(57)【要約】式（Ｉ）および式（Ｉｂ）によって表されるβ−カルボリンヒドロキサム酸化合物を記載し、ここで：Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アルコキシ（ａｉｋｏｘｙ）Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、−ＯＲc、−ＮＯ2、および−Ｎ（Ｒc）2から独立して選択され、各Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃaアルキニルから独立して選択され；Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、またはＣ2−Ｃ6アルキニルであり、これらの全ては、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｉｏａｌｋｙｌ）、およびヘテロアリールから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基によって置換され、ここで前記アリール、シクロアルキル（ｃｙｄｏａｌｋｙｉ）、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；Ｒ8およびＲ9は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、場合によって、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され、ここで前記アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換されている。β−カルボリンヒドロキサム酸化合物およびこれらの化合物を含有する組成物は、ＨＩＶインテグラーゼ酵素活性を阻害するかまたは調節するために、およびＨＩＶインテグラーゼ媒介疾患および状態を処置するために使用され得る。  【化１】2006516606.tif 000033
2006516606.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（Ｉ）：
【化１】
2006516606.tif 000031
〔式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アルコキシＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、−ＯＲc、−ＮＯ2、および−Ｎ（Ｒc）2から独立して選択され；
各Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され；
Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、またはＣ2−Ｃ6アルキニルであり、これらの全てが、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基によって置換され、ここで該アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；
Ｒ8およびＲ9は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され、ここで、該アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、場合によって、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され、ここで該アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換されている〕
の化合物、ならびにその薬学的に受容可能な塩および溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素、−Ｎ（Ｒc）2、および−ＮＯ2から独立して選択され；そして
Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから選択される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ7はＣ1−Ｃ6アルキルであり、該Ｃ1−Ｃ6アルキルは、場合によって、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールで置換され、ここで、該アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから選択される少なくとも１つの置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ8およびＲ9は、水素、およびＣ1−Ｃ6アルキルから独立して選択され、ここで、該アルキル基は、場合によって、アリールで置換され、ここで、該アリールは、場合によって、水素およびＣ1−Ｃ6アルキルから選択される少なくとも１つの置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6は、水素、−ＮＨ2、および−ＮＯ2から独立して選択され；
Ｒ7は、４−フルオロベンジル、（５−クロロチエン−２−イル）メチル、３−クロロ−２−フルオロベンジル、ベンジル、４−メチルベンジル、２，４−ジフルオロベンジル、３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル、または３−クロロベンジルであり；そして
Ｒ8およびＲ9は、水素、メチル、およびベンジルから独立して選択される、
請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
９−（４−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−［（５−クロロチエン−２−イル）メチル］−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−ベンジル−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（４−メチルベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（２，４−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；６−アミノ−９−（３−クロロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−メトキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；Ｎ−（ベンジルオキシ）−９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；Ｎ−ベンジル−９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（４−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミドから選択される、請求項１に記載の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物。
【請求項７】
式（Ｉｂ）
【化２】
2006516606.tif 000032
〔式中、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アルコキシＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、−ＯＲc、−ＮＯ2、および−Ｎ（Ｒc）2から独立して選択され；
各Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され；
Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、またはＣ2−Ｃ6アルキニルであり、これらの全ては、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基によって置換され、ここで該アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；
Ｒ9は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され、ここで、該アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、場合によって、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され、ここで該アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；
各Ｒ10およびＲ11は、水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニル、−ＯＲc、または−Ｎ（Ｒc）2基から独立して選択され、ここで、該アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、場合によって、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基から選択される１つもしくはそれ以上の置換基によって置換され、ここで該アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；
ｎが１、２、または３である〕
の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物。
【請求項８】
治療有効量の少なくとも１つの請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、またはビヒクルを含有する医薬組成物。
【請求項９】
治療有効量の少なくとも１つの請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物とヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）インテグラーゼ酵素とを接触させることを包含する、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）インテグラーゼ酵素活性を阻害するかまたは調節する方法。
【請求項１０】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）インテグラーゼ酵素によって媒介される疾患または状態の処置が必要な哺乳動物に、治療有効量の少なくとも１つの請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物を投与することを包含する、該疾患または状態を処置する方法。
【請求項１１】
ヒト免疫不全ウイルス阻害量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を、哺乳動物に投与することを包含する、哺乳動物におけるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の複製を阻害する方法。
【請求項１２】
ＨＩＶインテグラーゼ酵素阻害量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物と、該酵素とを接触させることを包含する、ＨＩＶインテグラーゼ酵素活性を阻害する方法。
【請求項１３】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）インテグラーゼ酵素によって媒介される疾患または状態を処置するための、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を含有する医薬品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本特許出願は、２００３年１月２７日に出願された米国出願番号６０／４４３,２２３の優先権を主張する。当該出願は、本明細書中にその全体が参照によって組み込まれる。
【０００２】
本発明は、β−カルボリンヒドロキサム酸化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩、薬学的に受容可能なプロドラッグ、および薬学的に受容可能な代謝物、それらの合成、ならびにヒト免疫不全ウイルス（「ＨＩＶ」）インテグラーゼ酵素のモジュレータまたはインヒビターとしてのそれらの使用に関する。本発明の化合物は、ＨＩＶインテグラーゼ酵素の酵素活性を調節（例えば阻害）するために、かつＨＩＶによって媒介される疾患または状態（例えば、後天性免疫不全症候群（「ＡＩＤＳ」）およびエイズ関連症候群（「ＡＲＣ」））を処置するために有用である。
【背景技術】
【０００３】
「ヒト免疫不全ウイルス」または「ＨＩＶ」と呼ばれるレトロウイルスは、免疫系を徐々に破壊する複雑な疾患の病因体である。この疾患は、後天性免疫不全症候群またはＡＩＤＳとして公知である。ＡＩＤＳおよび他のＨＩＶ原因疾患は、急速に複製し、変異し、そして薬物耐性を獲得するＨＩＶの能力に起因して処置することが困難である。感染後のウイルスの拡散を遅らせる目的で、ＡＩＤＳおよび他のＨＩＶ原因疾患の処置は、ＨＩＶ複製の阻害に向けられている。
【０００４】
ＨＩＶはレトロウイルスであり、従って、ポジティブセンスのＲＮＡ鎖をコードするので、その複製機構は、ウイルス性ＲＮＡからウイルス性ＤＮＡへの変換、および引き続く宿主細胞ゲノムへのウイルス性ＤＮＡの挿入に基づく。ＨＩＶ複製は、３つの構成的なＨＩＶコード化酵素：逆転写酵素（ＲＴ）、プロテアーゼ、およびインテグラーゼによる。
【０００５】
ＨＩＶが感染すると、レトロウイルスコア粒子は、特定の細胞レセプターに結合し、そして宿主細胞の細胞質に侵入する。細胞質に入ると、ウイルス性ＲＴは、ウイルス性ｓｓＲＮＡの逆転写を触媒し、ウイルス性ＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッドを形成する。このハイブリッド由来のＲＮＡ鎖は、次いで、部分的に分解され、そして第２のＤＮＡ鎖が合成されて、ウイルス性ｄｓＤＮＡを生じる。インテグラーゼは、次いで、ウイルス性タンパク質および細胞タンパク質に助けられ、プレインテグレーション複合体（ＰＩＣ）の構成要素としてウイルス性ｄｓＤＮＡを宿主細胞核に輸送する。さらに、インテグラーゼは、宿主細胞ゲノムへのウイルス性ｄｓＤＮＡの永久的な連結（すなわち、インテグレーション）を提供する（言い換えると、遺伝子発現のための宿主細胞の機構へのアクセスをウイルスに提供する）。インテグレーションの後、転写および翻訳によりウイルス性の前駆体タンパク質が生産される。次いで、プロテアーゼが、ウイルス性前駆体タンパク質を切断してウイルス性タンパク質を生じ、このウイルス性タンパク質は、さらなるプロセシングを受けた後に、新たな感染性ＨＩＶ粒子として宿主細胞から放出される。
【０００６】
ＨＩＶ複製における重要な工程である、ウイルス性ｄｓＤＮＡの宿主細胞ゲノムへの挿入は、少なくとも３つ、おそらく４つの工程において、インテグラーゼによって媒介されると考えられている：（１）プロウイルス性ＤＮＡのアセンブリ；（２）ＰＩＣのアセンブリを引き起こす３’末端プロセシング；（３）３’末端ジョイニングまたはＤＮＡ鎖転移（すなわち、インテグレーション）；および（４）ギャップ（ｇａｐ）充填、修復機能。例えば、Ｇｏｌｄｇｕｒ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９６（２３）：１３０４０−１３０４３（Ｎｏｖ．１９９９）；Ｓａｙａｓｉｔｈ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｔａｒｇｅｔｓ  ５（４）：４４３−４６４（２００１）；Ｙｏｕｎｇ，Ｓ．Ｄ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．＆Ｄｅｖｅｌ．４（４）：４０２−４１０（２００１）；Ｗａｉ，Ｊ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３（２６）：４９２３−４９２６（２０００）；Ｄｅｂｙｓｅｒ，Ｚ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｓｓａｙｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＨＩＶ−１  Ｉｎｔｅｇｒａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，ｆｒｏｍ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １６０：１３９−１５５，Ｓｃｈｅｉｎ，Ｃ．Ｈ．（ｅｄ．），Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．（２００１）；ａｎｄ  Ｈａｚｕｄａ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｉｓｃ．１３：１７−２４（１９９７）を参照のこと。
【０００７】
第１の工程において、インテグラーゼは、ウイルス性の長末端反復配列（ＬＴＲ）領域と安定な複合体を形成する。複合体が形成されると、インテグラーゼは次いで、エンドヌクレアーゼ様のプロセシング工程を行い、それによって両方のＤＮＡ鎖の３‘末端の末端ＧＴジヌクレオチド（保存されたＣＡジヌクレオチドからすぐ下流）を切断する。次いで、処理されたＤＮＡ／インテグラーゼ複合体（ＰＩＣ）は、核膜を横切って転移する。宿主細胞核に入ると、インテグラーゼは、第３の工程（３’末端連結）を行い、それによって、２回のエステル交換反応の間に、宿主細胞ＤＮＡにおいて切断を起こし、処理されたウイルス性ＤＮＡの処理された３’末端と共有結合させる。第４の工程において、細胞酵素が、ウイルス性ＤＮＡの挿入部位に生じたｇａｐを修復する。この修復プロセスに利用される酵素は、存在するにしても、正確にはまだ同定されていない。Ｓａｙａｓｉｔｈ，Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｔａｒｇｅｔｓ  ５（４）：４４３−４６４（２００１）。つまり、インテグラーゼがｇａｐ充填機能において果たす役割は、公知でない。
【０００８】
インテグラーゼが宿主細胞ゲノムへのウイルス性ＤＮＡのインテグレーションにおいて果たす役割は、種々のウイルス性因子および細胞因子によって指向される秩序だった反応を介して起こることが明らかである。この知見は、ＨＩＶのライフサイクルにおけるインテグレーションの必須の工程（およびその必須酵素であるインテグラーゼ）をブロックする種々の機会を提供する。
【０００９】
現在、ＡＩＤＳおよび他のＨＩＶ原因疾患は、ＲＴおよびプロテアーゼインヒビターを含む複数の薬物を含有する「ＨＩＶカクテル」で処置されている。しかし、多数の副作用および薬物耐性の急速な発生が、ＡＩＤＳおよび他のＨＩＶ原因疾患を安全にかつ効果的に処置するＲＴおよびプロテアーゼインヒビターの能力を制限している。ＲＴおよびプロテアーゼインヒビターの欠点を考慮すると、ＨＩＶ複製を阻害できる別の機構が必要である。インテグレーション、つまり、哺乳動物の対応物がないウイルス性コード化酵素であるインテグラーゼが、理論上の二代替となる機構である。例えば、Ｗａｉ，Ｊ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３：４９２３−４９２６（２０００）；Ｇｒｏｂｌｅｒ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９９：６６６１−６６６６（２００２）；Ｐａｉｓ，Ｇ．Ｃ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：３１８４−３１９４（２００２）；Ｙｏｕｎｇ，Ｓ．Ｄ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．＆Ｄｅｖｅｌ．４（４）：４０２−４１０（２００１）；Ｇｏｄｗｉｎ，Ｃ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：３１８４−３１９４（２００２）；Ｙｏｕｎｇ，Ｓ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，「Ｌ−８７０，８１０：Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ａ  Ｐｏｔｅｎｔ  ＨＩＶ  Ｉｎｔｅｇｒａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｗｉｔｈ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｕｔｉｌｉｔｙ，」Ｐｏｓｔｅｒ  ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ  ａｔ  ｔｈｅ  ＸＩＶ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＩＤＳ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ，Ｂａｒｃｅｌｏｎａ（Ｊｕｌｙ  ７−１２，２００２）；ａｎｄ  ＷＯ０２／０７０４９１を参照のこと。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
機能するインテグラーゼインヒビターは、鎖転移インテグラーゼ機能を阻害するはずであることが示唆されている。例えば、Ｙｏｕｎｇ，Ｓ．Ｄ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃ．＆  Ｄｅｖｅｌ．４（４）：４０２−４１０（２００１）を参照のこと。従って、ＨＩＶインヒビター、特にインテグラーゼインヒビター、およびより詳細には鎖転移インヒビターが、ＡＩＤＳおよび他のＨＩＶ原因疾患を処置するために必要である。本明細書中に記載される本発明の薬剤は、高い抗ウイルス活性および低い毒性を有する、新規で、強力であり、かつ選択的なＨＩＶインテグラーゼインヒビター、より詳細には鎖転移インヒビターである。
【００１１】
本発明が関連する分野の状況は、本出願を通じて公開文献に対してなされた参照によって、より完全に表される。これらの参考文献の開示は、本明細書中にそれらの全体が参照によって組み込まれる。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、次の式Ｉ
【化１】
2006516606.tif 000003
によって表される化合物に関し、
ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6は、水素；ハロゲン；ならびに非置換または１つもしくはそれ以上のハロゲンで置換された低級アルキル、低級アルコキシアルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、ＯＲc、およびＮ（Ｒc）2 基からなる群から独立して選択され、ここでＲcは、水素；酸素；または非置換低級アルキル、非置換低級アルケニル、または非置換低級アルキニル基であり；
Ｒ7は、非置換または以下からなる群から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換された低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、または−Ｏ−であり：
水素；ハロゲン；非置換または以下からなる群から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換された、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基；ならびに−Ｏ−：
ハロゲン；水素；および非置換または１つもしくはそれ以上のハロゲンで置換された低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基；
Ｒ8およびＲ9は、以下からなる群から独立して選択される：水素；ならびに非置換または以下からなる群から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換されたアルキル、アルケニル、およびアルキニル基：
ハロゲン；ならびに非置換または以下からなる群から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換されたアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基：
ハロゲン；ならびに非置換低級アルキル、非置換低級アルケニル、および非置換低級アルキニル基；そして
【００１３】
Ｒ2およびＲ8は、Ｒ8が結合するＮと一緒になって環化して、次の式Ｉｂによって表される以下の化合物を形成するものとし：
【化２】
2006516606.tif 000004
ここで、Ｒ10およびＲ11は、各々独立して：水素；ハロゲン；非置換または次の群から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換された低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、ＯＲcまたはＮ（Ｒc）2基であり：
ここでこの置換基はハロゲン；ならびに非置換または次の群から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換されたアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基であり：
ここでこの置換基はハロゲン；ならびに非置換低級アルキル、非置換低級アルケニル、および非置換低級アルキニル基であるものとし；
ここでＲcは、ハロゲン；水素；酸素；または非置換低級アルキル、非置換低級アルケニル、もしくは非置換低級アルキニル基であり；そして
ｎは、１、２、または３である。
【００１４】
本発明はまた、次の式（Ｉ）
【化３】
2006516606.tif 000005
の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、
ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アルコキシＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、−ＯＲc、−ＮＯ2、および−Ｎ（Ｒc）2から独立して選択され；
各Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され；
Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、またはＣ2−Ｃ6アルキニルであり、これらの全ては、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロア
リールから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基によって置換され、ここで前記アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；
Ｒ8およびＲ9は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、および  アルキニルは、場合によって、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され、ここで前記アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換されているものとする。
【００１５】
本発明の別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、
ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素、−Ｎ（Ｒc）2、および−ＮＯ2から独立して選択され；そして
Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから選択されるものとする。
【００１６】
本発明のなお別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで、Ｒ7は、場合によって、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールで置換されたＣ1−Ｃ6アルキルであり、ここで、前記アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから選択される少なくとも１つの置換基で置換されているものとする。
【００１７】
本発明のなお別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで、Ｒ8およびＲ9は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキルから独立して選択され、ここで、前記アルキル基は、場合によって、アリールで置換され、そして、ここで前記アリールは、場合によって、ハロゲンおよびＣ1−Ｃ6アルキルから選択される少なくとも１つの置換基で置換されているものとする。
【００１８】
本発明のなおさらなる態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素および−Ｎ（Ｒc）2から独立して選択され；
Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルであり；
Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ6アルキルであり、このＣ1−Ｃ6アルキルは、場合によって、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールから選択される少なくとも１つの置換基で置換され、ここで、前記アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
Ｒ8およびＲ9は、水素およびＣ1−Ｃ6アルキルから独立して選択され、ここで、前記アルキルは、場合によって、アリール基から選択される少なくとも１つの置換基で置換され、ここで前記アリールは、場合によって、ハロゲンおよびＣ1−Ｃ6アルキルから選択される少なくとも１つの置換基で置換されているものとする。
【００１９】
本発明のなお別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6は、水素、−ＮＨ2、および−ＮＯ2から独立して選択され；
Ｒ7は、４−フルオロベンジル、（５−クロロチエン−２−イル）メチル、３−クロロ−２−フルオロベンジル、ベンジル、４−メチルベンジル、２，４−ジフルオロベンジル、３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル、または３−クロロベンジルであり；そして
Ｒ8およびＲ9は、水素、メチル、およびベンジルから独立して選択されるものとする。
【００２０】
本発明の別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素であり；
Ｒ7は、−ＣＨ2フェニルであり、ここで前記フェニルは、フッ素および塩素から選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
Ｒ8は、水素または−ＣＨ3であり；
Ｒ9は、水素または−ＣＨ3であるものとする。
【００２１】
本発明のなお別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ5、およびＲ6は、水素であり；
Ｒ4は、−ＮＯ2または−ＮＨ2であり；
Ｒ7は、−ＣＨ2フェニルであり、ここで前記フェニルは、フッ素および塩素から選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
Ｒ8は、水素または−ＣＨ3であり；
Ｒ9は、水素または−ＣＨ3であるものとする。
【００２２】
本発明のなお別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素であり；
Ｒ7は、−ＣＨ2フェニルであり、ここで前記フェニルは、フッ素および塩素から選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
Ｒ8およびＲ9は、水素であるものとする。
【００２３】
本発明の別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素であり；
Ｒ7は、−ＣＨ2フェニルであり、ここで前記フェニルは、フッ素および塩素から選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
Ｒ8およびＲ9は、−ＣＨ3であるものとする。
【００２４】
本発明の別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素であり；
Ｒ7は、−ＣＨ2フェニルであり、ここで前記フェニルは、フッ素および塩素から選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
Ｒ8は、水素であり；
Ｒ9は、−ＣＨ3であるものとする。
【００２５】
本発明の別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物を提供するもので、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素であり；
Ｒ7は、−ＣＨ2フェニルであり、ここで前記フェニルは、フッ素および塩素から選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
Ｒ8は、−ＣＨ3であり；
Ｒ9は、水素であるものとする。
【００２６】
本発明の別の態様において、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物は、以下から選択される：９−（４−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−［（５−クロロチエン−２−イル）メチル］−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−ベンジル−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（４−メチルベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（２，４−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；６−アミノ−９−（３−クロロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−メトキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；Ｎ−（ベンジルオキシ）−９−（３−クロロ−２，  ６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；Ｎ−ベンジル−９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド；９−（４−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド並びにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物。
【００２７】
本発明の別の態様において、以下の式（Ｉｂ）
【化４】
2006516606.tif 000006
の化合物、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩および溶媒和物が提供され、ここで：
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、およびＲ6は、水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、アルコキシＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、−ＯＲc、−ＮＯ2、および−Ｎ（Ｒc）2から独立して選択され；
各Ｒcは、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され；
Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、またはＣ2−Ｃ6アルキニルであり、これらの全ては、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基によって置換され、ここで前記アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；
Ｒ9は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、および  アルキニルは、場合によって、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基から独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され、ここで前記アリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルが、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される１つもしくはそれ以上の置換基で置換され；
各Ｒ10およびＲ11は、水素、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニル、−ＯＲc、または−Ｎ（Ｒc）2基から独立して選択され、ここで、前記アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、場合によって、ハロゲン、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基から選択される１つもしくはそれ以上の置換基によって置換され、ここで前記アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールは、場合によって、ハロゲン、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、およびＣ2−Ｃ6アルキニルから独立して選択される少なくとも１つの置換基で置換され；
ｎが１、２、または３である。
【００２８】
式（Ｉ）および（Ｉｂ）の化合物に加えて、本発明はまた、このような化合物の薬学的に受容可能な塩、薬学的に受容可能なプロドラッグ、ならびに薬学的に活性な代謝物、およびこのような代謝物の薬学的に受容可能な塩に関する。このような化合物、塩、プロドラッグ、および代謝物は、時々、「ＨＩＶインテグラーゼ薬剤」として本明細書中で総称される。
【００２９】
本発明はまた、治療有効量の少なくとも１つの本発明に従うＨＩＶインテグラーゼ薬剤、ならびにそれらの薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、またはビヒクルを各々含有する薬学的組成物に関する。
【００３０】
さらに、本発明は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）インテグラーゼの酵素活性を阻害するかまたは調節する方法に関し、本方法は、有効量の少なくとも１つの本発明のＨＩＶインテグラーゼ薬剤と、前記酵素とを接触させる工程を包含する。
【００３１】
別の態様において、本発明は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）インテグラーゼ酵素によって媒介される疾患または状態を処置する方法に関し、本方法は、治療有効量の少なくとも１つの本発明のＨＩＶインテグラーゼ薬剤を、このような処置が必要な哺乳動物に投与する工程を包含する。この疾患または状態は、例えば、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）またはエイズ関連症候群（ＡＲＣ）であり得る。
【００３２】
本発明のさらなる態様において、哺乳動物におけるヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の複製を阻害するための方法が提供され、本方法は、ヒト免疫不全ウイルス阻害量の式（Ｉ）または（Ｉｂ）の化合物、またはそれらの薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を、前記哺乳動物に投与する工程を包含する。
【００３３】
本発明の別の態様において、ＨＩＶインテグラーゼ酵素活性を阻害する方法が提供され、本方法は、ＨＩＶインテグラーゼ酵素阻害量の式（Ｉ）もしくは（Ｉｂ）の化合物、またはそれらの薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物と前記酵素を接触する工程を包含する。ＨＩＶインテグラーゼ酵素活性を阻害するこれらの方法がまた、本発明において提供され、この酵素は、哺乳動物中で見出される。
【００３４】
本発明のさらなる態様は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）インテグラーゼ酵素によって媒介される疾患または状態の処置のための、式（Ｉ）もしくは（Ｉｂ）の化合物、またはそれらの薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を含有する医薬品を提供するものである。
【００３５】
本明細書中で使用される場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は、開放型で非限定的な意味で本明細書中で使用される。
【００３６】
用語「アルキル」とは、鎖中に１〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基をいう。アルキル基の例としては、メチル（Ｍｅ、これはまた「／」によって構造的に表され得る）、エチル（Ｅｔ）、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔＢｕ）、ペンチル、イソペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、ヘキシル、イソヘキシルなどが挙げられる。
【００３７】
用語「ヘテロアルキル」とは、鎖中に２〜１２個の原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基をいい、これらの原子の１つもしくはそれ以上は、Ｓ、Ｏ、およびＮから選択されるヘテロ原子である。ヘテロアルキルの例としては、アルキルエーテル、第二級アルキルアミンおよび第三級アルキルアミン、アルキルスルフィドなどが挙げられる。
【００３８】
用語「アルケニル」とは、鎖中に２〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルケニル基をいう。例示的なアルケニル基としては、プロパ−２−エニル、ブタ−２−エニル、ブタ−３−エニル、２−メチルプロパ−２−エニル、ヘキサ−２−エニルなどが挙げられる。
【００３９】
用語「アルキニル」とは、鎖中に２〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキニル基をいう。例示的なアルキニル基としては、プロパ−２−イニル、ブタ−２−イニル、ブタ−３−イニル、２−メチルブタ−２−イニル、ヘキサ−２−イニルなどが挙げられる。
【００４０】
用語「低級アルキル」、「低級アルケニル」、および「低級アルキニル」とは、それぞれ、鎖中に１〜６個の炭素原子を有するアルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基をいう。
【００４１】
用語「ハロアルキル」とは、鎖中に２〜１２個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基をいい、そして１つもしくはそれ以上の水素は、ハロゲンで置き換えられる。例示的なハロアルキル基としては、トリフルオロメチル、２−ブロモプロピル、３−クロロヘキシル、１−ヨード−イソブチルなどが挙げられる。
【００４２】
用語「アリール（Ａｒ）」とは、１個の環あたりに３〜１２個の環原子を有する、単環式、または縮合された多環式もしくはスピロ多環式の芳香族炭素環（全て炭素である環原子を有する環構造）をいう。アリール基の実例としては、以下に一部：
【化５】
2006516606.tif 000007
などが挙げられる。
【００４３】
用語「ヘテロアリール（ヘテロＡｒ）」とは、１個の環あたりに３〜１２個の環原子を有する、単環式、または縮合された多環式もしくはスピロ多環式の芳香族複素環（炭素原子、ならびに窒素、酸素および硫黄のヘテロ原子から選択される環原子を有する環構造）をいう。アリール基の実例としては、以下に一部：
【化６】
2006516606.tif 000008
などが挙げられる。
【００４４】
用語「シクロアルキル」とは、１個の環あたりに３〜１２個の環原子を有する、飽和または部分飽和の、単環式、または縮合された多環式もしくはスピロ多環式の炭素環をいう。シクロアルキル基の実例としては、以下に一部：
【化７】
2006516606.tif 000009
などが挙げられる。
【００４５】
用語「ヘテロシクロアルキル」とは、飽和または部分的に飽和され、そして１個の環あたりに３〜１２個の環原子を有する、単環式、または縮合された多環式もしくはスピロ多環式の環構造をいい、この環原子は、Ｃ原子、ならびにＮヘテロ原子、Ｏヘテロ原子およびＳヘテロ原子から選択される。ヘテロシクロアルキル基の実例としては、以下：
【化８】
2006516606.tif 000010
などが挙げられる。
【００４６】
用語「ハロゲン」は、塩素、フッ素、臭素、またはヨウ素を表す。用語「ハロ」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、またはヨードを表す。
【００４７】
用語「置換された」は、特定の基または部分が１つもしくはそれ以上の置換基を有することを意味する。
【００４８】
用語「非置換」により、特定の基が置換を有さないことを意味する。
【００４９】
用語「場合によって置換された」により、特定の基が非置換であるか、または１つもしくはそれ以上の置換基によって置換されていることを意味する。
【００５０】
用語「薬学的に受容可能な塩」とは、ＨＩＶインテグラーゼ薬剤を投与される対象に対して薬理学的に受容可能であり、かつ実質的に無毒性である塩形態をいう。
【００５１】
「治療有効量」とは、このような処置が必要な哺乳動物に投与される場合、本明細書中で規定されるような処置をするのに十分である化合物の量を意味することが意図される。従って、例えば、治療有効量の式Ｉの化合物、その塩、活性代謝物、もしくはプロドラッグは、ＨＩＶインテグラーゼの活性を調節するかまたは阻害し、活性によって媒介される疾患状態が縮小するか、または緩和されるのに十分な量である。
【００５２】
用語「処置（ｔｒｅａｔ）」、「処置（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」とは、哺乳動物（特に、ヒト）におけるＨＩＶインテグラーゼ媒介疾患またはＨＩＶインテグラーゼ媒介状態の任意の処置をいい、この処置としては以下が挙げられる：（ｉ）この状態にかかりやすいであろう対象において、この疾患または状態の発症を予防する（この処置は、病態の予防処置を構成する）；（ｉｉ）疾患または状態を調節するか、または阻害する（すなわち、その進行を止める）；（ｉｉｉ）疾患または状態を軽減する（すなわち、疾患または状態の退行（ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）を促す）；または（ｉｖ）疾患もしくは状態またはこの疾患もしくは状態から生じる症状を軽減および／または緩和する（例えば、根本的な疾患または状態を扱わずに炎症反応を軽減する）。
【００５３】
本明細書中で使用される場合、用語「ヒト免疫不全ウイルス阻害量」とは、インビボ（例えば、哺乳動物中）、またはインビトロでヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の複製を阻害するのに必要とされる、本発明の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の量をいう。このような阻害を生じるのに必要とされるこのような化合物の量は、当業者に公知の方法および本明細書中に記載される方法を使用して、過度の実験をすることなく決定され得る。
【００５４】
本明細書中で使用される場合、用語「ＨＩＶインテグラーゼ酵素阻害量」とは、哺乳動物中のようなインビボ、またはインビトロのいずれかでＨＩＶインテグラーゼ酵素活性を減少するのに必要とされる、本発明の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物の量をいう。このような阻害は、本発明の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物とＨＩＶインテグラーゼ酵素とを接触することによって行われ得る。このような阻害は、本発明の化合物がＨＩＶインテグラーゼ酵素に直接的に結合することによって行われ得る。さらに、酵素と化合物との間でこのような直接的な結合起こらない場合、ＨＩＶインテグラーゼ酵素活性は、本発明の化合物の存在下で減少し得る。さらに、このような阻害は、競合的、非競合的、不競合的（ｕｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ）であり得る。このような阻害は、インビトロ系もしくはインビボ系において、またはその両方の組み合わせにおいて、当業者に公知の方法を使用して測定され得る。
【００５５】
用語「本発明の化合物」とは、式（Ｉ）もしくは（Ｉｂ）の化合物、またはそれらの薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物をいう。
【００５６】
本発明の化合物は、ＨＩＶインテグラーゼ酵素を調節するか、または阻害するのに有用である。より詳細に、本発明の化合物は、ＨＩＶインテグラーゼ活性のモジュレータまたはインヒビターとして有用であり、従って、単独でか、または他の公知の抗ウイルス薬と組み合わせて、ＨＩＶ媒介疾患またはＨＩＶ媒介状態（例えば、ＡＩＤＳおよびＡＲＣ）の予防および／または処置に有用である。
【００５７】
本発明の化合物は、不斉炭素原子を有し得る。本発明の化合物中の炭素−炭素結合は、
【化９】
2006516606.tif 000011
を使用して、本明細書中に表され得る。不斉炭素原子に対する結合を表すための実線の使用は、その炭素原子での全ての可能な立体異性体が包含されることを示すことを意味する。不斉炭素原子に対する結合を表すための実線のくさび形または点線のくさび形のいずれかの使用は、示された立体異性体のみが包含されることを示すことを意味する。本発明の化合物は、１つ以上の不斉炭素原子を含むことが可能である。これらの化合物において、不斉炭素原子に対する結合を表すための実線の使用は、全ての可能な立体異性体が包含されることを示すことを意味する。本発明の化合物における１つまたはそれ以上の不斉炭素原子に対する結合を表すための実線の使用、ならびに同じ化合物における他の不斉炭素原子に対する結合を表すための実線のくさび形または点線のくさび形の使用は、ジアステレオマーの混合物が存在することを示すことを意味する。
【００５８】
本発明の化合物の個々のエナンチオマーは、当業者に公知の、およびＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，  Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に記載されるような簡便な命名法を使用して、（Ｒ）−エナンチオマーまたは（Ｓ）−エナンチオマーのいずれかに指定できる。さらに、本発明の化合物が１つ以上のキラル炭素原子を含む場合、個々の炭素原子の立体化学は、当業者に公知の方法、およびＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に記載されるような方法に従って、（Ｒ）−立体配置または（Ｓ）−立体配置のいずれかに割り当てられ得る。
【００５９】
本発明の個々の立体異性体化合物の溶液は、平面偏光を回転し得る。本発明の化合物の名称における「（＋）」または「（−）」の記号のいずれかの使用は、当業者に公知の技術、およびＥ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，  Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に記載されるような技術を使用して測定されるように、特定の立体異性体の溶液が（＋）または（−）方向に平面偏光を回転することを示す。
【００６０】
ジアステレオマー混合物は、当業者に公知の方法（例えば、クロマトグラフィーまたは分別結晶）によってそれらの物理化学的相違に基づいてそれらの個々のジアステレオマーに分離され得る。エナンチオマーは、エナンチオマー混合物を適切な光学活性化合物（例えば、アルコール）と反応させてジアステレオマーに変換し、そのジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーへ変換（例えば、加水分解）することによって分離され得る。個々のジアステレオマー化合物を分離する他の方法は、Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に記載される。エナンチオマー混合物、ジアステレオマー混合物、および純粋なエナンチオマーを含む全てのこのような異性体は、本発明の一部とみなされる。
【００６１】
あるいは、本発明の個々の立体異性体化合物は、不斉合成（必要な場合、その後、上記のように精製される）によって鏡像異性的に富化された形態で製造され得る。不斉合成は、市販されているか、または当業者に公知の方法を使用して容易に製造される不斉出発物質の使用、合成完了時に除去され得る不斉助剤（ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  ａｕｘｉｌｉａｒｉｅｓ）の使用、または酵素的方法を使用する中間化合物の分解のような、当業者に公知の技術を使用して行われ得る。鏡像異性的に純粋な化合物を製造する他の方法は、Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ｅｔａｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４に記載される。使用されるこれらの方法の選択は、様々な因子に依存し、これらの因子としては以下が挙げられるが、これらに限定されない：出発物質の有用性、方法の相対的効果、およびこのような方法が特定の官能基を含む本発明の化合物に有用であるか否か。このような選択は、当業者の知識の範囲内である。
【００６２】
本発明の化合物が不斉炭素原子を含む場合、化合物、薬学的に受容可能な塩、または溶媒和物は、単一の立体異性体、ラセミ化合物、ならびに／またはエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物として存在し得る。全てのこのような単一の立体異性体、ラセミ化合物、およびこれらの混合物は、本発明の範囲内であることが意図される。
【００６３】
化合物は互変異性の現象を示し得るが、本明細書内の式図は、可能な互変異性形態の１つのみを明示的に描いていることが理解される。従って、式は、描かれた化合物の任意の互変異性形態を表すことが意図され、そして構造式によって描かれた特定の化合物形態のみに限定されるべきでないと理解されるべきである。
【００６４】
また、本発明の化合物は、「Ｅ」立体配置異性体または「Ｚ」立体配置異性体、またはＥ異性体およびＺ異性体の混合物として存在し得ることが理解される。従って、式は、描かれた化合物の任意の立体配置形態を表すことが意図され、そして式図によって描かれた特定の化合物形態のみに限定されるべきでないと理解されるべきである。
【００６５】
本発明の化合物のいくつかは、単一の鏡像異性体（すなわち、他の鏡像異性体を実質的に含まない）、ラセミ化合物、ならびに／またはエナンチオマーおよび／もしくはジアステレオマーの混合物として存在し得る。全てのこのような単一の鏡像異性体、ラセミ化合物、およびそれらの混合物は、本発明の範囲内であることが意図される。１つの実施形態において、光学活性の本発明の化合物は、光学的に純粋な形態で使用される。
【００６６】
当業者によって一般的に理解されるように、１つのキラル中心（すなわち、１つの不斉炭素原子）を有する光学的に純粋な化合物は、基本的に２つの可能なエナンチオマーの一方からなる（すなわち、鏡像異性的に純粋である）化合物であり、そして１つを越えるキラル中心を有する光学的に純粋な化合物は、ジアステレオ的に（ｄｉａｓｔｅｒｅｏｍｅｒｉｃａｌｌｙ）純粋でありかつ鏡像異性的に純粋である化合物である。好ましくは、本発明の化合物は、少なくとも９０％、すなわち、少なくとも９０％の単一の異性体を含む形態（８０％のエナンチマー過剰率（「ｅ．ｅ．」）またはジアステレオマー過剰率（「ｄ．ｅ．」））、より好ましくは、少なくとも９５％（９０％のｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、なおより好ましくは少なくとも９７．５％（９５％のｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、および最も好ましくは、少なくとも９９％（９８％のｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）光学的に純粋な形態で使用される。
【００６７】
さらに、式（Ｉ）および（Ｉｂ）は、化合物の適切な形態、溶媒和形態、ならびに未溶媒和（ｕｎｓｏｌｖａｔｅｄ）形態の範囲に及ぶことが意図される。従って、各式は、水和形態ならびに非水和（ｎｏｎ−ｈｙｄｒａｔｅｄ）形態を含んで、示された構造を有する化合物を包含する。
【００６８】
本発明の化合物に加えて、本発明のＨＩＶインテグラーゼ薬剤は、このような化合物の薬学的に受容可能な塩、プロドラッグ、ならびに活性代謝物、およびこのような代謝物の薬学的に受容可能な塩が包含される。「薬学的に受容可能なプロドラッグ」は、生理学的条件下、または加溶媒分解によって、特定の化合物またはこのような化合物の薬学的に受容可能な塩に変換され得る化合物である。「薬学的に活性な代謝物」は、特定の化合物またはその塩の体内での代謝によって生産される薬学的に活性な産物である。化合物のプロドラッグおよび活性代謝物は、当該分野で公知の通常の技術を使用して同定され得る。例えば、Ｂｅｒｔｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４０，２０１１−２０１６（１９９７）；Ｓｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，８６（７），７６５−７６７（１９９７）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．，３４，２２０−２３０（１９９５）；Ｂｏｄｏｒ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．，１３，２２４−３３１（１９８４）；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｐｒｅｓｓ  １９８５）；Ｌａｒｓｅｎ，Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．，Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９１）；Ｄｅａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ，７４８，２８１−２９３（２０００）；Ｓｐｒａｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ＆  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ，１０（８），６０１−６０５（１９９２）；ａｎｄ  Ｐｒｏｘ  ｅｔ  ａｌ．，Ｘｅｎｏｂｉｏｌ．，３（２），１０３−１１２（１９９２）を参照のこと。
【００６９】
本発明の方法に使用される誘導体が塩基である場合、所望の塩は、塩酸；臭化水素酸；硫酸；硝酸；リン酸；などのような無機酸、または酢酸；マレイン酸；コハク酸；マンデル酸；フマル酸；マロン酸；ピルビン酸；シュウ酸；グリコール酸；サリチル酸；グルクロン酸またはガラクツロン酸のようなピラノシジル酸（ｐｙｒａｎｏｓｉｄｙｌ  ａｃｉｄ）；クエン酸または酒石酸のようなα−ヒドロキシ酸；アスパラギン酸またはグルタミン酸のようなアミノ酸；安息香酸または桂皮酸のような芳香族酸；ｐ−トルエンスルホン酸またはエタンスルホン酸のようなスルホン酸などのような有機酸での遊離塩基の処理を含む当該分野で公知の任意の適切な方法によって製造され得る。
【００７０】
本発明の方法に使用される誘導体が酸である場合、所望の塩は、無機塩基または有機塩基（例えば、アミン（第一級、第二級、または第三級）；アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物など）での遊離酸の処理を含む当該分野で公知の任意の適切な方法によって製造され得る。適切な塩の例としては、以下が挙げられる：グリシンおよびアルギニンのようなアミノ酸から誘導された有機塩；アンモニア；第一級アミン、第二級アミン、または第三級アミン；およびピペリジン、モルホリン、およびピペラジンのような環状アミン；ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウム、およびリチウムから誘導された有機塩。
【００７１】
「溶媒和物」は、特定の化合物の薬学的に受容可能な溶媒和物であって、その化合物の生物学的効果を維持しているものを意味することが意図される。溶媒和物の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、酢酸エチル、酢酸、エタノールアミン、またはそれらの混合物と組み合わされた本発明の化合物。
【００７２】
「薬学的に受容可能な塩」は、特定の誘導体の遊離酸および遊離塩基の生物学的効果を維持する塩（薬学的に受容可能なアニオンを含む）を意味することが意図され、それは生物学的にまたは別様で望ましくないものではない。薬学的に受容可能な塩の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：酢酸塩、アクリル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩（例えば、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、およびメトキシ安息香酸酸）、炭酸水素塩、重硫酸塩、亜硫酸水素塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、ブチン−１，４−ジオエート、エデト酸カルシウム、カンシレート（ｃａｍｓｙｌａｔｅ）、炭酸塩、クロリド、カプロン酸塩、カプリル酸塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、デカン酸塩、二塩酸塩、二水素リン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシレート、エチルコハク酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、グリコリルアルサニル酸塩（ｇｌｙｃｏｌｌｙｌａｒｓａｎｉｌａｔｅ）、ヘプタン酸塩、ヘキシン−１，６−ジオエート、ヘキシルレゾルシネート（ｈｅｘｙｌｒｅｓｏｒｃｉｎａｔｅ）、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、臭化水素酸塩、塩酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、ヨーダイド、イソ酪酸塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メタリン酸塩、メタンスルホン酸塩、メチル硫酸塩、一水素リン酸塩（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ムケート（ｍｕｃａｔｅ）、ナプシレート（ｎａｐｓｙｌａｔｅ）、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボナート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニル酪酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フタル酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロパンスルホン酸塩、プロピオン酸塩、プロピオル酸塩、ピロリン酸塩、ピロ硫酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、スベリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシレート、トリエチオダイド（ｔｒｉｅｔｈｉｏｄｏｄｅ）、および吉相酸塩。
【００７３】
本発明の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物が、異なった多形体形態または結晶形態で存在し得、これらの全ては、本発明および特定の式の範囲内であることが意図されることが、当業者によって理解される。さらに、本発明の化合物、ならびにその薬学的に受容可能な塩および溶媒和物は、互変異性体として存在し得、これらの全ては、本発明の範囲内であることが意図される。
【００７４】
性質が塩基性である本発明の化合物は、種々の無機酸および有機酸で、種々の異なる塩を形成し得る。このような塩は、動物への投与のために薬学的に受容可能でなければならないが、実際には、まず本発明の化合物を薬学的に受容不可能な塩として反応混合物から単離し、次いで、後者（薬学的に受容不可能な塩）をアルカリ性試薬で処理することによって遊離塩基の化合物に戻し、そしてその後薬学的に受容可能な酸付加塩に遊離塩基を変換することがしばしば所望される。本発明の塩基性化合物の酸付加塩は、水性の溶媒媒体、またはメタノールもしくはエタノールのような適切な有機溶媒中で、実質的に等価な量の選択された鉱酸または有機酸で、塩基性の化合物を処理することによって製造され得る。溶媒を乾燥することで、所望の固体塩が得られる。所望の酸塩はまた、溶液に適切な鉱酸または有機酸を添加することによって遊離塩基の有機溶媒溶液から沈殿され得る。
【００７５】
性質が酸性である本発明のこれらの化合物は、種々の薬学的に受容可能なカチオンと塩基塩を形成し得る。このような塩の例としては、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、および特にナトリウム塩およびカリウム塩が挙げられる。これらの塩の全ては、慣用の技術によって製造される。本発明の薬学的に受容可能な塩基塩を製造するための試薬として使用される化学塩基は、本発明の酸性化合物と無毒性の塩基塩を形成する化学塩基である。このような無毒性の塩基塩としては、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、およびマグネシウムなどのような薬学的に受容可能なカチオンから誘導される塩基塩が挙げられる。これらの塩は、所望の薬学的に受容可能なカチオンを含有する水溶液で対応する酸性化合物を処理し、次いで、好ましくは減圧下で、この得られた溶液を乾燥状態まで蒸発させることによって製造され得る。あるいは、これらの塩はまた、酸性化合物の低級アルコール性溶液（ａｌｋａｎｏｌｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）と所望のアルカリ金属アルコキシドとを一緒に混合し、次いで、前述と同じ様式で、乾燥状態まで得られた溶液を蒸発させることによっても製造し得る。いずれにしても、試薬の化学量論的量は、好ましくは反応の完了および所望の最終生成物の最大収率を確実にするために用いられる。
【００７６】
本発明の化合物が塩基性である場合、所望の薬学的に受容可能な塩は、当該分野で利用可能な任意の適切な方法（例えば、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸；などのような無機酸、または酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、グルクロン酸またはガラクツロン酸のようなピラノシジル酸、クエン酸または酒石酸のようなα−ヒドロキシ酸、アスパラギン酸またはグルタミン酸のようなアミノ酸、安息香酸または桂皮酸のような芳香族酸、ｐ−トルエンスルホン酸またはエタンスルホン酸のようなスルホン酸などのような有機酸で遊離塩基を処理）によって製造され得る。
【００７７】
本発明の化合物が酸性である場合、所望の薬学的に受容可能な塩は、任意の適切な方法（例えば、無機塩基または有機塩基（例えば、アミン（第一級、第二級、または第三級）、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物など）で遊離酸を処理）によって製造され得る。適切な塩の実例としては、以下が挙げられる：グリシンおよびアルギニンのようなアミノ酸から誘導された有機塩、アンモニア、第一級アミン、第二級アミン、または第三級アミン、ならびにピペリジン、モルホリン、およびピペラジンのような環状アミン、ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、鉄、銅、亜鉛、アルミニウム、およびリチウムから誘導された無機塩。
【００７８】
試薬が固体である場合、本発明の化合物、試薬、および塩は、種々の結晶形態または多形形態で存在し得、これらの全てが、本発明および特定の式の範囲内であることが意図されることが、当業者によって理解される。
【００７９】
本発明のＨＩＶインテグラーゼ薬剤は、以下に記載されるように、当業者が適切であると認識できる任意の薬学的形態で薬学的組成物に処方され得る。本発明の薬学的組成物は、治療有効量の少なくとも１つの式Ｉの化合物、および不活性な薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤を含有する。
【００８０】
ＨＩＶによって媒介される疾患または状態を処置するか、または予防するために、本発明の薬学的組成物は、治療有効量（すなわち、治療効果を達成するためのＨＩＶインテグラーゼの調節（ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ）量、規制（ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ）量、または阻害量）の少なくとも１つの本発明の化合物（活性成分として）と、１つまたはそれ以上の薬学的に適切なキャリアと合わせることによって調製される適切な処方物で投与される。薬学的に適切なキャリアは、例えば、希釈剤、賦形剤、および最終の医薬製剤への活性化合物の処理を容易にする助剤から選択され得る。
【００８１】
利用される薬学的キャリアは、固体または液体のいずれであってもよい。例示的な固体キャリアは、ラクトース、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシアガム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などである。例示的な液体キャリアは、シロップ、ピーナツ油、オリーブ油、水などである。同様に、本発明の組成物は、当該分野で公知の時間遅延物質（ｔｉｍｅ−ｄｅｌａｙ  ｍａｔｅｒｉａｌ）または時間放出物質（ｔｉｍｅ−ｒｅｌｅａｓｅ  ｍａｔｅｒｉａｌ）を含有し得、これらの物質としては、単独かもしくはロウと混合したモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリン、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルメタクリレートなどが挙げられる。さらなる添加物または賦形剤は、所望の処方物特性を達成するために添加され得る。例えば、ラブラゾル（Ｌａｂｒａｓｏｌ）、ゲルシア（Ｇｅｌｕｃｉｒｅ）などのようなバイオアベイラビリティーエンハンサー、ＣＭＣ（カルボキシメチルセルロース）、ＰＧ（プロピレングリコール）、またはＰＥＧ（ポリエチレングリコール）のような処方物（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒ）が添加され得る。光、湿度、および酸化から活性成分を保護する半固体ビヒクルのゲルシア（Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標））は、例えば、カプセル剤を調製する場合に添加され得る。
【００８２】
固体キャリアが使用される場合、製剤は、錠剤化され得るか、粉末形態もしくはペレッ
ト形態でハードゼラチンカプセル中に配置され得るか、またはトローチもしくはロゼンジ剤（ｌｏｚｅｎｇｅ）に形成され得る。固体キャリアの量は変化し得るが、一般的に、約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体キャリアが使用される場合、製剤は、シロップ、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、アンプルもしくはバイアル中の滅菌注射可能溶液または懸濁液、または非水溶性懸濁液の形態であり得る。半固体キャリアが使用される場合、製剤は、ハードゼラチンカプセル剤またはソフトゼラチンカプセル剤の形態であり得る。本発明の組成物は、投与の形式（例えば、非経口投与または経口投与）に適切な単位投薬形態に調製される。
【００８３】
適切な水溶性の投薬形態を得るために、本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩は、例えば０．３Ｍのコハク酸溶液またはクエン酸溶液のような有機酸または無機酸の水溶液に溶解され得る。可溶性塩形態が利用可能でない場合、薬剤は、適切な共溶媒（ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ）または共溶媒の混合物に溶解され得る。適切な共溶媒の例としては、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール３００、ポリソルベート８０、グリセリンなどが挙げられる（全量の０〜６０％の範囲の濃度）。例示的な実施形態において、式Ｉの化合物は、ＤＭＳＯに溶解され、そして水で希釈される。組成物はまた、水または等張食塩水またはデキストロース溶液のような適切な水溶性ビヒクル中の活性成分の塩形態の溶液形態であり得る。
【００８４】
適切な処方物は、投与選択の経路に依存される。注射用の本発明の化合物の薬剤は、水溶液、好ましくは、ハンクス液、リンゲル液、または生理食塩水緩衝液のような生理
学的に適合する緩衝液中に処方され得る。経粘膜投与には、透過するバリアに適切な浸透剤が、処方に使用される。このような浸透剤は、一般的に当該分野で公知である。
【００８５】
経口投与用には、本発明の化合物は、活性化合物と当該分野で公知の薬学的に受容可能なキャリアと混合することによって容易に処方され得る。このようなキャリアは、本発明の化合物が処置される対象による経口摂取のための、錠剤、丸剤、糖衣錠剤、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁剤などとして処方されることを可能にする。経口使用のための医薬製剤は、活性成分（薬剤）との混合物で固体賦形剤を使用して得ることができ、場合によって、得られた混合物を砕き、そして必要な場合、錠剤または糖衣錠コアを得るために、適切な助剤を添加した後に、顆粒の混合物を処理する。適切な賦形剤としては、以下が挙げられる：ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖類のようなフィラー；およびセルロース調製物（トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、ガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））。所望の場合、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、もしくはアルギン酸、またはアルギン酸ナトリウムのようなそれらの塩のような崩壊剤が添加されてもよい。
【００８６】
糖衣錠コアは、適切なコーティングを提供する。この目的にために、濃縮された糖溶液が使用され得、この糖溶液は、場合により、アラビアゴム、ポリビニルピロリドン、カーボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ）ゲル、ポリエチレングリコール、および／もしくは二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに適切な有機溶媒もしくは溶媒混合物を含有し得る。染料または顔料が、識別のために、または活性化剤の種々の組み合わせを特徴づけるために、錠剤コーティングまたは糖衣錠コーティングに添加されてもよい。
【００８７】
経口的に使用され得る医薬製剤は、ゼラチンで作られた押し込み型カプセル（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ  ｃａｐｓｕｌｅ）、ならびにゼラチンとグリセロールまたはソルビトールのような可塑剤で作られた軟質の密閉カプセル（ｓｏｆｔ  ｓｅａｌｅｄ  ｃａｐｓｕｌｅ）を包含する。押し込み型カプセルは、ラクトースのようなフィラー、デンプンのような結合剤、および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、ならびに、場合により安定剤との混合物中に活性成分を含み得る。軟カプセルにおいて、活性化剤は、脂肪油、液体パラフィン、または液体ポリエチレングリコールのような適切な液体中に溶解され得るか、または懸濁され得る。さらに、安定剤が添加され得る。経口投与のための全ての処方物は、このような投与に適切な投薬量であるべきである。舌下投与のために、組成物は、簡便な様式で処方された錠剤またはロゼンジ剤の形態を取り得る。
【００８８】
鼻腔内投与のために、または吸入による投与のために、本発明に従って使用する化合物は、適切な高圧ガス（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適切なガス）の使用と共に、加圧型パックまたはネブライザーからエアロゾルスプレー提示（ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ）の形態で簡便に送達され得る。加圧型エアロゾルの場合、投薬量単位は、定量を送達するためのバルブを与えることによって決定し得る。化合物とラクトースまたはデンプンのような適切な粉末基剤の粉末混合物を含む、吸入器（ｉｎｈａｌｅｒ）または吸入器（ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ）などに使用するためのゼラチンのカプセルおよびカートリッジが処方され得る。
【００８９】
化合物は、注射によって（例えば、ボーラス注射または持続注入によって）非経口的投与のために処方され得る。注射用の処方物は、単位投薬形態（例えば、アンプル中または複数用量容器（ｍｕｌｔｉ−ｄｏｓｅ  ｃｏｎｔａｉｎｅｒ）中）で、追加の防腐剤と共に与えられ得る。組成物は、油状物または水溶性ビヒクル中で懸濁剤、液剤、またはエマルジョン剤としてこのような形態を取り得、そして懸濁化剤、安定化剤、および／または分散剤のような処方剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔ）を含み得る。
【００９０】
非経口投与用の医薬製剤は、水溶性形態の活性化合物の水溶液を包含する。さらに、活性薬剤の懸濁剤は、適切な油性注射懸濁剤として調製され得る。適切な親油性の溶剤またはビヒクルとしては、ゴマ油のような脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドのような合成脂肪酸エステル、またはリポソームが挙げられる。水性注射懸濁剤は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランのような懸濁液の粘性を増加する物質を含み得る。場合により、懸濁液はまた、高濃度溶液の調製を可能にする適切な安定剤または化合物の溶解性を増大させる試薬を含み得る。
あるいは、活性成分は、使用の前に、適切なビヒクル（例えば、滅菌パイロジェンフリー水）との構成（ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）のために粉末形態であり得る。
【００９１】
上記の処方物に加えて、本発明の化合物はまた、持続性製剤として処方され得る。このような長期作用性処方物は、埋め込み（例えば、皮下または筋内）によって、または筋肉注射によって投与され得る。従って、例えば、化合物は、適切なポリマー物質もしくは疎水性物質（例えば、受容可能な油状物中のエマルジョンとして）、もしくはイオン交換樹脂と、またはやや溶けにくい誘導体として（例えば、やや溶けにくい塩として）、処方され得る。
【００９２】
疎水性化合物の薬学的キャリアは、ベンジルアルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機ポリマー、および水相を含む共溶媒系である。共溶媒系は、ＶＰＤ共溶媒系であり得る。ＶＰＤは、３ｗ／ｖ％のベンジルアルコール、８ｗ／ｖ％の非極性界面活性剤のポリソルベート８０、および６５ｗ／ｖ％のポリエチレングリコール３００を含み、無水エタノールで容量を合わせた溶液である。ＶＰＤ共溶媒系（ＶＰＤ：５Ｗ）は、５％のデキストロース水溶液で１：１に希釈したＶＰＤを含む。この共溶媒系は、疎水性化合物を十分に溶解し、そしてそれ自体は、全身投与の際に低毒性を示す。共溶媒系の比率は、その安定性および毒性の特徴を損なうことなく適切に変更され得る。さらに、共溶媒成分の同一性は、変更され得る：例えば、他の低毒性非極性界面活性剤は、ポリソルベート８０に代わって使用され得る；ポリエチレングリコールの画分の大きさは変更され得る；他の生体適合性ポリマー（例えば、ポリビニルピロリドン）は、ポリエチレングリコールに置き換えられ得る；そして他の糖または多糖は、デキストロースに代わり得る。
【００９３】
あるいは、疎水性医薬化合物の他の送達系が利用され得る。リポソーム剤およびエマルジョン剤は、疎水性薬物の送達ビヒクルまたはキャリアの例として公知である。ジメチルスルホキシドのようなある種の有機溶剤もまた、通常ＤＭＳＯの毒性に起因するより大きな毒性が負担であるが通常利用され得る。さらに、本発明の化合物は、治療剤を含む固体の疎水性ポリマーの半透過性マトリクスのような徐放系を使用して送達され得る。種々の徐放物質は確立され、そして当業者に公知である。徐放カプセルは、それらの化学的性質に依存して、数週間から１００日にわたって化合物を放出する。治療剤の化学的性質および生物学的安定性に依存して、タンパク質安定化のためのさらなるストラテジーが利用され得る。
【００９４】
薬学的組成物はまた、適切な固相またはゲル相のキャリアまたは賦形剤を含み得る。これらのキャリアおよび賦形剤は、溶けにくい薬物のバイオアベイラビリティーに顕著な改善を与え得る。このようなキャリアまたは賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールのようなポリマーが挙げられ得る。さらに、ゲルシア（Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標））、カプリオール（Ｃａｐｒｙｏｌ（登録商標））、ラグラフィル（Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標））、ラブラゾル（Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標））、ラウログリコール（Ｌａｕｒｏｇｌｙｃｏｌ（登録商標））、プルロール（Ｐｌｕｒｏｌ（登録商標））、ペセオール（Ｐｅｃｅｏｌ（登録商標））、トランスクトール（Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ（登録商標））などのような添加物または賦形剤が使用され得る。さらに、薬学的組成物は、皮膚上への薬物の直接的な送達のための皮膚パッチに取り込まれ得る。
【００９５】
本発明の薬剤の実際の投薬量は、使用される特定の薬剤、処方された特定の組成物、投与の様式、ならびに処置される特定の部位、ホストおよび疾患に従って変更されることが理解される。当業者は、所定の化合物についての試験データを考慮し、慣用の投薬量決定試験を使用して、所定のセットの状態について最適な投薬量を確定し得る。経口投与のために、一般的に利用される例示的な一日の用量は、約０．００１〜約１０００ｍｇ／ｋｇ（体重）であり、適切な間隔で処置の課程が繰り返される。プロドラッグの投与は、十分な活性化合物の質量レベルに対して化学的に等しい質量レベルで投薬され得る。
【００９６】
本発明の化合物は、ＨＩＶウイルスの感染、ＡＩＤＳ、エイズ関連症候群（ＡＲＣ）、またはＨＩＶウイルスの感染に関連する任意の他の疾患もしくは状態を被る哺乳動物（例えば、ヒト）の処置のための、さらなる薬剤（単数または複数）と組み合わせて投与され得る。本発明の化合物と組み合わせて使用され得る薬剤としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ＨＩＶプロテアーゼインヒビターとして有用な薬剤、ＨＩＶ逆転写酵素インヒビター、非ヌクレオシド系ＨＩＶ逆転写酵素インヒビター、ＨＩＶインテグラーゼのインヒビター、ＣＣＲ５インヒビター、ＨＩＶ融合インヒビター、免疫調節因子として有用な化合物、未知の機構によってＨＩＶウイルスを阻害する化合物、ヘルペスウイルスの処置に有用な化合物、抗感染薬として有用な化合物、および以下に記載されるような他の薬剤。
【００９７】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＨＩＶプロテアーゼインヒビターとして有用な化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：１４１  Ｗ９４（アンプレナビル）、ＣＧＰ−７３５４７、ＣＧＰ−６１７５５、ＤＭＰ−４５０、ネルフィナビル、リトナビル、サキナビル（インビラーゼ）、ロピナビル、ＴＭＣ−１２６、ＢＭＳ−２３２６３２（アタザナビル）、パリナビル（ｐａｌｉｎａｖｉｒ）、ＧＳ−３３３３、ＫＮＩ−４１３、ＫＮＩ−２７２、ＬＧ−７１３５０、ＣＧＰ−６１７５５、ＰＤ  １７３６０６、ＰＤ  １７７２９８、ＰＤ  １７８３９０、ＰＤ  １７８３９２、Ｕ−１４０６９０、ＡＢＴ−３７８、ＤＭＰ−４５０、ＡＧ−１７７６、ＭＫ−９４４、ＶＸ−４７８、インディナビル、チプラナビル、ＴＭＣ−１１４、ＤＰＣ−６８１、ＤＰＣ−６８４、フォザンプレナビルカルシウム（ｆｏｓａｍｐｒｅｎａｖｉｒ  ｃａｌｃｉｕｍ）（Ｌｅｘｉｖａ）、ＷＯ  ０３０５３４３５に開示されるベンゼンスルホンアミド誘導体、Ｒ−９４４、Ｒｏ−０３−３４６４９、ＶＸ−３８５、ＧＳ−２２４３３８、ＯＰＴ−ＴＬ３、ＰＬ−１００、ＳＭ−３０９５１５、ＡＧ−１４８、ＤＧ−３５−ＶＩＩＩ、ＤＭＰ−８５０、ＧＷ−５９５０Ｘ、ＫＮＩ−１０３９、Ｌ−７５６４２３、ＬＢ−７１２６２、ＬＰ−１３０、ＲＳ−３４４、ＳＥ−０６３、ＵＩＣ−９４−００３、Ｖｂ−１９０３８、Ａ−７７００３、ＢＭＳ−１８２１９３、ＢＭＳ−１８６３１８、ＳＭ−３０９５１５、およびＪＥ−２１４７。
【００９８】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＨＩＶ逆転写酵素のインヒビターとして有用な化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：アバカビル（１５９２Ｕ８９）、ＦＴＣ、ＧＳ−８４０、ラミブジン（３ＴＣ）、アデホビルジピボキシル（ａｄｅｆｏｖｉｒ  ｄｉｐｉｖｏｘｉｌ）、β−フルオロ−ｄｄＡ、ｄｄＣ（ジデオキシシチジン、ザルシタビン）、ｄｄＩ（ジデオキシインシン（ｄｉｄｅｏｘｙｉｎｓｉｎｅ）、ジダノシン）、スタブジン（ｄ４Ｔ）、ジドブジン（ＡＺＴ）、テノホビル、アンドキソビル（ａｍｄｏｘｏｖｉｒ）、ＳＰＤ−７５４，ＳＰＤ−７５６、ラシビール（ｒａｃｉｖｉｒ）、リバーセット（ｒｅｖｅｒｓｅｔ）（ＤＰＣ−８１７）、ＭＩＶ−２１０（ＦＬＧ）、β−Ｌ−Ｆｄ４Ｃ（ＡＣＨ−１２６４４３）、ＭＩＶ−３１０（アロブジン（ａｌｏｖｕｄｉｎｅ）、ＦＬＴ）、ｄＯＴＣ、ＤＡＰＤ、およびエムトリシタビン。
【００９９】
ＨＩＶ逆転写酵素の非ヌクレオシド系インヒビターとして有用な化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：エファビレンツ、ＨＢＹ−０９７、ネビラピン、ＴＭＣ−１２０（ダピビリン（ｄａｐｉｖｉｒｉｎｅ））、ＴＭＣ−１２５、デラビラジン（ｄｅｌａｖｉｒａｄｉｎｅ）、ＤＰＣ−０８３、ＤＰＣ−９６１、ＴＭＣ−１２０、カプラビリン（ｃａｐｒａｖｉｒｉｎｅ）、およびＷＯ０３０６２２３８に開示されるような三環系ピリミジノン誘導体。
【０１００】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＣＣＲ５インヒビターとして有用な化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ＴＡＫ−７７９、ＳＣ−３５１１２５、ＳＣＨ−Ｄ、ＵＫ−４２７８５７、ＰＲＯ−１４０、およびＧＷ−８７３１４０（Ｏｎｏ−４１２８、ＡＫ−６０２）。
【０１０１】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＨＩＶインテグラーゼ酵素のインヒビターとして有用な化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ＷＯ０３０６２２０４に開示される１，５−ナフチリジン−３−カルボキシアミド誘導体、ＷＯ０３０４７５６４に開示される化合物、ＷＯ０３０４９６９０に開示される化合物、およびＷＯ０３０３５０７６に開示される５−ヒドロキシピリミジン−４−カルボキシアミド誘導体。
【０１０２】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＨＩＶを処置するための融合インヒビターとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：Ｔ２０、Ｔ−１２４９、ＡＭＤ−３１００、およびＪＰ  ２００３１７１３８１に開示される縮合三環系化合物。
【０１０３】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得る有用なＨＩＶのインヒビターである他の化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：Ｓｏｌｕｂｌｅ  ＣＤ４、ＴＮＸ−３５５、ＰＲＯ−５４２、ＢＭＳ−８０６、フマル酸テノホビルジソプロキシル、およびＪＰ  ２００３１１９１３７に開示される化合物。
【０１０４】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得るＨＩＶ以外のウイルスによる感染を処置または管理するのに有用な化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：アシクロビル、ペンシクロビル、ＨＰＭＰＣ、オキセタノシン（ｏｘｅｔａｎｏｃｉｎ）Ｇ、ＡＬ−７２１、シドホビル（ｃｉｄｏｆｏｖｉｒ）、サイトメガロウイルス免疫グロブリン（ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  ｉｍｍｕｎｅ  ｇｌｏｂｉｎ）、サイトベン、ガンシクロビル、ファムシクロビル、Ｉｓｉｓ  ２９２２、ＫＮＩ−２７２、バラシクロビル、およびビラゾールリバビリン。
【０１０５】
免疫調節因子として作用し、そして本発明の化合物と組み合わせて使用され得る化合物としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ＡＤ−４３９、ＡＤ−５１９、αインターフェロン、ＡＳ−１０１、ブロピリミン（ｂｒｏｐｉｒｉｍｉｎｅ）、アセマンナン、ＣＬ２４６、７３８、ＥＬ１０、ＦＰ−２１３９９、γインターフェロン、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、ＩＬ−２、免疫グロブリン静脈注射、ＩＭＲＥＧ−１、ＩＭＲＥＧ−２、イムチオールジエチルジチオカルバメート、α−２インターフェロン、メチオニン−エンケファリン、ＭＴＰ−ＰＥ、顆粒球コロニー刺激因子、レミューン（ｒｅｍｕｎｅ）、ｒＣＤ４、組み換え可溶性ヒトＣＤ４、インターフェロンα−２、ＳＫ＆Ｆ１０６５２８、可溶性Ｔ４チモペンチン（ｙｈｙｍｏｐｅｎｔｉｎ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、ツカレソール（ｔｕｃａｒｅｓｏｌ）、組み換えヒトインターフェロンβ、およびインターフェロンαｎ−３。
【０１０６】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得る抗感染薬としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：プリマキンと共のクリンダマイシン、フルコナゾール、パスチル（ｐａｓｔｉｌｌ）、オルニジル（ｏｒｎｉｄｙｌ）、エフロールニチンペンタミジン（ｅｆｌｏｒｎｉｔｈｉｎｅ  ｐｅｎｔａｍｉｄｉｎｅ）、スピラマイシン、イトラコナゾール（ｉｎｔｒａｃｏｎａｚｏｌｅ）−Ｒ５１２１１、トリメトレキサート、ダウノルビシン、組み換えヒトエリスロポイエチン、組み換えヒト成長ホルモン、酢酸メゲストロール、テストステロン（ｔｅｓｔｅｒｏｎｅ）、および中心経腸栄養法（ｔｏｔａｌ  ｅｎｔｅｒａｌ  ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）。
【０１０７】
本発明の化合物と組み合わせて使用され得る他の化合物としては、以下が挙げられるこれらに限定されない：アセマンナン（ａｃｍａｎｎａｎ）、アンサマイシン、ＬＭ４２７、ＡＲ１７７、ＢＭＳ−２３２６２３、ＢＭＳ−２３４４７５、ＣＩ−１０１２、カードラン硫酸（ｃｕｒｄｌａｎ  ｓｕｌｆａｔｅ）、デキスロラン硫酸（ｄｅｘｔｒａｎ  ｓｕｌｆａｔｅ）、ＳＴＯＣＲＩＮＥ  ＥＬ  １０、ヒペリシン、ロブカビル（ｌｏｂｕｃａｖｉｒ）、ノバプレン（ｎｏｖａｐｒｅｎ）、ペプチドＴオクタペプチド配列（ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔ  ｏｃｔａｂｐｅｐｔｉｄｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ）、ホスホノギ酸三ナトリウム（ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈｏｎｏｆｏｒｍａｔｅ）、プロブコール、およびＲＢＣ−ＣＤ４。
【０１０８】
さらに、本発明の化合物は、ＭＭＰインヒビターといわれるメタロマトリクスプロテアーゼインヒビターとして作用する化合物と組み合わせて使用され得る。
【０１０９】
さらなる薬剤（単数または複数）の特定の選択は多数の因子に依存し、これらの因子としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：処置される哺乳動物の状態、処置される特定の状態（単数または複数）、本発明の化合物（単数または複数）およびさらなる薬剤（単数または複数）の同一性、ならびに哺乳動物を処置するために使用される任意のさらなる化合物の同一性。本発明の化合物（単数および複数）およびさらなる薬剤（単数および複数）の特定の選択は、当業者の知見の範囲内である。
【０１１０】
本発明の化合物は、ＨＩＶウイルスの感染、ＡＩＤＳ、エイズ関連症候群（ＡＲＣ）、またはＨＩＶウイルスの感染に関連する任意の他の疾患もしくは状態を被る哺乳動物（例えば、ヒト）を処置するための上記の任意のさらなる薬剤と組み合わせて投与され得る。このような組み合わせは、本発明の化合物（単数または複数）が、上記のさらなる薬剤と同じ処方物中に存在する状態で、哺乳動物に投与され得る。あるいは、このような組み合わせは、本発明の化合物（単数または複数）がさらなる薬剤が見出される処方物とは別個の処方物中に存在する状態で、ＨＩＶウイルス感染を被る哺乳動物に投与され得る。本発明の化合物（単数または複数）がさらなる薬剤と別々に投与される場合、このような投与は、同時にまたは適切な時間を間において連続して行われ得る。さらなる薬剤（単数または複数）として同じ処方物中に本発明の化合物（単数または複数）を含むか否かの選択は、当業者の知見の範囲内である。
【０１１１】
さらに、本発明の化合物は、本発明の化合物に対する哺乳動物の暴露を増加させる効果を有するさらなる薬剤と組み合わせて、哺乳動物（例えば、ヒト）に投与され得る。本明細書中で使用される場合、用語「暴露」とは、一定期間にわたって測定されるような哺乳動物の血漿中の本発明の化合物の濃度をいう。特定の化合物に対する哺乳動物の暴露は、適切な形態で哺乳動物に本発明の化合物を投与し、予め決定した時間で血漿サンプルを回収し、そして液体クロマトグラフィーまたは液体クロマトグラフィー／質量分析のような適切な分析技術を使用して、血漿中の本発明の化合物の量を測定することによって決定され得る。特定の時間での血漿中の本発明の化合物の量は測定され、そして全てのサンプルからの濃度および時間データが曲線を与えるようにプロットされる。この曲線下の面積が計算され、そして化合物に対する哺乳動物の暴露を提供する。用語「暴露」、「曲線下の面積」、および「濃度／時間曲線下の面積」は、同じ意味を有することが意図され、そして全体を通して交換可能に使用され得る。
【０１１２】
本発明の化合物に対する哺乳動物の暴露を増加するために使用され得る薬剤は、チトクロムＰ４５０（ＣＹＰ４５０）酵素の少なくとも１つのアイソフォームのインヒビターであり得る薬剤である。有益に阻害され得るＣＰＹ４５０のアイソフォームとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、およびＣＹＰ３Ａ４。ＣＹＰ３Ａ４を阻害するために使用され得る適切な薬剤としては、リトナビルが挙げられるがこれに限定されない。
【０１１３】
このような組み合わせは本発明の化合物（単数または複数）が、上記のさらなる薬剤と同じ処方物中に存在する状態で哺乳動物に投与され得る。あるいは、このような組み合わせは、本発明の化合物（単数または複数）が、さらなる薬剤が見出される処方物と別個の処方物中に存在する状態で投与され得る。本発明の化合物（単数または複数）がさらなる薬剤と別々に投与される場合、このような投与は、同時にまたは適切な時間を間において連続して行われ得る。さらなる薬剤（単数または複数）として同じ処方物中に本発明の化合物（単数または複数）を含むか否かの選択は、当業者の知見の範囲内である。
【０１１４】
いくつかの異なるアッセイフォーマットが、標的（または宿主）ＤＮＡへのウイルス性ＤＮＡのインテグラーゼ媒介組み込み（ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ）を測定するのに利用可能であり、従って、インテグラーゼ活性を調節（例えば、阻害）する化合物を同定する。一般的に、例えば、リガンド結合アッセイを使用して、目的の酵素との相互作用を決定できる。結合に注目する場合、標識化酵素が使用され得る。この標識は蛍光剤、放射性同位体などであり、これは酵素に結合する際に定量可能な変化を残す。あるいは、当業者は、酵素への結合のために抗体を利用し得る。この抗体は標識化され、シグナルの増幅を可能にする。従って、結合は、酵素に結合するリガンドの直接的な測定によって決定され得る。さらに、結合は、酵素へのリガンド結合の競合的置換によって決定され得、このリガンドは検出可能な標識で標識される。阻害活性に注目する場合、インタクトな生物体または細胞が研究され得、そして阻害化合物の結合に応じる生物体機能または細胞機能の変化が、測定され得る。あるいは、細胞応答は、例えば、ウイルス誘導性合胞体形成（ＨＩＶ−１合胞体形成アッセイ）をモニターすることによって顕微鏡的に決定され得る。従って、ＨＩＶインテグラーゼ阻害活性を測定するために有用な種々のインビトロアッセイおよびインビボアッセイが存在する。例えば、Ｌｅｗｉｎ，Ｓ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７３（７）：６０９９−６１０３（Ｊｕｌｙ  １９９９）；Ｈａｎｓｅｎ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １７（６）：５７８−５８２（Ｊｕｎｅ  １９９９）；ａｎｄ  Ｂｕｔｌｅｒ，Ｓ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ７（５）：６３１−６３４（Ｍａｙ
２００１）を参照のこと。
【０１１５】
インテグラーゼ媒介組み込みを測定するために使用される例示的な特定のアッセイフォーマットとしては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：ＥＬＩＳＡ、ＤＥＬＦＩＡ（登録商標）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ））、およびＯＲＩＧＥＮ（登録商標）（ＩＧＥＮ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ））の技術。さらに、ゲルベースの組み込み（ＳＤＳ−ＰＡＧＥでの産物形成を測定することによって組み込みを決定する）および二本鎖ＤＮＡ（ｄｓ−ＤＮＡ）の１単位を使用するシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）壊変アッセイ（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ  ａｓｓａｙ）を使用して、インテグラーゼ活性をモニターし得る。
【０１１６】
本発明の１つの実施形態において、好ましいアッセイは、インテグラーゼ鎖転移ＳＰＡ（ｓｔＩＮＴＳＰＡ）であり、これは、高スループットスクリーニングを可能にする小型化に拡張可能な均一系によるアッセイにおいてインテグラーゼの鎖転移機構を特異的に測定するためにＳＰＡを使用する。このアッセイは、ＤＮＡ結合および／または３’プロセシングではなく鎖転移に注目する。この高感度で再現性のあるアッセイは、標的ＤＮＡの添加前に、３’処理されたウイルス性ＤＮＡ／インテグラーゼ複合体を形成することによって実際の酵素的機能と非特異的相互作用とが識別され得る。このような形成は、インテグラーゼ３’プロセシングを阻害するか、またはウイルス性ＤＮＡとのインテグラーゼの関連を防止する化合物に対してではなく、鎖転移の化合物モジュレータ（例えば、インヒビター）への偏りを創り出す。この偏りは、公知のアッセイよりもより特異的なアッセイを提供する。さらに、不均一系によるアッセイ（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｏｕｓ  ａｓｓａｙ）の洗浄工程は必要とされないので、このアッセイの同質的性質は、アッセイを行うために必要な工程の数を減らせる。
【０１１７】
インテグラーゼ鎖転移ＳＰＡフォーマットは、ウイルス性ＤＮＡおよび標的ＤＮＡをモデルとする２つのＤＮＡ成分からなる。モデルのウイルス性ＤＮＡ（ドナーＤＮＡとしてもまた公知）は、３’末端で予め処理されたビオチン化ｄｓ−ＤＮＡであり、二重鎖の５’末端でオーバーハングするＣＡヌクレオチド塩基を提供する。標的ＤＮＡ（宿主ＤＮＡとしてもまた公知）は、一般的に両方の鎖（好ましくは３’末端）上の［3Ｈ］−チミジンヌクレオチドを含むｄｓ−ＤＮＡのランダムヌクレオチド配列であり、標的ｄｓ−ＤＮＡの両方の鎖上に生じるインテグラーゼ鎖転移反応の検出を可能にする。
【０１１８】
インテグラーゼ（組み換え的にか、または合成的に作製され、そして好ましくは精製された）は、例えば、ストレプトアビジンコート化ＳＰＡビーズを表面に結合したウイルス性ＤＮＡに予め複合体化される。一般的に、インテグラーゼは、希釈されたウイルス性ＤＮＡとインテグラーゼを合わせ、そしてインキュベートし、次いで、未結合のインテグラーゼを取り除くことによるバッチプロセスにおいて予め複合体化される。ウイルス性ＤＮＡ：インテグラーゼの好ましいモル比は、約１：約５である。インテグラーゼ／ウイルス性ＤＮＡのインキュベートは、任意であるが、しかし、インキュベートは、室温または約３７℃で約１５〜約３０分のインテグラーゼ／ウイルス性ＤＮＡのインキュベートにより、増大した特定の指標を提供する。好ましいインキュベートは、およそ室温で、約１５分間である。
【０１１９】
反応は、潜在的なインテグラーゼモジュレータ化合物の非存在下または存在下で、インテグラーゼ／ウイルス性ＤＮＡビーズ（例えば）に標的ＤＮＡを添加することによって開始され、そしておよそ室温または約３７℃、好ましくは３７℃で約２０〜約５０分間（利用されるアッセイ容器の型に依存する）続けられる。このアッセイは、インテグラーゼ反応混合物に停止緩衝液を添加することによって終結される。連続してか、または一度に添加される停止緩衝液の成分は、酵素活性を終結し、インテグラーゼ／ＤＮＡ複合体を解離し、非組み込みＤＮＡ鎖（変性剤）を分離し、場合により、例えば、プレートベースのシンチレーション計数の検出器に近い反応混合物の表面にＳＰＡビーズを浮かべ、ＳＰＡビーズから放たれる光（放射標識シグナル）として定量される組み込みウイルス性ＤＮＡのレベルを測定するために機能する。停止緩衝液へのさらなる成分（例えば、ＣｓＣｌまたは機能的等価化合物）の追加が、場合により、好ましくは、プレートベースのシンチレーション計数と共に、例えば、アッセイウェル上に配置された検出器（例えば、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（登録商標）カウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．（Ｂｏｓｔｏｎ，  ＭＡ）））と共に使用される。ＰＭＴ読み取りがプレートの底部から取り出される場合（例えば、ＭｉｃｒｏＢｅｔａ（登録商標）カウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ））が使用される場合）、ＣｓＣｌは利用されない。
【０１２０】
反応の特異性は、ジデオキシウイルス性ＤＮＡ／インテグラーゼから生成されるシグナルに対する、ウイルス性ＤＮＡ／インテグラーゼとの標的ＤＮＡ反応物から生成されるシグナルの比から決定され得る。高濃度（例えば、５０ｎＭまたはそれ以上）の標的ＤＮＡは、インテグラーゼ／ウイルス性ＤＮＡサンプル中の増大した濃度のインテグラーゼと共にｄ／ｄｄＤＮＡ比を増大し得る。
【０１２１】
結果を使用して、試験化合物のインテグラーゼ調節活性（例えば阻害活性）を評価し得る。例えば、当業者は、コンビナトリアル化合物ライブラリまたは合成化合物を試験するためのハイスループットスクリーニング方法を利用し得る。化合物の阻害パーセントは、例えば、（１−（（ＣＰＭサンプル−ＣＰＭｍｉｎ）／（ＣＰＭｍａｘ−ＣＰＭｍｉｎ）））*１００のような式を使用して計算され得る。最小値は、既知のモジュレータ（例えば、インヒビター）の存在下、化合物に対するＩＣ50よりも約１００倍高い濃度でのアッセイシグナルである。最小シグナルは、アッセイの実際のバックグラウンドに近似する。最大値は、化合物の非存在下、インテグラーゼ媒介活性について得られたアッセイシグナルである。さらに、合成されかつ精製されたコンビナトリアル化合物のＩＣ50値は決定され得、それによって、化合物はアッセイの試験のために所望の濃度よりも約１０〜１００倍高い濃度で調製され、次いで、化合物の希釈は、例えば１／２ｌｏｇの希釈間隔で８点の滴定曲線を作製する。次いで、例えば、化合物サンプルは、アッセイウェルに移される。さらなる希釈（例えば、１０倍希釈）は任意である。次いで、阻害化合物の阻害パーセントは、例えば、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍカーブフィッティングソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）または機能的に等価なソフトウェアを使用して、非線形回帰、Ｓ字形用量応答式（ｓｉｇｍｏｉｄａｌ  ｄｏｓｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｅｑｕａｔｉｏｎ）（変数傾斜（ｖａｒｉａｂｌｅ  ｓｌｏｐｅ））に適用した値を用いて上記のように決定され得る。
【０１２２】
ｓｔＩＮＴＳＰＡアッセイ条件は、好ましくは、大きくかつ特異的なアッセイシグナルを生成するようなインテグラーゼ、ウイルス性ＤＮＡ、および標的ＤＮＡの比のために最適化される。特異的なアッセイシグナルは、生成物を生じないインテグラーゼとＤＮＡとの複合体形成と、実際の鎖転移触媒事象を識別するシグナルとして定義される。他のインテグラーゼアッセイにおいて、緩衝条件が、改変されたウイルス性ＤＮＡオリゴヌクレオチドを使用して厳密に最適化され、そしてカウンター試験される場合を除き、大きな非特異的成分（バックグラウンド）は、しばしば全アッセイシグナルに寄与する。非特異的バックグラウンドは、生産的な鎖転移機構に依存せず高度に安定なインテグラーゼ／ウイルス性ＤＮＡ／標的ＤＮＡ複合体の形成に起因する。
【０１２３】
好ましいｓｔＩＮＴＳＰＡは、コントロールとして３’末端でジデオキシヌクレオシドを含む改変されたウイルス性ＤＮＡオリゴネクレオチドを使用することによって、生産的鎖転移反応と複合体形成を識別する。この改変されたコントロールＤＮＡは、インテグラーゼ／ウイルス性ＤＮＡ／標的ＤＮＡ複合体に取り込まれ得るが、鎖転移のための基質として機能し得ない。従って、生産的鎖転移反応と非生産的鎖転移反応との間の識別ウィンドウ（ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｗｉｎｄｏｗ）が観察され得る。さらに、ジデオキシウイルス性ＤＮＡビーズとの反応は、アッセイの好ましい最適化条件を使用して、アッセイの実際のバックグラウンドに密接にマッチしたアッセイシグナルを与える。アッセイの実際のバックグラウンドは、インテグラーゼの非存在下、全てのアッセイ成分（ウイルス性ＤＮＡおよび［3Ｈ］−標的ＤＮＡ）との反応として定義される。
【０１２４】
インテグラーゼアッセイに使用されるアッセイ緩衝液は、一般的に以下を含む：例えば、２−メルカプトエタノールまたはＤＴＴのような少なくとも１種の還元剤、ここで新しい粉末としてのＤＴＴが好ましい；例えば、Ｍｇ++、Ｍｎ++、またはＺｎ++のような少なくとも１種の二価カチオン、Ｍｇ++が好ましい；例えば、オクトキシノール（ＩＧＥＰＡＬ−ＣＡまたはＮＰ−  ４０としてもまた公知）またはＣＨＡＰＳのような少なくとも１種の乳化剤／分散剤；ＮａＣｌまたは機能的等価化合物；ＤＭＳＯまたは機能的等価化合物；および例えば、ＭＯＰＳのような少なくとも１種の緩衝剤。重要な緩衝液特性は、以下である：ＰＥＧの非存在；約１〜約５ｍＭのＣＨＡＰＳおよび／もしくは約０．０２〜約０．１５％のＩＧＥＰＡＬ−ＣＡのような高濃度の洗浄剤の含有、またはＳＰＡビーズおよびアッセイウェルに対する非特異的結合（ｓｔｉｃｋｉｎｇ）を少なくとも減少し得、そしておそらく特異的指標を増強する機能的に等価な化合物の含有；高濃度（約１〜約１２％）のＤＭＳＯの含有；および中程度のレベルのＮａＣｌ（５０ｍＭまたはそれ以上）およびＭｇＣｌ2（約３〜約１０ｍＭ）の含有、またはｄｄ−ＤＮＡバックグラウンドを減少し得る機能的等価化合物の含有。アッセイ緩衝液は、場合により、保存の間の真菌汚染および細菌汚染を減少するための、例えば、ＮａＮ3のような防腐剤を含み得る。
【０１２５】
好ましい停止緩衝液は、以下を含む：ＥＤＴＡ、または酵素活性を終結し得る機能的等価化合物、例えば、ＮａＯＨまたは塩酸グアニジンを含む変性剤、および場合により、ＣｓＣｌまたはレザバの上部で、シンチレーション検出のためのアッセイ容器の上部までＳＰＡビーズを浮揚することを補助し得、そしておそらく化合物の相互作用を最小化する機能的等価化合物。インテグラーゼ鎖転移ＳＰＡの例は、実施例１３に示される。
【０１２６】
あるいは、調節化合物の活性レベルは、以下のような抗ウイルスアッセイにおいて決定され得る：例えば、ウイルス性抗原（例えば、ＨＩＶ−１  ｐ２４）の生産、もしくはウイルス複製の指標としてのウイルス性酵素（例えば、ＨＩＶ−１逆転写酵素）の活性を定量的に測定するアッセイ、またはウイルスゲノムへ導入される外因性レポーター遺伝子の発現をモニターすることによるウイスル複製を測定するアッセイ（ＨＩＶ−１レポーターウイルスアッセイ）（Ｃｈｅｎ，Ｂ．Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６８（２）：６５４−６６０（１９９４）；Ｔｅｒｗｉｌｌｉｇｅｒ，Ｅ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ８６：３８５７−３８６１（１９８９））。潜在的なモジュレータ化合物の抗ウイルス性活性を測定する好ましい方法は、ＨＩＶ−１細胞保護アッセイを利用し、ここでウイルス複製は、例えば、実施例１４に示されるような色素還元法を使用して、宿主細胞細胞変性効果を誘導したウイルスをモニターすることによって間接的に測定される。
【０１２７】
１つの実施形態において、本発明の化合物は、ＨＩＶ細胞保護アッセイを用いて測定される場合、少なくとも１０-5Ｍ（または少なくとも１０μＭ）のＨＩＶインテグラーゼに対するＥＣ50値を有する化合物を含む。別の実施形態において、ＨＩＶ細胞保護アッセイを用いて測定される場合、本発明の化合物は、少なくとも１μＭのＨＩＶインテグラーゼに対するＥＣ50値を有する。なお別の実施形態において、本発明の化合物は、ＨＩＶ細胞保護アッセイを用いて測定される場合、少なくとも０．１μＭのＨＩＶインテグラーゼに対するＥＣ50値を有する。
【０１２８】
本発明の薬剤は、以下に記載されるような反応経路および合成スキームを使用し、容易に入手可能な出発物質を使用する当該分野で利用可能な技術を利用して、製造され得る。本発明の好ましい化合物の製造は、以下の実施例に詳細に記載されるが、当業者は、記載される化学反応が本発明の多数の他のＨＩＶインテグラーゼ薬剤を製造するために容易に適合され得ることを認識する。例えば、本発明に従う非例示的な化合物の合成は、当業者に明らかな改変によって（例えば、妨害基を適切に保護することによってか、当該分野で公知の他の適切な試薬に変更することによってか、または反応条件の通常の改変をなすことによって）行われ得る。あるいは、本明細書中に開示されるか、または当該技術において公知の他の反応は、本発明の他の化合物を製造するための適合性を有することが認識される。
【０１２９】
合成化合物に有用な試薬は、当該分野で公知の技術に従って得られ得るか、または製造され得る。例えば、一般的な塩形態および保存試薬溶液からの遊離アミンの製造は、小スケール反応に有用であり得る。Ａｂｄｅｌ−Ｍａｇｉｄ  ｅｔ  ａｌ．，「Ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ  Ａｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌｄｅｈｙｄｅｓ  ａｎｄ  Ｋｅｔｏｎｅｓ  ｗｉｔｈ  Ｓｏｄｉｕｍ  Ｔｒｉａｃｅｔｏｘｙｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ，」Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．６１：３８４９（１９９６）もまた参照のこと。
【０１３０】
遊離塩基のメタノール性溶液（ｍｅｈａｎｏｌｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）は、遊離塩基がメタノールに可溶性である場合、塩酸塩、二塩酸塩、臭化水素酸塩、または他の塩から製造され得る。この手順において、ナトリウムメトキシドが添加されると、アミンの遊離塩基、特に第一級アミンが塩を形成するための空気から二酸化炭素を吸収するので、空気に対する暴露を防止するように注意するべきである。０．１Ｍメタノール溶液の遊離塩基（１０ｍＬ量）を、以下のように製造し得る。攪拌棒を備えた風袋を測った三角フラスコに一塩酸塩（１．０ｍｍｏｌ質量）、およびメタノール（７ｍＬ）を添加する。攪拌したスラリーに、メタノール（２５質量％、４．３７Ｍ）中のナトリウムメトキシド（２２９ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ、１当量）を添加し、フラスコに栓をし、そしてこの混合物を２時間激しく攪拌する。塩化ナトリウムの微細な乳白色の沈殿物が形成されるので、このスラリーは、時々外観が変化する。１５ｍＬの中程度のガラス製漏斗にスラリーを通して濾過し、メタノール（１〜２ｍＬ）でフィルターケースを洗浄し、２０ｍＬのバイアルに濾液を移し、そしてメタノールで１０ｍＬに希釈する。塩化ナトリウムの理論的収量はほぼ５９ｍｇであるが、回収量は、メタノールにわずかに可溶性であるために定量的ではない。二塩酸塩について、ナトリウムメトキシドの第二の当量が必要である（４５８ｍＬ）。
【０１３１】
０．５Ｍエタノール溶液の水素化ホウ素ナトリウムは、以下のように製造され得る。水素化ホウ素ナトリウム（５２０ｍｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を、純粋な（非変性）無水エタノール（２５ｍＬ）中で、２〜３分間攪拌する。この懸濁液を中程度のガラス製漏斗に通して濾過し、少量の未溶解固体（代表的に、ホウ化水素の全量の約５％、または２５ｍｇ）を除去する。濾液は、少量の水素のみを導き出す無色の溶液として現れる。この溶液は、数時間の間にほとんど分解され、ゲル状の沈殿物の形成を生じるので、すぐに使用されるべきである。水素化ホウ素ナトリウムは、吸湿性であるので、一旦、固体を計量した後に溶液を作製することによって空気に対する暴露を避ける。水素化ホウ素ナトリウムは、室温でエタノール中で約４％の溶解性を有する。これは、０．８Ｍを少し超えることに対応する。しかし、時々、５分間またはそれ以上の時間の攪拌の後でさえ、固体の少しの割合が調製される濃度にかかわらず未溶解のまま残っている。
【０１３２】
明細書全体にわたって利用される以下の略語は、特に示されない限り、以下の意味を有する：
ＮａＨ：水素化ナトリウム；
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー；
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；
ＥＤＣ：Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジミド；
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；
ＤＤＱ：２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン；
ＭＳ：モレキュラーシーブ；
ＮａＢＨ3ＣＮ：水素化シアノホウ素ナトリウム；
ＴｉＣｌ4：四塩化チタン；
ＡｃＯＨ：酢酸；
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；
ＰＰＴＳ：ピリジニウムｐ−トルエンスルホネート；および
ＨＢＯｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール。
【０１３３】
本明細書の全体にわたって利用されるさらなる略語は、当業者に公知であるか、または以下の実施例に説明されるかのいずれかである。
【０１３４】
〔実施例〕
本発明は、以下の非限定的な実施例にさらに例示される。以下に記載される実施例において、特に示されない限り、以下の説明における全ての温度は、摂氏であり、そして全ての部および割合は、特に示されない限り、重量部または重量％である。
【０１３５】
種々の出発物質および他の試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ＣｏｍｐａｎｙまたはＬａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｌｔｄ．のような商業的供給業者から購入され、そして特に示されない限りさらに精製することなく使用された。ＳｕｒｅＳｅａｌ（登録商標）ボトル中のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）は、Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、そのまま使用した。全ての溶媒は、特に示されない限り、当該分野で標準の方法を使用して精製された。
【０１３６】
以下に示される反応は、窒素、アルゴンの陽圧下、または乾燥チューブを用いて、周囲温度にて（特に示されない限り）、無水溶媒中で行われ、そして反応フラスコは、シリンジを介する基質および試薬の導入のためのゴム製のセプタムをはめ込まれる。ガラス製品は、オーブン乾燥および／または熱乾燥された。分析用の薄層クロマトグラフィーを、ガラスバックのシリカゲル６０°Ｆ  ２５４プレート（Ａｎａｌｔｅｃｈ（０.２５ｍｍ））上で行い、そして適切な溶媒比（ｖ／ｖ）で溶出した。この反応をＴＬＣによってアッセイし、そして出発物質の消費が判断されたときに終了した。
【０１３７】
ＴＬＣプレートを、ＵＶ吸収によって、またはｐ−アニスアルデヒドスプレー試薬もしくはリンモリブデン酸試薬（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、エタノール中２０ｗｔ％）（これは、熱を用いて活性化された）を用いて可視化した。典型的に、反応溶媒または抽出溶媒で反応容量を二倍にすることによって、ワークアップを行い、次いで抽出容量の２５％容量（特に示されない限り）を使用して、示される水溶液で洗浄した。生成物の溶液を、濾過の前に無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして回転エバポレーター上で減圧下で溶媒を蒸発し、そして真空中で除去された溶媒を記録した。フラッシュカラムクロマトグラフィー［Ｓｔｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａ．Ｊ，Ｏｒｇ  Ｃｈｅｍ  ４３：２９２３（１９７８）］を、特に規定されない限り、Ｂａｋｅｒグレードフラッシュシリカゲル（４７−６１ｍｍ）、および約２０：１〜５０：１のシリカゲル：粗製物質の比を使用して行った。水素化分解を、示された圧力または周囲圧力で行った。
【０１３８】
1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、３００ＭＨｚ、５００ＭＨｚで作動するＢｒｕｋｅｒ機器で記録し、そして７５ＭＨｚで作動する13Ｃ−ＮＭＲを記録した。ＮＭＲスペクトルを、参照標準としてクロロホルム（７.２５ｐｐｍおよび７７.００ｐｐｍ）、もしくはＣＤ3ＯＤ（３.４および４.８ｐｐｍおよび４９.３ｐｐｍ）、または適切な場合、内部テトラメチルシラン標準（０.００ｐｐｍ）を使用して、ＣＤＣｌ3溶液（ｐｐｍで報告される）として得る。他のＮＭＲ溶媒が必要である場合使用された。ピークの多重項を報告し、以下の略語を使用する：ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｍ＝多重項、ｂｒ＝幅広い、ｄｄ＝二重項の二重項、ｄｔ＝三重項の二重項。得られる場合、カップリング定数は、Ｈｅｒｔｚで報告される。
【０１３９】
赤外線スペクトルを、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ＦＴ−ＩＲ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒで、ニートオイル、ＫＢｒペレット、またはＣＤＣＬ3溶液として記録し、そして報告される場合、波数（ｃｍ-1）で行った。質量スペクトルを、ＬＣ／ＭＳまたはＡＰＣＩを使用して得た。全ての融点は未補正である。
全ての最終生成物は、８５％以上の純度を有した（２２０ｎｍおよび２５４ｎｍの波長でＨＰＬＣにより）。
【０１４０】
（一般的な手順）
スキーム１は、メタノールまたはエタノール中の水酸化ナトリウムのような塩基の非存在下または存在下、エステル１−２（ここで、Ｒは、代表的にメチルまたはエチルであり、そしてＲ1〜Ｒ9は、上記に定義される通りである）、および置換または非置換のヒドロキシルアミンからの直接的な本発明の化合物１−４を製造する方法を示す（Ｃ．Ｒ．Ｈａｕｓｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｌｌ．，Ｖｏｌ．２，ｐ．６７，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９４３））。このエステル１−２は、ＤＭＦまたはＤＭＳＯ中のＮａＨの存在下、Ｒ7Ｘと化合物１−１とのアルキル化によって作製し得る（Ｍ．Ｋ．Ｅｂｅｒｌｅ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４１，６３３（１９７６）；Ｒ．Ｊ．Ｓｕｎｄｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３８，３３２４）。あるいは、エステル１−２を、遊離酸１−３にけん化し得、次いでこれを、Ｏ−（７−アザベンザトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、もしくはＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジミド（ＥＤＣ）のようなカップリング試薬、または当業者によく知られている多くの他のカップリング試薬を使用して、置換または非置換のヒドロキシルアミンとカップリングし、本発明の化合物１−４を得る。例えば、Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐｐ．５０８−５１１，Ｊｏｈｎ  Ｗｈｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（２００１）に適切な方法が記載される。以下の実施例に示されるような条件の使用は、ヒドロキサメート（ｈｙｄｒｏｘａｍａｔｅ）１−４のパラレル合成またはコンビナトリアル合成を可能にする。
【０１４１】
【化１０】
2006516606.tif 000012
【０１４２】
中間体および出発物質の製造
【化１１】
2006516606.tif 000013
【０１４３】
スキーム２は、置換β−カルボリン化合物１−１（ここで、Ｒはエチルであり、そしてＲ2〜Ｒ6は上記に定義された通りである）の調製にための簡便な方法を示す（Ｇ．Ｎｅｅｆ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，２０，１２９５（１９８３））。この合成は、インドール化学の標準的な方法を利用する：アルジミン２−２を、Ｃａｍｐｂｅｌｌ法（Ｋ．Ｎ．Ｃａｍｐｂｅｌｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，６６，８２（１９４４））によって製造し得、そしてＳｎｙｄｅｒの反応様式（Ｈ．Ｒ．Ｓｎｙｄｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，７９，２２１７（１９５７））と同様にインドールと反応させ、化合物２−３を得る。化合物２−３とエチルニトロアセテートとの縮合を、ＬｙｔｔｌｅおよびＥｒｏｆｅｅｖ（Ｄ．Ａ．Ｌｙｔｔｌｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，６９，２１１８（１９４７）；Ｙ．Ｖ．Ｅｒｏｆｅｅｖ，ｅｔ  ａｌ．，Ｋｈｉｍ．Ｇｅｔ．Ｓｏｅｄ．，７８０（１９７８））によって記載されるように行い、ニトロ化合物２−４を得ることができる。化合物２−４をまた、アルデヒド（Ｒ2ＣＨＯ）とエチルニトロアセテート（Ｏ2ＮＣＨ2ＣＯＯＥｔ）との縮合によって製造されたニトロエステル２−５（Ｒ2−ＣＨ＝Ｃ（ＮＯ2）−ＣＯＯＥｔ）へのインドールのＭｉｃｈａｅｌ型付加によって簡便に得ることができる。Ｒａｎｅｙ−Ｎｉの存在下、化合物２−４の水素化により、アイソマーの混合物としてトリプトファン誘導体２−６を得ることができる。Ｓａｎｄｒｉｎの変法（Ｊ．Ｓａｎｄｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，４，１１０１（１９７６））を使用するＰｉｃｔｅｔ−Ｓｐｅｎｇｌｅｒ反応は、テトラヒドロ−β−カルボリン２−７を生成し得、これをさらに精製することなく、ＤＤＱ（２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン）、硫黄、またはパラジウムによる還元に供し、所望のエスエル化合物１−１を得ることができる。
【０１４４】
【化１２】
2006516606.tif 000014
【０１４５】
スキーム３は、β−カルボリンエステル１−１（ここで、Ｒはエチルまたはメチルである；Ｒ1はＨである；そしてＲ2〜Ｒ6は上記に定義された通りである）を得るための別の効率的な経路を記載する（Ｍ．Ｄｅｋｈａｎｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，５０，６２９９（１９９４））。４Åのモレキュラーシーブ（ＭＳ）の存在下、アルデヒド３−４とアミノケタル３−３（Ｂｅｌｌｅａｕ，Ｔ．Ｗ．Ｄｏｙｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．，５５，４６８（１９７７）の方法によって製造される）との縮合により、イミン３−５を得ることができ、これをエタノール中の水素化シアノホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ3ＣＮ）を用いてアミン３−６に還元し得る。四塩化チタン（ＴｉＣｌ4）でのアミン３−６の処理により、所望のβ−カルボリンエステル１−１を得ることができる。
【０１４６】
【化１３】
2006516606.tif 000015
【０１４７】
β−カルボリンエステル１−１（ここで、Ｒはメチルまたはエチルである；Ｒ1、Ｒ2はＨである；そしてＲ3〜Ｒ6は上記に定義される通りである）をまた、スキーム４に説明されるワンポット手順によって製造し得る。Ｈ．Ｂｉｅｒｅ  ａｔ  ａｌ．，Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．，１７４９（１９８６）に記載される手順に従って、酢酸（ＡｃＯＨ）およびトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）の存在下、インドール誘導体４−１を２−アザブタジエン誘導体４−２（ここで、Ｒはメチルまたはエチルである）（Ｗ．Ｋａｎｔｌｅｈｎｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．，３４４（１９８０））と反応させると、置換β−カルボリンエスエル１−１を直接形成し得る。
【０１４８】
【化１４】
2006516606.tif 000016
【０１４９】
スキーム５は、置換β−カルボリンエステル１−１（Ｒはメチルまたはエチルである；Ｒ2はＨである；そして、Ｒ1およびＲ3〜Ｒ6は上記に定義される通りである）を得るための別の方法を示す。トルエン中のピリジニウムｐ−トルエンスルホネート（ＰＰＴＳ）の存在下、アリールアルデヒド５−２（Ｒ1はアリールである）とトリプトファン誘導体５−１との還流により、１工程で所望のβ−カルボリンエステル１−１を得ることができる（Ｃ．Ｂａｒｂｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，１，３７（２０００））。
【０１５０】
式Ｉの他の化合物は、上記の一般的に手順、または以下の実施例に記載される詳細な手順に類似の様式で製造され得る。
【０１５１】
実施例１：９−（４−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化１５】
2006516606.tif 000017
エチル９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（３６８ｍｇ、１.５３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、一部づつＮａＨ（６１.２ｍｇ、鉱油中６０％、１.５３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで４−フルオロベンジルブロミド（０.１９ｍＬ、１.５３ｍｍｏｌ）を添加した。２４時間、周囲温度で攪拌を続け、次いで水（１０ｍＬ）をこの混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥し、固体を得、これをメタノール（２０ｍＬ）に溶解した。この得られた溶液に、Ｈ2ＮＯＨ（２０ｍＬ、Ｈ2Ｏ中５０ｗｔ．％溶液、０.３０ｍｏｌ）を添加した。懸濁液を、５日間周囲温度で攪拌した。次いで、この混合物を濾過し、そして固体をメタノール（４０ｍＬ）中で沸騰させた。濾過の後、表題生成物（０.２０ｇ、３９％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ１１.２８（１Ｈ，ｓ），９.０２−９.０８（２Ｈ，ｍ），８.８５（１Ｈ，ｓ），８.４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９.０Ｈｚ），７.１０−７.８４（７Ｈ，ｍ），５.８５（２Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+ 実測値：３３６.１
１５７。計算値：Ｃ19Ｈ15Ｎ3Ｏ2Ｆ：３３６.１１４８。
【０１５２】
実施例２：９−［（５−クロロチエン−２−イル）メチル］−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化１６】
2006516606.tif 000018
エチル９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（３００ｍｇ、１.２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、一部づつＮａＨ（５０.０ｍｇ、鉱油中６０％、１.２５ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、２−クロロ−５−（クロロメチル）−チオフェン（１５１μＬ、１.２５ｍｍｏｌ）を添加した。この攪拌を２１時間周囲温度で続け、次いで水（５０ｍＬ）をこの混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥し、固体を得、これをメタノール（２５ｍＬ）中に溶解した。得られた溶液に、Ｈ2ＮＯＨ（２５ｍＬ、Ｈ2Ｏ中５０ｗｔ．％溶液、０.３８ｍｏｌ）を添加した。懸濁液を、４日間周囲温度で攪拌した。次いで、この混合物を濾過し、そして固体をメタノール（２５ｍＬ）中で沸騰させた。濾過の後、この所望の生成物（０.２６ｇ、５８％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：□１１.２８（１Ｈ，ｓ），９.１５（１Ｈ，ｓ），９.０１（１  Ｈ，ｓ），８.８１（１Ｈ，ｓ），８.４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），６.９４−７.９２（５Ｈ，ｍ），５.９９（２Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+実測値：３５８.０４１７。計算値：Ｃ17Ｈ13Ｎ3Ｏ2ＳＣｌ：３５８.０４１７。
【０１５３】
実施例３：９−（３−クロロ−２−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化１７】
2006516606.tif 000019
エチル９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（４００ｍｇ、１.６６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、一部づつＮａＨ（６６.４ｍｇ、鉱油中６０％、１.６６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで３−クロロ−２−フルオロベンジルブロミド（３７１ｍｇ、１.６６ｍｍｏｌ）を添加した。２５時間周囲温度にて攪拌を続け、次いで水（３０ｍＬ）をこの混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥し、固体を得、これをメタノール（２５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液に、Ｈ2ＮＯＨ（２５ｍＬ、Ｈ2Ｏ中５０ｗｔ．％溶液、０.３８ｍｏｌ）を添加した。懸濁液を、４日間周囲温度で攪拌した。次いで、この混合物を濾過し、そして固体をメタノール（２０ｍＬ）中で沸騰させた。濾過の後、表題生成物（０.１９ｇ、３１％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ１１.３３（１Ｈ，ｓ），９.０８（１Ｈ，ｓ），９.０４（１Ｈ，ｓ），８.８９（１Ｈ，ｓ），８.５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），６.９５−７.８１（６Ｈ，ｍ），６.００（２Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+実測値：３７０.０７６４。計算値：Ｃ19Ｈ14Ｎ3Ｏ2ＦＣｌ：３７０.０７５９。
【０１５４】
実施例４：９−ベンジル−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化１８】
2006516606.tif 000020
エチル９Ｈ−β−カルボリン−３−カリボキシレート（２９０ｍｇ、１.２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、一部づつＮａＨ（５３ｍｇ、鉱油中６０％、１.３３ｍｍｏｌ）を添加し、次いでベンジルブロミド（１７３μＬ、１.４５ｍｍｏｌ）を添加した。２１時間周囲温度にて攪拌を続け、次いで水（５０ｍＬ）をこの混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥し、固体を得、これをメタノール（２５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液に、Ｈ2ＮＯＨ（２５ｍＬ、Ｈ2Ｏ中５０ｗｔ．％溶液、０.３８ｍｏｌ）を添加した。懸濁液を、３日間周囲温度で攪拌した。次いで、この混合物を濾過し、そして固体をメタノール（２５ｍＬ）中で沸騰させた。濾過の後、表題生成物（０.１５ｇ、３９％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ１１.３２（１Ｈ，ｓ），９.１０（１Ｈ，ｓ），９.０５（１Ｈ，ｓ），８.８９（１Ｈ，ｓ），８.５２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７.２６−７.８７（８Ｈ，ｍ），５.９０（２Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+実測値：３１８.１２４９。計算値：Ｃ19Ｈ16Ｎ3Ｏ2：３１８.１２４３。
【０１５５】
実施例５：９−（４−メチルベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化１９】
2006516606.tif 000021
エチル９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（４００ｍｇ、１.６７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、一部づつＮａＨ（７３ｍｇ、鉱油中６０％、１.７６ｍｍｏｌ）を添加し、次いで４−メチルベンジルブロミド（３０８ｍｇ、１.６７ｍｍｏｌ）を添加した。４８時間周囲温度にて攪拌を続け、次いで水（５０ｍＬ）をこの混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥し、固体を得、これをメタノール（３５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液に、ＮａＯＨ（２Ｎ、１ｍＬ）およびＨ2ＮＯＨ（３５ｍＬ、Ｈ2Ｏ中５０ｗｔ．％溶液、０.５３ｍｏｌ）を添加した。懸濁液を、７日間周囲温度で攪拌した。次いで、この混合物を濾過し、そして乾燥し、表題生成物（０.２０ｇ、３６％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ１１.２５（１Ｈ，ｓ），８.９５−９.０３（２Ｈ，ｍ），８.８３（１Ｈ，ｓ），８.４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８  Ｈｚ），７.０５−７.８１（７Ｈ，ｍ），５.７８（２Ｈ，ｓ），２.２１（３Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+実測値：３３２.１４００。計算値：Ｃ20Ｈ18Ｎ3Ｏ2：３３２.１３９９。
【０１５６】
実施例６：９−（２，４−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２０】
2006516606.tif 000022
エチル９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（３７０ｍｇ、１.５４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、一部づつＮａＨ（６１.６  ｍｇ、鉱油中６０％、１.５４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで２，４−ジフルオロベンジルブロミド（１９８μＬ、１.５４ｍｍｏｌ）を添加した。４８時間周囲温度にて攪拌を続け、次いで水（１００ｍＬ）をこの混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥し、固体を得、これをメタノール（３５ｍＬ）に溶解した。得られた溶液に、Ｈ2ＮＯＨ（３０ｍＬ、Ｈ2Ｏ中５０ｗｔ．％溶液、０.４５ｍｏｌ）を添加した。懸濁液を、４日間周囲温度で攪拌した。次いで、この混合物を濾過し、そして固体をメタノールから再結晶化し、表題生成物（０.２０ｇ、３７％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ１１.４６（１Ｈ，ｓ），９.１５−９.２２（２Ｈ，ｍ），９.０２（１Ｈ，ｓ），８.６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８  Ｈｚ），７.１５−７.９６（６Ｈ，ｍ），６.０６（２Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+実測値：３５４.１０６２。計算値：Ｃ19Ｈ14Ｆ2Ｎ3Ｏ2ＦＣｌ：３５４.１０５４。
【０１５７】
実施例７：９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２１】
2006516606.tif 000023
【０１５８】
工程（ａ）：エチル９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート）
エチル９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（４４０ｍｇ、１.８３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、一部づつＮａＨ（７３.３ｍｇ、鉱油中６０％、１.８３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジルブロミド（４４２ｍｇ、１.８３ｍｍｏｌ）を添加した。２２時間周囲温度にて攪拌を続け、次いで水（３０ｍＬ）をこの混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、そして乾燥し、表題生成物（０.５５ｇ、６８％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）：δ９.０４（１Ｈ，ｓ），８.８６（１Ｈ，ｓ），８.２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），６.９８−７.６９（５Ｈ，ｍ），５.８２（２Ｈ，ｓ），４.４４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８Ｈｚ），１.４３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ）。
【０１５９】
工程（ｂ）：９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
エチル９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（２６０ｍｇ、０.６４９ｍｍｏｌ）のメタノール（２５ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、ＬｉＯＨ（４ｍＬ、Ｈ2Ｏ中１Ｎ、４.０ｍｍｏｌ）を添加した。２４時間周囲温度にて攪拌を続け、次いで、２０％のクエン酸を添加し、この混合物を中和した。この溶媒を減圧下で除去した。最後にＨ2Ｏ（２０ｍＬ）を得られた残留物に添加し、そして沈殿物を回収し、水で洗浄し、乾燥し、対応する酸（１６９ｍｇ、７０％）を得、これを次の工程に直接使用した。
【０１６０】
酸（１６９ｍｇ、０.４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）攪拌溶液に、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチル−カルボジミドヒドロクロリド（ＥＤＣ、２３４ｍｇ、１.２２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１４２ｍｇ、１.０５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物１時間攪拌し、次いでトリエチルアミン（０.６２ｍｌ、４.４ｍｍｏｌ）およびヒドロキシルアミンヒドロクロリド（２４３ｍｇ、３.４９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、４８時間周囲温度で攪拌し、次いで水（１００ｍＬ）を添加した。沈殿物を回収し、メタノールで洗浄し、そして乾燥し、表題化合物（１３０ｍｇ、７４％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ１１.３２（１Ｈ，ｓ），９.０１−９.０４（２Ｈ，ｍ），８.８３（１Ｈ，ｓ），８.４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７.２２−７.７３（５Ｈ，ｍ），５.９５（２Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+
実測値：３８８.０６７４。計算値：Ｃ19Ｈ13ＣｌＦ2Ｎ3Ｏ2：３８８.０６６４。
【０１６１】
実施例８：６−アミノ−９−（３−クロロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２２】
2006516606.tif 000024
【０１６２】
工程（ａ）：エチル９−（３−クロロベンジル）−６−ニトロ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート）
表題化合物を、実施例７の工程（ａ）に類似の方法で、３−クロロベンジルクロリドを用いるエチル６−ニトロ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（Ｓｅｔｔｉｍｊ，ｅｔ．ａｌ．，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．，２５，１３９１−１３９７（１９８８）に従って製造された）のアルキル化によって製造した。ＬＣＭＳ（ＡＰＣＩ，Ｍ＋Ｈ+）：４１０.１／４１２.１＝３／１。
【０１６３】
工程（ｂ）：エチル  ６−アミノ−９−（３−クロロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート
エチル９−（３−クロロベンジル）−６−ニトロ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（２.７ｇ、６.５９ｍｍｏｌ）および三塩化チタン（３６ｍＬ、２０％溶液、４６.７５ｍｍｏｌ）の酢酸（５４ｍＬ）、ＴＨＦ（１８０ｍＬ）、水（５４ｍＬ）、およびＤＭＦ（１０ｍＬ）の混合溶液を、５時間周囲温度で攪拌した。この反応混合物を、水（２００ｍＬ）でクエンチし、そして酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。水相のｐＨを、Ｎａ2ＣＯ3飽和水溶液を用いて７に調節した。次いで、得られた沈殿物を濾過し、そして真空中で乾燥した。ソックスレー（Ｓｏｘｈｌｅｔ）抽出器中で、ＣＨＣｌ3により沈殿物から生成物を抽出し、そして酢酸エチルを用いるクロマトグラフィーによって精製し、表題化合物（０.７０ｇ、収率２７.８％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ９.０６（ｓ，１Ｈ），８.７０（ｓ，１Ｈ），７.５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８.０Ｈｚ），７.４５（ｓ，１Ｈ），７.２７−７.３１（ｍ，３Ｈ），７.０９（ｓ，１Ｈ），７.０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８.０Ｈｚ），５.７５（ｓ，２Ｈ），５.０５（ｓ，２Ｈ），４.３６（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７.０Ｈｚ），１.３５（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７.０Ｈｚ）。ＬＣＭＳ（ＡＰＣＩ，Ｍ＋Ｈ+）：３８０.１／３８２.１＝３／１。
【０１６４】
工程（ｃ）：６−アミノ−９−（３−クロロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
エチル６−アミノ−９−（３−クロロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシレート（１３９ｍｇ、０.３７ｍｍｏｌ）のメタノール（１５ｍＬ）攪拌溶液に、窒素雰囲気下、ＮａＯＨ（２Ｎ、０.７ｍＬ）およびＨ2ＮＯＨ（１５ｍＬ、Ｈ2Ｏ中５０ｗｔ．％溶液、０.２３ｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を７日間周囲温度にて攪拌し、次いで、Ｈ2Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した。この混合物を濾過し、そして固体をメタノール（２０ｍＬ）中で沸騰させた。濾過の後、表題化合物（３６ｍｇ、２７％）を得た。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）：δ１１.１７（１Ｈ，ｓ），８.９０−８.
９５（２Ｈ，ｍ），８.５５（１Ｈ，ｓ），６.９６−７.５１（７Ｈ，ｍ），５.７２（２Ｈ，ｓ），５.０３（２Ｈ，ｂｒ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+実測値：３６７.０９６１。計算値：Ｃ19Ｈ16ＣｌＮ4Ｏ2：３６７.０９６２。
【０１６５】
実施例９：９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−メトキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２３】
2006516606.tif 000025
表題化合物を、実施例７の工程（ｂ）に提供される条件と類似の条件下、９−（３−クロロ−２，  ６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボン酸とＯ−メチルヒドロキシルアミンヒドロクロリドとのカップリングによって製造する。
【０１６６】
実施例１０：Ｎ−（ベンジルオキシ）−９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２４】
2006516606.tif 000026
表題化合物を、実施例７の工程（ｂ）に提供される条件と類似の条件下、９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボン酸とＯ−ベンジルヒドロキシルアミンとのカップリングによって製造する。
【０１６７】
実施例１１：９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２５】
2006516606.tif 000027
表題化合物を、実施例７の工程（ｂ）に提供される条件と類似の条件下、９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボン酸とＮ−メチルヒドロキシルアミンヒドロクロリドとのカップリングによって製造する。
【０１６８】
実施例１２：Ｎ−ベンジル−９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２６】
2006516606.tif 000028
表題化合物を、実施例７の工程（ｂ）に提供される条件と類似の条件下、９−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボン酸とＮ−ベンジルヒドロキシルアミンヒドロクロリドとのカップリングによって製造する。
【０１６９】
実施例１３：９−（４−フルオロベンジル）−Ｎ−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボキシアミド
【化２７】
2006516606.tif 000029
表題化合物を、実施例７の工程（ａ）および（ｂ）の条件と類似の条件下、エチル９−（４−フルオロベンジル）−９Ｈ−β−カルボリン−３−カルボンレートから製造し得る。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）：δ８.６０−８.９５（２Ｈ，ｍ），８.３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），７.６０−７.７５（２Ｈ，ｍ），６.９５−７.４５（５Ｈ，ｍ），５.７６（２Ｈ，ｓ），３.４６（３Ｈ，ｓ）。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+実測値：３５０.１２９７。計算値：Ｃ20Ｈ17ＦＮ3Ｏ2：３５０.１３０５。
【０１７０】
実施例１４：インテグラーゼ鎖転移シンチレーション近接アッセイ
オリゴヌクレオチド：オリゴヌクレオチド番号１−  ５’−（ビオチン）ＣＣＣＣＴＴＴＴＡＧＴＣＡＧＴＧＴＧＧＡＡＡＡＴＣＴＣＴＡＧＣＡ−３’（配列番号１）およびオリゴヌクレオチド番号２−  ５’−ＡＣＴＧＣＴＡＧＡＧＡＴＴＴＴＣＣＡＣＡＣＴＧＡＣＴＡＡＡＡＧ−３’（配列番号２）を、ＴｒｉＬｉｎｋ  Ｂｉｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によって合成した。アニール化産物は、ウイルスゲノムのＬＴＲ  Ｕ５配列由来の予め処理されたウイルス性ｄｓ−ＤＮＡを示す。非特異的相互作用について試験するためのｄｓ−ＤＮＡコントロールを、オリゴヌクレオチド番号２にアニール化されたオリゴヌクレオチド番号１の３’ジデオキシ誘導体を使用して作製した。ｄｓ−ＤＮＡの非ビオチン化鎖の５’末端のＣＡオーバーハングを、２塩基対短い相補的ＤＮＡオリゴヌクレオチドを使用することによって人為的に作成した。この形態は、鎖転移機構の前の必須のインテグラーゼ酵素の３’側の処理工程を除く。
【０１７１】
宿主ｄｓ−ＤＮＡを、アニール化オリゴヌクレオチド番号３−  ５−ＡＡＡＡＡＡＴＧＡＣＣＡＡＧＧＧＣＴＡＡＴＴＣＡＣＴ−３’（配列番号３）、およびオリゴヌクレオチド番号４−  ５’−ＡＡＡＡＡＡＡＧＴＧＡＡＴＴＡＧＣＣＣＴＴＧＧＴＣＡ−３’（配列番号４）からの非標識産物、ならびに［3Ｈ］−チミジン標識化産物として調製した。これらのオリゴヌクレオチドの両方は、ＴｒｉＬｉｎｋ  Ｂｉｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によって合成された。このアニール化産物は、ポリ（ｄＡ）のオーバーハングする３’末端を有する。宿主ＤＮＡは、１２／１の比の［メチル−3Ｈ］ｄＴＴＰ／冷ｄｓ−ＤＮＡを用いて９００Ｃｉ／ｍｍｏｌを越えての比活性を有する５’平滑末端ｄｓ−ＤＮＡを得る酵素的方法を使用して、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）によって放射標識された特注品であった。放射標識化産物を、ＮＥＮＳＯＲＢカートリッジを使用して精製し、そして安定化水溶液（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）中に保存した。最終の放射標識化産物は、宿主ｄｓ−ＤＮＡの両方の５’末端で６つの［3Ｈ］−チミジンヌクレオチドを有した。
【０１７２】
試薬：
ストレプトアビジンコート化ポリビニルトルエン（ＰＶＴ）ＳＰＡビーズを、Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）から購入した。塩化セシウムを、Ｓｈｅｌｔｏｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．（Ｓｈｅｌｔｏｎ，ＣＴ）から購入した。白色ポリスチレン製の平底非結合表面３８４ウェルプレートを、Ｃｏｒｎｉｎｇから購入した。全ての他の緩衝成分を、特に示さない限り、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から購入した。
【０１７３】
酵素構築物：
全長のＨＩＶ−１インテグラーゼ（ＳＦ１）配列（アミノ酸１〜２８８）（配列番号５）を、酵素の溶解性を促進し、そして酸化を減少する、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃｈｅｎ，Ｃ−Ｈ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９７：８２３３−８２３８（２０００））によって概説された変異を有するｐＥＴ  １５ｂベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）中で構築した。ベクターは、Ｔ７プロモーター、アミノ末端で６−ヒスチジンタグ、およびトロンビン切断部位を含んだ。変異Ｃ５６Ｓ、Ｗ１３１Ｄ、Ｆ１３９Ｄ、Ｆ１８５Ｋ、およびＣ２８０Ｓを、Ｑｕｉｃｋ  Ｃｈａｎｇｅキット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して導入した。この構築物を、ＤＮＡ配列決定によって確認した。
【０１７４】
酵素精製：
ペンタ−変異体（ｐｅｎｔａ−ｍｕｔａｎｔ）を、Ｅ．ｃｏｌｉ  ＢＬ２１（ＤＥ３）細胞中で発現させ、そして細胞が６００ｎｍで０.８〜１.０の間の光学密度に達した場合、イソプロピル−１チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）（１ｍＭ）で誘導した。細胞を、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.５）、１.５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのイミダゾール、および２ｍＭの２−メルカプトエタノール中に溶解した。酵素を、ヒスチジンタグ化タンパク質のための標準的な方法に従って精製した（Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｔ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７１：７７１２−７７１８（１９９６））。特に、細胞溶解物を、２５０ｍＭのイミダゾールを添加することによって溶出される６−Ｈｉｓタグ化インテグラーゼタンパク質を用いて、Ｎｉ−Ｎｔａカラム（Ｑｉａｇｅｎ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ）に通した。Ｇ−２５  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）カラム（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用して、インテグラーゼタンパク質のトロンビン切断の前に緩衝液を交換し、次いでベンズアミジン−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）６Ｂカラムを使用してトロンビンを除去した。切断された６−Ｈｉｓタグを、第２のＮｉ−Ｎｔａカラムを使用してインテグラーゼを分離した。インテグアーゼを、ヘパリン−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）カラム、ならびに２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.５）、４００ｍＭのＮａＣｌ、および１ｍＭのＤＴＴ緩衝液中ＮａＣｌ（０.４〜１Ｍ）の勾配を用いて、さらに精製した。精製したタンパク質を、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.５）、８００ｍＭのＮａＣｌ、および１ｍＭのＤＴＴに対して透析し、そして必要である場合、攪拌細胞限外濾過（ｓｔｉｒｒｅｄ  ｃｅｌｌ  ｕｉｔｒａｆｉｉｔｒａｔｉｏｎ）（Ｍｉｉｌｉｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）またはＵｌｔｒａ−ｆｒｅｅ  スピン濃縮機（ｓｐｉｎ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｒｓ）（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＭＡ）によって濃縮した。
【０１７５】
ウイルス性ＤＮＡビーズの調製：
ストレプトアビジン−コート化ＳＰＡビーズを、２０ｍｇ／ｍｌまで、２５ｍＭの３−モルホリノプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）（ｐＨ７.２）および０.１％ＮａＮ3に懸濁した。１ｍｇの懸濁されたＳＰＡビーズに２５ｐｍｏｌのｄｓ−ＤＮＡを混合することによって、バッチプロセスにおいて、ビオチン化ウイルス性ＤＮＡを水和ＳＰＡビーズに結合した（５０μＭのウイルス性ＤＮＡ（１０μｌ）に対し２０ｍｇ／ｍｌのＳＰＡビーズ（１ｍｌ））。この混合物を、時々混合しながら２２℃にて２０分間インキュベートし、次いで約２５００ｒｐｍで約１０分間遠心分離した。しかし、遠心分離の速さおよび時間は、特定の遠心分離機および条件に依存して変更し得る。この上清を除去し、ビーズを２５ｍＭのＭＯＰＳ（ｐＨ７.２）および０.１％ＮａＮ3に２０ｍｇ／ｍｌまで懸濁した。このウイルス性ＤＮＡビーズは、４℃で保存した場合、２週間以上安定であった。ジデオキシウイルス性ＤＮＡを、同一の様式で調製し、コントロールのジデオキシウイルス性ＤＮＡビーズを得た。
【０１７６】
インテグラーゼ−ＤＮＡ複合体の調製：
アッセイ緩衝液を、１０×ストックの２５０ｍＭのＭＯＰＳ（ｐＨ７.２）、２５０ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭの３−［（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］］−１−プロパンスルホン酸（ＣＨＡＰＳ）、０.５％（オクチルフェノキシ）ポリエトキシエタノール（ＮＰ４０）（ＩＧＥＰＡＬ−ＣＡ）、および０.０５％  ＮａＮ3として作製した。ウイルス性ＤＮＡビーズを、１×アッセイ緩衝液＋３ｍＭのＭｇＣｌ2、１％ＤＭＳＯ、および１０ｍＭの新しいＤＴＴ中に、２.６７ｍｇ／ｍｌまで希釈した。３８５ｎＭの濃度でインテグラーゼと希釈したウイルス性ＤＮＡビーズを混合することによってバッチプロセスにおいて、インテグラーゼ（ＩＮ）をウイルス性ＤＮＡビーズに予め混合し（ＩＮ／ウイルス性ＤＮＡ／ビーズ複合体）、次いで、１５分間２２℃にての最小時間でインキュベートした。このサンプルを、アッセイウェルに転移するまで２２℃で維持した。４℃での長時間の保存が可能であるが、通常適用されない。
【０１７７】
宿主ＤＮＡの調製：
宿主ＤＮＡを、１×アッセイ緩衝液＋８.５ｍＭのＭｇＣｌ2および１５ｍＭのＤＴＴ中に希釈された未標識および［3Ｈ］Ｔ−標識化の宿主ＤＮＡの混合物として２００ｎＭで調製した。代表的な濃度は、約１０ｎＭ〜約２０ｎＭの［3Ｈ］Ｔ−標識化宿主ＤＮＡ、および約１８８ｎＭ〜約１９０ｎＭの未標識宿主ＤＮＡであった。割合を、［3Ｈ］Ｔ−標識化宿主ＤＮＡの酵素活性および比活性と比較して調節し、インヒビターのようなモジュレータの非存在下において２０００〜３０００ＣＰＭのＳＰＡアッセイシグナルを生成した。
【０１７８】
鎖転移シンチレーション近接アッセイ：
鎖転移反応を、３８４ウェルマイクロタイタープレート中で行ったが、同一のプロトコルを５０μｌの最終酵素反応容積で９６ウェルプレートフォーマットに使用し得る。１０％のＤＭＳＯに希釈した化合物または試験試薬（５μｌ）を、アッセイウェルに添加し、次いでＩＮ／ウイルス性ＤＮＡ／ビーズ複合体（３２.５μｌ）を添加した。鎖転移反応を、プレートを激しく旋回しながら、宿主ＤＮＡ（１２.５μｌ）を添加することによって開始し、そして加湿した３７℃のインキュベーターにそれらを移した。５０分のインキュベート時間は、３８４ウェルプレート中の酵素反応の直線範囲内であることが示された。反応速度論は、９６ウェルフォーマット中よりも速い。２０または５０分のインキュベート時間を、それぞれ、９６または３８４のウェルプレートフォーマトで行われたアッセイについて化合物インヒビターを評価するための時点として使用した。アッセイウェル中のインテグラーゼおよび宿主ＤＮＡの最終濃度は、それぞれ２４６ｎＭおよび５０ｎＭであった。
【０１７９】
インテグラーゼ鎖転移反応を、停止緩衝液（３５μｌ）（１５０ｍＭのＥＤＴＡ、９０ｍＭのＮａＯＨ、および６ＭのＣｓＣｌ）をウェルに添加することによって停止した。停止緩衝液の成分は、酵素活性を停止するように（ＥＤＴＡ）、非組み込みＤＮＡ鎖の分離に加えてインテグラーゼ／ＤＮＡ複合体を解離するように（ＮａＯＨ）、およびＴｏｐＣｏｕｎｔ（登録商標）プレート−ベースシンチレーション計数（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．（Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ））のＰＭＴ検出器に近接する範囲にくるようにウェルの表面にＳＰＡビーズを浮かべるように機能する。停止緩衝液の添加の後、プレートを激しく旋回し、透明なテープで密閉し、そして最低６０分間２２℃でインキュベートした。アッセイシグナルを、［3Ｈ］−ＰＶＴ  ＳＰＡビーズについて最適に設定したＴｏｐＣｏｕｎｔ（登録商標）プレートベースシンチレーション計数を使用して測定した。ＴｏｐＣｏｕｎｔ（登録商標）プログラムは、化合物の色素吸収についてのデータを正規化するためのクエンチ標準化曲線（ｑｕｅｎｃｈ  ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ  ｃｕｒｖｅ）（色素クエンチ補正プログラム（ｃｏｌｏｒ  ｑｕｅｎｃｈ  ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ  ｐｒｏｇｒａｍ）（ＱｓｔｌＮＴ  ｆｉｌｅ）を取り込んだ。１分あたりのクエンチ補正計数（ｑｕｅｎｃｈ−ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ  ｃｏｕｎｔｓ  ｐｅｒ  ｍｉｎｕｔｅ：ＱＣＰＭ）についてのデータ値を使用して、インテグラーゼ活性を定量した。計数時間は、ＨＴＳモードで処理されたプレートについて３０秒／ウェルであり、そして精製化合物を計数するプレートについて２分／ウェルまでであった。
【０１８０】
ジデオキシウイルス性ＤＮＡビーズを使用して、インテグラーゼ鎖転移反応を最適化した。ウイルス性ｄｓ−ＤＮＡ配列のジデオキシ末端は、インテグラーゼによる宿主ＤＮＡへのウイルス性ＤＮＡの生産的な組み込みを阻止した。従って、ジデオキシウイルス性ＤＮＡの存在下でのアッセイシグナルは、非特異的相互作用の基準となった。ジデオキシウイルス性ＤＮＡビーズとの反応が、このアッセイの真のバックグラウンドにほぼ一致するアッセイシグナルを与えるように、アッセイパラメータを最適化した。このアッセイの真のバックグラウンドは、インテグラーゼの非存在下での全てのアッセイ成分（ウイルス性ＤＮＡおよび［3Ｈ］宿主ＤＮＡ）との反応として定義した。
【０１８１】
化合物活性の測定：
化合物を、２つの異なる方法を使用してインテグラーゼ阻害活性について評価した。ハイスループットスクリーニング方法を利用して、溶媒和されたか、またはマイクロタイタープレートに転移されたコンンビナトリアルな化合物ライブラリまたは合成化合物を試験した。化合物の阻害パーセントを、式：（１−（（ＱＣＰＭサンプル−ＱＣＰＭｍｉｎ）／（ＱＣＰＭｍａｘ−ＱＣＰＭｍｉｎ）））*１００を使用して計算した。最小値は、化合物についてのＩＣ50よりも１００倍高い濃度の公知のインヒビターの存在下におけるアッセイシグナルである。最小シグナルは、アッセイについての真のバックグラウンドの近似である。最大値は、化合物の非存在下におけるインテグラーゼ媒介活性について得られたアッセイシグナルである。
【０１８２】
合成化合物または精製されたコンビナトリアル化合物のＩＣ50値がまた、測定された。化合物を、アッセイの試験のために所望の濃度より１００倍高い濃度で１００％  ＤＭＳＯ中で調製し、次いで、１００％  ＤＭＳＯ中に化合物を希釈することによって、１／２ｌｏｇの希釈間隔で８点の滴定曲線を作製した。化合物サンプルを水で１０倍にさらに希釈し、そしてアッセイウェルに転移した。阻害化合物の阻害パーセントを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ曲線当てはめソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して、非線形回帰、Ｓ字形用量応答式（変数傾斜）に適用した値を用いて上記のように決定した。
【０１８３】
【表１】
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【０１８４】
実施例１４：ＨＩＶ−１細胞保護アッセイ
潜在的なモジュレータ化合物（試験化合物）の抗ウイルス活性を、ＨＩＶ−１のＲＦ株、ＣＥＭ−ＳＳ細胞、およびＸＴＴ色素還元法（ｄｙｅ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）（Ｗｅｉｓｌｏｗ，Ｏ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．８１：５７７−５８６（１９８９））を使用して、ＨＩＶ−１細胞保護アッセイで決定した。被験体細胞を、０.０２５〜０.８１９モル（ｍｏｉ）でＨＩＶ−１  ＲＦウイルスで感染させるか、または培地のみで擬似感染させ、そして１／２ｌｏｇ希釈量の試験化合物を含有する９６ウェルプレートに１ウェルあたり２×１０4細胞で添加した。６日
後、ＸＴＴ（１ｍｇ／ｍｌのＸＴＴテトラゾリウムおよび０.０２ｎＭのフェナジンメトサルフェート）（５０μｌ）をウェルに添加し、そしてこのプレートを４時間再インキュベートした。生成されたＸＴＴホルマザンの量によって測定されるような実現可能性を、４５０ｎｍでの吸光度による分光光度法で定量した。
【０１８５】
ＣＰＥアッセイからのデータを、未感染の化合物を含まない細胞のウェル中で生成されたホルマザンに対する、処理化合物細胞中で生成されたホルマザンのパーセントとして表した。５０％効果濃度（ＥＣ50）を、感染処理化合物細胞中のホルマザン生成の割合を未感染の化合物を含まない細胞によって生成されたホルマザンの５０％まで増加させる化合物の濃度として計算した。５０％細胞毒性濃度（ＣＣ50）を、未感染の処理化合物細胞中で生成されたホルマザンの割合を未感染の化合物を含まない細胞中で生成されたホルマザンの５０％まで減少する化合物の濃度として計算した。治療指数を、抗ウイルス活性（ＥＣ50）で細胞毒性（ＣＣ50）を除算することによって計算した。
【０１８６】
前述の説明は、事実上例示的かつ解説的なものであり、そしてそれは本発明およびその好ましい実施形態を説明することを意図されていると理解されるはずである。従って、本発明の範囲は、前述の説明によってではなく、添付の特許請求の範囲およびそれらの等価物によって規定されることが理解されるべきである。
【国際調査報告】
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