(57)【要約】本発明は、安定なルテインおよびその誘導体を得るための方法に関する。さらに本発明は、ルテイン、ルテインエステル、テトラヒドロクルクミノイド、およびカルノシン酸を含有してなる種々の組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）マリゴールドの花の花弁を陰干しする工程；
ｂ）工程ａ）の乾燥マリゴールドの花の花弁を溶媒で抽出し、抽出溶液を作製する工程；
ｃ）アニオン交換樹脂が充填されたカラムに抽出溶液を通過させ、溶出液を得る工程；
ｄ）溶出液を希釈して希釈溶液を形成させる工程；および
ｅ）希釈溶液からルテイン結晶を回収する工程
を含む、安定化ルテイン組成物の製造プロセス。
【請求項２】
マリゴールド花弁の陰干しが３〜４時間室温で行われる請求項１記載のプロセス。
【請求項３】
工程ｂ）が、１００ｋｇの乾燥マリゴールド花弁に対して４００Ｌのエチルアルコールの比率で行われ、工程ｂ）が、乾燥した花の花弁およびエチルアルコールの混合物を室温で５時間インキュベートすることをさらに含む請求項２記載のプロセス。
【請求項４】
工程ｂ）の溶媒がアルコールである請求項３記載のプロセス。
【請求項５】
工程ｂ）のアルコールがエチルアルコールである請求項４記載のプロセス。
【請求項６】
工程ｂ）が、エチルアルコールおよび乾燥マリゴールド花弁の混合物を排出することおよび適切なコンテナに液体を回収すること、同じマリゴールド花弁で少なくともさらに１回手順を繰り返すこと、および７０％アルコール溶液を得るのに十分な量の水で回収した液体を希釈することをさらに含む請求項３記載のプロセス。
【請求項７】
工程ｄ）の溶出液が脱イオン水で希釈される請求項１記載のプロセス。
【請求項８】
減圧下での回収されたルテイン結晶の乾燥および窒素雰囲気下での乾燥ルテイン結晶の包装をさらに含む請求項１記載のプロセス。
【請求項９】
式（Ｉ）の組成物またはその誘導体の安定化をさらに含み、ここで前記プロセスが包装工程の前に、ルテイン結晶と０．００１〜０．１ｗｔ％の量のテトラヒドロクルクミノイド、０．００１〜０．１ｗｔ％の量のクルクミノイドおよび０．００１〜０．１ｗｔ％の量のカルノシン酸の少なくとも１つとを合わせ、ＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物を形成させる工程をさらに含む請求項８記載のプロセス。
【請求項１０】
式（Ｉ）の組成物またはその誘導体のさらなる安定化をさらに含み、ここで前記プロセスが包装工程の前に：
ｉ）ショ糖スラリーとＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物とを１〜１０部のショ糖に対して１部のＸＥＮＯＧＡＲＤの比で合わせ、均一なブレンドを形成させる工程；
ｉｉ）工程ｉ）の均一なブレンドに１０部の澱粉を添加し、澱粉混合物を形成させる工程；
ｉｉｉ）０．１〜１０部のＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物に対して１部のＰＶＰの量でＰＶＰのエタノール溶液を添加し、得られた混合物を工程ｉｉ）の澱粉混合物に対して乾燥させ、エタノール澱粉混合物を形成させる工程
をさらに含む請求項９記載のプロセス。
【請求項１１】
ｉｖ）エタノール澱粉混合物顆粒を形成させ、タルクを潤滑させたトレイに顆粒を回収する工程および減圧下で顆粒を乾燥させる工程；および
ｖ）乾燥顆粒をコーティングパンに移し、減圧下で乾燥顆粒を乾燥させ、乾燥顆粒をふるいにかけ、乾燥顆粒を包装する工程
をさらに含む請求項１０記載のプロセス。
【請求項１２】
工程ｖ）のコーティングパンが、１部のパプリカ樹脂に対して約９部のＰＶＰの比率でＰＶＰおよびパプリカ樹脂でコートされる請求項１１記載のプロセス。
【請求項１３】
ａ）マリゴールドの花の花弁を陰干しする工程；
ｂ）工程ａ）の乾燥マリゴールドの花の花弁を超臨界二酸化炭素で処理する工程；
ｃ）超臨界二酸化炭素を蒸発させ、オレオ樹脂を残す工程；
ｄ）アニオン交換樹脂が充填されたカラムにオレオ樹脂のアルコール溶液を通過させる工程；および
ｅ）溶出液からルテイン結晶を回収する工程
を含む安定化ルテイン組成物の製造プロセス。
【請求項１４】
マリゴールドの花の花弁が室温で３〜４時間乾燥される請求項１３記載のプロセス。
【請求項１５】
乾燥マリゴールドの花の花弁が超臨界二酸化炭素で１０時間処理される請求項１４記載のプロセス。
【請求項１６】
アルコール溶液が７０％アルコール溶液である請求項１３記載のプロセス。
【請求項１７】
窒素雰囲気下で、回収したルテイン結晶を包装する工程をさらに含む請求項１３記載のプロセス。
【請求項１８】
式（Ｉ）の組成物またはその誘導体の安定化をさらに含み、ここで前記プロセスが包装工程の前に、ルテイン結晶と０．００１〜０．１ｗｔ％の量のテトラヒドロクルクミノイド、０．００１〜０．１ｗｔ％の量のクルクミノイドおよび０．００１〜０．１ｗｔ％の量のカルノシン酸の少なくとも１つとを組み合わせ、ＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物を形成させる工程をさらに含む請求項１３記載のプロセス。
【請求項１９】
式（Ｉ）の組成物またはその誘導体のさらなる安定化をさらに含み、ここで前記プロセスがさらに包装工程の前に：
ｉ）ショ糖スラリーとＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物とを１〜１０部のショ糖に対して１部のＸＥＮＯＧＡＲＤの比で合わせ、均一なブレンドを形成させる工程；
ｉｉ）工程ｉ）の均一なブレンドに１０部の澱粉を添加し、澱粉混合物を形成させる工程；
ｉｉｉ）０．１〜１０部のＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物に対して１部のＰＶＰの量でＰＶＰのエタノール溶液を添加し、得られた混合物を工程ｉｉ）の澱粉混合物に対して乾燥させ、エタノール澱粉混合物を形成させる工程
をさらに含む請求項１８記載のプロセス。
【請求項２０】
ｉｖ）エタノール澱粉混合物顆粒を形成させ、タルクを潤滑させたトレイに顆粒を回収し、減圧下で顆粒を乾燥させる工程；および
ｖ）乾燥顆粒をコーティングパンに移し、減圧下で顆粒を乾燥させ、乾燥顆粒をふるいにかけ、乾燥顆粒を包装する工程
をさらに含む請求項１９記載のプロセス。
【請求項２１】
工程ｖ）のコーティングパンが、１部のパプリカ樹脂に対して約９部のＰＶＰの比率で、ＰＶＰおよびパプリカ樹脂でコートされる請求項２０記載のプロセス。
【請求項２２】
少なくとも１つのルテインおよびルテインエステルならびに０．００１〜０．３部の安定剤化合物、テトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド、およびカルシノン酸、および２つまたはそれより多くのかかる安定化剤の混合物を含有してなる組成物。
【請求項２３】
抗酸化に有効な量のルテインまたはルテインエステル、ならびにそれぞれ０．０１〜１０．０ｗｔ％の比率でテトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド、およびカルシノン酸を含有してなる請求項２２記載の組成物。
【請求項２４】
生物学的に有効な量のルテインまたはルテインエステルおよび０．０１〜１０．０ｗｔ％の比率でテトラヒドロクルクミノイドを含有してなる請求項２２記載の組成物。
【請求項２５】
生物学的に有効な量のルテインまたはルテインエステルおよび０．０１〜１０．０ｗｔ％の比率でクルクミノイドを含有してなる請求項２２記載の組成物。
【請求項２６】
生物学的に有効な量のルテインまたはルテインエステルおよび０．０１〜１０．０ｗｔ％の比率でカルノシン酸を含有してなる請求項２２記載の組成物。
【請求項２７】
生物学的に有効な量のルテインまたはルテインエステルおよびそれぞれ０．０１〜１０．０ｗｔ％の比率でテトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド、およびカルノシン酸を含有してなる請求項２２記載の組成物。
【請求項２８】
ルテインまたはルテインエステル、それぞれ等量のテトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド、およびカルシノン酸を含有してなる請求項２２記載の組成物。
【請求項２９】
陰干しした粉砕マリゴールド花弁を超臨界二酸化炭素に供することから得られたマリゴールドオレオ樹脂から構成される柔らかい抽出物、植物油、クエン酸、および天然のトコフェロールをそれぞれ０．５〜５．０重量％の量で含有してなるＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【請求項３０】
前記植物油が精製ダイズ油である請求項２９記載のＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【請求項３１】
５．０重量％以上の量のルテイン、１．０重量％以上の量のゼアキサンチン、１．０重量％以上の量のピペリン、および１．０重量％以上の量の他のカロテノイドを含有してなるＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【請求項３２】
ゼアキサンチンエステル、クリプトキサンチンエステル、β−カロテンエステルからなる群より選ばれる１つまたはそれより多くの安定化化合物を１．０重量％以上であるが、１０．０重量％以下の量でさらに含有してなる請求項３１記載のＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【請求項３３】
パプリカカロテノイドエステル、テトラヒドロクルクミノイド、ロスマリン酸、緑茶カテキンからなる群より選ばれる１つまたはそれより多くの安定化化合物を１．０重量％以上であるが、１０．０重量％以下の量でさらに含有してなる請求項２０記載のＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【請求項３４】
１．０重量％以上の量のゼアキサンチン、５．０重量％以上の量のルテイン、１．０重量％以上の量のピペリン、および少なくとも１つのカプサンチンのエステル、カプソルビン、ゼアキサンチン、β−カロテン、またはクリプトキサンチンを１．０重量％以上の量で含有してなる請求項３１記載のＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【請求項３５】
ピペリンが２．０重量％以上の量で存在する請求項３４記載のＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【請求項３６】
５．０重量％以上の量のルテイン、１．０重量％以上のゼアキサンチン、１．０重量％以上のピペリン、および１．０重量％以上の量の他のカロテノイドを含有してなるＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
本出願は、２００１年１月３０日に出願された米国仮出願第６０／２６４，７２２号の利益を主張する。
【０００２】
ルテインは、その抗酸化剤および免疫調節／免疫刺激作用のためにニュートラシューティカル（ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）として重要性を獲得し始めた果実および野菜において見出されるカロテノイドである。これらの作用は、年齢関連黄斑変性、白内障、アテローム性動脈硬化症、およびいくつかの型の癌のような条件下で、酸化ストレスおよび／または免疫系の低下を減少させる能力において著明である。また、その黄色から赤色の呈色、およびヒト食物における天然の発生のために、ルテインはまた食物着色料として使用される。
【０００３】
ニュートラシューティカルおよび化粧品用途に適したルテインは、花、果実および根（例えば、ニンジンおよびイエローポテトであるが、これらに限定されない）のクロモプラストにおいて見出されうる。ルテインは、長鎖脂肪性エステル、典型的にはジエステル、パルミチン酸およびミリスチン酸等の酸のジエステル、例えば、ルテインジパルミネート、ルテインジミリステートおよびルテインモノミリステートとして植物クロモプラスト中に典型的に存在する。一旦、ルテインが植物から単離されると、ルテインはエステル形態または遊離形態のいずれでも生物学的に活性であることも注目されている。
【０００４】
さらに、ルテインを構成するカロテノイドの高度に不飽和な非抱合型の鎖は、空気、酸化剤、還元剤、および構造変化に非常に敏感である。それゆえ、保存中のルテインの損失が良く知られている。さらに、ルテインの損失は、プロセスの加工していない材料を取り扱う段階ほどの初期に始まることが示された。注意深く制御した条件下での白色蛍光への曝露は、１日当たり０．８〜１０．７％の範囲でルテインの分解を生じたことが記載された（Ｎａｈｒｕｎｇ， ４４， ３８−４１参照）。しかし、アスコルビン酸、アルカリｐＨ、低温（４℃）および暗所は、ルテインを含むカロテノイドの分解を遅延させることが見出された（Ａｋａｄ．Ｎａｕｋ．ＳＳＳＲ．， １２７， １１２８−１１３１； Ｃｈｅｍ Ａｂｓｔｒ．， ５４， １１６２参照）。また、ルテインおよびルテインエステルが室温またはそれ以上で安定な化合物ではなく、遊離ルテインが化学的および生物学的な変質に特に脆弱であることが発見された。
【０００５】
マリゴールド花弁等の天然の供給源からの安定で生物学的に活性なルテインおよび／またはそのエステルの調製は、挑戦的な課題である。以下の考察で理解されるように、かかるエステルおよびそれの組成物を得る方法に対して多くの特許が発行されている。
【０００６】
米国特許第５，３８２，７１４号（本明細書中以下では「’７１４特許」）は、好ましくはその純粋な遊離形態におけるけん化マリゴールドオレオ樹脂から、化学的不純物および他のカロテノイドは別として、実質的に純粋なルテインを単離し、精製し、再結晶化する方法を開示している。これはまた、’７１４特許の出願の時点でヒトにおける使用に適切な純粋なルテインが臨床試験において化学予防剤として使用するために市販されていなかったことを開示している。また、化学的夾雑物を含まない純粋なルテインが適切にヒト処置研究を設計し、行うために必要であることが記述された。
【０００７】
’７１４特許は、エステル化されたルテインが脂肪酸とともにマリゴールド花弁中で見出され、ルテインが、マリゴールドルテインエステルのけん化の際にルテインが産生されうることを記載した。しかし、得られたルテイン産物は、多数の化学的不純物を混入していたので純粋ではなかった。
【０００８】
’７１４特許は、化学的不純物をともなうことなくマリゴールド花弁からルテインを取り出す方法を開示した。この方法は、粗ルテイン結晶を得るための一連の濾過および水／アルコール洗浄の使用を介した、好ましくはけん化マリゴールド抽出物の精製を含むものとして開示されている。これらの結晶は次いで、ルテインが強く可溶性であるハロゲン化有機溶媒、次いでルテインが部分的にのみ可溶性である第２の溶媒に溶解される。この混合物は、次いで冷却され、ルテインは、高純度で再結晶化され、次いで濾過され、減圧下で乾燥される。
【０００９】
米国特許第５，６４８，５６４号（本明細書中以下では「’５６４特許」）は、マリゴールドの花の花弁からキサントフィル結晶、好ましくはルテインを形成し、単離し、精製するためのプロセスを開示している。これはさらに、キサントフィルジエステル含有植物抽出物が、プロピレングリコールおよび水性アルカリの組成物においてけん化され、キサントフィル結晶を形成することを開示している。これはまた、結晶化が、付加される有機溶媒の使用なしで達成されることを述べた。次いで、生じる結晶は、単離され、精製されて、ヒト消費に適した実質的に純粋なキサントフィル結晶が製造される。
【００１０】
’５６４特許はまた、請求項の方法が、先行技術を越えるいくつかの利点（単離または結晶化工程の間に比較的に毒性の溶媒を使用することなくヒト消費に適したルテインを製造する能力を含む）を有することを記載した。さらに、前記方法は再結晶化工程を必要としない。
【００１１】
米国特許第４，０４８，２０３号（本明細書中以下では、「’２０３特許」）は、アルカノール沈殿に基づくマリゴールドの花の花弁またはマリゴールド花弁オレオ樹脂からのルテイン−脂肪酸エステルの精製のためのプロセスを開示している。
【００１２】
米国特許第６，００７，８５６号（明細書中以下では、「’８５６特許」）は、β−カロテンおよび酸化に対して安定な他のカロテノイドの水中オイル分散物を開示している。分散物は、高濃度のコロイドβ−カロテンを含む水−分散性ビーズレット（ｂｅａｄｌｅｔ）から調製される。
【００１３】
米国特許第３，９９８，７５３号（本明細書中以下では、「’７５３特許」）は、医薬、化粧品調製物または動物食糧品に組み入れられうる液体または粉体形態の水分散性カロテノイド組成物を開示している。また、これは、これらの分散性カルテノイド組成物の調製プロセスを開示している。
【００１４】
米国特許第４，９２９，７７４号（本明細書中以下では、「’７７４特許」）は、トリグリセリド、複合体化剤および被覆物質をさらに含む酸化−感受性化合物の安定な混合物を開示している。
【００１５】
米国特許第５，５３６，５０４号（本明細書以下では、「’５０４特許」）は、キサントフィルエステル、およびキサントフィル化合物を有する新規エステルを含有する自発的分散性濃縮物由来の超微小エマルジョンで腫瘍を治療する方法を開示している。さらに、濃縮物の製造方法が開示される。
【００１６】
発明の要旨
本発明は、安定な形態のルテインおよびルテイン誘導体の製造方法ならびに個々の化合物に関する。さらに、本発明は、長期保存寿命を有する特異的ルテイン誘導体に関する。
【００１７】
詳細な開示
本発明の発見の前に、当業者は、ルテインを安定化するために抗酸化ビタミンおよび／またはビーズレットを使用していた。これらの以前に使用されていた方法は、主としてルテインの酸化ならびに化学的分解および生物学的分解を予防した。本発明が新規である１つの方法は、ルテインおよびそのエステルのその安定性が酸化の防止を越えることである。本発明は、ルテインおよびルテインエステルの酸化を防止するだけでなく、他の因子に対して保護するルテインおよびルテインエステルを得ることにより、酸化剤、温度、湿度、日光、およびＵＶ線（本明細書中以下では、「他の因子」）等の不安定化因子からルテイン化合物をも保護する。これらの因子が、抽出プロセスの間のルテインおよびルテインエステル、ならびに最終産物における使用のためのルテインおよびルテインエステルの産業的なプロセスの安定性に影響することがまた記載される。最後に、ビタミンベース抗酸化剤は、ルテインの変質を防止しうるが、それらが他の因子に対して効果的であるかどうかは知られていなかった。
【００１８】
本発明は、ルテインおよびルテインエステルの変質に寄与する直接的および間接的な物理的、化学的、および生物学的因子に対してルテインを保護する方法を提供する。この方法は、生体異物化合物および環境エレメントの両方からルテインおよびルテインエステルを保護する。前記方法の保護作用の全体は、本明細書中以下ではＸＥＮＯＧＡＲＤと呼ばれる（表１参照）。本発明の方法は２倍である。これは単離のユニークなプロセスに基づき、その単離された形態において化学的に、かつあまり物理的ではないストレスを受けるルテインおよびルテインエステルを提供する。ＸＥＮＯＧＡＲＤ法が生じる産物はまた、化学的／生物学的変質に対してより耐性である。さらに、本発明は、ルテインおよびルテインエステルと少なくとも１つの安定化化合物（例えば、０．０１〜１０ｗｔ％のテトラヒドロクルクミノイド、０．０１〜１０ｗｔ％のクルクミノイド、または０．０１〜１０ｗｔ％のカルノシン酸（ｃａｒｎｏｓｉｃ ａｃｉｄ）であるがこれらに限定されない）とを組み合わせる方法を提供する。
【００１９】
テトラヒドロクルクミノイドおよびクルクミノイドが天然でフェノール類であり、それらがまたフリーラジカルに対する保護を提供し、フリーラジカルの発生を防止する抗酸化剤として認識されることに留意されるべきである。さらに、クルクミノイドは、ＵＶ線を吸収し、物理化学的変質から医薬調製物を保護することが知られている。クルクミノイドはまた、加工された食物および栄養剤の高温関連変質である熱分解を防止することが知られている。クルクミノイドはまた、特に湿性条件においてルテインおよびルテインエステルの安定性に有害な因子である細菌または真菌の増殖を防止することにおいて抗微生物特性が認識されている。クルクミノイドの誘導体であるテトラクルクミノイドは、フリーラジカルを排除することにおいて特に効果的であり、またフリーラジカルを妨げて、生物学的系において存在させないことにおいて本来有効であるクルクミノイドの作用に補完的である。カルノシン酸は、クルクミノイドおよびテトラクルクミノイドの両方と適合性であり、補完性である。これは、フリーラジカルの防止および排除の作用からなるクルクミノイドおよびテトラクルクミノイドの広範な作用に類似する抗酸化化合物および抗菌化合物である。
【００２０】
ＸＥＮＯＧＡＲＤルテインおよびルテインエステルを得るためのプロセスは以下のように進行する。最初に、マリゴールドの花の花弁を収穫する。次いで、これらの花弁を、陰干し、粉砕し、ある期間、好ましくは３〜４時間、室温で放置する。次いで、得られた材料を、溶媒、好ましくはアルコール、より好ましくはエチルアルコールで処理し、好ましくは５時間、室温でインキュベートする。マリゴールドの花の花弁に対する溶媒の好ましい比は、４００Ｌのエチルアルコールに対して１００ｋｇのマリゴールド材料である。インキュベーション期間後、得られる溶液を収集する。次いで、この手順を、好ましくは少なくともさらに２回繰り返し、合わせたアルコール抽出物を組み合わせる。プロセスを２回繰り返し、好ましい比が使用される場合、総溶液は約１２５０Ｌになるはずである。次いで、抽出物を水で希釈し、アルコール溶液を得、これは好ましくは７０重量％アルコールである。
【００２１】
あるいは、陰干しした花弁を、超臨界二酸化炭素である期間、好ましくは１０時間、処理し、二酸化炭素の蒸発が起こった後、残渣のオレオ樹脂をアルコール、好ましくはエタノール、および上記のように水で希釈し、希釈したアルコール溶液、好ましくは７０％アルコール溶液が得られうる。
【００２２】
次いで、このアルコール溶液中のマリゴールド花弁の抽出物を使用して、加水分解に抽出物を供することによりルテインエステルまたは遊離ルテインが得られうる。このプロセスは、アニオン交換樹脂を充填したカラムにアルコール溶液中のオレオ樹脂を通過させる。好ましくは、これは、１時間当たり２０〜５０Ｌの比で行われる。適切な樹脂としては、Ａｍｂｅｒｊｅｔ ４２００（ｃｌ）、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ ４１０、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ ９００、Ｄｏｗｅｘ １ｘ２−１００、Ｄｏｗｅｘ ２２ｃｌ、Ｄｏｗｅｘ Ｍａｒａｔｈｏｎ Ａ２、Ｄｏｗｅｘ ＭＳＡ １、Ｄｏｗｅｘ ５５０ Ａが挙げられ、これら全てはＲｏｈｍ−ＨａａｓまたはＤｏｗの製品である。
【００２３】
加水分解の完了の際、溶出液を回収し、強く激しく撹拌しながら脱イオン水で希釈する。得られたルテイン結晶を濾過し、回収し、酸素を圧排しながら減圧下で乾燥する。
【００２４】
これらのルテイン結晶またはルテインエステルを、０．０１〜１０．０ｗｔ％のテトラヒドロクルクミノイド、０．０１〜１０．０ｗｔ％のクルクミノイド、および０．０１〜１０．０ｗｔ％のカルソン酸の安定化混合物とそれらの単離の後に合わせてＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物を形成した。好ましくは、安定化成分の各々は、０．１ｗｔ％の量で存在する。次いで、ルテインまたはルテインのエステルのＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物を、窒素雰囲気下でパッケージし、シールし、さらなる使用まで保存する。ルテインおよびルテインエステルのさらなるＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物は、少なくとも５０ｗｔ％マリゴールドオレオシン、４５ｗｔ％植物油（好ましくは精製されたダイズ油）、１．５ｗｔ％クエン酸、および２ｗｔ％天然のトコフェロールを含有する柔らかい抽出物の形態で調製されうる。
【００２５】
ＸＥＮＯＧＡＲＤルテインおよびルテインエステルは、被覆プロセスによりさらに安定化されうる。かかる被覆プロセスの例は、糖、好ましくはショ糖、好ましくはスラリー形態として、水（好ましくは蒸留水）およびＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物と組み合わせて均一なブレンドを得ることを含む。好ましくは、均一なブレンドを形成するのに使用される比は、４５０ｇのショ糖対１００ｍｌの蒸留水対２５０ｍｇのＸＥＮＯＧＡＲＤ組成物になる。次いで、澱粉を均一なブレンドに添加し、次いで得られる混合物を、混合物が混ざるまで、好ましくは３０分間ミキサーにかける。また、添加する澱粉の適切な量を決定するのに使用される好ましい比は、８００ｇの均一なブレンドに対して６３０ｇの澱粉である。次いで、溶媒（好ましくは７０％エタノール溶液）において組み合わされるＰＶＰ（好ましくは、１４３０ｇの澱粉溶液に対して４５０ｇの比）を澱粉溶液に添加し、３０℃に調整して減圧下で混合して５％未満の好ましい水分含量を有する練り粉（ｄｏｕｇｈ）を形成する。次いで、練り粉を、好ましくは３０メッシュスクリーンを当てはめた造粒機にフィードし、顆粒を、好ましくはタルクで潤滑にしたトレイに集め、８〜１２時間、減圧下で乾燥した。次いで、乾燥顆粒をコーティングパン（ｐａｎ）（適切には約３５０ｇのＰＶＰおよび４０ｇのパプリカ樹脂）に移す。得られた顆粒を減圧下で３０℃で約６〜８時間、再び乾燥し、ふるいにかけ、包装する。
【００２６】
ＸＥＮＯＧＡＲＤ産物の例は、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）である。Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）は、ルテイン、ゼキサンチン、ピペリン（Ｂｉｏｐｅｒｉｎｅ（登録商標））、他のカロテノイド、および他の安定化化合物からなる。図１は、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）の抗酸化活性を調べ、一方、図２および３は、２つの異なる形態での安定性を説明する。さらに、これは、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）Ｒｅｇｕｌａｒ Ｇｒａｎｕｌｅｓが通常の条件下で３年間安定であり、一方、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）ＢＪ−８０ Ｍｅｓｈが通常の条件下で２年間安定であることを示している。これらの両方の形態のＺｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）の組成物が図４および５に開示されている。しかし、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）の最終組成物が、最終産物の５重量％以上の量のルテイン、最終産物の１重量％以上の量のゼアキサンチン（Ｚｅａｘａｎｔｈｉｎ）、最終産物の２重量％以上の量のピペリン（Ｐｉｐｅｒｉｎｅ）（および好ましくは、Ｂｉｏｐｅｒｉｎ（登録商標））、および最終産物の１重量％以上の量の他のカロテノイドを含有する。
【００２７】
さらに、本発明で使用されうるさらなる安定化成分は、カプサンチン（Ｃａｐｓａｎｔｈｉｎ）エステル、カプソルビン（Ｃａｐｓｏｒｕｂｉｎ）エステル、ゼアキサンチンエステル、クリプトキサンチン（Ｃｒｙｐｔｏｘａｎｔｈｉｎ）エステル、およびβ−カロテンエステルの形態で他のカロテノイドを含む。これらの安定化成分は、最終産物の１〜１０重量％でありうる。さらに、パプリカカロテノイドは、パプリカカロテノイドがエステルの形態である場合、安定化成分の強力な供給源である。安定化成分に対する添加剤も添加されうる。これらの添加化合物としては、テトラクルクミノイド、ロスマリン酸（Ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ）、緑茶カテキンおよび他の類似した天然の抗酸化剤が挙げられる。
【００２８】
参考文献
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米国特許第５，３８２， ７１４号
米国特許第５，６４８， ５６４号
米国特許第４，０４８， ２０３号
米国特許第６，００７， ８５６号
米国特許第３，９９８， ７５３号
米国特許第４，９２９， ７７４号
米国特許第５，５３６， ５０４号
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）のＲａｎｃｉｍａｔ試験を説明し、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）が抗酸化特性を有することを示す。
【図２】
図２は、各々の安定性が４０℃および７５％の相対湿度の条件で３０日間隔で試験されたルテインに対するＺｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）レギュラー顆粒の比較を説明する。
【図３】
図３は、各々の安定性が４０℃および７５％の相対湿度の条件で３０日間隔で試験されたルテインに対するＺｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）ＢＪ−８０メッシュの比較を説明する。
【図４】
図４は、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）ＢＪ−８０メッシュに関する必要な条件および構成を列挙する。
【図５】
図５は、Ｚｅａｌｕｔｅｉｎ（登録商標）レギュラー顆粒に関する必要な条件および構成を列挙する。
【図６】
図６は、１２ Ｏ−テトラデカノイルフォルボル−１３−アセテート（ＴＰＡ）誘導性マウス耳浮腫におけるｚｅａｌｕｔｅｉｎの局所適用の効果を試験した結果を説明する。
【図７】
図７は、１つの群がＴＰＡ単独で処置され、別の群がＴＰＡおよびｚｅａｌｕｔｅｉｎで処置されたときのＴＰＡの局所適用で処置した場合の癌を有するマウスのパーセントにおける劇的な差異を説明する。
【図８】
図８は、７，１２−ジメチルベンズ［ザ］アントラセン（ＤＢＭＡ）で以前に開始したＣＤ１マウスでの１２ Ｏ−テトラデカノイルフォルボル−１３−アセテート（ＴＰＡ）−誘導性皮膚腫瘍促進に対するｚｅａｌｕｔｅｉｎの阻害効果を試験した結果を説明する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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