(57)【要約】本発明は、形質転換成長因子、（「ＴＧＦ」）−βシグナル化経路、特に、ｓｍａｄ２またはｓｍａｄ３のＩ型ＴＧＦ−βまたはアクチビン様キナーゼ（「ＡＬＫ」）−５受容体によるリン酸化の阻害剤である、新規アミノチアゾール誘導体、その製造方法および医薬、特にこの経路により介在される病態の治療および予防におけるその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2006527720.tif 000057
［式中：
ＡはＳであり、ＤはＮであるか；あるいはＡはＮであり、ＤはＳであり；
環Ｅは、飽和、不飽和または芳香族５または６員のヘテロサイクルであり、該ヘテロサイクルは、炭素に加えて、窒素および酸素から独立して選択される１個以上の環ヘテロ原子を含有し、ここに、該ヘテロサイクルは、いずれの窒素原子上で、適当な場合、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６アルコキシＣ１−６アルキルから選択される１個以上のＲＥａにより置換されていてもよく、いずれの炭素原子上で、適当な場合、オキソ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロから独立して選択される１個以上のＲＥｂ基により置換されていてもよく；
ＸはＮまたはＣＨであり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロ、シアノまたはペルフルオロＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、水素またはハロである］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物もしくは誘導体。
【請求項２】
Ｅを含有するベンゾ縮合環系が、ベンズイミダゾール−６−イル、ベンゾキサゾール−６−イル、ベンゾキサゾール−５−イル、４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル、ベンゾキオキサン−６−イル、キノリン−６−イルおよびベンゾトリアゾール−６−イルから選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＮである、前記請求項いずれか１項記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が水素、Ｃ１−６アルキル、クロロまたはフルオロである、前記請求項いずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、水素、メチル、クロロまたはフルオロである、請求項４の記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２がメチルである、請求項５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が水素である、前記請求項いずれか１項記載の化合物。
【請求項８】
ＸがＮであり、Ｒ２がメチルである、請求項１〜３いずれか１項記載の化合物。
【請求項９】
ＸがＮであり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ３がＨである、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
５−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
４−（ベンゾキサゾール−６−イル）−５−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
５−（１−エチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
５−（１−（２−メトキシエチル）−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
５−［４−メチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
５−［４−エチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
４−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
４−（ベンゾキオキサン−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
４−（キノリン−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
４−（１−メチル−ベンゾトリアゾール−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
４−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン；
から選択される前記請求項いずれか１項記載の化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物もしくは誘導体。
【請求項１１】
医薬として用いるための、前記請求項いずれか１項記載の式（Ｉ）で示される化合物。
【請求項１２】
ＡＬＫ−５阻害により介在される疾患または症状を治療または防止するための医薬の製造における、前記請求項いずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項１３】
ＬＫ−５阻害により介在される疾患または症状が、慢性腎疾患、急性腎疾患、創傷治癒、関節炎、骨粗鬆症、腎臓病、鬱血性心不全、潰瘍（糖尿病性潰瘍、慢性潰瘍、胃潰瘍および十二指腸潰瘍を含む）、眼疾患、角膜創、糖尿病性ネフロパシー、神経機能障害、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、腹膜および皮下癒着、線維症が主な要因である疾患（限定するものではないが、腎臓線維症、肺線維症および肝臓線維症を含む）、例えば、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、アルコール誘発肝炎、血色素症、原発性胆汁性肝硬変、再狭窄、後腹膜線維症、腸間膜線維症、子宮内膜症、ケロイド、癌、骨機能異常、炎症性障害瘢痕および光老化から選択される、請求項１２記載の使用。
【請求項１４】
哺乳動物の、慢性腎疾患、急性腎疾患、創傷治癒、関節炎、骨粗鬆症、腎臓病、鬱血性心不全、潰瘍（糖尿病性潰瘍、慢性潰瘍、胃潰瘍および十二指腸潰瘍を含む）、眼疾患、角膜創、糖尿病性ネフロパシー、神経機能障害、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、腹膜および皮下癒着、線維症が主な要因である疾患（限定するものではないが、腎臓線維症、肺線維症および肝臓線維症を含む）、例えば、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、アルコール誘発肝炎、血色素症、原発性胆汁性肝硬変、再狭窄、後腹膜線維症、腸間膜線維症、子宮内膜症、ケロイド、癌、骨機能異常、炎症性障害、瘢痕および光老化から選択される障害の治療または予防方法であって、該治療を必要とする哺乳動物に、有効量の請求項１〜１０いずれか１項記載の式（Ｉ）で示される化合物を投与することを含む方法。
【請求項１５】
請求項１〜１０いずれか１項記載の式（Ｉ）で示される化合物および医薬上許容される希釈剤または担体を含む医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１０いずれか１項記載の式（Ｉ）で示される化合物と、ＡＣＥ阻害剤またはアンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニストとの組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は形質転換成長因子（「ＴＧＦ」）−βシグナル伝達経路、特に、Ｉ型ＴＧＦ−βまたはアクチビン様キナーゼ（「ＡＬＫ」）−５受容体によるｓｍａｄ２またはｓｍａｄ３のリン酸化の阻害剤である新規アミノチアゾール誘導体、その製造法および医薬、特にこの経路により介在される症状の治療および予防におけるその使用に関する。
【０００２】
発明の背景
ＴＧＦ−β１は、一回膜貫通型セリン／スレオニンキナーゼ受容体のファミリーを介してシグナルを送る、ＴＧＦ−β、アクチビン、インヒビン、骨形成タンパク質およびミュラー管阻害物質を含むサイトカインのファミリーの原型メンバーである。これらの受容体は２種のクラス、Ｉ型またはアクチビン様キナーゼ（ＡＬＫ）受容体およびＩＩ型受容体に分類することができる。ＡＬＫ受容体は、（ａ）セリン／スレオニンが豊富な細胞内尾部を欠くこと、（ｂ）Ｉ型受容体間で非常に相同性であるセリン／スレオニンキナーゼドメインを有すること、および（ｃ）グリシンおよびセリン残基が豊富な領域からなるＧＳドメインと呼ばれる共通の配列モチーフを共有する点で、該ＡＬＫ受容体はＩＩ型受容体から区別される。ＧＳドメインは、細胞内キナーゼドメインのアミノ末端にあり、ＩＩ型受容体による活性化に重要である。いくつかの研究により、ＴＧＦ−シグナル伝達はＡＬＫとＩＩ型受容体の両方を必要とすることが示されている。特に、ＩＩ型受容体は、ＴＧＦ−βの存在下で、ＴＧＦ−β、ＡＬＫ５のＩ型受容体のＧＳドメインをリン酸化する。ついで、ＡＬＫ５は、細胞質タンパク質ｓｍａｄ２およびｓｍａｄ３を２つのカルボキシ末端セリンでリン酸化する。リン酸化されたｓｍａｄタンパク質は核中に転位し、細胞外マトリックスの産生に寄与する遺伝子を活性化する。したがって、本発明の好ましい化合物は、これらがＩ型受容体、かくしてマトリックス産生を阻害するという点で選択的である。
【０００３】
ＷＯ０２／０６２７７６、ＷＯ０２／０６２７５３およびＷＯ０２／０６２７９３（Ｇｌａｘｏ Ｇｒｏｕｐ Ｌｉｍｉｔｅｄ）は、ＴＧＦ−βの過剰発現により特徴付けられる障害の治療または予防に有用な、置換アミノチアゾール化合物を開示する。特に、化合物を、Ｉ型ＴＧＦ−β（Ａｌｋ５）受容体レベルで作用するＴＧＦ−β阻害剤として記載している。
【０００４】
ＷＯ０４／０１３１３４（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）は、ＴＧＦ−βの過剰発現により特徴付けられる障害の治療または予防に有用な、フェニルピリジル置換アミノチアゾール化合物を開示している。特に、化合物を、Ｉ型ＴＧＦ−β（Ａｌｋ５）受容体レベルで作用するＴＧＦ−β阻害剤として記載している。
【０００５】
ＷＯ２００４／０２６８６３（Ｐｆｉｚｅｒ）は、形質転換成長因子（「ＴＧＦ」）−βシグナリング経路の強力な阻害剤である新規オキサゾールおよびチアゾール化合物を開示する。化合物は、例えば、癌および線維症を含む種々のＴＧＦ関連病態の治療に有用であると言われている。
【０００６】
意外にも、この度、ＡＬＫ５キナーゼの強力かつ選択的な非ペプチド阻害剤として機能する一群の新規ピラゾール誘導体が見いだされた。
【０００７】
第１の態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2006527720.tif 000002
［式中：
ＡはＳであり、ＤはＮであるか；あるいはＡはＮであり、ＤはＳであり；
環Ｅは、飽和、不飽和または芳香族５または６員のヘテロサイクルであり、該ヘテロサイクルは、炭素に加えて、窒素および酸素から独立して選択される１個以上の環ヘテロ原子を含有し、ここに、該ヘテロサイクルは、いずれの窒素原子上で、適当な場合、Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６アルコキシＣ１−６アルキルから選択される１個以上のＲＥａにより置換されていてもよく、いずれの炭素原子上で、適当な場合、オキソ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロから独立して選択される１個以上のＲＥｂ基により置換されていてもよく；
ＸはＮまたはＣＨであり；
Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロ、シアノまたはペルフルオロＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、水素またはハロである］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩、溶媒和物もしくは誘導体を提供する。
【０００８】
好ましくは、Ｅを含有するベンゾ縮合環系は、ベンズイミダゾール−６−イル、ベンゾキサゾール−６−イル、ベンゾキサゾール−５−イル、４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル、ベンゾキオキサン−６−イル、キノリン−６−イルおよびベンゾトリアゾール−６−イルから選択される。
【０００９】
より好ましくは、Ｅを含有するベンゾ縮合環系は、ベンズイミダゾール−６−イル、ベンゾキサゾール−６−イル、ベンゾキサゾール−５−イル、４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル、ベンゾキオキサン−６−イルおよびキノリン−６−イルから選択される。
【００１０】
好ましくは、ＸはＮである。
好ましくは、Ｒ２は、水素、Ｃ１−６アルキル、クロロまたはフルオロである。より好ましくは、Ｒ２は、水素、メチル、クロロまたはフルオロである。さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルである。
好ましくは、Ｒ３は水素である。
好ましくは、ＸがＮである場合、Ｒ２はメチルである。より好ましくは、ＸがＮであり、Ｒ２がメチルである場合、Ｒ３はＨである。
【００１１】
本発明が、上記した好ましい群のいずれの組み合わせも有する化合物を含むことを意図することは明らかだろう。
【００１２】
ＴＧＦ−βの過剰発現により特徴付けられる障害の治療または予防に有用な薬剤として特に興味がある式（Ｉ）で示される化合物は：
５−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例１）；
４−（ベンゾキサゾール−６−イル）−５−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例２）；
５−（１−エチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例３）；
５−（１−（２−メトキシエチル）−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例４）；
５−［４−メチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例５）；
５−［４−エチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例６）；
４−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例７）；
４−（ベンゾキオキサン−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例８）；
４−（キノリン−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例９）；
４−（１−メチル−ベンゾトリアゾール−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例１０）；
４−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例１１）；および
その医薬上許容される塩、溶媒和物および誘導体から選択される。
【００１３】
より好ましい化合物は：
５−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例１）；
４−（ベンゾキサゾール−６−イル）−５−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例２）；
５−（１−エチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例３）；
５−（１−（２−メトキシエチル）−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例４）；
５−［４−メチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例５）；
５−［４−エチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例６）；
４−（ベンゾキオキサン−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例８）；
４−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例１１）；および
その医薬上許容される塩、溶媒和物および誘導体から選択される。
【００１４】
本明細書で用いられる場合、「Ｃ１−６アルキル」なる用語は、それ自体または他の基の一部であっても、鎖長を限定しないかぎり、１〜６個の炭素原子の直鎖または分枝鎖飽和脂肪族炭化水素ラジカルを意味し、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルを含む。
【００１５】
基または他の基の一部として、「アルコキシ」なる用語は、アルキルエーテルラジカルを意味し、ここに、「アルキル」なる用語は上記と同意義である。かかるアルコキシ基は、特に、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉｓｏ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシを含む。
【００１６】
本明細書で用いられる場合、「ペルフルオロアルキル」なる用語は、トリフルオロメチルのような化合物を含む。
「ハロ」または「ハロゲン」なる用語は、本明細書において同義的に用いられ、塩素、フッ素、ヨウ素および臭素から誘導されるラジカルを意味する。
【００１７】
疑念を回避するために、特記しない限り、「置換された」なる用語は、１つまたはそれ以上の特定の基により置換されていることを意味する。基が、多くの別の基から選択される場合、選択される基は同じであっても異なっていてもよい。
【００１８】
疑念を回避するために、用語は、１個以上の置換基を多くの可能性ある置換基から選択する場合、これらの置換基は同じであっても、異なっていてもよい。
【００１９】
本明細書で用いられる場合、「医薬上許容される誘導体」なる用語は、式（Ｉ）で示される化合物の、医薬上許容される塩、溶媒和物、エステルまたはアミド、あるいはかかるエステルまたはアミドの塩または溶媒和物、あるいは、受容者に投与した場合に、式（Ｉ）で示される化合物またはその活性代謝物もしくは残基を提供することができる（直接的または間接的に）他のいずれかの化合物、例えばプロドラッグを意味する。本発明の好ましい医薬上許容される誘導体は、いずれの医薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグである。
【００２０】
式（Ｉ）で示される化合物の適当な医薬上許容される塩は、酸性塩、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム塩、または、例えば適当な酸、例えば有機カルボン酸、例えば酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸およびクエン酸；有機スルホン酸、例えば、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸ｐ−トルエンスルホン酸および無機酸、例えば塩酸、硫酸、リン酸およびスルファミン酸とのモノまたはジ塩基性塩を含む。本発明の化合物のいくつかは、水性および有機溶媒のような溶媒から結晶化または再結晶することができる。かかる場合において、溶媒和物が形成されていてもよい。本発明は、水和物を含む化学量論的溶媒和物ならびに凍結乾燥の処理により生じうる種々の量の水を含有する化合物をその範囲内に含む。
【００２１】
以下、本明細書において、本発明のいずれの態様において定義される、化合物、その医薬上許容される塩、その溶媒和物および多形体（化学工程における中間体化合物を除く）は、「本発明の化合物」として称する。
【００２２】
本発明の化合物は、光学異性体、例えば、ジアステレオマーおよびすべての比でのその混合物、例えばラセミ混合物で存在することができる。本発明は、すべてのかかる形態、特に、純粋な異性体形態を含む。別個の異性体形態を、慣用的な方法により他から分離または分割することができるか、あるいは、所定のいずれの異性体を、慣用的な合成方法により、または立体特異的または不斉合成により得ることができる。
【００２３】
本発明の化合物は、１種またはそれ以上の互変異性体形態で存在することができる。すべての互変異性体およびその混合物は、本発明の範囲に含まれる。
【００２４】
本発明の化合物は、医薬組成物において用いることを意図しているので、これらは、各々、好ましくは、実質的に純粋な形態、例えば、少なくとも６０％の純度、より適当には、少なくとも７５％の純度、好ましくは、少なくとも８５％、特に、少なくとも９８％の純度（重量に基づく重量％）で提供されることは、容易に理解されるだろう。化合物の純粋でない調製物は、医薬組成物で用いられるより純粋な形を製造するために用いることができ；化合物の純度が劣る調製物は、少なくとも１％、より適当には、少なくとも５％、好ましくは、１０〜５９％の本発明の化合物を含有すべきである。
【００２５】
本発明の化合物は、種々の方法で調製することができる。下記反応スキームおよび以下において、特記しない限り、Ｒ１〜Ｒ３およびＸは、第１の態様の記載と同意義である。これらの工程は、本発明のさらなる態様を形成する。
【００２６】
本明細書を通じて、一般式は、ローマ数字（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）等で指定する。これら一般式のサブセットは、（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）・・・（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）等として定義される。
【００２７】
式（Ｉａ）で示される化合物、すなわち、ＡがＳであり、ＤがＮである一般式（Ｉ）で示される化合物は、式（ＩＩ）で示される化合物から、反応スキーム１に従って、式（ＩＩ）で示される化合物を、ポリマー支持過ヨウ素ピリジニウムと、適当な溶媒、例えばテトラヒドロフランまたはジクロロメタン中室温にて反応させ、ついで、チオ尿素で、適当な溶媒、例えばエタノール中高温で処理することにより調製することができる。
【００２８】
【化２】
2006527720.tif 000003
【００２９】
式（Ｉｂ）で示される化合物、すなわち、ＡがＮであり、ＤがＳである一般式（Ｉ）で示される化合物は、式（ＩＩＩ）で示される化合物から、反応スキーム２に従って、反応スキーム１に記載の方法と類似の反応条件を用いて調製することができる。
【００３０】
【化３】
2006527720.tif 000004
【００３１】
別法として、一般式（Ｉ）で示される化合物は、最終工程として環Ｅを形成することにより調製することができる。例えば、式（Ｉｃ）で示される化合物、すなわち、Ｅを含有するベンゾ縮合環系がベンズイミダゾール−６−イルである一般式（Ｉ）で示される化合物は、反応スキーム３に従って調製することができる。好ましい反応条件は、酢酸中高温で鉄と反応させ、ついで、高温でオルトギ酸トリメチルで処理することを含む。
【００３２】
【化４】
2006527720.tif 000005
【００３３】
加えて、式（Ｉｄ）で示される化合物、すなわち、Ｅを含有するベンゾ縮合環系がベンゾキサゾール−６−イルである一般式（Ｉ）で示される化合物は、反応スキーム４に従って調製することができる。好ましい反応条件は、酢酸中高温で鉄と反応させ、ついで、式（Ｖ）で示される化合物で、適当な溶媒、例えばエタノール中高温で処理することを含む。
【００３４】
【化５】
2006527720.tif 000006
【００３５】
式（ＩＩ）で示される化合物（スキーム１を参照）は、反応スキーム５に従って、式（ＶＩＩ）で示されるアルデヒドを、式（ＶＩＩＩ）で示されるＮ，Ｐアセタールと反応させ、ついで、得られたエナミンを加水分解することにより調製することができる（M. Journet, Tetrahedron Letters, 1998, 39, 1717-1720およびI. W. Davies et al., J. Org. Chem., 2000, 65, 8415-8420を参照）。好ましい反応条件は、適当な塩基、例えば炭酸セシウムまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドで、適当な溶媒、例えばテトラヒドロフランおよびイソプロピルアルコール中で処理することを含む。エナミンは、塩酸で加水分解することができる。
【００３６】
【化６】
2006527720.tif 000007
【００３７】
式（ＩＩＩ）で示される化合物は、反応スキーム６に従って、式（ＩＸ）で示されるＮ，Ｐアセタールを、式（Ｘ）で示される化合物と、反応スキーム５に記載のものと類似の条件下でカップリングすることにより調製することができる。
【００３８】
【化７】
2006527720.tif 000008
【００３９】
式（ＩＩＩａ）で示される化合物、すなわち、ＸがＮであり、Ｒ２がメチルであり、Ｒ３がＨであり、Ｅを含有するベンゾ縮合環系が、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル、ベンゾキオキサン−６−イル、キノリン−６−イルまたはベンゾトリアゾール−６−イルである一般式（ＩＩＩ）で示される化合物（スキーム２を参照）は、反応スキーム７に従って調製することができる。好ましい反応条件は、２，６−ルチジンを、式（ＸＩ）で示される化合物と、適当な塩基、例えばｎ−ブチルリチウムまたはナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドの存在下、−２０℃〜−５０℃で、テトラヒドロフランのような溶媒中でカップリングすることを含む。
【００４０】
【化８】
2006527720.tif 000009
【００４１】
式（ＶＩＩａ）で示される化合物は、スキーム８に記載の一般方法に従って調製することができる。
【００４２】
【化９】
2006527720.tif 000010
【００４３】
式（ＶＩＩｂ）で示される化合物は、スキーム９に記載の一般方法に従って調製することができる。
【００４４】
【化１０】
2006527720.tif 000011
【００４５】
式（Ｉ）で示される化合物の調製に関するさらなる詳細は、実施例において見られる。
【００４６】
本発明の化合物は、単一または少なくとも２個、例えば５〜１，０００個の化合物、より好ましくは１０〜１００個の化合物を含む化合物ライブラリーとして調製することができる。本発明の化合物のライブラリーは、コンビナトリアル「スプリットおよびミックス」手法により、または溶液相もしくは固相化学のいずれかを用いるマルチプル・パラレル合成により、当業者に既知の手法によって調製することができる。かくして、本発明のさらなる態様は、少なくとも２個の本発明の化合物を含む化合物ライブラリーを提供する。
【００４７】
ＴＧＦ−β１軸の活性化および細胞外マトリックスの増大は、慢性腎疾患および血管疾患の発症および進行に早期に、そして持続的に関与する。Border W.A., et al, N. Engl. J. Med., 1994; 331(19), 1286-92。さらに、ＴＧＦ−β１は、ＴＧＦ−β受容体ＡＬＫ５によるｓｍａｄ３のリン酸化作用により、硬化性沈積物の成分である、フィブロネクチンおよびプラスミノーゲンアクチベーター阻害剤−１の形成において一の役割を果たす。Zhang Y., et al, Nature, 1998; 394(6696), 909-13; Usui T., et al, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 1998; 39(11), 1981-9。
【００４８】
腎臓および心臓血管系での進行性の線維症は、罹患および死亡の主要な原因であり、かつ健康のケアの費用の重要な原因である。ＴＧＦ−β１は、多くの腎線維性障害に関係している。Border W.A., et al, N. Engl. J. Med., 1994；331(19), 1286-92。ＴＧＦ−β１は、急性および慢性糸球体腎炎（Yoshioka K., et al, Lab. Invest., 1993；68(2), 154-63）、糖尿病性ネフロパシー（Yamamoto, T., et al, 1993, PNAS 90, 1814-1818）、同種移植片拒絶反応、ＨＩＶ性ネフロパシーおよびアンジオテンシン誘導性ネフロパシー（Border W.A., et al, N. Engl. J. Med., 1994； 331(19), 1286-92）において上昇する。これらの疾患において、ＴＧＦ−β１発現レベルは、細胞外マトリックスの産生と同時に生じる。３系統の証拠が、ＴＧＦ−β１とマトリックスの産生との間の原因となる関係を示唆している。第１に、正常な糸球体メサンギウム細胞および非腎臓細胞が誘導され、細胞外マトリックスタンパク質が産生され、インビトロで外因性ＴＧＦ−β１によるプロテアーゼ活性が阻害され得る。第２に、ＴＧＦ−β１に対する抗体を中和することにより、腎症のラットにおいて細胞外マトリックスの蓄積を妨げることができる。第３に、ＴＧＦ−β１トランスジェニックマウスまたはインビボでの正常ラットの腎臓へのＴＧＦ−β１遺伝子のトランスフェクションにより、糸球体硬化症が早期に発症した。Kopp J.B., et al, Lab. Invest., 1996；74(6), 991-1003。かくして、ＴＧＦ−β１活性の阻害は、慢性腎疾患の治療的介入として示される。
【００４９】
ＴＧＦ−β１およびその受容体は、傷害を受けた血管で増加し、バルーン血管形成後の新生形成において示される。Saltis J., et al, Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 1996； 23(3), 193-200。さらに、ＴＧＦ−β１は、インビトロの平滑筋細胞（「ＳＭＣ」）移動の強力な刺激因子であり、そして動脈壁でのＳＭＣの移動は、アテローム性動脈硬化症および再狭窄の病因に関与する因子である。さらに、内皮細胞産生物の総コレステロールに対する多変量解析において、ＴＧＦ−β受容体であるＡＬＫ５は、総コレステロールと相関した（Ｐ＜０．００１）。Blann A.D., et al,  Atherosclerosis, 1996； 120(1-2), 221-6。さらに、ヒトアテローム性動脈硬化症の病巣由来のＳＭＣは、ＡＬＫ５／ＴＧＦ−βＩＩ型受容体の比を増加させる。ＴＧＦ−β１は、線維増殖性血管の病巣で過剰発現するため、受容体の変異細胞は、細胞外マトリックス成分を過剰産生しながら、ゆっくりであるが非制御の形態で増殖する。McCaffrey T.A., et al, Jr., J. Clin. Invest., 1995； 96(6), 2667-75。ＴＧＦ−β１は、活性マトリックス合成が生じている場所であるアテローム性動脈硬化症の病巣の非泡沫化マクロファージに免疫局在性であり、このことは、非泡沫化マクロファージが、ＴＧＦ−β依存性機序を介したアテローム性動脈硬化症のリモデリングにおいて、マトリックス遺伝子の発現の調節に関係することを示唆している。したがって、ＡＬＫ５でのＴＧＦ−β１作用を阻害することは、アテローム性動脈硬化症および再狭窄においても必要とされる。
【００５０】
ＴＧＦ−βは、創傷修復においても必要とされる。ＴＧＦ−β１抗体の中和を多くのモデルで用い、ＴＧＦ−β１のシグナル伝達の阻害が、治癒過程の過度の瘢痕形成を制限することにより、損傷後の機能回復で有益であることが示された。例えば、ＴＧＦ−β１およびＴＧＦ−β２抗体を中和することにより瘢痕形成が低減され、ラットの単球およびマクロファージ数が低減し、ならびに皮膚のフィブロネクチンおよびコラーゲン蓄積が減少することにより、新真皮の細胞構築が改善された。Shah M., J. Cell. Sci., 1995, 108, 985-1002。さらに、ＴＧＦ−β抗体は、ウサギにおいて角膜創傷治癒を改善し（Moller-Pedersen T., Curr. Eye Res., 1998, 17, 736-747）、ラットにおいて胃潰瘍の創傷治癒を速めた（Ernst H., Gut, 1996, 39, 172-175）。これらのデータは、ＴＧＦ−β活性を制限することは、多くの組織において有益であることを強く示唆し、ＴＧＦ−βの慢性的上昇を伴う任意の疾患が、ｓｍａｄ２およびｓｍａｄ３シグナル伝達経路を阻害することにより、有益であることを示唆している。
【００５１】
ＴＧＦ−βは、腹膜の癒着においても関与する。Saed G.M., et al, Wound Repair Regeneration, 1999 Nov-Dec, 7(6), 504-510。したがって、ＡＬＫ５の阻害剤は、外科処置後の腹膜および皮下の線維性癒着の予防において有益だろう。
【００５２】
したがって、さらなる態様より、本発明は、ＡＬＫ−５阻害により介在される疾患または症状の治療または予防用の医薬の製造における第１の態様に定義した化合物の使用を提供する。
【００５３】
好ましくは、ＡＬＫ−５阻害により介在される疾患または症状は、慢性腎疾患、急性腎疾患、創傷治癒、関節炎、骨粗鬆症、腎臓病、鬱血性心不全、潰瘍（糖尿病性潰瘍、慢性潰瘍、胃潰瘍および十二指腸潰瘍を含む）、眼疾患、角膜創、糖尿病性ネフロパシー、神経機能障害、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、腹膜および皮下癒着、線維症が主な要因であるいずれもの疾患（限定するものではないが、腎臓線維症、肺線維症および肝臓線維症を含む）、例えば、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、アルコール誘発肝炎、血色素症、原発性胆汁性肝硬変、再狭窄、後腹膜線維症、腸間膜線維症、子宮内膜症、ケロイド、癌、骨機能異常、炎症性障害、瘢痕および光老化から選択される。
【００５４】
より好ましくは、ＡＬＫ−５阻害により介在される疾患または症状は、線維症である。好ましくは、腎臓線維症である。
本明細書において治療なる言及は、予防ならびに確立した症状の治療にも及ぶことは明らかだろう。
【００５５】
本発明の化合物は、他の治療剤、例えば、肝臓疾患用の抗ウイルス剤と組み合わせて、または腎臓病用のＡＣＥ阻害剤またはアンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニストと組み合わせて投与することができる。
【００５６】
本発明の化合物は、当業者によく知られた慣用的な方法に従って、本発明の化合物を標準的な医薬担体または賦形剤と組み合わせることにより調製される慣用的な剤形で投与することができる。これらの方法は、混合、造粒および圧搾または、要すれば成分を所望の製剤に溶解することを含みうる。
【００５７】
本発明の医薬組成物は、いずれの経路による投与用に処方してもよく、ヒトを含む哺乳動物に経口、局所または非経口で投与するのに適した形態を含みうる。
【００５８】
組成物は、いずれの経路による投与用に処方することができる。これらの組成物は、錠剤、カプセル、散剤、顆粒、ロゼンジ、クリームまたは液体製剤、例えば経口または滅菌非経口溶液または懸濁液の形態であってもよい。
【００５９】
本発明の局所処方は、例えば、軟膏、クリームまたはローション、眼用軟膏および眼または耳用滴剤、含浸包帯およびエアロゾルとして提供され、適当な慣用的な添加剤、例えば油およびクリームにおいて、保存剤、薬剤の浸透を補助する溶媒、軟化剤を含有していてもよい。
【００６０】
また、処方は、適合する慣用的な担体、例えばクリームまたは軟膏基剤およびローション用のエタノールまたはオレイルアルコールを含有していてもよい。かかる担体は処方の約１％〜約９８％として存在することができる。より一般的には、これらは処方の約８０％までである。
【００６１】
経口投与用の錠剤およびカプセルは、単位投与剤形であってもよく、慣用的な賦形剤、例えば結合剤、例えば、シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントまたはポリビニルピロリドン；充填剤、例えば、ラクトース、糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン；錠剤滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えば、ポテトスターチ；または許容される湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含有していてもよい。錠剤は、通常の医薬手法でよく知られた方法に従ってコートすることができる。経口液体製剤は、例えば、水性または油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態であってもよく、あるいは、使用前に水または他のビヒクルで復元するための乾燥製剤として提供することもできる。かかる液体製剤は、慣用的な賦形剤、例えば懸濁化剤、例えばソルビトール、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは硬化食用油、乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノオレアートまたはアカシア；非水性ビヒクル（ここに、食用油を含んでいてもよい）、例えばアーモンド油、油性エステル、例えばグリセリン、プロピレングリコールまたはエチルアルコール；保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルまたはプロピルまたはソルビン酸、所望により、慣用的なフレーバーまたは着色剤を含有していてもよい。
【００６２】
坐剤は、慣用的な坐剤基剤、例えばココアバターまたは他のグリセライドを含有するだろう。
【００６３】
非経口投与に関して、流動体単位剤形は、化合物および滅菌ビヒクル、好ましくは水を利用して調製される。化合物は、使用するビヒクルおよび濃度に応じて、ビヒクル中に懸濁または溶解することができる。溶液の調製において、化合物は、注射用水に溶解し、濾過滅菌し、ついで、濾液を適当なバイアルに充填し、シールすることができる。
【００６４】
別法として、局所麻酔剤、保存剤および緩衝化剤のような薬剤も、ビヒクル中に溶解させることができる。安定性を増強させるために、組成物をバイアルに充填した後冷凍し、減圧下で水を除去することができる。ついで、凍結乾燥した粉末をバイアル中に密封し、注射用水のバイアルと一緒に提供して、使用前に液体に復元することができる。非経口懸濁液は、化合物をビヒクル中に溶解する代わりに懸濁させ、滅菌が濾過により行えないこと以外は、実質的に同様の方法で調製する。化合物は、滅菌ビヒクル中に懸濁する前に、エチレンオキシドに暴露することにより滅菌することができる。有利には、界面活性剤または湿潤剤が、化合物の均一な分散を粗鋼心するために組成物中に含まれる。
【００６５】
組成物は、投与方法に応じて、０．１重量％、好ましくは１０〜６０重量％の活性物質を含有することができる。組成物が単位投与量を含む場合、各々のユニットは、好ましくは、５０〜５００ｍｇの活性成分を含有するだろう。成人に用いられる場合の投与量は、投与経路および頻度に応じて、好ましくは、１日あたり１００〜３０００ｍｇ、例えば１日あたり１５００ｍｇの範囲であるだろう。かかる投与量は、１日あたり１．５〜５０ｍｇ／ｋｇに対応する。適当には、投与量は、１日あたり５〜２０ｍｇ／ｋｇである。
【００６６】
本発明の化合物の各々の投与の最適な量および間隔は、治療する症状の性質および広がり、投与の形態、経路および部位、および治療する特定の哺乳動物により決定されるだろうこと、およびかかる最適化は、慣用的な方法により決定されうることは、当業者には明らかだろう。治療の最適な方法、すなわち、所定の日数、１日あたりに投与される本発明の化合物の投与回数は、治療決定試験の慣用的な方法を用いて当業者により確認されうることは明らかだろう。
【００６７】
本発明の化合物を上記投与量範囲で投与する場合、毒性効果は示されなかった。
【００６８】
限定するものではないが、本明細書において示される特許および特許出願を含むすべての刊行物は、出典明示により本明細書に組み入れる。
【００６９】
本発明は、以下のさらなる態様を含むことは明らかだろう。第１の態様に関して記載した好ましい具体例は、これらのさらなる態様にまで及ぶ：
ｉ）本発明の化合物および医薬上許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物；
ｉｉ）医薬として用いるための本発明の化合物；
ｉｉｉ）哺乳動物の、慢性腎疾患、急性腎疾患、創傷治癒、関節炎、骨粗鬆症、腎臓病、鬱血性心不全、潰瘍（糖尿病性潰瘍、慢性潰瘍、胃潰瘍および十二指腸潰瘍を含む）、眼疾患、角膜創、糖尿病性ネフロパシー、神経機能障害、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、腹膜および皮下癒着、線維症が主な要因である疾患（限定するものではないが、腎臓線維症、肺線維症および肝臓線維症を含む）、例えば、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、アルコール誘発肝炎、血色素症、原発性胆汁性肝硬変、再狭窄、後腹膜線維症、腸間膜線維症、子宮内膜症、ケロイド、癌、骨機能異常、炎症性障害、瘢痕および光老化から選択される障害の治療または予防方法であって、該治療を必要とする哺乳動物に、有効量の本発明の化合物を投与することを含む方法；および
ｉｖ）本発明の化合物と、ＡＣＥ阻害剤またはアンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニストとの組み合わせ。
【００７０】
下記非限定実施例は本発明を説明する。
略語
ＡｃＯＨ−酢酸
ＡＰＴＳ−ｐ−トルエンスルホン酸
Ｃｓ２ＣＯ３−炭酸セシウム
ＤＣＭ−ジクロロメタン
ＥｔＯＨ−エタノール
ＥｔＯＡｃ−酢酸エチル
Ｋ２ＣＯ３−炭酸カリウム
ＭｅＯＨ−メタノール
Ｎａ２ＳＯ４−硫酸ナトリウム
ＮａＩＯ４−過ヨウ素酸ナトリウム
ＯｓＯ４−四酸化オスミウム
ＴＨＦ−テトラヒドロフラン
ＴＥＡ−トリエチルアミン
ＤＭＥ−ジメチルオキシエタン
Ｐｄ２（ｄｂａ）３−トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）
Ｂｉｎａｐ−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチル
ｉＰｒＯＨ−イソプロパノール
ＮａＨＭＤＳ−ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド
【００７１】
中間体１：２，４−ジブロモ−ニトロベンゼン
硫酸（２００ｍｌ）中の１，３−ジブロモベンゼン（１０ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）の氷冷溶液に、硝酸アンモニウム（３．３９ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、０℃で１０分間撹拌し、ついで、水に注いだ。ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した後、有機相を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。ペンタンでトリチュレーションした後、標題化合物を淡黄色固体として得た（８ｇ、６７．２％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：７．９５（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，１Ｈ），７．６（ｄ，１Ｈ）。
【００７２】
中間体２：４−ブロモ−２−（メチルアミノ）−ニトロベンゼン
【化１１】
2006527720.tif 000012
ＥｔＯＨ（２００ｍｌ）中の中間体１（８ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）の溶液に、水（２００ｍｌ）中のメチルアミン（４０％）の溶液を加え、混合物を２時間加熱還流し、ついで、冷却した。得られた沈殿を濾過し、乾燥した。標題化合物を橙色固体として得た（５ｇ、７６％）；ｍ．ｐ．１３０−１３２℃。
【００７３】
中間体３：４−ブロモ−２−（エチルアミノ）−ニトロベンゼン
【化１２】
2006527720.tif 000013
中間体１（６ｇ、２８ｍｍｏｌ）およびエチルアミン（水中７０％溶液、２００ｍｌ）を、中間体２に関する記載のように反応させて、標題化合物を黄色固体として得た（５ｇ、９９．９％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：８．２５（ｓ，１Ｈ），８．１（ｄ，１Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｄ，１Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），１．３（ｔ，３Ｈ）。
【００７４】
中間体４：４−ブロモ−２−（２−メトキシエチルアミノ）−ニトロベンゼン
【化１３】
2006527720.tif 000014
中間体１（６ｇ、２８ｍｍｏｌ）を、２−メトキシエチルアミンと、中間体２に関する記載のように反応させて、固体として標題化合物を得た（６ｇ、９９．９％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：８．３（ｂｒｓ，１Ｈ），８．１（ｄ，１Ｈ），７．１（ｓ，１Ｈ），６．８５（ｄ，１Ｈ），３．８（ｍ，２Ｈ），３．６（ｍ，２Ｈ），３．５（ｓ，３Ｈ）。
【００７５】
中間体５：１−メチル−６−ブロモ−ベンズイミダゾール
【化１４】
2006527720.tif 000015
ＥｔＯＨ（２００ｍｌ）中の中間体２（５ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（９．８ｇ、４３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４時間加熱還流し、ついで、減圧下で濃縮した。残渣を、水（２００ｍｌ）およびＮａＯＨ（１Ｎ）（１００ｍｌ）で処理した。ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した後、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、トルエン（５０ｍｌ）に溶解し、オルトギ酸トリメチル（２．６ｍｌ、２４ｍｍｏｌ）およびＡＰＴＳ（０．２ｇ）を加え、混合物を２時間加熱還流し、ついで、減圧下で濃縮した。残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９５／５）で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物をクリーム色粉末として得た（２．５ｇ、５４．７４％）；ｍ．ｐ．１２６−１２８℃。
【００７６】
中間体６：１−エチル−６−ブロモ−ベンズイミダゾール
【化１５】
2006527720.tif 000016
中間体３（５ｇ、２２ｍｍｏｌ）を、中間体５に記載のように反応させて、標題化合物を褐色油として得た（２．３ｇ、４７．２３％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：８．００（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，１Ｈ），７．６５（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，１Ｈ），４．２５（ｑ，２Ｈ），１．６（ｔ，３Ｈ）。
【００７７】
中間体７：１−（２−メトキシエチル）−６−ブロモ−ベンズイミダゾール
【化１６】
2006527720.tif 000017
酢酸（１００ｍｌ）中の中間体４（６ｇ、２２ｍｍｏｌ）の溶液に、６０℃で、激しく撹拌しながら、鉄（１２ｇ、２２０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、６０℃で２時間加熱し、ついで、冷却した。反応混合物を、水酸化ナトリウムを添加することにより塩基性化し、セライトにより濾過し、濾液をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をトルエン（８０ｍｌ）中に溶解し、オルトギ酸トリメチル（３．５ｍｌ、３２ｍｍｏｌ）およびＡＰＴＳ（０．６ｇ）を加え、混合物を一晩加熱還流した。ついで、減圧下で濃縮した。残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９／１）で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を油として得た（６ｇ、９６．０７％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：８．１（ｓ，１Ｈ），７．８（ｄ，１Ｈ），７．７（ｓ，１Ｈ），７．５（ｄ，１Ｈ），４．４（ｔ，２Ｈ），３．８５（ｔ，２Ｈ），３．４（ｓ，３Ｈ）。
【００７８】
中間体８：１−メチル−６−ビニル−ベンズイミダゾール
【化１７】
2006527720.tif 000018
ジオキサン（１００ｍｌ）中の中間体５（２．５ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）の溶液に、トリブチル（ビニル）スズ（５．２ｍｌ、１８ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．６９ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、２４時間加熱還流し、ついで、減圧下で濃縮した。残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９５／５）で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製した。標題化合物を油として得た（１．８ｇ、９６．１％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：７．９（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，１Ｈ），７．４（ｍ，２Ｈ），６．８５（ｄｄ，１Ｈ），５．８（ｄ，１Ｈ），５．２５（ｄ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）。
【００７９】
中間体９：１−エチル−６−ビニル−ベンズイミダゾール
【化１８】
2006527720.tif 000019
中間体６（２．３ｇ、１０ｍｍｏｌ）を、中間体８に関する記載のように反応させて、標題化合物を油として得た（１．５ｇ、８５．３１％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：７．９（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，１Ｈ），７．４（ｍ，２Ｈ），６．９５（ｍ，１Ｈ），５．８（ｍ，１Ｈ），５．２５（ｍ，１Ｈ），４．２（ｑ，２Ｈ），１．５５（ｔ，３Ｈ）。
【００８０】
中間体１０：１−（２−メトキシエチル）−６−ビニル−ベンズイミダゾール
【化１９】
2006527720.tif 000020
中間体７（６ｇ、２３．５ｍｍｏｌ）を、中間体８に関する記載のように反応させて、標題化合物を油として得た（３．５ｇ、７３．６４％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：７．９５（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，１Ｈ），７．４（ｍ，２Ｈ），６．９（ｍ，１Ｈ），５．８５（ｄ，１Ｈ），５．２５（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｔ，２Ｈ），３．７５（ｔ，２Ｈ），３．３（ｓ，３Ｈ）。
【００８１】
中間体１１：１−メチル−６−ホルミル−ベンズイミダゾール
【化２０】
2006527720.tif 000021
ジオキサン（１００ｍｌ）および水（１４ｍｌ）中の中間体８（１．８ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）の溶液に、四酸化オスミウム（水中２．５％溶液、６ｍｌ）を加え、混合物を５分室温にて撹拌した。ついで、過ヨウ素酸ナトリウム（５．１ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、室温にて３時間撹拌し、ついで、水に注いだ。水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。標題化合物をクリーム色粉末として得た（１ｇ、５５％）；ｍ．ｐ．１３２−１３４℃。
【００８２】
中間体１２：１−エチル−６−ホルミル−ベンズイミダゾール
【化２１】
2006527720.tif 000022
中間体９（１．５ｇ、８．８ｍｍｏｌ）を、中間体１１に関する記載のように反応させて、標題化合物を油として得た（１．３ｇ、８５．６７％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：１０．１（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｄ，１Ｈ），７．８５ｄ，１Ｈ），４．３（ｑ，２Ｈ），１．６（ｔ，３Ｈ）。
【００８３】
中間体１３：１−（２−メトキシエチル）−６−ホルミル−ベンズイミダゾール
【化２２】
2006527720.tif 000023
中間体１０（３．５ｇ、１７．３３ｍｍｏｌ）を、中間体１１に関する記載のように反応させて、標題化合物を油として得た（１．３ｇ、３６．７８％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：１０．０５（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｓ，１Ｈ），８（ｓ，１Ｈ），７．９（ｄ，１Ｈ），７．８（ｄ，１Ｈ），４．４（ｔ，２Ｈ），３．７（ｔ，２Ｈ），３．３（ｓ，３Ｈ）。
【００８４】
中間体１４：［（４−ホルミル−２−ニトロフェニル）オキシ］酢酸エチル
【化２３】
2006527720.tif 000024
アセトニトリル（２００ｍｌ）中の４−ヒドロキシ−３−ニトロ−ベンズアルデヒド（８ｇ、４８ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（１０ｇ、７２ｍｍｏｌ）およびブロモ酢酸エチル（８ｍｌ、７２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２４時間加熱還流し、ついで、水に注いだ。ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した後、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。標題化合物を油として得、これを静置して結晶化させた（３ｇ、２４．７５％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：９．９５（ｓ，１Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，１Ｈ），７．１（ｄ，１Ｈ），４．８５（ｓ，２Ｈ），４．２５（ｑ，２Ｈ），１．２５（ｔ，３Ｈ）。
【００８５】
中間体１５：６−ホルミル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン
【化２４】
2006527720.tif 000025
酢酸（２００ｍｌ）中の中間体１４（３ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）の溶液に、鉄（６．６３ｇ、１１８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、６０℃で２時間加熱し、ついで、水に注いだ。混合物を、ＮａＯＨ溶液で塩基性化し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、セライトにより濾過し減圧下で濃縮した。標題化合物を非晶質固体として得た（１．８ｇ、８５．７６％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ１７６ＭＨ−。
【００８６】
中間体１６：４−メチル−６−ホルミル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン
【化２５】
2006527720.tif 000026
アセトン（６０ｍｌ）中の中間体１５（１ｇ、５．６ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（１．１７ｇ、８．５ｍｍｏｌ）およびヨウ化メチル（０．５３ｍｌ、８．５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃で１６時間加熱し、ついで、水に注いだ。ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した後、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。標題化合物を淡黄色油として得た（１ｇ、９７．２５％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：９．９（ｓ，１Ｈ），７．５（ｍ，２Ｈ），７．０５（ｄ，１Ｈ），４．７（ｓ，２Ｈ），３．４（ｓ，３Ｈ）。
【００８７】
中間体１７：４−エチル−６−ホルミル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン
【化２６】
2006527720.tif 000027
中間体１５（０．８ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を、ヨウ化メチルの代わりにヨウ化エチルを用いて中間体１６に関する記載のように反応させて、標題化合物を黄色油として得た（０．７５ｇ、８１％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：９．９（ｓ，１Ｈ），７．５（ｍ，２Ｈ），７．１（ｄ，１Ｈ），４．７（ｓ，２Ｈ），４．０５（ｑ，２Ｈ），１．３（ｔ，３Ｈ）。
【００８８】
中間体１８：［（６−メチルピリジン−２−イル）−フェニルアミノ−メチル］−ホスホン酸ジフェニルエステル
【化２７】
2006527720.tif 000028
ｉＰｒＯＨ（２００ｍｌ）中の６−メチル−２−ピリジンカルボキシアルデヒド（１０ｇ、８２．５５ｍｍｏｌ）の溶液に、アニリン（１．２等量、９．２１ｇ、９９ｍｍｏｌ）および亜リン酸ジフェニル（２６．８５ｍｌ、１１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、室温にて３０分間結晶化させた。ｉＰｒＯＨ（３００ｍｌ）を加え、混合物を、２時間撹拌した。得られた固体を濾過し、乾燥して、標題化合物を白色固体として得た（４０ｇ、９９．５３％）；ｍ．ｐ．１１０−１１２℃。
【００８９】
中間体１９：［（３−ヒドロキシ−４−ニトロ−フェニル）−（フェニルアミノ）−メチル］−ホスホン酸ジフェニルエステル
【化２８】
2006527720.tif 000029
３−ヒドロキシ−４−ニトロ−ベンズアルデヒド（１１．５ｇ、６９ｍｍｏｌ）を、アニリンおよび亜リン酸ジフェニルと、中間体１８に記載のように反応させて、標題化合物を黄色固体として得た（２８ｇ、８５．４％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ：４７５ＭＨ−。
【００９０】
中間体２０：２−［３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル］−１−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化２９】
2006527720.tif 000030
ＴＨＦ（２００ｍｌ）およびｉＰｒＯＨ（２００ｍｌ）中の３−ヒドロキシ−４−ニトロ−ベンズアルデヒド（１５ｇ、９０ｍｍｏｌ）および中間体１８（３８．６２ｇ、９０ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸セシウム（８８ｇ、２７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて一晩撹拌した。混合物を、４ＮのＨＣｌを添加することにより酸性化し、室温にて２時間撹拌し、ついで、水に注いだ。１ＮのＮａＯＨ、水相をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（８／２）で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製した。標題化合物を橙色固体として得た（１５ｇ、６１．４％）；ｍ．ｐ．１２８−１３０℃。
【００９１】
中間体２１：１−［３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル］−２−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化３０】
2006527720.tif 000031
中間体１９（１３ｇ、２７ｍｍｏｌ）および６−メチル−ピリジン−２−カルボキシアルデヒド（ＴＣＩＪｐ、３ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）を、中間体２０に関する記載のように反応させて、標題化合物を固体として得た（５ｇ、７４．１４％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ：２７３ＭＨ＋。
【００９２】
中間体２２：２−［１−エチル−ベンズイミダゾール−６−イル］−１−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化３１】
2006527720.tif 000032
中間体１２（１．３ｇ、７．５ｍｍｏｌ）および中間体１８（３．８６ｇ、９ｍｍｏｌ）を、中間体２０に関する記載のように反応させて、標題化合物を褐色油として得た（１ｇ、４７．９７％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：７．９（ｓ，１Ｈ），８（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｍ，１Ｈ），７．５５（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｍ，１Ｈ），７．２（ｍ，１Ｈ），６．９（ｍ，１Ｈ），４．７（ｓ，２Ｈ），４．２５（ｑ，２Ｈ），２．６５（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｔ，３Ｈ）。
【００９３】
中間体２３：２−［１−（２−メトキシエチル）−ベンズイミダゾール−６−イル］−１−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化３２】
2006527720.tif 000033
中間体１３（１．３ｇ、６．４ｍｍｏｌ）および中間体１８（３．２９ｇ、７．６ｍｍｏｌ）を、中間体２０に関する記載のように反応させて、標題化合物を褐色油として得た（１．２ｇ、６０．９４％）；ＮＭＲ Ｈ１（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｐｐｍ）δ：８．００（ｓ，１Ｈ），７．９（ｍ，１Ｈ），７．７５（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｓ，１Ｈ），７．３（ｍ，１Ｈ），７．１（ｍ，１Ｈ），４．７（ｓ，２Ｈ），４．３（ｔ，２Ｈ），３．７（ｔ，２Ｈ），３．３（ｓ，３Ｈ），２．６（ｓ，３Ｈ）。
【００９４】
中間体２４：２−［４−メチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−１−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化３３】
2006527720.tif 000034
中間体１６（１ｇ、５．５ｍｍｏｌ）および中間体１８（２．８４ｇ、６．６ｍｍｏｌ）を、中間体２０に関する記載のように反応させて、標題化合物を褐色油として得た（１．３ｇ、７９．９３％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ２９７ＭＨ＋。
【００９５】
中間体２５：２−［４−エチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−１−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化３４】
2006527720.tif 000035
中間体２６（０．７５ｇ、３．６６ｍｍｏｌ）および中間体１８（１．８９ｇ、４．３９ｍｍｏｌ）を、中間体２０に関する記載のように反応させて、標題化合物を赤色油として得た（０．５ｇ、４４．１％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ３１１ＭＨ＋。
【００９６】
中間体２６：２−［３−（トリフルオロプロメタンスルホナート）−４−ニトロフェニル］−１−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化３５】
2006527720.tif 000036
ＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍｌ）中の中間体２０（１５ｇ、５５ｍｍｏｌ）の溶液に、アニリン−Ｎ−ビス（トリフルオロメタンスルホネート）（３０ｇ、８３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１．５ｍｌ、８３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、室温にて２４時間撹拌し、ついで、水に注いだ。ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した後、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。アセトニトリルから結晶化して、標題化合物を、黄色結晶として得た（２１ｇ、９４．２５％）；ｍ．ｐ．１１８−１２０℃。
【００９７】
中間体２７：２−［３−（メチルアミノ）−４−ニトロフェニル］−１−［６−メチルピリジン−２−イル］−エタノン
【化３６】
2006527720.tif 000037
メチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、２００ｍｌ）中の中間体２６（２１ｇ、５２ｍｍｏｌ）の溶液を、１５０℃で２時間シュレンクチューブ中で加熱し、ついで、冷却し、水に注いだ。ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した後、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２／シクロヘキサン（８／２）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を橙色固体として得た（１３ｇ、８７．７５％）；ｍ．ｐ．１００−１０２℃。
【００９８】
中間体２８：５−（３−メチルアミノ−４−ニトロ−フェニル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化３７】
2006527720.tif 000038
ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）中の中間体２７（１３ｇ、４６ｍｍｏｌ）の溶液に、ポリマー支持過ヨウ素ピリジニウム（１０ｇ）を加え、懸濁液を、室温にて４時間撹拌した。樹脂を濾過により除去し、濾液をチオ尿素（５．２ｇ、６９ｍｍｏｌ）に直接加え、樹脂を数回エタノールで洗浄した。濾液を１４時間加熱還流し、冷却して、減圧下で濃縮した。残渣を、ＮａＯＨ水溶液で塩基性化し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。シリカゲルのクロマトグラフィー（トルエン／イソプロピルアミン、８／２）に付して、標題化合物を橙色固体として得た（１５ｇ、９６．４３％）；ｍ．ｐ．１００−１０２℃。
【００９９】
中間体２９：４−（３−ヒドロキシ−４−ニトロ−フェニル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化３８】
2006527720.tif 000039
中間体２１（１ｇ、３．６７ｍｍｏｌ）を、中間体２８に関する記載のように反応させて、固体として標題化合物を得た（１ｇ、８２．９３％）；ｍ．ｐ．２６０−２６２℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３２７ＭＨ−。
【０１００】
中間体３０：１−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−２−（６−メチルピリジン−２−イル）−エタノン
【化３９】
2006527720.tif 000040
２，６−ルチジン（４．６６ｇ；４３ｍｍｏｌ）および１，３−ベンゾジオキソール−５−カルボン酸エチル（２ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）中に窒素雰囲気下で溶解し、溶液を−２０℃に冷却した。ＮａＨＭＤＳの溶液（ＴＨＦ中２Ｍ、６ｍｌ、１２ｍｍｏｌ）を、−２０℃以下で加え、混合物を１２時間−２０℃で、ついで、室温にて一晩撹拌した。反応混合物を濃縮し、得られた残渣を水に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相を飽和塩化アンモニウム溶液で洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。シリカゲルのクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５）に付して、標題化合物を黄色油として得た（２．２ｇ、７９％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝２５６ＭＨ＋。
【０１０１】
中間体３１：１−（ベンゾキオキサン−６−イル）−２−（ピリジン−２−イル）−エタノン
【化４０】
2006527720.tif 000041
１，４−ベンゾキオキサン−６−カルボン酸メチルエステルを、２−メチルピリジンと、中間体３０に記載のように反応させて、標題化合物を黄色油として得た（１．８ｇ、７０．６％）；［ＧＣＭＳ］ｍ／ｚ＝２５５。
【０１０２】
中間体３２：１−（キノリン−６−イル）−２−（ピリジン−２−イル）−エタノン
【化４１】
2006527720.tif 000042
６−キノリンカルボン酸、メチルエステルを、２−メチルピリジンと、中間体３０に記載のように反応させて、標題化合物を黄色固体として得た（１．３４ｇ、４９．４４％）；ｍ．ｐ．１０４℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝２４９ＭＨ＋。
【０１０３】
中間体３３：１−（１−メチルベンゾトリアゾール−６−イル）−２−（６−メチルピリジン−２−イル）−エタノン
【化４２】
2006527720.tif 000043
１−メチルベンゾトリアゾール−６−カルボン酸、メチルエステル（ＥＰ１２４７８１０に記載のように調製した）を、２−メチルピリジンと、中間体３０に記載のように反応させて、標題化合物を黄色固体として得た（０．６ｇ、４５．７４％）；［ＧＣＭＳ］ｍ／ｚ＝２５２。
【０１０４】
中間体３４：［（１−メチル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−６−イル）（フェニルアミノ）メチル］ホスホン酸ジフェニル
【化４３】
2006527720.tif 000044
中間体１１（２．２ｇ、１３．７５ｍｍｏｌ）を、アニリンおよび亜リン酸ジフェニルと、中間体１８に記載のように反応させて、標題化合物を灰白色粉末として得た（５．５ｇ、８５％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝４７０ＭＨ＋。
【０１０５】
中間体３５：１−（１−メチル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−６−イル）−２−（６−メチル−２−ピリジニル）エタノン
【化４４】
2006527720.tif 000045
中間体３４（５．５ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）および６−メチル−２−ピリジンカルボキシアルデヒド（１．５６ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）を、中間体２０に関する記載のように、標題化合物を橙色油として得た（１ｇ、３２％）；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝２６６ＭＨ＋。
【０１０６】
実施例
実施例１：５−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化４５】
2006527720.tif 000046
ＣＨ２Ｃｌ２（３００ｍｌ）および酢酸（８０ｍｌ）の混合物中の中間体２８（１５ｇ、４４ｍｍｏｌ）の溶液に、鉄（２４．８ｇ、４４０ｍｍｏｌ）を、激しく撹拌しながら加え、混合物を室温にて１６時間撹拌した。反応混合物をセライトにより濾過して、オルトギ酸トリメチル（６．２５ｍｌ、５７ｍｍｏｌ）を濾液に加え、混合物を４０℃で２時間加熱し、ついで、冷却した。混合物を、２ＮのＮａＯＨを添加することにより中和し、ついで、セライトにより濾過し、沈殿を水で洗浄した。濾液をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、トルエン／イソプロピルアミン（８／２）で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製し、ペンタンでトリチュレーションした後、標題化合物を淡黄色固体として得た（１．５ｇ、１０．６２％）；ｍ．ｐ．２４４−２４６℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３２２ＭＨ＋。
【０１０７】
実施例２：４−（ベンゾキサゾール−６−イル）−５−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化４６】
2006527720.tif 000047
酢酸（１００ｍｌ）中の中間体２９（１ｇ、３ｍｍｏｌ）の溶液に、鉄（１．６８ｇ、３０ｍｍｏｌ）を、激しく撹拌しながら加え、混合物を６０℃で３時間加熱し、ついで、水に注いだ。混合物を、ＮａＯＨの水溶液で中和し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。得られた油をＥｔＯＨ（２００ｍｌ）中に溶解し、ホルムイミド酸エチル塩酸塩（０．５ｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、一晩加熱還流した。ついで、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９／１）により精製した。ペンタンでトリチュレーションした後、標題化合物をクリーム色の固体として得た（０．１１ｇ、１１．７％）；ｍ．ｐ．１８８−１９０℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３０９ＭＨ＋。
【０１０８】
実施例３：５−（１−エチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化４７】
2006527720.tif 000048
ＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍｌ）中の中間体２２（０．５ｇ、１．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ポリマー支持過ヨウ素ピリジニウム（１．８ｇ）を加え、懸濁液を、室温にて４時間撹拌した。樹脂を濾過により除去し、濾液を直接チオ尿素（０．２０６ｇ、２．７ｍｍｏｌ）に加え、樹脂を数回エタノールで洗浄した。濾液を一晩加熱還流し、冷却し、減圧下で濃縮した。残渣をＮａＯＨ水溶液で塩基性化し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、この層を水で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。エタノールから結晶化して、標題化合物をクリーム色の結晶として得た（０．２５ｇ、４１．４９％）；ｍ．ｐ．２１８−２２０℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３３６ＭＨ＋。
【０１０９】
実施例４：５−（１−（２−メトキシエチル）−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化４８】
2006527720.tif 000049
中間体２３（０．６ｇ、１．９ｍｍｏｌ）を、実施例３に記載のように反応させて、アセトニトリルから結晶化し、標題化合物をクリーム色の結晶として得た（０．１２ｇ、１７．３％）；ｍ．ｐ．２００−２０２℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３６６ＭＨ＋。
【０１１０】
実施例５：５−［４−メチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化４９】
2006527720.tif 000050
ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）中の中間体２４（１．３ｇ、４．４ｍｍｏｌ）の溶液に、ポリマー支持過ヨウ素ピリジニウム（２ｇ）を加え、懸濁液を室温にて３時間撹拌した。樹脂を濾過により除去し、ついで、濾液を直接チオ尿素（０．３４ｇ、４．４ｍｍｏｌ）に加え、樹脂を数回エタノールで洗浄した。濾液を１６時間加熱還流し、室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残渣を、ＮａＯＨ水溶液で塩基性化し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、相を水で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。シリカゲルのクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９／１）に付し、ついで、ジイソプロピルオキシドでトリチュレートして、標題化合物をクリーム色の固体として得た（０．３ｇ、１９．４％）；ｍ．ｐ．２４０−２４２℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３５３ＭＨ＋。
【０１１１】
実施例６：５−［４−エチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化５０】
2006527720.tif 000051
中間体２５（０．５ｇ、１．６ｍｍｏｌ）を、実施例５に記載のように反応させて、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９／１）に付し、ついで、ジイソプロピルオキシドでトリチュレートして、標題化合物をクリーム色の固体として得た（０．０９ｇ、１５．２４％）；ｍ．ｐ．２２８−２３０℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３６７ＭＨ＋。
【０１１２】
実施例７：４−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化５１】
2006527720.tif 000052
中間体３０（１ｇ、３．９ｍｍｏｌ）を、実施例５に記載のように反応させて、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５）に付し、ついで、ペンタンでトリチュレートして、標題化合物を黄色粉末として得た（０．５２ｇ、４２．８７％）；ｍ．ｐ．１７０−１７２℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３１２ＭＨ＋。
【０１１３】
実施例８：４−（ベンゾキオキサン−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化５２】
2006527720.tif 000053
中間体３１（０．５１ｇ、２ｍｍｏｌ）を、実施例５に記載のように反応させて、ＥｔＯＨで結晶化して、標題化合物を黄色固体として得た（０．３５ｇ、５６．３％）；ｍ．ｐ．２１４℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３１２ＭＨ＋。
【０１１４】
実施例９：４−（キノリン−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化５３】
2006527720.tif 000054
中間体３３（０．７ｇ、２．８２ｍｍｏｌ）を、実施例５に記載のように反応させて、ｉＰｒＯＨから結晶化して、標題化合物を黄色固体として得た（０．２ｇ、２３．９％）；ｍ．ｐ．２２６℃；［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３０５ＭＨ＋。
【０１１５】
実施例１０：４−（１−メチル−ベンゾトリアゾール−６−イル）−５−（ピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化５４】
2006527720.tif 000055
中間体３３（０．８ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）を、実施例５に記載のように反応させて、ｉＰｒＯＨから結晶化して、標題化合物を淡いベージュ粉末として得た（０．０７ｇ、３０．２３％）。［ＡＰＣＩＭＳ］ｍ／ｚ＝３０９ＭＨ＋；ＴＯＦＭＳＥＳ＋：Ｃ１５Ｈ１２Ｎ６Ｓ（ＭＨ＋）として計算値：３０９．０９２２、実測値：３０９．０９２６。
【０１１６】
実施例１１：４−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−５−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン
【化５５】
2006527720.tif 000056
中間体３５（０．５ｇ、１．９ｍｍｏｌ）を、実施例５に記載のように反応させて、エタノールで再結晶して、標題化合物をベージュ粉末として得た（０．１５ｇ、１２％）；１Ｈ ＮＭＲ （３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）δ：７．８０（ｓ，１Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．６０（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｄ，１Ｈ），７．１５（ｔ，１Ｈ），６．８０（ｔ，２Ｈ），５．２５（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）；ＴＯＦＭＳＥＳ＋；Ｃ１７Ｈ１５Ｎ５Ｓ（ＭＨ＋）として計算値：３２２．２１２６、実測値：３２２．２１２０。
【０１１７】
生物学
本発明の化合物の生物学的活性は、下記のアッセイを用いて評価することができる。
【０１１８】
アッセイ１（細胞転写アッセイ）
本発明の化合物がＴＧＦ−βシグナル伝達を阻害する可能性は、例えば、下記のインビトロアッセイを用いて示すことができる。
該アッセイは、ルシフェラーゼ（ホタル）レポーター遺伝子に連結したＰＡＩ−１プロモーター（強力なＴＧＦ−β応答プロモーターとして知られている）で安定にトランスフェクトされたＨｅｐＧ２細胞において行った。化合物は、ＴＧＦ−βに曝露された細胞におけるルシフェラーゼ活性を阻害する能力に関して選択された。さらに、細胞を、ＴＧＦ−β応答プロモーターにより動かされず、毒性対照として用いられる第２のルシフェラーゼ（ウミシイタケ）遺伝子でトランスフェクトした。
【０１１９】
マルチドロップ装置を用いて、安定にトランスフェクトされた細胞株を２００μｌの血清含有培地中１ウェルあたり３５０００細胞の濃度で、９６ウェルマイクロプレートに播種した。これらのプレートを細胞インキュベーター中に置いた。
【０１２０】
１８〜２４時間後（２日目）、細胞インキュベーション法を開始した。細胞を、ＴＧＦ−βおよび５０ｎＭ〜１０μＭ（ＤＭＳＯ１％の最終濃度）の濃度範囲の候補化合物と一緒にインキュベートした。該試験に用いられたＴＧＦ−β（ｒｈＴＧＦβ−１）の最終濃度は、１ｎｇ／ｍＬであった。細胞を候補化合物と一緒に１５〜３０分インキュベートし、ついで、ＴＧＦ−βを添加した。試験反応物の最終容量は１５０μｌであった。各々のウェルは、ただ１つの候補化合物を含有し、そのＰＡＩ−１プロモーターに対する効果をモニターした。
【０１２１】
カラム１１および１２を対照として用いた。カラム１１は８ウェルを含み、その中で細胞を、ＴＧＦ−βの存在下、候補化合物を用いずにインキュベートした。カラム１１を用いて、「参照ＴＧＦ−β誘導性ホタルルシフェラーゼ値」を決定し、該値と試験ウェル（阻害活性を定量するための）における測定値を比較した。ウェルＡ１２〜Ｄ１２中において、細胞をＴＧＦ−β不含培地で増殖した。これらの位置から得られたホタルルシフェラーゼ値は、「基底ホタルルシフェラーゼ活性」を表す。ウェルＥ１２〜Ｈ１２中において、細胞を、ＴＧＦ−βおよび５００μＭの細胞毒性化合物ＣＰＯ（シクロペンテノン、Ｓｉｇｍａ）の存在下で培養した。毒性は、減少したホタルおよびウミシイタケルシフェラーゼ活性（カラム１１において得られた活性の約５０％）により示した。
【０１２２】
１２〜１８時間後（３日目）、ルシフェラーゼ定量法を開始した。デュアル・ルシフェラーゼ・アッセイ・キット（Ｐｒｏｍｅｇａ）から得られた試薬を用いて、下記の反応を行った。細胞を洗浄し、１０μｌのＰａｓｓｉｖｅ Ｌｙｓｉｓ Ｂｕｆｆｅｒ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で溶解した。振盪（１５〜３０分）後、プレートのルシフェラーゼ活性を、デュアル−インジェクター・ルミノメーター（ＢＭＧ ｌｕｍｉｓｔａｒ）で読み取った。この目的のため、５０μｌのルシフェラーゼアッセイ試薬および５０μｌの「Ｓｔｏｐ＆Ｇｌｏ」バッファーを連続的に注入して、両方のルシフェラーゼ活性を定量した。適当なソフトウェアを用いて、該測定から得られたデータを、処理し、分析した。ウェルＡ１１〜Ｈ１１（カラム１１、ＴＧＦ−βのみ）において得られた平均ルシフェラーゼ活性値は、１００％を示すと考え、ウェルＡ１２〜Ｄ１２（培地のみにおける細胞）において得られた値は基底レベル（０％）を与えると考えた。試験した各々の化合物に関して、濃度応答曲線を構築し、それからＩＣ５０値をグラフを用いて決定した。
【０１２３】
アッセイ２（Ａｌｋ５蛍光偏光アッセイ）
フルオロフォアに結合したキナーゼ阻害化合物を蛍光リガンドとして用いて、他の化合物の所定のキナーゼへのＡＴＰ競合的結合をモニターすることができる。該結合リガンドの溶液中への放出によって引き起こされる平面偏光の偏光解消の増加が偏光／異方性値として測定される。該プロトコールは、組み換え型ＧＳＴ−ＡＬＫ５（残基１９８−５０３）を用いるアッセイのためのローダミングリーン標識リガンドの使用を詳述する。
【０１２４】
アッセイバッファー成分：６２．５ｍＭのＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．５）（Ｓｉｇｍａ Ｈ−４０３４）、１ｍＭのＤＴＴ（Ｓｉｇｍａ Ｄ−０６３２）、１２．５ｍＭのＭｇＣｌ２（Ｓｉｇｍａ Ｍ−９２７２）、１．２５ｍＭのＣＨＡＰＳ（Ｓｉｇｍａ Ｃ−３０２３）
【０１２５】
プロトコール：固形化合物ストックを１００％ＤＭＳＯ中に１ｍＭ濃度まで溶解し、Ｕ底の９６ウェルポリプロピレンプレート（Ｃｏｓｔａｒ ＃３３６５）のカラム１、Ａ−Ｈ列に移して化合物プレートを作成した。該プレートのカラム１１まで化合物を連続希釈（１００％ＤＭＳＯ中３倍）して、各試験化合物につき１１段階の濃度を得た。カラム１２はＤＭＳＯのみを含有した。Ｒａｐｉｄｐｌａｔｅ（登録商標）−９６を用いて、各ウェルから１μｌの試料をＵ底の黒色９６ウェル未処理プレート中に移して、アッセイプレートを作成した。
【０１２６】
最終ＡＬＫ５濃度が該酵素の活性部位滴定に基づいて１０ｎＭになるように、ＡＬＫ５を上記成分および１ｎＭのローダミングリーン標識リガンドを含有するアッセイバッファーに加えた。該酵素／リガンド試薬（３９μｌ）を予め調製したアッセイプレートの各ウェルに添加した。低対照値のために、対照化合物（１μｌ）をカラム１２のＥ−Ｈ列に添加した。直ちに該プレートを、各々、４８５ｎｍ、５３０ｎｍおよび５０５ｎｍの励起、発光およびダイクロイック・フィルターを有するＬＪＬ Ａｃｑｕｅｓｔ蛍光リーダー（Molecular Devices, serial number AQ1048）上で読み取った。各ウェルの蛍光偏光をＡｃｑｕｅｓｔリーダーによって算出し、ついで、濃度応答曲線の構築のための曲線適合ソフトウェア中に取り込んだ。標準化した応答は、高対照（カラム１２、Ａ−Ｄ列中における１μｌのＤＭＳＯ）および低対照（カラム１２、Ｅ−Ｈ列中における１μｌ対照化合物）に相対的に決定された。ついで、ＩＣ５０値を各化合物につき算出した。
【０１２７】
上記のアッセイを用いて、本発明のすべての実施例が、ＡＬＫ５受容体のモジュレーター活性（１〜１００ｎＭの範囲のＩＣ５０値を有する）およびＴＧＦ−β細胞活性（０．００１〜１０μＭの範囲のＩＣ５０値を有する）を示す。
【０１２８】
５−（１−メチル−ベンズイミダゾール−６−イル）−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例１）は、１６ｎＭのＡＬＫ５受容体モジュレーター活性および１１ｎＭのＴＧＦ−β細胞活性を示した。
【０１２９】
５−［４−エチル−４Ｈ−ベンゾ［１，４］オキサジン−３−オン−６−イル］−４−（６−メチルピリジン−２−イル）−１，３−チアゾール−２−アミン（実施例６）は、２７ｎＭのＡＬＫ５受容体モジュレーター活性および１０４ｎＭのＴＧＦ−β細胞活性を示した。
【国際調査報告】
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