(57)【要約】本発明は、性腺刺激ホルモン放出ホルモンアンタゴニストとして有用である、式（Ｉ）（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ6a、Ｒ7、Ｒ8、Ａ、ＢおよびＭは、本明細書中に定義の通りである）を有する一群の新規なチエノピロール化合物に関する。本発明は、更に、該化合物の医薬製剤、該化合物を用いた処置方法、および該化合物の製造方法に関する。  【化１】2006501231.tif 000088
2006501231.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2006501231.tif 000076
［式中、Ａは、直接結合または置換されていてよいＣ1-5アルキレンであり；
Ｂは、式（II）
【化２】
2006501231.tif 000077
を有する基であり、ここにおいて、位置（ａ）において、式（II）は窒素原子に結合していて、そして基ＸはＲ8に結合していて；
Ｍは、−（ＣＨ2）0-2−Ｏ−であり；
Ｒ1は、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキル；または（ＣＨ2）b−Ｒa
（式中、ＲaはＣ3-8シクロアルキルであり、ｂは０または１〜６の整数である）
であり；
Ｒ2は、置換されていてよい単環式または二環式の芳香環構造であり、ここにおいて、任意の置換基は、シアノ、ＮＲ3Ｒ3a、置換されていてよいＣ1-8アルキル、置換されていてよいＣ1-8アルコキシまたはハロより選択され；
Ｒ3およびＲ3aは、独立して、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキルおよび置換されていてよいアリールより選択され；
Ｒ5は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環；または式III−ａ；III−ｂ；III−ｃ；III−ｄ；III−ｅ；III−ｆ、III−ｇ、III−ｈ、III−ｉまたはIII−ｊ
【化３】
2006501231.tif 000078
（式中、Ｃ1-4ａｌｋｙｌはＣ1-4アルキルであり、ｈｅｔは、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環である）
を有する基より選択され；
Ｒ6およびＲ6aは、独立して、水素および置換されていてよいＣ1-8アルキルより選択され；またはＲ6およびＲ6aは一緒になって、カルボニルであり；
Ｒ7は、水素または置換されていてよいＣ1-8アルキルであり；または
一緒になった
【化４】
2006501231.tif 000079
は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環を形成し、そしてＲ6aは、水素および置換されていてよいＣ1-8アルキルであり；
ＸおよびＲ8は、
（ｉ）ＸはＮであり、Ｒ8は、
シアノ、水素、ヒドロキシ、−Ｏ−Ｒb、−ＮＲbＲc−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒb、−ＣＯＮＲbＲcまたはＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒbより選択され、但し、ＲbおよびＲcは、独立して、水素、およびＣ1-4アルキルであって、ヒドロキシ、アミノ、Ｎ−Ｃ1-4アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−Ｃ1-4アルキルアミノ、ＨＯ−Ｃ2-4アルキル−ＮＨ−またはＨＯ−Ｃ2-4アルキル−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）−で置換されていてよいものより選択される；
（ii）ＸはＣＨであり、Ｒ8はＮＯ2である；および
（iii）Ｘ−Ｒ8は−Ｏ−である
より選択され；
Ｒ11は、式：Ｎ（Ｒ9Ｒ10）
（式中、Ｒ9は、水素、アリール、置換されていてよい３〜１０員複素環式環または置換されていてよいＣ1-8アルキルであり、そしてＲ10は、水素または置換されていてよいＣ1-8アルキルである）
を有する基であり；または構造Ｎ（Ｒ9Ｒ10）は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜１０員複素環式環であり；
Ｒ12およびＲ12aは、独立して、水素または置換されていてよいＣ1-8アルキルより選択され；またはＲ12およびＲ12aは、それらが結合している炭素と一緒になって、置換されていてよい３〜７員シクロアルキル環を形成し；
Ｒ13およびＲ14は、
（ｉ）Ｒ13は、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキル；置換されていてよいアリール；−Ｒd−Ａｒ（式中、ＲdはＣ1-8アルキレンであり、Ａｒは、置換されていてよいアリールである）；およびＯ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜８員複素環式環より選択され；そしてＲ14は、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキルおよび置換されていてよいアリールより選択される；
（ii）Ｒ5が、式III−ａ、III−ｂまたはIII−ｉを有する基である場合、基ＮＲ13（−Ｒ14）は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜８員複素環式環である；または
（iii）Ｒ5が、構造III−ｅである場合、基
【化５】
2006501231.tif 000080
は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜８員複素環式環である
より選択される］
を有する化合物；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物。
【請求項２】
Ｒ9が、水素、置換されていてよいアリール、置換されていてよい３〜１０員複素環式環または置換されていてよいＣ1-8アルキルであり、そして
Ｒ10が、水素または置換されていてよいＣ1-8アルキルであり、ここにおいて、
アリール、複素環式環およびＣ1-8アルキル上の任意の置換基が、ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；シアノ；置換されていてよいアリール；Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員ヘテロシクリル；−Ｏ−Ｒb；Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc；−ＮＲbＲc；−ＮＲcＣ（Ｏ）−Ｒb；−Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc；−ＮＲcＳ（Ｏ0-2）Ｒb；−Ｓ（Ｏ0-2）Ｒb（式中、ＲbおよびＲcは、請求項１に定義の通りである）より選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ9が、各々置換されていてよいピリジル、チエニル、ピペリジニル、イミダゾリル、トリアゾリル、チアゾリル、ピロリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、イミダゾリニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、フラニル、ピロリル、１，３−ジオキソラニルまたは２−アゼチニルで置換されているＣ1-6アルキル基である請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
構造Ｎ（Ｒ9Ｒ10）が、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜１０員複素環式環である請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
３〜１０員複素環式環が、Ｒ15より選択される１個またはそれを超える基で置換されていてよく、ここにおいて、Ｒ15は、置換されていてよいアリール、置換されていてよい３〜１０員複素環式環または置換されていてよいＣ1-4アルキルより選択され、ここにおいて、アリール、複素環式環またはＣ1-4アルキル上の任意の置換基が、ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；シアノ；置換されていてよいアリール；Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員ヘテロシクリル；−Ｏ−Ｒb；Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc；−ＮＲbＲc；−ＮＲcＣ（Ｏ）−Ｒb；−Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc；−ＮＲcＳ（Ｏ0-2）Ｒb；−Ｓ（Ｏ0-2）Ｒb（式中、ＲbおよびＲcは、請求項１に定義の通りである）より選択される請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ5が、式III−ａ、III−ｇ、III−ｈ、III−ｉまたはIII−ｊ
【化６】
2006501231.tif 000081
を有する基より選択される請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
ＸおよびＲ8が、
（ａ）ＸはＮであり、Ｒ8は、シアノまたは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒbである；または
（ｂ）ＸはＮであり、Ｒ8は水素である
より選択される請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ2が、置換されていてよい単環式芳香環構造より選択され、ここにおいて、任意の置換基が、シアノ、ＮＲeＲf、置換されていてよいＣ1-8アルキル、置換されていてよいＣ1-8アルコキシまたはハロより選択され、ここにおいて、ＲeおよびＲfは、独立して、水素、Ｃ1-6アルキルまたはアリールより選択される請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ1が水素である請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
化合物：
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）プロピル］−４−［１Ｓ−メチル−２−（Ｎ’−イソプロポキシカルボニル−３−ピリド−４−イルピロリジン−１−イルカルボキシミダミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物。
【請求項１１】
薬剤として用いるための請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物および薬学的に許容しうる希釈剤または担体を含む医薬製剤。
【請求項１３】
患者の性ホルモンに関係した状態を治療的に処置するおよび／または予防するための患者への投与用薬剤の製造における請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物の使用。
【請求項１４】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を製造する方法であって、次の工程（ａ）〜（ｆ）：
（ａ）ＸがＮであり、Ｒ8がＣＮである化合物について、式XXXIIの化合物の次の通りの反応
【化７】
2006501231.tif 000082
（ｂ）ＸがＮであり、Ｒ8が水素である化合物について、酸の存在下における式XXXIIIの化合物のシアノ基を切断して、式XXXIV
【化８】
2006501231.tif 000083
を有する化合物を生じること
（ｃ）ＸがＣＨであり、Ｒ8がＮＯ2である化合物について、式XXXVの化合物の次の通りの反応
【化９】
2006501231.tif 000084
（ｄ）Ｘ−Ｒ8がＯである化合物について、式XXXVIIの化合物の次の通りの反応
【化１０】
2006501231.tif 000085
（ｅ）Ｘ−Ｒ8がＯである化合物について、式XXXIXの化合物の次の通りの反応
【化１１】
2006501231.tif 000086
（ｆ）Ｘが窒素である化合物を形成するための、式XXXXIの化合物の次の通りの反応
【化１２】
2006501231.tif 000087
のいずれか一つより選択される反応工程と、その後必要ならば、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物に変換すること；
（ii）任意の保護基を除去すること；
（iii）塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を形成すること
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）活性を有するアンタゴニストである化合物に関する。本発明は、更に、医薬製剤、薬剤の製造における本発明の化合物の使用、このような化合物を用いた治療的処置方法、およびそれら化合物を製造する方法に関する。
【０００２】
性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）は、神経性刺激および／または化学的刺激に応答して、視床下部によって下垂体門脈循環中に分泌されるデカペプチドであり、下垂体による黄体形成ホルモン（ＬＨ）および濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の生合成および放出を引き起こす。ＧｎＲＨは、ゴナドリベリン、ＬＨ放出ホルモン（ＬＨＲＨ）、ＦＳＨ放出ホルモン（ＦＳＨ  ＲＨ）およびＬＨ／ＦＳＨ放出因子（ＬＨ／ＦＳＨ  ＲＦ）を含めたその他の名称によっても知られている。
【０００３】
ＧｎＲＨは、ＬＨおよびＦＳＨの作用を（それらのレベルの調節によって）調節する場合に重要な役割を果たしているので、プロゲステロン、エストロゲンおよびアンドロゲンという性ホルモンを含めた両方の性の性腺ステロイドのレベルを調節する役割を有する。ＧｎＲＨのより多くの考察は、ＷＯ９８／５５１９号およびＷＯ９７／１４６９７号に見出されうるが、それらの開示は本明細書中に援用される。
【０００４】
いくつかの疾患は、ＧｎＲＨ活性の調節から、具体的には、このような活性に拮抗することによって利益を得ると考えられる。これらには、性ホルモン依存性癌、良性前立腺肥大および子宮筋腫のような、性ホルモンに関係した状態が含まれる。性ホルモン依存性癌の例は、前立腺癌、子宮癌、乳癌および下垂体性腺刺激細胞腺腫である。
【０００５】
次は、ＧｎＲＨアンタゴニストとして作用すると主張された化合物を開示している。
ＷＯ９７／２１４３５号、ＷＯ９７／２１７０３号、ＷＯ９７／２１７０４号、ＷＯ９７／２１７０７号、ＷＯ５５１１６号、ＷＯ９８／５５１１９号、ＷＯ９８／５５１２３号、ＷＯ９８／５５４７０号、ＷＯ９８／５５４７９号、ＷＯ９９／２１５５３号、ＷＯ９９／２１５５７号、ＷＯ９９／４１２５１号、ＷＯ９９／４１２５２号、ＷＯ００／０４０１３号、ＷＯ００／６９４３３号、ＷＯ９９／５１２３１号、ＷＯ９９／５１２３２号、ＷＯ９９／５１２３３号、ＷＯ９９／５１２３４号、ＷＯ９９／５１５９５号、ＷＯ９９／５１５９６号、ＷＯ００／５３１７８号、ＷＯ００／５３１８０号、ＷＯ００／５３１７９号、ＷＯ００／５３１８１号、ＷＯ００／５３１８５号、ＷＯ００／５３６０２号、ＷＯ０２／０６６４７７号、ＷＯ０２／０６６４７８号、ＷＯ０２／０６６４５号およびＷＯ０２／０９２５６５号。
【０００６】
ＧｎＲＨアンタゴニストであるこのような化合物を更に提供することは、望まれると考えられる。したがって、本発明の第一の側面により、式（Ｉ）
【０００７】
【化１】
2006501231.tif 000003
【０００８】
［式中、Ａは、直接結合または置換されていてよいＣ1-5アルキレンであり；
Ｂは、式（II）
【０００９】
【化２】
2006501231.tif 000004
【００１０】
を有する基であり、ここにおいて、位置（ａ）において、式（II）は窒素原子に結合していて、そして基ＸはＲ8に結合していて；
Ｍは、−（ＣＨ2）0-2−Ｏ−であり；
Ｒ1は、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキル；または（ＣＨ2）b−Ｒa
（式中、ＲaはＣ3-8シクロアルキルであり、ｂは０または１〜６の整数である）
であり；
Ｒ2は、置換されていてよい単環式または二環式の芳香環構造であり、ここにおいて、任意の置換基は、シアノ、ＮＲ3Ｒ3a、置換されていてよいＣ1-8アルキル、置換されていてよいＣ1-8アルコキシまたはハロより選択され；
Ｒ3およびＲ3aは、独立して、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキルおよび置換されていてよいアリールより選択され；
Ｒ5は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環；または式III−ａ；III−ｂ；III−ｃ；III−ｄ；III−ｅ；III−ｆ、III−ｇ、III−ｈ、III−ｉまたはIII−ｊ
【００１１】
【化３】
2006501231.tif 000005
【００１２】
（式中、Ｃ1-4ａｌｋｙｌはＣ1-4アルキルであり、ｈｅｔは、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環である）
を有する基より選択され；
Ｒ6およびＲ6aは、独立して、水素および置換されていてよいＣ1-8アルキルより選択され；またはＲ6およびＲ6aは一緒になって、カルボニルであり；
Ｒ7は、水素または置換されていてよいＣ1-8アルキルであり；または
一緒になった
【００１３】
【化４】
2006501231.tif 000006
【００１４】
は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環を形成し、そしてＲ6aは、水素および置換されていてよいＣ1-8アルキルであり；
ＸおよびＲ8は、
（ｉ）ＸはＮであり、Ｒ8は、
シアノ、水素、ヒドロキシ、−Ｏ−Ｒb、−ＮＲbＲc−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒb、−ＣＯＮＲbＲcまたはＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒbより選択され、但し、ＲbおよびＲcは、独立して、水素、およびＣ1-4アルキルであって、ヒドロキシ、アミノ、Ｎ−Ｃ1-4アルキルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジ−Ｃ1-4アルキルアミノ、ＨＯ−Ｃ2-4アルキル−ＮＨ−またはＨＯ−Ｃ2-4アルキル−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）−で置換されていてよいものより選択される；
（ii）ＸはＣＨであり、Ｒ8はＮＯ2である；および
（iii）Ｘ−Ｒ8は−Ｏ−である
より選択され；
Ｒ11は、式：Ｎ（Ｒ9Ｒ10）
（式中、Ｒ9は、水素、アリール、置換されていてよい３〜１０員複素環式環または置換されていてよいＣ1-8アルキルであり、そしてＲ10は、水素または置換されていてよいＣ1-8アルキルである）
を有する基であり；または構造Ｎ（Ｒ9Ｒ10）は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜１０員複素環式環であり；
Ｒ12およびＲ12aは、独立して、水素または置換されていてよいＣ1-8アルキルより選択され；またはＲ12およびＲ12aは、それらが結合している炭素と一緒になって、置換されていてよい３〜７員シクロアルキル環を形成し；
Ｒ13およびＲ14は、
（ｉ）Ｒ13は、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキル；置換されていてよいアリール；−Ｒd−Ａｒ（式中、ＲdはＣ1-8アルキレンであり、Ａｒは、置換されていてよいアリールである）；およびＯ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜８員複素環式環より選択され；そしてＲ14は、水素；置換されていてよいＣ1-8アルキルおよび置換されていてよいアリールより選択される；
（ii）Ｒ5が、式III−ａ、III−ｂまたはIII−ｉを有する基である場合、基ＮＲ13（−Ｒ14）は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜８員複素環式環である；または
（iii）Ｒ5が、構造III−ｅである場合、基
【００１５】
【化５】
2006501231.tif 000007
【００１６】
は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有していてよい置換されていてよい３〜８員複素環式環である
より選択される］
を有する化合物；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を提供する。
【００１７】
本発明の第一の側面のもう一つの特徴により、式（Ｉ）の化合物、またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物および薬学的に許容しうる希釈剤または担体を含む医薬製剤を提供する。
【００１８】
本発明の第一の側面のもう一つの特徴により、式（Ｉ）の化合物、またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物の次の使用を提供する。
（ａ）性腺刺激ホルモン放出ホルモン活性に拮抗する薬剤の製造における使用；
（ｂ）患者の下垂体による黄体形成ホルモンの分泌を減少させるための患者への投与用薬剤の製造における使用；および
（ｃ）患者の性ホルモンに関係した状態、好ましくは、前立腺癌および閉経期前乳癌より選択される性ホルモンに関係した状態を治療的に処置するおよび／または予防するための患者への投与用薬剤の製造における使用。
【００１９】
本発明のもう一つの側面により、患者の性腺刺激ホルモン放出ホルモン活性に拮抗する方法であって、式（Ｉ）の化合物、またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を患者に投与することを含む方法を提供する。
【００２０】
本発明の化合物の薬学的に許容しうる塩は好適であるが、本発明の化合物の他の薬学的に許容し得ない塩も、例えば、本発明の化合物の薬学的に許容しうる塩の製造において有用でありうる。
【００２１】
本発明は、本発明の化合物およびそれらの塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を含むが、本発明のもう一つの態様において、本発明は、本発明の化合物およびそれらの塩を含む。
【００２２】
本明細書中において、特に断らない限り、アルキル、アルキレンまたはアルケニル部分は、直鎖状であってよいしまたは分岐状であってよい。
「アルキレン」という用語は、−ＣＨ2−基を意味する。したがって、例えば、Ｃ8アルキレンは−（ＣＨ2）8−である。
【００２３】
「アリール」という用語は、フェニルまたはナフチルを意味する。
「カルバモイル」という用語は、−ＣＯＮＨ2基を意味する。
「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
【００２４】
「ヘテロシクリル」または「複素環式環」という用語は、５〜１０員芳香族の単環式または二環式環、または５〜１０員飽和または部分飽和の単環式または二環式環であって、この芳香環、飽和環または部分不飽和環が、環炭素原子によって、または窒素からの結合が可能である場合、例えば、ピリジン環の窒素に可能な結合はないが、ピラゾール環の１−窒素を介して結合が可能である場合は環窒素原子によって連結した、窒素、酸素または硫黄より独立して選択される５個までのヘテロ原子を含有している環を意味する。５員または６員の芳香族複素環式環の例には、ピロリル、フラニル、イミダゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピリジニル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、イソチアゾリル、チアゾリルおよびチエニルが含まれる。９員または１０員の二環式芳香族複素環式環は、５員環かまたは別の６員環に縮合した６員環を含む芳香族二環式環系である。５／６および６／６二環式環系の例には、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、インドリル、ピリドイミダゾリル、ピリミドイミダゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、フタラジニル、シンノリニルおよびナフチリジニルが含まれる。飽和または部分飽和の複素環式環の例には、ピロリニル、ピロリジニル、モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ジヒドロピリジニルおよびジヒドロピリミジニルが含まれる。この定義は、更に、硫黄原子がＳ（Ｏ）基またはＳ（Ｏ２）基に酸化された硫黄含有環を含む。
【００２５】
「芳香環」という用語は、窒素、酸素または硫黄より独立して選択される５個までのヘテロ原子を含有してよい５〜１０員芳香族の単環式または二環式環を意味する。このような「芳香環」の例には、フェニル、ピロリル、フラニル、イミダゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピリジニル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、イソチアゾリル、チアゾリルおよびチエニルが含まれる。好ましい芳香環には、フェニル、チエニルおよびピリジルが含まれる。
【００２６】
記号
【００２７】
【化６】
2006501231.tif 000008
【００２８】
は、それぞれの基が、その分子の残部に連結している場合を示す。
疑わしさを免れるために、一緒になった
【００２９】
【化７】
2006501231.tif 000009
【００３０】
が、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環を形成する場合、それら示された基は環化して、窒素含有複素環式環、すなわち、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有してよい
【００３１】
【化８】
2006501231.tif 000010
【００３２】
を形成する。
Ｃ1-8アルキルの例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチルおよび２−メチルペンチルが含まれ；Ｃ1-8アルキレンの例には、メチレン、エチレンおよび２−メチルプロピレンが含まれ；Ｃ1-8アルコキシの例には、メトキシ、エトキシおよびブチルオキシが含まれ；Ｎ−Ｃ1-4アルキルアミノの例には、Ｎ−メチルアミノおよびＮ−エチルアミノが含まれ；Ｎ，Ｎ−ジ−Ｃ1-4アルキルアミノの例、ＨＯ−Ｃ2-4アルキル−ＮＨの例には、ヒドロキシメチルアミノ、ヒドロキシエチルアミノおよびヒドロキシプロピアミノ（hydroxypropyamino）が含まれ、ＨＯ−Ｃ2-4アルキル−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）の例には、Ｎ−メチルヒドロキシメチルアミノ、Ｎ−エチルヒドロキシエチルアミノおよびＮ−プロピルヒドロキシプロピアミノが含まれる。
【００３３】
本発明の若干の化合物が、１個またはそれを超える不斉炭素原子によって光学活性体またはラセミ体で存在しうる限りにおいて、本発明は、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）活性に拮抗する性質を有するいずれかこのような光学活性体またはラセミ体をその定義中に含むということは理解されるはずである。光学活性体の合成は、当該技術分野において周知の有機化学の標準法（standard techniques）によって、例えば、光学活性な出発物質からの合成によってまたはラセミ体の分割によって行うことができる。同様に、これら化合物の活性は、以下に論じられる標準的な実験室技法（laboratory techniques）を用いて評価することができる。
【００３４】
本発明は、更に、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）活性に拮抗する性質を有する本発明の種々の特徴の化合物のいずれかおよび全ての互変異性体に関する。
本発明の若干の化合物は、溶媒和の形、例えば、水和した形、更には、非溶媒和の形で存在しうるということも理解されるであろう。本発明が、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）活性に拮抗する性質を有するこのような溶媒和の形を全て包含するということは理解されるはずである。
【００３５】
式（Ｉ）の好ましい化合物は、次のいずれか一つまたは次の組合せが当てはまるものである。
好ましくは、Ａは、置換されていてよいＣ1-5アルキレンである。更に好ましくは、Ｃ1-4アルキレン。最も好ましくは、メチレンまたはエチレン。
【００３６】
好ましくは、Ｍは−ＣＨ2−Ｏ−である。
好ましくは、Ｒ1は、水素または置換されていてよいＣ1-6アルキルである。より好ましくは、Ｒ1は、水素、メチル、エチルまたは tert−ブチルである。最も好ましくは、Ｒ1は水素である。
【００３７】
好ましくは、Ｒ2は、置換されていてよい単環式芳香環構造であり、ここにおいて、任意の置換基は、シアノ、ＮＲeＲf、置換されていてよいＣ1-8アルキル（好ましくは、Ｃ1-4アルキル、例えば、メチルまたはエチル）、置換されていてよいＣ1-8アルコキシ（例えば、Ｃ1-6アルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシまたは tert−ブトキシ）またはハロ（例えば、Ｆ、ＢｒまたはＣｌ）より選択され、ここにおいて、ＲeおよびＲfは、独立して、水素、Ｃ1-6アルキルまたはアリールより選択される。更に好ましくは、Ｒ2は、置換されていてよいフェニルであり、ここにおいて、任意の置換基は、シアノ、ＮＲeＲf、置換されていてよいＣ1-4アルキル、置換されていてよいＣ1-6アルコキシ、Ｆ、ＢｒまたはＣｌより選択され、ここにおいて、ＲeおよびＲfは、上に定義の通りである。また更に好ましくは、Ｒ2は、置換されていてよいフェニルであり、ここにおいて、任意の置換基は、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、tert−ブトキシ、ＦまたはＣｌより選択される。最も好ましくは、Ｒ2は、
【００３８】
【化９】
2006501231.tif 000011
【００３９】
（式中、Ｍｅはメチルである）
である。好ましくは、Ｒ2は、１個、２個または３個の置換基を有する。
好ましくは、Ｒ3およびＲ3aは、独立して、水素；置換されていてよいＣ1-6アルキルおよび置換されていてよいアリールより選択される。更に好ましくは、Ｒ3およびＲ3aは、独立して、メチル、エチル、tert−ブチルおよびフェニルより選択される。
【００４０】
好ましくは、Ｒ5は、式III−ａ、III−ｇ、III−ｈまたはIII−ｉまたはIII−ｊ
【００４１】
【化１０】
2006501231.tif 000012
【００４２】
を有する基より選択される。更に好ましくは、Ｒ5は、次の基の一つより選択される。
【００４３】
【化１１】
2006501231.tif 000013
【００４４】
また更に好ましくは、Ｒ5は、次の基
【００４５】
【化１２】
2006501231.tif 000014
【００４６】
（式中、Ｍｅはメチルである）
の一つより選択される。最も好ましくは、Ｒ5は、次の基の一つより選択される。
【００４７】
【化１３】
2006501231.tif 000015
【００４８】
一つの態様において、Ｒ6およびＲ6aは、各々水素であり、そしてＡは、Ｃ1-4アルキレン（好ましくは、メチレン）である。
本発明のもう一つの態様において、Ｒ6は水素であり、Ｒ6aはメチルであり、そしてＡはＣ1-4アルキレン（好ましくは、メチレン）である。
【００４９】
好ましくは、Ｒ7は、水素または置換されていてよいＣ1-6アルキルより選択される。更に好ましくは、Ｒ7は、水素、メチル、エチルまたは tert−ブチルである。
好ましくは、ＸおよびＲ8は、
（ａ）ＸはＮであり、Ｒ8は、シアノまたは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒbである；かまたは
（ｂ）ＸはＮであり、Ｒ8は水素である
である。更に好ましくは、ＸはＮであり、そしてＲ8は、シアノまたは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒb（式中、ＲbはＣ1-6アルキルである）である。
【００５０】
本発明のもう一つの態様において、ＸはＮであり、そしてＲ8は、−ＣＯＮＲbＲc（式中、ＲbおよびＲcは、上に定義の通りである）である。
好ましくは、Ｒ9は、基Ｎ（Ｒ9Ｒ10）の一部分を含む、または水素、置換されていてよいアリール、置換されていてよい３〜１０員複素環式環または置換されていてよいＣ1-4アルキルであり、ここにおいて、任意の置換基は、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、置換されていてよいアリール、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員のヘテロシクリル、−Ｏ−Ｒb、Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc、−ＮＲbＲc、−ＮＲcＣ（Ｏ）−Ｒb、−Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc、−ＮＲcＳ（Ｏ0-2）Ｒb、−Ｓ（Ｏ0-2）Ｒb（式中、ＲbおよびＲcは、上に定義の通りである）より選択される。
【００５１】
Ｒ9が、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜１０員複素環式環で置換されたＣ1-6アルキル基である場合、その複素環式環は、好ましくは、各々置換されていてよいピリジル、チエニル、ピペリジニル、イミダゾリル、トリアゾリル、チアゾリル、ピロリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、イミダゾリニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、フラニル、ピロリル、１，３−ジオキソラニル、２−アゼチニルより選択される。更に好ましくは、式VI−ａ、VI−ｂ、VI−ｃ、VI−ｄ、VI−ｅ、VI−ｆ、VI−ｇ、VI−ｈ、VI−ｉ、VI−ｊまたはVI−ｋ
【００５２】
【化１４】
2006501231.tif 000016
【００５３】
を有する基（但し、各々の基は、Ｒ16より選択される１個またはそれを超える基で置換されていてよい）。最も好ましくは、式VI−ｂ、VI−ｉまたはVI−ｊ
【００５４】
【化１５】
2006501231.tif 000017
【００５５】
［式中、Ｒ16は、水素、アリール、３〜１０員複素環式環または置換されていてよいＣ1-4アルキルであり、ここにおいて、任意の置換基は、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、置換されていてよいフェニル、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員ヘテロシクリル、−Ｏ−Ｒb、Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc、−ＮＲbＲc、−ＮＲcＣ（Ｏ）−Ｒb、−Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc、−ＮＲcＳ（Ｏ0-2）Ｒb、−Ｓ（Ｏ0-2）Ｒb（式中、ＲbおよびＲcは、上に定義の通りである）より選択される］
を有する基。
【００５６】
好ましくは、Ｒ10は、基Ｎ（Ｒ9Ｒ10）の一部分を含む、または置換されていてよいＣ1-6アルキルである。更に好ましくは、Ｒ10は、基Ｎ（Ｒ9Ｒ10）の一部分を含む、またはメチル、エチルまたは tert−ブチルより選択される。
【００５７】
Ｎ（Ｒ9Ｒ10）が、置換されていてよい３〜１０員複素環式環である場合、Ｎ（Ｒ9Ｒ10）は、好ましくは、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個（好ましくは、１個または２個）のヘテロ原子を含有する５員または６員の単環式環より選択される。更に好ましくは、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個（好ましくは、１個または２個）のヘテロ原子を含有する５員または６員の単環式環は、ピロリジニル、チエニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル  ピペラジニル、イミダゾール、アゼチジニルまたはアゼチニルより選択される。更に好ましくは、構造Ｎ（Ｒ9Ｒ10）は、式IV−ａ、IV−ｂ、IV−ｃ、IV−ｄおよびIV−ｅ
【００５８】
【化１６】
2006501231.tif 000018
【００５９】
を有する置換されていてよい基より選択される複素環式環であり、ここにおいて、任意の置換基は、好ましくは、Ｒ15について下に挙げられた基より選択される。更に好ましくは、構造Ｎ（Ｒ9Ｒ10）は、式Ｖａ、ＶｂまたはＶｃ
【００６０】
【化１７】
2006501231.tif 000019
【００６１】
を有する基より選択される。最も好ましくは、構造Ｎ（Ｒ9Ｒ10）は、式Ｖｃを有する基である。Ｒ15は、水素、置換されていてよいアリール、置換されていてよい３〜１０員複素環式環または置換されていてよいＣ1-4アルキルであり、ここにおいて、アリール、複素環式環またはＣ1-4アルキル上の任意の置換基は、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、ハロ、置換されていてよいアリール、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員ヘテロシクリル、−Ｏ−Ｒb、Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc、−ＮＲbＲc、−ＮＲcＣ（Ｏ）−Ｒb、−Ｃ（Ｏ）ＮＲbＲc、−ＮＲcＳ（Ｏ0-2）Ｒb、−Ｓ（Ｏ0-2）Ｒb（式中、ＲbおよびＲcは、上に定義の通りである）より選択される。好ましくは、Ｒ15はヘテロシクリルである。更に好ましくは、Ｒ15は、ピリジル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニルまたはチアゾリルより選択される。最も好ましくは、Ｒ15はピリジルである。
【００６２】
本発明のもう一つの態様において、Ｎ（Ｒ9Ｒ10）は、置換されていてよい３〜１０員複素環式環であり、ここにおいて、任意の置換基は、上に定義のＲ15より選択される。
好ましくは、Ｒ12およびＲ12aは、独立して、水素、置換されていてよいＣ1-6アルキルより選択され、またはＲ12およびＲ12aは、それらが結合している炭素と一緒になって、置換されていてよい３〜６員シクロアルキル環を形成する。更に好ましくは、Ｒ12およびＲ12aは、独立して、水素、メチル、エチルまたは tert−ブチルより選択される。最も好ましくは、Ｒ12およびＲ12aは、両方ともメチルである。
【００６３】
好ましくは、Ｒ13およびＲ14は、独立して、水素；置換されていてよいＣ1-6アルキル；置換されていてよいフェニルおよび−Ｒd−フェニル（但し、ＲdはＣ1-6アルキレンである）；またはおよびＯ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個（好ましくは、１個または２個）の追加のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環（好ましくは、５員または６員の単環式環）より選択される。更に好ましくは、Ｒ13およびＲ14は、独立して、水素またはＣ1-6アルキルより選択される。
【００６４】
任意の置換基がいろいろな場所で述べられている場合、これは、１個、２個、３個またはそれを超える任意の置換基を意味する。上に特に断らない限り（すなわち、任意の置換基のリストが与えられる場合）、各々の置換基は、独立して、Ｃ1-8アルキル（例えば、Ｃ2-6アルキル、そして最も好ましくは、メチル、エチルまたは tert−ブチル）；Ｃ3-8シクロアルコキシ、好ましくは、シクロプロポキシ、シクロブトキシまたはシクロペントキシ；Ｃ1-6アルコキシ、好ましくは、メトキシまたはＣ2-4アルコキシ；ハロ、好ましくは、ＣｌまたはＦ；Ｈａｌ3Ｃ−、Ｈａｌ2ＣＨ−、ＨａｌＣＨ2−、Ｈａｌ3ＣＯ−、Ｈａｌ2ＣＨＯまたはＨａｌＣＨ2Ｏ［式中、Ｈａｌは、ハロ（好ましくは、Ｆ）である］；ＲgＣＨ2Ｏ−、ＲhＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、ＲhＳＯ2Ｎ（Ｒ）−またはＲg−ＲhＮ−［式中、ＲgおよびＲhは、独立して、水素またはＣ1-8アルキル（好ましくは、メチルまたはＣ2-6アルキルまたはＣ2-4アルキル）であり、またはＲg−ＲhＮ−は、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有してよい置換されていてよいＣ3-8、好ましくは、Ｃ3-6複素環式環である］；水素；またはＲkＣ（Ｏ）Ｏ−またはＲkＣ（Ｏ）−［式中、Ｒkは、水素、置換されていてよいフェニルまたはＣ1-6アルキル（好ましくは、メチル、エチル、イソプロピルまたは tert−ブチル）である］より選択することができる。Ｒg−ＲhＮ−で示された複素環式環の任意の置換基について、少なくとも１個（例えば、１個、２個または３個）の置換基は、Ｃ1-6アルキル（例えば、Ｃ2-4アルキル、より好ましくは、メチル）；フェニル；ＣＦ3Ｏ−；Ｆ2ＣＨＯ−；Ｃ1-8アルコキシ、好ましくは、メトキシ、エトキシまたはＣ3-6アルコキシ；Ｃ1-8アルコキシＣ（Ｏ）、好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、tert−ブトキシカルボニルまたはＣ3-6アルコキシＣ（Ｏ）−；フェノキシカルボニル；フェノキシ；Ｃ1-8アルカノイル、好ましくは、アセチル、エタノイルまたはＣ3-6アルキアノイル（alkyanoyl）；カルボキシ；Ｃ1-8アルキルＳ（Ｏ）nn（式中、ｎｎは、０〜２の整数である）、好ましくは、メチルチオ、エチルチオ、Ｃ3-6アルキルチオ、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、Ｃ3-6アルキルスルフィニル、メチルスルホニル、エチルスルホニルまたはＣ3-6アルキルスルホニル；ヒドロキシ；ハロ（例えば、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ）；ＲmＲnＮ−［式中、ＲmおよびＲnは、独立して、水素またはＣ1-6アルキル（好ましくは、Ｃ2-4アルキル、より好ましくは、メチル、最も好ましくは、Ｒm＝Ｒn＝メチル）である］；およびニトロより独立して選択されて与えられてよい。
【００６５】
ある環の任意の置換基がいろいろな場所で述べられている場合、これは、最も好ましくは、Ｃ1-8アルキル（例えば、Ｃ2-6アルキル、そして最も好ましくは、メチル）；Ｃ1-8アルコキシ、好ましくは、メトキシ、エトキシまたはＣ3-6アルコキシ；Ｃ1-8アルキルＳ（Ｏ）nn（式中、ｎｎは、０〜２の整数である）、好ましくは、メチルチオ、エチルチオ、Ｃ3-6アルキルチオ、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、Ｃ3-6アルキルスルフィニル、メチルスルホニル、エチルスルホニルまたはＣ3-6アルキルスルホニル；ハロ（例えば、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ）；シアノ；およびＮＯ2より選択される１個、２個、３個またはそれを超える任意の置換基を意味する。
【００６６】
本発明の好ましい群の化合物は、
Ｒ11が、式：Ｎ（Ｒ9Ｒ10）を有する基であり；そして
Ｎ（Ｒ9Ｒ10）が、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜３個の追加のヘテロ原子を含有してよい置換されていてよい、好ましくは、ヘテロシクリルで置換された３〜８員複素環式環である式（Ｉ）の化合物；またはそれらの塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を含む。
【００６７】
本発明の好ましい群の化合物は、
Ｒ11が、式：Ｎ（Ｒ9Ｒ10）を有する基であり；
Ｒ9が、Ｏ、ＮおよびＳより独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を含有する置換されていてよい３〜８員複素環式環で置換されたＣ1-6アルキル基であり；そして
Ｒ10が、水素またはＣ1-6アルキルである式（Ｉ）の化合物；またはそれらの塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を含む。
【００６８】
本発明の好ましい群の化合物は、式（Ｉａ）
【００６９】
【化１８】
2006501231.tif 000020
【００７０】
（式中、Ａ、Ｂ、Ｍ、Ｘ、Ｒ1、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ6a、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12およびＲ12aは、上に定義の通りである）
を有する化合物；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を含む。
【００７１】
本発明の好ましい群の化合物は、式（Ｉｂ）
【００７２】
【化１９】
2006501231.tif 000021
【００７３】
（式中、Ｒ5は、IIIａ、IIIｂ、IIIｇ、IIIｉまたはIIIｊ
【００７４】
【化２０】
2006501231.tif 000022
【００７５】
より選択され、そして
Ａ、Ｂ、Ｍ、Ｘ、Ｒ1、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ6a、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ12a、Ｒ13およびＲ14は、上に定義の通りである）
を有する化合物；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を含む。
【００７６】
本発明の更に好ましい群の化合物は、式（Ｉｃ）
【００７７】
【化２１】
2006501231.tif 000023
【００７８】
（式中、Ｒ5は、IIIａ、IIIｂ、IIIｇ、IIIｉまたはIIIｊ
【００７９】
【化２２】
2006501231.tif 000024
【００８０】
より選択され、そして
Ａ、Ｂ、Ｍ、Ｘ、Ｒ1、Ｒ6、Ｒ6a、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ12a、Ｒ13およびＲ14は、上に定義の通りである）
を有する化合物；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を含む。
【００８１】
本発明のまた更に好ましい群の化合物は、
Ｒ5が、式IIIａ
【００８２】
【化２３】
2006501231.tif 000025
【００８３】
を有する基であり、
ＮＲ13（−Ｒ14）が、置換されていてよい７〜８員二環式複素環式環であり、そして
Ａ、Ｂ、Ｘ、Ｒ1、Ｍ、Ｒ6、Ｒ6a、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12およびＲ12aが、上に定義の通りである式（Ｉａ）、（Ｉｂ）または（Ｉｃ）の化合物；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を含む。
【００８４】
本発明による好ましい化合物は、
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）プロピル］−４−［１Ｓ−メチル−２−（Ｎ’−イソプロポキシカルボニル−３−ピリド−４−イルピロリジン−１−イルカルボキシミダミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール；またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物である。
【００８５】
もう一つの態様において、本発明による特に好ましい化合物は、化合物が、
（１Ｚ）−（｛２−［３−（２，２−ジメチル−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］エチル｝アミノ）（３−ピリジン−４−イルピロリジン−１−イル）メチリデンカルバミン酸イソプロピル；
（１Ｚ）−（｛２−［３−（２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプト−７−イル）プロポキシ）−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］エチル｝アミノ）（３−ピリジン−４−イルピロリジン−１−イル）メチリデンカルバミン酸イソプロピル；
（１Ｚ）−（｛２−［３−［３−（ジエチルアミノ）−２，２−ジメチル−３−オキソプロポキシ］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］エチル｝アミノ）（３−ピリジン−４−イルピロリジン−１−イル）メチリデンカルバミン酸イソプロピル；
Ｎ−｛２−［３−［３−（ジエチルアミノ）−２，２−ジメチル−３−オキソプロポキシ］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］エチル｝−３−ピリジン−４−イルピロリジン−１−カルボキサミド；
またはその塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物より選択されるものである。
【００８６】
本発明の第一の側面のもう一つの特徴により、式（Ｉａ）、式（Ｉｂ）、式（Ｉｃ）の化合物または本発明の好ましい化合物、またはそれらの塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物および薬学的に許容しうる希釈剤または担体を含む医薬製剤を提供する。
【００８７】
本発明の第一の側面のもう一つの特徴により、式（Ｉａ）、式（Ｉｂ）、式（Ｉｃ）の化合物または本発明の好ましい化合物、またはそれらの塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物の次の使用を提供する。
【００８８】
（ａ）性腺刺激ホルモン放出ホルモン活性に拮抗する薬剤の製造における使用；
（ｂ）患者の下垂体による黄体形成ホルモンの分泌を減少させるための患者への投与用薬剤の製造における使用；および
（ｃ）患者の性ホルモンに関係した状態、好ましくは、前立腺癌および閉経期前乳癌より選択される性ホルモンに関係した状態を治療的に処置するおよび／または予防するための患者への投与用薬剤の製造における使用。
【００８９】
式（Ｉ）のそれら化合物は、ヒトまたは動物の体内で分解されて式（Ｉ）の化合物を生じるプロドラッグの形で投与することができる。プロドラッグの例には、式（Ｉ）の化合物の in vivo 加水分解性エステルが含まれる。いろいろな形のプロドラッグが、当該技術分野において知られている。このようなプロドラッグ誘導体の例については、次を参照されたい。
【００９０】
（ａ）Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) and Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, edited by K. Widder, et al.  (Academic Press, 1985)；
（ｂ）A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs", by H. Bundgaard p. 113-191 (1991)；
（ｃ）H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992)；
（ｄ）H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988)；および
（ｅ）N. Kakeya, et al., Chem Pharm Bull, 32, 692 (1984)。
【００９１】
カルボキシ基またはヒドロキシ基を含有する式（Ｉ）の化合物の in vivo 加水分解性エステルは、例えば、ヒトまたは動物の体内で加水分解されて、親酸または親アルコールを生じる薬学的に許容しうるエステルである。カルボキシに適した薬学的に許容しうるエステルには、Ｃ1-6アルコキシメチルエステル、例えば、メトキシメチル；Ｃ1-6アルカノイルオキシメチルエステル、例えば、ピバロイルオキシメチル；フタリジルエステル；Ｃ3-8シクロアルコキシカルボニルオキシＣ1-6アルキルエステル、例えば、１−シクロヘキシルカルボニルオキシエチル；１，３−ジオキソレン−２−オニルメチルエステル、例えば、５−メチル−１，３−ジオキソレン−２−オニルメチル；およびＣ1-6アルコキシカルボニルオキシエチルエステルが含まれる。
【００９２】
ヒドロキシ基を含有する式（Ｉ）の化合物の in vivo 加水分解性エステルには、リン酸エステル（ホスホロアミド環状エステルを含めた）などの無機エステルおよびα−アシルオキシアルキルエーテルおよび関連化合物が含まれ、それらは、エステル分解の in vivo 加水分解の結果として、一つまたは複数の親ヒドキシ基を生じる。α−アシルオキシアルキルエーテルの例には、アセトキシメトキシおよび２，２−ジメチルプロピオニルオキシメトキシが含まれる。ヒドロキシについての in vivo 加水分解性エステル形成性基の選択肢には、アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチルおよび置換されたベンゾイルおよびフェニルアセチル、アルコキシカルボニル（アルキルカルボン酸エステルを生じる）、ジアルキルカルバモイルおよびＮ−（ジアルキルアミノエチル）−Ｎ−アルキルカルバモイル（カルバメートを生じる）、ジアルキルアミノアセチルおよびカルボキシアセチルが含まれる。
【００９３】
本発明の化合物の適当な薬学的に許容しうる塩は、例えば、充分に塩基性である本発明の化合物の酸付加塩、例えば、無機酸または有機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸またはマレイン酸との酸付加塩である。更に、充分に酸性である本発明の化合物の適当な薬学的に許容しうる塩は、アルカリ金属塩、例えば、ナトリウムまたはカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム塩またはマグネシウム塩；アンモニウム塩；または生理学的に許容しうる陽イオンを与える有機塩基との塩、例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリンまたはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンとの塩である。
【００９４】
式（Ｉ）の化合物は、次のような（ａ）〜（ｆ）より選択される工程を含む方法によって製造することができるが、これら方法は、本発明のもう一つの特徴として提供される。
（ａ）ＸがＮであり、Ｒ8がＣＮである化合物について、式XXXIIの化合物の次の通りの反応
【００９５】
【化２４】
2006501231.tif 000026
【００９６】
（ｂ）ＸがＮであり、Ｒ8が水素である化合物について、酸の存在下における式XXXIIIの化合物のシアノ基を切断して、式XXXIV
【００９７】
【化２５】
2006501231.tif 000027
【００９８】
を有する化合物を生じること
（ｃ）ＸがＣＨであり、Ｒ8がＮＯ2である化合物について、式XXXVの化合物の次の通りの反応
【００９９】
【化２６】
2006501231.tif 000028
【０１００】
（ｄ）Ｘ−Ｒ8がＯである化合物について、式XXXVIIの化合物の次の通りの反応
【０１０１】
【化２７】
2006501231.tif 000029
【０１０２】
（ｅ）Ｘ−Ｒ8がＯである化合物について、式XXXIXの化合物の次の通りの反応
【０１０３】
【化２８】
2006501231.tif 000030
【０１０４】
（ｆ）Ｘが窒素である化合物を形成すること、および式XXXXIの化合物の次の通りの反応
【０１０５】
【化２９】
2006501231.tif 000031
【０１０６】
そしてその後必要ならば、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物を式（Ｉ）の別の化合物に変換すること；
（ii）任意の保護基を除去すること；
（iii）塩、プロドラッグ若しくは溶媒和化合物を形成すること。
【０１０７】
本発明のそれら方法において、出発試薬または中間体化合物中のヒドロキシル基またはアミノ基などの若干の官能基は、保護基で保護される必要がありうるということは、当業者に理解されるであろう。したがって、式（Ｉ）の化合物の製造は、適当な段階で、一つまたはそれを超える保護基の付加および引き続きの除去を行うことができる。
【０１０８】
官能基の保護および脱保護は、'Protective Groups in Organic Chemistry', edited by J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973) および 'Protective Groups in Organic Synthesis', 2nd edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1991) に記載されている。
【０１０９】
アミノ基またはアルキルアミノ基に適した保護基は、例えば、アシル基、例えば、アセチルなどのアルカノイル基、アルコキシカルボニル基、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基または tert−ブトキシカルボニル基、アリールメトキシカルボニル基、例えば、ベンジルオキシカルボニル、またはアロイル基、例えば、ベンゾイルである。上の保護基の脱保護条件は、保護基の選択で必然的に異なる。したがって、例えば、アルカノイル基またはアルコキシカルボニル基のようなアシル基、またはアロイル基は、例えば、アルカリ金属水酸化物、例えば、水酸化リチウムまたは水酸化ナトリウムなどの適当な塩基での加水分解によって除去することができる。或いは、tert−ブトキシカルボニル基のようなアシル基は、例えば、塩酸、硫酸またはリン酸、またはトリフルオロ酢酸のような適当な酸での処理によって除去することができ、そしてベンジルオキシカルボニル基のようなアリールメトキシカルボニル基は、例えば、炭素上パラジウムなどの触媒上での水素化によって、またはルイス酸、例えば、トリス（トリフルオロ酢酸）ホウ素での処理によって除去することができる。第一級アミノ基に適した別の保護基は、例えば、アルキルアミン、例えば、ジメチルアミノプロピルアミンでのまたはヒドラジンでの処理によって除去することができるフタロイル基である。
【０１１０】
ヒドロキシ基に適した保護基は、例えば、アシル基、例えば、アセチルなどのアルカノイル基、アロイル基、例えば、ベンゾイル、またはアリールメチル基、例えば、ベンジルである。上の保護基の脱保護条件は、保護基の選択で必然的に異なるであろう。したがって、例えば、アルカノイルのようなアシル基またはアロイル基は、例えば、アルカリ金属水酸化物、例えば、水酸化リチウムまたは水酸化ナトリウムなどの適当な塩基での加水分解によって除去することができる。或いは、ベンジル基のようなアリールメチル基は、例えば、炭素上パラジウムなどの触媒上での水素化によって除去することができる。
【０１１１】
カルボキシ基に適した保護基は、例えば、エステル形成性基、例えば、水酸化ナトリウムなどの塩基での加水分解によって除去することができる、例えば、メチル基またはエチル基；または例えば、酸、例えば、トリフルオロ酢酸などの有機酸での処理によって除去することができる、例えば、tert−ブチル基；または例えば、炭素上パラジウムなどの触媒上での水素化によって除去することができる、例えば、ベンジル基である。
【０１１２】
実験
一般的な反応スキーム
【０１１３】
【化３０】
2006501231.tif 000032
【０１１４】
３のようなピラゾールは、次の二段階で合成することができる（スキームａ）。
（１）ラクトンと適当なエステルとの反応により、クライゼン縮合を用いて、アルゴンのような不活性雰囲気の条件下、ＴＨＦのような適当な溶媒中において約０℃の温度で、式２の化合物を形成する。
【０１１５】
（２）その後、式２の化合物のヒドラジンでの環化を、エタノールのような適当な溶媒中において室温で行って、ピラゾール３を形成する。
【０１１６】
【化３１】
2006501231.tif 000033
【０１１７】
そのピラゾール３と、式４の化合物との選択的アルキル化反応を、アルゴンのような不活性雰囲気の条件下、炭酸カリウムのような適当な塩基の存在下、ＤＭＡのような適当な溶媒中において約９０℃の温度で行って、式５の化合物を形成することができる。次に、アミン６を、式５の化合物およびフタルイミドから、ジアゾカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）、ジアゾカルボン酸ジイソプロピル等のような活性剤と、トリフェニルホスフィン、トリブチルホスフィン等との Mitsunobu 反応を用いて、ベンゼン、トルエン、テトラヒドロフランまたはそれらの混合物のような不活性溶媒中において製造後、ヒドラジンでの脱保護を行うことができる（スキームｂ）。
【０１１８】
【化３２】
2006501231.tif 000034
【０１１９】
適当なピラゾール６は、塩化メチレン、クロロホルムまたはＴＨＦ等のような不活性溶媒中におけるイソシアネートでの直接的処理によってかまたは、トリホスゲンとの反応（６→７）後、８を生じるのに必要な置換を有するアミンを加える（７→８）二段階法によって、尿素に変換することができる（スキームｃ）。
【０１２０】
【化３３】
2006501231.tif 000035
【０１２１】
適当なピラゾール（６）は、適当なイソチオシアネート（９）との反応によってグアニジン（guandine）またはグアニジン誘導体（１２）に変換されて式１０の化合物を形成後、適当なアミン（１１）で置換することができる（スキームｄ）。
【０１２２】
したがって、本発明のもう一つの特徴により、式XXXXIVの置換ピラゾールの合成方法であって、式XXXXIIIの化合物とヒドラジンとの反応を含む方法を提供する。
【０１２３】
【化３４】
2006501231.tif 000036
【０１２４】
式中、
Ｒ2は、上に定義の通りであり；そして
ＲxおよびＲyは、独立して、置換されていてよいアルキル、置換されていてよいアリールまたは置換されていてよいヘテロシクリル（heteocyclyl）より選択される。
【０１２５】
本発明のもう一つの特徴により、上に定義の式XXXXIIIの中間体化合物を提供する。
実施例
ここで、本発明を、次の非制限実施例で詳しく説明するが、ここにおいて、特に断らない限り、
（ｉ）蒸発は、真空中のロータリーエバポレーションによって行ったし、処理手順は、乾燥剤などの残留固体の濾過による除去後に行った；
（ii）作業は、１８〜２５℃の範囲内である室温で且つアルゴンまたは窒素のような不活性ガスの雰囲気下で行った；
（iii）収率は、単に例示のために与えられ、必ずしも、達成可能な最大値ではない；
（iv）式（Ｉ）の最終生成物の構造は、核（一般的には、プロトン）磁気共鳴（ＮＭＲ）および質量スペクトルの技術によって確認した；プロトン磁気共鳴化学シフト値は、δスケールで測定したが、ピーク多重性は、次のように、ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｍ，多重線；ｂｒ，幅広；ｑ，四重線，ｑｕｉｎ，五重線として示される；
（ｖ）中間体は、概して、充分に特性決定されなかったが、純度は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、赤外（ＩＲ）またはＮＭＲ分析によって評価した；
（vi）クロマトグラフィーは、シリカ（Merck Keiselgel：Ａｒｔ．９３８５）上で行った。
【０１２６】
略語
ＤＣＣ      １，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＥＡＤ    アゾジカルボン酸ジエチル
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＤＭＡＰ    ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ      ジメチルホルムアミド
ＤＮＳ      ２，４−ジニトロベンゼンスルホニル
ＥＤＣ      １−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＨＯＢｔ    １−ヒドロキシベノトリアゾール（hydroxybenotriazole）
ＬＨＭＤＳ  リチウムビス（トリメチルシリル）アミド
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
出発物質
出発物質は、次のように製造した。
【０１２７】
【化３５】
2006501231.tif 000037
【０１２８】
アルゴン下のＴＨＦ（３００ｍｌ）中の３，５−ジメチル安息香酸メチル（２５ｇ；１５２ｍｍｏｌ）およびブチロラクトン（４０ｍｌ；５２０ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却し、ＬＨＭＤＳ（２００ｍｌ；２００ｍｍｏｌ；ヘキサン中１Ｍ）で滴下処理した。その混合物を撹拌し、室温に一晩暖めた。ＴＨＦを蒸発させた。残留物をＥｔ2Ｏ中に入れ、そして有機相を、飽和水性ＮａＨＣＯ3、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。その残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２０〜４０％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、油状物を生じたが、それは、徐々に結晶化して、２を白色固体（９．２ｇ）として生じた。クロマトグラフィー中に、出発物質３，５−ジメチル安息香酸メチル（１２．４ｇ）を回収した。
【０１２９】
収率：回収された３，５−ジメチル安息香酸メチルに基づく５５％。
【０１３０】
【化３６】
2006501231.tif 000038
【０１３１】
化合物２（７．４３ｇ；３４ｍｍｏｌ）を、ＥｔＯＨ（２００ｍｌ）中に溶解させ、ヒドラジン水和物（１７．２ｍｌ；３５４ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を３０分間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をペンタンで研和して、３を白色固体（７．０５ｇ）として生じた。
【０１３２】
収率：９０％
【０１３３】
【化３７】
2006501231.tif 000039
【０１３４】
アルゴン下のＤＭＡ（４０ｍｌ）中の３（４．２６ｇ；１８．４ｍｍｏｌ）および４（４．５１ｇ；１９．３ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｋ2ＣＯ3（５．０７ｇ；３６．７ｍｍｏｌ）で処理した。その混合物を撹拌し、９０℃で２時間加熱した。混合物を飽和水性ＮａＨＣＯ3中に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出し、そして有機相を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。その残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、アルコール５を淡黄色油状物（６．５６ｇ）として生じた。
【０１３５】
収率：９３％
【０１３６】
【化３８】
2006501231.tif 000040
【０１３７】
アルゴン下、０℃におけるＴＨＦ（１００ｍｌ）中の５（３．８５ｇ；１０ｍｍｏｌ）、フタルイミド（１．６２ｇ；１１ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１０．５ｇ；４０ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＥＡＤ（６．３３ｍｌ；４０ｍｍｏｌ）で処理した。その混合物を、この温度で１時間撹拌し、その時に水を加えた。混合物をＥｔ2Ｏで抽出し、そして有機相を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。
【０１３８】
蒸発は粗製固体を生じたが、それを、更に精製することなく、直ちにＥｔＯＨ（５０ｍｌ）中に入れ、ヒドラジン水和物（５ｍｌ；１００ｍｍｏｌ）で処理した。その混合物を１．５時間撹拌後、ＥｔＯＨを部分蒸発させた。ＣＨ2Ｃｌ2の添加は、フタルヒドラジドの沈殿を引き起こし、それを濾過し、ＣＨ2Ｃｌ2ですすぎ洗浄した。濾液を蒸発させ、そして残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）、次にＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜８％ＭｅＯＨ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、６をベージュ色固体（２．３４ｇ）として生じた。
【０１３９】
収率：６１％
【０１４０】
【化３９】
2006501231.tif 000041
【０１４１】
出発物質４は、次のように製造した。
【０１４２】
【化４０】
2006501231.tif 000042
【０１４３】
１滴のＤＭＦを含有する８（１４．４８ｇ；８０ｍｍｏｌ）および臭化オキサリル（４３．２ｇ；２００ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で２時間加熱後、冷却した。過剰の臭化オキサリルを蒸発させ、残留物をトルエンと共沸させて、粗製９を生じ、それをＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍｌ）中に直接入れ、０℃に冷却した。ジイソプロピルエチルアミン（１４ｍｌ；８０ｍｍｏｌ）を加えた後、ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍｌ）中のピロリジン（３．３ｍｌ；４０ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。混合物を室温に一晩暖め、ＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、水性ＨＣｌ（２Ｎ）、水性ＮａＯＨ（１Ｎ）、水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（５〜１０％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、４を白色固体（６．５ｇ）として生じた。
【０１４４】
収率：７０％
【０１４５】
【化４１】
2006501231.tif 000043
【０１４６】
実施例１
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（ピロリジン−１−イル）プロポキシ］−４−［２−（３−ピリジン−４−イルピロリジン−１−カルボキサミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール
【０１４７】
【化４２】
2006501231.tif 000044
【０１４８】
ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中の６（１５０ｍｇ；０．３９ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。ジイソプロピルエチルアミン（１３６μｌ；０．７８ｍｍｏｌ）を加えた後、ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中のクロロギ酸４−ニトロフェニル（８３ｍｇ；０．４１ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。その混合物を３時間撹拌し、その時に、ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中の４−（３−ピロリジル）−ピリジン（７０ｍｇ；０．４７ｍｍｏｌ）の溶液を加え、その混合物を室温に一晩暖めた。混合物を、直接的に、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ（０〜１０％ＭｅＯＨ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、実施例１をベージュ色固体（９５ｍｇ）として生じた。
【０１４９】
収率：４４％
【０１５０】
【化４３】
2006501231.tif 000045
【０１５１】
実施例２
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）プロピル］−４−［２−（Ｎ'−イソプロポキシカルボニル−３−ピリド−４−イルピロリジン−１−イルカルボキシミダミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール
【０１５２】
【化４４】
2006501231.tif 000046
【０１５３】
ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍｌ）中の１０（２６０ｍｇ；０．５ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。ＥＤＣＩ（１４５ｍｇ；０．７５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１３０μｌ；０．７５ｍｍｏｌ）を加えた後、４−（３−ピロリジル）−ピリジン（１１１ｍｇ；０．７５ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温に一晩暖めた。混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ3、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、実施例２をベージュ色固体（２７７ｍｇ）として生じた。
【０１５４】
収率：８６％
【０１５５】
【化４５】
2006501231.tif 000047
【０１５６】
出発物質１０は、次のように製造した。
【０１５７】
【化４６】
2006501231.tif 000048
【０１５８】
ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中の６（２００ｍｇ；０．５２ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。１１（１１５ｍｇ；０．７８ｍｍｏｌ）の溶液を加え、その混合物を室温に１時間暖めた。混合物を水で処理し、ＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、Ｅｔ2Ｏ／ヘキサン（０〜１００％Ｅｔ2Ｏ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、１０をベージュ色固体（２６０ｍｇ）として生じた。
【０１５９】
収率：９４％
【０１６０】
【化４７】
2006501231.tif 000049
【０１６１】
実施例３
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）プロピル］−４−［２−（Ｎ'−イソプロポキシカルボニル−３−ピリド−４−イルピロリジン−１−イルカルボキシミダミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール
【０１６２】
【化４８】
2006501231.tif 000050
【０１６３】
ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中のＢｂ４（１５６ｍｇ；０．２９ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。ＥＤＣＩ（８５ｍｇ；０．４４ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（７７μｌ；０．４４ｍｍｏｌ）を加えた後、４−（３−ピロリジル）−ピリジン（５６ｍｇ；０．３８ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温に一晩暖めた。混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ3、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＭｅＯＨ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、実施例３をベージュ色固体（１８０ｍｇ）として生じた。
【０１６４】
収率：９６％
【０１６５】
【化４９】
2006501231.tif 000051
【０１６６】
出発物質Ｂｂ４は、次のように製造した。
【０１６７】
【化５０】
2006501231.tif 000052
【０１６８】
アルゴン下のＤＭＡ（２０ｍｌ）中の３（１．２３ｇ；５．３ｍｍｏｌ）およびＢｂ１（１．３２ｇ；５．５ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｋ2ＣＯ3（１．４６ｇ；１０．６ｍｍｏｌ）で処理した。その混合物を撹拌し、７０℃で２時間加熱した。混合物を飽和水性ＮａＨＣＯ3中に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出し、そして有機相を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、アルコールＢｂ２を淡黄色油状物（１．９２ｇ）として生じた。
【０１６９】
収率：９４％
【０１７０】
【化５１】
2006501231.tif 000053
【０１７１】
アルゴン下、０℃におけるＴＨＦ（５０ｍｌ）中のＢｂ２（１．９２ｇ；４．９６ｍｍｏｌ）、フタルイミド（０．８ｇ；５．４６ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（５．２４ｇ；２０ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＥＡＤ（３．２ｍｌ；２０ｍｍｏｌ）で処理した。その混合物を、この温度で２時間撹拌し、その時に水を加えた。混合物をＥｔ2Ｏで抽出し、そして有機相を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。
【０１７２】
蒸発は粗製固体を生じたが、それを、更に精製することなく、直ちにＥｔＯＨ（５０ｍｌ）中に入れ、ヒドラジン水和物（２．５ｍｌ；５０ｍｍｏｌ）で処理した。その混合物を２時間撹拌後、ＥｔＯＨを部分蒸発させた。ＣＨ2Ｃｌ2の添加は、フタルヒドラジドの沈殿を引き起こし、それを濾過し、ＣＨ2Ｃｌ2ですすぎ洗浄した。濾液を蒸発させ、そして残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、Ｂｂ３をベージュ色固体（０．８６５ｇ）として生じた。
【０１７３】
収率：４５％
【０１７４】
【化５２】
2006501231.tif 000054
【０１７５】
ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍｌ）中のＢｂ３（２１０ｍｇ；０．５４４ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。１１（１２０ｍｇ；０．８２ｍｍｏｌ）の溶液を加え、その混合物を室温に１時間暖めた。混合物を水で処理し、ＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーによりＣＨ2Ｃｌ2で溶離して精製して、Ｂｂ４をベージュ色固体（２３５ｍｇ）として生じた。
【０１７６】
収率：８１％
【０１７７】
【化５３】
2006501231.tif 000055
【０１７８】
出発物質Ｂｂ１は、次のように製造した。
【０１７９】
【化５４】
2006501231.tif 000056
【０１８０】
１滴のＤＭＦを含有する８（１４．４８ｇ；８０ｍｍｏｌ）および臭化オキサリル（４３．２ｇ；２００ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で２時間加熱後、冷却した。過剰の臭化オキサリルを蒸発させ、残留物をトルエンと共沸させて、粗製９を生じ、それをＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍｌ）中に直接入れ、０℃に冷却した。ジイソプロピルエチルアミン（１４ｍｌ；８０ｍｍｏｌ）を加えた後、ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍｌ）中のピロリジン（３．３ｍｌ；４０ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。混合物を室温に一晩暖め、ＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、水性ＨＣｌ（２Ｎ）、水性ＮａＯＨ（１Ｎ）、水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（５〜１０％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、Ｂｂ１を白色固体（６．５ｇ）として生じた。
【０１８１】
収率：７０％
【０１８２】
【化５５】
2006501231.tif 000057
【０１８３】
実施例４
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）プロピル］−４−［２−（３−ピリジン−４−イルピロリジン−１−カルボキサミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール
【０１８４】
【化５６】
2006501231.tif 000058
【０１８５】
ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中のＢｂ３（１５０ｍｇ；０．３９ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。ジイソプロピルエチルアミン（１３５μｌ；０．７８ｍｍｏｌ）を加えた後、ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中のクロロギ酸４−ニトロフェニル（８３ｍｇ；０．４１ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。その混合物を３時間撹拌し、その時に、ＣＨ2Ｃｌ2（２ｍｌ）中の４−（３−ピロリジル）−ピリジン（７０ｍｇ；０．４７ｍｍｏｌ）の溶液を加え、その混合物を室温に一晩暖めた。混合物を、直接的に、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ（０〜１０％ＭｅＯＨ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、実施例４をベージュ色固体（１３８ｍｇ）として生じた。
【０１８６】
収率：６３％
【０１８７】
【化５７】
2006501231.tif 000059
【０１８８】
実施例５
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）プロピル］−４−［１Ｓ−メチル−２−（Ｎ'−イソプロポキシカルボニル−３−ピリド−４−イルピロリジン−１−イルカルボキシミダミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール
【０１８９】
【化５８】
2006501231.tif 000060
【０１９０】
ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍｌ）中のＣＮＲ（１４１ｍｇ；０．２５ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。ＥＤＣＩ（７２ｍｇ；０．３７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（６５μｌ；０．３７ｍｍｏｌ）を加えた後、４−（３−ピロリジル）−ピリジン（４６ｍｇ；０．３１ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温に一晩暖めた。混合物をＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ3、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）の漸増極性混合物で溶離して精製して、実施例５をベージュ色固体（１２８ｍｇ）として生じた。
【０１９１】
収率：７８％
【０１９２】
【化５９】
2006501231.tif 000061
【０１９３】
出発物質ＣＮＲは、次のように製造した。
【０１９４】
【化６０】
2006501231.tif 000062
【０１９５】
ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍｌ）中のＣｅ（１５０ｍｇ；０．３５ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却した。ＣＨ2Ｃｌ2（１ｍｌ）中の１１（７７ｍｇ；０．５３ｍｍｏｌ）の溶液を加え、その混合物を室温に１時間暖めた。混合物を水で処理し、ＣＨ2Ｃｌ2で希釈し、そして有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥させた。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜２０％ＥｔＯＡｃ）で溶離して精製して、ＣＮＲをガム（１４１ｍｇ）として生じた。
【０１９６】
収率：７０％
【０１９７】
【化６１】
2006501231.tif 000063
【０１９８】
実施例５．１〜５．２
次の実施例を、実施例５と同様に製造した。
【０１９９】
【化６２】
2006501231.tif 000064
【０２００】
表は、上の構造に関する基Ｒ、反応条件、および上に与えられた実施例５の製造の説明に対応する各々の実施例の特性を示す。
実施例５．１
【０２０１】
【表１】
2006501231.tif 000065
【０２０２】
クロマトグラフィー−ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）、そして次に、ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜５％ＭｅＯＨ）
【０２０３】
【化６３】
2006501231.tif 000066
【０２０４】
実施例５．２
【０２０５】
【表２】
2006501231.tif 000067
【０２０６】
クロマトグラフィー−ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）、そして次に、ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜５％ＭｅＯＨ）
【０２０７】
【化６４】
2006501231.tif 000068
【０２０８】
実施例６
３−［２，２−ジメチル−３−オキソ−３−（アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−７−イル）プロポキシ］−４−［１Ｓ−メチル−２−（３−ピリジン−４−イルピロリジン−１−カルボキサミド）エチル］−５−（３，５−ジメチルフェニル）−１Ｈ−ピラゾール
【０２０９】
【化６５】
2006501231.tif 000069
【０２１０】
ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍｌ）中のＣｅ（１７０ｍｇ；０．４ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、ＤＩＥＡ（１４０μｌ；０．８ｍｍｏｌ）を加えた。ＣＨ2Ｃｌ2（１ｍｌ）中のクロロギ酸４−ニトロフェニル（８５ｍｇ；０．４２ｍｍｏｌ）の溶液を加え、その混合物を３０分間撹拌させた。４−（３−ピロリジル）−ピリジン（７１ｍｇ；０．４８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温に１時間暖めた。その混合物を、直接的に、フラッシュクロマトグラフィーにより、ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１０％ＭｅＯＨ）で溶離して精製して、実施例６を淡黄色粉末（２１２ｍｇ）として生じた。
【０２１１】
収率：８８％
【０２１２】
【化６６】
2006501231.tif 000070
【０２１３】
実施例６．１〜６．
次の実施例を、実施例６と同様に製造した。
【０２１４】
【化６７】
2006501231.tif 000071
【０２１５】
表は、上の構造に関する基Ｒ、反応条件、および上に与えられた実施例６の製造の説明に対応する各々の実施例の特性を示す。
実施例６．１
【０２１６】
【表３】
2006501231.tif 000072
【０２１７】
クロマトグラフィー−ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ（０〜５％ＭｅＯＨ）
【０２１８】
【化６８】
2006501231.tif 000073
【０２１９】
実施例６．２
【０２２０】
【表４】
2006501231.tif 000074
【０２２１】
クロマトグラフィー−ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2（０〜１００％ＥｔＯＡｃ）
【０２２２】
【化６９】
2006501231.tif 000075
【０２２３】
治療的使用
式（Ｉ）の化合物を、患者、例えば、男性および／または女性の性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）活性に拮抗する薬剤として提供する。この目的には、式（Ｉ）の化合物を、薬学的に許容しうる希釈剤または担体（例えば、水）をも含む医薬製剤の一部分として提供することができる。その製剤は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、乳剤（例えば、脂質乳剤）、坐剤、軟膏剤、クリーム剤、滴剤、懸濁剤（例えば、水性または油状懸濁剤）または液剤（例えば、水性または油状液剤）の形であってよい。所望ならば、製剤は、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤、ラクトース、シアル酸、ステアリン酸マグネシウム、石膏、スクロース、トウモロコシデンプン、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、ラッカセイ油、オリーブ油、カカオ脂およびエチレングリコールより独立して選択される一つまたはそれを超える追加の物質を含んでよい。
【０２２４】
本化合物は、好ましくは、患者に経口投与されるが、非経口投与または直腸投与などの他の投与経路が可能である。静脈内、皮下または筋肉内の投与について、患者は、０．１ｍｇｋｇ-1〜３０ｍｇｋｇ-1（好ましくは、５ｍｇｋｇ-1〜２０ｍｇｋｇ-1）の１日用量の化合物であって、１日１〜４回投与される化合物を与えられてよい。静脈内、皮下および筋肉内の用量は、ボーラス注射によって与えることができる。或いは、静脈内用量は、一定期間にわたる連続注入によって与えることができる。或いは、患者は、１日非経口用量にほぼ等しい１日経口用量を与えられてよく、その組成物は１日１〜４回投与される。適当な医薬製剤は、単位剤形での経口投与に適したもの、例えば、１０ｍｇ〜１ｇ（好ましくは、１００ｍｇ〜１ｇ）の本発明の化合物を含有する錠剤またはカプセル剤としてのものである。
【０２２５】
緩衝剤、薬学的に許容しうる補助溶媒（例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロールまたはＥｔＯＨ）、またはヒドロキシプロピルβシクロデキストリンのような錯生成剤は、製剤化を助けるのに用いることができる。
【０２２６】
本発明の一つの側面は、患者の下垂体によるＬＨおよび／またはＦＳＨの分泌を減少させるための本発明による化合物の使用に関する。これに関して、その減少は、下垂体によるＬＨおよびＦＳＨの生合成の減少および／またはＬＨおよびＦＳＨの放出の減少によることがありうる。したがって、本発明による化合物は、患者の性ホルモンに関係した状態を治療的に処置するおよび／または予防するのに用いることができる。「予防すること」により、本発明者は、患者がその状態になる危険を減少させることを意味する。「処置すること」により、本発明者は、患者の状態を根絶することまたはその重症度を減少させることを意味する。性ホルモンに関係した状態の例には、性ホルモン依存性癌、良性前立腺肥大、子宮筋腫、子宮内膜症、多嚢胞性卵巣疾患、子宮類線維腫、前立腺肥大（prostatauxe）、子宮筋腫（myoma uteri）、多毛症および性的早熟である。性ホルモン依存性癌の例は、前立腺癌、子宮癌、乳癌および下垂体性腺刺激細胞腺腫である。
【０２２７】
本発明の化合物は、性ホルモンに関係した状態を処置する／予防するのに用いられる他の薬物および療法と組み合わせて用いることができる。
一定用量として製剤化する場合、このような組合せ製品は、本明細書中に記載の投与量範囲内の本発明の化合物と、承認された投与量範囲内の他の薬学的活性剤を用いる。逐次的使用は、組合せ製剤が不適当である場合に考えられる。
【０２２８】
医学腫瘍学の分野において、このような組合せの例には、次の種類の治療薬との組合せが含まれる。
（ｉ）抗血管新生薬（例えば、リノマイド（linomide）、インテグリンαｖβ３機能の阻害剤、アンギオスタチン（angiostatin）、エンドスタチン（endostatin）、ラゾキシン（razoxin）、サリドマイド）、および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体チロシンキナーゼ阻害剤（ＲＴＫＩ）を含めたもの（例えば、論文の開示全体が本明細書中に援用される国際特許出願公開ＷＯ−９７／２２５９６号、ＷＯ−９７／３００３５号、ＷＯ−９７／３２８５６号およびＷＯ−９８／１３３５４号に記載のもの）；
（ii）細胞分裂抑制薬であって、抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン、トレミフェン（toremifene）、ラロキシフェン（raloxifene）、ドロロキシフェン（droloxifene）、ヨードキシフェン（iodoxyfene））、プロゲストゲン（例えば、酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害剤（例えば、アナストロゾール（anastrozole）、レトロゾール（letrozole）、ボラゾール（vorazole）、エクセメスタン（exemestane））、抗プロゲストゲン、抗アンドロゲン（例えば、フルタミド、ニルタミド（nilutamide）、ビカルタミド（bicalutamide）、酢酸シプロテロン）、テストステロン５α−ジヒドロレダクターゼの阻害剤（例えば、フィナステリド）、抗浸潤薬（例えば、マリマスタト（marimastat）のようなメタロプロテイナーゼ阻害剤およびウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーター受容体機能の阻害剤）および増殖因子機能の阻害剤（このような増殖因子には、例えば、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、血小板由来増殖因子および肝細胞増殖因子が含まれ、このような阻害剤には、増殖因子抗体、増殖因子受容体抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびセリン／トレオニンキナーゼ阻害剤が含まれる）のようなもの；
（iii）免疫調節剤（biological response modifiers）（例えば、インターフェロン）；
（iv）抗体（例えば、エドレコロマブ（edrecolomab））；および
（ｖ）医学腫瘍学で用いられる抗増殖薬／抗腫瘍薬およびそれらの組合せであって、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサートのような葉酸拮抗薬、５−フルオロウラシルのようなフルオロピリミジン類、プリンおよびアデノシン類似体、シトシンアラビノシド）；抗腫瘍抗生物質（例えば、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシンおよびイダルビシン（idarubicin）、マイトマイシンＣ、ダクチノマイシン、ミトラマイシンのようなアントラサイクリン系）；白金誘導体（例えば、シスプラチン、カルボプラチン）；アルキル化剤（例えば、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、シクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソ尿素、チオテパ）；有糸分裂阻止薬（例えば、ビンクリスチンのようなビンカアルカロイド類、およびタキソールおよびタキソテールのようなタキソイド類（taxoids））；酵素（例えば、アスパラギナーゼ）；チミジル酸シンターゼ阻害剤（例えば、ラルチトレキセド（raltitrexed））；トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシドおよびテニポシドのようなエピポドフィロトキシン類、アムサクリン、トポテカン（topotecan）、イリノテカン（irinotecan））のようなもの。
【０２２９】
本発明の化合物は、外科手術または放射線療法と組み合わせて用いることもできる。
検定
ＧｎＲＨのアンタゴニストとして作用する本発明による化合物の能力は、次の in vitro 検定を用いて決定することができる。
【０２３０】
ラット下垂体ＧｎＲＨ受容体を用いた結合検定
この検定は、次のように行う。
１．ラット下垂体組織から調製された粗製原形質膜を、ウシ血清アルブミン（０．１％）、［Ｉ−１２５］Ｄ−ｔ−Ｂｕ−Ｓｅｒ６−Ｐｒｏ９−エチルアミド−ＧｎＲＨおよび試験化合物を含有するトリスＨＣｌ緩衝液（ｐＨ．７．５，５０ｍＭ）中でインキュベートする。インキュベーションは、４℃で９０分間〜２時間である。
【０２３１】
２．急速濾過し、ガラス繊維フィルターを介して繰り返し洗浄する。
３．膜に結合した放射性リガンドの放射能を、γカウンターを用いて決定する。このデータから、試験化合物のＩＣ50を、ＧｎＲＨ受容体への放射性リガンド結合を５０％阻害するのに必要な化合物の濃度として決定することができる。本発明による化合物は、１ｎＭ〜５μＭの濃度で活性を有する。
【０２３２】
ヒトＧｎＲＨ受容体を用いた結合検定
ヒトＧｎＲＨ受容体を発現するＣＨＯ細胞から調製された粗製膜が、ＧｎＲＨ受容体源である。本発明による化合物の結合活性は、ＧｎＲＨ受容体への［125Ｉ］ブセレリンの特異的結合を５０％阻害するのに必要な化合物濃度であるＩＣ50として決定することができる。［125Ｉ］ブセレリン（ペプチドＧｎＲＨ類似体）を、ここでは、その受容体の放射性標識リガンドとして用いる。
【０２３３】
ＬＨ放出の阻害を確認する検定
ＬＨ放出検定は、ＧｎＲＨに誘発されるＬＨ放出の減少によって示される化合物のアンタゴニスト活性を示すのに用いることができる。
【０２３４】
下垂体の調製
ラットから得られる下垂体を、次のように調製する。適当なラットは、一定温度（例えば、２５℃）において１２時間明／１２時間暗サイクルで維持された Wistar 雄ラット（１５０〜２００ｇ）である。それらラットを、断頭によって屠殺後、下垂体を、ハンクスの平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）が入っている試験管に、無菌的に取り出す。それら下垂体を、次によって更に処理する。
【０２３５】
１．２５０ｘｇで５分間の遠心分離；
２．ＨＢＳＳ溶液の吸引；
３．下垂体をペトリ皿に移した後、メスで細かく刻む；
４．細かく刻まれた組織を、０．２％コラゲナーゼおよび０．２％ヒアルロニダーゼを含有するＨＢＳＳの１０ｍｌアリコート中に３回連続して懸濁させることにより、その組織を遠心管に移す；
５．その管を水浴中において３７℃で保持しながら、組織懸濁液を静かに撹拌することによる細胞分散；
６．ピペットを用いて２０〜３０回吸引して、未消化の下垂体フラグメントを３〜５分間沈降させる；
７．懸濁した細胞の吸引後、１２００ｘｇで５分間遠心分離；
８．０．３７％ＮａＨＣＯ3、１０％ウマ血清、２．５％ウシ胎児血清、１％非必須アミノ酸、１％グルタミンおよび０．１％ゲンタマイシンを含有するＤＭＥＭの培地中での細胞の再懸濁；
９．未消化の下垂体フラグメントを、コラゲナーゼおよびヒアルロニダーゼの３０ｍｌアリコートで３回処理；
１０．細胞懸濁液をプールし、３ｘ１０5個／ｍｌの細胞濃度に希釈；
１１．２４ウェルトレーの各々に１．０ｍｌのこの懸濁液を入れ、それら細胞を、５％ＣＯ2／９５％空気の吸湿雰囲気中において３７℃で３〜４日間維持する。
【０２３６】
化合物の試験
試験化合物を、ＤＭＳＯ中に、インキュベーション用培地中０．５％の最終濃度に溶解させる。
【０２３７】
検定の１．５時間前に、それら細胞を、０．３７％ＮａＨＣＯ3、１０％ウマ血清、２．５％ウシ胎児血清、１％非必須アミノ酸（１００Ｘ）、１％グルタミン（１００Ｘ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（各１０，０００単位／ｍｌ）および２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有するｐＨ７．４のＤＭＥＭで３回洗浄する。検定直前に、再度、細胞をこの培地中で２回洗浄する。
【０２３８】
この後、試験化合物および２ｎＭ  ＧｎＲＨを含有する１ｍｌの新鮮培地を、２個のウェルに加える。他の試験化合物については（２種類以上の化合物を試験することが望まれる場合）、これらを、他のそれぞれの二重試験用ウェルに加える。次に、インキュベーションを３７℃で３時間行う。
【０２３９】
インキュベーション後、ウェルから培地を取り出し、その培地を２０００ｘｇで１５分間遠心分離して、細胞性物質を全て除去することにより、各々のウェルを分析する。上澄みを取り出し、そして二重抗体ラジオイムノアッセイを用いて、ＬＨ含量について検定する。適当な対照（試験化合物不含）との比較を用いて、試験化合物がＬＨ放出を減少させるかどうか確かめる。本発明による化合物は、１ｎＭ〜５μＭの濃度で活性を有する。
【国際調査報告】
2006501231.tif 000089
2006501231.tif 000090