(57)【要約】Ｑ，Ｘ，Ｙ，Ｚ及びＲ１，Ｒ９及びＲ１２−Ｒ１９が本明細書に定義された式（Ｉ）の化合物及び製剤学的に許容できるその塩が開示されている。これらの化合物はＭＣＨ１受容体の選択的モジュレーターであり、したがってそれは各種の代謝、摂食及び性的障害の治療に有用である。そのような障害の治療法及び包装された医薬品組成物も開示されている。
2004516239.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式
2004516239.tif 000015
又はその製剤学的に許容できる塩である化合物：
式中、Ｑは下式の基を示し、
2004516239.tif 000016
式中ＡはＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、ハロゲン、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、及びモノ又はジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノから独立に選択される置換基で任意によりモノ−、ジ−又はトリ−置換されたＣ１−Ｃ５アルキレンである；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は同じか又は異なり、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジアルキルスルホンアミド、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、又はモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミドを表す；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は独立して水素又はＣ１−Ｃ６アルキルを表す；
Ｗは窒素又はＣ−Ｒａで、Ｒａは水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル又はシアノを表す；
Ｘはハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドを表し；又は
Ｘは水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ又はジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、及びモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドからなる群から選択される、同じか又は異なる５つまでの置換基で任意により置換されていてもよいフェニルを表す；
Ｙは酸素、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−又は−ＳＯ２−である；そして
ＺはＣ１−Ｃ６アルキル又はモノ、ジ若しくはトリフルオロメチルである。
【請求項２】
Ｑが下式で表される基であって、ＡがＣ１−Ｃ２アルキルで任意により置換されるメチレンである、請求項１の化合物又は塩。
2004516239.tif 000017
【請求項３】
ＡがメチレンでＷが窒素である、請求項２の化合物又は塩。
【請求項４】
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素である、請求項３の化合物又は塩。
【請求項５】
Ｘがハロゲンであり；Ｙが酸素であり；そしてＺがＣ１−Ｃ２アルキルである、請求項４の化合物又は塩。
【請求項６】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｘが水素、ハロゲン、又はフェニルであり；
Ｙが酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項４の化合物又は塩。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｘが水素であり；
Ｙが酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ２アルキルである、請求項４の化合物又は塩。
【請求項８】
ＡがメチレンでＷがＣＨである、請求項２の化合物又は塩。
【請求項９】
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素である、請求項８の化合物又は塩。
【請求項１０】
Ｘがハロゲンであり；
Ｙが酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項９の化合物又は塩。
【請求項１１】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｘが水素、ハロゲン、又はフェニルであり；
Ｙが酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項９の化合物又は塩。
【請求項１２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｘがハロゲンであり；
Ｙが酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ２アルキルである、請求項９の化合物又は塩。
【請求項１３】
ＡがＣ１−Ｃ２アルキルで任意により置換されるメチレンである下式の請求項２の化合物又は塩。
2004516239.tif 000018
【請求項１４】
ＡがメチレンでＷが窒素又はＣＨである、請求項１３の化合物又は塩。
【請求項１５】
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素である請求項１４の化合物又は塩。
【請求項１６】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｒ１４とＲ１６は同じか又は異なり、水素又はメチルのいずれかであり；
Ｘは水素、ハロゲン、又はフェニルであり；
Ｙは酸素であり；そして
ＺはＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１５の化合物又は塩。
【請求項１７】
Ｒ１、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は水素であり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は独立して水素、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ又はハロゲンであり；
Ｘはハロゲンであり；
Ｙは酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１４の化合物又は塩。
【請求項１８】
下式で表される請求項１の化合物又は塩。
2004516239.tif 000019
【請求項１９】
Ｒ１３、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１９は水素であり；
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６及びＲ１８が独立して水素又はメチルを表す、請求項１８の化合物又は塩。
【請求項２０】
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６及びＲ１８は水素である、請求項１９の化合物又は塩。
【請求項２１】
ＷはＮ又はＣＨである、請求項２０の化合物又は塩。
【請求項２２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｘは水素又はハロゲンであり；
Ｙは酸素であり；そして
ＺはＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項２１の化合物又は塩。
【請求項２３】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ２アルキル、又はＣ１−Ｃ２アルコキシを表し；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は水素であり；
Ｘがハロゲンであり；
Ｙが酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項２１の化合物又は塩。
【請求項２４】
下式で表される請求項１の化合物又は塩。
2004516239.tif 000020
【請求項２５】
Ｒ１３、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１９は水素であり；
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６及びＲ１８は独立して水素又はメチルを表す、請求項２４の化合物又は塩。
【請求項２６】
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６及びＲ１８が水素である、請求項２５の化合物又は塩。
【請求項２７】
ＷがＮ又はＣＨである、請求項２６の化合物又は塩。
【請求項２８】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｘは水素又はハロゲンであり；
Ｙは酸素であり；そして
ＺはＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項２７の化合物又は塩。
【請求項２９】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ２アルキル、又はＣ１−Ｃ２アルコキシを表し；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は水素であり；
Ｘはハロゲンであり；
Ｙが酸素であり；そして
ＺがＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項２７の化合物又は塩。
【請求項３０】
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン；
（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン；
１Ｒ，２Ｒ−１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン；
１−（４−ヨード−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン；
１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン；
１−（４−フェニル−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−［トランス−２−（３−メトキシフェニル）シクロプロピル］メチルピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−［４−クロロフェニル］シクロプロピル）メチルピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−［２−メチルフェニル］シクロプロピル）メチルピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−［４−メトキシフェニル］シクロプロピル）メチルピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン；
１−（４−ヨード−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン；
１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン；
１−（４−メチル−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン；
１−（４−トリフルオロメチル−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン；及び
１−（４−ブロモ−３−エトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン；又はそれらの製剤学的に許容できる塩から選択される請求項１の化合物又は塩。
【請求項３１】
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３  −フェニル］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２−メチルフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（３−メトキシフェニル）−４−（［３−フェニル］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛３−メチルフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２−メトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛３−クロロフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛３−エトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２，３−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛３，４−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２，５−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン；及び
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２，４−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン、又はそれらの製剤学的に許容できる塩から選ばれる、請求項１の化合物又は塩。
【請求項３２】
下式で表される化合物：
2004516239.tif 000021
式中、Ｑは下式の基を表し、
2004516239.tif 000022
式中、ＡはＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、ハロゲン、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、及びモノ又はジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意によりモノ−、ジ−、又はトリ−置換されるＣ１−Ｃ５アルキレン；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は同じか又は異なり、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジアルキルスルホンアミド、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、又はモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミドを表し；
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は独立して水素又はＣ１−Ｃ６アルキルを表し；
Ｗは窒素又はＣ−Ｒａであり、Ｒａが水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル又はシアノを表し；
Ｘはハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドを表し；あるいは
Ｘは水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、及びモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドからなる群から選択される、同じか又は異なる５つまでのより置換基で任意により置換されていてもよいフェニルを表し；
Ｙは酸素、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−又は−ＳＯ２−であり；
ＺはＣ１−Ｃ６アルキル又はモノ、ジ若しくはトリフルオロメチルである。
【請求項３３】
Ｑが下式で表される基であって、
2004516239.tif 000023
ＡはＣ１−Ｃ２アルキルで任意により置換されるメチレン又はＡは一重結合である、請求項３２の化合物又は塩。
【請求項３４】
Ｗは窒素又はＣＨである、請求項３２の化合物又は塩。
【請求項３５】
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は水素である、請求項３４の化合物又は塩。
【請求項３６】
Ｘはハロゲンであり；
Ｙは酸素であり；そして
ＺはＣ１−Ｃ２アルキルである、請求項３５の化合物又は塩。
【請求項３７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを表し；
Ｘは水素であり；
Ｙは酸素であり；そして
ＺはＣ１−Ｃ２アルキルである、請求項３５の化合物。
【請求項３８】
少なくとも１つの製剤学的に許容できる担体又は賦形剤と組み合わされた請求項１の化合物又は塩を含む医薬組成物。
【請求項３９】
医薬組成物が注射液、ピル、カプセル、シロップ又は経皮パッチとして製剤化される請求項３８の医薬組成物。
【請求項４０】
肥満を治療する方法であって、その方法がそのような治療を必要とする患者に請求項１の化合物の治療的有効量を投与することを含む、方法。
【請求項４１】
細胞又は組織試料中におけるＭＨＣ１受容体の存在を証明する方法であって、その方法が
複数の対応した細胞又は組織試料を調製すること、
細胞及び組織試料内でＭＣＨ１受容体へのＭＣＨの結合を可能とする条件下で、その対応した細胞又は組織試料の少なくとも１つと、検出できるように標識された請求項１の選択された化合物又は塩の調製物を測定された第一のモル濃度で含み、選択された化合物又は塩の標識されていない調製物を測定された第一のモル濃度よりも大きい測定された第二のモル濃度で含む対照溶液とを接触させることによって少なくとも１つの対照試料を調製すること、
細胞及び組織試料内でＭＣＨ１受容体へのＭＣＨの結合を可能とする条件下で、その対応した細胞又は組織試料の少なくとも１つを、検出できるように標識された選択された化合物又は塩の調製物を測定された第一のモル濃度で含み、請求項１のいかなる化合物又は塩の標識されていない調製物もその測定された第一の濃度以上の濃度で含まない試験溶液とを接触させることによって少なくとも１つの実験試料を調製すること、
結合していない選択された化合物又は塩を除去するために少なくとも１つ対照試料を洗浄して、少なくとも１つの洗浄した対照試料を調製すること、
結合していない選択された化合物又は塩を除去するために少なくとも１つ実験試料を洗浄して、少なくとも１つの洗浄した実験試料を調製すること、
少なくとも１つの洗浄した対照試料中のすべての残存している結合した検出できるように標識された選択された化合物又は塩の検出可能な標識の量を測定すること、
少なくとも１つの洗浄した実験試料中のすべての残存している結合した検出できるように標識された選択された化合物又は塩の検出可能な標識の量を測定すること、
少なくとも１つの洗浄した各実験試料中で測定した検出可能な標識の量を少なくとも１つの洗浄した各対照試料中で測定した検出可能な標識の量と比較すること、ここで少なくとも１つの洗浄した実験試料中の検出可能な標識の量が、少なくとも１つの洗浄した対照試料のいずれかの中で検出される量よりも多いことを示す比較によって、その実験試料中にＭＣＨ１受容体が存在することが証明される、
を含む方法。
【請求項４２】
その化合物が放射能標識されている請求項４２の方法。
【請求項４３】
検出がオートラジオグラフィーを用いて行われる、請求項４２の方法。
【請求項４４】
ＭＣＨ１受容体の情報伝達活性を変える方法であって、そのような受容体を発現している細胞を細胞の電気生理学を検出可能なように変えるのに十分な濃度で、請求項１の化合物を含む溶液と接触させることを含み、その細胞の電気生理学の検出可能な変化がＭＣＨ１受容体の情報伝達活性の変化を示す、上記方法。
【請求項４５】
細胞が動物においてｉｎ  ｖｉｖｏで接触している神経細胞であり、溶液が体液であり、細胞の電気生理学の変化がその動物の摂餌行動の再現性のある変化として検出される、請求項４４の方法。
【請求項４６】
動物がヒトであり、細胞が脳細胞であり、液体が脳脊髄液である、請求項４５の方法。
【請求項４７】
容器中に請求項３８の医薬組成物と肥満患者の治療にその組成物を使用する指示書とを含む包装された医薬組成物。
【請求項４８】
肥満の治療に使用する薬物の調製における請求項１から３７のいずれかの化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の背景）
本願は２０００年７月６日出願の米国仮出願Ｓ．Ｎ．６０／２１６，０８１からの優先権を主張する。
【０００２】
（技術分野）
本発明はメラニン凝集ホルモン１型（ＭＣＨ１）受容体のモジュレーターである１−フェニル−２−アミノメチルシクロプロパン類を包含するフェニルシクロアルキルメチルアミノ及びフェニルアルケニルアミノ誘導体に関する。本発明はまたそのような化合物を含む医薬組成物に関する。
【０００３】
（関連する技術の記載）
メラニン凝集ホルモン即ちＭＣＨはヒトを含む多くの脊椎動物の視床下部内で作られる環状の１９個のアミノ酸の神経ペプチドである。ラットにおいて、視床下部の側脳室中へのＭＣＨのＩ．Ｃ．Ｖ．注入は同様な処置をした対照動物に比べてカロリー消費が増加することが示されている。更にｏｂ／ｏｂ遺伝子型を有するラットは痩せたｏｂ／＋遺伝子型のマウスと比較してＭＣＨ  ｍＲＮＡの発現の５０−８０％増加を示す。ＭＣＨノックアウトマウスは摂食低下（ｈｙｐｏｐｈａｇｉａ）と代謝速度の増加のためにＭＣＨを産生する同胞よりもやせている。従ってＭＣＨは摂餌行動と体重の重要な調節要因であると考えられる。
【０００４】
ＭＣＨ１受容体は最初にヒトｃＤＮＡと遺伝子ライブラリーから得られ、ソマトスタチン受容体との相当な配列の同一性を有する４０２個のアミノ酸のＧ−共役蛋白質受容体として特徴づけられた。この受容体はＳＬＣ−１受容体と命名された。ＭＣＨ１受容体のラットのオルソログ（ｏｒｔｈｏｌｏｇｕｅ）がＬａｋａｙｅ等（ＢＢＡ（１９９８）  １４０１：２１６−２２０）によってラット脳ｃＤＮＡライブラリーから単離され、７つの膜貫通αヘリックスと３つの共通（コンセンサス）Ｎ−グリコシルグリコシル化部位を有する３５３個のアミノ酸の蛋白質をコードすることが見いだされた。Ｌａｋａｙｅが報告したラットのＭＣＨ１受容体は５’イントロンが除かれている以外は以前に開示されたヒトのＭＣＨ１受容体と相同であった。従ってＬａｋａｙｅ等はＭＣＨ１受容体のＮ−末端の「修正」アミノ酸配列が、以前に開示されたＭＣＨ１受容体遺伝子を含むヒトクロモソーム２２の１２８ｋｂ断片に関し寄託された配列（Ｇｅｎｂａｎｋ受け入れ番号：Ｚ８６０９０）内に見出されると推測した。
【０００５】
以前に報告された４０２個のアミノ酸のＭＣＨ１受容体蛋白質はＭＣＨと相互作用しない。従ってＬａｋａｙｅが最初に報告した３５３個のアミノ酸の受容体が、現在ではヒトＭＣＨ１受容体の正確な完全長の配列であると考えられている。
【０００６】
ラット脳切片の免疫組織化学の研究によって、ＭＣＨ１受容体が脳内に広く発現していることが示されている。ＭＣＨ１受容体の発現は嗅結節、大脳皮質、黒質、海馬の基底前脳ＣＡ１，ＣＡ２及びＣＡ３野、扁桃、及び視床下部、視床、中脳及び菱脳の核に見られた。強い信号が摂餌行動に関係があることが知られている脳の２つの領域である視床下部の前正中及び背正中核に観察された。
【０００７】
ＨＥＫ２９３細胞中に発現したＭＣＨ１受容体は、ＭＣＨに結合すると、細胞内カルシウムの用量依存性放出を媒介する。ＭＣＨ受容体を発現している細胞もまた、フォルスコリンで上昇したサイクリックＡＭＰの百日咳毒素感受性の用量依存性阻害を行うことが示されており、これは受容体がＧｉ／ｏＧ蛋白質のαサブユニットに共役することを示す。
【０００８】
ＭＣＨは摂食及びエネルギーバランスの重要な調節要因であることが示されているので、ＭＣＨ１受容体の活性を調節できるリガンドは摂食障害及び代謝障害の治療に非常に望ましい。肥満の治療には、経口投与が可能で、低分子量の、ＭＣＨ１受容体の非ペプチドアンタゴニストが特に求められる。
【０００９】
（発明の概要）
本発明は、小さな分子のＭＨＣ受容体リガンド、特にＭＣＨ１受容体リガンドである新規化合物、特に１−フェニル−２−アミノメチルシクロプロパン類を含むフェニルシクロアルキルメチルアミノ及びフェニルアルケニルアミノ化合物を提供する。これらの化合物は非ペプチドで、アミノ酸を含まず、ＭＣＨ受容体で１マイクロモル未満のＫｉを示す。好ましいＭＣＨ１受容体はヒトとサルのＭＣＨ受容体を含む哺乳動物の受容体で、クローニングされ、遺伝子組み換えで発現した受容体であっても、又は自然に発現した受容体でもよい。
【００１０】
ある実施形態では、これらの化合物は次の性質の１つ以上を有し、また２つ以上、３つ以上又は全部を有することが好ましい：１）多アリール構造（複数の縮合していない又は縮合したアリール基を有する）である。２）ｉｎ  ｖｉｖｏで経口投与できる（致死量以下の又は製剤学的に許容できる経口用量によって食欲の低下等の検出可能なｉｎ  ｖｉｖｏ効果を与えるように）。３）ナノモルの濃度でＭＣＨ受容体へのＭＨＣの結合を阻害できる。４）ナノモル以下の濃度でＭＣＨ受容体へのＭＨＣの結合を阻害できる。
【００１１】
本発明はまた特異的且つ好ましくは高い親和性でＭＣＨ受容体に結合する下に示す式Ｉの新規化合物を提供する。
【００１２】
本発明はまた少なくとも１つの製剤学的に許容できる担体とともに、式Ｉの化合物を含む医薬組成物を提供する。本化合物は特に代謝、摂食及び性的障害の治療に有用である。本発明はさらに本発明の化合物の十分な濃度をもって、そのような治療が必要な患者を治療する方法を含む。好ましい濃度はｉｎ  ｖｉｔｒｏでＭＣＨのＭＣＨ１受容体への結合を阻害するのに十分な濃度である。本発明はそのような状態を患っているヒト、ペット動物又は食用動物を本発明の化合物の有効量で治療することを意図する。
【００１３】
本発明にはそのような治療が必要な患者にレプチン、レプチン受容体アゴニスト又はメラノコルチン受容体４（ＭＣ４）アゴニストとともにＭＣＨ１受容体モジュレーターを投与することを含む摂食障害、特に肥満と神経性大食症の治療法が含まれる。
【００１４】
別の態様においては、本発明は受容体の活性のアッセイに本発明の化合物を陽性対照として使用する方法及び適切に標識された本発明の化合物を組織切片における受容体、特にＭＣＨ受容体の位置決定のプローブとして使用する方法を提供する。
【００１５】
本発明はＭＣＨ１受容体へのＭＣＨの結合の阻害剤として、またＭＣＨ媒介情報伝達の阻害剤として有用な化合物及び組成物を提供する（例えばＭＣＨ結合及びＭＣＨ媒介情報伝達のアッセイの標準物質として使用できる）。本発明はさらにｉｎ  ｖｉｖｏのＭＣＨ受容体、好ましくは視床下部にあるＭＣＨ１受容体へのＭＨＣの結合を阻害する方法を含む。
【００１６】
従って本発明の広範な実施の形態は式Ｉの化合物と製剤学的に許容できる塩に向けられている。
2004516239.tif 000003
式中、Ｑは下式の基を示し、
2004516239.tif 000004
式中、ＡはＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、ハロゲン、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、及びモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノから独立して選択される置換基で任意によりモノ、ジ又はトリ置換されたＣ１−Ｃ５アルキレンであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は同じか又は異なり、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジアルキルスルホンアミド、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、又はモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミドを示し；
Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は独立して水素又はＣ１−Ｃ６アルキルを示し；
Ｗは窒素又はＣ−Ｒａを示し、Ｒａは水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル又はシアノであり；
Ｘはハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ２−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドを示し；あるいは
Ｘは水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、及びモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドからなる群から選ばれる、同じか又は異なる５つまでの置換基で任意により置換されたフェニル基を示し；
Ｙは酸素、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−又は−ＳＯ２−であり；そして、
ＺはＣ１−Ｃ６アルキル又はモノ、ジ若しくはトリフルオロメチルである。
【００１７】
本発明はまた式Ｉの化合物を調製するために有用な中間体及び方法を提供する。
【００１８】
（発明の詳しい説明）
本発明は特にＱが環でＡがＣ１−Ｃ２アルキルで任意により置換されるメチレンである式Ｉの化合物と塩を含む。
【００１９】
本発明はまた特にＷが窒素又はＣＨで、Ａがメチレンである式Ｉの化合物及び塩に向けられる。このクラスの好ましい化合物と塩はＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であるものである。このクラスの他の好ましい化合物と塩はＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であり、Ｘがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。Ｗが窒素又はＣＨであり、Ａがメチレンであり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを示し、Ｘが水素、ハロゲン、又はフェニル、最も好ましくはハロゲンであり、Ｙが酸素であり、そしてＺがＣ１−Ｃ６アルキルである式１の化合物と塩もまた好ましい。
【００２０】
本発明によって特に提供されるのは式ＩＩの化合物
2004516239.tif 000005
と製剤学的に許容できるその塩であり、ＡがＣ１−Ｃ２アルキルで任意により置換されるメチレンであり、Ｒ１−Ｒ１９、Ｗ、Ｘ、Ｙ、及びＺは式Ｉについて定義した通りである。
【００２１】
式ＩＩの好ましい化合物と塩はＷが窒素又はＣＨであるものである。
【００２２】
式ＩＩの他の好ましい化合物と塩はＷが窒素又はＣＨであり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であるものである。
【００２３】
Ｗが窒素又はＣＨであり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを示し、Ｒ１４とＲ１６は同じか又は異なり、水素かメチルのいずれかであり、Ｘが水素、ハロゲン、又はフェニルであり、Ｙが酸素であり、さらにＺがＣ１−Ｃ６アルキルである式ＩＩの化合物と塩もまた好ましい。
【００２４】
特に好ましい式ＩＩの化合物と塩はＷが窒素又はＣＨであり、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５が独立して水素、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ又はハロゲンであり、Ｘがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。
【００２５】
本発明はさらに式ＩＩＩ
2004516239.tif 000006
の化合物と製剤学的に許容できるその塩を提供する。式中、Ｒ１−Ｒ１９、Ｗ、Ｘ、Ｙ、及びＺは式Ｉについて定義した通りである。
【００２６】
好ましい式ＩＩＩの化合物と塩はＲ１３、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１９が水素であり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６及びＲ１８が独立して水素又はメチル、より好ましくは水素を示すものである。
【００２７】
Ｒ１０−Ｒ１９が水素であり、Ｗが窒素又はＣＨである式ＩＩＩの化合物と塩も好ましい。
【００２８】
より好ましい式ＩＩＩの化合物と塩はＲ１０−Ｒ１９が水素であり、Ｗが窒素又はＣＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシであり、Ｘが水素又はハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。
【００２９】
特に好ましい式ＩＩＩの化合物と塩はＲ１０−Ｒ１９が水素であり、Ｗが窒素又はＣＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４が独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ２アルキル又はＣ１−Ｃ２アルコキシを示し、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が水素であり、Ｘがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。
【００３０】
本発明の他の実施形態は式ＩＶ
2004516239.tif 000007
の化合物と製剤学的に許容できるその塩に向けられる。Ｒ１−Ｒ１９、Ｗ、Ｘ、Ｙ、及びＺは式Ｉについて定義した通りである。
【００３１】
式ＩＶの好ましい化合物と塩はＲ１３、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１９が水素であり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４、Ｒ１６及びＲ１８が独立して水素又はメチル、好ましくは水素を示すものである。
【００３２】
Ｒ１０−Ｒ１９が水素であり、Ｗが窒素又はＣＨである式ＩＶの化合物と塩も好ましい。
【００３３】
より好ましい式ＩＶの化合物と塩はＲ１０−Ｒ１９が水素であり、Ｗが窒素又はＣＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシであり、Ｘが水素又はハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。
【００３４】
特に好ましい式ＩＶの化合物と塩はＲ１０−Ｒ１９が水素であり、Ｗが窒素又はＣＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４が独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ２アルキル又はＣ１−Ｃ２アルコキシであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が水素であり、Ｘがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。
【００３５】
本発明はまた式Ｖ
2004516239.tif 000008
の化合物と製剤学的に許容できるその塩を提供する。Ｑは下式の基であり、
2004516239.tif 000009
式中、ＡはＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、ハロゲン、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、及びモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルアミノから独立に選択される置換基で任意によりモノ、ジ又はトリ置換されるＣ１−Ｃ５アルキレンであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８は同じか又は異なり、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジアルキルスルホンアミド、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、又はモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミドを示し；
Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９は独立して水素又はＣ１−Ｃ６アルキルを示し；
Ｗは窒素又はＣ−Ｒａであり、ここでＲａは水素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル又はシアノを示す；
Ｘはハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ又はジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドを示し；又は
Ｘは水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ１−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、ヒドロキシ、アミノ、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、モノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルカルボキサミド、−ＳＯ２ＮＨ２、及びモノ若しくはジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルスルホンアミドからなる群から選択される、同じか又は異なる５つまでの置換基で任意により置換されるフェニルを示し；
Ｙは酸素、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−であり；そして、
ＺはＣ１−Ｃ６アルキル又はモノ、ジ若しくはトリフルオロメチルである。
【００３６】
式Ｖの化合物はＭＣＨ１受容体リガンドの調製において有用な中間体である。
【００３７】
好ましい式Ｖの化合物はＱが下式の基を示し、
2004516239.tif 000010
式中、ＡはＣ１−Ｃ２アルキルでより任意に置換されるメチレンであるか又はＡは一重結合であるものである。そのような化合物を式ＶＡの化合物として言及する。
【００３８】
本発明は特にＷが窒素又はＣＨである式ＶＡの化合物に向けられる。
【００３９】
より好ましい式ＶＡの化合物はＷが窒素又はＣＨであり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であるものである。
【００４０】
他の好ましい式ＶＡの化合物はＷが窒素又はＣＨであり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であり、Ｘがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。
【００４１】
特に好ましい式ＶＡの化合物はＷが窒素又はＣＨであり、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシを示し、Ｘがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものである。
【００４２】
とりわけ好ましい式Ｖの化合物には、Ｑが下式の基であり、
2004516239.tif 000011
式中、ＡがＣ１−Ｃ２アルキルで任意に置換されるメチレンであるものが包含される。これらの化合物は本明細書中以下式ＶＩ−Ａの化合物として言及する。式ＶＩ−Ａの具体的な化合物にはＡがメチレンで、Ｒ１０とＲ１１がメチル又は好ましくは水素であるものが含まれる。
【００４３】
式ＶＡの具体的な化合物にはＷが窒素又はＣＨであるものが含まれる。Ｖ及びＶＡの好ましい化合物にはＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９が水素であるものが含まれる。
【００４４】
式ＶＡの他の具体的な化合物にはＸがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものが含まれる。
【００４５】
さらに他の式ＶＡの具体的な化合物にはＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、及びＲ８が同じか又は異なり、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシであり、Ｘがハロゲンであり、Ｙが酸素であり、ＺがＣ１−Ｃ６アルキルであるものが含まれる。
【００４６】
式Ｉから式ＶＡの化合物においてはシアノ又はニトロ基が５個以下であることが好ましく、３個以下であることがより好ましい。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５の２個以下が水素でない置換基であることが好ましい。Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７、Ｒ１８及びＲ１９の５個以下が水素でない置換基であることが好ましく、３個以下が水素でない置換基であることがより好ましい。
【００４７】
式Ｉの代表的な化合物を表１に示す。
【００４８】
2004516239.tif 000012
【００４９】
ある状況では、本発明の化合物は１つ以上の不斉炭素原子を含むことができ、従って本化合物は異なった立体異性体で存在し得る。これらの化合物は例えばラセミ体又は光学活性体であり得る。このような場合、単一のエナンチオマー、即ち光学活性体は不斉合成又はラセミ体の分割によって得られる。本発明の化合物の不斉合成は以下の例１に示した方法を用いて実施できる。α−メチルベンジル基を有する化合物（Ｒ３はメチル、Ｒ４は水素）についてはＲエナンチオマーが好ましい。ラセミ体の分割は、例えば分割剤の存在下での結晶化のような従来の方法で、又は例えばキラルＨＰＬＣカラムを用いたクロマトグラフィーによって遂行される。
【００５０】
式１によって包含される本発明の代表的な化合物には表１の化合物及び製剤学的に許容できるそれらの酸付加塩が含まれるが、これらに限定されるものではない。さらに、本発明の化合物が酸付加塩として得られた場合は、遊離塩基は酸塩の溶液を塩基性化することにより得られる。逆に製品が遊離塩基である場合は付加塩、特に製剤学的に許容できる付加塩は、その遊離塩基を適切な有機溶剤に溶解し、塩基化合物から酸付加塩を調製する従来の手順に従って、その溶液を酸で処理することにより、製造することができる。
【００５１】
毒性のない製剤学的塩には塩酸、燐酸、臭化水素酸、硫酸、スルフィン酸、蟻酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、硝酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、ヨウ化水素酸、酢酸のような飽和脂肪酸、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（ｎは０−４）等が含まれる。当業者は幅広い毒性のない製剤学的付加塩を認識するであろう。
【００５２】
本発明はまた式Ｉの化合物のアシル化したプロドラッグも包含する。当業者は式Ｉに包含される化合物の毒性のない製剤学的に許容できる付加塩及びアシル化したプロドラッグを調製するために採用し得る各種の合成法を認識するであろう。
【００５３】
化合物に各種の互変異性体がある場合は、本発明は１つの特定の互変異性体に限定されない。本発明は化合物のすべての互変異性体を含む。
【００５４】
本発明はヒトのメラニン凝集ホルモン受容体を含むメラニン凝集ホルモン受容体に高親和性で結合する化合物に関する。本発明はまたヒトとサルのメラニン凝集ホルモン受容体を含むメラニン凝集ホルモン受容体に高選択性で結合する化合物を含む。特別な理論に縛られることを望まないが、式Ｉの化合物とメラニン凝集ホルモン受容体の相互作用が、これらの化合物の医薬品としての有用性を与えると考えられている。
【００５５】
本発明はそのような治療が必要な患者を障害の症状を変えるのに十分な本発明の化合物の量で治療する方法を包含する。
【００５６】
本発明の化合物及び組成物を用いて治療できる疾患及び／又は障害は摂食障害、性障害、肥満、大食症、食欲不振、糖尿病、心臓病、脳卒中、無オルガスムス症、又は心因性インポテンツである。
【００５７】
本発明はまた、本発明の化合物の少なくとも１つの化合物と製剤学的に許容できる少なくとも１つの担体又は賦形剤を共に含む医薬組成物を提供する。そのような医薬組成物には、例えば肥満又は多食のような摂食障害又は無オルガスムス症又は心因性インポテンツのような性的障害の治療のようなメラニン凝集ホルモン受容体の変調に反応する障害の治療のための包装された医薬組成物が含まれる。包装された医薬組成物には、上述の少なくとも１つのメラニン凝集ホルモン受容体の変調の治療有効量を保持する容器と、含有された組成物はメラニン凝集ホルモン受容体の変調に反応する障害の治療のために患者で使用されるべきことを示した指示書（例えばラベル）が含まれる。
【００５８】
本発明はまた、メラニン凝集ホルモン受容体へのメラニン凝集ホルモンの結合を阻害する方法にも関連し、その方法は本発明の化合物をｉｎ  ｖｉｔｒｏでメラニン凝集ホルモン受容体へのメラニン凝集ホルモンの結合を阻害するのに十分な濃度でメラニン凝集ホルモン受容体を発現している細胞に接触させることを含む。この方法には、例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏでメラニン凝集ホルモン受容体へのメラニン凝集ホルモンの結合を阻害するのに十分な式Ｉの化合物の量を与えられた患者において、ｉｎ  ｖｉｖｏでメラニン凝集ホルモン受容体へのメラニン凝集ホルモンの結合を阻害することが含まれる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでメラニン凝集ホルモン受容体へのメラニン凝集ホルモンの結合を阻害するのに十分な式Ｉの化合物の量は、例えば例５に記載したアッセイのような、メラニン凝集ホルモン受容体結合アッセイによって容易に測定できる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの結合を測定するのに使用されるメラニン凝集ホルモン受容体を含む膜は、例えばクローニングしたヒト又はサルのメラニン凝集ホルモン受容体を発現しているＨＥＫ２９３細胞、特にそのような受容体を発現しているＨＥＫ２９３細胞のような各種の源から得られる。
【００５９】
本発明はまた、ＭＣＨ受容体の情報伝達活性を変化させる方法、特にＭＣＨ受容体に媒介される細胞内カルシウムの放出を変化させる方法に関し、その方法にはそのような受容体を発現している細胞を本発明化合物の有効量に暴露することが含まれる。この方法には例えばｉｎ  ｖｉｔｒｏでＭＣＨ受容体の情報伝達活性を変化させるのに十分な式Ｉの化合物の量が与えられた患者において、ｉｎ  ｖｉｖｏでＭＣＨ受容体の情報伝達活性を変化させることが含まれる。ＭＣＨ受容体の情報伝達活性を変化させるのに十分な化合物の量は、例えば例６に記載したカルシウムの動員（ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）アッセイのようなＭＣＨ受容体の情報伝達アッセイによって測定できる。
【００６０】
本発明によって提供されるメラニン凝集ホルモン受容体リガンドとその標識誘導体はまた、メラニン凝集ホルモン受容体への候補医薬品の結合能の測定において、標準物質及び試薬として有用である。
【００６１】
本発明によって提供されるメラニン凝集ホルモン受容体リガンドの標識誘導体は陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）造影又は単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＴ）の放射性トレーサーとしても有用である。
【００６２】
本発明の好ましい化合物は殺真菌活性を示さない。そのような殺真菌活性の欠如は固体ＭＡＧ培地上３２℃で４８時間生長させたＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｄｕｌａｎｓ  株  Ｒ１５３のコロニーサイズのわずか４０％の減少（１００ｐｐｍの化合物で処理し、非処理の対照と比較した時）で証明できる。ＢＥＮＯＭＹＬを任意により陽性対照として使用できる。ＭＡＧ培地は２％麦芽エキス、０．２％ペプトン、１％グルコース及び微量元素であり、ｐＨは６．５である。微量元素の５０００倍濃縮物は１０ｇ／Ｌ  ＥＤＴＡ、４．４ｇ／Ｌ  ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、１．０１ｇ／Ｌ  ＭｎＣｌ２・４Ｈ２Ｏ、０．３２ｇ／Ｌ  ＣｏＣｌ２・６Ｈ２Ｏ、０．３１５ｇ／Ｌ  ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ、０．２２ｇ／Ｌ  （ＮＨ４）６Ｍｏ７Ｏ２４・Ｈ２Ｏ、１．４７ｇ／Ｌ  ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ及び１．０ｇ／Ｌ  ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏからなる。培地は１．５％の寒天を加えて固めてある。
【００６３】
代わりに、そのような殺真菌作用の欠如は小麦上のＰｕｃｃｉｎｉａ  ｒｅｃｏｎｄｉｔａ（赤さび病）、大麦上のＥｒｙｓｉｐｈｅ  ｇｒａｍｉｎｉｓ（うどんこ病）、リンゴ上のＶｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ（赤かび病、黒色斑点）及びピーナツ上のＣｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｒａｃｈｉｄｉｃｏｌａ（早期斑点病）の６０％から１００％の各感染頻度で証明できる。
【００６４】
殺真菌活性の測定に採用される技術は次の通りである。植物を４ｃｍの直径のミニスポット中のＪｏｈｎ  Ｉｎｎｅｓ  Ｐｏｔｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐｏｓｔ（適宜、Ｎｏ１又はＳｅｅｄ）の中で生長させる。細かい砂をポットの底に置き、試験する化合物が根から取り込まれるのを容易にする。
【００６５】
試験される化合物は、例えば水性Ｄｉｓｐｅｒｓｏｌ  Ｔと共にビード粉砕で、又は使用直前に必要な濃度に希釈されるアセトン／エタノール溶液として製剤化される。葉には１００ｐ．ｐ．ｍ．ａ．ｉ．懸濁液をスプレーし、同じ植物の根には土壌を介して適用する。（スプレーは最大保持で適用し、根は約４０ｐｐｍａ．ｉ．／乾燥土壌と同等の最終濃度に浸す）。スプレーが穀物に適用される場合は、最終濃度０．１％のＴｗｅｅｎ  ２０を加える。
【００６６】
大部分の試験で、試験化合物は植物に病気が接種される１日又は２日前に土壌（根）と葉（スプレーで）に適用される。例外はＥｒｙｓｉｐｈｅ  ｇｒａｍｉｎｉｓの試験で、この場合、植物は処置の２４時間前に接種される。接種後、植物は感染が起きるような適切な環境に置き、病気が評価できるようになるまで接種される。接種と評価の間の期間は病気と環境によって４日から１４日まで変わる。
【００６７】
化学的記述及び用語
本発明の化合物には不斉中心がある；本発明はすべての光学異性体とその混合物を含む。
【００６８】
炭素−炭素の二重結合を有する本発明の化合物にはＺ型とＥ型がある；本化合物のすべての異性体が本発明に含まれる。
【００６９】
式Ｉに１回を超すいかなる変更が生じた時、そのたびに現れる定義は他のすべての場合に現れる定義に無関係である。
【００７０】
本発明中の「Ｃ１−Ｃ６アルキル」は１−６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝したアルキル又はシクロアルキル基を意味し、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎーブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル及び３−メチルペンチルである。好ましいＣ１−Ｃ６アルキル基はメチル、エチル、プロピル、ブチル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ノルボルニル等である。特に好ましいアルキル基はメチルとエチルである。
【００７１】
本発明中の「Ｃ１−Ｃ６アルコキシ」は酸素ブリッジによって結合した指定された炭素数のアルキル基を意味し、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒ−ブトキシ、ペントキシ、２−ペンチル、イソペントキシ、ネオペントキシ、ヘキソキシ、２−ヘキソキシ、３−ヘキソキシ及び３−メチルペントキシである。好ましいアルコキシ基はＣ１−Ｃ４アルコキシ基である。特に好ましいアルコキシ基はメトキシとエトキシである。
【００７２】
「ハロゲン」にはフッ素、塩素、臭素と沃素が含まれる。Ｘは式Ｉから式Ｖまでの式でハロゲンであり、臭素が特に好ましい。
【００７３】
「ハロアルキル」は１つ以上のハロゲン原子で置換された特定の炭素数を有する分枝した又は直鎖の飽和脂肪族炭化水素基を含む。ハロアルキルの例にはモノ、ジ、トリ−フルオロメチル、モノ、ジ、トリ−クロロメチル、モノ、ジ、トリ、テトラ−又はペンタ−フルオロエチル及びモノ、ジ、トリ、テトラ又はペンタ−クロロエチルが含まれるが、これらに限定されるものではない。典型的なハロアルキル基はトリフルオロメチル及びジフルオロメチルである。本発明の化合物に好ましくは５個以下、より好ましくは３個以下のハロアルキル基があることが好ましい。
【００７４】
「ハロアルコキシ」は酸素ブリッジによって結合した指定された炭素数の上に定義したハロアルコキシ基を示す。
【００７５】
毒性のない「製剤学的に許容できる塩」には塩酸塩、硫酸塩、燐酸塩、二燐酸塩、臭化水素酸塩及び硝酸塩又はリンゴ酸塩、マレエート、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、２−ヒドロキシスルホン酸塩、サリチル酸塩及びステアリン酸塩が含まれるが、これらの塩に限定されるものではない。同様に製剤学的に許容できるカチオンにはナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウム及びアンモニウムが含まれるが、これらに限定されるものではない。本発明は式Ｉの化合物のプロドラッグを包含する。
【００７６】
医薬製剤
当業者は式Ｉに包含される化合物の、製剤学的に許容できる毒性のないプロドラッグの調製のために採用される各種の合成方法を認識するであろう。当業者は本発明化合物の溶媒和物を調製するために使用される、例えば水、エタノール、鉱油、植物油及びジメチルスルホキシドのような製剤学的に許容できる毒性のない幅広い各種溶剤を認識するであろう。
【００７７】
一般式Ｉの化合物は従来の毒性のない製剤学的に許容できる担体、アジュバント及び溶媒を含む用量単位製剤で経口、局所、非経口、吸入又はスプレー又は経直腸で投与できる。ピル、カプセル、エリキシル、シロップ、薬用ドロップ、トローチ等の型での投与が特に好ましい。本明細書中で使用されている非経口と言う用語には皮下注射、皮内、血管内（例えば静脈内）、筋肉内、脊椎、くも膜下注射等又は注入技術が含まれる。さらに一般式Ｉの化合物と製剤学的に許容できる担体を含む医薬製剤が提供されている。１つ以上の一般式Ｉの化合物を１つ以上の毒性のない製剤学的に許容できる担体及び／又は希釈剤及び／又はアジュバント及び必要であれば他の活性成分と共に用いてもよい。一般式Ｉの化合物を含む医薬品組成物は例えば、錠剤、トローチ、薬用ドロップ、水性又は油性懸濁液、分散性粉末又は顆粒、エマルジョン、硬カプセル又は軟カプセル、シロップ又はエリキシルのような経口使用に適した剤型であってもよい。
【００７８】
経口用の組成物は技術分野で公知の医薬組成物の製造方法に従って調製でき、そのような組成物は製剤学的に優雅で味のよい製剤を提供するために甘味剤、フレーバー剤、着色剤及び防腐剤からなる群から選ばれた１つ以上の添加剤を含んでもよい。錠剤は錠剤の製造に適した毒性がなく、製剤学的に許容できる賦形剤との混合物中に活性成分を含む。これらの賦形剤は例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、燐酸カルシウム又は燐酸ナトリウムのような不活性希釈剤；例えばコーンスターチ、アルギン酸のような粒状化剤及び崩壊剤；例えば澱粉、ゼラチン又はアラビアゴムのような結合剤及び例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクのような潤滑剤である。錠剤はコーティングされていなくてもよく、又は消化管中での崩壊と吸収を遅らせ、それによって長期間にわたって持続する作用を与えるために公知の技術でコーティングされていてもよい。例えばグリセリルモノステアレート又はグリセリルジステアレートのような時間遅延物質を使用できる。
【００７９】
経口用の製剤は、例えば炭酸カルシウム、燐酸カルシウム又はカオリンのような不活性固体希釈剤と活性成分を混合した硬ゼラチンカプセルとして、又は活性成分を水又は例えばピーナッツ油、液状パラフィン若しくはオリーブ油のような油媒体と混合した軟カプセルとして提供できる。
【００８０】
水性懸濁液は水性懸濁液の製造に適した賦形剤との混合物中に活性物質を含む。そのような賦形剤は例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム塩、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、アラビアゴムのような懸濁剤；分散又は湿潤剤の例としてはレシチンのような天然由来のホスファチド又はアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合物、例えばポリオキシエチレンステアレート、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、エチレンオキシドと脂肪酸とヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合物、例えばポリオキエチレンソルビトールモノオレエート、又はエチレンオキシドと脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとの縮合物、例えばポリエチレンソルビタンモノオレエート等である。水性懸濁液は、例えばエチル、ｎ−プロピルｐ−ヒドロキシベンゾエートのような１つ以上の防腐剤、１つ以上の着色剤、１つ以上のフレーバー剤及び１つ以上の蔗糖又はサッカリンのような甘味剤を含んでもよい。
【００８１】
油性懸濁液は例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油若しくはココナッツ油のような植物油又は液状パラフィンのような鉱物油中に活性成分を懸濁して製剤化してもよい。油性懸濁液は例えば、みつろう、硬パラフィン又はセチルアルコールのような増粘剤を含んでもよい。味のよい経口製剤を提供するために上述したような甘味剤及びフレーバー剤を加えてもよい。これらの組成物はアスコルビン酸のような抗酸化剤を加えて保存される。
【００８２】
水を加えることによって水性懸濁液を調製するのに適した分散性粉末と顆粒は、活性成分を分散剤又は湿潤剤、懸濁剤及び１つ以上の防腐剤との混合物で提供する。適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤は既に上述したもので例示されている。例えば甘味剤、フレーバー剤及び着色剤のような賦形剤を更に添加してもよい。
【００８３】
本発明の医薬品組成物は水中油型のエマルジョンであってもよい。油層は例えばオリーブ油若しくはラッカセイ油のような植物油又は液状パラフィンのような鉱物油あるいはこれらの混合物であってもよい。適切な乳化剤は例えばアラビアゴム、トランガカントゴムのような天然由来のゴム、例えば大豆、レシチン、等の天然由来のホスファチド、脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導されるエステル又は部分エステル、例えばソルビタンモノオレエート、及びその部分エステルとエチレンオキシドとの縮合物、例えばポリオキエチレンソルビタンモノオレエートであってもよい。エマルジョンは甘味料及びフレーバー剤をまた含んでもよい。
【００８４】
シロップ及びエリキシルには例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール又は蔗糖を配合してもよい。そのような製剤はまた緩和薬、防腐剤及びフレーバー剤及び着色剤を含んでもよい。医薬組成物は滅菌した注射用水性又は油脂性懸濁物の剤型であってもよい。この懸濁物は公知の方法に従って上述の適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤を用いて製剤化され得る。滅菌した注射用製剤はまた、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液のような毒性のない非経口で許容できる希釈剤又は溶剤中の滅菌した注射用溶液又は懸濁物であってもよい。許容できるビヒクル及び溶媒の中で採用されるのは水、リンゲル溶液及び等張の塩化ナトリウム溶液である。さらに滅菌した硬化油が従来から溶剤又は懸濁媒体として採用されている。この目的のために合成したモノ及びジグリセリドを含め、刺激のないすべての硬化油を採用できる。更にオレイン酸のような脂肪酸が注射製剤に有用である。
【００８５】
一般式Ｉの化合物はまた例えば薬物の経直腸投与に座薬の形で投与できる。これらの製剤は、薬物と常温で固体であるが直腸の温度で液体であり、従って直腸内で融解して薬物を放出する適切な刺激のない賦形剤を混合して調製できる。そのような物質はココアバター及びポリエチレングリコールである。
【００８６】
一般式Ｉの化合物は滅菌した媒体中で非経口投与してもよい。薬物は使用するビヒクルと濃度によって、ビヒクル中に懸濁又は溶解できる。例えば、局所麻酔剤、防腐剤及び緩衝剤のようなアジュバントを溶剤に溶解することができるので、有利である。
【００８７】
ヒト以外の動物に投与する場合は、組成物を餌又は飲み水に加えてもよい。動物が餌と一緒に組成物の適量を摂取するように、これらの動物の餌及び飲み水の組成物を製剤化することは便利である。また、組成物を餌又は飲み水に添加するためのプレミックスとしての提供することも便利である。
【００８８】
上に示した状態の治療には、約０．１ｍｇから約１４０ｍｇ／ｋｇ体重／日の用量レベルが有用である（患者１人１日当たり約０．５ｍｇから約７ｇ）。単回用量剤型を製造するために担体物質と組み合わされる活性成分の量は治療される宿主と投与形態によって異なる。用量単位剤型は一般に約１ｍｇから約５００ｍｇの活性成分を含む。
【００８９】
投与回数も使用する化合物と治療される特定の病気の種類によって異なる。しかし大抵の障害の治療には、１日当たり４回以下の投与法が好ましい。肥満等の摂食障害の治療には、１日あたり１回又は２回の投与計画が特に好ましい。インポテンスの治療には速く有効量に達する単回投与が望ましい。
【００９０】
特定の患者のための特定の用量レベルは、使用する特定の化合物の活性、年齢、体重、一般健康状態、性別、食事、投与時期、投与経路及び排泄速度、併用薬及び治療中の特定の疾患の重症度等の各種の因子に依存する。
【００９１】
本発明の好ましい化合物は望ましい薬理学的性質を有する。そのような性質は経口でのバイオアベイラビリティー、低毒性、低血清蛋白質結合及びｉｎ  ｖｉｔｒｏとｉｎ  ｖｉｖｏの望ましい半減期等であるが、これらに限定されない。ＣＮＳ障害の治療に使用される化合物には血液脳関門の通過が必要である一方、末梢の障害に使用される化合物は脳内レベルが低いことがよく好ましい。
【００９２】
これらの望ましい薬理学的性質を予測するためにアッセイを用いることができる。バイオアベイラビリティーを予測するのに用いられるアッセイにはＣａｃｏ−２細胞単層を含むヒトの腸細胞の単層を超える輸送等がある。培養肝細胞に対する毒性は化合物の毒性を予測するのに用いることができる。ヒトにおける化合物の血液脳関門の通過は、化合物を静脈内投与した実験動物での化合物の脳内レベルから予測できる。
【００９３】
血清蛋白質結合はアルブミン結合アッセイから予測できる。そのようなアッセイはＯｒａｖｃｏｖａ等のレビュー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｂ（１９９６）Ｖｏｌｕｍｅ  ６７７、ｐａｇｅｓ１−２７）に記載されている。
【００９４】
化合物の半減期は化合物の投与頻度に逆比例する。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの化合物の半減期はＫｕｈｎｚとＧｉｅｓｃｈｅｎが記載しているミクロソームの半減期のアッセイから予測できる（Ｄｒｕｇ  Ｍａｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ，（１９９８）Ｖｏｌｕｍｅ  ２６，Ｐａｇｅｓ  １１２０−１１２７）。
【００９５】
式Ｉの化合物は標準的なｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＭＣＨ受容体結合アッセイ及び／又はカルシウム動員アッセイ、特に後に示す例５と６で特定されたアッセイで良好な活性を示す。「標準的なｉｎ  ｖｉｔｒｏ  受容体結合アッセイ」とは後に示す例５で定義したプロトコールのことである。「標準的なＭＣＨ  １受容体カルシウム動員アッセイ」とは後に示す例６で定義したプロトコールのことである。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＭＣＨＩ受容体結合アッセイで定義され、例５に示した標準において、一般的に式Ｉの好ましい化合物のＫｉは約１マイクロモル以下であり、Ｋｉが約１００ナノモル以下であることがより好ましく、Ｋｉが約１０ナノモル以下であることがさらに好ましく、１ナノモル以下がよりさらに好ましい。一般的に式Ｉの好ましい化合物はＭＣＨＩ受容体のアンタゴニストであり、後に例６で例示する、定義された標準的なｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＭＣＨ  １受容体媒介カルシウム動員アッセイにおいて、ＥＣ５０の値は約４マイクロモル以下であり、約１マイクロモル以下がより好ましく、約１００ナノモル以下のＥＣ５０の値がさらに好ましく、さらに約１０ナノモル以下又は１ナノモル以下がより好ましい。
【００９６】
式Ｉの好ましい化合物はドーパミン受容体、特にヒトのドーパミンＤ２及びＤ４受容体と相互作用しない。ドーパミン受容体結合アッセイは後に示す例９に記載する方法を用いて実施できる。式Ｉの好ましい化合物は例９に記載するドーパミンＤ２及びＤ４受容体結合アッセイのような標準的なドーパミン受容体結合アッセイで１マイクロモルを超すＫｉ値を示す。
【００９７】
例
化合物の調製
本発明の化合物は本質的に図式１に示した合成手順に従って調製できる。一般構造式７の２−フェニルアシルシクロアルキル化合物を還元剤の存在下で４−アリールピペラジン又はピペリジンと縮合して一般式Ｉの化合物を提供できる。還元剤は水素化硼酸ナトリウム、トリアセトキシ水素化硼酸ナトリウム、水素化リチウムアルムニウム、アラン等であってもよい。替わりに酸塩化物又は酸をピペラジンと結合してアミドを作り、引き続きそれを還元して所望の式Ｉの化合物を得ることができる。
【００９８】
本発明の特定の化合物の調製（化合物１の１Ｓ，２Ｓエナンチオマー）を図式２に記載し、使用する合成工程を例１に示す。図式２の範囲内において、１Ｓ、２Ｓ  ２−フェニルシクロプロパンカルボン酸（９）を１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の存在下で１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）ピペラジンと縮合させた。得られたアミド１１をテトラヒドロフラン中で、アランで還元して所望のアミンを得た。
【００９９】
当業者は下記例で示されるように、本発明に包含される化合物を製造するために出発原料を変え、また追加の工程を用いることができることを理解するであろう。特に断らない限り、試薬と溶剤は標準の市販グレードであり、さらに精製せずに使用される。
図式１
2004516239.tif 000013
図式２
化合物１の１Ｓ，２Ｓエナンチオマーの調製
2004516239.tif 000014
【０１００】
例１
（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジンの調製
以下の例中の番号９−１１の化合物は図式２に示した化合物を表す。
１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）ピペラジン（１０）
１−（３−メトキシフェニル）ピペラジン二臭化水素化物（３．５ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液をＤＭＳＯ（３０ｍＬ）に溶解し、大気に開放されたフラスコ中で６５℃で４時間加熱する。冷却後、混合物を１Ｎの水酸化ナトリウム溶液１００ｍＬを含む分液濾斗に注ぎ、エチルエーテル（３Ｘ１００ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過し、濃縮して固体の１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）ピペラジンを得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）７．３４−７．３６（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ，），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３８−６．４１（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ）），３．８７（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），３．１１−３．１３（ｍ，４Ｈ），３．０１−３．０３（ｍ，４Ｈ）
【０１０１】
（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）カルボニルピペラジン（１１）
ＥＤＣＩ（０．４２  ｇ，  ２．２  ｍｍｏｌ），ＤＭＡＰ（０．２７  ｇ，  ２．２  ｍｍｏｌ）及びＨＯＢＴ（０．２３  ｇ，  ２．２ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１５ｍＬ）中の酸９（０．３４ｇ、２．１ｍｍｏｌ）とピペラジン１０（０．５４ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に加え、得られた溶液を一夜攪拌する。溶液を水（１０ｍＬ），飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ），ブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥する。濾過後、溶液を濃縮し、得られた油をカラムクロマトグラフィーでクロロホルム中の２％メタノールで溶出して精製し、所望のアミド１１を白色の粘着性固体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．１−７．５（ｍ、６Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），６．４０（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），３．８（ｂｍ，４Ｈ），３．２（ｂｍ，４Ｈ），２．５（ｍ，１Ｈ），１．９８（ｍ，１Ｈ），１．７０（ｍ，１Ｈ），１．３５（ｍ，１Ｈ），ＬＣＭＳ（ＣＩ）４１６（Ｍ＋１）
【０１０２】
（１Ｓ，２Ｓ）−１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン（化合物１、表１）
アラントリエチルアミン錯体（３．１３ｍＬ，１．５７  ｍｍｏｌ）の溶液を０℃でＴＨＦ（１０ｍＬ）中のアミド１１（０．６５ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）溶液に加える。４５分後水で反応を終了させ、エーテルで抽出する。有機抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濃縮して得られた無色の油をカラムクロマトグラフィーで５％メタノール／クロロホルムで溶出して、無色の油として所望の化合物１を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．３８（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），７．１−７．３５（ｍ，５Ｈ），６．４５（ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，１Ｈ），６．４０（ｄｄ，Ｊ＝７，１Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），３．２（ｍ，４Ｈ），２．７（ｍ，４Ｈ），２．６３（ｍ，１Ｈ），２．４０（ｄｄ，Ｊ＝１２，５Ｈｚ，１Ｈ），１．７０（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｍ，１Ｈ），０．８５−１．０（ｍ，２Ｈ）
【０１０３】
例２
次の化合物は本質的に図式１と２に関連して記載し、さらに例１に挙げた手順によって調製できる。有機合成の専門家には次の化合物を調製するのに適した改変は極めて明白であろう。
ａ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン
ｂ）１Ｒ，２Ｒ−１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン
ｃ）１−（４−ヨード−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン
ｄ）１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン
ｅ）１−（４−フェニル−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペラジン
ｆ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−［トランス−２−（３−メトキシフェニル）シクロプロピル］メチルピペラジン
ｇ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−［４−クロロフェニル］シクロプロピル）メチルピペラジン（化合物４）
ｈ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−［２−メチルフェニル］シクロプロピル）メチルピペラジン（化合物２）
ｉ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−［４−メトキシフェニル］シクロプロピル）メチルピペラジン
ｊ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−フェニル］プロペン−２−イル）ピペラジン（化合物５）
ｋ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２−メチルフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン（化合物６）
ｌ）１−（３−メトキシフェニル）−４−（［３−フェニル］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｍ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛メチルフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｎ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２−メチルフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｏ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛３−クロロフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｐ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛３−エトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｑ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２，３−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｒ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛３，４−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｓ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２，５−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｔ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（［３−｛２，４−ジメトキシフェニル｝］プロペン−２−イル）ピペラジン
ｕ）１−（４−ブロモ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン
ｖ）１−（４−ヨード−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン
ｗ）１−（４−クロロ−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン
ｘ）１−（４−メチル−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン
ｙ）１−（４−トリフルオロメチル−３−メトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン
ｚ）１−（４−ブロモ−３−エトキシフェニル）−４−（トランス−２−フェニルシクロプロピル）メチルピペリジン
【０１０４】
例３
ＭＣＨ１受容体発現細胞
ヒトのＭＣＨ１受容体、サルのＭＣＨ１受容体又はヒトＭＣＨ１受容体／ヒトβ２アドレナリン作動性受容体のキメラ受容体を発現している細胞又は組み換え細胞の調製物を次の放射性リガンド結合アッセイ及びカルシウム動員アッセイに使用できる。そのようなＭＣＨ１受容体の発現ベクターの調製は、例えば２０００年７月６日出願の米国仮出願第６０／２１６，０８１及び２００１年４月１９日出願の米国仮出願第６０／２８４，８３５のページ１９−２０及び配列表に既に記載されており、ＭＣＨ１受容体のクローニングと発現に関するこれら教示について引用により本明細書中に組み込む。
【０１０５】
サルのＭＣＨ受容体を発現するＨＥＫ２９３細胞の調製
ＨＥＫ２９３細胞に、標準的な燐酸カルシウム沈殿手順によって、前に記載したアカゲザルのＭＣＨ発現ベクター又は他のＭＣＨ１発現ベクターを用いて安定してトランスフェクションする。
【０１０６】
細胞は１０％のウシ胎児血清、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ及び５００ｕｇ／ｍＬＧ４１８が補給されたＤＭＥＭ高グルコース培養培地（カタログ＃１０−０１７−ＣＶ，  ＭＥＤＩＡＴＥＣＨ，  Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ）中で約４８−７２時間、３７°Ｃ  ５％ＣＯ２で集密的になるまで増殖させる。細胞は穏やかに遠心分離してペレット化する。細胞のペレットは冷ＰＢＳで２回洗浄し、５ｍＭのＥＤＴＡを含む冷ＰＢＳ中に収穫し、−８０°Ｃで貯蔵する。
【０１０７】
サルのＭＣＨ受容体を発現しているＣＨＯ細胞の調製
ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞に、標準的な燐酸カルシウム沈殿手順によってＭＣＨ１発現ベクターを用いてトランスフェクションする。
【０１０８】
細胞は１０％のウシ胎児退治血清、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ及び５００ｕｇ／ｍＬ（活性）Ｇ４１８が補給されたＨａｍのＦ１２培養培地（カタログ＃１０−０８０−ＣＶ，  ＭＥＤＩＡＴＥＣＨ，  Ｈｅｒｎｄｏｎ，ＶＡ）中で約４８−７２時間，３７°Ｃ，  ５％ＣＯ２で集密的になるまで増殖させる。細胞は穏やかに遠心分離してペレット化する。細胞のペレットは冷ＰＢＳで２回洗浄し、５ｍＭのＥＤＴＡを含む冷ＰＢＳ中に収穫し、−８０°Ｃで貯蔵する。
【０１０９】
例４
精製膜
−８０°Ｃで冷凍貯蔵したＨＥＫ２９３細胞に洗浄緩衝液（１．０ｍＭＣａＣｌ２，５．０ｍＭ  ＭｇＣｌ２，１２０ｍＭ  ＮａＣｌ，ＰＨ７．４を加えた２５ｍＭのＨｅｐｅｓ）を加えて融解し、５に設定したＢＲＩＮＫＭＡＮ  ＰＯＬＹＴＲＯＮを用いて３０秒間ホモジナイズする。細胞を４８，０００ｘｇで１０分間遠心分離する。上清を捨て、ペレットを新しい洗浄緩衝液に再度懸濁し、再度均質化する。得られた膜調製物の蛋白質濃度をＢｒａｄｆｏｌｄ蛋白質アッセイ（ＢｉｏＲａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ）を用いて測定する。この測定で１Ｌの細胞の培養で通常５０−７５ｍｇの全膜蛋白質が得られる。
【０１１０】
例５
キメラ受容体モジュレーターの放射性リガンド結合アッセイ
サルのＭＣＨ受容体を発現しているＨＥＫ２９３細胞からの精製膜を例３で述べた手順で調製する。膜のホモジネートを前記と同様遠心分離し、５０ｕｇ膜蛋白質／１５０ｕｌ結合緩衝液のアッセイ容積のために、結合緩衝液（洗浄緩衝液＋０．１％ＢＳＡ及び１．０ｕＭの最終濃度のホスホラミドン）中３３３ｕｇ／ｍＬの蛋白濃度になるまで再懸濁する。ホスホラミドンはＳＩＧＭＡ  ＢＩＯＣＨＥＭＩＣＡＬｓ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ（ｃａｔ＃Ｒ−７３８５）製である。
【０１１１】
競合結合アッセイは室温でファルコン９６ウェルの丸底ポリプロピレンプレートで行う。各アッセイウェルに、上記のように調製した結合緩衝液中のＭＣＨ受容体を含む膜、１５０ｕｌ、結合緩衝液中の５０ｕｌの１２５Ｉ−Ｔｙｒ  ＭＣＨ，５０ｕｌの結合緩衝液及びＤＭＳＯ中の２ｕｌの試験化合物を加える。１２５Ｉ−Ｔｙｒ  ＭＣＨ（比活性＝２２００Ｃｉ／ｍＭｏｌ）はＮＥＮ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ（Ｃａｔ＃ＮＥＸ  ３７３）から購入し、結合緩衝液中で希釈して、３０ｐＭの最終アッセイ濃度とする。
【０１１２】
非特異的結合は１ｕＭの非標識ＭＣＨの存在下で測定した結合と定義する。ＭＣＨはＢＡＣＨＥＭ  Ｕ．Ｓ．Ａ．，Ｋｉｎｇ  ｏｆ  Ｐｒｕｓｓｉａ，  ＰＡ（Ｃａｔ＃Ｈ−１４８２）から購入する。非特異的ＭＣＨ結合の測定のために使用する各アッセイウェルに結合緩衝液中のＭＣＨ受容体を含む膜１５０ｕｌ，結合緩衝液中の５０ｕｌの１２５Ｉ−Ｔｙｒ，２５ｕｌの結合緩衝液中の非標識ＭＣＨ及び２５ｕｌの結合緩衝液を加える。
【０１１３】
アッセイプレートは室温で１時間培養する。膜はＷＡＬＬＡＣガラス繊維フィルター（ＰＥＲＫＩＮ−ＥＬＭＥＲ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ  ＭＤ）上に収穫し、それを使用前に２時間、１．０％ＰＥＩ（ポリエチレンイミン）に前もって浸す。フィルターは一昼夜乾燥させ、ＷＡＬＬＡＣ  ＢＥＴＡ  ＳＣＩＮＴシンチレーション液を加えた後、ＷＡＬＬＡＣ  １２０５  ＢＥＴＡ  ＰＬＡＴＥカウンター中で計測する。
【０１１４】
飽和結合に関して、１２５Ｉ−ＴｙｒＭＣＨの濃度は７から１，０００ｐＭまで変化する。通常、飽和結合曲線あたり１１の濃度点を集める。
【０１１５】
平衡結合パラメーターはコンピュータープログラムＦｉｔＰＴＭ（ＢＩＯＳＯＦＴ，  Ｆｅｒｇｕｓｏｎ，ＭＯ）を使って測定値をアロステリックなＨｉｌｌの方程式に当てはめて求めた。
【０１１６】
例６
サルのＭＣＨ受容体の機能アッセイ
カルシウム動員アッセイ
メラニン凝集ホルモン受容体を発現している細胞のメラニン凝集ホルモンに対する反応は次のアッセイを用いて観察できる。このアッセイはまた、試験化合物がメラニン凝集ホルモン受容体のアゴニスト又はアンタゴニストとして作用するかの測定のためにも使用できる。
【０１１７】
ＭＣＨ１受容体発現ベクターを安定してトランスフェクションしたチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞をＦＡＬＣＯＮ黒壁、透明な底の９６ウェルのプレート（＃３９０４、ＢＥＣＴＯＮ−ＤＩＣＫＩＮＳＯＮ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）中で１５，０００細胞／ウェルの密度まで増殖させる。アッセイを実施する前に培養培地を９６ウェルプレートから取り除く。Ｆｌｕｏ−３カルシウムに感受性のある染料（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を各ウェルに加える（染料溶液：１ｍｇＦＬＵＯ−３  ＡＭ，４４０ｕＬ  ＤＭＳＯ及び４４０ｕＬ  ２０％プルロン酸のＤＭＳＯ溶液を１：４に希釈し、希釈溶液５０ｕＬを各ウェルに加える）。プレートをアルミニウムフォイルで覆い、３７℃で１−２時間培養する。培養後、染料溶液をプレートから取り除き、細胞を１００ｕＬのＫＲＨ緩衝液（０．０５ｍＭ  ＫＣｌ，０．１１５Ｍ  ＮａＣｌ，９．６ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４，０．０１ｍＭ  ＭｇＳＯ４，２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，  ｐＨ７．４）で１回洗浄し、余分な染料を除去する。洗浄後、８０ｕＬのＫＲＨ緩衝液を各ウェルに加える。
【０１１８】
アゴニスト作用の測定
ヒトＭＣＨ又は試験化合物のいずれかを加えて、蛍光反応を４８０ｎＭでの励起と５３０ｎＭの放出により、下記のようにＦＬＩＰＲＴＭプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，  Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）で観察できる。
【０１１９】
アンタゴニスト作用の測定
試験化合物がＭＣＨ受容体を発現している細胞のＭＣＨに対する反応と拮抗する能力を測定するために、先ずＭＣＨのＥＣ５０を測定する。
【０１２０】
直ぐ上に記載したように調製した、細胞の各ウェルに、更に２０ｕＬのＫＲＨ緩衝液と１ｕＬ  ＤＭＳＯを加える。ＦＬＩＰＲ装置によって、ＫＲＨ緩衝液中の１００ｕＬのヒトＭＣＨを自動的に各ウェルに移す。１ｎＭから３ｕＭの最終ＭＣＨ濃度の８点の濃度反応曲線を用いてＭＣＨ  ＥＣ５０を測定する。
【０１２１】
試験化合物をＤＭＳＯに溶解し、２０ｕＬのＫＲＨ緩衝液で希釈し、上に記載したように調製した細胞に加える。調製した細胞と試験化合物を含む９６ウェルプレートを暗所室温で０．５−６時間培養する。培養は６時間を超えないことが重要である。蛍光反応を測定する直前に、ＫＲＨ緩衝液中で２ｘＥＣ５０まで希釈した１００ｕｌのヒトＭＣＨを、９６ウェルプレートの各ウェルに、最終試料容積が２００ｕＬで、最終ＭＣＨ濃度がＥＣ５０になるようにＦＬＩＰＲ装置によって自動的に加える。アッセイウェル中の試験化合物の最終濃度は１ｕＭと５ｕＭの間である。通常、ＭＣＨの１つのＥＣ５０に暴露された細胞は約１０，０００相対的蛍光単位の蛍光反応を示す。ＭＣＨ受容体のアンタゴニストは対照細胞と比べて統計的に重要なパラメトリック検定を用いた測定で、ｐ≦０．０５の有意に少ない反応を示す。通常、ＭＣＨ受容体のアンタゴニストは対応した対照と比べて、対照細胞に関する蛍光反応を約２０％，好ましくは約５０％、最も好ましくは約８０％低下する。
【０１２２】
アゴニスト作用の測定
化合物がＭＣＨ受容体のアゴニストとして作用する能力は上記の方法を用いて、ＭＣＨの非存在下で、ＭＣＨ受容体を発現する細胞の蛍光反応を測定することによって決定される。細胞にバックグラウンド以上の蛍光を生じる化合物がＭＣＨ１受容体のアゴニストである。
【０１２３】
例７
本発明の放射性標識プローブ化合物の調製
本発明の化合物は、放射性同位体である原子を少なくとも１つ含む先駆体を用いて合成を行うことによって、放射性標識プローブとして調製される。放射性同位体は、炭素（好ましくは１４Ｃ）、水素（好ましくは３Ｈ）、硫黄（好ましくは３５Ｓ）、又は沃素（好ましくは１２５Ｉ）の少なくとも１つから選ばれることが好ましい。そのような放射性標識プローブは放射性標識プローブ化合物の受注合成専門の放射性同位体供給業者によって便宜に合成されている。そのような業者はＡｍｅｒｓｈａｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ  Ｈｅｉｇｈｔｓ，ＩＬ；Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．Ａｎｄｏｖｅｒ，  ＭＡ；ＳＲＩ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｍｅｎｌｏ  Ｐａｒｋ，  ＣＡ；Ｗｉｚａｒｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｗｅｓｔ  Ｓａｃｒａｍｅｎｔｏ，  ＣＡ；ＣｈｅｍＳｙｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌｅｘｅｎａ，ＫＳ；Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ｃｈｅｉｃａｌｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ；及びＭｏｒａｖｅｋ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｒｅａ，ＣＡ等である。
【０１２４】
トリチウム標識プローブ化合物は、通常トリチウム化酢酸中でのプラチナ触媒交換法、トリチウム化トリフルオロ酢酸中での酸触媒交換法又はトリチウムガスとの不均一触媒交換法で触媒的に調製される。そのような調製は、本発明の化合物を基質として用いて、前パラグラフに示したいずれかの業者によって受注合成として通常行われている。更に特定の先駆体について、適宜トリチウムガスによるトリチウム−ハロゲン交換、トリチウムガスによる不飽和結合の還元又は硼酸トリチウムを用いた還元を行うことができる。
【０１２５】
例８
培養細胞及び組織試料中のメラニン受容体のプローブとしての本発明の化合物の使用
培養細胞又は組織試料中のメラニン凝集ホルモン受容体の受容体オートラジオグラフイー（受容体マッピング）は前記の例で記載した本発明の放射標識化合物を用いて、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（１９９８）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋの８．１．１から８．１．９節にＫｕｈａｒが記載しているようにｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施する。
【０１２６】
例９
Ｄ２及びＤ４受容体の結合活性の測定
次のアッセイは化合物のドーパミンＤ２及びＤ４受容体への結合親和性を測定するための標準的なアッセイである。
【０１２７】
遺伝子組み換えで発現している霊長類のＤ２及びヒトのＤ４ドーパミン受容体を含むチャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞のペレットをアッセイに使用する。試料を１２０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＭｇＣｌ２及び１ｍＭのＥＤＴＡを含む、０．０５ＭのトリスＨＣｌ緩衝液１００容量（ｗ／ｖｏｌ）中でホモジナイズする。ついで試料を３０，０００ｘｇで遠心分離し、再懸濁し、再ホモジナイズする。ついで記載したように、試料を遠心分離し、最終組織試料を使用するまで凍結する。組織を１２０ｍＭのＮａＣｌを含む０．０５ＭのトリスＨＣＬ緩衝液に１：２０（ｗｔ／ｖｏｌ）で再懸濁する。
【０１２８】
ドーパミン作動性結合についてのインキュベーションは２５℃で行い、１．０ｍｌの全インキュベーション液中に、０．４ｍｌの組織試料、０．１ｎＭの３Ｈ−ＹＭ  ０９１５１−２（ネモナプライド、ｃｉｓ−５−クロロ−２メトキシ−４−（メチルアミノ）−Ｎ−（２−メチル−２−（フェニルメチル）−３−ピロリジニル）ベンズアミド）及び問題の化合物を含む。非特異的結合は１マイクロモルのスピペロンの存在下での結合と定義する；更に添加することなしに、非特異的結合は全結合の２０％未満である。
【０１２９】
本発明とそれを製造し、使用する様式及び方法について、関連する技術当業者が同じものを製造し、使用することができるように、完全、明確、詳細かつ正確な用語で記載した。この記載は本発明の好ましい実施形態の記載であり、請求項に記載した本発明の精神又は範囲から逸脱することなく修正できることを理解すべきである。発明の主題を特に指摘し、明確に請求するために、以下の請求項で本明細書を締めくくる。
【国際公開パンフレット】
2004516239.tif 000024
2004516239.tif 000025
2004516239.tif 000026
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004516239.tif 000067
【国際調査報告】
2004516239.tif 000068
2004516239.tif 000069
2004516239.tif 000070
2004516239.tif 000071