(57)【要約】本発明は、式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲート、これらの放射性医薬品としての使用、これらの合成方法、及びかかる方法で使用される合成中間体に関する。【化１】2006523658.tif 000080式中、Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−である。
2006523658.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
【化１】
2006523658.tif 000058
式中、Ｒ１は、アルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、又はジオールもしくはＮ末端セリン残基のような官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものであり、
Ｒ２は、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド及びチオセミカルバジドから選択される基、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基であり、
Ｒ３は、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドから選択される基、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基であり、
Ｒ４は、アルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、又はジオールもしくはＮ末端セリン残基のような官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものである。
【化２】
2006523658.tif 000059
式中、Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、
式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物におけるリンカー基は以下の群から選択される。
【化３】
2006523658.tif 000060
式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
ｐは０又は１の整数であり、
ＺはＯ又はＳである。
【請求項２】
式（Ｉａ）の化合物と式（ＩＩａ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩａ）の化合物と式（ＩＶａ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖａ）又は（ＶＩａ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
【化４】
2006523658.tif 000061
式中、Ｒ１及びＲ４は、請求項１で定義した通りであり、
式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）の化合物におけるリンカー基は各々Ｃ１〜６０ヒドロカルビル基、好適にはＣ１〜３０ヒドロカルビル基であって、適宜酸素又は窒素のような１〜３０個のヘテロ原子、好適には１〜１０個のヘテロ原子を含むものである。
【化５】
2006523658.tif 000062
式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、リンカー基は式（ＩＩａ）又は（ＩＶａ）の化合物に関して定義した通りである。
【請求項３】
式（ＶＩＩ）の化合物と式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）又は（ＸＩ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＩＩ）〜（ＸＶ）の化合物を得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
【化６】
2006523658.tif 000063
【化７】
2006523658.tif 000064
式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−、好ましくは−Ｏ−であり、
ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。
【化８】
2006523658.tif 000065
式中、Ｘは、式（ＶＩＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ｍ及びｎは式（ＶＩＩＩ乃至ＸＩ）の化合物に関して定義した通りである。
【請求項４】
式（ＸＶＩ）の化合物と式（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物を得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
【化９】
2006523658.tif 000066
式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。
【化１０】
2006523658.tif 000067
式中、ｍは１〜１０の整数であり、ｎは１〜２０の整数であり、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−である。
【化１１】
2006523658.tif 000068
式中、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、
ｍ、ｎは、式（ＸＩＩＩ）〜（ＸＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ＹはＨ、アルキル又はアリール部分である。
【請求項５】
前記ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログである、請求項１乃至４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
前記ベクターが以下のフラグメントを含む、請求項５記載の方法。
【化１２】
2006523658.tif 000069
【請求項７】
前記ベクターが式（Ａ）のものである、請求項５又は請求項６記載の方法。
【化１３】
2006523658.tif 000070
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は以下の式のものであり、
【化１４】
2006523658.tif 000071
式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。
【請求項８】
請求項１で定義した式（ＩＩ）の化合物、又は請求項２で定義した式（ＩＩａ）の化合物であって、式（ＩＩ）の化合物においてリンカーがフェニルであるときはＲ２がアミノキシ（好適にはＯＮＨ２）であることを条件とする化合物。
【請求項９】
式（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物。
【化１５】
2006523658.tif 000072
式中、ｍは１〜１０の整数であり、ｎは１〜２０の整数であり、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−である。
【請求項１０】
請求項１で定義した式（ＩＶ）の化合物又は請求項２で定義した式（ＩＶａ）の化合物であって、
（ｉ）式（ＩＶ）の化合物においてリンカーがフェニルではなく、
（ｉｉ）式（ＩＶａ）の化合物においてリンカーがフェニルでも、ハロ、ヒドロキシ又はベンジルオキシで置換されたフェニルでもないことを条件とする化合物。
【請求項１１】
式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）又は（ＸＩ）の化合物。
【化１６】
2006523658.tif 000073
式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−、好ましくは−Ｏ−であり、
ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、式（Ｘ）の化合物ではｎが０ではないことを条件とする。
【請求項１２】
請求項１で定義した式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物、或いは請求項２で定義した式（Ｉａ）又は（ＩＩＩａ）の化合物。
【請求項１３】
前記ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログである、請求項１２記載の化合物。
【請求項１４】
前記ベクターが式（Ａ）のものである、請求項１２又は請求項１３記載の化合物。
【化１７】
2006523658.tif 000074
式中、Ｘ７は、−ＮＨ２又は以下の式のものであり、
【化１８】
2006523658.tif 000075
式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。
【請求項１５】
請求項１で定義した式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物。
【請求項１６】
請求項２で定義した式（Ｖａ）又は（ＶＩａ）の化合物。
【請求項１７】
請求項３で定義した式（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）の化合物。
【請求項１８】
請求項４で定義した式（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）の化合物。
【請求項１９】
前記ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログである、請求項１５乃至請求項１８のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２０】
前記ベクターが以下のフラグメントを含む、請求項１９記載の化合物。
【化１９】
2006523658.tif 000076
【請求項２１】
前記ベクターが、式（Ａ）のものである、請求項１９記載の化合物。
【化２０】
2006523658.tif 000077
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は以下の式のものであり、
【化２１】
2006523658.tif 000078
式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。
【請求項２２】
次式の化合物。
【化２２】
2006523658.tif 000079
【請求項２３】
請求項１５乃至請求項２２のいずれか１項記載の化合物の有効量を、薬学的に許容される１種以上の補助薬、賦形剤又は希釈剤と共に含む、放射性医薬品組成物。
【請求項２４】
医療用の、請求項１５乃至２２のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２５】
インビボイメージング法で使用される放射性医薬品を製造するための、請求項１５乃至請求項２２のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項２６】
ヒト又は動物の身体の画像を生成する方法であって、請求項１５乃至請求項２２のいずれか１項記載の化合物を身体に投与し、ＰＥＴを用いて化合物が分布した身体の少なくとも一部の画像を生成することを含む方法。
【請求項２７】
癌に付随する症状に作用する薬剤、好ましくは血管形成を抑制する薬剤によるヒト又は動物の身体の治療の効果をモニターする方法であって、請求項１９乃至請求項２２のいずれか１項記載の化合物を身体に投与し、及び細胞受容体によるコンジュゲートの取込みを検出することを含み、投与及び検出を、適宜、しかし好ましくは、上記薬剤による治療前、治療中及び治療後に行う方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、陽電子放出核種で標識した生物活性ベクターを含む診断薬及び放射線診断薬に関する。本発明はさらに、ベクターの［１８Ｆ］フッ素化法及び試薬に関するが、ベクターとは生物学的標的に特異的な親和性を示す分子であると定義され、好ましくはペプチドである。得られた１８Ｆ標識コンジュゲートは放射性医薬品、特に陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）用の放射線医薬品として有用である。
【背景技術】
【０００２】
画像診断用放射標識生物活性ペプチドの応用は核医学において重要性を増しつつある。特定の細胞型と選択的に相互作用する生物活性分子は、放射能を標的組織に送達するのに有用である。例えば、放射標識ペプチドは、画像診断及び放射線治療のための腫瘍、梗塞及び感染組織への放射性核種の送達に多大な可能性をもつ。１８Ｆは半減期が約１１０分であり、多くの受容体イメージング検査に格好の陽電子放出核種である。したがって、１８Ｆ標識生物活性ペプチドは、ＰＥＴで多種多様な疾患の定量的検出及び性質決定に有用性を保つので、多大な臨床的将来性がある。
【特許文献１】国際公開第０１／７７４１５号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０３／００６４９１号パンフレット
【非特許文献１】Ｗａｈｌ他、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｓ．  ３７，  ６８６１（１９９６）
【非特許文献２】Ａｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．及びＳｈｅｐｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．；”Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”；  ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ：  Ｏｘｆｏｒｄ，  １９８９
【非特許文献３】Ｂｒａｓｋ他、Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．  １１（２００１）  ６９７−７００
【非特許文献４】Ｈａｋａ他、Ｊ．Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｐｄｓ．  ＆  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍｓ  １９８９  ２７（７）８２３
【非特許文献５】Ｂｏｒｄｅｎ他、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，  １９８５，  ５０，  ５３１−５３４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
１８Ｆ標識ペプチドの問題の一つは、既存の１８Ｆ標識剤は調製に時間がかかることである。ペプチド及びタンパク質の１８Ｆでの効率的な標識は、好適な補欠分子族を用いたときにしか達成されない。かかる補欠分子族としては、Ｎ−スクシニミジル−４−［１８Ｆ］フルオロベンゾエート、ｍ−マレイミド−Ｎ−（ｐ−［１８Ｆ］フルオロベンジル）−ベンズアミド、Ｎ−（ｐ−［１８Ｆ］フルオロフェニル）マレイミド、及び４−［１８Ｆ］フルオロフェナシルブロミドを始めとして幾つか文献に記載されている。現在ペプチド及びタンパク質の１８Ｆ標識に用いられている方法はほとんどすべてフッ素標識シントンの活性エステルを利用する。ペプチド及びタンパク質は、活性エステルと反応し得る官能基を複数含んでいる可能性があるので、こうした現行法は部位特異的ではない。例えば、リジン残基を３個含有するペプチドは、標識シントンに対して反応性がすべて等しいアミン官能基を３個有する。したがって、穏和な条件下で１８Ｆを特にペプチドに迅速かつ化学選択的に導入して１８Ｆ標識生成物を高い放射化学的収率及び純度で得ることができる１８Ｆ標識補欠分子族及び方法に対するニーズが依然として存在する。さらに、臨床の場での放射性医薬品の合成を容易にする自動化に適した方法に対するニーズも存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化法を提供する。
【０００５】
【化１】
2006523658.tif 000003
【０００６】
式中、Ｒ１は、アルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、又はジオールもしくはＮ末端セリン残基のような官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものである。
【０００７】
Ｒ２は、水性緩衝液のような穏和な条件下で、Ｒ１と部位特異的に反応して安定なコンジュゲートを与える官能基である。Ｒ２としては、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドのようなアンモニア誘導体があり、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基である。
【０００８】
Ｒ３は、Ｒ４と部位特異的に反応する官能基である。Ｒ３としては、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドのようなアンモニア誘導体があり、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基である。
【０００９】
Ｒ４は、アルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、又はジオールもしくはＮ末端セリン残基のような官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものである。
【００１０】
【化２】
2006523658.tif 000004
【００１１】
式中、Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。
【００１２】
式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物におけるリンカー基は以下の群から選択される。
【００１３】
【化３】
2006523658.tif 000005
【００１４】
式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
ｐは０又は１の整数であり、
ＺはＯ又はＳである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物におけるリンカー基は、得られる式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートにおける好ましい排出特性など、良好なインビボ薬物動態が得られるように選択される。親油性及び／又は電荷の異なるリンカー基を使用することによって、診断の必要性に応じてペプチドのインビボ薬物動態を大きく変化させることができる。例えば、式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを腎排泄によって身体から除去することが望まれる場合には親水性リンカーを使用し、肝胆道排泄による除去が望ましい場合には疎水性リンカーを使用する。ポリエチレングリコール部分を含むリンカーは血液クリアランスが遅いことが判明しており、状況によっては望ましい。
【００１６】
好適には、Ｒ１アルデヒドは、１，２−ジオール又は１，２アミノアルコール基を含有する前駆体官能化ベクターのインサイツ酸化によって生成させる。例えば、後者は、Ｗａｈｌ他のＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｓ．  ３７，  ６８６１（１９９６）に記載のアミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ−Ｓｅｒ）−ＯＨを用いた合成でペプチド配列に直接挿入することができる。同様に、式（ＩＶ）の化合物のＲ４アルデヒドは、前駆体の酸化によって生成し得る。
【００１７】
式（Ｉ）及び（ＩＶ）の化合物においてそれぞれＲ１又はＲ４部分の生成に使用し得る好適な酸化剤としては、過ヨウ素酸塩、過ヨウ素酸、パラ過ヨウ素酸、メタ過ヨウ素酸ナトリウム及びメタ過ヨウ素酸カリウムが挙げられる。
【００１８】
式（Ｉ）及び（ＩＶ）の化合物並びに本発明の関連する態様におけるＲ１及びＲ４は、好ましくは−ＣＨＯ、＞Ｃ＝Ｏ、−ＣＨ（−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）のような−ＣＨ（−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル−Ｏ−）、及び−ＣＨ（ＯＣＨ３）２のような−ＣＨ（ＯＣ１〜４アルキル）２から選択され、好ましい態様では、Ｒ１及びＲ４は−ＣＨＯである。
【００１９】
式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物並びに本発明の関連する態様におけるＲ２及びＲ３は、好ましくは−ＮＨＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、及び−ＯＮＨ２から選択され、好ましくは−ＯＮＨ２である。
【００２０】
式（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物並びに本発明の関連する態様におけるＹは、好ましくはＨ、Ｃ１〜６アルキル（メチルなど）又はフェニルである。
【００２１】
この反応は、適当な溶媒、例えばｐＨ域２〜１１、好適には３〜１１、さらに好適には３〜６の水性緩衝液中、５〜７０℃の適度な温度、好ましくは室温で実施し得る。
【００２２】
本発明は、化学選択性の高い放射標識法を提供し、ペプチド又はベクター前駆体の合成時に標識の正確な導入部位を予め選択できる。ライゲーション反応はベクターの予め選定した所定の部位で起こり、生成する可能性のある生成物は１種類である。この方法は化学選択的であり、多種多様なペプチド、生体分子及び低分子量薬剤全般に応用できると考えられる。
【００２３】
別の態様では、本発明は、式（Ｉａ）の化合物と式（ＩＩａ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩａ）の化合物と式（ＩＶａ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖａ）又は（ＶＩａ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化法を提供する。
【００２４】
【化４】
2006523658.tif 000006
【００２５】
式中、Ｒ１及びＲ４は、それぞれ式（Ｉ）及び（ＩＶ）の化合物に関して上記で定義した通りであり、
式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）の化合物におけるリンカー基は各々Ｃ１〜６０ヒドロカルビル基、好適にはＣ１〜３０ヒドロカルビル基であって、適宜酸素又は窒素のような１〜３０個のヘテロ原子、好適には１〜１０個のヘテロ原子を含むものである。好適なリンカー基としては、アルキル、アルケニル、アルキニル鎖、芳香族、ポリ芳香族及びヘテロ芳香族環、さらにエチレングリコール、アミノ酸又は炭水化物サブユニットを含むポリマーが挙げられる。
【００２６】
【化５】
2006523658.tif 000007
【００２７】
式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、リンカー基は、式（ＩＩａ）又は（ＩＶａ）の化合物に関して定義した通りである。
【００２８】
「ヒドロカルビル基」という用語は、炭素と水素からなる有機置換基をいい、かかる基は、飽和、不飽和又は芳香族部分を含んでいてもよい。
【００２９】
好ましい態様では、本発明は、式（ＶＩＩ）の化合物と式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）又は（ＸＩ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＩＩ）〜（ＸＶ）の化合物を得ることを含む放射性フッ素化法を提供する。
【００３０】
【化６】
2006523658.tif 000008
【００３１】
【化７】
2006523658.tif 000009
【００３２】
式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−、好ましくは−Ｏ−であり、
ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。
【００３３】
【化８】
2006523658.tif 000010
【００３４】
式中、Ｘは、式（ＶＩＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ｍ及びｎは、式（ＶＩＩＩ〜ＸＩ）の化合物に関して定義した通りである。
【００３５】
反応は、適当な溶媒、例えばｐＨ域２〜１１、好適には３〜１１、さらに好適には３〜６の水性緩衝液中、５〜７０℃の適度な温度、好ましくは室温で実施し得る。
【００３６】
式（Ｉ）もしくは（ＩＩＩ）のベクター化合物又は式（ＩＩ）もしくは（ＩＶ）のシントンのアミン部分を官能基として使用する場合、また本発明のさらに具体的に記載した態様においても、得られたシッフ塩基を安定化させるための還元段階を含んでいると有用である考えられる。この段階での好適な還元剤は、当業者に周知であり、水素化ホウ素ナトリウム及びシアノ水素化ホウ素ナトリウムが挙げられる。
【００３７】
別の好ましい態様では、本発明は、式（ＸＶＩ）の化合物と式（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物を得ることを含んでなる放射性フッ素化法を提供する。
【００３８】
【化９】
2006523658.tif 000011
【００３９】
式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。
【００４０】
【化１０】
2006523658.tif 000012
【００４１】
式中、ｍ及びｎは、前述の化合物に関して定義した通りであり、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−である。
【００４２】
【化１１】
2006523658.tif 000013
【００４３】
式中、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、
ｍ、ｎは、式（ＸＩＩＩ〜ＸＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ＹはＨ、アルキル又はアリール部分である。
【００４４】
この反応は、適当な溶媒、例えばｐＨ域２〜１１、好適には３〜１１、さらに好適には３〜６の水性緩衝液中、５〜７０℃の適度な温度、好ましくは室温で実施し得る。
【００４５】
式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）並びに本発明のその他の態様では、特記しない限り、標識に適したベクターはペプチドであり、ソマトスタチンアナログ、例えばオクトレオチド、ボンベシン、血管作用性小腸ペプチド、走化性ペプチドアナログ、αメラニン細胞刺激刺激ホルモン、ニューロテンシン、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチドとそのアナログ、ヒトプロインスリン連結ペプチド、エンドセリン、アンジオテンシン、ホルミル−ノルロイシル−ロイシル−フェニルアラニル−ノルロイシル−チロシル−リジンが挙げられる。標識に好ましいペプチドはＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチドとそのアナログ、例えば国際公開第０１／７７４１５号及び同第０３／００６４９１号に記載されたものである。好ましいペプチドは以下のフラグメントを含む。
【００４６】
【化１２】
2006523658.tif 000014
【００４７】
ある具体的態様では、式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）のペプチドは式（Ａ）のものである。
【００４８】
【化１３】
2006523658.tif 000015
【００４９】
式中、Ｘ７は、−ＮＨ２又は次式式のものである。
【００５０】
【化１４】
2006523658.tif 000016
【００５１】
式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。
【００５２】
当業者には自明であろうが、本発明の方法は、その他の生体分子、例えばタンパク質、ホルモン、オリゴヌクレオチド、抗体フラグメントなど、並びに薬剤様低分子の放射性フッ素化に使用して様々なＰＥＴトレーサーを得ることができる。
【００５３】
式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）並びに本発明のその他の態様では、特記しない限り、リンカーはＣ１〜６０ヒドロカルビル基、好適にはＣ１〜３０ヒドロカルビル基であり、適宜、酸素又は窒素のような１〜３０個のヘテロ原子、好適には１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよく、良好なインビボ薬物動態が得られるように選択される。好適なリンカー基としては、アルキル、アルケニル、アルキニル鎖、芳香族、ポリ芳香族及びヘテロ芳香族環、並びにエチレングリコール、アミノ酸又は炭水化物サブユニットを含むポリマーが挙げられる。式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）並びに本発明のその他の態様における好ましいリンカー基としては、以下の群から選択されるものが挙げられる。
【００５４】
【化１５】
2006523658.tif 000017
【００５５】
式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
ｐは０又は１の整数であり、ＺはＯ又はＳである。
【００５６】
式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）並びに本発明のその他の態様における特に好ましいリンカー基は、以下の群から選択し得る。
【００５７】
【化１６】
2006523658.tif 000018
【００５８】
式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物は、ペプチド合成の常法、例えばＡｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．及びＳｈｅｐｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．，”Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，  ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ：  Ｏｘｆｏｒｄ，  １９８９に記載の固相ペプチド合成で調製し得る。式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物への基Ｒ１及びＲ３の導入は、ペプチドのＮ末端又はＣ末端の反応、或いはペプチド配列中の他の官能基でその修飾によってベクターの結合特性が影響されないものとの反応で達成できる。好ましい例では、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社から市販のアミノ酸Ｆｍｏｃ−Ａｍｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ又はＦｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ−Ａｏａ）−ＯＨを使用して、アミノキシ基、ＮＨ２−Ｏ−をペプチド配列に直接導入することができる。官能基Ｒ１及びＲ３は、好ましくは、ペプチドアミノ官能基と活性化酸との反応によって形成された安定なアミド結合の形成によって導入され、ペプチドの合成中又は合成後に導入される。前駆体が酸である場合、Ｒ１及びＲ３は、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）やＮ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド（ＨＡＴＵ）のような活性化剤をその場で使用して導入することができる。
【００５９】
別の態様では、本発明は、例えば上述の方法によるペプチド及びタンパク質の標識に有用な新規な１８Ｆ−補欠分子族を提供する。
【００６０】
そこで、式（ＩＩ）又は式（ＩＶ）の化合物、或いは式（ＩＩａ）、（ＩＶａ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、（ＸＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物が提供されるが、これらはすべて上記で定義した通りであり、以下の事項を条件とする。
（ｉ）式（ＩＩ）の化合物においてリンカーがフェニルであるときは、Ｒ２はアミノキシ（好適には−ＯＮＨ２）である。
（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物ではリンカーはフェニルではない。
（ｉｉｉ）式（ＩＶａ）の化合物では、リンカーはフェニルでも、ハロ、ヒドロキシ又はベンジルオキシで置換されたフェニルでもない。
（ｉｖ）式（Ｘ）の化合物では、ｎは０ではない。
【００６１】
本明細書に記載の方法で用いられる式（ＩＶ）の好ましい化合物であって、それ自体特許請求の範囲に記載される化合物には、以下のものがある。
【００６２】
【化１７】
2006523658.tif 000019
【００６３】
別の態様では、本発明は、式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物、並びに式（Ｉａ）、（ＩＩＩａ）、（ＶＩＩ）、（ＸＶＩ）の化合物を提供するが、これらはすべて上記で定義した通りである。式（Ｉ）、（ＩＩＩ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩａ）、（ＶＩＩ）及び（ＸＶＩ）の好ましい化合物は、ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はその上述のアナログであるものであり、特にベクターが式（Ａ）であるものである。
【００６４】
【化１８】
2006523658.tif 000020
【００６５】
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は次式のものである。
【００６６】
【化１９】
2006523658.tif 000021
【００６７】
式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。
【００６８】
別の態様では、本発明は、式（Ｖ）及び（ＶＩ）の放射標識コンジュゲート、並びに式（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）の化合物を提供するが、これらはすべて上記で定義した通りである。式（Ｖ）、（ＶＩ）、（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）及び（ＸＸＩＶ）の好ましい化合物は、ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はその上述のアナログであるものであり、特にベクターが式（Ａ）のものである
【００６９】
【化２０】
2006523658.tif 000022
【００７０】
式中、Ｘ７は−ＮＨ２又は次式の式のものである。
【００７１】
【化２１】
2006523658.tif 000023
【００７２】
式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。
【００７３】
式（ＩＩ）の化合物は、対応する式（ＸＸＶ）の前駆体から、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常室温又は昇温（例えば最高１５０℃、好適には６０〜１２０℃）で、或いはマイクロ波加熱によって、サイクロトロン生成水性［１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ２ＣＯ３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、酸分解処理のような常法でＮ−保護基を除去することによって調製し得る。
【００７４】
【化２２】
2006523658.tif 000024
【００７５】
式中、Ｌは脱離基、好ましくはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネートもしくはメタンスルホネート又はハロゲン化物であり、リンカーは上記で定義した通りであり、Ｘは、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、Ｒ５及びＲ６は、Ｈ、又はｔ−ブチルオキシカルボニルなどの好適な保護基である。
【００７６】
式（ＩＶ）の化合物は、対応する式（ＸＸＶＩ）の前駆体又はその保護誘導体から、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常室温又は昇温（例えば最高１２０℃）で、サイクロトロン生成水性［１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ２ＣＯ３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させることによって調製し得る。式（ＸＸＶＩ）の化合物のアルデヒド又はケトン官能基は、フッ素化後の単なる酸処理によって、アセタールやケタールのような保護前駆体から迅速に生成させることもできる。
【００７７】
【化２３】
2006523658.tif 000025
【００７８】
式中、Ｌは脱離基、好ましくはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート、又はメタンスルホネート、或いはハロゲン化物であり、リンカーは、前に定義した通りであり、Ｙは、好ましくはＨ、アルキル又はアリール置換基である。好ましい例では、式（ＩＶ）の化合物は式（ＸＸＶＩＩ）の化合物から調製される。
【００７９】
【化２４】
2006523658.tif 000026
【００８０】
式中、Ｌは、ｐ−トルエンスルホネートやトリフルオロメタンスルホネート、メタンスルホネート、ハロゲン化物などの脱離基であり、リンカーは、上記で定義した通りであり、アミド結合を介して保護セリン誘導体に連結している。この場合、Ｏ−保護基Ｒ６は好ましくはｔ−ブチルであり、Ｒ５は上記で定義した通りである。アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常室温又は昇温（例えば最高１５０℃、好適には６０〜１２０℃）で、或いはマイクロ波加熱によって、サイクロトロン生成水性［１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ２ＣＯ３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、Ｏ及びＮ−保護基を除去し、過ヨウ素酸塩のような酸化剤でアルデヒドに酸化させる。
【００８１】
ある好ましい態様では、式（ＩＶ）の化合物は、Ｂｒａｓｋ他のＢｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．  １１（２００１）  ６９７−７００に記載のＢＡＬ法を用いて、ポリマービーズ、コーティング、マイクロデバイスのような固体担体上、例えば樹脂上で調製し得る。ペプチドアルデヒドは、ＰＥＧ−ＡＭＰＳ樹脂上でのアミノアセトアルデヒドジメチルアセタールによるＯ−ＰＡＬアルデヒドの還元的アミノ化から開始し、リンカー成分でのアシル化によって合成される。この態様では、ポリマー結合生成物から過剰の試薬及び放射性フッ素化反応の副生物を洗浄によって分離し得る。酸処理によって、以下に示す通り、固体担体から式（ＩＶ）の化合物が直接得られる。
【００８２】
【化２５】
2006523658.tif 000027
【００８３】
式中、Ｌ及びリンカーは、上述の通りである。
【００８４】
この方法は、式（ＩＶ）の化合物の自動合成に特に適している。
【００８５】
本発明は、有効量（例えば、インビボＰＥＴイメージング用に有効な量）の一般式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物或いは式（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物であって、すべて上記で定義した化合物を、薬学的に許容される１種以上の補助薬、賦形剤又は希釈剤と共に含む放射性医薬品組成物も提供する。
【００８６】
本発明の好ましい実施形態は、医療用、特に腫瘍イメージング（好適にはＰＥＴ）用の一般式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物、或いは式（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物に関する。これらの化合物はすべて上記で定義したものであり、ベクターはＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログであって、例えば国際公開第０１／７７４１５号及び同第０３／００６４９１号に記載のようなもの、好ましくは、以下のフラグメントを含むペプチドである。
【００８７】
【化２６】
2006523658.tif 000028
【００８８】
さらに好ましくは、ベクターは式（Ａ）のペプチドである
【００８９】
【化２７】
2006523658.tif 000029
【００９０】
式中、Ｘ７は、−ＮＨ２又は次式のものである。
【００９１】
【化２８】
2006523658.tif 000030
【００９２】
式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。
【００９３】
本発明の放射標識コンジュゲートは、ＰＥＴイメージングのため、所望の信号が得られる十分な量で患者に投与すればよく、典型的な放射性核種投与量は体重７０ｋｇ当たり０．０１〜１００ｍＣｉ、好ましくは０．１〜５０ｍＣｉで通常十分である。
【００９４】
したがって、本発明による放射性標識コンジュゲートは、当業者の技術常識に属する方法で、生理学的に許容される担体又は賦形剤を用いて投与用に処方すればよい。例えば上述の化合物は、適宜薬学的に許容される賦形剤を添加して、水性媒体に懸濁又は溶解し、次いで得られた溶液又は懸濁液を滅菌すればよい。別の態様では、本発明は、インビボイメージング法、好適にはＰＥＴ、好ましくは腫瘍のイメージング法で使用される放射性医薬品を製造するための本発明の放射性標識コンジュゲートの使用を提供し、放射性医薬品をヒト又は動物の身体に投与し、身体の少なくとも一部の画像を生成することを含む。
【００９５】
さらに別の態様では、本発明は、ヒト又は動物の身体の画像を生成する方法を提供するが、当該方法は、身体、例えば血管系に本発明に係る放射標識コンジュゲートを含む放射性医薬品を投与し、ＰＥＴを用いて放射性医薬品を分布させた身体の少なくとも一部の画像を生成することを含む。
【００９６】
別の態様では、本発明は、癌に付随する症状に作用する薬剤、好ましくは血管形成を抑制する薬剤（例えば細胞障害性薬剤）によるヒト又は動物の身体の治療効果をモニターする方法を提供するが、当該方法は、本発明に係る放射標識コンジュゲートを身体に投与し、細胞受容体、好ましくは内皮細胞受容体、特にαｖβ３受容体によるコンジュゲートの取込みを検出することを含み、投与及び検出を、適宜、しかし好ましくは、上記薬剤による治療前、治療中及び治療後に繰返し実施する。
【００９７】
本発明のさらに別の実施形態では、式（ＩＩ）又は（ＩＶ）の補欠分子族と式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物を含む、放射性フッ素化トレーサー調製用キットを提供する。
【００９８】
本発明の別の態様では、式（ＸＸＶ）の補欠分子族と式（Ｉ）の化合物を含む、放射性フッ素化トレーサー調製用キットを提供する。本発明の別の態様では、式（ＸＸＶＩ）又は（ＸＸＶＩＩ）の補欠分子族と式（ＩＩＩ）の化合物を含む、放射性フッ素化トレーサー調製用キットを提供する。
【００９９】
キットの使用に際して、上述の方法を用いて、式（ＸＸＶ）の化合物を対応する式（ＩＩ）の化合物に、式（ＸＸＶＩ）又は（ＸＸＶＩＩ）の化合物を対応する式（ＩＶ）の化合物にそれぞれ変換する。好ましくは、式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は、反応混合物を固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジに流して、不要な反応体から分離し得る。ＳＰＥカートリッジには、グラファイトパッド、Ｃ１８固定相又はイオン交換樹脂を含むものがある。次いで式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物を、式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物にそれぞれ添加するが、これは水性緩衝液（ｐＨ３〜１１）に好適に溶解し得る。適度な温度で１〜７０分間反応させた後、標識ペプチドを例えばＳＰＥで精製し、回収すればよい。
【実施例】
【０１００】
以下の実施例によって本発明を例証するが、実施例では以下の略語を用いる。
【０１０１】
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ｈｒ（ｓ）：時間
ｍｉｎ（ｓ）：分
ＤＭＡＰ：４−（ジメチルアミノ）ピリジン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＴＢＡＦ：フッ化テトラブチルアンモニウム
ＭｅＯＨ：メタノール
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＰｙＡＯＰ：［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］
Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル。
【０１０２】
実施例１：  ４−トリメチルアンモニウムベンズアルデヒドトリフレート（化合物１）の合成
【０１０３】
【化２９】
2006523658.tif 000031
【０１０４】
本化合物は、Ｈａｋａ他（Ｊ．Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｐｄｓ．  ＆  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍｓ  １９８９  ２７（７）８２３）に記載の方法で合成した。
【０１０５】
実施例２：  ２−（２−｛２−［２−（２−フルオロ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−１，１−ジメトキシ−エタン（化合物７）の合成
【０１０６】
【化３０】
2006523658.tif 000032
【０１０７】
ａ）酢酸２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルエステル（化合物４）の合成
ＴＨＦ（５ｍｌ）中に懸濁した水素化ナトリウム（２４８ｍｇ、鉱油中５．１５ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、２−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エタノール（化合物２）（１．０ｇ、５．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）溶液をシリンジを介して室温で添加した。気体発生が止まった後、混合物を室温で４５分間撹拌したところ、その時点までに若干黄色がかった透明溶液が得られた。ブロモアセトアルデヒド（８．７１ｇ、５１．５ｍｍｏｌ）をシリンジで添加し、混合物を２４時間撹拌した。次いで酢酸エチル（３ｍｌ）を添加し、混合物を室温でさらに２時間撹拌した。この混合物をエーテル（１００ｍｌ）に注入し、１０％Ｋ２ＣＯ３水溶液（３０ｍｌ）及び塩水（３０ｍｌ）で１回ずつ抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残留油を蒸留して、過剰ブロモアセトアルデヒドを除去し、残留粗生成物を、１００％酢酸エチルを用いたフラッシュクロマトグラフィーで精製して、生成物（３５５ｍｇ、２１％）を無色オイルとして得た。
【０１０８】
ｂ）２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エタノール（化合物５）
メタノール（３ｍｌ）中の酢酸２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルエステル（化合物４）（１１０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１Ｎ  ＮａＯＨ／メタノール（１ｍｌ）を室温で添加した。反応をＴＬＣ（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、９：１）でモニターし、３０分以内で完了した。溶媒を蒸発させ、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、９：１）で精製して、生成物（７３ｍｇ、７６％）を無色オイルとして得た。
【０１０９】
ｃ）メタンスルホン酸２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルエステル（化合物６）
ＴＨＦ（１ｍｌ）中のアルコール（化合物５）（６０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（５９μｌ、０．４２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、塩化メタンスルホニル（２４：１、０．３０ｍｍｏｌ）を添加した。反応をＴＬＣ（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、９：１）でモニターした。２時間後、沈殿したトリエチルアミン塩酸塩を濾別した。溶媒を蒸発させ、クロロホルム／メタノール（９：１）を用いたフラッシュクロマトグラフィーの後に、生成物（７５ｍｇ、９９％）をオイルとして得た。
【０１１０】
ｄ）２−（２−｛２−［２−（２−フルオロ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−１，１−ジメトキシ−エタン（化合物７）
アセトニトリル（８ｍｌ）中のスルホネート（化合物６）（７５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）とＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．１Ｍ、５７３μｌ、０．６３ｍｍｏｌ）の混合物を９０℃で３０分間加熱した。ＴＬＣ（酢酸エチル）でモニターして反応が完了したことを確認した。室温に冷却し、溶媒を蒸発させた後、残留物をフラッシュ乾燥（酢酸エチル）して、生成物（５６ｍｇ、９３％）を無色オイルとして得た。
【０１１１】
実施例３：  ４−（３−フルオロプロポキシ）ベンズアルデヒドの合成（化合物１０）
【０１１２】
【化３１】
2006523658.tif 000033
【０１１３】
ａ）４−（３−ヒドロキシエトキシ）ベンズアルデヒド（化合物８）
ＤＭＦ（３０ｍｌ）中の４−ヒドロキシベンズアルデヒド（Ｆｌｕｋａ、４．９ｇ、０．０４０ｍｏｌ）と炭酸ナトリウム（４．７ｇ、０．０４４ｍｏｌ）と３−ブロモ−１−プロパノール（６．１ｇ、０．０４４ｍｏｌ）の溶液を１４０℃で８時間加熱した。反応混合物を冷却し、濃縮し、残留物をエーテルに取り、水洗し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。濾過及び濃縮で黄色シロップ４．６ｇ（６４％）が得られたが、これはそれ以上精製せずに次の段階で使用した。構造はＮＭＲ分析で確認した。
【０１１４】
ｂ）メタンスルホン酸３−（４−ホルミルフェノキシ）エチルエステル（化合物９）
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のアルコール１２（１．４ｇ、８．０ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１．２ｍｌ、８．５ｍｍｏｌ）及び塩化メシル（０．６２ｍｌ、８．０ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物を水洗し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）して、粗製物（黄色オイル）１．８ｇを得た。２９０ｍｇのアリコートを逆相クロマトグラフィー（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）５μｍ  ２１．２×２５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：６０分間で２０〜４０％、流量１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２５４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後２４４ｍｇの白色固形物を得た。構造はＮＭＲ分析で確認した。
【０１１５】
ｃ）４−（３−フルオロプロポキシ）ベンズアルデヒド（化合物１０）
フッ化カリウム（Ｆｌｕｋａ、７．２ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（Ｆｌｕｋａ、４６．７ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル（２．５ｍｌ）に溶解した。１０分後、混合物を、メタンスルホン酸３−（４−ホルミルフェノキシ）プロピルエステル１３（１６．０ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）の乾燥アセトニトリル（１．５ｍｌ）撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃で３０分間加熱した。生成物を、分析用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４及び２５４ｎｍ）で、市販標準物質（Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍ）と同時に５．０分で溶出したことから確認した。
【０１１６】
【化３２】
2006523658.tif 000034
【０１１７】
実施例４：  １，１ジメトキシ−４−フルオロメチルシクロヘキサンの合成（化合物１４）
【０１１８】
【化３３】
2006523658.tif 000035
【０１１９】
ａ）４−ヒドロキシメチルシクロヘキサノン（化合物１１）
本化合物はＢｏｒｄｅｎ他（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，  １９８５，  ５０，  ５３１−５３４）に記載の方法で合成した。生成物は１Ｈ及び１３Ｃ  ＮＭＲで特性決定した。
【０１２０】
ｂ）１，１−ジメトキシ−４−ヒドロキシメチルシクロヘキサン（化合物１２）
乾燥メタノール（３０ｍｌ）中のケトン１１（２．５４ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）、オルトギ酸トリメチル（９．７５ｍｌ、８９．１ｍｍｏｌ）とｐ−トルエンスルホン酸（１５０ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）の溶液を窒素中室温で２４時間撹拌した。反応混合物を、固形炭酸カリウム（４ｇ）で中和し、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗製物をＤＣＭ（３０ｍｌ）に溶解し、水（４０ｍｌ）で洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。黄色の粗製オイル（３．０ｇ）を８５Ｃで蒸留（０．２ｍｍＨｇ）して、生成物（１．６９ｇ、４９％）を無色オイルとして得た。生成物は１Ｈ及び１３Ｃ  ＮＭＲで特性決定した。
【０１２１】
ｃ）メタンスルホン酸４，４−ジメトキシ−シクロヘキシルメチルエステル（化合物１３）
乾燥ＤＣＭ（５ｍｌ）中のアルコール１２（２７５ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（３．３ｍｌ、２３．７ｍｍｏｌ）の冷却（０Ｃ）溶液に、窒素中で、塩化メタンスルホニル（２４６ｕｌ、３．１６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。沈殿したトリエチルアミン塩酸塩を濾別し、溶媒を蒸発させた。粗製物をＤＣＭ（３０ｍｌ）に溶解し、水洗し（２×２０ｍｌ）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ミネラルスピリット：ＮＨ３（５０：５０：４））で精製して、生成物（２１４ｍｇ、５４％）を薄黄色オイルとして得た。生成物は１Ｈ及び１３Ｃ  ＮＭＲで特性決定した。
【０１２２】
【化３４】
2006523658.tif 000036
【０１２３】
実施例５：  ペプチド前駆体の合成（化合物１５）
ペプチド化合物１４を標準的ペプチド合成法を用いて合成した。化合物１４（１５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液を、Ｂｏｃ−アミノキシ酢酸（３４．４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ＰｙＡＯＰ（９３．９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（４０μｌ、０．３６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に添加した。ＤＭＦを、１２時間後に真空蒸発させ、粗生成物を調製用逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５３−Ｖ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：６０分間で１０〜５０％Ｂ、流量５０ｍｌ／分、検出波長２５４ｎｍ）で精製して純粋な化合物９７．１ｍｇ（５７％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１９．４分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１４３１．２［Ｍ−Ｈ＋］であった。
【０１２４】
【化３５】
2006523658.tif 000037
【０１２５】
実施例６：  化合物１と化合物１５との化学選択的ライゲーションによる化合物１６の合成
【０１２６】
【化３６】
2006523658.tif 000038
【０１２７】
ペプチド１５の脱保護を、水分量５％のＴＦＡをペプチド１０ｍｇに添加して実施した。１ｍｌ水中のＢｏｃ脱保護ペプチド（５．９ｍｇ、０．００４４ｍｍｏｌ）を、１ｍｌアセトニトリル中の４−フルオロベンズアルデヒド（化合物１）（１．１ｍｇ、０．９４μｌ、０．００８９ｍｍｏｌ）に添加した。混合物のｐＨは３．５であった。４５分後、７０度で、混合物を調製用逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５３−Ｎ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜４０％Ｂ、流量５．０ｍｌ／分、２１４ｎｍで検出）で２回精製して、純粋な化合物２．０ｍｇ（３２％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１６．３分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１４３７．２［Ｍ−Ｈ＋］であった。
【０１２８】
実施例７：  化合物７と化合物１５との化学選択的ライゲーションによる化合物１７の合成
【０１２９】
【化３７】
2006523658.tif 000039
【０１３０】
２−（２−｛２−［２−（２−フルオロ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）１，１−ジメトキシエタン６（３．９ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）の保護基を、濃ＨＣｌのアセトニトリル溶液（１：１）（０．５ｍｌ）を用いて除去した。混合物を１５分間放置し、次いで、化合物９（１０ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）を水分量５％のＴＦＡで処理してから２０分後にＴＦＡを真空蒸発させて得たＢｏｃ脱保護ペプチドに添加した。アンモニアで混合物のｐＨを４に調節し、次いで７０度で２０分間加熱した。分析用ＨＰＬＣ及びＬＣ−ＭＳを用いて反応をモニターし、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５３−Ｎ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：３０分間で１０〜５０％Ｂ、流量５．０ｍｌ／分、２１４ｎｍで検出）で精製して、純粋な化合物を５．５ｍｇ（５１％）得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１４．３及び１４．７分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１５５１．１［Ｍ−Ｈ＋］であった。
【０１３１】
実施例８：  １８Ｆ−化合物１６の放射標識合成
ａ）１８Ｆ−化合物１の放射標識合成
１８Ｆ−フッ化物（最大３７０ＭＢｑ）をＫｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（０．５ｍｌのＭｅＣＮ中１２〜１４ｍｇ）及び炭酸カリウム（０．１Ｍ水溶液１００μｌ）の存在下、Ｎ２中で１２５℃に１５分間加熱して共沸乾燥した。この間、２×１ｍｌのＭｅＣＮを添加し、蒸発させた。＜４０℃に冷却した後、トリメチルアンモニウムベンズアルデヒドトリフレート溶液（０．７ｍｌのＤＭＳＯ中３〜７ｍｇ）を添加した。反応容器を密閉し、１２０℃で１５分間加熱して標識させた。粗製反応混合物を室温に冷却し、１０ｍｌの水に添加して希釈した。混合物を、Ｓｅｐ−ｐａｋ  ＣＭ−ｐｌｕｓカートリッジ（１０ｍｌの水でコンディショニング）及びＳｅｐＰａｋ  Ｃ１８−ｐｌｕｓカートリッジ（２０ｍｌのＥｔＯＨ及び２０ｍｌのＨ２Ｏでコンディショニング）に連続して流した。これらのカートリッジに水（１０ｍｌ）をフラッシュし、生成物の１８Ｆ−フルオロベンズアルデヒドを、ＳｅｐＰａｋ  Ｃ１８−ｐｌｕｓカートリッジからＭｅＯＨ（１ｍｌ）で溶出した。
【０１３２】
ｂ）化合物１５と４−１８Ｆ−フルオロベンズアルデヒドとの結合
化合物１５（４〜５ｍｇ）を水分量５％のＴＦＡで室温で５分間処理した。次いで溶媒を真空蒸発によって除去した。ペプチドを、０．５Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ緩衝液、ｐＨ４（０．５ｍｌ）に再び溶解し、反応容器内で４−１８Ｆ−フルオロベンズアルデヒドと一緒にした。反応容器を密閉し、７０℃に１５分間加熱して結合させた。室温に冷却した後、調製用放射標識ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｐｒｏｄｉｇｙ  ＯＤＳ−Ｐｒｅｐ、２５０×１０ｍｍ、１０μ、４ｍｌ／分、溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ（０．５％ＴＦＡ）、溶媒Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．５％ＴＦＡ）、勾配：５分間で１０％Ｂ、１５分間で１０〜４０％Ｂ）で生成物を得た。
【０１３３】
実施例９：  １８Ｆ−化合物１７の放射標識合成
ａ）１８Ｆ化合物７の放射標識合成
Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（１０ｍｇ）、炭酸カリウム（５０μｌ水中１ｍｇ）及びアセトニトリル（０．８ｍｌ）を仕込んだＷｈｅａｔｏｎバイアル（２ｍｌ）に、フッ素−１８を含有する水（１０ｍＣｉ、１ｍｌ）を添加した。窒素気流下１１０℃で３０分間加熱して溶媒を除去した。無水アセトニトリル（０．５ｍｌ）を添加し、同様に蒸発させた。この段階を２回繰り返した。無水ＤＭＳＯ（０．２ｍｌ）中の化合物６（１ｍｌ）の溶液を添加した。マイクロ波（５分、１６０℃、１５０→５０Ｗ）で加熱した後、反応混合物を室温に冷却し、ＭｅＣＮ（５ｍｌ）及びＨ２Ｏ（２０ｍｌ）でコンディショニングしたＳｅｐＰａｋ  ｔＣ１８−ｐｌｕｓカートリッジに流した。カートリッジに水（１０ｍｌ）をフラッシュし、生成物をＭｅＣＮ（０．５ｍｌ）で溶出した。８０℃の窒素気流を用いて溶媒を蒸発させた。ＨＣｌ（３４μｌ、１２Ｍ）とＭｅＣＮ（３４μｌ）の混合物を添加し、バイアルを室温で５分間放置した。
【０１３４】
ｂ）化合物１５と１８Ｆ−化合物７との結合
化合物１５（３ｍｇ）をＴＦＡ／５％Ｈ２Ｏ（０．２ｍｌ）と反応させた。室温で１分間静置した後、窒素気流で溶媒を除去した。脱保護した１８Ｆ−化合物７の入ったバイアルに水酸化アンモニウム（３８μｌ、２８％）を添加した。中和混合物を、酢酸アンモニウム緩衝液（５０μｌ、ｐＨ４．０、０．５Ｍ）中の脱保護化合物１５の入ったバイアルに移した。バイアルを７０℃で７分間インキュベートした。室温に冷却し、ＨＰＬＣ移動相（１００μｌ、２０％ＭｅＣＮ、８０％Ｈ２Ｏ、０．５％ＴＦＡ）を添加した後、調製用放射標識ＨＰＬＣ［カラム：Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、１００×１０ｍｍ、５μ、４ｍｌ／分、溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ（０．５％ＴＦＡ）、溶媒Ｂ：ＣＨ３ＣＮ（０．５％ＴＦＡ）、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ］で生成物を得た。
【０１３５】
実施例１０：  ４−（フルオロメチル）ベンゾイル］ヒドラジドの合成−化合物２３
【０１３６】
【化３８】
2006523658.tif 000040
【０１３７】
アルデヒド又はケトン修飾ペプチドとの結合用のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（フルオロメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成
ａ）ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］−ヒドラジノ−１−カルボキシレートの合成−化合物１８
【０１３８】
【化３９】
2006523658.tif 000041
【０１３９】
ジクロロメタン（２０ｍｌ）中の４−ヒドロキシメチル安息香酸ペンタフルオロフェニルエステル（Ｍｉｌｌｉｇｅｎ、０．６０ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．２９ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、カルバジン酸ｔ−ブチル（Ｆｌｕｋａ、０．２９ｇ、２．２ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．６８ｍｌ、４．０ｍｍｏｌ）の溶液を３時間還流した。反応混合物を真空濃縮し、生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／ヘキサン  ９：１）で精製した。収量は０．５０ｇ（９０％）。分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間２．３８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ。ＮＭＲ分析は上記構造と一致した。
【０１４０】
ｂ）ｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１−カルボキシレートの合成−化合物１９
【０１４１】
【化４０】
2006523658.tif 000042
【０１４２】
ジクロロメタン（６０ｍｌ）中のｔ−ブチルジフェニルクロロシラン（０．５７ｍｌ、２．２ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］−ヒドラジノ−１−カルボキシレート（０．４８ｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（０．３７ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１時間１５分撹拌した。この溶液を、硫酸水素カリウム水溶液で抽出し（ｐＨ３、３×２０ｍｌ）、乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４）。生成物を、ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で６０〜１００％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間３．３７分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）で分析した。溶液を濃縮し、生成物をそれ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１４３】
ｃ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２０
【０１４４】
【化４１】
2006523658.tif 000043
【０１４５】
ジクロロメタン（１５ｍｌ）中のｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］−ヒドラジノ−１−カルボキシレート（６９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＡＰ（２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．１３ｍｌ、０．９６ｍｍｏｌ）及びジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（９０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、減圧下で溶媒を蒸発させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル、４：１）で精製した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で６０〜１００％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間７．８５分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲ分析で確認した。
【０１４６】
ｄ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２１
【０１４７】
【化４２】
2006523658.tif 000044
【０１４８】
ＴＨＦ（２５ｍｌ）中のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレート（０．３７ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中１．１Ｍ、０．５０ｍｌ、０．５５ｍｍｏｌ）を添加した。５０分後、塩化アンモニウム水溶液（１０％、１０ｍｌ）を添加した。１０分後、この混合物をジクロロメタンで抽出し（３×１５ｍｌ）、有機相を乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４）。溶液を濃縮し、残留物を、カラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル  １：１）で精製して、生成物０．２１ｇ（８４％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で６０〜１００％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間１．３８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲ分析で確認した。
【０１４９】
ｅ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（メタンスルホネートメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２１
【０１５０】
【化４３】
2006523658.tif 000045
【０１５１】
ジクロロメタン（４０ｍｌ）中のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレート（０．２２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．０８０ｍｌ、０．５７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、塩化メタンスルホニル（０．０４０ｍｌ、０．５２ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、２回目として塩化メタンスルホニル及びトリエチルアミン（同量）を添加した。１２時間後、分析用ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間８．２５分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）で、反応が完了したことを確認した。混合物を、シリカに通して濾過し、真空濃縮した。生成物を、カラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル  １：１）で精製し、０．２１ｇ（８１％）を得た。ＮＭＲ分析は上記構造と一致した。
【０１５２】
ｆ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（フルオロメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２２
【０１５３】
【化４４】
2006523658.tif 000046
【０１５４】
フッ化カリウム（３．０ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（Ｆｌｕｋａ、２０ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトニトリル（０．６ｍｌ）に溶解した。１５分後、混合物を、乾燥アセトニトリル（０．４ｍｌ）中のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（メタンスルホネートメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレート（１４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃で１５分間加熱した。生成物を調製用ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）５μｍ  ２１．２×２５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：６０分間で６０〜１００％Ｂ、流量１０．０ｍｌ／分、保持時間３３分、２１４ｎｍで検出）で精製した。収量は３．２ｍｇ（２６％）。分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）３μｍ  ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間８．７８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ。構造はＮＭＲ分析で確認した。化合物２３を得るための化合物２２の脱保護を５０％ＴＦＡ／ＤＣＭで１５分間行った。
【０１５５】
実施例１１：  アミノキシ、ヒドラジン又はヒドラジド修飾ペプチドとの結合用の２−［２−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］−ジオキソランの合成−化合物２７
【０１５６】
【化４５】
2006523658.tif 000047
【０１５７】
ａ）［２−（２−［１，３］ジオキソラン−２−イルエチルスルファニル）フェニル］メタノールの合成−化合物２４
【０１５８】
【化４６】
2006523658.tif 000048
【０１５９】
２−（２−ブロモエチル）−１，３−ジオキソラン（２２３μｌ、１．８６ｍｍｏｌ）を、２−メルカプトベンジルアルコール（５２．３ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１０２．３、０．７４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に添加した。混合物を室温で一晩撹拌した後、減圧下でＤＭＦを蒸発させ、粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、２１４ｎｍで検出）で精製した。６５．１ｍｇの収量で精製物を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１５．０１７分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。
【０１６０】
ｂ）２−［２−（２−クロロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］ジオキソランの合成−化合物２５
【０１６１】
【化４７】
2006523658.tif 000049
【０１６２】
塩化メシル（６５μｌ、０．８３ｍｍｏｌ）を、［２−（２−［１，３］ジオキソラン−２−イル−エチルスルファニル）フェニル］−メタノール（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１１６μｌ、０．８３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に添加した。５日後、沈殿物を濾別し、ＴＨＦを減圧下で蒸発させ、粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、検出波長２５４ｎｍ）で精製した。画分を冷蔵庫内に一晩放置し、アセトニトリル相にジエチルエーテルを添加し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で蒸発させた。２４．５ｍｇの収量で精製物を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１０．４分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲで確認した。
【０１６３】
ｃ）２−［２−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］ジオキソランの合成−化合物２６
【０１６４】
【化４８】
2006523658.tif 000050
【０１６５】
フッ化カリウム（３．５ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（２２．５ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１ｍｌ）に溶解し、２−［２−（２−クロロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］ジオキソラン（７．７ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍｌ）溶液に添加した。反応混合物を７０度で３０分間加熱した。粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、検出波長２５４ｎｍ）で精製した。画分を冷蔵庫内に一晩放置し、アセトニトリル相にジエチルエーテルを添加し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で蒸発させた（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間９．２００分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲで確認した。
【０１６６】
実施例１２：  ４−フルオロメチルベンズアルデヒドの合成−化合物２９
【０１６７】
【化４９】
2006523658.tif 000051
【０１６８】
ａ）（４−ホルミルフェニル）メチルメタンスルホネートの合成−化合物２８
【０１６９】
【化５０】
2006523658.tif 000052
【０１７０】
塩化メシル（１２．８μｌ、０．１６ｍｍｏｌ）を、４−（ヒドロキシメチル）ベンズアルデヒドジメチルアセテート（３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２２．９μｌ、０．１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に添加した。１時間後、さらに同量の塩化メシル及びトリエチルアミンを添加した。１時間後、沈殿物を濾別し、ＴＨＦを減圧下で蒸発させた。粗生成物をシリカ短カラム及びＤＣＭを用いて精製し、純粋な生成物４２．０ｍｇ（９８％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ００Ｂ−４２５１−Ｅ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で５〜５０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間４．９００分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲで確認した。
【０１７１】
ｂ）４−フルオロメチルベンズアルデヒドの合成−化合物２９
【０１７２】
【化５１】
2006523658.tif 000053
【０１７３】
ＫＦ（２．７ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）及びｋｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２（１７．６ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１ｍｌ）に溶解して、（４−ホルミルフェニル）メチルメタンスルホネート（１０ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍｌ）溶液に添加した。反応混合物を６５度で１０分間加熱した。粗生成物を、シリカ短カラム及びジエチルエーテルを用いて精製した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ００Ｂ−４２５１−Ｅ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で５〜５０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間５．１分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。
【０１７４】
実施例１３：  官能化オキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ１−６）アナログ；［ＢｏｃＮＨＯＣＨ２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ２］の合成−化合物３０
【０１７５】
【化５２】
2006523658.tif 000054
【０１７６】
保護Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ２：完全自動合成（ＡＢＩ  ４３３Ａ）を用いたアミノ酸配列の構築。樹脂を手動式バブラー装置に入れ、５％の水及び５％のＴＩＳを含むＴＦＡで切断した。１時間後、ＴＦＡを減圧下で蒸発させた。得られた沈殿物をエーテルで洗浄し、自然乾燥した。ＴＦＡ及びＤＭＳＯ（９５：５）をペプチドに添加した。２時間後、ＴＦＡを減圧下で蒸発させ、残留物にジエチルエーテルを添加した。得られた沈殿物をエーテルで洗浄し、自然乾燥した。ペプチド（７０．６ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液を、Ｂｏｃ−アミノキシ酢酸（２３．９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＰｙＡＯＰ（６５．２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（２７．５μｌ、０．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液に添加した。ＤＭＦを、１２時間後に減圧下で蒸発させた。粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で１０〜６０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、２３０ｎｍで検出）で精製した（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１６．５分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１２９３．０［ＭＨ＋］であった。
【０１７７】
実施例１４：  ４−フルオロメチル−ベンズアルデヒドとオキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ１−６）；［ＮＨ２ＯＣＨ２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ２］との結合−化合物３１
【０１７８】
【化５３】
2006523658.tif 000055
【０１７９】
ＴＦＡ及び５％の水を使用して、オキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ１−６）；［Ｂｏｃ−ＮＨＯＣＨ２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ２］（３．０ｍｇ、０．００２３ｍｍｏｌ）からＢｏｃ保護基を切断した。ＴＦＡを３０分後に減圧下で蒸発させ、水（０．５ｍｌ）中の４−フルオロメチル−ベンズアルデヒド（１．５ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を添加し、ｐＨを希釈アンモニアで４に調節した。混合物を７０度で５０分間加熱した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ００Ｂ−４２５１−Ｅ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜６０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間６．３分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１３１３．１［ＭＨ＋］であった。
【０１８０】
実施例１４：  ３−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−プロピオンアルデヒドとオキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ１−６）；［ＮＨ２ＯＣＨ２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ２］）との結合−化合物３２
【０１８１】
【化５４】
2006523658.tif 000056
【０１８２】
結合に先だって、実施例６に記載の通りペプチド部分からＢｏｃ基を除去した。アセトニトリル０．１ｍｌ中の１Ｎ  ＨＣｌ（１：１）を使用して、３−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−プロピオンアルデヒド（０．８１ｍｇ、０．００３４ｍｍｏｌ）の保護基を除去した。混合物を３０分間放置し、その後、０．４ｍｌ水中のペプチド（２．０ｍｇ、０．００１７ｍｍｏｌ）に添加し、ｐＨを希釈アンモニアで４に調節した。混合物を７０度で５０分間加熱した（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１９．８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１３７３．５［ＭＨ＋］であった。
【０１８３】
実施例１５：  化合物７とオキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ１−６）；［ＮＨ２ＯＣＨ２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ２］）との結合−化合物３３
【０１８４】
【化５５】
2006523658.tif 000057
【０１８５】
ＴＦＡ及び５％の水を使用して、Ｂｏｃ保護基を、オキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ１−６）；［Ｂｏｃ−ＮＨＯＣＨ２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ２］（２．５ｍｇ、０．００１９ｍｍｏｌ）から切断した。ＴＦＡを、３０分後に減圧下で蒸発させた。アセトニトリル０．５ｍｌ中の１Ｎ  ＨＣｌ（１：１）を使用して、化合物７（１．０ｍｇ、０．００４１ｍｍｏｌ）の保護基を除去した。混合物を３０分間放置し、その後ペプチドに添加し、ｐＨを希釈アンモニアで４に調節した。混合物を７０度で１５分間加熱した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＶｙｄａｃ  ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１５．１及び１５．４分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１４１３．５［ＭＨ＋］であった。
【０１８６】
これらの実施形態は本発明の幾つかの態様を例示するためのものであり、本明細書及び請求項に記載された発明の技術的範囲は本明細書に開示した特定の実施形態によって限定されるものではない。いかなる均等な実施形態も本発明の技術的範囲に属する。実際、本明細書に記載したもの以外の本発明の様々な変形例は、本明細書の記載から当業者には明らかであろう。かかる変形例も、特許請求の範囲に包含される。
【国際調査報告】
2006523658.tif 000081
2006523658.tif 000082
2006523658.tif 000083
2006523658.tif 000084