(57)【要約】本発明は、培養により微生物ＳＴ  ００３２３６（ＤＭＳ  １４４７６）により形成される式（Ｉ）の化合物に関する。本発明はまた、前記化合物の製造方法、その誘導体、式（Ｉ）の化合物を含む医薬、および医薬の製造のためのその使用に関する。    【化１】2006501132.tif 000020
2006501132.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2006501132.tif 000015
〔式中、
Ｒ、Ｒ2およびＲ3は互いに独立して：
１．Ｈ、または
２．Ｃ1−Ｃ6−アルキル、Ｃ2−Ｃ6−アルケニルまたはＣ2−Ｃ6−アルキニル［ここで、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖または分枝鎖であって、場合によって以下の基：
２．１  −ＯＨ、
２．２  ＝Ｏ、
２．３  −Ｏ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．４  −Ｏ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．５  −アリール、
２．６  −ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．７  −ＮＨ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．８  −ＮＨ2または
２．９  ハロゲン
（ここで、上記の置換基２．３から２．７は追加的に−ＣＮ、−アミドまたは−オキシム基で置換されうる）により１または２回置換されている］であり、
Ｒ4は、Ｃ1−Ｃ6−アルキルまたはＣ2−Ｃ6−アルケニル（ここで、アルキルおよびアルケニルは直鎖または分枝鎖であってよく、そして場合によって置換基２．１から２．９で記載されているように１または２回置換されている）、
Ｒ5は、Ｈまたはメチルであり、
Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5は、互いに独立してＯ、ＮＨ、Ｎ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル、Ｎ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル、Ｎ−Ｃ2−Ｃ6−アルキニル、Ｎ−アシル、Ｎ−アリール、Ｎ−Ｏ−ＲまたＳである。〕
の化合物、または式（Ｉ）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型、または前記の型のあらゆる比率での混合物、または式（Ｉ）の化合物もしくは式（Ｉ）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩。
【請求項２】
式（Ｉ）中、
Ｒが、
１．０  Ｈ、または
２．０  Ｃ1−Ｃ6−アルキル、Ｃ2−Ｃ6−アルケニルまたはＣ2−Ｃ6−アルキニル〔ここで、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖または分枝鎖であって、場合によって
以下の基：
２．１  −ＯＨ、
２．２  ＝Ｏ、
２．３  −Ｏ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．４  −Ｏ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．５  −アリール、
２．６  −ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．７  −ＮＨ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．８  −ＮＨ2または
２．９  ハロゲン
（ここで、上記の置換基２．３から２．７は追加的に−ＣＮ、−アミドまたは−オキシム基で置換されうる）により１または２回置換されている〕であり、
Ｒ2がＨであり、
Ｒ3がＣＨ3であり、
Ｒ4が−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3であり、
Ｒ5がＣＨ3であり、そして
Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5がＯであることを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
式（Ｉ）中、
ＲがＨであり、
Ｒ2がＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ3がＣＨ3であり、
Ｒ4が−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3であり、
Ｒ5がＣＨ3であり、そして
Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5がＯであることを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）化合物。
【請求項４】
式（IV）：
【化２】
2006501132.tif 000016
の化合物、または式（IV）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型、または上記の型のあらゆる比率での混合物、または式（IV）の化合物もしくは式（IV）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩。
【請求項５】
式（Ｖ）：
【化３】
2006501132.tif 000017
の化合物、または式（Ｖ）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型、または上記の型のあらゆる比率での混合物、または式（Ｖ）の化合物もしくは式（Ｖ）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩。
【請求項６】
式（VI）：
【化４】
2006501132.tif 000018
の化合物、または式（VI）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型、または上記の型のあらゆる比率での混合物、または式（VI）の化合物もしくは式（VI）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩。
【請求項７】
式（VII）：
【化５】
2006501132.tif 000019
の化合物、または式（VII）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型、または上
記の型のあらゆる比率での混合物、または式（VII）の化合物もしくは式（VII）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩。
【請求項８】
ＥＳＩおよびＦＡＢ質量分析によって立証された実験式Ｃ25Ｈ35ＮＯ4を有し、そして1ＨＮＭＲデータ  δ（ＣＤＣｌ3、２７５Ｋ）＝０.７０、０.８１、０.８７、０.９２、１.２４、１.２６、１.２９、１.３６、１.６５、１.６９、１.８４、２.０８、２.３０、２.３２、２.６６、３.０２、３.３６、３.７６、５.０６、５.３１、５.４４、７.１、１７.７３、および13ＣＮＭＲデータ  δ（ＣＤＣｌ3、２７５Ｋ）＝１７.９０、２０.７７、２２.４１、２３.２７、２３.４３、２５.５２、２７.２０、２７.４４、２９.４６、３１.９１、３４.９７、３７.６１、４２.１７、４５.６９、４９.０１、５１.６２、６４.２７、９８.８１、１２８.９５、１３０.０４、１３２.２５、１３２.８６、１７７.０５、１７８.１８、１９０.３６、２０３.３７であることを特徴とするガブセクチン、または化合物ガブセクチンの立体異性体型若しくは互変異性体型、または上記の型それぞれのあらゆる比率での混合物、または化合物ガブセクチンの生理学的に許容可能な塩または化合物ガブセクチンの立体異性体型若しくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩。
【請求項９】
ＥＳＩおよびＦＡＢ質量分析によって立証された実験式Ｃ27Ｈ39ＮＯ5を有し、そして1ＨＮＭＲデータ  δ（ＣＤＣｌ3、２７５Ｋ）＝０.７０、０.８０、０.８８、０.９２、１.２４、１.２５、１.３０、１.３５、１.６４、１.６８、１.６９、１.８３、２.１１、２.２３、２.２９、２.６７、３.０２、３.３６、３.６６、３.７１、５.０５、５.３０、５.４３、１７.７５および13ＣＮＭＲデータ  δ（ＣＤＣｌ3、  ２７５Ｋ）＝１７.９０、２０.８３、２２.４２、２３.４４、２３.５２、２５.５５、２７.１３、２７.４２、２９.４８、３１.９１、３５.００、３７.６３、４２.１７、４５.７０、４８.８９、５１.６５、５１.９３、６４.４９、９８.９１、１２８.８７、１３０.０８、１３２.３５、１３２.８６、１７３.０５、１７７.０６、１９０.３３、２０２.８６であることを特徴とするガブセクチンメチルエステル、または化合物ガブセクチンメチルエステルの立体異性体型若しくは互変異性体型、または上記の型それぞれのあらゆる比率での混合物、または化合物ガブセクチンメチルエステルの生理学的に許容可能な塩または化合物ガブセクチンメチルエステルの立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩。
【請求項１０】
式（Ｉ）の化合物が培養ブロス中に蓄積するまで、ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）またはＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）の変種および／または突然変異体を培地中で培養し、続いて式（Ｉ）の化合物を単離し、そして、必要によって薬理学的に許容可能な塩に変換することによって得ることができる式（Ｉ）の化合物。
【請求項１１】
化合物ガブセクチンが培養ブロス中に蓄積するまでＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）またはＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）の変種および／または突然変異体を培地中で培養し、続いて化合物ガブセクチンを単離し、そして、必要によって薬理学的に許容可能な塩に変換することによって得ることができる実験式Ｃ26Ｈ37ＮＯ5の化合物（ガブセクチン）。
【請求項１２】
微生物ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）またはＳＴ  ００３２３６の変種および／または突然変異体を水性栄養培地中で培養すること、式（Ｉ）の化合物を単離しそして精製すること、そして、必要によって明らかな化学的同等物および／または薬理学的に許容可能な塩に変換することを含む、式（Ｉ）の化合物の製造方法。  
【請求項１３】
微生物ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）またはＳＴ  ００３２３６の突然変異体若しくは変種を、炭素源および窒素源、そして、通例の無機塩類および微量元素を含む培地中、好気性条件下で培養することを特徴とする、請求項１２に記載の方法。  
【請求項１４】
通気培養法での培養を２０℃〜３５℃の間の温度および４〜１０の間のｐＨで実施する
ことを特徴とする、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
式（IV）のガブセクチンを、Ｃ1−Ｃ6アルキル−、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル−またはＣ2−Ｃ6−アルキニル−アルコール誘導体を用いて、またはＣ1−Ｃ6−アルキル−、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル−またはＣ2−Ｃ6−アルキニル−アルキル化剤を用いて、請求項４のよ
うにエステル化して請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物とすることを含み、ここで、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖または分枝鎖であり、場合によって基２．１から２．９によって１回または２回置換されることができ、ここで、置換基２．３から２．７はさらに−ＣＮ、−アミドまたは−オキシム基で置換されることができ、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＣＨ3であり、Ｒ4は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3であり、Ｒ5はＣＨ3であり、Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5はＯであることを特徴とする、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法。
【請求項１６】
エステル化をＣ1−アルキル化剤を用いて行うことを特徴とする請求項１５に記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法。
【請求項１７】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物の、医薬の製造のための使用。
【請求項１８】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物の、細菌を原因とする感染症の治療および予防用医薬の製造のための使用。
【請求項１９】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物および生理学的に適した１つまたは複数の助剤物質を含む医薬。
【請求項２０】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物を、生理学的に適した１つまたは複数の助剤物質と共に適当な投与形態にすることを含む請求項１９に記載の医薬の製造方法
【請求項２１】
微生物ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
数多くの抗生物質が細菌を原因とする感染病の治療のために使用されている。しかし、病原体は使われる医薬に対して抵抗力を強めてきており、β−ラクタム抗生物質、グリコペプチドまたはマクロライドなどの個別の抗生物質群だけに耐性になるのではなく、いくつかの耐性を同時に備えた、多剤耐性微生物と呼ばれるものがさらに大きな脅威をもたらしている。市販の抗生物質全てに耐性になった病原体さえも存在する。このような微生物が原因の感染病はもはや治療することができない。したがって、耐性微生物に対して使用することができる新規な薬剤が大いに必要とされている。何千もの抗生物質が文献に記載されてきたにもかかわらず、そのほとんどは毒性が強すぎて医薬として使用することができない。
【０００２】
比較的多いテトラミック酸（ｔｅｔｒａｍｉｃ  ａｃｉｄ）基本構造を有する抗生物質がすでに記載されている。テトラミック酸、すなわち２，４−ピロリジンジオンは、いくつかの微生物および海洋無脊椎動物により形成される種々の天然生成物の親化合物である。
【０００３】
・ハルジアン酸（ｈａｒｚｉａｎｉｃ  ａｃｉｄ）（非常にわずかな活性を持つ抗生物質）は、１９９４年に記載された（Ｒ．Ｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、４７、７３１−７３２、１９９４）；
１９９４年までに発表された天然テトラミック酸誘導体は、Ｂ．Ｊ．Ｌ．Ｒｏｙｌｅｓにより総説中に記載されている（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．９５、１９８１−２００１ページ、１９９５）。
【０００４】
一部が抗菌特性を有する更なる天然テトラミック酸が１９９５年から文献に記載されている：
・ルウテリサイクリン（ｒｅｕｔｅｒｉｃｙｃｌｉｎ）（Ａ  Ｈｏｅｌｔｚｅｌ  ｅｔ
ａｌ．、Ａｎｄｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．１１２、２８８６−２８８８、２０００）、わずかな抗菌活性を有する化合物；
・イクイセチン（ｅｑｕｉｓｅｔｉｎ）およびホマセチン（ｐｈｏｍａｓｅｔｉｎ）（Ｓ．Ｓ．Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３９、２２４３−２２４６、１９９８）は、ＨＩＶ−１インテグラーゼ抑制剤の異性体である；
・クリプトシン（ｃｒｙｐｔｏｃｉｎ）（Ｊ．Ｙ．Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２、７６７−７７０、２０００）、抗真菌性化合物である；
・バンコレスマイシン（Ｎ．Ｖ．Ｓ．Ｒａｍａｋｒｉｓｈｎａ  ｅｔ  ａｌ．、Ｉｎｔ．特許公開番号ＷＯ  ００２８２０６４）、抗生物質；
・コニオセチン（ｃｏｎｉｏｓｅｔｉｎ）（Ｌ．Ｖｅｒｔｅｓｙ  ｅｔ  ａｌ．、独特許番号ＤＥ  １００６０８１０．８）、テトラミック酸部分とナフチル部分を有する強力な抗生物質。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
驚くべきことに、菌株ＳＴ  ００３２３６（ＤＭＳ  １４４７６）が、細菌に対して非常に活性を示すだけでなく、また許容性の良好な新規な抗生物質ガブセクチン（ｇａｂｕｓｅｃｔｉｎ）を形成することができることが見出された。
したがって、本発明は、菌株ＳＴ  ００３２３６（ＤＭＳ  １４４７６）により形成される化合物、およびその生理学的に許容される塩、立体異性体、互変異性体、誘導体特にエステル誘導体、およびエーテルなどのような明らかな化学的同等物に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は式（Ｉ）：
【化１】
2006501132.tif 000003
の化合物、または式（Ｉ）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型、または前述の型のあらゆる比率での混合物、または式（Ｉ）の化合物もしくは式（Ｉ）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容される塩に関し、
【０００７】
式中、
Ｒ、Ｒ2およびＲ3は互いに独立して：
１．Ｈ、または
２．Ｃ1−Ｃ6−アルキル、Ｃ2−Ｃ6−アルケニルまたはＣ2−Ｃ6−アルキニル〔ここで、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖または分枝鎖であって、場合によって以下の基：
２．１  −ＯＨ、
２．２  ＝Ｏ、
２．３  −Ｏ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．４  −Ｏ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．５  −アリール、
２．６  −ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．７  −ＮＨ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．８  −ＮＨ2、または
２．９  ハロゲン
（ここで、上記の置換基２．３から２．７は追加的に−ＣＮ、−アミドまたは−オキシム基で置換されうる）により１または２回置換されている〕であり、
Ｒ4は、Ｃ1−Ｃ6−アルキルまたはＣ2−Ｃ6−アルケニル（ここで、アルキルおよびアルケニルは直鎖または分枝鎖でよく、そして場合によって置換基２．１から２．９で記載されているように１または２回置換されている）、
Ｒ5は、Ｈまたはメチルであり、
Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5は、互いに独立してＯ、ＮＨ、Ｎ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル、Ｎ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル、Ｎ−Ｃ2−Ｃ6−アルキニル、Ｎ−アシル、Ｎ−アリール、Ｎ−Ｏ−ＲまたＳである。
【０００８】
Ｃ1−Ｃ6−アルキルは、１から６個のＣ原子、好ましくは１から４個のＣ原子を有する直鎖のまたは分枝鎖のアルキル、たとえば、メチル、エチル、ｉ−プロリル、ｔｅｒｔ−ブチルおよびヘキシルである。
【０００９】
Ｃ2−Ｃ6−アルケニルは、２から６個のＣ原子を有する直鎖のまたは分枝鎖のアルケニルであり、１回、２回もしくは３回不飽和のもの、たとえば、アリル、クロチル（ｃｒｏｔｙｌ）、１−プロペニル、ペンタ−１,３−ジエニルおよびペンテニルである。
【００１０】
Ｃ2−Ｃ6−アルキニルは、２から６個のＣ原子を有する直鎖のまたは分枝鎖のアルキニルであり、１回もしくは２回飽和のもの、たとえば、プロピニル、ブチニルおよびペンチニルである。
【００１１】
アリールは、フェニル、ベンジルまたは１−もしくは２−ナフチルであり、たとえば、塩素、臭素、フッ素などのハロゲンにより、１〜４個のＣ原子を有するアルキル、好ましくはメチル−により、ヒドロキシルにより、１〜４個のＣ原子を有するアルコキシ、好ましくはメトキシにより、またはトリフルオロメチルにより追加的に置換されうる。
【００１２】
アシルは脂肪族または芳香族アシル基であり得る。脂肪族アシルは１〜７個好ましくは１〜４個のＣ原子を有するホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、ヘキサノイル、アクリロイル、クロトノイル、またはプロピオロイルなどであり、これはたとえば、塩素、臭素またはフッ素などのハロゲンにより、アミノにより、または１〜４個のＣ原子を有するアルキルアミノ、好ましくはメチル若しくはエチルアミノ基によりさらに置換されうる。芳香族アシルは、たとえばベンゾイルまたはナフトイルであり得、これらはたとえば、塩素、臭素またはフッ素などのハロゲンにより、１〜４個のＣ原子を有するアルキル、好ましくはメチルにより、ヒドロキシルにより、エチルアミノなどのアミノ基により、または１〜７個好ましくは１〜４個のＣ原子を有するアルコキシ基、特にメトキシにより追加的に置換されうる。
【００１３】
本発明は、好ましくは式（Ｉ）；
〔式中、Ｒは、
１．０  Ｈ、または
２．０  Ｃ1−Ｃ6−アルキル、Ｃ2−Ｃ6−アルケニルまたはＣ2−Ｃ6−アルキニル［ここで、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖または分枝鎖であって、場合によって以下の基：
２．１  −ＯＨ、
２．２  ＝Ｏ、
２．３  −Ｏ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．４  −Ｏ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．５  −アリール、
２．６  −ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6−アルキル（ここでアルキルは直鎖または分枝鎖である）、
２．７  −ＮＨ−Ｃ2−Ｃ6−アルケニル（ここでアルケニルは直鎖または分枝鎖である）、
２．８  −ＮＨ2または
２．９  ハロゲン
（ここで、上記の置換基２．３から２．７は追加的に−ＣＮ、−アミドまたは−オキシム基で置換されうる）により１または２回置換されている］であり、
Ｒ2はＨであり、
Ｒ3はＣＨ3であり、
Ｒ4は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3であり、
Ｒ5はＣＨ3であり、そして
Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5はＯである〕の化合物に関する。
【００１４】
特に好ましくは、本発明は式（Ｉ）：
（式中、ＲはＨであり、
Ｒ2はＨまたはＣＨ3であり、
Ｒ3はＣＨ3であり、
Ｒ4は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3であり、
Ｒ5はＣＨ3であり、そして
Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5はＯである）の化合物に関する。
【００１５】
化合物（Ｉ）の互変異性体型はたとえば、式（II）：
【化２】
2006501132.tif 000004
（式中、基Ｒ、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5は上で定義したとおりである）の化合物であり、式（Ｉ）の化合物の互変異性体型は、たとえば水素結合されたテトラミック酸構造部分から生じ、
【化３】
2006501132.tif 000005
そしてｐＨおよび溶液の極性などのパラメーターに依存して溶液中で互いに変換される。
【００１６】
他に指示がない限り、式（Ｉ）および（II）の化合物中のキラル中心はＲ配置またはＳ配置に存在することができる。本発明は、光学上純粋な化合物およびあらゆる比率の光学異性体混合物およびジアステレオマー混合物などの立体異性体混合物の双方に関する。
【００１７】
本発明に係る式（Ｉ）および（II）の化合物のうち、配置が式（III）：
【化４】
2006501132.tif 000006
の置換された水素化ナフチル骨格に対応している化合物が好ましい。
【００１８】
本発明はさらに、式（IV）：
【化５】
2006501132.tif 000007
の化合物、式（Ｖ）：
【化６】
2006501132.tif 000008
の化合物、式（VI）：
【化７】
2006501132.tif 000009
の化合物、式（VII）：
【化８】
2006501132.tif 000010
の化合物、または、式（IV）、（Ｖ）、（VI）もしくは（VII）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型、またはあらゆる比率での前述したそれぞれの型の混合物、または式（IV）、（Ｖ）、（VI）もしくは（VII）の化合物、または式（IV）、（Ｖ）、（VI）もしくは（VII）の化合物の立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩に関する。
【００１９】
本発明化合物は、文献で公知である物質とは、たとえば極性、化学構造または抗菌活性またはその他物性において異なる。特に、従来技術の化合物と比較して、本発明の化合物は、ナフチル部分に付加的なメチル基を含む。
【００２０】
本発明は、さらに式（Ｉ）から（VII）の化合物の明らかな化学的同等物に関する。
【００２１】
本発明の化合物の明らかな化学的同等物は、本発明の化合物と同じ活性を有し、取るに足らない化学的差異を示す化合物、または穏やかな条件下で本発明の化合物へ変換される化合物である。前記同等物には、たとえば、本発明化合物のまたは本発明化合物とのエステル、アゾメチン（シッフ塩基）、ケタール、オキシム、水素化生成物、還元生成物、錯化合物、または付加化合物が含まれる。
【００２２】
たとえば、活性化した酸（たとえば、酸塩化物または他の酸誘導体）は式（Ｉ）の化合物のヒドロキシル基と反応することができ、または式（Ｉ）の化合物の１つまたは複数の二重結合および／またはカルボニル基を、還元剤を用いて還元することができる、そのときに、たとえばＨ2／Ｐｄを用いて二重結合が還元され、たとえばＮａＢＨ4を用いてカルボニル基が還元される。上述の誘導化方法は、Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、第４版、１９９２などの教科書に記載されている。選択的に反応を実施するために、それ自体公知の方法で、反応の前に適した保護基を導入することが有益であろう。反応後保護基を除去し、その後反応生成物を精製する。
【００２３】
本発明はさらに、ＥＳＩおよびＦＡＢ質量分析によって立証された実験式Ｃ25Ｈ35ＮＯ4を有し、そして表２に示した1ＨＮＭＲおよび13ＣＮＭＲデータによって特徴づけられる化合物であるガブセクチン、または化合物ガブセクチンの立体異性体型または互変異性体型、または前述したそれぞれの型のあらゆる比率での混合物、または化合物ガブセクチンもしくは化合物ガブセクチンの立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩に関する。
【００２４】
本発明はさらに、ＥＳＩおよびＦＡＢ質量分析によって立証された実験式Ｃ27Ｈ39ＮＯ5を有し、そして表３に示した1ＨＮＭＲおよび13ＣＮＭＲデータによって特徴づけられる化合物であるガブセクチンメチルエステル、または化合物ガブセクチンメチルエステルの
立体異性体型または互変異性体型、または前述したそれぞれの型のあらゆる比率での混合物、または化合物ガブセクチンメチルエステルもしくは化合物ガブセクチンメチルエステルの立体異性体型もしくは互変異性体型の生理学的に許容可能な塩に関する。
【００２５】
本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物が培養ブロス中に蓄積するまでＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）またはＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）の変種および／または突然変異体を培地中で培養し、そして式（Ｉ）の化合物を単離し、そして、必要によっては薬理学的に許容可能な塩に変換することによって得ることができる式（Ｉ）の化合物に関する。
【００２６】
本発明はまた、化合物ガブセクチンが培養ブロス中に蓄積するまでＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）またはＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）の変種および／または突然変異体を培地中で培養し、そして化合物ガブセクチンを単離し、そして、必要によっては薬理学的に許容可能な塩に変換することによって得ることができる実験式Ｃ26Ｈ37ＮＯ5の化合物（ガブセクチン）に関する。
【００２７】
本発明は加えて、微生物ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）またはＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）の変種および／または突然変異体を液体栄養培地中で培養すること、式（Ｉ）の化合物を単離しそして精製すること、そして、必要によっては明らかな化学的同等物または薬理学的に許容可能な塩に変換することを含む、式（Ｉ）の化合物の製造方法に関する。
【００２８】
本発明はさらに、式（ＩＶ）のガブセクチンをＣ1−Ｃ6アルキル−、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル−もしくはＣ2−Ｃ6−アルキニル−アルコール誘導体と、またはＣ1−Ｃ6−アルキル−、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル−もしくはＣ2−Ｃ6−アルキニル−アルキル化剤と、好ましくはＣ1−Ｃ6−アルキニル−アルキル化剤と、特に好ましくはＣ1−アルキル化剤とエステル化し、式（Ｉ）（式中、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは直鎖または分枝鎖であり、請求項１に記載の式（Ｉ）に規定された基２．１から２．９によって１回または２回置換されることができ（ここで、置換基２．３から２．７はさらに−ＣＮ、−アミドまたは−オキシム基で置換されることができる）、Ｒ2はＨであり、Ｒ3はＣＨ3であり、Ｒ4は−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3であり、Ｒ5はＣＨ3であり、Ｘ、Ｘ2、Ｘ3、Ｘ4およびＸ5はＯである）の化合物を得ることを含む、式（Ｉ）の化合物の製造方法に関する。
【００２９】
Ｃ1−Ｃ6−アルキル−、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル−またはＣ2−Ｃ6−アルキニル−アルコール誘導体は、直鎖または分枝鎖であり、場合により上述の基２．１から２．９により１回または２回置換されていてもよく、ここで、置換基２．３から２．７はさらに−ＣＮ、−アミドまたは−オキシム基で置換されることができ、たとえば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、および、ｎ−ヘキサノール、２−ブテン−１−オール（クロチルアルコール）、１−プロペン−３−オール（アリルアルコール）、１，３−ペンタジエン−５−オール、１，４−ペンタジエン−３−オールそして、２−ペンテン−１−オール、１−ペンテン−４−オール（アリルメチルカルビノール）、１−ペンテン−３−オール（エチルビニルカルビノール）、２−プロピン−１−オール（プロパルギルアルコール）、１−ブチン−３−オール、２−ブチン−１−オール、３−ブチン−１−オール、１−ペンチン−３−オール、２−ペンチン−１−オール、３−ペンチン−１−オールおよび４−ペンチン−１−オールがあり、メタノールが好ましい。
【００３０】
Ｃ1−Ｃ6−アルキル−、Ｃ2−Ｃ6−アルケニル−またはＣ2−Ｃ6−アルキニル−アルキル化剤は直鎖または分枝鎖であり、場合により上述の基２．１から２．９により１回または２回置換されており、たとえば、Ｃ1−アルキル化剤としてはジアゾメタン誘導体があ
り、たとえば、トリメチルシリルジアゾメタンである。
【００３１】
上述のエステル化方法は、たとえば、Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、第４版、１９９２に記載されている。
【００３２】
菌株ＳＴ  ００３２３６はブダペスト条約の規則に従い、番号ＤＳＭ１４４７６の下、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ  Ｓａｍｍｌｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ  ｕｎｄ  Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ（ドイツ微生物および細胞培養収集機関）ＧｍｂＨ（ＤＳＭ）、Ｍａｓｃｈｅｒｏｄｅｒ  Ｗｅｇ  １Ｂ、３８１２４  Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、Ｇｅｒｍａｎｙに寄託されている。
【００３３】
前記方法は、ＳＴ  ００３２３６（ＤＭＳ１４４７６）、その突然変異体または変種を、１つまたは２つの炭素源および窒素源、無機塩類、そして、必要によって微量元素を含む培地中で好気性条件下で培養することを含む。
【００３４】
本発明に係る培養の進行および抗生物質の形成は、当業者に公知の方法、たとえば、バイオアッセイで生物活性を試験することにより、または薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）もしくは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）のようなのようなクロマトグラフ法によりモニターすることができる。
【００３５】
突然変異体とは、そのゲノムの１つまたは複数の遺伝子が修飾された微生物であって、１つまたは複数の遺伝子が依然として有効でそして遺伝する本発明の化合物を生成する微生物の能力を担っている遺伝子である微生物である。
【００３６】
このような突然変異体は、公知の方法、たとえば紫外線またはＸ線等の照射などの物理的方法、またはメタンスルホン酸エチル（ＥＭＳ）；２−ヒドロキシ−４−メトキシ−ベンゾフェノン（ＭＯＢ）若しくはＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＭＮＮＧ）などの突然変異誘発化学物質を用いて、または“Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ”、Ｐｒｅｎｔｉｃｅ  Ｈａｌｌ、２３８−２４７ページ（１９８４）においてＢｒｏｃｋらが記載しているような方法で発生させることができる。
【００３７】
変種は微生物の表現型である。微生物は、環境に適応する能力を有しており、これにより生理学上の強い柔軟性を示す。表現的適応においては、微生物の全ての細胞が含まれ、そしてその変化の性質は遺伝的には条件づけられておらず、また、変えられた状況の下で可逆性ではない（Ｈ．Ｓｔｏｌｐ、Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｅｃｏｌｏｇｙ：ｏｒｇａｎｉｓｍ、ｈａｂｉｔａｔｓ、ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＧＢ、１８０ページ、１９８８）。
【００３８】
本発明に係る抗生物質を産生する突然変異体および変種のスクリーニングは、培養ブロス中に蓄積した活性化合物の生物活性の測定、たとえば、その抗菌効果の測定により、または抗菌活性を有することが知られている培養ブロス中の化合物を、たとえばＨＰＬＣまたはＬＣ−ＭＳ方法を用いて検出することにより実行することができる。
【００３９】
化合物ガブセクチンは、菌糸体および培養濾液の双方に見出される。それゆえ、培養溶液を濾過によって培養濾液と菌糸体に分離し、これらの画分を別々に乾燥することが好都合である。乾燥培養濾液および乾燥菌糸体を別々に、有機溶媒、たとえばメタノールまたは２−プロパノールで好都合に抽出される。
【００４０】
抽出は広い範囲のｐＨで行うことができるが、中性または弱酸性媒体で行うことが好都
合であり、ｐＨ３とｐＨ７との間が好ましい。抽出物は、たとえば真空中で濃縮し乾燥することができる。
【００４１】
本発明に係る抗生物質の単離のための方法の１つは、極性分離（ｐｏｌａｒｉｔｙ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ）の原理に従って、それ自体が公知である方法により進められる。
【００４２】
別の精製方法は、吸着樹脂上、たとえばＤｉａｉｏｎ(R)  ＨＰ−２０（Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ  Ｃａｓｅｉ  Ｃｏｒｐ．，Ｔｏｋｙｏ）、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ(R)  ＸＡＤ７（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ、ＵＳＡ）、Ａｍｂｅｒｃｈｒｏｍ(R)  ＣＧ（Ｔｏｓｏ
Ｈａａｓ、フィラデルフィア、ＵＳＡ）または同種の物質の上でのクロマトグラフィーである。数多くの逆相支持材、たとえば高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）において周知になったＲＰ8およびＲＰ18などが適している。
【００４３】
本発明に係る化合物の精製のための別の可能性は、順相クロマトグラフィー支持材と呼ばれるシリカゲルまたはＡｌ2Ｏ3または他の支持材などをそれ自体が公知である方法で用いることである。
【００４４】
別の単離方法は、モレキュラーシーブ、たとえばＦｒａｃｔｏｇｅｌ(R) ＴＳＫ  ＨＷ−４０（メルク、ドイツ）およびその他のものをそれ自体が公知である方法で用いる方法である。さらに、濃縮した材料から結晶化することによりガブセクチンを単離することもできる。有機溶媒およびこれらの混合物は、たとえば、無水であってもまたは水を含んでいてもこの目的に適している。本発明に係る抗生物質を単離および精製のための別の方法は陰イオン交換体（ｐＨ４から１０の範囲が好ましい）および陽イオン交換体（ｐＨ２から５の範囲が好ましい）を用いる方法である。多量の有機溶媒が添加されたバッファー溶液を用いることは、この目的に特に適している。ガブセクチン、その前記化学的誘導体、およびその明らかな化学的同等物は、当業者に公知の方法を用いることによって対応する薬理学的に許容可能な塩に変換することができる。
【００４５】
本発明に係る化合物の薬理学的に許容可能な塩は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１７版、１４１８ページ（１９８５））に記載されているように、無機塩および有機塩の両方であると考えられている。特に適している塩は、アルカリ金属塩、アンモニウム塩、アルカリ土類金属塩、生理学的に許容可能なアミンとの塩、および無機または有機酸（たとえばＨＣＩ、ＨＢｒ、Ｈ2ＳＯ4、マレイン酸およびフマル酸）との塩である。
【００４６】
驚くべきことに、本発明に係る式（Ｉ）の化合物が抗菌作用を示し、これにより細菌感染により引き起こされる疾病の治療に適していることが見出された。表１は実施例によるガブセクチンの最小阻止濃度（ＭＩＣ）を要約したものである。
【００４７】
〔表１〕
表１．段階希釈試験による化合物ガブセクチンのインビトロの抗菌活性
細菌（株）             ＭＩＣ値（μｇ／ｍＬ）
Ｓ.  ａｕｒｅｕｓ（ＳＧ５１１）                    ５
Ｓ.  ａｕｒｅｕｓ（Ｅｘｐ５４１４６）            ２０
Ｓ.  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（Ａ５６１）                ２０
Ｅ.  ｆａｅｃｉｕｍ（Ｍ７８Ｌ）                  ４０                       
【００４８】
ガブセクチンは、その有効濃度においてまたはそれより高い濃度において良好に許容されるものである。
【００４９】
したがって、本発明はまた、１つまたは複数の本発明に係る式（Ｉ）から（VII）の化合物の医薬としての使用、および１つまたは複数の本発明に係る式（Ｉ）から（VII）の化合物の医薬、特に細菌感染の治療および／または予防のための医薬の製造への使用に関する。
【００５０】
本発明は、さらに、１つまたは複数の本発明に係る化合物を含む医薬に関する。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物を含む前記医薬は、１つまたは複数の生理学的助剤物質を用いて製造され、そして適当な投与形態にされる。
【００５２】
本発明に係る医薬は、経腸的に（経口的に）、非経口的に（筋肉内注射で、または、静脈内注射で）、直腸に、または、局部的に（局所的に）用いることができる。それらは、溶液、粉末（錠剤およびカプセル、マイクロカプセルを含む）、軟膏（クリームまたはゲル）、または坐薬の形で投与されることができる。かかる製剤に適した補助物質は、薬学的に慣用の液体または固体の充填剤および増量剤、溶媒、乳化剤、滑剤（ｇｌｉｄａｎｔｓ）、風味矯味剤、着色剤および／または緩衝作用物質である。
【００５３】
体重１ｋｇ当たり０.１〜１０００好ましくは０.２〜１００ｍｇが好適な用量として投与される。用量は本発明に係る化合物を少なくとも１日有効量、たとえば３０〜３０００好ましくは５０〜１０００ｍｇを含む用量単位で投与するのが好ましい。
【００５４】
以下の実施例は発明の範囲を制限することなく発明を明確にするために使用されることを意図するものである。
【実施例１】
【００５５】
ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）のグリセリン培養株の調製
滅菌した１００ｍＬのエルレンマイヤーフラスコ中で、３０ｍＬの栄養溶液（麦芽エキス、２.０％、酵母エキス、０.２％、グルコース、１.０％、(ＮＨ4)2ＨＰＯ4、０.０５％、ｐＨ６.０）に株ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）を接種し、そして、回転シェーカー上で２５℃、１４０ｒｐｍで、６日間培養した。次にこの培養物１.５ｍＬを８０％グリセリン２.５ｍＬで希釈し、−１３５℃で貯蔵した。
【実施例２】
【００５６】
エーレンマイヤーフラスコ中でのＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）の予備培養の調製
滅菌した３００ｍＬのエルレンマイヤーフラスコ中で、１００ｍＬの栄養溶液（麦芽エキス、２.０％、酵母エキス、０.２％、グルコース、１.０％、(ＮＨ4)2ＨＰＯ4、０.０５％、ｐＨ６.０）に株ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）をアンプルで接種し、そして、２５℃、１４０ｒｐｍで、６日間培養した。続いてこの予備培養物２ｍＬを主培養の調製のために接種した。
【実施例３】
【００５７】
ＳＴ  ００３２３６（ＤＳＭ  １４４７６）の液体主培養の調製
栄養溶液（ジャガイモデキストロース、２.４％、酵母エキス、０.２％）１００ｍＬを含んでいる滅菌した３００ｍＬのエルレンマイヤーフラスコに、傾斜したチューブ上の培養グロース（寒天２％を含む以外は同じ栄養溶液）、または予備培養物（実施例２参照）２ｍＬを接種し、シェーカー上で１４０ｒｐｍおよび２５℃で培養した。１つまたは複数の本発明に係る式（Ｉ）の化合物の産生は、約１４４時間後に最大になった。９６時間同じ栄養溶液での液内培養物（接種量、約１０％）が、１０から２００Ｌの体積の培養槽に
接種するのに適当であった。これらの培養のための条件は：
温度：２５℃
攪拌速度：２００ｒｐｍ
通気：毎分１５Ｌであった。
【００５８】
エタノール化ポリオール溶液を繰り返し添加することによって泡発生を抑制することができた。産生最大は、約９６から１４４時間後に達成された。
【実施例４】
【００５９】
化合物ガブセクチンの単離
実施例３にて説明したように得られた培養溶液３Ｌを濾過し、培養濾液と菌糸体を別々に凍結乾燥した。乾燥培養濾液をメタノール３Ｌで抽出した。透明な液体層を真空で２００ｍＬまで濃縮して減らし、濾過した。このメタノール溶液をＨＰＬＣ高圧勾配ユニット中で９：１の比率で水と混合し、吸着樹脂ＭＣｌ  Ｇｅｌ(R) ＣＨＰ２０Ｐ（Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ  Ｃａｓｅｉ  Ｃｏｒｐ.，Ｔｏｋｙｏ）を充填した３００ｍＬ−許容カラム上に装填した。カラムの大きさ：幅×長さ：５ｃｍ×１５ｃｍ。カラムを水からメタノール１００％の溶媒勾配で溶出し、カラムからの流出物（５０ｍＬ／分）を、各ケース２５ｍＬ容量の分画で集めた。ＨＰＬＣ分析により調べたガブセクチンを含む画分６５から７５を集め真空下で濃縮し凍結乾燥した（０.２３ｇ）。
【実施例５】
【００６０】
高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）によるガブセクチンの精製
カラム：Ｐｕｒｏｓｐｈｅｒ(R) ＳＴＡＲ  ＲＰ−１８ｅ  ３μｍ、３０−２（Ｍｅｒｃｋ、Ｇｅｒｍａｎｙ）
移動層バッファーＡ：  ５％アセトニトリル＋０.１％酢酸アンモニウム
移動層バッファーＢ：  ９５％アセトニトリル＋０.１％酢酸アンモニウム
勾配：  １５分
流速：  毎分０.２５ｍＬ
２１０ｎｍでのＵＶ吸収により検出
ガブセクチンは、保持時間６.５分で検出された。
【実施例６】
【００６１】
ガブセクチンの最終精製
実施例４にて説明したように得られた濃縮された抗生物質ガブセクチン（０.２３ｇ）
を、０.０５％トリフルオロ酢酸中５％から９５％アセトニトリルの勾配方法を用いてＬＵＮＡ(R) １０μｍ  Ｃ１８（２）ＨＰＬＣカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（ＵＳＡ））（幅×長さ＝２.１ｃｍ×２５ｃｍ）上で分画した。流速：２５ｍＬ／分、画分サイズ：２５ｍＬ、ＨＰＬＣ分析（実施例５参照）により調べた画分４８を凍結乾燥した。純度９８％のガブセクチン５０ｍｇが得られた。
【実施例７】
【００６２】
ガブセクチンの特徴性
本発明に係る抗生物質の物理化学的な、そして分光学的な性質は次のように要約されることができる：
外観：中程度の極性および極性有機溶媒に可溶であるが、特に水には不溶である無色から薄い黄色の物質。中性および弱酸性媒体中で安定であるが強酸性および強アルカリ性溶液中では不安定である。
【００６３】
実験式：  Ｃ26Ｈ37ＮＯ5
分子量：  ４４３.５９
1ＨＮＭＲおよび13ＣＮＭＲ：  表２参照
最大ＵＶ：  ２３６ｎｍおよび２９４ｎｍ
【００６４】
分子量ピークの測定
４４３の質量は、以下の結果を基に求められている分子に割り当てられた：ＥＳＩ+スペクトルおよびＦＡＢ+スペクトルは４４４ａｍｕ(Ｍ＋Ｈ)+でピークを示した。ＥＳＩ-スペクトルは４４２ａｍｕ(Ｍ−Ｈ)-でピークを示した。準分子イオンの高解像度：ＦＡＢ+４４４.２７４２４(Ｍ＋Ｈ)+。４４３.５９は実験式Ｃ26Ｈ37ＮＯ5のために算出された。
【００６５】
【表１】
2006501132.tif 000011
【００６６】
【表２】
2006501132.tif 000012
【実施例８】
【００６７】
寒天拡散法試験におけるガブセクチンの阻止効果
寒天溶液２００ｍＬ中にＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ接種物２ｍＬを含む寒天プレートを準備した。直径６ｍｍのペーパーディスクに、ガブセクチンを１０ｍＭ溶液で塗布し、それを寒天プレート上に置いた。接種されたＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓプレートを３７℃で１６時間培養した。以下の直径（ｍｍ）を有する阻止ハロー（ｈａｌｏｓ）が観察された。
【００６８】
量    阻止ハローサイズ（ｍｍ）
１０μＬ                    ８
２０μＬ                  １４
４０μＬ                  １７
【実施例９】
【００６９】
ガブセクチンメチルエステルのメチル化およびそれに続く精製
実施例６にて説明したように得られた抗生物質ガブセクチン２０ｍｇ（０.０４５ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ５ｍＬに溶解し、その後トリメチルシリルジアゾメタンを６倍のモル過剰で加えた。反応混合物を室温で６０分間放置し、次に濃縮して乾燥した。得られた混合物を０.０５％トリフルオロ酢酸中５％から９５％アセトニトリルの勾配方法を用いてＬＵＮＡ(R) ５μｍ  Ｃ１８（２）ＨＰＬＣカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（ＵＳＡ））（幅×長さ＝１ｃｍ×２５ｃｍ）上のクロマトグラフィーで分画した。流速：６.５ｍＬ／分、画分サイズ：６.５ｍＬ、ＨＰＬＣ分析（実施例５参照）により調べた画分６１を凍結乾燥した。純度９７％のガブセクチンメチルエステル７.４ｍｇが得られた。
【実施例１０】
【００７０】
ガブセクチンメチルエステルの特徴性
本発明に係る抗生物質の物理化学的な、そして分光学的な性質は次のように要約されることができる：
外観：中程度の極性および極性有機溶媒に可溶であるが、特に水には不溶である無色から薄い黄色の物質。中性および弱酸性媒体中で安定であるが強酸性および強アルカリ性溶液中では不安定である。
【００７１】
実験式：  Ｃ27Ｈ39ＮＯ5
分子量：  ４５７.６２
1ＨＮＭＲおよび13ＣＮＭＲ：  表３参照
最大ＵＶ：  ２３６ｎｍおよび２９４ｎｍ
【００７２】
分子量ピークの測定
４５７.６の質量は、以下の結果を基に求められている分子に割り当てられた：ＥＳＩ+スペクトルおよびＦＡＢ+スペクトルは４５７ａｍｕ(Ｍ＋Ｈ)+でピークを示した。ＥＳＩ-スペクトルは４５８.５ａｍｕ(Ｍ−Ｈ)-でピークを示した。
【００７３】
【表３】
2006501132.tif 000013
【００７４】
【表４】
2006501132.tif 000014
【実施例１１】
【００７５】
寒天拡散法試験におけるガブセクチンメチルエステルの阻止効果
寒天溶液２００ｍＬ中にＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ接種物２ｍＬを含む寒天プレートを準備した。直径６ｍｍのペーパーディスクにガブセクチンメチルエステルを１０ｍＭ溶液で塗布し、それを寒天プレート上に置いた。接種されたＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓプレートを３７℃で１６時間培養した。以下の直径（ｍｍ）を有する阻止ハロー（ｈａｌｏｓ）が観察された。
【００７６】
量    阻止ハローサイズ（ｍｍ）
１０μＬ                  ０ 
２０μＬ                  ７
４０μＬ                  ８
【国際調査報告】
2006501132.tif 000021
2006501132.tif 000022
2006501132.tif 000023
2006501132.tif 000024
2006501132.tif 000025
2006501132.tif 000026