(57)【要約】本発明は、抗酸化活性を有する医薬用あるいは食餌用組成物であって、該組成物は活性成分として約６：１〜３：１のモル比範囲でカテキンとケルセチンとを含み、組み合わせることによって協働的効果を生むことを特徴とする、組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗酸化活性を有する医薬用あるいは食餌用組成物であって、該組成物は活性成分として約６：１〜３：１のモル比範囲でそれぞれカテキンとケルセチンとを組み合わせて含むことを特徴とする、組成物。
【請求項２】
該カテキンとケルセチンとの比が約５：１であることを特徴とする、請求項１の組成物。
【請求項３】
前記組成物が心臓及び循環器疾患を治療あるいは予防する際に血小板凝固の予防剤として使用する旨の指摘がなされていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物が、特に高齢者の痴呆の予防と治療の際に脳機能を改善する旨の指摘がなされていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物が、セリュライトを治療および予防する際に使用する旨の指摘がなされていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物が、肌の老化及びシワを治療及び予防する際に使用する旨指摘されていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物が、脱毛を治療及び予防する際に使用する旨指摘されていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が、紫外線で生じた肌の損傷を治療及び予防する際に使用する旨指摘されていることを特徴とする、請求項１記載の組成物。
【請求項９】
前記活性成分が、ヴィティス・ヴィニヘラの種子や葉等の部分からの抽出物由来のものである、請求項１記載の組成物。
【請求項１０】
前記抽出物において、抽出物１００ｇ当たり約７．５ｇのカテキンと１．５ｇのケルセチンとであることを特徴とする、請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
抗酸化活性を有する医薬用あるいは食餌用組成物を製造するにあたって、活性成分として６：１〜３：１のモル比範囲でそれぞれカテキンとケルセチンとを組み合わせてそれぞれ使用する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、医薬用あるいは食餌用のカテキンおよびケルセチンの組合わせに関する。
【０００２】
【従来の技術】
赤ワインを節度をもって摂取れば、心臓血管の疾患が減少することに関連性があることが知られている（Ｍｏｒｅ、Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　１９８６：６５：２４５−６７；Ｇｒａｚｉａｎｏ、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１９９３：３２９：１８２９−３４）。フラボノイド等の赤ワインの成分は血小板の機能を阻止する能力があるため、心臓血管系に付与される上記有益な効果に関与すると考えられてきた。実際、動物の生体内で実験的な研究を行なうことによって、赤ワイン及びグレープジュースは共に、犬の冠状動脈において狭窄により血小板が活性化するのを低減することが立証された。ケルセチンも含め、赤ワインから分離されたフラボノイドに関しても同様の効果が観察され、このことは、赤ワインのこれらの成分が血小板により流れが減少するのを阻止するのに関与していることを示す（Ｓｌａｎｅ，Ｃｌｉｎ．Ｒｅｓ．１９９４；４２；１６９Ａ（アブストラクト）。試験管内の研究によって、レスバーラトロール（ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ）、ケルセチンおよびカテキン等のフラボノイドは血小板の凝集を阻止することが立証されたが、このような阻止効果を得るのに用られる濃度が非常に高いという事実が、これらの研究の制限の一つとなる可能性がある。したがって、赤ワインのこれらの成分によって生体内で生ずる抗血小板活性を疑問視する著者もいる（Ｊａｎｓｓｅｎ，Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．１９９８；６７；２５５−６２）。血小板の機能についてのフラボノイドの影響を調査する場合、今までのところは個々に検討された各成分に焦点が当てられており、複数のフラボノイドが組み合わさって血小板の活性化を阻止することができるかどうかという研究は全くなかったことに留意すべきである。赤ワインを飲むと、２種類以上のフラボノイドが人体中を循環するが、依然に研究された濃度よりも低い濃度のフラボノイドにより血小板の活性を調節できるかもしれないという点で、このような相互作用が関連性を有する可能性があるかも知れない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
フラボノイドの抗血小板効果に関する別の問題として、フラボノイドの作用メカニズムがある。大部分の研究の結果は、フラボノイドはアラキドン酸の代謝と相互関係があり、それによってトロンボキサンＡ２の産出を阻止するということと符合しているが、この作用の基礎となるメカニズムは全く研究されてこなかった。フラボノイドは、フェノール化合物であり、該フェノール化合物の抗酸化効果は金属のキレート化とではなくラジカルによる脱酸と関係している。血小板機能とアラキドン酸の代謝の両方を阻止するかどうかは抗酸化活性に依存するが、その場で形成される複数の酸化性の種の影響と対比することによって、複数のフラボノイドが血小板の活性化と相互作用をするかどうかを発見する検討を予見させるような研究はなかった。したがって、本発明は複数のフラボノイド即ち選択的にそれらの幾つかのものが協動的に作用して血小板の機能を阻止しかつ抗酸化効果を基とした血小板の機能と相互作用をすることができるかどうかを研究したことに基づくものである。
【０００４】
この研究の結果、本発明は、抗酸化活性を有する医薬用あるいは食餌用組成物であって、該組成物は活性成分として約６：１〜３：１のモル比範囲でそれぞれカテキンとケルセチンとを含むことを特徴とする、組成物を提案するものである。
【０００５】
本発明によれば、実際驚くことに、これら２種類のフラボノイドを上記濃度比率で組み合わせると、協動的にそれらの抗酸化活性が発揮できることが見いだされた。
本発明の特徴及び利点をさらによく理解するために、本発明に至った研究をここに記載する。
【０００６】
主題及び方法
（材料）
３２Ｐと［３Ｈ］オレフィン酸をＡｍｅｒｓｈａｍ（Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ　Ｈｅｉｇｈｔｓ，ＩＬ）から得た。Ｆｕｒａ２／ＡＭおよび２’、７’−ジクロロフルオロレセイン　ジアセテート（ＤＣＦＨ−ＤＡ）をＭｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｐｒｏｂｅｓ（Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）から得、セファローゼ（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ）２ＢをＰｈａｒｍａｃｉａ（Ｕｐｐｓａｌａ，スェーデン）から得た。テトラペプチドＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ（ＲＤＧＳ）をＢａｃｈｅｍ　Ｆｅｉｎｃｈｅｍｉｋａｌｉｅｎ　ＡＧ（Ｂｕｄｅｎｄｏｒｆ，スイス）から得た。タイプ１のコラーゲンをＭａｓｃｉａ　Ｂｒｕｎｅｌｌｉ（Ｍｉｌａｎ，イタリー）から得た。ＨＰＬＣカラム（Ｐａｒｔｉｓｉｌ　１０　ＳＡＸ）をＷｈａｔｍａｎ（Ｃｌｉｆｔｏｎ，ＮＪ）から得た。牛血清アルブミン、ＨＥＰＥＳ，アセチルサルチル酸、カテキン、ケルセチン、フィブリノゲン、無機ピロホスファターゼ、ジギトニン、ホルムアルデヒド、インドメタシン、ホスホクレアチンおよびクレアチンキナーゼは、Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（セントルイス）から得た。
【０００７】
（血小板の調整）
健康な志願者から得た薬物を含まない人の血液を酸：クエン酸塩：デキストロースによって凝集させた。血小板リッチな血漿を室温にて８００ｘｇで２０分間遠心分離させ、ペレットを血小板レベルが低い自己血漿の当初の量の半量に等しい体積に懸濁させた。血小板の懸濁液をＦｕｒａ　２／ＡＭ／Ｌを３μｍｏｌと、ＤＣＦＨ−ＤＡ／Ｌを４０μｍｏｌ、７．４ＧＢｑ３２（２Ｃｉ）Ｐ／Ｌあるいは３．７ＭＢｑ（１ｍＣｉ）［３Ｈ］オレイン酸／Ｌによって３７℃で１時間培養した。血小板を０．２％の牛血清アルブミン、５ｍｍｏｌグルコース／Ｌおよび１０ｍｍｏｌＨＥＰＥＳ／Ｌを含むＣａ＋２を含まないタイローデス（Ｔｙｒｏｄｅｓ）緩衝液（１３４ｍｍｏｌＮａＣｌ／Ｌ，２．９ｍｍｏｌＫＣｌ／Ｌ，０．３４ｍｍｏｌＮａ２ＨＰＯ４／Ｌおよび２ｍｍｏｌＭｇＣｌ２／Ｌ）、ｐＨ７．３５を用いて、セファローゼ（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ）２Ｂでエクスクルージョン（ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ）クロマトグラフィーによって血小板を洗浄した。エクスクルージョンクロマトグラフィーを行なった血小板（ＰＳＥＣ）を最終濃度２ｘ１０１１細胞／Ｌに調整した。濃度が０．５％未満においてＰＳＥＣの懸濁液にメタノールを添加してもＰＳＥＣのコラーゲンに対する変化は生じなかったので、この比率を５〜２０μｍｏｌ／Ｌの間で変化するケルセチンの最終濃度を得るために採用した。３７℃で３０分間連続的に攪拌しながら、カテキンとケルセチンをＰＳＥＣの射懸濁液に添加し、８００ｘｇで２０分間室温で遠心分離により分離した。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
（血球計算を行なうことによる血小板の流れおよび凝集の分析）
ＤＣＦＨ−ＤＡをＰＳＥＣに加えた（最終濃度：４０μｍｏｌ／Ｌ）；カテキンあるいはケルセチンと共にあるいはカテキンあるいはケルセチンを伴わずに１５分間培養した後、コラーゲンによってＰＳＥＣを活性化した。一分後に２ｍｍｏｌＥＧＴＡ／Ｌで反応を停止させた。アルゴンレーザ（発光４８０ｎｍ）を備えたクールターＸＬ−ＭＣＬフロー血球計算機（Ｈｉａｌｅａｈ，ＦＬ）で試料を分析した。該レーザーは直接光の拡散を対数的に測定するよう設定されている。このものは、粒子の寸法の測定値であって、９０°での光の対数的拡散は、細胞の粒度の測定値であり、緑色蛍光（ＤＣＦ）は５１０〜５５０ｎｍである。プローブによって発生する蛍光シグナルは、刺激指数、即ち、（刺激を与えた血小板の平均チャネル蛍光強度／刺激を与えた血小板の平均チャネル蛍光の強度）として表される。試験管内の血小板の凝集は、ボム（Ｂｏｍ）にしたがって評価した。コラーゲンは２〜４ｍｇ／Ｌの濃度で使用した。
【０００９】
（細胞質ゾル血小板Ｃａ２＋の濃度）
Ｇｒｙｎｋｉｅｗｉｃｓ　ｅｔ．ａｌ．にしたがって、蛍光指示染料フラ（Ｆｕｒａ）２を用いて、細胞質ゾル血小板Ｃａ２＋の濃度を測定した。その時、蛍光測定器ＳＦＭ２５（Ｋｏｎｔｒｏｎ，チューリッヒ、スイス）を用いて蛍光の変化をモニターした。ＳＦＭ２５は、発光波長５１０ｎｍで励起波長が３４０ｎｍに設定した。
【００１０】
（フォスフォリーパーゼＣの活性化−コラーゲンに対する血小板の粘着）
Ｐｕｌｃｉｎｅｌｌｉ　ｅｔ．ａｌ．法により血小板に刺激を与えた後３０秒後にフォスホリパーゼＣの活性化の指示薬である１，３，４−イノシトールトリホスフェート（ＩＰ３）が生成されているかどうかを分析した。再現性のある応答を誘起しえる最小の濃度である１０ｍｇ／Ｌの濃度でコラーゲンを使用した。［３Ｈ］オレイン酸で同定した血小板の懸濁液を用いて、ＳｍｉｔｈとＤａｎｇｅｌｍａｉｅｒとの方法によってコラーゲン（５０ｍｇ／Ｌ）に対する血小板の粘着を評価した。
【００１１】
（統計的分析）
データを平均値±ＳＥＭとして与えてある。スチューデントｔテストとボンフェローニテストを用いて、異なった試験条件での応答を比較して、グループ間の特異的な差異を評価した。有意性レベルをＰ＜０．０５としてた。ＳＴＡＴＶＩＥＷ（Ａｂａｃｕｓ　Ｃｏｎｃｅｐｔｓ社、バークレー、カナダ）を用いて分析を行なった。
添付する図面の図１乃至図５に特に言及して、研究の結果を以下に論議する。図１乃至図５は、以下の図表を示す。
【００１２】
（図１）
コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、および本発明によるカテキン（Ｃａｔ）＋ケルセチン（Ｑ）を５：１の比、即ちＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて１０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは２０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線でのジクロロフルオロセイン　ジアセテートを加えた血小板における過酸化水素の平均発生率（±ＳＥＭ）。結果は、細胞蛍光測定法（ｃｙｔｏｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｙ）によって決定した。ｎ＝５回テスト。ＳＩは、刺激指数（ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎｄｅｘ）。＊＃コラーゲンのみに対して大きく異なる。＊Ｐ＜０．０５、＃Ｐ＜０．０１。
【００１３】
（図２）
コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはカテキン（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて２ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは４ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線における平均血小板凝集（±ＳＥＭ）。ｎ＝５回テスト。＊＃コラーゲンのみに対して大きく異なる。＊Ｐ＜０．０５、＃Ｐ＜０．０１。
【００１４】
（図３）
コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて２ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは４ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線において血小板内カルシウムの濃度におけるパーセント変化（Δ）の平均値（±ＳＥＭ）。ｎ＝５回テスト。＊＃コラーゲンのみに対して大きく異なる。＊Ｐ＜０．０５、＃Ｐ＜０．０１。
【００１５】
（図４）
コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて１０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは２０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線において血小板における１，３，４−イノシトールトリフォスヘート（ＩＰ３）の形成でのパーセント変化（Δ）の平均値（±ＳＥＭ）。ｎ＝５回テスト。＊＃コラーゲンのみに対して大きく異なる。＊Ｐ＜０．０５、＃Ｐ＜０．０１。
【００１６】
（図５）
コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキン（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチン（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）と組み合わせて２ｍｇのコラーゲン／Ｌおよび５０ｍｇのコラーゲン／Ｌで刺激を与えた後、参照線において血小板のコラーゲンへの付着のパーセント変化の平均値（±ＳＥＭ）。ｎ＝５回テスト。ＳＩは、刺激指数（ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎｄｅｘ）。＃コラーゲンのみに対して大きく異なる。Ｐ＜０．０１。
【００１７】
（結果：フロー血球計算による分析）
フロー血球計算はＤＣＦＨ−ＤＡの性質を用いるものであり、ＤＣＦＨ−ＤＡは細胞膜を通って迅速に拡散し、脱アセチル化反応を通じて細胞内部にトラップされる。過酸化水素の存在下に、この化合物は酸化されてジクロロフルオレセイン（ＤＣＦ）となるが、ＤＣＦは非常に蛍光性がある。１０および２０ｍｇのコラーゲン／Ｌによって誘起される過酸化水素の生成に対してケルセチンおよびカテキンを段階的に濃度を変えることによる影響を図１に示す。未処理血小板に比較して、コラーゲンで刺激を与えた血小板は過酸化水素の生成を増大したが、これは使用したコラーゲンの濃度に依存していた。カテキンおよびケルセチンは血小板の側でコラーゲンによって過酸化水素が発生するのを阻止した。５μｍｏｌのケルセチン／Ｌと２５μｍｏｌのカテキン／Ｌとを組み合わせることによって、コラーゲン１０と２０ｍｇによって過酸化水素が生成されるのを顕著に減少させた。２つの化合物のみをこのような少量で加えた場合には何ら阻止効果はなかったことを報告する。
【００１８】
（血小板の凝集）
コラーゲンを２つの異なる濃度で用いて、血小板凝縮におけるカテキンとケル・。セチンの影響を測定した。カテキンおよびケルセチンは共に、コラーゲンで生ずる血小板の凝集を阻止した。阻止度は、使用したコラーゲンの濃度に依存する。したがって、１００μｍｏｌのカテキン／Ｌは２ｍｇのコラーゲン／Ｌによって誘起された血小板の凝集の約７５％を阻止し、４ｍｇのコラーゲン／Ｌによって誘起された血小板の凝集の約７５％を阻止した。２０μｍｏｌのケルセチン／Ｌで処理した血小板では、コラーゲン（２と４ｍｇ／Ｌ）によって誘起された血小板の凝集を阻止する度合いは、それぞれ５０％と４３％であった。２５μｍｏｌのカテキン／Ｌと５μｍｏｌのケルセチンはそれ自体で用いた場合には血小板凝縮に対して影響を与えないが、これらを組み合わせることによって、コラーゲンの両濃度によって誘起された血小板の凝集を優位性をもって（５５％）阻止した（図２）。
【実施の態様】
【００１９】
（細胞内カルシウム濃度の変化）
細胞内カルシウムの濃度の％変化として表すと、カテキンとケルセチンとはカルシウムの稼動化を阻止した。コラーゲン４ｍｇで刺激を与えた血小板では、１００μｍｏｌのカテキン／Ｌと２０μｍｏｌのケルセチン／Ｌとによってカルシウムの稼動化がそれぞれ７１％と６５％とに顕著に減少した。
【００２０】本発明により２５μｍｏｌのカテキン／Ｌと５μｍｏｌのケルセチン／Ｌによって血小板を培養することによって、カルシウムの稼動化を７１％の顕著な阻止を示した。８ｍｇのコラーゲン／Ｌによってカルシウムを稼動化させた場合に、同様の結果が見られた（図３）。
【００２１】
（ホソホリパーゼＣの活性化）
コラーゲンによって刺激を与えた血小板において［３２Ｐ］ＩＰ３が生成されるのをカテキンとケルセチンとによって阻止した。その際、１０ｍｇコラーゲン／Ｌ、１００μｍｏｌカテキン／Ｌおよび２０μｍｏｌケルセチン／ＬによってそれぞれＩＰ３の生成を５０％と９３％とに顕著に減少させた。本発明に従って、２５μｍｏｌカテキン／Ｌと５μｍｏｌケルセチン／Ｌによって血小板を培養することによって、ＩＰ３の生成を７２％に顕著に阻止した。類似の結果が、血小板を２０ｍｇコラーゲン／Ｌで刺激した場合に見られたが（図４）、阻止度は依然顕著であったが、より低いものであった。
【００２２】
（コラーゲンに対する血小板の粘着）
コラーゲンによる血小板の活性化は、複数段階の工程である。従って、第２のメッセンジャーの経路を通って最初にコラーゲンが血小板に粘着した後、コラーゲンはトロンボキサンおよびＡＤＰの放出するよう刺激するが、トロンボキサンおよびＡＤＰは凝集を誘起する重要な血小板のアゴニストである。コラーゲンによって刺激された場合に血小板粒子により放出される既知の全てのアゴニストによって誘起される凝集と活性化が相互作用をせずに、血小板がコラーゲン（５０ｍｇ／ｌ）に対して粘着するかどうかを研究するために、アスピリン、シクロオキシゲナーゼ、ＡＤＰ除去系ホスフォクレアチンとクレアチンキナーゼ、およびフィブリノゲンフィブロネクチン（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ）アンタゴニストＲＤＧＳ（１３）によって、血小板を予備培養させた。
【００２３】
カテキン（５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチン（１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）と本発明によるカテキン（２５μｍｏｌ／Ｌ）プラスケルセチン（５μｍｏｌ／Ｌ）との存在下における５０μｍｏｌコラーゲン／Ｌに対する血小板の粘着状態を図５に示す。カテキンあるいはケルセチンそれら自体でコラーゲンに対する血小板の粘着を阻止したが、この粘着は１００μｍｏｌカテキン／Ｌと２０μｍｏｌケルセチン／Ｌとによって顕著に抑制された。２５μｍｏｌカテキン／Ｌプラス５μｍｏｌケルセチン／Ｌにより血小板を培養することによって血小板の粘着を８５％顕著に阻止した。
【００２４】
以下の一般的な結論は、上記研究から引き出すことができる。
【００２５】
既に述べたように、先行技術では、種々の実験的な研究において、赤ワインの摂取と血小板の機能との間の関係については、観察されてきている。実際、体重１ｋｇ当たり４．０ｍｌの赤ワインを胃内部に投与した場合に、冠動脈狭窄の犬モデルにおいて完全に血小板の活性化を抑制した。赤ワインを投与後に末梢血管中のフラボノイドの濃度を測定はしていないが、同じ実験モデルについての他の研究から、フラボノイドが血小板の活性化を阻止したことが示され、従って、フラボノイドは血小板の機能を阻止することに関与することが示唆される。本発明の研究によれば、５μｍｏｌのケルセチン／Ｌと２０μｍｏｌのカテキン／Ｌは独立的にはこれらの濃度で血小板の機能に影響を及ぼさないが、これらのもので血小板を培養する場合には、血小板の活性化を顕著に阻止することに関与してくる。カルシウムの稼動化とＩＰ３が生成されているかどうかを同定するために高濃度のコラーゲン（８−２０ｍｇ／Ｌ）の下に刺激を与えたが、ケルセチンおよびカテキンを組み合わせることによって全ての場合に血小板の作用を阻止した。
【００２６】
カテキンとケルセチンを組み合わせることによって血小板の粘着により深い影響を与えるが、本発明によって血小板を処理することによって血小板の粘着を略完全に抑えられる。動脈硬化の工程の開始あるいは進行過程で血小板がコラーゲンに粘着することが生物学上重大なことであることに鑑みて、本発明は心臓血管不全（動脈硬化、血栓症、梗塞等）の治療あるいは予防、脳機能の改善および高齢者における痴呆の治療において特に有益であることが期待される。
【００２７】
活性原則の抗酸化およびフリーラジカルは除去作用に基本的に基づく他の有益な適用は、セリュライト、皮膚の衰えおよびシワ、脱毛の治療あるいは予防、紫外線および環境汚染物質の活性への対処の処理および予防である。
【００２８】
全体的結論としては、本発明は、フラボノイドであるケルセチンおよびカテキンは濃度により協動的に作用し、コラーゲンに対する血小板の付着およびコラーゲンによる血小板の凝集を阻止することが示され、過酸化水素が細胞内で生成するのに拮抗することが立証するものである。
【００２９】
本発明の医薬あるいは食餌組成物の実際の適用例を以下に挙げるが、これらものに本発明は限定されるものではない。
【００３０】
同様に限定的ではないが、これらの例はモル比が約５：１のカテキンとケルセチンとの組み合わせからなる活性成分に関する。
とくに、これらの２つのフラボノイドの組み合わせは、実施例では「複合物」と呼ものであり、例えばＶｉｔｉｓ　ヴィニフェラの種子および葉等の部分の抽出物であって抽出物１００ｇ当たり約７．５ｇのカテキンと１．５ｇのケルセチンとを含む。これらの組成物は、活性成分の生体利用効率を最適化するために胃全体に対して摂取することが好ましい。
【００３１】
（実施例１）
蜂巣炎（ｃｅｌｌｕｌｉｔｅ）の予防および治療用食餌製品ソフトゼラチンカプセル
組成
各ソフトゼラチンカプセル（パール）の含有物：
2004512304.tif 000002
【００３２】
（実施例２）
セリュライト（ｃｅｌｌｕｌｉｔｅ）の予防および治療用食餌製品水に溶解する薬包（Ｓａｃｈｅｔｓ）
組成
各薬包（Ｓａｃｈｅｔ）の含有物：
2004512304.tif 000003
【００３３】
（実施例３）
毛髪増強および脱毛低減用製品ソフトゼラチンカプセル
組成
各ソフトゼラチンカプセル（パール）の含有物：
2004512304.tif 000004
【００３４】
（実施例４）
心臓血管疾患防止用製品ソフトゼラチンカプセル
組成
各ソフトゼラチンカプセル（パール）の含有物：
2004512304.tif 000005
【００３５】
（実施例５）
皮膚老化およびシワ防止用食餌製品ソフトゼラチンカプセル
組成
各ソフトゼラチンカプセル（パール）の含有物：
2004512304.tif 000006
【００３６】
（実施例６）
脳機能改良および高齢者の痴呆予防用食餌製品ソフトゼラチンカプセル
組成
各ソフトゼラチンカプセル（パール）の含有物：
2004512304.tif 000007
【００３７】
本発明の他の好適な医薬あるいは食餌形状は、広い範囲から選択することができ、錠剤、顆粒剤、粉剤あるいは他の形式等の全ての好適な経口形状を含む。
【図面の簡単な説明】
【図１】コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、および本発明によるカテキン（Ｃａｔ）＋ケルセチン（Ｑ）を５：１の比、即ちＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて１０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは２０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線でのジクロロフルオロセイン　ジアセテートを加えた血小板における過酸化水素の平均発生率（±ＳＥＭ）。
【図２】コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはカテキン（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて２ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは４ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線における平均血小板凝集（±ＳＥＭ）。
【図３】コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて２ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは４ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線において血小板内カルシウムの濃度におけるパーセント変化（Δ）の平均値（±ＳＥＭ）。
【図４】コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキンのみ（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチンのみ（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）とを組み合わせて１０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ａ）あるいは２０ｍｇのコラーゲン／Ｌ（Ｂ）で刺激を与えた後、参照線において血小板における１，３，４−イノシトールトリフォスヘート（ＩＰ３）の形成でのパーセント変化（Δ）の平均値（±ＳＥＭ）。
【図５】コラーゲンのみで刺激を与えた後、およびカテキン（カテキン：５０と１００μｍｏｌ／Ｌ）、ケルセチン（ケルセチン：１０と２０μｍｏｌ／Ｌ）、あるいはＣａｔ（２５μｍｏｌ／Ｌ）＋Ｑ（５μｍｏｌ／Ｌ）と組み合わせて２ｍｇのコラーゲン／Ｌおよび５０ｍｇのコラーゲン／Ｌで刺激を与えた後、参照線において血小板のコラーゲンへの付着のパーセント変化の平均値（±ＳＥＭ）。
【図１】
2004512304.tif 000008
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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