(57)【要約】本発明は、ビタミンＤ誘導体合成のための、式Ｉで示される新規合成中間生成物、その微生物学的生産、及び使用に関連する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式ＩＩＩ：
【化１】
2004501078.tif 000015
［式中、
Ｒ１は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基（該アルキル、アルケニル及びアルキニル基は、１〜５個のハロゲン原子もしくは１〜５個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基により置換されていてもよく、そして／又は１〜３個の酸素原子もしくは１〜３個の硫黄原子により中断されていてもよい）、Ｃ１〜Ｃ５ペルフルオロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ５ペルクロロアルキル基又はベンジル基（これは、任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基及び／又はＮＯ２基によりで置換されていてもよい）を意味し；そして
Ｚは水素原子又はヒドロキシ保護基を意味する］
により表される化合物。
【請求項２】
一般式ＩＶ：
【化２】
2004501078.tif 000016
［式中、
Ｒ１は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基（該アルキル、アルケニル及びアルキニル基は１〜５個のハロゲン原子もしくは１〜５個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基により置換されていてもよく、そして／又は１〜３個の酸素原子もしくは１〜３個の硫黄原子により中断されていてもよい）、Ｃ１〜Ｃ５ペルフルオロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ５ペルクロロアルキル基又はベンジル基（これは、任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基及び／又はＮＯ２基により換されていてもよいる）を意味し；
Ｚは水素原子又はヒドロキシ保護基を意味し；そして
Ｘ，Ｘは、一緒になって、ケトン−酸素原子又はケトン保護基を意味する］
により表される化合物。
【請求項３】
一般式ＩＶ：
【化３】
2004501078.tif 000017
［式中、
Ｒ１は水素原子、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基（該アルキル、アルケニル及びアルキニル基は１〜５個のハロゲン原子もしくは１〜５個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基により置換されていてもよく、そして／又は１〜３個の酸素原子もしくは１〜３個の硫黄原子により中断されていてもよい）、Ｃ１〜Ｃ５ペルフルオロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ５ペルクロロアルキル基又はベンジル基（これは、任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基及び／又はＮＯ２基により置換されていてもよい）を意味し；
Ｚは水素原子、（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）３Ｓｉ基、（Ｃ６Ｈ５）３Ｓｉ基、（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）２（Ｃ６Ｈ５）Ｓｉ基、（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）（Ｃ６Ｈ５）２Ｓｉ基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、（Ｃ１〜Ｃ５）Ｏ（Ｃ１〜Ｃ５）基、ベンジル基（これは、任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基又はＮＯ２基により置換されていてもよい）、−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ６）基、又はベンゾイル基（これは、任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基及、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基及び／又はＮＯ２基により置換されていてもよい）を意味し；そして
Ｘ，Ｘは、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ５）基、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ５）基、一緒になって、ケトン−酸素原子、環状−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ５）Ｏ−基もしくは環状−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ５）Ｓ−基、又はＣ６Ｈ５−ＳＯ２−ＮＨ−Ｎ基（そのフェニル環は任意に１〜３位置でＣ１〜Ｃ５アルキル基により置換されていてもよい）を意味する］
により表される請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
式Ｉ：
【化４】
2004501078.tif 000018
で示される請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
微生物を利用したステロイド前駆体の分解反応によって式Ｉで示される化合物を得ることを特徴とする、請求項４に記載の式Ｉの化合物の生産方法。
【請求項６】
前記ステロイド前駆体が、１７−位に任意の側鎖を含むΔ−１，４−状態をもつステロイド誘導体である請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ステロイド前駆体が、式：
【化５】
2004501078.tif 000019
で示される化合物である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記微生物がノカルディオイデス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ）属又はロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）属のいずれかに属する請求項５に記載の方法。
【請求項９】
２種類の微生物の一方が（ノカルディオイデス・シンプレックス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）（ＡＴＣＣ １３２６０）又はロドコッカス・スぺシース（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ）（ＡＴＣＣ １３２５９）である請求項５に記載の方法。
【請求項１０】
請求項５５記載のステロイド前駆体の微生物学的分解により得られる、一般式Ｉ：
【化６】
2004501078.tif 000020
で示される化合物をさらに処理するための方法であって、所望により該化合物の官能基を任意の手順で保護し；任意に、ケトン基を適当な前駆体に変換し、メチル基に還元し、プロパン酸側鎖を任意の反応手順でケトン基に分解し、続いて任意にヒドロキシ保護基を除去しそして／又は任意に他の保護基を導入することにより、一般式Ｘ：
【化７】
2004501078.tif 000021
（式中Ｚの意味は前記の通りである）
で示される化合物を得ることを特徴とする方法。
【請求項１１】
式Ｘで示される化合物を任意の反応ステップでさらに処理してビタミンＤ又はビタミンＤ誘導体とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
式Ｉで示される化合物を、一般式ＩＩａ：
【化８】
2004501078.tif 000022
で表される化合物の遊離ヒドロキシル基を保護し、エステルに転換して、一般式ＩＩＩａ：
【化９】
2004501078.tif 000023
（式中Ｚ２は水素を意味しない点を除けばＺと同じ意味であり、またＲ２は水素を意味しない点を除けばＲ１と同じ意味である）
で示される化合物とし、そのケトン基を慣用条件下でトシルヒドラゾンＶａ：
【化１０】
2004501078.tif 000024
（式中、Ａｒはフェニル基を意味し、これは任意に１〜３の位置でＣ１〜Ｃ５アルキル基により置換されていてもよいる）
へと変換し、それを、たとえば水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、水素化リチウムアルミニウム、水素化ジイソブチルアルミニウムなどの還元剤で、又はＢｉｒｃｈ還元条件下で、一般式ＶＩａ：
【化１１】
2004501078.tif 000025
で示される化合物へと還元し、酸化及びワーキングアップ条件下で保護基がすでに除去されている場合には保護基を再導入してから、該化合物のプロパン酸側鎖を下記の反応手順：
ａ）　リチウム＝ジイソプロピルアミド／ＤＭＰＨ／フェニルセレニル＝ブロミド／過酸化水素による２，３−二重結合の導入、
ｂ）　オゾン分解、
ｃ）　尿素／過酸化水素酸化、
ｄ）　ピリジニウムクロロクロメート酸化、
により分解し、ケトンＸａ：
【化１２】
2004501078.tif 000026
へと変換する、ことを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
一般式：
【化１３】
2004501078.tif 000027
【化１４】
2004501078.tif 000028
又はその類似体（式中、Ｚ及びＲ１は水素である）
で表される、請求項１２に記載の方法の中間生成物。
【請求項１４】
一般式Ｉ、ＩＩＩ 、ＶＩＩ 及びＶＩＩＩで示される化合物の、ビタミンＤ誘導体合成への使用。
【請求項１５】
請求項５の方法によって生産することができるステロイド分解生成物。
【請求項１６】
ロドコッカス・スぺシース（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）の使用によって生産される請求項１４のステロイド分解生成物。
【請求項１７】
ノカルディオイデス・シンプレックス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｄｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）の使用によって生産される請求項１４のステロイド分解生成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
ビタミンＤ誘導体は最近、既知の適応症（ビタミンＤ欠乏症、くる病など）に加えて新たな適応症が明らかにされ、その重要性がとみに増してきた。「非古典的な」ビタミンＤ活性たとえばがん細胞、皮膚細胞又は免疫系細胞の細胞増殖に対する作用の発見は、ビタミンＤ誘導体の腫瘍や皮膚病、免疫系疾患に対する治療薬としての可能性を示唆している。
ビタミンＤ誘導体は天然のものは微量にしか存在しないため、製剤ごとに合成原料を確保しなければならない。加えて、ビタミンＤ３の活性型代謝産物１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の構造変異は、多様な作用特性をもつ誘導体の生産を可能にする。
【０００２】
側鎖修飾型ビタミンＤ誘導体の最も有名な合成法はＢａｒｔｏｎ−Ｈｅｓｓｅ合成である［Ｄ．Ｒ． Ａｎｄｒｅｗｓ， Ｄ．Ｈ．Ｒ． Ｂａｒｔｏｎ， Ｒ．Ｈ． Ｈｅｓｓｅ， Ｍ．Ｍ． Ｐｅｃｈｅｔ， Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ２５−Ｈｙｄｒｏｘｙ Ｖｉａｔａｍｉｎ Ｄ３ ａｎｄ １α，２５−Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ３ ｆｒｏｍ Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ２（Ｃａｌｃｉｆｅｒｏｌ）， Ｊ．Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５１： ４８１９−４８２８（１９８６）； ＥＰ ００１０９９２； ＥＰ ０７８７０４； ＥＰ ０７８７０５］。同法はビタミンＤ２を出発物するが、出発物が高価であるうえに構造変異のフレキシビリティーを大いに制限するという難点がある。そのため同法では、たとえばビタミンＤ骨格に対する構造操作を確立することが不可能である。
【０００３】
多数のビタミンＤ誘導体の部分合成法が公知となっているが、それらは構造修飾の許容度こそ確かにもっと高いものの、一般に入手しやすいステロイド前駆体又はビタミンＤ２自体を使用しないため原料基盤の面で不経済である。
また、多数の合成段階を経て目標構造を実現する高コストの完全合成法も存在する。しかし、それらの方法では工業規模での効率的な合成は不可能である。
効率とフレキシビリティーを両立させる合成設計という点では、Ａ環断片とＣＤ環断片の構造設計を別々に行う収束型の合成管理が有利なように見受けられる。
【０００４】
Ａ環断片又はその変異形についてはすでに完成の域に達した合成法が存在している ［たとえばＥ．Ｇ． Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５１： ３０９８−３１０８ （１９８６）， Ｓｃｈｅｒｉｎｇ ＡＧ： ＥＰ ７６６６６０， ＷＡＲＦ： ＥＰ ５１６４１０］ ものの、それにふさわしいＣＤ環断片の準備のほうはやはり大きな問題をはらんでいる。したがって、全収率が低い又は高級原料（ビタミンＤ２など）の分解手順を伴う多段階全合成法を用いるのであれば、もっと単純な前駆体からＣＤ環断片を生成すると同時に高度の合成フレキシビリティーを確保する必要があるのは明らかである。
【０００５】
本発明はＣＤ環断片［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−オクタヒドロ−１−（２−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−７ａ−メチル−５−オキソ−１Ｈ−インデン−４−プロパン酸Ｉの生物学的方法による生産並びにこの方法による生産が可能な生成物に関する。
【０００６】
【化１５】
2004501078.tif 000002
【０００７】
ステロール類とステロール誘導体の部分分解を行うことができるノカルディオイデス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ）（旧アルトロバクター（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ））属及びロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）（旧ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ））属の数種の微生物がすでにスクリーニングで発見されている。たとえばノカルディオイデス・シンプレックス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）（旧アルトロバクター・シンプレックス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｉｍｐｌｅｘ））ＡＴＣＣ １３２６０株及びロドコッカス・スぺシース（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）（旧ノカルディア・コラリナ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｃｏｒａｌｌｉｎａ））ＡＴＣＣ １３２５９株は化合物２１−ヒドロキシ−２０−メチルプレグナ−１，４−ジエン−３−オン（Δ−１，４−ＨＭＰ） ［Ｗ．Ｊ． Ｍａｒｓｃｈｅｃｋ ｅｔ ａｌ．， Ａｐｐｌ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． ２３： ７２−７７（１９７２）］をＣＤ環化合物Ｉへと分解する。
【０００８】
他のステロイド前駆体の使用もまた可能である。後者は分子中にΔ−１，４−状態をもたなければならず、また慣用のステロイド側鎖を１７−位にもつことができる。
本発明では２１−ヒドロキシ−２０−メチルプレグナ−１，４−ジエン−３−オン（Δ−１，４−ＨＭＰ）の分解のほうが好ましい。
以下で、２つの式が、たとえばＺ基とＲ１基をもつＩＩ又はＺ２基とＲ２基をもつＩＩａを以って指示される場合、両式の違いはＺ２基及びＲ２基ではＺ基及びＲ１基の定義に水素が追加される点にあるだけで、慣用の定義はすべて同じである。この原則は本明細書で使用される他のすべての式にも当てはまる。
化合物Ｉは比較的単純な手順により、ビタミンＤ誘導体の合成に適した中間生成物へと変換させることができる。そこで、本発明は式Ｉ化合物を式Ｘ化合物へと変換させ、またビタミンＤ誘導体へとさらに変換させる方法に関する。
【０００９】
したがって、遊離カルボン酸のエステル化により、カルボン酸エステルＩＩａ：
【化１６】
2004501078.tif 000003
【００１０】
を生成させることができ、式中、Ｒ２はＣ１〜Ｃ１０アルキル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基（該アルキル、アルケニル及びアルキニル基は１〜５個のハロゲン原子もしくは１〜５個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基により置換されていてもよく、そして／又は１〜３個の酸素原子もしくは１〜３個の硫黄原子により中断されていてもよい）、Ｃ１〜Ｃ５ペルフルオロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ５ペルクロロアルキル基又はベンジル基（これは、任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基及び／又はＮＯ２基により置換されていてもよい）を意味する。
【００１１】
原則として、任意のエステルが可能である。
式中、Ｒ２が炭素原子１〜１０個を有する直鎖又は分枝アルキル基、トリフルオロメチル基、トリクロロメチル基又はベンジル基（これは、任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ基及び／又はＮＯ２基により置換されていてもよい）である式Ｉの化合物が好ましい。
Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基は、直鎖又は分枝鎖の何れでもよく、そして／又は１〜５個のハロゲン原子もしくは１〜５個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基により置換されていてもよく、そして／又は１〜３個の酸素原子もしくは硫黄原子により中断されていてもよい。
【００１２】
Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル基は、直鎖又は分枝鎖の何れでもよく、１〜３個の二重結合を含むことができ、１〜５個のハロゲン原子もしくは１〜５個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基により置換されていてもよく、そして／又は１〜３個の酸素原子もしくは１〜３個の硫黄原子により中断されていてもよい。１〜２個のハロゲン原子と１〜２個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基を有し、酸素原子及び／又は硫黄原子１個により中断されているＣ２〜Ｃ５アルケニル基が好ましい。
【００１３】
Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル基は、直鎖又は分枝鎖の何れでもよく、１〜３個の三重結合及び／又は１〜３個の二重結合（ただし少なくとも１個の三重結合）を含むことができ、そして／又は１〜５個のハロゲン原子もしくは１〜５個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基により置換されていてもよく、そして／又は１〜３個の酸素原子もしくは１〜３個の硫黄原子により中断されていてもよい。１〜２個のハロゲン原子又は１〜２個のＣ１〜Ｃ５アルコキシ基を有し、酸素原子及び／又は硫黄原子１個により中断されているＣ２〜Ｃ５アルキニル基が好ましい。
【００１４】
ベンジル基の置換基としては、メトキシ基及びニトロ基が、特に後者がｐ位に結合する場合が好ましい。本明細書において一般式ＩＩが使用される場合、Ｒ１基の意味はＲ２基の定義に準じるが、新たに水素が追加される。
Ｃ１〜Ｃ５アルコキシ基は、直鎖又は分枝鎖であることができそして例えばメトキシ、エポキシ、プロポキシ又はイソプロポキシを意味する。
本発明では、ハロゲンはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素を意味する。
Ｃ１〜Ｃ５ペルフルオロアルキル基はＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、Ｃ３Ｆ７、Ｃ４Ｆ９又はＣ５Ｆ１１を意味する。
Ｃ１〜Ｃ５ペルクロロアルキル基はＣＣｌ３、Ｃ２Ｃｌ５、Ｃ３Ｃｌ７、Ｃ４Ｃｌ９又はＣ５Ｃｌ１１を意味する。
【００１５】
遊離ヒドロキシ基には公知条件下で保護基を与えることができ、それにより一般式ＩＩＩａ：
【化１７】
2004501078.tif 000004
が得られる。
【００１６】
ここで、Ｚ２は、アルキル、アリール又は混合型アルキル−アリール置換シリル基、すなわち（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）３Ｓｉ基、（Ｃ６Ｈ５）３Ｓｉ基、（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）２（Ｃ６Ｈ５）Ｓｉ基、（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）（Ｃ６Ｈ５）２Ｓｉ基たとえばトリメチルシリル、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、ジフェニル−ｔｅｒｔ−ブチルシリル、フェニルジメチルシリル基など、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、（Ｃ１〜Ｃ５）Ｏ（Ｃ１〜Ｃ５）基たとえばメトキシメチル基、エトキシメチル基、ベンジル基（これもまた任意に１〜２個のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基及び／又はＣ１〜Ｃ４アルコキシ基により置換されていてもよい）、−ＣＯ−（Ｃ１〜Ｃ６）基（たとえばアセチル基、ピバロイル基など）、ベンゾイル基（そのフェニル環は任意にベンジル基の場合と同様の置換基をもつことができる）を意味することができ、あるいは標準的保護基でもよい（Ｔ．Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ， Ｐ．Ｇ．Ｍ． Ｗｕｔｓ， Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， １９９１を参照）。シリル基として、（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）３Ｓｉ基、（Ｃ６Ｈ５）３Ｓｉ基、（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）２（Ｃ６Ｈ５）Ｓｉ基、（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）（Ｃ６Ｈ５）２Ｓｉ基、それにＣ１〜Ｃ５アルキルエステル基及び（Ｃ１〜Ｃ５）Ｏ（Ｃ１〜Ｃ５）基が好ましい。
【００１７】
本願で一般式ＩＩＩ の化合物が引用される場合、式ＩＩＩのＺの定義は式ＩＩＩ ａのＺ２の定義に準じるが、Ｚの定義には新たに水素が追加され、また式ＩＩＩのＲ１の定義は式ＩＩＩ ａのＲ２の定義に準じるが、Ｒ１の定義には新たに水素が追加される。
【００１８】
今や、ケトン基にもまた保護基を与えることができ、それにより一般式ＩＶａ：
【化１８】
2004501078.tif 000005
の化合物が得られる。
【００１９】
上記式中、Ｘ，Ｘは、一緒になってケトン用の適当な保護基、たとえば式−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ５）（開鎖）、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ５）Ｏ−（環状）、特にＸ−ＯＭｅ、ＯＥｔ又はＸ，Ｘ−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−などで示されるケタール、又は式−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ５）（開鎖）、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ５）Ｓ−（環状）、特にＸ−ＳＭｅ、Ｘ−ＳＥｔ、Ｘ−ＳＰｒ、Ｘ−ＳＢｕ、又はＸ，Ｘ−ＳＣＨ２ＣＨ２Ｓ−、−ＳＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｓ−などで示されるチオケタールであり、該保護基は公知の方法による後続手順の任意の時点で除去され （Ｔ．Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ， Ｐ．Ｇ．Ｍ． Ｗｕｔｓ， Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， １９９１）、また随意に（Ｗｉｔｔｉｇ反応又は有機金属反応による）置換基の連結に使用される。
【００２０】
あるいは、分子からケトン基を除去してもよい。以下の合成経路を例にしてこれを説明する。一般式ＩＩＩａのケトンをアリールスルホン酸ヒドラジドと反応させることで、一般式Ｖａ：
【化１９】
2004501078.tif 000006
の化合物が得られ、式中、Ａｒはフェニル基であり、これは１〜３個所の位置でＣ１〜Ｃ５アルキル基による置換されていてもよい。この場合のＣ１〜Ｃ５アルキル基はたとえばメチル、エチル、プロピル、ブチル又はｔ−ブチルを意味する。好ましいのはトリル基、キシリル基又は２，４，６−トリアルキルフェニル基である。
このヒドラゾンＶａを還元剤（たとえば水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、水素化リチウムアルミニウム、水素化ジイソブチルアルミニウム、Ｂｉｒｃｈ還元条件−Ｌｉ又はＮａ／液体アンモニアなど）で還元することにより、一般式ＶＩａ：
【００２１】
【化２０】
2004501078.tif 000007
の化合物が得られる。
【００２２】
慣用の方法でビタミンＤ誘導体へと変換させることができるＣＤ環断片を生成するにはプロパン酸側鎖を分解しなければならない。そうするには、まず二重結合をカルボン酸エステル基と共に導入することができる。
【００２３】
一般式ＶＩＩ ａの化合物を形成するための誘導体ＶＩａの反応は、塩基（たとえばリチウム＝ジイソプロピルアミド、リチウムジエチルアミド、リチウム＝ヘキサメチル＝ジシラジド、ナトリウム＝ヘキサメチル＝ジシラジド、カリウム＝ヘキサメチル＝ジシラジド、水素化ナトリウム、水素化カリウムなど）を用いた脱プロトン化によって、またその後のフェニルセレニル＝ブロミド、フェニルセレニル＝クロリド、フェニルスルフリル＝ブロミド又はフェニルスルフリル＝クロリドもしくは類似試薬を用いた反応消滅、並びに含硫黄又は含セレン基の酸化・除去によって行うことができる［たとえばＨ． Ｒｅｉｃｈ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． ９５： ５８１３−５８１７（１９７２）； Ｂ．Ｍ． Ｔｒｏｓｔ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． ９８： ４８８７−４９０２（１９７２）］。他の代替方法を使用することもできる［たとえばＳａｅｇｕｓａ法。Ｉ． Ｍｉｎａｍｉ ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４２： ２９７１−２９７７ （１９８６）］。
【００２４】
【化２１】
2004501078.tif 000008
【００２５】
今や不飽和エステル基をオゾン分解的開裂又は類似の酸化的分解法で分解し、一般式ＶＩＩＩａ：
【化２２】
2004501078.tif 000009
の化合物を形成させるようにすることができる。
【００２６】
公知の方法により該構成部分の最適最終結合をはかるには、今度はアルデヒド官能基を分解しなければならない。Ｂａｅｙｅｒ−Ｖｉｌｌｉｇｅｒ酸化（Ｈ２Ｏ２−尿素付加体、過酢酸、メタクロロ過安息香酸、トリフルオロ過酢酸など）又は関連方法を用いれば、一般式ＩＸａ：
【化２３】
2004501078.tif 000010
の化合物が得られる。
【００２７】
ヒドロキシ基を酸化剤（ピリジニウムクロロクロメート、ピリジニウムジクロメート、Ｓｗｅｒｎ酸化条件、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ酸化条件など）で酸化すると、一般式Ｘａ：【化２４】
2004501078.tif 000011
の化合物が得られる。
【００２８】
必要なら、保護基Ｚ２の開裂後に、公知の方法により任意の側鎖を増成することができる［たとえばＥ．Ｇ． Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５１： ３０９８−３１０８ （１９８６）， Ｓｃｈｅｒｉｎｇ ＡＧ： ＥＰ ４２１５６１， ＥＰ ４４１４６７， ＥＰ ４５０７４３， ＥＰ ６３７２９９， ＥＰ ６３９１７９， ＥＰ ６４７２１９， ＥＰ ６４９４０５， ＥＰ ６６３９０２， ＥＰ ８３２０６３， ＥＰ ９００１９８など］。
【００２９】
本発明のもう１つの主題は一般式ＩＩＩ及びＩＶで示される中間段階、並びに式Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ 、ＶＩＩＩ、ＩＸ及びＸで示される中間段階である。ビタミンＤ系を仕上げるにはＣＤ環−ケトンを公知のＡ環断片と反応させることができる。これを一般式Ｘａの化合物を例に説明する。公知のＡ環−酸化ホスフィンＸＩの反応（前掲Ｅ．Ｇ． Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．を参照）からビタミンＤ誘導体ＸＩＩａが得られる。
【００３０】
【化２５】
2004501078.tif 000012
【００３１】
反応式中、ＸＩ及びＸＩＩのＺ’の定義は一般にＺ２と同じとする。ただし、互換性を確保するために、たとえばＺ２＝ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、Ｚ’＝ ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルならばＺ２とＺ’の独立した開裂が可能であるものとし、逆もまた成り立つものとする。
【００３２】
保護基の選択次第で、Ｚ２の開裂と側鎖の導入とを先に行う（前掲参考文献を参照）か、又はＺ’の開裂とＺ２に関する開裂条件の下で安定的である新しい保護基Ｚ”の導入とを先に行うことができる。また、他の公知断片（たとえばＸＩＶ、ＸＶ、ＸＶＩ）をケトンＸａと結合することもできる［Ｋ．Ｌ． Ｐｅｒｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． ３２： ７６６３−７６６６ （１９９１）； Ｓ．Ｊ． Ｓｈｉｕｅｙ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５５： ２４３−２４７ （１９９０）； Ｒ．Ｒ． Ｓｉｃｉｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ４１： ４６６２−４６７４ （１９９８）］。
【００３３】
【化２６】
2004501078.tif 000013
【００３４】
ケトンＸａは他のビタミンＤ骨格合成経路にも用いることができる。これは、たとえばブロモビニル基（ＸＶＩＩ）導入後にＢ．Ｍ． Ｔｒｏｓｔ， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １１４： ９８３６−９８４５ （１９９２）の方法に準じて、又はエノールトリフレート（ＸＩＸ）への転換後にＬ． Ｃａｓｔｅｄｏ， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． ２９： １２０３−１２０６ （１９８８）の方法に準じて行う。Ｈ．Ｊ． Ｋｎｏｅｌｋｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ５３： ９１−１０８ （１９９７）をも参照。
【００３５】
【化２７】
2004501078.tif 000014
【００３６】
本発明は、大量に入手できる手頃な価格のステロイド前駆体からのＣＤ環断片Ｉの直接的な微生物学的生産を含む。ＣＤ環断片Ｉの単純な構造的修飾により、側鎖、Ａ環部分及びＣＤ環部分に多様な変化（Ｃ−９、Ｃ−１１又はＣ−１４位の置換にケトン基を使用）を伴うフレキシブルなビタミンＤ誘導体が得られる。ＣＤ環断片Ｉ上に３個の官能基が種々の酸化段階で存在するため、技術上周知の保護基の単純な独立した化学的操作が可能になる。さらに、好都合なＣＤ環断片Ｉの置換度により、ビタミンＤ誘導体生産のための段階数を既存の方法よりも減らすことができる。
【００３７】
いくつかのＣＤ環断片生成法はすでに文献に出ている［Ｈｅｎｋｅｌ ＤＥ ３１１３０５３； Ｕｐｊｏｈｎ ＤＥ ２７４６３２３； Ｓ． Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｊ． １６４： ７１５−７２６ （１９７７）； Ｕ． Ｓｃｈｏｅｍｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ａｐｐｌ． Ｍｉｋｒｏｂｉｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． １０， ９９−１０６ （１９８０）； Ｔ． Ｎａｋｅｍａｔｓｕ ｅｔ ａｌ．， Ａｇｒｉｃ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ４４， １４６９−１４７４ （１９８０）］。しかし、これらの方法はどれも、側鎖をなお存続させているＣＤ環断片の単離を可能にするものではない。分解はいずれの場合も１７−ケトンで終了する。特に側鎖原子Ｃ−２０〜Ｃ−２２の合成構造は本質的にきわめて厄介であるため［Ｐ．Ｍ． Ｗｏｖｋｕｌｉｃｈ ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４０， ２２８３−２２９６ （１９８４）］、またキラル中心を生成する必要があるため、キラル中心をＣ−２０に保持したままステロイドの分解を進める本発明の方法は前述の諸方法よりもかなり有利である。
【００３８】
実施例
以下の実施例は本発明の主題のさらに詳しい説明を目的とするものであり、本発明を限定するものではない。
微生物の寄託
本発明に使用する公知の微生物及び発注に必要な情報は下記のとおりである。
【００３９】
１）ノカルディオイデス・シンプレックス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）ＡＴＣＣ １３２６０
この菌株はもともとアルトロバクター・シンプレックス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｉｍｐｌｅｘ）という旧名称でＡＴＣＣ １３２６０の番号で寄託された。現名称はノカルディオイデス・シンプレックス（Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）となっており、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ［１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｏｕｌｅｂａｒｄ， Ｍａｎａｓｓａｓ， ＶＡ ２０１１０， Ｔｅｌ： （７０３） ３６５−２７００， Ｆａｘ： （７０３） ３６５−２７５０］から番号を指定して入手することができる。
【００４０】
２）ロドコッカス・スぺシース（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）ＡＴＣＣ １３２５９
この菌株はもともとノカルディア・カロリナ（Ｎｏｃａｒｄｉａ ｃｏｒａｌｌｉｎａ）という旧名称でＡＴＣＣ １３２２５９の番号で寄託された。現名称はロドコッカス・スぺシース（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）となっており、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ［１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｏｕｌｅｂａｒｄ， Ｍａｎａｓｓａｓ， ＶＡ ２０１１０， Ｔｅｌ： （７０３） ３６５−２７００， Ｆａｘ： （７０３） ３６５−２７５０］から番号を指定して入手することができる。
【００４１】
実施例１． ロドコッカス・スぺシース（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ）菌株（ＡＴＣＣ １３２５９）による化合物Ｉの生産
前培養
０．５％グルコース、０．５％酵母抽出物、０．１％ペプトン及び０．２％コーンスティープリキュール（ｐＨ７．５）からなる、１２０℃で３０分滅菌処理した栄養液５００ｍｌを入れた２Ｌ三角フラスコにＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ． （ＡＴＣＣ １３２５９）菌株の斜面培養菌を接種し、ロータリーシェーカーを用い１６５ｒｐｍ、２８℃の条件で２４時間培養した。
【００４２】
前発酵槽
前発酵槽と主発酵槽には消包剤としてＳｙｎｐｅｒｏｎｉｃ又は好ましくはＷａｃｋｅｒ−Ｃｈｅｍｉｅ社（ミュンヘン）のシリコンＳＨを使用した。
前培養の場合と同じ組成の滅菌培地１０Ｌを入れた予備発酵槽に予備培養菌５００ｍｌを接種する。発酵は２８℃、ばっ気量１０Ｌ毎分、２２０ ｒｐｍで行う。
【００４３】
主発酵槽
前発酵槽の場合と同じ組成の滅菌培地１０Ｌに、２４時間予備発酵培養菌１０００ｍｌを接種する。発酵は２８℃、ばっ気量１０Ｌ毎分で行う。ｒｐｍを加減しながら、全発酵期間のｐＯ２値が２０％を超えるようにする。母体Δ−１，４−ＨＭＰは数段階に分けて添加するか、又は連続的に計量添加するほうが一度に投入するよりも有利であると判明している。本実施例では、Δ−１，４−ＨＭＰを粉末として２回に分け１０ｇずつ添加した。第１回分は１２時間の増殖期後に添加し、第２回分は反応完了（約２０時間）後に添加する。さらに１７〜２０時間後に反応を止める。母体は好ましくは粉末として使用するが、たとえばジメチルホルムアミド中でろ過滅菌した溶液として添加してもよい。反応の調節は薄膜クロマトグラフィー又は好ましくはガスクロマトグラフィーなどの方法を用いて行う。
【００４４】
収穫、ワーキングアップ
生成物は、生物資源を分離することなく培養液（９．７Ｌ）から単離する。培養液を３０％ ＮａＯＨ溶液でｐＨ ８〜９に調整し、容量各１のメチルイソブチルケトンで２回抽出する。水相を２０％ ＮａＯＨ溶液でｐＨ ２〜３に調整し、容量各１のメチルイソブチルケトンで３回抽出する。抽出物を混ぜ合わせ、ローターリーエバポレーターで蒸発乾燥する。発酵に使用した消包剤を分離した後、アセトンへの溶解とシリカゲルろ過により１７．１５ｇの粗生成物Ｉが得られる。蒸発乾燥による濃縮後に、追加回分量１４．９４ｇの粗生成物Ｉが得られる。この粗生成物をアセトン／ジイソプロピルエーテルに溶解し晶出させれば純度９８％超の最終生成物Ｉが得られる（収率６７％、引火点９８〜１００℃）。
【００４５】
ＣＤ環断片Ｉの追加反応
実施例２． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−オクタヒドロ−１−（２−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−７ａ−メチル−５−オキソ−１Ｈ−インデン−４−プロパン酸メチルエステル１
ＣＤ環断片［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−オクタヒドロ−１−（２−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−７ａ−メチル−５−オキソ−１Ｈ−インデン−４−プロパン酸メチルエステルＩを３００ｍｌのベンゼンに溶かし、２９ｍｌのメタノールとスパチュラ量のｐ−トルエンスルホン酸を加え、混合物を水分離器で６時間加熱沸騰させる。冷ましてから、重炭酸ナトリウム水で中和し、酢酸エチルで抽出し、有機相を塩化ナトリウム水で洗い硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を減圧で飛ばす。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサンにより溶離すると９．８ｇの標題化合物１が無色のフォームとして得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．９９ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０３ （ｄ， ３Ｈ）； ３．３８ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６２ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６３ （ｓ， ３Ｈ）．
【００４６】
実施例３． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−１−［２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−メチルエチル］オクタヒドロ−７ａ−メチル−５−オキソ−１Ｈ−インデン−４−プロパン酸メチルエステル２
５．６ｇのエステル１を１００ｍｌのジメチルホルムアミドに溶かし、２．６ｇのイミダゾールと５．９ｍｌのｔ−ブチルジフェニルシリル＝クロリドを加え、次いで混合物を室温で３時間かき混ぜる。次に塩化ナトリウム水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を塩化ナトリウム水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥する。蒸発濃縮後、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサンにより溶離すると、８．６ｇの標題化合物２が無色のフォームとして得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．９５ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０５ （ｓ， ９Ｈ）； １．０７ （ｄ， ３Ｈ）； ３．３９ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６０ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６５ （ｓ， ３Ｈ）； ７．３８ （ｍ， ６Ｈ）； ７．６８ （４Ｈ）．
【００４７】
実施例４． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−１−［２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−メチルエチル］オクタヒドロ−７ａ−メチル−５−［［（４−メチルフェニル）スルホニル］ヒドラゾノ］−１Ｈ−インデン−４−プロパン酸メチルエステル３
６．３ｇのシリルエステル２を２００ｍｌの酢酸と１００ｍｌのメタノールに溶かし、４．９ｇのｐ−トルエンスルホニル＝ヒドラジドを加える。室温で一晩かき混ぜてから塩化ナトリウム水で反応を消滅させる。酢酸エチルで抽出し、塩化ナトリウム水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥する。蒸発濃縮後、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサンにより溶離すると、５．２ｇの標題化合物３が無色のフォームとして得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．７３ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０４ （ｓ， ９Ｈ）； １．０５ （ｄ， ３Ｈ）； ２．４２ （ｓ， ３Ｈ）； ３．３８ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．５８ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６９ （ｓ， ３Ｈ）； ７．３０ （ｄ， ２Ｈ）； ７．３８ （ｍ， ６Ｈ）； ７．６７ （４Ｈ）； ７．８５ （ｄ， ２Ｈ）．
【００４８】
実施例５． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−１−［２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−メチルエチル］オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−４−プロパン酸メチルエステル４
５．２ｇのトシルヒドラゾン３を１５０ｍｌの酢酸に溶かし、１．４２ｇの水素化ホウ素ナトリウムを加える。混合物を室温で４時間かき混ぜてから水酸化ナトリウム水で反応を消滅させ、酢酸エチルで抽出し、塩化ナトリウム水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥する。溶媒を飛ばし、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサンにより溶離すると、２．７ｇの標題化合物４が無色のフォームとして得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．６１ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０３ （ｓ， ９Ｈ）； １．０６ （ｄ， ３Ｈ）； ３．３５ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６０ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６４ （ｓ， ３Ｈ）； ７．３８ （ｍ， ６Ｈ）； ７．６８ （ｍ， ４Ｈ）．
【００４９】
実施例６． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−３−［１−［２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−メチルエチル］オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−４−イル］プロプ−２−エン酸メチルエステル５
リチウム＝ジイソプロピルアミドのテトラヒドロフラン溶液０．５７ｍｍｏｌを調製し、２ｍｌのテトラヒドロフランに溶かした１００ｍｇのエステル４を、次いで１ｍｌの１，３−ジメチルテトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン（ＤＭＰＨ）を、−７８℃で加える。この温度に１０分間保った後、１３５ｍｇのフェニルセレニル＝ブロミドを少しずつ加えてから、さらに９０分間かき混ぜる。
【００５０】
次いで、塩酸アンモニウム水を加えて反応を消滅させ、酢酸エチルで抽出し、塩化ナトリウム水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥する。粗生成物を３ｍｌのテトラヒドロフランに溶かし、０℃に冷却し、０．２ｍｌの過酸化水素水（３０％）を加える。１時間０℃に保った後、亜硫酸水素ナトリウム水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相をチオ硫酸ナトリウム水と塩化ナトリウム水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥する。溶媒を飛ばし、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーでヘキサン／酢酸エチルにより溶離すると、７８ｍｇの標題化合物５が無色のフォームとして得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．６９ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０３ （ｓ， ９Ｈ）； １．０８ （ｄ， ３Ｈ）； ３．３９ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６４ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．７１ （ｓ， ３Ｈ）； ５．７６ （ｄ， １Ｈ）； ６．７８ （ｄｄ， １Ｈ）； ７．３７ （ｍ， ６Ｈ）； ７．６８ （ｍ， ４Ｈ）．
【００５１】
実施例７． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−１−［２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−メチルエチル］オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−４−カルボアルデヒド６
８３０ｍｇのエステル５を１０ｍｌのジクロロメタンと５ｍｌのメタノールに溶かし、この溶液が青色を呈するまで、オゾン発生器で生成するオゾン／酸素混合気を−７８℃で通す。次いで、５００ｍｇのトリフェニルホスフィンを加え、該混合物を放置し室温まで温める。反応混合物を蒸発で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサンにより溶離すると、６５０ｍｇの標題化合物６が無色のフォームとして得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．６９ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０４ （ｓ， ９Ｈ）； １．１０ （ｄ， ３Ｈ）； ３．３９ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６１ （ｄｄ， １Ｈ）； ７．３７ （ｍ， ６Ｈ）； ７．６８ （ｍ， ４Ｈ）； ９．５３ （ｄ， １Ｈ）．
【００５２】
実施例８． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３ａβ，４β，７ａα］］−１−［２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−メチルエチル］オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−４−オール７
５０６ｍｇの尿素−過酸化水素付加体と７１４ｍｇの二水素リン酸カリウムを８ｍｌのジクロロメタンに溶かし、１０ｍｌのジクロロメタンに溶かしたアルデヒド６を滴下する。次いで、０．１５ｍｌのトリフルオロ酢酸無水物を、溶液温度が３５℃を超えないように、ゆっくりと滴下する。
【００５３】
一晩かき混ぜた後、４Ｎ水酸化ナトリウム水でｐＨを６に調整し、次いで重炭酸ナトリウム水を、ガス発生が止むまで滴下する。反応混合物をジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を減圧で飛ばす。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサンにより溶離すると、３７５ｍｇの標題化合物７が無色のフォームとして得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．６６ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０５ （ｓ， ９Ｈ）； １．０９ （ｄ， ３Ｈ）； ３．３８ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．５４ （ｍ， １Ｈ）； ３．６１ （ｄｄ， １Ｈ）； ７．３７ （ｍ， ６Ｈ）； ７．６８ （ｍ， ４Ｈ）．
【００５４】
実施例９． ［１Ｒ−［１α（Ｓ＊），３αβ，４β，７ａα］］−１−［２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−メチルエチル］オクタヒドロ−７ａ−メチル−１Ｈ−インデン−４−オン４
４７ｍｇのアルコール７を４ｍｌのジクロロメタンに溶かし、３２ｍｇピリジニウム＝クロロクロメートを加え、室温で４時間かき混ぜる。次いで、ジエチルエーテルを加え、Ｃｅｌｉｔｅでろ過する。ろ液を捨て、残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサンにより溶離すると、３９ｍｇの標題化合物８が得られる。
１Ｈ−ＮＭＲ （３００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ＝０．６１ｐｐｍ （ｓ， ３Ｈ）； １．０５ （ｓ， ９Ｈ）； １．１１ （ｄ， ３Ｈ）； ３．４０ （ｄｄ， １Ｈ）； ３．６１ （ｄｄ， １Ｈ）； ７．３７ （ｍ， ６Ｈ）； ７．６８ （ｍ， ４Ｈ）．
【国際公開パンフレット】
2004501078.tif 000029
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【国際調査報告】
2004501078.tif 000056
2004501078.tif 000057
2004501078.tif 000058
2004501078.tif 000059
2004501078.tif 000060
2004501078.tif 000061