(57)【要約】自然精液または増量精液を同時または引き続いてのプロスタグランジンと共に投与する工程を含む群れ当りの平均受精処理数を軽減させる方法が提供される。また、自然精液、増量精液または精液増量剤のいずれか、１以上のプロスタグランジンおよび１以上の抗生物質を含む物質の新規な組成物が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
群れ当りの平均受精処理数（ａｖｅｒａｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｉｎｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｓ）を軽減させる方法であって、自然精液または増量精液を同時または引き続いてのプロスタグランジンと共に投与する工程を含むことを特徴する該方法。
【請求項２】
該群れが、ブタ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギまたはシカの群れであることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
該群れが、ブタの群れであることを特徴とする請求項２記載の方法。
【請求項４】
少なくとも８０％の群れ受胎率を達成するための処理数が、プロスタグランジンが投与されない場合に必要とされる処理数に比較して２０ないし８０％軽減されることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項５】
プロスタグランジンが、ＰＧＦ２αであることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項６】
該プロスタグランジンが、受精のために必要とされる精液と共に同時または引き続いて加えられることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項７】
プロスタグランジンが、自然精液、増量精液または精液増量剤と共に含まれることを特徴とする請求項６記載の方法。
【請求項８】
群れのメンバーに抗生物質を投与するさらなる工程を含むことを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項９】
（ａ）自然精液、増量精液または精液増量剤
（ｂ）１以上のプロスタグランジン：および
（ｃ）１以上の抗生物質
を含む物質の組成物。
【請求項１０】
（ｂ）が、プロスタグランジンＦ２αであって、（ｃ）がセフチオフル、ＬＩＮＣＯＭＹＣＩＮ、ＳＰＥＣＴＩＮＯＭＹＣＩＮまたはその混合物である請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
（ａ）が精液増量剤である請求項１０記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
１．発明の分野
本発明は、雌ブタにおける正常または増加した受胎率を得るために必要とされる人工授精数を軽減させるために自然または増量された雄ブタの精液中の黄体退行剤（ｌｕｔｅｏｌｙｔｉｃ ａｇｅｎｔ）、特にプロスタグランジン、ならびに特にプロスタグランジンＦ２αおよびそのアナログの使用に関する。また、精液の組成物は１以上の抗生物質を含み得る。
【０００２】
２．関連技術の記載
プロスタグランジンファミリー、特に、プロスタグランジンＦ２α（ＰＧＦ２α）の自然および合成のアナログは、黄体退行（ｌｕｔｅｏｌｙｔｉｃ）作用のために、食糧動物の繁殖に共通の人工受精プラクティスにおける補助物として広範囲に用いられている。ある報告は、ＰＧＦ２αアナログで成熟期および成熟した雄ブタにおける性欲の刺激を記載している（Ｓｚｕｒｏｐら、１９８５）。いくつかの報告は、雄ブタの増量精液中への５ｍｇのＰＧＦ２αの添加の結果、子ブタの生存産子数（）を増加させ、受胎する雌ブタの見込みを増大させたことを示している（Ｇｉｌら、１９９８）。同様に、ＰＧＦ２αの投与は、年間を通して一定レベルで同腹子当りの子ブタの産子数および子を生む雌ブタの数を維持することにより雌ブタにおける季節的不妊の効果を緩和するのを助けた（Ｐｅｎａら、１９９８）。Ｔａｋａｃｓら（１９８５）は、人工授精系における受精能レベルに関する雄ブタの精液および雌ブタのＰＧＦ２α処置の効果を言及した。Ｎｉｗａら（１９８２）は、精子生存率、受胎率および引き続いての子ブタの産子数に対する雄ブタ精液希釈物へのＰＧＦ２αの添加の影響を言及した。
【０００３】
ブタ産業において、一般的には、人工授精が雌ブタを受胎させるのに用いられる。通常のプラクティスにおいて、精液が雄ブタから集められ、精子細胞濃度、全精子細胞数およびその精子細胞生存率につき分析される。引き続いて、精液を一般的に増量剤で希釈して、人工授精に適する精液組成物を供する。典型的には、精液増量剤は、精子細胞生存率を保護するための栄養、および、所望により、細菌性分解から組成物を保護するための抗生物質を含有する。典型的には、増量剤は、ミルク、卵黄、卵黄−グルコースまたはミルク−グルコースベースである。
【０００４】
実際上、ブタの発情期の長さは、３６時間ないし１００時間持続し得る。結果的に、雌は、受胎を生じる受精の可能性を増大させるために各発情期中に数回受精させる。しかしながら、各受精処理は、人員、資材等に関して時間および費用を必要とする。８５％ないし９０％の受胎率を達成するのに必要とされる受精数は、２ないし４回の処理範囲であり得、３回が典型的である。一般的には、受精プロセスは、約１０ないし２０分間を必要とする。大きな群れでは、受精総数における軽減は、群れにわたって平均されると、分娩、精液、精液増量剤および精子提供雄ブタ数に実質的な節約を提供すると分かる。さらに、受精数の軽減は、動物の取扱いを軽減させ、それによって、動物の幸福を増大させる。
【０００５】
加えて、雄ブタの精液および雄ブタの増量精液中の抗生物質の使用が知られている。全くしばしば、抗生物質は、貯蔵条件の改善の目的のために、他の例では、同腹子における異常の可能性を低減するために添加される。例えば、Ｃｅｒｏｖｓｋｙ、１９８６、Ｈｏｖｏｒｋａ（１９８５）およびＵｎｄｅｒｗｏｏｄ（１９８２）参照。多数の精液増量剤が、既に、それらの組成物のベースとしてある種の抗生物質または抗生物質の組合せを含有している。法的要求は、１９９０年６月２６日のＴｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｕｎｉｏｎ Ｃｏｕｎｃｉｌ Ｄｉｒｅｃｔｉｖｅ（９０／４２９／ＥＥＣ）に示されるごとく精液が国内外に運ばれなければならない場合、生物安全の理由のために増量精液（ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｓｅｍｅｎ）の抗生物質処理につき存在し得る。本立法は、特に、レプトスピラおよびマイコプラズマに対する抗生物質の有効な組合せが、最終希釈後、精液に添加されなければならないことを推奨する。この組合せは、以下の希釈：
１ｍｌのストレプトマイシン当り５００ＩＵ
１ｍｌのペニシリン当り５００ＩＵ
１ｍｌのリンコマイシン当り１５０μｇ
１ｍｌのペクチノマイシン当り３００μｇ　　：以上
に少なくとも同等である効果を生じなければならない。
【０００６】
前記の教示にも拘らず、雌ブタの群れ当りの受精処理数を軽減させる方法につき依然として当該技術分野における必要性が存在する。加えて、プロスタグランジンおよび抗生物質の双方を有する二重の利益を提供できる組成物についての必要性が存在する。
【０００７】
発明の簡単な概要
本発明により、雌ブタの群れ当りの平均受精処理数（ａｖｅｒａｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｉｎｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｓ）を軽減させる新規な方法が提供される。より詳細には、本方法は、自然精液または増量精液をプロスタグランジンの同時または引き続いての投与と共にその群れに投与することを含む。
【０００８】
好ましい具体例において、プロスタグランジンは、ＰＧＦ２α（およびプロスタグランジンのＰＧＦ２αファミリーのいずれかの天然または合成化合物）であって、該方法は、群れにおける８０％を超える受胎率を達成するのに必要される処理数を、プロスタグランジンが投与されない場合に必要される処理数に比較して２０ないし８０％軽減できる。特に好ましい具体例において、該方法をブタ（雌ブタ）の処置につき用いる。
【０００９】
さらにもう一つの具体例において、物質の新規な組成物が提供される。該組成物は、自然精液、増量精液または精液増量剤、１以上のプロスタグランジンおよび１以上の抗生物質を含む。好ましい具体例において、該プロスタグランジンは、ＰＧＦ２αであって、該抗生物質は、セフチオフルまたはＬＩＮＣＯＭＹＣＩＮＲおよびＳＰＥＣＴＩＮＯＭＹＣＩＮＲの組合せのいずれかである。
【００１０】
本発明の目的は、群れ当りの受精数を軽減させる方法を提供することにある。
【００１１】
本発明のさらにもう一つの目的は、人工授精に用いられるべき新規な組成物を提供することにある。
【００１２】
これらのおよび他の目的は、参照が好ましい具体例の詳細な記載になされるので、当業者には容易に明らかであろう。
【００１３】
好ましい具体例の詳細な記載
好ましい具体例を記載するにおいて、ある種の技術用語が明瞭さのために利用されるであろう。かかる技術用語は、引用された具体例、ならびに同様の目的が同様の結果に達する同様な方法で操作する全ての技術的同等物を含むことを意図する。
【００１４】
本発明は、自然精液または増量精液と一緒のプロスタグランジンの投与によるその群れにおける少なくとも８０％の所望の受胎率を達成するための群れ当りの受精処理数を軽減させる方法に指向される。特に好ましい具体例において、標的受胎率は８０〜１００％の間にあり、８０〜９０％の率が最も一般的である。もちろん、１００％の受胎率が理想的ではあるが、常に実際上可能とは限らない。
【００１５】
実際上、本発明は、特に、雌ブタの受精に適合されるが、限定されるものではないが、ウシ、ヒツジ、ウマ、ヤギ、シカ等を含めた他の動物の受精も明示的に含む。
【００１６】
さらに、群れ当りの受精数は、プロスタグランジンを含まない受精方法に比較して約２０％ないし約８０％軽減させるべきである。これは、２、３、４または５回の受精から１、２、３または４回の受精とするものに軽減することによって達成される。受精数における最大の軽減は５回から１回になることであり、一方、最小の軽減は５回から４回になることである。
【００１７】
用いられるべきプロスタグランジンは、受胎を増強するために当該技術分野において知られているものであるべきである。実際上、好ましいプロスタグランジンは、アナログおよび合成アナログを含めたＰＧＦ２αである。本発明に特に有用な市販製品は、Ｕｐｊｏｈｎ Ａｎｉｍａｌ Ｈｅａｌｔｈにより、名称ＬＵＴＡＬＹＳＥＲ無菌溶液の下で販売されている。１ｍｌのＬＵＴＡＬＹＳＥＲ無菌溶液は、５ｍｇの有効成分、ＰＧＦ２α（トロメタミン塩としてのジノプロスト）を含有する。
【００１８】
プロスタグランジンは、受精に先立ち自然精液または精液増量剤に直接的に添加できるか、あるいは自然精液または希釈した精液の投与の直後または直前に別々に投与できる。また、受精用量当り１ないし１０ｍｇの最終濃度の活性プロスタグランジンを得るためのいずれの量のプロスタグランジンも含有するいずれかの新規な精液増量剤組成物も含まれる。実際上、プロセスにおいて助けるために添加されるプロスタグランジン量は、雌ブタ当り活性体の約１ないし約１０ｍｇの範囲にあり、より好ましくは、雌ブタ当り約１．５ないし約５ｍｇの間、最も好ましくは雌ブタ当り約２．５ｍｇである。
【００１９】
受精に用いた精液は、その自然または増量された形態のいずれかであり得る。実際上、農業経済学のために、商業上許容される増量剤を用いて自然精液を希釈することが好ましい。実際上、自然精液の１部毎に、約２ないし約１０部の増量剤を用い、１部の自然精液−対−約３ないし約７部の増量剤の比がより好ましく、１部の自然精液−対−約４部の増量剤の比が最も好ましい。
【００２０】
動物を受精させるのに用いる精液量は、典型的には、約５ｍｌと約２５０ｍｌとの間の自然精液、より好ましくは、約１０ｍｌと約５０ｍｌとの間の自然精液の範囲にある。精液を増量させる範囲まで増量精液量は単純に複数の増量である。例えば、雌ブタが、当該増量が１部の自然精液に対する４部の増量剤である８０ｍｌの増量精液で受精されるならば、受精に用いられた自然精液量は１６ｍｌである。
【００２１】
増量される場合、増量剤はミルク、卵黄、卵黄−グルコースまたはミルク−グルコースよりなる。また、前記の混合物は、本発明の範囲内にあると考えられる。商業上入手可能な増量剤の例は、Ｋｉｅｖ、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＭｏｄｅｎａＲまたはＢｅｌｔｓｖｉｌｌｅ Ｔｈａｗ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＢＴＳ）の名称の下販売され；これらの商業上入手可能な増量剤は、３日間まで精液の保存を可能とする。５ないし７日間までの精液の保存を可能とする長時間型増量剤は、ＡｎｄｒｏｈｅｐＲ、 ＭＲ−ＡＲ、Ｘ−ＣｅｌｌＴＭ、ＺｏｒｐｖａおよびＲｅａｄｉｎｇである。
【００２２】
また、１以上の抗生物質が、所望により、自然精液、増量精液または増量剤中に存在する。動物衛生処置に商業上用いられるものは、特に、本発明の範囲にあるものと考えられる。抗生物質は、以下のクラスの抗生物質：アミノグリコシド系、アムフェニコール系（ａｍｐｈｅｎｉｃｏｌｓ）、ベータ−ラクタム系、マクロライド系、リンコサミド系（ｌｉｎｃｏｓａｍｉｄｅｓ）、ＮＯＶＯＢＩＯＣＩＮ、ＳＰＥＣＴＩＮＯＭＹＣＩＮＲ、サルファ剤およびテトラサイクリン系ならびにその混合物から選択できる。かかる抗生物質の例には、限定されるものではないが、ナトリウム塩、塩酸塩および遊離酸を含めたセフチオフルファミリーのセファロスポリン、スペクチノマイシン、リンコマイシンおよびその混合物が含まれる。商業上有用な抗生物質の例には、ＮＡＸＣＥＬＲ、ＥＸＣＥＮＥＬＲおよびＬＩＮＣＯ−ＳＰＥＣＴＩＮＲが含まれ、それら全てがＵｐｊｏｈｎ Ａｎｉｍａｌ Ｈｅａｌｔｈにより販売されている。抗生物質は、罹患動物に投与されるべき用量が、投与形態当り約１ないし約１０ｍｇの活性な抗生物質成分／ｋｇ体重（罹患動物）、より好ましくは、約２ないし６ｍｇ／ｋｇの範囲であり、最も好ましくは、約３ｍｇ／ｋｇと５ｍｇ／ｋｇとの間にあるように、自然精液または増量精液もしくは増量剤中に存在する。
【００２３】
本発明は、以下の非限定の例によってより詳細に記載される。
【００２４】
実施例１
雌の未経産ブタ（ｇｉｌｔ）は、耳タグ番号に基いた飼育にて処置群または対照群のいずれかに割り当てた（処置群には偶数番号の雌、対照群には奇数番号の雌）。対照群の雌は、雄ブタの増量精液で受精させ、受精の時点にて０．５ｍｌのＬＵＴＡＬＹＳＥＲ無菌溶液を添加した。ＬＵＴＡＬＹＳＥＲを繁殖用カテーテル（ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｃａｔｈｅｔｅｒ）内に注入し、カテーテルを子宮頸管に挿入し、次いで、カテーテルを８０ｍｌの増量精液で勢いよく流した。対照群の雌を雄ブタの増量精液で受精させた。ピッグ・チャンプ（Ｐｉｇ Ｃｈａｍｐ）記録を記録方法として用い、記録を分娩率（ｆａｒｒｏｗｉｎｇ ｒａｔｅ；ＦＲ）、調整された分娩率および同腹子のサイズにつき分析した。不完全または矛盾するデータを含む記録を分析から除外した。２２７４匹の動物からの記録が、分析に利用可能であった（１５７５匹の未経産ブタおよび６９９匹の産次１（ｐａｒｉｔｙ １）。ＬＵＴＡＬＹＳＥＲ処置した精液で受精させた未経産ブタは、非処置精液で受精した未経産ブタより高い分娩率および受胎当りの低い種付け期間（ｓｅｒｖｉｃｅ ｐｅｒｉｏｄ）を有した。種付け期間は、一つの発情期の期間である。２群間の総産子数（ｔｏｔａｌ ｂｏｒｎ）および総生存産子数（ｔｏｔａｌ ｂｏｒｎ ａｌｉｖｅ）に差はなかった。雌の産次１において、引き続いての分娩での分娩率は、処置群において高かった。受胎当りの種付け期間（ＳＰ／Ｐ）、総産子数（ＴＢ）および総生存産子数に差はなかった。双方の出産経歴にわたって、ＬＵＴＡＬＹＳＥＲ処置群を支持して、分娩率および受胎当りの種付け期間に有意差があった。表１〜４参照。
【００２５】
【表１】
2004502738.tif 000002
【００２６】
【表２】
2004502738.tif 000003
【００２７】
【表３】
2004502738.tif 000004
【００２８】
暑いシーズン（＜８／３１）および中程度のシーズン（＞８／３１）の双方において、処置された未経産ブタは、ＦＲおよびＳＰ／Ｐに関して対照を凌いだ。
【００２９】
【表４】
2004502738.tif 000005
【００３０】
【表５】
2004502738.tif 000006
【００３１】
この試みにおいて、未経産ブタは、雄ブタの増量精液へのＬＵＴＡＬＹＳＥＲの添加にポジティブに応答した。分娩率および受胎の種付け期間はポジティブに影響された。同腹子のサイズは、影響されなかった。雌の産次１は、増量精液に対するＬＵＴＡＬＹＳＥＲ添加により高い分娩率で応答した。未経産ブタにおいて、ＬＵＴＡＬＹＳＥＲの添加の効果は、中程度のシーズンより暑いシーズンにて有意に大きく、対照より両シーズンにおいて有意に良好であった。
【００３２】
実施例２
精液増量剤は、以下の組成を一緒に混合することにより調製される：
卵黄　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３００ｍｌ
蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　６８０ｍｌ
グルコース　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３０ｇ
セフチオフルから選定された抗生物質　　　　　　　　　　　１．０ｇ
および／または
ＬＩＮＣＯ−ＳＰＥＣＴＩＮＲ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０ｍｌ
プロスタグランジンＦ２α（ＬＵＴＡＬＹＳＥＲ無菌溶液として）　６２．５ｍｇ
（１２．５ｍｌ ＬＵＴＡＬＹＳＥＲ）
【００３３】
４部の前記混合物を１部の雄ブタの自然精液に対して用いて、人工授精種用雌ブタに用いるべき組成物を得る。
【００３４】
詳細に本発明が記載され、その好ましい具体例を参照すれば、添付の特許請求の範囲から逸脱することなく修飾および変形が可能であることが明らかであろう。
【国際公開パンフレット】
2004502738.tif 000007
2004502738.tif 000008
2004502738.tif 000009
2004502738.tif 000010
2004502738.tif 000011
2004502738.tif 000012
2004502738.tif 000013
2004502738.tif 000014
2004502738.tif 000015
2004502738.tif 000016
2004502738.tif 000017
2004502738.tif 000018
【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004502738.tif 000019
【国際調査報告】
2004502738.tif 000020
2004502738.tif 000021
2004502738.tif 000022
2004502738.tif 000023
2004502738.tif 000024