(57)【要約】本発明の実施態様は巨大環を含む新規ペプチドミメティックスを提供する。このような化合物は神経保護性であり、神経細胞変性及び／又は死滅を特徴とする疾患、障害及びその他の症状の治療のための治療薬としての実用性を有する。また、これらの化合物はこのような症状の治療に有益な薬物の製造に有益である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2006523213.tif 000024
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
R1及びR2は独立に-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
R3は-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸはC0-C3の線状アルキル又はアルケニル鎖である〕
【請求項２】
式：
【化２】
2006523213.tif 000025
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
R1及びR2は独立に-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
R3は-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸはC0-C3の線状アルキル又はアルケニル鎖である〕
【請求項３】
式：
【化３】
2006523213.tif 000026
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
R1及びR2は独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸはC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である〕
【請求項４】
式：
【化４】
2006523213.tif 000027
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
R1及びR2は独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸはC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である〕
【請求項５】
式：
【化５】
2006523213.tif 000028
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
Ｒは独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸはC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である〕
【請求項６】
式：
【化６】
2006523213.tif 000029
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
Ｒは独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸはC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である〕
【請求項７】
式：
【化７】
2006523213.tif 000030
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
Ｒは独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれる〕
【請求項８】
式：
【化８】
2006523213.tif 000031
を有する化合物又はその医薬上許される塩もしくは水和物。
〔式中、
Ｒは独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれる〕
【請求項９】
R1が-COOHであり、かつR2が-(CH2)2-COOHである式１の化合物。
【請求項１０】
R1が-CH(COOH)-(CH2)2-COOHである式３の化合物。
【請求項１１】
R3がメチルである式１又はR2がメチルである式３の化合物。
【請求項１２】
R3がアリルである式１又はR2がアリルである式３の化合物。
【請求項１３】
Ｘが-(CH2)3-である式１又は式３の化合物。
【請求項１４】
Ｘが-(CH2)2-である式１の化合物。
【請求項１５】
Ｘが-(CH2)4-である式３の化合物。
【請求項１６】
Ｘが-CH2-CH=CH-（式中、ＸのCH2はNH2基に結合された炭素に隣接している）である式１の化合物。
【請求項１７】
Ｘが-CH2-CH=CH-CH2-である式３の化合物。
【請求項１８】
R1が-COOHであり、R2が-(CH2)2-COOHであり、R3がＨであり、Ｘが-(CH2)3-である式１の化合物。
【請求項１９】
R1が-CH(COOH)-(CH2)2-COOHであり、R2がＨであり、Ｘが-(CH2)4-である式３の化合物。
【請求項２０】
式１、式２、式３又は式４、式５、式６、式７又は式８の一つ以上の化合物及び医薬上許される賦形剤を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２１】
式１、式２、式３又は式４、式５、式６、式７又は式８の一つ以上の化合物、医薬上許される賦形剤及びバインダーを含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２２】
式１、式２、式３又は式４、式５、式６、式７又は式８の一つ以上の化合物、医薬上許される賦形剤及びカプセルを含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２３】
患者に有効量の式１、式２、式３又は式４、式５、式６、式７又は式８の一つ以上の化合物を投与することを特徴とする、治療しないと障害又は疾患の結果として変性又は死滅する定めの神経細胞を保護するための患者の治療方法。
【請求項２４】
疾患がアポトーシス神経細胞死滅を特徴とする、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
疾患が壊死性神経細胞死滅を特徴とする、請求項２３記載の方法。
【請求項２６】
疾患が神経細胞変性を特徴とする、請求項２３記載の方法。
【請求項２７】
障害が壊死性神経細胞死滅を生じる、請求項２３記載の方法。
【請求項２８】
障害がアポトーシス神経細胞死滅を生じる、請求項２３記載の方法。
【請求項２９】
障害が神経細胞変性を生じる、請求項２３記載の方法。
【請求項３０】
疾患がハンチントン病、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、末梢神経障害、棘筋アトロフィー、クロイツフェルト-ヤコブ病、AIDS痴呆、進行性核上麻痺、中枢広汎性髄鞘疾患（白質喪失疾患）、慢性神経変性疾患、ダウン症候群、白質脳症及びシルダー病からなる群から選ばれる、請求項２３記載の方法。
【請求項３１】
障害又は疾患が神経芽細胞腫、頭部外傷、外傷性脳障害、卒中、虚血性障害、低酸素性障害、再潅流障害、癲癇、心臓動脈バイパス移植手術、毒素損傷、放射線損傷及び窒息からなる群から選ばれた一種以上の症状の結果である、請求項２３記載の方法。
【請求項３２】
障害又は疾患が炎症性症状の結果である、請求項２３記載の方法。
【請求項３３】
障害又は疾患が慢性又は急性脳脊髄炎、脳炎、視神経炎、横断脊髄炎、脳膜炎、全脳炎、デビック病、進行性多病巣白質脳症、橋中心髄鞘崩壊及び視神経脊髄炎からなる群から選ばれた一種以上の症状の結果である、請求項２３記載の方法。
【請求項３４】
疾患が精神分裂症又は鬱病の結果である、請求項２３記載の方法。
【請求項３５】
少なくとも一種のその他の坑アポトーシス薬、坑壊死薬又は神経保護薬を投与する、請求項２３記載の方法。
【請求項３６】
その他の坑アポトーシス薬又は神経保護薬が成長因子及び関連誘導体（インスリン様成長因子-I〔IGF-I〕、インスリン様成長因子-II〔IGF-II〕、トランスフォーミング成長因子-β１、アクチビン、成長ホルモン、神経成長因子、成長ホルモン結合タンパク質、IGF結合タンパク質〔特にIGFBP-3〕、塩基性繊維芽細胞成長因子、酸性繊維芽細胞成長因子、hst/Kfgk遺伝子産物、FGF-3、FGF-4、FGF-6、ケラチノサイト成長因子、アンドロゲン誘導成長因子、int-2、繊維芽細胞成長因子相同因子-1(FHF-1)、FHF-2、FHF-3及びFHF-4、ケラチノサイト成長因子２、グリア活性化因子、FGF-10及びFGF-16、毛様体神経栄養因子、脳由来成長因子、ニューロトロフィン３、ニューロトロフィン４、骨誘導因子２〔BMP-2〕、グリア細胞系由来神経栄養因子、活性依存性神経栄養因子、サイトカイン白血病抑制因子、オンコスタチンＭ、インターロイキン、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、コンセンサスインターフェロン、TNF-α、クロメチアゾール）、キヌレン酸、セマックス、タクロリムス、L-トレオ-1-フェニル-2-デカノイルアミノ-3-モルホリノ-1-プロパノール、アドレノコルチコトロピン-(4-9)類似体〔ORG2766〕、ジゾルシピン〔MK-801〕、セレギリン、グルタメートアンタゴニスト、AMPAアンタゴニスト及び坑炎症薬からなる群から選ばれる、請求項３５記載の方法。
【請求項３７】
前記グルタメートアンタゴニストがNPS1506、GV1505260、MK-801及びGV150526からなる群から選ばれる、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
前記AMPAアンタゴニストが2,3-ジヒドロキシ-6-ニトロ-7-スルファモイルベンゾ(f)キノキサリン(NBQX)、LY303070及びLY300164からなる群から選ばれる、請求項３６記載の方法。
【請求項３９】
前記抗炎症薬が坑MAdCAM-1抗体並びにインテグリンα４β１受容体及びインテグリンα４β７受容体に対する抗体からなる群から選ばれる、請求項３６記載の方法。
【請求項４０】
前記抗MAdCAM-1抗体がMECA-367である、請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
化合物が(2S,3'S,8R',11'S)2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩(48)である、請求項２３記載の方法。
【請求項４２】
化合物が(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩(68)である、請求項２３記載の方法。
【請求項４３】
前記症状が低酸素性虚血である、請求項２３記載の方法。
【請求項４４】
前記症状が神経毒性である、請求項２３記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
この出願は2003年３月20日に出願された米国仮特許出願第60/456,136号及び2003年９月23日に出願された同第60/505,119号（両方とも参考として本明細書に完全に含まれる）の優先権を主張する。
本発明は巨大環を含む新規ペプチドミメティックス及びそれらの使用方法に関する。また、本発明はこのような化合物の神経保護活性に関する。更に特別には、本発明は神経細胞変性及び／又は死滅を特徴とする疾患及び症状の治療におけるこれらの化合物及びその医薬組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
神経系中の細胞の変性及び／又は死滅は多くの疾患及び医療症状における重大な因子である。このような疾患及び症状として、外傷性脳障害、外傷性脊髄障害、卒中、心臓バイパス移植手術(CABG)に二次的な減少された神経潅流に関連する低酸素又は虚血、パーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症及びその他の神経変性疾患が挙げられる。このような細胞死滅及び変性を予防又は減少し、神経機能の喪失を最小にすることが重要である。
或る種の化合物が神経保護薬として有益である。一種のこのような化合物はインスリン様成長因子１（IGF-1）（ScheepensらのWO 00/13650）である。IGF-1は神経細胞のグルタメート受容体へのグルタメートの結合を減少し得る天然産ペプチドである（Bourguinonの米国特許第5,804,550号）。IGF-1はまた損傷及び疾患により生じた神経細胞分解を減少し得る。IGF-1はin vivoでタンパク質分解により開裂されてdes1-3IGF-1及びＮ末端トリペプチドGly-Pro-Glu（GPE）を生じる。GPE及び類似体は神経保護性であることが判明していた（本明細書に参考として含まれるGluckmanらの米国特許第6,187,906号）。
しかしながら、このようなペプチドは特にそれらがin vivoで迅速に代謝される症状で神経死滅及び変性の治療に理想的ではないかもしれない。神経保護特性及び神経再生特性を有し、特に酵素分解に対し、一層代謝安定である化合物に対する要望がある。
生物活性ペプチドの挙動を模倣するペプチドミメティックスの使用が薬物候補の探求に普通である。ペプチドよりも代謝安定かつプロテアーゼ耐性であるペプチドミメティックスが望ましく、それらはしばしば良く特定されたコンホメーションをとる。環状構造は所定のペプチドの生物活性コンホメーションを探査するのに使用し得る剛性形状を与え得る。この剛性はその分子をコンホメーション上制限し、こうして高められた生物学的活性を有する分子の設計方法を与える。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本発明の局面はトリペプチドGly-Pro-Glu（GPE）の或る性質を模倣し得る新規環状ペプチドミメティックスを含む。本発明の或る局面は下記の構造式及び置換基を有する分子を含む。
【０００４】
【化１】
2006523213.tif 000002
【０００５】
或る実施態様において、式１及び式２の化合物は
R1及びR2が独立に-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
R3が-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸがC0-C3の線状アルキル又はアルケニル鎖である、置換基を含む。
【０００６】
【化２】
2006523213.tif 000003
【０００７】
別の実施態様において、式３及び式４の化合物は
R1及びR2が独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸがC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である、置換基を含む。
【０００８】
【化３】
2006523213.tif 000004
【０００９】
別の実施態様において、式５及び式６の化合物は
Ｒが独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸがC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である、置換基を含む。
【００１０】
【化４】
2006523213.tif 000005
【００１１】
別の実施態様において、式７及び式８の化合物は
Ｒが独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれる、置換基を含む。
本発明の別の局面は式1-8に記載された化合物の医薬上許される塩を提供する。
更に別の局面において、本発明は医薬上許される賦形剤及び治療有効量の本発明の少なくとも一種の化合物を含む医薬組成物を提供する。これらの組成物は坑アポトーシス薬及び坑壊死薬として、また神経変性又は障害を伴うその他の症状のための用途がある。
更に別の局面において、本発明は好適な化合物の投与により治療し得る疾患又は障害を有する動物の治療方法であって、その動物への、必要により治療される疾患のための少なくとも一種のその他の通常の治療薬と連係しての、本発明の少なくとも一種の化合物の投与を含むことを特徴とする治療方法を提供する。
更に別の局面において、治療される動物はヒトである。
更に別の局面において、本発明は本発明の式1-8の化合物の調製方法を提供する。
更に別の局面において、本発明は本発明の式1-8の化合物を含む医薬製剤の合成方法、製剤化方法及び調製方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
定義
“アルケニル”は少なくとも一つの炭素-炭素二重結合を有する不飽和分岐、直鎖又は環状炭化水素基を表す。その基は一つ以上の二重結合についてシス又はトランスコンホメーションであってもよい。例示のアルケニル基として、アリル、エテニル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、シクロペンテニル等が挙げられる。或る実施態様において、アルケニル基は(C2-C6)アルケニルであり、別の実施態様において、アリルが特に有益であり得る。
“アルキル”は飽和分岐、直鎖又は環状炭化水素基を表す。例示のアルキル基として、メチル、エチル、イソプロピル、シクロプロピル、tert-ブチル、シクロプロピルメチル、ヘキシル等が挙げられる。或る実施態様において、アルキル基は(C1-C6)アルキルである。
“アルキニル”は少なくとも一つの炭素-炭素三重結合を有する不飽和分岐、直鎖又は環状炭化水素基を表す。例示のアルキニル基として、エチニル、プロピニル、ブチニル、イソブチニル等が挙げられる。或る実施態様において、アルキニル基は(C2-C6)アルキニルである。
“アリール”は共役π電子系を有する不飽和環状炭化水素基を表す。例示のアリール基として、フェニル、ナフチル等が挙げられる。或る実施態様において、アリール基は(C5-C20)アリールである。
“アリールアルキル”は末端炭素に結合された水素原子の一つがアリール基で置換されている直鎖アルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を表す。例示のアリールアルキル基として、ベンジル、ナフチルメチル、ベンジリデン等が挙げられる。
“成長因子”は細胞を刺激して成長又は増殖させる細胞外のポリペプチドシグナリング分子を表す。
【００１３】
“ヘテロアルキル”は１個以上の炭素原子が別の原子、例えば、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ等で置換されているアルキル部分を表す。例示のヘテロアルキル基として、ピロリジン、モルホリン、ピペリジン、ピペラジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、テトラヒドロフラン、(C1-C10)置換アミン、(C2-C6)チオエーテル等が挙げられる。
“ヘテロアリール”は１個以上の炭素原子が別の原子、例えば、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ等で置換されているアリール部分を表す。例示のヘテロアリール基として、カルバゾール、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、イソキノリン、プリン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピロール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール等が挙げられる。
“障害”は神経系中の細胞の変性もしくは死滅をもたらし、又は機能の喪失をもたらす動物のあらゆる急性又は慢性の損傷を含む。このような細胞として、神経細胞及び非神経細胞が挙げられる。障害として、卒中、非出血誘発性卒中、外傷性脳障害、例えば、剥離、帯吻合後の胎児仮死と関連し、又は子宮内成長遅延と関連する周産期窒息、適度の蘇生又は呼吸の不全と関連する周産期窒息、ニアミス溺水、ニアミス揺りかご死、一酸化炭素吸入、アンモニア又はその他のガス中毒と関連する重度のCNS傷害、心停止、昏睡、脳膜炎、低血糖及び痙攣重積状態、冠バイパス手術と関連する脳仮死のエピソード、低血圧エピソード及び低血圧発症、並びに脳外傷が挙げられる。上記の例は例示のみのためであり、本発明の化合物及び方法により治療し得る障害の完全なリストであることを目的としないことが理解されるべきである。
【００１４】
“医薬上許される賦形剤”は一般に安全、無毒性であり、かつ望ましい医薬組成物を調製するのに有益である賦形剤を表し、家畜用途だけでなく、ヒト医薬用途に許される賦形剤を含む。このような賦形剤は固体、液体、半固体、又はエアゾール組成物の場合には、ガス状であってもよい。
“医薬上許される塩”は医薬上許され、かつ所望の薬理学的性質を有する塩を表す。このような塩として、化合物中に存在する酸性プロトンが無機又は有機塩基と反応し得る場合に生成し得る塩が挙げられる。好適な無機塩として、アルカリ金属、例えば、ナトリウム及びカリウム、マグネシウム、カルシウム、及びアルミニウムで生成される塩が挙げられる。好適な有機塩として、有機塩基、例えば、アミン塩基、例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、N-メチルグルカミン等で生成される塩が挙げられる。また、このような塩として、無機酸（例えば、塩酸及び臭化水素酸）及び有機酸（例えば、酢酸、クエン酸、マレイン酸、並びにアルカンスルホン酸及びアレーンスルホン酸、例えば、メタンスルホン酸及びベンゼンスルホン酸）で生成される酸付加塩が挙げられる。二つの酸性基が存在する場合、医薬上許される塩はモノ酸モノ塩又はジ塩であってもよく、同様に二つより多い酸性基が存在する場合、このような基の一部又は全部が塩形成し得る。
“保護基”は有機合成でそれと通常関連する意味を有し、即ち、化学反応が別の未保護反応性部位で選択的に行ない得るように、また選択的反応が完結した後にその基が容易に除去し得るように多官能性化合物中の一つ以上の反応性部位を選択的にブロックする基を意味する。
【００１５】
“置換”はアルキル基、ヘテロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基又はアリールアルキル基の一つ以上の水素原子が独立に別の置換基で置換されている場合を表す。置換基として、-R'、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、-NR'-C(NR')-OR'、-NR'-C(NR')-SR'、NR'-C(NR')-NR'R'、トリハロメチル及びハロゲンが挙げられ、この場合、夫々のR'は独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルである。
“治療有効量”は、疾患を治療するために動物に投与される場合に、その疾患について治療を行なうのに充分である量、即ち、不利な症候又は知見を減少し、望ましい症候又は知見を促進し、かつ／又は基礎をなす障害を治療し、かつ／又は治癒的である量を意味する。
疾患の“治療”は疾患にかかりやすいかもしれないが、疾患の症候を未だ経験せず、又は示していない動物で疾患が生じることを予防し（予防治療）、疾患を抑制し（その発生の遅延又は停止）、疾患の症候又は副作用からの軽減を与え（待期療法を含む）、また疾患を軽減すること（疾患の回帰を生じる）を含む。
暗黙の水素原子（例えば、ピロール環の水素等）は明瞭化のために式から省かれるが、存在していると理解されるべきである。
本発明の化合物
本発明の或る局面は下記の構造式及び置換基を有する分子を提供する。
【００１６】
【化５】
2006523213.tif 000006
【００１７】
或る実施態様において、式１及び式２の化合物は
R1及びR2が独立に-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
R3が-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸがC0-C3の線状アルキル又はアルケニル鎖である、置換基を含む。
本発明の更なる実施態様において、化合物はR1が-COOHであり、R2が-(CH2)2-COOHであり、R3がＨであり、Ｘが-(CH2)3である式１の化合物である。
本発明の別の実施態様において、化合物はR1が-COOHであり、R2が-(CH2)2-COOHであり、R3が-CH3であり、Ｘが-(CH2)3-である式１の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はR1が-COOHであり、R2が-(CH2)2-COOHであり、R3がアリルであり、Ｘが-(CH2)3-である式１の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はR1が-COOHであり、R2が-(CH2)2-CH3であり、R3がＨであり、Ｘが-(CH2)3-である式１の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はR1が-COOHであり、R2が-(CH2)2-COOHであり、R3がＨであり、Ｘが-(CH2)2-である式１の化合物である。
本発明の更なる実施態様において、化合物はR1が-COOHであり、R2が-(CH2)2-COOHであり、R3がＨであり、Ｘが-CH2-CH=CH-（この場合、ＸのCH2はNH2基に結合された炭素に隣接している）である式１の化合物である。
【００１８】
【化６】
2006523213.tif 000007
【００１９】
別の実施態様において、式３及び式４の化合物は
R1及びR2が独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸがC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である、置換基を含む。
本発明の更なる実施態様において、化合物はR1が-CH(COOH)-(CH2)2-COOHであり、R2がＨであり、Ｘが-(CH2)4-である式３の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はR1が-CH(COOH)-(CH2)2-COOHであり、R2がCH3であり、Ｘが-(CH2)4-である式３の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はR1が-CH(COOH)-(CH2)2-COOHであり、R2がアリルであり、Ｘが-(CH2)4-である式３の化合物である。
本発明の更なる実施態様において、化合物はR1が-CH(COOH)-(CH2)2-CH3であり、R2がＨであり、Ｘが-(CH2)4-である式３の化合物である。
本発明の別の実施態様において、化合物はR1が-CH(COOH)-(CH2)2-COOHであり、R2がＨであり、Ｘが-(CH2)3-である式３の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はR1が-CH(COOH)-(CH2)2-COOHであり、R2がＨであり、Ｘが-CH2-CH=CH-CH2-である式３の化合物である。
【００２０】
【化７】
2006523213.tif 000008
【００２１】
別の実施態様において、式５及び式６の化合物は
Ｒが独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、かつ
ＸがC0-C4の線状アルキル又はアルケニル鎖である、置換基を含む。
【００２２】
【化８】
2006523213.tif 000009
【００２３】
別の実施態様において、式７及び式８の化合物は
Ｒが独立に-H、-OR'、-SR'、-NR'R'、-NO2、-CN、-C(O)R'、-C(O)OR'、-C(O)NR'R'、-C(NR')NR'R'、トリハロメチル、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、置換ヘテロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールアルキル、置換アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル及び置換ヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれ、夫々のR'が独立に-H、アルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール及びヘテロアリールアルキルからなる群から選ばれる、置換基を含む。
本発明の更なる実施態様において、化合物はＲがＨである式７の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はＲがCH3である式７の化合物である。
本発明の更に別の実施態様において、化合物はＲがアリルである式７の化合物である。
本発明の別の局面は式1-8に記載された化合物の医薬上許される塩を提供する。
更に別の局面において、本発明は医薬上許される賦形剤及び治療有効量の本発明の少なくとも一種の化合物を含む医薬組成物を提供する。これらの組成物は坑アポトーシス薬及び坑壊死薬としての用途並びに神経変性又は障害を伴うその他の症状のための用途がある。
更なる局面において、本発明は式1-8の好適な化合物の投与により治療し得る疾患又は障害を有する動物の治療方法であって、その動物への、必要により治療される疾患のための少なくとも一種のその他の通常の治療薬と連係しての、本発明の少なくとも一種の化合物の投与を含む治療方法を提供する。
更に別の局面において、治療される動物はヒトである。
更に別の局面において、本発明は本発明の式1-8の化合物を含む医薬製剤の合成方法、製剤化方法及び調製方法を提供する。
当業者は上記構造式がキラル中心（その数は異なる置換基に依存するであろう）を含むことを認めるであろう。そのキラリティーは幾つかの中心のみについて示される。キラリティーは同じ中心でＲ又はＳであってもよい。式は唯一の可能な互変異性体形態、コンホメーションの異性体形態又は鏡像体形態を表し、本発明は本明細書に記載された生物学的又は薬理学的活性を示すあらゆる互変異性体形態、コンホメーションの異性体形態又は鏡像体形態を含むことが理解されるべきである。
【００２４】
薬理学及び実用性
本発明の或る局面は障害又は疾患に応答する哺乳類の細胞損傷、変性及び／又は死滅の治療又は予防における本発明の化合物の使用を含む。このような実施態様は本発明の化合物を含む組成物を神経変性、また或る場合には、アポトーシス細胞死滅及び壊死細胞死滅を伴う症状を患っている動物に送出することを含む。或る実施態様において、組成物は脳細胞に影響し、又は影響しやすいCNSの障害又は疾患を治療することが望ましい。神経再生を促進し、細胞変性もしくは死滅を減少し、又は神経保護性である一種以上のその他の薬剤をまた含み得る組成物が提供される。
このようなその他の薬剤は成長因子及び関連誘導体、例えば、インスリン様成長因子-I〔IGF-I〕、インスリン様成長因子-II〔IGF-II〕、トリペプチドGPE、トランスフォーミング成長因子-β１、アクチビン、成長ホルモン、神経成長因子、成長ホルモン結合タンパク質、及び／又はIGF結合タンパク質からなる群から選ばれる。
本発明の別の局面は軸索の束形成を促進する組成物及び方法を含む。神経束の形成を促進することにより、本発明の化合物は神経突起（軸索及び／又は樹状突起）が、例えば、するどい力の外傷、壊死もしくは疾患の局所領域、又は神経突起へのその他の局所の外傷におけるようにひどくなった症状を治療するのに有益であり得る。
更に別の実施態様において、障害及び疾患（CNS障害及び疾患を含む）に応答する細胞損傷及び死滅を治療又は予防するための組成物及び方法は、傷害後の、治療量の本発明の化合物単独又はその他の薬剤と組み合わせての投与を含む。これらの実施態様は心停止におけるような予期しない障害、自動車アクシデントにより生じた頭部外傷の如き外傷、頭部創傷等の状況で特に望ましいことがある。
【００２５】
更に別の実施態様において、本発明の化合物は単独で、又は計画される脳障害の不利な作用を予防するためのその他の薬剤と組み合わせて使用し得る。このような症状として、CABG又はその他の計画される手術、例えば、脳手術、血管手術又は神経系の減少された潅流をもたらし得るその他の介入が挙げられる。ヒトの如き動物を手術の前及び／又は同時及び／又は後に治療することにより、不利な神経学的作用が改善し得る。
先に示されたように、本発明は本発明の化合物が損傷、神経突起の損失、及び／又はアポトーシス細胞死滅もしくは壊死細胞死滅に対し、細胞、特に神経細胞を保護し得るという本件出願人の知見に広く基づいている。
本発明の化合物は神経変性疾患の細胞培養モデルで神経保護を示し、それ故、神経変性のための通常の療法への有効な追加又は別法であり得ることが本明細書に実証される。
保護作用のメカニズムはわからないが、一つの可能なメカニズムはアポトーシス細胞死滅及び壊死細胞死滅からの細胞の保護を伴う。しかしながら、作用のメカニズムにかかわらず、本発明の化合物は低酸素、虚血及び神経毒素誘発神経損傷を含む、種々の神経病に有効な治療薬として使用し得る。更に、本発明の化合物は神経突起外殖及び神経の束形成を促進するために特別な神経欠損の不在下で使用し得る。こうして、細胞死滅が必ずしも神経障害（例えば、脊髄障害により生じられるような軸索損傷）と関連しない状況で、本発明の化合物の投与は神経突起再生を促進する有効な方法であるかもしれない。
【００２６】
治療適用
本発明の組成物及び方法は神経障害又は疾患を患っているヒト患者の如き動物の治療に用途がある。更に一般に、本発明の組成物及び方法は障害及び疾患のために、神経損傷又は潜在的なアポトーシス細胞死滅及び／又は壊死細胞死滅を患っているヒト患者の如き哺乳類の治療に用途がある。
神経変性、アポトーシス及び／又は壊死を特徴とする特定の症状及び疾患として、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、棘筋アトロフィー、末梢神経障害、クロイツフェルト-ヤコブ病、AIDS痴呆、進行性核上麻痺、中枢広汎性髄鞘疾患(myelinopathia centralis diffusa)（白質喪失疾患）、慢性神経変性疾患、ハンチントン病、卒中、虚血性障害、低酸素性障害、再潅流障害、頭部外傷、CNS外傷、癲癇、脳虚血、緑内障、網膜疾患、視神経障害、視神経炎、ダウン症候群、脳脊髄炎、脳膜炎、全脳炎、神経芽細胞腫、精神分裂症及び鬱病が挙げられるが、これらに限定されない。上記症状の夫々がグルタメート毒性と関連する神経毒性により模擬される病態生理学的知見及び症候を示す。
更に一般に、本発明は外傷、毒素暴露、窒息又は低酸素-虚血の形態の発作後の神経束形成の誘導に適用を有する。更に、本発明は癌、ウイルス感染症、自己免疫疾患、神経の病気及び障害並びに心血管疾患の形態の障害又は疾患に応答するアポトーシスの治療又は予防に適用を有する。
治療は障害の前、例えば、選択的手術前に施し得る。妥当な選択的処置の例として、神経手術（この場合、脳の葉の後退が脳浮腫をもたらし得る）、又は心臓手術、例えば、弁交換（この場合、不可避の小さい塞栓が症例の約75％で検出し得る脳機能の障害をもたらすと言われている）が挙げられる。
【００２７】
効力の測定
本発明の化合物の坑アポトーシス活性及び坑壊死活性はKlemptらの方法（Klemptら, 1992, Molecular Brain Research: 13: 93-101）、形態の顕微鏡検査、チオニン／フクシンで染色された生存神経細胞及び死滅神経細胞の細胞カウント等を含む当業者に知られている方法により細胞カウントをin vivoで使用することにより測定し得る。本発明の化合物はまた質量分光分析、当業界で知られている免疫学的方法、又はクロマトグラフィー方法を使用してin vitroで測定し得る。
CNS損傷は、例えば、永久の神経欠乏認知機能、及び／又は発作障害の傾向の程度により臨床上測定し得る。in vivoの作用を測定するのに適した組織学的技術が本明細書に開示される。
化合物の治療比は(1)不利な副作用を生じる平均用量対(2)望ましい治療効果を生じる平均用量の比であると理解される。こうして、比較的低い用量で治療効果を有し、かつ高い用量で望ましくない副作用を有する化合物について、治療比は>1である。治療比は、例えば、ラット又はマウスの如き好適なin vivo動物種で坑アポトーシス活性及び坑壊死活性を生じる用量により割られた有意な体重損失（又はその他の観察し得る副作用）を生じる用量を比較することにより測定し得る。好適なモデルとして、低酸素-虚血障害（Sirimanneら, 1994 Journal of Neuroscience Methods: 55: 7-14）及び実験免疫脳脊髄炎（Mendelら, 1995 Eur. J. Immunol.: 25: 1951-1959）が挙げられる。
【００２８】
医薬組成物及び投与
本発明の化合物は薬物又は医薬製剤の一部として投与し得る。これは本発明の化合物を医薬上適当な担体、アジュバント又は賦形剤と合わせることを伴い得る。担体、アジュバント又は賦形剤の選択は勿論使用される投与の経路に通常依存するであろう。
一般に、本発明の化合物は、単独で、又は治療される疾患のためのその他の通常の治療薬と組み合わせて、当業界で知られている通常の様式のいずれかにより治療有効量で投与されるであろう。治療有効量は疾患又は障害、その重度、治療される動物の年齢及び相対的健康状態、一種以上の化合物の効力、及びその他の因子に応じて広く変化し得る。坑アポトーシス薬及び坑壊死薬として、本発明の化合物の治療有効量は動物の質量１キログラム当り0.001ミリグラムから100ミリグラムまでの範囲であってもよく、0.001〜0.1mg/kgの如き低い用量が、例えば、脳血管内投与によるような、脳脊髄液による投与に適し、また１〜100mg/kgの如き高い用量が経口投与、全身投与（例えば、経皮）、又は非経口投与（例えば、静脈内）のような方法による投与に適している。当業者は過度の実験をしないでも、そのスキル及びこの開示を考慮して、所定の疾患又は障害につき本発明の化合物の治療有効量を決めることができるであろう。
本発明の化合物は当業界で知られている末梢経路により末梢に投与し得る。これらとして、非経口経路、例えば、末梢循環系への注射、皮下、眼か内、眼、脊髄内、槽内、局所の注入（例えば、除放装置又はミニポンプ、例えば、浸透圧ポンプ又は皮膚パッチ）、移植体、エアゾール、吸入、乱切（腹腔内、包内、筋肉内、鼻内、経口、頬、経皮、肺、直腸又は膣）が挙げられる。組成物は上記神経疾患のための治療を施すのに治療有効量（例えば、患者の症状を排除又は減少する量）でヒト又はその他の哺乳類への非経口投与のために製剤化し得る。
【００２９】
望ましくは、可能な場合に、坑アポトーシス薬及び坑壊死薬として投与される時に、本発明の化合物は経口投与されるであろう。組成物中の本発明の化合物の量は組成物の型、単位用量のサイズ、賦形剤の種類、及び当業者に公知のその他の因子に応じて広く変化し得る。一般に、最終組成物は0.0001重量％（％w）〜10％w、好ましくは0.001％w〜１％wの本発明の化合物を含んでもよく、残部は一種以上の賦形剤である。
その他の都合の良い投与経路として、皮下注射（例えば、生理学上適合性の担体、例えば、0.9％の塩化ナトリウムに溶解されて）又はCNSへの直接投与が挙げられる。ステレオタクチック(stereotactic)装置及び動物のCNSの正確なマップを使用して、化合物が神経損傷の部位に直接注射し得る。このような投与の経路はその場所の潅流が減少された血管潅流又はその領域への減少された脳脊髄液(CSF)流により悪化される状況で特に所望し得る。例として、横の脳室注射又は患者の脳の横の脳室に手術により挿入されたシャントによる投与、所望の場所への静脈内の、直接注射又はその他の経路が挙げられる。
CNS中の化合物の有効量は本発明の化合物及び担体を含む化合物のプロドラッグ形態の投与により増大でき、この場合、担体が患者内の開裂又は消化を受けやすい結合により本発明の化合物に結合される。投与後に開裂又は消化されるあらゆる好適な結合が使用し得る。
しかしながら、本件出願人はその他の投与の形態を排除することを意図していない。
【００３０】
本発明の更なる実施態様において、動物の神経機能の回復は、例えば、成長因子及び関連誘導体（インスリン様成長因子-I〔IGF-I〕、インスリン様成長因子-II〔IGF-II〕、トランスフォーミング成長因子-β１、アクチビン、成長ホルモン、神経成長因子、成長ホルモン結合タンパク質、IGF結合タンパク質〔特にIGFBP-3〕、塩基性繊維芽細胞成長因子、酸性繊維芽細胞成長因子、hst/Kfgk遺伝子産物、FGF-3、FGF-4、FGF-6、ケラチノサイト成長因子、アンドロゲン誘導成長因子から選ばれた別の神経保護薬と組み合わせて治療量の本発明の化合物を投与することを含み得る。FGFファミリーの付加的な員として、例えば、int-2、繊維芽細胞成長因子相同因子-1(FHF-1)、FHF-2、FHF-3及びFHF-4、ケラチノサイト成長因子２、グリア活性化因子、FGF-10及びFGF-16、毛様体神経栄養因子、脳由来成長因子、ニューロトロフィン３、ニューロトロフィン４、骨誘導因子２〔BMP-2〕、グリア細胞系由来神経栄養因子、活性依存性神経栄養因子、サイトカイン白血病抑制因子、オンコスタチンＭ、インターロイキン、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、又はコンセンサスインターフェロン、及びTNF-αが挙げられる。神経保護治療薬のその他の形態として、例えば、クロメチアゾール；キヌレン酸、セマックス、タクロリムス、L-トレオ-1-フェニル-2-デカノイルアミノ-3-モルホリノ-1-プロパノール、アドレノコルチコトロピン-(4-9)類似体〔ORG2766〕及びジゾルシピン〔MK-801〕、セレギリン；グルタメートアンタゴニスト、例えば、NPS1506、GV1505260、MK-801、GV150526；AMPAアンタゴニスト、例えば、2,3-ジヒドロキシ-6-ニトロ-7-スルファモイルベンゾ(f)キノキサリン(NBQX)、LY303070及びLY300164；アドレシンMAdCAM-1及び／又はそのインテグリンα４受容体（α４β１及びα４β７）に対し誘導される坑炎症薬、例えば、坑MAdCAM-1mAb MECA-367（ATCC受理番号HB-9478）が挙げられる。
【００３１】
化合物は除放系により投与し得る。除放性組成物の好適な例として、成形物品、例えば、フィルム、又はマイクロカプセルの形態の半透過性ポリマーマトリックスが挙げられる。除放マトリックスとして、ポリラクチド（米国特許第3,773,919号；EP 58,481）、L-グルタミン酸とガンマ-エチル-L-グルタメートのコポリマー（Sidmanら, 1983, Biopolymers: 22: 547-56）、ポリ(2-ヒドロキシエチルメタクリレート)（Langerら, 1981, J. Biomed. Mater. Res.: 15: 267）、エチレン酢酸ビニル（Langerら, 1981, J. Biomed. Mater. Res.: 15: 267）、又はポリ-D-(-)-3-ヒドロキシ酪酸（EP 133,988）が挙げられる。除放性組成物はまたリポソームに閉じ込められた化合物を含む。化合物を含むリポソームはそれ自体知られている方法により調製される：DE 3,218,121、EP 52,322、EP 36,676、EP 88,046、EP 143,949、EP 142,641、日本特許出願83-118008、米国特許第4,485,045号及び同第4,544,545号、並びにEP 102,324。通常、リポソームは小さい（約200Åから800Åまでの）単層型のものであり、脂質含量が約30モル％より大きいコレステロールであり、選択される比率が最も有効な治療について調節される。
【００３２】
非経口投与について、一実施態様において、化合物が一般に夫々を所望の純度で、単位投薬注射形態（溶液、懸濁液、又はエマルション）で、医薬上、又は非経口上、許される担体、即ち、使用される用量及び濃度でレシピエントに無毒性であり、かつ製剤のその他の成分と適合性である担体と混合することにより製剤化される。
一般に、製剤は化合物を液体担体もしくは微細な固体担体又はその両方と一様かつ緊密に接触させることにより調製される。次いで、必要により、生成物が所望の製剤に成形されてもよい。担体は非経口担体、更に好ましくはレシピエントの血液と等張性である溶液であることが好ましい。このような担体ビヒクルの例として、水、食塩水、リンゲル液、緩衝液、及びデキストロース液が挙げられる。固定油及びオレイン酸エチルの如き非水性ビヒクルがまたここで有益である。
担体は少量の添加剤、例えば、等張性及び化学安定性を高める物質を含むことが好適である。このような物質は使用される用量及び濃度でレシピエントに無毒性であり、緩衝剤、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、酢酸、及びその他の有機酸又はそれらの塩；酸化防止剤、例えば、アスコルビン酸；低分子量（約10未満の残基）ポリペプチド、例えば、ポリアルギニン又はトリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；グリシン；アミノ酸、例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸、ヒスチジン、又はアルギニン；単糖類、二糖類、及びその他の炭水化物（セルロース又はその誘導体、グルコース、マンノース、トレハロース、又はデキストリンを含む）；キレート生成剤、例えば、EDTA；糖アルコール、例えば、マンニトール又はソルビトール；ナトリウムの如き対イオン；ノニオン性表面活性剤、例えば、ポリソルベート、ポロキサマー、又はポリエチレングリコール(PEG)；及び／又は中性塩、例えば、NaCl、KCl、MgCl2、CaCl2等を含む。
【００３３】
化合物は典型的にはこのようなビヒクル中で約4.5から８までのpHで製剤化される。以上の賦形剤、担体、又は可溶化剤の或るものの使用は化合物の塩の生成をもたらすことが理解されるであろう。最終製剤は安定な液体又は凍結乾燥された固体であってもよい。
医薬組成物中の化合物の製剤はまたアジュバントを含んでもよい。錠剤、カプセル等に混入し得る典型的なアジュバントはバインダー、例えば、アカシア、トウモロコシ澱粉、又はゼラチン；賦形剤、例えば、微結晶性セルロース；トウモロコシ澱粉又はアルギン酸のような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムの如き滑剤；蔗糖又はラクトースの如き甘味料；風味料、例えば、ペパーミント、冬緑油、又はチェリーである。投薬形態がカプセルである場合、上記物質に加えて、それはまた液体担体、例えば、脂肪油を含んでもよい。種々の型のその他の物質が被覆物として、又は投薬単位の物理的形態の改良剤として使用し得る。シロップ又はエリキシル剤は活性化合物、蔗糖のような甘味料、プロピルパラベンのような防腐剤、着色剤、及びチェリーの如き風味料を含んでもよい。注射用の無菌組成物は通常の医薬慣例に従って製剤化し得る。例えば、ビヒクル、例えば、水又はゴマ油、落花生油、もしくは綿実油のような天然産植物油又はオレイン酸エチル等のような合成脂肪ビヒクル中の活性化合物の溶解又は懸濁が所望されるかもしれない。緩衝剤、防腐剤、酸化防止剤等が受け入れられる医薬慣例に従って混入し得る。
注射、心室内投与、及びその他の投与の観血経路について、使用される化合物は無菌である必要がある。無菌性は当業界で知られているあらゆる方法、例えば、無菌濾過膜（例えば、0.2ミクロンの膜）による濾過により得られる。治療組成物は一般に無菌接近ポートを有する容器、例えば、皮下注射針により孔開けし得るストッパーを有する静脈内溶液バッグ又はバイアルに入れられる。
医薬製剤は通常単位投薬容器又は多投薬容器、例えば、シールされたアンプル又はバイアル中に、水溶液又は再生用の凍結乾燥された製剤として貯蔵されるであろう。凍結乾燥された製剤の例として、10mlのバイアルに化合物の無菌濾過された１％(w/v)の水溶液5mlが入れられ、得られる混合物が凍結乾燥される。注入溶液は静菌注射水を使用して凍結乾燥された化合物を再生することにより調製される。その他の投薬形態及び製剤の型が使用でき、全てが本発明の一部であると考えられることが容易に認められる。
【００３４】
本発明の化合物の調製
これらの化合物を調製するのに使用される出発物質及び試薬は商業上の供給業者、例えば、アルドリッチ・ケミカル社（ミルウォーキー、ウィスコンシン州）、ビーチャム（トランス、カリフォルニア州）、シグマ（セントルイス、ミズーリー州）、ストレム（ニューバリーポート、マサチューセッツ州）から入手でき、又はFieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, 1-17巻, John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1991; Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, 1-5巻及び補遺, Elsevier Science Publishers, 1989; Organic Reactions, 1-40巻, John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1991; March J; Advanced Organic Chemistry, 第４編, John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1992; 及びLarock: Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, 1989のような文献に記載された操作に従って当業者に公知の方法により調製される。殆どの場合、アミノ酸及びそれらのエステル又はアミド、並びに保護されたアミノ酸は、広く市販されており、修飾アミノ酸及びそれらのアミド又はエステルの調製は化学文献及び生化学文献に広範に記載されており、こうして当業者に公知である。
出発物質、中間体、及び本発明の化合物は通常の技術（濾過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィー等を含む）を使用して単離され、精製し得る。それらは通常の方法（物理定数及びスペクトルデータを含む）を使用して特性決定し得る。
明細書中に引用された全ての特許及び文献は参考としてそのまま明らかに含まれる。
【実施例】
【００３５】
本発明を以下の実施例により更に説明する。これらの実施例は説明のみのために示され、本発明を限定することを目的とするものではない。
一般方法
シャーラウ60（40-60μmメッシュ）シリカゲルを使用して、フラッシュクロマトグラフィーを行なった。分析薄層クロマトグラフィーを0.20mmの予備被覆シリカゲルプレート（アルグラム（登録商標）SIL G/UV254）で行ない、UV蛍光、又はアルカリ溶液中の過マンガン酸カリウム中に浸漬されたプレートの加熱を使用して化合物を視覚化した。
融点（摂氏温度（℃））をエレクトロサーマル（登録商標）融点装置で測定し、修正しない。
旋光を10cmの光路長のセルを使用するパーキン・エルマー341偏光器で20℃で測定し、10-1degcm2g-1の単位で示す。サンプルを明記された濃度（g/100cm3で測定）で示された溶媒中で調製した。IRスペクトルをパーキン・エルマー・スペクトラム・ワンFT-IRスペクトロメータで記録した。サンプルを塩化ナトリウムディスク上の薄いフィルムとして、又は臭化カリウムディスク中の固体として調製した。ブロードシグナルをbrにより示した。吸収最大値としての周波数（ν）を波数（cm-1）で示す。
NMRスペクトルを周囲温度でブルカーAVANCE DRX400（1H, 400 MHz; 13C, 100 MHz）又はブルカーAVANCE 300 (1H, 300 MHz; 13C, 75 MHz)スペクトロメータで記録した。1H NMRデータについて、化学シフトをSiMe4から下方の磁場のppmで記載し、位置（δH）、相対積分、多重度（ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、dd＝二重線の二重線、ｍ＝多重線、br＝ブロード）、カップリング定数（J/Hz）及び帰属として連続して報告する。13C NMRについて、化学シフトをCDCl3に対しppmで記載し、位置（δC）、DEPT実験により測定した混成の程度、及び帰属として連続して報告する。1H NMRスペクトルについて、SiMe4（δ0.00）又はCDCl3（δ7.26）を内部基準として使用した。13C NMRスペクトルについて、CDCl3（δ77.0）を内部基準として使用した。２組のピークがグリシン-プロリンアミド結合のまわりの異なるコンホメーションのためにNMRスペクトル中に生じる場合、少量のcis配座異性体に関する化学シフトをアステリスク（*）でマークする。
正確な質量測定をVG-70SE質量スペクトロメータで記録した。
ヘキサン及びジクロロメタンを使用前に蒸留した。マグネシウムターニング及びヨウ素を使用して、メタノールを乾燥させ、窒素雰囲気下で蒸留した。トリエチルアミンを水素化カルシウムで乾燥させ、窒素雰囲気下で蒸留した。
オールテク・エコノスフェアーC18 RPカラム（150mm x 4.6mm）を使用して、分析HPLCをウォーターズ600系で行なった。水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）による５分間のフラッシ、続いて25分間にわたる水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）からアセトニトリルへの勾配溶離を1ml/分の流量で使用した。半分取精製のために、オールテク・エコノシルC18 RPカラム（250mm x 22mm）をイソクラチック条件、典型的には13ml/分の流量の80％の水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）：20％のアセトニトリルで使用した。
実施例１：(2S,3'S,8'S)-2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕ウンデシル)-8'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩の合成
【００３６】
【化９】
2006523213.tif 000010
【００３７】
スキーム１試薬、条件及び収率：(i)Boc2O、NaHCO3、H2O、ジオキサン、０℃〜室温、一夜（約72％）；(ii)DCC、HOBt、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、一夜（約23％）；(iii)KOtBu、イミダゾリウムリガンド、THF、２分間、次いでグラブス触媒、ベンゼン、80℃、35分間、次いで４、ベンゼン、45℃、48時間、次いでDMSO、一夜（58％）；(iv)1MNaOH水溶液、ジオキサン、H2O、室温、次いで６、BoP-Cl、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、20時間（69％、２工程）；(v)PtO2、H2、THF、室温16時間、次いでCF3CO2H、CH2Cl2、室温、５時間（81％）
N-tert-ブトキシ-(S)-アリルグリシン２
水／ジオキサン（1:1、v/v、4cm3）中のアリルグリシン１（0.1g、0.87ミリモル）及び炭酸水素ナトリウム（0.08g、0.96ミリモル）の溶液を０℃に冷却し、ジ-tert-ブチルジカーボネート（0.07g、0.32ミリモル）を添加し、その溶液を０℃で２時間撹拌した。次いでジ-tert-ブチルジカーボネート（0.07g、0.32ミリモル）を添加し、その溶液を０℃で更に２時間撹拌し、その時間後に更にジ-tert-ブチルジカーボネート（0.1g、0.46ミリモル）を添加し、その溶液を室温に温め、一夜撹拌した。ジオキサンを減圧で40℃で除去し、得られる残渣を水に溶解し、エーテルで洗浄し、水層を2M塩酸水溶液で酸性にし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（MgSO4）、濾過し、溶媒を真空で除去して粗カルバメート２（0.14g、約72％）を無色の油として得た。この物質をその後の工程にそのまま使用した。カルバメート２は回転異性体の73:27混合物であることが示された：δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.45 [9H, s, C(CH3)3], 2.51-2.63 [2H, m, CH2(アリル)], 4.19＊ (0.27H, br s, 2-H), 4.41 (0.73H, d, J 6.1, 2-H), 5.13-5.20 (2.73H, m, =CH2, N-H), 5.70-5.80 [1H, m, C(H)=CH2], 6.26 (0.27H, br s, N-H＊) 及び 9.16 (1H, br s, OH);  δC (100 MHz; CDCl3)  28.2 [CH3, C(CH3)3], 36.3 [CH2, CH2(アリル)], 52.7 (CH, 2-C), 54.2＊ (CH, 2-C), 80.2 [quat., C(CH3)3], 81.6＊ [quat., C(CH3)3], 119.2 (CH2, =CH2), 132.1 [CH, C(H)=CH2], 155.4 (quat., NCO2), 155.4＊ (quat., NCO2), 及び 176.1 (quat., 1-CO)
【００３８】
N-tert-ブチルオキシ-(S)-アリルグリシル-(S)-アリルプロリンメチルエステル４
N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド（0.1g、0.49ミリモル）を０℃のジクロロメタン（10cm3）中の(S)-アリルプロリンメチルエステル３（0.1g、0.49ミリモル）、N-tert-ブトキシ-(S)-アリルグリシン２（0.12g、0.54ミリモル）、N-ヒドロキシベンゾトリアゾール（0.065g、0.486ミリモル）及びトリエチルアミン（0.07cm3、0.486ミリモル）の撹拌溶液に添加した。その混合物を室温で一夜撹拌し、２時間冷凍し、セライトTMで濾過してジシクロヘキシル尿素を除去した。濾液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して油を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、4:1、3:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してジエン４（0.041g、約23％）を無色の油として得た。ジエン４は専らトランスGlyC(O)-NPro配座異性体として存在した：δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.43 [9H, s, C(CH3)3], 1.94-2.15 (4H, m, Proβ-H2, Proγ-H2), 2.35 [1H, p, J 7.1, アリル-HAHB(Pro)], 2.50 [1H, p, J 7.2, アリルHAHB(Pro)], 2.62 [1H, dd, J 14.0 及び 8.4, アリル-HAHB(Gly)], 3.18 [1H, dd, J 14.1 及び 6.5, アリル-HAHB(Gly)], 3.65-3.80 (5H, m, OCH3 及び Proδ-H2), 4.46 (1H, dd, J 15.4 及び 6.7, Glyα-H), 5.08-5.25 (5H, m, 2 x =CH2 及び N-H) 及び 5.63-5.86 (2H, m, 2 x C(H)=CH2); δC (100 MHz; CDCl3)  23.6 (CH2, Proγ-C), 28.2 [CH3, C(CH3)3], 35.0 (CH2, Proβ-C), 36.3 [CH2, CH2(アリル)Gly], 37.7 [CH2, CH2(アリル)Pro], 48.5 (CH2, Proδ-C), 51.6 (CH, Glyα-C), 52.2 (CH3, OCH3), 68.5 (quat., Proα-C), 79.6 [quat., C(CH3)3], 118.5 (CH2, =CH2), 119.1 (CH2, =CH2), 132.7 [CH, C(H)=CH2], 133.0 [CH, C(H)=CH2], 155.4 (quat., NCO2), 170.2 (quat., Gly-CO) 及び 173.7 (quat., Pro-CO)
【００３９】
(3S,8S)-1-アザ-3-(tert-ブチルオキシカルボニルアミノ)-8-メトキシカルボニル-2-オキソビシクロ〔6.3.0〕ウンデカ-5-エン５
乾燥テトラヒドロフラン（1cm3）中の新たに昇華させたカリウムtert-ブトキシド（0.0018g、0.0157ミリモル）の溶液を窒素雰囲気下で乾燥テトラヒドロフラン（2cm3）中の1,3-ビス(2,4,6-トリメチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾリウムテトラフルオロボレート（0.07g、0.0177ミリモル）の撹拌懸濁液に添加した。乾燥テトラヒドロフラン（1cm3）を使用して残っているカリウムtert-ブトキシドを反応フラスコからすすいだ。得られる懸濁液を２分間撹拌し、次いで乾燥ベンゼン（10cm3）中のビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（グラブス触媒）（0.010g、0.011ミリモル）の溶液を添加し、紫色の溶液を80℃で35分間加熱した。暗褐色の溶液を室温に冷却し、乾燥ベンゼン（40cm3）中のジエン４（0.041g、0.112ミリモル）の溶液を添加し、その混合物を45℃で48時間加熱した。褐色の溶液を室温に冷却し、ジメチルスルホキシド（0.043g、0.56ミリモル）を添加し、その混合物を一夜撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をクロマトグラフィー（SiO2、2:1、1:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してアルケン５（0.022g、58％）を緑色の油として得た。アルケン５は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した：[α]D -86.3 (c 0.183 、CH2Cl2中) [文献.2, -87.4 (c 0.35 、CHCl3中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.44 [9H, s, C(CH3)3], 1.66-1.86 (2H, m, 10-H2), 1.96-2.11 (2H, m, 9-HAHB 及び 4-HAHB), 2.46 (1H, dd, J 12.3 及び 6.1, 9-HAHB), 2.66 (1H, dd, J 14.8 及び 8.2, 7-HAHB), 2.80-2.90 (1H, m, 4-HAHB), 3.04 (1H, dd, J 15.1 及び 8.6, 7-HAHB), 3.40 (1H, ddd, J 11.6, 11.1 及び 7.4, 11-HAHB), 3.76-3.83 (1H, m, 11-HAHB), 3.78 (3H, s, OCH3), 4.97-5.04 (1H, m, 3-H), 5.52-5.63 (2H, m, 6-H 及び N-H) 及び 5.74-5.79 (1H, m, 5-H);  δC (100 MHz; CDCl3)  20.6 (CH2, 10-C), 28.2 [CH3, C(CH3)3], 35.0 (CH2, 7-C), 35.4 (CH2, 4-C), 38.4 (CH2, 9-C), 48.4 (CH2, 11-C), 50.8 (CH, 3-C), 53.0 (CH3, OCH3), 69.7 (quat., 8-C), 79.4 [quat., C(CH3)3], 122.8 (CH, 5-C), 132.2 (CH, 6-C), 154.8 (quat., NCO2), 171.5 (quat., 2-C) 及び 173.7 (quat., 8-CO)
【００４０】
(2S,3'S,8'S)-ジ-tert-ブチル2-{〔(1'-アザ-3'-(tert-ブチルオキシカルボニルアミノ)-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕ウンデカ-5'-エン)-8'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタジオエート７
ジオキサン（0.7cm3）中のアルケン５（0.022g、0.065ミリモル）の溶液に、1M水酸化ナトリウム水溶液（0.32cm3、0.32ミリモル）を添加し、その不透明の溶液を室温で17時間撹拌した。水を添加し、その混合物をジクロロメタンで洗浄した。水層をクエン酸で酸性にし、生成物をジクロロメタンで抽出した。有機層を溜め、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して油（0.020g）を得た。ジクロロメタン（4cm3）中のこの油の溶液に、L-グルタミン酸ジ-tert-ブチルエステルp-トルエンスルホネート６（0.025g、0.085ミリモル）を添加し、その溶液を０℃に冷却した。トリエチルアミン（0.017g、0.17ミリモル）及びビス(2-オキソ-3-オキサゾリジニル)ホスフィンクロリド（0.021g、0.085ミリモル）を添加し、その溶液を20時間撹拌した。その反応混合物を2M塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して油（0.041g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、1:1、2:3、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してアミド７（0.025g、２工程で69％）を無色の油として得た。アミド７は専らシスC(O)-NPro配座異性体として存在した：[α]D -49.6 (c 0.25 、CH2Cl2中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.40-1.44 [27H, m, 3 x C(CH3)3], 1.55-1.66 (1H, m), 1.78 (1H, p, J 6.4), 1.89 (1H, td, J 13.2 及び 6.1), 2.05-2.39 (5H, m), 2.65-2.75 (2H, m, 4'-H2), 2.80 (1H, dd, J 15.0 及び 7.9, 7'-HAHB), 2.92 (1H, dd, J 14.9 及び 8.9, 7'-HAHB), 3.55 (1H, ddd, J 11.8, 11.8 及び 7.0, 11'-HAHB), 3.65-3.70 (1H, m, 11'-HAHB), 4.40-4.46 (1H, m, 3'-H), 4.88-4.97 (2H, m, 6'-H 及び 2-H), 5.67-5.79 (2H, m, 5'-H 及び N-H) 及び 8.36 (1H, d, J 8.4, N-H); δC (100 MHz; CDCl3)  20.4 (CH2, 10'-C), 25.4 (CH2, 3-C), 27.9 [CH3, C(CH3)3], 28.0 [CH3, C(CH3)3], 28.2 [CH3, C(CH3)3], 31.5 (CH2, 4-C), 32.2 (CH2, 4'-C), 34.6 (CH2, 7'-C), 37.4 (CH2, 9'-C), 49.3 (CH2, 11'-C), 52.1 (CH, 3'-C), 52.8 (2-C), 71.8 (quat., 8'-C), 80.4 [quat., C(CH3)3], 81.1 [quat., C(CH3)3], 125.0 (CH, 5'-C), 130.2 (CH, 6'-C), 156.3 (quat., NCO2), 170.5 (quat., 2'-C), 171.9 (quat., 8'-CO), 171.2 (quat., 1-C) 及び 173.5 (quat., 5-C);  m/z (EI+) 565.3365 (M+. C29H47N3O8 は565.3363を要する)
【００４１】
(2S,3'S,8'S) 2-{〔(1'-アザ-3'-アミノ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕ウンデシル)-8'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩８
PtO2（0.001g、0.004ミリモル）を窒素雰囲気下でテトラヒドロフラン（4cm3）中のアミド７（0.025g、0.044ミリモル）の撹拌溶液に添加した。その混合物を17時間にわたって水素化し（１気圧の水素）、セライトTMで濾過し、溶媒を真空で除去した。残渣をジクロロメタン（3cm3）に溶解し、トリフルオロ酢酸（1cm3）を添加し、その溶液を室温で４時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、HPLC及びNMRによる分析は反応が不完全であることを示した。それ故、残渣をジクロロメタン-トリフルオロ酢酸（3:1、4cm3）に再度溶解し、その溶液を室温で2.5時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、残渣をRP HPLC〔20％のアセトニトリル：80％の水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）〕により精製して油を得、これをエーテル／トルエンからすり砕いて８（0.0167g、２工程で81％）を吸湿性の白色の固体として得た。巨大環８は専らシスC(O)-NPro配座異性体として存在した：
mp 75-85 ℃; [α]D -4.4 (c 0.16 、MeOH中); δH  (400 MHz; D2O) 1.30-1.39 (1H, m, 5'-HAHB), 1.57-1.65 (1H, m, 6'-HAHB), 1.79-1.91 (4H, m, 5'-HAHB, 6'-HAHB, 4'-HAHB 及び 10'-HAHB), 1.98-2.13 (4H, m, 4'-HAHB, 10'-HAHB, 7'-HAHB 及び 3-HAHB), 2.23-2.37 (4H, m, 9'-H2, 3-HAHB 及び 7'-HAHB), 2.53 (2H, t, J 7.5, 4-H2), 3.68 (1H, dt, J 14.2 及び 7.4, 11'-HAHB), 3.79 (1H, dt, J 14.0 及び 7.5, 11'-HAHB), 4.20 (1H, dd, J 11.2 及び 6.3, 3-H) 及び 4.53 (1H, dd, J 10.2 及び 4.9, 2-H);  δC (100 MHz; D2O)  20.4 (CH2, 10'-C), 21.2 (CH2, 6'C), 22.1 (CH2, 5'-C), 24.8 (CH2, 3-C), 30.3 (CH2, 4-C), 31.1 (CH2, 4'-C), 36.4 (CH2, 7'-C), 40.9 (CH2, 9'-C), 49.1 (CH2, 11'-C), 51.2 (CH, 3'-C), 52.4 (CH, 2-C), 70.9 (quat., 8'-C), 116.1 (quat., q, J 291, CF3), 162.7 (quat., q, J 36.0, CF3CO2H), 169.4 (quat., 2'-C), 174.6 (quat., 8'-CO), 175.3 (quat., 1-C) 及び 177.0 (quat., 5-C);  m/z (FAB+) 356.1830 [MH(遊離塩基)+. C16H16N3O6 は356.1822を要する]
実施例２：(2S,9'S,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩の合成
【００４２】
【化１０】
2006523213.tif 000011
【００４３】
スキーム１試薬、条件及び収率：(i)70％のHClO4水溶液、tert-BuOAc、室温、24時間（56％）；(ii)DMAP、Boc2O、CH3CN、室温、19時間（95％）；(iii)LiEt3BH、THF、-78℃、１時間、次いで30％のH2O2、０℃、0.5時間；(iv)Me3SiOTf、アリルトリブチルスズ、CH2Cl2、-78℃、２時間（70％、２工程）；(v)4M HCl、ジオキサン、０℃、１時間、次いで室温、40分間（72％）
【００４４】
【化１１】
2006523213.tif 000012
【００４５】
スキーム２試薬、条件及び収率：(vi)4M HCl、ジオキサン、０℃、１時間、次いで室温、40分間、ついで８、EDCI、CH2Cl2、Et3N、０℃〜室温、16時間（２工程にわたって64％）；(vii)９、グラブス触媒、CH2Cl2、還流、48時間、次いでDMSO、室温、24時間（42％）；(viii)PtO2、H2、THF、室温、16時間、次いで30％のHBr/HOAc、室温、２時間、次いでNaHCO3、H2O、ジオキサン、Boc2O、室温、３日（58％、３工程）；(ix)BoP-Cl、Et3N、０℃〜室温、17時間；(x)CH2Cl2、CF3CO2H、室温、６時間（55％、２工程）
【００４６】
【化１２】
2006523213.tif 000013
【００４７】
(S)-tert-ブチルピログルタメート10
過塩素酸（70％の水溶液、0.521cm3、6.05ミリモル）をtert-ブチルアセテート（12cm3、85.5ミリモル）中の(S)-ピログルタミン酸９（1g、7.75ミリモル）の撹拌懸濁液に滴下して添加した。その混合物を24時間撹拌し、次いで炭酸ナトリウム（0.80g、7.60ミリモル）を慎重に添加し、エーテルを添加し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び食塩水で洗浄した。水相を酢酸エチルで抽出し、乾燥させ（MgSO4）、濾過し、溶媒を除去して油を得、これに四塩化炭素を添加し、溶媒を真空で蒸発させて痕跡の酢酸を除去してエステル10（0.81g、56％）を白色の固体として得た：δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.48 [9H, s, C(CH3)], 2.33-2.45 (4H, m, 3-H2, 4-H2), 4.12-4.16 (1H, m, 5-H) 及び 6.16 (1H, br s, N-H); δC (75 MHz; CDCl3) 24.7 (CH2, 4-C), 27.8 [CH3, C(CH3)], 29.2 (CH2, 3-C), 55.9 (CH, 5-C), 82.3 [quat., C(CH3)], 170.9 (quat., 5-CO) 及び 177.7 (quat., 2-C)
【００４８】
(S)-tert-ブチルN-tert-ブトキシカルボニルピログルタメート11
アセトニトリル（40cm3）中のエステル10（0.85g、4.58ミリモル）及びジメチルアミノピリジン（0.056g、0.458ミリモル）の溶液に、ジ-tert-ブチルジカーボネート（1.12g、5.50ミリモル）を添加した。得られる溶液を室温で19時間撹拌し、真空で濃縮し、クロマトグラフィー（SiO2、4:1、3:1のヘキサン-酢酸エチル；勾配溶離）により精製してカルバメート11（1.24g、95％）を白色の固体として得た：mp 53-55 ℃ (文献54-56 ℃); δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.48 [9H, s, C(CH3)3], 1.50 [9H, s, C(CH3)3], 1.93-2.03 (1H, m), 2.16-2.35 (1H, m), 2.40-2.66 (2H, m) 及び 4.47 (1H, dd, J 9.4 2.7, 5-H); δC (75 MHz; CDCl3) 21.6 (CH2, 4-C), 27.8 [CH3, C(CH3)3], 31.0 (CH2, 3-C), 59.5 (CH, 5-C), 82.2 [quat., C(CH3)], 83.2 [quat., C(CH3)3], 149.2 (quat., NCO2), 170.3 (quat., 5-CO) 及び 173.4 (quat., 2-C)
【００４９】
N-tert-ブトキシカルボニル-5-アリル-L-プロリンtert-ブチルエステル13
乾燥テトラヒドロフラン（40cm3）中のカルバメート11（1.14g、3.98ミリモル）の撹拌溶液に、窒素雰囲気下で-78℃でリチウムトリエチルホウ水素化物（4.78cm3、4.78ミリモル）の１モル/Lのテトラヒドロフラン溶液を添加した。その溶液を１時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（10cm3）を添加し、冷却浴を除去した。温度を０℃に到達させ、30％の過酸化水素水溶液（30滴）を添加し、撹拌を０℃で30分間続けた。水層をエーテルで抽出し、合わせた有機抽出液を食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、濾過し、溶媒を除去してアルコール12（1.17g）を得、これは1H NMRにより測定して約８％の11を含んでいた。粗アルコール12を乾燥ジクロロメタン（20cm3）に溶解し、窒素雰囲気下で-78℃で乾燥ジクロロメタン（20cm3）中のトリメチルシリルトリフレート（1.44cm3、7.96ミリモル）及びアリルトリブチルスタナン（2.46cm3、7.96ミリモル）の撹拌溶液に滴下して添加した。その溶液を-78℃で２時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（15cm3）を添加し、反応液を室温に温めた。水層をジクロロメタンで抽出し、溜めた有機抽出液を乾燥させ（MgSO4）、濾過した。溶媒を真空で除去して油（3.855g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、8:1、7:1、ヘキサン-酢酸エチル；勾配溶離）により精製してトリブチルスタナン残渣で汚染された油（1.047g）を得た。更にクロマトグラフィー（SiO2、12:1、10:1、8:1、ヘキサン-酢酸エチル；勾配溶離）にかけてアルケン13（0.872g、２工程で70％）を無色の油として得た。アルケン13はC(2)/C(5)シス：トランス異性体の57:43混合物であることが示された：δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.41-1.45 [18H, m, 2 x C(CH3)3], 1.67-2.24 [5H, m, Proβ-H2, Proγ-H2 及び CHACHB(アリル)], 2.39-2.71 [1H, m, CHACHB(アリル)], 3.79-4.18 (2H, m, Proα-H 及び Proδ-H), 4.99-5.08 (2H, m, =CH2) 及び 5.67-5.85 [1H, m, C(H)=CH2]; δC (75 MHz; CDCl3) 26.6 (CH2, Proγ-C), 27.4 (CH2, Proγ-C), 27.8 (CH2, Proγ-C), 27.86 [CH3, C(CH3)3], 27.92 [CH3, C(CH3)3], 28.25 [CH3, C(CH3)3], 28.31 [CH3, C(CH3)3], 28.4 (CH2, Proβ-C), 29.4 (CH2, Proβ-C), 30.2 (CH2, Proβ-C), 38.1 [CH2, CH2(アリル)], 38.5 [CH2, CH2(アリル)], 38.98 [CH2, CH2(アリル)], 39.1 [CH2, CH2(アリル)], 57.4 (CH, Proδ-C), 58.0 (CH, Proδ-C), 60.6 (CH, Proα-C), 60.9 (CH, Proα-C), 79.5 [quat., C(CH3)3], 79.6 [quat., C(CH3)3], 80.7 [quat., C(CH3)3], 80.74 [quat., C(CH3)3], 116.9 (CH2, =CH2), 116.99 (CH2, =CH2), 117.0 (CH2, =CH2), 135.12 (CH, C(H)=CH2), 135.2 (CH, C(H)=CH2), 135.5 (CH, C(H)=CH2), 153.7 (quat., NCO2), 153.8 (quat., NCO2), 154.3 (quat., NCO2), 172.1 (quat., Proα-CO), 172.2 (quat., Proα-CO) 及び 172.3 (quat., Proα-CO); m/z (EI+) 312.2171 (M+. C17H30NO4 は312.2175を要する)
【００５０】
(1S,2S)-5-アリルプロリンtert-ブチルエステル（トランス）14及び(1S,2R) 5-アリルプロリンtert-ブチルエステル（シス）15
アルケン13（0.24g、0.77ミリモル）に、０℃でジオキサン（4cm3）中の塩化水素の４モル/Lの溶液を添加した。その溶液を０℃で１時間、次いで室温で40分間撹拌し、その時間後に反応が完結した（tlcによる）。その混合物を０℃に冷却し、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液で中和し、生成物をジクロロメタンで抽出した。溶媒を真空で除去して油（0.142g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、2:1、5:4、1:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製して(i)アミン14（トランス）（0.051g、31％）を無色の油として得た。この化合物はδ83.70にあるProα-H原子とδ3.26にあるProδ-H原子の間にNOEを示さなかった：[α]D -31 (c 0.47 、CH2Cl2中); δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.35-1.41 (1H, m, Proγ-HAHB), 1.43 [9H, m, C(CH3)3], 1.72-1.90 (2H, Proγ-HAHB 及び ProβHAHB), 2.11-2.20 [3H, m, ProβHAHB 及び CH2(アリル)], 2.47 (1H, s, N-H), 3.26 (1H, p, J 6.5, Proδ-H), 3.70 (1H, dd, J 8.5 及び 5.9, Proα-H), 4.98-5.10 (2H, m, =CH2) 及び 5.73-5.84 [1H, m, C(H)=CH2];  δC (75 MHz; CDCl3)  27.9 [CH3, C(CH3)3], 29.5 (CH2, Proβ-C), 30.7 (CH2, Proγ-C), 40.8 [CH2, CH2(アリル)], 57.6 (CH, Proδ-C), 59.7 (CH, Proα-C), 80.7 [quat., C(CH3)3], 116.1 (CH2, =CH2), 136.0 [CH, C(H)=CH2], 及び 174.9 (quat., Proα-CO); (ii)無色の油としてのアミン15（シス）（0.066g、41％）。この化合物はδ3.57-3.62にあるProα-H原子とδ3.03-3.12にあるProδ-H原子の間にNOEを示した：[α]D -22.1 (c 0.66 、CH2Cl2中);  δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.24-1.30 (1H, m, Proγ-HAHB), 1.42 [9H, m, C(CH3)3], 1.78-1.87 (2H, Proγ-HAHB 及び Proβ-HAHB), 1.98-2.07 (1H, m, Proβ-HAHB), 2.18-2.31 [3H, m, CH2(アリル) 及び N-H], 3.03-3.12 (1H, m, Proδ-H), 3.57-3.62 (1H, m, Proα-H), 4.99-5.1 (2H, m, =CH2) 及び 5.72-5.86 [1H, m, C(H)=CH2]; δC (75 MHz; CDCl3)  27.9 [CH3, C(CH3)3], 30.4 (CH2, Proβ-C), 31.1 (CH2, Proγ-C), 39.9 [CH2, CH2(アリル)], 59.1 (CH, Proδ-C), 60.5 (CH, Proα-C), 80.8 [quat., C(CH3)], 116.5 (CH2, =CH2), 135.5 [CH, C(H)=CH2], 及び 174.3 (quat., Proα-CO); m/z (CI+) 212.1647 (MH+. C12H22NO2 は212.1651を要する)
【００５１】
(1S,2S)-N-アリル-N-ベンジルオキシカルボニルグリシン-5-アリルプロリンtert-ブチルエステル（トランス）18及び(1S,2R) N-アリル-N-ベンジルオキシカルボニルグリシン-5-アリルプロリンtert-ブチルエステル（シス）17
アルケン13（0.87g、0.77ミリモル）に、０℃でジオキサン（4cm3）中の塩化水素の4M溶液を添加した。その溶液を０℃で１時間、次いで室温で35分間撹拌し、その時間後に反応が完結した（tlcによる）。その混合物を０℃に冷却し、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液で中和し、生成物をジクロロメタンで抽出した。溶媒を真空で除去して油（0.568g）を得、これをジクロロメタン（30cm3）に溶解した。これに、トリエチルアミン（0.54cm3、4.0ミリモル）、N-アリル-N-ベンジルオキシカルボニルグリシン16（1.0g、4.0ミリモル）及び1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(EDCI)（0.77g、4.0ミリモル）を０℃で添加し、その溶液を16時間撹拌した。その混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、濾過し、溶媒を除去して油（1.7g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、5:1、4:1、3:1、2:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製して(i)ジエン18（トランス）（0.29g、24％）を無色の油として得た。ジエン18はGlyC(O)-NPro配座異性体の1:1のトランス：シス混合物であることが示された。加えて、GlyN-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の1:1混合物をもたらすと観察された：〔α〕D 56.1 (c 0.77、CH2Cl2中)：
【００５２】
δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.43 [9H, s, C(CH3)3], 1.46 [9H, s, C(CH3)3], 1.48 [9H, s, C(CH3)3], 1.74-2.71 [6H, m, Proβ-H2, Proγ-H2 及び CH2(アリル)], 3.54 (0.5H, d, J 16.5, Glyα-HAHB), 3.58 (0.5H, d, J 16.5, Glyα-HAHB), 3.84-4.40 [5H, m, Glyα-H, CH2(アリル), Proα-H 及び Proδ-H], 4.98-5.25 (6H, m, OCH2Ph 及び 2 x =CH2), 5.56-5.88 [2H, m, 2 x C(H)=CH2] 及び 7.30-7.37 (5H, m, Ph); δC (100 MHz; CDCl3)  25.8 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 25.9 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 26.16 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 26.2 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 27.8 [CH3, C(CH3)3], 28.3 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 29.3 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 29.4 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 36.9 [CH2, CH2(アリル)], 37.0 [CH2, CH2(アリル)], 39.0 [CH2, CH2(アリル)], 39.3 [CH2, CH2(アリル)], 47.4 (CH2, Glyα-C), 47.6 (CH2, Glyα-C), 47.8 (CH2, Glyα-C), 48.1 (CH2, Glyα-C), 50.14 [CH2, NCH2(アリル)], 50.18 [CH2, NCH2(アリル)], 50.7 [CH2, NCH2(アリル)], 50.8 [CH2, NCH2(アリル)], 56.9 (CH, Proδ-C), 57.1 (CH, Proδ-C), 58.2 (CH, Proδ-C), 58.3, (CH, Proδ-C), 60.0 (CH, Proα-C), 60.1 (CH, Proα-C), 60.2 (CH, Proα-C), 60.3 (CH, Proα-C), 67.3 (CH2, OCH2Ph), 67.4 (CH2, OCH2Ph), 81.1 [quat., C(CH3)3], 82.3 [quat., C(CH3)3], 116.9 (CH2, =CH2), 117.1 (CH2, =CH2), 117.2 (CH2, =CH2), 117.6 (CH2, =CH2), 117.7 (CH2, =CH2), 118.1 (CH2, =CH2), 118.2, (CH2, =CH2), 127.6 (CH, Ph), 127.8 (CH, Ph), 127.9 (CH, Ph), 128.2 (CH, Ph), 128.3 (CH, Ph), 133.3 [CH, C(H)=CH2], 133.4 [CH, C(H)=CH2], 133.6 [CH, C(H)=CH2], 133.8 [CH, C(H)=CH2], 134.9 [CH, C(H)=CH2], 135.0 [CH, C(H)=CH2], 136.5 (quat., Ph), 156.0 (quat., NCO2), 156.37 (quat., NCO2), 156.42, (quat., NCO2), 167.1 (quat., Gly-CO), 167.3 (quat., Gly-CO), 167.4 (quat., Gly-CO), 167.6 (quat., Gly-CO) 及び 170.9 (quat., Proα-CO), 171.0 (quat., Proα-CO), 171.1 (quat., Proα-CO); m/z (EI+) 442.2455 (M+. C25H34N2O5 は442.2468を要する)；(ii)17と18の混合物（0.044g、４％）；(iii)無色の油としてのジエン17（シス）（0.424g、36％）。ジエン17はGlyC(O)-NPro配座異性体の1:1のトランス：シス混合物であることが示された。加えて、GlyN-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の1:1混合物をもたらすと観察された：
【００５３】
[α]D -39.2 (c 0.57 、CH2Cl2中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.43 [9H, s, C(CH3)3], 1.45 [9H, s, C(CH3)3], 1.47 [9H, s, C(CH3)3], 1.49 [9H, s, C(CH3)3], 1.69-2.49 [5.75H, m, Proβ-H2, Proγ-H2 及び CH2(アリル)], 2.78-2.84 [0.25H, m, CH2(アリル)], 3.61-4.41 [6H, m, GlyαH2, CH2(アリル], Proα-H 及び Proδ-H), 5.02-5.12 (6H, m, OCH2Ph  及び 2 x =CH2), 5.67-5.87 [2H, m, 2 x C(H)=CH2] 及び 7.29-7.34 (5H, m, Ph); δC (100 MHz; CDCl3)  26.5 (CH2, Proβ-C), 27.7 [CH3, C(CH3)3], 27.8 [CH3, C(CH3)3], 27.9 [CH3, C(CH3)3], 29.4 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 29.6 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 29.7 (CH2, Proβ-C 又は Proγ-C), 37.65 [CH2, CH2(アリル)], 37.7 [CH2, CH2(アリル)], 38.9 [CH2, CH2(アリル)], 47.2 (CH2, Glyα-C), 47.6 (CH2, Glyα-C), 47.7 (CH2, Glyα-C), 48.0 (CH2, Glyα-C), 50.2 [CH2, NCH2(アリル)], 50.3 [CH2, NCH2(アリル)], 50.8 [CH2, NCH2(アリル)], 50.9 [CH2, NCH2(アリル)], 57.8 (CH, Proδ-C), 58.5 (CH, Proδ-C), 60.2, 60.4 (CH, Proα-C), 60.5 (CH, Proα-C), 67.3 (CH2, OCH2Ph), 67.4 (CH2, OCH2Ph), 81.0 [quat., C(CH3)3], 82.2 [quat., C(CH3)3], 116.9 (CH2, =CH2), 117.0 (CH2, =CH2), 117.5 (CH2, =CH2), 118.0 (CH2, =CH2), 127.6 (CH, Ph), 127.8 (CH, Ph), 127.9 (CH, Ph), 128.0 (CH, Ph), 128.3 (CH, Ph), 133.3 [CH, C(H)=CH2], 133.4 [CH, C(H)=CH2], 133.5 [CH, C(H)=CH2], 133.6 [CH, C(H)=CH2], 134.1 [CH, C(H)=CH2], 134.3 [CH, C(H)=CH2], 134.8 [CH, C(H)=CH2], 134.9 [CH, C(H)=CH2], 136.5 (quat., Ph), 155.8 (quat., NCO2), 155.9 (quat., NCO2), 156.38 (quat., NCO2), 156.44 (quat., NCO2), 166.95 (quat., Gly-CO), 167.01 (quat., Gly-CO), 167.4 (quat., Gly-CO), 167.5 (quat., Gly-CO), 171.0 (quat., Proα-CO), 172.2 (quat., Proα-CO) 及び 171.3 (quat., Proα-CO); m/z (EI+) 442.2462 (M+. C25H34N2O5 は442.2468を要する)
【００５４】
(6Z,9S,12S) N-ベンジルオキシカルボニル-1,4-ジアザ-12-tert-ブトキシカルボニル-2-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデカ-6-エン19
乾燥ジクロロメタン（56cm3）中のジエン17（0.10g、0.23ミリモル）の脱気溶液に、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（グラブス触媒）（0.018g、0.023ミリモル）を窒素雰囲気下で添加し、得られる紫色の溶液を24時間にわたって加熱、還流した。更にビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（0.018g、0.023ミリモル）を添加し、還流を24時間続け、次いで反応混合物を室温に冷却し、ジメチルスルホキシド（0.160cm3、2.3ミリモル）を添加し、オレンジ色／褐色の溶液を24時間撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をクロマトグラフィー（SiO2、3:1、2:1、1:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製して殆ど無色の油を得、これをクロマトグラフィー（C18 RPシリカ、100:0、9:1、9:3、1:1、1:9、水-アセトニトリル）により更に精製してアルケン19〔0.039g、42％（回収した出発物質に基づいて60％）〕を無色の油として得た。アルケン19は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した。加えて、N-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の1:1混合物をもたらすことが観察された：[α]D -118.2 (c 0.34 、CH2Cl2中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.46 [9H, s, C(CH3)3], 1.74 (1H, dd, J 11.8 及び 5.7, 10-HAHB), 1.93 (1H, dd, J 12.5 及び 6.5, 11-HAHB), 2.11-2.45 (4H, m, 8-H2, 10-HAHB 及び 11-HAHB), 3.53 (1H, dd, J 15.7 及び 8.0, 5-HAHB), 4.13-4.37 (4H, m, 3-H2, 9-H 及び 12-H), 4.50 (1H, d, J 15.4, 5-HAHB), 5.12-5.29 (2H, m, OCH2Ph), 5.54-5.82 (2H, m, 6-H 及び 7-H) 及び 7.31-7.43 (5H, m, Ph); δC (100 MHz; CDCl3)  26.7 (CH2, 11-C), 27.8 [CH3, C(CH3)3], 34.0 (CH2), 34.2 (CH2), 34.3 (CH2), 34.4 (CH2), 43.9 (CH2, 5-C), 44.5 (CH2, 5-C), 48.5 (CH2, 3-C), 49.5 (CH2, 3-C), 57.2 (CH, 9-C), 57.6 (CH, 9-C), 60.1 (CH, 12-C), 67.6 (CH2, OCH2Ph), 81.2 [quat., C(CH3)3], 126.8 (CH, 6-C), 126.9 (CH, 6-C), 128.0 (CH, Ph), 128.4 (CH, Ph), 128.7 (CH, Ph), 129.9 (CH, 7-C), 136.3 (quat., Ph), 136.4 (quat., Ph), 155.7 (quat., NCO2), 167.8 (quat., 2-C), 167.9 (quat., 2-C) 及び 170.7 (quat., 12-CO); m/z (EI+) 414.2157 (M+. C23H30N2O5 は414.2155を要する)
【００５５】
(9s,12s)-1,4-ジアザ-4-tert-ブチルオキシカルボニル-2-オキソ-ビシクロ〔7.3.0〕ドデシル-12-カルボン酸20
テトラヒドロフラン（4cm3）中のアルケン19（0.11g、0.263ミリモル）の撹拌溶液に、窒素流のもとに酸化白金（0.006g、0.026ミリモル）を添加した。その混合物を16時間にわたって水素化し（１気圧の水素）、セライトTMで濾過し、溶媒を真空で除去した。残渣を酢酸（3cm3）中30％の臭化水素酸の溶液に溶解し、室温で２時間撹拌した。揮発物を真空で40℃で除去し、続いてメタノール：水(3:1)から繰り返し蒸発させて臭化水素酸塩を得、これを飽和炭酸水素ナトリウム溶液（3cm3）に溶解した。ジオキサン（2cm3）及びジ-tert-ブチルジカーボネート（0.07g、0.32ミリモル）を添加し、得られる懸濁液を24時間撹拌し、次いで更にジ-tert-ブチルジカーボネート（0.07g、0.32ミリモル）を添加し、撹拌を更に48時間続けた。水（10cm3）を添加し、その溶液をジクロロメタンで洗浄し、水層を2M塩酸水溶液で酸性にし、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して油（0.072g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、1:1:0.3、ヘキサン-酢酸エチル：酢酸）により精製して酸20（0.05g、58％）を無色の油として得た。酸20は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した。
【００５６】
加えて、N-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の72:28混合物をもたらすことが観察された：[α]D +3.5-4.4 (c 0.23 、CH2Cl2中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.30-1.48 [11H, m, C(CH3)3, 8-HAHB 及び 11-HAHB], 1.63-1.79 (5H, m, 8-HAHB, 6-H2 及び 7-H2), 2.01-2.07 (1H, m, 11-HAHB), 2.12-2.32 (2H, m, 10-H2), 2.62-2.85 (1H, m, 5-HAHB), 3.73-3.83 (1.28 H, 3-HAHB 及び 5-HAHB＊), 4.0 (0.72H, br d, J 14.2, 5-HAHB), 4.20-4.32 (1H, m, 9-H), 4.41＊ (0.28H, d, J 8.0, 12-H), 4.50 (0.72H, d, J 8.8, 12-H), 4.57 (0.72H, d, J 17.8, 3-HAHB), 4.69＊ (0.28H, d, J 16.5, 3-HAHB) 及び 8.40 (1H, br s, OH); δC (100 MHz; CDCl3)  22.1 (CH2, 7-C), 22.6＊ (CH2, 7-C), 25.1 (CH2, 11-C), 25.7＊ (CH2, 11-C), 26.6 (CH2, 6-C), 28.1 [CH3, C(CH3)3], 28.3＊ [CH3, C(CH3)3], 32.5 (CH2, 10-C), 32.7＊ (CH2, 10-C), 35.9＊ (CH2, 8-C), 36.3 (CH2, 8-C), 50.3＊ (CH2, 5-C), 51.8 (CH2, 5-C), 54.9＊ (CH2, 3-C), 55.4 (CH, 9-C), 56.0＊ (CH, 9-C), 56.3 (CH2, 3-C), 60.5＊ (CH, 12-C), 60.8 (CH, 12-C), 80.6＊ [quat., C(CH3)3], 81.0 [quat., C(CH3)3], 155.2 (quat., NCO2), 155.5＊ (quat., NCO2), 169.5＊ (quat., 2-C), 169.8 (quat., 2-C), 174.9 (quat., 12-CO) 及び 175.1＊ (quat., 12-CO); m/z (EI+) 326.1837 (M+. C16H26N2O5 は326.1842を要する)
【００５７】
(2S,9'S,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩22
ビス(2-オキソ-3-オキサゾリジニル)ホスフィンクロリド（BoP-Cl）（0.057g、0.225ミリモル）を０℃でジクロロメタン（5cm3）中の酸10（0.05g、0.15ミリモル）、L-グルタミン酸ジ-tert-ブチルエステル塩酸塩21（0.062g、0.21ミリモル）及びトリエチルアミン（0.061cm3、0.44ミリモル）の溶液に添加した。その混合物を17時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して油（0.108g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、1:1、1:2、1:3、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してグルタメート／ビス(2-オキソ-3-オキサゾリジニル)ホスフィンクロリド付加物で汚染された所望のアミドの分離できない混合物（0.074g）を得た。その混合物をジクロロメタン（5cm3）に溶解し、トリフルオロ酢酸（2cm3）を添加し、その溶液を４時間撹拌した。次いで更にトリフルオロ酢酸（1cm3）を添加し、撹拌を２時間続けた。揮発物を真空で除去し、残渣を水に懸濁させ、綿ウールの栓で濾過した。続いて濾液をRP-HPLC〔水（0.05％のトリフルオロ酢酸）：アセトニトリル、90:10、13ml/分〕により精製してトリフルオロ酢酸塩22（0.039g、20から55％）をジエチルエーテル／トルエンからのすり砕き後に白色の固体として得た。巨大環22は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した：mp 50-100 ℃; [α]D -22.3 (c 0.35 、MeOH中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.68-2.04 (9H, m, 7'-H2, 6'-H2, 10'-H2, 3'-HAHB, 8'-HAHB 及び 11'-HAHB), 2.19-2.26 (2H, 8'-HAHB 及び 3'-HAHB), 2.42-2.48 (1H, m, 11'-HAHB), 2.50-2.58 (2H, m, 4-H2), 3.04 (1H, td, J 11.2 及び 2.5, 5'-HAHB), 3.33 (1H, dt, J 14.1 及び 4.9, 5'-HAHB), 3.82 (1H, d, J 14.1, 3'-HAHB), 4.32 (1H, d, J 14.0, 3'-HAHB), 4.38-4.45 (2H, m, 9'-H 及び 2-H) 及び 4.59 (1H, dd J 9.6 及び 1.8, 12'-H); δC (100 MHz; CDCl3) 25.6 (CH2, 6'-C 又は 7'-C), 26.0 (CH2, 6'-C 又は 7'-C), 28.1 (CH2, 3-C), 29.9 (CH2, 11'-C), 32.3 (CH2, 4-C), 34.0 (CH2, 10'-C 又は 8'-C), 35.2 (CH2, 10'-C 又は 8'-C), 46.9 (CH2, 5'-C), 48.7 (CH2, 3'-C), 54.3 (CH, 2-C), 62.9 (CH, 12'-C), 64.6 (CH, 9'-C), 118.6 (quat., q, J 291, CF3), 165.1 (quat., q, J 36.2, CF3CO2H), 167.9 (quat., 2'-C), 175.9 (quat., 12'-CO), 177.1 (quat., 1-C), 及び 179.4 (quat., 5-C);  m/z (FAB+) 356.1824 [MH(遊離塩基)+. C16H26N3O6 は356.1822を要する]
実施例３：(3S,8R,10S,13S) 3-アミノ-1,11-ジアザ-8,10-カルボキシ-2,12-オキソビシクロ〔13.3.0〕ヘキサデカントリフルオロ酢酸塩の合成
【００５８】
【化１３】
2006523213.tif 000014
【００５９】
スキーム１試薬、条件及び収率：(i)KOH、BnCl、iPrOH、40℃、5.5時間（78％）：(ii)SOCl2、CH2Cl2、Et3N、-30℃、次いで2-アミノベンゾフェノン、室温、一夜（43％）；(iii)KOH、グリシン、Ni(NO3)2・6H2O、60℃、75分間（78％）；(iv)NaOH、臭化アリル、CH3CN、2.5時間、室温（68％）；(v)2M HCl水溶液、MeOH、80℃、１時間、（84％）
【００６０】
【化１４】
2006523213.tif 000015
【００６１】
スキーム２試薬、条件及び収率：(i)BnOCOCl、Na2CO3、H2O/ジオキサン、０℃〜室温、17時間（53％）；(ii)DCC、HOBt、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、一夜、次いで1M NaOH水溶液、ジオキサン、室温、24時間（２工程にわたって64％）；(iii)TFA、CH2Cl2、０℃、２時間(iv)31、EtOCOCl、Et3N、CH2Cl2、０℃、40分間、次いで33、０℃〜室温、一夜（60％）；(v)グラブス触媒、CH2Cl2、還流、48時間次いでDMSO、24時間；(vi)10％のPd/C、H2、THF/H2O(4:1)、室温、21時間又は10％のPtO2、H2、THF、室温、16時間次いで10％のPd/C、H2、MeOH/H2O(4:1)、室温、５時間（34から58％）
N-ベンジル-L-プロリン塩酸塩24(BP)
イソプロパノール（50cm3）中のL-プロリン23（6.0g、52.1ミリモル）及び水酸化カリウム（85％、11.1g、198ミリモル）の懸濁液を殆ど溶解されるまで40℃で加熱した。塩化ベンジル（9.2cm3、79.7ミリモル）を滴下して添加し、その間に内部温度が70℃に上昇した。添加を停止し、40℃の内部温度が得られるまで反応フラスコを氷浴に入れ、次いで添加を40℃で続けた。乳白色の懸濁液を40℃で5.5時間撹拌し、室温に冷却し、pH=4が得られるまで32％の塩酸で中和した。クロロホルム（50cm3）を添加し、その懸濁液を０℃で一夜貯蔵し、白色の固体を濾過により除去した。濾液を真空で濃縮し、アセトン中で懸濁させ、固体を濾過し、空気乾燥してBP24（9.842g、78％）を白色の固体として得た：
mp 173-176 ℃ (分解) (文献, 174-175, 遊離塩基) [α]D -22.9 (c 0.20 、H2O中) (文献1 , -25.8 c 1 、EtOH中, 遊離塩基); δH  (300 MHz; D2O)  1.91-2.21 (3H, Proγ-H2, Proβ-HAHB), 2.47-2.60 (1H, m, Proβ-HAHB), 3.27-3.36 (1H, m, Proδ-HAHB), 3.60-3.67 (1H, m, Proδ-HAHB), 4.14 (1H, dd, J 9.3 7.0, Proα-H), 4.37 (1H, d, J 12.9, NCHAHBPh), 4.44 (1H, d, J 12.9, NCHAHBPh) 及び 7.45-7.54 (5H, m, Ph); δC (75 MHz; D2O)  22.4 (CH2, Proγ-C), 28.4 (CH2, Proβ-C), 54.6 (CH2, Proδ-C), 58.3 (CH2, NCH2Ph), 67.1 (CH, Proα-C), 129.0, 130.4 (CH, Ph), 129.6  (quat., Ph), 129.9 (CH, Ph) 及び 172.4 (quat., Proα-CO)
【００６２】
(S)-2-〔N-(N'-ベンジルプロピル)アミノ〕ベンゾフェノン25(BPB)
乾燥ジクロロメタン（70cm3）中のBP24（10.567g、43.84ミリモル）及びトリエチルアミン（5.9cm3、43.84ミリモル）の不透明な溶液に、塩化チオニル（4.3cm3、58.5ミリモル）を５分間にわたって-30℃で添加した。得られるオレンジ色の懸濁液を30分間にわたって-10℃に温め、この温度で30分間撹拌し、-30℃に冷却した。乾燥ジクロロメタン（30cm3）中の2-アミノベンゾフェノン（5.76g、29.2ミリモル）の溶液を５分間にわたって添加し、その黄色-オレンジ色の溶液を室温で一夜撹拌した。その混合物を０℃に冷却し、水（50cm3）中の炭酸ナトリウム（9.1g）の溶液を慎重に添加した。ガスの発生が停止した後、有機層を除去し、水層をジクロロメタンで抽出し、合わせた抽出液を乾燥させた（MgSO4）。溶媒を蒸発させ、最初にクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：エーテル、4:1、3:1、1:1）〔2-アミノベンゾフェノンの殆どを除去するため〕により精製して固体（6.405g）を得、これは1H NMRによれば10％の2-アミノベンゾフェノンを含んでいた。沸騰ヘキサンから再結晶してBPB25（5.218g、46％）を黄色の結晶として得た：mp 99-102 ℃(文献, 101-102 ℃); [α]D -129.1 (c 0.12 、MeOH中) (文献, -134 c 1 、MeOH中); δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.78-2.04 (3H, Proγ-H2, Proβ-HAHB), 2.21-2.47 (2H, m, Proβ-HAHB, Proδ-HAHB), 3.22-3.24 (1H, m, Proδ-HAHB), 3.34 (1H, dd, J 10.1 及び 4.6, Proα-H), 3.61 (1H, d, J 12.9, NCHAHBPh), 3.94 (1H, d, J 12.9, NCHAHBPh), 7.08-7.65 (12H, m, Ph), 7.81 (2H, d, J 8.2, Ph) 及び 11.6 (1H, s, N-H);  δC (75 MHz; CDCl3)  24.1 (CH2, Proγ-C), 30.9 (CH2, Proβ-C), 53.8 (CH2, Proδ-C), 59.8 (CH2, NCH2Ph), 68.2 (CH, Proα-C), 121.4, 122.7 (CH, Ph), 125.2  (quat., Ph), 127.1, 128.1, 128.2, 129.0, 130.0, 132.4, 132.5, 133.3 (CH, Ph), 138.0, 138.5, 139.0 (quat., Ph), 174.6 (quat., Pro-CON) 及び 198.0 (quat., Ph2CO)
【００６３】
Gly-Ni-BPB錯体26
メタノール（30cm3）中の水酸化カリウム（4.56g、81.3ミリモル）の溶液を50℃で窒素雰囲気下でBPB25（4.46g、11.61ミリモル）、グリシン（4.36g、58.07ミリモル）及び硝酸ニッケル６水和物（6.93g、23.2ミリモル）の懸濁液に添加した。その混合物を60℃で75分間加熱し、室温に冷却し、酢酸（4.65cm3、81.3ミリモル）を添加した。次いで水（150cm3）を添加し、その混合物を室温で２時間放置した。生成物をジクロロメタンで抽出して暗赤色のシロップを得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン：アセトン、7:1、6:1、4:1、3:1、2:1）により精製して粗生成物を得、これを-20℃で酢酸エチルから再結晶して錯体26（4.377g、78％）を赤色の固体として得た：
mp 226-228 ℃(文献, 208-212 ℃); [α]D +2010.6 (c 0.104 、MeOH中) (文献, +2006 c 0.1 、MeOH中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  2.03-2.20 (2H, Proγ-HAHB, Proδ-HAHB,), 2.38-2.49 (1H, m, Proβ-HAHB), 2.55 (1H, m, Proβ-HAHB), 3.30-3.42 (1H, m, Proγ-HAHB), 3.48 (1H, dd, J 10.7 及び 5.4, Proα-H), 3.66-3.75 (3H, m, Proδ-HAHB, NCHAHBPh, Glyα-HAHB), 3.79 (1H, d, J 20.1, Glyα-HAHB), 4.49 (1H, d, J 12.9, NCHAHBPh), 6.71 (1H, t, J 7.2, Ph), 6.81 (1H, dd, J 8.2 及び 1.5, Ph), 6.93-7.00 (1H, m, Ph), 7.11 (1H, br d, J 7.2, Ph), 7.20-7.24 (1H, m, Ph), 7.32 (1H, t, J 7.5, Ph), 7.44 (2H, t, J 7.52, Ph), 7.51-7.57 (3H, m, Ph), 8.09 (2H, d, J 7.4, Ph) 及び 8.30 (1H, d, J 8.6, Ph);  δC (100 MHz; CDCl3)  23.6 (CH2, Proγ-C), 30.6 (CH2, Proβ-C), 57.4 (CH2, Proδ-C), 61.2 (CH2, Glyα-C), 63.1 (CH2, NCH2Ph), 68.9 (CH, Proα-C), 120.8, 124.2 (CH, Ph), 125.1  (quat., Ph), 125.6, 126.2, 128.8, 129.0, 129.3, 129.5, 129.6, 131.6, 132.1, 133.1 (CH, Ph), 133.3, 134.5, 142.5 (quat., Ph), 171.5 (quat., C=N), 177.7 (quat., Glyα-CO) 及び 181.3 (quat., Pro-CON)
【００６４】
アリルGly-Ni-BPB錯体27
粉末水酸化ナトリウム（0.733g、18.34ミリモル）及び臭化アリル（2.06cm3、22.0ミリモル）を窒素雰囲気下で乾燥アセトニトリル（160cm3）中の錯体26（3.6g、7.33ミリモル）の撹拌溶液に添加した。その混合物を室温で2.5時間撹拌し、0.1M塩酸水溶液（100cm3）を添加し、生成物をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン：アセトン、2:1）により精製してジアステレオマーの混合物（1.468g）及び一種のジアステレオマー（2.174g）を得た。両方の画分を-20℃で酢酸エチルから再結晶して所望の化合物（1.9g）を得た。更なる化合物を母液（0.766g）からの結晶化から得て、アリル錯体27（2.676g、68％）を赤色の固体（単一ジアステレオマー）として得た：
mp 216-219 ℃(文献, 217 ℃); δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si)  2.0-2.16 (2H, m, Proγ-HAHB, Proδ-HAHB,), 2.36-2.55 [3H, m, Proβ-HAHB, CH2(アリル)], 2.74-2.83 (1H, m, Proβ-HAHB), 3.41-3.61 (4H, m, Proγ-HAHB, Proα-H, Proδ-HAHB, NCHAHBPh), 4.01 (1H, dd, J 6.3 及び 4.1, Glyα-H), 4.42 (1H, d, J 12.6, NCHAHBPh), 5.17 (1H, d, J 17, =CHAHB), 5.38 (1H, d, J 10, =CHAHB), 6.36-6.50 (1H, m, C(H)=CH2), 6.61-6.68 (2H, m, Ph), 6.94 (1H, d, J 7.0, Ph), 7.11-7.54 (8H, m, Ph), 8.03 (2H, d, J 7.4, Ph) 及び 8.17 (1H, d, J 8.7, Ph);  δC (75 MHz; CDCl3)  23.3 (CH2, Proγ-C), 30.8 (CH2, Proβ-C), 38.5 [CH2, CH2(アリル)], 56.9 (CH2, Proδ-C), 63.1 (CH2, NCH2Ph), 70.27, 70.34 (CH, Proα-C, Glyα-C), 119.7 (CH2, =CH2), 120.6, 123.6 (CH, Ph), 126.4 (quat., Ph), 127.0, 127.7, 128.8, 128.9, 129.0, 129.8, 131.5, 132.1, 132.2, (CH, C(H)=CH2, Ph), 133.2, (quat., Ph), 133.3 (CH, Ph), 133.9, 142.5 (quat., Ph), 170.8 (quat., C=N), 178.8 (quat., Glyα-CO) 及び 180.3 (quat., Pro-CON)
【００６５】
(S)-アリルグリシン28
メタノール（78cm3）中のアリル錯体27（2.520g、4.69ミリモル）及び2M塩酸水溶液（54cm3）の混合物を１時間加熱した（油浴80℃）。明緑色の溶液を室温に冷却し、28％のアンモニア溶液をpH=9-10まで添加した。水層をジクロロメタンで抽出してBPB（1.82g、100％回収）を回収し、水層を真空で濃縮して青色の固体を得、これをイオン交換クロマトグラフィー（ダウエックス50Wx8-100、H2O、次いで５％のアンモニア溶液）により精製した。アンモニア画分を合わせ、蒸発、乾燥させ、トルエン中で懸濁させ、真空で濃縮して(2x)固体を得、これを冷凍乾燥機で乾燥させてアリルグリシン28（0.455g、84％）を白色の粉末として得た：mp 195-190 ℃(分解) (文献, 208 ℃); [α]D -40.5 (c 0.11 、H2O中) (文献, -42.7 c 4 、H2O中);  δH  (400 MHz; D2O)  2.62-2.76 [2H, m, CH2(アリル)], 3.87 (1H, dd, J 6.9 及び 5.4, Glyα-H), 5.30-5.35 (2H, m, =CH2) 及び 5.58-5.88 (1H, m, C(H)=CH2); ); δC (100 MHz; D2O)  34.7 [CH2, CH2(アリル)], 53.8 (CH, Glyα-C), 120.4 (CH2, =CH2), 131.2 (CH, C(H)=CH2) 及び 174.0 (quat., Glyα-CO)
【００６６】
(S)-N-ベンジルオキシカルボニルアリルグリシン29
ジオキサン（1cm3）中のベンジルクロロホルメート（0.135cm3、0.956ミリモル）の溶液を０℃で水（5cm3）中のアリルグリシン28（0.1g、0.870ミリモル）及び炭酸ナトリウム（0.275g、2.60ミリモル）の溶液に添加した。その溶液を２時間にわたって室温に温め、次いで更に17時間撹拌した。水層をエーテルで洗浄し、31％の塩酸でpH=1に酸性にし、酢酸エチルで抽出した。溜めた有機層を乾燥させ（MgSO4）、溶媒を真空で除去してカルバメート７（0.114g、53％）を不透明の油として得た。カルバメート29は回転異性体の74:26混合物であることが示された：δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si)  2.52-2.67 [2H, m, CH2(アリル)], 4.37＊ (0.26H, br s, Glyα-H), 4.46-4.52 (0.76H, m, Glyα-H), 5.08-5.18 (4H, m, OCH2Ph, =CH2) 5.48 (0.74H, d, J 7.9, N-H), 5.69-5.79 (1H, m, C(H)=CH2), 6.34 (0.26H, br d, J 5.6, N-H), 7.26-7.34 (5H, m, Ph) 及び 9.46 (1H, br s, OH);  δC  (75 MHz; CDCl3)  36.4 [CH2, CH2(アリル)], 53.2 (CH, Glyα-C), 53.9＊ (CH, Glyα-C), 67.2 (CH2, OCH2Ph), 67.7＊ (CH2, OCH2Ph),  119.6 (CH2, =CH2), 128.1, 128.3, 128.6 (CH, Ph), 131.9 (CH, C(H)=CH2), 136.1 (quat., Ph), 156.1 (quat., NCO2) 及び 176.0 (quat., Glyα-CO)
【００６７】
(S)-N-ベンジルオキシカルボニルアリルグリシン-L-プロリン31
N,N-ジシクロヘキシルカルボジイミド（0.103g、0.504ミリモル）を０℃でジクロロメタン（12cm3）中のカルバメート（0.114g、0.457ミリモル）、プロリンメチルエステル塩酸塩30（0.083g、0.504ミリモル）、N-ヒドロキシベンゾトリアゾール（0.068g、0.504ミリモル）及びトリエチルアミン（0.071cm3、0.504ミリモル）の溶液に添加した。その混合物を一夜撹拌し、０℃で３時間貯蔵し、セライトTMで濾過した。その反応混合物を2M塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して油を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、2:1、1:1）により精製して保護されたジペプチド（0.141g）を得、これをジオキサン（4cm3）中で懸濁させた。1M水酸化ナトリウム水溶液（1.95cm3、1.95ミリモル）を添加し、その混合物を室温で24時間撹拌した。水（5cm3）を添加し、その混合物をジクロロメタンで抽出した。水層を31％の塩酸で酸性にし、生成物をジクロロメタンで抽出した。有機層を溜め、食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して油（0.152g）を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、3:1、次いでヘキサン：酢酸エチル：酢酸、3:1:0.4、2:1:0.3）により精製して酸31（0.102g、64％）を無色の油として得た。酸31は1H NMR分析により配座異性体の87:13のトランス：シス混合物であることが示された（その比は夫々少量の配座異性体及び主要配座異性体のProδ-H2原子に帰属されたδ3.33-3.50及び3.62-3.77における多重線の積分により推定された）：
[α]D -91 (c 0.26 、CH2Cl2中);  δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.65＊ (0.13H, br s, Proβ-HAHB), 1.84-2.25 (3.87H, m, Proβ-HAHB,＊ Proβ-H2, Proγ-H2), 2.34-2.53 [2H, m, CH2(アリル)], 3.33-3.50＊ (0.26H, m, Proδ-H2), 3.62-3.77 (1.74H, m, Proδ-H2), 4.30-4.58 (2H, m, Proα-H, Glyα-H), 4.93-5.15 (4H, m, OCH2Ph, =CH2) 5.71-5.85 (1H, m, C(H)=CH2), 6.0 (0.13H, br d, J 8.5, N-H), 6.06＊ (0.13H, br d, J 8.7, N-H), 7.26-7.31 (5H, m, Ph) 及び 8.01 (1H, br s, OH); δC  (75 MHz; CDCl3)  22.1＊ (CH2, Proγ-C), 24.8 (CH2, Proγ-C), 28.6 (CH2, Proβ-C), 31.2＊ (CH2, Proβ-C), 36.6 [CH2, CH2(アリル)], 37.8＊ [CH2, CH2(アリル)], 46.7＊ (CH2, Proδ-C), 47.3 (CH2, Proδ-C), 52.1 (CH, Glyα-C), 52.3＊ (CH, Glyα-C), 59.2 (CH, Proα-C), 66.6 (CH2, OCH2Ph), 67.1＊ (CH2, OCH2Ph), 119.1 (CH2, =CH2), 127.9, 128.0, 128.4, 128.5 (CH, Ph), 132.4 (CH, C(H)=CH2), 136.1＊ (quat., Ph), 136.3 (quat., Ph), 156.1 (quat., NCO2), 170.8＊ (quat., Glyα-CO), 171.4 (quat., Glyα-CO) 及び 174.6 (quat., Proα-CO); m/z (EI+) 346.1527 (M+. C18H22N2O5 は346.1529を要する)
【００６８】
(S)-N-ベンジルオキシカルボニルアリルグリシン-L-プロリル-L-γ(R)-アリルグルタミン酸ジベンジルエステル34
アルケン32（0.217g、0.464ミリモル）をジクロロメタン（7cm3）に溶解し、０℃に冷却し、トリフルオロ酢酸（1.5cm3）を添加した。２時間撹拌した後、揮発物を真空で除去してトリフルオロ酢酸塩33をオフホワイトの固体として得た。ジクロロメタン（10cm3）中の酸31（0.134g、0.387ミリモル）及びトリエチルアミン（0.062cm3、0.461ミリモル）の氷冷溶液に、エチルクロロホルメート（0.045cm3、0.464ミリモル）を滴下して添加した。その溶液を０℃で40分間撹拌し、次いでジクロロメタン（5cm3）中の33及びトリエチルアミン（0.062cm3、0.464ミリモル）の氷冷溶液を滴下して添加し、その混合物を一夜撹拌した。続いてその溶液を2M塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して油を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、2:1）により精製して保護されたトリペプチド34（0.162g、60％）を無色の油として得た。トリペプチド34は1H NMR分析により配座異性体の89:11のトランス：シス混合物であることが示された（その比は夫々少量の配座異性体及び主要配座異性体のGluN-H原子に帰属されたδ8.04及び7.10における二重線の積分により推定された）：[α]D -31.2 (c 0.462 、CH2Cl2中);  δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.90-1.99 (2H, m, Proβ-HAHB, Proγ-HAHB), 2.06-2.13 (3H, m, Proγ-HAHB, Gluβ-H2), 2.19-2.26 (1H, m, Proβ-HAHB), 2.33-2.42 [3H, m, CH2(アリル), CHACHB(アリル)], 2.47-2.54 (1H, m, CHACHB(アリル)), 2.63 (1H, p, J 6.7, Gluγ-H), 3.56-3.72 (2H, m, Proδ-H2), 4.18＊ (0.11H, q, J 6.2, Glyα-H),  4.38＊ (0.11H, d, J 7.7, Proα-H),  4.54-4.66 (2.78H, Glyα-H, Proα-H), Gluα-H),  4.86-5.18 (10H, m, 3 x OCH2Ph, 2 x =CH2), 5.60-5.81 (3H, m, 2 x C(H)=CH2, GlyN-H), 7.10 (0.89H, d, J 7.4, GluN-H), 7.26-7.39 (15H, m, Ph) 及び 7.10＊ (0.11H, d, J 7.9, GluN-H);  δC  (100 MHz; CDCl3)  22.0＊ (CH2, Proγ-C), 24.9 (CH2, Proγ-C), 27.5 (CH2, Proβ-C), 31.3＊ (CH2, Proβ-C), 31.4＊ (CH2, Gluβ-C), 32.9 (CH2, Gluβ-C), 35.65＊ [CH2, CH2(アリル)], 35.71＊ [CH2, CH2(アリル)], 35.9 [CH2, CH2(アリル)], 36.9 [CH2, CH2(アリル)], 41.0 (CH, Gluγ-C), 41.9＊ (CH, Gluγ-C), 46.9＊ (CH2, Proδ-C), 47.3 (CH2, Proδ-C), 50.7 (CH, Gluα-C), 51.3＊  (CH, Gluα-C), 51.8 (CH, Glyα-C), 52.4＊ (CH, Glyα-C), 59.9 (CH, Proα-C), 60.8＊ (CH, Proα-C), 66.31＊ (CH2, OCH2Ph), 66.4 (CH2, OCH2Ph), 66.8 (CH2, OCH2Ph),  67.0＊ (CH2, OCH2Ph), 67.2 (CH2, OCH2Ph),  117.7, 119.0, 119.8＊ (CH2, =CH2), 127.9, 128.0, 128.14, 128.22, 128.24, 128.31, 128.42, 128.46, (CH, Ph), 131.7,＊ 132.2, 134.2 (CH, C(H)=CH2), 135.2, 135.3,＊ 135.7, 136.0,＊ 136.2 (quat., Ph), 155.8 (quat., NCO2), 156.2＊ (quat., NCO2), 170.7＊ (quat., CO), 170.9 (quat., CO) 171.2 (quat., CO), 171.5 (quat., CO), 171.6＊ (quat., CO), 174.3＊ (quat.,  Gluγ-CO) 及び 174.4 (quat., Gluγ-CO);  m/z (EI+) 695.3170 (M+. C40H45N3O8 は695.3207を要する)
【００６９】
(3S,8R,10S,13S) 3-アミノ-1,11-ジアザ-8,10-カルボキシ-2,12-オキソビシクロ〔13.3.0〕ヘキサデカントリフルオロ酢酸塩36
乾燥ジクロロメタン（7.5cm3）中の保護されたトリペプチド34（0.041g、0.0589ミリモル）の溶液に、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）-ベンジリデンルテニウムジクロリド（0.015g、0.0126ミリモル）を窒素雰囲気下で添加した。紫色の溶液を48時間にわたって加熱、還流し、室温に冷却し、ジメチルスルホキシド（0.045cm3、0.63ミリモル）を添加した。そのオレンジ色-褐色の溶液を24時間撹拌し、シリカゲルの短い栓で濾過し（ヘキサン：酢酸エチル、1:3で溶離）、クロマトグラフィー（C18 RPシリカ、水：アセトニトリル、20％-70％）により精製してメタセシス生成物35（48mg）及びその他の一種以上の未同定生成物を黄色の油として得た〔m/z (FAB+) 668.2977 (MH+. C38H42N3O8は668.2972を要する)〕。メタセシス生成物を２種のサンプル（夫々約25mg）に分け、第一のサンプルをテトラヒドロフラン／水（4:1、5cm3）に溶解し、10重量％のパラジウム／活性炭（0.008g、0.00749ミリモル）を窒素雰囲気下で添加した。その反応フラスコに、水素のバルーンをフィットし、室温で21時間撹拌した。その反応混合物をセライトTMのパッドで濾過し、メタノール／水(4:1)で洗浄し、真空で濃縮してフィルムを得た。第二のサンプルをテトラヒドロフラン（3cm3）に溶解し、酸化白金(IV)（0.00078g、0.0034ミリモル）を窒素雰囲気下で添加した。その反応フラスコに、水素のバルーンをフィットし、室温で16時間撹拌した。その反応混合物をセライトTMのパッドで濾過し、メタノールで洗浄し、真空で濃縮してフィルムを得、これをメタノール：水（4:1、5cm3）に溶解し、10重量％のパラジウム／活性炭（0.008g、0.00749ミリモル）を窒素雰囲気下で添加した。その反応フラスコに水素のバルーンをフィットし、室温で５時間撹拌した。その反応混合物をセライトTMのパッドで濾過し、メタノール／水(4:1)で洗浄し、真空で濃縮してフィルムを得た。両方のサンプルを合わせ、RP HPLC〔10％のアセトニトリル：90％の水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）、次いで80:20、70:30〕により精製し、冷凍乾燥機で乾燥させて36（0.016g、34から58％）を白色の固体として得た。36は専らトランス配座異性体として存在した：mp 150-240 ℃; [α]D -39.4 (c 0.0864 、水中);  δH  (400 MHz; D2O), 1.20-1.62 (6H, m, 5-H2, 14-H2, 7-H2), 1.81-1.90 (1H, m, 4-HAHB), 2.04-2.36 (7H, m, 4-HAHB, 9-H2, 6-H2, 15-H2), 2.43 (1H, br t, J 6.2, 8-H), 3.68-3.79 (2H, m, 16-H2), 4.48-4.49 (1H, m, H-3) 及び 4.51-4.55 (1H, m, 10-H) [HODにより不明瞭にされた13-H ];  δC (100 MHz; D2O)  18.2 (CH2, 5-C), 23.9 (CH2, 14-C), 24.2 (CH2, 15-C), 26.0 (CH2, 6-C), 26.8 (CH2, 4-C), 28.0 (CH2, 7-C), 30.3 (CH2, 9-C), 38.2 (CH, 8-C), 47.1 (CH2, 16-C), 50.6 (CH, 10-C), 50.9 (CH, 3-C), 59.5 (CH, 13-C), 116.25 (q, J 291.7, CF3), 162.8 (q, J 35.2, CF3CO2H), 169.2 (quat., 2-C), 174.0 (quat., 10-CO), 及び 179.8 (quat., 8-CO);  m/z (FAB+) 356.1811 [MH(遊離塩基)+. C16H26N3O6 は356.1821を要する]
実施例４：(2S,3'S,8'R)-2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソ-ビシクロ〔6.3.0〕ウンデシル)11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩の合成
【００７０】
【化１５】
2006523213.tif 000016
【００７１】
スキーム１試薬、条件及び収率：(i)EtOH、SOCl2、０℃〜室温、一夜；(ii)DMAP、Boc2O、CH3CN、室温、18時間（２工程にわたって85％）；(iii)LiEt3BH、THF、-78℃、１時間、次いで30％のH2O2、０℃、0.5時間；(iv)BF3・OEt2、アリルトリブチルスタナン、CH2Cl2、-78℃、２時間（２工程にわたって54％）
【００７２】
【化１６】
2006523213.tif 000017
【００７３】
スキーム２試薬、条件及び収率：(i)CF3CO2H、CH2Cl2、室温、４時間；(ii)DCC、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、一夜（55％、２工程）；(iii)グラブス触媒、CH2Cl2、45℃、24時間、次いでDMSO、室温、一夜（74％）；(iv)1M NaOH水溶液、H2O、ジオキサン、室温、23時間；(v)BoP-Cl、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、21時間（70％、２工程）；(vi)PtO2、H2、THF、室温、一夜、次いでCF3CO2H、CH2Cl2、室温、５時間（60％、２工程）
【００７４】
【化１７】
2006523213.tif 000018
【００７５】
(S)-エチルN-tert-ブトキシカルボニルピログルタメート38
(S)-ピログルタミン酸９（3.0g、15.5ミリモル）をエタノール（40cm3）中で懸濁させ、窒素雰囲気下で０℃に冷却した。塩化チオニル（2.03g、17.0ミリモル）を滴下して添加し、その溶液を一夜にわたって室温に温めた。その溶液を０℃に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、クロロホルムで抽出した。合わせた有機層を溜め、乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して粗エステル37（2.53g、104％）を得、これを更に精製しないで使用した。アセトニトリル（30cm3）中のエステル37（2.53g）及びジメチルアミノピリジン（0.19g、1.55ミリモル）の溶液に、ジ-tert-ブチルジカーボネート（3.71g、17.05ミリモル）を添加した。得られる溶液を室温で18時間撹拌し、真空で濃縮し、クロマトグラフィー（SiO2、3:1、2:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製して黄色の固体を得、これをヘキサンから再結晶してカルバメート38（3.35g、２工程で85％）を白色の固体として得た：mp 53-54 ℃(文献53-54 ℃); [α]D -39.8 (c 0.5 、MeOH中) [文献 -46.3 (c 1.5 、MeOH中)]; δH (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.26 (3H, t, J 7.1, OCH2CH3), 1.48 [9H, s, C(CH3)3], 1.96-2.06 (1H, m), 2.24-2.68 (3H, m), 4.22 (2H, q, J 7.2, OCH2CH3), 及び 4.58 (1H, dd, J 9.4 及び 3.0, 5-H); δC (75 MHz; CDCl3) 14.2 (CH3, OCH2CH3), 21.5 (CH2, 4-C), 27.9 [CH3, C(CH3)3], 31.2 (CH2, 3-C), 58.9 (CH, 5-C), 61.7 (CH2, OCH2CH3), 83.5 [quat., C(CH3)3], 149.3 (quat., NCO2), 171.3 (quat., 5-CO) 及び 173.2 (quat., 2-C)
【００７６】
N-tert-ブトキシカルボニル-(S)-アリルグリシン-5-アリル-L-プロリンエチルエステル43
乾燥テトラヒドロフラン（40cm3）中のカルバメート38（1.0g、3.89ミリモル）の撹拌溶液に、-78℃で窒素雰囲気下でリチウムトリエチルホウ水素化物の１モル/Lのテトラヒドロフラン溶液（4.66cm3、4.66ミリモル）を添加した。その溶液を１時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（10cm3）を添加し、冷却浴を除去した。その温度を０℃に到達させ、次いで30％の過酸化水素水溶液（35滴）を添加し、撹拌を０℃で50分間続けた。水層をエーテルで抽出し、合わせた有機抽出液を食塩水で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、濾過し、溶媒を除去してアルコール39（1.301g）を得た。粗アルコール39（0.363g、約1.40ミリモル）を乾燥ジクロロメタン（10cm3）に溶解し、アリルトリブチルスタナン（0.87cm3、2.80ミリモル）を添加し、その溶液を窒素雰囲気下で-78℃に冷却した。三フッ化ホウ素エーテラート（0.36cm3、2.80ミリモル）を滴下して添加し、その溶液を-78℃で２時間撹拌し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（10cm3）を添加し、その反応混合物を室温に温めた。水層をジクロロメタンで抽出し、溜めた有機抽出液を乾燥させ（Na2SO4）、濾過した。溶媒を真空で除去して油（1.28g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、16:1、10:1、8:1、6:1、4:1、3:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してアルケン40〔0.217g、２工程で54％（74％brsm）〕を無色の油として得た。アルケン40は一種以上の少量成分と一緒にC(1)/C(5)シス：トランス異性体の66:33混合物であることが示された。NMRスペクトルの複雑な性質のために、この化合物は特性決定されず、次の工程にそのまま使用された。
【００７７】
トリフルオロ酢酸（2cm3）をジクロロメタン（4cm3）中のアルケン40（0.22g、0.77ミリモル）の溶液に添加し、その溶液を室温で４時間撹拌し、揮発物を真空で除去してトリフルオロ酢酸塩41を油として得た。この物質の半分（0.383ミリモル）をジクロロメタン（7cm3）に溶解し、N-tert-ブトキシカルボニル-(S)-アリルグリシン42（0.07g、0.32ミリモル）及びトリエチルアミン（0.042g、0.42ミリモル）を添加し、その溶液を０℃に冷却した。N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド（0.065g、0.316ミリモル）を添加し、その混合物を一夜撹拌し、次いでセライトTMで濾過してジシクロヘキシル尿素を除去した。続いて、濾液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、濾過し、溶媒を除去して油（0.113g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、4:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してジエン43（0.064g、55％、２工程）を無色の油として得た。ジエン43はジアステレオマーの分離できない混合物〔C2/C5、シス／トランス、77:23〕であった：δH (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.21-1.26 (3H, m, OCH2CH3), 1.37 [6.93H, s, C(CH3)3], 1.41 [2.07H, s, C(CH3)3], 1.64-1.97 (4H, m, Proβ-H2 及び Proγ-H2), 2.0-2.52 [3.77H, m, 2 x CH2(アリル)], 2.75-2.95 [0.23H, m, CHACHB(アリル)], 4.07-4.21 (2.23H, m, OCH2CH3 及び Proα-H＊), 4.32-4.48 (2.77H, Proδ-H, Glyα-H 及び Proα-H), 4.97-5.26 (5H, m, 2 x =CH2, N-H) 及び 5.64-5.84 [2H, m, 2 x C(H)=CH2]; δC (100 MHz; CDCl3) 13.9＊ (CH3, OCH2CH3), 14.1 (CH3, OCH2CH3), 26.8 (CH2, Proβ-C), 28.3 [CH3, C(CH3)3], 29.0＊ (CH2, Proγ-C), 29.5 (CH2, Proγ-C), 37.7＊ [CH2, CH2(アリル)Pro], 37.8 [CH2, CH2(アリル)Gly], 38.4＊ [CH2, CH2(アリル)Gly], 39.4＊ [CH2, CH2(アリル)Pro], 50.9 (CH, Glyα-C), 51.9＊ (CH, Glyα-C), 58.2 (CH, Proα-C), 58.5＊ (CH, Proα-C), 59.5 (CH, Proδ-C), 59.8＊ (CH, Proδ-C), 61.0 (CH2, OCH2CH3), 61.9＊ (CH2, OCH2CH3), 79.4＊[quat., C(CH3)3], 79.7 [quat., C(CH3)3], 117.2＊ (CH2, =CH2), 118.3 (CH2, =CH2), 118.35 (CH2, =CH2), 118.7＊ (CH2, =CH2), 132.7＊ (CH, C(H)=CH2), 133.2 [CH, C(H)=CH2], 134.0 [CH, C(H)=CH2], 134.7＊ [CH, C(H)=CH2], 154.7＊ (quat., NCO2), 155.3 (quat., NCO2), 170.5＊ (quat., CO), 171.4 (quat., CO), 171.6＊ (quat., CO) 及び 172.1 (quat., CO);  m/z (FAB+) 381.23896 (MH+. C20H33N2O5 は381.23895を要する)
【００７８】
(8R,3S,11S) 1-アザ-3-(tert-ブチルオキシカルボニルアミノ)-11-エトキシカルボニル-2-オキソビシクロ〔6.3.0〕ウンデカ-5-エン44
乾燥ジクロロメタン（43cm3）中のジエン43（0.064g、0.170ミリモル）の脱気溶液に、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（グラブス触媒）（0.014g、0.0170ミリモル）を窒素雰囲気下で添加し、得られる紫色の溶液を24時間にわたって加熱、還流した。オレンジ色／褐色の溶液を室温に冷却し、ジメチルスルホキシド（0.160cm3、2.26ミリモル）を添加し、その溶液を一夜撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をクロマトグラフィー（SiO2、2:1、1:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してアルケン44（0.044g、74％）を無色の油として得た。アルケン44は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した：[α]D -93.2 (c 0.29 、CH2Cl2中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.25 (3H, t, J 7.1, OCH2CH3), 1.42 [9H, s, C(CH3)3], 1.89-1.98 (2H, m, 10-HAHB 及び 9-HAHB), 2.01-2.09 (1H, m, 9-HAHB), 2.11-2.16 (1H, m, 10-HAHB), 2.24-2.33 (1H, m, 4-HAHB), 2.42 (1H, dq, J 15.2 及び 3.4, 7-HAHB), 2.70-2.80 (2H, m, 4-HAHB 及び 7-HAHB), 4.15 (3H, q, J 7.1, OCH2CH3 及び不明瞭にされた8-H ), 4.47 (1H, dd, J 8.4 及び 2.8, 11-H), 4.84 (3H, br q, J 7.8, 3-H), 5.59 (1H, d, J 7.3, N-H), 5.67-5.73 (1H, m, 6-H) 及び 5.77-5.83 (1H, m, 5-H);  δC (100 MHz; CDCl3) 14.0 (CH3, OCH2CH3), 27.1 (CH2, 10-C), 28.2 [CH3, C(CH3)3], 32.77 (CH2, 7-C 又は 9-C), 32.84 (CH2, 9-C 又は 7-C), 35.2 (CH2, 4-C), 51.7 (CH, 3-C), 58.6 (CH, 8-C), 60.2 (CH, 11-C), 60.8 (CH2, OCH2CH3), 79.4 [quat., C(CH3)3], 125.7 (CH, 6-C), 129.1 (CH, 5-C), 155.1 (quat., NCO2), 170.9 (quat., 11-CO) 及び 171.7 (quat., 2-C);  m/z (EI+) 352.2001 (M+. C18H28N2O5 は352.1998を要する)
【００７９】
(2S,3'S,8'R,11'S)-ジ-tert-ブチル2-{〔1'-アザ-3'-(tert-ブチルオキシカルボニルアミノ)-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデカ-5'-エン-11-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジオエート47
1M水酸化ナトリウム水溶液（0.63cm3、0.63ミリモル）をジオキサン（1.3cm3）中のエステル44の溶液に添加し、その不透明の溶液を室温で23時間撹拌した。その反応溶液を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出し、水層を固体クエン酸で酸性にし、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して酸45（0.040g）を得た。塩酸塩46（0.048g、0.1625ミリモル）を45の溶液に添加し、次いでその溶液を０℃に冷却した。トリエチルアミン（0.033cm3、0.325ミリモル）及びビス(2-オキソ-3-オキサゾリジニル)ホスフィンクロリド(BoP-Cl)（0.041g、0.163ミリモル）を添加し、その混合物を21時間撹拌した。その反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して油（0.078g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、1:1、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してアミド47（0.050g、２工程で70％）を無色の油として得た。アミド47は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した：[α]D -79.4 (c 0.47 、CH2Cl2中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.39-1.50 [27H, m, 3 x C(CH3)3], 1.78-1.91 (3H, m, 10'-HAHB, 3-HAHB 及び 9'-HAHB), 2.0-2.33 (7H, m, 10'-HAHB, 3-HAHB, 4-H2, 9'-HAHB, 7'-HAHB 及び 4'-HAHB), 2.80-2.95 (2H, br m, 7'-HAHB 及び 4'-HAHB), 4.15 (1H, br q, J 7.1, 8'-H), 4.42 (1H, ddd, J 7.8, 7.8 及び 5.2, 2-H), 4.66 (1H, d, J 7.5, 11'-H), 4.97 (1H, br q, J 7.4, 3'-H), 5.57 (1H, d, J 7.8, N-H), 5.61-5.67 (1H, m, 6'-H), 5.81 (1H, br t, J 7.8, 5'-H) 及び 7.47 (1H, d, J 8.0, N-H);  δC (100 MHz; CDCl3) 26.1 (CH2, 10'-C), 27.9 [CH3, C(CH3)3], 27.95 [CH3, C(CH3)3], 28.2 [CH3, C(CH3)3], 28.1, (CH2, 3-C), 31.3 (CH2, 4-C), 32.0 (CH2, 7'-C), 33.2 (CH2, 9'-C), 35.7 (CH2, 4'-C), 51.0 (CH, 3'-C), 51.9 (CH, 2-C), 58.6 (CH, 8'-C), 60.8 (CH, 11'-C), 79.6 [quat., C(CH3)3], 80.4 [quat., C(CH3)3], 81.9 [quat., C(CH3)3], 124.9 (CH, 6'-C), 130.4 (CH, 5'-C), 155.0 (quat., NCO2), 169.9 (quat., 1-C), 170.5 (quat., 11'-CO), 171.8 (quat., 2'-C 又は 5-C) 及び 171.9 (quat., 2'-C 又は 5-C); m/z (FAB+) 566.3454 [MH+. C29H48N3O8 は566.3441を要する]
【００８０】
(2S,3'S,8'R,11'S) 2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩48
PtO2（0.00184g、0.0081ミリモル）を窒素雰囲気下でテトラヒドロフラン（4cm3）中のアミド47（0.046g、0.081ミリモル）の撹拌溶液に添加した。その混合物を一夜にわたって水素化し（１気圧の水素）、セライトTMで濾過し、溶媒を真空で除去した。残渣をジクロロメタン（5cm3）に溶解し、トリフルオロ酢酸（3cm3）を添加し、その溶液を室温で５時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、RP HPLC〔10％のアセトニトリル：90％の水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）〕により精製し、エーテル／トルエンからすり砕いて13（0.0228g、60％、２工程）を吸湿性のオフホワイトの固体として得た。48は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した：mp 50-120 ℃; [α]D -27.9 (c 0.33 、MeOH中); δH  (400 MHz; D2O) 1.37-1.85 (8H, m, 5'-H2, 6'-H2, 4'-H2 及び 9'-H2), 1.98-2.28 (5H, m, 3-H2, 7'-H2 及び 10'-HAHB), 2.36 (1H, dt, J 12.4 及び 7.2, 10'-HAHB), 2.57 (2H, t, J 7.6, 4-H2), 4.23 (1H, br t, J 8.2, 8'-H) 及び 4.41 (3H, m, 2-H, 11'-H, 3'-H); δC  (100 MHz; D2O) 21.6 (CH2, 5'-C 又は 6'-C), 24.2 (CH2, 5'-C 又は 6'-C), 25.5 (CH2, 3-C), 27.1 (CH2, 10'-C), 29.7 (CH2, 4-C), 31.5 (CH2, 9'-C), 32.8 (CH2, 7'-C), 35.0 (CH2, 4'-C), 51.2 (CH, 3'-C), 51.9 (CH, 2-C), 59.9 (CH, 8'-C), 61.4 (CH, 11'-C), 116.2 (quat., q, J 291, CF3), 162.7 (quat., q, J 35.2, CF3CO2H), 168.5 (quat., 2'-C), 173.7 (quat., 11'-CO), 174.7 (quat., 1-C) 及び 176.8 (quat., 5-C);  m/z (FAB+) 356.1816 [MH(遊離塩基)+. C16H26N3O6 は356.1822を要する]
実施例５：(9R,11S,14S)-1,4,12-トリアザ-9,11-カルボキシ-2,13-ジオキソビシクロ〔14.3.0〕ヘプタデカントリフルオロ酢酸塩の合成
【００８１】
【化１８】
2006523213.tif 000019
【００８２】
スキーム１試薬、条件及び収率：(i)Boc2O、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、19時間（97％）；(ii)LiHMDS、THF、-78℃、40分間、次いで臭化アリル、-78℃、1.5時間（73％）；(iii)THF、０℃、2.5時間（47％）；(iv)BnOCOCl、Et3N、CH2Cl2、０℃、２時間、次いで1M NaOH水溶液、ジオキサン、メタノール、室温、２時間（３工程で52％）；(v)EDCI、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、19時間（66％）；(vi)1M NaOH水溶液、ジオキサン、室温、20時間（55％）
【００８３】
【化１９】
2006523213.tif 000020
【００８４】
スキーム２試薬、条件及び収率：(vi)TFA、CH2Cl2、０℃、２時間；(vii)EtOCOCl、Et3N、CH2Cl2、０℃、次いで58、一夜（94％）；(viii)KOtBu、THF、イミダゾリウムリガンド63、２分間、次いでグラブス触媒64、ベンゼン、80℃、35分間、次いで59、ベンゼン、40℃、65時間；(ix)10％のPd/C、H2、MeOH/H2O(4:1)、室温、17時間（59から58％）
【００８５】
【化２０】
2006523213.tif 000021
【００８６】
N-tert-ブチルオキシカルボニル-L-グルタミン酸ジベンジルエステル50
トリエチルアミン（2.25cm3、2.2ミリモル）を０℃でジクロロメタン（80cm3）中のL-グルタミン酸ジベンジルエステルp-トルエンスルホン酸塩49（4.0g、8.01ミリモル）の撹拌溶液に添加した。次いでジ-tert-ブチルジカーボネート（2.1g、9.61ミリモル）を添加し、その溶液を19時間撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣を最小量のジクロロメタンに溶解し、2M塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で連続して洗浄し、乾燥させた（MgSO4）。溶媒を除去して白色の固体（3.42g）を得、これをエーテル／ヘキサンからの結晶化により精製してカルバメート50（3.321g、97％）を白色の固体として得た：
mp 73-76 ℃; δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.46 [9H, s, C(CH3)3], 1.96-2.07 (1H, m), 2.22-2.27 (1H, m), 2.38-2.52 (2H, m), 4.40 (1H, br d, J 3.6, Gluα-H), 5.12-5.19 (5H, m, 2 x OCH2Ph, Gluα-NH) 及び 7.29-7.39 (10H, m, 2 x Ph) δC  (100 MHz; CDCl3) 27.6 (CH2, Gluβ-C), 28.1 [CH3, C(CH3)3], 30.1 (CH2, Gluγ-C), 52.8 (CH, Gluα-C), 66.4 (CH2, OCH2Ph), 67.1 (CH2, OCH2Ph), 79.7 [quat., C(CH3)3], 128.1, 128.2, 128.3, 128.5, 128.51, (CH, Ph), 135.2, 135.7 (quat., Ph), 155.3 (quat., NCO2) 及び 172.0, 172.4 (quat., CO)
【００８７】
N-tert-ブチルオキシカルボニル-L-γ(R)-アリルグルタミン酸ジベンジルエステル51
リチウムヘキサメチルジシラジドのテトラヒドロフラン溶液（１モル/L、10.3cm3、10.3ミリモル）を窒素雰囲気下で-78℃で乾燥テトラヒドロフラン（20cm3）中のカルバメート50（2.0g、4.68ミリモル）の溶液に滴下して添加した。得られる黄色の溶液をこの温度で40分間撹拌し、臭化アリル（1.31cm3、14.0ミリモル）を添加した。その溶液を-78℃で1.5時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液（20cm3）の添加により反応停止した。冷却浴を除去し、その混合物を1.5時間にわたって室温に温めた。白色の固体を濾過により除去し、酢酸エチルで洗浄し、濾液を真空で濃縮してオレンジ色の固体（2.312g）を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、6:1、ヘキサン：酢酸エチル、次いで5:1）により精製してアルケン51（1.589g、73％）を無色の油として得た：[α]D  +19.4 (c 0.232 、CH2Cl2中);  δH (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.43  [9H, s, C(CH3)3], 2.06 (2H, m, アリル-CH2), 2.30-2.44 (2H, m, Gluβ-H2), 2.64 (1H, p, J 6.7, Gluγ-H), 4.41 (1H, br d, J 7.6, Gluα-H), 5.01-5.71 (7H, m, 2 x OCH2Ph, =CH2, Gluα-NH), 5.60-5.74 (1H, m, C(H)=CH2) 及び 7.31-7.35 (10H, m, 2 x Ph); δC  (75 MHz; CDCl3) 28.2 [CH3, C(CH3)3], 33.4 (CH2, アリル-CH2), 36.2 (CH2, Gluβ-C), 41.7, (CH, Gluγ-C), 52.2 (CH, Gluα-C), 66.4 (CH2, OCH2Ph), 67.0 (CH2, OCH2Ph), 80.0 [quat., C(CH3)3], 117.6 (CH2, =CH2), 128.16, 128.18, 128.3, 128.44, 128.47, (CH, Ph), 134.1 (CH, C(H)=CH2), 135.2, 135.7 (quat., Ph), 155.3 (quat., NCO2), 172.1 (quat., Gluα-CO) 及び 174.6 (quat., Gluγ-CO); m/z (FAB+) 468.2382 (MH+. C27H34NO6 は468.2386を要する)
【００８８】
N-アリルグリシンエチルエステル54
乾燥テトラヒドロフラン（20cm3）中のエチルブロモアセテート52（3g、18.0ミリモル）の溶液を３分間にわたって乾燥テトラヒドロフラン（20cm3）中のアリルアミン53（2.05g、36ミリモル）の氷冷溶液に滴下して添加した。その溶液を０℃で2.5時間撹拌し（白色の沈殿を２時間後に観察した）、真空で濃縮し、ジエチルエーテル中で懸濁させた。白色の懸濁液をセライトTMで濾過し、溶媒を除去して粗生成物を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、1:1、ヘキサン：酢酸エチル）により精製してアルケン54（1.209g、47％）を明黄色の油として得た：δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.17 (3H, t, J 7.1, OCH2CH3), 1.70 (1H, br s, N-H), 3.16 [2H, d, J 5.9, CH2(アリル)], 3.28 (2H, s, CH2Gly), 4.08 (2H, q, J 7.1, OCH2CH3), 4.98-5.12 (2H, m, =CH2) 及び 5.70-5.85 (1H, m, C(H)=CH2); δC  (75 MHz; CDCl3) 13.9 (CH3, OCH2CH3), 49.7 (CH2), 51,6 (CH2), 60.4 (CH2, OCH2CH3), 116.2 (CH2, =CH2), 135.9 (CH, C(H)=CH2) 及び 172.2 (quat., CO)
【００８９】
N-アリル-N-ベンジルオキシカルボニルグリシン55
エチルブロモアセテート（9g、53.9ミリモル）及びアリルアミン（6.15g、107.7ミリモル）を使用して、N-アリルグリシンエチルエステル54を上記のように調製した。NMRにより判断して約30％のN-アリル-N-ビス(2-カルボエトキシエチル)アミンを含む粗生成物（7.054g）をジクロロメタン（50cm3）に溶解し、０℃に冷却し、トリエチルアミン（6.53g、64.09ミリモル）を添加した。ベンジルクロロホルメート（9.25g、54.2ミリモル）を10分間にわたって滴下して添加して白色の沈殿を生じた。２時間後、その混合物を０℃で一夜貯蔵し、濾過し、濾液を真空で濃縮した。続いて、残渣をジクロロメタン中で懸濁させ、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して、NMRにより判断して油（13.65g）が所望のカルバメート（70％）及びベンジルアルコール（30％）を含むことを明らかにした。この混合物をジオキサン／メタノール（8:3、110cm3）に溶解し、1M水酸化ナトリウム水溶液（40cm3、40ミリモル）を添加し、その溶液を室温で２時間撹拌した。食塩水（50cm3）を添加し、水層をジエチルエーテルで抽出した。水層を32％の塩酸で酸性にし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（MgSO4）、真空で濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル：酢酸、3:1:0.4）により精製して酸７（7.05g、52％、３工程）を無色のシロップとして得た。酸55はカルバメート回転異性体の1:1混合物として存在した：δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 4.02-4.08 [4H, m, CH2(アリル), CH2(Gly)],  5.17-5.24 (4H, m, OCH2Ph, =CH2), 5.77-5.84 (1H, m, C(H)=CH2), 7.32-7.39(m, 5H, Ph) 及び 8.45 (1H, br s, OH); δC  (100 MHz; CDCl3) 47.1, 47.7 [CH2, CH2(Gly)], 50.5, 50.7 [CH2, CH2(アリル)], 67.6, 67.7 (CH2, OCH2Ph), 117.8, 118.3 (CH2, =CH2), 127.7, 127.97, 128.01, 128.4, (CH, Ph),  132.7, 132.8 (CH, C(H)=CH2) 136.1 (quat., Ph), 155.8, 156.5, (quat., NCO2) 及び 174.7, 174.9 (quat., CO)
【００９０】
N-アリル-N-ベンジルオキシカルボニルグリシル-L-プロリンメチルエステル56
1-(3-ジメチルアミノプロピル-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(EDCI)（0.453g、2.36ミリモル）を０℃でジクロロメタン（20cm3）中のプロリンメチルエステル塩酸塩30（0.356g、2.15ミリモル）、酸55（0.590ミリモル、2.35ミリモル）及びトリエチルアミン（0.481g、4.73ミリモル）の溶液に添加した。得られる溶液を19時間撹拌し、2M塩酸水溶液及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して油を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、2:1、1:1）により精製して保護されたジペプチド56（0.508g、66％）を無色の油として得た。ジペプチド56は13C NMR分析により配座異性体の76:24トランス：シス混合物であることが示された（その比は夫々少量配座異性体及び主要配座異性体のProγ-C原子に帰属された、δ22.0及び24.5、24.7にあるシグナルの積分により推定された）。加えて、GlyN-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の更なる1:1の混合物をもたらすことが観察された：[α]D -54.6 (c 1.17 、CH2Cl2中);  δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.81-2.14 (4H, m, Proβ-H2, Proγ-H2), 3.29-3.58 (2H, m, Proδ-H2), 3.64, 3.66, 3.69＊ (3H, s, OCH3), 3.84-4.20 [4H, m, CH2(アリル), Glyα-H2], 4.40-4.48 (1H, m, Proα-H), 5.07-5.17 (4H, m, OCH2Ph, =CH2), 5.69-5.81 (1H, m, C(H)=CH2) 及び 7.24-7.30 (m, 5H, Ph);δC  (100 MHz; CDCl3) 22.0＊ (CH2, Proγ-C), 24.62, 24.73 (CH2, Proγ-C), 28.66, 28.73 (CH2, Proβ-C), 31.1,＊ 31.3＊ (CH2, Proβ-C), 45.93, 45.98 (CH2, Proδ-C), 46.5＊ (CH2, Proδ-C), 47.5, 48.0 (CH2, Glyα-C), 50.0, 50.6 [CH2, CH2(アリル)], 50.0,＊ 50.6＊ [CH2, CH2(アリル)], 52.0, (CH3, OCH3), 52.31,＊ 52.5＊ (CH3, OCH3), 58.4,＊ 58.5＊ (CH, Proα-C), 58.8 (CH, Proα-C),  67.2, 67.3 (CH2, OCH2Ph), 117.0, 117.5 (CH2, =CH2), 127.5, 127.7, 127.8, 128.3, (CH, Ph),  133.2, 133.4 (CH, C(H)=CH2) 136.4, 136.5 (quat., Ph), 155.8, 156.3, (quat., NCO2), 167.1 (quat., Gly-CO), 167.4,＊ 167.5＊ (quat., Gly-CO). 172.0,＊ 172.2＊ (quat., Pro-CO) 及び 172.3, 172.4 (quat., Pro-CO); m/z (EI+) 360.1676 (M+. C19H24N2O5 は360.1685を要する)
【００９１】
N-アリル-N-ベンジルオキシカルボニルグリシル-L-プロリン57
ジオキサン（13cm3）中の保護されたジペプチド56（0.474g、1.31ミリモル）の溶液に、1M水酸化ナトリウム水溶液（6.71cm3、6.71ミリモル）を添加し、その混合物を室温で20時間撹拌した。水（10cm3）を添加し、その混合物をジクロロメタンで抽出した。水層を10％のHClで酸性にし、生成物をジクロロメタンで抽出した。有機層を溜め、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して2-ヒドロキシ-1,4-ジオキサンで汚染された油（0.456g）を得た。続いてクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、1:1、1:2、1:3）により精製して酸57（0.250g、55％）を無色の油として得た。酸57は13C NMR分析により配座異性体の86:14トランス：シス混合物であることが示された（その比は夫々少量配座異性体及び主要配座異性体のProγ-C原子に帰属された、δ22.1及び24.6、24.7にあるシグナルの積分により推定された）。加えて、GlyN-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の更なる1:1の混合物をもたらすことが観察された：
[α]D -117 (c 0.8 、CH2Cl2中);  δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.88-2.25 (4H, m, Proβ-H2, Proγ-H2), 3.30-3.69 (2H, m, Proδ-H2), 3.75-4.26 [4H, m, CH2(アリル), Glyα-H2], 4.50-4.58 (1H, m, Proα-H), 5.10-5.22 (4H, m, OCH2Ph, =CH2), 5.73-5.82 (1H, m, C(H)=CH2), 7.33-7.34 (m, 5H, Ph) 及び 7.84 (1H, br s, OH); δC  (75 MHz; CDCl3) 22.1＊ (CH2, Proγ-C), 24.6, 24.7 (CH2, Proγ-C), 27.9, 28.0 (CH2, Proβ-C), 31.1,＊ 31.3＊ (CH2, Proβ-C), 46.5 (CH2, Proδ-C), 46.7＊ (CH2, Proδ-C), 47.5, 48.1 (CH2, Glyα-C), 47.7,＊ 48.2＊ (CH2, Glyα-C), 50.2, 50.7 [CH2, CH2(アリル)], 50.5,＊ 50.9＊ [CH2, CH2(アリル)], 58.6＊ (CH, Proα-C), 59.5 (CH, Proα-C), 67.6 (CH2, OCH2Ph), 117.3, 117.9 (CH2, =CH2), 127.6, 127.9, 128.0, 128.4, (CH, Ph), 133.0, 133.2 (CH, C(H)=CH2) 136.3 (quat., Ph), 155.9, 156.5, (quat., NCO2), 156.7＊ (quat., NCO2), 167.8＊ (quat., Gly-CO), 168.9, 169.0 (quat., Gly-CO), 173.6, 173.7 (quat., Pro-CO) 及び 174.4＊ (quat., Pro-CO); m/z (EI+) 346.1524 (M+. C18H22N2O5 は346.1529を要する)
【００９２】
N-アリル-N-ベンジルオキシカルボニルグリシル-L-プロリル-L-γ(R)-アリルグルタミン酸ジベンジルエステル59
アルケン51（0.359g、0.768ミリモル）をジクロロメタン（10cm3）に溶解し、０℃に冷却し、トリフルオロ酢酸（2cm3）を添加した。２時間撹拌した後、揮発物を真空で除去してトリフルオロ酢酸塩58を白色の固体として得た。酸57（0.288g、0.655ミリモル）及びトリエチルアミン（0.150cm3、0.80ミリモル）の氷冷溶液に、エチルクロロホルメート（0.075cm3、0.786ミリモル）を滴下して添加した。その溶液を０℃で40分間撹拌し、次いでジクロロメタン（15cm3）中の58及びトリエチルアミン（0.150cm3、0.80ミリモル）の氷冷溶液を滴下して添加し、その混合物を一夜撹拌した。続いてその溶液を2M塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、溶媒を除去して油を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、1:1）により精製して完全に保護されたトリペプチド59（0.432g、94％）を無色の油として得た。トリペプチド59は13C NMR分析により配座異性体の85:15トランス：シス混合物であることが示された（その比は夫々少量配座異性体及び主要配座異性体のProγ-C原子に帰属された、δ22.1及び24.9にあるシグナルの積分により推定された）。加えて、GlyN-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の更なる1:1の混合物をもたらすことが観察された：
【００９３】
[α]D -38.7 (c 0.73 、CH2Cl2中);  δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.75-2.33 [8H, m, Proβ-H2, Proγ-H2, Gluβ-H2, CH2(アリル)], 2.55-2.66 (1H, m, Gluγ-H), 3.25-3.63 (m, 2H, Proδ-H2), 3.77-4.19 [4H, m, Glyα-H2, CH2(アリル)], 4.32＊ (0.15H, d, J 7.7, Proα-H), 4.46-4.60 (1.85H, m, Proα-H, Gluα-H), 4.99-5.15 (10H, m, 3 x OCH2Ph, 2 x =CH2), 5.57-5.82 (2H, m, 2 x C(H)=CH2) 及び 7.19-7.34 (16H, m, 3 x Ph, GluN-H);  δC (75 MHz; CDCl3) 22.2＊ (CH2, Proγ-C), 24.9 (CH2, Proγ-C), 27.2＊ (CH2, Proβ-C), 27.5 (CH2, Proβ-C), 31.8＊ [CH2, CH2(アリル)], 32.7 [CH2, CH2(アリル)], 35.9 (CH2, Gluβ-C), 36.0＊ (CH2, Gluβ-C), 41.2 (CH, Gluγ-C), 41.9＊ (CH, Gluγ-C), 46.4 (CH2, Proδ-C), 46.9＊ (CH2, Proδ-C), 47.6,＊ (CH2, Glyα-C), 48.3 (CH2, Glyα-C), 48.2,＊ (CH2, Glyα-C), 50.4 [CH2, CH2(アリル)], 50.7, 50.9 (CH2, Gluα-C), 51.2,＊ [CH2, CH2(アリル)], 51.4＊ (CH2, Gluα-C), 59.96＊ (CH, Proα-C), 60.0 (CH, Proα-C), 60.4＊ (CH, Proα-C), 66.3 (CH2, OCH2Ph), 66.4＊ (CH2, OCH2Ph), 66.5＊ (CH2, OCH2Ph), 67.0 (CH2, OCH2Ph), 67.1＊ (CH2, OCH2Ph), 67.35 (CH2, OCH2Ph), 67.4 (CH2, OCH2Ph), 117.0 (CH2, =CH2), 117.1＊ (CH2, =CH2), 117.5 (CH2, =CH2), 117.6 (CH2, =CH2), 117.8＊ (CH2, =CH2) 118.0＊ (CH2, =CH2), 127.56,＊ 127.63,＊ 127.77,＊ 127.85,＊ 128.08, 128.13, 128.17, 128.35, 128.39, 128.43 (CH, Ph), 133.3 (CH, C(H)=CH2), 133.5＊ (CH, C(H)=CH2), 134.0＊ (CH, C(H)=CH2), 134.2＊ (CH, C(H)=CH2), 134.3 (CH, C(H)=CH2), 135.2＊ (quat., Ph), 135.3 (quat., Ph), 135.7 (quat., Ph),, 136.4 (quat., Ph), 136.6＊ (quat., Ph), 155.9＊ (quat., NCO2), 156.5, (quat., NCO2), 168.4 (quat., Gly-CO), 170.9,＊ 171.0, 171.4, 171.8＊ (quat., Pro-CON, Gluα-CO), 174.3＊ (quat., Gluγ-CO) 及び 174.4 (quat., Gluγ-CO); m/z (FAB+) 696.3280 (MH+. C40H46N3O8 は696.3285を要する)
【００９４】
(9R,11S,14S)-1,4,12-トリアザ-9,11-カルボキシ-2,13-ジオキソビシクロ〔14.3.0〕-ヘプタデカントリフルオロ酢酸塩61
新たに昇華したカリウムtert-ブトキシド（0.009g、0.0792ミリモル）を窒素雰囲気下でテトラヒドロフラン（6cm3）中の1,3-ビス(2,4,6-トリメチルフェニル)-4,5-ジヒドロイミダゾリウムテトラフルオロボレート3 63（0.031g、0.0792ミリモル）の撹拌溶液に添加した。得られる懸濁液を２分間撹拌し、次いで乾燥ベンゼン（6cm3）中のビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド64（0.054g、0.066モル）の溶液を添加し、その紫色の溶液を80℃で35分間加熱した。暗褐色の溶液を室温に冷却し、乾燥ベンゼン（85cm3）中の保護されたトリペプチド59（0.155g、0.22ミリモル）の溶液を添加し、その混合物を45℃で65時間加熱した。溶媒を真空で除去し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、1:1、1:2、1:3、1:4）により精製してメタセシス生成物60及び一種以上の未同定生成物（0.110g）を褐色の油として得た：〔m/z (FAB+) 668.2982 (MH+. C38H42N3O8は668.2972を要する)〕。続いて、その混合物をメタノール／水（4:1、50cm3）に溶解し、10重量％のパラジウム／活性炭（0.035g、0.033ミリモル）を窒素雰囲気下で添加した。その反応フラスコに、水素のバルーンをフィットし、その混合物を室温で17時間撹拌した。その反応混合物をセライトTMのパッドで濾過し、メタノール／水（4:1、100cm3）で洗浄し、真空で濃縮してフィルム（0.064g）を得、これをRP HPLC〔20％のアセトニトリル：80％の水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）〕により精製した。トルエン／エーテル混合物から繰り返し蒸発させ、冷凍乾燥機で乾燥させて61（0.045g、59から58％）をオフホワイトの固体として得た。61は1H NMR分析により配座異性体の65:35のトランス：シス混合物であることが示された（その比は夫々少量の配座異性体及び主要配座異性体の5-H原子に帰属されたδ2.99及び3.17-3.33にあるシグナルの積分により推定された）：
【００９５】
mp 120-130 ℃; [α]D -12.5 (c 0.104 、H2O中);  δH  (300 MHz; D2O), 1.24-2.68 (13.65H, m, 5-HAHB, 6-H2, 7-H2, 8-H2, 9-H, 10-H2, 15-H2, 16-H2), 2.99＊ (0.35H, dt, J 12.9 及び 7.3, 5-HAHB), 3.17-3.33 (1H, m, 5-H), 3.40＊ (0.35H, d, J 15.6, 3-HAHB), 3.50-3.73 (2H, m, 17-H2), 3.98＊ (0.35H, d, J 15.6, 3-HAHB), 4.01 (0.65H, d, J 15.6, 3-HAHB), 4.08 (0.65H, d, J 15.8, 3-HAHB), 4.44 (0.65H, dd, J 11.6 及び 4.3, 11-H), 4.51 (0.65H, dd, J 7.5 及び 5.0, 14-H) 及び 4.59-4.64＊ (0.7H, m, 11-H, 14-H); δC (75 MHz; D2O)  21.0, 21.4,＊ 21.7,＊ 22.2,＊ 23.6, 24.8, 25.2, 28.2, 31.2,＊ 31.3,＊ 31.6 (CH2, 6-C, 7-C, 8-C, 10-C, 15-C, 16-C), 38.4＊ (CH, 9-C), 40.2 (CH, 9-C), 45.5＊ (CH2, 3-C, 5-C), 46.9, 47.0 (CH2, 17-C, 5-C), 47.5＊, (CH2, 17-C), 48.2, (CH2, 3-C), 49.6 (CH, 11-C), 50.5＊ (CH, 11-C), 59.9＊ (CH, 14-C), 61.3 (CH, 14-C), 116.2 (q, J 291, CF3), 162.6 (q, J 35.5, CF3CO2H), 164.4＊ (quat., 2-C), 164.9 (quat., 2-C), 173.4,＊ 173.4＊ (quat., 13-C, 11-CO), 173.4, 173.4 (quat., 13-C, 11-CO), 179.3＊ (quat., 9-CO) 及び 179.8 (quat., 9-CO); m/z (FAB+) 356.1829 [MH(遊離塩基)+. C16H26N3O6 は356.1822を要する]; 
【００９６】
〔少量の成分はグリシル-L-プロリル-L-γ-ブチルグルタミン酸トリフルオロ酢酸塩62と一時的に帰属され、13C NMR分析により配座異性体の78:22のトランス：シス混合物であると示された（その比は夫々少量の配座異性体及び主要配座異性体のGluα-C原子に帰属されたδ51.2及び51.8にあるシグナルの積分により推定された）〕：
mp 155-190 ℃(分解); δH  (400 MHz; D2O), 0.90 (3H, t, J 6.5, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 1.33 (4H, br s, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 1.64 (2H, br q, J 7.0, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 2.03-2.17 (5H, m, Gluβ-H2, Proγ-H2, Proβ-HAHB), 2.31-2.35 (0.78H, m, Proβ-HAHB), 2.57 (1H, p, J 6.9, Gluγ-H), 3.59-3.75 (2.18H, m, Proδ-H2, Glyα-HAHB＊), 3.98-4.10 (1.82H, Glyα-H2, Glyα-HAHB＊), 4.47 (1H, t, J 7.5, Gluα-H) 及び 4.51-4.56 (1H, m, Proα-H); δC (100 MHz; D2O)  13.0 (CH3, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 21.7 (CH2, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 21.8＊ (CH2, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 24.0 (CH2, Proγ-C), 28.1 (CH2, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 28.2＊ (CH2, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 29.3 (CH2, Proβ-C), 30.9 (CH2, Gluγ-CH2CH2CH2CH3), 31.3＊, 31.6＊, 32.1＊ (CH2), 32.3 (CH2, Gluβ-C), 40.1＊ (CH2, Glyα-C), 40.3 (CH2, Glyα-C), 42.0 (CH, Gluγ-C), 43.0＊ (CH, Gluγ-C), 46.8 (CH2, Proδ-C), 47.4＊ (CH2, Proδ-C), 51.2 (CH, Gluα-C), 51.8＊ (CH, Gluα-C), 59.9＊ (CH, Proα-C), 60.2 (CH, Proα-C), 115.5 (q, J 291, CF3), 162.9 (q, J 35.2, CF3CO2H), 165.5 (quat., Gly-CO), 166.0＊ (quat., Gly-CO), 173.5＊ (quat., CO), 174.0 (quat., CO), 174.5＊ (quat., CO), 174.8 (quat., CO), 180.0 (quat., Gluγ-CO) 及び 180.2＊ (quat., Gluγ-CO); m/z (FAB+) 358.1978 [MH(遊離塩基)+. C16H28N3O6 は358.1978を要する]
実施例６：(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕-ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩の合成
【００９７】
【化２１】
2006523213.tif 000022
【００９８】
スキーム１試薬、条件及び収率：(i)グラブス触媒、CH2Cl2、還流、48時間、次いでDMSO、室温、24時間（46％）；(ii)PtO2、THF、H2、室温、16時間、次いで30％のHBr/HOAc、室温、２時間、次いでNaHCO3、H2O、ジオキサン、Boc2O、室温、４日（78％、３工程）；(iii)BoP-Cl、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、24時間（64％）；(iv)CF3CO2H、CH2Cl2、室温、４時間（80％）
(6Z,9R,12S)-1,4-ジアザ-4-ベンジルオキシカルボニル-12-tert-ブトキシカルボニル-2-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデカ-6-エン65
乾燥ジクロロメタン（60cm3）中のジエン17（0.11g、0.242ミリモル）の脱気溶液に、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（グラブス触媒）（0.020g、0.024ミリモル）を窒素雰囲気下で添加し、得られる紫色の溶液を24時間にわたって加熱、還流した。次いで更にビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（クラブス触媒）（0.020g、0.024ミリモル）を添加し、還流を更に24時間続けた。その溶液を室温に冷却し、ジメチルスルホキシド（0.16cm3、2.26ミリモル）を添加し、オレンジ色／褐色の溶液を22時間撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をクロマトグラフィー（SiO2、ヘキサン-酢酸エチル、3:1、2:1、1:1）により精製して殆ど無色の油を得、これを更にクロマトグラフィー（C18 RPシリカ、100:0、9:1、9:3、1:1、1:9、水-アセトニトリル）により精製してアルケン65（0.046g、46％）を無色の油として得た。アルケン65は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した。加えて、N-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の1:1混合物をもたらすことが示された： [α]D -243.9 (c 0.27 、CH2Cl2中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.49 [9H, s, C(CH3)3], 1.84-2.34 (5H, m, 8-HAHB, 10-H2 及び 11-H2), 2.98-3.08 (1H, m, 8-HAHB), 3.69-3.88 (2H, m, 5-HAHB 及び 3-HAHB),  4.0 (1H, p, J 7.6, 9-H), 4.33-4.61 (3H, m, 5-HAHB, 3-HAHB 及び 12-H), 5.10-5.30 (2H, m, OCH2Ph), 5.51-5.65 (1H, m, 6-H), 5.98-6.09 (1H, m, 7-H) 及び 7.29-7.38 (5H, m, Ph); δC (100 MHz; CDCl3)  27.2 (CH2, 11-C), 28.0 [CH3, C(CH3)3], 33.9 (CH2, 8-C), 35.1 (CH2, 10-C), 42.2 (CH2, 5-C), 42.3 (CH2, 5-C), 45.7 (CH2, 3-C), 45.9 (CH2, 3-C), 59.5 (CH, 9-C), 59.6 (CH, 9-C), 61.2 (CH, 12-C), 61.3 (CH, 12-C), 67.4 (CH2, OCH2Ph), 67.5 (CH2, OCH2Ph), 81.4 [quat., C(CH3)3], 81.5 [quat., C(CH3)3], 125.8 (CH, 6-C), 126.0 (CH, 6-C), 127.7 (CH, Ph), 127.8 (CH, Ph), 127.81 (CH, Ph), 127.9 (CH, Ph), 128.3 (CH, Ph), 132.0 (CH, 7-C), 132.4 (CH, 7-C), 136.5 (quat., Ph), 155.8 (quat., NCO2), 156.2 (quat., NCO2), 167.2 (quat., 2-C), 167.4 (quat., 2-C), 171.2 (quat., 12-CO)及び171.4 (quat., 12-CO); m/z (EI+) 414.2154 (M+. C23H30N2O5 は414.2154を要する)
【００９９】
(9R,12S)-1,4-ジアザ-4-tert-ブチルオキシカルボニル-2-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデカ-2-カルボン酸66
テトラヒドロフラン（4cm3）中のアルケン65（0.12g、0.29ミリモル）の撹拌溶液に、酸化白金（0.0066g、0.029ミリモル）を窒素流下で添加した。その混合物を16時間にわたって水素化し（１気圧のH2）、セライトTMで濾過し、溶媒を真空で除去した。残渣を酢酸中の臭化水素酸の溶液（30％w/w、3cm3）に溶解し、室温で２時間撹拌した。揮発物を真空で30℃で除去し、続いてメタノール：水(3:1)を数回添加し、蒸発させて臭化水素酸塩を得、これを飽和炭酸水素ナトリウムの溶液（3cm3）に溶解した。次いでジオキサン（2cm3）を添加し、ジ-tert-ブチルジカーボネートをその不透明の溶液に添加した（0.076g、0.350ミリモル）。得られる懸濁液を24時間撹拌し、ジ-tert-ブチルジカーボネート（0.076g、0.3504ミリモル）を添加し、撹拌を更に72時間続けた。水（10cm3）を添加し、その溶液をジクロロメタンで洗浄し、水層を2M塩酸水溶液で酸性にし、ジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を除去して油（0.08g）を得、これをクロマトグラフィー（SiO2、2:1:0、2:1:0.3、ヘキサン-酢酸エチル-酢酸）により精製して酸66（0.074g、約78％）を無色の油として得た。酸66は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した。加えて、N-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の1:1混合物をもたらすことが示された：δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.25-1.48 [11H, m, C(CH3)3, 8-HAHB 及び 6-HAHB 又は 7-HAHB], 1.54-1.82 (5H, m, 8-HAHB, 10-HAHB 及び 6-HAHB 又は 7-HAHB), 1.90-2.03 (1H, m, 10-HAHB), 2.10-2.33 (2H, m, 11-H2), 2.78 (1H, td, J 12.7 及び 2.6, 5-HAHB), 3.78-3.95 (2H, m, 5-HAHB 及び 3-H), 4.20-4.30 (1H, m, 9-H), 4.52 (0.5H, d, J 17.7, 3-HAHB), 4.62 (1H, t, J 8.6, 12-H) 及び 4.76 (0.5H, d, J 17.2, 3-HAHB);  δC (100 MHz; CDCl3)  22.2 (CH2, 6-C 又は 7-C), 27.6 (CH2, 6-C 又は 7-C), 24.3 (CH2, 11-C), 24.8 (CH2, 11-C), 26.8 (CH2, 6-C 又は 7-C), 27.9 (CH2, 6-C 又は 7-C), 28.3 [CH3, C(CH3)3], 32.6 (CH2, 10-C), 33.1 (CH2, 10-C), 34.8 (CH2, 8-C), 35.3 (CH2, 8-C), 51.1 (CH2, 5-C), 51.7 (CH2, 5-C), 54.7 (CH2, 3-C), 55.9 (CH2, 3-C), 56.6 (CH, 9-C), 56.7 (CH, 9-C), 60.8 (CH, 12-C), 61.1 (CH, 12-C), 80.7 [quat., C(CH3)3], 154.8 (quat., NCO2), 155.6 (quat., NCO2), 170.0 (quat., 2-C), 170.5 (quat., 2-C), 174.1 (quat., 12-CO) 及び 174.7 (quat., 12-CO); m/z (FAB+) 327.1925 (MH+. C16H27N2O5 は327.1920を要する)
【０１００】
(2S,9'S,12'S)-ジ-tert-ブチル2-{〔(1',4'-ジアザ-4'-tert-ブチルオキシカルボニル-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタノエート67
ビス(2-オキソ-3-オキサゾリジニル)ホスフィンクロリド（BoP-Cl）（0.08g、0.31ミリモル）を０℃でジクロロメタン（7cm3）中の酸66（0.07g、0.20ミリモル）、L-グルタミン酸ジ-tert-ブチルエステル塩酸塩21（0.085g、0.289ミリモル）及びトリエチルアミン（0.084cm3、0.60ミリモル）の溶液に添加した。その混合物を24時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（Na2SO4）、濾過し、溶媒を減圧で除去した。得られる油（0.141g）をクロマトグラフィー（SiO2、1:1、1:2、ヘキサン-酢酸エチル）により精製してアミド67（0.077g、約64％）を無色の油として得た。アミド67は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した。加えて、N-COカルバメート結合のまわりの制限された回転がまた配座異性体の46:54混合物をもたらすことが示された：
δH  (300 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.14-1.30 [2H, m, 8'-HAHB 及び H'-6(1H) 又は H'-7(1H)], 1.34-1.41 [27H, m, 3 x C(CH3)3], 1.54-2.28 (11H, m, 8'-HAHB, 10'-H2, 3-H2, 4-H2, 6'-H(3H) 又は 7'-H(3H)] 及び 11'-HAHB), 2.31-2.49 (1H, m, 11'-HAHB), 2.60-2.70 (1H, m, 5'-HAHB), 3.65-3.87 (2H, m, 5'-HAHB 及び 3'-HAHB), 4.18 (1H, br s, 9'-H), 4.39 (1H, q, J 7.6, 2-H), 4.48 (0.5H, d, J 17.5, 3'-HAHB),  4.65 (1H, t, J 7.8, 12'-H), 4.74 (0.5H, d, J 17.0, 3'-HAHB),  7.45 (0.46H, d, J 7.4, N-H), 及び 7.64 (0.54H, d, J 7.7, N-H); δC (75 MHz; CDCl3)  22.7 (CH2, 11'-C), 23.3 (CH2, 6'-C 又は 7'-C), 23.4 (CH2, 6'-C 又は 7'-C), 27.0 (CH2, 3-C, 6'-C 又は 7'-C), 27.7 (CH2, 3-C, 6'-C 又は 7'-C), 27.8 (CH2, 3-C, 6'-C 又は 7'-C), 28.2 (CH2, 3-C, 6'-C 又は 7'-C), 27.9 [CH3, C(CH3)3], 28.0 [CH3, C(CH3)3], 28.4 [CH3, C(CH3)3], 31.4 (CH2, 4-C), 32.5 (CH2, 10'-C), 32.8 (CH2, 10'-C), 34.4 (CH2, 8'-C, 35.1 (CH2, 8'-C), 50.7 (CH2, 5'-C), 51.5 (CH2, 5'-C), 52.25 (CH, 2-C), 52.33 (CH, 2-C), 54.6 (CH2, 3'-C), 55.0 (CH2, 3'-C), 56.6 (CH, 9'-C), 56.8 (CH, 9'-C), 60.2 (CH, 12'-C), 60.8 (CH, 12'-C), 80.4 [quat., C(CH3)3], 80.6 [quat., C(CH3)3], 81.9 [quat., C(CH3)3], 154.7 (quat., NCO2), 155.5 (quat., NCO2), 169.4 (quat., 2'-C), 169.8 (quat., 2'-C), 170.6 (quat., 12'-CO, 1-C, 5-C), 170.8 (quat., 12'-CO, 1-C, 5-C) 及び 171.8 (quat., 12'-CO, 1-C, 5-C); m/z (FAB+) 568.3592 (MH+. C29H50N3O8 は568.3598を要する)
【０１０１】
(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩68
アミド67（0.072g、0.126ミリモル）をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸の混合物（5:2、v/v）に溶解し、室温で４時間撹拌した。揮発物を蒸発させ、続いてRP-HPLC〔水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）：アセトニトリル、90:10、13ml/分〕により精製して、冷凍乾燥機で乾燥させた後に68（0.059g、80％）を白色の固体として得た。巨大環68は専らトランスC(O)-NPro配座異性体として存在した：mp 30-130 ℃; [α]D -36.9 (c 0.195 、MeOH中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si)  1.71-2.29 (11H, m, 6'-H2, 7'-H2, 8'-H2, 10'-H2, 3-H2 及び 11'-HAHB), 2.33-2.39 (1H, m, 11'-HAHB), 3.27 (1H, dt, J 10.2 及び 4.1, 5'-HAHB), 3.39 (1H, td, J 12.0 及び 2.2, 5'-HAHB), 3.76 (1H, d, J 13.6, 3'-HAHB), 4.25-4.20 (2H, m, 3'-HAHB 及び 9'-H), 4.45 (1H, dd, J 9.3 及び 5.1, 2-H) 及び 4.51 (1H, dd, J 9.2 及び 8.3, 12'-H); δC (100 MHz; CDCl3) 24.06 (CH2, 6'-C 又は 7'-C), 24.1 (CH2, 6'-C 又は 7'-C), 25.7 (CH2, 3-C), 27.7 (CH2, 11'-C), 29.6 (CH2, 4-C), 32.5 (CH2, 10'-C), 33.4 (CH2, 8'-C), 43.3 (CH2, 5'-C), 46.8 (CH2, 3'-C), 51.8 (CH, 2-C), 61.9 (CH, 12'-C), 62.8 (CH, 9'-C), 116.2 (quat., q, J 290, CF3), 162.6 (quat., q, J 35.2, CF3CO2H), 164.7 (quat., 2'-C), 173.4 (quat., 12'-CO), 174.6 (quat., 1-C), 及び 176.8 (quat., 5-C);  m/z (FAB+) 356.1823 [MH(遊離塩基)+. C16H26N3O6 は356.1822を要する]
実施例７：(2S,3'S,8'S,11'S)-2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソ-ビシクロ〔6.3.0〕ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩の合成
【０１０２】
【化２２】
2006523213.tif 000023
【０１０３】
スキーム１試薬、条件及び収率：(i)DCC、CH2Cl2、０℃〜室温、18時間（81％）；(iii)グラブス触媒、CH2Cl2、45℃、４日、次いでdmso、室温、一夜（39％）；(iii)CF3CO2H、CH2Cl2、室温、５時間、次いでNaHCO3、H2O、ジオキサン、Boc2O、室温、21時間；(iv)BoP-Cl、Et3N、CH2Cl2、０℃〜室温、19時間（３工程にわたって60％）；(v)PtO2、EtOAc、H2、CF3CO2H、室温、６時間、次いでPtO2、THF/MeOH、H2、室温、一夜、次いでCH2Cl2、CF3CO2H、室温、４時間（12％）
(2S,5S)-N-tert-ブトキシカルボニル-α-アリルグリシン-5-アリル-L-プロリンtert-ブチルエステル69
N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド（0.057g、0.2761ミリモル）をジクロロメタン（5cm3）中のアミン14（0.053g、0.251ミリモル）及びN-tert-ブトキシカルボニル-α-アリルグリシン２（0.059g、0.2761ミリモル）の撹拌溶液に添加し、その混合物を一夜撹拌し、次いでセライトTMで濾過してDCUを除去した。続いてその反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（MgSO4）、濾過し、溶媒を除去して油（0.106g）を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、7:1、5:1）により精製してジエン69（0.083g、81％）を無色の油として得た。NMRスペクトルの複雑さのために、データを報告しない；m/z (FAB+) 409.2707 (MH+. C22H37N2O5は409.2702を要する)。
【０１０４】
(8S,11S)-1-アザ-2-オキソ-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-11-tert-ブトキシカルボニルビシクロ〔6.3.0〕ウンデカ-5-エン70
乾燥ジクロロメタン（32cm3）中のジエン69（0.053g、0.129ミリモル）の脱気溶液に、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（グラブス触媒）（0.011g、0.0129ミリモル）を窒素流下で添加し、得られる紫色の溶液を窒素雰囲気下で24時間にわたって加熱、還流した。更にビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ベンジリデンルテニウムジクロリド（グラブス触媒）（0.011g、0.0129ミリモル）を添加し、還流を更に48時間続け、その時間後にグラブス触媒の別の部分（0.011g、0.0129ミリモル）を添加し、その溶液を更に24時間還流した。オレンジ色／褐色の溶液を室温に冷却し、ジメチルスルホキシド（0.151cm3、1.935ミリモル）を添加し、その溶液を一夜撹拌した。溶媒を真空で除去し、残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、4:3、3:1、2:1）により精製してアルケン70（0.0237g、39％）をオフホワイトの固体として得た。アルケン70は専らトランスC(O)-NPro配座異性体であることが示された：mp 175-195 ℃; [α]D -24.9 (c 0.237 、MeOH中); δH  (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.45 [9H, s, C(CH3)3], 1.47 [9H, s, C(CH3)3], 1.68-1.74 (1H, m, 9-HAHB), 1.82 (1H, td, J 11.0 及び 5.9, 10-HAHB), 2.17-2.26 (2H, m, 9-HAHB 及び 10-HAHB), 2.27-2.40 (1H, br m, 7-HAHB), 2.49 (1H, br d, J 17.6, 7-HAHB), 2.55-2.63 (1H, m, 4-HAHB), 2.66-2.80 (1H, m, 4-HAHB), 4.40 (1H, dd, J 8.6 及び 4.2, 11-H), 4.45-4.62 (2H, m, 3-H 及び 8-H), 5.62-5.68 (2H, m, H-6 及び N-H) 及び 5.80-5.90 (1H, m, 5-H);  δC (100 MHz; CDCl3) 25.5 (CH2, 10-C), 27.9 [CH3, C(CH3)3], 28.3 [CH3, C(CH3)3], 32.6 (CH2, 4-C), 33.4 (CH2, 7-C 及び 9-C), 55.8 (CH, 3-C), 57.2 (CH, 8-C), 61.5 (CH, 11-C), 79.5 [quat., C(CH3)3], 81.2 [quat., C(CH3)3], 128.6 (CH, 5-C 及び 6-C), 155.1 (quat., NCO2), 169.6 (quat., 2-C) 及び 171.2 (quat., 11-CO); m/z (EI+) 380.2304 (M+. C20H32N2O5 は380.2311を要する)
【０１０５】
(2S,8'S,11'S)-ジ-tert-ブチル2-{〔(1-アザ-2-オキソ-3-tert-ブトキシカルボニルアミノビシクロ〔6.3.0〕ウンデカ-5-エン)-11-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジオエート73
アルケン70（0.021g、0.055ミリモル）を室温で５時間にわたってジクロロメタン：トリフルオロ酢酸（3:1、v/v、4cm3）中で撹拌した。揮発物を真空で除去して油を得、これを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（1.5cm3）に溶解した。ジオキサン（1cm3）を添加し、続いてジ-tert-ブチルジカーボネート（0.015g、0.066ミリモル）を添加し、ミルク状の懸濁液を室温で21時間撹拌した。溶液が得られるまで、その反応液を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。水層を2M塩酸水溶液で酸性にし、ジクロロメタンで抽出し、合わせた有機抽出液を乾燥させた（Na2SO4）。溶媒を真空で除去して酸71（0.012g）を得、これをジクロロメタン（3cm3）に溶解した。グルタミン酸ジ-tert-ブチルエステル塩酸塩72（0.013g、0.044ミリモル）を添加し、その溶液を０℃に冷却した。トリエチルアミン（0.013cm3、0.092ミリモル）及びビス(2-オキソ-3-オキサゾリジニル)ホスフィンクロリド（BoP-Cl）（0.012g、0.048ミリモル）を添加し、その混合物を19時間撹拌した。その反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、2M塩酸水溶液で洗浄し、乾燥させ（Na2SO4）、溶媒を除去して油（0.033g）を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：酢酸エチル、2:1、1:1、1:2）により精製してアミド73（0.0125g、60％、３工程）を無色の油として得た：[α]D +12.1 (c 0.247 、CH2Cl2中);  δH (400 MHz; CDCl3; Me4Si) 1.45-1.48 [27H, s, 3 x C(CH3)3], 1.65-1.75 (1H, m, 9'-HAHB), 1.87-1.96 (1H, m, 3-HAHB), 2.02-2.41 (7H, m, 10'-H2, 4-H2, 3-HAHB, 9'-HAHB 及び 7'-HAHB), 2.51 (1H, br d, J 17.4, 7'-HAHB), 2.57-2.64 (1H, m, 4'-HAHB), 2.70-2.80 (1H, m, 4'-HAHB), 4.39-4.48 (2H, m, 11'-H 及び 2-H), 4.52-4.62 (2H, m, 8'-H 及び 3'-H), 5.63-5.69 (1H, m, 6'-H), 5.78-5.84 (1H, m, 5'-H), 5.91 (1H, br s, N-H) 及び 6.73 (1H, d, J 7.0, N-H);  δC (100 MHz; CDCl3) 25.4 (CH2, 10'-C), 27.2 (CH2, 3-C), 27.9 [CH3, C(CH3)3], 28.0 [CH3, C(CH3)3], 28.3 [CH3, C(CH3)3], 31.3 (CH2, 4-C), 32.5 (CH2, 5'-C), 33.3 (CH2, 9'-C), 33.7 (CH2, 7'-C), 52.3 (CH, 2-C), 56.3 (CH, 3'-C), 57.8 (CH, 8'-C), 61.9 (CH, 11'-C), 79.7 [quat., C(CH3)3], 80.6 [quat., C(CH3)3], 82.0 [quat., C(CH3)3], 127.9 (CH, 5'-C), 128.6 (CH, 6'-C), 155.4 (quat., NCO2), 170.4 (quat., 2'-C), 170.8 (quat., CO), 171.7 (quat., CO) 及び 172.6 (quat., CO)
【０１０６】
(2S,3'S,8'S,11'S)-2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソ-ビシクロ〔6.3.0〕ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩74
PtO2（0.001g、0.0042ミリモル）を窒素雰囲気下で酢酸エチル：トリフルオロ酢酸（5:3、v/v、8cm3）中のアミド73（0.012g、0.021ミリモル）の撹拌溶液に添加した。その混合物を一夜にわたって水素化し（１気圧の水素）、セライトTMで濾過し、溶媒を真空で除去した。NMR及びHPLC分析は反応が不完全であることを示した（二重結合及び保護基の両方が残っている）。こうして、PtO2（0.0003g、0.0126ミリモル）を窒素雰囲気下でテトラヒドロフラン：メタノール（1:1、v/v、2cm3）中の残渣の撹拌溶液に添加した。その混合物を一夜にわたって水素化し（１気圧の水素）、セライトTMで濾過し、溶媒を真空で除去した。残渣をジクロロメタン（3cm3）に溶解し、トリフルオロ酢酸（1cm3）を添加し、その溶液を室温で４時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、RP HPLC〔90％の水（0.05％のトリフルオロ酢酸を含む）：10％のアセトニトリル、13ml/分〕により精製し、冷凍乾燥機で乾燥させて74（1.4mg、73から12％）を薄いフィルムとして得た。少量のサンプルが得られたために、旋光を記録しなかった：δH  (400 MHz; D2O) 1.74-2.42 (14H, m, 5'-H2, 6'-H2, 4'-H2, 9'-H2, 3-H2, 7'-H2 及び 10'-H2), 2.52 (2H, t, J 8.8, 4-H2), 4.3-4.4 (1H, m, 2H), 4.43-4.5 (1H, m) 及び 4.62-4.69 (1H, m); δC  (100 MHz; D2O) 22.3 (CH2), 25.4 (CH2), 28.4 (CH2), 29.0 (CH2), 30.2 (CH2), 32.4 (CH2), 33.7 (CH2), 53.9 (CH), 55.1 (CH), 60.2 (CH), 62.8 (CH), 168.1 (quat., CO) 及び 173.7 (quat., CO); 
注：少量のサンプルのために、２個の四級炭素及びトリフルオロ酢酸塩シグナルを検出しなかった；m/z (FAB+) 356.1816 〔MH（遊離塩基）+. C16H26N3O6は356.1822を要する〕
【０１０７】
in vitro試験
以下の実施例は本発明の特徴を実証するために示される。それらは限定であることを目的とするものではなく、本発明のその他の組成物及び方法が不当な実験をしないで開発し得る。これらの組成物及び方法の全てが本発明の一部であると考えられる。本明細書に引用された全ての文献は参考として完全に含まれる。
Auckland Animal Ethics Committee大学により認められた指針のもとに開発されたプロトコルを使用して、下記の全ての実験を行なった。
実施例８：小脳細胞外殖体に関する環状G-2アリルPの効果
in vitroの神経細胞に関する本発明の化合物の効果を測定するために、成体ラットからの小脳外殖体を使用して一連の研究を行なった。in vitro系は神経増殖、神経突起成長、神経束の形成及び神経細胞に関する毒素の作用、in vivoで観察された作用に対応する作用を研究するのに適している。こうして、in vitroの小脳外殖体を使用する研究の結果はin vivoの本発明の効果を予測する。
第一系列の研究において、小脳外殖体に関するグルタメートの作用を測定した。生理学的濃度で、グルタメートは哺乳類（ヒトを含む）のCNS中の神経伝達物質である。しかしながら、充分に高い濃度では、グルタメートは神経毒性であり、神経細胞死滅をもたらす。グルタメートは哺乳類（ヒトを含む）のCNS中の天然産の神経伝達物質であるので、またグルタメート神経毒性は一般の神経毒性（また細胞死滅及び変性を含む）の反映として当業界で認められているので、それは神経変性及び神経細胞死滅の治療に有効な薬剤を同定し、特性決定するのに有益な貴重な手段である。
【０１０８】
物質及び方法
カバースリップを大きいペトリ皿に入れ、70％のアルコール中で５分間洗浄し、次いでミリポアH2Oで洗浄した。カバースリップを空気乾燥し、34℃で２時間にわたってポリ-D-リシン（PBS中1mg/mlの原液、90-100μl）で被覆した。
小脳組織の抽出
生後８日のウィスターラットをその研究に使用した。ラットを犠牲にし、氷中に１分間入れ、断頭し、小脳を除去し、氷の上に置いた。小脳組織を大きいペトリ皿中の0.65％のグルコースを補給したPBS（10μl、65％の保存Ｄ(+)グルコース／1mlのPBS）1mlに入れ、一層小さい切片に細断し、23G（0.4mm）ニードルにより1mlのインスリンシリンジですり砕き、次いで大きいペトリ皿中のグルコース溶液に逆に噴出した。組織を篩分け（125μmの細孔サイズのゲージにより）、２回遠心分離し（60gで２分間）、培地を無血清BSA補給START V培地（バイオクロム、ドイツ）に交換した。第二の遠心分離工程をSTART V培地1mlで行なった。微小外殖体をSTART V培地500μl中で再生し、氷の上に置いた。
小脳細胞の培養
PDL被覆の２時間後に、スライドをミリポアH2Oで洗浄し、空気乾燥した。夫々のスライドを小さいペトリ皿（直径：35mm）に入れ、40μlのSTART V/細胞懸濁液を添加した。組織を34℃で２時間インキュベートした（入植期間）。次いでSTART V培地（1ml）をペトリ皿に添加し、空気中５％のCO2の存在下で100％の湿度で48時間にわたって34℃で培養した。
薬物適用
研究のために、或る外殖体培養物をビヒクル(PBS)のみに暴露した。最初の研究（研究１）において、毒素１（L-グルタメート-ミリポア水中100mM；最終濃度：1mM）10μl及び毒素２（3-ニトロプロピオン酸-50mM-pH7-ミリポア水中、最終濃度：0.5mM）10μlを試験すべき化合物（PBS中で調製され、1-100nMの最終濃度に希釈された10mM原液）と同時に適用した。夫々の場合に、薬物を研究の期間にわたって外殖体と接触させた。
薬物効果の測定方法
外殖体を研究期間にわたって薬物に暴露した後、細胞をその後にPBS中ですすぎ、次いで増大する濃度のパラホルムアルデヒド中で固定した（0.4％のPFA500μl、次いで1.2％のPFA、次いで３％のPFA、最後に４％のPFAを適用した（夫々の固定工程：2-3分間））。最後に、微小外殖体をPBS中ですすいだ。
次いで外殖体中の神経細胞を形態（神経突起の存在）について評価し、顕微鏡視野当りの生細胞としてカウントした。最高の細胞密度を示す四つの視野をカバースリップ当りカウントし、データを平均±平均の標準偏差(SEM)として表した；夫々n=4。非対スチューデントｔ検定を使用することにより、統計有意差を評価した。
【０１０９】
結果
研究の結果を図１及び図２に示す。グルタメート処理（1mM）はビヒクル処理対照と較べて神経突起を有する小脳神経細胞の約80％の損失をもたらした。対照的に、(2S,3'S,8'R,11'S) 2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩48及び(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩68の投与（夫々図１及び２）はグルタメートと同時に投与された場合に用量依存様式で神経突起を有する細胞の数を有意に増加した。(2S,3'S,8'R,11'S) 2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩48及び(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩68による処理（夫々図１及び２）はグルタメート誘発神経毒性からの有意な回復を示した。
結論
(2S,3'S,8'R,11'S) 2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩48及び(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩68による処理はグルタメート誘発神経毒素を阻止し、(2S,3'S,8'R,11'S) 2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩48及び(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩68が神経保護性であり、神経変性又は細胞死滅を反転し、かつ／又は抑制するのに使用し得ることを示した。
【０１１０】
実施例９：低酸素性虚血性障害
物質及び方法
本発明の化合物が卒中、心臓動脈バイパス移植手術(CABG)又はその他の低酸素発作に応答する神経障害を阻止し得るか否かを測定するために、一連の研究を低酸素-虚血性障害(HI)に暴露されたラットで行なった。成体ラット（ウィスター、280-310g、雄）を使用した。改良レビンモデル調製操作及び実験操作を使用した（Riceら, 1981, Ann. Neurol. :9: 131-141; Guanら, J., 1993, Cereb. Blood Flow Metab.: 13(4): 609-16）。これらの操作は、簡単に言えば、一側頚動脈結さつ、続いて移植された側脳室カニューレによる動物の吸入窒息により誘発されたHI障害からなる。案内カニューレをハロタン麻酔下で中心線の右に1.5mmかつ耳間ゼロ面に前方に7.5mmの硬膜の上に定位に置いた。右頚動脈をカニューレ挿入の２日後に二重に結さつした。麻酔からの１時間の回復後に、ラットの夫々をインキュベーターに入れ、そこで湿度（90±５％）及び温度（31℃±0.5℃）を更に１時間にわたって調節し、次いで10分間にわたって低酸素（６％の酸素）に暴露した。動物を処置の前に更に２時間にわたってインキュベーター中に保った。
ラットの対を低酸素-虚血発作の２時間後に(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩(68)（100pM）又はビヒクル（通常の食塩水）で脳室内(icv)処置した。夫々のグループのラットに発作の２時間後に軽い麻酔（1.5％のハロタン）下で(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩(68)又はビヒクルを同時に注入した。20μlの全容積を20分間にわたって微量注入ポンプにより注入した(icv)。
【０１１１】
組織検査を低酸素-虚血性障害の５日後にラットについて行なった。ラットを過剰用量のナトリウムペントバルビタールで殺し、通常の食塩水、続いて10％のホルマリンで経心臓潅流した。脳を通常のパラフィン埋め込み操作を使用して処理する最小２日前に同じ固定液中に保存した。
厚さ８μｍの冠状切片を線条、脳皮質及び海馬から切断し、チオニン及び酸フクシンで染色した。組織学的成果を三つのレベルで評価した：(1)線条の中間レベル、(2)完全な海馬が最初に現れたレベル及び(3)海馬の前角が丁度現れるレベル。組織損傷の重度を線条、皮質並びに海馬のCA1-2、CA3、CA4及び歯状回で評価した。組織損傷を神経細胞損失（好酸性（赤色）細胞質及び萎縮した核）、汎壊死及び細胞反応として同定した。下記のスコアリング系を使用して、組織損傷をスコア付けた。０：組織が組織損傷を示さなかった、１：５％未満の組織が損傷された、２：50％未満の組織が損傷された、３：50％以上の組織が損傷された、４：95％以上の組織が損傷された。
結果及び結論
この研究の結果を図３に示す。図３は低酸素-虚血性障害（夫々の組の左バー）が研究された脳の領域の夫々でかなりの損傷スコアーを生じたことを示す。また、図３は比較的低い用量の(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩(68)（夫々の組の右バー；100pM）の中枢投与がビヒクル処置されたグループと較べて試験された夫々の脳領域で組織損傷を有意に減少したことを示す（p<0.001）。
(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩(68)は、低酸素-虚血性障害後に投与された場合でさえも、低酸素-虚血性障害により生じられる神経損傷に対し神経保護性であり得ることがわかる。この驚くべき知見は(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩(68)が神経変性又は細胞死滅を特徴とする種々の症状を治療するのに有益な薬剤であることを示す。
【図面の簡単な説明】
【０１１２】
【図１】興奮毒性酸化ストレス後の動物の神経細胞生存に関する(2S,3'S,8'R,11'S) 2-{〔(3'-アミノ-1'-アザ-2'-オキソビシクロ〔6.3.0〕-ウンデシル)-11'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩48の効果を示すグラフである。
【図２】興奮毒性酸化ストレス後の動物の神経細胞生存に関する(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩68の効果を示すグラフである。
【図３】脳虚血の総合モデルにおける(2S,9'R,12'S)-2-{〔(1',4'-ジアザ-2'-オキソビシクロ〔7.3.0〕ドデシル)-12'-カルボニル〕アミノ}-1,5-ペンタンジ酸トリフルオロ酢酸塩68の神経保護効果を示すグラフである。
【図１】
2006523213.tif 000032
【図２】
2006523213.tif 000033
【図３】
2006523213.tif 000034
【国際調査報告】
2006523213.tif 000035