(57)【要約】本発明は、式（Ａ１）もしくは（Ａ２）の光学活性5-ヒドロキシ-3-ケトエステル、又はその互変異性体の１つの製造方法、また、それを式（Ｂ）の光学活性ジヒドロピロンを製造する際に使用すること、ならびに、こうして製造された式（Ｂ）のジヒドロピロンを出発化合物として医薬的に活性な化合物、特にチプラナビルの製造に使用することに関する。【化１】2006509020.tif 000016
2006509020.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ａ１もしくはＡ２で表される光学活性5-ヒドロキシ-3-ケトエステル又はその互変異性体の製造方法であって、
【化１】
2006509020.tif 000013
（式中、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ互いに独立して、水素又はC1-C8-アルキル、C3-C8-シクロアルキル、C6-C10-アリール及びC1-C8-アルキレン-C6-C10-アリールから選択される基であって、ヒドロキシ、ハロゲン、C1-C4-アルコキシ及びCF3から選択される１、２又は３個の置換基を有していてもよく、Ｒ1及びＲ2は同時に同じ基を意味することはなく、
Ｒ3は、C1-C8-アルキル、C1-C4-ハロアルキル、C6-C10-アリール-C1-C8-アルキレン及びトリヒドロカルビルシリルから選択される基をしめす。）
式Ａ：
【化２】
2006509020.tif 000014
（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は前記定義のとおりである。）
の5-ヒドロキシ-3-ケトエステルのラセミ混合物を、分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によりキラル担体物質上で２種の鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１及びＡ２に分割することを特徴とする方法。
【請求項２】
前記２つの分離した鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１及びＡ２が、それぞれ、少なくとも95％の光学異性体過剰率で得られる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ1及びＲ2がそれぞれ互いに独立して、メチル、エチル、プロピル、ブチル、フェニル、ベンジル、フェニルエチル及びフェニルプロピルから選択され、ヒドロキシ、フッ素、塩素、臭素、メトキシ、エトキシ及びCF3から選択される置換基を有していてもよい請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ3が、メチル、エチル、プロピル、ブチル及びベンジルから選択されることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ1が2-フェニルエチルを示し、かつ、Ｒ2がプロピルを示すか、あるいは、Ｒ1がプロピルを示し、かつ、Ｒ2が2-フェニルエチルを示す請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ3が、t-ブチル又はエチルを示す請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
Ｒ1が2-フェニルエチル、Ｒ2がプロピル、かつ、Ｒ3がエチル又はt-ブチルを示す請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
前記キラル担体物質として、化学的に変性した多糖を使用する請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記化学的に変性した多糖が、化学的に結合した１つ以上の光学活性基を含む多糖である請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記多糖が、デキストリン、シクロデキストリン、デンプン、アミロース及びセルロースから選択される請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
前記担体物質が、トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-アミロース、トリス[(S)-α-メチルベンジルカルバメート]-アミロース、トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-セルロース、トリス(4-安息香酸メチル)-セルロース、三酢酸セルロース、三安息香酸セルロース、トリス(フェニルカルバメート)-セルロース、トリス(4-クロロフェニルカルバメート)-セルロース、三ケイ皮酸セルロース及び三安息香酸セルロースから選択される請求項８〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記担体物質として、トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-アミロース又はトリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-セルロースを使用する請求項８〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記分取ＨＰＬＣが、擬似移動床（ＳＭＢ）クロマトグラフィー方式で用いられる請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項により製造される式Ａ１又はＡ２の光学活性5-ヒドロキシ-3-ケトエステルの、式Ｂで表される光学活性ジヒドロピロン又はその互変異性体の１つを製造するための使用であって、
【化３】
2006509020.tif 000015
（式中、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ互いに独立して、水素又はC1-C8-アルキル、C3-C8-シクロアルキル、C6-C10-アリール及びC1-C8-アルキレン-C6-C10-アリールから選択される基であって、ヒドロキシ、ハロゲン、C1-C4-アルコキシ及びCF3から選択される１、２又は３個の置換基を有していてもよく、Ｒ1及びＲ2は同時に同じ基を意味することはない。）
鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１又はＡ２の一方を、公知の方法によって環化して式Ｂで表される光学活性ジヒドロピロンを生成することを特徴とする使用。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項により製造される一般式Ａ１、Ａ２又はＢで表される化合物の、医薬的に活性な化合物を製造するための使用。
【請求項１６】
請求項１〜１４のいずれか１項により製造される一般式Ａ１又はＢの化合物であって、式中、Ｒ1が2-フェニルエチルを示し、かつ、Ｒ2がプロピルを示す化合物の、チプラナビルを製造するための使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、光学活性５−ヒドロキシ−３−ケトエステルの製造方法、該化合物の光学活性ジヒドロピロン製造への使用、及び、製薬上有効な化合物を製造するための出発化合物としてのジヒドロピロンの使用に関するものである。
（背景技術）
鏡像異性体同士は、その物性はわずかにしか変わらないが生理学的活性が実質的に異なるので、特定の用途では鏡像異性体をお互いに分離して得ることが基本的に重要である。これは医薬の分野では特に重大である。一方の鏡像異性体を他のキラル化合物との予知できない様々な相互作用に関らせることができるように、鏡像異性体の純度ができるだけ高い化合物を生成することが主要目的である。この目的のために、有効性の高い鏡像異性体の選択作用がある酵素等の特別なキラル触媒がNatureにより開発されてきた。これとは対照的に、分取化学（preparative chemistry）においては、光学純度の高い一方の異性体のみを高い収量で合成する立体的選択方法を提供する試みがなされている。これは特別な場合にしか達成され得ない。また別の可能性としては、生成された２つの鏡像異性体を分離できる手段による物理学的分離方法である。
鏡像異性体の分離方法としてよく用いられるものの１つが、いわゆるラセミ体の分割であって、両方の鏡像異性体の等量混合物を光学活性成分に分離させる方法である。鏡像異性体の分離で最も一般的な方法の１つが、ラセミ混合物の化学的な分割であり、鏡像異性体に分離されるラセミ酸を光学活性塩基と反応させて塩を形成するか、又は光学活性酸をラセミ塩基と反応させて塩を形成させる。この方法によると、異なる溶解性を基にしてそれぞれを分離することができるジアステレオ異性体が生成される。
【０００２】
このように、例えば米国特許第4661628号にはα−ナフチルプロピオン酸のラセミ混合物をβ−アミノアルコールを添加することによって分離させる方法が記載されているが、この方法によると、生成されたジアステレオマー異性体アミドは分別晶出で分離することができ、さらにその後加水分解することで光学活性酸に戻すことができる。２種の異性体のうち片方しか抗炎症作用を有していないので、上記の鏡像異性体の分離は必須である。この異性体については「ナプロキセン（Naproxen）」という名前で国際的に公知である。
また、ラセミ体の分割には既知の物理的方法も用いられている。ガスクロマトグラフィー、薄膜クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、液−液抽出又は液−液分配において、水素結合、配位子交換、金属もしくは電荷移動錯体の形成等の相互作用を用いて鏡像異性体を分離する。クロマトグラフィー法で鏡像異性体を分離するためには、光学活性吸着物質（absorbence）が通常用いられ、キラル固定相又は可動相が使用される。公知の例として、ラクトースによるトレガー塩基のラセミ体分割が挙げられる。
医薬分野では特定の化合物、即ち、所望の薬理学的及び毒理学的効果を有する化合物の鏡像異性体に関心があり、この分野では鏡像異性体の分離がきわめて重要である。例えば、5-ヒドロキシ-3-ケトエステルの鏡像異性体又はその鏡像異性体から得られる5,6-ジヒドロ-4-ヒドロキシ-2-ピロンは、数多くの医薬的に活性な化合物において重要な構造的成分であり、5,6-ジヒドロ-4-ヒドロキシ-2-ピロンスルホンアミド類は、非ペプチドＨＩＶプロテアーゼ阻害剤として使用されることから特に重要である。経口でバイオアベイラビリティーのある有効なＨＩＶプロテアーゼ阻害剤の範疇において、特に効果のあるものとして化合物チプラナビル（PNU-140690）が挙げられるが、これは以下の構造を有する。
【０００３】
【化１】
2006509020.tif 000003
【０００４】
この化合物及び他の構造上の類似化合物は、従来技術から公知である（例えば、J. Med. Chem. 1998, 41, 3467-3476頁参照）。
上記化合物及び構造的類似化合物の合成における主要工程は、下記図式１のごとく、5,6-ジヒドロ-4-ヒドロキシ-2-ピロン１を好適な置換カルボニル化合物２と反応させて縮合物３を生成させる工程である。
【０００５】
【化２】
2006509020.tif 000004
【０００６】
図式１
Ｒ1及びＲ2が表す様々な基の定義については、本発明の説明に記載されている。Ｒ及びＲ’基は様々であり、従来技術から明らかなように、該当する対象化合物の置換パターンによって決まる。
光学活性ジヒドロピロンの鏡像異性体の調製、製造方法の１つが従来技術から既知である。すなわち、WO 02/068404 A1にこの種の方法が記載されているが、この方法では、まず第一に、有機又は無機塩基の存在下で好適な置換カルボニル化合物をアセト酢酸誘導体と反応させて、5,6-ジヒドロ-4-ヒドロキシ-2-ピロンのラセミ混合物を生成させる。その後、得られたラセミ混合物をキラルアミノアルコールで塩に変換させるが、このアミノアルコールの選択によって、Ｒ−又はＳ−配置の所望の塩を結晶させることができ、残りの鏡像異性体の方は溶液中に残留する。
このように、本発明は、従来技術をさらに開発した方法として、一方の鏡像異性体純度を上げて、できるだけ技術的経費をかけずに空間／時間の歩留まりをあげて、１（Ｂ）を高収量で合成させる方法を提供する課題に基づくものである。また、本方法は、より大きな工業規模での使用に好適、即ち、安価であるために経済的に実行できる方法であるとよい。さらには、本発明によって提供された化合物１（Ｂ）は、前述の医薬的に活性な化合物の合成において中心的重要性を有するもので、出発化合物に包含されていたキラル情報を後続の１つ以上の反応過程で失うことなく、所望の特性が得られるように該キラル情報がいずれにしても保持されるとよい。
【０００７】
（発明の詳細な説明）
驚くべきことに、前記の本発明における課題が３工程プロセスによって解決できることがわかった。即ち、工程（１）で5-ヒドロキシケトエステルのラセミ混合物Ａを調製し、工程（２）で該ラセミ体をクロマトグラフィーによりキラル担体物質上で２種の鏡像異性体Ａ１及びＡ２に分離させ、最後に工程（３）で従来の環化を行って、所望のキラル5,6-ジヒドロ-4-ヒドロキシ-2-ピロンＢを得るものである。これを以下の図式２に示す。
【０００８】
【化３】
2006509020.tif 000005
【０００９】
図式２
本発明の範囲において、式１、Ａ１、Ａ２又はＢの化合物を言及する際は、光学活性体化合物を言及するものである。該光学活性体はＲ1及びＲ2基の定義から得られる。すでに前記で記載したように、ラセミ混合物は式Ａで示される。１又はＢについて言及する際は、互変異性体も含まれる。
したがって、本発明は式Ａ１もしくはＡ２で表される光学活性5-ヒドロキシ-3-ケトエステル又はその互変異性体の１つの製造方法に関するもので、
【００１０】
【化４】
2006509020.tif 000006
【００１１】
（式中、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ互いに独立して、水素又はC1-C8-アルキル、C3-C8-シクロアルキル、C6-C10-アリール及びC1-C8-アルキレン-C6-C10-アリールから選択される基であって、ヒドロキシ、ハロゲン、C1-C4-アルコキシ及びCF3から選択される１、２又は３個の置換基を有していてもよく、Ｒ1及びＲ2は同時に同じ基を意味することはなく、
Ｒ3は、C1-C8-アルキル、C1-C4-ハロアルキル、C6-C10-アリール-C1-C8-アルキレン及びトリヒドロカルビルシリルから選択される基をしめす。）
式Ａの5-ヒドロキシ-3-ケトエステルのラセミ混合物を、分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によりキラル担体物質上で２種の鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１及びＡ２に分離させることによるものである。
【００１２】
【化５】
2006509020.tif 000007
【００１３】
（式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は前記定義のとおりである。）
また、本発明は、こうして調製された鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１及びＡ２を、式Ｂで表される光学活性ジヒドロピロン又はその互変異性体の１つを製造するための使用に関するもので、
【００１４】
【化６】
2006509020.tif 000008
【００１５】
（式中、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ互いに独立して、水素又はC1-C8-アルキル、C3-C8-シクロアルキル、C6-C10-アリール及びC1-C8-アルキレン-C6-C10-アリールから選択される基であって、ヒドロキシ、ハロゲン、C1-C4-アルコキシ及びCF3から選択される１、２又は３個の置換基を有していてもよく、Ｒ1及びＲ2は同時に同じ基を意味することはない。）
公知の方法によって鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１又はＡ２の一方を環化することによって式Ｂで表される光学活性ジヒドロピロンを生成する。
本発明の好ましい実施形態によると、Ｒ1及びＲ2はそれぞれ互いに独立して、メチル、エチル、プロピル、ブチル、フェニル、ベンジル、フェニルエチル及びフェニルプロピルから選択され、ヒドロキシ、フッ素、塩素、臭素、メトキシ、エトキシ及びCF3から選択される基によって任意でモノ置換されていてもよいが、ただし、Ｒ1及びＲ2が同時に同じ定義を意味することはありえない。Ｒ1及びＲ2として特に好ましいのは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ベンジル、フェニルエチル及びフェニルプロピル基であり、なかでもプロピル及びフェニルエチルがとりわけ好ましい。本発明の特に好ましい実施形態によると、Ｒ1が2-フェニルエチルでＲ2がプロピルを示すか、あるいは、Ｒ1がプロピルでＲ2が2-フェニルエチルを示す。
Ｒ3基は、好ましくはメチル、エチル、プロピル、ブチル、ベンジル及びトリ-(C1-4-アルキル)-シリルから選択されるが、エチル及びt-ブチルが特に好ましい。最も好ましいのは、Ｒ1がフェニルエチル、Ｒ2がプロピル、かつ、Ｒ3がエチル又はt-ブチルを表す。
【００１６】
本発明において、アルキル基という用語は、他の基の一部としてのアルキル基も含め、特に指定のないかぎり、炭素原子１〜８、好ましくは１〜６、特に好ましくは１〜４個の分岐のアルキル基及び分岐していないアルキル基を指す。例えば、以下の炭化水素基、メチル、エチル、プロピル、1-メチルエチル（イソプロピル）、n-ブチル、2-メチルプロピル（イソブチル）、1-メチルプロピル（sec-ブチル）、1,1-ジメチルエチル（t-ブチル）が例として挙げられる。また、プロピル及びブチルの定義には異性体も含まれる。場合によって、上記のアルキル基については、メチルをMe、エチルをEt、プロピルをprop、またブチルをbutという一般的な短縮形として使用することもある。
本発明において、ハロアルキル基という用語は、他の基の一部としてのハロアルキル基の場合も、特に指定のないかぎり、少なくとも１個の水素原子がハロゲン原子に置換された、炭素原子１〜４個の分岐したハロアルキル基及び分岐していないハロアルキル基を指す。式：-(CH2)r-(CX2)s-Yで表されるハロアルキル基が好ましく、式中、ｒは0、1、2又は3を表し、ｓは1、2、3又は4を表し、(r + s)の合計が1、2、3又は4であり、Ｘはフッ素又は塩素を表し、ＹはＸ又はＨである。
以下のハロゲン化炭化水素基が例として挙げられる。トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、2,2,2-トリフルオロエチル、2,2,2-トリクロロエチル、2,2-ジクロロエチル、2-クロロエチル、ペンタフルオロエチル及び1,1,1-トリフルオロプロパ-2-イル。
【００１７】
本発明のシクロアルキル基は、炭素原子３〜８個を有する飽和環状炭化水素基を指す。炭素原子３〜６個の環状炭化水素が好ましい。例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルが挙げられる。
アルキルオキシは、任意でアルコキシとも呼ばれるが、本発明の範囲においては直鎖又は分岐のアルキル基が酸素原子と結合したもので、炭素原子１〜８個、好ましくは１〜６個、より好ましくは１〜４個を有する。メトキシ基が特に好ましい。
アリールという用語は、６〜１０個の炭素原子を有する芳香族環系を指す。好ましいアリール基としては、ナフチル及びフェニルであり、フェニルが特に好ましい。任意であるが、ナフチルはNaph、フェニルはPhと短縮形で表される。
本発明によるアリール‐アルキレン又はアルキレン‐アリールは、炭素数１〜８、好ましくは１〜６、より好ましくは１〜４個のアルキレン基を介して結合したアリール基を意味し、アルキレン基とアリール基には前述の定義が適用される。本発明における好ましいアルキレン‐アリール基は、特に指定がないかぎりベンジル、2-フェニル-エチル及び3-フェニルプロピルである。
本発明の範囲におけるハロゲンとは、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を指し、特に指定のない限りフッ素、塩素及び臭素が好ましい。
【００１８】
本発明の方法について、方法における３つの工程を参照しながら詳細に説明する。
工程（１）
式Ａで表される5-ヒドロキシ-3-ケトエステルのラセミ混合物の合成製造は、本発明によるとアルドール付加によって達成され、下記図式３で示される。
【００１９】
【化７】
2006509020.tif 000009
【００２０】
図式３
このためには、好適な置換カルボニル化合物４（式中、Ｒ1及びＲ2基は本願明細書前記の定義を示す）を、アセト酢酸誘導体５（式中、Ｒ3はC1-C8-アルキル、C1-C4-ハロアルキル、C6-C10-アリール-C1-C8-アルキレン及びトリヒドロカルビルシリルから選択される基を示す）と反応させて、ラセミ体Ａを得る。
この反応は有機又は無機の強塩基、好ましくは有機の強塩基の存在下で行われる。本発明のこの目的のための強塩基としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム及び水酸化カルシウム等の水酸化物、リチウムアミド又はナトリウムアミド等のアミド類、n-ブチルリチウム、t-ブチルリチウム又はフェニルリチウム等の有機金属化合物、ならびに、例えば、第二アミンのリチウム塩、ナトリウム塩及びカリウム塩等の第二アミンのアルカリ金属塩が挙げられる。この種の好ましい塩基としては、水酸化ナトリウム、n-ブチルリチウム、リチウムジイソプロピルアミン、リチウムジエチルアミン、リチウムヘキサメチルジシラザン、ナトリウムヘキサメチルジシラザン、カリウムヘキサメチルジシラザン又はリチウム-ターシャリーブトキシドから選択され、好ましくは、リチウムジイソプロピルアミン、リチウムジエチルアミン、リチウムヘキサメチルジシラザン、ナトリウムヘキサメチルジシラザン、カリウムヘキサメチルジシラザンであり、リチウムジイソプロピルアミン及びリチウムジエチルアミンが最も好ましい。これらの塩基類は市販品を利用してもよいし、この分野で既知の方法を用いて合成することもできる。
【００２１】
本発明の5-ヒドロキシ-3-ケトエステルのラセミ混合物Ａであって、鏡像異性体Ａ１及びＡ２を含む混合物を調製するために、上記の塩基のうちの１種を現場で生成させるか、又は直接使用して、好適な有機溶媒、好ましくは無水の有機溶媒中に投入する。使用する溶媒は、好ましくは、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、メチルエチルエーテル、ジエチルエーテル、t-ブチル-メチルエーテル（ＴＢＭＥ）、ジオキサン等のエーテル系溶媒、又は、トルエン、ヘキサンもしくはヘプタン等の他の非極性有機溶媒である。所望であれば、エーテル系溶媒を上記の非極性溶媒と併用してもよい。上記のエーテル系溶媒を用いることが好ましい。ＴＨＦ、ＴＢＭＥ及びヘキサンが特に重要な溶媒である。混合溶媒を用いる場合は、ＴＨＦ／ヘキサン又はＴＨＦ／トルエンが好ましい。
本発明の範囲において、特定の状況のもとでは複合させた共溶媒の存在下で上記の種類の有機塩基を使うことが有利になることがある。このような共溶媒としては、例えばヘキサメチルホスファミド（ＨＭＰＴ）、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エン（ＤＢＵ）及び1,5-ジアザビシクロ[4.3.0]ノナ-5-エン（ＤＢＮ）から選択される。
こうして得られる溶液を、好ましくは約30℃より低く、より好ましくは約０℃より低く、最も好ましくは-10℃より低く冷却する。本発明によると、反応は約20〜-70℃の範囲、特には約０〜-40℃の温度範囲で行うことがとりわけ好ましい。もしも、このような温度において上記溶媒のうちの１種がもはや液状の状態(liquid aggregate state)でいられない場合は、使用している溶媒の流動点又は融点によって可能な最低反応温度を決めるが、当業者にとっては明らかであろう。その後、アセト酢酸誘導体５（式中、Ｒ3は前記定義のとおり）を、上記の溶媒のうちの１種の中で、冷却した塩基溶液に添加する。
【００２２】
５を添加した後、混合物を一定の温度で約５分〜１時間攪拌する。上記溶媒のうちの１種、好ましくは塩基を溶解させた同じ有機溶媒に４を含む溶液をゆっくり滴下する。
１モルの使用する化合物５に対して、少なくとも約1.8モルの塩基を使用する。
５に対する塩基のモル比は約（1.8:1）〜（3:1）が好ましく、より好ましくは（1.9:1）〜（2.5:1）、特に好ましくは約2:1である。
導入する化合物４の１モルに対して、５は少なくとも約0.5モル使用する。
５に対する４のモル比は約（2:1）〜（1:5）が好ましく、より好ましくは（1:1）〜（1:2.5）、特に好ましくは約1:1.5である。
添加終了後、一定の温度又はすこしずつ加熱して攪拌を続ける。加熱するとしても、温度は約20℃より低く、好ましくは０℃より低く、より好ましくは約-10℃より低く保つ。本発明によると温度は約+20℃〜-78℃の範囲に調整することが最も好ましい。反応時間は、通常約0.5〜８時間、好ましくは約１〜５時間、より好ましくは約1.5〜３時間である。
この分野では公知の方法、例えば塩化アンモニウム水溶液等の水溶液を加えることによって、反応を終了させることができる。２つの相が形成される。水性相を分離させて取り除く。残った有機相から溶媒を真空下で留去する。従来技術で公知の方法とまさに同様にして、生成物を生成させる。
このようにして5-ヒドロキシ-3-ケトエステルのラセミ混合物Ａが得られる。
5-ヒドロキシ-3-ケトエステルのラセミ混合物Ａは、ドイツ特許DE 10108471C1に準じて、とりわけ好ましい別の方法で調製することもできる。この開示、なかでも実施例１の開示は引用により本願明細書の記載に含まれるが、アセト酢酸エステル５のジアニオン５’をケトン４とマイクロリアクターで反応させて調製すればよい。
【００２３】
【化８】
2006509020.tif 000010
【００２４】
（式中、Metはそれぞれ独立してアルカリ金属を示す。）
工程（２）
本発明の方法により、工程１で得たラセミ混合物Ａを、キラル担体物質を用いた分取ＨＰＬＣで、２種の鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１とＡ２に実質的に定量の収率で分離する。
使用するＨＰＬＣシステム（高速液体クロマトグラフィーシステム）は公知の装置でよい。このような装置には溶離液を供給する少なくとも１つのポンプと、試料伝達系と、少なくとも１本の分離カラムと、ＵＶ検出器等の検出器と、記録系とを備えている。現在では、この種の分離システムは最適なソフトウェアを有するコンピュータ装置で制御され、バルブを開閉させたり、ポンプを始動、終了させたり、センサーの読み取りを行わせたりする。パラメータをセットしたり監視するだけでなく、保持時間（定性的測定）やピーク面積（定量的測定）に関する評価も適当なソフトウェアを使用して行うことが多い。このように、高度な精度が要求される連続的な分析にはＨＰＬＣ技術が最適である。
カラムは、通常内径が約１mm〜３ｍ、好ましくは50mm〜1.5m、長さが約１cm〜10mであり、鋼製又は耐圧ガラス製で、固定相が充填されている。
本発明による方法の工程（２）に応じてＨＰＬＣシステムを使用する場合は、約20cm〜150cm、好ましくは30cm〜120cm、特に好ましくは約35cm〜約100cmのカラム内径を採用し、固定相としてのキラル担体物質の使用が必要不可欠である。本発明で使用されるキラル担体物質は、光学活性体になるように化学的に化工された多糖を基準とする。この１例として挙げられるのは、１種以上の光学活性基を基本的多糖構造に結合させることによるものである。とりわけ、多糖がデキストリン、シクロデキストリン、デンプン、アミロース及びセルロースから選択されることが好ましい。
【００２５】
そこで、好適に使用されるキラル担体物質としては、トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-アミロース、トリス[(S)-α-メチルベンジルカルバメート]-アミロース、トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-セルロース、トリス(4-安息香酸メチル)-セルロース、三酢酸セルロース、三安息香酸セルロース、トリス(フェニルカルバメート)-セルロース、トリス(4-クロロフェニルカルバメート)-セルロース、三ケイ皮酸セルロース及び三安息香酸セルロースが挙げられるが、このなかでもトリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-アミロース及びトリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-セルロースが最も推奨される。
本発明で使用されるキラル担体物質によって、ラセミ体を２種の鏡像異性体に実質的に定量に分離することが可能となり、鏡像体過剰率が少なくとも95％より多く、好ましくは96〜100％、特に好ましくは98.2〜99.9％の高光学純度でキラル生成物を得ることができる。さらに、担体物質は、高品質を保ちながら長期間使用でき、例えば数ヶ月にわたってＨＰＬＣ装置における分離に用いることができると同時に、連続操作装置で容易に使用することができるという特徴を有する。
【００２６】
使用される移動相（溶離剤又はフロー剤）は１種の溶媒又は溶媒の混合物である。本発明によると、移動相として極性又は非極性溶媒が使用できる。好適な有機溶媒としては、例えば、アセトニトリル、プロピオニトリル、ブチロニトリル、塩化メチレン、クロロホルム、ヘキサン、イソへキサン、ヘプタン、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸n-ブチル、t-ブチルメチルエーテル、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノール、ブタノール、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸n-ブチル及び水、ならびにこれらの混合物が挙げられるが、定組成系、即ち、溶離液が１種のみ使用される装置においては、エタノール、メタノール、ブタノール及びイソヘキサンが特に有利であることがわかっている。少なくとも２種の溶媒の混合物を使用することがとりわけ好ましいが、その場合、極性溶媒を非極性溶媒と混合することが好ましい。例えば、イソヘキサン及び／又はn-ヘキサン／エタノール、イソヘキサン及び／又はn-ヘキサン／メタノール、ならびにイソヘプタン及び／又はn-ヘプタン／ブタノールが挙げられる。非極性溶媒に対する極性溶媒の割合は、分離すべき基質の極性とカラム材料によって決まるが、通常約1:100(v/v)〜約100:1(v/v)、好ましくは、約10:90(v/v)〜約90:10(v/v)の範囲である。
トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-アミロースを溶離剤のメタノールと併用すること、及び、トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-セルロースを溶離剤のイソヘキサン／エタノール又はイソヘキサン／ブタノールと併用することが特に好ましい。
ＨＰＬＣシステムにおける他のパラメータ、例えば、流量、使用する量、温度、圧力等は、分離を行う個々のラセミ体によって決められる。標準的な当業者であれば、参考のためのいくつかのテストを用いてこれらのパラメータを求めることができ、個々の場合に応じた調整及び最適化ができる。
【００２７】
本発明の工程（２）におけるクロマトグラフィーの工程は、不連続に行っても連続的におこなってもよいが、連続的に行う方が経済的な理由から好ましい。ＨＰＬＣシステムを部分的に変えたもの、例えばＳＭＢクロマトグラフィー（擬似移動床クロマトグラフィー）の技術を利用することもできる。これは、この分野では公知の概念であり、固定相と移動相の間に連続的な向流(counter flow)をシミュレートするものであるが、この方法によると比較的短い操作時間で効率的に分離することができる。数本のカラムを１本ずつ後ろへ後ろへと配置して使用され、カラムの長さは比較的短く、比較的小さな粒子が充填されており、個々のカラム間での切り替え時間が短い。材料は連続的に供給され、２種の生成物の流れに分けて分離が行われる。この種のシステムの原理の詳細部分については、この分野では既知であり、さらなる説明の必要はない。
単に例示する目的にすぎないが、ＳＭＢシステムの実行可能な構造について図１を参照しながら説明する。
ＳＭＢシステムは４つのゾーン（Ｉ〜IV）に分かれており、８本のカラム（１〜８）が用いられ、１つのゾーンはいずれも２本のカラムで画定される。ゾーン１は、溶離剤（溶媒、移動相）が添加されてから抽出物が排出されるまでのＳＭＢセクションである。ゾーンIIは、抽出物の排出後から材料の投入（分離させる材料の添加）までである。ゾーンIIIは、材料の投入から精製された生成物が排出されるまで、ゾーンIVは、精製された生成物の排出後から、溶離剤の投入までの範囲となる。こうして、溶出液はゾーンＩからゾーンIVまで流れる。精製された生成物とは所望の鏡像異性体であり、一方、抽出物とは他方の鏡像異性体である。
【００２８】
ゾーンＩにおける流量は、移動相がゾーンIIに確実に進めるように十分大きくするのに対し、ゾーンIVの流量は精製された生成物が取り出されるように小さく設定されているとよい。
分離に関する個々の問題に応じて、送り回数（サイクル数）を修正し、同様に、ＳＭＢシステムの４つのゾーンにおける流量（ml/分）、即ち、供給や排出の流量（溶離剤、抽出物、材料及び精製した生成物）であって全体としてシステムの平均流量（ml/分）となる流量、分離する混合物の濃度（g/lの材料）、１サイクルの操作時間（分）、分離時における最高圧力（bar）、固定相及び移動相の量と特性を修正する。鏡像異性体を可能な限り高純度で得られるように上記のパラメータを調整することは、当業者であれば容易に可能である。
本発明によると、以下に限定はされないが、ＳＭＢシステムの条件を以下の範囲に設定することがとりわけ有利である。
カラム数：        約2〜10本
カラム内径：      約0.1〜300cm
カラム長：        約1cm〜10,000cm
キラル固定相：    粒径約3〜50μmのキラル担体材料
移動相：          単一溶媒又は溶媒混合物
平均流量：        約0.1〜10,000ml/分
ＵＶ−検出：      約200〜300nm
温度：            約20〜60℃
測定圧力：        約10〜50bar
装置の生産能力は、例えば、鏡像異性体（g）／日／キラル固定相（kg）で得られる。
こうした構造を有するＳＭＢ装置があれば、本発明の方法における工程（２）でラセミ混合物Ａを２種の鏡像異性体Ａ１とＡ２に分離させ、いずれの場合において、所望の鏡像異性体の鏡像体純度を鏡像体過剰率で少なくとも98％、好ましくは少なくとも99％、より好ましくは99.5％以上とすることが可能である。
【００２９】
工程（３）
鏡像異性体の分離後、鏡像異性体5-ヒドロキシ-3-ケトエステルＡ１又はＡ２の一方を、図式４にしたがって公知の方法を用いて環化させて、式Ｂで表される光学活性ジヒドロピロンが得られる。
【００３０】
【化９】
2006509020.tif 000011
【００３１】
図式４
これは分子内エステル交換であり、わずかに酸性又はアルカリ性を示す溶液中で通常行われるラクトンの形成である。Ｒ3が直鎖のアルキル、ハロアルキル又はベンジルを示す場合は、アルカリ溶液を主として用いる。使用できる塩基類としては、例えば、アルカリ金属及び／又はアルカリ土類金属水酸化物、アルカリ金属及び／又はアルカリ土類金属炭酸塩、及びアンモニアが挙げられる。
Ｒ3が分岐アルキル又はトリヒドロカルビルシリルを示す場合は、酸が主として用いられる。好適な酸は、例えばフッ化水素酸、塩化水素酸、臭化水素、硫酸又は燐酸等の無機のブレーンステッド酸、例えば三フッ化ホウ素又は塩化アルミニウム等のルイス酸、ならびに、例えばトリフルオロ酢酸、p-トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸及びクエン酸等の有機酸である。溶媒としては、メタノール、エタノール又はプロパノール等のアルコール、ＴＨＦ、ジオキサン、ＴＢＭＥ又はジエチルエーテル等のエーテル、ヘキサン、トルエン、ジクロロメタン又はテトラクロロメタン等の炭化水素化合物で任意でハロゲン化されていてもよいもの、及び、水、又は上記溶媒の混合物が適している。
【００３２】
反応を実行させるには該当の酸又は塩基を添加するだけで、添加後は、好ましくは周囲温度で、必要な反応時間にわたり放置するが、例えば、反応混合物を好適な時間にわたって、任意で攪拌しながら放置する。混合物が公知の方法で生成される。
これは当業者にはよく知られた反応であるので、これ以上の詳細な説明は不要であるが、分取に関する実施例において説明する。
このように、本発明の方法を用いることで、これまで得ることが非常に難しかった鏡像異性体を簡単な方法で得ることができるようになり、卓越した費用便益比で大々的な工業規模で実行することができる。また、本発明にしたがって開発された方法によれば、所望の生成物が高い収率で得られるだけでなく、非常に高い鏡像異性体純度で得ることができるので、生成物をさらに首尾よく処理して医薬品としての重要なカテゴリーを形成することができる。
光学活性ジヒドロピロンは、製薬学的に有効な光学活性化合物の合成における出発化合物としてその主要な重要性があることから、本発明におけるもう１つの態様は、医薬的に活性な化合物を調製することへの一般式Ａ、Ａ１又はＡ２の化合物の使用に関するものである。好ましくは、本発明は、チプラナビルを調製するために式Ａ１又はＢで表される化合物（式中、Ｒ1は2-フェニルエチルを示し、Ｒ2はプロピルを示す）を使用することに関する。
【００３３】
本発明によって得られる有利な点は多種多様である。本発明の方法によって、いままで製造が比較的困難であった鏡像異性体を、卓越した生産性をもって大々的に工業規模で製造する簡易な方法が提供される。本発明の方法によれば、所望の生成物を高収率で得られるだけでなく、いずれの複雑な立体選択合成を行う必要もなく、容易に得られるラセミ混合物を介して処理することで非常に高い鏡像異性体純度で所望の生成物を得ることができる。本方法における個々の工程間に精製工程を加える必要はなく、得られた状態のままで生成物を直接次に供することができる。工程（２）では標準的なＨＰＬＣ装置を使うことができ、クロマトグラフィーによる分離を連続的又は不連続的に行えばよい。また、ＳＭＢクロマトグラフィーのような変形した方法を用いることもでき、クロマトグラフィーによる分離においてさらに良好な結果が得られる。驚くべきことに、ラセミ混合物から始めることで、所望の鏡像異性体が約99.5％過剰の鏡像体過剰率となるように２種の鏡像異性体に分離することができ、工業規模で行えるばかりか、大々的な工業プラントで所望の規模で行うことができる。
このようにして、重要な医薬物質のカテゴリーである非ペプチドＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、例えばチプラナビルを得ることができるが、これは、本発明の技術的思想が医薬の分野にとって価値のある重要なものであることを意味している。
以下、本発明を実施例により説明するが、これらの実施例は本発明の思想を限定するものではない。本発明の開示の範囲において、当業者であればさらなる実施形態は明らかであろう。
【００３４】
実施例１：
5-ヒドロキシ-5-(2-フェニルエチル)-3-オキソオクタン酸エチルのラセミ混合物（１）を以下のようにして調製した。
260ml(2.5mol)のジエチルアミンと500mlのテトラヒドロフランとを含む混合物を周囲温度にて窒素雰囲気下に用意した。この混合物を内部温度が-30℃になるまで冷却した。ここで、1.000ml(2.5mol)のn-ブチルリチウムを含むn-ヘキサンを滴下した。できた混合物を15分間攪拌し、158ml(1.25mol)のアセトアセテートを添加した。さらに10分間攪拌した後、150g(0.85mol)の1-フェニル-3-ヘキサノンと100mlのTHFの混合物を滴下した。さらに、-30℃で混合物を２時間攪拌した。反応溶液を1300mlの飽和NH4Cl溶液に加えた。水性相を分離して取り除き、有機相を500mlの飽和NH4Cl溶液と約300mlの2N塩酸と一緒に一回振盪にかけた。水性相を分離して取り除き、有機相を300mlの飽和NaHCO3溶液と一緒に一回振盪にかけた。有機相を再度分取して、真空化で蒸発させて濃縮させた。
収量：296g (> 理論値の100%; 理論値 = 260.4g)、NMR: 純度80%、MS: MH+ = 307、(M-H)- = 305
実施例２
5-ヒドロキシ-5-(2-フェニルエチル)-3-オキソオクタン酸t-ブチルのラセミ混合物（２）を以下のようにして調製した。
260ml(2.5mol)のジエチルアミンと、150ml(1.25mol)の1,3-ジメチルテトラヒドロ-2(1H)-ピリミドン(DMPU)と、500mlのTHFとの混合物を窒素雰囲気下で調製した。この混合物を内部温度が-15℃になるまで冷却し、-15℃〜-10℃で1.000ml(2.5mol)のn-ブチルリチウムを含むn-ヘキサンを滴下した。その後、同じ温度で207ml(1.25mol)のアセト酢酸t-ブチルを１時間以内で滴下した。150ml(0.85mol)の1-フェニル-3-ヘキサノン溶液と100mlのテトラヒドロフランとを１時間以内で滴下し、混合物を30分間攪拌した。さらに、冷却した反応溶液を3.000mlの飽和重炭酸ナトリウム溶液に添加し、上部の有機相を分取した。水性相は廃棄し、有機相を再度3.000mlの2N塩酸と3.000mlの水で順次抽出した。さらに、真空下で蒸発乾固させた。
NMR: 純度88%
【００３５】
実施例３
実施例１の5-ヒドロキシ-3-ケトエチルエステルのラセミ混合物（１）をＳＭＢシステムを使って２種の鏡像異性体に分割した。ＳＭＢシステムには、内径1cmで長さが10cmのカラムが８本収容されていた。以下の条件下でカラムを充填させた。
キラル固定相:  「Chiralpak（キラルパック）（登録商標）AD」（トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-アミロース）
溶媒:  イソプロパノール
圧力:  300bar
さらに、カラムを移動相のメタノールで平衡化させて、下記の条件下で試験を行った。
試料:  10μl、トレガー塩基(1g/l)及びTTBB(1,3,5,-トリ-t-ブチルベンゼン97%) (0.7g/l)
流量:  4ml/分
圧力:  28bar
UV-検出:  250nm
T℃:  25℃
システムにおける平均流量は279.3ml/分で、圧力35barsをシステム内で測定した。
それぞれの値を示す。流量ゾーン1 = 13.00ml/分、流量抽出物 = 3.9ml/分、流量ゾーンII = 9.10ml/分、流量供給材料 = 0.12ml/分、流量ゾーン III = 9.22ml/分、流量精製生成物 = 1.14ml/分、流量ゾーンIV = 8.08ml/分、供給材料 = 100g/l、ΔT（測定最高温度）= 80
所望の鏡像異性体は鏡像体過剰率99.40%（精製物）の純度で得た。もう一方の鏡像異性体は純度が鏡像体過剰率96.70%（抽出物）で単離された。
【００３６】
実施例４
実施例１の5-ヒドロキシ-3-ケトエチルエステルのラセミ混合物（１）をＳＭＢシステムを使って２種の鏡像異性体に分割した。ＳＭＢシステムには、内径1cmで長さが10cmのカラムが８本収容されていた。以下の条件下でカラムを充填させた。
キラル固定相:  「Chiralcel（キラルセル）（登録商標）OD」（トリス(3,5-ジメチルフェニルカルバメート)-アミロース）
溶媒:  イソプロパノール
圧力:  300bar
その後、カラムを移動相のイソヘキサン／イソプロパノール（90/10）で平衡化させて、下記の条件下で試験を行った。
試料:  10μl、TSO(トリメプラジンスルホキシド）(2g/l) + TTBB (1g/l)
流量:  4ml/分
圧力:  21bar
UV-検出:  250nm
T℃:  25℃
さらにすべての試料を下記の条件下で分析した。
移動相：  イソヘキサン／エタノール（98/2）
担体：  「Chiralcel（キラルセル）（登録商標）OD」(10μm 250*4.6mm)
流量：  0.5ml/分
UV-検出：  220nm
試料注入量：  10μl
T℃：  25℃
測定した圧力は23barだった。
それぞれの値を示す。流量ゾーン1 = 18.67ml/分、流量抽出物 = 11ml/分、流量ゾーンII = 7.67ml/分、流量供給材料 = 0.11ml/分、流量ゾーン III = 7.78ml/分、流量精製生成物 = 1.65ml/分、流量ゾーンIV = 6.13ml/分、供給材料 = 100g/l、ΔT = 203.5
カラムがオーバーロードしないように、供給材料の流量を50％以下で開始した。
所望の鏡像異性体は鏡像体過剰率99.64%（精製物）の純度で得られた。もう一方の鏡像異性体は純度が鏡像体過剰率99.15%（抽出物）で単離された。
【００３７】
実施例５
実施例１の5-ヒドロキシ-3-ケトエチルエステルのラセミ混合物（１）をＳＭＢシステムを使って２種の鏡像異性体に分割した。ＳＭＢシステムには、内径1cmで長さが10cmのカラムが８本収容されていた。以下の条件下でカラムを充填させた。
キラル固定相:  「Chiralcel（キラルセル）（登録商標）OD」
溶媒:  イソプロパノール
圧力:  300bar
その後、実施例４のようにしてカラムの試験を行った。
試料:  10μl、TSO（2g/l）+ TTBB（1g/l）
流量:  4ml/分
圧力:  21bar
UV-検出:  250nm
T℃:  25℃
すべての試料を下記の条件下で分析した。
移動相：  イソヘキサン／ブタン-1-オール（90/10）
担体：  「Chiralcel（キラルセル）（登録商標）OD」(10μm 250*4.6mm)
流量：  1ml/分
UV-検出：  220nm
試料注入量：  10μl
T℃：  25℃
カラムがオーバーロードしないように、供給材料の流量を下げて開始した。初期の条件の下では圧力は約15barだった。圧力が約21barとなるようにそれぞれの流量を上げた。
それぞれの値を示す。流量ゾーン1 = 19ml/分、流量抽出物 = 10.50ml/分、流量ゾーンII = 8.50ml/分、流量供給材料 = 0.09ml/分、流量ゾーン III = 8.59ml/分、流量精製生成物 = 2ml/分、流量ゾーンIV = 6.59ml/分、供給材料 = 100g/l、ΔT = 121.2、ΔP （測定された最大圧力）= 23
所望の鏡像異性体は鏡像体過剰率99.79%（精製物）の純度で得られた。もう一方の鏡像異性体は純度が鏡像体過剰率99.39%（抽出物）で単離できた。
【００３８】
実施例６
実施例２の5-ヒドロキシ-3-ケト-t-ブチルエステルのラセミ混合物（２）をＳＭＢシステムを使って２種の鏡像異性体に分割した。ＳＭＢシステムには、内径4.8mmで長さが10cmのカラムが８本収容されていた。以下の条件下でカラムを充填させた。
キラル固定相:  「Chiralpak（キラルパック）（登録商標）OD」粒径20μm
溶媒:  イソプロパノール
圧力:  300bar
その後、カラムを移動相のイソプロパノールで洗い流し、下記の条件下で試験を行った。
試料:  TSO(約3g/l) + TTBB (0.5g/l)を含むイソヘキサン／イソプロパノール(90/10)溶液、10μlを注入。
流量:  4ml/分
UV-検出:  250nm
T℃:  25℃
すべての試料を下記の条件下で分析した。
移動相：  イソヘキサン／エタノール（95/5）
担体：  「Chiralcel（キラルセル）（登録商標）OD」(10μm 250*4.6mm)
T℃：  25℃
内径4.8mm、長さ10cmの８本のカラムを備え、キラル固定相800g、供給材料の濃度90g/lのＳＭＢシステムでのパラメータは、以下のとおりであった。
【００３９】
【表１】
2006509020.tif 000012
【００４０】
結果、所望の鏡像異性体の方は鏡像体過剰率98.44%（精製物）の純度で得られた。他方の鏡像異性体は純度が鏡像体過剰率99.36%（抽出物）で単離された。
実施例７
実施例３〜５で得られた5-ヒドロキシ-5-(2-フェニルエチル)-3-オキソオクタン酸エチル（１）の所望の鏡像異性体を以下のようにして環化させた。
294g(0.864mol)のキラルケトエステル（１）を、周囲温度で112g(1.7mol)のKOH(85%)と600mlのメタノールを含む混合物と混ぜ合わせた。この混合物を周囲温度で一晩攪拌した。その後、メタノールを留去し、残渣を600mlの水に投入した。300mlのトルエンで２度抽出させ、水性相を新たな500mlのトルエンと混合し、290mlの30%H2SO4を用いてｐＨ値を２未満に調整した。生成物はトルエン相に移動した。酸性の水性相を300mlのトルエンで２度抽出させた。トルエン相を合わせて、逆に300mlの水で３回洗浄し、トルエンを真空下で留去した。
収量：192g（理論値の85.4%）
その後、残渣を580mlのトルエンに溶解させ、385mlのn-オクタンを滴下した。混合物を周囲温度で一晩攪拌し、吸引濾過を行い600mlのn-オクタン／トルエン（1:1）で洗浄した。これを30℃で一晩乾燥させた。
収量：156g（理論値の69.4%）  融点：99〜100℃
【００４１】
実施例８
実施例６で得られた5-ヒドロキシ-5-(2-フェニルエチル)-3-オキソオクタン酸t-ブチルの所望の鏡像異性体を以下のようにして環化させた。
3.3g(0.01mol)のキラルケトエステル（２）を15mlのトリフルオロ酢酸に投入し、周囲温度で一晩放置した。その後、余分なトリフルオロ酢酸を留去し、残渣を12mlのトルエンに投入した。そこに8mlのn-オクタンを添加し、混合物を一晩攪拌した。油状物を析出させ、上澄みの溶媒分をデカンテーションにより取り除いた。残渣を6mlのトルエンに溶解させ、4mlのn-オクタンを混合物が濁るまで添加した。種結晶を少量加え、混合物を一晩攪拌したところ、その間に結晶が析出した。それらを吸引濾過し、5mlのn-オクタン／トルエン（1:1）で洗浄し、真空下35℃で乾燥させた。
【図面の簡単な説明】
【００４２】
【図１】本発明の方法を実行するのに好適に使用することができるＳＭＢ（擬似移動床）システムの構造を模式的に示すものである。
【図１】
2006509020.tif 000017
【国際調査報告】
2006509020.tif 000018
2006509020.tif 000019
2006509020.tif 000020
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2006509020.tif 000023
2006509020.tif 000024
2006509020.tif 000025
2006509020.tif 000026
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