(57)【要約】【課題】アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物とその用途を提供する。【解決手段】本発明のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、局部虚血性疾患を治療する化合物で、内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)を保存、増加するメカニズムにより、局部虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物を生成することができ、虚血性疾患は、虚血性脳卒中、虚血性脳血栓症、虚血性脳閉塞症、酸欠虚血性脳症、虚血性心臓病、及び、虚血性腸病変等を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、Iの式を有する化合物で：
【化１】
2006527699.tif 000029
前記R1、R2、R6、R7は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPrから選択され、R3、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNから選択され、R4は、アリル、或いは、CnH2n+1且つ、n≧0，R8は、H、OH、OMeから選択されることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項２】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、IIの式を有する化合物で：
【化２】
2006527699.tif 000030
前記R1、R3は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNからなり、R2は、アリル、或いは、CnH2n+1、且つ、n≧0、R7は、H、OH、OMe、からなり、R4、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPrからなり、R6は、H、OH、O-アリル、OMeからなることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項３】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、IIIの式を有する化合物で：
【化３】
2006527699.tif 000031
前記R1、R2は、H、OH、O-アリル、OMe、OEt、OnPr、OiPrから選択され、R3、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CN、R4は、プロピレン、或いは、CnH2n+1且つ、n≧0，R6は、H、OH、O-アシル、OMeからなることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項４】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、IVの式を有する化合物で：
【化４】
2006527699.tif 000032
前記R1、R2、R5、R6は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPrから選択され、R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNから選択され、R7は、H、OH、O-アシル、OMeから選択されることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項５】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、IVの式を有する化合物で：
【化５】
2006527699.tif 000033
前記R1、R2は、H、アシル、Me、Et、nPr 、或いは、iPr からなり、R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNからなるから選択されることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項６】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、VIの式を有する化合物で：
【化６】
2006527699.tif 000034
前記R1、R2は、H、OH、O-アシル、OMe、F、C1、Br、NO2、或いは、CNからなり、R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPr、及び、R5は、H、OH、O-アシル、OMeから選択されることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項７】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、VIIの式を有する化合物で：
【化７】
2006527699.tif 000035
前記R1、R2、R5、R6は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPr、R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NO2、或いは、CN、R7は、H、OH、O-アシル、OMeから選択されることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項８】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物であって、VIIIの式を有する化合物で：
【化８】
2006527699.tif 000036
前記R1、R2は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPrから選択され、R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NO2、或いは、CNから選択され、R5は、H、OH、O-アシル、OMeから選択されることを特徴とするアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項９】
前記アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、局部虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物中に使用されることを特徴とする請求項１〜８の任意の一項に記載のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項１０】
前記アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、哺乳動物、或いは、人類の虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物中に使用されることを特徴とする請求項１〜８の任意の一項に記載のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項１１】
前記虚血性疾患は、虚血性脳卒中、虚血性脳血栓症、虚血性脳閉塞症、酸欠虚血性脳症、虚血性心臓病、及び、虚血性腸病変等を含むことを特徴とする請求項１０に記載のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項１２】
前記アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、哺乳動物、或いは、人類の虚血性疾患を治療するのに用いられることを特徴とする請求項１〜８の任意の一項に記載のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項１３】
前記虚血性疾患は、虚血性脳卒中、虚血性脳血栓症、虚血性脳閉塞症、酸欠虚血性脳症、虚血性心臓病、及び、虚血性腸病変等を含むことを特徴とする請求項１２に記載のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物。
【請求項１４】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、効果的な量の式Iの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【請求項１５】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、効果的な量の式IIの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【請求項１６】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、効果的な量の式IIIの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【請求項１７】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、
効果的な量の式IVの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【請求項１８】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、効果的な量の式Vの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【請求項１９】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、効果的な量の式VIの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【請求項２０】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、
効果的な量の式VIIの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【請求項２１】
虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせであって、効果的な量の式VIIIの化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含むことを特徴とする虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物の組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、局部虚血性疾患を治療する化合物に関するものであって、特に、内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)を保存、増加するメカニズムにより、局部虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物を生成するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
社会の発展、科学技術の進歩に伴い、人々の寿命も長くなっているが、年齢、飲食、肥満、運動の欠乏、ストレス等、多くの原因により疾病が生じ、中でも、虚血性疾患は、死亡原因の一つで、障害を残す主要原因でもあり、個人、家庭、社会、及び、国家に重大な衝撃と損失をもたらしている。よって、虚血性疾患に対する予防が非常に重要である。
【０００３】
虚血性疾患中の虚血性脳卒中は、発病率、死亡率、廃疾率、再発率が高く、中高年者によく見られる病気である。虚血性脳卒中とは、脳部に血液を供給する頭蓋外動脈、或いは、頭蓋内動脈で、閉塞性病変を発生し、脳組織が虚血酸欠になり、急性臨床症状が出現するもので、至急に供血がなされないと、神経細胞、ゲル質細胞、欠陥が壊死し、脳梗塞を形成する。
【０００４】
虚血性脳卒中は、血管を通す薬品、血栓溶解剤の組織性プラスミノーゲン活性化因子（Tissue Plasminogen Activator）が、現在、アメリカ食品、薬品管理局で許可された唯一の効果的な血栓卒中治療剤である。台湾では、２００１年に、衛生局の許可を得ている。しかし、脳出血の併発症を生じやすく、且つ、治療時効上、厳しい制限があり、いわゆる黄金時間というもので、卒中後、三時間以内に静脈注射するか、六時間以内に、脳血管撮影し、動脈内注射して、直接、血栓を溶解する。その他の公知の血を通す、抗凝血剤、血小板抑制剤等の薬品は、血栓が継続して拡大するのを防止するだけの作用で、すでに閉塞した血栓を溶解し、血路を通すことはできない。このほか、脳組織保護剤の使用（ピタセラム）も、効果的な治療方法ではあるが、この種の薬剤も、卒中後、六時間以内に使用しなければ、効果はない。近年の研究で、血栓溶解剤は、N-メチル-D-アスパラギン酸（NMDA）受容体の情報伝達を増強し、神経細胞の死亡を招き、病人の記憶が喪失したり、体温が下降するなどの副作用があり、血栓溶解剤により虚血性卒中を治療する意味が半減する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
よって、本発明は、アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物を提供し、化合物は、内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)を保存、増加するメカニズムを有し、局部虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物を生成して、効果的に、虚血性疾患を治療することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上述の目的を達成するため、本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式Iの構造を有する。
【化９】
2006527699.tif 000002
R1、R2、R6、R7は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPrから選択され；R3、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNから選択され；R4は、アリル、或いは、CnH2n+1且つn≧0から選択され；R8は、H、OH、OMeから選択される。
【０００７】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式IIの構造を有する。
【化１０】
2006527699.tif 000003
R1、R3は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNから選択され；R2は、アリル、或いは、CnH2n+1且つn≧0から選択され；R4、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPrから選択され；R6は、H、OH、O-アシル、OMeから選択される。
【０００８】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式IIIの構造を有する。
【化１１】
2006527699.tif 000004
R1、R2は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPrから選択され；R3、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNから選択され；R4は、アリル、或いは、CnH2n+1且つ、n≧0；R6は、H、OH、O-アシル、OMeから選択される。
【０００９】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式IVの構造を有する。
【化１２】
2006527699.tif 000005
R1、R2、R5、R6は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPrから選択され；R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNから選択され；R7は、H、OH、O-アシル、OMeから選択される。
【００１０】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式Vの構造を有する。
【化１３】
2006527699.tif 000006
R1、R2は、H、アシル、Me、Et、nPr、或いは、iPrから選択され；R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNから選択される。
【００１１】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式VIの構造を有する。
【化１４】
2006527699.tif 000007
R1、R2は、H、OH、O-アシル、OMe、F、C1、Br、NO2、或いは、CNから選択され；R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPrから選択され； R5は、H、OH、O-アシル、OMeから選択される。
【００１２】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式VIIの構造を有する。
【化１５】
2006527699.tif 000008
R1、R2、R5、R6は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPrから選択され；R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NO2、或いは、CNから選択され；R7は、H、OH、O-アシル、OMeから選択される。
【００１３】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式VIIIの構造を有する。
【化１６】
2006527699.tif 000009
R１、R２は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OｎPr、或いは、OiPrから選択され；R３、R４は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NO２、或いは、CNから選択され；R５は、H、OH、O-アシル、OMeから選択される。
【００１４】
本発明の化合物は、哺乳動物や人類の虚血性疾患を治療する薬品を製造するのに用いられ、具体的には、虚血性疾患は、虚血性脳卒中、虚血性脳血栓症、虚血性脳閉塞症、酸欠虚血性脳症、虚血性心臓病、及び、虚血性腸病変等を含む。
【００１５】
本発明が提供するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、血管を拡張する方法を利用し、公知技術の、閉塞された血栓を溶解し、血路を通じさせる方法よりも効果的である。アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、虚血性疾患を治療する時、病人に記憶喪失、体温下降等の副作用を生じさせない。
【００１６】
本発明は、更に、アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物が、局部虚血性疾患を予防、治療する薬物用途を開示し、アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物が、哺乳動物や人類の虚血性疾患を治療する薬品用途を開示する。
【００１７】
本発明は、更に、局部虚血性疾患を予防、治療する薬品組み合わせ物を提供し、効果的な量のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物と薬学上、受け入れられるキャリア、賦形剤等を含む。
【発明の効果】
【００１８】
本発明のアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)を保存、増加するメカニズムを有し、局部虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物を生成して、効果的に、虚血性疾患を治療する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
人体血管組織は、酸化窒素（nitric oxide、NO）を自己生成し、酸化窒素は、血管を拡張させるので、血圧調節と密接な関係がある。内生性酸化窒素は、血管平滑の作用中、重要な役割を果たし、離体主動脈環、局部血管床、及び、全身実験中、急なNO生成の阻害は、血管収縮、血圧上昇を招く。哺乳動物の体内で、酸化窒素の生成過程は、エルアルギニン（L-arginine）が、NO合成窒素の触媒下で、中間産物をエルシトルリン（L-citrulline）とNOに転換され、以下で示される。
【化１７】
2006527699.tif 000010
【００２０】
NOSは、主に三種類で、神経性（neuronal NOS、或いは、nNOS、type I NOS）、誘導性（inducible NOS、或いは、iNOS、type II NOS）及び、内皮性（endothelial NOS、或いは、eNOS、type III NOS）があり、eNOSは、血管張力を調節するもので、酸化窒素は、情報を伝達する功能と作用メカニズムを有し、場所によって異なる。eNOSの主な功能は、三種である。（１）神経シナプスが神経伝導要素となる時、脳部学習、及び、記憶と関係する。（２）血管内皮が、血管の平滑肌細胞を緩め、血管を拡張し、血圧を低下させる。（３）マクロファージ細胞が腫瘍細胞を損壊し、その繁殖を停止する。このほか、nNOSとeNOSは組み合わせ式で、カルシウムイオンとカルシウムカルモジュリンを先に組み合わせ、その後、更に、nNOS、或いは、eNOSを組み合わせて、触媒作用を生成する。iNOSは誘発式で、カルシウムイオンとカルシウムカルモジュリンを組み合わせなくてもよく、iNOSは、常に誘発を開始して、停止してはならず、何時間も作用するので、酸化窒素過度になり、酸化窒素が有害物質に変化する。公知では、eNOSを保存、或いは、増加するメカニズムを利用した研究が、心臓血管疾病を治療するものに集中しており（不整脈等、 Su MJ, et al, Drug Development Research, 2001, 52:446-453）、本発明は、新しい化合物により、このメカニズムを、卒中等の虚血性疾患を予防、治療する方面に応用するもので、以下で、このメカニズムを利用して、虚血性疾患を治療する方法と結果を説明する。
【００２１】
本発明は、局部虚血性疾患を予防、及び、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物を提供し、内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)を保存、増加するメカニズムにより、局部虚血性疾患を予防、及び、治療する。この化合物は、リリオデニン（liriodenine）で、式VIを、本発明の効果を検証する好ましい実施例とする。
【化１８】
2006527699.tif 000011
【００２２】
ここで、liriodenine化合物は、雄性SD系ラット（Male  Sprague-Dawley rat）に施用し、ラットの脳動脈閉塞性の脳虚血に対する作用を観察する。まず、ラットは、中大脳血管動脈閉塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）により、永久性脳虚血を生じ、続いて、中大脳動脈閉塞後の０、６、２４、及び、５４時間で、静脈注射5 ml/kgの溶媒（0.9% NaCl）を第一実験組とし、静脈注射0.1 mg/kgのliriodenineを第二実験組とし、0.1 mg/kgのN-メチル-D-アスパラギン酸（NMDA）受容体阻害薬MK−８０１を第三実験組とする。各組は、平均６匹のラットを使用し、ラットは、薬物注射前と注射後１５分、肛門による体温量測を実施し、中大脳動脈閉塞後第４日目に、各ラットを断頭して、脳部切片し、２％のクレゾールパープルにより染色し、各切片の虚血損傷面積と体積を記録し、その結果を表１、表２、及び、表３で示す。三者のデータ整理比較を表４で示し、実験結果を図１のような曲線に示すこともできる。図１は、本実験中の第一組と第二組の比較曲線図で、図２は、本実験中の第一組と第三組の比較曲線図である。上述の表と図式から、本発明により、虚血性損傷体積と面積を大幅に減少させることができることがわかる。体温では、表５、表６、及び、表７で示されるように、第一組の実験結果と比較して、本発明は、体温の大幅な変化が見られず、MK−８０１は、体温降下の不良反応を生成する。
【００２３】
続いて、図３、及び、図４で示される結果により、化合物liriodenineが、 eNOSを保護、或いは、eNOSを促進し、局部虚血性疾患を予防、治療する目的を達成することを検証する。
【００２４】
図３で示されるように、本発明のliriodenineの、ラットの心臓局部虚血３０分後、更に、２時間後に貫流作用後のeNOS蛋白に対する効果で、αチューブリンも標準量化の指標となる。この図式中、ａ図は、雄性ラットの正常状態下でのeNOSとαチューブリンを示し、ｂ図は、左冠動脈前下降枝(LAD) 結紮、並びに、賦形剤（vehicle）を含む溶液を再貫流した非閉塞領域のeNOSとαチューブリンの効果を示す図である。ｃは、LAD結紮、並びに、賦形剤を再貫流した非閉塞領域のeNOSとαチューブリンの効果を示す図である。ｄは、LAD結紮、並びに、1μMのliriodenine溶液を再貫流した非閉塞領域のeNOSとαチューブリンの効果を示す図である。これらのeNOSのαチューブリンに対する効果から、liriodenine溶液を再貫流して、心臓eNOSの効果を正常値に接近させ、本発明の化合物、liriodenineがeNOSを促進する効果、或いは、効果量を恒定維持する効果を証明する。
【００２５】
図４は、血清を除去した後、本発明のliriodenineの、ヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）のeNOS蛋白に対する効果を示した図で、密度画像ソフトにより、相関する蛋白増加級数対し定量を実行し、図中で示される結果は、相同の結果である三個の独立した実験の代表図形で、αチューブリンの効果量を標準量とした後、血清を除去したHUVEC  eNOSの量化恒定は１で、P＜0.05で、血清を除去したHUVEC  eNOSと比べて、顕著な差異があることを意味する。図４の実験結果から分かるように、liriodenine０．３、及び、１μM濃度処理による臍帯静脈内皮細胞のeNOSは増加し、この結果は、liriodenineが、eNOSを保護、或いは、eNOS生成を促進することを証明する。
【００２６】
これにより、本発明は、もう一つのメカニズムを利用し、即ち、eNOSを増加させて、白細胞と血小板粘附の抑制、血張力の調節など、内皮功能の完全性を維持する。遺伝子組み換えモデルは、それらの脳虚血中の作用を明確に示し、局部性脳虚血状況下で、eNOS遺伝子knockoutのラットが形成する梗塞が大きく、iNOS遺伝子のラットと野生型の梗塞を比較すると縮小し、nNOS遺伝子knockout2のラットが形成する梗塞も小さい。本発明は、雄ラットの脳虚血体積と面積を減少させると同時に、NMDA受容体阻害薬MK８０１のこれらの副作用もない。
【００２７】
更に、上述の化合物は、雄ラットを治療する以外に、その他の哺乳動物、及び、人類の虚血性疾患に対しても相同の効果を有し、虚血性疾患中、虚血性脳卒中以外に、虚血性脳血栓症、虚血性脳閉塞症、酸欠虚血性脳症、虚血性心臓病、及び、虚血性腸病変等の疾病に対しても、相同の効果を有する。
【表１】
2006527699.tif 000012
【表２】
2006527699.tif 000013
【表３】
2006527699.tif 000014
【表４】
2006527699.tif 000015
【表５】
2006527699.tif 000016
【表６】
2006527699.tif 000017
【表７】
2006527699.tif 000018
【００２８】
このほか、前述のeNOSを保存、増加するメカニズム、局部虚血性疾患を予防、治療する式VIの化合物は、
【化１９】
2006527699.tif 000019
R1、R2、R3、R4、及び、R5がどれもHである以外に、R1、及び、R2は、OH、OMe、F、C1、Br、NO2、或いは、CNで；R3、及び、R4は、OH、OEt、OnPr、OiPr、或いは、O-アシルで、；且つ、R5は、OH、或いは、OMeである。以上の異なる化合物は、どれも、人類、或いは、哺乳動物に対し、虚血性疾患を予防、治療する効果を有する。
【００２９】
上述の式VI以外に、虚血性疾患を予防、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式Iの化合物で、
【化２０】
2006527699.tif 000020
R1、R2、R6、R7は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPr；R3、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CN；R4は、アリル、或いは、CnH2n+1且つ、n≧0；R8は、H、OH、OMeである。
【００３０】
虚血性疾患を予防、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式IIの化合物で、
【化２１】
2006527699.tif 000021
R1、R3は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CN；R2は、アリル、或いは、CnH2n+1且つ、n≧0；R4、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPr；及び、R6は、H、OH、O-アシル、OMe等である。
【００３１】
虚血性疾患を予防、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式IIIの化合物で、
【化２２】
2006527699.tif 000022
R1、R2は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPr；R3、R5は、H、OH、O-アシル、OMe、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CN；R4は、アリル、或いは、CnH2n+1且つ、n≧0；及び、R6は、H、OH、O-アシル、OMeである。
【００３２】
虚血性疾患を予防、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式IVの化合物で、
【化２３】
2006527699.tif 000023
R1、R2、R5、R6は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、OiPr；R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CN；R7は、H、OH、O-アシル、OMeである。
【００３３】
虚血性疾患を予防、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式Vの化合物で、
【化２４】
2006527699.tif 000024
R1、R2は、H、アシル、Me、Et、nPr、或いは、iPr；及び、R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NH2、NO2、或いは、CNである。
【００３４】
虚血性疾患を予防、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式VIIの化合物で、
【化２５】
2006527699.tif 000025
R1、R2、R5、R6は、H、OH、OAc、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPr；R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NO2、或いは、CN；R7は、H、O-アシル、OMeである。
【００３５】
虚血性疾患を予防、治療するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、式VIIIの化合物で、
【化２６】
2006527699.tif 000026
R1、R2は、H、OH、O-アシル、OMe、OEt、OnPr、或いは、OiPr；R3、R4は、H、OH、O-アシル、OMe、F、Cl、Br、NO2、或いは、CN；及び、R5は、H、OH、O-アシル、OMeである。
【００３６】
前述の式I〜式VIIIで示される化合物は、薬学上、受け入れられるキャリア、或いは、賦形剤と共存し、キャリア、或いは、賦形剤は、通常、乳糖である。
【００３７】
以上で示されるアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物は、哺乳動物、及び、人類の虚血性疾患の治療に用いられ、虚血性疾患は、虚血性脳卒中、虚血性脳血栓症、虚血性脳閉塞症、酸欠虚血性脳症、虚血性心臓病、及び、虚血性腸病変等を含む。
【００３８】
アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物の各種類型、及び、達成する目的と効果を詳述した後、以下で、具体例により、アポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物の製造方法を説明する。
【実施例１】
【００３９】
２−９ジイソプロポキシ−１，１０―ジメトキシー７−オキソアポルフィン（３）  （2,9- Diisopropyloxy-1,10-dimethoxy-7-oxoaporphine、式VIIの化合物で、R1=R6= OMe，R2=R5=OiPr，R3=R4=R7=H）、及び、９−ヒドロキシー２−イソプロピルオキシー１、１０―ジメトキシー７−オキソアポルフィン（４）  （9-Hydroxy-2-isopropyloxy-1,10-dimethoxy-7-oxoaporphine，式VIIの化合物で、R1=R6=OMe，R2=OiPr，R3=R4=R7=H，R5=OH）を準備する。
【００４０】
１．２，９−イソプロピルオキシー１、１０−ジメトキシーN−メチルアポルフィン（2,9-Diisopropyloxy-1, 10-dimethoxy-N-methylaporphine，式Iの化合物で、R1=R7=OMe，R2=R6=OiPr，R3=R5=R8=H，R4=Me）を準備する。
【００４１】
ボルジン（Boldine）（１、１．６３、５mmol）、無水アルコール（５０ml）、無水炭酸カリウム（３グラム）、を順に、２５０mlの円底ビン中に入れ、７０℃の油浴中で攪拌し、更に、1小時内に、ヨウ化イソプロピル（3.4g20mmol）を加えた無水アルコール（10ml）溶液で、８時間反応させた後、室温になるまで冷却し、無機沈殿物をろ過して、更に、アルコールで沈殿物を洗浄する。ろ過液と洗浄液を減圧濃縮した後の残留物を、クロロホルム（１５０ml）に溶解し、１０％の水酸化ナトリウム（50ml）、及び、水（50ml x3）により、連続して、雑質を除去し、クロロホルム層は、更に、無水硫酸ナトリウムにより、脱水、減圧濃縮され、得られた残留物を、更に、アルカリ性アルミニウムゲルろ過クロマトグラフィー層析により分離し、クロロホルムにより、2,9-ジイソプロポキシ-1,10-ジメトキシ -N-メチルアポルフィン (2) （1.54g、歩留まり率75％）（2,9-diisopropyloxy-1,10-dimethoxy -N-methylaporphine）を得る。
【００４２】
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ1.40 (6H, d, J = 6.1 Hz, 2x CH3), 1.43 (6H, d, J = 6.2 Hz, 2x CH3), 2.52 (3H, s, NCH3), 3.64 (3H, s, 1-OCH3), 3.85 (3H, s, 10-OCH3), 4.54 (1H, m) and 4.59 (1H, m) (2x OCH), 6.56 (1H, s, H-3), 6.76 (1H, s, H-8), 8.06 (1H, s, H-11)。
【化２７】
2006527699.tif 000027
2、2,9-ジイソプロポキシ-1,10-ジメトキシ -7-オキサアポルフィン（３）（2,9-diisopropyloxy-1,10-dimethoxy-7-oxoaporphine），式VIIの化合物、R1=R6=OMe，R2=R5=OiPr，R3=R4=R7=H）を準備する。
【００４３】
四酢酸塩（95％，483mg，1.09mmol）を、化合物(2)（137mg，330nmol）の酢酸溶液（5ml）中に加え、室温下で、１２時間反応させる。反応液に水（150ml）を加え、クロロホルム（50ml x4）により、連続して抽出し、クロロホルム層は、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ml）、１０％のチオ硫酸ナトリウム（５０ml）、及び、水（５０ml×２）により、連続して洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより脱水、減圧濃縮して得られる残留物を、更に、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離し、クロロフィルで、２、９−ジイソプロピル−１、１０−ジメトキシ−７−オキサアポルフィンを抽出する。2,9-diisopropyloxy-1,10-dimethoxy-7- oxoaporphine(3)（68mg，歩留まり率50％）：m.p.82-840Cを得る; 
IR (KBr) γmax 2976, 2933, 1654, 1590, 1563, 1508, 1459, 1431, 1416, 1359, 1296, 1275, 1241, 1216, 1138, 1110, 1057, 1009, 9956, 925, 887, 864, 782 cm-1; 
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ 1.44 (6H, d, J = 6.1 Hz, 2x CH3), 1.53 (6H, d, J = 6.1 Hz, 2x CH3), 4.01 (3H, s, 1-OCH3), 3.85 (3H, s, 10-OCH3), 4.87 (2H, m) (2x OCH), 7.79 (1H, d, J =5.4 Hz, H-4), 7.96 (1H, s, H-8), 8.75 (1H, s, H-11), 8.86 (1H, d, J =5.4 Hz, H-5)；
13C NMR (50 MHz, CDCl3) δ21.7 (2C, q), 21.9 (2C, q), 56.0 (q), 60.4 (q), 70.9 (d), 71.2 (d), 107.2 (d), 110.6 (d), 112.2 (d), 120.2 (s), 121.3 (s), 123.2 (d), 126.7 (s), 128.8 (s), 135.4 (s), 14.5 9d), 145.3 (s), 147.8 (s), 151.5 (s), 154.6 (s), 154.8 (s), 181.3 (s);
ESI MS (positive): [M+H]+ 408。
【００４４】
3、9-ヒドロキシル基2-イソプロポキシ1,10-ジメトキシ7-オキサアポルフィン (4) （9-hydroxy-2-isopropyloxy-1,10-dimethoxy-7-oxoaporphine、式VIIの化合物、R1=R6=OMe，R2=R5=OiPr，R3=R4=R7=H）を準備する。
【００４５】
化合物(3)（50mg）の酢酸-硫酸溶液（96:4，5ml）を取り出し、この反応液は、窒素下で、1時間、加熱還流される。室温に冷却した後、減圧濃縮、中和（アンモニア水）され、クロロホルム抽出物（100ml x2）、クロロホルム層は、水（50ml x2）により洗浄、無水硫酸ナトリウムで除水、減圧濃縮し、得られた残留物は、更に、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離し、クロロフィルーメチルアルコール（97：3）で、オレンジ色の９−ヒドロキシル−２―イソプロポキシ1,10-ジメトキシ7-オキサアポルフィン（４）（１０mg、歩留まり率２２％）：m.p.２４０−２４２℃を抽出する。
IR (KBr) γmax 3422, 3008, 2977, 2932, 1728, 1651, 1593, 1513, 1461, 1417, 1380, 1351, 1280, 1247, 1213, 1149, 1116, 1059, 1013, 932, 894, 866, 822 cm-1; 
1H NMR (200 MHz, CD3OD) δ 1.51 (6H, d, J = 6.0 Hz, 2x CH3), 4.01 (3H, s, OCH3), 4.02 (3H, s, OCH3), 4.87 (1H, m, OCH), 7.25 (1H, s, H-3), 7.74 (1H, s, H-8), 7.83 (1H, d, J = 4.8 Hz, H-4), 8.63 (1H, d, J = 4.8 Hz, H-5), 8.68 (1H, s, H-11);
ESI MS (positive): [M+H]+ 366。
【実施例２】
【００４６】
1,10-ジメトキシ7-オキサアポルフィン (7) （1,10-Dimethoxy-7-oxoaporphine，式VIIの化合物、R1=R6=Me，R2=R3=R4=R5=R7=H）を準備する。
1、1,10-ジメトキシN-メチルアポルフィン(6)（1,10-dimethoxy-N-methylaporphine ，式Iの化合物、R１=R７=OMe，R２=R３=R５=R６= R８=H，R４=Me）を準備する。
【００４７】
円底ビン（５００ml）中に、ボルジン（boldine，(1)，10.0g  30.58mmol）、エタンシアン（350ml）、無水炭酸カリウム（8.4g，61mmol）、及び、5-クロロ-1-フェニルテトラゾール（5-chloro-1-phenyltetrazole）（TzCl，12.14g  33.64mmol）を、順に加入し、この混合物を加熱、還流し、２４時間反応させる。冷却後、無機塩をろ過し、更に、エタンシアンで沈殿物を洗浄し、ろ過液と洗浄液を減圧濃縮した後の残留物をクロロホルム（４００ml）に溶解し、水（２００ml×２）により雑質を抽出し、クロロホルム層は、無水硫酸ナトリウムで脱水、減圧濃縮され、得られた残留物を、更に、シリカゲル（５００g）カラムクロマトグラフィーにより分離し、クロロホルムーメチルアルコール（９９：１）により、２−９−Oビス（１−フェニルテトラゾール−５−yl）−１、１０−ジメトキシーN−メチルアポルフィン（2,9-O-bis (1-phenyltetrazol-5-yl) -1,10-dimethoxy-N-methylaporphine (5)（18g，歩留まり率96％））を得る：
【００４８】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ2.55 (3H, s, NCH3), 3.46 (3H, s, 1-OCH3), 3.76 (3H, s, 10-OCH3), 7.19 (1H, s, H-3), 7.31 (1H, s, H-8), 7.42-7.60 (6H, m) and 7.83-7.87 (4H, m) (C6H5 x 2), 8.04 (1H, s, H-11)。
【化２８】
2006527699.tif 000028
【００４９】
化合物（５）（８g）の酢酸溶液（５５ml）中に、１０％のパラジウム／活性炭（１g）を加え、１２０psi水素、及び、５０℃下で三日間反応させる。冷却後、珪藻岩により、パラジウム／活性炭を除去し、クロロホルムにより、ろ過物を洗浄する。ろ過液と洗浄液を減圧濃縮した後の残留物を、クロロホルム（２００ml）に溶解し、１０％の水産化ナトリウム水溶液（５０ml×２）、及び、水（１００ml×２）により雑質を抽出し、クロロホルムーメチルアルコール（９８：２）により、1,10-ジメトキシ-N-メチルアポルフィン(6)（4.12g  歩留まり率90％）：を得る。
【００５０】
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ2.55 (3H, s, NCH3), 3.82 (3H, s, 1-OCH3), 3.85 (3H, s, 10-OCH3), 6.76 (1H, dd, J = 2.7, 8.3 Hz, H-9), 6.87 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-2), 7.04 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-3), 7.16 (1H, d, J = 8.3 Hz, H-8), 7.89 (1H, d, J = 2.7 Hz, H-11)；
13C NMR (50 MHz, CDCl3) δ28.3 (t), 33.6 (t), 43.7 (q), 53.1 (t), 55.3 (q), 55.7 (q), 63.1 (d), 110.9 (d), 112.1 (d), 114.7 (d), 121.9 (s), 125.2 (s), 128.1 (d), 128.3 (s), 128.6 (d), 133.0 (s), 136.2 (s), 155.0 (s), 158.1 (s)。
【００５１】
2、1,10-ジメトキシ7-オキサアポルフィン(7) （1,10-Dimethoxy-7 -oxoaporphine，式VIIの化合物、R1=R6=Me，R2=R3=R4=R5= R7=H）を準備する。
【００５２】
タリウムトリアセテート（thallium triacetate）（８１６mg、２mmol）を化合物（６）（１４８mg、０．５mmol）に加入した酢酸溶液（１０ml）中、７０℃下で、1時間攪拌反応させる。反応液に水（１５０ml）を加え、クロロホルム（５０ml×４）により連続して抽出し、クロロホルム層は、更に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ml）、１０％のチオ硫酸ナトリウム（５０ml）、及び、水（５０ml×２）により、連続して洗浄し、無水硫酸ナトリウムにより脱水、減圧濃縮して得られる残留物を、更に、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離し、クロロホルムーメチルアルコール（９９：１）により、１−１０ジメトキシー７−オキサアポルフィン（７）（1,10-dimethoxy-7- oxoaporphine ）(7)（100mg、歩留まり率69％）を得る：
【００５３】
m.p.162-1640C; 
IR (KBr) γmax 2934, 2839, 1644, 1617, 1584, 1540, 1484, 1455, 1406, 1373, 1351, 1325, 1255, 1169, 1119, 1048, 1025, 985, 859, 810 cm-1; 
1H NMR (400 MHz, CDCl3-CD3OD, δ CHC137.24) δ3.79 (3H, s, 10-OCH3), 4.04 (3H, s, 1-OCH3), 6.88 (1H, dd, J = 2.4, 8.8 Hz, H-9), 7.47 (1H, d, J = 9.2 Hz, H-2), 7.73 (1H, d, J = 4.7 Hz, H-4), 7.77 (1H, d, J = 9.2 Hz, H-3), 8.29 (1H, d, J = 8.8 Hz, H-8), 8.35 (1H, d, J = 2.4 Hz, H-11), 8.64 (1H, d, J = 4.7 Hz, H-5)；
13C NMR (100 MHz, CDCl3-CD3OD, δ CDC13 77.0) δ55.2 (q), 56.3 (q), 112.3 (s), 113.5 (d), 113.8 (d), 119.7(d), 124.9 (d), 125.0 (s), 125.9 (s), 130.7 (d), 130.8 (d), 132.3 (s), 136.6 (s), 141.8 (d), 144.6 (s), 159.0 (s), 164.2 (s), 180.7 (s); 
ESI MS (positive): [M+Na]+ 314。
【００５４】
本発明は、内皮型一酸化窒素合成酵素(eNOS)を保存、増加するメカニズムにより、局部虚血性疾患を予防、及び、治療する薬物を生成するアポルフィン、及び、ケトンアポルフィン化合物を提供し、全ての虚血性疾患は、eNOSの保存、増加により、予防、及び、治療が可能である。且つ、虚血性疾患を治療する時、病人に記憶喪失、体温低下等の副作用を生じさせない。血管拡張の方式を利用し、現有の閉塞された血栓を溶解し、血路を通じさせる方法よりも効果的である。
【００５５】
本発明では好ましい実施例を前述の通り開示したが、これらは決して本発明に限定するものではなく、当該技術を熟知する者なら誰でも、本発明の精神と領域を脱しない範囲内で各種の変動や潤色を加えることができ、従って本発明の保護範囲は、特許請求の範囲で指定した内容を基準とする。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】実験中の第一組と第二組の結果比較を示した曲線図である。
【図２】実験中の第一組と第三組の結果比較を示した曲線図である。
【図３】本発明のliriodenineを局部虚血３０分後に使用し、2時間後、再度貫流作用後のｅNOS蛋白とαチューブリンの効果を示す図である。
【図４】本発明のliriodenineを人体の臍帯静脈血管内皮細胞（HUVEC）に使用したｅNOS蛋白の効果を示す図である。
【図１】
2006527699.tif 000037
【図２】
2006527699.tif 000038
【図３】
2006527699.tif 000039
【図４】
2006527699.tif 000040
【国際調査報告】
2006527699.tif 000041
2006527699.tif 000042
2006527699.tif 000043
2006527699.tif 000044
2006527699.tif 000045
2006527699.tif 000046