(57)【要約】本発明は、(a)高分子有効成分；および(b)非抱合型胆汁酸もしくは胆汁酸塩；および(c)没食子酸プロピル、ブチルヒドロキシアニソール（BHA）ならびにそれらの類似体および誘導体より選択された添加剤、またはそれらの混合物、からなる混合物を含む医薬組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a)  高分子有効成分、および
(b)  非抱合型胆汁酸もしくは胆汁酸塩、および
(c)  没食子酸プロピル、ブチルヒドロキシアニソール（BHA）ならびにそれらの類似体および誘導体より選択された添加剤、またはそれらの混合物、
の混合物を含む、医薬組成物。
【請求項２】
５重量％未満の水を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物が、pH３〜７において透過性になる腸溶性コーティングによりコートされている、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記混合物が、少なくとも１重量％の添加剤(c)を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
非抱合型胆汁酸塩／添加剤（b＋c）と高分子有効成分との重量比が少なくとも５：１である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記混合物が、溶液または微粒子分散体の形態である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記混合物が固体である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
高分子有効成分がポリペプチドもしくはタンパク質、ポリヌクレオチド、多糖またはそれらの混合物である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
高分子有効成分が、ヒトもしくは動物起源から得られる構造に一致する、合成のまたは天然源由来の、インスリン、カルシトニン、成長ホルモン、副甲状腺ホルモン、もしくはエリスロポエチン、ならびにそれらの誘導体および類似体より選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
高分子有効成分が、ヒトもしくは動物起源から得られる構造に一致する、合成のまたは天然源由来の、インスリン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、またはそれらの誘導体もしくは類似体である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
高分子有効成分が、ヒトもしくは動物起源から得られる構造に一致する、合成のまたは天然源由来のインスリンまたはその誘導体もしくは類似体であり、前記組成物がインスリン感作物質をさらに含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
非抱合型胆汁酸もしくは胆汁酸塩がケノデオキシコール酸塩である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
添加剤が、没食子酸プロピルまたは、没食子酸のエステルを含むその類似体もしくは誘導体より選択され、前記エステルは、直鎖もしくは分岐鎖C1-12アルキル、C1-12アルキルオキシ、C1-12アルキルチオもしくはC2-12アルケニルエステルとすることができ、これらの化合物は、場合により、ハロゲン、直鎖もしくは分岐鎖C1-12アルキル、C1-12アルキルオキシ、C1-12アルキルチオもしくはC2-12アルケニルエステルで置換されていてもよい、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
添加剤が、BHAまたは、ヒドロキシアニソールの類似体もしくは誘導体を含むその類似体もしくは誘導体より選択され、かかる類似体もしくは誘導体は、芳香環に連結されているメトキシ基もしくはメチル基、および／またはヒドロキシル基に対してオルト位にある水素が、直鎖もしくは分岐鎖C1-12アルキル、C1-12アルキルオキシ、C1-12アルキルチオもしくはC2-12アルケニル（置換されていないか、特にハロゲン原子によっていずれかの位置で置換されている）により置き換わっている、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
ヒトまたは動物の身体の治療的または診断的処置における使用のための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
腸壁を通過する高分子の吸収促進剤としての、没食子酸プロピルおよびBHAならびにそれらの類似体および誘導体より選択される添加剤またはそれらの混合物と組み合わされた非抱合型胆汁酸もしくは胆汁酸塩の、医薬組成物における使用。
【請求項１７】
ヒトまたは動物の身体への高分子有効成分の吸収を促進するための、没食子酸プロピルおよびBHAならびにそれらの類似体および誘導体より選択される添加剤またはそれらの混合物と組み合わされた非抱合型胆汁酸もしくは胆汁酸塩の、高分子有効成分を含有する医薬の製造における使用。
【請求項１８】
吸収される分子／高分子有効成分が、ポリペプチドもしくはタンパク質、ポリヌクレオチド、多糖またはそれらの混合物である、請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項１９】
吸収される分子／高分子有効成分が、ヒトもしくは動物起源から得られる構造に一致する、合成のまたは天然源由来の、インスリン、カルシトニン、成長ホルモン、副甲状腺ホルモン、もしくはエリスロポエチン、ならびにそれらの誘導体および類似体より選択される、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
吸収される分子／高分子有効成分が、ヒトもしくは動物起源から得られる構造に一致する、合成のまたは天然源由来の、インスリン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、またはそれらの誘導体もしくは類似体である、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
吸収される分子／高分子有効成分が、ヒトもしくは動物起源から得られる構造に一致する、合成のまたは天然源由来のインスリンまたはその誘導体もしくは類似体であり、インスリン感作物質が共存する、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
前記組成物が５重量％未満の水を含む、請求項１６〜２１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２３】
吸収される高分子有効成分を、溶液の形態で、微粒子分散体としてまたは固体として芳香族アルコールに組み込むことを含む、請求項１６〜２１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２４】
患者に請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物を投与することを含む、患者における高分子有効成分の吸収の促進方法。
【請求項２５】
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物の投与によって治療可能な病状または疾病に罹患した患者の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腸壁を通って腸の管腔から身体の他の部分への高分子の取り込みを促進する効力を有する物質の医薬組成物、および前記物質の医薬の製造における使用に関する。特に、これまでに使用されてきた製剤と比較して、胆汁酸塩の性能（有効性、再現性、または安定性に関する性能）を改善するように、胆汁酸塩が他の物質と組み合わされている製剤について記載する。
【背景技術】
【０００２】
胆汁酸塩は、腸での非常に有効な透過促進剤として既に認識されている。それらは表面活性化合物であり、細胞のリン脂質膜に容易に取り込まれて、細胞の挙動および形態に多くの変化を引き起こしうる。正確な作用機構は明らかになっていないが、１つの考えられる作用様式は、腸細胞間のタイトジャンクション（密着結合）の一過性の開放であって、それにより周囲にある物質がこれらの細胞の間を通過して、腸細胞層の基底側の細胞外液中に入ることができるようになる。その証拠が、腸細胞単層の経上皮電気抵抗（TEER）の減少を実証する研究室の実験により提供されており、これは、電気を遮断せずに伝導することが可能な、細胞間の水性チャネルの形成を示唆するものである。
【０００３】
腸での蠕動運動は広範な表面領域にわたって医薬製剤の素早い分散を引き起こす傾向にあるため、胆汁酸塩がその最大効力を発揮するためには胆汁酸塩の局所濃度をできるだけ高く保つことができるように、製剤中の胆汁酸塩が迅速に溶解して、可能な限り長く溶液の形で残ることが重要である。こうした理由から、多くの当業者は、タウロコール酸塩またはタウロデオキシコール酸塩などの抱合型胆汁酸塩を用いてきた。なぜならこれらは、腸内で見られることがあるpH３ほどにも低いpH値を含む広範なpHにわたって易溶性であるからである。しかしながらこれらの胆汁酸塩は、いくつかの非抱合型胆汁酸塩、特にデオキシ胆汁酸塩（例えばケノデオキシコール酸塩またはデオキシコール酸塩）ほど効果的ではない。とはいえ、非抱合型胆汁酸塩は中性よりもかなり低いpHにおいてしばしば不溶性である。したがって、透過促進剤としての非抱合型胆汁酸塩の性能は、それが作用している腸領域内のpH、ひいては胆汁酸塩が溶液として存在する（有効である）か沈殿物として存在する（あまり有効でない）かを決定するpHに依存して、非常に変動しうることが予想される。
【０００４】
この再現性の欠如を克服するために、胆汁酸塩が確実に可溶性の形態で存在するように、腸内のpHを7.5より高く調整する薬剤と胆汁酸塩とを組み合わせるアプローチが記述されてきた。残念なことに、そのような薬剤を製剤に含めると、ペプチドやタンパク質のような、製剤中に含まれる感受性有効成分の完全性（integrity）および安定性に悪影響を及ぼしうる。また、腸プロテアーゼに対する最適pHがpH８付近であることが知られており、そのようなアプローチの採用は、内在性プロテアーゼ活性によるタンパク質分解を増大させる可能性がある。
【発明の開示】
【０００５】
本発明は、胆汁酸塩と添加剤とを組み合わせる別のアプローチについて記載するが、この添加剤は、驚くべきことに、小腸内で通常見出されるpH値と同等の７より低いpH値において胆汁酸塩を溶解状態で維持することができる。特に、胆汁酸塩と、没食子酸プロピルもしくはその誘導体との、または有機酸の塩との共製剤化は、固体粉末を生じさせ、該固体粉末は、広範な様々な割合で人工腸液に加えたとき、該腸液の初期pHがpH５ほどに低い場合でさえ、容易に溶解することが見いだされた。食物摂取状態または絶食状態での腸の管腔内容物のためのモデルとして用いるのに好適な人工腸液が、Dressmanらにより記載されている（Dressman, B Jennifer & Reppas, Christos. European Journal of Pharmaceutical Sciences 11 Suppl 2 (2000) S73-S80 “In vitro-in vivo correlations for lipophilic, poorly water-soluble drugs.”）。
【０００６】
本発明に記載される組成物は、腸溶性のカプセル剤または錠剤として経口投与するために固体用量（solid-dose）製剤を調製するときには特に有利である。該組成物の固体成分はまた、非水性液体中の分散体として医薬製剤中に組み込むことができる。
【０００７】
没食子酸プロピルの場合、これは非常に水に不溶性の物質であるが、驚いたことに、ケノデオキシコール酸塩をはじめとする胆汁酸塩との共製剤化は、水中、特に人工腸液中での没食子酸プロピルの可溶化を顕著に促進しうることが見いだされた。したがって、ケノデオキシコール酸塩と没食子酸プロピルは、pH７より低いpHレベルにおいて、互いの水溶解度を相互に高めあうことができる。没食子酸プロピル自体が高度に水不溶性であるという事実を考えると、ケノデオキシコール酸塩への添加が、より易溶性の製剤をもたらすとは予想されないことであり、また、当業者はそのような方法を試みようと動機付けられないであろう。
【０００８】
本発明は、
(a)  高分子有効成分、および
(b)  非抱合型胆汁酸または胆汁酸塩、および
(c)  没食子酸プロピルおよびブチルヒドロキシアニソールならびにそれらの類似体および誘導体より選択された添加剤、またはそれらの混合物、
の混合物を含む医薬組成物を提供する。
【０００９】
本発明はまた、腸壁を通過する高分子の吸収促進剤としての、没食子酸プロピルおよびBHAならびにそれらの類似体および誘導体より選択された添加剤またはそれらの混合物と組み合わされた非抱合型胆汁酸または胆汁酸塩の、医薬組成物における使用を提供する。
【００１０】
別の実施形態では、本発明はヒトまたは動物の生体における高分子有効成分の吸収を促進するための、没食子酸プロピルおよびBHAならびにそれらの類似体および誘導体より選択された添加剤またはそれらの混合物と組み合わされた非抱合型胆汁酸または胆汁酸塩の、高分子有効成分を含む医薬の製造における使用を提供する。
【００１１】
本発明の範囲に含まれる高分子有効成分には、ヒトまたは動物の生体中に、特に腸壁を介して吸収されたときに、有利な効果を奏することができるあらゆる分子が含まれる。有利な効果とは、例えば、治療上の、美容上の、または、例えば病気予防や避妊を含む予防上のものでありうる。高分子有効成分は、天然（生物学的）、合成または半合成のものであってよい。
【００１２】
高分子は好ましくは、1000Daを超える、好ましくは2000Daを超える、最も好ましくは3000Daを超える分子量を有する分子として定義される。高分子有効成分を含めた高分子の例は、以下のものを含む：
１.  ポリペプチドおよびタンパク質、例えばインスリン；カルシトニン；ヒト血清アルブミン；成長ホルモン；成長ホルモン放出因子；ガラニン；副甲状腺ホルモン；血液凝固タンパク質（例えばキノゲン（kinogen）、プロトロンビン、フィブリノゲン、VII因子、VIII因子またはIX因子）；エリスロポエチンおよびEPOミメティクス；GCSFおよびGMCSFをはじめとするコロニー刺激因子；血小板由来増殖因子；上皮増殖因子；線維芽細胞増殖因子；トランスフォーミング増殖因子；GLP-1；GAG；サイトカイン；インスリン様増殖因子；骨および軟骨誘導因子；神経栄養因子；インターロイキン（例えばIL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12）；インターフェロン（例えばインターフェロンγ、インターフェロン1a、インターフェロンα）；TNFα；TNFβ；TGFβ；コレラ毒素AおよびB断片；大腸菌エンテロトキシンAおよびB断片；セクレチン；酵素（例えばヒストンデアセチラーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、カタラーゼ、アデノシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、プロテアーゼ、リパーゼ、カルボヒドラーゼ、ヌクレオチダーゼ、ポリメラーゼ、キナーゼおよびホスファターゼ）；輸送または結合タンパク質、特にビタミン、金属イオン、アミノ酸または脂質に結合し、かつ／またはそれらを輸送するもの（例えばコレステロールエステル輸送タンパク質、リン脂質輸送タンパク質、HDL結合タンパク質）；結合組織タンパク質（例えばコラーゲン、エラスチンまたはフィブロネクチン）；筋肉タンパク質（例えばアクチン、ミオシン、ジストロフィンまたはミニジストロフィン）；神経細胞、肝臓、心臓、または脂肪細胞タンパク質；細胞毒タンパク質；シトクロム；細胞の複製、増殖または分化を引き起こすことができるタンパク質；シグナル伝達分子（例えば細胞内シグナル伝達タンパク質または細胞外シグナル伝達タンパク質（例えばホルモン））；栄養因子（例えばBDNF、CNTF、NGF、IGF、GMF、aFGF、bFGF、VEGF、NT3、T3およびHARP）；アポリポタンパク質；抗体分子；可溶型の受容体（例えばT細胞受容体および、サイトカイン、インターフェロンまたはケモカインの受容体）；抗原性エピトープおよび断片を含むタンパク質またはペプチド；および上記のいずれかの誘導体、コンジュゲートおよび配列変異体。これらおよび他のタンパク質は、ヒト、植物、動物、細菌または真菌に由来するものであってもよく、かつ天然供給源から抽出されるか、発酵により組換え体として調製されるか、または化学的に合成されるかのいずれかであってもよい。
【００１３】
２.  ポリヌクレオチド、例えば長鎖直鎖状または環状一本鎖、二本鎖もしくは三本鎖DNA、一本鎖、二本鎖もしくは三本鎖RNA、オリゴヌクレオチド（例えばアンチセンスDNAもしくはRNA）、およびそれらの類似体（例えばPNAおよびホスホロチオエート誘導体）。一実施形態では、本発明に用いられるポリヌクレオチドはCpGモチーフを有することが好ましい。ポリヌクレオチドのコード配列は、治療上の産物をコードしていてもよく、特にコード配列は以下のものをコードしていてもよい：細胞外タンパク質（例えば分泌タンパク質）；細胞内タンパク質（例えば細胞質、核または膜タンパク質）；細胞膜内に存在するタンパク質；血液タンパク質、例えば凝固タンパク質（例えばキノゲン（kinogen）、プロトロンビン、フィブリノゲン、VII因子、VIII因子またはIX因子）；酵素、例えば異化酵素、同化酵素、胃腸の酵素、代謝酵素（例えば解糖回路またはクレブス回路）、または細胞シグナル伝達酵素、次の物質：脂質、脂肪酸、グリコーゲン、アミノ酸、タンパク質、ヌクレオチド、ポリヌクレオチド（例えばDNAもしくはRNA）もしくは炭水化物を分解もしくは修飾する酵素（例えばプロテアーゼ、リパーゼまたはカルボヒドラーゼ）、またはタンパク質修飾酵素（例えばタンパク質に化学基を付加するか、タンパク質から化学基を除去する酵素（例えばキナーゼもしくはホスファターゼ））；ビタミン、金属イオン、アミノ酸または脂質に結合するか、それらを輸送する輸送タンパク質または結合タンパク質（例えばコレステロールエステル輸送タンパク質、リン脂質輸送タンパク質もしくはHDL結合タンパク質））；結合組織タンパク質（例えばコラーゲン、エラスチンまたはフィブロネクチン）；筋肉タンパク質（例えばアクチン、ミオシン、ジストロフィンまたはミニジストロフィン）；神経細胞、肝臓、心臓または脂肪細胞タンパク質；細胞毒タンパク質；シトクロム；細胞の複製、増殖または分化を引き起こすことができるタンパク質；遺伝子の転写もしくは翻訳を助けるか、または転写もしくは翻訳を調節するタンパク質（例えば転写因子または転写因子もしくはポリメラーゼに結合するタンパク質）；シグナル伝達分子（例えば細胞内または細胞外シグナル伝達分子（例えばホルモン））；免疫系タンパク質、例えば抗体、T細胞受容体、MHC分子、サイトカイン（例えばIL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、TNFα、TNFβ、TGFβ）、インターフェロン（IFNγ、IFN1a、IFNα）、ケモカイン（例えばMIP-1、MIP-1、RANTES）、免疫受容体（例えばサイトカイン、インターフェロンもしくはケモカインに対する受容体（例えば上記のサイトカイン、インターフェロンもしくはケモカインのいずれかに対する受容体））または細胞表面マーカー（例えばマクロファージ、T細胞、B細胞、NK細胞もしくは樹上細胞表面マーカー）（例えばCD 1、2、3、4、5、6、7、8、16、18、19、28、40もしくは45；またはそれらの天然リガンド）、栄養因子（例えばBDNF、CNTF、NGF、IGF、GMF、aFGF、bFGF、VEGF、NT3、T5およびHARP）またはアポリポタンパク質；腫瘍抑制因子（例えばp53、Rb、Rap1A、DCCもしくはk-rev）；自殺タンパク質（チミジンキナーゼまたはシトシンデアミナーゼ）；または遺伝子リプレッサー。本発明に有用なポリヌクレオチドによりコードされるタ��パク質もしくはペプチドは、免疫原性があるものであり、すなわちタンパク質の活性に特異的な抗原（これに対する抗体が免疫系によって生成される）を含むことができる。
【００１４】
ポリヌクレオチドは、機能しうるようにコード配列に連結された制御配列を有していてもよい。制御配列は、典型的にはいずれかの真核生物由来のもの、またはそれら真核生物に感染するウイルス由来のものでありうる。ポリヌクレオチドは複製起点を含んでいてもよい。
【００１５】
ポリヌクレオチドは、化学的に修飾されていてもよい。このことはヌクレアーゼに対するポリヌクレオチドの耐性を強める可能性があり、またはそれらが細胞に侵入する能力を高めるかもしれない。例えば、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを用いることができる。他のデオキシヌクレオチド類似体としては、メチルホスホネート、ホスホルアミデート、ホスホロジチオエート、N3’P5’-ホスホルアミデートおよびオリゴリボヌクレオチドホスホロチオエートならびにそれらの2’-O-アルキル類似体および2’-O-メチルリボヌクレオチドメチルホスホネートが挙げられる。あるいはまた、混合主鎖オリゴヌクレオチド（MBO）を用いてもよい。MBOはホスホロチオエートオリゴデオキシヌクレオチドのセグメントと、適宜配置された修飾オリゴデオキシリボヌクレオチドまたは修飾オリゴリボヌクレオチドのセグメントを含む。MBOは、ホスホロチオエート結合のセグメントと、他のセグメントとして他の修飾オリゴヌクレオチド、例えばメチルホスホネート（非イオン性であり、かつヌクレアーゼに非常に耐性）もしくは2’-O-アルキルオリゴリボヌクレオチドを有する。
【００１６】
本発明での使用に好適なポリヌクレオチドは、好ましくは、細胞または細胞成分、原核生物成分、真核生物成分、核成分、クロマチン成分、ヒストン成分もしくはタンパク質成分を実質的に含まないか、それらと結合していない形態のものである。ポリヌクレオチドは実質的に単離された形態でもよく、または実質的に精製された形態でもよく、この場合、一般的に、調製物中に乾燥重量で90％より多く、例えば95％、98％もしくは99％以上のポリヌクレオチドを含むであろう。したがってポリヌクレオチドは、「裸のDNA」の形態でありうる。
【００１７】
３.  多糖類、例えばヘパリン、低分子量ヘパリン、ポリマンノース、シクロデキストリンおよびリポ多糖。
【００１８】
４.  上記のいずれかまたはすべてを、別々に、または互いに組み合わせて（例えばヘテロコンジュゲートの形態で）、または付加的な作用物質と組み合わせて用いる。
【００１９】
本発明の好ましい実施形態では、吸収される高分子有効成分は、カルシトニン、インスリン、低分子量ヘパリン、エリスロポエチン、ヒト成長ホルモンおよび副甲状腺ホルモンより選択される。
【００２０】
さらに好ましくは、該高分子成分はインスリン、カルシトニンまたは副甲状腺ホルモンである。高分子成分がインスリンであるとき、好適には、組成物はさらにインスリン感作物質を含む。インスリン感作物質は、吸収されたインスリンに対する生体の応答を増大させることができる。好適な感作物質は、当該技術分野で公知であり、例としてはトログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾンおよびグリタゾン系の分子の他のメンバーが挙げられる。
【００２１】
非抱合型胆汁酸もしくは胆汁酸塩は、好適にはケノデオキシコール酸、デオキシコール酸、コール酸またはそれらのナトリウム塩より選択される。胆汁酸塩は好ましくはケノデオキシコール酸塩である。
【００２２】
添加剤は没食子酸プロピル、ブチルヒドロキシアニソールならびにそれらの類似体および誘導体、ならびに有機酸もしくはその製薬上許容される塩より選択されるか、またはそれらの混合物であり、添加剤は、pH５〜6.5の腸液に加えられたときに、非抱合型胆汁酸塩を溶解状態のままにしておくことを可能にし、かつ、腸に導入されたときに、腸液のpHをpH7.5より上に上昇させないものである。
【００２３】
添加剤は没食子酸プロピルまたはその誘導体でありうる。没食子酸プロピルの好適な誘導体は、没食子酸のエステルを含む。該エステルは、直鎖もしくは分岐鎖C1-12アルキル、C1-12アルキルオキシ、C1-12アルキルチオもしくはC2-12アルケニルエステルとすることができる。これらの化合物は、場合により、ハロゲン、直鎖もしくは分岐鎖C1-12アルキル、C1-12アルキルオキシ、C1-12アルキルチオもしくはC2-12アルケニルエステルで置換されていてもよい。
【００２４】
添加剤はまた、BHAまたはその類似体もしくは誘導体であってもよい。好適な類似体もしくは誘導体としては、ヒドロキシアニソールの類似体もしくは誘導体が挙げられ、かかる類似体もしくは誘導体は、芳香環に連結されているメトキシ基もしくはメチル基、および／またはヒドロキシル基に対してオルト位にある水素が、直鎖もしくは分岐鎖C1-12アルキル、C1-12アルキルオキシ、C1-12アルキルチオもしくはC2-12アルケニル（置換されていないか、特にハロゲン原子によっていずれかの位置で置換されている）により置き換わっている。
【００２５】
胆汁酸塩と添加剤（例えば没食子酸プロピル）の比は、重量に基づいて、好ましくは１：１から５：１、より好ましくは４：３から５：２、最も好ましくは約２：１である。
【００２６】
添加剤は好ましくは没食子酸プロピルであり、好適には胆汁酸塩の没食子酸プロピルに対する比率は、最も好ましくは重量に基づいて約２：１である。
【００２７】
本発明の好ましい実施形態では、非抱合型胆汁酸塩はケノデオキシコール酸塩であり、添加剤は没食子酸プロピルである。
【００２８】
本発明の組成物中の非抱合型胆汁酸塩／添加剤（吸収促進剤）および高分子有効成分の量は、吸収されたときにその通常の有利な効果を奏すると考えられる適量の高分子有効成分の共存下で吸収の増加を引き起こすような、非抱合型胆汁酸塩／添加剤（吸収促進剤）の有効濃度を、腸細胞バリア層（腸壁）において達成するように選択される。本発明の実施者は、非抱合型胆汁酸塩／添加剤（吸収促進剤）および高分子有効成分の量を、治療上の有効性に必要とされる高分子有効成分の量（例えば血中濃度レベル）に基づいて選択するであろう。例えば、カプセル剤に含まれる混合物中の、非抱合型胆汁酸塩／添加剤（吸収促進剤）の合計重量と高分子有効成分の重量の比は、好ましくは１：１から200：１、より好ましくは３：１から100：１、最も好ましくは５：１から50：１でありうる。
【００２９】
高分子有効成分の絶対量は、用いられる投薬計画および対象の患者に対して通常の有利な効果を奏するのに必要とされる該物質の投与量に基づいて選択されるであろう。これら投与量の決定は、本発明の実施者の裁量の範囲内にある。
【００３０】
本発明の組成物は、１種類以上の他の吸収促進化合物、例えば中鎖モノグリセリド、キレート剤等をさらに含んでもよい。
【００３１】
本発明の組成物は、場合によっては、医薬品の製剤化の際に用いられる慣用の添加剤をさらに含んでもよく、そのようなものとしては例えば、酸化防止剤、抗菌剤、懸濁化剤、増量剤、希釈剤、吸着剤、流動促進剤、結合剤、アンチケーキング剤、滑沢剤、崩壊剤、膨張剤、粘度調節剤、可塑剤および酸性度調節剤（特に腸環境をpH７〜7.5に調整するもの）が挙げられる。好適な膨張剤としては、デンプングリコール酸ナトリウム、アルファ化デンプン、微結晶性セルロース、クロスポビドンおよびケイ酸マグネシウムアルミニウムまたはそれらの混合物が挙げられる。デンプングリコール酸ナトリウムおよび他の多糖系の膨張剤は、５〜10重量％の量で存在しうる。クロスポビドンは５〜30重量％の量で存在しうる。
【００３２】
混合物がカプセル剤または錠剤中に含まれる場合の本発明の組成物では、製剤は好ましくは実質的に無水である。本発明のより好ましい実施形態では、組成物全体が実質的に無水である。本発明において実質的に無水とは、混合物の重量基準で、水が５％未満、好ましくは１％未満、さらに好ましくは0.5％未満であることを意味する。
【００３３】
本発明の組成物は、そこで用いられる高分子有効成分に応じて、ヒトまたは動物身体の種々の病状もしくは疾患の治療処置に用いることができ、あるいは、ヒトまたは動物身体内に、疾患もしくは病状の診断に必要な高分子を導入するのに用いることができる。本発明の組成物は好ましくは医薬用または化粧用の組成物である。
【００３４】
本発明の組成物では、カプセル中に含まれる混合物は、溶液または微粒子分散体の形態のいずれかである液体、半固体またはゲルであってもよい。つまり、吸収のための高分子有効成分は、溶液の形態で、または微粒子分散体としてのいずれかで製剤中に組み込まれる。あるいはまた、組成物は固体の形態であってもよい。
【００３５】
本発明の組成物は、高分子有効成分および胆汁酸塩／添加剤（吸収促進剤）の実質的に無水の混合物を調製し、次に該混合物を未コートカプセルに充填し、その後所望の透過特性を実現するために適当なポリマー混合物で該カプセルをコートすることにより好適に製造される。用いられる追加の医薬用添加剤の性質に応じて、本発明の医薬組成物は液体、固体、半固体またはゲル形態とすることができる。本発明の医薬組成物は、口腔および舌下粘膜、鼻口蓋、肺、直腸、腸管（大腸および小腸を含む）および膣といった、様々な粘膜組織に近づく経路を介して投与するのに適している。液体、半固体またはゲル製剤の場合には、これらは無水または水性のいずれであってもよい。
【００３６】
本発明の組成物の意図される作用部位が腸である場合、組成物は、小腸または結腸の組織に到達するまで製剤の諸成分が一緒になって、希釈されずに、かつ緊密に結合したままであるように、胃の中を持ちこたえることができる腸溶性コーティング中に包含されているのが望ましい。そのような製剤は好適には無水であるだろう。液体の組成物は、腸溶性カプセル剤として好適に投与され、一方、固体製剤は腸溶性コーティングカプセル中、または錠剤、好ましくは腸溶性コーティング錠中のいずれかにおいて投与されうる。
【００３７】
腸溶性コーティングは、胃の自然状態に耐えるように、かつ腸内の所望の位置で透過性となるように適宜選択される。これは好ましくは腸の長さに沿って変化するpH条件により決定される。作用部位が小腸である場合、腸溶性コーティングはpH３〜７、好ましくはpH5.5〜７、より好ましくはpH5.5〜6.5において透過性になり、その内容物を放出することが好ましい。意図される作用部位が結腸である場合、腸溶性コーティングはpH6.8またはそれ以上において透過性になり、その内容物を放出することが好ましい。
【００３８】
好適な腸溶性コーティングは当該技術分野で周知であり、以下のものを含む：酢酸セルロース、フタレート、シェラックおよびポリメタクリレート（例えばオイドラギット（Eudragit）のLおよびSシリーズから選択したもの、特にオイドラギットL12.5P、L12.5、L100、L100-55、L30D-55、S12.5P、S12.5およびS100）。好適な可塑剤または湿潤剤、例えばクエン酸トリエチルおよびポリソルベート80もまた、コーティング混合物中に含めることができる。
【００３９】
カプセル剤（好ましくはHPMCまたはゼラチンカプセル）のための適当なコーティング剤は、当業者であれば、彼らの知識およびオイドラギット製品をサポートする利用可能な刊行物に基づいて、容易に選択することができる。
【００４０】
意図する作用部位が鼻粘膜である場合、製剤は水溶液の形態で、または乾燥粉末として提供されてもよく、これらはスプレーとして投与することが可能である。
【００４１】
意図する作用部位が直腸である場合、適切な投与方法は、カプセル外膜内に包含されるか、または侵食可能な座剤の基材中に組み込まれた無水液体または固体としてである。
【００４２】
膣への適用のためには、ゲル状の製剤の投与もまた適している。
【００４３】
以下の実施例は本発明を例示するためのものであり、制限的なものと解釈されるべきではない。
【実施例】
【００４４】
実施例１
高分子有効成分としてインスリンを含むケノデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル混合物の調製
１gのケノデオキシコール酸を3.4gの水酸化ナトリウム溶液（30mg/ml）中に温めながら溶解する。この溶液を室温にし、水酸化ナトリウム溶液をさらに加えることでpH7.85に調整する。それから500mgの没食子酸プロピルを加え、室温にて振盪することにより溶解させる。pHを7.45に調整し、56.25mgの組換えヒトインスリンを、37℃にて攪拌しながら加える。すべての固体物が溶解した後、蒸留水を用いて溶液を総重量８gにし、凍結させ、一晩凍結乾燥することで乾燥結晶粉末を得る。
【００４５】
ケノデオキシコール酸塩を単独で含む製剤を、没食子酸プロピルを適宜除くこと以外は上記と同じ方法で調製する。前と同様、乾燥前の最終溶液のpHは7.4〜7.5に調整する。
【００４６】
実施例２
ケノデオキシコール酸塩／ブチル化ヒドロキシアニソール混合物の調製
没食子酸プロピルの代わりにブチル化ヒドロキシアニソールを用いること以外は、実施例１に記載のものと同じ方法を用いる。
【００４７】
実施例３
人工腸液中への、没食子酸プロピル存在下または非存在下での、ケノデオキシコール酸塩の溶解
人工腸液は、以下の処方に従って調製する。ここで、「-」、「L」および「H」は、液中の異なる塩濃度を表し、それぞれゼロ、低濃度、高濃度である。 
【表１】
2006523663.tif 000002
【表２】
2006523663.tif 000003
【００４８】
実施例１で調製した乾燥粉末６×10mgを、平底96ウェルマイクロタイタープレートの別々のウェル中に入れ、37℃にてインキュベーションしながら、15分間隔で25μlのSIFのアリコートを連続的に加える。溶解度は、穏やかに混合した後、プレートリーダー中でウェル内容物の620nmでの光学的透明度を測定することにより評価する。図1Aおよび1Bのグラフにおける光学密度（＞0.5）の増加は沈殿物の存在を示唆している。見て取れるように、10mgのケノデオキシコール酸塩を容量150μlに希釈するときには、テストしたすべての条件で沈殿が生成し、テストした人工腸液のすべての変種中で溶解したままであるケノデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル混合物とは対照的である。
【００４９】
実施例４
人工腸液中へのケノデオキシコール酸塩／ブチル化ヒドロキシアニソール混合物の溶解
実施例２で調製したケノデオキシコール酸塩／ブチル化ヒドロキシアニソール混合物を用いること以外は、実施例３で採用した条件と同じ条件を用いる。10mgを200μlまでの記載したすべての人工腸液バッファーで希釈すると、実質的に透明な溶液が得られる。
【００５０】
実施例５
人工腸液中へのデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル混合物の溶解
ケノデオキシコール酸の代わりにデオキシコール酸を用い、胆汁酸塩と没食子酸プロピルの比を１：１（wt：wt）とすること以外は、実施例３で採用した条件と同じ条件を用いる。10mgを200μlまでの腸液バッファー（pH6.5）で希釈すると、実質的に透明な溶液が得られ、デオキシコール酸ナトリウム単独を用いる場合の製剤と対照的である。結果を図３に示す。
【００５１】
実施例６
幼若ブタでのケノデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル／インスリン混合物のin vivo効力
実施例１で調製した製剤（インスリン100iu、ケノデオキシコール酸66mgおよび没食子酸プロピル33mg、またはインスリン100iuおよびケノデオキシコール酸単独を含む）を、８匹の幼若ブタ（それぞれ体重約40kg）の空腸中に、ストーマを介して乾燥圧縮粉末として投与する。血中グルコースレベルを６時間にわたって間隔をおいて測定し、血漿グルコースの平均AUCの変化をh.mmol/lとして算出する。以下のデータの要約から見て取れるように、製剤中に没食子酸プロピル（PG）を含めると、より高度の再現性、およびより高度の効力が得られる。 
応答者数              AUC
インスリン／ケノ／PG          ８／８              -3.23
インスリン／ケノ単独          ４／８              -1.40
【００５２】
実施例７
幼若ブタでのケノデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル／カルシトニン混合物を含有する錠剤のin vivo効力
実施例１で調製した製剤（サケカルシトニン1mg（sCT、5000iu）、ケノデオキシコール酸66mg、没食子酸プロピル33mg、ヒュームドシリカ1mgおよびクロスポビドン20mgを含む）を、８匹の幼若ブタ（それぞれ体重約40kg）の空腸中に、ストーマを介して圧縮錠として投与する。血中カルシウムレベルを６時間にわたって間隔をおいて測定し、血漿カルシウムの平均AUCの変化をh.mmol/lとして算出する。以下のデータの要約から見て取れるように、該製剤は、対照と比較して、sCTに関連した顕著なカルシウムの低下をもたらす。処置                                AUC              標準偏差
偽投与                             -0.03              0.23
サケカルシトニン400iu (皮下)      -1.79              1.18
製剤(空腸内)                       -2.35              1.03
【００５３】
実施例８
幼若ブタでのケノデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル／インスリン混合物を含有するカプセル剤のin vivo効力
実施例１で調製した製剤（インスリン100iu、ケノデオキシコール酸66mg、没食子酸プロピル33mg、ヒュームドシリカ1mg、クロスポビドン22mgおよびケイ酸マグネシウムアルミニウム13mgを含む）を、４匹の幼若ブタ（それぞれ体重約40kg）の空腸中に、ストーマを介してヒドロキシプロピルメチルセルロースカプセル中の乾燥粉末として投与する。対照群を用意し、ストーマを介してPBSのみを投与する。血中グルコースレベルを６時間にわたって間隔をおいて測定し、血漿グルコースの平均AUCの変化をh.mmol/lとして算出して、以下の表に示す。 
処置                          応答者              AUC
偽投与                        ４／４             -4.2
製剤 (空腸内)                 ０／４             -1.4
【００５４】
実施例９
健常ヒトボランティアでのケノデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル／インスリン混合物のin vivo効力
有効成分および添加剤を以下の割合で含む製剤を実施例１で調製する：
インスリン                            87iu
没食子酸プロピル                      33mg
ケノデオキシコール酸塩                66mg
ヒュームドシリカ                       1mg
デンプングリコール酸ナトリウム       0.5mg
【００５５】
170iuおよび340iuを含む製剤の相当量をそれぞれ2mlおよび4mlの蒸留水に溶解し、経鼻空腸カニューレを介して健常ボランティアに投与する。インスリンレベルは投与後10分以内で上昇することが確認され、処置群および対照群に対して得られたピーク値を以下の表に示す。
【表３】
2006523663.tif 000004
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】人工腸液中でのケノデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル混合物（図1A）およびケノデオキシコール酸塩単独（図1B）の溶解度を表すグラフである。
【図２】人工腸液中でのケノデオキシコール酸塩／カプリン酸塩混合物の溶解度を表すグラフである。
【図３】人工腸液中でのデオキシコール酸塩／没食子酸プロピル混合物の溶解度を表すグラフである。
【図４】人工腸液中でのコール酸塩／カプロン酸ナトリウム混合物の溶解度を表すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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