(57)【要約】本発明は、癌治療用のタクソールをベースとするリポソーム組成物に関し、その組成物が実質的に以下の物質：パクリタクセル２〜５重量部，ホスファチド２０〜２００重量部，コレステロール２〜３０重量部，アミノ酸０．３〜４重量部，凍結乾燥賦型剤１０〜７５重量部からなる。本発明の製剤は、ポリオキシエチル化ひまし油を含まず、毒性のある高価なアジュバントを、毒性のない媒体と入手が容易なアジュバントに代替し、工業的に製造できる。本製品は、患者には毒性が低く良好な許容度、さらに良好な水溶解性とより良い安定性などの利点を有している。【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成が実質的に以下の物質：
パクリタクセル２〜５重量部，ホスファチド２０〜２００重量部，コレステロール２〜３０重量部，アミノ酸０．３〜４重量部，凍結乾燥賦型剤１０〜７５重量部
からなることを特徴とする、癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物。
【請求項２】
前記組成が実質的に以下の物質：
パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド４０〜１６０重量部，コレステロール５〜２５重量部，アミノ酸０．８〜３重量部，凍結乾燥賦型剤２０〜６５重量部
からなることを特徴とする、請求項１に記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物。
【請求項３】
前記組成が実質的に以下の物質：
パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド６０〜１２０重量部，コレステロール８〜２０重量部，アミノ酸１．０〜２重量部，凍結乾燥賦型剤３０〜６０重量部
からなることを特徴とする、請求項１に記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物。
【請求項４】
前記組成物がポリオキシエチル化ひまし油を含まないことを特徴とする、請求項１〜３のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物。
【請求項５】
前記凍結乾燥賦型剤が、マンニトール、スクロース、グルコースまたはラクトースであることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物。
【請求項６】
前記アミノ酸が、リジン、スレオニンまたはメチオニンであることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物。
【請求項７】
前記ホスファチドが、注射用の卵黄レシチンまたは大豆レシチンであることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物。
【請求項８】
組成が実質的に以下の物質：
パクリタクセル２〜５重量部，ホスファチド２０〜２００重量部，コレステロール２〜３０重量部，アミノ酸０．３〜４重量部，凍結乾燥賦型剤１０〜７５重量部
からなるパクリタクセル・リポソーム調製物を、
パクリタクセル、ホスファチド、コレステロールを上記の割合で、イソプロパノールまたはエタノールに連続して撹拌しながら溶解することにより清澄溶液を得て、次いで該溶液を温度５０〜６０℃の恒温水槽に置き、ロータリーエバポレーターで減圧下、溶媒を除去すると膜が形成され、そこへ上記の割合で溶かしたアミノ酸および凍結乾燥賦型剤の水溶液を導入し、次いで水和、超音波処理もしくは均質化を行うことにより、０．１μｍより大きいリポソームを得て、滅菌ろ過して得たものを容器に収め、凍結乾燥した後に窒素、ヘリウムまたはアルゴンを通気して得る
ことを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法。
【請求項９】
組成が実質的に以下の物質：
パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド４０〜１６０重量部，コレステロール５〜２５重量部，アミノ酸０．８〜３重量部，凍結乾燥賦型剤２０〜６５重量部
からなるパクリタクセル・リポソーム調製物を、
パクリタクセル、ホスファチド、コレステロールを上記割合で、イソプロパノールまたはエタノールに連続して撹拌しながら溶解することにより清澄溶液を得て、次いで該溶液を温度５０〜６０℃の恒温水槽に置き、ロータリーエバポレーターで減圧下、溶媒を除去すると膜が形成され、そこへ上記の割合で溶かしたアミノ酸および凍結乾燥賦型剤の水溶液を導入し、次いで水和、超音波処理もしくは均質化を行い、滅菌ろ過して得たものを容器に収め、凍結乾燥した後に窒素、ヘリウムまたはアルゴンを通気して得る
ことを特徴とすることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法。
【請求項１０】
組成が実質的に以下の物質：
パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド６０〜１２０重量部，コレステロール８〜２０重量部，アミノ酸１．０〜２重量部，凍結乾燥賦型剤３０〜６０重量部
からなるパクリタクセル・リポソーム調製物を、
パクリタクセル、ホスファチド、コレステロールを上記割合で、イソプロパノールまたはエタノールに連続して撹拌しながら溶解することにより清澄溶液を得て、次いで該溶液を温度５０〜６０℃の恒温水槽に置き、ロータリーエバポレーターで減圧下、溶媒を除去すると膜が形成され、そこへ上記の割合で溶かしたアミノ酸および凍結乾燥賦型剤の水溶液を導入し、次いで水和、超音波処理もしくは均質化を行い、滅菌ろ過して得たものを容器に収め、凍結乾燥した後に窒素、ヘリウムまたはアルゴンを通気して得る
ことを特徴とすることを特徴とする、請求項１〜４のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法。
【請求項１１】
前記凍結乾燥賦型剤が、マンニトール、スクロース、グルコースまたはラクトースであることを特徴とすることを特徴とする、請求項８〜１０のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法。
【請求項１２】
前記アミノ酸が、リジン、スレオニンまたはメチオニンであることを特徴とすることを特徴とする、請求項８〜１０のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法。
【請求項１３】
前記ホスファチドが、注射用の卵黄レシチンまたは大豆レシチンであることを特徴とする、請求項８〜１０のいずれかに記載の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の技術分野】
本発明は、癌治療用製薬組成物に関し、特に癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物およびその製造方法に関する。
【０００２】
【発明の技術的背景】
パクリタクセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）は、米国の国立がん研究所により、１９６０年代に何千もの植物をスクリーニングすることにより見出された抗癌物質である。これは一般には、卵巣腫、乳がん、非微小細胞性肺癌の治療に使用されている。パクリタクセルは、水および多くの公定溶媒に難溶であるために、現在、国内および海外市場で提供されているパクリタクセル注射液は、ポリオキシエチル化ひまし油および無水エタノールの混成溶剤（ｃｏｍｐｌｅｘ ｄｉｓｓｏｌｖｅｎｔ）を用いて調製されていた。この混成溶剤のポリオキシエチル化ひまし油は、体内で分解されるとヒスタミンを遊離することになり、深刻な過アルルギー反応／超過敏性を引き起こすかもしれない。
【０００３】
パクリタクセル注射液（商標名はタクソール（Ｔａｘｏｌ））は、中国ではブリストル−マイヤーズ  スクイブ社（米国）により登録され、その製品添付文書には、「タクソールを投与されるすべての患者には、重篤な過アレルギー反応の発生を防止するために、予め（デキサメタゾンなどの）コルチコステロイド、ジフェンヒドラミンおよび（シメチジン、ラニチジンといった）Ｈ２受容体アンタゴニストを与えるべきである。」と注意喚起されている。さらに、「注射前に生理食塩水または５％グルコースで希釈すると（晶出）沈殿が生じる可能性もある。そこで、投与の安全を確保するために０．２２μｍのミリポアフィルターでろ過することが必要である。」とも記載されていた。パクリタクセル自体は、血液毒性、骨髄抑圧、白血球減少症、血小板減少症、貧血などの毒性も示す。したがって、その溶解性を増し、安定性および臨床適合性を向上し、上記の混成溶剤によりもたらされるアレルギー反応や他の有害な副作用を回避すべく、パクリタクセルの剤型の変更が早急に求められている。
【０００４】
１９９０年代初頭そして最近の前臨床医学研究においてパクリタクセル・リポソームの基礎研究から実用的進歩が達成された。実験から、パクリタクセル・リポソームは、該パクリタクセル注射液製品と比較して、減少した毒性および改善された許容性とともに、変わらない治療効果を有することが示された。Ｓｈａｒｍａ  Ａは、単一種レシチンからなるパクリタクセル・リポソーム（コード名称ＥＴＬ）よりも良好な安定性を有する３種の合成ホスファチドからなるパクリタクセル・リポソーム（コード名称ＴＴＬ）を報告している（Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ １９９７，７１，１０３−１０７）。しかしながら、上記２つの調製物の間にどれほど安定性の相違があるのか開示しなかった。ＥＴＬ調製物は、水に溶解してから２４時間、安定性を維持したこと並びに使用した溶媒がベンゼンもしくはブタノールであったことを言及しただけだった。ベンゼンは溶媒として使用すると随分と毒性がある。
【０００５】
米国特許 ５，４１５，８６９（１９９５年）には、単一種レシチンからなるパクリタクセル・リポソームでは、凝集が起こることが記載されていた。このため正荷電の成分、またはホスファチジルグリセロール（ＰＧ）といった負荷電成分が導入された。その特許で採用されたレシチンとＰＧとの割合は、９：１または３：７であり、クロロホルムが溶媒として使用され、パクリタクセル・リポソームは凝集しなかった。しかしながら、上記割合が５：５であるとパクリタクセル・リポソームの結晶は沈殿した。ＰＧは、レシチン中では低い含量のために入手は困難である。また、海外でも値の張る試薬級のＰＧ製品しかない。クロロホルムもまた、溶媒として使用すると極めて毒性がある。
【０００６】
【発明の目的】
本発明の１つの目的は、ポリオキシエチル化ひまし油を含まない、癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物を提供することである。
【０００７】
本発明の第２の目的は、水溶性輸液と良好な共液状化性（ｃｏｌｌｉｑｕｅｆａｃｔｉｏｎ）を示し、振盪後、点滴静注用５％グルコース溶液に直接注入でき、しかも毒性が低く、上記の混成溶剤により惹き起こされる過アレルギー反応を回避でき、さらに優れた安定性と比較的低いコストである、癌治療用のパクリタクセル・リポソーム組成物を提供することである。
【０００８】
本発明の第３の目的は、ポリオキシエチル化ひまし油を含まない、癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法を提供することである。
【０００９】
本発明の第４の目的は、リポソーム包埋技術を用いることにより、改善された水溶解性と安定性を有する、癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物の製造方法を提供することである。
【００１０】
これらの目的および他の目的は、以下の詳細な説明を通じてさらに記載され示されるだろう。
【００１１】
【発明の具体的説明】
本発明において、癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物は、実質的に以下の物質：
パクリタクセル２〜５重量部，ホスファチド２０〜２００重量部，コレステロール２〜３０重量部，アミノ酸０．３〜４重量部，凍結乾燥賦型剤１０〜７５重量部
からなる。
【００１２】
さらに、本発明の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物は、実質的に以下の物質：
パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド４０〜１６０重量部，コレステロール５〜２５重量部，アミノ酸０．８〜３重量部，凍結乾燥賦型剤２０〜６５重量部
からなる。
【００１３】
本発明の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物は、実質的に以下の物質：
パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド６０〜１２０重量部，コレステロール８〜２０重量部，アミノ酸１．０〜２重量部，凍結乾燥賦型剤３０〜６０重量部
からなってもよい。
【００１４】
本発明の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物は、ポリオキシエチル化ひまし油を含まない。
【００１５】
さらに本発明の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物において、前記凍結乾燥賦型剤は、注射液に適する固体となるマンニトール、スクロース、グルコースまたはラクトースである。前記アミノ酸は、リジン、スレオニンまたはメチオニンである。前記ホスファチドは、注射用の卵黄レシチンまたは大豆レシチンである。
【００１６】
必要ならば本発明の組成物に、他の抗腫瘍薬剤を加えるか、共存させることも可能である。好適な抗腫瘍薬剤およびアジュバントは、ジフェンヒドラミン、シメチジン、ナイアシンアミド、ビタミンＢ６、Ｂ１であってもよく、あるいは熊の胆汁末（ｂｅａｒ ｇａｌｌ ｐｏｗｄｅｒ）、ベンケイソウ（ｒｈｏｄｉｏｌａ）根、朝鮮人参（ｇｉｎｓｅｎｇ）、アメリカ人参、冬虫夏草（ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ）、霊芝（ｇａｎｏｄｅｒｍａ ｌｕｃｉｄｕｍ）およびシュエ−リエン−ホア（ｈｓｕｅｈ−ｌｉｅｎ−ｈｕａ）などである。
【００１７】
本発明の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物は、実質的に以下の物質：パクリタクセル２〜５重量部，ホスファチド２０〜２００重量部，コレステロール２〜３０重量部，アミノ酸０．３〜４重量部，凍結乾燥賦型剤１０〜７５重量部
を含み、次の製造方法により調製できる：
パクリタクセル、ホスファチド、コレステロールを上記の割合で、イソプロパノールまたはエタノールに連続して撹拌しながら溶解することにより清澄溶液を得る。次いで該溶液を温度５０〜６０℃の恒温水槽に置き、ロータリーエバポレーターで減圧下、溶媒を除去すると膜が形成される。そこへ上記の割合で溶かしたアミノ酸および凍結乾燥賦型剤の水溶液を導入し、次いで水和、超音波処理もしくは均質化を行うことにより、０．１μｍより大きいリポソーム、好ましくは０．２〜５μｍの大きさのリポソームを得る。滅菌ろ過して得たものを、アンプルまたはバイアルなどの容器に収め、凍結乾燥して、白い塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得る。シールまたはキャップをする際に窒素、ヘリウムまたはアルゴンを通気する。
【００１８】
また、本発明の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物は、実質的に以下の物質：パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド４０〜１６０重量部，コレステロール５〜２５重量部，アミノ酸０．８〜３重量部，凍結乾燥賦型剤２０〜６５重量部
を含み、次の製造方法によって調製できる：
パクリタクセル、ホスファチド、コレステロールを上記の割合で、イソプロパノールまたはエタノールに連続して撹拌しながら溶解することにより清澄溶液を得る。次いで該溶液を温度５０〜６０℃の恒温水槽に置き、ロータリーエバポレーターで減圧下、溶媒を除去すると膜が形成される。そこへ上記の割合で溶かしたアミノ酸および凍結乾燥賦型剤の水溶液を導入し、次いで水和、超音波処理もしくは均質化を行うことにより０．１〜５μｍの大きさのリポソームを得る。滅菌ろ過して得たものを、アンプルまたはバイアルなどの容器に収め、凍結乾燥して、白い塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得る。シールまたはキャップをする際に窒素、ヘリウムまたはアルゴンを通気する。
【００１９】
さらに本発明の癌治療用パクリタクセル・リポソーム組成物は、実質的に以下の物質：
パクリタクセル３〜５重量部，ホスファチド６０〜１２０重量部，コレステロール８〜２０重量部，アミノ酸１．０〜２重量部，凍結乾燥賦型剤３０〜６０重量部を含み、次の製造方法によって調製できる：
パクリタクセル、ホスファチド、コレステロールを上記の割合で、イソプロパノールまたはエタノールに連続して撹拌しながら溶解することにより清澄溶液を得る。次いで該溶液を温度５０〜６０℃の恒温水槽に置き、ロータリーエバポレーターで減圧下、溶媒を除去すると膜が形成される。そこへ上記の割合で溶かしたアミノ酸および凍結乾燥賦型剤の水溶液を導入し、次いで水和、超音波処理もしくは均質化を行うことにより０．１μｍよりも大きいリポソームを得る。滅菌ろ過して得たものを、アンプルまたはバイアルなどの容器に収め、凍結乾燥して、白い塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得る。シールまたはキャップをする際に窒素、ヘリウムまたはアルゴンを通気する。
【００２０】
上記の方法で、前記凍結乾燥賦型剤は、マンニトール、スクロース、グルコースまたはラクトースである。前記アミノ酸は、リジン、スレオニンまたはメチオニンである。前記ホスファチドは、注射用の卵黄レシチンまたは大豆レシチンである。
【００２１】
本発明の製剤は、ポリオキシエチル化ひまし油を含まず、毒性のある溶剤および高価なアジュバントを、毒性のない溶剤と入手容易なアジュバントで代替し、工業的規模で製造できる。したがって、本製剤は、毒性が低く、良好な水溶解性と優れた安定性などの利点を有している。さらに本製剤は、振盪後、点滴静注用５％グルコース溶液に直接注入でき、しかも上記の混成溶剤により惹き起こされる過アレルギー反応を回避でき、比較的低いコストで済む。
本発明に基づいて調製したパクリタクセル・リポソーム調製物は、表１に示すように市販パクリタクセル注射液と同等の抗癌有効性を有している。
【００２２】
【表１】
2004516247.tif 000002
【００２３】
本発明において、単一種レシチンがコレステロールおよびアミノ酸と一緒に、安定化剤として使用される。アミノ酸は両性物質であり、例えば本発明の技術構成での所与のｐＨであっても荷電状態を示し得るものである。このことは、タクソール結晶の凝集および析出を防止するであろう。本発明の方法は、容易に得られる物質を使うことから、ＰＧといった負電荷成分または正電荷成分を添加する従来の方法と比べて、コストは低くなる。また得られるパクリタクセル・リポソームは、単一種レシチンを用いるだけのものよりもその安定性は優っている。得られるパクリタクセル・リポソームは、水に溶解して置いたときでも、凝集は起こらず、結晶の析出もない（表２）。
【００２４】
【表２】
2004516247.tif 000003
【００２５】
本発明によるパクリタクセル・リポソーム調製物は、注射用グルコースおよび生理的食塩水と良好な共液状化性を有する。得られた調製物のパクリタクセル含有量は、４〜６ｍｇ／ｍｌであり、これは臨床で投与するのに適する濃度であり、臨床治療において、市販パクリタクセル注射液と同じ量で用い得る。体表面積に基づく場合、点滴静注の投与量は、１７５ｍｇ／ｍ２である。
【００２６】
本発明において、すべての材料およびアジュバントは、市販されており購入できる。
【００２７】
【実施例】
本発明を数々の実施例でもってさらに説明する。これらの実施例は、あくまで本発明の説明のために使用され、本発明の範囲を限定するものではない。
【００２８】
とくにことわらない限り、すべての分量または測定量は、全重量に対する重量単位である。
【００２９】
【実施例１】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（２．５ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（３０ｇ）およびコレステロール（２．７ｇ）を丸底フラスコに入れた。イソプロパノールの適当量（約３００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５０℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。２．８ｇリジンを含有する５％マンニトール溶液を加えてその膜を溶解し、超音波微粉化のために、超音波破砕機を用いた。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、得られたもの、即ち溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、２５ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３０】
【実施例２】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（５．０ｇ）、注射用の精製大豆レシチン（７２ｇ）およびコレステロール（６ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約８００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５０℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。３．４ｇリジンを含有する５％マンニトール溶液を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機（ｒｅｆｉｎｅｒ）を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、得られたもの、即ち溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、３０ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３１】
【実施例３】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（２．５ｇ）、注射用の精製大豆レシチン（３０ｇ）およびコレステロール（２．７ｇ）を丸底フラスコに入れた。イソプロパノールの適当量（約４００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５０℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。２．０ｇメチオニンを含有する７．５％スクロース溶液を加えてその膜を溶解し、超音波微粉化のために、超音波破砕機を用いた。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、２０ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３２】
【実施例４】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（５．０ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（７２ｇ）およびコレステロール（６ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約１５００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５０℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。３．５ｇスレオニンを含有する７．５％マンニトール溶液を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機（ｒｅｆｉｎｅｒ）を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、３０ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３３】
【実施例５】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（５．０ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（６５ｇ）およびコレステロール（６．５ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約１５００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５０℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。３．８ｇリジンを含有する７．５％ラクトース溶液を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、２０ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３４】
【実施例６】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（２．０ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（４２ｇ）およびコレステロール（４ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約２６０ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（６０℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。２．０ｇリジンを含有する５％マンニトール溶液（約４００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３５】
【実施例７】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（２．８ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（６０ｇ）およびコレステロール（４ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約３５０ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５５℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。２．４ｇスレオニンを含有する５％マンニトール溶液（約３００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３６】
【実施例８】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（３．５ｇ）、注射用の精製大豆レシチン（１００ｇ）およびコレステロール（４．５ｇ）を丸底フラスコに入れた。イソプロパノールの適当量（約１０００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５８℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。３．１ｇメチオニンを含有する５％スクロース溶液（約５００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３７】
【実施例９】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（４．５ｇ）、注射用の精製大豆レシチン（１２２ｇ）およびコレステロール（８ｇ）を丸底フラスコに入れた。イソプロパノールの適当量（約１２００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５２℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。３．１ｇスレオニンを含有する５％マンニトール溶液（約１０００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３８】
【実施例１０】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（５．０ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（１００ｇ）およびコレステロール（１５ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約１２００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５３℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。３．８ｇリジンを含有する５％マンニトール溶液（約１０００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００３９】
【実施例１１】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（５．０ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（１２０ｇ）およびコレステロール（２１ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約１５００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５９℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。２．４ｇスレオニンを含有する５％グルコース溶液（約１４００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、３０ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００４０】
【実施例１２】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（４．０ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（１２０ｇ）およびコレステロール（１８ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約１２００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５２℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。３．０ｇメチオニンを含有する５％ラクトース溶液（約１０００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、２５ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００４１】
【実施例１３】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（５．０ｇ）、注射用の精製大豆レシチン（２００ｇ）およびコレステロール（３０ｇ）を丸底フラスコに入れた。エタノールの適当量（約２０００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５７℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。４．０ｇリジンを含有する５％グルコース溶液（約１４００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、２０ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【００４２】
【実施例１４】
無菌条件下で、注射用パクリタクセル（３．０ｇ）、注射用の精製卵黄レシチン（８０ｇ）およびコレステロール（５．０ｇ）を丸底フラスコに入れた。イソプロパノールの適当量（約７００ｍｌ）を、上記混合物が完全に溶解して清澄な溶液となるように加えた。次いで恒温水槽（５５℃）内で、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥すると膜が形成された。２．４ｇリジンを含有する５％マンニトール溶液（約１０００ｍｌ）を加えてその膜を溶解し、高圧精砕機を使用して均一化した。滅菌するために０．２２μｍのフィルターメンブレンを用いてろ過し、溶液をアンプル（バイアル）中に収容した。各瓶には、１５ｍｇのパクリタクセルが入っていた。凍結乾燥を行い、次に不活性ガス中で密封することにより、白色塊のパクリタクセル・リポソーム調製物を得た。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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