(57)【要約】本発明は、チエノ［２，３−ｃ］ピリジン誘導体、チエノ［２，３−ｃ］ピリジン誘導体を含む薬剤組成物、及びその使用方法を提供する。グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）とエフェクター細胞接着分子（ＥＣＡＭ）の相互作用を阻害することができるこの化合物は、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される疾患及び障害、特に炎症性及び自己免疫性疾患、ウィルス性疾患、癌、及びアミロイド疾患の治療に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミドのチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物。
【請求項２】
式２−［［４−［（４−メチル−ｌピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミドのチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物。
【請求項３】
有効成分として、一般式Ｉの化合物
【化１】
2006516610.tif 000026
［式中、
Ｒ１は、Ｈ；直鎖又は分岐の炭素原子１〜６個のアルキル；アリールアルキル；置換アリールアルキル；アルキル基で場合によっては置換されたシクロアルキル；アルカノイル；場合によってはアリール基が置換されているアリールカルボニル；シクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニルからなる群から選択され、
Ｒ２は、カルボキシ；シアノ；アミノカルボニル；アルキルアミノカルボニル；場合によってはアリール基が置換されているアリールアミノカルボニル；アルキルがそれぞれ直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルである、或いは２つのアルキル基が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、３〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよいジアルキルアミノカルボニル；アルコキシカルボニル；アルカノイル；シクロアルキルカルボニル；アリール基が場合によっては置換されているアリールカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ又はアルキルアミノで場合によっては置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ４一不飽和アルケニル、シクロアルキル、アリール、アリールメチルからなる群から選択され、或いはＲ３とＲ４が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、５〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよく、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８がＣ１〜Ｃ６アルキルの場合、Ｒ１は水素であることを条件として、Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される］、
及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる希釈剤又は担体を含む薬剤組成物。
【請求項４】
Ｒ１が、メチル、エチル、１−メチルエチル、フェニルメチル、アセチル、エトキシカルボニルからなる群から選択され、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８が水素である請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項５】
Ｒ１が水素であり、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８が水素又はメチル基である請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項６】
Ｒ１＝Ｒ５＝Ｒ６がメチルであり、Ｒ７＝Ｒ８が水素である請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項７】
Ｒ２が、シアノ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、アミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ピロリジニルカルボニル、ピペリジニルカルボニル、モルホリニルカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択される請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項８】
Ｒ３及びＲ４が、メチル、エチル、プロピル、ブチル、メトキシエチル、クロロブチル、シアノエチル、フェニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルメチル、アリル又はクロチルからなる群から選択され、Ｒ３及びＲ４が、同じでも異なってもよい請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項９】
Ｒ３及びＲ４が、ピロリジン、ピペリジン、２−メチル、３−メチル、４−メチル又は３，５−ジメチルピペリジン、ペルヒドロアゼピン、モルホリン、ピペラジン、４−メチルピペラジン、３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル、３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）キノリン、１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクト−６−アン、及びその置換誘導体を形成する請求項３に記載の薬剤組成物。
【請求項１０】
前記式Ｉの化合物が下記から選択される請求項３に記載の薬剤組成物。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−１−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（メチル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−６−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（３−メチル−１−ピペリジニル）］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（フェニルメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（シクロヘキシルメチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジ−２−プロペニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）］スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシミド；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１．］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸Ｎ−メチルアミド；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸モルホリニルアミド。
【請求項１１】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジンである請求項１０に記載の薬剤組成物。
【請求項１２】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジンである請求項１０に記載の薬剤組成物。
【請求項１３】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミドである請求項１０に記載の薬剤組成物。
【請求項１４】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミドである請求項１０に記載の薬剤組成物。
【請求項１５】
ＧＡＧとＧＡＧ特異的ＥＣＡＭの相互作用を阻害することができる請求項３から１４までのいずれか一項に記載の薬剤組成物。
【請求項１６】
前記ＧＡＧがヘパラン硫酸（ＨＳ−ＧＡＧ）、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、並びにその誘導体及び断片からなる群から選択される請求項１５に記載の薬剤組成物。
【請求項１７】
前記ＧＡＧがＨＳ−ＧＡＧでアル請求項１６に記載の薬剤組成物。
【請求項１８】
前記ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭがＬ−セレクチン及びＰ−セレクチンからなる群から選択される請求項１５に記載の薬剤組成物。
【請求項１９】
前記化合物が２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１．］オクト−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル以外であることを条件とする、好中球浸潤をｉｎ  ｖｉｖｏで阻害するための請求項１５に記載の薬剤組成物。
【請求項２０】
ＧＡＧと少なくとも１種のＧＡＧ特異的ＥＣＡＭとの相互作用を妨げるのに十分な量の請求項３から１９までのいずれか一項に記載の薬剤組成物に細胞を暴露するステップを含む、細胞接着又は細胞遊走をｉｎ  ｖｉｔｒｏで阻害する方法。
【請求項２１】
一般式Ｉの化合物
【化２】
2006516610.tif 000027
［式中、
Ｒ１は、Ｈ；直鎖又は分岐の炭素原子１〜６個のアルキル；アリールアルキル；置換アリールアルキル；低級アルキル基で場合によっては置換されたシクロアルキル；低級アルカノイル；場合によってはアリール基が置換されているアリールカルボニル；シクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニルからなる群から選択され、
Ｒ２は、カルボキシ；シアノ；アミノカルボニル；アルキルアミノカルボニル；場合によってはアリール基が置換されているアリールアミノカルボニル；アルキルがそれぞれ直鎖又は分岐鎖の低級アルキルである、或いは２つのアルキル基が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、３〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよいジアルキルアミノカルボニル；アルコキシカルボニル；低級アルカノイル；シクロアルキルカルボニル；アリール基が場合によっては置換されているアリールカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ又はアルキルアミノで場合によっては置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ４一不飽和アルケニル、シクロアルキル、アリール、アリールメチルからなる群から選択され、或いはＲ３とＲ４が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、５〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよく、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８がＣ１〜Ｃ６アルキルの場合、Ｒ１は水素であることを条件として、Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される］、
及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる希釈剤又は担体を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される細胞接着又は細胞遊走に関連する疾患又は障害の治療又は予防方法。
【請求項２２】
Ｒ１が、メチル、エチル、１−メチルエチル、フェニルメチル、アセチル、エトキシカルボニルからなる群から選択され、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８が水素である請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
Ｒ１が水素であり、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８が水素又はメチル基である請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
Ｒ１＝Ｒ５＝Ｒ６がメチルであり、Ｒ７＝Ｒ８が水素である請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
Ｒ２が、シアノ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、アミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ピロリジニルカルボニル、ピペリジニルカルボニル、モルホリニルカルボニル、（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾリル）、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択される請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
Ｒ３及びＲ４が、メチル、エチル、プロピル、ブチル、メトキシエチル、クロロブチル、シアノエチル、フェニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルメチル、アリル又はクロチルからなる群から選択され、Ｒ３及びＲ４が、同じでも異なってもよい請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
Ｒ３及びＲ４が、ピロリジン、ピペリジン、２−メチル、３−メチル、４−メチル又は３，５−ジメチルピペリジン、ペルヒドロアゼピン、モルホリン、ピペラジン、４−メチルピペラジン、３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル、３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）キノリン、１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクト−６−アン、及びその置換誘導体を形成する請求項２１に記載の方法。
【請求項２８】
前記式Ｉの化合物が下記から選択される請求項２１に記載の方法。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−１−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（メチル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−６−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（３−メチル−１−ピペリジニル）］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（フェニルメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（シクロヘキシルメチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジ−２−プロペニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）］スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシミド；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１．］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸Ｎ−メチルアミド；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸モルホリニルアミド。
【請求項２９】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジンである請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジンである請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミドである請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
前記式Ｉの化合物が２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミドである請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記細胞接着又は細胞遊走に関連する疾患又は障害が、炎症性プロセス、自己免疫プロセス又は疾患、血小板によって媒介される疾患、腫瘍転移、ウィルス性疾患、アテローマ性動脈硬化症、アミロイド疾患、及び腎疾患からなる群から選択される請求項２１に記載の方法。
【請求項３４】
前記炎症性障害が、敗血症性ショック、白血球によって媒介される虚血後性組織損傷、凍傷損傷又はショック、白血球を介した急性肺損傷、急性膵炎、喘息、外傷性ショック、発作、外傷性脳損傷、腎炎、急性及び慢性炎症、アトピー性皮膚炎、乾癬、ブドウ膜炎、網膜炎、並びに炎症性腸疾患からなる群から選択される請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記自己免疫性疾患が、慢性関節リウマチ及び多発性硬化症からなる群から選択される請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
請求項３から１４までのいずれか一項に記載の薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む、ＧＡＧによって媒介される疾患又は障害治療又は予防方法。
【請求項３７】
前記ＧＡＧがＨＳ−ＧＡＧである請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記疾患又は障害が、アミロイド疾患、ウィルス性疾患、細菌性感染症、腎疾患、癌、腫瘍転移、及び凝固障害からなる群から選択される請求項３６及び３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記疾患又は障害が、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、Ｃ型肝炎、Ｂ型肝炎、インフルエンザ、ライノウィルス感染症、サイトメガロウィルス感染症、ＡＩＤＳ、呼吸器合胞体ウィルス感染症、マラリア、及び白血病からなる群から選択される請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
請求項３から１４までのいずれかに記載の薬剤組成物の治療上有効量を投与し、それによってグリコサミノグリカンの抗凝固活性を変調させるステップを含む、被験者におけるグリコサミノグリカンの抗凝固活性の変調方法。
【請求項４１】
前記グリコサミノグリカンがヘパリンである請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
有効成分として式２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジンのチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物、及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる担体又は希釈剤を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む炎症性腸疾患の予防又は治療方法。
【請求項４３】
有効成分として式２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジンのチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物、及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる担体又は希釈剤を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む多発性硬化症の予防又は治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エフェクター細胞接着分子（ＥＣＡＭ）、特にセレクチンと、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）、特にヘパラン硫酸グリコサミノグリカン（ＨＳ−ＧＡＧ）との相互作用を阻害することができるチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物を含む薬剤組成物、並びに細胞接着及び細胞遊走に関連する疾患又は障害の治療又は予防、特に炎症性及び自己免疫性の疾患及び障害、ウィルス性疾患、癌及びアミロイド疾患の治療又は予防方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症性応答は、主として、血液中を循環し血管内皮と可逆的に相互作用する白血球、好中球、及びリンパ球によって媒介される。炎症性刺激に応答して、白血球は血管内皮に密接に付着し、血管壁を通り抜けて遊走（血管外遊走）し、続いて走化性勾配に従って炎症性刺激に向かって移動する。したがって、白血球と血管内皮細胞の相互作用は、炎症性応答の本質的な第１段階である。セレクチンが、血液由来の白血球を脈管構造に最初に接着させる責任を担っているので、炎症において重要な役割を果たす。セレクチンによって媒介される細胞接着を妨げると、炎症の有害な結果を改善又は回避することができる。したがって、セレクチンは、細胞接着障害の療法、具体的には炎症の治療において、第１の標的である。
【０００３】
セレクチンは、リンパ様組織及び炎症部位に対する好中球及びリンパ球の接着及び進入を調節する（Ｒｏｓｅｎ、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９９０年、３巻、３９７〜４０２頁）。セレクチンとして、（以前はＥＬＡＭ．１として知られる）Ｅ−セレクチン、（以前はＰＡＤＧＥＭ、ＧＭＰ−１４０又はＣＤ６１として知られる）Ｐ−セレクチン及び（以前はｍＬＨＲ、Ｌｅｕ８、ＴＱ−１、ｇｐ９０、ＭＥＬ、Ｌａｍ−１又はＬｅｃａｍ−ｌとして知られる）Ｌ−セレクチンの３種類が知られている（Ｌａｓｋｙ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１９９５年、６４巻、１１３頁；Ｋａｎｓａｓ、Ｂｌｏｏｄ、１９９６年、８８巻、３２５９頁）。各セレクチンはそれぞれ異なる形で調節され、それぞれ異なる形で炎症又は免疫のプロセスに関与する。各セレクチンのレクチンドメインが、タンパク質の接着機能にとってクリティカルである。セレクチンは、血流からの白血球の捕捉を担い、その間欠的な付着を媒介し、その結果として白血球が内皮細胞表面に沿って「ローリング」する。この捕捉によって、より密着した第２の細胞接着事象のカスケードが起こり得る。Ｌ−セレクチンは、白血球によって構成的に発現され、末梢リンパ節高内皮細静脈へのリンパ球の接着、及びサイトカインによって活性化された内皮細胞への好中球の接着を媒介する（Ｓｐｅｒｔｉｎｉら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９１年、１４７巻、２５６５〜２５７３頁）。炎症性障害で最も重要な役割を果たすのは、Ｌ−セレクチンであり得る（Ｓｈｉｍｉｚｕら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ、１９９２年、１３巻、１０６頁；Ｐｉｃｋｅｒら、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９２年、１０巻、５６１頁）。
【０００４】
Ｂｕｅｒｋｅらは、ネコにおける虚血−再灌流損傷などの炎症状態でのセレクチンの重要な役割を実証している（Ｂｕｅｒｋｅ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、１９９４年、９３巻、１１４０頁）。Ｌ−セレクチン、及びＥ−又はＰ−セレクチンリガンドが単核細胞上に存在することによって、これらの受容体−リガンド相互作用が慢性炎症に関与するものとされてきた（Ｌ．Ｌａｓｋｙ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１９９５年、６４巻、１１３〜３９頁）。Ｌ−セレクチンに対するモノクローナル抗体によって、好中球の炎症性皮膚への遊出（Ｌｅｗｉｎｓｏｈｎら、Ｊ．Ｉｒｎｍｕｎｏｌ．、１９８７年、１３８巻、４３１３頁）、好中球及び単球の炎症性腹水への遊出（Ｊｕｔｉｌａら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９８９年、１４３巻、３３１８頁）、並びに好中球の炎症性腹膜への遊出が妨げられる。Ｊａｓｉｎらは、炎症性滑膜での好中球蓄積を阻害する際に抗体を使用することを支持している（Ｊａｓｉｎら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．、１９９０年、３３巻、Ｓ３４頁）。Ｌ−セレクチンとＥ−セレクチンの両方に対するモノクローナル抗体ＥＬ−２４６によって、敗血症性肺損傷が弱められた（Ｒｉｄｉｎｇｓ，ＰＣら、Ａｒｃｈ  Ｓｕｒｇ．、１９９５年、１１９９〜１２０８頁）。モノクローナル抗体ＳＭＡＲＴは、多臓器不全を伴う外傷（この疾患は、一部は炎症細胞の浸潤によるものと考えられる）用の臨床試験に使用されているＬ−セレクチン阻止抗体である。抗Ｌ−セレクチン抗体は、好中球が内皮に接着するのを防ぐことによって、その治療効果を提供すると推定され、またそれは、重度外傷の霊長類モデルにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで活性がある（Ｓｃｈｌａｇ  Ｇら、Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９９年、２７巻、１９００〜１９０７頁）。このモノクローナル抗体は、成人呼吸促迫症候群及び心筋梗塞の治療にも有用になると考えられている。
【０００５】
グリコサミノグリカン（本明細書では「ＧＡＧ」又は「ＧＡＧｓ」とも呼ばれる）は、血液凝固、脈管形成、腫瘍成長、及び平滑筋細胞増殖を含めて、いくつかの細胞プロセスの調節に、おそらくはエフェクター分子との相互作用によって関与する天然由来の炭水化物系分子である。ＧＡＧは常にではないがしばしば、プロテオグリカンと呼ばれる構造のタンパク質コアに共有結合している。プロテオグリカン構造は、細胞表面に豊富にあり、細胞周辺の細胞外マトリックスと連係している。ＧＡＧは、二糖類の繰返し単位からなる。例えば、ヘパラン硫酸グリコサミノグリカン（本明細書では「ＨＳ−ＧＡＧ」とも呼ばれる）は、Ｄ−グルクロン酸及びＮ−アセチル−又はＮ−スルホ−Ｄ−グルコサミンの二糖類の繰返し単位からなる。ＨＳ−ＧＡＧ分子の広い多様性は、その独自の硫酸化パターンによるものである（Ｓａｓｉｓｅｋｈａｒａｎ，Ｒ．及びＶｅｎｋａｔａｒａｍａｎ，Ｇ．、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．、２０００年、４巻、６２６〜６３１頁；Ｌｉｎｄａｈｌ，Ｕ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、１９９８年、２７３巻、２４９７９〜２４９８２頁；Ｅｓｋｏ，Ｊ．及びＳｅｌｌｅｃｋ，Ｓ．Ｂ．、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２００２年、７１巻、４３５〜４７１頁）。最も徹底して研究されたＨＳ−ＧＡＧの１つは、幅広く使用されている抗凝血性ヘパリンである。ヘパリンは、肥満細胞中に見られるヘパラン硫酸の高度に硫酸化された形である。サイトカイン、成長因子、酵素、及び細胞接着分子を含めて、多数の重要な調節タンパク質がヘパリンに密接に結合する。タンパク質とヘパリンやヘパラン硫酸などのＧＡＧとの相互作用は、生物学的に非常に重要であるが、タンパク質−ＧＡＧ結合についての構造的要件はよく特徴付けられていない。イオン性相互作用は、タンパク質−ＧＡＧ結合を促進する上で重要であり、その荷電残基の空間的配置によって、タンパク質−ＧＡＧ親和性及び特異性が決定され得る。
【０００６】
ＨＳ−ＧＡＧのパラダイムは、細胞−組織−器官のインターフェースにおける治療的介入のための新しい手法及び戦略を提供する。例えば、特定の生物学的プロセスに影響を及ぼす特異的なＨＳ−ＧＡＧ配列を同定すれば、多糖類配列に基づく新規分子療法の開発が可能となるであろう。合成ＨＳ−ＧＡＧ、又はＨＳ−ＧＡＧ配列の分子模倣物は、細菌性やウィルス性感染、アテローマ性動脈硬化症、癌、アルツハイマー病などの健康問題に対処するための新規な手法を提供することができる。
【０００７】
セレクチンは、炭水化物リガンドに結合するレクチンドメインを介してその接着機能を媒介する。ＧＡＧ、特にＨＳ−ＧＡＧは、セレクチンが相互作用する炭水化物受容体であるという証拠が出てきている（Ｎｅｌｓｏｎ  ＲＭら、Ｂｌｏｏｄ、１９９３年、８２巻、３２５３〜３２５８頁；Ｍａ，ＹＱ及びＧｅｎｇ，ＪＧ、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２０００年、１６５巻、５５８〜５６５頁；Ｇｉｕｆｆｒｅ，Ｌ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、１９９７年、１３６巻、９４５〜９５６頁；Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｎ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１９９９年、１２５巻、８２６〜８３１頁；Ｌｉ  ＹＦら、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ、１９９９年、４４４巻、２０１〜２０５頁）。この観察と一致するが、ヘパリン、ＨＳ−ＧＡＧ、及びヘパリン誘導オリゴ糖は、Ｌ−セレクチン依存性の接着を直接阻止する（Ｂｅｖｉｌａｃｑｕａらの米国特許第５，５２７，７８５号）。さらに、短い硫酸化ヘパリン誘導四糖類は、Ｐ−セレクチンを発現しているＣＯＳ細胞への好中球の結合を低減させる（Ｎｅｌｓｏｎ  ＲＭら、Ｂｌｏｏｄ、１９９３年、８２巻、３２５３〜３２５８頁）。ＨＳの多価であるという性質は、浮動条件下でＬ−セレクチンと結合する際に重要な要因となっている可能性がある（Ｓａｎｄｅｒｓら、上述）。
【０００８】
ＧＡＧとセレクチンの間の相互作用は、細胞−マトリックス接着、及び細胞−細胞接着において重要な役割を果たすので、後者は、ある種の疾患及び炎症性障害に関わるプロセスであり、これらの相互作用を変調させることは、治療上意味がある。
【０００９】
Ｂｅｖｉｌａｃｑｕａら（米国特許第５，５２７，７８５号）は、ヘパリン様オリゴ糖を投与することによって、被検者におけるセレクチン結合を変調させる方法を提供している。このオリゴ糖は、Ｌ−又はＰ−セレクチンに結合することによって機能する。
【００１０】
Ｘｉｅ  Ｘら（ＪＢＣ、２０００年、２７５巻、３４８１８〜２５頁）は、Ｌ−及びＰ−セレクチンによって媒介される細胞接着を、カルボキシルを還元し硫酸化したヘパリンを含めて、硫酸化糖によって阻害することを記載している。これらの分子は、セレクチンブロッカーの炎症治療での有用性を示すのに役に立ってきたが、それぞれ、ｉｎ  ｖｉｖｏでの半減期の短さ、コスト高、潜在的免疫原性、及び他のあり得る副作用を含めて療法として重大な欠点を有している。これらの手法の別の制限は、これらの分子の薬理的諸特性を改善する有効な手段に欠けることである。
【００１１】
さらに、数グループが、天然のＧＡＧ及びＰＧの活性を変調させるために様々な応用例で使用するための、ヘパリン又はヘパリン様分子（すなわち、ＰＧ又は他のＧＡＧ）に対する親和性の高い小ペプチドを開発した（例えば、Ｗａｋｅｆｉｅｌｄらの米国特許第５，９１９，７６１号を参照）。
【００１２】
ＧＡＧの機能、及びＧＡＧとＧＡＧ効果タンパク質分子の相互作用を変調させることができる非ペプチドの合成小化合物を有する必要がまだ満たされていない。
【００１３】
米国特許第６，２３２，３２０号は、炎症の阻害剤として有用なチエノ［２，３−ｃ］ピリジンを細胞接着の阻害剤として使用することを開示している。この開示された化合物は、異なるヘテロ環系を有し、スルホニルベンゾイルアミノ基は有していないので、本発明の化合物とは異なる。
【００１４】
特開２００１−１５１７７９は、４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン、薬剤組成物、及びそれらを含むＴＮＦ−α形成阻害剤を開示し、それらはＦｕｊｉｔａら（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、２００２年、１２巻、１６０７〜１６１１頁）にも開示されている。関連する特開２００１−１５１７８０は、新規な４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジンをＴＮＦ−α合成の阻害剤として開示し、それらはＦｕｊｉｔａら（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、２００２年、１２巻、１８９７〜１９００頁）にも開示されている。この２つの日本特許出願は、４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン環の３位に異なる置換基を提供している（特開２００１−１５１７７９ではアリールカルボニル、特開２００１−１５１７８０ではカルボキシ、及びアルコキシカルボニル）。しかし、これらの化合物はすべて、骨格の一部分として本発明の化合物の本質的な特徴であるスルホニルベンゾイルアミノ基を含んでいないので、本発明のものとは異なる。
【００１５】
Ｂａｌａｋｉｎら（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｆ．Ｃｏｍｐｕｔ．Ｓｃｉ．、２００２年、４２巻、１３３２〜１３４２頁）は、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）を標的とする化合物のライブラリーのコンピュータによる設計を記載している。コンピュータでスクリーニングされた多数の構造のうち、ＧＰＣＲを標的としたライブラリーから、１個のチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物を含めて、いくつかの化合物が、その分析において適用された選択基準で、最高のスコアの構造とされた。
【００１６】
２００３年公開のＳｃｉＦｉｎｄｅｒ  Ｓｃｈｏｌａｒデータベースには、チエノ［２，３−ｃ］ピリジン誘導体が２８４６個（２００３年１２月時点）収録されているが、これらの化合物のどれにも有用性が記載されておらず、また化学的合成データも記載されていない。
【００１７】
化合物供給業者であるＣｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｌａｂｓ  Ｉｎｃ．（米国カリフォルニア州サンディエゴ）は、ＣｏｍｂｉＬａｂ  Ｐｒｏｂｅ  Ｌｉｂｒａｒｉｅｓという名前のデータベース（２００２年６月改訂；２２０，６７４個の化合物構造）を公開した。それにはチエノ［２，３−ｃ］ピリジン誘導体が４３８個収録されているが、有用性も化学的合成データも記載されていない。
【００１８】
化合物供給業者であるＩ．Ｆ．Ｌａｂ（ウクライナのキエフ）は、ＩＦ  ＬＡＢ  Ｌｉｂｒａｒｉｅｓという名前のデータベース（２００３年７月；７７，０９８個の化合物構造）を公開した。それにはチエノ［２，３−ｃ］ピリジン誘導体が３１４５個収録されているが、有用性も化学的合成データも記載されていない。Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｌａｂｓ  Ｉｎｃ．のデータベースの化合物の一部は、Ｉ．Ｆ．Ｌａｂのデータベースの化合物と同じである。
【００１９】
背景技術では、チエノ［２，３−ｃ］ピリジンのスルホニルベンゾイルアミノ誘導体が有益な薬剤活性を有することを教示する又は示唆するものは何もない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
本発明のいくつかの態様の目的は、エフェクター細胞接着分子（ＥＣＡＭ）、特にＬ−セレクチン及びＰ−セレクチンと、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）、特にヘパラン硫酸グリコサミノグリカン（ＨＳ−ＧＡＧ）との相互作用の阻害剤である小有機化合物を含む薬剤用途及び診断用途向けの薬剤組成物を提供することである。したがって、こうした組成物は、Ｌ−セレクチン及びＰ−セレクチンによって媒介される細胞−細胞相互作用、具体的には白血球の接着、遊走及び浸潤の阻害剤として有用である。さらに、この組成物は、ＨＳ−ＧＡＧＳと直接相互作用し、したがってＨＳ−ＧＡＧによって媒介される任意のプロセス及び状態の阻害剤としても有用である。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
一態様によれば、本発明は、有効成分として、一般式Ｉの化合物
【化１】
2006516610.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、Ｈ；直鎖又は分岐の炭素原子１〜６個のアルキル；アリールアルキル；置換アリールアルキル；アルキル基で場合によっては置換されたシクロアルキル；アルカノイル；場合によってはアリール基が置換されているアリールカルボニル；シクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニルからなる群から選択され、
Ｒ２は、カルボキシ；シアノ；アミノカルボニル；アルキルアミノカルボニル；場合によってはアリール基が置換されているアリールアミノカルボニル；アルキルがそれぞれ直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルである、或いは２つのアルキル基が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、３〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよいジアルキルアミノカルボニル；アルコキシカルボニル；アルカノイル；シクロアルキルカルボニル；アリール基が場合によっては置換されているアリールカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ又はアルキルアミノで場合によっては置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ４一不飽和アルケニル、シクロアルキル、アリール、アリールメチルからなる群から選択され、或いはＲ３とＲ４が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、５〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよく、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８がＣ１〜Ｃ６アルキルの場合、Ｒ１は水素であることを条件として、Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される］、
及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる希釈剤又は担体を含む薬剤組成物を提供する。
【００２２】
一実施形態によれば、Ｒ１は、メチル、エチル、１−メチルエチル、フェニルメチル、アセチル、エトキシカルボニルからなる群から選択され、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８は水素である。
【００２３】
別の実施形態によれば、Ｒ１は水素であり、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８は水素又はメチル基である。
【００２４】
さらに別の実施形態によれば、Ｒ１＝Ｒ５＝Ｒ６はメチルであり、Ｒ７＝Ｒ８は水素である。
【００２５】
別の実施形態によれば、Ｒ２は、シアノ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、アミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ピロリジニルカルボニル、ピペリジニルカルボニル、モルホリニルカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択される。
【００２６】
別の実施形態によれば、Ｒ３及びＲ４は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、メトキシエチル、クロロブチル、シアノエチル、フェニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルメチル、アリル又はクロチルからなる群から選択され、Ｒ３及びＲ４は、同じでも異なってもよい。
【００２７】
別の一実施形態によれば、Ｒ３及びＲ４は、ピロリジン、ピペリジン、２−メチル、３−メチル、４−メチル又は３，５−ジメチルピペリジン、ペルヒドロアゼピン、モルホリン、ピペラジン、４−メチルピペラジン、３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル、３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）キノリン、１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクト−６−アン、及びその置換誘導体を形成する。この置換誘導体としては、ピペラジニル−４−カルボン酸エステル、ピペリジニル−４−カルボン酸エステル、ピペリジニル−３−カルボン酸エステルがあるが、これだけに限定されない。
【００２８】
いくつかの好ましい実施形態によれば、本発明は、下記から選択された式Ｉの化合物を含む組成物を提供する。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号５）；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号１）；
２−［［４−（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号１１）；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−１−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（メチル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−６−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（３−メチル−１−ピペリジニル）］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（フェニルメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（シクロヘキシルメチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジ−２−プロペニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）］スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシミド；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１．］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸Ｎ−メチルアミド；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸モルホリニルアミド。
【００２９】
現時点でより好ましい実施形態によれば、本発明の薬剤組成物は、下記から選択された化合物を含む。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号５）；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号１１）；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号２８）；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物２９）。
【００３０】
別の実施形態によれば、本発明の薬剤組成物は、ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭへのＧＡＧの結合を阻害する。
【００３１】
別の実施形態によれば、本発明の薬剤組成物は、ＨＳ−ＧＡＧとセレクチン、特にＬ−セレクチン及びＰ−セレクチンとの相互作用を阻害する。
【００３２】
さらに別の実施形態によれば、本発明の薬剤組成物は、ＧＡＧ、特にＨＳ−ＧＡＧに直接結合する。
【００３３】
別の実施形態によれば、本発明の薬剤組成物は、白血球及び好中球の浸潤をｉｎ  ｖｉｖｏで阻害する。
【００３４】
本発明は、このような薬剤活性がすでに開示されている化合物又はその薬剤組成物を含まないと理解されるべきである。化合物２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１．］オクト−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステルは、明らかに除外される。
【００３５】
別の態様によれば、本発明は、いくつかの新規化合物を開示し、それ自体を特許請求する。一実施形態によれば、本発明は、式２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｎｏ．２８）を有する小有機化合物を提供する。
【００３６】
別の実施形態によれば、本発明は、式２−［［４−［（４−メチル−ｌ−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｎｏ．２９）を有する小有機化合物を提供する。
【００３７】
さらに別の態様によれば、本発明は、ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭへのＧＡＧの結合を阻害するのに十分量の本発明による薬剤組成物に細胞を暴露させるステップを含む、細胞接着及び細胞遊走をｉｎ  ｖｉｔｒｏで阻害する方法を提供する。
【００３８】
さらに別の態様によれば、本発明は、一般式Ｉの化合物
【化２】
2006516610.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、Ｈ；直鎖又は分岐の炭素原子１〜６個のアルキル；アリールアルキル；置換アリールアルキル；アルキル基で場合によっては置換されたシクロアルキル；アルカノイル；場合によってはアリール基が置換されているアリールカルボニル；シクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニルからなる群から選択され、
Ｒ２は、カルボキシ；シアノ；アミノカルボニル；アルキルアミノカルボニル；場合によってはアリール基が置換されているアリールアミノカルボニル；アルキルがそれぞれ直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルである、或いは２つのアルキル基が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、３〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよいジアルキルアミノカルボニル；アルコキシカルボニル；アルカノイル；シクロアルキルカルボニル；アリール基が場合によっては置換されているアリールカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ又はアルキルアミノで場合によっては置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ４一不飽和アルケニル、シクロアルキル、アリール、アリールメチルからなる群から選択され、或いはＲ３とＲ４が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、５〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよく、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８がＣ１〜Ｃ６アルキルの場合、Ｒ１は水素であることを条件として、Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される］、
及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる希釈剤又は担体を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される細胞接着及び細胞遊走に関連する疾患及び障害の治療又は予防方法を提供する。
【００３９】
いくつかの好ましい実施形態によれば、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される細胞接着及び細胞遊走に関連する疾患及び障害の治療又は予防方法は、有効成分として下記から選択された式Ｉの化合物を含む本発明による薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号５）；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号１）；
２−［［４−（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号１１）；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−１−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（メチル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−６−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（３−メチル−１−ピペリジニル）］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（フェニルメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（シクロヘキシルメチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジ−２−プロペニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）］スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシミド；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１．］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸Ｎ−メチルアミド；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸モルホリニルアミド。
【００４０】
現時点でより好ましい実施形態によれば、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される細胞接着及び細胞遊走に関連する疾患及び障害の治療又は予防方法は、有効成分として下記から選択された式Ｉの化合物を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号５）；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号１１）；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号２８）；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号２９）。
【００４１】
一実施形態によれば、本発明は、ＧＡＧが、ヘパラン硫酸（ＨＳ−ＧＡＧ）、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、並びにその誘導体及び断片からなる群から選択される、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される疾患又は障害の治療又は予防方法を提供する。現時点で好ましい実施形態によれば、ＧＡＧは、ＨＳ−ＧＡＧである。
【００４２】
さらに別の実施形態によれば、本発明は、ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭが、セレクチン、インテグリン、フィブロネクチン、及びサイトカインからなる群から選択される、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される疾患又は障害の治療又は予防方法を提供する。現時点で好ましい実施形態によれば、このＧＡＧ特異的ＥＣＡＭは、Ｌ−セレクチン及びＰ−セレクチンからなる群から選択される。
【００４３】
別の実施形態によれば、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される疾患又は障害は、炎症性プロセス又は障害、自己免疫性プロセス又は疾患、血小板によって媒介される疾患、腫瘍転移、ウィルス性疾患、凝固障害、アテローマ性動脈硬化症、アミロイド疾患、及び腎疾患から選択される。
【００４４】
別の実施形態によれば、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介されるこの炎症性プロセス又は障害の例は、敗血症性ショック、白血球によって媒介される虚血後性組織損傷、凍傷損傷又はショック、白血球によって媒介される急性肺損傷、急性膵炎、腎炎、喘息、外傷性ショック、発作、外傷性脳損傷、腎炎、並びにアトピー性皮膚炎、乾癬、ブドウ膜炎、網膜炎、及び炎症性腸疾患を含めた急性及び慢性炎症であるが、これだけに限定されない。
【００４５】
現時点で好ましい実施形態によれば、本発明は、式２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物Ｎｏ．１１）のチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物、及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる希釈剤又は担体を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む、炎症性腸疾患の予防又は治療方法を提供する。
【００４６】
さらに別の実施形態によれば、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される自己免疫性疾患の例は、慢性関節リウマチ及び多発性硬化症であるが、これだけに限定されない。
【００４７】
現時点で好ましい実施形態によれば、本発明は、有効成分チエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物として２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物Ｎｏ．１１）及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる担体又は希釈剤を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む、多発性硬化症の予防又は治療方法を提供する。
【００４８】
さらに別の実施形態によれば、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される疾患又は障害には、細胞−細胞、細胞−ウィルス、細胞−マトリックス、及び細胞−タンパク質相互作用によって媒介されるものが含まれ、例として、細胞−細胞接着へのウィルスの付着、血小板凝集、リンパ球接着及び遊走、並びにアミロイド線維形成があるが、これだけに限定されない。
【００４９】
さらに別の実施形態によれば、本発明は、ＧＡＧ、特にＨＳ−ＧＡＧによって媒介される疾患及び障害の治療又は予防方法を提供する。ＧＡＧによって媒介される疾患及び障害は、アルツハイマー病やＩＩ型糖尿病などのアミロイド疾患；Ｃ型及びＢ型肝炎、インフルエンザ、ライノウィルス感染症、サイトメガロウィルス感染症、ＡＩＤＳ、呼吸器合胞体ウィルス感染症などのウィルス性疾患；細菌性感染症及びマラリア；腎疾患；白血病などの癌；及び凝固障害からなる群から選択される。
【００５０】
本発明のこれ以外の実施形態及び完全な適用範囲は、下記に記載する詳細な説明で明らかになるであろう。しかし、この詳細な説明によって、本発明の趣旨及び範囲内の様々な変更及び修正は、当業者には明らかとなるので、詳細な説明及び特定の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しているが、例として挙げられているだけのものであると理解されたい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５１】
定義
本発明によれば、本明細書では、下記の用語は別段の記載がない限り、下記の意味をもつものとして定義される。
【００５２】
「化合物」という用語は、分子量１５００ダルトン未満、好ましくは３００〜１２００ダルトンの小有機分子を指す。
【００５３】
「ＧＡＧ」という用語は、ヘパラン硫酸（ＨＳ−ＧＡＧ）、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸及びケラタン硫酸を含めてグリコサミノグリカンを指す。これには、ヘパラン硫酸プロテオグリカンやコンドロイチン硫酸プロテオグリカンなどプロテオグリカンのＧＡＧ鎖が含まれる。これには、化学的又は酵素的に生成されたＧＡＧ断片も含まれる。また、これには、当技術分野では知られている化学的又は酵素的手段によって生成することができるＧＡＧ誘導体も含まれる。ＧＡＧは、遊離でも、リンカー、支持体、細胞又はタンパク質に付着してもよい。ＧＡＧは、粗製物でも、器官、組織又は細胞から精製したものでもよい。
【００５４】
「ＨＳ−ＧＡＧ」という用語は、ヘパラン硫酸グリコサミノグリカンを指す。これには、化学的に、酵素的に生成できる、又は精製中に生成され得るものなどのヘパラン硫酸断片が含まれる。ＨＳ−ＧＡＧには、ヘパラン硫酸プロテオグリカンなどプロテオグリカンのＨＳ−ＧＡＧ鎖が含まれる。ＨＳ−ＧＡＧは、遊離でも、リンカー、支持体、細胞又はタンパク質に付着してもよく、或いは化学的、酵素的に改変することもできる。ＨＳ−ＧＡＧは、粗製物でも、器官、組織又は細胞から精製したものでもよい。
【００５５】
「ＨＳ−ＰＧ」は、ヘパラン硫酸プロテオグリカンを指す。
【００５６】
「ヘパリン」は、タンパク質が結合していない多硫酸化多糖類である。本明細書では、ヘパリンは、ブタ腸粘膜など様々な器官又は種から調製されたヘパリンを指す。本発明は、市販のフラキシパリンなどの低分子量ヘパリンを含めて、様々な分子量のヘパリン、及び当技術分野で知られている化学的又は酵素的反応によって調製又は改変された他のヘパリン誘導体を含む。
【００５７】
「ＧＡＧ誘導体」又は「ＥＣＡＭ誘導体」はそれぞれ、ＧＡＧ又はＥＣＡＭから誘導され、１種又は複数の化学的又は酵素的改変によって作製された生成物からなる。この改変は、分子の関係のある基の活性を改変するように設計される。
【００５８】
「オリゴ糖断片」又は「ＧＡＧ誘導オリゴ糖」は、制御された切断によってＧＡＧから誘導され、好ましくは切断後に精製された生成物である。
【００５９】
「Ｌ−セレクチン／ＩｇＧ」及び「Ｐ−セレクチン／ＩｇＧ」という用語は、結合ドメインを含むセレクチンのＮ末端部分がＩｇＧのＦｃ領域に融合しているセレクチンキメラ分子を指す（Ａｒｕｆｆｏら、Ｃｅｌｌ、１９９１年、６７巻、３５頁、及びＦｏｘａｌｌら、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．、１９９２年、１１７巻、８９５号）。
【００６０】
「ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭ」という用語は、エフェクター細胞接着分子を意味し、細胞接着、細胞−細胞及び細胞−マトリックス相互作用を媒介することに関与し、ＧＡＧ結合ドメインを有する、炭水化物結合タンパク質分子を指す。ＥＣＡＭの例は、Ｌ−セレクチン、Ｐ−セレクチンなどのセレクチン、インテグリン、フィブロネクチン、サイトカインなどである。「ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭ」という用語は、突然変異体ＥＣＡＭ、タンパク質ドメイン、ＥＣＡＭから誘導されたポリペプチド又はペプチド、ＥＣＡＭの化学的又は酵素的誘導体なども、これら突然変異体ＥＣＡＭ、タンパク質ドメイン、ＥＣＡＭのポリペプチド、ペプチド及び誘導体が、ＧＡＧに結合する能力を保持している限り含む。
【００６１】
「阻害剤化合物」という用語は、ＧＡＧの機能を阻害、変調又は逆転させる小有機化合物を指す。例えば、阻害剤化合物は、２種の分子（１）ヘパリン又はＨＳ−ＧＡＧによって例示されるがこれらに限らないＧＡＧと、（２）Ｌ−セレクチン、Ｐ−セレクチン又はインテグリンによって例示されるがこれらに限らないＧＡＧ特異的ＥＣＡＭとの間の相互作用（結合）を阻害することができる。
【００６２】
「炎症」、「炎症性疾患」、「炎症性状態」又は「炎症性プロセス」という用語は、炎症性応答を伴う生理的又は病理的状態を意味する。そのような状態としては、敗血症、虚血−再潅流損傷、クローン病、関節炎、多発性硬化症、心筋症、大腸炎、感染性髄膜炎、脳炎、急性呼吸不全症候群、器官／組織移植の拒絶反応（皮膚、腎臓、心臓、肺、肝臓、骨髄、角膜、膵臓、小腸など）、感染症、皮膚炎、発作、外傷性脳損傷、炎症性腸疾患、及び自己免疫性疾患があるが、これだけに限定されない。
【００６３】
「治療」又は「治療する」という用語は、細胞接着又は細胞遊走事象、具体的にはセレクチン接着事象、さらに具体的にはＬ−セレクチン及びＰ−セレクチンによって媒介される接着事象によって媒介される障害の予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ）、改善、防止（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）又は治療を含み得る目的で、本発明の化合物を被験者に投与することを含むことを意味する。このような治療は、炎症性応答又は特定の障害に関連する他の応答を必ずしも完全に改善する必要はない。さらに、このような治療は、当業者に知られている疾患又は障害状態を軽減するための他の通常の治療と一緒に使用することもできる。
【００６４】
本発明の方法は、障害を、例えば移植患者などそのリスクが高い患者において発生させないために、例えば炎症状態を検出する前の「予防的」治療として提供することもできる。
【００６５】
「癌」という用語は、転移、腫瘍成長、及び脈管形成を含めて、癌に関連する様々な状態を指す。本発明によれば、癌の例は、白血病である。
【００６６】
この明細書及び添付の特許請求の範囲を通して、単数形の「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」には、文脈上からそうでないことがはっきりしていない限り、その複数が含まれる。したがって、例えば「ある化合物（ａ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」という言葉には、かかる化合物の混合物が含まれ、「あるＰ−セレクチン（ａ  Ｐ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ）」又は「あるＬ−セレクチン（ａｎ  Ｌ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ）」という言葉にはそれぞれ、かかる分子の混合物を示す言葉が含まれ、「その製剤（ｔｈｅ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）」又は「その方法（ｔｈｅ  ｍｅｔｈｏｄ）」という言葉には、本明細書に記載された、かつ／又はこの開示を読んで当業者には明らかとなるタイプの１種又は複数の製剤、方法、及び／又はステップが含まれる。
【００６７】
薬剤組成物
本発明は、有効成分として、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）、特にヘパラン硫酸グリコサミノグリカン（ＨＳ−ＧＡＧ）と、エフェクター細胞接着分子（ＥＣＡＭ）、特にＧＡＧ特異的ＥＣＡＭ、具体的にはＬ−セレクチン及びＰ−セレクチンとの相互作用を阻害することができる化合物を少なくとも１種含む薬剤組成物に関する。
【００６８】
いくつかの態様によれば、本発明は、有効成分として、一般式Ｉを有する化合物
【化３】
2006516610.tif 000004
［式中、
Ｒ１は、Ｈ；直鎖又は分岐の炭素原子１〜６個のアルキル；アリールアルキル；置換アリールアルキル；アルキル基で場合によっては置換されたシクロアルキル；アルカノイル；場合によってはアリール基が置換されているアリールカルボニル；シクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニルからなる群から選択され、
Ｒ２は、カルボキシ；シアノ；アミノカルボニル；アルキルアミノカルボニル；場合によってはアリール基が置換されているアリールアミノカルボニル；アルキルがそれぞれ直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルである、或いは２つのアルキル基が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、３〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよいジアルキルアミノカルボニル；アルコキシカルボニル；アルカノイル；シクロアルキルカルボニル；アリール基が場合によっては置換されているアリールカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ又はアルキルアミノで場合によっては置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ４一不飽和アルケニル、シクロアルキル、アリール、アリールメチルからなる群から選択され、或いはＲ３とＲ４が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、５〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよく、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８がＣ１〜Ｃ６アルキルの場合、Ｒ１は水素であることを条件として、Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される］、
及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる希釈剤又は担体を含む薬剤組成物を提供する。
【００６９】
一実施形態によれば、Ｒ１は、メチル、エチル、１−メチルエチル、フェニルメチル、アセチル、エトキシカルボニルからなる群から選択され、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８は水素である。
【００７０】
別の実施形態によれば、Ｒ１は水素であり、Ｒ５＝Ｒ６＝Ｒ７＝Ｒ８は水素又はメチル基である。
【００７１】
さらに別の実施形態によれば、Ｒ１＝Ｒ５＝Ｒ６はメチルであり、Ｒ７＝Ｒ８は水素である。
【００７２】
別の実施形態によれば、Ｒ２は、シアノ、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、アミノカルボニル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ピロリジニルカルボニル、ピペリジニルカルボニル、モルホリニルカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択される。
【００７３】
別の実施形態によれば、Ｒ３及びＲ４は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、メトキシエチル、クロロブチル、シアノエチル、フェニル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルメチル、アリル又はクロチルからなる群から選択され、Ｒ３及びＲ４は、同じでも異なってもよい。
【００７４】
別の一実施形態によれば、Ｒ３及びＲ４は、ピロリジン、ピペリジン、２−メチル、３−メチル、４−メチル又は３，５−ジメチルピペリジン、ペルヒドロアゼピン、モルホリン、ピペラジン、４−メチルピペラジン、３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル、３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）キノリン、１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクト−６−アン、及びその置換誘導体を形成する。この置換誘導体としては、ピペラジニル−４−カルボン酸エステル、ピペリジニル−４−カルボン酸エステル、ピペリジニル−３−カルボン酸エステルがあるが、これだけに限定されない。
【００７５】
一実施形態によれば、本発明の好ましい薬剤組成物は、有効成分として下記から選択された式Ｉの化合物を含む。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号５）；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号１）；
２−［［４−（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物１１）；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−１−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（メチル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（モルホリニルスルホニル）ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−６−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（３−メチル−１−ピペリジニル）］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（フェニルメチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（シクロヘキシルメチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジ−２−プロペニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）］スルホニル］ベンゾイル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキシミド；
２−［［４−［（１，３，３−トリメチル−６−アザビシクロ［３．２．１．］オクタ−６−イル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（ジ−２−メトキシエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］−アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−メチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−［（メチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−［［４−（エトキシカルボニル）−１−ピペラジニル］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−（１−メチルエチル）−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸エチルエステル；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロ−５，５，７，７−テトラメチルチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（メチルフェニルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド；
２−［［（４−（３，４−ジヒドロ−１（２Ｈ）−キノリニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルアミド；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸Ｎ−メチルアミド；
２−［［４−（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸モルホリニルアミド。
【００７６】
別の実施形態によれば、本発明のより好ましい薬剤組成物は、有効成分として下記から選択された式Ｉの化合物を含む。
２−［［４−［（エチルブチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号５）；
２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾール−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物番号１１）；
２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号２８）；
２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物番号２９）。
【００７７】
本発明はまた、式２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｎｏ．２８）及び２−［［４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｎｏ．２９）の化合物及びその薬剤組成物も提供する。この化合物の合成は、本明細書で下記の実施例１及び２に記述されている。
【００７８】
別段の記載がない限り、本発明に記載する化合物のキラル、ジアステレオマー、ラセミ体もすべて、本発明に含まれる。すなわち、化合物は不斉中心を有していてもよい。オレフィン、Ｃ−及びＮ−の二重結合など多数の幾何異性体も本明細書に記載された化合物中に存在することができ、このような安定な異性体はすべて、本発明で企図される。非対称置換炭素原子を含む本発明の化合物を、光学活性体又はラセミ体に分離できることが理解されよう。ラセミ体の分割や光学活性出発材料からの合成など光学活性体の調製方法は、当技術分野でよく知られている。特定の立体化学又は異性体が特に記載されていない場合は、ある構造のキラル、ジアステレオマー、ラセミ体のすべて、及び幾何異性体のすべてが意図されている。
【００７９】
置換基への結合が、環の２個の原子をつないでいる結合と交差して示されている場合、このような置換基は、環上のどの原子と結合してもよい。置換基を別の基に結び付ける結合が特に示されていない場合、或いは結合によって結び付けられるかかる他の基の原子が特に示されていない場合、このような置換基はかかる他の基のどの原子と結合を形成してもよい。
【００８０】
置換基及び／又は可変基の組合せは、かかる組合せによって安定な化合物がもたらされる場合のみ許容できる。本明細書では、安定な化合物又は安定な構造とは、反応混合物からの有用な純度での単離、及び有効な治療薬への調製を切り抜けるのに十分に丈夫な化合物を意味する。
【００８１】
本明細書では「置換された」という用語は、指定された原子上の任意の１個又は複数の水素が、記載した基から選択されたもので置換されていることを意味する。ただし、指定された原子の通常の原子価を超えていないこと、またその置換によって安定な化合物がもたらされることを条件とする。
【００８２】
「リード化合物」は、アッセイによって、変調させたい所望の細胞活性に関係する十分な効果が明らかにされた、選択されたコンビナトリアルライブラリー中の化合物である。この場合には、その特性は、ＧＡＧ又はＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用に関連する少なくとも１種の生物的活性の変調である。
【００８３】
「アルキル」という用語は、炭素原子１〜１２個の直鎖、分岐鎖又は環状の炭化水素を指す。一実施形態では、アルキルは１〜１０個の炭素を有する。別の実施形態では、アルキルは１〜８個の炭素を有する。別の実施形態では、アルキルは１〜６個の炭素を有する。別の実施形態では、アルキルは１〜４個の炭素を有する。アルキルは無置換でも、又は化合物の生物的活性を妨げない１種又は複数の置換基で置換されていてもよい。適切な置換基の非限定的な例としては、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ２〜Ｃ１０アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｃ７〜Ｃ１２アラルキル、Ｃ７〜Ｃ１２アルカリール、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルチオ、アリールチオ、アリールオキシ、アリールアミノ、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルケニル、ジ（Ｃ１〜Ｃ１０）−アルキルアミノ、Ｃ２〜Ｃ１２アルコキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルフィニル、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール、ヒドロキシ、ヒドロキシ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、アリールオキシ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アリーロイルオキシ、置換アルコキシ、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、シアノ（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルカンアミド、アリーロイルアミド、アリールアミノスルホニル、スルホンアミド、アミジノ、アミド、アルキルアミド、ジアルキルアミド、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノカルボニル、カルバミド、カルボキシ、ヘテロ環基、ニトロアルキル、及び（ＣＨ２）ｍ−Ｚ−（Ｃ１〜Ｃ１０アルキル）（ただし、ｍは１〜８であり、ｚは酸素又は硫黄である）があるが、これだけに限定されない。
【００８４】
「低級アルキル」という用語は、メチル、エチル、１−メチルエチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなど炭素原子１〜６個の直鎖又は分岐のアルキル基を指す。好ましい一実施形態では、低級アルキルは、メチル基である。別の好ましい実施形態では、低級アルキルは、メチルエチル基である。
【００８５】
「アリール」という用語は、無置換でも、或いは上記で定義した１種又は複数の不活性置換基で置換されてもよい、少なくとも１種の炭素環式芳香族基を有する芳香族基を指す。
【００８６】
「へテロシクリル」又は「ヘテロアリール」という用語は、１種又は複数のヘテロ原子、例えば酸素、窒素、硫黄などを含み、不飽和又は芳香族の性質を有する又は有することなく、上記で定義した１種又は複数の不活性置換基で場合によっては置換された環を指す。ヘテロ環置換基の非限定的な例は、イミダゾール、ピラゾール、ピラジン、チアゾール、チアジン、オキサゾール、フラン、ジヒドロフラン、テトラヒドロフラン、ピリジン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、イソオキサゾールなどである。複数の環は、キノリンやベンゾフランと同様に、縮合したものでもよく、或いは４−フェニルピリジンと同様に、縮合していないものでもよい。
【００８７】
ヘテロ環部分は、孤立していてもよく、又は縮合していてもよい、１種又は複数のヘテロ原子、好ましくは窒素を含む１又は２種の環を有する部分であり、例えばイミダゾール、ピラゾール、ピラジン、ピリジン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、イソオキサゾール、キノリン、イソキノリンなどがあるが、これだけに限定されない。
【００８８】
「ハロアルキル」基は、１種又は複数のハロゲン原子、例えばＦ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩで置換された上記で定義したアルキル基を指す。「ヒドロキシル」基は、ＯＨ基を指す。「アルケニル」基は、少なくとも１種の炭素−炭素二重結合を有する基を指す。「アリールアルキル」基は、アリールが結合したアルキルを指す。ただし、アルキル及びアリールは上記で定義したとおりである。アリールアルキル基の一例は、ベンジル基である。
【００８９】
本明細書で企図されるように、本発明は、本発明で定義された化合物の類似体、誘導体、異性体、薬剤として許容できる塩及び水和物をさらに含む。
【００９０】
「異性体」という用語には、光学異性体及び類似体、構造異性体及び類似体、配座異性体及び類似体などが含まれるが、これだけに限定されない。したがって、本発明は、本発明の化合物の様々な光学異性体を含む。本発明の化合物は少なくとも１個のキラル中心を含むことが当業者なら理解されよう。したがって、これらの化合物は、光学活性体又はラセミ体として存在し、かつ単離される。いくつかの化合物は、多形を示すこともある。本発明は、ラセミ体、光学活性体、多形体、立体異性体、又はその混合物のいずれを含むと理解されるべきである。一実施形態では、化合物は、純粋な（Ｒ）−異性体である。別の実施形態では、化合物は、純粋な（Ｓ）−異性体である。別の実施形態では、化合物は、（Ｒ）及び（Ｓ）異性体の混合物である。別の実施形態では、化合物は、等量の（Ｒ）及び（Ｓ）異性体を含むラセミ混合物である。光学活性体の調製方法、例えば再結晶技法によるラセミ体の分割、光学活性出発材料からの合成、キラル合成、又はキラル固定相を使用するクロマトグラフ分離は、当技術分野でよく知られている。
【００９１】
本発明はさらに、化合物の誘導体も含む。「誘導体」という用語には、エーテル誘導体、酸誘導体、アミド誘導体、エステル誘導体などが含まれるが、これだけに限定されない。さらに、本発明は、本明細書に記載された化合物の水和物もさらに含む。「水和物」という用語には、半水和物、一水和物、二水和物、三水和物などが含まれるが、これだけに限定されない。
【００９２】
本発明の化合物の誘導体は、プロドラッグの形とすることもできる。プロドラッグは、このようなプロドラッグが哺乳類被検体に投与されたとき、有効な式Ｉの親薬物をｉｎ  ｖｉｖｏで放出する、共有結合された任意の担体であると見なされる。式Ｉの化合物のプロドラッグは、その改変体が、ルーチンの操作で又はｉｎ  ｖｉｖｏで切断されて親化合物になるように、化合物中に存在する官能基を改変することによって調製される。プロドラッグには、哺乳類被検体に投与されたとき、切断されてそれぞれ遊離のヒドロキシル、アミノ、スルフヒドリル又はカルボキシル基を形成する、ヒドロキシル、アミノ、スルフヒドリル又はカルボキシル基が任意の基に結合された、式Ｉの化合物が含まれる。プロドラッグの例には、式Ｉの化合物中のアルコール及びアミン官能基の酢酸、ギ酸及び安息香酸誘導体などが含まれるが、これだけに限定されない。
【００９３】
一実施形態によれば、本発明の化合物は、ＧＡＧとＧＡＧ特異的ＥＣＡＭの相互作用を阻害する。
【００９４】
別の実施形態によれば、本発明の化合物は、ＨＳ−ＧＡＧと、セレクチン、特にＬ−セレクチン及びＰ−セレクチンとの相互作用を阻害する（本明細書で下記の実施例５及び表１を参照）。
【００９５】
さらに別の実施形態によれば、本発明の化合物は、ＧＡＧ、特にＨＳ−ＧＡＧに直接結合する（本明細書で下記の実施例６を参照）。したがって、本発明の化合物は、ＧＡＧによって媒介される疾患及び障害の治療又は予防のために使用することができる。
【００９６】
さらに別の実施形態によれば、本発明は、ＧＡＧとＧＡＧ特異的ＥＣＡＭの相互作用を阻害するのに十分な量の少なくとも１種の式Ｉの化合物に細胞を暴露させるステップを含む、細胞接着及び細胞遊走をｉｎ  ｖｉｔｒｏで阻害する方法を提供する（本明細書で下記の実施例７を参照）。
【００９７】
本発明の化合物の阻害作用を、いくつかの方法によってｉｎ  ｖｉｔｒｏで評価することができる。本明細書で下記に例示するＧＡＧ−ＥＣＡＭ結合を測定する一アッセイ法では、Ｌ−セレクチン／ＩｇＧの固定化ヘパリンへの結合を検出する。別のアッセイ法では、固定化Ｌ−セレクチン、又はＩｇＧ以外のタンパク質ドメインに融合したＬ−セレクチンを利用する。結合したＬ−セレクチンの量は、西洋ワサビペルオキシダーゼに結合させた、例えばＬ−セレクチンに対するモノクローナル抗体を使用するＥＬＩＳＡアッセイ法によって決定される。図１は、Ｌ−セレクチン／ＩｇＧのヘパリンへの結合の飽和曲線を示している。図２に示すように、可溶性ヘパリンは、Ｌ−セレクチン／ＩｇＧの固定化ヘパリンへの結合を阻害した。Ｌ−セレクチンの炭水化物結合ドメインに対するｍＡｂ（Ｄｒｅｇｇ−５５）は、Ｌ−セレクチン／ＩｇＧのヘパリンへの結合を阻害した（図３）が、抗βアミロイドなどの非特異的抗体は、結合を阻害せず、それによってこの結合の特異性がさらに確認された。このＤｒｅｇｇ−５５抗体は、Ｌ−セレクチン依存性接着をｉｎ  ｖｉｔｒｏで、好中球蓄積をｉｎ  ｖｉｔｒｏで、また炎症をｉｎ  ｖｉｖｏで阻害することもわかった（Ｃｏ  Ｍ．Ｓ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１９９９年、４９３巻、２５３〜２６６頁）。したがって、Ｄｒｅｇｇ−５５抗体を用いた実験によって、本発明によるアッセイ法が、細胞相互作用及び浸潤を阻害しかつ治療上の潜在能力を有する化合物を発見するのに有用であることが示されている。
【００９８】
本発明の式Ｉの化合物の生物的活性を、様々な系でアッセイすることができる。例えば、化合物を固体表面上に固定化し、ＨＳ−ＧＡＧを発現している細胞の接着を測定することができる。この試験化合物を、ＨＳ−ＧＡＧと他の細胞接着分子、サイトカイン、ウィルスタンパク質などＨＳ−ＧＡＧに結合する他のタンパク質との間の結合を競合阻害する能力についても、試験することができる。アッセイ形式の多くは、放射能又は非放射能標識アッセイ成分を使用する。標識系は、様々な形とすることができる。当技術分野でよく知られている方法に従って、標識を所望のアッセイ成分に直接又は間接カップリングさせることもできる。
【００９９】
別の実施形態によれば、本発明の化合物は、白血球及び好中球の浸潤をｉｎ  ｖｉｖｏで阻害する（本明細書で下記の実施例８及び図４を参照）。
【０１００】
本発明の化合物が白血球の急性炎症部位への遊走を低減する能力を、チオグリコレート誘導腹膜炎のＢＡＬＢ／ｃマウスモデルを使用して評価した。この動物モデルにおいては、Ｌ−及びＰ−セレクチンとＨＳ−ＧＡＧの相互作用が好中球浸潤に関与していた（Ｎｅｌｓｏｎ，Ｒ．Ｍ．、１９９３年、８２巻、３２５３〜３２５８頁；Ｘｉｅ，Ｘ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２０００年、２７５巻、３４８１８〜３４８２５頁）。
【０１０１】
本発明の式Ｉの化合物は、白血球及び好中球の腹膜腔への遊走を効率的に阻害することがわかった。また、この化合物は、遅延型過敏症マウスモデルを用いて評価して、リンパ球遊走を低減することもわかった（本明細書で下記の実施例１０及び図６を参照；方法に関しては、Ｌａｎｇｅ−Ａｓｓｃｈｅｎｆｅｌｄｔ  Ｂ．ら、Ｂｌｏｏｄ、２００２年、９９巻、５３８〜５４５頁を参照）。
【０１０２】
所望の生物的活性を有する本発明の化合物を、改善された薬理的諸特性など所望の特性を提供するように、必要に応じて改変することもできる。
【０１０３】
診断の目的の場合、検出可能信号を直接又は間接的に提供することができる多種多様な標識をこの化合物に結合させることができる。したがって、本発明の化合物を、生物的活性を保持させたまま、様々な目的のために様々なやり方で改変することができる。さらに、粒子、固体物質、巨大分子などに結合させるために、様々な反応性部位を末端に導入することもできる。
【０１０４】
標識化合物を、様々なｉｎ  ｖｉｖｏ又はｉｎ  ｖｉｔｒｏの用途に使用することができる。放射性核種（例えば、テクネチウム−９９やインジウム−１１１などのγ線放出放射性同位体）、蛍光剤（例えば、フルオレセイン）、酵素、酵素基質、酵素補因子、酵素阻害剤、化学発光化合物、生物発光化合物など、多種多様な標識を使用することができる。当業者なら、この化合物に結合するのに適した他の標識がわかり、ルーチンの実験を使用してそれを確認できるであろう。このような標識の結合は、当業者にはよく知られた標準的技法を使用して、実現される。
【０１０５】
例えば、炎症部位を特定するｉｎ  ｖｉｖｏ画像診断の場合、通常は放射性同位体をよく知られた技法に従って使用する。
【０１０６】
本発明は、本発明の化合物の薬剤として許容できる塩を含む。薬剤として許容できる塩は、無機塩基、例えば水酸化ナトリウム、又は塩酸、クエン酸などの無機／有機酸による処理によって調製することができる。
【０１０７】
「薬剤として許容できる塩」という用語は、無機又は有機の塩基及び無機又は有機の酸を含めて、薬剤として許容できる非毒性塩基又は酸から調製された塩を指す。無機塩基から誘導された塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン、第一マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩がある。アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、及びナトリウム塩が特に好ましい。薬剤として許容できる非毒性有機塩基から誘導された塩としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチル−モルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなど、第一級、第二級、第三級アミン、天然置換アミンを含めて、置換アミン、環状アミン、及び塩基性イオン交換樹脂の塩がある。
【０１０８】
本発明の化合物が塩基性の場合、無機及び有機の酸を含めて、薬剤として許容できる非毒性酸から塩を調製することができる。このような酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが含まれる。クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、酒石酸が特に好ましい。
【０１０９】
本明細書では、本発明の式Ｉの化合物という言葉は、薬剤として許容できるその塩も含むことを意味すると理解するべきである。
【０１１０】
製剤
経口、直腸、経皮、皮下、静脈内、筋内、及び鼻腔内を含めて、様々な経路によって投与するための本発明の薬剤組成物を調製することができる。このような組成物は、製薬分野でよく知られた方式で調製され、本明細書で上記に記載したように、有効成分として少なくとも１種の式Ｉの化合物及びその誘導体を含み、さらに賦形剤又は担体を含む。本発明による薬剤組成物の調製中に、その有効成分を通常は、賦形剤と混合し、賦形剤で希釈し、或いはカプセル、サッシェ、紙又は他の容器の形でよい担体内に封入する。賦形剤が希釈剤として働く場合は、有効成分用のビヒクル、担体又は媒体として働く、固体、半固体又は液体材料とすることができる。したがって、この組成物を、錠剤、丸薬、散剤、トローチ、サッシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤、（固体としての、又は液体媒体中の）エアゾール、例えば最高１０重量％の有効化合物を含む軟膏、軟質及び硬質ゼラチンカプセル、坐剤、滅菌注射剤、滅菌包装散剤の形とすることができる。
【０１１１】
製剤を調製する際に、適切な粒径をもたせるために、他の材料と組み合わせる前にこの有効成分を粉砕する必要があるかもしれない。この有効化合物が実質的に不溶性である場合、通常は２００メッシュ未満の粒径に粉砕する。この有効成分が実質的に水溶性である場合、通常は、製剤の実質的に均一な粒径分布、例えば、約４０メッシュになるように、粉砕して、その粒径を調整する。
【０１１２】
適切な賦形剤のいくつかの例には、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギナート、トラガカントゴム、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、及びメチルセルロースが含まれる。この製剤は、タルク、ステアリン酸マグネシウム、鉱油などの滑沢剤；湿潤剤；乳化及び懸濁剤；ヒドロキシ安息香酸メチル及びプロピルなどの保存剤；甘味剤；及び着香剤をさらに含むこともできる。本発明の組成物は、当技術分野で知られている手順を用いて患者に投与した後、その有効成分を速放、徐放、また遅放するように調製することができる。
【０１１３】
この組成物を単位剤形に調製することが好ましく、各用量は約０．１〜約５００ｍｇである。「単位剤形」という用語は、ヒト被験者及び他の哺乳類向けの単位用量として適した物理的に別々の単位を指し、各単位は、所望の治療効果をもたらすように計算された所定量のこの有効化合物を、適切な薬剤用賦形剤とともに含む。
【０１１４】
有効成分は、広範囲の用量で有効であり、一般には治療上有効量で投与される。しかし、この化合物の実際の投与量は、医師によって、治療対象の状態、選択された投与経路、実際の投与化合物、年齢、体重、個々の患者の応答、患者の症状の重症度などを含めて、関連する状況から見て決定されることが理解されよう。
【０１１５】
錠剤などの固体組成物を調製する場合、主要な有効成分を薬剤用賦形剤と混合して、本発明の化合物の均質な混合物を含む固体予備製剤組成物を形成する。この予備製剤組成物が均質であると言う場合、組成物を、錠剤、丸剤、カプセルなど同等に有効な単位剤形に容易に細分できるように、有効成分が組成物全体に一様に分散されていることを意味している。次いで、この固体予備製剤を、例えば０．１〜約５００ｍｇの本発明の有効成分を含む、上記に記載したタイプの単位剤形に細分する。
【０１１６】
本発明の錠剤又は丸剤を、コーティングし又は他の方法で配合して、持続性作用の利点をもたらす剤形を提供する。例えば、錠剤又は丸剤は、製剤の内側成分及び製剤の外側成分を含むことができ、後者は、前者を包む外包の形である。この２種の成分をエンテリック層で隔てることができる。この層は、胃での崩壊を阻止し、内側成分を元の形のまま十二指腸まで進ませ、遅放させるように働く。このようなエンテリック層又はコーティング用に、様々な材料を使用することができる。かかる材料としては、いくつかのポリマー酸、及びポリマー酸とシェラック、セチルアルコール、酢酸セルロースなどの材料との混合物がある。
【０１１７】
本発明の組成物を経口投与又は注射投与用に組み込むことができる液体剤形としては、水溶液、適切に着香させたシロップ、綿実油、ゴマ油、ヤシ油、落花生油などの食用油を含む水性又は油性懸濁剤及び着香させた乳剤、並びにエリキシル剤及び同様の薬剤用ビヒクルがある。
【０１１８】
吸入又は吹送用組成物としては、薬剤として許容できる水性又は有機溶媒、その混合物に溶かした液剤及び懸濁剤、並びに散剤がある。液体又は固体組成物は、上記に記載した適切な薬剤として許容できる賦形剤を含むことができる。組成物を、局所又は全身効果のために経口又は鼻呼吸経路によって投与することが好ましい。好ましくは薬剤として許容できる溶媒に溶かした組成物を、不活性ガスを使用して噴霧することができる。霧状にした液剤を噴霧装置から直接吸い込むことができ、或いは噴霧装置をフェースマスクテント又は間欠的陽圧呼吸機器に取り付けることもできる。液剤、懸濁剤、又は散剤の組成物を、製剤を適当な方式で送達する装置から、好ましくは経口又は鼻腔内投与することができる。
【０１１９】
本発明の方法に使用する別の好ましい製剤は、経皮送達装置（「パッチ」）を使用する。このような経皮パッチを使用して、本発明の化合物を制御した量で連続又は不連続注入することができる。薬剤送達用の経皮パッチの作製及び使用は、当技術分野でよく知られている。例えば、完全に記述されているかのように参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，０２３，２５２号を参照。薬剤を連続、脈動又はオンデマンド送達するためのこのようなパッチを作製することができる。
【０１２０】
この薬剤組成物を脳に導入することが望ましい又は必要である場合、直接又は間接導入技法を使用することができる。直接技法は、通常は薬物送達カテーテルをその受容者の脳室系に留置して、血液脳関門をバイパスするものである。生物的因子を身体の特定の解剖領域を輸送するために使用されるこのような植込み可能な一送達システムは、完全に記述されているかのように参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，０１１，４７２号に記載されている。一般的に好ましい間接技法は、通常は、親水性薬物を脂溶性薬物に転換することによって薬物潜伏化（ｄｒｕｇ  ｌａｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ）をもたらす組成物を調製するものである。潜伏化は、通常は、薬物に存在するヒドロキシ、カルボニル、硫酸及び第一級アミン基をブロックして、薬物をより脂溶性にし、血液脳関門を通り抜けて輸送できるようにすることによって実現される。或いは、高張液を動脈内注入し、血液脳関門を一時的に開くことができるようにすることによって、親水性薬物の送達を高めることができる。
【０１２１】
治療的使用
本発明は、細胞−マトリックス及び細胞−細胞相互作用を阻害し、それによって、ある種の疾患及び障害の発症を招く事象のカスケードを阻害する小有機化合物を提供する。
【０１２２】
いくつかの態様によれば、本発明は、一般式Ｉを有する化合物
【化４】
2006516610.tif 000005
［式中、
Ｒ１は、Ｈ；直鎖又は分岐の炭素原子１〜６個のアルキル；アリールアルキル；置換アリールアルキル；アルキル基で場合によっては置換されたシクロアルキル；アルカノイル；場合によってはアリール基が置換されているアリールカルボニル；シクロアルキルカルボニル；アルコキシカルボニルからなる群から選択され、
Ｒ２は、カルボキシ；シアノ；アミノカルボニル；アルキルアミノカルボニル；場合によってはアリール基が置換されているアリールアミノカルボニル；アルキルがそれぞれ直鎖又は分岐鎖のＣ１〜Ｃ６アルキルである、或いは２つのアルキル基が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、３〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよいジアルキルアミノカルボニル；アルコキシカルボニル；アルカノイル；シクロアルキルカルボニル；アリール基が場合によっては置換されているアリールカルボニル、ベンゾチアゾル−２−イルからなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ又はアルキルアミノで場合によっては置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ４一不飽和アルケニル、シクロアルキル、アリール、アリールメチルからなる群から選択され、或いはＲ３とＲ４が一緒になって、追加のヘテロ原子１個又は２個を場合によっては含む、５〜７員の飽和、不飽和又は芳香族の単環式又は二環式の窒素含有へテロシクリルを形成してもよく、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８がＣ１〜Ｃ６アルキルの場合、Ｒ１は水素であることを条件として、Ｈ又はＣ１〜Ｃ６アルキルからなる群から選択される］、
及び薬剤として許容できるその塩を含み、さらに薬剤として許容できる希釈剤又は担体を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される細胞接着及び細胞遊走に関連する疾患及び障害の治療又は予防方法を提供する。
【０１２３】
ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用によって媒介される細胞接着及び細胞遊走に関連する疾患及び障害の治療及び予防に好ましい薬剤組成物は、本明細書で上記に挙げてある。
【０１２４】
一実施形態によれば、ＧＡＧが、ヘパラン硫酸（ＨＳ−ＧＡＧ）、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、並びにその誘導体及び断片からなる群から選択される、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用に関連する疾患又は障害の治療のために、本発明による薬剤組成物を使用する。
【０１２５】
現時点で好ましい一実施形態によれば、ＧＡＧがＨＳ−ＧＡＧである、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用に関連する疾患又は障害の治療のために、本発明による薬剤組成物を使用する。
【０１２６】
さらに別の実施形態によれば、ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭが、セレクチン、インテグリン、フィブロネクチン、及びサイトカインからなる群から選択される、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用に関連する疾患又は障害の治療のために、本発明による薬剤組成物を使用する。
【０１２７】
現時点で好ましい一実施形態によれば、ＧＡＧ特異的ＥＣＡＭが、Ｌ−セレクチン及びＰ−セレクチンからなる群から選択される、ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用に関連する疾患又は障害の治療のために、本発明による薬剤組成物を使用する。
【０１２８】
抗細胞接着及び抗細胞遊走療法は、炎症性プロセス、自己免疫性プロセス、癌及び腫瘍転移、並びに血小板によって媒介される疾患を含めて、いくつかの疾患及び障害の治療に非常に有効であるとわかった。
【０１２９】
Ｌ−及びＰ−セレクチンに関連する、又はセレクチンによって媒介される白血球の血流に沿った流れが関与するいくつかの炎症性障害を本発明の薬剤組成物で治療することができる。治療できる障害としては、器官又は組織移植の拒絶反応（例えば、同種移植の拒絶反応又は自家骨髄移植）、アテローマ性動脈硬化症、網膜炎、癌転移、慢性関節リウマチ、白血球によって媒介される急性肺損傷（例えば、成人呼吸促迫症候群）、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、炎症性肺疾患、再狭窄、腎炎、急性及び慢性炎症、アトピー性皮膚炎、乾癬、接触性皮膚知覚過敏症、心筋虚血、及び炎症性腸疾患があるが、これだけに限定されない。好ましい実施形態では、この薬剤組成物を使用して、虚血−再潅流損傷、急性膵炎、敗血症性ショック、ブドウ膜炎、慢性関節リウマチ、炎症性腸疾患など好中球浸潤を伴う炎症性障害を治療する。
【０１３０】
再潅流損傷は、臨床心臓病学の重大な問題である。虚血性心筋における白血球付着を低減する治療剤は、血栓溶解剤の治療有効性を大幅に高めることができる。組織プラスミノゲンアクチベータやストレプトキナーゼなどの試剤を用いる血栓溶解療法は、不可逆的な心筋細胞死前の重症心筋虚血症の多数の患者における冠動脈閉鎖を緩和することができる。しかし、このような患者の多くは、血流が回復するにもかかわらず、なお心筋壊死を生じる。おそらく一部には、血小板及び内皮は、トロンビン及びサイトカインによって活性化され、それによって白血球に対して接着性になることから、この「再潅流損傷」が、虚血性ゾーンの血管内皮への白血球の付着に関連することが知られている（Ｒｏｍｓｏｎら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１９８３年、６７巻、１０１６〜１０２３頁）。これらの付着した白血球は、内皮を、また血流の回復によって救出されつつあるちょうどそのとき虚血性心筋を通り抜けて遊走することができる。
【０１３１】
炎症性腸疾患は、クローン病及び潰瘍性大腸炎と呼ばれる２種類の類似の疾患をまとめて表わす用語である。クローン病は、肉芽腫性炎症反応が、境界がはっきりした形で通常は経壁的に腸壁全層を巻き込むことを特徴とする特発性慢性の潰瘍狭窄性の炎症性疾患である。この疾患は、最も一般的には終末回腸及び／又は結腸に影響を及ぼすが、口から肛門までの消化管の任意の区域を巻き込む。潰瘍性大腸炎は、主として大腸粘膜及び粘膜下に限定される炎症性応答である。リンパ球及びマクロファージは、炎症性腸疾患の病変に多数存在し、炎症性損傷に寄与する可能性がある。
【０１３２】
さらに別の実施形態によれば、本発明は、有効成分として、式２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物Ｎｏ．１１）チエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物、及び薬剤として許容できる塩を含み、さらに薬剤として許容できる担体を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む、炎症性腸疾患の予防又は治療方法を提供する。本明細書で下記の実施例８に記載するように、化合物Ｎｏ．５及び化合物Ｎｏ．１１は、白血球及び好中球のマウス腹膜への浸潤を阻害した。白血球及び好中球の浸潤は炎症性腸疾患の特徴と見なされる。さらに、本明細書で下記の実施例１１は、化合物Ｎｏ．１１が、炎症性腸疾患マウスモデルにおいて大腸損傷を著しく抑制したことを実証した。図９及び１０に示すように、化合物Ｎｏ．１１の治療効果は、用量依存性であり、統計的に腹腔内投与後と経口投与後ではどちらも著しい。
【０１３３】
喘息は、様々な刺激に対する気管気管支樹の応答性を高めて、気管支気道の発作性狭窄を増強することを特徴とする疾患である。この刺激は、好塩基球、好酸球、及び好中球を動員する炎症の様々なメディエイタの放出を引き起こし、炎症性損傷を引き起こす。
【０１３４】
慢性関節リウマチは、主に関節の障害及び破壊を引き起こす慢性再発性炎症性疾患である。慢性関節リウマチは通常、まず手及び足の小関節に影響を及ぼすが、次いで手首、ひじ、足首、膝に影響を及ぼす。この関節炎は、滑膜細胞と、循環から関節の滑膜表層へ浸潤する白血球との相互作用に起因する。
【０１３５】
アテローマ性動脈硬化症は、動脈の疾患である。基本的な病変であるアテローマは、コアの脂質を繊維性皮膜が覆った、内膜内に隆起する病巣プラークからなる。アテローマは、動脈血流を弱め、影響を受けた動脈を弱体化する。心筋梗塞及び脳梗塞が、この疾患の主な結果である。マクロファージ及び白血球がアテローマに動員され、炎症性損傷に寄与する。
【０１３６】
本発明の薬剤組成物はさらに、器官又は移植片拒絶の治療に使用することができる。最近何年間かにわたって、皮膚、腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓、骨髄などの組織及び器官を移植するための外科手術技法の成功率に著しい改善があった。おそらく、未解決の主要な問題は、移植受容者において移植された同種移植片又は器官に対する免疫寛容を誘導する満足できる試剤の欠如である。同種異系細胞又は器官を宿主に移植すると、被移植体の免疫系が、移植された組織の破壊を招く、移植片における異物抗原に対する（宿主対移植片病）免疫応答を開始する可能性がある。ＣＤ８＋細胞、ＣＤ４細胞、及び単球がすべて移植組織の拒絶反応に関与する。セレクチンを阻害する本発明の化合物は、とりわけ同種異系抗原誘導の免疫応答を阻止し、それによってこのような細胞が移植された組織又は器官の破壊に参加しないようにするのに有用である（例えば、Ｇｅｏｒｃｚｙｎｓｋｉら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９９６年、８７巻、５７３〜５８０頁を参照）。
【０１３７】
本発明による薬剤組成物の関連する使用は、「移植片対宿主」病（ＧＶＨＤ）に関与する免疫応答を変調させる場合である。ＧＶＨＤは、免疫適格細胞が同種異系受容者に移動するときに起こる潜在的に致死的な疾患である。このような状況では、供給者の免疫適格細胞が、受容者の組織を攻撃する恐れがある。皮膚、腸上皮及び肝臓の組織が、しばしば標的となり、ＧＶＨＤの進行中に破壊される恐れがある。この疾患は、骨髄移植などで免疫組織が移植されている場合に特に深刻な問題を提示するが、それほど重症ではないＧＶＨＤが、心臓及び肝臓移植を含めて、他の場合にも報告されている。Ｌ−セレクチンによって媒介される供与細胞ホーミングパターンを変調させる本発明の化合物は、ＧＶＨＤの治療に有用である（Ｌｉ，Ｂ．、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００１年、３１巻、６１７〜２４頁）。
【０１３８】
本発明による薬剤組成物の別の使用は、癌及び転移の治療用である。本明細書で下記の実施例１３に記載するように、化合物Ｎｏ．１は、いくつかの腫瘍細胞系の成長を阻害した。患者の身体全体に広がるいくつかの癌の場合、細胞−細胞接着のプロセス、すなわち転移が起こらなければならない。具体的には、癌細胞は、遠位部位での転移増殖が促進されるように、その元の部位から遊走し、血管にアクセスできるようにならなければならない。このプロセスのクリティカルな局面は、周囲組織へ遊走する前のステップである、（血小板へのまた血管壁の内側を覆う内皮細胞への）癌細胞の接着である。このプロセスは、通常は細胞−細胞接着をブロックするのを支援する本発明の化合物の投与によって中断することができる。特に、Ｐ−セレクチンによって媒介されるプロセスが、転移に関与する（Ｖａｒｋｉ，Ａ．、及びＶａｒｋｉ，Ｎ．Ｍ．、Ｂｒａｚ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ  Ｒｅｓ．、２００１年、３４巻、７１１〜７頁）。
【０１３９】
本発明による薬剤組成物を、白血病細胞の血管外遊走及び腫瘍形成を含む急性骨髄性白血病などの白血病の治療に使用することも実施されている。実施例１４に記載するように、化合物Ｎｏ．１は、白血病細胞成長を阻害した。脈管形成障害の（予防も含めて）治療に有用な方法も本発明で実施されている。本明細書では「脈管形成障害」という用語は、腫瘍転移や例えば糖尿病性網膜症及び新生血管緑内障を含めて眼球新血管新生などの異常新血管新生が関与する状態を含む。
【０１４０】
本発明による薬剤組成物の別の使用は、多発性硬化症を治療する場合である。多発性硬化症は、ある種の白血球によって神経線維を被覆する絶縁鞘（ｉｎｓｕｌａｔｉｎｇ  ｓｈｅａｔｈ）であるミエリンの破壊が開始される特定の自己免疫反応の結果であると考えられる進行性神経性自己免疫性疾患である。Ｌ−セレクチンに対するマウスモノクローナル抗体は、多発性硬化症の動物モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）を抑制することを示した（Ａｒｃｈｅｌｏｓ，Ｊ．Ｊ．、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｓｃｉ．、１９９８年、１５９巻、１２７〜３４頁）。
【０１４１】
本発明はまた、有効成分であるチエノ［２，３−ｃ］ピリジン化合物２−［［４−［（ジエチルアミノ）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−３−（ベンゾチアゾル−２−イル）−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン（化合物Ｎｏ．１１）、及び薬剤として許容できる担体を含む薬剤組成物の治療上有効量を、それを必要とする被験者に投与するステップを含む多発性硬化症の予防又は治療方法も提供する。図１１に示すように、化合物Ｎｏ．１１は、２種の試験濃度でＥＡＥの症状を抑制した。
【０１４２】
本発明の式Ｉの化合物は、ＨＳ−ＧＡＧに直接結合し、したがってＨＳ−ＧＡＧによって媒介される疾患状態の治療に有用となり得ることもわかった。ＨＳ−ＧＡＧによって媒介される状態には、細胞−細胞、細胞−ウィルス、細胞−マトリックス及び細胞−タンパク質の相互作用によって媒介される状態が含まれる。ＨＳ−ＧＡＧによって媒介される状態の例としては、ウィルスの細胞への付着、細胞接着、血小板凝集、リンパ球接着及び遊走、及びアミロイド線維形成がある。
【０１４３】
したがって、別の実施形態によれば、本発明による薬剤組成物は、Ｃ型及びＢ型肝炎、サイトメガロウイルス感染症、呼吸器合胞体ウィルス感染症、ＡＩＤＳなどのウイルス性障害の治療（又は予防）にも有用である。
【０１４４】
さらに別の実施形態によれば、本発明の薬剤組成物は、アテローマ性動脈硬化症、アルツハイマー病及びＩＩ型糖尿病（インスリン非依存性糖尿病）を含めてアミロイド疾患、炎症性及び免疫障害、癌、骨変性（ｂｏｎｅ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ）、骨粗鬆症、骨関節症、腫瘍転移、及び糸球体腎炎を含めて腎疾患の治療又は予防に有用である。
【０１４５】
さらに別の実施形態によれば、本発明の薬剤組成物は、凝固障害の治療又は予防のために使用される。本発明の化合物は、トロンビン及び因子Ｘａの活性に対するヘパリン及び他の抗凝固性グリコサミノグリカンの作用に対抗するのに有用となり得、それどころか他の抗凝固性タンパク質にも影響を及ぼす。ヘパリンは、凝固阻止のためにルーチンで使用される。外因的に投与されたヘパリンと、凝固及び線繊維溶解経路のタンパク質との相互作用が詳細にまとめられている（例えば、Ｖａｎ  Ｋｕｐｐｅｖｅｌｔ，Ｔ．Ｈ．ら、Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ、１９９８年、２７３巻、１２９６０〜１２９６６頁を参照）。特に心肺バイパス術中にヘパリンを凝固阻止のためにルーチンで使用した後に、抗凝固作用が出血が脅威となる段階に達した場合、またヘパリン様凝固阻害剤を内因的に発生させる患者の場合、ヘパリンの効果を打ち消す必要がしばしばある。現在では、唯一ＦＤＡが承認した使用可能なヘパリンの解毒薬は、プロタミンである。プロタミンは、高濃度のアミノ酸のアルギニンを含有する魚精核からの塩基性タンパク質の混合物である。プロタミンは、ヘパリンで処置された人に注射すると、迅速にヘパリンと複合体を形成し、それによってヘパリンの活性を中和する。プロタミンは、ヒトにおける非分画ヘパリンに対して有効であるが、低分子量ヘパリンに対して、又は非ヘパリングリコサミノグリカン抗凝固剤であるオルガラン（登録商標）、すなわちコンドロイチン硫酸／ヘパラン硫酸／デルマタン硫酸の混合物に対して有効でない。また、プロタミンには、肺高血圧症を含めて、制御が困難であり、患者に重大な健康上のリスクをもたらす多数の副作用もある。また、プロタミンは、天然資源から得られるので、はっきりと規定されていない潜在的に可変な製品であり、用量の決定が問題となる可能性がある。はっきりと規定されたヘパリン−又は他のＧＡＧ−結合化合物なら、これらの特定の抗凝固性調製物が過量であることを打ち消すのに十分有用となり得る。Ｃａｒｓｏｎ及び同僚ら（Ｍｕｎｒｏ，Ｍ．Ｓ．ら、Ｔｒａｎｓ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ａｒｔｉｆ  Ｉｎｔｅｒｎ  Ｏｒｇａｎｓ、１９８３年、２７巻、４９９〜５０３頁）は、上皮／内皮細胞表面タンパク質から、トロンビン生成に対するヘパリンの効果を中和する能力を有するヘパリン結合ペプチドを同定したが、最適効果は、高濃度ペプチド、低濃度ヘパリン、かつ低濃度トロンビンの場合にしか見られなかった。本発明の小有機化合物は、これらのペプチドより安定であり費用効果が高いので、それらより実質的に好ましいはずである。したがって、本発明の化合物は、非分画ヘパリン、低分子量ヘパリン、又はオルガランの中和に有用となり得る。
【０１４６】
凝固及び線繊維溶解経路のタンパク質と内皮細胞表面ＰＧの複数の相互作用は通常、非血栓状態を生み出すために、内皮細胞の表面で均衡をとっている。本発明のヘパリン結合化合物なら、ヘパリンに結合でき、その抗凝固活性を低減でき、これが内皮細胞の表面で生じ、それによって血塊の形成を可能にするという点で、血小板第４因子（ＰＦ４）と同様の挙動を示し得る。
【０１４７】
本発明の化合物の考えられる追加の使用は、組織中のヘパリン受容体を循環性ヘパリンに結合させることなくブロックすることによって、ヘパリンが取り込まれ除去されるのを防ぎ、したがって循環中のヘパリンの半減期を長引かせることである。本発明の化合物を使用すると、ヘパリンの投与回数、及びその必要量が低減されるはずである。これは、皮下注射投与され、退院後の標準的抗凝固治療となりつつある低分子量ヘパリンを用いる在宅療法向けに特に有用になり得る。
【０１４８】
本発明の式Ｉの化合物は、ある種のセレクチンがＨＳ−ＧＡＧに結合するのを阻害する能力によって選択され、この特性が薬剤活性に寄与するが、この化合物が追加の作用機序を介して同時に又は相前後して好ましい薬剤効果を発揮することも無視するわけにはいかないと理解するべきである。したがって、本発明の一態様は、新規薬剤組成物の記述であること、また本出願人は、その予防又は治療効果を説明することができる特定の作用機序に拘泥されるつもりはないことを当業者なら理解されよう。
【０１４９】
ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用を阻害することができる本発明による新規化合物、その薬剤組成物、及びその使用を提供する本発明の原理は、下記の非限定的な例を参照してよりよく理解することができる。
（実施例）
【実施例１】
【０１５０】
式Ｉの化合物の一般的合成
Ｎｏｒａｖｙａｎらによって記述された反応スキームに従って、式Ｉの化合物を合成する（Ａ．Ｓ．Ｎｏｒａｖｙａｎら、Ｋｈｉｍ．−Ｆａｒｍ．Ｚｈ．、１９８０年、１４巻、３７〜４０頁）。本明細書で下記の式Ａの化合物（Ｒ１及びＲ２は、式Ｉと同様に定義される）を本明細書で下記の式Ｂの化合物の酸塩化物（式中、Ｒ３及びＲ４は、式Ｉと同様に定義される）と乾燥ベンゼン中、還流下でトリエチルアミンの存在下に反応させる。沈殿したトリエチルアミン塩酸塩の結晶をろ別し、ろ液をわずかに減圧下で蒸発させる。残渣を処理すると、式Ｉの標的化合物が収率６０〜８０％で得られる。
【０１５１】
【化５】
2006516610.tif 000006
【実施例２】
【０１５２】
化合物Ｎｏ．２９の合成
下記の化合物：２−［［４−［（４−メチル−ｌ−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｎｏ．２９）の合成を下記のとおり行った。
【０１５３】
２−アミノ−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド２．２５ｇ（１０ミリモル）の乾燥トルエン溶液に、乾燥トルエン３０ｍｌに溶かしたトリエチルアミン２．０ｇ（２０ミリモル）及びｐ−［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］ベンゾイルクロライド３．６ｇ（１２ミリモル）を添加した。反応混合物を３時間還流し、冷却した。沈殿したトリエチルアミン塩酸塩の結晶をろ別した。ろ液を真空中で蒸発させ、酢酸エチルを添加して残渣を結晶化させた。黄色の結晶を酢酸エチルで洗浄し、乾燥した。標的化合物を収率７２％で得た。融点２３２℃。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：７．８０〜８．１２（４Ｈ，ｍ，ベンゼン）、３，８（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２）、２．８２（８Ｈ，ｔ，ＣＨ２−ピペラジン）、２，２８〜２．４１（６Ｈ，ｍ，３ＣＨ２）、１．１４（３Ｈ，ｔ，ＣＨ３）、０．９０（３Ｈ，ｔ，ＮＣＨ３）。
【実施例３】
【０１５４】
化合物Ｎｏ．２８の合成
下記の化合物：２−［［４−［［エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイル］アミノ］−６−エチル−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド（化合物Ｎｏ．２８）の合成を下記のとおり行った。
【０１５５】
２−アミノ−６−エチル−４，５，６，７  テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド２．２５ｇ（１０ミリモル）の乾燥トルエン溶液に、乾燥トルエン３０ｍｌに溶かしたトリエチルアミン２．０ｇ（２０ミリモル）及びｐ−（（エチル（フェニルメチル）アミノ］スルホニル］ベンゾイルクロライド４．０ｇ（１２ミリモル）を添加した。反応混合物を３時間還流し、冷却した。沈殿したトリエチルアミン塩酸塩の結晶をろ別した。ろ液を真空中で蒸発させ、酢酸エチルを添加して残渣を結晶化させた。黄色の結晶を酢酸エチルで洗浄し、乾燥した。標的化合物を収率６５％で得た。融点２４６℃。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：８．０３〜８．１０（４Ｈ，ｍ，ベンゼン）、７．２８〜７．３３（５Ｈ，ｍ，ベンゼン）、４．３６（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２Ｐｈ）、３．５８（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２）、３．１８（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２）、２．５０〜２．９０（６Ｈ，ｍ，ＣＨ２）、１．３４（３Ｈ，ｔ，ＣＨ３）、０．８８（３Ｈ，ｔ，ＣＨ３）。
【実施例４】
【０１５６】
薬剤組成物
本発明の薬剤組成物を下記の処方例によって示す。
【０１５７】
処方例１
下記の材料を含む硬質ゼラチンカプセルを調製する。
【表１】
2006516610.tif 000007
上記の材料を混合し、硬質ゼラチンカプセルに３４０ｍｇずつ充填する。
【０１５８】
処方例２
錠剤製剤は、下記の材料を使用して調製する。
【表２】
2006516610.tif 000008
この成分をブレンドし、加圧して、２４０ｍｇ／錠の錠剤を形成する。
【０１５９】
処方例３
下記の成分を含有する乾燥散剤吸入用製剤を調製する。
【表３】
2006516610.tif 000009
有効成分をラクトースと混合し、混合物を乾燥散剤吸入用装置に添加する。
【０１６０】
処方例４
有効成分３０ｍｇ／錠を含有する錠剤は、下記のとおり調製する。
【表４】
2006516610.tif 000010
有効成分、デンプン、及びセルロースを米国篩メッシュ２０番に通し、よく混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を得られた粉末と混合し、次いで米国篩メッシュ１６番に通した。このようにして生成された顆粒を５０℃〜６０℃で乾燥し、米国篩メッシュ１６番に通した。次いで、予め米国篩メッシュ３０番に通したカルボキシメチルスターチナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、及びタルクをこの顆粒に添加し、混合した後、錠剤機で加圧して、重量１２０ｍｇ／錠の錠剤を得る。
【０１６１】
処方例５
有効成分４０ｍｇ／カプセルを含有するカプセルは、下記のとおり作製する。
【表５】
2006516610.tif 000011
有効成分、デンプン、及びステアリン酸マグネシウムをブレンドし、米国篩メッシュ２０番に通し、硬質ゼラチンカプセルに１５０ｍｇ量ずつ充填する。
【０１６２】
処方例６
有効成分２５ｍｇ／坐剤を含有する坐剤は、下記のとおり作製する。
【表６】
2006516610.tif 000012
有効成分を米国篩メッシュ６０番に通し、必要最小限の熱を用いて予め溶融させた飽和脂肪酸グリセリドに懸濁させる。次いで、この混合物を公称用量２．０ｇの坐剤型に注ぎ込み、放置して冷却する。
【０１６３】
処方例７
５．０ｍｌ服用当たり有効成分５０ｍｇを含有する懸濁剤は、下記のとおり作製する。
【表７】
2006516610.tif 000013
有効成分、スクロース、及びキサンタンガムをブレンドし、米国篩メッシュ１０番に通し、次いで予め作製した微結晶性セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウムの水溶液と混合する。安息香酸ナトリウム、着香剤、及び着色剤を水の一部で希釈し、攪拌しながら添加する。次いで、必要とされる体積を得るのに十分な量の水を加える。
【０１６４】
処方例８
有効成分１５ｍｇ／カプセルを含有するカプセルは、下記のとおり作製する。
【表８】
2006516610.tif 000014
有効成分、セルロース、デンプン、及びステアリン酸マグネシウムをブレンドし、米国篩メッシュ２０番に通し、硬質硬質ゼラチンカプセルに４２５ｍｇずつ充填する。
【０１６５】
処方例９
静脈内製剤は、下記のとおり調製することができる。
【表９】
2006516610.tif 000015
【０１６６】
処方例１０
局所用製剤は、下記のとおり調製することができる。
【表１０】
2006516610.tif 000016
白色軟質パラフィンを溶融するまで加熱する。流動パラフィン、及び乳化ロウを組み込み、溶解するまで攪拌する。有効成分を添加し、分散するまで攪拌を続ける。次いで、この混合物を、固化するまで冷却する。
【実施例５】
【０１６７】
式Ｉの阻害剤化合物による、Ｌ−セレクチン（Ｐ−セレクチン）のＨＳ−ＧＡＧへの結合の阻害を決定するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ
式Ｉの試験化合物の、Ｌ−セレクチンとＨＳ−ＧＡＧの相互作用を阻害する能力を評価するために、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ法を使用した。このアッセイ法は、特定の各化合物について５０％阻害（ＩＣ−５０）に必要とされる濃度を決定するのに適していた。このアッセイで、使用したＧＡＧは、ヘパリンであった。したがって、ウシ血清アルブミンに結合させたブタ腸粘膜ヘパリン（ヘパリン−ＢＳＡ；シグマカタログ番号Ｈ０４０３）を５ｍｇ／ｍｌで溶かしたリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ；ｐＨ６．５）を９６穴のポリスチレン製ＥＬＩＳＡプレート（ＮＵＮＣカタログ番号４４２４０４；０．１ｍｌ／穴）に添加し、４℃で終夜（ＯＮ）インキュベートした。インキュベートに続いて、このプレートを液浸によって脱イオン水、及びＰＢＳ（ｐＨ６．５）で十分洗浄した。次いで、ＥＬＩＳＡプレートを室温（ＲＴ）で１時間、ＢＳＡ（ＩＣＮカタログ番号１６００６９、３％、２００μｌ／ウェル）でブロックした。ブロックした後、このプレートを、脱イオン水で、次いでツィーン２０（シグマカタログ番号Ｐ−１３７９、０．０５％）を含むＰＢＳ（ｐＨ６．５）で洗浄した。化合物を合成、又はＣｈｅｍＤｉｖ  Ｌａｂｓ（米国カリフォルニア州サンディエゴ）から購入し、ＤＭＳＯに溶かし、ＰＢＳで希釈し、０．０１〜３００μＭの範囲の様々な濃度でこのウェルに添加した。ＢＳＡ（０．１％）及び塩化カルシウム（１ｍＭ）を補充したＰＢＳで溶かした組換えヒトＬ−セレクチン／ＩｇＧ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ番号７２８−ＬＳ）を、ＥＬＩＳＡプレート（１００μｌ／穴）に添加し、振盪しながら室温で６０分間インキュベートした。インキュベートに続いて、このプレートを脱イオン水で洗浄し、ツィーン２０を含むＰＢＳ（ｐＨ６．５）で３回洗浄した。ＢＳＡ（０．１％）及び塩化カルシウム（１ｍＭ）を補充したＰＢＳで希釈した抗ヒトＩｇＧペルオキシダーゼコンジュゲート（１：５０００；シグマ製品番号Ａ８６６７）を、ＥＬＩＳＡプレート（１００μｌ／穴）に添加し、振盪しながら室温で３０分間インキュベートした。次いで、このプレートを脱イオン水で洗浄し、ツィーン２０を含むＰＢＳ（ｐＨ６．５）で３回洗浄した。ペルオキシダーゼ基質クロモゲンであるＴＭＢ（Ｄａｋｏカタログ番号Ｓ１５９９）をＥＬＩＳＡプレートに添加し（１００μｌ／穴）、室温でインキュベートした。１５分後、ＥＬＩＳＡ反応停止液（塩酸１Ｎ、硫酸３Ｎ）を添加（２００μｌ／穴）して、ペルオキシダーゼを触媒とする比色反応を停止する。ＥＬＩＳＡプレートリーダ（Ｄｙｎａｔｅｃｈ  ＭＲ５０００）を使用して、試料の光学密度（ＯＤ）を４５０ｎｍにおいて測定した。データをグラフパッドプリズム（Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ）ソフトウェアで分析し、ＩＣ−５０値を求めた。組換えヒトＰ−セレクチン／ＩｇＧ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ番号１３７−ＰＳ）を使用した点以外は同様の方式で、Ｐ−セレクチンのアッセイを実施した。
【０１６８】
上記のアッセイで式Ｉの化合物が阻害活性を有することが立証された。表１に、阻害化合物の例を挙げる。
【０１６９】
【表１１−１】
2006516610.tif 000017
【表１１−２】
2006516610.tif 000018
【表１１−３】
2006516610.tif 000019
【表１１−４】
2006516610.tif 000020
【表１１−５】
2006516610.tif 000021
【表１１−６】
2006516610.tif 000022
【表１１−７】
2006516610.tif 000023
【表１１−８】
2006516610.tif 000024
アッセイはすべて少なくとも２回繰返し、代表的な結果を示す。
【０１７０】
さらに、ウシ血清アルブミン（シグマカタログ番号Ａ７６３８）に結合させたウシ腎臓ヘパラン硫酸（シグマカタログ番号Ｈ７６４０）を、本明細書で上記に記載したｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイで使用して、ヘパリンとは異なるＨＳ−ＧＡＧへのＬ−セレクチンの結合を実証し、阻害剤化合物による結合阻害を実証した。図８は、それぞれ異なる数種の式Ｉの阻害剤化合物による、Ｌ−セレクチンのウシ腎臓ヘパラン硫酸への結合の阻害を示している。
【実施例６】
【０１７１】
阻害剤化合物とヘパリン及び他のＨＳ−ＧＡＧとの直接相互作用を実証するためのアッセイ
アッセイ１．
Ｌ−セレクチン阻害剤化合物が実際にヘパリン及び他のＨＳ−ＧＡＧに直接結合することを実証するために、下記のとおり、Ｌ−セレクチンなしで、個々の化合物を固定化ヘパリンとインキュベートした。実施例５に記載したように、９６穴のＥＬＩＳＡプレートをヘパリン−ＢＳＡでコーティングし、次いでＢＳＡでブロックした。最終濃度０．１〜２００μＭの阻害剤化合物を、このＥＬＩＳＡプレート中で９０分インキュベートし、次いでインキューベーションバッファで洗浄した。洗浄した後、Ｌ−セレクチン／ＩｇＧを、化合物を加えてプレインキュベートしたウェルに添加した。同時に、別の対照ウェルで、Ｌ−セレクチンを阻害剤化合物と９０分間共インキュベート（ｃｏ−ｉｎｃｕｂａｔｅ）した。インキュベートに続いて、プレートに結合されたＬ−セレクチンを、西洋ワサビペルオキシダーゼに結合させた抗体で定量し、実施例５に記載したようにＯＤ測定を行った。プレインキュベーション又は共インキュベーション（ｃｏ−ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ）の実験で、阻害剤化合物Ｎｏ．５及びＮｏ．１１は、Ｌ−セレクチンのヘパリンへの結合に対して同じレベルの阻害作用を及ぼした。
【０１７２】
アッセイ２．
アッセイ１を拡張して、阻害剤化合物のヘパリン及び他のＨＳ−ＧＡＧへの直接結合の追加の証拠を実証した。６９穴のＥＬＩＳＡプレートを、ヘパリン−ＢＳＡでコーティングし、次いで上記に記載したように、ＢＳＡでブロックした。Ｌ−セレクチン結合を阻害するように予め決定した濃度の阻害剤化合物を、このＥＬＩＳＡプレート中で６０分インキュベートし、次いでインキューベーションバッファで洗浄した。洗浄した後、このプレートに、Ｌ−セレクチン／ＩｇＧを濃度を上げながら（５〜２５０μｇ／ｍｌ）添加し、９０分間インキュベートした。インキュベートした後、プレートに結合されたＬ−セレクチンを、西洋ワサビペルオキシダーゼに結合させた抗体で定量し、続いて実施例５に記載した光学密度測定を行った。Ｌ−セレクチン濃度がより高い（５０〜２５０μｇ／ｍｌ）場合、Ｌ−セレクチンは定量的に結合することが実証され、またこの阻害剤化合物はＬ−セレクチンのヘパリンへの結合を阻止することが実証され、したがってこれらの結果から、この阻害剤化合物はヘパリンと直接相互作用し、すなわち後者はＬ−セレクチン受容体であることが確認される。図７に、一例を示す。白三角でプロットした容量応答曲線（対照）は、阻害剤化合物Ｎｏ．１なしで、プレートをＬ−セレクチンとインキュベートした後に得られた結果を表す。
【実施例７】
【０１７３】
せん断流中における、阻害剤化合物による、白血球の内皮細胞への接着の阻害
ローレンス及びスプリンガーの方法（Ｃｅｌｌ、１９９１年、６５巻、８５９〜８７３頁）に従って、ヒトＴ−リンパ球をヒト内皮細胞層を通り抜けさせた。高せん断流において、遊走するＴ−リンパ球は、ＨＳ−ＧＡＧ−ＥＣＡＭ相互作用の結果として、内皮細胞に一時的にかつ間欠的に付着した。結果として起こるＴ細胞ローリングをビデオカメラで記録し、一定の時間中における規定面積当たりのローリング細胞数を決定した。可溶性ヘパリン（細胞表面ＧＡＧの競合相手）は、高せん断流条件下でのＴ細胞ローリングを停止させた。それぞれ２５μＭの化合物Ｎｏ．１、１１及び２５は、細胞ローリングをそれぞれ９０、９０及び７０％阻害した。
【０１７４】
【表１２】
2006516610.tif 000025
【実施例８】
【０１７５】
マウス腹膜への白血球及び好中球の浸潤モデル
ＢＡＬＢ／ｃマウス（６週齢、体重約２０ｇ、マウス１５匹／群）に、チオグリコレート（シグマ）を投与する１時間前に、ＤＭＳＯ／ツィーン／滅菌生理食塩水０．２ｍｌ中の阻害剤化合物を腹腔内注射した。対照群には、ビヒクルを与え、シャム対照にはチオグリコレートを与えなかった。マウスに、３％チオグリコレートブロス１ｍｌを腹腔内注射した（Ｘｉｅ，Ｘ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２０００年、２７５巻、３４８１８〜３４８２５頁）。マウスを３時間後に屠殺し、腹膜腔を、ＥＤＴＡ２ｍＭを含む氷冷生理食塩水５ｍｌで洗浄して、凝固するのを防いだ。赤血球溶解後に、白血球を血球計で計数した。チュルク染色した後、好中球を計数した。データを平均値±ＳＥＭで示し、スチューデントｔ−検定で統計的解析を行った。Ｐ＜０．０５の値を統計的有意を示すものと見なした。
【０１７６】
チオグリコレート投与で、腹膜腔における白血球蓄積が約３倍に増加した。化合物Ｎｏ．５及び化合物Ｎｏ．１１を含めて、阻害剤化合物の投与によって、腹膜腔への白血球の遊走が効率的に阻害された。好中球数を求めたときも、同様な結果が得られた。化合物Ｎｏ．５を、２ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、及び５０ｍｇ／ｋｇの３種類の用量でより詳細に試験した（図４）。この化合物は、白血球遊走の強力な阻害剤であることがわかった。すなわち、その浸潤を、用量５０ｍｇ／ｋｇで７５％、１０ｍｇ／ｋｇで５０％、２ｍｇ／ｋｇで２５％低減させた。ｉｎ  ｖｉｖｏでの白血球の遊走及び浸潤が、炎症、自己免疫及び他の障害の特徴であることはよく知られている。したがって、本発明の阻害剤化合物は、白血球浸潤をｉｎ  ｖｉｖｏで阻害する能力によって、これらの障害の治療に適用される。
【実施例９】
【０１７７】
カラゲナン誘発足浮腫
Ｂａｌｂ／ｃマウスの左後足に、試験化合物を投与して６０分後に、新たに調製した２％カラゲナン溶液０．０２ｍｌを注射することによって、急性浮腫を誘発させた（Ｔｏｒｒｅｓ，Ｓ．Ｒ．ら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２０００年、４０８巻、１９９〜２１１頁）。右足には、対照として生理食塩水０．０２ｍｌを与えた。右後足の足底領域下に、カラゲナンを注射し、カラゲナン攻撃の２、４及び２４時間後に、ミツトヨエンジニア（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ  ｅｎｇｉｎｅｅｒ）のマイクロメータを使用して、その足の厚さを測定し、左右足の差異を平均±ＳＥＭで表した。腹膜内投与した後、阻害剤化合物は、カラゲナン誘発足浮腫を大幅に低減した。図５に、化合物Ｎｏ．５の場合の用量応答曲線を示す。これらの結果から、ＧＡＧのＧＡＧ−ＥＣＡＭへの結合を阻害する化合物は抗炎症活性を示すことが実証される。
【実施例１０】
【０１７８】
遅延型過敏症（ＤＴＨ）
２％オキサゾロン（４−エトキシメチレン−２−フェニル−２−オキサゾリン−５−オン；米国ミズーリ州セントルイスのシグマ）のアセトン／オリーブオイル（４：１体積／体積）溶液を毛を剃った腹部（５０μｌ）及び各足（５μｌ）に局所塗布することにより、マウス（１５匹／群）を感作させた（Ｌａｎｇｅ−Ａｓｓｃｈｅｎｆｅｌｄｔ  Ｂ．ら、Ｂｌｏｏｄ、２００２年、９９巻、５３８〜５４５頁）。感作して５日後、右耳を１％オキサゾロン溶液１０μｌの局所塗布によって攻撃し、左耳はビヒクルだけで処置した。攻撃の１時間前に、化合物を投与した。攻撃の２４時間後に、マウス耳腫脹試験によって、炎症の範囲を測定した。統計的解析のために、独立スチューデントｔ−検定を用いた。
【０１７９】
図６に示すように、攻撃して２４時間後に、化合物Ｎｏ．５（用量３ｍｇ／ｋｇ、静脈内投与）はＤＴＨを対照値の５６％にまで抑制した。データは、ｐ＞０．００１で統計的に有意を示すものとした。
【実施例１１】
【０１８０】
トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）誘発大腸炎
対照マウス（１２匹／群）に、試験化合物（ＴＣ）ビヒクル（ツィーン８０、５％、２００μｌ）を腹腔内（ＩＰ）注射した。実験マウス（１２匹／群）に、ＴＣ（２００μｌ中、１０ｍｇ／ｋｇ、又は３５ｍｇ／ｋｇ）をＩＰ注射した。この対照及び実験マウスに、連続７日間、１日に１回注射した。最初のＩＰ注射の２４時間後に、この対照、実験、及び非処置群に、ＴＮＢＳ（ＮａＣｌ（０．９％）：ＥｔＯＨ（５０％）（１：１；８０μｌ、マウス））に溶かした１５０ｍｇ／ｋｇの直腸下投与により、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を誘発させた。ＴＮＢＳ投与の７日後に、マウスをすべて頚部脱臼によって殺した。マウスの結腸を解剖顕微鏡下（×５）で検査し、肉眼的病変を０〜１０の尺度（結腸損傷スコア）で評価した。図９に示すように、阻害剤化合物Ｎｏ．１１は、用量１０及び３５ｍｇ／ｋｇで結腸損傷を大幅に抑制した。図１０は、同じ実験モデルにおける化合物Ｎｏ．１１の経口投与の効果を示している。この化合物を、０．５％メチルセルロースを加えた懸濁剤として、７日間、１日に１回経口投与した。マウス１２匹を１群とし、対照マウスには０．５％メチルセルロースのみ与えた。化合物Ｎｏ．１１は、用量３、５０及び１００ｍｇ／ｋｇの経口投与で、結腸損傷を大幅に抑制した（図１０）。
【実施例１２】
【０１８１】
実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）
自己免疫状態では、自己抗原に反応するＴ細胞は、胸腺で除去されるのを免れ、末梢で活性化され、そこで特定の器官で損傷を引き起こす恐れがある。ルイスラットにおいて誘発される自己免疫性疾患モデルであるＥＡＥは、ヒトの疾患である多発性硬化症（ＭＳ）との類似点が多数ある。ＭＳ患者の脳病変で見られるＴ細胞は、ミエリン塩基性タンパク質ＭＢＰのｐ８７〜９９のペプチドで免疫したルイスラットの脊髄で見られるＴ細胞と同一のＴＣＲ接合部の再配列を生じている。さらに、ＭＳ患者におけるＴ及びＢ細胞応答は主にＭＢＰのｐ８７〜９９を対象としている。
【０１８２】
ＥＡＥは、ラットにおいてＭＢＰのｐ８７〜９９で免疫することによって誘発される。この阻害剤化合物を、ＥＡＥの症状が現れる１日前（ＥＡＥ誘発後１２日目）から始めて毎日１回、連続３日間、腹腔内注射投与する。臨床的疾患の程度を次のとおり評価する。０＝徴候なし、１＝尾の緊張の喪失、２＝後肢の麻痺；３＝四肢すべての麻痺、４＝瀕死状態の四肢麻痺動物。図１１に示すように、化合物Ｎｏ．１１は、用量１０及び３５ｍｇ／ｋｇで、ＥＡＥの臨床的徴候を大幅に抑制した。
【実施例１３】
【０１８３】
癌細胞系成長の阻害
各細胞系（ＭＣＦ７（乳癌）、ＮＣＩ−Ｈ４６０（非小細胞肺癌）、及びＳＦ−２６８（神経膠腫）をマイクロタイタープレート上でプレインキュベートした。次いで、阻害剤化合物を、０．１μＭの濃度で添加し、培養物を４８時間インキュベートした。アラマーブルーで終点を決定した（Ｇｒａｙ  ＧＤ、Ｗｉｃｋｓｔｒｏｍ  Ｅ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、１９９６年、２１巻、５号、７８０〜７８２頁）。各化合物ごとの結果を、非処置細胞に対する処置細胞の成長のパーセントで示す。この細胞系のいずれか１種の成長を約３２％以下に低減する化合物は、さらに進んだより詳細な研究に適していると見なされた（Ｍｏｎｋｓ  Ａら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、１９９１年、８３巻、７５７〜７６６頁）。化合物Ｎｏ．１は、細胞系ＭＣＦ７、ＮＣＩ−Ｈ４６０、及びＳＦ−２６８の成長をそれぞれ９９％、１００％、及び９９％抑制した。
【実施例１４】
【０１８４】
白血病細胞成長の阻害
各細胞系（ＲＰＭＩ−８２２６（多発性骨髄腫）、ＭＯＬＴ−４（急性リンパ性白血病）、ＣＣＲ−ＣＥＭ（ヒトＴ細胞白血病）、Ｋ５６２（慢性骨髄性白血病）、ＳＲ（慢性骨髄性白血病）をマイクロタイタープレート上でプレインキュベートした（Ｍｏｎｋｓ  Ａら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、１９９１年、８３巻、７５７〜７６６頁）。次いで、阻害剤化合物を、様々な濃度で（１０−８〜１０−４モル）で添加し、培養物を４８時間インキュベートした。スルホロダミンＢ（ＳＲＢ）タンパク質アッセイを使用して、細胞の生死又は成長を推定した（Ｓｋｅｈａｎ  Ｐら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、１９９０年、８２巻、１１０７〜１１１２頁）。化合物Ｎｏ．１は、細胞系ＲＰＭＩ−８２２６、ＭＯＬＴ−４、ＣＣＲ−ＣＥＭ、Ｋ５６２、及びＳＲの成長をそれぞれ１００％、１００％、１００％、１００％、及び９３％阻害した。細胞壊死は無視できるほどであった（１５％未満）。
【実施例１５】
【０１８５】
ヘパリン及び他の抗凝固性ＧＡＧの凝固への対抗作用を測定する方法
アッセイ１．因子Ｘａ活性に対する阻害剤化合物の逆転効果のｉｎ  ｖｉｔｒｏ決定方法
０．５Ｕ／ｍｌの抗因子Ｘａ活性を有する、０．３２％クエン酸ナトリウム又は正常ヒト血漿に溶かしたロベノックス（ローヌプーランローラー）、オルガラン（オルガノン）又は非分画ヘパリン（シグマ）の溶液を調製する。Ｓｔａｃｈｒｏｍ  Ｈｅｐａｒｉｎ（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ  Ｓｔａｇｏ）アッセイキットによって提供された標準物質とつき合わせて較正を行う（Ｄｉｇｎａｃ  Ｍら、Ｎｏｕｖ．Ｒｅｓ．Ｆｒ  Ｈｅｍａｔｏｌ．、１９９４年、３５巻、５４５〜５４９頁）。ヘパリン／ＡＴＩＩＩ複合体を３７℃、２分間で形成することができ、阻害剤化合物を添加し、その混合物をさらに１〜５分間インキュベートし、次いで因子Ｘａを添加し、最後に発色性基質を１分間添加し、４０５ｎｍにおける吸光度を読み取る。試験試料の吸光度に対するヘパリンを添加した対照の吸光度の増加分を、ヘパリンを添加した対照とヘパリンを添加していない対照の４０５ｎｍにおける吸光度の差異で割って、逆転率（％）を得る。
【０１８６】
アッセイ２．非分画ヘパリンによるトロンビン活性阻害に対する阻害剤化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ逆転効果
正常供給者から血漿を得る。トロンビン濃縮物（ヒトα−トロンビン、米国インディアナ州サウスベンドのエンザイムリサーチラボラトリーズ）を、凝固時間が２０〜２２秒になるように標定する。０．５ＩＵ抗トロンビン活性／ｍｌのヘパリンを添加する。ヘパリン単独の場合の凝固時間は、約３分である。この系における化合物の効果を試験するために、ヘパリンを血漿に添加して１分後に、化合物を０．１〜１００μＭの範囲の濃度で添加する。１分後に、トロンビンを添加し、凝固時間を決定する。
【０１８７】
アッセイ３．因子Ｘａ活性に対するロベノックスの効果を逆転させる阻害剤化合物のｉｎ  ｖｉｖｏ効果
ラット（３００〜４００ｇｍ）をケタミン／アセプロマジンで麻酔し、左頚静脈及び右大腿静脈にカニューレを挿入する。ロベノックスを注入する直前に血液を抜き取り、因子Ｘａ活性のベースラインを確立する。ロベノックス（生理食塩水０．１ｍｌ中４３ＩＵ抗ＦＸａ活性／ｋｇ、ヒトの場合に示唆された用量に基づく）を、続いてすぐに生理食塩水０．２ｍｌを、頚静脈カテーテル経由で注入する。３分間は、大腿静脈から３０秒ごとに血液（０．１ｍｌ）を採り、クエン酸ナトリウム中に集める。３分後に、リン酸緩衝生理食塩水０．１ｍｌに溶かした化合物を、続いて生理食塩水フラッシュ０．２ｍｌを頚静脈カテーテル経由で注入する。化合物を投与してすぐに採血を再開し、最初にロベノックスを注入してから１０分間は３０秒ごとに、その後は１５、２０、２５及び３０分後に採血する。試料を遠心して、血漿を得、Ｓｔａｃｈｒｏｍ  Ｈｅｐａｒｉｎ試験キットによる抗因子Ｘａ活性のアッセイによって残渣ロベノックスについて定量する。発色性因子Ｘａ基質を加えて１分間インキュベートした後、４０５ｎｍにおける吸光度を測定する。
【０１８８】
本発明は本明細書で上記に具体的に示され記載されたものに限定されないことを当業者なら理解されよう。そうではなくて、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲で定義される。
【図面の簡単な説明】
【０１８９】
【図１】Ｌ−セレクチンの固定化ヘパリンへの結合を示すグラフである。
【図２】固定化ヘパリンへのＬ−セレクチン／ＩｇＧの結合に対する可溶性ヘパリンの阻害を示すグラフである。
【図３】固定化ヘパリンへのＬ−セレクチン／ＩｇＧの結合に対する抗Ｌ−セレクチン抗体ＤＲＥＧＧ−５５の阻害を示すグラフである。抗βアミロイド抗体を対照として使用した。
【図４】マウス腹膜炎における好中球浸潤に対する化合物Ｎｏ．５の用量依存性阻害を示すグラフである。
【図５】足浮腫における化合物Ｎｏ．５の抗炎症特性を示すグラフである。
【図６】遅延型過敏症（ＤＴＨ）モデルにおいて静脈内注射した化合物Ｎｏ．５の抗炎症特性を示すグラフである。
【図７】化合物Ｎｏ．１（１００μＭ）の存在下又は非存在下におけるＬ−セレクチンの固定化ヘパリンへの結合を示すグラフである。
【図８】固定化ウシ腎臓ヘパラン硫酸へのＬ−セレクチンの結合に対する異なる阻害剤化合物の阻害を示すグラフである。
【図９】炎症性腸疾患（ＩＢＤ）マウスモデルにおいて腹腔内投与された試験化合物Ｎｏ．１１（ＴＣ１１）の治療効果を示すグラフである。
【図１０】炎症性腸疾患（ＩＢＤ）マウスモデルにおいて経口投与された試験化合物Ｎｏ．１１（ＴＣ１１）の治療効果を示すグラフである。
【図１１】多発性硬化症（実験的自己免疫性脳脊髄炎）ラットモデルにおける試験化合物Ｎｏ．１１の治療効果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図７】
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【図１１】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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