(57)【要約】本発明は、挿管された患者における挿管法に関連する呼吸性感染症および／または機械的換気法に関連する肺炎を予防する方法を提供する。この方法は一般に、IB-367ペプチドを含む組成物を、挿管された患者の口腔へ局所的に投与することを含む。IB-367ペプチドは非常にわずかの耐性しか生じないので、本発明の重要な利点は、病原体の耐性株を作ることについて心配しなければならないことがなく、予防治療を施用することができることである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
挿管法または機械的換気法に関連する呼吸性感染症を予防する方法であって、挿管されているかまたは挿管されようとしている患者の口腔に、IB-367ペプチドまたは製薬上許容されるその塩を含む組成物を局所的に投与することを含み、該組成物が感染症を予防するのに有効な量で施用される方法。
【請求項２】
選択的口内汚染除去から本質的に成る請求項１記載の方法。
【請求項３】
組成物が経口リンス剤である請求項１記載の方法。
【請求項４】
組成物が約0.03〜約0.3重量％のIB-367を含む請求項１記載の方法。
【請求項５】
組成物が２〜５日間１日当たり１回または多数回施用される請求項４記載の方法。
【請求項６】
3mLの組成物が４〜６時間毎に１回施用される請求項４記載の方法。
【請求項７】
IB-367が天然のIB-367である請求項１〜６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
組成物がまた、患者に挿入されているかまたは挿入される気管内チューブの近づきやすい部分に施用される請求項１記載の方法。
【請求項９】
呼吸性感染症がVAPである請求項１記載の方法。
【請求項１０】
VAPを予防する方法であって、VAPを生じる危険のある患者の口腔に、0.3重量％の天然IB-367ペプチドまたは製薬上許容されるその塩、10重量％のソルビトール、3重量％のキシリトール、0.2重量％のヒドロキシプロピルメチルセルロース、0.1重量％の乳酸、0.18重量％のメチルパラベン、0.02重量％のプロピルパラベンおよび残部水を含み、約４のpHを有する水性組成物を局所的に施用することを含み、該組成物がVAPを予防するのに有効な量で施用される方法。
【請求項１１】
選択的口内汚染除去から本質的に成る請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
１日当たり一回3ml投与量が施用される請求項１０記載の方法。
【請求項１３】
組成物が２〜５日間施用される請求項１０記載の方法。
【請求項１４】
3mLの組成物が４〜６時間毎に１回施用される請求項１０記載の方法。
【請求項１５】
天然のIB-367が塩酸塩の形態である請求項１０〜１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
組成物がまた、患者に挿入されているかまたは挿入される気管内チューブの目に見える部分に施用される請求項１０記載の方法。
【請求項１７】
挿管法または機械的換気法に関連する呼吸性感染症を予防する方法であって、挿管されているかまたは挿管されようとしている患者の口腔に、IB-367ペプチドまたは製薬上許容されるその塩を含む組成物を局所的に投与することから本質的に成り、該組成物が呼吸性感染症を予防するのに有効な量で施用される方法。
【請求項１８】
組成物が経口リンス剤である請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
組成物が約0.03〜約0.3重量％のIB-367を含む請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
組成物が２〜５日間１日当たり１回または多数回施用される請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
3mLの組成物が４〜６時間毎に１回施用される請求項１９記載の方法。
【請求項２２】
IB-367が天然のIB-367である請求項１７〜２１のいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】
組成物がまた、患者に挿入されているかまたは挿入される気管内チューブの近づきやすい部分に施用される請求項１７記載の方法。
【請求項２４】
呼吸性感染症がVAPである請求項１７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
1.  発明の分野
本発明は、機械的換気を必要とする患者における挿管法に一般に関連する呼吸性感染症の予防に関する。
2.  発明の背景
人工呼吸器関連性肺炎(ventilator associated pneumonia)(VAP)は、集中治療室および長期介護施設の患者の中で一般的な疾患である。それは、挿管法の複雑さ（気管内チューブの挿入）および機械的な人工呼吸器のサポートに関連する。気管内チューブの配置は、細菌が下気道に直接入るのを可能にし、咳反射の介入、粘膜繊毛清掃の抑制および／または過度の粘液分泌の刺激によって、微生物のコロニー形成を促進する。病院で起こるかまたは病院で広まる肺炎の発生率は、機械的な換気サポートを受けている患者で6〜20倍も増加する。
【０００２】
合衆国において毎年約880,000人の患者が人工呼吸器をつけられ、48時間以上機械的換気状態にある患者の約15〜30％の間にVAPが発生する。連続的な機械的換気を受けている患者間では、人工呼吸器のサポートを受けていない患者より肺炎の頻度が6〜21倍である。ナテンズ(’Nathens)ら、1999年、「手術患者における消化管の選択的汚染除去：徴候の体系的再検討(Selective Decontamination of the Digestive Tract in Surgical Patients: A Systematic Review of the Evidence)」、Arch Surg 134: 170-6；およびシルベストリ(Silvestri)ら、2000年、「消化管の選択的汚染除去：人命救助者(Selective Decontamination of the Digestive Tract: A Life Saver)」、J Hosp Infect 45: 185-90。換気の最初の数日以内に発生する肺炎（初期発生VAPと呼ばれる）、この期間後に発生する肺炎（後期発生VAPと称される）は一般に、患者の口腔咽頭部および／または胃にコロニー形成している細菌の吸引によって、または下気道への最初の侵入によって引き起こされる。VAPについての粗死亡率は、治療剤および支援介護物理療法の利用可能性にもかかわらず、70％もの高さであり得る。ダミコ(D’Amico)ら、1998年、「危篤状態III成人患者における抗生物質予防法の有効性：無作為に制御された試みの体系的再検討(Effectiveness of Antibiotic Prophylaxis in Critically III Adult Patients: Systematic Review of Randomised Controlled Trials)」、BMJ 316: 1275-85。合衆国においてVAPを含む病院で起こる肺炎を治療する直接の費用は、１年当たり10.1億ドルを超えると見積もられる。ウェンゼル(Wenzel)、1989年、Eur J Clin Microbiol Infect 8: 56-60。
【０００３】
口腔咽頭部および胃でコロニー形成している細菌はVAPの主な原因であるので、VAPおよびその後遺症を防ぐための介入は、口腔咽頭部および／または胃の細菌のコロニー形成を最小にすることを目標にしていた。消化管の選択的汚染除去(SDD)は、細菌のコロニー形成を減らし、気道感染の速度を低下させるために設計された１つの予防法である。種々のSDD養生法が評価されている。汚染除去法としては、口腔表面に直接殺菌剤もしくは抗菌剤を施用すること（選択的口内汚染除去、また選択的口腔咽頭汚染除去もしくはSODと称される）および／または、これらの養生法の溶液を、飲み下すかもしくは供給チューブを通すことによって胃に送ること（選択的胃汚染除去もしくはSGD）を含む。さらに、多くのSDD養生法は、静脈内抗生物質、特にセフォタキシムの投与を用いて、局所的な経口および／または胃への抗菌剤の使用を補う。
【０００４】
文献の分析は、SDDを用いた予防法が肺炎の発生に関連する結果を改善することを示す。SDD予防法は、機械的換気の持続時間（ICUに滞在する長さまたは病院に滞在する長さ）を有意に減らさないが、全身性の成分を含む養生法について特に、死亡の確率を有意に減らす。SDDを用いた予防法は、グラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方による感染症（肺炎を含む）を減らす。多くの病原体（S.アウレウス(aureus)およびP.アエルギノサ(aeruginosa)を含む）について、対照患者よりSDDの患者において肺炎の発生頻度が少ない。
【０００５】
VAPの予防のためのSDDの妥当性は、医療専門職によって活発に討論されている。疾病制御および予防のための合衆国センター(The United States Centers for Disease Control and Prevention (CDC)は、院内肺炎の予防のためのガイドラインにおいて、現今入手可能なデータは、ICU患者の院内肺炎の予防のためにSDDの日常使用を正当としないことをやんわりと勧める。さらにCDCは、グラム陽性菌および他の抗生物質耐性の院内病原体での抗菌剤耐性および重感染の発生についての懸念を引用する。タブラン(Tablan)ら、1994年、Infect. Control Hosp. Epidemiol. 15: 587-627。1991年には、集中治療医療における欧州コンセンサス会議は、換気を行なわれる患者においてSDDの全身使用をやめさせる勧めを発行した。ミセット(Misset)ら、1996年、Inten. Care. Med. 22: 981-984。実際に、少なくとも１つの論文は以下を含んでいた：「消化管の選択的汚染除去は、介護の費用を実質的に増加させるが、集中治療室で機械的換気を受けている患者の生存率を改善しない」。ガスティン(Gastinne)ら、1992年、NEJM 326: 594-599。
【０００６】
機械的換気を受けている患者において呼吸性感染症および／またはVAPを防止し、かくして人工呼吸器に費やす時間を減じ、かつ患者の生存の質を向上させるための新しい方法が必要とされる。
【発明の開示】
【０００７】
3.  発明の概要
本発明は、機械的換気を受けている患者における挿管法に関連する呼吸性感染症、例えば人工呼吸器に関連する肺炎を予防する方法を提供する。この方法は、経口、経鼻または気管的に挿管されている患者において実際的であり得る。この方法によれば、抗生物質IB-367ペプチドを活性成分として含む組成物が、挿管患者の口腔に局所的に投与される。典型的には、組成物は、口腔の近づきやすい表面に、かつ気管内チューブの目に見える部分に直接施用され、少なくとも1〜10分間、好ましくは少なくとも5分間保持された後、すすがれる。組成物は、患者が挿管される前、同時またはその後に施用され得る。組成物は任意的に、無菌を確実にするために患者に挿入される気管内チューブの一部に施用することができる。患者が挿管された後に、人工呼吸器に関連する感染症、例えばVAPの発生を遅らせるか、または全く防止する手段として、予防治療法を続けることができる。生じるVAPの予防は、患者の治療費用を全般的に減らし、機械的換気に支えられている患者の生命の質を向上させる。
5.  好ましい実施態様の詳細な説明
5.1  抗菌性IB-367ペプチド
本発明の方法は、抗菌性IB-367ペプチドの投与を使用する。天然抗菌性ペプチドIB-367は、（慣例にしたがって、N  C方向に挙げられた）以下のアミノ酸配列を有する、17個のアミノ酸残基の合成プロテグリン(protegrin)ペプチドである：
RGGLCYCRGRFCVCVGR(SEQ ID NO:1)
このペプチドは、４個のシステイン残基を有し、任意の種々のジスルフィド架橋形態で存在し得る。好ましい形態では、ペプチドは、２個のジスルフィド架橋：Cys5とCys14の間に１個およびCys7とCys12の間にもう１個を有する。かくして、いかなる特定の理論にも束縛されるつもりはないが、天然IB-367ペプチドは溶液中でジスルフィド架橋されたβ-シート構造を採用すると思われる。遊離のカルボキシル末端を有するペプチドの形態（カルボキシIB-367）がまた活性であるが、天然IB-367ペプチドは、カルボキシル末端でアミド化される。さらに、天然IB-367は完全にL-アミノ酸からなるが、完全にD-アミノ酸からなる類似体（「対称IB-367」）がまた活性である。本明細書において使用されるように、「IB-367」という表現は、ペプチドの天然形態、カルボキシ形態および対称形態を包含することが意図される。特定の形態が意図されるときには、接頭辞の「天然」、「カルボキシ」または「対称」を付ける。
【０００８】
IB-367は理想的には、動物の患者、特に人の患者において、経口挿管法に関連する感染症、例えば人工呼吸器に関連する肺炎（VAP)を予防するのに適する。IB-367は、種々の病原体（しばしばVAPに関連するグラム陽性菌およびグラム陰性菌を含む）に対して広いスペクトル活性を有する。例えば、  IB-367はとりわけS. アウレウス(aureus)（メチシリン耐性のS. アウレウス(aureus)（「MRSA」）を含む）、P. アエルギノサ(aeruginosa)、アチネトバクター(Acinetobacter)sp.およびクレブシエラ(Klebsiella)sp.ならびに、VAPに関連のある他の病原体に対して殺菌性である。さらには、天然ペプチドIB-367は、人の唾液中でその抗菌活性を保持し、口腔のポリ微生物(polymicrobial)フロラを迅速に殺す。関連病原体に対する唾液中での迅速な殺菌活性、作用の広いスペクトルおよび耐性発生の傾向が低いことを含むIB-367の有益な特徴は、IB-367ペプチドを、挿管法および／または機械的換気に関連する感染症、例えばVAPの発生を予防および／または低下させるのに理想的に適したものにする。
【０００９】
プロテグリンペプチドは一般に、非常にわずかな耐性しか生じないことを示した。例えば、1/2最小阻止濃度(MIC)でプロテグリンペプチドPG-1の存在下での細菌の繰り返し植え継ぎ培養物は、耐性の発生をもたらさなかった。ステインベルグ(Steinberg)ら、1997年、Antim icrob. Agents and Chemother. 41(8): 1738-1742参照。かくして、耐性を生じ、したがって予防使用のために適当でない慣用の抗生物質と違って、IB-367ペプチドは、挿管された患者の予防治療のために、そのような挿管法に関連する感染症の発生を遅らせるかまたは全く防止する努力において、理想的に適している。耐性を生じさせないという事実のために、これらのペプチドは、治療に耐性の病原体の株を作る恐れなく予防に使用できる。その上、IB-367の予防使用は、ICUおよび他の病院環境へ耐性生物を導入することを避けることができる。
【００１０】
天然IB-367ならびにその関連のカルボキシ形態および対称形態は、標準の固相もしくは溶液相ペプチド合成法を用いて便利に合成することができる。IB-367ペプチドを合成するための特定の方法ならびに、IB-367ペプチドを酸化して種々のジスルフィド架橋形態を形成するための特定の方法は、例えば米国特許第5,804,558号および米国特許第5,994,306号に記載されており、その開示は引用することによって本明細書に組み入れられる。
5.2  投与
本発明の方法は一般に、挿管された対象の口腔に、挿管法および／または機械的換気に関連する呼吸性感染症、例えばVAPを予防するのに有効な量のIB-367ペプチドを局所的に施用することを含む。いかなる操作の理論によっても束縛されるつもりはないが、気管内チューブの挿入が、細菌を下気道に入らせると思われる。さらに、チューブは、咳反射の介入によって、粘膜繊毛清掃を阻害することによって、および／または過度の粘液分泌を刺激することによって、細菌のコロニー形成を直接促進すると考えられる。かくして、抗菌剤IB-367ペプチドの施用による、口腔および口腔咽頭の腔における細菌の負荷を迅速かつ広く低下させる能力は、患者を挿管することに関連する、またはそれによって引き起こされる呼吸性感染症を防止する手段を提供する。
【００１１】
本明細書で使用されるように、SODまたは選択的口内汚染除去は、抗菌剤を口腔の近づきやすい表面に局所的に施用することをいう。SGDという語または選択的な胃の汚染除去は、飲み下すかまたは供給チューブによって抗菌剤の溶液を胃に投与することを意味する。選択的消化汚染除去(SDD)（適当には、SODおよびSGDの両方の組合せをいう）はかくして、全部の前消化管（口腔咽頭および胃の領域を含む）を汚染除去することをいう。任意の選択的汚染除去の養生法、SOD、SGDまたはSDDはさらに、消化管の微生物病原体を除去することを目指した全身性の抗生物質の投与によって補うことができる。1つの実施態様においては、予防養生法はSODを含む。
【００１２】
有効な投与量は、挿管された患者において呼吸性感染症および／またはVAPの発生の開始を遅らせるか、または全く避けるのに十分なペプチドの量をいう。１つの実施態様においては、有効な投与量は、対象の口腔中で感染に関連するフロラのコロニー形成単位(colony forming unit)(CFU)の数を、治療前に観察されるCFUの数に比べて減少させるのに十分なペプチドの量である。典型的には、3〜4 logの大きさのCFUの減少が有効であると考えられるが、1〜2 logの大きさの減少でさえ、有意の予防を提供し得る。
【００１３】
当業者は、本明細書で使用される予防が、患者の呼吸系または肺が、口腔からかまたは他の供給源からであろうと、細菌でコロニー形成されるようになり得る可能性を除外しないことを認識するであろう。むしろ、本明細書で使用される予防は、そのようなコロニー形成が、標準のよく知られている診断基準を用いて診断された呼吸性感染症または肺炎に至らないか、またはそのような感染症もしくは肺炎の開始が、その治療を受けていない挿管患者に比べて遅れることを意味する。この後者の態様においては、この予防治療は、挿管される患者または機械的換気を受ける患者に比較的短い期間中に有意の利益を提供する。この予防治療は、使用される挿管法のタイプにかかわらず、挿管された患者に施用することができる。例えばこの治療は、経口挿管された患者、経鼻挿管された患者または気管換気を受けている患者に施用され得る。
【００１４】
どのIB-367ペプチドについても、有効投与量は、イン  ビトロ(in vitro)試験、例えばMICおよび唾液殺反応速度(saliva kill kinetics)から最初に見積もることができる。最初の投与量はまた、当技術分野でよく知られている技術を用いて、例えば動物モデルのイン  ビボ(in vivo)データから見積もることができる。当業者は、特に本明細書での詳細な開示に基づいて、動物のデータを基にヒトへの投与を容易に最適化することができる。患者の口腔中のCFUを、治療の効力を監視するために（例えば拭き取り試験(swab test)によって）便利に得ることができる。
【００１５】
概してペプチドは、呼吸性感染症、例えばVAPの発生前に挿管患者の口腔に施用されるときに、最も有益である。かくして一般に、治療は患者の挿管と同時に、直前に、または挿管後直ちに開始され、患者が人工呼吸器をはずされるまで続けられ得る。もちろん、治療を始めるかどうか、いつ始めるか、終わらすかどうか、いつ終わらすかは、治療する医師の判断に依存する。
【００１６】
以下でより詳細に論じるように、このペプチドは典型的には、局所用経口組成物もしくは処方物の形態で投与される。そのような処方物は一般に、約0.001〜約2.5％（重量／重量）の全ペプチドを含むが、約0.005〜約0.75％（重量／重量）または約0.03〜約0.3％（重量／重量）の濃度範囲が有効であると予測される。１つの実施態様においては、組成物は、IB-367ペプチドが接触した組織に認め得るほどに吸収されないように、非吸収性である。そのような非吸収性の組成物は、全身性摂取を避け、汚染の部位へ直接局所的投与を可能にする。
【００１７】
組成物は、施用された投与量の濃度および他の要因、例えば患者の食物および流体摂取の頻度に一部依存して、１日数回局所的に施用され得る。かくして、特定の状況に応じて、組成物は、１日当たり１回、２回、３回、４回または、６回さえも施用することができる。治療剤は、１日、数日間（例えば２〜５日、もしくはそれ以上）、数週間、または患者が挿管されている全期間中投与することができる。治療の持続期間は挿管の持続期間に依存し、かくしてVAP発生の危険のある期間に依存し、治療を行なっている医師により決定され得る。例えば、患者が挿管されている全期間中または、治療している医師が、患者が挿管に関連した呼吸性感染症、例えばVAPを発生させる危険が高まったかまたは危険が高いと判断する他の期間中施用することができる。
【００１８】
この治療は、全身性の抗生物質の補助的投与を含むことができる。「補助的投与」とは、IB-367ペプチドの局所的施用での治療の前、同時または後に全身性の治療が施用され得ることを意味する。この態様においては、VAPを治療もしくは予防するためにSODおよび／またはSDD治療アプローチに有用であると考えられる全身性の抗生物質が選択される。そのような抗生物質の例としては、限定されることはないが、セフォタキシム、セフタジジム、セファゾリン、セフラジン、セフロキシム(cefuroxime)、シプロフロキサシン、バンコマイシン、トブラマイシン、アンピシリン、ピペラシリン、カルベニシリン、トリカルシリン(tricarcillin)、メトロニダゾル、エリスロマイシン、ゲンタマイシン、トリメトプリム、クリンダマイシン、テトラサイクリン、タゾバクタム(tazobactam)、リネゾリド(linezolid)およびトリメトプリム-スルファメトキサゾールが包含される。
【００１９】
１つの実施態様においては、IB-367治療は、VAPを治療もしくは予防することを目的とした全身性の抗生物質の補助的使用を排除する。この実施態様においては、IB-367ペプチドは、SODまたはSDDに有用な抗生物質の助けなしに、上記したように局所的に施用される。もちろん、当業者は、他の非VAP感染症と戦うことを目的とした全身性の抗生物質治療をなお施用することができることを認識するであろう。
【００２０】
実際の投与方式は、選択組成物または処方物、例えば組成物がリンス剤またはゲルであるかどうかに依存し、施用される組成物または処方物のタイプに共通である。好ましくは、組成物の吸引を避けるように注意すべきである。液体組成物、例えばリンス剤、シロップ、エリキシル剤、乳剤等は、アプリケーター、例えばスポンジもしくは他の柔かい吸収性のアプリケーターを用いて、口腔の近づきやすい表面に、任意的には挿管チューブの近づきやすい表面に、便利に施用することができる。あるいは、これらの処方物を、口腔の近づきやすい表面に、任意的には挿管チューブの近づきやすい表面に、噴霧器によって噴霧することができる。噴霧器は、機械的ポンプ式噴霧器または当技術分野で一般に使用される他のタイプの噴霧器であることができる。治療剤は、口腔をすすぐ前に、常在病原体を殺すのに十分な時間、例えば約１〜10分間の長さ、好ましくは約５分間口中に存在させるべきである。
5.3  組成物
先に論じたように、IB-367ペプチドは、挿管された患者または挿管されようとしている患者の口腔に、経口組成物の形態で局所的に投与される。動物の患者、特にヒトの患者の口腔に局所的に投与もしくは施用することができる実質的に任意の組成物を使用することができる。そのような組成物および処方物は当技術分野でよく知られており、限定ではなく例としては、経口の溶液、経口のシロップ、経口のエリキシル剤、経口の懸濁物、経口の乳剤、経口の噴霧剤、口内錠、経口のマグマ剤および経口のゲルが包含される。そのような組成物の例は、例えばアンセル(Ansel)ら、1995年、医薬投与形態および薬剤放出系(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)、ア  リー  アンド  フェビガー  ブック(A Lea & Febiger Book)、ウィリアムス  アンド  ウィルキンス(Williams & Wilkins)、モルバン、ペンシルバニア州、pp.227-285に見出すことができる。ゲル処方物は以下および説明の実施例で記載されるリンス剤処方物より有効ではないのだが、本発明の方法において使用するのに適当な経口のゲルの特定の例は、米国特許第6,025,326号に見出され、引用することによって本明細書に組み入れられる。
【００２１】
IB-367ペプチドは、遊離の酸、遊離の塩基の形態で、または当技術分野でよく知られている製薬上許容される塩として、そのような局所的経口組成物中に含まれることができる。典型的には、製薬上許容される塩は、水性の経口組成物、例えばリンス剤およびスイッシュ(swish)のために好ましい。というのは、これらのペプチドの塩は、遊離の酸または塩基形態より可溶性の傾向があるからである。特に好ましい製薬上許容される塩は塩酸塩である。
【００２２】
先に論じたように、このペプチドは、典型的には１日当たり１回の施用で所望の予防効果を達成するのに有効な量で組成物中に含まれるが、より典型的には１日当たり多数回の施用をまた使用することができる。
【００２３】
組成物は、単一のIB-367ペプチド、例えば天然のIB-367ペプチドまたは、IB-367ペプチドの組合せ、例えば天然のIB-367と対称IB-367との組合せを含むことができる。その上、組成物は、追加の活性成分、例えば慣用の抗生物質、抗菌剤、抗ウィルス剤または鎮痛剤等を含むことができる。
【００２４】
局所的経口投与のために好ましい組成物は、約0.3重量％の全IB-367ペプチドを含む、水性の経口リンス剤またはスイッシュである。そのような組成物は、当技術分野でよく知られている追加の成分、例えば湿潤剤、甘味料、粘液接着剤(mucoadhesive)、緩衝液、防腐剤等を含むことができる。ペプチドの活性に悪影響を与えず、局所的経口投与のために適当な任意のpHを使用することができるが、典型的にはそのような組成物は、約pH3-5の範囲のpHを有し、好ましいpHは約pH4.0である。特に好ましい経口リンス剤組成物を以下の表１に提供する。
【００２５】
【表１】
2004529095.tif 000002
局所的経口組成物または処方物は、任意の種々の当技術分野で公知の技術によって製造することができる。好ましくはIB-367ペプチドは、塩酸塩の形態で添加される。というのは、ペプチドの遊離の塩基形態は水への溶解性が乏しく、20mg/mLの濃度より上でゲルを形成する傾向があるからである。ペプチドはゲル化を避けるために15-20mg/mLより下の濃度で、低張性かまたは等張性の溶液で処方しなければならない。特に、HMPCの量はペプチドの安定性に悪影響を与えないので、組成物の粘度は、多少HMPCを添加することによって容易に調節できる。さらに、IB-367ペプチドは、ペプチドを分解しないかさもなければペプチドの活性に悪影響を与えない温度で、例えば約40-44℃の範囲またはそれ以下の温度で組成物に添加しなければならない。
6.  実施例
以下の実施例は、本発明を限定するのでなく、本発明を説明することを意図する。
6.1  天然のIB-367経口リンス剤処方物の製造
表１に記載した天然IB-367経口リンス剤処方物の典型的75kgバッチは以下のようにして製造される。乳酸（75g）を適当な量の精製水に溶かし、溶液のpHを1 NのNaOHおよび／または1 NのHCl溶液にてpH4.0（±0.2）に調整する。得られた溶液を72-78℃に加熱する。メチルパラベン（135g）およびプロピルパラベン（15g）を添加し、完全に溶けるまで混合する。すばやく撹拌しながらHMPC（150g）をゆっくりと加える。溶液の温度が50-60℃に達するまで、冷却しながら溶液を撹拌する。混合速度を減じて空気の混和を避け、ソルビトール（7500g）溶液を添加し、混合する。キシリトール（2250g）を加え、溶かす。温度が40-44℃に達するまで、冷却を続けながら（空気の混和を避けるために）溶液をゆっくりと混合する。次に、連続的に混合しながら天然IB-367（225g）を混合物に加える。精製水を加えて、混合物を最終的な重量にし、均質になるまで（空気の混和を避けるために）溶液をゆっくりと混合する。溶液のpHを調べ、必要なら1 NのNaOHおよび／または1 NのHCl溶液にてpHをpH4.0（±0.2）に調整する。次に、組成物を１回投与量の容器に分配する。
【００２６】
天然IB-367を添加せずに上記したようにして偽薬リンス剤を製造する。１mLの組成物は、およそ1グラムの重量である。比例した量の成分を用いて、異なるバッチサイズを製造することができる。さらに、多い量または少ない量の活性成分を含むバッチを、加える活性成分および水の量を調整することによって作ることができる。その上、カルボキシもしくは対称のIB-367を含むバッチまたは、天然、カルボキシおよび／または対称のIB-367の混合物を含むバッチを同じ方法によって製造することができる。
【００２７】
組成物の25℃の貯蔵寿命は、pH3-5の範囲のpHで、２年より上と見積もられる。
6.2  経口リンス剤の１回投与量は、経口挿管された患者において全微生物負荷量を安全かつ迅速に減らした。
【００２８】
この実施例は、天然のIB-367経口リンス剤の１回投与量が、経口挿管されている患者におけるグラム陽性菌およびグラム陰性菌ならびに酵母に対して活性であり、深刻な有害な結果を示さなかったことを説明する。挿管された患者の口腔および口腔咽頭の腔の両方で観察される口内フロラの減少は、人工呼吸器に関連する呼吸性感染症、例えばVAPの予防におけるIB-367リンス剤の有用性を証明する。
6.2.1  実験プロトコル
複数機関での試験において、天然IB-367リンス剤または偽薬対照の１回投与量（表１に記載され、0.3重量％または1重量％の天然IB-367を含む）が、16人の経口挿管された患者に投与された。８人の患者が無作為に9mgの天然IB-367 リンス剤の１回投与量(n=6)または偽薬リンス剤の１回投与量(n=2)を受けた。さらに８人の患者が無作為に、30mgの天然IB-367リンス剤の１回投与量(n=6)または偽薬リンス剤の１回投与量(n=2)を受けた。全ての16人の患者について、3mLのIB-367 リンス剤または偽薬リンス剤が口腔の全表面および気管内チューブの目に見える全表面にスポンジアプリケーターにて直接施用された。リンス剤は少なくとも５分間保持された。
【００２９】
各患者の全口内微生物負荷量を測定するために、口内拭い取り物、口腔咽頭拭い取り物および気管分泌物を、投与前および投与後0.5時間、2時間、4時間、6時間、8時間、12時間、18時間および24時間に集めた。
6.2.2  結果
天然IB-367リンス剤の投与を受けた挿管患者の全微生物負荷量は、有意に減らされた。例えば図１に示したように、投与後0.5時間に、9mgの天然IB-367リンス剤は、挿管患者の全口内好気性フロラを有意に減少させた(P=0.007)。さらに図２に示したように、9mgの天然IB-367リンス剤の１回投与量は、挿管患者の口内全グラム陽性菌、全グラム陰性菌および全口内酵母を減少させた。
【００３０】
さらに図１に示したように、9mgの天然IB-367リンス剤の１回投与量は、より少ない大きさであるにもかかわらず、口内微生物負荷量の減少と同様に、挿管患者の口腔咽頭の微生物負荷量の減少を生じさせた。
【００３１】
図３に示したように、30 mgの天然IB-367リンス剤の１回投与量は、挿管患者の全好気性口内フロラの減少を生じさせ、これは、9mgの天然IB-367リンス剤の１回投与量により生じた減少と同様の大きさおよび持続時間であった。
【００３２】
天然IB-367リンス剤の投与に関連する深刻な有害な結果は観察されなかった。
6.3   IB-367の繰り返し投与は、経口挿管患者において全微生物負荷量を減少させた。
【００３３】
この実施例は、５日間にわたる天然IB-367経口リンス剤の規則的間欠的投与が、経口挿管患者におけるグラム陽性菌およびグラム陰性菌ならびに酵母に対して活性であり、深刻な有害な結果を示さなかったことを説明する。
6.3.1  実験プロトコル
複数機関での試験において、天然IB-367リンス剤の１回投与量（表１に記載され、0.3重量％の天然IB-367を含む）が、16人の経口挿管された患者に投与された。８人の患者が無作為に9mgの天然IB-367 リンス剤 (n=6)または偽薬リンス剤 (n=2)を受け、５日間６時間毎に口腔に施用された。さらに８人の患者が無作為に、9mgの天然IB-367リンス剤 (n=6)または偽薬リンス剤 (n=2)を受け、５日間４時間毎に口腔に施用された。全ての16人の患者について、3mLのIB-367 リンス剤または偽薬リンス剤が口腔の全表面および気管内チューブの目に見える全表面にスポンジアプリケーターにて直接施用された。リンス剤は少なくとも５分間保持された後、吸引、嚥下または喀出された。
【００３４】
各治療日の最初の投与前、各治療日の最初の投与30分後、および挿管の持続中毎日１回、口内拭い取り物および気管分泌物を集めた。口内および気管試料を、定量微生物分析、同定および感染率試験のために中央実験室で処理した。３つの時点（最初の投与前、最初の投与の15分後および最後の投与の15分後）で、血液を集め、血漿のIB-367濃度を分析した。２つの時点（投与前および研究の出口）で、血液をまた集め、IB-367に対する抗体について分析した。
6.3.2  結果
16人の患者は無作為化され、治療をすべて受け、そのデータが分析された。７人の患者は５日間の治療の完了前に研究薬物療法を中断した。初期抜管が、７人のうち６人の中断の理由であった。１人の患者は、有害な結果、発疹のために中断した。
【００３５】
天然IB-367リンス剤を受けた挿管患者の全微生物負荷量は、早くも最初の日に有意に減少された。たとえば図４に示したように、第１日に、IB-367リンス剤を受けている患者は、全好気性口内フロラが10倍減少（Q４時間投与）または約30倍減少（Q６時間投与）を体験した。さらに図５に示したように、天然IB-367リンス剤を受けている患者はまた、５日の治療養生法にわたって口内微生物負荷量の蓄積減少を体験した。
【００３６】
この研究において試験した濃度および処方物のうち、Q4Hに与えられた、9mgのIB-367リンス剤処方物は、経口挿管され機械的に換気されている患者において、即座の減少および蓄積効果によって、最大の抗菌効果を提供した。この研究において観察された効力および安全性の結果に基づいて、IB-367リンス剤処方物は、VAPを含む人工呼吸器に関連する呼吸性感染症の予防のための見込みのある広いスペクトルの単一剤候補である。
【００３７】
種々の特定の実施態様によって本発明を説明したが、当業者は、添付の請求の範囲の意図および範囲から離れることなく多くの変更をなし得ることを認識するであろう。
【００３８】
この開示の中で引用した全ての文献は、あらゆる目的のためその全部が引用することにより本明細書に組み入れられる。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】天然IB-367経口リンス剤の１回投与量（9mgの天然IB-367を含む）の、経口挿管された患者の口、口腔咽頭部および気管からの全好気性フロラへの効果を説明するグラフを提供する。
【図２】天然IB-367経口リンス剤の１回投与量（9mgの天然IB-367を含む）の、経口挿管された患者の口内のグラム陽性菌およびグラム陰性菌ならびに酵母への効果を説明するグラフを提供する。
【図３】9mgまたは30mgの天然IB-367を含む天然IB-367経口リンス剤１回投与量の、経口挿管された患者の全好気性口内フロラへの効果を比べるグラフを提供する。
【図４】経口挿管された患者の全好気性口内フロラへの、Q４時間またはQ６時間での天然IB-367経口リンス剤の繰り返し投与の効果を説明するグラフを提供する。
【図５】9mgの天然IB-367を用いてQ４時間またはQ６時間治療された経口挿管された患者の口内拭き取り物からの全好気性菌の平均-時間プロットを説明するグラフを提供する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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