(57)【要約】化学式1のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩、その調製方法、およびその誘導体またはその非毒性塩を活性成分として含む薬学的組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式1で表示されるピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩：
2006504639.tif 000026
式中、
R1及びR2はそれぞれ独立してC1-C3アルキル、アリール、または置換アリールを表し、
R3はアミノまたはメチルを表し、
R4及びR5はそれぞれ独立して水素、C1-C3アルキル、ハロゲン、ハロゲンで置換されたメチル、C1-C3アルコキシ、シアノ、またはニトロを表す。
【請求項２】
R1及びR2がそれぞれ独立してC1-C3アルキルを表し、R3がメチルであり、かつR4及びR5がそれぞれ独立して水素、C1-C3アルキル、ハロゲン、またはC1-C3アルコキシである、請求項1記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩。
【請求項３】
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-4-(4-メトキシフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-フェニル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-(4-メチルフェニル)-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；および
4-(3,4-ジクロロフェニル)-5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン
からなる群より選択される、請求項1記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩。
【請求項４】
化学式4で表されるプロピオン酸誘導体：
2006504639.tif 000027
式中、R3、R4、及びR5は請求項1で定義される通りであり、かつR6はC1-C3アルキルを表す。
【請求項５】
化学式5のヒドラジン誘導体と化学式4のプロピオン酸誘導体とを反応させる段階を含む、化学式1のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の調製方法：
2006504639.tif 000028
式中、R1、R2、R3、R4、及びR5は請求項1で定義される通りであり、かつR6はC1-C3アルキルを表す。
【請求項６】
化学式4のプロピオン酸誘導体が、化学式2のスルホニル安息香酸誘導体と化学式3の酢酸フェニル誘導体とを塩基の存在下で反応させて調製される、請求項5記載の調製方法：
2006504639.tif 000029
式中、R3、R4、及びR5は請求項1で定義される通りであり、R6はC1-C3アルキルを表す。
【請求項７】
活性成分として請求項1から請求項3のいずれか一項記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の治療的有効量、及び薬学的に許容される担体を含む、発熱、疼痛、炎症の治療のための薬学的組成物。
【請求項８】
活性成分として請求項1から請求項3のいずれか一項記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の治療的有効量、及び薬学的に許容される担体を含む、癌の治療用の薬学的組成物。
【請求項９】
活性成分として請求項1から請求項3のいずれか一項記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の治療的有効量、及び薬学的に許容される担体を含む、痴呆の治療用の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明はピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩、これらの調製方法、及びこれらを活性成分として含む薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
非ステロイド性の抗炎症剤の大部分は、シクロオキシゲナーゼまたはプロスタグランジンG/Hシンターゼと呼ばれる酵素を遮断して炎症、疼痛、発熱を低減させる役割を果たす。また、ホルモンによって起こる子宮収縮を阻害し、かつ何種類かの癌の成長も阻害する。シクロオキシゲナーゼ-1(COX-1)は、最初は牛から発見された。COX-1は様々な細胞型で構成的に発現する。COX-1と異なり、シクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)は、マイトジェン、エンドトキシン、ホルモン、成長因子、及びサイトカインによって容易に誘発されうる、最近発見されたシクロオキシゲナーゼのアイソフォームである。
【０００３】
プロスタグランジンは、病理学的及び生理学的プロセスの強力なメディエーターである。COX-1は、内因性プロスタグランジンの放出、胃腸の形状及び機能の維持、ならびに腎臓の血液循環などにおいて生理学的に重要な役割を果たす。一方、COX-2は炎症因子、ホルモン、成長因子、及びサイトカインなどにより誘発される。したがって、構成的なCOX-1と異なり、COX-2はプロスタグランジンの病理学的プロセスに関与する。したがって、COX-2の選択的阻害剤は、既存の非ステロイド性抗炎症剤に比べて作用機序による副作用が少ない。さらに、これらは炎症、疼痛、発熱を低減し、また、ホルモンによって起こる子宮収縮及び何種類かの癌の成長を阻害する。特に、胃毒性、腎臓毒性などの副作用を減らすのに有効である。さらに、これらは収縮性プロスタノイドの合成を阻害して平滑筋の収縮を抑制する。したがって、早産、月経不順、喘息、及び好酸球性疾患の予防に役立つ。
【０００４】
最近、非ステロイド性抗炎症剤が大腸癌（European Journal of Cancer、Vol 37、p2302、2001）、前立腺癌（Urology、Vol 58、p127、2001）、および痴呆（Exp. Opin. Invest. Drugs、Vol 9、p671、2000）にも有効であるということが報告された。
【０００５】
その他にも、COX-2の選択的阻害剤は、骨粗鬆症または緑内障の治療にも有効であると予想される。COX-2の選択的阻害剤の有用性については文献（John Vane、「Towards a Better Aspirin」、Nature、Vol.367、pp215〜216、1994；Bruno Battistini、Regina Botting、およびY.S.Bakhle、「COX-1 and COX-2:Toward the Development of More Selective NSAIDs」Drug News and Perspectives、Vol.7、pp501〜512、1994；David B. ReitzおよびKaren Seibert、「Selective Cyclooxygenase Inhibitors」Annual Reports in Medicinal Chemistry、James A. Bristol編、Vol.30、pp179〜188、1995）に詳しく記述されている。
【０００６】
多様な構造を有する様々な選択的COX-2阻害剤が公知である。その中で、ジアリール複素環構造、すなわち三環構造を有する選択的COX-2阻害剤が、強力な候補物質として広く研究されている。ジアリール複素環構造は、中心環、及び一方のアリール環に結合したスルホンアミドまたはメチルスルホン基を有する。このようなジアリール複素環構造の初期物質は、Dup697（Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters、Vol 5、p2123、1995）である。この後、ピラゾ−ル環を有するSC-58635（Journal of Medicinal Chemistry、Vol 40、p1347、1997）、およびフラノン環を有するMK-966（国際公開公報第95/00501号）がDup697の誘導体として発見された。
【０００７】
米国特許第5,466,823号には、選択的COX-2阻害剤である化学式14のセレコキシブが開示されている。セレコキシブは、置換ピラゾリルベンゼンスルホンアミド誘導体である。
2006504639.tif 000002
【０００８】
国際公開公報95/00501号には、別の選択的COX-2阻害剤である化学式15のロフェコキシブが開示されている。ロフェコキシブは、中心フラノン環を有するジアリール複素環構造を有する。
2006504639.tif 000003
【０００９】
米国特許第5,633,272号には、化学式16のバルデコキシブが開示されている。バルデコキシブは、中心イソキサゾール環を有するフェニルスルホンアミド部分を有する。
2006504639.tif 000004
化学式14から16の選択的COX-2阻害剤は、既存の非ステロイド性抗炎症剤に比べて副作用が少なくかつ小さい、有効な炎症治療剤である。
【発明の開示】
【００１０】
発明の開示
本発明の一つの局面は、化学式1のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩を提供する。
【００１１】
本発明の他の局面は、ピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の調製方法を提供する。
【００１２】
本発明の他の局面は、ピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩を、発熱、疼痛、炎症の治療用の活性成分として含む薬学的組成物を提供する。
【００１３】
本発明のさらに他の局面は、ピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩を癌および痴呆の治療用の活性成分として含む薬学的組成物を提供する。
【００１４】
発明を実施するための最良の形態
本発明の一局面によれば、化学式1で表示されるピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩が提供される。
2006504639.tif 000005
式中、
R1及びR2はそれぞれ独立してC1-C3アルキル、アリール、または置換アリールを表し；
R3はアミノまたはメチルを表し；
R4及びR5はそれぞれ独立して水素、C1-C3アルキル、ハロゲン、ハロゲンで置換されたメチル、C1-C3アルコキシ、シアノ、またはニトロを表す。
【００１５】
好ましくは、R1及びR2はそれぞれ独立してC1-C3アルキルを表し；R3はメチルを表し；R4及びR5はそれぞれ独立して水素、C1-C3アルキル、ハロゲン、またはC1-C3アルコキシである。
【００１６】
R4及びR5の位置はそれぞれ3位及び4位、2位及び4位、3位及び5位、または3位及び2位であることが好ましく、3位及び4位であることがより好ましい。
【００１７】
化学式１で表示されるピラゾール-3-オン誘導体は非毒性塩の形態で存在しうる。「非毒性塩」という用語は、有機塩及び無機塩を含む薬学的に許容される無毒塩を意味する。
【００１８】
化学式1のピラゾール-3-オン誘導体の無機塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン、カリウム、ナトリウム、または亜鉛の無機塩があるがこれに限定されない。アンモニウム、カルシウム、カリウム、またはナトリウムの無機塩であることが好ましい。
【００１９】
化学式1のピラゾール-3-オン誘導体の有機塩には、1級、2級または3級アミン、天然に存在する置換アミン、環状アミンの有機アミン塩、または塩基性イオン交換樹脂の塩があるが、これに限定されない。塩基性イオン交換樹脂の塩の例には、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、N,N-ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、N-エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、N-メチルグルカミン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドロアミン、N-(2-ヒドロキシエチル)ピペリジン、N-(2-ヒドロキシエチル)ピロリジン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンの塩があるがこれに限定されない。
【００２０】
化学式1のピラゾール-3-オン誘導体は、有機酸塩または無機酸塩の形態で存在しうる。
【００２１】
化学式1のピラゾール-3-オン誘導体の有機酸塩または無機酸塩の例には、酢酸、アジピン酸、アスパラギン酸、1,5-ナフタレンジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、1,2-エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、エチレンジアミン四酢酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヨウ化水素酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムシン酸（mucinic acid）、2-ナフタレンジスルホン酸、硝酸、シュウ酸、パントテン酸、リン酸、ピバル酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、p-トルエンスルホン酸、ウンデカノン酸、および10-ウンデセノン酸の塩があるがこれに限定にされない。コハク酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、リン酸、硫酸、または酒石酸の塩が好ましい。
【００２２】
本発明のピラゾール-3-オン誘導体は、好ましくは：
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-4-(4-メトキシフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-フェニル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-(4-メチルフェニル)-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；および
4-(3,4-ジクロロフェニル)-5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン
を含む。
【００２３】
本発明の別の局面によれば、化学式１のピラゾール-3-オン誘導体の合成中間体として、化学式4のプロピオン酸誘導体が提供される。
2006504639.tif 000006
式中、R3、R4、及びR5は化学式1で定義される通りであり、R6はC1-C3アルキルを表す。
【００２４】
本発明の別の局面によれば、化学式5のヒドラジン誘導体と化学式4のプロピオン酸誘導体とを反応させる段階を含む、化学式1のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の調製方法が提供される。
2006504639.tif 000007
式中、R1及びR2は化学式1で定義される通りである。
【００２５】
前記反応は、ディーン-スタークトラップ装置（Dean-Stark trap apparatus）により反応中に生成される水から分離できる溶媒で行うのが好ましい。溶媒の例としては、ベンゼン、トルエン、キシレンなどがあるが、これに限定されない。トルエンの使用が最も好ましい。
【００２６】
反応は、反応物を溶媒の沸点まで加熱し、反応を完結させることで行うのが好ましい。より好ましくは、トルエンを溶媒として使用し、反応物をトルエンの沸点まで加熱し、還流させることで反応を完結させる。
【００２７】
反応生成物の分離及び精製は、有機合成過程で通常用いられる濃縮、抽出、またはその他の過程によって、及び任意でシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって行なうことができる。
【００２８】
化学式4のプロピオン酸誘導体は、化学式2のスルホニル安息香酸誘導体と化学式3の酢酸フェニル誘導体とを塩基存在下で反応させて調製することができる。
2006504639.tif 000008
式中、R3、R4、及びR5は化学式1で定義される通りであり、R6はC1-C3アルキルである。
【００２９】
前記の塩基としては、水素化ナトリウム、炭酸カリウム、または水酸化カリウムなどがある。好ましくは、水素化ナトリウムを用いる。
【００３０】
本発明の別の局面によれば、活性成分として治療的有効量の化学式1のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩、および薬学的に許容される担体を含む、発熱、疼痛、炎症の治療のための薬学的組成物が提供される。
【００３１】
薬学的組成物は、それがシクロオキシゲナーゼ-2の選択的阻害剤である場合、化学式1の化合物またはその非毒性塩を含む。したがって、本薬学的組成物は、副作用が低減された解熱剤、鎮痛剤、消炎剤として使用されうる。
【００３２】
従来の非ステロイド性消炎剤は、プロスタグランジン合成酵素であるシクロオキシゲナーゼ-1及びシクロオキシゲナーゼ-2を非選択的に阻害する。そのため様々な副作用が生じうる。
【００３３】
これに対して、化学式1の化合物及びその非毒性塩は、シクロオキシゲナーゼ-2を選択的に阻害する。そのため、従来の非ステロイド性解熱剤、鎮痛剤、消炎剤の副作用が低減されうる。
【００３４】
本発明の薬学的組成物は、化学式1の化合物及び／またはその非毒性塩、ならびに薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。したがって、本薬学的組成物は、従来の非ステロイド性抗炎症剤の代替薬として用いることができる。特に従来の非ステロイド性解熱剤、鎮痛剤、および消炎剤の副作用が低減されることにより、本発明の薬学的組成物は、消化性潰瘍、胃炎、限局性腸炎、潰瘍性大腸炎、憩室炎、胃出血、低プロトロンビン血症の患者に有用である。
【００３５】
本発明の薬学的組成物は、病理学的プロスタグランジンに関連する炎症疾患すべてに使うことができ、特に高用量の非ステロイド性抗炎症剤を必要とする骨関節炎、リウマチ様関節炎に有用である。
【００３６】
本発明の薬学的組成物は、化学式1の化合物の50mg/kg/日から400mg/kg/日の成人用量の形態で投与できる。適切な用量は疾病の重症度に応じて決定される。
【００３７】
本発明のさらに別の局面によれば、治療的有効量の化学式1のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩、および薬学的に許容される担体を含む、癌及び痴呆の治療用の薬学的組成物が提供される。
【００３８】
最近、非ステロイド性抗炎症剤が大腸癌（European Journal of Cancer、Vol 37、p2302、2001）、前立腺癌（Urology、Vol 58、p127、2001）、および痴呆（Exp. Opin. Invest. Drugs、Vol 9、p671、2000）にも有効であることが報告された。したがって、非ステロイド性抗炎症剤である本発明の薬学的組成物は、これらの疾患の治療のためにも使用されうる。
【００３９】
本発明の薬学的組成物は、化学式1の化合物またはその非毒性塩の50mg/kg/日から400mg/kg/日の成人用量の形態で投与でき、適切な用量は疾病の重症度に応じて決定される。
【００４０】
本発明の薬学的組成物は、錠剤、発泡錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、徐放性錠剤、徐放性カプセル剤（単独単位製剤（single unit formulation）及び複合単位製剤（multiple unit formulation））、静脈内及び筋肉内注射用溶液、注入液、懸濁液、坐剤、またはその他の適した剤形で投与されうる。
【００４１】
徐放性薬学的剤形は、初期負荷用量を有する、または有しない活性成分を含む。それらは、活性成分を調節された様式で放出する、完全または部分的徐放性薬学的剤形である。
【００４２】
好ましくは、薬学的組成物は経口投与される。
【００４３】
薬学的組成物は、薬学的に許容される賦形剤及び／または希釈剤及び／または補助剤の薬学的有効量をさらに含む。
【００４４】
賦形剤及び補助剤の例には、ゼラチン、ショ糖またはラクトースのような天然糖、レシチン、ペクチン、デンプン（例えば、トウモロコシデンプンまたはアミロース）、シクロデキストリン及びシクロデキストリン誘導体、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアセテート、アラビアゴム、アルギン酸、キシロース、滑石、サリチル酸、リン酸水素カルシウム、セルロース、セルロース誘導体（例えばメチルセルロース、メトキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびフタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、炭素原子数12〜22個の脂肪酸、乳化剤、油及び脂肪、特に、植物性グリセロールエステル及び飽和脂肪酸のポリグリセロールエステル、1価アルコール、多価アルコール、ポリエチレングリコールのようなポリグリコール、炭素原子数1〜20個の脂肪族アルコール、または、グリコール、グリセロール、ジエチレングリコール、1,2-プロピレングリコール、ソルビトール、マンニトールのような多価アルコールを有する炭素原子数2〜22個の脂肪族飽和または不飽和脂肪酸エステルがある。
【００４５】
他の適した補助剤には、崩解剤がある。崩壊剤の例には、架橋されたポリビニルピロリドン、カルボキシメチルデンプンナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び微結晶性セルロースがある。当技術分野で通常用いられる被覆剤もまた使用されうる。アクリル酸及び／もしくはメタクリル酸ならびに／またはそのエステル重合体及び共重合体、ゼイン、エチルセルロース、コハク酸エチルセルロース（ethyl cellulose succinate）、セラック（Shellac）などがある。
【００４６】
被覆剤として適する可塑剤は、クエン酸エステル及び酒石酸エステル、グリセロール及びグリセロールエステル、多様な鎖長のポリエチレングリコールである。
【００４７】
溶液及び懸濁液などの液体組成物は、水または生理学的に許容される有機溶媒、（例えば、アルコール及び脂肪族アルコール）中で製剤化される。
【００４８】
液体薬学的組成物において、カリウム溶媒和物（potassium solvate）、4-ヒドロキシ安息香酸メチルまたは4-ヒドロキシ安息香酸プロピルのような保存剤、アスコルビン酸のような抗酸化剤、及びペパーミントオイルのような芳香剤をさらに含みうる。
【００４９】
さらに、液体薬学的組成物を製剤化する場合、ポリビニルピロリドン及びポリソルベート80のような通常の溶解剤、または乳化剤が使用されうる。
【００５０】
適する賦形剤及び補助剤の他の例は、Dr. H.P. Fielder、「Lexikon der Hilfsstoffe fur Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete」[Encyclopaedia of auxiliaries for pharmacy, cosmetics and related fields］に開示されている。
【００５１】
以下、本発明を実施例によってさらに具体的に説明する。しかし、以下の実施例は例示のみを目的として提供され、本発明がこれらによって制限されることはない。
【００５２】
実施例1
3-(4-メタンスルホニルフェニル)-2-(4-メトキシフェニル)-3-オキソ-プロピオン酸エチルエステル
2006504639.tif 000009
4-メタンスルホニル安息香酸1gに4-メトキシフェニル酢酸エチルエステル970mg、及びカルボニルジイミダゾール950mgをジメチルホルムアミド15mlに溶解した後、水素化ナトリウム230mgを溶液に滴加し、混合物を常温で12時間反応させた。その後、水を加えて反応物を希釈し、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、標記化合物を薄黄色の液体（1.5g）として得た（収率83％）。
2006504639.tif 000010
【００５３】
実施例2
3-(4-メタンスルホニルフェニル)-3-オキソ-2-フェニルプロピオン酸メチルエステルの調製
2006504639.tif 000011
4-メトキシフェニル酢酸エチルエステルの代わりに4-メトキシフェニル酢酸メチルエステル750mgを使用したことを除いては、実施例1と同様に標記化合物1.3g（収率80％）を液体として調製した。
2006504639.tif 000012
【００５４】
実施例3
3-(4-メタンスルホニルフェニル)-3-オキソ-2-(4-メチルフェニル)プロピオン酸エチルエステル
2006504639.tif 000013
4-メトキシフェニル酢酸エチルエステルの代わりに4-メチルフェニル酢酸エチルエステル0.89mgを使用したことを除いては、実施例1と同様に標記化合物1.5g（83％）を液体として調製した。
2006504639.tif 000014
【００５５】
実施例4
2-(3,4-ジクロロフェニル)-3-(4-メタンスルホニルフェニル)-3-オキソ-プロピオン酸エチルエステル
2006504639.tif 000015
4-メトキシフェニル酢酸エチルエステルの代わりに(3,4-ジクロロフェニル)酢酸エチルエステル1.1gを使用したことを除いては、実施例１と同様に標記化合物1.7g（85％）を液体として調製した。
2006504639.tif 000016
【００５６】
実施例5
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-4-(4-メトキシフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン
2006504639.tif 000017
3-(4-メタンスルホニルフェニル)-2-(4-メトキシフェニル)-3-オキソ-プロピオン酸エチルエステルをトルエン20mlに溶解した後、ジメチルヒドラジン0.24gを溶液に加えた。ディーン−スタークトラップ装置において、混合物を含む装置を120℃で24時間加熱及び還流させた。反応混合物を冷却し、水で希釈した後、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層は無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、減圧下で濃縮した。生成物をn-へキサンで再結晶させ、標記化合物160mgを黄色固体として得た（収率53％）。
2006504639.tif 000018
FAB Mass(M+1)：373
IR:(υC=O) 1637cm-1
融点：245〜247℃
【００５７】
実施例6
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-フェニル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン
2006504639.tif 000019
3-(4-メタンスルホニルフェニル)-2-(4-メトキシフェニル)-3-オキソ-プロピオン酸エチルエステルの代りに3-(4-メタンスルホニルフェニル)-3-オキソ-2-フェニルプロピオン酸メチルエステル0.3gを使用したことを除いては、実施例5と同様に標記化合物170mg（収率56％）を調製した。
2006504639.tif 000020
EI Mass(M+)：342
IR:(υC=O) 1640cm-1
融点：210〜212℃
【００５８】
実施例7
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-(4-メチルフェニル)-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン
2006504639.tif 000021
3-(4-メタンスルホニルフェニル)-2-(4-メトキシフェニル)-3-オキソ-プロピオン酸エチルエステルの代りに3-(4-メタンスルホニルフェニル)-3-オキソ-2-(4-メチルフェニル)プロピオン酸エチルエステル0.3gを使用したことを除いては、実施例5と同様に標記化合物180mg（収率60％）を調製した。
2006504639.tif 000022
EI Mass(M+)：356
IR：(υC=O) 1626cm-1
融点：247〜249℃
【００５９】
実施例8
4-(3,4-ジクロロフェニル)-5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン
2006504639.tif 000023
3-(4-メタンスルホニルフェニル)-2-(4-メトキシフェニル)-3-オキソ-プロピオン酸エチルエステルの代りに2-(3,4-ジクロロフェニル)-3-(4-メタンスルホニルフェニル)-3-オキソ-プロピオン酸エチルエステル0.3gを使用したことを除いては、実施例5と同様に標記化合物190mg（収率57％）を調製した。
2006504639.tif 000024
EI Mass(M+)：411
IR：(υC=O) 1637cm-1
融点：240〜242℃
【００６０】
実験例
1．選択的COX-2阻害活性の評価
1）方法
選択的COX-2阻害活性を薬理学的に決定するために、実施例で例示した本発明の化合物のCOX-1及びCOX-2阻害率を次のような方法で測定した。
【００６１】
a．U-937を用いたCOX-1阻害活性のアッセイ法
U-937ヒトリンパ腫細胞（Korean Cell Line Bank、Seoul、Korea、寄託番号：21593）を培養し、遠心分離した。回収した細胞をHBSS（1×、ハンクス液（Hank's balanced salt solution））を用いて1×106細胞/ml濃度に希釈した。希釈細胞溶液1mlを、12-ウェルプレートの各ウェルに分注した。試験化合物の1μM DMSO溶液5μl、および対照として5μlのDMSOをウェルに添加した。ウェルをCO2インキュベーターにて37℃で15分間インキュベートした。それとは別に、エタノールに溶解したアラキドン酸の10mMストック溶液をエタノールで10倍希釈してアラキドン酸の1mM溶液を調製した。アラキドン酸は基質として作用する。各ウェルに1mMアラキドン酸溶液を10μlずつ加え、CO2インキュベーターにて37℃で30分間インキュベートした。各ウェルの細胞溶液を遠心分離試験管に入れ、4℃、10,000rpmで5分間遠心分離した。集められた細胞及び上清中に存在するPGE2の濃度をモノクローナルキット（Cayman Chemicals）を用いて定量した。DMSO処理細胞群に対する試験化合物処理細胞群のPGE2阻害率を算出した。計算値に基づき、COX-1阻害活性を評価した。
【００６２】
b．RAW 264.7細胞株を用いたCOX-2阻害活性のアッセイ法
RAW 264.7細胞株（Korean Cell Line Bank、Seoul、Korea、寄託番号：40071）を12ウェルプレートの各ウェルに2×106細胞ずつ接種した。アスピリン250μMで各ウェルを処理し、37℃で2時間インキュベートした。培地を新しい培地に交換した後、新しい培地を試験化合物（10nM）で処理して30分間インキュベートした。次に、各ウェルをインターフェロンγ（100単位/ml）及びリポポリサッカライド（LPS、100ng/ml）で処理し、18時間インキュベートした。培地を他の試験管に移し入れた。EIAキット（Cayman Chemicals）を用いてPGE2濃度を定量した。
【００６３】
2）試験結果
試験結果を下記の表1に示した。COX阻害率を次の式によって計算した。
％阻害＝（試験化合物非処理試料のPGE2濃度−試験化合物処理試料のPGE2濃度）／（試験化合物非処理試料のPGE2濃度）×100
【００６４】
（表１）シクロオキシゲナーゼ（COX）阻害（％）
2006504639.tif 000025
【００６５】
3）評価
COX-1及びCOX-2の阻害率に関するインビトロ試験結果を表1に列記する。
【００６６】
表1に示すように、実施例5から7におけるCOX-1に対するCOX-2の阻害（％）の比は、参照（バルデコキシブ）より有意に高かった。これは、本発明の化合物のCOX-1に対するCOX-2の選択的阻害が、参照より優れていることを示す。
【００６７】
また、実施例5から7の化合物は、参照よりも有意に高いCOX-2阻害活性を示した。この結果に基づき、本発明の化合物は、参照と比較して、増強した選択性によって副作用が低減されており、かつ発熱、疼痛、及び炎症の軽減効果が改善されていると考えることができる。
【００６８】
産業上の利用可能性
上記の説明から明らかなように、本発明は、ピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩、その調製方法、およびその誘導体またはその塩を活性成分として含有する薬学的組成物を提供する。本発明の薬学的組成物は、発熱、疼痛、炎症を低減するのに有効である。特に、従来の非ステロイド性消炎剤の副作用が低減された結果、本薬学的組成物は、消化性潰瘍性疾患、胃炎、限局性腸炎、潰瘍性大腸炎、憩室炎、胃出血、または低プロトロンビン血症の患者の治療に有用である。
【００６９】
本発明をその例示的な態様を参照して具体的に示し、かつ記載してきたが、当業者には、特許請求の範囲で定義される本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、形態及び詳細における様々な変更を本発明に加えてもよいことが理解されると考えられる。
【手続補正書】
【提出日】平成16年8月31日(2004.8.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式1で表示されるピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩：
2006504639.tif 000030
式中、
R1及びR2はそれぞれ独立してC1-C3アルキル、アリール、または置換アリールを表し、
R3はアミノまたはメチルを表し、
R4及びR5はそれぞれ独立して水素、C1-C3アルキル、ハロゲン、ハロゲンで置換されたメチル、C1-C3アルコキシ、シアノ、またはニトロを表す。
【請求項２】
R1及びR2がそれぞれ独立してC1-C3アルキルを表し、R3がメチルであり、かつR4及びR5がそれぞれ独立して水素、C1-C3アルキル、ハロゲン、またはC1-C3アルコキシである、請求項1記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩。
【請求項３】
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-4-(4-メトキシフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-フェニル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；
5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-4-(4-メチルフェニル)-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン；および
4-(3,4-ジクロロフェニル)-5-(4-メタンスルホニルフェニル)-1,2-ジメチル-1,2-ジヒドロピラゾール-3-オン
からなる群より選択される、請求項1記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩。
【請求項４】
化学式4で表されるプロピオン酸誘導体：
2006504639.tif 000031
式中、R3、R4、及びR5は請求項1で定義される通りであり、かつR6はC1-C3アルキルを表す。
【請求項５】
化学式5のヒドラジン誘導体と化学式4のプロピオン酸誘導体とを反応させる段階を含む、化学式1のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の調製方法：
2006504639.tif 000032
式中、R1、R2、R3、R4、及びR5は請求項1で定義される通りであり、かつR6はC1-C3アルキルを表す。
【請求項６】
化学式4のプロピオン酸誘導体が、化学式2のスルホニル安息香酸誘導体と化学式3の酢酸フェニル誘導体とを塩基の存在下で反応させて調製される、請求項5記載の調製方法：
2006504639.tif 000033
式中、R3、R4、及びR5は請求項1で定義される通りであり、R6はC1-C3アルキルを表す。
【請求項７】
活性成分として請求項1から請求項3のいずれか一項記載のピラゾール-3-オン誘導体またはその非毒性塩の治療的有効量、及び薬学的に許容される担体を含む、発熱、疼痛、炎症の治療のための薬学的組成物。
【国際調査報告】
2006504639.tif 000034
2006504639.tif 000035