(57)【要約】カフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する組成物を局所的に適用することにより、光老化及び日焼けを防止する方法を提供する。また、光老化及び日焼けを防止するためのカフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する医薬組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
光老化及び日焼けから日光に曝された皮膚を保護する組成物の使用であって、前記組成物は、光老化及び日焼けから皮膚を保護するために、皮膚に局所的に適用するのに有効な量のカフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する、前記使用。
【請求項２】
組成物がカフェイン、テオフィリン又はテオブロミンを含有する、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
日光に皮膚を曝す前に組成物を適用する、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
日光に皮膚を曝した後に組成物を適用する、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
カフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する組成物の使用であって、前記組成物を日光に曝す前の個体の皮膚に局所的に適用することにより、日光に対する感受性の高い個体を日光による傷害から保護するための、前記使用。
【請求項６】
組成物がカフェイン、テオフィリン又はテオブロミンを含有する、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
カフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物と、第２の日焼け止め剤又はフリーラジカルスカベンジャーを含有する、光老化及び日焼けを防止するための医薬組成物。 
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
背景技術
ヒトの皮膚を日光に曝すことによる紫外線の影響は、今日の長寿化した人口にとって問題となりつつある。加齢に関する外観上の変化の大部分は、日光による慢性的な傷害の結果であることが明らかになっている（Warren等, J. Am. Acad. Dermatol., 1991, 25:751〜760; Frances, C. 及び Robert, L., Int. J. Dermatol., 1984, 23:166〜179）。表皮の劇的変化は、光老化した皮膚に共通する深い皺と弛緩を伴う。光老化した皮膚の主な組織病理学的変化は、日常的な組織病理学検査において、エラスチンの特徴である染みを有する物質の蓄積であり、太陽光線弾性線維症（solar elastosis）と呼ぶ。免疫組織化学的染色は、エラスチン（Chen等, J. Invest. Dermatol., 1986, 87:334〜337; Mera等, Br. J. Dermatol., 1987, 117:21〜27）、フィブリン（Chen等, J. Invest. Dermatol., 1986, 87:334〜337; Dahlback等, J. Invest. Dermatol., 1990, 94:284〜291; Bernstein等, J. Invest. Dermatol., 1994, 103:182〜186）及びバーシカンの、エラスチン繊維の正常な成分（Zimmerman等, J. Cell. Biol., 1994, 124:817〜825）から構成される太陽光線弾性線維症を含む繊維形成の欠乏を示してきた。光により傷害された皮膚から誘導された線維芽細胞において、エラスチン、フィブリン及びバーシカンのｍＲＮＡが、同一の個体の正常な皮膚から誘導された線維芽細胞と比較して、同等に増加することが示された（Bernstein等, J. Invest. Dermatol., 1994, 103:182〜186）。クロラムフェニコール アセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）レポーター遺伝子に結合したヒトのエラスチンプロモーターからなるＤＮＡ構成物を有する線維芽細胞の一過性形質転換により示されるように、日光により傷害された皮膚におけるエラスチンｍＲＮＡレベルの増大は、エラスチンプロモーター活性の増大により得られる（Bernstein等, J. Invest. Dermatol., 1994, 103:182〜186）。
【０００２】
現在、カフェイン又は構造上関連する化合物を含有する組成物を局所的に適用することは、太陽光線、特に紫外線に曝すことによる光老化及び他の皮膚傷害を防止すると考えられる。
【０００３】
発明の要約 
本発明において、カフェイン又は構造上関連する化合物を含有する組成物についての新たな使用を提供する。カフェイン又は構造上関連する化合物の局所的適用は、光老化及び太陽光線による日焼け等の他の日光傷害から保護すると考えられる。したがって、カフェイン及びカフェインに構造上類似する化合物は日焼け止め剤として有用であると考えられる。また、カフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する日焼け止め剤用の組成物も提供する。
【０００４】
発明の詳細な説明
慢性的な日光曝露の結果として表皮中に深在性の変化が生じる。主な変化は弾性線維症と呼ばれる大量の異常弾性物質の沈着である。太陽光線弾性線維症はエラスチン及びフィブリンのｍＲＮＡの上昇並びにエラスチンプロモーター活性の上昇を伴うことが示されている。
【０００５】
クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）レポーター遺伝子に結合したヒトエラスチンプロモーターを含有するトランジェニックマウスモデルが、皮膚の光傷害を防止する化合物を試験するために開発された。これらのマウスは、組織特異的及び発生学的調節方法によりヒトエラスチンプロモーター活性を発現する。プロモーター活性は、このモデルにおいて、分析感度を示す、紫外線中で少し増加する機能として検討することができる。さらに、１回紫外線に曝しただけで定量データを得ることができる。試験化合物をヒトエラスチンプロモーターを発現することが可能なトランジェニックマウスの皮膚に適用する。次に、トランジェニックマウスを太陽光線に曝し、マウス中のヒトのエラスチンプロモーター活性を測定する。試験化合物が太陽光線に対する保護作用を示すかどうかを測定するために、当量の太陽光線に曝した、試験化合物を処置していないトランジェニックマウスとヒトエラスチンプロモーター活性を比較する。エラスチンプロモーター活性は皮膚の老化の主な事象であるので、これらのマウスはヒトの光老化のマウスモデルを意味する。
【０００６】
このトランジェニックマウス系列を用い、カフェイン及びカフェインに構造上類似する化合物の、ヒトエラスチンプロモーター活性における太陽光線の作用を抑制する能力を測定することができる。これらの実験において、マウスを３つのグループに分け、１つのグループは全く処置を施さず、１つのグループはカフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を薬学上許容される媒体中に含有する、局所適用するための溶液又は懸濁液をそれらの背中に局所的に適用し、第３のグループは薬学上許容される媒体のみをそれらの背中に局所的に適用する。局所的に適用してから約１５分後に、ヒトに紅斑を与える最小限の線量（ＭＥＤ）の２０倍の線量の太陽刺激光線（ＳＳＲ）にマウスを曝す。光処置の後、マウスの背中を７０％のイソプロピルアルコールパッドで２回洗浄し、過剰なカフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を除く。この操作を連続して３日以上繰り返す。
【０００７】
次に、３回目の光処理をしてから２４時間後のＣＡＴ活性を測定するために、マウスを犠牲にし、皮膚を採取した。ベースラインは照射及び処置のいずれも受けない対照マウスの標準化されたＣＡＴ活性の値である。媒体だけで処置したマウスのＣＡＴ活性の相対的増加は、カフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する媒体で処置したマウスのＣＡＴ活性と比較する。
【０００８】
これらの実験結果から、カフェイン又はカフェインに構造上関連する化合物を含有する組成物の局所的適用が光老化及び日焼け等の他の日光傷害から皮膚を保護すると予想される。「カフェインに構造上類似する化合物」は、カフェインに類似する日光傷害に対する保護特性を有する、カフェインに類似する化学式及び構造を有する化合物を意味する。例としては、メチル化したキサンチン、テオフィリン及びテオブロミン等の追加のキサンチン類を含むが、これらに限定されない。既知化合物に類似する構造を有する、合理的に設計された化合物を追加する方法は当業者により確立され日常的に用いられている。したがって、本願を読むことにより、カフェインに構造上類似する化合物及びテオフィリン及びテオブロミン等の他のメチルキサンチン類を本発明において使用することは、当業者により日常的に確認することが可能である。
【０００９】
カフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する組成物の例には、クリーム、ローション及びスプレーが挙げられるがこれらに限定されない。クリーム、ローション及びスプレーにカフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を調合する方法は、このような製剤に用いる薬学的な添加剤と同様に当業者によく知られている。かかる組成物がさらに第２の又は追加の日焼け止め剤又はフリーラジカルスカベンジャー、特に限定されないが、例えばビタミンＣ及びビタミンＥ及びそれらの類似物を含有してもよいことは、この開示を受けた当業者には明らかである。好ましい実施形態においては、カフェイン又はカフェインに構造上類似する化合物を含有する組成物を、皮膚を太陽に曝す前に適用する。しかし、これらの組成物を太陽に曝された後に適用することによっても、太陽に曝されたことによる皮膚の損傷を緩和することができる。太陽に対する感受性が高められた個体、特に限定されないが、例えば癌、乾癬及び他の皮膚病のためにソラレン処置を受けている個体、皮膚癌、乾癬及び他の皮膚病のために光線力学的療法を受けている個体、色素性乾皮症、色素欠乏症又はメラニン色素の内因性低下による他の病気等の遺伝子修復欠陥を罹った個体の保護に、本発明のこれらの組成物が特に有用であると考えられる。
【００１０】
本発明を以下の例によりさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００１１】
例
例１：ヒトのエラスチンプロモーターを発現するトランジェニックマウス
ＣＡＴレポーター遺伝子に結合した、５．２−ｋｂのヒトのエラスチンプロモーターを発現するホモ接合系列のトランジェニックマウスを用いた。Ｈｓｕ−Ｗｏｎｇ等, J. Biol. Chem., 1994, 269 : 18072〜18075。これらのマウスは組織特異的、発生的に制御された方法でヒトのエラスチンプロモーターを発現する。視認できる体毛の成長がないため、４又は５日齢のマウスを用いた。
【００１２】
例２：太陽模擬光線
Ｓｃｈｏｔｔ  ＷＧ  ３２０  フィルター（Schott Glaswerke, Mainz, ドイツ国）によりろ過したキセノンアーク灯を有する、複数ポート太陽光模擬装置（Solar Light社、フィラデルフィア、PA）を太陽光模擬光線（ＳＳＲ）を照射するのに用いることができる。太陽光模擬装置の出力は３Ｄ ＵＶメータ（Solar Light社）により測定することができ、ヒトの最小紅斑投与量（ＭＥＤ）として表示する。ランプの発光スペクトルは地球上に到達する太陽光に近似している。太陽光模擬装置からの光導波路は、光がマウスの胸椎表面に接触するように配置し、マウスはＳＳＲを照射している間動かないように拘束する。照射しない対照マウスもＳＳＲを受けることなく拘束される。
【００１３】
例３：ＣＡＴ分析
トランジェニックマウスの皮膚中、及びこれらの動物から確立された線維芽細胞培養中のヒトのエラスチンプロモーター／ＣＡＴレポーター遺伝子の発現を測定するため、ＣＡＴ活性を測定する。皮膚からＣＡＴを抽出するために、試料を０．２５Ｍトリス−塩酸、ｐＨ７．５中で組織ホモジナイザー（Brinkmann Instruments, Inc. Westbury, NY）を用いて均質化する。ホモジェネートを４℃、１０，０００×ｇで１５分間遠心分離し、上清中のタンパク質濃度を市販のタンパク質分析キット（Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA）で測定する。１００μｇのタンパク質を含有する各上清は、周知の方法に従い[１４Ｃ]クロラムフェニコールとのインキュベーションによりＣＡＴ活性を測定するために用いる。放射性クロラムフェニコールのアセチル化及び非アセチル化形態は、薄層クロマトグラフィーにより分離し、ＣＡＴ活性をアセチル化形態の放射活性により各試料の全放射活性のパーセントとして測定する。
【国際調査報告】
2006511501.tif 000002