(57)【要約】基質（基板）をカバーする膜模倣性表面フィルムからなる生体適合性の生物学的構成要素が提供される。適切な基質としては、水和した基質、例えば、この膜模倣性フィルムを通じて患者に送達するための薬物を含み得るか、または移植用の細胞（例えば膵島細胞）から形成され得るヒドロゲルが挙げられる。この表面は、患者に移植された場合、宿主応答のためにインビボで標的分子に結合するための曝露された生物活性の分子または部分を示し得る（例えば、この表面は抗血栓性または抗炎症性であり得る）、そしてこの表面は、それを通じた物質の輸送を容易にするための選択されたサイズの孔を有し得る。この基質と膜模倣性表面との間の必要に応じた親水性クッションまたはスペーサーによって、膜貫通タンパク質が表面から親水性クッション（天然に存在する細胞の構造を模倣する）を通って達することが可能になる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
人工膜および基板から成る生物学的構成要素。
【請求項２】
請求項１のそこにおいて、生物学的な構成要素リン脂質膜−模倣の表層から成る人工膜。
【請求項３】
前記リン脂質がホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、エーテルに基づくリン脂質、リポペプチド同根語および糖脂質からなる群から選択される請求項２の生物学的構成要素は、接合する。
【請求項４】
前記基板が移植可能なプロステーゼ、人工の器官、細胞、薬交付装置または治療的な装置からなる群から選択される請求項１の生物学的構成要素。
【請求項５】
前記基板がヒドロゲルである請求項１の生物学的構成要素。請求項１の生物学的構成要素がそこにおいて、言った６．基板は、ゼラチン、コラーゲン、アルギン酸塩およびキトサンからなる群から選択されることであり、以下を備えている、生物活性な物質。
【請求項６】
前記基板がヒドロゲルである請求項１の生物学的構成要素。請求項１の生物学的構成要素がそこにおいて、言った６．基板は、ゼラチン、コラーゲン、アルギン酸塩およびキトサンからなる群から選択されることであり、以下を備えている、生物活性な物質。
【請求項７】
前記基板が生物活性な物質から成るアルギン酸塩である請求項６の生物学的構成要素。
【請求項８】
前記基板が小島細胞、肝細胞、上皮小体細胞、甲状腺の細胞神経単位、セルトーリ細胞および遺伝子工学による細胞からなる群から選択される細胞である請求項１の生物学的構成要素は、生物活性な合成物を分泌するために設計した。
【請求項９】
前記膜−模倣の表層が選択されたサイズの孔から成る請求項１の生物学的構成要素。
【請求項１０】
前記膜−模倣の表層が細胞、組織、血液、器官または他の生きている材料間の相互作用を調整するために機能化された、そして、前記膜または表層があった前記膜表層または基板が配置した請求項１の生物学的構成要素。
【請求項１１】
この種の調整された相互作用が血栓形成性、扇動的な反応の減少、前記膜による分子の選択的な輸送の減少からなる群から選択される請求項９の生物学的な構成要素、そして、生物学的構成要素が配置された宿主からの分子の隔離する。
【請求項１２】
高分子電解質が前記基板および前記膜−模倣の表層の上へ複雑になる請求項１の生物学的構成要素は、それに対して取り付けられる。
【請求項１３】
前記基板および前記膜−模倣の表層間の親水性重合体クッションから成る請求項１の生物学的構成要素。
【請求項１４】
前記基板の上へ複雑になる高分子電解質からまた、成っている請求項１３の生物学的構成要素。
【請求項１５】
以下のステップによって安定した、アルキル化された表層でおおわれている水和する基板から成る生物学的構成要素
水和する基板の上の高分子電解質を合成して、長い原子連鎖を含むアルカンを含んでいる反対の位置に充電される両親媒性の重合体を有する高分子電解質の表面をおおうこと。
【請求項１６】
膜−模倣の表層がアルキル化された表層の上に形成される請求項１５の生物学的構成要素。
【請求項１７】
前記基板が細胞からなる群から選択される一つ以上の材料から成る請求項１５および自然であるか合成多糖類の生物学的な構成要素、そして、タンパク質高分子電解質を有するどの複合体。
【請求項１８】
前記材料が以下を有する請求項１７の生物学的構成要素：自然であるか合成コラーゲン、ゼラチン、アルギン酸塩、再結合物コラーゲン・タンパク質またはタンパク質−模倣のポリペプチド重合体。
【請求項１９】
前記水和する基板が以下を有する請求項１５の生物学的構成要素：生物活性な分子。
【請求項２０】
前記生物活性な分子が細胞生存能力または機能を強化するかまたはローカル・宿主扇動的な反応を最小にする請求項１９の生物学的構成要素。
【請求項２１】
前記水和する基板が患者に移植の装置の開口部の範囲内で成られる請求項１５の生物学的構成要素。
【請求項２２】
前記水和する基板が患者に移植の装置の表層の上へおおわれている請求項１５の生物学的構成要素、前記装置が透析管、透析膜、中空の繊維、膜酸素供給器、人工の血管、人工心臓弁からなる群から選択される請求項２２の生物学的構成要素が心室のままにした。
【請求項２３】
装置、人工心臓、人工肺、人工腎臓、人工肝臓、脈管の移植片を援助する、人工心臓弁、人工のジョイント、カテーテル、合成で眼球内のレンズ、電極、人工軟骨、靭帯、腱、骨および骨移植片、組織増援、細胞および／または組織から成る組織足場を含んでいる組織足場、細胞を含むカプセル、血管の範囲内の使用のための腔内な広さ、胆汁のシステムまたはうつろなオルガン。
【請求項２４】
前記水和する物質が穴の多いか無孔導管の管腔な表層の上へおおわれている請求項１５の生物学的構成要素。
【請求項２５】
前記高分子電解質がアルギン酸塩またはボリエステル繊維である請求項１５の生物学的構成要素Ｌ−リジン。
【請求項２６】
反対の位置に充電される高分子電解質の層を交替させることは前記水和する基板の上へ複雑になる請求項１５の生物学的構成要素。
【請求項２７】
前記膜−模倣の表層が以下を有する請求項１６の生物学的構成要素：リン脂質。
【請求項２８】
前記リン脂質がホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、エーテルに基づくリン脂質、リポペプチド同根語および糖脂質からなる群から選択される請求項１６の生物学的構成要素は、接合する。
【請求項２９】
前記エーテルに基づくリン脂質がジアルキルエーテルにリンクされた（Ｃ１０−Ｃ２０）リン脂質、モノラルおよびジアルケニルエーテルにリンクされた（Ｃ１０−Ｃ２０）リン脂質からなる群から選択される請求項２８の生物学的構成要素。
【請求項３０】
前記リポペプチドが活用する請求項２８の生物学的構成要素は生物学上グループから選択される活発な合成の（再結合物）または、天然のペプチドは脂質グループに接合した。
【請求項３１】
前記糖脂質同根語が合成であるか天然のオリゴ糖類からなる群から選択される請求項２８の生物学的構成要素、多糖類、グリコサミノグリカン、ヘパラン硫酸塩の含んでいる派生物、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、ケラタン硫酸塩およびヒアルロナンは、脂質グループに活用した。
【請求項３２】
前記リン脂質がアクリルオイルオキシ、メタクリルオイル、ジエノイル、ソルビル、アクリルアミド、アクリロニトリル、Ｎ−ビニル・ピロリドン、モノ・アクリル酸塩、ビス・アクリル酸塩、モノ・ジエン、ビス・ジエン、モノジアセチレン、ビスジアセチレン、モノスチリルグループ、ビススチリルグループ、モノ・チオール、ビス・チオール、モノ二硫化物およびビス二硫化物からなる群から選択される請求項２７の生物学的構成要素。
【請求項３３】
前記リン脂質が少なくとも一つの重合可能な基を含む請求項２７の生物学的構成要素。
【請求項３４】
前記リン脂質が１つの重合可能な基だけを含む請求項２７の生物学的構成要素。
【請求項３５】
前記リン脂質が以下を有する請求項２７の生物学的構成要素：重合可能で非重合可能なリン脂質の混合物それによって、非重合された領域は、膜バウンド受容器から成る。
【請求項３６】
前記膜−模倣の表層が以下を有する請求項１６の生物学的構成要素：重合するホスファチジルコリン・リン脂質。
【請求項３７】
前記膜−模倣の表層が原位置に前記アルキル化された表層上のリン脂質の重合によって形成される請求項１６の生物学的構成要素。
【請求項３８】
前記重合が次の事態の前に前記リン脂質の融合によって実行される請求項３７の生物学的構成要素；
上記のリン脂質は、光重合に先行する。
【請求項３９】
前記膜−模倣の表層が前記アルキル化された表層上の機能性に脂質分子の中で光架橋することによって形成される請求項１６の生物学的構成要素。
【請求項４０】
合成自動組立両親媒性物質が静止している構成要素および親水性間隔保持装置構成要素から成る重合体からなる群から選択した前記膜−模倣の表層で前記基板の間で成り立っている請求項１６の生物学的構成要素。
【請求項４１】
前記自動組立両親媒性物質も以下を含む請求項４０の生物学的構成要素：
自動組立疎水性のコンポーネント。
【請求項４２】
前記自動組立両親媒性物質が以下を含む請求項４１の生物学的構成要素：
以下の通りの成られる三量体
ａ）被支持脂質アセンブリを有する反応をクロスリンクするのを容易にする任意のターミナルの機能性を有する飽和したか不飽和の一つの長い鎖・アルカンである静止しているグループ；
ｂ）被支持脂質アセンブリを有する反応をクロスリンクするのを容易にする任意のターミナルの機能性を有する２台以上の長い鎖・アルカン装置を有する飽和したか不飽和のグループである親水性間隔保持装置；
そして、
ｃ）自動組立疎水性の構成要素それ「ある飽和したまたは不飽和の、生物活性な分子を有する膜−模倣の表層の機能化を容易にする任意のターミナルの機能性を有する一つ以上の長い鎖・アルカンを有する対称形であるか非対称ボロ両親媒性物質。
【請求項４３】
前記自動組立両親媒性物質が以下を含む請求項４１の生物学的構成要素：２−ヒドロキシメチルアクリル酸塩から成る三量体（ＨＥＡ）（３−アクリルオイル−３つのオキサプロピル−３−（Ｎ（Ｎ−ジオクタデシルカルバモイル））プロピオン酸エステル）（ＡＯＤ）そして、６のモル比率のスチレン・スルホン酸塩：３：１。
【請求項４４】
前記基板がボリエステル繊維−Ｌリジンでおおわれているアルギン酸塩である請求項４３の生物学的構成要素。
【請求項４５】
前記両親媒性物質が以下を含む請求項４１の生物学的構成要素：２−ヒドロキシメチルアクリル酸塩（ＨＥＡ）および３−アクリルオイル−３−オキサプロピル−３−（Ｎから成っている共重合体Ｎ−ジオクタデシルカルバモイル）−中でプロピオン酸エステル（ＡＯＤ）１：１つのモル比率。
【請求項４６】
前記共重合体が直接アルギン酸塩基板に適用される請求項４５の生物学的構成要素。
【請求項４７】
前記膜−模倣の表層が以下を有する請求項２の生物学的構成要素：重合するホスファチジルコリン・リン脂質。
【請求項４８】
前記膜−模倣の表層が選択されたサイズの孔から成る請求項１６の生物学的構成要素。
【請求項４９】
前記孔が、約１０パーセントをプラスあるいはマイナスした、約２０〜５０のＡ、５０〜１００のＡ、２０〜５０のＡおよび１００〜２５０のＡからなる群から選択されるサイズの中である請求項３４の生物学的構成要素。
【請求項５０】
抗血栓形成性な膜模倣の表層が抗血栓形成性な半分を血栓形成性を最小にするのに十分な量の前記表層に組み込むことによって形成される請求項１６の生物学的構成要素。
【請求項５１】
前記抗血栓形成性な半分が抗血栓性であるか、抗血小板であるかフィブリン溶解促進性な代理人の半分である請求項１６の生物学的構成要素。
【請求項５２】
前記抗血栓形成性な半分がトロンボモジュリン、内皮細胞タンパク質Ｃ受容器、脈管のＡＴＰ　ジホスホヒドロラーゼ、ヒルジンおよびリジンからなる群から選択される分子に含む請求項５１の生物学的構成要素。
【請求項５３】
前記抗血栓形成性な半分がｓｉｔｕ．の重合の前にリン脂質に加えられる請求項５１の生物学的構成要素
【請求項５４】
脂質改変されたトロンボモジュリン変異体が前記リン脂質に加えられる請求項５１の生物学的構成要素。
【請求項５５】
前記抗血栓形成性な半分がトロンボモジュリン．の細胞質外な領域から成る請求項５４の生物学的構成要素。
【請求項５６】
総合してあるいは、再結合物方法によって、前記脂質−修正されたトロンボモジュリン変異体がトロンボモジュリン断片からなる群から選択される請求項５４の生物学的構成要素が酵素で発生して、いずれでもまたはＥＧＦを含む細胞外領域の全てを含むことは、４−６を繰り返す。
【請求項５７】
ネオグリコカリクスから成る扇動的な反応が合成であるか自然のグリコサミノグリカンを使用している前記膜−模倣の表層の上に形成した宿主を最小にするように設計されている請求項１６の膜−模倣の表層から成る生物学的構成要素。
【請求項５８】
前記合成であるか自然のグリコサミノグリカンがそれについてヘパリン、ヘパラン硫酸塩、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、ケラタン硫酸塩およびヒアルロナンで反扇動的なアナログからなる群から選択される請求項５７の生物学的構成要素は、宿主扇動的な反応を最小にするのに効果的な量の前記膜−模倣の表層にリンクした。
【請求項５９】
％の約１０および約１００間の表層の領域範囲の請求項５８のそこにおいて、前記総額の生物学的構成要素。
【請求項６０】
合成親水性重合体から成る扇動的な反応がポリエチレン酸化物、ポリアクリルアミド、ボリエステル繊維（ヒドロキシメチルアクリル酸塩）からなる群から選択した宿主を最小にするように設計された請求項１６の膜−模倣の表層から成る生物学的な構成要素（ボリエステル繊維（ＨＥＡ））（ボリエステル繊維（ヒドロキシメチルメタクリル酸塩）（ボリエステル繊維（ＨＥＭＡ）））、そして、ボリエステル繊維（ビニルピロリドン）宿主扇動的な反応を最小にするのに効果的な量の前記膜−模倣の表層にリンクされる。
【請求項６１】
前記膜−模倣の表層が以下を有する請求項１６の生物学的構成要素：目標としている半分は、それに対して連結した。
【請求項６２】
前記目標としている半分がアビディン、ストレプトアビジン、チオールを含有するタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖類、レクチン、酵素および抗体からなる群から選択される請求項６１の生物学的構成要素。
【請求項６３】
アルキル化された表層を以下を有している水和する基板の上に形成する方法：水和する基板の上の高分子電解質を合成して、長い原子連鎖を含むアルカンを含んでいる反対の位置に充電される両親媒性の重合体を有する高分子電解質の表面をおおうこと。
【請求項６４】
請求項６３の両親媒性の重合体の上へ膜模倣の脂質を重合させることから成る形成生物学的構成要素の方法。
【請求項６５】
前記膜−模倣の表層の孔を形成することから成る請求項６５の方法。
【請求項６６】
選択されたサイズおよび、前記膜−模倣の表層に、形の中で、アルブミン、ナノスフェアおよびデンドリマーからなる群から選択される分子を取り入れることから成る請求項６５の方法。
【請求項６７】
前記生物学的構成要素に連結されることができる半分によって、前記デンドリマーの各々の腕が終了される請求項６６の方法。
【請求項６８】
前記半分が共有結合して前記生物学的構成要素に連結される請求項６７の方法。
【請求項６９】
前記半分が非共有に前記生物学的構成要素に連結される請求項６７の方法。
【請求項７０】
前記半分が前記膜−模倣の表層にリンクされる請求項６７の方法。
【請求項７１】
前記半分が前記膜−模倣の表層の下で、前記生物学的構成要素に連結される請求項６７の方法。
【請求項７２】
前記分子がそれについてポリエチレン酸化物、ポリアクリルアミド、ボリエステル繊維（ヒドロキシメチルアクリル酸塩）（ボリエステル繊維（ＨＥＡ））、ボリエステル繊維（ヒドロキシメチルメタクリル酸塩）（ボリエステル繊維（ＨＥＭＡ））、ボリエステル繊維（ビニルピロリドン）、ポリアクリル酸、ポリスチレンおよびブロック共重合体からなる群から選択されるデンドリマーである請求項６６の方法。
【請求項７３】
孔が自然であるか人工の孔の挿入によって、前記膜−模倣の表層において形成される請求項６６の方法。
【請求項７４】
孔が人工であるか自然の運搬装置分子の挿入によって、前記膜−模倣の表層において形成される請求項６５の方法。
【請求項７５】
：のステップによって形成されている膜模倣性の表層の、前記表層を有する水和する基板から成る生物学的構成要素水和する基板の上へ高分子電解質を合成すること、そうすると、反対の位置に充電される両親媒性の重合体を有する高分子電解質の表面をおおうことは、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロールおよび脂質のようなボロ両親媒性物質ｓからなる群から選択される合成物によって誘導した。
【請求項７６】
前記高分子電解質がアルギン酸塩およびボリエステル繊維−Ｌリジンからなる群から選択される請求項７５の生物学的構成要素。
【請求項７７】
前記薬を請求項１の生物学的構成要素に組み込むことから成る薬を届ける方法。
【請求項７８】
前記薬が前記基板に組み込まれる請求項７７の方法。
【請求項７９】
以下を含んでいる請求項１の植設された基板への宿主扇動的な反応を最小にするかまたは廃止する方法：
反扇動的な効果を有する半分を請求項１の人工膜に組み込むこと。
【請求項８０】
前記半分がトロンボモジュリン、内皮細胞タンパク質Ｃ受容器、脈管のＡＴＰ　ジホスホヒドロラーゼ、ヒルジン、アネキシン、ＨＬＡ−Ｇ、ＩＬ−１０、ヒアルロナン、ヘパラン硫酸塩、ヘパリン、コンドロイチン硫酸塩、ケラタン硫酸塩、デルマタン硫酸塩および前述のことの抗炎症薬アナログからなる群から選択される分子のそれである請求項７７の方法。
【請求項８１】
前記抗炎症性の半分が前記膜−模倣の表層に組み込まれる請求項７７の方法。
【請求項８２】
前記基板が小島細胞、肝細胞、副甲状腺細胞、甲状腺の細胞、神経単位、セルトーリ細胞および遺伝子工学による細胞からなる群から選択される請求項７７の方法は、生物活性な合成物を分泌するために設計した。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
いくつかの方法は、医学の適用に役立つ生体適合物質の生体適合性を改良することに推薦された。
例えば、低い極性かイオンの負担を提供する生体適合物質表層を修正するかまたは表層を生物学的物質（例えば細胞、タンパク質、酵素、その他）でおおうことは、望ましくないタンパク質粘着力を防ぐために用いた。
他のアプローチは生体適合物質に抗凝血剤の編入を必要とする。そして、抗血栓形成性な生体適合物質を描く。
更なるアプローチは、生体適合物質にさまざまなリン脂質の編入を必要とする。追加の方法は複雑なｈｅｐａｒｉｎ−ｑｕａｔｅｒｎａｒｙアミンまたは他の抗血栓性のエージェントの中で縛ることを含むバイオ、よりＨｏｗｅｖｅｒな、これらの方法で多くの材料表層はそれの永続しないシステムである表層のコーティングが結局はぎ取られるかまたは浸出する効果がある。
例えば、ヘパリン（それは生体適合物質表層に複雑になる）は周囲の媒体への重合体表層から、段階的に消失するだけでなくて、自動組織化しているｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔな集計としての生理的状況（膜ｓ）の下で、異化およびその固有の不安定性のためにまた、生物活性を制限しもした、モデルを組成の部材が制御されることができて、修正されることができて、正確に定義されることができて、容易にａｓｓｅｍｂａｌｅｄされることができる分子の工学に対して提供する。
【０００２】
過去の１０年の間に、化学組成物、飽和およびサイズにおいて異なっているリン脂質は、合成の幾何の様々な構造の設計の建築用ブロックとして利用された。脂質に基づくシリンダ、立方体および球は、適用を両方の薬交付で見つけて、複合物のためのテンプレートとして分子的に構造を設計した。
バイオセンサ・適用のための表層−被結合二分子層が、また、次の事態の前に下にある基板の上へ密接に包まれた炭化水素鎖の層を集めることによって生じた；上記の基板は、乳状にされた脂質の薄めた溶液かｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ脂質小嚢への露出に先行する（Ｓｐｉｎｋｅほか［１９９２の］Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．６３：１６６７−１６７１；サイフェルトほか［１９９３の］Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．６４：３８４−３９３；そして、Ｆｌｏｒｉｎほか［１９９３の］Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｊ．６４：３７５−３８３）．加えて、方法を経た二分子層を支持される構造物に対する交互の戦略が有機的な両親媒性の単分子層（Ｕｌｍａｎ（Ａ．［１９９１の］「Ｌａｎｇｍｕｉｒ−ＢｌｏｄｇｅｔｔからＳｅｌｆ−アセンブリ、ニューヨーク、アカデミック・プレスへのＵｌｔｒａｔｈｉｎ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｆｉｌｍｓに対するＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ））による基板の中で下がるのを抑制したように、Ｌａｎｇｍｕｉｒ−Ｂｌｏｄｇｅｔｔ技術が使われた。著しく、これらのｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔな分子のアセンブリは、高度な安定性を呈する。２６ｋＴの力は、水に二分子層から倍の鎖でつながれたＣ−１６のホスファチジルコリン分子を除去することを必要とする（Ｃｅｃｖ、Ｇ．およびマーシュ（Ｄ．）［１９８７の］「リン脂質二分子層、ニューヨーク、ワイリー；そして、Ｈｅｌｍほか［１９９１の］会報Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．科学ＵＳＡ　８８：８１６９−８１７３）．これは、ほとんど３５ｋＴのビオチン−ストレプトアビジン結合エネルギーに近くて、典型的モノクロナール抗体−抗原相互作用の強さより大きいいくつかの桁である。このように、本発明の方法論の重要性が、再現性の比類がないレベルを有する比較的強い材料を設計する能力および表層命令および化学の分子の制御に存在する。血液−接触適用の大部分の膜−模倣のシステムがいずれのサイド鎖ものｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ官能基を含んでいる共重合体として計画されているか、よりしばしばでない、重合体バックボーンだって、強い表層構造をつくるために（児島ほか［１９９１の］Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　１２：１２１；上田、Ｔ．ほか、［１９９２の］Ｐｏｌｙｍ．Ｊ．２４：１２５９；イシハラ（Ｋ．ほか［１９９５の］Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　１６）：８７３；キャンベルほか［１９９４の］ＡＳＡＩＯ　Ｊ．４０　（３）：Ｍ８５３；鎖ほか［１９９６の］Ｊ　ＡｐｐＬ　Ｐｏｌｙｍ．科学６０：４５５；そして、山田ほか［１９９５の］ＪＭＳ　Ｐｕｒｅ出願化学Ａ３２：１７２３）．
これらの材料が安定性を改善した、そして、有望な血液−接触特性が報告された一方、多くの限界が存在する。特に、両親媒性の分子に固有の自己組織化の主体を利用することによって、分子のレベル上のエンジニア表層特性に対する能力は、消失する。加えて、早く多様な生体分子官能基を膜−模倣の表層に組み込む能力は、また、消失する。被支持生体膜の広範囲にわたる使用の重大な限定は、研究所環境の外の大部分の適用のためのそれらの限られた安定性である。
戦略が介入している可撓性間隔保持装置または重合体クッションの有無にかかわらず、下にある基板に対する限界膜、例えば金またはガラスに開発されて、より強力なシステムを生成するために（Ｓｐｉｎｋｅ（Ｊ．Ｙ．ほか（１９９２の）Ｂｉｏｐｈｙｓ．）Ｊ．６３：１６６７−１６７１；フロリン、Ｅ．−Ｌ．およびＧａｕｂ（Ｈ．Ｅ．（１９９３の）Ｂｉｏｐｈｙｓ．）Ｊ　６４：３７５−３８３；Ｍｅｕｓｅ、Ｃ．Ｗ．その他、（１９９８の）ＢｉｏｐｈｙｓＪ７４：
１３８８−１３９８；Ｓｅｉｔｚ、Ｍ．ほか（１９９８の）Ｔｈｉｎ　Ｓｏｌｉｄ　Ｆｉｌｍｓ　３２９：７６７−７７１；Ｂｅｙｅｒ（Ｄ．ほか（１９９６の）Ｔｈｉｎ　Ｓｏｌｉｄ　Ｆｉｌｍｓ　２８５，８２５−８２８）；シェン（Ｗ．Ｗ．ほか（２００１の）Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　２）：７０−７９）。
【０００３】
膜流動性が生物学的膜の機能の反応の多くのために重要な一方、特定の適用は膜安定性の相当な増加が原位置に平らな脂質アセンブリの重合によって成し遂げられることができる妥協の役に立つ。多様な脂質および他の膜提携の構成要素のアセンブリの高度な分子の制御を有する表層を設計する能力は、保持される。この事については、出願人および同僚は以前に報告した原位置に、ｏｃｔａｄｅｃｙｌメルカプタンのｓｅｌｆａｓｓｅｍｂｌｅｄされた単分子層上のリン脂質の重合は金にはずむ（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｇ．、ほか（１９９７の）Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１３：５６９７−５７０１。）、動いているｏｃｔａｄｅｃｙｌ　ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｓｉｌａｎｅは、ガラス板を入れる（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｇ．、ほか（１９９７の）Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３０：６４８３−６４８８；Ｏｒｂａｎ、Ｊ．Ｍ．ほか（２０００の）Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３３：４２０５−４２１２。）、そして、両親媒性の重合体クッション上の（チョン（Ｉ．Ｈ．ほか（１９９９の）Ｊ．Ｂｉｏｍａｔ．）科学重合体編集
１０：９５−１０８）．最近、高分子電解質多層フィルム（ＰＥＭ）は、薬交付および免疫隔離システムの界面の分子の輸送を調整するために細胞およびタンパク質粘着力（エルバート（Ｄ．Ｌ．ほか［１９９９の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１５：５３５５−５３６２））を減らすｂｉｏｉｎｅｒｔフィルムとして、そして、コーティングとして研究された（Ｍｏｙａ、Ｓ．その他［２０００）１Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３３：４５３８−４５４４；
Ｓｈｉ、Ｘ．ａｎｄ−Ｃａｒｕｓｏ、Ｆ．［２００１の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１７：２０３６−２０４２）。
【０００４】
これらの材料のための他の可能な用途は、限外濾過膜としてのそれらの用途を含む（バンＡｃｋｅｒｎ（Ｆ．ほか［９９８の］Ｔｈｉｎ　Ｓｏｌｉｄ　Ｆｉｌｍｓ　３２９）：７６２−７６６）、そして、光電子工学の装置の組立ての（Ｃｈｅｕｎｇ、Ｊ．Ｈ．ほか（１９９４の）Ｔｈｉｎ　Ｓｏｌｉｄ　Ｆｉｌｍｓ　２４４：９８５）。膜−模倣のシステムは、また、脈管の壁怪我の、そして、人工の表層上のサイトで、血液凝固のメカニズムを理解することを目的とする効果に対する直接の衝撃を有した。
【０００５】
過去の１０年の最も興味をそそる開発のうちの１つは、ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ構成要素を有する膜−模倣のシステムが表層提携の血塊形成の誘導を制限する認識であった。この生物学的特性は、ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ頭グループの両性イオン構造のために、表層の縛られた水の大きい量に帰された。それは、また、方法を凝固させている血液を禁ずるその特定のプラスマ・タンパク質がこの先頭のグループに選択的に吸着されることを示唆された（チャップマン［１９９３の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　９：３９）．平らな膜モデルを使用している一連の調査、トンプソンおよび同僚の（Ｐｅａｒｃｅほか［１９９３の］Ｊ．Ｂｉｏｌ．化学２６８：２２９８４−２２９９１；そして、Ｔｅｎｄｉａｎほか［１９９１の］Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　３０：１０９９１−１０９９９）リン脂質膜に縛っているプロトロンビンのために分子の必要な条件を特徴づける。ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ頭グループが合成の表層上の血塊形成の誘導を制限するように見えることに気がついた「（イシハラほか［１９９４の］Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．母。Ｒｅｓ．２８：２２５−２３２；ヘイワードほか［１９８４の］Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　５：１３５−１４２；そして、ホールほか［１９８９の］Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　１０［４］：２１９−２２４）。
【０００６】
この生物学的特性が考えられるところではかこのｚｗｉｔｔｅｒｉｏｎｉｃな頭グループに大きい水量バウンドに関連があることを提案した「方法を凝固させている血液を禁ずる特定のプラスマ・タンパク質（ｓ）のｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅに選択的な吸着（チャップマン（Ｄ．［１９９３の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　９）：３９−４５）．数人の調査者は、適用に連絡している血液のためのｔｈｒｏｍｂｏｒｅｓｉｓｔａｎｔな材料を生成するために重合体の表層の上へトロンボモジュリンの直接の固定することを解説した。
キシダほかＢｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　１５の（１９９４の）（１０）：８４８−８５２；キシダほかＢｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　１５の（１９９４の）（１４）：１１７０−１１７４；そして、キシダほか（１９９４の）ＡＳＡＩＯジャーナル４０（３）：Ｍ８４０−８４５はボリエステル繊維（ビニル・アミン）を含むａｍｉｎａｔｅｄされてカルボキシル基を導入された表層に、ＴＭを活用させた、そして、ボリエステル繊維（アクリル酸）はポリエチレンおよび表層−加水分解されたボリエステル繊維（エーテルｕｒｅｔｈａｎｅｕｒｅａ）を表面−ｇｒａｆｔｅｄした。ＶａｓｉｌｅｔｓほかＢｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　１８の（１９９７の）（１７）：１１３９−１１４５，ボリエステル繊維（アクリル酸）の上のＴＭの固定することがＰＴＦＥを表面−ｇｒａｆｔｅｄしたと報告した。
【０００７】
全てのケースにおいて、活用計画は、タンパク質表層上の入手自由なアミンのカルボキシル機能性を経た基板に、リンクＴＭに対するｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅベースの継手反応を利用した。試験管内の研究は時間を凝結させることおよびタンパク質Ｃ起動が強化されることを証明した、そして、この活動は、ニンヒドリン分析評価によって定まる、ＴＭ表面密度に正比例するように見えた。しかし、ＴＭ表層集中を制御する能力は、０．１５の０．４５のＦｇ／ｃｍ２および生物活性がかなり減少したＴＭの間で変動することは増加したタンパク質Ｃ起動率だけによって明白な様に、連結することに表面をつける報告されたＴＭ密度については、依存している基板であった５〜１０−ＴＭがいずれの脂質小嚢もまたは内皮細胞表層の構成要素として評価される観察された２０，０００倍の強化と比較して折り目。共同因子活動のロスはタンパク質固定すること手順（それはＴＭ表層上のいかなるアクセスできる官能基にも対するランダムなサイト反応によって駆動される）に起因していると信じられる。そして、サイトを結合しているトロンビンの範囲内でそれらを含む。この戦略の効果上のローカル流れ状況の衝撃は、報告されなかった。これらの研究が基板−バウンドトロンボモジュリンが一方ｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｉｃである合成の表層上の血栓形成を制限するために可能性を有すると確認するにもかかわらず、トロンボモジュリン生物活性の観察された減少はトロンボモジュリンの生物学的特性が個人的に生体適合物質表層に直接の共有結合連結に消失することができる様々な構造上の特徴に結ばれると強調する。例えば、トロンボモジュリンの能力は、Ｃが縛っているトロンビンとして役立つ３つのｔａｎｄｅｍｌｙな繰り返されたＥＧＦのような領域が据え付けることが必要であるタンパク質のトロンビンに依存する起動を速める；ＥＦＴのような領域の間のｓｅｒｉｎｅ／ｔｈｒｅｏｎｉｎｅの豊富な６５のＡスペーサおよび最適にトロンビンの活発なサイトを臨界ｓｃｉｓｓｉｌｅに合わせる膜内外領域は、タンパク質Ｃで接着する；
そして、１０−ｔｏ　２０−折り目によってトロンボモジュリンに縛っているトロンビンの類似性を増加して、トロンビンのＡＴＩＩＩ不活化に触媒作用を及ぼす共有結合して関連するコンドロイチン硫酸塩半分「（Ｓａｄｌｅｒ（Ｊ．Ｅ．［１９９７の］Ｔｈｒｏｍｂ．）Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ　７８［１］：３９２−３９５；そして、Ｅｓｍｏｎ（Ｃ．Ｔ．［１９９５の］ＦＡＳＥＢジャーナル９）［１０］９４６−９５５）．いくらかの活動が後に保持されさえする、洗剤（関連がトロンボモジュリンにかなりタンパク質Ｃ起動を速める膜）を有するトロンボモジュリンの可溶化。
【０００８】
一つには、これは局所的に反応している共同因子の近似の配置を集中して、コーディネートする膜およびトロンボモジュリン（ガルヴィンほか［１９８７の］Ｊ．Ｂｉｏｌ．化学２６２［５］：２１９９−２２０５）を有する基板の能力によって調停される。例えば、タンパク質Ｃは、Ｃ−ターミナル４ｃａｒｂｏｘｙｇｌｕｔａｍｉｃ（Ｇｌａ）おそらく、そして、細胞膜に縛る領域がそれを脂質二分子層の二次元の平面に限定することによってそのローカル集中を増加する効果がある（Ｅｓｍｏｎほか［１９８３の］Ｊ．Ｂｉｏｌ．化学２５８：［９］：５５４８−５５５３；マンほか［１９８８の］アン。回転速度を上げる。生化学５７：９１５−９５６；ＥｕｋａｒｙｏｔｉｃなジーンＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　６［１］のＫａｌａｆａｔｉｓほか［１９９６の］Ｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ：８７−１０１）。
【０００９】
加えて、タンパク質Ｃを原形質膜に結合することは、また、タンパク質Ｃ裂け目サイトをトロンビンのｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃａｌｌｙな活発な領域に合わせるのを助けるｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌな変化を誘発することができる。
静電的で疎水性の相互作用は、細胞膜を有するタンパク質Ｃの関連に関係していることができる。この事については、最近の研究は、タンパク質Ｃがホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミン脂質を含む膜を縛って、機能するのを好むことを示唆する。タンパク質Ｃは、また、膜二分子層の範囲内で直接脂肪質の酸性のサイド鎖と相互に作用することができる（Ｓｍｉｒｎｏｖほか［１９９９の］Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　３８［１２］：３５９１−３５９８）．リン脂質ｈｅａｄｇｒｏｕｐの性質が活性化されたタンパク質Ｃの次の触媒作用で結合する効率に貢献することができることは、驚くべきである。
例えば、Ｓｍｉｒｎｏｖその他（１９９９以前に）；そして、Ｓｍｉｒｎｏｖほか（１９９４の）Ｊ．Ｂｉｏｌ．化学２６９（２）：８１６８１９は、ＰＥ　ｈｅａｄｇｒｏｕｐおよびリン脂質ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｉｏｎが複雑な活性化されたタンパク質Ｃによって、要因Ｖａ不活化に貢献することを証明した。このように、脂質二分子層は、トロンボモジュリンと協力したタンパク質Ｃ起動を速めて、その後ＡＰＣ抗凝血剤活動を最適化するｅｓｓｅｎｔｉａｌ’ｃｏｆａｃｔｏｒとして役立つ。
【００１０】
アテローム性動脈硬化症は、不健全の重大な出所および予防措置および薬理学的な治療学の進歩にもかかわらず死のままである。ほぼ７００，０００の脈管の外科の手順は、いくつかの１０万周辺機器および冠状の血管形成（１）とともに米国において毎年実行される。補綴のバイパスは接ぎ木する、そして、より最近、動脈の広さおよび他のｅｎｄｏｖａｓｃｕｌａｒプロステーゼはこれらのｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅな手順に関連して利用された。大きい直径脈管の移植片（内部６ｍｍの直径）がうまくポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）およびポリエチレン・テレフタル酸塩のような重合体から発達したにもかかわらず、耐久性がある小さい直径プロステーゼ（＜内部６ｍｍの直径）の製作は未解決のままである。補綴のバイパス移植が合理的短期の成功を有する下に鼠蹊部の位置において実行すると共に、これらの移植片の６０％に対する３０％が失敗して５年以内で、さらに、（Ｗｉｎｇｅｒ　Ｔ．Ｍ．ほか（１９９６）（リポペプチド同根語）：膜模倣性の構造を活性化している受容器のための生体分子建築用ブロック。生体適合物質１７：４４３−４４９）。
【００１１】
同様に、再狭窄および／または閉塞は、６ヵ月のサイトによって、広さ配置および病気の範囲の範囲内で全ての患者の５０％ぐらいで起こる（Ｗｉｎｇｅｒ　Ｔ．Ｍ．その他［（１９９７］）（空気での膜模倣性な単分子層／水インタフェースの脂質改変されたペプチドの挙動）Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１３：３２５６−３２５９）。
【００１２】
多くの脈管のプロステーゼの失敗につながっている逆イベントが血液−材料および組織材料インタフェースでｍａｌａｄａｐｔｉｖｅな生物学的反応に関すると認識される。小さい直径プロステーゼのこれらの課題および特に血栓症に応答して、移植片および広さは、アルブミン、ヘパリンまたはプロスタシクリン・アナログでおおわれていた。そして、あるいは、ポリエチレン酸化物のような比較的不活性材料については、それは凝固している滝および小板反応性を禁止する「（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｇ．その他［（１９９７］）（アルキル化された表層上のリン脂質のＩｎ−Ｓｉｔｕ重合）高分子３０：６４８３−６４８７）．交互の方法は、材料を設計することになっていたどのサポート原位置に内皮細胞ライニングの耐久性があるｔｈｒｏｍｂｏｒｅｓｉｓｔａｎｔなインタフェースを有する機能の動脈の置換をつくるために再生（Ｍａｒｒａ（Ｋ．Ｇ．その他［１９９７］）は、原位置に固い液体インタフェース（重合体Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ　３８（２））で、重合を経たホスファチジルコリン表層を安定させた：６８２−６８３；Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９８の］「被支持生物活性な脂質膜の統合および特徴描写）。の：「細胞（編集）の材料科学Ａ．ＰｌａｎｔおよびＶ．Ｖｏｇｅｌ、ＭＲＳ　Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、ピッツバーグ、１９９８。）、Ｈｏｗｅｖｅｒ、マトリックス・タンパク質を有する補綴の表層のコーティングまたはｄｅｒｉｖｉｔｉｚａｔｉｏｎに基づく戦略または内皮細胞成長を促進するｉｎｔｅｇｒｉｎ−選択的なペプチド・シーケンスは、小板を活性化するこれらの基板および凝固滝の吸収力に打ち勝つことができなかった。このように、完全な内皮再生より前の期間において、小さい直径プロステーゼの表層は、血栓形成のための増加する危険で残る。
植設および処理装置を血液含有するための効果的抗血栓形成性な処理用の技術の必要が、ある。現在の免疫抑制的なプロトコルを使用している全部の器官膵臓の同種移植片は、移植の後、５年で１年および７４％で８６％と同じ程度の期待される移植片生存を有する。この方法の重大な限界は、これらの奨励の結果、主要な術周囲の不健全の危険性、慢性の免疫抑制薬療法の関連する複雑および提供者器官組織の永続的な不足にもかかわらず残る。結果として、１９９０年代において、すい臓移植は、糖尿病の管理の限られた役割を有し続ける。
異種器官の利用は、移植用提供組織の慢性の不足の解答を提供しなければならない。それでもなお、クロス種移植に続いている組織拒否の防止は、未解決のままである。
【００１３】
細胞が異種小島を使用して療法の基礎を形成した、または、人間外の移植用提供組織の供給を増加すると共に、免疫隔離バリアに関連して細胞系を生産しているインシュリンが宿主の活発な体液で細胞反応を迂回するために合理的な戦略を提供すると仮定した「（自発的に糖尿病のｃｙｎｏｍｏｌｏｇｕｓの糖尿病の正常化が異種移植片によっていじるＳｕｎ（Ｙ．その他［１９９６］）は、免疫抑制（Ｊ．Ｃｌｉｎ）のない豚の小島をマイクロカプセルに入れた。Ｉｎｖｅｓｔ．９８：１４１７；ハレＩ．、その他［１９９３］「ａｌｇｉｎａｔｅ−ｐｏｌｙにＬ−リジン膜、移植、４４を有するマイクロカプセル化による抗体からのランゲルハンス島の保護：３５０−４；コルトン、Ｃ．およびＡｖｇｏｕｓｔｉｎｉａｔｏｓ（Ｅ．［１９９１の］「複合型人工のすい臓Ｉ”Ｂｉｏｃｈｅｍ．英の開発の生物工学）１１３：１５２−７０；コルトン、Ｃ．Ｋ．［１９９２］、免疫隔離による異種小島移植の工学、Ｄｉａｂ．Ｎｕｔｒ．Ｍｅｔａｂｏｌ．５：１４５−９）．異種小島またはインシュリン−生成電池を使用してベースの療法が免疫隔離バリアに関連して線をひく細胞は、このようにインシュリンに依存する糖尿病ｍｅｌｌｉｔｕｓ（ＤＤＭ）の成功した処理における重要なステップである。
この方法の臨界構成要素は、小島細胞構造に至る受取人の免疫学の方法から保護するかまたはドナー電池を分離することによる長期の移植片生存のメンテナンスである。輸送特性および表層の生理化学的な特徴の強化された制御は、膵臓の小島細胞移植の成功にとって重大な効果的免疫隔離バリアを提供するために必要である。
【００１４】
マイクロカプセル化洋服屋のための現在の方法は、熱力学的に被駆動物理的な過程までに発生する孔サイズの配布を制御することによって特性を輸送する。
一般的に、細胞カプセル化のための半透性の膜は、３つの物理的な方法のうちの１つ時までに公式化されることができる。最も一般の方法論は、重合体沈殿時間、重合体−希釈剤互換性および希釈剤集中がフェーズ分離に影響するそれによってフェーズ倒置の原則に、そして、結果として基礎を形成される膜多孔性（湾曲、Ｃ．Ａ．、ダグラス、Ｉ．Ａ．、ブロートン、Ｒ．Ｌ．、Ｓｅｆｔｏｎ、Ｍ．Ｖ．（ＨＥＭＡＭＭＡ共重合体の哺乳類の細胞のマイクロカプセル化）：カプセル形態学および透過性に対する効果」（Ｂｉｏｍｅｄ．）Ｍａｔｅｒ．物件。［１９９０］２４：１２４１−１２６２；Ｓｅｆｔｏｎ（Ｍ．Ｖ．［１９８９］）は、そうすることができる。ｉ．化学英６７：７０５；Ｕｌｕｄａｇ、Ｈ．、そして、Ｓｅｆｔｏｎ（Ｍ．Ｖ．［１９９３］）代謝の活動、そして、ヒドロキシメチルメタクリル酸塩メタクリル酸メチルのＣＥＯ細胞の増殖（ＫＥＡ−Ｍ．
Ａ．），”細胞移植２：１７５８２；ロバーツ。１に、ほか［１９９６］、ヒドロキシメチルメタクリル酸塩−メタクリル酸メチル共重合体においてマイクロカプセルに入れられるＰＣ１２細胞によってドーパミン分泌、生体適合物質１７：２６７−７５）．フェーズ倒置技術を使用することによって、外側の膜表層形態学は、ナノメートルからミクロンまで孔サイズにおいて変動することができる。第２の方法として、バリアが浸透する状況、希釈剤およびポリカチオン性種の分子量配布によって調整される高分子電解質コアセルベーション反応および分子量中断（ＭＷＣＯ）によってつくられることができること（マシュー（Ｈ．Ｗ．その他［１９９３の］「哺乳類の細胞培養および人工の器官開発（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．）のための合成のコアセルベート・マイクロカプセル）９を訓戒する：５１０−５１９；Ｙｏｓｈｉｏｋｏ、Ｔ．その他［１９９０］、「キトサン−ＣＭＣカプセル（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．）を有する哺乳類の細胞のカプセル化Ｂｉｏｅｎｇ　３５：６６７２；Ｄａｕｔｚｅｎｂｅｒｇ、Ｈ．ほか［１９９６］、Ｐｏｌｙｍ．科学１０１：１４９）。
【００１５】
ｍｕｌｔｉｃｏｍｐｏｎｅｎｔなポリカチオン性重合体の利用は混ざる、そして、膜がこのやり方で生じるときに、ｐｏｌｙａｎｉｏｎｉｃな重合体の建築用ブロックに作られた配合物によるｏｌｉｇｏｃａｔｉｏｎｉｃな種の拡散時間はまた、ＭＷＣＯの制御のときの重要な変数であることを示した。
アルギン酸塩−塩化カルシウム・システムは、半透性のカプセルを生成することの第３の技術を表して、ｍｏｎｏｄｉｓｐｅｒｓｅ（球形の）を生産するために用いた高い製造率で透明なビーズ（Ｌｉｍ、Ｆ．およびＳｕｎ（Ａ．Ｍ．［１９８０］）は、ｂｉｏ人工な内分泌のすい臓（サイエンス２１０）として、小島をマイクロカプセルに入れた：９０８；哺乳類の細胞のための制御膜分子量中断のアルギン酸塩−ポリリシン・マイクロカプセルが設計することを培養する王（Ｇ．Ａ．その他［１９８７］）（生物工学Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　３）：２３１−２４０；Ｇｏｏｓｅｎ、Ｍ．Ｆ．Ａ．［１９８５］（マイクロカプセル化パラメータの最適化）：ｂｉｏ人工なすい臓（Ｂｉｏｔｅｃｈ　Ｂｉｏｅｎｇ　２７）としての半透性のマイクロカプセル：１４６−１５０）。
【００１６】
細胞互換の多糖類として、アルギン酸塩が訴える重合体であって、加えて、カプセルに入れられた細胞の低温保存を容易にすること（Ｒａｊｏｔｔｅ、Ｒ．その他［１９９５］、成人の小島低温保存。の：リコルディ、Ｃ．、細胞移植における編集方法、オースティン：Ｒ．ランド、１７−２４）。しかし、一般的に、輸送特性の制御は、ボリエステル繊維（アミノ酸）を有するアルギン酸塩のポスト・コーティングを必要とするボリエステル繊維−Ｌリジンまたはそれの派生物。
これらの戦略の全てにおいて、膜強さは、組成物、構造および膜の寸法を変えることによって増加することができる。これは、しばしば拡散性の輸送に第２の影響を及ぼす。従って、相互依存している膜特徴は、大部分のシステム、膜強さおよび大量輸送特性においてある。それは、また、重大であるその分子の除外のための基準、孔サイズおよび／または非均一な孔の次元の特徴の比較的幅広い配布によるこれらのシステムの全てにおいて、決定する。正確に現在利用できるカプセル化バリアの輸送特徴を制御することができないことは、選ばれた膜公式化に関係なくそれらの必然的な失敗にリードがある。最近のデータは、ｉｓｏｇｅｎｅｉｃな小島のａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ滅失かａｌｌｏｇｅｎｅｉｃな移植片の不認可にかかわるそれとは別である免疫学の経路によって、膵臓の小島異種移植片の不認可が起こることを示唆する。後者２つのケースの、小島損害が支配的な効果器細胞が細胞障害性ＣＤ８　Ｔ細胞であるｐｒｉｍａｒｙ”Ｔｈｌ”ｉｍｍｕｎｅ反応によって調停されるように見えること（ピーターソン、Ｉ．、Ｄ．およびＨａｓｋｉｎｓ（Ｋ．［１９９６］）は、ＣＤ４　Ｔ細胞クローンによってＮＯＤ−ｓｃｉｄマウスの糖尿病の中で移る：ＣＤ８　Ｔｃｅｌｌｓ（糖尿病４５）のために差動の必要な条件：３２８−３６；Ｈａｓｋｉｎｓ、Ｋ．、そして、ＭｃＤｕｆｆｅ（Ｍ．［１９９０］）ＣＤ４＋小島−特定のＴ細胞クローン（科学２４９）を有する若いＮＯＤマウスの糖尿病の加速：１４３３−６；Ｊａｒｐｅ、Ａ．その他小島を浸透させているｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ細胞人口の血球計算列挙を流す［１９９０］糖尿病前症患者ＮＯＤマウスのＬａｎｇｅｒｈａｎｓ：Ｔｙｐｅのためのａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　ｉｎｓｕｌｉｎｉｔｉｓのモデルの開発私糖尿病（地域のＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　３）：３０５−１７；Ｌｙｔ−２＋およびＬ３Ｔ４＋　Ｔ細胞サブセットが糖尿病の転送のために必要であるミラー（Ｂ．その他［１９８８］）ｎｏｎｏｂｅｓｅ糖尿病患者マウスＩ．ｐｒｉｍｅ２．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４０：５２−８）．対照的に、小島異種移植片の不認可は、ａ’Ｔｈ２によって特徴づけられる』、ＣＤ８細胞以外以外は、ＣＤ４ヘルパーＴ細胞が主な役割を演ずる反応（ウェーバー、Ｃ．その他［１９９０］ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ−糖尿病患者およびＮＯＤマウス（Ｈｏｒｍ．）へのマイクロカプセルに入れられた犬およびネズミ小島異種移植片Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｓ．３５：２１９−２２６；秋田（Ｋ．その他［１９９４］）は、ＮＯＤ／Ｌｔ、ＣＢＡおよびＢＡＬＢ／ｃマウス（Ｃｅｌｌ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　３）の胎児のブタすい臓異種移植片および宿主ｌｙｍｐｈｏｉｄ細胞上のＦＫ５０６および反ＣＤ４療法の中で遂行する：６１−７３；ギル（Ｒ．その他［１９９４］）、ＣＤ４＋　Ｔ細胞は、必要で小島異種移植片拒否（移植Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２６）に充分である：１２０３４；Ｌｏｕｄｏｖａｒｉｓ、Ｔ．ほか（１９９２）、細胞しみ通らない膜の範囲内の異種移植片の滅失のＴ細胞の役割、移植Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２４：２９３８−９；ピアソン、Ｒ．その他ＣＤ−４つの陽リンパ球は、ネズミ異種反応で支配的な役割を演ずる［１９８９］」、移植訴訟２１：５１９−２１；パーカー、Ｗ．ほか［１９９６］（一致しない異種移植片の移植）：チャレンジは、再訪問した（免疫学Ｔｏｄａｙ　１７）：３７３−８）．すなわち、ｘｅｎｏ−認識（ａｌｌｏｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎまたはａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ滅失と異なった）が主にディスプレイ・ペプチドが細胞（ＡＰＣ）を示しているどの宿主抗原を廃品の中から取り出したか、ａｎ”ｉｎｄｉｒｅｃｔ”ａｎｔｉｇｅｎプレゼンテーション経路を経て起こるというかなりの証拠が、提供者タンパク質から宿主・ヘルパーＴ細胞まである（タケウチ、Ｔ．ほか［１９９２］、ネズミ・システムの心臓同種移植片、移植５３：１２８１−９４；異種増殖およびリンフォカイン製造が次第であるモーゼ（Ｒ．その他［１９９０］）ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞、そして、マウスの細胞をａｎｔｉｇｅｎ−ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇしている自己。私」（ｅｘｐ．）Ｍｅｄ．１７２：５６７−７５；異種膵臓の小島移植片の長期の生存がＣＴＬＡ４Ｉｇ（科学２５７）によって誘導したＬｅｎｓｃｈｏｗ（Ｄ．その他［１９９２］）：７８９−９５）．おそらく、ｘｅｎｏｇｅｎｉｃな抗原は、あるどちらか、時折の壊れたカプセルによってリリースしてまたは細胞表層から及ぼされるかまたは壊死であるかａｐｏｐｔｏｔｉｃな細胞から解放された後の完全なカプセル膜全体に放散する。ＡＰＣは、これらの抗原性の細胞構成要素を処理して、Ｔｈ２細胞に発達するＣＤ４＋　Ｔ細胞を活性化する。順番に、Ｔｈ２細胞はＢ細胞の成熟を刺激する。そして、ｘｅｎｏａｎｔｉｇｅｎ特定の抗体を分泌する形質細胞に、それは独自に被処理外国のペプチドを表す。
【００１７】
調査者は、現在、それが免疫性の複合体の世代でもあると思う直接それらのエントリを除外するバリアさえある場合には、必然的な小島細胞滅失に至る小島抗原に新しく形成された抗体をｘｅｎｏａｎｔｉｇｅｎｓまたは既存の自己抗体に結合することによって。（ウェーバー。Ｃに、Ｉ．その他［１９９８］（ボリエステル繊維−Ｌｌｙｓｉｎｅアルギン酸塩マイクロカプセルに入れられたネズミの長期の生存）、中で、自発的に糖尿病のＮＯＤマウスのウサギおよびブタ小島異種移植片：Ｌａｎｚａ　Ｒ、Ｃｈｉｃｋ、Ｗ．、Ｃｅｌｌ　Ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙの編集ハンドブックおよびＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」［ニューヨーク：シュプリンガー出版］）。抗原−抗体複合体は、それぞれそれらの起動に至るマクロファージの表層およびサイトカインを含んでいる様々な低い分子量細胞障害性仲裁者および遊離基（例えばｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１および一酸化窒素）の次の分泌に表されるＦｃ受容器に、能率的に縛る（Ｋｅ、Ｙ．その他完全なフロイントアジュバントによって注射されるＯｖａｌｂｕｒｎｉｎは、細胞融解反応を刺激する［１９９５］」、Ｅｕｒ．。Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９５：５４９−５３）。
【００１８】
生成された抗原−抗体コンビナートのそばの補足滝の起動が小島滅失を強化することにおける重大な要因であることは、また、ありそうである「（マラー−Ｅｂｅｒｈａｒｄ、Ｈ．Ｉ．［１９８８］、分子の組織および補足システム（アンＲｅｖ　Ｂｉｏｃｈｅｍ　５７）の機能：３２１−４７）．免疫性の複合体を回すことに関するＣ３ｂの製造および関連は、細胞表層Ｃ３ｂ受容器を経たマクロファージに、これらの複合体の締め具を強化してもよい（Ｋｒｙｃｈ（Ｍ．その他［１９９２］）は、受容器（Ｃｕｒｒ）を補足する。Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：８−１３）．加えて、Ｃ３ａの相伴う発表は、更に可溶なこのことにより要因の発表を有するローカル好中球反応を誘発する起動およびマクロファージの漸増を強化する（フランク、Ｍ．［１９９１］、燃焼の補足の役割および食菌作用（ＩｍｍｕｎｏＬ　Ｔｏｄａｙ　１２）：３２２−６）．特に、小島拒否の時点でマクロファージおよびＢ細胞の存在下で、支配する強いｐｅｒｉｃａｐｓｕｌａｒ細胞反応が観察されること（ウェーバー、Ｃ．ほか［１９９４］、マイクロカプセルに入れられたネズミ小島をｐｏｌｙ−Ｌｌｙｓｉｎｅ−ａｌｇｉｎａｔｅするＮＯＤマウス腹膜の細胞反応、移植Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２６：１１１６−１１１９；ウェーバー。Ｃに、Ｉ．その他［１９９０］（ＮＯＤマウスのマイクロカプセルに入れられた小島異種移植片の滅失のＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞の役割）移植４９：３９６−４０４）．この発明者による従来の仕事は米国特許出願数字１９９８年９月８日に出願の第０９／１４９０９８号、暫定的な出願番号１９９７年９月８日に出願の第６０／０５８，１９４号、暫定的な出願番号６０／０９１，３９９および１９９８年６月３０日に出願の第６０／１０１，２５２号を含む、そして、１９９８年９月２１日、それぞれ、暫定的な適用６０／１９７，０７２番は２０００年４月１３日、暫定的な適用６０／２２１、２０００年７月２８日に出願の第６１８号、暫定的な適用ｎｏ．に出願した。２０００年４月２０日および６０／２２１に出願された６０／１９８，７９２、２０００年７月２８日に出願の第８２８号、ＵＳ０１／２００１年４月１３日に出願の第１２０９４号およびＰＣＴ出願ｎｏ．ＵＳ０１／１２９１８が２００１年４月２０日出願したＰＣＴ出願（ＰＣＴ出願１９９７年４月１１日に出願の第９７／１６０８０号、適用０８／７２９番、１９９８年９月８日に出願された１９９６年１０月１５日に出願の第９２８号，０９／１９９９年６月３０日に出願の第３４２，９２２号，０９／１４９，０９８、米国Ｐａｔｅｎｔ　Ｎｏｓ）。６，１７１，６１４は，５，７４１，３２５を，６，０７１，５３２が２０００年６月６日出した２００１年１月９日に支給した発行日および４，９０６，４６５は、１９９８年４月２１日、１９９０年３月６日、出た。本願明細書において参照される全ての刊行物は、これと共に矛盾していない範囲を参照することで取り入れられる。
【００１９】
（発明の開示）
本発明は、基板をカバーしている膜−模倣の表層（また、本願明細書において膜−模倣のフィルムと称されて）から成っている生物学的適合性の生体適合物質（または生物学的構成要素）を提供する。
【００２０】
好適な実施例において、基板はヒドロゲルのような水和する基板である。
水和する基板は、膜−模倣のフィルムによる患者に対する交付のための薬を含むことができるかまたは細胞（例えば移植のための小島細胞）から成り立つことができる。表層は、目標に縛るためにその上にさらされる生物活性な分子または患者に植設されるときに、生体内分子が変調するために反応の宿主をつとめる効果があることができるｅ。ｇ．表層は抗血栓形成性でもよいか抗炎症性でもよい、そして、表層にそれによって物質の輸送を容易にするために選択されたサイズの孔があることができる。膜内外タンパク質が親水性クッションによる表層から伸びることができるために、任意の親水性クッションまたは間隔保持装置が基板および膜−模倣の表層の間にあってもよい。そして、自然に膜内外タンパク質を備えている電池の構造を模倣する。
【００２１】
本発明の生物学的構成要素は、表層の中で接着するのを容易にするために直接膜−模倣の表層の下で、好ましくはアルキル化された層を提供する。
アルキル・鎖は、それが有るときには親水性クッションによって完全に伸びることができる。基板は、任意に高分子電解質で処理されることができるかまたは膜−模倣のフィルムの充電される締め具を容易にする反対の位置に充電される高分子電解質の層を交替させていることができるかまたは基板に膜−模倣のフィルムの下で、層をアルキル化することができた。実施例において、本発明は水和する基板の上へ高分子電解質を合成するステップによって、安定した、アルキル化された表層でおおわれている水和する基板から成っていて、長い原子連鎖を含むアルカンを含んでいる反対の位置に充電される両親媒性の重合体を有する高分子電解質の表面をおおっている生物学的構成要素を提供する。好ましくは、その後で、膜−模倣の表層は、アルキル化された表層の上に形成される。基板の上に横たわっている生物学的構成要素の部分は、本願明細書においてａｎ”人工膜と称される。」高分子電解質はおおわれていることができるかまたは水和する基板の上に複雑になることができる。そして、反対の位置に充電される高分子電解質のコーティングが続く。反対の位置に充電される高分子電解質の交替しているいくつかの層は、このような方法で確立されることができる。
医療用に補綴の植設（人工の器官または組織）として設計される本発明の製造された目的に対する用語”ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ”ｒｅｆｅｒｓは、人間であるか動物のボディに、配置のために設計される交付装置または他の目的に薬を混ぜる、または、生体内である細胞を送ることと接触して処理装置、組織または患者の器官。高い湿気内容および親水性表層を有するヒドロゲルのような物質に対する用語”ｈｙｄｒａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ”ｒｅｆｅｒｓ。
【００２２】
水和する基板は、以下を有することができる：
自然であるか合成コラーゲン、ゼラチン、アルギン酸塩、キトサン、ｐｏｌｙｈｅｍａは、ヒドロキシエチルメタクリレートする（ポリアクリルアミド）再結合物コラーゲン・タンパク質、タンパク質−模倣のポリペプチド重合体、細胞、組織、器官、微生物または多糖類またはタンパク質運送負担、そして、できる本発明の高分子電解質を有する複雑にする。
【００２３】
水和する基板は、また、金属のような他の材料または水和する層でおおわれているプラスチックから成ることができる。人間であるか動物のボディに、挿入用の技術にとって公知のいかなる水和する材料も、本発明において使われることができる。
【００２４】
好適な実施例において、アルギン酸塩ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓまたは細胞は、本発明の人工膜に入っている。基板が本質的に備えるかまたは備えるために処理されるときに、本発明の水和する基板は、高分子電解質−おおわれている基板に関しては、接着している負担−負担によってまたは共有結合結合によって基板に付属することができる、共有結合結合の場所。
【００２５】
好適な実施例において、基板は宿主に植設される細胞から成る。
この種の細胞は、小島細胞、肝細胞、副甲状腺細胞、甲状腺の細胞、神経単位、細胞および遺伝子工学による細胞が生物活性な合成物を分泌するのを予定したセルトーリ、ｅを含む。ｇ．例えば神経変性不調、内分泌の不足、ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ、扇動的で悪意のある状況の治療のための。水和する物質をおおっている高分子電解質への用語”ｃｏａｔｅｄ”ｗｉｔｈ関心は、少なくとも、前記高分子電解質がイオンであるか共有結合結合によって前記表層に取り付けられるように、前記基板の一部の表面が高分子電解質によってかぶせられることを意味するアルキル化された表層への用語”ｓｔａｂｌｅ”ｗｉｔｈ関心は、使用中に遭遇される剪断力に耐えることが可能であるということを意味する。好適な実施例において、好ましくは最少の約２６のｋＴで、モノクロナール抗体から縛られた抗原を除去することを概して必要とするそれより大きくてより好ましくは、耐えることが可能な力を必要としている手段が壁について少なくとも力からはぎ取る膜−模倣の表層に関する用語”ｓｔａｂｌｅは、率から２０００のｓｅｃ−ｌをはぎ取る。
【００２６】
「本発明の両親媒性のｐｏｌｙｍｅｒｓ”ｕｓｅｆｕｌは、親水性下層および脂肪親和性外側の膜−模倣の層にイオンであるか共有結合結合を経て取り付けられることができるいかなる重合体も含む。好適な両親媒性の重合体は、以下を含むジアルキルを含有する重合体を含む：アルキル基を含んでいる構成要素および親水性クッションを提供している構成要素。
【００２７】
両親媒性の重合体は、また、基板に安定付着を提供している構成要素を含むことができる。
【００２８】
好適な三量体は、第３のモノマー、３−アクリルオイル−３−オキサプロピル−３−（Ｎ、Ｎ−ジオクタデシルカルバモイルを有する２−ヒドロキシメチルアクリル酸塩（ＨＥＡ）および２−（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉｏ）エチル・メタクリル酸塩（ＭＴＥＭ）である）−、６の統計の組成物で、プロピオン酸エステル（ＡＯＤ）：３：１ＨＥＡ：ＡＯＤ：ＭＴＥＭ。硫黄を含有するモノマーが、基板に縛るアンカー、小嚢融合のためのアルキル・鎖の命じられた層をさらして、疎水性モノマーＡＯＤが表層に移るのに対して。ａ”ｃｕｓｈｉｏｎ”ｗｈｉｃｈが固い水のインタフェースでアルキル化された鎖の自己集合を容易にするように、親水性ＨＥＡ構成要素は行う。
脂質小嚢の融合は、それからそれとして技術にとって公知の手段によってそのようなものを実行されることができる工場（１９９３の）Ｌａｎｇｍｕｉｒ　９：２７６４；Ｌａｍｐａｒｓｋｉほか（１９９３の）Ｊ．Ａｍ．化学協会１１５：８０９６、その他。もう一つの実施例では、三量体は２−ヒドロキシメチルアクリル酸塩（ＨＥＡ）、３−アクリルオイル３−オキサプロピル−３−（Ｎ（Ｎ−ジオクタデシルカルバモイル））プロピオン酸エステル（ＡＯＤ）およびスチレン・スルホン酸塩を６のモル比率に含む：３：１。静止している構成要素のないＨＥＡおよびＡＯＤの共重合体は、また、ヒドロゲル基板の上へキャスティングに役立つ好ましくはで１：１つの比率。共重合体がアルギン酸塩または他のヒドロゲル基板によって使われるときに、高分子電解質は省かれることができる。アルキル・鎖（置換分の有無にかかわらず）が前記表層に共有結合してまたはイオンによって結合されるＡｎ”アルキル化した表層１。
アルキル化された表層は、本発明（例えばそれとともに関連する膜−模倣の表層および／またはいかなる生物学上作動中の半分も）の生物学的構成要素の更なる要素のイオンであるか共有結合結合を容易にするために充電される置換分から成ることができる。代わりにまたは加えて、アルキル化された表層は、表層構成要素または半分がもつれることができるスパゲッティのような質量を示すことができる。約６を有するアルキルまたはアシル・鎖に対する少なくともまたは最少の約８つのカーボン、より好ましくは、約１４〜約２４および最も好ましくは約１６〜約２２での用語”ｌｏｎｇ−ｃｈａｉｎ”ｒｅｆｅｒｓ。
用語ｓ”アルキルａｔｉｏｎ（アルキル化される）アシルおよび他の置換されたアルキルの使用が鎖でつなぐａｎｄ”アルキル鎖”ｉｎｃｌｕｄｅ。この種の鎖はまっすぐでもよくてまたは分岐して、アミンの追加の置換分（例えばハロゲンを含んでいるそれら）を含むことができる。そして、酸素、硫黄、共通のｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ−ａｎｄ他、合成物が人間であるか動物性細胞および組織において見つかる。明らかにある否定的に充電されるかボリエステル繊維−Ｌリジンであるアルギン酸塩のような明らかにまたは否定的に充電される重合体の物質が満たした用語”ｐｏｌｙｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ”ｍｅａｎｓ。Ａ”膜−模倣の表面”ｏｆ本発明は、本発明の人工膜の外側の層である。Ａｎ”人工　膜”ｏｆ本発明は脂質表層（好ましくはリン脂質表層）であってもよい。そして、基板をカバーする。好ましくは、人工膜は、以下を有する：
外側の脂質表層の付着を容易にするためにアルキル化された表層を示している両親媒性の重合体の上に横たわっている膜−模倣の表層。人工膜または表層への用語”膜模倣性”ｗｉｔｈ関心は人工膜または表層に前記膜または表層に細胞、組織、血液、器官または他の生きている物質で前記膜間の相互作用を調整するのを可能にしている少なくとも一つの特性があることを意味する。そして、前記膜または表層があった表層または基板が配置される。この種の変調は、血栓形成性、扇動的な反応の減少、薬のような分子の選択的な輸送の減少を含む、膜−模倣の表層が動いている受容器のような半分によって置かれるかまたはいずれを自然に起こっている膜の表層および他の調節的な効果に取り付けたか、宿主からの分子の隔離する。本発明の膜−模倣の表層は、脂質（好ましくはリン脂質）の中で形成されることができる。
【００２９】
好適なリン脂質はホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、シングルの鎖・エステルのようなボロ両親媒性物質または周期的エステルまたは、例えば、エーテルにリンクされたリン脂質がジアルキル（Ｃ１０−Ｃ２０）、エーテルにリンクされたリン脂質、モノラルまたはリポペプチドがそれらのような活用するエーテルにリンクされたリン脂質（例えばｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｏｌｉｎｅ、ホスファチジル基エタノールアミン、ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃな酸）が記載したジアルケニル（Ｃ１０−Ｃ２０）のようなリン脂質をｅｔｈｅｒ−ｂａｓｅｄしたエーテルにリンクされたリン脂質（ダブル・鎖・エステルまたはエーテルにリンクされたリン脂質）であるＰａｔｅｎｔがＰｕｂｌｉｓｈｅｄしたインターナショナルＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ＷＯ　００／０００２３９、そして、米国特許第６，１７１，６１４号（合成の）、再結合物または天然のペプチドは脂質グループに接合したどこで。ペプチドはそれらの生物学的活動を基礎として選ばれる；例えば、細胞粘着力サイト、抗血栓性であるか抗炎症性の特徴、合成であるか天然のオリゴ糖類のような糖脂質同根語、多糖類、グリコサミノグリカン、ヘパラン硫酸塩の含んでいる派生物、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、ケラタン硫酸塩および脂質グループに活用されるヒアルロナン、そこにおいて、グリコ・グループは、その生物学的活動（例えば細胞粘着力サイト、抗血栓性であるか抗炎症性の特徴）を基礎として選ばれる。
【００３０】
用語”リン脂質”ｉｎｃｌｕｄｅｓリン脂質は、重合可能な半分（リン脂質分子につき好ましくは一つの重合可能な半分だけ）から成るために誘導しておよび／またはアルキルアミノグループ（例えばコリンまたはエタノールアミン）によって誘導した。リン脂質をｄｅｒｉｖａｔｉｚｉｎｇするための適切な重合可能な半分は、アクリルオイルオキシ、メタクリルオイル、ジエノイル、ソルビル、スチリル、アクリルアミド、アクリロニトリル、Ｎ−ビニル・ピロリドンである。
好適なリン脂質は、ホスファチジルコリン・リン脂質である。
実施例において、リン脂質は構造（Ｉ）を有する：そこにおいて、Ｒｌは、（Ｃｌ−Ｃ３０）アルキル基である；Ｗは、（Ｃｌ−Ｃ３０）アルキル基である；ｍは、１−４である；ｎは、１−４である；Ｙは、アルキルアミノグループである；そして、Ｚ　ｉｓ−Ｈまたは重合可能な単量体のグループ「Ｒｉが＝Ｈ　Ｚに取り付けられる場合、Ｒ２がＺ　＝に取り付けられる重合可能な単量体のグループ、そして、ＲｌがＺ　＝に取り付けられる、重合可能な単量体のグループ、そしてＷが、Ｚ　＝−Ｈ．に取り付けられる。
より好ましくは、生物学的適合性の生体適合物質は、構造（Ｉ）を有するそこにおいて、Ｒｌは、（Ｃｌ２−Ｃ３０）アルキル基である；Ｒ２は、（Ｃ８−Ｃ１４）アルキル基である；ｍは１である、そして、ｎは１である。好適な実例の、生物学的適合性の材料が１−ｐａｌｍｉｔｏｙｌ−２［１２−（アクリルオイルオキシ）ドデカノイル］であること−ｓｎｇｌｙｃｅｒｏ−３−ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ．脂質分子のアクリル酸塩グループは重合する。そして、二次元の平面の表層のネットワークを形成する。
【００３１】
リン脂質は、また、以下を有することができる：
重合可能なリン脂質の混合物およびそれほど非常に非重合する領域がトロンボモジュリン活動の最適化または活動がそれらの容量に依存している膜−バウンド受容器の活動またはその基板または共同因子の容量の最適化のために発生する非重合可能なリン脂質は、膜−模倣のフィルムを移動しておよび／または集まる。
【００３２】
好ましくは、膜−模倣の表層は、穴の多い膜による押し出しによってそこからｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢の統合によって形成される。
【００３３】
小嚢は、それから長い鎖および重合によってアルキル化される表層の上へ溶かされる原位置に持ち歩くｅ。ｇ．、および／または技術にとって公知の重合創始者については、光重合によって。
【００３４】
膜−模倣の表層は、機能性（例えば下にある表層から伸びているアルキル・鎖上のアミンまたはアシル基）に、脂質分子の中でクロスリンクすることによって共有結合して下にあるアルキル化された表層にリンクされることができる。
【００３５】
膜−模倣の表層は、また、下にある表層から伸びているアルキル・鎖を有する脂質分子上のアルキル・鎖のイオンに接着することまたはもつれによって非共有に下にあるアルキル化された表層を結ばれることができる。
【００３６】
以下のテーブルは、脂質および下にあるアルキル化された表層間の結合の好適な若干のタイプを示す：被支持脂質二分子層の表ｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔな脂質アルキル化した　表面　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎアルキル・アルキル：ｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔな疎水性重合体のアルキル・アルキル：共有結合疎水性アルキル・アミン・アルキル・アミン：共有結合ａｃｙｌａｔｉｏｎアルキル作動中のエステル・アルキル・アミン：共有結合ａｃｙｌａｔｉｏｎアルキル・アクリル酸塩アルキル・アミン：マイケル加算本発明の膜−模倣の表層は、好ましくは２レベルの付着またはクロス反応（ｉ）から成る：
ｅ．，　リン脂質分子の平面の中で（ａ）。ｅに、異なるリン脂質アルキル・鎖の中で連結して、ｇ．、そして、平面間の（ｂ）ｅ。ｇ．、リン脂質単分子層および基板表層間の互いに嵌合している鎖。
あるいは、以下を含む合成ｓｅｌｆａｓｓｅｍｂｌｉｎｇしている両親媒性物質の中で、膜−模倣の表層は、形成されることができる：
上部上の、そして、底でのリン脂質頭グループを有するボロ両親媒性物質はアルキル・鎖によって分かれた。そして、それによって親水性クッションを含んでいる表層が原位置に小嚢の重合なしで形成されることができる。
膜−模倣の表層は、選択されたサイズの下で分子の輸送を許可するために選択されたサイズの孔から成るために形成されることができる。
例えば、実施例において、分子量を有する分子は、約７０ｋＤを超える、表層を通過することができなかった。
【００３７】
好適なサイズ範囲は、以下の通りである：
約２０〜５０Ａ、５０〜１００Ａ、２０〜５０Ａおよび、約１０パーセントをプラスあるいはマイナスした、１００〜２５０Ａ。
孔は、技術にとって公知の手段によって形成されることができる。
好適な実施例において、孔はこの種の分子がそれの形成の後、膜から浸出することができるそれによって技術にとって公知の手段によって、重合可能な宿主分子を有する膜をｔｅｍｐｌａｔｉｎｇすることによって形成されるかまたは篩のような挿入物として機能するために膜の範囲内で保持されることができる。
【００３８】
この種の分子は、それについてアルブミン、ナノスフェアおよび選択されたサイズおよび形（例えばポリエチレン酸化物、ポリアクリルアミド、ボリエステル繊維（ヒドロキシメチルアクリル酸塩）（ボリエステル繊維（ＨＥＡ））、ボリエステル繊維（ヒドロキシメチルメタクリル酸塩）（ボリエステル繊維（ＨＥＭＡ））、ボリエステル繊維（ビニルピロリドン）、ポリアクリル酸、ポリスチレンおよびブロック共重合体）のデンドリマーからなる群から選択されることができる。
好ましくは、クロスリンクされることができる（共有結合して、連結されて）かまたは膜−模倣の表層に、非共有に本発明の一部の生物学的構成要素に、好ましくは連結されることができる半分によって、デンドリマーの各々の腕は、終了される「（ｉ．ｅ。脂質分子に）、または、基板に。
さまざまな官能基から成る生物活性な分子（ｅ。ｇ．、脂質、ペプチド、砂糖、その他）膜−模倣の表層が重合する表層に対する重合する、このことにより貢献している新しいか指定された生化学特徴である基板を取り入れられることができてまたは追加されることができる。
【００３９】
所望のモジュール式の装置を基板に最初に取り付けることによって（ｅ。ｇ．、重合体または金属、または、それの派生物）、そうすると、ｓｉｔｕ重合において本発明を実行すること「不安定な、永続しないシステムの不利な点を解決する膜−模倣のシステムの表層特性およびｂｉｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙの所望の特性を提供する。
【００４０】
本願明細書において用いられる用語”生物活性　ｍｏｌｅｃｕｌｅ”ａｓは、複数（生物活性な分子）を含んで、それの活発な部分から成る分子の頭を切って短くして、いかなる分子もまたはそれの部分に関連する、それは生きている有機体に測定できる影響を及ぼす。ｅに、ｇ．生存能力または機能を強化してまたは病理学の状況を最小にする。
【００４１】
本願明細書において用いられる用語”生物活性　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ”ａｓは、病原性の状態を修正するために患者の管理のための薬を含む。
患者への移植の装置は、プロステーゼ、人工の器官、細胞、薬交付装置または治療的な装置のいかなるタイプも含む。
【００４２】
この種の装置としては、透析管、透析膜、中空の繊維、膜酸素供給器、人工の血管、人工心臓弁、左の心室の援助装置、人工心臓、人工肺、人工腎臓、人工肝臓、脈管の移植片、人工心臓弁、人工のジョイントが挙げられるが、これに限定されるものではない、カテーテル、合成で眼球内のレンズ、電極、人工軟骨、靭帯、腱、骨および骨移植片、組織増援、細胞および／または組織から成る組織足場を含んでいる組織足場、細胞を含むカプセル、血管の範囲内の使用のための腔内な広さ、胆汁のシステムまたは他のうつろなオルガン。この種の装置は、造られることができてまたは重合体、ガラス、金属または技術にとって公知のいかなる物質もおおわれていることができて、多孔性にされてもよいか無孔にされてもよい。この種の開口部を充満状態にするかまたはチューブ、導管などの内面をおおうために、本発明の水和する基板は、また、植設された装置の開口部に組み込まれることができる。
【００４３】
本発明の好適な導管は穴の多い発泡させたポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）を含む、または、ゼラチンまたはアルギン酸塩を含浸されるダクロン・プロステーゼはアルギン酸塩およびボリエステル繊維−Ｌリジンを有する連続したコーティングによってあとに続いた。しかし、導管はいかなる合成重合体でもできていることがありえる（ＰＴＦＥ、ポリエチレン・テレフタル酸塩（ＰＥＴ）、ポリエステル・ウレタン（ＰＥＵ）または適切に被処理自国のｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ（例えばコラーゲンまたは多糖類）。この種の装置を作る方法は特許協力条約出願特許協力条約／ＵＳ０１／２００１年４月１３日に出願の第１２０９４号に記載されている。そして、これと共に矛盾していない範囲を参照することで本願明細書において取り入れられる。
【００４４】
本発明の生物学的構成要素に関して使用される用語”ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ”ａｓは、構成要素が中で移植の後の扇動的な反応または人間であるか動物性ティッシュとの接触を誘発しなくておよび／または血栓症の傾向がある表層を提供しないことを意味する。膜−模倣の表層は、抗血栓形成性であるために形成されることができる。例えば、本発明の膜−模倣の表層に抗血栓形成性な特性があることを続けて集めるときに、リン脂質頭グループはそうする。更に、膜−模倣の表層は、後述するように、抗血栓形成性な半分を表層に組み込むことができる。抗血栓形成性な半分は技術にとって公知のいかなる抗血栓形成性な分子にも含むことができる。そして、抗血栓性で、抗血小板でフィブリン溶解促進性なエージェントを含む。抗血栓形成性な半分は、トロンボモジュリン、内皮細胞タンパク質Ｃ受容器、脈管のＡＴＰ　ジホスホヒドロラーゼ、アルブミン、ヘパリン、プロスタシクリン、ヒルジン、リジンからなる群から選ばれていてもよくてそれのアナログでもよくて他の抗血栓形成性な技術にとって公知で半分でもよい。タンパク質断片は、脂質または他の膜−挿入疎水性のグループにも連結することができる形成重合する膜−模倣の表層（膜−模倣の表層の形成の間、他の膜部品で嵌入されるために、ｉ．ｅ．）、または、膜−模倣の表層（更に形成された表層をｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅするために、ｉ．ｅ．）の形成の後の脂質または他の膜−バウンド・グループに連結する。好ましくは、それは原位置に重合の前にリン脂質に加えられる、そして、この実施例にて説明したように、抗血栓形成性な分子の生物学的活動を破壊しないような方法で、重合は行われる。
【００４５】
脂質トロンボモジュリン変異体が酵素で（総合して）発生するトロンボモジュリン断片のような使われることができる、または、再結合物方法によって、それはいずれでも含む、または、ＥＧＦを含む細胞外領域の全ては４−６を繰り返す。（Ｓａｄｌｅｒ（Ｊ．Ｅ．［１９９７の］Ｔｈｒｏｍｂ．）Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ　７８［１］：３９２−３９５；そして、Ｅｓｍｏｎ（Ｃ．Ｔ．［１９９５の］ＦＡＳＥＢジャーナル９）［１０］９４６−９５５。）Ｓｕｃｈ脂質−修正されたトロンボモジュリンｓが、備えられることができる適切な宿主のトロンボモジュリン分子の細胞質外な領域を表すこと。使用される抗血栓形成性な半分の量は、本発明の膜−模倣の表層から成る植設と比較して、測定できる抗血栓形成性な反応が生じないのに十分である。好ましくは、膜−模倣の表層の表層範囲の量は、約１０および約１００％の間にある。ホスファチジルエタノールアミンのうちの少なくとも１つおよび人工の表層上のホスファチジルコリン・グループの存在はかなりトロンボモジュリンの生物学的活動を改善する、または、先端を切ったトロンボモジュリン派生物は内部から発生するタンパク質Ｃ起動抗凝血剤経路の起動を経たｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｅｓｉｓを最小にする観点から、そして、同様に植設された医学の材料のための生体適合性を改良する。膜−模倣の表層は、抗炎症性であるために形成されることができる、ｅ。ｇ．植設された材料（例えば重合体および人工組織）、細胞および器官の宿主不認可を避けるために。ＩＬ−１０、ヒアルロナン、ヘパラン硫酸塩、ヘパリン、コンドロイチン硫酸塩、ケラタン硫酸塩、デルマタンの硫酸塩またはａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙアナログおよびそれの派生物がそうすることができる抗炎症性の半分（例えばトロンボモジュリン、内皮細胞タンパク質Ｃ受容器、脈管のＡＴＰ　ジホスホヒドロラーゼ、ヒルジン、アネキシンまたはＨＬＡ−Ｇ）は、膜に組み込まれる。ヘパリン、ヘパラン硫酸塩、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、ケラタン硫酸塩およびヒアルロナンのような自然のグリコサミノグリカンは、抗炎症性のネオグリコカリクスを膜−模倣の表層の上に形成するために用いてもよい。使用される抗炎症薬半分の量は、本発明の膜−模倣の表層から成る植設と比較して、測定できる抗炎症性の反応が生じないのに十分である。好ましくは、膜模倣性な表層の表層範囲の量は、約１０および約１００％の間にある。
【００４６】
本発明の生物学的構成要素は、また、生物学的構成要素が植設された宿主の分子に縛るためにそれに対して連結される目標としている半分を有することができる。役立つ目標としている半分は、技術にとって公知で、ビオチン、ｍａｌｅｉｍｉｄｅ、ｍａｌｅｉｍｉｄｏｃａｐｒｏｙｌ（ＥＭＣ）、炭水化物およびさまざまな抗体およびタンパク質のためのリガンドを含む。引きつけられる分子は、アビディン、ストレプトアビジン、チオールを含有するタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖類、レクチン、酵素および抗体を含む。
【００４７】
以下のテーブルは好適な脂質リンカーを示す。そして、取り入れられることができるかまたは膜−模倣の表層に付属した半分および接着することのタイプが含まれる：
リンカーを目標とすることの表
脂質リンカーＰａｒｔｉｃｌｅ　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ（膜上の）は、ビオチン・アビディン（ｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔなストレプトアビジン）をＴａｒｇｅｔｅｄした：
タンパク質（共有結合）をｔｈｉｏｌ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇしている水素結合ｍａｌｅｉｍｉｄｅ：
ｔｈｉｏｅｓ用語ａｌｅｉｍｉｄｏｃａｐｒｏｙｌ（ＥＭＣ）ポリペプチド、ペプチド、ｐｏｌｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ炭水化物レクチン、酵素ｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔ：
水素結合リガンド抗体（ｎｏｎｃｏｖａｌｅｎｔなタンパク質）
用語”ｐａｔｉｅｎｔ”ｍｅａｎｓ人間または動物（好ましくは哺乳類）。
本発明の生物学的構成要素が、薬をその中で取り入れることによって薬交付のために使われることができる。
薬は、膜−模倣の表層にまたは生物学的構成要素（例えば水和する基板）のいかなる基底部分にも組み込まれることができる。
【００４８】
好適な実施例の、本発明が膜模倣の表層の一部として成り立っている生体適合物質にリン脂質または重合可能な単量体のグループによって派生的なリン脂質を提供することｉ．ｅ。単一の重合可能な基（ｅ。ｇ．（アクリルオイルオキシ）メタクリルオイル、ジエノイル、ソルビル、スチリル、アクリルアミド、アクリロニトリル、Ｎ−ビニル・ピロリドン、モノフォニックのビス・アクリル酸塩（アクリルオイル、メタクリルオイルおよびソルビル）、モノフォニックのビス・ジエン、モノフォニックのビスジアセチレン、モノフォニックであるかビス−スチリルグループ、モノフォニックのビス・チオール、モノフォニックのビス二硫化物、その他）。
【００４９】
役立つ半分は、下で表される：
ウゾーｗ　ｗ　Ａｃｒｙｌ　ソルビル　ｌ｛ｉ　ｓＯ　Ｘ、私ＳＩ−ＳＨ　メタクリルオイル　ジエノイル　ジアセチレン　スチリルチオール二硫化物。
【００５０】
この種の生体適合物質リン脂質分子は、付属する自動集められた単分子層を形成する、または、吸収する（ｅ。疎水性の相互作用、その他で、ｇ．）重合可能な単量体グループの生体適合物質リン脂質半分がｓｉｔｕ．においてｐｈｏｔｏｐｏｌｙｍｅｒｉｚｅｄされる基板に。
【００５１】
本発明の生体適合物質は、少なくとも２レベルのリン脂質分子（ｅ）の平面の中の付着またはクロス反応（ｉ．ｅ．）から成る。ｇ．，　ｅを、そして、平面との間に、異なるリン脂質アルキル・鎖の、結びつける。ｇ．、リン脂質単分子層間の互いに嵌合している鎖、そして、基板表層。
【００５２】
本願明細書において提供される小嚢融合および光重合状況は、以前に使用する重合状況、生物学上活性分子のこのように調停しているより少ない不活化、ｅよりきつくない。ｇ．トロンボモジュリン．本発明の人工の細胞膜は、他の免疫調節高分子を有するより複合の合成構造のためのテンプレートとして作用するその能力による同程度よく、チャネル、運搬装置および孔の存在下で、界面の輸送を制御するその能力を原因として生じるので、免疫隔離バリアに改良された性能特徴を供給する。
本発明の好適な実施例において、膜−模倣のｇｌｙｃｏｃａｌｙｘは厩舎から成って提供される。そして、膜のような二分子層が水和する小島で支えた脂質がアルギン酸塩基板をカプセルに入れる。人工の分子の孔およびチャネルをつくるために、輸送特性はボリエステル繊維樹状突起の（酸化エチレン）重合体の挿入によって合わせられる、そして、補足起動およびマクロファージ粘着力に対する障害として、ｍａｌａｄａｐｔｉｖｅな扇動的な反応はグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）ｎｅｏｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄｓの編入によって調整される。ヘパリンおよびコンドロイチン硫酸塩が、粘着力を最小にするために重合可能なリン脂質高分子上のぶら下がったグループとして使われる。本発明の図として、本願明細書において記載されているように、豚の小島はカプセルに入れられる。提供者膵臓の小島移植片は良い生存性（小型の安定性生体適合性）を示す、そして、ｅｕｇｌｙｃｅｍｉａは維持される。本発明の人工の細胞膜は、表層および大量輸送特性を強化した。この種のマイクロカプセルに入れられた膵臓の小島異種移植片は、インシュリンに依存する糖尿病ｍｅｌｌｉｔｕｓの処理のｅｕｇｌｙｃｅｍｉａを元に戻すための効果的戦略である。グリコサミノグリカンｎｅｏｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄｓおよび、膜−模倣のバリアの構成要素として、はっきりした分子の孔は、カプセルに入れられた小島を逆宿主免疫反応から保護する。
【００５３】
（発明の詳細な説明）
好適な実施例において、便利な手段を介入している重合体クッションを有する表層アルキル化のために用意している陰イオン静止しているグループを有する両親媒性の重合体から成る人工膜は、提供される。モノａｃｒｙｌａｔｅｄされた脂質の表層−被支持アセンブリの形成に続いて、ｐｈｏｔｏｉｎｉｔｉａｔｅｄされた重合は、膜を安定させるために実行される。この人工膜は、高い剪断率環境において安定していて、界面の分子の輸送を調整することができる。加えて、システムがこの実施例にて説明したように、細胞カプセル化バリアとして使われることができる。
【００５４】
本発明も、内部から発生するタンパク質Ｃ抗凝血剤経路のローカル起動によって、血栓形成および再狭窄を制限することによって小直径の臨床耐久性を強化する方法に脈管の移植片を提供する。この発明の膜−模倣の組立てへのトロンボモジュリンの編入は、生理的に支配的な抗凝血性のメカニズムに基づく能動的に抗血栓形成性な動脈の生体補綴を生成する。
【００５５】
本発明は、血行力学条件．−Ｆｏｒ＄ｅｘａｍｐｌｅの範囲の下で血液−材料インタフェースで働いているこの発明能動的に抗血栓形成性なメカニズムの人工の膜システムを識別して、結合することによって、内部から発生するタンパク質Ｃ抗凝血剤経路の活性剤として、トロンボモジュリン（ＴＭ）を含む膜−模倣のアセンブリが特にこの目的に役立つことはあり得るようにされた。自然な細胞膜は、生理的に血液凝固の制御に関連する分子の認識プロセスに参加するその能力を原因として生じるので、抗血栓形成性な表層の設計のための重要な方法を決める。内皮で滑らかな筋肉細胞の腔内な表面の上に形成される膜内外タンパク質として、トロンボモジュリンはタンパク質Ｃ経路の臨界調節であって、通常で傷ついた血管の熟練工である主な抗凝血性のメカニズムを表す。かなり、その触媒作用の効率は、脂質二分子層の範囲内で直接その局地化に関する。膜−模倣のアセンブリは厩舎に組み込まれるＴＭから成る本願明細書において提供される。そして、基質支持される、脂質膜のような二分子層。これらの生体模倣的な材料は、タンパク質Ｃを活性化することができて、ｖｉｔｒｏの動脈で静脈の流れ状況の下で、そして、中で活発に開始および凝固方法の普及を管理することができる。
【００５６】
具体的には、ａｎ”ｏｎ−ｄｅｍａｎｄ”ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ反応の仲裁者として、トロンボモジュリンを取り入れている膜−模倣の薄膜は提供される、そして、タンパク質Ｃ起動およびトロンビン生成を調整する際の血行力学流れ制度の役割はこれらの膜−模倣のシステムを使用して定義される。
膜−模倣のインタフェースに組み込まれるトロンボモジュリンは、生体内に血栓形成およびａｎａｓｔｏｍｏｔｉｃなｎｅｏ腔内な過形成の開発に影響する。小さい直径脈管のプロステーゼは、小板およびフィブリノゲン沈澱物に抵抗する生体安定な表層を形成するためにＴＭを含む膜−模倣の部品で機能化されることができる。細胞−細胞て細胞−マトリックス相互作用は、内皮再生を管理する。生体内内皮再生の生物学的調節は、生体補綴設計が、一つには、生体模倣的な材料から成る合成構造に基づく組織工学のための出発点として役立つ。内皮細胞は、グリコプロテインおよびプロテオグリカンを平滑筋細胞原形質膜から成る合成の基板を通じて移ることによる裸出怪我を修理して、分泌しておよび／または吸着した。この環境の範囲内で、細胞間の通信は、可溶な要因の双方向性の交換によって、そして、直接の接触調停された相互作用によって調停される。Ｅ．ｇ．、特定の重要性の平滑筋細胞−表層専門化、内皮移動の方法ｆｉｂｒｏｎｅｘｕｓにある；いずれがｔｒａｃｋｌｉｋｅと記述されて、細胞表層から発していて、他の細胞またはマトリックス構成要素に連絡する細胞外ｆｌｂｒｏｎｅｃｔｉｎフィラメントによって特徴づけられるか、最も一般の変化。
二量体が脂質であってもよいように、フィブロネクチンは細胞によって分泌される−変更して、そして、３種類のモジュール式のタンパク質装置の構成される、それは固有の機能の領域に組織される。これらの領域は、ｉｎｔｅｇｒｉｎｓのような内皮細胞−表層受容器の結合する場所を含む。従って、脈管の壁怪我に続いているフィブロネクチン合成のｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎは、内皮再生の方法の間、細胞移動のためのアンカーとして作用するサイトを結合している細胞の増加する数を生む。同様に、内皮修復方法の第２の重要な調節は、ヘパランの硫酸塩（ＨＳ）プロテオグリカンである。そして、それは、脈管の平滑筋細胞の表面上の、豊かにうそをついて、そして、ｐｅｒｉｃｅｌｌｕｌａｒマトリックスに分泌される。それらの表現は、上に向かう管理された以下のｄｅ−ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｉｚａｔｉｏｎ怪我である；特に、周囲のマトリックスのｐｅｒｌｅｃａｎおよび細胞上のｓｙｎｄｅｃａｎｓ　１および４は、表面化する。ヘパラン硫酸塩は、ヘパラン−締め具サイトカインのためのローカル倉庫および交付デポーとして作用することによって内皮運動性に影響する。このように、単独であるいは、より複合の原形質膜アセンブリの構成要素として、フィブロネクチンおよびヘパラン硫酸塩は、癒えている脈管の壁のための重要な適応反応として役立つ。
【００５７】
このように、本発明は膜−ａｎｄグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）からなる合成構造に基づく動脈のｂｉｏｐｒｏｓｔｈｅｓｅｓを提供する−医学の植設適用のために十分に強い模倣の構成要素。これらのアセンブリへの種が活発なｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｉｚａｔｉｏｎ．において容易にする適当なペプチドの編入多くの膜ベースの生理的プロセスは、また、膜の脂質構成要素に加うるに、ｎｏｎｔｈｒｏｍｂｏｇｅｎｉｃな環境を維持することに役立つ。内皮ライニングの部分的なロスにもかかわらず、腔内な修復方法は生理的反応のために明白な容器血栓症がない場合、しばしば起こる。そして、それは能率的に凝固滝および小板起動を調整する。明らかに、一酸化窒素の発表および容器によるｐｒｏｓｔａｃｙｃｉｎは、限度小板起動および集合を壁で囲う。しかし、血液凝固の抑制は、主に２台の交互のメカニズムによって成し遂げられる：セリン・プロテイナーゼ抑制剤（また、周知のａｓ”ｓｅｒｐｉｎｓ）」。そして、それは、厩舎１の形成による行為：それらの目標酵素を有する１つのモル複合体および凝固因子Ｖａおよびヴィヤの不活化に至るタンパク質Ｃ経路。アンチトロンビンＩＩＩ（ＡＴＩＩＩ）および組織要因経路抑制剤は、血栓形成を禁止するｓｅｒｐｉｎｓの両方の実施例である。Ｓｅｒｐｉｎによって媒介される血液凝固の阻止方法は、主に硫酸で処理されたｇｌｙｃｏａｓｍｉｎｏｇｌｙｃａｎｓ（特にヘパラン硫酸塩）に縛るそれらの能力のために、内皮で滑らかな筋肉細胞の表面に限定される。さらに、ＥＣＭにおいて、平滑筋細胞表層上のまたは隣接した無傷の内皮上のヘパラン硫酸塩は、能動的にこれらのプロテイナーゼ抑制反応を速める。現在まで、ヘパラン硫酸塩によるＡＴＩＩＩ−トロンビン反応の触媒作用は、最も完全に特徴づけられた。しかし、縛ることはヘパラン硫酸塩およびこれらのグリコサミノグリカンのかなり特徴づけられた抗凝血性の特性に据え付ける、抗凝血性の／抗血栓性の機能の生理的重要性がヘパランに帰したｓｅｒｐｉｎの存在にもかかわらず、脈管の細胞表層での硫酸塩は、決定的に決められなかった。例えば、血液と直接接触してあるヘパラン硫酸塩に、サイトを結合している高い類似性ＡＴＩＩＩは、局所化されなかった。
【００５８】
さらに、ＡＴＩＩＩ−トロンビン反応上のヘパラン硫酸塩の推定される触媒作用の効果は、確かめられなかった。対照的に、タンパク質Ｃ経路の臨界調節として、トロンボモジュリン（ＴＭ）が通常で傷ついた血管の熟練工である主な抗凝血性のメカニズムを表すという発達する証拠が、生体内に生理学上の状況の下にある。トロンボモジュリンは、トロンビン特性および機能を変えることによって生理学上のオンデマンドの抗凝血性の反応を起こす。トロンボモジュリンは、脈管の内皮の、そして、平滑筋細胞上の管腔な表層で、トロンビンの場所を結合している高い類似性を提供する。それが構成的に細胞表層に存在する一方、その表現はまた、トロンビン、基本的な線維芽細胞発育因子（ｂＦＧＦ）および血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）への露出の後、ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄされる。ＴＭは、形成する１：トロンビンを有する、そして、方法の１つのモル複合体は、トロンビンの全ての周知のｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔ／ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ機能のスイッチを切って、複合のａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ／ａｎｔｉ−扇動的な活動に、の代わりに酵素の触媒作用の力に溝を掘る。特にそのｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ基板に関して、これは動作の変更トロンビンのモードによって達成される。
ＴＭは、３本のはっきりした基板依存している抗凝血性の経路に沿って、その活動を変えることによってトロンビンの生物学的機能に影響を及ぼす。
【００５９】
自由なトロンビンが能率的にフィブリノゲンをフィブリンに変換する一方、ＴＭに束縛されるトロンビンはフィブリノゲンを裂くことがもはやできないし、それは要因Ｖまたは小板を活性化することが可能でない。加えて、ＴＭもＡＴＩＩＩ（８−折り目について）によってトロンビン不活化の率を強化する。そして、最も大きい重要性の仮定は、劇的にタンパク質Ｃ（ビタミンＫ依存しているセリン・プロテアーゼ）を活性化するためにトロンビンの能力を速める（２０，０００−折り目について）。注の中で、機能させなくされたトロンビンおよび活性化されたタンパク質Ｃ（ＡＰＣ）は、それから好意的な追加のｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ基板ができるＴＭから自由にされる。流体フェーズ反応体、例えばタンパク質Ｃ、トロンビンおよび触媒作用の表層および形成された製品の除去率に対するＡＴＩＩＩの転送は、境界層領域の中で流体の流れおよび拡散によって分子の吸着および脱着方法、固有の表層の反応率定数、対流の動力学に依存する。このように、所与の共同因子および酵素活性部位のための競争している基板がある場合には、ローカル流れ状況は、トロンビンがｐｒｏ−ｏｒ抗凝血剤としてふるまうかどうかに、重大な影響を及ぼす。
【００６０】
驚くべきことに、ほとんど情報は、流れ制度がｖｉｔｒｏのＴＭの効率に影響する範囲に関して利用できないか生体内でない。その共同因子タンパク質Ｓと活性化されたタンパク質Ｃは２つの凝固因子を機能させない。そして、ＶａおよびＶＩＩＩａがそれによってＸａの生成および凝固滝の拡大のために重要であるトロンビンを防ぐ。活性化されたタンパク質Ｃは、線維素溶解を促進することができる。一旦発生すると、ＡＰＣは機能させなくされるセリン・プロテアーゼが最も遅いもののうちの１つであって、循環からクリアになった。ターンのこれがタンパク質Ｃ起動を制限した時から、ＴＭがＡＴＩＩＩによってトロンビンの不活化を進めることは、いくぶん逆説的なようであることができる。過剰なトロンビンが発生している限り、ＡＰＣ生成は進むことができる。このように、ＴＭのアンチトロンビンに依存する抗凝血性のメカニズムは、一旦過剰なトロンビン形成が終わるならば、タンパク質Ｃ起動が終了されることを確実にする。動脈で静脈の循環のローカル血行力学状況が局所的に要因ＶａおよびＶＩＩＩａを機能させないＡＰＣの能力の重要な調節である一方、この役割は生体内に定義されないかまたは試験管内である。それでもなお、タンパク質Ｃまたはタンパク質Ｓ不足をもつ患者がＡＰＣに対する抵抗を有するそれらと同じくｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｃなイベントを開発しやすいことは、基礎がしっかりしている。
【００６１】
同様に、ＴＭ遺伝子の変化は静脈で動脈の血栓症のための危険因子であってもよい。そして、心筋梗塞を含む。移植された小島細胞に対する宿主免疫反応に対する効果的障害の形成は、細胞で可溶な要素の除外に命令する。大部分の現在の細胞カプセルに入れている膜は、細胞移植を直接の細胞−細胞相互作用（大きい高分子（＞　１００ｋＤ）（例えば抗体または関連する免疫性の複合体）と同様に）の効果から分離することができる。しかし、一旦免疫反応が始められるならば、低い分子量サイトカインおよび遊離基の選択的な除外は同時に、必須の高分子（例えばインシュリン、ブドウ糖または他の栄養物）の通過を許可すると共に、今まで達成されなかった。
【００６２】
外国の抗原の発表を禁止することによって免疫反応の誘導を廃止するカプセル設計によって、現在の免疫隔離バリアの強化は、提供される、補足起動を最小にすること、マクロファージをカプセル状の表層に結合することを制限すること。多孔性である人工膜は、本発明において提供される。
ポリエチレン酸化物（ＰＥＯ）デンドリマーフェーズ分離は、かなり定義済みの分子の孔をつくるこの方法の利用の潜在的な落し穴であると思われた。しかし（驚くべきことに）、ＰＥＯ　デンドリマーが最も高い表層の圧力でさえ直ちにデンドリマーの比較的ほとんど減少を有する自動集められた脂質単分子層と関連しないことは、空気／水インタフェースで脂質／ＰＥＯ　デンドリマー混合の調査によって発見された。ジアルキル炭化水素鎖でｅｎｄ機能化されるＰＥＯ　デンドリマーは、ＰＥＯ鎖の自由な端に現在一般の縄でつながれたエンドポイントがあるＰＥＯ　リポポリマーに似ている。１０未満のｍｏｌ％の臼歯集中で、Ｘ線回折研究は、それに調べられるときに、ジアルキルグループをもつＰＥＯ鎖をｅｎｄ官能化することは更にサーブするマルチラメラサスペンション・サポートが脂質アセンブリのデンドリマーをｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｚｅするように、ＰＥＯ−脂質同根語が他の脂質をかなり混ぜ合わせられることを示唆する。航空の水インタフェースでの脂質／ＰＥＯ　リポポリマー混合の蛍光顕微鏡検査研究は、かなり混合でフェーズで区切られた制度が混合の分子の記録密度によって、存在することができると確認する。それにもかかわらず、フェーズ分離された状況の下でさえ、ｐｕｒｅ”ＰＥＯ　リポポリマー制度が、存在しない。
むしろ、アセンブリはたぶんＰＥＯの豊富で貧しい領域から成る。隣接した星の分子によってホモ重合化するよりはむしろ、隣接した自由な脂質モノマーによって共重合化するデンドリマーのａ”ＰＥＯ−ｒｉｃｈ”ｐｈａｓｅさえある場合には、端−ターミナルデンドリマー機能性の精選は、混ざっている構成要素および能力を強化する。これは、ＰＥＯ孔の高い地域の密度に至って、変えない膜の星の個々の星の特徴および総数によって書き取る膜輸送特徴。具体的には、メチルａｔｒｏｐａｔｅな基をもつジアルキル鎖の端−官能化一つは、この目的に役立つ。この機能性は、フェニル置換分構造の点でメタクリル酸メチルと同様である。メチルの代わりにグループがアルファ・カーボン位置に存在すること。この重合可能な半分は、いかなる種類ものビニル不飽和を有する共重合化ｓ以外の、ホモ重合化することができない。急進家の世代を容易にする技術−薄い、重合体の、両方の表層の生理化学的な特徴を変えるアルギン酸塩ヒドロゲル上の模倣のコーティングおよび界面の輸送特性が提供される膜。具体的には、アルギン酸塩／水のインタフェースによるＢＳＡの拡散係数が膜−模倣のコーティングの追加によって、３．４２のｘ　１０のｃｎｒＶｈｒから２．２５　ｘ　１０−ｌ６　ｃｍ２／ｈｒまで減少したことが分かっている。同様に、重合体おおわれているアルギン酸塩ビーズによるＢＳＡのための全体的な大量の転送係数は、それが標準のボリエステル繊維−Ｌリジン・アルギン酸塩カプセル（１．５のｘ　１０４のｃｍ／分）のための従来技術においてまたはヒドロキシエチルメタクリレートなメタクリル酸メチル共重合体（４．２１　ｘ　１０−６　ｃｍ／最小限度）から成るマイクロカプセルのためにデモをしたより、かなり少なかった４．７１×１０’９ｃｍ／最小限度であった（マシュー、Ｈ．Ｗ．その他［１９９３］は、哺乳類の細胞培養および人工の器官開発（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ）のためのコアセルベート・マイクロカプセルを複雑にする。Ｐｒｏｇ．９：５１０−５１９；湾曲（Ｃ．Ａ．その他［１９９０］）、「ＨＥＭＡＭＭＡ共重合体の哺乳類の細胞のマイクロカプセル化：カプセル形態学および透過性に対する効果。私（Ｂｉｏｍｅｄ．）Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．２４：１２４１−１２６２）．本発明の極薄の、重合体の、膜模倣性の表層は、免疫グロブリンを通さないインタフェースを生む。ＰＥＯ　デンドリマーは、アセンブリおよび個々のデンドリマーが低温電子顕微鏡検査を使用している充分に水和する環境において、視覚化した脂質に組み込まれることができる。マイクロカプセル化は小島関連する抗原の発表を制限することによって宿主増感を減らす、そして、カプセル提携のマクロファージはｘｅｎｇｒａｆｔ拒否において重要である。バリア（宿主扇動的な反応の発達を制限するそれらの表層の特性と同様に）をカプセル化する選択透過性を強化することは、小島生存性を強化する。本発明は、自己集合方法論を組織工学適用のための生体模倣的なリン脂質に基づく材料の設計に適用する。この方法は、表層命令および化学の分子の制御の高いレベルを提供して、結果として、細胞栄養および保護の間の適当な釣合いを達成する免疫隔離バリアを設計するために必���である表層の分子の決定要素の審査を容易にする。このプラットフォームのモジュール式の性質は、追加のペプチドまたは炭水化物の編入に関して、柔軟性の強化された程度に脂肪親和性同根語または膜内外孔を提供する、運搬装置（ｅ。ｇ．ブドウ糖運搬装置）、または、表層または輸送の更なる変更のための客を形成しているテンプレート。デンドリマーに基づく孔の使用によって本発明の人工膜がインシュリン・リリースおよび栄養物への接近を許可することができる、その一方で、扇動的な反応の潜在的に細胞障害性仲裁者を除外する。かなり定義済みのサイズ、ｃｏｍｐａｃｔｉｃｉｔｙおよび化学組成物の分子篩を生成する能力は、膜選択透過性の制御を強化して、小島滅失に至る可溶な要因の識別の援助に、役立つツールを提供する。膜提携のヘパランおよびコンドロイチン硫酸塩から成るｇｌｙｃｏｃａｌｙｘ−模倣の膜の統合は、補足およびマクロファージによって媒介される異種移植片拒否を減らす。両方の輸送特性の強化された制御および表層の生理化学的な特徴は、膵臓の小島細胞移植の成功に重要な効果的免疫隔離バリアの開発における重要なステップである。
【００６３】
自然な細胞膜は、他の免疫調節高分子を有するより複合の合成構造のためのテンプレートとして作用するその能力による同程度よく、チャネル、運搬装置および孔の存在下で、界面の輸送を制御するその能力を原因として生じるので、改良された性能特徴を有する生体模倣的な免疫隔離バリアの設計のための重要な方法を決める。安定した、重合体の脂質膜への合成の分子のチャネル（抗炎症薬特性を有するＧＡＧ　ｎｅｏｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄｓと同様に）として、樹状突起の重合体を取り入れている非常に合わせられた輸送および表層特性を有する生物活性なバリアは、宿主扇動的な反応によって発生するｍａｌａｄａｐｔｉｖｅなイベントの誘導を制限することによって分離して、提供者小島を保存するために提供される。
一つには、提案された免疫隔離バリアの特定の設計特徴は、カプセルに入れられた異種小島の不認可に対して責任がある分子で細胞メカニズムによって書き取る。
【００６４】
実施例
実施例１
Ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ試薬上の膜−模倣のフィルムの準備。
全ての始まっている材料および合成試薬は、特に明記しない限り商用の供給元から購入された。ボリエステル繊維−Ｌリジン（ＰＬＬ；２１−４７９　ｋＤ）Ｓｉｇｍａ．から購入する受け取られるように、アルギン酸塩（ｇｕｌｕｒｏｎｉｃなおよそ４１％の酸）がＩＳＰアルギン酸塩（サンディエゴ（ＣＡ））から得られて、使われた。６、３、１−ｐａｌｍｉｔｏｙｌ−２−（１２−（アクリルオイルオキシ）ドデカノイル）ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ　３−ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ（モノＡｃｒｙｌＰＣ）および１−ｐａｌｍｉｔｏｙｌ−２−（１２−（アクリルオイルオキシ）ドデカノイル）ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ　３−ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ−フルオレセイン・イソチオシアン酸塩（モノフォニックのＡｃｒｙｌＰＥ　ＦＩＴＣ）が以前に合成されたボリエステル繊維（ＨＥＡ−ＤＯＤ）が記載したＮ（Ｎ−ジオクタデシルカルバモイルプロピオン酸（ＤＯＤ））。（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｇ．、Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．、ハンソン、Ｓ．Ｒ．及びＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９７の］高分子３０）：６４８３−６４８８；チョン、Ｊ．Ｈ．、Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｇ．及びＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９９の］Ｊ．Ｂｉｏｍａｔ．）科学重合体編集１０，９５−１０８；人気商品、Ｔ．Ｄ．及びオブライエン（Ｄ．Ｆ．［１９９４の］高分子２７，２２６２３３）；Ｓｕｎ、Ｘ．Ｌ．、Ｌｉｕ、Ｈ．、Ｏｒｂａｎ、Ｊ．Ｍ．、Ｅ．Ｌ．［２００１］がＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ化学に提出したＳｕｎ（Ｌ．及びＣｈａｉｋｏｆ）。）計測。偏光解析法データはＰｌａｓＭｏｓ偏光解析装置を使用して得られた。そして、Ｍｏｄｅｌ　ＳＤ２３００が光源としてＨｅＮｅレーザーを備えていた。光は、通常の表層に対する７０の角度で事変であった。有機的な層は、１．４５の屈折率ｎを有すると仮定された。高解像度のスキャン電子顕微鏡写真（ＨＲ−ＳＥＭ）は、５ｋＶで作動されたｉｎｌｅｎｓ電界放出走査型電子顕微鏡（ＩＳＩ　ＤＳ−１３０Ｆショットキ・フィールドＥｍｉｓｓｉｏｎ　ＳＥＭ）を使用して得られた。サンプルを含むシリコンチップは、銀のペーストを有するアルミニウム標本突出部に載置して、３０分間ガスを除去されて、クロミウム１ナノメートルの（ｃｒ）フィルムでおおわれていた。赤外線の分光学。スペクトルはＩｎｆｒａｒｅｄされた（ＦＴ−ＩＲ）分光計が広帯域のＭＣＴ探知器を備えたＢｉｏＲａｄ　ＦＴＳ−６０のフーリエＴｒａｎｓｆｏｒｍを使用して得られた。そして、１０２４の走査、三角形のアポディゼーションおよび４つのｃｍ〜’ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎによって集められた。極性を与えられた赤外線の外部の反射スペクトルは、赤外線極性を与えられた垂直を有するＨａｒｒｉｃｋ外部の反射アクセサリ（６００の入射角）（Ｏｓｓｉｎｉｎｇ（ＮＹ））を使用して得られるかまたはＭｏｌｅｃｔｒｏｎ　ＺｎＳｅ導線格子偏光子（ポートランド（ＯＲ））を使用して、通常の表層と平行である。
【００６５】
（蛍光顕微鏡検査）
蛍光イメージは５０ｘ拡大中でツァイスｅｐｉｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ顕微鏡を使用して得られた。そして、キセノン−水銀アーク・ランプおよび低い軽い平らなＳＩＴカメラ探知器で明るくされた。２−ヒドロキシメチルアクリル酸塩（ＨＥＡ）およびスチレン・スルホン酸塩（ＳＳＳ）の統計の共重合。
ＨＥＡ（１．１５ｍＬ；１０ｍｍｏｌ）、そして、ＳＳＳ「（０．２０６ｇ；１．０　ｍｍｏｌ）２０ｍｌのジメチルスルホキシドに溶かした。２，２．ｐｒｉｍｅ．−Ａｚｏｂｉｓｉｓｏｂｕｔｙｒｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＡＩＢＮ；１８ｍｇ；０．１１　ｍｍｏｌ）加えた溶液が、２０ｈ．のための７０のＣ油浴槽に置かれる３０の最小限度および反応混合のためのＮ２によって、一掃された反応混合は、ゆっくり４００ｍＬの冷えたＣＨ２Ｃ１２に活発に撹拌することと加えられた。形成される無色の接着剤のような沈殿物および固体は、真空の下で一晩乾燥することに二度をＣＨ２Ｃｌ２ｐｒｉｏｒできれいにした。最終的な製品は、非常に吸湿性で、ボリエステル繊維（ＨＥＡ−ＳＳＳ）ｌｏと称した白い固体であった。生む：（８５％、１．１６ｇ）。１ＨのＮＭＲ（ＣＤ３０Ｄ）（５）：３．９９　（２Ｈ、ＨＥＡのＣＨ２）７．５０および７．０４（４Ｈ、ＳＳＳのＡｒ−Ｈ）。１Ｈ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６）。ボリエステル繊維（ＨＥＡ−共同ＳＳＳ）１０（０．４１０ｇ；３．０　ｍｍｏｌ　ＨＥＡ　ｍｅｒ−装置の）１５ｍｌのｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ）の溶かされる、そして、後で１０ｍｌのＣＨ２Ｃ１２．を有する薄くなった「Ｎ、Ｎ−ジオクタデシルカルバモイルプロピオン酸（ＤＯＤ；０．６５２　ｇ；１．０５　ｍｍｏｌ）、次の事態の前の上記の溶液は、１０ｍｌのＣＨ２Ｃ１２においてゆっくり増された；上記の溶液は、ｐｄｉｍｅｔｈｙｌ　ａｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｅの追加に先行する（１２．８ｍｇ；０．１１　ｍｍｏｌ）。ＤＭＦの小さい量（ｃａ．０。５ｍｌ）溶液、氷水浴槽に置かれる反応混合および３ｍＬのＣＨ２　Ｃｌ２のｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ（１．３８ｍｍｏｌ、０．２８４ｇ）の明快さが加えられたと主張するために加えた液滴の。反応は、Ｎ２の下で一晩進んだ。反応混合は、それからそっけなさに蒸発して、２０ｍＬのジエチルエーテルと混ざった。混合はフィルターをかけられた。そして、濾過水がそっけなさ（５ｍＬのＣＨ２Ｃ１２および１００ｍＬのアセトニトリルにおいて引き起こされる重合体において溶かされる）に蒸発した。製品は白い粉であった、そして、１ＨのＮＭＲおよび基本的分析はＨＥＡの三量体のモノマー比率を確かめた：ＤＯＤ：６のＳＳＳ：３：
１．この合成物は、ボリエステル繊維と称した（ＨＥＡ６：ＤＯＤ３：ＳＳＳ）。生む：０．７７０　ｇ、１Ｈ　７３％　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）（＃）：。
【００６６】
ガラス上の（ＰＬＬ−アルギン酸塩）５−ＰＬＬ−重合体フィルムの準備。
それぞれ、ＰＬＬおよびアルギン酸塩は０．１０ｗ／ｖ　％の集中およびＰＢＳの０．１５ｗ／ｖ　％で準備された。多層の高分子電解質の生成において、接触時間は各々の溶液のためのほぼ３０秒であった、そして、表層は３つの時間を各々のコーティング溶液間の水できれいにした。おおわれているガラスが摺動させる（ＰＬＬ−ａｌｇ）５−ＰＬＬは、いずれのｐｏｌｙ０ＩＥＡ−ＤＯＤもの解答にさらされた）６３またはボリエステル繊維（ＨＥＡ−ＤＯＤＳＳＳ）、３ｍｍｏｌのＤＯＤまたは、それぞれ、１ｍｍｏｌ　ＳＳＳの集中でのｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅグリコール（ＴＥＧ）において、６３。接触時間は３０秒から２０ｈまで変動した。そしてその後、スライドは一度簡潔に水を有するＴＥＧおよび５〜１０の時間できれいにされた。小嚢融合。２０ｍＭのリン酸ナトリウム・バッファ（ｐＨ　７．４）の０ｍＭのアクリル酸塩−ＰＣの大きいｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢（ＬＵＶ）は、液体Ｎ２および４０のＣ水浴を使用している３つの連続したｆｒｅｅｚｅ／ｔｈａｗ／ｖｏｒｔｅｘサイクルまでに準備された。
ＬＵＶｓはそれから２．０ｐｍそれぞれ２１回を押し出された、そして、６００ナノメートルのポリカーボネート・フィルタおよび溶液は２０ｍＭのリン酸ナトリウム・バッファ（ｐＨ　７．４）および１５０ｍＭのＮａＣｌを有する１．２ｍＭまで薄くなった。特定されるように、アルキル化された基板は、融合時間の間の３７Ｃで小嚢溶液によって培養された。被支持脂質フィルムのｓｉｔｕ光重合の。ｃｏｉｎｉｔｉａｔｏｒｓの貯蔵液は、１０ｍＭのＥｏｓｉｎ　Ｙ（ＥＹ）、２２５ｍＭのｔｒｉｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ（ＴＥＡ）および水の３７ｍＭのＶＰとして準備された。
【００６７】
Ａ　１０：１つの（ｍｏｌ／ｍｏｌ）モノマー／ＥＹ比率が、光重合のために使われた。このように、１０ｕＬの創始者は、１ｍＬの小嚢溶液および試験基板を含んでいる小びんに撹拌することと加えられた。小びんは、１５ｍｍのためのＮ２および３０ｍｍ（５０ｍＷ／ｃｍ２）のための６．５ｃｍ離れたところに、見える灯りで照らされる試験サンプルによって一掃された。
【００６８】
重合された脂質フィルムでおおわれているアルギン酸塩ビーズの生成。
Ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ（ｄ−３００の壷）は、静電的なビーズ発生器（Ｐｒｏｎｏｖａ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ社）を使用して準備された。細胞またはＦＩＴＣのラベルが付いたデキストランの有無にかかわらないアルギン酸塩溶液（２．０％のｗ／ｖ（ｐＨ　７．４））は、０．１０ｍｍの内部直径を有する平坦な端針で、０．２のｍＬ／分の流速で、押し出された１。１％のｗ／ｖ　ＣａＣ１２溶液。アルギン酸塩ビーズは、３０秒の間のＰＬＬ（０．１０％のｗ／ｖ）によって培養されて、それから二度をＰＢＳできれいにした。ビーズは、それから次の事態の前に３０秒の間の薄めたアルギン酸塩（０．１５％のｗ／ｖ）において培養された；上記の第二２つの短い塩分のあるすすぎを先行する。この過程は、１サイクルの形成単一のＰＬＬ−アルギン酸塩二分子層を完了して、次の事態の前の繰り返された４つの時間であった；上記は、時、ＰＬＬの最終的な３０秒のインキュベーションに先行する。ビーズは、それからボリエステル繊維を含んでいるソリューションで培養された（ＨＥＡ６：ＤＯＤ３：ＳＳＳ）ＰＢＳを有する３０秒およびその後すすがれた３つの時間の間の（０．１０ｍｍｏｌの１％のＤＭ５０のＳＳＳ）。フィルムが３７のＣで４ｈの脂質小嚢解答（１ｍＬ）のビーズ（０．５ｍＬ）を培養することによって成し遂げられた被支持脂質の形成は、混ざることをなだめる。インキュベーション期間の終わりに、ｐｈｏｔｏｉｎｉｔｉａｔｏｒ混合（１０ｍＭのＥＹ、２２５ｍＭのＴＥＡおよび水の３７ｍＭのＶＰ）の１０ｐＬは、加えられた。溶液は、室温で、３０ｍｍのための見える灯り（５０ｍＷ／ｃｍ２）で照らされた。ビーズは、ＰＢＳのそれからすすがれた３つの時間であった。重合体の膜−模倣のバリアでおおわれているｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ全体の分子の輸送の特徴描写。さまざまな分子量（９，２１，３８，７２ｋＤ）のＦＩＴＣのラベルが付いたデキストランは、高分子電解質および脂質膜コーティングのさまざまな舞台で、ビーズの輸送特性を研究するために用いた。ビーズを含んでいるデキストランは塩水湖の室温で培養された、そして、溶液を浸す約数は一定時刻に発生するように仕組んだ間隔でＷ−ＶＩＳ吸収分光学によって分析された。膜模倣性なカプセル化バリアでおおわれているアルギン酸塩ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓの範囲内のＣＨＯ　Ｋ−１細胞の生存能力。ＣＨＯ　Ｋ−１細胞（ＡＴＣＣ社）は、４−６つのｘ１０６　ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度でのアルギン酸塩溶液の中で漂って、詳細な上記として、塩化カルシウム浴槽に押出し成形した。
ｍｉｃｒｏｂｅａｄ形成の方法論は、一方細胞生存能力を最大にするためにいくつかの変更態様に関して以前に記載されているそれと同様だった。
具体的には、コーティング溶液は、ブドウ糖（３．１５のｇ／Ｌ）、小嚢が血清およびフェノールレッドのないハムのＦ−１２の媒体で、用意されたｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒおよび実行される全ての手順で補充された、そこにおいて、可能な、３７のＣおよび５％のＣＯ２での保育器において。
細胞生存能力は、ビーズ・コーティングの後、そして、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ　Ｃｅｌｌ　Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ／Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙキットを使用している最高４８の時間の試験管内のインキュベーション期間以後特徴づけられた（Ｌ−３２２４；分子の調査、Ｉｎｃ）。充電される水和する基板上の膜−模倣のフィルムの層−副層アセンブリ。多層の高分子電解質のアセンブリに基づく薄膜は、基板の上へ薄めた溶液から反対の位置に充電される重合体の連続した吸着を含む。
（Ｄｅｃｈｅｒ、Ｇ．［１９９７の］サイエンス２７７：１２３２−１２３７。）Ｉｎ方法、フィルム最も厚い部分が高分子電解質（堆積する層の総数と同様に）の負担密度および分子量次第の所で、しみ通られた多層構造が生じる。
（リヴォフ、Ｙ．その他［１９９３の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　９：４８１−４８６；マオ、Ｇ．、ほか［１９９５の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１１：９４２−９５２。）Ｉｎ、これはａｌｇｉｎａｔｅ−ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅシステムが生成するために用いたと報告するＰＥＭ。
アルギン酸塩およびボリエステル繊維−Ｌリジンは、否定的に、そして、明らかに、それぞれ、充電される高分子電解質であって、合成のゲル、コロイド粒子および多層フィルムとしての強い研究の主題であった。
ボリエステル繊維−Ｌリジンは、否定的に充電される両親媒性物質および次の脂質フィルム形成の中で静電的に静止するための明らかに充電される基板を生産する常に堆積する最後であった。接触角度は、方法（図２）を形成しているフィルムのさまざまな舞台で測定された。
【００６９】
予期されるように、接触角度を進めることは連続したアルギン酸塩（〜５）およびＰＬＬのために低かって、（−１０−２０）多層フィルム。
３つのＰＬＬ／アルギン酸塩二分子層の形成の後、接触角度が、少なくとも２０の連続した二分子層（示されないデータ）の上のほとんど変化を有する両方の層のための安定した価格に接近するというわけではなかった。
ＰＬＬ分子量（２１−４７９のｋＤ）の範囲以上の進んでいて退いている接触角度の比較的小さい違いは、また、観察された。全ての次の研究の、膜−模倣のフィルム形成が実行されたこと多層の成っているＰＬＬ／アルギン酸塩（（ＰＬＬ／アルギン酸塩）５−ＰＬＬ）の５つの二分子層の上へ吸着されるＰＬＬ（４７９ｋＤ）の。
【００７０】
両親媒性の重合体、ボリエステル繊維（ＨＥＡ：ＤＯＤ：ＳＳＳ）３０秒と同程度不足してインキュベーション期間以後１００を上回っている接触角度を進めることに関する（ＰＬＬａｌｇｉｎａｔｅな）５−ＰＬＬフィルムの表層の上へおおわれていた。特に、２０から３０ｇまで接触角度を進めることの増加によって確かめられるように、ＨＥＡおよび、ＤＯＤの類似したモル集中で、ＤＯＤの共重合体を有する基板の２４時間のインキュベーションは、重大な共重合体吸着に結果としてならなかった。このように、陰イオン・スルホン酸塩グループの存在は、重合体吸着のために重要である。小嚢融合は、多層のアルキル化された高分子電解質上の脂質アセンブリの堆積のために選ばれた。原位置に堆積するリン脂質層の光重合の後、前の研究との良い契約において、進んでいる接触角度ｏｆ−６０は、観察された。これらの値は、また、従来のレポートｏｆＨａｙｗａｒｄほか（１９８６の）Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　７と整合している：２５２−２５８）、そして、ケーラーほか［１９９６の］Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．３２：ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ−誘導されたガラス（他の重合された脂質系の我々自身のデータと同様に）の２３７−２４２。注の中で、接触角度のほとんど変化は、ＰＢＳの３週インキュベーション期間の間に観察されなかった。追加の表層の機密に関わる技術は、フィルム特性に対する更なる洞察を提供した。高解像度のｉｎ−ｌｅｎｓ　ＦＥＳＥＭは、大きいフィルム域の上の表層地形学を調べるために便利な方法を提供した。
時折の小嚢がフィルム表層に強調された一方、全体的なほとんど表層粗さは観察されなかった。偏光解析法は、各々のフィルム層の水和する厚みを計って、更に原子の平らな表層特性を定義するために光電子分光学（ＸＰＳ）のＸ線写真を撮るために用いた。２８Ａの厚みは、アルギン酸塩−ＰＬＬ二分子層につき観察されて、このシステムの従来のレポートと整合している。吸着された三量体の厚みは５２Ａであった、そして、被支持脂質フィルムの厚みは２３Ａであった。
この値は、有利にＸ線回折によって決定される寸法に匹敵する（Ｎａｇｌｅ（Ｊ．Ｆ．ほか［１９９６の］Ｂｉｏｐｈｙｓ．）Ｊ．７０：１４１９−１４３１）または中性子反射「（Ｍｅｕｓｅ、Ｃ．Ｗ．その他［１９９８］Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．７４：１３８８−１３９８）液体の水晶のようなＤＰＰＣ多層フィルムおよび、それぞれ、被支持単分子層のための。ＸＰＳは、５つ以上のアルギン酸塩−ＰＬＬ二分子層の堆積の後、表層Ｓｉがもはや観察されなかったと確認した。かなり、三量体吸着およびリンが脂質小嚢融合および重合の後、デモをしたあと、硫黄は識別された。（表１−３を参照のこと。）
赤外線の分光学による被支持脂質アセンブリのＳｔｒｕｃｔｕｒａｌ特徴描写。スペクトルが各々のフィルム構成要素に特有でもあった官能基特徴を識別するためにフィルム構造の各段階の間、得られた赤外線は、アシル・鎖・オリエンテーションに対する洞察を提供する。かなり、この分析は、両方のフレームワークを環境条件を変化させることの下でフィルム安定性を特徴づけるために提供して、被支持脂質アセンブリの範囲内で不調のレベルを決める。この後者機能は膜透過性を含むフィルム特性に対する重要な衝撃を有することができる、そして、組織化して、適切に膜を指向する能力はタンパク質の基礎を形成した。垂直（ルピー）および平行の極性を持たれた外部の（Ｒｐ）反射スペクトルは、図３において示される。特に、私が引き伸ばすアミドを含んでいるＰＬＬ−アルギン酸塩多層現れられたＰＬＬｄｅｐｅｎｄｅｎｔバンドの極性を持たれたＩＲ範囲およびＮＨを含んでいる肩は、ｏｆＮＨ３＋（それぞれ、１６５０，１６１５　ｃｍ−１）を伸ばす。カルボン酸塩イオン（ＣＯＯ）の対称形（１４１０のｃｍ−ｌ）で反対称の伸びている（１５５０のｃｍ−ｌ）振動は、アルギン酸塩に特有で、Ｒｐ極性を与えられたスペクトルにおいて分解されてもよい。アルギン酸塩のために、幅広くて強いＯＨ振動は、３６００−３０００のｃｍ−１の間で観察された。三量体（図３Ｂ）の追加は強い対称形で反対称のメチレン伸びにかかわった。そして、３０００−２８００のｃｍ−ｌ（１７３４のｃｍ−ｌで中心におかれるエステル・カルボニル・バンドと同様に）から位置した。
それぞれ、これらの振動は、ＤＯＤおよびＨＥＡグループに帰されることができる。ユニークなＰＬＬ（私が引き伸ばすアミド）のスペクトルの強度およびアルギン酸塩（反対称で対称形のＣＯＯ−範囲）振動は、減少するが、定義可能なままである。
【００７１】
ＲおよびＲｐ極性を与えられたＩＲスペクトルの劇的な変化は、融合および脂質重合（図３Ｃ）の後、わかられた。〜１２６３　ｃｍ−ｌでのバンドはＲ、反対称のＰ＝Ｏ範囲のための極性を与えられたスペクトルおよび強度増加において強調されるＶＡ、そして、Ｖ５　ＣＨ２、Ｃ＝Ｏ（エステル・カルボニル）および吸収モード（１１２０−１１０５のｃｍ〜ｌ）を引き伸ばしているＣ＝Ｏ−ＯＣはまた、両方の極性を与えられたスペクトルにおいて観察された。後の吸収モードは、脂質および三量体コンポーネントに存在した。しかし、
最も顕著な違いは、ｔｈｅｖａａｎｄ　ｖ（バンドがポジティブにからに脂質堆積および重合（図３　ＩＩ、ＢおよびＣ）の後の否定の強度に変わったＲｐ極性を与えられたスペクトルのＣＨ２ｓｔｒｅｔｃｈｉｎｇモード）で起こる。
正および負の吸収バンドは、理論的に予測されて、シリコンおよび他の半導体基板の上へおおわれている単分子の薄膜の研究において、実験的に観察された。（Ｄｌｕｈｙ（Ｒ．Ａ．［１９８６の］Ｊ．）物理学化学９０：１３７３−１３７９；Ｗｏｎｇ、Ｊ．Ｓ．及び円（Ｙ．Ｓ．［１９８８の］出願Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃ．）４２：５９８−６０４；Ｍｉｅｌｃｚａｒｓｋｉ、Ｊ．Ａ．およびＹｏｏｎ（Ｒ．Ｈ．［１９８９の］Ｊ．物理学化学９３）：２０３４−２０３８；円、Ｙ．−Ｓ．およびＷｏｎｇ（Ｊ．［１９８９の］Ｊ．物理学化学９３）：７２０８−７２１６。）よりＭｏｒｅｏｖｅｒに、この挙動が、ＯＴＳ／Ｓｉ．に置かれる重合体の脂質フィルムの最近の調査において観察された（Ｄｅｃｈｅｒ、Ｇ．［１９９７の］サイエンス２７７：１２３２−１２３７。）三相のシステムのためのフレネル反射式から発生する理論上の反射−吸収プロット線をＵｓｉｎｇする（ハセガワ（Ｔ．ほか［１９９５の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１１）：１２３６１２４３；堺、Ｈ．およびウメムラ（Ｊ．［１９９８の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１４）：６２４９−６２５５）、質的に、そして、量的に、正および負の吸収モードは、ＯＴＳおよび被支持脂質のアルキル連鎖の分子のオリエンテーションに関連した。（Ｏｒｂａｎ、Ｊ．Ｍ．ほか［２０００の］Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３３：４２０５−４２１２．）Ｒｐ極性を与えられた外部の反射スペクトル（図３Ｂ）の陽メチレン吸収バンドは、三量体アルキル・鎖の分子のオリエンテーションがランダムで、通常の表層から離れて傾けられることを示す。これはまた、振動を引き伸ばしているメチレンの周波数位置で支えられる。そして、それは炭化水素鎖命令を表す。（Ｔａｓｕｍｉ、Ｍ．Ｓ．およびＭｉｙａｚａ（Ｔ．Ｊ．［１９６２の］Ｊ．Ｍｏｌ）。Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃ．９：２６１；スナイダー、Ｒ．Ｇ．、Ｈｓｕ、Ｓ．Ｌ．及びＫｒｉｍｍ（Ｓ．）［１９７８の］Ｓｐｅｃｔｒｏｃｈｉｍ．公式記録、ＰａｒｔＡ　３４Ａ：３９５−４０６；塗装工、Ｐ．Ｃ．Ｃ．その他［１９８２］振動の分光学および重合体の材料［ジョン・ワイリー（ニューヨーク）］へのその応用の理論。）具体的には、対称形の（ｖ９（ＣＨ２））メチレンの平均の位置およびＲの反対称の伸びている（ｖａ　ＣＨ２）モードは、スペクトルが２８５４であることを極性を与えた。
７および２９２５．３ｃｍｌ（図３Ｂ）。これらの位置は、炭化水素鎖が乱されて、両方とも所有することを意味するトランス、そして、不器用な従う人。
三量体に存在するアルキル・鎖が比較的長くて、ＨＥＡ間隔保持装置グループ（図１）のために、一緒にきつく包まれることができないように、これは必ずしも予想外でない。アクリル酸塩−ＰＣアセンブリの融合および重合の後、メチレン吸収バンドは、強度において逆転した。質的に、この結果は、アシル・鎖傾斜が通常の表層により近いことを示す。おそらく、三量体の移動炭化水素連鎖は、現在関連する脂質アシル・鎖を有するバンｄｅｒ　Ｗａａｌ相互作用のために、より小さい鎖傾斜に保持される。偏光解析法および先に述べた算出手順（Ｏｒｂａｎ、Ｊ．Ｍ．ほか（２０００の）Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３３、４２０５−４２１２）によって決定されるフィルム最も厚い部分を使用することによって、脂質の追加の後の平均のオリエンテーションは、３９．５であると決定された。この結果は、確実に脂質および三量体アルキル・鎖のオリエンテーションを含む。鎖命令およびオリエンテーションの増加はまた、対称形のメチレンおよび反対称の伸びている振動の周波数位置で支えられる。そして、それは２８５３．９および２９２２．３ｃｍであった』それぞれ￥。アクリル酸塩−ＰＣフィルムの追加は炭化水素鎖のｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌな注文にかかわる。そして、それは炭化水素鎖傾斜の増加と一致する。注の中で、それぞれ、Ｌａｎｇｍｕｉｒシェファーまたは小嚢融合方法によって金上のｏｃｔａｄｅｃａｎｅｔｈｉｏｌの自動集められた単分子層に生じるときに、３４および３８の鎖傾斜はＤＰＰＣの非重合する脂質単分子層のために観察された。（Ｍｅｕｓｅ（Ｃ．Ｗ．ほか［１９９８の］Ｂｉｏｐｈｙｓ．）Ｊ．７４：１３８８−１３９８。）、このように、アシル・鎖命令の注目に値する程度は、脂質アセンブリの重合の後、さえ維持されることができる。重合体の脂質フィルム（多層の高分子電解質に集められる）は、高い剪断流れ環境において安定している。コーティング手順の各々の舞台で、フィルムは２０００のｓｅｃ−’ｆｏｒ　１つの２時間の接触期間の壁剪断率で、ＰＢＳにさらされた。重大な鎖配列が高い剪断機（示されなデータ）への露出によって誘発されたｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒ−ｃｏａｔｅｄされたサンプルを除いては、極性を与えられたＩＲスペクトルは、不変だった。
【００７２】
アクリル酸塩機能化されたホスファチジルエタノールアミン（それはアミン・グループのａｃｙｌａｔｉｏｎによってＦＩＴＣのはじめにを許した）は、更に視覚的にフィルム安定性（図４）をモニタする能力を強化するために設計された。このように、モノフォニックのＡｃｒｙｌＰＥ　ＦＩＴＣの１つのｍｏｌ％によって不純物を添加される小嚢は、ｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒ−ｃｏａｔｅｄされた基板の上へ溶かされて、流れにさらされた。蛍光信号の識別できるロスは、観察されなかった。ＰＥＭのバリア透過性は、膜模倣性なフィルムを有するコーティングによって調整される。
関連してとしてのフィルム構成要素の層−ｂｙ−ｌａｙｅｒ堆積に対するカプセルに入れられた７１ｋＤ　ＦＩＴＣ−デキストランの発表は、図社において示される。率の進歩的な減少およびデキストラン・リリースの大きさは、各々の連続したフィルム層の追加によって観察された。７１ｋＤデキストランのほとんど発表が被支持脂質フィルムの形成および重合に続いて強調されなかった一方、下の分子量デキストラン（９，２１および３８ｋＤ）の発表は観察された（図５Ｂ）。
これらのデータはしかし膜−模倣の表層をおおうことは通さないフィルムの不統一の若干のレベルを表す免疫グロブリン。そして、それは、効果的免疫隔離を設計することのために重大な必要な条件はバリアである。
カプセルに入れられた細胞生存能力は、膜−模倣のコーティングのアセンブリおよび重合の間、維持される。細胞生存能力上の形成が分析された膜−模倣のフィルムのために、材料、手順および状況の衝撃は、アルギン酸塩がＣＨＯ細胞をカプセルに入れることが必要であった。事前の研究において、アルギン酸塩、ＰＬＬ、両親媒性の重合体および脂質小嚢が単独でＰＢＳにおいて準備されるときに、ほぼ５０％の細胞はカプセル化を生き残った。細胞生存を改善するために、ブドウ糖は全てのＰＢＳ、アルギン酸塩およびＰＬＬ溶液に加えられた、そして、重合体吸着および小嚢融合ステップは血清およびフェノールレッドのないハムのＦ−１２の媒体で実行された。
加えて、細胞の代謝要求を下げるために、氷−冷やした溶液を使用することは、小嚢融合、全てのコーティングおよびすすぎ手順を除いては実行された。
この戦略は、膜構造または特性に影響を及ぼさなかった。ビーズ表層上の安定した、均一な膜−模倣の映画を生産する能力はＦＩＴＣのラベルが付いた脂質を有する膜−模倣のフィルムのドーピングで示された。そして、輸送特性は不変だった、そして、全体的な細胞生存能力は９０％を上回った。
【００７３】
結論
安定する、重合体の膜−模倣の表層が、脂質アセンブリの光重合によって原位置に多層のアルキル化された高分子電解質に生じた。分子の特徴描写は秩序立った被支持脂質単分子層の生成を確かめた。そして、それは高い剪断流れ状況の下で安定していて界面の分子の輸送を調整することができた。加えて、細胞カプセル化バリアとしてこのシステムを使用する能力は、例示される。安定した、被支持脂質膜の追加は追加のメカニズムを多層の高分子電解質の生理化学的で生物学的特性を制御するために提供する。そして、このようにそれを人工の器官および他の植設された医療機器の臨床性能特性を最適化することが可能にする。
【００７４】
（実施例２）
Ｃｙｔｏ模倣性な生体適合物質：リポペプチドおよび糖脂質同根語の生物活性な膜模倣性のＳｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓの統合およびＡｎａｌｙｓｉｓ。特定地域向けの方法は、複合のブロックしているグループ戦略がない場合、ｌｉｐｉｄｐｅｐｔｉｄｅおよび糖脂質高分子の統合および浄化のために開発された。（Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．ほか［１９９５の］Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ化学６：３２３−３２６；Ｗｉｎｇｅｒ（Ｔ．Ｍ．ほか［１９９５の］Ｊ．）液体Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．１８：４１１７−４１２５；Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．ほか［１９９５の］Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ　１６：４４３−４４９；Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［９９７の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１３）：３２５６−３２５９；Ｓｕｎ、Ｌ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．）［１９９７の］Ｂｉｏｃｏｎｊ．化学８：５６７−５７１；Ｓｕｎ（Ｌ．およびＣｈａｉｋｏｆ）Ｅ．Ｌ．［１９９８の］炭水化物物件。３７０：７−８１。）、これらの技術、被結合ペプチドのオリエンテーションおよび炭水化物をＵｓｉｎｇすることは、維持された。そして、それは効果的リガンド−受容器相互作用のために、しばしば必要である。このように得られた同根語は、自動組立システム（例えば航空の水インタフェースでのまたは生物活性分析評価のための生体膜−模倣している構造（リポソームまたは基板−被支持膜）としての行動の研究のための脂質単分子層）に組み込まれる。リポペプチド同根語の形成の計画は、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）のＮ−ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ派生物を有するチオールで終わるペプチドのＳＮ２−タイプ反応に基づく。間隔保持装置鎖柔軟性、疎水性および長さは、全く容易に修正されることができる。リポペプチド同根語を結合しているＩｎｔｅｇｒｉｎおよびヘパラン硫酸塩は合成されて、分析された。そして、膜−模倣の映画の構成要素として、混合特性を膜−模倣の単分子層およびそれらの生物学的活動に含んだ。（よりＷｉｎｇｅｒにＴ．Ｍ．、そして、Ｃｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９７の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１３）：３２５６−３２５９。）、リポペプチドのための特性が活用するＲｅｃｅｐｔｏｒは、対応するすべてのもの−ｄシーケンスを有するａｌｌ−ｉアミノ酸シーケンスの置き換えに、生物活性の完全なロスによってｖｉｔｒｏにおいて示された（ｉ．ｅ。光学の活性ペプチドの異性体）。
＊　Ａ”ネオグリコカリクス”ｃａｎは、親多糖類に由来するヘパラン硫酸塩または生物活性なシーケンスを有する被支持膜を官能化することによってつくられる。生成されたｇｌｙｃｏｃａｌｙｘは、凝固滝の起動を制限して、内皮発育因子を結合しているヘパラン硫酸塩のための分子のシンクとして作用するのに役立つ。方法が脂質に糖類を共有結合して活用するために記載されていた一方、報告された反応計画は能率が悪くて、しばしばオリゴ糖類シーケンスの還元糖の滅失を含むように見える。
同様に、限られた成功だけは、間隔保持装置を取り入れる際に、そして、同根語生物活性を最適化するために成し遂げられた。（Ｄｅｆｒｅｅｓ（Ｓ．Ａ．ほか［１９９６の］Ｊ．Ａｍ．）化学Ｓｏｃ．１８：６１０１−６１０４；Ｋｕｈｌｅｎｓｃｈｍｉｄｔ、Ｔ．Ｂ．およびリー（Ｙ．Ｃ．［１９８３］生化学２３）：３５６９；Ｂｉｅｓｓｅｎ（Ｅ．Ａ．Ｌ．ほか［１９９５の］Ｊ．Ｍｅｄ化学３８）：１５３８−４６；ワング（Ｐ．ほか［１９９３の］Ｊ．Ａｍ．）化学協会１１５：１０４８７；シュミット（Ｒ．Ｒ．純粋な［１９８９の］出願化学６１）：１２５７−７０；売店、Ｍ．Ｓ．ほか［１９８８の］Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｊ．２５６：６６１−４。）これらの限界を迂回するＩｎ＄ｏｒｄｅｒ、方法論は間隔保持装置腕を使用して開発された。そして、それは減少させるアミノ化反応（計画１）を経たＰＥに、活用のための必須のカルボニル機能性を所有した。（Ｓｕｎ、Ｌ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．）［１９９７の］Ｂｉｏｃｏｎｊ．化学８：５６７−５７１．）３〜１６台のメチレン装置のアルキル連鎖によって縄でつながれるＮｅｏｇｌｙｃｏリン脂質ｓは、４つのステップの良い全体的な産出（４０−５０％）において合成された。活用する単糖類は、ブドウ糖、マンノース、フルクトース、ガラクトースおよびＮ−アセチル・グルコサミンを含んだ。近年、反応手順は、オリゴ糖類リガンドまで広げられた。（Ｓｕｎ、Ｌ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．）［１９９７の］Ｂｉｏｃｏｎｊ　Ｃｈｅｍ　８：５６７−５７１；Ｓｕｎ、Ｌ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９８の］炭水化物物件）。３７０：７７−８１；
Ｇｒａｎｄｅ、Ｄ．ほか［２０００の］Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３３：１１２３−１１２５．）多数のリポペプチド構成要素を有する被支持膜−模倣の表層の統合および特徴描写。放射化学の滴定および原子の力顕微鏡検査を使用している相互関係のある調査。強力なサポート上のＳｕｐｒａｍｏｌｅｃｕｌａｒ膜複合体は、宿主−材料インタフェースで徹底調査して、臨床的に逆方法を制御する役立つシステムを構築する。強力なサポート上の脂質アセンブリを研究する最初の科学的な動機は、ｃｅｌｌ−ａｎｄタンパク質−膜相互作用の特徴描写において使用される安定、固定された膜−模倣の単分子層の準備のための再生可能な方法の開発であった。ペプチドをつくるために、機能化された表層は、膜を支持した；リポソームが用意されたリポペプチド／ｄｉｐａｌｍｉｔｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ（ＤＰＰＣ）を混ぜる（Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９８の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１４）：４１４８；よりＷｉｎｇｅｒにＴ．Ｍ．、そして、Ｃｈａｉｋｏｆ：のＥ．Ｌ．［１９９８］Ｃｅｌｌ、Ｖｏｇｅｌ、Ｖ．、編集の材料サイエンス、ピッツバーグ：夫人刊行；Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．ほか［１９９９の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１５：３８６６）。
【００７５】
小嚢形成の前に、リポペプチドｓがリポペプチドおよびＤＰＰＣのｒａｄｉｏｉｏｄｉｎａｔｅｄされて周知の量であったことそれから１％の（ｗ／ｖ）ｏｃｔｙｌ−を有する２０ｍＭのリン酸ナトリウム（ｐＨ　７．４）の溶液の混ぜた（３−Ｄ−グルコシド（ＯＧ）。サンプルは、次の事態の前にＯＧのないバッファの４つの交換に対して透析された；上記のバッファは、アルキル化されたガラス製の（ｏｃｔａｄｅｃｙｌｔｒｉｃｈｏｌｏｒｏｓｉｌａｎｅ（ＯＴＳ））表層の上へ、小嚢溶液の融合に先行する。実験は、１を有する単分子層形成を確かめた：小嚢およびそれのリポペプチドの集中の間の１つの通信は、融合（図６）に続いている平らな基板が動いているとわかった。相互関係のある湿式ＡＦＭ研究は、他の場所で更に詳細であると報告された。（Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９８の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１４）：４１４８；Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．およびＣｈａｉｋｏｆ（中でＥ．Ｌ．［１９９８］）：プラントＡ、ＣｅｌｌのＭａｔｅｒｉａｌｓサイエンス、ピッツバーグ：刊行夫人；Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．その他［１９９９の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１５：３８６６．）膜安定性は、多様な生化学環境の時間の関数として、表層放射能を測ることによって特徴づけられた。表層は、ＲＧＤ−誘導されたリポペプチドの３つのｍｏｌｅ％を有するＤＰＰＣから成った。
【００７６】
図７は、塩水湖（ＰＢＳ）を緩衝されるリン酸塩において培養されるときに、２２のそこのＣが３％未満の１２日の期間にわたる総表層のリポペプチド濃度のロスであったことを証明する。３７Ｃで、８つの日期間以後のリポペプチド損失は、１８％に近づいて、その後で、安定していた。２０％のＦＢＳまたは上澄みがある場合には、内皮細胞から収穫されて、リポペプチドの最初の表層集中の４０％だけは、７日の露出期間以後あった。特に、表層組成物は、観察の追加の５つの日の間、不変のままだった。構成要素の追加のＨＰＬＣ分析と協力して時間にわたる表層集中をｐｌａｔｅａｕｉｎｇすることは、これらの変化が本質的に同根語低下を表さないことを示唆する。膜組成物の変化は、膜流動性の関数として、新規な表層の平衡集中の設立を反映することができる（ｉ．ｅ。温度が、変わる）（縛っているタンパク質および膜−液体インタフェースでの交換反応と同様に）。膜ａｓｓｏｃｉａｔｅｄされたコレステロールの効果および脂質鎖長は詳細に調べられた、しかし、膜安定性の改良は制限された。（Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．ほか［１９９９の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１５：３８６６．）、Ｔｈｉｓ作業は、それ自身において、そして、の中で、非共有結合して関連するアセンブリが医学の植設適用のために不十分に強いことを示唆する。（Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．）［１９９８の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１４：４１４８；Ｍａｕｋ、Ａ．その他ｌ１９９８］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１４：５２５５；Ｗｉｎｇｅｒ、Ｔ．Ｍ．その他［１９９９の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１５：３８６６．）。
【００７７】
（実施例３）
膜−模倣の生体適合物質の安定化：
脂質マクロ・アセンブリの重合および特性に連絡している血液の特徴描写。アルキル化された表層上のリン脂質のｓｉｔｕ重合の。原位置に、重合戦略は、固い液体インタフェース（図８）で、自動集められた脂質単分子層を安定させる手段として、ｍｏｎｏａｃｒｙｌａｔｅなリン脂質を使用して開発された。（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｇ．ほか［１９９７の］Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３０：６４８３−６４８７。）、リン脂質モノマー（１−ｐａｌｍｉｔｏｙｌ−２−（１２の（アクリルオイルオキシ）ドデカノイル）ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ　３−ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）は、合成されて、ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢として備えて、アルキル化された（ＯＴＳ）ガラスの上へ溶けた。遊離基重合は、水溶性の創始者（２，２．ｐｒｉｍｅ．−ａｚｏｂｉｓ（２ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎａｍｉｄｉｎｅ）ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＡＡＰＤ）（計画２））を使用している７０のＣで、水溶液において実行された。最適化された状況の下で、それぞれ、被支持単分子層は、６５および４４の進んでいて退いている水接触角度を表示した。角度に依存するＥＳＣＡ結果は、リンおよび窒素の存在を確かめて、脂質鎖の精密に通常の配置を有する密集した単分子層形成のための理論上の予言と整合していた。ネットワーク形成がない場合、高い剪断流れ環境（２００ダイン／ｃｍ２）がある場合には、同程度よく、重合体のフィルムは、水および空気の静的状況の下で、受け入れられる安定性を示した。この方法は安定する、異種の、生物学上作動中の表層構造の生成への道を提供する。そして、それは密接に生きている細胞の表面を模倣する。親水性重合体のクッションで支えられるアルキル化された表層上のリン脂質のｓｉｔｕ重合の。２次元の重合およびフィルム安定性の強化。小嚢融合および原位置に重合は、より能率的に分子的に移動アルキル化された表層を続ける。
（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｃ．ほか［１９９７の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１３：５６９７−５７０１。）、Ａ三量体は、モノマー２−ヒドロキシメチルアクリル酸塩（ＨＥＡ）、３−アクリルオイル−３オキサプロピル−３−（Ｎ（Ｎ−ジオクタデシルカルバモイル））プロピオン酸エステル（ＡＯＤ）および６の統計の組成物の（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉｏ）エチル・メタクリル酸塩（ＭＴＥＭ）からなる合成された：３：１（ＨＥＡ）：ＡＯＤ：ＭＴＥＭ．親水性ＨＥＡ構成要素がａ”ｃｕｓｈｉｏｎ”ｕｐｏｎとして作用するのに対して、ｓｕｌｆｕｒｃｏｎｔａｉｎｉｎｇしているメタクリル酸塩モノマーは、アンカーとして金に縛るそれ、小嚢融合のためのＣ１８鎖の命じられた層をさらして、疎水性のジアルキルａｔｅｄされたモノマーＡＯＤ　ｓｅｌｆａｓｓｅｍｂｌｅｓ。金のおおわれているシリコン・ウェーハ上の疎水性の表層の形成は進むことによって検査された、そして、それぞれ、退くことは１０２および８２の角度測定に連絡する。上記の通りに、ｍｏｎｏａｃｒｙｌａｔｅなリン脂質モノマーは、ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢として準備されて、三量体おおわれている表層の上へ溶けて、重合した（図９）。それぞれ、被支持単分子層は、５８および３１の進んでいて退いている水接触角度を表示した。角度に依存するＥＳＣＡ結果は、リンおよび窒素の存在を確かめて、密集した単分子層のための理論上の予言と整合していた。かなり、接触角度寸法は、水（固有のフィルム安定性の高いレベルを表す）の数週観察期間にわたって不変のままだった。比較の分析のために、リン脂質はまた、溶解されて、金に束縛されるｏｃｔａｄｅｃｙｌメルカプタン（ＯＤＴ）のｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ”ｒｉｇｉｄ”ｓｅｌｆ−集められた単分子層の上へ重合した。ＥＳＣＡデータはしかし近い包まれた単分子層と整合していた。そして、接触角度寸法は重合する表層が両親媒性の三量体で支えられるそれより高い時間にわたる不安定性のレベルを呈することを証明した。
従って、より可撓性表層を提供する際の三量体は、原位置に重合の小嚢融合および／または効率を強化する。重合された膜−模倣の表層の特性に連絡している血液。膜−模倣の表層の血液互換性は、ヒヒａｒｔｅｒｉｏｖｅｎｏｕｓな（Ｐａｐｉｏ　ａｎｕｂｉｓ）分路モデルにおいて査定された。（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｇ．ほか［１９９７の］Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３０：６４８３−６４８７。）Ｇｌａｓｓチューブ（４ｍｍのｉ．ｄ。３ｃｍ　ｘ）アルキル化した、そして、原位置に、上記の通りに、リン脂質重合は、実行した。試験表層上の小板理解とラベルをつけられる１１１−Ｉｎｄｉｕｍは、使用している１００のｍＬの／分シンチレーションカメラ・イメージングの流速で、１２０分の期間にわたってモニタされた。非処理のガラス製の表層とは対照的に、２時間の期間（図１０）にわたるＰＣ　機能化された表層上の最小の小板堆積が、あった。
【００７８】
（実施例４）
自国で分子的に設計された表層上の内皮細胞挙動の特徴描写。
機能の複合型脈管の生体補綴は、識別することによってなし遂げられて、優先して目標とされた内皮細胞の選択的な再生する反応を誘発するそれらの分子の特徴を補綴の足場に組み込んでいる。この事については、細胞移動に対するｍａｔｅｒｉａｌｉｎｄｕｃｅｄされた効果は、設計方法の臨界決定要素であった。この断面において示されるデータは、デモをする：（ａ）ＥＣマトリックス締め具受容器は、差別的に細胞粘着力および運動を管理する；（ｂ）ＦＧＦ−２は、細胞速度に対する直接の効果によって、内皮ランダムな運動性を強化する；そして、（ｃ）内皮細胞粘着力、移動および増殖は、基板縛られたＲＧＤ　リポペプチドｓで支えられる。ＥＣマトリックス締め具受容器は、差別的に細胞粘着力および運動を管理する。内皮が再生する方法、担保物件形式またはアテローム性動脈硬化症患者プラクがｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚｅｄされると説明するために、最近の強調は、細胞粘着力および移動を制御するために細胞外マトリックスおよびその能力に配置された。生体適合物質設計に関するこれらの調査の重要性が、ＥＣＭのはっきりしたペプチド・シーケンスを結さつして、このことにより選択的な細胞反応を調停するために特定の細胞表層受容器の能力に存在する。例えば、研究は細胞粘着力を調停する受容器が必ずしも細胞運動を制御するものと同じものであってもよいというわけでないことを証明した。（チョン（Ｊ．Ｈ．ほか［１９９８の］アン）。Ｂｉｏｍｅｄ．英２６：１０９１−１１０１。）おおわれているフィブロネクチン上の人間の大動脈の内皮細胞の挙動を観察する際の表層、ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ　ａ４　ｌ’ａ５ｐｌおよびａＶ　３がすっかり効果的に細胞粘着力を調停したこと。予期されるように、ａｄの中で妨害して、（３１は、両方の絶対の細胞速度（細胞を動かす割合と同様に）を減らした。しかし「禁止する（ｐ）、受容器は細胞速度を効果にしなくて、運動能力のある表現型に選択的に静止細胞の責任を管理した。
驚くべきことに、妨害する「の３は、細胞運動性を制限する際の効果を有しなかった。これらの調査結果は、小板以外以外は、内皮細胞の粘着力を調停するためにＳＭＣまたは線維芽細胞のように見えるフィブロネクチンから派生したペプチド・シーケンスＲＥＤＶに、ａｚｉｄが選択的に縛るというハッベルの観察のコンテキストに対する特定の関心の中である（Ｍａｓｓｉａ、Ｓ．Ｐ．およびハッベル（Ｊ．Ａ．［１９９２の］Ｊ．Ｂｉｏｌ．化学）２６７：１４０１９−１４０２６；Ｈｕｂｂｅｌ、Ｊ．Ａ．ほか［１９９１の］Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　９：５６８−５７２．）．データは、細胞／基板接着剤相互作用を調整する際のその役割に加えていかなるマトリックスも自然であるか合成であるにせよ、特定のｉｎｔｅｇｒｉｎ受容器のくくることによる内皮細胞を委託するｍｅｃｈａｎｏｃｈｅｍｉｃａｌなスイッチを決めるように提案するどちらか、運動能力のあるか固定された表現型。ＳＭＣ単分子層を含む天然の基板および生体適合物質設計へのそれらの含み上のＥＣ挙動のより詳細な会計は、他の場所で見つかる。（チョン（Ｊ．Ｈ．ほか［１９９８の］アン）。Ｂｉｏｍｅｄ．英２６：１０９１−１１０１；チョン（Ｊ．Ｈ．ほか［１９９７の］Ｊ）；Ｓｕｒｇ物件。７２：５３−５９．）基本的な線維芽細胞発育因子（ＦＧＦ−２）は、細胞速度に対する直接の効果によって、人間の内皮細胞のｃｈｅｍｏｋｉｎｅｔｉｃな反応を強化する。膜−ｏｒ　ヘパラン硫酸塩−模倣の構造の構成要素としてのＣｙｏｔｏｋｉｎｅｓ（例えばＦＧＦ−２）は、ＥＣ移動を強化して、結果として、内皮再生を容易にする。大部分のレポートがＦＧＦ−２が試験管内のＥＣ移動を増加して、生体内にｒｅ−ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｉｚａｔｉｏｎを速めることを証明した、（バイロウ、Ｓ．その他［１９９４）Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．７４：４８５−４９４；リンドナー（Ｖ．ほか［１９９０の］Ｊ．Ｃｌｉｎ．）Ｉｎｖｅｓｔ．８５：２００４−２００８；Ｒｉｆｋｉｎ、Ｄ．Ｂ．およびＭｏｓｃａｔｅｌｌｉ（Ｄ．［１９８９の］Ｊ．細胞）。生物学１０９：１−６；サトウ、Ｙ．およびＲｉｆｋｉｎ（Ｄ．Ｂ．）［１９８８の］Ｊ．細胞。生物学。１０７：１１９９−１２０５）、他はＦＧＦ−２の能力について論じたＥＣ移動を刺激する（ローゼン（Ｅ．Ｍ．ほか［１９９１の］Ｊ　ＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ．）１４６：３２５−３５；壁（Ｒ．Ｔ．ほか［１９７８の］Ｌａｂ　Ｉｎｖｅｓｔ）。３９：５２３−９；Ｔｅｒｒａｎｏｖａ（Ｖ．Ｐ．ほか［１９８５の］細胞Ｂｉｏ１．）１０１：２３３０−４）．これらの調査において使用する移動分析評価の多くの、例えば試験管内のまたは生体内傷つける、容易に増殖および移動に対するＦＧＦ−２つの効果間の、区別しない、それはこれらのデータの矛盾する性質に貢献する。明白に、細胞運動性上のＦＧＦ−２の均一な集中の効果を決定するために、数学的な分析と組み合わせられる単細胞ビデオ追跡は、実行された。単一の集中（１０のｎｇ／ｍＬ）でのＦＧＦ−２の効果を調べる、細胞速度は、５０％増加した（３１．９の４．９の対１９．３の０．７のＦｍ／ｈｒ；持続時間の対応する減少を有するｐ　＜０．００５）（１．４６の０．４の対１．７２のｉ　０．２７時間；ｐ　＜　０。０５）．全体的に、ランダムな運動性係数（ｕ）は、二倍になった（７４２の３５６の対３１８の６９ｐ．ｍ／ｈｒ；ｐ　＜　０．０５）。
【００７９】
このように、ｖｉｔｒｏの細胞運動性は、集中勾配ＦＧＦ−２の非存在下でさえ直接増大する。内皮細胞成長は、自動集められたＲＧＤ　リポペプチド二分子層に強化される。内皮細胞粘着力、そして、移動適切に機能化された脂質表層アセンブリ（図１１）上の強化する。（Ｃｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［１９９６の］Ｃｈｅｍｔｅｃｈ．）２６：１７−２４。）ＲＧＤペプチド・シーケンスが受容器のｉｎｔｅｇｒｉｎ一系統の多くの部材のための周知のリガンドであるので、特徴づけられて、リポペプチドが活用するＲＧＤが合成されて、そして、基板は形成される二分子層を支持した。
粘着力がＥＣｓと分類されるサーおよび特徴づけられる移動を有する２時間のインキュベーション期間以後評価された４つのＣ．ＥＣで、全ての表層がウシ１％の血清アルブミンを有する夜通しのインキュベーションによって抑止されて、非特異性の効果を減らすために、ｍｉｃｒｏｃａｒｒｉｅｒは分析する。加えて、３Ｈ−チミジン理解は、培養の２日以後ＥＣ増殖を特徴づけるために用いた。アルキル化された金の（ＯＤＴ）表層上のそれらと比較して細胞粘着力、移動および有糸分裂生起は脂質二分子層を含んでいるＲＧＤにかなりより大きかった。加えて、ＲＧＤ　リポペプチド表層上の反応は、自由なペプチドがある場合には、廃止された。概要において、様々なリポペプチドおよび糖脂質同根語は、総合されて、浄化されて、特徴づけられた。受容器に特有の生物活性は保持される、そして、分子のアセンブリは航空の水て固い液体インタフェースで形成されることができる。さらに、安定する膜のような構造が、状況の適当な選択によって生じる。この種のモデル・システムは、生体膜−模倣している表層の設計に関係している構造上でダイナミックな原則の研究を容易にして、膜−ｂａｓｅｄ”ｏｎｄｅｍｎｄ”ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔシステムの臨界決定要素を識別する。
【００８０】
（実施例５）
見える光による脂質アセンブリの安定化は、光重合を調停した。計画が存在のｍｏｎｏａｃｒｙｌａｔｅな機能化された脂質モノマーの重合に基づいて、平らな脂質アセンブリを安定させるためにのどちらか（ＡＩＢＮまたはＡＡＰＤ）、遊離基として、創始者が使われる。この方法の認められた限界は、以下を含む：８時間を上回っている期間の間の７０Ｃで、この反応を実行する必要条件。このように、効果的にタンパク質または炭水化物構造をこれらのシステムに組み込む能力は、生物活性の当然の減少を有する重合反応の間、それらの熱低下によって制限されることができる。効果的膜ベースの抗凝血性のシステムを成し遂げるために必要であるトロンボモジュリンまたはその他要素を有する脂質フィルムをｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅするために、室温で、実行される見える軽い調停された光重合計画は、開発された。（Ｏｒｂａｎ、Ｊ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．［２０００の］高分子）。）以下のそれぞれ、アルキル化された基板を有する脂質小嚢の融合、エオシンＹおよびｔｒｉｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅは遊離基創始者およびアクセラレータとして加えられる。
分子のアセンブリは、クォーツ・ハロゲン・ランプへの３０分の露出に続いている室温で重合する。平均の進んでいる／退いている接触角度は５８／４２０であって、熱的に始められた方法によって得られた値と同等である。そして、以前に記載されている。角度に依存するＥＳＣＡ寸法は、更に原子の平らな表層特性を定義するために実行された。加えて、垂直で平行のｒｅｆｌｅｃｔａｎｃｅ−ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ　Ｒスペクトルは得られた、そして、アクリル酸塩−ＰＣの炭化水素鎖の分子のオリエンテーションが薄皮でおおうｒｅｖｅａｌｅｄ−ｔｈａｔは通常の表層と関連する４６．５であった。安定性研究を含んでいるこれらの結果およびパックしている脂質を特徴づける振動の分光学およびオリエンテーションの使用の詳細は、Ｏｒｂａｎ、Ｊ．およびＣｈａｉｋｏｆ（Ｅ．Ｌ．（２０００の）Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）に記載されている。注の、この戦略が分子の鎖長の増加に関連したメカニズムによる熱的に始められた方法を使用しているのを見られるそれの上のフィルム安定性を増加することそれ「重合が脂質種の転移温度の下で、温度で起こるときに、成し遂げられてある。
【００８１】
（実施例６）
動いているフィルムが水和させた膜−模倣の脂質の形成。ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙｄｅｒｉｖｅｄされた基板。アルキル化された水力ゲル上のリン脂質のｓｉｔｕ重合の。小さい直径脈管の移植片の腔内な表層は、膜−模倣の薄膜によって機能化される。市販の脈管の移植片（発泡させたＰＩＰＥまたはダクロン繊維から作られる）は、穴の多い織物構造である。
このように、これらのプロステーゼをおおうことは、次のアルキル化および脂質フィルム形成に快く従う基板を有するそれらの最初の飽和によって容易にされる。
例えば、移植片飽和のための候補基板は、ゼラチンおよび／またはアルギン酸塩を含む。安定する脂質フィルムを水和する基板の上に形成する能力を調査するように設計されているモデル研究において、アルギン酸塩溶液は、ガラス製のスライドの上へ階層化されて、塩化カルシウムの追加に続いてゲル化した。（チョン（Ｊ．Ｈ．ほか［１９９９の］Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．）科学重合体編集１０：９５−１０８。）、Ａ共重合体は、１の統計の組成物のモノマー２−ヒドロキシメチルアクリル酸塩（ＨＥＡ）および３−アクリルオイル−３−オキサプロピル−３−（Ｎ（Ｎ−ジオクタデシルカルバモイル））プロピオン酸エステル（ＡＯＤ）からなる合成された：１（ＨＥＡ）：
ＡＯＤ．アルギン酸塩は、共重合体溶液にさらされて、乾燥して、ｒｅｈｙｄｒａｔｅｄされた。ゲル表層からの水脱着の方法において、親水性ＨＥＡ構成要素がアルギン酸塩鎖内でもつれると仮定された、共重合体を停泊させること、
固い空気インタフェースでｓｅｌｆａｓｓｅｍｂｌｅに疎水性ジアルキルａｔｅｄされたモノマーを許すこと。ｒｅｈｙｄｒａｔｅｄされた多糖類ゲル上の疎水性の表層の形成は進むことによって検査された、そして、それぞれ、退くことは９４の５’ａｎｄ　６３　＋　７の角度測定に連絡する。ｍｏｎｏａｃｒｙｌａｔｅなリン脂質モノマーからなるＵｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢は、準備されて、共重合体おおわれている表層の上へ溶けた。Ｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌな重合は、ＡＡＰＤを使用している水溶液において実行された。それぞれ、被支持脂質単分子層は、４７のｚｔ　８、そして、２６　７の進んでいて退いている水接触角度を表示した。ＥＳＣＡ結果は、脂質フィルムの存在を確かめた。接触角度寸法は、固有のフィルム安定性の高いレベルを表す水の静的状況の下で、数週観察期間にわたって不変のままだった。アルギン酸塩をＨＥＡでおおう一方：ＡＯＤ両親媒性の重合体は結果（限界が強調されたいくつか）を約束することを生んだ。そして、有機溶媒、ＴＨＦおよび真空上の信頼がヒドロゲルのアルキル化を調停するために乾燥した。結果として、スチレン・スルホン酸塩が、この共重合体システムのモノマーとして使われた。結果として生じる新規なアルキル化された高分子電解質は、ＨＥＡ、ＡＯＤおよび６のモル比率のスチレン・スルホン酸塩から成る：３：１．この三量体キャリーは、否定的に明らかに充電される基板にこの重合体を定着させるのに役立つグループをスルホン酸塩（Ｓ０３）に請求した；例えばボリエステル繊維−Ｌリジン（ＰＬＬ）（計画３）。有機溶媒のために必要な条件または乾燥している長くなる真空のない膜−模倣のフィルムを形成する能力は、アルギン酸塩／ＰＬＬ多層フィルムからなる基板を使用して示された。アルギン酸塩のマルチ層（Ｋｅｌｃｏ；０．１５％のｗ／ＰＢＳのｖ）、そして、ＰＬＬ「（４５９ｋＤ；０．１％のｗ／ＰＢＳのｖ）３０秒の各々の溶液の接触時間の間の試験表層を水に入れることによるガラス製のスライド上の生成した。ｎ−ＰＬＬ（ＰＬＬ−ａｌｇ）フィルムは、高分子電解質三量体の溶液によって、その後中で培養された三１ｍＭの４〜６ｈ．のためのスルホン酸塩の濃度で（エチレングリコール）（ＴＥＧ）小嚢融合および見える軽い調停された光重合は、上記の通りに実行された。分析に表面をつける、接触角度角度測定、ＥＳＣＡ、偏光解析法および高解像度スキャン電子顕微鏡検査法は実行されて、脂質フィルム形成（図１２）を確かめた。１ヵ月を上回っている期間の間のＰＢＳのインキュベーションに続いているこれらのシステムの安定性は、また、確かめられた。注の中で、アルギン酸塩およびボリエステル繊維−Ｌリジンの安定した多層フィルムがゼラチンを含んでいる様々な水和する生物学上誘導された基板に生じることができる。そして、それは生理学上のＰｈでネット陽責任を負う。ｅＰＴＦＥ脈管の移植片の腔内な表層上の膜−模倣の脂質フィルムの形成。上記した技術は、重合されたｍｏｎｏａｃｒｙｌ　ＰＣ膜−模倣の薄膜を有するＰＴＦＥ移植片（４ｍｍのＩＤ）の腔内な表層をおおうために利用された。ＰＴＦＥ移植片は、まず最初に次の事態に先行しているゼラチン（６’ｗｔ％）の水溶液を含浸された；上記（６’ｗｔ％）は、アルギン酸塩（ＰＢＳの０．１５重量部）およびボリエステル繊維−Ｌリジン（ＰＢＳの０．１０重量部）の一連の５枚の交替している層を有する腔内な表層のコーティングに先行する。コーティングは、３０秒の間の１つのｍＬ／分の流速で、プロステーゼの連続的散水によって実行された。各々の散水の後、プロステーゼは１つのｍＬ／分に消イオンされた水できれいにされた。腔内な表層は、それからＨＥＡの１ｍＭの溶液によって注がれた：ＡＯＤ：次の事態の前の１時間の１つのｍＬ／ｈの流速で、ＴＥＧのＳＳ三量体；上記の時間は、１つのｍＬ／ｈでＴＥＧを有する表層の１時間の散水に先行する。小嚢が２０ｍＭのリン酸ナトリウムにおいて用意された６００ナノメートルのｍｏｎｏａｃｒｙｌＰＣの１．２ｍＭの溶液は、１５０ｍＭ含むことを緩衝する（ｐＨ　７．４）ＮａＣｌ、そして、１０：Ｅｏｓｉｎ　Ｙ．に対するｍｏｎｏａｃｒｙｌＰＣの１つのモル比率小嚢溶液は、３時間の１つのｍＬ／ｈの流速で、プロステーゼで注がれて、それからクォーツ・ハロゲン・ランプを使用している３０分間照らされた。
高解像度ＳＥＭイメージは、乾燥している真空およびクロミウムを有するコーティングの後、全てのケースにおいて得られた。小嚢融合、そして、重合移植片表層上の安定均一な膜−模倣のコーティングを生成する。高い拡大で、溶けられた小嚢は、腔内な表層に強調される。概要において、膜模倣性な薄膜を有するｇｅｌａｔｉｎ−（アルギン酸塩／ＰＬＬ）ｎコアセルベートの変更態様は、ジアルキルサイド鎖を有する両親媒性の重合体、可撓性間隔保持装置グループおよび陽イオン表層に重合体を定着させる陰イオン置換分の設計によって、うまく実行された。アルキル化されたヒドロゲルに対する脂質小嚢融合の後、脂質アセンブリは、原位置に光重合を経て安定する。構造を薄皮でおおう、そして、形態学は様々な表層の機密に関わる技術を使用して特徴づけられた。ＰＢＳの最高４週の間のフィルム安定性は、確かめられた。
【００８２】
（実施例７）
膜−模倣の脂質アセンブリへのトロンボモジュリンの還元。ラビットＴＭは、ｍｏｎｏａｃｒｙｌＰＣ（ＡｃＰＣ）にＰＯＰＣのモル比率において異なっているｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒリン脂質小嚢に再構成された。ＴＭの編入効率は、サッカロース勾配によって定まる９５％を上回った。小嚢は、エオシンＹ／ｔｒｉｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅがある場合には、期間を変化させるための見える光にさらされた。前の研究は、脂質小嚢の洗剤可溶化の後、Ｇｌａ−ｄｏｍａｉｎｌｅｓｓなタンパク質Ｃ（ＧＤ−ＰＣ）活動を測ることによって定まる、総ＴＭ濃度が１２５ＩのラベルをつけられたＴＭを用いて得られたそれらの値との優れた契約においてあることを証明した；（ガルヴィン（Ｊ．Ｂ．ほか［１９８７の］Ｊ．生物学化学）２６２　（５）：２１９９−２２０５。）、Ｇｌａ−ｄｏｍａｉｎｌｅｓｓなタンパク質Ｃは、残留物１−４１に局所化される領域を含んでいるｙｃａｒｂｏｘｙｇｌｕｔａｍｉｃな酸（Ｇｌａ）のタンパク質分解裂け目によって得られる。（Ｅｓｍｏｎ、Ｎ．Ｌ．その他［１９８３の］Ｊ．Ｂｉｏｌ．化学２５８［９］：５５４８−５５５３。）、Ｔｈｉｓ領域は、アンカーを細胞膜に縛っているタンパク質Ｃのために用意することによって最適のタンパク質Ｃ起動の原因となる。（Ｋａｌａｆａｔｉｓ、Ｍ．その他ＥｕｋａｒｙｏｔｉｃなジーンＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　６［１］の［１９９６の］Ｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｒｅｖｉｅｗｓ：８７−１０１。）、Ｉｔはまた、Ｃ活動が表層の集中を査定するために機能的に使われることができる示された非常にＧｌａ−ｄｏｍａｉｎｌｅｓｓタンパク質であった。そして、作動中のＴＭは適切に触媒作用のサイトが脂質小嚢の外面より上に配置されるようなものを指向した。（ガルヴィン（Ｊ．Ｂ．ほか［１９８７の］Ｊ．生物学）化学２６２（５）：２１９９−２２０５。）、ＴＭのＲｅｐｏｒｔｅｄされた小嚢集中は、ＧＤ−ＰＣ起動料金の寸法に基づく。脂質組成物（ＰＯＰＣ対ＡｃＰＣ）にかかわりなく、全ての小嚢システムは、重合の前にタンパク質Ｃ起動の類似した率を呈した。しかし「以下の光重合、ＰＣ起動率の適度の減少は、有名だった（図１３）。この効果は、２つの要因に帰されることができる。一つには、ＴＭ活動の減少は、おそらく重合方法の間、発生する遊離基によって、一部のＴＭ分子の直接の不活化に関した。
加えて、触媒作用の効率は、また、複雑な膜の範囲内で減少する脂質可動性の結果として減らされた。ＴＭが重合可能な脂質（図１４）の濃度を増やすことから成る小嚢に組み込まれるときに、これは触媒作用の活動の減少がより大きかったという観察で支えられる。運動のパラメータ、ｋｃ、そして、Ｋｍ、タンパク質Ｃ集中（表１）の関数としてのＡＰＣ製造の観察された率の非線形の後退分析によって得た。予期されるように、自由なＴＭはＰＯＰＣまたは非重合されたＡｃＰＣ小嚢に組み込まれるＴＭと比較して、かなりより高いＫｍ値を有する。しかし「Ｋｍ、重合するＡｃＰＣのＴＭのための値は、脂質二分子層のＴＭの可動性が複合体を活性化しているタンパク質Ｃの形成に影響することを示して、重合の前に観察されるそれより非常に高い。ｋ、ａｌは全ての４枚の書式のために高く評価する類似していて、そして、予期されるように、触媒作用の反応メカニズムが不変のままであることを示す。ｋｃ、／、Ｋｍは、Ｋｍ実施例８の適度の増加にもかかわらず、タンパク質Ｃ起動が重合体の小嚢において触媒的に効率的である顕現を評価する。適切な膜内外オリエンテーションのＴＭを含んでいる膜−模倣のフィルムが、分子の自己集合の、そして、ｓｉｔｕ重合の過程までに生じることができる。ＴＭを含んでいる典型的な膜−模倣の表層が、分析評価必要条件によって、ガラス、金またはシリコン基板の上に形成される平らなアルキル化された基板に生じることができる。膜−模倣の表層の形成は、次の事態の前にｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒリン脂質小嚢の表層融合を含む；上記の小嚢ｓｉｔｕ光重合の先立って、そして、詳述した。最近の研究は、タンパク質Ｃがホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを含む脂質膜の上へ縛るのを好むことを示唆する。（Ｓｍｉｒｎｏｖ、Ｍ．Ｄ．ほか［１９９９の］Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　３８［１２］：３５９１−３５９８；Ｓｍｉｒｎｏｖ、Ｍ．Ｄ．およびＥｓｍｏｎ（Ｃ．Ｔ．［１９９４の］Ｊ．生物学化学２６９［２］）：８１６−８１９。）特に要因Ｖａ不活化に関してＭｏｒｅｏｖｅｒ（ｈｅａｄｇｒｏｕｐがまた、ＡＰＣの触媒作用の効率に貢献することができるＰＥ）。従って、１は基線ＤＰＰＣ表層に異なるモル集中でＴＭを加える効果を分析することができる（１：１０４１：１０６）そして、第２に、単一のＴｍ濃度でホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミン・リン脂質（０−５０のｍｏｌ％）の異なるモル比率から成る表層を特徴づける。
【００８３】
最後に、局所的に強化された膜力学を有する安定表層のマイクロドメインを生成する能力は、両方の重合可能から成る混合アセンブリを利用することによって調べられる（ｅ。ｇ．（モノ・アクリル酸塩ＤＰＰＣ））、そして、ｎｏｎ重合可能な脂質「（ｅ。ｇ．（ＤＰＰＣ））。これは、膜抗凝血剤特性上のｇｅｎｅｒａｔｅｄ”ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ−ｍｏｂｉｌｅ”マイクロドメインの効果の判定を許す。高解像度ＳＥＭおよびＡＦＭによって同程度よく、基板被支持フィルムの形態的で、構造上で化学の特性は、接触角度角度測定、ＥＳＣＡ、外部の反射率ＩＲおよびＲａｍａｎ分光学を含む技術によって調査される。膜力学は、ｃｏｎｆｏｃａｌな蛍光顕微鏡検査に連結する（ＦＲＡＰ）技術をｐｈｏｔｏｂｌｅａｃｈｉｎｇした後に蛍光回復を使用して研究される。方法、蛍光的なタグを付けられた脂質の分子の拡散係数およびアルキル化された基板タイプの関数としてのＴＭの（ＨＥＡ：ＡＯＤ：ＭＴＥＭ対ＨＥＡ．ＡＯＤ．ＳＳ）（脂質微環境（ＰＣ対ＰＥ））そして、２次元の重合（％　ＡｃＰＣ）の範囲は、決定される。効果的ＴＭ表層集中は、測定Ｇｌａ　ｄｏｍａｉｎｌｅｓｓなタンパク質Ｃ（ＧＤ−ＰＣ）起動によって決定される。表層集中は、アルキル化された試験基板（実施例９）に、小嚢融合に平らな脂質フィルムの範囲内でＴＭの新しい方向づけを査定するために脂質小嚢を含んでいるＴＭのために決定されるそれらと比較してある。伝えるところによるとホスファチジルコリン頭グループから成る脂質膜が接触起動を始めないにもかかわらず、ヘパリン化された材料を含む大部分の人工の表層は凝固システムの固有の経路を活性化する。（Ｂｌｅｚｅｒ（Ｒ．ほか［１９９８の］Ｔｈｒｏｍｂ．）血液生成７９［２］：２９６−３０１。）ＴＭ含んでいる膜−模倣のフィルムが血液凝固を始めるかどうか決定するＩｎ＄ｏｒｄｅｒ、２つの試験システムは、利用された被支持脂質フィルムおよび重合体の脂質小嚢である。被支持脂質フィルムが、循環ガラス製のカバー・スリップ（ｄ　２０ｍｍ）に生じて、マルチウェルプレートに置かれて、ｃｉｔｒａｔｅｄされた小板のない人間のプラスマにさらされる。凝固することは、カルシウムの４ｍＭの総濃度への追加によって始められる。サンプルは、９０の分間隔の上の反応混合からとられて、ＡＰＣの生成と同じく、要因ＸＩａ、ＩＸａ、Ｘａおよびトロンビン製造のために分析される。表層の誘導されたタンパク質Ｃ起動の効果は、タンパク質Ｃ−減少するプラスマ（ジョージ・キングＢｉｏｍｅｄｉｃａｌ（オーヴァーランド・パークＫＳ））を使用しているこれらの調査を選択的に繰り返すことによって決定される。第２の実験的なシステムとして、重合体の脂質小嚢のさまざまな集中は、試験表層域を最大にするために平らなガラス製のおおわれている表層と置換される。要因ＸＩａ、ＩＸａ、Ｘａおよび、ＡＰＣレベルがｃｉｔｒａｔｅｄされた小板のない人間のプラスマのｒｅｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎの後、測られるのと、同程度よく、トロンビン活動。準弾力性がある軽い散在によって定まる、小嚢寸法がリン脂質濃度を合計して、先頭のグループ表層域のための寸法を発表したと仮定すると、総小嚢濃度および露出した膜表層域は決定される。膜−模倣のアセンブリをＴＭｃｏｎｔａｉｎｉｎｇすることによって血液凝固の起動を制限する際のアンチトロンビンＩＩＩの役割は、ＴＭ提携のコンドロイチン硫酸塩鎖を取り外すためにｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎａｓｅを有する選択的な試験表層を前もって処理することによって決定される。実験の最初の連続において、ＡＴＩＩＩ−締め具容量は、他の場所で詳細にて説明したように、試験表層をＩ１２５のラベルが付いたＡＴＩＩＩの５００のｎＭ溶液にさらすことによって定義される。（Ｂｌｅｚｅｒ（Ｒ．ほか［１９９７の］Ｊ．）Ｂｉｏｍｅｄ．母。Ｒｅｓ．３７［１］：１０８−１１３。）、Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃな脂質小嚢は、勾配が１１２５−ラベルをつけられたＡＴＩＩＩの関連を決定するために使われる表層域およびサッカロースが試験する試験を最大にするために用いる小嚢。実験の第２の連続は、トロンビン中立化に関して表面ｂｏｕｎｄコンドロイチン硫酸塩鎖の触媒作用の活動を定義する。試験サンプルは、１５ｎＭのトロンビンを含んでいるＨｅｐｅｓバッファおよび２０ｎＭのアンチトロンビンにさらされる。
一定時刻に発生するように仕組んだ間隔で、サンプルは除去されて、残されたトロンビン活動のために分析される、そして、ｔｈｒｏｍｂｉｎａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ　ＩＩＩ（ＴＡＴ）は形成を複雑にする。ＴＡＴ形成は、ＥＬＩＳＡ（Ｅｎｚｙｇｎｏｓｔ　ＴＡＴ、ベーリング、マールブルク、ドイツ）によって決定される。
【００８４】
（実施例１０）
血液凝固の普及フェーズを制限する際の脂質アセンブリを含んでいるＴＭの役割を決定するために、試験表層は、２０／ＬＭ　ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢によって釘で打ちつけられる自由な人間のプラスマが２５のｍｏｌ％　ＤＯＰＳ／７５のｍｏｌ％　ＤＯＰＣの中で構成したｃｉｔｒａｔｅｄされた小板にさらされる。（Ｂｌｅｚｅｒ、Ｒ．ほか［１９９７の］Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．３７［１］：１０８−１１３。）、Ｔｈｅｓｅ小嚢は、ｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔな小板リン脂質膜の脂質組成物を模倣するために利用される。それによって、複合体（ｔｅｎａｓｅ）を活性化している要因Ｘのアセンブリを容易にする。凝固することは、４ｍＭ、カルシウムの総濃度への追加によって始められる、サンプルは９０の分間隔の上の反応混合から、必要とされて、要因Ｘａ、活性化されたタンパク質Ｃおよびトロンビン製造のために分析した。近似の一部のｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔな経路にアクセスできるトロンビンは、フィブリノペプチドＡ形成を測ることによって決定される。試験サンプルは、重合体の脂質小嚢を含んでおよび／または、上記の通りに、平らな重合体の脂質フィルムを支えた。
【００８５】
（実施例１１）
上記したフィルムは、ｖｉｔｒｏの、そして、活発な使用の両方とものための充分なｂｉｏｓｔａｂｉｌｉｔｙを有する。例えば、非重合された形式にさえおいて、リポソームは皮下の注入のサイトで日または週間さえ持続する。（Ｍａｕｋ、Ｍ．Ｒ．ほか［１９８０の］サイエンス２０７：３０９−３１１。）、Ｏｔｈｅｒ研究は、また、様々なｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓによって修正される表層が試験管内の長くなる期間の間の分子特定の生物活性を保持すると決定した、そして、生体内である。（ＩｍａｎｓｈｉにＹ．［１９９２］「ｂｉｏｃｏｍｐｏｓｉｔｅ材料の統合：自然の重合体、ボカラトン、フロリダ、ＣＲＣプレスの化学で生物学的変更態様；Ｎｏｊｉｒｉ、Ｃ．ほか［１９９６の］ＡＳＡＩＯジャーナル４２［５］：Ｍ４６８−４７５。）、Ｎｏｎｅｔｈｅｌｅｓｓ、リン脂質、タンパク質および炭水化物は、内部から発生するペプチダーゼ、グリコシダーゼおよびヒドロラーゼの作用の結果として、必然的に等級が下がる。このように、試験管内の実験は、ＴＭ−機能化された重合体の脂質膜のｂｉｏｓｔａｂｉｌｉｔｙを定義するために用いる。具体的には、生物学的で生理化学的なフィルム安定性は、実験の２つの集合において評価される：膜安定性上の物理的な要因の効果。
【００８６】
フィルム安定性は、まず最初に２３および３７ＣでＰＢＳおよびｃｉｔｒａｔｅｄされた人間のプラスマのサンプルのインキュベーションによって査定される。全てのケースにおいて、集中がＧＤ−ＰＣ起動を測って決定されるＴＭ表層の変化は、評価される。査定する追加の表層の機密に関わる技術の使用はフィルム身体検査において変わる、そして、化学の特性は選択的な基礎に実行される。これらの研究は、ＴＭ活動の重大なロスが直接の脱着でまたは相互作用を血清タンパク質か自然に起こっている界面活性剤分子で縛る効果のためにあるかどうか決定する。
【００８７】
最後に、大部分の臨床適用で、血液−接触表層は、２０ダイン／ｃｍ２以下の壁剪断率に従属する。従って、フィルムはまた、平行のプレート流れ室の最高１２０分の間の連続する剪断応力（２０および２００ダイン／ｃｍ２）へのＰＢＳ露出の後、分析される。膜安定性上の生化学要因の効果。試験表層は、穴の多いインサートを付けている２４−井戸プレートから成っている二重の室共同培養システム（タカ社）を使用している内皮細胞がある場合には、培養される（０．４５人のｊｊ．ｍ孔サイズ）。内皮細胞は、挿入物で培養されて、下にある井戸に置かれる基板を試験する。新しく洗練された内皮細胞を有する井戸挿入物の置き換えは、実験の継続期間に従い必要であることができる。さまざまな時間間隔（０，２４ｈ、４８ｈ、９６ｈ、１ｗｋ、２ｗｋおよび４ｗｋ）で、試験基板は除去される、そして、ＧＤ−ＰＣ起動を測ることによって決定されるＴＭ表層集中の変化は評価される。ＰＢＳの単独でサンプルまたは１の脂質に対するリパーゼの重量比率でのホスホリパーゼＣをもつＰＢＳのインキュベーション：２０，１：１００および１：それぞれ、１０００は否定で明確な制御として役立つ。査定する追加の表層の機密に関わる技術の使用はフィルム身体検査において変わる、そして、化学の特性は選択的な基礎に実行される。
【００８８】
（実施例１２）
この断面の調査は、以下に捜索する：（ｉ）静脈（５０の集合』）で動脈の流れ率（５００秒１）で、ＡＰＣ製造のためのｋｉｎｅｔｉｃａｌｌｙな限られた制度を定義する；（ｉｉ）ＡＰＣ製造の固有の運動パラメータおよび剪断率、脂質頭グループ組成物および膜力学のこれらのパラメータに対する効果を決定する；そして、（ｉｉｉ）タンパク質Ｃ−活性化している複合体の形成の率が拡散であるかどうか識別する、さもなければ、反応は方法を制御した。詳細などこか他の所として、方法論的方法は、毛管流れ原子炉システムの使用に基づく。（Ｂｌｅｚｅｒ（Ｒ．ほか［１９９８の］Ｔｈｒｏｍｂ．）Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ　７９［２］：２９６−３０１；ー（Ｄ．ほか［１９９５の］Ｊ．ＢｉｏＬ化学２７０［３］）：１０２９−１０３４；Ｃｏｎｔｉｎｏ（Ｐ．Ｂ．ほか［１９９４の］Ｂｉｏｐｈｙｓ．）Ｊ．６７［３］：１１１３−１１１６。）、Ｔｈｉｓ技術が、基礎を形成される膜が処理する脂質上の流れ率の効果を研究する際に広く使われた。ガラス製の毛管（０．６５ｍｍのＩＤおよび１２７ｍｍの長）は、膜−模倣のフィルムでおおわれていて、ハミルトン注射器に付属した。試験溶液の流れ率は、注射器ポンプによって制御されて、流れ原子炉の先端から集められるサンプルを計時した。全ての研究は、３７Ｃで実施される。ｐｈｏｔｏｐｏｌｙｍｅｒｉｚｅｄされた脂質フィルムに加えて、ＴＭが脂質分子を含んでいる非アクリル酸塩から成る小嚢に組み込まれること（ｅ。ｇ．ＰＯＰＣ、ＤＬ２ＰＥ、その他）ガラス製の毛管の内壁の上の融合のための。天然のリン脂質から成る脂質コーティングへのＴＭの還元は、下で概説される全ての研究のための基準点として役立つ。最も密接にこの参照システムを使用して発生するデータは、細胞膜の本当の微環境を模倣する。ＡＰＣ製造のためのｋｉｎｅｔｉｃａｌｌｙな限られた制度を定義する実験は、１００ｍＭのＮａＣｌ、５つのｍｇの／ｍＬのＢＳＡ、５ｍＭのＣａ２＋、タンパク質Ｃ（０．１／ＬＭ）およびトロンビン（１０ｎＭ）を含んでいる起動バッファ（Ｔｒｉｓ−ｃｌ　２０ｍＭのｐＨ　５．５）を有するおおわれている毛細管の散水を含む。ＡＰＣ製造は、静脈で動脈の剪断率で、ＴＭ表面密度の関数として、決定される。輸送限界は、これらのシステムの挙動に対する重大な衝撃を有する。従って、これらの実験は、与えられた流れ制度のために、ＡＰＣ製造が大量の転送限界のためにＴＭ集中から独立しているようになるＴＭ表面密度を定義するのを助ける。ＡＰＣ製造の固有の運動パラメータは、タンパク質Ｃの集中を変化させることに関するトロンビン（１０ｎＭ）を含んでいる起動バッファを有するおおわれている毛管の散水によって、ｋｉｎｅｔｉｃａｌｌｙな限られた制度において査定される（０．０１４　ｕＭ）。
全てのケースの、毛管がＡＰＣ製造の１０分のＲａｔｅｓのために一人のトロンビンによってｐｒｅｐｅｒｆｕｓｅｄされること流れ原子炉の放出口で測られるＡＰＣの安定したステート・レベルから決定する。運動のパラメータ、ｋｃ、そして、Ｋｍ、散水溶液のタンパク質Ｃ集中の関数としてのＡＰＣ製造の観察された率の非線形の後退分析によって得る。剪断率のこれらのパラメータ上の効果（５０　ｓｅｃ−’ｖｓ。５００セクト）、そして、脂質頭グループ組成物「（ｉ．ｅ。様々なモルｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｘｎｉｎｅに対するホスファチジルコリンの比率）決定する。加えて、これらのシステムが十分に安定している場合、運動パラメータは重合体で非重合体の脂質から成る混合膜−模倣のアセンブリのために定義される。
【００８９】
最後に、運動パラメータは、重合体の脂質の中で、ＴＭのために引き出されるそれらに脂質小嚢に嵌入される複合体が全てを構成したのと、同程度よく、ＰＯＰＣ小嚢に嵌入されるＴＭ複合体のたにまたは一部において報告されるそれらの値と比較してある。タンパク質Ｃ−活性化している複合体の形成の率（ｉ．ｅ．（ＴＭ）：ｔｈｒｏｍｂｉｎ）動脈で静脈の流れ状況の下で推定されて、拡散か反応制御方法として定義される。膜おおわれている毛管は、タンパク質Ｃ（０．１ｕＭ）を含んでいて、トロンビン（０．１−１０のｎＭ）の量を変化させている起動バッファおよび原子炉放出口で測られるＡＰＣ製造によって注がれる。
ＡＰＣ製造の安定したステート・レベルに達する時は、散水溶液のトロンビンの量の増加と共に減少する。従って、ＡＰＣ生成カーブの最初の一部は膜−模倣の表層で、活動を生成しているＡＰＣの形成の率を反映する、そして、この率は散水混合のトロンビンの量の増加と共に増加する。ＡＰＣ製造の実験的な率は、複合体を活性化しているタンパク質Ｃの形成が輸送であるかどうか決定するために触媒作用の表層またはｋｉｎｅｔｉｃａｌｌｙな限られた方法へのトロンビン質量移動の算出率と比較してある。
【００９０】
（実施例１３）
これらの実験は、動脈（５００のｓｅｃ’１）で静脈の（５０のｓｅｃ’１）流れ状況の下で、膜−模倣のフィルムを含んでいるＴＭの抗血栓形成性な特性を調べる。進行中に、凝固滝の固有であるか外部の経路のいずれの起動にもよって始められる場合、トロンビン形成を制限する試験フィルムの容量は定義される。加えて、トロンビンが機能させなくされるかタンパク質Ｃ経路に目指す範囲は、決定される。上記の通りに、これらの研究の全ての方法論的方法が毛管流れ原子炉システムを利用すること。ｃｉｔｒａｔｅｄされた小板自由な人間のプラスマのＲｅｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎまたは凝固滝（例えばトロンビンまたは組織要因）の創始者が流れ原子炉に入口の前にちょうどこれらの要因を潅水に混入して起こるその他の追加。全ての研究は、３７Ｃで実施される。
固有の経路を経て始められるときに、血液凝固の普及を制限するために膜−模倣のフィルムの能力を定義するために実験するｒｅｃａｌｃｉｆｉｅｄされた小板自由な人間のプラスマを有するｐｅｒｆｕｓｉｏｎ’ｏｆおおわれている毛細管を含む。サンプルは、流れ原子炉の放出口から集められて、要因ＸＩａ、ＩＸａ、Ｘａ、ＡＰＣおよびトロンビン製造のために分析される。この過程の表層によって誘発されたタンパク質Ｃ起動の効果は、ＴＭのない膜システムがある場合には、測定凝固している要因起動によって決定される。血液凝固の普及を強化するために、実験は２５のｍｏｌ％　ＤＯＰＳ／７５のｍｏｌ％　ＤＯＰＣから成るｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢の１Ｍ　２０によって釘で打ちつけられるｒｅｃａｌｃｉｆｉｅｄされた小板のない人間のプラスマによって、選択的に繰り返される。
これらの小嚢は、ｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔな小板リン脂質膜の脂質組成物を模倣して、複合体（ｔｅｎａｓｅ）を活性化している要因Ｘのアセンブリを容易にする。これらの研究の第２のフェーズにおいて、外部の経路を経て始められるときに、実験は血液凝固を制限するために膜−模倣のフィルムの能力を定義するために実施される。これらの調査は、自由なプラスマが２５のｍｏｌ％　ＤＯＰＳ／７５のｍｏｌ％　ＤＯＰＣから成るｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ小嚢に再構成される組織要因（１−１００のｐＭ）の集中を変化させると共に刺したｒｅｃａｌｃｉｆｉｅｄされた小板を有するおおわれている毛細管の散水を含む。流れ原子炉放出口でのサンプルは、集められて、要因Ｘａ、ＡＰＣおよびトロンビン製造のために分析される。近似の一部のｐｒｏｃｏａｇｕｌａｎｔな経路にアクセスできるトロンビンは、フィブリノペプチドＡ形成を測ることによって決定される。表層によって誘発されたタンパク質Ｃ起動の効果は、ＴＭのない膜システムがある場合には、測定凝固している要因起動によって決定される。直接のトロンビン不活化複合体の形成の率を推定する（ＴＭ：ＡＴＩＩＩ）チューブがＨｅｐｅｓに注がれるおおわれている毛細管は、２０ナノメートルのトロンビンおよびアンチトロンビンの１５ナノメートル含むことを緩衝する。一定時刻に発生するように仕組んだ間隔で、サンプルは集められて、残されたトロンビン活動のために分析される、そして、ｔｈｒｏｍｂｉｎ−ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ　ＩＩＩ（ＴＡＴ）は形成を複雑にする。前もって決定された様に、トロンビン不活化活動は膜の容量を結合している周知のＡＴＩＩＩと比較してある。実験の他の連続を、トロンビンを含有する人間のプラスマがある場合には、抗血栓形成性なフィルム特性を調べることにあてる。自由なプラスマがトロンビン（１０−１００のｎＭ）の集中を変化させると共に刺したｒｅｃａｌｃｉｆｉｅｄされた小板によって、おおわれている毛細管は、注がれる。流れ原子炉放出口でのサンプルは、集められて、要因Ｘａ、ＡＰＣ、トロンビンおよびフィブリノペプチドＡ形成のために分析される。
【００９１】
（実施例１４）
合成プロステーゼは、次の事態の前に移植片壁（６ｍｍのＩＤ　ｅＰＴＦＥ）にゼラチンを最初に含浸することによって作られる；上記のゼラチンは、アルギン酸塩およびボリエステル繊維−Ｌリジンの高分子電解質層を交替させることに関するプロステーゼの腔内な表層のコーティングに先行する。プロステーゼの腔内な表層上のアルキル化された層の次の形成は、両親媒性の三量体を使用して成し遂げられる。プロステーゼはある、そして、次の事態の前に脂質小嚢の水の混合物によって培養される；上記の小嚢自動集められた脂質膜のｓｉｔｕ重合の先立つ。表層特徴描写はＥＳＣＡを使用して実行される。そして、接触角度角度測定、高解像度ＳＥＭおよび表層のＴＭ集中がＧＤ−ＰＣ起動分析評価で測定される。フィルム・コーティングの一様性は、ｅｐｉｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔな顕微鏡検査と組み合わせられる脂質調査とラベルをつけられる発色団を使用して決定される。表面ｉｎｄｕｃｅｄされた血栓症の危険性を予測することの研究に連絡している短期の血液の限界は、周知である。それでもなお、鋭い血液−接触分析評価を使用しているこれらの材料の性能の特徴描写は、便利なスクリーニング・メカニズムを表層組成物の大きい配列のために用意する。大腿骨のａｒｔｅｒｉｏｖｅｎｏｕｓな分路モデルが使われる前活発なＬａｍｅが鋭い小板およびフィブリノゲン堆積を評価するヒヒは、流れ制度をｗｅｌｌｄｅｆｉｎｅｄした。試験サンプルは、分路に置かれて、いずれの５０のｓｅｃ’１もまたは５００のｓｅｃ’１の壁剪断率での最高１２０分の間の小板とラベルをつけられるＩｎにさらされる。小板堆積は、シンチレーションカメラ・イメージングによってモニタされる。注射された１２１１のラベルをつけられたフィブリノゲンの吸着は、計数しているγによって血液露出期間の終わりに決定される。１２１１を使用することによって、プラスマ・タンパク質吸着の目印として、ラベルをつけられたフィブリノゲンが小板が付着するかどうか調査することために、そして、主要な表層のそばの活性化する、または、吸着されたプラスマｐｒｏｔｅｉｎ￥ｆｉｂｒｉｎフィルムを経た。目印（それは小板および凝固酵素の起動に上げられる）の活発なプラスマ分析評価のいくつかは、また、これらの研究のコースの間、利用される。具体的には、トロンビンによるフィブリノゲンおよびその裂け目の消費は、ｃｌｏｔｔａｂｌｅなフィブリノゲンおよびｆｌｂｒｉｎｏｐｅｐｔｉｄｅ　Ａ（ＦＰＡ）が平らにするプラスマの寸法によって査定される。小板の起動は、小板カウントを回すことの変化から、そして、剥離可能な小板ａ−ｇｒａｎｕｌｅタンパク質、８−ｔｈｒｏｍｂｏｇｌｏｂｕｌｉｎおよび小板要因４のプラスマ・レベルによって判断される。線維素溶解は、フィブリンＤ−二量体断片の循環レベルの寸法によって推定される。活性化された部分的なトロンボプラスチン時間。（ＡＰＴＴ）寸法は、また、ｃｉｔｒａｔｅｄされたプラスマ・サンプルを使用して実行される。かなり、表層によって誘発されたトロンビン形成の程度は、ｔｈｒｏｍｂｉｎ−ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ　ＩＩＩ複合体の測定レベルによって決定される。これらの分析評価のヒヒ分路モデルの利用は、そば���他の場所で詳述した。（ハンソン（Ｓ．Ｒ．ほか［１９９３の］Ｊ．Ｃｌｉｎ．）Ｉｎｖｅｓｔ．９２［４］：２００３−２０１２。）、Ｆｉｎａｌｌｙに、脂質フィルムの範囲内の放射性同位元素で識別されるか発色団のラベルが付いた同根語の使用は、血液−接触環境の短期のｂｉｏｓｔａｂｉｌｉｔｙの特徴描写を許す。小さい直径移植片の腔内な表層に線をひいている膜−模倣のフィルムのために必要な条件は、コーティングしてない移植片（単独でアルギン酸塩／ＰＬＬまたはアルギン酸塩／ＰＬｌｉｔｅｒ重合体でおおわれているそれらと同様に）上の小板およびタンパク質堆積を査定することによって試験される。この動物のモデルを有する関連する方法論は、更なる詳細に記載されていた。（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｃ．［１９９７の］Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３０：６４８３−６４８７；ゴールデン（Ｍ．Ａ．Ｊ．脈管の［１９９０の］手術１１［６］）：８３８−８４４；ハンソン、Ｓ．Ｒ．［１９９３の］Ｊ．臨床は、投資する。９２［４つの］：２００３−２０１２；ハンソン（Ｓ．Ｒ．ほか［１９８５の］Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　５）：５９５−６０３；クラウス（Ａ．Ｗ．ほか［１９８５の］Ａｍ．）Ｊ．病理学１１８［１］：４３−５４。）、Ｍｕｌｔｉｐｌｅ前活発な分路は、単一の動物（１０−１５の分路研究が与えられたヒヒにおいて我慢されることができるのと、同程度多くであるもの）において実行されることができる。従来の試験管内の研究の完全な使用によって、必要な動物の数は、結果の正当性を障害を生じさせずに最小にされる。Ｃ．Ｔｏが年代を示す、高度なシーケンス異体同形（＞　９８％）が人間のおよびヒヒｃＤＮＡ種符号化の間で決定された人間のＴＭおよびタンパク質によって全ての研究は、実施される多様性タンパク質。（Ｈａｙｚｅｒ、Ｄ．ほか［１９９３の］ジーン１２７：２７１−２７１；ショウジ（Ｍ．ほか［１９９３の］ジーン１３３）：３０７−３０８；Ｈａｙｚｅｒ、Ｄ．その他［１９９９］Ｔｈｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．）Ｍｏｒｅｏｖｅｒ、ヒヒに噴射されるときに、再結合物人間の可溶なＴＭはタンパク質Ｃを活性化して、トロンビン生成を制限することができる。（Ｈａｒｋｅｒ（Ｌ．Ａ．ほか［２０００の］Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．））Ｔｈｕｓ、人間のＴＭによって機能化される膜−模倣のフィルムは、内部から発生するタンパク質Ｃ経路を活性化することが可能であるヒヒ。
【００９２】
（実施例１５）
動脈の剪断率状況の下で実施される研究のために、プロステーゼは霊長類モデルの頸動脈で腸骨の動脈において配備される。これらの研究のための両方の腸骨のおよび頸動脈動脈を使用することによって、少なくとも４０の動脈のサイト（１０匹の動物）は、選択された標本の並列の、平行の調査に使える。２つのフィルム組成物は、これらの調査の焦点である：（ｉ）単純なｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅリン脂質膜のようなアセンブリ；そして、（ｉｉ）ＴＭを含む膜−模倣のフィルム。これらの異なる移植片公式化は、非処理の集合とともに査定される。動脈状の数が据え付ける合計は、ＡＮＯＶＡおよびｔ−試験を使用しているデータ分析をもつ各々のグループの少なくとも６つの複製の移植を許す。植片移植に続いて、開通は関連する動脈の体積流れ寸法を有するＤｕｐｌｅｘイメージングによって、３０日または６ヵ月に犠牲の前に、そして、初めに決められる。
これらの時間位置は従来の研究に基づく。そして、それは慎重にヒヒ・モデルにおいて癒えているｅＰＴＦＥ移植片を分析した。（ゴールデン（Ｍ．Ａ．ほか［１９９０の］Ｊ．Ｖａｓｃｕｌａｒ　Ｓｕｒｇｅｒｙ　１１［６］）：８３８−８４４；クラウス（Ａ．Ｗ．ほか［１９８５の］Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１１８［１］）：４３−５４；クラウス（ＡＷほか［１９８６の］Ｊ．Ｖａｓｃ．）Ｓｕｒｇ．３：８７７−８８４。）１ヵ月Ｂｙ、内への成長はほぼ１ｃｍを延長する、そして、移植片ルーメンの約１０％を妨げてある重大なａｎａｓｔｏｍａｔｉｃなｎｅｏ腔内な障害はある。これらの調査結果は、再生可能だった；それゆえに、１ヵ月の時間位置は、早い治療するイベントを査定することに適当である。１２ヵ月までの更なるほとんど変化以外については、ｐａｎｎｕｓ内への成長の腔内な領域および範囲は、１および６ヵ月の間で次第に増加する。同様に、ＳＭＣ対マトリックス構成要素から成る内膜の一部分は６ヵ月まで外へ減少する。そして、その後で、安定しているままである。従って、６ヵ月の時間位置は、結果を最近癒やしている評価のために選ばれた。移植片収穫の前に、動物はエヴァンズＢｌｕｅの静脈注射を受信する。そして、それは内皮が不在である移植片壁および細胞増殖の測定のためのブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ）に入る。外移植の時点で、移植片は長手方向に切開されて、血栓のない表層で全体的なｐａｎｎｕｓ組織内への成長の測定のために写真を撮られる。そして、ｅＰＴＦＥ移植片を有する制御研究のそれは約１つのｃｍ／ヵ月を平均する。それから、連続的断面は、隣接した動脈から、そして、電子顕微鏡検査法および光顕微鏡検査を走査することによって審査のためのほぼ５ｍｍの間隔でとられる全ての移植片に沿って得られる。この方法は、前述したように、全ての移植片長以上のイベントを癒やす組織学の再建を許可する。
（ハンソン（Ｓ．Ｒ．ほか［１９９１の］Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　１８［４つのＳｕｐｐ］）：１１７０−６。）、Ｓｔａｉｎｉｎｇすることは内皮および平滑筋細胞範囲（細胞状の関連する動脈の壁およびマトリックス反応と同様に）を調べるために実行される。例えば、免疫組織化学の研究は、マクロファージを識別するために内皮細胞、平滑筋細胞を識別する平滑筋ａ−ａｃｔｉｎおよびハム５６を識別するために内皮要因ＶＩＩＩ／フォン・ウィルブラント要因によって汚れることを含む。Ｎｅｏ腔内な過形成（ｉ．ｅ。内側の移植片のカプセル）確立した量的コンピュータ化された形態計測的な技術によって査定する。
【００９３】
（実施例１６）
膜−模倣の表層のそばの分子の輸送の変調。膜−模倣のコーティングによるヒドロゲル−水インタフェースでの大量輸送特性の変更。１２１１のウシ血清アルブミンを積んでいるアルギン酸塩ビーズ（平均直径２．３２ｍｍ）（１０：１アルギン酸塩／ＢＳＡ溶液）共重合体被支持脂質膜を有するおおった。ビーズは、３７Ｃ、培養された、サンプルは溶液に散ったＢＳＡの量を計るために計数される規則的な間隔および放射能で必要とされた。Ｓｋｅｌｌａｎｄによって記載されているように、球からのＢＳＡの不安定な状態拡散は分析された（Ｓｋｅｌｌａｎｄ。Ａ．Ｈ．Ｐに、［１９７４）ＤｉｆｆｕｓｉｏｎａｌミサＴｒａｎｓｆｅｒ（ニューヨーク）：ジョン・ワイリー）、そして、Ｃｒｏｏｋｓによって利用されるそれと同様の手順によって決定される全体的な大量の転送係数その他「（湾曲（Ｊ．がＢｉｏｍｅｄしたＣ．Ａ．ほか［１９９０］）。Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．２４：１２４１−１２６２）．ＢＳＡ輸送挙動は、図１５において示される。示されるように、重合された脂質膜の存在はかなりＢＳＡ拡散係数を減らした。２４時間以後、アルブミンの８０％以上は、コーティングしてないアルギン酸塩ビーズから自由にされた。対照的に、アルブミンのほぼ９５％は、おおわれているビーズにおいて保持された。具体的には、アルギン酸塩／水のインタフェースによるＢＳＡの拡散係数は、１２５の見せかけのフィルム厚みを有する膜−模倣のコーティングの追加によって、３．４２のｘ　１０−４つのｃｍ２／ｈｒ　ｔｊｉｏ　２２５×１０−１６のｃｍ２／ｈｒから減少した。同様に、重合体おおわれているアルギン酸塩ビーズによるＢＳＡのための全体的な大量の転送係数は、それがいずれのマシューもその他によってデモをしたより、かなり少なかった４．７１　ｘ　１０−９　ｃｍ／最小限度であった（マシュー（Ｈ．Ｗ．ほか［１９９３の］ＢｉｏｔｅｃｈｎｏＬ　Ｐｒｏｇ　９）：５１０−５１９）標準のボリエステル繊維−Ｌ−リジン・アルギン酸塩カプセル（１．５　ｘ　１０−４　ｃｍ／最小限度）のためのまたはＣｒｏｏｋｓその他によって（湾曲（Ｊ．がＢｉｏｍｅｄしたＣ．Ａ．ほか［１９９０］）。Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．２４：１２４１−１２６２）ヒドロキシエチルメタクリレートなメタクリル酸メチル共重合体（４．２１　ｘ　１０−６　ｃｍ／最小限度）から成るマイクロカプセルのための。免疫隔離バリアの設計において、ＭＷＣＯのための認められた基準が、現在存在しない。しかし、これらの研究は、極薄の、重合体の膜−模倣のコーティングが免疫グロブリンを通さないインタフェースを生むことができることを証明する。航空の水インタフェースでの自動集められた脂質単分子層を有する第２の生成ＰＥＯ　デンドリマーの相互作用。第二世代のＰＥＯ　デンドリマーは、Ｓｃｈｅｍｅ　４（５２，０００グラム／モルＭｎ　＝、７１，０００グラム／モルＭｗ　＝、ＰＤ　＝　１．３）にて図示したように、合成された。空気でのＰＥＯ　デンドリマー／脂質混合の表層の領域−圧力等温線／水インタフェースが円形のＬａｎｇｍｕｉｒＢｌｏｄｇｅｔｔ谷に得られて、リン脂質単分子層のＰＥＯ　デンドリマーの混合特性を特徴づけるために（２０００、邇摩���Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、コベントリーをタイプする、Ｅｎｇｌａｎｄ）２５のＣ．ＰＥＯ　デンドリマーおよびｄｉｐａｌｍｉｔｏｙｌ　ホスファチジルグリセロールで（ＤＰＰＧ）ｃｈｏｌｏｒｏｆｏｒｍに溶かされた：メタノール（４：１ｖ／ｖ）および１５０のｍＭＮａＣＩ溶液の水のｓｕｂｐｈａｓｅの上へ、気密ハミルトン注射器を使用している広がり。（Ｈｅｒｏｇｕｅｚ、Ｖ．ほか［１９９７の］Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３０：４７９１−９８。）ＰＥＯのＭｏｌａｒ比率：ＤＰＰＧは、１から変動した：１０３〜１：標準の参照として含まれる純粋なＤＰＰＧを有する１０７。混合システムおよびＤＰＰＧのための表層の領域−圧力等温線は、単独ではっきりした発泡させて凝縮されたフェーズ（図１６）を特徴とした。圧縮カーブは、デンドリマーの比較的低いモル集中でさえ、分子につき領域の重大な増加を有する脂質単分子層に、明らかにＰＥＯ　デンドリマーの表層編入を示す。液体発泡させて液体縮合されたフェーズ間の移行領域は、単分子層のＰＥＧ編入のために分子につきより高い領域の方へ移される。純粋なＤＰＰＧおよび混合システムのための圧壊圧力はかなり異ならなかった（７５のｍＮ／ｍ）。但し、圧壊での領域は混合（７０のＡ／ｍｏｌｅｃｕｌｅ対４０の２／ｍｏｌｅｃｕｌｅ）を含んでいるデンドリマーのためにより大きかった。注の中で、ＤＰＰＧのための圧壊域は、ジアルキル　両親媒性物質のための期待値と同等である。これらのデータは、ＰＥＯ　デンドリマーが最も高い表層の圧力でさえ直ちにデンドリマーの比較的ほとんど減少を有する自動集められた脂質単分子層と関連しないことを示す。低温電子顕微鏡検査による個々のＰＥＯ　デンドリマー分子の視覚化。４０５，０００（ＰＥＯの５４本の腕を代表する）の報告された相対的な分子の量を有する水のＰＥＯ　デンドリマー（星５９４、Ｓｈｅａｒｗａｔｅｒ　Ｐｏｌｙｍｅｒｓ、Ｉｎｃ、Ａｌａｂａｓｔｅｒ、Ａｌ）は、低温電子顕微鏡検査によって特徴づけられた。ＰＥＯ　デンドリマーのためのＰＤＩは、２９ナノメートルの範囲の水のフェーズ直径を有する２より大きい。（Ｇｎａｎｏｕ（Ｙほか［１９９８の］Ｍａｋｒｏｍｏｌ．）化学１８９：２８８５−２８９２；Ｃｉｍａ、Ｌ．Ｇ．およびＬｏｐｉｎ（Ｓ．Ｔ．［１９９５の］高分子２８）：６７８７−６７９４．）デンドリマーは、約０．２のｍｇ／ｍＬの集中に、蒸留水に溶かされた。ＳＴＥＭおよびＳＥＭモードのｃｒｙｏ−ＥＭ実験のために、２つのサンプル準備方法は、利用された。サンプル（５ｕＬ）は、どちらでも適用された以下：（ｉ）平坦な表層（ＢＵＯＩ２　１２８Ｔ）を有するキャリアが液体エタン（−１８６のＣ）への浸水によって、続いて、砕くことを凍らせる金の３ｍｍの標本；または、３００−メッシュ銅格子上の市販のレースのカーボン膜は、薄膜幅濾紙ににじんで、直ちにＲｅｉｃｈｅｒｔ　ＫＦ−８０のｃｒｙｏ−ステーションの液体エタンに飛び込んだ。（ｉｉ）サンプルは、オックスフォードＣＴ−３５００のｃｒｙｏｈｏｌｄｅｒに移ることの前の液体窒素および１つのｘ　１０−５でクロミウムでおおわれている表層の下で保たれたＰａ　ａｎｄ−１６０　Ｃ．ガラスにされたサスペン���ョンを含んでいる格子またはキャリアは、オックスフォードＣＴ−３５００のＴＥＭ−タイプｃｒｙｏｓｔａｇｅを受け入れるために修正される伝送て高解像度第２のｅｌｅｃｔｒｏｎ−Ｉ顕微鏡を走査しているトプコンＤＳ１３０Ｆショットキ電界放出に変形した。水晶のような氷は、ＩｍａｇｉｎｇしているＣ．が光線損害を最小にするために２５ｋＶ実行されたａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ−１０５で、そして、最高２００，０００ｘの拡大で純化によって除去された。Ｃｒｙｏ−ＳＥＭイメージは、ガラスにされた水のこの特定のＰＥＯ星の三次元球形の性質を示す。直径は、１７からほぼ３０ナノメートルの平均の直径を有する５０ナノメートルまで変動する。このサイズ範囲はこの商業上用意されたサンプルの多分散を反映する。但し、２つのデンドリマーが集めた可能性は除外されることができない。
それでもなお、中間のデンドリマー直径は、著しく２９ナノメートルの予期された直径に匹敵する。ｃｒｙｏ−ＴＥＭの使用は、類似したイメージを示した。これらの研究は、凍った水和する状態のデンドリマーが突起において循環性で、適当な状況の下で平面において一様に計量分配されることができることを証明する。かなり、これらの調査は、近い自国の水和する環境の個々のＰＥＯ　デンドリマーを特徴づける能力を確かめる。
【００９４】
（実施例１７）
Ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ　異種　Ｉｓｌｅｔｓの滅失において活発な免疫学の経路の解明。マイクロカプセルは、小島提携の抗原の発表を制限することによって宿主増感を減らす。脾臓に噴射されるｕｎｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄされた小島の生存と比較してマイクロカプセル化は糖尿病のＮＯＤマウスの小島異種移植片の機能の生存を長くする。同じものは、ＮＯＤマウスに移植される小島ａｌｌｏ−ａｎｄ同種移植片にあてはまる。（ウェーバー、Ｃ．Ｊ．その他［１９９５の］Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２７：３３０８−３３１１；ウェーバー（Ｃ．Ｊ．ほか［１９９７の］Ｃｅｌｌ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　６）：５０５−５０８；ウェーバー（Ｃ．Ｊ．ほか［１９９４の］Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２６）：１１１６１１１９、そして、表１。）、Ｔｏは異種ネズミ小島の長期のマイクロカプセル保護のメカニズムを明らかにする、対にされた糖尿病のＮＯＤマウスは腹膜内にいずれの２００のルイス・ネズミ小島（ＮＯＤをｐｒｅｓｅｎｓｉｔｉｚｅｄした）もまたはハンクのバランスのよい塩溶液を注射された（ＨＢＳＳ；制御ＮＯＤ）。小島がその後融合したカプセルに入れられたルイス・ネズミは、１４日後に、ｐｒｅｓｅｎｓｉｔｉｚｅｄして、ＮＯＤマウスを制御する。小島前処理は、速い移植片拒否に結果としてなった（１０の＋７の日；ｎ＝４）非感度を高められたＮＯＤマウスがカプセルに入れられた異種小島の長くなる生存を示す、（１１６のｉ　３７日；ｎ＝５）（図１７）。ＮＯＤマウスが１０６のルイス・ネズミｓｐｌｅｎｏｃｙｔｅｓのｉ．ｐ．注入によって前もって処理される場合、類似した結果は観察された。これらのデータは、マイクロカプセルの主な機能が単に移植片を宿主反応の効果器腕から保護するだけであるよりはむしろ、受取人増感を減らすことであることを示す。このように、バリアをカプセル化する選択透過性を強化して、抗原を関連する小島の発表を減らす計略は、小島生存性を強化する。Ｔｈ２　Ｔ細胞反応は、カプセルに入れられた小島ｘｅｎｏ移植片の不認可の原因となる。カプセルに入れられた小島細胞滅失、異種ネズミ、犬およびウサギ小島の病因を解明することはＮＯＤマウスに腹膜内に移植された。ｍＲＮＡは移植片拒否およびＩＬ−２、ＩＬ−４およびＥＬ−１０の現れの時点で収穫される腹膜の細胞が研究されたＮＯＤから抽出されたＲＴ−ＰＣＲ．（ウェーバー（Ｃ．Ｊ．ほか［１９９５の］Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２７）：３３０８−３３１１。）、ＲＮＡサンプルのＩｎｔｅｇｒｉｔｙは、交雑されたノーザンしみの点検によって、３’ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅｄ領域のための調査を査定された−アクチン。ＩＬ−４は、拒否を経ている大多数のカプセルに入れられた小島異種移植片に認められた。ＩＬ−１０の表現は可変だった、そして、ＩＬ−２はａｕｔｏｉｍｍｕｎｅの間、異種移植片を拒絶することにＮＯＤ同種移植片の滅失をまず認められなかった。これらのデータは、拒絶する際の主要なＴ細胞反応が小島異種移植片ｉｓ”Ｔｈ−２．ｐｒｉｍｅ２．−ｌｉｋｅをカプセル化して、Ｔ細胞反応からａｌｌｏｇｅｎｅｉｃな小島まで異なることを示す。オコンネル、そして、同僚（Ｎｉｃｋｅｒｓｏｎ、Ｐ．ほか［１９９３の］Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２５：９８４−９８５；オコンネル（Ｐ．Ｊ．ほか［１９９３の］Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）１５０：１０９３−１１０４）また、ＩＬ−２つのメッセンジャＲＮＡが拒絶されたａｌｌｏｇｅｎｅｉｃな小島の生検法に認められることを証明する。Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ’Ｔｈ２’ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｔｏ’Ｔｈｌ’ａｃｔｉｖｉｔｙは、周知のＮＯＤ”Ｔｈｌ”ａｎｔｉ−小島免疫反応とは別である。（コーフマン（Ｄ．ほか［１９９３の］ネイチャー３６５）：６９−７２；Ｊａｎｅｗａｙ、Ｃ．およびボトムリー（Ｋ．［１９９４の］Ｃｅｌｌ　７６）：２７５−２８５。）、Ｔｈｅ”Ｔｈ２”ｒｅｓｐｏｎｓｅは外国の抗原への引き起こされた抗体反応に特有で、体液の反応がカプセルに入れられた小島異種移植片の不認可にとって重要でもよいことを示唆する。（タケウチ（Ｔ．ほか［１９９２の］Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　５３）：１２８１−１２９４．）従って、ａｂｒｏｇａｔｅ’Ｔｈ２’ｒｅｓｐｏｎｓｅｓに設計される戦略は、カプセルに入れられた小島異種移植片生存を長くする。ｐｅｒｉｃａｐｓｕｌａｒ細胞反応は、異種移植片拒否の時点で観察されて、マクロファージによって支配した。生検は、さまざまな時間ポスト移植で糖尿病のＮＯＤマウスの腹膜の移植片部位から、機能していて拒絶されたカプセルに入れられた小島異種移植片に実行された。非処理のマウスから空のカプセルで扱われるＮＯＤｓまたは機能している小島異種移植片（＜　１４のｘ　１０５の細胞）を有するカプセルから収穫されるときに、腹膜の（ｐｅｒｉｃａｐｓｕｌａｒで自由な）細胞の総数はかなり異ならなかった。しかし、腹膜の細胞番号は、拒否（６１３のｘ　１０５の細胞）で劇的に増加した。ｐｅｒｉｃａｐｓｕｌａｒ浸透物の分析は、流れｃｙｔｏｍｅｔｒｙ（ＦＡＣＳ）によって実行された。粘着性の細胞は、ハンクの溶液の生検を行われたカプセルを穏やかにピペットで取ることによって解かれた。ＦＡＣＳ分析で、非粘着性の腹膜の細胞人口の２０−５０％がＢ２２０＋（Ｂ細胞）であった、そして、ＣＤ４４およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージが低かった（４−９％）ことが分かった。
マイクロカプセルに対するそれらの細胞支持者がマックｌ．ｐｒｉｍｅ．として描写されたのと、同程度よく、大多数の無料の腹膜の電池（マクロファージ）。
【００９５】
ＦＡＣＳ分析によって、腹膜のＭａｃｌ＋細胞の表現型が主にＧｒａｎ’１からＧｒａｎ　１＋へのシフトしたこと（ｉ．ｅ。ａｃｔｉｖａｔｅｄ”ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ）異種小島の不認可の間。これらの調査結果は、免疫細胞化学によって確かめられた、そこにおいて、Ｍａｃｌ＋細胞は、細胞浸透物のほぼ８０％から成る。加えて、ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌに汚れることは、ＩｇＧの存在およびマイクロカプセルおよび両方のＩＬ−１のまわりのＩｇＭおよびｐｅｒｉｃａｐｓｕｌａｒ細胞の、そして、マイクロカプセルの範囲内のＴＮＦａを文書化した。実施例１８。Ｖｉｔｒｏの新生児のブタ小島細胞機能の、そして、Ｙｉｖｏのカプセル化されたＳｅｎｏｇｒａｆｔとしての特徴描写；新生児のブタ小島は、マイクロカプセル化の後、ｖｉｔｒｏのインシュリンを放出し続ける。移植拒否が起こるまで、ブタ、ウシ、ウサギおよび人間以下霊長類からのそれらを含む異種小島は全く糖尿病患者齧歯動物のｎｏｒｍｏｇｌｙｃｅｍｉａを維持することができた。それでもなお、新生児のブタからの小島およびトランスジェニックの豚の緊張を起こすことにおける増加する成功の大規模な隔離の技術の最近の開発は、人間の糖尿病ために、ブタ提供者に最も有望な異種ソースを作った。従来のレポートに基づいて、新生児のブタ提供者からの大量の機能的に生き残れる小島の隔離のための再生可能な方法は、開発された。（Ｋｏｒｂｕｔｔ、Ｇ．Ｓ．ほか［１９９５の］Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２７：３２１２；ウェーバー（Ｃ．Ｊ．ほか［１９９７の］Ｃｅｌｌ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　６）：５０５−５０８；Ｋｏｒｂｕｔｔ、Ｇ．Ｓ．その他［１９９６の］Ｊ．臨床Ｉｎｖｅｓｔ．９７：２１１９−２１２９；Ｋｏｒｂｕｔｔ、Ｇ．Ｓ．ほか［１９９５の］Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　２８：８２１−８２３。）、この技術３０，０００−１００，０００の小島がそうすることができるＷｉｔｈは、各々の提供者ピンから得られる。新生児のブタ小島細胞は、マイクロカプセル化（図１８）の後、ｖｉｔｒｏのインシュリンを分泌し続ける。（ウェーバー（Ｃ．Ｊ．ほか［１９９７の］Ｃｅｌｌ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　６）：５０５−５０８；Ｊａｎｅｗａｙ、Ｃ．およびボトムリー（Ｋ．［１９９４の］Ｃｅｌｌ　７６）：２７５−２８５。）、Ｔｈｅｓｅ新生児のブタ小島は、実際に分散する新生児のブタ膵臓の細胞であるｆｏｒｍ”ｉｓｌｅｔのような回転楕円体にどの再集合物、そして、ほぼ５−１０％ベータ細胞の構成する；かなり成人のブタすい臓の１２％のベータ細胞集中より高い割合。Ｅｕｇｌｙｃｅｍｉａは、新生児のブタ小島の移植の後、ＮＯＤマウスにおいて成し遂げられる。自発的に糖尿病のＮＯＤマウスは、移植の後、すぐに小島異種移植片を拒絶する。例えば、脾臓のカプセルの下に配置されるｕｎｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄされた新生児のブタ小島は、６つの１つの日において拒絶される。ａｌｇｉｎａｔｅ−ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅのカプセル化が２７の１３の日までかなり小島生存を長くする一方、異種受取人の長期の小島機能の評価は制限される。最近、Ｓｃｉｄ変化はＮＯＤ背景の上へ戻し交配された。そして、ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔなＮＯＤ−Ｓｃｉｄマウスに結果としてなった。（シュルツ（Ｌ．ほか［１９９５の］Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　１５４）：１８０−１９１；Ｇｅｒｌｉｎｇ（Ｉ．ほか［１９９４の］Ｄｉａｂｅｔｅｓ　４３）：４３３−４４０；ｈｒｉｓｔｉａｎｓｏｎ、Ｓ．その他［１９９３の］Ｄｉａｂｅｔｅｓ　４２：４４４５．）、Ｔ細胞受容器を再配置することができないことおよび免疫グロブリン遺伝子に結果としてなるＳｃｉｄ変化のために、Ｔｈｅｓｅマウスは、ｈｏｍｏｚｙｇｏｕｓである。従って、これらのマウスは、ＴおよびＢｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓを欠いている。ＮＯＤ−Ｓｃｉｄマウスは、自発的に糖尿病にならない；しかし、それらは多数の低い服用ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎを有する処理の後、糖尿病になることができる。（Ｇｅｒｌｉｎｇ、Ｉ．その他［１９９４の］Ｄｉａｂｅｔｅｓ　４３：４３３−４４０。）、Ｔｏは新生児のブタ小島の長期の機能の活動が接ぎ木すると実証するｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ．をもつ糖尿病患者とされるＮＯＤ−Ｓｃｉｄマウスに配置する両方の非カプセルに入れられた内部脾臓でカプセルに入れられた腹膜内の（ａｌｇｉｎａｔｅ−ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ）小島は、１００日以上（図１９）の間のｅｕｇｌｙｃｅｍｉｃな状態を回復した。このデータは、新生児のブタ小島が生存して、免疫学の攻撃がない場合、長くなる期間の間の異種受取人において生理的に機能することを証明する。
【００９６】
（実施例１９）
合成ｇｌｙｃｏｃａｌｖｘは、選択的に組成のｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ．の適切な選択による補足に依存する細胞毒性を禁止することができる、直接補足経路を活性化するために合成された膜−模倣の材料の容量を査定するために、Ｃ３ａの生成、Ｃ４ａおよびＣ５ａは、Ａｍｅｒｓｈａｍ人間補足１２５Ｉ標識免疫検定法（ＲＩＡ）システムを使用して測定される。（Ｃｈａｉｋｏｆ、Ｅ．Ｌ．その他［１９９２の］Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．２６：１１６３−１１６８。）、試験膜組成物を変化させるＮｏｎｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄされてカプセルに入れられた豚の小島は、薄められる人間の血清によって培養される１：ベロナールの４は、ｘｅｎｏｒｅａｃｔｉｖｅな抗体および補語の出処として、塩水湖（ＶＨＳ）を緩衝した。流体フェーズの補足起動は、標識免疫検定法（Ａｍｅｒｓｈａｍ人間の補足ＲＩＡキット）によって全体の補足活動（ＣＲ５０）を測ることによる時間に依存する傾向（０−４８のｈ）およびＣ３ａ／Ｃ３ａｄｅｓ　Ａｒｇ、Ｃ４ａ、Ｃ５ａ抗原の発表において査定される。ｉＣ３ｂ、Ｃ５抗原およびＣ５ｂ−９の堆積は、また、あるｉＣ３ｂ新抗原に対する抗体を有する免疫組織化学の汚していて量的標識免疫検定法、Ｃ５およびＣ５ｂ−９によって定義する。
【００９７】
（実施例２０）
バリアを維持することはａｎｔｉｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ活動と関連すると共に、ヘパラン硫酸塩に膜バウンド・コンドロイチンの表層の比率を増やすことはマクロファージ粘着力を減らす。モデル膜が、ＨＳのＧＡＧモル比率を変化させると共に生じる：ＣＳ．ＮＯＤマウスの腹膜の空洞から収穫されるマクロファージは、差動の遠心分離分析評価によって定義される試験基板に、サーおよびそれらの粘着力によってラベルをつけられる。試験表層に付着する常駐（非活性化された）で活性化された腹膜のマクロファージの能力は、通常のマウスの腹膜の空洞からｔｈｉｏｇｌｙｃｏｌａｔｅ．の腹膜内の注入によって刺激されるそれらから収穫されるマクロファージを使用することによって決定される（Ｑｕｉ、Ｚ．Ｈ．その他［１９９４］）Ｊ．生物学化学２６９：１９４８０−１９４８７。）これらの状況の下で収穫される非活性化される、活性化されたマクロファージの割合が、Ｍａｃ−ｌ＋／Ｇｒａｎ　ｌ−（ｎｏｎａｃｔｉｖａｔｅｄされた）およびＭａｃ−ｌ＋／Ｇｒａｎ　Ｉ．ｐｒｉｍｅ．のＦＡＣＳ分析によって特徴づけられる（活性化された）細胞。
【００９８】
（実施例２１）
ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ世代を有するデンドリマーは、ｓｕｂｎａｎｏｍｅｔｅｒ範囲の孔サイズの狭い配布を有するはっきりした膜内外経路を生産する。ベータ細胞分泌に続いて、特徴として、２３のＡ．の効果的半径を有する球として立体感を与えられることができる二量体として、インシュリンは循環する（Ｄｏｄｓｏｎ（Ｇ．Ｇ．ほか［１９９３の］Ｂｉｏｃｈｅｍ．）Ｓｏｃ．ｔｒａｎｓ．２１：６０９−６１４；ブランデル、Ｐｒｏｔｅｉｎ　ＣｈｅｍｉｓｔｒｙのＴ．ほか［１９７２の］Ａｄｖａｎｃｅｓ、第２６巻、ニューヨーク：アカデミック・プレス。）ａｎ”ｉｄｅａｌ”ｐｏｒｅの構造が、容易にするインシュリンおよびブドウ糖の比較的空いている通過。従って、周知のものはインシュリン二量体の中で必要な大きさにする、妨害されてない輸送が効果的孔が２５−３０のＡ．の範囲で大きさを設定することを必要とする既知の事実ｅｆｆｅｃｉｔｖｅ孔サイズは、デンドリマーサイズ、ｇ　ｅｎｅｒａｔｉｏｎ腕長および分岐しているｉｎｔｅｒｎａｌｊの範囲によって決定される。
３０の効果的孔大きさのために、ＰＥＯ　デンドリマーは、各々の腕（計画５）のための５，０００〜１０，０００グラム／モルの平均の分子量を有する３　ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ代を必要とする。デンドリマーは、端−それらの安定した編入を容易にするためにＣｌ　８つのジアルキル半分を有する各々のターミナルの分岐点で機能化。更に膜内外質量上のＰＥＯ　デンドリマーの効果を定義するために、運搬する、次のように膜−模倣のフィルムに嵌入される候補ＰＥＧ”ｃｈａｎｎｅｌｓ”ａｒｅ。脂質小嚢は、リン脂質が生じる重合可能から構成されたｆｒｅｅｚｅ−ｔｈａｗ、そして、連続的な押し出し方法。小嚢溶液は、試験デンドリマーの集中を変化させると共に培養される。リポソーム分裂が観察されるデンドリマーの上の集中は、軽い散在によって決定される。その後、他の場所で記載されているように、小嚢を含むことは溶かされるデンドリマーは基板をアルキル化して、原位置に重合した。（Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｃ．ほか［１９９７の］Ｌａｎｇｍｕｉｒ　１３：５６９７−５７０１；Ｍａｒｒａ、Ｋ．Ｃ．ほか［１９９７の］Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　３０：６４８３６４８７．）、アルキル化された基板の選択は、定義される特定の生理化学的であるか生物学的パラメータによって決定される：（ｉ）ＡＦＭによる形態的で構造上の特徴描写、ＥＳＣＡおよび接触角度角度測定は、ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｓｉｌａｎｅ（ＯＴＳ）がガラス板を入れるｏｃｔａｄｅｃｙｌの自動集められた単分子層の上へ、小嚢融合を必要とする。終わった角度寸法が計時する連続的接触は、ｖｉｔｒｏの水の状況の下で全体的なフィルム安定性の特徴描写を許す。（ｉｉ）膜−模倣のフィルムの範囲内のよりデンドリマーな（「人工”ｐｏｒｅサイズ）配布および分離の分析は両方のモデル・カプセル上の低温電子顕微鏡検査によって実行される、そして、アルギン酸塩の上に形成される平らな膜はガラス製のスライドをおおった。技術は、伝送て高解像度第２のｅｌｅｃｔｒｏｎ−Ｉ顕微鏡検査（ＳＴＥＭ／ＨＲＳＥＭ）を走査している両方のｃｒｙｏｅｍｉｓｓｉｏｎを利用する。かなり、この方法によって、近い土地の人構造がバッファ、ｐＨおよびイオン強度のような、そして、脱水または汚れることのない環境の変数の制御によって観察されることができる。４ナノメートルの解答は、これらの技術の範囲の中でよい。（ｉｉｉ）生体模倣的で標準のボリエステル繊維−Ｌリジンの特徴／アルギン酸塩マイクロカプセルを輸送する１０２から１０５まで分子量において変動している種を放散するための算出大量の転送および透過性係数によって決定する。カプセルは、サイズを変化させる目印とラベルをつけられるｌ２５Ｉ−を積んでいる（ｅ。ｇ．１８０ＭＷ（ブドウ糖）１３００ＭＷビタミンＢ　１２　１１ｋＤインシュリンＭＷ、２９ｋＤ炭酸脱水酵素ＭＷ、鈍重な６６ｋＤ血清アルブミンＭＷ、１５０ｋＤ　ＩｇＧＭＷ）。試験サンプルは、３７Ｃ塩水湖（ＰＢＳ）を緩衝されるリン酸塩および規則的な間隔で測られる放射能の放出において培養される。球からの目印の不安定な状態拡散は、分析される。（ｉｖ）一旦膜−模倣のフィルムを含んでいるデンドリマーの形成が最適化されると、上記の通りに、カプセルに入れられた膵臓の小島の機能および生存能力はｖｉｔｒｏにおいて評価される。
【００９９】
（実施例２２）
ＧＡＧｌｉｐｉｄ同根語および樹状突起の重合体を取り入れている膜−模倣の免疫隔離バリアは、膜内外チャネルとして非特異性の扇動的な反応を誘発しない。標準のｐｏｌｙＬｌｙｓｉｎｅ／アルギン酸塩カプセルと同様にＥｍｐｔｙ”生体模倣的」（ｉ．ｅ．（おおわれて膜模倣性の））は、ＮＯＤマウスに腹膜内に移植される。カプセルは２，４，８，１６て２４週に回復される、そして、腹膜の扇動的な反応は少しの顕微鏡検査を使用することを調査した。細胞浸透物が観察される、（免疫組織化学）ＦＡＣＳ、そして、ＰＣＲ分析、概説された下記として、また、実行する。扇動的な反応の発達は、生物学的環境の損なわれたカプセル安定性に関することができる。膜−模倣の表層が、ａ”ｄｏｕｂｌｅ−ｗａｌｌ”ｏｆアルギン酸塩によって公式化されるカプセルに生じる。二倍の壁ボリエステル繊維−Ｌ−リジン・アルギン酸塩カプセルは、カプセル壁による小島突出の減少のために、一部の最少で、従来のマイクロカプセルより耐久性がある。それでもなお、生体内に空の生体模倣的なカプセルのｂｉｏｓｔａｂｉｌｉｔｙを特徴づけるために、活用するネズミＩｇＧがロードされるＦＩＴＣは、バリア完全性の目印としてカプセルを空にする。カプセルは、量的蛍光顕微鏡検査によって測られるカプセルにつき、２，４，８，１６て２４の週および蛍光強度で回復される。ＦＩＴＣ−ＩｇＧを含むことをカプセルに入れて、そして、３７のＣでのＰＢＳの卵を抱いた平行の否定の制御グループとして使用する。
【０１００】
（実施例２３）
提供者小島が生体模倣的なバリアにおいてカプセルに入れられるときに、ＴｈｌおよびＴｈ２応答は妨げられて、強化される生存を融合させる。ＮＯＤおよび新生児の豚の（白いランドレース・ブタ）小島は、分離されて、ｖｉｔｒｏで培養される。ほぼ、８０００の小島は倍の壁においてカプセルに入れられる。そして、アルギン酸塩マイクロカプセルも生体模倣的な膜によってまたは標準のボリエステル繊維−Ｌリジン／アルギン酸塩公式化において機能化されて、ＮＯＤマウスにおいて腹膜内に移植される。制御は、脾臓のカプセルの下で融合する８０００のｕｎｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄされた小島を受信する。移植片機能は、２週およびそれから週刊誌のためのランダムな血液ブドウ糖の寸法によって、毎日モニタされる。移植片拒否は、２日連続の間の２５０のｍｇ／ｄＬ、ランダムな血液ブドウ糖＞として定義された。カプセルに入れられた小島への腹膜の扇動的な反応は、免疫組織化学、ＦＡＣＳおよびＰＣＲ分析によって毎週の間隔で分析される。生物学的環境の損なわれたカプセル安定性は、カプセルに入れられた小島細胞の存在下で、強化される。具体的には、抗原リリースまたは他の要因の結果として、低い等級扇動的な反応の開始は、バリア完全性の更なるロスを有するカプセル低下にリードすることができる。生体内にカプセルを含んでいる小島のｂｉｏｓｔａｂｉｌｉｔｙを特徴づけるために、ＦＩＴＣ活用するネズミＩｇＧは、バリア完全性の目印としてカプセルにロードされる。カプセルは、測られるカプセルにつき２，４，８，１６て２４の週および蛍光強度で回復される。カプセル完全性上のｉｓｏｇｅｎｅｉｃで異種（豚のＮＯＤ）小島の効果は、特徴づけられる。
Ａｌｇｉｎａｔｅ−ｐｏｌｙ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅは、ＦＩＴＣ−ＩｇＧを含むことをカプセルに入れて、Ｃが使われる３７分にＰＢＳにおいて卵を抱いた平行の制御グループ。良い安定性は、分かる。本発明は、さまざまな具体例で例示されるが、均等物が技術にとって公知であるいかなる特定の構成要素または方法ステップにも、限られていない。
表１．偏光解析法によって決定した薄層フィルム厚
【０１０１】
【表１】
2004512062.tif 000002
表２．支持された膜模倣性薄層フィルムの形成の間の多層アセンブリの角依存性ＸＰＳ解析
【０１０２】
【表２】
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表３．支持された膜模倣性薄層フィルムの連続的アセンブリの赤外線帯割り当て
【０１０３】
【表３】
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表４．局所脂質微小環境の関数としてのＴＭに関するＫｍおよびｋｃａｔの決定
【０１０４】
【表４】
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表５．ＮＯＤマウスにおけるイソ−、アロ−、および異種移植片の生存に対する微小カプセル化の有利な効果
【０１０５】
【表５】
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【０１０６】
【化１】
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【０１０７】
【化２】
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【０１０８】
【化３】
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【０１０９】
【化４】
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【０１１０】
【化５】
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【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、多層の高分子電解質で支えられる重合体のリン脂質単分子層を表す。
【図２】
図２は、アルギン酸塩／多層のＰＬＬ上の三量体および脂質フィルムの連続したアセンブリを有する接触角度を進めることを示す：５つの＝（アルギン酸塩／ＰＬＬ）Ｆｉｌｍ５；（アルギン酸塩／ＰＬＬ）５／ｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒ　＝　ＦｉｌｍＳ−ｔｅｒｐｏｌｙに；５／ｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒ／ＰＣ　＝（アルギン酸塩／ＰＬＬ）ＦｉｌｍＳ−ｔｅｒｐｏｌｙなＰＣ。Ｃｏｐｏｌｙ”ｄｅｓｉｇｎａｔｅｓＨＥＡ：ＤＯＤ（２：１）スルホン酸塩のない共重合体は、停泊して、デモをするＰＬＬに吸収する重合体の不能。
【図３】
図３　１。垂直を示す（ＲＪは、Ａの連続した吸着に続いている外部の反射赤外線のスペクトルに極性を与えた：（ＰＬＬ／アルギン酸塩）５−ＰＬＬ；Ｂ：ボリエステル繊維（ＨＥＡＴ：ＡＯＤ３：ＳＳＳ１）；そして、Ｃ：重合された脂質フィルム。
図３　ＩＩ．は、平行（Ｒｐ）がＡの連続した吸着に続いている外部の反射スペクトルに極性を与えたことを示す：（ＰＬＬ／アルギン酸塩）５−ＰＬＬ；
Ｂ：ボリエステル繊維（ＨＥＡ６：ＡＯＤ３：ＳＳＳ１）；そして、Ｃ：
重合された脂質フィルム。
【図４】
図４は、ａｌｇｉｎａｔｅ／ＰＬＬ／ｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒが小嚢融合の後のシリコン・スライドおよびＡｃｒｙｌ−ＰＣおよびＡｃｒｙＩＰＥ−ＦＩＴＣ（ｌｍｏｌ％）から成る脂質アセンブリの重合をおおったことを示す。
【図５】
図５　（Ａ）は、（ＰＬＬ／アルギン酸塩）５−ＰＬＬの連続した吸着に続いているアルギン酸塩ビーズから、カプセルに入れられた７１ｋＤ　ＦＩＴＣ−デキストランのリリース率を示す；ボリエステル繊維（ＨＥＡ６：ＤＯＤ３：ＳＳ）、そして、重合脂質フィルム。
図５（Ｂ）は、ｐｈｏｔｏｐｏｌｙｍｅｒｉｚｅｄされた膜−模倣のバリア（Ｔ　２３Ｃ）でおおわれているアルギン酸塩−ＰＬＬ　ｍｉｃｒｏｂｅａｄｓから、カプセルに入れられたＦＩＴＣ−デキストラン（ＭＷ　９，２１，３８ｋＤ）のリリース率を示す。
【図６】
図６は、小嚢形成の、そして、表層の膜上のリポペプチド集中間の相互関係を示す。
【図７】
図７は、時間および環境の関数として、表層のリポペプチド集中の平衡を示す。
【図８】
図８は、示す原位置に被支持脂質単分子層の重合。
【図９】
図９は、ａ”ｍｏｂｉｌｅ”アルキル化した三量体上の重合する脂質単分子層の概略図を示す。
【図１０】
図１０は、ヒヒ前の活発な分路モデルの処理されていないＰＣ　機能化されたガラス製の表層上の小板堆積を示す。
【図１１】
図１１は人間の臍の静脈内皮細胞粘着力（Ａ）（移動（Ｂ））を示す、そして、増殖（Ｃ）は膜−模倣の基板に増加する。
【図１２】
図１２は、ガラス製のスライドの連続的コーティングのための接触角度を示す：（ａｌｇｉｎａｔｅｔＰＬＬ）５（フィルム５）；（アルギン酸塩／ＰＬＬ）５／ｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒ（ＦｉｌｍＳ−ｔｅｒｐｏｌｙに）；（アルギン酸塩／ＰＬＬ）５／ｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒ／ＰＣ（ＦｉｌｍＳ−ｔｅｒｐｏｌｙ−ＰＣ）。「Ｃｏｐｏｌｙ”ｄｅｓｉｇｎａｔｅｓ　ＨＥＡ：スルホン酸塩のないＡＯＤ共重合体は、ＰＬＬに吸着する重合体の不能を停泊させて、示す。
【図１３】
図１３は、タンパク質Ｃ起動率上の光重合時間の効果を示す。ＴＭは、いずれのＰＯＰＣまたはＡｃＰＣ小嚢にも、１ｎＭの表層の集中で取り入れられた。
これは、ＴＭのモル定量を表す：１のＰＣ：８００，０００。
【図１４】
図１４は、ＡＰＣ率上の脂質組成物の効果を示す。ＴＭは、混合ＰＯＰＣ／ＡｃＰＣ小嚢に、１ｎＭの表層の集中で取り入れられた。光重合期間は、３０分であった。
【図１５】
図１５は、備えられる（アルギン酸塩／（４）／ＰＣ）アルギン酸塩ビーズからのアルブミン（ＭＷ　６．９×１０４）のまたは重合体の膜−模倣の（アルギン酸塩）コーティングのない拡散係数を示す。いつでも溶出媒体のＢＳＡの濃度が質量によって算出したＣｅ　＝が釣り合うと共にＢＳＡのＣｔ　＝濃度。Ｃｔ／Ｃｅは、１パーセントとして表される。
【図１６】
図１６は、純粋なＤＰＰＧ　（１）の、そして、混合ＰＥＯ　デンドリマー／ＤＰＰＧｍｏｎｏｌａｙｅｒｓの表層の領域−圧力等温線を示す：（２）ＰＥＯ：ＤＰＰＧ　１：１０３；（３）１：１０５；（４）１：１０７。
【図１７】
図１７は、ルイスｒａｔ−ｔｏ−ＮＯＤ上の小島雷管取付けが小島異種移植片生存をカプセルに入れたことをルイス・ネズミの効果に明らかにする。
【図１８】
図１８は、非カプセルに入れられ（Ｎ）てカプセルに入れられた新生児の豚の（Ｅ）小島（ｉｌｓ／１０００のｉｓｌｅｔｓ／２４ｈｒ）からの試験管内のインシュリン解放を示す。
【図１９】
図１９は、ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ糖尿病患者ＮＯＤ−Ｓｃｉｄマウスの新生児のブタ小島異種移植片を示す。０の＝非カプセルに入れられた脾臓の移植片；Ｏ　＝は、ｉ．ｐ．移植片をカプセルに入れた；＝が犠牲にするＳ；Ｂ　＝生検。
【図２０Ａ】
図２０Ａは、基板をカバーしている高分子電解質に、直接作られるボロ両親媒性物質から、膜−模倣の表層の構造を示す。
【図２０Ｂ】
図２０Ｂは、基板をカバーしている高分子電解質に、直接作られるボロ両親媒性物質から、膜−模倣の表層の構造を示す。
【図２０Ｃ】
図２０Ｃは、基板をカバーしている高分子電解質に、直接作られるボロ両親媒性物質から、膜−模倣の表層の構造を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２０Ｃ】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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