(57)【要約】医用器具の表面上のタンパク付着物の形成を予防または低減するためのＮＩＰＡＭポリマーの使用が記載されている。特に、本発明はコンタクトレンズおよびその他医用人工装具の表面上のタンパク質吸着の低減に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
医用器具の表面上のタンパク質吸着を低減させるための、ＮＩＰＡＭポリマーの使用。
【請求項２】
コンタクトレンズの表面上のタンパク質吸着を低減させるための、ＮＩＰＡＭポリマーの使用。
【請求項３】
医用器具の表面上のタンパク付着物の形成を低減させるための、有効量のＮＩＰＡＭポリマーを含む組成物。
【請求項４】
コンタクトレンズの処理に適合した、請求項３の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は表面へのタンパク質付着を低減させることに関する。本発明は医用器具（ｍｅｄｉｃａｌ  ｄｅｖｉｃｅ）特に生物医用および人工装具（ｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ）の器具の表面にタンパク質が付着するのを抑制するための組成物および方法を提供する。本発明は、モノマーｎ−イソプロピルアクリルアミド（「ＮＩＰＡＭ」）を含む特定ポリマーおよび関連コポリマーはコンタクトレンズの表面へのタンパク質付着を有意に抑制するということの発見に基づいている。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質は殆ど全ての表面に吸着し、そしてタンパク質吸着の最小化または解消は多数の研究、たとえば、Ｌｅｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｒｅｓ．，ｖｏｌ．２３，ｐａｇｅｓ  ３５１−３６８（１９８９）の中に報告されているもの、の主題であった。センサー、クロマトグラフの支持体、免疫検定、分離用膜、生物医用インプラント、人工装具器具（たとえば、コンタクトレンズ）および多数のその他の器具または対象物はタンパク質吸着によって悪影響を受けることがある。従って、タンパク質付着を防止または低減するようにかかる対象物の表面を処理（ｔｒｅａｔ）するための方法および／または手段は実に有益であろう。
【０００３】
表面を改質させるためのそしてガラスおよびシリコン基体上へのタンパク質付着を防除するためのＮＩＰＡＭ含有ポリマーの使用は従来記述されている。下記刊行物はかかる改質に関する更なる予備知識を提供する：
１．Ｋｉｄｏｋｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｇｍｕｉｒ，１７，ｐｐ．２４０２−２４０７（２００１）；
２．Ｂｏｈａｎｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｅｄｎ．，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．１，ｐｐ．１９−３９（１９９６）；
３．国際（ＰＣＴ）特許公開ＷＯ０２／３０５７１Ａ２号公報（スードル（Ｓｕｄｏｒ））；
４．米国特許第６，４４７，８９７号明細書（リアング（Ｌｉａｎｇ）他）；
５．米国特許第６，２７０，９０３号明細書（ファング（Ｆｅｎｇ）他）；および
６．Ｈｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．３０１，ｐｐ．３５２−３５４  Ｊｕｌｙ  １８，２００３．
【０００４】
上記刊行物は、ＮＩＰＡＭ含有ポリマーはコンタクトレンズのような医用器具の表面を改質するのにそしてかかる表面上のタンパク質の付着と解放をコントロールするのに使用できるであろうということを開示または示唆していない。
【０００５】
コンタクトレンズに関する用語「ソフト」および「ハード」は一般的に、レンズのそれぞれのタイプの相対硬度ばかりでなくレンズを形成する高分子材料にも関連している。用語「ソフト」は一般に、ヒドロキシエチルメタクリレートすなわち「ＨＥＭＡ」のような親水性高分子材料から形成されているコンタクトレンズを称するが、用語「ハード」は一般に、ポリメチルメタクリレートすなわち「ＰＭＭＡ」のような疎水性高分子材料から形成されているレンズを称する。ハードレンズとソフトレンズの表面化学および多孔度は全く異なっている。ソフトレンズは典型的に大量の水分を含有し、実に多孔質であり、そしてレンズの露出した表面上にイオン性電荷を担持しているが、ハードレンズはあまり多孔性でなく、そして一般にイオン性表面電荷を担持していない。
【０００６】
ソフトコンタクトレンズのイオン性表面および多孔質特性は、レンズが涙膜と接触しているときには、涙膜が主としてタンパク質、脂質、酵素および様々な電解質から構成されている故に、かなりの問題に至ることがある。涙成分はアルブミン、ラクトフェリン、リゾチーム、および多数の免疫グロブリンを包含する。涙液からレンズ上へのタンパク質の吸収は共通の問題であり、そしてレンズを形成している材料の特性を含めて多数の要因に依存する。
【０００７】
ソフトコンタクトレンズはタンパク質の付着および吸着にとっての効率的な基質として働く。このような汚れはレンズの脱水および涙膜の不安定性につながることがあり、結果として装用者に不快および許容できない感じを生じさせる。タンパク質の吸着は細菌のコロニー化を促進することもあり、そしてこれは視力を脅かす感染症の危険性を増大させることがある。
【０００８】
上に論じた通り、コンタクトレンズのありうる汚れとかかる汚れによって生じる問題を考慮して、コンタクトレンズ洗浄は患者のレンズケアレジメの標準の部分でなければならないということが一般に受け入れられている。多数の様々なタイプの洗浄剤（ｃｌｅａｎｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）がこの目的のために従来利用されてきた。界面活性剤や酵素のような洗浄剤はタンパク付着物を除去するためにコンタクトレンズケア（ｃｏｎｔａｃｔ  ｌｅｎｓ  ｃａｒｅ）製品の中に典型的に組み込まれている。しかしながら、これら薬剤の使用は刺激につながることがあり、そして擦り洗いおよび洗浄のレジメが要求される場合には、洗浄剤が適切に使用されなかったり又はレンズを損傷する仕方で使用されたりする恐れがある。上記問題にかんがみて、コンタクトレンズの表面が、表面へのタンパク質の吸着を防止または低減するように、改質されることができるならば有益であろう。
【０００９】
コンタクトレンズ上のタンパク付着物の形成を減少させるために様々な試みがなされた。かかる試みに関する更なる予備知識には下記特許が参照されてもよい：
【００１０】
米国特許第４，４１１，９３２号明細書は、コンタクトレンズ上に汚れが付着しないようにする予防剤（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）として、ポリ（エチレングリコール）やポリエチレンオキシドやポリエチレングリコールメチルエーテルを含めてポリマー性アルコールおよびポリマー性エーテルを使用することを開示している；
【００１１】
米国特許第６，２７４，１３３号明細書（フ（Ｈｕ）他）は、シリコーン−ヒドロゲル製レンズ上に脂質およびタンパク質が蓄積するのを防止するための陽イオン性セルロースポリマーの使用を開示している；
【００１２】
米国特許第６，３２３，１６５号明細書（ハイラー（Ｈｅｉｌｅｒ）他）は、親水性コンタクトレンズにタンパク質が蓄積するのを防止するための帯電したポリクォーターニウム（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ）ポリマーの使用を開示している；
【００１３】
米国特許第６，０９６，１３８号明細書（ハイラー他）は、レンズにタンパク性物質が結合するのを阻止するように、親水性コンタクトレンズ素材に結合できるビニルピロリドンとビニルイミダゾリウム成分の混合物であるルビクァット（Ｌｕｖｉｑｕａｔ）（登録商標）（ＢＡＳＦ）のようなポリクォーターニウムポリマーの使用を記載している。
【００１４】
タンパク質が結合するのを低下させるためのこれら従来の試みは欠点を有している。たとえば、陽イオン性ポリマーは高温で利用されたときには眼に接触すると刺激物として作用するかも知れない。加えて、これら巨大分子の正電荷特性のせいで、ＣＬＣ製品の中の陰イオン性界面活性剤との又はその他成分との複合体形成は処方物の凝集および相分離に至るかも知れず、それは重大な問題である。従って、タンパク抵抗表面を提供するための新規アプローチが必要とされている。
【００１５】
レンズを長時間装用する傾向になってきたので、患者の安全性を危うくすることなく、長時間にわたってタンパク性物質の吸着を阻止するコンタクトレンズ表面をコンタクトレンズ装用者に提供できることは有用であろう。ポリマーはまた、保存、消毒および／または洗浄の際のコンタクトレンズケア液の中に混和性であるべきことが患者によって要望されている。本発明はこれらの要求を満足させることに関している。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
（発明の概要）
本発明は、表面活性であり且つ水溶液中で温度応答性を示すポリマーの使用に関している。該ポリマーおよび関連ポリマー（たとえば、コポリマー）はＮ−イソプロピルアクリルアミド（「ＮＩＰＡＭ」）モノマーから形成される。
【００１７】
本発明は、ＮＩＰＡＭポリマーおよび関連ポリマーはヒドロゲルコンタクトレンズの表面上へのタンパク質付着を抑制するのに利用できるかもしれない、という発見に基づいている。ＮＩＰＡＭポリマーは独特の溶液特性を付与し、そしてこれらの性質はタンパク抵抗性ヒドロゲル表面を要望されている処方物の中で発揮できるということが発見された。
【００１８】
先に論じた通り、コンタクトレンズ表面へのタンパク質の吸着を軽減するための改良されたアプローチが必要とされている。本発明はここに記載されたＮＩＰＡＭポリマーがこの目的に特有に適しているという発見に基づいている。
【００１９】
コンタクトレンズ表面およびその他医用器具の表面の改質を達成するためには、ここに記載されたＮＩＰＡＭポリマーが様々な仕方で使用されてもよい。たとえば、コンタクトレンズを装用に先立ってＮＩＰＡＭポリマー含有溶液の中に保管することができる。この予防的アプローチは消費者がレンズをタンパク質含有涙液に曝す前にもポリマーがレンズの表面に保護層を形成することを可能にさせる。ＮＩＰＡＭポリマーはコンタクトレンズを毎日処理するためのマルチパーパースソリューション（多目的溶液、ｍｕｌｔｉ−ｐｕｒｐｏｓｅ  ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）の中に組み込まれてよい。表面に化学的グラフト化（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｇｒａｆｔｉｎｇ）してＮＩＰＡＭポリマーの永久被覆を形成することはタンパク抵抗表面を付与するためのもう一つのアプローチである。
【００２０】
コンタクトレンズに加えて、ここに記載の表面改質技法はタンパク抵抗表面が望まれる様々な医用器具、たとえば、眼球内レンズ、カテーテル、心臓ステント、人工装具、および人間またはその他哺乳動物の身体の中または上での使用中にタンパク質に長時間曝されるその他の医用器具、に適用されてもよい。
【００２１】
理論によって拘束されることを望むものではないが、ここに記載のＮＩＰＡＭポリマーはこれらポリマーが優れたタンパク質阻害特性を示すことを可能にさせる固有の物理的性質の範囲（たとえば、低い界面自由エネルギー、親水疎水特性（ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ−ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  ｐｒｏｐｔｅｒｔｉｅｓ）、非常に低い毒性、動的表面移動度（ｄｙｎａｍｉｃ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｍｏｂｉｌｉｔｙ）および立体安定化）を有していると考えられる。
【００２２】
（発明の詳細）
本発明に利用されるＮＩＰＡＭポリマーは次の式を有する：
【００２３】
【化１】
2006515685.tif 000002
【００２４】
式中、ｎは１０〜３，０００の全数である。
【００２５】
本発明に利用されるＮＩＰＡＭポリマーは上記モノマーを含む様々なタイプのポリマーが挙げられる。ポリマーはもっぱら上記に同定されたＮＩＰＡＭモノマーから形成されてもよいし、又はＮＩＰＡＭモノマーをその他のモノマー、たとえば、アクリル酸、アクリルアミド、Ｎ−アセチルアシルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミドおよびブチルメタクリレート、と共重合させることによってその他モノマーがポリマーの中に組み込まれることもできる。加えて、末端基の官能化、ブロック共重合体の製造およびポリマーの架橋によって、変性重合体またはＮＩＰＡＭモノマー含有共重合体が製造できる。かかる重合体、共重合体またはそれらの変性はここでは「ＮＩＰＡＭポリマー」または「ＰＮＩＰＡＭ」どちらかとして称されている。本発明に利用されるＮＩＰＡＭポリマーは代表的には、１，０００〜３００，０００ダルトンの分子量を有するであろう。該ポリマーはポリマーソース社（Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｏｕｒｃｅ，Ｉｎｃ．）（ドルバル（Ｄｏｒｖａｌ）、ケベック州（カナダ））から入手可能である。
【００２６】
本発明の組成物の中に利用されるＰＮＩＰＡＭの量は組成物の形態およびその意図する用途に依存して変動するであろう。利用されるＰＮＩＰＡＭの濃度は一般に、室温（２３℃）で５０ミリニュートン／メートル（「ｍＮｍ−１」）未満の溶液表面張力を得るのに十分な量であろう。
【００２７】
上記ＮＩＰＡＭポリマーは表面活性であり、そして従って、殆どのタイプの表面に容易に吸着するであろう。表面のタイプ（疎水性−対−親水性）、温度、緩衝剤および医薬品添加物（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）のような要因はポリマーと表面の間の界面に影響するであろう、そして相互作用の大きさに影響するであろう。
【００２８】
上記ＰＮＩＰＡＭポリマーはコンタクトレンズを処理するための製品の中に普通に利用されているその他成分、たとえば、レオロジー調節剤、酵素、抗菌剤、界面活性剤、キレート化剤またはそれらの組合せ、と組み合わされてもよい。好ましい界面活性剤は陰イオン性界面活性剤たとえばＲＬＭ１００、および非イオン性界面活性剤たとえば「テトロニック（Ｔｅｔｒｏｎｉｃ）（登録商標）」の名で入手可能なポロキサミン（ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅｓ）、および「プルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）」（登録商標）の名で入手可能なポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒｓ）、が挙げられる。さらには、様々な緩衝剤、たとえば、ホウ酸ナトリウム、ホウ酸、クエン酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、燐酸塩緩衝剤およびそれらの組合せ、が添加されてもよい。
【００２９】
ＣＬＣ製品として使用することを意図されている本発明の組成物は、一つまたはそれ以上の眼科的に許容できる抗菌剤を、組成物の微生物汚染を防止するのに有効な量（ここでは、「保存に有効な量」と称される）で、又はレンズ上に存在する生存微生物の数を実質的に減少させることによってコンタクトレンズを消毒するのに有効な量（ここでは、「消毒に有効な量」と称される）で、含有するであろう。
【００３０】
眼科用組成物を微生物汚染から防護するのに又はコンタクトレンズを消毒するのに要求される抗菌活量（ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）のレベルは、個人の経験と、公式刊行標準たとえば米国薬局方（ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）（「ＵＳＰ」）およびその他の国における同様の刊行物との両方に基づいて、当業者には周知である。
【００３１】
本発明は利用されてもよい抗菌剤のタイプに関しては制限されない。使用されてもよい抗菌剤の例は次のものが挙げられる：クロルヘキシジン、ポリヘキサメチレンビグアニド（ｐｏｌｙｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｂｉｇｕａｎｉｄｅ）ポリマー（「ＰＨＭＢ」）、ポリクォーターニウム−１、およびその全内容が本願明細書の中に組み込まれる米国特許出願０９／５８１，９５２号明細書および対応国際（ＰＣＴ）公開ＷＯ９９／３２１５８号公報の中に記載されたアミノビグアニド。
【００３２】
好ましい抗菌剤はポリクォーターニウム−１、および米国特許出願０９／５８１，９５２号明細書および対応国際（ＰＣＴ）公開ＷＯ９９／３２１５８号公報の中に記載されたタイプのアミノビグアニドである。最も好ましいアミノビグアニドは米国特許出願０９／５８１，９５２号明細書の中に「化合物番号１」として同定されている。この化合物は次の構造式を有する：
【００３３】
【化２】
2006515685.tif 000003
【００３４】
それは下記には、コード番号「ＡＬ−８４９６」によって引用されている。
【００３５】
本発明の眼科用組成物は一般に、滅菌水溶液として処方されるであろう。組成物は眼の組織およびコンタクトレンズの素材とは適合性であるように処方されなければならない。組成物は一般に、水１キログラム当り約２００〜約４００ミリオスモル（ｍＯｓｍ／ｋｇ）のオスモル濃度（ｏｓｍｏｌａｌｉｔｙ）と、生理学的に適合性のｐＨを有するであろう。
【００３６】
本発明の組成物と、それら組成物の、コンタクトレンズ上のタンパク質吸着を減少させる能力は、下記実施例によって更に例証される。非変性（すなわち、非イオン性）ＮＩＰＡＭポリマーおよび変性（すなわち、−ＣＯＯＨ基で末端停止された）ＮＩＰＡＭポリマーは、コンタクトレンズを処理するための緩衝マルチパーパスソリューション（ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｍｕｌｔｉ−ｐｕｒｐｏｓｅ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）の成分として利用されたときのこれらポリマーのタンパク質吸着を低減する能力を実証するために、適切に緩衝された溶液に添加された。消費者によって典型的に使用されるコンタクトレンズ消毒／洗浄レジメをまねるために、ＰＮＩＰＡＭ変性表面をつくりだす簡単な手段が使用された。
【実施例１】
【００３７】
ＮＩＰＡＭポリマーの、コンタクトレンズ表面を変性させそれによりタンパク質吸着を減少させる能力を評価するために、以下に記載されている試験が行われた。
素材／方法
評価に利用された素材および方法は次の通りであった：
化学物質
リゾチーム（シグマ、鶏卵白、グレード１、３×結晶質）、無水トリフルオロ酢酸（シグマ、プロテイン・シーケンシング・グレード（ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  ｇｒａｄｅ））アセトニトリル（ＥＭサイエンス、ＨＰＬＣグレード）、燐酸ナトリウム一塩基性一水和物（シグマ、ＡＣＳ試薬グレード）、燐酸ナトリウム二塩基性無水物（シグマ、ＡＣＳ試薬グレード）、塩化ナトリウム（シグマ、超純粋グレード）、ユニソール（Ｕｎｉｓｏｌ）（登録商標）４（アルコン・ラボラトリーズ社（Ａｌｃｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、防腐剤なし、洗浄用にｐＨバランスのとれた生理食塩水の溶液）。
【００３８】
利用されたＮＩＰＡＭポリマーは下記の表１の中に同定されている。これらポリマーはポリマーソース社から購入され、そして更なる精製なしで使用された。
【００３９】
【表１】
2006515685.tif 000004
【００４０】
レンズ
アキュビュー（Ａｃｕｖｕｅ）（ビスタコン（Ｖｉｓｔａｋｏｎ）、ジョンソン・アンド・ジョンソン・ビジョン・プロダクツ社（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｖｉｓｉｏｎ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｉｎｃ）の一部門）レンズはこの試験における基体として使用された。レンズは下記パラメーターを有していた：４２％エタフィルコン（ｅｔａｆｉｌｃｏｎ）Ａ、５８％水、ＦＤＡグループＩＶレンズ。１４．０ｍｍの直径；８．８ｍｍの基本曲線（ｂａｓｅ  ｃｕｒｖｅ）；−２．００の拡大能（ｐｏｗｅｒ）。
【００４１】
処方物
表１の中に同定されているＮＩＰＡＭポリマーおよびＮＩＰＡＭ−ＣＯＯＨポリマーは１．５％ソルビトールと０．６％ホウ酸と０．３２％ＮａＣｌを含有する緩衝ビヒクルの中にｐＨ７．８で処方された。処方物のＮＩＰＡＭポリマー以外の化学物質の全てをビーカーの中に量り取り、そして精製水を添加した（９５％にするＱＳ）。ｐＨはＮａＯＨ／ＨＣｌによって７．８に調整した。ＮＩＰＡＭポリマーを秤量しそして緩衝液に添加し、そしてこれを一晩攪拌してポリマーを可溶化した。これら試験処方物は下記の表２の中に示されている；濃度は重量／体積％（「ｗ／ｖ％」）として表わされている。
【００４２】
【表２】
2006515685.tif 000005
【００４３】
試験処方物はそれらの予防挙動について、以下に記載されている通り、モデルタンパク質としてリゾチームを使用して評価された。
【００４４】
付着用溶液の調製
燐酸塩緩衝生理食塩水（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）（ＰＢＳ）は、１．３１１ｇの一塩基性燐酸ナトリウム（一水和物）、５．７４ｇの二塩基性燐酸ナトリウム（無水）、および９．０ｇの塩化ナトリウムが脱イオン水の中に溶解され、そして体積が脱イオン水によって１０００ｍＬにされ、そしてｐＨが調整された（必要ならば）。燐酸ナトリウムおよび塩化ナトリウムの最終濃度はそれぞれ０．０５Ｍおよび０．９％であった。最終ｐＨは７．４であった。
【００４５】
リゾチーム溶液
７．４にｐＨ調整済みの５００ｍＬの燐酸塩緩衝生理食塩水の中に７５０ｍｇのリゾチウムを溶解することによって、１．５ｍｇ／ｍＬのリゾチウム溶液が製造された。
【００４６】
レンズ抽出用溶液（ＡＣＮ／ＴＦＡ）
レンズ抽出用溶液は、１．０ｍＬのトリフルオロ酢酸を５００ｍＬのアセトニトリルおよび５００ｍＬの脱イオン水と混合することによって製造された。溶液のｐＨは１．５〜２．０の範囲にあった。
【００４７】
レンズの予浸漬（ｐｒｅｓｏａｋ）手順
各レンズを３ｍＬの各試験処方物の中に浸漬し、そして室温に一晩放置した。翌朝、レンズを試験処方物から取り出しそしてタオルの上で軽くはたいた。
【００４８】
レンズに付着物を付着させる手順（生理付着モデル）
予浸漬された各レンズを、３ｍＬのリゾチーム溶液を含有するウィートン（Ｗｈｅａｔｏｎ）ガラス製試料バイアルの中に浸けた。バイアルをプラスチックスナップキャップで密閉し、そして恒温水浴の中で３７℃で２４時間温置した。付着したリゾチームの総量を確立するために対照として３つの追加のレンズが包含された。温置後、付着物の付いたレンズをそれらのバイアルから取り出し、そして過剰の付着用溶液を除去するために２００ｍＬのユニソール（登録商標）４または水を含有する３連続ビーカーの中に浸すことによって洗浄した。
【００４９】
抽出およびリゾチーム抽出の測定
レンズは、ねじ付きのフタをしたガラス製シンチレーションバイアルの中の５ｍＬのＡＣＮ／ＴＦＡ抽出溶液によって抽出された。抽出はバイアルを回転振盪器（ｒｏｔａｒｙ  ｓｈａｋｅｒ）（レッド・ローター（Ｒｅｄ  Ｒｏｔｏｒ））によって室温で少なくとも２時間（通常、一晩）振盪することによって行われた。
【００５０】
リゾチームの測定のための計算
レンズ抽出物のリゾチームの定量測定はオートサンプラー（ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ）とコンピューターをインターフェースした蛍光分光光度計を使用して行われた。各サンプル溶液からの２ｍＬのアリコートの蛍光強度は２８０ｎｍ／３４６ｎｍの励起／発光波長をそれぞれ２．５ｎｍ／１０ｎｍの励起／発光スリットをもって設定することによって測定され、そして光電子増倍管の感度は９５０ボルトに設定された。
【００５１】
リゾチーム標準曲線は、リゾチームストック溶液を、レンズ抽出物のためのＡＣＮ／ＴＦＡ抽出用溶液と浸漬用溶液のためのビヒクルとを使用して、０〜４０μｇ／ｍＬの範囲の濃度に希釈することによって、確立された。蛍光強度を測定するための機器設定はレンズ抽出物とレンズ浸漬用溶液について同じであった。
【００５２】
全てのサンプルについて、リゾチーム濃度は直線のリゾチーム標準曲線から展開された勾配に基づいて算出された。各処方物の予防％は、レンズ抽出物の中のリゾチームの量を対照レンズからのリゾチームの量（総付着物）から差し引き、それから、それを総付着物で除しそして１００を乗じることによって、算出された。
【００５３】
結果
図１は、それぞれ４６，３８０；７１，６００；および１２２，０００の分子量を有する非イオン性ＮＩＰＡＭポリマーについてのＰＮＩＰＡＭ濃度（ｇ／１００ｍＬ）の関数としての予防％を示している。
【００５４】
図１は規定ポリマー濃度を使用する予防％には有意なＰＮＩＰＡＭの分子量に対する依存性が存在しなかったことを示している。０．２ｇ／１００ｍＬまでのＰＮＩＰＡＭ濃度は約３０％の予防結果（％）を与えた。ＰＮＩＰＡＭ濃度を０．２ｇ／１００ｍＬより高くした場合、０．４ｇ／１００ｍＬ〜０．６５ｇ／１００ｍＬのポリマー濃度を使用して予防％が５０％〜６０％に増大することができた。予防％はＮＩＰＡＭポリマーの分子量に依存しなかった。
【実施例２】
【００５５】
ＮＩＰＡＭポリマーの予防特性は３日サイクル試験を使用して更に評価された。２組のレンズを用意した。一方の組はリゾチーム溶液に浸ける前に表２に示された処方物の中に予浸漬されたが、他方の組はそうしなかった。それから、両方の組のレンズをリゾチーム溶液の中に８時間（第１日）置いた。その日の最後に、全てのレンズを洗浄し、そしてそれぞれの処方物の中に入れて一晩浸漬させた。翌日（第２日）に、レンズをリゾチームの中に日中（８時間）もどしておいた。これを３サイクル（３日）が完了するように繰り返した。実験の最後に、全てのレンズを実施例１に記載された手順に従って分析した。結果は表３に呈示されている：
【００５６】
【表３】
2006515685.tif 000006
【００５７】
結果は、ＮＩＰＡＭポリマー（すなわち、Ｐ２９９１−ＮＩＰＡＭ）を含有する緩衝溶液は予浸漬されたレンズおよび予浸漬されなかったレンズの両方においてタンパク質吸収を低減するのに有効であったということを実証している。たとえば、ＮＩＰＡＭポリマー０．０３４％および０．０１７％の濃度を含有する溶液で処理された予浸漬されたレンズはそれぞれ、６７．８％および６０．８％の予防値を実証した。予浸漬されなかったレンズについては予防値は、０．０３４％および０．０１７％の濃度において、それぞれ４５．９％および４１．９％であった。
【００５８】
表３に示された結果は、タンパク質に曝されるのに先立つＮＩＰＡＭポリマー溶液によるレンズのトリートメントは好ましいということを実証している。しかしながら、結果は次のことも示している：ＮＩＰＡＭポリマー溶液による初期トリートメントに先立って既にタンパク質に曝されたときでさえ、その後にレンズがＮＩＰＡＭポリマー溶液で処理されたときにはタンパク質の吸収が低減される。従って、この研究の結果は次のことを確認する：本発明の組成物は、コンタクトレンズが繰り返しタンパク質付着に曝されるときでさえ、コンタクトレンズ上のタンパク付着物の形成を低減させるのに有効である。
【実施例３】
【００５９】
予防行為は、未変性ＮＩＰＡＭ（非イオン性）および変性ＮＩＰＡＭ（ＣＯＯＨで末端官能化された）ポリマーと共に抗菌剤ＡＬ−８４９６を含有する処方物にも拡大された。評価処方物は下記の表４の中に示されている：
【００６０】
【表４】
2006515685.tif 000007
【００６１】
利用された手順は実施例１におけると同じであった。図２はそれぞれのＰＮＩＰＡＭ処方物の中に予浸漬されたレンズで、一晩浸漬モデルを使用して、得られた予防データを示す。
【００６２】
図２は、ＮＩＰＡＭポリマーの予防特性は抗菌剤ＡＬ−８４９６およびその他の処方物成分（洗浄成分（たとえば、クエン酸塩およびテトロニック（登録商標）１３０４）が挙げられる）の存在下で維持された、ということを示している。データは、未変性および変性ＮＩＰＡＭポリマーは両者ともポリマーの予防的性質を危うくすることなく多目的コンタクトレンズケア処方物の中に組み込むことができる、ということを立証している。
【実施例４】
【００６３】
上記の表４の中に示されている処方物の消毒活量も評価された。結果は下記の表５の中に示されている。
【００６４】
【表５】
2006515685.tif 000008
【００６５】
結果はＮＩＰＡＭポリマーが抗菌剤ＡＬ−８４９６の抗菌活量に悪影響を与えなかったということを実証している。
【実施例５】
【００６６】
幾つかの処方物はＰＮＩＰＡＭの予防特性を、２種の周知のブロック共重合体テトロニック（登録商標）１１０７およびプルロニック（登録商標）Ｆ１２７と比較する評価がなされた。処方物の成分および予防結果は下記の表６の中に与えられている。
【００６７】
評価は実施例１に概説されているのと同じ手順を使用して行われた。対照（１０５８１−８５Ｊ）として利用された緩衝溶液は何らの予防特性も示さなかった。しかしながら、図６に示されている通り、ＰＮＩＰＡＭを濃度０．２％（１０５８１−８５Ｂ）および０．４％（１０５８１−８５Ｃ）で含有している本発明の組成物はそれぞれ５６．２％および６３％の予防結果を生じた。
【００６８】
対照的に、テトロニック（登録商標）１１０７およびプルロニック（登録商標）Ｆ１２７ブロック共重合体を０．８％までの濃度で含有する溶液は何ら有意な予防を生じなかった。
【００６９】
【表６】
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【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】実施例１に記載された試験の結果を示すグラフである。
【図２】実施例３に記載された試験の結果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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