(57)【要約】本発明は、内毒血症、敗血症、または菌血症の予防および／または治療のための、タンパク質および脂質、特にリン脂質が豊富な脂質画分を含む、経腸組成物およびこれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
腸内投与による内毒血症、敗血症、または菌血症の治療および／または予防のための栄養性組成物の製造のための、タンパク質および脂質を含む組成物の使用であって、前記脂質は、リン脂質およびトリグリセリドを、トリグリセリド対するリン脂質が1を超える重量比で含み、前記組成物は、0.5重量％未満のコレステロールまたはこれらの前駆体を含む使用。
【請求項２】
前記リン脂質が1日につきkg体重あたり0.008〜2.0グラムの用量で投与される、請求項1記載の使用。
【請求項３】
前記トリグリセリドが1日につきkg体重あたり0.01〜1.5gの用量で投与される、請求項1または2記載の使用。
【請求項４】
敗血症、内毒血症、および／または菌血症が、一般に、大手術、重要な疾病、炎症性腸疾患（IBD）、HELLP症候群、細菌転移に対する増強された危険、および敗血症、特に、放射線療法／化学療法の間に、細菌、褥瘡によって特に引き起こされるか、または併発される大きな外傷、やけど、肺炎と、易感染性の免疫系と、または胆管閉塞と関係する、前述の請求項のいずれか1項記載の使用。
【請求項５】
大量の摂取ができない人、特に神経性食欲不振に罹患している患者、癌またはAIDSの患者、および高齢者の治療のための、前述の請求項のいずれか1項記載の使用。
【請求項６】
新生児の治療のための、前述の請求項のいずれか1項に記載の使用。
【請求項７】
家畜が屠殺されるか、または離乳期のブタの前に、家畜を治療するための、請求項1〜3のいずれか1項記載の使用。
【請求項８】
a）-少なくとも1重量％のタンパク質および／またはペプチド、および、
b）-脂質の少なくとも3.5重量％であって、該脂質画分は、リン脂質およびトリグリセリドを、トリグリセリドに対するリン脂質が1を超える重量比で含む脂質、
を含む経腸組成物であって、該組成物は、0.5重量％未満のコレステロールまたはこれらの前駆体を含む経腸組成物。
【請求項９】
前記リン脂質が組成物の脂質画分の50重量%〜95重量％の量で存在する、請求項8に記載の経腸組成物。
【請求項１０】
前記リン脂質が、好ましくはホスファチジルコリンと、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、フォスファチジルグリセロール、およびホスファチジン酸の1つまたは複数とを含むリン脂質の混合物の形態である、請求項8または9に記載の経腸組成物。
【請求項１１】
前記リン脂質画分が、それが存在するときには、組成物に存在するリン脂質の総量の72重量％以下のホスファチジルコリンの量と、それが存在するときには、組成物に存在するリン脂質の総量の70重量％未満のホスファチジルエタノールアミンの量と、およびそれが存在するときには、組成物に存在するリン脂質の総量の5重量%以上の負に荷電したリン脂質の量とを含む、請求項8〜10のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１２】
前記トリグリセリドが、特定の長鎖多価不飽和脂肪酸の中に、少なくとも50重量%、好ましくは60%以上、および最も好ましくは75%以上の長鎖脂肪酸を含む、請求項8〜11のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１３】
前記トリグリセリドが、植物油、魚油およびこれらの混合物から選択され、好ましくはダイズ油、トウモロコシ油、カノーラ油、オリーブ油、ヒマワリ油、ゴマ油、サフラワー油、コムギ胚種油、アラキジック（arachidic）油、マツヨイグサ油、卵油などの動物起源由来の油、魚油、藻類の油、並びにこれらの混合物から選択される、請求項8〜12のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１４】
前記トリグリセリドに対するリン脂質の重量比が、1.5よりも大きく、好ましくは2よりも大きい、請求項8〜13のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１５】
前記組成物が、コレステロールまたはこれらの前駆体の0.5重量％未満、好ましく0.2重量％未満を含み、およびより好ましくはコレステロールまたはこれらの前駆体を含まない、請求項8〜14のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１６】
前記タンパク質材料が、少なくとも0.3kダルトンの分子量を有するタンパク質および／またはペプチドの組成物の少なくとも30重量％を含む、請求項8〜15のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１７】
前記組成物が卵または卵画分を含む、請求項8〜16のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１８】
前記組成物が、免疫グロブリン、好ましくはIgYをさらに含む、請求項8〜17のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１９】
前記組成物がダイズレシチンを含む、請求項8〜18のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２０】
前記組成物が経管栄養である、請求項8〜19のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、コレステロールまたはこれらの前駆体を実質的に含まない、請求項8〜20のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、好ましくはビタミンK（メナキノン）、ユビキノン、ビタミンAなどのカロテノイド、抱合型リノール酸などの特定の脂肪酸、リポ酸、ビタミンD、およびこれらの混合物から選択される1つまたは複数の脂溶性物質をさらに含む、請求項8〜21のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２３】
前記組成物が、好ましくはクエン酸、リンゴ酸、乳酸、これらの塩類、およびこれらの混合物から選択される1つまたは複数の有機酸をさらに含む、請求項8〜22のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２４】
請求項8〜23のいずれか1項に定義した組成物を製造するための方法であって、前記方法は：
a）-非脂質成分を共に混合して、6〜8の範囲のpHに調整することと；
b）-脂質成分を、混合することによって工程a）で得られた混合物に組み入れることと；
c）-工程b）で得られた混合物を低温殺菌して、組成物の乾燥重量に基づいて少なくとも2.5重量部の量の有機酸、好ましくはクエン酸、シトラート、またはこれらの混合物を添加することによってpHを6〜8の範囲内に調整することと、および、
d）-混合物を殺菌することと、
の工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の技術分野
本発明は、内毒血症、敗血症、または菌血症の予防および／または治療のための、タンパク質および脂質を含む、経腸組成物およびこれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景  
敗血症は、比較的大量の微生物またはこれらの断片が体に入るときに生じる障害である。これは、血液中に病原微生物またはこれらの毒素が存在すること、およびの残留することと関係する全身性疾患として特徴づけられる。細菌断片である内毒素が血液に存在する場合、この条件は、内毒血症または内毒素ショックとも称される。血液に侵入した微生物が生存可能なときは、この症状は、菌血症とも称される。内毒素またはリポ多糖（LPS）は、グラム陰性菌の外側の細胞膜成分である。また、リポテイコ酸（LTA）およびペプチドグリカン（PG）は、敗血症を生じさせることができるグラム陽性菌の外膜成分である。腸、特に結腸は、共生大腸菌などの、LPSおよびグラム陰性菌の保有宿主であるだけでなく、LTA、PG、およびグラム陽性菌の保有宿主でもある。LPS並びにLTAおよびPGは、腸からの直接の転移、または腸壁を超えたグラム陰性菌および／またはグラム陽性菌の転移を介して体循環に入ることができる。
【０００３】
腸にグラム陰性菌および／または陽性菌、並びにLPSおよび／またはLTAが存在しても、健常な人には特に問題はない。しかし、腸のバリヤー機能の障害をもつ人（例えば虚血、手術、慢性炎症、放射線療法、外傷、NSAIDもしくは化学療法学などの一定の薬物の使用によって生じる）、集中的管理下にある人など、非常に重篤な人、または浸潤性病原体、LPS、LTA、グラム陽性菌および／またはグラム陰性菌に感染した人では、腸壁を越えて循環に達することができる。一旦これらの細菌が系に入ると、LPSおよび／またはLTAが放出される（これは主に食作用性の系（または、細菌による散布性）の活性が高いことによる）。また、この感染プロセスは、肺を経て（または、感染の間に）、または周辺体部分を経て（たとえば、事故によって生じる外傷の後、または褥瘡の間、一部の妊娠障害（HELLP症候群）の後期の間、または輸血の間に）生じ得る。
【０００４】
体内でのLPSおよび／またはLTAの放出により、LPSおよび／またはLTAが適切に中和されない場合は、急性期反応および敗血症に至る可能性がある。このような不適当な中和は、易感染性の免疫機能の動物／人に生じる可能性があり、栄養不良、絶食、手術、虚血症状、重篤な熱傷、慢性感染症、癌治療、肝臓または脾臓の機能障害の後に、非常に重篤な人で、更に重症手術の直後の回復しなければならない人では、よくあることである。
【０００５】
急性期反応は、血中のC反応性タンパク質のレベルを測定することによって決定することができる。C反応性タンパク質は、男性の急性期タンパク質であり、生得的な免疫系の重要な成分である。C反応性タンパク質は、宿主防御を提供するする際のその主な機構のうちの1つである補体の古典的経路を活性化する。C反応性タンパク質は、Fcガンマ受容体に結合することによって免疫系の細胞と相互作用することが最近認められた。したがって、これは、生得的な免疫と適応免疫との間のギャップを橋渡して、初期の有効な抗菌反応を提供するのであろう。さらに、これは、リポ多糖およびサイトカインに対して損傷を与える炎症反応から保護するので、細菌産物による致死的副作用を防げるであろう。敗血症の危険度は、Januszkiewicz et al. Clin. Nutr. 2001,20 (2), 181-182に記載されているように、Tリンパ球などの免疫系の細胞のインビボでのタンパク質合成を測定することによって決定することができる。
【０００６】
敗血症では、多臓器不全または死に至ることさえもある。従って、治療方法を見いだすこと、特に敗血症を予防することは、非常に重要である。症状を軽減し、または敗血症を予防し、もしくは治療するための、いくつかのアプローチが従来技術において提唱された。
【０００７】
1つのアプローチはWO-A-98/32428に与えられており、これは、内毒素で誘導される傷害および死亡率の減少および／または予防のための、経腸栄養におけるコリンの使用を記載している。投与される量は、１日に1.5〜20gである。コリンは、酒石酸コリンとして投与される。
【０００８】
もう一つのアプローチは、US5,434,183に与えられるものなどのリン脂質が使用されており、これには、慢性関節リウマチおよび敗血症の治療における抗炎症および／または免疫抑制効果のための、ω-3脂肪酸DHAおよびEPAを含むリン脂質を植物油および／または魚油と組み合わせることが記載されている。これにより、非常に低レベルの血清コレステロールおよび血清トリグリセリドを獲得することができる。
【０００９】
WO-A-96/04916は、内毒素に関連した症状の予防および治療のために、コラン酸またはコラン酸塩と組み合わせた少なくとも１つのリン脂質を含む、タンパク質およびペプチドを含まない静脈内注射製剤を記載している。選択的に、中性脂質を添加することができる。
【００１０】
JP-A-05320043は、リン脂質、特にホスファチジルコリン、コレステロール、および飽和脂肪酸、特にミリスチン酸からなるリポ多糖スカベンジャーを記載している。これらの成分はリポソームに変換され、虚血もしくは虚血後の組織傷害の予防または治療のために静脈内投与のための溶液に使用されている。コレステロール対ホスファチジルコリン対ミリスチン酸の適切な濃度比率は、5〜10：5〜10：1〜5である。
【００１１】
また、US4,474,773は、とりわけ、免疫系の機能障害を治療するために、リン脂質、トリグリセリド、およびコレステロールの組み合わせを投与することを記載しており、US4,474,773に従った投与が、静脈内に都合よくなされている。
【００１２】
敗血症を治療するための従来技術のこれらの組成物の欠点は、製剤が複合体、たとえばリポソームであることである。さらなる欠点は、患者に対してより重大な危険を呈する非経口投与が企図されることである。したがって、敗血症の予防および治療のための比較的単純で、有効で、安全な製剤の要求がある。
【００１３】
2003年2月6日の刊行日のWO-A-03/009704は、敗血症の予防および／または治療のための、経腸栄養としてリン脂質、トリグリセリド、およびコレステロールの使用が記載されており、その中では、コレステロール濃度は、組成物の少なくとも0.5重量％であることが述べられており、トリグリセリドに対するリン脂質の比率は、0.32〜0.80であることが例示されている。コレステロールは、血管動脈に対するダメージとリンクしていることが多く、製品中にこれが存在すると、これらの消費者の許容性を減少させると考えられている。
【００１４】
DE-A-19.644.518では、0.25〜0.67の比率を有するリン脂質とトリグリセリドの混合物が記載されており、該混合物は、経腸栄養として適用することができる。脂質供与源として、アラキドン酸および／またはドコサヘキサエン酸がここでは必要とされ、多価不飽和脂肪酸は、一般的に不安定である。
【００１５】
WO-A-90/15609は、細菌感染に対して、リン脂質（好ましくは、オメガ-6脂肪酸だけを含む本質的に純粋なホスファチジルコリン）の使用を記載しているが、内毒血症および敗血症には言及していない。抗菌性効果は、マクロファージによって細菌を殺害することに向けられており、殺傷により、敗血症の予防には望ましくない大量の内毒素の放出を生じる。
【００１６】
現在、見いだされたその敗血症、菌血症、および／または内毒血症は、タンパク質および脂質を含み、脂質画分が特定の比率のリン脂質およびトリグリセリドを含む経腸組成物によって効率的に予防および／または治療することができる。
【００１７】
本発明は、LPSおよび／またはLTAが、LDL（低密度リポタンパク質）、VLDL（非常に低密度のリポタンパク質）、カイロミクロン、およびHDL（高密度リポタンパク質）などのリポタンパク質に、特にカイロミクロンに組み入れることによって、循環において解毒されるという知見に基づく。本発明者らは、カイロミクロンは、これが腸を経て体に入ることができるが、体の一部では、死細菌細胞の残遺物の除去の場合にもこれを形成することができ、一般に食品成分および毒素（たとえば、LPSSおよび／またはLTA）などの親油性物質の吸収および輸送に重要な役割を果たしていると考えている。カイロミクロンは、腸関連リンパ系組織（GALT）において放出され、腸細胞において、特にリンパ節において細菌の溶解後に放出されるLPSおよび／またはLTAを吸収する。カイロミクロンは、リンパ節から胸管を経て左静脈角（angulus venosus sinister）に輸送され、これが、カイロミクロン、およびその他のリポタンパク質を心臓に輸送し、次いでこれらを細網内皮系（特に脾臓）および肝臓（星細胞）に輸送する。したがって、カイロミクロンは、脂質可溶性物質の肝臓内へのデリバリーのための媒体としても使用することができ、これにより、吸収不良によって生じ得る減少が防止される。
【００１８】
血漿中だけでなく、特にGALTにおいても、腸の長さの比較的大部分にわたって長時間の間カイロミクロンの天然のレベルを維持することにより、体のいくつかの位置で、たとえば腸または肺で放出される大部分のLPSおよび／またはLTAを中和して、実質的に局所的に生じる高レベルのLPSおよび／またはLTAの危険度を確実に減少させることができる。
【００１９】
したがって、これらの知見からみて、本発明に従って、経腸組成物としての（静脈内組成物として従来技術では処方されていない）タンパク質および脂質の組み合わせであって、脂質がリン脂質およびトリグリセリドを含む組み合わせを投与することが必須である。タンパク質および該脂質の組み合わせは、腸において消化され、該産物が比較的ゆっくりと消化されるので、GALTにおいて長期間の間比較的一定のカイロミクロンの放出が確実になる。さらに、リン脂質とトリグリセリドの組み合わせは、使用される成分にリポソーム形成などの特異的な前処理を必要としない利点があり、比較的低コストの価格を有する有効な製品となる。さらに、組成物の経腸投与は、単純で、かつ安全である。
【００２０】
リン脂質、トリグリセリド、およびコレステロールの静脈内投与を提供するUS4,474,773と比較して、今回、経腸投与がGALTでのカイロミクロンの形成に有利であり、これにより敗血症の有効な予防および／または治療を提供することが、前述したように見いだされた。この点で、US4,474,773の教示は、このような予防および／または治療に有害であると考えられる。実際には、US4,474,773は、リンパ球生成を増大することによる免疫系の刺激を提供する。しかし、この刺激によって生じる問題は、サイトカインが産生されるということであり、該成分は、敗血症の基礎をなす炎症誘発性の反応に関与する（(Intensive Care Med. 2000; 26 Suppl. 1 : S124-8, Immunomodulatory therapy in sepsis, Kox WJ et al.）。これは Inflamm. Res. 1998 May; 47 (5): 201-10, "The inflammatory basis of traumalshock associated multiple organ failure", Yao YM et al,（これは、免疫系の活性化が一般的な炎症を生じて、最終的に持続性の炎症および多臓器の障害に至るであろうことを記載する）によってさらに確認される。従って、US4,474,773の教示に従うと、免疫系の刺激がもたらされるが、それにもかかわらず、これは敗血症の治療および／または予防に有害である。
【００２１】
Wang X. D. et al は、Scand. J. Gastroenterol 1994: 1117-1121において、リン脂質の腸内投与がラットの90%の肝切除後の細菌転移の発病率を有意に減少させたことを記載されている。彼らは、一定の条件下での細菌転移が、敗血症または菌血症を生じさせるのであろうことを記載している。次いで、細菌転移の減少は、おそらくリン脂質が腸管粘膜を滋養し、腸のバリヤーを維持する結果であるか、または粘膜界面活性物質としてのバリヤー機能を防止することによると結論づけられる。しかし、本論文では、カイロミクロンの言及はなされておらず、敗血症の予防または治療とこれらの関係は言うまでもない。
【００２２】
さらに別のアプローチは、WO-A-01/19356またはその同等物EP-A-1.090 636によって与えられており、これは、敗血症を予防するための、中鎖脂肪と脂質を組み合わせた経腸投与を処方しており、1未満のトリグリセリドに対するリン脂質の比率を例示している。中鎖脂肪は、LPSの中和にも、カイロミクロンの形成にも、有効であることは見いだされなかった。
【００２３】
WO-A-03/009704、DE-A-19.644.518、およびWO-A-01/19356に記載の敗血症の予防のための、リン脂質とトリグリセリドを含む組成物では、これらの成分比率は、組成物中のリン脂質を超える過剰のトリグリセリドが得られるものである。このような製品は、本発明におけるものとして、このような高比率のトリグリセリドに対するリン脂質を有する製品について観察される不安定性の問題を受けない。
【発明の開示】
【００２４】
発明の概要  
本発明の1つの側面によれば、腸内投与による内毒血症、敗血症、または菌血症の治療および／または予防のための栄養性組成物の製造のための、タンパク質および脂質を含む組成物の使用であって、前記脂質は、リン脂質およびトリグリセリドを、トリグリセリド対するリン脂質が1を超えるの重量比で含み、前記組成物は、0.5重量％未満のコレステロールまたはこれらの前駆体を含む使用が提供される。
【００２５】
本発明の別の態様では、a）-少なくとも1重量％のタンパク質および／またはペプチド、および、
b）-脂質の少なくとも3.5重量％であって、該脂質画分は、リン脂質およびトリグリセリドを、トリグリセリドに対するリン脂質が1を超える重量比で含む脂質、
を含む経腸組成物であって、該組成物は、0.5重量％未満のコレステロールまたはこれらの前駆体を含む経腸組成物が提供される。
【００２６】
1を超えるトリグリセリドに対するリン脂質の比率を有するこれらの組成物は、i）リン脂質の一定の組み合わせ、ii）有機酸またはの存在、iii）調製の間のpH調節を使用して、安定にすることができる。さらに、コレステロールが本発明に従った組成物の0.5重量％以下で存在するときは、組成物の安定性がさらに増強されることが分かっている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
発明の詳細な説明  
脂質は、本発明の主成分である。典型的には、本発明の組成物に存在する脂質の量は、組成物の少なくとも3.5重量％、好ましくは組成物の少なくとも4重量％、より好ましくは組成物の少なくとも6重量％である。好ましくは、脂質は、組成物の50重量％までのレベル、より好ましくは組成物の20重量％までのレベルで存在する。
【００２８】
本発明のための必須な脂質は、リン脂質である。本明細書において使用するためのリン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、フォスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、これらの供与源、およびこれらの混合物から選択される。
【００２９】
リン脂質の供与源としては、リゾリン脂質、特定のリン脂質が濃縮されたか、または比較的純粋な（合成の）リン脂質を含む標品を使用することができる。合成リン脂質およびリゾリン脂質の消費後に、さらにカイロミクロンがインビボで形成されるが、天然の供与源、特にダイズレシチンおよび卵レシチンを使用することが好ましい。実際に、これらは、経済的であり、消費者によって支持される、また完成品においてもより安定であることが見いだされている。
【００３０】
好ましくは、リン脂質は、リン脂質、特にホスファチジルコリンと、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、フォスファチジルグリセロール、およびホスファチジン酸の1つまたは複数とを含む混合物として、投与される。より好ましくは、組成物は、ホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンを少なくとも含む。
【００３１】
典型的には、天然の供与源は、リン脂質の混合物を含む。それ故、本明細書においてリン脂質の天然の供与源として使用するための好ましいダイズレシチンは、総リン脂質含量に基づいて、20〜40重量％のホスファチジルコリンおよび20〜33重量％のホスファチジルエタノールアミンを含む。ダイズレシチン存在する負に荷電したリン脂質の量、すなわちホスファチジン酸および／またはホスファチジルセリンおよび／またはホスファチジルイノシトールおよび／またはフォスファチジルグリセロールの総量は、10〜50重量％である。
【００３２】
本明細書においてリン脂質の天然の供与源として使用するために好ましい卵リン脂質抽出物は、73〜82重量％のホスファチジルコリンおよび15〜22重量％のホスファチジルエタノールアミンを含む。卵レシチンで存在する負に荷電したリン脂質の量は、2重量％未満である。
【００３３】
典型的には、本発明のためのリン脂質は、組成物の脂質画分の、23%〜95重量%、好ましくは50%〜9重量%、およびより好ましくは50重量%以上の量で存在する。しかし、本発明の組成物の脂質画分に存在する高レベルのリン脂質の存在により、さらに敗血症の予防および／または治療が改善したことも今回見いだされた。従って、リン脂質は、組成物の脂質画分の45%〜78重量%、より好ましくは50%〜69重量％のレベルで使用されるか、または存在することが好ましく；脂質画分は、好ましくはリン脂質およびトリグリセリドの組み合わせによって表される。
【００３４】
本発明の組成物の安定性の改善のためには、特に多量のリン脂質では、リン脂質の組成は、存在するときには、組成物に存在するリン脂質の総量の72重量％以下、好ましくは50%未満、より好ましくは35重量％未満、および最も好ましくは25重量％未満のホスファチジルコリンの量であることが好ましい。ホスファチジルエタノールアミンの重量百分率は、好ましくは組成物に存在するリン脂質の総量の70%以下、より好ましくは50%以下である。負に荷電したリン脂質の重量百分率、すなわちホスファチジン酸および／またはホスファチジルセリンおよび／またはホスファチジルイノシトールおよび／またはフォスファチジルグリセロールの総量は、存在するときには、好ましくは5%以上、より好ましくは7%以上、最も好ましくは10%以上である。
【００３５】
従って、本発明のためには、リン脂質の唯一の供与源として純粋な卵リン脂質または卵レシチンを使用することは、これらのリン脂質含量、特に高含量のホスファチジルコリンかつ低含量の負に荷電したリン脂質を考慮すると好ましくないが、その代わりに、卵レシチンにおいて見いだされるよりも小量のホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルコリン並びに多量の負に荷電したリン脂質が得られるように、以下の成分のいずれかまたはこれらの混合物と純粋な卵リン脂質または卵レシチンの混合物を使用することが好ましい：ダイズレシチンもしくはダイズリン脂質またはその他の起源のレシチンもしくはリン脂質。
【００３６】
リン脂質中の脂肪酸は、特に30%未満のドコサヘキサエン酸および／またはエイコサペンタエン酸を含む。本発明のリン脂質は、特に長鎖脂肪酸によってエステル化されたグリセロールから選択される。長鎖脂肪酸とは、少なくとも18の炭素原子を有する脂肪酸を意味する。リン脂質中の脂肪酸の総量に関して、長鎖脂肪酸の量は、モル濃度に基づいて、少なくとも50%、好ましくは60%以上、および最も好ましくは70%以上であるべきである。好ましい長鎖脂肪酸は、ステアリドン酸（stearidonic acid）、パルミチン酸、オレイン酸、α-リノレン酸、リノール酸、γリノレン酸、抱合型リノール酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、およびアラキドン酸である。リン脂質画分中のミリスチン酸の量は、好ましくは40%未満、より好ましくは25重量%未満である。典型的には、6〜12の炭素原子の範囲の鎖長を含む中間鎖脂肪酸は、これらが低いLPS中和性能であるために、本明細書においてリン脂質の主成分として使用することは望まれない。従って、リン脂質画分は、少なくとも50重量％、より好ましくは70重量％以上、および最も好ましくは75%以上の長鎖脂肪アシルを含むことが好ましい。
【００３７】
リン脂質は、単位用量あたりにキログラム体重につき0.008〜2.0グラム、好ましくは0.01〜、2.0グラム、より好ましくは0.035グラム以上の量で投与される。ヒトのためには、体重70kgと仮定して、これによれば、1単位用量につき約0.6〜140g、好ましくは1単位用量につき約0.7〜140g、より好ましくは1単位用量につき2.5g以上となる。リン脂質は、24時間ごと、しかし好ましく2〜12時間ごと、および好ましくは3〜8時間ごとに少なくとも一回、または連続的な方法で均一な用量で投与される。別の言い方では、連続的に投与されないときは、24時間あたりの用量の数は、１日の用量がキログラム体重あたり0.008〜2.0グラム、好ましくは0.01〜2.0グラム、より好ましくは0.035グラム以上であるとして、2〜12、好ましくは2〜7の範囲内である。連続的な方法のときは、24時間にわたって連続的に投与される量が、1用量を構成する。
【００３８】
本発明は、短期経管栄養を使用するときに、特に適している。従って、完全な経腸栄養法組成物のために、2000kcalの消費を考えると、短期経管栄養のためのリン脂質の１日の用量は、12〜140g、好ましくは12〜100g、より好ましくは12〜75g、さらにより好ましくは16〜75g、および最も好ましくは30〜75gである。1日につき16〜60gリン脂質は、特に短期経管栄養のために好ましい。従って、典型的な経管栄養は、2000kcalにつき12〜140g、好ましくは12〜100g、より好ましくは、12〜75g、さらにより好ましくは16g〜75g、および最も好ましくは30〜75gのリン脂質を含む。2000kcalにつき16〜60gが特に好ましい。
【００３９】
組成物がサプリメントとして使用されるときに、200〜600mlの消費および約10%の脂質含有量を考えると、サプリメントのためのリン脂質の1日の用量は、好ましくは2.3〜56g、より好ましくは5〜50gである。組成物がサプリメントとして使用されるときに、200〜600mlの消費および約5%の脂質含有量を考えると、サプリメントのためのリン脂質の1日の用量は、好ましくは2.3〜28g、より好ましくは5〜25gである。
【００４０】
本発明のためのもう一つの必須の脂質は、トリグリセリドである。本発明のトリグリセリドは、特に長鎖脂肪酸によってエステル化されたグリセロールから選択される。長鎖脂肪酸とは、少なくとも18の炭素原子を有する脂肪酸を意味する。トリグリセリド中の脂肪酸の総量に関して、長鎖脂肪酸の量は、モル濃度に基づいて、少なくとも50%、好ましくは60%以上、および最も好ましくは70%以上であるべきである。好ましい長鎖脂肪酸は、ステアリドン酸（stearidonic acid）、パルミチン酸、オレイン酸、α-リノレン酸、リノール酸、γリノレン酸、抱合型リノール酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、およびアラキドン酸である。より好ましくは、より効果的なカイロミクロンを生じる、すなわち、カイロミクロン中においてLPSおよび／またはLTAを除去するためにより適している多価不飽和脂肪酸が使用される。トリグリセリド画分中のミリスチン酸の量は、好ましくは40%未満、より好ましくは25重量%未満である。典型的には、6〜12の炭素原子の範囲の鎖長を含む中間鎖脂肪酸は、これらが低いLPS中和性能であり、並びにこれらのカイロミクロン形成が低い性能であるために、本明細書においてトリグリセリドの主成分として使用することは望まれない。従って、トリグリセリド画分は、少なくとも50重量％、より好ましくは70重量％以上、および最も好ましくは75%以上の長鎖脂肪トリグリセリドを含むことが好ましい。トリグリセリドの脂肪酸は、特に30%未満のドコサヘキサエン酸および／またはエイコサペンタエン酸を含む。
【００４１】
好ましくは、リン脂質およびトリグリセリド画分中のα-リノレン酸の量は、総食物組成のエネルギーの4.5%を上回らないのに対して、リノール酸の量は、総組成物のエネルギーの10%を上回らない。
【００４２】
トリグリセリドの例は、ダイズ油、カノーラ油、トウモロコシ油、オリーブ油、ヒマワリ油、ゴマ油、サフラワー油、コムギ胚種油、アラキン酸（arachidic）油、マツヨイグサ油などの植物油、卵油などの動物起源に由来する油、またはこれらの混合物だけでなく、魚油および藻類油などの魚油も適しており、選択的に1つまたは複数の植物油と混合される。
【００４３】
典型的には、本発明のためのトリグリセリドは、少なくとも7%〜77重量%未満の量で本発明の組成物の脂質画分に存在する。しかし、リン脂質が脂質画分に多量に存在するときは、7%〜50重量%のレベルのトリグリセリドが本発明組成物の脂質画分に使用され、または存在することが好ましい。
【００４４】
トリグリセリドの１日量は、0.01〜1.5g／kg体重である。これにより、70kg体重の病気にかかった人に対して、約0.7〜105g、好ましくは約0.7〜90gのトリグリセリドが投与される。これは、別々の用量（24hにつき1〜12、好ましくは2〜7）で、または連続的な方法（1用量と考えられる）で与えられる。トリグリセリドの投与計画および量は、単位用量あたりの量が0.01〜1.5g／kg体重であるような方法で選択される。
【００４５】
リン脂質およびトリグリセリドの１日量は、リポタンパク質を低レベルから健常な栄養が十分な人で観察されるレベルまで回復するか、または短期間のレベルを健常な人と比較してさらに120%もしくは150%以上まで増強し、および／または血液中のリン脂質／リポタンパク質の比率を増強するような方法で選択される。好ましくは、トリグリセリドの１日の用量は、0.01〜1.5g／kgの体重である。実際に、リン脂質に有利なように高い重量比を有することが好ましいと考えられる。多量のリン脂質を含むカイロミクロン（およびその他のリポタンパク質）は、内毒素を中和する際により高い能力を有する。さらにまた、多量のリン脂質は、トリグリセリドの吸収を助ける。
【００４６】
本発明の組成物の成分は、これらの天然の形態で、または別々の成分として存在する。これは、リポソームが本発明によって想定されないことを意味する。
【００４７】
本発明の組成物において、トリグリセリドに対するリン脂質の重量比は、1より大きく、より好ましくは1.5より大きく、およびさらにより好ましくは2よりも大きい。
【００４８】
本発明のリン脂質とトリグリセリドの組み合わせのための供与源としては、卵油または卵粉末の形態の卵などの卵も使用される。卵、特にこれらの脂質画分は、所望の成分をすでに含んでいる。組成物の最終用途および使用する脂質抽出物のタイプに応じて、患者の食事が正しい量のこれらの成分を含むように、全てまたはいくつかの成分（リン脂質およびトリグリセリド）を示した範囲内に補う必要がある。卵がこれらの飼料中に特定の混合脂質を有する動物で使用される場合、卵はα-リノレン酸、抱合型リノール酸、およびドコサヘキサエン酸の含量を増大させるのが特に有利である。前記したように、純粋な卵リン脂質または卵レシチンは、卵レシチンにおいて見いだされるよりも小量のホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルコリン並びに多量の負に荷電したリン脂質が得られるように、以下の成分のいずれかまたはこれらの混合物と純粋な卵リン脂質または卵レシチンの混合物を使用することが好ましい：ダイズレシチンもしくはダイズリン脂質またはその他の起源のレシチンもしくはリン脂質。
【００４９】
さらに、本発明のもう一つの必須成分は、タンパク質である。脂質の組み合わせに対してタンパク質を添加することにより、完全な栄養組成物を形成することができる。完全な栄養組成物の投与は、これにより1つの組成物で全ての必要な多量養素並びに微量栄養素をデリバリーすることができるので、疾患をもつ患者または集中治療中の患者にとって切実な要求がある。好ましくは、タンパク質は、乳タンパク質、ホエータンパク質、カゼインタンパク質、ダイズタンパク質、卵蛋白質、およびこれらのタンパク質の混合物から選択される。タンパク質は、無処理のタンパク質の形態であってもよく、または（部分的に）加水分解されてもよい。また、小麦米、エンドウ、およびオート麦タンパク質、またはこれらの加水分解産物などのその他のタンパク質またはこれらの混合物を使用してもよい。さらに、必要に応じて、タンパク源は、遊離アミノ酸を含んでいてもよい。
【００５０】
タンパク質は、有利には、卵によって提供することができる。実際に、これは、本発明の適切な成分を含む他に、卵にも、これらが有益なタンパク質を含むという利点がある。卵のタンパク質分画は、細菌と相互作用することができる免疫グロブリンを含む。免疫グロブリン、特にIgYが存在すると、腸内の本発明の成分と共に、細菌が腸壁を通って移動することを防止する非常に効果的な系を提供する。
【００５１】
これらの免疫グロブリン、特にIgYは、敗血症を生じさせる最も高いリスクを生じる菌種に特異的に結合させるために適するように作製されることが好ましい。このような免疫グロブリンは、当該技術分野において既知の方法に従って、鳥において誘導し、卵へ移すことができる。したがって、本発明に従った使用に特に適した製品は、超免疫された卵であり、わずかな低温殺菌後にそれ自体を使用することができ、これは、主に非変性かつ活性な状態に免疫グロブリンを保つ。
【００５２】
好ましくは、タンパク質の材料の少なくとも30重量％が、少なくとも0.3kDaの、より好ましくは少なくとも0.5kDaお、最も好ましくは少なくとも1kDaの、および最も好ましくは少なくとも2kDaの分子量を有するタンパク質および／またはペプチドで構成される。これらのタンパク質は、特に本発明に使用するために有益であることが見いだされた。さらに、より高い分子量の、たとえば10kDaのよりも高い分子量のタンパク質の使用により、より安定な製品を生じる。
【００５３】
組成物は、好ましくは1日あたりkg体重につきに少なくとも0.02g、好ましくは0.07〜2.5g、より好ましくは0.08〜2.0gのタンパク質を含む。ヒトについては、70kgの体重と仮定すると、これにより、1日につき少なくとも1.4g、好ましくは4.9〜175g、より好ましくは5.6〜140gのタンパク質となる。単位用量あたり、タンパク質の量は、kg体重あたり少なくとも0.02g、好ましくは0.07〜2.5g、より好ましくは0.08〜2.0gである。
【００５４】
超免疫した鳥の卵から生じるタンパク質を使用するときは、投与することができるIgYの１日量は、好ましくは0.2〜120mgである。しかし、IgYの有効性として、発明と組み合わせたときに、組成物が細菌の転移の予防を改善することが見いだされたら、投与することができるIgYの１日量は、より好ましくは、0.2〜800mg、最も好ましくは10〜600mgの範囲内である。この成分の用量は、好ましくは用量あたりのkg体重につき0.1mg〜10mgである。ヒトについては、70kgの体重と仮定すると、これは、単位用量につき7〜700mgとなる。
【００５５】
投与のための量は、治療される被検者の重量に基づいて決定することができる。１日量は、用量を、用量が1日につき消費される回数で掛けることによって算出することができる。投与計画は、たとえば2〜12時間、好ましくは3〜8時間ごとに投薬を繰り返すことによって、または均一に連続的方法で、リンパにおいて高いレベルのカイロミクロンを維持するように調整されるべきである。患者群のためには、腸の経管栄養が推奨される。
【００５６】
本発明の好ましい特徴は、コレステロールまたはこれらのその前駆体が実質的にない組成物である。実際に、コレステロールの存在は、LPSの中和および／またはカイロミクロンの形成に影響を及ぼさずに実質的に減少させられることができ、または除去することができることが分かっている。
【００５７】
このコレステロールのレベルの実質的減少、またはさらに除去のさらなる利点は、製品の消費者の認識である。コレステロールは、血液動脈に対するダメージとリンクすることが多く、したがってさらに患者の症状を悪化させるので、この製品は、消費者にはより健康に見える。
【００５８】
コレステロールの前駆体は、有機酸、たとえばコレステリルアセテート、ヘミスクシナート、n-ブチラート、オレアートとのエステル、またはリン脂質とのエステルなどの天然の抽出物（卵）と合成の供与源で生じるものなどのコレステリルエステルを意味する。
【００５９】
好ましくは、「コレステロールまたはこれらの前駆体が実質的にのない」とは、組成物がコレステロールまたはこれらの前駆体の0.5重量％未満、好ましくは0.2重量％未満を含むこと、および最も好ましくはこれらのコレステロールおよび前駆体がないことを意味する。
【００６０】
また、コレステロールが小量だけで存在するか、またはさらに存在しないときに、特にダイズレシチンが使用されるときに、組成物の安定性に関して最高の反応およびカイロミクロンの生産が得られることが見いだされた。卵レシチンを含む組成物は、時に望まれない組成物のクリーミングに向かう傾向を有する。本明細書で定義されるように、リン脂質およびトリグリセリドを含む組成物における、ダイズ由来のリン脂質と組み合わせてこのような特異的な低いコレステロールレベルの使用、またはさらにコレステロールもしくはこれらの前駆体の非存在化では、この問題に対する救済がなされ、一方でさらにカイロミクロンの有効な生産を提供することが見いだされた。
【００６１】
存在するときには、コレステロールまたはコレステロールとして算出されるこれらの同等物の用量は、好ましくは用量あたりkg体重につき2mg未満であり、単位用量につきヒトにおいて0.14g未満、より好ましくは0.1g未満の用量を生じる。
【００６２】
経腸組成物は、さらに組成物の安定性を増大するために、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、これらの塩類、またはこれらの混合物などの有機酸をさらに含むことができる。本明細書において使用するための好ましい有機酸は、クエン酸、その塩、またはこれらの混合物などの多座の酸である。存在するときには、これらの有機酸は、組成物の少なくとも0.5重量%、より好ましくは0.6重量%以上、最も好ましくは0.8重量%以上2重量%まで、より好ましくは1.5重量％までの濃度で組成物中に存在する。組成物の乾燥重量に基づいて、有機酸の量は、2.5重量%以上、好ましくは3重量%以上、および最も好ましくは4重量%以上の範囲で、最大10重量%である。
【００６３】
また、経腸組成物は、乳酸菌、乳酸菌の産物、プレ生物質、外部のL-グルタミンおよび／またはL-アルギニン、抗酸化物、線維、炭水化物、多糖体、ビタミン、脂溶性の物質の吸着を促進する亜鉛などのミネラル、更には経腸栄養において通常存在するその他の成分をさらに含むことができる。
【００６４】
存在するときには、炭水化物は、任意の適切な炭水化物または炭水化物混合物であってもよい。たとえば、炭水化物は、グルコース、ショ糖、マルトデキストリン、化工デンプン、アミロース澱粉、タピオカ澱粉、コーンスターチ、コーンシロップ、もしくはフルクトース、またはこれらの混合物であってもよい。低いモル浸透圧濃度が必要な場合、マルトデキストリンが好ましい。
【００６５】
組成物は、脂溶性の物質を含むことができる。これらは、特に、ビタミンK（メナキノン）、ユビキノン、ビタミンAなどのカロテノイド、抱合型リノール酸などの特定の脂肪酸、リポ酸、およびビタミンDから選択される。本発明の混合脂質中にこれらの成分の一つまたは複数が含まれると、敗血症の有病率を効率的に低下させ、急性期反応を減少させ、手術または外傷の後の回復を改善する。
【００６６】
これらが本発明の混合脂質と共に、および選択的に亜鉛塩と共に、経腸製品に含まれるときは、従来技術のものよりも少量の脂溶性物質でも有効であろう。
【００６７】
また、調製の中のベルベリンまたはベルベリス・アリスタタ（Berberis aristata）またはコクシニア・フェネストラタム（Coccinia fenestratum）の抽出物を、用量あたりに10〜100、好ましくは20〜50mg/kg体重の量で、本製剤に組み入れることが好ましい。
【００６８】
本発明の経腸組成物は、好ましくは、敗血症、菌血症、および／または内毒血症（内毒素ショック）の予防および／または治療において、および急性期応答を遅延させるために使用される。特に、本組成物は、一般に、大手術を受けている患者、非常に重篤な患者、炎症性腸疾患（IBD）の患者、HELLP症候群の患者、細菌転移および敗血症に対する増強された危険、特に放射線療法／化学療法の間に、細菌、褥瘡によって引き起こされるか、または併発される特に大きな外傷、やけど、肺炎に罹患したもの、高齢者病に罹患した人々、または胆管閉塞を有する人々の治療のために使用される。
【００６９】
手術の場合には、内毒血症のリスクは、患者が術前に絶食する必要があること、および手術後にわずかな食物だけを摂取することという事実に関連すると考えられる。その結果、カイロミクロンの正常量が減少し、これにより、LPSによって生じるダメージに対して彼らをより脆弱にしてしまう。通常、これらの患者は、手術の前に、および手術の直後に、約3時間まで本発明の組成物をとることができるが、手術前の短期間の間に本組成物を摂取するという選択肢も、本発明によって想定される。この場合、組成物中の総脂質濃度は、典型的には、用量につき5〜70、好ましくは10〜50gの範囲である。この用量は、経口使用のためのサプリメントによって、好ましくは比較的少量の、たとえば100〜700、好ましくは150〜600mlの酪農に基づいた飲物などの液体によって供給することができる。
【００７０】
また、組成物は、神経性食欲不振に罹患する人または癌もしくはエイズなどの疾患の末期の人などの限られた量を摂取することができる人によって摂取されることができるが、多くの高齢者によっても摂取されることができる。この場合、組成物中のトリグリセリドレベルは、0.7〜30、好ましくは2〜15g／用量の範囲であり比較的少量で投与される。
【００７１】
また、本発明の組成物は、一般的に不規則な飼料計画などにより、感染症に対する感受性の高い（感染症が肉品質の低下を生じ得る）哺乳類、たとえばウシおよびブタ、特に離乳期のブタの治療のために使用することができる。また、輸送の間のストレスは、動物の細菌転移を生じ得る。
【００７２】
本発明の経腸組成物は、経口または経管栄養、好ましくは経管栄養であることができる。経管は、鼻食道（nasooesophagial）、鼻腔胃（nasogastric）、または鼻空腸（nasojejunal）であることができるが、また、胃瘻造設（gastrostomy）または空腸造設（jejustomy）経管も想定される。経口栄養は、液体状態で、またはカプセルまたは粉として、完全な栄養または食品補助食品であることができる。好ましい液体状態は、分散液である。先に説明される理由のために、静脈内組成物は、本発明から除かれる。
【００７３】
したがって、本発明は、用量につき
8〜180g、好ましくは8〜140g、より好ましくは8〜120g、より好ましくはさらに12〜120g、および最も好ましくは12〜80gの、リン脂質およびトリグリセリドの組み合わせを含む脂質、  
3〜120g、好ましくは3〜100g、より好ましくは12〜100g、および最も好ましくは30〜90gのタンパク分画、および選択的に、
1.2〜400g、好ましくは5〜200gの炭水化物画分、
を含む経腸食品を提供する。
【００７４】
このような経腸組成物を作製するための好ましい方法は、脂質成分とその他の組成物成分を別々に混合することを含む。pHは、好ましくは約7.0〜7.2に合わせる。次いで、脂質成分を好ましくは高剪断下で混合物に組み入れる。次いで、混合を低温殺菌し、均質にする（好ましくは、550bar〜50barで行われる）。一旦均質にしたら、混合物のpHを20℃で測定したときに6〜8の範囲似合わせる。実際に、低温殺菌の間のpHを6〜8の範囲、好ましくはpH6.2に調節することは、最適な安定性を有する組成物を得るためには好ましいことが見いだされた。pHの調節のための好ましい薬剤は、シトラートおよびクエン酸の混合物（重量比1：1）である。しかし、二価の陽イオンに結合する能力を有するその他の調節薬を本明細書において使用してもよい。一旦pHが調整したら、混合物を殺菌する。
【００７５】
従って、本発明の好ましい態様において、先に定義したとおりの組成物を作成するための方法であって、該方法は、以下の工程を含む方法が提供される：
a）-非脂質成分を共に混合して、6〜8の範囲のpHに調整することと；
b）-脂質成分を、混合することによって工程a）で得られた混合物に組み入れることと；
c）-工程b）で得られた混合物を低温殺菌して、組成物の乾燥重量に基づいて少なくとも2.5重量部の量の有機酸、好ましくはクエン酸、シトラート、またはこれらの混合物を添加することによってpHを6〜8の範囲内に調整するすることと、および、
d）-混合物を殺菌すること。
【００７６】
ミネラルおよびビタミンの添加は、組成物のその他の成分部分とは別にミネラルおよびビタミン成分を殺菌し、殺菌されたミネラルおよびビタミンを殺菌された組成物に組み入れるか、または上述した方法に従ってその他の成分と共にミネラルおよびビタミンを添加すること（ミネラルおよびビタミンの滅菌は、組成物が殺菌されるときになされる）によって行うことができる。
【００７７】
経腸栄養の例は、タンパク質、油、糖、繊維、および通常の完全な経腸栄養に存在するその他の成分の存在下において、0.5%〜7%（w／v）、好ましくは1〜5%（w／v）、より多くの好ましくは1〜4%（w／v）のリン脂質を含む、たとえば心臓外科を受けている患者に対して経管で投与することができる栄養補給である。栄養補給は、手術の24時間前に開始され、患者の症状に応じて、吸収栄養（sip-feeding）または経管栄養のいずれかによって行うことができ、および経管で手術後の24〜72時間の間続けられる。また、経管栄養は、十二指腸または空腸に直接行うことができ、これにより、有利には空の胃を維持して、手術の間に吸引を防止することができる。本発明組成物による連続的な治療は、重要であり、かつ本発明の好ましい側面である。実際に、連続的な治療（すなわち手術の前に開始して、あるとしても4〜5日間続けられる）により、カイロミクロンの持続的な産生がもたらされることにより、微生物の感染症、特に敗血症を引き起こするものに対するより良好かつ長続きする抵抗性が与えられる。
【００７８】
本発明に従った混合脂質を含むカプセルまたは粉末の食品サプリメントは、炎症性腸疾患をもつ人々に与えられる。サプリメントは、上記のように、繊維、オリゴ糖、ビタミン、特に脂溶性ビタミン、プロバイオティックス、抗酸化剤、ハーブもしくは植物抽出物、タンパク質、またはペプチド、その他をさらに含んでいてもよい。サプリメントは、炎症の再発を防止するために、または一旦炎症が再発したらこれを軽減するために、小康状態の患者に与えられる。
【００７９】
1〜7%（w／v）、好ましくは6%（w／v）、より好ましくはさらに1〜5%（w／v）のリン脂質濃度を有する液体の吸収栄養（sip-feeding）は、たとえば手術を受けるであろう閉塞性黄疸患者に投与することができる。タンパク質および脂肪が存在するが、多糖体および微量栄養素も存在してもよい。栄養は、手術の24〜12時間前に投与され、手術後にできるだけ早く24〜72時間に続けられる。
【００８０】
また、本発明の組成物は、新生児および早産児、並びに動物に適している。
【００８１】
以下は、本発明を例証する非限定の実施例である：
実施例において、以下の略語を使用した。
【表１】
2006516614.tif 000002
下記の実施例に存在するトリグリセリド1の脂肪酸の組成物は、7〜10%の飽和脂肪酸、60〜65%のモノ不飽和脂肪酸、および28〜31%の多価不飽和脂肪酸である。トリグリセリド1のn3：n6脂肪酸の重量比は、5：1ある。トリグリセリド2において、飽和脂肪酸、モノ不飽和脂肪酸、および多価不飽和脂肪酸の量は、それぞれ約71、18、および61であり、n3：n6は7.7の比である。トリグリセリド1〜2は、長鎖脂肪酸トリグリセリドである。
【実施例】
【００８２】
実施例1  
100mlあたりに含む経管栄養  
エネルギー    125kcal  
タンパク質1    7.5g  
炭水化物1    14.5g  
脂質    4.2gで以下を含む：  
リン脂質    2.1g  
トリグリセリド1    0.66g  
トリグリセリド2    1.44g。
【００８３】
また、ビタミン、ミネラル、および微量元素、並びに経管栄養の技術分野において既知のその他の成分、たとえばNa、K、Cl、Ca、Mg、Fe、Se、Cu、P、Zn、I、Vit A、D、C、E、B6、B12、K、葉酸、パントテン酸、ナイアシン、ビオチン、リボフラビン、葉酸、コリン、ミオイノシトール、L-カルニチンを、経管栄養の技術分野において既知の量で、上述した組成物に、および実施例2〜6のものに含めることができる。
【００８４】
実施例2  
100mlあたりに含む経管栄養  
エネルギー  100kcal  
タンパク質2    4.0g  
炭水化物2    12.3g  
脂質    3.9gで以下を含む：  
リン脂質    2.0g  
トリグリセリド1    0.63g  
トリグリセリド2    1.27g
繊維    1g。
【００８５】
実施例3  
100mlあたりに含む、サプリメントとして使用するための液体栄養（吸収栄養）
エネルギー    100kcal  
タンパク質2    4.0g  
炭水化物3    8.8g  
脂質    5.4gで以下を含む：  
リン脂質    3.6g  
トリグリセリド1    1.19g  
トリグリセリド2    0.61g  
実施例4  
100mlあたりに含む、サプリメントとして使用するための液体栄養（吸収栄養）
エネルギー    130kcal  
タンパク質2    2.8g  
炭水化物3    13.3g  
脂質    7.3gで以下を含む：  
リン脂質    5.0g  
トリグリセリド2    2.3g。
【００８６】
実施例5  
粉末形態の栄養性経口サプリメント。個々のエネルギー／液体の必要に従って希釈するためのもの。100gの粉末あたりの組成物。
【００８７】
エネルギー    460kcal  
タンパク質2    18.6g  
炭水化物4    52.3g  
脂質    18.1gで以下を含む：  
リン脂質    10.8g  
トリグリセリド1    3.38g  
トリグリセリド2    3.92g。
【００８８】
実施例6：
100mlあたりに含む、経管栄養のために企図される栄養：
エネルギー  125kcal  
タンパク質1    7.5g  
炭水化物2    12.3g  
脂質6.67gで以下を含む：  
リン脂質    4.58g  
トリグリセリド2    2.09g  
繊維（選択的）    1.5g。
【００８９】
実施例7：
動物  
この研究のプロトコルは、マーストリヒ大学の動物看護委員会（the Animal Care Committee of the University ofMaastricht）（Netherlands）によって承認された。Charles River(Maastricht, the Netherlands)から購入した301〜410グラム（平均、342グラム）の重さの健康な雄SDラットは、制御された温度条件（20〜22℃）および湿度（50%）下で収容した。実験の開始前に、ラットには自由に水および食事を与えた。
【００９０】
実験デザイン  
動物を6群（群につきn=8）に分けた。対照ラット（C）は、単独で絶食の効果を評価するために、18時間飢えさせて、t=24hで屠殺した。偽ショック（SS）ラットは、18h飢えさせて、t=0で大腿動脈をカニューレ処置したが、ショックは誘導されなかった。出血性ショック群は、手順の18時間前に絶食させるか（HS-S）、または出血性のショックを誘導する前の18h（3ml）、2h（0.75ml）、および45分（0.75ml）に、およびショック後の3h（0.75ml）および6h（0.75ml）に経口胃管栄養法により、低脂肪の液体経腸の食事（HS-LF）、高脂肪高トリグリセリドの液体経腸の食事（HS-HT）、もしくは高脂肪高リン脂質の液体経腸の食事（HS-HP）を経腸的に供給した。血液および組織試料をショックの開始の後24時間で採取した。低脂肪栄養の脂肪の量は、標準的な齧歯類の食事（16.0エネルギー%）に存在するものと等熱量であった。高脂肪の液体経腸の食事を与えるは、低脂肪食事と等熱量であり、等窒素性（isonitrogenous）であったが、52.2エネルギー%の脂肪を含んだ。栄養中の組成は、表2に与えてある。
【００９１】
第2の実験では、高リン脂質および高トリグリセリド食事を、出血性ショックを受けているラットにおいて試験した。2つの実験を組み合わせた。その結果、今回はHS-TGおよびHS-PL群は、16匹の動物からなった。
【００９２】
表2：  ラットに供給される栄養物の組成（100mlにつき）  
【表２】
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出血性ショックの手順  
ラットには、腹腔内にナトリウム・ペントバルビタール（40mg/kg）を注射して麻酔をかけた。左の大腿領域にわたる皮膚を剃り、ポビドンヨード溶液によって除感染（desinfected）した。動物を仰臥位に配置し、自発的に呼吸させた。手術の間に、および実験の全体にわたって、体温は、直腸のプローブに接続された温度アナライザー・システム（Hugo Sachs Elektronik, March-Hugstetten, Germany）によって制御される赤外線加熱灯で37℃に維持した。大腿動脈は、無菌技術を使用して切開し、ヘパリン処置した（10IU／ml）塩類溶液を含むポリエチレン・チューブ（PE-10）でカニューレ処置した。動脈圧を連続的に測定し(Uniflow(商標) external pressure transducer;Baxter(商標), Utrecht, the Netherlands）、平均動脈圧（Mean Arterial Pressure：MAP）として記録した。心拍数（HR）は、瞬間的な圧力信号から連続的に評価した。動脈カテーテルの開存性を保持するために、Uniflow(商標)システムを介して生理食塩水（3ml／h）で常に灌流し；ヘパリンは、使用しなかった。
【００９３】
30分の順化期間の後、ラットは、1ml／分の速度で、2.1ml／体重100グラムの量（循環量の約30〜40%を表す）で血液を引くことによって、出血に供した。ショックの誘導の50分後に、カテーテルを除去して、大腿動脈は結紮した。
【００９４】
出血の6時間後に、これらは、自由に標準的な食事へアクセスさせた。偽ショック群のラットを麻酔して、左大腿動脈をカニューレ処置した。偽ショック・ラットも出血性ショック群と同様にモニターしたが、血液は引かなかった。
【００９５】
ショックの誘導の24時間後に、ラットをナトリウム・ペントバルビタール（60mg/kg）によって麻酔した。腹部全体の皮膚を剃り、ポビドンヨードによって除感染（desinfected）した。腹部を正中切開によって切開し、血液試料を採取し、腸間膜リンパ節、脾臓の中間部、および肝臓のセグメントIVを細菌検査のために無菌的に除去した。
【００９６】
細菌転移  
腸間膜リンパ節（MLN）、脾臓の中間部、および肝臓のセグメントを2mlの予め計量したチオグリコレート・ブロス・チューブ（Becton Dickinson (BBL) Microbiology Europe, Maylan, France）に無菌的に集めた。秤量後、組織検体を無菌の研磨ロッド（(Potter S, B. Braun Melsungen, Melsungen, Germany）でホモジナイズした。その後、500μlの体積を以下の寒天板に移した：5%vol／volのヒツジ血液（BBL）を補ったコロンビアIII血液寒天培地基材（二重プレート）、Chocolate PolyviteX寒天（BioMerieux, Marcy L'Etoile, Franc）、および5%のヒツジ血液（BBL）を補ったSchaedler Kanamycin-Vancomycin寒天。一定分量を寒天の全面に広げた。全ての寒天板を5% CO2濃縮された雰囲気において、または嫌気的条件（Shaedler寒天板）下で48hインキュベートした。インキュベーション後、非選択的なコロンビア・ヒツジ血液寒天板上でコロニーを計数した。グラム組織あたりのコロニー形成単位（CFU）の数の決定のためには、全ての好気的プレートでコロニー数を計数し、次に粉砕した組織の重量に合わせた。
【００９７】
統計解析  
リン脂質がトリグリセリドよりも優れているという仮説により、群間の比較のために1側マン-ホイットニーU検定（1-sidedMann-Whitney U test ）を使用した。転移の発生率については、50cfu／グラム組織のカットオフを使用して1側フィッシャーの正確試験（1-sided Fisher's Exact test）を使用した。
【００９８】
50以下の値は、転移が生じていないとみなされ、50よりも高い値は、細菌の転移が生じたとみなした。P≦0.05を統計学的に有意であるとみなした。
【００９９】
結果  
表3は、転移した細菌数に関する結果を示してあり、平均値および範囲（ブラケット間の）が示してある。
【０１００】
表3：1側マン-ホウィットニーU検定から得られる平均値としての、転移した細菌数
【表３】
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*p<0.05および**p<0.01は、HS-LFと比較した
#p＜0.05および##p<0.01は、HS-Sと比較した
§p=0.07は、HS-TGと比較した
¶p=0.05は、HS-TGと比較した。
【０１０１】
第1の実験において、出血性ショック（HS-S）を受けている飢餓ラットおよび出血性ショック（HS-LF）を受けている等熱量の低脂肪食を与えられたラットは、対照の飢餓ラット（C）、または偽ショック（SS）を受けている飢餓ラットと比較して、より高い細菌転移数を示した。高脂肪食を受けているラットは、出血性ショックを受けているその他の群と比較して、有意に低い細菌転移を示した。第1の実験において、高濃度のリン脂質（HS-HP）を与えられた群は、高濃度のトリグリセリド（HS-HT）を与えられた群と比較して、低い細菌数が転移する強い傾向を示した（p=0.07）。第2の実験を行った後に、これらの群をn=16を拡張することにより、HS-HTとHS-HP群との間で得られた相違は、有意に（P=0.05）HS-HP群において低い転移であった。
【０１０２】
転移発生率  
表4は、細菌転移の発生率についての結果を示す。飢餓対照ラット（C）および偽ショックラット（SS）は、出血性ショック受けている飢餓または低脂肪供給ラットと比較して、低い転移発生率を示した。高脂肪での食事は、細菌転移の発生率にポジティブな効果を有した。これらの高脂肪食の中で、高濃度のリン脂質（HS-HP）を有する食事では、高濃度のトリグリセリド（HS-HT）を有する食事と比較して、細菌転移発生率に対して有意な効果が観察された。
【０１０３】
これらの実験で得られた結果は、高脂肪食が、発症率のレベルで、および転移した細菌数のレベルでの両方で、手術および出血によって生じる細菌の転移を防御することを証明する。試験される2つの高脂肪食から、高比率のトリグリセリドに対するリン脂質を有する食事では、単独でトリグリセリドを含む高脂肪食よりも良好な有意な保護作用を示した。細菌転移の発生率の減少および転移した細菌数の減少は、菌血症の変化を減少させ、LPSおよびLTAの流入、これによりしたがって、内毒血症および敗血症の発症のチャンスを減少させ。
【０１０４】
表4：1側フィッシャーの正確試験（1-sided Fisher's Exact test）から得られる転移の発生率
【表４】
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【手続補正書】
【提出日】平成16年2月18日(2004.2.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腸内投与による内毒血症、敗血症、または菌血症の治療および／または予防のための栄養性組成物の製造のための、タンパク質および脂質を含む組成物の使用であって、前記脂質は、リン脂質およびトリグリセリドを、トリグリセリド対するリン脂質が1を超える重量比で含み、前記組成物は、0.5重量％未満のコレステロールまたはこれらの前駆体を含む使用。
【請求項２】
前記リン脂質が1日につきkg体重あたり0.008〜2.0グラムの用量で投与される、請求項1記載の使用。
【請求項３】
前記トリグリセリドが1日につきkg体重あたり0.01〜1.5gの用量で投与される、請求項1または2記載の使用。
【請求項４】
前記組成物が、好ましくはビタミンK（メナキノン）、ユビキノン、ビタミンAなどのカロテノイド、抱合型リノール酸、リポ酸、ビタミンD、およびこれらの混合物から選択される1つまたは複数の脂溶性物質をさらに含む、前述の請求項のいずれか1項記載の使用。
【請求項５】
敗血症、内毒血症、および／または菌血症が、一般に、大手術、重要な疾病、炎症性腸疾患（IBD）、HELLP症候群、細菌転移に対する増強された危険、および敗血症、特に、放射線療法／化学療法の間に、細菌、褥瘡によって特に引き起こされるか、または併発される大きな外傷、やけど、肺炎と、易感染性の免疫系と、または胆管閉塞と関係する、前述の請求項のいずれか1項記載の使用。
【請求項６】
大量の摂取ができない人、特に神経性食欲不振に罹患している患者、癌またはAIDSの患者、および高齢者の治療のための、前述の請求項のいずれか1項記載の使用。
【請求項７】
新生児の治療のための、前述の請求項のいずれか1項に記載の使用。
【請求項８】
家畜が屠殺されるか、または離乳期のブタの前に、家畜を治療するための、請求項1〜4のいずれか1項記載の使用。
【請求項９】
a）-少なくとも1重量％のタンパク質および／またはペプチド、および、
b）-脂質の少なくとも3.5重量％であって、該脂質画分は、リン脂質およびトリグリセリドを、トリグリセリドに対するリン脂質が1を超える重量比で含む脂質、
を含む経腸組成物であって、該組成物は、0.5重量％未満のコレステロールまたはこれらの前駆体を含み、前記リン脂質は、脂質画分の78重量％以下の量で存在し、かつ前記トリグリセリドは、長鎖脂肪酸の少なくとも50重量％を含む、経腸組成物。
【請求項１０】
前記リン脂質が、好ましくはホスファチジルコリンと、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、フォスファチジルグリセロール、およびホスファチジン酸の1つまたは複数とを含むリン脂質の混合物の形態である、請求項9に記載の経腸組成物。
【請求項１１】
前記リン脂質画分が、それが存在するときには、組成物に存在するリン脂質の総量の重量に基づいて、72重量％以下のホスファチジルコリンと、少なくとも70重量％未満のホスファチジルエタノールアミンと、および5重量%以上の負に荷電したリン脂質とを含む、請求項9または10に記載の経腸組成物。
【請求項１２】
前記トリグリセリドが、特定の長鎖多価不飽和脂肪酸の中に、60%以上、および最も好ましくは75%以上の長鎖脂肪酸を含む、請求項9〜11のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１３】
前記トリグリセリドに対するリン脂質の重量比が、1.5よりも大きく、好ましくは2よりも大きい、請求項9〜12のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、コレステロールまたはこれらの前駆体の0.2重量％未満を含む、請求項9〜1.のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１５】
前記タンパク質材料が、少なくとも0.3kダルトンの分子量を有するタンパク質および／またはペプチドの組成物の少なくとも30重量％を含む、請求項9〜14のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１６】
前記組成物が卵または卵画分を含む、請求項9〜15のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１７】
前記組成物が、免疫グロブリン、好ましくはIgYをさらに含む、請求項9〜16のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１８】
前記組成物がダイズレシチンを含む、請求項9〜17のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項１９】
前記組成物が経管栄養である、請求項9〜18のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２０】
前記組成物が、コレステロールまたはこれらの前駆体を実質的に含まない、請求項9〜19のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、好ましくはビタミンK（メナキノン）、ユビキノン、ビタミンAなどのカロテノイド、抱合型リノール酸、リポ酸、ビタミンD、およびこれらの混合物から選択される1つまたは複数の脂溶性物質をさらに含む、請求項9〜20のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、好ましくはクエン酸、リンゴ酸、乳酸、これらの塩類、およびこれらの混合物から選択される1つまたは複数の有機酸をさらに含む、請求項9〜21のいずれか1項に記載の経腸組成物。
【請求項２３】
請求項9〜22のいずれか1項に定義した組成物を製造するための方法であって、前記方法は：
a）-非脂質成分を共に混合して、6〜8の範囲のpHに調整することと；
b）-脂質成分を、混合することによって工程a）で得られた混合物に組み入れることと；
c）-工程b）で得られた混合物を低温殺菌して、組成物の乾燥重量に基づいて少なくとも2.5重量部の量の有機酸、好ましくはクエン酸、シトラート、またはこれらの混合物を添加することによってpHを6〜8の範囲内に調整することと、および、
d）-混合物を殺菌することと、
の工程を含む方法。
【国際調査報告】
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