(57)【要約】ＮＨＥ−３阻害剤としての、式（Ｉ）：【化１】2004501082.tif 000007式中、Ａｒは、無置換またはモノ−Ｒ３−置換フェニルまたはナフチルであり、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ、互いに独立して、Ｈ、Ａ、ＯＡ、ＨａｌまたはＣＦ３であり、Ｒ３は、Ａ、ＯＡ、ＨａｌまたはＣＦ３であり、Ａは、１、２、３、４、５または６個の炭素原子を有するアルキルであり、Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、で表される化合物、およびその塩および溶媒和物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＮＨＥ−３阻害剤としての、式Ｉ：
【化１】
2004501082.tif 000006
式中、
Ａｒは、無置換か、または、モノ−Ｒ３−置換フェニルまたはナフチルであり、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ａ、ＯＡ、ＨａｌまたはＣＦ３であり、
Ｒ３は、Ａ、ＯＡ、ＨａｌまたはＣＦ３であり、
Ａは１、２、３、４、５または６個の炭素原子を有するアルキルであり、そして
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、
で表される化合物、およびそれらの生理学的に許容し得る塩および溶媒和物。
【請求項２】
請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、筋緊張亢進、血栓症、心臓、末梢および中枢神経系、および卒中の虚血状態、末梢器官および四肢の虚血状態の治療、ならびに、ショック状態の治療のための医薬の製造への使用。
【請求項３】
請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、外科手術および臓器移植に使用するための医薬の製造、および、外科的措置のための移植組織の保存および貯蔵への使用。
【請求項４】
請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、細胞増殖が１次的または２次的な原因である疾患の治療、脂肪代謝障害または混乱した呼吸動作の治療または予防のための医薬の製造への使用。
【請求項５】
請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、腎虚血、虚血性腸疾患の治療、または急性または慢性腎疾患の予防のための医薬の製造への使用。
【請求項６】
少なくとも１種の請求項１に記載のＮＨＥ−３阻害剤および／または少なくとも１種のその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物を含有することを特徴とする、医薬製剤。
【請求項７】
６−クロロ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−ブロモ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６，７−ジメトキシ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
７−クロロ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
８−メチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（２−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−トリフルオロメチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３，４−ジメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−クロロ−４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−エチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−８−フルオロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−７−メチル−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（２，４−ジメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−イソプロピルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（２−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−フルオロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−８−メチル−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（２−クロロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
４−（３−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−８−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−７−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
からなる群から選択される化合物、およびその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ＮＨＥ−３阻害剤としての、式Ｉ：
【化２】
2004501082.tif 000002
式中、
Ａｒは、無置換か、または、モノ−Ｒ３−置換フェニルまたはナフチルであり、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ａ、ＯＡ、ＨａｌまたはＣＦ３であり、
Ｒ３は、Ａ、ＯＡ、ＨａｌまたはＣＦ３であり、
Ａは１、２、３、４、５または６個の炭素原子を有するアルキルであり、そして
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである、
で表される化合物、および、それらの生理学的に許容し得る塩および溶媒和物に関する。
【０００２】
式Ｉはまた、式Ｉ’：
【化３】
2004501082.tif 000003
で表される互変異性化合物を包含する。
他のナトリウム／プロトン交換輸送体サブタイプ３阻害剤は、例えば、ＥＰ ０ ８２５ １７８に記載されている。
式ＩおよびＩ’で表される化合物は、他の目的のための使用を有するとして、ＵＳ ３，１３１，１８７にすでに記載されている。
キナゾリニルグアニジン誘導体は、Ｖ．Ｉ． Ｓｈｖｅｄｏｖ らによりＰｈａｒｍ． Ｃｈｅｍ． Ｊ． （Ｅｎｇｌ． ｔｒａｎｓｌ．） １９８０、１４、５３２〜５３８またはＫｈｉｍ． Ｆａｒｍ． Ｚｈ． １９８０、１４、３８〜４３に、そして、Ｓ．Ｃ．Ｂｅｌｌ ｅｔ ａｌ．により、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｐｈａｒｍ． Ｃｈｅｍ． １９６２、５、６３〜６９に記載されている。
【０００３】
本発明は、有用な特性を有する新規な化合物、特に医薬の製造に使用できるものを探索することを目的とした。
驚くべきことに、式Ｉで表される化合物およびそれらの塩がよく耐容され、そしてナトリウム／プロトン交換輸送体サブタイプ３を阻害することが見出された。
式Ｉで表される化合物は、ヒト医薬および獣医薬における医薬活性成分として使用することができる。
【０００４】
Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体は、少なくとも６種の異なるアイソフォーム（ＮＨＥ−１〜ＮＨＥ−６）を有するファミリーを表すことが知られており、それらの全ては現在クローニングされている。サブタイプＮＨＥ−１は、体中の全ての組織に偏在的に分配されているが、他のＮＨＥサブタイプは、特定の器官、例えば腎臓または小腸の管腔壁（ｌｕｍｅｎ ｗａｌｌ）および反管腔壁（ｃｏｎｔｒａ−ｌｕｍｉｎａｌ ｗａｌｌ）などに選択的に発現されている。この分配は、様々なアイソフォームが果たす特定の機能、すなわち、一方ではサブタイプＮＨＥ−１による細胞内ｐＨおよび細胞容量の調整、および、他方ではアイソフォームＮＨＥ−２およびＮＨＥ−３による腸管および腎臓におけるＮａ＋の吸収と再吸収、を反映している。アイソフォームＮＨＥ−４は、主に胃で見出された。ＮＨＥ−５の発現は、脳および神経組織に限定されている。ＮＨＥ−６は、ミトコンドリアにおいてナトリウム／プロトン交換輸送体を形成するアイソフォームである。
【０００５】
アイソフォームＮＨＥ−３は、近位尿細管の頂側膜に特に発現している。したがって、ＮＨＥ−３阻害剤は、とりわけ、腎臓に対して保護作用を及ぼす。
アイソフォームＮＨＥ−３の選択的阻害剤の治療用途は多様である。ＮＨＥ−３阻害剤は、腎虚血の最中または腎移植中の腎の摘出、輸送および再潅流の最中のような、ＮＨＥ活性の活性化をもたらす病態生理学的な低酸素および虚血イベント後の組織損傷および細胞壊死を阻害、または、軽減する。
式Ｉで表される化合物は、酸素の供給が不足している器官の細胞内へのナトリウムおよび水の過剰な吸収を防ぐことにより、細胞保護作用を有している。
【０００６】
式Ｉで表される化合物は、血圧低下作用を有し、筋緊張亢進の処置のための医薬活性成分として好適である。
これらはさらにまた、利尿剤として好適である。
式Ｉで表される化合物は、単独で、または、他のサブタイプに特異的なＮＨＥ阻害剤との組合せで、抗虚血作用を有し、血栓症、アテローム性動脈硬化症、血管痙攣の場合に、器官、例えば腎臓および肝臓などの、手術前および手術後の保護のために、そして、慢性または急性腎不全の場合に使用することができる。
【０００７】
これらは、さらに、卒中、脳浮腫、神経系の虚血、種々の形態のショック、例えばアレルギー性、心原性、循環血液量減少性または細菌性ショックの治療のために、および、例えば次の状態：中枢性睡眠時無呼吸症、乳幼児突然死、術後低酸素症およびその他の呼吸障害、において呼吸動作（ｂｒｅａｔｈｉｎｇ ｄｒｉｖｅ）を改善するために用いることができる。
炭酸脱水素酵素（ｃａｒｂｏａｎｈｙｄｒａｓｅ）阻害剤との組合せにより、呼吸活性はさらに向上する。
式Ｉで表される化合物は、細胞の増殖、たとえば線維芽細胞増殖および平滑筋細胞の増殖に対し阻害効果を有し、したがって、細胞増殖が１次的または２次的な原因となっている疾患の治療に使用することができる。
【０００８】
式Ｉで表される化合物は、糖尿病の遅発性の合併症（ｄｅｌａｙｅｄ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ）、癌性疾患、線維性疾患、内皮障害、器官の肥大または過形成、特に前立腺過形成または前立腺肥大におけるものに使用できる。
これらはさらにまた、ある形態の筋緊張亢進、アテローム性動脈硬化症、糖尿病および増殖性疾患の決定および区別のための診断剤としても好適である。
式Ｉで表される化合物は、血清リポタンパク質レベルに有利な効果をも有するため、これらは、単独または他の医薬との組合せで、増加した血液脂肪レベルの治療に用いることができる。
【０００９】
本発明は、請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、血栓症、心臓、末梢および中枢神経系、および卒中の虚血状態、末梢器官および四肢の虚血状態の治療、ならびに、ショック状態の治療のための医薬の製造への使用に関する。
本発明は、さらにまた、請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、外科手術および臓器移植に使用するための医薬の製造、および、外科的措置のための移植組織の保存および貯蔵への使用にも関する。
【００１０】
本発明はまた、請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、細胞増殖が１次的または２次的な原因である疾患の治療、脂肪代謝障害または混乱した呼吸動作の治療または予防のための医薬の製造への使用にも関する。
本発明はまた、請求項１に記載の式Ｉで表される化合物およびその生理学的に許容し得る塩および／または溶媒和物の、腎虚血、虚血性腸疾患の治療、または急性または慢性腎疾患の予防のための医薬の製造への使用にも関する。
【００１１】
ナトリウム／プロトン交換輸送体サブタイプ３を阻害する物質の同定方法は、例えばＵＳ ５，８７１，９１９に記載されている。
１回より多く現れる式Ｉで表される化合物中の全ての基、例えばＡについて、それらの意味は、互いに独立である。
水和物および溶媒和物という用語は、例えば、半水和物、一水和物または二水和物を意味すると解され、溶媒和物という用語は、例えば、アルコール付加化合物（ａｌｃｏｈｏｌ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）、例えばメタノールまたはエタノールが付加されたものなどを意味すると解される。
【００１２】
上式において、Ａはアルキルであり、線状または分枝状であり、１、２、３、４、５または６個の炭素原子を有する。Ａは、好ましくはメチルであり、さらにエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルであり、さらにまた、ペンチル、１−、２−または３−メチルブチル、１，１−、１，２−または２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−または４−メチルペンチル、１，１−、１，２−、１，３−、２，２−、２，３−または３，３−ジメチルブチル、１−または２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、または１，１，２−または１，２，２−トリメチルプロピルである。
ＯＡは、好ましくはメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシまたはブトキシである。
Ｈａｌは、好ましくはＦ、ＣｌまたはＢｒであるが、またＩである。
【００１３】
Ａｒは、好ましくは無置換のフェニルまたはナフチル、さらにまた好ましくは、例えば、Ａ、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシまたはＣＦ３で単置換されたフェニルまたはナフチルである。
従って、本発明は特に、前記基の少なくとも１個が上記の好ましい意味の１つを有する式Ｉで表される化合物の使用に関する。化合物のいくつかの好ましい基は、式Ｉに従う以下の従属式Ｉａ〜ＩＩにより表現されてもよく、その中で詳細に指定されていない基は、式Ｉに示された意味を有するが、式中、
【００１４】
Ｉａにおいて、Ｒ１は、ＨまたはＨａｌであり、
Ｉｂにおいて、Ｒ１は、ＨまたはＨａｌであり、
Ｒ２は、Ｈであり、
Ｉｃにおいて、Ｒ１は、ＨまたはＨａｌであり、
Ｒ２は、Ｈであり、
Ａｒは、フェニルであり、
Ｉｄにおいて、Ｒ１は、ＨまたはＨａｌであり、
Ｒ２は、Ｈであり、
Ｒ３は、Ａ、ＯＡまたはＨａｌであり、
Ｉｅにおいて、Ａｒは、フェニルであり、
Ｉｆにおいて、Ａｒは、フェニルであり、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ、互いに独立して、Ｈ、Ａ、ＯＡ、ＨａｌまたはＣＦ３であり、
【００１５】
Ｉｇにおいて、Ａｒは、無置換またはモノ−Ｒ３−置換フェニルであり、
Ｒ１は、ＨまたはＨａｌであり、
Ｒ２は、Ｈであり、
Ｒ３は、Ａ、ＯＡまたはＨａｌであり、
Ｉｈにおいて、Ａｒは、モノ−Ｒ３−置換フェニルであり、
Ｒ１は、ＨまたはＨａｌであり、
Ｒ２は、Ｈであり、
Ｒ３は、Ａ、ＯＡまたはＨａｌであり、
Ｉｉにおいて、Ａｒは、モノ−Ｒ３−置換フェニルであり、
Ｒ１は、Ｈ、Ｈａｌ、ＯＡまたはＡであり、
Ｒ２は、Ｈであり、
Ｒ３は、Ｈａｌであり、
【００１６】
Ｉｊにおいて、Ａｒは、モノ−Ｒ３−置換フェニルであり、
Ｒ１は、Ｈ、Ｈａｌ、ＯＡまたはＡであり、
Ｒ２は、ＨまたはＯＡであり、
Ｒ３は、Ｈａｌであり、
Ｉｋにおいて、Ａｒは、無置換またはモノ−Ｒ３−置換フェニルであり、
Ｒ１は、Ｈ、Ｈａｌ、ＯＡまたはＡであり、
Ｒ２は、ＨまたはＯＡであり、
Ｒ３は、Ｈａｌであり、
Ｉｌにおいて、Ａｒは、無置換またはモノ−またはジ−Ｒ３−置換フェニル、
Ｒ１は、Ｈ、Ｈａｌ、ＯＡまたはＡであり、
Ｒ２は、Ｈ、Ｈａｌ、ＯＡまたはＡであり、
Ｒ３は、ＨａｌまたはＡであり、
Ａは、１、２、３または４個の炭素原子を有するアルキルまたはＣＦ３である。
【００１７】
本発明はまた、
６−クロロ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−ブロモ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６，７−ジメトキシ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
７−クロロ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
８−メチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（２−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
【００１８】
６−トリフルオロメチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３，４−ジメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−クロロ−４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−エチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−８−フルオロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−７−メチル−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（２，４−ジメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−イソプロピルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
【００１９】
６−クロロ−４−（２−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−フルオロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−８−メチル−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（４−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（２−クロロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
４−（３−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−（３−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−８−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−７−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
からなる群から選択される新規な化合物およびその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物にも関する。
【００２０】
加えて、式Ｉで表される化合物およびまたその製造のための出発物質は、文献（例えば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ ［有機化学の方法］、Ｇｅｏｒｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔなどの標準的な著作）に記載されたような、それ自体自明の方法により、正確に言えば、その反応に好適な既知の反応条件下で製造される。それ自体公知だが、ここで詳細に記載されていない変法もまた使用できる。
【００２１】
出発物質は、所望ならば、それらが反応混合物から単離されないが、その代わりさらに式Ｉで表される化合物に直ちに変換されるように、その場で（ｉｎ ｓｉｔｕ）形成することができる。
式Ｉの２−グアニジノ−４−アリールキナゾリンは、好ましくは、式ＩＩ：
【化４】
2004501082.tif 000004
式中、Ｒ１、Ｒ２およびＡｒは、請求項１で定義されたとおりである、
で表されるｏ−アミノフェニルケトンを、１−シアノグアニジンと反応させることにより製造される。
反応は不活性溶媒中で行なわれる。
【００２２】
好ましい不活性溶媒は、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンまたはキシレンなどの炭化水素、トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、テトラクロロメタン、クロロホルムまたはジクロロメタンなどの塩素化炭化水素、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはジオキサンなどのエーテル、エチレングリコールモノメチルまたはモノエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル（ジグリム）などのグリコールエーテル、アセトンまたはブタノンなどのケトン、アセトアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）またはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのアミド、アセトニトリルなどのニトリル、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド、二硫化炭素、蟻酸または酢酸などのカルボン酸、ニトロメタンまたはニトロベンゼンなどのニトロ化合物、酢酸エチルなどのエステル、または、前記溶媒の混合物である。
【００２３】
ＤＭＦ、水またはアルコールが好ましく使用される。
反応は、極めて特に好ましくは、溶媒なしで、即ち融解生成物中で、１００〜２００℃の温度で行なわれる。
ＡｌＣｌ３、ＴｉＣｌ４、ｐ−トルエンスルホン酸、ＢＦ３、酢酸、硫酸、蓚酸、ＰＯＣｌ３または五酸化リンなどの酸性触媒の存在が有利である。
好ましい変種は、すでに塩としての、例えば塩酸塩としての反応物の１つを用いることを含む。
【００２４】
式Ｉで表される化合物の製造のためのさらに有用な方法は、１−シアノグアニジンの代わりに式ＩＩＩ
ＨＮ＝ＣＸ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２ＩＩＩ
式中、
Ｘは、−ＳＡ、−ＳＡｒ、ＯＡまたはＯＡｒであり、
そして、ＡｒおよびＡは、例えば、請求項１で定義されたとおりである、
で表される化合物を、式ＩＩで表される化合物と反応させることを含む。
【００２５】
最後に、式Ｉで表される化合物は、式ＩＶ：
【化５】
2004501082.tif 000005
式中、Ａｒ、Ｒ１およびＲ２は、請求項１で定義したとおりである、
で表される２−クロロ−４−アリールキナゾリンと、グアニジンとの反応により製造できる。
【００２６】
式Ｉの塩基は、例えば、エタノールなどの不活性溶媒中における等量の塩基および酸との反応と、引き続く蒸発により、酸を用いて対応する酸付加塩に変換することができる。この反応に好適な酸は、特に、生理学的に許容し得る塩を提供するものである。従って、無機酸、例えば硫酸、硝酸、塩酸または臭化水素酸などのハロゲン化水素酸、オルトリン酸などのリン酸、または、スルファミン酸、さらにまた有機酸、特に脂肪族の、脂環式の、芳香族脂環式の、芳香族のまたは多環式の単塩基または多塩基カルボン酸、スルホン酸または硫酸、例えば、蟻酸、酢酸、プロピオン酸、ピバル酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、メタン−またはエタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンモノ−およびジスルホン酸、およびラウリルスルホン酸である。生理学的に許容し得ない酸との塩、例えば、ピクリン酸塩は、式Ｉで表される化合物の単離および／または精製に使用することができる。
【００２７】
本発明はさらにまた、ＮＨＥ−３阻害剤としての式Ｉで表される化合物、および／または生理学的に許容し得る塩の、医薬製剤の製造、特に非化学的方法によるものへの使用に関する。この場合、これらは、少なくとも１種の固形、液状および／または半液状賦形剤または助剤と共に、そして、所望ならば１種または２種以上のさらなる活性成分との組合せで好適な用量形態に変換することができる。
本発明はさらにまた、少なくとも１種の式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤および／または少なくとも１種のその生理学的に許容し得る塩および溶媒和物を含む医薬製剤に関する。
【００２８】
これらの製剤は、ヒト医薬または獣医薬において医薬として使用することができる。好適な賦形剤は、経腸（例えば経口）、非経口または局所投与に好適で、新規化合物と反応しない有機または無機物質、例えば水、植物油、ベンジルアルコール、アルキレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロールトリアセテート、ゼラチン、乳糖またはデンプンなどの炭水化物、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはワセリンである。経口投与に好適なのは、特に錠剤、ピル、被覆錠剤、カプセル、粉末、顆粒、シロップ、ジュースまたはドロップであり、直腸投与に好適なのは坐剤であり、非経口投与に好適なのは、溶液、好ましくはオイルベースのまたは水性の溶液、さらにまた懸濁液、エマルジョンまたは移植片であり、そして局所適用に好適なのは、軟膏、クリームまたはパウダーであり、またはパッチで経皮的になされるものである。
【００２９】
本発明による新規化合物は、凍結乾燥してもよく、精製した凍結乾燥物を、例えば、注射製剤の製造に使用してもよい。示された前記製剤は、滅菌してもよく、および／または、潤滑剤、保存剤、安定剤などの助剤、および／または、湿潤剤、乳化剤、浸透圧を変更するための塩、緩衝物質、着色剤および風味剤、および／または、多数のさらなる活性成分、例えば１種または２種以上のビタミンを含んでもよい。
エアロゾル又はスプレーの形態での投与のための好適な薬学製剤は、例えば、薬学的に許容し得る溶媒中の式Ｉで表される活性成分の溶液、懸濁液またはエマルジョンである。
【００３０】
式Ｉで表される化合物およびそれらの生理学的に許容し得る塩および溶媒和物は、上記の疾患または病的状態の治療および／または予防に使用することができる。
一般的に、本発明の物質は、好ましくは用量単位あたり、０．１〜５００ｍｇ、特に１〜１０ｍｇの用量で投与される。日量は、好ましくは体重１ｋｇあたり約０．００１〜１０ｍｇである。しかしながら、各患者への具体的な用量は、広範な因子、例えば、用いられる具体的な化合物の有効性、年齢、体重、健康の一般状態、性別、食餌、投与の時間および方法、排泄率、医薬の組合せおよび治療が適用される特定の疾患の重篤度に左右される。経口投与が好ましい。
【００３１】
例
好ましいＮＨＥ−３阻害剤は、
４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、融点２４７〜２５０℃（分解）、
４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２３６〜２３８℃、
６−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、
６−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３０９〜３１０℃、
４−（４−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点１８５〜１８９℃、
４−（４−クロロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２９６〜２９７℃、
【００３２】
４−（４−メトキシフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２７５〜２７７℃、
４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３００〜３０１℃、
６−クロロ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２７５〜２７６℃、
７−メチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３００〜３０１℃、
６−ブロモ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２９４〜２９５℃、
７−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２８８〜２９０℃、
【００３３】
７−メトキシ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２８０〜２８２℃、
５−メトキシ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２７２〜２７３℃、
６，７−ジメトキシ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２２０〜２２２℃、
６−メトキシ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２７８〜２７９℃、
８−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３０９〜３１０℃、
５−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３００℃、
【００３４】
７−クロロ−４−（２−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２８１〜２８３℃、
６−クロロ−４−（４−クロロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２６１〜２６２℃、
６−ブロモ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、分解２９１〜２９３℃、
６−メチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２９５〜２９６℃、
６−フルオロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２８３〜２８５℃、
６−フルオロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点１９３〜１９５℃、
【００３５】
６−クロロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３１２℃、
８−メチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２８５〜２８６℃、
６−クロロ−４−（２−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３０８℃、
６−クロロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３３６℃、
６−トリフルオロメチル−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３００〜３０２℃、
６−クロロ−４−（３，４−ジメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３２３〜３２５℃、
【００３６】
６−クロロ−４−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３１７〜３２０℃、
６−クロロ−４−（３−クロロ−４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３３６〜３３８℃、
６−クロロ−４−（４−エチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、ｐ−トルエンスルホン酸塩、融点１７９〜１８４℃、
６−クロロ−４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、二塩酸塩、融点３２９〜３３２℃、
６−クロロ−８−フルオロ−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、ｐ−トルエンスルホン酸塩、融点２９０〜３００℃、
６−クロロ−７−メチル−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、ｐ−トルエンスルホン酸塩、融点３６０℃、
【００３７】
６−クロロ−４−（２，４−ジメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、ｐ−トルエンスルホン酸塩、
６−クロロ−４−（３−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３１９〜３２３℃、
６−クロロ−４−（４−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３３０℃、
６−クロロ−４−（４−イソプロピルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３２６〜３２９℃、
６−クロロ−４−（２−ブロモフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３１６〜３１８℃、
６−クロロ−４−（３−フルオロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点２３０〜２３２℃、
【００３８】
６−クロロ−８−メチル−４−（４−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３１０℃、
６−クロロ−４−（４−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点３４６〜３４８℃、
６−クロロ−４−（２−クロロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、ｐ−トルエンスルホン酸塩、融点３３２〜３３６℃、
４−（３−メチルフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点１６０〜１６３℃、
６−クロロ−４−（３−フルオロフェニル）−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、３０８℃から分解、
６−クロロ−８−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、塩酸塩、融点１６３〜１６６℃、
６−クロロ−７−クロロ−４−フェニル−２−キナゾリニルグアニジン、ｐ−トルエンスルホン酸塩、融点２６９〜２７１℃、
からなる群から選択される化合物である。
【００３９】
薬学的試験
ＮＨＥ−３阻害剤としての式Ｉで表される化合物の特徴化のために用いた方法を以下に記載する。
式Ｉで表される化合物は、アイソフォームＮＨＥ−１〜ＮＨＥ−３に対するそれらの選択性に従って特徴化した。３種のアイソフォームが、マウス線維芽細胞株において安定な形態で発現されていた。化合物の阻害作用は、細胞内アシドーシス後の細胞内へのＥＩＰＡ−感受性の２２Ｎａ＋の取り込みの測定により評価した。
【００４０】
材料および方法
異なるＮＨＥアイソフォームを発現するＬＡＰ１細胞株
アイソフォームＮＨＥ−１、−２および−３を発現するＬＡＰ１細胞株をＪ． Ｐｏｕｙｓｓｅｇｕｒ教授（ニース、フランス）より得た。トランスフェクションをＦｒａｎｃｈｉら（１９８６）の方法で行なった。細胞を１０％不活化ウシ胎児血清（ＦＣＳ）加ダルベッコ変法イーグル培地中で培養した。ＮＨＥ発現細胞の選択には、Ｓａｒｄｅｔら（１９８９）のいわゆる「酸死滅法（ａｃｉｄ ｋｉｌｌｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ）」を用いた。最初に細胞を３０分間、ＮＨ４Ｃｌ含有、重炭酸塩およびナトリウム非含有緩衝液中でインキュベートした。次に細胞外ＮＨ４Ｃｌを、重炭酸塩、ＮＨ４Ｃｌおよびナトリウム非含有緩衝液での洗浄により除去した。次に細胞を重炭酸塩非含有、ＮａＣｌ含有緩衝液中で培養した。ＮＨＥを機能的に発現している細胞だけが、それらが対象となっている細胞内酸性化において生存することができた。
【００４１】
アイソフォーム選択性に関するＮＨＥ阻害剤の特徴化
アイソフォームＮＨＥ−１、ＮＨＥ−２およびＮＨＥ−３を発現している上記のマウス線維芽細胞株で、化合物を、アイソフォームに関する選択性について、Ｃｏｕｎｉｌｌｏｎら（１９９３）およびＳｃｈｏｌｚら（１９９５）により記載された手順によって試験した。細胞をＮＨ４Ｃｌプレパルス法および引き続く重炭酸塩非含有、２２Ｎａ＋含有緩衝液中でのインキュベートにより細胞内酸化した。細胞内酸化により、ＮＨＥが活性化され、ナトリウムが細胞内に取り込まれた。試験化合物の効果は、ＥＩＰＡ（エチルイソプロピルアミロジド）感受性２２Ｎａ＋取り込みの抑制として表した。
【００４２】
次にＮＨＥ−１、ＮＨＥ−２およびＮＨＥ−３を発現している細胞を、２４穴マイクロタイタープレートに５〜７．５ｘ１０４細胞／穴の密度で播種し、コンフルエントになるまで２４〜４８時間培養した。培地を吸引により除去し、細胞を６０分間、３７℃で、ＮＨ４Ｃｌ緩衝液（５０ｍＭ ＮＨ４Ｃｌ、７０ｍＭ塩化コリン、１５ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ７．０）中でインキュベートした。次に緩衝液を除去し、細胞を塩化コリン洗浄緩衝液（１２０ｍＭ塩化コリン、１５ｍＭ ＰＩＰＥＳ／トリス、０．１ｍＭウアバイン、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、２ｍＭ ＣａＣｌ２、ｐＨ７．４）で２回迅速に被覆した。細胞をこの緩衝液中で６分間インキュベートした。インキュベーション時間経過後、インキュベーション緩衝液を吸引により除去した。細胞外放射能を除去するため、細胞を氷冷リン酸緩衝食塩液（ＰＢＳ）で、素早く４回洗浄した。次に細胞を１穴あたり０．３ｍｌの０．１Ｎ ＮａＯＨの添加により可溶化した。細胞片含有液をシンチレーションチューブに移した。次に各穴を２回、０．３ｍｌの０．１Ｎ ＮａＯＨで洗浄し、そして洗液を対応するシンチレーションチューブに同様に導入した。シンチレーションカクテルを細胞溶解物を含有するチューブに添加し、細胞内に取り込まれた放射能をβ線の測定により決定した。
【００４３】
文献
Ｃｏｕｎｉｌｌｏｎら、（１９９３） Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ４４： １０４１−１０４５
Ｆｒａｎｃｈｉら、（１９８６） Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８３： ９３８８−９３９２
ＭｏｒｇａｎおよびＣａｎｅｓｓａ、（１９９０） Ｊ． Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ｂｉｏｌ． １１８、１９３−２１４
Ｓａｒｄｅｔら、（１９８９） Ｃｅｌｌ ５６： ２７１−２８０
Ｓｃｈｏｌｚら、（１９９５） Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ． Ｒｅｓ． ２９： ２６０−２６８
【００４４】
以下の例は医薬製剤に関する。
例Ａ：注射バイアル
二回蒸留（ｂｉｄｉｓｔｉｌｌｅｄ）水３ｌ中の、１００ｇの式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤と５ｇのリン酸水素二ナトリウムの溶液を、２Ｎ塩酸でｐＨ６．５に調製し、滅菌濾過し、注射バイアルに移し、無菌条件下で凍結乾燥し、そして、無菌条件下で密封する。各注射バイアルは５ｍｇの活性成分を含む。
【００４５】
例Ｂ：坐剤
２０ｇの式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤の混合物を１００ｇの大豆レシチンおよび１４００ｇのココアバターと融解し、型に注ぎ、冷却する。各坐剤は２０ｍｇの活性成分を含む。
【００４６】
例Ｃ：溶液
９４０ｍｌの二回蒸留水中の１ｇの式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤、９．３８ｇのＮａＨ２ＰＯ４？２Ｈ２Ｏ、２８．４８ｇのＮａ２ＨＰＯ４？１２Ｈ２Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムから、溶液を製造する。ｐＨを６．８に調製し、溶液を１ｌにし、そして、照射により滅菌する。この溶液は点眼剤として使用することができる。
【００４７】
例Ｄ：軟膏
５００ｍｇの式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤を無菌条件下で９９．５ｇのワセリンと混合する。
【００４８】
例Ｅ：錠剤
１ｋｇの式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤、４ｋｇの乳糖、１．２ｋｇのジャガイモデンプン、０．２ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムを、各錠が１０ｍｇの活性成分を含むように、慣用の方法で圧縮し、錠剤を得る。
【００４９】
例Ｆ：被覆錠剤
錠剤を例Ｅと同様に圧縮し、次いで、慣用の方法でショ糖、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカントおよび色素の被覆で被覆する。
【００５０】
例Ｇ：カプセル
２ｋｇの式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤を硬質ゼラチンカプセルに、各カプセルが２０ｍｇの活性成分を含むように、慣用の方法で導入する。
【００５１】
例Ｈ：アンプル
６０ｌの二回蒸留水中の１ｋｇの式Ｉで表されるＮＨＥ−３阻害剤の溶液を滅菌濾過し、アンプルに移し、無菌条件下で凍結乾燥し、無菌条件下で密封する。各アンプルは１０ｍｇの活性成分を含む。
【国際公開パンフレット】
2004501082.tif 000008
2004501082.tif 000009
2004501082.tif 000010
2004501082.tif 000011
2004501082.tif 000012
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2004501082.tif 000019
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2004501082.tif 000021
2004501082.tif 000022
2004501082.tif 000023
2004501082.tif 000024
2004501082.tif 000025
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2004501082.tif 000027
2004501082.tif 000028
2004501082.tif 000029
2004501082.tif 000030
【国際調査報告】
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2004501082.tif 000032
2004501082.tif 000033
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