(57)【要約】一般構造式（Ｉ）の化合物、および当該化合物ならびにその塩および溶媒化合物の治療剤としての使用。【化８６】2004501919.tif 000087
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式を有する化合物、およびその薬学的に許容可能な塩ならびに溶媒化合物であって：
【化１】
2004501919.tif 000068
式中、Ｒ０は、独立して、ハロおよびＣ１−６アルキルからなるグループから選択され；
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキルＣ１−３アルキル、アリールＣ１−３アルキルおよびヘテロアリールＣ１−３アルキルからなるグループから選択され；
Ｒ２は、ベンゼン、チオフェン、フランおよびピリジンからなるグループから選択される、任意に置換した単環の芳香族環と、以下の式：
【化２】
2004501919.tif 000069
　式中、融合環Ａは、飽和または部分的または完全に不飽和の５員環または６員環であり、そして炭素原子と、任意に、酸素、硫黄および窒素から選択される１個または２個のへテロ原子とを含む、任意に置換した二環の環からなるグループから選択され；
Ｒ３は、水素またはＣ１−３アルキルであり、
あるいは、Ｒ１およびＲ３は共に、５員または６員の複素環の３員または４員のアルキル成分またはアルケニル成分を形成し；
環Ｂおよび環Ｃは、以下の構造：
【化３】
2004501919.tif 000070
【化４】
2004501919.tif 000071
【化５】
2004501919.tif 000072
【化６】
2004501919.tif 000073
【化７】
2004501919.tif 000074
【化８】
2004501919.tif 000075
からなるグループから選択される、任意に置換した融合環構造を形成し；
Ｒａは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−３アルキル、Ｃ１−３アルキレンアリールからなるグループから選択され；
ｑは、０、１、２、３または４である。
【請求項２】
以下の式：
【化９】
2004501919.tif 000076
によって表される請求項１に記載の化合物およびその薬学的に許容可能な塩ならびに溶媒化合物。
【請求項３】
Ｒ１がメチルである請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が水素である請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
環Ｂおよび環Ｃが、以下の構造：
【化１０】
2004501919.tif 000077
【化１１】
2004501919.tif 000078
【化１２】
2004501919.tif 000079
からなるグループから選択される、任意に置換した融合環構造を形成する請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２が、ナフタレン、インデン、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾイミダゾール、キノリン、インドール、ベンゾチオフェンおよびベンゾフランからなるグループから選択される、任意に置換した二環の環である請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２が、以下の式：
【化１３】
2004501919.tif 000080
式中、ｎは１または２の整数であり、Ｘは、独立して、Ｃ（Ｒａ）２、Ｏ、ＳまたはＮＲａである請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
置換または非置換のＲ２が、以下の式：
【化１４】
2004501919.tif 000081
からなるグループから選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２が、ハロゲン、Ｃ１−３アルキル、ＯＲａ、ＣＯ２Ｒａ、ハロメチル、ハロメトキシ、シアノ、ニトロおよびＮ（Ｒａ）２からなるグループから選択される置換基によって置換される請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
下記の化合物：
【化１５】
2004501919.tif 000082
【化１６】
2004501919.tif 000083
【化１７】
2004501919.tif 000084
【化１８】
2004501919.tif 000085
【化１９】
2004501919.tif 000086
からなるグループから選択される化合物およびその薬学的に許容可能な塩ならびに溶媒化合物。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物を薬学的に許容可能な希釈剤または担体と共に含む薬学的組成物。
【請求項１２】
ｃＧＭＰに特異的なＰＤＥの阻害が治療的に有用である状態の雄動物または雌動物を処置する方法であって、請求項１に記載の化合物を薬学的に許容可能な希釈剤または担体と共に含む薬学的組成物の効果的な量で前記動物を処置することを含む方法。
【請求項１３】
状態が、男性の勃起機能不全である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
処置が、経口処置である請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
状態が、女性の性的興奮障害である請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
処置が、経口処置である請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
状態が、安定型狭心症、不安定型狭心症、異型狭心症、高血圧、肺高血圧症、慢性閉塞性肺疾患、悪性高血圧症、クロム親和性細胞腫、急性呼吸窮迫症候群、鬱血性心不全、急性腎不全、慢性腎不全、アテローム性動脈硬化症、血管能力の低下した状態、末梢血管疾患、血管障害、血小板血症、炎症性疾患、心筋梗塞、発作、気管支炎、慢性喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、緑内障、消化性潰瘍、消化管運動障害、経皮経管冠動脈形成術後、頸動脈血管形成術、バイパス手術後移植片狭窄症、骨粗鬆症、早産、良性前立腺肥大および過敏性腸症候群からなるグループから選択される請求項１２に記載の方法。
【請求項１８】
ヒトまたはヒト以外の動物の生体において、ｃＧＭＰに特異的なＰＤＥの阻害が治療的に有用である状態の処置方法であって、請求項１に記載の化合物の治療上有効な量を前記生体に投与することを含む方法。
【請求項１９】
雄の勃起機能不全または雌の性的興奮障害を治療的または予防的に処置する方法であって、請求項１に記載の化合物およびその薬学的に許容可能な塩ならびに溶媒化合物の効果的な量を動物に投与することを含む方法。
【請求項２０】
ｃＧＭＰに特異的なＰＤＥの阻害が治療的に有用である状態を治療的または予防的に処置するための医薬品を製造するための請求項１に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
発明の分野および背景
本発明は、一連の化合物、当該化合物の調製方法、当該化合物を含有する薬学的組成物、および治療剤としてのその使用に関する。
【０００１】
詳細には、本発明は、環状グアノシン３’、５’−モノリン酸に特異的なホスホジエステラーゼ（ｃＧＭＰ特異的ＰＤＥ）、特にＰＤＥ５の強力な選択的阻害剤であり、心臓血管障害および勃起機能不全の処置を含めて、そのような阻害が有用と考えられる様々な治療領域において有用な化合物に関する。
【０００２】
発明の詳細な説明
本発明は、下記の一般構造式（Ｉ）を有する化合物およびその薬学的に許容可能な塩ならびに水和物に関し：
【０００３】
【化２０】
2004501919.tif 000002
【０００４】
式中、Ｒ０は、独立して、ハロおよびＣ１−６アルキルからなるグループから選択され；
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８シクロアルキルＣ１−３アルキル、アリールＣ１−３アルキルおよびヘテロアリールＣ１−３アルキルからなるグループから選択され；
Ｒ２は、ベンゼン、チオフェン、フランおよびピリジンからなるグループから選択される、任意に置換した単環の芳香族環と、以下の式：
【０００５】
【化２１】
2004501919.tif 000003
【０００６】
式中、融合環Ａは、飽和または部分的または完全に不飽和の５員環または６員環であり、そして炭素原子と、任意に、酸素、硫黄および窒素から選択される１個または２個のへテロ原子とを含む、任意に置換した二環の環からなるグループから選択され；
Ｒ３は、水素またはＣ１−３アルキルであり、
あるいは、Ｒ１およびＲ３は共に、５員または６員の複素環の３員または４員のアルキル成分またはアルケニル成分を形成し；
環Ｂおよび環Ｃは、下記の構造：
【０００７】
【化２２】
2004501919.tif 000004
【０００８】
【化２３】
2004501919.tif 000005
【０００９】
【化２４】
2004501919.tif 000006
【００１０】
【化２５】
2004501919.tif 000007
【００１１】
【化２６】
2004501919.tif 000008
【００１２】
【化２７】
2004501919.tif 000009
【００１３】
からなるグループから選択される、任意に置換した融合環構造を形成し；
Ｒａは、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−３アルキル、Ｃ１−３アルキレンアリールからなるグループから選択され；
ｑは、０、１、２、３または４である。
【００１４】
本明細書中で使用される「アルキル」の語には、示された数の炭素原子を含有する直鎖状および分枝状の炭化水素基が含まれ、典型的には、メチル基、エチル基、ならびに直鎖および分枝状のプロピル基およびブチル基が含まれる。　炭化水素基は、１６個までの炭素原子を含有することができる。　「アルキル」の語は、「架橋アルキル」、すなわち、Ｃ６〜Ｃ１６のビシクロ炭化水素基または多環炭化水素基を含み、例えば、ノルボルニル、アダマンチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ビシクロ［３．２．１］オクチルまたはデカヒドロナフチルを含む。
【００１５】
「シクロアルキル」の語は、環状のＣ３〜Ｃ８炭化水素基として定義され、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロヘキシルおよびシクロペンチルである。
【００１６】
「アルケニル」および「アルキニル」の語は、基がそれぞれ炭素−炭素の二重結合または炭素−炭素の三重結合を有することを除いて、アルキルと同様に定義される。
【００１７】
「アルキレン」の語は、置換基を有するアルキル基を示す。　例えば、「Ｃ１−３アルキレンアリール」の語は、１〜３個の炭素原子を含有し、かつ１個のアリール基で置換されたアルキル基を示す。　本明細書中で使用される「アルケニレン」の語は同様に定義され、示された数の炭素原子と１つの炭素−炭素の二重結合とを含有し、そしてエチエニレンのような、直鎖状および分枝状のアルケニレン基を含む。
【００１８】
「ハロ」または「ハロゲン」の語は、フッ素、臭素、塩素およびヨウ素を含むことが、本明細書中で定義される。
【００１９】
「ハロアルキル」の語は、１つ以上のハロ置換基で置換されたアルキル基として、すなわち、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨードまたはそれらの組合せのいずれかで置換されたアルキル基として本明細書では定義する。　同様に、「ハロシクロアルキル」は、１つ以上のハロ置換基を有するシクロアルキル基として定義される。
【００２０】
「アリール」の語は、単独または組合せにおいて、非置換であり得るか、または例えば、１つ以上、特に１〜３つのアルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロアルキル、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、アシルアミノ、アルキルチオ、アルキルスルフィニルおよびアルキルスルホニルで置換され得る単環または多環の芳香族基として本明細書では定義され、好ましくは、単環または二環の芳香族基であり、例えば、フェニルまたはナフチルである。　アリール基の例として、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２−メチルフェニル、４−メトキシフェニル、３−トリフルオロメチルフェニル、４−ニトロフェニルなどがあるが、これらに限定されない。
【００２１】
「ヘテロアリール」の語は、１つまたは２つの芳香族環を含有し、かつ少なくとも１個の窒素原子または酸素原子または硫黄原子を芳香族環に含有する単環系または二環系で、非置換であり得るか、あるいは例えば、ハロ、アルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロアルキル、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、アシルアミノ、アルキルチオ、アルキルスルフィニルおよびアルキルスルホニルのような置換基の１つ以上、特に１〜３の置換基により置換され得る単環系または二環系として本明細書では定義する。　ヘテロアリール基の例として、チエニル、フリル、ピリジル、オキサゾリル、キノリル、イソキノリル、インドリル、トリアゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、チアゾリルおよびチアジアゾリルがあるが、これらに限定されない。
【００２２】
「ヒドロキシ」の語は、−ＯＨとして定義される。
【００２３】
「ヒドロキシアルキル」の語は、アルキル基に付属するヒドロキシル基として定義される。
【００２４】
「アルコキシ」の語は、Ｒがアルキルである−ＯＲとして定義される。
【００２５】
「アルコキシアルキル」の語は、１つの水素がアルコキシ基によって置換されているアルキル基として定義される。
【００２６】
「アミノ」の語は、−ＨＮ２として定義され、「アルキルアミノ」の語は、少なくとも１つのＲがアルキルであり、もう１つのＲがアルキルまたは水素である−ＮＲ２として定義される。
【００２７】
「アシルアミノ」の語は、ＲがアルキルまたはアリールであるＲＣ（＝Ｏ）Ｎとして定義される。
【００２８】
「アルキルチオ」の語は、Ｒがアルキルである−ＳＲとして定義される。
【００２９】
「アルキルスルフィニル」の語は、ＲがアルキルであるＲ−ＳＯ２として定義される。
【００３０】
「アルキルスルホニル」の語は、ＲがアルキルであるＲ−ＳＯ３として定義される。
【００３１】
「ニトロ」の語は、−ＮＯ２として定義される。
【００３２】
「シアノ」の語は、−ＣＮとして定義される。
【００３３】
Ｒ０に関して、Ｒ０置換基をＢ環またはＣ環に存在させることができる。　２つ以上のＲ０が存在する場合、Ｒ０置換基を一方の環、または両方の環に存在させることができる。
【００３４】
好ましい実施形態において、Ｒ２は、任意に置換される二環の環系：
【００３５】
【化２８】
2004501919.tif 000010
【００３６】
であり、この二環の環は、例えば、ナフタレンまたはインデン、あるいは複素環、例えば、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾイミダゾール、キノリン、インドール、ベンゾチオフェン、またはベンゾフラン、または
【００３７】
【化２９】
2004501919.tif 000011
【００３８】
式中、ｎは１または２の整数であり、Ｘは独立して、Ｃ（Ｒａ）２、Ｏ、ＳまたはＮＲａである環がある。　Ｒ２置換基を含む二環の環は、典型的には、フェニル環の炭素原子によって分子の残り部分に結合している。
【００３９】
式（Ｉ）の化合物の好ましいグループにおいて、Ｒ２は、任意に置換された二環の環：
【００４０】
【化３０】
2004501919.tif 000012
【００４１】
式中、ｎは１または２であり、Ｘは独立してＣＨ２またはＯである環として表される。　特に好ましいＲ２置換基として、以下のものがある：
【００４２】
【化３１】
2004501919.tif 000013
【００４３】
この特定の化合物グループにおいて、二環の環に対する置換基の非限定的な例として、ハロゲン（例えば、塩素）、Ｃ１−３アルキル（例えば、メチル、エチルまたはｉ−プロピル）、ＯＲａ（例えば、メトキシ、エトキシまたはヒドロキシ）、ＣＯ２Ｒａ、ハロメチルまたはハロメトキシ（例えば、トリフルオロメチルまたはトリフルオロメトキシ）、シアノ、ニトロおよびＮ（Ｒａ）２がある。
【００４４】
式（Ｉ）の一般的な範囲に含まれる化合物の特に好ましいサブクラスが、以下の式（ＩＩ）の化合物ならびにその薬学的に許容可能な塩および溶媒化合物（例えば、水和物）によって表される。
【００４５】
【化３２】
2004501919.tif 000014
【００４６】
式（Ｉ）の化合物は、１つ以上の非対称中心を含むことができ、従って、立体異性体として存在し得る。　本発明は、式（Ｉ）の化合物の両方の混合物および別々の個々の立体異性体を含む。　式（Ｉ）の化合物は、互変異性形態でも存在し得るので、本発明は、両方の混合物およびその別々の個々の立体異性体を含む。
【００４７】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な塩として、薬学的に許容可能な酸と形成される酸付加塩を挙げることができる。　好適な塩の例として、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、水素リン酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩およびｐ−トルエンスルホン酸塩の塩などがあるが、これらに限定されない。　式（Ｉ）の化合物はまた、塩基との薬学的に許容可能な金属塩、特に、アルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩をもたらし得る。　その例として、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩およびカルシウム塩がある。
【００４８】
本発明の化合物は、ｃＧＭＰに特異的なＰＤＥ５の強力な選択的阻害剤である。　従って、式（Ｉ）の化合物は、治療用途での使用が考えられ、具体的には、ＰＤＥ５の選択的な阻害が有用であると考えられる様々な状態を処置するための使用が考慮される。
【００４９】
ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）は、環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）および環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）などの環状ヌクレオチドの加水分解を触媒する。
【００５０】
ＰＤＥは、少なくとも７つのアイソザイムファミリーに分類されており、多くの組織内に存在している（Ｊ．Ａ．Ｂｅａｖｏ、Ｐｈｙｓｉｏｌ． Ｒｅｖ．， ７５， ｐ．７２５（１９９５））。
【００５１】
ＰＤＥ５の阻害は、特に興味のある標的である。　ＰＤＥ５の強力な選択的阻害剤は、様々な疾患状態の処置において、その効果のすべてが有用である血管拡張効果、弛緩効果および利尿効果をもたらす。　この領域での研究により、数種類の阻害剤がｃＧＭＰの基本構造に基づいてもたらされている（Ｅ． Ｓｙｂｅｒｔｚ ｅｔ ａｌ．， Ｅｘｐｅｒｔ． Ｏｐｉｎ． Ｔｈｅｒ． Ｐａｔ．， ７， ｐ．６３１（１９９７））。
【００５２】
従って、ＰＤＥ５阻害剤の生化学的効果、生理学的効果および臨床的効果により、その有用性が、平滑筋機能、腎臓機能、止血機能、炎症機能および／または内分泌機能の調節が望まし様々な疾患状態において示唆されている。　従って、式（Ｉ）の化合物は、安定型および不安定型および異型（プリンズメタル型）の狭心症、高血圧、肺高血圧症、慢性閉塞性肺疾患、鬱血性心不全、悪性高血圧症、クロム親和性細胞腫、急性呼吸窮迫症候群、急性腎不全および慢性腎不全、アテローム性動脈硬化症、血管能力の低下した状態（例えば、経皮経管冠動脈形成術後もしくは頸動脈血管形成術またはバイパス手術後移植片狭窄症）、末梢血管疾患、レイノ病などのような血管障害、血小板血症、炎症性疾患、心筋梗塞、発作、気管支炎、慢性喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、緑内障、骨粗鬆症、早産、良性前立腺肥大、消化性潰瘍、男性の勃起機能不全、女性の性的興奮障害、ならびに消化管運動障害を特徴とする疾患（例えば、過敏性腸症候群）を含む多数の障害を処置することにおいて有用である。
【００５３】
特に重要な用途として、インポテンスの１つの形態であり、また一般的な医学的問題である男性の勃起機能不全の処置がある。　インポテンスは、男性において性交力がないものとして定義することができ、陰茎勃起または射精またはその両方を達成できないことを伴い得る。　勃起機能不全の発生率は年齢とともに増大し、４０歳を越える男性の約５０％がある程度の勃起機能不全に罹っている。
【００５４】
さらに他の重要な用途には、女性の性的興奮障害（これは女性の性的刺激障害とも呼ばれている）の処置がある。　女性の性的刺激障害は、性的興奮の十分な潤滑／膨張応答を達成すること、または性行為が完了するまでそのような応答を維持することが頻発してできないこと、と定義される。　性的興奮応答は、骨盤の血管充血、膣潤滑、ならびに外性器の拡大および膨張からなる。
【００５５】
従って、式（Ｉ）の化合物は、男性の勃起機能不全および女性の性的刺激障害を処置する上で有用であることが考えられる。　従って、本発明は、ヒトを含む雄動物での勃起機能不全およびヒトを含む雌動物における性的刺激障害を治療的または予防的に処置する医薬品を製造するための、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、またはそれらのいずれかを含有する薬学的組成物の使用に関する。
【００５６】
「処置」の語は、処置されている状態の進行または重篤度を防止、低下、停止または逆転することを含む。　そのため、「処置」の語には、必要に応じた医学的な治療的投与および／または予防的投与の両方が含まれる。
【００５７】
「式（Ｉ）の化合物」またはその生理学的に許容可能な塩もしくは溶媒化合物は、それをそのままで、あるいはそれらのいずれかを含有する薬学的組成物として投与され得ることもまた理解される。
【００５８】
本発明の化合物は、男性の勃起機能不全および女性の性的刺激障害などのヒトにおける性的機能不全を処置するための用途が主に考えられるが、本発明の化合物は、他の様々な疾患状態を処置する目的で使用することができる。
【００５９】
従って、本発明のさらなる態様は、安定型および不安定型および異型（プリンズメタル型）の狭心症、高血圧、肺高血圧症、慢性閉塞性肺疾患、鬱血性心不全、悪性高血圧症、クロム親和性細胞腫、急性呼吸窮迫症候群、急性腎不全および慢性腎不全、アテローム性動脈硬化症、血管能力の低下した状態（例えば、ＰＴＣＡ後またはバイパス手術後移植片狭窄症）、末梢血管疾患、レイノ病のような血管障害、血小板血症、炎症性疾患、心筋梗塞の予防、発作の予防、気管支炎、慢性喘息、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、緑内障、骨粗鬆症、早産、消化性潰瘍、良性前立腺肥大、男性および女性の勃起機能不全、あるいは消化管運動障害を特徴とする疾患（例えば、ＩＢＳ）を処置する際に使用される式（Ｉ）の化合物を提供することにある。
【００６０】
本発明の他の態様によれば、上記した状態および障害を処置する医薬品を製造するための式（Ｉ）の化合物の使用が提供される。
【００６１】
さらなる態様において、本発明は、ヒトまたは非ヒト動物の生体における上記した状態および障害を処置する方法を提供する。　この方法は、治療効果的な量の式（Ｉ）の化合物を前記生体に投与することを含む。
【００６２】
本発明の化合物は任意の好適な経路で投与することができ、例えば、経口投与、口内投与、吸入投与、舌下投与、直腸投与、膣内投与、経尿道投与、鼻腔投与、局所投与、皮膚を介した投与、すなわち、経皮的投与、または非経口投与（静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与および冠状動脈内投与を含む）によることができる。　非経口投与は、ニードルおよびシリンジを使用して、またはＰＯＷＤＥＲＪＥＣＴ（商標）のような高圧技術を使用して達成することができる。
【００６３】
本発明の化合物の経口投与は、好ましい経路である。　経口投与は最も便利であり、これにより、他の投与経路に付随する様々な不都合が避けられる。　嚥下障害の患者や経口投与後の薬物吸収が損なわれている患者については、薬物を非経口的に投与することができ、例えば、舌下投与または口内投与することができる。
【００６４】
本発明での使用に好適な化合物および薬学的組成物には、有効成分が、その意図された目的を達成するために効果的な量で投与されるものが含まれる。　より詳細には、「治療効果的な量」とは、処置されている患者の発症を防止するために効果的な量、または処置されている患者の既に存在する症状を緩和する上で効果的な量を意味する。　効果的な量は、特に、本明細書の詳細な説明を考慮すれば、当業者によって決定可能な範囲内である。
【００６５】
「治療効果的な用量」は、所望する効果の達成をもたらす化合物の量を示す。
【００６６】
そのような化合物の毒性および治療効力は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％致死量）およびＥＤ５０（集団の５０％において治療効果的な用量）を決定するための細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手法によって決定することができる。
【００６７】
毒性効果と治療効果との用量比は、ＬＤ５０とＥＤ５０との比として表される治療指数である。　治療指数が大きな化合物が好ましい。　そのようなデータから得られる情報は、ヒトにおいて使用する投薬量範囲を明確化する際に使用することができる。　そのような化合物の投薬量は、好ましくは、毒性を多少なりとも伴わない、ＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内にある。　投薬量は、適用する投薬形態および利用される投与経路に依存して、この範囲内で変化させることができる。
【００６８】
正確な配合、投与経路および投薬量は、患者の状態を考慮して、個々の医師によって選択することができる。　投薬量および投薬間隔は、治療効果を維持する上で十分な活性成分の血漿中レベルをもたらすために、個々に調節することができる。
【００６９】
組成物の投与量は、処置されている患者、患者の体重、苦痛の重篤度、投与方法および処方医師の判断によって決められる。
【００７０】
詳細には、上記の状態および障害の治療的または予防的な処置においてヒトに投与される場合、式（Ｉ）の化合物の経口投薬量は、一般に、平均的な成人患者（７０ｋｇ）では、１日に約０．５ｍｇ〜約１０００ｍｇである。　従って、典型的な成人患者の場合、個々の錠剤またはカプセルは、１日あたり１回または数回、単回用量物または多回用量物で投与するためには、０．２ｍｇ〜５００ｍｇの活性な化合物を好適な薬学的に許容可能な賦形剤または担体に含有する。　静脈内投与または口内投与または舌下投与に対する投薬量は、典型的には、必要に応じて、単回用量あたり０．１ｍｇ〜５００ｍｇである。　実際には、医師によって、個々の患者に対して最も好適な実際の投薬法が決定されるが、投薬量は、特定の患者の年齢、体重および応答によって変化する。　上記の投薬量は、平均的な事例のものであるが、個々の場合には、それよりも大きい投薬量またはそれよりも少ない投薬量が効果を有する場合があり、そのようなことは本発明の範囲内である。
【００７１】
ヒトに使用される場合、式（Ｉ）の化合物は単独で投与することができるが、一般には、意図された投与経路および標準的な製薬操作に関して選択された薬学的担体と混合されて投与される。　本発明に従って使用される薬学的組成物は、従って、薬学的に使用されえる調製物に対して、式（Ｉ）の化合物を加工することを容易にする賦形剤および補助剤を含む１つ以上の生理学的に許容可能な担体を使用して、従来の方法で配合することができる。
【００７２】
これらの薬学的組成物は、従来の方法で、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠作製、選別、乳化、カプセル化、包括化または凍結乾燥のプロセスによって製造することができる。　適正な配合は、選択された投与経路に依存する。　治療効果的な量の本発明の化合物が経口投与される場合、組成物は、典型的には、錠剤、カプセル、粉末剤、溶液剤またはエリキシル剤の形態である。　錠剤形態で投与される場合、組成物は、ゼラチンまたはアジュバントなどの固体の担体をさらに含有することができる。　錠剤、カプセルおよび粉末剤は、約５％〜約９５％の本発明の化合物を含有し、好ましくは約２５％〜約９０％の本発明の化合物を含有する。　液体形態で投与される場合、水、鉱油、または動物起源もしくは植物起源の油脂などの液体担体を加えることができる。　組成物の液体形態では、生理食塩水、デキストロースもしくは他の糖の溶液、またはグリコールをさらに含有することができる。　液体形態で投与される場合、組成物は約０．５重量％〜約９０重量％の本発明の化合物を含有し、好ましくは約１重量％〜約５０重量％の本発明の化合物を含有する。
【００７３】
治療効果的な量の本発明の化合物が、静脈内注射、経皮注射または皮下注射によって投与される場合、組成物は、パイロジェンを含まない非経口的に許容可能な水溶液の形態とする。　このような非経口的に許容可能な溶液剤の調製は、ｐＨ、等張性、安定性などを適正に考慮すれば、当業者が再現可能である。　静脈内注射、経皮注射または皮下注射のための好ましい組成物は、典型的には、本発明の化合物に加えて、等張性のビヒクルを含有する。
【００７４】
経口投与される場合、化合物は、式（Ｉ）の化合物を、当該技術分野で周知の薬学的に許容可能な担体と組み合わせることによって、容易に配合することができる。　そのような担体は、処置される患者が経口摂取する錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁剤などとして、本発明の化合物が配合されることを可能にする。　経口使用される薬学的調製物は、式（Ｉ）の化合物を固体の賦形剤とともに加え、必要に応じて、得られた混合物を粉砕し、そして錠剤または糖衣錠コアを得るために、所望の場合には、好適な補助剤を加えた後、顆粒の混合物を加工することによって得ることができる。　好適な賦形剤として、例えば、充填剤およびセルロース調製物がある。　所望の場合には、崩壊剤を加えることができる。
【００７５】
吸入によって投与される場合、本発明の化合物は、好適な噴射剤の使用によって、加圧パックまたはネブライザーから得られるエアロゾルスプレー物として、都合よく送達される。　加圧されたエアロゾルの場合、投薬量単位は、計量された量を送達するためのバルブによって決定することができる。　吸入器または吹き入れ器において使用される、化合物と好適な粉末基剤（ラクトースまたはデンプンなど）との粉末混合物を含有する、例えば、ゼラチン製のカプセルおよびカートリッジを作製することができる。
【００７６】
化合物は、注射による非経口投与、例えば、ボーラス注射または連続注入による非経口投与のために配合することができる。　注射用配合物は、保存剤が添加された形態、例えば、アンプルまたは多回用量容器におけるユニット投薬形態で提供され得る。　組成物は、懸濁物、溶液、または油性もしくは水性の賦形剤におけるエマルジョンのような形態とすることができ、そして懸濁剤、安定化剤および／または分散剤などの配合剤を含有することができる。
【００７７】
非経口投与される薬学的調製物は、活性な水溶性の化合物の水溶液を含む。　さらに、活性な化合物の懸濁物を、適当な油性の注射用懸濁物として調製することができる。　好適な親油性の溶媒または賦形剤として、油脂また合成脂肪酸エステルがある。　水性の注射用懸濁物には、懸濁物の粘度を増大させる物質を含ませることができる。　任意に、懸濁剤には、好適な安定化剤、または化合物の安定性を増大させ、かつ高濃度の溶液剤の調製を可能にする薬剤を含ませることができる。　あるいは、本発明の組成物は、好適なビヒクル、例えば、滅菌されたパイロジェン不含水で、使用前に粉末形態とすることができる。
【００７８】
本発明の化合物は、例えば、従来の坐薬基剤を含有する坐薬または滞留型浣腸剤などの直腸用組成物としても調製できる。　前述の調製物に加えて、化合物はまた、デポ剤調製物として配合することができる。　このような長期間作用する調製物は、埋め込み（例えば、皮下または筋肉内）によって、または筋肉内注射によって投与することができる。　従って、例えば、化合物は、好適なポリマー物質もしくは疎水性物質（例えば、許容可能な油状物におけるエマルションとして）またはイオン交換樹脂と一緒に配合することができ、あるいは難溶解性の誘導体として、例えば、難溶解性の塩として配合することができる。
【００７９】
本発明の化合物の多くは、薬学的に許容可能な対イオンとの塩として提供される。　そのような薬学的に許容可能な塩基付加塩は、遊離酸の生物学的な有効性および性質を保持し、そして好適な無機塩基または有機塩基との反応によって得られる。
【００８０】
特に、式（Ｉ）の化合物は、デンプンまたはラクトースなどの賦形剤を含有する錠剤の形態で、またはそれ単独もしくは賦形剤との混合物のカプセルもしくは卵型剤の形態で、あるいは矯味矯臭剤または着色剤を含有するエリキシル剤または懸濁剤の形態で、経口投与、口内投与または舌下投与することができる。　このような液体の調製物は、懸濁剤などの薬学的に許容可能な添加剤を用いて調製することができる。　化合物はまた非経口的に注射することができ、例えば、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与または冠状動脈内投与することができる。　非経口投与される場合、化合物は、溶液を血液と等張性にするために、マンニトールやグルコースなどの塩または単糖などの他の物質を含有し得る滅菌された水溶液の形態で最もよく使用される。
【００８１】
獣医学的に使用される場合、式（Ｉ）の化合物またはその非毒性の塩は、通常の獣医学的手順に従って好適に許容され得る調製物として投与される。　獣医は、特定の動物について最適である投薬法および投与経路を容易に決定することができる。
【００８２】
従って、本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）の化合物と、それに対して薬学的に許容可能な希釈剤または担体とを共に含む薬学的組成物を提供する。
【００８３】
さらに、本発明によって、式（Ｉ）の化合物を含む薬学的組成物を調製する方法が提供される。　この方法は、式（Ｉ）の化合物を、それに対して薬学的に許容可能な希釈剤または担体と共に混合することを含む。
【００８４】
特定の実施態様において、本発明は、ヒトを含む雄動物における勃起機能不全またはヒトを含む雌動物における性的刺激障害を治療的または予防的に処置するための薬学的組成物を含む。　この組成物は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を薬学的に許容可能な希釈剤または担体と共に含む。
【００８５】
式（Ｉ）の化合物は、この分野で知られている任意の好適な方法によって、または本発明の一部を形成する以下のプロセスによって調製することができる。　以下の合成方法において、Ｒ０、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、上記の構造式（Ｉ）において定義されている通りである。　例えば、式（Ｉ）の化合物は、適切な出発物質を用いて、本明細書に参考までに組み込んだ、Ｄａｕｇａｎの米国特許第５，８５９，００６号に記載の方法によって調製することができる。　当業者に周知のように、クロロギ酸ベンジルおよびクロロギ酸トリクロロエチルのような保護化合物および保護基（例えば、Ｔ．Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ ｅｔ ａｌ．， ”Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版”、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， ＩｎＣ．、ＮＹ、ＮＹ（１９９９）を参照のこと）もまた、構造式（Ｉ）の化合物を合成するために利用することができる。
【００８６】
式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の他の化合物に変換することができる。　従って、例えば、Ｒ２が置換されたベンゼン環であるとき、式（Ｉ）の別の好適に置換された化合物を調製することが可能である。　適切な相互変換の例として、（例えば、ＳｎＣｌ２またはパラジウム担持カーボンのようなパラジウム触媒などの好適な薬剤を使用する）好適な還元手段によるニトロからアミノへの変換、またはＯＲａからヒドロキシへの変換、あるいはアミノから置換アミノへの変換、例えば、標準的なアシル化条件またはスルホニル化条件を使用する、アミノからアシルアミノまたはスルホニルアミノへの変換があるが、これらに限定されない。　Ｒ２が、置換された二環系を表す場合、適切な相互変換は、パラジウム触媒での処理による置換基の除去、例えば、それにより、ベンジル置換基の好適な二環系からの除去を含む。
【００８７】
式（Ｉ）の化合物は、適切な立体異性体から個々の立体異性体として、またはラセミ混合物として、上記の方法によって調製することができる。　本発明の化合物の個々の立体異性体は、ラセミ混合物を、それを構成する立体異性体に分離するために、当該技術分野で周知の方法を使用する分割によって、例えば、ＨｙｐｅＲｓｉｌナフチルウレアなどのキラルなカラムにてＨＰＬＣを使用する分割によって、または立体異性体の塩の分離を用いる分割によってラセミ体から調製することができる。　本発明の化合物は、適切な溶媒から結晶化することによって、または適切な溶媒化合物を蒸発させることによって、溶媒分子と結合した状態で単離することができる。
【００８８】
塩基性の中心を含む式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な酸付加塩を、従来の方法で調製することができる。　例えば、遊離塩基の溶液を、好適な酸を直接または好適な溶液のいずれかを用いて処理することができ、そして得られる塩を、ろ過によって、または反応溶媒を減圧下で蒸発させることによって単離することができる。　薬学的に許容可能な塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物の溶液を好適な塩基で処理することによって、類似の方法で得ることができる。　両方のタイプの塩は、イオン交換樹脂技術を使用して形成または相互変換させることができるので、本発明のさらなる態様によれば、（ｉ）塩の形成、または（ｉｉ）溶媒化合物（例えば、水和物）の形成を伴った、式（Ｉ）の化合物または塩もしくは溶媒化合物（例えば、水和物）を調製するための方法が提供される。
【００８９】
下記の略称が、以後の実施例において使用される：Ｒｔ（室温）、ｍｉｎ（分）、ｈ（時間）、ｇ（グラム）、ｍｍｏｌ（ミリモル）、ｍ．ｐ．（融点）、ｅｑ（当量）、Ｌ（リットル）、ｍＬ（ミリリットル）、μＬ（マイクロリットル）、Ｍｅ（メチル）、Ｂｎ（ベンジル）、ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、ＣＨ２Ｃｌ２（ジクロロメタン）、ＩＰＡ（イソプロピルアルコール）、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）、ＴＰＡＰ（過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム）、ＳＯＣｌ２（塩化チオニル）、Ｅｔ３Ｎ（トリエチルアミン）、ＣＨ３ＮＨ３（メチルアミン）、ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）、ＥｔＯＨ（エタノール）、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）、ＣＨＣｌ３（クロロホルム）、ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）、ＭｅＯＨ（メタノール）およびＴＨＦ（テトラヒドロフラン）。
【００９０】
実施例１の調製
【００９１】
【化３３】
2004501919.tif 000015
【００９２】
実施例１を、下記の合成スキームに示した手順に従い、中間体１〜３から調製した。　中間体１は、ウィスコンシン州ミルオゥキィーのＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社が販売している化合物、ＤＬ−７−アザトリプトファンから調製した。
【００９３】
【化３４】
2004501919.tif 000016
【００９４】
【化３５】
2004501919.tif 000017
【００９５】
【化３６】
2004501919.tif 000018
【００９６】
【化３７】
2004501919.tif 000019
【００９７】
中間体１
ＤＬ−７−アザトリプトファンメチルエステル一塩酸塩の調製
塩化チオニル（１．７４ｇ、１．１ｍＬ、１４．６ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、０℃で、ＤＬ−７−アザトリプトファン一水和物（１．００ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）を含む無水メタノール（４０ｍＬ）での懸濁物に滴下して加えた。　この混合物を室温にてゆっくり加温して、２４時間撹拌した。　メタノールを減圧下で除き、白色の固体を得た。　得られた固体を１Ｈ−ＮＭＲで分析し、出発物質と中間体１との混合物であることが示された。
【００９８】
塩化チオニル処理を上記したようにして再度繰り返して、白色の固体を得た（１．３９ｇ、１００％）。　１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ１２．０５（ｓ、１Ｈ）、８．５４（ｂｓ、２Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝４．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．１８（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２４（ｄｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４（ｍ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．３３（ｄ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）。
【００９９】
中間体２
（＋／−）−Ｃｉｓ−β−カルボリンの調製
中間体１（１．３９ｇ、５．４４ｍｍｏｌ）およびピペロナール（１．０６ｇ、７．０７ｍｍｏｌ）を含むピリジン（３５ｍＬ）での懸濁物を１００℃に加熱して、窒素雰囲気下で、５時間撹拌した。　得られた褐色の懸濁物を室温にて冷却し、ろ過して、未反応の出発物質を除いた。　ろ液を真空下で濃縮し、そしてカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１％〜２０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、０．３４ｇの白色の固体を得た。　この固体をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、０％〜４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）によって再精製し、そして、ＭｅＯＨとともに粉砕して、０．３１ｇ（１６．４％）のＣｉｓ生成物を得た。　このものを１Ｈ−ＮＭＲ分析したところ、約９４％の純度であった。　ＴＬＣ Ｒｆ（５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．５１；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ１０．９９（ｓ、１Ｈ）、８．１０（ｄｄ、Ｊ＝１．４Ｈｚ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、Ｊ＝６．７５、１Ｈ）、７．００（ｄｄ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１〜６．９０（ｍ、３Ｈ）、６．００（ｄ、Ｊ＝１Ｈｚ、１Ｈ）、５．１６（ｍ、１Ｈ）、３．８２〜３．８９（ｍ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、２．９８〜３．０７（ｍ、１Ｈ）、２．７７〜２．８７（ｍ、１Ｈ）、２．６８〜２．７３（ｍ、１Ｈ）；ＭＳ（ＡＰＩ）ｍ／ｚ ３５２（Ｍ＋Ｈ）。　ｔｒａｎｓ−カルボリンは、純粋でない形態でカラムから溶出した：　ＴＬＣ Ｒｆ（５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．４０。
【０１００】
中間体３
（＋／−）−Ｃｉｓ−２−クロロアセチル−β−カルボリンの調製
クロロアセチル塩化物（０．１１ｍＬ、１．３４ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、０℃で、ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）での中間体２（０．３１ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．５ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）の混合物に滴下して加えた。　得られた混合物を室温にまで加温して、約１．５時間撹拌した。　反応を１ＮのＨＣｌ（２ｍＬ）で停止させ、そして、ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）および水（１０ｍＬ）で希釈した。　層を分離した。　有機相を飽和重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）および塩性溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥した。　ろ過および真空濃縮を行うことで、中間体３は、緑色を帯びた泡状物として得られた（０．３９ｇ）。　これを、精製することなく、次工程で使用した：ＴＬＣ Ｒｆ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．５８；ＭＳ（ＡＰＩ）ｍ／ｚ ４２８（Ｍ＋Ｈ）。
【０１０１】
実施例１
（＋／−、Ｃｉｓ）−１０−ベンゾ［１、３］ジオキソル−５−イル−７−メチル−５、５ａ、７、８、１０、１１−ヘキサヒドロ−１、７、９ａ、１１−テトラアザベンゾ［β］フルオレン−６、９−ジオンの調製
粗中間体３（０．３８ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）、４０％メチルアミン水溶液（１．４７ｍＬ、１７．１ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（４０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１０ｍＬ）の混合物を、窒素雰囲気下、４０℃で２．５時間加熱した。　得られた溶液を室温にまで冷却し、その後、濃塩酸（ＨＣｌ）で酸性化した。　得られた混合物をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）で希釈して、層を分離し、有機相を水（１０ｍＬ）および塩性溶液（１０ｍＬ）で洗浄した。　有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過して、真空濃縮した。　生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、０％〜５％ ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、白色の固体を、４５℃で真空乾燥した後に得た（０．２０ｇ、２段階で５７．５％）。　生成物は、約１０％のｔｒａｎｓ異性体が混入していた：ｍｐ、２６２〜２７６℃；ＴＬＣ Ｒｆ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．４５；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．６５（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｄｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．００（ｄｄ、Ｊ＝１．２Ｈｚ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５（ｄｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、６．８２〜６．９０（ｍ、２Ｈ）、６．１３（ｓ、１Ｈ）、５．９３（ｓ、２Ｈ）、４．４２（ｄｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、Ｊ＝１１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．１９（ｄ、Ｊ＝１６．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．９６（ｄ、Ｊ＝１７．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．５５（ｄｄ、Ｊ＝４．５１、Ｊ＝１６．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．９２〜３．０１（ｍ、４Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）；ＭＳ（ＡＰＩ）ｍ／ｚ ３９１（Ｍ＋Ｈ）；［α］Ｄ２５℃＝旋光性は観測されず（Ｃ＝０．１５、ＤＭＳＯ）。　元素分析、計算値（Ｃ２１Ｈ１８Ｎ４Ｏ４・０．７Ｈ２Ｏ）：Ｃ，６２．５９；Ｈ，４．８５；Ｎ，１３．９０。　実測値：Ｃ，６２．６１；Ｈ，４．７１；Ｎ，１３．８８。　主生成物の相対的な立体化学は、ＮＯＥ差実験（ＤＭＳＯ−ｄ６）によって、すなわち、４．４２ｐｐｍのＣ５ａプロトンから６．１３ｐｐｍのＣ１０プロトンへの正のＮＯＥ増強によってＣｉｓ異性体であることが確認された。
【０１０２】
実施例２の調製
【０１０３】
【化３８】
2004501919.tif 000020
【０１０４】
実施例２は、インドリン置換されたアラニン中間体４から調製することができる。　その合成は、Ｍ． Ｃａｒｄｅｌｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｎ．Ｃｈｉｍ．（Ｒｏｍｅ）， ５８（１１）， ｐｐ．１２０６〜１２１３（１９６８）に、そして、Ｐ． Ｇｍｅｉｎｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．、３２１（９）、ｐｐ．５０５〜５０７（１９８８）に開示されている。　以下の記載は、実施例２に関して考えうる合成経路である。
【０１０５】
【化３９】
2004501919.tif 000021
【０１０６】
【化４０】
2004501919.tif 000022
【０１０７】
【化４１】
2004501919.tif 000023
【０１０８】
【化４２】
2004501919.tif 000024
【０１０９】
実施例３の調製
以下の実施例３は、以下のアザインドリジン置換されたアラニン中間体５を用いて出発して、実施例２と同じものと考えられる合成経路によって調製することができる。
【０１１０】
【化４３】
2004501919.tif 000025
【０１１１】
実施例４の調製
【０１１２】
【化４４】
2004501919.tif 000026
【０１１３】
実施例４を、下記の合成スキームに記載されるようにして、中間体６〜８から調製した。　中間体６は、ウィスコンシン州ミルオゥキイーのＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社から市販されている（Ｒ）−α−アミノ−３−［１］ベンゾチオフェン−３−イルプロピオン酸から調製した。　以下の反応系の様々な態様が、Ｈ．Ｋａｗａｋｕｂｏ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３６、ｐｐ．３５２６〜３５３２（１９９３）に、そして、Ｈ．Ｋａｗａｋｕｂｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．， ３３、ｐｐ．３１１０〜３１１６（１９９０）に開示されている。
【０１１４】
【化４５】
2004501919.tif 000027
【０１１５】
【化４６】
2004501919.tif 000028
【０１１６】
【化４７】
2004501919.tif 000029
【０１１７】
【化４８】
2004501919.tif 000030
【０１１８】
【化４９】
2004501919.tif 000031
【０１１９】
中間体６
（Ｒ）−α−アミノ−３−［１］ベンゾチオフェン−３−イルプロピオン酸メチルエステルの調製
塩化チオニル（２．６９ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、０℃で、（Ｒ）−α−アミノ−３−［１］ベンゾチオフェン−３−イルプロピオン酸（１．００ｇ、４．５２ｍｍｏｌ）を含む無水ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）での懸濁物に滴下して加えた。　この混合物を室温にまでゆっくり加温して、合計で２４時間撹拌した。　溶媒を減圧下で除き、淡黄色の固体を得た。　得られた残渣をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解し、その後、１：１のＣＨ２Ｃｌ２：飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で希釈した。　層を分離して、水層をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）で逆抽出した。　有機相を一緒にして、水、飽和塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、そして濃縮して、淡い褐色の油状物を得た（１．０８ｇ、１００％）：ＴＬＣ Ｒｆ（９０：１０：１のＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）＝０．３４；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ７．８８〜７．７８（ｍ、２Ｈ）、７．４３〜７．３４（ｍ、２Ｈ）、７．２６（ｓ、１Ｈ）、３．８８（ｄｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、３．４１（ｄｄ、Ｊ＝０．７Ｈｚ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．３６（ｄｄ、Ｊ＝０．７Ｈｚ、Ｊ＝４．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．１０（ｄｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、Ｊ＝１４．１Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１２０】
中間体７
（＋／−）−Ｃｉｓ−β−カルボリンの調製
トリフルオロ酢酸（２．４ｍＬ、３３．２ｍｍｏｌ）を、トルエン（２０ｍＬ）での中間体６（２．３７ｇ、５．２４ｍｍｏｌ）およびピペロナール（１．０８ｇ、７．２１ｍｍｏｌ）の混合物に加えた。　この混合物を４０℃にまで加温して、少なくとも２４時間撹拌した。　溶液を室温にまで冷却し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、そして、１ＮのＨＣｌ（２０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄した。　有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、そして溶媒を減圧下で除いて、褐色の油状固体を得た。
【０１２１】
この粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、０％〜５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、０．３３ｇ（１６．９％）の淡黄色の泡状物を得た。　ＴＬＣ Ｒｆ（５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．４４；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ７．８２（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．７１（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１〜７．２８（ｍ、２Ｈ）、６．９６〜６．８８（ｍ、３Ｈ）、６．０１（ｄ、Ｊ＝０．８Ｈｚ、２Ｈ）、５．１９（ｍ、１Ｈ）、３．９９〜３．９６（ｍ、１Ｈ）、３．７４（ｓ、３Ｈ）、３．１７〜３．１１（ｍ、１Ｈ）、２．９６（ｍ、１Ｈ）、２．９１〜２．８４（ｍ、１Ｈ）。
【０１２２】
ｔｒａｎｓ−カルボリンはまた、純粋でない形態でカラムから溶出した：ＴＬＣ Ｒｆ（５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．３８。
【０１２３】
中間体８
（＋／−）−Ｃｉｓ−２−クロロアセチル−β−カルボリン４の調製
クロロアセチル塩化物（０．０９ｍＬ、１．１６ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、０℃で、無水ＴＨＦ（８ｍＬ）における中間体７（０．３３ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．７８ｍｍｏｌ）の混合物に滴下して加えた。　得られた混合物を室温にまで加温して、０．５時間撹拌した。　反応を１ＮのＨＣｌ（３ｍＬ）で停止させて、反応液を真空下で濃縮した。　残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解し、水（２×１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１０ｍＬ）で洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。　ろ過および真空濃縮によって、０．４４ｇのベージュ色の泡状物を得た。　これを、精製することなく、次工程で使用した：ＴＬＣ Ｒｆ（３％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．５７。
【０１２４】
実施例４
（＋／−，Ｃｉｓ）−１０−ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル−７−メチル−５，７，８，１０−テトラヒドロ−５ａＨ−１１−チア−７，９ａ−ジアゾベンゾ［β］フルオレン−６，９−ジオンの調製
ＴＨＦ（２ｍＬ）における粗中間体８（約０．３９ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）、４０％メチルアミン水溶液（０．３８ｍＬ、４．４５ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素雰囲気下、４５℃で１５分間加熱した。　得られた溶液を室温にまで冷却し、その後、０．２ｍＬの濃ＨＣｌで停止させた。　ＴＨＦを真空蒸留によって除き、ベージュ色の固体を得た。　固体をろ過によって集め、ＭｅＯＨにおいて再びスラリーにした。　ろ過およびＭｅＯＨによる洗浄（２×１０ｍＬ）を行うことで、クリーム色の固体を得た（０．２３ｇ、２段階について６３％）；ｍｐ、２４５〜２６６℃；ＴＬＣ Ｒｆ（５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．１２；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．８８（ｄｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、Ｊ＝１４．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．４２（ｄｔ、Ｊ＝１．０Ｈｚ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄｔ、Ｊ＝１．２Ｈｚ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｓ、１Ｈ）、６．７６〜６．８２（ｍ、２Ｈ）、６．２５（ｓ、１Ｈ）、５．９３（ｄ、Ｊ＝１．４Ｈｚ、２Ｈ）、４．４８（ｄｄ、Ｊ＝４．１Ｈｚ、Ｊ＝１１．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．１９（ｄ、Ｊ＝１６．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．９６（ｄ、Ｊ＝１７．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．６８（ｄｄ、Ｊ＝４．４Ｈｚ、Ｊ＝１６．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．０８〜２．９９（ｍ、１Ｈ）、２．９４（ｓ、３Ｈ）；ＭＳ（ＡＰＩ）ｍ／ｚ ４０７（Ｍ＋Ｈ）、４２９（Ｍ＋Ｎａ）；［α］Ｄ２５℃＝旋光性は観測されず（Ｃ＝０．５１、ＤＭＳＯ）。　元素分析、計算値（Ｃ２２Ｈ１８Ｎ４Ｏ４Ｓ１・０．５Ｈ２Ｏ）：Ｃ，６３．６０；Ｈ，４．６１；Ｎ，６．７４；Ｓ、７．７２。　実測値：Ｃ，６３．７３；Ｈ，４．６２；Ｎ，６．７１；Ｓ，７．９３。　生成物の相対的な立体化学は、ＮＯＥ差実験（ＤＭＳＯ−ｄ６）によって、すなわち、４．４８ｐｐｍのＣ１２ａプロトンから６．２５ｐｐｍのＣ６プロトンへの正のＮＯＥ増強によってＣｉｓ異性体であることが確認された。
【０１２５】
実施例５（ａ）および５（ｂ）ならびに実施例６および７の調製
【０１２６】
【化５０】
2004501919.tif 000032
【０１２７】
【化５１】
2004501919.tif 000033
【０１２８】
【化５２】
2004501919.tif 000034
【０１２９】
実施例５（ａ）、５（ｂ）、６および７を、以下の市販の化合物から調製した。
【０１３０】
【化５３】
2004501919.tif 000035
【０１３１】
【化５４】
2004501919.tif 000036
【０１３２】
式中、Ｘは、ＮＨ、ＯまたはＳである。　２−インドリルアラニン、２−ベンゾフラニルアラニンおよび２−ベンゾチオフェニルアラニンの出発物質の合成は、Ｔ．Ｍａｓｑｕｅｌｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ、７７、ｐｐ．１３９５〜１４１１（１９９４）にも開示されている。　以下のスキームにより、実施例５の１つと考えられるものの調製が例示される。　実施例６および７の化合物も、同様にして合成することができる。
【０１３３】
【化５５】
2004501919.tif 000037
【０１３４】
【化５６】
2004501919.tif 000038
【０１３５】
【化５７】
2004501919.tif 000039
【０１３６】
【化５８】
2004501919.tif 000040
【０１３７】
【化５９】
2004501919.tif 000041
【０１３８】
【化６０】
2004501919.tif 000042
【０１３９】
【化６１】
2004501919.tif 000043
【０１４０】
以下に、実施例５（ａ）および５（ｂ）の他の合成例を示す。
【０１４１】
実施例５（ａ）の調製
【０１４２】
【化６２】
2004501919.tif 000044
【０１４３】
実施例５（ａ）を、以下の合成スキームに示されるようにして中間体９および１１から調製した。　中間体９および１０は、市販の化合物であるＤ−イソトリプトファンから調製した。
【０１４４】
【化６３】
2004501919.tif 000045
【０１４５】
【化６４】
2004501919.tif 000046
【０１４６】
【化６５】
2004501919.tif 000047
【０１４７】
【化６６】
2004501919.tif 000048
【０１４８】
【化６７】
2004501919.tif 000049
【０１４９】
【化６８】
2004501919.tif 000050
【０１５０】
中間体９および１０
Ｃｉｓ−β−カルボリンおよびｔｒａｎｓ−β−カルボリンの調製
Ｄ−イソトリプトファン（０．８４ｇ、３．６ｍｍｏｌ）およびピペロナール（０．７１ｇ、４．８ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（３０ｍＬ）における溶液に、アルゴン雰囲気下、０℃で、トリフルオロ酢酸（０．５６ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）を加えた。　その後、混合物を４時間にわたって室温にまで加温した。　得られたピンク色の溶液を、飽和重炭酸ナトリウム溶液で塩基性ｐＨに調整した。　相を分離し、水相を塩化メチレンで抽出した（２×５０ｍＬ）。　有機相を一緒にして、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、その後、溶媒を減圧下で除き、淡いピンク色の油状の残渣として得た。　この残渣を、塩化メチレン／酢酸エチル（６：１）で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、Ｃｉｓ−β−カルボリン中間体９を黄色の油状物として得た（０．５５ｇ、４２％）：ＴＬＣ Ｒｆ（６：１の塩化メチレン／酢酸エチル）＝０．６２；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ７．９０（ｓ、Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．０７（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．９４〜６．７５（ｍ、５Ｈ）、５．９２（ｄ、Ｊ＝１．４Ｈｚ、２Ｈ）、５．１８（ｓ、１Ｈ）、４．３０〜４．１９（ｍ、２Ｈ）、３．９７〜３．９２（ｄｄ、Ｊ＝６．３、８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．１３〜３．０９（ｍ、２Ｈ）、１．３１（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）ｐｐｍ。　その後に溶出するｔｒａｎｓ異性体の中間体１０もまた黄色の油状物として単離された（０．７３ｇ、５５％）：ＴＬＣ Ｒｆ（６：１の塩化メチレン／酢酸エチル）＝０．３８；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ８．０４（ｓ、１Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２〜７．０７（ｍ、１Ｈ）、７．０２〜６．９１（ｍ、２Ｈ）、６．８２〜６．７２（ｍ、３Ｈ）、５．９１（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、２Ｈ）、５．３５（ｓ、１Ｈ）、４．２７〜４．０７（ｍ、２Ｈ）、３．９６〜３．９２（ｄｄ、Ｊ＝５．３、７．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．１７〜３．０７（ｍ、２Ｈ）、２．３５（ｂｓ、１Ｈ）、１．２７（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）ｐｐｍ。
【０１５１】
中間体１１
Ｃｉｓ−２−クロロアセチル−β−カルボリンの調製
クロロアセチル塩化物（０．１６ｍＬ、２．０１ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下、０℃で、Ｃｉｓ−β−カルボリン中間体９（０．５５ｇ、１．５１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．１５ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（４０ｍＬ）における溶液に加えた。　その後、得られた混合物を３時間にわたって室温にまで加温した。　黄色のスラリーを塩化メチレン（５０ｍＬ）に溶解して、水（２０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２０ｍＬ）で洗浄した。　有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、その後、溶媒を減圧下で除き、Ｃｉｓ−２−クロロアセチル−β−カルボリン中間体１１をオレンジ色の固体として得た（０．６２ｇ、９３％）。　これを精製せずに使用した：ＴＬＣ Ｒｆ（８：１の塩化メチレン／酢酸エチル）＝０．６３。
【０１５２】
実施例５（ａ）
（５Ｒ，９ａＲ）−５−ベンゾ（１，３）ジオキソル−５−イル−８−メチル−５，７，８，９ａ，１０，１１−ヘキサヒドロ−５ａ，８，１１−トリアザベンゾ［β］フルオレン−８，９−ジオンの調製
中間体１１（０．６２ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）およびメチルアミン（３．５ｍＬ、７．０３ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおける２Ｍ溶液）を含むメタノール（１５ｍＬ）における溶液を、アルゴン雰囲気下、５０℃で１６時間加熱した。　得られた固体を減圧ろ過によって単離して、実施例５（ａ）を淡黄色の固体として得た（０．２０７ｇ、３８％）：ｍｐ、２７４〜２７７℃；ＴＬＣ Ｒｆ（４：１：０．３の塩化メチレン／酢酸エチル／メタノール）＝０．４０；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．１４（ｓ、Ｈ）、７．４５（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５〜６．９９（ｄｔ、Ｊ＝１．０、７．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．９２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｓ、１Ｈ）、６．８３（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．７１（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．２３（ｓ、１Ｈ）、５．８８〜５．８７（ｄｄ、Ｊ＝１．０、３．７Ｈｚ、２Ｈ）、４．５１〜４．４５（ｄｄ、Ｊ＝４．３、１１．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．１６（ｄ、Ｊ＝１７．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．９２（ｄ、Ｊ＝１７．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．４７〜３．４０（ｄｄ、Ｊ＝４．７、１６．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．３２〜３．２２（ｍ、１Ｈ）、２．９２（ｓ、３Ｈ）ｐｐｍ；ＥＳＩ ＭＳ ｍ／ｚ ３９０［Ｃ２２Ｈ１９Ｎ３Ｏ４＋Ｈ］＋。　元素分析、計算値（Ｃ２２Ｈ１９Ｎ３Ｏ４）：Ｃ，６７．８６；Ｈ，４．９２；Ｎ，１０．７９。　実測値：Ｃ，６７．５３；Ｈ，４．９６；Ｎ，１０．７３。
【０１５３】
ＨＰＬＣ分析（Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤカラム、２５０×４．５ｍｍ、保持時間＝１２．８分；１：１のイソプロパノール／ヘキサン；流速＝１．００ｍＬ／分；検出器、２５４ｎｍ；周囲温度）は１つのピークを示し、純度は９９．５％であった。　実施例５（ａ）の立体化学は、一連のＮＯＥ差実験（ＤＭＳＯ−ｄ６）、すなわち、４．５０ｐｐｍのＣ１２ａプロトンから６．２３ｐｐｍのＣ６プロトンへの正のＮＯＥ増強；６．２３ｐｐｍのＣ６プロトンから４．５０ｐｐｍのＣ１２ａプロトンへの正のＮＯＥ増強によって、所望するＣｉｓ異性体であることが確認された。
【０１５４】
実施例５（ｂ）の調製
【０１５５】
【化６９】
2004501919.tif 000051
【０１５６】
実施例５（ｂ）を、以下の合成スキームに示されるようにして上記の中間体１０から調製した。
【０１５７】
【化７０】
2004501919.tif 000052
【０１５８】
【化７１】
2004501919.tif 000053
【０１５９】
中間体１２
（＋）−ｔｒａｎｓ−２−クロロアセチル−β−カルボリンの調製
クロロアセチル塩化物（０．２１ｍＬ、２．６４ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下、０℃で、中間体１０（０．７３ｇ、２．００ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．３６ｍＬ、２．５８ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（４５ｍＬ）における溶液に加えた。　その後、得られた混合物を３時間にわたって室温にまで加温した。　オレンジ色の溶液を塩化メチレン（５０ｍＬ）に溶解して、水（２０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２０ｍＬ）で洗浄した。　有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、その後、溶媒を減圧下で除き、ｔｒａｎｓ−２−クロロアセチル−β−カルボリン中間体１２をオレンジ色の泡状物として得た（０．８６ｇ、９８％）。　これを精製せずに使用した：ＴＬＣ Ｒｆ（８：１の塩化メチレン／酢酸エチル）＝０．４８。
【０１６０】
実施例５（ｂ）
（５Ｓ，９ａＲ）−５−ベンゾ［１，３］ジオキソル−５−イル−８−メチル−５，７，８，９ａ，１０，１１−ヘキサヒドロ−５ａ，８，１１−トリアザベンゾ［β］フルオレン−８，９−ジオンの調製
ｔｒａｎｓ−２−クロロアセチル−β−カルボリン中間体１２（０．８６ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）およびメチルアミン（９．８ｍＬ、１９．５ｍｍｏｌ、ＴＨＦにおける２Ｍ溶液）を含むメタノール（１５ｍＬ）における溶液を、アルゴン雰囲気下、５０℃で１６時間加熱した。　得られた溶液を室温に冷却し、その後、減圧濃縮して、オレンジ色の泡状物を得た。　この残渣を、塩化メチレン／酢酸エチル／メタノール（４：１：０．３）で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、黄色の泡状物を得た。
【０１６１】
この泡状物を、ジエチルエーテルにてスラリーにして、固体を真空ろ過によって集めて、実施例５（ｂ）を灰白色の固体として得た（０．３４５ｇ、４５％）：ｍｐ、２７４〜２７７℃；ＴＬＣ Ｒｆ（４：１：０．３の塩化メチレン／酢酸エチル／メタノール）＝０．３０；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．１９（ｓ、１Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０８〜７．００（ｍ、２Ｈ）、６．９１〜６．８０（ｍ、４Ｈ）、６．６８（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．９７（ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．２３（ｄ、Ｊ＝１７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．１５〜４．０９（ｄ、Ｊ＝４．６、１１．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．０３（ｄ、Ｊ＝１７．５Ｈｚ、１Ｈ）、３．３６〜３．１０（ｍ、３Ｈ）、２．８４（ｓ、３Ｈ）ｐｐｍ；ＥＳＩ ＭＳ ｍ／ｚ ３９０［Ｃ２２Ｈ１９Ｎ３Ｏ４＋Ｈ］＋。　元素分析、計算値（Ｃ２２Ｈ１９Ｎ３Ｏ４）：Ｃ，６７．８６；Ｈ，４．９２；Ｎ，１０．７９。　実測値：Ｃ，６７．４９；Ｈ，４．９５；Ｎ，１０．６８。　ＨＰＬＣ分析（Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤカラム、２５０×４．５ｍｍ、保持時間＝８．５分および１０．９分；１：１のイソプロパノール／ヘキサン；流速＝１．００ｍＬ／分；検出器、２５４ｎｍ；周囲温度）は２つのピークを示し、それぞれ、比率は５：９５であり、総収率は１００．０％であった。　実施例５（ｂ）の立体化学は、ＮＯＥ差実験（ＤＭＳＯ−ｄ６）によって、すなわち、４．４０ｐｐｍのＣ１２ａプロトンから７．０８ｐｐｍのＣ６プロトンへのＮＯＥ増強がないこと；７．０８ｐｐｍのＣ６プロトンから４．４０ｐｐｍのＣ１２ａプロトンへのＮＯＥ増強がないことによって、所望するｔｒａｎｓ異性体であることが確認された。
【０１６２】
実施例８の調製
【０１６３】
【化７２】
2004501919.tif 000054
【０１６４】
実施例８のベンゾイミダゾールの合成法として、実施例５〜７の合成の場合と同じ反応系が利用でき、この場合、硫酸を触媒として、公知の中間体１３のアミノ酸をメタノール中でエステル化することによって開始される。
【０１６５】
【化７３】
2004501919.tif 000055
【０１６６】
【化７４】
2004501919.tif 000056
【０１６７】
【化７５】
2004501919.tif 000057
【０１６８】
【化７６】
2004501919.tif 000058
【０１６９】
実施例９の調製
【０１７０】
【化７７】
2004501919.tif 000059
【０１７１】
実施例９は、中間体１４、すなわち、Ｄ． Ｒａｎｇａｎａｔｈａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．， ２３（２７）， ｐｐ．２７８９〜２７９２に記載の１−インドリルアラニンから調製することができる。　実施例８を製造するために使用された同じ合成系を、実施例９の合成において利用することができる。
【０１７２】
【化７８】
2004501919.tif 000060
【０１７３】
実施例１０の調製
【０１７４】
【化７９】
2004501919.tif 000061
【０１７５】
インドリジン（実施例１０）のアミノエステル中間体１５からの合成にあっては、実施例８と同じ合成スキームが利用される。　中間体１５は、公知のアルデヒド中間体１６から、適切なＷｉｔｔｉｇ反応と、その後に続く、得られたアルケンの触媒的水素化によって調製される。
【０１７６】
【化８０】
2004501919.tif 000062
【０１７７】
【化８１】
2004501919.tif 000063
【０１７８】
実施例１１および１２の調製
【０１７９】
【化８２】
2004501919.tif 000064
【０１８０】
【化８３】
2004501919.tif 000065
【０１８１】
実施例１１および１２を、実施例８を調製するために用いられたのと同じ手順によって、以下の中間体１７および１８から調製した。
【０１８２】
【化８４】
2004501919.tif 000066
【０１８３】
以下の化合物、実施例１３は、実施例１〜１２の調製時の反応系に類似する反応系によって調製することができる。
【０１８４】
【化８５】
2004501919.tif 000067
【０１８５】
本発明の化合物は、経口投与用の錠剤に配合することができる。　例えば、式（Ｉ）の化合物は、本明細書に参考までに組み込んだ、国際公開公報 ＷＯ９６／３８１３１に示された共沈殿法によって、ポリマー担体との分散物にすることができる。
【０１８６】
共沈殿させた分散物は、その後、賦形剤と混合されて、錠剤に圧縮成形することができ、そして、この錠剤は任意にフィルムコーティングされる。
【０１８７】
構造式（Ｉ）の化合物は、ＰＤＥ５を阻害する能力に関して試験を行った。　化合物がＰＤＥ５活性を阻害する能力は、化合物のＩＣ５０値、すなわち、酵素活性の５０％を阻害するために必要な阻害剤の濃度に関連する。　構造式（Ｉ）の化合物に対するＩＣ５０値は、組換えヒトＰＤＥ５を使用して測定された。
【０１８８】
本発明の化合物は、典型的には、組換えヒトＰＤＥ５に対して約５０μＭ未満のＩＣ５０値を示し、好ましくは、約２５μＭ未満のＩＣ５０値を示し、より好ましくは、約１５μＭ未満のＩＣ５０値を示す。　本発明の化合物は、典型的には、組換えヒトＰＤＥ５に対して約１μＭ未満のＩＣ５０値を示し、多くの場合には約０．０５μＭ未満のＩＣ５０値を示す。　本発明の利点を完全に引き出すために、本発明のＰＤＥ５阻害剤は、約０．１ｎＭ〜約１５μＭのＩＣ５０を有する。
【０１８９】
組換えヒトＰＤＥの産生およびＩＣ５０の測定は、当該技術分野で周知の方法によって行うことができる。　例示的な方法は、以下の通りである。
【０１９０】
ヒトＰＤＥの発現
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ Ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（酵母）での発現
ヒトのＰＤＥ１Ｂ、ＰＤＥ２、ＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＤＥ４Ｃ、ＰＤＥ４Ｄ、ＰＤＥ５およびＰＤＥ７の組換え産生を、Ｐｒｉｃｅ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１８５、ｐｐ．３０８〜３１８（１９９０）に記載の基本ＡＤＨ２プラスミドに由来する酵母形質転換ベクターであって、酵母のＡＤＨ２プロモーター配列およびターミネーター配列が組み込まれたベクターを用いたこと、そして、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ Ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ宿主が、１９９８年８月３１日に、ヴァージニア州マナサスのＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託され、受託番号ＡＴＣＣ７４４６５が付与されたプロテアーゼ欠損ＢＪ２−５４株であること以外は、本明細書に参考までに組み込んだ、米国特許第５，７０２，９３６号の実施例７に記載の組換え産生と同様に行った。　形質転換された宿主細胞を、微量金属およびビタミンを含む２×ＳＣ−ｌｅｕ培地（ｐＨ６．２）で増殖させた。　２４時間後、ＹＥＰ培地含有グリセロールを加えて、２×ＹＥＴ／３％グリセロールの最終濃度にした。　約２４時間後に細胞を集め、洗浄して、−７０℃で保存した。
【０１９１】
ヒトホスホジエステラーゼ調製物
ホスホジエステラーゼ活性の測定
調製物のホスホジエステラーゼ活性は、以下のようにして測定した。　活性炭分離技術を利用するＰＤＥアッセイを、本質的には、Ｌｏｕｇｈｎｅｙ ｅｔ ａｌ（１９９６）に記載のようにして行った。　このアッセイでは、ＰＤＥ活性により、［３２Ｐ］ｃＡＭＰまたは［３２Ｐ］ｃＧＭＰが、存在するＰＤＥ活性の量に比例して、対応する［３２Ｐ］５’−ＡＭＰまたは［３２Ｐ］５’−ＧＭＰに変換される。　［３２Ｐ］５’−ＡＭＰまたは［３２Ｐ］５’−ＧＭＰは、その後、ヘビ毒の５’−ヌクレオチダーゼの作用によって遊離の［３２Ｐ］リン酸および非標識のアデノシンまたはグアノシンに定量的に変換された。　従って、放出された［３２Ｐ］リン酸の量は酵素活性に比例している。　このアッセイは、４０ｍＭのＴｒｉｓ ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１μＭのＺｎＳＯ４、５ｍＭのＭｇＣｌ２および０．１ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）（いずれも最終濃度）を含有する１００μＬの反応混合物において３０℃で行われた。　ＰＤＥ酵素は、基質の総加水分解が３０％未満である量で存在した（直線的なアッセイ条件）。　アッセイは、基質（１ｍＭの［３２Ｐ］ｃＡＭＰまたはｃＧＭＰ）の添加によって開始され、混合物を１２分間インキュベーションした。　その後、７５μｇのガラガラヘビ毒液を加え、インキュベーションを３分間続けた（合計で１５分間）。　反応を、２００μＬの活性炭（０．１ＭのＮａＨ２ＰＯ４（ｐＨ４）における２５ｍｇ／ｍｌの懸濁物）の添加によって停止させた。　遠心分離（７５０×ｇ、３分間）によって活性炭を沈降させた後、上清のサンプルを採取して、シンチレーションカウンターで放射能測定を行い、そしてＰＤＥ活性を計算した。
【０１９２】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅからのＰＤＥ５の精製
細胞ペレット（２９ｇ）を、等容量の溶解緩衝液（２５ｍＭのＴｒｉｓ ＨＣｌ（ｐＨ８）、５ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのベンズアミジンおよび１０μＭのＺｎＳＯ４）と共に氷上で解凍した。　細胞を、窒素を２０，０００ｐｓｉで使用するＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ社）で溶解した。　溶解液を遠心分離して、０．４５μｍのディスポーザブルフィルターによりろ過した。　ろ液を、Ｑ ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）Ｆａｓｔ−Ｆｌｏｗ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）の１５０ｍＬのカラムに適用した。　カラムを１．５容量の緩衝液Ａ（２０ｍＭのビス−トリスプロパン（ｐＨ ６．８）、１ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２５ｍＭのＤＴＴ、１０μＭのＺｎＳＯ４）で洗浄して、１２５ｍＭのＮａＣｌを含む緩衝液Ａのステップグラジエントで溶出し、続いて、緩衝液Ａにおける１２５ｍＭ〜１０００ｍＭのＮａＣｌの直線勾配で溶出した。
【０１９３】
直線勾配から得られる活性な画分を、緩衝液Ｂ（２０ｍＭのビス−トリスプロパン（ｐＨ ６．８）、１ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２５ｍＭのＤＴＴ、１０μＭのＺｎＳＯ４、および２５０ｍＭのＫＣｌ）における１８０ｍＬのヒドロキシアパタイトカラムに適用した。　適用後、カラムを２容量の緩衝液Ｂで洗浄し、そして緩衝液Ｂにおける０ｍＭ〜１２５ｍＭのリン酸カリウムの直線勾配で溶出した。　活性な画分をプールし、６０％硫酸アンモニウムで沈殿させ、そして緩衝液Ｃ（２０ｍＭのビス−トリスプロパン（ｐＨ ６．８）、１２５ｍＭのＮａＣｌ、０．５ｍＭのＤＴＴおよび１０μＭのＺｎＳＯ４）に再懸濁した。　プールしたものを、１４０ｍＬのＳＥＰＨＡＣＲＹＬ（登録商標）Ｓ−３００ＨＲの１４０ｍＬのカラムに負荷して、緩衝液Ｃで溶出した。　活性な画分を５０％グリセロールに希釈し、−２０℃で保存した。
【０１９４】
得られた調製物は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによれば、約８０％の純度であった。　これらの調製物は、約３μｍｏｌのｃＧＭＰ加水分解／分／ミリグラムタンパク質の比活性を有した。
【０１９５】
ｃＧＭＰ−ＰＤＥに対する阻害効果
本発明の化合物のｃＧＭＰ−ＰＤＥ活性を、Ｗｅｌｌｓ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ、３８４、４３０（１９７５）から改変した１段階アッセイを使用して測定した。　反応媒体には、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ ７．５）、５ｍＭの酢酸マグネシウム、２５０μｇ／ｍＬの５’−ヌクレオチダーゼ、１ｍＭのＥＧＴＡ、および０．１５μＭの８−［Ｈ３］−ｃＧＭＰが含まれていた。　特に断りの無い限り、使用した酵素は、ヒト組換えＰＤＥ５（ワシントン州、ボウゼルのＩＣＯＳ社）であった。
【０１９６】
本発明の化合物は、アッセイにおいて、２％で最終的に存在するＤＭＳＯに溶解された。　インキュベーション時間は３０分であり、その間、基質の総変換は３０％を越えなかった。
【０１９７】
調査した化合物に対するＩＣ５０値を、１０ｎＭ〜１０μＭの範囲の濃度で、一般に使用する濃度−応答曲線から求めた。　標準的な方法論を使用する他のＰＤＥ酵素に対する試験は、本発明の化合物が、ｃＧＭＰに特異的なＰＤＥ酵素に対して選択的であることを示した。
【０１９８】
生物学的データ
本発明の化合物は、典型的には、５００ｎＭ未満のＩＣ５０値を示すことが認められた。　実施例１（本発明の代表的な化合物）を用いたインビトロ試験は、ＰＤＥ５に関して２．３ｎＭのＩＣ５０を示した。　実施例４、５（ａ）および５（ｂ）は、ＰＤＥ５に関して、それぞれ、５５５ｎＭ、３３８ｎＭおよび１２５ｎＭのＩＣ５０を示した。
【０１９９】
本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、本明細書に記載の実施態様に多様な変更および修正を付加できることは明らかである。　従って、特許請求の範囲の欄に記載の限定のみが付加されるべきである。
【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
2004501919.tif 000174
【国際調査報告】
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2004501919.tif 000176
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