(57)【要約】本発明は、糖尿網膜症診断剤に関する発明であって、詳しくは糖尿網膜症の診断のできる免疫グロブリンＡ（Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  Ａ）蛋白質、その蛋白質の抗体を含む診断キット及び診断方法に関する。本発明は、糖尿網膜症診断に用いることができる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖尿網膜症診断に有効な配列番号１に記載された免疫グロブリンＡ蛋白質及び類似蛋白質、またはその蛋白質切片。
【請求項２】
上記蛋白質切片は、配列番号２に記載されたペプチド配列を含むことを特徴とする請求項１に記載の蛋白質切片。
【請求項３】
請求項１または請求項２に記載の蛋白質に結合する抗体。
【請求項４】
請求項３に記載の抗体を含む糖尿網膜症診断用キット。
【請求項５】
上記キットは、抗免疫グロブリンＡ抗体を酵素ペロキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、ビオチンなどで標識された蛋白質をさらに含むことを特徴とする請求項４に記載の糖尿網膜症診断用キット。
【請求項６】
ａ）請求項２の抗体に血液サンプル及びペロキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、またはビオチンで標識させた免疫グロブリンＡ蛋白質を処理する段階と、
ｂ）上記の複合体の吸光度を測定して正常より低い吸光度（ＥＬＩＳＡ値）を示す場合に糖尿網膜症であることを診断する方法。
【請求項７】
請求項１または請求項２の蛋白質をコーディングする配列番号３の免疫グロブリンＡ遺伝子及びその類似遺伝子。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔技術分野〕
本発明は、糖尿網膜症診断剤に関する発明であり、詳しくは糖尿網膜の診断のできる免疫グロブリンＡ（Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  Ａ）蛋白質、その蛋白質の抗体を含む診断キット及び診断方法に関する。
【０００２】
〔背景技術〕
一般に、糖尿病は微細血管系に病変を起こす複雑な代謝性疾患であり、目を含んだ全身組織に広範囲な障害をもたらし、目に影響を及ぼす全身疾患の中で、もっとも重要な疾患である（ＬＥＥ  Ｔａｅ−ｈｅｅ，  ＣＨＯＩ  Ｙｏｕｎｇ−ｇｉｌ．  糖尿病性血管合併症、ソウル：高麗医学（１９９３））。その中で糖尿網膜症は、もっとも重症の合併症に属し、生活水準の向上と治療水準の発展により糖尿病患者の寿命と有病期間とが長くなるにつれて重要な問題がなってきた（Ｋｌｅｉｎ  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ，  Ａｒｃｈ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．  １０２：５２０−５３２（１９８４））。糖尿網膜症は、血管障害による網膜の病変が網膜内に限られている非増殖性糖尿網膜症と、網膜から硝子体腔の方へと新生血管組織が浸透されていく増殖性糖尿網膜症とに分ける（Ｇｒｅｅｎ，Ｉｎ：Ｓｐｅｎｃｅｒ  ＷＨ，ｅｄ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ：ａｎ  ａｔｌａｓ  ａｎｄ  ｔｅｘｔｂｏｏｋ．  ４ｔｈ  ｅｄ．  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：ＷＢ  Ｓａｕｎｄｅｒ；１１２４−１１２９（１９９６））。糖尿網膜症の診断は眼底で特徴的な構造変化を観察して行われる。糖尿網膜症による視力損傷は増殖性糖尿網膜症での硝子体出血、黄斑の牽引網膜剥離とともに黄斑変成症のためであるが、これに対して手術治療とともにレーザー治療の効用性がよく知られている（Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ  Ｓｔｕｄｙ  Ｒｅｐｏｒｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  １４：  Ｉｎｔ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ  Ｃｌｉｎ．  ２７：２３９−２５３（１９８７））。このような治療は適切な段階に施すことによって、副作用を最小化しながら視力喪失を予め防止することができる。従って、糖尿網膜症の検査と診断上の努力とは、手術治療のすべき段階に既に至ったか否かなどを判断するため、度々検査を通じて行われるべきである。しかし、現在までは診断方法として眼科で行われる眼底撮影による検査のみ可能である。従って、早期診断が難しく、予防及び手術時期を逃す場合が頻繁である。従って、本発明では、血液にて容易に糖尿網膜症診断ができる方法を考案した。現在、このように血液を通じた糖尿網膜症診断法はなく、本発明者らは蛋白質体学を用いて血液内の変化のある蛋白質を探して診断に応用した。この蛋白質は、糖尿のみを患っている患者と糖尿合併症まで患っている患者との間で、明らかな量的変化を見せることによって、免疫学的方法による正確な定量法を用いて発明を完成するに至った。
【０００３】
〔発明の詳細な説明〕
本発明は、上記の問題点を解決し、上記の必要性によって案出されたものであって、本発明の目的は糖尿網膜症診断剤を提供することである。
【０００４】
本発明のほかの目的は、上記診断剤を含む糖尿網膜症診断用キットを提供することである。
【０００５】
本発明のさらにほかの目的は、易しく、簡単な糖尿網膜症診断方法を提供することである。
【０００６】
上記の目的を達成するため、本発明は、糖尿網膜症診断に有効な免疫グロブリンＡ蛋白質とその蛋白質切片を提供する。
【０００７】
本発明の蛋白質分析を通じて見出した配列は、免疫グロブリンＡのヘビーチェーンのコンスタント（ｃｏｎｓｔａｎｔ）部位に該当する。免疫グロブリンＡ蛋白質は、ヘビーチェーン及びライトチェーンとが存在し、それぞれのチェーンには可変部（ｖａｒｉａｂｌｅ  ｒｅｇｉｏｎ）があって、様々な配列の可能な部位が存在する。従って、免疫グロブリンＡ蛋白質と判明されられる配列を有する蛋白質が可能である。
【０００８】
従って、本発明の免疫グロブリンＡ蛋白質は、以下の配列番号１のヘビーチェーンの配列以外にも様々な配列が可能である。
【０００９】
上記ＩｇのＨチェーンの配列は、下記の配列番号１に記載されたものと同様である。また本発明で上記免疫グロブリンＡの蛋白質切片は、配列番号２のペプチドを含んだ様々な切片が可能である。
【００１０】
また本発明は、上記の蛋白質に結合する抗体を提供し、上記の抗体はポリクローナル、モノクローナル両方とも望ましいが、モノクローナル抗体のほうがもっと望ましい。
【００１１】
また本発明は、上記の抗体を含む糖尿網膜症診断用キットを提供する。
【００１２】
本発明のキットは、抗免疫グロブリンＡ抗体を酵素ペロキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ（ａｌｋａｌｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ）、ビオチン（ｂｉｏｔｉｎ）などで標識させた蛋白質をさらに含むことを特徴とする糖尿網膜症診断用キットで構成される。
【００１３】
本発明で診断用キットに用いられる残りの試薬などは、一般的な診断用キットに用いられる成分から容易に選択することができる。
【００１４】
さらに、本発明は、上記の抗体に硝子体または血液サンプル及びペロキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、ビオチンなどで標識させた抗免疫グロブリンＡ抗体を処理する段階と、上記の複合体の吸光度を測定して糖尿病のみを患っている患者より低い吸光度（ＥＬＩＳＡ値）を示す場合に、糖尿網膜症であることを診断する方法を提供する。
【００１５】
また本発明は、免疫グロブリンＡ蛋白質をコーディングする配列番号３の免疫グロブリンＡ遺伝子と配列番号２のペプチドをコーディングする配列番号４のヌクレオチドを提供する。
【００１６】
以下、本発明を詳しく説明する。
【００１７】
本発明は、糖尿網膜症患者の眼球内の硝子体にて、免疫グロブリンＡが正常硝子体に比べて増加するという事実から、血液内にてこの蛋白質の変化があることを確認した結果、血液内では糖尿病患者らに比べて、糖尿網膜症患者にて免疫グロブリンＡが減少したことがわかり、これを用いて免疫学的方法で完成された糖尿網膜症診断剤に関するものである。
【００１８】
上記の目的を達成するため、本発明はまず、糖尿網膜症に特に変化のある蛋白質群を蛋白質体学（ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ）方法で分析した。正常人と糖尿網膜症患者との硝子体の変化を、蛋白質種類と量的な変化とを分析して以下のような新規な現象を見出し、見出された同一の蛋白質の変化を血液内で確認した後、糖尿網膜症診断に適用するための適切な免疫学的方法で診断キットを制作した。：  第一、正常人を対照群にして、糖尿病患者と糖尿網膜症患者の眼球内の硝子体を採取して、２次元ゲル分離及びイメージ分析を通じて定性及び定量的差を示す蛋白質群を確保し、これら蛋白質群の正体を調べるために、ＭＳ及びＱ−ＴＯＦ分析器などで同定した。変化が観測されて確認された蛋白質は、免疫グロブリンＡと判明されて、糖尿網膜症患者の硝子体内では、正常人の硝子体ではほとんど観察されない免疫グロブリンＡの増加が観察された。糖尿網膜症の硝子体内で免疫グロブリンＡが増加するという報告は今までない。第二、このような定量的変化を示すこの蛋白質は、血液内での量的変化を示した。糖尿病患者の血液を対照群にした場合、免疫グロブリンＡは糖尿網膜症患者の血液内で減少した。このような結果もまた今まで報告されていない。第三、蛋白質の存在数値は、免疫学的方法を通じたキットを制作することによって、使用し易くて、敏感でありながらも正確度の高い方法を採択した。
【００１９】
以下、非限定的な実施例を通じて本発明をさらに具体的に説明する。
〔好ましい実施形態〕
（実施例１：蛋白質体学分析のための眼球硝子体サンプル処理）
糖尿網膜症は、糖尿が長期間にわたって持続されて発生される合併症の一つである。この疾患は、不完全な血管構造を持つ新生血管が多く生成されて、眼球内の硝子体に出血を引き起こすことによって網膜に異常を誘発するようになり、程度によって視力低下及び喪失に至る。本発明では、正常対照群と糖尿網膜症患者との硝子体の蛋白質分析を通じて、疾患誘発因子を探索するとともに疾患状態を示す蛋白質に対する情報を得て診断の目的を遂げた。蛋白質分析は最新技法である蛋白質体学方法を用いた。まず蛋白質体学方法に適用するため、眼球硝子体を分析しやすく処理した。硝子体は高分子糖であるｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄが過量含有されている。しかし、この糖は、蛋白質分離の際、かなりの悪影響を及ぼすと判明された。従って、これを有効に除去できる方法を考案した（図１参照）。この方法は、４ｍｌの硝子体を１６ｍｌの蒸留水で希釈して１、０００、０００カットオフ（ｃｕｔ  ｏｆｆ）膜があるチューブに入れて４℃で８、０００ｒｐｍの速度で２時間遠心分離し、この過程を３回繰り返して１、０００、０００以上の高分子糖を分子量の差を利用して篩い分けた。篩い分けられなかった蛋白質は１０、０００ｃｕｔ−ｏｆｆ膜があるチューブに入れて４℃で４、０００ｒｐｍの速度で遠心分離して濃縮した後分析に用いた。高分子糖を除去する方法は、低いｐＨでよく分離されなかった問題を解決することによって、非常に有効な分析が出来るようにした。
【００２０】
（実施例２：正常人と糖尿網膜症患者との眼球内硝子体内の変化された蛋白質群の調査）
それぞれの硝子体から蛋白質のみを抽出して１ｍｇ／ｍＬの硝子体内の蛋白質濃度に濃縮して分析に用いた。過程は、まず、蛋白質を２種類の異なる特性を利用する段階的分離法である２次元的に分離させた。第一の過程は、蛋白質に電気的刺激を加えて蛋白質要素の持つｐＨによる蛋白質移動を（ＩＥＦ、ｐＨ３−１０）、第二の過程は、蛋白質の持つそれぞれの分子量によってアクリルアミドゲル（８〜１８％）上で蛋白質の移動を行った。１次元電気移動（ｐＨによる蛋白質移動）は、ゲル当り５０ｍＡの電流で１２時間移動させた後、２次元電気移動（分子量によ蛋白質移動）は、ポリアクリルアミド上でゲル当り５０ｍＡで６時間電気移動させた。このように移動された蛋白質をＣｏｏｍａａｓｉｅ  Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｂｌｕｅ−２５０染色薬及びシルバーステーニング方法で染色して存在を確認した後、正常人の持っている蛋白質と糖尿網膜症患者の硝子体内蛋白質の違いを、コンピュータでイメージ分析ソフトウェアのＰｈｏｒｅｔｉｘ（Ｎｏｎｌｉｎｅａｒ  ｄｙｎａｍｉｃｓ、  ＵＫ）を用いて分析した。この両群の蛋白質を分析した結果、差を示す蛋白質群が存在した（図２、図３参照）。
【００２１】
（実施例３：糖尿のみ患っている患者の血清と糖尿網膜症で異なる量が存在する蛋白質の同定）
量的あるいは質的に差を示す蛋白質を探し出して、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦとＱ−ＴＯＦ分析器とで同定を遂行して蛋白質の種類がわかるようになった（図４参照）。これを通じて糖尿網膜症血液で免疫グロブリンＡの量が減少するという事実がわかるようになった。  
【００２２】
（実施例４：酵素免疫学的分析法による糖尿網膜症診断）
抗免疫グロブリンＡ抗体を用いてサンドイッチ酵素免疫学的分析法（ＥＬＩＳＡ）を通じて、糖尿患者の中で糖尿網膜症患者の血清を識別できるかどうか調べるため本研究を行った。病院から入手した１０人の正常人、４５人の糖尿網膜症のない糖尿患者、８６人の糖尿網膜症患者の血清を用いた。まず、ＥＩＡ９６孔プレートに各ｗｅｌｌ当りコーテイングバッファー（５０ｍＭ  ＮａＨＣＯ3、ｐＨ９．０）に１０ｕｇ／ｍｌの濃度で溶解された抗免疫グロブリンＡ（Ｋｏｍａ、  Ｋｏｒｅａ）１００ｕｌ（各ｗｅｌｌ当り１ｕｇの抗体蛋白質）を常温で１時間反応させてコーテイングし、４００ｕｌのＰＢＳＴで２回それぞれ１０分間洗浄した後、１％ＢＳＡを含んだＰＢＳで後コーテイングさせた。ＰＢＳＴバッファーで希釈された患者の血清を１００ｕｌを入れて１時間反応させた後、ＰＢＳで５回洗浄してペロキシダーゼで標識された抗免疫グロブリンＡ抗体（ＫＯＭＡ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．，韓国）を希釈して１００ｕｌを入れて１時間の間反応させた。反応が終了した後、ＰＢＳで３回洗浄した後、１ｍｇ／ｍｌ  ＯＰＤ（ｏ−フェニレンジアミンジヒドロクロライド）及び０．０３％  Ｈ2Ｏ2が含有された０．１Ｍシートレート‐フォスフェイトバッファー（ｐＨ４．９）１００ｕｌを入れて室温で２０〜３０分間反応させた後、３Ｍ硫酸を１００ｕｌを入れて反応を停止させ、酵素免疫学的分析リーダー（ＥＬＩＳＡ  ｒｅａｄｅｒ）を用いて４５０ｎｍで吸光度を測定した。この吸光度は標準滴定曲線を通じた換算と希釈倍率とを適用して、血液単位体積（ｍｌ）当り免疫グロブリンＡの量を決定した（図５参照）。ＥＬＩＳＡ測定結果、正常人の血清内の免疫グロブリンＡの測定値分布は、１３１．２〜２９８．７ｍｇ／ｄＬ、糖尿のみを患っている患者の血清内の免疫グロブリンＡの測定値分布は、２２６．５〜７７１．９ｍｇ／ｄＬであり、糖尿網膜症患者の血清内の免疫グロブリンＡの測定値分布は、１０５．３〜５５７．２ｍｇ／ｄＬであった。これを平均値で示すと表１のようである。免疫グロブリンＡの測定平均値は、正常人である場合２１７．６±８２．１ｍｇ／ｄＬ、糖尿のみを患っている患者である場合４５７．５±１５１．６ｍｇ／ｄＬ、糖尿網膜症の中で非増殖性患者である場合２４４．４±１１７．１ｍｇ／ｄＬ、増殖性である場合には２７８．６±１２３．６ｍｇ／ｄＬであった。この結果から、糖尿のみを患っている患者群で、血清内免疫グロブリンＡの量が多く存在しているということが  明らかにわかり、非増殖性と増殖性糖尿網膜症患者との間では、血清内免疫グロブリンＡの量において、大きい差がないということがわかる。糖尿病患者の中で免疫グロブリンＡの量がＥＬＩＳＡ値  ４００ｍｇ／ｄＬ以下である場合を糖尿網膜症陽性と判定するとすると、診断された８６人の中で７２人が患者と判明される。  約８３．７％の診断敏感性（ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）を示した。また、網膜症のない糖尿患者と判定する割合は、４５人の中で２２人で、４８．９％の診断特異性（ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）を示している（表２参照）。
【００２３】
（表１：ＥＬＩＳＡを通じた正常人及び患者血清内の免疫グロブリンＡ量の測定平均値）
【００２４】
【表１】
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（表２：ＥＬＩＳＡを通じた糖尿網膜症患者判定）
【００２５】
【表２】
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〔産業上の利用可能性〕
本発明は、糖尿病の合併症である糖尿網膜症を容易に診断できる技術である。現在まで糖尿網膜症診断に対する商業的に販売される効率的な診断剤はない。糖尿網膜症に対する診断は、専ら病院に来院して眼科医の検診によって行われている。従って、糖尿病患者が自覚症状で視力の異常を感じることなく、定期的な眼科検査を受けない状況では早期診断は不可能である。この診断剤の開発は簡単な血液検査を通じて行われる特徴を持っているので、眼科検診の前に予め合併症が発生されたかが確認できるという点で非常に有用性が大きい。特にこの発明は、大量で検査が可能な９６孔を用いたＥＬＩＳＡ方法を採択することによって、健康検診の際、或いは内科に来院した多数の糖尿病患者を対象として、安価で易しくて簡単に処理できる長所を持つ。免疫学的方法が使用されて正確性と精密性などに優れている。  結論的にこの発明品は、糖尿網膜症診断で早期診断とスクリーニングに有用性があって、潜在及び初期糖尿網膜症患者には治療剤の投与時期を決めるのに役に立て、重症の糖尿網膜症への疾患を遅延させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は、蛋白質体学に適用するための眼球硝子体の前処理過程を図式化して示したものである。
【図２】図２は、眼球硝子体蛋白質を２次元電気泳動の後ＣＢＢ染色したゲル写真を示したものである。示された領域は、正常人眼球の硝子体には存在しないが、糖尿網膜症眼球の硝子体にはその量が増加されたことが示されている。
【図３】図３は、糖尿網膜症患者の血清蛋白質と糖尿のみを患っている患者の血清とを、２次元電気泳動の後、ＣＢＢ染色したゲル写真を示したものである。表示した領域は、糖尿のみを患っている患者には過量存在するが、糖尿網膜症患者の血清にはその量が減少した蛋白質を示している。
【図４】図４は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ及びＱ−ＴＯＦ分析器を用いて図２の表示された領域の蛋白質の中で、トリプシン処理されたペプチドらの質量スペクトル（Ａ）とその中の一つのペプチドのアミノ酸の配列を分析した結果（Ｂ）である。
【図５】図５は、免疫グロブリンＡ標準液０、１５．６、３１．２５、６２．５、１２５、２５０、５００ｎｇ／ｍｌ濃度とＥＬＩＳＡ反応後の吸光度測定値との標準滴定グラフである。このグラフを用いて未知の免疫グロブリンＡの量を計算することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成15年9月9日(2003.9.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖尿網膜症の診断のための免疫グロブリンＡポリペプチドであって、上記ポリペプチドは、配列番号１に記載されたポリペプチド配列と、配列番号１に記載されたポリペプチド配列のペプチド切片とからなるグループより選択されたポリペプチド。
【請求項２】
上記ペプチド切片は、配列番号２に記載されたペプチド配列を含むことを特徴とする請求項１に記載の蛋白質。
【請求項３】
ａ）請求項１又は請求項２のポリペプチドに対する抗体に血液サンプル及びペロキシダーゼ、アルカリフォスファターゼ、またはビオチンで標識させた免疫グロブリンＡ蛋白質を処理する段階と、
ｂ）上記の複合体の吸光度を測定して正常より低い吸光度(ＥＬＩＳＡ値)を示す場合に糖尿網膜症であることを診断する段階とを含む糖尿網膜症診断方法。
【手続補正書】
【提出日】平成16年11月4日(2004.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖尿病の免疫グロブリンＡレベルより糖尿網膜症の免疫グロブリンＡレベルが低い免疫グロブリンＡポリペプチドを糖尿病患者の中で糖尿網膜症を診断する際に用いる免疫グロブリンＡポリペプチドの用途。
【請求項２】
上記免疫グロブリンＡポリペプチドは、配列番号１又は配列番号２に記載されたアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項１に記載の免疫グロブリンＡポリペプチドの用途。
【請求項３】
ａ）抗免疫グロブリンＡでソリッドフェーズをコーティングする段階と、
ｂ）上記ソリッドフェーズへ試料を加える段階と、
ｃ）上記抗免疫グロブリンＡに特異性を有するように標識された抗体を加えて培養する段階と、
ｄ）上記標識を測定することで免疫反応を検出して、測定された免疫反応値が所定値より低い場合糖尿網膜症と診断する段階とを含む糖尿病患者の中で糖尿網膜症を診断する糖尿網膜症診断方法。
【請求項４】
上記試料は、血清、血漿、全血、尿、脳脊髄液または滑液からなるグループより選択されたことを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
上記標識は、ホースラディシュペロキシダーゼ、グルコース-６-リン酸デヒドロゲナーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ‐ガラクトシダーゼ、フルオロイソチオシアネート、ローダミン、フルオレセイン、ルシフェラーゼ、ラジオアイソトープ及び粒子からなるグループより選択された物質であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項６】
上記所定値が４００ｍｇ／ｄＬであることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【手続補正書】
【提出日】平成17年9月22日(2005.9.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫グロブリンＡポリペプチドまたは該免疫グロブリンＡポリペプチド断片の血液中の濃度を決定することにより糖尿病患者の中で糖尿網膜症を診断する、免疫グロブリンＡポリペプチドまたは該免疫グロブリンＡポリペプチド断片の用途。
【請求項２】
上記免疫グロブリンＡポリペプチドは、配列番号１に記載されたアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項１に記載の用途。
【請求項３】
上記免疫グロブリンＡポリペプチド断片は、配列番号２に記載されたアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項１に記載の用途。
【請求項４】
ａ）抗免疫グロブリンＡ抗体によってソリッドフェーズをコーティングする段階と、
ｂ）該ソリッドフェーズへ血液試料を加える段階と、
ｃ）標識された抗免疫グロブリンＡ抗体を加える段階と、
ｄ）上記標識を測定することで免疫反応を検出して、測定された免疫反応値が所定値より低い場合糖尿網膜症と診断する段階と、を含む糖尿病患者の中で糖尿網膜症を診断する糖尿網膜症診断方法。
【請求項５】
上記標識は、ペロキシダーゼ、アルカリホスファターゼ及びビオチンからなる群より選択された物質であることを特徴とする請求項４に記載の糖尿網膜症診断方法。
【請求項６】
上記所定値が、４００ｍｇ／ｄＬであることを特徴とする請求項４に記載の糖尿網膜症診断方法。
【請求項７】
免疫グロブリンＡポリペプチドまたは免疫グロブリンＡポリペプチド断片の血液中の濃度を決定することにより、糖尿網膜症を診断するためのキットであって、
該キットは、該免疫グロブリンＡポリペプチドまたは該免疫グロブリンＡポリペプチド断片に対する抗体を含むことを特徴とするキット。
【国際調査報告】
2006506606.tif 000010
2006506606.tif 000011