(57)【要約】水溶性スズメソポルフィリン化合物を記載する。水溶性金属メソポルフィリン化合物および製薬学的調製物も記載する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
第２の薬剤と錯体を形成しているスズメソポルフィリンを含む水溶性スズメソポルフィリン化合物。
【請求項２】
前記第２の薬剤がアミノ酸を含む、請求項１に記載の水溶性スズメソポルフィリン化合物。
【請求項３】
前記水溶性スズメソポルフィリン化合物が液体または固体の形態である、請求項２に記載の水溶性スズメソポルフィリン化合物。
【請求項４】
前記アミノ酸が、アルギニン、グリシン、アラニン、ロイシン、セリン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２に記載の水溶性スズメソポルフィリン化合物。
【請求項５】
水溶性スズメソポルフィリン化合物と少なくとも１つの製薬学的に許容されうる担体を含む製薬学的製剤。
【請求項６】
前記水溶性スズメソポルフィリン化合物が、第２の薬剤と錯体を形成しているスズメソポルフィリンを含む、請求項５に記載の製薬学的製剤。
【請求項７】
前記第２の薬剤がアミノ酸を含む、請求項６に記載の製薬学的製剤。
【請求項８】
前記水溶性スズメソポルフィリン化合物が、液体または固体の形態である、請求項７記載の製薬学的製剤。
【請求項９】
前記アミノ酸が、アルギニン、グリシン、アラニン、ロイシン、セリン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項７に記載の製薬学的製剤。
【請求項１０】
前記製薬学的製剤が、約０．１〜約５０ｍｇのスズメソポルフィリンを含有する、請求項７に記載の製薬学的製剤。
【請求項１１】
スズメソポルフィリン化合物の溶液をアミノ酸と混合するステップを含む、スズメソポルフィリンの水溶性錯体を製造する方法。
【請求項１２】
前記溶液が塩基性溶液である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記溶液が、水酸化ナトリウムの水溶液を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記アミノ酸が、アルギニン、グリシン、アラニン、ロイシン、セリン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項１５】
前記アミノ酸に対するスズメソポルフィリン化合物の比が少なくとも約２：１である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記塩基性溶液に対するスズメソポルフィリンの比が少なくとも約１：３である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
溶液をろ過して、固体または製薬学的に許容されうる液体を得るステップをさらに含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記ろ過後の生成物が固体である場合、固体を真空乾燥するステップをさらに含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記スズメソポルフィリン化合物がメソポルフィリンのハロゲン化物を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
前記ハロゲン化物がスズメソポルフィリンの二塩化物を含む、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
スズメソポルフィリン中間体に接触による水素化を実施するステップと、スズメソポルフィリンのギ酸塩を回収するステップと、ギ酸塩を乾燥してスズメソポルフィリンフォルメートを得るステップと、メソポルフィリンＩＸフォルメートに、緩衝化した反応条件下においてハロゲン化金属化合物による化学的金属挿入処理反応を実施して、金属メソポルフィリンのハロゲン化物を製造するステップとをさらに含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１１に記載の方法によって製造したスズメソポルフィリン化合物に少なくとも１つの製薬学的に許容されうる担体を混合したものを含む製薬学的製剤。
【請求項２３】
ヘミンと水素化触媒の反応混合物を第１の高い温度に第１の時間にわたって接触させるステップと、
前記反応混合物を第２の高い温度に第２の時間にわたって接触させるステップと、
前記反応混合物からギ酸塩を回収し、塩を乾燥して金属メソポルフィリンＩＸフォルメートを得るステップと、
メソポルフィリンＩＸフォルメートに、金属メソポルフィリンのハロゲン化物を製造する反応条件下においてハロゲン化金属化合物による化学的金属挿入処理反応を実施するステップと、塩基性溶液の存在下において前記金属メソポルフィリンのハロゲン化物に少なくとも１つのアミノ酸を反応させて金属メソポルフィリンの水溶性錯体を製造するステップと
を含む、金属メソポルフィリンの水溶性錯体を製造する方法。
【請求項２４】
前記第１の温度が第２の温度より高い、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記第１の温度が約８５〜９５℃である、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
ヘミンと水素化触媒の前記反応混合物が酸性溶液中に存在し、少なくとも１時間水素圧に接触される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記第２の温度が約４５〜５０℃であり、前記第２の時間が少なくとも約３時間である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記メソポルフィリンＩＸフォルメートを、ハロゲン化金属化合物による化学的金属挿入処理反応に接触させるステップが、緩衝化した酸性反応条件下において酸化剤の存在下において実施される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
請求項２３に記載の方法によって製造される金属メソポルフィリン化合物を含む製薬学的組成物。
【請求項３０】
前記金属メソポルフィリンがスズメソポルフィリンを含む、請求項２９に記載の製薬学的組成物。
【請求項３１】
前記アミノ酸が、アルギニン、グリシン、アラニン、ロイシン、セリン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
水溶性スズメソポルフィリン化合物の製薬学的に有効な量を投与するステップを含む、病状を有するヒトを治療する方法。
【請求項３３】
前記水溶性スズメソポルフィリン化合物が、第２の薬剤と錯体を形成しているスズメソポルフィリンを含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記第２の薬剤がアミノ酸を含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記アミノ酸が、アルギニン、グリシン、アラニン、ロイシン、セリン、リジン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記病状が高ビリルビン血症である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記病状が乾癬である、請求項３５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、一般に、水溶性メソポルフィリン化合物とそれらを製造する方法とに関する。さらに具体的には、本発明の１つ以上の実施態様は、このような化合物を含有する新規製薬学的組成物を製造するための方法と、新生児高ビリルビン血症および他の形態の高ビリルビン血症などの種々の状態を治療する際の上記組成物の用途とに関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ塩化物すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）は、図１に示す構造を有するメソポルフィリン化合物である。例えば、乾癬（Ｋａｐｐａｓらに付与された米国特許第４，７８２，０４９号）および小児の黄疸（例えば、米国特許第４，６８４，６３７号、同第４，６５７，９０２号および同第４，６９２，４４０号）を含む種々の疾患を治療する際の医薬としての用途が提案されている。スタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）はまた、哺乳類のヘム代謝を阻害すること、哺乳類のトリプトファン代謝速度を制御すること、およびヘムが哺乳類によって排泄される速度を増加することも知られている（共にＫａｐｐａｓらに付与された米国特許第４，６５７，９０７号、および同第４，６９２，４４０号）。
【０００３】
スタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）を入手する方法は当技術分野において既知である。図２に示す構造式の鉄（ＩＩＩ）プロトポルフィリンＩＸ塩化物すなわちヘミンは、通常、出発物質として使用される。ヘミンは、一般に、水素化されて中間体メソポルフィリンＩＸジヒドロクロライドを形成し、その後スズが挿入されてスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）を生ずる。
【０００４】
しかし、上記に参照するスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）すなわちスズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸの製造方法は非水溶性化合物を生ずる。非水溶性化合物は治療薬として使用するのが困難であり、錠剤もしくはカプセルへの封入または粉末としての使用などの専用の送達方法がない。従って、新生児、小児および成人が罹患する状態の治療的治療へのスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）の適用が妨げられている。
【０００５】
発明の開示
本発明の１つ以上の実施態様は、水溶性メソポルフィリン化合物を製造するための新規方法を提供する。具体的な実施態様は、水溶性金属メソポルフィリン化合物を製造するための新規方法を提供する。本発明の他の実施態様は、新生児高ビリルビン血症を含む種々の疾患を治療する際に使用するための水溶性スズメソポルフィリンを組み入れた新規製薬学的組成物を提供する。
【０００６】
１つ以上の実施態様によると、塩基性溶液中でスズメソポルフィリンＩＸ二塩化物すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）とアミノ酸が反応すると、新規最終化合物、スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸアルギネートなどのスズメソポルフィリンＩＸアミノ酸を形成する。１つ以上の実施態様によると、最終化合物は実質的に純粋で、水溶性の固体または粉末で単離できるように凍結して真空乾燥することができる。１つ以上の実施態様において、実質的に純粋で水溶性の固体または粉末は、注射、経口または経皮パッチなどの経皮的送達で使用して、治療的に有用で、活性な用量を可能にすることができる。
【０００７】
発明を実施する最良の形態
本明細書に記載する種々のプロセスパラメーター（例にすぎないが、温度、時間および圧力）は近似値であって、変更されてもよく、あるステップは異なる順序で実施されてもよいことが考慮されるべきである。本発明のいくつかの例示的な実施態様を記載する前に、本発明は以下の説明に記載する構成または工程段階の細目に限定されないことが理解されるべきである。本発明は他の実施態様が可能であり、種々の方法で実施または実行することができる。
【０００８】
一般に、１つ以上の実施態様によると、スズメソポルフィリン化合物を塩基性溶液などの溶液中で１種以上のアミノ酸と反応させて、スズメソポルフィリンの水溶性アミノ酸錯体すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）を製造する。１つ以上の実施態様によると、スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物（すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ））は種々の方法、例えば、参照として本明細書に組み入れられている、２００３年６月３日提出の同時係属出願の米国特許出願第１０／４５３，８１５号に開示されている方法によって入手することができる。しかし、他の方法を使用してスズメソポルフィリンＩＸ二塩化物などのメソポルフィリンのハロゲン化物を製造することができることが理解され、本発明は特定のメソポルフィリン製造方法に限定されない。
【０００９】
１つ以上の実施態様によると、２段階水素化方法を使用して、スズメソポルフィリンを製造する。第１の段階において、ヘミンと水素化触媒の反応混合物を第１の時間の間第１の高温に接触させる。ある実施態様において、第１の段階の温度は約８５〜９５℃の範囲内であってもよく、時間は少なくとも約１時間、例えば、約１〜３時間である。
【００１０】
第２の水素化段階において、反応混合物を第２の時間にわたって第２の温度に冷却する。実質的に全てのヘミン（鉄（ＩＩＩ）プロトポルフィリンＩＸ塩化物）をメソポルフィリンＩＸフォルメートに変換するために、例えば、第２の温度は、約４５〜５０℃の範囲内で、約３〜６時間の第２の期間にわたって水素化することができる。ある実施態様において、この第２の段階はギ酸の存在下において実施してもよい。２つの工程段階を同一の反応器内で実施することができるように、上記の第１の段階と同じ触媒を使用してもよい。必要に応じて、第２の段階を開始する前にさらに水素を反応器に供給してもよい。１つ以上の実施態様によると、第２の水素化段階はメソポルフィリンＩＸフォルメートの収率を増加すると同時に、最終の金属メソポルフィリンのハロゲン化物中の不純物の量を低下する。
【００１１】
上記の方法によって、本発明のメソポルフィリンＩＸ中間体化合物は二塩酸塩として単離されるのではなく、ギ酸塩として単離される。当然のことながら、スズ（ＩＶ）メソポルフィリン中間体を製造するために他の方法を使用することができることが理解される。
【００１２】
メソポルフィリンＩＸフォルメートは、エーテルなどの溶媒または他の有機溶媒を添加することによってギ酸溶液から単離されて、メソポルフィリンＩＸフォルメート中間体を直接生じ、乾燥される。例えば、特にメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、ジエチルエーテルまたはジ−イソプロピルエーテルなどのエーテルを使用してもよい。本発明の１つの具体的な実施態様では、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを使用することが挙げられる。
【００１３】
上記の方法によると、他の方法と比較して少ない溶媒しか必要ではなく、このように容量が少ないと、中間体を得るためのろ過時間が短くてすむ。例示的な実施態様において、約１：１０〜約１：２０の溶媒量に対するヘミンの量の比を使用してもよい。また、メソポルフィリンＩＸフォルメートのろ過および洗浄は迅速である。乾燥後、粗中間体フォルメートは高収率（約８０〜９５％）で得られ、純度はＨＰＬＣで確率したとき、約９７％以上である。
【００１４】
金属メソポルフィリンのハロゲン化物を得るためにメソポルフィリンＩＸフォルメートに金属を挿入することは、スタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）を製造するためのスズに具体的に言及して以下に記載されている。
【００１５】
本発明の実施態様によると、メソポルフィリンＩＸフォルメートへのスズの挿入は図４に例示されている。１つ以上の実施態様において、メソポルフィリンＩＸフォルメートは、酸化剤の存在下において酢酸イオンで緩衝化した酢酸などの酸中でスズ（ＩＩ）担体と共に加熱環流される。ハロゲン化スズ（ＩＩ）または酢酸スズ（ＩＩ）などのスズ（ＩＩ）担体を使用することができる。好適な酢酸対イオンはアンモニウム、ナトリウムまたはカリウムイオンを含む。空気中の酸素または純粋な形態の酸素および過酸化水素などの酸化剤を使用してもよい。本発明の１つの例示的な実施態様において、メソポルフィリンＩＸフォルメートへの金属の挿入が生じる。１つ以上の実施態様において、メソポルフィリンＩＸフォルメートは、酢酸アンモニウムで緩衝化した酢酸中で塩化スズ（ＩＩ）と共に加熱され、反応は空気の存在下において環流して実施される。この実施態様によると、スズメソポルフィリン二塩化物は、水を添加してからろ過し、フィルターケーキを提供することによって反応混合物から単離される。さらに例示的な実施態様によると、約９０〜１００℃において乾燥する前に、フィルターケーキを、温度の高い希塩酸、例えば、約９０〜１００℃、約０．１Ｎ〜６Ｎの濃度の希塩酸中で粉砕する。この実施態様によると、未精製で、実質的に純粋なメソポルフィリン塩化物（粗スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物は約７５〜９５％の収率で得られ、ＨＰＬＣ分析で判断したとき純度は約９５％である。
【００１６】
少なくとも１つの実施態様によると、上記の方法で得られるスズメソポルフィリンＩＸ二塩化物は、無機塩基水溶液、例えば、希水酸化アンモニウムに生成物を溶解してから、活性炭で処理することによってさらに精製することができる。次いで、生成物は、酢酸、塩酸またはそれらの混合物などの酸溶液に添加することによって再沈殿される。望ましい純度を確保するために、上記の溶解、活性炭処理および再沈殿ステップを数回、典型的には約１〜３回反復することができる。乾燥する前に、任意の残存アンモニウム塩を除去するために、約９０〜１００℃の温度の約０．１Ｎ〜６Ｎの濃度の温度の高い希塩酸中でケーキを粉砕する。スズメソポルフィリン塩化物生成物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ））は約５０〜７０％の収率で得られ、ＨＰＬＣ純度は約９７％以上である。
【００１７】
出発反応物質の規模の増加に基づいて適宜反応時間または乾燥時間を延長するなど、上記の手法をわずかに改良することによって、実質的に純粋または製薬学的品質のスズメソポルフィリン塩化物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ））を約０．１ｋｇ〜数キログラムの量などの大規模な量で製造するためにも上記の方法を実施することができる。温度および加圧時間は、同様に、本発明の範囲内で適宜改良することができる。スズメソポルフィリン塩化物生成物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ））は、大規模生成方法において約６０〜９０％の収率で得られ、ＨＰＬＣ純度は約９７％である。
【００１８】
本発明の１つ以上の実施態様によると、上記のように得られるスズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸなどのスズメソポルフィリンを、次いで、塩基性溶液などの溶液中で１種以上のアミノ酸と反応させて、スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸの水溶性アミノ酸錯体すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）を生成する。選択するアミノ酸は、アルギニン、グリシン、アラニン、ロイシン、セリンおよびリジンを含むが、これらに限定されない既知のアミノ酸の１つ以上であってもよい。塩基性溶液は、水酸化ナトリウム、リン酸三ナトリウム、アルカリ金属（第ＩＩＡ族）の水酸化物、アルカリ土類金属（第ＩＩＡ族）の水酸化物もしくはエタノールアミンなどのアミンまたは上記塩基の１つ以上の水溶液を含むが、これらに限定されない水溶性形態の任意の一般的な塩基を含んでもよい。
【００１９】
本発明の水溶性化合物は、多種多様の経口および非経口剤形で製剤化し、投与することができる。従って、本発明の化合物は、注射、すなわち、静脈内、筋肉内、くも膜下腔内、皮内、皮下、十二指腸内または腹腔内に投与することができる。また、本発明の化合物は、吸入、例えば、経鼻的に投与することができる。さらに、本発明の化合物は経皮的に投与することができる。さらに、本発明の化合物は、経直腸的、経膣的または例えば、口腔の頬側粘膜などの任意の粘膜表面から投与することができる。以下の剤形は、作用成分として、図Ｉの化合物または図ＩもしくはＩＩの化合物の対応する製薬学的に許容されうる塩を含むことができることは当業者に明らかである。
【００２０】
本発明の１つ以上の実施態様によると、製薬学的組成物の製剤化は、固体または液体であってもよい製薬学的に許容されうる担体の使用に関係してもよい。固体の剤形には、粉末、錠剤、ピル、カプセル、カシェ、坐剤および分散性顆粒が挙げられる。固体の担体は、希釈剤、矯味矯臭剤、可溶化剤、潤滑剤、懸濁化剤、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤、封入物質またはリポソーム製剤などの薬物送達剤として作用することもできる１つ以上の物質であってもよい。
【００２１】
粉末を含む実施態様において、担体は、微粉化した作用成分との混合物中に存在する微粉化した固体である。錠剤を含む実施態様において、作用成分は、必要な結合特性を有する担体と好適な割合で混合され、望ましい形状およびサイズに打錠される。
【００２２】
粉末および錠剤は、好ましくは、約０．１〜約５０％の作用化合物を含む。好適な担体には、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、カカオ脂等が挙げられるが、これらに限定されない。「製剤化」という用語は、作用化合物を他の担体と共にまたは他の担体を伴わないで、作用化合物と関連する担体が取り囲むカプセルを提供する担体としての封入化材料と共に作用化合物を製剤化することを含むことを意図している。同様に、カシェおよびトローチも含まれる。錠剤、粉末、カプセル、ピル、カシェおよびトローチは、経口投与に好適な固体剤形として使用することができる。
【００２３】
坐剤の製剤化は、脂肪酸グリセリドまたはカカオ脂の混合物などの低融点ワックスを最初に融解し、作用成分を撹拌することによって均一に分散する。次いで、融解した均一な混合物を好適なサイズの成形型にそそぎ、冷却させて固化させる。
【００２４】
液剤には、溶液、懸濁液およびエマルジョン、例えば、水溶液またはプロピレングリコール水溶液が挙げられる。非経口注射液については、液剤はポリエチレングリコール水溶液の溶液の形態で製剤化することができる。
【００２５】
経口使用に好適な水溶液は、作用成分を水に溶解し、好適な着色剤、芳香剤、安定剤および増粘剤を適宜添加することによって製剤化することができる。経口使用に好適な水性懸濁液は、細分割した作用成分を、天然または合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび他の既知の懸濁化剤と共に水に分散することによって作製することができる。
【００２６】
本発明の１つ以上の実施態様は、使用直前に経口投与のための液剤に変換されることが意図されている固形剤を含む。このような液剤には、溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。これらの製剤は、作用成分以外に、着色剤、芳香剤、安定剤、緩衝剤、人工および天然甘味剤、分散剤、増粘剤、可溶化剤等を含有してもよい。
【００２７】
製剤は、好ましくは、単位剤形の形態である。このような剤形では、製剤は、適当な量の作用成分を含有する単位用量に細分される。単位剤形は、包装された錠剤、カプセルおよびバイアルまたはアンプルに充填された粉末などの別個の量の製剤を含有する包装物である、包装された製剤であってもよい。また、単位剤形はカプセル、錠剤、カシェもしくはトローチ自体であっても、またはこれらのいずれかの適当な数が包装された形態のものであってもよい。
【００２８】
単位剤形中の作用成分の量は、作用成分の特定の用途および効力並びに患者のサイズに応じて約０．１から約５０ｍｇまで、好ましくは０．１から１０ｍｇまで変更または調節することができる。組成物は、適宜、他の適合性のある治療薬を含有してもよい。
【００２９】
１つ以上の実施態様によると、新生児高ビリルビン血症を治療するための薬剤としての治療的使用において、本発明の製薬学的方法に使用する化合物は、体重１キログラムあたり約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇを毎日の初回量が投与される（ＩＭ）。具体的な例示的な実施態様は、新生児高ビリルビン血症を治療するための、体重１キログラムあたり約０．５ｍｇ〜約５ｍｇの使用（ＩＭ）に関係する。しかし、この投与量は、患者の要件、治療対象の状態の重症度および使用する化合物に応じて変更してもよい。特定の状況に対する適切な投与量の決定は当技術分野の範囲内である。一実施態様において、一般に、治療は、化合物の至適容量より少ない少量から開始される。従って、用量は、その状況における最適の影響に達するまで少量ずつ増加される。
【００３０】
本発明の例示的な実施態様は、以下の限定するものではない実施例を参照して、例示的な目的のためにさらに記載される。
【００３１】
実施例１−スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸアルジネート塩の製造
Ａ）メソポルフィリンＩＸフォルメートの製造−２０００ｍｌの水素化容器に、４０．０ｇのヘミン、４．０ｇの５％Ｐｄ／ｃ（５０重量％の水）および８００ｍｌの９６％ギ酸を添加した。報告によると、ヘミンおよびメソポルフィリンＩＸフォルメート並びに全ての反応中間体は感光性物質であるので、可視光線または紫外線に対する反応の暴露を最小にするようにこの手法全体に注意を払った。
【００３２】
容器に窒素気流を１０分間通気した。次いで、激しく撹拌しながら、水素で５０ｐｓｉに１０分間加圧して、圧抜きし、このサイクルを反復した。さらに水素で容器を５０ｐｓｉに加圧し、温度を約２０分で９０℃に上昇させた。
【００３３】
水素化反応を９０℃、４５〜５５ｐｓｉにおいて１〜１．５時間維持した。反応混合物は、９０℃において長時間は安定でなかった。この温度におけるこの時間は、全てのヘミンを溶解し、この物質の大半を中間体および最終生成物、メソポルフィリンＩＸフォルメートに変換するのに十分であった。反応液を２０分間かけて５０℃／５０ｐｓｉに冷却した。この圧力および温度を３時間維持した。反応混合物はこの温度において最長１８時間安定であることが示された。反応液を２０〜２５℃に冷却し、圧抜きし、窒素を通気した。
【００３４】
２０ｇのセライトベッドでろ過して触媒を除去し、フィルターケーキを生じた。フィルターケーキを５０ｍｌのギ酸で３回すすいで、ギ酸を含むろ液およびフィルターケーキを、磁気回転子、温度計および蒸留塔を備える２０００ｍｌの三頚丸底フラスコに添加した。アスピレーターによる真空下でギ酸溶媒を残存容量２００ｍｌまで留去した。蒸留塔を添加ロートと交換した。中程度に撹拌しながら、８００ｍｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを３０〜６０分かけて滴下した。得られた懸濁液を２０〜２５℃において６０分間撹拌してから、−２０〜−２５℃に１〜２時間冷却した。懸濁液を減圧ろ過した。フィルターケーキを１００ｍｌのろ液ですすいでから、５０ｍｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで２回すすぎ、４０〜６０℃、高真空下において２４時間乾燥した。約３０〜３８ｇのメソポルフィリンＩＸフォルメートを得た（収率７５〜９５％）。
【００３５】
Ｂ）−実質的に純粋なスズメソポルフィリン塩化物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）の製造．機械的撹拌子、冷却器、気泡管および通気管を備える１０００ｍｌの三頚丸底遮光フラスコに３０．０ｇのメソポルフィリンＩＸフォルメート、３４．５ｇの塩化スズ（ＩＩ）、７．１ｇの酢酸アンモニウムおよび６００ｍｌの酢酸を添加した。懸濁液を２０〜２５℃において３０分間撹拌した。報告によると、メソポルフィリンＩＸフォルメートおよびスズメソポルフィリン並びに全ての反応中間体は感光性物質であるので、光線に対する反応の暴露を最小にするようにこの手法全体に注意を払った。
【００３６】
通気しながら反応液を３〜４時間加熱環流した。反応液は１１０〜１１５℃において最長４８時間安定であることが示された。反応が終了したら、反応混合物を６０〜７０℃に冷却して、６０分間で２０〜２５℃に冷却しながら、３００ｍｌの水を添加した。懸濁液を減圧ろ過した。フィルターケーキを６０ｍｌの水で２回すすいだ。撹拌子、温度計、冷却器および窒素通気を備える１０００ｍｌの三頚丸底遮光フラスコに上記ステップの湿った状態のケーキおよび５００ｍｌの１Ｎ  ＨＣｌを添加した。得られた懸濁液を９０℃に１時間加温した。懸濁液を減圧ろ過した。フィルターケーキを５０ｍｌの０．１Ｎ  ＨＣｌで２回すすぎ、８０〜９０℃、高真空下で２４時間乾燥した。約２５〜２８ｇの精製していない実質的に純粋な（純度約９５％を超える）スズメソポルフィリン塩化物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物、すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ））を、収率８３〜９３％で得た。
【００３７】
Ｃ）−アルギネート塩の製造．次いで、上記に言及した方法により製造したスズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物を、アルギニンの水酸化ナトリウム水溶液の溶液と合わせて、反応が終了に近くなるように十分な時間の間混合した。アルギニンに対するスズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物の比は約２：１である。水酸化ナトリウム水溶液に対するスズメソポルフィリンＩＸ二塩化物の比は約１：３である。次いで、溶液をろ過し、脱イオン水ですすぎ、凍結した。液体およびスズメソポルフィリン−アミノ酸錯体を含むろ液を凍結後、凍結した溶液を真空乾燥して、凍結乾燥した生成物を提供する。
【００３８】
実施例２−スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸアルギネート塩の注射用または経皮的製剤の製剤化
Ａ）−メソポルフィリンＩＸフォルメートの製造−２０００ｍｌの水素化容器に、４０．０ｇのヘミン、４．０ｇの５％Ｐｄ／Ｃ（５０重量％の水）、および８００ｍｌの９６％ギ酸を添加した。報告によると、ヘミンおよびメソポルフィリンＩＸフォルメート並びに全ての反応中間体は感光性物質であるので、可視光線または紫外線に対する反応の暴露を最小にするようにこの手法全体に注意を払った。
【００３９】
容器に窒素気流を１０分間通気した。次いで、激しく撹拌しながら、水素で５０ｐｓｉに１０分間加圧して、圧抜きし、このサイクルを反復した。さらに水素で容器を５０ｐｓｉに加圧し、温度を約２０分で９０℃に上昇させた。
【００４０】
水素化反応を９０℃、４５〜５５ｐｓｉにおいて１〜１．５時間維持した。反応混合物は、９０℃において長時間は安定でなかった。この温度におけるこの時間は、全てのヘミンを溶解し、この物質の大半を中間体および最終生成物、メソポルフィリンＩＸフォルメートに変換するのに十分であった。反応液を２０分間かけて５０℃／５０ｐｓｉに冷却した。この圧力および温度を３時間維持した。反応混合物はこの温度において最長１８時間安定であることが示された。反応液を２０〜２５℃に冷却し、圧抜きし、窒素を通気した。
【００４１】
２０ｇのセライトベッドでろ過して触媒を除去した。フィルターケーキを５０ｍｌのギ酸で３回すすいで、ろ液を、磁気回転子、温度計および蒸留塔を備える２０００ｍｌの三頚丸底フラスコに添加した。アスピレーターによる真空下でギ酸溶媒を残存容量２００ｍｌまで留去した。蒸留塔を添加ロートと交換した。中程度に撹拌しながら、８００ｍｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを３０〜６０分かけて滴下した。得られた懸濁液を２０〜２５℃において６０分間撹拌してから、−２０〜−２５℃に１〜２時間冷却した。懸濁液を減圧ろ過した。フィルターケーキを１００ｍｌのろ液ですすいでから、５０ｍｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで２回すすぎ、４０〜６０℃、高真空下において２４時間乾燥した。約３０〜３８ｇのメソポルフィリンＩＸフォルメートを得た（収率７５〜９５％）。
【００４２】
Ｂ）−実質的に純粋なスズメソポルフィリン塩化物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物、すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）の製造．機械的撹拌子、冷却器、気泡管および通気管を備える１０００ｍｌの三頚丸底遮光フラスコに３０．０ｇのメソポルフィリンＩＸフォルメート、３４．５ｇの塩化スズ（ＩＩ）、７．１ｇの酢酸アンモニウム、および６００ｍｌの酢酸を添加した。懸濁液を２０〜２５℃において３０分間撹拌した。報告によると、メソポルフィリンＩＸフォルメートおよびスズメソポルフィリン並びに全ての反応中間体は感光性物質であるので、光線に対する反応の暴露を最小にするようにこの手法全体に注意を払った。
【００４３】
通気しながら反応液を３〜４時間加熱環流した。反応液は１１０〜１１５℃において最長４８時間安定であることが示された。反応が終了したら、反応混合物を６０〜７０℃に冷却して、６０分間で２０〜２５℃に冷却しながら、３００ｍｌの水を添加した。懸濁液を減圧ろ過した。フィルターケーキを６０ｍｌの水で２回すすいだ。撹拌子、温度計、冷却器および窒素通気を備える１０００ｍｌの三頚丸底遮光フラスコに上記ステップの湿った状態のケーキおよび５００ｍｌの１Ｎ  ＨＣｌを添加した。得られた懸濁液を９０℃に１時間加温した。懸濁液を減圧ろ過した。フィルターケーキを５０ｍｌの０．１Ｎ  ＨＣｌで２回すすぎ、８０〜９０℃、高真空下で２４時間乾燥した。約２５〜２８ｇの精製していない実質的に純粋な（純度約９５％を超える）スズメソポルフィリン塩化物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ））を、収率８３〜９３％で得た。
【００４４】
Ｃ）−アルギネート塩の製造．次いで、上記の方法により製造したスズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物を、過剰量のアルギニンの水酸化ナトリウム水溶液の溶液と合わせて（比は約２：１：３である）、溶解するように十分な時間の間混合した。アルギニンに対するスズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物の比は約２：１である。水酸化ナトリウム水溶液に対するスズメソポルフィリンＩＸ二塩化物の比は約１：３である。次いで、溶液をろ過し、脱イオン水ですすぎ、凍結した。溶液を凍結後、凍結した溶液を真空乾燥して、凍結乾燥した生成物を生ずる。
【００４５】
再構成される生成物はＤＩ  Ｈ2Ｏもしくは５％生理食塩液または当技術分野において既知の他の注射用もしくは経皮用溶液の１つに再溶解され、このような注射または経皮的方法によって患者に送達することができることを本発明者らは予想している。他のアミノ酸も同様にスズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物と反応して、本発明に矛盾しない水溶性錯体を形成すると思われることを当業者は容易に理解すると思われる。
【００４６】
例えば、本発明者らは、ＮａＯＨの存在下において数多くのアミノ酸とスズ−メソポルフィリンを製造し、反応させた。これらの反応から単離される物質を1Ｈ  ＮＭＲおよびＵＶ／ＶＩＳ（紫外可視）分光法で調査し、反応生成物の溶解度をそれぞれの出発物質の溶解度と比較して、アミノ酸−スズ−メソポルフィリン錯体がこのような反応から形成するかどうかも判定した。
【００４７】
出発物質の1Ｈ  ＮＭＲスペクトルを反応生成物のスペクトルと比較すると、本質的に、アミノ酸とスズ−メソポルフィリンの１：１混合物が明らかになる。当技術分野において説明されるように、1Ｈ  ＮＭＲ方法は、1Ｈ  ＮＭＲ分光法は望ましい錯体の形成を検出するほど感度が十分でないことを示しているので、本発明者らは分析方法としてＵＶ／ＶＩＳ分光法も使用した。ＵＶ／ＶＩＳ分光法は、アミノ酸とスズ−メソポルフィリンの錯体の形成に一致すると思われるスペクトルの別個のわずかな変化を明らかにした。
【００４８】
溶解度プロファイルの変化も同様に、以下の表に示すように、反応混合物のアミノ酸成分  の溶解度の変化により、ＮａＯＨの存在下においてスズメソポルフィリンとアミノ酸を混  合すると新規の種、アミノ酸−スズ−メソポルフィリン錯体の形成を、示唆している（メ  タノール＝ＭｅＯＨ、イソプロピルアルコール＝ＩＰＡ、酢酸エチル＝ＥｔＯＡｃ、テト  ラヒドロフラン＝ＴＨＦ、メチル−ｔ−ブチルエーテル＝ＭＴＢＥ。
【００４９】
【表１】
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【００５０】
本発明者らは、さらに、本発明によりＮａＯＨの存在下において数多くの追加のアミノ酸とスズメソポルフィリンを反応させた。これらの反応から単離される物質を1Ｈ  ＮＭＲおよびＵＶ／ＶＩＳ分光法で調査した。これらの追加の反応生成物の溶解度もそれぞれの出発物質と比較した。
【００５１】
アミノ酸Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−フェニルアラニンおよびＬ−チロシンは、それらが各々芳香族部分を含有するという点において、これまでに反応させたアミノ酸と異なる。ポルフィリンと上記アミノ酸の芳香族部分のπ−π相互作用は、錯体の1Ｈ  ＮＭＲスペクトルの明らかな化学シフト変化を生ずる。錯体の1Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、−１０．５ｐｐｍに見られるスズメソポルフィリン1Ｈ  ＮＭＲ共鳴のかなりの高磁場シフトを示す。錯体では、これらの共鳴は９．５ｐｐｍにおいて見られる。ＵＶＩＶＩＳスペクトルの調査も、〜３５０ｎｍに見られる吸収の大きな変化を示す。これらの吸収の変化は、アミノ酸とスズメソポルフィリン間に化学結合が形成される可能性を示しており、アミノ酸とスズメソポルフィリン間の錯体の形成をさらに証明している。
【００５２】
【表２】
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【００５３】
【表３】
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【００５４】
最後に、本発明者らは、本発明により、全ての既知の天然型アミノ酸とスズメソポルフィリンを反応させた。アミノ酸は、ＮａＯＨ水溶液の存在下においてスズメソポルフィリンと反応させた。これらの反応から単離される物質を、1Ｈ  ＮＭＲおよびＵＶ／ＶＩＳ分光法で調査した。次いで、反応生成物の溶解度を、それぞれの出発物質の溶解度と比較もした。
【００５５】
【表４】
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【００５６】
【表５】
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【００５７】
数多くの反応生成物は、それぞれの出発物質の溶解性と比較したとき、異なる溶解性を示す。結果として、反応混合物のアミノ酸成分の溶解度の変化は、スズ−メソポルフィリン−アミノ酸錯体の形成を示唆し、裏付けている。従って、アミノ酸の溶解性の変化をガイドとして使用すると、上記の表は、スズメソポルフィリンと掲載する全てのアミノ酸の錯体形成を示唆し、裏付けている。本発明者らは、表に示す他のアミノ酸の結果に基づいて、スズメソポルフィリンとアミノ酸のプロリンの同様の錯体形成を予想している。
【００５８】
反応生成物の多くについて、スズメソポルフィリンナトリウムと反応生成物のＵＶ／ＶＩＳスペクトル間に、わずかな差から明らかな差を観察した。この変化は、新規化学種の形成を示している。アミノ酸のグリシンナトリウム、アラニンナトリウム、ロイシンナトリウム、リジンナトリウムおよびセリンナトリウムから誘導される反応生成物については、ＵＶ／ＶＩＳスペクトルの〜４００ｎｍのピークにショルダーが出現する。アミノ酸のヒスチジンナトリウム、フェニルアラニンナトリウム、チロシンナトリウム、トリプトファンナトリウム、メチオニンナトリウムおよびスレオニンナトリウムから誘導される反応生成物にはさらに劇的な変化が観察され、ＵＶ／ＶＩＳスペクトルの〜３８０ｎｍに全く新規の吸収が観察される。アルギニンナトリウムから誘導される反応生成物のＵＶ／ＶＩＳスペクトルは、スズメソポルフィリンナトリウムのＵＶＮＩＳスペクトルと比較するとき、本質的に変化がない。従って、スズ−メソポルフィリンの生化学的および治療的性質は、本発明によって形成される新規スズ−メソポルフィリン−アミノ酸錯体において示される可能性がある。
【００５９】
本発明は特定の実施態様に言及して本明細書において記載されているが、これらの実施態様は本発明の原則および用途を例示するにすぎないことが理解されるべきである。従って、添付の特許請求の範囲によって規定される本発明の精神および範囲から逸脱することなく、数多くの改良を例示的な実施態様に加えることができることおよび他のアレンジを考案することができることが理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１】スズメソポルフィリン塩化物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物）すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）の化学構造を例示する。
【図２】鉄（ＩＩＩ）プロトポルフィリンＩＸ塩化物すなわちヘミンの化学構造を例示する。
【図３】鉄（ＩＩＩ）プロトポルフィリンＩＸ塩化物（フェリポルフィリンの塩化物（ｆｅｒｒｉｐｏｒｐｈｙｒｉｎ）すなわちヘミン）のメソポルフィリンＩＸフォルメートへの変換を例示する。
【図４】メソポルフィリンＩＸフォルメートのスズメソポルフィリン塩化物（スズ（ＩＶ）メソポルフィリンＩＸ二塩化物）、すなわちスタンソポルフィン（ｓｔａｎｎｓｏｐｏｒｆｉｎ）への変換を例示する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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