(57)【要約】オリゴアルギニン化合物のようなオリゴグアニジン化合物の大規模合成に適合され得る合成経路が記載され、この経路は、ペルグアニジニル化工程を使用してω−アミノ基のうちの１つの基を対応するグアニジニル基に転換する。これらの化合物は輸送因子としての有用性を見出す。改変されたオリゴグアニジン化合物もまた記載される。オリゴグアニジン化合物を調製するための方法であって、（ａ）複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーと保護基除去剤とを接触させて該保護基を除去し、複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーを生成する工程であって、ここで、該結合されたアミンの一部は保護基に結合されている、工程；および（ｂ）該複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーをグアニジニル化試薬と接触させて該化学的に結合された各アミンをグアニジニル基に転換し、オリゴグアニジン化合物を生成する工程、を包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
オリゴグアニジン化合物を調製するための方法であって、該方法は、以下：
（ａ）複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーと保護基除去剤とを接触させて該保護基を除去し、複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーを生成する工程であって、ここで、該結合されたアミンの一部は、保護基に結合されている、工程；および
（ｂ）該複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーをグアニジニル化試薬と接触させて該化学的に結合された各アミンをグアニジニル基に転換し、オリゴグアニジン化合物を生成する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
前記グアニジニル化試薬が、ピラゾール−１−カルボキサミジンの塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記化学的に結合された各アミン上の保護基が、トリフルオロアセチル基である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記接触させる工程の両方が、単一の反応容器中で行なわれる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記接触させる工程が、連続的に実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記接触させる工程が、同時に実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記オリゴマーが、ペプチド骨格を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ペプチド骨格が、環状ペプチド骨格である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記オリゴマーが、オリゴオルニチン化合物である。請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記オリゴオルニチン化合物が、オクタオルニチン化合物であり、そして、２つのテトラオルニチン化合物のカップリングによって生成される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記テトラオルニチン化合物の各々が、２つのオルニチンダイマーのカップリングによって生成される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記オリゴマーが、ペプトイド、ポリ−ｐ−フェニレン、ポリエチレングリコール、ペプチド−ペプトイドハイブリッド、ポリアミド、アザペプチド、ペプチド−尿素ハイブリッド、ポリエナミン、ポリオキサミド、炭化水素、ポリエチレン／ポリプロピレンエーテル、炭水化物およびオキシ置換されたジクロロへキシエーテルからなる群から選択される非ペプチド骨格を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記非ペプチド骨格が、環状非ペプチド骨格である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記オリゴグアニジン化合物が、少なくとも４つのアルギニン残基を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記オリゴグアニジン化合物が、少なくとも６個のアルギニン残基を有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記オリゴグアニジン化合物が、連続した少なくとも８個のアルギニン残基を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記オリゴグアニジン化合物が、Ｄ−アルギニンまたはＬ−アルギニンのオクタマーである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記オリゴグアニジン化合物が、連続していない４〜８個のアルギニン残基を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記オリゴグアニジン化合物が、基本的には、８個〜１６個のアミノ酸残基から構成されており、ここで、４個〜８個の該アミノ酸残基がアルギニン残基である、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記アルギニン残基が、Ｄ−アルギニン、Ｌ−アルギニン、Ｄ−ホモアルギニンおよびＬ−ホモアルギニンからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
前記アルギニン残基が、Ｄ−アルギニンおよびＬ−アルギニンからなる群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１に記載の方法であって、前記オリゴグアニジン化合物が、（Ｘ０−Ａｒｇ−Ｘ０）ｑおよび（Ｘ０−Ａｒｇ）ｑからなる群から選択される式を有し、ここで、各Ｘ０は、グアニジノ部分を有さないアミノ酸残基であり；Ａｒｇは、Ｄ−アルギニン、Ｌ−アルギニン、Ｄ−ホモアルギニンおよびＬ−ホモアルギニンからなる群から選択され；そしてｑは、２、４、６、８および１６から選択される整数である、方法。
【請求項２３】
前記オリゴグアニジン化合物が、式（Ｘ０−Ａｒｇ−Ｘ０）ｑを有する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記オリゴグアニジン化合物が、式（Ｘ０−Ａｒｇ）ｑを有する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記アルギニン残基の側鎖が改変されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項２６】
前記アルギニン残基の側鎖が、Ｃ誘導体、Ｏ誘導体、Ｎ誘導体、Ｓ誘導体またはＢ誘導体を含むように改変されている、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記アルギニン残基の側鎖が、２重結合または３重結合を含むように改変されている、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記アルギニン残基の側鎖が、環状構造を含むように改変されている、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記グアニジニル基が改変されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
請求項１に記載の方法であって、前記オリゴグアニジン化合物を塩に転換する工程をさらに包含する、方法。
【請求項３１】
前記塩が、ポリトリフルオロ酢酸塩である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
請求項１に従って調製されるオリゴグアニジン化合物を含む化合物であって、該オリゴグアニジン化合物は、治療剤に化学的に結合されている、化合物。
【請求項３３】
請求項２０に従って調製されるオリゴグアニジン化合物を含む化合物であって、該オリゴグアニジン化合物は、治療剤に化学的に結合されている、化合物。
【請求項３４】
適切に保護されたオルニチンモノマーからオリゴアルギニン化合物を調製する方法であって、該方法は、以下：
（ａ）適切に保護された２つの異なるオルニチンモノマーをカップリングして直交的に保護されたカップリングされたオルニチン化合物を生成する、工程；
（ｂ）該直交的に保護されたカップリングされたオルニチン化合物を２つの部分に分割し、そしてアミドカップリングのために該部分の各々を活性化して２つの独立して活性化されたカップリングされたオルニチン化合物を生成する工程；
（ｃ）前記２つの独立して活性化されたカップリングされたオルニチン化合物を、アミドカップリングに十分な条件下で再結合し、新しい、直交的に保護されたカップリングされたオルニチン化合物を生成する工程；
（ｄ）工程（ｃ）の生成物を、該分割する工程、活性化する工程および再結合する工程に０〜３回供して、線状構成で４個、８個または１６個のオルニチンモノマーを有するオリゴオルニチン化合物を生成する、工程；
（ｅ）該オリゴオルニチン化合物とペルグアニジル化試薬とを、オリゴアルギニン化合物を生成するのに十分な条件下で接触させる工程、
を包含する、方法。
【請求項３５】
前記オリゴグアニジン化合物が、連続した少なくとも８個のアルギニン残基を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記オリゴアルギニン化合物が、Ｄ−アルギニンのオクタマーである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
請求項３４に記載の方法であって、前記オリゴアルギニン化合物が、（Ｘ０−Ａｒｇ−Ｘ０）ｔおよび（Ｘ０−Ａｒｇ）ｔからなる群から選択される式を有し、ここで、各Ｘ０は、グアニジノ部分を有さないアミノ酸残基であり；Ａｒｇは、Ｄ−アルギニンおよびＬ−アルギニンからなる群から選択され；そしてｔは、４、８および１６から選択される整数である、方法。
【請求項３８】
各Ｘ０が、グリシン、β−アラニン、４−アミノ酪酸、５−アミノ吉草酸、および６−アミノカプロン酸からなる群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
前記オリゴアルギニン化合物が、式（Ｘ０−Ａｒｇ）ｔを有し、そして各Ｘ０が、グリシン、β−アラニン、４−アミノ酪酸、５−アミノ吉草酸、および６−アミノカプロン酸からなる群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４０】
前記オリゴアルギニン化合物が、式（Ｘ０−Ａｒｇ）ｔを有し、そして各Ｘ０が、グリシン、β−アラニン、４−アミノ酪酸、５−アミノ吉草酸、および６−アミノカプロン酸からなる群から選択され、そしてｔが８または１６であるる、請求項３４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（政府助成の通知）
本明細書中に記載される研究の一部は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（ＣＡ３１８４１、ＣＡ３１８４５）およびＮａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｆｅｌｌｏｗｓｈｉｐ（ＣＡ８０３４４）により助成された。米国政府は、本発明の特定の局面において権利を有し得る。
【０００２】
（技術分野）
本発明は、オリゴグアニジン化合物の合成に関する。より具体的には、本発明は、輸送因子としての用途を見出すオリゴグアニジン化合物の合成に関する。
【背景技術】
【０００３】
（背景技術）
薬物分子およびプローブ分子の間には、かなりの構造的多様性が見出されるが、細胞内標的を有するこれらの薬剤のほとんどの物理的特性は、極性細胞外環境および細胞の非極性脂質二重層を通る輸送を確実にするための狭い範囲に限定される。この範囲の外側に入る薬剤は、水溶性と受動的膜輸送との最適なバランスを達成するために、反復する類似の合成によって、しばしば調整されなければならない。より広い範囲の物理的特性を保有する薬物、薬物候補またはプローブ分子の細胞取り込みを改善または可能にすることに向けられた有望なアプローチは、これらの薬剤を細胞へと能動的に運搬するための、ペプチドベースの分子トランスポーターの使用を含む。Ｗｅｎｄｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：１３００３−１３００８（２０００）；Ｍｉｔｃｈｅｌｌら、Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｒｅｓ．５５：３１８−３２５（２０００）；Ｐｒｏｃｈｉａｎｔｚ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１２：４００−４０６（２０００）；Ｌｉｎｄｇｒｅｎら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．２１：９９−１０２（２０００）；Ｓｃｈｗａｒｔｚら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．２：１６２−１６７（２０００）；Ｓｃｈｗａｒｚｅら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ．，２１，４５−４８（２０００）；およびＳｃｈｗａｒｚｅら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０：２９０−２９５（２０００）を参照のこと。このアプローチの代表である、種々のプローブ分子（例えば、フルオレセイン）または薬物（例えば、シクロスポリンＡ）への結合体化の際に、Ｌ−アルギニンのホモオリゴマー（７〜９マー）は、細胞（例えば、ヒトＪｕｒｋａｔ）に迅速に進入する、高度に水溶性の結合体を提供する。Ｗｅｎｄｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：１３００３−１３００８（２０００）およびＭｉｔｃｈｅｌｌら、Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｒｅｓ．５５：３１８−３２５（２０００）を参照のこと。さらに、これらのアルギニントランスポーターの薬物結合体は、ヒトの皮膚への有意な浸透を示し、そして標的化Ｔ細胞においてそれらの薬物カーゴ（ｃａｒｇｏ）を放出することが示されている（Ｒｏｔｈｂａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ６：１２５３−１２５７（２０００））。
【０００４】
アルギニンベースの分子トランスポーターの大きな可能性は、主にその利用可能性および費用によって、いくつかの適用に制限されている。このようなホモオリゴペプチドは、通常、固相ペプチド合成を使用して調製される（例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９−２１５４（１９６３）；Ａｔｈｅｒｔｏｎら、Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；ＩＲＬ：Ｏｘｆｏｒｄ，Ｅｎｇｌ．（１９８９）；およびＦｉｅｌｄｓら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔ．Ｒｅｓ．３５：１６１−２１４（１９９０））。このアプローチは、容易に自動化され、そして長いペプチドの合成および精製を可能にするが、樹脂の高い費用、限定された拡張性、ならびに結合および切断についての必要性を含む欠点を被る。対照的に、溶液相合成は、樹脂の費用および拡張の制限を回避し、そして特にオリゴマーの場合、工程を省いた二方向性ストラテジーを使用して実施され得る。後者の点の例示である、固相合成を使用するオクタマーの一方向合成は、１４の工程（各付加されるモノマーについて、１つのカップリング工程および脱保護工程）を必要とし、一方、同じオクタマーの溶液相二方向合成は、７つの工程のみ（３つのカップリング工程および４つの脱保護工程）を必要とする。例えば、Ａｐｐｅｌｌａら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２１：７５７４−７５８１（１９９９）；Ｈｕｎｇｅｒｆｏｒｄら、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ，３６６６−３６７９（２０００）；およびＣｈａｋｒａｂｏｒｔｙら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．４１：８１６７−８１７１（２０００）を参照のこと。アルギニンベースのペプチドの特定の場合において、溶液相合成は、固相合成において必要とされるグアニジニウムサブユニットについての高価な保護基（例えば、Ｍｔｒ、ＰｍｃおよびＰｂｆ；それぞれ、Ａｔｈｅｒｔｏｎら、Ｊ．Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１０６２−１０６３（１９８３）；Ｒａｍａｇｅら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ４７：６３５３−６３７０（１９９１）；およびＣａｒｐｉｎｏら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３４：７８２９−７８３２（１９９３）を参照のこと）の使用を回避するという、さらなる利点を提供する。
【０００５】
しかし、当該分野における進歩にもかかわらず、アルギニンオリゴマー、より一般にはオリゴグアニジンの調製のための方法（これらは両方とも、費用効率がよく、かつ拡張可能である）についての必要性が、なお存在する。本発明は、この必要性を扱う。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の開示）
本発明の１局面は、オリゴグアニジン化合物の調製のための方法に関し、この方法は、以下の工程を包含する：（ａ）複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマー（ここで、結合されたアミンの一部は、保護基に結合されている）を、保護基除去剤と接触させて、保護基の各々を除去して、複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーを生成する工程；および（ｂ）複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーを、グアニジニル化試薬と接触させて、これらの化学的に結合されたアミンの各々をグアニジニル基に転換して、オリゴグアニジン化合物を生成する工程。
【０００７】
本発明の別の局面は、工程（ｂ）のオリゴグアニジン化合物を塩（例えば、ポリトリフルオロ酢酸塩）に転換する工程をさらに提供する。
【０００８】
本発明のなお別の局面は、適切に保護されたオルニチンモノマーからのオリゴアルギニン化合物の調製のための方法に関し、この方法は、以下の工程を包含する：（ａ）２つの異なる適切に保護されたオルニチンモノマーをカップリングして、直交性に保護されたカップリングされたオルニチン化合物を生成する工程；（ｂ）この直交性に保護されたカップリングされたオルニチン化合物を２つの部分に分割し、そしてこれらの部分の各々をアミドカップリングのために活性化して、２つの独立して活性化されたカップリングされたオルニチン化合物を生成する工程；（ｃ）これら２つの独立して活性化されたカップリングされたオルニチン化合物を、アミドカップリングに十分な条件下で再結合して、新たな直交性に保護されたカップリングされたオルニチン化合物を生成する工程；（ｄ）工程ｃ）の化合物を、分割する工程、活性化する工程および再結合する工程に０〜３回供して、線状構成で４個、８個または１６個のオルニチンモノマーを有するオリゴオルニチン化合物を生成する工程；ならびに（ｅ）このオリゴオルニチン化合物を、オリゴアルギニン化合物を生成するのに十分な条件下でペルグアニジル化試薬と接触させる工程。
【０００９】
本発明のなお別の局面は、上記方法により生成されるオリゴグアニジン化合物に関する。
【００１０】
（発明の詳細な説明）
（Ｉ．定義および命名法）
本発明の詳細な実施形態を記載する前に、本発明を記載するのに使用される略語および定義を示すことが有用である。示される定義は、この特許中に使用されるような用語に対してのみ適用し、他（例えば、科学文献または他の特許もしくは出願（本発明者らによるかまたは共同所有者に譲渡された他の出願も含む））で使用される場合の同一の用語に対しては適用可能でないかもしれない。以下の好ましい実施形態および実施例の記載は、例示および例証として提供される。このように、これらは、特許請求の範囲によって規定される本発明の範囲を限定するものとしてみなされない。さらに、実施例が与えられる場合、これらは、例示のみを意図するものであり、制限するためのものではない。例えば、ある実施例が、特定の特徴を「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」といわれる場合、この例がこの特徴を有し得るが、このような例が、この特徴を含むものに限定されないことを含意することが意図される。
【００１１】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形の「ａ」「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、その内容が他に明らかに示されない限り、複数形の対象を含むことに留意すべきである。従って、例えば、「薬学的に活性な薬剤（ａ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ）」に対する言及は、２種以上のこのような薬剤の混合物を含み、「水酸化物放出薬剤（ａ  ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ−ｒｅｌｅａｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）」に対する言及は、２種以上のこのような薬剤の混合物を含む、など。
【００１２】
本発明を記載および特許請求する際に、以下の用語法が、以下に示される定義に従って使用される。
【００１３】
本明細書中で使用される場合、用語「オリゴグアニジン化合物」は、サブユニットのオリゴマーをいい、これらの各々は、化学的に結合されたグアニジン基を含む。例示的なサブユニットとしては、アルギニン残基およびアルギニン様残基、ならびに反復基（例えば、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（より一般的には、Ｘ０−Ａｒｇ−Ｘ０であって、ここで、各Ｘ０は、グアニジノ基を欠くアミノ酸であり、Ａｒｇは、Ｄ−アルギニン残基またはＬ−アルギニン残基およびアルギニン様残基を含むことが意味される））が挙げられる。アルギニン様残基は、アルギニンアミノ酸（Ｄ形態およびＬ形態の両方を含む）の一般構造特徴を有するが、アルギニンのグアニジノ部分とα−炭素との間に６つまでのさらなるメチレン基を有するか、またはアルギニンのグアニジノ部分とα−炭素との間に２つまでのより少ないメチレン基を有する。したがって、本発明の１つの実施形態において、オリゴグアニジン化合物は、ペプチド骨格および以下の式Ａ：
【００１４】
【化１】
2004537596.tif 000002
を有し、ここで、ｍは、１〜１２の整数であり；ｎは、４〜１６の整数であり；Ｐ１は、Ｈまたは窒素保護基であり；そしてＰ２は、保護されているかまたは保護されていないヒドロキシ基またはアミノ基である。上記の式において、グアニジノ基は、荷電して示されている。当業者は、オリゴアルギニン化合物が荷電される程度が環境に依存する傾向があり、この環境（媒体、ｐＨなどを含む）において、オリゴアルギニン化合物が存在し、そして荷電形態および非荷電形態の全てが、本発明によって意図されることを理解する。
【００１５】
用語「オリゴグアニジン化合物」はまた、式Ａの多くのバリエーションを含むことも意図され、ここで、結合（側鎖）は改変されるが、その末端のグアニジン基（−ＨＮ−Ｃ（ＮＨ２）ＮＨ非プロトン化または−ＨＮ−Ｃ（ＮＨ２）ＮＨ２＋プロトン化）は、非荷電のままである（ｎ、Ｐ１およびＰ２は、上記定義のとおりである）。側鎖に対する改変は、以下の置換を含む：
【００１６】
【化２】
2004537596.tif 000003
ここで、Ｙ、Ｙ’およびＹ’’は、独立して、Ｃ誘導体、Ｏ誘導体、Ｎ誘導体、Ｓ誘導体またはＢ誘導体である。改変は、２重結合または３重結合の配置を含み得る：
【００１７】
【化３】
2004537596.tif 000004
改変はまた、環状構造（ａ＝０〜５）の付加も含み得、それらの環炭素は、さらに置換され得る：
【００１８】
【化４】
2004537596.tif 000005
上に示すように、アルギニン側鎖中の炭素のうち２個または３個は、環状構造に含まれ得る。
【００１９】
用語「オリゴグアニジン化合物」はまた、式Ａの非ペプチドバリエーションを含むことが意図される。例は以下に示され、ここで、Ｇは、グアニジニル側鎖であり、そしてｎ、Ｐ１およびＰ２は、上記のとおりである。
【００２０】
【化５】
2004537596.tif 000006
【００２１】
【化６】
2004537596.tif 000007
この骨格はまた、ペプチド−ペプトイドハイブリッド、ポリアミド、アザペプチド（例えば、α−炭素を窒素で置換している）、ペプチド−尿素ハイブリッド、ポリエナミン（Ｐ１−｛Ｎ（Ｇ）−［ＣＨ２］ｖ｝ｎ−Ｐ２であって、ここで、ｖは１〜８、例えば、ｖ＝２は、上記のようなポリエチレンイミン）、ポリオキサミド、炭化水素、ポリエチレン／ポリプロピレンエーテル、炭水化物およびオキシ置換されたジクロロヘキシエーテル（上記のとおり）骨格であり得る。これらの非ペプチド骨格は、増強された生物学的安定性（例えば、インビボでの酵素分解に対する耐性）を提供し得る。この骨格はまた、環状ペプチドまたは非ペプチド系であり得、例えば、以下である：
【００２２】
【化７】
2004537596.tif 000008
同様に、「化学的に結合されたアミン（ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  ｔｅｔｈｅｒｅｄ  ａｍｉｎｅ）を有するポリアミドオリゴマー」は、１つ、２つ、または３つのアミノ酸残基の反復単位を有するポリペプチド化合物のことをいい、ここで、各反復単位は、側鎖アミノ基を有する。このアミノ酸は、α−アミノ酸、β−アミノ酸、γ−アミノ酸、またはδ−アミノ酸であり得るが、各サブユニット中のアミノ酸の少なくとも１つが、側鎖アミノ基（例えば、リジン、オルニチン、ホモオルニチンなど）を有するように選択される。ある意味では、化学的に結合されたアミンを有するポリアミドオリゴマーは、式Ａ’：
【００２３】
【化８】
2004537596.tif 000009
を有する化合物であり得、ここで、ｍ、ｎ、Ｐ１およびＰ２は、上で定義された通りであるが、このポリアミドオリゴマーはまた、さらなるアミノ酸を有し得、このアミノ酸が存在することによって、結合されたアミン残基間に間隔が提供される。式Ａ’の化合物の側鎖はまた、式Ａについて上に記載されたのと同様に改変され得るが、その末端アミン基は、未変化のままである。さらに、全てＤ異性体のオリゴマー、全てＬ異性体のオリゴマーおよびＤ異性体とＬ異性体の混合物は、上記の式の範囲内である。
【００２４】
本明細書中で使用される場合、用語「改変されたオリゴグアニジン化合物」とは、化学的に改変されている、化学的に結合されたグアニジン基をサブユニットの各々が含むサブユニットのオリゴマーのことをいう。グアニジン基に対する改変は、適切な出発物質（すなわち、化学的に結合された「改変された」アミンを有するオリゴマー）を使用することにより合成の前にか、またはこの化合物が合成されている間になされ得る。あるいは、オリゴグアニジン化合物は、本明細書中に記載された通りに作製され得、その後、グアニジン基を改変され得る。好ましくは、この改変は、合成の終わりに生じる。このように、多くのバリエーションが共通の中間体から生成され得る。Ｒは、任意の適切な置換基（例えば、Ｈ、アルキル、ヒドロキシル、シアノ、アルコキシ、＝Ｏ、＝Ｓ，−ＮＯ２、ハロ、ヘテロアルキル、アミン、チオエーテル、−ＳＨ、アリールおよびヘテロアルキル）であり得る。
【００２５】
【化９】
2004537596.tif 000010
（ＩＩ．省略記号）
本発明を記載および特許請求する際に、以下の省略記号が以下の定義に従って使用される。
ＡｃＯＨ          酢酸
Ｂｎ              ベンジル
Ｂｏｃ            ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＤＭＡＰ          ４−（ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＦ            Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ          ジメチルスルホキシド
Ｅｔ３Ｎ          トリエチルアミン
ＥｔＯＡｃ        酢酸エチル
Ｆｍｏｃ          ９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＭｅＯＨ          メタノール
Ｍｔｒ            ４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル
ＮＭＭ            Ｎ−メチルモルホリン
Ｏｒｎ            オルニチン
Ｐｂｆ            ２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル
ＰＧ              保護基
Ｐｍｃ            ２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル
ＲＰ−ＨＰＬＣ    逆相高速液体クロマトグラフィー
ＲＴ              室温
ＴＦＡ            トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ            テトラヒドロフラン
Ｚ                ベンジルオキシカルボニル
（ＩＩＩ．反応）
（Ａ．概要）
図１は、直交的に保護されたオルニチン化合物で始められる、アルギニンオクタマー（ｍ＝３の場合）の二方向合成についての図を提供する。この保護オルニチン化合物ｉは、２つの部分に分割される。第１の部分は、脱保護されてｉｉを生じ、一方、第２の部分は、脱保護されてｉｉｉを生じる。次いで、この２つの部分を適切なカップリング試薬で再結合し、ジペプチドｉｖを得る。再び、この生成物を２つの部分に分割し、第１の部分は、一端を脱保護することによってｖを生じ、一方、第２の部分は、カルボキシ末端を脱保護することによってｖｉを生じる。次いで、化合物ｖおよびｖｉをカップリングして、保護されたテトラペプチドｖｉｉを得る。部分に分割し、選択的に脱保護し、カップリングする、もう１回の手順によりして、Ｐ３保護基の除去およびペルグアニジル化化学（以下により詳細に提供される）のための中間体として、保護オクタペプチドｘを得る。
【００２６】
図２は、−Ｇｌｙ−Ｏｒｎ−Ｇｌｙ−サブユニットに適用される類似の順序を図示し、完全保護形態の（Ｇｌｙ−Ｏｒｎ−Ｇｌｙ）８を生じる。
【００２７】
図１および図２に見られ得るように、本発明の二方向方法は、２、４、８、１６または３２のサブユニット（十分な反復を介して実行される場合）を有するオリゴマーを提供する。ここで記されたオリゴマーよりも長いオリゴマーまたは短いオリゴマーについて、任意の中間体化合物が脱保護され得、そして単一のアミノ酸、トリペプチド、ペンタペプチドなどにカップリングされる。
【００２８】
本明細書中に記載される二方向方法は、脱保護／ペルグアニジニル化手順によってオリゴグアニジン化合物を生成し、この手順は、複数の化学的に結合されたアミンを有するポリアミドオリゴマー（例えば、リジン、オルニチン、ホモオルニチン、ならびにこれらのβ−アミノ酸、γ−アミノ酸およびδ−アミノ酸対応物を含有するオリゴマー）を表している。この転換の範囲を図３に示す。図３Ａにおいて、適切に保護されたオルニチンオクタマーは、脱保護されて、示されるとおりの結合されたアミン基を有するオクタマーを生じる。
【００２９】
ペルグアニジニル化によってアルギニンオクタマーを得る。本発明の１つの実施形態において、この脱保護およびペルグアニジニル化は、図３Ｂに示されるように、単一の反応容器中で実施される。
【００３０】
図３Ｃは、γ−アミノ酸のオリゴマーに対する適応性を示し、一方図３Ｄは、間隔を空けられたオリゴマーに対する適応性を示す。ここで、この間隔は、グリシン残基によって与えられる。
【００３１】
本発明の別の実施形態は、以下のスキームで示され、このスキームは、オリゴグアニジン化合物についての一般式を示し、そして間隔を空けられたオリゴアルギニン化合物（化学的に結合されたアミンを有する間隔を空けられたオリゴマーから誘導される）と隣接するオリゴアルギニン化合物（オリゴオルニチン化合物から誘導される）の両方に対するオリゴグアニジン化合物の適用を示す。
【００３２】
【化１０】
2004537596.tif 000011
前述の考察は、ペプチド骨格を有するオリゴマーに焦点をあてているが、ペプトイド、ポリ−ｐ−フェニレン、ポリエチレンイミン、ポリエチレングリコール、ペプチド−ペプトイドハイブリッド、ポリアミド、アザペプチド、ペプチド−尿素ハイブリッド、ポリエナミン、ポリエナミン、炭化水素、ポリエチレン／ポリプロピレンエーテル、または炭水化物骨格を有するオリゴマーの合成への、本発明の方法の適用の仕方を、当業者は容易に理解することが理解される。所望の骨格は、購入されるかまたは合成され得、単一の工程において、化学的に結合されたアミン側鎖が付加され得、その後保護基除去剤およびグアニジニル化試薬を添加して各保護アミンをグアニジニル基に転換し、オリゴグアニジン化合物を得る。
【００３３】
（Ｂ．本発明の方法の特定の実施形態）
従って、本発明の１つの実施形態は、オリゴグアニジン化合物の調製のための方法であって、この方法は、化学的に結合されたアミン（このアミンの少なくとも一部分は、保護されたている）を有するオリゴマーを、保護基除去剤およびグアニジニル化試薬と接触させて、この各保護アミンをグアニジニル基に転換して、オリゴグアニジン化合物を生成する工程を包含する。より具体的には、この方法は、以下の工程（ａ）および（ｂ）を包含し得る：（ａ）複数の化学的に結合されたアミン（この結合されたアミンの一部は、保護基と結合している）を有するオリゴマーを、保護基除去剤と接触させて保護基を除去し、複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーを生成する工程；および（ｂ）得られたオリゴマーをグアニジル化試薬と接触させて化学的に結合されたアミンの各々をグアニジニル基に転換して、オリゴグアニジニン化合物を生成する工程。
【００３４】
いくつかの実施形態において、化学的に結合されたアミンを有するポリアミドオリゴマーは、イオン交換クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、カラムクロマトグラフィーなどのような方法を使用して、単離および精製される。このポリアミドオリゴマー（結合されたアミン）化合物は、塩としてかまたは中性形態で単離され得る。しかし、好ましい実施形態において、化学的に結合されたアミンを有するポリアミドオリゴマー化合物は、単離されず、工程（ｂ）に直接持ち越される。
【００３５】
方法は、必要に応じて、オリゴグアニジン生成物を塩（例えば、ポリトリフルオロ酢酸塩）に転換する工程をさらに包含する。
【００３６】
特定の実施形態において、工程（ａ）および（ｂ）は、同じ反応容器中で実施され、そして連続的にかまたは同時に実施され得る。例えば、各ω−アミン上に保護基を有するオリゴオルニチン化合物は、保護基除去剤とグアニジニル化試薬の組み合わせで処理され得、単一の工程でオリゴアルギニン化合物を得る。結果として、特定のアミン基のグアニジニル化の前に全ての保護基が除去される必要はない。１つの特定の好ましい実施形態において、各ω−アミン上にトリフルオロアセチル保護基を有するオリゴオルニチン化合物は、保護基除去剤（好ましくは、炭酸ナトリウム）とグアニジニル化試薬（好ましくは、ピラゾール−１−カルボキサミジンヒドロクロリド）の両方と接触される。
【００３７】
他の実施形態において、化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーは、オリゴオルニチン化合物である。別の実施形態において、このオリゴオルニチン化合物は、オクタオルニチン化合物（ここで、「オルニチン」とは、オルニチンよりも長い鎖または側鎖を有する化合物、ならびにオルニチン自体をいう）であり、好ましくは、２つのテトラオルニチン化合物（これらは、好ましくは、２つのオルニチンダイマーのカップリングによって次々に生成される）のカップリングによって生成される。
【００３８】
なおさらに好ましい実施形態において、保護オリゴマーは、化学的に結合されたアミン（保護形態で）を有するポリアミドであって、以下の式：
【００３９】
【化１１】
2004537596.tif 000012
を有し、ここで、ｍ、ｎ、Ｐ１およびＰ２は、上で定義された通りであり、そしてＰ３は、アミノ保護基であるかまたはＰ３が結合する窒素原子上の水素原子と一緒になって二価のアミノ保護基を形成する。好ましいｍは、３〜６の整数であり、より好ましくは、３〜５である。特定の好ましい実施形態の群において、保護ポリアミドオリゴマー化合物は、上の式を有し、ここで、各反復基は、Ｄ異性体（Ｄアミノ酸に対応する立体化学を有する）である。
【００４０】
本発明の別の実施形態は、適切な保護オルニチンモノマーからオリゴアルギニン化合物を調製するための方法であって、この方法は以下の（ａ）〜（ｅ）の工程を包含する：（ａ）適切に保護された２つの異なるオルニチンモノマーをカップリングして、直交的に保護されカップリングされたオルニチン化合物を生成する工程；（ｂ）直交的に保護されカップリングされたオルニチン化合物を２つの部分に分割し、その各部分をアミドカップリングのために活性化して、２つの独立して活性化された、カップリングされたオルニチン化合物を得る工程；（ｃ）アミドカップリングのために十分な条件下で、独立して活性化された２つのカップリングされたオルニチン化合物を再結合して新規の直交的に保護されたカップリングされたオルニチン化合物を得る工程；（ｄ）工程（ｃ）の生成物を０〜３回、分割する工程、活性化する工程、および再結合する工程に供して、線状構成で、４個、８個または１６個のオルニチンモノマーを有するオリゴオルニチン化合物を生成する工程；および（ｅ）オリゴオルニチン化合物を、オリゴアルギニン化合物を生成するのに十分な条件下でペルグアニジニル化試薬と接触させる工程。
【００４１】
より一般的な意味において、このカップリング、分割および活性化、カップリング技術は、他のオリゴグアニジン化合物のアセンブリに適用され得、ここで、各サブユニットまたはモノマーは、オルニチン（または他の化学的に結合されたアミン含有アミノ酸）および化学的に結合された側鎖アミンを有さない１つまたは２つのアミノ酸が隣接するオルニチンから選択される。カップリング反応は、公知の溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノン、ジクロロメタン、水など）を使用する公知のカップリング法によって実施される。例示的なカップリング試薬としては、Ｏ−ベンゾトリアゾリルオキシテトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ブロモ−トリス（ピロリジノ）ホスホニウムブロミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールなどが挙げられる。
【００４２】
（Ｃ．本発明の例示的な方法）
ペルグアニジン化（ｐｅｒｇｕａｎｉｄｉｎｉｎｙｌａｔｉｏｎ）は、グアニジノグリコシドの調製（Ｌｕｅｄｔｋｅら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２２：１２０３５−１２０３６（２０００）およびＦｅｉｃｈｔｉｎｇｅｒら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６３：３９０４−３８０５（１９９８））およびペプトイド（ｐｅｐｔｉｏｄ）のペルグアニジン化（Ｗｅｎｄｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９７：１３００３−１３００８（２０００））について記載される。ペルグアニジン化は、ここで、本明細書中に記載されるような、オリゴアルギニン誘導体および一定間隔を空けたアルギニン輸送因子の調製において有用性を有することが見出された。
【００４３】
例えば、アルギニンオクタマー１の適切な合成は、膜輸送因子としてのこの化合物の有用性に起因して所望された（Ｒｏｔｈｂａｒｄら、ＷＯ  ０１／１３９５７およびＣｏｏｋｅら、ＷＯ  ００／７４７０１）。上記されるペルグアニジン化研究を考慮すると、オクタマー１は、原則として、オルニチンオクタマーからペルグアニジン化反応の後期段階によって調製され得る。
【００４４】
【化１２】
2004537596.tif 000013
市販で入手可能な直交的に保護されたオルニチンモノマーは、ＢｏｃＮＨ−Ｏｒｎ（Ｚ）−ＣＯ２Ｈ（４）およびＨＣｌ・ＮＨ２−Ｏｒｎ（Ｚ）−ＣＯ２Ｍｅ（５）を含む。従って、オルニチンについての直交的保護基戦略は、α−アミン上の酸不安定性Ｂｏｃ基、δ−アミン上の水素化不安定性Ｚ基およびカルボキシル末端の塩基不安定性メチルエステルを使用した。この戦略は、最初から（出発のカップリングおよび続いての脱保護）有望な結果を生じた。しかし、Ｚ−保護オルニチンテトラマーは、有用であるが、有機溶媒において溶解度が限定されていることが見出され、スケールアップされた手順について、大容量の溶媒の使用を必要とする。
【００４５】
オルニチンオリゴマーの溶解度を改善するために、代替的な保護戦略が開発された。オルニチンのδ−アミンの保護基に塩基不安定性トリフルオロアセトアミド保護基を導入することは、より可溶性の組成物を提供した。α−アミンＢｏｃ保護に加えて、残りの直交的保護基は、カルボキシル末端上の水素化不安定性ベンジルエステルであった。１、ＢｏｃＮＨ−Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３）−ＣＯ２Ｈ（６）およびＨＣｌ・ＮＨ２−Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３）−ＣＯ２Ｍｅ（７）の二方向合成を追跡するために必要とされる必須のオルニチンモノマーは、スキーム１に記載されるように、４から調製された。４のＺ−基を対応する６のトリフルオロアセトアミドに保護基転換することは、水素化と、それに続くトリフルオロ酢酸エチルでの処理とによって定量的収量で達成された。６のエステル化は、クロロ蟻酸ベンジルを用いた処理による公知の手順（Ｋｉｍら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５０：５６０−５６５（１９８５））を使用して達成され、これは混合二酸化炭素を与え、その後、ＤＭＡＰ（２０モル％）を用いて処理し、８を定量的収量で得る。最終的に、ＨＣｌを用いるＢｏｃ基の除去によって、９８％の収率で酸７を得た。
【００４６】
（スキームＩ）
【００４７】
【化１３】
2004537596.tif 000014
（ａ）ｉ）Ｐｄ／Ｃ，ＭｅＯＨ，Ｈ２；ｉｉ）ＥｔＯ２ＣＣＦ３，Ｅｔ３Ｎ（＞９９％）；（ｂ）ｉ）ＣｌＣ（Ｏ）ＯＢ  ＮＭＭ，ＴＨＦ  −１５℃；ｉｉ）ＤＭＡＰ（＞９９％）（ｃ）ＨＣｌ，ＥｔＯＡｃ（９８％）。
【００４８】
次いで、二方向合成は、スキーム２に示されるように、クロロ蟻酸イソブチルを６の活性化に使用し、そして塩基としてＮＭＭを使用して、酸６とアミン７とをカップリングさせることによって開始された。この反応は、円滑に進行し、以後の反応において直接使用されるようにワークアップした後、十分な純度の完全保護されたオルニチンダイマー９を９７％の収率で与えた。オルニチンダイマー９は、２つの等しい部分に分割され得る。第１の部分は、水素化され、定量的収量で１１を与えるのに対して、第２の部分は、ＨＣｌで処理され、８３％の収率でアミン塩酸塩１０を与えた。両方の化合物は、以後のカップリングに直接使用されるようにワークアップした後、十分純粋であった。
【００４９】
（スキーム２）
【００５０】
【化１４】
2004537596.tif 000015
（ａ）ｉ）酸、ｉ−ＢｕＯＣＯＣｌ，ＮＭＭ，ＴＨＦ，ＤＭＦ；ｉｉ）アミン，ＮＭＭ；（ｂ）ＨＣｌ，ＥｔＯＡｃまたはジオキサン；（ｃ）Ｈ２，Ｐｄ／Ｃ，ＭｅＯＨ。
【００５１】
オルニチンダイマー１０および１１は、引き続いて、クロロ蟻酸イソブチルおよびＮＭＭとカップリングされ、ワークアップおよびショートプラグのシリカゲルを通した精製において、オルニチンテトラマー１２を８３％の収率で与えた。化合物１２は、数グラム（４ｇ）スケールで酢酸エチル中に容易に可溶であった。次いで、完全に保護されたテトラマー１２は、２つの等しい部分に分割され、各々は、それぞれ、遊離酸１４およびアミン塩酸塩１３の調製のために適切な条件に供された。通常の様式（クロロ蟻酸イソブチルおよびＮＭＭ）でのカップリング１３および１４は、円滑に進行し、完全に保護されたオルニチンオクタマー１５を、８３％の収率およびその後の反応において使用されるのに十分な純度で与えた。１５の水素化は、ベンジルエステルの除去に成功し、定量的収量で遊離酸１６を与えた。
【００５２】
標的１への１６の転化は、段階的な様式（脱保護、次いで、ペルグアニジン化）でまたは単一の操作を介してのいずれかで、達成され得る。水性炭酸ナトリウムは、以前にトリフルオロアセトアミドの脱保護を実施するために使用され（Ｂｏｇｅｒら、Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５４：２４９８−２５０２（１９８９））、そしてまたアミンのグアニジン化における試薬の１つとして使用されてきた（Ｗｅｎｄｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：１３００３−１３００８，（２０００）およびＢｅｒｎａｔｏｗｉｃｚら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５７：２４９７−２５０２（１９９２））ので、単一工程処理が研究された。このようにして、水性メタノール中での炭酸ナトリウムおよびピラゾール−１−カルボキサミド塩酸塩（１７）でのオクタオルニチン誘導体１６の処理が進行し、スキーム３に示されるように、ＲＰ−ＨＰＬＣ（９９＋純度％）および凍結乾燥による精製の後に、５１％の単離収率でオクタアルギニン誘導体１８を与えた。
【００５３】
（スキーム３）
【００５４】
【化１５】
2004537596.tif 000016
（ａ）１７，Ｎａ２ＣＯ３，水性ＭｅＯＨ，５５℃（５１％）；（ｂ）ＴＦＡ（＞９９％）。
【００５５】
重要なことに、８個のトリフルオロアセトアミドは、穏やかな条件下で、１つの工程で８個のグアニジンに転化された（全部で１６転化）。最後に、合成は、ＴＦＡによる１８の処理によって完了され、これにより定量的収率で、所望のオクタアルギニン生成物１を与えた。オクタアルギニン１は、全ての点において、Ｆｍｏｃベースの固相合成を使用して調製された真性サンプルに同一であった。
【００５６】
（ＩＶ．保護基および保護基除去剤）
上記されるように、本発明の方法の工程（ａ）は、複数の化学的に結合されたアミン（結合保護基を有する結合アミンの一部分）を有するオリゴマーを、保護基を除去するための保護基除去剤と接触させる工程を包含する。
【００５７】
この工程において使用される正確な条件および試薬または薬剤は、除去される保護基の性質に依存する。側鎖アミン基または化学的に結合されたアミン基の保護のために選択される保護基は、一般的に、オリゴマーの他の部分（例えば、アミノ末端またはカルボキシ末端）での保護基の存在下において除去され得る保護基である。このような保護基は、しばしば、「直交的（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ）」といわれる。一般的に、試薬および条件は、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  ＮＹ（１９９９），ならびにその中に引用された参考文献のような保護基の論文における指針に従うことによって、使用され得る。
【００５８】
本発明の１つの実施形態において、化学的に結合されたアミンの各々における保護基は、トリフルオロアセチル基、ベンジルオキシカルボニル基、およびｔ−ブトキシカルボニル基から選択される。
【００５９】
従って、保護基除去剤は、使用される保護基に従って選択される。例えば、トリフルオロアセチル基と共に使用されるために適切な保護基除去剤は、好ましくは水性アルコール溶媒中にある、より好ましくは水性メタノール中にある、炭酸ナトリウムである。同様に、好ましさは劣るが、触媒性水素化は、アミンに直接接合される、カルバミン酸ベンジル（Ｃｂｚまたは単純にＺ）基およびベンジル基を切断するために使用され得る（保護基除去剤としてＨ２）。トリフルオロ酢酸のような酸は、ｔ−ブトキシカルボニル基を除去するために使用され得る。なお他の方法が、本発明に従って使用され得、当業者に周知である。
【００６０】
結合アミン上の保護基を除去する工程は、対イオンを形成し得、このようなものとしては、限定ではなく例示として、フルオレセイン、ｐＫａ＜１３を有する酸（例えば、トリフルオロアセチル基（ＣＦ３ＣＯＯ−））、ハロ基（Ｃｌ−、Ｆ−、Ｂｒ−、Ｉ−）、およびカルボキシレート（例えば、ＣＨ３ＣＯＯ−）、カルボネート、ビカルボネート、ホスフェート、ホスホネート、スルフェート、スルホネート、スルフィド、ボレート、シリケート、ニトレート、ニトライト、フェノキシド、アジド、チオフェノキシド、ペルヨーダイドおよびハイポクロライトから誘導される基；ならびにアニオン性基（負に荷電する基）（例えば、ＳｉＦ６−およびＢＦ４−）が挙げられる。これらの対イオンは、単独で使用されても、ポリカルボキシレート、ポリホスフェート（核酸およびそれらのアナログにおいて見出されるような）、ポススルフェート、ポリホスフェート／ハライドの組み合わせなどに共有結合されてもよい。
【００６１】
（Ｖ．グアニジン化試薬）
上記されるように、本発明の方法の工程（ｂ）は、複数の化学的に結合されたアミンを有するオリゴマーを、グアニジン化試薬と接触させ、各々の化学的に結合されたアミンをグアニジニル基に転化し、オリゴグアニジン化合物を生成する工程を包含する。
【００６２】
アミノ基をグアニジノ基に転化する工程に有用な任意のグアニジン化試薬が、本発明において使用され得る。好ましくは、グアニジン化試薬は、ピラゾール−１−カルボキサミジンの塩である。最も好ましくは、グアニジン化試薬は、ピラゾール−１−カルボキサミジン塩酸塩である。他の適切なグアニジン化試薬は、Ｂｅｒｎａｔｏｗｉｃｚら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５７：２４９７−２５０２（１９９２）に記載される。
【００６３】
（ＶＩ．本発明の方法によって生成される化合物）
一般的な意味において、本発明は、以下の式（Ｉ）：
【００６４】
【化１６】
2004537596.tif 000017
を有する化合物の調製方法を提供し、ここで、ｒは、４〜２４までの整数であり；Ｔは、保護されるかまたは保護されていない水酸基であり；そしてＷは、Ｈまたは保護基である。サブユニット部分（括弧にて囲われる）において、ｓは、０または１であり；各Ｘｉは、アミノ酸骨格サブユニット（例えば、−ＮＨ−ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−）であり、そしてｉは、１〜ｒまでの整数であり、Ｗの下流位置を示し；各Ｙｉは、ｓが０の場合、Ｈ、アミノ酸側鎖、アリール、およびヘテロアリールから選択されるか；またはｓが１の場合、Ｃ１−８アルキレン、Ｃ２−８アルケニレン、Ｃ２−８アルキニレン、Ｃ２−８へテロアルキレン、Ｃ３−８シクロアルキルアルキレン、Ｃ２−８スピロシクロアルキレン、アリーレン、ヘテロアリーレン、およびこれらの組み合わせであり；各Ｚｉは、グアニジノ基またはグアニジウム基である。
【００６５】
例えば、本明細書中に記載される二方向合成方法は、オリゴアルギニン化合物（例えば、４、８、または１６個のアルギニン残基のポリマー）および一定間隔を空けたアルギニン化合物（例えば、式（Ｘ０−Ａｒｇ−Ｘ０）ｑまたは（Ｘ０−Ａｒｇ）ｑを有する化合物であり、ここで、ｑは、整数であり、代表的には、２、４、６、８など、より好ましくは、２、４、６、８、または１６などの偶数であり、各Ｘ０は、アルギニンでもグアニジンを含むアミノ酸でもないアミノ酸である）の調製に適用され得る。１つの実施形態において、Ａｒｇは、Ｄ−アルギニン、Ｌ−アルギニン、Ｄ−ホモアルギニンまたはＬ−ホモアルギニンである。
【００６６】
従って、本発明を使用して、例えば、Ｌ−アルギニン（Ｒ７またはＲ８）、Ｄ−アルギニン（ｒ７またはｒ８）、（Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ）−（Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ）−（Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ）−（Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ）（ここで、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙは反復単位である）のヘプタマーまたはオクタマー、およびより短いオリゴマーまたはより長いオリゴマー（代表的に、４〜２０個のグアニジノ含有サブユニットを有する）を調製し得る。この様式において、本発明の方法を使用して、本質的に８〜１６アミノ酸残基（ここで、４〜８個の残基がアルギニン残基である）からなる化合物を含む、種々のオリゴグアニジン化合物を調製し得る。
【００６７】
無論、末端官能基（ＷおよびＴ）のさらなる詳細は、保護された連結基または保護されていない連結基、あるいは生物学的に活性な薬剤が結合された連結基を有する化合物を導き得る。
【００６８】
さらに他の実施形態において、生成されるオリゴグアニジン化合物は、少なくとも４個、好ましくは少なくとも６個、そしてさらに好ましくは少なくとも８個のアルギニン残基を有する。ここで、各々のアルギニン残基は、天然に存在するアルギニンのＤ異性体またはＬ異性体のいずれかである。これらのアルギニン残基は、連続であり得るかまたは不連続であり得る。例えば、このオリゴグアニジン化合物は、少なくとも４個以上の連続するアルギニン残基を有し得るか、またはこの化合物は、４個以上の不連続のアルギニン残基を有し得る。
【００６９】
別の実施形態において、生成されるオリゴグアニジン化合物は、ポリトリフルオロ酢酸塩に転換される。一般的に、この転換は、代表的には水性混合物または水性／有機性混合物において、オリゴグアニジン化合物を適切な量のトリフルオロ酢酸と接触させることによって達成される。
【００７０】
上記のカップリング、分割および活性化、カップリング方法は、オリゴグアニジン化合物を生成することにおいて特定の有用性を見出し、ここで、各サブユニットまたは各モノマーは、オルニチン（または他の化学的に結合されたアミンを含むアミノ酸）および化学的に結合された側鎖アミンを有さない１つまたは２つのアミノ酸が隣接したオルニチンから選択される。従って、本発明の１つの実施形態において、調製されるオリゴアルギニン化合物は、（Ｘ０−Ａｒｇ−Ｘ０）ｔおよび（Ｘ０−Ａｒｇ）ｔ（ここで、各Ｘ０はグアニジノ部分を有さないアミノ酸残基であり；各ＡｒｇはＤ−アルギニンおよびＬ−アルギニンからなる群より選択され；そしてｔは４、８、１６、３２などから選択される整数であるが、好ましくは４、８または１６である）からなる群から選択される式を有する。当業者は、この後者の群のオリゴアルギニン化合物を調製するために使用されるオルニチンモノマーが、（Ｘ０−ＯｒｎＰ−Ｘ０）ｔおよび（Ｘ０−ＯｒｎＰ）ｔ（ここで、各ＯｒｎＰは適切に保護されたオルニチンを指し、そしてＸ０はグアニジノ部分も側鎖アミノ基も有さないアミノ酸残基（例えば、リジン）である）から選択される式を有するサブユニットであることを理解する。好ましくは、各Ｘ０は、グリシン、β−アラニン、４−アミノ酪酸、５−アミノ吉草酸、および６−アミノカプロン酸からなる群より選択される。なおさらに好ましい実施形態において、オリゴアルギニン化合物は、（Ｘ０−Ａｒｇ）ｔの式を有し、各Ｘ０は、グリシン、β−アラニン、４−アミノ酪酸、５−アミノ吉草酸、および６−アミノカプロン酸の群より選択され、そしてｔは８または１６である。さらに好ましい実施形態において、オリゴアルギニン化合物は、Ｄ−アルギニンのオクタマーであるかまたは（Ｘ０−Ａｒｇ）ｕの式を有し、ここで各Ｘ０はグリシンであり、ＡｒｇはＤ−Ａｒｇであり、そしてｔは８である。
【００７１】
（ＶＩＩ．本発明の方法によって作製される化合物との結合体）
上記のように、オリゴグアニジン化合物は、輸送因子としての有用性を見出す。従って、本発明はまた、本明細書中に記載されるオリゴグアニジン化合物に関する。この化合物は治療剤（これは、活性な薬剤およびそのプロドラッグを含む）と化学的に結合される。
【００７２】
オリゴグアニジン化合物は、以下に例示されるように、種々の異なる方法で治療剤と結合され得る。ここで、Ｔは本発明のオリゴグアニジントランスポーターであり、Ｄは適切な治療剤であり、Ｌはリンカーであり、ＲＬは放出可能リンカー（例えば、インビボで切断可能）であり、そしてＰＤはプロドラッグである：
トランスポーター−薬物の結合体（Ｔ−Ｄ）→Ｔ−Ｄ（ここで、Ｔ−Ｄが活性である）；
トランスポーター−リンカー−薬物の結合体（Ｔ−Ｌ−Ｄ）→Ｔ−Ｌ−Ｄ（ここで、Ｔ−Ｌ−Ｄが活性である）；
トランスポーター−放出可能リンカー−薬物の結合体（Ｔ−ＲＬ−Ｄ）→ＲＬ＋Ｄ（ここで、Ｔ−ＲＬは切断され、そしてＤが活性である）；
トランスポーター−放出可能リンカー−プロドラッグの結合体（Ｔ−ＲＬ−ＰＤ）→Ｔ−ＲＬ＋ＰＤ→Ｄ（ここで、Ｄが活性である）。
上記例に注記されるように、治療剤は多くの方法（これは直接結合（例えば、カルボジイミドとの直接結合）を含むか、または連結部分による）で本発明の輸送因子に連結され得る。特に、カルバメート結合、エステル結合、チオエーテル結合、ジスルフィド結合、およびヒドラゾン結合は、一般的に、形成が容易であり、そしてほとんどの適用に適切である。さらに、種々の官能基（例えば、ヒドロキシル、アミノ、ハロゲンなど）を使用して、治療剤を輸送因子に結合させ得る。副反応を最小にするのに役立つように、グアニジノ部分は、従来の保護基（例えば、カルボベンジルオキシ基（ＣＢＺ）、ジ−ｔ−ＢＯＣ、ＰＭＣ、Ｐｂｆ、Ｎ−ＮＯ２など）を使用してブロックされ得る。結合された輸送因子が放出されるまで不活性な治療剤のために、リンカーは、好ましくは容易に切断可能なリンカーであり、このことは、そのリンカーがインビボで酵素的切断または溶媒媒介性切断に感受性であることを意味する。この目的のために、カルボン酸エステル結合およびジスルフィド結合を含むリンカーが好ましく、ここで、前者の基は酵素的かまたは化学的に加水分解され、そして後者の基は、例えばグルタチオンの存在下でのジスルフィド交換によって切断される。
【００７３】
前出のいずれかの非共有結合バリエーションもまた本発明によって企図され、例えば：
トランスポーター−薬物複合体（Ｔ・・Ｄ）→Ｔ＋Ｄ（ここで、Ｄが活性である）。
【００７４】
本発明の輸送因子から利益を受け得る治療剤としては、有機低分子および高分子（例えば、核酸、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチドおよびタンパク質）の両方が挙げられる。例示的な治療剤としては、局所的または全身性の抗癌剤、抗生物質、アンチセンス薬物、プロテアーゼインヒビターなどが挙げられる。さらに、本発明のトランスポーター化合物と共に使用され得る多くの放出可能なリンカーが存在する（例えば、ホスファターゼ、プロテアーゼ、エラスターゼ、酸化還元化合物、光化学薬剤、求核剤、酸性化合物など）。治療剤の放出は、酵素的作用および非酵素的作用の結果であり得る。
【実施例】
【００７５】
(実施例）
本発明の実施は、他に示されない限り、有機合成化学、生化学などの従来の技術を使用し、これらの技術は当業者の範囲内である。これらのような技術は、文献に完全に説明される。例えば、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｄ．ＨａｉｎｅｓおよびＳ．Ｊ．Ｈｉｇｇｉｎｓ編、１９８４）；Ｋｉｒｋ−ＯｔｈｍｅｒのＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ならびにＨｏｕｓｅのＭｏｄｅｒｎ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓを参照のこと。
【００７６】
以下の実施例は、当業者に、本発明の組成物／化合物／方法を作製および使用する方法の完全な開示かつ説明を提供するように記載されている。数（例えば、量、温度など）に関する正確性を保証するための試みがなされているが、もちろん、いくらかの実験的な誤差および偏差が許容されるべきである。他に示されない場合、部とは重量部であり、温度とは摂氏の度であり、そして圧力は大気圧であるかまたは大気圧に近い。全ての成分は、他に示されない場合、購入して入手した。
【００７７】
（一般的な方法）
ＢｏｃＮＨ−Ｏｒｎ（Ｚ）−ＯＨ（４）を、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍから購入した。全ての試薬および溶媒を、商業的供給源から購入し、そしてさらなる精製なしに利用した。分析的ＴＬＣを、蛍光指示薬（２５４ｎｍ）と共に０．２５ｍｍのシリカゲル６０Ｆプレートを用いて実施した。プレートを、紫外線およびモリブデン酸アンモニウム染色（９０ｇのモリブデン酸アンモニウム、６ｇの硫酸セリウムおよび１８００ｍＬの１０％  Ｈ２ＳＯ４を混合することによって調製した）または過マンガン酸カリウム染色（８ｇのＫＭｎＯ４、６０ｇのＫ２ＣＯ３、１６ｍＬの５％  ＮａＯＨおよび９００ｍＬのＨ２Ｏを混合することによって調製した）のいずれかによる処理によって視認可能とした。ＲＰ−ＨＰＬＣを、生成物を紫外線（λ＝２１４ｎｍ）検出を用いて、調製的カラム（Ａｌｌｔｅｃ  Ａｌｌｔｉｍａ  Ｃ１８、２５０×２２ｍｍ）または分析的カラム（Ｖｙｄａｋ  Ｃ１８、１５０×４．６ｍｍ）のいずれかを使用してＶａｒｉａｎ  ＰｒｏＳｔａｒ  ２１０／２１５  ＨＰＬＣを用いて実施した。この生成物を、溶媒勾配（溶媒Ａ＝０．１％  ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ；溶媒Ｂ＝０．１％  ＴＦＡ／ＣＨ３ＣＮ）を利用して溶出させた。融点を、Ｔｈｏｍａｓ  Ｈｏｏｖｅｒ単一融解装置を利用する開管キャピラリーチューブ中で測った。ＮＭＲスペクトルを、Ｖａｒｉａｎ  ＧＥＭ−３００（３００ＭＨｚでの１Ｈ  ＮＭＲ；７５ＭＨｚでの１３Ｃ  ＮＭＲ）磁気吸収スペクトルメーターで測定した。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルについてのデータを以下のように報告する：化学シフト、多重度（Ｓ＝一重項、ｂｒ  ｓ＝幅広な一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、およびｍ＝多重項）、積分、および結合定数（Ｈｚ）。１３Ｃ  ＮＭＲについてのスペクトルを、残存の溶媒ピーク（Ｄ６−ＤＭＳＯ＝３９．５またはＣＤ３ＣＮ＝１．３）に関する化学シフトによって記録する。赤外スペクトルを、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  １６００  Ｓｅｒｉｅｓ  ＦＴＩＲで報告した。高解像度質量分析（ＨＲＭＳ）を、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｒｉｆｏｒｎｉａ、Ｓａｎ  ＦｒａｎｃｉｓｃｏのＮＩＨの地域の質量分析施設で記録した。電子スプレーイオン化を利用する質量分析（ＥＳ−ＭＳ）を、Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ四重極イオントラップ質量分析計を利用して、Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙの質量分析ラボで記録した。
【００７８】
（一般手順Ａ：Ｂｏｃ−アミドの脱保護）
ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）またはジオキサン（３００ｍＬ）中のＢｏｃ−アミド（５．０ｍｍｏｌ）の室温（ＲＴ）の撹拌溶液に、ＨＣｌガス（レクチャーボトル（ｌｅｃｔｕｒｅ  ｂｏｔｔｌｅ）から）をバブリングした。この反応混合物を、ＴＬＣが出発物質の消費を示すまで、撹拌した。溶媒の濾過またはエバポレートのいずれかによって、この反応混合物（沈殿物を含有）から所望の生成物を得、これをさらに精製することなく使用した。
【００７９】
（一般手順Ｂ：ベンジルエステルの脱保護）
ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）中のベンジルエステル（５．０ｍｍｏｌ）の脱気溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％  Ｐｄ、２５０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて水素ガス（１ａｔｍ、風船）を添加した。この反応混合物を、ＴＬＣが出発物質の完全な消費を示すまで、室温で撹拌した。次いで、この反応混合物をＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、そして溶媒を減圧下で除去して、所望の生成物を得、これをさらに精製することなく使用した。
【００８０】
（一般手順Ｃ：アミドカップリング）
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の酸（１０ｍｍｏｌ）の室温の撹拌溶液に、ＤＭＦ（２００ｍＬ）およびＮＭＭ（１０．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、−４０℃まで冷却し、次いで、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のクロロギ酸イソブチル（１０．５ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。−４０℃で１時間撹拌した後、この反応混合物を、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のアミン（１０ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（１０ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、この反応混合物を、室温までゆっくりと加温し、そしてＴＬＣが初めの酸の消費を示すまで、撹拌した。次いで、この反応混合物を、多量のＥｔＯＡｃ（１Ｌ）および水（１Ｌ）で処理した。有機層を分離し、そして水層をＥｔＯＡｃ（２×５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、ＨＣｌ水溶液（０．１Ｍ、２×５００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（５％ｗ／ｖ、２×５００ｍＬ）、ブライン（２×５００ｍＬ）で洗浄し、そして硫酸マグネシウムで乾燥した。このようにして得た粗物質を、次いで、示されるようにしてさらに精製して、所望の生成物を得た。
【００８１】
（実施例１）
（ＢｏｃＮＨ−Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３）−ＣＯ２Ｈ（６）の合成）
【００８２】
【化１７】
2004537596.tif 000018
ＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）中の酸４（２５ｇ、６８ｍｍｏｌ）の脱気した溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％  Ｐｄ、３５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、水素ガス（１ａｔｍ、風船）を添加した。この反応混合物を、室温で１２時間（ＴＬＣが出発物質の完全な消費を示すまでの時間）撹拌した。次いで、この水素の風船を取り外し、そしてＭｅＯＨ（１００ｍＬ）、トリフルオロ酢酸エチル（１４．６ｇ、１０３ｍｍｏｌ）、およびＥｔ３Ｎ（１３．８ｇ、１３６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をさらに９時間撹拌し、そして得られた黒色の懸濁液を、Ｃｅｌｉｔｅを通して濾過した。次いで、この溶媒の一部を、減圧下で除去した。残りの溶液（１００ｍＬ）を、水（１５０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で処理した。有機層を除去し、次いで、ＨＣｌ水溶液（２Ｍ）を添加することによって、水層を慎重に酸性化した。この水層を、ＥｔＯＡｃ（５×８０ｍＬ）で抽出し、次いで、合わせた有機抽出物を、ＨＣｌ水溶液（０．１Ｍ、４×２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、そして硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下で除去して、所望の生成物６を、粘性の油状物として得た（２２．４ｇ、６８ｍｍｏｌ、定量的収率）：（Ｓａｋａｒｅｌｌｏｓら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４３：２９３−２９６（１９７８）、粘性の油状物）；Ｒｆ＝０．６５（６５：３１：４  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン／ＡｃＯＨ）；
【００８３】
【化１８】
2004537596.tif 000019
ＩＲ（薄膜）３３１６，１７０９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（Ｍ−Ｂｏｃ，Ｃ７Ｈ１０Ｆ３Ｎ２Ｏ３）：計算値  ２２７．０６４４、実測値  ２２７．０６５８。
【００８４】
（実施例２）
（ＢｏｃＮＨ−Ｏｒｍ（ＣＯＣＦ３）−ＣＯ２Ｂｎ（８）の合成）
【００８５】
【化１９】
2004537596.tif 000020
公知の手順の改変に従う（Ｋｉｍら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８５  ５０，５６０−５６５）。ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の酸６（１１．３ｇ、３４．６ｍｍｏｌ）の室温の撹拌溶液に、ＮＭＭ（３．５０ｇ、３４．６ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応混合物を、−１５℃まで冷却した（ＮａＣｌ／氷／水浴）。この冷却した反応混合物に、ＴＨＦ（５ｍＬ）中のクロロギ酸ベンジル（６．１７ｇ、３６．１ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。−１５℃で２分間撹拌した後、この反応混合物を０℃まで加温し（氷／水浴）、そして１５分間撹拌した。この反応混合物に、ＤＭＡＰ（１．０５ｇ、８．６５ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応混合物を室温まで加温して、２時間撹拌した。次いで、この反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）で処理し、ＨＣｌ水溶液（１Ｍ）で慎重に酸性化した。有機層を分離し、そしてＨＣｌ水溶液（０．１Ｍ、２×５０ｍＬ）で洗浄した。次いで、合わせた水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で抽出した。次いで、合わせた有機層を、ＮａＨＣＯ３水溶液（５％ｗ／ｖ、４×５０ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、そして硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下で溶媒を除去して、所望の生成物８を、白色の非結晶性固体として得た（１４．２ｇ、３３．９ｍｍｏｌ、収率９８％）：ｍｐ  ７２〜７３．５℃；Ｒｆ＝０．５８（３：７  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）；
【００８６】
【化２０】
2004537596.tif 000021
ＩＲ（薄膜）３３３３，１７０９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（Ｍ＋２Ｈ−Ｂｏｃ、Ｃ１４Ｈ１８Ｆ３Ｎ２Ｏ３）計算値  ３１９．１２７０，実測値  ３１９．１２１５。
【００８７】
（実施例３）
（ＨＣｌ・ＮＨ２−Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３）−ＣＯ２Ｂｎ（７）の合成）
【００８８】
【化２１】
2004537596.tif 000022
保護化オルニチン６（１４．２ｇ、３３．９ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）、および反応時間＝１２時間を用いる一般的手順Ａ。溶媒のエバポレーションによって、所望の生成物７を白色粉末（１２．０ｇ、３３．８ｍｍｏｌ、定量的収率）として得た：
【００８９】
【化２２】
2004537596.tif 000023
（実施例４）
（ＢｏｃＮＨ−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））２−ＣＯ２Ｂｎ（９）の合成）
【００９０】
【化２３】
2004537596.tif 000024
酸６（４．６９ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）およびアミン７（５．０１ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）を用いる一般的手順Ｃ。ワークアップ後、減圧での溶媒除去によって、所望の生成物９を白色粉末（８．７５ｇ、１３．９ｍｍｏｌ、９７％収率）として得た：
【００９１】
【化２４】
2004537596.tif 000025
（実施例５）
（ＨＣｌ・ＮＨ２−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））２−ＣＯ２Ｂｎ（１０）の合成）
【００９２】
【化２５】
2004537596.tif 000026
ジ−オルニチン９（３．８ｇ、６．０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）、反応時間＝１２時間を用いる一般的手順Ａを参照のこと。反応混合物の濾過、固体の洗浄（ＥｔＯＡｃ）、および減圧での乾燥後、所望の生成物１０を、白色粉末（２．９ｇ、５．０ｍｍｏｌ、８３％収率）として得た：
【００９３】
【化２６】
2004537596.tif 000027
（実施例６）
（ＢｏｃＮＨ−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））２−ＣＯ２Ｈ（１１）の合成）
【００９４】
【化２７】
2004537596.tif 000028
保護化ジ−オルニチン９（３．８ｇ、６．０ｍｍｏｌ）および反応時間＝１２時間を用いる一般的手順Ｂを参照のこと。ワークアップ後、所望の生成物１１を白色泡状物（３．３ｇ、６．０ｍｍｏｌ、定量的収率）として得た：
【００９５】
【化２８】
2004537596.tif 000029
（実施例７）
（ＢｏｃＮＨ−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））４−ＣＯ２Ｂｎ（１２）の合成）
【００９６】
【化２９】
2004537596.tif 000030
酸１１（２．６０ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）およびアミン１０（２．７２ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）を用いて一般手順Ｃを参照のこと。ワークアップ後、粗製固体を溶液（９：１  ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）中に取り、シリカゲルのショートプラグを通過させた。減圧下での溶媒の除去により、白色粉末として所望の生成物１２（４．２０ｇ、４．００ｍｍｏｌ、収率８３％）を得た：
【００９７】
【化３０】
2004537596.tif 000031
（実施例８）
（ＨＣｌ・ＮＨ２−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））４−ＣＯ２Ｂｎ（１３）の合成）
【００９８】
【化３１】
2004537596.tif 000032
保護されたテトラオルニチン１２（２．０ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、ジオキサン（３００ｍＬ）、および反応時間＝１８時間を用いて一般手順Ａを参照のこと。減圧下での溶媒の濃縮の後、所望の生成物１３を、黄色アモルファス固体（１．９ｇ、１．９ｍｍｏｌ、定量的収率）として得た：
【００９９】
【化３２】
2004537596.tif 000033
（実施例９）
（ＢｏｃＮＨ−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））４−ＣＯ２Ｈ（１４）の合成）
【０１００】
【化３３】
2004537596.tif 000034
保護されたテトラオルニチン１２（２．０ｇ、１．９ｍｍｏｌ）および反応時間＝１６時間を用いて一般手順Ｂを参照のこと。ワークアップの後、所望の生成物１４を、白色発泡体（１．８ｇ、１．９ｍｍｏｌ、定量的収率）として得た：
【０１０１】
【化３４】
2004537596.tif 000035
（実施例１０）
（ＢｏｃＮＨ−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））８−ＣＯ２Ｂｎ（１５）の合成）
【０１０２】
【化３５】
2004537596.tif 000036
酸１４（３００ｍｇ、０．３１３ｍｍｏｌ）およびアミン１３（３０８ｍｇ、０．３１３ｍｍｏｌ）を用いて一般手順Ｃを参照のこと。ワークアップの後、所望の生成物（１５）を、白色アモルファス固体（４９０ｍｇ、０．２５９ｍｍｏｌ、収率８３％）として得た：
【０１０３】
【化３６】
2004537596.tif 000037
（実施例１１）
（ＢｏｃＮＨ−（Ｏｒｎ（ＣＯＣＦ３））８−ＣＯ２Ｈ（１６）の合成）
【０１０４】
【化３７】
2004537596.tif 000038
保護化オクタオルニチン１５（３６ｍｇ，０．０１９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（１０％，１０ｍｇ，０．００９４ｍｍｏｌ），ＭｅＯＨ（３ｍＬ）および反応時間＝３時間を用いて、一般的手順Ｂを参照のこと。ワークアップの後、所望の生成物１６を白色粉末として得た（３４ｍｇ，０．０１９ｍｍｏｌ，定量的収量）：ｍｐ  ２３５−２３９℃（摂氏）；Ｒｆ＝０．８０（４：１  ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，２：１  ＣＤ３ＣＮ／Ｄ２Ｏ）δ８．７０−８．７９（ｍ，３Ｈ），７．５５−７．６８（ｍ，４Ｈ），４．０８−４．２６（ｍ，７Ｈ），３．２１（ｂｒ  ｍ，１６Ｈ），１．４９−１．７４（ｍ，３２Ｈ），１．３５（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，２：１  ＣＤ３ＣＮ／Ｄ２Ｏ）δ１７５．６，１７４．８，１７４．７，１７４．６，１７４．１，１７３．６，１７３．５，１７３．４，１５８．５（ｑ，Ｊ＝３６Ｈｚ），１５７．７，１１７．０（ｑ，Ｊ＝２８０Ｈｚ），８１．２，５６．１，５５．５，５５．２，５４．９，５４．４，５３．９，５３．４，５３．０，３９．９（ｍ），２５．５−２９．４（ｍ）ｐｐｍ；ＩＲ（薄膜）３３０５，１７０４，１６５８ｃｍ−１；ＥＳ−ＭＳ（−イオン化）（Ｃ６１Ｈ８３Ｆ２４Ｎ１６Ｏ１９−Ｈ）計算値１７９８．６，実測値１７９９．２。
【０１０５】
（実施例１２）
（ＢｏｃＮＨ−Ａｒｇ８−ＣＯ２Ｈ（・８ＴＦＡ塩）（１８）の合成）
【０１０６】
【化３８】
2004537596.tif 000039
ＭｅＯＨ（３ｍＬ）中、１６（１４３ｍｇ，０．０８０ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸ナトリウム（３４５ｍｇ，３．２６ｍｍｏｌ）、ピラゾール−１−カルボキサミジン塩酸塩（１７）（４７８ｍｇ，３．２６ｍｍｏｌ）、および脱イオン水（６ｍＬ）を添加した。溶液を５５℃で３６時間加熱し、次いで、反応混合物を、ＴＦＡの添加によって慎重に酸性化した（ｐＨ約４まで）。溶媒を、減圧下で除去し、白色固体を得、これをＲＰ−ＨＰＬＣを使用して精製した（アイソクラチック：５％溶媒Ａ，５分；勾配：５％溶媒Ａ〜５０％溶媒Ａ，１９分）。主要な生成物（Ｒｔ＝１５．２分）の凍結乾燥によって、所望の生成物を白色粉末１８として得た（９３ｍｇ，０．０４１ｍｍｏｌ，５１％収率）。：分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（勾配：５％溶媒Ａ〜９５％溶媒Ａ，１５分）Ｒｔ＝４．６４分，９９＋％純度；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．２０−８．２８（ｍ，３Ｈ），４．０５−４．２２（ｍ，７Ｈ），３．８０−３．９０（ｍ，１Ｈ），２．９９−３．１０（ｍ，１６Ｈ），１．４０−１．８２（ｍ，３２Ｈ），１．２６（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，Ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１６９．７，１６８．０，１６７．９２，１６７．８９，１６７．８，１５７．５（ｑ，Ｊ＝３６Ｈｚ，ＴＦＡ  Ｃ＝Ｏ），１５２．１，１５１．３，１１１．０（ｑ，Ｊ＝２９０Ｈｚ，ＴＦＡ  ＣＦ３），７６．２，４９．２，４８．０，４７．９，４７．１，３５．１，２２．９，２２．３，２２．２，１９．１ｐｐｍ；ＥＳ−ＭＳ（−イオン化）（Ｃ５３Ｈｌ０６Ｎ３２Ｏ１１−Ｈ）計算値１３６５．９，実測値１３６５．８。
【０１０７】
（実施例１３）
（９ＴＦＡ・ＮＨ３−Ａｒｇ８−ＣＯ２Ｈ（１）の合成）
【０１０８】
【化３９】
2004537596.tif 000040
１５０μＬのトリイソプロピルシランを含むトリフルオロ酢酸（３ｍＬ）中、１８（８５ｍｇ，０．０３７ｍｍｏｌ）の溶液を、ＲＴで３０分間攪拌した。反応混合物に、脱イオン水（３ｍＬ）を添加し、次いで、溶媒を、凍結乾燥によって除去した。得られた粗残渣を、ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した（アイソクラチック：５％溶媒Ａ，５分；勾配：５％溶媒Ａ〜５０％溶媒Ａ，１９分）。主要な生成物（Ｒｔ＝１２．８分）の凍結乾燥によって、所望の生成物１（８５ｍｇ，０．０３７ｍｍｏｌ，＞９９％収率）を白色粉末として得た：分析用ＲＰ−ＨＰＬＣ（勾配：５％溶媒Ａ〜９５％溶媒Ａ，１５分）Ｒｔ＝４．６分，９９＋％純度；ｍｐ１０５−１０８℃；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）δ８．３３−８．５０（ｍ，３Ｈ），４．１２−４．２５（ｍ，７Ｈ），３．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），３．０２−３．１０（ｍ，１４Ｈ），２．８７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），１．４０−１．８２（ｍ，３２Ｈ）ｐｐｍ；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ．Ｄ２Ｏ）δ１６９．９，１６８．０，１６７．９，１６７．７，１６４．１，１５７．６（ｑ，Ｊ＝３５Ｈｚ，ＴＦＡ  Ｃ＝Ｏ），１５１．４，１１１．０（ｑ，Ｊ＝２９０Ｈｚ，ＴＦＡ  ＣＦ３），４８．１，４８．０，４７．８，４７．３，４７．１，３５．２，３５．１，３５．０，３３．５，２３．０，２２．９，２２．７，２２．３，１９．１，１８．９，１８．１，１７．９ｐｐｍ；ＥＳ−ＭＳ（−イオン化）（Ｃ４８Ｈ９８Ｎ３２Ｏ９−Ｈ）計算値１２６５．８，実測値１２６５．９。
【０１０９】
本明細書中に記載される実施例および実施形態は、例示的目的のみのためであり、その観点から種々の改変または変更が当業者に示唆され、そして本明細書の精神および範囲ならびに添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれるべきであることが理解される。
【図面の簡単な説明】
【０１１０】
【図１】図１は、保護オルニチンモノマーからの保護アルギニンオクタマーの二方向合成スキームを示す。
【図２】図２は、保護−Ｇｌｙ−Ｏｒｎ−Ｇｌｙ−サブユニットからの間隔を空けられた保護アルギニンオクタマーの二方向合成スキームを示す。
【図３】図３Ａ、３Ｂ、３Ｃおよび３Ｄは、本発明において使用される脱保護／ペルグアニジル化化学の適用性を示す。
【図１】
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【図２】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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