(57)【要約】本発明は、VEGFR-2およびVEGFR-3を阻害する選択されたアントラニルアミドピリドン、および持続性脈管形成により誘発される疾患を治療する薬剤としてのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式I：
【化１】
2006527228.tif 000011
（式中、
Aはアリールまたはヘテロアリールであり、
Xは水素またはフッ素であり、
R1およびR2は、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である）
の化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩。
【請求項２】
式中、
Aがフェニルまたはピリジルであり、
Xが水素またはフッ素であり、
R1およびR2が、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である、
請求項1に記載の一般式Iの化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩。
【請求項３】
式中、
Aがフェニルであり、
Xが水素またはフッ素であり、
R1およびR2が、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である、
請求項1又は2に記載の一般式Iの化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩。
【請求項４】
式中、
Aがフェニルであり、
Xが水素であり、
R1およびR2が、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である、
請求項1〜3のいずれか1項に記載の一般式Iの化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩。
【請求項５】
請求項1〜4のいずれか1項に記載の少なくとも1種の化合物を含有する薬剤。
【請求項６】
腫瘍または転移性増殖、乾癬、カポージ肉腫、再狭窄、例えば、ステント誘導再狭窄、子宮内膜炎、クローン病、ホジキン病、白血病; 関節炎、例えば、慢性関節リウマチ、血管腫、血管線維腫; 眼の疾患、例えば、糖尿病性網膜症、血管新生緑内症; 腎臓疾患、例えば、糸球体腎炎、糖尿病性ネフロパシー、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群、移植拒絶反応および糸球体症; 線維症、例えば、肝硬変、糸球体間質細胞増殖性疾患、アテローム性動脈硬化症、神経組織に対する障害の場合において、バルーンカテーテル治療後、血管補てつにおいてまたは血管を開口して保持するための機械的装置、例えば、ステントの使用後における血管再閉塞を抑制するために、免疫抑制剤として、および無瘢痕治癒を支持するために、老人性角化症および接触皮膚炎において使用するための請求項5に記載の薬剤。
【請求項７】
適当な処方物質および賦形剤と組み合わせた、請求項1〜4のいずれか1項に記載の化合物、および請求項5又は6に記載の薬剤。
【請求項８】
チロシンキナーゼKDR、FLT-1およびFLT-4のインヒビターとしての請求項1〜4のいずれか1項に記載の式Iの化合物の使用。
【請求項９】
腸内、非経口的および経口的に投与する医薬製剤の形態の請求項1〜4のいずれか1項に記載の一般式Iの化合物の使用。
【請求項１０】
腫瘍または転移性増殖、乾癬、カポージ肉腫、再狭窄、例えば、ステント誘導再狭窄、子宮内膜炎、クローン病、ホジキン病、白血病; 関節炎、例えば、慢性関節リウマチ、血管腫、血管線維腫; 眼の疾患、例えば、糖尿病性網膜症、血管新生緑内症; 腎臓疾患、例えば、糸球体腎炎、糖尿病性ネフロパシー、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群、移植拒絶反応および糸球体症; 線維症、例えば、肝硬変、糸球体間質細胞増殖性疾患、アテローム性動脈硬化症、神経組織に対する障害の場合、バルーンカテーテル治療後、血管補てつにおいてまたは血管を開口して保持するための機械的装置、例えば、ステントの使用後における血管再閉塞の抑制、免疫抑制剤としての、および無瘢痕治癒の支持、老人性角化症および接触皮膚炎における請求項1〜4のいずれか1項に記載の化合物の使用。
【請求項１１】
リンパ管形成のVEGFRキナーゼ3インヒビターとしての請求項1〜4のいずれか1項に記載の一般式Iの化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、米国仮出願No. 60/482,009号、2003年6月25日提出の出願日の利益を主張する。
本発明は、VEGFR-2およびVEGFR-3阻害性アントラニルアミドピリドン、および持続性脈管形成により誘発される疾患を治療する薬剤としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
持続性脈管形成は、種々の疾患、例えば、腫瘍または転移性増殖、乾癬; 関節炎、例えば、慢性関節リウマチ、血管腫、血管線維腫; 眼の疾患、例えば、糖尿病性網膜症、血管新生緑内症; 腎臓疾患、例えば、糸球体腎炎、糖尿病性ネフロパシー、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群、移植拒絶反応および糸球体症; 線維症、例えば、肝硬変、糸球体間質細胞増殖性疾患およびアテローム性動脈硬化症の原因または前提条件であることができるか、あるいはこれらの疾患を悪化することがある。
【０００３】
持続性脈管形成は、因子VEGFによりそのレセプターを介して誘導される。VEGFはこの作用を発揮するためには、VEGFはレセプターに結合し、そしてチロシンのリン酸化を誘導することが必要である。
VEGFレセプター (VEGF = 血管内皮増殖因子) を直接的または間接的に阻害して、このような疾患および他のVEGF誘導病理学的脈管形成および血管透過性状態、例えば、腫瘍血管新生を治療するすることができる。例えば、可溶性レセプターおよびVEGFに対する抗体により、腫瘍増殖を阻害できることは知られている。
【０００４】
下記の薬剤として使用されるアントラニルアミドピリドンアミドはWO 00/27820 (例えば、実施例38) から知られている: 乾癬; 関節炎、例えば、慢性関節リウマチ、血管腫、血管線維腫; 眼の疾患、例えば、糖尿病性網膜症、血管新生緑内症; 腎臓疾患、例えば、糸球体腎炎、糖尿病性ネフロパシー、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群、移植拒絶反応および糸球体症; 線維症、例えば、肝硬変、糸球体間質細胞増殖性疾患、アテローム性動脈硬化症、神経組織に対する障害を治療するため、バルーンカテーテル治療後、血管補てつにおいてまたは血管を開口して保持するための機械的装置、例えば、ステントの使用後における血管再閉塞を抑制するため。
【０００５】
WO 00/27820から知られている化合物は、一般に、引用された適用において有効であるが、それらの有効性は非常には顕著ではない。
【０００６】
高度に有効であるが、またシトクロムP 450イソ酵素3A4のすぐれた阻害を示すアントラニル酸アミドもまたWO 03/040102から知られている。シトクロムP 450イソ酵素3A4は、それを介して薬剤を分解させる必須の代謝酵素の1つである。このイソ酵素を阻害すると、特に多病的患者 (多疾患状態) の場合において、望ましくない薬剤の相互作用が生ずる。また、他の投薬法を用いる組み合わせ療法において、化合物分解の抑制および関連する血清レベル過剰のために、毒性が増加する。
【０００７】
したがって、一方において有効であり、かつ他方においていっそう適合性であるか、あるいは望ましくない副作用を示さない活性成分が必要とされている。
【発明の開示】
【０００８】
下記一般式Iの化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩が発見された:
【０００９】
【化１】
2006527228.tif 000002
【００１０】
式中、
Aはアリールまたはヘテロアリールであり、
Xは水素またはフッ素であり、
R1およびR2は、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である。
【００１１】
アルキルは、各場合において、直鎖状または分枝鎖状のアルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、s-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシルまたはドデシルとして定義される。
【００１２】
アルコキシは、各場合において、直鎖状または分枝鎖状のアルキル基、例えば、メチルオキシ、エチルオキシ、プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ブチルオキシ、イソブチルオキシ、s-ブチルオキシ、ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ヘプチルオキシ、オクチルオキシ、ノニルオキシ、デシルオキシ、ウンデシルオキシまたはデシルオキシとして定義される。
【００１３】
シクロアルキルは、一環式アルキル環、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニルまたはシクロデシル、また二環式環または三環式環、例えば、アダマンチルとして定義される。
シクロアルキル基は、炭素原子の代わりに、1または2以上の異種原子、例えば、酸素、硫黄および/または窒素を含有することができる。3〜8個の環原子を有するヘテロシクロアルキルが好ましい。
【００１４】
ハロゲンは、各場合において、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素として定義される。
ハロアルキルは、1または2以上の位置においてハロゲンで置換されることができるアルキル基として定義される。
アリール基は、各場合において、3〜12個の炭素原子を含んでなり、各場合において、ベンゾ縮合されることができる。
例えば、下記の基を列挙することができる: シクロプロペニル、シクロペンタジエニル、フェニル、トロピル、シクロオクタジエニル、インデニル、ナフチル、アズレニル、ビフェニル、フルオレニル、アントラセニル、およびその他。
【００１５】
ヘテロアリール基は各場合において3〜12環原子を含んでなり、炭素の代わりに、同一であるか、あるいは異なる1または2以上の異種原子、例えば、酸素、窒素または硫黄を環中に含有することができ、そして一環式、二環式または三環式であることができ、そしてさらに各場合においてベンゾ縮合されることができる。
【００１６】
例えば、下記の基を列挙することができる: チエニル、フラニル、プロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、およびその他; およびそれらのベンゾ誘導体、例えば、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾキサゾリル、ベンズインダゾリル、インダゾリル、インドリル、イソインドリル、およびその他; またはピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、およびその他; およびそれらのベンゾ誘導体、例えば、キノリル、イソキノリルおよびその他; またはアゾシニル、インドリジニル、プリニル、およびその他; およびそれらのベンゾ誘導体; またはキノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、ペテリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、キサンテニルまたはオキセピニル、およびその他。
【００１７】
酸性基が含まれる場合、有機塩基および無機塩基の生理学的に適合性の塩は塩として適当であり、例えば、易溶性アルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩ならびにN-メチル-グルカミン、ジメチル-グルカミン、エチル-グルカミン、リシン、1,6-ヘキサジアミン、エタノールアミン、グルコサミン、サルコシン、セリノール、トリス-ヒドロキシ-メチル-アミノ-メタン、アミノプロパンジオール、ソバック塩基、および1-アミノ-2,3,4-ブタントリオールの塩である。
塩基性基が含まれる場合、有機酸および無機酸の生理学的に適合性の塩は塩として適当であり、例えば、なかでも、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩である。
【００１８】
式中、
Aがフェニルまたはピリジルであり、
Xが水素またはフッ素であり、
R1およびR2が、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である、
一般式Iの化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩は、特別の性質を有する。
【００１９】
式中、
Aがフェニルであり、
Xが水素またはフッ素であり、
R1およびR2が、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である、
一般式Iの化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩は、特に好都合である。
【００２０】
式中、
Aがフェニルであり、
Xが水素であり、
R1およびR2が、互いに独立して、水素、ハロゲン、C1-C12-アルキル、C1-C12-アルコキシ-C1-C10-アルキレン、ハロ-C1-C10-アルキル、C3-C10-シクロアルキルまたはハロ-C3-C10-シクロアルキルであり、そして
Yは結合または酸素または-S-、-S(O)-または-SO2-である、
一般式Iの化合物、ならびにそれらの異性体、鏡像異性体、ジアスレオマーおよび塩は、好ましい。
【００２１】
また、本発明による一般式Iの化合物は可能な互変異性形態を含有し、そしてE-またはZ-異性体または、キラル中心が存在する場合、またラセミ体または鏡像異性体を含んでなる。
式Iの化合物ならびにそれらの生理学的に適合性の塩を、VEGFレセプターのリン酸化に関する、それらの阻害活性に基づいて薬剤として使用することができる。それらの作用の構造に基づいて、本発明による化合物は持続性脈管形成により引き起こされるか、あるいは促進される疾患の治療に適する。
【００２２】
式Iの化合物はチロシンキナーゼKDR、FLT-1およびFLT-4のインヒビターとして同定されたので、VEGFレセプターを介して誘発される持続性脈管形成により、または血管透過性の増加によりにより引き起こされるか、あるいは促進される疾患の治療に特に適する。
また、本発明の主題は、チロシンキナーゼKDR、FLT-1およびFLT-4のインヒビターとして本発明による化合物を使用することである。
こうして、本発明の主題は、腫瘍を治療する薬剤およびそれらの使用である。
【００２３】
本発明による化合物は、単独でまたは処方物の形態で薬剤として下記において使用することができる: 腫瘍または転移性増殖、乾癬、カポージ肉腫、再狭窄、例えば、ステント誘導再狭窄、子宮内膜炎、クローン病、ホジキン病、白血病; 関節炎、例えば、慢性関節リウマチ、血管腫、血管線維腫; 眼の疾患、例えば、糖尿病性網膜症、血管新生緑内症; 腎臓疾患、例えば、糸球体腎炎、糖尿病性ネフロパシー、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群、移植拒絶反応および糸球体症; 線維症、例えば、肝硬変、糸球体間質細胞増殖性疾患、アテローム性動脈硬化症、神経組織に対する障害を治療するために、バルーンカテーテル治療後、血管補てつにおいてまたは血管を開口して保持するための機械的装置、例えば、ステントの使用後における血管再閉塞を抑制するために、免疫抑制剤として、および無瘢痕治癒を支持するために、老人性角化症および接触皮膚炎において。
【００２４】
神経組織に対する障害の治療において、損傷部位上の急速な瘢痕の形成は本発明による化合物を使用して防止することができ、すなわち、軸索再接続前に瘢痕の形成が起こることが防止される。こうして、神経化合物の再構成は促進されるであろう。
また、本発明による化合物を使用して患者における腹水の形成を抑制することができる。また、VEGF誘導浮腫を抑制することができる。
リンパ管形成はリンパ球新生転移において重要な役割を演ずる (Karpanen T. 他、Cancere Research 2001 Mar. 1、61(5): 1786-90; Veikkola T. 他、ENBO J. 2001 Mar. 15、20(6): 1223-31) 。
【００２５】
また、本発明による化合物はVEGFRキナーゼ3インヒビターとしてきわめてすぐれた作用を示し、したがって、また、リンパ管形成の有効なインヒビターである。
本発明による化合物で治療することによって、転移の大きさが減少するばかりでなく、かつまた転移の数が減少する。
また、このような薬剤、それらの処方物および使用は本発明の主題である。
【００２６】
こうして、本発明は、また、下記の場合に使用する薬剤を製造するために一般式Iの化合物を使用することに関する: 乾癬、カポージ肉腫、再狭窄、例えば、ステント誘導再狭窄、子宮内膜炎、クローン病、ホジキン病、白血病; 関節炎、例えば、慢性関節リウマチ、血管腫、血管線維腫; 眼の疾患、例えば、糖尿病性網膜症、血管新生緑内症; 腎臓疾患、例えば、糸球体腎炎、糖尿病性ネフロパシー、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群、移植拒絶反応および糸球体症; 線維症、例えば、肝硬変、糸球体間質細胞増殖性疾患、アテローム性動脈硬化症、神経組織に対する障害の治療において、バルーンカテーテル治療後、血管補てつにおいてまたは血管を開口して保持するための機械的装置、例えば、ステントの使用後における血管再閉塞の抑制において、免疫抑制剤として、および無瘢痕治癒の支持において、老人性角化症および接触皮膚炎において。
【００２７】
また、本発明による化合物を使用して患者における腹水の形成を抑制することができる。また、VEGF誘導浮腫を抑制することができる。
【００２８】
式Iの化合物を薬剤として使用するために、それを医薬製剤の形態にする。医薬製剤は、腸内または非経口的投与のために活性成分に加えて、適当な医薬、有機または無機の不活性物質、例えば、水、ゼラチン、アラビアゴム、ラクトース、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ポリアルキレングリコール、およびその他を含有する。医薬製剤は、固体の形態、例えば、錠剤、被覆錠剤、坐剤、またはカプセル剤、または液体の形態、例えば、溶液、懸濁液または乳濁液の形態で存在することができる。その上、それらは必要に応じてアジュバント、例えば、保存剤、安定剤、湿潤剤または乳化剤、浸透圧調節塩または緩衝剤を含有する。
【００２９】
非経口的投与のために、特に注射溶液または懸濁液、ことにポリヒドロキシエトキシル化ヒマシ油中の活性化合物の水溶液は適当である。
担体系として、表面活性アジュバント、例えば、胆汁酸塩または動物性または植物性のリン脂質ばかりでなく、かつまたそれらの混合物ならびにリポソームまたはそれらの成分を使用することもできる。
経口的投与のために、ことにタルクおよび/または炭化水素の賦形剤または結合剤、例えば、ラクトース、コーンスターチまたはジャガイモ澱粉を含む錠剤、被覆錠剤またはカプセル剤は適当である。また、投与は甘味料または、必要に応じて、1種または2種以上の香辛料を添加した液体の形態、例えば、ジュースの形態で実施であることができる。
【００３０】
活性成分の投与量は、投与方法、患者の年齢または体重、治療すべき疾患のタイプまたは重症度、および同様な因子に依存して変化することがある。1日量は0.5〜1000 mg、好ましくは50〜200 mgであり、ここで投与量は1回で投与する単一投与量として使用するか、あるいは2またはそれ以上の1日量に分割することができる。
また、小出しのための前述の処方物および形態は本発明の主題である。
本発明による化合物の製造は、この分野において知られている方法に従い実施する。例えば、一般式Iの化合物は次のようにして得られる: 一般式II:
【００３１】
【化２】
2006527228.tif 000003
【００３２】
式中Xは一般式Iにおいて示した意味を有し、そしてRxは水素またはC1-C6-アルキルである、
の化合物をまず還元的にアミン化して、一般式 (III) :
【００３３】
【化３】
2006527228.tif 000004
【００３４】
の化合物を生成し、次いで一般式Iの対応するアミドに転化し、次いで必要に応じて一般式Iの化合物を酸化して硫黄化合物を生成する。また、工程の順序を交換することができ、ここでRxは好ましくはC1-C6-アルキルである。RxがC1-C6-アルキルである場合、また、それをけん化し、次いで対応するアミドに転化することができる。
【００３５】
還元的アミン化をアルデヒドまたはケトンを使用して実施し、ここで反応は還元剤、例えば、シアノホウ水素化ナトリウムの存在下に適当な不活性溶媒、例えば、エタノール中で0℃〜溶媒の沸点の温度において実施する。また、酸、例えば、氷酢酸の添加は好都合であることを証明できる。この反応順序は単一ポットプロセスとして実施することができる。最初に生成したアミンを単離し、次いで別の工程において、それを溶媒、例えば、アセトニトリル中において、例えば、ホウ水素化ナトリウムで還元することは好都合であることを証明できる。
【００３６】
アミドの生成は、この分野において知られている方法に従い実施する。
アミドの生成のために、対応するエステルから出発することができる。このエステルをJ. Org. Chem. 1995、8414に従いアルミニウムトリメチルおよび対応するアミンと溶媒、例えば、トルエン中で0℃〜溶媒の沸点の温度において反応させる。分子が2つのエステル基を含有する場合、両方は同一アミドに転化される。アルミニウムトリメチルの代わりに、ナトリウムヘキサメチルジシラジドを使用することもできる。
【００３７】
しかしながら、アミドの生成のために、ペプチド化学から知られているすべてのプロセスを利用することもできる。例えば、対応する酸をアミンと非プロトン性極性溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド中で、例えば、ヒドロキシベンゾトリアゾールおよびカーボジイミド、例えば、ジイソプロピルカーボジイミドを使用して得ることができる活性化酸を介して、0℃〜溶媒の沸点の温度、好ましくは80℃の温度において反応させことができる。
【００３８】
しかしながら、カルボン酸とアミンとの間の反応は、また、カルボン酸とアミンとの間の反応は、活性化試薬、例えば、HATU (N-ジメチルアミノ-1H-1,2,3-トリアゾロ-[4,5-b]ピリジン-1-イルメチレン-N-メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェート-N-オキシド) により生成することができ、ここで極性非プロトン性溶媒、例えば、ジメチルアセトアミドはこの反応に適する。塩基、例えば、N-メチルモルホリンの添加は必要である。この反応は0〜100℃において進行し、ここでこの手順は室温において実施することが好ましい。アミドの生成のために、酸ハロゲン化物、混合酸無水物、イミダゾールまたはアジドを使用してこのプロセスを実施こともできる。追加のアミノ基を前もって保護すること、例えば、アミドとしてを保護することはすべての場合において不必要であるが、反応に好都合な影響を及ぼすことがある。
【００３９】
硫黄の酸化はこの分野において知られている方法に従い実施する。こうして、この硫黄化合物を酸化剤、例えば、m-クロロ過安息香酸と溶媒、例えば、ジクロロメタン中で反応させることができ、これによりスルホキシドとスルホンとの混合物を得ることができる。また、過酸化水素を酸化剤として溶媒、例えば、氷酢酸中で使用することができる。また、溶媒、例えば、アセトニトリルおよび四塩化炭素中で三塩化ルテニウムの存在下に過ヨウ素酸ナトリウムを使用して、メタノールおよび水中で過ヨウ素酸ナトリウムを使用して酸化を実施することができ、ここで前者の方法において、スルホンが生成し、そして後者の方法において、主としてスルホキシドが生成する。
【実施例】
【００４０】
本発明による化合物の製造
下記の実施例により、本発明による化合物の製造を説明する。特許請求された化合物の範囲はこれらの実施例に限定されない。
【００４１】
実施例１．
【化４】
2006527228.tif 000005
2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-N-(4-トリフルオロメトキシ-フェニル)-ベンズアミド
【００４２】
441 mg (1.8 mmol) の2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-安息香酸を無湿分環境中でアルゴン雰囲気下に12 mlの塩化メチレン中に導入し、連続して456 mg (4.5 mmol) のN-メチルモルホリンおよび336 mgの4-トリフルオロメトキシアニリンおよび822 mg (2.16 mmol) のHATU (N-ジメチルアミノ-1H-1,2,3-トリアゾロ-[4,5-b]ピリジン-1-イルメチレン-N-メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェート-N-オキシド) と混合し、そして混合物を室温において2.5時間攪拌する。この酸は溶解する。次いで、それを100℃の浴温度に1.5時間加熱する。
【００４３】
まず、生成物は沈殿し、次いで再び溶解する。それを真空蒸発により濃縮し、そして残留物を希薄重炭酸ナトリウム溶液および酢酸エチル中に分散させる。有機相を洗浄し、乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮する。残留物を10 gのシリカゲル (Isolute、フラッシュ、SI) 上のクロマトグラフィーにかけ、溶離液としてCH2Cl2〜CH2Cl2: MeOH = 9:1の勾配を使用し、414 mgの生成物が得られ、これを塩化メチレン: ジイソプロピルエーテル = 5:1で吸収的に沈殿させ、吸引濾過した後、364 mg (理論値の50.1%) の2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-N-(4-トリフルオロメトキシ-フェニル)-ベンズアミドが生成する、融点189.2℃。
【００４４】
同様に、下記の化合物をまた製造する:
【化５】
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【００４５】
【表１】
2006527228.tif 000007
【００４６】
【表２】
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【００４７】
【表３】
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【００４８】
出発物質の製造
2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-安息香酸
a)     2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-安息香酸メチルエステル
4.53 g (30 mmol) のアントラニル酸メチルエステルを209 mlのメタノール中で2.09 mlの氷酢酸および5.76 g (42 mmol) の2-ピリドン-5-カルバルデヒドと混合し、そしてこの混合物を室温においてアルゴン雰囲気下に無湿分環境中で24時間攪拌する。次いでそれを少しずつ2.64 g (42 mmol) のシアノホウ水素化ナトリウムと混合し、そしてそれを室温において3日間攪拌する。次いでそれを真空中で乾燥状態に蒸発させ、150 mlの希薄重炭酸ナトリウム溶液中に取り、吸収的に沈殿させ、吸引濾過する。残留物として、4.75 g (理論値の61%) の2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-安息香酸メチルエステルが得られる。
【００４９】
b)     2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-安息香酸
3.5 g (12.7 mmol) の2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-安息香酸メチルエステルを15 mlのジメチルホルムアミド中で30 mlの6N水酸化ナトリウム溶液と混合し、室温において1.5時間攪拌する。氷中で冷却しながら、それを約50 mlの4N塩酸と混合し、沈殿を吸引濾過し、水で洗浄する。3.1 gが得られ、これを29.3 mlの1N水酸化ナトリウム溶液および142 mlのエタノール中に取り、120℃の浴温度に1.5時間加熱する。次いでエタノールを真空中で抜き出し、それを2 N塩酸で酸性とし、沈殿した生成物を吸引濾過し、十分に乾燥する。2.9 g (理論値の93.5%) の2-[(6-オキソ-1,6-ジヒドロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ]-安息香酸が得られる。
【００５０】
下記の試料の適用により、本発明による化合物の生物学的作用および使用を説明する。本発明はこれらの実施例に限定されない。
試験に必要な溶液
貯蔵溶液
貯蔵溶液A:     水中の3 mmolのATP、pH 7.0 (-70℃)
貯蔵溶液B:     g-33P-ATP 1 mCi/100 μl
貯蔵溶液C:     ポリ-(Glu4Tyr) 水中の10 mg/ml
希釈用溶液
基質溶媒:      10 mmolのDTT、10 mmolの塩化マンガン、100 mmolの塩化マグネシウム
酵素溶液:      120 mmolのトリス/HCl、pH 7.5、10 μMの酸化ナトリウムバナジウム
【００５１】
試料の適用1．
本発明による化合物の存在下のKDRおよびFLT-1キナーゼ活性の阻害
1点にテーパーするマイクロタイタープレート (タンパク質が結合されていない) において、10 μlの基質混合物 (10 μlの体積のATP貯蔵溶液A + 25 μCiのg-33P-ATP (約2.5 μlの貯蔵溶液B) + 30 μlのポリ-(Glu4Tyr) 貯蔵溶液C + 1.21 mlの基質溶媒) 、10 μlのインヒビター溶液 (希釈物、対照として基質溶媒中の3% DMSOに対応する物質) および10 μlの酵素溶液 (11.25 μgの酵素貯蔵溶液 (KDR、FLT-1またはFLT-4キナーゼ)) を4℃において1.25 mlの酵素溶液 (希釈) に添加する。それを十分に混合し、室温において10分間インキュベートする。次いで、10 μlの停止溶液 (250 mmolのEDTA、pH 7.0) を添加し、混合し、そして10 μlのこの溶液をP 81ホスホセルロースフィルターに移す。次いで、それを0.1 Mのリン酸中で数回洗浄する。濾紙を乾燥し、メルティレックス (Meltilex) で被覆し、そしてマイクロベータカウンター中で測定する。
【００５２】
ブランクの読み (EDTAで停止させた反応) を除去した後、ホスフェートの組込みを阻害されなかった組込みの50% に阻害するために必要なインヒビター濃度から、IC50値を決定する。
【００５３】
試料の適用2．
シトクロムP450の阻害
下記の刊行物に従い、バキュロウイルス/昆虫細胞発現およびヒトシトクロムP450イソ酵素 (3A4) を使用して、シトクロムP450の阻害を実施した: Crepsi 他、Anal. Biochem. 248、188-190 (1997)) 。
キナーゼ阻害IC50 (nM) およびシトクロムP450イソ酵素Cyt P 3A4の阻害 (IC50、nM) の結果を下記表に示す:
【００５４】
【表４】
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既知の化合物に比較して本発明による化合物のよりすぐれた作用は、結果から明瞭に理解することができる。
【国際調査報告】
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