(57)【要約】本発明は、Ｂ細胞膜タンパク質ＣＤ１９に特異的に結合する抗体に基づく免疫毒素を含む組成物を使用する治療方法に関する。抗ＣＤ−１９免疫毒素、このような免疫毒素を含む組成物、および免疫毒素を用いる方法が提供される。種々の疾患を処置するための医薬の製造における免疫毒素の使用もまた、提供される。本発明の１つの局面に従って、被験体におけるＢ細胞悪性疾患を処置する方法が提供される。この方法は、このような治療が必要な被験体に、Ｂ細胞悪性疾患を処置するのに有効な量の、抗ＣＤ１９免疫毒素および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物を投与する工程を包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体においてＢ細胞悪性疾患を処置するための方法であって、該方法は、
Ｂ細胞悪性疾患を処置するための、抗ＣＤ−１９免疫毒素および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物の有効量を、このような処置を必要とする被験体に投与する工程
を包含する、方法。
【請求項２】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、細胞傷害性放射性核種または放射線治療同位元素で標識されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素が、α放射同位元素である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記α放射同位元素が、２２５Ａｃ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２４Ｒａおよび２２３Ｒａからなる群より選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素がβ放射同位元素である、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記β放射同位元素が、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１３１Ｉ、６７Ｃｕ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏおよび６４Ｃｕからなる群より選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素が、オージェ電子および低エネルギー電子を放射する、請求項２に記載の方法。
【請求項８】
オージェ電子および低エネルギー電子を放射する同位体が、１２５Ｉ、１２３Ｉおよび７７Ｂｒからなる群より選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記組成物が静脈内投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記被験体に投与される前記抗ＣＤ−１９免疫毒素の量が、約１０μｇ／ｋｇと約１００，０００μｇ／ｋｇとの間である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記被験体に投与される前記抗ＣＤ−１９免疫毒素の量が、約１００μｇ／ｋｇと約１０，０００μｇ／ｋｇとの間である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素は前記放射線核種を含み、ここで、前記被験体に投与される該放射線核種の量が、約０．００１ｍＣｉ／ｋｇと約１０ｍＣｉ／ｋｇとの間である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記被験体に投与される前記放射線核種の量が、約０．１ｍＣｉ／ｋｇと約１．０ｍＣｉ／ｋｇとの間である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記被験体に投与される前記放射線核種の量が、約０．００５ｍＣｉ／ｋｇと約０．１ｍＣｉ／ｋｇとの間である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒトモノクローナル抗体である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒト化モノクローナル抗体である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１およびＣＬＢ−ＣＤ１９からなる群より選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１に記載の方法であって、前記Ｂ細胞悪性疾患が、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞前駆体急性リンパ性白血病（ｐｒｅ−Ｂ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）およびヘアリーセル白血病からなる群より選択される、方法。
【請求項２０】
前記Ｂ細胞悪性疾患が、ＣＤ２０を発現しないＢ細胞を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記被験体に、１以上の免疫調整剤を投与する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記免疫調整剤がサイトカインまたはアジュバントである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記サイトカインがインターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポエチンおよびγ−インターフェロンからなる群より選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、化学毒素または化学治療剤で標識される、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の方法であって、前記化学毒素または化学治療剤が、カリキアマイシンおよびエスペラミシンのようなエンジイン；デュオカルマイシン、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、エトポシド、ブレオマイシンおよび５−フルオロウラシルからなる群より選択される、方法。
【請求項２６】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、腫瘍新血管形成に作用する薬剤または免疫モジュレーターで標識されている、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記腫瘍新血管形成に作用する薬剤が、コンブレスタチンＡ４、アンギオスタチンおよびエンドスタチンからなる群より選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記免疫モジュレーターが、α−インターフェロン、γ−インターフェロン、および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）からなる群より選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
抗ＣＤ−１９免疫毒素および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物であって、該抗ＣＤ−１９免疫毒素が、細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素で標識されている、組成物。
【請求項３０】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素が、α放射同位元素である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記α放射同位元素が、２２５Ａｃ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２４Ｒａおよび２２３Ｒａからなる群より選択される、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素がβ放射同位元素である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３３】
前記β放射同位元素が、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１３１Ｉ、６７Ｃｕ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏおよび６４Ｃｕからなる群より選択される、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素が、オージェ電子および低エネルギー電子を放射する、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３５】
オージェ電子および低エネルギー電子を放射する同位体が、１２５Ｉ、１２３Ｉおよび７７Ｂｒからなる群より選択される、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記組成物が静脈内投与のために処方される、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３７】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３８】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒトモノクローナル抗体である、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒト化モノクローナル抗体である、請求項３７に記載の組成物。
【請求項４０】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１およびＣＬＢ−ＣＤ１９からなる群より選択される、請求項３７に記載の組成物。
【請求項４１】
１以上の免疫調整剤をさらに包む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項４２】
前記免疫調整剤がサイトカインまたはアジュバントである、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
前記サイトカインがインターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポエチンおよびγ−インターフェロンからなる群より選択される、請求項４２に記載の組成物。
【請求項４４】
抗ＣＤ−１９免疫毒素および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物であって、該抗ＣＤ−１９免疫毒素が、化学毒素または化学治療剤で標識されている、組成物。
【請求項４５】
請求項４４に記載の組成物であって、前記化学毒素または化学治療剤が、カリキアマイシンおよびエスペラミシンのようなエンジイン；デュオカルマイシン、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、エトポシド、ブレオマイシンおよび５−フルオロウラシルからなる群より選択される、組成物。
【請求項４６】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、腫瘍新血管形成に作用する薬剤または免疫モジュレーターで標識されている、請求項４４記載の組成物。
【請求項４７】
前記腫瘍新血管形成に作用する薬剤が、コンブレスタチンＡ４、アンギオスタチンおよびエンドスタチンからなる群より選択される、請求項４６に記載の組成物。
【請求項４８】
前記免疫モジュレーターが、α−インターフェロン、γ−インターフェロン、および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）からなる群より選択される、請求項４６に記載の組成物。
【請求項４９】
１以上の免疫調整剤をさらに包む、請求項４４に記載の組成物。
【請求項５０】
前記免疫調整剤がサイトカインまたはアジュバントである、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
前記サイトカインがインターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポエチンおよびγ−インターフェロンからなる群より選択される、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５２】
細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素で標識されている、抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、抗ＣＤ−１９免疫毒素。
【請求項５３】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素が、α放射同位元素である、請求項５２に記載の免疫毒素。
【請求項５４】
前記α放射同位元素が、２２５Ａｃ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２４Ｒａおよび２２３Ｒａからなる群より選択される、請求項５３に記載の免疫毒素。
【請求項５５】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素がβ放射同位元素である、請求項５２に記載の免疫毒素。
【請求項５６】
前記β放射同位元素が、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１３１Ｉ、６７Ｃｕ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏおよび６４Ｃｕからなる群より選択される、請求項５５に記載の免疫毒素。
【請求項５７】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素が、オージェ電子および低エネルギー電子を放射する、請求項５２に記載の免疫毒素。
【請求項５８】
オージェ電子および低エネルギー電子を放射する同位体が、１２５Ｉ、１２３Ｉおよび７７Ｂｒからなる群より選択される、請求項５７に記載の免疫毒素。
【請求項５９】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項５２に記載の免疫毒素。
【請求項６０】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒトモノクローナル抗体である、請求項５９に記載の免疫毒素。
【請求項６１】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒト化モノクローナル抗体である、請求項５９に記載の免疫毒素。
【請求項６２】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１およびＣＬＢ−ＣＤ１９からなる群より選択される、請求項５９に記載の免疫毒素。
【請求項６３】
化学毒素または化学治療剤で標識されている、抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、抗ＣＤ−１９免疫毒素。
【請求項６４】
請求項６３に記載の免疫毒素であって、前記化学毒素または化学治療剤が、カリキアマイシンおよびエスペラミシンのようなエンジイン；デュオカルマイシン、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、エトポシド、ブレオマイシンおよび５−フルオロウラシルからなる群より選択される、免疫毒素。
【請求項６５】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項６３に記載の免疫毒素。
【請求項６６】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒトモノクローナル抗体である、請求項６５に記載の免疫毒素。
【請求項６７】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒト化モノクローナル抗体である、請求項６５に記載の免疫毒素。
【請求項６８】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１およびＣＬＢ−ＣＤ１９からなる群より選択される、請求項６５に記載の免疫毒素。
【請求項６９】
腫瘍新血管形成に作用する薬剤または免疫モジュレーターで標識されている、抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、抗ＣＤ−１９免疫毒素。
【請求項７０】
前記腫瘍新血管形成に作用する前記薬剤が、コンブレスタチンＡ４、アンギオスタチンおよびエンドスタチンからなる群より選択される、請求項６９に記載の免疫毒素。
【請求項７１】
前記免疫モジュレーターが、α−インターフェロン、γ−インターフェロン、および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）からなる群より選択される、請求項６９に記載の免疫毒素。
【請求項７２】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項６９に記載の免疫毒素。
【請求項７３】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒトモノクローナル抗体である、請求項７２に記載の免疫毒素。
【請求項７４】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒト化モノクローナル抗体である、請求項７２に記載の免疫毒素。
【請求項７５】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１およびＣＬＢ−ＣＤ１９からなる群より選択される、請求項７２に記載の免疫毒素。
【請求項７６】
被験体における自己免疫障害を処置するための方法であって、該方法は、
該自己免疫障害を処置するための有効量の、請求項５２〜７５のいずれか１項に記載の抗ＣＤ−１９免疫毒素、および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物を、このような処置を必要とする被験体に投与する工程
を包含する、方法。
【請求項７７】
請求項７６に記載の方法であって、ここで、前記自己免疫疾患が、ＩｇＭ多発性ニューロパシー、免疫血小板減少症および自己免疫溶血性貧血；シェーグレン症候群；多発性硬化症；慢性関節リウマチ；自己免疫リンパ増殖症候群（ＡＬＰＳ）；サルコイドーシス；糖尿病；全身性エリテマトーデス；および水疱性類天疱瘡を含むプラスマ細胞障害からなる群より選択される、方法。
【請求項７８】
被験体におけるＣＤ１９＋Ｂ細胞を枯渇させるか、またはＣＤ１９＋Ｂ細胞の数を減少させる方法であって、該方法は、
ＣＤ１９＋Ｂ細胞を枯渇させるか、またはＣＤ１９＋Ｂ細胞の数を減少させるための有効量の、請求項５２〜７５のいずれか１項に記載の抗ＣＤ−１９免疫毒素、および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物を、このような処置を必要とする被験体に投与する工程
を包含する、方法。
【請求項７９】
前記組成物が、異種移植片の移植またはドナー器官もしくは組織の移植の、前、その間またはその後に投与される、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記有効量が有害な抗体形成を防ぐか、または減少させる、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記有害な抗体が、自己抗体、異種移植片抗体、または抗移植物抗体である、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
Ｂ細胞悪性疾患を処置するための医薬を製造するための、抗ＣＤ−１９免疫毒素を含む組成物の使用。
【請求項８３】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、細胞傷害性放射性核種または放射線治療同位元素で標識されている、請求項８２に記載の使用。
【請求項８４】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素が、α放射同位元素である、請求項８３に記載の使用。
【請求項８５】
前記α放射同位元素が、２２５Ａｃ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２４Ｒａおよび２２３Ｒａからなる群より選択される、請求項８４に記載の使用。
【請求項８６】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療同位元素がβ放射同位元素である、請求項８３に記載の使用。
【請求項８７】
前記β放射同位元素が、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１３１Ｉ、６７Ｃｕ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏおよび６４Ｃｕからなる群より選択される、請求項８６に記載の使用。
【請求項８８】
前記細胞傷害性放射線核種または放射線治療用同位体が、オージェ電子および低エネルギー電子を放射する、請求項８３に記載の使用。
【請求項８９】
オージェ電子および低エネルギー電子を放射する同位体が、１２５Ｉ、１２３Ｉおよび７７Ｂｒからなる群より選択される、請求項８８に記載の使用。
【請求項９０】
前記医薬が静脈内投与のために適切である、請求項８２に記載の使用。
【請求項９１】
前記医薬が、約１０μｇ／ｋｇと約１００，０００μｇ／ｋｇとの間で、被験体に免疫毒素を提供するために適切である、請求項８２に記載の使用。
【請求項９２】
前記組成物が、約１００μｇ／ｋｇと約１０，０００μｇ／ｋｇとの間の濃度で、前記被験体への投与のために適切な量の前記抗ＣＤ−１９免疫毒素を含む、請求項９１に記載の使用。
【請求項９３】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素は放射線核種を含み、ここで、前記医薬が、約０．００１ｍＣｉ／ｋｇと約１０ｍＣｉ／ｋｇとの間の該放射線核種の量を、被験体に提供するために適切である、請求項８２に記載の使用。
【請求項９４】
前記医薬が、約０．１ｍＣｉ／ｋｇと約１．０ｍＣｉ／ｋｇとの間で、被験体に提供されるために適切である、請求項９３に記載の使用。
【請求項９５】
前記医薬が、約０．００５ｍＣｉ／ｋｇと約０．１ｍＣｉ／ｋｇとの間で、被験体に提供されるために適切である、請求項９３に記載の使用。
【請求項９６】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項８２に記載の使用。
【請求項９７】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒトモノクローナル抗体である、請求項９６に記載の使用。
【請求項９８】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、ヒト化モノクローナル抗体である、請求項９６に記載の使用。
【請求項９９】
前記モノクローナル抗ＣＤ−１９抗体が、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１およびＣＬＢ−ＣＤ１９からなる群より選択される、請求項９６に記載の使用。
【請求項１００】
請求項８２に記載の使用であって、前記Ｂ細胞悪性疾患が、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞前駆体急性リンパ性白血病（ｐｒｅ−Ｂ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）およびヘアリーセル白血病からなる群より選択される、使用。
【請求項１０１】
前記Ｂ細胞悪性疾患が、ＣＤ２０を発現しないＢ細胞を含む、請求項８２に記載の使用。
【請求項１０２】
前記医薬が、１以上の免疫調整剤をさらに包む、請求項８２に記載の使用。
【請求項１０３】
前記免疫調整剤がサイトカインまたはアジュバントである、請求項１０２に記載の使用。
【請求項１０４】
前記サイトカインがインターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポエチンおよびγ−インターフェロンからなる群より選択される、請求項１０３に記載の使用。
【請求項１０５】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、化学毒素または化学治療剤で標識されている、請求項８２に記載の使用。
【請求項１０６】
請求項１０５に記載の使用であって、前記化学毒素または化学治療剤が、カリキアマイシンおよびエスペラミシンのようなエンジイン；デュオカルマイシン、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、エトポシド、ブレオマイシンおよび５−フルオロウラシルからなる群より選択される、使用。
【請求項１０７】
前記抗ＣＤ−１９免疫毒素が、腫瘍新血管形成に作用する薬剤または免疫モジュレーターで標識されている、請求項８２に記載の使用。
【請求項１０８】
前記腫瘍新血管形成に作用する薬剤が、コンブレスタチンＡ４、アンギオスタチンおよびエンドスタチンからなる群より選択される、請求項１０７に記載の使用。
【請求項１０９】
前記免疫モジュレーターが、α−インターフェロン、γ−インターフェロン、および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）からなる群より選択される、請求項１０７に記載の使用。
【請求項１１０】
被験体における自己免疫疾患を処置するための医薬の製造のための、請求項５２〜７５のいずれか１項に記載の抗ＣＤ−１９免疫毒素を含む組成物の使用。
【請求項１１１】
請求項１１０に記載の使用であって、ここで、前記自己免疫疾患が、ＩｇＭ多発性ニューロパシー、免疫血小板減少症および自己免疫溶血性貧血；シェーグレン症候群；多発性硬化症；慢性関節リウマチ；自己免疫リンパ増殖症候群（ＡＬＰＳ）；サルコイドーシス；糖尿病；全身性エリテマトーデス；および水疱性類天疱瘡を含むプラスマ細胞障害からなる群より選択される、使用。
【請求項１１２】
被験体におけるＣＤ１９＋Ｂ細胞を枯渇させるか、またはＣＤ１９＋Ｂ細胞の数を減少させるための医薬の製造のための、請求項５２〜７５のいずれか１項に記載の抗ＣＤ−１９免疫毒素を含む組成物の使用。
【請求項１１３】
前記組成物が、異種移植片の移植またはドナーの器官もしくは組織の移植の、前、その間またはその後の投与に適切である、請求項１１２に記載の使用。
【請求項１１４】
前記医薬が有害な抗体形成を防ぐか、または減少させる、請求項１１３に記載の使用。
【請求項１１５】
前記有害な抗体が、自己抗体、異種移植片抗体、または抗移植物抗体である、請求項１１４に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、Ｂ細胞膜タンパク質ＣＤ１９に特異的に結合する抗体に基づく免疫毒素を含む組成物を使用する治療方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞前駆体急性リンパ性白血病（プレＢ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）、およびヘアリーセル白血病を含むＢ細胞リンパ腫は、悪性疾患の重要な群を構成する。非ホジキンリンパ腫は、主にＢ細胞を起源とする異質な群のリンパ系腫瘍を含む。米国のみにおいても、約２４０，０００人が、Ｂ細胞ＮＨＬを有し、そして約６０，０００の新たな症例が毎年発生している。発生率における年間５％の増加は、全てのヒト癌において最速であり、そしてこの増加は、ＡＩＤＳ関連リンパ腫における増加に一部起因する。
【０００３】
Ｂ細胞悪性疾患に対する治療的介入としては、化学治療および放射線治療が挙げられる。応答率は高いが、治癒は稀であり、応答期間の中央値は、わずか２〜３年である（Ｈｏｒｎｉｎｇ，Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．，２５［捕遺］：７５−８８，１９９３）。疾患再発を防止または克服するために、新規の毒性の少ない治療が、直ちに必要とされている。
【０００４】
抗体治療（ＲｉｔｕｘａｎＴＭ、米国特許第５，７３６，１３７号（本明細書中で参考として援用される））は、近年、再発したＣＤ２０陽性Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、または不応性の低程度のＣＤ２０陽性Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、または濾胞性のＣＤ２０陽性Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫の治療について、米国食品医薬品庁（ＦＤＡ）によって認可された。ＲｉｔｕｘａｎＴＭは、ヒトＣＤ２０（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｘ０７２０３）（末梢血およびリンパ組織における大部分のＢ細胞の表面において見出される３５キロダルトンの４回膜貫通タンパク質）に対するキメラマウス−ヒトモノクローナル抗体である。さらに、放射標識抗ＣＤ２０抗体を用いるリンパ腫治療は、米国特許第５，５９５，７２１号、同第５，８４３，３９８号、同第６，０１５，５４２号、および同第６，０９０，３６５号に記載されている。
【０００５】
ＣＤ１９（Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号Ｍ２８１７０）は、Ｂ系統の細胞に存在する９５キロダルトンの内在性膜糖タンパク質である。ＣＤ１９抗原のいくつかの特性により、ＣＤ１９は、免疫治療の見込みのある標的とされている。ＣＤ１９は、おそらく、Ｂ細胞系統において、最も普遍的に発現される抗原であり、＞９５％のＢ細胞リンパ腫（ＣＤ２０を発現しないＢ−ＡＬＬ細胞を含む）で発現される。ＣＤ１９は、多能性ＣＤ３４＋造血幹細胞において発現されず、従って、Ｂ系統は、ＣＤ１９特異的治療後に再増殖され得る。ＣＤ１９はまた、一定期間に分化した形質細胞または代表的なＢ細胞骨髄腫が、ＣＤ１９を発現する形質転換した前駆細胞に由来し得るという証拠が存在するにも関わらず、これらの細胞において発現されない（ＳｃｈｅｕｅｒｍａｎｎおよびＲａｃｉｌａ，Ｌｅｕｋ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ  １８：３８５−３９７，１９９５およびその中の参照文献）。さらに、ＣＤ１９は、存在したとしても、ほとんどの他の細胞型において発現されず、従って、ＣＤ１９特異的治療により許容され得る。ＣＤ１９は、循環中に放出されない。注目すべきことに、ＣＤ１９の発現は、抗ＣＤ２０治療に対して耐性を獲得したＢ細胞リンパ腫において維持される（Ｄａｖｉｓら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５：６１１，１９９９）。
【０００６】
１つのＣＤ１９免疫治療剤は、フェーズＩＩＩ試験に進んでいる。この薬剤は、改変形態のリシン（植物毒素）に結合されたマウス抗ＣＤ１９抗体（Ｂ４）を含んだ。この薬剤の複数のフェーズＩおよびフェーズＩＩ研究において、目的の応答が、耐容性のある毒性および可逆的な毒性を有する多くの患者において見られた。しかし、試験は、マウス抗体よびその毒素に対する免疫応答の生成ならびに植物に基づく毒素に特徴的な血管漏出症候群として知られる副作用に関連する文献（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｂａｓｅｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｍ．Ｌ．Ｇｒｏｓｓｂａｒｄ，編者，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９８およびその中の参照文献）が原因で、フェーズＩＩＩ試験の間に停止された。
【０００７】
抗ＣＤ１９抗体の使用に関する他の報告は、この抗体が、Ｂ細胞悪性疾患の処置において効果を有さないことを言及している。Ｉｌｌｉｄｇｅら（Ｂｌｏｏｄ，９４：２３３−２４３，１９９９）は、Ｂ細胞マーカー(抗ＣＤ１９、抗ＣＤ２２、抗ＭＨＣＩＩ、および抗Ｉｄ）に対する放射標識モノクローナル抗体を用いたＢ細胞リンパ腫（ＢＣＬ）の放射免疫治療（ＲＩＴ）を調査した。その結果は、放射標識抗体としてＢＣＬ保有マウスに投与されるか裸の抗体として投与されるかに関わらず、抗ＣＤ１９および抗ＣＤ２２が治療的に活性を有さないことを実証した。この著者らは、非標識抗ＣＤ１９モノクローナル抗体が、Ｂ細胞リンパ腫における治療性を有するが、それは、多量でかつ長期間にわたり与えられた場合のみであることを、彼らが以前に示したと注釈している。この著者らは、比較的低レベルで発現されるＢ細胞表面抗原（ＣＤ１９、ＣＤ２２）が、より強力に発現される抗原（ＭＨＣＩＩ、Ｉｄ）よりもＲＩＴについての適切な標的ではないと結論付けた。さらなる結論は、エンドサイトーシスを受けない抗原がＲＩＴについて優れた標的であることである。従って、Ｉｌｌｉｄｇｅらは、ＣＤ１９が、その低い発現レベルおよびリガンド結合の際の迅速なエンドサイトーシスの観点で、放射免疫治療について不適切な標的であることを教示している。
【０００８】
米国特許第５，６８６，０７２号は、マウスにおけるリンパ腫の処置において、抗ＣＤ２２免疫毒素と組み合わせて高用量の非標識抗ＣＤ１９抗体（５００μｇ／マウス）を使用する可能性を開示している。しかし、この特許に記載される処置は、抗ＣＤ２２免疫毒素の毒性活性と、非標識抗ＣＤ１９抗体の増殖阻害効果の組み合わせを反映しており；マウスは、免疫毒素単独または抗ＣＤ１９抗体単独のいずれによっても（非常に高用量の抗体（５ｍｇ／マウス）でさえも）治療されなかった。
【０００９】
従って、ＣＤ１９抗体単独の使用または免疫毒素としての使用は、今日まで、Ｂ細胞悪性疾患の処置における許容できない副作用、毒性、多用量の抗体の必要性、および／または効果の欠如に起因して成功していない。ＣＤ１９の発現プロフィールは、免疫毒素剤の開発に適しているように見えるが、このような薬剤の作製または使用は、成功していない。
【００１０】
従って、受容可能な毒性プロフィールを有し、悪性Ｂ細胞および一定期間に分化するＢ細胞（造血幹細胞ではない）に対する選択性を有する免疫毒素に対する必要性が存在する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の要旨）
抗ＣＤ１９免疫毒素、このような免疫毒素を含む組成物、およびこの免疫毒素を使用する方法が、先行技術の免疫毒素における欠点に予想以上に悩まされないことが同定された。
【００１２】
本発明の１つの局面に従って、被験体におけるＢ細胞悪性疾患を処置する方法が提供される。この方法は、このような治療が必要な被験体に、Ｂ細胞悪性疾患を処置するのに有効な量の、抗ＣＤ１９免疫毒素および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物を投与する工程を包含する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、抗ＣＤ１９免疫毒素は、細胞毒性放射性核種または放射線治療同位元素（例えば、α放射同位元素、β放射同位元素、またはオージェ電子および低エネルギー電子を放射する同位元素）で標識される。好ましくは、α放射同位元素は、２２５Ａｃ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２４Ｒａ、および２２３Ｒａからなる群より選択される。好ましくは、β放射同位元素は、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１３１Ｉ、６７Ｃｕ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、および６４Ｃｕからなる群より選択される。好ましくは、オージェ電子および低エネルギー電子を放射する同位元素は、１２５Ｉ、１２３Ｉ、および７７Ｂｒからなる群より選択される。
【００１４】
他の実施形態において、この組成物は、静脈内投与される。
【００１５】
さらに他の実施形態において、被験体に投与される抗ＣＤ１９免疫毒素の量は、約１０μｇ／ｋｇと約１００，０００μｇ／ｋｇとの間である。好ましくは、被験体に投与される抗ＣＤ１９免疫毒素の量は、約１００μｇ／ｋｇと約１０，０００μｇ／ｋｇとの間である。
【００１６】
特定の実施形態において、抗ＣＤ１９免疫毒素は、放射性核種を含み、そして被験体に投与される放射性核種の量は、約０．００１ｍＣｉ／ｋｇと約１０ｍＣｉ／ｋｇとの間である。いくつかの好ましい実施形態において、被験体に投与される放射性核種の量は、約０．１ｍＣｉ／ｋｇと約１．０ｍＣｉ／ｋｇとの間である。他の好ましい実施形態において、被験体に投与される放射性核種の量は、約０．００５ｍＣｉ／ｋｇと約０．１ｍＣｉ／ｋｇとの間である。
【００１７】
他の実施形態において、抗ＣＤ１９免疫毒素は、モノクローナル抗ＣＤ１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。好ましくは、モノクローナル抗ＣＤ１９抗体は、ヒトモノクローナル抗体またはヒト化モノクローナル抗体であるか、あるいはＢ４抗体、ＨＤ３７抗体、ＢＵ１２抗体、４Ｇ７抗体、Ｊ４．１１９抗体、Ｂ４３抗体、ＳＪ２５Ｃ１抗体、およびＣＬＢ−ＣＤ１９抗体からなる群より選択される。
【００１８】
特定の方法において、Ｂ細胞悪性疾患は、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞前駆体急性リンパ性白血病（プレＢ−ＡＬＬ）、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）、およびヘアリーセル白血病からなる群より選択される。他の実施形態において、Ｂ細胞悪性疾患は、ＣＤ２０を発現しないＢ細胞を含む。
【００１９】
他の実施形態において、この方法はさらに、１つ以上の免疫調整剤（好ましくは、サイトカインまたはアジュバント）を被験体に投与する工程を包含する。好ましいサイトカインは、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポエチン、およびγ−インターフェロンからなる群より選択される。本発明はまた、１つ以上の非抗ＣＤ１９免疫毒素治療（例えば、化学治療または放射線治療）が被験体に施される実施形態を包含する。
【００２０】
なお他の実施形態において、抗ＣＤ１９免疫毒素は、化学毒素または化学治療剤で標識される。好ましくは、化学毒素または化学治療剤は、カリキアマイシン（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）およびエスペラマイシンのようなエンジイン；デュオカルマイシン、メトトレキセート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ，ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン（ｃｉｓ−ｐｌａｔｉｎｕｍ）、エトポシド、ブレオマイシン、および５−フルオロウラシルからなる群より選択される。
【００２１】
さらなる実施形態において、抗ＣＤ１９免疫毒素は、腫瘍の新生脈管形成または免疫調整剤に作用する薬剤で標識される。好ましくは、腫瘍の新生脈管形成に作用する薬剤は、コンブレスタチン（ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ）Ａ４、アンジオスタチン、およびエンドスタチンからなる群より選択される。好ましくは、免疫調整剤は、α−インターフェロン、γ−インターフェロン、および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）からなる群より選択される。
【００２２】
本発明の別の局面において、上記方法で投与される抗ＣＤ１９免疫毒素が提供される。
【００２３】
本発明のさらに別の局面において、上記方法で投与される抗ＣＤ１９免疫毒素および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物が提供される。好ましくは、この組成物は、静脈内投与のために処方される。
【００２４】
本発明のなお別の局面において、被験体における自己免疫障害を処置する方法が提供される。この方法は、自己免疫障害を処置するのに有効な量の上記抗ＣＤ１９免疫毒素組成物を、このような治療を必要とする被験体に投与する工程を包含する。自己免疫障害としては、ＩｇＭ多発性神経障害、免疫性血小板減少症、および自己免疫性溶血性貧血を含む形質細胞障害；シェーグレン症候群；多発性硬化症；慢性関節リウマチ；自己免疫性リンパ増殖症候群（ＡＬＰＳ）；サルコイドーシス；糖尿病；全身性エリテマトーデス；ならびに水疱性類天疱瘡が挙げられる。
【００２５】
本発明のさらなる局面に従って、被験体における抗体形成を減少させるために、ＣＤ１９＋Ｂ細胞を欠失させる方法が提供される。この方法は、抗体形成を減少させるのに有効な量の上記抗ＣＤ１９免疫毒素組成物を、このような処置を必要とする被験体に投与する工程を包含する。これらの方法において、この組成物は、異種移植に対する処置または移植プロセスの前、その最中、またはその後に投与され得る。
【００２６】
この免疫毒素はまた、医薬（特に、Ｂ細胞悪性疾患、自己免疫障害、および移植についての医薬）の調製においても有用である。
【００２７】
本発明のさらに別の局面に従って、医薬の調製のための、上記免疫毒素および組成物の使用が提供される。この医薬は、ＣＤ１９を発現する細胞によって引き起こされる障害（例えば、Ｂ細胞悪性疾患、自己免疫障害、および移植拒絶）の処置に有用である。この医薬はまた、被験体中のＢ細胞を欠失または減少させるのに有用である。
【００２８】
本発明のこれらおよび他の局面は、以下に記載される。
【００２９】
（発明の詳細な説明）
ＣＤ１９は、抗体結合の際に迅速にインターナライズされるので、細胞内で異化作用を受け、その後、循環に放出され得る１３１Ｉを用いる従来の放射免疫治療の標的としてほとんど見過ごされていた。しかし、抗原のインターナリゼーションは、他の形態の免疫治療（例えば、金属放射性核種または化学毒素を使用する免疫治療）を増強する。従って、ＣＤ１９は、これらの様式の治療についての好ましい標的である。
【００３０】
従って、本発明は、抗ＣＤ１９免疫毒素、および有効量の抗ＣＤ１９免疫毒素を、Ｂ細胞悪性疾患またはＢ細胞過剰増殖疾患を有する被験体に投与することにより、この被験体を処置する方法を提供する。好ましくは、抗ＣＤ１９免疫毒素は、α波を放射する放射性核種または化学毒素で放射標識される。植物毒素で標識された免疫毒素は、代表的に、上記のように、植物毒素（例えば、リシン）の投与に付随する副作用（例えば、血管漏出症候群）に起因して好ましくない。
【００３１】
本明細書中で使用する場合、用語「免疫毒素」は、１つ以上の毒性分子に結合した抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、結合体をいう。抗ＣＤ１９抗体は、抗ＣＤ１９抗体またはその抗原結合フラグメントを含む。種々の抗ＣＤ１９抗体が、本発明に従って有用であることが企図され、例えば、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１、およびＣＬＢ−ＣＤ１９が挙げられる（例えば、Ｎａｄｌｅｒら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３１（１）：２４４−５０，１９８３；Ｐｅｚｚｕｔｔｏら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３８（９）：２７９３−９，１９８７；Ｆｌａｖｅｌｌら，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ７２（６）１３７３−９，１９９５；Ｂｅｊｃｅｋら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５５（１１）：２３４６−５１，１９９５；Ｇｕｎｔｈｅｒら，Ｌｅｕｋ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ２２（１−２）：６１−７０，１９９６；Ｌｉら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．４７：１２１−３０，１９９８；Ｍｙｅｒｓら，Ｌｅｕｋ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ２９：３２９−３８，１９９８；Ｃｈｅｎら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３９：１２４８−５５，１９９９；Ｖｌａｓｖｅｌｄら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．４０：３７−４７，１９９５を参照のこと）。あるいは、一般的に当業者に公知であり、そして本明細書中に記載されるモノクローナル抗体技術を用いて、他の抗ＣＤ１９抗体が作製され得る。好ましい実施形態において、作製される抗ＣＤ１９抗体は、完全ヒトモノクローナル抗体である。
【００３２】
従って、本発明は、ＣＤ１９に選択的に結合する能力を有する抗体または抗体フラグメントを包含する。本明細書中で使用する場合、「抗体」は、天然に存在する抗体および非天然の抗体の両方を含む。詳細には、「抗体」は、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体、ならびにそれらの一価フラグメントおよび二価フラグメントを含む。さらに、「抗体」は、キメラ抗体、完全合成抗体、単鎖抗体、およびそれらのフラグメントを含む。抗体は、ヒト抗体または非ヒト抗体であり得る。非ヒト抗体は、ヒトにおけるその免疫原性を減少させるために、組換え方法によりヒト化され得る。抗体は、従来方法に従って調製される。
【００３３】
モノクローナル抗体は、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎの方法（Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５，１９７５）を用いて作製され得る。本発明において有用な抗ＣＤ１９モノクローナル抗体を調製するために、マウスまたは他の適切な宿主動物が、ヒトＢ細胞、Ｂ細胞膜、組換えＣＤ１９、および／またはヒトＢ細胞から精製されたＣＤ１９タンパク質の形態のヒトＣＤ１９抗原により、適切な間隔（例えば、一週間に二度、一週間に一度、一月に二度、または一月に一度）免疫される。この動物は、屠殺の一週間以内に最後の抗原の「ブースト」を施され得る。しばしば、免疫の間に免疫学的アジュバントを使用することが望ましい。適切な免疫学的アジュバントとしては、フロイント完全アジュバント、フロイント不完全アジュバント、ミョウバン、Ｒｉｂｉアジュバント、Ｈｕｎｔｅｒ’ｓ  Ｔｉｔｅｒｍａｘ、サポニンアジュバント（例えば、ＱＳ２１またはＱｕｉｌ  Ａ）、またはＣｐＧ含有免疫刺激オリゴヌクレオチドが挙げられる。他の適切なアジュバントは、当該分野で周知である。この動物は、皮下経路、腹腔内経路、筋肉内経路、静脈内経路、鼻腔内経路、または他の経路により免疫され得る。所定の動物は、複数形態のＣＤ１９を用いて複数経路により免疫され得る。
【００３４】
免疫レジメン後、リンパ球が、この動物の脾臓、リンパ節、または他の器官から単離され、そしてポリエチレングリコールのような薬剤を用いて適切な骨髄腫細胞株と融合され、ハイブリドーマが形成される。融合後、細胞は、記載されるような標準的な方法（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ：Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，第３版，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９６）を用いて、ハイブリドーマの増殖を許容するが融合パートナーの増殖は許容しない培地中に置かれる。
【００３５】
ハイブリドーマの培養後、細胞上清は、所望の特異性の抗体（すなわち、ＣＤ１９およびＢ細胞に選択的に結合する抗体）の存在について分析される。適切な分析技術としては、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、免疫沈降、Ｂｉａｃｏｒｅ（表面プラズモン共鳴）、およびウェスタンブロットが挙げられる。他のスクリーニング技術は、当該分野で周知である。好ましい技術は、コンホメーションがインタクトな、ネイティブで折り畳まれたＣＤ１９に対する抗体の結合を確認する技術（例えば、非変性ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、および免疫沈降）である。
【００３６】
重要なことであるが、当該分野で周知のように、抗体分子の小部分（パラトープ）のみが、抗体のそのエピトープへの結合に関与する（一般的には、Ｃｌａｒｋ，Ｗ．Ｒ．（１９８６）Ｔｈｅ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｒｏｉｔｔ，Ｉ．（１９９１）Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，第７版，Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｏｘｆｏｒｄを参照のこと）。例えば、ｐＦｃ’領域およびＦｃ領域は、補体カスケードのエフェクターであるが、抗原結合に関与しない。ｐＦｃ’領域が酵素切断されるかまたはｐＦｃ’領域を有さずに生成される抗体（Ｆ（ａｂ’）２フラグメントと呼ばれる）は、インタクトな抗体の両方の抗原結合部位を保持する。同様に、Ｆｃ領域が酵素切断されるかまたはＦｃ領域を有さずに生成される抗体（Ｆａｂフラグメントと呼ばれる）は、インタクトな抗体分子の抗原結合部位の１つを保持する。さらにいうと、Ｆａｂフラグメントは、共有結合した抗体軽鎖および抗体重鎖の一部（Ｆｄと呼ばれる）からなる。Ｆｄフラグメントは、抗体特異性の主要な決定因子であり（単一のＦｄフラグメントは、抗体特異性を変更することなく、１０個までの異なる軽鎖に結合され得る）、そしてＦｄフラグメントは、単離体においてエピトープ結合能力を保持する。
【００３７】
当該分野で周知のように、抗体の抗原結合部分内に、抗原のエピトープと直接的に相互作用する相補性決定部位（ＣＤＲ）、およびパラトープの三次構造を維持するフレームワーク領域（ＦＲ）が存在する（一般的には、Ｃｌａｒｋ，１９８６；Ｒｏｉｔｔ，１９９１を参照のこと）。ＩｇＧ免疫グロブリンの重鎖Ｆｄフラグメントおよび軽鎖の両方において、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）によりそれぞれ分断された、４つのフレームワーク領域（ＦＲ１〜ＦＲ４）が存在する。ＣＤＲ（特に、ＣＤＲ３領域、より特に、重鎖ＣＤＲ３）は、抗体特異性の大部分を担う。
【００３８】
哺乳動物抗体の非ＣＤＲ領域が、本来の抗体のエピトープ特異性を維持しつつ、同種特異的抗体または異種特異的抗体の類似の領域と置換され得ることは、現在、当該分野で十分に確立されている。このことは、「ヒト化」抗体の開発および使用において最も明確に明らかにされる。ヒト化抗体において、非ヒトＣＤＲは、機能的抗体を作製するために、ヒトＦＲおよび／またはＦｃ／ｐＦｃ’領域に共有結合される。
【００３９】
本発明は、特定の実施形態において、抗ＣＤ１９抗体のヒト化形態を含む組成物および方法を提供する。本明細書中で使用する場合、「ヒト化」は、ＣＤＲ領域の外側のアミノ酸のいくつか、ほとんど、または全てが、ヒト免疫グロブリン分子由来の対応するアミノ酸で置換された抗体を示す。ヒト化の方法としては、米国特許第４，８１６，５６７号、同第５，２２５，５３９号、同第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６１号、同第５，６９３，７６２号、および同第５，８５９，２０５号に記載される方法が挙げられるがこれらに限定されない。当業者は、抗体のヒト化について、他の方法に熟知している。
【００４０】
この抗体のヒト化形態の１つの実施形態において、ＣＤＲ領域の外側のアミノ酸のいくつか、ほとんど、または全ては、ヒト免疫グロブリン分子由来のアミノ酸で置換されるが、１つ以上のＣＤＲ領域内のいくつか、ほとんど、または全てのアミノ酸は変更されない。アミノ酸の小さな付加、欠失、挿入、置換、または改変は、それらが所定の抗原に結合する抗体の能力を排除しない限り許容され得る。適切なヒト免疫グロブリン分子としては、ＩｇＧ１分子、ＩｇＧ２分子、ＩｇＧ３分子、ＩｇＧ４分子、ＩｇＡ分子、およびＩｇＭ分子が挙げられる。「ヒト化」抗体は、本来の抗体と類似の抗原特異性（すなわち、本発明においては、ＣＤ１９に結合する能力）を保持する。しかし、Ｗｕら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９４：１５１，１９９９（その内容は、本明細書中で参考として援用される）に記載されるように、ヒト化の特定の方法を使用して、ＣＤ１９に対する抗体の結合の親和性および／または特異性は、「方向付けられた発展（ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ）」の方法を用いて増大され得る。
【００４１】
完全ヒトモノクローナル抗体はまた、ヒト免疫グロブリン重鎖および軽鎖の遺伝子座の大部分がトランスジェニックなマウスを免疫することにより調製され得る。例えば、米国特許第５，５９１，６６９号、同第５，５９８，３６９号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５４５，８０７号、同第６，１５０，５８４号、およびそれらにおいて列挙された参照文献を参照のこと（これらの内容は、本明細書中で参考として援用される）。これらの動物は、内因性（例えば、マウス）抗体の産生において機能的欠陥が存在するように、遺伝子改変される。この動物はさらに、これらの動物の免疫により、目的の抗原に対する完全ヒト抗体が産生されるように、ヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含むよう改変される。これらのマウス（例えば、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（Ａｂｇｅｎｉｘ）、ＨｕＭＡｂマウス（Ｍｅｄａｒｅｘ／ＧｅｎＰｈａｒｍ））の免疫後、モノクローナル抗体が、標準的なハイブリドーマ技術に従って調製され得る。これらのモノクローナル抗体は、ヒト免疫グロブリンアミノ酸配列を有し、それによって、ヒトに投与した場合に、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を誘導しない。
【００４２】
ヒト抗体を生成するためのインビトロ方法もまた存在する。これらとしては、ファージディスプレイ技術（米国特許第５，５６５，３３２号および同第５，５７３，９０５号）およびヒトＢ細胞のインビトロ刺激（米国特許第５，２２９，２７５号および同第５，５６７，６１０号）が挙げられる。これらの特許の内容は、本明細書中で参考として援用される。
【００４３】
従って、当業者に明らかなように、本発明はまた、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆｖフラグメント、およびＦｄフラグメント；Ｆｃ領域および／またはＦＲ領域ならびに／あるいはＣＤＲ１領域および／またはＣＤＲ２領域および／または軽鎖ＣＤＲ３領域が相同なヒト配列または非ヒト配列で置換されたキメラ抗体；ＦＲ領域ならびに／あるいはＣＤＲ１領域および／またはＣＤＲ２領域および／または軽鎖ＣＤＲ３領域が相同なヒト配列または非ヒト配列で置換されたキメラＦ（ａｂ’）２フラグメント抗体；ＦＲ領域ならびに／あるいはＣＤＲ１領域および／またはＣＤＲ２領域および／または軽鎖ＣＤＲ３領域が相同なヒト配列または非ヒト配列で置換されたキメラＦａｂフラグメント抗体；ならびにＦＲ領域ならびに／あるいはＣＤＲ１領域および／またはＣＤＲ２領域が相同なヒト配列または非ヒト配列で置換されたキメラＦｄフラグメント抗体を提供する。本発明はまた、いわゆる単鎖抗体を含む。
【００４４】
種々の抗体分子およびフラグメントは、任意の一般的に知られている免疫グロブリンクラスに由来し得、これらとしては、ＩｇＡ、分泌性ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭが挙げられるが、これらに限定されない。ＩｇＧサブクラスもまた当業者に周知であり、これらとしては、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
モノクローナル抗体は、哺乳動物細胞の培養により、ハイブリドーマまたは組換え細胞株（例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞またはマウス骨髄腫細胞株）において産生され得る。このような方法は、当業者に周知である。細菌細胞株、酵母細胞株、および昆虫細胞株はまた、モノクローナル抗体またはそのフラグメントを産生するために使用され得る。さらに、トランスジェニック動物またはトランスジェニック植物においてモノクローナル抗体を産生する方法が存在する（Ｐｏｌｌｏｃｋら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２３１：１４７，１９９９；Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４０：１１９，１９９９）。
【００４６】
抗体は、検出可能なマーカー、抗腫瘍剤、または免疫調整剤と連結され得る。抗腫瘍剤としては、細胞毒性剤および腫瘍の新生脈管形成に対して作用する薬剤が挙げられ得る。検出可能なマーカーとしては、例えば、放射活性マーカーまたは蛍光マーカーが挙げられる。細胞毒性剤としては、細胞毒性放射性核種、化学毒素、またはタンパク質毒素が挙げられる。
【００４７】
細胞毒性放射性核種または放射線治療同位元素は、好ましくは、２２５Ａｃ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２４Ｒａ、または２２３Ｒａのようなα放射同位元素である。あるいは、細胞毒性放射性核種は、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１３１Ｉ、６７Ｃｕ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、または６４Ｃｕのようなβ放射同位元素であり得る。さらに、細胞毒性放射性核種は、オージェ電子および低エネルギー電子を放射し得、これらとしては同位体１２５Ｉ、１２３Ｉ、または７７Ｂｒが挙げられる。
【００４８】
適切な化学毒素または化学治療剤としては、エンジインファミリーの分子のメンバー（例えば、カリキアマイシンおよびエスペラマイシン（ｅｓｐｅｒａｍｉｃｉｎ））が挙げられる。化学毒素はまた、以下からなる群より選択され得る：デュオカルマイシン（ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ）（例えば、米国特許第５，７０３，０８０号および米国特許第４，９２３，９９０号を参照のこと）、メトトレキセート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シス−白金、エトポシド、ブレオマイシンおよび５−フルオロウラシル。本発明の組成物および方法において好ましくない毒素としては、有毒なレクチン、植物毒素（例えば、リシン、アブリン、モデシン（ｍｏｄｅｃｃｉｎ）、ボツリナ（ｂｏｔｕｌｉｎａ））およびジフテリア毒素が挙げられる。もちろん、種々の毒素の組み合わせもまた、１種の抗体分子にカップリングされ得、それによって種々の細胞毒性に適応させる。他の化学治療剤が、当業者に公知である。
【００４９】
腫瘍新血管形成（ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ）に作用する試薬としては、以下が挙げられ得る：チューブリン結合剤（例えば、カンブレスタチン（ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ）Ａ４（Ｇｒｉｇｇｓら、Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．２：８２、２００１）、ならびにアンギオスタチンおよびエンドスタチン（Ｒｏｓｅｎ、Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ  ５：２０、２０００（本明細書中で参考して援用される）に総説される）。抗ＣＤ１９抗体への結合に適切な免疫調整剤としては、以下が挙げられる：α−インターフェロン、γ−インターフェロン、および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）。
【００５０】
１種以上の毒素分子の抗ＣＤ１９抗体へのカップリングは、多数の化学機構（例えば、共有結合、親和性結合、挿入、配位結合、および錯体化）を含めて想定される。抗ＣＤ１９免疫毒素を調製するために使用される毒素化合物は、当該分野で公知の標準的なプロトコルによって、抗体またはそのＣＤ１９結合フラグメントに結合される。
【００５１】
共有結合は、存在する側鎖の直接的な縮合によってかまたは外部架橋分子の取り込みによってかのいずれで、達成され得る。多くの二価または多価の試薬は、他のタンパク質、ペプチドまたはアミノ基などにタンパク質分子をカップリングさせる際に有用である。例えば、文献は、カップリング剤（例えば、カルボジイミド、ジイソシアネート、グルタルアルデヒド、ジアゾベンゼン、およびヘキサメチレンジアミン）を十分に記載している（ｒｅｐｌｅｔｅ）。この列挙は、当該分野で公知の種々のカップリング剤を網羅することが意図されるが、むしろ、より一般的なカップリング剤の例示である。
【００５２】
好ましい実施形態において、最初に抗体を誘導体化し、次いで毒素成分を、この誘導体化された生成物に結合させることが望まれ得ることが企図される。この様式における使用に適切な架橋剤としては、例えば、以下が挙げられる：ＳＰＤＰ（Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート）、およびＳＭＰＴ、４−スクシンイミジル−オキシカルボニル−α−メチル−α（２−ピリジルジチオ）トルエン。
【００５３】
放射性核種は、代表的には、キレート化によって抗体にカップリングされる。例えば、金属性の放射性核種の場合において、二官能性のキレート剤を通常使用して、アイソトープを目的の抗体または他のタンパク質に連結する。代表的には、キレート剤は、最初に抗体に結合され、そしてこのキレート剤−抗体結合体が、金属性の放射核種と接触される。多数の二官能性キレート剤が、この目的のために開発されており、これらとしては、ジチレントリアミン（ｄｉｔｈｙｌｅｎｅｔｒｉａｍｉｎｅ）ペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）（米国特許第５，１２４，４７１号、同第５，２８６，８５０号および同第５，４３４，２８７号（これらは、本明細書中で参考として援用される）に記載される一連のアミノ酸）が挙げられる。別の例として、ヒドロキサム酸ベースの二官能性キレート化剤が、米国特許第５，７５６，８２５号に記載されており、その内容は、本明細書中で援用される。別の例は、ｐ−ＳＣＮ−Ｂｚ−ＨＥＨＡ（１，４，７，１０，１３，１６−ヘキサアザシクロ−オクタデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’，Ｎ’’’’，Ｎ’’’’’−ヘキサ酢酸）（Ｄｅａｌら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４２：２９８８、１９９９）と呼ばれるキレート化剤（これは、２２５Ａｃのような放射性金属の効果的なキレート剤である）である。なお別の例は、ＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカンＮ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−テトラ酢酸）であり、これは、標識に続く結合体化のための二工程方法（実施例４を参照のこと）において使用され得る、二官能性キレート化剤である（ＭｃＤｖｅｉｔｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９４：１５３７−１５４０、２００１を参照のこと）。
【００５４】
本発明はまた、Ｂ細胞悪性疾患に罹患した被験体を処置する方法を提供し、この方法は、本明細書中に記載の、有効量の抗ＣＤ１９免疫毒素組成物を被験体に投与する工程を包含する。本明細書中で使用される場合、「被験体」とは、Ｂ細胞悪性疾患に罹患した任意の動物を意味する。好ましい実施形態において、被験体は、ヒトである。本明細書中で使用される場合、「処置」とは、Ｂ細胞悪性疾患の進行を遅くするか、停止させるかまたは逆転させることのいずれかを意味する。他の臨床学的パラメータもまた使用して、熟練した臨床医に公知のような処置の有効性（生存時間の増加、転移の阻害など）を評価し得る。好ましい実施形態において、「処置」とは、障害を排除する程度まで進行を逆転させることを意味する。本明細書中で使用される場合、「Ｂ細胞悪性疾患に罹患する」とは、その被験体が、Ｂ細胞マーカーを発現する少なくとも１個の癌細胞（ＣＤ１９を含むがこれに限定されない）を保有することを意味する。
【００５５】
従って、本発明は、新生物Ｂ細胞が役割を果たす種々のヒト疾患およびヒト障害の臨床学的処置における直接的有用性を有する。特に、このようなＢ細胞悪性疾患としては、以下が挙げられる：Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；Ｂ細胞急性リンパ性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）；Ｂ細胞前駆体リンパ性白血病（ｐｒｅ−Ｂ−ＡＬＬ）；Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ−ＣＬＬ）；ヘアリーセル白血病；前駆体Ｂリンパ芽球性白血病／前駆体Ｂリンパ芽球性リンパ腫；前リンパ球性白血病；小リンパ球性リンパ種；リンパ形質細胞性悪性リンパ腫；免疫細胞腫；外套細胞リンパ腫；節周囲濾胞リンパ球（ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｃｅｎｔｅｒ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）；周辺帯Ｂ細胞リンパ腫（硬膜外（ＭＡＬＴ型＋／−単球様Ｂ細胞）および正常（＋／−単球様Ｂ細胞）を含む）；脾性周辺帯Ｂ細胞リンパ腫（＋／−絨毛リンパ求）；ヘアリーセルリンパ腫；プラズマ細胞腫；プラズマ細胞骨髄腫；大Ｂ細胞型リンパ腫（一次縦隔（胸腺）Ｂ細胞リンパ腫を含む）；ならびにバーキットリンパ腫。
【００５６】
本発明の抗ＣＤ１９免疫毒素を使用するのに適切な治療レジメンは、当業者に公知である。処置は、抗ＣＤ１９免疫毒素を投与する前に、非癌性細胞上の抗ＣＤ１９分子をブロックするために未標識の抗ＣＤ１９抗体を投与する工程を包含し得る。他の腫瘍標的に対して未標識の抗体で前処置する方法が、米国特許第５，５９５，７２１号に記載される。
【００５７】
本発明の方法および組成物はまた、さらなる臨床学的実施形態（例えば、ＣＤ１９＋Ｂ細胞の欠失もしくは欠損、または望ましくない抗体もしくは有害な抗体を生成するＣＤ１９＋Ｂ細胞の数を減少させる）における使用が、企図される。このような望ましくない抗体または有害な抗体は、自己免疫疾患および異種移植片プロセスまたは移植プロセスにおいて生じる。自己免疫疾患としては、以下が挙げられる：プラズマ細胞障害（ＩｇＭ多発性神経障害、免疫性血小板減少症および自己免疫性溶血性貧血を含む）；シェーグレン症候群；多発性硬化症；慢性関節リウマチ；自己免疫リンパ増殖症候群（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）（ＡＬＰＳ）；サルコイドーシス；糖尿病；全身性エリテマトーデス、および水疱性類天疱瘡。このような障害を処置する際に、本発明の抗ＣＤ１９免疫毒素は、ＣＤ１９＋発現Ｂ細胞を排除するか、枯渇させるかまたはその数を減少させるのに有効な量で患者に投与され、それによって、有害な抗体（例えば、自己抗体など）の形成を減退させるか、減少させるかまたは排除する。この治療目的に有効な量を表わす用量は、Ｂ細胞悪性疾患の処置について本明細書中で記載される有効量と類似であることが企図される。
【００５８】
本発明の抗ＣＤ１９免役毒素は、単独で、各々組み合わせて、および／または他の治療剤（例えば、化学治療剤および放射治療剤）と組み合わせて使用され得ることが理解される（ＭｃＬａｕｇｈｌｉｎら、Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２７（６  Ｓｕｐｐｌ  １２）：３７−４１、２０００）。本発明の抗ＣＤ１９免役毒素はまた、ヘテロ二量体二重特異性抗体（ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）（例えば、Ｃｏｃｈｌｏｖｉｕｓら、Ｊ：Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５（２）：８８８−９５、１９９０を参照のこと）において、他の抗腫瘍抗体（例えば、抗ＣＤ３）と架橋され得る。
【００５９】
本明細書中で開示される免疫毒素と組み合わせて使用され得る抗腫瘍性化合物としては、以下のサブクラスの化合物が挙げられるがこれらに限定されない。特定の癌について、抗ＣＤ１９免疫毒素と組み合わせて投与される抗腫瘍性化合物の用量の決定は、当業者にとって日常的な実験の十分範囲内である。
【００６０】
抗腫瘍性試薬としては、以下が挙げられる：アクチビン（Ａｃｉｖｉｃｉｎ）；アクラルビシン；塩酸アコダゾール（Ａｃｏｄａｚｏｌｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；アクロニン；アドゼレシン（Ａｄｏｚｅｌｅｓｉｎ）；アドリアマイシン；アルデスロイキン（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）；アルトレトアミン（Ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）；アンボマイシン（Ａｍｂｏｍｙｃｉｎ）；酢酸アメタントロン（Ａｍｅｔａｎｔｒｏｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール（Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ）；アントラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン（Ａｓｐｅｒｌｉｎ）；アザシチジン（Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）；アザテパ（Ａｚｅｔｅｐａ）；アゾトマイシン（Ａｚｏｔｏｍｙｃｉｎ）；バチマスタット（Ｂａｔｉｍａｓｔａｔ）；ベンゾデパ（Ｂｅｎｚｏｄｅｐａ）；ビカルトアミド（Ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）；塩酸ビサントレン（Ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ビスナフィドジメシレート（Ｂｉｓｎａｆｉｄｅ  Ｄｉｍｅｓｙｌａｔｅ）；ビゼレシン（Ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ）；ブルオマイシンスルフェート；ブレキナルナトリウム（Ｂｒｅｑｕｉｎａｒ  Ｓｏｄｉｕｍ）；ブロピリミン；ブスルファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド（Ｃａｒａｃｅｍｉｄｅ）；カルベチマー（Ｃａｒｂｅｔｉｍｅｒ）；カルボプラチン；カルムスチン；塩酸カルビシン（Ｃａｒｕｂｉｃｉｎ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；カルゼレシン（Ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）；セデフィンゴル（Ｃｅｄｅｆｉｎｇｏｌ）；クロラムブシル；シロレマイシン（Ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）；シスプラチン；クラドリビン（Ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ）；クリスナトールメシレート（Ｃｒｉｓｎａｔｏｌ  Ｍｅｓｙｌａｔｅ）；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ＤＡＣＡ（Ｎ−［２−（ジメチル−アミノ）エチル］アクリジン−４−カルボキサミド）；ダクチノマイシン；塩酸ダウノルビシン；ダウノマイシン；デシタビン（Ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；デキソラマプラチン（Ｄｅｘｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）；デザグアニン；デザグアニンメシレート；ジアジコン（Ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）；ドセタキセル（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）；ドキソルビシン；塩酸ドキソルビシン；ドロロキシフェン（Ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）；硝酸ドロロキシフェン（Ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ  Ｃｉｔｒａｔｅ）；プロピオン酸ドロモスタノロン；デュアゾマイシン（Ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）；エダトレキセート（Ｅｄａｔｒｅｘａｔｅ）；塩酸エフロルニチン；エラサミトルシン（Ｅｌｓａｍｉｔｒｕｃｉｎ）；エンロプラチン（Ｅｎｌｏｐｌａｔｉｎ）；エンプロメート（Ｅｎｐｒｏｍａｔｅ）；エピプロピジン（Ｅｐｉｐｒｏｐｉｄｉｎｅ）；塩酸エピルビシン（Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；エルブロゾール（Ｅｒｂｕｌｏｚｏｌｅ）；塩酸エソルビシン（Ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；エストラムスチン；エストラムスチンリン酸ナトリウム；エタニダゾール（Ｅｔａｎｉｄａｚｏｌｅ）；エチオダイズオイル（Ｅｔｈｉｏｄｉｚｅｄ  Ｏｉｌ）Ｉ  １３１；エトポシド；エトポシドホスフェート；エトプリン（Ｅｔｏｐｒｉｎｅ）；塩酸ファドロゾール（Ｆａｄｒｏｚｏｌｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ファザラビン（Ｆａｚａｒａｂｉｎｅ）；フェンレチニド（Ｆｅｎｒｅｔｉｎｉｄｅ）；フロクスウリジン；リン酸フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）；フルオロウラシル；５−ＦｄＵＭＰ；フルオシタビン（Ｆｌｕｒｏｃｉｔａｂｉｎｅ）；フォスキドン（Ｆｏｓｑｕｉｄｏｎｅ）；フォストリエシンナトリウム（Ｆｏｓｔｒｉｅｃｉｎ  Ｓｏｄｉｕｍ）；ゲンシタビン（Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）；塩酸ゲンシタビン（Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；グリーベク（Ｇｌｅｅｖｅｃ）；金Ａｕ  １９８；ヒドロキシ尿素；塩酸イダルビシン；イホスファミド；イルモフォシン（Ｉｌｍｏｆｏｓｉｎｅ）；インターフェロンα−２ａ；インターフェロンα−２ｂ；インターフェロンα−ｎｌ；インターフェロンα−ｎ３；インターフェロンβ−Ｉａ；インターフェロンγ−Ｉｂ；イプロプラチン（Ｉｐｒｏｐｌａｔｉｎ）；塩酸イリノテカン；酢酸ランレオチド（Ｌａｎｒｅｏｔｉｄｅ  Ａｃｅｔａｔｅ）；レトロゾール（Ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）；酢酸ロイプロリド；塩酸リアロゾール（Ｌｉａｒｏｚｏｌｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ロメトレキソルナトリウム（Ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ  Ｓｏｄｉｕｍ）；ロムスチン；塩酸ロソキサントロン（Ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；マソプロコール（Ｍａｓｏｐｒｏｃｏｌ）；マイタンシン（Ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）；塩酸メクロレタミン；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル（Ｍｅｎｏｇａｒｉｌ）；メルカプトプリン；メトトレキセート；メトトレキセートナトリウム；メトプリン；メツレデパ（Ｍｅｔｕｒｅｄｅｐａ）；マイチンドミド（Ｍｉｔｉｎｄｏｍｉｄｅ）；マイトカルシン（Ｍｉｔｏｃａｒｃｉｎ）；マイトクロミン（Ｍｉｔｏｃｒｏｍｉｎ）；マイトギリン（Ｍｉｔｏｇｉｌｌｉｎ）；マイトマルシン（Ｍｉｔｏｍａｌｃｉｎ）；マイトマイシン；マイトスペル（Ｍｉｔｏｓｐｅｒ）；マイトタン；塩酸ミトキサントロン；ミコフェノール酸（Ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃ  Ａｃｉｄ）；ノコダゾール（Ｎｏｃｏｄａｚｏｌｅ）；ノガラマイシン（Ｎｏｇａｌａｍｙｃｉｎ）；オルマプラチン（Ｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）；オキシスレン（Ｏｘｉｓｕｒａｎ）；パクリタキセル；ペガスパルガーゼ（Ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ）；ペリオマイシン；ペンタムスチン；硫酸ペプロマイシン；ペルホスファミド（Ｐｅｒｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；ピポブロマン；ピポスルファン；塩酸ピロキサントロン（Ｐｉｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ピリカマイシン（Ｐｌｉｃａｍｙｃｉｎ）；プロメスタン（Ｐｌｏｍｅｓｔａｎｅ）；ポルフィメルナトリウム（Ｐｏｒｆｉｍｅｒ  Ｓｏｄｉｕｍ）；ポルフィロマイシン（Ｐｏｒｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）；プレドニムスチン（Ｐｒｅｄｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）；塩酸プロカルバジン；プロマイシン；塩酸プロマイシン；ピラゾフリン；リボプリン；リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）（リツキサン（Ｒｉｔｕｘａｎ））；ログレチミド（Ｒｏｇｌｅｔｉｍｉｄｅ）；サフィノゴル（Ｓａｆｉｎｇｏｌ）；塩酸サフィノゴル（Ｓａｆｉｎｇｏｌ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；セムスチン；シムトラゼン（Ｓｉｍｔｒａｚｅｎｅ）；スパルフォセートナトリウム（Ｓｐａｒｆｏｓａｔｅ  Ｓｏｄｉｕｍ）；スパルソマイシン（Ｓｐａｒｓｏｍｙｃｉｎ）；塩酸スピロゲルマニウム（Ｓｐｉｒｏｇｅｒｍａｎｉｕｍ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；スピロムスチン（Ｓｐｉｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）；スピロプラチン（Ｓｐｉｒｏｐｌａｔｉｎ）；ストレプトニグリン（Ｓｔｒｅｐｔｏｎｉｇｒｉｎ）；ストレプトゾシン；塩化ストロンチウムＳｒ  ８９；スルフェニル（Ｓｕｌｏｆｅｎｕｒ）；タリソマイシン（Ｔａｌｉｓｏｍｙｃｉｎ）；タキサン（Ｔａｘａｎｅ）；タキソイド；テコガランナトリウム（Ｔｅｃｏｇａｌａｎ  Ｓｏｄｉｕｍ）；テガフール；塩酸テロキサントロン（Ｔｅｌｏｘａｎｔｒｏｎｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；テモプロフィン（Ｔｅｍｏｐｏｒｆｉｎ）；テニポシド（Ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）；テロキシロン（Ｔｅｒｏｘｉｒｏｎｅ）；テストラクトン；チアミプリン（Ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎｅ）；チオグアニン；チオテパ；チミタック（Ｔｈｙｍｉｔａｑ）；チアゾフリン（Ｔｉａｚｏｆｕｒｉｎ）；チラパザミン（Ｔｉｒａｐａｚａｍｉｎｅ）；トムデクス（Ｔｏｍｕｄｅｘ）；ＴＯＰ−５３；塩酸トポテカン（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；硝酸トレミフェン；酢酸トレストロン（Ｔｒｅｓｔｏｌｏｎｅ  Ａｃｅｔａｔｅ）；リン酸トリシリビン（Ｔｒｉｃｉｒｉｂｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）；トリメトレキサート；グルクロン酸トリメトレキサート；トリプトレリン（Ｔｒｉｐｔｏｒｅｌｉｎ）；塩酸ツブロゾール（Ｔｕｂｕｌｏｚｏｌｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ウラシルマスタード；ウレデパ（Ｕｒｅｄｅｐａ）；ベプレオチド（Ｖａｐｒｅｏｔｉｄｅ）；ベルテポルフィン（Ｖｅｒｔｅｐｏｒｆｉｎ）；ビンブラスチン；硫酸ビンブラスチン；ビンクリスチン；硫酸ビンクリスチン；ビンデシン；硫酸ビンデシン；硫酸ビネピジン（Ｖｉｎｅｐｉｄｉｎｅ  Ｓｕｌｆａｔｅ）；硫酸ビングリシネート（Ｖｉｎｇｌｙｃｉｎａｔｅ  Ｓｕｌｆａｔｅ）；硫酸ビンロイロシン（Ｖｉｎｌｅｕｒｏｓｉｎｅ  Ｓｕｌｆａｔｅ）；硝酸ビノレルビン（Ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ  Ｔａｒｔｒａｔｅ）；硫酸ビンロシジン（Ｖｉｎｒｏｓｉｄｉｎｅ  Ｓｕｌｆａｔｅ）；硫酸ビンゾリジン（Ｖｉｎｚｏｌｉｄｉｎｅ  Ｓｕｌｆａｔｅ）；ベロゾール（Ｖｏｒｏｚｏｌｅ）；ゼニプラチン（Ｚｅｎｉｐｌａｔｉｎ）；ゼノスタチン（Ｚｉｎｏｓｔａｔｉｎ）；塩酸ゾルビシン；２−クロロデオキシアデノシン；２’−デオキシホルミシン；９−アミノカンプトセシン；ラルチトレキシド（ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ）；Ｎ−プロパルジル−５、８−ジデアザ葉酸；２−クロロ−２’−アラビノ−フルオロ−２’−デオキシアデンシン；２−クロロ−２’−デオキシアデノシン；アニソマイシン；トリコスタチンＡ；ｈＰＲＬ−Ｇ１２９Ｒ；ＣＥＰ−７５１；イノマイド（ｌｉｎｏｍｉｄｅ）。
【００６１】
他の抗腫瘍性化合物としては、以下が挙げられる：２０−ｅｐｉ−１，２５ジヒドロキシビタミンＤ３；５−エチニルウラシル；アビラテロン（ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ）；アクラルビシン；アシルフルベン；アデシペノル（ａｄｅｃｙｐｅｎｏｌ）；アドゼレシン（ａｄｏｚｅｌｅｓｉｎ）；アルデシロイキン（ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）；ＡＬＬ−ＴＫアンタゴニスト；アルトレタミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）；アンバムスチン（ａｍｂａｍｕｓｔｉｎｅ）；アミドクス（ａｍｉｄｏｘ）；アミフォスチン（ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）；アミノレブリン酸；アンルビシン（ａｍｒｕｂｉｃｉｎ）；アムサクリン；アナグレリド（ａｎａｇｒｅｌｉｄｅ）；アナストロゾール（ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ）；アンドレグラホリド（ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ）；新脈管形成インヒビター；アンタゴニストＤ；アンタゴニストＧ；アンタレリキシ（ａｎｔａｒｅｌｉｘ）；抗背方化形態形成タンパク質１（ａｎｔｉ−ｄｏｒｓａｌｉｚｉｎｇ  ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１）；抗男性ホルモン、前立腺癌；抗エストロゲン；抗新生物薬；アンチセンスオリゴヌクレオチド；グリシン酸アフィジコリン；アポトーシス遺伝子モジュレーター；アポトーシスレギュレーター；アプリン酸；ａｒａ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ；アルギニンデアミナーゼ；アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）；アタメスタン（ａｔａｍｅｓｔａｎｅ）；アトリムスチン（ａｔｒｉｍｕｓｔｉｎ）；アキシナスタチン１（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ  １）；アキシナスタチン２；アキシナスタチン３；アザセトロン（ａｚａｓｅｔｒｏｎ）；アザトキシン；アザチロシン；バッカチンＩＩＩ誘導体；バラノール（ｂａｌａｎｏｌ）；ベチマスタツ（ｂａｔｉｍａｓｔａｔ）；ＢＣＲ／ＡＢＬアンタゴニスト；ベンゾクロリン；ベンゾイルスタウロスポリン；βラクタム誘導体；βアレチン；βクラマイシンＢ（ｂｅｔａｃｌａｍｙｃｉｎ  Ｂ）；ベツリン酸（ｂｅｔｕｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；ｂＦＧＦインヒビター；ビカルタミド（ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）；ビサントレン（ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）；ビサジルジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｉｒｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）；ビスナフィド（ｂｉｓｎａｆｉｄｅ）；ビストラテンＡ（ｂｉｓｔｒａｔｅｎｅ  Ａ）；ビゼレシン（ｂｉｚｅｌｅｓｉｎ）；ブレフレート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）；ブロピリミン；ブドチタン（ｂｕｄｏｔｉｔａｎｅ）；ブチオニンスルホキシイミン；カルシポトロイル（ｃａｌｃｉｐｏｔｒｉｏｌ）；カルポスチンＣ（ｃａｌｐｈｏｓｔｉｎ  Ｃ）；カンプトセシン誘導体（例えば、１０−ヒドロキシ−カンプトセシン）；カナリア痘ＩＬ−２；カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；カルボキサミド−アミノ−トリアゾール；カルボキサミドトリアゾール；ＣａＲｅｓｔ  Ｍ３；ＣＡＲＮ  ７００；軟骨誘導体化インヒビター；カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）；カゼインキナーゼインヒビター（ＩＣＯＳ）；カスタノスペルミン（ｃａｓｔａｎｏｓｐｅｒｍｉｎｅ）；セクロピンＢ（ｃｅｃｒｏｐｉｎ  Ｂ）；セトロレリクス（ｃｅｔｒｏｒｅｌｉｘ）；クロリン（ｃｈｌｏｒｉｎｓ）；クロロキノキサリンスルホンアミド；シカプロ���ト（ｃｉｃａｐｒｏｓｔ）；シス−ポルフィリン；クラドリビン（ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ）；クロミフェンアナログ（ｃｌｏｍｉｆｅｎｅ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ）；クロトリマゾール；コリスマイシンＡ（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ  Ａ）；コリスマイシンＢ；コンブレタスタチンＡ４（ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎ  Ａ４）；コンブレタスタチンアナログ；コナゲニン（ｃｏｎａｇｅｎｉｎ）；クラムベシジン（ｃｒａｍｂｅｓｃｉｄｉｎ）８１６；クリスナトル（ｃｒｉｓｎａｔｏｌ）；クリプトフィシン８（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎ  ８）；クリプトフィシンＡ誘導体；クラシンＡ（ｃｕｒａｃｉｎ  Ａ）；シクロペンタントラキノン（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓ）；シクロプラタン（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）；シペマイシン（ｃｙｐｅｍｙｃｉｎ）；シタラビンオクフォスフェート（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ  ｏｃｆｏｓｆａｔｅ）；細胞溶解性因子；サイトスタチン（ｃｙｔｏｓｔａｔｉｎ）；ダシリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）；デシタビン（ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；セヒドロジデミンＢ（ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｄｅｍｎｉｎ  Ｂ）；デスロレリン（ｄｅｓｌｏｒｅｌｉｎ）；デキシホスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；デキストラゾキサン（ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ）；デキシベラパミル（ｄｅｘｖｅｒａｐａｍｉｌ）；ジアジキノン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）；ジデミンＢ（ｄｉｄｅｍｎｉｎ  Ｂ）；ジドキシ（ｄｉｄｏｘ）；ジエチルノルスペルミン；ジヒドロ−５−アザシチジン；ジヒドロタキソール、９−；ジオキサマイシン；ジフェニルスピロムスチン；ジスコデルモリド（ｄｉｓｃｏｄｅｒｍｏｌｉｄｅ）；ドコサノール（ｄｏｃｏｓａｎｏｌ）；ドラセトロン（ｄｏｌａｓｅｔｒｏｎ）；ドキシフルリジン；ドロルオキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）；ドロナビノール；ドュオカルマイシンＳＡ（ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ  ＳＡ）；エブセレン（ｅｂｓｅｌｅｎ）；エコムスチン（ｅｃｏｍｕｓｔｉｎｅ）；エデルフォシン（ｅｄｅｌｆｏｓｉｎｅ）；エドレコロマブ（ｅｄｒｅｃｏｌｏｍａｂ）；エフロルニチン；エレメン（ｅｌｅｍｅｎｅ）；エミテフル（ｅｍｉｔｅｆｕｒ）；エピルビシン；エポチロン（Ａ、Ｒ＝Ｈ；Ｂ、Ｒ＝Ｍｅ）；エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅｓ）；エプリステリド（ｅｐｒｉｓｔｅｒｉｄｅ）；エストラムスチンアナログ；エストロゲンアゴニスト；エストロゲンアンタゴニスト；エタニダゾール（ｅｔａｎｉｄａｚｏｌｅ）；エトポシド；エトポシド４’−ホスフェート（エトポフォス（ｅｔｏｐｏｆｏｓ））；エキセメスタン（ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）；ファドロゾール（ｆａｄｒｏｚｏｌｅ）；ファザラビン（ｆａｚａｒａｂｉｎｅ）；フェンレチニド（ｆｅｎｒｅｔｉｎｉｄｅ）；フィルグラスチム；フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）；フラボピリドル（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）；フラゼラスチン（ｆｌｅｚｅｌａｓｔｉｎｅ）；フラステロン（ｆｌｕａｓｔｅｒｏｎｅ）；フルダラビン（ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ）；塩酸フルオロダウノルビシン；ホルフェニメクス（ｆｏｒｆｅｎｉｍｅｘ）；フォルメスタン（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｅ）；フォストリエシン（ｆｏｓｔｒｉｅｃｉｎ）；フォテ���スチン（ｆｏｔｅｍｕｓｔｉｎｅ）、ガドリニウムテキサフィリン；ガリウムニトレート、ガロシタビン（ｇａｌｏｃｉｔａｂｉｎｅ）；ガニレリキシ（ｇａｎｉｒｅｌｉｘ）；ゼラチナーゼインヒビター；ゲメシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）；グルタチオンインヒビター；ヘプスルファム（ｈｅｐｓｕｌｆａｍ）；ヘレグリン（ｈｅｒｅｇｕｌｉｎ）；ヘキサメチレンビスアセトアミド；ヒペリシン；イバンドロニン酸（ｉｂａｎｄｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）；イバルビシン（ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ）；イドキシフェン（ｉｄｏｘｉｆｅｎｅ）；イドラマントン（ｉｄｒａｍａｎｔｏｎｅ）；イルモフェシン（ｉｌｍｏｆｏｓｉｎｅ）；イロマスタット（ｉｌｏｍａｓｔａｔ）；イミダゾアクリドン；イミキモド（ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ）；免疫刺激性ペプチド；インスリン様増殖因子１レセプターインヒビター；インターフェロンアゴニスト；インターフェロン；インターロイキン；イオベングアン（ｉｏｂｅｎｇｕａｎｅ）；ヨードドキソルビシン；イポメアノル（ｉｐｏｍｅａｎｏｌ）、４−；イリノテカン；イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）；イルソグラジン；イソベンガゾール（ｉｓｏｂｅｎｇａｚｏｌｅ）；イソホモハリコンドリンＢ（ｉｓｏｈｏｍｏｈａｌｉｃｏｎｄｒｉｎ  Ｂ）；イタデトロン（ｉｔａｓｅｔｒｏｎ）；ジャスプラキノリド（ｊａｓｐｌａｋｉｎｏｌｉｄｅ）；カハラリドＦ（ｋａｈａｌａｌｉｄｅ  Ｆ）；ラメラリン−Ｎトリアセテート；ランレオチド（ｌａｎｒｅｏｔｉｄｅ）；レイナマイシン（ｌｅｉｎａｍｙｃｉｎ）；レノグラスチム；レンチナンスルフェート；レプトルスタチン（ｌｅｐｔｏｌｓｔａｔｉｎ）；レトロゾール（ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）；白血病抑制因子；白血球αインターフェロン；ロイプロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン；ロイプロレニン；レバミゾール；リアゾロール（ｌｉａｒｏｚｏｌｅ）；線状ポリアミンアナログ；脂肪親和性二糖ペプチド；脂肪親和性白金化合物；リソクリンアミド７（ｌｉｓｓｏｃｌｉｎａｍｉｄｅ  ７）；ロバプラチン；ロンブリシン（ｌｏｍｂｒｉｃｉｎｅ）；ロメトレキソール（ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ）；ロニダミン（ｌｏｎｉｄａｍｉｎｅ）；ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；ロバスタチン；ロキソリビン（ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ）；ルロトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）；ルテチウムテキサフィリン（ｌｕｔｅｔｉｕｍ  ｔｅｘａｐｈｙｒｉｎ）；リソフィリン（ｌｙｓｏｆｙｌｌｉｎｅ）；溶解性ペプチド；マイタンシン（ｍａｉｔａｎｓｉｎｅ）；マノスタチンＡ（ｍａｎｎｏｓｔａｔｉｎ  Ａ）；マリマスタット（ｍａｒｉｍａｓｔａｔ）；マソプロセル（ｍａｓｏｐｒｏｃｏｌ）；マスピン（ｍａｓｐｉｎ）；マトリリシンインヒビター；マトリクスメタロプロテイナーゼインヒビター；メノガリル（ｍｅｎｏｇａｒｉｌ）；メルバロン（ｍｅｒｂａｒｏｎｅ）；メテレリン（ｍｅｔｅｒｅｌｉｎ）；メチオニナーゼ（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎａｓｅ）；メトクロプラミド；ＭＩＦインヒビター；ミフェプリストン；ミルテフォシン（ｍｉｌｔｅｆｏｓｉｎｅ）；ミリモスチム（ｍｉｒｉｍｏｓｔｉｍ）；不一致二本鎖ＲＮＡ；ミトラシン（ｍｉｔｈｒａｃｉｎ）；ミトグアジン（ｍｉｔｏｇｕ��ｚｏｎｅ）；ミトラクトール；マイトマイシンアナログ；ミトナフィド（ｍｉｔｏｎａｆｉｄｅ）；マイトトキシン繊維芽細胞成長因子−サポリン；ミトザントロン；モファロテン（ｍｏｆａｒｏｔｅｎ）；モルグラモスチン（ｍｏｌｇｒａｍｏｓｔｉｍ）；モノクローナル抗体、ヒロ絨毛性ゴナドトロピン；モノホスホリルリピドＡ＋ミコバクテリウム細胞壁ｓｋ；モピダモル（ｍｏｐｉｄａｍｏｌ）；複合薬物耐性遺伝子インヒビター；複合腫瘍サプレッサ１ベースの治療剤；マスタード抗癌剤；ミカペルオキシドＢ（ｍｙｃａｐｅｒｏｘｉｄｅ  Ｂ）；ミコバクテリア細胞壁抽出物；ミリアポロン（ｍｙｒｉａｐｏｒｏｎｅ）；Ｎ−アセチルジナリン；Ｎ−置換ベンズアミド；ナファレリン（ｎａｆａｒｅｌｉｎ）；ナグレスチプ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）；ナフテルピン（ｎａｐｈｔｅｒｐｉｎ）；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモルブシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）；ネルドロン酸（ｎｅｒｉｄｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）；天然のエンドペプチダーゼ；ニルタミド（ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ）；ニサマイシン（ｎｉｓａｍｙｃｉｎ）；一酸化窒素モジュレーター；窒素抗酸化剤（ｎｉｔｒｏｘｉｄｅ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ）；ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）；Ｏ６−ベンジルグアニン；オクトレオチド；オキセノン（ｏｋｉｃｅｎｏｎｅ）；オリゴヌクレオチド；オナプリストン（ｏｎａｐｒｉｓｔｏｎｅ）；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン（ｏｒａｃｉｎ）；経口サイトカインインデューサ；オルマプラチン（ｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）；オサテロン（ｏｓａｔｅｒｏｎｅ）；オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）；オキサウノマイシン（ｏｘａｕｎｏｍｙｃｉｎ）；パクリタキセルアナログ；パクリタキセル誘導体；パラウアミン（ｐａｌａｕａｍｉｎｅ）；パルミトイルリゾキシン（ｐａｌｍｉｔｏｙｌｒｈｉｚｏｘｉｎ）；パミドロン酸（ｐａｍｉｄｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）；パナキシトリオール（ｐａｎａｘｙｔｒｉｏｌ）；パノミフェン（ｐａｎｏｍｉｆｅｎｅ）；パラバクチン（ｐａｒａｂａｃｔｉｎ）；パゼリプチン（ｐａｚｅｌｌｉｐｔｉｎｅ）；ペガスパアガーゼ（ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ）；ペルデシン（ｐｅｌｄｅｓｉｎｅ）；ペントサンポリ硫酸ナトリウム；ペントスタチン；ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）；ペルフルブロン（ｐｅｒｆｌｕｂｒｏｎ）；ペルホスファミド；ペリリルアルコール（ｐｅｒｉｌｌｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）；フェナジンマイシン（ｐｈｅｎａｚｉｎｏｍｙｃｉｎ）；フェニルアセテート；ホスファターゼインヒビター；ピシバニール；塩酸ピロカルピン；ピラルビシン；ピリトレキシム（ｐｉｒｉｔｒｅｘｉｍ）；プラセチンＡ（ｐｌａｃｅｔｉｎ  Ａ）；プラセチンＢ；プラスミノゲン活性化因子インヒビター；白金錯体；白金化合物；白金−トリアミン錯体；ポドフィロトキシン；ポリフェメルナトリウム（ｐｏｒｆｉｍｅｒ  ｓｏｄｉｕｍ）；ポロフィロマイシン（ｐｏｒｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）；プロピルビス−アクリドン；プロスタグランジンＪ２；プロテアソームインヒビター；プロテインＡベースの免疫モジュレーター；タンパク質キナーゼＣインヒビター；タンパク質キナーゼＣインヒビター、微細藻類；タンパク質チロシンホスファターゼインヒビター；プリンヌクレオシドホスホリラーゼインヒビター；プルプリン；ピラゾロアクリジン；ピリドキシル化（ｐｙｒｉｄｏｘｙｌａｔｅｄ）ヘモグロビンポリオキシエチレン結合体；ｒａｆアンタゴニスト；ラルチトレキシド（ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ）；ラモセトロン（ｒａｍｏｓｅｔｒｏｎ）；ｒａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼインヒビター；ｒａｓインヒビター；ｒａｓ−ＧＡＰインヒビター；ジメチル化レテリプチン（ｒｅｔｅｌｌｉｐｔｉｎｅ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ）；レニウムＲｅ１８６エチドロン酸；リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘｉｎ）；リボザイム；ＲＩＩレチンアミド；ログレチミド（ｒｏｇｌｅｔｉｍｉｄｅ）；ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）；ロムルチド；ロキニメキシ（ｒｏｑｕｉｎｉｍｅｘ）；ルビジノンＢ１（ｒｕｂｉｇｉｎｏｎｅ  Ｂ１）；ルボシキシル（ｒｕｂｏｘｙｌ）；サフィノゴル（ｓａｆｉｎｇｏｌ）；サイントピン（ｓａｉｎｔｏｐｉｎ）；ＳａｒＣＮＵ；サルコフィトールＡ（ｓａｒｃｏｐｈｙｔｏｌ  Ａ）；サルグロモスチン（ｓａｒｇｒａｍｏｓｔｉｍ）；Ｓｄｉ  １模倣物；セムスチン；老化誘導体化インヒビター１；センスオリゴヌクレオチド；単一形質導入インヒビター；単一形質導入モジュレーター；単鎖抗原結合タンパク質；シゾフィラン；ソブゾキサン（ｓｏｂｕｚｏｘａｎｅ）；ホウ化水素ナトリウム；酢酸フェニルナトリウム；ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）；ソマトメジン結合タンパク質；ソネルミン（ｓｏｎｅｒｍｉｎ）；スパロフォシン酸（ｓｐａｒｆｏｓｉｃ  ａｃｉｄ）；スピカマイシンＤ（ｓｐｉｃａｍｙｃｉｎ  Ｄ）；スピロムスチン；スプレノペンチン（ｓｐｌｅｎｏｐｅｎｔｉｎ）；スポンジスタチン１（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ  １）；スクアラミン（ｓｑｕａｌａｍｉｎｅ）；幹細胞インヒビター；幹細胞分裂インヒビター；スチピアミド（ｓｔｉｐｉａｍｉｄｅ）；ストロメライシンインヒビター；スルフィノヂン；過度活動性血管作用性腸ペプチドアンタゴニスト（ｓｕｐｅｒａｃｔｉｖｅ  ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）；スラジスタ（ｓｕｒａｄｉｓｔａ）；スラミン；スウェインソニン（ｓｗａｉｎｓｏｎｉｎｅ）；合成グリコサミノグリカン；タリムスチン（ｔａｌｌｉｍｕｓｔｉｎｅ）；タモキシフェンメチオジド；タウロムスチン（ｔａｕｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）；タザロテン（ｔａｚａｒｏｔｅｎｅ）；タコガランナトリウム（ｔｅｃｏｇａｌａｎ  ｓｏｄｉｕｍ）；テガフール（ｔｅｇａｆｕｒ）；テレウラピリリウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）；テロメラーゼインヒビター；テモポルフィン（ｔｅｍｏｐｏｒｆｉｎ）；テモゾロミド（ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）；テニポシド（ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）；テトラクロロデカノキシド；テトラゾミン（ｔｅｔｒａｚｏｍｉｎｅ）；タリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）；サリドマイド；チオコラリン（ｔｈｉｏｃｏｒａｌｉｎｅ）；トロンボポエチン；トロンボポエチン模倣物；チマルファシン（ｔｈｙｍａｌｆａｓｉｎ）；トロンボポエチンレセプターアゴニスト；チモトリナン（ｔｈｙｍｏｔｒｉｎａｎ）；甲状腺刺激ホルモン；スズエチルエチオプルプリン；チラパザミン（ｔｉｒａｐａｚａｍｉｎｅ）；チタノセンジクロリド（ｔｉｔａｎｏｃｅｎｅ  ｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ）；トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）；トプセンチン（ｔｏｐｓｅｎｔｉｎ）；トレミフェン；全能幹細胞因子；翻訳インヒビター；トレチノイン；トリアセチルウリジン；トリシリビン（ｔｒｉｃｉｒｉｂｉｎｅ）；トリメトレキサート；トリプトレリン（ｔｒｉｐｔｏｒｅｌｉｎ）；トロピセトロン（ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ）；ツロステリド（ｔｕｒｏｓｔｅｒｉｄｅ）；チロシンキナーゼインヒビター；チルホスチン（ｔｙｒｐｈｏｓｔｉｎｓ）；ＵＢＣインヒビター；ウベニメクス；尿生殖洞誘導化増殖阻害因子；ウロキナーゼレセプターアンタゴニスト；バプレオチド（ｖａｐｒｅｏｔｉｄｅ）；バリオリンＢ（ｖａｒｉｏｌｉｎ  Ｂ）；ベクター系、赤血球遺伝子治療剤；ベラレソル（ｖｅｌａｒｅｓｏｌ）；ベラミン（ｖｅｒａｍｉｎｅ）；ベルジン；ベルテポルフィン（ｖｅｒｔｅｐｏｒｆｉｎ）；ビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）；ビノキサルチン（ｖｉｎｘａｌｔｉｎｅ）；ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）；ボロゾール（ｖｏｒｏｚｏｌｅ）；ゾノテロン（ｚａｎｏｔｅｒｏｎｅ）；ゼニプラチン（ｚｅｎｉｐｌａｔｉ）；ジラスコルブ（ｚｉｌａｓｃｏｒｂ）；ジノスタチンスチマラメル（ｚｉｎｏｓｔａｔｉｎ  ｓｔｉｍａｌａｍｅｒ）。
【００６２】
抗癌補充増強剤としては、以下が挙げられる：三環式抗うつ剤（例えば、イミプラミン、デシプラミン、アミトリプチリン、クロミプラミン、トリミプラミン、ドキセピン、ノルトリプチリン、プロトリプチリン、アモキサピンおよびマプロチリン）；非三環式抗うつ剤（例えば、セルトラリン、トラゾドンおよびシタロプラム）；Ｃａ＋＋アンタゴニスト（例えば、ベラパミル、ニフェジピン、ニトレンジピンおよびカダベリン）；カルモジュリンインヒビター（例えば、プレニラミン、トリフルオロペラジンおよびクロミプラミン）；アンホテリシンＢ；トリパラノールアナログ（例えば、タモキシフェン）；抗不整脈剤（例えば、キニジン）；抗高血圧剤（例えば、レセルピン）；チオール減損剤（ｔｈｉｏｌ  ｄｅｐｌｅｔｅｒ）（例えば、ブチオニンおよびスルホキシイミン）、ならびに複合薬物耐性還元剤（例えば、Ｃｒｅｍａｐｈｏｒ  ＥＬ）。
【００６３】
抗増殖性剤：ピリトレキシムイソチオネート（Ｐｉｒｉｔｒｅｘｉｍ  Ｉｓｅｔｈｉｏｎａｔｅ）。
【００６４】
血管新生インヒビター：エンドスタチン、アンギオスタチン、可溶性トロポニンＩ。
【００６５】
放射活性剤としては、以下が挙げられる：フィブリノゲンＩ  １２５；フルデオキシグルコースＦ１８；フルオロドーパＦ１８；インスリンＩ  １２５；インスリンＩ  １３１；イオベングアン（Ｉｏｂｅｎｇｕａｎｅ）Ｉ  １２３；ヨージパミドナトリウムＩ  １３１；ヨードアンチピリンＩ  １３１；ヨードコレステロールＩ  １３１；ヨード馬尿酸ナトリウムＩ  １２３；ヨード馬尿酸ナトリウムＩ  １２５；ヨード馬尿酸ナトリウムＩ  １３１；ヨードピラセトＩ  １２５；ヨードピラセトＩ  １３１；塩酸イオフェタミン（Ｉｏｆｅｔａｍｉｎｅ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）Ｉ  １２３；イオメチン（Ｉｏｍｅｔｈｉｎ）Ｉ  １２５；イオメチンＩ  １３１；イオタラメートナトリウム（Ｉｏｔｈａｌａｍａｔｅ  Ｓｏｄｉｕｍ）Ｉ  １２５；イオタラメートナトリウムＩ  １３１；イオチロシンＩ  １３１；リオチロニンＩ  １２５；リオチロニンＩ  １３１；酢酸メルソピロール（Ｍｅｒｉｓｏｐｒｏｌ  Ａｃｅｔａｔｅ）Ｈｇ  １９７；酢酸メルソピロールＨｇ  ２０３；メルソピロールＨｇ  １９７；セレノメチオニンＳｅ  ７５；テクネチウムＴｃ  ９９ｍ三硫化アンチモンコロイド；テクネチウムＴｃ  ９９ｍビシセート（Ｂｉｃｉｓａｔｅ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍジソフェニン；テクネチウムＴｃ  ９９ｍエチドロネート；テクネチウムＴｃ  ９９ｍ  エキサメタジン；テクネチウムＴｃ  ９９ｍフリホスミン（Ｆｕｒｉｆｏｓｍｉｎ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍグルセプテート；テクネチウムＴｃ  ９９ｍリドフェニン；テクネチウムＴｃ  ９９ｍメブロフェニン（Ｍｅｂｒｏｆｅｎｉｎ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍメドロネート（Ｍｅｄｒｏｎａｔｅ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍメドロネート二ナトリウム；テクネチウムＴｃ  ９９ｍメルチアチド（Ｍｅｒｔｉａｔｉｄｅ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍオキシドロネート（Ｏｘｉｄｒｏｎａｔｅ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍペンテテート；テクネチウムＴｃ  ９９ｍペンテテート三ナトリウムカルシウム；テクネチウムＴｃ  ９９ｍセスタミビ（Ｓｅｓｔａｍｉｂｉ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍシボロキシム（Ｓｉｂｏｒｏｘｉｍｅ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍスクシマー（Ｓｕｃｃｉｍｅｒ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍ硫黄コロイド；テクネチウムＴｃ  ９９ｍテボロキシム（Ｔｅｂｏｒｏｘｉｍｅ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍテトロフォスミン（Ｔｅｔｒｏｆｏｓｍｉｎ）；テクネチウムＴｃ  ９９ｍチアチド（Ｔｉａｔｉｄｅ）；チロキシンＩ  １２５；チロキシンＩ  １３１；トルピビドン（Ｔｏｌｐｏｖｉｄｏｎｅ）Ｉ  １３１；トリオレインＩ ２５；トリオレインＩ  １３１。
【００６６】
処置は、抗ＣＤ１９免疫毒素を、補助治療剤とともにかまたは補助治療剤なしで、投与することを含み得る。補助治療剤としては、免疫刺激剤または免疫調整剤が挙げられ得る。免疫刺激剤としては、以下が挙げられる：インターロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５およびＩＬ−１８を含む）のようなサイトカイン；コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦおよびＧＭ−ＣＳＦを含む）；トロンボポエチン、ならびにインターフェロン（γインターフェロンを含む）。免疫調整剤は、免疫性アジュバントであり得る。この免疫性アジュバントはまた、メチル化されていないＣｐＧジヌクレオチド配列を含有するオリゴヌクレオチドを含み得る。
【００６７】
投与の際に、本明細書中の治療剤は、薬学的に受容可能な調製物中で投与され得る。このような調製物は、通常、薬学的に受容可能な濃度の塩、緩衝剤、保存剤、適合性キャリア、補助免疫増強剤（例えば、アジュバントおよびサイトカイン）および必要に応じて他の治療剤を含有し得る。
【００６８】
本発明の治療剤は、従来の任意の経路（注射を含む）または経時的な漸進的注入によって、投与され得る。この投与はまた、例えば、経口または非経口（例えば、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内、黒質内、腫瘍内、滑液包内、経皮など）であり得る。抗体が治療的に使用される場合、好ましい投与経路は、静脈内であるかまたは肺のエアロゾルによってである。抗体を含有するエアロゾル送達系を調製するための技術は、当業者に周知である。一般的には、このような系は、抗体の生物学的特性（例えば、パラトープ結合能）を有意に損なわない成分を用いるべきである（例えば、ＳｃｉａｒｒａおよびＣｕｔｉｅ、「Ａｅｒｏｓｏｌｓ」Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８巻、１９９０、ｐｐ．１６９４−１７１２を参照のこと；参考として援用される）。当業者は、過度の実験に頼る必要なく、抗体エアロゾルを生成するための、種々のパラメータおよび条件を容易に決定することができる。本発明のアンチセンス調製物を使用する場合、遅い静脈内投与が好ましい。
【００６９】
本発明の組成物は、有効量で投与される。「有効量」とは、単独でかまたはさらなる用量と一緒になって、所望の応答を生じる（例えば、被験体におけるＢ細胞悪性疾患を処置する）、抗ＣＤ１９免疫毒素組成物の量である。これは、疾患の進行を一時的に遅くするだけでなく、より好ましくは、疾患の進行を永久的に停止することに関し得る。これは、日常的な方法によってモニタリングされ得る。疾患または状態の処置に対する望ましい応答はまた、疾患または状態の発病を遅滞させ得るかまたはこれらの発病を予防さえし得る。
【００７０】
このような量は、もちろん、処置される特定の状態、その状態の重篤度、個々の患者のパラメータ（年齢、物理的状態、身長および体重、処置の期間、併用治療の種類（ある場合）、特定の投与経路、ならびに健康開業医の知識および技術内の同様な因子を含む）に依存する。これらの因子は、当業者に周知であり、日常的な実験のみを用いてアドレス可能であり得る。個々の成分またはそれらの組み合わせの最大用量、すなわち、十分な医学的判断に従った最も安全な用量を使用することが、一般に好ましい。しかし、医学的理由、心理学的理由または実質的に任意の他の理由のために、患者がより低用量または耐量を要求し得ることを、当業者は理解する。
【００７１】
前出の方法において使用される薬学的組成物は、好ましくは、滅菌され、かつ患者に投与するのに適した重量単位または容量単位において、所望の応答を生じるために有効な量の抗ＣＤ１９免疫毒素を含有する。この応答は、例えば、抗ＣＤ１９免疫毒素化合物の物理学的効果（例えば、腫瘍の退行または疾患症状の軽減）を決定することによって測定され得る。他のアッセイが、当業者に公知であり、そして応答のレベルを測定するために使用され得る。
【００７２】
被験体に投与される抗ＣＤ１９免疫毒素の用量は、異なるパラメータに従って、特に、使用される投与形態および被験体の状態に従って、選択され得る。他の因子としては、所望の処置期間が挙げられる。被験体の応答が、適用される初期用量において不十分である事象において、より高用量（すなわち、異なる、より局在化された送達経路による、効率的に高い用量）が、患者の耐性が可能な程度まで使用され得る。
【００７３】
一般的に、用量は、約１０μｇ／ｋｇから約１００，０００μｇ／ｋｇの範囲にわたり得る。組成物に基づいて、この用量は、例えば、連続ポンプによって連続的にか、または定期的な間隔で送達され得る。多用量の特定の組成物の望ましい時間間隔は、当業者によって過度な実験なしに決定され得る。抗ＣＤ−１９免疫毒素組成物の投与のための他のプロトコルは、当業者に公知であり、このプロトコルにおいて、用量、投与のスケジュール、投与の部位、投与の様式などは、前述のものと異なる。
【００７４】
一般的に、本発明の抗ＣＤ１９免疫毒素により送達される放射性核種の用量は、約０．００１ｍＣｉ／Ｋｇから約１０ｍＣｉ／ｋｇの範囲にわたり得る。いくつかの好ましい実施形態では、この放射性核種の用量は、約０．１ｍＣｉ／Ｋｇから約１．０ｍＣｉ／Ｋｇの範囲にわたる。他の好ましい実施形態では、放射性核種の用量（例えば、２２５Ａｃのようなα放射放射性核種）は、約０．００５ｍＣｉ／ｋｇから０．１ｍＣｉ／ｋｇの範囲にわたる。
【００７５】
所定の同位体の最適用量は、当業者に周知の単純な慣用的な滴定実験によって、経験的に決定され得る。
【００７６】
ヒト以外の哺乳動物への（例えば、試験目的または獣医学的治療目的のための）抗ＣＤ１９免疫毒素組成物の投与は、上記と実質的に同じ条件下で実行される。
【００７７】
投与される場合、本発明の薬学的調製物は、薬学的に受容可能な量で、かつ薬学的に受容可能な組成物中で適用される。用語「薬学的に受容可能」とは、活性成分の生物学的活性の効力を妨害しない無毒性の物質を意味する。このような調製物は、慣用的に、塩、緩衝剤、保存剤、適合性のキャリア、および、必要に応じて、他の治療剤を含み得る。医薬において用いられる場合、塩は、薬学的に受容可能であるべきであるが、薬学的に受容可能ではない塩は、その薬学的に受容可能な塩を調製するために便利に用いられ得、そして本発明の範囲から除外されない。このような薬理学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能な塩としては、以下の酸から調製されるものが挙げられるが、これらに限定されない：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、クエン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸など。また、薬学的に受容可能な塩は、ナトリウム塩、カリウム塩またはカルシウム塩のような、アルカリ金属塩またはアルカリ土類塩として調製され得る。
【００７８】
抗ＣＤ１９免疫毒素組成物は、所望される場合、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わされ得る。本明細書中で用いられる場合、用語「薬学的に受容可能なキャリア」とは、ヒトへの投与に適切である、１つ上の適合性の固体または液体のフィラー、希釈剤またはカプセル化物質を意味する。用語「キャリア」とは、活性成分を組合わせて適用を容易にする、天然もしくは合成の有機成分または天然もしくは合成の無機成分を示す。薬学的組成物の成分はまた、所望の薬学的効力を実質的に弱める相互作用が存在しないような様式で、本明細書中の分子と共にかつ互いに混合され得る。
【００７９】
薬学的組成物は、以下を含む、適切な緩衝剤を含み得る：酢酸の塩；クエン酸の塩；ホウ酸の塩；およびリン酸の塩。
【００８０】
薬学的組成物はまた、必要に応じて、適切な保存剤（例えば：塩化ベンザルコニウム；クロロブタノール；パラベンおよびチメロサール）を含み得る。
【００８１】
薬学的組成物は、単位投薬形態で都合よく存在し得、そして薬学分野で周知の方法のいずれかによって調製され得る。全ての方法は、活性な薬剤を、１つ以上の補助成分を構成するキャリアと会合させる工程を包含する。一般的に、組成物は、活性化合物を、液体キャリア、細かく分割された固体キャリア、またはこの両方と会合させて、均一かつ親密に結合し、次いで、必要ならば、製品を形作ることにより調製される。
【００８２】
非経口投与に適切な組成物は、好ましくは、レシピエントの血液と等張である、抗ＣＤ１９免疫毒素の滅菌した水性調製物または滅菌した非水性調製物を都合よく含む。この調製物は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いる公知の方法に従って処方され得る。滅菌した注射可能な調製物はまた、無毒性の非経口的に受容可能な希釈剤または溶媒中の滅菌した注射可能な溶液または滅菌した注射可能な懸濁液（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として）であり得る。用いられ得る受容可能なビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンガー液、および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌した、不揮発性油は、溶媒または懸濁媒体として都合よく用いられる。この目的のために、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含む、任意の無刺激の不揮発性油が用いられ得る。さらに、オレイン酸のような脂肪酸は、注射可能物の調製に用いられ得る。経口投与、皮下投与、静脈内投与、筋肉内投与などに適切なキャリア処方物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡにおいて見出され得る。
【００８３】
（実施例）
（実施例１：抗体の放射標識）
抗ＣＤ１９抗体を、抗体に細胞傷害性放射性核種を付着させるために放射標識する。ＣＤ１９に対する多数のモノクローナル抗体が市販されている。例えば、Ｂ４抗体は、Ｊ４．１１９と命名された抗ＣＤ１９抗体のように、Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｉｎｃ．（Ｍｉａｍｉ，ＦＬ）製のＩｇＧ１形態およびＩｇＧ２ａ形態の両方で利用可能である。それぞれのカタログ番号は、６６０２６８３、６６０３７０８、およびＩＭ１２８３である。他の抗ＣＤ１９抗体は、上記の方法を用いて得られ得る。
【００８４】
種々の技術が、抗体または抗体フラグメントに対して細胞傷害性放射性核種を付着させるために存在する（Ｍａｇｅｒｓｔａｄｔ，Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  Ｄｉｓｅａｓｅ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，１９９１）。選択される方法は、放射性核種の性質に一部依存する。１３１Ｉのような非金属放射性核種は、タンパク質に直接連結され得るが、化学リンカーは、一般的に、９０Ｙおよび２１３Ｂｉのような、金属同位体と共に用いられる。
【００８５】
例として、Ｎａ１３１Ｉ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）を、クロラミンＴ法またはヨードゲン（Ｉｏｄｏｇｅｎ）（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を用いて酸化する。酸化されたハロゲン化物および目的のタンパク質は、製造業者の指示書に従って組み合わされる。２００μｇのタンパク質あたり１ｍＣｉの放射性同位体の割合を、首尾よく用いているが、他の割合を、放射標識タンパク質の比活性を変化させるために用い得る。適切なインキュベーション期間の後、放射標識タンパク質を、ヒト血清アルブミンのような、適切なキャリアタンパク質の存在下もしくは非存在下でのサイズ排除クロマトグラフィー、または任意の他の適切な方法により、遊離の同位体から分離する。この方法において、ハロゲン化物を、チロシンのような芳香族アミノ酸上の求電子性置換反応を介して目的のタンパク質に付着させ得る。
【００８６】
キラルＤＰＴＡ誘導体２−（４−イソチオシアナトベンジル）ジエチレントリアミン五酢酸（ｃｈｉｒａｌ  ＤＴＰＡ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ  ２−（４−ｉｓｏｔｈｉｃｙａｎａｔｏｂｅｎｚｙｌ）ｄｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｒｉａｍｉｎｅ  ｐｅｎｔａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＳＣＮ−ＣＨＸ−Ａ’’−ＤＴＰＡ）を、以前に記載された方法および装置（Ｎｉｋｕｌａら、Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏ．２２：２８７，１９９５；ＭｃＤｅｖｉｔｔら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４０：１７２２，１９９９；Ｎｉｋｕｌａら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４０：１６６，１９９９）を用いて、抗体に結合体化させる。以下の記載において、全ての緩衝液を、金属を含まない水を用いて調製する。さらなる注意として、緩衝液を、Ｃｈｅｌｅｘ−１００（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）イオン交換クロマトグラフィー樹脂に通して、残余の金属をさらに取り除く。
【００８７】
Ｂ４抗体を、最初に、１〜１０ｍＭのＥＤＴＡを含む、適切な緩衝液（例えば、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ  塩化ナトリウム、ｐＨ８．６）に対する透析またはダイアフィルトレーションによって、金属を含まないものにする。次いで、抗体を、ＥＤＴＡの非存在下で、緩衝液に対して透析またはダイアフィルトレーションする。次いで、抗体を、周囲温度で一晩、モル過剰のＳＣＮ−ＣＨＸ−Ａ’’−ＤＴＰＡと接触させる。ＳＣＮ−ＣＨＸ−Ａ’’−ＤＴＰＡを、１０倍〜１００倍モル過剰に添加する。他の割合を、置換の程度を変えるために用い得る。次いで、結合体化した抗体を、適切な緩衝液（例えば、２０ｍＭ  酢酸ナトリウム、１５０ｍＭ  塩化ナトリウム、ｐＨ６．７）に対するさらなる透析またはダイアフィルトレーションによって、非結合体化二官能性キレート剤から分離する。緩衝液のｐＨ、緩衝液の正体、反応時間、反応温度、およびキレート剤：抗体の割合のようなパラメーターは、所定の抗体に最適である反応条件を同定するために変更され得る。
【００８８】
免疫結合体の濃度を、２８０ｎｍの波長でのＵＶ吸光度により決定する。１個の抗体あたりのキレート剤の平均数を、イットリウムアルセナゾ分光光度法（Ｐｉｐｐｉｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．３：３４２−３４５，１９９２）により決定する。代表的な結合の割合は、１個の抗体あたり１〜１０個のキレート剤である。最適な結合の割合は、抗体ごとに変化し得るが、経験的に決定され得る。
【００８９】
ＣＨＸ−Ａ’’−ＤＴＰＡ結合体化抗体は、放射性金属同位体（例えば、１１１Ｉｎおよび９０Ｙ、ならびに２１３Ｂｉ）を用いて効率的に標識され得る。１１１Ｉｎまたは９０Ｙについて、キャリアを含まない同位体（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、３Ｍ酢酸アンモニウムを用いてｐＨ４．５に緩衝化する。抗酸化剤である１−アスコルビン酸を、放射線防御剤として５ｇ／Ｌの最終濃度まで添加する。この同位体を、代表的には、約１〜１００ｍＣｉ／ｍｇの割合で、免疫結合体と組み合わせるが、他の割合を、所望される比活性に依存して用い得る。混合物を、周囲温度で１０〜３０分間インキュベートする。反応を、モル過剰のＥＤＴＡの添加によりクエンチする。放射標識抗体を、１％ＨＳＡのような受容可能な移動相を用いて、１０ＤＧサイズ排除クロマトグラフィーカラム（ＢｉｏＲａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）に通すことによって、遊離の同位体から分離する。免疫結合体は、以前に記載された類似の方法（ＭｃＤｅｖｉｔｔら、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔ．，５０：８９５，１９９９；Ｓｇｏｕｒｏｓら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４０：１９３５，１９９９；ＭｃＤｅｖｉｔｔら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４０：１７２２，１９９９）を使用して、２１３Ｂｉ、２２５Ａｃ、または１７７Ｌｕを用いて標識され得る。
【００９０】
α粒子、２２５Ａｃについて、ＭｃＤｅｖｉｔｔら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９４：１５３７−１５４０，２００１に記載されるように、キレート部分ＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸）の二官能性バージョンを用いて、２２５Ａｃを抗体に安定に結合させ得る。
【００９１】
（実施例２．放射標識抗体のインビトロ試験）
放射標識抗体の免疫反応性を、記載されるように（ＭｃＤｅｖｉｔｔら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４０：１７２２，１９９９）、ＣＤ１９ポジティブヒトＢ細胞株（例えば、Ｒａｍｏｓ、Ｄａｕｄｉ、ＲａｊｉまたはＮａｍａｌｗａ）を用いて決定する。これらの細胞株の各々は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（それぞれ、カタログ番号ＣＲＬ−１５９６、ＣＣＬ−２１３、ＣＣＬ−８６およびＣＲＬ−１４３２）から入手可能である。ＣＤ１９ネガティブヒトＴ細胞株（例えば、ＭＯＬＴ−４またはＳｕｐ−Ｔ１（それぞれ、ＡＴＣＣカタログ番号ＣＲＬ−１５８２およびＣＲＬ−１９４２））を、ネガティブコントロールとして用いる。精製した産物の反応収率および放射化学的純度を、記載されるように（ＭｃＤｅｖｉｔｔら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４０：１７２２，１９９９）、インスタント薄層クロマトグラフィーおよびサイズ排除高圧液体クロマトグラフィーを用いて決定する。９０Ｙおよび１１１Ｉｎのキレート化化学は類似するので、γ放射同位元素を、インビトロ研究における検出を容易にするために９０Ｙの代わりに用い得る。
【００９２】
ＣＤ１９の抗体誘導内部移行を、適切な濃度（例えば、０．１〜１ｍｇ／ｍｌ）で放射標識抗体を、約５×１０４のＣＤ１９ポジティブヒトＢ細胞（例えば、Ｒａｊｉ、Ｒａｍｏｓ、Ｎａｍａｌｗａ）と共に、血清含有培地中で、３７℃にて約２時間インキュベートすることにより測定する。このインキュベーション時間を変更して、内部移行の速度論を決定し得る。細胞を、遠心分離によりペレット化し、次いで、培地で洗浄する。表面結合放射標識抗体を、ｐＨ２．８のグリシン緩衝液を用いて、約１０分間、周囲温度で剥ぎ取る。細胞に関係する放射能および酸耐性（内部移行した）放射能の合計を、目的の同位体について適切なように、γ計数またはβ計数により決定する。
【００９３】
内部移行した抗体の細胞内局在を調べるために、細胞小器官を、パーコール勾配で分画して、内部移行した放射能が、低密度表面膜画分を標的とするのか、高密度リソソーム画分を標的とするのかを同定する。簡単には、細胞を、飽和濃度の放射標識ｍＡｂと共に、４℃にてインキュベートし、洗浄し、次いで、３７℃にて０〜２４時間インキュベートする。次いで、細胞のアリコート（５０×１０６細胞）を、ＴＥＳ緩衝液（１０ｍＭトリエタノールアミン、ｐＨ７．５）中に懸濁し、Ｄｏｕｎｃｅホモジナイザーを用いて破壊し、そして２５０×ｇで沈降させて、核および破壊されていない細胞を取り除く。上清（１ｍｌ）を、ＴＥＳ緩衝液（９ｍｌ）中のパーコールの２０％溶液の表面上に重層し、そして４℃にて、２０，０００×ｇで６０分間遠心分離する。連続する０．５ｍｌ画分を、収集し、そして放射能およびリソソームβ−ガラクトシダーゼ活性についてアッセイする。
【００９４】
放射標識抗体の分解および異化を調べるために、抗体およびＣＤ１９ポジティブ細胞を、３７℃にて種々の時間（例えば、０時間、２時間、４時間、８時間、２８時間、４８時間、および７２時間）で組合わせ、そして培養上清（０．２ｍｌ）を０．５ｍｌの２５％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）と混合して、細胞から放出されたタンパク質結合放射能を沈殿させる。次いで、沈殿を、０．５ｍｌの２５％ＴＣＡで洗浄し、そしてペレット中の放射能（ＴＣＡ不溶性）および上清の放射能（ＴＣＡ可溶性）を決定する。このＴＣＡ不溶性部分は、上清中にインタクトな形態で脱落する標識抗体結合体を表し、そしてＴＣＡ可溶性部分は、腫瘍細胞により異化および排出された、タンパク質を含まない放射能を表す。
【００９５】
インビトロでの細胞傷害性を、記載されるように（Ｎｉｋｕｌａら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４０：１６６，１９９９；ＭｃＤｅｖｉｔｔら、前出、２００１）、２２５Ａｃおよび２１３Ｂｉのような、α粒子放射同位元素を用いて標識した抗体について容易に試験し得る。１ウェルあたり５０，０００個の標的細胞（ＣＤ１９−ポジティブ細胞（例えば、Ｒａｍｏｓ）およびＣＤ１９ネガティブコントロール細胞（例えば、Ｍｏｌｔ−４））を、２２５Ａｃ標識構築物および２１３Ｂｉ標識構築物と共に、９６ウェルプレート中で、３７℃にて５％ＣＯ２中２４〜９６時間処理し、この時点で、細胞生存率を、ＭＴＴアッセイおよび／またはＨ−３チミジンアッセイの取り込みにより評価する。細胞障害性を、１Ｍ  ＨＣｌ（１００％の細胞殺傷）および培地（バックグラウンドの細胞殺傷）を用いて見られた細胞障害性に対して表す。特異性を、コントロール細胞、コントロール放射性結合体、および過剰な非標識抗ＣＤ１９抗体の使用によって決定する。抗体濃度、比活性、活性濃度、および曝露の時間の効果を評価し得る。次いで、種々の比活性での細胞殺傷を、合計の核種、表面核種および内部移行した核種、ならびに抗ＣＤ１９結合体の代謝および細胞内局在と相関させ得る。ＬＤ５０値を、細胞上に結合した２２５Ａｃ原子および／または２１３Ｂｉ原子の数の関数として、細胞生存率をプロットすることによって、計算する。
【００９６】
２２５Ａｃの放射性核種崩壊は、ＭｃＤｅｖｉｔｔら、前出、２００１により記載されるように、γスペクトル分析法によりモニターされ得る、２つの娘放射性核種、２２１Ｆｒおよび２１３Ｂｉを生じる。
【００９７】
（実施例３：Ｂ細胞悪性疾患に対する抗ＣＤ１９抗体のインビボ活性）
ヒトＢ細胞リンパ腫の多数の動物モデルが、免疫治療剤の評価のために開発されている（Ｇｈｅｔｉｅら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，４５：４８１，１９９０；Ｓｈａｈら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，５３：１３６０，１９９３）。これらは、ＳＣＩＤマウスへの、Ｒａｍｏｓのようなヒトリンパ腫細胞株のｉ．ｖ．接種およびｉ．ｍ．接種の後に生じた播種性腫瘍モデルおよび固形腫瘍モデルの両方を含む。
【００９８】
１つの固形腫瘍モデルは、Ｒａｍｏｓ細胞を用いる。雌性ＳＣＩＤマウス（体重１８〜２４ｇ）を、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）または他の供給元から購入する。マウスに、１０６〜１０７個のＲａｍｏｓ腫瘍細胞を、後側腹部に筋肉内注射する。腫瘍が予定のサイズ（約１ｃｍ２）に達した時、マウスを、上記のように放射標識するか、または標識しないかのいずれかの、抗ＣＤ１９抗体またはコントロール抗体を用いて処置する。用量は、９０Ｙ標識抗体または２１３Ｂｉ標識抗体について、約１０ｍＣｉ／ｋｇ以上までの範囲にわたり得るが、最適な用量は、各々の場合において経験的に決定されなければならない。この動物の群を、一用量または多用量の薬物を用いて処置する。動物の健康状態を、毎日またはそれよりも頻繁にモニターする。マウスが重度の病気であると考えられる場合、または腫瘍サイズが約３ｃｍ２を超える場合、このマウスを屠殺する。治療群の間の統計学的差異を、分散分析（ＡＮＯＶＡ）法を用いて分析したデータから決定し、そして動物の生存データを、Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒプロットを用いて図示する。代表的には、０．０５未満のｐ値は、有意であると考えられる。
【００９９】
播種性腫瘍モデルは、ＤａｕｄｉヒトＢ細胞株を用いる。雌性ＳＣＩＤマウス（体重１８〜２４ｇ）を、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）または他の供給元から購入する。マウスに、１０６〜１０７個のＤａｕｄｉ腫瘍細胞を、尾静脈にて静脈内注射する。注射の約２４時間後に始めて、動物を、１以上の用量の放射標識抗体を用いて処置する。用量は、９０Ｙ標識抗体または２１３Ｂｉ標識抗体について約１０ｍＣｉ／ｋｇ以上までの範囲にわたり得るが、最適な用量は、各々の場合において経験的に決定されなければならない。動物の健康状態を、毎日またはより頻繁にモニターし、動物が重度の病気になった場合、この動物を安楽死させる。治療群の間の統計学的差異を、分散分析（ＡＮＯＶＡ）法を用いて分析したデータから決定し、そして動物の生存データを、Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒプロットを用いて図示する。代表的には、０．０５未満のｐ値は、有意であると考えられる。
【０１００】
腫瘍モデルを、腫瘍への放射標識ｍＡｂの送達が、非標識ｍＡｂの事前投薬により改善され得るか否かを試験するために改変し得る。リンパ腫異種移植片を有するＳＣＩＤマウスに、非標識抗体（代表的には、５〜１００μｇ）の事前の単回注射の有りまたは無しで、放射標識抗ＣＤ１９抗体（代表的には＜１μｇ）を注射する。数日後、動物を、腫瘍、正常組織、および血液における放射能の分布の評価のために屠殺する。非標識ｍＡｂの事前投薬が、放射標識ｍＡｂの異種移植片への送達および標的化を改善する場合、このアプローチを、さらなる前臨床試験および臨床試験に適用および最適化し得る。
【０１０１】
用量範囲研究は、正常なマウスおよび腫瘍保有マウスに対して静脈内経路または他の経路を介して投与される時の、放射標識抗体の毒性を決定するために行われる。動物を、外見、体重変化、腫瘍サイズ、および生存率についてモニターする。動物を、研究の間または研究の終りに屠殺して、組織病理学および評価のために血液および身体組織を収集する。
【０１０２】
（実施例４：Ｂ細胞悪性疾患に対する２２５Ａｃ抗ＣＤ１９抗体の使用）
（方法）
（構築物の調製）
これらの研究に用いられる放射標識［２２５Ａｃ］ＤＯＴＡ−ＩｇＧ複合体を、２工程標識方法を用いて調製する。用いられる抗ＣＤ１９抗体としては、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１、およびＣＬＢ−ＣＤ１９が挙げられる。２工程標識方法を用いる。この方法は、ｍＣｉ量の２２５Ａｃ（および１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ）標識ＤＯＴＡ−ＳＣＮ種を、２Ｍ酢酸緩衝液を用いて、５５℃〜６０℃にて３０分間、ｐＨ４．５〜５で、高収率で調製することを可能にする。引き続いて、［２２５Ａｃ］ＤＯＴＡ−ＳＣＮを、ＩｇＧおよび１Ｍ炭酸緩衝液と混合して、３７℃にて３０分間、８．５〜９にｐＨを調整する。最終生成物を、１０ｍｌ  ＢｉｏＲａｄ  １０ＤＧカラムおよび１％ヒト血清アルブミン（ＨＡＳ）を用いる、サイズ排除クロマトグラフィーにより精製する。代表的な反応は、これらの研究について、十分な量の安定な２２５Ａｃ標識薬物を提供する。このようにして、調製した構築物を、標識ＩｇＧ、遊離の［２２５Ａｃ］キレートおよび非結合２２５Ａｃを定量する確立されたＩＴＬＣ法、ならびに細胞ベースの免疫反応性アッセイ［Ｎｉｋｕｌａら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．４０，１６６−１７６（１９９９）］を用いてアッセイする。
【０１０３】
（二工程標識プロセスを用いる２つの異なるＤＯＴＡの評価）
２つの異なるＤＯＴＡ分子を、上記のように、２２５Ａｃ抗ＣＤ１９抗体構築物の調製のために評価する：ＭｅＯ−ＤＯＴＡ−ＮＣＳ、［（５−イソチオシアナト−２−メトキシフェニル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸］、ＣＡＳ登録番号１３０７０７−７９−８；２Ｂ−ＤＯＴＡ、［２−（ｐ−イソチオシアナトベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸］、ＣＡＳ登録番号１２７９８５−７４−４。これらのＡｃキレートの化学的性質、安定性、または生体分布において有意な差異は観察されなかった。
【０１０４】
（インビトロ安定性の評価）
同様に調製した［２２５Ａｃ］ＤＯＴＡ−抗ＣＤ１９構築物および［１７７Ｌｕ］ＤＯＴＡ抗ＣＤ１９構築物のインビトロでの安定性を、１００％ヒト血清（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、１００％マウス血清、および２５％ヒト血清アルブミン（Ｓｗｉｓｓ  Ｒｅｄ  Ｃｒｏｓｓ，Ｂｅｒｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）において、３７℃にて１５日間で決定する。［２２５Ａｃ］−抗ＣＤ１９または［１７７Ｌｕ］抗ＣＤ１９のいずれかの０．２０ｍｌのアリコートを、これらの培地の各々の４．０ｍｌに添加する。引き続いた時間点で、０．０５ｍｌを６つのサンプルから取り出し、そして０．０１ｍｌの１０ｍＭジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）と、３７℃にて１５分間混合する。この１５分のインキュベーション時間の後、アリコートを取り出し、そしてシリカゲルを含浸させたインスタント薄層クロマトグラフィー紙（Ｇｅｌｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｃ．，Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ，ＭＩ）上にスポットし、そして０．０１Ｍ  ＥＤＴＡ溶液を用いて展開する（三連の分析）。ストリップを乾燥し、そして、４日後に、ガス電離検出器（Ａｍｂｉｓ  ４０００，Ａｍｂｉｓ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いて計数する。１００％マウス血清および２５％ヒト血清アルブミン中の同一の２つの構築物についての方法および値は、１００％ヒト血清における方法および値と実質的に同一である。
【０１０５】
（インビボ安定性の評価）
インビボ安定性を、１０匹の雌性ヌードマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ，Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）に、０．１２ｍｌ中３００ｎＣｉの［２２５Ａｃ］ＤＯＴＡ−抗ＣＤ１９を、尾静脈ｉ．ｖ．経路を介して注射することにより決定する。この目的は、マウス血清中の抗ＣＤ１９に結合した、２２５Ａｃの百分率を、時間の関数として決定することである。ＩｇＧ結合２２５Ａｃを、プロテインＡ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＣＬ−４８（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）沈殿アッセイを用いて決定する。結果をまた、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて確認する。このＨＰＬＣ分析を、Ｂｉｏｓｃａｎ  Ｆｌｏｗｃｏｕｎｔ（Ｂｉｏｓｃａｎ  Ｉｎｃ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ）を備えるＲａｉｎｅｎ  ＨＰＬＸシステム（Ｒａｉｎｅｎ，Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）を用いて実行する。固定相は、３００ｍｍ、７．８ｍｍ  ＴＳＫ  ３０００ＳＷＸＬサイズ排除カラム（Ｓｕｐｅｌｃｏ，Ｂｅｌｌｅｆｏｎｔｅ，ＰＡ）であり、そして移動相は、０．１５Ｍ  塩化ナトリウム／０．０２Ｍ酢酸ナトリウム（ｐＨ６．５）である。画分を、手動で収集し、そしてＢｅｃｋｍａｎ  ＬＳ  ６０００ＩＣβシンチレーションカウンター（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）を用いて計数する。さらに、血清中の２２５Ａｃ抗ＣＤ１９の免疫反応性画分を、細胞ベースのアッセイを用いて決定する。
【０１０６】
血清中の２２５Ａｃ種のＨＰＬＣ分析はまた、注射した本来の薬物のサンプルと比較した、血清サンプル中の成分の観察された保持時間に基づいて、この２２５Ａｃ種は、抗ＣＤ１９ＩｇＧと会合し、そして他の血清タンパク質に対してトランスキレート化（ｔｒａｎｓｃｈｅｌａｔｅ）しないことを示す。抗ＣＤ１９に結合した２２５Ａｃは、５日間にわたるマウスへの注射の後でも、ＩｇＧと会合したままであり、このことは、インビボでの薬物の安定性を実証する。
【０１０７】
（内部移行した放射性核種の決定）
内部移行した放射性核種の量を決定するための方法は、以下のとおりである。このアッセイを、２％のヒト血清の存在下で行う。Ｂ細胞を、抗ＣＤ１９抗体（例えば、Ｂ４、ＨＤ３７、ＢＵ１２、４Ｇ７、Ｊ４．１１９、Ｂ４３、ＳＪ２５Ｃ１、またはＣＬＢ−ＣＤ１９（抗体−対−抗原過剰））に結合した［２２５Ａｃ］を用いて、９０分間処理し、ペレット化し、そして氷冷ＰＢＳで３回洗浄し、次いで、新鮮な培地に、３７℃にて５時間、再懸濁する。この５時間のインキュベーションの後、細胞をペレット化し、氷冷ＰＢＳで３回洗浄する。１ｍｌの５０ｍＭグリシン（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｉｎｃ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）／１５０ｍＭ  ＮａＣｌ（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｉｎｃ．）（ｐＨ２．８）を用いて、２４℃にて１０分間、外表面結合［２２５Ａｃ］抗ＣＤ１９抗体を、ペレット化細胞から剥ぎ取る。表面結合放射能および内部移行放射能の組成を、異なる時間で、２つのエネルギーウィンドウ（１８５〜２５０ｋｅＶウィンドウ内の２２１Ｆｒおよび３６０〜４８０ｋｅＶウィンドウ中の２１３Ｂｉ）を使用する、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｃｏｂｒａ  Ｇａｍｍａ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）を用いて、サンプルを繰返し計数することによって、決定する。
【０１０８】
（等価物）
本明細書中に開示される全ての参考文献は、参考として援用される。
【０１０９】
当業者は、本明細書中に記載される本発明の特定の実施形態に対する多くの等価物を認識するか、または慣用を超えない実験を用いて確認し得る。このような等価物は、添付の特許請求の範囲により包含されることが意図される。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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