(57)【要約】関節炎、変形性関節症、慢性関節リウマチ、炎症の治療のための、一酸化窒素シンターゼ誘導型アイソフォームの阻害に有用な式（Ｉ）のイミノアゼピニルヘキサン酸誘導体、ならびに医薬的に受容可能なそれらの塩およびそれらの誘導体を開示する。
2004512271.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
2004512271.tif 000108
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項２】
以下の式の化合物：
【化２】
2004512271.tif 000109
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項３】
化合物が以下の式で表される請求項２に記載の化合物：
【化３】
2004512271.tif 000110
【請求項４】
化合物が以下の式で表される請求項２に記載の化合物：
【化４】
2004512271.tif 000111
【請求項５】
化合物が以下の式で表される請求項２に記載の化合物：
【化５】
2004512271.tif 000112
【請求項６】
化合物が以下の式で表される請求項２に記載の化合物：
【化６】
2004512271.tif 000113
【請求項７】
以下の式の化合物：
【化７】
2004512271.tif 000114
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項８】
化合物が以下の式で表される請求項７に記載の化合物：
【化８】
2004512271.tif 000115
【請求項９】
化合物が以下の式で表される請求項７に記載の化合物：
【化９】
2004512271.tif 000116
【請求項１０】
化合物が以下の式で表される請求項７に記載の化合物：
【化１０】
2004512271.tif 000117
【請求項１１】
化合物が以下の式で表される請求項７に記載の化合物：
【化１１】
2004512271.tif 000118
【請求項１２】
以下の式の化合物：
【化１２】
2004512271.tif 000119
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項１３】
化合物が以下の式で表される請求項１２に記載の化合物：
【化１３】
2004512271.tif 000120
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項１４】
化合物が以下の式で表される請求項１２に記載の化合物：
【化１４】
2004512271.tif 000121
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項１５】
化合物が以下の式で表される請求項１２に記載の化合物：
【化１５】
2004512271.tif 000122
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項１６】
化合物が以下の式で表される請求項１２に記載の化合物：
【化１６】
2004512271.tif 000123
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項１７】
請求項１２の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１８】
以下の式からなる群から選択される化合物：
【化１７】
2004512271.tif 000124
；
【化１８】
2004512271.tif 000125
；
【化１９】
2004512271.tif 000126
；
【化２０】
2004512271.tif 000127
；
【化２１】
2004512271.tif 000128
；
【化２２】
2004512271.tif 000129
および
【化２３】
2004512271.tif 000130
【請求項１９】
前記化合物が以下の式である請求項１８に記載の化合物。
【化２４】
2004512271.tif 000131
【請求項２０】
前記化合物が以下の式である請求項１８に記載の化合物。
【化２５】
2004512271.tif 000132
【請求項２１】
前記化合物が以下の式である請求項１８に記載の化合物。
【化２６】
2004512271.tif 000133
【請求項２２】
前記化合物が以下の式である請求項１８に記載の化合物。
【化２７】
2004512271.tif 000134
【請求項２３】
前記化合物が以下の式である請求項１８に記載の化合物。
【化２８】
2004512271.tif 000135
【請求項２４】
前記化合物が以下の式である請求項１８に記載の化合物。
【化２９】
2004512271.tif 000136
【請求項２５】
前記化合物が以下の式である請求項１８に記載の化合物。
【化３０】
2004512271.tif 000137
【請求項２６】
以下の式の化合物：
【化３１】
2004512271.tif 000138
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項２７】
以下の式の化合物：
【化３２】
2004512271.tif 000139
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項２８】
以下の式の化合物：
【化３３】
2004512271.tif 000140
または医薬的に受容可能なその塩。
【請求項２９】
以下の式の化合物：
【化３４】
2004512271.tif 000141
または医薬的に受容可能なその塩。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連する出願書類に対する引照
本出願は米国仮特許出願第６０／２２２，１７９の利益を主張する。
【０００２】
発明の属する技術分野
本発明は、ホモイミノピペリヂニルヘキサン酸誘導体および治療におけるそれらの使用、特に一酸化窒素シンターゼ阻害薬としてのそれらの使用に関する。
【０００３】
関連技術
１９８０年代初頭より、アセチルコリンに起因する血管の弛緩は血管内皮に依存することが認められてきた。内皮由来弛緩因子（ＥＤＲＦ）は現在一酸化窒素（ＮＯ）であることが認められており、一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）により血管内皮中に産生される。血管拡張物質としてのＮＯの活性は１００年にわたり十分に解明されてきた。さらにＮＯは亜硝酸アミル、グリセリントリニトラートおよび他のニトロ系血管拡張物質に由来する活性種である。ＮＯとしてのＥＤＲＦの同定は、ＮＯが酵素ＮＯシンターゼによりアミノ酸Ｌアルギニンから合成される生化学的経路の発見と一致した。
【０００４】
一酸化窒素は可溶性グアニル酸シクラーゼの内因性刺激物質である。内皮依存型弛緩に加えて、ＮＯは貧食細胞の細胞傷害および中枢神経系内の細胞間コミュニケーションを含む多数の生物学的作用に関与する。
【０００５】
以下に示すように少なくとも３種類のＮＯシンターゼがある：
（ｉ）レセプターまたは物理的刺激に応答してＮＯを放出する、内皮に局在する構成型Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存型酵素。
（ｉｉ）レセプターまたは物理的刺激に応答してＮＯを放出する、脳に局在する構成型Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存型酵素。
（ｉｉｉ） エンドトキシンおよびサイトカインによる血管平滑筋、マクロファージ、内皮細胞、および多数のその他の細胞の活性化後に誘導される、Ｃａ＋＋非依存型酵素。一度発現すると、この誘導型一酸化窒素シンターゼ（本明細書では以降“ｉＮＯＳ”）は長時間継続してＮＯを産生する。
【０００６】
２つの各構成型酵素により放出されるＮＯは、いくつかの生理学的応答の基本となる変換メカニズムとして作用する。誘導型酵素により産生されるＮＯは、腫瘍細胞および侵入微生物に対する細胞傷害性分子である。過剰なＮＯ産生による副作用、特に病理学的血管拡張および組織損傷が、ｉＮＯＳにより合成されるＮＯにかなり起因し得ることもまた明らかである。
【０００７】
関節炎のようなある種の症状の結果としておこる軟骨の変性にＮＯが関与し得るというエビデンスの主要部分が明らかとなり、ＮＯ産生が慢性関節リウマチおよび変形性関節症で増加することもまた認められている。
【０００８】
治療への使用を目的として提供されているＮＯシンターゼ阻害薬には非選択的なものもある；これらは構成型および誘導型双方のＮＯシンターゼを阻害する。このような非選択的ＮＯシンターゼ阻害薬の使用には、構成型ＮＯシンターゼへの過剰な阻害による重篤な結果（例えば高血圧および血栓症の可能性および組織損傷を含む）の可能性を避けるよう、十分な注意を必要とする。特に毒性ショックの処置にＬ−ＮＭＭＡ（非選択的ＮＯシンターゼ阻害薬）を治療に使用する場合、処置を通して患者には継続的に血圧をモニターしなければならないことが推奨されてきた。したがって非選択的ＮＯシンターゼ阻害薬は適当な注意が予め払われているという条件で治療的有効性を持つが、一方、ＮＯシンターゼ構成型アイソフォームと比較してかなり大幅に誘導型ＮＯシンターゼを阻害するＮＯシンターゼ阻害薬であるという意味で選択的である同阻害薬は、まさにより大きな治療上の利点および簡便性を備えることになる （Ｓ．Ｍｏｎｃａｄａ ａｎｄ Ｅ． Ｈｉｇｇｓ， ＦＡＳＥＢ Ｊ．， ９， １３１９−１３３０， １９９５）。
【０００９】
米国特許第５，８５４，２３４（同特許の開示内容はその全内容において、本明細書に記載されたものとして参照として援用する）は、一酸化窒素の合成を阻害する化合物、および一酸化窒素シンターゼの誘導型アイソフォームを優先的に阻害する化合物を開示している。
【００１０】
発明の概要
誘導型一酸化窒素シンターゼ（ｉＮＯＳ）の高度に選択的な阻害薬である化合物が、今回発見された。
【００１１】
広範な側面において本発明は、一酸化窒素シンターゼ構成型アイソフォームと比較して、一酸化窒素シンターゼ誘導型アイソフォームをより優先的に阻害または修飾する化合物を投与することにより、このような阻害および修飾を必要とする被験者において一酸化窒素合成を阻害または修飾することを目的とする、新規化合物、医薬組成物、新規化合物の製造方法、医薬組成物の製造方法、および前記化合物および組成物を使用する方法を定める。一酸化窒素レベルの低減を必要とする被験者において、同レベルを低減することもまた本発明のもう一つの目的である。本発明の化合物は有用な一酸化窒素シンターゼ阻害活性があり、一酸化窒素の合成または過剰な合成が一因となる疾患または症状の、治療または予防に有効であると期待される。
【００１２】
本発明の化合物は特に被験者の炎症の治療、または一酸化窒素シンターゼの介する他の障害の治療に、例えば疼痛および頭痛の治療用鎮痛薬として有用となる。本発明の化合物は、体細胞原性（侵害受容またはニューロパシーのいずれか）、急性および慢性双方を含む疼痛の治療に有用となり、また一般的なＮＳＡＩＤ、オピオイド鎮痛薬またはある種の抗痙攣薬が従来的に投与される、ニューロパシー性疼痛を含む状況に使用することができるだろう。
【００１３】
本発明の化合物が、ＬアルギニンからのＮＯ産生阻害において有利となる症状は、関節炎の症状を含む。例えば、本発明の化合物は関節炎（慢性関節リウマチ、脊椎関節症、痛風関節炎、変形性関節炎、全身性紅斑性狼そう、若年性関節炎、急性リウマチ性関節炎、腸疾患に基づく関節炎、ニューロパシー性関節炎、乾癬性関節炎および化膿性関節炎を含むがこれに限定されない）の治療に有用となる。
【００１４】
本発明の化合物はさらに喘息、気管支炎、月経性痙攣（例えば月経困難症）、早産、腱炎、滑液包炎、皮膚に関する症状　例えば乾癬、湿疹、火傷、日焼け、皮膚炎、膵炎、肝炎、および眼手術の術後炎症（例えば白内障手術および屈折手術に起因する炎症を含む）の治療に有用となる。本発明の化合物はまた胃腸の症状、例えば炎症性腸疾患、クローン病、胃炎、過敏性腸症候群および潰瘍性大腸炎の治療にも有用となるだろう。
【００１５】
本発明の化合物は血管性疾患、偏頭痛、結節性関節周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキンス病、強皮症、リウマチ熱、Ｉ型糖尿病、重症筋無力症を含む神経筋接合部疾患、多発性硬化症を含む白質の疾患、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、腎炎、過敏症、外傷後腫脹、心筋虚血等々のような疾患における、炎症および組織損傷の治療に有用となるだろう。当該化合物はまた眼性疾患、例えば緑内障、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、羞明症、および急性眼組織損傷に伴う炎症および疼痛の治療にも有用となるだろう。緑内障、特に緑内障の症候群が一酸化窒素の産生に起因する場合、例えば一酸化窒素を介しての神経の損傷の治療は、本発明の化合物の使用例の中でも特に興味深い。当該化合物はまた、例えばウイルス感染および嚢胞性線維症に伴う肺の炎症の治療にも有用となるだろう。当該化合物はまたある種の中枢神経系障害、例えばアルツハイマー病を含む皮質性痴呆、および発作、虚血および外傷に起因する中枢神経系損傷の治療にも有用となるだろう。これらの化合物はまたアレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、エンドトキシンショック症候群、およびアテローム硬化症の治療にも有用となるだろう。当該化合物はまた疼痛（術後疼痛、歯科の疼痛、筋肉痛、顎関節症候群による疼痛、癌に起因する疼痛を含むがこれに限定されない）の治療にも有用となるだろう。当該化合物は痴呆、例えばアルツハイマー病の予防に有効となるだろう。
【００１６】
ヒトの治療に有用なだけでなく、これらの化合物はまた哺乳類および他の脊椎動物を含む愛玩動物、外来種動物および家畜の獣医治療にも有用である。より好ましい動物としてウマ、イヌおよびネコを含む。
【００１７】
本発明の化合物はまた他の従来の抗炎症治療の際に治療の一部または全体で併用して使用する、例えばステロイド、ＮＳＡＩＤｓ、ＣＯＸ−２選択的阻害薬、マトリックスメタプロテナーゼ阻害薬、５−リポキシゲナーゼ阻害薬、ＬＴＢ４アンタゴニストおよびＬＴＡ４ヒドロラーゼ阻害薬と共に使用することもできる。
【００１８】
本発明の化合物がＮＯの阻害において有利となるその他の症状として、心血管虚血、糖尿病（Ｉ型またはＩＩ型）、うっ血性心不全、心筋炎、アテローム硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏（異痛症）、大脳虚血（病巣虚血、血栓性発作および全身性虚血（例えば心停止の二次的障害）の双方）、多発性硬化症およびＮＯを介した他の中枢神経系障害、例えばパーキンソン病を含む。ＮＯ阻害が有用となり得るさらなる神経変性障害は、例えば低酸素症、低血糖症、癲癇のような障害、および中枢神経系（ＣＮＳ）外傷（例えば脊椎損傷および頭部損傷）、高圧酸素による痙攣および酸素中毒、痴呆、例えば初老期痴呆、およびＡＩＤＳに関連する痴呆、悪液質、シドナム舞踏病、ハンティングトン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、大脳血管障害に関連する精神遅退、睡眠障害、精神分裂病、鬱病、月経前症候群（ＰＭＳ）に伴う鬱またはその他の症候、不安および敗血症によるショックの症例における神経変性または神経壊死を含む。
【００１９】
本発明の化合物による治療が有利になるさらに他の障害または症状は、長期間アヘン鎮痛薬を必要とする患者のアヘン耐性、およびベンゾジアゼピンを投与している患者のベンゾジアゼピン耐性、ならびに他の依存性習慣、例えばニコチン依存、アルコール依存、および摂食障害の予防処置を含む。本発明の化合物および方法はまた薬物の禁断症状の治療または予防、例えばアヘン、アルコール、またはタバコ依存の使用中止による症状の治療または予防にも有用となる。本発明の化合物はまた、抗細菌薬または抗ウイルス薬と併用して治療する場合、組織損傷の予防に有用となり得る。
【００２０】
本発明の化合物はまた、広範な多様な薬剤に由来する敗血症および／または毒性出血性ショックに伴う全身性低血圧；サイトカイン、例えばＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２による治療；および移植療法における短期的免疫抑制に対するアジュバントとしての使用を含むＬアルギニンからのＮＯ産生の阻害にも有用となる。
【００２１】
本発明の化合物は癌、例えば直腸結腸癌および乳癌、肺、前立腺、膀胱、子宮頸部および皮膚の癌に有用である。本発明はさらに、新生物の治療および予防のための本発明の化合物の使用を定める。本発明の化合物および方法により治療可能または予防可能となる新生物は、脳の癌、骨癌、白血病、例えば慢性リンパ性白血病、リンパ腫、上皮細胞由来新生物（上皮性癌）例えば基底細胞癌、腺癌、消化管の癌、例えば口唇癌、口の癌、食道癌、小腸癌および胃癌、結腸癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、尿生殖器癌、例えば卵巣癌、子宮頸癌、外陰部癌、および肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば扁平上皮細胞、黒色腫、および基底細胞癌、前立腺癌、腎細胞癌、および全身の上皮細胞に影響を与えるその他の公知の癌を含む。本発明の化合物は同様に間葉由来新生物の治療にも有効となる。好ましくは治療する新生物は、消化管の癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮頸癌、外陰部癌、肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば鱗状細胞および基底細胞癌から選択される。化合物および方法はまた放射線療法により生じる線維症の治療にも使用することができる。本発明の化合物および方法は、家族性大腸ポリポーシス（ＦＡＰ）の患者を含む腺腫ポリープの患者の治療に使用することができる。加えて本発明の化合物および方法はＦＡＰのリスクのある患者に形成されるポリープの予防に使用することができる。
【００２２】
本発明の化合物と別の抗新生物薬剤との併用治療は相乗効果をもたらし、あるいは治療の有効性に必要とされる副作用の原因となる薬剤の治療投与量を減らすことにより、または副作用の原因となる薬剤に起因する有毒な副作用の症候群を直接抑えることにより、化学療法に伴う有毒な副作用を抑えることになる。本発明の化合物はさらに放射線療法の副作用を抑えたり、または有効性を高めたりする付加的薬剤として有用となる。本発明において、本発明の化合物と併用治療できるもう一方の薬剤として、酵素シクロオキシゲナーゼ−２（“ＣＯＸ−２”）を阻害することのできるあらゆる治療薬を含む。好ましくはこのようなＣＯＸ−２阻害薬は、酵素シクロオキシゲナーゼ−１（“ＣＯＸ−１”）と比較して選択的にＣＯＸ−２を阻害する。このようなＣＯＸ−２阻害薬は“ＣＯＸ−２選択的阻害薬”として知られている。より好ましくは本発明の化合物はＣＯＸ−２選択的阻害薬と併用して治療することができ、その場合ＣＯＸ−２選択的阻害薬はｉｎ ｖｉｔｒｏ 試験で、ＣＯＸ−１への阻害と比較してＣＯＸ−２を少なくとも１０：１、より好ましくは少なくとも３０：１、さらにより好ましくは少なくとも５０：１の比率で選択的に阻害するものとする。本発明の化合物との併用治療に有用なＣＯＸ−２選択的阻害薬は、セレコキシブ、バルデコキシブ（ｖａｌｄｅｃｏｘｉｂ）、デラコキシブ（ｄｅｒａｃｏｘｉｂ）、エトリコキシブ（ｅｔｏｒｉｃｏｘｉｂ）、ロフェコキシブ（ｒｏｆｅｃｏｘｉｂ）、ＡＢＴ−９６３（２−（３，４−ジフルオロフェニル）−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブトキシ）−５−［４−（メチルスルホニル）フェニル−３（２Ｈ）−ピリダジノン；ＰＣＴ特許出願第ＷＯ　００／２４７１９号に記載）、またはメロキシカムを含む。本発明の化合物はまたＣＯＸ−２選択的阻害薬、例えばパレコキシブのプロドラッグとの併用治療において有利に使用することができる。
【００２３】
本発明の化合物と併用して有用となるもう一つの化学療法薬は、例えば以下の非包括的および非限定的リストから選択することができる：
アルファ−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）、５−ＦＵ−フィブリノーゲン、アカンチ葉酸（ａｃａｎｔｈｉｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、アミノチアジアゾール、ブレキナルナトリム、カルモフール、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ ＣＧＰ−３０６９４、シクロペンチルシトシン、シタラビンフォスファートステアラート、シタラビン共役物（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ）、リリーＤＡＴＨＦ、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＤＤＦＣ、デザグアニン、ジデオキシシチジン、ジデオキシグアノシン、ダイドックス（ｄｉｄｏｘ）、吉富ＤＭＤＣ、ドキシフルソジン、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＥＨＮＡ、Ｍｅｒｋ ＆ Ｃｏ． ＥＸ−０１５、ファザラビン、フロクスウリジン、フルダラビンリン酸塩、５−フルオロウラシル、Ｎ−（２‘−フラニジル（ｆｕｒａｎｉｄｙｌ）−５−フルオロウラシル）、第一製薬ＦＯ−１５２、イソプロピルピロリジン、リリーＬＹ−１８８０１１、リリーＬＹ−２６４６１８、メトベンザプリム（ｍｅｔｈｏｂｅｎｚａｐｒｉｍ）、メトトレキサート、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＭＺＰＥＳ、ノースパーミジン（ｎｏｒｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ）、ＮＣＩ　ＮＳＣ−１２７７１６、ＮＣＩ　ＮＳＣ−２６４８８０、ＮＣＩ　ＮＳＣ−３９６６１、ＮＣＩ　ＮＳＣ−６１２５６７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＡＬＡ、ペントスタチン、ピリトレキシム（ｐｉｒｉｔｒｅｘｉｍ）、プリカマイシン、アサヒケミカルＰＬ−ＡＣ、武田ＴＡＣ−７８８、チオグアニン、チアゾフリン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＴＩＦ、トリメトレキサート、チロシンキナーゼ阻害薬、チロシンプロテインキナーゼ阻害薬、大鵬ＵＦＴ、ウリシチン（ｕｒｉｃｙｔｉｎ）、シオノギ２５４−Ｓ、アルドーホスファミド類似体、アルトレタミン、アナキシロン、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＢＢＲ−２２０７、ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）、ブドチタン、湧永ＣＡ−１０２、カルボプラチン、カルムスチン、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１３９、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１５３、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＣＬ−２８６５５８、Ｓａｎｏｆｉ ＣＹ−２３３、シプラタート（ｃｙｐｌａｔａｔｅ）、Ｄｅｇｕｓｓａ Ｄ−１９−３８４、住友ＤＡＣＨＰ（Ｍｙｒ）２、ジフェニルスピロムスチン、ジプラチナサイトスタティック（ｄｉｐｕｌａｔｉｎｕｍ ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ）、Ｅｒｂａ ジスタマイシン誘導体、中外ＤＷＡ−２１１４Ｒ、ＩＴＩ　Ｅ０９、エルムスチン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＦＣＥ−２４５１７、エストラムスチンホスファートナトリウム、フォテムスチン、Ｕｎｉｍｅｄ Ｇ−６−Ｍ、Ｃｈｉｎｏｉｎ ＧＹＫＩ−１７２３０、ヘプサルファム（ｈｅｐｓｕｌ−ｆａｍ）、イホスファミド、イプロプラチン（ｉｐｒｏｐｌａｔｉｎ）、ロムスチン、マホスファミド、ミトラクトール、日本化薬ＮＫ−１２１、ＮＣＩ　ＮＳＣ−２６４３９５、ＮＣＩ　ＮＳＣ−３４２２１５、オキサリプラチン、Ｕｐｊｏｈｎ ＰＣＮＵ、プレドニムスチン、Ｐｒｏｔｅｒ ＰＴＴ−１１９、ラニムスチン、セムスチン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０１７７２、ヤクルト本社ＳＮ−２２、スピロムスチン、田辺製薬ＴＡ−０７７、タウロームスチン、テモゾロミド、テロキシロン、��トラプラチン、トリメラモール（ｔｒｉｍｅｌａｍｏｌ）、大鵬４１８１−Ａ、アクラルビシン、アクチノマイシンＤ、アクチノプラノン（ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｏｎｅ）、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＡＤＲ−４５６、エアロプリシニン（ａｅｒｏｐｌｙｓｉｎｉｎ）誘導体、味の素ＡＮ−２０１−ＩＩ、味の素ＡＮ−３、日本ソーダ　アニソマイシン、アントラシクリン、アジノマイシン−Ａ、ビスカベリン（ｂｉｓｕｃａｂｅｒｉｎ）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＬ−６８５９、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５０６７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５５５１、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２６６０５、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２７５５７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２８４３８、硫酸グレオマイシン、ブリオスタチン（ｂｒｙｏｓｔａｔｉｎ）−１、大鵬Ｃ−１０２７、カリケマイシン（ｃａｌｉｃｈｅｍｙｃｉｎ）、クロモキシマイシン（ｃｈｒｏｍｏｘｉｍｙｃｉｎ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、協和発酵ＤＣ−１０２、協和発酵ＤＣ−７９、協和発酵ＤＣ−８８Ａ、協和発酵ＤＣ８９−Ａ１、協和発酵ＤＣ９２−Ｂ、ジトリサルビシン（ｄｉｔｒｉｓａｒｕｂｉｃｉｎ）Ｂ、シオノギＤＯＢ−４１、ドキソルビシン、ドキソルビシン−フィブリノーゲン、エルサミシン−Ａ、エピルビシン、エルブスタチン、エソルビシン、エスペラミシン−Ａ１、エスペラミシン−Ａ１ｂ、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＦＣＥ−２１９５４、藤沢ＦＫ−９７３、ホストリエシン、藤沢ＦＲ−９００４８２、グリドバクチン（ｇｌｉｄｏｂａｃｔｉｎ）、グレガチン（ｇｒｅｇａｔｉｎ）−Ａ、グリンカマイシン（ｇｒｉｃａｍｙｃｉｎ）、ハービマイシン、イダルビシン、イルジン、カズサマイシン、ケサリルホジン（ｋｅｓａｒｉｒｈｏｄｉｎｅｓ）、協和発酵ＫＭ−５５３９、キリン醸造ＫＲＮ−８６０２、協和発酵ＫＴ−５４３２、協和発酵ＫＴ−５５９４、協和発酵ＫＴ−６１４９、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＬＬ−Ｄ４９１９４、明治製菓ＭＥ２３０３、メリガリル、マイトマイシン、ミトキサントロン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｍ−ＴＡＧ、ネオエナクチン（ｎｅｏｅｎａｃｔｉｎ）、日本化薬ＮＫ−３１３、日本化薬ＮＫＴ−０１、ＳＲＩ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＮＳＣ−３５７７０４、オキサリシン、オキザウノマイシン、ペプロマイシン、ピラチン、ピラルビシン、プロトラマイシン（ｐｒｏｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、ピリンダマイシン（ｐｙｒｉｎｄａｍｙｃｉｎ）Ａ、東菱ＲＡ−Ｉ、ラパマイシン、リゾキシン、ロドルビシン、シバノミシン（ｓｉｂａｎｏｍｉｃｉｎ）、シウェンマイシン（ｓｉｗｅｎｍｙｃｉｎ）、住友ＳＭ−５８８７、雪印ＳＮ−７０６、雪印ＳＮ−０７、ソランギシン（ｓｏｒａｎｇｉｃｉｎ）−Ａ、スパルソマイシン、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−２１０２０、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−７３１３Ｂ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−９８１６Ｂ、ステッフィマイシンＢ、大鵬４１８１−２、タリソマイシン、武田ＴＡＮ−８６８Ａ、テルペンテシン（ｔｅｒｐｅｎｔｅｃｉｎ）、トラジン、トリクロザリン（ｔｒｉｃｒｏｚａｒｉｎ）Ａ、Ｕｐｊｏｈｎ Ｕ−７３９７５、協和発酵ＵＣＮ−１００２８Ａ、藤沢ＷＦ−３４０５、吉富Ｙ−２５０２４、ゾルビシン、アルファ−カロテン、アルファ−ジフルオロメチル−アルギニン、アシトレチン、Ｂｉｏｔｅｃ ＡＤ−５、キョーリンＡＨＣ−５２、アルストニン（ａｌｓｔｏｎｉｎｅ）、アモナフィド、アムフェチニル（ａｍｐｈｅｔｈｉｎｉｌｅ）、アムサクリン、アンギオスタット（Ａｎｇｉｏｓｔａｔ）、アキノマイシン（ａｋｉｎｏｍｙｃｉｎ）、アンチネオプラストン（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｏｎ）Ａ１０、アンチネオプラストンＡ２、アンチネオプラストンＡ３、アンチネオプラストンＡ５、アンチネオプラストンＡＳ−１、Ｈｅｎｋｅｌ ＡＰＤ、アフィジコリングリシナート、アスパラギナーゼ、アバロール（Ａｖａｒｏｌ）、バッカリン（ｂａｃｃｈａｒｉｎ）、バトラシリン（ｂａｔｒａｃｙｌｉｎ）、ベンフルロン（ｂｅｎｆｌｕｒｏｎ）、ベンゾトリプト、Ｉｐｓｅｎ−Ｂｅａｕｆｌｏｕｒ ＢＩＭ−２３０１５、ビサントレイン、Ｂｒｉｓｔｏ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−４０４８１、Ｖｅｓｔａｒ ｂｏｒｏｎ −１０、ブロモホスファミド（ｂｒｏｍｏｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、Ｗｅｌｌｃｏｍ ＢＷ−５０２、Ｗｅｌｌｃｏｍ ＢＷ−７７３、カラセミド、カルメチゾール（ｃａｒｍｅｔｈｉｚｏｌｅ）塩酸塩、味の素ＣＤＡＦ、クロルスルファキノキサロン（ｃｈｌｏｒｓｕｌｆａｑｕｉｎｏｘａｌｏｎｅ）、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−２０５３、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−１００、Ｗａｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９２１、Ｗａｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９３７、Ｗａｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９４１、Ｗａｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９５８、クランフェヌル（ｃｌａｎｆｅｎｕｒ）、クラビリデノン（ｃｌａｖｉｒｉｄｅｎｏｎｅ）、ＩＣＮ化合物１２５９、ＩＣＮ化合物４７１１、コントラカン（Ｃｏｎｔｒａｃａｎ）、ヤクルト本社ＣＰＴ−１１、クリスナトール、クラデルム（ｃｕｒａｄｅｒｍ）、サイトカラシンＢ、シタラビン、シトシチン（ｃｙｔｏｃｙｔｉｎ）、Ｍｅｒｚ Ｄ−６０９、ＤＡＢＩＳマレイン酸塩、ダカルバジン、ダテリプチウム、ジデムニンＢ、ジヘマトポルフィリン （ｄｉｈａｅｍａｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ）エーテル、ジヒドロレンペロン（ｄｉｈｙｄｒｏｌｅｎｐｅｒｏｎｅ）、ジナリン、ジスタマイシン、東洋ファルマーＤＭ−３４１、東洋ファルマーＤＭ−７５、第一製薬ＤＮ−９６９３、エリプラビン、酢酸エリプチニウム、ツムラＥＰＭＴＣ、エルゴタミン、エトポシド、エトレチナート、フェンレチニド、フジサワＦＲ−５７７０４、硝酸ガリウム、ゲンクワダフニン（ｇｅｎｋｗａｄａｐｈｎｉｎ）、中外ＧＬＡ−４３、ＧＬａｘｏ ＧＲ−６３１７８、グリフォランＮＭＦ−５Ｎ、ヘキサデシルホスホコリン、Ｇｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ ＨＯ−２２１、ホモハリントニン、ヒドロキシウレア、ＢＴＧ　ＩＣＲＦ−１８７、イルモホシン、イソグルタミン、イソトレチノイン、大塚ＪＩ−３６、Ｒａｍｏｔ Ｋ−４７７、大塚Ｋ−７６ＣＯＯＮａ、クレハ化学Ｋ−ＡＭ、ＭＥＣＴ Ｃｏｒｐ ＫＩ−８１１０、Ａｍｅｒｉｃａ Ｃｙａｎａｍｉｄ Ｌ−６２３、ロイコレグリン（ｌｅｕｋｏｒｅｇｕｌｉｎ）、ロンダミン、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ ＬＵ−２３−１１２、リリーＬＹ−��８６６４１、ＮＣＩ（ＵＳ）ＭＡＰ、マリシン（ｍａｒｙｃｉｎ）、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＭＤＬ−２７０４８、Ｍｅｄｃｏ ＭＥＤＲ−３４０、メルバロン（ｍｅｒｂａｒｏｎｅ）、メロシアニン（ｍｅｒｏｃｙａｎｉｎｅ）誘導体、メチルアニリノアクリジン（ｍｅｔｈｙｌａｎｉｌｉｎｏａｃｒｉｄｉｎｅ）、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ＭＧＩ−１３６、ミナクチビン（ｍｉｎａｃｔｉｖｉｎ）、ミトナフィド、ミトキドン、モピダモール、モトレチニド、全薬工業ＭＳＴ−１６、Ｎ−（レチノイル（ｒｅｔｉｎｏｙｌ））アミノ酸、日清製粉Ｎ−０２１、Ｎ−アシル化ジヒドロアラニン、ナファザトロム、大正ＮＣＵ−１９０、ノコダゾール誘導体、ノルモザン（Ｎｏｒｍｏｓａｎｇ）、ＮＣＩ　ＮＳＣ−１４５８１３、ＮＣＩ　ＮＳＣ−３６１４５６、ＮＣＩ　ＮＳＣ−６０４７８２、ＮＣＩ　ＮＳＣ−９５５８０、オクトレオチド、小野ＯＮＯ−１１２、オキザキノシン、Ａｋｚｏ Ｏｒｇ −１０１７２、パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）、パゼリプチン、Ｗａｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１１７０７、Ｗａｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１５９３４、Ｗａｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＤ−１３１１４１、Ｐｉｅｒｒｅ Ｆａｂｒｅ ＰＥ−１００１、ＩＣＲＴペプチドＤ、ピロキサントロン、ポリヘモトポルフィリン、ｐｏｌｙｐｒｅｉｃ ａｃｉｄ 、Ｅｆａｍｏｌ ポルフィリン、プロビマン、プロカルバジン、プログルミド、インビトロンプロテアーゼネキシン（ｎｅｘｉｎ）Ｉ、東菱ＲＡ−７００、ラゾキサン、サッポロ醸造ＲＢＳ、レストリクチン（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｎ）Ｐ、レテリプチン、レチノイン酸、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−４９５３２、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−５６９７６、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０４８６４、住友ＳＭ−１０８、Ｋｕｒａｒａｙ ＳＭＡＮＣＳ、ＳｅａＰｈａｒｍ ＳＰ−１００９４、スパトール（ｓｐａｔｏｌ）、スピロシクロプロパン誘導体、スピロゲルマニウム、Ｕｎｉｍｅｄ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−５５４、ストリポルジノン（ｓｔｒｙｐｏｌｄｉｎｏｎｅ）、スチポルジオン（Ｓｔｙｐｏｌｄｉｏｎｅ）、サントリーＳＵＮ０２３７、サントリーＳＵＮ２０７１、スーパーオキシドジスムターゼ、富山Ｔ−５０、富山Ｔ−６８０、タキソール、帝人ＴＥＩ−０３０３、テニポシド、サリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）、Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ ＴＪＢ−２９、トコトリエノール、トポスチン、帝人ＴＴ−８２，協和発酵ＵＣＮ−０１、協和発酵ＵＣＮ−１０２８、ウクライン（ｕｋｒａｉｎ）、Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ ＵＳＢ−００６、ビンブラスチン硫酸塩、ビンクリスチン、ビンデシン、ビネストラミド（ｖｉｎｅｓｔｒａｍｉｄｅ）、ビノレルビン、ビントリプトール、ビンゾリジン、ウィザノリド（ｗｉｔｈａｎｏｌｉｄｅｓ）、山之内ＹＭ−５３４、ウログアニリン、コンブレタスタチン、ドラスタチン、イダルビシン、エプルビシン、エストラムスチン、シクロホスファミド、９−アミノ−２−（Ｓ）−カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン （Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エキセメスタン、デカペプチル（トリプトレリン）、またはオメガ−��脂肪酸。
【００２４】
本発明の化合物との併用治療に使用できる放射線の保護薬の例は、ＡＤ−５，アドクノン、アミホスチン類似体、デトックス、ジメスナ、ｌ−１０２、ＭＭ−１５９，Ｎ−アシル化−ジヒドロアラニン、ＴＧＦ−Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、チプロチモド、アミホスチン、ＷＲ−１５１３２７、ＦＵＴ−１８７、ケトプロフェン経皮薬、ナブメトン、スーパーオキシドジスムターゼ（Ｃｈｉｒｏｎ）、スーパーオキシドジスムターゼＥｎｚｏｎ を含む。
【００２５】
本発明の化合物はまた、脈管形成に関連する障害または症状、例えば腫瘍の成長、転移、斑状変性、およびアテローム硬化症の治療または予防にも有用となる。
【００２６】
さらなる態様において本発明はまた眼性障害または症状、例えば緑内障の治療または予防のための併用治療を提供する。例えば本発明の化合物は、緑内障の患者の眼圧を低下する薬剤との併用治療での使用が有利となる。このような眼圧低下薬は、ラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロスト（ｂｉｍａｔｏｐｒｏｓｔ）、またはウノプロストール（ｕｎｏｐｒｏｓｔｏｌ）を含むがこれに限定されない。本発明の化合物と眼圧低下薬との併用治療は、各薬剤が異なるメカニズムに作用してその効果を達成すると考えられるため有用となる。
【００２７】
本発明のもう一つの併用において、本発明の化合物は抗高脂血症薬またはコレステロール降下薬、例えばベンゾチエピン（ｂｅｎｚｏｔｈｉｅｐｉｎｅ）またはベンゾチアゼピン抗高脂血症薬との併用治療に使用することができる。本発明の併用治療に有用なベンゾチエピン抗高脂血症薬の例は、米国特許第５，９９４，３９１号（参照として援用する）に見出すことができる。ベンゾチアゼピン抗高脂血症薬の一部はＷＯ９３／１６０５５に記載されている。あるいは本発明の化合物との併用に有用な抗高脂血症薬またはコレステロール降下薬は、ＨＭＧ　Ｃｏ−Ａリダクターゼ阻害薬とすることができる。本発明の併用治療に有用なＨＭＧ　Ｃｏ−Ａリダクターゼ阻害薬の例として、各々ベンフルオレクス、フルバスタチン、ロバスタチン、プロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ブレバスタチン（ｂｒｅｖａｓｔａｔｉｎ）、ＺＤ−９７２０（ＰＣＴ特許出願第ＷＯ９７／０６８０２に記載）、ＺＤ−４５２２（カルシウム塩についてはＣＡＳ第１４７０９８−２０−２号、ナトリウム塩についてはＣＡＳ第１４７０９８−１８−８号；欧州特許第ＥＰ　５２１４７１号に記載）、ＢＭＳ１８０４３１（ＣＡＳ第１２９８２９−０３−４号）またはＮＫ−１０４（ＣＡＳ第１４１７５０−６３−２号）を含む。本発明の化合物に加えての抗高脂血症薬またはコレステロール降下薬との併用治療は、例えば血管内のアテローム硬化病巣形成のリスクを低減することにおいて有用となる。例えばアテローム硬化病巣は、血管内炎症部位にしばしば発症する。抗高脂血症薬またはコレステロール降下薬は血中脂質レベルを低下することによりアテローム硬化病巣形成のリスクを抑えることが証明されている。本発明を唯一つの作用機序に限定するものではないが、一方において本併用治療の化合物が協力して作用し、例えば血中脂質レベルの低下に協力して血管の炎症を抑えることにより、アテローム硬化病巣のコントロールの改善を提供するだろうと考えられる。
【００２８】
本発明のもう一つの態様において、本発明の化合物は中枢神経の症状または障害、例えば偏頭痛の治療のため、他の化合物または他の治療法と併用して使用することができる。例えば本発明の化合物をカフェイン、５−ＨＴ−１Ｂ／１Ｄアゴニスト（例えばトリプタン系薬剤、例えばスマトリプタン、ナラトリプタン（ｎａｒａｔｒｉｐｔａｎ）、ゾルミトリプタン、リザトリプタン、アルモトリプタンまたはフロバトリプタン）、ドーパミンＤ４アンタゴニスト（例えばソネピプラゾール（ｓｏｎｅｐｉｐｒａｚｏｌｅ））、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセンナトリム、イソメトヘプテン、ジクロラールフェナゾン、ブタルビタール、麦角アルカロイド（例えば麦角アミン、ジヒドロ麦角アミン、ブロモクリプチン、エルゴノビン、またはメチルエルゴノビン）、三環系抗うつ薬（例えばアミトリプチンまたはノルトリプチン）、セロトニンアンタゴニスト（例えばメチセルギドまたはシクロヘプタジン）、ベータアンドレネルジック（ｂｅｔａ−ａｎｄｒｅｎｅｒｇｉｃ）アンタゴニスト（例えばプロプラノール、チモロール（ｔｉｍｏｌｏｌ）、アテノロール、ナドロール、メトプロロール）またはモノアミンオキシダーゼ阻害薬（例えばフェネルジン、イソカルボキサジド）との併用治療に使用することができる。
【００２９】
さらなる態様により本発明の化合物とオピオイド化合物との併用治療を提供する。当併用に有用なオピオイド化合物は、非限定的にモルフィン、メタドン、ヒドロモルフィン、オキシモルフィン、レボルファノール、レバロルファン、コデイン、ジヒドロコデイン、ジヒドロヒドロキシコデイン、ペンタゾシン、ヒドロコドン、オキシコドン、ナルメフェン、エトルフィン、レボルファノール、フェンタニール、スファンタニル、ＤＡＭＧＯ、ブトルファノール、ブプレノルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ＣＴＯＰ、ジプレノルフィン、ベータフナルトレキサミン、ナロキソジン、ナロルフィン、ペンタゾシン、ナルブフィン、ナロキソン、ベンゾイルヒドラゾン、ブレマゾシン、エチルケトシクラゾシン、Ｕ５０，４８８、Ｕ６９，５９３、スピラドリン、ノルビナルトルフィミン、ナルトリドール、ＤＰＤＰＥ、［Ｄ−ｌａ２，ｇｌｕ４］デルトルフィン、ＤＳＬＥＴ、ｍｅｔエンケファリン、ｌｅｕエンケファリン、ベータエンドルフィン、ジノルフィンＡ、ジノルフィンＢ、およびアルファネオエンドルフィンを含む。本発明の化合物とオピオイド化合物との併用の有利な点は、本発明の化合物によりオピオイド化合物の投与量が減少し、それによりオピオイドの副作用、例えばオピオイド依存のリスクまたは重症度を低減することになることである。
【００３０】
本発明の詳細な説明
最も広範な意味において本発明を以下の式の化合物で表す。
【００３１】
【化３５】
2004512271.tif 000003
【００３２】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００３３】
【化３６】
2004512271.tif 000004
【００３４】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００３５】
【化３７】
2004512271.tif 000005
【００３６】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００３７】
【化３８】
2004512271.tif 000006
【００３８】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００３９】
【化３９】
2004512271.tif 000007
【００４０】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００４１】
【化４０】
2004512271.tif 000008
【００４２】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００４３】
【化４１】
2004512271.tif 000009
【００４４】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００４５】
【化４２】
2004512271.tif 000010
【００４６】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００４７】
【化４３】
2004512271.tif 000011
【００４８】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００４９】
【化４４】
2004512271.tif 000012
【００５０】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００５１】
【化４５】
2004512271.tif 000013
【００５２】
本発明のさらなる態様において当該化合物を以下の式で表す。
【００５３】
【化４６】
2004512271.tif 000014
【００５４】
やはりもう一つの態様を以下の化合物で表す。
【００５５】
【化４７】
2004512271.tif 000015
【００５６】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００５７】
【化４８】
2004512271.tif 000016
【００５８】
やはりもう一つの態様を以下の化合物で表す。
【００５９】
【化４９】
2004512271.tif 000017
【００６０】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００６１】
【化５０】
2004512271.tif 000018
【００６２】
もう一つの態様において本発明を以下の化合物で表す。
【００６３】
【化５１】
2004512271.tif 000019
【００６４】
やはりもう一つの態様を以下の化合物で表す。
【００６５】
【化５２】
2004512271.tif 000020
【００６６】
そしてさらなる態様を以下の化合物で表す。
【００６７】
【化５３】
2004512271.tif 000021
【００６８】
もう一つの態様をさらに以下の化合物で表す。
【００６９】
【化５４】
2004512271.tif 000022
【００７０】
上記化合物のグループにこれらの医薬的に受容可能な塩もまた含まれる。“医薬的に受容可能な塩”という用語はアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩を形成する、および遊離酸または遊離塩基の付加塩を形成する一般に使用される塩を包含する。塩の性質は重大ではないが、ただし医薬的に受容可能であるものとする。式Ｉの化合物の適切な医薬的に受容可能な酸付加塩は、無機酸または有機酸から製造することができる。このような無機酸の例は塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸、リン酸である。適当な有機酸は有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、アリール環式（ａｒｙｌｉｐｈａｔｉｃ）、複素環式、カルボン酸およびスルホン酸の化合物（ｃｌａｓｓｅｓ）から選択され、これらの例はギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、メシル酸、サリチル酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（ｅｍｂｏｎｉｃ ａｃｉｄ）（パモ酸）、メタスルホン酸、エチルスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、スルファニル酸、ステアリン酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、アルギン酸、ガラクツロン酸である。当該化合物の適切な医薬的に受容可能な塩基付加塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から形成される金属塩、またはＮ，Ｎ‘−ジベンジルエチレンジアミン、コリン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）およびプロカインから形成される有機塩を含む。これらの塩はすべて、例えば適当な酸または塩基と相応の当該化合物を反応させることにより、同化合物から従来の方法で製造することができる。本発明をいかなる特定の塩にも限定するものではないが、例として以下の本発明の塩の形を含む：
【００７１】
【化５５】；
2004512271.tif 000023
【００７２】
【化５６】；
2004512271.tif 000024
【００７３】
【化５７】；
2004512271.tif 000025
【００７４】
【化５８】；
2004512271.tif 000026
【００７５】
【化５９】；
2004512271.tif 000027
【００７６】
【化６０】；
2004512271.tif 000028
【００７７】
【化６１】；
2004512271.tif 000029
【００７８】
【化６２】；
2004512271.tif 000030
【００７９】
【化６３】；
2004512271.tif 000031
【００８０】
【化６４】；
2004512271.tif 000032
【００８１】
【化６５】；および
2004512271.tif 000033
【００８２】
【化６６】
2004512271.tif 000034
【００８３】
当該化合物を化学物質のままで投与することもできるかもしれないが、これらを医薬組成物として提供することはより好ましい。さらなる側面により本発明は、当該化合物または医薬的に受容可能なその塩もしくはその溶媒和物を、１つまたはそれ以上の医薬的に受容可能なその担体、および任意に１つまたはそれ以上の他の治療成分と共に含む医薬組成物を提供する。担体は、製剤の他の成分と両立でき、そのレシピエントに有毒ではないという意味で受容可能でなければならない。
【００８４】
最も適切な投与経路は例えばレシピエントの症状および障害に依存し得るが、当該製剤は経口、非経口（皮下、皮内、筋内、静脈内および関節内を含む）、直腸および局所（経皮、頬から、舌下および眼内を含む）投与に適するものを含む。製剤は使用しやすいようにユニット投与量の形で提供することができ、薬学技術分野に公知のいかなる方法で製造することもできる。すべての方法は、化合物または医薬的に受容可能なその塩または溶媒和物を、１つまたはそれ以上の付加的な成分から成る担体と会合させるステップを含む。一般に製剤は、活性成分を液体の担体または微細に分割した固体の担体、またはその双方と均一におよび密接に会合させ、その後必要があれば製造物を所望の製剤に成型することにより製造する。
【００８５】
経口投与に適する本発明の製剤は、個別のユニット、例えば予め決定された活性成分量を各々含むカプセル、カシュー剤もしくは錠剤として；粉末もしくは顆粒として；水溶性液体もしくは非水溶液性液体の溶液もしくは懸濁液として；または水中油型液体エマルジョンもしくは油中水型液体エマルジョンとして提供することができる。活性成分はまたボーラス、舐剤またはペーストとして提供することもできる。
【００８６】
錠剤は任意に１つまたはそれ以上の付加的な成分と共に圧縮または成型することにより製造できる。圧縮加工の錠剤は、自由に浮遊している形、例えば粉末または顆粒状の活性成分を、任意に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、潤滑剤、界面活性剤または分散剤と混合して適切な機械で圧縮することにより製造することができる。成型加工の錠剤は、不活性な液体希釈剤で湿らせた粉末状化合物の混合物を適切な機械で成型することにより製造することができる。錠剤は場合によりコーティングしたり切り込みを入れたりしてもよく、錠剤中の活性成分の徐放性もしくはコントロールされた放出を提供するように製剤化することができる。
【００８７】
非経口投与用製剤は、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、および製剤を対象のレシピエントの血液と製剤を等張にする溶媒を含むことのできる、水溶性または非水溶性の滅菌注射溶液；懸濁物質および増粘物質を含むことのできる、水溶性または非水溶性滅菌懸濁液を含む。製剤はユニット投与量または複数のユニット投与量を含む容器、例えば封入アンプルおよびバイアル中に提供することができ、滅菌液体担体、例えば生理食塩水、注射用蒸留水を使用直前に加えるだけでよい凍結−乾燥（凍結乾燥）状態で保存することができる。必要に応じて調合する注射用溶液および懸濁液は、上述の種類の滅菌した粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
【００８８】
直腸投与用製剤は通常の担体、例えばココアバターまたはポリエチレングリコールを含む座薬として提供することができる。
口内の局所投与、例えば頬からまたは舌下用の製剤は、香料主成分、例えばショ糖およびアカシアまたはトラガント中に活性成分を含む口内錠（ｌｏｚｅｎｇｅ）、ならびに主成分、例えばゼラチンおよびグリセリンまたはショ糖およびアカシアをベースとして活性成分を含む錠剤（ｐａｓｔｉｌｌｅ）を含む。
【００８９】
好ましいユニット投与製剤は、以下に述べるように活性成分の有効投与量、またはその適当な分画を含むものである。
特に上に述べた成分に加えて本発明の製剤は、製剤のこのようなタイプに対して当該技術分野で従来より使用されるその他の物質を含むこともでき、例えば経口投与に適する物質は香料物質を含んでもよいと理解されるべきである。
【００９０】
本発明の化合物は経口または注射により１日当たり０．００１から２５００ｍｇ／ｋｇの投与量で投与することができる。ヒト成人の投与量は一般に０．００５ｍｇから１０ｇ／日である。分別ユニットで提供する錠剤または他の形は、このような投与でまたは同一投与を複数回として有効な本発明の化合物の量を使い勝手よく含む、例えば０．５ｍｇから２００ｍｇ、通常大体０．５ｍｇから１００ｍｇを含むユニットとして提供することができる。
【００９１】
当該化合物は好ましくは経口または注射（静注または皮下注）で投与する。患者に投与する化合物の正確な量は、担当医の責任に委ねられる。しかし実際の投与量は、患者の年齢および性別、治療する障害の詳細、およびその重症度を含む多数の因子に依存することになる。また投与経路は症状およびその重症度に依存して多様となり得る。
【００９２】
本発明の化合物は互変異性または立体異性の形で存在し得る。本発明はＲ形およびＳ形鏡像異性体、ジアステレオマー、ｄ−異性体、ｌ−異性体、それらのラセミ混合物、およびそれらの他の混合物を含み、本発明の範疇に含まれる限りこのような化合物すべてを考慮する。このような互変異性、幾何異性または立体異性の形の医薬的に受容可能な塩もまた本発明に含まれる。
【００９３】
上述の化合物には１つまたはそれ以上の立体中心を含むものもあり、各立体中心の存在に対してのＲ型およびＳ型、およびＲ型とＳ型の混合物を含むことを意味する。
【００９４】
以下のスキームは本発明の製造に有用である。
スキーム１：
【００９５】
【化６７】
2004512271.tif 000035
【００９６】
【化６８】
2004512271.tif 000036
【００９７】
スキーム２：
【００９８】
【化６９】
2004512271.tif 000037
【００９９】
【化７０】
2004512271.tif 000038
【０１００】
スキーム３：
【０１０１】
【化７１】
2004512271.tif 000039
【０１０２】
ａ）メーヤワイン試薬。ｂ）塩酸ヒドロキシルアミン。ｃ）１，１’−カルボニルジイミダゾール。ｄ）ｉ．Ｏ３　ｉｉ．ＮａＢＨ３。ｅ）ＰＰｈ３／ＣＢｒ４。ｆ）ＰＰｈ３、還流。ｇ）ウィッティッヒ反応。ｈ）水素化。ｉ）ＨＣｌ。ｊ）Ｚｎ、ＨＯＡｃ。ｋ）ＫＯＨ水溶液。
【０１０３】
以下の実施例を本発明を説明するために提供するが、本発明の範囲を限定するものではない。当該技術分野の業者は、以下の製造法に関する公知の様々な条件および過程を、これらの化合物の製造に使用できることは十分に理解するだろう。
【０１０４】
実施例１：
（αＲ，２Ｓ）−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸、三水和物塩酸塩。
【０１０５】
【化７２】
2004512271.tif 000040
【０１０６】
実施例１ａ）
【０１０７】
【化７３】
2004512271.tif 000041
【０１０８】
３Ｌの三頚フラスコを窒素ガスでパージした後、シクロヘキサノン（１．２７ｍｏｌ、１３２ｍＬ）およびトルエン５００ｍＬを入れた。撹拌した混合液を０℃に冷却し、カリウムｔ−ブトキシド１５７．２ｇ（１．１等量）を加えた。この混合液を１時間撹拌後、色と外見の変化が観察された後、機械的に撹拌させている反応混合液中に１００ｍＬトルエン中の５−臭化ペンチル溶液（１．２７ｍｏｌ，１３６ｍＬ）を１時間かけて滴下させながら加えた。反応混合液を２５℃に温め、オーバーナイト撹拌した。次に１Ｎ　ＫＨＳＯ４８００ｍＬで希釈し、有機溶媒層を乾燥（ＭｇＳＯ４）して濾過し、乾燥するまで蒸発させ、粗生成物２０８．５ｇを得た。その後この物質を次に減圧蒸留により（水流式アスピレーター減圧下）精製し、表題の化合物を４７％の収率で得た。
【０１０９】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．０−２．４（ｍ、１３Ｈ）、４．９−５．１（ｍ、２Ｈ）、５．７−５．９（ｍ、１Ｈ）。
実施例１ｂ）
【０１１０】
【化７４】
2004512271.tif 000042
【０１１１】
実施例１ａの生成物（９３．６７ｇ、０．５６３ｍｏｌ）を３Ｌ三頚フラスコ中でＥｔＯＨ（６００ｍＬ）、水（３００ｍＬ）、ＮａＯＡｃ（１０１．６７ｇ、１．２４ｍｏｌ）およびＮＨ２ＯＨ．ＨＣｌ（７８．３１ｇ、１．１３ｍｏｌ）に加え混合した。この撹拌した反応混合液を１６時間還流後、さらに２５℃で２４時間撹拌した。すべての溶媒を減圧下で除去し、残渣をジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ，５００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）に分配させた。水層から２００ｍＬエーテルで３回抽出した。合わせた有機溶媒層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空内でストリッピングし、表題のオキシム（１２１．３ｇ、粗生成物の収率１００％）を得た。
【０１１２】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２−２．６（ｍ、１３Ｈ）、４．９−５．１（ｍ、２Ｈ）、５．７−５．９（ｍ、１Ｈ）。
実施例１ｃ）
【０１１３】
【化７５】
2004512271.tif 000043
【０１１４】
３Ｌ三頚フラスコを窒素ガスでパージした後、ヘキサメチルジシロキサン（４７１．７ｍＬ、２．２ｍｏｌ）、トルエン（５００ｍＬ）および五酸化二リン（２０３．８８ｇ、１．４ｍｏｌ）を入れた。この不均質な混合液が透明な溶液になるまで還流した（約１．５時間）。この混合液を室温まで冷却した後、２００ｍＬトルエン中の実施例１ｂのオキシム生成物（１０２．１ｇ、０．５６３ｍｏｌ）を、上の反応混合液に２５℃で１時間かけて加えた。反応混合液をさらに４−６時間撹拌した後（ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）にて確認：Ｈｅｘ、Ｉ２中５０％ＥＡ）、混合しながら反応液を氷水中に注いだ。この氷スラリー混合液にＮａＣｌを２５０ｇ加え、得られた混合液に固体の炭酸カリウムを加えてｐＨ５に調整した。このスラリーから５００ｍＬのジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）で３回抽出し、合わせた有機溶媒フラクションをＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し真空内でストリッピングし、位置異性体の （ｒｅｇｉｏｉｓｏｍｅｒｉｃ）ラクタム粗製混合物（８４．６ｇ）を得た。
【０１１５】
実施例１ｄ）
【０１１６】
【化７６】
2004512271.tif 000044
【０１１７】
実施例１ｃの生成物の精製および位置異性体を分離するためクロマトグラフィー（シリカ：アセトニトリル）にかけた。粗製サンプルより７−ペンテニル位置異性体を５０％の収率で単離し、キラルクロマトグラフィー後、所望の単一鏡像異性体を各々４３％の収率で単離した。
【０１１８】
Ｒ−異性体
Ｃ１１Ｈ１９ＮＯとしたときの元素分析計算値：Ｃ、７１．９９；Ｈ、１０．５７；Ｎ、７．６３。実測値：Ｃ、７１．９７；Ｈ、１０．５８；Ｎ、７．５２。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−１．６（ｍ、７Ｈ）、１．７５−１．９（ｍ、２Ｈ）、１．９５−２．１５（ｍ、３Ｈ）、２．４−２．５（ｍ、２Ｈ）、３．２５−３．３５（ｍ、１Ｈ）、４．９５−５．０５（ｍ、２Ｈ）、５．７−５．８５（ｍ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２３．１６６、２５．１６９、２９．６０１，３３．２０９，３５．４７５，３５．６２４、３６．７８３、５３．６００，１１４．９７６、１３７．９２３、１７７．７０３。
［α］２５＝＋２６．９°（ＣＨＣｌ３）３６５ｎｍ
Ｓ−異性体
Ｃ１１Ｈ１９ＮＯとしたときの元素分析計算値：Ｃ、７１．９９；Ｈ、１０．５７；Ｎ、７．６３。実測値：Ｃ、７２．０２；Ｈ、１０．６１；Ｎ、７．５７。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−１．６（ｍ、７Ｈ）、１．７５−１．９（ｍ、２Ｈ）、１．９５−２．１５（ｍ、３Ｈ）、２．４−２．５（ｍ、２Ｈ）、３．２５−３．３５（ｍ、１Ｈ）、４．９５−５．０５（ｍ、２Ｈ）、５．７−５．８５（ｍ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２３．１８７、２５．１７８、２９．６３０、３３．２３０，３５．５２６、３５．６５３、３６．７７８、５３．６２１、１１５．０３２、１３７．９１４、１７７．７０３。
［α］２５＝−２５．７°（ＣＨＣｌ３）３６５ｎｍ
実施例１ｅ）
【０１１９】
【化７７】
2004512271.tif 000045
【０１２０】
実施例１ｄのＲ−異性体生成物（１０２．１ｇ、０．５６ｍｏｌ）、乾燥（ｄｒｙ）
ＴＨＦ（８００ｍＬ）、ＤＭＡＰ（６８．９ｇ、０．５６ｍｏｌ）、ジ炭酸ジ−ｔ−ブチル（Ｂｏｃ２Ｏ、９９ｇ、０．４５ｍｏｌ）を、アルゴンガスでパージした３Ｌ三頚フラスコ中で混合した。反応混合液を３０分以内に７０℃まで加熱した後、さらにＢｏｃ２Ｏ　５２．８ｇおよび乾燥ＴＨＦ２００ｍＬを追加した。３０分後さらにＢｏｃ２Ｏ　３２ｇを加え、混合液を７０℃で１時間撹拌した。さらにＢｏｃ２Ｏ　３６ｇを加え、混合液を１時間撹拌した。反応混合液を室温まで冷却し、１８℃から２０℃での減圧下でＴＨＦをストリッピングした。沈殿物を濾過、エチルアセテート（ＥＡ）１００ｍＬで洗浄し、除去した（〜４５ｇ）。ＥＡ濾液にさらにＥＡ５００ｍＬを加えて希釈した後、１Ｎ　ＫＨＳＯ４５００ｍＬ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液５００ｍＬおよび食塩水（ｂｒｉｎｅ）５００ｍＬで洗浄し、その後無水Ｎａ２ＳＯ４上で１２時間乾燥した。このＥＡ抽出液をＤＡＲＣＯ２０ｇで処理し、上にＭｇＳＯ４をのせたセライトを通して濾過、真空内で濃縮し、濃褐色油状物質として表題の生成物１５０ｇを得た。
【０１２１】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−１．６（ｍ、４Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．６−１．９（ｍ、６Ｈ）、１．９５−２．０５（ｍ、２Ｈ）、２．５−２．７（ｍ、２Ｈ）、４．２−４．２５（ｍ、１Ｈ）、４．９５−５．０５（ｍ、２Ｈ）、５．７−５．８５（ｍ、１Ｈ）。
【０１２２】
実施例１ｆ）
【０１２３】
【化７８】
2004512271.tif 000046
【０１２４】
３ＬのＣＨ２Ｃｌ２に溶かした実施例１ｅの生成物（１５０ｇ、０．５３３）を入れた３Ｌ三頚フラスコを−７８℃まで冷却した。この溶液にＯ３ガス流を反応混合液の色が青色に変わるまで２．５時間通した。次にアルゴンガスを−６０℃から−７０℃に維持した溶液に曝気し、溶液が無色透明になるまで行った（〜３０分）。次にジメチルスルフィド（ＤＭＳ、５００ｍＬ）を加えた後、反応液を還流させ、この還流を２４時間継続した。さらにＤＭＳ１００ｍＬを加えて１２時間還流を継続した。さらにＤＭＳ１００ｍＬを加えてさらに１２時間還流を継続した。その後溶媒および過剰のＤＭＳを２０℃でロータリーエバポレーターにてストリッピングした。得られた残渣の黄色油状物質を蒸留水５００ｍＬで希釈し、ＥＡ３００ｍＬで３回抽出した。ＥＡ層を無水ＭｇＳＯ４上で乾燥、ＤＡＲＣＯ　２０ｇで処理し、上に無水ＭｇＳＯ４をのせたセライト薄層を通して濾過し、減圧下ですべての溶媒をストリッピングし、黄橙色油状物質として表題の粗生成物１５６ｇを得た。
【０１２５】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−１．６（ｍ、４Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．６−１．９（ｍ、６Ｈ）、２．４５−２．７５（ｍ、４Ｈ）、４．２−４．２５（ｍ、１Ｈ）、９．７５（ｓ、１Ｈ）。
【０１２６】
実施例１ｇ）
【０１２７】
【化７９】
2004512271.tif 000047
【０１２８】
ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）１Ｌに溶かして０℃に冷却したＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−アルファ−ホスホノグリシントリメチルエステル（１６０ｇ、０．４８ｍｏｌ）のサンプルに、ＣＨ２Ｃｌ２１００ｍＬ中のＤＢＵ（１１０．２９ｇ、０．７２ｍｏｌ）溶液を加えた。この無色透明の反応混合液を０℃から６℃で１時間撹拌した後、ＣＨ２Ｃｌ２６００ｍＬ中の実施例１ｆのＢｏｃアルデヒド生成物（１５０ｇ、０．５３ｍｏｌ）を−５℃から−１℃で滴下させながら加えた。この反応混合液を同温度で３０分間撹拌した後、約１時間で１０℃までゆっくり加熱した。反応混合液を１Ｎ　ＫＨＳＯ４（５００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２００ｍＬ）および５０ＮａＣｌ水溶液（２００ｍＬ）で洗浄した。その後この有機溶媒層を無水ＭｇＳＯ４上で乾燥、ＤＡＲＣＯ４０ｇで処理し、上に無水ＭｇＳＯ４をのせたセライト薄層を通して濾過、濃縮し、黄色油状物質として表題の粗生成物２５８ｇを得た。この物質をクロマトグラフィーで精製し、純度の高い表題の生成物１３０ｇ（５５％）を得た。
【０１２９】
Ｃ２６Ｈ３６Ｎ２Ｏ７としたときの元素分析計算値：Ｃ、６３．９６；Ｈ、７．４２；Ｎ、５．７７。実測値：Ｃ、６３．４２；Ｈ、８．１６；Ｎ、５．３１。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２５（ｍ、２Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．５１−１．９（ｂｍ、８Ｈ）、２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．５（ｍ、１Ｈ）、２．６５（ｍ、１Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、４．１２（ｍ、１Ｈ）、５．１５（ｓ、２Ｈ）、６．３（ｂｓ、１Ｈ）、６．５５（ｔ、１Ｈ）、７．４５（ｍ、５Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１４．０４、２２．６２、２３．４６、２４．０８、２５．２７、２７．８９、２７．９２、２８．３４、２８．９５、３１．８１、３１．８６、３２．０５、３９．１８、５２．３１、５４．６５、６７．２７、８２．６２、１２８．０７、１２８．１８、１２８．４６、１３５．９８、１３６．８２、１５４．５０、１６４．９２、１７６．６８。
［α］２５＝＋１０．９°（ＣＨＣｌ３）３６５ｎｍ
実施例１ｈ）
【０１３０】
【化８０】
2004512271.tif 000048
【０１３１】
実施例１ｇの生成物（９１．３ｇ、０．１９ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１Ｌ）溶液にＳ，Ｓ−Ｒｈ−ＤＩＰＡＭＰ触媒２．５ｇを加え、続いて水素を通した。水素化はＰａｒｒ水素添加装置（Ｐａｒｒ ａｐｐａｒａｔｕｓ）にて２５℃で１．５時間行った。反応混合液はセライト濾過後、濃縮して褐色油状物質として表題の粗生成物（９０ｇ、９８％）を得た。
【０１３２】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３５（ｍ、４Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．５５−１．９５（ｍ、１０Ｈ）、２．４−２．７（ｍ、２Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、４．２（ｍ、１Ｈ）、４．４（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｍ、２Ｈ）、５．３５（ｄ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）。
【０１３３】
実施例１ｉ）
【０１３４】
【化８１】
2004512271.tif 000049
【０１３５】
氷酢酸２００ｍＬ中の実施例１ｈの生成物（９０ｇ）の溶液にジオキサン中の４Ｎ　ＨＣｌ ２００ｍＬを加えた。反応混合液を２５℃で２０分間撹拌した後、４０℃の減圧下すべての溶媒をストリッピングし、赤褐色の油状物質を得た。この油状生成物を水５００ｍＬで処理し、３００ｍＬジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機溶媒層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥、濾過し、すべての溶媒をストリッピングして表題の粗生成物を得た。この物質をクロマトグラフィーにかけ、純度の高い表題の生成物４５ｇ（６２％）を得た。
【０１３６】
Ｃ２１Ｈ３０Ｎ２Ｏ５としたときの元素分析計算値：Ｃ、６４．０２；Ｈ、７．６８；Ｎ、７．１７。実測値：Ｃ、６３．１０；Ｈ、７．８８；Ｎ、６．６０。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、１４Ｈ）、２．４５（ｔ、２Ｈ）、３．２５（ｍ、１Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、４．３８（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｓ、２Ｈ）、５．３（ｄ、１Ｈ）、５．４５（ｂｓ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１４．０９、２３．１１、２４．８９、２５．４１、２９．５３、３２．３３、３５．５２、３５．７９、３６．６８、５２．２６、５３．５１、５３．５５、５３．６０、６０．２６、６６．８６、１２７．９７、１２８．０５、１２８．４０、１３６．１８、１５５．８５、１７２．８５、１７７．８０。
［α］２５＝−９．９°（ＣＨＣｌ３）３６５ｎｍ
実施例１ｊ）
【０１３７】
【化８２】
2004512271.tif 000050
【０１３８】
アルゴンガスでパージしたジクロロメタン３００ｍＬ中の実施例１ｉの生成物のサンプル４５．０ｇ（０．１１５ｍｏｌ）にトリエチルオキソニウムテトラフルオロボラート２３．０ｇ（０．１２１ｍｏｌ）を加えた。この混合液を２５℃で１時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１５０ｍＬを加えた。ジクロロメタン層を分離し、５０％ＮａＣｌ水溶液１５０ｍＬで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥、セライト濾過し、２５℃で濃縮して表題の生成物の透明な黄色油状物質４７．０ｇ（９７％）を得た。
【０１３９】
Ｃ２３Ｈ３４Ｎ２Ｏ５としたときの元素分析計算値：Ｃ、６０．０１；Ｈ、８．１９；Ｎ、６．６９。実測値：Ｃ、６５．１３；Ｈ、８．４５；Ｎ、６．６４。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２（ｔ、３Ｈ）、１．２５−１．７４（ｍ、１２Ｈ）、１．７５−１．９５（ｍ、２Ｈ）、２．２−２．３（ｍ、１Ｈ）、２．４−２．５（ｍ、１Ｈ）、３．１（ｍ、１Ｈ）、３．７（ｓ、３Ｈ）、３．９−４．０（ｍ、２Ｈ）、４．３５（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｓ、２Ｈ）、５．２５（ｄ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１４．２３、２３．３８、２５．０１、２５．２１、２６．１０、３０．２４、３２．１６、３２．７７、３３．９２、３９．１５、５２．２２、５３．９１、５８．０５、６０．１９、６６．９２、１２８．１１、１２８．３３、１２８．４８、１３６．２７、１５５．８３、１６６．２９、１７３．１１、１７７．６４。
【０１４０】
実施例１ｋ）
【０１４１】
【化８３】
2004512271.tif 000051
【０１４２】
メタノール５００ｍＬ中の塩化アンモニウム７．０ｇ（０．１３０ｍｏｌ）に実施例１ｊの表題の物質（４５．０ｇ、０．１０７ｍｏｌ）の３１．２ｇを加えた。反応液を６５℃で５時間還流した後、すべての溶媒を減圧下で除去し、泡状のどろどろした固まりとして粗生成物４０ｇ（８７％）を得た。この物質をカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題の物質３７ｇ（８１％）を得た。
【０１４３】
Ｃ２１Ｈ３１Ｎ３Ｏ４としたときの元素分析計算値：Ｃ、５９．２２；Ｈ、７．５７；Ｎ、９．８６；Ｃｌ、８．３２。　Ｃ２１Ｈ３１Ｎ３Ｏ４＋１．２ＨＣｌ＋０．５Ｈ２Ｏとしたときの実測値：Ｃ、５７．２０；Ｈ、７．９９；Ｎ、９．６６；Ｃｌ、９．６２。
ＩＲ（Ｎｅａｔ、λｍａｘ　ｃｍ−１）：２９３５、１７１６、１６６９。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、１３Ｈ）、２．５（ｔ、１Ｈ）、２．９５（ｍ、１Ｈ）、３．４（ｂｓ、１Ｈ）、３．７（ｓ、３Ｈ）、４．３（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｓ、２Ｈ）、５．５５（ｄ、１Ｈ）、７．３（ｍ、５Ｈ）、８．７５（ｂｓ、１Ｈ）、８．９（ｂｓ、１Ｈ）、９．５（ｓ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２３．２０、２４．９５、２５．２２、２８．９４、３１．８０、３２．０５、３３．７５、３４．８９、５２．３３、５３．７６、５６．０７、６６．８３、１２７．９３、１２８．０４、１２８．４３、１３６．２６、１５６．００、１７２．２４、１７２．８７。
質量（ＥＳＩ法）：Ｍ／Ｚ、３９０。
［α］２５＝＋３１．５°、３６５ｎｍ
実施例１）
１Ｌの２．３Ｎ　ＨＣｌ中の実施例１ｋの表題の生成物（３６．０ｇ、０．０８４ｍｏｌ）を３時間還流した。室温まで冷却した後、溶液を１５０ｍＬＣＨ２Ｃｌ２で２回洗浄し、真空内ですべての溶媒をストリッピングし、２５．６ｇ（９６％）の表題のアミノ酸生成物を淡黄色泡状物質として得た。
【０１４４】
Ｃ１２Ｈ２３Ｎ３Ｏ２．２ＨＣｌとしたときの元素分析計算値：Ｃ、４６．０２；Ｈ、８．０１；Ｎ、１３．３９；Ｃｌ、２２．４５。　Ｃ１２Ｈ２３Ｎ３Ｏ２＋２．２ＨＣｌ＋０．１Ｈ２Ｏとしたときの実測値：Ｃ、４２．７６；Ｈ、８．０２；Ｎ、１２．４１；Ｃｌ、２２．７９。
ＩＲ（Ｎｅａｔ、λｍａｘ　ｃｍ−１）：２９３０、２８６１、１７３８、１６６５。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．３−２．５（ｍ、１６Ｈ）、２．６（ｄｄ、１Ｈ）、２．８（ｔ、１Ｈ）、３．６５（ｍ、１Ｈ）、４．０（ｔ、１Ｈ）、７．８５（ｓ、１Ｈ）、８．８５（ｓ、１Ｈ）、８．９５（ｓ、１Ｈ）。１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：２４．４９、２５．６７、２６．３３、２９．７１、３１．２６、３２．４５、３５．０４、３５．８７、５３．７３、５７．２１、１７１．７７、１７３．９６。
ＵＶ、２８２ｎｍ、ａｂｓ０．０１５。
質量（Ｍ＋１）＝２４２。
［α］２５＝−４７．４°（ＭｅＯＨ）、３６５ｎｍ
ｅｅ（エナンチオマー過剰率）＝９１％　λ＝２１４ｎｍでのＣＥによる決定
実施例２：
（αＳ，２Ｒ）−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸、三水和物塩酸塩。
【０１４５】
【化８４】
2004512271.tif 000052
【０１４６】
実施例２ａ）
【０１４７】
【化８５】
2004512271.tif 000053
【０１４８】
実施例１ｄのＳ−異性体生成物（５．４５ｇ、０．０３０ｍｏｌ）を実施例１ｅの方法によりＢｏｃ誘導体に変換した。クロマトグラフィー後、この反応により所望の表題生成物６．３ｇ（７５％）を得た。
【０１４９】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−１．６（ｍ、４Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．６−１．９（ｍ、６Ｈ）、１．９５−２．０５（ｍ、２Ｈ）、２．５−２．７（ｍ、２Ｈ）、４．２−４．２５（ｍ、１Ｈ）、４．９５−５．０５（ｍ、２Ｈ）、５．７−５．８５（ｍ、１Ｈ）。
【０１５０】
実施例２ｂ）
【０１５１】
【化８６】
2004512271.tif 000054
【０１５２】
実施例２ａの生成物（６．３ｇ、０．０２５ｍｏｌ）を実施例１ｆの方法によりオゾン化し、さらに精製せずに使用する表題の粗製アルデヒド８．０３ｇを生成した。
【０１５３】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−１．６（ｍ、４Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．６−１．９（ｍ、６Ｈ）、２．４５−２．７５（ｍ、４Ｈ）、４．２−４．２５（ｍ、１Ｈ）、９．７５（ｓ、１Ｈ）。
【０１５４】
実施例２ｃ）
【０１５５】
【化８７】
2004512271.tif 000055
【０１５６】
実施例２ｂの生成物（８．０３ｇ、０．０２４ｍｏｌ）を実施例１ｇの方法によりＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−アルファ−ホスホノグリシントリメチルエステル（７．９ｇ、０．０２４ｍｏｌ）を用いて濃縮し、クロマトグラフィー後、所望の表題の生成物４．９ｇ（４４％）を生成した。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２５（ｍ、２Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．５１−１．９（ｂｍ、８Ｈ）、２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．５（ｍ、１Ｈ）、２．６５（ｍ、１Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、４．１５−４．２５（ｍ、１Ｈ）、５．１５（ｓ、２Ｈ）、６．３−６．４（ｂｓ、１Ｈ）、６．４５−６．５５（ｔ、１Ｈ）、７．３−７．４（ｍ、５Ｈ）。
【０１５７】
実施例２ｄ）
【０１５８】
【化８８】
2004512271.tif 000056
【０１５９】
実施例２ｃの生成物（４．８ｇ、０．０１０ｍｏｌ）をＲ，Ｒ−Ｒｈ−ＤＩＰＡＭＰ触媒の存在下で実施例１ｈの方法により還元し、クロマトグラフィー後、所望の表題の生成物２．９ｇ（６０％）を生成した。
【０１６０】
実施例２ｅ）
【０１６１】
【化８９】
2004512271.tif 000057
【０１６２】
実施例２ｄの生成物（２．９ｇ、０．００６ｍｏｌ）を実施例１ｉの方法によりＨＣｌで処理して脱保護し、所望の表題の生成物２．３ｇ（１００％）を生成した。
【０１６３】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−２．０（ｍ、１４Ｈ）、２．４５（ｔ、２Ｈ）、３．２５（ｍ、１Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、４．３８（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｓ、２Ｈ）、５．３（ｄ、１Ｈ）、５．４５（ｂｓ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）。
【０１６４】
実施例２ｆ）
【０１６５】
【化９０】
2004512271.tif 000058
【０１６６】
実施例２ｅの生成物（０．５６ｇ、０．００１５ｍｏｌ）を実施例１ｊの方法により、トリエチルオキソニウムテトラフルオロボラートを用いてアルキル化し、所望の表題の生成物０．６２ｇ（９８％）を生成した。
【０１６７】
実施例２ｇ）
【０１６８】
【化９１】
2004512271.tif 000059
【０１６９】
実施例２ｆの生成物（０．６２ｇ、０．００１５ｍｏｌ）を実施例１ｋの方法により、メタノール中の塩化アンモニウムを用いて処理し、クロマトグラフィーによる精製後、所望の表題の生成物０．５０ｇ（８８％）を生成した。
【０１７０】
実施例２ｈ）
【０１７１】
【化９２】
2004512271.tif 000060
【０１７２】
ＭｅＯＨに溶かした実施例２ｇの生成物（０．３７ｇ、０．０００９ｍｏｌ）をＰａｒｒ水素添加装置に加えた。この容器に触媒量の５％Ｐｄ／Ｃを加えた。水素を導入して室温、５ｐｓｉの圧で７時間にわたり反応を行った。濾過により触媒を除去し、すべての溶媒を減圧下で濾液より除去し、所望の表題の生成物０．２６ｇ（定量）を生成した。
【０１７３】
実施例２）
２Ｎ　ＨＣｌ（３０ｍＬ）に溶かした実施例２ｈの生成物の溶液を２時間還流を維持した後、室温まで冷却した。すべての溶媒を減圧下で除去し、残渣を水５０ｍＬに溶かした。この溶液から再びすべての溶媒を減圧下でストリッピングした後、再び水１２ｍＬに溶かし、その後凍結乾燥して表題の化合物０．２４５ｇ（７１％）を得た。
【０１７４】
Ｃ１２Ｈ２３Ｎ３Ｏ２．２．３ＨＣｌ．１．９Ｈ２Ｏとしたときの元素分析計算値：Ｃ、４０．１０；Ｈ、８．１６；Ｎ、１１．６９；Ｃｌ、２２．６９。　Ｃ１２Ｈ２３Ｎ３Ｏ２＋２．１ＨＣｌ＋０．７Ｈ２Ｏとしたときの実測値：Ｃ、４０．２７；Ｈ、８．２８；Ｎ、１１．６２；Ｃｌ、２２．７０。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．４−２．１（ｍ、１６Ｈ）、２．６（ｄｄ、１Ｈ）、２．８（ｔ、１Ｈ）、３．６５（ｍ、１Ｈ）、４．０（ｔ、１Ｈ）、７．８５（ｓ、１Ｈ）、８．４５（ｓ、１Ｈ）、８．９（ｓ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：２４．４６、２５．６４、２６．３１、２９．６９、３１．２４、３２．５４、３５．００、３５．８３、５３．７５、５７．２０、１７１．８５、１７３．９３。
［α］２５＝＋２５．７°（ＭｅＯＨ）、３６５ｎｍ
実施例３：
（αＲ，２Ｒ）−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸、三水和物塩酸塩。
【０１７５】
【化９３】
2004512271.tif 000061
【０１７６】
実施例３ａ）
【０１７７】
【化９４】
2004512271.tif 000062
【０１７８】
実施例２ｃの生成物をＳ，Ｓ−Ｒｈ−ＤＩＰＡＭＰ触媒の存在下で実施例１ｈの方法により還元し、クロマトグラフィー後、所望の表題の生成物を生成した。
実施例３ｂ）
【０１７９】
【化９５】
2004512271.tif 000063
【０１８０】
実施例３ａの生成物を実施例１ｉの方法によりＨＣｌで処理して脱保護し、所望の表題の生成物を生成した。
実施例３ｃ）
【０１８１】
【化９６】
2004512271.tif 000064
【０１８２】
実施例３ｂの生成物を実施例１ｊの方法により、トリエチルオキソニウムテトラフルオロボラートを用いてアルキル化し、所望の表題の生成物を生成した。
実施例３ｄ）
【０１８３】
【化９７】
2004512271.tif 000065
【０１８４】
実施例３ｃの生成物を実施例１ｋの方法により、メタノール中の塩化アンモニウムを用いて処理し、クロマトグラフィーによる精製後、所望の表題の生成物を生成した。
【０１８５】
実施例３）
２Ｎ　ＨＣｌ中の実施例３ｄの生成物の溶液を実施例１に記載したように処理し、表題の化合物を得た。
【０１８６】
実施例４：
（αＳ，２Ｓ）−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸、三水和物塩酸塩。
【０１８７】
【化９８】
2004512271.tif 000066
【０１８８】
実施例４ａ）
【０１８９】
【化９９】
2004512271.tif 000067
【０１９０】
上部から撹拌するスターラー、半月形パドル、加熱用マントル、熱電対、および銀製真空外套式蒸留カラム（５段）を装着した２２Ｌ丸底フラスコに、シクロヘキサノン（４５００．０ｇ、４５．８５ｍｏｌ）、アセトンジメチルアセタール（５２５２．６ｇ、５０．４３ｍｏｌ）、アリルアルコール（６３９０．８７ｇ、１１０．０４ｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（ＰＴＳＡ）（０．２５６ｇ、０．００１ｍｏｌ）を入れた。撹拌（１３７ｒｐｍ）開始後、最初の設定温度を７０℃として徐々にポットを加熱した。最終的なポットの温度の１５０℃まで段階的に加熱していった。反応容器の設定温度を上げるかどうかの決定は、蒸留速度で判断した。蒸留速度が遅くなったり、止まってしまう場合にはさらに加熱した。１５０℃に付加的に加熱することでクライゼン転移を行うことができた。ポットの温度を１５０℃に上げても蒸留が観察されなくなった後、加熱用マントルの温度を下げ、反応混合液を１３０℃に冷却した。次に２．５Ｎ　ＮａＯＨを３滴加えてＰＴＳＡを中和した。その後加熱用マントルをフラスコからはずして真空下のストリッピングを開始した。気化冷却を利用してポットの温度を下げ、圧を徐々に４０ｍｍＨｇまで下げた。ポットの温度が〜１００℃に下がった時点で、加熱用マントルを加熱可能な適当な位置に戻した。未反応のシクロヘキサノンおよび低沸点不純物を蒸留除去した。ポットの温度を徐々に上げた（ポットと蒸気との最大温度差は〜１２℃だった）。生成物を４０ｍｍＨｇ、１０９−１１２℃で単離した。典型的な収率は４０−４５％だった。面積（ＧＣ）にして９５％以上含有するフラクション（ガスクロマトグラフィー）を集め、再度蒸留し表題の生成物を総収率５５％で得た。
【０１９１】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：５．８−５．６（ｍ、１Ｈ）、４．８−５．０（ｍ、２Ｈ）、２．５−２．４（ｍ、１Ｈ）、２．３−２．１（ｍ、３Ｈ）、２．１−１．２（ｍ、７Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２１２．５３、１３６．６２、１１６．３２、５０．３９、４２．１８、３３．９１、３３．５２、２８．０９、２５．１０。
ＧＣ／ＭＳ　ｍ／ｚ＝１３８。
【０１９２】
実施例４ｂ）
【０１９３】
【化１００】
2004512271.tif 000068
【０１９４】
酢酸（４７０ｇ）に溶かしたヒドロキシアミン−Ｏ−スルホン酸（９１．８ｇを、機械的に撹拌するスターラー、熱電対、０℃まで冷却できるコンデンサー、および添加用漏斗を装着した１ＬＢａｙｅｒフラスコに加え、７０℃に加熱した。温度を７０と７８℃との間に維持しながら、上の溶液にアリルシクロヘキソン（ｃｙａｌｏｈｅｘｏｎｅ）（１００ｇ）を滴下させながら約４０分で加えた。添加の間に反応液の様子は白色スラリーからオレンジ色透明溶液に変わった。添加後反応液を過熱し、さらに７５℃で５時間撹拌した。ＩＰＣ（イオンペアクロマトグラファイー）用サンプルを１時間ごとに採取した。反応終了後、ロータリーエバポレーターにて減圧下５０℃で酢酸をストリッピングした。次に残渣に水（２００ｍＬ）を加え、溶液をトルエンで抽出した（３００ｍＬ、２回）。有機溶媒層を集め、水（１５０ｍＬ）で処理し１０分間撹拌した。水層がアルカリ性（ｐＨ１２）になるまで水酸化ナトリウム溶液（５０溶液７９．４ｇ）を加えた。温度を４０℃以下にコントロールすることにより、反応容器内で中和を行った。次に液層分離し、トルエン層をフィルターを通してすべての固体またはタール状物質を除去した。その後有機溶媒溶液をロータリーエバポレーターにて減圧下５０℃でストリッピングした。残渣をトルエン（５１０ｍＬ）およびヘプタン（２０４０ｍＬ）の混合液に浸し、３Ｌ反応容器中で６０℃に加熱した。透明な黄橙色溶液が得られた。撹拌しながら溶液を徐々に５℃まで冷却する際、５３℃で表題の生成物が結晶化し始めた。固体を濾過、ヘプタン（５０ｍＬ）で洗浄し、オーバーナイト４０℃減圧下で （ｈｏｕｓｅ ｖａｃｕｕｍ）乾燥し、オフホワイトの結晶として表題の生成物６６．３ｇ（６０％）を生成した。この物質の部分をトルエンおよびヘプタンから再結晶し、表題の生成物を白色結晶性固体として得た。
【０１９５】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：５．８−５．６（ｍ、１Ｈ）、５．５（ｂｓ、１Ｈ）、４．８−５．０（ｍ、２Ｈ）、３．４−３．３（ｍ、１Ｈ）、２．５−２．３（ｍ、２Ｈ）、２．３−２．１（ｍ、２Ｈ）、２．０−１．２（ｍ、６Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１１７．７３、１３３．８３、１１９．３１、５２．８８、４０．９５、３７．２０、３５．７５、２９．９６、２３．３３。
ＧＣ／ＭＳ（ＥＩモード）＝１５３。
融点＝９７−９９℃。
【０１９６】
実施例４ｃ）
【０１９７】
【化１０１】
2004512271.tif 000069
【０１９８】
実施例４ｂで生成されたラセミ混合物をＣｈｉｒａｌｐａｃ ＡＳ２０ｕｍカラムで１００％アセトニトリルにて溶出し、クロマトグラフィーによるキラル分離を行った。２２０ｎＭの波長で検出した。サンプルロード量０．０８ｇ／ｍＬアセトニトリルとし、ｅｅ（エナンチオマー過剰率）９５％以上の各異性体の分離を再現率９０％で得た。Ｒ−異性体物質部分をトルエンおよびヘプタンから再結晶し、表題の生成物のＲ−異性体を白色結晶性固体として得た。
【０１９９】
Ｒ−異性体：融点＝８１−８２℃。
実施例４ｄ）
【０２００】
【化１０２】
2004512271.tif 000070
【０２０１】
滴下用漏斗、温度計および上部から機械的に撹拌するスターラーを装着した五頚平底フラスコを、窒素ガスで３回排気およびパージを行った。実施例４ｃのＲ−異性体生成物ラクタム（１００．０ｇ、０．６５３ｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（７．９８ｇ、６５ｍｍｏｌ）およびＮ−ジイソプロピルエチルアミン（Ｈｕｎｉｇｓ塩基、１１３．３ｇ、０．８７６ｍｏｌ）をトルエン（３５０ｍＬ）に溶かし、トルエン（１００ｍＬ）に溶かしたジ炭酸ジ−ｔ−ブチル（１７０．２ｇ、０．７８ｍｏｌ）を加えた。（注意：Ｈｕｎｉｇｓ塩基を２等量使用すると反応がより良好に進む）。混合液を６５℃に加熱した（注意：同反応中、一定の気体の放出が観察された）。１．５時間後トルエン（５０ｍＬ）に溶かした８６．２５ｇのジ炭酸ジ−ｔ−ブチル（０．３９５ｍｏｌ）をさらに加えた。１７時間加熱を続け、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）によるＩＰＣで７５の変換を示した。さらにトルエン（３０ｍＬ）中の４２．７８ｇのジ炭酸ジ−ｔ−ブチル（０．１９６ｍｏｌ）を加え、褐色の混合液を５．５時間加熱した。周囲温度まで冷却後、混合液を４Ｍ　ＨＣｌ（２１５ｍＬ）で処理し、水層をトルエンで抽出した（８０ｍＬ、２回）。合わせた有機溶媒層をＮａＨＣＯ３（１７０ｍＬ）および水２５０ｍＬで洗浄した（注意：クエンチ中の内部温度は外側から氷／水で冷やすことにより調整した）。気体の放出が観察された。有機溶媒層を気化させ、２５７．４ｇの褐色液体を得た。この粗製物質を溶出液としてトルエン／ＥｔＯＡｃ９／１（６Ｌ）およびトルエン／ＡｃＯＥｔ１／１（０．５Ｌ）を用いてＳｉＯ２（９５０ｇ）の上からのプラグ濾過（ｐｌｕｇ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）により精製し、黄色液体の表題の生成物１３９．５ｇ（５１％）を得た。
【０２０２】
実施例４ｅ）
【０２０３】
【化１０３】
2004512271.tif 000071
【０２０４】
実施例４ｅ−１）
【０２０５】
【化１０４】
2004512271.tif 000072
【０２０６】
バッフルおよび６枚羽の気体分散用軸つき羽根車を装着した２Ｌステンレス製オートクレーブ内に、Ｒｈ（ＣＯ）２（ａｃａｃ）（０．２４８ｇ、０．９５９ｍｍｏｌ）、ＢＩＰＨＥＰＨＯＳ（構造を以下に示す、米国特許４，７６９，４９８の実施例１３に記載された方法で製造。２．２６５ｇ、２．８７９ｍｍｏｌ）、実施例４ｄの生成物（Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｓ−７−アリルカプロラクタム（２４２．９ｇ、０．９５９ｍｏｌ）およびトルエン（９６５ｇ）を入れた。
【０２０７】
【化１０５】
2004512271.tif 000073
【０２０８】
反応器を密封し１００％一酸化炭素でパージした（５１５ｋＰａ、８回）。反応器を１００％一酸化炭素で３０８ｋＰａ（３０ｐｓｉｇ）まで加圧した後、１：１ＣＯ／Ｈ２混合気体を加え、総圧を５１５ｋＰａ（６０ｐｓｉｇ）とした。機械的に激しく撹拌させて、総圧約５１５ｋＰａ（６０ｐｓｉｇ）を維持するように１：１ＣＯ／Ｈ２混合気体を加えながら、混合物を５０℃に加熱した。２２時間後混合液を約２５℃に冷却し、注意深く圧をリリースした。生成混合物を真空濾過し、減圧下で濾液を蒸発させ、明黄色油状物質２６７．７ｇを得た。１Ｈ　ＮＭＲの分析は約９６％の選択性で出発物質から相応の実施例１ｆのアルデヒド生成物への本質的に定量的な変換を示した。この油状物質をさらに精製せずに以下の実施例に使用した。
【０２０９】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．４７（ｓ、９Ｈ）、１．６−１．８０（ｍ、９Ｈ）、１．８４−１．９２（ｍ、１Ｈ）、２．４１−２．５８（ｍ、３Ｈ）、２．６１−２．７１（ｍ、１Ｈ）、４．２（ｄ、Ｊ＝５．２Ｈｚ、１Ｈ）、９．７４（ｓ、１Ｈ）。
【０２１０】
実施例４ｅ−２）
【０２１１】
【化１０６】
2004512271.tif 000074
【０２１２】
ＣＨ２Ｃｌ２に溶かし、０℃に冷却したＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−アルファ−ホスホノグリシントリメチルエステルのサンプル（９０１．８ｇ、２．７ｍｏｌ）に、ＣＨ２Ｃｌ２中のＤＢＵ（５９７．７ｇ、３．９ｍｏｌ）溶液を加えた。この無色透明の反応混合液を０℃から６℃で１時間撹拌した後、ＣＨ２Ｃｌ２中の実施例１ｆのＢｏｃアルデヒド生成物のサンプル（８１２．０ｇ、２．９ｍｏｌ）を−５℃から−１℃で滴下させながら加えた。反応は以上までとし、実施例１ｇに記載したように精製を完了させ、少量のＣＨ２Ｃｌ２を含む実施例１ｇの表題の生成物１５５０ｇを得た。
【０２１３】
実施例４ｅ）
実施例１ｇの生成物（１００ｇ、０．２０ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１Ｌ）溶液にＲＲ−Ｒｈ−ＤＩＰＡＭＰ触媒３ｇを加えた。Ｐａｒｒ水素添加装置にて２５℃で１．５時間水素化を行った。反応混合液をセライト濾過後、濃縮して実施例４ｅの表題の粗生成物を褐色油状物質として得た（１００ｇ）。
【０２１４】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３５（ｍ、４Ｈ）、１．５（ｓ、９Ｈ）、１．６−１．９（ｍ、１０Ｈ）、２．５−２．８（ｍ、２Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、４．２５（ｍ、１Ｈ）、４．４５（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｍ、２Ｈ）、５．６５（ｄ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）。
【０２１５】
実施例４ｆ）
【０２１６】
【化１０７】
2004512271.tif 000075
【０２１７】
氷酢酸２００ｍＬ中の実施例１ｈの生成物（１００ｇ）の溶液にジオキサン中の４Ｎ　ＨＣｌ２５ｍＬを加えた。反応混合液を２５℃で２０分間撹拌した後、４０℃での減圧下ですべての溶媒をストリッピングし、１０５ｇの赤褐色油状物質を得た。この油状生成物を水５００ｍＬで処理し、３００ｍＬジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機溶媒層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥、濾過し、すべての溶媒をストリッピングし、表題の生成物９９．９ｇを赤褐色油状物質として得た。
【０２１８】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２５−２．０（ｍ、１４Ｈ）、２．４５（ｔ、２Ｈ）、３．２５（ｍ、１Ｈ）、３．７（ｓ、３Ｈ）、４．３５（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｓ、２Ｈ）、５．５（ｄ、１Ｈ）、６．４５（ｂｓ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）。
ｅｅ＝９５％　キラルＨＰＬＣによる決定
実施例４ｇ）
【０２１９】
【化１０８】
2004512271.tif 000076
【０２２０】
アルゴンガスでパージしたジクロロメタン６００ｍＬ中の実施例４ｆの生成物のサンプル３０．０ｇ（０．０７７ｍｏｌ）にトリエチルオキソニウムテトラフルオロボラート１５．７ｇ（０．０８２ｍｏｌ）を加えた。この混合液を２５℃で１時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液３００ｍＬを加えた。ジクロロメタン層を分離し、５０％ＮａＣｌ水溶液３００ｍＬで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥、セライト濾過後、２５℃で濃縮して表題の生成物、透明な黄色油状物質３１．２ｇ（〜９７％）を得た。
【０２２１】
Ｃ２３Ｈ３４Ｎ２Ｏ５としたときの元素分析計算値：Ｃ、６０．０１；Ｈ、８．１９；Ｎ、６．６９。Ｃ２３Ｈ３４Ｎ２Ｏ５＋０．５Ｈ２Ｏしたときの実測値：Ｃ、６４．６６；Ｈ、８．２４；Ｎ、６．５９。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．２５（ｔ、３Ｈ）、１．２８−１．７５（ｍ、１２Ｈ）、１．８−１．９８（ｍ、２Ｈ）、２．２−２．３（ｍ、１Ｈ）、２．４−２．５（ｍ、１Ｈ）、３．１（ｍ、１Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）、３．９−４．０（ｍ、２Ｈ）、４．３５（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｓ、２Ｈ）、５．２５（ｄ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１４．２７、２３．３６、２５．２１、２５．５３、２６．０９、３０．２２、３２．１５、３２．７３、３３．９０、３９．１４、５２．２１、５３．８９、５８．０４、６０．３３、６６．８９、１２８．１１、１２８．３５、１２８．４８、１３６．２９、１５５．８６、１６６．３０、１７３．１４、１７７．６９。
ＩＲ（Ｎｅａｔ、λｍａｘ　ｃｍ−１）：３２９５、２９２０、１７３９，１６８０。
ＵＶ、２５７ｎｍ、ａｂｓ０．０１５。
［α］２５＝＋３９．８°（ＣＨＣｌ３）、３６５ｎｍ
実施例４ｈ）
【０２２２】
【化１０９】
2004512271.tif 000077
【０２２３】
５００ｍＬメタノール中の塩化アンモニウム４．２ｇ（０．０７８ｍｏｌ）に実施例４ｇの表題の物質３１．２ｇを加えた。反応液を６５℃で５時間還流した後、すべての溶媒を減圧下で除去し、泡状のどろどろした固まりとして粗生成物２９ｇ（９２％）を得た。この物質をカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題の生成物２３ｇ（７０％）を生成した。
【０２２４】
元素分析計算値（Ｃ２１Ｈ３１Ｎ３Ｏ４．１ＨＣｌとして）：Ｃ、５９．２８；Ｈ、７．５７；Ｎ、９．８９；Ｃｌ、８．３９。　実測値（Ｃ２１Ｈ３１Ｎ３Ｏ４＋１ＨＣｌ＋１Ｈ２Ｏとして）：Ｃ、５６．７３；Ｈ、７．７４；Ｎ、９．４０；Ｃｌ、８．０６。
ＩＲ（Ｎｅａｔ、λｍａｘ　ｃｍ−１）：３１３６、３０３４８、２９３５、１７１６、１６６９。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．３−２．０５（ｍ、１３Ｈ）、２．５（ｔ、１Ｈ）、２．９８（ｍ、１Ｈ）、３．４（ｂｓ、１Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）、４．３５（ｍ、１Ｈ）、５．１（ｓ、２Ｈ）、５．５（ｄ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、５Ｈ）、８．７５（ｓ、１Ｈ）、９．０（ｓ、１Ｈ）、９．５（ｓ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２３．２５、２５．０１、２５．３４、２９．０１、３１．８８、３２．２６、３３．８９、３５．０６、５２．３３、５３．７３、５６．２０、６６．８９、１２７．９５、１２８．０６、１２８．４５、１３６．２７、１５５．９３、１７２．２７、１７２．８０。
ＵＶ、２５７ｎｍ、ａｂｓ０．００９。
質量（ＥＳＩ法）：Ｍ／Ｚ、３９０。
［α］２５＝−４２．８°（ＭｅＯＨ）、３６５ｎｍ
ｅｅ＝９５％　キラルＨＰＬＣによる決定
実施例４）
５００ｍＬの２Ｎ　ＨＣｌ中の実施例４ｈの表題の生成物（２３ｇ）を５時間還流した。次に真空内ですべての溶媒を除去し、残渣を再び水に溶かして３００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２で２回洗浄した。次に水溶液を真空内で濃縮し、淡褐色吸湿性固体の表題の生成物１７ｇ（１００％）を得た。
【０２２５】
Ｃ１２Ｈ２３Ｎ３Ｏ２．２ＨＣｌとしたときの元素分析計算値：Ｃ、４５．８６；Ｈ、８．０２；Ｎ、１３．３７；Ｃｌ、２２．５６。　Ｃ１２Ｈ２３Ｎ３Ｏ２＋２．１ＨＣｌ＋０．７Ｈ２Ｏとしたときの実測値：Ｃ、４３．９４；Ｈ、８．６５；Ｎ、１２．５２；Ｃｌ、２２．２３。
ＩＲ（Ｎｅａｔ、λｍａｘ　ｃｍ−１）：２９３６、１７４２、１６６９。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．３−２．１（ｍ、１６Ｈ）、２．６（ｄｄ、１Ｈ）、２．８（ｔ、１Ｈ）、３．６５（ｍ、１Ｈ）、４．０（ｔ、１Ｈ）、７．８５（ｓ、１Ｈ）、８．４（ｓ、１Ｈ）、８．９５（ｓ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：２４．４９、２５．６７、２６．３３、２９．７１、３１．２６、３２．４５、３５．０４、３５．８７、５３．７３、５７．２１、１７１．７７、１７３．９６。
ＵＶ、２０９ｎｍ、ａｂｓ０．３４３。
質量（Ｍ＋１）＝２４２。
［α］２５＝＋６０．０°（ＭｅＯＨ）、３６５ｎｍ
ｅｅ＝９２％　λ＝２１０ｎｍでのＣＥによる決定
実施例５
（αＲ，２Ｓ）−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸、三水和物塩酸塩。
【０２２６】
【化１１０】
2004512271.tif 000078
【０２２７】
実施例５ａ）
【０２２８】
【化１１１】
2004512271.tif 000079
【０２２９】
塩化メチレンおよびメタノール（７５／４５ｍＬ）中の実施例４ｃ（３．０ｇ、０．０１５ｍｏｌ）の溶液をドライアイス浴中で−７８℃まで冷却した。オゾンを３ｍｌ／分の流量で溶液に通して反応液を撹拌した。溶液の色が濃青色のまま変わらなくなったら、オゾンを除去し、反応液を窒素ガスでパージした。冷却した溶液にホウ水素化ナトリウム（２．１４ｇ、．０６１ｍｏｌ）を、一回の気体の放出を最少にするように非常にゆっくり加えていった。反応液に氷酢酸を徐々に加え、ｐＨを３とした。次に反応液を飽和炭酸水素ナトリウムで中和した。その後有機溶媒層を５０ｍＬの食塩水で３回洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥、減圧下で除去した。青白色油状物質をシリカ（１５ｇ）プラグ（ｐｌｕｇ）に通し、５．１５ｇ、０．０２６ｍｏｌ（６４％）のアルコールＣ９Ｈ１４Ｎ２Ｏ３を得た。
【０２３０】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）１．１８−２．１５（ｍ、８Ｈ）、３．５９（ｍ、２Ｈ）、４．３９（ｍ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）２４．４５、２５．７１、２６．４７、３２．５６、３４．６７、５１．１６、５８．８５、１６０．６６、１６０．８９。
【０２３１】
実施例５ｂ）
【０２３２】
【化１１２】
2004512271.tif 000080
【０２３３】
０℃の氷浴中で塩化メチレン（１００ｍＬ）中の実施例５ａ（５．１５ｇ、０．０２６ｍｏｌ）の溶液に、四臭化炭素（１０．７８ｇ、０．０３３ｍｏｌ）を加えた。溶液を氷浴中で０℃に冷却した。次にトリフェニルホスフィン（１０．２３ｇ、０．３９ｍｏｌ）を温度が３℃以上に上がらないように分けて加えた。反応液を２時間撹拌し、溶媒を真空内で除去した。粗生成物をフラッシュ（ｆｌａｓｈ ）クロマトグラフィーで精製し、臭化物（５．９ｇ、０．０２３ｍｏｌ）を８７％の収率で得た。
【０２３４】
Ｃ１０Ｈ１６Ｎ２Ｏ３としたときの元素分析計算値：Ｃ、４１．４０；Ｈ、５．０２；Ｎ、１０．７３；Ｂｒ、３０．６０。　実測値：Ｃ、４１．５９；Ｈ、５．０７；Ｎ、１０．６０；Ｂｒ、３０．８６。
【０２３５】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．５０−２．６０（ｍ、９Ｈ）、２．９９（ｄｄ、１Ｈ）、３．３５（ｍ、２Ｈ）、４．４１（ｍ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２３．８９、２５．３３、２６．０４、２８．０６、３１．５９、３５．０５、５２．７９、１５９．３、１６０．２。
【０２３６】
実施例５ｃ）
【０２３７】
【化１１３】
2004512271.tif 000081
【０２３８】
トルエン（２５ｍＬ）中の実施例５ｂ（５．７１ｇ、０．０２６ｍｏｌ）の溶液にトリフェニルホスフィン（７．１７ｇ、０．０２７ｍｏｌ）を加えた。反応液を油浴中で１６時間還流した。冷却後、ガラス状の固体からトルエンをデカントして除去した。固体をジエチルエーテルと共にオーバーナイトで粉末にし、臭化スルホニウム（１０．２１ｇ、０．０２０ｍｏｌ）を９０％の収率で得た。
【０２３９】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．５０−２．９（ｍ、１１Ｈ）、３．５８（ｍ、１Ｈ）、４．１６（ｍ、１Ｈ）、４．４１（ｍ、１Ｈ），７．６−８．０（ｍ、１５Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２４．４３、２４．９７、２５．５０、５５．０８、５５．２７、１１６．９、１１８．１、１３０．４、１３０．６、１３３．５、１３５．１、１３５．２、１５９．４、１６０。
３１Ｐ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）２６．０。
【０２４０】
実施例５ｄ）
【０２４１】
【化１１４】
2004512271.tif 000082
【０２４２】
１Ｌ丸底フラスコにエタノール（５００ｍＬ）中のＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ホモセリンラクトン（９７ｇ、０．４４２ｍｏｌ）を加えた。この反応液に水酸化ナトリウム溶液（１Ｍ、５０ｍＬ）を加えた。出発物質が消費されるまで、薄層クロマトグラフィーで１２時間反応をモニターした。トルエン（６０ｍＬ）を加えた後、溶媒を真空内で除去した。残渣はさらに精製せずに次の反応に進めた。
【０２４３】
実施例５ｅ）
【０２４４】
【化１１５】
2004512271.tif 000083
【０２４５】
実施例５ｄの残渣を１Ｌ丸底フラスコ中でＤＭＦに懸濁させた。この懸濁液に臭化ベンジル（７６．９ｇ、０．４５ｍｏｌ、５３．５ｍＬ）を加え、混合液を１時間撹拌した。サンプルをクエンチし、質量分析計で分析して出発物質が消費され、ラクトンが再形成されてないことを確認した。反応液に酢酸エチル１Ｌおよび食塩水５００ｍＬを加えた。水層をさらに２回５００ｍＬの酢酸エチルで洗浄した。有機溶媒層を合わせ、ＭｇＳＯ４上で乾燥、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィーにより、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｓ−ホモセリンベンジルエステルを白色固体として得た（８０ｇ）。
【０２４６】
実施例５ｆ）
【０２４７】
【化１１６】
2004512271.tif 000084
【０２４８】
２Ｌの丸底フラスコにＣＨ２Ｃｌ２（６００ｍＬ）に懸濁させたクロロクロム酸ピリジニウム（１８７ｇ、０．８７６ｍｏｌ）およびシリカゲル（１９７ｇ）を加えた。このスラリーにＣＨ２Ｃｌ２（６００ｍＬ）中の実施例５ｅの生成物（８０ｇ、０．２３３ｍｏｌ）の溶液を加えた。混合液を４時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消費されたことを確認した。この反応液にジエチルエーテル１Ｌを加えた。その後溶液をセライトパッド次にシリカゲルパッドで濾過した。溶媒を真空内で除去し、得られた油状物質をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、総収率３８％でアルデヒド（５８．８ｇ）を得た。
ＭＨ＋３４２．５、ＭＨ＋ＮＨ４＋３５９．５。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：３．１５（ｑ、２Ｈ）、４．１２（ｍ、１Ｈ）、５．１５（ｓ、２Ｈ）、５．２０（ｓ、２Ｈ），７．３１（ｍ、１０Ｈ）、９．７２（ｓ、１Ｈ）。
【０２４９】
実施例５ｇ）
【０２５０】
【化１１７】
2004512271.tif 000085
【０２５１】
３Ｌ三頚フラスコに、真空下Ｐ２Ｏ５上で乾燥させた実施例５ｃのホスホニウム塩（５６．８６ｇ、０．１１ｍｏｌ）をＴＨＦ（１Ｌ）に混合したものを加えた。このスラリーをドライアイス浴中で−７８℃に冷却した。冷却したスラリーに、温度が−７２℃以上に上がらないようにＫＨＭＤＳ（２２０ｍＬ、０．２２ｍｏｌ）を滴下させながら加えた。反応液を−７８℃で２０分間、その後−４５℃で２時間撹拌した。温度を次に−７８℃に戻し、実施例５ｆのアルデヒド（１５．９ｇ、０．０４７１ｍｏｌ）を４５分かけてＴＨＦ（５０ｍＬ）中に滴下させながら加えた。反応液を−７７℃で３０分間撹拌し、次に−５０℃に１時間温めた後、４時間かけて室温まで温めた。反応液に酢酸エチル（２００ｍＬ）および飽和塩化アンモニウムを加えた。有機溶媒層を集め、ＭｇＳＯ４上で乾燥、真空内で濃縮した。油状粗生成物をシリカクロマトグラフィーで精製し、オレフィン化合物（４５．１ｇ）を淡黄色のねばねばした油状物質として８１％の収率で得た。
【０２５２】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．４−２．６（ｍ、１０Ｈ）、２．９２（ｄ、１Ｈ）、４．１７（ｍ、１Ｈ）、４．３８（ｍ、１Ｈ）、５．０５（ｑ、２Ｈ）５．４０（ｍ、２Ｈ），７．３（ｍ、１０Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）２９．４９、２９．６４、３１．３２、３９．６０、４９．５６、５３．９８、６１．０１、６５．２５、１２４．１４、１２７．８１、１２８．２０、１２８．５５、１２８．７９、１２９．３０、１３０．９６、１３５．６８、１３７．３１、１５２．５９、１５７．５７、１７１．６１。
【０２５３】
実施例５）
２０ｍＬのバイアルに、ジオキサン（５０ｍＬ）および４Ｎ　ＨＣｌ水溶液（２５０ｍＬ）中の実施例５ｇの生成物（１９．７７ｇ、０．０３９ｍｏｌ）を加えた。この溶液を水素化用フラスコ中の触媒量の１０％Ｐｄ／炭素に加えた。フラスコをＨ２ガスで５時間加圧した（５０ｐｓｉ）。反応を質量分析計でモニターし、出発物質が消費されたことを確認した。この溶液をセライトパッドで濾過し、水で洗浄した。凍結乾燥により溶媒を除去し、表題の化合物（７．５２ｇ）を８１％の収率で得た。
【０２５４】
ＭＨ＋２４２．２、ＭＨ＋ＮＨ４＋２５９．２。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、１５Ｈ）、２．４２（ｄ、１Ｈ）、２．６５（ｄｄ、１Ｈ）、３．４９（ｍ、１Ｈ）、３．９８（ｔ、１Ｈ）、７．２６（ｓ）、８．０５（ｓ）、８．３５（ｓ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）２４．４３、２５．５８、２６．００、２６．１０、３２．７５、３３．４５、３５．３１、５３．７６、５４．５５、１５７．２７、１７５．１３。
【０２５５】
実施例６
（αＳ，２Ｓ）−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸、三水和物塩酸塩。
【０２５６】
【化１１８】
2004512271.tif 000086
【０２５７】
実施例６ａ）
【０２５８】
【化１１９】
2004512271.tif 000087
【０２５９】
１Ｌ三頚フラスコに、ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の実施例５ｃのホスホニウム塩（２１．２１ｇ、０．０４１ｍｏｌ）を加えた。このスラリーをドライアイス浴中で−７８℃まで冷却した。冷却したスラリーに、内部の温度が−７２℃以上に上がらないようにＫＨＭＤＳ（８８ｍＬ、０．０４４ｍｏｌ）を滴下させながら加えた。反応液を−７８℃で２０分間、次に−４５℃で１時間撹拌した。その後温度を−７８℃に戻し、アルデヒド（１５．９ｇ、０．０４７ｍｏｌ）（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ホモセリンラクトンを用いて実施例５（ｄ−ｆ）で製造）を４５分かけて滴下させながらＴＨＦ（５０ｍＬ）中に加えた。反応液を−７７℃で３０分間撹拌し、次に−５０℃に３０分間温めた後、４時間かけて室温まで温めた。この反応液に酢酸エチル（１００ｍＬ）および飽和塩化アンモニウムを加えた。有機溶媒層を集め、ＭｇＳＯ４上で乾燥、真空内で濃縮した。油状粗生成物をシリカクロマトグラフィーで精製し、オレフィン化合物（９．０ｇ）を淡黄色のねばねばした油状物質として４５％の収率で得た。
【０２６０】
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：１．４−２．６（ｍ、１０Ｈ）、２．９２（ｄ、１Ｈ）、４．１７（ｍ、１Ｈ）、４．３８（ｍ、１Ｈ）、５．０５（ｑ、２Ｈ）５．４０（ｍ、２Ｈ），７．３（ｍ、１０Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）２９．４９、２９．６４、３１．３２、３９．６０、４９．５６、５３．９８、６１．０１、６５．２５、１２４．１４、１２７．８１、１２８．２０、１２８．５５、１２８．７９、１２９．３０、１３０．９６、１３５．６８、１３７．３１、１５２．５９、１５７．５７、１７１．７１。
【０２６１】
実施例６）
２０ｍＬのバイアルに、ジオキサン（５ｍＬ）および４Ｎ　ＨＣｌ水溶液（１６ｍＬ）中の実施例６ａの生成物を加えた。この溶液を水素化用フラスコ中の触媒量の１０％Ｐｄ／炭素に加えた。フラスコをＨ２ガスで５時間加圧（５０ｐｓｉ）した。反応を質量分析計でモニターし、出発物質が消費されたことを確認した。この溶液をセライトパッド濾過し、水で洗浄した。凍結乾燥により溶媒を除去し、表題の化合物（９８．７ｍｇ）を７９．４％の収率で得た。
【０２６２】
ＭＨ＋２４２．２、ＭＨ＋ＮＨ４＋２５９．２
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、１５Ｈ）、２．４２（ｄ、１Ｈ）、２．６（ｄｄ、１Ｈ）、３．４９（ｍ、１Ｈ）、３．９８（ｔ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）２４．４３、２５．５８、２６．００、２６．１０、３２．７５、３３．４５、３５．３１、５３．７６、５４．５５、１５７．２７、１７５．１３。
【０２６３】
実施例７
（２Ｓ，４Ｚ）−２−アミノ−６−［（２Ｒ）−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル］−４−ヘキサン酸。
【０２６４】
【化１２０】
2004512271.tif 000088
【０２６５】
実施例７ａ）
（２Ｓ，４Ｚ）−６−［（２Ｒ）−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル］−２−［［（フェニルメトキシ）カルボニル］アミノ］−４−ヘキサン酸、フェニルメチルエステル。
【０２６６】
【化１２１】
2004512271.tif 000089
【０２６７】
５０ｍＬのフラスコにメタノール中（２５ｍＬ）の実施例６ａのサンプル（１．５ｇ、２．９７ｍｍｏｌ）を加えた。次に氷酢酸の６０％溶液（１６ｍＬ）をこの反応混合液に加えた。沈殿が観察された。さらにメタノールを加えて（１ｍＬ）固体を溶かした。その後反応液に亜鉛末（０．２００ｇ）を加えた。反応液を温度を３７℃に維持しながら４時間超音波処理した。反応はＴＬＣおよびＭＳ（質量分析計）により、出発物質が消費され生成物に相応する質量が観察されるまでモニターした。溶液をデカントして亜鉛を除去し、濾液にアセトニトリル／水の３０％溶液（１００ｍＬ）を加えた。反応液をＷａｔｅｒｓ社製ＨＰＬＣ［３０分間での２０％から７０％アセトニトリルの濃度勾配］に２回流し５２％アセトニトリル／水にて精製された。得られた生成物を凍結乾燥し、実施例７ａの表題の物質（１．０１ｇ）を白色固体として７３％の収率で得た。
【０２６８】
ＭＨ＋４６４．４、ＭＨ＋Ｎａ＋４８６．４
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、８Ｈ）、２．４２（ｍ、２Ｈ）、２．６（ｍ、５Ｈ）、３．４９（ｑ、１Ｈ）、４．３１（ｔ、１Ｈ）５．１５（ｓ、２Ｈ）、５．２２（ｓ、２Ｈ）、５．４３（ｑ、１Ｈ）、５．５９（ｑ、１Ｈ）、７．２５（ｂｓ、１０Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２４．３７、２９．６１、３０．７６、３２．４５、３３．７３、３４．４２、５５．４０、５７．０９、６８．０６、６８．０７、１２２．３、１２４．９、１２８．７６、１２９．０９、１２９．２８、１２９．３９、１２９．５１、１２９．６１、１５５．７１、１５８．３５、１７３．９０。
【０２６９】
実施例７）
２５０ｍＬのフラスコに４Ｍ　ＨＣｌ（１００ｍＬ）中の実施例７ａの生成物（１．０ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液をオーバーナイト還流し、出発物質が消費され生成物相応の質量が観察されるまで、ＭＳでモニターした。反応液はそれ以上操作せずに、Ｗａｔｅｒ’ｓ社製逆相カラム［３０分間での０％から３０％アセトニトリル／水の濃度勾配］に２回流し、１８％アセトニトリル／水にて精製された。集めたフラクションを凍結乾燥し、表題の生成物（０．３４ｇ）を黄白色泡状物質として６４％の収率で得た。
【０２７０】
ＭＨ＋２４０．３、ＭＨ＋Ｎａ＋４８６．４
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、６Ｈ）、２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．４５（ｄｄ、２Ｈ）、２．６９（ｍ、２Ｈ）、３．６１（ｄｔ、１Ｈ）３．９８（ｔ、１Ｈ）、５．５９（ｍ、１Ｈ）、５．６５（ｍ、１Ｈ）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、δｐｐｍ）：２３．６５、２４．６６、３２．５１、３２．８４、３３．１、３３．２５、５４．１０、５６．１、１２６．８０、１２９．３３、１５３．３３、１７２．５２。
【０２７１】
実施例８
（２Ｓ，４Ｅ）−２−アミノ−６−［（２Ｒ）−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル］−４−ヘキサン酸。
【０２７２】
【化１２２】
2004512271.tif 000090
【０２７３】
実施例８ａ）
（２Ｓ，４Ｅ）−２−［［（フェニルメトキシ）カルボニル］アミノ］−６−［（５Ｒ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−オキソ−３Ｈ，５Ｈ−［１，２，４］オキサジアゾロ［４，３−α］アゼピン−５−イル］−４−ヘキサン酸、フェニルメチルエステル。
【０２７４】
【化１２３】
2004512271.tif 000091
【０２７５】
２５０ｍＬのフラスコにシクロヘキサン（７０ｍＬ）／ベンゼン（４０ｍＬ）溶液中の実施例６ａの生成物（２．０ｇ、３．９ｍｍｏｌ）および二硫化フェニル（０．８６０ｇ、３．９ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液に窒素ガスを通してシステム中の酸素をパージした。反応液を短波長ＵＶランプに週末中暴露させた。反応液を順相ＨＰＬＣ（酢酸エチル／ヘキサン）で評価した。７１％のｔｒａｎｓ 異性体および２９％のｃｉｓ 異性体が観察された。反応液をさらに３日間ＵＶ照射したところ、出発物質の８４％はｔｒａｎｓ 異性体に転移し、出発物質の１６％はｃｉｓ 異性体のままであった。クロマトグラフィーによる精製で、実施例８ａの物質（０．９５６ｇ）を４８％の収率で得た。
【０２７６】
ＭＨ＋５０６．１、ＭＨ＋ＮＨ４＋５２３．２。
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、８Ｈ）、２．４２−２．６（ｍ、６Ｈ）、２．９１（ｄｄ、１Ｈ）、４．１９（ｍ、１Ｈ）、４．３１（ｄｔ、１Ｈ）、５．０９（ｓ、２Ｈ）、５．１１（ｓ、２Ｈ）、５．１８（ｄｔ、１Ｈ）、５．２７（ｍ、１Ｈ）、７．２５（ｂｓ、１０Ｈ）。
【０２７７】
実施例８ｂ）
（２Ｓ，４Ｅ）−６−［（２Ｒ）−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル］−２−［［（フェニルメトキシ）カルボニル］アミノ］−４−ヘキサン酸、フェニルメチルエステル一塩酸塩。
【０２７８】
【化１２４】
2004512271.tif 000092
【０２７９】
ＭｅＯＨ（８０ｍＬ）中の実施例８ａの生成物のサンプル（０．９５６ｇ、１．９ｍｍｏｌ）を、実施例７ａの方法により亜鉛末（１．５ｇ）および６０％ＨＯＡｃ／Ｈ２Ｏ（４０ｍＬ）により脱保護した。得られた生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題の物質（０．２４８ｇ）を２８％の収率で得た。
【０２８０】
実施例８）
実施例８ｂの生成物（０．２４８ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を、実施例７の方法によりＨＣｌ（２ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）、ＣＨ３ＣＮ（４ｍＬ）を用いて表題の生成物に転移させた。粗生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製し、実施例８の表題の生成物（０．０７３ｇ）を５７％の収率で得た。
【０２８１】
ＭＨ＋２４０．３、ＭＨ＋Ｎａ＋４８６．４
１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、δｐｐｍ）：１．２−２．０（ｍ、６Ｈ）、２．３５（ｔ、２Ｈ）、２．５５−２．８２（ｍ、４Ｈ）、３．６８（ｄｔ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、１Ｈ）、５．６５（ｍ、２Ｈ）。
【０２８２】
実施例９
（２Ｓ，４Ｚ）−２−アミノ−６−［（５Ｒ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−オキソ−３Ｈ，５Ｈ−［１，２，４］オキサジアゾロ［４，３−α］アゼピン−５−イル］−４−ヘキサン酸、一塩酸塩
【０２８３】
【化１２５】
2004512271.tif 000093
【０２８４】
実施例６ａの生成物のサンプルを、実施例８の方法に従ってＨＣｌを用いた反応により表題の化合物に変換した。
実施例１０
（２Ｓ，４Ｅ）−２−アミノ−６−［（５Ｒ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−３−オキソ−３Ｈ，５Ｈ−［１，２，４］オキサジアゾロ［４，３−α］アゼピン−５−イル］−４−ヘキサン酸、一塩酸塩
【０２８５】
【化１２６】
2004512271.tif 000094
【０２８６】
実施例８ａの生成物のサンプルを、実施例８の方法に従ってＨＣｌを用いた反応により表題の化合物に変換した。
実施例１１
（２Ｓ，４Ｚ）−２−アミノ−６−［（２Ｒ，７Ｚ）−ヘキサヒドロ−７−（ヒドロキシアミノ）−１Ｈ−アゼピン−２−イル］−４−ヘキサン酸、一塩酸塩
【０２８７】
【化１２７】
2004512271.tif 000095
【０２８８】
実施例９の生成物のサンプルを、水酸化カリウム水溶液または水酸化ナトリウム水溶液との反応により表題の化合物に変換した。
実施例１２
（２Ｓ，４Ｅ）−２−アミノ−６−［（２Ｒ，７Ｚ）−ヘキサヒドロ−７−（ヒドロキシイミノ）−１Ｈ−アゼピン−２−イル］−４−ヘキサン酸、一塩酸塩
【０２８９】
【化１２８】
2004512271.tif 000096
【０２９０】
実施例１０の生成物のサンプルを、水酸化カリウム水溶液または水酸化ナトリウム水溶液との反応により表題の化合物に変換した。
本発明の化合物の合成に有用な特定の新規中間体化合物は、以下の式のすべての鏡像異性体、立体異性体および幾何異性体である：
【０２９１】
【化１２９】
2004512271.tif 000097
【０２９２】
【化１３０】
2004512271.tif 000098
【０２９３】
【化１３１】
2004512271.tif 000099
【０２９４】
【化１３２】
2004512271.tif 000100
【０２９５】
【化１３３】
2004512271.tif 000101
【０２９６】
【化１３４】
2004512271.tif 000102
【０２９７】
【化１３５】
2004512271.tif 000103
【０２９８】
生物学的活性
上に列記した化合物の活性は以下のアッセイで決定することができる：
一酸化炭素シンターゼのシトルリンアッセイ
一酸化炭素シンターゼ（ＮＯＳ）の活性を［３Ｈ］−アルギニンから［３Ｈ］−シトルリンへの変換をモニターすることにより測定する（Ｂｒｅｄｔ ａｎｄ Ｓｎｙｄｅｒ， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ．， ８７， ６８２−６８５，１９９０およびＭｉｓｋｏ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，　２３３，　１１９−１２５， １９９３）。ヒト誘導型ＮＯＳ（ｈｉＮＯＳ）、ヒト内皮型構成型ＮＯＳ（ｈｅｃＮＯＳ）およびヒト神経型構成型ＮＯＳ（ｈｎｃＮＯＳ）は、各々ヒト組織より抽出するＲＮＡからクローニングする。ヒト誘導型ＮＯＳ（ｈｉＮＯＳ）のｃＤＮＡは、潰瘍性大腸菌を持つ患者の結腸サンプルより抽出するＲＮＡから作成するラムダｃＤＮＡライブラリーから単離する。ヒト内皮型構成型ＮＯＳ（ｈｅｃＮＯＳ）のｃＤＮＡは、ヒト臍静脈血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）より抽出するＲＮＡから作成するラムダｃＤＮＡライブラリーから単離し、ヒト神経型構成型ＮＯＳ（ｈｎｃＮＯＳ）のｃＤＮＡは、死体から採取するヒト小脳より抽出するＲＮＡから作成するラムダｃＤＮＡライブラリーから単離する。組み換え酵素はバキュロウイルスを用いてＳｆ９昆虫細胞内に発現させる（Ｒｏｄｉ ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｎｉｔｒｉｃ Ｏｘｉｄｅ， Ｐｔ．４： Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ； Ｍｏｎｃａｄａ，Ｓ．， Ｆｅｅｌｉｓｃｈ，Ｍ．， Ｂｕｓｓｅ，Ｒ．， Ｈｉｇｇｓ，Ｅ．， Ｅｄｓ．； Ｐｏｒｔｌａｎｄ Ｐｒｅｓｓ Ｌｔｄ．： Ｌｏｎｄｏｎ， １９９５； ｐｐ４４７−４５０）。酵素活性物質は水溶性の細胞抽出物から単離し、ＤＥＡＥセファロースクロマトグラフィーによりある程度精製する。ＮＯＳ活性を測定するため、酵素１０μＬを検査化合物存在下または不在下の５０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．６）４０μＬに加え、５０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ７．６）、２．０ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン、２．０ｍＭ　ＤＴＴ、４．０ｍＭＣａＣｌ２、２０μＭ　ＦＡＤ、１００μＭテトラヒドロビオプテリン、０．４−２．０ｍＭ　ＮＡＤＰＨおよび６０μＭ　Ｌ−アルギニン（０．９μＣｉのＬ−［２，３−３Ｈ］−アルギニンを含む）を含む反応混合液５０μＬを加えることにより、反応を開始する。アッセイにおけるＬ−アルギニンの最終濃度は３０μＭである。ｈｅｃＮＯＳまたはｈｎｃＮＯＳは、カルモジュリンを最終濃度４０−１００μＭで含む。３７℃、１５分間のインキュベーションの後、１０ｍＭ　ＥＧＴＡ、１００ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、ｐＨ５．５および１ｍＭ　シトルリンを含む冷却した反応停止バッファー３００μＬを加えることにより、反応を終了させる。［３Ｈ］−シトルリンをＤｏｗｅｘ５０Ｗ　Ｘ−８陽イオン交換樹脂クロマトグラフィーで分離し、液体シンチレーションカウンターにより放射能活性を測定する。ｈｉＮＯＳ、ｈｅｃＮＯＳおよびｈｎｃＮＯＳについて化合物のＩＣ５０値として表Ｉに結果を示す。
【０２９９】
【表１】
2004512271.tif 000104
【０３００】
Ｉｎ Ｖｉｖｏ アッセイ
ラットに１０−１２．５ｍｇ／ｋｇのエンドトキシン（ＬＰＳ）を腹腔内注射して、誘導型一酸化炭素シンターゼの全身の発現を誘導し、血漿中亜硝酸塩／硝酸塩レベルの著明な増加を得る。ＬＰＳ投与の０．５−１時間前に化合物を経口投与し、ＬＰＳ投与の５時間後に血漿中亜硝酸塩／硝酸塩レベルを測定する。実施例１（（２Ｓ，５Ｅ）−２−アミノ−６−フルオロ−７−［（１−イミノエチル）アミノ］−５−ヘプテン酸、二塩酸塩）は、ＬＰＳにより誘導される血漿中亜硝酸塩／硝酸塩レベルの増加を投与量に依存して阻害し、ＥＤ５０値３ｍｇ／ｋｇ未満が観察され、ｉｎ ｖｉｖｏ で誘導型一酸化炭素シンターゼを阻害する活性を示した（表ＩＩ）。
【０３０１】
【表２】
2004512271.tif 000105
【０３０２】
Ｒａｗ細胞亜硝酸塩アッセイ
ＲＡＷ２６４．７細胞を９６穴組織培養プレートに集密的に接種し、ＬＰＳ存在下でオーバーナイト（１７時間）培養し、ＮＯＳを誘導することができる。３−６穴の１列は未処置のまま残し、非特異的なバックグラウンドを差し引くためのコントロールとして使うことができる。培地を各穴から除去し、細胞を２ｍｇ／ｍｌグルコースを含むＫｒｅｂ−Ｒｉｎｇｅｒｓ−Ｈｅｐｅｓ（２５ｍＭ、ｐＨ７．４）で２回洗浄する。細胞を次に氷上に置き、Ｌ−アルギニン（３０ｍＭ）＋／−阻害薬を含むバッファー５０ｍＬで１時間インキュベーションする。アッセイはプレートを湯浴中で１時間３７℃に加熱することにより開始することができる。細胞内ｉＮＯＳによる亜硝酸塩の産生は時間に比例して増加する。細胞アッセイを終了するには、細胞のプレートを氷上に置き、亜硝酸塩を含むバッファーを除去し、既に公開されている亜硝酸塩の蛍光測定により亜硝酸塩を分析することができる。Ｔ．Ｐ．Ｍｉｓｋｏ ｅｔ ａｌ．， Ａｎａｌｙｔｙｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２１４， １１−１６（１９９３）。
ヒト軟骨外植片アッセイ
骨片をダルベッコリン酸緩衝化生理食塩水（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｐｈｏｓｏｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ）（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）で２回、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅｓ Ｍｅｄｉｕｍ （ＧｉｂｃｏＢＲＬ）で１回すすぎ、フェノールレッドを含まない最小必須培地（ＭＥＭ）（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）を入れたペトリ皿に入れる。軟骨は重さ約２５−４５ｍｇの小外植片に切断し、１穴あたり１個または２個の外植片を、１穴あたり５００μＬの培地を分注した４８穴の培養プレートに入れる。培地は、Ｌ−アルギニンを含まず、Ｌ−グルタミンを含まず、そしてフェノールレッドを含まないように調製したアール塩（Ｅａｒｌｅ’ｓ ｓａｌｔ）を含む最小必須培地（Ｅａｇｌｅ）とする独自に変更を加えたものか、あるいはまたはＬ−アルギニンを含まず、インスリンを含まず、アスコルビン酸を含まず、Ｌ−グルタミンを含まず、そしてフェノールレッドを含まないように調製した血清を含まないＮｅｕｍａｎ ａｎｄ Ｔｙｔｅｌｌ 培地（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）とする独自に変更を加えたものかのいずれかである。双方とも使用前に１００μＭＬ−アルギニン（Ｓｉｇｍａ）、２ｍＭ　Ｌ−グルタミン、１Ｘ　ＨＬ−１サプリメント（Ｂｉｏ Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ）、５０ｍｇ／ｍｌアスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ）および１５０ｐｇ／ｍｌ組み換えヒトＩＬ−１β（ＲＤ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を補充し、一酸化窒素シンターゼを誘導する。次に化合物を１０μＬアリコートに加え、外植片を３７℃、５％ＣＯ２下で１８−２４時間インキュベーションする。１日たった古い上清を捨て、組み換えヒトＩＬ−１βおよび化合物を含む新しい培地に換え、さらに２０−２４時間インキュベーションする。この上清を亜硝酸塩の蛍光光度アッセイにて分析する（Ｍｉｓｋｏ ｅｔ ａｌ．， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．， ２１４， １１−１６， １９９３）。すべてのサンプルを４つずつ行う。外植片の重さを量り、亜硝酸塩レベルを重量あたりに換算する。未処置のコントロールは組み換えヒトＩＬ−１β不在の培地で培養する。６種類の異なる阻害薬の濃度での亜硝酸塩生成の阻害割合（パーセント）をプロットすることにより、ＩＣ５０値を測定する（表ＩＩＩ）。
【０３０３】
【表３】
2004512271.tif 000106
【０３０４】
阻害の時間依存性のアッセイ
化合物のヒトＮＯＳアイソフォームの阻害の時間依存性について、（Ｌ−アルギニンを除いたシトルリン酵素アッセイ成分の存在下で３７℃、０−６０分の時間の範囲で、同酵素と共に化合物をプレインキュベーションすることにより評価する。アリコート（１０μＬ）を０，１０，２１および６０分に採取し、直ちにＬ−［２，３−３Ｈ］−アルギニンを含むシトルリンアッセイ酵素反応混合液に加え、最終液量１００ｍＬ中に最終濃度３０μＭのＬ−アルギニンとなるようにする。反応は３７℃で１５分間進め、反応停止バッファーを加えて終了させ、シトルリンＮＯＳアッセイについて記載したようにＤｏｗｅｘ５０Ｗ　Ｘ−８陽イオン交換樹脂クロマトグラフィーにかける。阻害薬によるＮＯＳ活性の阻害％は、阻害薬不在下で同時間プレインキュベーションしたコントロールの酵素と比較して、活性の阻害をパーセントで表した。表ＩＶに示したデータは、阻害薬を酵素と共にプレインキュベーションした２１分および６０分後の阻害％である。
【０３０５】
【表４】
2004512271.tif 000107
【０３０６】
これまでの記述より、当該技術分野の技術者は本発明の本質的な特色を容易に理解し、それらの趣旨および範囲から逸脱することなく、本発明を様々に変化させ修飾して、様々な使用および条件に適合することができるだろう。
【国際公開パンフレット】
2004512271.tif 000142
2004512271.tif 000143
2004512271.tif 000144
2004512271.tif 000145
2004512271.tif 000146
2004512271.tif 000147
2004512271.tif 000148
2004512271.tif 000149
2004512271.tif 000150
2004512271.tif 000151
2004512271.tif 000152
2004512271.tif 000153
2004512271.tif 000154
2004512271.tif 000155
2004512271.tif 000156
2004512271.tif 000157
2004512271.tif 000158
2004512271.tif 000159
2004512271.tif 000160
2004512271.tif 000161
2004512271.tif 000162
2004512271.tif 000163
2004512271.tif 000164
2004512271.tif 000165
2004512271.tif 000166
2004512271.tif 000167
2004512271.tif 000168
2004512271.tif 000169
2004512271.tif 000170
2004512271.tif 000171
2004512271.tif 000172
2004512271.tif 000173
2004512271.tif 000174
2004512271.tif 000175
2004512271.tif 000176
2004512271.tif 000177
2004512271.tif 000178
2004512271.tif 000179
2004512271.tif 000180
2004512271.tif 000181
2004512271.tif 000182
2004512271.tif 000183
2004512271.tif 000184
2004512271.tif 000185
2004512271.tif 000186
2004512271.tif 000187
2004512271.tif 000188
2004512271.tif 000189
2004512271.tif 000190
2004512271.tif 000191
2004512271.tif 000192
2004512271.tif 000193
2004512271.tif 000194
2004512271.tif 000195
2004512271.tif 000196
2004512271.tif 000197
2004512271.tif 000198
2004512271.tif 000199
2004512271.tif 000200
2004512271.tif 000201
2004512271.tif 000202
2004512271.tif 000203
2004512271.tif 000204
2004512271.tif 000205
2004512271.tif 000206
2004512271.tif 000207
2004512271.tif 000208
2004512271.tif 000209
2004512271.tif 000210
2004512271.tif 000211
2004512271.tif 000212
2004512271.tif 000213
2004512271.tif 000214
2004512271.tif 000215
2004512271.tif 000216
2004512271.tif 000217
2004512271.tif 000218
2004512271.tif 000219
2004512271.tif 000220
【国際調査報告】
2004512271.tif 000221
2004512271.tif 000222