(57)【要約】頭蓋内出血を含む、血栓溶解性／線維素溶解性治療により誘導される主要出血を、そのような出血を伴う対象体に対して、有効量の活性化凝固因子ＶＩＩ（ＶＩＩａ）又はその機能的誘導体を投与することにより治療する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
血栓溶解性／線維素溶解性治療誘導性の主要出血の治療用薬物の製造における、活性化凝固因子ＶＩＩ（ＶＩＩａ）又はその機能的誘導体の使用。
【請求項２】
出血が、天然又は組換え型のいずれかの形態の組織プラスミノーゲンアクチベータ、例えばアルテプラーゼ又はレテプラーゼ、デュテプラーゼ、サルプラーゼ、組換え型ＤＳＰＡα１（ＢＡＴ  ＰＡ）、ストレプトキナーゼ、ペジレート化スタフィロキナーゼ及び免疫原性が全くないか又は低減されたスタフィロキナーゼの変異体を含むスタフィロキナーゼ、ウロキナーゼ、単鎖ウロキナーゼ、第３世代血栓溶解剤、又はそれらの治療的に許容可能な誘導体を用いる血栓溶解性／線維素溶解性治療により誘導される請求項１に記載の使用。
【請求項３】
出血が頭蓋内出血である請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
薬剤が、静脈内ボーラス注射又は静脈内注入により有効量の因子ＶＩＩａ又はその機能的誘導体を投与するのに適するものである請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
因子ＶＩＩａ又はその機能的誘導体の有効量が、体重１ｋｇあたり約６０〜１２０μｇの組換え型因子ＶＩＩａに相当する、１又は２以上の、単回静脈内ボーラス注射投与量約３０００〜６０００ＩＵ、及び／又は、毎時、体重１ｋｇあたり約１０〜３０μｇの組換え型因子ＶＩＩａに相当する静脈内注入投与量約５００〜１５００ＩＵを含む請求項４に記載の使用。
【請求項６】
有効量の因子ＶＩＩａ又はその機能的誘導体を、約２時間のインターバルで反復静脈内ボーラス注射の形態で投与する請求項４又は５に記載の使用。
【請求項７】
頭蓋内出血を含む、血栓溶解性／線維素溶解性治療誘導性の主要出血を治療する方法であって、そのような出血を伴う対象体に対して、有効量の活性化凝固因子ＶＩＩ（ＶＩＩａ）又はその機能的誘導体を投与することを含む方法。
【請求項８】
出血が、天然又は組換え型のいずれかの形態の組織プラスミノーゲンアクチベータ、例えばアルテプラーゼ又はレテプラーゼ、デュテプラーゼ、サルプラーゼ、組換え型ＤＳＰＡα１（ＢＡＴ  ＰＡ）、ストレプトキナーゼ、ペジレート化スタフィロキナーゼ及び免疫原性が全くないか又は低減されたスタフィロキナーゼの変異体を含むスタフィロキナーゼ、ウロキナーゼ、単鎖ウロキナーゼ、第３世代血栓溶解剤、又はそれらの治療的に許容可能な誘導体を用いる血栓溶解性／線維素溶解性治療により誘導される請求項７に記載の方法。
【請求項９】
有効量の因子ＶＩＩａ又はその機能的誘導体を、静脈内ボーラス注射又は静脈内注入により、好ましくは約２時間のインターバルでの反復静脈内ボーラス注射により投与する請求項７又は８に記載の方法。
【請求項１０】
因子ＶＩＩａ又はその機能的誘導体の有効量が、体重１ｋｇあたり約６０〜１２０μｇの組換え型因子ＶＩＩａに相当する、１又は２以上の、単回静脈内ボーラス注射投与量約３０００〜６０００ＩＵ、及び／又は、毎時、体重１ｋｇあたり約１０〜３０μｇの組換え型因子ＶＩＩａに相当する静脈内注入投与量約５００〜１５００ＩＵを含む請求項９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
線維素溶解、血液凝固、及び血小板を含む止血系は、血管損傷時における血流の維持及び血液損失の制限に重要な役割を果す。血管損傷時、血小板は、血管壁に付着し、凝集し、かつ、プラグを形成し、そのプラグが、因子ＶＩＩ、因子Ｘ及びプロトロンビンの活性化による凝集活性で形成されるフィブリンネットワークにより合併される。血液損失を停止させた後、創傷治癒が開始され、その後、組織プラスミノーゲンアクチベータ（ｔ−ＰＡ）誘導性プラスミン産生を介する線維素溶解系により血餅が溶解される。
病的状態の間、循環器疾患におけるように、この系は、正常な生理学的調節から免れ、かつ、アテローム斑の破裂後に観察されるような血管の完全な閉塞を生じ得る。この血栓閉塞症を治療するため及び血流を回復させるために、血栓溶解性治療（ｔｈｒｏｍｂｏｌｙｔｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ）が幅広く利用される（文献１）。
【０００２】
血栓溶解性治療は、抗血小板剤（例えばアセチルサリチル酸）、抗凝固剤（例えばヘパリン）及び線維素溶解剤（例えば組織プラスミノーゲンアクチベータ、ストレプトキナーゼ、スタフィロキナーゼ、ウロキナーゼ又はそれらの誘導体）での組み合わせ治療を含む。これらの薬剤の組み合わせは、治療的に非常に有効である一方で、出血性脳卒中を含む出血性合併症を引き起こす重大な危険性を伴う（文献２及び３）。深刻な出血により、血栓溶解性治療を必要とする患者が多数続発している。最近の広範な臨床試験、即ち、１６９４９人の患者を包含するＡｓｓｅｎｔ−２試験によれば、頭蓋内出血の割合は、テネクテプラーゼ（ｔｅｎｅｃｔｅｐｌａｓｅ）（組織プラスミノーゲンアクチベータ（ｔ−ＰＡ）誘導体）について０．９３％及びアルテプラーゼ（ｔ−ＰＡ誘導体）について０．９４％であり、また、脳以外の出血合併症は、テネクテプラーゼ及びアルテプラーゼについて、それぞれ、２６．４３％及び２８．９５％である。輸血が必要な割合は、４．２５及び５．４９％であった。３０日での死亡率及び非致死的脳卒中は、それぞれ、テネクテプラーゼで７．１１％及びアルテプラーゼで７．０４％であった（文献３）。
従って、使用されている血栓溶解剤とは関係なく、そのような血栓溶解性治療誘導性の主要（ｍａｊｏｒ）出血を後退（ｒｅｖｅｒｓｅ）させる薬物（ａｎｔｉｄｏｔｅ）を医師に提供する薬剤が必要とされる。
【０００３】
発明の概要
従って、本発明の目的は、血栓溶解性／線維素溶解性治療誘導性の主要出血を伴う対象体、例えばヒト又は動物において、そのような出血を治療するための組成物及び方法を提供することである。
本発明は、この目的が、活性化凝固因子ＶＩＩ（ＶＩＩａ）の使用により解決可能であるとの知見に基づく。
因子ＶＩＩは、ビタミンＫ依存性糖タンパクであり、それは、肝細胞により生理学的に合成され、かつ、血液中に、４０６アミノ酸残基からなる単鎖分子として分泌される。因子ＶＩＩの因子ＶＩＩａへの活性化は、Ａｒｇ−１５２及びＩｌｅ−１５３間の単一ペプチド結合の加水分解を包含し、単一ジスルフィド結合により一緒に保持される１５２アミノ酸残基の軽鎖と２５４アミノ酸残基の重鎖からなる二本鎖分子を生じる。その活性化形態においては、そのタンパクが、血液凝固カスケードの外因性経路に関係するセリンプロテアーゼとして作用する。損傷血管壁に組織因子（ＴＦ）が暴露されると、因子ＶＩＩの複合体が形成され、それからアクチベータＶＩＩ（因子ＶＩＩａ）が生じ、ＴＦ及び因子ＶＩＩａの複合体により、因子Ｘが因子Ｘａに活性化され、順に、プロトロンビンがトロンビンに転化される。トロンビンは、血液凝固及び創傷治癒において中心的な役割を果す。血管損傷の初期においては、それが、血小板凝集及びフィブリン形成をもたらし、その後、細胞成長が刺激されて、損傷血管の修復が強化される（文献１）。
【０００４】
組換え型因子ＶＩＩ（ｒＦＶＩＩ）は、因子ＶＩＩをコードするヒトＤＮＡで細胞トランスフェクトされたベビーハムスター腎細胞において発現し、精製の間にアクチベータＶＩＩ（ｒＦＶＩＩａ）に転化される（文献４）。市販形態の組換え型因子ＶＩＩａ、ノボセブン（登録商標）（Ｎｏｖｏ， Ｎｏｒｄｉｓｋ， Ｂａｇｓｖａｅｒｄ， Ｄｅｎｍａｒｋ）は、他の治療では有効でなかった、因子ＶＩＩ又はＩＸに対する抑制剤を用いる、出血障害者、主に血友病患者の幅広い範囲における出血エピソードの治療における使用が増大している（文献５〜１０）。
しかしながら、この薬剤に関する１３年間の経験にもかかわらず、血栓溶解性治療誘導性の主要出血現象を後退させるための因子ＶＩＩａの使用は、示唆も研究もされていない。
【０００５】
発明の詳細な記載
第１の態様においては、本発明は、頭蓋内出血を含む、血栓溶解性／線維素溶解性治療誘導性の主要出血の治療用薬物の製造における、活性化凝固因子ＶＩＩ（ＶＩＩａ）又はその機能的誘導体の使用に関する。
第２の態様においては、本発明は、頭蓋内出血を含む、血栓溶解性／線維素溶解性治療誘導性の主要出血を治療する方法であって、そのような出血を伴う対象体に対して、有効量の活性化凝固因子ＶＩＩ（ＶＩＩａ）又はその機能的誘導体を投与することを含む方法に関する。その方法は、特に、ヒトを含む哺乳類の治療において有用である。
【０００６】
本発明における使用に適切なヒト精製因子ＶＩＩａは、天然源から単離することができ、又は、好ましくは、例えば、文献２０に記載されているように、ＤＮＡ組換え技術により製造することができる。組換え技術により生成される因子ＶＩＩａは、天然因子ＶＩＩａ、例えば、製品ノボセブン（登録商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ製）と本質的に同一であり得る。用語“機能的誘導体”は、対象となる生物学的活性が本質的に同一である、因子ＶＩＩａの改質誘導体を意味する。そのような機能的因子ＶＩＩａ誘導体は、例えば、因子ＶＩＩＩをコードする核酸配列の部位特異的突然変異誘発により製造され、天然発生アミノ酸配列とは１又は２以上のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を有する改質組換え型タンパクを生じる。そのような変異には、例えば、アミノ酸の欠失、挿入、付加、置換及び反転が含まれ得る。また、有用な翻訳後改質、例えば、グリコシル化パターンにおける除去又は変化が有効であり得る。
【０００７】
血栓溶解性／線維素溶解性治療において使用する血栓溶解／線維素溶解剤は、天然又は組換え型のいずれかの形態の組織プラスミノーゲンアクチベータ、例えばアルテプラーゼ又はレテプラーゼ（ｒｅｔｅｐｌａｓｅ）、デュテプラーゼ（ｄｕｔｅｐｌａｓｅ）、サルプラーゼ（ｓａｒｕｐｌａｓｅ）、組換え型ＤＳＰＡα１（ＢＡＴ  ＰＡ）、ストレプトキナーゼ、アニストレプラーゼ（ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ）、ペジレート化（ｐｅｇｉｌａｔｅｄ）スタフィロキナーゼ及び免疫原性が全くないか又は低減されたスタフィロキナーゼの変異体を含むスタフィロキナーゼ、ウロキナーゼ、単鎖ウロキナーゼ、当該技術分野において既知の第３世代血栓溶解剤、例えばアメディプラーゼ（ａｍｅｄｉｐｌａｓｅ）、テネクテプラーゼ（ｔｅｎｅｃｔｅｐｌａｓｅ）、モンテプラーゼ（ｍｏｎｔｅｐｌａｓｅ）、ラノテプラーゼ（ｌａｎｏｔｅｐｌａｓｅ）、パミテプラーゼ（ｐａｍｉｔｅｐｌａｓｅ）（文献２、３、１１〜１５及び１９）、又はそれらの治療的に許容可能な誘導体を含み得る。
【０００８】
好ましくは、因子ＶＩＩａを含む薬剤又は医薬組成物は、静脈内ボーラス注射により又は断続的又は連続的静脈内注入により投与されるであろう。また、因子ＶＩＩａの単一静脈内ボーラス注射、その後の静脈内注入の組み合わせが有用であるかもしれない。
注射又は注入に適切な医薬製剤としては、無菌注射又は注入溶液の即席製剤のための無菌水性溶液及び無菌パウダーが挙げられる。一般に、最終溶液は、また、適切な塩及び当該技術分野において既知の他の補助剤を含むであろう。例えば、ノボノルディスク製のノボセブン（登録商標）の再構成水溶液は、３ｍｇ／ｍｌの塩化ナトリウム、１．５ｍｇ／ｍｌの塩化カルシウム二水和物、１．３ｍｇ／ｍｌのＮ−グリシルグリシン、０．１ｍｇ／ｍｌのポリソルベート８０及び３０ｍｇ／ｍｌのマンニトールを含む。
【０００９】
因子ＶＩＩａの投与量は、例えば、特定の対象体の年令及び体調、治療される出血合併症の重症度、及び選択される投与経路に依存して変動するであろう。適切な投与量は、当該技術分野における当業者が容易に決定できる。
典型的には、静脈内ボーラス注射について因子ＶＩＩａの適切な投与量範囲は、体重１ｋｇあたり、約６０〜１２０μｇの組換え型因子ＶＩＩａに相当する、約３０００〜６０００ＩＵ（国際単位；因子ＶＩＩａ８９／６８８に関する第１国際規格に従ったもの）であろう。好ましくは、静脈内ボーラス注射についての投与量は、体重１ｋｇあたり、役４５００〜６０００ＩＵの範囲であろう。通常、組換え型因子ＶＩＩａの全身性半減期がほんの約２〜３時間であるため、比較的短時間のインターバル、好ましくは２〜３時間、より好ましくは２時間のインターバルでの反復静脈内ボーラス注射が必要であるかもしれない。適切な場合には、初期インターバルを、治療期間内において、例えば、４、６、８、１２時間まで延長してもよい。
治療的に適切な場合には、静脈内ボーラス注射は、約２〜５分以内に投与すべきである。
【００１０】
因子ＶＩＩａの断続的注入について適切な投与計画は、２〜６時間ごとに、体重１ｋｇあたり、約４５００〜６０００ＩＵであるかもしれない。
因子ＶＩＩａの連続的注入について適切な投与量は、約１０〜３０μｇ／ｋｇ／ｈのｒＦＶＩＩａに相当する、約５００〜１５００ＩＵ／ｋｇ／ｈであるかもしれない。適切な場合には、体重１ｋｇあたり、約４５００〜６０００ＩＵの単一ボーラス注入投与量が、因子ＶＩＩａの連続的注入に先行するかもしれない。組換え型因子ＶＩＩａの連続的注入についての先の研究の結果（文献１７及び１８）は、因子ＶＩＩａの連続的注入による治療が、ボーラス注射と比較して、低い全薬剤投与量で効果的であろうことを示す。
今日まで、因子ＶＩＩａの既知の適用における副作用の頻度が低く、また、血栓形成性又は消費性凝固障害を示す生化学的徴候が存在しなかったため、血栓溶解性治療に関連する主要出血を、受容者に対する明らかな害がないアクチベータＶＩＩａにより効率的に後退させることが期待される。
【００１１】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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