(57)【要約】本発明は、一般に血管症および特定の腫瘍の予後および診断の分野に関連する。特に、本発明は、哺乳動物における血管症、神経外胚葉腫瘍、上皮性腫瘍、骨髄単球性腫瘍またはリンパ系腫瘍の予後あるいは診断のための方法を提供する。この方法はまた、血管症、神経外胚葉腫瘍、上皮性腫瘍、リンパ系腫瘍または骨髄単球性腫瘍の処置の有効性をモニターするために使用され得る。本方法において、いかなるＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡまたはその誘導体もしくはそのフラグメントも、予後の判定または診断のマーカーとして用いられ得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における血管症を予後または診断するための方法であって、該方法が以下の工程：
ａ）血管症を有するかまたは有する疑いのある哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；
ｂ）該血管症を有さない哺乳動物において、該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントをコードする該ｍＲＮＡを評価する工程；ならびに
ｃ）工程ａ）およびｂ）において評価した該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの存在または量を比較する工程、
を包含する方法であって、
工程ａ）において評価した該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが、工程ｂ）において評価した該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡよりも多いことが、該哺乳動物において該血管症の存在を示す、方法。
【請求項２】
前記血管症が脈管炎である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記脈管炎が小血管脈管炎である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記小血管脈管炎が、皮膚血管炎、じんま疹様血管炎、白血球破砕性血管炎、皮斑様血管炎および結節性脈管炎からなる群より選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記皮膚血管炎が突発性皮膚血管炎である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが、インビボまたはインビトロで評価される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記哺乳動物から採集されたサンプルに含まれる前記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが評価される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記サンプルが血清サンプルである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの血管の発現が、インサイチュの検出方法により評価される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの血管の発現が、内皮細胞に局在する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記哺乳動物における前記血管症の処置をモニターするために使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１に記載の方法であって、ここで、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡのレベルが定量化され、かつ該定量化されたレベルが、該血管症の程度または存在を評価するために使用される、方法。
【請求項１４】
哺乳動物における神経外胚葉腫瘍、上皮性腫瘍または骨髄単球性腫瘍を予後または診断するための方法であって、該方法が、以下の工程：
ａ）神経外胚葉腫瘍、上皮性腫瘍、骨髄単球性腫瘍またはリンパ性腫瘍を有するかまたは有する疑いのある哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；
ｂ）該神経外胚葉腫瘍、該上皮性腫瘍または該骨髄単球性腫瘍を有さない哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ならびに
ｃ）工程ａ）およびｂ）において評価した該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの存在または量を比較する工程、
を包含する方法であって、
工程ａ）において評価した該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが、工程ｂ）において評価した該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡよりも多いことが、該哺乳動物において該神経外胚葉腫瘍、該上皮性腫瘍または該骨髄単球性腫瘍の存在を示す、方法。
【請求項１５】
評価されている前記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質が、可溶性ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが、インビボまたはインビトロで評価される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記神経外胚葉腫瘍が黒色腫または神経芽腫である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記上皮腫瘍が腎癌および肺癌である、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記骨髄単球性腫瘍が骨髄単球性白血病である、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
前記哺乳動物における前記神経外胚葉腫瘍、前記上皮性腫瘍または前記骨髄単球性腫瘍の処置をモニターするために使用される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１４に記載の方法であって、ここで、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは該ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡのレベルが、定量化され、かつ該定量化されたレベルが、前記神経外胚葉腫瘍、前記上皮性腫瘍または前記骨髄単球性腫瘍の程度または存在を評価するために使用される、方法。
【請求項２３】
前記哺乳動物から採集されたサンプルに含まれる前記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが評価される、請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、一般に血管症および特定の腫瘍の予後および診断の分野に関する。詳細には、本発明は、哺乳動物における血管症、神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、骨髄単球性の腫瘍、またはリンパ系の腫瘍の予後を判定または診断する方法を提供する。その方法は、ａ）血管症、神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、骨髄単球性の腫瘍、またはリンパ系の腫瘍を有する、またはこれらを有する疑いのある哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ｂ）血管症、神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、リンパ系の腫瘍、または骨髄単球性の腫瘍を有しない哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；およびｃ）工程ａ）およびｂ）において評価した上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質およびＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの存在または量を比較する工程を包含し、それによって工程ａ）において評価された上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが工程ｂ）において評価されたものよりも多いことは、上記の哺乳動物において上記の血管症、神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、リンパ系の腫瘍、または骨髄単球性の腫瘍が存在することを示す。この方法はまた、上記の血管症、神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、リンパ系の腫瘍、または骨髄単球性の腫瘍の処置の効果をモニタリングするためにも用いられ得る。
【０００２】
（背景技術）
小静脈の脈管炎は皮膚血管炎、じんま疹様血管炎、白血球破砕性血管炎、皮斑血管炎、および結節性脈管炎などの様々な形態で存在し得る（概して、ＪｅｎｎｅｔｔｅおよびＦａｌｋ，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３３７（２１）：１５１２〜２３（１９９７）を参照のこと）。いくつかの小静脈の脈管炎（例えば、皮膚血管炎）は不均一の障害群であり、皮膚に限られ得るか、または関連した全体性疾患の一部であり得る（Ｍａｔら、Ｂａｉｌｌｉｅｒｅｓ　Ｃｌｉｎ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．，１１（２）：２３７〜５７（１９９７））。皮膚血管炎を模倣する様々の病因学的因子および条件は通常、同様な臨床兆候（主に触知可能な紫斑）を見せる。皮膚生検は通常、白血球破砕性血管炎を示す。このことは多大なる偉大な診断上および治療上の試練を医師に課す。
【０００３】
神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、または骨髄単球性の腫瘍などの特定の腫瘍もまた様々な形態で存在する（例えば、Ｋａｙａら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｏｔｏｒｈｉｎｏｌａｒｙｎｇｏｌ．，５２（２）：１６９〜７２（２０００）；ｄｅ　ＡｌａｖａおよびＧｅｒａｌｄ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，１８（１）：２０４〜１３（２０００）；ｄｅ　Ｓｏｕｚａら，Ｏｒａｌ　Ｓｕｒｇ．Ｏｒａｌ　Ｍｅｄ．Ｏｒａｌ　Ｐａｔｈｏｌ．Ｏｒａｌ　Ｒａｄｉｏｌ．Ｅｎｄｏｄ．，８８（４）：４６６〜８（１９９９）；Ｔｏｄａら，Ａｕｒｉｓ　Ｎａｓｕｓ　Ｌａｒｙｎｘ，２６（１）：８３〜９０（１９９９）；Ｋｉｒａｔｌｉら，Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，１０６（１）：９８〜１０２（１９９９）；Ｃｈｉｎｇら，Ａｍ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｒａｄｉｏｌ．，２１（２）：３４３〜５（２０００）；ＢｅｒｇｅｒｓおよびＣｏｕｓｓｅｎｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖ．，１０（１）：１２０〜７（２０００）；Ａｕｎｏｂｌｅら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．，１６（３）：５６７〜７６（２０００）；およびＬｉｅｕｔａｕｄら，Ｌｅｕｋ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ．，３４（３〜４）：４０５〜８（１９９９））。
【０００４】
それゆえ、血管症、神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、および骨髄単球性の腫瘍の予後を判定または診断する方法を提供することが本発明の目的である。
【０００５】
（発明の開示）
本発明は一般に、脈管炎および特定の腫瘍の予後および診断の分野に関する。１つの側面においては、本発明は哺乳動物における血管症の予後を判定または診断するための方法に関し、その方法は：ａ）血管症を有する、またはこれを有する疑いのある哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ｂ）血管症を有しない哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ならびに、ｃ）工程ａ）およびｂ）において評価された上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質およびＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの存在または量を比較する工程を包含し、それによって工程ａ）において評価された上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが工程ｂ）において評価されたものよりも多いことは、上記の哺乳動物において血管症が存在することを示す。この方法はまた、血管症の処置の効果をモニタリングするためにも用いられ得る。
【０００６】
別の側面において、この発明は哺乳動物における神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、骨髄単球性の腫瘍、またはリンパ系の腫瘍の予後を判定または診断するための方法に関し、その方法は：ａ）神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、骨髄単球性の腫瘍、またはリンパ系の腫瘍を有する、またはこれらを有する疑いのある哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ｂ）神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、骨髄単球性の腫瘍、またはリンパ系の腫瘍を有しない哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ならびに、ｃ）工程ａ）およびｂ）において評価された上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質およびＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの存在または量を比較する工程を包含し、それによって工程ａ）において評価された上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが工程ｂ）において評価されたものよりも多いことは、上記の哺乳動物において神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、骨髄単球性の腫瘍、またはリンパ系の腫瘍が存在することを示す。この方法はまた、神経外胚葉の腫瘍、上皮の腫瘍、骨髄単球性の腫瘍、またはリンパ系の腫瘍の処置の効果をモニタリングするためにも用いられ得る。
【０００７】
（発明を実施するための様式）
（Ａ．定義）
他に定義されない限り、本明細書中に使用される、すべての技術的用語および科学的用語は本発明の属する当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を持つ。本明細書中に引用されるすべての特許、出願、公開された出願および他の刊行物、ならびにＧｅｎＢａｎｋおよび他のデータベースからの配列は、それら全体が参考として援用される。
【０００８】
本明細書中に使用される場合、「血管症」は血管の任意の疾患をいう。
【０００９】
本明細書中に使用される場合、「脈管炎（血管炎（ａｎｇｉｉｔｉｓ、ａｎｇｉｔｉｓ））」は血管の炎症（例えば、動脈炎、静脈炎、またはリンパ管の炎症（例えば、リンパ管炎））をいう。脈管炎は皮膚血管炎、じんま疹様血管炎、白血球破砕性血管炎、皮斑血管炎、および結節性脈管炎などの様々な形態を取り得る。
【００１０】
本明細書中に使用される場合、「小脈管の脈管炎」は小もしくは中サイズの血管またはリンパ管（例えば、毛細血管、小静脈、小動脈、および動脈）の炎症をいう。
【００１１】
本明細書中に使用される場合、「皮膚血管炎（または過敏性血管炎）」は、（皮膚の）小脈管の壁および周囲への多形核の浸潤を伴う、皮膚のみに影響するだけでなく、他の組織も含み得る、脈管炎の急性形態をいう。核フラグメントは好中球の核崩壊によって形成される。
【００１２】
本明細書中に使用される場合、「白血球破砕性血管炎」は、赤血球の核の塵および管外遊出を伴う、臨床的には触知可能な紫斑、特に足の触知可能な紫斑によって、ならびに組織学的には好中球の排出およびときには皮膚の小静脈の周りの繊維素によって特徴付けられる、急性皮膚血管炎をいい；皮膚に限られ得るか、またはヘーノホ−シェーンライン紫斑病にあるように他の組織を含み得る。
【００１３】
本明細書中に使用される場合、「じんま疹様血管炎（または低補体血症性血管炎）」は、白血球破砕性血管炎および変動性の全身性変化の生検所見を伴い、しばしば低補体血症性血管炎を伴う、じんま疹に似ているが２４時間より長く続く、苦痛を伴う紫斑様皮膚の病変をいう。
【００１４】
本明細書中に使用される場合、「皮斑血管炎」は、クリオグロブリン血症または白色萎縮に伴って見られる、塞栓の閉塞を伴う皮膚の小血管の壁のヒアリン変性をいう。壊死は見られない。
【００１５】
本明細書中に使用される場合、「結節性脈管炎」は、硬結性紅斑に似ているが関連した結核の徴候を伴わない、小葉の皮下脂肪組織炎、多核の巨細胞での肉芽性炎、巣状壊死、および小血管の閉塞性炎症を伴う、皮下組織の慢性のまたは再発性の結節性病変、特に高齢女性の脚の皮下組織の慢性のまたは再発性の結節性病変をいう。
【００１６】
本明細書中に使用される場合、「ヴェーゲナー肉芽腫症」は、小から中サイズの脈管（例えば、毛細血管、小静脈、小動脈、および動脈）に影響を与える、気道の脈管炎および壊死性の脈管炎を含む肉芽性炎をいう。壊死性糸球体腎炎はヴェーゲナー肉芽腫症を有する患者において一般的である。
【００１７】
本明細書中に使用される場合、「チャーグ−ストラウス症候群」は、小から中サイズの脈管に影響を与え、そして喘息および血液の好酸球増加症（ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｌａ）に関連する気道の脈管炎ならびに壊死性脈管炎を含む好酸球増加炎症のおよび肉芽性炎をいう。
【００１８】
本明細書中に使用される場合、「微視的な多発性血管炎（微視的な多発性動脈炎）」は、小脈管（例えば、毛細血管、小静脈、または小動脈）に影響を与える免疫沈積物をほとんど有さないかもしくは有さない壊死性脈管炎をいう。小および中サイズの動脈を含む壊死性動脈炎が、微視的な多発性血管炎を有する患者に存在し得る。壊死性糸球体腎炎は一般的である。肺毛細管炎がたびたび起こる。
【００１９】
本明細書中で使用される場合、「ヘーノホ−シェーンライン紫斑病」とは、小脈管（すなわち、毛細管、細静脈または細動脈）に影響を与えるＩｇＡ−優性免疫沈着物を伴う脈管炎をいう。ヘーノホ−シェーンライン紫斑病は、代表的には、皮膚、消化管、および糸球体（ｇｌｏｍｅｒｕｌｌ）に関連し、そして、関節痛または関節炎に関与する。
【００２０】
本明細書中で使用される場合、「本態性クリオグロブリン性脈管炎（ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｃｒｙｏｇｌｏｂｕｌｉｎｅｍｉｃ　ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ）」とは、小脈管（すなわち、毛細管、細静脈または細動脈）に影響を与えるクリオグロブリン免疫沈着物を伴う脈管炎をいい、そして、血清中のクリオグロブリンと関連する。皮膚および糸球体は、しばしば、本態性クリオグロブリン性脈管炎に関与する。
【００２１】
本明細書中で使用される場合、「皮膚性白血球破砕性血管炎」とは、器官系性（ｓｙｓｔｅｍ）脈管炎または糸球体腎炎を伴わない孤立性の皮膚性白血球破砕性血管炎をいう。
【００２２】
本明細書中に使用される場合、「結節性多発動脈炎（古典的結節性多発動脈炎）」は、糸球体腎炎または小動脈、毛細血管、もしくは小静脈における脈管炎を伴わない中サイズの動脈または小動脈の壊死性炎症をいう。
【００２３】
本明細書中に使用される場合、「川崎病」は、大動脈、中サイズの動脈、および小動脈を含む動脈炎ならびに皮膚粘膜リンパ節症候群に関連する動脈炎をいう。冠動脈炎はしばしば、川崎病に関与し、そして大動脈および静脈が川崎病に関与し得る。川崎病は普通、子供において起こる。
【００２４】
本明細書中に使用される場合、「巨細胞性（側頭）動脈炎」は、頸動脈の頭蓋外の側枝に対する偏好を伴う、大動脈およびその主な側枝の肉芽腫性動脈炎をいう。巨細胞性（側頭）動脈炎はしばしば、側頭動脈を含む。通常、５０歳より年上の患者に起こり、そしてしばしば、リウマチ性多発性筋痛に関連している。
【００２５】
本明細書中に使用される場合、「高安動脈炎」は、大動脈およびその主な側枝の肉芽性炎をいう。通常、５０歳未満の若い患者に起こる。
【００２６】
本明細書中に使用される場合、「新生物（ｎｅｏｐｌａｓｍ）（新生物（ｎｅｏｐｌａｓｉａ））」は、異常な新成長をいい、それゆえ良性または悪性であり得る腫瘍と同じ意味を持つ。過形成とは異なって、新生物形成の増殖は、元の刺激の非存在下においてでさえ存続する。
【００２７】
本明細書中に使用される場合、「癌」は、任意の型の悪性腫瘍によっても引き起こされる疾患に対する一般的な用語をいう。
【００２８】
本明細書中に使用される場合、「神経外胚葉の腫瘍」は、神経外胚葉に存在するおよび／または神経外胚葉に由来する腫瘍もしくは癌をいう。
【００２９】
本明細書中に使用される場合、「上皮の腫瘍」は、上皮組織に存在するおよび／または上皮組織に由来する腫瘍もしくは癌をいう。
【００３０】
本明細書中に使用される場合、「骨髄単球性の腫瘍」は、骨髄単球に存在するおよび／または骨髄単球に由来する腫瘍もしくは癌をいう。
【００３１】
本明細書中に使用される場合、「神経細胞接着分子Ｌ１（ＮＣＡＭ　Ｌ１）」は、ＩｇＳＦ　スーパーファミリーに属する神経細胞接着分子をいう。好ましくは、ＮＣＡＭ　Ｌ１は、６つのイムノグロブリン様ドメインを有し、５つのＩＩＩ型フィブロネクチン様ドメインを有し、そして小さな側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン）で始まる十分な数（例えば、２３）の疎水性アミノ酸残基を有する領域において膜を貫通すると予想される膜貫通型糖タンパク質である（ＥＰ　０，５７２，６６４　Ａｌ；およびＭｏｏｓら，Ｎａｔｕｒｅ，３３４：７０１−７０３（１９８８））。ＮＣＡＭ　Ｌ１は本質的にその活性を変化させない保存的アミノ酸置換を有する改変体を含むことが、意図されている。アミノ酸の適切な保存的置換は当業者に公知であり、そして一般に、生じる分子の生物学的活性を変化させることなくされ得る。当業者は、一般に、ポリペプチドの重要でない領域における１アミノ酸置換が本質的には生物学的活性を変化させないということを認識する（例えば、Ｗａｔｓｏｎら　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｇｅｎｅ，第４版，１９８７，Ｔｈｅ　Ｂｅｊａｃｍｉｎ／Ｃｕｍｍｉｎｇｓ　Ｐｕｂ．ｃｏ．，２２４項）。
【００３２】
本明細書中に使用される場合、「評価」は、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡの存在または量の定量的な、および／または定性的な決定（例えば、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡ種の量または濃度に対する絶対的な値を得ること、そしてまたＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡ種のレベルを示している指標、割合、百分率、視覚的な値、もしくは他の値を得ること）をいう。評価は直接的または間接的であり得、そして実際に検出される化学種は、当然ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡ種それ自体である必要はなく、例えば、その誘導体もしくはいくつかのさらなる物質であり得る。
【００３３】
本明細書中に使用される場合、「抗体」は、ポリクローナルまたはモノクローナル抗体、単鎖抗体、ならびに軽鎖および重鎖の可変領域を含むＦａｂ　フラグメントなどの他の抗体フラグメントを包含する。
【００３４】
本明細書中に使用される場合、「サンプル」は、分析的アッセイが望まれる分析物を含み得るいかなるものをいう。サンプルは生物学的体液または生物学的組織などの生物学的サンプルであり得る。生物学的体液の例としては、尿、血液、血漿、血清、唾液、精液、便、痰、大脳脊髄の体液、涙、粘液、羊水などが挙げられる。または同様のものを含む。生物学的組織は、細胞の集合体、通常、結合組織、上皮組織、筋肉組織、および神経組織を含む、ヒトの構造、動物の構造、植物の構造、微生物の構造、真菌の構造、またはウイルス構造の構造材料のうちの１つを形成する細胞間物質を共にする、特別な種類の細胞の集合体である。生物学的組織の例としてはまた、組織器官、腫瘍、リンパ節、動脈、および個々の細胞も挙げられる。
【００３５】
本明細書中に使用される場合、「血液」は、体の「循環組織」をいい；心臓、動脈、毛細血管、および静脈を通して循環する体液ならびにその浮遊形態の要素である。「血液」はまた、１）酸素および栄養物質を組織に運ぶ、そして２）二酸化炭素および様々な代謝産物を排出のために取り除く手段もいう。血液は、赤血球（ｒｅｄ　ｂｌｏｏｄ　ｃｅｌｌ）（赤血球（ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ））、白血球（ｗｈｉｔｅ　ｂｌｏｏｄ　ｃｅｌｌ）（白血球（ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ））、および血小板が浮遊している、黄白色のもしくは灰色−黄色の体液である血漿より成る。
【００３６】
本明細書中に使用される場合、「全血」は、選ばれた提供者から引き出された血液をいい、クエン酸イオン、ヘパリン、またはＥＤＴＡなどの抗血液凝固剤を含み得る。
【００３７】
本明細書中に使用される場合、「血清」は、循環血液における血漿からは区別される、線維素凝塊および血球の除去後に得られる血液の流体部分をいう。
【００３８】
本明細書中に使用される場合、「血漿」は、血液凝固後に得られる血清から区別される流体、つまり血液の非細胞部分をいう。
【００３９】
開示の明瞭化のために、そして限定としてではなく、発明の詳細な説明は以下に続くサブセクションに分けられる。
【００４０】
（Ｂ．血管症の予後を判定および診断するための方法）
１つの側面においては、本発明は哺乳動物における血管症の予後を判定または診断するための方法に関し、その方法は：ａ）血管症を有する、またはこれを有する疑いのある哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ｂ）血管症を有しない哺乳動物において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；ならびに、ｃ）工程ａ）およびｂ）において評価された上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの存在または量を比較する工程を包含し、それによって、工程ａ）において評価された上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが工程ｂ）において評価されたものよりも多いことは、上記の哺乳動物において血管症が存在することを示す。
【００４１】
本方法は血管症のいかなる型の予後の判定および診断においても用いられ得る。好ましくは、本方法は、小脈管の脈管炎、中脈管の脈管炎、大脈管の脈管炎を含む脈管炎の予後の判定および診断に用いられる。より好ましくは、本方法は小脈管の脈管炎の予後の判定および診断に用いられる。
【００４２】
例示的な小脈管の脈管炎としては、皮膚血管炎（例えば、特発性の皮膚血管炎、じんま疹様血管炎、白血球破砕性血管炎、皮斑血管炎、結節性脈管炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、チャーグ−ストラウス症候群、微視的な多発性血管炎（微視的な多発性動脈炎）、ヘーノホ−シェーンライン紫斑病、本態性クリオグロブリン血症、および皮膚の白血球破砕性血管炎）が挙げられる。例示的な中脈管の脈管炎としては、結節性多発性動脈炎（古典的な結節性多発性動脈炎）および川崎病が挙げられる。例示的な大脈管の脈管炎としては、巨細胞性（側頭）動脈炎および高安動脈炎が挙げられる。
【００４３】
ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡは、インビボまたはインビトロにおいて評価され得る。例えば、哺乳動物から収集されたサンプル（例えば、血清サンプル）に含まれるＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが評価される。あるいは、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの脈管発現がインサイチュ検出法によって評価され得る。内皮細胞に局在するＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡの脈管発現もまた、評価され得る。
【００４４】
予後の判定および診断のほかに、本方法は哺乳動物における血管症の処置をモニタリングするために用いられ得る。好ましくは、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいは上記のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントをコードするｍＲＮＡレベルが、定量され、そして定量されたレベルが血管症の程度もしくは範囲を評価するために用いられる。
【００４５】
本方法において、いかなるＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメント、あるいはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡまたはその誘導体もしくはそのフラグメントも、予後の判定または診断のマーカーとして用いられ得る。例えば、以下のＧｅｎＢａｎｋ登録番号を有するＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質が、予後の判定または診断のマーカーとして用いられ得る：Ｔ３０５３２（Ｆｕｇｕ　ｒｕｂｒｉｐｅｓ）；Ｔ３０５８１（ゼブラ　フィッシュ）；Ｓ３６１２６（ラット）；Ａ４３４２５（ニワトリ）；Ｓ０５４７９（マウス）；Ａ４１０６０（ヒト）；ＮＰ＿０３２５０４（Ｍｕｓ　ｍｕｓｃｕｌｕｓ）；ＮＰ＿００６６０５（Ｌ１　ｓａｐｉｅｎｓの近縁ホモログ）；ＮＰ＿０００４１６（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＡＦ２２１５３（Ｍｕｓ　ｍｕｓｃｕｌｕｓ）；ＣＡＢ５７３０１（Ｍｕｓ　ｍｕｓｃｕｌｕｓ）；Ｐ３２００４（ヒト）；Ｑ０５６９５（ラット）；Ｐ１１６２７（マウス）；ＡＡＤ２８６１０（Ｃｅｒｃｏｐｉｔｈｅｃｕｓ　ａｅｔｈｉｏｐｓ）；ＣＡＢ３７８３１（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＡＣ５１７４６（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＡＣ１５５８０（Ｆｕｇｕ　ｒｕｂｒｉｐｅｓ）；ＡＡＣ１４３５２（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＣＡＡ９６４６９（Ｆｕｇｕ　ｒｕｂｒｉｐｅｓ）；ＣＡＡ８２５６４（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＣＡＡ４１５７６（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；１４１１３０１Ａ；ＣＡＡ４２５０８（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＣＡＡ４１８６０（Ｒａｔｔｕｓ　ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）；ＡＡＡ９９１５９（Ｃａｒａｓｓｉｕｓ　ａｕｒａｔｕｓ）；ＣＡＡ６１４９１（Ｄａｎｉｏ　ｒｅｒｉｏ）；ＣＡＡ６１４９０（Ｄａｎｉｏ　ｒｅｒｉｏ）；ＡＡＡ５９４７６（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＡＡ３６３５３（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）。
【００４６】
同様に、以下のＧｅｎＢａｎｋ登録番号を有する、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質をコードする核酸が、予後の判定または診断のマーカーとして用いられ得る：ＡＣ００５７７５（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＣ　００４６９０（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；Ｍ２８２３１（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ　ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ　ニューログリアン前駆体）；ＡＨ００６３２６（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ　ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ　ニューログリアン（ｎｒｇ）、選択的スプライシング産物）；ＡＦ０５００８５（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ　ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ　ニューログリアン（ｎｒｇ）遺伝子；ＡＦ１７２２７７（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＦ１３３０９３（Ｍｕｓ　ｍｕｓｃｕｌｕｓ）；ＡＪ２３９３２５（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＬ０２１９４０（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＦ１２９１６７（Ｃｈｌｏｒｏｃｅｂｕｓ　ａｅｔｈｉｏｐｓ）；ＡＪ０１１９３０（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；Ｕ５２１１２（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；Ｍ９７１６１（Ｒａｔｔｕｓ　ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）；ＡＣ００５６２６（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；ＡＦ０２６１９８（Ｆｕｇｕ　ｒｕｂｒｉｐｅｓ）；Ｍ７７６４０（Ｈｏｍｏ　ｓａｐｉｅｎｓ）；Ｕ５５２１１（Ｃａｒａｓｓｉｕｓ　ａｕｒａｔｕｓ）；Ｍ７４３８７（ヒト）。
【００４７】
ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはそのフラグメントあるいはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡまたはその誘導体もしくはそのフラグメントは、当該分野における任意の公知の方法によって評価され得る。タンパク質の検出に関しては、ゲル移動度、クロマトグラフィー特性、リガンド結合の親和性もしくは特異性、または生物活性などの、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質の物理的、化学的、または生物学的性質が、アッセイにおいて用いられ得る（概して、Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ　ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９８）２０節，Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．）。好ましくは、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロッティング、免疫蛍光、または免疫沈降などの免疫学的アッセイが用いられ得る。ｍＲＮＡの検出に関しては、ノーザンブロッティング、インサイチュハイブリダイゼーション、またはＲＮＡ配列決定が用いられ得る（同書）。
【００４８】
ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡは、インビボまたはインビトロにおいて評価され得る。好ましくは、哺乳動物由来の生物サンプルにおけるＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが、インビトロにおいて評価され得る。例えば、血液サンプル（例えば、血清、血漿、または全血サンプル）におけるＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡが、評価され得る。
【００４９】
任意のサンプルが、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡについて、上記の方法を用いてアッセイされ得る。１つの実施形態において、アッセイされるサンプルは、哺乳動物、特にヒト由来の生物学的サンプル（例えば、生物学的流体または生物学的組織）である。生物学的流体としては、尿、血液、血漿、血清、唾液、精液、糞便、痰、毛髪、および他のケラチンからなるサンプル、大脳脊髄液、涙、粘膜および羊水が挙げられるが、これらに限定されない。企図される生物学的組織としては、細胞の凝集物、通常は、ヒト、動物、植物、細菌、真菌またはウイルス構造の構造物質の１つを形成する細胞内物質を伴う特定の種類の細胞（結合組織、上皮組織、筋組織および神経組織、器官、腫瘍、リンパ節、動脈、および個々の細胞が挙げられる）の凝集物が挙げられるが、これらに限定されない。１つの特定の実施形態において、アッセイされる体液は、尿である。別の特定の実施形態において、アッセイされる体液は、血液である。好ましくは、血液サンプルが、血漿画分または血清画分にさらに分離される。
【００５０】
血清または血漿は、当該分野で任意の公知の方法により、採取された血液から回収され得る。１つの特定の実施形態において、血清または血漿は、遠心分離により、採取された血液から回収される。好ましくは、この遠心分離は、血清または血漿より大きな比重、かつより下部を形成する血球より小さな比重を有する密封剤の存在下で行われる。それにより、遠心分離の際に、この密封剤は、上部の血清層または血漿層と、下部の血球層との間で分離帯を形成する。このプロセスにおいて用いられ得る密封剤としては、スチレン樹脂粉末、２−ヒドロキシエチルメタクリレートまたはアクリルアミドの架橋ポリマーのヒドロゲルのペレットまたはプレート（米国特許第３，６４７，０７０号）、表面に抗トロンビン剤または湿潤剤を有するポリスチレンビーズ（米国特許第３，４６４，８９０号）、およびシリコーン流体（米国特許第３，８５２，１９４号および同第３，７８０，９３５号）が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい実施形態において、この密封剤は、置換されていないアルキルアクリレートおよび／または置換されていないアルキルメタクリレート（アルキル部分は１８炭素原子以下を有する）のポリマーであり、このポリマー材料は、約２５℃で測定された場合に、約１．０３〜１．０８の比重かつ約１秒−１の剪断速度で約５，０００〜１，０００，０００ｃｐｓの粘性を有する（米国特許第４，１４０，６３１号）。
【００５１】
別の特定の実施形態において、血清または血漿は、採取された血液から濾過により回収される。好ましくは、この血液は、ガラス繊維層を通して濾過され、このガラス繊維は、約０．２〜５μの平均直径および約０．１〜０．５ｇ／ｃｍ３の密度を有し、分離される血漿または血清の総容量は、ガラス繊維層の吸収容量の約５０％以下であり、そして血漿または血清がガラス繊維層からの通り抜け画分として採取される（米国特許第４，４７７，５７５号）。また好ましくは、血液は、ポリアクリル酸エステル誘導体およびポリエチレングリコールを染み込ませた、０．５〜２．５μの平均直径を有するガラス繊維層を通して濾過される（米国特許第５，３６４，５３３号）。より好ましくは、このポリアクリル酸エステル誘導体は、ポリ（ブチルアクリレート）、ポリ（メチルアクリレート）またはポリ（エチルアクリレート）であり、（ａ）ポリ（ブチルアクリレート）、（ｂ）ポリ（メチルアクリレート）またはポリ（エチルアクリレート）、および（ｃ）ポリエチレングリコールは、（１０〜１２）：（１〜４）：（１〜４）の比で混合されて用いられる。
【００５２】
さらに別の特定の実施形態において、血清または血漿は、血液を、酸素含有側鎖または酸素含有環を有するリグナン骨格を含む凝固剤で処理することにより、採取された血液から回収される（米国特許第４，８０３，１５３号）。好ましくは、この凝固剤は、酸素含有側鎖または酸素含有環を有するリグナン骨格（例えば、ｄ−セサミン、ｌ−セサミン、パウローニン（ｐａｕｌｏｗｎｉｎ）、ｄ−アサリニン（ａｓａｒｉｎｉｎ）、ｌ−アサリニン、２α−パウローニン、６α−パウローニン、ピノレジノール（ｐｉｎｏｒｅｓｉｎｏｌ）、ｄ−ユーデスミン（ｅｕｄｅｓｍｉｎ）、ｌ−ピノレジノールβ−Ｄ−グルコシド、ｌ−ピノレジノール、ｌ−ピノレジノールモノメチルエーテルβ−Ｄ−グルコシド、エピマグノリン（ｅｐｉｍａｇｎｏｌｉｎ）、リリオレジノール（ｌｉｒｉｏｒｅｓｉｎｏｌ）−Ｂ、シリンガレジノール（ｓｙｒｉｎｇａｒｅｓｉｎｏｌ）（ｄｌ）、リリオレジノールＢ−ジメチルエーテル、フィリリン（ｐｈｙｌｌｙｒｉｎ）、マグノリン、リリオレジノール−Ａ、２α，６α−ｄ−セサミン、ｄ−ジアユーデスミン、リリオレジノール−Ｃジメチルエーテルｄジアヤンガンビン（ｄｄｉａｙａｎｇａｍｂｉｎ）、およびセサモリン（ｓｅｓａｍｏｌｉｎ））を含む。より好ましくは、この凝固剤は、約０．０１〜５０ｇ／１リットルの血液の範囲の量で用いられる。
【００５３】
特定の実施形態において、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡは、インサイチュ検出方法によりアッセイされる。任意のインサイチュ検出方法が用いられ得る（一般には、Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ　ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９８）§２０，Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．を参照のこと）。例えば、免疫蛍光がＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質種のインサイチュ検出のために用いられ得、インサイチュハイブリダイゼーションは、ＮＣＡＭ　Ｌ１　ｍＲＮＡ種のインサイチュ検出のために用いられ得る。好ましくは、内皮細胞の間に位置するか、またはそれらの管腔表面に位置するＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡが、評価される。
【００５４】
任意の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ネコ、イヌ、ブタ、雌ウシ、雄ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、サルおよび他の非ヒト霊長類）が本発明の方法により試験され得る。好ましくは、ヒトが本発明の方法により試験される。
【００５５】
（Ｃ．神経外胚葉腫瘍、上皮腫瘍または骨髄単球腫瘍を予測または診断するための方法）
別の局面において、本発明は、哺乳動物における神経外胚葉腫瘍、上皮腫瘍、骨髄単球腫瘍またはリンパ系腫瘍を予測または診断するための方法に関し、この方法は、以下の工程：（ａ）神経外胚葉腫瘍、上皮腫瘍、骨髄単球腫瘍またはリンパ系腫瘍を有するか、またはこれらを有すると疑われる哺乳動物における、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質、またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは上記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質、またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；（ｂ）神経外胚葉腫瘍、上皮腫瘍、骨髄単球腫瘍またはリンパ系腫瘍を有さない哺乳動物における、上記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質、またはその誘導体もしくはフラグメント、あるいは上記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質、またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡを評価する工程；および（ｃ）工程（ａ）および（ｂ）において評価されるＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはｍＲＮＡの存在または量を比較する工程を包含し、工程（ａ）において評価される上記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはｍＲＮＡが、工程（ｂ）において評価される上記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはｍＲＮＡより多いことにより、上記哺乳動物における神経外胚葉腫瘍、上皮腫瘍、骨髄単球腫瘍またはリンパ系腫瘍の存在が示される。
【００５６】
ＮＣＡＭ　Ｌ１を発現する神経外胚葉腫瘍、上皮腫瘍および骨髄単球腫瘍の任意の形態は、本発明の方法を用いて予測または診断され得る。例えば、神経外胚葉腫瘍（例えば、黒色腫、神経芽腫または髄質芽腫（ｍｅｄｕｌｌｂｌａｓｔｏｍａ））、上皮腫瘍（例えば、腎臓癌腫および肺癌腫）、骨髄単球腫瘍（例えば、骨髄単球性白血病）またはリンパ性腫瘍（例えば、リンパ腫）が予測または診断され得る。
【００５７】
任意のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡまたはその誘導体もしくはフラグメントは、本発明の方法において予後マーカーまたは診断マーカーとして用いられ得る。好ましくは、アッセイされるＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質は可溶性ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質である。
【００５８】
予測および診断のほかにも、本発明の方法は、哺乳動物における神経外胚葉腫瘍、上皮腫瘍または骨髄単球腫瘍の処置をモニターするために用いられ得る。好ましくは、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントのレベル、あるいは、上記ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはその誘導体もしくはフラグメントをコードするｍＲＮＡのレベルが定量され、この定量されたレベルは、腫瘍負荷および／または腫瘍処置に対する応答を評価するために用いられる。
【００５９】
ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡまたはそれらの誘導体もしくはフラグメントは、当該分野で公知の方法により評価され得る。タンパク質検出について、ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質の物理的特性、化学的特性または生物学的特性（例えば、ゲル移動性、クロマトグラフィー的特徴、リガンド結合親和性もしくは特異性、または生体活性）がこのアッセイにおいて用いられ得る（一般には、Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ　ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９８）§２０，Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．を参照のこと）。好ましくは、免疫学的アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロッティング、免疫蛍光または免疫沈降）が用いられ得る。ｍＲＮＡの検出については、ノーザンブロッティング、インサイチュハイブリダイゼーションまたはＲＮＡ配列決定が用いられ得る（同書）。任意のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡ（上記Ｂ節で記載されるものを含む）は、予後または診断のマーカーとして用いられ得る。
【００６０】
ＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡは、インビボまたはインビトロで評価され得る。好ましくは、生体サンプル中のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡが採取され、インビトロで評価される。例えば、血液サンプル（例えば、血清、血漿または全血サンプル）中のＮＣＡＭ　Ｌ１タンパク質またはそのｍＲＮＡが評価され得る。サンプルの任意の形態および公知のサンプル採取方法（上記Ｂ節で記載されるものを含む）が本発明の方法において用いられ得る。
【００６１】
任意の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ネコ、イヌ、ブタ、雌ウシ、雄ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、サルおよび他の非ヒト霊長類）が、本発明の方法により試験され得る。好ましくは、ヒトが本発明の方法により試験される。
【００６２】
以下の実施例は、例示目的で含まれるにすぎず、本発明の範囲を限定することを意図しない。
【００６３】
（Ｄ．実施例）
本発明者らは、感度の高い定量的２抗体サンドイッチイムノアッセイを開発した。このアッセイは、特定の脈管疾患および特定の癌についての診断キット／予後キットの両方として重要な臨床的有用性を有し得る。このアッセイは、血清サンプル中の神経細胞接着分子Ｌ１を検出するように設計される。このアッセイは、好ましくは、０．２〜５ｎｇ／ｍｌの線形範囲のＬ１を検出しうる（図１Ａを参照のこと）。
【００６４】
（脈管疾患の検出）
正常血清において、Ｌ１レベルは、１〜５ｎｇ／ｍｌの範囲で検出された（図１Ｂおよび表１を参照のこと）。しかし、有意に上昇したＬ１のレベルが小血管脈管炎（特発性皮膚血管炎またはじんま疹様血管炎）を有する患者の血清中で、小血管疾患を示す狼瘡（ＳＬＥ）患者においてもまた検出された（図１Ｂ）。検出されたレベルは、正常血清、慢性関節リウマチを有する患者由来の血清、または脈管炎の証拠がない狼瘡患者で認められたレベルより有意に高かった（図１Ｂ）。正常血清と、大脈管炎（巨細胞性動脈炎）患者由来の血清サンプルの限られた群との間のＬ１レベルは、有意差はなく、脈管サイズまたは床に対する特異性を反映するか、あるいは単に脈管の関与の程度を反映するかのいずれかである（図１Ｂ）。上昇したＬ１レベルはまた、強皮症、すなわち、脈管関与のエピソードを伴う結合組織疾患を有する患者のサブセットにおいて検出された。これらのレベルは、急性相反応のマーカーであるＬ１に対して議論されているＣＲＰレベル（示さず）とは相関しない。
【００６５】
【表１】
2004512506.tif 000002
統計分析を、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定を用いて行った。統計学的有意性を、０．００２４より低い値に割り当てた。
【００６６】
小血管脈管炎を有する患者の血清において検出された、増加したＬ１レベルが、罹患した血管（内皮細胞）の部分でのＬ１の新規の発現におそらく起因することを、罹患した血管のインサイチュ染色は示している（図２を参照のこと）。血清におけるＬ１の存在は、おそらく、血流への翻訳後のＬ１の切断または分断の結果である。この点に関して、Ｌ１は、セリンプロテアーゼおよび特定のＡＤＡＭＳの両方による切断に対して感受性である。
【００６７】
Ｌ１発現の誘導は、内皮細胞の損傷および／または活性化に起因することが推定される。本発明者らの知る限りでは、血管疾患における内皮細胞の損傷／活性化を、単に検出または測定し得る確かな血清学的試験は、現在存在しない。このような試験は、予後および異なる治療モダリティーに対する応答の測定について重要な臨床的有用性を有する。
【００６８】
（腫瘍の検出）
Ｌ１は、異なる組織学的起源の広範な種々の癌（神経外胚葉腫瘍（例えば、黒色腫および神経芽腫）および上皮性腫瘍（例えば、腎癌および肺癌）ならびに骨髄単球性起源の腫瘍系を含む）により高発現される。Ｌ１は、翻訳後の切断の結果として、これらの腫瘍の表面から分離される。
【００６９】
本発明者らは、神経芽腫を有する患者の血清におけるＬ１のレベルが、正常の血清におけるＬ１のレベルを有意に上回ることを確定した（図３を参照のこと）。これらの知見に基づいて、本発明者らは、Ｌ１の血清学的検出がまた、Ｌ１および腫瘍における腫瘍の負荷および／または転移の評価を可能にし、そして治療の有効性を評価する手段を提供し得ることを提案する。
【００７０】
改変は当業者に明らかであるので、本発明は、添付の請求の範囲よってのみ制限されることが意図されている。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、血清においてＬ１を検出するための酵素結合免疫測定法を示す。プレートを抗Ｌ１　ＭＡｂ　５Ｇ３でコートティングし、５％ＢＳＡでブロックした。次いで、そのウェルを希釈された血清サンプル（ＰＢＳ中１０分の１）と共にインキュベートした。洗浄後、そのウェルをアフィニティー精製された抗Ｌ１ウサギポリクローナル抗体（ｐｏｌｙｇｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｙ）と共にインキュベートした。結合したウサギ抗体を、ヒト吸収型ヤギ抗ウサギＩｇＧ西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体を用いて検出した。（Ａ）標準曲線を作成するために組換えＬ１−ＥＣＤの適定をいくつかのウェルに添加した（０．１〜５ｎｇ／ｍｌ）。（Ｂ）正常な個体または脈管の疾患の証拠を持つかもしくは持たない自己免疫疾患を有する患者からの血清サンプルから、結果の散布図を得た。慢性関節リウマチ（ＲＡ）、大静脈の脈管炎または小静脈の脈管炎、小静脈の脈管炎を有するもしくは有さない狼瘡（ＳＬＥ）を有する患者から、および強皮症を有する患者から血清サンプルを得た。ＭＡｂ　５Ｇ３または抗Ｌ１ポリクローナル抗体とアイソタイプを適合させたモノクローナル抗体またはコントロールポリクローナル抗体とのいずれかの置換が、いかなる反応性も阻害したこと、およびヒトイムノグロブリンでの反応性に関しての証拠が見い出されなかったことに注意することは重要である。
【図２】
図２は、脈管のＬ１発現を示す。ＡおよびＢ．アイソタイプ（ｉｓｏｔｏｐｅ）を適合させたコントロールＭＡｂで染色した正常な皮膚（Ａ）、または抗Ｌ１　ＭＡｂ　５Ｇ３で染色した正常な皮膚（Ｂ）。Ｃ．ＭＡｂ　５Ｇ３で染色した乾癬の皮膚。ＤおよびＥ．コントロールＭＡｂで染色した小静脈の脈管炎を有する患者からの皮膚（Ｄ）、またはＭＡｂ　５Ｇ３で染色した小静脈の脈管炎を有する患者からの皮膚（Ｅ）。ＦおよびＧ．ＭＡｂ　５Ｇ３で染色した慢性関節リウマチを有する患者からの滑膜組織。（Ｈ）５Ｇ３（赤）および抗ＰＥＣＡＭ　ＭＡｂ（緑）を用いて二重免疫蛍光染色した滑膜組織。サンプルは急速凍結し、そして切片は抗体染色より前にアセトンで固定し、そしてブロックした。
【図３】
図３は、神経芽細胞腫患者の血清におけるＬ１−ＣＡＭの検出を示す。
【図１】
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【図３】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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