(57)【要約】本発明は、抗黄体ホルモン、特に抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体の投与による、細胞、特に乳癌細胞におけるアポトシスの誘発のための方法及び使用に関する。本発明はさらに、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における高められた量の腫瘍細胞であるタイプの癌の、抗黄体ホルモン、特に抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体による処理に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞におけるアポトシスの誘発のためへの抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体の使用。
【請求項２】
前記アポトシスの誘発が、末端分化の開始により引き起こされる請求項１記載の使用。
【請求項３】
前記細胞が、哺乳類細胞である請求項１又は２記載の使用。
【請求項４】
前記哺乳類細胞が、ヒト細胞である請求項３記載の使用。
【請求項５】
前記細胞が、腫瘍細胞である請求項１〜４のいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
前記腫瘍が、乳癌である請求項５記載の使用。
【請求項７】
前記薬剤がさらに、抗エストロゲンを含んで成る請求項１〜６のいずれか１項記載の使用。
【請求項８】
高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における高められた量の腫瘍細胞であるタイプの癌の処理のための薬剤の調製のためへの抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体の使用。
【請求項９】
前記疾病が、乳癌である請求項８記載の使用。
【請求項１０】
有効量の抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体を、インビトロでの細胞に投与することを含んで成る、細胞におけるアポトシスを誘発する方法。
【請求項１１】
前記細胞が、哺乳類腫瘍細胞である請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
前記細胞が、乳癌細胞である請求項１０又は１１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野：
本発明は、細胞におけるアポトシスの誘発のためへの抗黄体ホルモンの使用に関する。特に、本発明は、細胞におけるアポトシスの誘発のためへの抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体の使用に関する。本発明はさらに、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における高められた量の腫瘍細胞であるタイプの癌、例えば乳癌の処理のための薬剤の調製のためへの抗黄体ホルモンの使用を提供する。
【０００２】
発明の背景：
抗黄体ホルモンは、ホルモン−依存性腫瘍及び他の疾病に対して有意な衝撃を有する、比較的新規で且つ有望な種類の治療剤を提供する。抗黄体ホルモンは本来、妊娠の非手術的な医薬的終結に関して創造されたが、一定の抗黄体ホルモンが、プロゲステロンに対する受容体を有するそれらの乳癌の内分泌治療において相当の重要性を増して来た（Ｔ． Ｍａｕｄｅｌｏｎｄｅなど．， Ｊ．Ｇ．Ｍ． Ｋｌｉｊｎなど．， Ｈｏｒｍｏｎａｌ Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ， ｐｅｐｉｄｅｓ， Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ Ｎｅｗ （Ａｎｔｉ） Ｓｔｅｒｏｉｄａｌ Ａｇｅｎｔｓ， Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９８７， ｐｐ． ５５−５９）。
【０００３】
内分泌治療におけるこの新規手段は、インビトロでのプロゲステロン受容体−陽性ヒト乳癌細胞系、及びインビボでのマウス又はラットのいくつかのホルモン−依存性乳癌における抗黄体ホルモンの抗腫瘍活性に基づかれる。特に、抗黄体ホルモン　オナプリストン及びミフェプリストン（ＲＵ４８６）の抗腫瘍機構が、マウスホルモン−依存性ＭＸＴ乳癌モデル、及びラットのＤＭＢＡ−及びＮＭＵ−誘発された乳癌モデルを用いてすでに研究されている（Ｍ．Ｒ． Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒなど．， Ｅｕｒ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．， Ｖｏｌ． ２５， Ｎｏ． ４， ｐｐ． ６９１−７０１， １９８９； Ｈ． ｍｉｃｈｎａなど．， Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ １４： ２７５−２８８， １９８９： Ｈ． Ｍｉｃｈｎａ， Ｊ． Ｓｔｅｒｏｉｄ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｖｏｌ． ３４， Ｎｏｓ １−６， ｐｐ． ４４７−４５３， １９８９）。
【０００４】
しかしながら、例えばミフェプリストンに関する低い活性及び悪い副作用のために、この化合物は乳癌の治療において単一の剤として推薦され得ない（Ｄ． Ｐｅｒｒａｕｌｔなど．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ． １９９６ Ｏｃｔ． １４ （１０）， ｐｐ． ２７０９−２７１２）。さらに、ミフェプリストンは、強い抗グルココルチコイド副作用を示す（Ｌ．Ｍ． Ｋｅｔｔｅｌなど．， Ｆｅｒｔｉｌ． Ｓｔｅｒｉｌ． １９９１ Ｓｅｐ， ５６（３）， ｐｐ． ４０２−４０７； Ｘ． Ｂｅｒｔａｇｎａ， Ｐｓｙｃｈｏｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １９９７， ２２ ｓｕｐｐｌ． １， ｐｐ． ５１−５５）。
【０００５】
細胞周期のそれぞれの期における腫瘍細胞の百分率の決定は、強力なＤＮＡ流動細胞計測法により行われ得る（Ｇ．Ｍ． Ｃｌａｒｋなど．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３２０， １９８９， Ｍａｒｃｈ， ｐｐ． ６２７−６３３； Ｌ．Ｇ． Ｄｒｅｓｓｌｅｒなど．， Ｃａｎｃｅｒ ６１ （３）， １９８８， ｐｐ． ４２０−４２７及びそこに引用される文献を参照のこと）。従って、腫瘍細胞の細胞周期の段階、及び特に、細胞周期の一定の段階における腫瘍細胞の数が、疾病の進行及び治療の成功の重要な臨床学的予測体であり得ることが示されている。細胞周期のＳ−期における細胞の数は、これに関して特に重要である。
【０００６】
ヨーロッパ特許０４９５８２５Ｂ１号は、高い危険因子であると思われる、細胞周期のＳ期における高められた割合の腫瘍細胞を有する乳癌の処理のための薬剤の生成のためへの抗黄体ホルモン（競争プロゲテロンアンタゴニスト）の使用を開示する。これは、抗黄体ホルモンが、細胞周期のＧ０Ｇ１期における腫瘍細胞の進行を阻止することができ、Ｓ期における主用細胞の実質的な低下をもたらす観察に基づかれている。
【０００７】
しかしながら、この効果は、標準の乳癌治療剤、タモキシフェン、エストロゲン療法又は卵巣摘出に関しては観察されていなかった。ヨーロッパ特許０４９５８２５Ｂ１号において試験される抗黄体ホルモンは、１１β−［４−Ｎ， Ｎ−ジメチルアミノ−フェニル］−１７α−ヒドロキシ−１７β−（３−ヒドロキシプロピル）−１３αメチル−４，９（１０）−ゴナジン−３−オン及び１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（プロプ−１−イニル）−４，９（１０）−エストラジエン−３−オンである。
【０００８】
強い抗黄体ホルモン活性を有する１７α−フルオロアルキルステロイド類、及びそれらの生成方法は、ＷＯ９８／３４９４７号に記載されている。ＷＯ９８／３４９４７号は、そこに開示される１７α−フルオロアルキルステロイドが細胞アポトシス又は細胞周期阻止において演じ得る役割を論じても又は研究もしていない。
【０００９】
腫瘍細胞の場合、Ｇ０Ｇ１期における進行を阻止することによって、細胞におけるアポトシスを誘発する剤の可能性ある価値が与えられる場合、この特定の作用機構を有する追加の剤、例えば抗黄体ホルモンを同定することが所望される。そのような剤は、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における腫瘍細胞の高められた量である、一定の型の癌、例えば乳癌の処理及び予防への可能性ある用途を有する。
【００１０】
発明の目的：
従って、ホルモン−依存性疾病、例えば乳癌における抗黄体ホルモンの作用の形式をさらに調べ、そして細胞におけるアポトシスの標的化された誘発のための方法を提供することが本発明の目的である。
驚くべきことには、本発明者は、抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン（又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体）が、細胞におけるアポトシスの誘発のために使用され得ることを発見した。
【００１１】
発明の要約：
本発明は、抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン（この後、“抗黄体ホルモン（Ｉ）”として言及される）が、標準の乳癌腫瘍モデルの腫瘍細胞においてアポトシス及び細胞死を誘発する予測できない観察に基づかれている。抗黄体ホルモン（Ｉ）は、末端分化の開始を通して、細胞におけるアポトシスを誘発できることが見出された。
【００１２】
従って、本発明は、細胞におけるアポトシスの誘発のための薬剤の調製のためへの抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体の使用を提供する。好ましくは、アポプロシスの誘発は、末端分化の開始により引き起こされる。細胞は好ましくは、哺乳類細胞、より好ましくはヒト細胞、及び最も好ましくは腫瘍細胞であり、ここで前記腫瘍は好ましくは、乳癌である。
本発明のもう１つの観点は、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における高められた量の腫瘍細胞であるタイプの癌の処理のための薬剤の調製のためへの抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体の使用である。
【００１３】
本発明のもう１つの観点は、インビトロでの細胞におけるアポトシスの誘発のためへの抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘発体又は類似体の使用である。好ましくは、前記細胞は、哺乳類、より好ましくはヒト細胞及び最も好ましくは腫瘍細胞であり、ここで前記腫瘍は好ましくは、乳癌である。
本発明のもう１つの観点は、細胞に有効量の抗黄体ホルモン（Ｉ）を投与することによって、細胞におけるアポトシスを誘発するための方法である。この方法は、インビトロ又はインビボで適用され得る。好ましくは、前記細胞は、哺乳類、より好ましくはヒト細胞及び最も好ましくは腫瘍細胞であり、ここで前記腫瘍は好ましくは、乳癌である。
【００１４】
細胞アポトシスを誘発する能力のために、抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘発対又は類似体が、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における高められた量の腫瘍細胞である、一定のタイプの癌、例えば乳癌の処理のために使用され得る。細胞アポトシスを誘発するその能力のために、抗黄体ホルモン（Ｉ）により影響され、そして処理され得る、他のタイプの癌又はホルモン−依存性疾病は、例えば乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、骨髄腫、無排卵性不妊症、骨膜腫、すなわちホルモン受容体及び／又はホルモン−依存性経路の存在に実質的に起因するか又はそれにより影響される疾病を包含する。
【００１５】
発明の特定の記載：
抗黄体ホルモン（Ｉ）−１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オンは、下記式（Ｉ）：
【００１６】
【化１】
2004511523.tif 000002
により表される。
【００１７】
抗黄体ホルモン（Ｉ）（又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体）は、強い抗黄体ホルモン活性を有する価値ある医薬剤である。抗黄体ホルモン（Ｉ）は、細胞におけるアポトシスの誘発のために本発明に従って使用され得る。
本発明における用語“抗黄体ホルモン”は、プロゲステロン受容体を競争的に阻害することができるすべての化合物を主に含んで成ることを意味する。しかしながら、それはまた、プロゲスチンの生合成を阻害できる化合物を包含するべきである。
本発明のおける抗黄体ホルモン（Ｉ）の医薬的に許容できる誘導体又は類似体は、例えばＷＯ９８／３４９４７号に開示される発明の化合物のいずれか１つを包含することができる。
【００１８】
本発明において行われる研究は、種々のホルモン−依存性腫瘍モデルにおける抗黄体ホルモン（Ｉ）の効果的な腫瘍阻害性質を示す（例１〜６を参照のこと）。アポトシスの誘発の結果としての抗黄体ホルモン（Ｉ）の腫瘍阻害活性が従来の抗腫瘍剤、例えば抗エストロゲンタモキシフェンよりも強いことがさらに示されている。本発明に従って抗黄体ホルモン（Ｉ）を用いての乳癌の処理は、卵巣摘出よりも卓越している。
【００１９】
下記例に示されているように種々の腫瘍モデルにおける抗黄体ホルモン（Ｉ）の適用は、細胞周期のＳ及びＧ２Ｍ期における細胞の数における有意な及び生物学的に適切な低下と共に、細胞周期のＧ０Ｇ１期における腫瘍細胞の蓄積を示した。それらの結果は、分化の誘発を示す。分化−特異的Ｇ１阻止は、他の幹細胞システムに関して、すでに提案されている（Ｊ．Ｊ． Ｗｉｌｌｅ Ｊｒ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． １９８２， ４２ （１２）： ５１３９−４６； Ｒ．Ｅ． Ｓｃｏｔｔ， Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １９８２， ９４ （２）： ４００−４０５を参照のこと）。
【００２０】
種々の腫瘍モデルにおいて得られる実験結果は、抗黄体ホルモン（Ｉ）による処理が、分泌生成物の多量の分離を伴なって腺構造及び腺房、及び紡錘形状の生理的組織変性副集団への有糸分裂的活性多角形腫瘍細胞の分化を誘発すると思われる（例５及び特に図５Ａ及び５Ｂを参照のこと）。腫瘍サイズ、有糸分裂指数及び悪性度の程度は明確に低下したが、腫瘍における腺構造の体積画分及びアポトシスの出現は、対照に比較して、３倍上昇した（例５、図５Ｅ及び５Ｆを参照のこと）。
【００２１】
いずれかの理論にも制限されないが、それらの結果は、試験されたモデルにおける抗黄体ホルモン（Ｉ）の抗腫瘍作用の主用機構が、末端細胞死に関連する末端分化の誘発を通しての、腫瘍細胞のレベルでの直接的なプロゲステロン−受容体−介在性抗増殖効果であることを示す。この態様においては、抗黄体ホルモン（Ｉ）は、プロゲステロン受容体−陽性腫瘍における悪性腫瘍細胞固有の末端分化における本質的な阻止を排除することができると思われる。抗黄体ホルモン（Ｉ）のこの抗増殖効果は、抗黄体ホルモン（Ｉ）の抗ホルモン（抗黄体ホルモン）活性から分離されると思われる。
【００２２】
例えば、腫瘍細胞の場合、Ｇ０Ｇ１−期における進行を阻止することによって、細胞におけるアポトシスを誘発する剤、例えば抗黄体ホルモン（Ｉ）は、多くの状態を処理し、そして予防するための可能性ある用途を有する。抗黄体ホルモン（Ｉ）を包含する、そのような剤は、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における腫瘍細胞、例えば乳癌細胞の高められた量であるそれらの癌を処理するために使用され得る。
【００２３】
従って、本発明の１つの観点は、細胞におけるアポトシスの誘発のための薬剤の調製のためへの抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体の使用である。好ましい態様においては、抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体の使用は、ヒトにおける腫瘍細胞、好ましくは乳癌細胞におけるアポトシスの誘発のための薬剤に関する。そのような薬剤は、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における腫瘍細胞の高められた量である、ホルモン−依存性疾病、例えば乳癌の処理において有益であり得る。
【００２４】
薬剤の製造は、当業者に知られている方法に従って行われ得る。通常知られており、そして使用されるアジュバント、及びさらなる適切なキャリヤー又は稀釈剤が使用され得る。適切なキャリヤー及びアジュバントは、薬学、化粧品、及びＵｌｌｍａｎｎ’ｓ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ｖｏｌ． ４， （１９５３）， ｐｐ． １−３６； Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｖｏｌ． ５２ （１９６３）， ｐ． ９１８ｆｆ； Ｈ．ｖ． Ｃｚｅｔｓｃｈ−Ｌｉｎｄｅｎｗａｌｄ， “Ｈｉｌｆｓｓｆｏｆｆｅ ｆｕｒ Ｐｈａｒｍａｚｉｅ ａｎｄ ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ Ｇｅｂｉｅｔｅ”， Ｐｈａｒｍ． Ｉｎｄ． ２， １９６１， ｐ．７２ｆｆ； Ｄｒ． Ｈ． Ｐ． Ｆｉｅｄｌｅｒ， Ｌｅｘｋｏｎ ｄｅｒ Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ ｂｕｒ Ｐｈａｒｍａｚｉｅ， Ｋｏｓｍｅｔｉｋ ａｎｄ ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ Ｇｅｂｉｅｔｅ， Ｃａｎｔｏｒ ＫＧ， Ａｕｌｅｎｄｏｒｔ ｉｎ Ｗｏｒｔｔｅｍｂｅｒｇ， １９７１における関連する分野のために推薦される通りである。
【００２５】
本発明の目的のために適切な抗黄体ホルモン、好ましくは抗黄体ホルモン（Ｉ）、又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体は、経口又は非経口、例えば腹腔内、筋肉内、皮下又は経皮適用のための生薬を調製するための既知方法に従って、医薬組成物中に導入され得る。それらはまた、組織中に移植され得る。移植片は、不活性材料、例えば生物分解ポリマー又は合成シリコーン、例えばシリコンゴムを含んで成ることができる。
【００２６】
それらは、錠剤、ピル、糖剤、ゲルカプセル、顆粒、坐剤、移植片、注射可能な無菌水性又は油状溶液、懸濁液又はエマルジョン、軟膏、クリーム、ゲルの形で、又は膣内（例えば、膣用リング）又は子宮内システム（例えば、隔膜、ループ）により投与され得る。
【００２７】
経口投与のための薬剤の調製に関しては、上記で定義されたような本発明のために適切な抗黄体ホルモンは、通常知られており、そして使用されるアジュバント及びキャリヤー、例えばアラビアガム、タルク、澱粉、糖、例えばマンニトース、メチルセルロース、ラクトース、ゼラチン、界面活性剤、ステアリン酸マグネシウム、水性又は非水性賦形剤、パラフィン誘導体、架橋剤、乳化剤、滑剤、保存剤及び風味剤（例えば、エーテル性油）と共に混合され得る。医薬組成物においては、抗黄体ホルモンは、微小粒子、例えば超微粒状組成物に分散され得る。
【００２８】
活性剤の生物利用能をさらに増強するために、上記で定義されるような本発明のために適切な抗黄体ホルモンはまた、それらとα−、β−又はγ−シクロデキストリン又はその誘導体とを、ＰＣＴ／ＥＰ９５／０２６５６号に開示されるような方法に従って反応せしめることによって、シクロデキストリン包接体として配合され得る。
非経口投与に関しては、上記で定義されるような本発明のために適切な抗ホルモンは、生理学的に許容できる稀釈剤、例えば油に、溶解剤、界面活性剤、分散剤又は乳化剤を伴って、又はそれを伴なわないで溶解されるか又は懸濁され得る。油として、例えばオリーブ油、ピーナッツ油、綿種子油、大豆油、ヒマシ油及ゴマ油（但し、それらだけには限定される）が使用され得る。
【００２９】
投与されるべき量（すなわち、“医薬的有効量”）は、広い範囲内で変化し、そして処理される状態及び投与のモードに依存する。それは、意図される処理のために効果的ないずれかの量を満たすことができる。“医薬的有効量”の決定は、当業者の範囲内である。
１単位用量は、約０．１〜１００ｍｇの活性剤を提供することができる。ヒトへの投与に関しては、活性剤の毎日の用量は、約０．１〜４００ｍｇ、好ましくは１０〜１００ｍｇ、最も好ましくは５０ｍｇである。
【００３０】
前記薬剤はまた、貯蔵物注入、又は移植片調製物を通して、任意には、活性剤の持効性供給のために投与され得る。
好ましい投与の態様は、経口投与である。本発明に従って使用のための抗黄体ホルモン、及び特に抗黄体ホルモン（Ｉ）は、経口投与のために特に適切である。
【００３１】
本発明のすべての観点に従えば、上記で定義されるような少なくとも１つの抗黄体ホルモン、特に抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体を、少なくとも１つの抗エストロゲンと共に組合すことも可能である。なぜならば、多くのホルモン−依存性疾病、特に乳癌はプロゲストロン受容体のみならず、またエストロゲン受容体も示すからである。抗エストロゲンは、抗黄体ホルモンと同時に又はそれに続いて、及び特に抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体と同時に又はそれに続いて投与され得る。抗黄体ホルモン及び抗エストロゲンの量は、等しいか、又は１つの成分が他の成分よりもより卓越することができ、例えば抗黄体ホルモン：抗エストロゲンの比は、１：５０〜５０：１、好ましくは１：３０〜３０：１、及び最も好ましくは１：１５〜１５：１である。
【００３２】
本発明に従って使用するための適切な抗エストロゲンの例は、非ステロイド性抗エストロゲン、例えばタモキシフェン及びナフォキシジン、並びにラロキシフェン、ファスロデクス及びＥＭ８００、及びステロイド性抗エストロゲンファスロデキシンである。ステロイド性抗エストロゲンの例は、ＥＰＯ３４８３４１Ａ号に開示されるそれら、及びＷＯ９８／０７７４０号に開示されるそれら、特に１１β−フルオロ−７α−｛５−［Ｎ−メチル−Ｎ−３−（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルチオ−プロピル）アミノ］−ペンチル｝−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール、又はＷＯ９９／３３８５５号に開示されるそれら、特に１１β−フルオロ−７α−｛５−［メチル−（７，７，８，８，９，９，１０，１０， １０−ノナフルオロ−デシル）−アミノ］−ペンチル｝−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール又は医薬的に許容できるそれらの誘導体又は類似体を包含する。抗エストロゲン効果を有するアロマターゼインヒビター、例えばＥＰ０４９５８２５Ｂ１の第７〜８頁に開示されるそれらはまた、抗エストロゲンとして使用され得る。
【００３３】
本発明のもう１つの観点は、高い危険性のインジケーターが細胞周期のＳ期における高められた量の腫瘍細胞であるタイプの癌の処理のための薬剤の調製のためへの抗黄体ホルモン１１β−（４−アセチルフェニル）−１７β−ヒドロキシ−１７α−（１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル）−エストラ−４，９−ジエン−３−オン又は医薬的許容できるその誘導体又は類似体の使用に関する。
【００３４】
Ｓ期における腫瘍細胞の数は、Ｄｒｅｓｓｌｅｒなど．， “ＤＮＡ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ Ｆａｃｔｏｒ ｉｎ １３３１ Ｆｆｏｚｅｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ”， Ｃａｎｃｅｒ， Ｖｏｌ． ６１（３）， １９８８， ｐｐ． ４２０−４２７； ＭｃＧｕｉｒｅ ＆ Ｄｒｅｓｓｌｅｒ， “Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｉｍｐａｃｙ ｏｆ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｉｎ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ Ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｐａｔｉｅｎｔｓ”， ＪＮＣＩ， Ｖｏｌ． ７５（３）， １９８５， ｐｐ． ４０５−４０９ に記載のようにして、ＤＮＡ誘導細胞計測法により決定され得る。Ｓ期における腫瘍細胞の高い危険性の量は、本発明への使用のための特に適切な候補体である。抗黄体ホルモン（Ｉ）の場合、利点は、標準の動物モデルにより明らかなように（例１〜４を参照のこと）、有力な抗腫瘍効果、及びアポトシス（特に例５を参照のこと）及び細胞周期阻止を誘発するこの剤の作用構造の両者から生まれる。
【００３５】
他の観点においては、本発明は、細胞においてアポトシスを誘発するための方法を提供する。前記細胞は好ましくは、哺乳類細胞及び最も好ましくは、ヒト細胞であり、そして前記方法はインビトロ又はインビボで適用され得る。好ましくは、アポトシスは、例えば抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体の投与により、末端分化を開始する機構を通して誘発される。前記方法においては、有効量の抗黄体ホルモン（Ｉ）又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体が、問題の細胞に適用され得る。
【００３６】
例えば、その増殖がエストラジオールの投与により刺激されるＴ４７Ｄ乳癌細胞系においては、抗黄体ホルモン（Ｉ）は１０−９〜１０−８モルの有効限界濃度で細胞増殖の完全な阻害を誘発した（例６及び図６を参照のこと）。これは、既知抗黄体ホルモンがこの腫瘍モデルにおける細胞増殖に対する縮小効果を有さないので、特に驚くべきことである。従って、抗黄体ホルモン（Ｉ）は、他の抗黄体ホルモン、例えばオナプリストン、及び抗エストロゲン、例えばタモキシフェン、並びに純粋な抗エストロゲン、例えば１１β−フルオロ−７α−｛５−［Ｎ−メチル−Ｎ−３−（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルチオ）−プロピルアミノ］−ペンチル｝−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオールよりも、効能及び効率に関して卓越する。
【００３７】
細胞におけるアポトシスの誘発における抗黄体ホルモン（Ｉ）の役割は、この抗黄体ホルモン（又は医薬的に許容できるその誘導体又は類似体）が、アポトシスの誘発が特に所望される場合、宿主の状態、特にホルモン−依存性状態において有用であることを示す。特に、それは、乳癌、子宮内膜癌、骨髄腫、無排卵性不妊症、髄膜腫のような疾病、すなわちホルモン受容体及び／又はホルモン−依存性経路の存在に実質的に起因するか又はそれにより影響される疾病の処理に使用され得る。従って、抗黄体ホルモン、例えば抗黄体ホルモン（Ｉ）はさらに、上記ですでに記載されたように、ホルモン−依存性疾病の処理のためにアポトシス又は細胞死を誘発するための薬剤の調製に使用され得る。
本発明はさらに、例により例示される。次の例は本発明を制限するものではない。
【００３８】
実施例
例１．ＤＭＢＡ−誘発された腫瘍モデルにおける用量−応答研究
材料及び方法：
未成熟雌のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（生後４９〜５１日；１０匹の動物／グループ）を、この研究に使用した。乳房腫瘍を、１０ｍｇの７，１２−ジメチルベンズ ［ａ］ アントラセン（ＤＭＢＡ， Ｓｅｒｖａ／Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）の単一の経口に投与により誘発した。１５０ｍｍ２以上のサイズを有する少なくとも１つの確立された腫瘍を有するラットを、１）溶媒対照、２）処理開始での卵巣摘出、３）抗黄体ホルモン（Ｉ）、０．５ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ．， ４）抗黄体ホルモン（Ｉ）、２ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ．， ５）抗黄体ホルモン（Ｉ）、５ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ．， ６）抗黄体ホルモン（Ｉ）、１０ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ．， 及び７）オナプリストン、５ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ． により４週間、毎週、処理した。
【００３９】
増殖阻害についてのパラメーターとして、毎週のカリパス測定により決定された腫瘍面積の変化率（初期腫瘍サイズに対する％）を用いた。平均値のグループ間差異の統計学的分析のために、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ−試験を用いた。ＤＭＢＡ予防モデルのさらなる記載及び評価については、Ｒ．Ｇ． Ｍｅｔｈａ， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ３６ （２０００）， ｐｐ． １２７５−１２８２を参照のこと。
【００４０】
結果：
損なわれていない対照動物においては、進行性腫瘍の増殖が観察され、ところが卵巣摘出は動物の９０％において相当の腫瘍後退を引き起こした。２ｍｇ／ｋｇ以上の用量での抗黄体ホルモン（Ｉ）による処理は、対照に比較して、腫瘍増殖の阻害をもたらすアポトシスの有意な誘発をもたらした（図２を参照のこと）。明確な用量−応答関係が存在した。０．５ｍｇ／ｋｇの抗黄体ホルモン（Ｉ）による処理は腫瘍の増殖を有意に妨げなかったが、２ｍｇ／ｋｇで、アポトシスの最大の誘発及び従って増殖阻害が観察された。このグループにおいては、完全な腫瘍後退は、ラットの５０％において見出された。この実験において試験された抗黄体ホルモン（Ｉ）の最高の用量（１０ｍｇ／ｋｇ）の効果は、２ｍｇ／ｋｇの効果に比較できた。オナプリストン（５ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ．）は、比較できる用量で、抗黄体ホルモン（Ｉ）よりも明確に低い効果を有した。
【００４１】
結論：
ラットにおけるＤＭＢＡ−誘発された乳房腫瘍モデルにおいては、抗黄体ホルモン（Ｉ）は、腫瘍細胞におけるアポトシスを強く誘発し、そして従って、損なわれていない動物において腫瘍増殖を完全に抑制した。２ｍｇ／ｋｇの抗黄体ホルモン（Ｉ）が腫瘍細胞に対して最大のアポトシス効果を有することが見出された。抗黄体ホルモン（Ｉ）は明確に、腫瘍増殖の阻害に関して、オナプリストンよりも卓越した。
【００４２】
例２．ラットにおけるＮＭＵ−誘発された乳癌における腫瘍増殖阻害
材料及び方法：
腫瘍を、雌Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｔｉｅｒｚｕｃｈｔ Ｓｃｈｏｎｗａｌｄｅから得られた；生後５０〜５５日）において、ＮＭＵ（ニトロソメチルウレア；５０ｍｇ／ｋｇ）の単一の静脈内注入により誘発した。１０日後に出発して、少なくとも１つの確立された腫瘍を有するラットを、１）溶媒対照、２）処理開始での卵巣摘出、３）抗黄体ホルモン、１．０ｍｇ／ｋｇ／日、４）抗黄体ホルモン（Ｉ）、０．５ｍｇ／ｋｇ／日、及び５）オナプリストン、５ｍｇ／ｋｇ／日により４週間、処理した。増殖阻害についてのパラメーターとして、毎週のカリパス測定により決定された腫瘍面積の変化率（初期腫瘍サイズに対する％）を用いた。平均値のグループ間差異の統計学的分析のために、Ｋｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ−試験を用いた。
【００４３】
結果：
損なわれていない対照動物においては、進行性腫瘍の増殖が観察され、ところが卵巣摘出は完全な腫瘍増殖阻害を引き起こした。０．５又は１．０ｍｇ／ｋｇの用量での抗黄体ホルモン（Ｉ）による処理は、対照に比較して、アポトシスの誘発による腫瘍増殖の有意な阻害をもたらした（図２を参照のこと）。オナプリストン（５ｍｇ／ｋｇ）は、０．５ｍｇ／ｋｇのより低い容量で、抗黄体ホルモン（Ｉ）よりも明確に効果を有した。
【００４４】
結論：
ラットにおけるＭＮＵ−誘発された乳房腫瘍モデルにおいては、腫瘍細胞においてアポトシスを誘発するその有能な能力のために、抗黄体ホルモン（Ｉ）は、損なわれていない動物において腫瘍増殖を完全に抑制する。１．０ｍｇ／ｋｇ及び０．５ｍｇ／ｋｇの用量での抗黄体ホルモン（Ｉ）は腫瘍細胞に対して有意なアポトシス効果を有する。
【００４５】
例３．ｓｃｉｄマウスにおけるヒトＴ４７Ｄ乳癌異腫移植
材料及び方法：
雌Ｆｏｘ Ｃｈａｓｅ ｓｃｉｄマウス（Ｍ＆Ｂ）を、エストラジオールペレット（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ）により補充した。細胞培養物から得られ、そしてマトリゲルに懸濁されたＴ４７Ｄ乳癌細胞を、マウスの鼡径領域に皮下移植した。腫瘍が約２５ｍｍ２に達する場合、処理を開始した。処理は、腫瘍の進行まで続けられた。実験グループは次の通りであった：１）対照（ビークル）、２）卵巣摘出、３）抗黄体ホルモン（Ｉ）、１０ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ．。腫瘍面積を、カリパス測定により決定した。Ｋｒｕｓｋａｌ Ｗａｌｌｉｓ試験を、平均値のグループ間差異の統計学的分析のために使用した。
【００４６】
結果：
Ｔ４７Ｄ乳癌モデルにおいては、卵巣摘出は、対照における急速な増殖に比較して、腫瘍増殖の相当の阻害をもたらした。図３は、１０ｍｇ／ｋｇの抗黄体ホルモン（Ｉ）の皮下適用が腫瘍細胞においてアポトシスを誘発することを示す。抗黄体ホルモン（Ｉ）の効果は、従来のエストロゲン消耗治療（卵巣摘出）の効果にほとんど匹敵できる。
【００４７】
結論：
アポトシスを誘発し、そしてＦｏｘ Ｃｈａｓｅ ａｃｉｄマウスに異種移植されたヒトＴ４７Ｄ乳癌の増殖を阻害する抗黄体ホルモン（Ｉ）の効果は、このモデルにおける乳癌の増殖を阻害する最大の効果的方法であると思われる標準のエストロゲン消耗療法（卵巣摘出）の効果に匹敵できる。
【００４８】
例４．ｓｃｉｄマウスにおけるヒトＭＣＦ−７乳癌異腫移植
材料及び方法：
雌Ｆｏｘ Ｃｈａｓｅ ｓｃｉｄマウス（Ｍ＆Ｂ）を、エストラジオールペレット（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ）により補充した。細胞培養物から得られ、そしてマトリゲルに懸濁されたＭＣＦ−７乳癌細胞を、マウスの鼡径領域に皮下移植した。腫瘍が約２５ｍｍ２に達する場合、処理を開始した。処理は、腫瘍の進行まで続けられた。実験グループは次の通りであった：１）対照（ビークル）、２）卵巣摘出、３）抗黄体ホルモン（Ｉ）、１０ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ．。腫瘍面積を、カリパス測定により決定した。Ｋｒｕｓｋａｌ Ｗａｌｌｉｓ試験を、平均値のグループ間差異の統計学的分析のために使用した。
【００４９】
結果：
ＭＣＦ−７乳癌モデルにおいては、卵巣摘出は、対照における急速な増殖に比較して、腫瘍増殖の相当の阻害をもたらした。図３は、１０ｍｇ／ｋｇの抗黄体ホルモン（Ｉ）の皮下適用が腫瘍細胞においてアポトシスを誘発することを示す。抗黄体ホルモン（Ｉ）の効果は、従来のエストロゲン消耗治療（卵巣摘出）の効果にほとんど匹敵できる。
【００５０】
結論：
アポトシスを誘発し、そしてＦｏｘ Ｃｈａｓｅ ａｃｉｄマウスに異種移植されたヒトＭＣＦ−７乳癌の増殖を阻害する抗黄体ホルモン（Ｉ）の効果は、標準のエストロゲン消耗療法（卵巣摘出）の効果に匹敵できる。
【００５１】
例５．ラットにおけるＮＭＵ−誘発された乳癌（組織、増殖指数及びＴＵＮＥＬアッセイ）
材料及び方法：
腫瘍を、雌Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｔｉｅｒｚｕｃｈｔ Ｓｃｈｏｎｗａｌｄｅから得られた；生後５０〜５５日）において、ＮＭＵ（ニトロソメチルウレア；５０ｍｇ／ｋｇ）の単一の静脈内注入により誘発した。１５０ｍｍ２以上のサイズを有する少なくとも１つの確立された腫瘍を有するラットを、１）溶媒対照、２）処理開始での卵巣摘出、３）抗黄体ホルモン（Ｉ）、３ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ． により７日間、毎週、処理した。処理の最後で、腫瘍を切除し、ホルマリンに固定し、そしてパラフィンに包埋した。組織、増殖指数及びアポトシス誘発アッセイを、それらの切除された腫瘍に対して行った。
【００５２】
組織：組織に関しては、組織スライドをヘマトキシリンにより染色し、そして顕微鏡により分析した。
増殖指数：増殖指数を決定するために、ＰＣＮＡの発現を決定した。増殖する細胞核抗原（ＰＣＮＡ）は、細胞周期に関連する３６ｋＤの核タンパク質である。核ＰＣＮＡ免疫反応性は、正常組織の増殖性区画に見出される。固定化及びプロセッシング耐性エピトープを認識するモノクローナル抗体を用いて、その組織を調べた。
【００５３】
ＴＵＮＥＬ（アポトシス試験）：アポトシスの生化学的特徴は、細胞死に起因する不可逆的現象であるゲノムＤＮＡの分解である。この特徴的なＤＮＡ断片化は、ヌクレオソーム単位間に位置する部位でＤＮＡを選択的に切断する核エンドヌクレアーゼの活性化の結果である。それらのＤＮＡ鎖の分裂を、ターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ（ＴＵＮＥＬ， Ｔｅｒｍｉｎａｌ Ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌ Ｔｒａｎｓｆｅｒｏｓｅ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄＵＴＰ Ｎｉｃｋ Ｅｎｄ Ｌａｂｅｌｉｎｇ； Ｇａｖｒｉｅｌｉなど．， Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １１９， ４９３， １９９２）を用いて、フルオロセイン−ｄＵＴＰによる３’−ＯＨ末端の酵素的ラベリングにより検出した。組み込まれたフルオレセインを、抗−フルオレセイン抗体アルカリホスファターゼ接合体、続いてアルカリホスファターゼ基質反応を用いて検出した。
【００５４】
結果：
組織：抗黄体ホルモン（Ｉ）による処理の後、ＮＭＵ腫瘍からの組織切断は、通常、分泌材料により満たされた、形式異常性管及び腺房形式を示した（図５Ａ）。さらに、腫瘍における腺構造の体積画分は、対照に比較して、上昇した（図５Ｂ）。さらに、抗黄体ホルモン（Ｉ）により処理される動物の乳房腫瘍は、分化の形態学的特徴を示した。
【００５５】
増殖指数：ＰＣＮＡ免疫反応性は、処理されていないＮＭＵ−誘発された乳癌組織において高い（図５Ｃ：処理されていない対照）。ＰＣＮＡ免疫反応性を有する細胞の数は、抗黄体ホルモン（Ｉ）により処理されたラットからのＮＭＵ−誘発された乳癌組織における分化の誘発により低められる（図５Ｄ）。これらのデータは、乳癌においては、抗黄体ホルモンによる処理が分化の誘発により増殖指数を低めることを示す。
【００５６】
ＴＵＮＥＬ（アポトシス）：図５Ｅは、処理されていない対照に比較して、ＮＭＵ−誘発された乳癌組織における抗黄体ホルモン（Ｉ）により誘発されたアポトシスの出現を示す（図５Ｆ）。抗黄体ホルモン（Ｉ）は単独で、ＮＭＵ−誘発された乳癌組織においてアポトシスを誘発でき、そして従って、それらの腫瘍の増殖を阻害したことは、明らかに明確である。
【００５７】
例６．Ｔ４７Ｄ細胞系におけるインビトロでの抗黄体ホルモン（Ｉ）の抗増殖活性
材料及び方法：
Ｔ４７Ｄ細胞を、０．１ｎＭのＥ２（エストラジオール）及び抗黄体ホルモン（Ｉ）により補充された木炭−処理された血清において６日間、１回の培地交換を伴なって、増殖した。固定化及び結晶バイオレットによる続く染色に続いて、吸光度を記録し、そして値を、Ｒ．Ｂ． Ｌｉｃｈｔｎｅｒ， Ｊ． Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９９９， ７１： １８１−１８９に記載のようにして、処理されていない対照の吸光度に対して標準化した。ＴＵＮＥＬアッセイを、上記例５に類似して行う。但し、組織断片の代わりに、顕微鏡スライド上で培養される細胞をアッセイのために使用する。
【００５８】
結果：
このＴ４７Ｄ細胞系インビトロ試験においては、抗黄体ホルモン（Ｉ）は、１０−９〜１０−８モル／ｌほどの低い有効限界濃度で有能な腫瘍増殖阻害活性を示したが、ところが抗体ホルモンオナプリストンはいずれの阻害効果も示さなかった。純粋な抗エストロゲン１１β−フルオロ−７α−｛５−［Ｎ−メチル−Ｎ−３−（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルチオ）−プロピルアミノ］−ペンチル｝−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール（ＷＯ９８／０７７４０号）でさえ、抗黄体ホルモン（Ｉ）よりも明確に低い効果を有した（図６を参照のこと）。
【００５９】
結論：
本発明の抗黄体ホルモン（Ｉ）は、非常に低い濃度で、エストラジオール−刺激されたＴ４７Ｄ細胞増殖の完全な阻害を誘発し、そして従って、試験される他の抗黄体ホルモン、例えばオナプリストン及び純粋な抗エストロゲン１１β−フルオロ−７α−｛５−［Ｎ−メチル−Ｎ−３−（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルチオ）−プロピルアミノ］−ペンチル｝−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオールよりも、有能性及び効率性に関して、卓越する。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、対照、抗黄体ホルモンオナプリストン及び卵巣摘出に比較しての、ラットのＤＭＢＡ−誘発された乳癌における用量−応答研究における抗黄体ホルモン（Ｉ）によるアポトシスの誘発の結果としての腫瘍増殖阻害効果を示す。この研究は、０．５， ２．０， ５．０及び１０．０ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ． 用量（毎日）の抗黄体ホルモン（Ｉ）により行われた。
【図２】
図２は、対照及び卵巣摘出に比較しての、ラットのＮＭＵ−誘発された乳癌における抗黄体ホルモン（Ｉ）によるアポトシスの誘発の結果としての腫瘍増殖阻害効果を示す。この研究は、０．５及び１．０ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ． 用量（毎日）の抗黄体ホルモン（Ｉ）により行われた。
【図３】
図３は、対照及び卵巣摘出に比較しての、ｓｃｉｄマウスにおける異種移植されたヒトＴ４７Ｄ腫瘍に対するアポトシスの誘発及び従って、１０ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ． 用量の抗黄体ホルモン（Ｉ）の腫瘍増殖阻害効果を示す。
【図４】
図４は、対照及び卵巣摘出に比較しての、ｓｃｉｄマウスにおけるＭＣＦ−７ヒト乳癌モデルにおけるアポトシスの誘発及び従って、１０ｍｇ／ｋｇ， ｓ．ｃ． 用量の抗黄体ホルモン（Ｉ）の腫瘍増殖阻害効果を示す。
【図５】
図５Ａ〜５Ｆは、ラットにおけるＮＭＵ−誘発された乳癌モデルにおけるアポトシスの誘発に関する組織学的データを示す（図５を参照のこと）。特に、図５Ａは、抗黄体ホルモン（Ｉ）により処理された腫瘍が、対照（図５Ｂ）に比較して、通常分泌材料により満たされた管及び腺房形成を示すことを示す。図５Ｃは、低いＰＣＮＡ（増幅性細胞核抗原）免疫反応性を示す。抗黄体ホルモン（Ｉ）により処理されたＮＭＵ−誘発された乳がん組織（図５Ｄ）に比較しての、高いＰＣＮＡ免疫反応性有する未処理のＮＭＵ−誘発された乳癌組織を示す。図５Ｅは、対照（図５Ｅ）に比較しての、抗黄体ホルモン（Ｉ）−処理されたＮＭＵ−誘発された乳癌組織におけるアポトシスの出現を示す。
【図６】
図６は、抗黄体ホルモンオナプリストン及び純粋な抗エストロゲン１１β−フルオロ−７α−｛５−［Ｎ−メチル−Ｎ−３−（４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンチルチオ）−プロピルアミノ］−ペンチル｝−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，１７β−ジオール（ＷＯ９８／０７７４０号）に比較しての、１０−９〜１０−８モル／ｌの有効限界濃度でのＴ４７Ｄ乳癌細胞系（エストラジオールにより刺激された）における抗黄体ホルモン（Ｉ）の腫瘍増殖阻害効果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図６】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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