(57)【要約】本発明は、炎症性疾患、心血管疾患、及び癌を含む疾患及び状態の治療における剤として有用な、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＬが明細書中でそれについて定義される値のいずれかを有する式Ｉのベンゾ［ｂ］チオフェン及びその医薬として許容される塩を提供する。１以上の式Ｉの化合物を含む医薬組成物もまた提供される。
2006526614.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物：
【化１】
2006526614.tif 000038
｛式中、Ｒ2及びＲ3は：
（ｉ）Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はＨ、メチル、メトキシ及びＣＨ3ＯＣＨ2−から成る群から選ばれる；
（ｉｉ）Ｒ2はメチルである、及びＲ3はメトキシである；
（ｉｉｉ）Ｒ2はエトキシである、及びＲ3はＨである
から成る群から選ばれる；
ここで、Ｌは不在、−ＣＨ2ＣＨ2−、Ｃ1−Ｃ4アルキレン又は
【化２】
2006526614.tif 000039
である；
ここで、Ｒ1は：フェニル、フラニル、５−員ヘテロアリール、及びベンゾ［１，３］ヂオキソリルから成る群から選ばれる場合により置換される基である、
ここで、前記場合により置換される基は：
−ＣＮ、Ｂｒ、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＦ3、−ＯＨ、−ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ3、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｏ−Ｃ1−Ｃ3アルキル、Ｏ−ＣＨ3、−Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、及び−ＣＨ2ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ
から成る群から独立に選ばれる１、２又は３の置換基を有しうる｝
又はその医薬として許容される塩。
【請求項２】
Ｒ1は場合により置換されるフェニルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はＨ、メチル、メトキシ及びＣＨ3ＯＣＨ2−から成る群から選ばれる、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
前記化合物は：
３−（４−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
５−メトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−（４−イソプロピル−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−（４−ヂメチルアミノ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−安息香酸；
｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸；
３−｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸；
５−メトキシ−６−メチル−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；及び
５−メトキシ−６−メチル−３−フェネチルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
から成る群から選ばれる、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
前記化合物は：
３−（２，５−ヂメトキシ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−［５，６−ヂメトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−安息香酸メチルエステル；
５，６−ヂメトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；及び
５，６−ヂメトキシ−３−フェネチルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
から成る群から選ばれる、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
前記化合物は５−メトキシ−６−メトキシメチル−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミドである、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
前記化合物は５−メトキシ−３−ｏ−トリスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミドである、請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ2はメチルである、及びＲ3はメトキシである、請求項２に記載の化合物。
【請求項９】
前記化合物は：
３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
６−メトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
４−［６−メトキシ−５−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニルメチル］−安息香酸；及び
３−［２−（アセチル−メチル−アミノ）−１−フェニル−プロピルスルファニル］−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
から成る群から選ばれる、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害を患う患者に、治療的に有効な量の請求項１に記載の化合物及び医薬として許容される担体を含む医薬組成物を投与すること：
を含むＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態を患う患者の治療方法。
【請求項１１】
前記ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害は：
慢性関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、乾癬、炎症性疾患、自己免疫疾患、呼吸疾患、気管支炎、喘息、及び慢性閉塞性肺疾患
から成る群から選ばれる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害は：
癌、結腸癌、グリア芽細胞腫、子宮内膜癌腫、肝細胞癌、肺癌、黒色腫、腎細胞癌腫、甲状腺癌腫、細胞リンパ腫、リンパ球増殖性障害、小細胞肺癌、扁平上皮細胞肺癌腫、グリオーム、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、頸部の癌、及び白血病
から成る群から選ばれる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物は請求項１〜９のいずれか１に記載の化合物である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
治療的に有効な量の請求項１に記載の化合物及び医薬として許容される担体：
を含む医薬組成物。
【請求項１５】
治療的に有効な量の請求項１〜９のいずれか１に記載の化合物及び医薬として許容される担体：
を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願へのクロスリファレンス
本願は、その教示を本明細書中に援用する、２００３年６月５日出願の米国仮特許出願番号６０／４７６，０５７号の利益を請求する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
フォスフォイノシチド−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋｓ）は３’−ＯＨ上でフォスフォイノシトールをリン酸化し、ＰＩ−３−Ｐ（フォスファチヂルイノシトール３−リン酸）、ＰＩ−３，４−Ｐ２及びＰＩ−３，４，５−Ｐ３を生成する脂質キナーゼのファミリーである。１のクラスのＰＩ３Ｋｓは成長因子により刺激される。別のクラスのＰＩ３ＫｓはＧ−タンパク質連結型受容体により活性化され、及びＰＩ３Ｋγを含む。上記成長因子に刺激されたＰＩ３Ｋｓ（例えば、ＰＩ３Ｋα）は細胞増殖及び癌に関連している。ＰＩ３Ｋγはシグナルカスケードに関連していることが示されている。例えば、ＰＩ３ＫγはＣ５ａ、ｆＭＬＰ、ＡＤＰ、及びＩＬ−８の如きリガンドに応答して活性化される。さらに、ＰＩ３Ｋγは免疫疾患に関連している（Ｈｉｒｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０００；２８７：１０４９−１０５３）。ＰＩ３Ｋγナルマクロファージは減少した走化性応答及び炎症と闘う減少した能力を示す（Ｈｉｒｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，上記）。さらに、ＰＩ３Ｋγはまた血栓崩壊性疾患（例えば、血栓塞栓症、虚血性疾患、心臓発作、及び卒中）にも関連している（Ｈｉｒｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ．  ２０００；１５（１１）：２０１９−２０２１；及びＨｉｒｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．  ＦＡＳＥＢ  Ｊ．，  Ｊｕｌｙ  ９  ２００１；１０．１０９６／ｆｊ．００−０８１０ｆｊｅ（Ｈｉｒｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１として本明細書中に引用される））。
【０００３】
ＰＩ３Ｋｓのメンバーの阻害剤はヒト疾患の治療のために開発されている（例えば、ＷＯ  ０１／８１３４６；ＷＯ  ０１／５３２６６；及びＷＯ  ０１／８３４５６を参照のこと）。医薬剤としての使用のためのＰＩ３Ｋｓを阻害しうる追加の化合物について要求がある。
【発明の開示】
【０００４】
発明の要約
１の局面において、本発明は式Ｉのベンゾ［ｂ］チオフェン：
【化１】
2006526614.tif 000003
又はその医薬として許容される塩を提供する；
ここで、Ｒ2及びＲ3は：
（ｉ）Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はＨ、メチル、メトキシ及びＣＨ3ＯＣＨ2−から成る群から選ばれる；
（ｉｉ）Ｒ2はメチルである、及びＲ3はメトキシである；
（ｉｉｉ）Ｒ2はエトキシである、及びＲ3はＨである
から成る群から選ばれる；
ここで、Ｌは不在、−ＣＨ2ＣＨ2−、Ｃ1−Ｃ4アルキレン又は
【化２】
2006526614.tif 000004
である；
ここで、Ｒ1は：フェニル、フラニル、５−員ヘテロアリール、及びベンゾ［１，３］ヂオキソリルから成る群から選ばれる場合により置換される基である、
ここで、前記場合により置換される基は：
−ＣＮ、Ｂｒ、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＦ3、−ＯＨ、−ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ3、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｏ−Ｃ1−Ｃ3アルキル、Ｏ−ＣＨ3、−Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、及び−ＣＨ2ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）ＯＨから成る群から独立に選ばれる１、２又は３の置換基を有しうる。
【０００５】
式Ｉのある態様において、Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はメチルである−式ＩＩの化合物：
【化３】
2006526614.tif 000005
。
【０００６】
式ＩＩのある態様において、Ｒ1は場合により置換されるフェニルである。式ＩＩの他の態様において、Ｒ1は置換されないフェニルである。式ＩＩの化合物の例は、非限定的に：
３−（４−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
５−メトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−（４−イソプロピル−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−（４−ヂメチルアミノ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−安息香酸；
｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸；及び
３−｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸
を含む。
【０００７】
式ＩＩの化合物の例はまた：
５−メトキシ−６−メチル−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；及び
５−メトキシ−６−メチル−３−フェネチルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
を含む。
【０００８】
式Ｉのある態様において、Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はメトキシである−式ＩＩＩの化合物：
【化４】
2006526614.tif 000006
。式ＩＩＩのある態様において、Ｒ1は場合により置換されるフェニルである。式ＩＩＩの他の態様において、Ｒ1は置換されないフェニルである。式ＩＩＩの化合物の例は、非限定的に：
３−（２，５−ヂメトキシ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
３−［５，６−ヂメトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−安息香酸メチルエステル；
５，６−ヂメトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；及び
５，６−ヂメトキシ−３−フェネチルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
を含む。
【０００９】
式Ｉのある態様において、Ｒ2はメチルである、及びＲ3はメトキシである−式ＩＶの化合物：
【化５】
2006526614.tif 000007
。
【００１０】
式ＩＶのある態様において、Ｒ1は場合により置換されるフェニルである。式ＩＶの他の態様において、Ｒ1は置換されないフェニルである。式ＩＶの化合物の例は、非限定的に：
３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
６−メトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
４−［６−メトキシ−５−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニルメチル］−安息香酸；及び
３−［２−（アセチル−メチル−アミノ）−１−フェニル−プロピルスルファニル］−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
を含む。
【００１１】
式Ｉのある態様において、Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はＣＨ3−Ｏ−ＣＨ2−である−式Ｖの化合物：
【化６】
2006526614.tif 000008
。
【００１２】
式Ｖのある態様において、Ｒ1は場合により置換されるフェニルである。式Ｖの他の態様において、Ｒ1は置換されないフェニルである。式Ｖの化合物の例は：
５−メトキシ−６−メトキシメチル−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
である。
【００１３】
式Ｉのある態様において、Ｒ2はエトキシである、及びＲ3はＨである−式ＶＩの化合物：
【化７】
2006526614.tif 000009
。
【００１４】
式ＶＩのある態様において、Ｒ1は置換されるフェニルである。式ＶＩの他の態様において、Ｒ1は置換されないフェニルである。式ＶＩの化合物の例は、非限定的に：
５−エトキシ−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
５−エトキシ−３−フェネチルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；
｛４−［５−エトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸；及び
３−｛４−［５−エトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸
を含む。
【００１５】
式Ｉのある態様において、Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はＨである−式ＶＩＩの化合物：
【化８】
2006526614.tif 000010
。
【００１６】
式ＶＩＩのある態様において、Ｒ1は場合により置換されるフェニルである。式ＶＩＩの他の態様において、Ｒ1は置換されないフェニルである。式ＶＩＩの化合物の例は：
５−メトキシ−３−ｏ−トリスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
である。
【００１７】
式Ｉのある態様において、Ｒ1は置換されるフェニルである−式ＶＩＩＩの化合物：
【化９】
2006526614.tif 000011
ここで、Ｒ6は：
Ｂｒ、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＦ3、−ＯＨ、−ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ3、Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｏ−Ｃ1−Ｃ3アルキル、Ｏ−ＣＨ3、−Ｎ（ＣＨ3）2、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ2ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ3、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、及び−ＣＨ2ＣＨ2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ
から成る群から独立に選ばれる１、２又は３の置換基である。式ＶＩＩＩのある態様において、Ｒ2又はＲ3はメトキシである。式ＶＩＩＩの他の態様において、Ｌは不在、−ＣＨ2ＣＨ2−、Ｃ1−Ｃ4アルキレン又は
【化１０】
2006526614.tif 000012
である。式ＶＩＩＩの化合物の例は３−（２，５−ヂメトキシ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
である。
【００１８】
ある態様において、Ｒ1は置換されないフェニルである−式ＩＸの化合物：
【化１１】
2006526614.tif 000013
ここで、Ｌは−ＣＨ2ＣＨ2−、Ｃ2−Ｃ4アルキレン又は
【化１２】
2006526614.tif 000014
である。
【００１９】
式ＩＸのある態様において、Ｒ2はメトキシである、及びＲ3はメトキシである。式ＩＸの化合物の例は、非限定的に：
５−メトキシ−６−メチル−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド；及び
５−メトキシ−６−メチル−３−フェネチルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド
を含む。
【００２０】
他の局面において、本発明は治療的に有効な量の式Ｉ〜ＩＸの化合物及び医薬として許容される担体を含む医薬組成物を提供する。ある態様において、これらの組成物はＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態の治療において有用である。本発明に係る化合物はまた癌、血栓崩壊性疾患、心疾患、卒中、慢性関節リウマチの如き炎症性疾患又は他のＰＩ３Ｋ仲介障害の治療のために有用な化合物をも含む医薬組成物中に混合されうる。
【００２１】
他の局面において、本発明は：ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害を患う患者に、治療的に有効な量の式Ｉ〜ＩＸの化合物及び医薬として許容される担体を含む医薬組成物を投与することを含む、ＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態を患う患者の治療方法を提供する。ある態様において、ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害は：慢性関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、乾癬、炎症性疾患、及び自己免疫疾患から成る群から選ばれる。他の態様において、上記ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害は：心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高血圧、深層静脈血栓症、卒中、心筋梗塞、不安定なアンギナ、血栓塞栓症、肺の塞栓症、血栓崩壊性疾患、急性動脈虚血、末梢血栓閉塞、及び冠状動脈疾患から成る群から選ばれる。また他の態様において、上記ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害は：癌、結腸癌、グリア芽細胞腫、子宮内膜癌腫、肝細胞癌、肺癌、黒色腫、腎細胞癌腫、甲状腺癌腫、細胞リンパ腫、リンパ球増殖性障害、小細胞肺癌、扁平上皮細胞肺癌腫、グリオーム、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、頸部の癌、及び白血病から成る群から選ばれる。さらに他の態様において、上記ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害は：ＩＩ型糖尿病から成る群から選ばれる。また他の態様において、上記ＰＩ３Ｋ仲介状態又は障害は：呼吸疾患、気管支炎、喘息、及び慢性閉塞性肺疾患から成る群から選ばれる。ある態様において、上記患者はヒトである。
【００２２】
定義
本明細書中で使用されるとき、以下の用語は別段の定めなき限り、それらに帰する意味を有する。
【００２３】
「ＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態」は障害又は状態の発端、１以上の症状又は疾患マーカーの発現、重篤さ又は進行における１以上のＰＩ３Ｋｓ又はＰＩ３Ｐリン酸（例えば、ＰＴＥＮ等）の参加により特徴付けられる。ＰＩ３Ｋ仲介障害及び状態は、非限定的に：慢性関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、乾癬、炎症性疾患、肺の線維症、自己免疫疾患、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高血圧、深層静脈血栓症、卒中、心筋梗塞、不安定なアンギナ、血栓塞栓症、肺の塞栓症、血栓崩壊性疾患、急性動脈虚血、末梢血栓閉塞、冠状動脈疾患、癌、乳癌、グリア芽細胞腫、子宮内膜癌腫、肝細胞癌腫、結腸癌、肺癌、黒色腫、腎細胞癌腫、甲状腺癌腫、小細胞肺癌、扁平上皮細胞肺癌腫、グリオーム、前立腺癌、卵巣癌、頸部の癌、白血病、細胞リンパ腫、リンパ球増殖性障害、ＩＩ型糖尿病、呼吸疾患、気管支炎、喘息、及び慢性閉塞性肺疾患を含む。
【００２４】
ＰＩ３Ｋはフォスフォイノシトールの３’−ＯＨをリン酸化し、ＰＩ３Ｐを生成することができる酵素である。ＰＩ３Ｋｓは、非限定的に、ＰＩ３Ｋα、ＰＩ３Ｋβ、ＰＩ３Ｋγ、及びＰＩ３Ｋδを含む。ＰＩ３Ｋは典型的に少なくとも１の触媒サブユニット（例えば、ｐ１１０γ）を含み、及び制御サブユニット（例えば、ｐ１０１等）をさらに含みうる。
【００２５】
上記用語「アルキル基」又は「アルキル」は直鎖の又は有枝鎖の炭素鎖ラヂカルを含む。上記用語「アルキレン」は置換されない又は置換されるアルカンのヂラヂカルをいう。例えば、「Ｃ1-6アルキル」は１〜６の炭素原子を有するアルキル基である。直鎖のアルキル基の例は、非限定的に、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル等を含む。有枝鎖のアルキル基の例は、非限定的に、イソプロピル、第三−ブチル、イソブチル等を含む。アルキレン基の例は、非限定的に、−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−、及び−（ＣＨ2）1-6を含む。アルキレン基はアルキルについて以下に示される基で置換されうる。
【００２６】
さらに、上記用語アルキルは「置換されないアルキル」及び「置換されるアルキル」の両方を含み、そのうちの後者は炭化水素骨格の１以上の炭素上の水素を置換する（例えば、１、２、３、４、５又は６の炭素上の水素を置換する）置換基を有するアルキル基をいう。上記置換基は、非限定的に、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル、Ｃ2−Ｃ6−アルキニル、ハロ、Ｉ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、スルフヒドリル、（Ｃ1−Ｃ6−アルキル）Ｓ−、Ｃ1−Ｃ6−アルキルスルフィニル、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、−ＮＨ2、＝Ｏ、＝Ｓ、＝Ｎ−ＣＮ、＝Ｎ−ＯＨ、−ＯＣＨ2Ｆ、−ＯＣＨＦ2、−ＯＣＦ3、−ＳＣＦ3、−ＳＯ2−ＮＨ2、Ｃ1−Ｃ6−アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ2、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）2、−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ2、−Ｃ（Ｏ）−Ｈ、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−Ｃ（Ｓ）−（Ｃ1−Ｃ6アルキル）、−ＮＲ70Ｒ72を含みうる、ここで、Ｒ70及びＲ72はＨ、Ｃ1−Ｃ6−アルキル、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル、Ｃ2−Ｃ6−アルキニル、及びＣ（Ｏ）−Ｃ1−Ｃ6−アルキルからそれぞれ独立に選ばれる。
【００２７】
典型的な置換されるアルキル基はしたがってアミノメチル、２−ニトロエチル、４−シアノブチル、２，３−ヂクロロペンチル、及び３−ヒドロキシ−５−カルボキシへキシル、２−アミノエチル、ペンタクロロエチル、トリフルオロメチル、２−ヂエチルアミノエチル、２−ヂメチルアミノプロピル、エトキシカルボニルメチル、メタニルスルファニルメチル、メトキシメチル、３−ヒドロキシペンチル、２−カルボキシブチル、４−クロロブチル、及びペンタフルオロエチルである。
【００２８】
「アルコキシ」は酸素をとおして結合される上記に挙げられるアルキル基をいい、その例はメトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、第三−ブトキシ等を含む。さらに、アルコキシはＯ−（ＣＨ2）2−Ｏ−ＣＨ3等の如きポリエーテルをいう。上記用語「アルコキシ」は置換される及び置換されないアルコキシ基の両方を含むと意図される。アルコキシ基はアルキルについて上記に示されるものの如き基で炭素原子上で置換されうる。典型的な置換されるアルコキシ基はアミノメトキシ、トリフルオロメトキシ、２−ヂエチルアミノエトキシ、２−エトキシカルボニルエトキシ、３−ヒドロキシプロポキシ等を含む。
【００２９】
「ハロ」はフルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードを含む。
「アルケニル」は２以上の炭素原子を有する及び少なくとも１の炭素−炭素二重結合を含む直鎖の及び有枝鎖の炭化水素ラヂカルを意味し、及びエテニル、３−ブテン−１−イル、２−エテニルブチル、３−ヘキセン−１−イル等を含む。上記用語「アルケニル」は置換される及び置換されないアルケニル基両方を含むと意図される。「Ｃ2−Ｃ6−アルケニル」は２〜６の炭素原子を有するアルケニル基である。アルケニル基はアルキルについて上記に示されるものの如き基で置換されうる。上記用語「アルケニレン」は置換される又は置換されないアルケンのヂラヂカルをいう。アルケニレン基の例は、非限定的に、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−、及び−（ＣＨ2）1-6−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−を含む。
【００３０】
「アルキニル」は２以上の炭素原子を有する及び少なくとも１の炭素−炭素三重結合を含む直鎖の及び有枝鎖の炭化水素ラヂカルを意味し、及びエチニル、３−ブチン−１−イル、プロピニル、２−ブチン−１−イル、３−ペンチン−１−イル等を含む。上記用語「アルキニル」は置換される及び置換されないアルキニル基の両方を含むと意図される。アルキニル基はアルキルについて上記に示されるものの如き基で置換されうる。ある態様において、直鎖の又は有枝鎖のアルキニル基はその骨格中に６以下の炭素原子を有する（例えば、直鎖についてＣ2−Ｃ6、有枝鎖についてＣ3−Ｃ6）。上記用語Ｃ2−Ｃ6は２〜６の炭素原子を含むアルキニル基を含む。上記用語「アルキニレン」は置換される又は置換されないアルキンのヂラヂカルをいう。アルキニレン基の例は、非限定的に、−ＣＨ≡ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−、及び−（ＣＨ2）1-6−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−を含む。
【００３１】
アリール基は芳香族炭化水素ラヂカルである。さらに、上記用語「アリール」は多環状アリール基、例えば、ナフチルの如き二環状アリール基を含む。典型的なアリール基はフェニル、及びナフチルを含む。フェニルは、非限定的に、アルキルについて上記に示されるそれらの置換基の如き置換基で１以上の位置で置換されない又は置換されうる。典型的な置換されるフェニル基は、非限定的に、３−クロロフェニル、２，６−ヂブロモフェニル、２，４，６−トリブロモフェニル、２，６−ヂクロロフェニル、４−トリフルオロメチルフェニル、３−アミノ−４−ニトロフェニル、３，５−ヂヒドロキシフェニル、３−メチル−フェニル、４−メチル−フェニル、３，５−ヂメチル−フェニル、３，４，５−トリメトキシ−フェニル、３，５−ヂメトキシ−フェニル、３，４−ヂメトキシ−フェニル、３−メトキシ−フェニル、４−メトキシ−フェニル、４−第三−ブチル−フェニル、４−ヘキシル−フェニル、４−シアノ−フェニル、３，５−ヂ−トリフルオロメチル−フェニル、３，５−ヂフルオロ−フェニル、４−クロロ−フェニル、３−トリフルオロメチル−フェニル、４−メトキシカルボニル−フェニル、２−トリフルオロメトキシ−フェニル、３，５−ヂクロロ−フェニル、２−メトキシ−５−メチル−フェニル、２−フルオロ−５−メチル−フェニル、４−フェノキシ−フェニル、４−クロロ−２−トリフルオロメチル−フェニル等を含む。ナフタレニルの如き多環状アリール基は、非限定的に、アルキルについて上記に示されるそれらの置換基の如き置換基で１以上の位置で置換されない又は置換されうる。上記用語「アリール」は置換される及び置換されないフェニル基の両方を含むと意図される。
【００３２】
「５−員のヘテロアリール」は１〜４の炭素原子及び：１Ｏ；１Ｓ；１Ｎ；２Ｎ；３Ｎ；４Ｎ；１Ｓ及び１Ｎ；１Ｓ及び２Ｎ；１Ｏ及び１Ｎ；及び１Ｏ及び２Ｎから成る群から選ばれる１〜４のヘテロ原子を有する安定な５−員単環状芳香環ラヂカルである。安定な５−員ヘテロアリールの例示的な例は、非限定的に、フラニル、２−フラニル、３−フラニル、イミダゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサヂアゾリル、オキサゾリル、ピリヂニル、２−、３−又は４−ピリヂニル、ピリミヂニル、２−、４−又は５−ピリミヂニル、ピラゾリル、ピローリル、２−又は３−ピローリル、ピラジニル、ピリダジニル、３−又は４−ピリダジニル、２−ピラジニル、チエニル、２−チエニル、３−チエニル、テトラゾリル、チアゾリル、チアヂアゾリル、トリアジニル及びトリアゾリルを含む。
【００３３】
ヘテロアリールはまた１以上の（互変異性化され、環にＣ＝Ｏ基を与えうる）−ＯＨ官能基で環炭素上で置換される及び／又は１又は２の酸素原子により環硫黄原子上で置換され、それぞれ、Ｓ＝Ｏ又はＳＯ2基を与える環系をも含みうる。
【００３４】
本発明における化合物のいくつかはエナンチオマー、ヂアステレオマーを含む立体異性体、及び幾何異性体として存在しうる。幾何異性体はＥ又はＺ配置として存在しうる、アルケニル基を有する本発明に係る化合物を含み、その場合、その全ての幾何異性形、Ｅ及びＺ、ｃｉｓ及びｔｒａｎｓ、及びそれらの混合物は本発明の範囲内である。本発明に係るいくつかの化合物は１超の炭素原子で置換されうるシクロアルキル基を有し、その場合、その全ての幾何異性形、ｃｉｓ及びｔｒａｎｓ、及びそれらの混合物は本発明の範囲内である。（Ｒ）、（Ｓ）、エピマー、ヂアステレオマー、ｃｉｓ、ｔｒａｎｓ、ｓｙｎ、ａｎｔｉ、（Ｅ）、（Ｚ）、互変異性形、及びそれらの混合物を含む、これらの形の全ては本発明に係る化合物中で企図される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３５】
発明の詳細な説明
Ｉ．  序説
本発明は、炎症性疾患、心血管疾患、及び癌を含む、疾患及び状態の治療における剤として有用な、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、及びＬが本明細書中にそれらについて定義される値のいずれかを有する式Ｉ〜ＩＸのベンゾ［ｂ］チオフェン、及びその医薬として許容される塩に関する。１以上の式Ｉ〜ＩＸの化合物を含む医薬組成物もまた提供される。
【００３６】
ＩＩ．  化合物の調製
本発明に係る化合物（例えば、式Ｉ〜ＩＸの化合物）は本分野において知られる合成法及び以下に示されるスキーム中に概略される合成法を適用することにより調製されうる。
【００３７】
【化１３】
2006526614.tif 000015
スキーム１において、酸クロリド２０をアセトニトリルの如き好適な溶媒中でトリエチルアミンの如き塩基の存在下でアミノテトラゾールにカップリングし、２２を作出する。２２をその後１，８−ヂアザバイシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）又は１，５−ヂアザバイシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）の如き第三アミンでの処理により３位でチオール２３、ＨＳ−Ｌ−Ｒ1にカップリングし、２４を得る。式２３の化合物の例は、非限定的に、ベンゼンチオール、４−メルカプト−フェノール、２−メチル−ベンゼンチオール、２−フェニル−エタンチオール、及び３−（４−メルカプト−フェニル）−プロピオン酸メチルエステルを含む。ある態様において、２４上のＲ1のエステル置換基はテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の如き溶媒中で水酸化ナトリウムの如き好適な塩基を用いて対応する酸に加水分解されうる。
【００３８】
【化１４】
2006526614.tif 000016
スキーム２において、ベンゾチオフェン３０（例えば、３−メルカプト−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸ベンジルエステル）をアセトニトリルの如き溶媒中でトリエチルアミンの如き塩基及び、Ｘがハロ基である式３１の化合物（Ｘ−Ｃ1−Ｃ4アルキレン−Ｒ1）（例えば、４−ブロモメチル−ベンゾニトリル）と反応し、３２（例えば、３−（４−シアノ−ベンジルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸ベンジルエステル）を得る。Ｒaはカルボン酸基を保護する及び塩基加水分解により続いて除去されうる好適な基（例えば、Ｃ1−Ｃ4アルキル、イソプロピル、フェニル、ベンジル、メチル等）でありうる。
【００３９】
エステル３２その後ＴＨＦ及びメタノールの混合物の如き溶媒中でＬｉＯＨ、ＫＯＨ又はＮａＯＨの如き塩基を用いて３４に加水分解する。無水ＣＨ2Ｃｌ2中のカルボン酸３４（例えば、３−（４−シアノ−ベンジルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸）を触媒量のＤＭＦ（ヂメチルフォルムアミド）、続いて塩化オキサリルで処理しうる。アセトニトリルをその後この混合物に添加し、続いて５−アミノテトラゾール及びトリエチルアミンを添加し、３６（例えば、３−（４−シアノ−ベンジルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミド）を得る。３４の塩化オキサリル及びＤＭＦとの反応はＴＨＦ（テトラヒドロフラン）中で行われうる。
あるいは、酸３４をＴＨＦ（テトラヒドロフラン）の如き非プロトン溶媒中でカルボニルヂイミダゾール（ＣＤＩ）と反応し、続いて５−アミノテトラゾールを添加し、カルボキサミド３６を得うる。
【００４０】
ＩＩＩ．  化合物の評価
本発明に係る化合物（例えば、式Ｉ〜ＩＸの化合物及びその医薬として許容される塩）はそれらのＰＩ３Ｋを阻害する能力について分析されうる。これらの分析の例は以下に示され、及びＰＩ３Ｋ活性のｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏ分析を含む。
【００４１】
本発明のある態様において、非限定的に、環状ヌクレオチド依存タンパク質キナーゼ、ＰＤＧＦ、チロシンキナーゼ、ＭＡＰキナーゼ、ＭＡＰキナーゼキナーゼ、ＭＥＫＫ、サイクリン依存タンパク質キナーゼを含む１以上の酵素に比較して１以上のＰＩ３Ｋｓを選択的に阻害する化合物がある。本発明の他の態様において、他のＰＩ３Ｋに比較して１のＰＩ３Ｋを選択的に阻害する化合物がある。例えば、ある態様において、本発明に係る化合物はＰＩ３Ｋα又はＰＩ３Ｋβに比較してＰＩ３Ｋγを選択的に阻害する能力を示す。化合物は、第一の酵素に対する上記化合物のＩＣ50が第二の化合物に対する上記化合物のＩＣ50より小さいとき、第二の酵素に比較して第一の酵素を選択的に阻害する。上記ＩＣ50は、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏＰＩ３Ｋ分析において計測されうる。
現在好ましい態様において、本発明に係る化合物はｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏ分析（以下を参照のこと）においてＰＩ３Ｋ活性を阻害するそれらの能力について分析されうる。
【００４２】
ＰＩ３Ｋ分析はＰＩ３Ｋ阻害化合物の存在下又は非存在下で行われ、及び酵素活性の量は上記ＰＩ３Ｋ阻害化合物の阻害活性の決定のために比較される。
ＰＩ３Ｋ阻害化合物を含まないサンプルは１００の相対ＰＩ３Ｋ活性値を割り当てられる。ＰＩ３Ｋ活性の阻害は、ＰＩ３Ｋ阻害化合物の存在下でのＰＩ３Ｋ活性がコントロールサンプル（すなわち、阻害化合物なし）より小さいとき、達成される。化合物のＩＣ50はコントロールサンプル活性の５０％を示す化合物の濃度である。ある態様において、本発明に係る化合物は約１００μＭ未満のＩＣ50を有する。他の態様において、本発明に係る化合物は約１μＭ以下のＩＣ50を有する。また他の態様において、本発明に係る化合物は約２００ｎＭ以下のＩＣ50を有する。
【００４３】
ＰＩ３Ｋγ分析は本分野において示されている（例えば、Ｌｅｏｐｏｌｄｔ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９８；２７３：７０２４−７０２９を参照のこと）。典型的に、ｐ１０１及びｐ１１０γタンパク質の複合体を含むサンプルはＧβ及びＧγタンパク質と混合される（例えば、Ｇタンパク質β1／γ2サブユニット）。放射性標識ＡＴＰ（例えば、γ−32Ｐ−ＡＴＰ）がその後この混合物に添加される。脂質基質は脂質ミセルを含むＰＩＰ2を作出することにより形成される。反応はその後上記脂質及び酵素混合物を添加することにより開始され、及びＨ3ＰＯ4の添加で停止される。上記脂質生成物はその後ガラスファイバーフィルタープレートに移され、及びＨ3ＰＯ4で何回か洗浄される。放射活性脂質生成物（ＰＩＰ3）の存在は本分野において周知の放射分析法を用いて計測されうる。
【００４４】
成長因子制御ＰＩ３Ｋｓの活性はまた脂質キナーゼ分析を用いて計測されうる。例えば、ＰＩ３Ｋαは制御及び触媒サブユニットを含むサンプルを用いて分析されうる。活性化するペプチド（例えば、ｐＹペプチド、ＳｙｎＰｅｐ  Ｃｏｒｐ．）は放射性標識ＡＴＰと共に上記サンプルに添加される。脂質ミセルを含むＰＩＰ2はその後上記サンプルに添加され、反応を開始する。上記反応は上記に示されるＰＩ３Ｋγ分析について示されるように生じさせられ、及び分析される。分析はまた細胞抽出物を用いて行われうる（Ｓｕｓａ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  １９９２；２６７：２２９５１−２２９５６）。
【００４５】
ＩＶ．  医薬として許容される塩及び溶媒和物
本発明において使用されるべき化合物は非溶媒和化形及び水和化形を含む溶媒和化形で存在しうる。一般的に、水和化形を含む上記溶媒和化形は非溶媒和化形と同等であり、及び本発明の範囲内に含まれると意図される。
本発明に係る化合物（例えば、式Ｉ〜ＩＸの化合物）は非限定的に、酸添加及び／又は塩基性塩を含む、両方の医薬として許容される塩をさらに形成することができる。式（Ｉ）の化合物の医薬として許容される塩はその酸添加及び塩基性塩（二塩を含む）を含む。好適な塩の例は例えば、Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｗｅｒｍｕｔｈ，  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｕｓｅ，  Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，  Ｇｅｒｍａｎｙ  （２００２）；及びＢｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”  Ｊ．  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  １９７７；６６：１−１９中に見られうる。
【００４６】
式Ｉ〜ＩＸの化合物の医薬として許容される酸添加塩は式Ｉ〜ＩＸの化合物の塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、臭化水素酸、ヨー化水素酸、亜リン酸等の如き無機酸に由来する非毒性塩、及び脂肪族一及び二カルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸、アルカン二酸、芳香族酸、脂肪族及び芳香族スルフォン酸等の如き有機酸に由来する塩を含む。上記塩はしたがって、酢酸、アスパラギン酸、安息香酸、ベシル酸（ベンゼンスルフォン酸）、重炭酸／炭酸、重硫酸、カプリル酸、カムシル酸（カンファースルフォン酸）、クロロ安息香酸、クエン酸、エヂシル酸（１，２−エタンヂスルフォン酸）、リン酸二水素、ジニトロ安息香酸、エシル酸（エタンスルフォン酸）、フマル酸、グルセプト酸、グルコン酸、グルクロン酸、ヒベンズ酸、塩酸／クロリド、臭化水素酸／ブロミド、ヨー化水素酸／ヨーディド、イソブチル酸、リン酸一水素、イセチオン酸、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、マンデル酸、メシル酸（メタンスルフォン酸）、メタリン酸、メチル安息香酸、メチル硫酸、２−ナプシル酸（２−ナフタレンスルフォン酸）、ニコチン酸、硝酸、オロト酸、シュウ酸、パルモ酸、フェニル酢酸、リン酸、フタル酸、プロピオン酸、ピロリン酸、ピロ硫酸、糖酸、セバシン酸、ステアリン酸、スベリン酸、琥珀酸、硫酸、亜硫酸、Ｄ−酒石酸、Ｌ−酒石酸、トシル酸（トルエンスルフォン酸）、及びキシナフォ酸塩等を含む。アルギン酸、グルコン酸、ガラクツロン酸等の如きアミノ酸の塩もまた企図される。
【００４７】
上記塩基性化合物の酸添加塩は慣用の様式で上記遊離塩基形を十分な量の所望の酸と接触させ、塩を作出することにより調製される。上記遊離塩基形は慣用の様式で上記塩形を塩基と接触させ、及び上記遊離塩基を単離することにより再生されうる。上記遊離塩基形は極性溶媒中での溶解性の如きある物理的特性においてそれらのそれぞれの塩形とはいくらか異なるが、他の点では上記塩は本発明の目的のためにそれらのそれぞれの遊離塩基と同等である。
【００４８】
医薬として許容される塩基添加塩は水酸化アルカリ及びアルカリ土壌金属又は有機アミンのものの如き、金属又はアミンと共に形成される。陽イオンとして使用される金属の例はアルミニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム等である。好適なアミンの例はアルギニン、コリン、クロロプロカイン、Ｎ，Ｎ’−ヂベンジルエチレンヂアミン、ヂエチルアミン、ヂエタノールアミン、ヂオールアミン、エチレンヂアミン（エタン−１，２−ヂアミン）、グリシン、リジン、メグルミン、Ｎ−メチルグルカミン、オールアミン、プロカイン（ベンザチン）、及びトロメタミンを含む。
【００４９】
酸性化合物の塩基添加塩は慣用の様式で上記遊離酸形を十分な量の所望の塩基と接触させ、上記塩を作出することにより調製される。上記遊離酸形は慣用の様式で上記塩形を酸と接触させ、及び上記遊離酸を単離することにより再生されうる。上記遊離酸形は極性溶媒中での溶解性の如きある物理的特性においてそれらのそれぞれの塩形とはいくらか異なるが、他の点では上記塩は本発明の目的のためにそれらのそれぞれの遊離酸と同等である。
【００５０】
Ｖ．  医薬組成物及び投与方法
本発明はまたそのための医薬として許容される担体、希釈剤又は賦形剤と共に治療的に有効な量の式Ｉ〜ＩＸの化合物又はその医薬として許容される塩を含む医薬組成物を提供する。上記句「医薬組成物」は医療の又は獣医学の使用における投与に好適な組成物をいう。上記句「治療的に有効な量」は特定の患者又は患者集団において単独で又は他の医薬剤又は治療と共に投与されるとき、処置される障害又は状態を阻害する、止める又はそれらにおける改善を許容するのに十分な、化合物又はその医薬として許容される塩の量を意味する。例えば、ヒト又は他の哺乳類において、治療的に有効な量は研究室の又は臨床の設定において実験的に決定されうる又は処置される特定の疾患及び患者について、ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ又は同等の外国の機関のガイドラインにより必要とされる量でありうる。
【００５１】
適切な投与形態、投与量、及び投与経路の決定は医薬及び医学分野の通常の技術のレベルの範囲内であり、及び以下に示されることが理解されるべきである。
本発明に係る化合物はシロップ、エリキシル剤、懸濁物、粉末、顆粒、錠剤、カプセル、舐剤、トローチ剤、水溶液、クリーム、軟膏、ローション、ジェル、エマルジョン等の形態の医薬組成物として調合されうる。好ましくは、本発明に係る化合物は定量的に又は定性的に計測されるＰＩ３Ｋ仲介障害に関連する症状又は疾患徴候における減少を引き起こすであろう。
【００５２】
本発明に係る化合物から医薬組成物を調製するために、医薬として許容される担体は固体又は液体でありうる。固体形調製物は粉末、錠剤、ピル、カプセル、カシェ剤、坐剤、及び分散可能な顆粒を含む。固体担体は希釈剤、香味剤、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤又はカプセル化物質としてもはたらきうる１以上の物質でありうる。
【００５３】
粉末において、上記担体は細かく分けられた活性成分を伴う混合物中の細かく分けられた固体である。錠剤において、上記活性成分は好適な割合で必要な結合特性を有する担体と混合され、及び所望の形及び大きさに圧縮される。
【００５４】
上記粉末及び錠剤は１％〜９５％（ｗ／ｗ）の活性化合物を含む。ある態様において、上記活性化合物は５％〜７０％（ｗ／ｗ）に及ぶ。好適な担体は炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融解ロウ、ココアバター等である。上記用語「調製物」は、他の担体を伴う又は伴わない活性成分がそのようにそれに関連する担体により囲まれるカプセルを提供する担体としてのカプセル化物質を伴う活性化合物の調剤を含むと意図される。同様に、カシェ剤及び舐剤が含まれる。錠剤、粉末、カプセル、ピル、カシェ剤、及び舐剤は経口投与に好適な固体投与形態として使用されうる。
【００５５】
坐剤を調製するために、脂肪酸グリセリド又はココアバターの混合物の如き低融解ロウははじめに融解され、及び上記活性成分は攪拌により、その中に均一に分散される。上記融解した均一な混合物はその後便利な大きさの型に注がれ、冷却され、及びそれにより固体化する。
【００５６】
液体形調製物は溶液、懸濁物、及びエマルジョン、例えば、水又は水／プロピレングリコール溶液を含む。非経口注入のために、液体調製物は水性ポリエチレングリコール溶液中の溶液で調合されうる。
【００５７】
経口使用のために好適な水溶液は上記活性成分を水中に溶解し、及び所望のように好適な着色、香味、安定化、及び濃化剤を添加することにより調製されうる。経口使用のために好適な水性懸濁物は上記細かく分けられた活性成分を天然又は合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び他の周知の懸濁剤の如き粘性物質を伴う水中に分散させることにより作出されうる。
【００５８】
使用直前に経口投与のための液体形調製物に変換されることが意図される固体形調製物もまた含まれる。上記液体形は溶液、懸濁物、及びエマルジョンを含む。これらの調製物は上記活性成分に加えて、着色剤、香味剤、安定化剤、緩衝液、人工及び天然甘味剤、分散剤、濃化剤、可溶化剤等を含みうる。
【００５９】
上記医薬調製物は好ましくは単位投与形態である。上記形態において、上記調製物は適切な量の上記活性成分を含む単位用量に分けられる。上記単位投与形態は包装された調製物であり、上記包装はひとくくりにした錠剤、カプセル、及びバイアル又はアンプル中の粉末の如き、別々の量の調製物を含みうる。また、上記単位投与形態はカプセル、錠剤、カシェ剤又は舐剤自体でありうる又はそれは包装された形態中の適切な数のこれらのいずれかでありうる。
【００６０】
単位用量調製物中の活性成分の量は特定の適用及び上記活性成分の有効性にしたがって、０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１．０ｍｇ〜１００ｍｇ又は１％〜９５％（ｗ／ｗ）の単位用量に変化され又は合わせられうる。上記組成物は、所望の場合、また他の和合性の治療用剤をも含みうる。
【００６１】
医薬として許容される担体は部分的には投与される特定の組成物により、及び上記組成物を投与するために使用される特定の方法により決定される。したがって、本発明に係る医薬組成物の広くさまざまな好適な調剤がある（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  ２０ｔｈ  ｅｄ．，  Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｄｓ．，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  ２０００を参照のこと）。
【００６２】
単独の又は他の好適な成分を伴う本発明に係る化合物は吸入を介して投与されるエーロゾル調剤に作出されうる（すなわち、それらは「噴霧され」うる）。エーロゾル調剤はヂクロロヂフルオロメタン、プロパン窒素等の如き、加圧された許容される駆出剤中に入れられうる。
【００６３】
例えば、静脈内、筋内、皮内、及び皮下経路によるような、非経口投与に好適な調剤は抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び上記調剤を意図される受容者の血液と等張にする溶質を含みうる水性及び非水性等張滅菌注入溶液、及び懸濁剤、可溶化剤、濃化剤、安定化剤、及び保存剤を含みうる水性及び非水性滅菌懸濁物を含む。本発明の実施において、組成物は、例えば、静脈内注入により、経口で、局所で、腹腔内に、のう内に又は包膜内に投与されうる。化合物の調剤はアンプル及びバイアルの如き、単位用量の又は多用量の密閉容器中に提示されうる。注入溶液及び懸濁物は以前に示される種類の滅菌粉末、顆粒、及び錠剤から調製されうる。
【００６４】
本発明の内容において患者に投与される用量は時間にわたり患者において有益な治療応答に影響するのに十分であるべきである。上記用語「患者」は哺乳類鋼のメンバーをいう。哺乳類の例は、非限定的に、ヒト、霊長類、チンパンジー、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、ウマ、家畜、イヌ、ネコ、ヒツジ、及びウシを含む。
【００６５】
上記用量は使用される特定の化合物の有効性及び患者の状態、並びに処置される患者の体重又は表面領域により決定されるであろう。上記用量の大きさはまた特定の患者における特定の化合物の投与に付随する悪い副作用の存在、性質、及び程度によっても決定されるであろう。処置される障害の治療又は予防において投与されるべき化合物の有効な量を決定することにおいて、医師は上記化合物の循環血漿値、化合物の毒性、及び／又は疾患の進行等の如き因子を評価しうる。一般的に、化合物の用量当量は典型的な患者について約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである。多くの異なる投与方法は当業者に知られる。
【００６６】
投与のために、本発明に係る化合物は、集団及び患者の全体の健康に適用されるとき、非限定的に、上記化合物のＬＤ50、上記化合物の薬物速度論プロファイル、禁忌を示される薬物、及びさまざまな濃度での上記化合物の副作用を含みうる因子により決定される速度で投与されうる。投与は単一の又は別々の用量を介して達成されうる。
【００６７】
典型的な錠剤、非経口、及びパッチ調剤の例は以下のものを含む：
【表１】
2006526614.tif 000017
本発明に係る化合物（例えば、式Ｉ〜ＩＸの化合物又はその医薬として許容される塩）をラクトース及びトウモロコシデンプン（混合のための）と混合し、及び均一になるまで配合し、粉末にしうる。トウモロコシデンプン（ペーストのための）を６ｍＬの水中に懸濁し、及び攪拌しながら加熱し、ペーストを形成する。上記ペーストを上記混合した粉末に添加し、及び上記混合物を粒状化する。上記湿性粒状物をＮｏ．８ハードスクリーンにとおし、及び５０℃で乾燥させる。上記混合物を１％ステアリン酸マグネシウムで潤滑化し、及び錠剤に圧縮する。上記錠剤をＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態の治療のために患者に１〜４日毎の速度で投与する。
【００６８】
非経口溶液調剤実施例１
注入のための７００ｍＬのプロピレングリコール及び２００ｍＬの水の溶液中に２０．０ｇの本発明に係る化合物を添加しうる。上記混合物を攪拌し、及び上記ｐＨを塩酸で５．５に合わせる。上記体積を注入のために水で１０００ｍＬに合わせる。上記溶液を滅菌し、それぞれ２．０ｍＬ（４０ｍｇの本発明の化合物）を含む５．０ｍＬアンプルに満たし、及び窒素下で密閉する。上記溶液をＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態を患う及び治療の必要のある患者に注入により投与する。
【００６９】
パッチ調剤実施例１
１０ミリグラムの本発明に係る化合物を１ｍＬのプロピレングリコール及び樹脂製のクロス結合剤を含む２ｍｇのアクリル酸に基づいた重合体粘着剤と混合しうる。上記混合物を不浸透性の裏打ち（３０ｃｍ2）に適用し、及びＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態の維持された放出処置のために患者の背上部に適用する。
【００７０】
ＶＩ．  ＰＩ３Ｋ仲介障害及び状態の治療方法
本発明に係る化合物及び本発明に係る化合物を含む医薬組成物はＰＩ３Ｋ仲介障害又は状態を患う患者に投与されうる。ＰＩ３Ｋ仲介障害及び状態は、上記障害又は状態の性質に因り、本発明に係る化合物を用いて予防的に、急性的に、及び慢性的に処置されうる。典型的に、これらの方法のそれぞれにおける宿主又は患者はヒトであるが、他の哺乳類もまた本発明に係る化合物の投与から恩恵を受けうる。
【００７１】
治療適用において、本発明に係る化合物は広くさまざまな経口及び非経口投与形態で調製され、及び投与されうる。上記用語「投与」は化合物を患者と接触させる方法をいう。したがって、本発明に係る化合物は注入により、すなわち、静脈内に、筋内に、皮膚内に、皮下に、十二指腸内に、非経口で又は腹腔内に投与されうる。また、本明細書中に示される化合物は吸入により、例えば、鼻内に、投与されうる。さらに、本発明に係る化合物は経皮で、局所で及び埋め込みを介して投与されうる。ある態様において、本発明に係る化合物は経口でデリバリーされる。上記化合物はまた直腸で、頬で、膣内に、眼に、ａｎｄｉａｌｌｙ又は注入によりデリバリーされうる。
【００７２】
本発明に係る医薬方法において利用される化合物は毎日約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの開始投与量で投与されうる。ある態様において、上記毎日の用量範囲は約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇである。しかしながら、上記投与量は患者の必要性、処置される状態の重篤さ、及び使用される化合物に因り変化されうる。特定の状況についての適切な投与量の決定は実施者の技術の範囲内である。一般的に、治療は上記化合物の最適用量より少ない、より少量の投与量で開始される。その後、上記投与量は状況下での最適効果が達成されるまで小さな増加で増大される。便利のために、上記全体の毎日の投与量は、所望の場合、１日の中で部分に分けられ、及び投与されうる。上記用語「治療（処置）」は処置される障害に関連する又はそれにより引き起こされる少なくとも１の症状又は特徴の急性の、慢性の又は予防の消去又は緩和を含む。例えば、治療は障害のいくつかの症状の消去、障害の病理学的進行の阻害又は障害の完全な根絶を含みうる。本発明に係る化合物は患者に共投与されうる。上記用語「共投与される」は同じ医薬組成物又は別々の医薬組成物中で組み合わせにより患者に投与される、２以上の異なる医薬剤又は治療（例えば、放射線治療）の投与を意味する。したがって、共投与は２以上の医薬剤を含む単一の医薬組成物の同時の投与又は同じ若しくは異なるときの同じ患者への２以上の異なる組成物の投与を含む。例えば、８  ａ．ｍ．に本発明に係る化合物を含む第一の投与量を投与され、及びその後１〜１２時間後、例えば、その同じ日の６  ｐ．ｍ．にＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標）を投与される患者は本発明に係る化合物及びＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標）を共投与されている。あるいは、例えば、８  ａ．ｍ．に本発明に係る化合物及びＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標）を含む単一の投与量を投与されうる患者は本発明に係る化合物及びＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標）を共投与されている。
【００７３】
したがって、本発明に係る化合物はまた癌の治療に有用な化合物（例えば、ＴＡＸＯＬ（商標）、タキソテレ、ＧＬＥＥＶＥＣ（商標）（Ｉｍａｔｉｎｉｂ  Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、アドリアマイシン、ダウノマイシン、シスプラチン、エトポシド、ヴィンカアルカロイド、ヴィンブラスチン、ヴィンクリスチン、メトトレキセート又はアドリアマイシンの如き細胞毒性薬、ダウノマイシン、シス−プラチナ、エトポシド、及びヴィンクリスチンの如きアルカロイド、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、エンドスタチン及びアンギオスタチン、ＶＥＧＦ阻害剤、及びメトトレキセートの如き代謝拮抗物質）をも共投与されうる。本発明に係る化合物はまたタキサン誘導体、プラチナ協調複合体、ヌクレオシドアナログ、アントラサイクリン、トポイソメラーゼ阻害剤又はアロマターゼ阻害剤と共にも使用されうる。放射線治療もまた癌の治療のために本発明に係る化合物と共投与されうる。
【００７４】
本発明に係る化合物はまた血栓崩壊性疾患、心疾患、卒中等の治療のために有用な化合物（例えば、アスピリン、ストレプトキナーゼ、組織プラスミノーゲンアクチヴェーター、ウロキナーゼ、抗凝集薬、抗血小板薬（例えば、ＰＬＡＶＩＸ（商標）；重硫酸クロピドグレル）、スタチン（例えば、ＬＩＰＩＴＯＲ（商標）（Ａｔｏｒｖａｓｔａｔｉｎ  ｃａｌｃｉｕｍ）、ＺＯＣＯＲ（商標）（Ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ）、ＣＲＥＳＴＯＲ（商標）（Ｒｏｓｕｖａｓｔａｔｉｎ）等）、ベータブロッカー（例えば、Ａｔｅｎｏｌｏｌ）、ＮＯＲＶＡＳＣ（商標）（アムロヂピンベシレート）、及びＡＣＥ阻害剤（例えば、Ａｃｃｕｐｒｉｌ（商標）（Ｑｕｉｎａｐｒｉｌ  Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｌｉｓｉｎｏｐｒｉｌ等））とも共投与されうる。
【００７５】
本発明に係る化合物はまたＡＣＥ阻害剤、スタチン、ＬＩＰＩＴＯＲ（商標）（Ａｔｏｒｖａｓｔａｔｉｎ  ｃａｌｃｉｕｍ）の如き脂質低下剤、ＮＯＲＶＡＳＣ（商標）（アムロヂピンベシレート）の如きカルシウムチャネルブロッカーの如き化合物と共にも高血圧の治療のために共投与されうる。本発明に係る化合物はまたフィブレート、ベータ−ブロッカー、ＮＥＰＩ阻害剤、アンギオテンシン−２−受容体アンタゴニスト及び血小板凝集阻害剤と共にも使用されうる。
【００７６】
慢性関節リウマチを含む、炎症性疾患の治療のために、本発明に係る化合物は（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標）、ＣＤＰ−８７０及びＨＵＭＩＲＡ（商標）（アダリムマブ）の如き）抗−ＴＮＦαモノクローナル抗体及び（ＥＮＢＲＥＬ（商標）の如き）ＴＮＦ−受容体免疫グロブリン融合分子の如きＴＮＦ−α阻害剤、ＩＬ−１阻害剤、受容体アンタゴニスト又は可溶性ＩＬ−１Ｒα（例えば、ＫＩＮＥＲＥＴ（商標）又はＩＣＥ阻害剤）、非ステロイド抗炎症剤（ＮＳＡＩＤＳ）、ピロキシカム、ヂクロフェナク、ナプロキセン、フルルビプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェン、イブプロフェン、フェナメート、メフェナミン酸、インドメタシン、スリンダック、アパゾン、ピラゾロン、フェニルブタゾン、アスピリン、（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標）（セレコキシブ）、ＶＩＯＸＸ（商標）（ロフェコキシブ）、ＢＥＸＴＲＡ（商標）（ヴァルデコキシブ）及びエトリコキシブの如き）ＣＯＸ−２阻害剤、メタロプロテアーゼ阻害剤（好ましくはＭＭＰ−１３選択的阻害剤）、ＮＥＵＲＯＴＩＮ（商標）、プレガバリン、低用量メトトレキセート、レフルノミド、ヒドロキシクロロキン、ｄ−ペニシルラミン、オーラノフィン又は非経口の若しくは経口の金の如き剤と共投与されうる。
【００７７】
本発明に係る化合物は変形性関節症の治療のために現存する治療用剤と共投与されうる。組み合わせで使用されるべき好適な剤はピロキシカム、ヂクロフェナク、ナプロキセン、フルルビプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェン及びイブプロフェンの如きプロピオン酸、メフェナミン酸の如きフェナメート、インドメタシン、スリンダック、アパゾン、フェニルブタゾンの如きピラゾロン、アスピリンの如きサリチル酸塩、セレコキシブ、ヴァルデコキシブ、ロフェコキシブ及びエトリコキシブの如きＣＯＸ−２阻害剤の如き標準の非ステロイド抗炎症剤（本明細書中後にＮＳＡＩＤ’ｓ）、鎮痛薬及びコルチコステロイド及びヒアルガン及びシンヴィスクの如きヒアルロン酸の如き関節内治療を含む。
【００７８】
本発明に係る化合物はまたＶｉｒａｃｅｐｔ、ＡＺＴ、アシクロヴィル及びファムシクロヴィルの如き抗ウイルス剤、及びＶａｌａｎｔの如き抗敗血症化合物と共にも共投与されうる。
【００７９】
本発明に係る化合物は（セルトラリンの如き）抗うつ剤、（デプレニル、Ｌ−Ｄｏｐａ、Ｒｅｑｕｉｐ、Ｍｉｒａｐｅｘ、セレジン及びラサジリンの如きＭＡＯＢ阻害剤、Ｔａｓｍａｒの如きｃｏｍＰ阻害剤、Ａ−２阻害剤、ドパミン再取り込み阻害剤、ＮＭＤＡアンタゴニスト、Ｎｉｃｏｔｉｎｅアゴニスト、Ｄｏｐａｍｉｎｅアゴニスト及び神経性一酸化窒素合成酵素の阻害剤の如き）抗振せん麻痺薬、及びドネペジル、タクリン、α２δリガンド、ＮＥＵＲＯＴＩＮ（商標）、プレガバリン、ＣＯＸ−２阻害剤、プロペントフィルリン又はメトリフォネートの如き抗アルツハイマー病薬の如きＣＮＳ剤とさらに共投与されうる。
【００８０】
本発明に係る化合物はＥＶＩＳＴＡ（商標）（塩酸ラロキシフェン）、ドロロキシフェン、ラソフォキシフェン又はフォソマックスの如き骨粗しょう症剤及びＦＫ−５０６及びラパマイシンの如き免疫抑制剤とさらに共投与されうる。
【実施例】
【００８１】
実施例
【化１５】
2006526614.tif 000018
【００８２】
【表２】
2006526614.tif 000019
【００８３】
【表３】
2006526614.tif 000020
【００８４】
【表４】
2006526614.tif 000021
【００８５】
【表５】
2006526614.tif 000022
【００８６】
【表６】
2006526614.tif 000023
【００８７】
【表７】
2006526614.tif 000024
【００８８】
【表８】
2006526614.tif 000025
【００８９】
実施例１〜６５は以下のように合成された：
中間体１．  ３−クロロ−５−エトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル。  ３−（３−エトキシ−フェニル）−アクリル酸（５．３ｇ、２８ｍｍｏｌ）、ピリヂン（０．２１ｍＬ、２．６５ｍｍｏｌ）、ヂメチルフォルムアミド（２．０５ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）、塩化チオニル（１０．４ｍＬ）及びクロロベンゼン（４０ｍｌ）のスラリーを２１時間の間還流まで熱した。上記反応を室温まで冷却し、及び上記溶媒を減圧下で除去した。上記残留物をヂクロロメタン（１５ｍＬ）中に溶解し、及びメタノール（１５ｍＬ）で処理した。生ずる固体をろ過により除去し、及びメタノールで洗浄し、上記表題の化合物（６．７ｇ、８８％）を得た。
【化１６】
2006526614.tif 000026
【００９０】
中間体２．  ３−クロロ−５−エトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。  ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の中間体１（２．０ｇ、７．３９ｍｍｏｌ）の溶液に１Ｎ  ＮａＯＨ（２０ｍＬ）を添加した。上記混合物を攪拌し、及び６５〜７５℃まで２時間熱し、及びその後室温まで冷却させた。上記反応混合物をＥｔＯＡｃで２回洗浄し、及びその後酸性化し、オフホワイトの固体沈殿物を得た。上記沈殿物をＥｔＯＡｃで何回か抽出した。上記有機物を塩水で洗浄し、及び濃縮させ、５−エトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸を得た。ＣＨ2Ｃｌ2中の３−クロロ−５−エトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１．８ｇ、７．０１ｍｍｏｌ）の室温の溶液に塩化オキサリル（１．３５ｍＬ、１５．５ｍｍｏｌ）、続いて２〜３滴のＤＭＦを添加した。上記反応を室温で２時間攪拌し、及びその後濃縮させた。上記残留物をＣＨ3ＣＮ（６０ｍＬ）中に溶解した。トリエチルアミン（１．０８ｍＬ、７．７５ｍｍｏｌ）、続いて５−アミノテトラゾール（０．７２５ｇ、９．５２ｍｍｏｌ）を上記反応に添加した。上記反応を６０℃で１６時間攪拌し、及びその後室温まで冷却させた。上記混合物をＨ2Ｏ（〜３０ｍＬ）で希釈し、固体沈殿物を得た。上記固体をろ過し、Ｈ2Ｏ及びＣＨ3ＣＮで洗浄し、上記表題の化合物（１．２ｇ、５０％）を得た。ＭＳ：Ｍ+1＝３２４．
【００９１】
中間体３．  ３−クロロ−５−メトキシ−６−ブロモメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル。  ３−クロロ−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．７１ｇ、９．９９ｍｍｏｌ）、触媒量のＡＩＢＮ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル）及び四塩化炭素（８０ｍＬ）の混合物を還流まで２４時間熱した。上記溶液を冷却し、及び減圧下で濃縮させた。上記粗い生成物をヘキサン−ヂクロロメタン（１〜２）を移動相として用いて少量のシリカゲルにとおした。減圧下での濃縮は上記表題の化合物（２．１ｇ、６５％）を与えた。
【化１７】
2006526614.tif 000027
【００９２】
中間体４．  ３−クロロ−５−メトキシ−６−（メチルカルボニルオキシ）メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル。  ＤＭＦ（２０ｍｌ）及びＴＨＦ（１０ｍｌ）中の中間体３（２．１ｇ、６．０ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（１．４８ｇ、１８ｍｍｏｌ）の混合物を８０℃まで１８時間熱した。上記溶媒を減圧下で除去し、及び上記残留物を酢酸エチル／水中に溶解した。上記有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させ、及び減圧下で濃縮させ、上記表題の化合物（２．１ｇ、９５％）を得た。
【化１８】
2006526614.tif 000028
【００９３】
中間体５．  ３−クロロ−５−メトキシ−６−ヒドロキシメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル。  メタノール（８０ｍＬ）中の中間体４（１．８６ｇ、５．７ｍｍｏｌ）の溶液を炭酸カリウム（２ｇ）と共に１８時間攪拌した。上記溶媒を減圧下で除去し、及び上記残留物を水で何回か滴定し、及び乾燥させた。上記残留物を酢酸エチル／メタノールから再結晶化し、上記表題の化合物（０．８９ｇ、５４％）を得た。
【化１９】
2006526614.tif 000029
【００９４】
中間体６．  ３−クロロ−５−メトキシ−６−メトキシメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸。  ＤＭＦ（５ｍｌ）中の中間体５（０．２５ｇ、０．８７ｍｍｏｌ）の溶液をＮａＨ（０．０３８ｇ、０．９５ｍｍｏｌ）で処理し、及び１５分間攪拌した。インドメタン（０．２７ｍＬ、４．３５ｍｍｏｌ）を添加し、及び１８時間混合を続けた。上記溶媒を減圧下で除去し、及び上記残留物を酢酸エチル中に溶解した。上記溶液を１Ｎ  ＮａＯＨ、水、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させ、及び減圧下で濃縮させ、０．２２０ｇ（８９％）の粗い化合物を得た。上記エステルをＴＨＦ（５ｍｌ）中に溶解し、及び１Ｎ  ＮａＯＨ（２ｍｌ）と共に１８時間攪拌した。上記ＴＨＦを減圧下で除去し、及び酢酸エチルで抽出した。上記水層を酸性になるまでＨＣｌで処理し、及び上記生成物をろ過により回復し、上記表題の化合物（０．１１ｇ、４４％）を得た。
【化２０】
2006526614.tif 000030
【００９５】
中間体７．  ３−クロロ−５−メトキシ−６−メトキシメチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。  中間体６（０．１１ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、塩化チオニル（２ｍｌ）及びヂクロロメタン（５ｍｌ）の溶液を５０℃まで２時間熱した。上記反応を環境温度まで冷却し、及び上記溶媒を減圧下で除去し、中間体６の酸クロリドを得た。上記酸クロリド、トリエチルアミン（０．１０ｍｌ、０．７７ｍｍｏｌ）、及び５−アミノ−１Ｈ−テトラゾール（０．０６５ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１０ｍｌ）中に溶解し、及び７０℃まで１８時間熱した。上記溶媒の半分を減圧下で除去し、及び生ずる溶液を水（１ｍｌ）で処理し、生成物を沈殿させた。上記生成物をろ過により除去し、アセトニトリル／水で洗浄し、及び乾燥させ、上記表題の化合物（０．１ｇ、７４％）を得た。
【化２１】
2006526614.tif 000031
【００９６】
中間体８．  塩化３−クロロ−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボニル。  ３−（４−メトキシ−３−メチル−フェニル）−アクリル酸（Ｋｕｌｋａｒｎｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９６７）  Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．  Ｃｈｅｍ．  ５：  ４７１−４７４）（５．３ｇ、２８ｍｍｏｌ）、ピリヂン（０．２１ｍＬ、２．６５ｍｍｏｌ）、ヂメチルフォルムアミド（２．０５ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）、塩化チオニル（１０．４ｍＬ）及びクロロベンゼン（４０ｍＬ）を還流まで２１時間熱した。上記反応を室温まで冷却し、及び上記溶媒を減圧下で除去した。上記残留物をトルエン中に再溶解し、及び減圧下で濃縮させた。上記表題の化合物をトルエン／ヘキサンから再結晶化し、上記表題の化合物（４．１ｇ、２８％）を得た。
【化２２】
2006526614.tif 000032
【００９７】
中間体９．  ３−クロロ−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。  アセトニトリル（６０ｍｌ）中の中間体８（２．０ｇ，７．２ｍｍｏｌ）、５−アミノテトラゾール（０．６４９ｇ、７．６ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（１．３２ｍＬ、９．４ｍｍｏｌ）の溶液を還流まで１８時間の間熱した。上記反応を冷却し、及び上記溶媒を減圧下で除去した。水を上記残留物に添加し、及び生ずる固体をろ過により回収した。上記乾燥させた固体をヂクロロメタン／メタノールから再結晶化させ、上記表題の化合物（１．７ｇ、７２％）を得た。
【化２３】
2006526614.tif 000033
【００９８】
中間体１０．  ３−クロロ−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。  中間体９の合成について示されるものと類似の様式で、アセトニトリル（２００ｍＬ）中の塩化３−クロロ−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボニル（Ｃｏｎｎｏｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ，  ３５：  ９５８−９６５）（５．８２ｇ、２０ｍｍｏｌ）、５−アミノテトラゾール（１．７ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（５．５８ｍＬ、４０．０ｍｍｏｌ）は上記表題の化合物（５．０ｇ、７６％）を与えた。ＭＳ：Ｍ+1＝３４０．
【００９９】
中間体１１．  ３−クロロ−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。  中間体９の合成について示されるものと類似の様式で、アセトニトリル中の塩化３−クロロ−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボニル（Ｃｏｎｎｏｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９５）  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ，  ３８：  ４５９７−４６１４）、５−アミノテトラゾール、及びトリエチルアミンは上記表題の化合物を与えた。ＭＳ：Ｍ+1＝３１０．マイクロ分析：計算された：Ｃ＝４２．６６；Ｈ＝２．６０；Ｎ＝２２．６１．発見された：Ｃ＝４３．０１；Ｎ＝２．７０；Ｈ＝２２．０．
【０１００】
中間体１２．  ３−メトキシ−４−メチル桂皮酸。  ３−（３−メトキシ−４−メチル−フェニル）−アクリル酸出発物質を以下の反応にしたがって調製した：３−メトキシ−４−メチルベンズアルデヒド（２０．０ｍＬ、１３７ｍｍｏｌ）をピペリヂン（６ｍＬ）及びピリヂン（２００ｍＬ）の混合物中でマロン酸（２７．２ｇ、２０６ｍｍｏｌ）と共に２．５時間還流した。上記混合物を２分の１の体積まで濃縮させた。Ｈ2Ｏ（〜２０ｍＬ）及び１Ｎ  ＨＣｌ（〜６ｍＬ）を添加し、固体沈殿物を得た。上記固体をろ過し、及び１Ｎ  ＨＣｌ及びその後Ｈ2Ｏですすぎ、及びその後ｅｎ  ｖａｃｕｏで乾燥させ、上記表題の生成物を計量可能な収率で得た。ＭＳ：Ｍ＋１＝１９３．１（ＡＰＣＩ）．
【化２４】
2006526614.tif 000034
【０１０１】
中間体１３．  塩化３−クロロ−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボニル。  中間体１２（９．１８ｇ、４７．８ｍｍｏｌ）を還流コンデンサーとフィットしたアルゴンでパージした丸底フラスコ中のピリヂン（０．３９ｍＬ）、ＤＭＦ（３．５１ｍＬ）、及びクロロベンゼン（６０ｍＬ）の混合物中に溶解した。塩化チオニル（１７．８ｍＬ、２４４ｍｍｏｌ）をシリンジを介して上記混合物に添加した。上記反応を攪拌し、及び活発な還流まで１８時間熱した。上記反応を室温まで冷却させ、及びその後ｅｎ  ｖａｃｕｏで濃縮させた。上記残留物をＣＨ2Ｃｌ2（〜４０ｍＬ）中に溶解し、及びその後過剰のヘキサンで希釈した。上記希釈物をおよそ２分の１の体積まで濃縮させ、沈殿物を得た。上記固体沈殿物をろ過し、回収し、及びｅｎ  ｖａｃｕｏで乾燥させ、上記表題の生成物（８．４９ｇ、３２．９ｍｍｏｌ、６９％）を茶色−灰色のふわふわした固体として得た。
【０１０２】
中間体１４．  ３−クロロ−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。  中間体７の合成について示されるものと同様の様式で、中間体１３を上記表題の化合物（０．４４２ｇ；５８％）に変換した。ＭＳ：Ｍ+1＝３２４．
【０１０３】
所望のチオール（Ｒ1−Ｌ−ＳＨ）の溶液を、上記溶液（ＤＭＦ）の最終モーラーが０．６６Ｍの所望のチオール（１当量）及び０．６６Ｍ  ＤＢＵであるように調製した。適切なバイアル（２ドラム）に、上記所望の中間体２、７、９、１０、１１又は１４（１．５ｍｌ、０．１１ｍｍｏｌ）及び上記所望のチオール溶液（０．５ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加した。上記バイアルに蓋をし、及び振騰しながら８０℃まで１０時間熱した。上記反応を冷却し、及びＢｏｈｄａｎ  Ｍｉｎｉ  Ｂｌｏｃｋの個々の容器に移した。上記バイアルをＤＭＦ（０．５ｍｌ）で洗浄し、及び上記洗浄物をＭｉｎｉ  Ｂｌｏｃｋ中の適切な容器に移した。ＡｒｇｏＰｏｒｅ（商標）−Ｉｓｏｃｙａｎａｔｅ  ｃａｐｔｕｒｅ  ｒｅｓｉｎ（０．２０ｇ）（Ａｒｇｏｎａｕｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，  ＣＡ）をそれぞれの容器に添加し、及び２時間混合した。生ずる溶液を上記樹脂を除去するためにろ過した。上記樹脂をその後ＤＭＦ（０．５ｍＬ）で洗浄した。上記反応をその後酢酸（０．２Ｍメタノール、０．５ｍｌ）で処理し、及びその後上記溶媒を減圧下で除去した。上記残留物をメタノール（２ｍＬ）中に溶解し、及びＢｏｈｄａｎ  Ｍｉｎｉ  Ｂｌｏｃｋ上の新しい容器に移した。Ａｒｇｏｎａｕｔ  ＭＰ−ＴｓＯＨ  ｃａｐｔｕｒｅ  ｒｅｓｉｎ（０．２０ｇ）（Ａｒｇｏｎａｕｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，  ＣＡ）をそれぞれの容器に添加し、及び１８時間混合した。上記樹脂をろ過により除去し、上記樹脂をメタノール（０．４ｍＬ）及びＤＭＦ（１．５ｍＬ）で洗浄した。上記溶媒を減圧下で除去し、及び上記表題の化合物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。
【０１０４】
実施例５５〜６４の合成のために、Ｔｈｅ  Ａｒｇｏｎａｕｔ  ＭＰ−ＴｓＯＨ  ｃａｐｔｕｒｅ  ｒｅｓｉｎをろ過により除去し、及び上記に示されるようにメタノール（０．４ｍｌ）及びＤＭＦ（１．５ｍｌ）で洗浄した。上記溶媒を減圧下で除去し、及び上記残留物をＴＨＦ（１．０ｍＬ）中に再溶解した。上記溶液をその後水酸化ナトリウム（１ｍＬ、１．０Ｎ）で処理し、及び１８時間振騰させた。上記溶媒を減圧下で除去し、及び上記残留物を水（０．５ｍＬ）中に再溶解し、及びＨＣｌ（１ｍｌ、１．０Ｎ）で処理した。上記溶液を酢酸エチルで抽出し、及び上記有機抽出物を減圧下で濃縮させた。実施例１〜６５の表題の化合物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。
【０１０５】
実施例１．  ５，６−ヂメトキシ−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１０６】
実施例２．  ５−メトキシ−６−メチル−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１０７】
実施例３．  ５−エトキシ−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１０８】
実施例４．  ３−（４−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１０９】
実施例５．  ５，６−ヂメトキシ−３−ｏ−トリスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１０】
実施例６．  ３−（２−エチル−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１１】
実施例７．  ３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）アミド。
【０１１２】
実施例８．  ３−（４−クロロ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１３】
実施例９．  ３−（２，４−ヂメチル−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１４】
実施例１０．  ３−（２，３−ヂクロロ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１５】
実施例１１．  ３−（３，４−ヂメチル−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１６】
実施例１２．  ３−（３，４−ヂクロロ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１７】
実施例１３．  ５，６−ヂメトキシ−３−フェネチルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１８】
実施例１４．  ３−（４−ヒドロキシ−３−メトキシ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１１９】
実施例１５．  ３−（２，５−ヂメトキシ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２０】
実施例１６．  ５−メトキシ−３−（２−メチル−フラン−３−イルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２１】
実施例１７．  ５−メトキシ−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２２】
実施例１８．  ５−メトキシ−３−ｏ−トリスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２３】
実施例１９．  ３−（２−クロロ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２４】
実施例２０．  ３−（２−ブロモ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２５】
実施例２１．  ３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２６】
実施例２２．  ５−メトキシ−３−（３−メトキシフェニルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２７】
実施例２３．  ３−（４−クロロ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２８】
実施例２４．  ３−（２，５−ヂメトキシ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１２９】
実施例２５．  ３−（２，３−ヂクロロ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３０】
実施例２６．  ５−メトキシ−３−フェネチルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３１】
実施例２７．  ３−（ベンゾ［１，３］ヂオキソール−５−イルスルファニル）−５−メトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３２】
実施例２８．  ３−（４−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３３】
実施例２９．  ５，６−ヂメトキシ−３−（２−メチル−フラン−３−イルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３４】
実施例３０．  ３−（４−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３５】
実施例３１．  ｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸メチルエステル。
【０１３６】
実施例３２．  ３−｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸メチルエステル。
【０１３７】
実施例３３．  ３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３８】
実施例３４．  ５−メトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１３９】
実施例３５．  ３−（４−イソプロピル−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４０】
実施例３６．  ３−（３−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４１】
実施例３７．  ５−メトキシ−３−（４−メトキシ−フェニルスルファニル）−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４２】
実施例３８．  ３−（４−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４３】
実施例３９．  ３−（３−ヒドロキシ−フェニルスルファニル）−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４４】
実施例４０．  ｛４−［６−メトキシ−５−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸メチルエステル。
【０１４５】
実施例４１．  ３−｛４−［６−メトキシ−５−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸メチルエステル。
【０１４６】
実施例４２．  ６−メトキシ−５−メチル−３−（３−トリフルオロメチル−フェニルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４７】
実施例４３．  ３−［２−（アセチル−メチル−アミノ）−１−フェニル−プロピルスルファニル］−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４８】
実施例４４．  ３−［２−（アセチル−メチル−アミノ）−１−フェニル−プロピルスルファニル］−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１４９】
実施例４５．  ３−（３−クロロ−フェニルスルファニル）−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５０】
実施例４６．  ６−メトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５１】
実施例４７．  ３−（４−イソプロピル−フェニルスルファニル）−６−メトキシ−５−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５２】
実施例４８．  ３−［５，６−ヂメトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−安息香酸メチルエステル。
【０１５３】
実施例４９．  ｛４−［５，６−ヂメトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸メチルエステル。
【０１５４】
実施例５０．  ５，６−ヂメトキシ−３−（３−トリフルオロメチル−フェニルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５５】
実施例５１．  ５，６−ヂメトキシ−３−（３−メトキシ−フェニルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５６】
実施例５２．  ５−エトキシ−３−フェネチルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５７】
実施例５３．  ３−（４−ヂメチルアミノ−フェニルスルファニル）−５−メトキシ−６−メチル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５８】
実施例５４．  ５−メトキシ−６−メチル−３−フェネチルスルファニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１５９】
実施例５５．  ４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−安息香酸。
【０１６０】
実施例５６．  ｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸。
【０１６１】
実施例５７．  ３−｛４−［５−メトキシ−６−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸。
【０１６２】
実施例５８．  ４−［６−メトキシ−５−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−安息香酸。
【０１６３】
実施例５９．  ｛４−［６−メトキシ−５−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸。
【０１６４】
実施例６０．  ４−［６−メトキシ−５−メチル−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニルメチル］−安息香酸。
【０１６５】
実施例６１．  ｛４−［５，６−ヂメトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸。
【０１６６】
実施例６２．  ３−｛４−［５，６−ヂメトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸。
【０１６７】
実施例６３．  ｛４−［５−エトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−酢酸。
【０１６８】
実施例６４．  ３−｛４−［５−エトキシ−２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルカルバモイル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イルスルファニル］−フェニル｝−プロピオン酸。
【０１６９】
実施例６５．  ５−メトキシ−６−メトキシメチル−３−フェニルスルファニル−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。
【０１７０】
中間体１５．  ３−（４−シアノ−ベンジルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸ベンジルエステル。  ３−メルカプト−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸ベンジルエステル（３．６ｇ、１０ｍｍｏｌ）を１２０ｍＬのアセトニトリル（ＡＣＮ）中でアルファ−ブロモ−パラ−トルニトリル（１．９６ｇ、１０ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（ＴＥＡ）（１．８０ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）と混合した。上記反応を環境温度で５時間攪拌した。上記溶媒を真空下で除去した。水を上記残留物に添加し、及び上記固体をろ過により回収した。収率：４．７５ｇ、１００％。
【０１７１】
中間体１６．  ３−（４−シアノ−ベンジルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸。  テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（５０ｍＬ）、メタノール（ＭｅＯＨ）（１０ｍＬ）及び１Ｎ水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）（５０ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）中の中間体１５（４．７５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を還流まで１時間熱した。上記反応を冷却し、及び１Ｎ  ＨＣｌで酸性化した。上記生成物を酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）に抽出した。上記層を分離し、及び上記有機層をろ過した。上記固体をメタノール（ＭｅＯＨ）で洗浄し、上記表題の生成物を得た。収率：２．２６ｇ、５９％。
【０１７２】
実施例６６．  ３−（４−シアノ−ベンジルスルファニル）−５，６−ヂメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）−アミド。  中間体１６（０．５８ｇ、１．５ｍｍｏｌ）をアルゴンでパージしたフラスコ中で無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（１５ｍＬ）中に溶解した。触媒量のＤＭＦ、続いて塩化オキサリル（０．４ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）をシリンジを介して添加した。上記反応を室温で１時間攪拌した。上記溶媒を真空下で除去した。上記残留物をＴＨＦ（１０ｍＬ）中に再溶解し、及び５−アミノテトラゾール（０．１５５ｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）を添加した。上記反応を環境温度で１．５時間攪拌した。上記反応をＨ2Ｏ及びＥｔＯＡｃで希釈した。上記固体をろ過し、ＭｅＯＨですすぎ、及びｉｎ  ｖａｃｕｏで乾燥させ、上記表題の生成物を得た。収率：０．４７ｇ、６９％。Ｃ20Ｈ16Ｎ6Ｏ3Ｓ2・０．２Ｈ2Ｏについてのマイクロ分析：計算された：Ｃ，５２．６７；Ｈ，３．６２；Ｎ，１８．４３．発見された：Ｃ，５２．３８；Ｈ，３．９０；Ｎ，１８．１６．
【０１７３】
生物学的実施例１
ＰＩ３Ｋγタンパク質発現及び精製プロトコル
ＥＳＦ９２１培地中で生育させたＳｐｏｄｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞にｇｌｕ−ｔａｇｇｅｄ  ｐ１０１を発現するバキュロウイルス及びＨＡ−ｔａｇｇｅｄ  ｐ１１０γを発現するバキュロウイルスを３：１のｐ１０１バキュロウイルス対ｐ１１０γバキュロウイルスの割合で共感染させた。Ｓｆ９細胞を１０Ｌバイオリアクター中で１×１０7総細胞／ｍＬになるまで生育させ、及び感染４８〜７２時間後に回収した。感染した細胞のサンプルをその後免疫沈降法及びＷｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔ分析法によりｐ１０１／ｐ１１０γＰＩ３キナーゼの発現について試験した（以下を参照のこと）。
【０１７４】
ＰＩ３Ｋγを精製するために、細胞ペーストのグラム当たり４倍量の室温の低浸透圧の溶解緩衝液（１ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１ｍＭ  ＤＴＴ、５ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  Ｐｅｆａｂｌｏｃ、０．５μＭ  アプロチニン、５μＭ  ロイペプチン、２μＭ  ペプスタチン、５μＭ  Ｅ６４、ｐＨ８）を冷凍した細胞ペレット上に攪拌しながら注ぎ、その後４００ｐｓｉの窒素「爆弾」（５９９ＨＣ  Ｔ３１６、Ｐａｒｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ，  Ｍｏｌｉｎｅ，  ＩＬ）中で溶解した。ＮａＣｌを１５０ｍＭになるように添加し、及びコール酸ナトリウムを１％になるように添加し、及びさらなる４５分間混合した。上記溶解物を１４，０００ｒｐｍでの２５分間の遠心分離によりきれいにした。上記溶解物をその後抗−ｇｌｕ−結合Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ｇ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅビーズ（Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，  Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，  ＣＡ）上に２０ｍＬ樹脂／５０ｇ細胞ペーストを用いてロードした。上記カラムを１５倍量の洗浄緩衝液（１ｍＭ  ＤＴＴ、０．２ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  Ｐｅｆａｂｌｏｃ、０．５μＭ  アプロチニン、５μＭ  ロイペプチン、２μＭ  ペプスタチン、５μＭ  Ｅ６４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１％コール酸ナトリウム、ｐＨ８）で洗浄した。ＰＩ３Ｋγをｇｌｕタグの結合と競合する１００μｇ／ｍＬのペプチドを含む６カラム体積量の洗浄緩衝液で溶離した。溶離したタンパク質（ＯＤ280記録をとることにより決定された）を含むカラム画分を回収し、及び０．２ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  Ｐｅｆａｂｌｏｃ、５μＭ  ロイペプチン、０．５％コール酸ナトリウム、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、及び５０％グリセロール、ｐＨ８中で透析した。上記画分をさらなる使用まで−８０℃で貯蔵した。
【０１７５】
生物学的実施例２
Ｇタンパク質サブユニット発現
Ｓｐｏｄｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞にｇｌｕ−ｔａｇｇｅｄ  Ｇタンパク質β1を発現するバキュロウイルス及びＧタンパク質β2を発現するバキュロウイルスを１：１のｇｌｕ−ｔａｇｇｅｄ  Ｇタンパク質β1バキュロウイルス対Ｇタンパク質β2バキュロウイルスの割合で共感染させた。Ｓｆ９細胞を１０Ｌのバイオリアクター中で生育させ、及び感染４８〜７２時間後に回収した。感染した細胞のサンプルを以下に示されるようにＷｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔ分析によりＧタンパク質β1／β2発現について試験した。細胞溶解物をホモジェナイズし、及び生物学的実施例１中のようにｇｌｕ−ｔａｇｇｅｄビーズのカラム上にロードし、及びｇｌｕペプチドでカラムから競合させて出し、及び生物学的実施例１中に示されるようにプロセスした。
【０１７６】
生物学的実施例３
Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔ分析
タンパク質サンプルを８％  Ｔｒｉｓ−Ｇｌｙｃｉｎｅゲル上で分け、及び４５μＭニトロセルロース膜に移した。上記ブロットをその後ＴＢＳＴ（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％  Ｔｗｅｅｎ  ２０、ｐｈ７．４）中の５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及び５％卵白アルブミンで室温で１時間ブロックし、及び０．５％ＢＳＡを含むＴＢＳＴ中に１：１０００に希釈した一次抗体で４℃で一晩インキュベートした。ｐ１１０γ、ｐ１１０α、ｐ１１０β、ｐ８５α、Ｇタンパク質β1、及びＧタンパク質γ2サブユニットについての一次抗体をＳａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，  Ｉｎｃ．，  Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，ＣＡから購入した。ｐ１０１サブユニット抗体をｐ１０１ペプチド抗原に基づいてＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，  ＡＬで開発した。
【０１７７】
上記一次抗体とのインキュベーション後、上記ブロットをＴＢＳＴ中で洗浄し、及び０．５％ＢＳＡを含むＴＢＳＴ中に１：１０，０００に希釈したヤギ−抗−ウサギＨＲＰ結合物（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，  ＣＡ，  ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  １７０−６５１５）と共に室温で２時間インキュベートした。上記抗体をＥＣＬ（商標）検出試薬（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．，  Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，  Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ）で検出し、及びＫｏｄａｋ  ＩＳＯ４００Ｆスキャナー上で定量した。
【０１７８】
生物学的実施例４
免疫沈降法
生物学的実施例１又は２からの１００μＬの細胞ペーストを解凍し、及び４００μＬの低浸透圧の溶解緩衝液（２５ｍＭ  ｔｒｉｓ、１ｍＭ  ＤＴＴ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  Ｐｅｆａｂｌｏｃ、５μＭ  ロイペプチン、５μＭ  Ｅ−６４（Ｒｏｃｈｅ）、１％  Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０、ｐＨ７．５〜８）で氷上で溶解した。上記溶解物をｇｌｕ−ｔａｇｇｅｄビーズ（Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｅｎｇｌａｎｄ，ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  ＡＦＣ−１１５Ｐ）と共に室温で２時間インキュベートした。上記ビーズを洗浄緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．８〜８、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ2、０．５％  ＮＰ４０）中で３回洗浄し、及び上記タンパク質を２倍のサンプル緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  ＬＣ１６７６）中で熱することにより上記ビーズから溶離させた。
【０１７９】
生物学的実施例５
ＰＩ３Ｋγ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏキナーゼ分析
表１中の化合物の阻害特性をｉｎ  ｖｉｔｒｏＰＩ３Ｋ分析において分析した。９６ウェルポリプロピレンプレートにおいて、それぞれのウェルに２μＬのＤＭＳＯ中の所望の最終濃度の５０倍の化合物をスポットした。それぞれの反応についての精製組換えｐ１０１／ｐ１１０γタンパク質（０．０３μｇ；〜２．７ｎＭ）及びＧタンパク質β1／γ2サブユニット（０．０９μｇ；〜５７．７ｎＭ）を分析緩衝液（３０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、及び１ｍＭ  ＤＴＴ）中で混合した。ＡＴＰ及び［γ−32Ｐ−ＡＴＰ］（０．０９μＣｉ）を、上記反応中の最終ＡＴＰ濃度が２０μＭであるようにこの混合物に添加した。脂質ミセルを上記分析緩衝液中でフォスファチヂルイノシトール−４，５−二リン酸（ＰＩＰ2）、フォスファチヂルエタノールアミン（ＰＥ）、及びＮａ−コール酸を１０分間超音波処理し、ＭｇＣｌ2を添加し、及び氷上で２０分間インキュベートすることにより形成させ、上記反応中の最終濃度は２５μＭ  ＰＩＰ2、３００μＭ  ＰＥ、０．０２％Ｎａ−コール酸、及び１０ｍＭ  ＭｇＣｌ2であった。上記反応を５０μＬの総体積中の等体積の脂質及び酵素の混合物を添加することにより開始し、室温で２０分間反応させ、及び１００μＬ  ７５ｍＭ  Ｈ3ＰＯ4で停止させた。上記脂質生成物をガラスファイバーフィルタープレートに移し、及び７５ｍＭ  Ｈ3ＰＯ4で何回か洗浄した。放射活性脂質生成物（ＰＩＰ3）の存在を、Ｗａｌｌａｃ  Ｏｐｔｉｐｈａｓｅ  ｍｉｘをそれぞれのウェルに添加し、及びＷａｌｌａｃ  １４５０  Ｔｒｉｌｕｘプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，  Ｂｏｓｔｏｎ，  ＭＡ  ０２１１８）内でカウントすることにより計測した。試験されたそれぞれの化合物についてのＩＣ50は表１中にμＭで報告される：
【０１８０】
【表９】
2006526614.tif 000035
【０１８１】
【表１０】
2006526614.tif 000036
【０１８２】
【表１１】
2006526614.tif 000037
【０１８３】
本明細書中に示される実施例及び態様は例示の目的のためのみであること、及びそれに照らしたさまざまな改変又は変化が当業者に提案されるであろう及びこの明細書の本質及び範囲並びに付属の請求項の範囲内に含まれるべきであることが理解される。本明細書中に引用される全ての公開公報、特許、及び特許出願は全ての目的についてそれらを全体として本明細書中に援用する。
【国際調査報告】
2006526614.tif 000040
2006526614.tif 000041
2006526614.tif 000042