(57)【要約】本発明は、インテグリンαｖβ３のアンタゴニストを利用した、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供する。本発明は、別の治療（例えば、別の予防薬又は治療薬）と組み合わせてインテグリンαｖβ３アンタゴニストを利用した、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する状態を予防、治療、管理又は緩和する方法の使用を包含する。特に、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、少なくとも１つのインテグリンαｖβ３のアンタゴニスト及び少なくとも１つの他の治療をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明は、歯周疾患若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症又はそれに関連する状態を予防、治療、管理又は緩和する際に使用するための組成物及び製品を包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
疾患又はそれに関連する症候若しくは症状を治療、管理又は緩和する方法であって、それを必要とする被験体に有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストを投与するステップを含み、前記疾患は、関節置換の無菌的弛緩、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎又は肥大性肺性骨関節症である、上記方法。
【請求項２】
疾患又はそれに関連する症候若しくは症状を治療、管理又は緩和する方法であって、
ａ）それを必要とする被験体に有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストを投与するステップ；及び
ｂ）治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の治療剤を前記被験体に投与するステップ
を含み、前記疾患が、関節置換の無菌的弛緩、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎又は肥大性肺性骨関節症である、上記方法。
【請求項３】
前記疾患が関節置換の無菌的弛緩である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記疾患が関節置換の無菌的弛緩である、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記疾患が歯周疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記疾患が歯周疾患である、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記疾患がゴーラム−スタウト病である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記疾患がゴーラム−スタウト病である、請求項２に記載の方法。
【請求項９】
前記疾患がウィルソン病である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記疾患がウィルソン病である、請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記疾患が慢性中耳炎である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記疾患が慢性中耳炎である、請求項２に記載の方法。
【請求項１３】
前記疾患が肥大性肺性骨関節症である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記疾患が肥大性肺性骨関節症である、請求項２に記載の方法。
【請求項１５】
前記被験体に対して手術を実施するステップをさらに含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項１６】
前記被験体に対して歯科手術を実施するステップをさらに含む、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項１７】
前記治療剤が骨代謝調節剤である、請求項４、６、８、１２又は１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記骨代謝調節剤がビスホスフォネート又はビタミンＤ化合物である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記治療剤が、鎮痛剤、免疫調節剤又は抗炎症剤である、請求項２に記載の方法。
【請求項２０】
前記鎮痛剤が、非ステロイド性抗炎症薬、サリチレート又はアセトミノフェンである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記治療剤が抗生物質である、請求項４、６、１２又は１４に記載の方法。
【請求項２２】
前記抗生物質が、ペニシリン、テトラサイクリン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン又はネオマイシンである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記治療剤が抗炎症剤である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗炎症剤が非ステロイド性抗炎症薬である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが非経口投与される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項２６】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが経口投与又は局所投与される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項２７】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、練り歯磨き又は歯肉に塗布されるゲルとして投与される、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項２８】
前記歯周疾患が、歯肉炎、歯周炎又は歯周症である、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項２９】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項３０】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、治療部分に結合された抗体又は抗体フラグメントである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項３１】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項３２】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、治療部分に結合されたＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項３３】
前記被験体がヒトである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項３４】
包装材料、前記包装材料内に含まれた指示書及びヒトへの投与に適した形態の医薬組成物を含む製品であって、前記医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び薬学的に許容される担体を含み、前記指示書が、疾患又はそれに関連する症候若しくは症状の予防、治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆し、前記疾患が、関節置換の無菌的弛緩、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎又は肥大性肺性骨関節症である、上記製品。
【請求項３５】
包装材料、前記包装材料内に含まれた指示書及びヒトへの投与に適した形態の２つの医薬組成物を含む製品であって、第１の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び薬学的に許容される担体を含み、第２の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含み、前記指示書が、疾患又はそれに関連する症候若しくは症状の予防、治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆し、前記疾患が、関節置換の無菌的弛緩、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎又は肥大性肺性骨関節症である、上記製品。
【請求項３６】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである、請求項３４又は３５に記載の製品。
【請求項３７】
前記抗体又は抗体フラグメントが治療部分に結合されている、請求項３６に記載の製品。
【請求項３８】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントである、請求項３４又は３５に記載の製品。
【請求項３９】
前記インテグリンαｖβ３アンタゴニストが、治療部分に結合されたＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントである、請求項３４又は３５に記載の製品。
【請求項４０】
インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の前記予防薬又は治療薬が、鎮痛剤、抗炎症剤又は免疫調節剤である、請求項３５に記載の製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．発明の分野
本発明は、インテグリンαｖβ３のアンタゴニストを利用した、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供する。本発明は、別の治療（例えば、別の予防薬又は治療薬）と組み合わせてインテグリンαｖβ３アンタゴニストを利用した、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する状態を予防、治療、管理又は緩和する方法の使用を包含する。特に、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３のアンタゴニスト及び少なくとも１種の他の治療をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明は、歯周疾患若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症又はそれに関連する状態を予防、治療、管理又は緩和する際に使用するための組成物及び製品を包含する。
【０００２】
本願は、その全体が本明細書中に参照により組み入れられる米国仮出願第６０／４４４，１５６号（２００３年１月３０日出願）に対して権利を有し、その優先権の利益を主張する。
【背景技術】
【０００３】
２．１  歯周疾患
歯周疾患は、広範な医学的問題であり、合衆国において成人のほとんどが３０代半ばまでにこの疾患の何らかの兆候又は症状を示す（Oral Health in America:A Report of the Surgeon General-Executive Summary. Rockville, MD:US Department of Health and Human Services, National Institute of Dental and Craniofacial Research、National Institutes of Health、2000、本明細書中で「Report of the Surgeon General 2000」という）。歯周疾患は歯肉炎で開始し、歯肉炎は、紅斑（発赤）、及び浮腫（膨潤）、出血、そしてしばしば歯肉の感受性及び圧痛を特徴とする歯肉の炎症である（Report of the Surgeon General 2000；米国特許第６，２７７，５８７号もまた参照のこと）。これらの症候は、歯肉縁部に沿った生物膜（biofilm）の蓄積及び破壊的な細菌性産物の放出に応答した免疫系の炎症応答の結果である（Report of the Surgeon General 2000；米国特許第６，２７７，５８７号もまた参照のこと）。
【０００４】
歯肉炎の初期段階は、歯垢を減少させるための徹底的な歯磨き及び糸ようじ歯磨きによってしばしば逆転可能である。しかし、歯周疾患の進行は、個人の口腔衛生手順によって常に停止することができるわけではなく、歯周炎（すなわち、歯の付着の喪失）を引き起こす（Report of the Surgeon General 2000）。
【０００５】
歯周炎は、その最も一般的な形態で、一般的かつ中程度に進行していると記載される。第２のより攻撃的な形態は、迅速に進行しかつ重篤であると記載され、しばしば治療に対して抵抗性である。中程度に進行性の成熟した形態は、支持骨構造の喪失と共に、歯肉及び骨への歯周靭帯の付着の漸進的喪失によって特徴付けられる（Report of the Surgeon General 2000）。歯周靭帯及び骨のこの破壊は、歯と隣接組織との間のポケットの形成を生じ、このポケットが歯肉の歯垢を潜ませる。次いで、歯石が、隣接組織中の炎症液（inflammatory fluid）及びミネラルに起因してこのポケット中で形成し、これは特に有害であり得る（Report of the Surgeon General 2000）。
【０００６】
歯周疾患についての伝統的な治療には、歯根表面への線維芽細胞の付着を増大させる方法（例えば、ＣＯ２レーザー治療、歯石除去及び根面平滑化）が含まれる（Crespi,R.ら、2002、J.Periodontol 73(11):1308-12）。他の治療は、抗生物質及び宿主調節因子（host modulator）の２つの群に分割することができる。宿主調節因子には、ＰｅｒｉｏｓｔａｔＴＭ、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、アレンドロネート（ＦｏｓａｍａｘＴＭ）、ホルモン置換療法及び抗関節炎医薬が含まれる（Ciancio,S.G.、2002、J Clin Periodontol 29 補遺2:17-21；及びSoory,M.、2002、Curr.Drug Targets Immune Endocr.Metabol.Disord.2(1):13-25）。ＮＳＡＩＤは、歯周疾患の管理において細菌抗原の機械的除去に対する補助物として使用されてきた。別の存在する選択肢は、組織再生を導く自己骨髄幹細胞移植を含む外科的介入である（Ou,L.、2002、Zhong Kuo Qiang Yi Xue Za Zhi 37(2):132-4）。
【０００７】
歯周疾患、特に歯周炎の慢性の性質、及び一般に受容された動物モデル又はｉｎ  ｖｉｔｒｏモデルの不在が、この疾患の分子病理学の研究を困難にし、治療方法の形成を困難にしている。従って、歯周疾患の治療のためのより有効な治療についての必要性が存在したままである。
【０００８】
２．２  無菌的な関節の弛緩
関節置換手順での主な困難の１つは、経時的に、これらのデバイスがｉｎ  ｓｉｔｕで緩む傾向があることである。無菌的な弛緩が主要原因となって、総股関節置換のうち約２０％が最終的に失敗する。El-Warrak,A.ら、「A New Animal Model for Aseptic Loosening in Cement Hip Replacements」、2003年3月14日のSwiss Society of Biomaterials (SSB) Meetingのために受理された要約書。骨とセメント質との間の慢性炎症反応は通常、線維組織の界面膜を生じるこの状態と関連する。界面膜の形成を誘発する原因はとりわけ、微動、磨耗粉、マトリックス分解メタロプロテイナーゼ及び局所的炎症性メディエータ（プロスタグランジンＥ２及び一酸化窒素）である（El-Warrakら、前出）。骨とセメント質との界面における微動は、界面組織の形成を引き起こすと考えられる（El-Warrakら、前出）。この界面膜は、股関節補綴の不安定性をさらに増大させる病理学的骨吸収を誘発すると考えられる（El-Warrakら、前出）。磨耗粉の形成は炎症反応を悪化させ、最終的に補綴構成要素の弛緩を促進する。El-Warrakら、前出。この弛緩は、疼痛（特に一時的な大腿の疼痛）、不快感、骨関節炎、慢性関節リウマチ、骨壊死、発達性異形成、動作範囲、関節機能の機能、安定性及び強度の減少、並びに進行性の関節及び軟組織の悪化が含まれ得る多数の合併症を生じ得る（Kim,Y.H.ら、2003、J.Bone Joint Surg.Am 85-A(1):109-14）。未治療のままの無菌的な弛緩は、最終的に関節の脱臼を生じ得、これは、痛みを伴いかつ費用のかかる矯正手術若しくは再建手術を必要とするか、又は最後の手段として、関節骨の外科的癒合を必要とする（Widel,J.D.、2002、Clin Orthop.404:139-42）。
【０００９】
関節置換における主な目的は、固定の改善並びに磨耗及び骨溶解の減少を介して寿命を延長することである。現在の治療方法には、薬理学的アプローチ：ＮＳＡＩＤ；前炎症性サイトカイン及びＰＧＥ（２）の同時抑制（Lavigne,P.ら、2002、Osteoarthritis Cartilage 10(11):898-904）；経口のビスホスフォネート及びカルシウム（Soininvaara,T.A.、2002、Calcif.Tissue Int.71(6):472-7）；並びにその他（例えば、一酸化窒素（骨吸収を活性化し得る分子）の生合成の制御（Stea,S.ら、2002、Biomaterials 23(24):4822-8）；オステオプレテゲリン（破骨細胞生成及び骨吸収の天然の負の調節因子）及び遺伝子移入（Yang,S.Y.ら、2002、Arthritis Rheum.46(9):2514-23;及びUlrich-Vinther,M.ら、2002、J.Bone Joint Surg Am 84-A(8):1405-12））が含まれる。しかし、これらの治療を用いてさえ、多数の患者がなお矯正手術を受けなければならない。
【００１０】
最後の手段として、患者は、インプラント修正手術を受け得るか、又は同種移植片増大を示し得る。これらの手順についての合併症の確率はかなりのものであり、この合併症には、治癒できない補綴周囲の骨折、肘頭骨折、永久的な尺骨神経損傷及び三頭筋機能不全が含まれる（Sanchez-Sotelo,J.、2002、J. Bone Joint Surg.Am.84-A(9):1642-50）。従って、関節置換の無菌的弛緩及びそれに関連する症状の治療のためのより有効な治療についての必要性が存在したままである。
【００１１】
２．３  慢性中耳炎
慢性中耳炎（ＣＯＭ）は、感染及び炎症による中耳への長期損傷から生じる種々の兆候、症候及び身体的所見を表わす。この疾患は以下を特徴とする：鼓膜の穿孔、中耳の小さい音伝道骨の瘢痕化又は糜爛、耳損傷から周囲の構造（例えば、内耳の平衡器官又は聴覚器官、顔面神経又は脳及びその被覆物（髄膜））への慢性又は再発性の感染した排膿。慢性中耳炎を引き起こす一般的な感染性因子は、ＲＳウイルス、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、エンテロウイルス及びアデノウイルスである。ＣＯＭについての現在の治療選択肢には、抗菌薬、細胞外抗酸化剤（例えば、鼻エアロゾルによって投与されるグルタチオン、Testa,B.ら、2001、Laryngoscope 111(8):1486-9を参照のこと）、ステロイド（Mandel,E.ら、2002、Pediatrics 110(6):1071-80を参照のこと）、抗生物質（例えば、列挙された感染性因子を標的化する抗生物質）（Cripps A.及びKyd,J.、2003、Immunol.Cell Biol.81(1):46-51を参照のこと）、手術（例えば、鼓膜切開術及びアデノイド切除術（adenoidectomy）、Haynes,D.及びHarley,D.、2002、Otolaryngol Clin.North Am.35(4):827-39を参照のこと）、並びにＣｏ２レーザー補助鼓膜開窓術、Garin,P.ら、2001、J.Clin.Laser Med.Surg.19(4):185-7を参照のこと）が含まれる。従って、慢性中耳炎の治療のためのより有効な治療についての必要性が存在したままである。
【００１２】
２．４  ウィルソン病
ウィルソン病は、肝レンズ核変性症としても知られ、稀な銅代謝の遺伝性全身障害である。ウィルソン病を有する個体は、胆汁中に銅を排泄することができず、従って、肝臓中に銅が蓄積し始める。肝臓の貯蔵能を越えると、銅は、他の器官（特に、脳、眼及び腎臓）中に集中し始める。これは、肝機能の進行性の喪失に起因して、急性若しくは慢性の肝炎（肝臓の炎症）又は肝硬変（重篤な肝臓疾患）を引き起こし得る。肝臓の関与の程度は変動性であり、特定の肝臓酵素の軽度の上昇から完全な肝臓の機能不全までの範囲であり得る。ウィルソン病に関連する症状には、疲労、拒食症、体重減少、全身的な虚弱、腹水症（腹部における流体の蓄積）及び腹部膨張又は黄疸が含まれる。他の所見には、肝臓の拡大（肝腫大）、脾臓の拡大（脾腫）又はそれら両方の拡大（肝脾腫大）が含まれ得る。
【００１３】
ウィルソン病を治療する現在の方法には、キレート化剤を用いて過剰の銅を除去する方法が含まれる。この目的のために使用される最も一般的な薬剤は、Ｄ−ペニシラミン（Ｃｕｐｒｉｍｉｎｅ（登録商標）、Ｄｅｐｅｎ（登録商標））である。この薬物は銅に結合して、次いで尿中に放出される安定な化合物を形成する。Ｄ−ペニシラミンは、身体からピリドキシンすなわちビタミンＢ６を枯渇させる。従って、ピリドキシンを含む栄養補助食品が必要とされる。Ｄ−ペニシラミンの副作用は、軽微な障害から重篤又は生命を脅かす合併症（例えば、再生不良性貧血、免疫複合体腎炎、全身性エリテマトーデス又は重症筋無力症）までの範囲である。いくつかの個体において、神経学的症状がペニシラミン治療の間に悪化し得る。従って、ウィルソン病及びそれに関連する症候を治療する改善された方法についての必要性が当該分野に存在する。
【００１４】
２．５  ゴーラム−スタウト病
ゴーラム−スタウト病（ＧＳＤ）すなわち大量の骨溶解は、悪性又は感染性の障害の兆候を全く有さない、骨の急性の自発的な吸収を特徴とする非常に稀な骨溶解状態である。その病変は、骨格の任意の部分において発症し得、広範な骨の喪失を伴うが良性である。この疾患の稀な性質を考慮すると、その病因論又は可能な治療選択肢についてはほとんど知られていない。ＧＳＤを治療する現在の方法には、放射線療法治療（Handl-Zeller,L.及びHohenberg,G.、1990、Br.J.Radiol.63(747):206-8を参照のこと）、ＩＬ−６に対する中和抗体の使用（Devlin,R.ら、1996、J.Clin.Endocrinol.Metab.81(5):1893-7を参照のこと）、並びに骨移植及び照射（Giraudet-Le,Q.ら、1995、Presse Med.24(15):719-21を参照のこと）が含まれる。従って、ゴーラム−スタウト病の治療のためのより有効な治療についての必要性が存在したままである。
【００１５】
２．６  肥大性肺性骨関節症
肥大性肺性骨関節症（ＨＰＯＡ）は、種々の原発性疾患の１つに関連する二次的疾患であり、通常手首及び膝中の、長骨上の骨膜性の新たな骨を一般に特徴とする。症状には、疼痛、長骨、中足骨、中手骨及び近位指趾骨の遠位端での骨膜下の新たな骨の形成、隣接関節の対称的な関節症、ばち状指の形成、女性化乳房が含まれ得る。ＨＰＯＡ症例のうち９０％は、気管支癌腫、特に末梢扁平細胞腫瘍、他の胸腔内腫瘍、慢性肺敗血症及び慢性肝臓疾患に関連している。Mito,K.ら、2001、Intern Med.40(6):532-50（非小細胞肺癌）、Kishi,K.ら、2002、Lung Cancer 38(3):317-20（肺癌）、Garske,L.及びBell,S.、2002、Chest 121(4):1363-4（嚢胞性線維症に関連する肺癌）を参照のこと。ＨＰＯＡについての現在の治療選択肢には、この原発性疾患について利用可能な任意の治療（例えば、癌治療又は嚢胞性線維症の症状についての治療）が含まれる。さらなる非限定的な治療選択肢には、破骨細胞の骨吸収阻害剤が含まれる（例えば、パミドロネートの静脈内投与、Garske,L.及びBell,S.、2002、Chest 121(4):1363-4を参照のこと）。
【発明の開示】
【００１６】
３．発明の概要
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症及び／若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状の予防、治療、管理及び／又は緩和のためのプロトコルを提供する。特に、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症及び／若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状の現在の単一の薬剤治療又は併用療法より良好な予防プロフィール及び治療プロフィールを提供する治療プロトコルを包含する。本発明は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストを単独で又は少なくとも１種の他の治療と組み合わせて投与する方法を包含し、その結果、安全性が損なわれないままで効力が改善される。本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストを単独で又は少なくとも１種の他の治療と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。一実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである。この実施形態によれば、この抗体又は抗体フラグメントは、治療部分又は薬物にコンジュゲート又は融合することができる。好ましい実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントである。別の実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、治療部分又は薬物にコンジュゲート又は融合されたＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントである。別の実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体ではない。なお別の実施形態において、インテグリンαｖβ３は、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントではない。
【００１７】
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は以下のステップを含む：（ａ）予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の少なくとも１回用量をそれを必要とする被験体に投与するステップ；及び（ｂ）特定の回数の用量（例えば、１回用量、２回用量、３回用量、４回用量、５回用量、６回用量、７回用量、８回用量、９回用量、１０回用量又は１２回用量）のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの投与後の、この被験体におけるインテグリンαｖβ３アンタゴニストの血漿レベル／濃度をモニターするステップ。好ましくは、使用されるインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントである。
【００１８】
本発明は、本発明の予防薬又は治療薬を、治療が必要とされる領域に局所的に（例えば、局所注入により、注射により、インプラントにより）投与する方法を提供し、このインプラントは、多孔性材料若しくは非多孔性材料又はゼラチン性材料（シラスティックメンブレンのような膜及びマトリックス、又は線維を含む）である。特定の実施形態において、本発明の方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の局所用量、及び任意選択で、予防有効量又は治療有効量の少なくとも１種の他の治療（例えば、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【００１９】
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、ｅｘ  ｖｉｖｏ及び／又はｉｎ  ｖｉｖｏの遺伝子治療を使用して、予防有効量又は治療有効量の予防薬又は治療薬（特にインテグリンαｖβ３アンタゴニスト）をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。特定の実施形態において、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、細胞（好ましくは、被験体にとって自己の細胞）を、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含むヌクレオチド配列と接触させるステップ、及びこの細胞をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、細胞（好ましくは、被験体にとって自己の細胞）を、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含むヌクレオチド配列でトランスフェクトするステップ、及びこのトランスフェクトされた細胞をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【００２０】
別の実施形態において、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は以下のステップを含む：（ｉ）細胞（好ましくは、被験体にとって自己の細胞）を、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬をコードする核酸配列を含む第２のヌクレオチド配列と接触させるステップの前、その後又はそれと同時に、この細胞を、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含む第１のヌクレオチド配列と接触させるステップ；並びに（ｉｉ）この細胞をそれを必要とする被験体に投与するステップ。別の実施形態において、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は以下のステップを含む：（ｉ）細胞（好ましくは、被験体にとって自己の細胞）に、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬をコードする核酸配列を含む第２のヌクレオチド配列でトランスフェクトするステップの前、その後又はそれと同時に、この細胞を、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含む第１のヌクレオチド配列でトランスフェクトするステップ；並びに（ｉｉ）このトランスフェクトされた細胞をそれを必要とする被験体に投与するステップ。
【００２１】
別の実施形態において、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含むヌクレオチド配列を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、被験体にインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬をコードする核酸配列を含む第２のヌクレオチド配列を投与するステップの前、その後又はそれと同時に、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含むヌクレオチド配列を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【００２２】
上記実施形態によれば、このヌクレオチド配列は、当該分野で周知の任意の技術を使用して（例えば、レトロウイルスベクターの使用によって、又は直接注射によって、又は微小粒子（microparticle）ボンバードメント（例えば遺伝子銃）の使用によって、又は脂質若しくは細胞表面レセプター若しくはトランスフェクト剤で被覆して、又は核に侵入することが公知のホメオボックス様ペプチドにこのヌクレオチド配列を連結して投与することによって）投与することができる。
【００２３】
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状の予防、治療、管理又は緩和のための併用療法を提供し、この併用療法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の少なくとも１種の他の治療（例えば、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。一実施形態において、本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状の予防、治療、管理又は緩和のための併用療法を提供し、この併用療法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストとは異なる作用機構を有する少なくとも１種の他の治療（例えば、予防薬又は治療薬）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、予防有効量又は治療有効量の骨代謝調節剤（例えば、ゾレドロネートのようなビスホスフォネート）の用量、及び予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト又は骨調節剤以外の少なくとも１種の他の治療（例えば、予防薬又は治療薬）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【００２４】
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の以下の予防薬又は治療薬のいずれかの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤（例えば、ステロイド性及びＮＳＡＩＤ）、鎮痛剤（例えば、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、サリチレート、麻薬、並びに非麻薬及び不安寛解剤の組み合わせ）、亜鉛、キレート化剤、抗関節炎剤（例えば、鎮痛薬、ＮＳＡＩＤ、抗リウマチ剤、糖質コルチコイド、皮膚及び粘膜の因子）、骨代謝調節剤（例えば、ビスホスフォネート、ビタミンＤ化合物及びホルモン）、免疫調節剤、抗生物質、ホルモン置換療法及び／又はメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤、プロスタグランジン産生を阻害する薬剤、分泌型ホスホリパーゼＡ２を阻害する薬剤、リジンデカルボキシラーゼを阻害する薬剤、並びに歯科調製物（例えば、ＰＥＲＩＯＳＴＡＴＴＭ錠及びリンス）。
【００２５】
本発明は、無菌的な関節（例えば股関節）の弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の以下の予防薬又は治療薬のいずれかの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤；抗生物質；抗炎症剤；ホルモン置換療法；メタロプロテイナーゼを阻害する薬剤；抗関節炎剤；鎮痛剤及び／又は骨代謝調節剤。
【００２６】
本発明はまた、歯周疾患又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の以下の予防薬又は治療薬のいずれかの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤；抗生物質；抗炎症剤；歯科調製物（例えば、ＰＥＲＩＯＳＴＡＴＴＭ）；抗関節炎剤及び／又は骨代謝調節剤。
【００２７】
本発明は、ゴーラム−スタウト病又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の以下の予防薬又は治療薬のいずれかの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤（例えば、抗ＩＬ−６抗体）；抗炎症剤；メタロプロテイナーゼを阻害する薬剤；抗関節炎剤及び／又は骨代謝調節剤。
【００２８】
本発明はまた、ウィルソン病又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の以下の予防薬又は治療薬のいずれかの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤；キレート化剤；ビタミン；酢酸亜鉛（Ｇａｌｚｉｎ（登録商標））；抗炎症剤；抗関節炎剤及び／又は骨代謝調節剤。
【００２９】
本発明は、慢性中耳炎又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の以下の予防薬又は治療薬のいずれかのうち少なくとも１種の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤；抗炎症剤；骨代謝調節剤；抗酸化剤（例えば、鼻エアロゾルによって投与されるグルタチオン、Testa,B.ら、2001、Laryngoscope 111(8):1486-9を参照のこと）、抗ウイルス剤及び／又は抗生物質。
【００３０】
本発明はまた、肥大性肺性骨関節症又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬のいずれかの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤（例えば化学療法）；抗炎症剤；骨代謝調節剤、抗関節炎剤及び／又は抗生物質。
【００３１】
特定の実施形態において、本発明は、関節置換の無菌的弛緩に関連する炎症又はその症状を治療、予防、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤；抗関節炎剤；免疫調節剤及び／又は抗生物質。別の特定の実施形態において、本発明は、関節置換の無菌的弛緩に関連する骨吸収（例えば、破骨細胞吸収）又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の予防薬又は治療薬（免疫調節剤；抗関節炎剤；抗炎症剤；骨代謝調節剤及び／又はメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【００３２】
特定の実施形態において、本発明は、歯周疾患に関連する炎症又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤；免疫調節剤；抗関節炎剤及び／又は抗生物質（例えば、ＰＥＲＩＯＳＴＡＴＴＭ）。別の特定の実施形態において、本発明は、歯周疾患に関連する骨吸収（特に破骨細胞吸収）又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤；抗炎症剤；骨代謝調節剤及び／又はメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤。
【００３３】
特定の実施形態において、本発明は、ゴーラム−スタウト病に関連する炎症又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤；免疫調節剤（例えば、抗ＩＬ−６抗体）及び／又は抗関節炎剤。別の特定の実施形態において、本発明は、ゴーラム−スタウト病に関連する骨吸収（特に破骨細胞吸収）又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤（例えば、抗ＩＬ−６抗体）；抗炎症剤；骨代謝調節剤及び／又はメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤。
【００３４】
特定の実施形態において、本発明は、肥大性肺性骨関節症に関連する炎症又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤；免疫調節剤（例えば、化学療法剤）及び／又は抗関節炎剤。別の特定の実施形態において、本発明は、肥大性肺性骨関節症に関連する骨吸収（特に、破骨細胞吸収）又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：免疫調節剤（例えば、化学療法剤）；抗炎症剤；骨代謝調節剤及び／又はメタロプロテイナーゼを阻害する薬剤。
【００３５】
特定の実施形態において、本発明は、ウィルソン病に関連する炎症又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤；免疫調節剤及び／又は抗関節炎剤。別の特定の実施形態において、本発明は、慢性中耳炎に関連する炎症又はその症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の１種又は複数の以下の予防薬又は治療薬の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤；免疫調節剤及び／又は抗生物質。
【００３６】
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、鎮痛剤、抗関節炎剤、骨代謝調節剤、抗生物質、抗炎症剤及び免疫調節剤のような予防薬又は治療薬）を、それを必要とする被験体に投与するステップを含み、この方法において、有効量のこのインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量が、３日に１回、好ましくは４日に１回、５日に１回、６日に１回、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回又は１ヶ月に１回投与される。本発明はまた、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供し、この方法は以下のステップを含む：（ａ）予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量、及び予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、予防薬又は治療薬）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップ；並びに（ｂ）特定の回数の用量（例えば、１回用量、２回用量、３回用量、４回用量、５回用量、６回用量、７回用量、８回用量、９回用量、１０回用量、１１回用量又は１２回用量）のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの投与後の、この被験体におけるインテグリンαｖβ３アンタゴニストの血漿レベル／濃度をモニターするステップ。
【００３７】
本発明は、歯周疾患又はその症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量を、歯周疾患についての以下の治療のうち少なくとも１種と組み合わせてか又はそれに対する補助物として、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：ＣＯ２レーザー治療；歯石除去；根面平滑化；歯周手術。特定の実施形態において、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、鎮痛剤、抗関節炎剤、骨代謝調節剤、抗炎症剤及び歯科調製物のような予防薬又は治療薬）の用量を、被験体に投与するステップをさらに含む。
【００３８】
本発明は、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量を、手術と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。特定の実施形態において、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、鎮痛剤、抗関節炎剤、骨代謝調節剤及び抗炎症剤のような予防薬又は治療薬）の用量を、この被験体に投与するステップをさらに含む。
【００３９】
本発明は、肥大性肺性骨関節症又はそれに関連する症候若しくは症状を予防、治療、管理又は緩和する方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）の用量を、手術と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。特定の実施形態において、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、鎮痛剤、抗関節炎剤、骨代謝調節剤及び抗炎症剤のような予防薬又は治療薬）の用量を、この被験体に投与するステップをさらに含む。
【００４０】
インテグリンαｖβ３アンタゴニストと少なくとも１種の他の治療（例えば、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の予防薬又は治療薬）との組み合わせにより、いずれかの治療単独よりも良好な予防効果又は治療効果が被験体において達成される。特定の実施形態において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストとインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の治療（例えば、予防薬又は治療薬）との組み合わせは、いずれかの治療単独よりも、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態を有する被験体において、２倍、好ましくは３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍又は２０倍良好な予防効果又は治療効果を達成する。他の実施形態において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストとインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の治療（例えば、予防薬又は治療薬）との組み合わせは、いずれかの治療単独よりも、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態を有する被験体において、１０％、好ましくは１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、１２５％、１５０％又は２００％良好な予防効果又は治療効果を達成する。他の実施形態において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストとインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、予防薬又は治療薬）との組み合わせは、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態を有する被験体において、相加効果又は相乗効果よりも高い効果を有する。
【００４１】
本発明の併用療法は、予防効果又は治療効果を達成するための、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態の予防、治療、管理又は緩和のためにインテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて利用されるべき治療（例えば、予防薬又は治療薬）の投薬量を低下させ得、かつ／あるいは歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態を有する被験体へのこのような治療の投与頻度を低下させ得る。本発明の併用療法は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態についての、現在の単一の薬剤治療及び／あるいは既存の併用療法の投与に関連する所望されないか又は有害な副作用を低下又は回避し、それが次いで、この治療プロトコルを用いた場合の患者のコンプライアンスを改善する。さらに、本発明の併用療法は、被験体の生活の質を改善するために、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態を有する被験体へのインテグリンαｖβ３アンタゴニストの投薬量及び／又はインテグリンαｖβ３アンタゴニストの投薬頻度を低下させる。
【００４２】
本発明の併用療法の治療（例えば、予防薬又は治療薬）は、同時又は連続的に被験体に投与することができる。本発明の併用療法の治療（例えば、予防薬又は治療薬）は、周期的にも投与することができる。周期的治療は、これらの薬剤のうち１種に対する抵抗性の発生を低下させるため、これらの薬剤のうち１種の副作用を回避若しくは低下させるため、及び／又はこの治療の効力を改善するために、一定の時間期間にわたる第１の治療（例えば、第１の予防薬又は治療薬）の投与とその後の一定の時間期間にわたる第２の治療（例えば、第２の予防薬又は治療薬）予防薬又は治療薬の投与と、この連続的投与（すなわち周期）を反復するステップとを含む。
【００４３】
本発明の併用療法の治療（例えば、予防薬又は治療薬）は、被験体に同時に投与することができる。用語「同時に」は、正確に同時の予防薬又は治療薬の投与に限定されず、むしろこれは、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び他の薬剤が、次々と同じ時間間隔内で被験体に投与され、その結果、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストが、それらが他の方法で投与された場合よりも増大した利益を提供するように、他の治療（例えば薬剤）と一緒に作用し得ることを意味する。例えば、各治療（例えば、予防薬又は治療薬）は、同時に投与することができるか又は遅れずに異なる時点で任意の順序で連続的に投与することができる。しかし、同時に投与されない場合、これらは、所望の治療効果又は予防効果を提供するように、遅れずに充分に接近して投与されるべきである。各治療（例えば、予防薬又は治療薬）は、任意の適した形態で任意の適切な経路によって別々に投与することができる。種々の実施形態において、これらの治療（例えば、予防薬又は治療薬）は、１５分未満、３０分未満、１時間未満間隔、約１時間間隔、約１時間〜約２時間間隔、約２時間〜約３時間間隔、約３時間〜約４時間間隔、約４時間〜約５時間間隔、約５時間〜約６時間間隔、約６時間〜約７時間間隔、約７時間〜約８時間間隔、約８時間〜約９時間間隔、約９時間〜約１０時間間隔、約１０時間〜約１１時間間隔、約１１時間〜約１２時間間隔、２４時間間隔、４８時間間隔、７２時間間隔、又は１週間の間隔で投与される。好ましい実施形態において、２つ以上の治療（例えば、予防薬又は治療薬）は、同じ患者の来院内に投与される。
【００４４】
これらの併用療法の予防薬又は治療薬は、同じ医薬組成物中で被験体に投与することができる。あるいは、これらの併用療法の予防薬又は治療薬は、別個の医薬組成物中で被験体に同時に投与することができる。これらの予防薬又は治療薬は、同じ投与経路又は異なる投与経路によって被験体に投与することができる。
【００４５】
本発明は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。本発明は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬を含む医薬組成物の使用を包含する。本発明は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、鎮痛剤、抗関節炎剤、骨代謝調節剤、抗炎症剤又は歯科調製物のような予防薬又は治療薬）を含む医薬組成物を提供する。本発明はまた、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト、少なくとも１種の骨代謝調節剤（例えば、ゾレドロネートのようなビスホスフォネート）、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の予防薬又は治療薬、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【００４６】
一実施形態において、この医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含むヌクレオチド配列を含む。別の実施形態において、この医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）をコードする核酸配列を含むヌクレオチド配列、及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬をコードする核酸配列を含むヌクレオチド配列を含む。
【００４７】
特定の実施形態において、医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、少なくとも１種の鎮痛剤及び薬学的に許容される担体を含み、ここでこの鎮痛剤は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストではない。別の実施形態において、医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、少なくとも１種の抗関節炎剤及び薬学的に許容される担体を含み、ここでこの抗関節炎剤は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストではない。別の実施形態において、医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、少なくとも１種の骨代謝調節剤及び薬学的に許容される担体を含み、ここでこの骨代謝調節剤は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストではない。
【００４８】
特定の実施形態において、医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、少なくとも１種の抗炎症剤及び薬学的に許容される担体を含み、ここでこの抗炎症剤は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストではない。別の実施形態において、医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、少なくとも１種の歯科調製物及び薬学的に許容される担体を含み、ここでこの歯科調製物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストではない。別の実施形態において、医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、少なくとも１種の抗生物質及び薬学的に許容される担体を含む。別の実施形態において、医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、少なくとも１種の免疫調節剤（例えば、化学療法剤又は化学療法剤以外の免疫調節剤）及び薬学的に許容される担体を含む。
【００４９】
本発明は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）及び／又はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の予防薬若しくは治療薬の被験体への投与のための徐放性製剤を包含する。この徐放性製剤は、被験体へのこのような薬剤の投薬量及び／又は投与頻度を低下させる。
【００５０】
本発明の医薬組成物は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状の予防、治療、管理又は緩和のために本発明の方法に従って使用することができる。好ましくは、本発明の医薬組成物は滅菌であり、かつ歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状を有する被験体への特定の投与方法のために適した形態である。
【００５１】
本明細書中に記載される組成物及び方法は、歯周疾患（歯肉炎、歯周炎及び歯周症を含むがこれらに限定されない）の予防、治療、管理又は緩和のために有用である。本明細書中に記載される組成物及び方法は、関節置換又は骨置換（例えば、股関節又は膝の置換）の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状（骨溶解（特に補綴周囲の骨溶解）、破骨細胞生成、骨粗鬆症、関節炎及び異形成を含むがこれらに限定されない）の予防、治療、管理又は緩和のためにも有用である。特に、本明細書中に記載される組成物及び方法は、炎症性骨溶解に関連する症状、異常な骨吸収を特徴とする他の障害又は骨喪失を特徴とする障害（例えば骨粗鬆症）の予防、治療、管理又は緩和のために有用である。
【００５２】
本明細書中に記載される組成物及び方法は、慢性中耳炎又はそれに関連する症状若しくは症候の予防、治療、管理又は緩和のために有用である。本明細書中に記載される組成物及び方法は、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病若しくは肥大性肺性骨関節症（ＨＰＯＡ）又はそれに関連する症状若しくは症候の予防、治療、管理又は緩和のためにも有用である。
【００５３】
被験体における歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態の進行、寛解又は停滞は、インテグリンαｖβ３の発現を測定又は検出するためにインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント）を利用してモニター又は評価することができる。歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態の程度を測定、モニター及び評価するための他の技術は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストを使用してインテグリンαｖβ３の発現を測定又は検出するための方法と組み合わせて使用することができる。歯周疾患の程度を測定、モニター及び評価するための技術には以下が含まれるがこれらに限定されない：歯周骨及び付着の喪失を、特にデジタルサブトラクション放射線医学によって測定すること、歯肉の炎症及び出血の程度、抵抗を感じる地点までのポケットの探査深さ、歯の固定された地点（通常、セメント質−エナメル質境）から測定された歯周靭帯の臨床的付着の喪失、Ｘ線によって測定されるような隣接歯槽骨の喪失並びに歯垢蓄積を測定すること。関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する状態の進行又は寛解を測定する当該分野で公知の現在の方法には以下が含まれるがこれらに限定されない：骨再構成の測定、骨溶解、線形／体積測定磨耗、Harris股関節スコア、Merle d'Aubign及び Postelの股関節スコア、McMaster-Toronto Arthritis Patient Preference Disability Questionnaire(MACTAR)、Western Ontario and McMaster University Osteoarthritis Index(WOMAC)、マイクロコンピュータ断層撮影分析によりｉｎ  ｖｉｖｏで骨体積を測定すること、並びに骨組織形態計測分析。
【００５４】
本発明は、包装材料及びこの包装材料内に含まれた被験体への投与に適した形態の本発明の医薬組成物を含む製品を提供する。特に、本発明は、包装材料及びこの包装材料内に含まれたヒトへの投与に適した形態の医薬組成物を含む製品を提供し、ここでこの医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び薬学的に許容される担体を含む。本発明はまた、包装材料及びこの包装材料内に含まれたヒトへの投与に適した形態の２つの医薬組成物を含む製品を提供し、ここでその第１の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び薬学的に許容される担体を含み、第２の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含む。本発明はまた、包装材料及びこの包装材料内に含まれた被験体への投与に適した形態の本発明の医薬組成物を含む製品を提供し、ここでこの医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント、最も好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含む。本発明の製品は、医薬組成物の使用又は投与に関する指示書、あるいは問題の疾患又は障害を適切に予防、治療、管理又は緩和するためにはどうするかについて医師、技術者又は患者にアドバイスする他の情報資料を含み得る。
【００５５】
３．１  用語
本明細書に使用される、タンパク質性薬剤（例えば、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド及び抗体）に関する用語「類似体」は、第２のタンパク質性薬剤と類似した又は同じ機能を保持する（しかし必ずしも第２のタンパク質性薬剤と類似した又は同じアミノ酸配列を含むのでない）タンパク質性薬剤又は第２のタンパク質性薬剤と類似した又は同じ構造を保持するタンパク質性薬剤を意味する。類似したアミノ酸配列を有するタンパク質性薬剤は、次の３つの条件：（ａ）タンパク質性薬剤が第２のタンパク質性薬剤のアミノ酸配列と、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を有すること；（ｂ）タンパク質性薬剤が、第２のタンパク質性薬剤の少なくとも５個の連続アミノ酸残基、少なくとも１０個の連続アミノ酸残基、少なくとも１５個の連続アミノ酸残基、少なくとも２０個の連続アミノ酸残基、少なくとも２５個の連続アミノ酸残基、少なくとも４０個の連続アミノ酸残基、少なくとも５０個の連続アミノ酸残基、少なくとも６０個の連続アミノ酸残基、少なくとも７０個の連続アミノ酸残基、少なくとも８０個の連続アミノ酸残基、少なくとも９０個の連続アミノ酸残基、少なくとも１００個の連続アミノ酸残基、少なくとも１２５個の連続アミノ酸残基，又は少なくとも１５０個の連続アミノ酸残基をコードするヌクレオチド配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされること；及び（ｃ）タンパク質性薬剤が第２のタンパク質性薬剤をコードするヌクレオチド配列と少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも９９％の同一性を有するヌクレオチド配列によりコードされることのうち少なくとも１つの条件を満たす第２のタンパク質性薬剤を意味する。第２のタンパク質性薬剤と類似した又は同じ構造を保有するタンパク質性薬剤は、第２のタンパク質性薬剤と類似した二次、三次又は四次構造をもつタンパク質性薬剤を意味する。タンパク質性薬剤の構造は当業者に公知の方法により決定することができ、かかる方法として、限定されるものでないが、ペプチドのアミノ酸配列決定、Ｘ線結晶学、核磁気共鳴、円偏光二色性、及び結晶学的電子顕微鏡が挙げられる。
【００５６】
２つのアミノ酸配列又は２つの核酸配列の同一性パーセントを決定するには、最適な比較のために配列同士をアラインメントする（例えば、第２のアミノ酸又は核酸配列との最適なアラインメントのために第１のアミノ酸又は核酸配列の配列中にギャップを導入することができる）。その後、対応するアミノ酸位置又はヌクレオチド位置のアミノ酸残基又はヌクレオチドを比較する。第１の配列のある位置が第２の配列の対応する位置と同じアミノ酸残基又はヌクレオチドで占められている場合、それらの分子はその位置で同一となる。２つの配列間の同一性パーセントは、それらの配列が共有する同一位置の数の関数である（すなわち、同一性％＝重なり合う同一位置の数／位置の総数×１００％）。ある実施形態では、２つの配列が同じ長さである。
【００５７】
２つの配列間の同一性パーセントはまた、数学的アルゴリズムを使っても決定することができる。２つの配列の比較に利用される数学的アルゴリズムの好適な非限定的な例は、Karlin及びAltschul, 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87: 2264-2268に記載され、Karlin及びAltschul, 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 5873-5877において改変されたアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、Altschulら, 1990, J. Mol. Biol. 215: 403に記載のＮＢＬＡＳＴ及びＸＢＬＡＳＴプログラムに組み込まれている。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索を、ＮＢＬＡＳＴヌクレオチドプログラムパラメーターセット（例えば、スコア＝１００、ワード長＝１２）を用いて行うことにより、本発明の核酸分子と相同なヌクレオチド配列を得ることができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索を、ＸＢＬＡＳＴプログラムパラメーターセット（例えば、スコア＝５０、ワード長＝３）を用いて行うことにより、本発明のタンパク質分子と相同なアミノ酸配列を得ることができる。比較の目的でギャップを挿入したアラインメントを得るためには、Gapped BLASTをAltschulら, 1997, Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402に記載のように使用する。あるいはまた、ＰＳＩ−ＢＬＡＳＴを用いて、分子間の遠い関係を検出する反復検索を行うこともできる（同上）。ＢＬＡＳＴ、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴ、及びＰＳＩ−Ｂｌａｓｔプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴ及びＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメーターを使用してもよい（例えば、ＮＣＢＩウェブサイトを参照のこと）。配列比較に利用される数学的アルゴリズムの別の好ましい非限定的な例は、Myers及びMiller, 1988, CABIOS 4:11-17に記載のアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、ＧＣＧ配列アラインメントソフトウェアパッケージの一部であるＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれている。アミノ酸配列の比較のためにＡＬＩＧＮプログラムを利用する場合は、ＰＡＭ１２０加重残基表（weight residue table）、ギャップ長ペナルティー１２、及びギャップペナルティー４を使用してもよい。
【００５８】
２つの配列間の同一性パーセントは、上述したものと類似の技法を用いて、ギャップを挿入して又は挿入しないで決定することができる。同一性パーセントを計算するには、典型的には、正確な一致（マッチ）だけを数える。
【００５９】
本明細書中で用いる、非タンパク質性類似体に関する用語「類似体」は、第１の有機若しくは無機分子と類似した又は同じ機能を有し、かつ第１の有機若しくは無機分子と構造上類似している第２の有機若しくは無機分子を意味する。
【００６０】
本明細書中で用いる用語「アンタゴニスト（拮抗薬）」は、別の分子の機能、活性及び／又は発現を遮断し、阻害し、低減し、又は中和する任意のタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、ペプチド擬似体、糖タンパク質、抗体、抗体フラグメント、炭水化物、核酸、有機分子、無機分子、大分子、又は小分子を意味する。様々な実施形態において、拮抗薬は、別の分子の機能、活性及び／又は発現を、リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）のような対照と比べて、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％低減する。
【００６１】
本明細書中で用いる用語「抗インテグリンαｖβ３抗体」及び「インテグリンαｖβ３抗体」とは、セクション４．１．１に記載の抗体を意味する。
【００６２】
本明細書中で用いる用語「抗体」は、モノクローナル抗体、多重特異性抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、ラクダ化抗体、キメラ抗体、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、１本鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、及び抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、本発明の抗体に対する抗Ｉｄ抗体を含む）、並びに前記抗体のエピトープ結合フラグメントを意味する。特に、抗体は免疫グロブリン分子及び免疫グロブリン分子の免疫学的に活性なフラグメント（すなわち、抗原結合部位を含む分子）を含む。免疫グロブリン分子はいずれのタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスのものであってもよい。
【００６３】
本明細書中で用いる、タンパク質性薬剤（例えば、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド及び抗体）に関する用語「誘導体」は、アミノ酸残基の置換、欠失及び／又は付加の導入により改変されたアミノ酸配列を含むタンパク質性薬剤を意味する。本明細書中で用いる用語「誘導体」はまた、任意のタイプの分子のタンパク質性薬剤との共有結合により修飾されたタンパク質性薬剤も意味する。例えば、限定されるものでないが、抗体は、グリコシル化、アセチル化、ペグ（ＰＥＧ）化、リン酸化、アミド化、誘導体化（公知の保護基／ブロッキング基による）、タンパク質加水分解による切断、細胞性リガンド又は他のタンパク質との結合などによって修飾することができる。タンパク質性薬剤の誘導体は当業者に公知の技法を用いて化学的修飾により調製することができ、例えば、限定されるものでないが、特定の化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝的合成などが含まれる。さらに、タンパク質性薬剤の誘導体は１個以上の非古典的アミノ酸を含んでいてもよい。タンパク質性薬剤の誘導体はそれが誘導された元来のタンパク質性薬剤と類似の又は同一の機能を保持している。
【００６４】
本明細書中で用いられる、非タンパク質性誘導体に関する用語「誘導体」は、第１の有機又は無機分子の構造に基づいて形成された第２の有機又は無機分子を意味する。有機分子の誘導体には、限定されるものでないが、例えば、ヒドロキシル、メチル、エチル、カルボキシル又はアミノ基の付加又は欠失により修飾された分子が含まれる。有機分子はまた、エステル化、アルキル化及び／又はリン酸化されていてもよい。
【００６５】
本明細書中で用いられる用語「障害」又は「疾患」は互換的に用いられ、被験体の状態を意味する。特に「歯周疾患」という用語は、「歯周障害」と互換的に用いられる。
【００６６】
本明細書中で用いる用語「有効量」は、疾患若しくは障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はその症候の進行、重篤度及び／又は期間を低減するか又は改善し、疾患若しくは障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の再発を防止し、疾患若しくは障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）に関連する症候群の発症又は発達を防止し、あるいは別の治療の予防効果又は治療効果を増大するために十分な治療薬の量を意味する。疾患若しくは障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）を診断又は検出することに関して、インテグリンαｖβ３アンタゴニストの「有効量」は、インテグリンαｖβ３の発現を検出するために有効な量である。
【００６７】
本明細書中で用いる用語「エピトープ」は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトの体内で抗原性又は免疫原活性を有するポリペプチド又はタンパク質の断片を意味する。免疫原活性を有するエピトープは、動物の体内で抗体応答を引き出すポリペプチド又はタンパク質のフラグメントである。抗原活性のあるエピトープは、当業者に公知の方法（例えば、イムノアッセイ）で測定したとき、抗体が免疫特異的に結合するポリペプチド又はタンパク質の断片である。抗原性エピトープは必ずしも免疫原性である必要はない。
【００６８】
本明細書中に用いる用語「断片（フラグメント）」は、別のポリペプチド又はタンパク質（抗体）のアミノ酸配列の少なくとも５個の連続アミノ酸残基、少なくとも１０個の連続アミノ酸残基、少なくとも１５個の連続アミノ酸残基、少なくとも２０個の連続アミノ酸残基、少なくとも２５個の連続アミノ酸残基、少なくとも４０個の連続アミノ酸残基、少なくとも５０個の連続アミノ酸残基、少なくとも６０個の連続アミノ酸残基、少なくとも７０個の連続アミノ酸残基、少なくとも８０個の連続アミノ酸残基、少なくとも９０個の連続アミノ酸残基、少なくとも１００個の連続アミノ酸残基、少なくとも１２５個の連続アミノ酸残基、少なくとも１５０個の連続アミノ酸残基、少なくとも１７５個の連続アミノ酸残基、少なくとも２００個の連続アミノ酸残基、又は少なくとも２５０個の連続アミノ酸残基のアミノ酸配列を含むペプチド又はポリペプチドを意味する。特定の実施形態においては、ポリペプチド又はタンパク質の断片はそのポリペプチド又はタンパク質の機能を少なくとも１つ保持する。別の実施形態において、ポリペプチドの断片は、第２の異なるポリペプチド又はタンパク質の２つ、３つ又はそれ以上の機能を保持する。好ましくは、抗体のフラグメントは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する能力を保持する。
【００６９】
本明細書中で用いる用語「融合タンパク質」は、第１のタンパク質、ポリペプチド又はその機能性断片、類似体若しくは誘導体のアミノ酸配列と異種タンパク質又はポリペプチド（すなわち、第１のタンパク質、ポリペプチド又はその機能性断片、類似体若しくは誘導体と天然には結合していない異なる第２のタンパク質、ポリペプチド又はその断片、類似体若しくは誘導体）のアミノ酸配列を含むるポリペプチド又はタンパク質を意味する。一実施形態においては、融合タンパク質は異種タンパク質、ポリペプチド又はペプチドと融合した予防薬若しくは治療薬を含むものであってもよい。この実施形態によると、異種タンパク質、ポリペプチド又はペプチドは、予防薬若しくは治療薬の異なるタイプであってもなくてもよい。好ましい実施形態において、融合タンパク質は、異種タンパク質、ポリペプチド、又はペプチドと融合する前の元のタンパク質、ポリペプチド又はペプチドの活性と比較して改善された活性を有する又は保持する。
【００７０】
本明細書中で用いる用語「宿主細胞」は、ある核酸分子を用いてトランスフェクト又は形質転換された被験細胞及びかかる細胞の子孫又は潜在的子孫を意味する。かかる細胞の子孫は、後の世代で起こりうる突然変異若しくは環境上の影響のため、あるいは核酸分子の宿主細胞ゲノムへの組込みのため、核酸分子を用いてトランスフェクトされた親細胞と同一でなくてもよい。
【００７１】
本明細書中で用いる「ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする」は、お互いに少なくとも３０％（好ましくは３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、又は９８％）同一性を有するヌクレオチド配列同士が、典型的にはお互いとハイブリダイズしたまま残る、ハイブリダイゼーション及び洗浄の条件を記載する。そのようなストリンジェントな条件は当業者に公知であり、「Current Protocols in Molecular Biology」, John Wiley & Sons, N. Y. (1989), 6.3.1-6.3.6に見出すことができる。一般的に、ストリンジェントな条件は、特定のイオン強度ｐＨとして特異的配列についての熱融解点（Ｔｍ）よりも約５〜１０℃低くなるように選択される。Ｔは、（特定のイオン強度、ｐＨ及び核酸濃度の条件下で）標的に対して相補的なプローブの５０％が平衡状態で標的配列とハイブリダイズする温度である（標的配列が過剰に存在するため、そのＴｍでは、プローブの５０％が平衡状態で占有される）。ストリンジェントな条件とは、塩濃度が約１．０Ｍ未満のナトリウムイオンであり、典型的にはｐＨ７．０〜８．３において約０．０１〜１．０Ｍナトリウムイオン濃度（又は他の塩）であり、温度が、短いプローブ（例えば１０〜５０ヌクレオチド）の場合には少なくとも約３０℃、長いプローブ（例えば５０ヌクレオチド以上）の場合には少なくとも約６０℃の条件である。ストリンジェントな条件はまた、例えばホルムアミドなどの脱安定化剤の添加により達成しうる。選択的又は特異的ハイブリダイゼーションについては、陽性シグナルは、バックグラウンドハイブリダイゼーションの少なくとも２倍、好ましくは１０倍である。
【００７２】
一つの非限定的な例では、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件は、６×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）中の約４５℃でのハイブリダイゼーション、続いて、０．１×ＳＳＣ、０．２％ＳＤＳ中の約６８℃での１回以上の洗浄からなる。好ましい非限定的な例では、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件は、６×ＳＳＣ中の約４５℃でのハイブリダイゼーション、続いて、０．２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ中の約５０〜６５℃での１回以上の洗浄（すなわち、５０℃、５５℃、６０℃又は６５℃での１回以上の洗浄）からなる。本発明の核酸は、これらの条件下で、Ａ又はＴヌクレオチドだけから構成されるヌクレオチド配列と専らハイブリダイズする核酸分子を含まないことが判る。
【００７３】
本明細書中で用いる「免疫調節薬」なる用語及びその複数形、「免疫調節剤」又は「イミュノモジュラント」を含むがそれに限らない変形語は、宿主の免疫系を調節する薬剤（作用薬）をさす。特定の実施形態において、免疫調節薬は被験体の免疫応答の一態様をシフトさせる薬剤である。ある実施形態において、免疫調節薬は被験体の免疫系を抑制又は低下させる薬剤（すなわち免疫抑制薬）である。他の特定の実施形態では、免疫調節薬は被験体の免疫系を活性化又は上昇させる薬剤（すなわち免疫刺激薬）である。本発明によれば、本発明の併用療法で用いる免疫調節薬にはインテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体が含まれない。免疫調節薬としては、限定するものではないが、小分子、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸（例えば、限定するものではないがアンチセンスヌクレオチド配列、トリプルヘリックス、及び生物学的に活性なタンパク質、ポリペプチド又はペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むＤＮＡ及びＲＮＡヌクレオチド）、抗体、合成若しくは天然の無機分子、擬似薬剤、及び合成若しくは天然の有機分子が挙げられる。
【００７４】
本明細書中で用いる用語「抗原と免疫特異的に結合する」及び類似の用語は、ある抗原又は断片と特異的に結合するが、他の抗原と特異的に結合しないペプチド、ポリペプチド、タンパク質、融合タンパク質、及び抗体若しくはそのフラグメントを意味する。抗原と免疫特異的に結合するペプチド、ポリペプチド、タンパク質、融合タンパク質又は抗体は、例えば、イムノアッセイ、ＢＩＡｃｏｒｅ、又は当技術分野で公知の他のアッセイで測定したとき、他のペプチド、ポリペプチド、タンパク質、融合タンパク質又は抗体とより低い親和性で結合しうる。抗原と免疫特異的に結合する抗体又はフラグメントは、関連する抗原と交差反応しうる。好ましくは、抗原と免疫特異的に結合する抗体又はフラグメントは他の抗原と交差反応しない。
【００７５】
本明細書中で用いる用語「インテグリンαｖβ３と免疫特異的に結合する」及び類似の用語は、インテグリンαｖβ３又はその断片と特異的に結合するが、他のポリペプチドと特異的に結合しないペプチド、ポリペプチド、タンパク質、融合タンパク質及び抗体又はそのフラグメントを意味する。インテグリンαｖβ３と免疫特異的に結合するペプチド、ポリペプチド、タンパク質、融合タンパク質、抗体又はそのフラグメントは、例えば、イムノアッセイ、ＢＩＡｃｏｒｅ、又は当技術分野で公知の他のアッセイで測定したとき、より低い親和性で他のペプチド、ポリペプチド、タンパク質、融合タンパク質、抗体又はそのフラグメントと結合してもよい。インテグリンαｖβ３と免疫特異的に結合する抗体又はフラグメントは、関連する抗原と交差反応してもよい。好ましくは、インテグリンαｖβ３又はその断片と免疫特異的に結合する抗体又はフラグメントは、他の抗原と交差反応しない。インテグリンαｖβ３と免疫特異的に結合する抗体又はフラグメントは、例えば、イムノアッセイ、ＢＩＡｃｏｒｅ、又は当技術分野で公知の他の技法を用いて同定することができる。或る抗体又はそのフラグメントが、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）や酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）などの実験手法を用いて測定したとき、他のどのような交差反応性の抗原と結合するより高い親和性でインテグリンαｖβ３と結合するとき、その抗体又はフラグメントはインテグリンαｖβ３と特異的に結合することになる。例えば、抗体特異性に関する考察については、Paul編, 1989, 「基礎免疫学（Fundamental Immunology）」 Second Edition, Raven Press, New York, pp.332-336を参照。一実施形態において、融合タンパク質であるインテグリンαｖβ３と免疫特異的に結合する抗体は、インテグリンαｖβ３である該融合タンパク質の一部と特異的に結合する。
【００７６】
本明細書中で用いる用語「併用して」又は「組合せて」は２種以上の治療（例えば２種以上の予防薬及び／又は治療薬）を使用することを意味する。用語「併用して」又は「組合せて」の使用は、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）を有する被験体に治療（予防薬及び／又は治療薬）を投与する順序を制限するものでない。第１の治療（例えば予防薬若しくは治療薬）を第２の治療（例えば、第２の予防薬若しくは治療薬）の投与前（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、又は１２週間前）に、投与と同時に、又は投与後（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、又は１２週間後）に、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）を有する被験体に投与することができる。
【００７７】
本明細書中で用いる「インテグリンαｖβ３」なる用語は、インテグリンαｖβ３のヘテロ二量体、その類似体、誘導体若しくは断片、又はインテグリンαｖβ３、その類似体、誘導体又は断片を含む融合タンパク質をいう。インテグリンαｖβ３はいかなる種由来のものであっても良い。インテグリンαｖβ３のヌクレオチド及び／又はアミノ酸配列は、文献中又は公共のデータベースに見出すことができ、あるいはヌクレオチド及び／又はアミノ酸配列は、当業者に公知のクローニング及び配列決定技術を用いて決定することができる。例えば、ヒトインテグリンαｖβ３のヌクレオチド配列は、ＧｅｎＢａｎｋデータベース中に見つけることができる（例えばαｖについて登録番号Ｎｏ．ＮＭ＿００２２１０、β３について登録番号Ｎｏ．Ｌ２８８３２を参照のこと）。ヒトαｖβ３のアミノ酸配列はＧｅｎＢａｎｋデータベース中に見つけることができる（例えばαｖについて登録番号Ｎｏ．ＡＡＡ６１６３１、β３について登録番号Ｎｏ．Ｓ４４３６０を参照のこと）。好ましい実施形態において、インテグリンαｖβ３はヒトインテグリンαｖβ３、その類似体、誘導体又は断片である。
【００７８】
好ましい実施形態において、インテグリンαｖβ３はヒトインテグリンαｖβ３、その類似体、誘導体又は断片である。
【００７９】
タンパク質性薬剤（例えば、ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）に関して本明細書中で用いる用語「単離された」は、それが由来する細胞又は組織源からの細胞性物質又は混入タンパク質を実質的に含まないか、それが化学合成されたものであるときは化学前駆体又は他の化学物質を実質的に含まないタンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）を意味する。用語「細胞性物質を実質的に含まない」は、タンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）が細胞から単離されるか又は組換えで生産されたものであって、細胞の細胞成分から分離されているタンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）の調製物を意味する。従って、細胞性物質を実質的に含まないタンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）は、約３０％、２０％、１０％又は５％（乾燥重量基準）未満の量の異種タンパク質（本明細書では「混入タンパク質」ともいう）を含有するタンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）の調製物を含む。タンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）が組換えにより生産されたものであるときは、培地をも実質的に含まないことが好ましく、すなわち、培地はタンパク質調製物の体積の約２０％、１０％又は５％未満となるようにする。タンパク質性薬剤が化学合成により調製されたものであるときは、化学前駆体又は他の化学物質を実質的に含まないことが好ましく、例えばペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体の合成に伴う化学前駆体又は他の化学物質から分離される。したがって、そのようなタンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）の調製物は、約３０％、２０％、１０％又は５％（乾燥重量基準）未満の化学前駆体又は目的のタンパク質性薬剤（ペプチド、ポリペプチド、融合タンパク質、又は抗体）以外の化合物を含有する。好ましい実施形態においては、本発明の抗体が単離される。
【００８０】
核酸分子に関して本明細書中で用いる用語「単離された」は、その核酸分子の天然源中に存在する他の核酸分子から分離されている核酸分子を意味する。さらに、ｃＤＮＡ分子のような「単離された」核酸分子は、組換え法により生産された場合には他の細胞性物質若しくは培地を実質的に含まず、また、化学的に合成された場合には化学前駆体若しくは他の化学物質を実質的に含まない。好ましい実施形態においては、本発明の抗体をコードする核酸分子が単離される。
【００８１】
タンパク質性薬剤又は核酸以外の有機又は無機分子（小分子又は高分子のいずれも）に関して本明細書中で用いる用語「単離された」は、異なる有機又は無機分子を実質的に含まない有機又は無機分子を意味する。好ましくは、有機又は無機分子は、第２の異なる有機又は無機分子を６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９９％含まないものである。好ましい実施形態において、有機又は無機分子は単離されている。
【００８２】
本明細書中で用いる用語「管理する」及び「管理」は、被験体に、疾患の治癒をもたらさない治療（例えば、予防薬若しくは治療薬）から引き出す有益な効果を意味する。ある特定の実施形態において、被験体は疾患の進行又は悪化を防止するために、疾患を「管理する」ための１種以上の治療（例えば、予防薬若しくは治療薬）を投与される。
【００８３】
本明細書中で用いる用語「非応答性」及び「不応性」は、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）のための現在利用可能な治療（予防薬若しくは治療薬）であって、臨床上、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）に関連する１以上の症候を緩和するのに十分でない上記予防薬若しくは治療薬を用いて治療された患者を意味する。典型的には、そのような患者は重症の持続的活動性の疾患を患っており、疾患又は障害に関連する症候又はその症状を改善するために更なる治療を必要とする。
【００８４】
本明細書中で用いる「予防する」及び「予防」なる用語は、治療（例えば予防薬）の投与、併用療法（例えば予防薬又は治療薬の併用）の投与により結果的に生じる、被験体における疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はその症候の発達、再発又は発症の防止を意味する。
【００８５】
本明細書中で用いる「予防薬」なる用語は、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の予防に使用されるあらゆる薬剤をさす。特定の実施形態において、「予防薬」なる用語はインテグリンαｖβ３に特異的に結合する抗体をさす。特定の他の実施形態では、「予防薬」なる用語はインテグリンαｖβ３アンタゴニストを意味しない。また別の実施形態において、「予防薬」なる用語は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の薬剤をいう。好ましくは、予防薬は疾患又は障害（例えば、関節置換の無菌的弛緩若しくはこれに関連する症状、又は歯周疾患）の開始、発達、進行及び／又は重篤度を防止したり遅らせたりするために、有用であることが知られているか、使用されていたか、あるいは現在使用されている薬剤である。予防薬は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎ  ｖｉｖｏで有する１以上の効果に基づいて異なる薬剤として同定される。
【００８６】
本明細書中で用いる「予防有効量」とは、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はその症候の発達、再発又は発症を防止するのに、あるいは別の治療（例えば別の予防薬又は治療薬）の予防効果を増大又は改善するのに十分な治療（例えば予防薬）の量のことである。薬剤の予防有効量の好適な投与量の例は、下記のセクション４．５．２に記載する。
【００８７】
本明細書中で用いる「予防プロトコル」とは、少なくとも１つの予防薬の投与量とタイミングの投薬方法（ｒｅｇｉｍｅｎ）を意味する。
【００８８】
本明細書中で用いる「プロトコル」には投薬スケジュール及び投薬方法が含まれる。ここにおいてプロトコルは使用方法のことであり、予防及び治療上のプロトコルを含む。
【００８９】
本明細書中で用いる「副作用」とは、予防薬若しくは治療薬の望ましくない不利な作用を包含する。不利な作用は常に望まれていないが、望まれない作用が必ずしも不利とは限らない。予防薬若しくは治療薬からの不利な作用は有害であったり、不快であったり、危険であったりする。
【００９０】
本明細書中で用いる「小分子」及び類似の用語は、限定されるものでないが、約１０，０００グラム／モルより小さい分子量を有するペプチド、ペプチド擬似体、アミノ酸、アミノ酸類似体、ポリヌクレオチド、ポリヌクレオチド類似体、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、有機又は無機化合物（すなわち、ヘテロ有機及び有機金属化合物を含む）、約５，０００グラム／モルより小さい分子量を有する有機又は無機化合物、約１，０００グラム／モルより小さい分子量を有する有機又は無機化合物、約５００グラム／モルより小さい分子量を有する有機又は無機化合物、並びにかかる化合物の塩、エステル、及びその他の製薬上許容される形態を包含する。
【００９１】
本明細書では用語「被験体」及び「患者」は相互交換可能に用いられる。本明細書中で用いる「被験体」は、動物、好ましくは、限定されるものでないが、非霊長類（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ネコ、イヌ、ラット、及びマウス）及び霊長類（例えば、チンパンジー、マカクザルのようなサル及びヒト）を含む哺乳動物、そしてより好ましくはヒトを意味する。一実施形態において、被験体は、家畜動物（例えば、ウマ、ブタ、又はウシ）、ペット（例えば、ネコ、イヌ又はモルモット）、又は実験動物（マウス又はラット）である。別の実施形態において、被験体は、哺乳動物、好ましくは、関節置換の無菌的弛緩を有する又はそれに関連する症状を有するヒトである。別の実施形態においては、被験体は、哺乳動物、好ましくは臀部若しくは膝置換の無菌的弛緩を有する又はそれに関連する症状を有するヒトである。別の実施形態において、被験体は、哺乳動物、好ましくは歯周疾患を有するヒトである。別の実施形態において、被験体は、哺乳動物、好ましくは歯周疾患を発症するリスクの高いヒト、例えば、喫煙者、公衆衛生が不良な被験体）、特定のグラム陰性細菌（例えば、ポルフィロモナス・ギンギバリス、プレボテラ・インテルネディア、バクテリオイデス・ホルシタス、トレポネマ・デンティコラ、及びアクチノバチルス・アクチノマイセテコミタンス）の存在が増大した被験体、歯肉過剰及び炎症となりうる特定の処方薬、例えば抗癲癇薬（例：フェニトイン（ＤＩＬＡＮＴＩＮＴＭ））、移植患者における免疫抑制療法に使用する薬剤（例：シクロスポリン）、及び心疾患に用いられる種々のカルシウムチャネル遮断薬などを摂取する被験体である。別の実施形態において、被験体は、哺乳動物、好ましくはゴーラム−スタウト病を有するヒトである。別の実施形態において、被験体は哺乳動物、好ましくはウィルソン病を有するヒトである。別の実施形態において、被験体は哺乳動物、好ましくは慢性中耳炎を有するヒトである。別の実施形態において、被験体は哺乳動物、好ましくは肥大性肺性骨関節症を有するヒトである。
【００９２】
本明細書中で用いる用語「相乗作用」は、２以上の単一薬剤の相加作用よりも効果的である治療の組合わせ（例えば、予防薬若しくは治療薬の組合せ）を意味する。治療（例えば、予防薬若しくは治療薬）の組合せの相乗作用により、少なくとも１つの薬剤の投与量を少なくすることができ、並びに／あるいは疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）を有する被験体への上記治療（例えば薬剤）の投与回数を減らすことが可能である。治療（予防薬若しくは治療薬）の投与量を少なくし、かつ／又は上記治療（例えば薬剤）の投与回数を減らすことができるということは、治療（例えば薬剤）の被験体への投与に伴う毒性を減らし、しかも疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の予防、治療、管理又は改善における上記薬剤の効力を低下させることがない。その上、相乗作用により、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の予防、治療、管理又は改善における治療（例えば薬剤）の効力を改善することができる。最後に、治療（例えば、予防薬若しくは治療薬）の組合わせの相乗作用により、単一療法の使用に伴う有害な又は望ましくない副作用を回避し又は軽減することができる。
【００９３】
本明細書中で用いる「治療薬」とは、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はその症候の治療、管理又は改善（緩和）に使用することができる薬剤を意味する。特定の実施形態において、「治療薬」という用語はインテグリンαｖβ３アンタゴニストを指す。特定の他の実施形態では、「治療薬」という用語はインテグリンαｖβ３アンタゴニストを意味しない。また別の実施形態において、用語「治療薬」とは、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の薬剤を意味する。好ましくは、治療薬は疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はその症候を治療又は改善するために、有用であることが知られているか、使用されていたか、あるいは現在使用されている薬剤である。治療薬は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎ  ｖｉｖｏで該薬剤が有する１以上の効果に基づいて、別の薬剤として特性付けされることがある。例えば、特定の抗炎症剤は、抗関節炎剤として特性付けることもできる。
【００９４】
本明細書中で用いる「治療有効量」とは、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はその症候の重篤度を低減するか、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はその症候の持続期間を低減するか、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の症候を改善するか、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の有害事象を防止するか、疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の退行を引き起こすか、あるいは他の治療（例えば他の治療薬）の治療効果を増大若しくは改善するのに十分な治療（例えば治療薬）の量をいう。特定の実施形態において、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状の治療に関して、治療有効量とは、被験体における周囲人工骨欠損の割合を低減する治療薬の量を意味する。好ましくは、治療薬の治療有効量は、例えば、骨再モデリングの量、骨溶解、直線／容量存在度（wear）、Ｈａｒｒｉｓヒップスコア、Ｍｅｒｌｅ ｄ’Ａｕｂｉｇｎ及びＰｏｓｔｅｌヒップスコア、ＭｃＭａｓｔｅｒ−Ｔｏｒｏｎｔｏ関節炎患者選択不能力質問（ＭＡＣＴＡＲ）、Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｏｎｔａｒｉｏ ａｎｄ ＭｃＭａｓｔｅｒ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ変形性関節炎インデックス（ＷＯＭＡＣ）、マイクロコンピュータ化断層撮影解析及び骨組織形態計測分析によるｉｎ ｖｉｖｏでの骨容量の測定により測定した場合に、ＰＢＳ等の対照と比較して少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％、例えば被験体における周辺骨欠損の割合を低減する。他の実施形態において、歯周疾患の治療に関しては、治療有効量は、被験体における歯茎の炎症の量が低減する治療薬の量である。好ましくは、治療薬の治療有効量は、例えば、歯肉の紅斑（赤味）、浮腫（膨潤）、出血並びに過敏性及び圧痛の程度により測定した場合に、ＰＢＳ等の対照と比較して少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なく��も９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％、被験体における歯茎の炎症の程度を低減する。他の実施形態において、慢性中耳炎の治療に関しては、治療有効量は、被験体における炎症の量（特に耳内の炎症の量）が低減する治療薬の量である。好ましくは、治療薬の治療有効量は、例えば、中耳の紅斑（赤味）、浮腫（膨潤）、出血並びに過敏性及び圧痛の量により測定した場合に、ＰＢＳ等の対照と比較して少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％、被験体における炎症の量を低減する。他の実施形態において、ゴーラム−スタウト病及び肥大性肺性骨関節症の治療に関しては、治療有効量は、被験体における骨吸収の量を低減する治療薬の量である。好ましくは、治療薬の治療有効量は、例えば、マイクロコンピュータ断層撮影法又は骨組織分析によりｉｎ ｖｉｖｏで骨容積を測定することにより骨再形成又は骨溶解の量を測定した場合に、ＰＢＳ等の対照と比較して少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％、被験体における骨再吸収の量を低減する。
【００９５】
本明細書中で用いる「治療プロトコル」とは、少なくとも１つの治療薬を投与する際の用量及びタイミングの計画をさす。
【００９６】
本明細書中で用いる「治療（therapies又はtherapy）」又は「療法」とは、医療関係者（例えば医師又は看護士）又は当分野における熟練した研究者に公知の疾患又は障害（例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）又はそれに関連する症候又は症状の予防、治療、管理又は改善において使用できる任意のプロトコル、方法及び／又は薬剤をいうことができる。特定の実施形態において、用語「治療」とは、鎮痛薬、抗炎症薬、歯科用調製物、抗関節炎薬、メタロプロテイナーゼ阻害剤、抗生物質（ＰｅｒｉｏｓｔａｔＴＭなど）、キレート化剤、酢酸亜鉛（Ｇａｌｚｉｎ（登録商標））、骨代謝調節剤、ホルモン、ビタミン、免疫調節薬、外科手術、並びに／あるいは、医師、看護士又は他の医療従事者に公知の、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状の治療に有用な他の治療を意味する。
【００９７】
本明細書中で用いる「治療する」及び「治療」とは、少なくとも１つの治療（例えば治療薬又は予防薬）の投与（適用）により生じる疾患又は障害（歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状）の進行、重篤度、及び／若しくは持続期間の低減又は改善、又は該疾患若しくは障害と関連した症候の改善をさす。特定の実施形態において、上記用語は、炎症と関連した１以上の関節、臓器又は組織の腫れの改善、又は痛みの改善を意味する。他の実施形態において、かかる用語は、骨吸収の低減をいう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００９８】
４．発明の詳細な説明
本発明は、関節置換の無菌的置換若しくはそれに関連する症状、又は歯周疾患のための従来の単一薬剤療法又は併用療法よりも良好な予防又は治療プロフィールをもたらす予防及び治療プロトコールを包含する。本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、治療、管理又は改善のためのインテグリンαｖβ３アンタゴニスト療法を提供する。特に、本発明は、必要がある被験体に、予防又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくはインテグリンαｖβ３抗体、より好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）を単独で又はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１つの他の治療（例えば少なくとも１つの他の予防薬又は治療薬）の予防又は治療有効量と併用して投与することを含む、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、治療、管理又は改善のための予防及び治療プロトコールを提供する。
【００９９】
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、治療、管理又は改善において使用するための、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくはインテグリンαｖβ３抗体、より好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）を含む医薬組成物及び製品を提供する。本発明はまた、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、治療、管理又は改善において使用するための、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（好ましくはインテグリンαｖβ３抗体、より好ましくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント）及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１つの他の予防薬又は治療薬を含む医薬組成物及び製品を提供する。本発明はまた、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状を診断し、検出し、及びその進行、退行又は停滞をモニターする方法を包含する。
【０１００】
４．１  インテグリンαＶβ３アンタゴニスト
当業者に公知のいずれのインテグリンαＶβ３アンタゴニストを本発明の方法及び組成物に利用してもよい。本発明は、本発明の組成物及び方法において、インテグリンαＶβ３アンタゴニストの使用を包含する。インテグリンαＶβ３アンタゴニストの例は、限定するものではないが、タンパク質性薬剤、例えば、非触媒性メタロプロテイナーゼ断片、ＲＧＤペプチド、ペプチド擬似体、融合タンパク質、ディスインテグリン（disintegrin）又はそれらの誘導体若しくは類似体、及びインテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体（例えば、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体をコードする核酸分子）、有機分子、及び無機分子が挙げられる。インテグリンαＶβ３により認識されるＲＧＤペプチドの例は、限定するものではないが、トリフラビン（Triflavin）が挙げられる。インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体の例は、限定するものではないが、１１Ｄ２（Searle）、ＬＭ６０９（Scripps；国際公開ＷＯ８９／０１５１５５号及び米国特許第５，７５２，２３０号、これらを参照によりその全体を本明細書に組み入れる）、及びＭＥＤＩ−５２２（ＶＩＴＡＸＩＮＴＭとしても知られる；MedImmune, Inc., Gaithersburg, MD；Wuら, 1998, PNSA USA 95(11):6037-6042；国際公開ＷＯ９０／３３９１９号及びＷＯ００／７８８１５号、これらをそれぞれ参照によりその全体を本明細書に組み入れる）、１７６６１−３７Ｅ及び１７６６１−３７Ｅ  １−５（US Biological）、ＭＯＮ２０３２（CalTag）、ａｂ７１６６（ＢＶ３）及びａｂ７１６７（ＢＶ４）（Abcam）、及びＷＯＷ−１（Kiossesら, Nature Cell Biology 3:316-320）が挙げられる。小分子ペプチドメトリック（peptidometric）インテグリンαＶβ３アンタゴニストの例は、限定するものではないが、Ｓ８３６（Searle）及びＳ４４８（Searle）が挙げられる。ディスインテグリンの例は、限定するものでないが、アキュチン（Accutin）が挙げられる。本発明はまた、次の米国特許及び米国特許出願公開：米国特許第６，３４４，４８４号、６，３１６，４１２号、６，２９７，２４９号、６，２９４，５４９号、６，２７４，６２０号、６，２６８，３７８号、６，２３２，３０８号、６，２１１，１８４号、６，２０４，２８２号、６，１９３，９６８号、６，１７１，５８８号、６，１６０，０９９号、６，１５３，６２８号、６，１３０，２３１号、６，１２７，３３５号、６，１００，４２３号、６，０９６，７０７号、６，０９０，９４４号、６，０６６，６４８号、６，０４８，８６１号、６，０３７，１７６号、６，０１７，９２６号、６，０１７，９２５号、５，９８５，２７８号、５，９８１，５４６号、５，９８１，４７８号、５，９５５，５７２号、５，９５２，３４１号、５，９２５，６５５号、５，９１９，７９２号、５，８７７，２８１号、５，８５２，２１０号、５，８４９，８６５号、５，８４９，６９２号、５，８３０，６７８号、５，８４３，９０６号、５，８４３，７７４号、５，８１７，４５７号、５，８０７，８１９号、５，７９２，７４５号、５，７８０，４２６号、５，７７３，６４６号、５，７７３，６４４号、５，７７３，４１２号、５，７７０，５６５号、５，７６７，０７１号、５，７６６，５９１号、５，７６０，０２９号、５，７６０，０��８号、５，７５９，９９６号、５，７５３，２３０号、５，７１０，１５９号、５，７０５，４８１号、５，６９３，６１２号、５，６８１，８２０号、５，６５２，１１０号、５，６５２，１０９号、５，５７８，７０４号、５，５８９，５７０号、５，５２３，２０９号、５，４９８，６９４号、５，４７８，７２５号、５，３０６，６２０号、５，２６２，５２０号、５，２０４，４４５号、５，１９６，５１１号、５，１９０，８７３号、５，１４９，７８０号、及び米国特許出願公開第２００２００１９４０２号、２００２００１９３８７号、２００２００１０１７６号、２００２０００１８４０号、２００１００５３８５３号、２００１００４４５３５号、２００１００２３２４２号、２００１００１６６４５号、２００１００１１１２５号、及び２００１０００１３０９号に開示されたいずれのインテグリンαＶβ３アンタゴニストの本発明の組成物及び方法における使用も包含し、これらは全て、本明細書に参照によりその全文が組み入れられる。
【０１０１】
ある特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３アンタゴニストは小さい有機分子である。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３アンタゴニストは小さい有機分子ではない。特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３アンタゴニストはインテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体である。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３アンタゴニストはインテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体ではない。他の特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３アンタゴニストはＶＩＴＡＸＩＮＴＭ、その誘導体、類似体若しくは抗原結合フラグメントである。他の実施形態において、インテグリンαＶβ３アンタゴニストは、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント以外の抗体である。
【０１０２】
好ましい実施形態において、インテグリンαＶβ３アンタゴニストは血管形成を抑制するか又は低下させる。特定の実施形態において、インテグリンαＶβ３アンタゴニストは、例えば動的感受率コントラスト促進ＭＲＩを用いた局所的血量の変化を測定した場合に、ＰＢＳなどの対照と比較して、少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％、被験体における血管形成を抑制又は低減する。
【０１０３】
好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３アンタゴニストとして使用されるタンパク質、ポリペプチド又はペプチド（抗体及び融合タンパク質を含む）は、該タンパク質、ポリペプチド又はペプチドのレシピエントと同じ種に由来するものであり、これらのタンパク質、ポリペプチド又はペプチドに対する免疫応答の可能性を低下させる。他の好ましい実施形態において、被験体がヒトである場合には、インテグリンαＶβ３アンタゴニストとして使用される抗体はヒトのものであるか、又はヒト化される。
【０１０４】
本発明に従って、インテグリンαｖβ３アンタゴニストは、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候を有する被験体に、上記歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防又は治療に使用されていた、現在使用されている又は有効であると知られている少なくとも１つの治療（例えば予防薬又は治療薬）、好ましくは複数の治療の前に、その後に、又は同時に投与する。
【０１０５】
インテグリンαＶβ３アンタゴニストとして機能するタンパク質、ポリペプチド、若しくはペプチドをコードする核酸分子、又はインテグリンαＶβ３アンタゴニストとして機能するタンパク質、ポリペプチド、若しくはペプチドを、本発明の方法に従って、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はそれに関連する症候若しくは症状を有する被験体に投与することができる。さらに、インテグリンαＶβ３アンタゴニストとして機能するタンパク質、ポリペプチド、若しくはペプチドの誘導体、類似体、断片又は変異体をコードする核酸分子、又はインテグリンαＶβ３アンタゴニストとして機能するタンパク質、ポリペプチド、若しくはペプチドの誘導体、類似体、断片又は変異体を、本発明の方法に従って歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状を有する被験体に投与することができる。好ましくは、かかる誘導体、類似体、変異体又は断片は、全長の野生型タンパク質、ポリペプチド、又はペプチドのインテグリンαＶβ３アンタゴニスト活性を保持するものである。
【０１０６】
４．１．１  インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体
インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合しかつアンタゴニストとして機能する抗体が当技術分野で知られていることを理解されたい。インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する公知の抗体の例は、限定するものではないが、１１Ｄ２（Searle）、マウスモノクローナルＬＭ６０９（Scripps；本明細書中に参照によりその全文が組み入れられる、国際公開ＷＯ８９／０１５１５５号及び米国特許第５，７５３，２３０号）、ヒト化モノクローナル抗体ＭＥＤＩ−５２２（ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ、MedImmune, Inc., Gaithersburg, MD）としても知られる；Wuら, 1998, PNAAS USA 95(11):6037-6042；国際公開ＷＯ９０／３３９１９号及びＷＯ００／７８８１５号、これらはそれぞれ本明細書中に参照によりその全文が組み入れられる）、１７６６１−３７Ｅ及び１７６６１−３７Ｅ  １−５（US Biological）、ＭＯＮ２０３２（CalTag）、ａｂ７１６６（ＢＶ３）及びａｂ７１６７（ＢＶ４）（Abcam）、及びＷＯＷ−１（Kiosses et al., Nature Cell Biology 3:316-320）が挙げられる。
【０１０７】
インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、鳥類及び哺乳類（例えば、ヒト、マウス、ロバ、ヒツジ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、又はニワトリ）を含むいずれの動物起源のものであってもよい。好ましくは、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体はヒト又はヒト化モノクローナル抗体である。本明細書に使用される「ヒト」抗体は、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体を含み、また、ヒト免疫グロブリンライブラリーから単離された又はヒト遺伝子から抗体を発現するマウスから単離された抗体を含む。
【０１０８】
インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、単一特異性、二重特異性、三重特異性又はさらに多重特異性であってもよい。多重特異性抗体は、インテグリンαＶβ３の様々なエピトープに特異的であっても、インテグリンαＶβ３エピトープと異種エピトープ（異種ポリペプチド又は固相支持体物質など）の両方に特異的であってもよい。例えば、国際公開ＷＯ９３／１７７１５号、ＷＯ９２／０８８０２号、ＷＯ９１／００３６０号、及びＷＯ９２／０５７９３号；Tuttら, J. Immunol. 147:60-69 (1991)；米国特許第４，４７４，８９３号、第４，７１４，６８１号、第４，９２５，６４８号、第５，５７３，９２０号、及び第５，６０１，８１９号；並びにKostelnyら, 1992, J. Immunol. 148:1547-1553を参照されたい。
【０１０９】
本発明は、インテグリンαＶβ３に対して高い結合親和性を有する抗体の使用を包含する。特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体の結合速度定数すなわちｋｏｎ速度（抗体（Ａｂ）＋抗原（Ａｇ）ｋｏｎ→Ａｂ−Ａｇ）は、少なくとも１０５Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１ｓ−１、少なくとも１０６Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１ｓ−１、少なくとも１０７Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１ｓ−１、又は少なくとも１０８Ｍ−１ｓ−１である。好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体のｋｏｎは、少なくとも２×１０５Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１ｓ−１、少なくとも１０６Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１ｓ−１、少なくとも１０７Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１ｓ−１、又は少なくとも１０８Ｍ−１ｓ−１である。
【０１１０】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体のｋｏｆｆ速度（抗体（Ａｂ）＋抗原（Ａｇ）ｋｏｆｆ←Ａｂ−Ａｇ）は、１０−１ｓ−１未満、５×１０−１ｓ−１未満、１０−２ｓ−１未満、５×１０−２ｓ−１未満、１０−３ｓ−１未満、５×１０−３ｓ−１未満、１０−４ｓ−１未満、５×１０−４ｓ−１未満、１０−５ｓ−１未満、５×１０−５ｓ−１未満、１０−６ｓ−１未満、５×１０−６ｓ−１未満、１０−７ｓ−１未満、５×１０−７ｓ−１未満、１０−８ｓ−１未満、５×１０−８ｓ−１未満、１０−９ｓ−１未満、５×１０−９ｓ−１未満、又は１０−１０ｓ−１未満である。好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体のｋｏｎ速度は、５×１０−４ｓ−１未満、１０−５ｓ−１未満、５×１０−５ｓ−１未満、１０−６ｓ−１未満、５×１０−６ｓ−１未満、１０−７ｓ−１未満、５×１０−７ｓ−１未満、１０−８ｓ−１未満、５×１０−８ｓ−１未満、１０−９ｓ−１未満、５×１０−９ｓ−１未満、又は１０−１０ｓ−１未満である。
【０１１１】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体の親和性定数すなわちＫａ（ｋｏｎ／ｋｏｆｆ）は、少なくとも１０２Ｍ−１、少なくとも５×１０２Ｍ−１、少なくとも１０３Ｍ−１、少なくとも５×１０３Ｍ−１、少なくとも１０４Ｍ−１、少なくとも５×１０４Ｍ−１、少なくとも１０５Ｍ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１、少なくとも１０６Ｍ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１、少なくとも１０７Ｍ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１、少なくとも１０８Ｍ−１、少なくとも５×１０８Ｍ−１、少なくとも１０９Ｍ−１、少なくとも５×１０９Ｍ−１、少なくとも１０１０Ｍ−１、少なくとも５×１０１０Ｍ−１、少なくとも１０１１Ｍ−１、少なくとも５×１０１１Ｍ−１、少なくとも１０１２Ｍ−１、少なくとも５×１０１２Ｍ−１、少なくとも１０１３Ｍ−１、少なくとも５×１０１３Ｍ−１、少なくとも１０１４Ｍ−１、少なくとも５×１０１４Ｍ−１、少なくとも１０１５Ｍ−１、又は少なくとも５×１０１５Ｍ−１である。さらに他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体の解離定数すなわちＫｄ（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）は、１０−２Ｍ未満、５×１０−２Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−３Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、５×１０−１０Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、５×１０−１１Ｍ未満、１０−１２Ｍ未満、５×１０−１２Ｍ未満、１０−１３Ｍ未満、５×１０−１３Ｍ未満、１０−１４Ｍ未満、５×１０−１４Ｍ未満、１０−１５Ｍ、又は５×１０−１５Ｍである。
【０１１２】
特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＬＭ６０９又はその抗原結合フラグメント（例えば、ＬＭ６０９の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ））である。ＬＭ６０９は、例えば国際公開ＷＯ８９／０５１５５号（本明細書に参照によりその全文が組み入れられる）に開示されたアミノ酸配列、又はAmerican Type Culture Collection（ＡＴＣＣＴＭ）（10801 University Boulevard, Manassas, Virginia 20110-2209）に受託番号ＨＢ９５３７として寄託されている細胞系が産生するモノクローナル抗体のアミノ酸配列を有する。別の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体はＬＭ６０９又はＬＭ６０９の抗原結合フラグメントでない。
【０１１３】
好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント（例えば、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭの少なくとも１つのＣＤＲ）である。ＶＩＴＡＸＩＮＴＭは、例えば、国際公開ＷＯ９８／３３９１９号及びＷＯ００／７８８１５号、米国特許出願第０９／３３９，２２２号及び米国特許第５，７５３，２３０号に開示されていて、これらはそれぞれ本明細書に参照によりその全文が組み入れられる。別の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭの抗原結合フラグメント以外の抗体である。
【０１１４】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭの可変重鎖（ＶＨ）ドメインのアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む上記抗体の使用を包含する。本発明はまた、上記表１に掲げたいずれか１つのＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲを含む、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体の使用も包含する。
【表１】
2006516635.tif 000002
【０１１５】
一実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１と配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２との組み合わせを含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１と配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３との組み合わせを含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２と配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３との組み合わせを含む。好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２、及び配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含む。
【０１１６】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭの可変軽鎖（ＶＬ）ドメインのアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む上記抗体の使用を包含する。他の実施形態において、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１と配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２との組み合わせを含む。他の実施形態において、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１と配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３との組み合わせを含む。他の実施形態において、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２と配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３との組み合わせを含む。本発明はまた、表１に掲げたいずれか１つのＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲを含む、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体の使用を包含する。
【０１１７】
一実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む。好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２、及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０１１８】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、本明細書に開示したＶＨドメインを、本明細書に開示したＶＬドメイン又は他のＶＬドメインと組み合わせて含む上記抗体の使用を包含する。本発明はさらに、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、本明細書に開示したＶＬドメインを、本明細書に開示したＶＨドメイン又は他のＶＨドメインと組み合わせて含む上記抗体の使用を包含する。
【０１１９】
本発明はまた、表１に掲げた少なくとも１つのＶＨ  ＣＤＲ及び少なくとも１つのＶＬ  ＣＤＲを含む、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体の使用を包含する。特に、本発明は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＶＨ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＨ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ１  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；又は上記表１に掲げたＶＨ  ＣＤＲとＶＬ  ＣＤＲのいずれかの組合せを含む上記抗体の使用を包含する。
【０１２０】
一実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１及び配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１及び配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０１２１】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２及び配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２及び配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０１２２】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３及び配列番号４のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３及び配列番号５のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２を含む。好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む。
【０１２３】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体をコードする、一般的には単離された、核酸分子の使用を包含する。特定の実施形態においては、単離された核酸分子はインテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列を有する上記抗体をコードする。
【０１２４】
一実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨドメインのアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む上記抗体をコードする。他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＨドメインのアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含む上記抗体をコードする。他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、表１に掲げたＶＨ  ＣＤＲ１のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１を含む上記抗体をコードする。他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、表１に掲げたＶＨ  ＣＤＲ２のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２を含む上記抗体をコードする。さらに他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、表１に掲げたＶＨ  ＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含む上記抗体をコードする。
【０１２５】
一実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＬドメインのアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む上記抗体をコードする。他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＬドメインのアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む上記抗体をコードする。他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、表１に掲げたＶＬ  ＣＤＲ１のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１を含む上記抗体をコードする。他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、表１に掲げたＶＬ  ＣＤＲ２のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２を含む上記抗体をコードする。さらに他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、表１に掲げたＶＬ  ＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３を含む上記抗体をコードする。
【０１２６】
他の実施形態においては、単離された核酸分子は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨドメインのアミノ酸配列を有するＶＨドメインと、ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＬドメインのアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む上記抗体をコードする。他の実施形態においては、単離された核酸分子は、表１に掲げたアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＨ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ１  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ１；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ２；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＶＬ  ＣＤＲ２とＶＬ  ＣＤＲ３；又はそれらのいずれかの組合せを含むインテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体をコードする。
【０１２７】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する本明細書に記載したＶＨドメイン、ＶＨ  ＣＤＲ、ＶＬドメイン、又はＶＬ  ＣＤＲの誘導体を含む上記抗体の使用を包含する。当業者に公知の標準技術を使用して、本発明の抗体をコードするヌクレオチド配列に、例えばアミノ酸置換をもたらす位置指定突然変異誘発及びＰＣＲ媒介突然変異誘発を含めて、突然変異（例えば置換、欠失及び／又は付加）を導入することができる。好ましくは、該誘導体は、元の分子と比較して２５個未満のアミノ酸置換、２０個未満のアミノ酸置換、１５個未満のアミノ酸置換、１０個未満のアミノ酸置換、５個未満のアミノ酸置換、４個未満のアミノ酸置換、３個未満のアミノ酸置換又は２個未満のアミノ酸置換を含む。好ましい実施形態においては、該誘導体は、少なくとも１つの推定される非必須アミノ酸残基（例えば、抗体がインテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合するために重要でないアミノ酸残基）においてなされた保存的アミノ酸置換を有する。「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基を類似した電荷の側鎖を有するアミノ酸残基と置き換える置換のことである。類似した電荷の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは当技術分野で定義されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β分枝側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）をもつアミノ酸が挙げられる。あるいは、突然変異を、飽和突然変異誘発などによりコード配列の全体又は部分に沿って無作為に導入し、得られる突然変異体を生物学的活性についてスクリーニングして活性を保持する突然変異体を同定してもよい。突然変異誘発の後、コードされた抗体を発現させて、抗体の活性を確認することができる。
【０１２８】
本発明は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、可変軽鎖（ＶＬ）ドメイン及び／又は可変重鎖（ＶＨ）ドメインに少なくとも１つのアミノ酸残基置換をもつＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列を含む上記抗体の使用を包含する。本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、少なくとも１つのＶＬ  ＣＤＲ及び／又は少なくとも１つのＶＨ  ＣＤＲに少なくとも１つのアミノ酸残基置換をもつＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列を含む上記抗体の使用を包含する。ＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨドメイン、ＶＨ  ＣＤＲ、ＶＬドメイン及び／又はＶＬ  ＣＤＲに置換を導入して作製された抗体は、例えば、そのインテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する能力について（例えば、限定するものでないが、ＥＬＩＳＡ及びＢＩＡｃｏｒｅを含むイムノアッセイにより）、又はその歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩に関連する症候を予防、管理、治療又は改善する能力について、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏで試験することができる。
【０１２９】
特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体をコードするヌクレオチド配列に、ストリンジェントな条件下（例えば、６×塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）中約４５℃でのフィルター結合ＤＮＡとのハイブリダイゼーションと、これに続く０．２×ＳＳＣ／０．１％ＳＤＳ中約５０〜６５℃での１回以上の洗浄）、高度にストリンジェントな条件下（例えば、６×ＳＳＣ中約４５℃でのフィルター結合ＤＮＡとのハイブリダイゼーションと、これに続く０．１×ＳＳＣ／０．２％ＳＤＳ中約６８℃での１回以上の洗浄）、又はその他の当業者に公知のストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下（例えば、Ausubel, F. M.ら, 編, 1989, Current Protocols in Molecular Biology, Vol. I, Green Publishing Associates, Inc. and John Wiley & Sons, Inc., New Yorkの6.3.1-6.3.6及び2.10.3頁を参照）でハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされる。
【０１３０】
特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ストリンジェントな条件下でＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされる。別の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ストリンジェントな条件下でＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨ又はＶＬドメインをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされるＶＨドメインのアミノ酸配列又はＶＬドメインのアミノ酸配列を含む。別の実施形態において、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ストリンジェントな条件下でＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨ又はＶＬドメインをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされるＶＨドメインのアミノ酸配列又はＶＬドメインのアミノ酸配列を含む。別の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ストリンジェントな条件下で表１に挙げるＶＨ  ＣＤＲ又はＶＬ  ＣＤＲのいずれか一つをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされるＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列又はＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。
【０１３１】
別の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ストリンジェントな条件下で、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託されている細胞系によって産生されるモノクローナル抗体のＶＨ  ＣＤＲ又はＶＬ  ＣＤＲのいずれか一つをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされるＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列又はＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。別の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ストリンジェントな条件下で表１に挙げるＶＨ  ＣＤＲ及びＶＬ  ＣＤＲのいずれか一つをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされるＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列及びＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。別の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ストリンジェントな条件下で、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託されている細胞系によって産生されるモノクローナル抗体をコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む核酸配列によってコードされるＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列及びＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。
【０１３２】
特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のアミノ酸配列と、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列と、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。２つのアミノ酸配列間の同一性％の決定は、ＢＬＡＳＴタンパク質サーチを含む、当業者に公知の任意の方法によって決定することができる。
【０１３３】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨドメインと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一であるＶＨドメインのアミノ酸配列を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＨドメインと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一であるＶＨドメインのアミノ酸配列を含む。
【０１３４】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、表１に掲げたＶＨ  ＣＤＲのいずれかと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一である１以上のＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＨ  ＣＤＲのいずれか１つと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一である１以上のＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。
【０１３５】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＬドメインと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一であるＶＬドメインのアミノ酸配列を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＬドメインと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一であるＶＬドメインのアミノ酸配列を含む。
【０１３６】
他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、表１に掲げたＶＬ  ＣＤＲのいずれかと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一である１以上のＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。他の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ  ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＬ  ＣＤＲのいずれか１つと、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一である１以上のＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含む。
【０１３７】
本発明は、インテグリンαＶβ３との結合について本明細書に記載した抗体と競合する抗体を包含する。特定の実施形態においては、本発明は、インテグリンαＶβ３との結合についてＬＭ６０９又はその抗原結合フラグメントと競合する抗体を包含する。好ましい実施形態においては、インテグリンαＶβ３との結合についてＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメントと競合する抗体を包含する。特定の実施形態において、競合アッセイ系を用いて競合を測定する。かかるアッセイは当技術分野で慣用かつ周知である（例えば、Ausubelら編、1994, Current Protocols in Molecular Biology, Vol.1, John Wiley & Sons, Inc., New York、参照によりその全体を本明細書に組み入れる）。一実施形態において、競合アッセイは酵素結合性免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）である。
【０１３８】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３との結合について、ＬＭ６０９若しくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨドメイン、又はＬＭ６０９若しくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＨドメインを含むタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチドと競合するＶＨドメインを含む複数のタンパク質、ポリペプチド又はペプチドを包含する。本発明はまた、インテグリンαＶβ３との結合について、ＬＭ６０９若しくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＬドメイン、又はＬＭ６０９若しくはＶＩＴＡＸＩＮＴＭのＶＬドメインを含むタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチドと競合するＶＬドメインを含む複数のタンパク質、ポリペプチド又はペプチドを包含する。
【０１３９】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３との結合について、表１に掲げたＶＨ  ＣＤＲ、又は表１に掲げたＶＨ  ＣＤＲを含む少なくとも１つのＶＨ  ＣＤＲを含むタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチドと競合する少なくとも１つのＶＨ  ＣＤＲを含む複数のタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチド、あるいはインテグリンαＶβ３との結合についてＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＨ  ＣＤＲと競合するＶＨ  ＣＤＲを包含する。本発明はまた、インテグリンαＶβ３との結合について表１に掲げたＶＬ  ＣＤＲ、又は表１に掲げたＶＬ  ＣＤＲを含むＶＨ  ＣＤＲを含むタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチドと競合するＶＨ  ＣＤＲを含む複数のタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチド、あるいはインテグリンαＶβ３との結合についてＡＴＣＣＴＭに受託番号ＨＢ９５３７として寄託された細胞系が産生するモノクローナル抗体のＶＬ  ＣＤＲと競合する少なくとも１つのＶＬ  ＣＤＲを含む複数のタンパク質、ポリペプチド若しくはペプチドを包含する。
【０１４０】
インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、すなわち、いずれかのタイプの分子と抗体との共有結合により、改変された誘導体を含む。例えば、限定するものではないが、抗体誘導体には、例えば、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、公知の保護基／ブロッキング基による誘導体化、タンパク分解切断、細胞リガンド若しくは他のタンパク質との連結、その他により改変されている抗体が含まれる。多数の化学的改変のいずれも、特定の化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成などを含めて、公知技術により実施することができる。さらに、上記誘導体は１種以上の非古典的アミノ酸を含有してもよい。
【０１４１】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、当業者に公知のフレームワーク領域を含む上記抗体も提供する。好ましくは、本発明の抗体のフラグメント領域はヒトである。特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭのフレームワーク領域を含む。
【０１４２】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、フレームワーク領域に少なくとも１つの突然変異（例えば、少なくとも１つのアミノ酸残基置換）をもつＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列を含む上記抗体も包含する。ある特定の実施形態においては、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体は、ＶＨ及び／又はＶＬドメインのフレームワークに少なくとも１つのアミノ酸残基置換をもつＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列を含む。
【０１４３】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、可変部及びフレームワーク領域に、少なくとも１つの突然変異（例えば、少なくとも１つのアミノ酸残基置換）をもつＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列を含む上記抗体も包含する。
【０１４４】
本発明はまた、当業者に公知の定常領域を含む本発明の抗体を提供する。好ましくは、本発明の抗体の定常領域はヒトである。
【０１４５】
本発明はまた、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体及び異種ポリペプチドを含む融合タンパク質の使用を包含する。好ましくは、抗体と融合させる異種ポリペプチドは、抗体を血小板、単球、マクロファージ、内皮細胞、破骨細胞、活性化Ｔ細胞、及び／又はＢ細胞にターゲティングするために有用である。
【０１４６】
４．１．１．１  増加した半減期を有する、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体
本発明は、長いｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を有する、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体を提供する。特に、本発明は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体であって、動物、好ましくは哺乳類、そして最も好ましくはヒトにおいて、３日より長い、７日より長い、１０日より長い、好ましくは１５日より長い、２５日より長い、３０日より長い、３５日より長い、４０日より長い、４５日より長い、２ヶ月より長い、３ヶ月より長い、４ヶ月より長い、又は５ヶ月より長い半減期を有する上記抗体を提供する。
【０１４７】
抗体（例えば、モノクローナル抗体、一本鎖抗体及びＦａｂフラグメント）のｉｎ  ｖｉｖｏ血清循環を延長させるために、例えば、高分子量ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの不活性ポリマー分子を、多機能リンカーを用いて又は用いないで、ＰＥＧと抗体のＮ若しくはＣ末端との位置指定コンジュゲーションを介して又はリシン残基に存在するε−アミノ基を介して、抗体と結合させることができる。生物学的活性の低下を最小限に抑える直鎖又は分枝鎖ポリマー誘導体化を利用しうる。コンジュゲーションの程度をＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び質量分析により綿密にモニターして、ＰＥＧ分子と抗体との適切なコンジュゲーションを確保することができる。未反応ＰＥＧは、サイズ排除又はイオン交換クロマトグラフィーにより抗体−ＰＥＧコンジュゲートから分離することができる。ＰＥＧ誘導体化抗体は、結合活性並びにｉｎ  ｖｉｖｏ効力について、当業者に公知の方法を用いて、例えば、本明細書に記載のイムノアッセイにより試験することができる。
【０１４８】
増加したｉｎ  ｖｉｖｏ半減期を有する抗体はまた、少なくとも１つのアミノ酸改変（すなわち、置換、挿入若しくは欠失）をＩｇＧ定常ドメイン又はそのＦｃＲｎ結合フラグメント（好ましくは、Ｆｃ又はヒンジ−Ｆｃドメインフラグメント）中に導入して作製することもできる。例えば、国際公開ＷＯ９８／２３２８９号及びＷＯ９７／３４６３１号；及び米国特許第６，２７７，３７５号を参照されたい（これらはそれぞれ本明細書に参照によりその全文が組み入れられる）。
【０１４９】
更に、抗体又は抗体フラグメントをｉｎ  ｖｉｖｏでより安定にする、あるいはｉｎ  ｖｉｖｏにおける半減期をより長くするために、抗体をアルブミンにコンジュゲートすることができる。その技術は当分野において周知である。例えば、それぞれ参照によりその全体を本明細書中に組み入れる、国際公開ＷＯ９３／１５１９９号、ＷＯ９３／１５２００号、及びＷＯ０１／７７１３７号、及びヨーロッパ特許ＥＰ４１３，６２２号を参照のこと。
【０１５０】
４．１．１．２  抗体コンジュゲート
本発明は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体又はそのフラグメントを、別の異種のポリペプチド抗体又は抗体フラグメント、マーカー配列、診断剤、治療成分、放射性金属イオン、ポリマー、アルブミン、及び固相支持体と組換えにより融合させるか、又は化学的にコンジュゲート（共有結合及び非共有結合によるコンジュゲーションを含む）させた、上記抗体又はそのフラグメントを包含する。特に、本発明は、インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体又はそのフラグメントを、異種ポリペプチド若しくはタンパク質又はその断片（好ましくは、少なくとも１０個、少なくとも２０個、少なくとも３０個、少なくとも４０個、少なくとも５０個、少なくとも６０個、少なくとも７０個、少なくとも８０個、少なくとも９０個又は少なくとも１００個のアミノ酸のポリペプチド）と組換えにより融合させるか、又は化学的にコンジュゲートさせる（共有結合及び非共有結合によるコンジュゲーションを含む）ことにより作製された融合タンパク質である、上記抗体又はその抗原結合フラグメントを提供する。特に、本発明は、本明細書に記載した抗体の抗原結合フラグメント（例えばＦａｂフラグメント、Ｆｄフラグメント、Ｆｖフラグメント、Ｆ（ａｂ）２フラグメント、ＶＨドメイン、ＶＨ  ＣＤＲ、ＶＬドメイン又はＶＬ  ＣＤＲ）と、異種ポリペプチド、又はタンパク質とを含む融合タンパク質を提供する。好ましくは、抗体又は抗体フラグメントが融合する異種ポリペプチドは、抗体が内皮細胞、Ｂ細胞、破骨細胞又は活性化Ｔ細胞を標的とするのに有用なものである。例えば、特定の細胞型（例えば、内皮細胞、Ｂ細胞、破骨細胞、又は活性化Ｔ細胞）によって発現された細胞表面受容体に免疫特異的に結合する抗体を、本発明の抗体又はフラグメントに融合又はコンジュゲートさせてもよい。ポリペプチドを抗体又は抗体フラグメントに融合又はコンジュゲートさせるための方法は当分野で公知である。例えば米国特許第５，３３６，６０３号、５，６２２，９２９号、５，３５９，０４６号、５，３４９，０５３号、５，４７７，８５１号、及び５，１１２，９４６号；ヨーロッパ特許ＥＰ３０７，４３４号及びＥＰ３６７，１６６号；国際公開ＷＯ９６／０４３８８号及びＷＯ９１／０６５７０号；Ashkenaziら, 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:10535-10539；Zhengら, 1995, J. Immunol. 154:5590-5600；Vilら, 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:11337-11341（これらの文献を参照によりその全体を組み入れる）を参照のこと。
【０１５１】
抗インテグリンαＶβ３抗体の更なる融合タンパク質は、遺伝子シャフリング、モチーフシャフリング、エキソンシャフリング、及び／又はコドンシャフリング（まとめて「ＤＮＡシャフリング」という）の技術を用いて生成することができる。ＤＮＡシャフリングを用いて、本発明の抗体又はそのフラグメント（例えばより高い親和性及びより低い解離速度を有する抗体又はそのフラグメント）の活性を変えることができる。概説として、米国特許第５，６０５，７９３号、５，８１１，２３８号、５，８３０，７２１号、５，８３４，２５２号及び５，８３７，４５８号、及びPattenら, 1997, Curr. Opinion Biotechnol. 8:724-33；Harayama, 1998, Trends Biotechnol. 16(2):76-82；Hanssonら, 1999, J. Mol. Biol. 287:265-76；Lorenzo及びBlasco, 1998, Biotechniques 24(2):308-313（これらの特許及び発表を参照によりその全体を本明細書に組み入れる）を参照のこと。抗体若しくはそのフラグメント、又はコードされた抗体若しくはそのフラグメントを、組み換え前にエラープローンＰＣＲ、ランダムヌクレオチド挿入、又は他の方法によるランダム突然変異誘発に供することによって変えることができる。インテグリンαＶβ３と免疫特異的に結合する抗体又はそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドを、少なくとも１つの異種分子の少なくとも１つの成分、モチーフ、切片（section）、部分、ドメイン、断片等と組み換えることができる。
【０１５２】
さらに、抗体又は抗体フラグメントは、精製を容易にするためにペプチドなどのマーカー配列と融合させることができる。特定の実施形態においては、マーカーアミノ酸配列は、市販される多数のものの中で、とりわけｐＱＥベクター（ＱＩＡＧＥＮＴＭ, Inc., 9259 Eton Avenue, Chatsworth, CA, 91311）で提供されるタグなどのヘキサヒスチジンペプチドである。Gentzら, 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:821-824に記載されるように、例えば、ヘキサヒスチジンペプチドは、融合タンパク質の精製にとって好都合である。精製に有用な他のペプチドタグとしては、限定するものではないが、インフルエンザ・ヘマグルチニンタンパク質由来のエピトープに対応するヘマグルチニン「ＨＡ」タグ（Wilsonら, 1984, Cell 37: 767）、及び「ｆｌａｇ」タグが挙げられる。
【０１５３】
別の実施形態において、本発明の抗体又はそのフラグメント若しくは変異型を、診断剤又は検出可能な薬剤にコンジュゲートさせる。こうした抗体は、特定の治療の効力を決定する等の、臨床試験手順の一部として、疾患又は障害の発達又は進行をモニター又は予知するのに有用であり得る。こうした診断及び検出は、限定するものではないが、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、又はアセチルコリンエステラーゼ等の種々の酵素；限定するものではないが、ストレプトアビジン／ビオチン、及びアビジン／ビオチン等の人工（prosthetic）基；限定するものではないが、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロライド又はフィコエリトリン等の蛍光物質；限定するものではないが、ルミノール等の発光物質；限定するものではないが、ルシフェラーゼ、ルシフェリン、及びエクオリン等の生物発光物質；限定するものではないが、ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ）、及びテクネチウム（９９Ｔｃ）、タリウム（２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８５Ｓｒ、３２Ｐ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ、及び１１７Ｔｉｎ等の放射性物質；種々の陽電子放射断層撮影法を用いた陽電子放射金属、非放射性常磁性金属イオン、及び特定の放射性同位体に放射標識される、又はコンジュゲートされる分子、を含むが、これらに限定されない検出可能な物質に抗体をカップリングさせることによって達成することができる。
【０１５４】
本発明はさらに、治療用部分にコンジュゲートした抗体又は抗体フラグメントの使用も包含する。抗体又は抗体フラグメントは、例えば、細胞毒、例えば、細胞増殖抑制剤、若しくは細胞破壊薬、治療成分、又は放射性金属イオン、例えば、α放射体などの治療用部分に結合することができる。細胞毒又は細胞毒性薬剤には、細胞に有害な任意の薬剤が含まれる。これらの例には、パクリタクセル、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、エチジウムブロマイド、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポサイド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジオキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロ試験ステロン、糖質コルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール及びピューロマイシン、並びにこれらの類似体又はホモログが含まれる。治療用部分には、代謝拮抗剤（例えば、メトトレキセート、６−メルカプトプリン、及び６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシル、ダカルバジン）、アルキル化剤（例えば、メクロエタミン、チオテパ、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、及びシスジクロロジアミン、プラチナ（ＩＩ）（ＤＤＰ）、シスプラチン）；アントラサイクリン系（例えば、ダウノルビシン（以前ダウノマイシン）、ドキソルビシン）；抗生物質類（例えば、ダクチノマイシン（以前アクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン、及びアントラマイシン（ＡＭＣ））；アウリスタチン分子（例えば、アウリスタチンＰＨＥ、ブリオスタチン１、ソラスタチン１０（Woykeら、Antimicrob. Agents Chemother. 46:3802-8(2002), Woykeら、Antimicrob. Agents Chemother. 45:3580-4(2001), Mohammadら、Anticancer Drugs 12:735-40(2001), Wallら、Biochem. Biophys. Res. Commun. 266:76-80(1999), Mohammadら、Int. J. Oncol. 15:367-72(1999)）を参照。これらすべてを参照により本明細書に組み入れる）；有糸分裂阻害剤（例えば、ビンクリスチン及びビンブラスチン）；ホルモン（例えば、糖質コルチコイド、プロジェスタチン、アンドロゲン、及びエストロゲン）；ＤＮＡ修復酵素阻害剤（例えば、エトポシド又はトポテカン）；キナーゼ阻害剤（例えば、化合物ＳＴ１５７１、メシル酸イマチニブ（Kantarjianら、Clin Cancer Res. 8(7):2167 76(2002)）、並びに、米国特許第６，２４５，７５９号、第６，３９９，６３３号、第６，３８３，７９０号、第６，３３５，１５６号、第６，２７１，２４２号、第６，２４２，１９６号、第６，２１８，４１０号、第６，２１８，３７２号、第６，０５７，３００号、第６，０３４，０５３号、第５，９８５，８７７号、第５，９５８，７６９号、第５，９２５，３７６号、第５，９２２，８４４号、第５，９１１，９９５号、第５，８７２，２２３号、第５，８６３，９０４号、第５，８４０，７４５号、第５，７２８，８６８号、第５，６４８，２３９号、及び第５，５８７，４５９号に開示された化合物）、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（例えば、Ｒ１１５７７７、ＢＭＳ２１４６６２、並びに米国特許第６，４５８，９３５��、第６，４５１，８１２号、第６，４４０，９７４号、第６，４３６，９６０号、第６，４３２，９５９号、第６，４２０，３８７号、第６，４１４，１４５号、第６，４１０，５４１号、第６，４１０，５３９号、第６，４０３，５８１号、第６，３９９，６１５号、第６，３８７，９０５号、第６，３７２，７４７号、第６，３６９，０３４号、第６，３６２，１８８号、第６，３４２，７６５号、第６，３４２，４８７号、第６，３００，５０１号、第６，２６８，３６３号、第６，２６５，４２２号、第６，２４８，７５６号、第６，２３９，１４０号、第６，２３２，３３８号、第６，２２８，８６５号、第６，２２８，８５６号、第６，２２５，３２２号、第６，２１８，４０６号、第６，２１１，１９３号、第６，１８７，７８６号、第６，１６９，０９６号、第６，１５９，９８４号、第６，１４３，７６６号、第６，１３３，３０３号、第６，１２７，３６６号、第６，１２４，４６５号、第６，１２４，２９５号、第６，１０３，７２３号、第６，０９３，７３７号、第６，０９０，９４８号、第６，０８０，８７０号、第６，０７７，８５３号、第６，０７１，９３５号、第６，０６６，７３８号、第６，０６３，９３０号、第６，０５４，４６６号、第６，０５１，５８２号、第６，０５１，５７４号、及び第６，０４０，３０５号に開示された化合物）；トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、カンプトテシン、イリノテカン、ＳＮ３８、トポテカン、９アミノカンプトテシン、ＧＧ２１１（ＧＩ  １４７２１１）、ＤＸ  ８９５ｌｆ、ＩＳＴ６２２、ルビテカン、ピラゾロアクリジン、ＸＲ  ５０００、サイントピン、ＵＣＥ６、ＵＣＥ１０２２、ＴＡＮ  １５１８Ａ、ＴＡＮ１５１８Ｂ、ＫＴ６００６、ＫＴ６５２８、ＥＤ１１０、ＮＢ５０６、ＥＤ１１０、ＮＢ５０６、レベッカマイシン、及びブルガレイン）、ヘキスト色素３３３４２及びヘキスト色素３３２５８、ニチジン（nitidine）、ファガロニン（fagaronine）、エピベルベリン（epiberberine）、コラリン（coralyne）、ベータラパコン、ＢＣ  ４ｌなどのＤＮＡ副溝結合物質、並びに、これらの薬学的に許容される塩、溶媒和化合物、クラスレート、及びプロドラッグが含まれるが、これらに限定されるものではない（例えば、Rothenberg, M.L., Annals of Oncology 8:837 855(1997);及びMoreau, P.ら、J. Med. Chem. 41:1631 1640(1998)参照）、アンチセンス・オリゴヌクレオチド（例えば、米国特許第６，２７７，８３２号、第５，９９８，５９６号、第５，８８５，８３４号、第５，７３４，０３３号、及び第５，６１８，７０９号に開示した化合物）；免疫調節剤（例えば、抗体とサイトカイン）；抗体；及びアデノシンデアミナーゼ阻害剤（例えば、リン酸フルダラビン及び２−クロロデオキシアデノシン）でもよい。
【０１５５】
さらに、抗体又は抗体フラグメントは、所与の生物学的反応を改変する治療用部分又は薬剤部分にコンジュゲートさせてもよい。治療用部分又は薬剤部分は、解釈を古典的な化学治療薬に限定するべきではない。例えば、薬剤部分は、望ましい生物学的活性を保持するタンパク質、ポリペプチド又はペプチドであってもよい。そのようなタンパク質には、例えば、アブリン、リシンＡ、プソイドモナスエキソトキシン、コレラトキシン、又はジフテリアトキシンなどの毒素、ＴＮＦ、αインターフェロン、βインターフェロン、γインターフェロン、神経増殖因子、血小板由来増殖因子、組織プラスミノーゲンアクチベータ、アポトーシス薬、例えば、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、ＡＩＭ  Ｉ（国際公開ＷＯ９７／３３８９９号参照）、ＡＩＭ  ＩＩ（国際公開ＷＯ９７／３４９１１号参照）、Ｆａｓリガンド（Takahashiら, 1994, J. Immunol., 6:1567-1574）、ＶＥＧＦ（国際公開ＷＯ９９／２３１０５号参照）、又は、例えば、リンフォカイン（例えば、インターロイキン−１（「ＩＬ−１」）、インターロイキン−２（「ＩＬ−２」）、インターロイキン−４（「ＩＬ−４」）、インターロイキン−６（「ＩＬ−６」）、インターロイキン−９（ＩＬ−９）、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（「ＧＭ−ＣＳＦ」）、及び顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ−ＣＳＦ」）、又は増殖因子（例えば、成長ホルモン（「ＧＨ」））などの生物反応調節剤であってもよい。
【０１５６】
さらに、放射性金属イオン、例えば、２１３Ｂｉなどのα放射体、又は、限定されるものではないが、１３１１ｎ、１３１ＬＵ、１３１Ｙ、１３１Ｈｏ、１３１Ｓｍを含む放射性金属イオンをポリペプチドに結合するのに有用な大環状キレート化剤などの治療用部分に、抗体又は抗体フラグメントを結合することができる。ある実施形態では、大環状キレート化剤は、リンカーを介して抗体に結合可能な１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ，’Ｎ’’，Ｎ’’’四酢酸（ＤＯＴＡ）である。そのようなリンカー分は、一般的に当技術分野で公知であり、Denardoら、1998, Clin Cancer Res. 4(10):2483-90;Petersonら、1999, Bioconjug. Chem. 10(4):553-7;及びZimmermanら、1999, Nucl. Med. Biol. 26(8):943-50に記載されている。これらのそれぞれの全体を参照により本明細書に組み入れる。
【０１５７】
抗体に治療用部分を結合する技法は周知であり、例えば、Arnonら、"Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy", Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeldら編、243-56(Alan R. Liss, Inc. 1985);Hellstromら、"Antibodies For Drug Delivery", Controlled Drug Delivery第2版Robinsonら編、623-53(Marcel Dekker, Inc. 1987);Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy:A Review", Monoclonal Antibodies 84:Biological And Clinical Applications, Pincheraら編、475-506(1985);"Analysis, Results, And Future Prospective Of The Therapeutic Use Of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy", Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwinら編、303-16(Academic Press 1985),及びThorpeら、1982, Immunol. Rev. 62:119-58を参照。
【０１５８】
あるいは、Segalによって、米国特許第４，６７６，９８０号（この全体を参照により本明細書に組み入れる）に記載されるように、二次抗体に抗体を結合させて、抗体異種コンジュゲートを形成させることもできる。
【０１５９】
インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントにコンジュゲートされる治療用部分、薬剤又は抗体は、被験体における特定の障害に望ましい予防効果又は治療効果を達成するように選ばれるべきである。どの治療用部分又は薬剤にインテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントに結合するかを決める際、臨床医又は他の医学専門家は、疾患の性質、疾患の重篤度及び被験体の状態を考慮するべきである。
【０１６０】
抗体はまた、固相担体に結合させてもよく、これは特に、標的抗原のイムノアッセイ又は精製に有用である。そのような固相担体には、ガラス、セルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニール又はポリプロピレンが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０１６１】
本明細書に記載されるものなどの治療用部分又は薬剤は、当技術分野で周知の技術を用いて抗体以外のインテグリンαｖβ３アンタゴニストにコンジュゲートさせうる。
【０１６２】
４．２  インテグリンαｖβ３に対して免疫特異的な抗体を同定する方法
本発明は、インテグリンαｖβ３に対して免疫特異的なアンタゴニスト、特に、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）及び／又はＬＭ６０９と同じエピトープに特異的に結合する抗体を同定するための方法を提供する。ヒトβ３鎖の１７１、１７３及び／又は１７４番目の残基の変異は、インテグリンαｖβ３ヘテロダイマーに対するＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）抗体及び／又はＬＭ６０９抗体の結合を破壊することが見出されている。ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）及びＬＭ６０９はマウスインテグリンαｖβ３に結合しないが、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）及びＬＭ６０９は、ヒトβ鎖のアミノ酸１６４〜２０２に対応するマウスβ鎖の領域がヒトβ鎖のアミノ酸１６４〜２０２で置換された改変マウスインテグリンαｖβ３には結合することが見出されている。特定の実施形態において、アミノ酸置換は、例えば、インテグリンαｖβ３のリガンド特異性を変化させるため及び／又はこれらのサブユニット鎖のヘテロダイマー化を破壊するために、インテグリンαｖβ３のサブユニット中でなされる。好ましくは、このインテグリンαｖβ３はヒトである。特定の実施形態において、このようなアミノ酸置換は、インテグリンαｖβ３の特定のアンタゴニストと特定のインテグリンαｖβ３エピトープとの特異的相互作用を破壊する。好ましい実施形態において、これらのアミノ酸置換は、リガンド結合特異性、好ましくはＬＭ６０９及び／又はＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）のリガンド結合特異性を付与するインテグリンサブユニットの領域内、特にヒトβ３の１６４〜２０２番目の残基でなされる。あるいは、ヒトβ３鎖の１６４〜２０２番目の残基に対応するマウスβ鎖残基が、ヒトβ３の１６４〜２０２番目の残基で置換される。このようなマウス−ヒトキメラは、ヒトβ３の領域１６４〜２０２に結合するがマウスインテグリンαｖβ３には結合しないアンタゴニストについてスクリーニングするために使用することができる。
【０１６３】
好ましい実施形態において、これらのアミノ酸置換は、β３サブユニット中でなされる。特定の実施形態において、ヒトβ３残基は、表２中に記載されるようにラット残基で置換される。一実施形態において、位置１７１におけるヒト残基Ｇｌｕのラット残基Ｇｌｎへの置換（「変異Ａ」）は、ＬＭ６０９へのインテグリンαｖβ３の結合を破壊する。この同じ変化は、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）への結合を破壊する。別の実施形態において、それぞれ位置１７３及び位置１７４におけるヒト残基Ｌｅｕ及びＧｌｕのラット残基Ｉｌｅ及びＬｙｓへの置換（「変異Ｂ」）は共に、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）への結合を破壊し、抗ラットβ３抗体への結合を増大させる。なお別の実施形態において、それぞれ位置１７９及び位置１８２におけるヒト残基Ａｓｐ及びＴｈｒのラット残基Ｔｈｒ及びＳｅｒへの置換（「変異Ｃ」）は、抗ラットβ３抗体に対する結合特異性を付与する。変異Ａ及び変異Ｃの組み合わせ（３つの置換された残基）は、マウス抗ラットβ３抗体に対する結合特異性を付与し、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）に対する結合を破壊する。特定の好ましい実施形態において、アミノ酸１７１、１７３及び１７４は、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）に対する結合を破壊するために置換することができる。代替的な好ましい実施形態において、アミノ酸１７１、１７３、１７４、１７９及び１８２は、ＬＭ６０９及びヒト化抗インテグリンαｖβ３抗体（例えば、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標））に対するインテグリンαｖβ３の結合を破壊するために置換することができる。このような置換は好ましい例であり、限定ではない。このような置換されたサブユニットは例示に過ぎず限定するものではない。抗体結合を担うと同定された任意のインテグリンαｖβ３領域が、種々の抗体の結合特異性を特徴付けるため及び同じ類似の結合特異性を有する抗体についてスクリーニングするために、置換された残基、欠失された残基又は挿入された残基によって変更することができる。
【０１６４】
インテグリンαｖβ３のアミノ酸置換されたサブユニットは、野生型インテグリンαｖβ３に結合するが改変形態には結合しないモノクローナル抗体、又はヒトαｖβ３由来の対応する領域で置換された領域を有するマウスαｖβ３インテグリンに結合するが野生型マウスインテグリンαｖβ３には結合しないモノクローナル抗体を同定することによって、特定のエピトープに対する特異的親和性を有する抗体をスクリーニングするために使用することができる。さらに、本発明は、ヘテロダイマー化したαｖβ３に結合するが、ヘテロダイマー中に含まれていない場合にはαｖ鎖にもβ３鎖にも結合しないモノクローナル抗体を同定するための方法を提供する。このようなスクリーニングは、例えば、変異体αｖβ３又は個々のαｖ鎖若しくはβ３鎖を組換え的に発現するために野生型インテグリンαｖβ３を発現しない細胞系統を使用して、当該分野で公知の抗体特異性をアッセイするための任意の慣用的な方法によって達成することができる。このようなスクリーニング方法から同定された抗体は、インテグリンαｖβ３媒介性の疾患及び障害（歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候が含まれるがこれらに限定されない）の予防、治療、管理及び緩和のために有用であり得る。このような抗体が、本発明によって企図される方法及び組成物において使用することができることもまた企図される。好ましくは、これらの抗体は、ＬＭ６０９でもＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）でも、１以下、２以下、５以下、８以下又は１０以下のアミノ酸の置換、欠失又は挿入を有するＬＭ６０９又はＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）のＣＤＲ（すなわち、ＣＤＲの１つ、２つ、３つ、４つ若しくは５つ又は重鎖のＣＤＲ３）を有する抗体でも、それらの抗原結合部位でもない。
【表２】
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【０１６５】
４．３  インテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて使用される他の薬剤
本発明は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト（例えば、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体）及び／又はインテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体以外の少なくとも１種の予防薬若しくは治療薬を含む組成物、並びに１つ又は複数のこれらの組成物をそれを必要とする被験体に投与するステップを含む、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、治療、管理又は緩和するための方法を提供する。治療薬又は予防薬には、低分子、合成薬物、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸（例えば、アンチセンスヌクレオチド配列、三重螺旋及び生物学的に活性なタンパク質、ポリペプチド又はペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むがこれらに限定されない、ＤＮＡヌクレオチド及びＲＮＡヌクレオチド）、抗体、合成又は天然の無機分子、擬似薬剤並びに合成又は天然の有機分子が含まれるがこれらに限定されない。歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の予防、治療、管理又は緩和のために有用であることが既知であるか、そのために使用されてきたか、又はそのために現在使用されている任意の薬剤が、本明細書中に記載される発明に従って、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体と組み合わせて使用することができる。例えば、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を治療、予防、管理又は緩和するために使用されてきたか又はそのために現在使用されている予防薬又は治療薬に関する情報については、Physician's Desk Reference（第57版、2003）を参照のこと。このような薬剤の例には、鎮痛剤、抗炎症剤、歯科調製物、抗関節炎剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、抗生物質（ＰｅｒｉｏｓｔａｔＴＭを含む）、キレート化剤、酢酸亜鉛（Ｇａｌｚｉｎ（登録商標））、骨代謝調節剤、ホルモン、ビタミン及び免疫調節剤が含まれるがこれらに限定されない。
【０１６６】
４．３．１  鎮痛剤
本発明の組成物と方法において、当業者に公知の任意の鎮痛薬を使用することができる。本発明で使用できる鎮痛薬の非限定例には、ＮＳＡＩＤ、サリチル酸類、アセトミノフェン、麻酔薬、及び非麻酔薬と抗不安薬の組合せがある。
【０１６７】
鎮痛薬とその用量、投与経路及び推奨用量は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献に記載されている。
【０１６８】
４．３．２  抗炎症剤
本発明の組成物と方法において、当業者に公知の抗炎症剤を使用することができる。本発明で使用可能な抗炎症剤の非限定例には以下がある：非ステロイド抗炎症剤（ＮＩＳＡＩＤ）、ステロイド抗炎症剤、ベータアゴニスト、抗コリン作動薬、及びメチルキサンチン。ＮＳＡＩＤの例には、特に限定されないが、アスピリン、イブプロフェン、セレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸＴＭ）、ジクロフェナック（ＶＯＬＴＡＲＥＮＴＭ）、エトドラック（ＬＯＤＩＮＥＴＭ）、フェノプロフェン（ＮＡＬＦＯＮＴＭ）、インドメタシン（ＩＮＤＯＣＩＮＴＭ）、ケトラック（ＴＯＲＡＤＯＬＴＭ）、オキサプロジン（ＤＡＹＰＲＯＴＭ）、ナブメントン（ＲＥＬＡＦＥＮＴＭ）、スリンダック（ＣＬＩＮＯＲＩＬＴＭ）、トルメンチン（ＴＯＬＥＣＴＩＮＴＭ）、ロフェコキシブ（ＶＩＯＸＸＴＭ）、ナプロキセン（ＡＬＥＶＥＴＭ、ＮＡＰＲＯＳＹＮＴＭ）、ケトプロフェン（ＡＣＴＲＯＮＴＭ）、及びナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮＴＭ）。そのようなＮＳＡＩＤは、シクロオキシゲナーゼ（例えばＣＯＸ−１及び／又はＣＯＸ−２）を阻害することにより機能する。ステロイド抗炎症剤の例には、特に限定されないが、糖質コルチコイド、デキサメタゾン（ＤＥＣＡＤＲＯＮＴＭ）、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニソン（ＤＥＬＴＡＳＯＮＥＴＭ）、プレドニソロン、トリアムシノロン、アズルフィジン、及びエイコサノイド（例えば、プロスタグランジン類、トロンボキサン類、及びロイコトリエン類）がある。
【０１６９】
抗炎症剤とその用量、投与経路及び推奨される用途は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献に記載されている。
【０１７０】
４．３．３  歯科調製物
本発明の組成物と方法において、当業者に公知の任意の歯科用薬剤を使用することができる。本発明で使用可能な歯科用薬剤の非限定例には、フルオリド、カルシウム、リンス（例えばＬＩＳＴＥＲＩＮＥＴＭ）、抗生物質（例えば、ドキシサイクリンヒクレート、ＰＥＲＩＯＳＴＡＴＴＭ（CollaGenex Pharmaceuticals, Inc., Newtown, ペンシルバニア州）及びＡｔｒｉｄｏｘＴＭ（Atrix Laboratories, Inc.）としても知られている）、フルオリド及びカルシウムサプリメント（例えば、ＦＬＯＲＩＣＡＬＴＭ（Mericon Industries, Inc., Peoria、イリノイ州）、及びＭＯＮＯＣＡＬＴＭ（Mericon Industries, Inc., Peoria、イリノイ州））がある。
【０１７１】
さらに本発明において歯周病ワクチンも使用することができる。DeCarlo, A.ら、2003, Infect. Immun. 71(1):562-6（ラット歯周炎モデルで歯周炎を防御することがわかっているヘモグロビンのポルフィロモナス・ギンギバリス（Porphyromonas gingival）ＨＡ２結合ドメインを周囲接種）；及びRajapakse, P.ら、2002, Infection and Immunity 7085):2480-2486（ラット歯周炎モデルで歯周骨喪失を防御することがわかっているポルフィロモナス・ギンギバリスのＲｇａＡ−Ｋｇｐプロテイナーゼ接着複合体で免疫）を参照されたい（参照のことによりその全体が本明細書に組み込まれる）。
【０１７２】
歯科用薬剤とその用量、投与経路及び推奨される用途は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003)のような文献に記載されている。
【０１７３】
４．３．４  抗関節炎剤
当業者に公知の任意の抗関節炎薬を、本発明の組成物と方法で使用することができる。本発明で使用できる抗関節炎薬の非限定例には以下がある：鎮痛薬（非限定例は、最大４０００ｍｇ／ｄのアセトアミノフェン；フェナセチン；及びトラマドル、１日用量が２００〜３００ｍｇの範囲）；ＮＳＡＩＤ（非限定例には、特に限定されないが、アスピリン、ジフルニサル、ジクロフェナック、エトドラック、フェナメート、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、メチルサリチレート、ネブメトン、ナプロキシン、オキサプラジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、スリンダック及びトルメチンがある）；非アセチル化サリチル酸塩、例えばサルサレート；シクロオキシゲナーゼ（Ｃｏｘ）−２特異的阻害剤（ＣＳＩ）、例えばセレコキシブ（celecoxib）とロフェコキシブ（rofecoxib）；デポ糖質コルチコイド製剤の関節内又は関節周囲注入；ヒアルロン酸の関節内注入；カプサイシンクリーム；フィブリン、軟骨破片及び他の破片を洗い流すための骨関節炎膝の多量の洗浄；及び関節置換手術。低用量ＮＳＡＩＤ、例えば１２００ｍｇ／ｄのイブプロフェン、５００ｍｇ／ｄのナプロキセンが、好適である。胃保護薬、例えばミソプロストール、ファモチジン又はオメプラゾールが、ＮＳＡＩＤと同時に使用するのに好適である。
【０１７４】
本発明の組成物はまた、以下を含むがこれらに限定されない他の非薬理学的手段と組み合わせて使用することができる：関節負荷の低下（非限定的な例は、姿勢不良の矯正であり、過度の腰部脊椎前彎症について支持し、関与した関節の過度の負荷を回避し、延長された直立、横倒し（keeling）及びしゃがみこみを回避する）；罹患した関節への熱の適用；有酸素運動及び他の身体的治療。
【０１７５】
抗血管形成薬とその用量、投与経路及び推奨される用途は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献に記載されている。
【０１７６】
４．３．５  メタロプロテイナーゼ阻害剤
本発明の組成物と方法において、当業者に公知の任意のメタロプロテイナーゼ阻害剤を使用することができる。メタロプロテイナーゼの阻害剤の非限定例には以下がある：マリマスタット、ＢＢ９４（バチマスタット：［４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソブチル−３Ｓ−チエニル−チオメチル）−スクシニル−］Ｌ−フェニルアラニン−Ｎ−メチルアミド；British Pharmaceuitcals Limited （Oxford、英国））、ストレプトミセス（Streptomyces）メタロプロテイナーゼ阻害剤（ＳＭＰＩ）、ＢＢ−３１０３、及びメタロプロテイナーゼの組織阻害剤（例えば、ＴＩＭＰ−１、ＴＩＭＰ−２及びＴＩＭＰ−３）。
【０１７７】
メタロプロテイナーゼ阻害剤とその用量、投与経路及び推奨される用途は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献に記載されている。
【０１７８】
４．３．６  抗生物質
本発明の組成物と方法において、当業者に公知の任意の抗生物質を使用することができる。抗生物質の非限定例には、ペニシリン、ドキシサイクリン、セファロスポリン、イミペネム、アキストレオナム、バンコマイシン、シクロセリン、バシトラシン、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、クリンダマイシン、テトラサイクリン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ゲンタマイシン、アミカシン、カナマイシン、ネオマイシン、スペクチノマイシン、トリメトプリム、ノルフロキサシン、リファンピン、ポリミキシン、アンホテリシンＢ、ナイスタチン、ケトカナゾール、イソニアジド、メトロニダゾール、及びペンタミジンがある。
【０１７９】
抗生物質とその用量、投与経路及び推奨される用途は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献に記載されている。
【０１８０】
４．３．７  骨代謝調節剤
骨代謝調節剤には以下が含まれるがこれらに限定されない：ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、融合タンパク質、核酸分子、低分子、擬似薬剤、合成薬物、無機分子及び有機分子。骨代謝を調節するために有用であることが既知であるか、そのために使用されてきたか、又はそのために現在使用されている任意の薬剤又は治療が、本明細書中に記載される発明に従って、インテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて使用することができる。骨代謝調節剤の非限定的な例には以下が含まれる：ホスフェート、水酸化アルミニウム、炭酸アルミニウムゲル、マグネシウム、ビタミンＤ、カルシトリオール、ビタミンＤ２（エルゴカルシフェロール）、ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）、カルシウム、リチウム、糖質コルチコイド、ビホスホネート又はそれらの薬学的に許容される塩若しくはエステル（非限定的な例は、アレンドロネート、クロドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、パミドロネート、リセドロネート、チルドロネート（tiludronate）及びゾレドロネートである）、カルシトニン、プリカマイシン（ミトラマイシン）、硝酸ガリウム、エストロゲン、プロゲスチン、エストロゲンアンタゴニスト（例えばタモキシフェン）、エストロゲンレセプターモジュレータ、アンドロゲンレセプターモジュレータ、細胞傷害性剤又は抗増殖剤、マトリックスメタロプロテイナーゼインヒビター、表皮由来増殖因子、線維芽細胞由来増殖因子又は血小板由来増殖因子のインヒビター、ＶＥＧＦのインヒビター、増殖因子又は増殖因子レセプターに対する抗体、Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ、Ｆｌｔ−１、Ｔｃｋ／Ｔｉｅ−２又はＴｉｅ−１のインヒビター、カテプシンＫインヒビター、破骨細胞プロトンＡＴＰａｓｅのインヒビター、ウロキナーゼプラスミノゲンアクチベータ（ｕ−ＰＡ）のインヒビター、腫瘍特異的抗体−インターロイキン−２融合タンパク質、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼのインヒビター（非限定的な例は、Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ、Ｐｒａｖａｓｔａｔｉｎ、Ｆｌｕｖａｓｔａｔｉｎ、Ｓｔａｔｉｎ、Ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ、セリバスタチン、レスコール、リピトール、ロバスタチン及びＡｔｏｒｖａｓｔａｔｉｎである）、プレニル化インヒビター、ファルネシルトランスフェラーゼインヒビター、ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼインヒビター又は二重ファルネシル／ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼインヒビター、副甲状腺ホルモン又は副甲状腺ホルモンフラグメント（非限定的な例は、外因性ＰＴＨアナログである１−３４  ＰＴＨがある）、成長ホルモン、米国特許第６，４７２，４０２号及び同第６，４８２，４１１号に開示される分子、あるいはそれらの組み合わせ。骨代謝調節治療の非限定的な例には、腎透析及び手術が含まれる。
【０１８１】
骨代謝調節剤及び治療並びにそれらの投薬量、投与経路及び推奨される用法は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献中に記載されている。
【０１８２】
４．３．８  ホルモン
本発明の組成物と方法において、当業者に公知の任意のホルモン剤を使用することができる。本発明の組成物と方法で使用可能なホルモン剤の非限定例には、カルシトニン、糖質コルチコイド、プロゲスチン、アンドロゲン及びエストロゲンがある。
【０１８３】
ホルモン剤とその用量、投与経路及び推奨される用途は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献に記載されている。
【０１８４】
４．３．９  免疫調節剤
当業者に周知の任意の免疫調節剤は、本発明の組成物及び方法において使用することができる。本発明に従って使用することができる免疫調節剤の非限定的な例には、化学療法剤及び化学療法剤以外の免疫調節剤が含まれる。化学療法剤の例には以下が含まれるがこれらに限定されない：メトトレキセート、シクロスポリンＡ、マロノニトリロアミド（malononitriloaminde）（例えば、レフルノミド）、シスプラチン、イフォスファミド、タキサン（例えば、タキソール及びパクリタキセル）、トポイソメラーゼＩインヒビター（例えば、ＣＰＴ−１１、トポテカン、９−ＡＣ及びＧＧ−２１１）、ゲムシタビン、ビノレルビン、オキサリプラチン、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ロイコボリン、ビノレルビン、テモダール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラセンジオン（dihydroxy anthracin dione）、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン、Ｉｍｍｕｒａｎ、ミノサイクリン、アザチオプリン、抗生物質（例えば、ＦＫ５０６（タクロリムス））、メチルプレドニゾロン（ＭＰ）、コルチコステロイド、ステロイド、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン（シロリムス）、ミゾリビン、デオキシスパガリン（deoxyspergualin）、ブレキナル（brequinar）、糖質コルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、及びピューロマイシンホモログ、並びにサイトキサン（cytoxan）。化学療法剤以外の免疫調節剤の例には以下が含まれるがこれらに限定されない：抗Ｔ細胞レセプター抗体（例えば、抗ＣＤ４抗体（例えば、ｃＭ−Ｔ４１２（Boeringer）、ＩＤＥＣ−ＣＥ９．１（登録商標）（IDEC及びSKB）、ｍＡＢ  ４１６２Ｗ９４、Ｏｒｔｈｏｃｌｏｎｅ及びＯＫＴｃｄｒ４ａ（Janssen-Cilag））、抗ＣＤ３抗体（例えば、Nuvion(Product Design Labs）、ＯＫＴ３（Jahnson & Johnson）又はリツキサン（IDEC））、抗ＣＤ５抗体（例えば、抗ＣＤ５リシン連結イムノコンジュゲート）、抗ＣＤ７抗体（例えば、ＣＨＨ−３８０（Novartis））、抗ＣＤ８抗体、抗ＣＤ４０リガンドモノクローナル抗体（例えば、ＩＤＥＣ−１３１（IDEC））、抗ＣＤ５２抗体（例えば、ＣＡＭＰＡＴＨ  １Ｈ（Ilex））、抗ＣＤ２抗体（例えば、ＭＥＤＩ−５０７（MedImmune,Inc.、国際公開第ＷＯ０２／０９８３７０号及び同第ＷＯ０２／０６９９０４号）、抗ＣＤ１１ａ抗体（例えば、Ｘａｎｅｌｉｍ（Genentech））及び抗Ｂ７抗体（例えば、ＩＤＥＣ−１１４（IDEC））；抗サイトカインレセプター抗体（例えば、抗ＩＦＮレセプター抗体、抗ＩＬ−２レセプター抗体（例えば、Ｚｅｎａｐａｘ（Protein Design Labs））、抗ＩＬ−４レセプター抗体、抗ＩＬ−６レセプター抗体、抗ＩＬ−１０レセプター抗体及び抗ＩＬ−１２レセプター抗体）；ＣＴＬＡ４−免疫グロブリン；ＬＦＡ−３ＴＩＰ（Biogen、国際公開第ＷＯ９３／０８６５６号及び米国特許第６，１６２，４３２号）；可溶性サイトカインレセプター（例えば、ＴＮＦ−αレセプターの細胞外ドメイン又はそのフラグメント、ＩＬ−１βレセプターの細胞外ドメイン又はそのフラグメント及び���Ｌ−６レセプターの細胞外ドメイン又はそのフラグメント）；サイトカイン又はそのフラグメント（例えば、インターロイキン（ＩＬ）−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、インターフェロン（ＩＦＮ）−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ及びＧＭ−ＣＳＦ）；並びに抗サイトカイン抗体（例えば、抗ＩＦＮ抗体、抗ＩＦＮ−γ抗体、抗ＴＮＦ−α抗体、抗ＩＬ−１β抗体、抗ＩＬ−２抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−８抗体（例えば、ＡＢＸ−ＩＬ−８（Abgenix））、抗ＩＬ−９抗体、抗ＩＬ−１０抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１５抗体）。
【０１８５】
特定の実施形態において、この免疫調節剤は化学療法剤ではない。別の実施形態において、この免疫調節剤は化学療法剤である。
【０１８６】
免疫療法剤及び治療並びにそれらの投薬量、投与経路及び推奨される用法は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献中に記載されている。
【０１８７】
４．３．１０  キレート化剤
当業者に周知の任意のキレート化剤を、本発明の組成物及び方法において使用することができる。キレート化剤の非限定的な例には、Ｄ−ペニシラミン（Ｃｕｐｒｉｍｉｎｅ（登録商標）及びＤｅｐｅｎ（登録商標））、トリエンチン（Ｓｙｐｒｉｎｅ）及びテトラチオモリブデートが含まれる。
【０１８８】
キレート化剤並びにそれらの投薬量、投与経路及び推奨される用法は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献中に記載されている。
【０１８９】
４．３．１１  ビタミン及びミネラル
当業者に周知の任意のビタミン及び／又はミネラルを、本発明の組成物及び方法において使用することができる。ビタミン及びミネラルの非限定的な例には、マグネシウム、カルシウム、ビタミンＣ化合物、ビタミンＢ化合物（例えば、ビタミンＢ６（ピリドキシン））及びビタミンＤ化合物が含まれる。好ましくは、マルチビタミン及びミネラルサプリメントが、本発明に従って使用される。
【０１９０】
ビタミン及びミネラル並びにそれらの投薬量、投与経路及び推奨される用法は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献中に記載されている。
【０１９１】
４．３．１２  抗ウイルス剤
当業者に周知の任意の抗ウイルス剤を、本発明の組成物及び方法において使用することができる。抗ウイルス剤の非限定的な例には以下が含まれる：タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、融合タンパク質抗体、核酸分子、有機分子、無機分子、及びウイルスのそのレセプターへの付着、ウイルスの細胞中への内在化、ウイルスの複製又は細胞からのウイルスの放出を阻害又は低下する低分子。特に、抗ウイルス剤には以下が含まれるがこれらに限定されない：ヌクレオシドアナログ（例えば、ジドブジン、アシクロビル、ガンシクロビル、ビダラビン、イドクスウリジン、トリフルウリジン（trifluridine）及びリバビリン）、フォスカルネット（foscarnet）、アマンタジン、リマンタジン、サキナビル、インジナビル、リトナビル、α−インターフェロン、γ−インターフェロン及び他のインターフェロン、並びにＡＺＴ。
【０１９２】
特定の実施形態において、この抗ウイルス剤は、ウイルス抗原に対して免疫特異的な免疫調節剤である。本明細書中で使用する場合、用語「ウイルス抗原」には以下が含まれるがこれらに限定されない：免疫応答を惹起し得る任意のウイルス性のペプチド、ポリペプチド及びタンパク質（例えば、ＲＳＶ  Ｆ糖タンパク質、ＲＳＶ  Ｇ糖タンパク質、インフルエンザウイルスノイラミニダーゼ、インフルエンザウイルス血球凝集素）。ウイルス感染疾患の治療のために本発明において有用な抗体には、病原性ウイルスの抗原に対する抗体が含まれるがこれらに限定されず、これには例として以下が含まれるがこれらに限定されない：アデノウイルス（例えば、マストアデノウイルス及びアビアデノウイルス（aviadenovirus））、パラミクソウイルス科（例えば、パラミクソウイルス、パラインフルエンザウイルス１、ニューモウイルス亜科（例えば、ニューモウイルス、ヒトＲＳウイルス）、及びメタニューモウイルス（例えば、トリニューモウイルス及びヒトメタニューモウイルス））、ピコルナウイルス科及び（例えば、ライノウイルス）。ウイルス感染疾患の予防又は治療のために有用な入手可能な抗体の特定の例には、ＲＳＶの治療のために有用なヒト化抗体であるＳＹＮＡＧＩＳ（登録商標）（MedImmune,Inc.；国際公開第ＷＯ０２／４３６６０号）が含まれるがこれに限定されない。
【０１９３】
抗ウイルス剤及び治療並びにそれらの投薬量、投与経路及び推奨される用法は当該分野で公知であり、Physician's Desk Reference（第57版、2003）のような文献中に記載されている。
【０１９４】
４．４  予防的使用及び治療的使用
４．４．１  歯周疾患の治療
本発明は、歯周疾患又はその症状を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、歯周疾患又はその症状を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、上記セクション４．３において開示されたような予防薬又は治療薬）を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。特定の実施形態において、本発明は、歯周疾患又はその症状を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の以下の治療のうち少なくとも１種の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗生物質、手術、抗炎症剤、免疫調節剤、抗関節炎剤、ホルモン療法、ＣＯ２レーザー治療、根面平滑化及び／又は骨代謝調節剤。好ましくは、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態において、この抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭである。
【０１９５】
一実施形態において、本発明は、歯周疾患又はその症状を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量のＰｅｒｉｏｓｔａｔＴＭの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、歯周疾患又はその症状を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量のビスホスフォネートの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、歯周疾患又はその症状を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗炎症剤（例えば、ＮＳＡＩＤ）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、歯周疾患又はその症状を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗ポルフィロモナス・ジンジバリスＨＡ２結合ドメインＩｇＧの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０１９６】
本発明の組成物及び方法は、歯周疾患についての治療の第１、第２、第３又は第４のラインとして使用することができる。本発明は、このような疾患についての従来の治療に対して不応性である被験体において歯周疾患又はその症状を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、このような疾患についての既存の単一の薬剤治療に対して不応性である被験体において歯周疾患又はその症状を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、治療されている被験体にとって従来の治療があまりに毒性である（すなわち、許容できない副作用又は我慢できない副作用を生じる）ことを証明したか証明し得る場合の、歯周疾患の管理又は治療のための代替的方法を提供する。さらに、本発明は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせて投与するステップによる、治療された患者又は疾患活性を有さない患者において歯周疾患の再発を予防するための方法を提供する。
【０１９７】
上記実施形態の各々において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸が、インテグリンαｖβ３アンタゴニストの代わりにか、又はインテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【０１９８】
歯周疾患には、歯肉炎、歯周炎及び歯周症が含まれるがこれらに限定されない。
【０１９９】
４．４．２  関節置換の無菌的弛緩の治療
関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、上記セクション４．３において開示されたような予防薬又は治療薬）を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。関節置換の無菌的弛緩に関連する症状の非限定的な例には炎症及び関節炎が含まれる。
【０２００】
特定の実施形態において、本発明は、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の以下の治療のうち少なくとも１種の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗生物質、手術、抗炎症剤、免疫調節剤、抗関節炎剤、ホルモン療法、及び／又は骨代謝調節剤。好ましくは、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態において、この抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭである。
【０２０１】
一実施形態において、本発明は、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量のビスホスフォネートの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗炎症剤（例えばＮＳＡＩＤ）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗関節炎剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量のメタロプロテイナーゼ阻害剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２０２】
本発明の組成物及び方法は、関節置換の無菌的弛緩についての治療の第１、第２、第３又は第４のラインとして使用することができる。本発明は、このような疾患についての従来の治療に対して不応性である被験体において関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、このような疾患についての既存の単一の薬剤治療に対して不応性である被験体において関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、治療されている被験体にとって従来の治療があまりに毒性である（すなわち、許容できない副作用又は我慢できない副作用を生じる）ことを証明したか証明し得る場合の、関節置換の無菌的弛緩の管理又は治療のための代替的方法を提供する。さらに、本発明は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせて投与するステップによる、治療された患者又は疾患活性を有さない患者において関節置換の無菌的弛緩の再発を予防するための方法を提供する。
【０２０３】
上記実施形態の各々において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸が、インテグリンαｖβ３アンタゴニストの代わりにか、又はインテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【０２０４】
特定の実施形態において、関節の無菌的弛緩は、臀部又は膝の無菌的弛緩である。
【０２０５】
４．４．３  ウィルソン病
ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、上記セクション４．３において開示されたような少なくとも１つの他の予防薬又は治療薬）を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２０６】
特定の実施形態において、本発明は、ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の以下の治療のうち少なくとも１種の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤、免疫調節剤、キレート化剤、及び／又は酢酸亜鉛。好ましくは、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態において、この抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭである。
【０２０７】
一実施形態において、本発明は、ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量のキレート化剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、予防有効量又は治療有効量のＤ−ペニシラミンの用量、及び予防有効量又は治療有効量のピリドキシンの用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗炎症剤（例えば、ＮＳＡＩＤ）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の酢酸亜鉛の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、ウィルソン病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、予防有効量又は治療有効量のＤ−ペニシラミンの用量、予防有効量又は治療有効量のピリドキシンの用量、及び予防有効量又は治療有効量の酢酸亜鉛の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２０８】
本発明の組成物及び方法は、ウィルソン病又はその症候についての治療の第１、第２、第３又は第４のラインとして使用することができる。本発明は、このような疾患についての従来の治療に対して不応性である被験体においてウィルソン病又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、このような疾患についての既存の単一の薬剤治療に対して不応性である被験体においてウィルソン病又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、治療されている被験体にとって従来の治療があまりに毒性である（すなわち、許容できない副作用又は我慢できない副作用を生じる）ことを証明したか証明し得る場合の、ウィルソン病又はその症候の管理又は治療のための代替的方法を提供する。さらに、本発明は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせて投与するステップによる、治療された患者又は疾患活性を有さない患者においてウィルソン病又はその症候の再発を予防するための方法を提供する。
【０２０９】
上記実施形態の各々において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸が、インテグリンαｖβ３アンタゴニストの代わりにか、又はインテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【０２１０】
４．４．４  ゴーラム−スタウト病
ゴーラム−スタウト病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、ゴーラム−スタウト病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、上記セクション４．３において開示されたような予防薬又は治療薬）を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２１１】
特定の実施形態において、本発明は、ゴーラム−スタウト病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の以下の治療のうち少なくとも１種の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤、免疫調節剤、骨代謝調節剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、及び／又はホルモン療法。好ましくは、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態において、この抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭである。
【０２１２】
一実施形態において、本発明は、ゴーラム−スタウト病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗炎症剤（例えばＮＳＡＩＤ）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、ゴーラム−スタウト病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量のメタロプロテイナーゼ阻害剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、ゴーラム−スタウト病又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗ＩＬ−６抗体の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２１３】
本発明の組成物及び方法は、ゴーラム−スタウト病又はその症候についての治療の第１、第２、第３又は第４のラインとして使用することができる。本発明は、このような疾患についての従来の治療に対して不応性である被験体においてゴーラム−スタウト病又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、このような疾患についての既存の単一の薬剤治療に対して不応性である被験体においてゴーラム−スタウト病又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、治療されている被験体にとって従来の治療があまりに毒性である（すなわち、許容できない副作用又は我慢できない副作用を生じる）ことを証明したか証明し得る場合の、ゴーラム−スタウト病又はその症候の管理又は治療のための代替的方法を提供する。さらに、本発明は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせて投与するステップによる、治療された患者又は疾患活性を有さない患者においてゴーラム−スタウト病又はその症候の再発を予防するための方法を提供する。
【０２１４】
上記実施形態の各々において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸が、インテグリンαｖβ３アンタゴニストの代わりにか、又はインテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【０２１５】
４．４．５  慢性中耳炎
慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、上記セクション４．３において開示されたような予防薬又は治療薬）を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２１６】
特定の実施形態において、本発明は、慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の以下の治療のうち少なくとも１種の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤、免疫調節剤、骨代謝調節剤、抗生物質、抗ウイルス剤、及び／又は外科手術。好ましくは、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態において、この抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭである。
【０２１７】
一実施形態において、本発明は、慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗生物質の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の骨代謝調節剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の抗炎症剤（例えば、ＮＳＡＩＤ）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗生物質の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、慢性中耳炎又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量のＤ−ペニシラミンの用量、予防有効量又は治療有効量の免疫調節剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２１８】
本発明の組成物及び方法は、慢性中耳炎又はその症候についての治療の第１、第２、第３又は第４のラインとして使用することができる。本発明は、このような疾患についての従来の治療に対して不応性である被験体において慢性中耳炎又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、このような疾患についての既存の単一の薬剤治療に対して不応性である被験体において慢性中耳炎又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、治療されている被験体にとって従来の治療があまりに毒性である（すなわち、許容できない副作用又は我慢できない副作用を生じる）ことを証明したか証明し得る場合の、慢性中耳炎又はその症候の管理又は治療のための代替的方法を提供する。さらに、本発明は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせて投与するステップによる、治療された患者又は疾患活性を有さない患者において慢性中耳炎又はその症候の再発を予防するための方法を提供する。
【０２１９】
上記実施形態の各々において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸が、インテグリンαｖβ３アンタゴニストの代わりにか、又はインテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【０２２０】
４．４．６  肥大性肺性骨関節症
肥大性肺性骨関節症又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをそれを必要とする被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、肥大性肺性骨関節症又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及びインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の治療（例えば、上記セクション４．３において開示されたような予防薬又は治療薬）を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２２１】
特定の実施形態において、本発明は、肥大性肺性骨関節症又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の以下の治療のうち少なくとも１種の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む：抗炎症剤、免疫調節剤、骨代謝調節剤、抗生物質、ホルモン療法、及び／又は外科手術。好ましくは、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントである。特定の実施形態において、この抗体はＶＩＴＡＸＩＮＴＭである。
【０２２２】
一実施形態において、本発明は、肥大性肺性骨関節症又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の少なくとも１種の化学療法剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、肥大性肺性骨関節症又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量、及び予防有効量又は治療有効量の骨代謝調節剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、肥大性肺性骨関節症又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の抗炎症剤（例えば、ＮＳＡＩＤ）の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。別の実施形態において、本発明は、肥大性肺性骨関節症又はその症候を予防、管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量及び予防有効量又は治療有効量の化学療法剤以外の免疫調節剤の用量を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む。
【０２２３】
本発明の組成物及び方法は、肥大性肺性骨関節症又はその症候についての治療の第１、第２、第３又は第４のラインとして使用することができる。本発明は、このような疾患についての従来の治療に対して不応性である被験体において肥大性肺性骨関節症又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、このような疾患についての既存の単一の薬剤治療に対して不応性である被験体において肥大性肺性骨関節症又はその症候を管理、治療又は緩和するための方法を提供し、この方法は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせてこの被験体に投与するステップを含む。本発明はまた、治療されている被験体にとって従来の治療があまりに毒性である（すなわち、許容できない副作用又は我慢できない副作用を生じる）ことを証明したか証明し得る場合の、肥大性肺性骨関節症又はその症候の管理又は治療のための代替的方法を提供する。さらに、本発明は、予防有効量又は治療有効量のインテグリンαｖβ３アンタゴニストの用量を、単独であるいは予防有効量又は治療有効量の別の治療（例えば、上記セクション４．３において記載されたような予防薬又は治療薬）の用量と組み合わせて投与するステップによる、治療された患者又は疾患活性を有さない患者において肥大性肺性骨関節症又はその症候の再発を予防するための方法を提供する。
【０２２４】
上記実施形態の各々において、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸が、インテグリンαｖβ３アンタゴニストの代わりにか、又はインテグリンαｖβ３アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【０２２５】
４．５  組成物、及び組成物の投与方法
本発明は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候、あるいはその症候の治療、管理、予防及び改善のための組成物を提供する。別の実施形態においては、組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニストを含む。別の実施形態において、組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸分子を含む。他の実施形態においては、組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニストと、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬を含む。好ましくは、かかる予防薬又は治療薬は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、管理、治療又は改善に有用であることが知られている、又はそれに使用されていた若しくは現在使用されているものである。別の実施形態において、組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸分子とインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１つの予防薬又は治療薬を含む。好ましくは、かかる予防薬又は治療薬は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、管理、治療又は改善に有用であることが知られている、又はそれに使用されていた若しくは現在使用されているものである。別の実施形態において、組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニストとインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１つの予防薬又は治療薬をコードする核酸分子を含む。好ましくは、かかる予防薬又は治療薬は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、管理、治療又は改善に有用であることが知られている、又はそれに使用されていた若しくは現在使用されているものである。また別の実施形態において、組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニストをコードする核酸分子とインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１つの予防薬又は治療薬をコードする核酸分子を含む。好ましくは、かかる予防薬又は治療薬は、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、管理、治療又は改善に有用であることが知られている、又はそれに使用されていた若しくは現在使用されているものである。歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の予防、管理、治療又は改善に有用であることが知られている他の非限定的な治療薬又は予防薬の例については、セクション４．３．１から４．３．９を参照されたい。
【０２２６】
好ましい実施形態においては、本発明の組成物は医薬組成物である。かかる組成物は、予防又は治療上有効な量の少なくとも１つの予防薬若しくは治療薬（例えば、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト、又は他の予防薬若しくは治療薬）、及び製薬上許容される担体を含む。特定の実施形態においては、用語「製薬上許容される」は、動物、特にヒトにおける使用について、連邦政府若しくは州政府の規制当局により認可されているか又は米国薬局方若しくは他の一般的に認められた薬局方に掲げられていることを意味する。用語「担体」は、治療薬とともに投与される希釈剤、アジュバント（例えば、フロイント（Freund）のアジュバント（完全及び不完全））、賦形剤、又はビヒクルを意味する。かかる製薬用担体は水及び、落花生油、大豆油、鉱物油、胡麻油などの石油、動物、植物又は合成起源のものを含む油などの無菌の液体でありうる。水が医薬組成物を静脈内に投与するときの好ましい担体である。生理食塩水及びデキストロース及びグリセロール水溶液も、特に注射溶液用の液状担体として使用することができる。適当な医薬賦形剤は、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、コムギ粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどが挙げられる。所望であれば、組成物はまた、少量の湿潤剤若しくは乳化剤、又はｐＨ緩衝化剤を含有してもよい。これらの組成物は、溶液、懸濁剤、乳濁剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、粉剤、徐放製剤などの形態をとってもよい。経口製剤は、医薬グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどの標準の担体を含んでもよい。適当な医薬担体の例は、E. W. Martinによる「レミントンの製薬科学（Remington's Pharmaceutical Sciences）」に記載されている。かかる組成物は、予防又は治療上有効な量の予防薬若しくは治療薬を、好ましくは精製した形態で含有し、適当な量の担体と一緒にして、患者への適当な投与形態を提供するであろう。製剤は投与の様式に適合しなければならない。好ましい実施形態においては、医薬組成物は無菌であり、かつ被験体、好ましくは動物被験体、さらに好ましくは哺乳類被験体、そして最も好ましくはヒト被験体への投与に適切な剤形である。
【０２２７】
特定の実施形態においては、本発明の治療（例えば予防薬又は治療薬）を治療を必要とする領域へ局所投与することが望ましく、これは、例えば、限定されるものでないが、局所注入により、注射により、又はインプラント（シアラスチック（sialastic）膜などの膜、若しくは繊維を含む多孔質若しくは非多孔質又はゼラチン状材料である）を使うことにより達成することができる。好ましくは、予防薬若しくは治療薬を投与したときに、少なくとも１つの予防薬若しくは治療薬を吸収しない材料を使用するように注意しなければならない。
【０２２８】
他の実施形態においては、組成物を小胞、特にリポソームに入れて送達することができる（Langer, Science 249:1527-1533(1990)；Treatら, 「Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer」, Lopez-Berestein及びFidler (編), Liss, New York, pp.353-365 (1989)；Lopez-Berestein, 同書, pp.317-327を参照；全般的に同書を参照）。
【０２２９】
さらに他の実施形態においては、本発明の治療を制御放出又は持続放出システムで送達することができる。一実施形態においては、ポンプを利用して制御又は持続放出を達成してもよい（Langer, 前掲；Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:20；Buchwaldら, 1980, Surgery 88:507；Saudekら, 1989, N. Engl. J. Med. 321:574を参照）。他の実施形態においては、ポリマー材料を利用して本発明の治療の制御又は持続放出を達成することができる（例えば、「Medical Applications of Controlled Release」, Langer及びWise (編), CRC Pres., Boca Raton, Florida (1974)；「Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance」, Smolen及びBall (編), Wiley, New York (1984)；Ranger及びPeppas, 1983, J., Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61を参照；また、Levyら, 1985, Science 228:190；Duringら, 1989, Ann. Neurol. 25:351；Howardら, 1989, J. Neurosurg. 7 1:105；米国特許第５，６７９，３７７号；米国特許第５，９１６，５９７号；米国特許第５，９１２，０１５号；米国特許第５，９８９，４６３号；米国特許第５，１２８，３２６号；国際公開ＷＯ９９／１５１５４号；及び国際公開ＷＯ９９／２０２５３号も参照）。持続放出製剤に使用されるポリマーの例としては、限定されるものでないが、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エチレン−コ−酢酸ビニル）、ポリ（メタクリル酸）、ポリグリコリド（ＰＬＧ）、ポリ酸無水物、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリアクリルアミド、ポリ（エチレングリコール）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、及びポリオルトエステルが挙げられる。好ましい実施形態においては、持続放出製剤に利用されるポリマーは不活性であって、浸出可能な不純物を含まず、貯蔵に安定で、無菌かつ生物分解性である。さらに他の実施形態においては、制御又は持続放出システムを予防又は治療上の標的、すなわち表皮の近くに配置することができ、こうして全身用量のほんの一部しか必要としなくなる（例えば、Goodson, 「Medical Applications of Controlled Release」, 前掲, vol. 2, pp.115-138 (1984)を参照）。
【０２３０】
制御放出システムはLanger（1990, Science 249:1527-1533）の総説に考察されている。当業者に公知のいずれの技術を利用して本発明の少なくとも１つの予防薬又は治療薬を含む持続放出製剤を生成してもよい。例えば、米国特許第４，５２６，９３８号、ＰＣＴ公開ＷＯ９１／０５５４８号、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／２０６９８号、Ningら, 1996,「Intratumoral Radioimmunotheraphy of a Human Colon Cancer Xenograft Using a Sustained-Release Gel」, Radiotherapy & Oncology 39:179-189、Songら, 1995,「Antibody Mediated Lung Targeting of Long-Circulating Emulsions」, PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 50:372-397、Cleekら, 1997, 「Biodegradable Polymeric Carriers for a bFGF Antibody for Cardiovascular Application」, Pro. Int'l. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 24:853-854、及びLamら, 1997, 「Microencapsulation of Recombinant Humanized Monoclonal Antibodiy for Local Delivery」, Proc. Int'l. Symp. Control Rel. Bioact. Mater. 24:759-760を参照されたい。これらはそれぞれ本明細書に参照によりその全文が組み入れられる。
【０２３１】
特定の実施形態においては、本発明の組成物が予防薬若しくは治療薬（本発明の抗体など）をコードする核酸分子である場合、核酸をｉｎ  ｖｉｖｏに投与してそのコードする予防薬若しくは治療薬の発現を促進することができ、それは、核酸を、例えばレトロウイルスベクターの利用により、適当な核酸発現ベクターの部分として構築してそれが細胞内に取り込まれるように投与する（米国特許第４，９８０，２８６号を参照）ことにより、又は直接注入により、又は微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；バイオリスチック（Biolistic）、Dupont）により、又は脂質若しくは細胞表面受容体若しくはトランスフェクション剤をコーティングすることにより、又は核に進入することが知られるホメオボックス様ペプチド（例えば、Joliotら, 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:1864-1868を参照）と連結して投与することにより実施することができる。あるいは、核酸を細胞内に導入し、相同組換えにより宿主細胞ＤＮＡ内に組み込ませて発現してもよい。
【０２３２】
本発明の医薬組成物は、意図する投与経路と適合しうるように製剤する。投与経路の例は、限定されるものでないが、非経口、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口、鼻内（例えば、吸入）、鼻腔内、経皮（例えば局所）、経粘膜、及び直腸投与が挙げられる。特定の実施形態においては、組成物を、ヒトに対する静脈内、皮下、筋肉内、経口、鼻腔内、腫瘍内又は局所投与用に適合させた医薬組成物として日常的方法に従って製剤する。典型的には、静脈内投与用組成物は無菌等張性バッファー水溶液である。必要な場合は、組成物はまた、可溶化剤、及び注射部位の痛みを和らげるリグノカインなどの局所麻酔薬を含んでもよい。
【０２３３】
本発明の予防薬又は治療薬を局所に投与するのであれば、予防薬又は治療薬を、例えば、練り歯磨き、経口用ゲル、軟膏、クリーム、経皮パッチ、ローション、ゲル、シャンプー、スプレー、エーロゾル、溶液、エマルジョンの形態、又は当業者に周知のその他の形態に製剤化してもよい。例えば、「Remington's Pharmaceutical Sciences and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms」, 19th ed., Mack Pub. Co., Easton, PA (1995)、及びPharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery System, 7th ed., Lippincott Williams & Wilkins (1999)を参照されたい。特定の実施形態において、歯周疾患のための本発明の予防薬又は治療剤は、練り歯磨き又は経口用ゲルの形態で投与する。別の実施形態において、関節障害のための本発明の予防薬又は治療薬は、軟膏、クリーム、経皮パッチ、ローション、ゲル、スプレー、エーロゾル、溶液、又はエマルジョンの形態で投与する。非スプレー型局所用剤形については、局所適用に適合性がありかつ好ましくは水より大きい動粘性を有する担体又は少なくとも１つの賦形剤を含有する粘性ないし半固体又は固体剤形が通常使用される。適当な製剤は、限定されるものでないが、溶液剤、懸濁剤、乳濁剤、クリーム剤、膏薬、粉剤、リニメント剤、軟膏などが挙げられ、これらは、所望であれば、無菌化するか、例えば浸透圧などの様々な特性に影響を与えるために助剤（例えば、保存剤、安定化剤、湿潤剤、バッファー、若しくは塩）と混合する。他の適当な局所用剤形は、活性成分を、好ましくは固体若しくは液体不活性担体と一緒に加圧揮発成分（例えば、フレオンなどの気体噴霧剤）との混合物に又はスクイズボトルにパッケージした、スプレー可能なエーロゾル製剤が挙げられる。所望であれば、加湿剤又は保湿剤を、医薬組成物及び剤形に添加してもよい。かかる添加成分の例は、当技術分野では公知である。
【０２３４】
本発明の組成物は、エーロゾル剤形、スプレー、ミスト又は液滴の剤形に製剤化することなどにより、鼻腔内に投与することができる。特に、本発明に従って使用する予防薬若しくは治療薬は、エーロゾルスプレーの剤形で加圧パック又は噴霧器から、適当な噴霧剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適当な気体の使用により、好都合に送達することができる。加圧エーロゾルの場合、投与単位は、計量した量を送達するバルブを備えることにより決定することができる。吸入器又は吹送器に使用するために、化合物及びラクトース若しくはデンプンなどの適当な粉末基剤のパウダーミックスを含有する、例えば、ゼラチンのカプセル及びカートリッジを製剤化してもよい。
【０２３５】
本発明の組成物を経口投与する場合には、本発明の予防薬又は治療薬を経口用に、例えば、錠剤、カプセル剤、カシェ剤、ゲルカップ（ｇｅｌｃａｐ）剤、液剤、懸濁剤などの剤形で製剤することができる。錠剤又はカプセル剤は通常の方法により、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン若しくはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；増量剤（例えば、ラクトース、微結晶セルロース若しくはリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク若しくはシリカ）；崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプン若しくはグリコールデンプンナトリウム）；又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）などの製薬上許容される賦形剤を用いて調製することができる。錠剤は、当技術分野で公知の方法によりコーティングしてもよい。経口投与用の液体製剤は、例えば現地されるものではないが、溶液剤、シロップ剤若しくは懸濁剤の剤形であってもよいし、又はそれらを水若しくは他の適当なビヒクルを用いて使用前に調合する乾燥製品として提供してもよい。かかる液体製剤は、通常の方法により、懸濁剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体又は食用硬化油脂）；乳化剤（例えば、レシチン又はアカシア）；非水性ビヒクル（例えば、アーモンドオイル、油状エステル、エチルアルコール又は分留植物油）；及び保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル若しくはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル又はソルビン酸）などの製薬上許容される添加剤を用いて調製することができる。製剤はまた、バッファー塩、香料、着色料及び甘味剤を必要に応じて含有してもよい。経口投与用製剤は、予防薬若しくは治療薬の徐放、制御放出又は持続放出にとって適するように製剤することができる。
【０２３６】
本発明の組成物は、エアゾール化剤と共に製剤化した組成物の経肺投与、例えば吸入器又は噴霧器を用いることにより投与しうる。例えば、米国特許第６，０１９，９６８号、第５，９８５，３２０号、第５，９８５，３０９号、第５，９３４，２７２号、第５，８７４，０６４号、第５，８５５，９１３号、第５，２９０，５４０号、及び第４，８８０，０７８号、並びに国際公開ＷＯ９２／１９２４４号、ＷＯ９７／３２５７２号、ＷＯ９７／４４０１３号、ＷＯ９８／３１３４６号、及びＷＯ９９／６６９０３号（それぞれ参照によりその全体を本明細書に組み入れる）を参照されたい。特定の実施形態において、肥大性肺性骨関節症又はそれに関連する症候若しくは症状を治療、予防、管理又は改善するための方法は、本発明の少なくとも１つの予防薬又は治療薬を経肺投与することを含む。
【０２３７】
本発明の組成物は、注射（例えばボーラス注射又は連続輸液）による非経口投与用に製剤化することができる。注射用製剤は、単位剤形（例えばアンプル又は複数用量容器）で、保存剤を加えて提供することができる。組成物は、油性若しくは水性ビヒクル中の懸濁液、溶液又は乳濁液などの剤形であってもよく、かつ懸濁化剤、安定化剤及び／又は分散助剤などの製剤用助剤を含有してもよい。あるいは、活性成分は、使用前に適当な溶媒、例えば発熱物質を含まない滅菌水を用いて調合する粉末剤形であってもよい。
【０２３８】
本発明の組成物はまた、例えば、ココアバター又は他のグリセリドなどの通常の座薬基剤を含有する、座剤又は保持浣腸などの直腸組成物に製剤化することもできる。
【０２３９】
以上記載した製剤に加えて、本発明の組成物はまた、デポ製剤として製剤化することもできる。かかる長期作用製剤は、植込み（例えば皮下又は筋肉内）により又は筋肉内注射により投与することができる。従って、例えば、組成物を、適当なポリマー又は疎水性物質（例えば許容しうる油中のエマルジョンとして）若しくはイオン交換樹脂を用いて、又は難溶性誘導体（例えば難溶性塩）として製剤化してもよい。
【０２４０】
好ましい実施形態において、本発明の組成物は、歯周疾患又はその症候の予防、治療、管理又は改善に使用するための練り歯磨き、歯茎に塗布する局所用ゲル、又はチューインガムとして製剤化する。
【０２４１】
本発明の組成物は、中性又は塩形態で製剤化しうる。薬学的許容される塩としては、アニオン（塩化水素、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来するアニオン）、並びにカチオン（水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するカチオン）と共に形成される塩が含まれる。
【０２４２】
一般的に、本発明の組成物の成分は、別々に又は一緒に混合して単位剤形で、例えば、薬剤の量を示すアンプルなどの密封容器又はサシェット（ｓａｃｈｅｔｔｅ）に入れて、乾燥した凍結乾燥粉末又は水を含まない濃縮物として供給する。組成物を輸液により投与する場合、それを無菌の製薬グレードの水又は生理食塩水を含有する輸液ボトルを用いて調剤することができる。組成物を注射により投与する場合、注射用滅菌水又は生理食塩水のアンプルを提供し、投与前に成分を混合することができる。
【０２４３】
特に、本発明は、薬剤の量を示すアンプル又はサシェットなどの密封容器にパッケージされた、１種以上の本発明の予防薬若しくは治療薬又は医薬組成物を提供する。一実施形態においては、１種以上の本発明の予防薬若しくは治療薬又は医薬組成物を、密封容器に入った乾燥滅菌済凍結乾燥粉末又は水を含まない濃縮物として供給し、例えば、水又は生理食塩水を用いて被験体への投与に適当な濃度に再調合することができる。好ましくは、１種以上の本発明の予防薬若しくは治療薬又は医薬組成物を、乾燥した無菌の凍結乾燥粉末として密封容器に入れて、少なくとも５ｍｇ、さらに好ましくは少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、又は少なくとも１００ｍｇの単位用量にて供給する。凍結乾燥した本発明の予防薬若しくは治療薬又は医薬組成物は、２〜８℃でその元の容器中で保存しなければならないし、かつ本発明の予防薬若しくは治療薬又は医薬組成物は、再調合後、１週間以内、好ましくは、５日間以内、７２時間以内、４８時間以内、２４時間以内、１２時間以内、６時間以内、５時間以内、３時間以内、又は１時間以内に投与しなければならない。別の実施形態においては、１種以上の本発明の予防薬若しくは治療薬又は医薬組成物を、液体剤形で、活性薬剤の量と濃度を示す密封容器に入れて供給する。好ましくは、投与される組成物の液体剤形は、少なくとも０．２５ｍｇ／ｍｌ、さらに好ましくは、少なくとも０．５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２．５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも８ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも７５ｍｇ／ｍｌ又は少なくとも１００ｍｇ／ｍｌで密封容器に入れて供給する。液体剤形はその元の容器中で２℃〜８℃にて保存しなければならない。本発明の好ましい実施形態においては、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭは、静脈内注射用では１ｍｇ／ｍｌ、５ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、及び２５ｍｇ／ｍｌで、反復皮下投与用では５ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、８０ｍｇ／ｍｌ、及び１００ｍｇ／ｍｌで製剤化する。本発明の他の好ましい実施形態において、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭは、経口投与用では１ｍｇ／ｍｌ、５ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、４０ｍｇ／ｍｌ、６０ｍｇ／ｍｌ、８０ｍｇ／ｍｌ、又は１００ｍｇ／ｍｌで製剤化する。本発明のまた他の好ましい実施形態において、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭは、局所投与用では５ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、１５ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ、２００ｍｇ／ｍｌ、３００ｍｇ／ｍｌ、４００ｍｇ／ｍｌ、又は５００ｍｇ／ｍｌで製剤化する。
【０２４４】
組成物は、所望であれば、活性成分を含有する１以上の単位剤形を含むパック又はディスペンサーで提供することができる。パックは、例えばブリスターパックなどの金属又はプラスチック箔でありうる。パック又はディスペンサーには投与の説明書を添付してもよい。特定の好ましい実施形態において、パック又はディスペンサーは、２０ｍｇ以下のＰｅｒｉｏｓｔａｔＴＭ及び５ｍｇ／ｍｌのＶＩＴＡＸＩＮＴＭを含有する１以上の単位投与剤形を含む。
【０２４５】
一般的に、本発明の組成物の成分は、かかる組成物のレシピエントと同じ種起源又は種反応性である被験体から誘導される。従って、好ましい実施形態においては、ヒト又はヒト化抗体を治療又は予防するヒト患者に投与する。
【０２４６】
４．５．１  遺伝子治療
特定の実施形態においては、遺伝子治療により、予防薬若しくは治療薬をコードする配列を含む核酸を投与して歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症候を治療、管理、予防又は改善する。遺伝子治療は、発現された核酸又は発現しうる核酸の被験体への投与により行われる治療を意味する。本発明のこの実施形態においては、その核酸は、それらにコードされた予防効果又は治療効果を媒介する予防薬若しくは治療薬を産生する。
【０２４７】
当技術分野で利用しうるいずれの遺伝子治療を本発明に従って利用してもよい。典型的な方法を以下に記載する。
【０２４８】
遺伝子治療の一般的総説については、Goldspielら, 1993, Clinical Pharmacy 12:488-505；Wu及びWu, 1991, Biotherapy 3:87-95；Tolstoshev, 1993, Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32:573-596；Mulligan, Science 260:926-932（1993）；並びにMorgan及びAnderson, 1993, Ann. Rev. Biochem. 62:191-217；May, 1993, TIBTECH 11 (5):155-215を参照のこと。組換えDNA技術の分野で一般的に知られておりかつ利用しうる方法は、Ausubelら (編), 「Current Protocols in Molecular Biology」, John Wiley & Sons, NY (1993)；及びKriegler, 「Gene Transfer and Expression」, A Laboratory Manual, Stockton Press, NY (1990)に記載されている。
【０２４９】
好ましい態様においては、本発明の組成物は予防薬若しくは治療薬をコードする核酸を含み、かつその核酸は適当な宿主において前記予防薬若しくは治療薬を発現する発現ベクターの一部分である。特に、かかる核酸は、抗体コード領域と機能しうる形で連結されたプロモーター、好ましくは、異種プロモーターを有し、かつそのプロモーターは誘導性又は構成的であって、場合によっては、組織特異的である。他の特定の実施形態においては、予防薬若しくは治療薬をコードする配列と任意の他の所望の配列とが、ゲノム中の所望の部位における相同組換えを促進する領域とフランキングしている核酸分子を使用し、それにより、抗体をコードする核酸を染色体内に発現させる（Koller及びSmithies, 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:8932-8935；Zijlstraら, 1989, Nature 342:435-438）。ある特定の実施形態においては、発現される予防薬若しくは治療薬はインテグリンαｖβ３アンタゴニストである。他の実施形態においては、発現される予防薬若しくは治療薬は、関節置換の無菌的弛緩若しくはこれに関連する症状、又は歯周疾患若しくはその症候の予防、治療、管理、又は改善にとって有用であることが公知であり、又は用いられたことがあり、又は現在用いられている薬剤である。好ましい実施形態においては、発現される予防薬若しくは治療薬はＶＩＴＡＸＩＮＴＭである。
【０２５０】
核酸の被験体中への送達は、直接的（すなわち被験体を直接、その核酸又は核酸保有ベクターに曝す）、又は間接的（すなわち最初に細胞をその核酸を用いてｉｎ  ｖｉｔｒｏで形質転換し次いで被験体に移植する）のいずれであってもよい。これらの２つの手法は、それぞれｉｎ  ｖｉｖｏ又はｅｘ  ｖｉｖｏ遺伝子治療として知られる。
【０２５１】
特定の実施形態においては、核酸配列を直接、ｉｎ  ｖｉｖｏに投与し、そこで発現させてコードされた産物を産生させる。これは、当技術分野で公知の多数の方法のいずれかによって達成することができ、例えば、前記核酸配列を適当な核酸発現ベクターの一部分として構築し、それらが細胞内に存在するように投与することにより、例えば、欠陥若しくは弱毒レトロウイルス若しくは他のウイルスベクターを使用する感染により（米国特許第４，９８０，２８６号を参照）、又は裸のＤＮＡの直接注入により、又は微粒子ボンバードメント（例えば、遺伝子銃；バイオリスチック（Biolistic）、Dupont）により、又は核酸配列が含有されているｉｎ  ｓｉｔｕでの足場（scaffolding）を有するマトリックス（例えば、欧州特許第ＥＰ  ０  ７４１  ７８５  Ｂｌ号及び米国特許第５，９６２，４２７号を参照）により、又は脂質若しくは細胞表面受容体若しくはトランスフェクション剤をコーティングすることにより、又はリポソーム、微粒子、若しくはマイクロカプセルに封入することにより、又はそれらを核に進入することが知られるペプチドと連結して投与することにより、又は受容体が媒介するエンドサイトーシスを受けるリガンドと連結して投与することにより（例えば、Wu及びWu, 1987, J. Biol. Chem. 262:4429-4432を参照）（受容体を特異的に発現する細胞型を標的とするのに利用しうる）などにより、実施することができる。他の実施形態においては、エンドソームを破壊する融合性ウイルスペプチドをリガンドが含有しているような核酸−リガンド複合体を形成させることにより、核酸のリソソーム分解を回避することができる。さらに他の実施形態においては、核酸を、特異的受容体にターゲティングすることにより、ｉｎ  ｖｉｖｏで細胞特異的取り込みと発現が行われるようにすることができる（例えば、国際公開ＷＯ９２／０６１８０号；ＷＯ９２／２２６３５号；Ｗ０９２／２０３１６号；Ｗ０９３／１４１８８号、ＷＯ９３／２０２２１号を参照）。あるいは、核酸を細胞内に導入し、相同組換えにより宿主細胞ＤＮＡ内に組み込んで発現させることができる（Koller及びSmithies, 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:8932-8935；及びZijlstraら, 1989, Nature 342:435-438）。
【０２５２】
特定の実施形態においては、予防薬若しくは治療薬をコードする核酸配列を含有するウイルスベクターを使用することができる。例えば、レトロウイルスベクターを使用することができる（Millerら, 1993, Meth. Enzymol. 217:581-599を参照）。これらのレトロウイルスベクターは、ウイルスゲノムの正確なパッケージング及び宿主細胞ＤＮＡ中への組み込みに必要な構成要素を含有する。遺伝子治療に使用する抗体をコードする核酸配列を、被験体へのその遺伝子の送達を容易にする１以上のベクター中にクローニングする。レトロウイルスベクターのさらなる詳細は、Boesenら, 1994, Biotherapy 6:291-302に見ることができ、本文献には、化学療法に対してさらに耐性のある幹細胞を作る目的でｍｄｒ  １遺伝子を造血幹細胞へ送達するためのレトロウイルスベクターの利用が記載されている。遺伝子治療におけるレトロウイルスベクターの使用を説明する他の参考文献は次の通りである：Clowesら, 1994, J. Clin. Invest. 93:644-651；Kleinら, 1994, Blood 83:1467-1473；Salmons及びGunzberg, 1993, Human Gene Therapy 4:129-141；並びにGrossman及びWilson, 1993, Curr. Opin. in Genetics and Devel. 3:110-114。
【０２５３】
アデノウイルスは遺伝子治療に利用しうる別のウイルスベクターである。アデノウイルスは、気道上皮へ遺伝子を送達するための特に魅力的な運搬体である。アデノウイルスはもともと気道上皮に感染して軽度の疾患を引き起こす。アデノウイルスに基づく送達系の他の標的は、肝臓、中枢神経系、内皮細胞、及び筋肉である。アデノウイルスは非分裂細胞に感染できるという利点がある。Kozarsky及びWilson, 1993, Current Opinion in Genetics and Development 3:499-503は、アデノウイルスに基づく遺伝子治療の総説を記載している。Boutら, 1994, Human Gene Therapy 5:3-10は、遺伝子をアカゲザル（rhesus monkeys）の気道上皮へ導入するためのアデノウイルスベクターの利用を実証している。遺伝子治療におけるアデノウイルスの使用の他の例は、Rosenfeldら, 1991, Science 252:431-434；Rosenfeldら, 1992, Cell 68:143-155；Mastrangeliら, 1993, J. Clin. Invest. 91:225-234；ＰＣＴ公開ＷＯ９４／１２６４９号；及びWangら, 1995, Gene Therapy 2:775-783に見出すことができる。好ましい実施形態においては、アデノウイルスベクターを使用する。
【０２５４】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）についても遺伝子治療における使用が提案されている（Walshら, 1993, Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 204:289-300；及び米国特許第５，４３６，１４６号）。
【０２５５】
遺伝子治療のための他の手法は、エレクトロポレーション、リポフェクション、リン酸カルシウム媒介トランスフェクション、又はウイルス感染などの方法により遺伝子を組織培養物の細胞に導入することを含む。通常、導入方法は、選択マーカーの細胞への導入を含む。従って、細胞を選択条件下に置き、導入された遺伝子を取り込んで発現している細胞を単離する。これらの細胞を次いで被験体に送達する。
【０２５６】
この実施形態においては、核酸を細胞中に導入した後、得られる組換え細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで投与する。かかる導入は、当技術分野で公知のいかなる方法により実施してもよく、そのような方法としては、限定されるものでないが、トランスフェクション、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、核酸配列を含有するウイルス若しくはバクテリオファージベクターによる感染、細胞融合、染色体媒介型遺伝子導入、ミクロセル媒介型遺伝子導入、スフェロプラスト融合などが挙げられる。当技術分野では、外来遺伝子を細胞中へ導入する多数の技術が公知であり（例えば、Loeffler及びBehr, 1993, Meth. Enzymol. 217:599-618；Cohenら, 1993, Meth. Enzymol. 217:618-644；Clin. Pharma. Ther. 29:69-92 (1985)を参照）、受容細胞の必須の発生上及び生理学的な機能が破壊されない限り、それらを本発明に従って使用することができる。該技術は、核酸が細胞により発現されうるように、かつ好ましくは、細胞の子孫に伝達され発現されうるように、核酸の細胞への安定した導入を提供するものでなければならない。
【０２５７】
得られる組換え細胞は、当技術分野で公知の様々な方法により被験体に送達することができる。組換え血液細胞（例えば、造血幹細胞若しくは造血前駆細胞）を静脈内に投与することが好ましい。想定される細胞使用量は、所望の効果、患者の状態などに依存し、当業者により決定されうる。
【０２５８】
遺伝子治療の目的で核酸を導入することができる細胞には、すべての所望の利用しうる細胞型が包含され、限定されるものでないが、上皮細胞、内皮細胞、ケラチノサイト、繊維芽細胞、筋細胞、破骨細胞、肝細胞；Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、マクロファージ、好中球、好酸球、巨核球、顆粒球などの血液細胞；様々な幹細胞若しくは前駆細胞、特に、例えば、骨髄、臍帯血、末梢血、胎児肝などから得られる造血幹細胞若しくは造血前駆細胞が挙げられる。
【０２５９】
好ましい実施形態においては、遺伝子治療に利用する細胞は被験体自己由来のものである。
【０２６０】
組換え細胞を遺伝子治療に利用する実施形態においては、予防薬若しくは治療薬をコードする核酸配列を、細胞又はその子孫細胞により発現されうるように細胞中に導入し、次いでその組換え細胞をｉｎ  ｖｉｖｏ投与して予防又は治療効果をもたらす。特定の実施形態においては、幹細胞若しくは前駆細胞を使用する。単離しかつｉｎ  ｖｉｔｒｏで維持しうるいかなる幹細胞及び／若しくは前駆細胞も、本発明のこの実施形態に従って使用できる可能性がある（例えば、国際公開ＷＯ９４／０８５９８号；Stemple及びAnderson, 1992, Cell 7 1:973-985；Rheinwald, 1980, Meth. Cell Bio. 21A:229；並びにPittelkow及びScott, 1986, Mayo Clinic Proc. 61:771を参照）。
【０２６１】
特定の実施形態においては、遺伝子治療の目的で導入される核酸は、コード領域と機能しうる形で連結された構成的、組織特異的、又は誘導プロモーターを含む。好ましい実施形態においては、遺伝子治療の目的で導入される核酸は、コード領域と機能しうる形で連結された誘導プロモーターを含み、そのため、適当な転写インデューサーの存在又は不在を制御することによりその核酸の発現が制御可能である。
【０２６２】
４．５．２  投与量及び投与頻度
歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、若しくは関節置換の無菌的弛緩、又はこれに関連する症状若しくは症候の治療、管理、予防、又は改善に有効となりうる本発明の組成物の量は、標準の臨床的方法により決定することができる。製剤に使用される正確な用量はまた、投与経路、症状の重症度に依存し、医師の判断と各患者の状況に従って決定すべきである。有効量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで又は動物モデル試験系で得られた用量応答曲線から外挿される。例えば以下を参照されたい：ラット歯周炎モデル（DeCarlo, A.ら、Jan 2003, Infect. Immun. 71(1):562-6；及びRajapakse, P.ら、2002, Infect. Immun. 70(5):2480-6に記載）、ジャコウネズミ歯周炎モデル（Takata T.ら、1999, J. Periodontol. 70(2):195-200に記載）、カニクイザル（Macaca fascicularis）歯周炎モデル（Persson G.ら、1994, Oral Microbiol. Immunol. 9(2):104-11に記載）、ヒヒ歯周炎モデル（Miller, D.ら、1995, J. Periodontal Res. 30(6):404-9に記載）、無菌的人工関節弛緩のラットモデル（Pap, G.ら、2001, Arthritis Rheum. 44(4):956-63に記載）、無菌的弛緩のイヌモデル（Dowd, J.ら、1995, Clin. Orthop.(319):106-21に記載）、超高分子量ポリエチレン（ＵＨＭＷＰＥ）粒子の導入による炎症の誘発（Yang, S.Y.ら、2002, Arthritis Rheum. 46(9):2514-23）。
【０２６３】
本発明に包含される抗体、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド及び融合タンパク質について、患者に投与される用量は典型的には、患者の体重当たり０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである。好ましくは患者に投与される用量は、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜２ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．７５ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．１５ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．２５ｍｇ／ｋｇ、又は０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜０．１０ｍｇ／ｋｇ患者体重である。一般に外来ポリペプチドに対する免疫応答のために、ヒト抗体は、他の種からの抗体よりヒト体内でより長い半減期を有する。すなわち、より低用量のヒト抗体と低頻度の投与がしばしば可能である。さらに本発明の抗体又はそのフラグメントの投与量と投与頻度は、例えば脂質化のような修飾により、抗体の取り込み及び組織貫通を上昇させることにより、低下させることができる。
【０２６４】
小分子の用量例は、被験体又は試料重量１キログラムにつきミリグラム又はマイクログラム量である（例えば、約１μｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇ、又は約１μｇ／ｋｇ〜約５０μｇ／ｋｇ）。
【０２６５】
好適な実施形態において、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント（例えば、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）又はその抗原結合フラグメント）の用量は、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ／週、好ましくは１〜９ｍｇ／ｋｇ／週、さらに好ましくは２〜８ｍｇ／ｋｇ／週、さらにより好ましくは３〜７ｍｇ／ｋｇ／週、最も好ましくは４〜６ｍｇ／ｋｇ／週である。別の実施形態において、被験体、好ましくはヒトは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する予防的又は治療有効量の抗体又は抗体フラグメント（例えば、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）又はその抗原結合フラグメント）を投与され、ここで、該被験体に投与される予防的又は治療有効量の抗体又は抗体フラグメントの用量は、治療が進行するに連れて、例えば０．０１μｇ／ｋｇ、０．０２μｇ／ｋｇ、０．０４μｇ／ｋｇ、０．０５μｇ／ｋｇ、０．０６μｇ／ｋｇ、０．０８μｇ／ｋｇ、０．１μｇ／ｋｇ、０．２μｇ／ｋｇ、０．２５μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、０．７５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、１．５μｇ／ｋｇ、２μｇ／ｋｇ、４μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、１５μｇ／ｋｇ、２０μｇ／ｋｇ、２５μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ、３５μｇ／ｋｇ、４０μｇ／ｋｇ、４５μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、５５μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、６５μｇ／ｋｇ、７０μｇ／ｋｇ、７５μｇ／ｋｇ、８０μｇ／ｋｇ、８５μｇ／ｋｇ、９０μｇ／ｋｇ、９５μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、又は１２５μｇ／ｋｇだけ増加する。別の実施形態において、被験体、好ましくはヒトは、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する予防的又は治療有効量の抗体又は抗体フラグメント（例えば、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）又はその抗原結合フラグメント）を投与され、ここで、該被験体に投与される予防的又は治療有効量の抗体又は抗体フラグメントの用量は、治療が進行するに連れて、例えば０．０１μｇ／ｋｇ、０．０２μｇ／ｋｇ、０．０４μｇ／ｋｇ、０．０５μｇ／ｋｇ、０．０６μｇ／ｋｇ、０．０８μｇ／ｋｇ、０．１μｇ／ｋｇ、０．２μｇ／ｋｇ、０．２５μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、０．７５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、１．５μｇ／ｋｇ、２μｇ／ｋｇ、４μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、１５μｇ／ｋｇ、２０μｇ／ｋｇ、２５μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ、３５μｇ／ｋｇ、４０μｇ／ｋｇ、４５μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、５５μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、６５μｇ／ｋｇ、７０μｇ／ｋｇ、７５μｇ／ｋｇ、８０μｇ／ｋｇ、８５μｇ／ｋｇ、９０μｇ／ｋｇ、９５μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、又は１２５μｇ／ｋｇだけ増加する。
【０２６６】
具体的な実施形態において、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント（例えば、ＶＩＴＡＸＩＮ（登録商標）又はその抗原結合フラグメント）の用量は、インテグリンαｖβ３に免疫特異的な抗体の血漿濃度を、インテグリンαｖβ３活性を連続的に阻止する、好ましいレベル（例えば、約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ）に維持する投与処方で投与される。具体的な実施形態において抗体の血漿濃度は、０．２μｇ／ｍｌ、０．５μｇ／ｍｌ、１μｇ／ｍｌ、２μｇ／ｍｌ、３μｇ／ｍｌ、４μｇ／ｍｌ、５μｇ／ｍｌ、６μｇ／ｍｌ、７μｇ／ｍｌ、８μｇ／ｍｌ、９μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌ、１５μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌ、３０μｇ／ｍｌ、３５μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌ、４５μｇ／ｍｌ、又は５０μｇ／ｍｌで維持される。被験体で好ましい血漿濃度は、いくつかの要因（特に限定されないが、疾患又は障害の性質、疾患又は障害の重症度、及び被験体の状態を含む）に依存する。そのような投与処方は、慢性疾患又は障害、例えば歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症又は関節置換の無菌的弛緩の予防、治療、管理、及び改善に特に有益である。
【０２６７】
別の実施形態において、インテグリンαｖβ３のアンタゴニストは、例えばマイクロコンピュータ断層撮影解析又は骨組織分析により骨容積をｉｎ  ｖｉｖｏで測定して骨再形成又は骨溶解の量を測定することにより測定した場合に、例えばＰＢＳなどの対照と比較して、骨吸収の少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％を阻止するレベルに、アンタゴニストの血漿濃度を維持する投与処方を使用して、骨吸収に関連する疾患又は障害の被験体に投与される。
【０２６８】
具体的な実施形態において、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメント（例えば、特にインテグリンαｖβ３に免疫特異的な結合抗体又は抗体フラグメント）は、間欠的に投与される（例えば、１週間置き、２週間に１回、３週間に１回、又は月に１回）。本明細書において「結合抗体又は抗体フラグメント」は、他の残基（特に限定されないが、異種ペプチド、ポリペプチド、他の抗体又は抗体フラグメント、マーカー配列、診断物質、治療薬、放射性金属イオン、ポリマー、アルブミン、及び固体支持体を含む）に結合される抗体又は抗体フラグメントを意味する。
【０２６９】
予防薬又は治療薬の用量は、Physician's Desk Reference（第57版、2003）に記載されている。
【０２７０】
４．６  生物学的アッセイ
本発明の医薬組成物及び／又は予防薬若しくは治療薬のいくつかの態様は、ヒトにおける使用の前に、所望の治療活性について、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、細胞培養系において、及び動物モデル生物（例えば、げっ歯類動物モデル系）において好ましくは試験される。例えば、特定の医薬組成物の投与が示されるか否かを決定するために使用することができるアッセイには、患者組織サンプルが培養物中で増殖され、医薬組成物に曝露されるか又は他の方法で医薬組成物と接触され、この組織サンプルに対するこのような組成物の効果が観察される細胞培養物アッセイが含まれる。この組織サンプルは、患者から生検によって得られ得る。この試験により、各個々の患者について治療的に最も有効な予防分子又は治療分子の同定が可能となる。種々の特定の実施形態において、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイが、本発明の医薬組成物がこのような細胞型に対する所望の効果を有するか否かを決定するために、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症、関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症候若しくは症状に関与する細胞型の代表的細胞（例えば、破骨細胞、Ｂ細胞及び活性化されたＴ細胞）を用いて実施することができる。
【０２７１】
本発明の医薬組成物及び併用療法は、ヒトにおける使用の前に適切な動物モデル系において試験することができる。このような動物モデル系には、ラット、マウス、ニワトリ、ウシ、サル、ブタ、イヌ、ウサギなどが含まれるがこれらに限定されない。当該分野で周知の任意の動物系を使用することができる。本発明の特定の実施形態において、本発明の医薬組成物及び併用療法は、マウスモデル系において試験される。このようなモデル系は広く使用されており、当業者に周知である。予防薬及び／又は治療薬は、反復して投与することができる。手順のいくつかの態様は変動し得る。これらの態様は、予防薬及び／又は治療薬を投与する一時的手法、及びこのような薬剤が別々に投与されるか又は混合物として投与されるかを含む。
【０２７２】
歯周疾患の実験的動物モデル及び自発的動物モデルが、当該分野で公知の歯周疾患の種々の実験的動物モデル（例えば、DeCarlo,A.ら、Jan 2003、Infect.Immun.71(1):562-6及びRajapakse,P.ら、2002、Infect.Immun.70(5):2480-6中に記載されるラット歯周炎モデル；Takata T.ら、1999、J.Periodontol.70(2):195-200中に記載されるようなジャコウネズミ歯周炎モデル；Persson G.ら、1994、Oral Microbiol.Immunol.9(2):104-11中に記載されるようなカニクイザル歯周炎モデル；並びにMiller,D.ら、1995、J Periodontal Res.30(6):404-9中に記載されるようなヒヒ歯周炎モデル（これらの各々が、本明細書によりその全体が参照により組み入れられる））を使用して、本発明の医薬組成物及び併用療法を評価するために使用することができる。
【０２７３】
関節置換の無菌的弛緩の実験的動物モデル及び自発的動物モデルが、当該分野で公知の関節置換の無菌的弛緩の種々の実験的動物モデル（例えば、Pap,G.ら、2001、Arthritis Rheum.44(4):956-63中に記載される無菌的人工関節弛緩のラットモデル;及びDowd,J.ら、1995、Clin.Orthop.(319):106-21中に記載される無菌的弛緩のイヌモデル）を使用して、本発明の医薬組成物及び併用療法を評価するために使用することができる。骨置換の無菌的弛緩が生じる場合に存在する症状を模倣するように炎症及び骨溶解を刺激する方法もまた当該分野で公知であり、これには、炎症を刺激するための超高分子量ポリエチレン（ＵＨＭＷＰＥ）粒子の導入（Yang,S.Y.ら、2002、Arthritis Rheum.46(9):2514-23）が含まれるがこれに限定されない。上記の参考文献の各々は、本明細書中でその全体が参照により組み入れられる。
【０２７４】
慢性中耳炎の動物モデル及び自発的動物モデルが、当該分野で公知の慢性中耳炎の種々の実験的動物モデル（例えば、Nellら、2000、Infect Immun.68(5):2992-4中に記載される慢性中耳炎のラットモデル）を使用して、本発明の医薬組成物及び併用療法を評価するために使用することができる。上記の参考文献は、本明細書中でその全体が参照により組み入れられる。
【０２７５】
ウィルソン病の動物モデル及び自発的動物モデルが、当該分野で公知のウィルソン病の種々の実験的動物モデル（例えば、Terada及びSugiyama、1999、Pediatr Int.41(4):414-8中に記載されるウィルソン病のLong-Evans Cinnamonラットモデル）を使用して、本発明の医薬組成物及び併用療法を評価するために使用することができる。上記の参考文献は、本明細書中でその全体が参照により組み入れられる。
【０２７６】
実験的動物モデル及び自発的動物モデルはまた、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症又は関節置換（補綴）の無菌的弛緩に関連する炎症を予防、治療、管理又は緩和するために使用することができる本発明の医薬組成物及び併用療法の抗炎症活性を評価するために使用することができる。以下は、限定としてではなく例として提供されるいくつかのアッセイである。
【０２７７】
本発明の医薬組成物及び併用療法の抗炎症活性は、カラギナン（carrageenan）により誘導された関節炎ラットモデルを使用して評価することができる。カラギナンにより誘導された関節炎は、慢性の関節炎又は炎症の研究において、ウサギ、イヌ及びブタにおいても使用されてきた。定量的組織形態計測評価が治療効力を決定するために使用される。このようなカラギナンにより誘導された関節炎モデルを使用するための方法は、Hansra P.ら、「Carrageenan-Induced Arthritis in the Rat」、Inflammation、24(2):141-155、(2000)中に記載される。当該分野で公知かつ記載されているようなザイモサンにより誘導された炎症動物モデルもまた一般に使用される。
【０２７８】
本発明の医薬組成物及び併用療法の抗炎症活性はまた、Winter C.A.ら、「Carrageenan-Induced Edema in Hind Paw of the Rat as an Assay for Anti-inflammatory Drugs」Proc.Soc.Exp.Biol Med.111、544-547、(1962)中に記載される方法の改変を使用して、ラットにおけるカラギナンにより誘導された脚の浮腫の阻害を測定することによって評価することができる。このアッセイは、ほとんどのＮＳＡＩＤの抗炎症活性についての一次ｉｎ  ｖｉｖｏスクリーニングとして使用されており、ヒトでの効力を予測するとみなされている。試験予防薬又は試験治療薬の抗炎症活性は、ビヒクル投与された対照群と比較した、試験群の後脚重量の増大の阻害率（％）として表される。
【０２７９】
使用される実験的動物モデルがアジュバントにより誘導された関節炎ラットモデルである本発明の特定の実施形態において、本発明の併用療法の抗炎症活性を決定するために、体重を対照群と比較して測定することができる。試験した併用療法には、ラットモデルにおいて併用療法でも試験することができる、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭと機能的に相同な任意のインテグリンαｖβ３のアンタゴニストを含む組み合わせが含まれ得るがこれに限定されない。
【０２８０】
ゴーラム−スタウト病の進行又は寛解を測定する当該分野で公知の現在の方法には、ゴーラム−スタウト病患者において破骨細胞前駆体の循環数及び破骨細胞生成因子に対する感受性を分析することが含まれる。単球は、Ｍ−ＣＳＦ（２５ｎｇ／ｍｌ）及びＲＡＮＫＬ（３０ｎｇ／ｍｌ）と共に培養され得、破骨細胞形成は、ＴＲＡＰ（＋）及びＶＮＲ（＋）多核細胞の形成並びに窩状吸収の程度に関して評価することができる。その全体が参照により組み入れられるHirayamaら、2001、J Pathol.195(5):624-30を参照のこと。
【０２８１】
歯周疾患の進行又は寛解を測定する当該分野で公知の現在の方法には、歯周骨及び付着の喪失の測定（デジタルサブトラクション放射線医学を含む）が含まれるがこれらに限定されない（Jeffcoat,M.及びReddy,M.、2000、Monogr.Oral Sci.17:56-72）。
【０２８２】
歯周疾患に対する本発明の医薬組成物及び併用療法の効果は、当業者に公知の標準的な技術を使用してモニター／評価することができる。被験体における歯周疾患は、例えば、歯肉の炎症及び出血の程度、抵抗を感じる地点までのポケットのプローブ深さ（例えば、少なくとも５ｍｍの深さを有する１つ又は複数の部位）、歯の固定された地点（通常、セメント質−エナメル質境）から測定された歯周靭帯の臨床的付着の喪失、Ｘ線（例えば、根尖周囲又は咬翼の歯科レントゲン写真）によって測定されるような隣接歯槽骨の喪失並びに歯垢蓄積を測定することによって決定することができる。米国特許第６，２７７，５８７号を参照のこと。
【０２８３】
歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、慢性中耳炎、肥大性骨関節症及び関節置換の無菌的弛緩の進行又は寛解を測定する当該分野で公知の現在の方法には、骨再構成、骨溶解及び線形／体積測定磨耗の測定が含まれるがこれらに限定されない。Kim,Y.H.ら、2003、J.Bone Joint Surg.Am 85-A(1):109-14。これは、デジタルサブトラクション放射線医学を含む、放射線医学的画像化方法、超音波断層撮影的（sonographical）画像化方法、磁気共鳴画像化（ＭＲＩ）方法を使用することによって実施することができる（Jeffcoat,M.及びReddy,M.、2000、Monogr.Oral Sci.17:56-72;Schill,S.ら、2002、Orthopade 31(12):1132-44）。当該分野で充分確立された股関節置換の無菌的弛緩を測定するための他の方法には、Ｈａｒｒｉｓ股関節スコア（Soerman,P.及びMalchau,H.、2001、Clin.Ortho.Related Res.384:189-197）；Merle d'Aubign及びPostelの股関節スコア、McMaster-Toronto Arthritis Patient Preference Disability Questionnaire（ＭＡＣＴＡＲ）及びWestern Ontario and McMaster University Osteoarthritis Index（ＷＯＭＡＣ）(Laupacis A.ら、2002、J.Bone Joint Surg.Am.84-A(10):1823-8);並びにその他（Andersson,G.、1972、J.Bone Joint Surg.Br.54(4):621-5）が含まれ、上記参考文献の各々は、その全体が本明細書中で参照により組み入れられる。
【０２８４】
本発明の医薬組成物及び併用療法の効力はまた、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症又は関節置換（補綴）の無菌的弛緩の測定として骨喪失を決定するアッセイを使用して評価することができる。卵巣摘出術により誘導された骨吸収マウスモデル、ラットモデル及びウサギモデルのような動物モデルが、骨形成についての動的パラメータを得るために当該分野で公知である。Yositakeら又はYamamotoらによって記載されるような方法を使用して、骨体積が、マイクロコンピュータ断層撮影分析及び骨組織形態計測分析によってｉｎ  ｖｉｖｏで測定される。共に本明細書中でその全体が参照により組み入れられる、Yoshitakeら、「Osteopontin-Deficient Mice Are Resistant to Ovariectomy-Induced Bone Resorption」、Proc.Natl.Acad.Sci.96:8156-8160、(1999);Yamamotoら、「The Integrin Ligand Echistatin Prevents Bone Loss in Ovariectomized Mice and Rats」、Endocrinology 139(3):1411-1419、(1998)。
【０２８５】
さらに、当業者に公知の任意のアッセイを、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症若しくは関節置換（補綴）の無菌的弛緩又はそれに関連する状態についての本明細書中で開示された本発明の医薬組成物及び併用療法の予防的有用性及び／又は治療的有用性を評価するために使用することができる。
【０２８６】
本発明の予防プロトコル及び／又は治療プロトコルの毒性及び／又は効力は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％にとって致死的な用量）及びＥＤ５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）を決定するために、細胞培養物又は実験動物において標準的な薬学的手順によって決定することができる。毒性と治療的効果との間の用量比率は治療指数であり、比率ＬＤ５０／ＥＤ５０として表することができる。大きい治療指数を示す医薬組成物及び併用療法が好ましい。毒性副作用を示す予防薬及び／又は治療薬が使用することができるものの、未感染の細胞に対する潜在的な損傷を最小化し、それによって副作用を低下させるために、罹患した組織の部位へとこのような薬剤を標的化する送達系を設計するために注意を払うべきである。
【０２８７】
細胞培養物アッセイ及び動物研究から得られたデータは、ヒトにおける使用のための予防薬及び／又は治療薬の投薬量範囲を処方する際に使用することができる。このような薬剤の投薬量は、ほとんど又は全く毒性を有さないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内に好ましくは入る。この投薬量は、使用される投与剤形及び利用される投与経路に依存してこの範囲内で変動し得る。本発明の方法において使用される任意の薬剤について、治療有効量は、細胞培養物アッセイから最初に概算することができる。用量は、細胞培養物において決定されるようなＩＣ５０（すなわち、症状の最大の半分の阻害を達成する試験化合物の濃度）を含む循環血漿濃度範囲を達成するために、動物モデルにおいて処方することができる。このような情報は、ヒトにおいて有用な用量をより正確に決定するために使用することができる。血漿中のレベルは、例えば、高性能液体クロマトグラフィーによって測定することができる。
【０２８８】
４．７  検出及び診断
標識されたインテグリンαｖβ３アンタゴニスト（例えば、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体）を含む本発明の組成物は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候（上記の各々に起因する炎症又は骨吸収を含む）を検出、診断又はモニターするための診断目的のために使用することができる。好ましい実施形態において、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を検出、診断又はモニターするための診断目的のために使用される。歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の検出又は診断は、当業者に周知の技術を使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイ又はｉｎ  ｖｉｖｏアッセイにおいて有効量（すなわち、インテグリンαｖβ３の発現を検出し得るのに有効な量）の本発明の組成物を利用して実施することができる。好ましい実施形態において、関節置換の無菌的弛緩若しくはそれに関連する症状、又は歯周疾患若しくはその症候は、被験体、好ましくは哺乳動物被験体、最も好ましくはヒト被験体において、当業者に公知の標準的な画像化技術において有効量の本発明の組成物を利用して検出される。
【０２８９】
本発明は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を検出、診断又はモニターする方法を包含し、この方法は以下のステップ：ａ）インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する標識された抗体又は抗体フラグメントを含む本発明の組成物の有効量を被験体に投与するステップ；ｂ）標識された抗体又は抗体フラグメントが被験体における任意の所望の部位（例えば、無菌的に緩んだ関節）で選択的に濃縮することを可能にするため（及び未結合の標識された抗体又は抗体フラグメントがバックグラウンドレベルまでクリアランスされるのを可能にするため）に、上記投与するステップの後に一定の時間間隔にわたって待機するステップ；ｃ）バックグラウンドレベルを決定するステップ；及びｄ）この被験体において標識された分子を検出するステップを含み、その結果、バックグラウンドレベルを上回る標識された抗体又は抗体フラグメントの検出がその疾患の存在を示すステップ。
【０２９０】
本発明は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を検出、診断又はモニターする方法を包含し、この方法は以下のステップ：ａ）インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントを含む本発明の組成物の有効量を被験体に投与するステップ；ｂ）本発明の組成物の抗体又は抗体フラグメントを認識する第２の標識された抗体又は抗体フラグメントを投与するステップ；ｃ）標識された抗体又は抗体フラグメントが被験体における任意の所望の部位（例えば、無菌的に緩んだ関節）で選択的に濃縮することを可能にするため（及び未結合の標識された抗体又は抗体フラグメントがバックグラウンドレベルまでクリアランスされるのを可能にするため）に、上記投与するステップの後に一定の時間間隔にわたって待機するステップ；ｄ）バックグラウンドレベルを決定するステップ；及びｅ）この被験体において標識された分子を検出するステップであって、その結果、バックグラウンドレベルを上回る標識された抗体又は抗体フラグメントの検出がその疾患の存在を示すステップ。
【０２９１】
本発明は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候を診断、検出又はモニターするための方法を包含し、この方法は、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する標識された抗体又は抗体フラグメントを含む本発明の組成物の有効量を被験体に投与するステップの後に一定の時間間隔で被験体を画像化するステップを含み、この時間間隔は、標識された抗体又は抗体フラグメントがこの被験体における特定の部位（例えば、無菌的に緩んだ関節）で選択的に濃縮することを可能にするのに充分な時間間隔であり、この被験体中のこの部位に局在化した標識された抗体又は抗体フラグメントの検出は、その疾患又は障害の存在を示す。
【０２９２】
いくつかの実施形態において、疾患又は障害のモニターは、この疾患又は障害を診断するための方法を、例えば、最初の診断の１ヵ月後、最初の診断の６ヵ月後及び最初の診断の１年後に反復することによって実施される。
【０２９３】
４．７．１  検出及び画像化の方法
インテグリンαｖβ３アンタゴニストの存在は、ｉｎ  ｖｉｖｏスキャンのための当該分野で公知の方法を使用して患者において検出することができる。これらの方法は、使用される標識の種類に依存する。当業者は、特定の標識を検出するために適切な方法を決定し得る。本発明の診断方法において使用することができる方法及びデバイスには以下が含まれるがこれらに限定されない：コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）のような全身スキャン、磁気共鳴画像化（ＭＲＩ）及び超音波断層撮影。
【０２９４】
特定の実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは、放射性同位体で標識され、放射線応答性の外科的装置を使用して患者において検出される（Ｔｈｕｒｓｔｏｎら、米国特許第５，４４１，０５０号）。別の実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは蛍光化合物で標識され、蛍光応答性のスキャン装置を使用して患者において検出される。別の実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは陽電子放射金属で標識され、陽電子放射断層撮影を使用して患者において検出される。なお別の実施形態において、このインテグリンαｖβ３アンタゴニストは常磁性標識で標識され、磁気共鳴画像化（ＭＲＩ）を使用して患者において検出される。
【０２９５】
４．８  製品
本発明はまた、完成した包装されラベルを貼られた医薬製品を包含する。本発明は、包装材料及びこの包装材料内に含まれた被験体への投与に適した形態の本発明の医薬組成物を含む製品を提供する。特に、本発明は、包装材料及びこの包装材料内に含まれた被験体への投与に適した形態の本発明の医薬組成物を含む製品を提供し、この医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び薬学的に許容される担体を含む。本発明はまた、包装材料並びにこの包装材料内に含まれた指示書及びヒトへの投与に適した形態の２つの医薬組成物を含む製品を提供し、ここでその第１の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト及び薬学的に許容される担体を含み、第２の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含む。本発明はまた、包装材料及びこの包装材料内に含まれた被験体への投与に適した形態の本発明の医薬組成物を含む製品を提供し、この医薬組成物は、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含む。
【０２９６】
特定の実施形態において、製品は、包装材料並びにこの包装材料内に含まれた被験体への投与に適した形態の医薬組成物及び指示書を含み、ここでこの医薬組成物は、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体及び薬学的に許容される担体を含み、この指示書は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆する。別の実施形態において、この製品は、包装材料並びにこの包装材料内に含まれた指示書及びヒトへの投与に適した形態の２つの医薬組成物を含み、ここでその第１の医薬組成物はインテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体及び薬学的に許容される担体を含み、第２の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含み、この指示書は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆する。別の実施形態において、製品は、包装材料及びこの包装材料内に含まれた被験体への投与に適した形態の医薬組成物及び指示書を含み、ここでこの医薬組成物は、インテグリンαｖβ３に免疫特異的に結合する抗体、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含み、この指示書は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆する。
【０２９７】
別の実施形態において、製品は、包装材料並びにこの包装材料内に含まれたヒトへの投与に適した形態の医薬組成物及び指示書を含み、ここでこの医薬組成物は、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント及び薬学的に許容される担体を含み、この指示書は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆する。別の実施形態において、製品は、包装材料並びにこの包装材料内に含まれたヒトへの投与に適した形態の２つの医薬組成物及び指示書を含み、ここでその第１の医薬組成物はＶＩＴＡＸＩＮＴＭ及び薬学的に許容される担体を含み、第２の医薬組成物はインテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含み、この指示書は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆する。好ましい実施形態において、製品は、包装材料並びにこの包装材料内に含まれたヒトへの投与に適した形態の医薬組成物及び指示書を含み、ここでこの医薬組成物は、ＶＩＴＡＸＩＮＴＭ又はその抗原結合フラグメント、インテグリンαｖβ３アンタゴニスト以外の少なくとも１種の予防薬又は治療薬及び薬学的に許容される担体を含み、この指示書は、歯周疾患、ウィルソン病、ゴーラム−スタウト病、肥大性肺性骨関節症、慢性中耳炎若しくは関節置換の無菌的弛緩又はそれに関連する症状若しくは症候の治療、管理又は緩和のための投薬方法を示唆する。
【０２９８】
任意の医薬製品を用いる場合、本発明の製品の包装材料及び容器は、保存及び出荷の間に製品の安定性を保護するように設計される。より具体的には、本発明は、包装材料（例えば、箱、瓶、チューブ、バイアル、容器、噴霧器、吸入器、静脈内（ｉ．ｖ．）バッグ、包みなど）；及びこの包装材料内に含まれた少なくとも１つの単位投与剤形の薬学的薬剤を含む製品を提供する。本発明はまた、包装材料（例えば、箱、瓶、チューブ、バイアル、容器、噴霧器、吸入器、静脈内（ｉ．ｖ．）バッグ、包みなど）；及びこの包装材料内に含まれた少なくとも１つの単位投与剤形の各薬学的薬剤を含む製品の使用を包含する。本発明はさらに、包装材料（例えば、箱、瓶、チューブ、バイアル、容器、噴霧器、吸入器、静脈内（ｉ．ｖ．）バッグ、包みなど）；及びこの包装材料内に含まれた少なくとも１つの単位投与剤形の各薬学的薬剤を含む製品を提供する。この製品は、密封されたガラスバイアル又は他の容器のような適切な器又は容器中に適切な単位投与剤形を含む。非経口投与に適切な投与剤形の場合、その活性成分は滅菌であり、粒状物を含まない溶液としての投与に適切である。言い換えると、本発明は、非経口溶液及び凍結乾燥粉末の両方を包含し、これら各々は滅菌であり、後者は注射前の再構成に適切である。あるいは、この単位投与剤形は、経口送達、経皮送達、局所送達又は粘膜送達に適切な固体であり得る。本発明は、好ましくは滅菌の、各送達経路に適切な溶液を包含する。
【０２９９】
本発明の製品は、医薬組成物の使用又は投与に関する指示書あるいは問題の疾患又は障害を適切に予防又は治療するためにはどうするかについて医師、技術者又は患者にアドバイスする他の情報資料を含み得る。言い換えると、この製品は、投薬方法（実際の用量及びモニター手順を含むがこれらに限定されない）を示すか又は示唆する指示手段を含む。
【０３００】
本発明は、本発明の方法によって低下又は回避することができる有害な効果が示される、関節置換の無菌的弛緩又は歯周疾患に関連する症候を予防、治療又は緩和する際に使用するための製品中に同封された情報資料を提供する。本発明の方法によって低下又は回避することができる有害な効果には以下が含まれるがこれらに限定されない：生命徴候の異常（発熱、頻脈、徐脈、高血圧、低血圧）、血液学的事象（貧血、リンパ球減少症、白血球減少症、血小板減少症）、頭痛、悪寒、眩暈、悪心、無気力、背部疼痛、胸部疼痛（胸部圧力）、下痢、筋肉痛、疼痛、掻痒、乾癬、鼻炎、発汗、注射部位反応及び血管拡張。本発明に従って使用される予防薬又は治療薬のいくつかは免疫抑制性であり得るので、延長された免疫抑制は、日和見感染を含む感染のリスクを増大させ得る。延長及び持続された免疫抑制はまた、特定の種の癌を発症するリスクの増大を生じ得る。
【０３０１】
さらに、歯周疾患、ゴーラム−スタウト病、ウィルソン病、慢性中耳炎、肥大性肺性骨関節症又は関節置換の無菌的弛緩に関連する症状又は状態を予防、治療、管理又は緩和する際に使用するための製品中に同封された情報資料は、外来タンパク質もまたアレルギー反応（アナフィラキシー又はシトシン放出症候群（cytosine release syndrome）を含む）を生じ得ることを示し得る。この情報資料は、アレルギー反応が軽微な掻痒性の発疹程度のみを示し得ること、又はこのアレルギー反応が紅皮症、スティーブンス−ジョンソン症候群、脈管炎又はアナフィラキシーのように重篤であり得ることを示すべきである。この情報資料はまた、アナフィラキシー反応（アナフィラキシー）が重篤であり、しばしば致死性の過敏症反応であることを示すべきである。アナフィラキシーを含むアレルギー反応は、任意の外来のタンパク質が身体中に注射される場合に生じ得る。これらのアレルギー反応は、蕁麻疹又は発疹のような軽微な現れから致死性の全身反応までの範囲であり得る。アナフィラキシー反応は、曝露の後直ぐに、通常１０分以内に生じる。患者は、感覚異常症、低血圧、喉頭浮腫、精神状態の変化、顔面又は咽頭の血管浮腫、気道閉塞、気管支痙攣、蕁麻疹及び掻痒、血清病、関節炎、アレルギー性腎炎、糸球体腎炎、一時的関節炎又は好酸球増加症を経験し得る。
【０３０２】
４．９  抗体の作製方法
抗原（例えばインテグリンαｖβ３）と免疫特異的に結合する抗体は、抗体を合成するための当技術分野で公知の任意の方法により、特に化学合成又は好ましくは組換え発現技術により製造することができる。
【０３０３】
抗原に対して免疫特異的に結合するポリクローナル抗体は、当技術分野で公知の様々な方法により製造することができる。例えば、ヒト抗原を、限定されるものでないが、ウサギ、マウス、ラットその他を含む様々な宿主動物に投与して、ヒト抗原に対して特異的なポリクローナル抗体を含有する血清の産生を誘導することができる。宿主種に依存して様々なアジュバントを使用して、免疫応答を増加させてもよく、かかるアジュバントとしては、限定されるものでないが、フロイントのアジュバント（完全及び不完全）、水酸化アルミニウムなどのミネラルゲル、リゾレシチンなどの表面活性物質、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、油性エマルジョン、キーホールリンペットヘモシアニン、ジニトロフェノール、及びＢＣＧ（カルメット・ゲラン桿菌（bacille Calmette-Guerin)）及びコリネバクテリウム・パルブム（corynebacterium parvum）などの潜在的に有用なヒトアジュバントが挙げられる。かかるアジュバントもまた当技術分野では公知である。
【０３０４】
モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術、組換え技術、及びファージディスプレイ技術、又はそれらの組合せの利用を含む、当技術分野で公知の多種多様な技術を用いて調製することができる。例えば、モノクローナル抗体は、当技術分野で公知であって、例えば、Harlowら, 「Antibodies: A Laboratory Manual」（Cold Spring Harbor Laboratory Press, 第２版 1988)；Hammerlingら, 「Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas」 563-681（Elsevier, N.Y., 1981）、及びHarlowら、「Using Antibodies: A Labolatory Manual」（Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999）（前記参考文献は、参照によりその全文が組み入れられる）に教示される方法をはじめとするハイブリドーマ技術を利用して製造することができる。本明細書に用いる用語「モノクローナル抗体」は、ハイブリドーマ技術によって製造される抗体に限定されるものではない。用語「モノクローナル抗体」は、それを製造する方法ではなく、任意の真核生物、原核生物、又はファージクローンを含む単一クローンから得られる抗体を意味する。
【０３０５】
ハイブリドーマ技術を用いて特異的抗体を製造しスクリーニングする方法は、当技術分野では日常的に利用されかつ公知である。簡単に説明すると、マウスを、非マウス抗原（例えばインテグリンαｖβ３）を用いて免疫感作することができ、そして免疫応答が一度検出されれば（例えば、その抗原に特異的な抗体がマウス血清中に検出されれば）、マウス脾臓を採取して脾細胞を単離する。次いでその脾細胞を公知の技術により任意の適当な骨髄腫細胞、例えばＡＴＣＣＴＭから入手しうる培養細胞株ＳＰ２０由来の細胞と、融合する。ハイブリドーマを選択し、限定希釈によりクローン化する。さらに、ＲＩＭＭＳ（反復免疫複数部位）技法を用いて動物を免疫してもよい（Kilptrackら、1997, Hybridoma 16:381-9、参照によりその全体を組み入れる）。次いで、ハイブリドーマクローンを、当技術分野で公知の方法により、本発明のポリペプチドと結合できる抗体を分泌する細胞についてアッセイする。一般的に高レベルの抗体を含有する腹水液は、マウスを陽性ハイブリドーマクローンを用いて免疫感作することにより生成することができる。
【０３０６】
従って、本発明は、本発明の抗体を分泌するハイブリドーマ細胞を培養することにより抗体を作製する方法を提供するものであり、好ましくは、上記方法におけるハイブリドーマは、非マウス抗原（例えばインテグリンαｖβ３）を用いて免疫感作したマウスから単離した脾細胞を骨髄腫細胞と融合し、次いで融合から得たハイブリドーマを、その抗原（例えばインテグリンαｖβ３）と結合しうる抗体を分泌するハイブリドーマクローンについてスクリーニングすることにより作製されるものである。
【０３０７】
特異的な特定のエピトープ（例えばインテグリンαｖβ３）を認識する抗体フラグメントは、当業者に公知のいかなる技術により作製してもよい。例えば、本発明のＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２フラグメントは、パパイン（Ｆａｂフラグメントを生成する）又はペプシン（Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを生成する）などの酵素を用いて、免疫グロブリン分子のタンパク質分解切断により生成することができる。Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは可変領域、軽鎖定常領域及び重鎖のＣＨ１ドメインを含有する。さらに、本発明の抗体はまた、当技術分野で公知の様々なファージディスプレイ法を用いて作製することができる。
【０３０８】
ファージディスプレイ法においては、機能性抗体ドメインが、同ドメインをコードするポリヌクレオチド配列を保持するファージ粒子の表面に提示される。特に、ＶＨ及びＶＬドメインをコードするＤＮＡ配列を、動物ｃＤＮＡライブラリー（例えば、罹患組織のヒト又はマウスｃＤＮＡライブラリー）から増幅する。ＶＨ及びＶＬドメインをコードするＤＮＡをＰＣＲによりｓｃＦｖリンカーと一緒に組換えて、ファージミドベクター中にクローニングする。そのベクターを大腸菌中にエレクトロポレーションして大腸菌をヘルパーファージに感染させる。これらの方法で使用されるファージは、典型的には、ｆｄ及びＭ１３を含む繊維状ファージであり、ＶＨ及びＶＬドメインを通常、組換え法によりファージ遺伝子ＩＩＩ又は遺伝子ＶＩＩＩのいずれかに融合させる。特定の抗原と結合する抗原結合ドメインを発現するファージを、抗原により、例えば、標識した抗原又は固体表面若しくはビーズに結合若しくは捕獲された抗原を用いて、選択又は同定することができる。本発明の抗体を作製するために利用しうるファージディスプレイ法の例としては、Brinkmanら, 1995, J. Immunol. Methods 182:41-50；Amesら, 1995, J. Immunol. Methods 184:177-186；Kettleboroughら, 1994, Eur. J. Immunol. 24:952-958；Persicら, 1997, Gene 187:9-18；Burtonら, 1994, Advances in Immunology 57:191-280；国際出願第ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４号；国際公開ＷＯ９０／０２８０９号、ＷＯ９１／１０７３７号、ＷＯ９２／０１０４７号、ＷＯ９２／１８６１９号、ＷＯ９３／１１２３６号、ＷＯ９５／１５９８２号、ＷＯ９５／２０４０１号、及びＷ０９７／１３８４４号；並びに米国特許第５，６９８，４２６号、第５，２２３，４０９号、第５，４０３，４８４号、第５，５８０，７１７号、第５，４２７，９０８号、第５，７５０，７５３号、第５，８２１，０４７号、第５，５７１，６９８号、第５，４２７，９０８号、第５，５１６，６３７号、第５，７８０，２２５号、第５，６５８，７２７号、第５，７３３，７４３号、第５，９６９，１０８号、第６，３３３，１８７号、第５，８２４，５２９号、第５，７０２，８９２号に開示された方法が挙げられ、これらはそれぞれ参照によりその全文が本明細書に組み入れられる。
【０３０９】
以上の参考文献に記載の通り、ファージ選択の後、ファージからの抗体コード領域を単離し、さらにそれを使用して、ヒト抗体を含む全抗体、又は任意の他の所望の抗原結合フラグメントを作製し、それらを、例えば以下に記載のようにして、哺乳類細胞、昆虫細胞、植物細胞、酵母、及び細菌を含む任意の所望の宿主にて発現させることができる。組換え法によりＦａｂ、Ｆａｂ’及びＦ（ａｂ’）２フラグメントを製造する技術はまた、国際公開ＷＯ９２／２２３２４号；Mullinaxら, 1992, BioTechniques 12 (6):864-869；Sawaiら, 1995, AJRI 34:26-34；並びにBetterら, 1988, Science 240:1041-1043（上記参考文献は参照によりその全文が組み入れられる）に開示された方法などの当技術分野で公知の方法を用いて、使用することができる。
【０３１０】
全抗体を作製するために、ＶＨ又はＶＬヌクレオチド配列、制限酵素切断部位、及び制限酵素切断部位を保護するフランキング配列を含むＰＣＲプライマーを用いて、ｓｃＦｖクローン中のＶＨ又はＶＬ配列を増幅することができる。当業者に公知のクローニング技術を利用して、ＰＣＲ増幅されたＶＨドメインをＶＨ定常領域、例えば、ヒトγ４定常領域を発現するベクター中にクローニングし、また、ＰＣＲ増幅したＶＬドメインをＶＬ定常領域、例えばヒトκ若しくはλ定常領域を発現するベクター中にクローニングすることができる。好ましくは、ＶＨ又はＶＬドメインを発現するベクターは、ＥＦ−１αプロモーター、分泌シグナル、可変ドメイン、定常ドメイン及びネオマイシンなどの選択マーカーに対するクローニング部位を含む。ＶＨ及びＶＬドメインを、必要な定常領域を発現する１つのベクター中にクローニングすることもできる。次いで、重鎖変換ベクター及び軽鎖変換ベクターを培養細胞株中に共トランスフェクトし、当業者に公知の技術を用いて、全長抗体、例えばＩｇＧを発現する安定した一過性の培養細胞株を作製する。
【０３１１】
ヒトにおける抗体のｉｎ  ｖｉｖｏ使用、及びｉｎ  ｖｉｔｒｏ検出アッセイを含む複数の用途について、ヒト化、ヒト又はキメラ抗体を使用することが好ましい場合がある。完全なヒト抗体及びヒト化抗体は、ヒト被験体の治療のためには特に望ましい。ヒト抗体は、ヒト免疫グロブリン配列由来の抗体ライブラリーを用いる上記のファージディスプレイ法を含む、当技術分野で公知の様々な方法により作製することができる。米国特許第４，４４４，８８７号及び第４，７１６，１１１号、；並びに国際公開ＷＯ９８／４６６４５号、ＷＯ９８／５０４３３号、ＷＯ９８／２４８９３号、Ｗ０９８／１６６５４号、ＷＯ９６／３４０９６号、ＷＯ９６／３３７３５号、及びＷＯ９１／１０７４１号も参照のこと；これらはそれぞれ参照によりその全文が本明細書に組み入れられる。
【０３１２】
ヒト抗体はまた、機能性の内因性免疫グロブリンを発現できないがヒト免疫グロブリン遺伝子を発現できるトランスジェニックマウスを用いて製造することもできる。例えば、ヒト重鎖及び軽鎖免疫グロブリン遺伝子複合体を、無作為に又は相同組換えによりマウス胚幹細胞中に導入してもよい。あるいは、ヒト重鎖及び軽鎖遺伝子に加えて、ヒト可変領域、定常領域、及び多様性領域を、マウス胚性幹細胞中に導入してもよい。相同組換えによりヒト免疫グロブリン遺伝子座を導入して、マウス重鎖及び軽鎖免疫グロブリン遺伝子を別々に又は同時に非機能化してもよい。特に、ＪＨ領域のホモ接合性欠失は内因性抗体産生を妨げる。改変した胚幹細胞を増殖させ、胚盤胞中にマイクロインジェクションしてキメラマウスを作る。次いでキメラマウスを交配し、ヒト抗体を発現するホモ接合性子孫を作る。そのトランスジェニックマウスを、通常の方式で、選択した抗原、例えば本発明のポリペプチドの全体若しくは部分を用いて、免疫感作する。その抗原に対するモノクローナル抗体を、免疫感作したトランスジェニックマウスから通常のハイブリドーマ技術を利用して得ることができる。トランスジェニックマウスによって保持されるヒト免疫グロブリントランスジーンはＢ細胞分化の際に再配列し、その後、クラススイッチ及び体細胞突然変異を受ける。従って、かかる技術を利用して、治療上有用なＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ及びＩｇＥ抗体を製造することが可能である。ヒト抗体を製造するためのこの技術の総括については、Lonberg及びHuszar（1995, Int. Rev. Immunol. 13:65-93）を参照のこと。ヒト抗体及びヒトモノクローナル抗体を製造するためのこの技術並びにかかる抗体を製造するためのプロトコルの詳細な考察については、例えば、参照によりその全文が本明細書に組み入れられる、国際公開ＷＯ９８／２４８９３号、ＷＯ９６／３４０９６号、及びＷＯ９６／３３７３５号；及び米国特許第５，４１３，９２３号、第５，６２５，１２６号、第５，６３３，４２５号、第５，５６９，８２５号、第５，６６１，０１６号、第５，５４５，８０６号、第５，８１４，３１８号、及び第５，９３９，５９８号を参照のこと。さらに、Abgenix, Inc.（Freemont、CA）及びGenpharm（San Jose、CA）などの会社と、選択した抗原に対するヒト抗体を上記と類似の技術を利用して提供する契約を結ぶことができる。
【０３１３】
キメラ抗体は、抗体の異なる部分が異なる免疫グロブリンに由来する分子である。キメラ抗体を製造する方法は当技術分野で公知である。例えば、Morrison, 1985, Science 229:1202；Oiら, 1986, BioTechniques 4:214；Gilliesら, 1989, J. Immunol. Methods 125:191-202；並びに米国特許第５，８０７，７１５号、第４，８１６，５６７号、第４，８１６，３９７号、及び第６，３３１，４１５号（これらは本明細書に参照によりその全文が組み入れられる）を参照のこと。
【０３１４】
ヒト化抗体は、所定の抗原と結合することができ、そして実質的にヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有するフレームワーク及び実質的に非ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有するＣＤＲを含む抗体又はその変異体若しくはそのフラグメントである。ヒト化抗体は、実質的に少なくとも１つの、そして典型的には２つの可変ドメイン（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂｃ、Ｆｖ）を含み、ここでＣＤＲ領域の全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリン（すなわち、ドナー抗体）のＣＤＲ領域と対応しかつフレームワーク領域の全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のフレームワーク領域である。好ましくは、ヒト化抗体はまた、少なくとも免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の一部分、典型的にはヒト免疫グロブリンの一部分を含む。通常、抗体は軽鎖並びに重鎖の少なくとも可変ドメインの両方を含有するであろう。抗体はまた、重鎖のＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４域を含んでもよい。ヒト化抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＥを含む免疫グロブリンのいずれのクラス、及びＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含むいずれのイソ型から選択してもよい。通常、定常ドメインは、ヒト化抗体が細胞傷害活性を示すことが所望される補体固定定常ドメインであり、かつクラスは典型的にはＩｇＧ１である。かかる細胞傷害活性が所望でない場合、定常ドメインはＩｇＧ２クラスである。ヒト化抗体は１以上のクラス又はイソ型からの配列を含んでもよく、そして所望のエフェクター機能を最適化するための特定の定常ドメインの選択は当技術分野の通常の技術に包含されている。ヒト化抗体のフレームワーク及びＣＤＲ領域は正確に親配列に対応する必要はなく、例えば、ドナーＣＤＲ又はコンセンサスフレームワークは少なくとも１つの残基の置換、挿入又は欠失により突然変異されていてその部位におけるＣＤＲ又はフレームワーク残基がコンセンサス又はインポート抗体に対応しないようにしてもよい。しかしかかる突然変異は広汎なものではないであろう。通常、親フレームワーク及びＣＤＲ配列の残基と対応しうるヒト化抗体残基は、少なくとも７５％、さらにしばしば９０％、そして最も好ましくは９５％超であろう。ヒト化抗体は、当技術分野で公知の様々な技術を用いて製造することができ、そのような技術としては、限定されるものでないが、ＣＤＲグラフト（欧州特許ＥＰ２３９，４００号；国際公開ＷＯ９１／０９９６７号；及び米国特許第５，２２５，５３９号、第５，５３０，１０１号、第５，５８５，０８９号）、ベニアリング（veneering）又は再表面形成（resurfacing）（欧州特許EP 592,106；EP 519,596；Padlan, 1991, Molecular Immunology 28 (4/5):489-498；Studnickaら, 1994, Protein Engineering 7 (6):805-814；及びRoguskaら, 1994, PNAS 91:969-973）、及びチェーンシャッフリング（chain shuffling）（米国特許第５，５６５，３３２号）、並びに、例えば、米国特許第６，４０７，２１３号、第５，７６６，８８６号、ＷＯ９３／１７１０５号、Tanら, J. Immunol. 169:1119-25 (2002)、Caldasら, タンパク質 Eng. 13(5):353-60 (2000)、Moreaら, Methods 20(3):267-79 (2000)、Bacaら, J. Biol. Chem. 272(16):10678-84 (1997)、Roguskaら, タンパク質 Eng. 9(10):895-904 (1996)、Coutoら, Cancer Res. 55(23 Supp):5973s-5977s (1995)、Coutoら, Cancer Res. 55(8):1717-22 (1995)、Sandhu JS, Gene 150(2):409-10 (1994)、及びPedersenら, J. Mol. Biol. 235(3):959-73 (1994)に開示された技術が挙げられる。しばしば、フレームワーク領域のフレームワーク残基を、ＣＤＲドナー抗体由来の対応する残基によって置換して、抗原結合を改変し、好ましくは改良する。これらのフレームワーク置換は、当技術分野で公知の方法によって、例えば、ＣＤＲとフレームワーク残基の相互作用をモデル化して抗原結合に重要なフレームワーク残基を同定し、さらに配列比較により特定位置の異常なフレームワーク残基を同定することによって確認する（例えば、本明細書に参照によりその全文が組み入れられる、Queenら, 米国特許第５，５８５，０８９号；及びRiechmannら, 1988, Nature 332:323を参照）。
【０３１５】
単一ドメイン抗体、例えば、軽鎖を欠損する抗体を、当技術分野で公知の方法により作製することができる。Riechmannら, 1999, J. Immuno. 231:25-38；Nuttallら, 2000, Curr. Pharm. Biotechnol. 1(3):253-263；Muylderman, 2001, J. Biotechnol. 74(4):277302；米国特許第６，００５，０７９号；及び国際公開ＷＯ９４／０４６７８号、ＷＯ９４／２５５９１号、及びＷＯ０１／４４３０１号を参照されたい（それぞれ、本明細書に参照により組み入れられる）。
【０３１６】
さらに、今度は、抗原（例えば、インテグリンαｖβ３）と免疫特異的に結合する抗体を使用し、当業者に公知の技術を用いて、抗原を「模倣する」抗イディオタイプ抗体を作製することができる（例えば、Greenspan & Bona, 1989, FASEB J. 7 (5):437-444；及びNissinoff, 1991, J. Immunol. 147(8):2429-2438を参照）。
【０３１７】
４．９．１  抗体をコードするポリヌクレオチド配列
本発明は、抗原（例えば、インテグリンαｖβ３）と免疫特異的に結合する抗体又は抗体フラグメントをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを提供する。本発明はまた、例えば、先に規定したような、高いストリンジェンシー、中度の若しくは低いストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件のもとで、本発明の抗体をコードするポリヌクレオチドとハイブリダイズするポリヌクレオチドも包含する。
【０３１８】
ポリヌクレオチドを得て、当技術分野で公知のいずれかの方法によりポリヌクレオチドのヌクレオチド配列を決定することができる。所望の抗原に対して免疫特異的な抗体のヌクレオチド配列は、例えば、文献又はＧｅｎＢａｎｋなどのデータベースから得ることができる。ＶＩＴＡＸＩＮＴＭのアミノ酸配列は既知であるので、これらの抗体をコードするヌクレオチド配列を、当技術分野で公知の方法を利用して（すなわち、特定のアミノ酸をコードすることが知られるヌクレオチドコドンを、抗体をコードする核酸を生成するように組み立てて）決定するることができる。抗体をコードするかかるポリヌクレオチドは、化学合成したオリゴヌクレオチドから組み立てることができ（例えば、Kutmeierら, 1994, BioTechniques 17:242に記載の通り）、これは、簡単に説明すると、抗体又はその変異体をコードする配列の一部分を含有する重複オリゴヌクレオチドの合成、これらのオリゴヌクレオチドのアニーリング及びライゲーション、次いでライゲートしたオリゴヌクレオチドのＰＣＲによる増幅を伴う。
【０３１９】
あるいは、抗体をコードするポリヌクレオチドを、好適な起源由来の核酸から作製することができる。特定の抗体をコードする核酸を含有するクローンが入手できなくても、その抗体分子の配列が既知であれば、その免疫グロブリンをコードする核酸は、化学的に合成することができるし、あるいは、適当な起源（例えば、抗体ｃＤＮＡライブラリー若しくはそれから作製したｃＤＮＡライブラリー、それから単離した核酸、好ましくはポリＡ＋ＲＮＡ、本発明の抗体を発現するように選択されたハイブリドーマ細胞などの、抗体を発現する任意の組織若しくは細胞）からその配列の３’及び５’末端にハイブリダイズする合成プライマーを用いるＰＣＲ増幅によるか、又は、特定の遺伝子配列に特異的なオリゴヌクレオチドプローブを用いて、例えばｃＤＮＡライブラリーから前記抗体をコードするｃＤＮＡクローンを同定してクローニングすることにより、取得することができる。ＰＣＲにより作製された増幅核酸は、次いで、当技術分野で公知の方法を用いて複製可能なクローニングベクター中にクローニングすることができる。
【０３２０】
抗体のヌクレオチド配列が一度決定されると、抗体のヌクレオチド配列を、ヌクレオチド配列の遺伝子操作に関する当技術分野で公知の方法、例えば組換えＤＮＡ技術、位置指定突然変異、ＰＣＲなど（例えば、Sambrookら, 1990, 「分子クローニング、研究室マニュアル（Molecular Cloning, A Laboratory Manual）」, 第２版, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY、及びAusubelら, 編, 1998, 「分子生物学の現行プロトコル（Current Protocols in Molecular Biology）」, John Wiley & Sons, NY、に記載の技術を参照、これらの文献は本明細書に参照によりその全文が組み入れられる）を用いて遺伝子操作して、異なるアミノ酸配列を有する抗体を作製し、例えばアミノ酸置換、欠失、及び／又は挿入を創出することができる。
【０３２１】
特定の実施形態においては、少なくとも１つのＣＤＲを、慣用される組換えＤＮＡ技術を利用してフレームワーク領域内に挿入する。フレームワーク領域は、天然又はコンセンサスフレームワーク領域であってもよく、好ましくはヒトフレームワーク領域である（例えば、ヒトフレームワーク領域の列挙については、Chothiaら, 1998, J. Mol. Biol. 278:457-479を参照）。好ましくは、フレームワーク領域とＣＤＲの組合せにより作製されたポリヌクレオチド配列は、特定の抗原（例えば、インテグリンαｖβ３）と免疫特異的に結合する抗体をコードする。好ましくは、１以上のアミノ酸置換をフレームワーク領域内で引き起こしてもよく、かつ好ましくはそのアミノ酸置換は抗体のその抗原との結合を改良するものである。さらに、かかる方法を利用して、鎖内ジスルフィド結合に参加する１以上の可変領域システイン残基のアミノ酸置換若しくは欠失を引き起こし、１以上の鎖内ジスルフィド結合を欠く抗体分子を作製してもよい。ポリヌクレオチドに対するその他の改変は本発明により包含されかつ当技術分野の範囲内にある。
【０３２２】
４．９．２  抗体の組換え発現
抗原（例えばインテグリンαｖβ３）と免疫特異的に結合する本発明の抗体（例えば、本発明の抗体の重鎖若しくは軽鎖、又は本発明の一本鎖抗体）の組換え発現は、抗体をコードするポリヌクレオチドを含有する発現ベクターの構築を必要とする。本発明の抗体分子、抗体の重鎖若しくは軽鎖、又は抗体フラグメント（好ましくは、重鎖又は軽鎖の可変ドメインを含むが、必ずしも必要ではない）をコードするポリヌクレオチドが一度得られると、抗体分子を製造するためのベクターは、当技術分野で公知の技術を利用して組換えＤＮＡ技術により作製することができる。例えば、本明細書に参照によりその全文が組み入れられる、米国特許第６，３３１，４１５号を参照のこと。そこで、抗体をコードするヌクレオチド配列を含有するポリヌクレオチドを発現させることによりタンパク質を製造する方法を本明細書に記載する。当業者に公知の方法を利用して、抗体コード配列及び適当な転写及び翻訳制御シグナルを含有する発現ベクターを構築することができる。これらの方法としては、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ組換えＤＮＡ技術、合成技術、及びｉｎ  ｖｉｖｏ遺伝子組換えが挙げられる。本発明は、従って、本発明の抗体分子、抗体の重鎖若しくは軽鎖、抗体の重鎖若しくは軽鎖可変ドメイン又はそれらの部分、あるいは重鎖若しくは軽鎖のＣＤＲをコードし、プロモーターと機能しうる形で連結されたヌクレオチド配列を含む複製可能なベクターを提供する。かかるベクターは、抗体分子の定常領域をコードするヌクレオチド配列（例えば、国際公開ＷＯ８６／０５８０７号；国際公開ＷＯ８９／０１０３６号；及び米国特許第５，１２２，４６４号を参照）を含んでもよく、また抗体の可変ドメインをかかるベクター中にクローニングして重鎖全体、軽鎖全体、又は重鎖全体と軽鎖全体の両方を発現させてもよい。
【０３２３】
発現ベクターを通常の技術により宿主細胞に導入し、次いでトランスフェクトした細胞を通常の技術により培養して、本発明の抗体を製造する。従って、本発明は、本発明の抗体若しくはそのフラグメント、あるいはその重鎖若しくは軽鎖又はそれらの一部分、あるいは本発明の一本鎖抗体をコードし、異種プロモーターと機能しうる形で連結されたポリヌクレオチドを含有する宿主細胞を含む。２本鎖抗体を発現させるための好ましい実施形態においては、以下に詳しく説明するように、重鎖及び軽鎖の両方をコードするベクターを宿主細胞において同時発現させ、免疫グロブリン分子全体を発現させることができる。
【０３２４】
様々な宿主発現ベクター系を利用して、本発明の抗体分子を発現させることができる（例えば、米国特許第５，８０７，７１５号を参照）。かかる宿主発現系は、本発明のコード配列を作製し次いで精製するために用いられる運搬体を意味するのみならず、適当なヌクレオチドコード配列を用いて形質転換又はトランスフェクトすると、本発明の抗体分子をｉｎ  ｓｉｔｕで発現することができる細胞も意味する。これらとしては、限定されるものでないが、抗体コード配列を含有する組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ又はコスミドＤＮＡ発現ベクターを用いて形質転換した細菌などの微生物（例えば、大腸菌及び枯草菌）；抗体コード配列を含有する組換え酵母発現ベクターを用いて形質転換した酵母（例えば、サッカロミセス・ピキア）；抗体コード配列を含有する組換えウイルス発現ベクター（例えば、バキュロウイルス）に感染した昆虫細胞系；組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）に感染したか若しくは抗体コード配列を含有する組換えプラスミド発現ベクター（例えば、Ｔｉプラスミド）を用いて形質転換した植物細胞系；又は、哺乳類細胞のゲノム由来のプロモーター（例えば、メタロチオネインプロモーター）若しくは哺乳類ウイルス由来のプロモーター（例えば、アデノウイルス後期プロモーター；ワクシニアウイルス７．５Ｋプロモーター）を含有する組換え発現構築物を保持する哺乳類細胞系（例えば、ＣＯＳ、ＣＨＯ、ＢＨＫ、２９３、ＮＳＯ、及び３Ｔ３細胞）が挙げられる。好ましくは、大腸菌などの細菌細胞を、そしてさらに好ましくは、特に組換え抗体分子全体を発現させるために真核細胞を使用して、組換え抗体分子を発現させる。例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞などの哺乳類細胞は、ヒトサイトメガロウイルス由来の主要中初期遺伝子プロモーターエレメントのようなベクターと一緒に使うと、抗体の有効な発現系である（Foeckingら, 1986, Gene 45:101；及びCockettら, 1990, Bio/Technology 8:2）。特定の実施形態においては、少なくとも１つの抗原（例えばインテグリンαｖβ３）と免疫特異的に結合する本発明の抗体、その誘導体又は類似体をコードするヌクレオチド配列の発現を、構成的プロモーター、誘導プロモーター又は組織特異的プロモーターにより調節する。
【０３２５】
細菌系においては、様々な発現ベクターを、発現される抗体分子に対して意図される用途に依存して有利に選択することができる。例えば、抗体分子の医薬組成物を作製するために大量のかかる抗体を生産する場合には、容易に精製される融合タンパク質産物の高レベルの発現を指令するベクターが望ましい。かかるベクターとしては、限定されるものでないが、抗体コード配列を個々にｌａｃＺコード領域とイン・フレームとなるようにベクター中にライゲートして融合タンパク質を産生させうる大腸菌発現ベクターｐＵＲ２７８（Rutherら, 1983, EMBO 12:1791）；ｐＩＮベクター（Inouye & Inouye, 1985, Nucleic Acids Res. 13:3101-3109；Van Heeke & Schuster, 1989, J. Biol. Chem. 24:5503-5509）などが挙げられる。ｐＧＥＸベクターを利用して、外来ポリペプチドをグルタチオン−５−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）との融合タンパク質として発現させることもできる。一般的に、かかる融合タンパク質は可溶であり、マトリックスであるグルタチオンアガロースビーズへの吸着及び結合と、それに続く遊離グルタチオンの存在下での溶出により、溶解細胞から容易に精製することができる。ｐＧＥＸベクターを、トロンビン又はＸａ因子プロテアーゼ切断部位を含むように設計し、クローニングした標的遺伝子産物をＧＳＴ部分から遊離させることができる。
【０３２６】
昆虫系においては、オートグラファ・カリフォルニカ核多角体病ウイルス（ＡｃＮＰＶ）を、外来遺伝子を発現するベクターとして利用する。該ウイルスは、スポドプテラ・フルギペルダ（Spodoptera frugiperda）細胞で増殖する。抗体コード配列を個々にそのウイルスの非必須領域（例えば、ポリヘドリン遺伝子）中にクローニングしてＡｃＮＰＶプロモーター（例えば、ポリヘドリンプロモーター）の制御下に置くことができる。
【０３２７】
哺乳類宿主細胞においては、様々なウイルスに基づく発現系を使用することができる。アデノウイルスを発現ベクターとして利用する場合、目的の抗体コード配列を、アデノウイルス転写／翻訳制御複合体、例えば、後期プロモーター及びトリパータイト（tripartite）リーダー配列とライゲートしてもよい。次いでこのキメラ遺伝子を、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏ組換えによりアデノウイルスゲノムに挿入することができる。ウイルスゲノムの非必須領域（例えば、領域Ｅ１又はＥ３）への挿入により、感染宿主において生存可能でかつ抗体分子を発現しうる組換えウイルスを得ることができる（例えば、Logan & Shenk, 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 8 1:355-359を参照）。特定の開始シグナルも、挿入された抗体コード配列の効率的な翻訳に必要でありうる。これらのシグナルとしてはＡＴＧ開始コドン及び隣接配列が挙げられる。さらに、開始コドンは所望のコード配列のリーディングフレームと同期していて全インサートの翻訳を保証しなければならない。これらの外因性翻訳制御シグナル及び開始コドンは、天然及び合成の両方の様々な起源のものであってよい。発現効率は、適当な転写エンハンサーエレメント、転写ターミネーターなど（例えば、Bittnerら, 1987, Methods in Enzymol. 153:51-544を参照）を組み入れることにより増強することができる。
【０３２８】
さらに、挿入された配列の発現をモジュレートするか、又は所望の特定の様式で遺伝子産物を修飾及びプロセシングする宿主細胞株を選択することができる。タンパク質産物のかかる修飾（例えば、グリコシル化）及びプロセシング（例えば、切断）は、タンパク質の機能にとって重要でありうる。異なる宿主細胞は、タンパク質及び遺伝子産物の翻訳後プロセシング及び修飾のための特有かつ特定の機構を有する。適当な細胞系又は宿主系を選んで、発現された外来タンパク質の正しい修飾とプロセシングを保証することができる。この目的のために、適切な一次転写のプロセシング、遺伝子産物のグリコシル化及びリン酸化のための細胞機構を持つ宿主真核細胞を使用することができる。かかる哺乳類宿主細胞としては、限定されるものでないが、ＣＨＯ、ＶＥＲＹ、ＢＨＫ、Ｈｅｌａ、ＣＯＳ、ＭＤＣＫ、２９３、３Ｔ３、Ｗ１３８、ＢＴ４８３、Ｈｓ５７８Ｔ、ＨＴＢ２、ＢＴ２０及びＴ４７Ｄ、ＮＳＯ（内因的に全く免疫グロブリン鎖を産生しないマウス骨髄腫培養細胞株）、ＣＲＬ７Ｏ３Ｏ及びＨｓＳ７８Ｂｓｔ細胞が挙げられる。
【０３２９】
組換えタンパク質の長期間にわたる高収量の生産のためには、安定した発現が好ましい。例えば、安定して抗体分子を発現する培養細胞株を遺伝子操作によって作ることができる。ウイルスの複製起点を含有する発現ベクターを用いるのではなしに、宿主細胞を、適当な発現制御エレメント（例えば、プロモーター、エンハンサー、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位など）により制御したＤＮＡ、及び選択マーカーを用いて形質転換することができる。外来ＤＮＡの導入後、遺伝子操作した細胞を、１〜２日間富栄養培地で増殖させ、次いで選択培地に切り換えてもよい。組換えプラスミド中の選択マーカーは、選択に対する耐性を付与し、細胞がプラスミドをその染色体中に安定的に組み込み、増殖して細胞巣を形成することを可能にするので、これを次にクローニングして培養細胞株に拡大することができる。この方法を利用して抗体分子を発現する細胞系を遺伝子操作により有利に作製することができる。かかる遺伝子操作で作製した培養細胞株は、抗体分子と直接又は間接に相互作用する組成物をスクリーニングしたり評価したりするのに特に有用である。
【０３３０】
様々な選択系を利用することができ、限定されるものでないが、例えば単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ（Wiglerら, 1977, Cell 11:223）、ヒポキサンチン−グアニン・ホスホリボシルトランスフェラーゼ（Szybalska & Szybalski, 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48:202）、及びアデニン・ホスホリボシルトランスフェラーゼ（Lowyら, 1980, Cell 22:8-17）遺伝子が挙げられ、これらはそれぞれｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−又はａｐｒｔ−細胞において使用することができる。また、以下の遺伝子については代謝拮抗物質耐性を選択の基礎として利用することができる：メトトレキセート耐性を付与するｄｈｆｒ（Wiglerら, 1980, Natl. Acad. Sci. USA 77:357；O'Hareら, 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:1527）；ミコフェノール酸耐性を付与するgpt（Mulligan & Berg, 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2072）；アミノグリコシドG-418耐性を付与するneo（Wu及びWu, 1991, Biotherapy 3:87-95；Tolstoshev, 1993, Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32:573-596；Mulligan, 1993, Science 260:926-932；並びにMorgan及びAnderson, 1993, Ann. Rev. Biochem. 62:191-217；May, 1993, TIB TECH 11 (5):155-215)；並びにハイグロマイシン耐性を付与するhygro（Santerreら, 1984, Gene 30:147）。当技術分野で公知の組換えDNA技法を慣用的に適用して所望の組換えクローンを選択することができ、かかる方法は、例えば、Ausubelら (編), 「Current Protocols in Molecular Biology」, John Wiley & Sons, NY (1993)；Kriegler, 「Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual」, Stockton Press, NY (1990)；及びDracopoliら (編), 「Current Protocols in Human Genetics」, John Wiley & Sons, NY (1994)の第12章及び第13章；Colberre-Garapinら, 1981, J. Mol. Biol. 150:1（これらは参照により本明細書にその全文が組み入れられる）に記載されている。
【０３３１】
抗体分子の発現レベルは、ベクター増幅により増加させることができる（総説については、Bebbington及びHentschel, 「The use of vectors based on gene amplification for the expression of cloned genes in mammalian cells in DNA cloning」, Vol.3. (Academic Press, New York, 1987)を参照）。抗体を発現するベクター系中のマーカーが増幅可能であれば、宿主細胞培養中に存在するインヒビターレベルの増加は、マーカー遺伝子のコピー数を増加させうる。増幅される領域は、抗体遺伝子と関連しているので、抗体の産生も増加しうる（Crouseら, 1983, Mol. Cell. Biol. 3:257）。
【０３３２】
宿主細胞を、本発明の２つの発現ベクター、すなわち、重鎖由来のポリペプチドをコードする第１ベクターと軽鎖由来のポリペプチドをコードする第２ベクターとを用いて共トランスフェクトすることができる。その２つのベクターは、重鎖ポリペプチドと軽鎖ポリペプチドの同等の発現を可能にする同一の選択マーカーを含有してもよい。あるいは、重鎖ポリペプチドと軽鎖ポリペプチドの両方をコードしかつ発現できる単一ベクターを利用してもよい。かかる状況では重鎖の前に軽鎖を配置して、毒性である遊離の重鎖が過剰になることを避けなければならない（Proudfoot, 1986, Nature 322:52；及びKohler, 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:2 197）。重鎖と軽鎖のコード配列はｃＤＮＡ又はゲノムＤＮＡを含んでいてもよい。
【０３３３】
本発明の抗体分子が組換え発現により一旦産生されれば、抗体分子は、免疫グロブリン分子を精製するための当技術分野で公知の任意の方法により、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、アフィニティー、特に、プロテインＡの後の特異的抗原に対する親和性、及びサイズ分離カラムクロマトグラフィ）により、遠心分離、溶解度差（differential solubility）により、又はタンパク質を精製する他の任意の標準技術により、精製することができる。さらに、本発明の抗体又はそのフラグメントを、精製を容易にする本明細書に記載されているか又はさもなくば当技術分野で公知の異種ポリペプチド配列と融合させてもよい。
【０３３４】
本発明はまた、当技術分野で公知の方法（限定されるものではないが組換え方法）により作製される本発明のタンパク質、ペプチド及びポリペプチドを包含する。国際公開ＷＯ０２／０７０００７号（参照によりその全体を本明細書に組み入れる）を参照されたい。
【０３３５】
４．１０  均等物
当業者であれば、本明細書に記載の特定の実施形態に対する多数の均等物を理解しうるか又はさらに慣用的実験を行うことなく確認できるであろう。かかる均等物は添付の特許請求の範囲に包含されると考える。
【０３３６】
本明細書に記述した全ての公開文献、特許及び特許出願は、あたかもそれぞれの個々の公開文献、特許又は特許出願が特定してかつ個々に参照により本明細書に組み入れられると示されたのと同じように、参照により本明細書にその全文が組み入れられる。
【配列表】
2006516635.tif 000004
2006516635.tif 000005
【国際調査報告】
2006516635.tif 000006
2006516635.tif 000007