後にまた、修飾されたカンプトテシン誘導体に伝えられた（ＷＯ９６／０２５４６号）。しかしながら、該記載されている２０−Ｏ−アシル誘導体は、インビボでの非常に短い半減期を有しており、そして非常に速く切断されてその親構造を与える。
【００１１】
ＷＯ９６／３１５３２は、炭水化物を修飾した細胞分裂停止薬を記載しており、ここで、腫瘍細胞中での該細胞分裂停止薬の血清中安定性および放出、並びに腫瘍組織中での該細胞分裂停止薬の特異的な濃度の両方は、選択的に修飾した炭水化物と細胞分裂停止薬（例えば、ベトラサイクリン、キノロン−ａ、カンプトテシン）とを好ましいスペーサー基および連結基によって新たに連結することによって達成される。
【００１２】
インテグリンは、細胞の表面上で見られるヘテロ二量体の膜貫通タンパク質であって、このものは該細胞の細胞外マトリックスヘの接着において重要な役割を果たしている。それらは、これらのタンパク質中で生じるＲＧＤ配列によって細胞外マトリックス上での細胞外糖タンパク質（例えば、フィブロネクチンまたはビトロネクチン）を認識する（ＲＧＤは、アミノ酸配列アルギニン−アスパラギン酸についての１文字表記である）。
【００１３】
通常、インテグリン（例えば、ビトロネクチン受容体；これは、αvβ3受容体、あるいはαvβ5受容体またはＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体とも呼ばれる）は、生物学的なプロセス（例えば、細胞移動、血管新生および細胞−マトリックスの接着）において、およびその結果これらのプロセスが重要な段階である疾患に対して重要な役割を果たしている。例えば、癌、骨粗しょう症、動脈硬化症、再狭窄および眼炎を記載することができる。
【００１４】
例えば、αvβ3受容体は増殖性の内皮細胞上で多量に生成し、そしてこのものはそれらの細胞外マトリックスとの接着が可能となる。従って、該αvβ3受容体は血管新生、すなわち新たな血管の形成（これは、腫瘍の増殖および癌性障害における転移の生成において重要な欠くことができないものである）において重要な役割を果たしている。
【００１５】
上記の受容体の遮断がこのタイプの障害の処置のために重要な出発点であることを示すことは可能である。増殖性内皮細胞と細胞外マトリックスとの接着が、例えば環状ペプチドまたはモノクローナル抗体によってそれらに対応するインテグリン受容体を遮断することによって抑制される場合には、腫瘍増殖の停止または回帰を引き起こす血管新生を生じない（例えば、Brooksらによるin Cell79, 1157-1164 (1994)を参照）。
【００１６】
その上、それらのαvβ3受容体が抗体によって遮断される場合には、腫瘍細胞の侵襲性性質および従ってそれらの転移を生成する能力は著しく低下する（BrooksらによるJ. Clin. Invest.96, 1815 (1995)）。
【００１７】
ＷＯ９８／１０７９５は、腫瘍に付加する分子が官能性単位（例えば、細胞分裂停止薬または検出可能な標識（例えば、放射性核種）と連結している接合体を記載している。とりわけ、インテグリン拮抗薬（例えば、上記のＲＧＤ配列を有するＲＧＤ）は腫瘍に付加する分子として記載されている。ドキソルビシンは、このタイプの腫瘍に向く分子と連結させた細胞分裂停止薬の例として記載されている。
【００１８】
ＷＯ９８／１０７９５の化合物の場合には、該連結を、腫瘍に向く分子および官能性単位がそれらのそれぞれの性質を保持しながら、互いに直接に結合するように行なわれている（例えば、５６頁、１．１７〜５８頁、１・１０および実施例６を参照）。これは、これらの化合物が実際は腫瘍に向く実体の結合によって腫瘍細胞の直近に選択的に濃縮されるという結果を有するが（αvβ3インテグリン受容体との結合によるαvβ3インテグリンを有する基−拮抗薬の場合には、これは特に、血管新生によって新たに形成する内皮細胞上で発現する）、直接の組み合わせのために該官能性単位（例えば、細胞分裂停止薬）は腫瘍組織の細胞内腔中に放出され得ない。
【００１９】
基本的に、一方で該接合体中に見られるαvβ3またはαvβ5インテグリン受容体に向く部分の効果によって腫瘍組織中で選択的に濃縮されるが、しかし他方で該接合体から放出することができる細胞分裂停止薬を含む接合体は、ＷＯ９８／１０７９５に記載される接合体と比較して腫瘍細胞における該細胞分裂停止薬のより直接的な作用の可能性のために、腫瘍組織に及ぼす毒性団(toxophoric)効果が増大する。特に、それらの毒性団効果および腫瘍選択性は、該細胞分裂停止薬の放出が腫瘍組織の直近でまたは腫瘍細胞中でさえも起こるならば、一層高い。
【００２０】
実際には、薬物を含有する接合体は、例えばAnti-Cancer Drug Design10, 1-9 (1995)（特に、１頁）において説明されている通り、複雑で製造するのが困難な化合物である。この項は、細胞分裂停止薬のメトトレキセート、オリゴペプチドスペーサーおよびタンパク質（ヒト血清アルブミン）の接合体を記載している。しかしながら、それはまた、該連結単位の性質およびこの単位の該毒性団および担体（例えば、抗体）との連結の種類は該連結単位の切断に影響を及ぼし得ることも指摘している（７頁の最初の段落を参照）。従って、この項目は、そこで供される連結が困難を伴うことなく、他の接合系に移すことができないことを教示している。特に、この様式でαvβ3インテグリン受容体にも向く部分が、この手法によってαvβ3インテグリン受容体に向くが、αvβ3インテグリン受容体と結合するその能力を失った部分なしで、毒性団と連結することができるかどうかについては、注目されている。
【００２１】
ＷＯ９６／３１５３２に開示されている該連結単位は、モノ−またはオリゴ糖基に対する毒性団の連結について特異的に使用される。αvβ3インテグリン受容体にも向く分子が、この手法によってαvβ3インテグリン受容体に向くが、αvβ3インテグリン受容体と結合するその能力を失った部分なしで、この様式で毒性団と連結することができるかどうかについては、注目されている。
【００２２】
ＷＯ００／６９４７２において、酵素により活性化された抗腫瘍プロドラッグ化合物は開示されており、このものはコラゲナーゼ(ＩＶ）およびエラスターゼによって特異的に切断され得る。従って、エラスターゼによって切断可能な連結単位に関しては、本出願は特異的なテトラペプチド配列であるＡｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＡｌａおよびＡｌａ−ＡＬＡ−Ｐｒｏ−Ｎｖａが適当であると記載している。その上、この引用文献において、αvβ3インテグリン受容体に向く部分および細胞分裂停止薬を含む接合体については全く記載されていない。
【００２３】
従って、本発明の１目的はαvβ3インテグリン受容体に向く部分、および好ましくは少なくとも腫瘍組織の近傍にある該接合体から放出され得る細胞分裂停止薬を含む接合体を開発することであって、ここでαvβ3インテグリン受容体に向く接合体における部分は、そのαvβ3インテグリン受容体と結合する能力を保ち、そして従って該化合物に対する組織選択性を与える。
【００２４】
上記の目的は、αvβ3インテグリン受容体に向く非ペプチド性部分；細胞分裂停止薬；およびエラスターゼによって、すなわち腫瘍組織中に特に見ることができる酵素によって、該細胞分裂停止薬の放出を伴って選択的に酵素により切断可能である連結単位；を含む接合体によって達成される。
【００２５】
本発明によれば、３つの特異的なアミノ酸残基をベースとするペプチド基である連結単位が腫瘍関連酵素であるエラスターゼまたはエラスターゼ様の活性によって選択的に切断され得ることを驚くべきことに見出した。この特異的な連結単位と該細胞分裂停止薬との間の結合はエラスターゼによって有利に切断されるので、該細胞分裂停止薬は直接に放出される。このことにより、本発明の接合体の組織特異性の増大、および従って他の組織タイプにおける本発明の接合体の更なる毒性の低下を生じる。
【００２６】
本発明の更に好ましい態様によれば、該連結単位は腫瘍組織に対する選択性を有する抗体と結合した酵素によって切断され得て、そしてその結果腫瘍組織に向くことができる。このことはまた、ＡＤＥＰＴ研究とも呼ばれる。同様に、このことは本発明の接合体の組織特異性の更なる増大、および従って他の組織タイプにおける本発明の接合体の更なる減少を生じる。
【００２７】
本発明は、式：ＣＴ−ＬＩ−Ｓｐx−ＬＡ      （Ｉ）
［式中、
ＣＴは、細胞毒性基、細胞分裂停止基および細胞分裂停止誘導体の基の群から選ばれる一価の基であって、このものは各々更にヒドロキシル、カルボキシルまたはアミノ基を有し得る。
ＬＩは、式：−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４q−      （ＩＩＩ）
の二価のペプチド基であって、ここで
ＡＡ１〜ＡＡ４基は互いに独立してＤ−またはＬ−立体配置であるアミノ酸残基であり、これらは各々場合により保護基を有し得て、そしてｑは０または１である。
Ｓｐは、カルボニル基またはチカルボニル基である。
ｘは、０または１である。
ＬＡは、αvβ3インテグリン受容体に向く一価の非ペプチド性基であって、このものは式：
【化４】
2004529118.tif 000005
に相当する基である。
上記式中、
基（ＩＩ）と、Ｓｐ（ｘが１である場合）またはＬＩ（ｘが０である場合）との間の結合は、
ａ）式（ＩＩ）において十字で示す炭素原子による基（ＩＩ）とＬＩとの間の結合、
ｂ）（ｉｉｉ）Ｙによるか（ｐが１である場合にのみ可能）
（ｉｉ）Ｒ10が結合している炭素原子によるか、または好ましくは
（ｉｉｉ）Ｒ10による
基（ＩＩ）とＳＰまたはＬＩとの間の結合
の変形の一つとして位置する。
式（ＩＩ）中、
Ｒ7は、
ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルコキシ、置換もしくは非置換のシクロアルコキシ、置換もしくは非置換のアリールオキシ、または飽和もしくは不飽和で場合により置換されたヘテロサイクリルオキシであるか；あるいは、
基（ＩＩ）が十字で示される炭素原子によって直接に該接合体の残りと結合する場合には単結合である。
Ｒ8は、
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルコキシ、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｒ9および（ｉｉ）Ｒ8と結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の炭素環またはヘテロ環を形成する。
Ｒ9は、
水素、ヒドロキシル、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルコキシ、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｒ8と、および（ｉｉ）Ｒ9が結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の炭素環またはヘテロ環を形成する。
Ｒ10は、
ａ）基（ＩＩ）が十字で示される炭素原子によるかまたはＹによって直接に該接合体の残りと結合する場合には、−ＳＯ2Ｒ101、−ＣＯ−Ｒ101、−ＣＯ−ＯＲ102、−ＣＯ−ＮＲ101Ｒ103、−ＣＳ−ＮＲ101Ｒ103の一価の基の１つであるか；
ｂ）基（ＩＩ）がＲ10によって該接合体の残りと結合する場合には、−ＳＯ2Ｒ101、−ＣＯ−Ｒ101、−ＣＯＯＲ102、−ＣＯ−ＮＲ101Ｒ103、−ＣＳ−ＮＲ101Ｒ103の二価の基の１つであるか；あるいは、
ｃ）基（ＩＩ）が、Ｒ11が結合している窒素原子によって該接合体の残りと結合する場合には、単結合である。
Ｒ101は、
ａ）基（ＩＩ）がＲ101によって該接合体の残りと結合しない場合には、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであり；あるいは、
ｂ）基（ＩＩ）がＲ101によって該接合体の残りと結合する場合には、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリレン、および飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロシクロ−ジイルから選ばれる二価の基である。
Ｒ102は、
ａ）基（ＩＩ）がＲ102によって該接合体の残りと結合しない場合には、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであり；あるいは、
ｂ）基（ＩＩ）がＲ102によって該接合体の残りと結合する場合には、置換もしくは非置換のアルキレン、置換もしくは非置換のシクロアルキレン、置換もしくは非置換のアリレン、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロシクロ−ジイルから選ばれる二価の基である。
Ｒ103は、水素またはＲ101の定義の１つである。
Ｒ11は、（ｉ）水素、（ｉｉ）置換もしくは非置換のアルキル、（ｉｉｉ）１分子当たり４個までのヘテロ原子を含むことができる飽和もしくは不飽和（非芳香族性もしくは芳香族性）の環状化合物の基、または（ｉｖ）上記の群（ｉｉｉ）の基で置換されたアルキルである。
Ｌは、−(ＣＨ2)nＮＨＳＯ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＳＯ2ＮＨ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＮＨ−ＣＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＯＮＨ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＯＣＨ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2Ｏ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＯＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＯＯＣ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2ＣＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＯＣＨ2(ＣＨ2)O−、−ＮＨＣＯＮＨ−、−(ＣＨ2)nＳＣＨ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2Ｓ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2ＳＯ(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＳＯＣＨ2(ＣＨ2)O−、−(ＣＨ2)nＣＨ2ＳＯ2(ＣＨ2)O−または−(ＣＨ2)nＳＯ2ＣＨ2(ＣＨ2)O−であって、ここでｎおよびｏは０または１であり、ｎ＋ｏは１以下である。
Ｒ12は、
水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ13またはＲ14と、および（ｉｉ）Ｒ12が結合する窒素原子と一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換のヘテロサイクリルを形成する。
Ｘは、Ｎ、ＯまたはＳである。
ｙは、ＸがＯまたはＳである場合には０であり、またＸがＮである場合には１である。
Ｒ13は、水素、置換もしく非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、シアノ、ニトロ、−ＣＯ−Ｒ104または−ＣＯ−ＯＲ105であるか；あるいは、
（ｉ）Ｘと、および（ｉｉ）Ｒ12、Ｒ14またはＲ15のうちの１つと一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る置換もしくは非置換のヘテロシクロサイクリルを形成する。
Ｒ104は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または更にヘテロ原子を含み得る飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルである。
Ｒ105は、水素またはＲ104の定義の１つである。
Ｙは、ＮまたはＳである。
Ｒ14は、
（ｉ）水素、（ｉｉ）置換または非置換のアルキル、（ｉｉｉ）１分子当たり４個までのヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和（非芳香族性または芳香族性）の環状化合物の基、（ｉｖ）上記の群（ｉｉｉ）で置換されたアルキルであるか；あるいは、
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ12またはＲ13の１つと一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換のヘテロサイクリルを形成する。
ｚは、ＹがＳである場合には０であり、またＹがＮである場合には１である。
ｐは、０または１である。
Ｒ15は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換のヘテロサイクリルであるか；
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ14（ｐおよびｚが１である場合）、Ｒ12またはＲ13の１つと一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換のヘテロサイクリルを形成するか；あるいは、
基（ＩＩ）がＹによって該接合体の残りと結合する場合には、単結合である。
Ｒ16〜Ｒ19は各々独立して、シアノ、ハロゲン、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルコキシ、または置換もしくは非置換のシクロアルキルである。そして、
ｇ、ｈ、ｉおよびｋは各々独立して、０または１である］
の接合体およびその立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物に関する。
【００２８】
本明細書において、二価の置換基はそれらの個々の左端が式（ＩＩ）における対応する置換基の左に示す基と結合し、そしてそれらの個々の右の端が式（ＩＩ）の対応する置換基の右に示す基と結合する。例えば、式（ＩＩ）における基Ｌが−(ＣＨ2)nＮＨ−ＳＯ2(ＣＨ2)Ｏ−と示される場合には、該窒素原子は式（ＩＩ）におけるフェニレンＡと基(ＣＨ2)nによって結合する。
【００２９】
本明細書に記載の接合体（Ｉ）において、キノロン−ａ、カンプトテシンまたはカンプトテシン誘導体の基は好ましい毒性団基ＣＴである。それらは、Ｃ20炭素原子上の酸素原子（カンプトテシンの場合には、ヒドロキシル基の部分である）によるかまたは場合により存在する官能基によって、該接合体の残りと連結することができる。カンプトテシン誘導体の好ましい例としては、Ａ−およびＢ−環置換のカンプトテシンを含み、例えば９−アミノカンプトテシン、ヒドロキシル置換のカンプトテシン（例えば、１０−ヒドロキシカンプトテシン）およびそれらの誘導体（例えば、１０,１１−メチレンジオキシおよび１０,１１−エチレンジオキシカンプトテシン）、７−置換のカンプトテシン（例えば、７−エチル−１０−ヒドロキシカンプトテシン）およびホモカンプトテシンを含み、加えてこれらはＡ−および／またはＢ−環上に置換基を有し得る（O. LavergneらによるJ. Med. Chem.41, 5410 (1998)）。本発明の目的のために、２０(Ｒ)−および２０(Ｓ)−カンプトテシン（誘導体）またはそれらの混合物を使用することができる。該２０(Ｓ)−立体配置が好ましい。
【００３０】
基ＬＩの内容における用語「アミノ酸」とは、特に天然に存在するα−アミノ酸を意味するが、このものは更にまたそれらの同族体、異性体および誘導体を含む。用語「誘導体」とは例えば、保護基を伴って供されるアミノ酸を含む。該基ＬＩにおける該アミノ酸基は各々互いに連結したり、またそれらのカルボキシルまたはアミノ官能基によって基：ＣＴ、ＳｐまたはＬＡと連結することができる。ＡＡ１〜ＡＡ４は互いに独立して、Ｄ−および／またはＬ−立体配置であるアミノ酸残基である。該天然に存在するアミノ酸の残基である、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ノルバリン、セリン、トレオニン、システイン、Ｓ−メチルシステイン、オルニチン、メチオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、アルギニン、リシン、ヒスチジン、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシンおよびプロリンが好ましい。該Ｌ−立体配置が特に好ましい。
【００３１】
本明細書に記載するＡＡ１は好ましくは、Ｄ−またはＬ−立体配置である天然に存在するアミノ酸の残基であって、このものはグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、セリン、リシン、オルニチンおよびフェニルアラニンから選ばれる。
【００３２】
本明細書に記載するＡＡ２は好ましくは、Ｄ−またはＬ−立体配置である天然に存在するアミノ酸の残基であって、このものはアラニン、バリン、フェニルアラニン、チロシン、トレオニン、セリン、イソロイシン、リシン、グルタンミン酸、ヒスチジン、グリシン、アルギニン、アスパラギン、グルタミン、Ｓ−メチルシステイン、メチオニン、アスパラギン酸、トリプトファン、プロリン、オルニチンおよびロイシンから選ばれる。該Ｌ−立体配置が好ましく；ＡＡ２は、プロリン残基が最も好ましい。
【００３３】
本明細書に記載するＡＡ３およびＡＡ４は（ｑが１である場合）は各々独立して、Ｄ−またはＬ−立体配置である天然に存在するアミノ酸の残基であることが好ましく、このものはアラニン、バリン、フェニルアラニン、チロシン、セリン、イソロイシン、リシン、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、グリシン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、トリプトファン、プロリン、オルニチン、メチオニン、Ｓ−メチルシステイン、ノルバリンおよびロイシンから選ばれる。該Ｌ−立体配置が好ましい。ＡＡ３およびＡＡ４（ｑが１である場合）はそれぞれ、アラニン、ノルバリン、ヒスチジン、グリシン、アスパラギンおよびアスパラギン酸から選ばれるアミノ酸の残基であることが最も好ましい。
【００３４】
好ましい接合体（Ｉ）は、ＬＩが式：−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−ＡＡ４q−（ＩＩＩ）の基である接合体であって、該式中、各ＬＩのアミノ酸基は上記の群から選ばれる。
【００３５】
該連結単位は、それぞれ３つまたは４つのアミノ酸残基ＡＡ１〜ＡＡ３またはＡＡ４（ｑが１である場合）を、および基Ｓｐを含有するＬＩ基から形成されることが好ましい。特に、ＡＡ２およびＡＡ３／ＡＡ４単位を保護基によって側鎖上で修飾することが可能である。これらの場合に、概して基ＣＴとの連結はアミノ酸ＡＡ１のカルボキシル官能基によって生じ、そして直接のまたはＳｐ基によるＩＡ基との連結は、単位ＩＡのアミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシル基を用いて生じる。
【００３６】
しかしながら、連結が単位ＩＡのカルボキシル官能基によって生じる場合には、単位Ｓｐを有しない連結単位を使用することが好ましい。この場合には、基ＬＩおよびＬＡの間の連結はＬＩの一部であるアミノ酸のアミノ官能基によって生じることができる。
【００３７】
特に好ましい接合体（Ｉ）は、ＬＩが上記式（ＩＩＩ）の二価の基である接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物であって、ここで
ＡＡ１は、バリン、ロイシンまたはイソロイシンの二価の残基であり；
ＡＡ２は、二価のプロリン残基であり；
ＡＡ３／ＡＡ４は互いに独立して、アラニン、ノルバリン、ヒスチジン、グリシン、アスパラギンまたはアスパラギン酸の二価の残基であり；
ｑは、０または１であって、そして、
基ＣＴ、ＳｐおよびＬＡは上で定義する通りである。
【００３８】
側鎖に官能基を有するアミノ酸の場合には、これらの官能基は遊離であるかまたはペプチド化学において使用される通常の保護基によって保護することができる。アミノ酸の官能基について使用される保護基は、例えばウレタン、アルキル、アシル、エステルまたはアミドタイプを含む。それらは、ベンジルオキシカルボニル、３,４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３,５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、２,４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロ−４,５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、アリルオキシカルボニル、ビニルオキシカルボニル、３,４,５−トリメトキシベンジルオキシカルボニル、フタロイル、２,２,２−トリクロロエトキシカルボニル、２,２,２−トリクロロ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルカルボニル、メンチルオキシカルボニル、４−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−９−メトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、２−クロロアセチル、２−ブロモアセチル、２,２,２−トリフルオロアセチル、２,２,２−トリクロロアセチル、ベンゾイル、ベンジル、４−クロロベンゾイル、４−ブロモベンゾイル、４−ニトロベンゾイル、フタルイミド、イソバレロイル、ベンジルオキシメチレン、４−ニトロベンジル、２,４−ジニトロベンジル、４−ニトロフェニルおよび２−ニトロフェニルスルフェニルの基を含むことが好ましい。ＦｍｏｃおよびＢｏｃが、特に好ましい。
【００３９】
適当な反応段階における保護基の除去は、例えば酸または塩基の作用、水素化分解または別の様式での還元によって有効であり得る。（ｉ）Ｒ12およびＲ13、（ｉｉ）Ｒ12およびＲ14、（ｉｉｉ）Ｒ13およびＲ14、（ｉｖ）Ｒ14およびＲ15、または（ｖ）（ｐが０である場合）Ｒ12およびＲ14の基は互いに連結したり、またＸおよび／またはＹと一緒になって、以下の基：
【化５】
2004529118.tif 000006
をベースとするヘテロ環系を形成することができる。上で示す該環系のうち、該４〜６員の環系が好ましい。
【００４０】
上記の通り、基：−Ｎ(Ｒ12)[Ｃ(＝ＸＲ13y)ＹＲ14Z]pＲ15、アミノ、ウレア、チオウレアまたはグアニジン単位は非環状であるかまたは環系中に包含され得て、その結果、以下の好ましい官能性単位：
【化６】
2004529118.tif 000007
【化７】
2004529118.tif 000008
の１構成成分であり得る。ここで、上記の一覧は、可能な構造単位の非排他的な列挙である。
【００４１】
上記の好ましい構造単位に加えて、１つ以上の４〜６員の環系がヘテロ環と縮合するそれらのアナログ（例えば、上記の構造単位の対応するベンゾ縮合アナログ）もまた含む。
【００４２】
中心（フェニレンＡ−連結基Ｌ−フェニレンＢ）単位がｍ−置換フェニン単位Ａおよびｍ−置換フェニレン単位Ｂを含む基（ＩＩ）が、特に好ましい。本発明によれば、Ｒ10およびＲ11が結合する窒素原子は、−ＳＯ2Ｒ101、−ＣＯＲ101、−ＣＯ−ＯＲ102、−ＣＯＮＲ101Ｒ103またはＣＳＮＲ101Ｒ103によって置換されることが特に好ましく、ここでＲ101、Ｒ102およびＲ103は上で定義する通りである。特に、Ｒ8およびＲ9が水素であって且つＲ10が単結合でない基（ＩＩ）が好ましい。
【００４３】
該連結基Ｌは−ＮＨＳＯ2−、−ＣＨ2ＮＨＳＯ2−、−ＮＨＳＯ2ＣＨ2−、−ＯＣＨ2−、−ＣＨ2Ｏ−、−ＣＨ2ＯＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2Ｏ−または−ＯＣＨ2ＣＨ2−であり、そして該フェニレン単位Ｂ上に見られる基は非環状または環状のグアニジン単位であることが好ましい。環状グアニジン単位（例えば、４,５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イルアミノ）が特に好ましい。
【００４４】
一層特に好ましい接合体（Ｉ）は、
ＣＴが、カンプトテシンまたはカンプトテシン誘導体の基であって、このものはＣ20炭素原子上のヒドロキシル基から、またはアミノもしくはヒドロキシ基などの該分子に存在する官能基から水素原子を引き抜くことによって形式的に形成され；
ＬＩおよびＳＰが、請求項１〜３のいずれか１つにおいて定義する通りであり；
ＬＡが、αvβ3インテグリン受容体に向く式（ＩＩ）の非ペプチド基であり；そして、
Ｒ7が、
メトキシ、エトキシ、プロピキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ネオペントキシ、ヘキシオキシ、シクロプロポキシ、シクロプロピルメトキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ、シクロヘキシオキシ、フェノキシ、トリルオキシ、ベンジルオキシまたはそれらの置換誘導体であり、あるいは、
好ましくはヒドロキシルまたは単結合（基（ＩＩ）が十字で示される炭素原子によって該接合体の残りと結合する場合）であり；
Ｒ8が、
水素、ヒドロキシル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシ、ヘキシオキシ、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジル、ベンジルオキシまたはそれらの置換誘導体であるか、あるいは、
（ｉ）Ｒ9と、および（ｉｉ）Ｒ8が結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の３〜６員の炭素環またはヘテロ環を形成し；
Ｒ9が、
水素、ヒドロキシル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシ、ヘキシオキシ、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体であるか、あるいは、
（ｉ）Ｒ8と、および（ｉｉ）Ｒ9が結合する炭素原子と一緒になって、置換または非置換の３〜６員の炭素環またはヘテロ環を形成し；
Ｒ10が、請求項１〜３のいずれか１つにおいて定義する通りであり；
Ｒ101が、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルもしくはそれらの誘導体、−Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、−Ｃ6(ＣＨ3)5、−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２,３−ジクロロフェニル、２,４−ジクロロフェニル、３,４−ジクロロフェニル、２,５−ジクロロフェニル、３,５−ジクロロフェニル、２,６−ジクロロフェニル、４−クロロフェニルメチル、２,４−ジクロロフェニルメチル、２,６−ジクロロフェニルメチル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、４−カルボキシフェニル、２−メトキシカルボニルフェニルメチル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニル、４−トリフルオロメトキシフェニル、ベンジル、２−アセトアミド−４−メチルチアゾール−５−イル、フェニルエチル、１−フェニルプロピル、(Ｓ)−(＋)−カンファー１０−イル、(Ｒ)−(−)−カンファ−１０−イル、２−チオフェニル、４−メトキシフェニル、３,５−ジメトキシフェニル、３−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル、４−プロピルフェニル、２,５−ジメチルフェニル、２−メトキシ−５−メチルフェニル、２,３,５,６−テトラメチルフェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−フルオロフェニル、２,４−ジフルオロフェニル、２−クロロ−６−メチルフェニル、２−クロロ−４−フルオロフェニル、２,５−ジメトキシフェニル、３,４−ジメトキシフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、２−トリフルオロメチルフェニル、２−アルキルスルホニルフェニル、２−アリールスルホニルフェニル、３−(Ｎ−アセチル−６−メトキシ)アニリノ、４−アセトアミドフェニル、２,２,２−トリフルオロエチル、５−クロロ−３−メチルベンゾチアゾール−２−イル、Ｎ−メトキシカルボニルピペリジン−３−イル、チオフェン−２−イル、イソオキサゾール−５−イル、エトキシ、２−クロロピペリジン−３−イル、ピリジン−３−イル、ベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イル、１−アダマンチル、４−クロロフェノキシメチル、２−クロロピリジン−５−メチル、５,７−ジメチル−１,３,４−トリアザインドリジン−２−イル、(Ｓ)−カンファン−１−イル、(Ｒ)−カンファン−１−イルまたは８−キノリニルから選ばれる一価の基であるか、あるいは、
上記の一価のＲ101基から水素を引き抜くことによって形式的に得られる二価の基であって、それによって（二価の基の）基（ＩＩ）は該接合体の残りと結合し得て；
Ｒ102が、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、−Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、−Ｃ6(ＣＨ3)5、−ＣＨ2Ｃ6Ｈ2(ＣＨ3)3、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２,３−ジクロロフェニル、２,４−ジクロロフェニル、３,４−ジクロロフェニル、２,５−ジクロロフェニル、３,５−ジクロロフェニル、２,６−ジクロロフェニル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、４−クロロフェニルメチル、２,４−ジクロロフェニルメチル、２,６−ジクロロフェニルメチル、２−メトキシカルボニルフェニルメチル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニル、４−トリフルオロメトキシフェニル、２−アセトアミド−４−メチルチアゾール−５−イル、フェニルエチル、１−フェニルプロピル、(Ｓ)−(＋)−カンファ−１０−イル、(Ｒ)−(−)−カンファ−１０−イル、２−フェニルエテニル、２−チオフェニル、４−メトキシフェニル、３,５−ジメトキシフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル、４−プロピルフェニル、２,５−ジメチルフェニル、２−メトキシ−５−メチルフェニル、２,３,５,６−テトラメチルフェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−フルオロフェニル、２,４−ジフルオロフェニル、２−クロロ−６−メチルフェニル、２−クロロ−４−フルオロフェニル、２,５−ジメトキシフェニル、３,４−ジメトキシフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、２−トリフルオロメチルフェニル、２−アルキルスルホニルフェニル、２−アリールスルホニルフェニル、３−(Ｎ−アセチル−６−メトキシ)アニリン、４−アセトアミドフェニル、２,２,２−トリフルオロエチル、５−クロロ−３−メチルベンゾチアゾール−２−イル、Ｎ−メトキシカルボニルピペリジン−３−イル、チオフェン−２−イル、イソオキサゾール−５−イル、エトキシ、２−クロロピリジン−３−イル、ピリジン−３−イル、ベンジルオキシ、５−メチルイソオキサゾール−３−イル、１−アダマンチル、４−クロロフェノキシメチル、２,２−ジメチルエテニル、２−クロロピリジン−５−メチル、５,７−ジメチル−１,３,４−トリアザインドリジン−２−イル、(Ｓ)−カンファン−１−イル、(Ｒ)−カンファン−１−イルまたは８−キノリニルから選ばれる一価の基であるか、あるいは、
上記の一価のＲ102基から水素を引き抜くことによって形質的に得られる二価の基であって、それによって（二価の基の）基（ＩＩ）は該接合体の残りと結合することができ；
Ｒ103が、水素またはＲ101の定義の１つであり、それによってＲ103基が二価である場合には基（ＩＩ）は該接合体の残りと結合することができ；
Ｒ11が、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、あるいは以下の基：
【化８】
2004529118.tif 000009
【化９】
2004529118.tif 000010
の１つであり；
Ｌが、−ＮＨＳＯ2−、−ＣＨ2ＮＨＳＯ2−、−ＮＨＳＯ2ＣＨ2−、−ＳＯ2−ＮＨ−、−ＣＨ2ＳＯ2ＮＨ−、−ＳＯ2ＮＨＣＨ2−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＨ2ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨＣＯＣＨ2−、−ＣＯＮＨ−、−ＣＨ2ＣＯＮＨ−、−ＣＯＮＨＣＨ2−、−ＯＣＨ２−、−ＣＨ2ＯＣＨ2、−ＯＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2Ｏ−または−ＣＨ2ＣＨ2Ｏ−であり；
Ｒ12が、
水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、フェニル、トリル、ベンジルもしくはそれらの置換誘導体、または基：（ａ１）〜（ａ２８）のいずれか１つであるか、あるいは、
（ｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ13もしくはＲ14の１つと、および（ｉｉ）Ｒ12が結合する窒素原子と一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る置換または非置換の飽和または不飽和の４〜６員のヘテロ環基を形成し；
Ｘが、Ｎ、ＯまたはＳであり；
ｐが、０または１であり；
Ｒ13が、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ニトロ、シアノ、−ＣＯＲ104、−ＣＯ−ＯＲ105であるか、あるいは
（ｉ）Ｘと、および（ｉｉ）Ｒ12、Ｒ14またはＲ15の１つと一緒になって更にヘテロ原子を含み得る置換または非置換の４〜６員のヘテロ環を形成し；
Ｒ104は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シキロヘキシル、シクロヘプチル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体であり；
Ｒ105が、水素またはＲ104の定義の１つであり；
Ｙが、ＮまたはＳであり；
Ｒ14が、
水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4−ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、（ａ１）〜（ａ２８）の基の１つであるか、あるいは、
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ15（存在する場合）、Ｒ12またはＲ13と一緒になって更にヘテロ原子を含み得る飽和または不飽和の置換または非置換の４〜６員のヘテロ環基を形成し；そして、
Ｒ15が、
水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、４−メチルシクロヘキシル、３,３,５−トリメチルシクロヘキシル、シクロプロピルメチル、５−メチルヘキサ−２−イル、Ｃ1〜4アルコキシ−Ｃ1〜4アルキル、アミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4アルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、Ｃ1〜4ジアルキルアミノ−Ｃ1〜4アルキル、フェニル、トリル、ベンジルまたはそれらの置換誘導体、（ａ１）〜（ａ２８）基の１つであるか、
（ｉ）Ｙと、および（ｉｉ）Ｒ14（ｐおよびｚが１である場合）、Ｒ12またはＲ13と一緒になって、更にヘテロ原子を含み得る飽和もしくは不飽和の置換もしくは非置換の４〜６員のヘテロ環基を形成するか、あるいは、
基（ＩＩ）がＹによって該接合体の残りの部分と結合する場合には単結合であり；そして、
他の基が、請求項１〜３のいずれか１つにおいて定義する通りである、
接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物である。
【００４５】
この更に好ましい態様における好ましい接合体（Ｉ）は、Ｒ7がヒドロキシ基または直結であり、その結果基（ＩＩ）が十字で示される炭素原子によって直接に該接合体の残りと結合する接合体である。
【００４６】
この更に好ましい態様における特に好ましい接合体（Ｉ）は、基（ＩＩ）はＲ10／Ｒ11が結合する窒素原子によって該接合体の残りと連結する接合体である。これらの接合体のうち、
ＣＴが、Ｃ20−炭素原子上の酸素原子によって該接合体の残りと連結するカンプトテシン基であり；
ＬＩが、式：−ＡＡ１−ＡＡ２−ＡＡ３−      （ＩＩＩ）の基であって、該式中、
ＡＡ１が、バリン、ロイシンまたはイソロイシンの二価の残基であり；
ＡＡ２が、二価のプロリン残基であり；そして、
ＡＡ３が、アラニン、ノルバリン、ヒスチジン、グリシン、アスパラギンまたはアスパラギン酸の二価の残基であり；
Ｓｐが、カルボニル基またはチオカルボニル基であり；
ＬＡが、αvβ3インテグリン受容体に向く式（ＩＩ）の非ペプチド基であって、ここで
Ｒ7が、ヒドロキシルであり；
Ｒ8、Ｒ9、Ｒ12およびＲ14が、水素であり；
ｇ、ｈ、ｉおよびｋが、０であり；
Ｒ10が、−ＣＯＮＨＲ101基であり；
Ｒ101が、−Ｐｈ−ＮＨ−であって、その結果基（ＩＩ）がＲ101における窒素原子によって該接合体の残りと連結し；
Ｌが、隣接するフェニレン単位ＡおよびＢと連結する−ＮＨ−ＳＯ2−であって、その結果これらフェニレン単位は各々１,３−置換であり；
Ｘが、酸素であり；
ｙが、０であり；
ｐが、１であり；
Ｒ15が、プロピルであり、そして
他の記号は、上で定義する通りである、
接合体、およびそれらの立体異性体、並びにそれらの水和物、それらの生理学的に許容し得る塩およびそれらの塩の水和物が特に好ましい。
【００４７】
本発明はまた、個々のエナンチマーおよびジアステレオマー、並びに該接合体（Ｉ）の対応するラセミ体、ジアステレオマー混合物の両方をも含む。加えて、上記の該接合体の全ての可能な互変異性体を本発明にしたがって含む。その上、本発明は該接合体（Ｉ）の純粋なＥ−およびＺ−異性体、並びに全ての比率のそれらＥ／Ｚ混合物の両方を含む。該ジアステレオマー混合物またはＥ／Ｚ混合物を、クロマトグラフィー法によって個々の異性体に分離することができる。該ラセミ体を、キラル相を用いるクロマトグラフィー法によるかまたは分離によるかのいずれかによって個々のエナンチオマーに分離することができる。
【００４８】
本発明の該接合体（Ｉ）の生理学的に許容し得る塩は、本発明によれば無毒の塩を意味すると理解され、このものは通常、該接合体（Ｉ）をこの目的のために通常使用される無機または有機の塩基または酸と反応させることによって入手することができる。該化合物（Ｉ）の好ましい塩の例としては、対応するアルカリ金属塩（例えば、リチウム塩、カリウム塩およびナトリウム塩）、対応するアルカリ土類金属塩（例えば、マグネシウム塩またはカルシウム塩）、４級アンモニウム塩（例えば、トリエチルアンモニウム塩）、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、二カルボン酸塩、二硫酸塩、二酒石酸塩、ボラン酸塩、臭化物、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、二塩酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、ヘキシルレゾルシン酸、臭化水素塩、塩化水素塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物塩、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラウリル酸塩、リノール酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル塩、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩およびバレイン酸塩、並びに医学上の目的のために使用する他の塩である。
【００４９】
本明細書において、特に断わらなければ置換基は通常、以下の定義を有する。
【００５０】
アルキルそのもの；「アルキルカルボニル」、「アルキルスルホニル」、「アルキルアミノカルボニルアミノ」、「アルコキシ」、「アルコキシアルキル」および「アルコキシカルボニル」などの用語における接頭辞「アルキル」および「アルカ」；並びに、「ハロアルキル」、「ハロアルコキシ」および「アリールオキシアルキル」における接尾辞は、好ましくは炭素数１〜２０、より好ましくは炭素数１〜１４および最も好ましくは炭素数１〜６である直鎖または分枝のアルキルを意味する。非限定的な例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、イソヘプチル、オクチル、イソオクチル、ノニル、デシル、ドデシルおよびエイコシルを含む。
【００５１】
アルコキシの非限定的な例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ヘキシオキシ、イソヘキシオキシ、ヘプトキシ、イソヘプトキシ、オクトキシおよびイソオクトキシを含む。
【００５２】
アルコキシアルキルの非限定的な例としては、エトキシエチル、エトキシプロピルなどを含む。アルコキシカルボニルの非限定的な例としては、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニルおよびイソブトキシカルボニルを含む。ハロアルキルの非限定的な例としては、２,２,２−トリフルオロエチルである。ハロアルコキシの非限定的な例としては、トリフルオロメトキシである。アリールオキシアルキルの非限定的な例としては、フェノキシメチルおよび４−クロロフェノキシメチルを含む。
【００５３】
アルケニルは、好ましくは炭素数が２〜２０、より好ましくは炭素数が２〜１２および最も好ましくは炭素数が２〜６であって、且つ少なくとも１つ、好ましくは１〜２個のＣ−Ｃ二重結合を有する直鎖または分枝のアルケニルを意味する。非限定的な例としては、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、２,２−ジメチルエテニル、ペンテニル、イソペンテニル、ヘキセニル、イソヘキセニル、ヘプテニル、イソヘプテニル、オクテニルおよびイソオクテニルを含む。
【００５４】
アルキニルは、好ましくは炭素数が２〜２０、より好ましくは炭素数が２〜１２および最も好ましくは炭素数が２〜６を有し、且つ少なくとも１つ、好ましくは１〜２個のＣ−Ｃ三重結合を有する、直鎖または分枝のアルキニルを意味する。非限定的な例としては、エチニル、２−ブチニル、２−ペンチニルおよび２−ヘキシニルを含む。
【００５５】
アシルは、好ましくは炭素数が１〜９である直鎖または分枝のアシルを意味する。非限定的な例としては、アセチル、エチルカルボニル、プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ブチルカルボニルおよびイソブチルカルボニルを含む。
【００５６】
シクロアルキルそのもの；用語「シクロアルコキシ」および「シクロアルキル−アルキル」における接頭辞「シクロアルカ」は、好ましくは炭素数が３〜１０、より好ましくは炭素数が３〜７であるシクロアルキルを意味する。非限定的な例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチル、(Ｒ)−および(Ｓ)−カンファニル、並びにそれらのケト誘導体（例えば、カンホリルである(Ｒ)−(−)−および(Ｓ)−(＋)−カンホリル）を含む。シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが好ましい。シクロアルコキシの非限定的な例としては、シクロプロポキシおよびシクロヘキシオキシを含む。シクロアルキル−アルキルの非限定的な例としては、シクロプロピル−メチルである。
【００５７】
アリールそれ自体、並びに用語「アリールオキシ」、「アラルキル」および「アラルコキシ」における接頭辞「アル(または、アリール)（ar(yl)）」は、好ましくは炭素数が６〜１０である芳香族基；または、好ましくはアルキル、ハロゲンアルキル、アルコキシ、ハロゲンアルコキシ、ハロゲン、アミノ、アシルアミノ、アルキルスルホニルおよび／またはアリールスルホニルで置換されたそれらの誘導体を意味する。該誘導体としては例えば、３−および４−メチルフェニル、４−プロピルフェニル、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル、２,５−ジメチルフェニル、２,３,５,６−テトラメチルフェニル、４−メトキシフェニル、２,５−、３,４−および３,５−ジメトキシフェニル、２−メトキシ−５−メチルフェニル、４−フルオロフェニル、２−、３−および４−クロロフェニル、２,４−ジフルオロフェニル、２,３−、２,４−、３,４−、２,５−、３,５−および２,６−ジクロロフェニル、２−クロロ−４−フルオロフェニル、２−クロロ−６−メチルフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、２−,３−および４−トリフルオロメチルフェニル、４−トリフルオロメトキシフェニル、３,５−ビス(トリフルオロメチル)フェニル、３−および４−アミノフェニル、１−アセチルアミノ−２−メトキシフェン−５−イル、２−アルキル−および２−アリールスルホニルフェニル、４−アセトアミドフェニルを挙げられる。フェニル、トリル、キシリルおよびペンタメチルフェニルが好ましい。
【００５８】
アラルキルは、好ましくはＣ6〜10アリール−Ｃ1〜4アルキル、より好ましくはＣ5〜6アリール−Ｃ1〜2アルキルを意味し、例えばベンジル、２−フェネチルもしくは１−フェニルプロピル；または好ましくはアルキル、ハロゲンもしくはアルコキシカルボニルで置換されたそれらの誘導体（例えば、ジメチルベンジル、４−クロロベンジル、２,４−および２,６−ジクロロフェニルメチル、２−メトキシカルボニルフェニルメチル）を挙げられる。
【００５９】
ヘテロアラルキル(Hetaralkyl)とは、Ｓ、ＮおよびＯからなる群から選ばれる３個までのヘテロ原子を含み得る好ましくはＣ3〜10ヘテロアリール−Ｃ1〜4アルキル、より好ましくはＣ5〜6ヘテロアリール−Ｃ1〜2アルキルを意味し、例えば２−クロロピリジン−５−メチルである。
【００６０】
アラルコキシとは、好ましくはＣ6〜10アリール−Ｃ1〜4アルコキシであり、より好ましくはＣ6アリール−Ｃ1〜2アルコキシを意味し、例えばベンジルオキシである。
【００６１】
アラルケニル(Aralkenyl)とは、好ましくはＣ6〜10アリール−Ｃ2〜4アルケニル、より好ましくはＣ6アリール−Ｃ2〜4アルケニルを意味し、例えば２−フェニルエテニルである。
【００６２】
ハロゲンとは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を意味する。
【００６３】
ヘテロサイクリル(Heterocyclyl)とは、Ｓ、ＮおよびＯからなる群から選ばれる３個までのヘテロ原子を含むことができ且つ窒素原子の場合にはこれによって結合し得る、飽和、部分的に不飽和または芳香族性の３〜１０員、例えば５または６員のヘテロサイクリルを意味する。非限定的な例としては、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チエニル、フリル、ピロリル、ピロリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、１,２,３−トリアゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、モルホリニル、ピペリジニルおよびキノリニル、並びにそれらの誘導体を含む。チアゾリル、フリル、オキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニルおよびテトラヒドロピラニルが好ましい。
【００６４】
ヘテロサイクリル誘導体の非限定的な例としては、好ましくはハロゲン、アルキル、アルコキシカルボニルおよび／またはアシルアミノで置換されたヘテロサイクリルを含み,例えば、２−クロロピリジン−３−イル、Ｎ−メトキシカルボニルピペリジン−３−イル、５−メチルイソオキサゾール−３−イル、２−アセトアミノ−４−メチルチアゾール−５−イル、５−クロロ−３−メチルベンゾチアゾール−２−イル、５,７−ジメチル−１,３,４−トリアザインドリジン−２−イルを挙げられる。
【００６５】
用語「ヘテロアリール」および「ヘタリール(hetaryl)」とは、芳香族性のヘテロ環状基を意味する。
【００６６】
例えば、置換基Ｒ8およびＲ9の定義において、本明細書で使用する用語「炭素環またはヘテロ環」、および「炭素環状」または「ヘテロ環状」とは、好ましくは３〜６員の環を意味し、例えばシクロプロパン環、シクロブタン環、シクロペンタン環、シクロヘキサン環、ジヒドロフラン環、テトラヒドロフラン環、ジヒドロピラン環、テトラヒドロピラン環、ジオキサン環、ジヒドロチオフェン環、テトラヒドロチオフェン環またはそれらの置換誘導体を挙げられる。
【００６７】
本発明の接合体は、細胞毒性基または細胞分裂停止薬の基もしくは細胞分裂停止誘導体の基がαvβ3インテグリン受容体に向く非ペプチド基と連結単位によって結合することを特徴とする。該αvβ3インテグリン受容体に向く接合体の非ペプチド部分は、該接合体の毒性団部を腫瘍細胞にまたは腫瘍細胞の近傍に運び、その結果選択的に組織に達する役割を果たす。増殖性の腫瘍組織は、新しい血管の形成、すなわち血管新生を有意な程度にまで刺激して、その栄養上の要求の増大を補っている。血管新生によって形成する血管は、形成する内皮細胞の表面上の特異的なマーカーによって、通常の組織と区別される。その上、該αvβ3インテグリン受容体は多数のヒト腫瘍によって発現する（ＷＯ98/10795号およびその中の引用文献を参照）。従って、該接合体は、αvβ3インテグリン受容体に向くその非ペプチド部と内皮細胞または血管新生によって形成される腫瘍細胞上に見られるαvβ3インテグリン受容体との相互作用によって処理されるべく、腫瘍組織またはその該腫瘍組織の近傍に選択的に運ばれる。
【００６８】
αvβ3インテグリン受容体に向くペプチド基（例えば、ＷＯ98／10795に開示）とは異なって、αvβ3インテグリン受容体に向く本発明の非ペプチド分子は血清中安定性の増大によって区別され、そのことによって、腫瘍組織への該接合体の毒性団(toxophore)の運搬は増大した大きさにまで保証される。
【００６９】
好ましい態様において、αvβ3インテグリン受容体に対する拮抗作用を有する上記の接合体（Ｉ）は、該接合体内の向くαvβ3インテグリン受容体のそれらの性質を保持する。このことは、該化合物の上記の作用の全くかまたはほんのわずかなしか損傷が生じないような形で、基ＩＡが毒性団基ＣＴと連結することを意味する。通常の場合に、連結単位−ＬＩ−Ｓｐx−との連結は、ＩＡ基を含有する部分中の適当な官能基（例えば、アミノ、ヒドロキシルまたはカルボキシル官能基）によって生じる（本明細書における用語「を含有する部分」とは、該分子を完全なものとするために、基（例えば、水素またはヒドロキシル）を加えることによって形式的に得られる化合物を意味する）。上記の部分が官能基を全く有しない場合には、それらの官能基は、αvβ3インテグリン受容体に対する拮抗作用の損失を伴わずに、当該分野の当業者にとって知られる通常の方法によって該分子中に容易に導入することができる。
【００７０】
本発明の該接合体はその標的部位上でその毒性団基を放出することができ、そしてこのことにより該腫瘍組織への侵入が可能となる。このことは、該毒性団基ＣＴとαvβ3インテグリン受容体に向く基ＩＡとを連結させる単位の特定の選択によって行なう。本発明の該接合体の連結単位は、そのものが腫瘍関連酵素であるエラスターゼまたはエラスターゼ様の活性によって切断され得るように設計する。該酵素がアミノまたはカルボキシ末端の両方でかなりバルキーな部分と結合する本発明の化合物内の基質配列を認識しそして切断し、そしてそのものは該毒性団を直接に放出することは驚くべきことである。
【００７１】
本発明の該接合体の作用の組織選択性を促進するための更に適当な出発点は、いわゆるＡＤＥＰＴ方法（ここで、接合体は特定の酵素によって切断される）から構成される。これらの酵素は、本発明の接合体と組み合わせて抗体にカップリングされた身体に導入され、該抗体は腫瘍組織に特異的に向くビヒクルとして機能する。このことにより、腫瘍組織中での接合体および酵素／抗体系の両方の選択的な濃度を生じ、そのことによって、該毒性団は一層より大きな選択性をもって腫瘍組織中に放出され、そしてそこでその作用を示し得る。
【００７２】
本発の新規な接合体は、毒性団基ＣＴと連結単位−ＬＩ−Ｓｐx−との連結、および続くαvβ3インテグリン受容体に向く基ＩＡとの連結によって製造することができる。しかしながら、第１にαvβ3インテグリン受容体に向く基ＩＡを連結単位−ＬＩ−Ｓｐx−と連結し、そして次いで該毒性団基ＣＴを該連結単位と結合することも可能である。
【００７３】
該接合体（Ｉ）の個々の単位の組み合わせは、好ましくは互いに反応することができる官能基によって行なうことができ、その結果、当該分野において知られる通常の方法によって連結することができる。例えば、カルボキシル官能基は、アミド基の形成を伴うアミノ官能基と反応させることができる。該連結単位−ＬＩ−Ｓｐx−を、連結させる２分子のうちの１つの上で、すなわち基ＣＴを含有する毒性団部分またはαvβ3インテグリン受容体に向く基ＩＡを含有する部分上で、当該分野において知られる通常の方法によって段階毎に製造して、そして次いでその仕上げた連結単位を更に結合させる基と連結することも可能である。
【００７４】
したがって、本発明は該接合体（Ｉ）の製造法に関するものであって、該製造法は、、
［Ａ］（ｘが０である接合体（Ｉ）の場合）遊離のまたは活性化されたカルボキシル官能基を有する基（ＩＩ）を含有する部分と、遊離な１級または２級のアミノ基を有する単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分との反応；
［Ｂ］遊離な１級または２級のアミノ官能基を有する基（ＩＩ）を含有する部分と、例えばホスゲン、チオホスゲンまたはクロロギ酸エステルなどのカルボン酸誘導体との反応、および続く遊離な１級または２級のアミノ基を有する単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分との反応；または、
［Ｃ］遊離な１級または２級のアミノ官能基を含む基（ＩＩ）を含有する部分と、遊離のまたは活性化されたカルボキシル官能基を含む単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分との反応
を含み、
ここで［Ａ］〜［Ｃ］の全ての基は式（Ｉ）の定義を有する。
【００７５】
適宜、保護基を導入したりおよび除去することができる。窒素原子の誘導化を誘導化することができる。得られた化合物を、無機または有機の塩基または酸と反応させることによって、該遊離な酸および／または生理学的に許容し得る塩の１つに変換することができる。全てのこれら工程が、該製造法における適当な時点で可能である。
【００７６】
好ましい態様によれば、該製造法のいくつかの工程を固相上で行なう。
【００７７】
製造法の変形法［Ａ］において、基（ＩＩ）の基由来のαvβ3インテグリン受容体に向く基ＩＡを含有する分子を、その遊離なカルボキシル官能基によって、アミド基の形成を伴う単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分のアミノ官能基と連結する。この反応を、当該分野における当業者に知られる通常の方法によって行なうことができる（例えば、J. March, Advanced Organic Chemistry, 3編., p. 370 et seq., Wiley 1985）。本発明によれば、αvβ3インテグリン受容体に向く基ＩＡを含有する部分のカルボキシル官能基を活性化して、次いで単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分と、好ましくは有機溶媒中で且つ好ましくは塩基の存在下で反応させることが好ましい。
【００７８】
カルボキシル基の活性化のために、ペプチド化学において知られるカップリング試薬を、例えばJakubke/Jeschkeit in Aminosauren, Peptide, Proteine [Amino Acids, Peptides, Proteins], Verlag Chemie 1982またはTetrahedron Lett.34, 6705 (1993)に記載する通り使用することができる。上記の例は、Ｎ−カルボン酸無水物、酸クロリドまたは混合酸無水物、カルボジイミドを有する付加物（例えば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−、またはＮ,Ｎ'−ジシクロヘキシル−カルボジイミド、Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド・塩酸塩、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ'−(２−モルホリノエチル)カルボジイミド・ｐ−トルエンスルホン酸塩）、カルボニル化合物（例えば、カルボニルジイミダゾール）、１,２−オキゾリウム化合物（例えば、２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム−３−スルフェートまたは２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソオキサゾリウム・過塩素酸塩）、アシルアミノ化合物（例えば、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリン）、プロパンホスホン酸無水物、クロロギ酸イソブチル、ベンゾトリアゾリル−トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールまたはＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを挙げられる。その上、ロイシュ(Leuch's)無水物の形態である酸成分を使用することが可能である。
【００７９】
製造法の変形法［Ａ］〜［Ｃ］において使用することができる塩基としては例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジンまたはこの種類の工程において通常使用される他の塩基を含み；ジイソプロピルエチルアミンが特に好ましい。
【００８０】
上記の製造法の変形法［Ａ］〜［Ｃ］は、広範囲にわたる圧力および温度の条件（例えば、０．５〜２バールであって、常圧下が好ましかったり、または−３０〜＋１００℃であって−１０〜＋８０℃が好ましい）内で、適当な溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルム、Ｃ1〜4アルコール、アセトニトリル、ジオキサン、水またはそれらの混合物）中で実施することができる。概して、ＤＭＦ、ジクロロメタン、ＴＨＦ、ジオキサン／水またはＴＨＦ／ジクロロメタン中、室温または冷却しながら、常圧下での反応が好ましい。
【００８１】
上記の製法法の変形法［Ｂ］において、基（ＩＩ）を含有する部分は、その遊離なアミノ官能基によって第１に対応するイソシアネート、イソチオシアネートまたはカルバメートの形成を伴う炭酸誘導体と反応させ、そして次いで該接合体（Ｉ）の形成を伴う毒性団との連結単位の接合体（Ｉａ）のアミノ官能基と連結させる。
【００８２】
基（ＩＩ）を含有する部分の、それらの遊離なアミノ官能基による炭酸誘導体との反応は、当該分野において知られる通常の方法（例えば、J. March, Advanced Organic Chemistry, 3編., p. 370 et seq., Wiley 1985を参照）によって行なうことができる。該反応は好ましくは、ホスゲンまたはその置換体（例えば、クロロギ酸トリクロロメチル、チオホスゲン）またはクロロギ酸エステル（例えば、クロロギ酸ｐ−ニトロフェニルエステル）を用いて、溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド、ジオキサン／水（１：１）混合物、またはテトラヒドロフラン／ジクロロメタン（１：１）混合物）中で、冷却しながらまたは好ましくは室温で反応させ、そして適宜、塩基の存在下で約１０分間〜約３時間撹拌するのが好ましい。
【００８３】
その結果得られるイソシアネート、イソチオシアネートまたはカルバメートと、対応するチオウレアまたはウレア基の生成を伴う毒性団との連結単位の接合体（Ｉａ）のアミノ官能基との続く反応は、当該分野における当業者にとって知られる通常の方法によって行なうことができる（例えば、J. March, Advanced Organic Chemistry, 3編, p. 802 et seq., Wiley 1985を参照）。
【００８４】
本発明によれば、該カルバメート、イソシアネートまたはイソチオシアネートは、化合物（Ｉａ）のアミノ官能基と、室温で約１〜５時間（好ましくは２〜３時間）撹拌しながら、溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中で塩基の存在下、反応させることが好ましい。
【００８５】
上記の製造法の変形法［Ｃ］において、基（ＩＩ）を含有する部分を遊離のアミノ官能基によって、アミド基の生成を伴う単位ＣＴ−ＬＩ−のカルボキシル官能基と連結する。この反応は、通常の方法（例えば、J. March, Advanced Organic Chemistry, 3編, p. 370 et seq., Wiley 1985を参照）によって行なうことができる。化合物（Ｉａ）のカルボキシ官能基を活性化し、そして次いでそれを基（ＩＩ）を含有する部分と、好ましくは有機溶媒中で好ましくは塩基の存在下で反応させることが好ましい。
【００８６】
カルボキシル基の活性化のために、ペプチド化学において知られるカップリング試薬を用いることができ、このものは例えば、Jakubke/JeschkeitによるAminosauren, Peptide, Proteine [Amino Acids, Peptides, Proteins], Verlag Chemie 1982またはTetrahedron Lett.34, 6705 (1993)に記載されている。例えば、Ｎ−カルボン酸無水物、酸クロリドまたは混合酸無水物、カルボジイミドを有する添加物（例えば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−またはＮ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド・塩酸塩、Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ'−(２−モルホリノエチル)カルボジイミド・ｐ−トルエンスルホン酸塩）、カルボニル化合物（例えば、カルボニルジイミダゾール）、１,２−オキサゾリウム化合物（例えば、２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム−３−スルフェートまたは２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチル−イソオキサゾリウム・過塩素酸塩）、アシルアミノ化合物（例えば、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリン）、プロパンホスホン酸無水物、クロロギ酸イソブチル、ベンゾトリアゾリルオキシ−トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを含む。更に、ロイシュ無水物の形態で酸成分を使用することが可能である。
【００８７】
上で説明する方法によって得られる化合物は、存在し得る保護基の除去、製造法において好ましい位置で存在する窒素原子の更なる置換、および／または得られる化合物の遊離酸および／またはその生理学的に許容し得る塩への変換によって更に誘導化することができる。例えば、窒素原子の保護基として通常使用されるｔｅｒｔ−ブトキシメトキシカルボニル基は、例えばトリフルオロ酢酸の添加によって酸性媒質中で除去される。この工程における窒素原子の誘導化にとって好ましいアルキル化剤は、この目的にために通常使用される試薬であり、このものを用いて例えば、置換もしくは無置換のアルキル、置換もしくは無置換のシクロアルキル、置換もしくは無置換のアリール、または飽和もしくは不飽和の置換もしくは無置換のヘテロサイクリルを適当な窒素原子に結合することができる。上記の反応およびそれらの実行は、当該分野においてよく知られており、そしてこれは標準的な業績（例えば、「Methoden der Organischen Chemie」 [Methods of Organic Chemistry] (Houben-Weyl),Vols. 15.1 and 15.2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart; 1974）において詳述されている。
【００８８】
出発物質として機能することができる単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分は、通常の方法によって製造することができる。基ＣＴとアミノ酸単位との連結は、ペプチド化学の通常の方法（例えば、Jakubke/JeschkeitによるAminosauren, Peptide, Proteine [Amino Acids, Peptides, Proteins], Verlag Chemie 1982、または「Methoden der Organischen Chemie」 [Methods of Organic Chemistry] (Houben-Weyl), 4編; Vols. 15.1 and 15.2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974を参照）によって行なうことができ、そしてこれはまた例えばWO 96/31532および98/51703（これらは、本明細書の一部を構成する）においても記載されている。
【００８９】
適当なカルボニルまたはチオカルボニル基の結合は、上記のとおり、単位ＣＴを含有する部分またはＣＴアミノ酸接合体と、ホスゲンまたはその置換体（例えば、クロロギ酸トリクロロメチルまたはチオホスゲン）とを反応させることによって行なうことができる。
【００９０】
単位ＣＴ−ＬＩ−を含有する部分を第１に製造することが好ましいが、当然ながら単位−ＬＩ−Ｓｐx−を含有する部分を組み立てることも可能であり、順次、第１にαvβ3インテグリン受容体に向く基ＩＡを含有するかまたは全体としてそれと結合する部分上で、および次いでその結果得られる接合体を基ＣＴと連結することも可能である。
【００９１】
好ましい態様によれば、本発明の化合物の製造は、固相（例えば、ポリスチレン樹脂、特に商業的に入手可能なワングポリスチレン樹脂）上で部分的に行なう。該樹脂は、この場合に第１に溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中に膨潤させる。次いで、αvβ3インテグリン受容体に向く部分（ＩＩ）を、標準的な方法によってそのカルボキシル官能基によって該樹脂と結合させる。例えば、該カルボン酸と該樹脂との結合は、塩基（例えば、ピリジン）およびカルボキシ単位の活性化試薬（例えば、ジクロロベンゾイルクロリドなどの酸ハライド）の存在下、溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中で行なうことができる。しかしながら、この目的のために通常使用される他の試薬をまた使用することができる。該反応混合物を室温で且つ常圧で、少なくとも２時間（１２時間が好ましく、約２４時間が特に好ましい）撹拌し、使用する該カルボン酸は該固相のロードに対して過剰量で、好ましくは２〜３倍の過剰量で使用する。次いで、以下に記載する通り、本明細書に記載の全ての反応を該樹脂および向くαvβ3インテグリン受容体と結合する部分（ＩＩ）上で行なうことができる。
【００９２】
基ＣＴを含有する部分と第１のアミノ酸との連結後に、ジアステレオマー混合物が生じ得る。純粋なジアステレオマーを、上記の方法によって、例えば第１のアミノ酸単位とカンプトテシンとのカップリング反応および場合により続く保護基の除去後に、適当な様式で該ジアステレオマーを分離することによって製造することができる。
【００９３】
基（ＩＩ）を含有する部分を、本明細書に以下に記載する通り、商業的に入手可能な出発化合物から製造することができる。製造法の必須の工程は、式：
【化１０】
2004529118.tif 000011
［式中、
ＴＰは、−(ＣＨ2)mＮＯ2、−(ＣＨ2)mＯ−Ｃ1〜6アルキル、−(ＣＨ2)mＳＯ2Ｇ、(Ｃ
Ｈ2)mＣＯＧまたは−(ＣＨ2)mＣＨ2Ｏ−Ｃ1〜6アルキルであって、
各ｍは、０または１である。
Ｇは、ヒドロキシルまたはＣ1〜6アルコキシである。そして、
他の基は、上で定義する通りである。
加えて、Ｒ7は固相反応を行なうために通常、使用する固相であり得る］
のβ−アミノ酸と、
式：Ｒ10−Ａ
［式中、
Ｒ10は、−ＳＯ2Ｒ101、−ＣＯＲ101または−ＣＯＯＲ102である。
Ａは、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、トリフルオロメトキシ、−Ｏ−トシル、Ｃ1〜6アルコキシ、−Ｏ−ＣＯ−Ｃ1〜6アルキル、−Ｏ−ＣＯ−Ｃ1〜6アルコキシまたは−ＯＣ(ＣＨ3)
＝ＣＨ2である。そして、
他の基は、上で定義する通りである］
の化合物との反応によって、
【化１１】
2004529118.tif 000012
の化合物を得て、
基Ｔｐを基Ｑに変換して
（ここで、
Ｑは、−(ＣＨ2)mＮＨ2、−(ＣＨ2)mＯＨ、−(ＣＨ2)mＣＨ2ＯＨ、−(ＣＨ2)mＳＯＨ2
Ａまたは−(ＣＨ2)mＣＯＡである。
Ａは、上で定義する通りである。そして、
ｍは、０または１である）、
得られた化合物を式：
【化１２】
2004529118.tif 000013
［式中、
ＴＳは、ＡＳＯ2(ＣＨ2)n−、ＮＨ2(ＣＨ2)n−、ＡＣＯ(ＣＨ2)n−、ＨＯＣＨ2(ＣＨ2)n−、Ｍ(ＣＨ2)n−、ＭＣＨ2(ＣＨ2)n−、ＨＳＣＨ2(ＣＨ2)n−またはＨＳ(ＣＨ2)n−である。
ｎは、０または１である。
Ｍは、Ｍｇ、Ｌｉ、ＣｄまたはＳｎから選ばれる。
ＴＣは、−ＮＯ2または式：
【化１３】
2004529118.tif 000014
である。そして、
Ａ、ＸおよびＲ12〜Ｒ15は、上で定義する通りである］
の化合物と反応させて式：
【化１４】
2004529118.tif 000015
［式中、
該基は、上で定義する通りである］
の化合物を得て、
適宜、ＴＣがニトロ基である場合には、基（ＩＩ）を保持しながら、ＴＣを非環状または環状のウレア、チオウレアまたはグアニジンに変換する、
ことである。
【００９４】
該β−アミノ酸誘導体（ＩＩａ）は、商業的に入手可能であるかまたは標準的な化学的方法（これは例えば、当該分野において知られたりおよび標準的な研究（例えば、「Methoden der Organischen Chemie」 [Methods of Organic Chemistry] (Houben-Weyl), Georg Thieme Verlag, Stuttgart）に記載されている）による簡単な方法で入手することができる。特に、RodionowらによるJ. Am. Chem. Soc.51, 844-846 (1929)、KunzらによるAngew. Chem.101, 1042-1043 (1989)およびIshiharaらによるBull. Chem. Soc. Jpn.68(6), 1721-1730 (1995)に記載のβ−アミノ酸誘導体の製造法を引用する。
【００９５】
好ましい態様によれば、該β−アミノ酸誘導体（ＩＩａ）は、マロン酸またはマロン酸エステルを式：
【化１５】
2004529118.tif 000016
［式中、
Ｒ17、Ｒ19、ｈ、ｋおよびＴＰは、好ましくはアンモニア、アンモニウム化合物またはアミンの存在下で、上で定義する通りである］
のベンズアルデヒド誘導体と反応させることによって得る。マロン酸エステルを反応させる場合には、この目的に通常使用する塩基（例えば、水素化ナトリウムまたはナトリウムアルコキシド、好ましくはナトリウムメトキシドまたはナトリウムエトキシド）を加えることができる。アンモニウム化合物（例えば、酢酸アンモニウム）を使用することが好ましい。
【００９６】
該ベンズアルデヒド誘導体（ＩＩｅ）は、商業的に入手することができたりまたは標準的な化学的方法（例えば、当該分野において知られていたりおよび通常の業績（例えば、「Methoden der Organischen Chemie」 [Methods of Organic Chemistry] (Houben-Weyl), Georg Thieme Verlag, Stuttgart.）に記載されている）による簡単な方法で入手することができる。
【００９７】
好ましい態様によれば、ニトロベンズアルデヒド誘導体（例えば、３−または４−ニトロベンズアルデヒド）またはアルコキシベンズアルデヒド誘導体（例えば、３−または４−メトキシベンズアルデヒド）を、化合物（ＩＩｅ）として使用する。
【００９８】
好ましい態様によれば、β−アミノ酸（ＩＩａ）は、ほぼ等モル量のマロン酸、酢酸アンモニウムおよび３−ニトロベンズアルデヒドまたは３−メトキシベンズアルデヒドを、溶媒（例えば、イソプロパノール）中で加熱しながら、２または３時間（好ましくは２〜６時間）、５０〜１１０℃で（好ましくは溶媒の還流温度で）、通常の条件（すなわち、
常圧および通常の空気の雰囲気）下で反応させることによって得る。
【００９９】
以下の反応工程について、該カルボキシル基を通常の保護基ＰＧによって遮断する。このタイプの保護基は、当該分野の当業者にとって知られる（参考として、例えばJakubke/JeschkeitによるAminosauren, Peptide, Proteine [Amino Acids, Peptides, Proteins], Verlag Chemie 1982、または「Methoden der Organischen Chemie」 [Methods of Organic Chemistry] (Houben-Weyl), 4編; Vols. 15.1および15.2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974を参照）。該カルボキシル基は、エステル化されることが特に好ましい。ここで、ＰＧはＣ1〜6アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、Ｃ3〜7シクロアルキル（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル）、Ｃ3〜7シクロアルキル−Ｃ1〜6アルキル（例えば、シクロプロピルメチル）、アリール（例えば、フェニル、トリル）、Ｃ6〜10アラ(ar)−Ｃ1〜4アルキル（例えば、ベンジル）またはそれらの置換誘導体である。該エステル基を、通常の方法（例えば、塩基のエステル加水分解による）で対応する遊離のカルボン酸に変換することができる。
【０１００】
好ましい態様によれば、上記のβ−アミノ酸のカルボキシ基を、アルコール（例えば、エタノール）または固相反応を実施するのに通常使用される高分子と反応させることによってエステル化する。このことは、当該分野の当業者にとって知られる条件（例えば、酸による触媒反応、および適宜脱水剤（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド）の添加）下で行なうことができる。しかしながら、β−アミノ酸を過剰量で存在する適当なアルコール（例えば、エタノール）中に懸濁し、塩化水素を約３０分間〜約２時間通気し、次いで該混合物を通常の条件下で（例えば、２または３時間、好ましくは約１〜６時間、特に好ましくは約３〜５時間、約５０〜約１００℃、好ましくは該アルコールの還流温度で）加熱することが好ましい。
【０１０１】
好ましい態様によれば、基（ＩＩ）を含有する部分の製造は、固相（例えば、ポリスチレン樹脂、特に好ましくは商業的に入手可能なワングポリスチレン樹脂）上で行う。この事に関連して、該樹脂を最初に溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中に膨潤させる。次いで、出発化合物として供する適当なカルボン酸体を標準的な方法によって該樹脂に結合させる。例えば、該カルボン酸の該樹脂への結合は、塩基（例えば、ピリジン）および該カルボキシル単位を活性化させる試薬（例えば、ジクロロベンゾイルクロリドなどの酸ハライド）の存在下、溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中で行なうことができる。しかしながら、この目的のために通常使用される他の試薬をまた使用することができる。該反応混合物を室温および常圧で、少なくとも２時間、好ましくは少なくとも１２時間、特に好ましくは約２４時間撹拌し、使用する該カルボン酸は該固相のロードに対して過剰量、好ましくは２〜３倍の過剰量（当量ベースで）とする。
【０１０２】
未反応であり得る試薬の除去後に、所望するならば、該樹脂と結合した該カルボン酸の誘導化を、従来の樹脂から取り出す必要なしで行なうことができる。該樹脂からの取り出しは、通常の方法で、好ましくは酸性媒質中で行なう。該樹脂から取り出した生成物を、存在し得る溶媒の除去後、公知の精製法（例えば、クロマトグラフィー法）によって精製することができる。
【０１０３】
この方法で入手することができる該カルボキシ保護のβ−アミノ酸は、適当なスルホン化試薬、カルバモイル化試薬またはアシル化試薬と反応させて、対応するスルホンアミド、カルバメートまたはアミド誘導体を得ることができる。使用する好ましいスルホン化試薬およびカルバモイル化試薬は、式Ｒ101pr−ＳＯ2Ｃｌのスルホニルクロリドおよび式Ｒ102pr−ＣＯＯＣｌのカルバモイルクロリドであり、ここでＲ101prおよびＲ102prはＲ101およびＲ102と同一であるかあるいは基Ｒ101およびＲ102に変換することができる前駆体である。
【０１０４】
上記のスルホニルクロリドまたはカルバモイルクロリドの代わりに、対応するフルオリド、ブロミドまたはヨードを使用することも可能である。アシル化試薬として、適当なカルボン酸ハライドまたはカルボン酸無水物をアミノ基、適当なＣ1〜6アルキルカルボン酸クロリド（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチルおよびヘキシルのカルボン酸クロリド）、Ｃ3〜7シクロアルキルカルボン酸クロリド（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルのカルボン酸クロリド）；アリールおよびアラルキルのカルボン酸クロリド（例えば、安息香酸クロリド、トリルおよびベンジルのカルボン酸クロリド）、並びに好ましいそれらの置換誘導体と反応させる。
【０１０５】
ウレア基またはチオウレア基の製造について、該アミノ基を好ましくは第１に、炭酸もしくはチオ炭酸の誘導体（例えば、クロロギ酸エステル）またはチオホスゲンと反応させ、次いで目的のアミンＨＮＲ101prＲ103pr（ここで、Ｒ101prおよびＲ103prは、Ｒ101およびＲ103と同一であるかまたは残基Ｒ101およびＲ103に変換することができる前駆体である）と反応させる。上記の反応およびそれらの実行は、当該分野の当業者にとってよく知られており、また標準的な業績（例えば、「Methoden der Organischen Chemie」 [Methods of Organic Chemistry] (Houben-Weyl), Georg Thieme Verlag, Stuttgart）において詳述されている。
【０１０６】
本発明の好ましい態様によれば、該カルボキシル保護のβ−アミノ酸（ＩＩａ）を、等モル量またはわずかに過剰量の適当なスルホニル化試薬（例えば、フェニルスルホニルクロリド）またはアセチル化試薬（例えば、メシチルアセチルクロリド）を用いて、冷却しながら（好ましくは０℃で）、溶媒（例えば、ピリジンまたはジオキサン）中で、通常の条件下、好ましくは塩基（例えば、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンなどのアミン）の存在下で処理し、そして該混合物をこの温度で約１０分間〜約２時間撹拌する。スルホニル化の場合には、これを室温で２〜３時間、好ましくは約２〜６時間撹拌する。
【０１０７】
連結基Ｌの製造前に、化合物（ＩＩｂ）の基Ｔｐを基Ｑ（これは、求核試薬または基質のいずれかとして求核置換反応に関与することができる）に変換することができる。ＴＰがニトロ基を有する場合には、このものを対応するアミノ基に還元し、これは好ましくはスズ(ＩＩ)クロリドを溶媒（例えば、エタノール）中の化合物（ＩＩｂ）の溶液に加え、引き続いて約５０〜１１０℃まで（好ましくは溶媒の還流温度で）、２〜３時間（好ましくは約１〜約４時間）、通常の条件下で加熱することによって行うことができる。ＴＰがエーテル基を含む場合には、対応するヒドロキシル基の遊離を好ましくは、ルイス酸（例えば、ボロントリブロミド）を溶媒（例えば、ジクロロメタン）中で冷却しながら（好ましくは−７８℃で）加えて、続いて２〜３時間（好ましくは、６〜２４時間）、室温で撹拌することによって行なう。ＴＰがスルホ基またはカルボキシル基を有する場合には、対応するスルホニルハライドまたはカルボン酸ハライドヘの変換を、例えばチオニルクロリドとの反応によって行なうことが好ましい。
【０１０８】
Ｑ−修飾の化合物（ＩＩｂ）と化合物（ＩＩｃ）との反応について、該反応体を約等モル量で一緒に、好ましくは塩基（例えば、ピリジンまたは水素化ナトリウム）の存在下で、適宜溶媒（例えば、テトラヒドロフランまたはジメチルホルムアミド）中で、通常の条件下、室温でまたは冷却しながら（約０℃が好ましい）混合し、そして２〜３時間（好ましくは約１〜２４時間）室温でまたは冷却しながら（例えば、約０℃で）撹拌する。
【０１０９】
その結果得られる化合物（ＩＩｄ）を、存在するならば末端ニトロ基を非環状または環状のグアニジン基、ウレア基またはチオウレア基に変換することによって、基（ＩＩ）を含有する部分に変換することができる。
【０１１０】
この目的のために、該ニトロ基を第１に、好ましくは通常の還元剤（例えば、スズ(ＩＩ)クロリド）を適宜、溶媒（例えば、エタノール）の存在下で加え、該反応混合物を約５０〜１１０℃で（好ましくは溶媒の還流温度で）通常の条件下、約２時間加熱しながら該反応混合物を撹拌することによってアミノ基に変換する。
【０１１１】
その結果得られたアミノ基のグアニジン基、ウレア基またはチオウレア基ヘの変換のために、次いで上記のアミノ基を好ましくは第１に、溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中、塩化水銀(ＩＩ)の存在下で、冷却しながら（好ましくは、約０℃で）炭酸エステル誘導体またはチオ炭酸エステル誘導体と反応させ、および冷却しながら（好ましくは、約０℃で）および適宜、続いて室温で約１０分間〜３時間撹拌することができる。使用する該炭酸エステルまたはチオ炭酸エステル誘導体は好ましくは、ホスゲン、チオホスゲン、クロロギ酸エステルまたはチオ偽ウレア誘導体、ウレア誘導体の製造に好ましい商業的に入手可能なクロロギ酸エステル、チオウレア誘導体の製造に好ましいチオホスゲン、およびグアニジン誘導体の製造に好ましいチオ偽ウレア誘導体である。
【０１１２】
この方法で形成されるカルバメートまたはイソチオシアネートを、適当なアミンとの反応によって対応するウレア、チオウレアおよびグアニジン誘導体に変換することができる。使用するアミンは、式ＨＮＲ101prＲ103prの基質であって、ここでＲ101PrおよびＲ103Prはそれぞれ、Ｒ101およびＲ103と同一であるかまたは基Ｒ101およびＲ103に変換され得る前駆体である。
【０１１３】
本発明によれば、該カルバメートまたはイソチオシアネートは好ましくは、補助塩基（例えば、ジソプロピルエチルアミン）の存在下、溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド）中、室温で約１〜５時間（好ましくは、約２〜３時間）撹拌しながら、アミンと反応させる。環状のグアニジン誘導体の製造の場合には、該対応するイソチオシアネートを好ましくは第１に、エタノール中で２〜３時間（好ましくは、約１２〜２４時間）加熱し、そして次いでジアミン（例えば、ジアミノエタン）と一緒に溶媒（例えば、トルエン、ジメチルホルムアミドまたはその両方の混合物）中で加熱する。
【０１１４】
更に好ましい態様によれば、上記の方法で化合物（ＩＩｃ）上に上記のグアニジン基、ウレア基またはチオウレア基を生成させ、そして次いで上記の方法で、そうして修飾した化合物（ＩＩｃ）を化合物（ＩＩｂ）と反応させることも可能である。
【０１１５】
上で説明した方法に従って得られる化合物は更に、存在し得る保護基を除去し、更に得られた化合物の製造法および／または変換において好ましい位置で存在する窒素原子を更に置換することによって誘導化して、その遊離の酸および／またはその生理学的に許容し得る塩とすることができる。例えば、窒素原子の保護基として通常使用されるｔｅｒｔ−ブトキシメトキシカルボニル基を、酸性媒質（例えば、トリフルオロ酢酸の添加による）中で除去する。
【０１１６】
本発明のエステル誘導体を、通常の方法（例えば、塩基によるエステル加水分解）で対応する遊離のカルボン酸に変換することができる。
【０１１７】
本発明の接合体を、癌に対する薬物の製造において活性成分として使用することができる。
【０１１８】
この目的のために、それらを、不活性な非毒性の医薬的に適当な賦形剤または溶媒を用いて、製剤（例えば、錠剤、コーティング錠、エアロゾル剤、丸剤、顆粒剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤および液剤）に変換することができる。好ましくは、本発明の接合体を全混合物中でのそれらの濃度が約０．５〜９０重量％の範囲となる量で使用し、該濃度はとりわけ該薬物の対応する指標に依存する。
【０１１９】
上記の製剤を、例えば該活性化合物を上記の性質を有する溶媒および／または賦形剤、適宜、更に乳化剤または分散剤を用いて拡張することによって製造することができ、溶媒が水の場合には、有機溶媒を加えることができる。したがって、本発明の更なる態様は、少なくとも１つの接合体（Ｉ）を少なくとも１つの薬理学的に許容し得る製剤化剤と組み合わせることによって医薬組成物を製造する方法である。
【０１２０】
接合体（Ｉ）に加えて、他の製剤は接合体（Ｉ）と異なる少なくとも１つの医薬的に活性な成分を含む。したがって、活性成分として有効な量の少なくとも１つの接合体（Ｉ）および少なくとも１つの医薬的に活性な成分（これは、接合体（Ｉ）とは異なる）を含有する医薬組成物は、本発明の別の態様である。
【０１２１】
本発明の更なる態様は、有効な量の接合体（Ｉ）を不活性な医薬的な担体と一緒に含有する投与単位形態である薬物を意味する。
【０１２２】
本発明の更なる態様は、癌の処置のための医薬組成物の製造における接合体（Ｉ）の使用を意味する。
【０１２３】
本発明の更なる態様は、哺乳動物において癌を処置する方法を意味し、該方法は有効な量の少なくとも１つの接合体（Ｉ）を単独でもしくは希釈剤と混合してまたは医薬の形態で投与することを含む。
【０１２４】
投与は、通常の方法で、好ましくは経口的に、経皮的にまたは非経口的に（例えば、舌下で、頬側的に、静脈内で、鼻腔的に、直腸でまたは吸入的に）行なうことができる。
【０１２５】
ヒトでの使用について、経口投与の場合には、用量を０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇで投与することが推奨される。非経口投与（例えば、静脈内または粘膜による鼻腔的に、頬側的にまたは吸入的に）の場合には、用量を０．００１〜０．５ｍｇ／ｋｇで使用することが推奨される。
【０１２６】
適宜、すなわち体重または投与経路の種類に応じて、該医薬に対する個体の反応、その製剤化の様式および投与を行なう期間または間隔に応じて、上記の量から外れることが必要となり得る。したがって、ある場合には上記の最少量よりも少なく管理して十分であり得て、一方で別の場合には上記の上限を超えなければいけない。かなり多量の投与の場合には、これらを１日かけて数回の別個の用量に分けることが推奨され得る。
【０１２７】
本発明の接合体（Ｉ）はまた、獣医学における使用が適当でもある。獣医学における使用の場合、本発明の接合体（Ｉ）を、通常の獣医学的な実施に従って適当な製剤で投与することができる。処置する動物の種類に応じて、獣医学の外科医は使用の種類(nature)および用量を決めることができる。
【０１２８】
本発明は、特に癌と闘うための医学的な利用における使用のために接合体を提供する。
【０１２９】
本発明は更に、少なくとも１つの本発明の接合体を少なくとも１つの薬理学的に許容し得る製剤化剤と組み合わせることによって医薬組成物を製造する方法を提供する。
【０１３０】
本発明は更に、活性成分として有効な量の少なくとも１つの本発明の接合体、および少なくとも１つの薬理学的に許容し得る製剤化剤を含む医薬組成物を提供する。
【０１３１】
本発明は更に、活性成分として有効な量の少なくとも１つの本発明の接合体、および本発明の接合体とは異なる少なくとも１つの医薬的に活性な成分を含む医薬組成物を提供する。
【０１３２】
本発明は更に、有効な量の本発明の接合体を不活性な医薬的な担体と一緒に含む用量単位形態の医薬を提供する。
【０１３３】
本発明は更に、哺乳動物における癌と闘う方法を提供するものであって、該方法は有効な量の少なくとも１つの本発明の接合体を単独でもしくは希釈剤と混合して、または医薬の形態で投与することを含む。
【０１３４】
本発明を、実施例を限定するものではなく、実施例を比較する目的で、例示する。
【０１３５】
以下の試験および実施例における上記のパーセントは、特に指示しなければ重量％である。部は、重量部である。溶媒比率、希釈比率および液体中の液体の溶液濃度は、容量比および容量濃度である。
【０１３６】
以下の実施例の収率パーセントは、最も低い当量で使用した場合の出発成分に対するものを意味する。
【０１３７】
実施例
質量測定は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）法を用いる高速液体クロマトグラフィー−質量分光法（ＨＰＬＣ−ＭＳ）、またはＦＡＢもしくはＭＡＬＤＩ質量分光法によって行なった。
【０１３８】
使用する略号の表
Ａｂｕは、      γ−アミノ酪酸である。
ＡＣＮは、      アセトニトリルである。
Ｂｏｃは、      ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。
ＤＣＭは、      ジクロロメタンである。
ＤＩＥＡは、    ジイソプロピルエチルアミン（ヘニッヒ(Hunig)塩基）である。
ＤＭＡＰは、    ジメチルアミノピリジンである。
ＤＭＦは、      ジメチルホルムアミドである。
ＤＭＳＯは、    ジメチルスルホキシドである。
ＦＣＳは、      胎児ウシ血清である。
Ｆｍｏｃは、    フルオロレニル−９−メトキシカルボニルである。
ＨＰＬＣは、    高速液体クロマトグラフィーである。
ＭＴＢＥは、    メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルである。
ＮＭＰは、      Ｎ−メチルピロリドンである。
ＮＭＲＩは、    ヌードマウス系統である。
ＲＰは、        逆相である。
ＲＴは、        室温である。
ＲＴＶは、      腫瘍の大きさの比率（relative tumour volume）である。
ＴＦＡは、      トリフルオロ酢酸である。
ＴＨＦは、      テトラヒドロフランである。
ＴＬＣは、      薄相クロマトグラフィーである。
【０１３９】
シリーズＩ：出発物質の製造
Ｉ．１  ２０−Ｏ−Ｌ−バリルカンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化１６】
2004529118.tif 000017
Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)バリン−Ｎ−カルボキシ酸無水物（１４ｇ、２当量）および４−(Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ)ピリジン（１ｇ）を、２０(Ｓ)−カンプトテシン（１０ｇ、２８．７ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（５００ｍＬ）の撹拌懸濁液に加える。４日間加熱還流後に、該混合物を真空下で濃縮する。該残渣をＭＴＢＥ（１００ｍＬ）と一緒に２０分間撹拌する。次いで、石油エーテル（２００ｍＬ）を加え、そして該混合物をろ過する。Ｂｏｃ−保護の中間体化合物（１４．９ｇ）を得て、このものは少量のＤ−バリンエピマーを含み得るが、しかしながらこのものを保護基の除去後に問題なく除去することができる。
【０１４０】
次いで、このＢｏｃ−保護中間体化合物（１１．６５ｇ）のジクロロメタン（３００ｍＬ）および無水トリフルオロ酢酸（７０ｍＬ）混合物を５℃で１時間撹拌する。真空下で少量になるまで濃縮後に、該生成物をジエチルエーテルを用いて沈降させ、そしてジエチルエーテルを用いて十分に洗浄する。該生成物を再び、ジエチルエーテルを用いてジクロロメタン／メタノールから沈降させる。適宜、該粗生成物を再び、メタノール（４０ｍＬ）に溶かし、ＭＴＢＥ（１２０ｍＬ）を加えて、該溶液を０℃まで冷却する。該沈降物をろ取して、乾燥後に２０−Ｏ−(バリル)−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩（９．４ｇ、８０％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水（２０：１）；Ｒf＝０．３９］。
【０１４１】
Ｉ．２  ２０−Ｏ−[Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル]−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化１７】
2004529118.tif 000018
実施例Ｉ．１由来の化合物（１．５ｇ、２．６７ｍｍｏｌ）およびヘニッヒ塩基（１．４ｍＬ）を、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルプロリン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＳｕ）（１ｇ、３．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７５ｍＬ）溶液に加え、そして該混合物を６時間撹拌する。更にＢｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＳｕ（１ｇ）を加えて、該混合物を終夜撹拌する。該溶媒を蒸発させて、そして該残渣を水と一緒に撹拌してろ過する。該ろ液の残渣をジクロロメタンに溶解し、ジエチルエーテル／石油エーテル（１：１）を用いて沈降させる。該再結晶化を繰り返して、該生成物をろ過によって単離し、そして真空下で乾燥する。
収量は、１．７１５ｇ（７５％）である。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水（２０：１）；Ｒf＝０．７３］。
【０１４２】
次いで、該Ｂｏｃ−保護中間化合物（１．７１５ｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１００ｍＬ）および無水トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）混合液中、５℃で１時間撹拌する。真空下で濃縮後に、該生成物をジクロロメタン／メタノールに溶かし、ジエチルエーテルを用いて沈降させ、そしてジエチルエーテルを用いて十分に洗浄する。該生成物を再び、ジエチルエーテルを用いてジクロロメタン／メタノールから沈降させる。該沈降物をろ取して、乾燥後に、該標的化合物（１．４６ｇ、８３％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒf＝０．４３］。
【０１４３】
Ｉ．３  ２０−Ｏ−[Ｌ−プロリル−Ｌ−ロイシル]−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化１８】
2004529118.tif 000019
この化合物を、実施例Ｉ．２およびＩ．１に類似して製造する。
【０１４４】
Ｉ．４  ２０−Ｏ−[グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル]−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化１９】
2004529118.tif 000020
４−ジメチルアミノピリジン（３７１ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を、化合物Ｉ．２（１ｇ、１．５２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）およびＮ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−グリシン−Ｎ−カルボキシ酸無水物（Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＮＣＡ）（６５３ｍｇ、３ｍｍｏｌ）の懸濁液に加える。１時間撹拌後に、該溶媒を除去し、該残渣を水と一緒に撹拌して、ろ過する。該粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（溶出液としてアセトニトリルを使用）によって精製する。関連する画分を単離し、そして溶媒を蒸発させることにより、該保護した中間生成物（７４８ｍｇ、７０％）を得る。該ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を、実施例Ｉ．２に記載する通り除去する。該標的化合物（７０９ｍｇ、９３％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒf＝０．３４］。
【０１４５】
Ｉ．５  ２０−Ｏ−[Ｌ−アラニル−Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル]−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化２０】
2004529118.tif 000021
ジイソプロピルエチルアミン（８０ｍｇ）を、化合物Ｉ．２（１３５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）およびＮ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)アラニン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（Ｂｏｃ−Ａｌａ−ＯＳｕ）（６５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の懸濁液に加える。１６時間撹拌後に、更にＢｏｃ−Ａｌａ−ＯＳｕ（３２ｍｇ）を加えて、そして撹拌を６時間続ける。該溶媒を除去し、該残渣を水と一緒に撹拌し、ろ過する。該粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（溶出液としてアセトニトリルを使用）によって精製する。関連する画分を単離し、そして溶媒を除去することにより、保護した中間生成物（１０７ｍｇ、７３％）を得る。
該ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を実施例Ｉ．２に記載の通り除去する。該標的化合物（９２ｍｇ、８７％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒf＝０．３２］。
【０１４６】
Ｉ．６  ２０−Ｏ−[Ｌ−アスパルチル(Aspartyl)−Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル]−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化２１】
2004529118.tif 000022
１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）（１２ｍｇ）、Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド・塩酸塩（１４ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２４ｍｇ）を、Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−アスパラギン酸−γ−ブチルエステル（Ｂｏｃ−Ａｓｐ(Ｏ−ｔＢｕ)−ＯＨ）（２１ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に加える。該混合物を３０分間撹拌する。続いて、化合物Ｉ．２（４０ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）を加える。２時間音波処理の後、該反応を完結させ、そして該溶媒を除去する。該残渣は、ジクロロメタンおよび水の間で分配する。該有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮する。該残渣を、石油エーテルおよびジエチルエーテルの混合物を用いてジクロロメタンから沈降させる。該保護した中間化合物（４７ｍｇ、９５％）を得る。
該ｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび該ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基の両方を、実施例Ｉ．２に記載する通り除去する。該標的化合物（３３ｍｇ、７４％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒf＝０．２８］。
【０１４７】
表１に示す更なるカンプトテシンペプチド接合体は、「Methoden der Organischen Chemie」 [Methods of Organic Chemistry] (Houben Weyl), 4版., XV巻 1部および2部, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974、またはHans-Dieter JakubkeおよびHans Jeschkeitによるin Aminosauren, Peptide, Proteine [Amino Acids, Peptides, and Proteins], Verlag Chemie, Weinheim 1982に記載するかあるいは上記の実施例に例示する標準的な方法に類似して製造する。
表１
2004529118.tif 000023
*)アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）
【０１４８】
Ｉ．１１  Ｎ−ロイシル−キノロン−ａ・トリフルオロ酢酸塩
【化２２】
2004529118.tif 000024
１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）（１０８ｍｇ）、Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチル−カルボジイミド塩酸塩（１２２．３ｍｇ、０．６４ｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２０６ｍｇ）を、Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ロイシン（Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ）（１２２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に加える。該混合物を３０分間撹拌する。続いて、キノロン−ａ（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を加える。４時間撹拌後に、該反応を完結させて、該溶媒を除去する。該残渣を水と一緒に撹拌して、ろ過する。該残渣をジエチルエーテルを用いてジクロロメタンから沈降させる。該保護した中間化合物（２４７ｍｇ、７４％）を得る。該ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を、実施例Ｉ．１に記載する通り除去する。該標的化合物（２４５ｍｇ、９８％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒf＝０．４６］。
【０１４９】
Ｉ．１２  Ｎ−(アラニル−プロリル−ロイシル)−キノロン−ａ・トリフルオロ酢酸塩
【化２３】
2004529118.tif 000025
化合物Ｉ．１１から出発して、この接合体を実施例Ｉ．５に類似して製造する。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒｆ＝０．３５］。
【０１５０】
Ｉ．１３  Ｎ−(グリシル−プロリル−ロイシル)−キノロン−ａ・トリフルオロ酢酸塩
【化２４】
2004529118.tif 000026
化合物Ｉ．１１から出発して、この接合体を実施例Ｉ．５に類似して製造する。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒf＝０．４］。
【０１５１】
Ｉ．１４  Ｎ−(グリシル−プロリル−バリル)−キノロン−ａ・トリフルオロ酢酸塩
【化２５】
2004529118.tif 000027
この接合体を実施例Ｉ．１２に類似して製造する。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水／氷酢酸（５／１／０．２）；Ｒf＝０．５］。
【０１５２】
Ｉ．１５  ７−エチル−１０−(Ｌ−バリルオキシ)−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化２６】
2004529118.tif 000028
２０(Ｓ)−７−エチル−１０−ヒドロキシ−カンプトテシン（３０ｍｍｇ、７６４ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）懸濁液を、Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)−バリン−Ｎ−カルボキシ酸無水物（３７２ｍｇ、１．５μｍｏｌ）および４−(Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ)ピリジン（３０ｍｇ）と一緒に撹拌しながら、処理する。２時間加熱還流後に、ジクロロメタン（２００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）を加える。該混合物を分液ろうと中で振り混ぜ、該有機相を分離して真空下で濃縮する。該目的生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル（３：１〜＞１：１）を用いて溶出）によって精製する。関連する画分を集めて、真空下で濃縮する。１０−Ｂｏｃ−バリンオキシ置換の中間化合物（１４０ｍｇ、３１％）を得る。
【０１５３】
次いで、この中間化合物（１３９ｍｇ、２３０μｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）および無水トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）の混合物中、５℃で１時間撹拌する。少量になるまで真空下で濃縮後に、該生成物をジエチルエーテルを用いて沈降させ、ジエチルエーテルを用いて十分に洗浄する。該生成物を再び、ジエチルエーテルを用いてジクロロメタン／メタノールから沈降させる。該沈降物をろ取して乾燥後に、２０(Ｓ)−７−エチル−１０−(バリルオキシ)−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩（１２２ｍｇ、８６％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水（１０：１）Ｒf＝０．２５］。
【０１５４】
Ｉ．１６  ７−エチル−１０−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化２７】
2004529118.tif 000029
２０(Ｓ)−７−エチル−１０−ヒドロキシ−カンプトテシン（３００ｍｇ、７６４μｍｍｏｌ）のジクロロメタン／ジメチルホルムアミド（８：１）（１２０ｍＬ）懸濁液を、Ｂｏｃ2Ｏ（１６６８ｍｇ、７．６５ｍｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−ジイソプロピルアミン（９８８ｍｇ）と一緒に撹拌しながら処理する。３日間撹拌後に、ジクロロメタン（２００ｍＬ）および５％の強い炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加える。該混合物を分液ろうと中で振り混ぜ、有機相を分離し、水洗して真空下で濃縮する。該生成物をジエチルエーテルおよび石油エーテルを用いてジクロロメタンから沈降させる。１０−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ中間化合物（３３５ｍｇ、９２％）を得る。
［ＴＬＣ：アセトニトリル／水（２０：１）  Ｒf＝０．６］。
【０１５５】
Ｉ．１７  ２０(Ｓ)−７−エチル−１０−Ｏ−[グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル]−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化２８】
2004529118.tif 000030
実施例Ｉ．１５に記載する化合物から出発して、実施例Ｉ．４に類似して製造する。
【０１５６】
Ｉ．１８  ２０(Ｓ)−７−エチル−１０−ヒドロキシ−２０−Ｏ−[グリシル−Ｌ−プロリル−Ｌ−バリル]−カンプトテシン・トリフルオロ酢酸塩
【化２９】
2004529118.tif 000031
実施例Ｉ．１６の化合物から出発して、実施例Ｉ．４に類似して製造する。
【０１５７】
シリーズＩＩ：インテグリンリガンドの製造
実施例ＩＩ．１
【化３０】
2004529118.tif 000032
ＩＩ．１−ａ  ３−アミノ−３−[３−(プロピルアミノカルボニルアミノ−フェニル−スルホニルアミノ)−フェニル]プロピオン酸
【化３１】
2004529118.tif 000033
ポリスチレンワング樹脂（１．０８ｍｍｏｌ／ｇをロードする）（１．２ｇ）をＤＭＦ中で膨潤させる。該溶媒を吸引ろ過して除き、(３Ｒ,Ｓ)−３−(９−フルオレニル−メトキシカルボニルアミノ)−３−(３−ニトロフェニル)プロピオン酸（アミノ酸試薬）（８４１ｍｇ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液を加える。室温で１５分間振り混ぜた後に、ピリジン（３５０μＬ）および２,６−ジクロロベンゾイルクロリド（５４０ｍｇ）を該懸濁液に加える。該混合物を室温で終夜振り混ぜる。次いで、該樹脂をＤＭＦ、メタノールおよびＤＣＭを用いて洗浄する。該樹脂および塩化ズズ(ＩＩ)・二水和物（５４００ｍｇ）のＮＭＰ（１２ｍＬ）混合物を室温で終夜振り混ぜる。次いで、該樹脂をＮＭＰ、メタノール、ＴＨＦおよびＤＭＦを用いて洗浄する。該樹脂を、ＤＩＥＡ（４５０μＬ）のＴＨＦ（５００μＬ）溶液および３−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（４３０ｍｇ）のＴＨＦ（５００μＬ）溶液と混合する。該混合物を室温で終夜振り混ぜる。次いで、該樹脂をＤＭＦ、メタノールおよびＴＨＦを用いて洗浄する。
【０１５８】
得られた樹脂を塩化スズ(ＩＩ)・二水和物（５４００ｍｇ）のＮＭＰ（１２ｍＬ）溶液と混合し、該混合物を室温で終夜振り混ぜる。次いで、該樹脂をＮＭＰ、メタノール、ＴＨＦおよびＤＣＭを用いて洗浄する。該樹脂を、ＤＩＥＡ（５００μＬ）のＴＨＦ／ＤＣＭ（１：１）（１２ｍＬ）溶液および４−ニトロフェニル−クロロギ酸エステル（２７５７ｍｇ）のＴＨＦ／ＤＣＭ（１：１）（１２ｍＬ）溶液を用いて処理する。室温で４５分間振り混ぜた後に、そのものをＴＨＦおよびＤＭＦを用いて洗浄し、そしてプロピルアミン（９４３ｍｇ）およびＤＩＥＡ（２７８０μＬ）のＮＭＰ（２０ｍＬ）溶液を加える。１０時間振り混ぜた後に、該樹脂をＤＭＦ、メタノール、ＴＨＦおよびＤＣＭを用いて洗浄する。該生成物の取り出しのために、該樹脂をＴＦＡ／ＤＣＭ（１２ｍＬ）と一緒に１時間振り混ぜ、ろ取し、そして該ろ液を真空下で濃縮する。
【０１５９】
ＩＩ．１  ３−(４−アミノフェニルアミノカルボニルアミノ)−３−[３−(３−プロピルアミノカルボニルアミノフェニルスルホニルアミノ)フェニル］プロピオン酸
【化３２】
2004529118.tif 000034
化合物ＩＩ．１−ａ（７０ｍｇ，０．１６６ｍｍｏｌ）、４−ニトロフェニルイソシアネート（５４ｍｇ、２当量）およびＤＭＦ（１０ｍＬ）の混合物を、１時間撹拌する。該混合物を濃縮し、そして該残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール／１７％の強アンモニア水溶液（１５：２：０．２）を用いて溶出）によって精製する。ジエチルエーテルを用いてジクロロメタン／メタノールから沈降後に、中間体−ａ（２９ｍｇ、３０％）を得る。
【０１６０】
この中間体−ａをメタノールに溶解し、パラジウム−炭素を用いて水素添加する。該触媒を分離して除き、該溶液を濃縮し、該残渣をジオキサン／水から凍結乾燥する。標的化合物（１８ｍｇ、７４％）を得る。
【０１６１】
ＩＩ．２：ＩＩ．１のエナンチマーＡ  ３−(４−アミノフェニルアミノカルボニルアミノ)−３−[３−(３−プロピルアミノカルボニルアミノフェニルスルホニルアミノ)−フェニル]−プロピオン酸
【化３３】
2004529118.tif 000035
ＩＩ．２．ａ  ３−(アミノ)−３−(３−ニトロフェニル)−プロピオン酸・塩酸塩
【化３４】
2004529118.tif 000036
３−ニトロベンズアルデヒド（１５１ｇ）、酢酸アンモニウム（９４ｇ）、マロン酸（１２７ｇ）および２−プロパノール（１Ｌ）混合物を、５時間加熱還流した。該溶液をろ過し、該沈降物を熱２−プロパノール（０．７Ｌ）を用いて洗浄した。該粗生成物を真空下で乾燥し、水（１．５Ｌ）中に懸濁し、１Ｎ塩酸を加えて、該混合物をろ過した。該ろ液を濃縮して１４６ｇを得た。
1H-NMR (400 MHz, D4-メタノール): δ＝3.09 (m, 2 H), 4.88 (m, 1 H), 7.74 (t, 1 H), 7.90 (d, 1 H), 8.33 (d, 1 H), 8.43 (s, 1 H)。
【０１６２】
ＩＩ.２.ｂ  ３−アミノ−３−(３−ニトロフェニル)プロパン酸エチル・塩酸塩
【化３５】
2004529118.tif 000037
塩化水素を、実施例ＩＩ.２.ａ由来の３−アミノ−３−(３−ニトロフェニル)プロピオン酸・塩酸塩（６０ｇ）のエタノール（６６０ｍＬ）懸濁液中に１時間通気した。次いで、該混合物を４時間加熱還流し、次いで冷却して濃縮した。白色固体（６２ｇ）を得た。
1H-NMR (400 MHz, D4-メタノール): δ＝1.22 (t, 3 H), 3.12 (dd, 1 H), 3.20 (dd, 1 H), 4.18 (q, 2 H), 4.95 (t, 1 H), 7.77 (t, 1 H), 7.94 (d, 1 H), 8.35 (d, 1 H), 8.43 (s, 1 H)。
【０１６３】
ＩＩ.２.ｃ  ３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−(３−ニトロフェニル)プロパン酸エチル
【化３６】
2004529118.tif 000038
ジイソプロピルエチルアミン（４８．８ｇ）、アリルオキシカルボニルクロリド（２４．８ｇ）およびジクロロメタン（１５０ｍＬ）混合物を、実施例ＩＩ.２.ｂ由来の３−アミノ−３−(３−ニトロフェニル)プロピオン酸エチル・塩酸塩（４１．２ｇ）およびジクロロメタン（３５０ｍＬ）の混合物に０℃で加えた。３０分間撹拌後に、該混合物を水洗し、該有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して白色固体（収量は５６．４ｇ）を得る。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 1.18 (t, 3 H), 2.90 (d, 2 H), 4.11 (q, 2 H), 4.58 (m, 2 H), 5.15-5.40 (m, 3 H), 5.90 (m, 1 H), 6.05 (m, 1 H), 7.55 (t, 1 H), 7.70 (d, 1 H), 8.12 (d, 1 H), 8.19 (s, 1 H)。
【０１６４】
ＩＩ.２.ｄ  ３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−(３−アミノフェニル)プロパン酸エチル
【化３７】
2004529118.tif 000039
塩化スズ(ＩＩ)（６４．６ｇ）を、実施例ＩＩ.２.ｃ由来の３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−(３−ニトロフェニル)プロパン酸エチル（１８．８ｇ）のエタノール（２４５ｍＬ）溶液に加え、そして該混合物を２時間加熱還流した。該反応混合物を２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）を用いて加水分解し、次いでシリカゲルを通してろ過し、そして該ろ液をジクロロメタンを用いて洗浄した。該有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、白色固体（１３．１ｇ）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ＝1.19 (t, 3 H), 2.80 (m, 2 H), 4.06 (q, 2 H), 4.57 (m, 2 H), 5.07 (m, 1 H), 5.20 (d, 1 H), 5.29 (d, 1 H), 5.70 (m, 1 H), 5.89 (m, 1 H), 6.57 (d, 1 H), 6.62 (s, 1 H), 6.68 (d, 1 H), 7.11 (t, 1 H)。
【０１６５】
ＩＩ.２.ｅ  ３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−{{３−{[(３−ニトロフェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチル
【化３８】
2004529118.tif 000040
３−ニトロフェニルスルホニルクロリドを、０℃で実施例ＩＩ.２.ｄ由来の３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−(３−アミノフェニル)プロパン酸エチル（１１．６ｇ）のピリジン（１１０ｍＬ）溶液に加えた。２時間の反応後に、該混合物を濃縮し、１Ｎ塩酸を加え、そして該溶液をジクロロメタンを用いて抽出した。該有機相を硫酸マグネシウムで乾燥後に、該溶媒を除去し、そして該粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝４０：１を使用）によって精製して、固体（１７．８ｇ）を得た。
【０１６６】
ＩＩ.２.ｆ  ３−{{(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−{{３−{[(３−アミノフェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチル
【化３９】
2004529118.tif 000041
塩化スズ(ＩＩ)（４３．５ｇ）を、実施例ＩＩ.２.ｅ由来の３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−{{３−{[(３−ニトロフェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチル（１７．８ｇ）のエタノール（１６５ｍＬ）溶液に加え、そして該混合物を２時間加熱還流させた。該反応混合物を２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）を用いて加水分解し、次いでシリカゲルを通してろ過してジクロロメタンを用いて洗浄した。該有機相を硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、濃縮して固体（９．２ｇ）を得た。
【０１６７】
該物質を、キラルクロマトグラフィー（セレクター(selector)バイエル−ＣＳＰ（Ｎ−メタアクリロイル−Ｌ−バリン−３−ペンチルアミド）を使用し、溶媒としてＴＨＦを用いる）によってそのエナンチオマーに分離した。同様なセレクターは文献（Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 30, 1662-1664 (1991)）に記載されている。この分離により、２つの生成物の画分１および２を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝1.18 (t, 3 H), 2.80 (m, 2 H), 3.95 (br.s, 2 H), 4.08 (q, 2 H), 4.54 (m, 2 H), 5.08 (m, 1 H), 5.22 (d, 1 H), 5.30 (d, 1 H), 5.78 (m, 1 H), 5.90 (m, 1 H), 6.58 (s, 1 H), 6.75 (d, 1 H), 6.88 (d, 1 H), 6.95 (s, 1 H), 7.05 (d, 1 H), 7.11 (d, 1 H), 7.15-7.22 (m, 3 H)。
【０１６８】
ＩＩ.２.ｇ  ３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−{{３−{[(３−{[(プロピルアミノ)カルボニル]アミノ}フェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチル
【化４０】
2004529118.tif 000042
プロピルイソシアネート（９．６ｇ）を、実施例ＩＩ.２.ｆ由来の画分１のエナンチ的に純粋な３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−{{３−{[(３−アミノフェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチル（５０ｇ）のジオキサン（５００ｍＬ）溶液に加え、そして該混合物を５０℃で１８時間撹拌した。該溶媒を蒸発させた後に、１Ｍ塩酸（１．５Ｌ）を加え、そして該溶液をジクロロメタンを用いて抽出した。該有機相を硫酸マグネシウムを用いて乾燥して濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー精製（ジクロロメタン／メタノール＝３０：１を使用）により、該化合物（１９．１ｇ）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ＝0.90 (t, 3 H), 1.19 (t, 3 H), 1,52 (q, 2 H), 2.83 (m, 2 H), 3.18 (m, 2 H), 4.10 (q, 2 H), 4.56 (m, 2 H), 5.05-5.35 (m, 3 H), 5.90 (m, 1 H), 6.18 (m, 1 H), 6.77 (m, 1 H), 6.88 (s, 1 H), 7.00-7-45 (m, 8 H), 7.98 (m, 1 H)。
【０１６９】
ＩＩ.２.ｈ  ３−アミノ−３−{{３−{[(３−{[(プロピルアミノ)カルボニル]アミノ}フェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチル
【化４１】
2004529118.tif 000043
酢酸（２．５７ｍＬ）、水素化トリブチルスズ（５．３２ｍＬ）およびビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)クロリド（１７７ｍｇ）を、実施例ＩＩ.２.ｇ由来の３−{[(３−アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−{{３−{[(３−{[プロピルアミノ)カルボニル]アミノ}フェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチル（９．５８ｇ）のジクロロメタン（２４５ｍＬ）溶液に加え、そして得られた混合物を室温で２２時間撹拌した。炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、そして該混合物をジクロロメタンを用いて抽出した。該有機相を硫酸マグネシウムで乾燥後に、該溶液を除去し、そして該粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール（１０：１）を使用）によって精製して、目的の化合物（２．３０ｇ）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): 0.88 (t, 3 H), 1.20 (t, 3 H), 1,50 (q, 2 H), 2.60 (dd, 1 H), 2.67 (dd, 1 H), 3.17 (m, 2 H), 4.11 (q, 2 H), 4.33 (m, 1 H), 5.21 (m, 1 H), 6.89 (d, 1 H), 7.07 (d, 1 H), 7.16 (t, 1 H), 7.22-7.34 (m, 5 H), 7.38 (s, 1 H), 7.49 (s, 1 H)。
【０１７０】
ＩＩ.２.  ３−(４−アミノフェニルアミノカルボニルアミノ)−３−[３−(プロピルアミノカルボニルアミノフェニルスルホニルアミノ)フェニル]プロピオン酸のエナンチマーＡ
【化４２】
2004529118.tif 000044
化合物ＩＩ.２.ｈ（７００ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）、４−ニトロフェニルイソシアネート（５１０ｍｇ、２当量）およびＤＭＦ（１００ｍＬ）混合物を、１時間撹拌する。該混合物を濃縮し、そして該残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール／１７％強アンモニア水溶液（１５：２：０．２）を使用）によって精製する。ジエチルエーテルを用いてジクロロメタン／メタノールから沈降させた後に、中間体−ａ（２９０ｍｇ、３０％）を得る。この中間体−ａをメタノールに溶解して、パラジウム−炭素を用いて水素添加を行なう。該触媒を分離して除き、該溶液を濃縮し、そして残渣をジオキサン／水から凍結乾燥させる。中間体−ｂ（２０４ｍｇ、７４％）を得る。中間体−ｂ（２００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をメタノールに溶解し、そして２Ｍ水酸化リチウム水溶液（１ｍＬ）と混合する。６時間後に、更に水酸化リチウム溶液（３００μＬ）を加え、そして該混合物を脱エステル化反応が完結するまで撹拌する。該溶液を濃縮し、そして該生成物をジエチルエーテルを用いてジクロロメタンから沈降させる。化合物ＩＩ.２（１４１ｍｇ、７５％）を得る。
[ＴＬＣ：(アセトニトリル／水／氷酢酸（１０／１／０．１）；Ｒf＝０．６]。
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝５５５（Ｍ＋Ｈ）+］。
【０１７１】
ＩＩ.３  ３−(４−アミノフェニルアミノカルボニルアミノ)−３−[３−(プロピルアミノカルボニルアミノフェニルスルホニルアミノ)フェニル]プロピオン酸のエナンチオマーＢ
３−{[(アリルオキシ)カルボニル]アミノ}−３−{{３−{[(３−アミノフェニル)スルホニル]アミノ}フェニル}}プロパン酸エチルの画分２を該エナンチオマーの分離後に使用する点を除いて、エナンチマーＡの製造についての同じプロトコールを使用した。
【０１７２】
シリーズＩＩＩ：インテグリンリガンドと細胞毒性薬との接合体の製造
一般的な製法Ａ（チオウレア連結）：
チオホスゲン（９．６μＬ、０．１３ｍｍｏｌ）を、シリーズＩＩ由来のインテグリンリガンド（０．０９ｍｍｏｌ）のジオキサン／水（１：１）溶液に加える。室温で１５分間撹拌後に、ヘニッヒ塩基（９４μＬ、０．５４ｍｍｏｌ）を加え、そして該混合物を更に１０分間撹拌し、次いで濃縮する。該残渣をジクロロメタンに溶かし、ジエチルエーテルを用いて沈降させる。該得られたイソチオシアネートを更に精製することなく、次の工程において反応させる。
【０１７３】
該イソシナネート（０．０９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５ｍＬ）に溶解し、そして得られた溶液をヘニッヒ塩基（４３μＬ）の存在下、シリーズＩにおけるペプチド接合体の１つ（０．０８ｍｍｏｌ）と混合する。室温で３０分間撹拌後に、該混合物を濃縮し、そして該残渣を水と一緒に撹拌する。該残渣を分離して、メタノール／ジクロロメタンに溶解する。該生成物をジエチルエーテルを用いて沈降させる。
【０１７４】
必要に応じて、更なる精製はシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー精製によって行なう。適当な溶出系は以下の通りである：
ジクロロメタン／メタノール／１７％強アンモニア水溶液（１５／３／０．３）、
ジクロロメタン／メタノール／１７％強アンモニア水溶液（１６／２／０．２）。
【０１７５】
該関連する画分を集め、濃縮し、そして標的生成物をジエチルエーテルを用いてメタノール／ジクロロメタンから沈降させることによって単離する。多くの場合に、接合体はそれぞれのナトリウム塩に変換して、水溶性を改善する。従って、該接合体を水に懸濁し、そして溶液が生じて且つｐＨが約８に達するまで、１〜２当量の０．０１Ｎ水酸化ナトリム水溶液を加える。続いて凍結乾燥することにより、インテグリンリガンドと細胞毒性薬との接合体のナトリウム塩を得る。
【０１７６】
一般的な製法Ｂ（ウレア連結）
ヘニッヒ塩基（１６μＬ）を、４−ニトロフェニルクロロギ酸エステル（０．０７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に加える。続いて、ＴＨＦ（５ｍＬ）およびＤＭＦ（０．５ｍＬ）の混合物に溶解したシリーズＩＩ由来のインテグリンリガンドの１つ（０．０５ｍｍｏｌ）を数回に分けて加え、そして得られた混合物を室温で１０分間撹拌する。ＤＭＦ（２ｍＬ）およびヘニッヒ塩基（２４μＬ）に溶解したシリーズＩ由来のペプチド接合体（０．０４ｍｍｏｌ）を加え、そして得られた混合物を室温で更に１時間撹拌する。該溶媒を除去し、そして該残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精製する。適当な溶出液は以下の通りである：
ジクロロメタン／メタノール／１７％強アンモニア水溶液（１５／３／０．３）、
ジクロロメタン／メタノール／１７％強アンモニア水溶液（１６／２／０．２）。
【０１７７】
該関連する画分を集め、濃縮し、そして該標的生成物をジエチルエーテルを用いてメタノール／ジクロロメタンから沈降させることによって単離する。多くの場合に、接合体をその個々のナトリウム塩に変換して、水溶性を改善する。従って、該接合体を水に懸濁し、そして溶液が生じて且つｐＨが約８に達するまで、１〜２当量の０．０１Ｎ水酸化ナトリム水溶液を加える。続いて、凍結乾燥することにより、インテグリンと細胞毒性薬との接合体のナトリウム塩を得る。
以下の溶出系をＴＬＣにおいて使用した：
１）ジクロロメタン／メタノール／１７％強アンモニア水溶液（１５／４／０．５）、および
２）アセトニトリル／水／氷酢酸（１０／１／０．１）。
【０１７８】
実施例１：
【化４３】
2004529118.tif 000045
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．４、ＩＩ．２
製法：Ａ
収率：５１％（２段階）
Ｒf＝０．３７1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１１９８＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１７９】
実施例２：
【化４４】
2004529118.tif 000046
ジアステレオマーＢ：
抽出物  Ｉ．４、ＩＩ．３
製法：Ａ
収率：５１％（２段階）
Ｒf＝０．３７1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１１９８＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８０】
実施例３：
【化４５】
2004529118.tif 000047
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．５、ＩＩ．２
製法：Ａ
収率：６９％（２段階）
Ｒｆ＝０．３９1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１２１２＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８１】
実施例４：
【化４６】
2004529118.tif 000048
ジアステレオマーＢ：
抽出物  Ｉ．５、ＩＩ．３
製法：Ａ
収率：６６％（２段階）
Ｒｆ＝０．３９1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１２１２＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８２】
実施例５：
【化４７】
2004529118.tif 000049
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．８、ＩＩ．２
製法：Ａ
この化合物を、その塩酸塩（ナトリウム塩ではない）に変換する。
該ベタインを水に溶解し、１当量の０．１Ｎ塩酸を用いて処置する。同じ容量のジオキサンを加えて、そして該混合物を凍結乾燥する。
収率：５％（２段階）
Ｒf＝０．４５1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１２７８＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８３】
実施例６：
【化４８】
2004529118.tif 000050
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．７、ＩＩ．２
製法：Ａ
収率：４４％（２段階）
Ｒf＝０．３1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１２５５＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８４】
実施例７：
【化４９】
2004529118.tif 000051
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．９、ＩＩ．２
製法：Ａ
収率：５７％（２段階）
Ｒf＝０．４４1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１２４０＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８５】
実施例８：
【化５０】
2004529118.tif 000052
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．６、ＩＩ．２
製法：Ａ、ナトリウム塩には変換しない。
収率：１２％
Ｒf＝０．１３1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１２５６＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８６】
実施例９：
【化５１】
2004529118.tif 000053
ジアステレオマーＢ：
抽出物  Ｉ．１０、ＩＩ．３
製法：Ａ、ナトリウム塩には変換しない。
収率：４０％（２段階）
Ｒf＝０．４１1)
[ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｅ＝１２１２＝(Ｍ(酸)＋Ｈ)+]
【０１８７】
実施例１０：
【化５２】
2004529118.tif 000054
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．１７、ＩＩ．２
製法：Ａ
【０１８８】
実施例１１：
【化５３】
2004529118.tif 000055
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．１８、ＩＩ．２
製法：Ａ
【０１８９】
実施例１２：
【化５４】
2004529118.tif 000056
ジアステレオマーＡ：
抽出物  Ｉ．１２、ＩＩ．２
製法：Ａ、ナトリウム塩には変換しない。
フラッシュクロマトグラフィー（溶出液としてアセトニトリル／水（１：１）を使用）によって精製する。
収率：３６％
Ｒf＝０．５2)
[ＥＳＩ−ＬＣ−ｎｅｇ：ｍ／ｅ＝１２９３＝(Ｍ−Ｈ)-]
【０１９０】
生物学的な試験
Ａ：αvβ3結合試験
ヒトＡ３７５細胞のαvβ3は、WongらによるMolecular Pharmacology50, 529-537 (1996)によって記載の方法に類似して精製した。各場合に、αvβ3（５ｎｇ）のＴＢＳ（ｐＨ  ７．６）溶液（１０μＬ）、２ｍＭ  ＣａＣｌ2、１ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１％非オクチルグルコピラノシド（シグマ製）；被験物質のＴＢＳ（ｐＨ  ７．６）溶液（１０μＬ）、０．１％ＤＭＳＯおよびＴＢＳ（ｐＨ  ７．６）（４５μＬ）、２ｍＭ  ＣａＣｌ2、１ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１ｍＭ  ＭｎＣｌ2を、室温で１時間インキュベートした。次いで、各場合に、ＷＧＡ  ＳＰＡベッド（アマーシャム製、４ｍｇ／ｍＬ）（２５μＬ）およびエチスタチン(echistatin)（０．１μＣｉ、アマーシャム製、クロラミン−Ｔ標識）（１０μＬ）を加えた。室温で１６時間後に、該試料をシンチレーション測定装置（ワラック(Wallac)1450）内で測定した。該試験結果を、以下の表２に示す。
表２：αvβ3受容体との結合のＩＣ50値
2004529118.tif 000057
【０１９１】
Ｂ．様々な腫瘍セルラインにおける細胞毒性性質の測定のための増殖抑制試験
ヒト大腸セルラインＳＷ４８０およびＨＴ２９（ATCC受託番号CCL228）、並びにＨＴＢ３８およびマウス黒色腫セルラインＢ１６Ｆ１０（CRL6475）を、Roux皿内の１０％ＦＣＳを添加したセロメド(seromed)（登録商標）ＲＰＭＩ１６４０培地（Biochrom KG製, ベルリン）中で集密にまで増殖させた。次いで、それらをトリプシン処理し、そして細胞計数がｍＬ当たり５０,０００細胞、Ｂ１６Ｆ１０の場合には２０,０００細胞ヘ１０％ＦＣＳを足したＲＰＭＩ中に溶かした。ウェル当たり細胞懸濁液（１００μＬ）を９６ウェルプレートに加えて、そしてＣＯ2インキュベータ−内で３７℃で１日インキュベートした。次いで、更にＲＰＭＩ培地（１００μＬ）およびＤＭＳＯ（１μＬ）を、該被験物質と一緒に加えた。該増殖を６日後に調べた。この目的のために、ＭＴＴ溶液（３−(４,５−ジメチルチアゾール−２−イル)−２,５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）（２５μＬ）を各ウェルに、出発濃度が水中、５ｍｇ／ｍＬで加えた。該プレートを、ＣＯ2インキュベーター内で３７℃で５時間インキュベートした。次いで、該培地を吸引し、ｉ−プロパノール／ウェル（１００μＬ）を加えた。水（１００μＬ）と一緒に３０分間振り混ぜた後に、該吸光度をマルチプレートリーダー（BIO-RAD 3550-UV）を用いて５９５ｎｍで測定した。
【０１９２】
該細胞分裂停止作用を、個々のセルラインについての各場合についてＩＣ50値として表３に示す。
表３：腫瘍セルラインに及ぼす細胞毒性作用のＩＣ50値
2004529118.tif 000058
【０１９３】
Ｃ．ヌードマウスモデルを用いたインビボ抑制または腫瘍増殖
物質：
腫瘍増殖の抑制を調べるための全てのインビボ実験において、無胸腺症ヌードマウス（NMRI nu/nu系統）を使用した。該腫瘍をヌードマウスにおける連続的な継代によって発生させた。該ヒト起源の腫瘍は、イソ酵素的な方法および免疫組織化学的な方法によって確認した。
【０１９４】
実験学上の段取り：
該腫瘍は、６〜８週齢のnu/nuヌードマウスの両方の横腹に皮下インプラントした。該処置は、腫瘍が直径５〜７ｍｍに達すると直ぐに、倍加時間(doubling time)時間により開始させた。該マウスを、無作為化によって処置群またはコントロール群に（８〜１０の評価することができる腫瘍を有する群当たり５マウス）割り当てた。該コントロール群の個々の腫瘍は全て進行的に増殖する。
【０１９５】
腫瘍の大きさを、スライドゲージによって２次元に測定した。次いで、細胞計数と十分に相関する腫瘍の大きさを全評価のために使用した。該大きさは、式「長さ×幅×幅／２」（「ａ×ｂ2」；ここで、ａおよびｂは正しい角度で整えられた(arranged)２つの直径を示す）にしたがって測定した。
【０１９６】
腫瘍の大きさの比率（ＲＴＶ）の値は、Ｘ日目の腫瘍の大きさを０日目の腫瘍の大きさで割ることによって（無作為の時点に）各々の腫瘍について算出した。次いで、ＲＴＶの平均値を更なる評価のために使用した。
【０１９７】
腫瘍の大きさの増大の抑制（被験群／コントロール群、Ｔ／Ｃ、単位はパーセント）を、最終的な測定値とした。
【０１９８】
処置：
該化合物を、腹腔内、静脈内、経口または皮下経路のいずれかによって、毎日または２〜３日の間欠的な療法スケジュールで投与することができる。
【０１９９】
皮下的な増殖性の黒色種異種移植片モデル（MEXF 989）の場合、実施例１および３の化合物を試験し、腫瘍増殖の抑制に有効であった。該化合物を１％デキストロース溶液に溶解し、そして１〜３日目および１５〜１７日目に静脈内投与した。最適な算出されたＴ／Ｃ値を、表４に示す。
表４
2004529118.tif 000059
【０２００】
その上、皮下増殖性の腎臓異種移植片モデル（ＲＸＦ９４４）の場合に、実施例１および３の化合物を調べ、そしてこれらもまた腫瘍増殖の抑制に有効であった。該化合物を１％デキストロース水溶液に溶解し、そして１〜３日目および１５〜１７日目に静脈内投与する。最適な算出されたＴ／Ｃ値を、表５に示す。
表５
2004529118.tif 000060
【０２０１】
その上、皮下増殖性の乳癌モデル（ＭＸ−１）の場合には、実施例１および３の化合物を調べ、そしてこれらもまた腫瘍増殖の抑制に有効であった。該化合物を１％デキストロース水溶液に溶解し、そして１〜３日目および１５〜１７日目に静脈内投与した。最適な算出されたＴ／Ｃ値を、表６に示す。
表６
2004529118.tif 000061
【０２０２】
Ｄ．造血性幹細胞のＣＳＦ誘発性増殖
骨髄細胞を、マウスの大腿からフラッシュする。１０5細胞を、組換えマウスＧＭ−ＣＳＦ（Genzyme；親細胞コロニー形成）および物質（１０-4〜１００μｇ／ｍＬ）と一緒に、３７℃、７％ＣＯ2でＭｃＣｏｙ５Ａ培地（０．３％寒天）中でインキュベートする。７日後に、コロニー（＜５０細胞）およびクラスター（１７〜５０細胞）をカウントする。
【０２０３】
実施例１〜４の化合物を試験した。それらは、カノプトテシンと比較して、インビトロで幹細胞に対する毒性を劇的に低下させることを示す。
表７：造血幹細胞に対する毒性のＩＣ50値
2004529118.tif 000062
【０２０４】
Ｅ．ＨＴ２９の培地中でのエラスターゼによる接合体の切断
表８：２４時間インキュベート後のエラスターゼで補足したＨＴ２９の上清中の放出されたカンプトテシン対接合体のピーク面積の比率
2004529118.tif 000063
【国際公開パンフレット】
2004529118.tif 000066
2004529118.tif 000067
2004529118.tif 000068
2004529118.tif 000069
2004529118.tif 000070
2004529118.tif 000071
2004529118.tif 000072
2004529118.tif 000073
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2004529118.tif 000075
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【国際調査報告】
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