(57)【要約】【課題】インシュリン様成長因子−１の分泌を誘導することを特徴とする、インシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物および分泌誘導用食品組成物を提供する。【解決手段】本発明は、インシュリン様成長因子−１の分泌誘導用組成物であり、（ａ）続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）、桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）及びその組み合わせで構成された群から選択される漢薬材から収得した抽出物の薬剤学的有効量、及び（ｂ）薬剤学的に許容される担体を含む、インシュリン様成長因子−１の血清濃度の減少に係わる疾患を治療、または予防するための薬剤学的組成物であって、前記抽出物はインシュリン様成長因子−１の分泌を誘導することに特徴を有する。【選択図】図１ａ
2004518647.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）、桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）及びその組み合わせで構成された群から選択される漢薬材から収得した抽出物の薬剤学的有効量、及び（ｂ）薬剤学的に許容される担体を含む、インシュリン様成長因子−１の血清濃度の減少に係わる疾患を治療、または予防するための薬剤学的組成物であって、
前記抽出物はインシュリン様成長因子−１の分泌を誘導することを特徴とする、
インシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物。
【請求項２】
続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）、桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）及びその組み合わせで構成された群から選択される漢薬材から収得した抽出物を有効成分として含むことを特徴とする、
インシュリン様成長因子−１の分泌誘導用食品組成物。
【請求項３】
前記抽出物は、（ａ）続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）、桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）及びその組み合わせで構成された群から選択される漢薬材を熱水処理し粗悪抽出物を収得する段階と、（ｂ）分子量カットオフが３０，０００乃至１００，０００である限外濾過膜により前記粗悪抽出物を濾過する段階を含む方法により製造されることを特徴とする、請求項１または２に記載のインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物または食品組成物。
【請求項４】
前記熱水は６０乃至９５℃の温度範囲を有することを特徴とする、請求項３に記載のインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物または食品組成物。
【請求項５】
前記熱水は８０乃至９０℃の温度範囲を有することを特徴とする、請求項４に記載のインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物または食品組成物。
【請求項６】
前記限外濾過膜の分子量カットオフは５０，０００乃至１００，０００であることを特徴とする、請求項３に記載のインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物または食品組成物。
【請求項７】
前記組成物は骨形成刺激活性を有することを特徴とする、請求項１または２に記載のインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物または食品組成物。
【請求項８】
前記組成物は骨損失抑制活性を有することを特徴とする、請求項１または２に記載のインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物および食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インシュリン様成長因子−１の分泌を誘導または刺激する組成物に関するものであり、よく詳しくは、インシュリン様成長因子−１の分泌を誘導または刺激する薬剤学的組成物または食品組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
インシュリン様成長因子−１（以下、ＩＧＦ−１）は、７０個のアミノ酸から構成された単一鎖ポリペプチドであって、主に肝から分泌される。ＩＧＦ−１はＩＧＦ−１収容体を通じてその機能を発揮する。ＩＧＦ−１の生体内の機能に関して多くの研究が実施されており、そのような研究によりＩＧＦ−１の成長促進以外の多様な機能、例えば、タンパク質の合成促進、血糖量減少及び細胞分化促進機能などが解明された。
【０００３】
例えば、ＩＧＦ−１は、神経性幹細胞の増殖に必須的であるということが報告されており、高齢の女性にとって筋力の減少及び運動性の減少がＩＧＦ−１の生体内濃度の減少と直接的に関連されていることが報告されている。また、骨格筋の再生がＩＧＦ−１により可能になるという報告があり、エタノール過用の後にはＩＧＦ−１の生体内利用効率（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）が大いに減少されるとの報告もある。一方、ＩＧＦ−１は細胞の増殖において重要な役割をするという報告があり、糖尿患者（第１形及び第２形）にとってＩＧＦ−１が治療効果を奏するという報告もある（Ｔｈｒａｉｋｉｌｌ  ＫＭ，  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｔｅｃｈｎｏｌ  Ｔｈｅｒ．，  ２（１）：６９−８０（２０００））。
【０００４】
ＩＧＦ−１の血液内低濃度は、閉経期以後の女性にとって大腿骨の減退と直接的な連関のあることが解明されており、心筋梗塞の急性段階でＩＧＦ−１の急激な減少が観察されるということが報告された。ＩＧＦ−１が多様な器官で虚血リパヒュジョン（ｉｓｃｈｅｍｉａ−ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ）損傷に対しての細胞保護機能を有しているとの多様な報告があり、神経細胞の死滅を抑制する能力があるということが立証された。
【０００５】
Ｗｏｏｄｓ  Ｋ．Ａ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．，  ３３５：１３６３（１９９６）に開示されたように、ＩＧＦ−１欠乏患者は、生後成長の欠如、精神発達遅延、小頭症及び感覚神経の無感症により苦しみ、このような症状を示す患者は、成長ホルモンが正常に分泌されて、成長ホルモンによるシグナリングは正常に成されるが、ＩＧＦ−１が局所的または全身的に生成されない。ＩＧＦ−１欠乏患者にＩＧＦ−１を投与する場合には体組成、インシュリン敏感性、骨無機質密度及び長さの成長が改善されるとの報告もある（Ｋ．Ａ．  Ｗｏｏｄｓ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｎｄｏｃｒｉ．  ＆  Ｍｅｔ．，  ８５：１４０７（２０００）。
【０００６】
また、Ｂｌｕｍら（Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  Ｍｅｔａｂ．  ７６：１６１０−１６１６（１９９３））は、低い濃度のＩＧＦ−１とＩＧＦ結合タンパク質３（ＩＧＦＢＰ−３）を示す若い男性は一般的に背が低いということを報告し、Ｒａｎｋｅ  ら（Ｈｏｒｍ．  Ｒｅｓ．  ４４：  ２５３−２６４  （１９９５））は、ＩＧＦ−１による長期間治療は長さ成長率を増加させるのに非常に効率的であるということを報告した。即ち、ＩＧＦ−１は成長ホルモン欠乏により苦しんでいる患者の治療に非常に有用である。
【０００７】
前記のように、ＩＧＦ−１は成長ホルモンと連係してまたは独立的な方式で多様な生理学的機能を有する。
【０００８】
米国特許第５，２４０，９６１号は、Ｌ−カルニチン及び／またはその前駆体を投与する段階を含む老化関連インシュリン様成長因子の減少及び骨損失を治療する方法について開示している。米国特許第５，４６６，６７０号は、ＩＧＦ−１を健康な個体の特徴的な血清濃度の４００ｎｇ／ｍｌ以下として皮下投与し、第１形糖尿病を治療する方法について開示している。
【０００９】
また、米国特許第５，８６１，３７３号は、哺乳動物の神経膠または他の非コリン性細胞に影響を与えるＣＮＳインサルト（ｉｎｓｕｌｔ）後の神経損傷を治療する方法を開示しており、この方法は、ＩＧＦ−１及び／またはＩＧＦ−１の生物学的活性類似体の有効量を含む医薬を哺乳動物の中枢神経系に投与する段階を含む。
【００１０】
現在まで、生体内ＩＧＦ−１の濃度を増加させる有効物質及び組成物は開発されていない。
【００１１】
従って、ＩＧＦ−１の欠乏により苦しんでいる患者を治療するための物質及び組成物開発が要求されている。
【００１２】
本明細書全体に掛けて、多数の論文及び特許文献を参照し、その引用は括弧内に表示した。引用された論文及び特許文献の開示内容は、その全体として本明細書に参照として挿入されて本発明が属する技術分野の水準及び本発明の内容がより明確に説明される。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
前述のような従来技術の状況下で、本発明者は、生体内のＩＧＦ−１の濃度を増加させる有効物質及び組成物を開発するために鋭意研究した結果、何種類の漢薬抽出物がＩＧＦ−１の分泌を誘導または刺激するのに非常に効果的であるということを発見した。
【００１４】
従って、本発明の目的は、インシュリン様成長因子−１の減少された血清濃度と関連した疾患を治療または予防するために利用される薬剤学的組成物を提供することにある。
【００１５】
本発明の他の目的は、インシュリン様成長因子−１の分泌誘導用食品組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の他の目的及び利点は、下記の発明の詳細な説明、請求の範囲及び図面によりさらに明確になる。
【００１７】
本発明の一態様によると、本発明は、（ａ）続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）、桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）及びその組み合わせで構成された群から選択される漢薬材から収得した抽出物の薬剤学的有効量、及び（ｂ）薬剤学的に許容される担体を含む、インシュリン様成長因子−１の血清濃度の減少に係わる疾患を治療、または予防するための薬剤学的組成物であって、前記抽出物はインシュリン様成長因子−１の分泌を誘導することを特徴とするインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用薬剤学的組成物を提供する。
【００１８】
本発明の他の態様によると、本発明は、続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）、桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）及びその組み合わせで構成された群から選択される漢薬材から収得した抽出物を有効成分として含むインシュリン様成長因子−１の分泌誘導用食品組成物を提供する
【発明の効果】
【００１９】
ＩＧＦ−１の分泌を誘導することのできる本発明の組成物は、ＩＧＦ−１の減少された血清濃度に関連した多様な疾患または疾病を軽減させることができる。例えば、本発明の組成物は、体組成、インシュリン敏感性、骨無機質密度及び長さ成長を改善させることができると共に、精神発達遅延、小頭症、感覚神経の無感症及び閉経期以後の女性の大腿骨減少を抑制することができて、また神経細胞の増殖を促進させることができ、高齢の女性にとって筋力の減少及び運動能力の減少を抑制することができる。
【００２０】
本発明者は、ＩＧＦ−１誘導のできる候補物質をスクリーニングするに当たって、漢薬材に焦点を合わせたが、その理由は、漢薬材は従来からその安全性が立証され、次の理由からそれを確認することができるからである。（ａ）漢薬材は天然源、一般的に植物から由来のものであり、（ｂ）薬材として通常的に利用されるものである。このようなスクリーニングを通じて、多様な漢薬材、続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）及び桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）がＩＧＦ−１誘導に相当な効果を有するということが立証された。
【００２１】
前記原料物質の中で、続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）は、高さ１ｍの多年生草本であり、肝臓と腎臓を保護する薬理学的効能を有するとのことが知られている。白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）は、多年生草本であり、大韓民国と中国のような東洋で貧血、便秘、潰瘍などの治療または予防に用いられている。乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）は、生姜科（Ｚｉｎｇｉｂｅｒａｃｅａｅ）に属する植物であり、嘔吐の抑制、鎮痛及び血小板凝集の抑制などの薬理学的効果を奏するものとして東洋国家に知られている。
【００２２】
本発明者は、前記の漢薬材がインヴィヴォ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）でＩＧＦ−１の分泌を誘導または刺激するという新規な用途を発見した。
【００２３】
一方、本発明の組成物に添加される前記漢薬材抽出物の製造方法は、相当の精製度を保ちながら有効成分の分離ができるように提供されなければならない。特に、本発明の製造方法は、低費用で、しかも最終抽出物の生理学的活性の維持及び評価もできるようにデザインされなければならない。本発明で利用される漢薬材はかなり高価であるため、前記の低費用という問題は非常に重要な考慮要素となる。
【００２４】
このような側面から、本発明者は、前記漢薬材から抽出物を製造する新規な方法を開発したが、この方法は、漢薬材の有効成分の損失をほとんど発生させずに、低費用かつ大量に抽出物を製造することを可能にする。しかも、本発明の方法は簡便で、非常に効果的である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
本発明の一態様によると、本発明の組成物に含まれる抽出物は、（ａ）続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）、桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）及びその組み合わせで構成された群から選択される漢薬材を熱水処理し粗悪抽出物を収得する段階と、（ｂ）分子量カットオフが３０，０００乃至１００，０００である限外濾過膜により前記粗悪抽出物を濾過する段階を含む方法により製造される。
【００２６】
前記一番目の段階の抽出は、溶媒として水を用いるが、これは人体に有害な物質により最終生成物が汚染されることを避けるためである。従って、本発明の望ましい具現例によると、メタノールのような有機溶媒は使用されない。
【００２７】
前記一番目の抽出に用いられる熱水は、６０乃至９５℃の温度範囲を有するのが望ましい。温度が６０℃未満であるとＩＧＦ−１の分泌を誘導する有効成分の抽出が非常に微弱であり、温度が９５℃を超えると有効成分が急速に破壊される虞がある。さらに望ましくは、前記熱水は８０乃至９０℃の温度範囲を有する。本発明の望ましい具現例によると、前記粗悪抽出物は冷却されて、その後、沈殿物を除去するために遠心分離及びペーパー濾過を経るようになる。
【００２８】
その後、得られた粗悪抽出物は、分子量による分離が行われ、最終的に低分子量の有効成分を含有する抽出物が収得される。本発明で利用できる分子量による分離は、特定の分子量カットオフ（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｗｅｉｇｈｔ  ｃｕｔ  ｏｆｆ）範囲を有する限外濾過膜を利用する方法により実施される。本発明者は、限外濾過膜を用いた方法が、収率、便利性及び経済性を考慮し、多様な方法の中で最も望ましいということを発見した。
【００２９】
本発明で利用される限外濾過膜は、典型的に分子量カットオフが３０，０００乃至１００，０００のものである。分子量カットオフが３０，０００未満であると抽出物の分離にたくさんの所要時間が掛かるため経済的な側面から劣り、分子量カットオフが１００，０００を超えると、生理活性成分と巨大分子物質との分離度が低くなり、最終的に製造される本発明の抽出物の相対純度が低下される問題がある。本発明で利用される限外濾過膜は、さらに望ましくは分子量カットオフが５０，０００乃至１００，０００である。
【００３０】
望ましくは、高濃度の抽出物を製造するために、前記収得された抽出物は濃縮される。濃縮は当業界で通常的に利用される多様な方法で実施でき、例えば、減圧加熱により実施することができる。必要に応じ、前記濃縮された抽出物は当業界に公知された多様な方法により粉末化されてもよく、例えば、減圧乾燥により粉末化することができる。
【００３１】
前述のように、所望の抽出物を製造する本発明の方法は、容易に実施できるだけではなく、高純度、高収率及び経済的にＩＧＦ−１分泌誘導機能を有する有効成分を分離することができる。
【００３２】
本発明の望ましい具現例によると、必要に応じ、本発明の組成物は、カルシウム、アルギニン、ライシン及び／またはカルボキシメチルセルロースを追加的に含んでもよい。前記カルシウムは骨の主無機成分であり、アルギニンは体内で成長ホルモンの分泌作用を増進させることができ、ライシンはアルギニンの作用を増進させることができて、カルボキシメチルセルロースは含湿を抑制し微生物の増殖可能性を減らすと共に様々な物質の均一な混合を促進させる。より望ましくは、漢薬材抽出物１００重量％を基準として、カルシウムの量は６５乃至８０重量％、アルギニンの量は２５乃至４０重量％、ライシンの量は５乃至２０重量％、カルボキシメチルセルロースの量は２乃至８重量％である。
【００３３】
本発明の薬剤学的組成物に含まれる、薬剤学的に許容される担体は、製剤時に通常的に利用されるものであって、炭水化物（例えば、ラクトース、アミロース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン）、アカシアゴム、燐酸カルシウム、アルギネート、ゼラチン、珪酸カルシウム、微細結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、塩溶液、アルコール、シロップ、メチルセルロース、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、滑石、ステアリン酸マグネシウム及びミネラルオイルなどがあるが、これに限定されるものではない。本発明の薬剤学的組成物は、前記成分以外に潤滑剤、湿潤剤、甘味剤、香味剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤などをさらに含有してもよい。
【００３４】
本発明の薬剤学的組成物は、経口投与するのが最も望ましい。本発明の組成物は、ＩＧＦ−１の減少された血清濃度と関連した多様な疾患及び疾病を治療または予防するのに非常に効果的であり、特に、体組成及び虚弱体質の改善、そして骨多孔症及び老化を抑制する効果を奏する。
【００３５】
本発明の薬剤学的組成物は、ＩＧＦ−１の分泌を刺激または誘導することができるため、成長不振の治療、長さ成長の促進、骨密度の改善（骨多孔症の予防及び治療）、老化の抑制、体組成の改善、閉経期女性の大腿骨損失の治療及び神経細胞の保護などの効果を奏する。
【００３６】
本発明の薬剤学的組成物の適合な投与量は、製剤化方法、投与方式、患者の年齢、体重、性、病的状態、飲食、投与時間、投与経路、排泄速度及び反応感応性のような要因により多様に処方される。従って、通常の医者なら本発明の薬剤学的組成物の適正な投与量を容易に決定、処方することができるということは充分予測される。本発明の薬剤学的組成物の、ヒトに対しての一日投与量は約５乃至１００ｍｇ／ｋｇである。
【００３７】
本発明の薬剤学的組成物は、当該発明の属する技術分野で通常の知識を有する者が容易に実施できる方法により、薬剤学的に許容される担体及び／または賦形剤を用いて製剤化することによって単位容量形態として製造されるか、または多容量容器内に入れて製造される。剤形の非制限的な例は、溶液、懸濁液、乳化液、エリキシール剤（ｅｌｉｘｉｒ）、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、エンプラストラ剤（ｅｍｐｌａｓｔｒａ）、リニメント剤（ｌｉｎｉｍｅｎｔ）、ローション剤及び軟膏剤などを含む。
【００３８】
本発明の健康食品組成物は、食品製造時に通常的に添加される成分を含んでもよい。典型的な食品組成物の成分は、タンパク質、炭水化物、脂肪、栄養分及び甘味剤を含む。望ましい食品は、ドリンク、濃縮ドリンク及びインスタントドリンクを含み、これはクエン酸、液状果糖、スクロース、ブドウ糖、酢酸及び／または果汁を含む。他の望ましい食品は粉末状のものであり、これはライシン、アルギニン、オルニチン、グリシン及びトリプトファンのような必須アミノ酸、ニアシンまたはγ−ハイドロキシブチレートを含む。
【００３９】
以下、実施例を通じて本発明をさらに詳細に説明する。これら実施例は本発明をより具体的に説明するためのものであり、本発明の技術的範囲がこれら実施例に限定されないことは本発明の属する技術分野で通常の知識を有する者にとっては自明なことであろう。
【実施例１】
【００４０】
＜実施例Ｉ＞  漢薬材から低分子量の有効成分を含む抽出物の製造
漢薬材、続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）及び桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）はキョンドン市場（ソウル、大韓民国）から購入し、原料物質として利用した。
【００４１】
＜Ｉ−１＞  続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）抽出物
乾燥された続断５０ｇに蒸留水１．５ｌを添加し、抽出のために８０乃至９０℃で２時間加熱して、水溶性抽出液０．７ｌを収得した。残存の続断薬材に最初抽出時加えた量の半分の蒸留水を添加し、抽出のために８０乃至９０℃で２時間加熱した。一番目及び二番目の抽出から得られた抽出液１ｌを収集し、９０℃で加熱して抽出液の嵩を最終５００ｍｌまで濃縮させた。
【００４２】
収得した抽出物５００ｍｌを１０分間３，０００ｘｇで遠心分離した後、上清液を攪拌セル（ｓｔｉｒｒｅｄ  ｃｅｌｌ）装置（Ａｍｉｃｏｎ社、アメリカ）を用いて分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）５０，０００または１００，０００の限外濾過膜に通過させた。この際、加える窒素の圧力は３気圧として固定した。
【００４３】
一方、限外濾過膜が詰まれた場合、新しい限外濾過膜に交替して作業を続けた。詰まれた膜は、０．１Ｎ  ＮａＯＨ及び２０％エタノールで洗滌して再使用した。
【００４４】
抽出効率を計算するために、各段階から収得した抽出物を減圧乾燥（Ｆｒｅｅｚｅ  ｄｒｙｅｒ、Ｅｄｗａｒｄｓアメリカ）し、粉末の重量を基準として抽出効率を計算した（表１参照）。
【００４５】
【表１】
2004518647.tif 000003
【００４６】
加熱及び抽出段階の抽出効率は、毎回実施するたびに少しずつ変動があるが、平均的に３８乃至４０％の抽出効率を示した。表１から確認できるように、ＩＧＦ−１分泌誘導能を有する有効成分の抽出効率及び精製度の側面から、１００，０００以下の分子量カットオフが望ましいということが分かる。
【００４７】
＜Ｉ−２＞  白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）抽出物
白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）抽出物は、続断５０ｇの代りに白何首烏５０ｇを利用したことを除いては前記実施例Ｉ−１と同様な方法により製造した。粉末の重量を基準として抽出効率を計算した（表２参照）
【００４８】
【表２】
2004518647.tif 000004
【００４９】
表２から確認できるように、ＩＧＦ−１分泌誘導能を有する有効成分の抽出効率及び精製度の側面から、１００，０００以下の分子量カットオフが望ましいということが分かる。
【００５０】
＜Ｉ−３＞  乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）抽出物
乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）抽出物は、続断５０ｇの代りに乾薑５０ｇを利用したことを除いては前記実施例Ｉ−１と同様な方法により製造した。粉末の重量を基準として抽出効率を計算した（表３参照）
【００５１】
【表３】
2004518647.tif 000005
【００５２】
表３から確認できるように、乾薑を用いた抽出は、続断及び白何首烏の場合に比べ低い効率を示す。また、ＩＧＦ−１分泌誘導能を有する有効成分の抽出効率及び精製度の側面から、１００，０００以下の分子量カットオフが望ましいということが分かる。
【００５３】
＜Ｉ−４＞  桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）抽出物
桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）抽出物を、続断５０ｇの代りに桔梗５０ｇを利用したことを除いては前記実施例Ｉ−１と同様な方法により製造した。粉末の重量を基準として抽出効率を計算した（表４参照）
【００５４】
【表４】
2004518647.tif 000006
【００５５】
表４から確認できるように、桔梗を用いた抽出は、続断及び白何首烏の場合に比べ低い効率を示す。また、ＩＧＦ−１分泌誘導能を有する有効成分の抽出効率及び精製度の側面から、１００，０００以下の分子量カットオフが望ましいということが分かる。
【００５６】
結論的に、ＩＧＦ−１分泌誘導能を有する有効成分の抽出物は、続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）及び桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）から効率的且つ簡単に製造されて、このような過程は（ａ）熱水による抽出、及び（ｂ）分子量カットオフが３０，０００乃至１００，０００である限外濾過膜による濾過段階を含む。また、抽出過程での望ましい熱水の温度は８０乃至９０℃であり、濾過に用いられる限外濾過膜の望ましいＭＷＣＯは５０，０００乃至１００，０００である。
【実施例２】
【００５７】
＜実施例ＩＩ＞  本発明の抽出物によるＩＧＦ−１分泌誘導
前記実施例ＩでＭＷＣＯ５０，０００の限外濾過膜を利用し得られた粉末２５２ｍｇを蒸留水１ｍｌに溶解し、これを投与液として使用した。本実施例で利用した動物は、平均体重が約３００ｇである、９週齢のスプラグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ）系雄性ラットである。実験動物は、本発明の抽出物を投与する前の一日中断食させたが、それはＩＧＦ−１の分泌刺激に対しての反応性増大のためである。動物の数は、対照群は６匹、実験群は７匹とした。
【００５８】
前記ラットに経口投与用注射器を用いて前記投与液１，０００μｌを経口投与した。血液は、投与前と、投与の２時間後、４時間後、６時間後、８時間後及び１０時間後に心臓から直接採取した。また、ＩＧＦ−１の分泌パターンに影響を与える可能性のある麻酔剤は実験の間には使用しなかった。
【００５９】
その後、採血された試料でのＩＧＦ−１の定量は、酵素免疫分析キット（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、アメリカ）を用いて製造者のプロトコール（ｐｒｏｔｏｃｏｌ）に従い実施し、その結果は図１ａ乃至１ｄに示した。
【００６０】
図１から分かるように、本発明の続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）、白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）または桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）抽出物が投与された実験群は、投与４時間後から対照群に比べて著しく高い血中ＩＧＦ−１濃度を示した。従って、本発明の抽出物は、動物の血中ＩＧＦ−１濃度を上昇させるのに効果的であることが分かる。また、図１ａ乃至１ｄに示したように、血清内ＩＧＦ−１の濃度は投与８時間後に最高の上昇点に到達した。
【実施例３】
【００６１】
＜実施例ＩＩＩ＞  本発明の抽出物による骨形成の評価
前記実施例ＩでＭＷＣＯ５０，０００の限外濾過膜を用いて収得した粉末を含む投与飼料を製造した。飼料の組成は、次の表５及び表６に記載されている。
【００６２】
【表５】
2004518647.tif 000007
【００６３】
【表６】
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【００６４】
前記飼料の総重量は１５ｇであり、動物飼料に通常的に利用される他の成分も飼料に添加された。
【００６５】
本実施例で利用された動物は、３週齢のスプラグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ）系雄性ラットである。前記飼料を実験用動物に長期間（８週）投与した後、ラットを犠牲させて大腿部及び脛骨を摘出し長さ成長の変化を測定した。対照群及び実験群の数は、各々４匹とした。対照群は本発明の抽出物が含有されていない飼料を与えた動物群である。
【００６６】
図２ａ、図２ｂ及び図３から分かるように、続断抽出物を含む飼料が与えられた実験動物は、対照群に比べて増加された長さの大腿部及び脛骨を示した。このことから、続断抽出物は、骨形成を刺激し、長さの成長を促進させるということを再び確認することができる。
【００６７】
また、図４から分かるように、白何首烏、乾薑及び桔梗抽出物を含む飼料が与えられた実験動物は、対照群に比べて増加された長さの大腿部及び脛骨を示した。このことから、白何首烏、乾薑及び桔梗抽出物は、骨形成を刺激し、長さの成長を促進させるということを再び確認することができる。
【００６８】
＜製造例＞
前記実施例でＭＷＣＯ５０，０００を有する限外濾過膜を用いて収得した抽出物８０ｍｌ、果糖１０ｍｌ、クエン酸０．５ｍｌ及び甘草抽出液９．６ｍｌを均一に混合してドリンク剤を製造した。
【００６９】
以上、本発明の望ましい具現例を詳細に記述したが、当業界の通常の知識を有する者にとっては、このような具体的な技術はただ望ましい具現例に過ぎず、これに本発明の範囲が限定されないことは明らかである。従って、本発明の実質的な範囲は添付された特許請求の範囲に記載された各請求項とその等価物により定義されると言える。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１ａ】続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）の抽出物を含む組成物により血清内ＩＧＦ−１の濃度が増加されることを示したグラフ図である。
【図１ｂ】白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）  の抽出物を含む組成物により血清内ＩＧＦ−１の濃度が増加されることを示したグラフ図である。
【図１ｃ】乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）  の抽出物を含む組成物により血清内ＩＧＦ−１の濃度が増加されることを示したグラフ図である。
【図１ｄ】桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）  の抽出物を含む組成物により血清内ＩＧＦ−１の濃度が増加されることを示したグラフ図である。
【図２ａ】続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）の抽出物を含む組成物が投与されたラットでの大腿部の長さの増加を示した写真図である。
【図２ｂ】続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）の抽出物を含む組成物が投与されたラットでの脛骨の長さの増加を示した写真図である。
【図３】続断（Ｐｈｌｏｍｉｓ  ｕｍｂｒｏｓａ  Ｔｕｒｅｚ）の抽出物を含む組成物が投与されたラットでの大腿部の長さの増加を示したグラフ図である。
【図４】白何首烏（Ｃｙｎａｎｃｈｕｍ  ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ（Ｍａｘ）  Ｈｅｍ  ＆  ｌｅｙ）、乾薑（Ｚｉｎｇｉｂｅｒ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ  Ｒｏｓｃ．）及び桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｉ  Ｒａｄｉｘ）の抽出物を含む組成物が投与されたラットでの大腿部の長さの増加を示した写真図である。
【図１ａ】
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【図１ｂ】
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【図１ｃ】
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【図１ｄ】
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【図３】
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【図２ａ】
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【図２ｂ】
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【図４】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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