(57)【要約】本発明は、新規なジアミンジチオール誘導体及びその薬学的に適合する塩、又はその放射性レニウムまたは放射性テクネチウム錯体、そしてその放射性レニウム錯体とリピオドールを含む肝癌治療用組成物及びその肝癌治療用組成物の製造用キットに関する。本発明による肝癌治療用組成物中、活性物質である長いアルキル側鎖を導入したジアミンジチオール誘導体は、新規な物質で、放射性レニウムまたは放射性テクネチウムと錯体の形成が容易で、また、ジアミンジチオール誘導体-放射性レニウムの錯化合物がリピオドールとさらに強力なファンデルワールス結合を可能にできる。したがって、錯化合物がメチルリピオドール中でさらに安定な状態を維持し、本発明の組成物を肝動脈を通じて肝癌に注射した時、肝臓組織で高い蓄積率を示すため効果的な肝癌治療効果が得られる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の化学式２で表示されるジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【化１】
2004531495.tif 000008
(式中、R2、R3、R8〜R14は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基であり、R4とR5は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R6とR7は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R2〜R14中少なくても一つは炭素数６〜24の高級アルキル基で、R4〜R7は同時に二個のオキソ(=O)基を形成しない。R1とR15は各々水素またはベンゾイル、アセトアミドメチル、ジフェニルメチル、エチルアミノカルボニル、t-ブチル、トリチル、アセチル等のチオール保護基または、R1とR15が共にS-S結合を形成し、n、o、pは各々1または2である。)
【請求項２】
R10が、炭素数６〜24の高級アルキル基である、請求項1記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【請求項３】
R10が、炭素数６〜20の高級アルキル基である、請求項1記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【請求項４】
R10が、側鎖のない直鎖アルキル基である、請求項1及び請求項2に記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【請求項５】
n、o、pが、すべて1である、請求項4記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【請求項６】
R2、R3、R13、R14がすべてメチル基で、R1、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R11、R12、R15がすべて水素である、請求項5記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【請求項７】
R4とR5が、オキソ(=O)基を形成する、請求項1記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【請求項８】
R6とR7が、オキソ(=O)基を形成する、請求項1記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【請求項９】
請求項1ないし請求項8中のいずれか1項のジアミンジチオール誘導体と放射性レニウムまたは放射性テクネチウムで形成される錯化合物。
【請求項１０】
請求項1ないし請求項8中のいずれか1項のジアミンジチオール誘導体と放射性レニウムの錯体及びリピオドールを含む肝癌治療用組成物。
【請求項１１】
請求項1ないし請求項8中のいずれか1項の凍結乾燥したジアミンジチオール誘導体、還元剤及び補助剤を含む１番目の容器;そして、リピオドールを含む2番目の容器を含む請求項10による薬剤学的に許容される非発熱性滅菌形態の肝癌治療用組成物の製造用キット。
【請求項１２】
還元剤及び補助剤が各々塩化スズ及び酒石酸である、請求項11記載の薬剤学的に許容される非発熱性滅菌形態の肝癌治療用組成物の製造用キット。
【請求項１３】
請求項1ないし請求項8中のいずれか1項の凍結乾燥したジアミンジチオール誘導体、還元剤及び補助剤を含む１番目の容器を含む、請求項10による肝癌治療用組成物中、薬剤学的に許容される非発熱性滅菌形態のジアミンジチオール誘導体と放射性レニウム錯体の製造用キット。
【請求項１４】
還元剤及び補助剤が各々塩化スズ及び酒石酸である、請求項13記載の薬剤学的に許容される非発熱性滅菌形態のジアミンジチオール誘導体と放射性レニウム錯体の製造用キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、 新規なジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩、又はその放射性レニウムまたは放射性テクネチウム錯体、そしてその放射性レニウム錯体とリピオドールを含む肝癌治療用組成物及びその肝癌治療用組成物の製造用キットに関する。
【背景技術】
【０００２】
肝癌は、韓国を始めとする東洋に特に多く、致死率の高い疾病である。転移が無く大きさが小さい初期には手術で除去すれば、治療効率が高いが、後期になるほど手術による治療が難しくなる。このような場合には、肝動脈塞栓術が広く行なわれる。
【０００３】
正常な肝組織の血流と酸素の供給は、門脈と動脈が各々血液は75:25と酸素は50:50担当する。しかし、肝癌は90%以上が肝動脈から血流供給を受ける。したがって、肝癌患者の肝動脈に毛細血管塞栓物質を注射した場合、主に肝癌組織に流れ肝癌組織に塞栓現象を起すようになる。このような物質の一つにリピオドールがある。
【０００４】
リピオドールは、けし科植物の種の脂肪酸をヨード化またはメチルエステル化して得られる脂溶性造影剤である。リピオドールは主にリンパ腺造影剤に利用されてきた。重量比38%のヨードが含まれていて常温での粘度高く、毛細血管塞栓症をたやすく起し得る。したがって、リピオドールは肝癌患者の肝動脈に注射すれば、肝癌組織に集まる。このような性質を利用して、リピオドールに抗癌剤を混合して肝癌に注射することによって肝癌を治療する方法が行なわれた。
【０００５】
リピオドールに放射線同位元素を標識して肝動脈に投与して肝癌を治療する方法は、過去にも行なわれたことがある。131Iを標識したリピオドールを肝臓患者に投与して肝癌組織に蓄積されることを観察した例が報告された(M.ナカジョウ、H.小林、K.島袋、K.シロノ、H.サカタ、M.田口、N.内山、I.ソノダとS.篠原,'Biodistibution and in vivo kinetics of iodine-131 lipiodol infused via the hepatic artery of patients with hepatic cancer.'J.Nncl.Med.,1988年、第29巻、P.1066-1077)。そして90Yを標識したリピオドールの生体内分布に関する研究(S-J.Wang等, 'Preparation and biodistribution of yttrium-90 lipiodol in rats following hepatic arterial injection.'Eur.J.Necl.Med. 1995年、第22巻、P.233-236)等が報告されたことがある。しかし、I-131は治療に適合した同位元素ではなく、Y-90は価格が高く映像化が難しく使用が制限的である短所があった。このような短所を克服するためにRe-188で標識された論文も発表された(S-J.Wang等, 'Radiolabelling of lipiodol with generator-produced 188Re for hepatic tumor therapy.' Appl.Radiat.Isot. 1996年、第47巻、P.267-271;S-J.Wang等, 'Biodistibution of rhenium-188 lipiodol infused via the hepatic artery of rats with hepatic tumours.'Eur.J.Nucl.Med. 1996年、第23巻、P.13-17)しかし、これらの論文に提示された方法は、標識方法が複雑で標識効率と安定性が低く、改善が必要な状況であった。
【０００６】
このような標識方法を改善したのが、本出願人が韓国特許出願第99-54469号(特許文献１参照)で出願したジアミンジチオール化合物に放射性レニウムを標識した後、これをリピオドールに溶かす方法である。この方法によれば、水溶性のジアミンジチオールを生理食塩水に溶けている放射性レニウムと水溶液中で反応させ脂溶性錯化合物に作った後、リピオドールで抽出することによって便利で効率が高く標識できる長所があった。このような長所にもかかわらず、ジアミンジチオールのレニウム錯体は脂溶性が充分ではなく、組織内に拡散して出る傾向があった。したがって肝癌に蓄積した後、長く留まらず抜け出してしまうためこのような短所を改善する必要があった。
【０００７】
一方、ジアミンジチオールは、下記の化学式1で表示される構造をしている。
ダイビソン(Davison)等が、1985年3月27日付けで公開した欧州特許願第135,160号(特許文献２参照)に腎臓映像化剤としてTc-99mの各種置換された陰イオン性ジアミンジチオール錯体に関して記述されたことがある。
【０００８】
【化１】
2004531495.tif 000002
【０００９】
(式中、R1〜R12は各々独立して水素、炭素数1〜3のアルキル基または、-COOR(ここでRは、-CH3、-C2H5または-C3H7である)で;但し置換体、R1〜R12中、R3、R5、R7〜R10だけが-COORであり得る。
【００１０】
また、韓国特許公告92-2167号(特許文献３参照)には、中性脂溶性のエステルで置換されたジアミンジチオールを含んだキットに関するものが報告されている。これは文献「Blondeau 等, Can.J.Chem.1967年、第45巻、P.46」に、チアゾリジンを還元的に二量体化してN,N'-1,2-エチレンビス-L-システイン誘導体とそのエステルを作る方法によってリガンドを合成した後、Tc-99mで標識して中性脂溶性錯体を作成し頭脳の血流映像化に使用することに関するものである。
【００１１】
一方、1999年、11月9日に公開された米国特許第5,980,860号(特許文献４参照)には、ジアミンジチオールにトロパン系列の化合物を導入した誘導体を合成し、ドパーミン運搬体映像用放射性医薬品に関して記述されている。
【特許文献１】
韓国特許出願第99-54469号
【特許文献２】
欧州特許願第135,160号
【特許文献３】
韓国特許公告92-21267号
【特許文献４】
米国特許第5,980,860号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
それで、本発明は、上記の問題点を考慮して完成された。本発明の目的は、新規なジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩を提供することにある。
【００１３】
また、本発明の目的は、そのジアミンジチオール−放射性レニウムまたはジアミンジチオール−放射性テクネチウム錯体を提供することにある。
【００１４】
新規なジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体を利用して、製造方法が容易で製造後、安定で肝癌組織への蓄積率が高いだけではなく持続的な蓄積をすることによって副作用が無く、効果的に肝癌治療の効果が得られる新しい肝癌治療用組成物を提供することである。
【００１５】
特に、韓国特許出願第99-54469号でジアミンジチオールのレニウム錯化合物が組織に長く留まることができず抜け出してしまう短所を補強して、さらに効果的な肝癌治療用組成物を提供することが重要な目的である。
【発明の効果】
【００１６】
本発明は、新規なジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩、その放射性レニウムまたは放射性テクネチウム錯体を提供する。また、本発明はジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体を利用して製造方法が容易で製造後は安定で肝癌組織での蓄積率が高いだけではなく、持続的に蓄積される新しい肝癌治療用組成物を提供することにより、副作用なしに効果的に肝癌治療効果を得られる。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、下記の化学式２で表示される新規な長鎖アルキル基を含んだジアミンジチオール誘導体(以下、ジアミンジチオール誘導体とする)及び、その薬剤学的に適合する塩;その放射性レニウムまたは放射性テクネチウム錯体;その放射性レニウム錯体とリピオドールを含む肝癌治療用組成物及びその肝癌治療用組成物の製造用キットに関するものである。
【００１８】
本発明で下記の化学式２で表示されるジアミンジチオール誘導体及び、その薬剤学的に適合する塩は新規な物質であり、放射性レニウムまたは放射性テクネチウムと錯体を形成する。長鎖アルキル側鎖を導入することによって、ジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯化合物がリピオドールとさらに強力なファンデルワールス結合を可能にする。したがって、錯化合物がメチルリピオドール中でさらに安定な状態を持つようになる。また、ジアミンジチオール誘導体の放射性テクネチウム錯体は、リピオドールまたは室温で液体である油に溶かした後、静脈注射をして肺血流映像製剤に使用できる。
【００１９】
【化２】
2004531495.tif 000003
【００２０】
(式中、R2、R3、R8〜R14は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基であり、R4とR5は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R6とR7は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R2〜R14中少なくても一つは炭素数６〜24の高級アルキル基で、R4〜R7は同時に二個のオキソ(=O)基を形成しない。R1とR15は各々水素またはベンゾイル、アセトアミドメチル、ジフェニルメチル、エチルアミノカルボニル、t-ブチル、トリチル、アセチル等のチオール保護基または、R1とR15が共にS-S結合を形成し、n、o、pは各々1または2である。)
【００２１】
前記でR1とR15がチオール保護基の場合、放射性レニウムまたはテクネチウムを標識する以前までは、チオール基がチオール保護基と結合していて、放射性レニウムまたはテクネチウムを標識する直前または標識する段階でチオール保護基が離れ落ちてチオール基が生成される。
【００２２】
前記化学式２で肝癌治療用組成物の製造には、R10が炭素数６〜24で高級アルキル基であるジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩が好ましい。さらに好ましくは、R10が炭素数８〜20で高級アルキル基であるジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩が使用できる。また、前記でR10が側鎖のない直鎖アルキル基であるジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩の場合には、さらに大きな効果が期待できる。
【００２３】
また、前記化学式2でn、o、pがすべて1のジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩が肝癌治療用組成物の製造に好ましく使用できる。
【００２４】
さらに、肝癌治療用組成物の製造に使用されるジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩として、前記の条件をすべて満足し、R2、R3、R13、R14がすべてメチル基でR1、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R11、R12、R13、R15がすべて水素であるものが最も好ましく使用できる。
【００２５】
また、前記化学式2の化合物で、R4とR5またはR6とR7は、各々独立してオキソ(=O)基になり得る。万一、二個またはそれ以上のオキソ(=O)基が化合物に存在することは肝癌治療用組成物としての適合性が下がる。それで、一つのオキソ(=O)基だけが存在する化合物が肝癌治療用組成物の製造に好ましく使用できる。
【００２６】
本発明の肝癌治療用組成物は、ジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体とリピオドールを含む。組成物の製造方法は、ジアミンジチオール誘導体、還元剤及びその他補助剤を放射性レニウムまたは放射性テクネチウムに反応させて錯体を形成させ、これをリピオドールに溶解させる段階を含む。
【００２７】
ここで、ジアミンジチオール誘導体と錯体をなす放射性レニウムは、186Reまたは188Reを意味し、放射性テクネチウムは、99mTcを意味する。また、還元剤は放射性レニウムまたは放射性テクネチウムを還元させ、ジアミンジチオールに結合するようにするためのものである。例えば、塩化スズ、ビタミンC、塩化鉄、ジチオナイト、亜硫酸ナトリウム等を挙げることができ、好ましくは塩化スズである。また、その他の補助剤は、放射性同位元素標識時に副産物の生成を抑制し、標識効率を増大させるための添加剤を始め化学的及び物理的安定性等の品質向上のための添加剤である。例えば、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、乳酸、MDP、ラクトース、EDTA、ゲンチシン酸(gentisic acid)等が挙げられ、好ましくは酒石酸である。
【００２８】
放射性レニウムまたは放射性テクネチウムで標識する過程を見ると、従来の物質と方法(S-J.Wang等, 'Radiolabelling of lipiodol with generator-produced 188Re for hepatic tumor therapy.' Appl.Radiat.Isot. 1996年、第47巻、P.267-271)を使用して標識する場合、炭酸アンモニウム液を入れ煮沸し、酢酸を加えた後、窒素ガスを通過させて蒸発させる等の5時間以上にわたる過程を経なければならない。一方、本発明で使用したジアミンジチオール誘導体に対して放射性レニウムで標識すれば、1時間以内に製造でき、生成された錯体はまた、優秀な安定性を示す。
【００２９】
本発明の組成物の構成成分中リピオドールは、前記技術分野に記載したように脂溶性物質である。この物質は、1983年にナカムラ等によって肝癌組織に選択的に蓄積されることが発見された。したがって、本発明の組成物は、リピオドールを媒質として含むことによって活性物質のジアミンジチオール誘導体-放射性レニウムまたは放射性テクネチウム錯体を肝癌や肺組織に蓄積させられる。本発明の組成物中リピオドールの含量は、形成されたジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体を溶解できる量であれば良い。好ましくは、ジアミンジチオール誘導体1mgに対して0.5ml〜50mlの範囲である。
【００３０】
本発明の組成物中、活性物質のジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体は、脂溶性が強く油性X線造影剤のリピオドールによく溶解する。したがって、リピオドールを媒質にして肝動脈に投与すればリピオドールが肝癌組織の毛細血管に塞栓症を起し蓄積される時に一緒に蓄積できる。ジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体は、脂溶性が強くリピオドールに継続して溶けていて周辺の組織に拡散して出ないため、リピオドールが癌組織に存在する限り共に留まり結局、肝癌組織に選択的に放射線を照射して癌細胞だけを選択的に除去できる。
【００３１】
本発明の肝癌治療用組成物の具体的な製造方法は、まず、ジアミンジチオール誘導体を還元剤と補助剤存在下で放射性レニウムと反応させて錯体を形成させる。形成された錯体の水溶液にリピオドールを加えて良く混ぜる。脂溶性の錯体がリピオドールに抽出されて出るようにして、これを遠心分離して二層にする。下の層を成しているリピオドール層を注射器で吸い出すことによって、本発明の肝癌治療用組成物を得られる。
【００３２】
本発明のまた他の態様は、前記肝癌治療用組成物の製造用キットとして、凍結乾燥したジアミンジチオール誘導体、還元剤及び補助剤を含む１番目の容器;そして、リピオドールを含み、遠心分離操作を直接遂行可能な2番目の容器を含む。ここで、還元剤と補助剤は前記で定義したのと同じである。また、放射性レニウムは使用直前に外部から供給できる。
【００３３】
また、前記肝癌治療用組成物の製造用キット中、リピオドールは外部から供給できためキットは、凍結乾燥したジアミンジチオール誘導体、還元剤及び補助剤を含む１番目の容器を含むことを特徴とし、肝癌治療用組成物中、ジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体の製造用キットの形態でも利用できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
以下、実施例及び実験例をあげて本発明を具体的に説明するが、これらにより本発明の範囲が制限されるものではない。
【実施例１】
【００３５】
5-オクチル-3,3,10,10-テトラメチル-1,2-ジチア-5,8-ジアザシクロデカン(OTDD)の合成
部分合成A:3,3,10,10-テトラメチル-1,2-ジチア-5,8-ジアザシクロデカン(TDD)の合成
2,2'-ジチア-ビス(2-メチルプロパノール)29gをトシル酸50mgを含むベンゼン280mlに溶かしてよく混ぜながら、2-メチル-1,2-ジアミノプロパン12.6gを滴下した。反応混合物を2時間、水を除去しながら還流させた。溶媒は加圧して除去した。残渣に低沸点石油エーテルを加えて溶かした。そして、活性炭で処理した後、混合物をろ過した。ろ過液を沈殿ができ始める時まで濃縮した。結晶をろ過し集めた後、冷たい石油エーテルで洗浄して、うす黄色の結晶を得た。得た結晶をエタノールに溶かして同一当量のナトリウムシアノボロハイドライドを徐々に混ぜながら加えた。この溶液に無水酢酸を加えpHが5.0を維持するようにした。室温で2時間放置そして、温度を60℃に上げて6時間撹拌した。反応が終結する前まで溶液のpHが5.0を維持するように無水酢酸を加えた。6時間後、反応溶液に飽和塩化アンモニウム溶液(10ml)を加え20分間さらに混ぜた。溶媒は減圧下で除去した。残渣に1M水酸化ナトリウム溶液(5ml)を加え溶かした。これをクロロホルム(20ml)で抽出した有機層を飽和食塩水溶液で洗って無水硫酸ナトリウムで乾燥した。この生成物から減圧下で溶媒を除去し、うすい褐色の液体を得た。
【００３６】
TCL(シリカゲル/ジエチルエーテル:n-ヘキサン:n-プロピルアミン=7:3:1):Rf=0.3
1H NMR(CDCl3):δ 1.24(s,6H), 1.36(s,6H), 2.34(s,2H), 2.55-2.59(d,2H,J=12.0Hz), 2.80(s,4H), 2.98-3.02(d,2H,J=12.0Hz).MS(EI m/z) 234.2(M+,12%), 130.2(100%)
【００３７】
部分合成B:OTDDの合成
前記A部分で製造したTDD(3.0g,12.8mmol)をアセトニトリル(30ml)に溶かして、常温で1時間撹拌した。この溶液に1-ヨードオクタン(2.24ml,12.2mmol)を加えて常温で12時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ過液を減圧下で蒸溜して濃縮した。この濃縮液をプレパラチブ薄層クロマトグラフィー(ジエチルエーテル:n-ヘキサン:n-プロピルアミン=30:30:1)で分離して薄い黄色のオイル(1.11g,3.20mmol,26.3%)を得た。
【００３８】
TCL(シリカゲル/ジエチルエーテル:n-ヘキサン:n-プロピルアミン=7:3:1):Rf=0.7
1H NMR(CDCl3):δ 0.88(t,3H,J=6.8Hz), 1.21-1.38(m,24H), 1.52(t,2H,J=7.1Hz), 1.83(bs,1H), 2.47-2.86(m,8H). MS(EI m/z) 346.4(M+,17%), 204.1 (100%)
【実施例２】
【００３９】
5-ドデシル-3,3,10,10-テトラメチル-1,2-ジチア-5,8-ジアザシクロデカン(DTDD)の合成
前記実施例1のA部分で製造したTDD(3.0g,12.8mmol)をアセトニトリル(30ml)に溶かして、炭酸カリウム(17.7g,128mmol)を加え常温で1時間撹拌した。この溶液に1-ヨードドデカン(3.06ml,12.2mmol)を加えて常温で12時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ過液を減圧下で蒸溜して濃縮した。この濃縮液をプレパラチブ薄層クロマトグラフィー(ジエチルエーテル:n-ヘキサン:n-プロピルアミン=30:30:1)で分離して薄い黄色のオイル(1.49g,3.70mmol,30.3%)を得た。
【００４０】
TCL(シリカゲル/ジエチルエーテル:n-ヘキサン:n-プロピルアミン=7:3:1):Rf=0.7
1H NMR(CDCl3):δ 0.88(t,3H,J=6.8Hz), 1.22-1.35(m,32H), 1.52(t,2H,J=7.1Hz), 1.96(bs,1H), 2.55-2.87(m,8H). MS(EI m/z) 402.4(M+,14%), 204.1 (100%)
【実施例３】
【００４１】
5-ヘキサデシル-3,3,10,10-テトラメチル-1,2-ジチア-5,8-ジアザシクロデカン(HTDD)の合成
前記実施例1のA部分で製造したTDD(1.75g,7.47mmol)をアセトニトリル(20ml)に溶かして、炭酸カリウム(10.3g,74.7mmol)を加え常温で1時間撹拌した。この溶液に1-ヨードヘキサデカン(2.35ml,7.1mmol)を加えて常温で12時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ過液を減圧下で蒸溜して濃縮した。この濃縮液をプレパラチブ薄層クロマトグラフィー(ジエチルエーテル:n-ヘキサン:n-プロピルアミン=30:30:1)で分離して薄い黄色のオイル(0.66g,1.40mmol,19.2%)を得た。
【００４２】
TCL(シリカゲル/ジエチルエーテル:n-ヘキサン:n-プロピルアミン=7:3:1):Rf=0.7
1H NMR(CDCl3):δ 0.88(t,3H,J=6.8Hz), 1.23-1.35(m,40H), 1.52(t,2H,J=7.1Hz), 2.05(bs,1H), 2.55-2.86(m,8H)
【実施例４】
【００４３】
N1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-(ヘキサデシル(2-(トリチルスルファニル)エチル)アミノ)アセトアミドの合成
部分合成A:2-(トリチルスルファニル)-1-エタンアミンの合成
2-アミノエタンチオール塩酸塩(1.0g,8.6mmol)を三フッ化酢酸(10ml)に溶かした後、トリフェニルメタノール(2.32g,8.6mmol)を加えた。常温で1時間撹拌して減圧蒸溜し濃縮した。余液をエチル酢酸(50ml)で薄めた後、3M水酸化ナトリウム溶液、水、飽和重曹水溶液、飽和食塩水溶液等で順に洗った。無水硫酸ナトリウムで有機層を乾燥し減圧蒸留して、白色の固体の2-(トリチルスルファニル)-1-エタンアミン(2.32g,7.3mmol,85.2%)を得た。
【００４４】
mp:142〜143℃
TCL(シリカゲル/エチル酢酸:n-ヘキサン=1:1):Rf=0.1
1H NMR(CDCl3):δ 2.33(t,2H), 2.57(t,2H), 4.76(bs,2H), 7.21-7.31(m,9H), 7.42-7.45(m,6H)
【００４５】
部分合成B:N1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-ブロモアセタミドの合成
2-(トリチルスルファニル)-1-エタンアミン(0.5g, 1.6mmol)をメチレンクロライド(10ml)に溶かした後、トリエチルアミン(0.22ml,1.6mmol)を加えた。この溶液にブロモアセチルブロマイド(0.14ml,1.6mmol)をメチレンクロライド(1ml)に溶かして滴下した。常温で15分間撹拌して水(30ml)を加えた。有機層を1M塩酸、水、飽和重曹水溶液、飽和食塩水溶液等で順に洗った。無水硫酸ナトリウムで有機層を乾燥し減圧蒸留して、白色の固体のN1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-ブロモアセタミド(0.67g,1.51mmol,94.2%)を得た。
【００４６】
mp:223〜224℃
TCL(シリカゲル/エチル酢酸:n-ヘキサン=3:1):Rf=0.45
1H NMR(CDCl3):δ 2.43(t,2H), 3.11(q,2H), 6.57(s,1H), 7.21-7.31(m,9H), 7.42-7.45(m,6H)
【００４７】
部分合成C:N1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-((2-(トリチルスルファニル)エチル)アミノ)アセトアミドの合成
N1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-ブロモアセタミド(0.5g,1.1mmol)をメチレンクロライド(5ml)に溶かした後、トリエチルアミン(0.23ml,1.6mmol)を加えた。この溶液に2-(トリチルスルファニル)-1-エタンアミン(0.4g, 1.1mmol)を加え常温で16時間撹拌した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で溶媒を除去した。生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して白色の固体のN1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-((2-(トリチルスルファニル)エチル)アミノ)アセトアミド(0.4g,0.6mmol,55.3%)を得た。
【００４８】
mp:88〜92℃
TCL(シリカゲル/エチル酢酸:n-ヘキサン=2:1):Rf=0.4
1H NMR(CDCl3):δ 2.37(q,4H), 2.46(t,2H), 3.04(s,2H), 3.08(q,2H), 7.18-7.30(m,18H), 7.39-7.44(m,12H)
【００４９】
部分合成D:N1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-(ヘキサデシル(2-(トリチルスルファニル)エチル)アミノ)アセトアミドの合成
N1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-((2-(トリチルスルファニル)エチル)アミノ)アセトアミド(0.1g, 0.15mmol)を無水アセトニトリル(5ml)に溶かして、炭酸カリウム(9243mg, 1.5mmol)を加えた。1時間撹拌して1-ヨードヘキサン(32μl, 0.097mmol)をクロロホルム(1.5ml)に溶かして加えた。溶液を45℃で12時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。クロロホルム(10ml)を加えた後、ろ過して、ろ過液を濃縮しカラムクロマトグラフィーで精製して黄色固体のN1-(2-(トリチルスルファニル)エチル)-2-(ヘキサデシル(2-(トリチルスルファニル)エチル)アミノ)アセトアミド(44mg,32.5%)を得た。
【００５０】
mp:188〜193℃
TCL(シリカゲル/エチル酢酸:n-ヘキサン=2:1):Rf=0.8
1H NMR(CDCl3):δ 0.88(t,2H), 1.23-1.35(m,30H), 2.37(q,4H), 2.46(t,2H), 3.04(s,2H), 3.08(q,2H), 7.18-7.30(m,18H), 7.39-7.44(m,12H)
【実施例５】
【００５１】
188Re-OTDDの合成
OTDD(0.5mg, 1.45μ mol)とグルコヘプトン酸(glucoheptonic acid)(200mg, 960μ mol)を0.1M塩酸水溶液(0.125ml)に混ぜて、塩化第一スズ二水和物(10mg, 44 μ mol)の0.0132 M塩酸水溶液(1ml)を加えた。この混合液に188Re-過レニウム酸(perrhenic acid)水溶液(20mCi, 2.5ml)を加え100℃の温水槽で１時間反応させた。生成物は41.5%の収率で得た。
ITLC-SG(エチル酢酸): Rf=0.9
【実施例６】
【００５２】
188Re-DTDDの合成
DTDD(0.5mg, 1.24μ mol)をエタノール(0.1ml)に溶かし、10.2M塩酸水溶液(50μl)に溶かしたスズ粉末(5mg, 42μ mol)を加えた。この混合液にグルコヘプトン酸(200mg, 960μ mol)の水溶液(1ml)を加え、188Re-過レニウム酸水溶液(20mCi, 3ml)を加えた。この溶液を100℃の温水槽で１時間反応させた。生成物は23.3%の収率で得た。
ITLC-SG(エチル酢酸): Rf=0.9
【実施例７】
【００５３】
188Re-HTDDの合成
HTDD(0.5mg, 1.09μ mol)をエタノール(0.1ml)に溶かし、10.2M塩酸水溶液(50μl)に溶かしたスズ粉末(5mg, 42μ mol)を加えた。この混合液にグルコヘプトン酸(200mg, 960μ mol)の水溶液(1ml)を加え、188Re-過レニウム酸水溶液(20mCi, 3ml)を加えた。この溶液を100℃の温水槽で１時間反応させた。生成物は14.3%の収率で得た。
ITLC-SG(エチル酢酸): Rf=0.9
【実施例８】
【００５４】
188Re標識化合物のリピオドール溶液製造
先の実施例4〜6で製造した188Reを標識した反応混合物にリピオドール(5ml)を加えてよく混ぜた後、3000rpmで10分間遠心分離した。上澄み液を除去して生理食塩水2mlを加えた。よく混ぜた後、もう一度、3000rpmで10分間遠心分離して上澄み液を除去し、下層のリピオドール層を回収した。
【００５５】
実験例1
動物実験における188Re標識化合物の組織蓄積の増加及び持続確認
マウス(ICR)の尾静脈に前記実施例7で製造した188Re標識化合物のリピオドール溶液を投与した。各組織に分布した放射能と組織の重さを測定し、注射した総放射能に対する単位組織グラム当り分布放射能の百分率を求めた。肺に蓄積される放射能は、肝癌に蓄積される放射能と原理が似ているため、これを観察する必要がある。表1〜表4に見られるように、表1の長い側鎖がない化合物より表2〜4のように長い側鎖がある場合、肺によく蓄積され、また抜け出す速度も遅いことが観察できた。したがって長い側鎖を持ったジアミンジチオール誘導体と放射性レニウムの錯化合物が肝癌治療にさらに効果的であることが分かった。
【００５６】
188Re-TDDとリピオドール溶液のマウス体内分布
【表１】
2004531495.tif 000004
【００５７】
188Re-OTDDとリピオドール溶液のマウス体内分布
【表２】
2004531495.tif 000005
【００５８】
188Re-DTDDとリピオドール溶液のマウス体内分布
【表３】
2004531495.tif 000006
【００５９】
188Re-HTDDとリピオドール溶液のマウス体内分布
【表４】
2004531495.tif 000007
【産業上の利用可能性】
【００６０】
前記の記載からも明らかなように、本発明は新規なジアミンジチオール誘導体及びその薬学的に適合する塩、その放射性レニウムまたは放射性テクネチウム錯体を提供する。本発明は又、製造方法が容易で、製造後安定なジアミンジチオール誘導体-放射性レニウム錯体を含む肝癌治療用組成物を提供するものであり、前記組成物は、肝癌組織への蓄積率が高いだけでなく、持続的に蓄積することにより、副作用がなく、効果的に肝癌治療の効果が得られることを特徴とする。
本発明の好ましい実施態様は説明した目的のために開示されるが、不随の特許請求の範囲に開示する発明の範囲から離れることなしに、当業者は本発明の改変、追加および置換が可能であることが理解される。
【国際公開パンフレット】
2004531495.tif 000009
2004531495.tif 000010
2004531495.tif 000011
2004531495.tif 000012
2004531495.tif 000013
2004531495.tif 000014
2004531495.tif 000015
2004531495.tif 000016
2004531495.tif 000017
2004531495.tif 000018
2004531495.tif 000019
2004531495.tif 000020
2004531495.tif 000021
2004531495.tif 000022
2004531495.tif 000023
2004531495.tif 000024
2004531495.tif 000025
2004531495.tif 000026
2004531495.tif 000027
2004531495.tif 000028
【手続補正書】
【提出日】平成14年10月14日(2002.10.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
下記の化学式２で表示されるジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【化１】
2004531495.tif 000029
(式中、R2、R3、R8〜R14は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基であり、R4とR5は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R6とR7は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R2〜R14中少なくても一つは炭素数15〜24の高級アルキル基で、R4〜R7は同時に二個のオキソ(=O)基を形成しない。R1とR15は各々水素またはベンゾイル、アセトアミドメチル、ジフェニルメチル、エチルアミノカルボニル、t-ブチル、トリチル、アセチル等のチオール保護基または、R1とR15が共にS-S結合を形成し、n、o、pは各々1または2である。)
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２】
R10が、炭素数15〜24の高級アルキル基である、請求項1記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３】
R10が、炭素数15〜20の高級アルキル基である、請求項1記載のジアミンジチオール誘導体及びその薬剤学的に適合する塩。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
標識方法を改善するためにアルキル鎖を持ったジアミンジチオール誘導体が開発された(TW Jackson等、Rhenium diamino dithiol complexes. III Lipophilic ligands for endotherapeutic radiopharmaceuticals. Aust. J. Chem. 第53巻P.983-987)。C１〜C14のアルキル長鎖を持ったジアミンジチオール誘導体を合成し、この化合物に放射性レニウムを標識した。C１〜C10のアルキル鎖を持ったジアミンジチオール誘導体だけが肝癌治療に十分に安定であることを示した。C10以上のアルキル鎖を持ったジアミンジチオールは、安定しなかった。実際にC10アルキル鎖を含有したジアミンジチオールとレニウムの錯化量は、分析のために必要な十分な量の錯化合物を得ることができなかった。実験でアルキル長鎖を含有したジアミンジチオールとレニウムの錯化合物を得ることはさらに難しい。これが、C10以上のアルキル長鎖を持ったジアミンジチオール化合物を放棄した理由である。米国特許第5,496,533号(特許文献１参照)には、肝炎治療のためのC１〜C10のアルキル鎖を持ったジアミンジチオール誘導体が述べられている。しかし、本実験では、C10以上のアルキル鎖を含有するジアミンジチオールが188Reと安全な親油性錯化合物を作ることができる。さらに、米国特許第5,496,533号に含まれた化合物のC13以下のアルキル鎖を持ったジアミンジチオール誘導体は、癌組織に留まる程度に親油性ではなく、癌組織から早く抜け出てしまう。この特許からC14以上のアルキル長鎖を含有するジアミンジチオール誘導体が主要請求項であることが立認された。


【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
一方、ジアミンジチオールは、下記の化学式1で表示される構造をしている。
この化合物は、テクネチウムまたはレニウムと安定な親油性錯体を合成する旨知られている(HF Kung,等、Synthesis and biodistribution of neutral lipid-soluble Tc-99m complexes that cross the blood-brain barrier. J. Nucl. Med. 1984年、第25巻、P.326-332)。ダイビソン(Davison)等が、1985年3月27日付けで公開した欧州特許願第135,160号(特許文献２参照)に腎臓映像化剤としてTc-99mの各種置換された陰イオン性ジアミンジチオール錯体に関して記述されたことがある。


【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
一方、1999年、11月9日に公開された米国特許第5,980,860号(特許文献４参照)には、ジアミンジチオールにトロパン系列の化合物を導入した誘導体を合成し、ドパーミン運搬体映像用放射性医薬品に関して記述されている。
【特許文献１】
米国特許第5,496,533号
【特許文献２】
欧州特許願第135,160号
【特許文献３】
韓国特許公告92-21267号
【特許文献４】
米国特許第5,980,860号


【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
ジアミンジチオールのレニウム錯化合物が組織に長く留まることができず抜け出してしまう短所を補強して、さらに効果的な肝癌治療用組成物を提供することが重要な目的である。


【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
(式中、R2、R3、R8〜R14は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基であり、R4とR5は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R6とR7は各々水素かまたは炭素数1〜5の低級アルキル基かまたはオキソ(=O)基が可能で、R2〜R14中少なくても一つは炭素数15〜24の高級アルキル基で、R4〜R7は同時に二個のオキソ(=O)基を形成しない。R1とR15は各々水素またはベンゾイル、アセトアミドメチル、ジフェニルメチル、エチルアミノカルボニル、t-ブチル、トリチル、アセチル等のチオール保護基または、R1とR15が共にS-S結合を形成し、n、o、pは各々1または2である。)


【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
前記化学式２で肝癌治療用組成物の製造には、R10が炭素数15〜24で高級アルキル基であるジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩が好ましい。さらに好ましくは、R10が炭素数15〜20で高級アルキル基であるジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩が使用できる。また、前記でR10が側鎖のない直鎖アルキル基であるジアミンジチオール誘導体または、その薬剤学的に適合する塩の場合には、さらに大きな効果が期待できる。


【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５５】
実験例1
動物実験における188Re標識化合物の組織蓄積の増加及び持続確認
マウス（複数）(ICR)の尾静脈に前記実施例7で製造した188Re標識化合物のリピオドール溶液を投与した。各組織に分布した放射能と組織の重さを測定し、注射した総放射能に対する単位組織グラム当り分布放射能の百分率を求めた。肺に蓄積される放射能は、肝癌に蓄積される放射能と原理が似ているため、これを観察する必要がある。表1〜表4に見られるように、表1の長い側鎖がない化合物より表2〜4のように長い側鎖がある場合、肺によく蓄積され、また抜け出す速度も遅いことが観察できた。したがって長い側鎖を持ったジアミンジチオール誘導体と放射性レニウムの錯化合物が肝癌治療にさらに効果的であることが分かった。


【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
188Re-TDDリピオドール溶液のマウス体内分布
【表１】
2004531495.tif 000030
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
188Re-OTDDリピオドール溶液のマウス体内分布
【表２】
2004531495.tif 000031
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
188Re-DTDDリピオドール溶液のマウス体内分布
【表３】
2004531495.tif 000032
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
188Re-HTDDリピオドール溶液のマウス体内分布
【表４】
2004531495.tif 000033
【国際調査報告】
2004531495.tif 000034