(57)【要約】式（Ｉ）の化合物が提供される。式中、Ｒ１は、アルキルオキシアルキル基；ニトリル基；Ｃ１〜１０以外によって置換されているアルキルアリール基；置換されているアルケニルアリール基；アルキルヘテロアリール基；アルケニルヘテロアリール基；＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基；分岐アルケニル；アルキル−アルコール基；アミドまたはアルキルアミド；−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともにエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯから選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに；ピラゾールであって、Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分枝アルキル基、およびアミドの一つによって置換され、および／または２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されている、ピラゾール；式（ｂ）の化合物を提供するヘテロアリール環を形成する。
2006521338.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
2006521338.tif 000584
の化合物であって、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基であって、この場合、Ｒ２は、水素結合を形成し得る、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はＣ１〜１０基以外で置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基であって、該アリール基は置換されているアルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環内にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外で置換されているアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）分岐アルケニル、
（ｉｘ）アルキルアルコール基、
（ｘ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二置換であり、そして／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉ）Ｒ１はＲ３とともに式
【化２】
2006521338.tif 000585
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分岐アルキル基およびアミドの一つで置換され、および／または（ｃ）２位は−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されるものとする、ピラゾール
（ｘｉｉｉ）式
【化３】
2006521338.tif 000586
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成する、
から選ばれ、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）−模倣物
から選ばれる
化合物。
【請求項２】
１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）に関連する状態または疾患の治療に用いられる薬物の製造における化合物の使用であって、前記化合物は式Ｉ
【化４】
2006521338.tif 000587
であり、ここで、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はメチル基以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）カルボン酸エステルであって、（ａ）Ｒ３は＝Ｏであり、そして／または（ｂ）前記エステルは、−ＣＯ２Ｘ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｘおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｘから選ばれ、ここでＸはヒドロカルビル基であるカルボン酸エステル、
（ｉｘ）ＣＯ２Ｈ基またはアルキル−ＣＯ２Ｈ基であって、アルキルはＣＨ２基またはＣＨ２ＣＨ２基であるＣＯ２Ｈ基またはアルキル−ＣＯ２Ｈ基、
（ｘ）分岐アルケニル、
（ｘｉ）アルキル−アルコール基あるいはアルケニル−アルコール基、
（ｘｉｉ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二置換であり、そして／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉｖ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【化５】
2006521338.tif 000588
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいは、Ｒ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは置換され、そして／または（ｃ）２位は−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【化６】
2006521338.tif 000589
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる、化合物の使用。
【請求項３】
前記アルケニルアリール基のアリール基は、置換されている、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記カルボン酸エステルは、ＣＯ２Ｘ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｘおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｘから選ばれ、Ｘはヒドロカルビル基である、請求項２または３に記載の使用。
【請求項５】
Ｘは、炭化水素基アルキルである、請求項２または３に記載の使用。
【請求項６】
前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分岐アルキル基およびアミドの一つで置換されている、請求項２〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）に関連する状態または疾患の治療に用いられる薬物の製造における化合物の使用であって、前記化合物は、請求項１に定義される化合物である使用。
【請求項８】
Ｒ１がニトリル基であるとき、Ｒ２は−ＯＨである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の発明。
【請求項９】
前記アルキルアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル基、アルコキシ基、ニトロ基（−ＮＯ２−）、ニトリル基およびアザアルキル基から選ばれる基によって置換される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の発明。
【請求項１０】
前記Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、ＮＭｅ２である、請求項９に記載の発明。
【請求項１１】
前記アルコキシ基は、メトキシである、請求項９または１０に記載の発明。
【請求項１２】
前記アルキルアリール基は、−ＣＨ２−Ｐｈである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の発明。
【請求項１３】
前記アルケニルアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル基、アルコキシ基、ニトロ基（−ＮＯ２−）およびニトリル基から選ばれる基によって置換される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の発明。
【請求項１４】
前記Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、ＮＭｅ２である、請求項１３に記載の発明。
【請求項１５】
前記アルコキシ基は、メトキシである、請求項１３または１４に記載の発明。
【請求項１６】
前記アルケニルアリール基は、＝ＣＨ−Ｐｈである、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の発明。
【請求項１７】
前記アルキルヘテロアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル基、アルコキシ基、ニトロ基（−ＮＯ２−）およびニトリル基から選ばれる基によって置換される、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の発明。
【請求項１８】
前記Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、ＮＭｅ２である、請求項１７に記載の発明。
【請求項１９】
前記アルコキシ基は、メトキシである、請求項１７または１８に記載の発明。
【請求項２０】
前記アルキルへテロアリール基は、
【化７】
2006521338.tif 000590
から選ばれる、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の発明。
【請求項２１】
前記アルケニルヘテロアリール基のアリール基は置換される、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の発明。
【請求項２２】
前記アルケニルヘテロアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル基、アルコキシ基、ニトロ基（−ＮＯ２−）およびニトリル基から選ばれる基によって置換される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の発明。
【請求項２３】
前記Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、ＮＭｅ２である、請求項２２に記載の発明。
【請求項２４】
前記アルコキシ基は、メトキシである、請求項２２または２３に記載の発明。
【請求項２５】
前記アルケニルヘテロアリール基は、
【化８】
2006521338.tif 000591
から選ばれる、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の発明。
【請求項２６】
前記＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基は、＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基である、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の発明。
【請求項２７】
Ｒ１が＝Ｎ−Ｏ−アルキル基および＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれるとき、Ｒ３は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基である、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の発明。
【請求項２８】
Ｒ１およびＲ３がピラゾールを形成するとき、２位は−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換される、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の発明。
【請求項２９】
Ｒ１およびＲ３がピラゾールを形成するとき、前記２−位は−ＯＨおよび−Ｏ−アルキルから選ばれる基で置換される、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の発明。
【請求項３０】
前記アミドは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ５Ｒ６または−Ｎ（ＣＯ−Ｒ７）Ｒ８の式であり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、Ｈおよびヒドロカルビル基から選ばれる、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の発明。
【請求項３１】
前記アミドまたはアルキルアミドは、アルキルアミドである、請求項１〜３０のいずれか１項に記載の発明。
【請求項３２】
前記二置換アミドの置換基は、一緒に環状構造を形成する、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の発明。
【請求項３３】
前記二置換アミドの置換基は、一緒にアリール環を形成する、請求項３２に記載の発明。
【請求項３４】
前記二置換アミドの置換基は、一緒に複素環を形成する、請求項３２または３３に記載の発明。
【請求項３５】
Ｒ２は、水素結合を形成できる基およびスルファミン酸エステル基から選ばれる、請求項１〜３４のいずれか１項に記載の発明。
【請求項３６】
前記水素結合を形成できる基は、−ＯＨから選ばれる、請求項３５に記載の発明。
【請求項３７】
前記−Ｃ（＝Ｏ）模倣物は、−ＣＮ、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基、＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、ピリジン、ピリミジン、および式
【化９】
2006521338.tif 000592
の基から選ばれる、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の発明。
【請求項３８】
Ｒ３は、−ＯＨおよび＝Ｏから選ばれる、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の発明。
【請求項３９】
Ｒ３は＝Ｏである、請求項１〜３８のいずれか１項に記載の発明。
【請求項４０】
前記化合物は、式ＩＩ
【化１０】
2006521338.tif 000593
の化合物である、請求項１〜３９のいずれか１項に記載の発明。
【請求項４１】
前記化合物は、式ＩＩＩ
【化１１】
2006521338.tif 000594
の化合物である、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の発明。
【請求項４２】
前記化合物は、式ＩＶ
【化１２】
2006521338.tif 000595
の化合物である、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の発明。
【請求項４３】
前記化合物は、式ＩＸ
【化１３】
2006521338.tif 000596
の化合物であり、Ｒ１１は、アルコキシ基またはアルキル基である、請求項１〜４２のいずれか１項に記載の発明。
【請求項４４】
Ｒ１１は、アルコキシ基である、請求項４３に記載の発明。
【請求項４５】
Ｒ１１は、メトキシ基である、請求項４４に記載の発明。
【請求項４６】
Ｒ１１は、アルキル基である、請求項４３に記載の発明。
【請求項４７】
Ｒ１１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、好ましくはＣ１〜Ｃ６アルキル基、好ましくはＣ１〜Ｃ３アルキル基である、請求項４６に記載の発明。
【請求項４８】
Ｒ１１は、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ３である、請求項４６または４７に記載の発明。
【請求項４９】
前記スルファミン酸エステルは、式
【化１４】
2006521338.tif 000597
で表され、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリールまたはそれらの組み合わせから選ばれるか、あるいは一緒にアルキレンを表し、前記アルキル、前記シクロアルキルまたは前記アルケニルは、それぞれは任意に一つ以上のへテロ原子または基を含む、請求項１〜４８のいずれか１項に記載の発明。
【請求項５０】
Ｒ９およびＲ１０の少なくとも一つは、Ｈである、請求項４９に記載の発明。
【請求項５１】
Ｒ９およびＲ１０はＨである、請求項４９に記載の発明。
【請求項５２】
薬学的に許容される担体、希釈剤、医薬品添加剤またはアジュバントと必要に応じて混合される、請求項１および８〜５１のいずれか１項に記載の化合物を含む医薬品用組成物。
【請求項５３】
医薬における使用のための、請求項１および８〜５１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５４】
実施例の任意の一つを参照して本明細書中で実質的に説明した化合物。
【請求項５５】
実施例の任意の一つを参照して本明細書中で実質的に説明した組成物。
【請求項５６】
実施例の任意の一つを参照して本明細書中で実質的に説明した使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化合物に関する。詳しくは、本発明は、１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）を阻害することができる化合物を提供する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
乳癌は、ほとんどの西欧諸国でいまだに女性の主要な死因である恐るべき疾患である。乳癌は、世界中で年間約１００万人の女性に影響を及ぼすと見積もられている１。
【０００３】
英国の乳癌による死亡率は、世界で最も高いものの一つであり、毎年３５，０００人を超える女性が乳癌と診断され、すべての癌症例の５分の１近くを算える。英国では、８５歳まで生きる女性の１０人に１人が生涯の間に乳癌を発症すると推定されている。この疾患に対する最新の治療法ならびに早期発見によって生存率は大いに改善したが、乳癌は、依然３５〜５４歳の女性の第一の死因である２。
【０００４】
多数の危険因子が特定され、そのほとんどは女性たちのホルモンおよび出産に関する履歴ならびに乳癌に関わる家系に関連するが、すべての女性は、乳癌の危険にさらされている。一般に、危険性が高い女性は、強い乳癌の家系、早い初潮年齢、高い閉経年齢または３０歳過ぎの最初の満期妊娠歴を有する女性である２。
【０００５】
乳癌の最早期段階では、外科手術が選ぶべき治療法のように見える。症例のほとんどで、乳房切除術でなく、乳房（片方または両方）内部のしこり（単数または複数）の局部切除など、乳房保存外科手技が選択される。乳癌の再発を完全に予防するため、多くの場合、特に乳房保存手技を行なった場合、放射線治療が処方される３。放射線治療は、乳房保存のための外科手術が実行できるよう、大きな腫瘍を手術可能な大きさに縮小させるためにも用いられる４。
【０００６】
転移した腫瘍の場合、または再発した進行乳癌の場合、治療の目的はもはや治癒させることではなく、苦痛緩和制御を施すことである。これは、この腫瘍の転移が骨、皮膚、リンパ、結節または脳などの部位に達した場合である。治療法は、患者のホルモン状態（治療を受けるのが閉経前女性であるか閉経後女性であるか）によって、および腫瘍の種類によって変化する。実際、ある種の腫瘍の成長および発症は、エストロゲンに依存することが証明され、ホルモン依存乳癌（ＨＤＢＣ、Ｉ−１参照）と呼ばれるものに至る。非ＨＤＢＣは、細胞毒薬物５の組み合わせを用いて腫瘍細胞を区別して殺すことを目的とする化学療法によって治療されるが、ＨＤＢＣは内分泌療法に応えると予測される。
【０００７】
ホルモン依存腫瘍の概念は、エストロゲン作用のモデルが最初に導入された６１９６０年代初期に現れた。エストロゲンが人間の細胞成長および機能を調節するためには、ヒトエストロゲン受容体（ｈＥＲ）と呼ばれる特定の蛋白質７が存在しなければならない。この蛋白質は、核に局在し、エストロゲンと相互作用して結合複合体を生成する。これは、特定の遺伝子からのｍ−ＲＮＡの産生を活性化することによって転写因子として作用し、効率的な腫瘍細胞成長のためにこの複合体の一つ以上がおそらく必須である。
【０００８】
測定可能なレベルの受容体蛋白質を有する患者は、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ）に対して、エストロゲン受容体陽性（ＥＲ＋）として分類される。閉経前女性の約５０％および閉経後女性の７５％がＥＲ＋群に分類され８、乳癌の発症をエストロゲンの存在に直接関連づけることができる。薬物の使用によって細胞に対するエストロゲン様刺激の妨害を起こす内分泌療法は、ＨＤＢＣの治療への有効な手法であることが証明された。当初、さまざまな戦略に応えて二種類の薬物、すなわち抗エストロゲン薬およびアロマターゼ阻害薬が開発された。
【０００９】
エストロゲン受容体の拮抗薬としての抗エストロゲン薬は、ＨＤＢＣに対して考案された最初の治療法の一つであった。抗エストロゲン薬の作用は、特定の受容体蛋白質ｈＥＲに競争結合し、従って特定の結合部位への内因性エストロゲンのアクセスを妨げる能力に依存する。従って、内因性エストロゲンは、腫瘍増殖を維持できない。
【００１０】
乳癌治療において通常用いられる抗エストロゲン薬の中で、タモキシフェン（下式）は、その分子の非常に低い毒性プロフィルのため最も広く使われている。タモキシフェンは、その非ステロイド性骨格にもかかわらず、その治癒力を限定する作動薬−拮抗薬混合活性９を有する。さらに、長期のタモキシフェン治療後の患者で、何らかの形の薬剤耐性１０が報告されている。
【００１１】
その後、ＩＣＩ１６４３８４（下式）などの新規な純抗エストロゲン薬物が発見されたが、タモキシフェンと比較すると効力が低いため、さらに高い効力のターゲットを設計する必要性が示唆された１１。
【００１２】
【化１５】
2006521338.tif 000003
今から数年前に、骨または肝臓などの標的組織に対するエストロゲン作動性と、乳房または子宮などの生殖組織中での拮抗作用および／または最小の作動性とを併せもつ新しい種類の抗エストロゲン薬１２が出現した。選択エストロゲン受容体修飾物質（ＳＥＲＭ）として設計されたこれらの化合物は、患者の乳房上皮癌の危険性を低下させるのに有効な可能性があるだけでなく、骨無機質密度を高めて閉経後女性の骨粗しょう症を予防することも示された。ラロキシフェンは、臨床的に使われたこの種類の化合物の最初のもの１３である。さらに多くのＳＥＲＭが現在臨床治験段階にあり、これらの分子がいつかＨＤＢＣの女性の第一線治療法としてタモキシフェンに取って代わるかもしれない。
【００１３】
ステロイド生合成経路の一つまたは数個の酵素を阻害する治療薬の使用は、エストロゲン依存腫瘍の発症の抑制をめざす別の重要な戦略１４を代表する。アンドロゲンＣ１９ステロイドをエストロゲンＣ１８ステロイドに変換する酵素アロマターゼは、エストロゲンレベルを低下させるための第一目標であった。チトクロームＰ４５０ヘム蛋白質を含有するこの酵素複合体は、アンドロゲンＡ環の芳香族化と、続くＣ１９メチル基の脱離とを触媒してエストロゲンを生成させる。
【００１４】
アミノグルテチミド（下式）は、乳がん治療に使われた最初のアロマターゼ阻害薬であった。しかし、アミノグルテチドは、他のＰ４５０依存性酵素に対する抑制効果のスペクトルが広いため、多数の望ましくない副作用を示し、その最初の構造を改善する試みから、臨床治験段階に入りつつある多数の非ステロイド化合物１５が生まれた。その最新世代から、酵素に対する高い効力と高い選択性とを併せもち、より良好な許容性も有するレトロゾールなどの化合物が開発された。
【００１５】
【化１６】
2006521338.tif 000004
いろいろな種類のアロマターゼ阻害薬の構造。第Ｉ世代  アミノグルテチミド（ＡＧ）、第ＩＩＩ世代、レトロゾール
伝統的に、アロマターゼ阻害薬は、疾患がタモキシフェンではもはや制御されない進行ＨＤＢＣ患者の第二線治療法とされ、すぐには使用されない。しかし、最新のアロマターゼ阻害薬のいくつかのものの極めて良好な毒性プロフィルを契機として、ＨＤＢＣに対する第一線治療法としての適格性を評価するために、臨床治験が最近行なわれた。
【００１６】
過去１０年間にわたって、酵素アロマターゼの阻害だけでは、ＨＤＢＣにつながるエストロゲン刺激を有効に低下させることはできないという強力な証拠が、生化学および臨床の両面で表れた。その理由は、エストロゲン生合成に他の経路が関与していたのである。スルファターゼ活性によって、アロマターゼ活性より１０倍多いエストロンが供給されることが見いだされたので、今ではスルファターゼ経路が乳房腫瘍エストロゲン合成の主経路であると考えられている１６。
【００１７】
スルファターゼ経路では、エストロゲンは簡単に利用できる前駆物質エストロン−硫酸エステルから、二つの酵素（下記スキーム）、すなわちエストロン−硫酸エステルをエストロンに加水分解するエストロンスルファターゼ（ＳＴＳ）、およびエストロンをエストラジオールに還元する１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）によって合成される。これらの二つの酵素が、エストロゲン妨害戦略の最新の標的の代表である。
【００１８】
【化１７】
2006521338.tif 000005
正常乳房細胞および腫瘍乳房細胞中のエストロゲン類の起源、ＡＲ  アロマターゼ、ＳＴ  ステロイドスルフォトランスフェラーゼ、ＳＴＳ  ステロイドスルファターゼ、１７β−ＨＳＤ  １７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ、３β−ＩＳ  ３β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼΔ５、Δ４−イソメラーゼ、ＥＲ  エストロゲン受容体
エストロンスルファターゼに対して、いくつかの強力な阻害剤が特定された。それらは、すべて、酵素基質であるエストロン−硫酸エステルのフェノール性Ａ環をミミックする置換基を有する芳香族環という一般的な構造的特徴を共有する。ステロイド阻害剤の開発では、非常にさまざまな化学基がＣ３に導入され、その中で３−Ｏ−スルファミン酸エステルがエストロン分子に対して最も強力であることが見いだされた。その結果得られた化合物エストロン−３−Ｏ−スルファミン酸エステル（下式）から、ＳＴＳの強力な阻害に必要な活性ファルマコフォアとして、アリール−Ｏ−スルファミン酸エステル構造が特定された。ＥＭＡＴＥは、時間および濃度に依存してステロイドスルファターゼ活性を阻害する１７ことが示され、経口投与で生体活性であった１８。しかし、ＥＭＡＴＥは、高度にエストロゲン様であることが明らかになり、そのためｈＥＲに対する作動薬活性が欠損しているＳＴＳ抑制剤を設計する必要が明らかになった。
【００１９】
活性なステロイド核に付随する問題を回避するため、非ステロイド系阻害剤が合成された。活性ファルマコフォアが保存されている４−メチルクマリン−７−Ｏ−スルファミン酸エステル（ＣＯＵＭＡＴＥ、下式）などのクマリンスルファミン酸エステルは、特定された非ステロイド系の最初の阻害剤の中にあった１９。ＣＯＵＭＡＴＥは、効力ではＥＭＡＴＥに劣るが、非エストロゲン様である利点を有する２０。いくつかの三環クマリン系スルファミン酸エステルも開発され、非エストロゲン様特性を保持しながらもＣＯＵＭＡＴＥよりはるかに効力が強い２１ことが判明した。現在、インビトロで効力がＥＭＡＴＥより約３倍強い６６７ＣＯＵＭＡＴＥが前臨床試験段階２２にある。
【００２０】
【化１８】
2006521338.tif 000006
ステロイドスルファターゼ阻害剤ＥＭＡＴＥ、ＣＯＵＭＡＴＥおよび６６７ＣＯＵＭＡＴＥの構造
国際出願ＰＣＴ／ＧＢ９２／０１５８７号明細書には、新規なステロイドスルファターゼ阻害剤およびそれらを含有するエストロン依存性腫瘍、特に乳癌の治療用の医薬品組成物が教示されている。これらのステロイドスルファターゼ阻害剤は、Ｎ，Ｎ−ジメチルエストロン−３−スルファミン酸エステルおよび、好ましくはエストロン−３−スルファミン酸エステル（ＥＭＡＴＥ）などのスルファミン酸エステルである。ＥＭＡＴＥは、０．１ｍＭでＭＣＦ−７健常細胞中のＥ１−ＳＴＳ活性の９９％を超える阻害率を示す強力なＥ１−ＳＴＳ阻害剤であることが知られている。ＥＭＡＴＥは、Ｅ１−ＳＴＳ酵素を時間および濃度依存性様式でも阻害し、活性部位指向不活性化剤として作用することが示唆される。ＥＭＡＴＥは、本来Ｅ１−ＳＴＳの阻害のために設計されたが、エストロゲンステロイドであるアンドロステンジオールの生合成を調節する上で中心的な役割を果たすと考えられる酵素であるデヒドロエピアンドロステロンスルファターゼ（ＤＨＡ−ＳＴＳ）も阻害する。現在では、アンドロステンジオールが乳房腫瘍増殖の促進因子としてさらに重要である可能性さえ示唆する証拠もある。ＥＭＡＴＥは、経口または皮下のどちらかで投与されると、ラット肝臓Ｅ１−ＳＴＳ（９９％）およびＤＨＡ−ＳＴＳ（９９％）というほとんど完全な阻害活性を示すので、生体内でも活性である。さらに、ＥＭＡＴＥは、ラットで記憶増強効果を有することが示された。マウスでの研究によって、ＤＨＡ−ＳＴＳ活性と免疫応答系の一部分の制御との間の関連が示唆された。これはヒトでも起こり得ると考えられる。ＥＭＡＴＥのスルファミン酸エステル部分の橋かけＯ原子が阻害活性にとって重要である。従って、エストロン−３−Ｎ−スルファミン酸エステルおよびエストロン−３−Ｓ−スルファミン酸エステルのように、３−Ｏ−原子を他のヘテロ原子で置換すると、これらの類似物は、効力のより弱い非時間依存性不活性化剤になる。
【００２１】
Ｅ１−ＳＴＳ阻害の最適な効力がＥＭＡＴＥで達成されてしまった可能性はあるが、スルファターゼ阻害に際してエストロンが放出され、ＥＭＡＴＥおよびそのエストラジオール同属種はエストロゲン様活性を具えている可能性がある。
【００２２】
エストロゲンおよびアンドロゲン生合成の最終段階を触媒する１７β−ＨＳＤも、エストロゲン妨害戦略の標的であるように見える。この酵素は、ステロイドの酸化形（低活性）と還元形（高活性）との相互変換を引き起こす。その活性は、エストロンをエストラジオール２５に有利に還元するので、エストロゲン依存腫瘍の増殖および発達を直接支援するが、アンドロゲンＤＨＥＡのアンドロステンジオール（Ａジオール）への変換を介して副次的に支援する。Ａジオールは、エストロゲン様の性質を有し、エストロゲン受容体に結合できることが最近証明された２６。
【００２３】
１７β−ＨＳＤは、アイソエンザイムのファミリーに属し、これまでのところ１１種類が特定され、クローン化されている２７。それぞれのタイプが選択的基質親和性および特異的活性を有する。これは、薬物作用の選択性を実現しなければならないことを意味する。１７β−ＨＳＤタイプ１は、エストロンとエストラジオールとの相互変換を触媒するアイソタイプである。
【００２４】
ＳＴＳ阻害剤とは異なり、小数の１７β−ＨＳＤ阻害剤だけが報告されている。１７β−ＨＳＤタイプ１のためのステロイド阻害剤のほとんどは、共通してＤ環修飾構造を有する。良好な脱離基を有する側鎖を１６α−位に備えるエストラジオール誘導体は、強力な種類の阻害剤であることが示された。特に、側鎖が酵素の活性部位の求核性アミノ酸残基に対して高い反応性を示す１６α−（ブロモアルキル）−エストラジオール２８は、有望な不可逆阻害剤であることが見いだされた。１６−位に短いブロモアルキル部分を含む類似体が最も高い活性を示し、この系列の中で１６α−（ブロモプロピル）−エストラジオール、次いで１６α−（ブロモブチル）−エストラジオール（３および４）が最も強力であった。しかし、これらの化合物はエストロゲン受容体の純作動薬であることが判明した。
【００２５】
【化１９】
2006521338.tif 000007
１７β−ＨＳＤタイプ１阻害剤  １６α−（ブロモプロピル）−エストラジオール  ３、１６α−（ブロモプロピル）−エストラジオール、４およびフラボン誘導体アピゲニン
強力な阻害剤の固有エストロゲン活性を取り除き、あわよくば同時に抗エストロゲン性を分子に組み込む試みとして、既知の抗エストロゲン薬ＩＣＩ１６４３８４のＣ７α−アルキルアミド側鎖を有するいくつかの１６α−（広範な置換）−エストラジオール誘導体が合成された２９。しかし、むしろ貧弱な１７β−ＨＳＤタイプ１の阻害しか得られず、エストロゲン活性および抗エストロゲン性は、それぞれ完全に消失することも導入されることもなかった。
【００２６】
並行して、１７β−ＨＳＤタイプ１の非ステロイド阻害剤が設計された。構造的にエストロゲンに類似するフラボノイドは、エストロゲン受容体に結合して、エストロゲンまたは抗エストロゲン活性を有する３０。アロマターゼ活性に対するそれらの作用は、十分詳細に記録されており、最近の研究では、１７β−ＨＳＤタイプ１によって触媒されるエストロンのエストラジオールへの変換を低下させることが見いだされた３１。阻害濃度でエストロゲン様になることなく、１７β−ＨＳＤタイプ１に対して若干の阻害活性を有する有望な化合物として、アピゲニンなどのフラボン誘導体が、ＳＡＲ研究から登場した３２。
【００２７】
Ａｈｍｅｄら（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９９年１月２７日、２５４巻（３号）８１１〜５頁）は、ＳＴＳのステロイドおよび非ステロイド阻害剤の構造活性相関研究について報告している。
【００２８】
エストラジオール１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ｅ２ＨＳＤ）などのステロイドデヒドロゲナーゼ（ＤＨ）は、エストロゲン受容体と相互作用するリガンドの利用しやすさを調節する上で中心的な役割を果たしている。Ｅ２ＨＳＤタイプＩは、エストロン（Ｅ１）を生物的に活性なエストロゲン、エストラジオール（Ｅ２）に還元し、一方Ｅ２ＨＳＤタイプＩＩは、Ｅ２のＥ１への酸化を触媒することによって、Ｅ２を不活性化する。従って、ＤＨ阻害活性を有する化合物、特にＥ２ＨＳＤタイプＩの阻害剤の特定は、Ｅ２の生成を阻害して治療上の価値を有する可能性がある。
【００２９】
（本発明の様相の要約）
本発明は、有効な１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）阻害剤として作用できる新規な化合物を提供する。本発明は、本出願の化合物が、有効な１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）阻害剤であることを明らかにする。
【００３０】
図１は、硫酸エストロンおよびエストラジオールからのエストロンのインサイチュ合成に関与する酵素のいくつかを示す。「ＳＴＳ」は、エストロンスルファターゼを示し、「Ｅ２ＤＨタイプＩ」は、エストラジオール１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼタイプ１、またはエストラジオール１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼタイプ１、３、５および／または７を示し、「Ｅ２ＤＨタイプＩＩ」は、エストラジオール１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼタイプＩＩ、またはエストラジオール１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼタイプ２および／または８を示す。
【００３１】
図から明らかなように、エストロゲンの周辺合成に関与する二つの酵素は、酵素エストラジオール１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼおよび酵素エストロンスルファターゼである。
【００３２】
エストロゲンのインサイチュ合成は、腫瘍におけるエストロゲンの高いレベルに重要な寄与をすると考えられ、従ってエストロゲン生合成の特異的阻害剤は、内分泌依存腫瘍の治療に潜在的な価値を有する。
【００３３】
さらに、たとえ、悪性乳房および子宮内膜組織において、スルファターゼ経路を経るエストロゲン生成がエストロゲンの高い濃度に主要な寄与をしているとしても、エストロゲンの生体内合成に寄与する他の酵素経路は、他にもある。
【００３４】
従って、これらの癌の治療のための新しい治療法を開発する緊急な必要がある。
【００３５】
従って、本発明は、乳癌および子宮内膜癌を治療する先行技術の方法に付随する一つ以上の問題を克服することを目的とする。
【００３６】
従って、一つの様相では、本発明は、ステロイドデヒドロゲナーゼ経路、すなわちエストロンをエストラジオールに、およびエストラジオールをエストロンに変換する経路を実質的に阻害するか、または該経路に影響を及ぼす薬物の調製のための化合物の使用を提供する。
【００３７】
本発明のこの様相は、一つの種類の化合物の投与によってエストロンからのエストラジオールの合成を妨害することが可能なので、有利である。従って、本発明は、特に乳癌および子宮内膜癌を治療するために、多くの治療上の利点を有する化合物を提供する。
【００３８】
本発明の化合物は、他の置換基を含むことがある。これらの他の置換基は、例えば、本発明の化合物の活性をさらに高めることがあり、および／または安定性（エクスビボおよび／または生体内）を高めることがある。
【００３９】
（本発明の詳細な様相）
本発明の一つの様相によれば、式Ｉ
【００４０】
【化２０】
2006521338.tif 000008
を有する化合物が提供される。式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、なお、Ｒ２が水素結合を形成できるのはこのときであり、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はＣ１〜１０以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基であって、該アリール基は置換されているアルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）分岐アルケニル、
（ｉｘ）アルキル−アルコール基、
（ｘ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【００４１】
【化２１】
2006521338.tif 000009
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに、
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分枝アルキル基、およびアミドの一つで置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００４２】
【化２２】
2006521338.tif 000010
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００４３】
本発明の一つの様相によれば、１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）に関連する状態あるいは疾患の治療に用いられる薬物の製造における化合物の使用が提供される。ここで、前記化合物は式Ｉ
【００４４】
【化２３】
2006521338.tif 000011
の化合物であり、式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はメチル基以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）カルボン酸エステルであって、（ａ）Ｒ３は＝Ｏであり、および／または（ｂ）前記エステルは、−ＣＯ２Ｘ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｘおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｘから選ばれ、ここでＸはヒドロカルビル基であるカルボン酸エステル、
（ｉｘ）ＣＯ２Ｈ基またはアルキル−ＣＯ２Ｈ基であって、アルキルはＣＨ２またはＣＨ２ＣＨ２基であるＣＯ２Ｈ基またはアルキル−ＣＯ２Ｈ基、
（ｘ）分岐アルケニル、
（ｘｉ）アルキル−アルコール基あるいはアルケニル−アルコール基、
（ｘｉｉ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉｖ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【００４５】
【化２４】
2006521338.tif 000012
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいは、Ｒ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００４６】
【化２５】
2006521338.tif 000013
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００４７】
本発明の一つの様相によれば、１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）に関連する状態あるいは疾患の治療に用いられる薬物の製造における化合物の使用が提供される。ここで、前記化合物は、式Ｉ
【００４８】
【化２６】
2006521338.tif 000014
の化合物であり、式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、なお、Ｒ２が水素結合を形成できるのはこのときであり、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はＣ１〜１０以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基であって、該アリール基は置換されているアルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）分岐アルケニル、
（ｉｘ）アルキル−アルコール基、
（ｘ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二基置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに
【００４９】
【化２７】
2006521338.tif 000015
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分枝アルキル基、およびアミドの一つで置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００５０】
【化２８】
2006521338.tif 000016
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００５１】
本発明の一つの様相によれば、式Ｉ
【００５２】
【化２９】
2006521338.tif 000017
を有する化合物を含む医薬品組成物が提供される。式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、なお、Ｒ２が水素結合を形成できるのはこのときであり、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はＣ１〜１０以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基であって、該アリール基は置換されているアルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）分岐アルケニル、
（ｉｘ）アルキル−アルコール基、
（ｘ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二基置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【００５３】
【化３０】
2006521338.tif 000018
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分枝アルキル基、およびアミドの一つで置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００５４】
【化３１】
2006521338.tif 000019
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
オプションとして、
薬学上許容される担体、希釈剤、医薬品添加物またはアジュバントと混合される−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００５５】
本発明の一つの様相によれば、式Ｉ
【００５６】
【化３２】
2006521338.tif 000020
を有する化合物が提供される。式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、なお、Ｒ２が水素結合を形成できるのはこのときであり、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はＣ１〜１０以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基であって、該アリール基は置換されているアルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）分岐アルケニル、
（ｉｘ）アルキル−アルコール基、
（ｘ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二基置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【００５７】
【化３３】
2006521338.tif 000021
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分枝アルキル基、およびアミドの一つで置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００５８】
【化３４】
2006521338.tif 000022
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
医療で用いられる−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００５９】
本発明の一つの様相によれば、有害１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）レベルに関連する状態または疾患の治療に用いられる薬物の製造における化合物の使用が提供される。ここで前記化合物は、式Ｉ
【００６０】
【化３５】
2006521338.tif 000023
の化合物である。式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、なお、Ｒ２が水素結合を形成できるのはこのときであり、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はＣ１〜１０以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基であって、該アリール基は置換されているアルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）分岐アルケニル、
（ｉｘ）アルキル−アルコール基、
（ｘ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二基置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【００６１】
【化３６】
2006521338.tif 000024
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ、
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分枝アルキル基、およびアミドの一つで置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００６２】
【化３７】
2006521338.tif 000025
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００６３】
本発明の一つの様相によれば、式Ｉ
【００６４】
【化３８】
2006521338.tif 000026
を有する化合物の使用が提供される。式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、なお、Ｒ２が水素結合を形成できるのはこのときであり、
（ｉｉｉ）アルキルアリール基であって、該アリール基はＣ１〜１０以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基であって、該アリール基は置換されているアルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）分岐アルケニル、
（ｉｘ）アルキル−アルコール基、
（ｘ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二基置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【００６５】
【化３９】
2006521338.tif 000027
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分枝アルキル基、およびアミドの一つで置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００６６】
【化４０】
2006521338.tif 000028
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）活性を阻害する医薬品の製造における−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００６７】
本発明の一つの様相によれば、患者の体内における１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）活性を、必要とされるときに、阻害する方法が提供される。前記方法は、式Ｉ
【００６８】
【化４１】
2006521338.tif 000029
を有する化合物を投与することを含む。式中、
（Ｉ）Ｒ１は、
（ｉ）アルキルオキシアルキル基、
（ｉｉ）ニトリル基、
（ＩＩＩ）アルキルアリール基であって、該アリール基はメチル基以外によって置換されているアルキルアリール基、
（ｉｖ）アルケニルアリール基、
（ｖ）アルキルヘテロアリール基であって、ヘテロアリール基が環の中にＣおよびＮだけを含むとき、該アリール基はメチル基以外によって置換されているものとするアルキルヘテロアリール基、
（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、
（ｖｉｉ）＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、
（ｖｉｉｉ）カルボン酸エステルであって、（ａ）Ｒ３は、＝Ｏであり、および／または（ｂ）前記エステルは、−ＣＯ２Ｘ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｘおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｘから選ばれ、ここでＸはヒドロカルビル基であるカルボン酸エステル、
（ｉｘ）ＣＯ２Ｈ基またはアルキル−ＣＯ２Ｈ基であって、アルキルはＣＨ２またはＣＨ２ＣＨ２基であるＣＯ２Ｈ基またはアルキル−ＣＯ２Ｈ基、
（ｘ）分岐アルケニル、
（ｘｉ）アルキル−アルコール基あるいはアルケニル−アルコール基、
（ｘｉｉ）アミドまたはアルキルアミドであって、（ａ）前記アルキルアミドのアルキルは−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）前記アミドは二基置換であり、および／または（ｃ）前記アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されているアミドまたはアルキルアミド、
（ｘｉｖ）−ＣＨＯであって、Ｒ１はＲ３とともに式
【００６９】
【化４２】
2006521338.tif 000030
のエノール互変異性体を提供する−ＣＨＯ
から選ばれるか、あるいはＲ１はＲ３とともに
（ｘｉｉ）ピラゾールであって、（ａ）Ｒ４は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であり、（ｂ）前記ピラゾールは置換され、および／または（ｃ）ステロイド環２−位は−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビルから選ばれる基で置換されているものとする、ピラゾール、
（ｘｉｉｉ）式
【００７０】
【化４３】
2006521338.tif 000031
の化合物を提供するヘテロアリール環
を形成し、
（ＩＩ）Ｒ２は、
水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基
から選ばれ、
（ＩＩＩ）Ｒ３は、
−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物
から選ばれる。
【００７１】
（いくつかの利点）
本発明の一つの主な利点は、本発明の化合物が、１７β−ＨＳＤ阻害剤として作用できることである。
【００７２】
本発明の化合物の別の利点は、それらの化合物が、生体内で強力なことである。
【００７３】
本発明の化合物のいくつかは、非エストロゲン様化合物のことがある。ここで、用語「非エストロゲン様」は、エストロゲン活性をまったく示さないか、または実質的に示さないことを意味する。
【００７４】
別の利点は、これらの化合物のいくつかは、代謝されて、ホルモン活性を示すかまたはホルモン活性を誘導する化合物に変わることができないことである。
【００７５】
本発明の化合物のいくつかは、経口で活性なことがある点でも有利である。
【００７６】
本発明の化合物のいくつかは、乳癌などの癌、ならびに（または、あるいは）自己免疫疾患の予防などの非悪性状態の治療に、特に早期年齢から医薬品を投与する必要があるときに有用なことがある。
【００７７】
従って、本発明の化合物のいくつかは、自己免疫疾患の治療など、内分泌依存癌の治療目的以外の用途も有すると考えられる。
【００７８】
参照を容易にするために、次に、本発明のこれらの様相およびさらに別の様相を、適切なセクション標題の下で考察する。しかし、各セクションの教示は、必ずしもそれぞれの特定のセクションに限定されない。
【００７９】
（さらに別の様相／好ましい様相）
本明細書で用いられる用語「水素結合を形成できる」は、水素結合の一部を形成できる負電荷の領域を有する基を意味する。
【００８０】
本明細書で用いられる用語「ヒドロカルビル基」は、少なくともＣおよびＨを含み、オプションとして一つ以上のその他の適当な置換基を含むことがある基を意味する。そのような置換基の例は、ハロ、アルコキシ、ニトロ、アルキル基、環状基等を含むことがある。置換基が環状基である可能性に加えて、置換基の組み合わせが環状基を形成することがある。ヒドロカルビル基が二つ以上のＣを含むなら、それらの炭素は必ずしも互いに結合している必要はない。例えば、これらの炭素の少なくとも二つが適当な元素または基を介して結合していることがある。従って、ヒドロカルビル基はヘテロ原子を含むことがある。適当なヘテロ原子は当業者にとって自明であり、例えば、硫黄、窒素および酸素を含む。ヒドロカルビル基の非限定的な例は、アシル基である。
【００８１】
一般的なヒドロカルビル基は、炭化水素基である。ここで、用語「炭化水素」は、直鎖状、分岐状または環状またはアリール基のことがあるアルキル基、アルケニル基、アルキニル基の任意のものを意味する。炭化水素という用語は、オプションとして置換された場合以外の基も含む。炭化水素が置換基（単数または複数）を有する分岐構造なら、置換は、炭化水素主鎖上または側鎖上のどちらかのことがあり、あるいは、置換は、炭化水素主鎖上および側鎖上のことがある。
【００８２】
本発明のいくつかの様相では、ヒドロカルビル基は、置換される場合があるアルキル基、置換される場合があるハロアルキル基、アリール基、アルキルアリール基、アルキルアリールアルキル基およびアルケン基から選ばれる。
【００８３】
本発明のいくつかの様相では、ヒドロカルビル基は、置換される場合があるアルキル基である。
【００８４】
本発明のいくつかの様相では、ヒドロカルビル基は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基およびＣ１〜Ｃ３アルキル基などのＣ１〜Ｃ１０アルキル基から選ばれる。一般的なアルキル基は、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ３アルキル、Ｃ４アルキル、Ｃ５アルキル、Ｃ７アルキルおよびＣ８アルキルを含む。
【００８５】
本発明のいくつかの様相では、ヒドロカルビル基は、Ｃ１〜Ｃ１０ハロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル基、Ｃ１〜Ｃ１０ブロモアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６ブロモアルキル基およびＣ１〜Ｃ３ブロモアルキル基から選ばれる。一般的なハロアルキル基は、Ｃ１ハロアルキル、Ｃ２ハロアルキル、Ｃ３ハロアルキル、Ｃ４ハロアルキル、Ｃ５ハロアルキル、Ｃ７ハロアルキル、Ｃ８ハロアルキル、Ｃ１ブロモアルキル、Ｃ２ブロモアルキル、Ｃ３ブロモアルキル、Ｃ４ブロモアルキル、Ｃ５ブロモアルキル、Ｃ７ブロモアルキルおよびＣ８ブロモアルキルを含む。
【００８６】
本発明のいくつかの様相では、ヒドロカルビル基は、アリール基、アルキルアリール基、アルキルアリールアルキル基、−（ＣＨ２）１〜１０−アリール、−（ＣＨ２）１〜１０−Ｐｈ、（ＣＨ２）１〜１０−Ｐｈ−Ｃ１〜１０アルキル、−（ＣＨ２）１〜５−Ｐｈ、（ＣＨ２）１〜５−Ｐｈ−Ｃ１〜５アルキル、−（ＣＨ２）１〜３−Ｐｈ、（ＣＨ２）１〜３−Ｐｈ−Ｃ１〜３アルキル、−ＣＨ２−Ｐｈおよび−ＣＨ２−Ｐｈ−Ｃ（ＣＨ３）３から選ばれる。
【００８７】
ヒドロカルビル基がアリール基であるとき、またはアリール基を含むとき、このアリール基またはこれらのアリール基の一つ以上は、ヘテロ原子を含むことがある。従って、このアリール基またはこれらのアリール基の一つ以上は、炭素環化合物または複素環のことがある。一般的なヘテロ原子は、Ｏ、ＮおよびＳ、特にＮを含む。
【００８８】
本発明のいくつかの様相では、ヒドロカルビル基は、−（ＣＨ２）１〜１０−シクロアルキル、−（ＣＨ２）１〜１０−Ｃ３〜１０シクロアルキル、−（ＣＨ２）１〜７−Ｃ３〜７シクロアルキル、−（ＣＨ２）１〜５−Ｃ３〜５シクロアルキル、−（ＣＨ２）１〜３−Ｃ３〜５シクロアルキルおよび−ＣＨ２−Ｃ３シクロアルキルから選ばれる。
【００８９】
本発明のいくつかの様相では、ヒドロカルビル基は、アルケン基である。一般的なアルケン基は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６またはＣ７アルケン基などのＣ１〜Ｃ１０アルケン基、Ｃ１〜Ｃ６アルケン基、Ｃ１〜Ｃ３アルケン基を含む。好ましい様相では、アルケン基は、１個、２個または３個のＣ＝Ｃ結合を含む。好ましい様相では、アルケン基は、１個のＣ＝Ｃ結合を含む。いくつかの好ましい様相では、少なくとも一つのＣ＝Ｃ結合、または唯一のＣ＝Ｃ結合は、アルケン鎖の末端Ｃにある。すなわち、この結合は環構造に対して側鎖の遠位端にある。
【００９０】
（環構造）
本化合物がステロイド環構造を含むこと、またはステロイド環構造にもとづくこと／ステロイド環構造から導かれることは、当業者には明らかであろう。当分野において公知のように、古典的なステロイド環構造は一般式
【００９１】
【化４４】
2006521338.tif 000032
を有する。
【００９２】
上記の式では、通常の方式によって環に記号を付けた。
【００９３】
バイオ同配体の例は、環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤの任意の一つ以上が複素環のとき、および／または、環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤの任意の一つ以上が置換されたとき、および／または、環Ａ、Ｂ、ＣおよびＤの任意の一つ以上が修飾されたときであるが、これらのバイオ同配体がステロイド的な性質を有する場合である。
【００９４】
この点に関して、本発明の環構造は、ステロイド環構造に類似し、ステロイド環構造のバイオ同配体のことがある。
【００９５】
本多環構造の構造は、
【００９６】
【化４５】
2006521338.tif 000033
のように表すことができる。ここで、各環Ａ′、Ｂ′およびＣ′は、独立に、複素環または非複素環を表し、各環は、独立に、置換、非置換、飽和または非飽和のことがある。
【００９７】
例として、環Ａ′、Ｂ′、Ｃ′およびＤ′の任意の一つ以上は、独立に、例えばアルキル基、アリール基、ヒドロキシ基、ハロ基、ヒドロカルビル基、オキシヒドロカルビル基等の適当な基で置換されることがある。
【００９８】
Ａ′、Ｂ′およびＣ′の少なくとも一つは、複素環基（複素環）または非複素環基のことがある。
【００９９】
Ａ′、Ｂ′、Ｃ′およびＤ′の少なくとも一つは、飽和環構造または不飽和環構造（アリール基など）のことがある。
【０１００】
好ましくは、Ａ′、Ｂ′、Ｃ′およびＤ′の少なくとも一つはアリール環である。
【０１０１】
好ましくは、本化合物は、すべての置換基を含んで、約５０個を超えない炭素原子、より普通には約３０から４０個を超えない炭素原子を含む。
【０１０２】
Ｄ′の例は、５員環または６員環である。
【０１０３】
本発明の化合物の基礎を形成する好ましいステロイド核環Ａ′〜Ｄ′は、以下の化合物の環Ａ〜Ｄを含む。すなわち、
（エストロン類および置換エストロン類）すなわち、
エストロン                              １６β−ＯＨ−エストロン
４−ＯＨ−エストロン                    １７−デオキシエストロン
６α−ＯＨ−エストロン                  ２−ＯＨ−エストロン
７α−ＯＨ−エストロン                  ２−ＭｅＯ−エストロン
１６α−ＯＨ−エストロン                エストロン
（エストラジオール類および置換エストラジオール類）すなわち、
４−ＯＨ−１７β−エストラジオール      １６β−ＯＨ−１７β−エストラジオール
６α−ＯＨ−１７β−エストラジオール    １７α−エストラジオール
７α−ＯＨ−１７β−エストラジオール    １７β−エストラジオール
４−ＯＨ−１７α−エストラジオール      １７α−エチニル−１７β−エストラジオール
６α−ＯＨ−１７α−エストラジオール    １７β−エチニル−１７α−エストラジオール
７α−ＯＨ−１７α−エストラジオール    １７−デオキシエストラジオール
１６α−ＯＨ−１７α−エストラジオール  ２−ＯＨ−１７α−エストラジオール
１６α−ＯＨ−１７β−エストラジオール  ２−ＯＨ−１７β−エストラジオール
１６β−ＯＨ−１７α−エストラジオール  ２−ＭｅＯ−１７α−エストラジオール
２−ＭｅＯ−１７β−エストラジオール
（エストリオール類および置換エストリオール類）すなわち、
エストリオール                          １７−デオキシエストリオール
４−ＯＨ−エストリオール                ２−ＯＨ−エストリオール
６α−ＯＨ−エストリオール              ２−ＭｅＯ−エストリオール
７α−ＯＨ−エストリオール
（デヒドロエピアンドロステロンおよび置換デヒドロエピアンドロステロン）すなわち、
デヒドロエピアンドロステロン類            １６α−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン
６α−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン  １６β−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン
７α−ＯＨ−デヒドロエピアンドロステロン  ５−アンドロステンジオール
本発明の一つの好ましい様相では、本化合物は式ＩＩ
【０１０４】
【化４６】
2006521338.tif 000034
の化合物である。
【０１０５】
本発明の一つの好ましい様相では、本化合物は式ＩＩＩ
【０１０６】
【化４７】
2006521338.tif 000035
の化合物である。
【０１０７】
本発明の一つの好ましい様相では、本化合物は式ＩＶ
【０１０８】
【化４８】
2006521338.tif 000036
の化合物である。
【０１０９】
（Ｒ１）
（アルキルオキシアルキル基）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルキルオキシアルキル基である。
【０１１０】
アルキルオキシアルキル基は、−アルキル−Ｏ−アルキル基である。
【０１１１】
この基の各アルキルは、好ましくは独立に、１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１、２または３個の炭素を有する。
【０１１２】
この基の各アルキルは、独立に、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、一つのアルキルまたは各アルキルは直鎖である。
【０１１３】
特に好ましいアルキルオキシアルキル基は、−ＥｔＯＥｔ、−ＥｔＯＭｅ、−ＭｅＯＥｔおよび−ＭｅＯＭｅである。
【０１１４】
（ニトリル基）
本発明の一つの好ましい様相では、Ｒ１はニトリル基のことがあり、あるいはニトリル基を含むことがある。ニトリル基は、−Ｃ≡Ｎ基を意味するものとする。
【０１１５】
本発明の一つの好ましい様相では式ＩのＲ１は、ニトリル基である。
【０１１６】
一つの好ましい様相では、Ｒ１がニトリル基のとき、Ｒ２は−ＯＨである。
【０１１７】
一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１はニトリル基であり、Ｒ２は−ＯＨである。
【０１１８】
（アルキルアリール基）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルキルアリール基である。
【０１１９】
アルキルアリール基は、アルキル−アリールで示される基を意味するものとする。
【０１２０】
アルキル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有する。
【０１２１】
アルキル基は、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、アルキル基は直鎖である。
【０１２２】
アリール基は、一般に６員環を有する。
【０１２３】
アリール基は、置換されている。好ましい様相では、アルキルアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、アルコキシ、ニトロ（−ＮＯ２−）、ニトリルおよびアザアルキル基から選ばれる基で置換される。
【０１２４】
好ましくは、Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、−Ｎ（Ｃ１〜１０アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１〜５アルキル）２、または−Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）２である。特に好ましいのは、ＮＭｅ２である。
【０１２５】
好ましくは、アルコキシ基は、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜５アルコキシおよびＣ１〜３アルコキシである。特に好ましいのは、メトキシである。
【０１２６】
非常に好ましい様相では、アルキルアリール基は−ＣＨ２−Ｐｈである。
【０１２７】
（アルケニルアリール基）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルケニルアリール基である。
【０１２８】
アルキルアリール基は、アルケニル−アリールで示される基を意味するものとする。
【０１２９】
本発明の一つの好ましい様相では、本使用または本方法において、アルケニルアリール基のアリール基は、置換されている。
【０１３０】
アルケニル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有する。
【０１３１】
アルケニル基は、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、アルケニル基は直鎖である。
【０１３２】
アリール基は、一般に６員環を有する。
【０１３３】
アリール基は、置換されている。好ましい様相では、アルキルアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、アルコキシ、ニトロ（−ＮＯ２−）、ニトリルおよびアザアルキル基から選ばれる基によって置換される。
【０１３４】
好ましくは、Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、−Ｎ（Ｃ１〜１０アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１〜５アルキル）２、または−Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）２である。特に好ましいのは、ＮＭｅ２である。
【０１３５】
好ましくは、アルコキシ基は、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜５アルコキシおよびＣ１〜３アルコキシである。特に好ましいのは、メトキシである。
【０１３６】
非常に好ましい様相では、アルキルアリール基は＝ＣＨ−Ｐｈである。
【０１３７】
（アルキルヘテロアリール基）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルキルへテロアリール基である。
【０１３８】
アルキル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有する。
【０１３９】
アルキル基は、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、アルキル基は直鎖である。
【０１４０】
アリール基は、一般に６員環を有する。
【０１４１】
ヘテロアリール基は、炭素およびヘテロ原子を含む。一般的なヘテロ原子は、Ｏ、ＮおよびＳ、特にＮを含む。
【０１４２】
アリール基は置換、非置換のことがある。好ましくは、アリール基は、置換されている。好ましい様相では、アルキルアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、アルコキシ、ニトロ（−ＮＯ２−）、ニトリルおよびアザアルキル基から選ばれる基で置換される。
【０１４３】
好ましくは、Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、−Ｎ（Ｃ１〜１０アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１〜５アルキル）２、または−Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）２である。特に好ましいのは、ＮＭｅ２である。
【０１４４】
好ましくは、アルコキシ基は、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜５アルコキシおよびＣ１〜３アルコキシである。特に好ましいのは、メトキシである。
【０１４５】
非常に好ましい様相では、アルキルヘテロアリール基は
【０１４６】
【化４９】
2006521338.tif 000037
から選ばれる。
【０１４７】
（アルケニルヘテロアリール基）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルケニルへテロアリール基である。一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルケニルヘテロアリール基であり、該アリール基は、置換されている。好ましくは、式ＩのＲ１は、アルケニルヘテロアリール基であり、該アリール基は、非置換である。
【０１４８】
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルキルへテロアリール基である。
【０１４９】
アルケニル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有する。
【０１５０】
アルケニル基は、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、アルケニル基は直鎖である。
【０１５１】
アリール基は、一般に６員環を有する。
【０１５２】
ヘテロアリール基は、炭素およびヘテロ原子を含む。一般的なヘテロ原子は、Ｏ、ＮおよびＳ、特にＮを含む。
【０１５３】
アリール基は置換、または非置換のことがある。好ましくは、アリール基は、置換されている。好ましい様相では、アルキルアリール基のアリール基は、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、アルコキシ、ニトロ（−ＮＯ２−）、ニトリルおよびアザアルキル基から選ばれる基で置換される。
【０１５４】
好ましくは、Ｎ，Ｎ−ジアルキルは、−Ｎ（Ｃ１〜１０アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１〜５アルキル）２、または−Ｎ（Ｃ１〜３アルキル）２である。特に好ましいのは、ＮＭｅ２である。
【０１５５】
好ましくは、アルコキシ基は、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜５アルコキシおよびＣ１〜３アルコキシである。特に好ましいのは、メトキシである。
【０１５６】
非常に好ましい様相では、アルキルヘテロアリール基は
【０１５７】
【化５０】
2006521338.tif 000038
から選ばれる。
【０１５８】
（オキシム基（＝Ｎ−Ｏ−アルキルまたは＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基））
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、オキシム基、すなわち＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基である。
【０１５９】
好ましくは、オキシム基は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基である。
【０１６０】
一つの好ましい様相では、Ｒ１が＝Ｎ−Ｏ−アルキル基および＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれるとき、Ｒ３は＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基である。
【０１６１】
アルキル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有する。
【０１６２】
アルキル基は、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、アルキル基は直鎖である。
【０１６３】
驚くべきことに、Ｒ３が＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であるとき、Ｒ４が＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基であるなら、Ｒ１は＝Ｎ−Ｏ−アルキルまたは＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基でなくてもよいことも見いだした。Ｒ３およびＲ４が独立に＝Ｎ−Ｏ−アルキルおよび＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれるとき、１７β−ＨＳＤ阻害剤が提供されることがあることを見いだした。従って、本発明のさらに別の様相は
式Ｖ
【０１６４】
【化５１】
2006521338.tif 000039
（式中、Ｒ３およびＲ４は独立に、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれる）を有する化合物、
１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）に関連する状態あるいは疾患の治療に用いられる薬物の製造における式Ｖ
【０１６５】
【化５２】
2006521338.tif 000040
（式中、Ｒ３およびＲ４は独立に、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれる）を有する化合物の使用、
式Ｖ
【０１６６】
【化５３】
2006521338.tif 000041
（式中、Ｒ３およびＲ４は独立に、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれる）を有する化合物を含む医薬品組成物、
式Ｖ
【０１６７】
【化５４】
2006521338.tif 000042
（式中、Ｒ３およびＲ４は独立に、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれる）を有する医療に使用するための化合物、
１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）の有害レベルに関連する状態あるいは疾患の治療に用いられる医薬品の製造における式Ｖ
【０１６８】
【化５５】
2006521338.tif 000043
（式中、Ｒ３およびＲ４は独立に、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれる）の化合物の使用、
１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）活性を阻害する医薬品の製造における式Ｖ
【０１６９】
【化５６】
2006521338.tif 000044
（式中、Ｒ３およびＲ４は独立に、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれる）を有する化合物の使用、
被験者の体内において、１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（１７β−ＨＳＤ）活性を、必要とされるときに、阻害する方法であって、前記方法は、式Ｖ
【０１７０】
【化５７】
2006521338.tif 000045
（式中、Ｒ３およびＲ４は独立に、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基または＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基から選ばれる）を有する化合物を投与することを含む方法
を提供する。
【０１７１】
（カルボン酸エステル）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、カルボン酸エステルである。
【０１７２】
いくつかの様相では、式ＩのＲ１がカルボン酸エステルのとき、Ｒ３は＝Ｏであり、および／または、エステルは−ＣＯ２Ｘ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｘおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｘ（式中、Ｘはヒドロカルビル基である）から選ばれる。
【０１７３】
本発明の一つの好ましい様相では、本使用または本方法において、カルボン酸エステルは、−ＣＯ２Ｘ、−ＣＨ２ＣＯ２ＸおよびＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｘ（式中、Ｘはヒドロカルビル基である）から選ばれる。
【０１７４】
いくつかの様相では、式ＩのＲ１がカルボン酸エステルであるとき、Ｒ３は＝Ｏであり、エステルは、−ＣＯ２Ｘ、−ＣＨ２ＣＯ２Ｘおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｘ（式中、Ｘはヒドロカルビル基である）から選ばれる。
【０１７５】
好ましくは、Ｘは炭化水素基である。さらに好ましくは、Ｘは、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有するアルキル基などのアルキル基である。
【０１７６】
アルキル基は、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、アルキル基は直鎖である。
【０１７７】
（ＣＯ２Ｈまたはアルキル−ＣＯ２Ｈ基）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、−ＣＯ２Ｈまたはアルキル−ＣＯ２Ｈ基である。
【０１７８】
アルキル基は、分岐鎖または直鎖のことがある。好ましくは、アルキル基は直鎖である。
【０１７９】
アルキル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有する。
【０１８０】
（分岐アルケニル）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、分岐アルケニル基である。
【０１８１】
アルケニル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個、３または４個の炭素を有する。
【０１８２】
（アルキル−アルコール基またはアルケニル−アルコール基）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アルキル−アルコール基またはアルケニル−アルコール基である。
【０１８３】
アルキル基は、分岐または直鎖のことがある。好ましくは、アルキル基は直鎖である。
【０１８４】
アルキル−アルコール基またはアルケニル−アルコール基は、式ＣｘＨ２ｘ−２ｎ−ｙ（ＯＨ）ｙ（式中、ｘは整数、ｙは整数、ｎは不飽和の度合いである）の基を意味する。
【０１８５】
一般に、ｘは１から２０、好ましくは１から１０、好ましくは１から５、好ましくは１、２、３または４である。一般に、ｙは１、２または３である。一般に、ｎは０、１、２または３である。
【０１８６】
好ましくは、アルケニル−アルコールは、次の構造式
【０１８７】
【化５８】
2006521338.tif 000046
を有する。
【０１８８】
一つの好ましい様相では、アルケニルアルコールは置換される。この様相では、好ましくは、次の構造式
【０１８９】
【化５９】
2006521338.tif 000047
において、Ｈａおよび／またはＨｂは置換基で置換される。
【０１９０】
適当な置換基は、エステル基、ハロアルキル基、ヘテロアリール基などのアリール基およびアルキル基を含む。
【０１９１】
好ましい置換アルケニル−アルコール基は、
【０１９２】
【化６０】
2006521338.tif 000048
を含む。Ｘは、ヒドロカルビル基、好ましくは炭化水素、より好ましくはアルキル基であり、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個または３個の炭素を有する。非常に好ましい様相では、Ｘはエチル基である。
【０１９３】
（アミドまたはアルキルアミド）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、アミドまたはアルキルアミド基である。
【０１９４】
一つの様相では、式ＩのＲ１は、アミドまたはアルキルアミドであり、ここで、（ａ）アルキルアミドのアルキルは、−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）アミドは、二置換であり、および／または（ｃ）アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されている。
【０１９５】
好ましくは、一つの様相では、式ＩのＲ１は、アミドまたはアルキルアミドであり、ここで、（ａ）アルキルアミドのアルキルは、−ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２−であり、（ｂ）アミドは、二基置換であり、および／または（ｃ）アミドは、アルキル複素環基、アルケニル複素環基、アルキルヘテロアリール基、アルケニルヘテロアリール基、ヘテロアリール基、アルキルアミン基、アルキルオキシアルキル基、アルキルアリール基、直鎖または分岐アルキル基の少なくとも一つで置換されている。
【０１９６】
一つの好ましい様相では、アミドは、式−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ５Ｒ６または−Ｎ（ＣＯ−Ｒ７）Ｒ８の化合物であり、ここで、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、独立に、Ｈおよびヒドロカルビル基から選ばれる。
【０１９７】
好ましいアミド基は、ＮＨＣＯ−Ｃ１〜１０アルキル、ＣＯＮＨ−Ｃ１〜１０アルキル、ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１〜１０ＣＨ３、ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１〜１０ＣＨ３、ＮＨＣＯ（ＣＨ２）３〜７ＣＨ３、ＣＯＮＨ（ＣＨ２）３〜７ＣＨ３、ＮＨＣＯ（ＣＨ２）６ＣＨ３、ＣＯＮＨ（ＣＨ２）６ＣＨ３を含む。
【０１９８】
一つの好ましい様相では、アミドまたはアルキルアミドは、アルキルアミドである。
【０１９９】
好ましいアルキルアミド基は、Ｃ１〜１０アルキル−ＮＨＣＯ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキル−ＣＯＮＨ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキル−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１−１０ＣＨ３、Ｃ１〜１０アルキル−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）１−１０ＣＨ３、Ｃ１〜１０アルキル−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）３−７ＣＨ３、Ｃ１〜１０アルキル−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）３−７ＣＨ３、Ｃ１〜１０アルキル−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）６ＣＨ３、Ｃ１〜１０アルキル−ＣＯＮＨ（ＣＨ２）６ＣＨ３を含む。
【０２００】
一つの好ましい様相では、二置換アミドの置換基は、一緒に環構造を形成する。
【０２０１】
一つの好ましい様相では、二置換アミドの置換基は、一緒にアリール環を形成する。
【０２０２】
一つの好ましい様相では、二置換アミドの置換基は、一緒に複素環を形成する。
【０２０３】
（−ＣＨＯ（エノール互変異性体））
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、Ｒ３と一緒にエノール互変異性体
【０２０４】
【化６１】
2006521338.tif 000049
を提供する。
【０２０５】
（Ｒ１とＲ３とが一緒に−ピラゾール）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、Ｒ３と一緒にピラゾールを形成する。
【０２０６】
本発明の一つの好ましい様相では、本使用または本方法において、ピラゾールは置換される。好ましくは、ピラゾールは、アルキル−ＯＨ基、アルキルエステル基、アルキルオキシアルキル基、分岐アルキル基およびアミドの中の一つで置換される。
【０２０７】
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、Ｒ３と一緒にピラゾールを形成し、ここで、ピラゾールは、本明細書で説明するように、（ｉ）アルキルオキシアルキル基、（ｉｉ）ニトリル基、（ｉｉｉ）アルキルアリール基、（ｉｖ）アルケニルアリール基、（ｖ）アルキルヘテロアリール基、（ｖｉ）アルケニルヘテロアリール基、（ｖｉｉｉ）カルボン酸エステル、（ｉｘ）ＣＯ２Ｈまたはアルキル−ＣＯ２Ｈ基、（ｘ）分岐アルケニル、（ｘｉ）アルキル−アルコール基またはアルケニル−アルコール基、（ｘｉｉ）アミドまたはアルキルアミドの一つ以上で置換される。
【０２０８】
本発明の一つの好ましい様相では、Ｒ１とＲ３とがピラゾールを形成するとき、環構造の２−位は、−ＯＨおよび−Ｏ−ヒドロカルビル、好ましくは−ＯＨおよび−Ｏ−アルキルから選ばれる基で置換される。アルキル基は、好ましくは１個から２０個の炭素、好ましくは１個から１０個の炭素、好ましくは１個から５個の炭素、好ましくは１個、２個、３または４個の炭素を有する。
【０２０９】
用語「環構造の２位」は、下式
【０２１０】
【化６２】
2006521338.tif 000050
で「２」と表示されたステロイド環構造上の位置を意味する。
【０２１１】
本発明の一つの好ましい様相では、Ｒ１とＲ３とがピラゾールを形成するとき、ピラゾールは置換される。この様相では、ピラゾール環への置換基の追加によって、不飽和がなくなることがある。
【０２１２】
置換ピラゾール環の例は、
【０２１３】
【化６３】
2006521338.tif 000051
【０２１４】
【化６４】
2006521338.tif 000052
を含む。
【０２１５】
（Ｒ１とＲ３とが一緒に−ヘテロアリール環）
本発明の一つの好ましい様相では、式ＩのＲ１は、Ｒ３と一緒にヘテロアリール環を形成する。
【０２１６】
アリール基は、一般に６員環を有する。
【０２１７】
ヘテロアリール基は、炭素およびヘテロ原子を含む。一般的なヘテロ原子は、Ｏ、ＮおよびＳ、特にＮを含む。
【０２１８】
アリール基は、置換または非置換のことがある。好ましくは、アリール基は、非置換である。
【０２１９】
（Ｒ２）
Ｒ２は、水素結合を形成できる基、スルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基およびスルホンアミド基から選ばれる。
【０２２０】
好ましくは、Ｒ２は、水素結合を形成できる基およびスルファミン酸エステル基から選ばれる。
【０２２１】
好ましくは、スルファミン酸エステル基は、式
【０２２２】
【化６５】
2006521338.tif 000053
の化合物であり、ここで、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリールまたはそれらの組み合わせから選ばれ、または一緒にアルキレンを表わし、これらのアルキル、シクロアルキルまたはアルケニルの両方またはそれぞれは、あるいオプションとして、一つ以上のヘテロ原子またはヘテロ基を含むことがある。
【０２２３】
一つの好ましい様相では、Ｒ９およびＲ１０の少なくとも一つは、Ｈである。
【０２２４】
一つの好ましい様相では、Ｒ９およびＲ１０の両方がＨである。
【０２２５】
好ましくは、水素結合を形成できる基は、−ＯＨから選ばれる。
【０２２６】
（Ｒ３）
Ｒ２は−ＯＨ、＝Ｏまたは−Ｃ（＝Ｏ）模倣物から選ばれる。
【０２２７】
用語「−Ｃ（＝Ｏ）模倣物」は、当業者には自明であろう。
【０２２８】
好ましくは、−Ｃ（＝Ｏ）模倣物は、−ＣＮ、＝Ｎ−Ｏ−アルキル基、＝Ｎ−Ｏ−Ｈ基、ピリジン、ピリミジンおよび式
【０２２９】
【化６６】
2006521338.tif 000054
の基から選ばれる。
【０２３０】
一つの好ましい様相では、Ｒ３は、−ＯＨおよび＝Ｏから選ばれる。
【０２３１】
一つの好ましい様相では、Ｒ３は、＝Ｏである。
【０２３２】
（置換基）
本発明の化合物は、本明細書に示した環構造の置換基以外の置換基を有することがある。さらに、本明細書では、環構造は一般式として表され、そのように解釈するべきである。所定の環上に特定して示したなんらかの置換基がないとき、その環は、Ｈが一つの例に過ぎない任意の基で置換されることがあることを示す。環構造は、一つ以上の不飽和度を含むことがあり、例えばいくつかの様相では、環構造の一つ以上の環は、芳香族である。環構造は炭素環のことがあり、または一つ以上のヘテロ原子を含むことがある。
【０２３３】
本発明の化合物、詳しくは、本発明の発明の環構造化合物は、本明細書に示した置換基以外の置換基を含むことがある。例として、これらその他の置換基は、一つ以上のスルファミン酸エステル基（単数または複数）、一つ以上のホスホン酸エステル基（単数または複数）、一つ以上のチオホスホン酸エステル基（単数または複数）、一つ以上のスルホン酸エステル基（単数または複数）、一つ以上のスルホンアミド基（単数または複数）、一つ以上のハロ基、一つ以上のＯ基、一つ以上のヒドロキシ基、一つ以上のアミノ基、一つ以上の硫黄含有基（単数または複数）、一つ以上のヒドロカルビル基（単数または複数）の一つ以上、例えば、オキシヒドロカルビル基のことがある。
【０２３４】
一般的には、本化合物の環構造Ａ′Ｂ′Ｃ′Ｄ′は、さまざまな非干渉置換基を含むことがある。詳しくは、環構造Ａ′Ｂ′Ｃ′Ｄ′は、一つ以上のヒドロキシ、アルキルとりわけ低級（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよびその他のペンチル異性体、ｎ−ヘキシルおよびその他のヘキシル異性体、アルコキシとりわけ低級（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ等、アルキニル、例えばエチニル、またはハロゲン、例えばフルオロ置換基を含むことがある。
【０２３５】
本発明のいくつかの化合物の場合、環構造は、オキシヒドロカルビル基で置換されることが好ましい。より好ましくは、環構造のＡ′環はオキシヒドロカルビル基で置換される。
【０２３６】
本発明のいくつかの化合物の場合、少なくとも環構造のＡ′環の２−位は、オキシヒドロカルビル基で置換されることが非常に好ましい。
【０２３７】
本明細書で用いられる用語「オキシヒドロカルビル基」は、少なくともＣ、ＨおよびＯを含み、一つ以上のその他の適当な置換基を含む場合もある基を意味する。そのような置換基の例は、ハロ、アルコキシ、ニトロ、アルキル基、環状基等を含むことがある。置換基が環状基である可能性に加えて、置換基の組み合わせによって環状基が形成されることがある。オキシヒドロカルビル基が二個以上のＣを含むなら、それらの炭素は、必ずしも互いに結合する必要はない。例えば、炭素の少なくとも二つは、適当な元素または基を通して結合することがある。従って、オキシヒドロカルビル基は、ヘテロ原子を含むことがある。適当なヘテロ原子は、当業者には自明であり、例えば硫黄および窒素である。
【０２３８】
本発明の一つの実施態様では、オキシヒドロカルビル基は、オキシ炭化水素基である。
【０２３９】
ここで、用語「オキシ炭化水素」は、アルコキシ基、オキシアルケニル基、オキシアルキニル基、またはオキシアリール基の任意の一つを意味し、最初の３つの基は直鎖、分岐または環状のことがある。オキシ炭化水素という用語は、任意に置換された場合を除いて、それらの基も含む。オキシ炭化水素が置換基（単数または複数）を有する分岐構造なら、置換は炭化水素主鎖上または側鎖上のことがある。あるいは、置換は炭化水素主鎖上および側鎖上のことがある。
【０２４０】
一般に、オキシヒドロカルビル基は、式Ｃ１〜６Ｏ（Ｃ１〜３Ｏなど）の基である。
【０２４１】
本発明のいくつかの化合物の場合、環構造のＡ′環は、アルコキシ基で置換されることが非常に好ましい。
【０２４２】
本発明のいくつかの化合物の場合、少なくとも環構造のＡ′環の２−位は、アルコキシ基で置換されることが非常に好ましい。
【０２４３】
好ましくは、アルコキシ基は、メトキシである。
【０２４４】
本発明のいくつかの化合物の場合、環構造は、ヒドロカルビルスルファニル基で置換されることが好ましい。より好ましくは、環構造のＡ′環は、ヒドロカルビルスルファニル基で置換される。用語「ヒドロカルビルスルファニル」は、少なくともヒドロカルビル基（本明細書で定義される）および硫黄、好ましくは−Ｓ−ヒドロカルビル、より好ましくは−Ｓ−炭化水素を含む基を意味する。その硫黄基は、酸化されている場合もある。
【０２４５】
本発明のいくつかの化合物の場合、少なくとも環構造のＡ′環の２−位は、ヒドロカルビルスルファニル基で置換されることが非常に好ましい。
【０２４６】
好ましくは、ヒドロカルビルスルファニル基は、−Ｓ−Ｃ１〜１０アルキル、より好ましくは−Ｓ−Ｃ１〜５アルキル、より好ましくは−Ｓ−Ｃ１〜３アルキル、より好ましくは−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ３または−ＳＣＨ３である。
【０２４７】
本発明のいくつかの化合物の場合、少なくとも環構造のＡ′環は、ヒドロカルビル基で置換されることが非常に好ましい。
【０２４８】
本発明のいくつかの化合物の場合、少なくとも環構造のＡ′環の２−位は、アルキル基で置換されることが非常に好ましい。
【０２４９】
好ましくは、アルキル基はエチルである。
【０２５０】
本発明のいくつかの化合物の場合、その化合物が、少なくとも二つ以上のスルファミン酸エステル基、ホスホン酸エステル基、チオホスホン酸エステル基、スルホン酸エステル基またはスルホンアミド基を含むことは非常に好ましい。
【０２５１】
本発明のいくつかの化合物の場合、その化合物が、少なくとも二つのスルファミン酸エステル基を含むことは非常に好ましい。
【０２５２】
本発明のいくつかの化合物の場合、その化合物が、少なくとも二つのスルファミン酸エステル基を含み、前記スルファミン酸エステル基が同一環上にないことは非常に好ましい。
【０２５３】
本発明のいくつかの化合物の場合、環構造のＡ′環が、少なくとも一つのスルファミン酸エステル基を含み、環構造のＤ環′が、少なくとも一つのスルファミン酸エステル基を含むことは非常に好ましい。
【０２５４】
本発明のいくつかの様相では、好ましくはＡ′環は、アルコキシ置換基およびアルキル置換基の一つ以上を含む。従って、本発明のさらに別の様相によれば、本化合物は、以下の式
【０２５５】
【化６７】
2006521338.tif 000055
【０２５６】
【化６８】
2006521338.tif 000056
（式中、Ｒ１１は、アルコキシ基またはアルキル基である）の一つを有する。
【０２５７】
好ましくは、Ｒ１１は、アルキル基である。好ましくは、Ｒ１１は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基、好ましくはＣ１〜Ｃ６アルキル基、好ましくはＣ１〜Ｃ３アルキル基である。好ましくは、Ｒ１１は、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ３である。
【０２５８】
別の好ましい様相では、Ｒ１１は、アルコキシ基である。好ましくは、Ｒ１１は、メトキシである。
【０２５９】
（さらに別の様相）
本発明のさらに別の様相によれば、（ａ）本明細書で定義した式を有する一つ以上の候補化合物を用いて、ステロイドデヒドロゲナーゼアッセイを実施すること、（ｂ）前記候補化合物の一つ以上は、ステロイドデヒドロゲナーゼ活性を変調できるか否かを決定すること、および（ｃ）ステロイドデヒドロゲナーゼ活性を変調できる前記候補化合物の一つ以上を選抜することを含む方法が提供される。
【０２６０】
本発明のさらに別の様相によれば、（ａ）本明細書で定義した式を有する一つ以上の候補化合物を用いて、ステロイドデヒドロゲナーゼアッセイを実施すること、（ｂ）前記候補化合物の一つ以上は、ステロイドデヒドロゲナーゼ活性を阻害できるか否かを決定すること、および（ｃ）ステロイドデヒドロゲナーゼ活性を阻害できる前記候補化合物の一つ以上を選抜することを含む方法が提供される。
【０２６１】
本発明の方法の任意の一つにおいて、一つ以上の追加の工程が存在することがある。例えば、本方法は、特定した候補化合物を修飾する（化学的技法および／または酵素的技法によるなど）工程およびその修飾した化合物のステロイドデヒドロゲナーゼ阻害効果を試験する（その効果がより大きいかまたは異なるかを見るための）オプションの追加工程も含むことがある。さらに別の例として、本方法は、特定した候補化合物の構造を決定し（結晶学的技法の使用によるなど）、例えばさらにそのステロイドデヒドロゲナーゼ阻害作用を高めるために、コンピュータモデル化研究を実行する工程も含むことがある。従って、本発明は、前記特定した候補化合物のデータセット（結晶学的座標値など）を有するコンピュータも包含する。本発明は、蛋白質結合研究など、解析のためにコンピュータスクリーン上に示されるとき、特定した候補化合物も包含する。
【０２６２】
本発明の一つの様相によれば、本発明の方法によって特定される化合物が提供される。
【０２６３】
本発明の一つの様相によれば、医療に用いるために本発明による化合物が提供される
本発明の一つの様相によれば、薬学上許容できるキャリア、希釈剤、医薬品添加物またはアジュバントと混合される場合もある、本発明による化合物を含む医薬品組成物が提供される。
【０２６４】
本発明の一つの様相によれば、ステロイドデヒドロゲナーゼに関連する状態または疾患の治療に用いられる薬物の製造における本発明による化合物の使用が提供される。
【０２６５】
本発明の一つの様相によれば、ステロイドデヒドロゲナーゼ有害レベルに関連する状態または疾患の治療に用いられる薬物の製造における本発明による化合物の使用が提供される。
【０２６６】
いくつかの用途では、好ましくは、本化合物は、エストロゲン様効果をまったく有さないか、またはほとんど有さない。
【０２６７】
いくつかの用途では、好ましくは、本化合物は、エストロゲン様効果を有する。
【０２６８】
いくつかの用途では、好ましくは、本化合物は、可逆的な作用を有する。
【０２６９】
いくつかの用途では、好ましくは、本化合物は、非可逆的な作用を有する。
【０２７０】
一つの実施態様では、本発明の化合物は、乳がん治療に有用である。
【０２７１】
本発明の化合物は、塩の形のことがある。
【０２７２】
本発明は、本発明の化合物を合成するために有用な新規中間体も包含する。例えば、本発明は本化合物用の新規アルコール前駆体を包含する。さらに別の例として、本発明は、本化合物用のビス保護前駆物質を包含する。これらの前駆体のそれぞれの例を本明細書中に示す。本発明は、本発明の化合物の合成用の前駆体のそれぞれまたは両方を含むプロセスも包含する。
【０２７３】
本発明のいくつかの様相において、本化合物は、ステロイドデヒドロゲナーゼ（ＨＳＤ）の活性を阻害することがあることも明らかにした。
【０２７４】
ステロイドデヒドロゲナーゼまたはＨＳＤは、１７βヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼを意味する。一つの様相では、１７βヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼは、ＥＣ１．１．１．６２である。
【０２７５】
好ましくは、前記ＨＳＤは、タイプ１、３、５および／または７のものである。好ましくは、前記ＨＳＤは、エストロン（ケトン）をエストラジオール（ヒドロキシ）に変換する。
【０２７６】
好ましくは、前記ＨＳＤは、タイプ２および／または８のものである。好ましくは、前記ＨＳＤは、エストラジオール（ヒドロキシ）をエストロン（ケトン）に変換する。
【０２７７】
本発明のいくつかの様相では、ステロイドデヒドロゲナーゼは、ステロイドデヒドロゲナーゼタイプＩであることが好ましい。
【０２７８】
本発明のいくつかの様相では、ステロイドデヒドロゲナーゼは、ステロイドデヒドロゲナーゼタイプＩＩであることが好ましい。
【０２７９】
好ましくは、前記ＨＳＤは、タイプ１、３、５および／または７のものである。好ましくは、前記ＨＳＤは、エストロン（ケトン）をエストラジオール（ヒドロキシ）に変換する。
【０２８０】
好ましくは、前記ＨＳＤは、タイプ２および／または８のものである。好ましくは、前記ＨＳＤは、エストラジオール（ヒドロキシ）をエストロン（ケトン）に変換する。
【０２８１】
（ステロイドデヒドロゲナーゼ）
ステロイドデヒドロゲナーゼまたは略して「ＤＨ」は、タイプＩおよびタイプＩＩの二つのタイプからなるとして分類されることがある。エストラジオール１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ｅ２ＨＳＤ）など、これらの二つのタイプの酵素は、エストロゲン受容体と相互作用するリガンドの利用可能性を調節する上で中心的な役割を果たしている。タイプＩは、エストロン（Ｅ１）を生物学的に活性なエストロゲンであるエストラジオール（Ｅ２）に還元し、一方Ｅ２ＨＳＤタイプＩＩは、Ｅ２のＥ１への酸化を触媒することによって、Ｅ２を不活性化する。
【０２８２】
（ＤＨ阻害）
ＤＨ活性に関連するいくつかの疾患状態は、非活性なエストロンの活性なエストラジオールへの変換に起因すると考えられている。ＤＨ活性に関連する疾患状態では、ＤＨ活性を阻害することは望ましいと思われる。
【０２８３】
ここで、用語「阻害する」は、ＤＨの有害な作用を弱めること、および／または除くこと、および／またはマスクすること、および／または予防することを含む。
【０２８４】
（ＤＨ阻害剤）
本発明によれば、本発明の化合物は、ＤＨ阻害剤として作用できる。
【０２８５】
ここで、本明細書で本発明の化合物に対して用いられる用語「阻害剤」は、ＤＨ活性を阻害できる、例えばＤＨの有害な作用を弱め、および／または除き、および／またはマスクし、および／または予防することができる化合物を意味する。ＤＨ阻害剤は、拮抗薬として作用することがある。
【０２８６】
ステロイドデヒドロゲナーゼ活性を阻害する化合物の能力は、Ｅ２ＨＳＤタイプＩ活性に豊むＴ４７Ｄ乳がん細胞か、タイプＩＩ阻害剤研究用のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のどちらかを用いて評価できる。両方の細胞系統において、産物の生成は、時間および細胞数に対して線型である。適当なアッセイプロトコルに関する詳細は、実施例のセクションに示す。
【０２８７】
本発明の化合物は、ＤＨ活性を阻害するその能力に加えて、またはその能力の代わりに、その他の有益な性質を有することがあることに注意すべきである。
【０２８８】
（ステロイドスルファターゼ）
いくつかの様相では、本明細書に定義される化合物は、ステロイドスルファターゼを阻害することもある。
【０２８９】
時に、ステロイドスルファターゼ、ステリルスルファターゼまたは省略して「ＳＴＳ」と呼ばれるステロイドスルファターゼは、硫酸エストロン、硫酸デヒドロエアピンドロステロンおよび硫酸コレステロールなど、いくつかの硫酸エステル化ステロイドを加水分解する。ＳＴＳには、酵素番号ＥＣ３．１．６．２が割り当てられている。
【０２９０】
ＳＴＳは、クローン化され、発現された。例えば、Ｓｔｅｉｎら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．第２６４巻１３８６５〜１３８７２頁（１９８９年））およびＹｅｎら（Ｃｅｌｌ第４９巻４４３〜４５４頁（１９８７年）を参照すること。
【０２９１】
ＳＴＳは、多数の疾患状態への関与が推測されている酵素である。
【０２９２】
例を挙げると、研究者たちは、ＳＴＳがまったく欠落すると、魚鱗癬（せん）となることを見いだした。一部の研究者たちによれば、ＳＴＳ欠乏症は、日本ではかなり一般的である。同じ研究者たち（Ｓａｋｕｒａら、Ｊ  Ｉｎｈｅｒｉｔ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓ１９９７年１１月、第２０巻（６）号８０７〜１０頁）は、気管支喘息、アレルギー性鼻炎またはアトピー性皮膚炎などのアレルギー疾患がステロイドスルファターゼ欠損に関連する可能性があるとも報告している。
【０２９３】
ＳＴＳ活性の全欠損によって表面化する疾患状態に加えて、増進したＳＴＳ活性のレベルも疾患症状をもたらすことがある。例を挙げると、上記で示したように、乳癌増殖および転移におけるＳＴＳの役割を支持する強力な証拠がある。
【０２９４】
ＳＴＳは、その他の疾患状態においても関与が示唆された。例を挙げると、ＬｅＲｏｙら（Ｂｅｈａｖ  Ｇｅｎｅｔ  １９９９年３月、第２９巻（２）号１３１〜６頁）は、マウスのステロイドスルファターゼ濃度と攻撃行動の始まりとの間に遺伝相関がある可能性を報告した。これらの著者は、ステロイドの硫酸エステル化が、突然変異誘発による攻撃性への関与を示唆される遺伝子を含む複雑なネットワークの主要な駆動力かもしれないと結論している。
【０２９５】
（ＳＴＳ阻害）
ＳＴＳ活性に関連する一部の疾患状態は、非活性な、硫酸エステル化エストロンの活性な、非硫酸エステル化エストロンへの変換に起因すると考えられている。ＳＴＳ活性に関連する疾患状態では、ＳＴＳ活性を阻害することは望ましいと思われる。
【０２９６】
ここで、用語「阻害する」は、ＳＴＳの有害な作用を弱めること、および／または除くこと、および／またはマスクすること、および／または予防することを含む。
【０２９７】
（ＳＴＳ阻害剤）
本発明によれば、本発明の化合物は、ＳＴＳ阻害剤として作用できる。
【０２９８】
ここで、本明細書で本発明の化合物に関して用いられる用語「阻害剤」は、ＳＴＳ活性を阻害できる、例えば、ＳＴＳの有害な作用を弱め、および／または除き、および／またはマスクし、および／または予防することができる化合物を意味する。ＳＴＳ阻害剤は、拮抗薬として作用することがある。
【０２９９】
エストロンスルファターゼ活性を阻害する化合物の能力は、健常ＭＣＦ−７乳がん細胞または胎盤ミクロソームのどちらかを用いて評価できる。さらに、動物モデルを用いることがある。適当なアッセイプロトコルに関する詳細を、以下のセクションに示す。ＳＴＳ活性を測定し、従ってＳＴＳ阻害を測定するためにその他のアッセイを用いることも可能であることに注意すべきである。例えば、国際公開第９９／５０４５３号明細書の教示が参照されることもある。
【０３００】
好ましくは、いくつかの用途の場合、本化合物は、スルファミン酸エステル基を硫酸エステル基で置換して硫酸エステル誘導体を生成させたら、硫酸エステル誘導体は、ステロイドスルファターゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．６．２）活性を有する酵素によって、つまりｐＨ７．４、３７℃でステロイドスルファターゼＥＣ３．１．６．２とインキュベートすると、加水分解できるであろうという特徴をさらに備える。
【０３０１】
一つの好ましい実施態様では、本化合物のスルファミン酸エステル基を硫酸エステル基で置換して、硫酸エステル化合物を生成させたら、硫酸エステル化合物は、ステロイドスルファターゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．６．２）活性を有する酵素によって加水分解でき、ｐＨ７．４、３７℃でステロイドスルファターゼＥＣ３．１．６．２とインキュベートすると、２００ミリモル濃度未満、好ましくは１５０ミリモル濃度未満、好ましくは１００ミリモル濃度未満、好ましくは７５ミリモル濃度未満、好ましくは５０ミリモル濃度未満のＫｍ値を示すであろうと考えられる。
【０３０２】
一つの好ましい実施態様では、本化合物のスルファミン酸エステル基を硫酸エステル基で置換して、硫酸エステル化合物を生成させたら、硫酸エステル化合物は、ステロイドスルファターゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．６．２）活性を有する酵素によって加水分解でき、ｐＨ７．４、３７℃でステロイドスルファターゼＥＣ３．１．６．２とインキュベートすると、２００マイクロモル濃度未満、好ましくは１５０マイクロモル濃度未満、好ましくは１００マイクロモル濃度未満、好ましくは７５マイクロモル濃度未満、好ましくは５０マイクロモル濃度未満のＫｍ値を示すであろうと考えられる。
【０３０３】
好ましい実施態様では、本発明の化合物は、ステロイドスルファターゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．６．２）活性を有する酵素によって加水分解できない。
【０３０４】
いくつかの用途では、好ましくは、本発明の化合物は、所望の標的（例えばＳＴＳ）に対する少なくとも約１００倍の選択性、好ましくは、所望の標的（例えばＳＴＳ）に対する少なくとも約１５０倍の選択性、好ましくは、所望の標的（例えばＳＴＳ）に対する少なくとも約２００倍の選択性、好ましくは、所望の標的（例えばＳＴＳ）に対する少なくとも約２５０倍の選択性、好ましくは、所望の標的（例えばＳＴＳ）に対する少なくとも約３００倍の選択性、好ましくは、所望の標的（例えばＳＴＳ）に対する少なくとも約３５０倍の選択性を有する。
【０３０５】
本発明の化合物は、ＨＳＤ活性を阻害するその能力に加えて、またはその能力の代わりに、その他の有益な性質を有することがあることに注意すべきである。
【０３０６】
（スルファミン酸エステル基）
一つの実施態様では、環Ｘは、置換基としてスルファミン酸エステル基を有する。本明細書で用いられる用語「スルファミン酸エステル」は、スルファミン酸のエステル、またはスルファミン酸のＮ−置換誘導体のエステルまたはそれらの塩を含む。
【０３０７】
Ｒ１がスルファミン酸エステル基なら、本発明の化合物は、スルファミン酸エステル化合物と呼ばれる。
【０３０８】
一般に、スルファミン酸エステル基は、
（Ｒ９）（Ｒ１０）Ｎ−Ｓ（Ｏ）（Ｏ）−Ｏ−
を有し、ここで、好ましくは、Ｒ９およびＲ１０は、独立に、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリールまたはそれらの組み合わせから選ばれ、あるいは一緒に、アルキレンを示し、これらのアルキル、シクロアルキル、アルケニルは、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基を含む。
【０３０９】
置換されるとき、本発明のＮ−置換化合物は、好ましくは全体としてまたはそれぞれが最大１０個の炭素原子を含有する一個または二個のＮ−アルキル、Ｎ−アルケニル、Ｎ−シクロアルキルまたはＮ−アリール置換基を含むことがある。Ｒ９および／またはＲ１０がアルキルであるとき、好ましい値は、Ｒ９およびＲ１０がそれぞれ独立に１から６個の炭素原子を含む低級アルキル基、すなわちメチル、エチル、プロピル等から選択される場合のものである。Ｒ４およびＲ５は、両方がメチルのことがある。Ｒ９および／またはＲ１０がアリールのとき、一般的な値はフェニールおよびトリル（ＰｈＣＨ３、ｏ）である。Ｒ９およびＲ１０がシクロアルキルを表す場合、一般的な値は、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル等である。一体化されるとき、一般にＲ９およびＲ１０は、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基によって中断され、例えば５員複素環、例えばモルホリノ、ピロリジノまたはピペリジノを提供する４から６個の炭素原子の鎖を提供するアルキレン基を表す。
【０３１０】
これらの値の範囲内には、置換基として問題の化合物のＨＳＤ阻害活性と干渉しない一つ以上の基を含むアルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリール置換された基が含まれる。例となる非干渉置換基は、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、アルコキシ、アルキルおよびアリールを含む。
【０３１１】
いくつかの実施態様では、スルファミン酸エステル基は、基Ｘの中のまたは基Ｘの上の一つ以上の原子に融合する（または会合して）ことによって環構造を形成することがある。
【０３１２】
いくつかの実施態様では、二つ以上のスルファミン酸エステル基がある。例として、二つのスルファミン酸エステル（すなわちビス−スルファミン酸エステル化合物）がある。これらの化合物がステロイド核に基づくなら、好ましくは、第二の（または追加されるものの少なくとも一つの）スルファミン酸エステル基はステロイド核の１７−位に位置する。これらの基は、同じである必要はない。
【０３１３】
いくつかの好ましい実施態様では、Ｒ９およびＲ１０の少なくとも一つはＨである。
【０３１４】
いくつかのさらに好ましい実施態様では、Ｒ９およびＲ１０のそれぞれはＨである。
【０３１５】
（ホスホン酸エステル基）
Ｒ１がホスホネート基であれば、本発明の化合物は、ホスホネート化合物と呼ばれる。
【０３１６】
一般に、ホスホネート基は、式を有する。
【０３１７】
（Ｒ１２）−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｏ−
を有する。ここで、好ましくは、Ｒ１２はＨ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルまたはアリール、あるいはそれらの組み合わせであり、これらのアルキル、シクロアルキル、アルケニルは、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基を含む。
【０３１８】
置換されるとき、本発明のＮ−置換化合物は、好ましくは全体としてまたはそれぞれが最大１０個の炭素原子を含有する一個または二個のＮ−アルキル、Ｎ−アルケニル、Ｎ−シクロアルキルまたはＮ−アリール置換基を含むことがある。Ｒ１２がアルキルであるとき、Ｒ１２は、１から６個の炭素原子を含む低級アルキル基、すなわちメチル、エチル、プロピル等のことがある。例として、Ｒ１２はメチルのことがある。Ｒ６がアリールのとき、一般的な値は、フェニールおよびトリル（ＰｈＣＨ３、ｏ）である。Ｒ６がシクロアルキルを表すとき、一般的な値は、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル等である。Ｒ１２は、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基によって中断され、例えば５員複素環、例えばモルホリノ、ピロリジノまたはピペリジノを提供する４から６個の炭素原子の鎖を提供するアルキレン基を含むことさえある。
【０３１９】
これらの値の範囲内には、置換基として問題の化合物のＨＳＤ阻害活性と干渉しない一つ以上の基を含むアルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリール置換された基が含まれる。例となる非干渉置換基は、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、アルコキシ、アルキルおよびアリールを含む。
【０３２０】
いくつかの実施態様では、ホスホネート基は、基Ｘの中のまたは基Ｘの上の一つ以上の原子に融合する（または会合して）ことによって環構造を形成することがある。
【０３２１】
いくつかの実施態様では、二つ以上のホスホネート基がある。例として、二つのホスホネート（すなわちビス−ホスホネート化合物）がある。これらの化合物がステロイド核に基づくなら、好ましくは、第二の（または追加されるものの少なくとも一つの）ホスホネート基はステロイド核の１７−位に位置する。これらの基は、同じである必要はない。
【０３２２】
（チオホスホン酸エステル基）
Ｒ２がチオホスホネート基であるなら、本発明の化合物はチオホスホネート化合物と呼ばれる。
【０３２３】
一般に、チオホスホネート基は、式
（Ｒ１３）−Ｐ（Ｓ）（ＯＨ）−Ｏ−
を有し、ここで、好ましくは、Ｒ１３はＨ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルまたはアリール、あるいはそれらの組み合わせであり、これらのアルキル、シクロアルキル、アルケニルは、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基を含む。
【０３２４】
置換されるとき、本発明のＮ−置換化合物は、好ましくは全体としてまたはそれぞれが最大１０個の炭素原子を含有する一個または二個のＮ−アルキル、Ｎ−アルケニル、Ｎ−シクロアルキルまたはＮ−アリール置換基を含むことがある。Ｒ７がアルキルであるとき、Ｒ７は、１から６個の炭素原子を含む低級アルキル基、すなわちメチル、エチル、プロピル等のことがある。例として、Ｒ７はメチルのことがある。Ｒ１３がアリールのとき、一般的な値は、フェニールおよびトリル（ＰｈＣＨ３、ｏ）である。Ｒ１３がシクロアルキルを表すとき、一般的な値は、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル等である。Ｒ１３は、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基によって中断され、例えば５員複素環、例えばモルホリノ、ピロリジノまたはピペリジノを提供する４から６個の炭素原子の鎖を提供するアルキレン基を含むことさえある。
【０３２５】
これらの値の範囲内には、置換基として問題の化合物のＨＳＤ阻害活性と干渉しない一つ以上の基を含むアルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリール置換された基が含まれる。例となる非干渉置換基は、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、アルコキシ、アルキルおよびアリールを含む。
【０３２６】
いくつかの実施態様では、チオホスホネート基は、基Ｘの中のまたは基Ｘの上の一つ以上の原子に融合する（または会合して）ことによって環構造を形成することがある。
【０３２７】
いくつかの実施態様では、二つ以上のチオホスホネート基がある。例として、二つのチオホスホネート（すなわちビス−チオホスホネート化合物）がある。これらの化合物がステロイド核に基づくなら、好ましくは、第二の（または追加されるものの少なくとも一つの）チオホスホネート基はステロイド核の１７−位に位置する。これらの基は、同じである必要はない。
【０３２８】
（スルホン酸エステル基）
Ｒ２がスルホネート基であるなら、本発明の化合物はスルホネート化合物と呼ばれる。
【０３２９】
一般に、スルホネート基は、式
（Ｒ１４）−Ｓ（Ｏ）（Ｏ）−Ｏ−
を有し、ここで、好ましくは、Ｒ１４はＨ、アルキル、シクロアルキル、アルケニルまたはアリール、あるいはそれらの組み合わせであり、これらのアルキル、シクロアルキル、アルケニルは、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基を含む。
【０３３０】
置換されるとき、本発明のＮ−置換化合物は、好ましくは全体としてまたはそれぞれが最大１０個の炭素原子を含有する一個または二個のＮ−アルキル、Ｎ−アルケニル、Ｎ−シクロアルキルまたはＮ−アリール置換基を含むことがある。Ｒ１４がアルキルであるとき、Ｒ１４は、１から６個の炭素原子を含む低級アルキル基、すなわちメチル、エチル、プロピル等のことがある。例として、Ｒ１４はメチルのことがある。Ｒ１４がアリールのとき、一般的な値は、フェニールおよびトリル（ＰｈＣＨ３、ｏ）である。Ｒ１４がシクロアルキルを表すとき、一般的な値は、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル等である。Ｒ１４は、オプションとして一つ以上のヘテロ原子または基によって中断され、例えば５員複素環、例えばモルホリノ、ピロリジノまたはピペリジノを提供する４から６個の炭素原子の鎖を提供するアルキレン基を含むことさえある。
【０３３１】
これらの値の範囲内には、置換基として問題の化合物のＨＳＤ阻害活性と干渉しない一つ以上の基を含むアルキル、シクロアルキル、アルケニルおよびアリール置換された基が含まれる。例となる非干渉置換基は、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、アルコキシ、アルキルおよびアリールを含む。
【０３３２】
いくつかの実施態様では、スルホネート基は、基Ｘの中のまたは基Ｘの上の一つ以上の原子に融合する（または会合して）ことによって環構造を形成することがある。
【０３３３】
いくつかの実施態様では、二つ以上のスルホネート基がある。例として、二つのスルホネート（すなわちビス−スルホネート化合物）がある。これらの化合物がステロイド核に基づくなら、好ましくは、第二の（または追加されるものの少なくとも一つの）スルホネート基はステロイド核の１７−位に位置する。これらの基は、同じである必要はない。
【０３３４】
（スルホン酸エステル／ホスホン酸エステル／チオホスホン酸エステル／スルファミン酸エステルの組み合わせ）
本発明のいくつかの化合物については、本明細書に定義されるスルホネート、または本明細書に定義されるホスホネート、または本明細書に定義されるチオホスホネート、または本明細書に定義されるスルファミン酸エステルの一つと、本明細書に定義されるスルホネート、または本明細書に定義されるホスホネート、または本明細書に定義されるチオホスホネート、または本明細書に定義されるスルファミン酸エステルの別の一つとが存在することがある。例として、本発明の化合物は、一つのスルファミン酸エステル基と、一つのホスホネート基とを含むことがある。
【０３３５】
本発明のこれらの化合物がステロイド核にもとづくなら、好ましくは、前記基のその他のものは、ステロイド核の１７−位に位置する。
【０３３６】
（癌細胞を用いてＳＴＳ活性を決定するアッセイ（プロトコル１））
（ＭＣＦ−７細胞中のステロイドスルファターゼ活性の阻害）
ステロイドスルファターゼ活性は、健常ＭＣＦ−７ヒト乳がん細胞を用いてインビトロで測定される。このホルモン依存細胞系統は、ヒト乳癌細胞成長の制御を研究するために広く用いられている。それは、顕著なステロイドスルファターゼ活性を有し（Ｍａｃｉｎｄｏｅら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、第１２３巻、１２８１〜１２８７頁（１９８８年）、Ｐｕｒｏｈｉｔ  ＆  Ｒｅｅｄ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、第５０巻、９０１〜９０５頁（１９９２年））、米国内でＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から、および英国内で入手できる（例えばＩｍｐｅｒｉａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｆｕｎｄから）。
【０３３７】
細胞は、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５％ウシ胎児血清、２ｍＭグルタミン、非必須アミノ酸類および０．０７５％炭酸水素ナトリウムを含む最小必須培地（ＭＥＭ）（Ｆｌｏｗ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｒｖｉｎｅ，Ｓｃｏｔｌａｎｄ）中で維持される。上記の培地を用いて、２５ｃｍ２組織培養フラスコを、最大３０複製まで約１ｘ１０５細胞／フラスコで接種する。細胞は８０％飽和密度まで成長させ、３日目ごとに培地を変えた。
【０３３８】
三連２５ｃｍ２組織培養フラスコ中のＭＣＦ−７細胞の無傷の単層をＥａｒｌｅの均衡塩溶液（英国Ｈｉｇｈ  ＷｙｃｏｍｂｅのＩＣＮ  ＦｌｏｗからのＥＢＳＳ）で洗浄し、５ピコモル（７ｘ１０５ｄｐｍ）の［６，７−３Ｈ］エストロン−３−硫酸エステル（米国マサチューセッツ州ボストンＮｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ製、比活性６０Ｃｉ／ミリモル）を加えて、エストロン−３−スルファミン酸エステル（０、１ｆＭ、０．０１ｐＭ、０．１ｐＭ、１ｐＭ、０．０１ｎＭ、０．１ｎＭ、１ｎＭ、０．０１ｍＭ、０．１ｍＭ、１ｍＭの１１段階の濃度）とともに、無血清ＭＥＭ（２．５ｍｌ）中３７℃で３〜４時間培養する。培養後、各フラスコを冷却し、［１４Ｃ］エストロン（７ｘ１０３ｄｐｍ）（英国ＡｍｅｒｓｈａｍのＡｍｅｒｓｈａｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｒｅ製、比活性９７Ｃｉ／ミリモル）を含む別々の試験管中にピペットで培地（１ｍｌ）を移す。この混合物をトルエン（５ｍｌ）とともに３０秒間強く振とうする。実験によると、この処理によって＞９０％の［１４Ｃ］エストロンおよび＜０．１％の［３Ｈ］エストロン−３−硫酸エステルが水相から抽出されることが分かっている。有機相の一部（２ｍｌ）を取って蒸発させ、シンチレーション分光分析によって、残留物の３Ｈおよび１４Ｃ含量を決定した。得られる３Ｈカウントおよび基質の比活性から、加水分解したエストロン−３−硫酸エステルの質量を計算した（使用した培地および有機相の体積、および加えた［１４Ｃ］エストロンの回収率について補正した）。実験の各バッチは、スルファターゼ陽性ヒト胎盤から調製したミクロソーム（陽性対照）および細胞を入れないフラスコ（基質の見かけの非酵素加水分解を評価するため）の培養を含む。フラスコあたりの細胞核の数は、細胞単層をザポニンで処理した後、Ｃｏｕｌｔｅｒカウンタを用いて決定される。各バッチにおいて、一つのフラスコは、トリパンブルー除去法（Ｋｒｕｓｅ，Ｄ．Ｆ．およびＰａｔｔｅｒｓｏｎ，Ｍ．Ｋ．編のＴｓｉｓｓｕｅ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ニューヨーク、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ（１９７３年）４０６〜４０８頁のＰｈｉｌｌｉｐｓ，Ｈ．Ｊ．）を用いて、細胞膜の状態および生育力を評価するために用いられる。
【０３３９】
ステロイドスルファターゼ活性の結果は、１０６個の細胞について計算した、培養期間（２０時間）中に生成した全産物（エストロン＋エストラジオール）の平均値±１Ｓ．Ｄ．として、統計的有意を示す値については、エストロン−３−スルファミン酸エステルをまったく含まない培養に対する百分率減少（阻害）として表される。結果の統計的有意性を試験するために、不対スチューデントｔ検定を用いた。
【０３４０】
（胎盤ミクロソームを用いてＳＴＳ活性を決定するアッセイ（プロトコル２））
（胎盤ミクロソームにおけるステロイドスルファターゼ活性の阻害）
正常期間妊娠からのスルファターゼ陽性ヒト胎盤をはさみで十分細かく切り、冷リン酸緩衝液（ｐＨ７．４、５０ｍＭ）で一度洗浄してから、冷リン酸緩衝液（５ｍｌ／ｇ組織）中に再懸濁した。Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘホモジナイザーによる１０秒間のバーストを、間に氷で冷却する２分間の冷却期間をおいて、３回行なうことによって、ホモジナイゼーションを行なう。２０００Ｇ、３０分間の遠心分離（４℃）によって、核および細胞破壊片を取り除き、上清の部分（２ｍｌ）を２０℃で保管する。上清の蛋白質濃度は、Ｂｒａｄｆｏｒｄ（Ａｎａｌ．Ｇｉｏｃｈｅｍ．、第７２巻、２４８〜２５４頁（１９７６年））の方法によって決定される。
【０３４１】
蛋白質濃度１００ｍｇ／ｍｌ、基質［６，７−３Ｈ］エストロン−３−硫酸エステル（米国マサチューセッツ州ボストンのＮｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ製、比活性６０Ｃｉ／ミリモル）濃度２０ｍＭおよび３７℃でインキュベーション時間２０分間を用いて、培養（１ｍｌ）を行なう。必要なら、０（すなわち対照）、０．０５ｍＭ、０．１ｍＭ、０．２ｍＭ、０．４ｍＭ、０．６ｍＭ、０．８ｍＭ、１．０ｍＭの８つの化合物濃度を使用する。培養後、各試料を冷却し、［１４Ｃ］エストロン（７ｘ１０３ｄｐｍ）（英国ＡｍｅｒｓｈａｍのＡｍｅｒｓｈａｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｒｅ製、比活性９７Ｃｉ／ミリモル）を含む別々の試験管中にピペットで培地（１ｍｌ）を移した。この混合物をトルエン（５ｍｌ）とともに３０秒間強く振とうする。実験によると、この処理によって＞９０％の［１４Ｃ］エストロンおよび＜０．１％の［３Ｈ］エストロン−３−硫酸エステルが水相から抽出されることが分かっている。有機相の一部（２ｍｌ）を取って蒸発させ、シンチレーション分光分析によって、残留物の３Ｈおよび１４Ｃ含量を決定した。得られる３Ｈカウントおよび基質の比活性（使用した培地および有機相の体積、および加えた［１４Ｃ］エストロンの回収率について補正してある）から、加水分解したエストロン−３−硫酸エステルの質量が計算される。
【０３４２】
（ＳＴＳ活性を決定する動物アッセイモデル（プロトコル３））
（生体内におけるエストロンスルファターゼ活性の阻害）
本発明の化合物は、動物モデルを用いて、詳しくは卵巣切除されたラットで研究されることがある。このモデルでは、エストロゲン活性を有する化合物は、子宮増殖を活性化する。
【０３４３】
ラットに化合物（１０ｍｇ／Ｋｇ／日で５日間）を経口投与し、別の群の動物にはベヒクル（プロピレングリコール）だけを投与した。さらに別の群は、化合物ＥＭＡＴＥを１０μｇ／日の量で５日間皮下投与された。研究の終わりに肝臓組織の試料を取得し、既に説明した（ＰＣＴ／ＧＢ９５／０２６３８号明細書参照）ように、３Ｈエストロン硫酸エステルを基質として用いて、エストロンスルファターゼ活性をアッセイした。
【０３４４】
（エストロゲン活性を決定する動物アッセイモデル（プロトコル４））
（生体内のエストロゲン性の欠如）
本発明の化合物は、動物モデルを用いて、詳しくは卵巣切除されたラットで研究されることがある。このモデルでは、エストロゲン活性を有する化合物は、子宮増殖を活性化する。
【０３４５】
ラットに化合物（１０ｍｇ／Ｋｇ／日で５日間）を経口投与し、別の群の動物にはベヒクル（プロピレングリコール）だけを投与した。さらに別の群は、エストロゲン性化合物ＥＭＡＴＥを１０μｇ／日の量で５日間皮下投与された。研究の終わりに、子宮を取得して重さを量り、結果を子宮重量／全身重量×１００として表した。
【０３４６】
子宮増殖に対して有意な効果を有さない化合物は、エストロゲン性ではない。
【０３４７】
（ＳＴＳ活性を決定するバイオテクノロジー的なアッセイ（プロトコル５））
エストロンスルファターゼ活性を阻害する化合物の能力は、例えば高スループット検索において、ＳＴＳ、あるいは活性フラグメント、誘導体、ホモログまたはそれらの変異形をコードするアミノ酸配列またはヌクレオチド配列を用いて評価することもできる。
【０３４８】
ＳＴＳを調節する能力がある作用物質を特定するために、さまざまな薬物スクリーニング技法の任意のものにおいて、アミノ酸配列および／またはヌクレオチド配列などの任意の一つ以上の適切な標的が用いられることがある。そのような試験で使用される標的は、溶液中に遊離し、固体担体に結合され、細胞表面上に固定化され、あるいは細胞内に位置することがある。標的活性の消失または試験される標的と作用物質との間の結合複合体の生成が測定されることがある。
【０３４９】
本発明のアッセイは、多数の作用物質を試験する検索試験のことがある。一つの様相では、本発明のアッセイ方法は、高スループット検索試験である。
【０３５０】
薬物スクリーニング技法は、１９８４年９月１３日に公開されたＧｅｙｓｏｎのヨーロッパ特許出願８４／０３５６４号明細書に記載されている方法にもとづくことがある。要約すると、プラスチックピンまたはその他の表面などの固体基板上で多数のさまざまな小ペプチド試験化合物を合成する。ペプチド試験化合物は、適当な標的またはそのフラグメントと反応し、洗浄される。次に、当分野で公知の技術を適切に採用することによって、結合した実体を検出する。薬物スクリーニング技法用のプレート上に、精製した標的を直接塗布することもできる。あるいは、非中和抗体を用いてペプチドを補足し、固体担体上にそれを固定することもできる。
【０３５１】
本発明は、標的と結合できる中和抗体が、試験化合物と特異的に標的への結合を競合する競合薬スクリーニングアッセイの使用も意図する。
【０３５２】
別のスクリーニング技法は、基質に対する適当な結合親和力を有する作用物質の高スループットスクリーニング（ＨＴＳ）を提供し、国際特許出願８４／０３５６４号明細書に詳細に記載されている方法にもとづく。
【０３５３】
本発明のアッセイ方法は、試験化合物の小規模および大規模スクリーニングならびに定量的アッセイに適すると予想される。
【０３５４】
一つの好ましい様相では、本発明は、ＳＴＳを選択的に調節する作用物質を特定する方法に関し、それらの化合物は式（Ｉａ）を有する。
【０３５５】
（レポーター）
本発明のアッセイ方法（ならびにスクリーニング）では、非常に多様なレポーターが用いられることがあり、好ましいレポーターは、検出可能な信号を簡便に提供する（例えば分光法によって）。例を挙げると、レポーター遺伝子は、光吸収特性を変化させる反応を触媒する酵素をコードすることがある。
【０３５６】
その他のプロトコルは、酸素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）および蛍光活性化細胞選別法（ＦＡＣＳ）を含む。二つの非干渉性エピトープに対して反応するモノクローナル抗体を利用する、二部位モノクローナルベースのイムノアッセイが用いられることさえある。これらのアッセイおよびその他のアッセイは、とりわけ、Ｈａｍｐｔｏｎ，Ｒ．ら（１９９０、Ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、ＡＰＳ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ）およびＭａｄｄｏｘ，Ｄ．Ｅ．ら（１９８３年、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．１５，（８）１２１  １）に記載されている。
【０３５７】
レポーター分子の例は、（β−ガラクトシダーゼ、インベルターゼ、緑色蛍光蛋白質、ルシフェラーゼ、クロラムフェニコール、アセチルトランスフェラーゼ、（−グルクロニダーゼ、エキソ−グルカナーゼおよびグルコアミラーゼを含むが、これらに限定されない。あるいは、発生する転写産物に放射性同位元素標識化または蛍光タグ標識化ヌクレオチドを組み込み、オリゴヌクレオチドプローブに結合したときそれらの標識を特定することもできる。
【０３５８】
さらに別の例として、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）、Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）およびＵＳ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，ＯＨ）など、多数の会社が、市販キットおよびアッセイ手順のプロトコルを提供している。適当なレポーター分子または標識は、それらの放射性核種、酵素、蛍光試薬、化学発光試薬、または発色性試薬ならびに基質、補因子、阻害剤、磁粉その他同種のものを含む。そのような標識の使用を教示する特許は、米国特許第３，８１７，８３７、米国特許第３，８５０，７５２、米国特許第３，９３９，３５０、米国特許第３，９９６，３４５、米国特許第４，２７７，４３７、米国特許第４，２７５，１４９および米国特許第４，３６６，２４１号明細書を含む。
【０３５９】
（宿主細胞）
本発明に関連する用語「宿主細胞」は、本発明の作用物質の標的を含む可能性のある任意の細胞を含む。
【０３６０】
従って、本発明のさらに別の実施態様は、本発明の標的である、または本発明の標的を発現するポリヌクレオチドで変換または形質転換された宿主細胞を提供する。好ましくは、前記ポリヌクレオチドは、標的となるか、または標的を発現するポリヌクレオチドの複製および発現のためのベクター中に保持される。細胞は前記ベクターとの相性のよさで選ばれ、例えば、原核生物（例えば細菌）、菌類、酵母または植物細胞のことがある。
【０３６１】
グラム陰性細菌である大腸菌は、非相同の遺伝子発現のホストとして広く用いられている。しかし、この細胞の内部には、大量の非相同蛋白質が蓄積される傾向がある。後で行なう大腸菌の菌体内蛋白質のバルクからの目的の蛋白質の精製は、時に困難なことがある。
【０３６２】
大腸菌と比べると、バチルス属に属するバクテリアは蛋白質を培地中に分泌する能力があるので、非相同ホストとして非常に適している。ホストとして適するその他のバクテリアは、ストレプトマイセス属およびシュードモナス属に属するものである。
【０３６３】
本発明のポリペチドをコードするポリヌクレオチドの性質および／または発現した蛋白質のその後の処理の望ましさによっては、酵母またはその他の菌類などの真核生物宿主が好ましいことがある。一般に、酵母細胞は取り扱いがより簡単なので菌類細胞より好ましい。しかし、いくつかの蛋白質は、酵母菌から分泌されにくいか、または場合によって適切に処理されない（例えば、酵母のハイパーグリコシル化）。このような場合には、別の菌類の宿主生物を選ぶべきである。
【０３６４】
本発明の範囲にある適当な発現ホストの例は、アスペルギルス（欧州特許出願公開第０１  ８４４３８号および欧州特許出願公開第０２  ８４６０３号明細書に記載されているものなど）およびトリコデルマなどの菌類、バチルス（欧州特許出願公開第０１  ３４０４８号および欧州特許出願公開第０２  ５３４５５号明細書に記載されているものなど）、ストレプトミセスおよびシュードモナスなどのバクテリア、およびクルーベロミセス（欧州特許出願公開第００  ９６４３０号および欧州特許出願公開第０３  ０１６７０号明細書に記載されているものなど）およびサッカロミセスなどの酵母である。例として、一般的な発現ホストは、黒色麹菌、黒色麹菌チュービゲニス変異株、黒色麹菌アワモリ変異株、アスペルギルス・アクレアティス、アスペルギルス・ニドゥランス、米麹菌、トリコデルマ・レエセイ、枯草菌、バチルス・リケニホルミス、バチルス・アミロリケファシエンス、クルーベロミセス・ラクティスおよびＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから選ばれることがある。
【０３６５】
酵母、菌類および植物宿主細胞などの適当な宿主細胞の使用によって、本発明の組み換え発現産物に最適な生物活性を与えるために必要なときには、翻訳後修飾（例えば、ミリストイル化、グリコシル化、トランケーション、切断およびチロシン、セリンまたはスレオニンリン酸化）を提供することがある。
【０３６６】
（生物）
本発明に関連する用語「生物」は、本発明による標的および／または本発明によって得られる生成物を含む可能性のある任意の生物を含む。生物の例は、菌類、酵母または植物を含むことがある。
【０３６７】
本発明に関連する用語「トランスジェニック生物」は、本発明による標的および／または本発明によって得られる生成物を含む任意の生物を含む。
【０３６８】
（宿主細胞／宿主生物の転換）
既に示したように、宿主生物は原核生物または真核生物であってよい。適当な原核生物宿主の例は、大腸菌および枯草菌を含む。当分野では、原核生物宿主の転換に関する教示は十分に文書化されている。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第２版、１９８９年、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ）およびＡｕｓｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９５年）、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．を参照すること。
【０３６９】
原核生物宿主が用いられる場合、ヌクレオチド配列は、イントロンを除去するなどして、変換前に十分な修正が必要なことがある。
【０３７０】
別の実施態様では、トランスジェニック生物は酵母であってよい。この点について、酵母は、非相同遺伝子発現用のベヒクルとしても広く使われてきた。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅは、非相同遺伝子発現のための使用を含めて、長い産業的な利用の歴史を有する。
【０３７１】
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅにおける異種遺伝子の発現については、Ｇｏｏｄｅｙら（１９８７年、Ｙｅａｓｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｄ．Ｒ．Ｂｅｒｒｙら編、４０１〜４２９頁、Ａｌｌｅｎ  ａｎｄ  Ｕｎｗｉｎ、ロンドン）およびＫｉｎｇら（１９８９年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｙｅａｓｔｓ、Ｆ．Ｔ．ＷａｌｔｏｎおよびＧ．Ｔ．Ｙａｒｒｏｎｔｏｎ編、１０７〜１３３頁、Ｂｌａｃｋｉｅ、グラスゴー）が解説している。
【０３７２】
いくつかの理由によって、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅは非相同遺伝子の発現に十分適している。まず、それは人間に対して非病原性であり、ある種の内毒素を産生できない。第二に、それはさまざまな目的による何世紀もの商業利用とともに歩んだ長い安全な使用の歴史を有する。これによって、広く一般に受け入れられている。第三に、広範囲な商用利用およびこの生物にささげられた研究によって、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの遺伝学および生理学ならびに大規模発酵の特性についての豊かな知識が蓄積されている。
【０３７３】
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅにおける異種遺伝子発現および遺伝子産物の分泌の原理の概説は、Ｅ  Ｈｉｎｃｈｃｌｉｆｆｅ  Ｅ  Ｋｅｎｎｙ（１９９３，「Ｙｅａｓｔ  ａｓ  ａ  ｖｅｈｉｃｌｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ  ｇｅｎｅｓ」、Ｙｅａｓｔｓ，第５巻、Ａｎｔｈｏｎｙ  Ｈ  ＲｏｓｅおよびＪ  Ｓｔｕａｒｔ  Ｈａｒｒｉｓｏｎ編、第２版、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  Ｌｔｄ．）によって与えられている。
【０３７４】
維持のために宿主ゲノムとの遺伝子組み換えを必要とし、自律的にプラスミドベクターを複製する統合ベクターを含む数種類の酵母ベクターが入手できる。
【０３７５】
トランスジェニックなサッカロミセスを調製するために、酵母中の発現のために設計した構成体にヌクレオチド配列を挿入することによって発現構成体を調製する。非相同発現のために用いられる数種類の構成体が開発された。これらの構造物は、ヌクレオチド配列に融合した酵母中で活性なプロモータ、を含む。通常はＧＡＬ１プロモータなど酵母起源のプロモータが用いられる。通常、ＳＵＣ２シグナルペプチドをコードする配列など、酵母起源のシグナル配列が用いられる。酵母中で活性なターミネータで発現系を終了させる
酵母の形質転換のために、いくつかの形質転換プロトコルは開発された。例えば、本発明によるトランスジェニックなサッカロミセスは、Ｈｉｎｎｅｎら（１９７８年、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＵＳＡ、第７５巻、１９２９頁）、Ｂｅｇｇｓ，Ｊ．Ｄ．（１９７８年、Ｎａｔｕｒｅ，Ｌｏｎｄｏｎ、第２７５巻、１０４頁）およびＩｔｏｈ，Ｈら（１９８３年、Ｊ．Ｂｅｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、第１５３巻、１６３〜１６８頁）の教示に従うことによって調製することができる。
【０３７６】
形質転換された酵母細胞は、さまざまな選択マーカーを用いて選ばれる。形質転換のために用いられるマーカーには、ＬＥＵ２、ＨＩＳ４およびＴＲＰ１などの多数の栄養要求性マーカーおよびアミノグリコシド抗生物質マーカー、例えばＧ４１８などの優勢抗生物質耐性マーカーがある。
【０３７７】
別の宿主生物は、植物である。遺伝子組み替え植物の構築の基本原理は、挿入した遺伝物質の安定な維持が得られるように、遺伝情報を植物ゲノムに挿入することである。遺伝情報を挿入するためにいくつかの技法が存在するが、二つの主要な原理は、遺伝情報の直接導入およびベクターシステムの使用による遺伝情報の導入である。一般的技法の概説は、Ｐｏｔｒｙｋｕｓの論文（Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｌａｎｔ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｌａｎｔ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．［１９９１］第４２巻、２０５〜２２５頁）およびＣｈｒｉｓｔｏｕ（Ａｇｒｏ−Ｆｏｏｄ−Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  Ｈｉ−Ｔｅｃｈ  ３月号／４月号、１９９４年、１２〜２７頁）中に見いだされる。植物形質転換に関するさらに別の教示が欧州特許第０４  ４９３７５号明細書中に見いだされる。
【０３７８】
従って、本発明は、標的であるか、または標的を発現するヌクレオチド配列で宿主細胞を形質転換する方法も提供する。ヌクレオチド配列で形質転換された宿主細胞は、コードされた蛋白質の発現に適する条件下で培養されることがある。組み換え細胞によって産生される蛋白質は、細胞の表面に表示されることがある。望むなら、当業者には理解されることであるが、コード配列を含む発現ベクターは、特定の原核または真核細胞膜を通してコード化配列の分泌を制御するシグナル配列を有するように設計することができる。その他の組み換え構造物は、可溶性蛋白質の精製を容易にするポリペチドドメインをコードするコード化配列をヌクレオチド配列に結合することがある（Ｋｒｏｌｌ  Ｄ．Ｊ．ら（１９９３年、ＤＮＡ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、第１２巻、４４１〜５３頁）。
【０３７９】
（変異菌／相同体／誘導体）
本明細書で言及する特定のアミノ酸配列およびヌクレオチド配列に加えて、本発明は、それらの変異株、相同体および誘導体の使用を包含する。ここで、用語「相同性」は「同一性」と同等に考えてよい。
【０３８０】
この状態では、相同配列は、少なくとも７５、８５または９０％同一、好ましくは少なくとも９５または９８％同一であるアミノ酸配列を含むと理解される。類似性（すなわち類似の化学的性質／機能を有するアミノ酸残基）によって相同性を考慮することもできるが、本発明の状況では、配列同一性によって相同性を表す方が好ましい。
【０３８１】
相同性比較は、眼によって、あるいはさらに一般的には容易に入手できる配列比較プログラムを用いて実行できる。これらの市販コンピュータプログラムは、二つ以上の配列の間の％相同性を計算することができる。
【０３８２】
％相同性は、隣り合わせの配列上で計算されることがある。すなわち一つの配列を他の配列と並べて置き、一方の配列中の各アミノ酸を他方の配列中の対応するアミノ酸と一度に一残基ずつ直接比較する。これは、「ギャップなし」配列と呼ばれる。一般に、このようなギャップなし配列は比較的に短い数の残基の場合にだけ実行される。
【０３８３】
これは非常に簡単で確実な方法であるが、例えば、他は同一の配列の対において、一個の挿入または削除によってそれ以降のアミノ酸残基が整列から外れ、従って全体にわたって整列を実行すると、可能性として％相同性が大幅に低下することを考慮していない。従って、ほとんどの配列比較法は、総合相同性スコアを過大に減点することなくあり得る挿入および削除を考慮する最適な整列を生み出すように設計されている。これは、配列整列にギャップを挿入して局所相同性の最大化を試みることによって実現される。
【０３８４】
しかし、これらの複雑な方法は、同じ数の同一アミノ酸の場合、比較される二つの配列の間のより高い相関性を反映して、できるだけ少ないギャップを有する配列整列が、多数のギャップを有するものより高い得点を獲得できるように、配列中に発生する各ギャップに「ギャップ減点」を割り当てる。一般に、ギャップの存在に対しては比較的高いコストを課し、ギャップ中のその後の各残基に対しては小さなペナルティしか課さない「アフィンギャップコスト」が用いられる。これは最も普通に用いられているギャップスコアリングシステムである。高いギャップペナルティは、もちろんギャップの少ない最適化配列を生み出す。ほとんどの配列プログラムは、ギャップペナルティの修正ができる。しかし、配列比較のためにそのようなソフトウェアを用いるときには、既定値を用いることが好ましい。例えば、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｂｅｓｔｆｉｔパッケージ（下記参照）を用いるとき、アミノ酸配列のギャップペナルティ既定値は、ギャップあたり−１２、延長あたり−４である。
【０３８５】
従って、最大％相同性の計算には、第一にギャップペナルティを考慮して最適整列をつくることが必要である。そのような整列を実行する適切なコンピュータプログラムが、ＧＣＧ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｂｅｓｔｆｉｔパッケージ（ウィスコンシン大学、米国、Ｄｅｖｅｒｅｕｘら、１９８４年、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第１２巻、３８７頁）である。配列比較を実行できるその他のソフトウェアの例は、ＢＬＡＳＴパッケージ（Ａｕｓｕｂｅｌら、１９９９年、前出、第１８章参照のこと）、ＦＡＳＴＡ（Ａｔｓｃｈｕｌら、１９９０年、Ｊ．Ｍｏ．Ｂｉｏｌ．、４０３〜４１０頁）および比較ツールのＧＥＮＥＷＯＲＫＳスイーツを含むがそれらに限定されない。ＢＬＡＳＴおよびＦＡＳＴＡの両方は、オフラインおよびオンライン検索に利用できる（Ａｕｓｕｂｅｌら、１９９９年、前出、７−５８から７−６０頁を参照のこと）。しかし、ＧＣＧ  Ｂｅｓｔｆｉｔプログラムを用いる方が好ましい。
【０３８６】
さらに別の有用なレファレンスがＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．、１９９９年５月１５日、第１７４巻２号２４７〜５０頁に見いだされる（ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．、１９９９年８月１日、第１７７巻１号１８７〜８頁に訂正が公表されている）。
【０３８７】
同一性に関して、最終的な％相同性を測定できるが、一般に、整列プロセスそれ自体はすべてか無かの比較にもとづいていない。代わって、一般に、化学的な類似性または進化的な隔たりにもとづいて、それぞれの対の間の比較にスコアを割り当てる比例類似性スコアマトリックスが用いられる。一般に用いられるそのようなマトリックスの例が、ＢＬＡＳＴプログラムスイート用の既定マトリックスであるＢＬＯＳＵＭ６２マトリックスである。一般に、ＧＣＧウィスコンシンプログラムは、公開既定値または供給されれば専用シンボル比較テーブルのどちらかを用いる（詳細についてはユーザマニュアル参照のこと）。ＧＣＧパッケージについては公開既定値を用い、その他のソフトウェアの場合にはＢＬＯＳＵＭ６２などの既定マトリックスを用いることが好ましい。
【０３８８】
ソフトウェアが最適整列を作成したら、％相同性、好ましくは％配列同一性を計算することが可能である。一般に、ソフトウェアは、配列比較の一部としてこれを実行し、数値的な結果を生成する。
【０３８９】
配列は、サイレント変化を生ずるアミノ酸残基の欠失、挿入または置換も含み、結果として機能的に等価な物質を生み出す。その物質の二次的な結合活性が保持される限り、残基の極性、電荷、溶解度、疎水性、親水性および／または両親媒性の性質の類似性にもとづいて、故意のアミノ酸置換が施されることがある。例えば、負電荷を有するアミノ酸はアスパラギン酸およびグルタミン酸を含み、正電荷を有するアミノ酸はリシンおよびアルギニンを含み、類似の親水性値を有する非荷電の極性頭基を有するアミノ酸はロイシン、イソロイシン、バリン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、フェニルアラニンおよびチロシンを含む。
【０３９０】
下記の表によって、保存的置換が施されることがある。第二列の同じブロック内にあって、好ましくは第三列の同一行にあるアミノ酸は、互いに置換されることがある。
【０３９１】
【表１】
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（発現ベクター）
標的として用いるため、または標的を発現させるためのヌクレオチド配列を、組換え型複製可能ベクター中に組み込むことができる。適合する宿主細胞中に、および／また適合する宿主細胞から、ヌクレオチド配列を発現させるために、ベクターを用いることがある。プロモータ／エンハンサおよびその他の発現制御信号を含む制御配列を用いて、発現を制御することがある。原核生物のプロモータおよび真核細胞中の機能プロモータを用いることがある。組織特異的または刺激特異的プロモータを用いることがある。上記で説明した二つ以上の異なるプロモータからの配列要素を含むキメラプロモータを用いることもある。
【０３９２】
ヌクレオチド配列の発現によって宿主組換え細胞が産生する蛋白質は、配列および／または用いられるベクターによって、分泌され、または細胞内に保持されることがある。特定の原核生物または真核生物細胞膜を通して、物質コード配列の分泌を指示するシグナル配列を有するコード配列を設計することができる。
【０３９３】
（融合蛋白質）
例えば、抽出および精製を支援するように標的アミノ酸配列を融合蛋白質として産生することがある。融合蛋白質のパートナーの例は、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、６ｘＨｉｓ、ＧＡＬ４（ＤＮＡ結合および／または転写活性化ドメイン）および（−ガラクトシダーゼを含む。融合蛋白質配列の除去を可能にするために、融合蛋白質パートナーと対象となる蛋白質配列との間に蛋白質分解切断部位を含むと便利なこともある。好ましくは、融合蛋白質は標的の活性を妨げない。
【０３９４】
融合蛋白質は、本発明の物質に融合した抗原または抗原決定基を含むことがある。この実施態様では、融合蛋白質は、免疫系の一般化刺激を提供するという意味でアジュバントとして作用する物質を含む非天然融合蛋白質のことがある。抗原または抗原決定基は、物質のアミン末端またはカルボキシ末端のどちらかに結合される。
【０３９５】
本発明の別の実施態様では、融合蛋白質をコードするために、アミノ酸配列を非相同配列に結合することがある。例えば、物質活性に影響を及ぼすことができる作用物質のペプチドライブラリのスクリーニングのために、市販の抗体によって認識される非相同エピトープを発現するキメラ物質をコード化すると有用なことがある。
【０３９６】
（治療）
本発明の化合物は、治療薬として用いられる、すなわち治療用途で用いられることがある。
【０３９７】
用語「治療」は、治療効果、軽減効果および予防効果を含む。
【０３９８】
治療はヒトに、動物に関わり、好ましくは雌の動物に関わることがある。
【０３９９】
（医薬品組成物）
一つの様相では、本発明は、医薬品組成物を提供する。本医薬品組成物は、本発明による化合物、およびオプションとして、薬学上許容されるキャリア、希釈剤または医薬品添加物（それらの組み合わせを含む）を含む。
【０４００】
医薬品組成物は、ヒトおよび獣医科医薬品中にあって、ヒトまたは動物への使用のためにあり、一般に、任意の一つ以上の薬学上許容される希釈剤、キャリアまたは医薬品添加物を含む。治療用に許容されるキャリアまたは希釈剤は、医薬品分野では公知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５年）に記載されている。医薬品キャリア、添加物または希釈剤は、意図する投与の経路および標準的な薬務実務によって選ぶことができる。医薬品組成物は、キャリア、添加剤または希釈剤として、あるいはキャリア、添加剤または希釈剤に加えて、任意の適当なバインダ（単数または複数）、潤滑剤（単数または複数）、懸濁剤（単数または複数）、コーティング剤（単数または複数）、可溶化剤（単数または複数）を含むことがある。
【０４０１】
医薬品組成物中には、防腐剤、安定剤、色素および香味料まで提供されることがある。防腐剤の例は、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸およびｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルを含む。酸化防止剤および懸濁化剤が用いられることもある。
【０４０２】
さまざまなデリバリシステムに依存して、さまざまな組成物／製剤要件がある。例を挙げると、本発明の医薬品組成物は、ミニポンプを用いて、または粘膜経路、例えば鼻噴霧として、または吸入用のエーロゾルまたは経口摂取可能な溶液によって、あるいは非経口的に供給されるよう製剤化されることがある。非経口的な場合には、本組成物は、例えば静脈、筋肉または皮下経路によるデリバリーのために、注射可能な形に製剤化される。あるいは、製剤は、両方の経路によって供給されるように設計されることがある。
【０４０３】
薬剤が胃腸の粘膜を通して粘膜経路で供給される場合には、薬剤は、消化管内の移動時に安定である必要があり、例えば、蛋白質分解劣化に抵抗し、酸性ｐＨにおいて安定で、胆汁の界面活性剤効果に抵抗する必要がある。
【０４０４】
必要に応じて、本医薬品組成物は、吸入によって、坐薬またはペッサリーの形で、ローション、溶液、クリーム、軟膏または散粉剤の形で塗布薬として、皮膚パッチの使用によって、デンプンまたはラクトースなどの添加剤を含む錠剤の形で経口で、または単独または添加剤との混合物でカプセルまたは胚珠で、または香味料または着色剤を含むエリキシル剤、溶液または懸濁液の形で投与することができ、あるいは非経口的に、例えば静脈、筋肉または皮下注射することができる。非経口投与の場合、本組成物は、他の物質、例えば溶液を血液と等張性にするために十分な塩類または単糖類を含む無菌水溶液の形で最も良く使われることがある。バッカル剤または舌下投与の場合、本組成物は、従来の方法で製剤化できる錠剤またはトローチ剤の形で投与されることがある。
【０４０５】
（組み合わせ医薬品）
本発明の化合物は、一つ以上の薬学上活性な他の作用物質など、一つ以上の活性な他の作用物質と組み合わせて、用いられることがある。
【０４０６】
例を挙げると、本発明の化合物は、他のＳＴＳ阻害剤、および／またはアロマターゼ阻害薬（例えば４−ヒドロキシアンドロステンジオン（４−ＯＨＡ））などの他の阻害剤、および／または天然物ステルニューロステロイドのデヒドロエピアンドロステロンスルフェート（ＲＨＥＡＳ）およびプレグネノロンスルフェート（ＰＳ）などのステロイド、および／またはその他の構造的に類似の有機化合物と組み合わせて用いられることがある。その他のＳＴＳ阻害剤の例は、上記参考文献中に見られる。例を挙げると、本発明に用いられるＳＴＳ阻害剤は、ＥＭＡＴＥ、および本明細書に示す化合物５に類似する２−エチルおよび２−メトキシ１７−デオキシ化合物の一方または両方を含む。
【０４０７】
さらに、あるいは、本発明の化合物は、生体応答調節剤と組み合わせて用いられることがある。
【０４０８】
用語「生体応答調節剤（ＢＲＭ）」は、サイトカイン、免疫調節因子、増殖因子、造血調節因子、コロニー刺激因子、走化性、溶血性および血栓溶解因子、細胞表面受容体、リガンド、白血球接着分子、モノクローナル抗体、予防および治療ワクチン、ホルモン類、細胞外基質成分、フィブロネクチンなどを含む。いくつかの用途の場合、好ましくは、生体応答調節剤はサイトカインである。サイトカインの例は、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１９などのインターロイキン（ＩＬ）、ＴＮＦ−α、インターフェロンアルファ、ベータおよびガンマ、ＴＧＦ−βなどの腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）を含む。いくつかの用途では、好ましくは、サイトカインは腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）である。いくつかの用途では、ＴＮＦは、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−βなど、それらの誘導体または混合物を含むＴＮＦの任意の種類のことがある。より好ましくは、サイトカインはＴＮＦ−αである。ＴＮＦに関する教示は、ＷＯ特許９８／０８８７０号およびＷＯ特許９８／１３３４８号明細書など当分野において見いだされる。
【０４０９】
（投与）
一般に、医師が個々の被験者に最も適する実際の投与量を決定し、それは特定の患者の年齢、体重および応答によって変化する。下記の投与量は、平均事例の例である。もちろん、これらより高い、または低い投与量範囲が相当する個々の事例があり得る。
【０４１０】
本発明の組成物は、直接注射によって投与されることがある。組成物は、非経口、粘膜、筋肉内、静脈内、皮下、眼内または経皮投与のために製剤化されることがある。必要によって、薬剤は、０．０１から３０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば０．１から１０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１から１ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与されることがある。
【０４１１】
さらに別の例を挙げると、本発明の薬剤は、一日あたり１回から４回、好ましくは一日あたり１回または２回の投薬計画に従って投与されることがある。任意の特定の患者のための特定の投薬量レベルおよび投薬の頻度はさまざまであり、使用する特定の化合物の活性、その化合物の代謝安定性および作用の長さ、年齢、体重、健康状態、性別、食生活、投薬のモードおよび回数、排出速度、薬剤の組み合わせ、特定の病態の重篤さおよび治療を受けている宿主を含むさまざまな因子に依存する。
【０４１２】
上記で示した投薬の一般的なモードを除いて、用語「投与される」は、脂質媒介形質移入、リポソーム、免疫リポソーム、リポフェクチン、カチオン性界面両親媒性物質（ＣＦＡ）およびそれらの組み合わせなどの技法による投薬を含む。そのような投薬機構の経路は、粘膜、鼻、経口、非経口、胃腸、局部または舌下経路を含むが、それらに限定されない。
【０４１３】
用語「投与される」は、例えば鼻内噴霧または吸入用エーロゾル剤としてまたは消化可能な溶液としての粘膜経路による投薬、投薬が例えば静脈、筋肉または皮下経路などの注射可能な形による非経口経路を含むがそれらに限定されない。
【０４１４】
従って、医薬品投薬については、本発明のＳＴＳ阻害剤は、通常の医薬品製剤技法および医薬品キャリア、アジュバント、添加剤、希釈剤等を利用して、任意の適当な方法で、通常は非経口投与用に製剤化することができる。近似的な有効用量率は、問題の化合物の個々の活性によって平均体重（７０Ｋｇ）の患者のために１から１０００ｍｇ／日、例えば１０から９００ｍｇ／日または１００から８００ｍｇ／日の範囲のことがある。好ましいおよびより活性化合物のためのもっと普通の投薬率は、２００から８００ｍｇ／日、より好ましくは、２００から５００ｍｇ／日、もっとも好ましくは２００から２５０ｍｇ／日の範囲である。それらは、数日間にわたって続く一回投与体制、分割投与体制および／または多回投与体制で与えられることがある。経口投与の場合、それらは１単位投与量あたり１００から５００ｍｇの化合物を含む錠剤、カプセル、溶液または懸濁液に製剤化されることがある。あるいは、好ましくは、本化合物は、適当な非経口的に投薬可能なキャリア中に非経口投与用に製剤化され、２００から８００ｍｇ、好ましくは２００から５００、より好ましくは２００から２５０ｍｇの範囲で単一の１日投薬率を提供する。しかし、そのような有効日用量は、活性成分の固有の活性および患者の体重によって変化し、そのような変動は医師の技術および判断の範囲内である。
【０４１５】
（細胞周期）
本発明の化合物は、細胞周期障害の治療法で有用なことがある。
【０４１６】
「分子細胞生物学」第３版、Ｌｏｄｉｓｈら、１７７〜１８１頁で考察されているように、種々の真核細胞は、非常に異なる速度で成長し分裂できる。例えば、酵母細胞は、１２０分ごとに分裂することができ、ウニおよび昆虫の胚細胞の受精卵の最初の分裂には、一つの大きな既存の細胞が再分割されるので、１５３０分しか要しない。しかし、ほとんどの成長する植物および動物細胞は、二倍の数になるのに１０〜２０時間を要し、あるものははるかに遅い速度で複製する。成体中の多くの細胞、神経細胞および横紋筋細胞などはまったく分裂せず、傷の治癒を支援する繊維芽細胞のような他の細胞は、要求があると成長するが、さもなければ休止している。
【０４１７】
それでも、分裂するあらゆる真核細胞は、二つの娘細胞に等しい遺伝物質を与えられる体制でなければならない。真核生物内のＤＮＡ合成は、細胞分裂周期全体を通して起こるわけではなく、細胞分割の前のその一部分に限定されている。
【０４１８】
真核生物のＤＮＡ合成と細胞分裂との間の関係は、成長および分裂の能力をすべて備える哺乳類細胞の培養物中で、綿密に分析された。バクテリアとは対照的に、真核細胞はその時間のほんの一部をＤＮＡ合成に費やし、細胞分裂の数時間前には完結する（有糸分裂）ことが見いだされた。従って、ＤＮＡ合成後と細胞分裂前との間に時間のギャップがある。分裂の後と次の回のＤＮＡ合成の前との間に別のギャップがあることが見いだされた。この分析は、真核生物の細胞周期は、Ｍ（有糸分裂）期、Ｇ１期（第一ギャップ）、Ｓ（ＤＮＡ合成）期、Ｇ２期（第二ギャップ）および再びＭからなるという結論を導いた。有糸分裂の間の期（Ｇ１、ＳおよびＧ２）は、まとめて間期として知られている。
【０４１９】
組織中の多くの非分裂細胞（例えば、すべての休止繊維芽細胞）は、有糸分裂後、ＤＮＡ合成の直前にサイクルを停止し、そのような「休止」細胞は、細胞周期から外れてＧ０状態にあると言われる。
【０４２０】
細胞が細胞周期の三つの間期段階の一つにあるとき、細胞の相対的ＤＮＡ含量を測定する蛍光標示式細胞分取器（ＦＡＣＳ）を用いて細胞を特定することが可能である。Ｇ１（ＤＮＡ合成前）にある細胞は、ＤＮＡの定められた量ｘを有し、Ｓ（ＤＮＡ複製）の間にはｘと２ｘとの間の量を有し、Ｇ２（またはＭ）にあるときには２ｘのＤＮＡを有する。
【０４２１】
動物細胞の有糸分裂および細胞質分裂の段階は、次のようである
（ａ）間期。間期のＧ２段階は、有糸分裂の開始の直前である。Ｓ期の間に、染色体ＤＮＡは複製され、蛋白質に結合しているが、染色体は明瞭な構造としてまだ見られない。核小体は、光学顕微鏡下で見える唯一の核下部構造である。ＤＮＡ複製前の二倍体細胞には、それぞれのタイプの二つの形態学的染色体があり、この細胞は２ｎであると言われる。Ｇ２では、ＤＮＡ複製後、細胞は４ｎである。各染色体ＤＮＡの四つのコピーがある。姉妹染色体は互いにまだ分裂していないので、姉妹染色分体と呼ばれる。
【０４２２】
ｂ）前期初期。それぞれ新たに形成された娘中心小体を有する中心小体が、細胞の両極の方へ移動し始め、染色体は、長い糸として見ることができる。核膜は、小さなベシクルに分裂し始める。
【０４２３】
（ｃ）前期中期および終期。染色体凝縮は完結し、目に見える染色体構造はそれぞれ中心体で一緒に保持された二つの染色分体で構成されている。各染色分体は、新たに複製された二つの娘ＤＮＡ分子の一方を含んでいる。極に接近しつつある中心小体に隣接する領域から、微小管紡錘体が広がり始める。いくつかの紡錘体繊維は極から極に達し、大部分は染色分体へ伸び動原体に付く。
【０４２４】
（ｄ）中期。染色体は細胞の赤道の方へ移動し、赤道面に整列する。姉妹染色分体は、まだ分裂しない。
【０４２５】
（ｅ）後期。二つの姉妹染色分体は、独立の染色体に分かれる。それぞれが、紡錘体繊維によって一つの極につながれた中心体を含み、極の方に移動する。従って、各染色体の一つのコピーが、各娘細胞に与えられる。同時に、細胞は伸張し、極間紡錘体も伸張する。分裂溝が形成し始め、それにつれて、細胞質分裂が始まる。
【０４２６】
（ｆ）終期。娘核の周りに新しい膜が形成され、染色体はほどけて目立たなくなり、核小体が再び見えるようになり、各娘核の回りに核膜が形成される。細胞質分裂はほとんど完結し、微小管およびその他の繊維が解重合するにつれて、紡錘体は消える。有糸分裂を通して、各極の「娘」中心小体は全長に達するまで成長する。終期において、元の中心小体のそれぞれの複製が完結し、次の間期の間に新しい娘中心小体が発生する。
【０４２７】
（ｇ）間期。細胞質分裂の完結と同時に、細胞は細胞周期のＧ１期に入り、再び周期を続ける。
【０４２８】
細胞周期が極めて重要な細胞プロセスであることは自明である。正常な細胞周期からの逸脱は、多数の医学的障害を引き起こす。増進したおよび／または無制限の細胞周期は、癌に至ることがある。低下した細胞周期は、退行性の状態を生じることがある。本発明の化合物の使用は、そのような障害および条件を治療する手段を提供することがある。
【０４２９】
従って、本発明の化合物は、ホルモン依存性およびホルモン非依存性癌を含む癌などの細胞周期障害の治療に適することがある。
【０４３０】
さらに、本発明の化合物は、乳癌、卵巣癌、子宮体癌、肉腫、メラノーマ、前立腺癌、膵臓癌等およびその他の固体腫瘍などのガンの治療に適することがある。
【０４３１】
いくつかの用途では、細胞周期を阻害し、および／または妨害し、および／または停止させ、好ましくは、細胞周期を妨害し、および／または停止させる。一つの様相では、細胞周期をＧ２／Ｍ期で阻害し、および／または妨害し、および／または停止させることがある。一つの様相では、細胞周期を不可逆的に妨害し、および／または阻害し、および／または停止させ、好ましくは、細胞周期を不可逆的に妨害し、および／または停止させる。
【０４３２】
用語「不可逆的に妨害し、および／または阻害し、および／または停止させる」によって、本発明の化合物の服用後に、化合物を取り除いても、化合物の効果、すなわち細胞周期の妨害および／または阻害および／または停止が依然観測できることを意味する。より詳しくは、用語「不可逆的に妨害し、および／または阻害し、および／または停止させせる」によって、本明細書に提示する細胞周期アッセイプロトコルに従ってアッセイするときに、興味の対象である化合物で処理した細胞は、プロトコルＩの段階２の後で、対照細胞より少ない成長を示すことを意味する。このプロトコルに関する詳細を、下記に示す。
【０４３３】
従って、本発明は、細胞周期を妨害し、および／または阻害し、および／または停止させることによって、試験管内で、エストロゲン受容体陽性（ＥＲ＋）およびＥＲ陰性（ＥＲ−）乳がん細胞の成長の阻害の原因となり、および／または健常動物（すなわち、非卵巣切除）におけるニトロソメチル尿素（ＮＭＵ）誘発乳腺腫瘍の退行の原因となり、および／または、癌細胞における細胞周期を妨害し、および／または阻害し、および／または停止させ、および／または、生体内で、細胞周期を妨害し、および／または阻害し、および／または停止させることによって作用し、および／または細胞周期作動薬として作用する化合物を提供する。
【０４３４】
（細胞周期アッセイ（プロトコル６））
（手順）
（段階１）
マルチウェル培養物プレートにＭＣＦ−７乳がん細胞を１０５細胞／ウェルの密度で接種する。以下のように処理して、細胞を付着させ、約３０％密度まで成長させた。
【０４３５】
（対照  無処理）
（対象化合物（ＣＯＩ）  ２０μＭ）
３日ごとに培地／ＣＯＩを変え、ＣＯＩを含む成育培地中で６日間細胞を成長させる。この期間の終わりに、Ｃｏｕｌｔｅｒ細胞カウンタを用いて細胞数を数えた。
【０４３６】
（段階２）
ＣＯＩによる６日間の細胞処理後、１０４細胞／ウェルの密度で細胞を再接種する。それ以上の処理はまったく加えない。成育培地の存在下、さらに６日間細胞に成長を続けさせる。この期間の終わりに、再び細胞数を数える。
【０４３７】
（癌細胞を用いてＤＨ活性を決定するアッセイ（プロトコル７））
エストロンからエストラジオール（Ｅ１→Ｅ２、Ｅ２ＤＨタイプＩ）、およびエストラジオールからエストロン（Ｅ２→Ｅ１、Ｅ２ＤＨタイプＩＩ）への変換を、Ｔ４７ＤおよびＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳がん細胞の健常細胞単層中で測定した。８０〜９０％密度になるまでフラスコ中で細胞を培養した。２．５ｍｌ培地中のさまざまな試験化合物（１０μＭ）の非存在下（対照）または存在下で、３Ｈ−Ｅ１または３Ｈ−Ｅ２（６ピコモル、〜９０Ｃｉ／ミリモル）を各フラスコに加えた。細胞の入っていないフラスコにも基質を加え、平行して培養した（ブランク）。
【０４３８】
Ｔ４７Ｄ細胞で３０分間、またはＭＤＡ細胞で３時間、３７℃で培養後、１４Ｃ−Ｅ２または１４Ｃ−Ｅ１（〜５０００ｃｐｍ）および５０μｇのＥ２またはＥ１をそれぞれ含む試験管に２ｍｌの培地を加えた。ジエチルエーテル（４ｍｌ）で水性培地からステロイドを抽出した。固体二酸化炭素−メタノール混合物中で水相を凍結した後、エーテル相を別の試験管に移した。空気流下、４０℃でエーテルを蒸発乾固した。残留物を少量のジエチルエーテルに溶解して、蛍光指示薬を含むＴＬＣプレートに塗布した。ＤＣＭ−酢酸エチル（４：１、体積／体積）を用いてＴＬＣでＥ１およびＥ２を分離した。紫外線灯下での可視化後、ＴＬＣプレート上の各培養フラスコからの生成物の位置をマークした。マークした部分を切り取り、メタノール（０．５ｍｌ）を含むシンチレーションバイアル中に入れて生成物を溶出させた。シンチレーション分光分析後、生成した３Ｈ−産物および回収した１４Ｃ−Ｅ１または１４Ｃ−Ｅ２の量を計算した。生成した産物の量を、手順中の損失および各フラスコ中の細胞の数で補正した。
【０４３９】
（癌）
前記のように、本発明の化合物は、細胞周期障害の治療において有用なことがある。特定の細胞周期障害は、癌である。
【０４４０】
癌は、ほとんどの西欧諸国において、依然として、主な死亡原因である。これまでに開発された癌治療は、ホルモン依存性腫瘍の成長を阻害するためにホルモン類の作用または合成を妨害することを含む。しかし、ホルモン非依存腫瘍の治療のためには、現在、より積極的な化学療法が使用されている。
【０４４１】
従って、化学療法に関連する副作用のいくつかまたはすべてをさらに欠く、ホルモン依存および／またはホルモン非依存腫瘍の抗癌治療のための医薬品の開発は、大きな治療上の進歩を表す。
【０４４２】
エストロゲンは、合成された後、多数のヒドロキシル化および抱合反応を受けることが知られている。最近まで、そのような反応は、エストロゲンを最終的には水溶性にして、身体からのエストロゲンの排出を促進する代謝プロセスの一部であると考えられていた。いくつかのヒドロキシ代謝物（例えば２−ヒドロキシおよび１６アルファ−ヒドロキシ）および抱合体（例えばエストロンスルフェート、Ｅ１Ｓ）が、エストロゲンが身体の中で有する複雑な作用のいくつかを決定する上で重要であることは、今や明らかである。
【０４４３】
研究者たちは、乳癌の危険性を変える条件に関連して、２−および１６−ヒドロキシル化エストロゲンの生成を検討した。今では、２−ヒドロキシラーゼ活性を増加させる因子は発癌リスクの低下と関連し、１６アルファ−ヒドロキシル化を増加させる因子は乳癌の危険性を高めることがあるという証拠がある。エストロゲン代謝物の生物学的役割におけるさらに別の関心は、２−メトキシエストラジオールが抗有糸分裂の性質を有する内因性の代謝物であるという強力になりつつある証拠の集積によって刺激された。２−ＭｅＯＥ２は、体内に広く分布する酵素であるカテコールエストロゲンメチルトランスフェラーゼによって、２−ヒドロキシエストラジオール（２−ＯＨＥ２）から形成される。
【０４４４】
研究者たちは、生体内で、Ｍｅｔｈ  Ａサルコーマ、Ｂ１６メラノーマまたはＭＤＡ−ＭＢ−４３５エストロゲン受容体陰性（ＥＲ−）乳癌細胞の皮下注射から発生する腫瘍の成長を、２−ＭｅＯＥ２が阻害することを示した。それは、内皮細胞増殖および移動、ならびに試験管内での血管新生も阻害する。生体内で腫瘍増殖を阻害する２−ＭｅＯＥ２の能力は、腫瘍細胞の増殖の直接の抑制ではなく、腫瘍によって誘起される血管新生を阻害するその能力による可能性があることが示唆された。
【０４４５】
２−ＭｅＯＥ２がその強い抗有糸分裂効果および抗血管新生効果を及ぼす機構は、まだ解明されていない。高濃度では、それは微小管の重合を阻害し、チューブリンへのコルヒチン結合の弱い阻害剤として作用できるという証拠がある。しかし、最近、有糸分裂を妨害する濃度で、細胞中のチューブリンフィラメントは、解重合することは見いだされなかったが、タキソール処理後に見られるのと同じ形態を有することが見いだされた。従って、タキソールのように、乳癌および卵巣乳癌治療のために用いられる薬物、２−ＭｅＯＥ２が微小管動態力学を安定させることによって作用することはあり得る。
【０４４６】
癌のための新しい治療としての２−ＭｅＯＥ２の特定は、重要な進歩を表すが、経口投与したエストロゲンの生物学的利用能は貧弱である。さらに、エストロゲンは肝臓を通る初回の通過の間に広範囲な代謝を受ける可能性がある。乳癌治療のためのステロイドスルファターゼ阻害剤を開発する研究計画の一部として、エストロン−３−Ｏ−スルファミン酸エステル（ＥＭＡＴＥ）が強い活性部位特異的阻害剤として特定された。意外にも、ＥＭＡＴＥは強いエストロゲン様性質を備え、ラットにおけるその経口子宮肥大活性はエストラジオールのそれより１００倍高いことが立証された。その増進したエストロゲン性は、肝臓通過中に失活から保護し、徐放のための貯槽として長期間にわたって作用する赤血球（ｒｂｃｓ）による吸収によるものと考えられる。２−メトキシエストロン−３−Ｏ−スルファミン酸エステルを含む多数のＡ−環修飾類似体が合成され、試験された。この化合物は、ステロイドスルファターゼ阻害剤としては、ＥＭＡＴＥと等効力だったが、エストロゲン性が欠けていた。
【０４４７】
我々は、本発明の化合物が癌、特に、乳癌の治療のための手段を提供すると信じる。
【０４４８】
さらにまたはあるいは、本発明の化合物は、白血病および乳房、子宮内膜、前立腺、卵巣および膵臓腫瘍などの固形腫瘍を含む癌の成長の阻害において有用なことがある。
【０４４９】
（エストロゲンに関わる治療）
本発明の化合物のいくつかは、特に女性において、体内のエストロゲンレベルの制御において有用なことがあると考えられる。従って、本化合物のあるものは、経口避妊薬錠剤、丸剤、溶液またはトローチ剤などの避妊の手段を提供するとして有用なことがある。あるいは、本化合物は、インプラントの形であってもよく、またはパッチとしてであってもよい。
【０４５０】
従って、本発明の化合物は、エストロゲンに関連するホルモン状態を治療する際に有用なことがある。
【０４５１】
さらにまたはあるいは、本発明の化合物は、エストロゲンに関連するものに加えて、ホルモン状態を治療する際に有用なことがある。従って、本発明の化合物は、ホルモン活性に影響を及ぼす能力もあり、免疫応答に影響を及ぼすことができる場合がある。
【０４５２】
（神経変性疾患）
本発明の化合物のいくつかは、神経変性疾患および類似の状態の治療において有用なことがあると考えられる。
【０４５３】
例を挙げると、ＳＴＳ阻害剤は、記憶喪失症、頭部損傷、アルツハイマー型痴呆、癲癇性痴呆、初老性痴呆、心的外傷後ストレス精神障害、老人性痴呆、血管痴呆および卒中後痴呆などの疾患に苦しむ患者または他の理由で記憶増進を求めている個人の記憶機能を高めることにおいて有用なことがあると考えられている。
【０４５４】
（ＴＨ１）
本発明の化合物のいくつかは、ＴＨ１実体化において有用なことがあると考えられる。
【０４５５】
例を挙げると、マクロファージまたはその他の抗原提示細胞中のＳＴＳ阻害剤の存在によって、ＴＨ１応答（高ＩＬ−２、ＩＦＮｙ、低ＩＬ−４）を実行する感作Ｔ細胞の能力の低下につながることがあると考えられる。従って、グルココルチコイドなどの他のステロイドの正常な調節性の影響が優勢になる。
【０４５６】
（炎症性状態）
我々は、本発明の化合物のあるものは、例えば、リウマチ性関節炎、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、甲状腺炎、脈管炎、潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む自己免疫状態、皮膚疾患例えば乾せん症および接触性皮膚炎、対宿主性移植片病、皮膚炎、気管支ぜん息および移植後の臓器拒絶反応の任意の一つ以上のものを伴う状態などの炎症性の状態を治療する際に有用なことがあると考えている。
【０４５７】
例を挙げると、ＳＴＳ阻害剤は、免疫性および／または炎症性応答に対するＤＨＥＡまたは関連するステロイドの正常な生理作用を妨げることがあると考えられている。
【０４５８】
本発明の化合物は、内因性グルココルチコイド類似の結果を顕す医薬品の製造において有用なことがある。
【０４５９】
（その他の治療）
本発明の化合物／組成物は、他の重要な医学的な意味を有することがあることも理解されるものとする。
【０４６０】
例えば、本発明の化合物または組成物は、国際公開第９９／５２８９０号明細書に列挙されている疾患の治療において有用なことがある。下記参照。
【０４６１】
さらに、またはあるいは、本発明の化合物または組成物は、国際公開第９８／０５６３５号明細書に列挙されている疾患の治療において有用なことがある。次に、参照を容易にするために、そのリストの一部を提供する。すなわち、癌、炎症または炎症性疾患、皮膚病学的な疾患、熱、心血管影響、出血、凝血および急性相応答、悪液質、食欲減退、急性感染症、ＨＩＶ感染症、ショック様、対宿主移植片反応、自己免疫性疾患、再かん流損傷、髄膜炎、偏頭痛およびアスピリン依存抗血せん症、腫瘍増殖、侵襲および展開、血管形成、転移、悪性腫瘍、腹水症および悪性胸水、脳虚血、虚血性心臓疾患、骨関節炎、リウマチ性関節炎、骨粗鬆症、気管支喘息、多発性硬化症、神経変性、アルツハイマー型痴呆、アテローム性動脈硬化症、脳卒中、脈管炎、クローン病および潰瘍性大腸炎、歯周炎歯肉炎、乾せん症、アトピー性皮膚炎、慢性潰瘍、表皮水疱症、角膜潰瘍、網膜症および外科的創傷治癒、鼻炎、アレルギー性結膜炎、皮膚炎、過敏症、再狭窄、うっ血性心不全、子宮内膜症、アテローム性動脈硬化症またはエンドスクレローシス。
【０４６２】
さらに、またはあるいは、本発明の化合物または組成物は、国際公開第９８／０７８５９号明細書に列挙されている疾患の治療において有用なことがある。次に、参照を容易にするために、そのリストの一部を提供する。すなわち、サイトカインおよび細胞増殖／分化活性、免疫抑制薬または免疫賦活薬活性（例えば、ヒト免疫不全ウイルスによる感染を含む免疫不全を治療するため、リンパ球成長の調節のため、癌および多くの自己免疫性疾患を治療するため、および移植拒絶を予防しまたは腫瘍免疫を誘導するため）、造血の調節、例えば脊髄またはリンパ系の疾患の治療、例えば、傷を治癒するために骨、軟骨、腱、靱帯および神経組織の成長を促進すること、火傷、潰瘍および歯周疾患および神経変性の治療、卵胞刺激ホルモンの阻害または活性化（受精能力の変調）、化学走性／化学的運動性活性（例えば、創傷または感染部位に特定の細胞型を動員するため）、止血および血栓溶解活性（例えば、血友病および脳卒中を治療するため）、抗炎症活性（例えば敗血症性ショックまたはクローン病を治療するため）、抗菌物質として、例えば代謝または挙動の修飾物質、鎮痛薬として、特定の欠乏疾患を治療すること、例えば乾せん症の治療などのヒトの医学または獣医学的において。
【０４６３】
さらに、またはあるいは、本発明の組成物は、国際公開第９８／０９９８５号明細書に列挙されている疾患の治療において有用なことがある。次に、参照を容易にするために、そのリストの一部を提供する。すなわち、マクロファージ抑制および／またはＴ細胞阻害活性および、従って抗炎症作用、抗免疫活性、すなわち炎症に関連しない応答を含む細胞および／または体液免疫応答に対する抑制効果、細胞外マトリックス成分およびフィブロネクチンに付着するマクロファージおよびＴ細胞の能力ならびにＴ細胞中の増加調節されたｆａｓ受容体発現を阻害すること、リウマチ性関節炎を含む関節炎を含む望ましくない免疫反応および炎症、過敏症、アレルギー性反応、気管支ぜん息、全身性エリテマトーデス、膠原病および他の自己免疫性疾患と関連する炎症、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、アテローム硬化性心臓疾患、再かん流損傷、心停止、心筋梗塞、脈管炎症性の疾患、呼吸障害症候群または他の心肺性疾患と関連する炎症、消化性潰瘍と関連する炎症、潰瘍性大腸炎およびその他の消化管の疾患、肝線維症、肝硬変またはその他の肝臓疾患、甲状腺炎またはその他の腺疾患、腎炎またはその他の腎臓および泌尿器科疾患、耳炎またはその他の耳鼻咽喉科疾患、皮膚炎またはその他の皮膚疾患、歯周疾患またはその他の歯科疾患、睾丸炎または睾丸副睾丸炎、不妊性、睾丸外傷またはその他の免疫関連する睾丸疾患、胎盤機能障害、胎盤機能不全、習慣性流産、子癇、子癇前症およびその他の免疫および／または炎症性の関連する婦人科疾患、後部ブドウ膜炎、中部ブドウ膜炎、前部ブドウ膜炎、結膜炎、脈絡網膜炎、ブドウ膜網膜炎、視神経炎、眼内炎症、例えば網膜炎または嚢様黄斑水腫、交感性眼炎、強膜炎、色素性網膜炎、変性フォンデュ疾患の免疫および炎症性の成分、眼球損傷の炎症性成分、感染によって引き起こされる眼球炎症、増殖性硝子体網膜症、急性虚血性視覚神経障害、例えば緑内障濾過手術後の過剰瘢痕化、眼球インプラントに対する免疫および／または炎症反応、およびその他の免疫および炎症性関連眼科疾患、中枢神経系（ＣＮＳ）または任意の他の臓器のどちらにおいても、免疫および／または炎症抑制は有益である自己免疫性疾患または状態または障害と関連する炎症、パーキンソン病、パーキンソン病の治療からの合併症および／または副作用、ＡＩＤＳ関連痴呆複合ＨＩＶ関連脳障害、デビック病、シデナム舞踏病、アルツハイマー型痴呆およびその他の変性疾患、ＣＮＳの状態または障害、脳卒中の炎症性成分、ポリオ後症候群、精神障害の免疫性および炎症性成分、脊髄炎、脳炎、亜急性硬化性全脳炎、脳脊髄炎、急性神経障害、亜急性の神経障害、慢性神経障害、Ｇｕｉｌｌａｉｍ−Ｂａｒｒｅ症候群、シデナム舞踏病、重症筋無力症、偽性脳腫瘍、ダウン症候群、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、ＣＮＳ圧迫またはＣＮＳ損傷またはＣＮＳ感染の炎症性成分、筋萎縮症および筋ジストロフィーの炎症性成分、ならびに免疫および炎症関連疾患、中枢および末梢神経系の状態または障害、外傷後炎症、敗血症性ショック、感染症、炎症性合併症または外科手術の副作用、骨髄移植またはその他の移植合併症および／または副作用、例えばウィルスキャリアによる感染、またはＡＩＤＳと関連する炎症に起因する遺伝子治療の炎症性および／または免疫合併症および副作用を阻害すること、体液および／または細胞免疫反応を抑制または阻害すること、単核白血球またはリンパ球の量を低下させることによって単核白血球または白血球増殖性疾患（例えば白血病）を治療または改善すること、角膜、骨髄、臓器、水晶体、ペースメーカー、天然または人工皮膚組織などの天然または人工の細胞、組織および臓器の移植の場合に、移植片拒絶の予防および／または治療のため。
【０４６４】
（スルファミン酸エステル化合物合成）
本発明のスルファミン酸エステル化合物は、適切なアルコールを適当な塩化物と反応させることによって合成されることがある。例を挙げると、本発明のスルファミン酸エステル化合物は、適切なアルコールを式Ｒ９Ｒ１０ＮＳＯ２Ｃｌの適当な塩化スルファモイルと反応させることによって合成されることがある。
【０４６５】
この反応を実行するための一般的な条件は次のようである。
【０４６６】
無水ジメチルホルムアミド中のアルコールの撹拌溶液に、０℃で水素化ナトリウムおよび塩化スルファモイルを加える。続いて、反応混合物を室温に戻し、そのままさらに２４時間撹拌を続ける。冷たい炭酸水素ナトリウムの飽和溶液上に反応混合物を注ぎ、得られた水相をジクロロメタンで抽出する。有機抽出液を合わせ、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥する。ろ過およびそれに続く減圧での溶媒蒸発およびトルエンとの共沸で粗製残留物を得る。これをフラッシュクロマトグラフィーによってさらに精製する。
【０４６７】
好ましくは、塩化スルファモイルとの反応の前に、アルコールを適切に誘導体化する。必要な場合には、既知の方法でアルコール中の官能基を保護することがあり、反応の終わりに単数または複数の保護基を除去することがある。
【０４６８】
好ましくは、スルファミン酸エステル化合物は、Ｐａｇｅらの（１９９０年、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ第４６巻２０５９〜２０６８頁）の教示によって合成される。
【０４６９】
ホスホン酸エステル化合物は、Ｐａｇｅら（１９９０年Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ第４６巻２０５９〜２０６８頁）および国際出願ＧＮ９２／０１５８６号明細書の教示を適当に組み合わせることによって、合成されることがある。
【０４７０】
スルホン酸エステル化合物は、Ｐａｇｅら（１９９０年Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ第４６巻２０５９〜２０６８頁）およびＰＣＴ／ＧＮ９２／０１５８６号明細書の教示を適当に応用することによって、合成されることがある。
【０４７１】
チオホスホン酸エステル化合物は、Ｐａｇｅら（１９９０年Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ第４６巻２０５９〜２０６８頁）およびＰＣＴ／ＧＮ９１／００２７０号明細書の教示を適当に応用することによって、合成されることがある。
【０４７２】
以下の文中にも、好ましい合成方法が示される。
【０４７３】
（要約）
要約すると、本発明は、ステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤としての使用のための化合物および同使用のための医薬品組成物を提供する。
【実施例】
【０４７４】
次に、実施例によってのみ本発明を説明する。
【０４７５】
（実施例）
（セクション１）
（１６−（４−ジメチルアミノ−ベンジリデン）−３−ヒドロキシ−１３−メチル−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン
ＳＴＸ４７７（ＣＡＢ０２１４３、ＧＭＡ０１０４４））
【０４７６】
【化６９−１】
2006521338.tif 000058
エタノール（１２０ｃｍ３）中のエストロン（４．０５ｇ、１５ミリモル）および４−ジメチルアミノベンズアルデヒド（２．２４ｇ、１５ミリモル）の撹拌懸濁液に、水酸化ナトリウム（３．０ｇ、７５ミリモル）を加え、得られた黄色の溶液を室温で７２時間撹拌した。この溶液に氷酢酸（２０ｃｍ３）を加え、生成した黄色の沈澱物をろ過によって集め、水（１００ｃｍ３）、エタノール（５０ｃｍ３）、ジエチルエーテル（５０ｃｍ３）およびヘキサン（１００ｃｍ３）で洗浄した後、減圧で乾燥した。収率６６％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４７７】
【化６９−２】
2006521338.tif 000059
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４０１．２、実測値４０２．２（Ｍ＋Ｈ＋）
１６−（４−ジメチルアミノ−ベンジリデン）−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール
ＳＴＸ５１１（ＣＡＢ０２１５８、ＧＭＡ０１００６）
【０４７８】
【化７０−１】
2006521338.tif 000060
ＴＨＦ（２０ｃｍ３）およびエタノール（２０ｃｍ３）中の１６−（４−ジメチルアミノベンジリデンエストロン（０．４０２ｇ、１ミリモル）の冷却（氷浴）溶液に、ＮａＢＨ４（０．１００ｇ、２．６ミリモル）を加え、反応混合物を室温に戻して一夜撹拌した。この混合物を、沈殿物が析出し始めるまで減圧で濃縮した後、水（５０ｃｍ３）を加えて、生成物を白色の粉末として沈澱させた。ろ過によってこの粉末を集め、水（５０ｃｍ３）、メタノール（２０ｃｍ３）およびジエチルエーテル（５０ｃｍ３）で洗浄した後、減圧で乾燥した。収率８６％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４７９】
【化７０−２】
2006521338.tif 000061
、ＨＰＬＣ（９８％、Ｒｔ＝３．５２、１０：９０  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４０３．３、実測値４０３．２（Ｍ＋）
（水素化反応の一般手順）
原料１６−メチレンエストラジオールを所定体積のＴＨＦに溶解し、同じ体積のエタノールをこの溶液に加えた。次に、窒素をバブリングさせて４０分間流すことによってこの溶液を脱気した後、Ｐｄ／Ｃ（５重量％、触媒量）を加え、反応混合物上に水素ガス（風船）を流した。水素下室温で反応混合物を一夜撹拌した後、セライトを通してろ過した。
【０４８０】
（１６−（４−ジメチルアミノ−ベンジル）−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール
ＳＴＸ５９４（ＧＭＡ０１００８））
【０４８１】
【化７１−１】
2006521338.tif 000062
ヘキサン、次いでヘキサン中２０％酢酸エチルを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーによって精製し、Ｒｆ０．３３（ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）の生成物を収率４５％で得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４８２】
【化７１−２】
2006521338.tif 000063
、ＨＰＬＣ（９２％、Ｒｔ＝３．２８、１０：９０  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４０５．２、実測値４０５．２（Ｍ＋）、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値４０５．２６６８、実測値４０５．２６６８（Ｍ＋）
（１３−メチル−１６−ピリジン−２−イルメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［□］フェナントレン−３−１７−ジオール
ＳＴＸ５６７（ＧＭＡ０１０１８））
【０４８３】
【化７２−１】
2006521338.tif 000064
１００％ヘキサンから１００％酢酸エチルまでを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーによって精製し、Ｒｆ０．１（２５％ＥｔＯＡｃ、７５％ヘキサン）の生成物を収率５７％で得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４８４】
【化７２−２】
2006521338.tif 000065
、ＨＰＬＣ（９８％、Ｒｔ＝２．６２、１０：９０  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値３６３．２、実測値３６４．１（Ｍ＋Ｈ＋）、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３６４．２２７６、実測値３６４．２２９７（Ｍ＋Ｈ＋）
（１３−メチル−１６−ピリジン−３−イルメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール
ＳＴＸ５４２（ＧＭＡ０１０２２））
【０４８５】
【化７３−１】
2006521338.tif 000066
１００％ヘキサンから１００％酢酸エチルまでを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーによって精製し、生成物（Ｒｆ０．１（ヘキサン中２５％ＥｔＯＡｃ）を収率８８％で得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４８６】
【化７３−２】
2006521338.tif 000067
、ＨＰＬＣ（９７％、Ｒｔ＝２．５０、１０：９０  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値３６３．２、実測値３６４．１（Ｍ＋Ｈ＋）。高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３６４．２２７６、実測値３６４．２２８７（Ｍ＋Ｈ＋）
（１３−メチル−１６−ピリジン−４−イルメチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール
ＳＴＸ５４３（ＧＭＡ０１０２０））
【０４８７】
【化７４−１】
2006521338.tif 000068
１００％ヘキサンから１００％酢酸エチルまでを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物（Ｒｆ０．１（２５％ＥｔＯＡｃ、７５％ヘキサン）を収率９６％で得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４８８】
【化７４−２】
2006521338.tif 000069
、ＨＰＬＣ（９２％、Ｒｔ＝２．４４、１０：９０  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値３６３．２、実測値３６４．１（Ｍ＋Ｈ＋）。高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３６４．２２７６、実測値３６４．２２９４（Ｍ＋Ｈ＋）
（酢酸  ８−アセチル−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナンテン−２−イルエステル（ＧＭＡ０１１１０））
【０４８９】
【化７５−１】
2006521338.tif 000070
乾燥ピリジン（８ｃｍ３）中の原料ピラゾール（０．５９８ｇ、２ミリモル）の溶液に無水酢酸（２ｃｍ３）を加え、この混合物を窒素下で１６時間還流した。次に、この混合物を冷却して氷の上へ注ぎ、析出したクリーム色の沈殿物をろ過によって集め、酢酸エチル／ヘキサン（１／１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製した。Ｒｆ０．４８、収率４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０４９０】
【化７５−２】
2006521338.tif 000071
、ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）３８０．２３（Ｍ＋２Ｈ＋）
（酢酸  ８−アセチル−６ａ−メチル−１２−オキソ−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ−［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル（ＧＭＡ０１１２０））
【０４９１】
【化７６−１】
2006521338.tif 000072
アセトニトリル（２．５ｃｍ３）中のビス−酢酸エステル保護ピラゾール出発物質（０．１２１ｇ、０．３２ミリモル）の溶液に、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（７０重量％水溶液０．１４ｃｍ３、１ミリモル）およびヘキサカルボニルクロム（０．０２１ｇ、０．０９ミリモル）を加えた。この溶液を２４時間加熱還流した後、室温に冷却した。水（１０ｃｍ３）を加え、生成物をジエチルエーテル（３×１０ｃｍ３）で抽出した。エーテル抽出液を合わせ、水、飽和炭酸水素塩水溶液およびブラインで洗浄した後、乾燥（ＭｇＳＯ４）して減圧で濃縮した。酢酸エチル／ヘキサン（１／１）を溶離液（Ｒｆ０．４）として用いるフラッシュカラムクロマトグラフィーによって、目的生成物を単離した。収率２３％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０４９２】
【化７６−２】
2006521338.tif 000073
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１−オクタヒドロ−４ｂＨ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−１２−オンＳＴＸ７３７（ＧＭＡ０１１３８））
【０４９３】
【化７７−１】
2006521338.tif 000074
ビス−酢酸エステル保護出発物質（０．０１３７ｇ）をエタノール（１ｃｍ３）に溶解した。ＫＯＨ（０．００４ｇ）のエタノール／水（１／１の２ｃｍ３）溶液をこれに加え、この混合物を振とうした後、室温に３０分間静置した。この段階でＴＬＣによって残存出発物質をまったく検出しなかったので、この混合物を氷酢酸で酸性にし、減圧で濃縮して水を加えた。この溶液を一夜静置したところ、薄いオレンジ色の沈澱物が生成した。この粉末をろ過によって集めた。収率４６％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４９４】
【化７７−２】
2006521338.tif 000075
、ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）３０９．９９（Ｍ＋２Ｈ＋）、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３０９．１６０３０、実測値３０９．１６１３２（Ｍ＋Ｈ＋）
（６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２，９−ジオール  ＳＴＸ８２０（ＧＭＡ０２０２４））
【０４９５】
【化７８−１】
2006521338.tif 000076
トルエン（１０ｃｍ３）中の原料エステル（０．６５７ｇ、２ミリモル）の懸濁液に、ヒドラジン一水和物（０．１１ｃｍ３、２．２ミリモル）を加え、この混合物を封管中１５０℃で４時間加熱した。この間に出発物質は溶解し、別の白色の沈殿物が生成した。次に、反応混合物を室温に冷却して氷酢酸で酸性にし、すべての生成物が確実に沈澱するように水を加えた。白色の粉末をろ過によって集め、水、少量のエタノール、ジエチルエーテルおよびヘキサンで洗浄した。ＬＣＭＳによると、目的生成物（３１２）およびエストロンのヒドラゾン誘導体（２８５）に対応する質量を有する二つの化合物が見いだされた。ＤＣＭ中１０％メタノールから１００％メタノールまでを用いるフラッシュクロマトグラフィーを試みたが、これらを分離することはできなかった。この固体をエタノール中に懸濁させ、次に固体が溶解するまでＮａＯＨ水溶液をゆっくり加えてから、氷酢酸でｐＨ３の酸性にすることによって再結晶を試みた。当初、沈殿物はまったく生成しなかったので、微細な白色の粉末が沈澱するまで少量の水を加えた。ＬＣＭＳおよびＨＰＬＣによって、これは目的の生成物であることが示された。純粋な生成物の収率１８％、回収した生成物の全収率５０％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０４９６】
【化７８−２】
2006521338.tif 000077
、ＨＰＬＣ（１００％、Ｒｔ＝２．３３、２０：８０  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＬＣＭＳ（ＡＰＣＩ）３１１．２９（Ｍ＋Ｈ＋）、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３１１．１７５９、実測値３１１．１７６１（Ｍ＋Ｈ＋）
（Ｒａｄｌｅｙｓ  ＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを用いるアミドカップリングの一般手順）
窒素下で、乾燥ＤＣＭ（２ｃｍ３）およびトリエチルアミン（０．０２ｃｍ３、０．１８ミリモル）中の酸出発物質（０．１０７ｇ、０．２５ミリモル）の溶液に、乾燥ＤＣＭ（１ｃｍ３）中のＥＤＣ（０．０５８ｇ、０．３ミリモル）トリエチルアミン（０．０１７ｃｍ３、０．１６ミリモル）およびＤＭＡＰ（触媒量）の溶液を加え、この反応混合物を室温で３０分間撹拌した。次に、この溶液にアミン（１．１当量）を加え、窒素下での撹拌を１２時間続け、その後窒素下に１４時間静置した。次に、この溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した後、有機層を分離および濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した。
【０４９７】
（２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸イソプロピルアミド  ＧＭＡ０２０３８−６）
【０４９８】
【化７９−１】
2006521338.tif 000078
収率１６％。Ｒｆ０．７２（ＥｔＯＡｃ）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０４９９】
【化７９−２】
2006521338.tif 000079
、ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）４７０．３７（Ｍ＋Ｈ＋）
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸イソプロピルアミド  ＳＴＸ８５７（ＧＭＡ０２０４６））
【０５００】
【化８０−１】
2006521338.tif 000080
窒素を３０分間バブリングさせることによって、ＴＨＦ（５ｃｍ３）およびエタノール（５ｃｍ３）中のベンジル保護出発物質（０．０２０ｇ、０．０４ミリモル）の溶液を脱気した後、Ｐｄ／Ｃ（５重量％、触媒量）を加え、反応混合物上に水素ガス（風船）を流した。水素雰囲気下、室温での撹拌を一夜続けた後、セライトを通して混合物をろ過し、セライトを酢酸エチルおよびメタノールで洗った。濾液を減圧で濃縮し、Ｒｆ０．６０（ＥｔＯＡｃ）の白色の固体を得た。収量０．０９６ｇ、６３％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０５０１】
【化８０−２】
2006521338.tif 000081
、ＨＰＬＣ（９５％、Ｒｔ＝１．７２、４：９６  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＬＣＭＳ（ＡＰ−）３７８．３５（Ｍ−Ｈ＋）。
【０５０２】
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（ピリジン−３−イルメチル）−アミド  ＳＴＸ８６０（ＧＭＡ０２０５６／３））
【０５０３】
【化８１−１】
2006521338.tif 000082
窒素下で、乾燥ＤＣＭ（１０ｃｍ３）中の酸出発物質（０．１７０ｇ、０．５ミリモル）の懸濁液に、ＤＭＡＰ（触媒量）、ＥＤＣ（０．１１６ｇ、０．６ミリモル）およびトリエチルアミン（０．０６ｃｍ３、０．５５モル）を加え、この溶液を室温で２０分間撹拌した。この混合物に３−（アミノメチル）ピリジン（０．０６ｃｍ３、０．５５ミリモル）、続いて出発物質の完全溶解を確実にするために乾燥ＤＭＦ（１０ｃｍ３）を加え、この反応溶液を窒素下室温で２４時間撹拌した。この溶液を炭酸水素塩の飽和水溶液で洗浄し、有機層を分液して減圧で濃縮した。得られた濃縮溶液（ＤＭＦ中）にヘキサン、次いで少量のＤＣＭを加えた。得られたクリーム色の沈殿物をろ過によって集め、ＤＣＭ、続いてＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、白色の結晶固体を得た。Ｒｆ０．４０（ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ）、収量０．０３４ｇ、１６％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０５０４】
【化８１−２】
2006521338.tif 000083
、ＨＰＬＣ（９８％、Ｒｔ＝２．０４、１０：９０  Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）。ＬＣＭＳ（ＥＳ＋）４２９．１９（Ｍ＋Ｈ＋）
【０５０５】
【化８２】
2006521338.tif 000084
ＳＴＸ８２０への経路
【０５０６】
【化８３】
2006521338.tif 000085
ＳＴＸ７３７への経路
【０５０７】
【化８４】
2006521338.tif 000086
ＳＴＸ８５７およびＳＴＸ８６０への経路
（ＧＭＡ０３０３４  ［３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２−エチル−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデン］−ヒドロキシ−酢酸  エチルエステル）
【０５０８】
【化８５−１】
2006521338.tif 000087
トルエン（３０ｃｍ３）中のＴＢＤＭＳ保護エストロン（１．２７５ｇ、３．１ミリモル）の撹拌溶液に、シュウ酸ジエチル（０．８４ｃｍ３、６．２ミリモル）およびカリウムｔ−ブトキシド（０．４５ｇ、４ミリモル）を加え、この反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物を氷酢酸で酸性にし、減圧で濃縮した後、酢酸エチル（３０ｃｍ３）を加えた。この溶液を水（３０ｃｍ３）およびブライン（３０ｃｍ３）で洗浄した後、減圧で濃縮して白色の粉末を得た。この粉末をエタノール／水で洗浄し、ろ過によって集めた。収率は定量的。
１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０５０９】
【化８５−２】
2006521338.tif 000088
、ＦＡＢ−ＬＲＭＳ（ＭＨ＋）５１３．３  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３０Ｈ４４Ｏ２Ｓｉ計算値５１２．２９５８、実測値（Ｍ＋）５１２．２９６５  ｍ／ｚ
（ＧＭＡ０３０３５  ２−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−３−エチル−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸  エチルエステル）
【０５１０】
【化８６−１】
2006521338.tif 000089
エタノール（２５ｃｍ３）中の出発物質（１．５３ｇ、３ミリモル）の攪拌懸濁液に、ヒドラジン一水和物（０．１７ｃｍ３、３．４ミリモル）を加えたところ、出発物質は溶解した。室温での撹拌を一夜続け、この間に溶液は濁った。これにｐ−トルエンスルホン酸（〜０．１ｇ）を加え、この混合物を５分間加熱してピラゾール環を芳香族化させた。この溶液を沈澱物が生成し始めるまで減圧で濃縮した後水を加え、白色の粉末をろ過によって集め、水で洗浄して風乾した。収率〜定量的。１Ｈ  ＮＭＲ
【０５１１】
【化８６−２】
2006521338.tif 000090
、ＨＰＬＣ＞９６％（Ｒｔ＝６．６９、１００％  ＭｅＣＮ）、ＦＡＢ−ＬＲＭＳ（ＭＨ＋）５０９．２  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３４Ｈ４１Ｎ２Ｏ３計算値５０９．３１６８、実測値（ＭＨ＋）５０９．３１７８  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１０６６、ＧＭＡ０２１８７  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸）
【０５１２】
【化８７−１】
2006521338.tif 000091
ＭｅＯＨ（３０ｃｍ３）中の出発物質（１．２７ｇ、２．６４ミリモル）の撹拌懸濁液に、ＮａＯＨ水溶液（１６ｃｍ３中０．２１１ｇ）を加え、この混合物を一夜還流した（出発物質は加熱すると溶解した）。反応混合物を冷却して氷酢酸で酸性にし、沈澱物が生成し始めるまで減圧で濃縮（〜半分の体積）した。水（２０ｃｍ３）を加え、析出した沈殿物をろ過によって集めた。これをメタノールに溶解し、濃縮して減圧で乾燥した。収率５７％。
（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５１３】
【化８７−２】
2006521338.tif 000092
、ＨＰＬＣ＞９２％（Ｒｔ＝１．４９、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、Ｅｓ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）３６５．１６  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ２７Ｎ２Ｏ３計算値３６７．２０２２、実測値（ＭＨ＋）３６７．２０１０  ｍ／ｚ
（アミドカップリングの一般手順）
Ｎ２下で、乾燥ＤＣＭ（８ｃｍ３）中の酸出発物質（０．０４５ｇ、０．１２３ミリモル）の撹拌懸濁液に、ＤＭＡＰ（触媒量）、ＥＤＣ（０．０７１ｇ、０．３７ミリモル）およびＮＥｔ３（０．０２ｃｍ３）を加え、この溶液を室温で３０分間撹拌した。次に、これにアミン（０．０２ｃｍ３）を加え、撹拌を４日間続けた。この溶液を飽和炭酸水素塩で洗浄して有機層を分液し、水層をＤＣＭで洗浄した。有機層を合わせて減圧で濃縮し、ＤＣＭからＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨまでの溶離液グラジエントを用いるフラッシュクロマトグラフィー（Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩ）によって生成物を精製した。
【０５１４】
（ＳＴＸ１０１３、ＧＭＡ０２１８８  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（ピリジン−３−イルメチル）−アミド）
【０５１５】
【化８８−１】
2006521338.tif 000093
収率３９％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５１６】
【化８８−２】
2006521338.tif 000094
、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ２．１１、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）４５７．３８  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３３Ｎ４Ｏ２計算値４５７．２６０３、実測値（ＭＨ＋）４５７．２５８９  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１１４４、ＧＭＡ０３０７４−１  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（ピリジン−２−イルメチル）−アミド）
【０５１７】
【化８８−３】
2006521338.tif 000095
収率４１％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５１８】
【化８８−４】
2006521338.tif 000096
、ＨＰＬＣ＞９２％（Ｒｔ２．１５、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）、Ｅｓ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４５５．３６  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３３Ｎ４Ｏ２計算値４５７．２６０３、実測値（ＭＨ＋）４５７．２６０７  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１０８４、ＧＭＡ０３０５６−２  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（２−ピリジン−２−イル−エチル）−アミド）
【０５１９】
【化８９−１】
2006521338.tif 000097
収率４６％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５２０】
【化８９−２】
2006521338.tif 000098
、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ３．４１、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、Ｅｓ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４６９．５５  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２９Ｈ３５Ｎ４Ｏ２計算値４７１．２７６０、実測値（ＭＨ＋）４７１．２７４７  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１０８５、ＧＭＡ０３０５６−１  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（２−ピリジン−３−イル−エチル）−アミド）
【０５２１】
【化９０−１】
2006521338.tif 000099
収率５１％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５２２】
【化９０−２】
2006521338.tif 000100
、ＨＰＬＣ＞９８％（Ｒｔ３．０９、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、Ｅｓ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４６９．４９  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２９Ｈ３５Ｎ４Ｏ２計算値４７１．２７６０、実測値（ＭＨ＋）４７１．２７５６  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１１４５、ＧＭＡ０３０７４−２  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（２−メトキシ−エチル）−アミド）
【０５２３】
【化９１−１】
2006521338.tif 000101
収率３６％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５２４】
【化９１−２】
2006521338.tif 000102
、ＨＰＬＣ＞９６％（Ｒｔ２．１１、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）。Ｅｓ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４２２．３５  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ３４Ｎ３Ｏ３計算値４２４．２６００、実測値（ＭＨ＋）４２４．２６０６  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１１４６、ＧＭＡ０３０７４−４  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（５−メチル−ピラジン−２−イルメチル）−アミド）
【０５２５】
【化９２−１】
2006521338.tif 000103
収率４２％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５２６】
【化９２−２】
2006521338.tif 000104
、ＨＰＬＣ＞９４％（Ｒｔ２．０８、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）、Ｅｓ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４７０．３５  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３４Ｎ５Ｏ２計算値４７２．２７１３、実測値（ＭＨ＋）４７２．２７１８  ｍ／ｚ。
【０５２７】
（ＳＴＸ１１６６、ＧＭＡ０３０９２  ３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イルメチル）−アミド）
【０５２８】
【化９３−１】
2006521338.tif 000105
収率５６％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５２９】
【化９３−２】
2006521338.tif 000106
、ＨＰＬＣ＞９８％（Ｒｔ７．２９、Ｈ２Ｏ中９０％ＭｅＣＮ）、ＡＰＣＩ（Ｍ−Ｈ＋）４９８．３２  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３４Ｎ５Ｏ２計算値、実測値（ＭＨ＋）  ｍ／ｚ。
【０５３０】
（ＧＭＡ０３０２８（３−ベンジルオキシ−２−エチル−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデン）−ヒドロキシ−酢酸  エチルエステル）
【０５３１】
【化９４−１】
2006521338.tif 000107
トルエン（２０ｃｍ３）中のベンジル保護２−エチルエストロン（２．００ｇ、５．１５ミリモル）の撹拌溶液に、シュウ酸ジエチル（１．４０ｃｍ３、１０．２０ミリモル）、続いてカリウムｔ−ブトキシド（０．６９３ｇ、６．１８ミリモル）を加え、この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。この溶液を氷酢酸で酸性にした後、減圧で濃縮した。残留物に酢酸エチル（３０ｃｍ３）を加え、この溶液を水（３０ｃｍ３）およびブライン（３０ｃｍ３）で洗浄した。有機層を減圧で濃縮して白色の粉末とし、エタノール／水で洗浄し、ろ過によって集めた。収率９７％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０５３２】
【化９４−２】
2006521338.tif 000108
、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ＝２．８６、Ｈ２Ｏ中９８％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４８７  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３１Ｈ３６Ｏ５計算値４８８．２５６３、実測値（ＭＨ＋）４８８．２５６９  ｍ／ｚ。
【０５３３】
（ＧＭＡ０３０２９  ２−ベンジルオキシ−３−エチル−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸  エチルエステル）
【０５３４】
【化９５−１】
2006521338.tif 000109
エタノール（５０ｃｍ３）中の出発物質（２．４４ｇ、５ミリモル）の攪拌懸濁液に、ヒドラジン一水和物（０．３ｃｍ３、６ミリモル）を加えたところ、出発物質は溶解した。室温での撹拌を一夜続けた後、白色の結晶をろ過によって集め、水で洗浄した。ろ液を氷酢酸で酸性にし、さらに沈殿物を析出させて集めた。沈澱物を合わせてエタノール中に懸濁させた後、ｐ−トルエンスルホン酸（〜０．ｌｇ）を加えた。この混合物を５分間加熱してピラゾール環を芳香族化させてから、室温で１時間撹拌した。この微黄色の溶液を沈澱物が析出し始めるまで減圧で濃縮した後、水を加えて白色の粉末をろ過によって集め、水で洗浄して風乾した。収率９６％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０５３５】
【化９５−２】
2006521338.tif 000110
、ＨＰＬＣ＞９２％（Ｒｔ＝５．１７、Ｈ２Ｏ中９４％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４８３  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３１Ｈ３６Ｎ２Ｏ３計算値４８４．２７２６、実測値（Ｍ＋）４８４．２７３０  ｍ／ｚ。
【０５３６】
（ＳＴＸ１０５７、ＧＭＡ０３０３２／２、ＧＭＡ０３０６２
３−エチル−２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸エチルエステル）
【０５３７】
【化９６−１】
2006521338.tif 000111
窒素をバブリングして流すことによって、ＭｅＯＨ（７０ｃｍ３）中の出発物質（３．４０ｇ、７ミリモル）の懸濁液を３０分間脱気した。これにＰｄ／Ｃ（５重量％、触媒量）を加え、さらに１０分間脱気を続けた後、反応混合物上に水素気体を通し、水素下で撹拌をさらに３日間続けた。セライトを通してこの混合物をろ過し、セライトを酢酸エチルおよびメタノールで洗って濾液を減圧で濃縮した。ヘキサンから酢酸エチル：ヘキサンの１：１までのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィー（Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩ）によって、生成物を精製した。Ｒｆ（酢酸エチル／ヘキサンの１／１）０．２４。収率８９％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５３８】
【化９６−２】
2006521338.tif 000112
、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ３０Ｎ２Ｏ３計算値３９５．２３３５、実測値（Ｍ＋）３９５．２３１２  ｍ／ｚ。
【０５３９】
（ＳＴＸ１０２４、ＧＭＡ０３００８、ＧＭＡ０３０４４／３、ＧＭＡ０３０６３  ３−エチル−６ａ−メチル−２−スルファモイルオキシ−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸エチルエステル）
【０５４０】
【化９７−１】
2006521338.tif 000113
塩化スルファモイルの溶液（トルエン中０．６８Ｍ溶液の３０ｃｍ３、２０．４ミリモル）を加熱せず減圧で濃縮し、次いで窒素下氷の上で冷却した。これにＤＭＡ（１５ｃｍ３）を加え、この混合物を冷却（氷／アセトン浴）したＤＭＡ（１０ｃｍ３）中の出発物質（２．４２ｇ、６．１３ミリモル）の溶液に加えた。この溶液を一夜撹拌して室温に戻した後、水（６０ｃｍ３）で希釈し、生成物を酢酸エチル（１００ｃｍ３）で抽出して、オイル状のＤＭＡ溶液を得た。これを酢酸エチルに再溶解して水で洗浄した後、濃度してクリーム色の結晶固体を得た。ＤＣＭ／ヘキサンから再結晶して２ｇ、収率６９％の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５４１】
【化９７−２】
2006521338.tif 000114
、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ＝２．４０、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）、ＦＡＢ−ＬＲＭＳ（ＭＨ＋）４７４  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ３２Ｎ３Ｏ５Ｓ計算値４７４．２０６３、実測値（ＭＨ＋）４７４．２０６７  ｍ／ｚ。
【０５４２】
（ＧＭＡ０３０６４）
【０５４３】
【化９８】
2006521338.tif 000115
窒素下、無水ＤＣＭ（１２ｃｍ３）およびＤＩＰＥＡ（５．３４ｃｍ３、２９．５ミリモル）中の膨潤した塩化２−クロロトリチル樹脂（２．２７ｇ、１．１ミリモル／ｇ理論担持量）の懸濁液に、出発物質（２．００ｇ、４．２２ミリモル）を固体として少しずつ加え、続いて追加のＤＣＭ（５ｃｍ３）を加えた。この反応混合物を室温で９６時間振とうした後、樹脂をろ過によって集め、ＤＣＭ、メタノールおよび再びＤＣＭで３回洗浄した。
【０５４４】
（ＧＭＡ０３０６８）
【０５４５】
【化９９】
2006521338.tif 000116
ＴＨＦ（２５ｃｍ３）中の膨潤した担持樹脂（３．７４ｇ）に水酸化ナトリウム水溶液（１Ｎの３０ｃｍ３）をゆっくり加え、この混合物を室温で２４時間振とうした。樹脂をろ過によって集め、ＴＨＦ／水（１／１）で洗浄し、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで洗浄した後、減圧で乾燥した。
【０５４６】
（ＳＴＸ１０８０、ＧＭＡ０３０５２−１  ３−エチル−６ａ−メチル−２−スルファモイルオキシ−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸）
【０５４７】
【化１００−１】
2006521338.tif 000117
フリット付き注射器の中に担持樹脂（０．０３ｇ）を入れ、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１／１の２０ｃｍ３、洗浄間隔を５分間あけて小量ずつ加えた）、次にＤＣＭで洗浄した。洗液を合わせて減圧で濃縮した。粗生成物の重量からの樹脂担持率を計算したところ、０．８ミリモル／ｇであった。ＤＣＭからＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨまでのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィー（Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩ）によって精製し、Ｒｆ０．６（ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ）の生成物を得た。
【０５４８】
１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５４９】
【化１００−２】
2006521338.tif 000118
、ＨＰＬＣ＞９３％（Ｒｔ１．４５、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）４６８  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２２Ｈ２８Ｎ３Ｏ５Ｓ計算値４４６．１７５０、実測値（ＭＨ＋）４４６．１７１３  ｍ／ｚ。
【０５５０】
（樹脂に結合した出発物質上でのアミドカップリングの一般手順）
Ｎ２下で、乾燥ＤＣＭ（３ｃｍ３）中の膨潤した担持樹脂（０．２００ｇ）に、ブロモ−トリス−ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢＯＰ、０．２６０ｇ、０．５ミリモル）およびＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ、０．０７０ｇ、０．５ミリモル）、続いてＤＩＰＥＡ（０．１８ｃｍ３、１．０ミリモル）を加えた。この混合物を１０分間振とうした後、アミン（０．０６ｃｍ３）を加え、Ｎ２下室温で７２時間振とうし続けた。フリット付き注射器中に樹脂を集め、ＤＭＦ、ＤＣＭおよびＭｅＯＨ（×３）、さらに再びＤＣＭ（×３）で洗浄した後、ＴＦＡ／ＤＣＭ（１／１）を用いて生成物を開裂させた。ＤＣＭからＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨまでのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィー（Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩ）によって精製し、収率１〜５３％およびＨＰＬＣ純度８８〜９８％でスルファミン酸エステルを得た。
【０５５１】
（ＳＴＸ１０８３、ＧＭＡ０３０５２−２／３  スルファミン酸  ３−エチル−６ａ−メチル−９−［（ピリジン−２−イルメチル）−カルバモイル］−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５５２】
【化１０１−１】
2006521338.tif 000119
収率５３％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５５３】
【化１０１−２】
2006521338.tif 000120
、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ２．１１、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）５３４  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３４Ｎ５Ｏ４Ｓ計算値５３６．２３３２、実測値（ＭＨ＋）５３６．２３３０  ｍ／ｚ。
【０５５４】
（ＳＴＸ１０８２  ＧＭＡ０３０５２−３／３  スルファミン酸  ３−エチル−６ａ−メチル−９−（２−ピリジン−３−イル−エチルカルバモイル）−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５５５】
【化１０２−１】
2006521338.tif 000121
収率７％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５５６】
【化１０２−２】
2006521338.tif 000122
、ＬＣ純度＞９５％、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）５４８  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２９Ｈ３６Ｎ５Ｏ４Ｓ計算値５５０．２４８８、実測値（ＭＨ＋）５５０．２４９９  ｍ／ｚ。
【０５５７】
（ＳＴＸ１０８１、ＧＭＡ０３０５２−４／３  スルファミン酸  ３−エチル−６ａ−メチル−９−（２−ピリジン−２−イル−エチルカルバモイル）−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５５８】
【化１０３−１】
2006521338.tif 000123
収率２５％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５５９】
【化１０３−２】
2006521338.tif 000124
、ＨＰＬＣ＞９８％（Ｒｔ１．９６、Ｈ２Ｏ中９０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）５４８  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２９Ｈ３６Ｎ５Ｏ４Ｓ計算値５５０．２４８８、実測値（ＭＨ＋）５５０．２４８３  ｍ／ｚ。
【０５６０】
（ＳＴＸ１１２３  ＧＭＡ０３０７２−１／２  スルファミン酸  ３−エチル−６ａ−メチル−９−［（ピリジン−３−イルメチル）−カルバモイル］−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５６１】
【化１０４−１】
2006521338.tif 000125
収率８％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５６２】
【化１０４−２】
2006521338.tif 000126
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ１．９１、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）５３６．３１  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３４Ｎ５Ｏ４Ｓ計算値５３６．２３３２，実測値（ＭＨ＋）５３６．２３３０  ｍ／ｚ。
【０５６３】
（ＳＴＸ１１２４、ＧＭＡ０３０７２−２／２  スルファミン酸  ３−エチル−６ａ−メチル−９−［（５−メチル−ピラジン−２−イルメチル）−カルバモイル］−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５６４】
【化１０５−１】
2006521338.tif 000127
収率８％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５６５】
【化１０５−２】
2006521338.tif 000128
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ１．９３、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）５５１．５８  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３５Ｎ６Ｏ４Ｓ計算値５５１．２４４１、実測値（ＭＨ＋）５５１．２４４７  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１１２５、ＧＭＡ０３０７２−４ａ  スルファミン酸  ３−エチル−９−（２−メトキシ−エチルカルバモイル）−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５６６】
【化１０６−１】
2006521338.tif 000129
収率１０％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５６７】
【化１０６−２】
2006521338.tif 000130
、ＨＰＬＣ＞８８％（Ｒｔ３．２８、１０分間かけてＨ２Ｏ中５％ＭｅＣＮから９５％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）５０３．２４  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ３５Ｎ４Ｏ５Ｓ計算値５０３．２３２８、実測値（ＭＨ＋）５０３．２３２５  ｍ／ｚ。
【０５６８】
（ＳＴＸ１１２６、ＧＭＡ０３０７２−５／２  スルファミン酸  ３−エチル−９−（エチル−メチル−カルバモイル）−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５６９】
【化１０７−１】
2006521338.tif 000131
収率５％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５７０】
【化１０７−２】
2006521338.tif 000132
、ＨＰＬＣ＞９８％（Ｒｔ２．４３、１０分間かけてＨ２Ｏ中５％ＭｅＣＮから９５％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）４８７．２４  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ３５Ｎ４Ｏ４Ｓ計算値４８７．２３７９、実測値（ＭＨ＋）４８７．２３９６  ｍ／ｚ。
【０５７１】
（ＳＴＸ１１５２、ＧＭＡ０３０７６−１  スルファミン酸  ３−エチル−９−［（フラン−２−イルメチル）−カルバモイル］−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５７２】
【化１０８−１】
2006521338.tif 000133
収率６％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５７３】
【化１０８−２】
2006521338.tif 000134
、ＨＰＬＣ＞９１％（Ｒｔ２．１７、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）５２３．２７  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２７Ｈ３３Ｎ４Ｏ５Ｓ計算値５２５．２１７２、実測値（ＭＨ＋）５２５．２１７６  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１１５３、ＧＭＡ０３０７６−３  スルファミン酸  ９−［（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イルメチル）−カルバモイル］−３−エチル−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５７４】
【化１０９−１】
2006521338.tif 000135
収率１％。１Ｈ  ＮＭＲ
【０５７５】
【化１０９−２】
2006521338.tif 000136
、ＨＰＬＣ＞９３％（Ｒｔ５．３９、１０分間かけてＨ２Ｏ中５％ＭｅＣＮから９５％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）５７７．２６  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３０Ｈ３５Ｎ４Ｏ６Ｓ計算値５７９．２２７７、実測値（ＭＨ＋）５７９．２２５７  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１１５４、ＧＭＡ０３０７６−４  スルファミン酸  ３−エチル−９−［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）−エチルカルバモイル］−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５７６】
【化１１０−１】
2006521338.tif 000137
収率３％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５７７】
【化１１０−２】
2006521338.tif 000138
、ＨＰＬＣ＞９８％（Ｒｔ２．２２、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）５８６．３３  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３２Ｈ３８Ｎ５Ｏ４Ｓ計算値５８８．２６４５、実測値（ＭＨ＋）５８８．２６５９  ｍ／ｚ
（ＳＴＸ１１５５、ＧＭＡ０３０７６−６  スルファミン酸３−エチル−６ａ−メチル−９−フェネチルカルバモイル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−イルエステル）
【０５７８】
【化１１１−１】
2006521338.tif 000139
収率９％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５７９】
【化１１１−２】
2006521338.tif 000140
、ＨＰＬＣ＞９３％（Ｒｔ２．８３、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）５４７．２７  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３０Ｈ３７Ｎ４Ｏ４Ｓ計算値５４９．２５３６、実測値（ＭＨ＋）５４９．２５３２  ｍ／ｚ。
【０５８０】
（ＧＭＡ０３０３６  ２−ベンジルオキシ−７−（２−シアノ−エチル）−３−エチル−４ｂ，５，６，６ａ，７，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸  エチルエステル）
【０５８１】
【化１１２−１】
2006521338.tif 000141
エタノール（１０ｃｍ３）中の出発物質（０．１７ｇ、０．３５ミリモル）の撹拌懸濁液に、２−シアノエチルヒドラジン（０．０５ｃｍ３）を加え、暗いオレンジ色のこの溶液を室温で一夜撹拌した。得られた暗褐色の溶液を氷酢酸で酸性にして、水（１０ｃｍ３）を加えた。この溶液を減圧で〜１ｃｍ３に濃縮した後、生成物が黄色味をおびた粉末として析出するまで、追加の水を加えた。これを濾過によって集め、水で洗浄した。この段階で１Ｈ  ＮＭＲは、ピラゾール環がまだ水和していることを示したので、生成物をエタノールに再び溶解してｐ−トルエンスルホン酸一水和物を加え、この溶液を数分間加熱した。次に、この溶液を沈澱物が析出し始めるまで減圧で濃縮して水（２０ｃｍ３）を加え、得られたオレンジ色の粉末をろ過によって集めた。ヘキサンから酢酸エチル：ヘキサンの１：１までのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、生成物を精製した。収量０．０３２ｇ、１７％
（１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３））
【０５８２】
【化１１２−２】
2006521338.tif 000142
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）５６０  ｍ／ｚ。
【０５８３】
（ＧＭＡ０３０４３、ＳＴＸ１０７９  ７−（２−シアノ−エチル）−３−エチル−４ｂ，５，６，６ａ，７，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７、８−ジアザペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸  エチルエステル）
【０５８４】
【化１１３−１】
2006521338.tif 000143
Ｎ２をバブリングさせて流すことによって、ＴＨＦ（２ｃｍ３）およびエタノール（３ｃｍ３）中の出発物質（０．０３ｇ、０．０６ミリモル）の撹拌溶液を２０分間脱気した後、Ｐｄ／Ｃ（５重量％、触媒量）を加えた。さらに１０分間脱気を続けた後、反応混合物上にＨ２気体を流し、反応混合物を水素雰囲気下で一夜撹拌した。セライトを通してこの混合物をろ過し、ＤＣＭからＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨまでのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、生成物を精製した。収量０．０２５ｇ、９３％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０５８５】
【化１１３−２】
2006521338.tif 000144
、ＨＰＬＣ＞９４％（Ｒｔ２．６７、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）４４８  ｍ／ｚ
（ＧＭＡ０２１８０）
【０５８６】
【化１１４】
2006521338.tif 000145
Ｎ２下、−７８℃に冷却（ドライアイス／アセトン浴）した乾燥ＴＨＦ（２０ｃｍ３）中のベンジル保護エストロン（１．０８ｇ、３．０ミリモル）の溶液に、ＬＤＡ（１．８Ｍ溶液の６．０ｃｍ３、３．３ミリモル）を滴下によってゆっくり加え、反応混合物を−７８℃で３０分間撹拌した。次に、これに乾燥ＴＨＦ（１５ｃｍ３）中の無水コハク酸（０．３０ｇ、３．０ミリモル）の溶液を加え、この反応混合物を一夜でゆっくり室温に戻した。この混合物を５％ＨＣｌ（１２０ｃｍ３）中に注ぎ、生成物をジエチルエーテル（２×６０ｃｍ３）で抽出した。エーテル抽出液を合わせ、減圧で濃縮した。ＤＣＭからＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨまでのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、出発物質（２．７ミリモル）を分離して、混合物を得た。この混合物をそれ以上精製せず、以下の反応に用いた。
【０５８７】
（ＧＭＡ０２１８１）
【０５８８】
【化１１５−１】
2006521338.tif 000146
ＥｔＯＨ（５ｃｍ３）中の粗出発物質（０．２９ｇ、０．３ミリモルと仮定）の溶液に、ヒドラジン一水和物（０．０７ｃｍ３、１．４ミリモル）を加え、この反応混合物を室温で３ｈ撹拌した後、３０分間加熱還流して反応の完結およびピラゾール環の芳香族化を確実にした。反応混合物を冷却して氷酢酸で酸性にし、生成物が薄いオレンジ色の粉末として析出するまで水を加えた。収量０．０９８ｇ、１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０５８９】
【化１１５−２】
2006521338.tif 000147
、ＨＰＬＣ＞８０％（Ｒｔ＝１．８９、Ｈ２Ｏ中８０％ＭｅＣＮ）、ＦＡＢ−ＬＲＭＳ（ＭＨ＋）４５７  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２９Ｈ３３Ｎ２Ｏ３計算値４５７．２４９１、実測値（ＭＨ＋）４５７．２４７９  ｍ／ｚ。
【０５９０】
（ＧＭＡ０２１９０）
【０５９１】
【化１１６−１】
2006521338.tif 000148
乾燥ＤＣＭ（５ｃｍ３）中の出発物質（０．０９０ｇ、０．２ミリモルと仮定）の撹拌溶液に、ＤＭＡＰ（触媒量）、ＥＤＣ（０．０４６ｇ、０．２４ミリモル）およびＮＥｔ３（０．０２ｃｍ３）を加え、この溶液を１５分間撹拌した後、テトラヒドロフルフリルアミン（０．０２３ｃｍ３、０．２２ミリモル）を加えた。この反応混合物を４０時間撹拌した後、ＤＣＭ（１５ｃｍ３）で希釈し、この溶液を飽和炭酸水素塩水溶液で洗浄した。ＤＣＭからＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨまでのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、０．０３５ｇ、０．０６４ミリモルの生成物を得た。
ＮＭＲ  δ  （２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５９２】
【化１１６−２】
2006521338.tif 000149
、ＦＡＢ−ＬＲＭＳ（ＭＨ＋）５４０  ｍ／ｚ
（ＧＭＡ０３０１４、ＳＴＸ１０３５）
【０５９３】
【化１１７−１】
2006521338.tif 000150
Ｎ２をバブリングさせて２０分間流すことによって、ＴＨＦ（２ｃｍ３）およびエタノール（３ｃｍ３）中の出発物質（０．０３ｇ、０．０６ミリモル）の撹拌溶液を脱気した後、Ｐｄ／Ｃ（５重量％、触媒量）を加えた。さらに１０分間脱気を続けた後、反応混合物上にＨ２気体を流し、反応混合物を水素雰囲気下で一夜撹拌した。Ｔｌｃは出発物質の存在を示したので、Ｈ２下での撹拌をさらに７２時間続けた。セライトを通してこの混合物をろ過し、ＤＣＭからＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨまでのグラジエント溶出を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、生成物を精製した。収量、０．０１２ｇ、４４％。１Ｈ  ＮＭＲ  δ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【０５９４】
【化１１７−２】
2006521338.tif 000151
、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ２．０３、Ｈ２Ｏ中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（ＭＨ＋）４５０  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２７Ｈ３６Ｎ３Ｏ３計算値４５０．２７５７、実測値（ＭＨ＋）４５０．２７４５  ｍ／ｚ。
【０５９５】
（セクション２）
（３−ベンジルオキシ−１３−メチル−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＪＡＣ０１００２））
【０５９６】
【化１１８−１】
2006521338.tif 000152
ＤＭＦ（１１０ｍＬ）中の１５ｇのエストロン（５５ミリモル）の溶液を、０℃に冷却し、２．４４ｇ（６１ミリモル）のＮａＨ（オイル中６０％）をゆっくり加えた。この混合物をＮ２下０℃で１時間撹拌した後、０℃で１３．２ｍＬのベンジル臭素（１１１ミリモル）を滴下して加えた。次に、反応混合物を８０℃で４時間加熱した。冷却後、混合物を水中に注いだ。この懸濁物をジエチルエーテルで抽出（５回）した。混合した有機層を２Ｎ  ＨＣｌ（３回）およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥して減圧で濃縮した。エタノール中での固体残留物の再結晶によって、１２．３３ｇのＪＡＣ０１００２（６２％）を淡褐色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０５９７】
【化１１８−２】
2006521338.tif 000153
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３６０．２０８９、実測値（Ｍ＋）３６０．２１６７５。
【０５９８】
（３−ベンジルオキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１０１１）［Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９１年、第６５巻、６１９９−６２０５頁］）
【０５９９】
【化１１９−１】
2006521338.tif 000154
３．４８ｇ（８７ミリモル）のＮａＨ（オイル中６０％）を無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）で覆い、６．１１ｍＬの炭酸ジメチル（７２ミリモル）で処理し、Ｎ２下で磁気撹拌しながら加熱還流した。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のベンジルエストロン（１０．４５ｇ、２９ミリモル）の溶液を滴下して加え、反応混合物を８時間還流し、０℃に冷却して３Ｍ酢酸（５０ｍＬ）で処理した後、ブライン中に注いだ。ＣＨＣｌ３中に生成物を抽出（３回）し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥して濃縮した。メタノール中での固体残留物の再結晶によって、９．８ｇのＪＡＣ０１０１１（８１％）を淡褐色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６００】
【化１１９−２】
2006521338.tif 000155
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４１８．２１、実測値４１８．２０（Ｍ＋）。
【０６０１】
（３−ベンジルオキシ−１７α，β−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１０１３、ＳＴＸ５６９）および（ＪＡＣ０１０１３Ｂ、ＳＴＸ５７０））
【０６０２】
【化１２０−１】
2006521338.tif 000156
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（９０：１０）中のＪＡＣ０１０１１（５ｇ、１２ミリモル）の冷たい（０℃）磁気撹拌溶液に、固体ＮａＢＨ４（４５６ｍｇ、１２ミリモル）を加え、この反応混合物を０℃で４時間撹拌し、酸性ｐＨになるまで２Ｎ  ＨＣｌで処理してエーテルで抽出（二回）した。合せた有機層をブラインで洗浄してＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、減圧で濃縮した。この固体を、ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ（９０：１０）を溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーによって精製し、２．４８ｇのＳＴＸ５６９（４８％）および０．９１ｇのＳＴＸ５７０（１８％）を白色の固体として得た。
【０６０３】
（３−ベンジルオキシ−１７β−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１０１３、ＳＴＸ５６９））
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６０４】
【化１２０−２】
2006521338.tif 000157
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値４２０．２３０１、実測値４２０．２２９８、元素分析Ｃ２７Ｈ３２Ｏ４計算値Ｃ  ７７．１１％、Ｈ  ７．６７％、実測値Ｃ  ７６．７０％、Ｈ  ７．６２％、純度９９％。
【０６０５】
（３−ベンジルオキシ−１７α−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１０１３Ｂ、ＳＴＸ５７０））
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６０６】
【化１２０−３】
2006521338.tif 000158
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値４２０．２３０１、実測値４２０．２３０１、元素分析Ｃ２７Ｈ３２Ｏ４計算値Ｃ  ７７．１１％、Ｈ  ７．６７％、実測値Ｃ  ７６．６０％、Ｈ  ７．７１％、純度９９％。
【０６０７】
（３−ベンジルオキシ−１６−ヒドロキシメチル−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オール（ＪＡＣ０１０２３Ｃ））
【０６０８】
【化１２１−１】
2006521338.tif 000159
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（９０：１０）中のＪＡＣ０１０１１（５ｇ、１２ミリモル）の冷却した（０℃）磁気撹拌溶液に、固体ＮａＢＨ４（４５２ｍｇ、１２ミリモル）を加え、この反応混合物を０〜２０℃で１８時間撹拌し、酸性ｐＨになるまで２Ｎ  ＨＣｌで処理してエーテルで抽出（二回）した。合せた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥して減圧で濃縮した。ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ（９０：１０）を溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーによって、この固体を精製し、１．９５ｇのＳＴＸ５６９（３９％）、０．５５ｇのＳＴＸ５７０（１８％）および０．６３ｇのＪＡＣ０１０２３Ｃ（１３％）を白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６０９】
【化１２１−２】
2006521338.tif 000160
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３９２．２３５１、実測値３９２．２３４２。
【０６１０】
（３−ベンジルオキシ−１６−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イルメチル）−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１１５９））
【０６１１】
【化１２２−１】
2006521338.tif 000161
乾燥ＴＨＦ２ｍＬ中に、ＮａＨ５７ｍｇ（オイル中６０％、１．４３ミリモル）を懸濁させた。この懸濁液を氷浴中で０℃に冷却し、乾燥ＴＨＦ５ｍＬ中に溶解した５００ｍｇのＪＡＣ０１０１１（１．１９ミリモル）を滴下して加えた。この混合物を３０分間撹拌し、乾燥ＴＨＦ３ｍＬ中のＮ−（ブロモメチル）フタルイミド（３４４ｍｇ、１．４３ミリモル）を滴下して加えた。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、室温でさらに１２時間反応させた。この混合物に１Ｎ  ＨＣｌを加え、酸性層をジエチルエーテルで抽出（３回）した。合せた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（３回）、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水し、減圧で濃縮してＪＡＣ０１１５９を白色の固体として得た。この化合物を、それ以上精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６１２】
【化１２２−２】
2006521338.tif 000162
（脱ベンジル化の代表的手順）
（３−ヒドロキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１０１２、ＳＴＸ５６８））
【０６１３】
【化１２３−１】
2006521338.tif 000163
ＴＨＦ（３０ｍＬ）に、２．５ｇのＪＡＣ０１０１１（５．９７ミリモル）を溶解した。触媒量の１０％Ｐｄ／Ｃを加え、反応混合物をＨ２下室温で８時間撹拌した。Ｐｄ／Ｃをセライト上でろ過し、ろ液を減圧で濃縮した。メタノール中での固体残留物の再結晶によって、１．８２ｇのＳＴＸ５６８（９３％）を白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６１４】
【化１２３−２】
2006521338.tif 000164
、融点２１５〜２１７℃、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３２８．１６７５、実測値３２８．１６８４、元素分析Ｃ２０Ｈ３２Ｏ４計算値Ｃ  ７３．１５％、Ｈ  ７．３７％、実測値Ｃ  ７２．９％、Ｈ  ７．３４％、純度９７％。
【０６１５】
（同じ手順で以下のフェノール類を示した収量で得た）
（３，１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１０２７、ＳＴＸ５７２））
【０６１６】
【化１２４−１】
2006521338.tif 000165
メタノール／水中での固体残留物の再結晶。収率＝９２％、白色固体。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６１７】
【化１２４−２】
2006521338.tif 000166
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３３０．１８３１、実測値３３０．１８３１、融点２２２〜２２４℃、元素分析Ｃ２０Ｈ２６Ｏ４計算値Ｃ  ７２．７０％、Ｈ  ７．９３％、実測値Ｃ  ７２．９０％、Ｈ  ７．９０％、純度９５％。
【０６１８】
（１６−ヒドロキシメチル−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（ＪＡＣ０１０４９、ＳＴＸ６１２））
【０６１９】
【化１２５−１】
2006521338.tif 000167
収率＝７８％、白色の固体。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６２０】
【化１２５−２】
2006521338.tif 000168
、融点  分解、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値３０２．１９、実測値３０２．１（Ｍ＋）、元素分析Ｃ１９Ｈ２６Ｏ３計算値Ｃ  ７５．４６％、Ｈ  ８．６７％、実測値Ｃ  ７５．２％、Ｈ  ８．７％、純度１００％。
【０６２１】
（１６−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イルメチル）−３−ヒドロキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  メチルエステル（ＪＡＣ０１１７１−４、ＳＴＸ７８０））
【０６２２】
【化１２６−１】
2006521338.tif 000169
フラッシュカラムＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＩ  １ｇおよびヘキサン／酢酸エチルの溶離グラジエントを用いるカラムクロマトグラフィーによって精製。酢酸エチル／ヘキサン中で白色の固体を沈澱させた。収率＝６．９％、白色の固体。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＭｅＯＨ−ｄ３）
【０６２３】
【化１２６−２】
2006521338.tif 000170
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値４８７．２０、実測値４８９．３６（Ｍ＋２）、純度８８％。
【０６２４】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ＪＡＣ０１０８３））
【０６２５】
【化１２７−１】
2006521338.tif 000171
２０ｍＬのＴＨＦ中に２ｇのＳＴＸ５６９（４．７５ミリモル）を溶解し、この溶液に室温で、５ｍＬの水に溶解した２８５ｍｇ（７．１３ミリモル）のＮａＯＨを加え、２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物に６Ｎ  ＨＣｌを加えた。酸性の層をジエチルエーテルで抽出した（５回）。合せた有機層を１０％Ｋ２ＣＯ３で抽出した（５回）。６Ｎ  ＨＣｌを加えて、この塩基性の溶液を酸性にし、酢酸エチルで抽出した（５回）。合せた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。白色の固体をヘキサン中に懸濁させ、ろ過して７２０ｍｇのＪＡＣ０１０８３（３７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６２６】
【化１２７−２】
2006521338.tif 000172
（３−ヒドロキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ＪＡＣ０１０４３、ＳＴＸ６１０））
【０６２７】
【化１２８−１】
2006521338.tif 000173
４６ｍＬの５Ｎ  ＮａＯＨ中に２．１４ｇのＳＴＸ５６８（６．５１ミリモル）を懸濁させ、完全に溶解するまで室温で７２時間撹拌した。０℃に冷却した後、この溶液に６Ｎ  ＨＣｌをｐＨ１になるまで滴下して加えた。酸性の層をジエチルエーテルで抽出した（３回）。合せた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して室温で減圧で濃縮した。この固体をヘキサン中に懸濁させてろ過し、ヘキサンで洗浄して減圧で乾燥し、１．５６ｇのＳＴＸ６１０（７６％）を淡褐色の固体として得た。これをそれ以上生成せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６２８】
【化１２８−２】
2006521338.tif 000174
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３１４．１５１８、実測値３１４．１５２４、純度９５％。
注  室温で時間とともに分解してエストロンに変化する。
【０６２９】
（３，１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ＪＡＣ０１０４１、ＳＴＸ６１１））
【０６３０】
【化１２９−１】
2006521338.tif 000175
１０ｍＬのＭｅＯＨ中に１．１ｇのＳＴＸ５７２（３．２０ミリモル）を懸濁させ、この懸濁液に３ｍＬの水に溶解した０．５８ｇのＮａＯＨ（１４ミリモル）を加えた。この溶液を室温で５時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残留物に６Ｎ  ＨＣｌを加えた。酸性の層を酢酸エチルで抽出（５回）し、合せた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。アセトニトリル中での固体残留物の再結晶によって、４７０ｍｇのＳＴＸ６１１（４６％）を白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６３１】
【化１２９−２】
2006521338.tif 000176
、融点  分解、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３１６．１６７５、実測値３１６．１６７７、純度９５％。
【０６３２】
（固相化学）
【０６３３】
【化１３０】
2006521338.tif 000177
（２−クロロトリチル樹脂上へのエストロンの担持）
５００ｍｇの２−クロロ−トリチル樹脂（担持量１．１ミリモル／グラム樹脂）を７ｍＬの乾燥ＤＣＭおよび３ｍＬのＤＩＥＡ中で１５分間膨潤させた後、エストロンを加えた。この混合物を、Ｎ２下で７２時間振とうした。樹脂をろ過し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＭｅＯＨ（３サイクル）およびＭｅＯＨ（５回）で洗浄し、減圧で乾燥した。ＩＲ（ｃｍ−１）１７３６（Ｃ＝Ｏ、ケトン）。エストロンの担持比の決定。１ｍｌのろ過ロート中でＤＣＭに５１．４ｍｇの担持樹脂を膨潤させ、１０ｍｌのＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＴＦＡ（７：１：２）を加え（２ｍＬずつ５回）、ろ液を減圧で濃縮して、１Ｈ  ＮＭＲで構造チェックするとエストロンに対応する１１．５ｍｇの白色の固体を得た。次に、担持比を０．８２ミリモル／グラム樹脂と決定した。
注  ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＴＦＡを加えると、樹脂は紫色になった。
【０６３４】
（コンビナトリアルライブラリー構築）
（方法Ａ）
（工程１  ＪＡＣ０１０４１のオキシム樹脂への担持）
【０６３５】
【化１３１】
2006521338.tif 000178
７ｍＬの乾燥ＤＭＦ中で、５００ｍｇのオキシム樹脂（担持量１．０６ミリモル／グラム樹脂）を１５分間膨潤させた後、２５１ｍｇのＪＡＣ０１０４１を加え、さらに４１μＬのＤＩＣおよび３５８ｍｇのＨＯＢＴを加えた。不活性雰囲気下室温で、この混合物を４８時間振とうし、樹脂をろ過し、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＭｅＯＨ（３サイクル）およびＭｅＯＨ（５回）で洗浄して減圧で乾燥した。ＩＲ（ｃｍ−１）１７５０（Ｃ＝Ｏ、エステル）、１６００（Ｃ＝Ｎ、オキシム）。
【０６３６】
（工程２  アミド化）
４ｍＬの乾燥ＤＣＭ中でＪＡＣ０１４１（最大担持量１．０６ミリモル／グラム樹脂）を担持した２００ミリグラムのオキシム樹脂を膨潤させ、この懸濁液に４７μＬのフルフリルアミン（０．５３ミリモル）を加えた。この混合物を窒素雰囲気下、４０℃で２４時間振とうした。ろ過後、ＤＣＭで樹脂を洗浄（５回）して、ろ液を減圧で濃縮した。
【０６３７】
（方法Ｂ）
（工程１  活性エステル生成）
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸  ４−ニトロ−フェニルエステル（ＪＡＣ０１１７７））
【０６３８】
【化１３２−１】
2006521338.tif 000179
［Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔ．１９６３、７９５−８０４］。４ｍＬの乾燥ＤＭＦ中に４００ｍｇのＪＡＣ０１０８３を溶解し、０．１４ｍＬのトリエチルアミン（０．９８ミリモル）および２９９ｍｇの炭酸ビス（４−ニトロフェニル）（０．９８ミリモル）を続けて加えた。窒素雰囲気下室温で、この溶液を２時間撹拌した。この溶液を０℃に冷却し、２Ｎ  ＨＣｌを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した（３回）。合せた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（５回）およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。ヘキサン／酢酸エチル溶離グラジエントを用いるＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＩ  ２０ｇカラムクロマトグラフィーによって残留物を精製し、２７０ｍｇのＪＡＣ０１１７７（５２％）を黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６３９】
【化１３２−２】
2006521338.tif 000180
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値５２７．２３、実測値５２７．４（Ｍ＋）３８９．４（Ｍ  ｐＮＯ２ＰｈＯ）、９１．１（ＰｈＣＨ２＋）。
【０６４０】
（工程２  アミド化の一般手順）
２ｍＬ乾燥アセトニトリル中に活性エステルＪＡＣ０１１７７（０．１７ミリモル）を溶解し、この混合物に上記アミン（２当量）を加えた。この溶液を室温で一夜撹拌し、溶媒を減圧で蒸発させた。残留物を、フラッシュカラムＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＩ  ５ｇおよびヘキサン／酢酸エチル溶離グラジエントを用いるカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【０６４１】
（⇒工程３  脱ベンジルのための一般手順）
ＴＨＦ（３ｍＬ）中に上記ベンジル化アミドを溶解した。触媒量の５％Ｐｄ／Ｃを加え、Ｈ２下室温で、反応混合物を２４時間撹拌した。紙でＰｄ／Ｃをろ別し、ろ液を減圧で濃縮した。酢酸エチル／ヘキサン混合物中で、最終生成物を沈澱させた。
【０６４２】
【表２】
2006521338.tif 000181
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１６３−３））
【０６４３】
【化１３３−１】
2006521338.tif 000182
方法Ｂ、工程２。収率＝９６％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６４４】
【化１３３−２】
2006521338.tif 000183
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ピリジン−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１７９、ＳＴＸ７８９））
【０６４５】
【化１３４−１】
2006521338.tif 000184
方法Ｂ、工程２。収率＝９４％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６４６】
【化１３４−２】
2006521338.tif 000185
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４９６．２７、実測値４９７．３（Ｍ＋１）。
【０６４７】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ピリジン−３−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１７９−２、ＳＴＸ７９０））
【０６４８】
【化１３５−１】
2006521338.tif 000186
方法Ｂ、工程２。収率＝８２％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６４９】
【化１３５−２】
2006521338.tif 000187
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４９６．３、実測値４９７．３（Ｍ＋１）。
【０６５０】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン（ＪＡＣ０１１７９−３、ＳＴＸ７９１））
【０６５１】
【化１３６−１】
2006521338.tif 000188
方法Ｂ、工程２。収率＝８６％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６５２】
【化１３６−２】
2006521338.tif 000189
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４８８．３、実測値４８９．３（Ｍ＋１）。
【０６５３】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸エチル−メチル−アミド（ＪＡＣ０１１７９−４、ＳＴＸ７９４））
【０６５４】
【化１３７−１】
2006521338.tif 000190
方法Ｂ、工程２。収率＝３５％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６５５】
【化１３７−２】
2006521338.tif 000191
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４４７．３、実測値４４８．３（Ｍ＋１）。
【０６５６】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸イソプロピルアミド（ＪＡＣ０１１７９−５、ＳＴＸ７９５））
【０６５７】
【化１３８−１】
2006521338.tif 000192
方法Ｂ、工程２。収率＝９２％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６５８】
【化１３８−２】
2006521338.tif 000193
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４４７．３、実測値４４８．３（Ｍ＋１）。
【０６５９】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１７９−６、ＳＴＸ７９３））
【０６６０】
【化１３９−１】
2006521338.tif 000194
方法Ｂ、工程２。収率＝８６％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６６１】
【化１３９−２】
2006521338.tif 000195
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４４７．３、実測値４４８．３（Ｍ＋１）。
【０６６２】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（５−メチル−ピラジン−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１７９−７、ＳＴＸ７９２））
【０６６３】
【化１４０−１】
2006521338.tif 000196
方法Ｂ、工程２。収率＝８５％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６６４】
【化１４０−２】
2006521338.tif 000197
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値５１１．３、実測値５１２．３（Ｍ＋１）。
【０６６５】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ピリジン−３−イルエチル）−アミド（ＪＡＣ０１１８５−１、ＳＴＸ８１４））
【０６６６】
【化１４１−１】
2006521338.tif 000198
方法Ｂ、工程２。収率＝５８％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６６７】
【化１４１−２】
2006521338.tif 000199
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値５１０．３、実測値５１１．３（Ｍ＋１）。
【０６６８】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（１−フェニル−エチル）−アミド（ＪＡＣ０１１８５−４Ａ、ＳＴＸ８１５））
【０６６９】
【化１４２−１】
2006521338.tif 000200
方法Ｂ、工程２。収率＝４６％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６７０】
【化１４２−２】
2006521338.tif 000201
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値５０９．３、実測値５１０．３（Ｍ＋１）。
【０６７１】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（１−フェニル−エチル）−アミド（ＪＡＣ０１１８５−４Ｂ、ＳＴＸ８１６））
【０６７２】
【化１４３−１】
2006521338.tif 000202
方法Ｂ、工程２。収率＝２４％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６７３】
【化１４３−２】
2006521338.tif 000203
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値５０９．３、実測値５１０．３（Ｍ＋１）。
この第二の異性体は、ＳＴＸ８１５と同じ反応から単離された。
【０６７４】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（２−ピペラジン−１−イル−エチル）−アミド（ＪＡＣ０１１８５−２、ＳＴＸ８１７））
【０６７５】
【化１４３−３】
2006521338.tif 000204
方法Ｂ、工程２。収率＝７３％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６７６】
【化１４３−４】
2006521338.tif 000205
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値５１７．３、実測値５１８．４（Ｍ＋１）。
【０６７７】
（３−ベンジルオキシ−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ピリジン−４−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１９１−１、ＳＴＸ８１８））
【０６７８】
【化１４４−１】
2006521338.tif 000206
方法Ｂ、工程２。収率＝９２％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６７９】
【化１４４−２】
2006521338.tif 000207
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値４９６．３、実測値４９７．３（Ｍ＋１）。
【０６８０】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（フラン−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１０８１Ｂ、ＳＴＸ６７９））
【０６８１】
【化１４５−１】
2006521338.tif 000208
方法Ａ、工程２。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（５０：５０）を溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーによって、褐色のオイルを精製し、黄色の固形として３ｍｇのＳＴＸ６７９（２工程で３．６％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６８２】
【化１４５−２】
2006521338.tif 000209
、ＭＳ（ＦＡＢ＋）計算値３９５．２１、実測値３９６．１８（Ｍ＋１）、純度９８％。
【０６８３】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１７１−３、ＳＴＸ７７９））
【０６８４】
【化１４６−１】
2006521338.tif 000210
方法Ｂ、工程３。収率＝１２％。白色の固体。１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＨ−ｄ３、２７０ＭＨｚ）
【０６８５】
【化１４６−２】
2006521338.tif 000211
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値３９９．５３、実測値４０１．３４（Ｍ＋２）、純度９９％。
【０６８６】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ピリジン−３−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１８１−２、ＳＴＸ７９８））
【０６８７】
【化１４７−１】
2006521338.tif 000212
方法Ｂ、工程３。収率＝３６％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６８８】
【化１４７−２】
2006521338.tif 000213
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値４０６．５、実測値４０８．３（Ｍ＋２）、純度１００％。
【０６８９】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン（ＪＡＣ０１１８１−３、ＳＴＸ７９９））
【０６９０】
【化１４８−１】
2006521338.tif 000214
方法Ｂ、工程３。収率＝５８％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６９１】
【化１４８−２】
2006521338.tif 000215
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値３９８．５、実測値４００．３（Ｍ＋２）、純度１００％。
【０６９２】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸エチル−メチル−アミド（ＪＡＣ０１１８１−４、ＳＴＸ８００））
【０６９３】
【化１４９−１】
2006521338.tif 000216
方法Ｂ、工程３。収率＝７５％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０６９４】
【化１４９−２】
2006521338.tif 000217
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値３５７．５、実測値３５９．３（Ｍ＋２）、純度１００％。
【０６９５】
（３−、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸イソプロピルアミド
（ＪＡＣ０１１８１−５、ＳＴＸ８０１））
【０６９６】
【化１５０−１】
2006521338.tif 000218
方法Ｂ、工程３。収率＝５０％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０６９７】
【化１５０−２】
2006521338.tif 000219
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値３５７．５、実測値３５９．２（Ｍ＋２）、純度１００％。
【０６９８】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１８１−６、ＳＴＸ８０２））
【０６９９】
【化１５１−１】
2006521338.tif 000220
方法Ｂ、工程３。収率＝４５％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０７００】
【化１５１−２】
2006521338.tif 000221
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値４０８．５、実測値４０８．３（Ｍ＋）、４１０．３（Ｍ＋２）、純度１００％。
【０７０１】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（５−メチル−ピラジン−２−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ０１１８１−７、ＳＴＸ８０３））
【０７０２】
【化１５２−１】
2006521338.tif 000222
方法Ｂ、工程３。収率＝２６％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０７０３】
【化１５２−２】
2006521338.tif 000223
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値４２１．５４、実測値４２３．３（Ｍ＋２）、純度１００％。
【０７０４】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（１−フェニル−エチル）−アミド（ＪＡＣ０１１９３−３、ＳＴＸ８４４））
【０７０５】
【化１５３−１】
2006521338.tif 000224
［出発物質は、ＳＴＸ８１５であった］。方法Ｂ、工程３。収率＝７．３％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０７０６】
【化１５３−２】
2006521338.tif 000225
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値４１９．２５、実測値４２０．４２、純度９８％。
【０７０７】
（３、１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボン酸（ピリジン−４−イルメチル）−アミド（ＪＡＣ００１１９３−５、ＳＴＸ８４５））
【０７０８】
【化１５４−１】
2006521338.tif 000226
方法Ｂ、工程３。収率＝１７％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０７０９】
【化１５４−２】
2006521338.tif 000227
、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）計算値４０６．２、実測値４０７．３（Ｍ＋１）、純度９６％。
【０７１０】
（セクション３）
（スキーム１  エストロンからの共通中間体酸（５および７）の合成）
【０７１１】
【化１５５−１】
2006521338.tif 000228
（実験法）
一般的な方法。特に明記しない限り、乾燥器で乾燥したガラス器具中でＨＰＬＣ品位の溶媒を用いて、すべての反応を行なった。フラッシュ真空システムによるＡｒｇｏｎａｕｔ充填カラム（フラッシュカラムクロマトグラフィー）を用いて、化合物の精製を行なった。キーゼルゲル６０  Ｆ２５４プレート（メルク）上で、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を行なった。Ｊｅｏｌ２７０ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計またはＢｒｕｋｅｒ４００ＭＨｚＮＭＲ分光計を用いて、重水素化溶媒を内部基準として１Ｈ  ＮＭＲを測定した。ＭｉｃｒｏｍａｓｓプラットホームＬＣＺ（ＥＳ＋、ＡＰＣＩ＋）またはＦａｂのどちらかで低分解能質量スペクトルデータを得た。高分解能質量は、ＦＡＢ法を用いて求めた。Ｓｙｍｍｅｔｒｙ（Ｒ）Ｃ１８カラムを有するＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ−ＨＴ−２７９０システムを用いて、メタノール中１０％の水を溶離液とするＨＰＬＣスペクトルによって純度を決定した。掲げたＲＴ値はこれらの条件でのものである。
【０７１２】
（２−ベンジルエストロン２（ＨＤＳ０１−０８２））
窒素下で、ＴＨＦ（１８０ｍｌ）中の３−ヒドロキシエストロン（１０．００ｇ、０．０３６モル）の溶液に、水素化ナトリウム（１．０５６ｇ、０．０４４モル）を少しずつ加え、室温で３０分間撹拌した。室温で臭化ベンジル（７．５２ｇ、０．０４４モル）を加え、反応混合物を一夜還流した。ｔｌｃ（酢酸エチル：ヘキサン、３：７）によって反応の完結をモニターした。粗製混合物を室温に冷却し、水の添加（滴下）によって終了させた。有機相をＤＣＭ（２×１００ｍｌ）、次いで酢酸エチル（２×１００ｍｌ）で抽出し、合せた有機抽出液を脱水し、減圧で濃縮して無色の固体を得た。粗製の固体を５％のＥｔＯＡｃを含むＥｔＯＨに溶解し、冷蔵庫の中に置いて目的生成物２（１０．７１１ｇ、８２％）を結晶性の無色の固体として得た。分析データについてはＪＡＣ０１−００２を参照のこと。
【０７１３】
（３−ベンジルオキシ−１６−メチレンエストロンカルボン酸  エチルエステル３（ＨＤＳ０１−０８６およびＨＤＳ０１−１２６））
０℃で、ＴＨＦ（２０ｍｌ）中のリチウムジイソプロピルアミド（ヘプタン、ＴＨＦおよびエチルベンゼン中１．８Ｍ溶液、５．６６ｍｌ）の溶液に、ＴＨＦ（３０ｍｌ）中のエストロンベンジルエーテル２（３．９０ｇ、１０．８ミリモル）の溶液を加えた。反応混合物を０℃で約１５分間撹拌し、−４５℃に冷却した。ＴＨＦ（１０．０ｍｌ）中のブロモ酢酸エチル（５．３４４ｇ、３２ミリモル）の溶液を１０分間かけて滴下して加え、−４５℃で８時間および室温で一夜撹拌した。ｔｌｃで反応をモニターした。粗反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌで反応停止させ、ＤＣＭ（２×１００ｍｌ）中に生成物を抽出して脱水し、減圧で濃縮して黄色のオイル状生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、酢酸エチルヘキサングラジエント溶出）によって粗生成物を精製し、目的生成物３（４．９１ｇ、７０％、ジアステレオマーの混合物）を微黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７１４】
【化１５５−２】
2006521338.tif 000229
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝４４８］、（Ｍ＋Ｈ２Ｏ）＝４６５、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝６．１１）
（３−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボン酸  エチルエステル４（ＳＴＸ５７３、ＨＤＳ０１−０９０））
３−ベンジルオキシ−１６−メチレンカルボン酸エチルエステル３（１．５０ｇ、３．３６ミリモル）の溶液をＥｔＯＨ（１５ｍｌ）に溶解し、この混合物を約２０分間脱気した後、風船の水素下、室温で４８時間脱ベンジル化を行なった。ｔｌｃ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、３：７）を用いて、反応の完結をモニターした。セライトの充填層を通して粗反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮して粘着性の白色の固体を得た。次に、この固体をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中５〜２０％酢酸エチル）によって精製し、脱ベンジル化生成物４（０．８２８ｇ、７０％、２つのジアステレオマーの３：１混合物）を白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）［１３−位のＭｅシグナルを用いて、主異性体対副異性体の化学シフト比約３：１を決定した］
【０７１５】
【化１５５−３】
2006521338.tif 000230
、質量（ＦＡＢ）（Ｍ＋１）＋＝３５７、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３５７．２０６５、実測値３５７．２０５４、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝２．０１）。
【０７１６】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボン酸  エチルエステル６（ＳＴＸ５７４、ＨＤＳ０１−０９４））
ＭｅＯＨ（１５ｍｌ）中の３−ヒドロキシ−１６−メチレンカルボン酸エチルエステル４（１．２０ｇ、３．３ミリモル）の溶液を０℃に冷却して、ＮａＢＨ４（０．１９１ｇ、５．０ミリモル）を１５分間かけて加えた。反応混合物を室温に戻し、一夜撹拌した。ｔｌｃ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、１：１）で反応をモニターした。粗製混合物を水で反応停止させ、酢酸エチルおよびＤＣＭで水層を抽出した。合せた有機相を飽和ＮａＣｌで洗浄し、脱水して濃縮し、白色の固体を得た。次に、この固体をＤＣＭおよびヘキサンで再結晶して純粋な化合物６（０．７９１ｇ、７１％）を白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）［１３−位のＭｅシグナルを用いて、主異性体対副異性体の化学シフト比約３：１を決定した］
【０７１７】
【化１５５−４】
2006521338.tif 000231
、（ＦＡＢ）（Ｍ＋１）＋＝３５９、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３５９．２２２２、実測値３５７．２２２０、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝１．８９）。
【０７１８】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボン酸７（ＳＴＸ６０３、ＨＤＳ０１−０９６））
封管中でＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１：０．５、１０ｍｌ）の混合物中に、エチルエステル６（０．７８０ｇ、２．１ミリモル）を溶解して、ＮａＯＨ（０．４３ｇ、１０．５ミリモル）を加えた。この混合物を８０℃に一夜加熱した。ｔｌｃ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、１：１）で反応をモニターした。粗製混合物をｐＨ＝３〜４の酸性にし、ＥｔＯＡｃおよびＤＣＭで抽出した。合せた有機相を脱水（ＭｇＳＯ４）し、濃縮して白色の固体を得た。この固体をＭｅＯＨおよびヘキサンで再結晶し、純粋な酸７（０．７００ｇ、１０１％）を白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３）２−ＳＯ）［１３−位のＭｅシグナルを用いて、主異性体対副異性体の化学シフト比約３：１を決定した］
【０７１９】
【化１５５−５】
2006521338.tif 000232
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３３０．１８３１、実測値３３０．１８３２、ＨＰＬＣ（＞９５％、Ｒｔ＝２．２１）。
【０７２０】
（３−ヒドロキシ−１７−オキソ−１６−メチレンエストロンカルボン酸５（ＳＴＸ６０４、ＨＤＳ０１−０９８））
化合物７で概要を説明した手順を用いて、３−ヒドロキシ−１６−メチレンカルボン酸エチルエステル４（１．００ｇ、２．８ミリモル）、ＮａＯＨ（０．５６ｇ、１．４ミリモル）およびＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１：０．５、１０ｍｌ）の反応を行なった。再結晶後、生成物５（０．９４０ｇ、１０２％）を白色の固体として単離した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３）２−ＳＯ）［１３−位のＭｅシグナルを用いて、主異性体対副異性体の化学シフト比約３：１を決定した］
【０７２１】
【化１５５−６】
2006521338.tif 000233
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３２９．１７５２、実測値３３０．１７５１、ＨＰＬＣ（＞９５％、Ｒｔ＝２．６０）。
【０７２２】
（３−ヒドロキシ−１７−オキソ−１６−メチレンエストロンカルボン酸８（ＳＴＸ６６６、ＨＤＳ０１−１０９））
化合物７で概要を説明した手順を用いて、３−ベンジルオキシ−１６−メチレンカルボン酸エチルエステル３（１．７１４ｇ、３．８ミリモル）、ＮａＯＨ（１．５３７ｇ、３８．４ミリモル）およびＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ（１：１：０．５、１０ｍｌ）の反応を実行った。再結晶後、生成物８（１．１１４ｇ、９０％）を白色の固体として単離した。特性シグナル１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３）２−ＳＯ）
【０７２３】
【化１５５−７】
2006521338.tif 000234
、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値４１８．２０９９、実測値４１８．２１４８、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝１．８９）。
【０７２４】
（スキーム２  固体担体上でのアミド類の合成  方法Ａ）
【０７２５】
【化１５６】
2006521338.tif 000235
（スキーム３  溶液相中でのアミド類の並列合成  方法Ｂ）
【０７２６】
【化１５７】
2006521338.tif 000236
（樹脂結合中間体９（ＨＤＳ０１−１０４）の合成）
前記オキシム樹脂（０．５００ｇ、担持比１．０６ミリモル／ｇ）をできるだけ少量のＤＭＦ（７ｍｌ）中で膨潤させ、エストロンカルボン酸５（ＳＴＸ６０４）［０．５２１ｇ、５．３ミリモル）、続いてジイソプロピルカルボジイミド［ＤＩＣ］（０．６６７ｇ、５．３ミリモル）およびヒドロキシベンゾトリアゾール［ＨＯＢｔ］（０．７１５ｇ、５．３ミリモル）を加えた。フラスコシェーカーを用いて、Ｎ２下で、反応混合物を約７２時間振とうした。７２時間後に得られた黄色の反応混合物をろ過して、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＭｅＯＨ（各溶媒で３サイクル）、最後にＭｅＯＨ（５回）で洗浄し、減圧で乾燥して樹脂結合中間体８を黄色のビーズとして得た。ＩＲ（ｃｍ−１）１６６２（Ｃ＝Ｏ）、１７３９（ＣＯ−Ｏ−Ｎ＝）、３５０２（ＯＨ）。
【０７２７】
（エストロン−アミドの並列合成  方法Ａ）
Ｒａｄｌｅｙｓ  ＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒ内のガラス管の中で、Ｎ２下、樹脂に結合したエストロン中間体９（０．１００ｇ、０．１０６ミリモル）を無水ＤＣＭ（３．０ｍｌ）に懸濁させ、対応するアミン（５モル当量）を加えて、Ｎ２下４０℃で７２時間加熱した。反応混合物をろ過し、Ｇｅｎｅｖａｃを用いてろ液を濃縮し、微黄色の固体を得た。ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（グラジエント溶出、ＤＣＭ中２％ＭｅＯＨで始める）によるフラッシュ真空システムおよび充填カラム（５ｇまたは１０ｇ）を用いて粗化合物を精製し、純化合物（平均回収量は１４ｍｇ／１００ｍｇ樹脂結合中間体）を得た。
【０７２８】
（１６−メチレンエストロン−アミドの並列合成  方法Ｂ）
Ｒａｄｌｅｙｓ  ＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ  Ｐａｒａｌｌｅｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒ内のガラス管の中で、ＤＣＭ（１．０ｍｌ）中にカルボン酸５（０．０５０ｇ、０．１５ミリモル）または７（０．５０ｇ、０．１５ミリモル）を懸濁させ、ＤＣＭ（１．０ｍｌ）中のＥＤＣ（０．０４３ｇ、０．２２７ミリモル）、ＤＭＡＰ（触媒量、５ｍｇおよびＥｔ３Ｎ（０．１００ｍｌ）の溶液を加えた。反応混合物を約３０分間撹拌し、ＤＣＭ（１．０ｍｌ）中の対応するアミン（５モル当量）を加えて一夜撹拌した。［各反応で用いたＤＣＭの総体積は、３．０ｍｌであった］。ｔｌｃ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、２：７）で反応の完結をモニターした。前記Ｇｅｎｅｖａｃ中で粗混合物を濃縮し、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（ＤＣＭ中２％ＭｅＯＨで始めるグラジエント溶出）によるＦｌａｓｈ真空システムおよび充填カラム（５ｇまたは１０ｇ）を用いて精製し、純化合物を得た。
【０７２９】
（３−ヒドロキシ−１７−オキソ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−フルフリルアミド（ＳＴＸ６７２、ＨＤＳ０１−１１２−３）の合成）
【０７３０】
【化１５８−１】
2006521338.tif 000237
方法Ｂ、収率＝３３％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７３１】
【化１５８−２】
2006521338.tif 000238
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋１）＋＝４０７］、高精度質量（ＦＡＢ＋、Ｍ＋１）計算値４０８．３１７２、実測値４０８．２１７４、ＨＰＬＣ（９０％、Ｒｔ＝１．４７）。
【０７３２】
（３−ヒドロキシ−１７−オキソ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−テトラヒドロ−２−フリルアミド（ＳＴＸ６７１、ＨＤＳ０１−１１２−６）の合成）
【０７３３】
【化１５９−１】
2006521338.tif 000239
方法Ｂ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７３４】
【化１５９−２】
2006521338.tif 000240
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋１）＋＝４１１］、高精度質量（ＦＡＢ＋、Ｍ＋１）計算値４１２．２４８７、実測値４０８．２４９１、ＨＰＬＣ（９０％、Ｒｔ＝１．４９）。
【０７３５】
（３−ヒドロキシ−１７−オキソ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−３−ピリジルアミド（ＳＴＸ６７０、ＨＤＳ０１−１１２−２およびＨＤＳ０１−１６８）の合成）
【０７３６】
【化１６０−１】
2006521338.tif 000241
方法Ｂ、収率＝５０％。１Ｈ  ＮＭＲδ（ＣＤ３）２−ＳＯ）、
【０７３７】
【化１６０−２】
2006521338.tif 000242
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋１）＋＝４１９、（Ｒｔ＝８．５８）］、ＨＰＬＣ（１００％、Ｒｔ＝２．０８）。
【０７３８】
（ＳＴＸ６７０の単一のジアステレオマーは、以下の分析データを示す）
融点＝２１０〜２１１℃、１Ｈ  ＮＭＲδ（ＣＤ３ＯＤ）、
【０７３９】
【化１６０−３】
2006521338.tif 000243
ＨＰＬＣ（１００％、Ｒｔ＝２．２６）。
【０７４０】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−３−ピリジルアミド（ＳＴＸ６６９、ＨＤＳ０１−１１２−１）の合成）
【０７４１】
【化１６１−１】
2006521338.tif 000244
方法Ｂ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ３）
【０７４２】
【化１６１−２】
2006521338.tif 000245
、ＬＣＭＳ［（Ｍ）＋＝４１８］、高精度質量（ＦＡＢ＋、Ｍ＋１）計算値４１９．２３３４、実測値４１９．２３４９、ＨＰＬＣ（１００％、Ｒｔ＝１．８３）。
【０７４３】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ、Ｎ−ジメチルプロピルアミド（ＳＴＸ６８８、ＨＤＳ０１−１１６−１）の合成）
【０７４４】
【化１６２−１】
2006521338.tif 000246
方法Ａ。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７４５】
【化１６２−２】
2006521338.tif 000247
、ＬＣＭＳ［（Ｍ）＋＝４１１および（Ｍ＋１）＋＝４１２］、ＨＰＬＣ（９８％、Ｒｔ＝１．５１）。
【０７４６】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−エチル−メトキシアミド（ＳＴＸ６８９、ＨＤＳ０１−１１６−３）の合成）
【０７４７】
【化１６３−１】
2006521338.tif 000248
方法Ａ。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７４８】
【化１６３−２】
2006521338.tif 000249
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋１）＋＝３８６］、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝１．４７）。
【０７４９】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−エチル−メトキシアミド（ＨＤＳ０１−１００−２）の合成）
【０７５０】
【化１６４−１】
2006521338.tif 000250
方法Ｂ。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７５１】
【化１６４−２】
2006521338.tif 000251
、ＦＡＢ［（Ｍ＋１）＋＝３９９）、高精度質量（ＦＡＢ＋、Ｍ＋１）計算値３９９．２６４７、実測値３９９．２６７２、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝１．５１）。
【０７５２】
（３−ヒドロキシ−１７−オキソ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−∝−メチルベンジルアミド（ＳＴＸ６９０、ＨＤＳ０１−１１６−４）の合成）
【０７５３】
【化１６５−１】
2006521338.tif 000252
方法Ａ。この化合物は４つのジアステレオマーの混合物として存在する。１Ｈ  ＮＭＲの特性シグナル（ＣＤＣｌ３）
【０７５４】
【化１６５−２】
2006521338.tif 000253
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋１）＋＝４３２］、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝１．５１）。
【０７５５】
（３−ヒドロキシ−１７−オキソ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−２−エチルピリジルアミド（ＳＴＸ６９１、ＨＤＳ０１−１１６−５）の合成）
【０７５６】
【化１６６−１】
2006521338.tif 000254
方法Ａ。１Ｈ  ＮＭＲの特性シグナル（ＣＤＣｌ３）
【０７５７】
【化１６６−２】
2006521338.tif 000255
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋１）＋＝４３３および（Ｍ−ＯＨ）＋＝４１５］、ＦＡＢ［（Ｍ＋１）＋＝４３３，ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝１．５１）。
【０７５８】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−テトラヒドロ−２−フリルアミド（ＳＴＸ６６８、ＨＤＳ０１−１１０−６）の合成）
【０７５９】
【化１６７−１】
2006521338.tif 000256
方法Ｂ、収率＝３３％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７６０】
【化１６７−２】
2006521338.tif 000257
、ＬＣＭＳ［（Ｍ−Ｃ５Ｈ９ＮＯ）＋＝３１３］、ＨＰＬＣ（９５％、Ｒｔ＝１．５７）。
【０７６１】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−フルフリルアミド（ＳＴＸ６６７、ＨＤＳ０１−１１０−３）の合成）
【０７６２】
【化１６８−１】
2006521338.tif 000258
方法Ｂ、収率＝３７％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７６３】
【化１６８−２】
2006521338.tif 000259
、ＬＣＭＳ［（Ｍ−１）＋＝４０８（Ｒｔ＝８．５８）］、ＨＰＬＣ（１００％、Ｒｔ＝２．０８）、高精度質量（ＦＡＢ＋、Ｍ＋１）計算値４１０．２３３１、実測値４１０．２３１７、ＨＰＬＣ（９０％、Ｒｔ＝１．８２および１．９０）。
【０７６４】
（スキーム４  固体担体上でのアミド類の合成  方法Ｃ）
【０７６５】
【化１６９】
2006521338.tif 000260
（樹脂結合中間体１２（ＨＤＳ０１−１２０）の合成）
オキシム樹脂（２．０ｇ、担持比１．０６ミリモル／ｇ）を、できるだけ少量のＤＭＦ（７ｍｌ）中で膨潤させ、エストロンカルボン酸８（１．４２８ｇ、３．１８ミリモル）、続いてジイソプロピルカルボジイミド［ＤＩＣ］（１．３３ｇ、１０．６ミリモル）およびヒドロキシベンゾトリアゾール［ＨＯＢｔ］（１．４３１ｇ、１０．６ミリモル）を加えた。フラスコシェーカーを用いて、Ｎ２下で反応混合物を約７２時間振とうした。７２時間後に得られた黄色の反応混合物をろ過して、ＤＣＭ、ＤＭＦ、ＭｅＯＨ（各溶媒で３サイクル）、最後にＭｅＯＨ（５回）で洗浄し、減圧で乾燥して樹脂結合中間体８（２．３９１ｇ）を黄色のビーズとして得た。ＩＲ（ｃｍ−１）１６６２（Ｃ＝Ｏ）、１７３９（ＣＯ−Ｏ−Ｎ＝）、３５０２（ＯＨ）。
【０７６６】
（エストロン−アミドの並列合成、方法Ｃ）
Ｒａｄｌｅｙｓ  ＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒ内のガラス管の中で、Ｎ２下、無水ＤＣＭ（３．０ｍｌ）中に樹脂結合エストロン中間体１２（スキーム４）（０．１００ｇ、０．１０６ミリモル）を懸濁させ、対応するアミン（５モル当量）を加え、Ｎ２下４０℃で７２時間加熱した。反応混合物をろ過し、Ｇｅｎｅｖａｃを用いてろ液を濃縮して微黄色の固体を得た。Ｆｌａｓｈ真空システムおよびＤＣＭ：ＭｅＯＨ（グラジエント溶出、ＤＣＭ中２％ＭｅＯＨで始める）による充填カラム（５または１０ｇ）を用いて、粗化合物を精製し、純ベンジル化中間体（１Ｈ  ＮＭＲによる分析で平均回収率は１５ｍｇ／１００ｍｇ樹脂結合中間体）を得た。次に、前記ＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒ中でＨ２の風船を連結してこれらの中間体を脱ベンジルし、平均純度９０％で最終化合物を得た。
【０７６７】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミド（ＳＴＸ７４１、ＨＤＳ０１−１２８−１）の合成）
【０７６８】
【化１７０−１】
2006521338.tif 000261
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７６９】
【化１７０−２】
2006521338.tif 000262
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝３７１、（Ｒｔ＝６．０８）］、ＨＰＬＣ（８５％、Ｒｔ＝２．２９）。
【０７７０】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミド（ＳＴＸ７４２、ＨＤＳ０１−１２８−２）の合成）
【０７７１】
【化１７１−１】
2006521338.tif 000263
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７７２】
【化１７１−２】
2006521338.tif 000264
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝３８５、（Ｒｔ＝６．５５）］、ＨＰＬＣ（８６％、Ｒｔ＝２．３７）。
【０７７３】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−イソプロピルアミド（ＳＴＸ７４３、ＨＤＳ０１−１２８−４）の合成）
【０７７４】
【化１７２−１】
2006521338.tif 000265
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７７５】
【化１７２−２】
2006521338.tif 000266
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝３７１、（Ｒｔ＝５．８３）］、ＨＰＬＣ（９３％、Ｒｔ＝２．２７）。
【０７７６】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−エチルアミド（ＳＴＸ７４４、ＨＤＳ０１−１２８−５）の合成）
【０７７７】
【化１７３−１】
2006521338.tif 000267
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７７８】
【化１７３−２】
2006521338.tif 000268
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝３５７、［（Ｍ＋Ｎａ）＋＝３７９］、ＨＰＬＣ（８７％、Ｒｔ＝２．１７）。
【０７７９】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−メチルアミド（ＳＴＸ７４５、ＨＤＳ０１−１２８−６）の合成）
【０７８０】
【化１７４−１】
2006521338.tif 000269
方法Ｃ、収率＝４０％。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７８１】
【化１７４−２】
2006521338.tif 000270
、ＬＣＭＳ［（Ｍ−３０）＋＝３１１］、ＨＰＬＣ（９７％、Ｒｔ＝２．１２）。
【０７８２】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−メチルアミド（ＳＴＸ７４６、ＨＤＳ０１−１２８−９）の合成）
【０７８３】
【化１７５−１】
2006521338.tif 000271
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７８４】
【化１７５−２】
2006521338.tif 000272
、ＬＣＭＳ［（Ｍ）＋＝４１２］、ＨＰＬＣ（７７％、Ｒｔ＝２．１６）。
【０７８５】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−メチル−Ｎ−エチルアミド（ＳＴＸ７７１、ＨＤＳ０１−１３８−１）の合成）
【０７８６】
【化１７６−１】
2006521338.tif 000273
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７８７】
【化１７６−２】
2006521338.tif 000274
、ＬＣＭＳ［（Ｍ−２９）＋＝３４１］、ＨＰＬＣ（９２％、Ｒｔ＝２．３２）。
【０７８８】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−Ｎ−ジエチルアミド（ＳＴＸ７７２、ＨＤＳ０１−１３８−２）の合成）
【０７８９】
【化１７７−１】
2006521338.tif 000275
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７９０】
【化１７７−２】
2006521338.tif 000276
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝３８７］、ＨＰＬＣ（９９％、Ｒｔ＝２．４８）。
【０７９１】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−Ｎ−ジエチルアミド（ＳＴＸ７７３、ＨＤＳ０１−１３８−４）の合成）
【０７９２】
【化１７８−１】
2006521338.tif 000277
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７９３】
【化１７８−２】
2006521338.tif 000278
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝３７３］、ＨＰＬＣ（８７％、Ｒｔ＝２．３１）。
【０７９４】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−Ｎ−ジエチルアミド（ＳＴＸ７７４、ＨＤＳ０１−１３８−５）の合成）
【０７９５】
【化１７９−１】
2006521338.tif 000279
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７９６】
【化１７９−２】
2006521338.tif 000280
、ＬＣＭＳ［（Ｍ＋２）＋＝３５９］、ＨＰＬＣ（９０％、Ｒｔ＝２．１０）。
【０７９７】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−Ｎ−ジエチルアミド（ＳＴＸ７７５、ＨＤＳ０１−１３８−６）の合成）
【０７９８】
【化１８０−１】
2006521338.tif 000281
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０７９９】
【化１８０−２】
2006521338.tif 000282
、ＬＣＭＳ［（Ｍ−ＣＨ３）＋＝３２７］、ＨＰＬＣ（９０％、Ｒｔ＝２．１０）。
【０８００】
（３−ヒドロキシ−１７−ヒドロキシ−１６−メチレンエストロンカルボキシ−Ｎ−プロピルアミド（ＳＴＸ７７６、ＨＤＳ０１−１３８−８）の合成）
【０８０１】
【化１８１−１】
2006521338.tif 000283
方法Ｃ、収率＝４０％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
【０８０２】
【化１８１−２】
2006521338.tif 000284
、ＨＰＬＣ（９０％、Ｒｔ＝２．１０）。
【０８０３】
（スキーム１  固体担体を用いるスルファミン酸エステルライブラリーおよびフェノールライブラリーへの合成経路）
【０８０４】
【化１８２−１】
2006521338.tif 000285
試薬は、ａ）臭化ベンジル、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、室温。ｂ）ＬＤＡ、ＴＨＦ、ブロモ酢酸エチル−７８℃〜室温。ｃ）Ｈ２、Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ：ＴＨＦ（１：１）ｄ）塩化スルファモイル、ＤＭＡ、０℃から室温。ｅ）トリチル−Ｃｌ樹脂、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ、７２時間。ｆ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ−Ｈ２Ｏ（１：１）、室温。ｇ）ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ＰｙＢＯＰ、ＤＩＰＥＡ、ＤＣＭ、Ｒ−ＮＨ２、室温、Ｏ／Ｎ。ｈ）ＴＦＡ：ＤＣＭ（５０：５０）。ｉ）ピペラジン、ＴＨＦ。ｊ）ＤＣＭ中５０％ＴＦＡ、２０分。ｋ）ピペラジン、ＴＨＦ、７０℃、７２時間。
【０８０５】
（２−エチルベンジルエストロン（ＨＤＳ０２−０５４）の合成）
不活性雰囲気下で、無水ＤＭＦ（１００ｍｌ）中の２−エチルエストロン１（１０．００ｇ、３３．５ミリモル）の撹拌溶液に、炭酸カリウム（１４．０ｇ、１００ミリモル）、続いて臭化ベンジル（４．７８ｍｌ、４０ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で２日間撹拌し続けた。生成した固体をブフナー漏斗を用いてろ過し、ＤＣＭに溶解してろ過して無機物を完全に除去し、濃縮して白色の固体を得た。得られた白色の固体をＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９０：１０）で再結晶して、純生成物ベンジルエーテルエストロン誘導体２（１２．００ｇ、９２％）も白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８０６】
【化１８２−２】
2006521338.tif 000286
、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２７Ｈ３２Ｏ２計算値３８８．２３５７、実測値（Ｍ＋）３８８．２３８９。
【０８０７】
（ベンジルエチルエステル（ＨＤＳ０２−０９８、ＨＤＳ０２−１０８）２の合成
不活性雰囲気下−１０℃で、無水ＴＨＦ中の２−エチルベンジルエストロン（５．００ｇ、１２．８ミリモル）の撹拌溶液に、ＬＤＡの溶液（ヘプタン、ＴＨＦおよびエチルベンゼン中の１．８Ｍ溶液４．０７ｍｌ）を２０分間かけて加えた。反応混合物を−６０℃に冷却して１５分間撹拌し、ブロモ酢酸エチルを１０分間かけて滴下して加え、そのまま一夜で室温に戻らせた。ＤＣＭで混合物を希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌを加えてＤＣＭで抽出した。有機相を合わせて乾燥し、濃縮して黄色い固体を得た。次に、Ｆｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ−１１（５０ｇカラム、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、グラジエント溶出）を用いてこれを精製し、純粋な生成物（６．１０１ｇ、９９％収率）を微黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８０８】
【化１８２−３】
2006521338.tif 000287
、ＦＡＢ−ＭＳ（Ｍ＋）４７４  ｍ／ｚ。
【０８０９】
（３−ヒドロキシエストロン誘導体（ＨＤＳ０２−１００、ＨＤＳ０２−１１０）３の合成）
窒素気体をバブリングさせ、ＴＨＦ：ＭｅＯＨ（１：１、４０ｍｌ）中の２（２．８０ｇ、５．９ミリモル）の溶液を２０分間脱気した。Ｃ担持５％Ｐｄ（１０重量％、３００ｍｇ）を加え、Ｈ２の風船につないで２４時間脱ベンジル化した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、９０：１０）を用いて反応をモニターした。セライトの充填層を用いて粗製混合物をろ過し、濃縮して脱ベンジル生成物３（２．２１０ｇ、９７％）を無色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８１０】
【化１８２−４】
2006521338.tif 000288
、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ＝６．５３、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）３８３  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ３２Ｏ４計算値３８４．２２５５、実測値（Ｍ＋）３８４．２２８８ｍ／ｚ。
【０８１１】
（スルファミン酸エステルエストロン誘導体（ＨＤＳ０２−９０２）４の合成）
ロータリーエバポレータを用いて、塩化スルファモイルの溶液（５７ｍｌ、トルエン中０．６３Ｍ溶液）を３０℃より低温で濃縮した。得られた褐色のオイルを不活性雰囲気下で０℃に冷却して無水ＤＭＡ（３０ｍｌ）に溶解し、カニューレを用いて無水ＤＭＡ（３０ｍｌ）中の３を滴下して加えた。反応混合物を０℃で撹拌し続け、一夜かけて室温に戻らせた。ＴＬＣは、反応の完結を示した（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、９８：２）。粗製混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水（５×）およびブラインで洗浄した。有機相を脱水して濃縮し、微黄色の固体を得た。Ｆｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ−１１（５０ｇカラム、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、グラジエント溶出）を用いて粗生成物を精製し、純生成物４（５．９０１ｇ、９８％）を無色の泡状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８１２】
【化１８２−５】
2006521338.tif 000289
、ＨＰＬＣ＞９０％（Ｒｔ＝６．５３、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４６２  ｍ／ｚ。
【０８１３】
（樹脂結合エストロンスルファミン酸エステル誘導体（ＨＤＳ０２−１１４）５の合成）
不活性雰囲気下、無水ＤＣＭ（２５ｍｌ）中で上記塩化トリチル樹脂（２．６０ｇ、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、担持比１．１ミリモル／グラム）を膨潤させた。エストロンスルファミン酸エステル（２．００ｇ、４．３１ミリモル）、続いてＤＩＰＥＡ（７．５０ｍｌ、４３．１ミリモル）を加えた。この混合物を約７５時間振とうした。反応混合物から取った試料を酸ミニ開裂（５０％ＴＦＡ／ＤＣＭ、２０分間）試験して、反応の完結を確認した。粗製混合物をろ過してＤＭＦ、ＤＣＭ、ＭｅＯＨ（各５サイクル）で洗浄し、最後にＭｅＯＨ（３サイクル）で洗浄した。真空下で乾燥させた後、この樹脂結合中間体４（３．７８ｇ、担持比０．８６ミリモル／グラム、淡黄色）を、次の段階に使用されるまで冷蔵庫中に保管した。開裂させた化合物の１Ｈ  ＮＭＲおよびその他の分析結果は、４で報告したものと同じであった。
【０８１４】
（樹脂結合ライブラリ前駆体エストロンスルファミン酸エステル（ＨＤＳ０２−１１２）６の合成）
ＴＨＦ（６０ｍｌ）中で樹脂５（６．００ｇ、担持比０．８６ミリモル／グラム）を膨潤させ、ＮａＯＨの水溶液（４Ｍ、７ｍｌ）をゆっくり加えた。樹脂を室温で約３０時間振とうした後、ろ過してＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１：１、３×５０ｍｌ）、ＴＨＦ、ＤＣＭおよびＭｅＯＨ（各５サイクル）で洗浄した。真空下で恒量になるまで乾燥し、樹脂結合酸６（５．２５ｇ、０．８６ミリモル／グラム担持）を微黄色のビーズとして得た。この樹脂のから取った試料の酸ミニ開裂（５０％ＴＦＡ／ＤＣＭ、２０分間）によって、エステルの酸への完全な加水分解を確認した。この化合物は、ジアステレオマーの混合物として存在する。この化合物の１Ｈ  ＮＭＲは、化合物１０Ａで報告したものと同じである。
【０８１５】
（スルファミン酸エステルの酸１０Ａ（ＫＲＢ０１−１３７）の合成）
樹脂６（２００ｍｇ、０．１５４ミリモル）をＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２の５０：５０溶液ですすぎ（１０ｍｌ、２０分間）、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を熱メタノールから再結晶して、１０Ａ（５０ｍｇ、７４％）を白色の固体とし得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８１６】
【化１８２−６】
2006521338.tif 000290
、ＨＰＬＣ＞９４％（Ｒｔ＝１．８９、１０％水／アセトニトリル）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）４３４  ｍ／ｚ。
【０８１７】
（酸（ＫＲＢ０１−１３９）の合成）
（１０Ｂを生成させる求核開裂）  丸底フラスコ中で、樹脂６（３００ｍｇ、０．２３１ミリモル）にピペラジン（１９９ｍｇ、２．３１ミリモル）および無水ＴＨＦ（５ｍＬ）を加えた。Ｎ２下で、この混合物を４８時間６５℃に加熱（撹拌なし）した後、混合物をろ過して樹脂をＭｅＯＨおよびＣＨ２Ｃｌ２ですすぐ（５×）。合せた洗液を減圧下で濃縮し、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中５％→１５％メタノールで展開、ピペラジンは原点から動かない）によって精製して、１０Ｂ（６０ｍｇ、７３％）を白色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲシグナル（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８１８】
【化１８２−７】
2006521338.tif 000291
、ＨＰＬＣ＞９９％（１０％水／アセトニトリル）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ−Ｈ＋）３５６ｍ／ｚ。
【０８１９】
（スルファミン酸エステルアミドライブラリーの合成の一般手順）
１４ｍｌのＤＣＭ中にＰｙＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−イル−オキシトリス−ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート）の原液を調製し、２．０ｍｌを各反応に用いた。９．０ｍｌのＤＣＭ中にＨＯＢｔの原液（（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．１８５ｇ／反応）およびＤＩＰＥＡ（０．２９７ｍｌ／反応）を調製し、１．０ｍｌを各反応に用いた。不活性雰囲気下で、２５ｍｌ丸底フラスコ内のＤＣＭ（４．０ｍｌ）中に樹脂結合酸６（０．４００ｇ、担持比０．８６ミリモル／グラム）を懸濁させ、活性化剤ＰｙＢＯＰ（０．７１５ｇ、１．３７ミリモル）、続いてＨＯＢｔとＤＩＰＥＡとの混合物（ＨＯＢｔ０．１８５ｇ、１．３７ミリモル、ＤＩＰＥＡ０．２９７ｍｌ）およびアミン（４モル当量）を加えた。フラスコシェーカーを用いて、この混合物を約７２時間振とうした。次に、粗製の樹脂をろ過して、Ａｒｇｏｎａｕｔ  Ｆｌａｓｈ  Ｖａｃｕｕｍ  Ｍａｎｉｆｏｌｄおよびフリット付き注射器を用いてＤＭＦ（５×）、ＤＣＭ（５×）、ＭｅＯＨ（５×）で洗浄した。洗浄した樹脂を真空下で乾燥してから、フェノールライブラリーを作製するために各樹脂の半分をＲａｄｌｅｙｓ  Ｇｒｅｅｎ  Ｈｏｕｓｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒの合成管に移した。残りの半分は、スルファミン酸エステルライブラリーを作製するために、ＤＣＭ中の５０％ＴＦＡで２０分間処理し、Ｇｅｎｅｖａｃを用いてＴＦＡを蒸発させ、Ｆｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ−１１（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、グラジエント溶出、５ｇまたは１０ｇ充填カラム）を用いて生成物を精製した。合成した化合物は、ジアステレオマーの混合物として存在する。
【０８２０】
（フェノールライブラリーの合成の一般手順）
不活性雰囲気（これらの反応を実行するためにＲａｄｌｅｙｓ  Ｇｒｅｅｎ  Ｈｏｕｓｅ  Ｐａｒａｌｌｅｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｅｒを用いた）下で、無水ＴＨＦ（４ｍｌ）中に樹脂結合スルファミン酸エステルアミド（０．２００ｇ、０．８６ミリモル／グラム）を懸濁させ、ピペラジン（０．７５ｇ、８．７ミリモル）を加えて７０℃で約７０時間還流した。樹脂をろ別し、ろ液を試験管中に集めてＧｅｎｅｖａｃを用いて濃縮した。これらの化合物をシリカゲルに予め吸収させ、Ｆｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ−１１（酢酸エチル／ヘキサンのグラジエント溶出）を用いて精製し、純生成物を無色の固体として得た。これらの化合物は、ジアステレオマーの混合物として存在する。
【０８２１】
【化１８３−１】
2006521338.tif 000292
【０８２２】
【表３】
2006521338.tif 000293
【０８２３】
【表４】
2006521338.tif 000294
【０８２４】
【表５】
2006521338.tif 000295
化合物１１（ＳＴＸ１０３９）ＨＤＳ０２−０８８（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８２５】
【化１８３−２】
2006521338.tif 000296
、ＨＰＬＣ＞９５（Ｒｔ＝１２．１３、５％ＭｅＣＮ／水から９５％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）５２６  ｍ／ｚ、（ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３５Ｎ３Ｏ５Ｓ計算値５２６．２３７５、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）５２６．２３７９。
【０８２６】
化合物１２  ＨＤＳ０２−１２８−８（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８２７】
【化１８３−３】
2006521338.tif 000297
、ＨＰＬＣ＞９１％（Ｒｔ＝２．１２、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）５２６  ｍ／ｚ、（ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３５Ｎ３Ｏ５Ｓ計算値５２６．２３７５、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）５２６．２３７９。
【０８２８】
化合物１３  ＨＤＳ０２１２４−２（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８２９】
【化１８３−４】
2006521338.tif 000298
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）５４１、（Ｍ＋Ｈ−１８＋）５２３  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝２．０、８０％ＭｅＣＮ／水）、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３６Ｎ４Ｏ５Ｓ計算値５４１．２４８４、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）５４１．２４７８。
【０８３０】
化合物１５  ＨＤＳ０２１２８−２（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８３１】
【化１８３−５】
2006521338.tif 000299
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）５３９  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞９１％（Ｒｔ＝２．０、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３０Ｈ３８Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値５３９．２５７９、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）５３９．２５７９。
【０８３２】
化合物１６  ＨＤＳ０２１２８−３（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８３３】
【化１８３−６】
2006521338.tif 000300
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）５３９  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞９８％（Ｒｔ＝２．６９、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３０Ｈ３８Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値５３５．２５７９、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）５３９．２５７４。
【０８３４】
化合物１７  ＨＤＳ０２１２０−２（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８３５】
【化１８３−７】
2006521338.tif 000301
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）５１９  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞９０％（Ｒｔ＝２．４２、７０％ＭｅＣＮ／水）。
【０８３６】
化合物１８  ＨＤＳ０２１２８−１（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８３７】
【化１８３−８】
2006521338.tif 000302
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４６３  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞８９％（Ｒｔ＝３．５１、５％ＭｅＣＮ／水から９５％ＭｅＣＮ／水）、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ３４Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値４６３．２２６６、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４６３．２２８２。
【０８３８】
化合物１９  ＨＤＳ０２１２８−４（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８３９】
【化１８３−９】
2006521338.tif 000303
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４７７  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞９５％（Ｒｔ＝２．４４、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ３６Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値４７７．２４２３、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４７７．２４１４。
【０８４０】
化合物２０  ＨＤＳ０２１２８−５（ＴＦＡ塩）、特性シグナル１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８４１】
【化１８３−１０】
2006521338.tif 000304
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４９１  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞９２％（Ｒｔ＝２．４５、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２６Ｈ３８Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値４９１．２５７９、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４９１．２５８１。
【０８４２】
化合物２１  ＨＤＳ０２１２８−６（ＴＦＡ塩）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【０８４３】
【化１８３−１１】
2006521338.tif 000305
、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４９１  ｍ／ｚ、ＨＰＬＣ＞９７％（Ｒｔ＝２．６５、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２６Ｈ３８Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値４９１．２５７９、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４９１．２５８１。
【０８４４】
化合物２２  （ＳＴＸ１０４０）ＨＤＳ０２−０８０−１、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８４５】
【化１８３−１２】
2006521338.tif 000306
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝５．２０、５％ＭｅＣＮ／水から９５％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４４５ｍ／ｚ。
【０８４６】
化合物２３  ＨＤＳ０２−０８６−１、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８４７】
【化１８３−１３】
2006521338.tif 000307
０．４６（ｓ，３Ｈ，１８−ＣＨ３）、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝２．２５および２．７６、７５％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４４５  ｍ／ｚ。ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３４Ｎ２Ｏ３計算値４４７．２６４７、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４４７．２６５５。
【０８４８】
化合物２４  ＨＤＳ０２−０８６−４、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８４９】
【化１８３−１４】
2006521338.tif 000308
、ＨＰＬＣ＞９５％（Ｒｔ＝２．１６および２．３８、８０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ−ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４４５  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２８Ｈ３５Ｎ３０３計算値４６２．４７５６、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４６２．２７４４。
【０８５０】
化合物２５  ＨＤＳ０２−１３４−２、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８５１】
【化１８３−１５】
2006521338.tif 000309
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝３．３６、８０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４６０  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３０Ｈ３７ＮＯ３計算値４６０．２８５１、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４６０．２８４１。
【０８５２】
化合物２６  ＨＤＳ０２−１３４−３、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８５３】
【化１８３−１６】
2006521338.tif 000310
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝３．３６、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４６０  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ３０Ｈ３７ＮＯ３計算値４６０．２８５１、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４６０．２８４２。
【０８５４】
化合物２７  ＨＤＳ０２−１３４−１、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８５５】
【化１８３−１７】
2006521338.tif 000311
、ＨＰＬＣ＞９５％（Ｒｔ＝５．２０、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）３８４  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２４Ｈ３３ＮＯ３計算値３８５．２５３８、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）３８４．２５３２。
【０８５６】
化合物２８  ＨＤＳ０２−１３４−４、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８５７】
【化１８３−１８】
2006521338.tif 000312
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝５．２０、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）３９８  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ３５ＮＯ３計算値３９８．２６９５、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）３９８．２６９５。
【０８５８】
化合物２９  ＨＤＳ０２−１３４−５、特性シグナル１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８５９】
【化１８３−１９】
2006521338.tif 000313
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝２．９６、７０％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４１２  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２６Ｈ３７ＮＯ３計算値４１２．２８５１、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４１２．２８５７。
【０８６０】
化合物３０  ＨＤＳ０２−１３４−６、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８６１】
【化１８３−２０】
2006521338.tif 000314
、ＨＰＬＣ＞９６％（Ｒｔ＝１３．４１、５％ＭｅＣＮ／水から９５％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４１２  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ計算値Ｃ２６Ｈ３７ＮＯ３  ４１２．２８５１、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）４１２．２８５４。
【０８６２】
化合物３１  ＨＤＳ０２−１３４−７  ジアステレオマーの混合物  １Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８６３】
【化１８３−２１】
2006521338.tif 000315
、ＨＰＬＣ＞８４％（Ｒｔ＝３．９０、５％ＭｅＣＮ／水から９５％ＭｅＣＮ／水）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）３９８  ｍ／ｚ、ＦＡＢ−ＨＲＭＳ  Ｃ２５Ｈ３５ＮＯ３計算値３９８．２６９５、実測値（Ｍ＋Ｈ＋）３９８．２６９２。
【０８６４】
（２−メトキシエストロンアミドの合成）
【０８６５】
【化１８４−１】
2006521338.tif 000316
（ベンジルエーテル（ＨＤＳ０２−１７０）３２の合成）
窒素雰囲気下で、無水ＤＭＦ中に２−メトキシエストロン（０．５２１ｇ、０．００１７３モル）を溶解し、Ｋ２ＣＯ３（０．７１８ｇ、０．００２２５モル）を加えて室温で約４０時間撹拌した。粗製混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄した。有機相を脱水（ＭｇＳＯ４）して濃縮した。粗生成物をシリカゲルに予め吸収させ、フラッシュマスター２システムを用いて精製し、ベンジル化合物３２（０．６５１ｇ、９６％）を脆い白色の固体として得た。ＴＬＣ（Ｒｔ０．４、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、３：７）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８６６】
【化１８４−２】
2006521338.tif 000317
（エチルエーテル（ＨＤＳ０２−１７４）３３の合成）
不活性条件下−１０℃で、無水ＴＨＦ中の２−メトキシベンジルエストロン３２（１５０ｍｇ、０．３８ミリモル）の撹拌溶液に、ＬＤＡの溶液（ヘプタン、ＴＨＦおよびエチルベンゼン中の１．８Ｍ溶液、０．２３４ｍｌ）を２０分間かけて加えた。反応混合物を−６０℃に冷却し、１５分間撹拌し、ブロモ酢酸エチル（０．０５２ｍｌ、０．４６ミリモル）を１０分間かけて滴下して加え、そのまま一夜で室温に戻らせた。ＤＣＭで混合物を希釈し、飽和ＮＨ４Ｃｌを加えてＤＣＭで抽出した。有機相を合わせて脱水し、濃縮して黄色い固体を回収し、次にＦｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ−２（１０ｇカラム、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、グラジエント溶出）を用いてこれを精製し、純生成物（０．１２０ｇ、６５％収率）を無色のガラス状固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８６７】
【化１８４−３】
2006521338.tif 000318
（酸（ＨＤＳ０２−１８２）  ３４の合成）
ＭｅＯＨ：ＴＨＦの混合物（１：１、６ｍｌ）中にエストロンエステル３３（０．１２０ｇ、０．２５２ミリモル）を溶解し、ＮａＯＨ（４Ｍ、３．０ｍｌ）を加えて室温で３０時間撹拌した。ｔ．ｌ．ｃによって、反応の完結を決定した（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン  ３：７、生成物−ベースラインスポット）。ｐＨ＝２から３の酸性にして粗製混合物をＤＣＭで抽出し、水およびブラインで洗浄した。有機相を脱水（ＭｇＳＯ４）して濃縮し、生成物を微黄色の固体として得た。ＭｅＯＨ：ＴＨＦ（１：１、７ｍｌ）の混合物にこの生成物３３（０．０９２ｇ、０．２０５ミリモル）を溶解し、Ｎ２を用いて混合物を脱気し、Ｃ担持５％Ｐｄ（１０ｍｇ）を加えた後、水素の風船をつないで約１５時間水素化した。セライト層を用いて粗製混合物をろ過し、精製（Ｆｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ−２を用いるＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ：ヘキサングラジエント溶出）して、生成物３４（０．０８１ｇ、１００％）を微黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）の特性シグナル
【０８６８】
【化１８４−４】
2006521338.tif 000319
、ＨＰＬＣ＞９９％（Ｒｔ＝１．５９、水中７０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）３５７  ｍ／ｚ。
【０８６９】
（アミド（ＨＤＳ０２−１９０）３５（ＳＴＸ１１９１）の合成）
ＤＣＭ（５．０ｍｌ）に出発物質の酸３４（０．０３８ｇ、０．１０６ミリモル）を懸濁させ、ＰｙＢＯＰ（０．０６２ｇ、０．０１２ミリモル）およびＨＯＢｔ（０．０１６ｇ、０．０１２ミリモル）加えて２０分間撹拌し、ＤＩＰＥＡ（０．０７６ｍｌ）、続いて３−アミノメチルピリジン（０．０２６ｇ、０．２４ミリモル）を加えた。そのまま反応混合物を２０時間撹拌し、飽和Ｎａ２ＣＯ３で反応を停止させ、ブラインで洗浄した。有機相を分液し、脱水、濃縮して淡黄色のオイルを得た。Ｆｌａｓｈ  Ｍａｓｔｅｒ−２システムを用いてこの粗製のオイルを精製し、白色の固体を得た。この時点で得た生成物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃで再結晶して、目的の生成物アミド３５を白色の固体としても得た。３５のジアステレオマーの混合物の特性シグナル１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【０８７０】
【化１８４−５】
2006521338.tif 000320
、ＨＰＬＣ＞９０％（Ｒｔ＝１．５９、水中の９０％ＭｅＣＮ）、ＥＳ＋ｖｅ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）４４８  ｍ／ｚ。
【０８７１】
（セクション４）
（３−Ｏ−アセチル−エストロン（ＤＳＦ０２１２４））
【０８７２】
【化１８５−１】
2006521338.tif 000321
Ｎ２雰囲気下０℃で、無水ピリジン（２００ｍＬ）中のエストロン（３ｇ、１．１１ミリモル）の撹拌溶液に、酢酸（６０ｍｌ、１．０５ミリモル）を４５分間かけて滴下した。得られた黄色の混合物を加熱して１時間還流した。冷却後、Ｈ２Ｏおよび氷（３００ｍＬ）の中へこれを注ぎ、ＨＣｌ  ５Ｍで酸性化した。ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（２００ｍＬ）、次いでブライン（２００ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。結晶性のオレンジ色の粗生成物（３．８８ｇ）をＩＰＡから再結晶して、淡黄色の針状晶（３．２５ｇ、９４％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、４：１）Ｒｆ０．８２、比較Ｒｆ０．６８（Ｅ１）、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０８７３】
【化１８５−２】
2006521338.tif 000322
（６−オキソ−３−Ｏ−アセチル−エストロン（ＤＳＦ０２１２８））
【０８７４】
【化１８６−１】
2006521338.tif 000323
氷／水浴中１０〜１５℃で、酢酸中の３−Ｏ−アセチル−エストロン（５００ｍｇ、１．６０ミリモル）の撹拌溶液に、酢酸中のＣｒＯ３（６７３ｍｇ、６．７３ミリモル）の１０％溶液（４ｍｌ）を２時間かけて滴下した。得られた暗褐色の溶液を一夜室温で撹拌した。次に、減圧下で溶媒を留去して、Ｈ２Ｏ（１００ｍｌ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧下で濃縮して緑色の発泡体を得た。これをＩＰＡから再結晶して、灰色の結晶（１０３ｍｇ、２０％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、４：１）Ｒｆ０．５３、比較Ｒｆ０．８６、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０８７５】
【化１８６−２】
2006521338.tif 000324
（６−オキソエストロン（ＤＳＦ０２１３０、ＳＴＸ４１６））
【０８７６】
【化１８７−１】
2006521338.tif 000325
ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中の６−オキソ−３−Ｏ−アセチル−エストロン（８０ｍｇ、０．２４ミリモル）の撹拌溶液に、ＭｅＯＨ（１．５ｍＬ）中のＫＯＨ（２４７ｍｇ、４．４０ミリモル）の溶液を滴下した。得られた褐色の溶液を室温で２時間撹拌した。次に、減圧下で溶媒を濃縮し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）続いて５Ｍ  ＨＣｌを加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。クロロホルム／ＥｔＯＡｃ（７：３）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物（７４ｍｇ）を精製し、明るいピンク色の粉末（４１ｍｇ、５８％）として融点２４１〜２４３℃の生成物を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、４：１）Ｒｆ０．３９、比較Ｒｆ０．６４、ＩＲ（ＫＢｒ）３３４５（ｂｒ、ＯＨ）、２９４０〜２８８０（脂肪族ＣＨ）、１７２０（Ｃ＝Ｏ）、１６８０（Ｃ＝Ｏ）、１６１０〜１４９５（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０８７７】
【化１８７−２】
2006521338.tif 000326
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３６９．２［５０］、２８５．１［９５、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１１３．１［６８］、８４．０［９４］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）実測値２８５．１４９１７、Ｃ１８Ｈ２１Ｏ３計算値２８５．１４９０７。ＨＰＬＣ（メタノール／水、９０：１０、λｍａｘ＝２２３．９ｎｍ）Ｒｔ＝２．３４分、１００％。
【０８７８】
（６，１７−ビス−オキシム−エストロン（ＤＳＦ０２１６９、ＳＴＸ４５４））
【０８７９】
【化１８８−１】
2006521338.tif 000327
ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（５：１、１８ｍＬ）の混合物中の６−オキソ−エストロン（１００ｍｇ、０．３５ミリモル）の溶液に、ＮａＯＡｃ（２９３ｍｇ、３．５８ミリモル）、続いて塩酸ヒドロキシルアミン（２７４ｍｇ、３．９４ミリモル）を加えた。得られた溶液を室温で一夜撹拌した。次に、減圧下で溶媒を蒸発させ、Ｈ２Ｏ（５０ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ＋２０ｍＬ）で有機物を抽出してＨ２Ｏ（２×２０ｍＬ）次いでブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧下で濃縮して淡褐色の粗生成物（１２０ｍｇ）を得た。クロロホルム／ＥｔＯＡｃ（７：３  １：１）、次いでクロロホルム／ＥｔＯＡｃ／アセトン（２：２：１  １：１：２）のグラジエントを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製し、生成物をクリーム色の粉末（４６ｍｇ、４１％）として得た。融点３４１〜３４４℃、ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、７：３）Ｒｆ０．１１、比較Ｒｆ０．４４、ＩＲ（ＫＢｒ）３４１０、３２６５〜３０５０（ｂｒ、ＮＯＨ、ＯＨ）、２９３０〜２８５０（脂肪族ＣＨ）、１７０５（Ｃ＝Ｎ）、１５８０〜１４９５（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０８８０】
【化１８８−２】
2006521338.tif 000328
、ＭＳ  ｍ／ｚ  （ＦＡＢ＋）３１５．１［８２、（Ｍ＋Ｈ）＋］、７３［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１５．１７１４９、Ｃ１８Ｈ２３Ｎ２Ｏ３計算値３１５．１７０８７。
【０８８１】
（６，１７−ビス−Ｏ−メチル−オキシム−エストロン（ＤＳＦ０２１８３、ＳＴＸ５１５））
【０８８２】
【化１８９−１】
2006521338.tif 000329
ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（５：１、９ｍＬ）の混合物中の６−オキソエストロン（５０ｍｇ、０．１８ミリモル）の溶液に、ＮａＯＡｃ（１４６ｍｇ、１．７９ミリモル）、次いでＯ−メチル−ヒドロキシルアミン塩酸塩（１６４ｍｇ、１．９７ミリモル）を加えた。得られた溶液を室温で一夜撹拌した。次に、減圧下で溶媒を留去して、Ｈ２Ｏ（３０ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ＋１０ｍｌ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２×１０ｍＬ）、次にブライン（２×１０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。白色の結晶性粗生成物をＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶して、生成物を白色の結晶（５５ｍｇ、９２％）として得た。融点２０６〜２０８℃、ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．７０、比較Ｒｆ０．２８、ＩＲ（ＫＢｒ）３１３４（ｂｒ、ＯＨ）、２９９５（芳香族ＣＨ）、２９３５〜２８９０（脂肪族ＣＨ）、１５７０〜１４９０（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０８８３】
【化１８９−２】
2006521338.tif 000330
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４３．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４３．２０３２９、Ｃ２０Ｈ２７Ｎ２Ｏ３計算値３４３．２０２１７。実測値Ｃ  ７０．２０、Ｈ  ７．５７、Ｎ  ８．１４。Ｃ２０Ｈ２６Ｎ２Ｏ３計算値Ｃ  ７０．１５、Ｈ  ７．６５、Ｎ  ８．１８。
【０８８４】
（１６−オキシイミノ−エストロン（ＤＳＦ０２０３６／ＳＴＸ３２７））
【０８８５】
【化１９０−１】
2006521338.tif 000331
Ｎ２雰囲気下で、ｔｅｒｔ−ブタノール（２ｍＬ）にカリウム金属（８０ｍｇ、２．０５ミリモル）を溶解させて新たに調製したカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの撹拌溶液に、エストロン（２００ｍｇ、７４０ミリモル）を加えた。この反応混合物を室温で１時間撹拌した後、亜硝酸イソアミル（１８０μＬ、１．３４ミリモル）を滴下によって加えた。得られた濃赤色の混合物を一夜撹拌してからＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中に注いだ。得られた溶液をエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出し、水層を氷酢酸（１０ｍｌ）で酸性にして淡黄色の沈殿物を析出させた。２時間静置した後、固体をろ別して黄色の粉末（１４０ｍｇ、６３％）を得た。分析用に、アセトンから試料を再結晶して白色の結晶を得た。融点２２３〜２２５℃［文献１（水性ＭｅＯＨ）２１４〜２１５℃］、ＴＬＣ（クロロホルム／アセトン、９：１）Ｒｆ０．２７、比較Ｒｆ０．６９（Ｅ１）、ＩＲ（ＫＢｒ）３３８５（ＮＯＨ）、２９２０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１７３５（Ｃ＝Ｏ）、１６０５〜１５００（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０８８６】
【化１９０−２】
2006521338.tif 000332
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４５３．２［３０、（Ｍ＋Ｈ＋ＮＢＡ）＋］、３００．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ−）４５１．３［３８、（Ｍ−Ｈ＋ＮＢＡ）−］、２９８．２［１００、（Ｍ−Ｈ）−］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３００．１５９６３、Ｃ１８Ｈ２２ＮＯ３計算値３００．１５９９７。実測値Ｃ  ７１．３０、Ｈ  ７．０８、Ｎ  ４．３５。Ｃ１８Ｈ２１ＮＯ３・（ＡｃＯＨ）１／６計算値Ｃ  ７１．１７、Ｈ  ７．０６、Ｎ  ４．５３。
１  Ｈｕｆｆｍａｎ，Ｍ．Ｎ．、Ｄａｒｂｙ，Ｈ．Ｈ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９４４，６６，１５０
（１６，１７−ビス−オキシイミノ−エストロン（ＤＳＦ０２１１０、ＳＴＸ３３８））
【０８８７】
【化１９１−１】
2006521338.tif 000333
ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（５：１、３６ｍＬ）の混合物中の１６−オキシイミノ−エストロン（２００ｍｇ、０．６７ミリモル）の溶液に、ＮａＯＡｃ（５５６ｍｇ、６．７９ミリモル）、続いて塩酸ヒドロキシルアミン（５２０ｍｇ、７．４８ミリモル）を加えた。得られた淡黄色の溶液を室温で一夜撹拌した。次に、減圧下で溶媒を留去して、ブライン（１００ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で有機物を抽出してブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮して粗生成物（２３６ｍｇ）を得た。これをアセトンから再結晶して、クリーム色の結晶（１０９ｍｇ、５２％）を得た。融点２４５〜２４７℃、ＴＬＣ（クロロホルム／アセトン、８：２）Ｒｆ０．１３、比較Ｒｆ０．５０、ＩＲ（ＫＢｒ）３４２０〜３２００（ｂｒ、ＮＯＨ、ＯＨ）、３０２０（芳香族ＣＨ）、２９３５〜２８７０（脂肪族ＣＨ）、１７０５（Ｃ＝Ｎ）、１６２０（Ｃ＝Ｎまたは芳香族Ｃ＝Ｃ）、１５８５〜１５００（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０８８８】
【化１９１−２】
2006521338.tif 000334
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１５．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１３３．１［２１］、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ−）４６６．２［６６、（Ｍ−Ｈ−ＮＢＡ）−］、３１３．２［１００、（Ｍ−Ｈ）−］、２７６．１［８０］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１５．１７１０８、Ｃ１８Ｈ２３Ｎ２Ｏ３計算値３１５．１７０８７。ＨＰＬＣ（メタノール／水、７０：３０、λｍａｘ＝２５２．１ｎｍ）Ｒｔ＝２．７１分、９９．２％。実測値Ｃ  ６７．３０、Ｈ  ７．４１、Ｎ  ７．５９。Ｃ１８Ｈ２３Ｎ２Ｏ３・（ＣＨ３）２Ｏ計算値Ｃ  ６７．７２、Ｈ  ７．５８、Ｎ  ７．５２。
【０８８９】
（１７−オキシム−エストロン（ＤＳＦ０３００７））
【０８９０】
【化１９２−１】
2006521338.tif 000335
ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（５：１、９０ｍＬ）の混合物中のＥ１（５００ｍｇ、１．８５ミリモル）の懸濁液に、ＮａＯＡｃ（１．５ｇ、１８．８ミリモル）、続いて塩酸ヒドロキシルアミン（１．４ｇ、２０．７２ミリモル）を加えた。得られた懸濁液を室温で一夜撹拌した。次に、減圧下で溶媒を留去して、Ｈ２Ｏ（１００ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ＋５０ｍＬ）で有機物を抽出してＨ２Ｏ（５０ｍＬ）、次にブライン（５０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮し、白色の結晶性粗生成物（６２７ｍｇ）を得た。これをＭｅＯＨから再結晶して、白色の結晶（４２６ｍｇ、８１％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、４：１）Ｒｆ０．１３、比較Ｒｆ０．５５（Ｅ１）、ＩＲ（ＫＢｒ）３４１５（ＮＯＨ）、３２７０（ＯＨ）、２９３０（脂肪族ＣＨ）、１６２０（Ｃ＝Ｎまたは芳香族Ｃ＝Ｃ）、１５８５〜１４６０（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０８９１】
【化１９２−２】
2006521338.tif 000336
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２８６．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、２６８．１［２３、（Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２８６．１８０９３、Ｃ１８Ｈ２４ＮＯ２計算値２８６．１８０７０。
【０８９２】
（３−Ｏ−ベンジル−マリアノール酸（ＤＳＦ０１０４２））
【０８９３】
【化１９３−１】
2006521338.tif 000337
ＭｅＯＨ（１Ｌ）中の３−Ｏ−ベンジル−エストロン（３．８ｇ、１０．５ミリモル）の撹拌溶液に、９５ｍＬのＭｅＯＨ中のヨウ素（７．６ｇ、２９．９ミリモル）の溶液と、２７ｍＬのＨ２Ｏおよび６１ｍＬのＭｅＯＨ中のＫＯＨ（１３．７ｇ）の溶液とを、反応混合物の色がオレンジ色／茶色にとどまるようにかわるがわる滴下して加えた。４５分間にわたって添加を行ない、その結果得られた淡黄色の溶液を、Ｎ２雰囲気下室温で一夜撹拌した。次に、得られた透明な淡黄色の溶液を減圧下で濃縮して、Ｈ２Ｏ（８００ｍＬ）中へ注いだ。５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした後、有機物をエーテル（６００ｍＬ）で抽出してＮａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（４×１００ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（４×１００ｍＬ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）、ろ過して減圧下で濃縮した。次に、得られた黄色の発泡体（４．５４ｇ）をＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：２、２２８ｍＬ）中のＫＯＨ（７．６ｇ）の溶液に溶解し、加熱して４時間還流した。得られたオレンジ色の溶液をＨ２Ｏ（８００ｍＬ）中に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした後、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で有機物を抽出した。ブライン（４×２００ｍＬ）で洗浄した後、有機層を脱水（ＭｇＳＯ４）、ろ過して減圧下で濃縮して、黄色の残留物（４．３２ｇ）を得た。これをＣＨＣｌ３／ヘキサン５：３から再結晶して、クリーム色の粉末（３．２５ｇ、７５％）を得た。融点２１２〜２１５℃［文献２（水性ＭｅＯＨ）２２６〜２２７℃］ＴＬＣ（クロロホルム／メタノール、５：１）Ｒｆ０．３７、比較Ｒｆ０．８８、ＩＲ（ＫＢｒ）３０５０〜２６５０（ＣＯ２Ｈ）、１７００（Ｃ＝Ｏ）、１６００〜１５００（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０８９４】
【化１９３−２】
2006521338.tif 000338
４０８．２［４１、Ｍ＋］、９１．１［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４０８．１９４０４、Ｃ２５Ｈ２８Ｏ５計算値４０８．１９３６７。
２  Ｈｅｅｒ，Ｊ．，Ｍｉｅｓｃｈｅｒ，Ｋ．  Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  １９４５，２８，１５６。
【０８９５】
（マリアノール酸（ＤＳＦ０２１３６、ＳＴＸ４１７））
【０８９６】
【化１９４−１】
2006521338.tif 000339
ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（２：１、３０ｍｌ）の混合物中の３−ベンジル−Ｏ−マリアノール酸（２００ｍｇ、０．６１ミリモル）の撹拌溶液に、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＰｄ−Ｃ（１０％、９０ｍｇ）の懸濁液を加えた。水素を充てんした風船を用いて、得られた懸濁液を室温で２時間水素化した。ろ過による担持触媒の除去および減圧下でのろ液の蒸発後、得られた黄色の発泡体（１４２ｍｇ）を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶した。融点２１１〜２１３℃［文献２（ＥｔＯＨ）、２２３〜２２４℃］、ＴＬＣ（クロロホルム／ＭｅＯＨ、５：１）Ｒｆ０．４０、比較Ｒｆ０．５３）、ＩＲ（ＫＢｒ）３６００〜３３５０（ｂｒ．ＣＯ２Ｈ）、３０８０〜３００５（芳香族ＣＨ）、２９４０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１７１５（Ｃ＝Ｏ）、１６９５（Ｃ＝Ｏ）、１６１０〜１４５０（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０８９７】
【化１９４−２】
2006521338.tif 000340
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１８．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、３０１．１［８０、（Ｍ−ＯＨ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１８．１４６３５、Ｃ１８Ｈ２２Ｏ５計算値３１８．１４６７２。
２  Ｈｅｅｒ，Ｊ．，Ｍｉｅｓｃｈｅｒ，Ｋ．  Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  １９４５，２８，１５６．
（３−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストロン（ＤＳＦ０３０３４））
【０８９８】
【化１９５−１】
2006521338.tif 000341
Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＤＭＦ（３００ｍＬ）中のＥ１（１０ｇ、３７．０ミリモル）の撹拌溶液に、イミダゾール（６．３ｇ、９２．４ミリモル）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（７．８ｇ、５１．８ミリモル）を加えた。得られた溶液を一夜撹拌して白色の懸濁液を得た。これをＨ２Ｏ（５００ｍＬ）に注ぎ、有機物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ＋３００ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×２００ｍＬ）、次にブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄さし、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をＥｔＯＨから再結晶して、白色の針状結晶（〜１４ｇ、１００％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．９１、比較Ｒｆ０．６１（Ｅ１）、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０８９９】
【化１９５−２】
2006521338.tif 000342
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−１６−ホルミル−エストロン（ＤＳＦ０３０６６））
【０９００】
【化１９６−１】
2006521338.tif 000343
乾燥トルエン（２５０ｍＬ）中の３−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−エストロン（９ｇ、２３．４ミリモル）の撹拌溶液に、Ｎ２雰囲気下、室温でＮａＯＭｅ（３．８ｇ、７０．２ミリモル）を少しずつ加えた。次に、ギ酸エチル（１３．２ｍＬ、１６４ミリモル）を加え、得られた淡黄色の溶液を一夜撹拌した。最終的な濃厚な黄色の混合物をＨ２Ｏ（３００ｍＬ）に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。ＥｔＯＡｃ（２×５００ｍＬ）で有機物を抽出し、水（３×２００ｍＬ）、次いでブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧下で濃縮してクリーム色の粗生成物（９．４９ｇ、９８％）を得た。分析用に、ＥｔＯＨから試料を再結晶して、白色の結晶を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．６１、比較Ｒｆ０．８４）、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９０１】
【化１９６−２】
2006521338.tif 000344
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４１３．２［６８、（Ｍ＋Ｈ）＋］、３５５．１［３３、（Ｍ−Ｃ（ＣＨ３）３）＋］、７２．９［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４１３．２４９２１、Ｃ２５Ｈ３７Ｏ３Ｓｉ計算値４１３．２５１２０。
【０９０２】
（３−ヒドロキシ−１６−ホルミル−エストロン（ＤＳＦ０３０９、ＳＴＸ４８６））
【０９０３】
【化１９７−１】
2006521338.tif 000345
Ｎ２雰囲気下室温で、乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）中の３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−１６−ヒドロキシメチレン−エストロン（４．４ｇ、１０．７ミリモル）の撹拌溶液に、乾燥ＴＨＦ（２１．３ｍＬ、２１．３ミリモル）中のテトラブチルアンモニウムフルオリドの１．０Ｍ溶液を加えた。この混合物を一夜撹拌して褐色の溶液を得た。減圧下で溶媒を除去した後、Ｈ２Ｏ（３００ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×２００ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）、次いでブライン（２００ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。淡黄色の粗生成物を沸点のＥｔＯＡｃから沈澱させて、微黄色の粉末（２．２１ｇ、６９％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．３２、比較Ｒｆ０．６８、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９０４】
【化１９７−２】
2006521338.tif 000346
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２９９．２［３６、（Ｍ＋Ｈ＋）］、２４２．３［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２９９．１６５０５、Ｃ１９Ｈ２３０３計算値２９９．１６４７２。
【０９０５】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−ピラゾール（ＣＡＢ０２１５６／ＤＳＦ０３０６０、ＳＴＸ５０９））
【０９０６】
【化１９８−１】
2006521338.tif 000347
Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＥｔＯＨ（１０ｍｌ）中の１６−ヒドロキシメチレン−エストロン（２００ｍｇ、０．６７ミリモル）の溶液に、ヒドラジン水和物（４８μＬ、１．００ミリモル）を加えた。得られた濃い黄色の溶液を３０分間加熱還流した。次に、減圧下で溶媒を除去してＨ２Ｏ（５０ｍｌ）を加え、５Ｍ  ＨＣｌで混合物を酸性にした。ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ＋５０ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２×５０ｍＬ）、次いでブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮して微黄色の粗生成物（２１２ｍｇ）を得た。これを無水ＥｔＯＨから再結晶して、微黄色の薄片状結晶（１２５ｍｇ、６４％）を得た。融点３２６〜３２８℃［文献２３２０〜３２８℃］、ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、７：３）Ｒｆ０．１１、比較Ｒｆ０．２８、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９０７】
【化１９８−２】
2006521338.tif 000348
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２９５．０［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２９５．１８０７８、Ｃ１９Ｈ２３Ｎ２Ｏ計算値２９５．１８１０４。
３  Ｓｗｅｅｔ，Ｆ．、Ｂｏｙｄ，Ｊ．、Ｍｅｄｉｎａ，Ｏ．、Ｋｏｎｄｅｒｓｋｉ，Ｌ．、Ｍｕｒｄｏｃｋ，Ｇ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１９９１，１８０，１０５７〜１０６３。
【０９０８】
（１６−シアノ−エストラジオール（ＤＳＦ０３０１９／ＳＴＸ５６１））
【０９０９】
【化１９９−１】
2006521338.tif 000349
室温で１６−ニトリル−エストロン（１５０ｍｇ、０．５１ミリモル）のＴＨＦ／ＥｔＯＨ（３：２、５ｍＬ）の混合溶液を撹拌し、これに水素化ホウ素ナトリウム（５０ｍｇ、１．３２ミリモル）を少しずつ加えた。得られた淡黄色の溶液を３０分間撹拌した。次に、減圧下で溶媒を除去し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ＋１０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮し、淡黄色の粗生成物（１５９ｍｇ）を得た。これをＩＰＡ／Ｈ２Ｏから再結晶して白色の結晶（１６ｍｇ）を回収し、母液残渣の無水ＥｔＯＨからの再結晶によって二次晶（４０ｍｇ）を得た（全収率３７％）。融点２５２−２５４℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３４３０−３２３５（ＯＨ）、２９２５−２８５０（脂肪族ＣＨ）、２２５５（ＣＮ）、１６１０−１５００（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９１０】
【化１９９−２】
2006521338.tif 000350
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２９７．１［１００、Ｍ＋］、２４２．１［５０］。高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）２９７．１７２３９、Ｃ１９Ｈ２３ＮＯ２理論値２９７．１７２８８。
【０９１１】
（１６−イソブチリデン−エストロン（ＤＳＦ０３０２９、ＳＴＸ５７１））
【０９１２】
【化２００−１】
2006521338.tif 000351
Ｎ２雰囲気下−７８℃で、ＬＤＡ（１．８Ｍヘプタン／ＴＨＦ／エチルベンゼン溶液の２．４７ｍＬ、４．４４ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、エストロン（４２０ｍｇ、１．５５ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を滴下して加えた。−７８℃で２時間撹拌した後、イソブチルアルデヒド（１８５μＬ、２．０３ミリモル、Ｎａ２ＳＯ４から新たに蒸留）を加えた。得られた混合物を一夜撹拌して、室温に戻らせた。次に、減圧下で溶媒を留去して、Ｈ２Ｏ（５０ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ＋２０ｍＬ）で有機物を抽出してＨ２Ｏ（２０ｍＬ）次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧下で濃縮して白色の粗生成物（６０２ｍｇ）を得た。溶離液としてクロロホルム／ＥｔＯＡｃ（９：１）を用いるフラッシュクロマトグラフィーでこれを精製して、生成物として白色の発泡体（４０１ｍｇ、７９％）を得た。これをＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶して、白色の結晶（３２５ｍｇ、６４％）を得た。融点１８８〜１９０℃、ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．６５、比較Ｒｆ０．７４（Ｅ１）、ＩＲ（ＫＢｒ）３３７０（ＯＨ）、２９３０〜２８９０（脂肪族ＣＨ）、１７１０（Ｃ＝Ｏ）、１６４５〜１４４５（芳香族Ｃ＝Ｃおよび環外Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９１３】
【化２００−２】
2006521338.tif 000352
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２５．１［１００，（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２５．２１６６３、Ｃ２２Ｈ２９Ｏ２計算値３２５．２１６７５。実測値Ｃ  ８１．３０、Ｈ  ８．７１、Ｎ  ０。Ｃ２２Ｈ２８Ｏ２計算値Ｃ  ８１．４４、Ｈ  ８．７０、Ｎ  ０。
【０９１４】
（１６−イソブチリデン−エストラジオール（ＤＳＦ０３０４６、ＳＴＸ６１４））
【０９１５】
【化２０１−１】
2006521338.tif 000353
０℃で、１６−イソブチリデン−エストロン（１００ｍｇ、０．３１ミリモル）のＭｅＯＨ／ＴＨＦ（３：１、９ｍＬ）混合物溶液を撹拌しながら、水素化ホウ素ナトリウム（５７ｍｇ、１．５１ミリモル）のＨ２Ｏ（３ｍＬ）溶液を滴下して加えた。得られた溶液を０℃で２０分間撹拌した。次に、５滴の氷酢酸、次さらにＮａＣｌ水溶液（１０％溶液、２０ｍＬ）を加え、生成した白色の沈殿物をろ過して乾燥した（１０２ｍｇ）。これをアセトン／ヘキサンから再結晶して、白色の結晶（６０ｍｇ、６０％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．７２、比較Ｒｆ０．８２）、ＩＲ（ＫＢｒ）３４３５〜３３２５（ＯＨ）、２９５５〜２８６５（脂肪族ＣＨ）、１６９５〜１５００（芳香族Ｃ＝Ｃおよび環外Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９１６】
【化２０１−２】
2006521338.tif 000354
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２６．２［９５、Ｍ＋］、３０９．２［１００、（Ｍ−ＯＨ）＋］、２８３．１［５０，（Ｍ−Ｃ３Ｈ７）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２６．２２５２０、Ｃ２２Ｈ３０Ｏ２計算値３２６．２２４５８。
【０９１７】
（１６−（２’，２’−ジメチル）−プロピリデン−エストロン（ＤＳＦ０３０６９Ａ／ＳＴＸ７４８））
【０９１８】
【化２０２−１】
2006521338.tif 000355
Ｎ２雰囲気下−７８℃で、乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＬＤＡ（１．８Ｍヘプタン／ＴＨＦ／エチルベンゼン溶液２．４７ｍＬ、４．４４ミリモル）の溶液を撹拌しながら、乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中のエストロン（５００ｍｇ、１．８５ミリモル）の溶液を滴下して加えた。−７８℃で２時間撹拌した後、Ｎａ２ＳＯ４から新たに蒸留した２，２−ジメチル−プロピオンアルデヒド（２６１μＬ、２．４０ミリモル）を加えた。得られた混合物を５０時間撹拌して、室温に戻らせた。次に、減圧下で溶媒を留去して、Ｈ２Ｏ（５０ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ＋２０ｍｌ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。溶離液としてクロロホルム／ＥｔＯＡｃ（８：２）のグラジエントを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって淡黄色の粗生成物を精製して、生成物として白色の結晶性の固体（２６４ｍｇ、４２％）を得た。これをＥｔＯＡｃから再結晶して、白色の結晶（１１３ｍｇ、２１％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．７１、比較Ｒｆ０．６１（Ｅ１）、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９１９】
【化２０２−２】
2006521338.tif 000356
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）６７７．５［５４，（２Ｍ＋Ｈ）＋］、３３９．２［１００，（Ｍ＋Ｈ）＋］、４９２．２［２４，（Ｍ＋Ｈ＋ＮＢＡ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３３９．２３２５６、Ｃ２３Ｈ３１Ｏ２計算値３３９．２３２４１。実測値Ｃ  ８１．５０、Ｈ  ８．９６、Ｎ  ０。Ｃ２３Ｈ３０Ｏ２計算値Ｃ  ８１．６１、Ｈ  ８．９３、Ｎ  ０。
【０９２０】
（１６−（１’−ヒドロキシ−プロピル）−エストロン（ＤＳＦ０３０４４Ｂ、ＳＴＸ６６５））
【０９２１】
【化２０３−１】
2006521338.tif 000357
Ｎ２雰囲気下−７８℃で、乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＬＤＡ（１．８Ｍヘプタン／ＴＨＦ／エチルベンゼン溶液２．４７ｍＬ、４．４４ミリモル）の溶液を撹拌しながら、乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のエストロン（５００ｍｇ、１．８５ミリモル）の溶液を滴下して加えた。−７８℃で２時間撹拌した後、プロピオンアルデヒド（１６０μＬ、２．４０ミリモル、ＣａＣｌ２上で脱水してＮａ２ＳＯ４から新たに蒸留）を加えた。得られた混合物を５０時間撹拌して、室温に戻した。次に、減圧下で溶媒を留去して、Ｈ２Ｏ（１００ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）、次いでブライン（１００ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮し、結晶化するクリーム色の粗製のオイル（９７１ｍｇ）を得た。溶離液としてクロロホルム／ＥｔＯＡｃ（８：２）のグラジエントを用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製して、生成物として白色の固体（３６３ｍｇ、６０％）を得た。これをＥｔＯＡｃから再結晶して、白色の結晶（４９ｍｇ）を得た。また、母液の残留物をＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶することによって生成物の二次晶（総収率３６％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．３８、比較Ｒｆ０．６１（Ｅ１）、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９２２】
【化２０３−２】
2006521338.tif 000358
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２９．２［１００，（Ｍ＋Ｈ）＋］、３１１．２［３０，（Ｍ−ＯＨ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２９．２１１８８、Ｃ２１Ｈ２９Ｏ３計算値３２９．２１１６７。
【０９２３】
（３−Ｏ−アセチル−１６−メチレン−エストロン（ＤＳＦ０３０２３））
【０９２４】
【化２０４−１】
2006521338.tif 000359
無水イソアミルアルコール（８ｍＬ）中の３−Ｏ−アセチル−エストロンの撹拌溶液に、パラホルムアルデヒド（４８０ｍｇ、１単位あたり１６．０ミリモル）および塩酸ジメチルアミン（１．６ｇ、１９．６ミリモル）を加えた。得られた混合物を２４時間加熱還流した。得られた淡黄色の溶液をＨ２Ｏ（３０ｍｌ）中に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で有機物を抽出し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）、次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮して淡黄色のオイルを得た。これをイソアミルアルコールがそれ以上留出しなくなるまでＫｕｇｅｌｒｏｈｒで濃縮した。オイル状の残留物を一夜静置すると結晶化した。溶離液としてクロロホルム／ＥｔＯＡｃ（９５：５）を用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製し、生成物（５２７ｍｇ、５１％）を白色の固体として得た。蒸留して得たオイル状の粗生成物にヘキサンを加えて１時間静置することにより、分析用の若干の結晶を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９２５】
【化２０４−２】
2006521338.tif 000360
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２５．２［１００，（Ｍ＋Ｈ）＋］、２８２．２［７８，（Ｍ＋Ｈ−ＣＨ３ＣＯ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２５．１８２２４、Ｃ２１Ｈ２５Ｏ３計算値３２５．１８０３７。
【０９２６】
（１６−エトキシメチル−エストロン（ＤＳＦ０３０３６Ｂ、ＳＴＸ６６４））
【０９２７】
【化２０５−１】
2006521338.tif 000361
０℃で、無水ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中の１６−メチレン−エストロン（２０ｍｇ、０．６２）の撹拌溶液に、Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）中のＫＯＨ（４１ｍｇ、０．７４ミリモル）の溶液を滴下して加えた。得られた淡黄色の溶液を０℃で３０分間撹拌した。次に、減圧で溶媒を除き、Ｈ２Ｏ（４０ｍｌ）、次いで２、３滴の５Ｍ  ＨＣｌを加えた。生成した白色の沈殿物をろ別して乾燥した（１３１ｍｇ）。クロロホルム／ＥｔＯＡｃ（９５：５）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、これを精製して、淡黄色の固体（２６ｍｇ、１３％）として生成物を得た。これをＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏから再結晶して、淡黄色の結晶（１３ｍｇ、６％）を得た。融点２０８〜２１０℃、ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．４０、比較Ｒｆ０．８６、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９２８】
【化２０５−２】
2006521338.tif 000362
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２９．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２９．２１２４２、Ｃ２１Ｈ２９Ｏ３計算値３２９．２１１６７。実測値Ｃ  ７６．６０、Ｈ  ８．６２、Ｎ  ０、Ｃ２１Ｈ２８Ｏ３計算値Ｃ  ７６．７９、Ｈ  ８．５９、Ｎ  ０。
【０９２９】
（１７−Ｏ−アリル−オキシム−エストロン（ＤＳＦ０３０４８））
【０９３０】
【化２０６−１】
2006521338.tif 000363
ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（５：１、１８０ｍＬ）の混合物中のエストロン（１ｇ、３．７０ミリモル）の溶液に、ＮａＯＡｃ（３ｇ、１０．１７ミリモル）、続いてＯ−アリル−塩酸ヒドロキシルアミン（４．５ｇ、４１．４ミリモル）を加えた。得られた溶液を室温で一夜撹拌した。次に、減圧下で溶媒を留去して、水（２００ｍｌ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ＋１００ｍＬ）で有機物を抽出し、水（２×１００ｍＬ）、次いでブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮し、白色の粗生成物（１．３７ｇ）を得た。これをＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏから再結晶して、白色の結晶（１．１３ｇ、９４％）として生成物を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．６６、比較Ｒｆ０．５６、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９３１】
【化２０６−２】
2006521338.tif 000364
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２６．１［１００，（Ｍ＋Ｈ）＋］、２６８．１［３０、ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２６．２１１５７、Ｃ２１Ｈ２８ＮＯ２計算値３２６．２１２００。実測値Ｃ  ７６．４０、Ｈ  ８．２４、Ｎ  ４．３６。Ｃ２１Ｈ２７ＮＯ２計算値Ｃ  ７６．２３、Ｈ  ８．５０、Ｎ  ４．１７。
【０９３２】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−（１７，１６）−［１］ピリンジン（ＤＳＦ０３０７３、ＳＴＸ６６３））
【０９３３】
【化２０７−１】
2006521338.tif 000365
１７−Ｏ−アリル−オキシム（２．４５ｇ、７．５３ミリモル）を撹拌し、２３０℃に（砂浴を用いる）４６時間加熱した。得られた暗褐色の固体を冷却し、大部分の固体が溶解するまでＥｔＯＨを加えた。溶けずに残っている物質を細かな粉末に潰し、シリカを加えて減圧で溶媒を除いた。次に、淡褐色の粉末をフラッシュクロマトグラフィーカラム（湿式充填）に移し、カラムをクロロホルム／ＥｔＯＡｃ（９：１）で溶離した。暗いオレンジ色の固体（２００ｍｇ、９％）を回収し、クロロホルム／ＥｔＯＡｃ（９５：５）を溶離液として用いる別のフラッシュクロマトグラフィーを実行することによって精製し、薄いオレンジ色の粉末（１４６ｍｇ、６％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．２６、比較Ｒｆ０．７０、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９３４】
【化２０７−２】
2006521338.tif 000366
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０６．１［８５，（Ｍ＋Ｈ）＋］、２０７．０［９５］、１１４．９［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０６．１８６４５、Ｃ２１Ｈ２４ＮＯ計算値３０６．１８５７９。
【０９３５】
（３−Ｏ−アセチル−１６−アセトキシメチレン−エストロン（ＤＳＦ０３０５４））
【０９３６】
【化２０８−１】
2006521338.tif 000367
Ｎ２雰囲気下０℃で、乾燥ピリジン（１５ｍｌ）中の１６−ホルミル−エストロン（２３０ｍｇ、０．７７ミリモル）の撹拌溶液に、無水酢酸（８．３４ｍＬ、８８．４ミリモル）を１０分間かけて滴下して加えた。次に、得られた黄色の混合物を加熱して１時間還流した。最終的な褐色の溶液を冷却し、次にＨ２Ｏ（５０ｍＬ）および氷に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。ＥｔＯＡｃ（２×５ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（３０ｍｌ）、１０％Ｎａ２ＣＯ３（３０ｍｌ）、次にブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮してオレンジ色の発泡体（２５０ｍｇ）を得た。クロロホルム／ＥｔＯＡｃ（９５：５）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製し、結晶（１４０ｍｇ、４７％）化する微黄色のオイルとして生成物を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．７０、比較Ｒｆ０．３０、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９３７】
【化２０８−２】
2006521338.tif 000368
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８３．０［１００，（Ｍ＋Ｈ）＋］、３４１．０［８６，（Ｍ＋Ｈ−ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８３．１８５２３、Ｃ２３Ｈ２７Ｏ５計算値３８３．１８５８５。
【０９３８】
（６−オキソ−３−Ｏ−アセチル−１６−アセトキシメチレン−エストロン（ＤＳＦ０３０６２））
【０９３９】
【化２０９−１】
2006521338.tif 000369
氷／水浴中１０〜１５℃で、酢酸中の３−Ｏ−アセチル−１６−アセトキシメチレン−エストロン（１２０ｍｇ、０．３１ミリモル）の撹拌溶液に、１０％酢酸（７５０μＬ）中のＣｒＯ３（１１３２ｇ、１１．３２リモル）の溶液を３０分間かけて滴下して加えた。得られた暗褐色の溶液を室温で４０時間撹拌した。次に、溶媒を減圧で除き、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）および氷を加えた。ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、次にブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮して褐色の粗生成物を得た。クロロホルム／ＥｔＯＡｃ（８：２）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製し、淡黄色の固体（１３ｍｇ、１０％）として生成物を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、４：１）Ｒｆ０．４０、比較Ｒｆ０．６３、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９４０】
【化２０９−２】
2006521338.tif 000370
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）６６３．５［４８］、３９７．２［３８，（Ｍ＋Ｈ）＋］、３５５．２［３０］、７３．０［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３９７．１６７００、Ｃ２３Ｈ２５Ｏ６計算値３９７．１６５１１。
【０９４１】
（６−オキソ−１６−エトキシメチレン−エストロン（ＤＳＦ０３０８３Ａ、ＳＴＸ７４９））
【０９４２】
【化２１０−１】
2006521338.tif 000371
０℃で、無水ＥｔＯＨ中の６−オキソ−３−Ｏ−アセチル−１６−アセトキシメチレン−エストロン（８０ｍｇ、０．２０ミリモル）の撹拌溶液に、Ｈ２Ｏ（０．８ｍＬ）中のＫＯＨ（２７ｍｇ、０．４８ミリモル）の溶液を滴下して加えた。得られた淡黄色の混合物を０℃で３０分間撹拌した。次に、この混合物を３滴の５Ｍ  ＨＣｌで酸性にして減圧で溶媒を除いた。Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、次にブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮して淡黄色の粗生成物（５２ｍｇ）を得た。ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（７５：２５）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、これを精製し、生成物を白色の固体（１２ｍｇ、１８％）として得た。融点３１４〜３１６℃（分解）、ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、８：２）Ｒｆ０．１１、比較Ｒｆ０．８２、δＨ（ＣＤＣｌ３、２７０ＭＨｚ）
【０９４３】
【化２１０−２】
2006521338.tif 000372
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４１．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４１．１７４６６、Ｃ２１Ｈ２５Ｏ４計算値３４１．１７５２８。
【０９４４】
（６−オキソ−１６−ホルミル−エストロン（ＤＳＦ０３１０５、ＳＴＸ７８４））
【０９４５】
【化２１１−１】
2006521338.tif 000373
ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中の６−オキソ−３−Ｏ−アセチル−１６−アセトキシメチレン−エストロン（３０ｍｇ、０．０８ミリモル）の撹拌溶液に、Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（６３ｍｇ、０．４６ミリモル）の溶液を滴下して加えた。得られた淡黄色の溶液を４５分間撹拌した。最終的な淡褐色の混合物を３滴の５Ｍ  ＨＣｌで酸性にして減圧で溶媒を除いた。Ｈ２Ｏ（３０ｍｌ）を加えてＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、次にブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮した。淡褐色の粗生成物をＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶し、白色の粉末（１３ｍｇ、５４％）を得た。融点２２４〜２２７℃、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９４６】
【化２１１−２】
2006521338.tif 000374
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１３．２［６、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１４９．１［１００］、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ−）３１１．２［１００（Ｍ−Ｈ）−］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１３．１４５０３、Ｃ１９Ｈ２１Ｏ４計算値３１３．１４３９８。
【０９４７】
（３−Ｏ−ベンジル−１６−ホルミル−エストロン（ＤＳＦ０３０９１））
【０９４８】
【化２１２−１】
2006521338.tif 000375
Ｎ２雰囲気下室温で、乾燥トルエン（２５０ｍＬ）中の３−Ｏ−ベンジル−エストロン（１０ｇ、２７．７ミリモル）の撹拌溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（９．４ｇ、８４．１ミリモル）を少しずつ加えた。２０分間撹拌した後、ギ酸エチル（１４．８ｍＬ、１９４ミリモル）を加え、得られた懸濁液を２．５時間撹拌した。最終的な濃いクリーム色の懸濁液をＨ２Ｏ（３００ｍＬ）および氷に注ぎ、有機物をＥｔＯＡｃ（２×２００ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（３×１００ｍＬ）、次にブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮した。沸点のＥｔＯＡｃから粗生成物を沈澱させ、クリーム色の固体を得た（９．２５ｇ、８６％）。ＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）Ｒｆ０．５７比較Ｒｆ０．７８）、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９４９】
【化２１２−２】
2006521338.tif 000376
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８９．３［３１、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８９．２０９９４、Ｃ２６Ｈ２９Ｏ３計算値３８９．２１１６７。
【０９５０】
（３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１、３、５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３０９５））
【０９５１】
【化２１３−１】
2006521338.tif 000377
Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＥｔＯＨ（２００ｍＬ）中の３−Ｏ−ベンジル−１６−ホルミル−エストロン（４ｇ、１０．３ミリモル）の懸濁液に、ヒドラジン水和物（７５１μＬ、１５．４ミリモル）を加えた。得られた黄色の溶液を４５分間加熱還流した。５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした後、減圧下で生成物が沈殿するまで溶媒を除いた。次に、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）を加え、クリーム色の沈殿物をろ過して乾燥して生成物（３．７３ｇ、９４％）を得た。ＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）Ｒｆ０．２０比較Ｒｆ０．６６、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９５２】
【化２１３−２】
2006521338.tif 000378
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８５．３［７５、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８５．２２７９６、Ｃ２６Ｈ２９Ｎ２Ｏ計算値３８５．２２７９９。
【０９５３】
（Ｄ−環縮合ピラゾールのアルキル化の一般手順）
Ｎ２雰囲気下０℃で、ＤＭＦ中の３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−ピラゾールの撹拌溶液に、ＮａＨ（６０％分散、１．５当量）を加えた。０℃で２０分間撹拌した後、アルキル化剤（２当量）を加え、反応が完結するまで（ＴＬＣで追跡）この混合物を室温で撹拌した。次に、この混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、次にブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮した。ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、粗生成物を精製した。
【０９５４】
（３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）――Ｎ−メチル−ピラゾール）
上記一般手順に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−ピラゾール（１５０ｍｇ，０．３９ミリモル）をＮａＨ（１９ｍｇ、０．４７ミリモル）で処理し、続くヨウ化メチル（５７μＬ、０．７８ミリモル）との反応は５０分以内に完結した。ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（９８：２  ９５：５）のグラジエントを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製し、淡黄色のオイルとして、１’−メチル−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール、ＤＳＦ０３０９８Ａを得た。この化合物を静置すると結晶（５２ｍｇ、３３％）化した。ＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）Ｒｆ０．５２比較Ｒｆ０．３８、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９５５】
【化２１３−３】
2006521338.tif 000379
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３９９．３［７４、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、７３．０［２４］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３９９．２４４６７、Ｃ２７Ｈ３１Ｎ２Ｏ計算値３９９．２４３６４。
【０９５６】
（２’−メチル−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール）は、クリーム色の固体（５５ｍｇ、３５％）として得られた。ＴＬＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）Ｒｆ０．４６比較Ｒｆ０．３８、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９５７】
【化２１３−４】
2006521338.tif 000380
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３９９．３［５５、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３９９．２４３４１、Ｃ２７Ｈ３１Ｎ２Ｏ計算値３９９．２４３６４。
【０９５８】
（１’−イソブチル−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾールおよび２’−イソブチル−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール）
上記一般手順に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−ピラゾール（２５０ｍｇ，０．６５ミリモル）を、ＮａＨ（３１ｍｇ、０．７８ミリモル）で処理した。続く１−ブロモ−２−メチル−プロパン（１２４μＬ、１．３０ミリモル）との反応は２時間以内に完結した。溶離液としてＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（９５：５）を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、微黄色のオイル（１２１ｍｇ、４２％）として、１’−イソブチル−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１１１Ａ）を得た。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．９３、比較Ｒｆ０．２６、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９５９】
【化２１３−５】
2006521338.tif 000381
（２’−イソブチル−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール、ＤＳＦ０３１１１Ｂ）は、白色の結晶固体（５６ｍｇ、１９％）として得られた。融点１２６〜１２８℃、ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０，６４、比較Ｒｆ０．２６、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９６０】
【化２１３−６】
2006521338.tif 000382
（１’−メチルアセテート−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾールおよび２’−メチルアセテート−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール）
上記一般手順に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−ピラゾール（３００ｍｇ，０．７８ミリモル）を、ＮａＨ（４７ｍｇ、１．１７ミリモル）で処理した。続くクロロ酢酸メチル（１３６μＬ、１．５６ミリモル）との反応は、２．５時間以内に完結した。ＤＣＭからＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（９５：５）までのゆるやかなグラジエントを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、１’−メチルアセテート−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１１７−２Ａ）を白色の結晶固体（１７３ｍｇ、４８％）として得た。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．５３、比較Ｒｆ０．０９、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９６１】
【化２１３−７】
2006521338.tif 000383
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４５７．３［５５、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、７３．０［７２］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４５７．２４９５４、Ｃ２９Ｈ３３Ｎ２Ｏ３計算値４５７．２４９１２。
【０９６２】
（２’−メチルアセテート−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール、ＤＳＦ０３１１７−２Ｂ）も、微黄色のオイル（７０ｍｇ、２０％）として得られた。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．２８、比較Ｒｆ０．０９、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９６３】
【化２１３−８】
2006521338.tif 000384
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４５７．３［６４、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、７３．０［２７］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４５７．２５０７１、Ｃ２９Ｈ３３Ｎ２Ｏ３計算値４５７．２４９１２。
【０９６４】
（１’−（２−メトキシエチル）−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール、ＤＳＦ０３１１７−３Ａおよび２’−（２−メトキシエチル）−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール、ＤＳＦ０３１１７−３Ｂ）
上記一般手順に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−ピラゾール（３００ｍｇ，０．７８ミリモル）を、ＮａＨ（４７ｍｇ、１．１７ミリモル）で処理した。続く１−クロロ−２−メトキシ−エタン（１４２μＬ、１．５６ミリモル）との反応は、４時間以内に完結した。ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（９：１）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、１’−（２−メトキシエチル）−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール、ＤＳＦ０３１１７−３Ａをクリーム色の固体（９２ｍｇ、２７％）として得た。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．３８、比較Ｒｆ０．１２、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９６５】
【化２１３−９】
2006521338.tif 000385
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４４３．３［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［８０、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４４３．２７１１９、Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２計算値４４３．２６９８５。
【０９６６】
（２’−（２−メトキシエチル）−３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール  ＤＳＦ０３１１７−３Ｂ）は、クリーム色の固体（８０ｍｇ、２３％）として得られた。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．２９、比較Ｒｆ０．１２、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９６７】
【化２１３−１０】
2006521338.tif 000386
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４４３．３［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．１［９５、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、７３．１［４４）、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４４３．２６９６４、Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２計算値４４３．２６９８５。
【０９６８】
（ベンジル化誘導体の水素化の一般手順）
ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（２：１、３０ｍｌ）中の前記ベンジル化前駆体の撹拌溶液に、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＰｄ−Ｃ懸濁液（１０％）を加え、得られた懸濁液を、水素を充填した風船を用いて室温で水素化した。ろ過して担持触媒を除去し、減圧でろ液を留去した後、得られた生成物を再結晶によって精製して親化合物を得た。
【０９６９】
（１’−メチル−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１５−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１００、ＳＴＸ７８５））
【０９７０】
【化２１４−１】
2006521338.tif 000387
上記水素化条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−Ｎ−メチル−ピラゾール（５０ｍｇ、０．０１２ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（２０ｍｇ）の懸濁液を一夜水素化して、生成物を微黄色の固体（３１ｍｇ）として得た。これをＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏから再結晶してクリーム色の結晶（２６ｍｇ、６８％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．１６、比較Ｒｆ０．５０、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９７１】
【化２１４−２】
2006521338.tif 000388
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０９．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、２１９．２［５２］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０９．１９７４７、Ｃ２０Ｈ２５Ｎ２Ｏ計算値３０９．１９６６９。
【０９７２】
（２’−メチル−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−［１７，１６−ｃ］−ピラゾール（ＤＳＦ０３１０２、ＳＴＸ７８６））
【０９７３】
【化２１５−１】
2006521338.tif 000389
上記水素化条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−Ｎ−メチル−ピラゾール（５０ｍｇ、０．０１２ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（２０ｍｇ）の懸濁液を一夜水素化して、生成物を白色の固体（４０ｍｇ）として得た。これをＥｔＯＨから再結晶して白色の結晶（２０ｍｇ、５３％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．１３、比較Ｒｆ０．３２、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【０９７４】
【化２１５−２】
2006521338.tif 000390
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）６６３．５［２４］、３９１．３［２８］、３０９．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０９．１９７３７、Ｃ２０Ｈ２５Ｎ２Ｏ計算値３０９．１９６６９。
【０９７５】
（２’−イソブチル−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−［１７，１６−ｃ］−ピラゾール（ＤＳＦ０３１１３、ＳＴＸ８１３））
【０９７６】
【化２１６−１】
2006521338.tif 000391
上記水素化条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−Ｎ−イソブチル−ピラゾール（４５ｍｇ、０．０１０ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（２０ｍｇ）の懸濁液を一夜水素化して、生成物を淡黄色の固体（１０３ｍｇ）として得た。これをＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶してクリーム色の結晶（３３ｍｇ、９２％）を得た。ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．３０、比較Ｒｆ０．５７、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９７７】
【化２１６−２】
2006521338.tif 000392
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３５１．３［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３５１．２４４３７、Ｃ２３Ｈ３１Ｎ２Ｏ計算値３５１．２４３６４。
【０９７８】
（１’−イソブチル−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−［１７，１６−ｃ］−ピラゾール（ＤＳＦ０３１１５、ＳＴＸ８１２））
【０９７９】
【化２１７−１】
2006521338.tif 000393
前記水素化の条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−Ｎ−イソブチル−ピラゾール（１１０ｍｇ、０．２５ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（４０ｍｇ）の懸濁液を一夜水素化し、白色の固体として生成物（７８ｍｇ）を得た。これをＭｅＯＨから再結晶して無色の結晶（４２ｍｇ、４８％）を得た。融点１２２〜１２３℃、ＴＬＣ（クロロホルム／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．２９、比較Ｒｆ０．７２、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９８０】
【化２１７−２】
2006521338.tif 000394
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３５１．３［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３５１．２４４８５、Ｃ２３Ｈ３１Ｎ２Ｏ計算値３５１．２４３６４。実測値Ｃ  ７５．２０、Ｈ  ８．７９、Ｎ  ７．４２。Ｃ２３Ｈ３０Ｎ２Ｏ・ＭｅＯＨ計算値Ｃ  ７５．３５、Ｈ  ８．９６、Ｎ  ７．３２。
【０９８１】
（１−メチルアセテート−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１２９、ＳＴＸ８０６））
【０９８２】
【化２１８−１】
2006521338.tif 000395
前記水素化の条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−Ｎ−メチルアセテート−ピラゾール（９０ｍｇ、０．２０ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（４０ｍｇ）の懸濁液を６時間水素化処理して、生成物を白色の固体（６６ｍｇ）として得た。これをＭｅＯＨから再結晶して無色の結晶（４９ｍｇ、６８％）を得た。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．１５、比較Ｒｆ０．５５、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９８３】
【化２１８−２】
2006521338.tif 000396
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３６７．３［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１７６．１［２３］、７３．１［２９２］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３６７．２０３８３、Ｃ２２Ｈ２７Ｎ２Ｏ３計算値３６７．２０２１７。
【０９８４】
（２’−メチルアセテート−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１３１、ＳＴＸ８０７））
【０９８５】
【化２１９−１】
2006521338.tif 000397
前記水素化の条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−Ｎ−メチルアセテート−ピラゾール（６０ｍｇ、０．１３ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（２５ｍｇ）の懸濁液を一夜水素化して、淡褐色の発泡体（３４ｍｇ）として生成物を得た。ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（８：２）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製して、生成物を淡黄色の発泡体（１８ｍｇ、３７％）として得た。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．１８、比較Ｒｆ０．３７、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９８６】
【化２１９−２】
2006521338.tif 000398
（１’−（２−メトキシエチル）−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１３３、ＳＴＸ８０８））
【０９８７】
【化２２０−１】
2006521338.tif 000399
前記水素化の条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−Ｎ−（２−メトキシエチル）−ピラゾール（８０ｍｇ、０．１８ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（３５ｍｇ）の懸濁液を６時間水素化して、生成物を白色の結晶固体（５８ｍｇ）として得た。これをＭｅＯＨから再結晶して、以下の性質を有する白色の結晶（３２ｍｇ、５０％）を得た。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．１１、比較Ｒｆ０．２８、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９８８】
【化２２０−２】
2006521338.tif 000400
（２’−（２−メトキシエチル）−３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１３５、ＳＴＸ８０９））
【０９８９】
【化２２１−１】
2006521338.tif 000401
前記水素化の条件に従って、３−Ｏ−ベンジル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）−ピラゾール（７０ｍｇ、０．１６ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（３０ｍｇ）の懸濁液を一夜水素化して、生成物をクリーム色の発泡体（５０ｍｇ）として得た。ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（８：２）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製して、生成物をクリーム色のオイル（２５ｍｇ、４５％）として得た。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）Ｒｆ０．１５、比較Ｒｆ０．２７、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９９０】
【化２２１−２】
2006521338.tif 000402
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３５３．３［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３５３．２２３５９、Ｃ２２Ｈ２９Ｎ２Ｏ２計算値３５３．２２２９０。
【０９９１】
（３−ベンジルオキシ−１６−ニトリル、１６−メチル−エストロン（ＤＳＦ０３１５１／ＤＳＦ０３１６３））
【０９９２】
【化２２２−１】
2006521338.tif 000403
Ｎ２雰囲気下０℃で、無水ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３−ベンジルオキシ−１６−ニトリル−エストロン（０．２０７ミリモル、８０ｍｇ）の撹拌溶液に、ＮａＨ（鉱油中６０％分散、１０ｍｇ、０．２４８ミリモル、１．２当量）を加えた。３０分間撹拌した後、白色の懸濁液にヨウ化メチル（０．３１０ミリモル、１９μＬ）を加え、この混合物を３時間撹拌して、室温に戻した。次に、得られた淡黄色の溶液を水（５０ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で有機物を抽出し、ブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン（３：２）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、淡黄色の固体（６０ｍｇ、７２％）として生成物を得た。δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、２７０ＭＨｚ）
【０９９３】
【化２２２−２】
2006521338.tif 000404
、実測値Ｃ  ８０．８０、Ｈ  ７．４５、Ｎ  ３．４５。Ｃ２７Ｈ２９ＮＯ２計算値Ｃ  ８１．１７、Ｈ  ７．３２、Ｎ  ３．５１。
【０９９４】
（１６−ニトリル、１６−メチル−エストロン（ＤＳＦ０３１７０、ＳＴＸ９２４））
【０９９５】
【化２２３−１】
2006521338.tif 000405
ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（１：１、４０ｍｌ）の混合物中の３−ベンジルオキシ−１６−ニトリル、１６−メチル−エストロン（９０ｍｇ、０．２２５ミリモル）の撹拌溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％、４０ｍｇ）を加えた。得られた懸濁液を、水素を充填した風船を用いて室温で一夜水素化した。最終的な混合物をろ過してろ過ケーキを沸点のＭｅＯＨおよびＴＨＦで数回洗浄し、減圧で濃縮して粗生成物の白色の発泡体を得た。ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（９：１）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによってこれを精製し、白色の発泡体（４６ｍｇ、６６％）として生成物を得た。試料をヘキサン中で砕いてクリーム色の粉末を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３、２７０ＭＨｚ）
【０９９６】
【化２２３−２】
2006521338.tif 000406
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０９．１［６０、Ｍ＋］、９７．１［５０］、８３．０［６５］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０９．１２７６１、Ｃ２０Ｈ２３ＮＯ２計算値３０９．１２７８８。ＨＰＬＣ（メタノール／水、８０：２０、λｍａｘ＝２８０．５ｎｍ）Ｒｔ＝２．５３分、９８％。
【０９９７】
（１’−プロピオニトリル−３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−ピラゾール（ＤＳＦ０３１４５Ａ））
【０９９８】
【化２２４−１】
2006521338.tif 000407
Ｎ２雰囲気下０℃で、無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−−ピラゾール（０．７３４ミリモル、３００ｍｇ）の撹拌溶液にＫＯＣ（ＣＨ３）３（０．８０７ミリモル、９１ｍｇ）を加えた。２０分間撹拌した後、アクリロニトリル（０．８８１ミリモル、５８μＬ）を加え、得られた明るいオレンジ色の溶液を５時間撹拌した。その間は室温であった。次に、得られた暗いオレンジ色の濁った混合物を真空で濃縮して水（５０ｍＬ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で有機物を抽出し、水（２×３０ｍＬ）、次にブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、真空で蒸発させた。ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（９：１）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製し、二つの生成物を得た。その一つは、淡黄色の固体（２９ｍｇ、８％）のＤＳＦ０３１４５Ａであった。δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【０９９９】
【化２２４−２】
2006521338.tif 000408
（３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエノ−（１７，１６−ｃ）−Ｎ−プロピオニトリル−ピラゾール（ＤＳＦ０３１５３、ＳＴＸ９２１）
【１０００】
【化２２５−１】
2006521338.tif 000409
Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の３−ＴＢＤＭＳ−Ｎ−プロピオニトリル（２５ｍｇ、０．０５０ミリモル）の撹拌溶液に、ＴＢＡＦ（０．１１０ミリモル、０．１１ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で３時間撹拌した。次に、減圧で溶媒を除き、水（５０ｍＬ）を加えた。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ＋２０ｍＬ）で有機物を抽出し、水（２０ｍＬ）、次にブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、真空で濃縮した。ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ（８：２）を溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物の黄色のオイルを精製し、淡黄色のオイル（１２ｍｇ、６３％）を得た。次に、これをＥｔＯＡｃ／ヘキサンから沈澱させ、淡黄色のオイル（８ｍｇ）を得た。δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１００１】
【化２２５−２】
2006521338.tif 000410
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ）３４８．３［３２、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１４１．０［２０］。ＨＰＬＣ（メタノール／水、９０：１０、λｍａｘ＝２２９．８ｎｍ）Ｒｔ＝２．２７分、９６％。
【１００２】
（１６−（２’，２’−ジメチル−プロピリデン）−エストラジオール（ＳＴＸ９４８））
【１００３】
【化２２６−１】
2006521338.tif 000411
０℃で、ＭｅＯＨ／ＴＨＦ混合物（２：１、１５ｍＬ）中のＳＴＸ７４８の撹拌溶液に、Ｈ２Ｏ（２．５ｍＬ）中のＮａＢＨ４（４４ｍｇ、１．１６ミリモル）の溶液を加えた。無色の溶液を０℃で１時間撹拌した後、氷酢酸（４滴）、次に１０％ＮａＣｌ水溶液（１５ｍＬ）を加えた。得られた白色の沈殿物をろ過し、脱水し（７９ｍｇ）てＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：８）から再結晶し、以下の性質を有する白色の結晶（６３ｍｇ、７９％）として６８を得た。融点２１９〜２２２℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３５５０、３４１０（ＯＨ）、２９６０〜２８７５（脂肪族ＣＨ）、１６１０、１５０５（脂肪族Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１００４】
【化２２６−２】
2006521338.tif 000412
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４０．２［４９、Ｍ＋］、３２３．２［１００、（Ｍ−ＯＨ）＋］、２８３．２［９２、（Ｍ−Ｃ（ＣＨ３）３）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４０．２３９０、Ｃ２３Ｈ３２Ｏ２計算値３４０．２４０２。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、９６：４、λｍａｘ＝２８０．５ｎｍ）Ｒｔ＝２．５４分、９９．５％。実測値Ｃ  ８１．００、Ｈ  ９．５４。Ｃ２３Ｈ３２Ｏ２計算値Ｃ  ８１．１３、Ｈ  ９．４７％。
【１００５】
（Ｎ−プロピオニトリル［１７−１６−ｃ］−ピラゾール誘導体の合成）
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストロン（１））
【１００６】
【化２２７−１】
2006521338.tif 000413
Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＤＭＦ（３００ｍＬ）中のＥ１（ｇ、３７．０ミリモル）の撹拌溶液に、イミダゾール（６．３ｇ、９２．４ミリモル）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（７．８ｇ、５１．８ミリモル）を加えた。一夜撹拌した後、得られた白色の懸濁液をＨ２Ｏ（５００ｍＬ）中に注いだ。ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ＋３００ｍｌ）で有機物を抽出し、Ｈ２Ｏ（２×２００ｍＬ）、次にブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。粗生成物をＥｔＯＨから再結晶して白色の針状結晶（１４．０ｇ、９８％）として１を得た。融点１７１〜１７３℃［文献｛Ｆｅｖｉｇ，１９８７｝（ＥｔＯＨ）１７０〜１７２℃］、ＩＲ（ＫＢｒ）２９６０〜２８５５（脂肪族ＣＨ）、１７３０（Ｃ＝Ｏ）、１６０５、１４９５（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１００７】
【化２２７−２】
2006521338.tif 000414
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８４．２［１００、Ｍ＋］、３２７．２［４４、（Ｍ−Ｃ（ＣＨ３）３）＋］、７３．０［４４］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８４．２４７７、Ｃ２４Ｈ３６Ｏ２Ｓｉ計算値３８４．２４８５。
【１００８】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−１６−ヒドロキシメチレン−エストロン（２））
【１００９】
【化２２８−１】
2006521338.tif 000415
Ｎ２雰囲気下室温で、無水トルエン（２５０ｍＬ）中の１（９ｇ、２３．４ミリモル）の撹拌溶液に、ＮａＯＭｅ（４．８ｇ、７０．２ミリモル）を少しずつ加えた。２０分間撹拌した後、ギ酸エチル（１３．２ｍＬ、１６４ミリモル）を加え、得られた淡黄色の溶液を一夜撹拌した。最終的な黄色の濃厚な懸濁液をＨ２Ｏ（３００ｍＬ）中に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。ＥｔＯＡｃ（２×５００ｍＬ）で有機物を抽出し、水（３×２００ｍＬ）、次いでブライン（２×２００ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧下で濃縮してクリーム色の粗生成物（９．４９ｇ、９８％）を得た。分析用に試料をＥｔＯＨから再結晶して、白色の結晶として２を得た。融点１６８〜１７１℃、ＩＲ（ＫＢｒ）２９３０〜２８５５（脂肪族ＣＨ）、１７１０（Ｃ＝Ｏ）、１６９５〜１５００、１４９５（Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０１０】
【化２２８−２】
2006521338.tif 000416
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４１３．２［６８、（Ｍ＋Ｈ）＋］、３５５．１［３３、（Ｍ−Ｃ（ＣＨ３）３）＋］、７２．９［１００］。高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４１３．２４９２  Ｃ２５Ｈ３７Ｏ３Ｓｉ計算値４１３．２５１２。実測値Ｃ  ７２．７７、Ｈ  ８．７９。Ｃ２５Ｈ３６Ｏ３Ｓｉ計算値Ｃ  ７２．４０、Ｈ  ８．９０％。
【１０１１】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−ピラゾール（３））
【１０１２】
【化２２９−１】
2006521338.tif 000417
Ｎ２雰囲気下室温で、ＥｔＯＨ（１２５ｍＬ）中の２（２．５ｇ、６．１ミリモル）の懸濁液に、ヒドラジン水和物（４４０μＬ、９．１ミリモル）を加えた。得られた混合物を加熱して４５分間還流した。冷却後、減圧下で溶媒を除去して、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）を加え、この混合物を５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。有機物をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出して、Ｈ２Ｏ（２×５０ｍＬ）次いでブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧下で濃縮して黄色の泡状物（２．９ｇ）を得た。これをＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏから再結晶して、黄色の結晶（２．０ｇ、８１％）として３を得た。融点１２２〜１２４℃。ＩＲ（ＫＢｒ）３１９０（芳香族ＣＨ）、２９３０〜２８５５（脂肪族ＣＨ）、１６０５〜１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１。δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０１３】
【化２２９−２】
2006521338.tif 000418
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４０９．２［１００，（Ｍ＋Ｈ）＋］、７３．０［３３］。高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４０９．２６６２  Ｃ２５Ｈ３７Ｎ２ＯＳｉ計算値４０９．２６７５。実測値Ｃ  ７１．４０、Ｈ  ８．９３、Ｎ  ６．５３。Ｃ２５Ｈ３６Ｎ２ＯＳｉ・（Ｈ２Ｏ）２／３計算値Ｃ  ７１．３８、Ｈ  ８．９５、Ｎ  ６．６６％。
【１０１４】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（１’−プロピオニトリル）−ピラゾール（４）および３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（２’−プロピオニトリル）−ピラゾール（５））
Ｎ２雰囲気下０℃で、無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｔＢｕＯＫ（９１ｍｇ、８０７マイクロモル）の撹拌溶液に、３（３００ｍｇ、７３４マイクロモル）を加えた。２０分間の撹拌後に、アクリロニトリル（５８μＬ、８８１マイクロモル）を加え、得られた明るいオレンジ色の溶液を室温で５時間撹拌した。次に、得られた暗いオレンジ色の混合物を減圧で濃縮して、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、９：１）によって精製して二つの生成物を得た。
【１０１５】
【化２３０−１】
2006521338.tif 000419
より極性の低い画分から、淡黄色のオイル（２９ｍｇ、８％）として４を得た。ＩＲ（ＫＢｒ）２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、２２５０（ＣＮ）、１６４０〜１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）、１２５０（Ｃ−ＯまたはＳｉ（ＣＨ３）２）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０１６】
【化２３０−２】
2006521338.tif 000420
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４６２．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、７３．０［５５］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４６２．２９１４、Ｃ２８Ｈ４０Ｎ３ＯＳｉ計算値４６２．２９４１。
【１０１７】
【化２３１−１】
2006521338.tif 000421
より極性の高い画分から、静置すると結晶化する淡褐色のオイル（４２ｍｇ、１２％）として５を得た。融点８０〜８２℃、ＩＲ（ＫＢｒ）２９３０〜２８５５（脂肪族ＣＨ）、２２５５（ＣＮ）、１７０５〜１４４５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）、１２８５、１２５０（Ｃ−ＯまたはＳｉ（ＣＨ３）２）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０１８】
【化２３１−２】
2006521338.tif 000422
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４６２．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、７３．０［７９］。高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４６２．２９２２、Ｃ２８Ｈ４０Ｎ３ＯＳｉ計算値４６２．２９４１。
【１０１９】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１、３、５（１０）−トリエン−［１７、１６−ｃ］−（１’−プロピオニトリル）−ピラゾール（ＳＴＸ９２１））
【１０２０】
【化２３１−３】
2006521338.tif 000423
Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の４（２５ｍｇ、５０マイクロモル）の撹拌溶液に、無水ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１．０Ｍ溶液（１１０μＬ、１１０マイクロモル）を加えた。この混合物を室温で３時間撹拌した後、減圧で溶媒を除去してＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗製の黄色のオイルをフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、８：２）によって精製し、淡黄色のオイル（１２ｍｇ、６３％）としてＳＴＸ９２１を得た。次に、これをＥｔＯＡｃ／ヘキサンでほぐして淡黄色の粉末（８ｍｇ）を得た。融点９２−９４℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３２３０（ＯＨ）、３０９５（芳香族ＣＨ）、２９２５〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、２２６５（ＣＮ）、１６６５〜１５００（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）、１２４５（Ｃ−Ｏ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０２１】
【化２３１−４】
2006521338.tif 000424
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４８．１［９０、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１４７．１［６４］、７３．０［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４８．２０７２、Ｃ２２Ｈ２６Ｎ３Ｏ計算値３４８．２０７６。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、９０：１０、λｍａｘ＝２２９．８ｎｍ）、Ｒｔ＝２．２７分、９６％。
【１０２２】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（２’−プロピオニトリル）−ピラゾール）
【１０２３】
【化２３２−１】
2006521338.tif 000425
方法Ａ  Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の５（３５ｍｇ、７６マイクロモル）の撹拌溶液に、無水ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１．０Ｍ溶液（１５０μＬ、１５０マイクロモル）を加えた。この混合物を室温で３時間撹拌した後、減圧下で溶媒を除去してＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）次いでブライン（２０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗製の褐色のオイルをフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、８：２）によって精製して、３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（２’−プロピオニトリル）−ピラゾールを明るい褐色のオイル（１０ｍｇ、３８％）として得た。
【１０２４】
方法Ｂ  Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の６（２２０ｍｇ、４５８マイクロモル）の撹拌溶液に、無水ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１．０Ｍ溶液（９１６μＬ、９１６マイクロモル）を加えた。この混合物を室温で一夜撹拌した後、減圧下で溶媒を除去してＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ３、９：１）によって精製して、３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（２’−プロピオニトリル）−ピラゾールを薄いピンク色の発泡体（１３６ｍｇ、８５％）として得た。次に、これをＥｔＯＡｃ／ヘキサンでほぐして白色の結晶（９９ｍｇ、６２％）を得た。融点１９８−２００℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３１６０（ｂｒ、ＯＨ）、２９２５〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、２２５０（ＣＮ）、１６１０〜１５００（芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０２５】
【化２３２−２】
2006521338.tif 000426
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４８．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１４７．０［５０］、８５．１（７５］、７３．０［９４］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３４８．２０６０、Ｃ２２Ｈ２６Ｎ３Ｏ計算値３４８．２０７６。実測値Ｃ  ７５．９０、Ｈ  ７．１７、Ｎ  １２．１０。Ｃ２２Ｈ２５Ｎ３Ｏ計算値Ｃ  ７６．０５、Ｈ  ７．２５、Ｎ  １２．０９％。
【１０２６】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（２’−プロピオニトリル−３’，４’−ジヒドロ）−ピラゾール−３’−オール（６））
【１０２７】
【化２３３−１】
2006521338.tif 000427
Ｎ２雰囲気下で、ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中の２（６００ｍｇ、１．４５ミリモル）の撹拌溶液に、シアノエチルヒドラジン（１７７μＬ、２．１８ミリモル）を加えた。室温で４時間の撹拌後、得られたオレンジ色の混合物を減圧で濃縮して、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）次いで５Ｍ  ＨＣｌを加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）次いでブライン（５０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ３、７：３）によって精製して、薄い黄色の固体（５１０ｍｇ、７３％）として６を得た。これをＥｔＯＨから再結晶して、白色の針状晶（２４０ｍｇ、３４％）を得た。ＩＲ（ＫＢｒ）３３８０（ＯＨ）、２９５０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、２２６０（ＣＮ）、１６１０、１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０２８】
【化２３３−２】
2006521338.tif 000428
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４８０．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、４６２．１［６３、（Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ）＋］、７２．９［７７］、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ−）６３２．３［３２、（Ｍ＋ＮＢＡ）−］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４８０．３０３８  Ｃ２８Ｈ４２Ｎ３Ｏ２Ｓｉ計算値４８０．３０４６。
【１０２９】
（１６−ヒドロキシメチレン誘導体および対応する５’−アルキル化［１７、１６−ｃ］−ピラゾールの合成）
（３−ベンジルオキシ−１６−（１’−ヒドロキシエチリデン）−エストロン（９９）
【１０３０】
【化２３４−１】
2006521338.tif 000429
Ｎ２雰囲気下０℃で、無水トルエン（６ｍｌ）中の３−ベンジルオキシ−エストロン（５００ｍｇ、１．３８ミリモル）の撹拌溶液にｔＢｕＯＫ（４３８ｍｇ、４．１４ミリモル）および無水ＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）を加えた。次に、酢酸エチル（１．２７ｍＬ、１７．９４ミリモル）を加え、この混合物を１時間加熱還流した。冷却後、得られた褐色の溶液をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）中に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。有機物をＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×１００ｍＬ）、次いでブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ）によって粗生成物を精製して、淡黄色の結晶固体（４４７ｍｇ、８０％）として９９を得た。これをＥｔＯＨから再結晶して黄色の結晶（３５１ｍｇ、６３％）を得た。融点１２６〜１２８℃、ＩＲ（ＫＢｒ）２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６６０（Ｃ＝Ｏ）、１６１５−１４５５（Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０３１】
【化２３４−２】
2006521338.tif 000430
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４０３．１［６８、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９１．０［１００、（ＣＨ２Ａｒ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４０３．２２４６、Ｃ２７Ｈ３１Ｏ３計算値４０３．２２７３。実測値Ｃ  ８０．２０、Ｈ  ７．５６。Ｃ２７Ｈ３０Ｏ３計算値Ｃ  ８０．５６、Ｈ  ７．５１％。
【１０３２】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−１６−（１’−ヒドロキシ−２’、２’、２’−トリフルオロ−エチリデン）−エストロン（１００））
【１０３３】
【化２３５−１】
2006521338.tif 000431
Ｎ２雰囲気下０℃で、無水トルエン（２０ｍｌ）中の１（１ｇ、２、６０ミリモル）の撹拌溶液に、ｔＢｕＯＫ（８７５ｍｇ、７．８０ミリモル）を加えた。２０分間撹拌した後、トリフルオロ酢酸エチル（２．１６ｍＬ、１８．２ミリモル）を加え、この混合物を２時間加熱還流した。冷却後、得られた暗いオレンジ色の懸濁液をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）中に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。有機物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。静置すると結晶化するこのオレンジ色の粗製オイル（１．４ｇ、定量的）をそれ以上精製せずに用いた。分析用の試料をＥｔＯＨから再結晶して淡黄色の結晶として１００を得た。融点１４５〜１４６℃、ＩＲ（ＫＢｒ）２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６９０（Ｃ＝Ｏ）、１６４０〜１４９５（Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０３４】
【化２３５−２】
2006521338.tif 000432
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４８０．１［４７、Ｍ＋］、４２３．０［３８、（Ｍ−Ｆ３）＋］、７３．０［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４８０．２２９６、Ｃ２６Ｈ３５Ｆ３Ｏ３Ｓｉ計算値４８０．２３０８。実測値Ｃ  ６４．９０、Ｈ  ７．１３。Ｃ２６Ｈ３５Ｆ３Ｏ３Ｓｉ計算値Ｃ  ６４．９７、Ｈ  ７．３４％。
【１０３５】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−１６−（１′−ヒドロキシ−１″−ピリジン−３″−イルメチレン）−エストロン（１０１））
【１０３６】
【化２３６−１】
2006521338.tif 000433
Ｎ２雰囲気下０℃で、無水トルエン（３０ｍｌ）中の１（１．０ｇ、２、６０ミリモル）の撹拌溶液に、ｔＢｕＯＫ（８７５ｍｇ、７．８０ミリモル）を加えた。２０分間撹拌した後、ニコチン酸エチル（２．４８ｍＬ、１８．２ミリモル）を加え、この混合物を１．５時間加熱還流した。冷却後、得られた暗赤色の懸濁液をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）中に注ぎ、５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。有機物をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）、次いでブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。粗製の黄色い固体をＥｔＯＨから再結晶して、白色の薄片状結晶（９８５ｍｇ、７７％）として１０１を得た。融点１６９〜１７０℃、ＩＲ（ＫＢｒ）２９３０〜２８５５（脂肪族ＣＨ）、１６６０（Ｃ＝Ｏ）、１６０５、１４９５（Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０３７】
【化２３６−２】
2006521338.tif 000434
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４９０．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４９０．２７７５、Ｃ３０Ｈ４０ＮＯ３Ｓｉ計算値４９０．２７７７。実測値Ｃ  ６４．９０、Ｈ  ７．１３。Ｃ２６Ｈ３５Ｆ３Ｏ３Ｓｉ計算値Ｃ  ６４．９７、Ｈ  ７．３４％。
【１０３８】
（１６−（１’−ヒドロキシ−エチリデン）−エストロン（１０２））
【１０３９】
【化２３７−１】
2006521338.tif 000435
方法２に従って、ＭｅＯＨ／ＴＨＦ  ２：１（３０ｍｌ）中の９９（２００ｍｇ、４９７マイクロモル）およびＰｄ−Ｃ（１０％、８０ｍｇ）の懸濁液を２時間水素化して、１０２を白色の固体として（９８ｍｇ、６３％）得た。これをアセトン／ヘキサンから再結晶して白色の結晶（７２ｍｇ、４６％）を得た。融点２１１〜２１４℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３４５０（ＯＨ）、２９１５〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１７０５（Ｃ＝Ｏ）、１６５５〜１５１０（Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０４０】
【化２３７−２】
2006521338.tif 000436
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１３．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、７３．０［１９］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３１３．１７９９、Ｃ２０Ｈ２５Ｏ３計算値３１３．１８０４。実測値Ｃ  ７６．６０、Ｈ  ７．８２。Ｃ２０Ｈ２４Ｏ３計算値Ｃ  ７６．８９、Ｈ  ７．７４％。
【１０４１】
（１６−（１’−ヒドロキシ−２’、２’、２’−トリフルオロ−エチリデン）−エストロン（１０３、ＳＴＸ９４６））
【１０４２】
【化２３８−１】
2006521338.tif 000437
Ｎ２雰囲気下、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の１００（１．１８ｇ、２．４５ミリモル、粗生成物）の撹拌溶液に、無水ＴＨＦ（４．９０ｍＬ、４．９０ミリモル）中のＴＢＡＦの１．０Ｍ溶液を加えた。得られた淡褐色の溶液を室温で４時間撹拌した後、減圧で溶媒を除き、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×８０ｍＬ）、次いでブライン（２×８０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗製の褐色のオイルをフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ）によって精製して、淡褐色のオイル（５３５ｍｇ、６０％）として１０３を得た。これを冷ＤＣＭから結晶化して白色の結晶（２４９ｍｇ、２８％）を得た。融点９１〜９３℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３４３０（ＯＨ）、２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６８５（Ｃ＝Ｏ）、１６１０、１５００（Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０４３】
【化２３８−２】
2006521338.tif 000438
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３６６．１［１００、Ｍ＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３６６．１４７６、Ｃ２０Ｈ２１Ｆ３Ｏ３計算値３６６．１４４３。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、９６：４、λｍａｘ＝２８０．５ｎｍ）Ｒｔ＝１．６６分、１００％。実測値Ｃ  ５７．６０、Ｈ  ５．３７。Ｃ２０Ｈ２１Ｆ３Ｏ３・（ＣＨ２Ｃｌ２）３／４計算値Ｃ  ５７．９５、Ｈ  ５．２７％。
【１０４４】
（１６−（１’−ヒドロキシ−１’’−ピリジン−３’’−イルメチレン）−エストロン（１０４））
【１０４５】
【化２３９−１】
2006521338.tif 000439
Ｎ２雰囲気下、無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の１０１（３５０ｍｇ、７１６マイクロモル）の撹拌溶液に、無水ＴＨＦ（１．４３ｍＬ、１．４３ミリモル）中のＴＢＡＦの１．０Ｍ溶液を加えた。得られた淡褐色の溶液を室温で３時間撹拌した後、減圧で溶媒を除いてＨ２Ｏ（１００ｍＬ）、続いて２、３滴の氷酢酸を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ）およびＣＨＣｌ３（１００ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）、次いでブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮した。この粗生成物を沸点のＥｔＯＨでほぐし、以下の性質を示す微黄色の固体（１２５ｍｇ、５０％）として１０４を得た。融点２７５〜２７８℃、ＩＲ（ＫＢｒ）２９５０〜２８５５（脂肪族ＣＨ）、１６４５（Ｃ＝Ｏ）、１６１０〜１５００（Ｃ＝Ｃおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０４６】
【化２３９−２】
2006521338.tif 000440
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３７６．０  ［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、２４２．１［５４］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３７６．１９０３、Ｃ２４Ｈ２６ＮＯ３計算値３７６．１９１３。実測値Ｃ  ７４．７０、Ｈ  ６．８０、Ｎ  ３．５１。Ｃ２４Ｈ２５ＮＯ３・（Ｈ２Ｏ）１／２計算値Ｃ  ７４．９８、Ｈ  ６．８２、Ｎ  ３．６４％。
【１０４７】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−［５’−（１’’−ピリジン−３’’−イル）−３’，４’−ジヒドロ）］−ピラゾール−３’−オール（１０５））
【１０４８】
【化２４０−１】
2006521338.tif 000441
Ｎ２雰囲気下、ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中の１０１（５００ｍｇ、１．０２ミリモル）の還流溶液にヒドラジン水和物（７５μＬ、１．５３ミリモル）を加えた。得られた淡黄色溶液を１時間加熱還流した後、減圧で溶媒を一部除いて、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）を加えた。得られた白色の沈殿物をろ過および乾燥し（４６０ｍｇ、８９％）、ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏから分析用の試料を再結晶して白色の結晶として１０１を得た。融点１４４〜１４５℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３４８０、３３３０、３１９０（ＮＨおよびＯＨ）、２９４０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６１０〜１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０４９】
【化２４０−２】
2006521338.tif 000442
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）５０４．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、４８６．１（Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）５０４．３０４５、Ｃ３０Ｈ４２Ｎ３Ｏ２Ｓｉ計算値５０４．３０４６。
【１０５０】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（５’−メチル）−ピラゾール（１０６））
【１０５１】
【化２４１−１】
2006521338.tif 000443
Ｎ２雰囲気下で、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の１０２（２４０  ｍｇ、７６８マイクロモル）の還流溶液にヒドラジン水和物（５６μＬ、１．１５ミリモル）を加えた。得られた薄い黄色の溶液を４５分間加熱還流した後、減圧で溶媒を除きいてＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、混合物を５Ｍ  ＨＣｌで酸性にした。有機物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、８：２）によって精製し、薄い茶色の固体（８４ｍｇ、３５％）として１０６を得た。これをアセトンでほぐしてクリーム色の固体（３２ｍｇ、１３％）を得た。融点２３４〜２３６℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３２９５（ＯＨ）、２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６２０〜１５００（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０５２】
【化２４１−２】
2006521338.tif 000444
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０９．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、９５．１［３３］、６９．０［３９］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３０９．１９７８、Ｃ２０Ｈ２５Ｎ２Ｏ計算値３０９．１９６７。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、９６：４、λｍａｘ＝２８０．５ｎｍ）Ｒｔ＝１．９８分、９９％。
【１０５３】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１、３、５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（５’−トリフルオロ−メチル）−ピラゾール（１０７、ＳＴＸ９４９））
【１０５４】
【化２４２】
2006521338.tif 000445
Ｎ２雰囲気下で、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の１０３（１６０ｍｇ、４３７マイクロモル）の還流溶液に、ヒドラジン水和物（３２μＬ、６５５マイクロモル）を加えた。得られた薄い黄色の溶液を加熱して３時間還流させた後、ｐ−トルエンスルホン酸（〜１０ｍｇ）を加えた。次に、この混合物を加熱して一夜還流し、冷却後、減圧で溶媒を除いてＨ２Ｏ（５０ｍＬ）、次に５Ｍ  ＨＣｌを加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ、８：２）によって精製し、薄い黄色の固体として１０７（９５ｍｇ、６０％）を得た。これをＤＣＭ／ヘキサン（１：５）から沈澱させ、ほぼ白色の固体（５１ｍｇ、３２％）を得た。融点１５２〜１５５℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３２２０（ｂｒ、ＯＨ）、２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６１０〜１５００（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３６３．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３６３．１６８９、Ｃ２０Ｈ２２Ｎ２Ｆ３Ｏ計算値３６３．１６８４。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、８５：１５、λｍａｘ＝２８０．５ｎｍ）Ｒｔ＝２．４３分、９８％。
【１０５５】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１、３、５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−［５’−（１″−ピリジン−３″−イル）］−ピラゾール（１０８））
【１０５６】
【化２４３−１】
2006521338.tif 000446
Ｎ２雰囲気下室温で、無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の１０５（１１０ｍｇ、２１８マイクロモル）の撹拌溶液に無水ＴＨＦ中のＴＢＡＦの１．０Ｍ（４３６μＬ、４３６マイクロモル）溶液を加えた。得られた淡褐色の溶液を室温で一夜撹拌した後、減圧で溶媒を除いてＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗製の発泡体を沸点のＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ３（１：１）でほぐし、以下の性質を示す白色の粉末（６１ｍｇ、７５％）として１０８を得た。融点２９８〜３００℃（分解）、ＩＲ（ＫＢｒ）２９８０〜２８４０（脂肪族ＣＨ）、１６１０〜１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０５７】
【化２４３−２】
2006521338.tif 000447
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３７２．０［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３７２．２０８０、Ｃ２４Ｈ２６Ｎ３Ｏ計算値３７２．２０７６。
【１０５８】
（３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル−エストラ−１、３、５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−（５’−トリフルオロメチル−３’，４’−ジヒドロ）−ピラゾール−３’−オール（１０９））
【１０５９】
【化２４４−１】
2006521338.tif 000448
Ｎ２雰囲気下で、無水ＥｔＯＨ（８ｍＬ）中の１００（１５０ｍｇ、３１２マイクロモル）の還流溶液にヒドラジン水和物（２２μＬ、４６８マイクロモル）を加えた。得られた薄い黄色の溶液を加熱して１時間還流した後、真空で溶媒を除いてＨ２Ｏ（５０ｍＬ）、次に５ＭのＨＣｌ（４滴）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ、９８：２、グラジエント、Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ）によって精製し、淡褐色の結晶固体（６５ｍｇ、４２％）を得た。これをＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏから再結晶してクリーム色の結晶（２６ｍｇ、１８％）を得た。融点２３５〜２３８℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３３３５（ＮＨ）、３１７０（ｂｒ、ＯＨ）、２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６６４、１６０５、１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０６０】
【化２４４−２】
2006521338.tif 000449
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４９５．０［６９、（Ｍ＋Ｈ）＋］、４５３．０［５４］、４３７．０［５１、（Ｍ−Ｆ３）＋］、７３．０［１００］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４９５．２６３１１、Ｃ２６Ｈ３６Ｎ２Ｆ３Ｏ２Ｓｉ計算値４９５．２６５４７。
【１０６１】
（３−ヒドロキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−（１７、１６−ｃ）−３’−トリフルオロメチル−５’−ヒドロキシ−ピラゾール（１１０、ＳＴＸ９４７））
【１０６２】
【化２４５−１】
2006521338.tif 000450
Ｎ２雰囲気下室温で、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１０９（１００ｍｇ、２０２マイクロモル）の撹拌溶液に乾燥ＴＨＦ中のテトラブチルフッ化アンモニウムの１．０Ｍ溶液（４０４μＬ、４０４マイクロモル）を加えた。得られた淡褐色の溶液を室温で４時間撹拌した後、減圧で溶媒を除いて、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を加えた。有機物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）、次いでブライン（２×３０ｍＬ）で洗浄して脱水（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して減圧で濃縮した。淡褐色の粗製オイルをフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＡｃ、９：１、Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ）によって精製し、薄い黄色のオイル（５１ｍｇ、６６％）を得た。次に、これをＥｔ２Ｏ／ヘキサン（１：５）から沈澱させ淡黄色のオイル（７ｍｇ）を得た。ＩＲ（ＫＢｒ）３４７０、３４１５（ＯＨ）、２９３０〜２８７０（脂肪族ＣＨ）、１６４０、１６１５、１５００（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０６３】
【化２４５−２】
2006521338.tif 000451
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８１．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、８５．１［８７］、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ−）５３３．３［１００、（Ｍ＋ＮＢＡ）−］、３７９．２［９８（Ｍ−Ｈ）−］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３８１．１７９６７、Ｃ２０Ｈ２４Ｎ２Ｏ２Ｆ３計算値３８１．１７８９９。ＨＰＬＣ（メタノール／水、９６：４、λｍａｘ＝２８０．５ｎｍ）Ｒｔ＝１．６６分、１００％。
【１０６４】
（ＳＴＸ６６４への新しい経路）
（３−ベンジルオキシ−１６−エトキシメチレン−エストロン（１２７））
【１０６５】
【化２４６−１】
2006521338.tif 000452
Ｎ２雰囲気下室温で、アセトン（２０ｍＬ）中の３−ベンジルオキシ−１６−ヒドロキシメチレン−エストロン（２５０ｍｇ、６４３ミリモル）の撹拌懸濁液に、Ｋ２ＣＯ３（５３９ｍｇ、４．３１ミリモル）を少しずつ加えた。１０分間撹拌した後、ヨウ化エチル（２９６μＬ、３．７０ミリモル）を加え、得られた混合物を室温で３６時間撹拌した。次に、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）を加え、有機物をＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出して、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）、次にブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、脱水（Ｎａ２ＳＯ４）およびろ過して、減圧で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：３）によって精製し、白色の固体（２１５ｍｇ、８０％）として１２７を得た。これをＥｔＯＡｃから再結晶して白色の結晶（１３９ｍｇ、５２％）を得た。融点１５８〜１６０℃、ＩＲ（ＫＢｒ）２９３５−２８５０（脂肪族ＣＨ）、１７１０（Ｃ＝Ｏ）、１６４０〜１５００（脂肪族および芳香族Ｃ＝Ｃ）、１２３５（Ｃ−Ｏ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０６６】
【化２４６−２】
2006521338.tif 000453
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４１７．０［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４１７．２４２５、Ｃ２８Ｈ３３Ｏ３計算値４１７．２４３０。
【１０６７】
（１６β−エトキシメチル−エストロン（ＳＴＸ６６４））
ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（１：１、６０ｍＬ）中の１２７（６４０ｍｇ、１．５４ミリモル）およびＰｄ−Ｃ（１０％、２００ｍｇ）の懸濁液を、室温で４８時間水素化（Ｈ２充てん風船）した。セライトろ過による担持触媒の除去およびろ液の減圧濃縮後、得られた生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、３：７）によって精製し、白色の結晶質固体としてＳＴＸ６６４（２３２ｍｇ、４６％）を得た。ＥｔＯＨから再結晶して分析用試料を得た。融点２０８〜２１０℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３３７０（ＯＨ）、２９７０〜２８５５（脂肪族ＣＨ）、１７３０（Ｃ＝Ｏ）、１６１０、１５０５（芳香族Ｃ＝Ｃ）、１２２５（Ｃ−Ｏ）ｃｍ−１、δＨ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０６８】
【化２４６−３】
2006521338.tif 000454
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２９．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３２９．２１２４、Ｃ２１Ｈ２９Ｏ３計算値３２９．２１１７。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、９０：１０、λｍａｘ＝２７９．３ｎｍ）Ｒｔ＝２．３７分、９８％。実測値Ｃ  ７６．６０、Ｈ  ８．６２。Ｃ２１Ｈ２８Ｏ３計算値Ｃ  ７６．７９、Ｈ  ８．５９％。
【１０６９】
（スルファミン酸エステル）
（３−スルファモイルオキシ−１６β−エトキシメチル−エストロン（２０））
【１０７０】
【化２４７−１】
2006521338.tif 000455
Ｎ２雰囲気下で、新たに濃縮して０℃に冷却した塩化スルファモイル溶液（２．２当量）に、無水ＤＭＡ（１．５ｍＬ）を加えた。次に、ＳＴＸ６６４（１００ｍｇ、３０４マイクロモル）を加え、得られた混合物を室温で３時間撹拌した。次に、混合物を冷ブライン（１５ｍＬ）に注ぎ、有機物をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）で抽出してブライン（５×２０ｍＬ）で洗浄し、脱水（ＭｇＳＯ４）してろ過し、減圧で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ、８：２）によって精製し、無色のオイル（１２４ｍｇ、１００％）として２０を得た。ＩＲ（ＫＢｒ）３３８０、３２８５（ｂｒ、ＮＨ２）、２９７０〜２８６５（脂肪族ＣＨ）、１７３０（Ｃ＝Ｏ）、１６０５〜１４９５（芳香族Ｃ＝Ｃ）、１３８０、１１９０（ＳＯ２）ｃｍ−１、□Ｈ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０７１】
【化２４７−２】
2006521338.tif 000456
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）、４０８．３［３９、（Ｍ＋Ｈ）＋］、１４５．１［６３］、１３１．１［６１］、１１７．１［５７］、８５．１（１００］、６８．０［５０］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４０８．１８４１、Ｃ２１Ｈ３０ＮＯ５Ｓ計算値４０８．１８４５。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、９０：１０、λｍａｘ＝２６７．５ｎｍ）Ｒｔ＝２．２８分、９９％。実測値Ｃ、５９．６５、Ｈ  ６．８４、Ｎ  ３．３６。Ｃ２１Ｈ２９ＮＯ５Ｓ・（ＣＨＣｌ３）１／６計算値Ｃ  ５９．４８、Ｈ  ６．８８、Ｎ  ３．２８％。
【１０７２】
（３−スルファモイルオキシ−１６−オキシイミノ−エストロン（２１））
【１０７３】
【化２４８−１】
2006521338.tif 000457
２０の合成で説明したものと類似の手順に従い、１６−オキシイミノ−エストロン（２００ｍｇ、６６８マイクロモル）とＤＭＡ（１．５ｍＬ）中の塩化スルファモイルとの反応は、３時間以内に完結した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／アセトン、８：２）によって精製し、白色の発泡体（９３ｍｇ、３７％）を得た。これをヘキサンでほぐし、白色の粉末として２１（３６ｍｇ、１４％）を得た。融点８８〜９１℃、ＩＲ（ＫＢｒ）３３７０〜３２５０（ＮＨ２、ＮＯＨ）、２９３０〜２８５０（脂肪族ＣＨ）、１７４０（Ｃ＝Ｏ）、１６３５〜１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）、１３８０、１１８５（ＳＯ２）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０７４】
【化２４８−２】
2006521338.tif 000458
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）５３２．２［３２、（Ｍ＋Ｈ＋ＮＢＡ）＋］、３７９．１［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ−）５３１．１［４０、（Ｍ＋ＮＢＡ）−］、３７７．１［１００、（Ｍ−Ｈ）−］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３７９．１３２０、Ｃ１８Ｈ２３Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値３７９．１３２８。実測値Ｃ  ５６．７０、Ｈ  ６．０２、Ｎ  ６．８３。Ｃ１８Ｈ２２Ｎ２Ｏ５Ｓ計算値Ｃ  ５７．１３、Ｈ  ５．８６、Ｎ  ７．４０％。
【１０７５】
（３，１’−ビス−スルファモイルオキシ−エストラ−１、３、５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−ピラゾール（２１）および３−スルファモイルオキシ−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−［１７，１６−ｃ］−ピラゾール（２２））
２０の合成で説明したものと類似の手順に従って、３−ヒドロキシ−エストラ−１、３、５（１０）−トリエン［１７、１６−ｃ］−ピラゾール（１７０ｍｇ、５７７マイクロモル）と、ＤＭＡ（２ｍＬ）中の塩化スルファモイルとの反応は、４時間以内に完結した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３／ＥｔＯＡｃ、１：１）によって精製し、以下の二つの生成物を得た。
【１０７６】
【化２４９−１】
2006521338.tif 000459
より極性の低い画分から、薄い黄色の固体として２１（８５ｍｇ、３２％）を得た。ＩＲ（ＫＢｒ）３４４０、３４１０（ＮＨ２）、２９３０〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１６３５〜１４９５（Ｃ−Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）、１３８５、１１８５（ＳＯ２）ｃｍ−１。δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０７７】
【化２４９−２】
2006521338.tif 000460
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４５２．８［１００、Ｍ＋］、３７３．９［８０、（Ｍ＋Ｈ−ＳＯ２ＮＨ２）＋］、１７１．０［２６］、１１６．０［２９］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）４５２．１１６４、Ｃ１９Ｈ２４Ｎ４Ｏ５Ｓ２計算値４５２．１１８８。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、８０：２０、λｍａｘ＝２２０．４ｎｍ）Ｒｔ  ＝１．９５分、９７％。
【１０７８】
【化２５０−１】
2006521338.tif 000461
より極性の高い画分から、白色の固体として２２（１２３ｍｇ、５７％）を得た。ＩＲ（ＫＢｒ）３３７０、３３０５（ＮＨ２）、２９７５〜２８６０（脂肪族ＣＨ）、１５９０、１４９５（Ｃ＝Ｎおよび芳香族Ｃ＝Ｃ）、１３７０、１１９５（ＳＯ２）ｃｍ−１、δＨ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１０７９】
【化２５０−２】
2006521338.tif 000462
、ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）は、７４７．３［３８、（２Ｍ＋Ｈ）＋］、５２７．２［８０、（Ｍ＋Ｈ＋ＮＢＡ）＋］、５０９．２［３０］、４４３．２［２８］、３７４．２［１００、（Ｍ＋Ｈ）＋］、高精度ＭＳ  ｍ／ｚ（ＦＡＢ＋）３７４．１５４４、Ｃ１９Ｈ２４Ｎ３Ｏ３Ｓ計算値３７４．１５３８。ＨＰＬＣ（ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、８０：２０、λｍａｘ  ＝２１８．０ｎｍ）Ｒｔ＝２．０４分、１００％。
【１０８０】
（セクション５）
（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボニトリル−（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル）シリル−１６−シアノエストロン）（ＣＡＢ０１０４４））
【１０８１】
【化２５１−１】
2006521338.tif 000463
トルエン（５０ｍＬ）中の３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル）シリル−１６−ヒドロキシメチレンエストロン（８２０ｍｇ、２．０ミリモル、ＣＡＢ０１０４２）およびピリジン（１．０ｍｌ）の溶液に、Ｏ、Ｎ−ビストリフルオロアセチル−ヒドロキシルアミン（１．３５ｇ、６．０ミリモル）を加えた。この混合物を加熱して（油浴温度１２０℃）１時間還流した後、室温に冷却（ＴＬＣで確認）した。酢酸エチル（５０ｍＬ）を加えて混合物を分液ロートに移し、水（５０ｍＬ）およびブライン（３０ｍｌ）で洗浄してＮａ２ＳＯ４上で脱水し、減圧で濃縮した。残留物を、シリカ上のカラムクロマトグラフィー（溶離液、酢酸エチル／ヘキサン１：２、Ｒｆ０．３８）によって精製し、淡黄色のオイルを得た。これを少量のアセトン（２ｍＬ）に溶解して、ヘキサンを加えて沈澱させた。淡黄色の固体をろ別して、高真空で乾燥させた。収量５８５ｍｇ（７１％）、１６α−シアノおよび１６β−シアノジアステレオマーの混合物）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０８２】
【化２５１−２】
2006521338.tif 000464
、ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）：７３．１（１００）、３５２．２（６５）、４０９．３（８５、［Ｍ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）４０８．３（１００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）４０９．２４３２９４  Ｃ２５Ｈ３５ＮＯ２Ｓｉ計算値４０９．２４３７０８
（３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２−メトキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７、８、９、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボニトリル  （３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル）シリル−２−メトキシ−１６−シアノエストロン）（ＣＡＢ０１０６６））
【１０８３】
【化２５２−１】
2006521338.tif 000465
トルエン（２０ｍＬ）中の２−メトキシ−３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル）シリルエストロン（８２９ｍｇ、２．０ミリモル）およびギ酸エチル（２．０ｍｌ）の溶液にナトリウムエトキシド（３４０ｍｇ、５．０ミリモル）を加えた。この混合物を室温で２時間撹拌（ＴＬＣで確認）し、酢酸（１ｍＬ）および酢酸エチル（６０ｍＬ）を加えた。混合物を分液ロートに移して、水（２×３０ｍｌ）およびブライン（３０ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で脱水し、減圧で濃縮した。得られた粗製の２−メトキシ−３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル）−１６−ヒドロキシメチレンエストロン（７８５ｍｇ、１．７７３ミリモル）をトルエン（５０ｍＬ）に溶解し、ピリジン（１ｍＬ）およびＯ、Ｎ−ビストリフルオロアセチル−ヒドロキシルアミン（６７５ｍｇ、３．０ミリモル）を加えた。この混合物を加熱して１時間還流した後（ＴＬＣ確認）、放冷して室温に戻した。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈して分液ロートに移し、水（２×５０ｍＬ）およびブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。残留物を、シリカ上のカラムクロマトグラフィー（溶離液、酢酸エチル／ヘキサン１：２、Ｒｆ０．３８）によって精製し、微黄色のオイルを得た。これを少量のアセトン（２ｍＬ）に溶解して、ヘキサンを加えて沈澱させた。淡黄色の固体をろ別して、高真空で乾燥させた。収量６２０ｍｇ（７１％、１６α−シアノおよび１６β−シアノジアステレオマーの約２対１の混合物）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０８４】
【化２５２−２】
2006521338.tif 000466
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）：７３．１（１００）、３８２．３（６５）、４４０．３（２０、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）  ４３８．４（１００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）４４０．２６００２５  Ｃ２６Ｈ３８ＮＯ３Ｓｉ計算値４４０．２６２０９８。
【１０８５】
（ＳＴＸ２０７  ３−ヒドロキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７、８、９、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボニトリル  （１６−シアノ−エストロン、１６αおよび１６βジアステレオマーの混合物）（ＣＡＢ０１０５８））
【１０８６】
【化２５３−１】
2006521338.tif 000467
０℃（氷浴）で、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル）シリル−１６−シアノエストロン（３５０ｍｇ、０．８５６ミリモル、ＣＡＢ０１０４４）の溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（１．０ｍｌ、１ＭＴＨＦ溶液、１．０ミリモル）を加えた。この温度で３０分間混合物を撹拌し、酢酸（０．５ｍｌ）および酢酸エチル（８０ｍＬ）を加えて混合物を分液ロートに移した。有機相を水（２×２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。固体残留物を酢酸エチルに溶解させ、ヘキサンを加えて沈澱させた。微黄色の固体をろ別して、高真空下で乾燥させた。収量２２３ｍｇ（８８％、１６α−シアノおよび１６β−シアノジアステレオマーの約２対１の混合物）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０８７】
【化２５３−２】
2006521338.tif 000468
（ＳＴＸ２０８  ３−ヒドロキシ−２−メトキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７、８、９、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−カルボニトリル  （２−メトキシ−１６−シアノ−エストロン、１６αおよび１６βジアステレオマーの混合物）（ＣＡＢ０１０６８））
【１０８８】
【化２５４−１】
2006521338.tif 000469
０℃（氷浴）で、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル）シリル−２−メトキシ−１６−シアノエストロン（４４０ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１０６６）の溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（１．０ｍｌ、１ＭＴＨＦ溶液、１．０ミリモル）を加えた。この温度で３０分間混合物を撹拌し、酢酸（０．５ｍｌ）および酢酸エチル（８０ｍＬ）を加えて混合物を分液ロートに移した。有機相を水（２×２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。固体残留物を酢酸エチル（約２ｍＬ）に溶解させ、ヘキサンを加えて沈澱させた。微黄色の固体をろ別して、高真空で乾燥させた。収量２３３ｍｇ（７２％、１６α−シアノおよび１６β−シアノジアステレオマーの約２対１の混合物）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０８９】
【化２５４−２】
2006521338.tif 000470
、ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３２５．３（１００、［Ｍ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）３２４．３（１００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）：３２５．１６８９８３  Ｃ２０Ｈ２３ＮＯ３Ｓ計算値３２５．１６７７９４。
【１０９０】
（ＳＴＸ２０９  スルファミン酸  １６−シアノ−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル  （３−スルファモイル−１６−シアノ−エストロン、１６αおよび１６βジアステレオマーの混合物）（ＣＡＢ０１０６２））
【１０９１】
【化２５５−１】
2006521338.tif 000471
トルエン中の塩化スルファモイル溶液（１．０ｍＬ、０．７Ｍ、０．７ミリモル）を、減圧下（水浴温度３０℃）で約０．５ｍＬの体積に濃縮した。残留物を０℃に冷却（氷浴）し、ＤＭＡ（１．５ｍＬ）を加えて無色の溶液を調製した。０℃で、１６−シアノ−エストロン（８９ｍｇ、０．３ミリモル、ＣＡＢ０１０５８）を加え、溶液を室温に戻し、この温度で一夜撹拌した。酢酸エチル（５０ｍＬ）および水（２５ｍｌ）を加え、有機層を分液して水（２×２５ｍｌ）およびブライン（２５ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。残留物をアセトン（約２ｍＬ）に溶解させ、ヘキサンを加えて沈澱させた。白色の固体をろ別して、高真空で乾燥させた。収量９４ｍｇ（８４％、１６α−シアノおよび１６β−シアノジアステレオマーの約２対１の混合物）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０９２】
【化２５５−２】
2006521338.tif 000472
（ＳＴＸ２１０  スルファミン酸  １６−シアノ−２−メトキシ−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル  （２−メトキシ−３−スルファモイル−１６−シアノ−エストロン、１６αおよび１６βジアステレオマーの混合物）（ＣＡＢ０１０７０））
【１０９３】
【化２５６−１】
2006521338.tif 000473
減圧下（水浴温度３０℃）で、トルエン中の塩化スルファモイル溶液（１．０ｍＬ、０．７Ｍ、０．７ミリモル）を、約０．５ｍＬの体積に濃縮した。残留物を０℃に冷却（氷浴）し、ＤＭＡ（１．５ｍＬ）を加えて無色の溶液を調製した。０℃で、２−メトキシ−１６−シアノ−エストロン（８９ｍｇ、０．３０ミリモル、ＣＡＢ０１０６８）を加え、溶液を室温に戻らせ、この温度で一夜撹拌した。酢酸エチル（５０ｍＬ）および水（２５ｍｌ）を加え、有機層を分液して水（２×２５ｍｌ）およびブライン（２５ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。残留物をアセトン（約２ｍＬ）に溶解させ、ヘキサンを加えて沈澱させた。白色の固体をろ別して、高真空で乾燥させた。収量１０２ｍｇ（８２％、１６α−シアノおよび１６β−シアノジアステレオマーの約２対１の混合物）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０９４】
【化２５６−２】
2006521338.tif 000474
（３−ベンジルオキシ−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデン）−ヒドロキシ酢酸  エチルエステル（ＣＡＢ０３０４８）
【１０９５】
【化２５７−１】
2006521338.tif 000475
トルエン（１００ｍＬ）中の３−ベンジル−エストロン（５．７７ｇ、１６．０ミリモル）およびシュウ酸ジエチル（５ｍＬ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２．２４ｇ（２０．０ミリモル）を加えた。得られた透明な黄色の溶液を室温で一夜撹拌した。酢酸（５ｍＬ）を加え（濃い黄色から淡黄色へ色が変化する）、混合物を分液ロートに移して酢酸エチル（５０ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を加えた。有機層を分液して水（１００ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。淡黄色の固体残留物をエタノール（５０ｍＬ）中に懸濁させ、加熱して５分間還流した。室温に冷却後、無色の結晶質固体をろ別して高真空で乾燥した。収量７．２８ｇ（９９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０９６】
【化２５７−２】
2006521338.tif 000476
（２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸  エチルエステル（ＣＡＢ０３０４９）
【１０９７】
【化２５８−１】
2006521338.tif 000477
エタノール（１００ｍＬ）およびジクロロメタン（２０ｍＬ）中の（３−ベンジルオキシ−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデン）−ヒドロキシ−酢酸エチルエステル（６．９１ｇ、１５．０ミリモル、ＣＡＢ０３０４８）の懸濁液に、ヒドラジン水和物（０．７５、約１５ミリモル）を加えた。この懸濁液は２、３分後に透明な淡黄色の溶液に変わった。これを１５分間還流し、室温で一夜撹拌した。溶媒を減圧で除いて白色の固体を回収し、これをエタノール（５０ｍＬ）に溶解して、ｐ−トルエンスルホン水和物（２００ｍｇ）を加えた。混合物を５分間加熱還流し、室温に冷却した後、分液ロートに移した。酢酸エチル（１２０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）を加え、有機層を分液して高濃度のＮａＨＣＯ３水溶液（３０ｍｌ）およびブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。残留物を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化させた。収量５．４３ｇ（７９％）、細かな無色の結晶。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１０９８】
【化２５８−２】
2006521338.tif 000478
（２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸  エチルエステル（ＣＡＢ０３０５１））
【１０９９】
【化２５９−１】
2006521338.tif 000479
エタノール（４０ｍｌ）中の２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸エチルエステル（２．２８３ｇ、５．０ミリモル、ＣＡＢ０３０４９）の懸濁液に、水酸化ナトリウム溶液（７．５ｍＬ、２Ｎ  ＮａＯＨ、１５ミリモル）を加えた。この混合物を３０分間加熱還流した。室温に冷却した後、酢酸（５ｍＬ）を加えて混合物を２時間撹拌した。その間に生成物が沈澱した。生成物をろ別して、水（５０ｍＬ）およびエタノール（２０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で２日間乾燥した。収量２．１３０ｇ（９９％）白色の粉末。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１００】
【化２５９−２】
2006521338.tif 000480
（ＳＴＸ７８２  ２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸  エチルエステル（ＣＡＢ０３０５２））
【１１０１】
【化２６０−１】
2006521338.tif 000481
ＴＨＦ（３０ｍｌ）およびエタノール（３０ｍｌ）中の２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸エチルエステル（９１３ｍｇ、２．０ミリモル、ＣＡＢ０３０４８）の溶液に、チャコール担持パラジウム（１００ｍｇ、５％Ｐｄ）を加えた。得られた混合物を水素雰囲気下（風船）で７２時間撹拌し、セライトの３ｃｍ層を通してろ過し、減圧で濃縮した。残留物をアセトン／シクロヘキサンから結晶化させた。収量６０２ｍｇ（８２％）微黄色の結晶。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１０２】
【化２６０−２】
2006521338.tif 000482
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）：３６７．２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）：３６７．２０３７９６  Ｃ２２Ｈ２７Ｎ２Ｏ３計算値３６７．２０２１６８。
【１１０３】
（ＳＴＸ７８３  ２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（ＣＡＢ０３０５３））
【１１０４】
【化２６１−１】
2006521338.tif 000483
ＴＨＦ（１５ｍｌ）およびエタノール（１５ｍｌ）中の２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸エチルエステル（２１４ｍｇ、０．５ミリモル、ＣＡＢ０３０５１）の溶液に、チャコール担持パラジウム（５０ｍｇ、５％Ｐｄ）を加えた。得られた混合物を水素雰囲気下（風船）で２４時間撹拌し、３ｃｍのセライト層を通してろ過し、減圧で濃縮した。残留物を高真空で乾燥した。収量１６５ｍｇ（９８％）薄い灰色の結晶。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１０５】
【化２６１−２】
2006521338.tif 000484
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）１７６．０（１００）、３２９．１（４５、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３３９．１７１１３５  Ｃ２０Ｈ２３Ｎ２Ｏ３計算値３３９．１７０８６８。
【１１０６】
（（２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−イル）−メタノール（ＣＡＢ０３０５８））
【１１０７】
【化２６２−１】
2006521338.tif 000485
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ４（１００ｍｇ）の懸濁液に、２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸エチルエステル（４５７ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０３０４９）を加えた。この混合物を室温で３０分間撹拌した後、水（１ｍＬ）を加えた（過剰のＬｉＡｌＨ４を分解するため）。撹拌を１時間続け（明るい黄緑色の懸濁液）て酢酸（０．５ｍｌ）を加え、無機固体をろ別してＴＨＦ（約５０ｍＬ）で注意深く洗浄した。合せた有機層をＮａ２ＳＯ４上で脱水して減圧で濃縮した。残留物を酢酸エチル／ジエチルエーテルから結晶化させた。収量２１５ｍｇ（５２％）無色の結晶。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１０８】
【化２６２−２】
2006521338.tif 000486
（ＳＴＸ８０４  ９−ヒドロキシメチル−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−オール（ＣＡＢ０３０６５））
【１１０９】
【化２６３−１】
2006521338.tif 000487
ＴＨＦ（２０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）中の（２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−イル）−メタノール（１２０ｍｇ、０．２８９ミリモル、ＣＡＢ０３０５８）の溶液に、チャコール担持パラジウム（５０ｍｇ、５％Ｐｄ）を加えた。得られた混合物を水素雰囲気下（風船）で２４時間撹拌し、３ｃｍのセライト層を通してろ過し、減圧で濃縮した。残留物を高真空で乾燥した。収量９３ｍｇ（９９％）白色の結晶。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、２７０ＭＨｚ）
【１１１０】
【化２６３−２】
2006521338.tif 000488
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）：３２５．２（１００、［Ｍ］＋）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）：３２５．１９２５２８  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ２Ｏ２計算値３２５．１９１６０３。
【１１１１】
（ＳＴＸ３１９  ３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−ピリジン−２−イルメチレン−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０１１５０））
【１１１２】
【化２６４−１】
2006521338.tif 000489
室温で、エタノール（４０ｍｌ）中のエストロン（１．３５ｇ、５．０ミリモル）およびピリジン−２−カルボアルデヒド（５３９ｍｇ、５．０ミリモル）の懸濁液に、水酸化ナトリウム（１．０ｇ、２５ミリモル）を加えた。得られた暗いオレンジ色の溶液を室温で４時間撹拌した。次に、撹拌しながら氷酢酸（約１０ｍｌ）を加えた。反応液の色は淡黄色に変化し、淡黄色の固体が沈殿した。固体をろ別し、水（５０ｍＬ）、エタノール（２０ｍＬ）、ジエチルエーテル（５０ｍＬ）およびヘキサン（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量１．６３８ｇ（９１％）黄色の粉末。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１１３】
【化２６４−２】
2006521338.tif 000490
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６０．２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）３５８．２（１００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６０．１９６６４０、Ｃ２４Ｈ２６ＮＯ２計算値３６０．１９６３５４。
Ｃ２４Ｈ２５ＮＯ２（３５９．４６）
計算値Ｃ  ８０．１９％    Ｈ  ７．０１％    Ｎ  ３．９０％
実測値Ｃ  ７９．８％      Ｈ  ７．００％    Ｎ  ３．９２％。
【１１１４】
（ＳＴＸ３２１  ３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−ピリジン−４−イルメチレン−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０１１５４））
【１１１５】
【化２６５−１】
2006521338.tif 000491
室温で、エタノール（４０ｍｌ）中のエストロン（１．３５ｇ、５．０ミリモル）およびピリジン−４−カルボアルデヒド（５９５ｍｇ、５．０ミリモル）の懸濁液に、水酸化ナトリウム（１．０ｇ、２５ミリモル）を加えた。得られた暗いオレンジ色の溶液を室温で４時間撹拌した。次に、撹拌しながら、氷酢酸（約１０ｍｌ）を加えた。反応液の色は淡黄色に変化し、淡黄色の固体が沈殿した。固体をろ別し、水（５０ｍＬ）、エタノール（２０ｍＬ）、ジエチルエーテル（５０ｍＬ）およびヘキサン（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量１．５８８ｇ（８８％）淡黄色の固体。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１１６】
【化２６５−２】
2006521338.tif 000492
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６０．２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）３５８．２（１００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６０．１９６９８６、Ｃ２４Ｈ２６ＮＯ２計算値３６０．１９６３５４。
Ｃ２４Ｈ２５ＮＯ２（３５９．４６）
計算値Ｃ  ８０．１９％    Ｈ  ７．０１％    Ｎ  ３．９０％
実測値Ｃ  ７９．８％      Ｈ  ７．００％    Ｎ  ３．９２％。
【１１１７】
（ＳＴＸ３２０  ３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−ピリジン−３−イルメチレン−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０１１５６））
【１１１８】
【化２６６−１】
2006521338.tif 000493
室温で、エタノール（４０ｍｌ）中のエストロン（１．３５ｇ、５．０ミリモル）およびピリジン−３−カルボアルデヒド（５９５ｍｇ、５．０ミリモル）の懸濁液に、水酸化ナトリウム（１．０ｇ、２５ミリモル）を加えた。得られた暗いオレンジ色の溶液を室温で４時間撹拌した。次に、撹拌しながら、氷酢酸（約１０ｍｌ）を加えた。反応液の色は淡黄色に変化し、淡黄色の固体が沈殿した。固体をろ別し、水（５０ｍＬ）、エタノール（２０ｍＬ）、ジエチルエーテル（５０ｍＬ）およびヘキサン（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量１．６３１３ｇ（９０％）黄色の粉末。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１１９】
【化２６６−２】
2006521338.tif 000494
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６０．２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）２７６．１（１００）、３５８．２（９０、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６０．１９６４３４、Ｃ２４Ｈ２６ＮＯ２計算値３６０．１９６３５４。
【１１２０】
（ＳＴＸ３２４  １３−メチル−１６−ピリジン−４−イルメチレン−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（ＣＡＢ０１１５８））
【１１２１】
【化２６７−１】
2006521338.tif 000495
１６−（ピリジン−４−イル）メチレンエストロン（３６０ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１１５４）をエタノール（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却（氷浴）して、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温に戻し、この温度で一夜撹拌した。この透明で無色の溶液を減圧で約２０ｍＬに濃縮して、水（５０ｍＬ）を加えた。生成物をろ別して水（５０ｍＬ）、エタノール（２０ｍＬ）およびジエチルエーテル（２０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量３１２ｍｇ（８６％）白色の粉末。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１２２】
【化２６７−２】
2006521338.tif 000496
（ＳＴＸ３２２  １３−メチル−１６−ピリジン−２−イルメチレン−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（ＣＡＢ０１１６０））
【１１２３】
【化２６８−１】
2006521338.tif 000497
１６−（ピリジン−２−イル）メチレンエストロン（３６０ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１１５０）をエタノール（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却（氷浴）して、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温に戻らせ、そのまま一夜撹拌した。この透明で無色の溶液を減圧で約２０ｍＬに濃縮して、水（５０ｍＬ）を加えた。生成物をろ別して水（５０ｍＬ）、メタノール（２０ｍＬ）およびジエチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量３２８ｍｇ（９１％）白色の粉末。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１２４】
【化２６８−２】
2006521338.tif 000498
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６２．２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）３６０．２（１０００、［Ｍ−Ｈ］−）。
【１１２５】
（ＳＴＸ３２３  １３−メチル−１６−ピリジン−３−イルメチレン−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（ＣＡＢ０１１６２））
【１１２６】
【化２６９−１】
2006521338.tif 000499
１６−（ピリジン−３−イル）メチレンエストロン（３６０ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１１５６）をエタノール（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解した。この溶液を０℃に冷却（氷浴）して、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温に戻し、この温度で一夜撹拌した。この透明で無色の溶液を減圧で約２０ｍＬの体積に濃縮して、水（５０ｍＬ）を加えた。生成物をろ別して水（５０ｍＬ）、メタノール（２０ｍＬ）およびジエチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量３３３ｍｇ（９２％）白色の粉末。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１２７】
【化２６９−２】
2006521338.tif 000500
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６２．２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）３６０．２（１０００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３６２．２１１７２３  Ｃ２４Ｈ２８ＮＯ２計算値３６２．２１２００４
（ＳＴＸ４５２  スルファミン酸  １３−メチル−１７−オキソ−１６−ピリジン−４−イルメチレン−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル（ＣＡＢ０２０７８）
【１１２８】
【化２７０−１】
2006521338.tif 000501
減圧下（水浴温度３０℃）で、トルエン中の塩化スルファモイル溶液（５ｍＬ、０．７Ｍ、３．５ミリモル）を濃縮した。残留物を０℃に冷却してＤＭＡ（５ｍＬ）を加えた。得られた無色の溶液を５分間撹拌し、１６−（ピリジン−４−イル）メチレンエストロン（３６０ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１１５４）を加えた。この溶液を室温で一夜撹拌して、ジエチルエーテル（２０ｍＬ）および酢酸エチル（２０ｍＬ）を加えて沈殿させた。固体をろ別して、アセトン（３０ｍＬ）で加熱還流して精製した（生成物は完全には溶解しなかった）。室温に冷却した後、固体をろ別して高真空で乾燥した。収量３４１ｍｇ（７８％）黄色の粉末。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１２９】
【化２７０−２】
2006521338.tif 000502
（ＳＴＸ４５３  スルファミン酸１３−メチル−１７−オキソ−１６−ピリジン−３−イルメチレン−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル（ＣＡＢ０２０８５））
【１１３０】
【化２７１−１】
2006521338.tif 000503
減圧下（水浴温度３０℃）で、トルエン中の塩化スルファモイル溶液（５ｍＬ、０．７Ｍ、３．５ミリモル）を濃縮した。残留物を０℃に冷却してＤＭＡ（８ｍＬ）を加えた。得られた無色の溶液を５分間撹拌し、１６−（ピリジン−３−イル）メチレンエストロン（３６０ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１１５６）を加えた。この混合物を室温で一夜撹拌し、ジエチルエーテル（２０ｍＬ）および酢酸エチル（２０ｍＬ）を加えて生成物を沈殿させた。黄色の固体をろ別して、アセトン（３０ｍＬ）で加熱還流して精製した（生成物は完全には溶解しなかった）。室温に冷却した後、固体をろ別して高真空で乾燥したた。収量３３３ｍｇ（７８％）黄色の粉末。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１３１】
【化２７１−２】
2006521338.tif 000504
（ＳＴＸ４７４  １６−フラン−２−イルメチレン−３−ヒドロキシ−１３−メチル−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０２０７２））
【１１３２】
【化２７２−１】
2006521338.tif 000505
エタノール（４０ｍｌ）中のエストロン（２．７０４ｇ、１０ミリモル）およびフルフラルデヒド（２ｍＬ、約２０ミリモル）の懸濁液に、水酸化カリウム（２．０ｇ）を加えた。得られた暗褐色の溶液を室温で４時間撹拌した後、酢酸（５ｍｌ）および水（５ｍＬ）を加えた。数分後に生成物が沈殿し始めた。追加の水（約１０ｍＬ）を加えて沈殿を完結させた。黄色の固体をろ別し、水で洗浄し、クロロホルムに溶解してＮａ２ＳＯ４上で脱水した。溶媒を減圧で除いて、残留物を酢酸エチルから結晶化させた。収量３．２４ｇ（９３％）淡黄色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１３３】
【化２７２−２】
2006521338.tif 000506
（ＳＴＸ４７５  ３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−チオフェン−２−イルメチレン−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０２０７３））
【１１３４】
【化２７３−１】
2006521338.tif 000507
エタノール（４０ｍｌ）中のエストロン（１．３５２ｇ、５．０ミリモル）およびチオフェン−２−カルボキシアルデヒド（５６１ｍｇ、５．０ミリモル）の懸濁液に、水酸化カリウム（２．０ｇ）を加えた。得られた暗褐色の溶液を室温で４時間撹拌した後、酢酸（５ｍｌ）および水（５ｍＬ）を加えた。数分後に生成物が沈殿し始めた。これを水（２０ｍＬ）、エタノール（１０ｍＬ）およびジエチルエーテル（１０ｍＬ）で洗浄し、高真空で乾燥した。収量１．６１４ｇ（８９％）黄色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１３５】
【化２７３−２】
2006521338.tif 000508
（ＳＴＸ５０７  １３−メチル−１６−チオフェン−２−イルメチレン−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−ジオール（ＣＡＢ０２０７６））
【１１３６】
【化２７４−１】
2006521338.tif 000509
ＴＨＦ（２０ｍＬ）およびエタノール（４０ｍｌ）中の１６−（チオフェン−２−イル）メチレンエストロン（３６５ｍｇ、１．０ミリモル）の溶液に、０℃で、水素化ほう素ナトリウム（１００ｍｇ）を加えた。この溶液を室温で一夜撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチル（４０ｍＬ）に溶解し、有機層を水（４０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で脱水して減圧下で濃縮した。白色の粗生成物を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化させた。収量２０８ｍｇ（５７％）無色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１３７】
【化２７４−２】
2006521338.tif 000510
（ＳＴＸ４７６  ３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−（４−ニトロ−ベンジリデン）−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０２１４２））
【１１３８】
【化２７５−１】
2006521338.tif 000511
エタノール（８０ｍｌ）中のエストロン（１．３５２ｇ、５．０ミリモル）および４−ニトロ−ベンズアルデヒド（７５５ｍｇ、５．０ミリモル）の懸濁液に、水酸化カリウム（２．０ｇ）を加えた。得られた暗褐色の溶液を室温で４時間撹拌した後、酢酸（５ｍＬ）および水（５ｍｌ）を加えた（色はオレンジ色に変化した）。生成物は沈殿し、これをろ別して、水（５０ｍＬ）、エタノール（５０ｍＬ）およびジエチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量１．６８２ｇ（８３％）黄色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１３９】
【化２７５−２】
2006521338.tif 000512
（ＳＴＸ４７８  ４−（３−ヒドロキシ−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデンメチル）−ベンゾニトリル（ＣＡＢ０２１４４））
【１１４０】
【化２７６−１】
2006521338.tif 000513
エタノール（４０ｍｌ）中のエストロン（１．３５２ｇ、５．０ミリモル）および４−シアノ−ベンズアルデヒド（６５５ｍｇ、５．０ミリモル）の懸濁液に、水酸化カリウム（２．０ｇ）を加えた。得られたオレンジ色の溶液を室温で４時間撹拌した後、酢酸（５ｍＬ）および水（５ｍｌ）を加えた（色は黄色に変化した）。生成物が沈殿し、これをろ別して、水（５０ｍＬ）、エタノール（５０ｍＬ）およびジエチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄し、高真空で乾燥した。収量１．７９５ｇ（９４％）微黄色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１４１】
【化２７６−２】
2006521338.tif 000514
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３８４．１（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）３８３．２（１００、［Ｍ］−）。
【１１４２】
（ＳＴＸ５０８  １３−メチル−１６−（４−ニトロ−ベンジリデン）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（ＣＡＢ０２１５５））
【１１４３】
【化２７７−１】
2006521338.tif 000515
０℃で、ＴＨＦ（２０ｍＬ）およびエタノール（２０ｍｌ）中の１６−（４−ニトロフェニル）メチレンエストロン（４０４ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０２１４２）の溶液に、水素化ほう素ナトリウム（１００ｍｇ）を加えた。この溶液を室温で一夜撹拌し、減圧下で約１０ｍＬの体積に濃縮した。この混合物に水（５０ｍＬ）を加え、沈殿物をろ別し、水（５０ｍＬ）、エタノール（５０ｍＬ）およびジエチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量４０１ｍｇ（９９％）微黄色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１４４】
【化２７７−２】
2006521338.tif 000516
（ＳＴＸ５１０  ４−（３，１７−ジヒドロキシ−１３−メチル−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデンメチル）−ベンゾニトリル（ＣＡＢ０２１５７））
【１１４５】
【化２７８−１】
2006521338.tif 000517
０℃で、ＴＨＦ（２０ｍＬ）およびエタノール（２０ｍｌ）中の１６−（４−シアノ−フェニル）メチレンエストロン（３８４ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０２１４４）の溶液に、水素化ほう素ナトリウム（１００ｍｇ）を加えた。この溶液を室温で一夜撹拌し、減圧で約１０ｍＬの体積に濃縮した。この混合物に水（５０ｍＬ）を加え、沈殿物をろ別し、水（５０ｍＬ）、エタノール（３０ｍＬ）およびジエチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄して高真空で乾燥した。収量３６６ｍｇ（９５％）白色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、４００ＭＨｚ）
【１１４６】
【化２７８−２】
2006521338.tif 000518
（［３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデン］−ヒドロキシ−酢酸  エチルエステル（ＣＡＢ０１０７２））
【１１４７】
【化２７９−１】
2006521338.tif 000519
トルエン（２０ｍＬ）中の３−Ｏ−ＴＢＤＭＳ−エストロン（７００ｍｇ、１．８２ミリモル）およびシュウ酸ジエチル（１．０ｍｌ）の溶液に、ナトリウムエトキシド（３４０ｍｇ、５．０ミリモル）を加えた。得られた黄色の溶液を室温で２時間撹拌した（ＴＬＣ確認）。この溶液を分液ロートに移し、酢酸エチル（５０ｍＬ）および６Ｎ塩酸（２０ｍＬ）を加えた。強く振とうして、ほとんど無色の有機層を得た。これを分液して硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。残留物をエタノールから結晶化させた。収量７３７ｍｇ（８３％）無色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１４８】
【化２７９−２】
2006521338.tif 000520
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）７３．１（６１）、４８５．３（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）４８３．２（１００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）４８４．２６３７７１  Ｃ２８Ｈ４０Ｏ５Ｓｉ計算値４８４．２６４５０３
（ヒドロキシ−（３−ヒドロキシ−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデン］−酢酸  エチルエステル（ＣＡＢ０１０９６、ＳＴＸ３３０））
【１１４９】
【化２８０−１】
2006521338.tif 000521
０℃（氷浴）で、ＴＨＦ（２５ｍｌ）中の［３−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−１３−メチル−１７−オキソ−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１７−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１６−イリデン］−ヒドロキシ−酢酸エチルエステル（４８５ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１０７２）の溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（１．５ｍｌ、１．５ミリモル、ＴＨＦ中１Ｍ溶液）を加えた。得られた溶液をこの温度で１時間撹拌した後、氷酢酸（１ｍｌ）および酢酸エチル（７５ｍｌ）を加えた。この混合物を分液ロートに移し、水（３×２５ｍｌ）およびブライン（２５ｍｌ）で洗浄して硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。残留物を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化させた。収量３０３ｍｇ（８２％）無色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１５０】
【化２８０−２】
2006521338.tif 000522
（１６−ベンジリデン−３−ヒドロキシ−１３−メチル−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０１１２２、ＳＴＸ３１２））
【１１５１】
【化２８１−１】
2006521338.tif 000523
室温で、メタノール（５０ｍｌ）中のエストロン（１．３５０ｇ、５．０ミリモル）およびベンズアルデヒド（１．０ｇ、９．４ミリモル）の溶液に、水酸化カリウム（１．０ｇ）を加えた。得られたオレンジ色の溶液をこの温度で４時間撹拌した。次に、撹拌しながら氷酢酸（約５ｍｌ）を加えた。色が淡黄色に変化し、白色の結晶が沈殿した。この固体をろ別し、水（５０ｍｌ）、メタノール（２０ｍｌ）、ジエチルエーテル（５０ｍｌ）およびヘキサンで洗浄して高真空で乾燥した。収量１．５７８ｇ（８８％）。Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１５２】
【化２８１−２】
2006521338.tif 000524
ＬＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３５９．２（１００、［Ｍ＋Ｈ］＋）。ＬＲＭＳ（ＦＡＢ−）３５７．２（１００、［Ｍ−Ｈ］−）。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ＋）３５９．２０２３３２  Ｃ２５Ｈ２７Ｏ２計算値３５９．２０１１０５
（３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジリデン）−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（ＣＡＢ０１１２４、ＳＴＸ３２８））
【１１５３】
【化２８２−１】
2006521338.tif 000525
室温で、エタノール（５０ｍｌ）中のエストロン（１．３５０ｇ、２．０ミリモル）および３，４，５−トリメトキシベンズアルデヒド（１．０ｇ、５．１０ミリモル）の溶液に、水酸化カリウム（１．０ｇ）を加えた。得られた暗褐色の溶液をこの温度で４時間撹拌してから、撹拌を続けながら氷酢酸（約２．５ｍｌ）を加えた。色が黄色に変化し、白色の結晶が沈殿した。この固体をろ別し、水（５０ｍｌ）、エタノール（２０ｍｌ）、ジエチルエーテル（５０ｍｌ）およびヘキサンで洗浄し、エタノールで再結晶した。収量２．０６３ｇ（９２％）淡黄色の結晶。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１５４】
【化２８２−２】
2006521338.tif 000526
Ｃ２８Ｈ３２Ｏ５計算値４４８．２２４９７４  Ｃ２８Ｈ３２Ｏ５
計算    Ｃ  ７４．９７％      Ｈ  ７．１９％
実測    Ｃ  ７５．０６％      Ｈ  ７．１８％。
【１１５５】
（１３−メチル−１６−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジリデン）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（ＣＡＢ０２００１、ＳＴＸ３２９））
【１１５６】
【化２８３−１】
2006521338.tif 000527
ＴＨＦ／メタノール（１：１、４０ｍｌ）中の３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジリデン）−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（４４８ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１１２４）の溶液を０℃（氷浴）に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ、２．６４ミリモル）を加えた。反応混合物をこの温度で２時間撹拌した。その間に反応混合物は淡黄色から無色に変化した。この溶液を分液ロートに移して、酢酸エチル（１００ｍｌ）および水（１００ｍｌ）を加えた。有機層を分液し、水（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄して硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。収量４４５ｍｇ（９９％）白色の固体。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１５７】
【化２８３−２】
2006521338.tif 000528
（１６−ベンジリデン−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（ＣＡＢ０１１２８、ＳＴＸ３１３））
【１１５８】
【化２８４−１】
2006521338.tif 000529
（１６−ベンジリデン−３−ヒドロキシ−１３−メチル−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（１７９ｍｇ、０．５０ミリモル、ＣＡＢ０１１２２））をエタノール（１０ｍｌ）およびＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解した。得られた淡黄色の溶液を０℃（氷浴）に冷却して、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ、２．６４ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で一夜撹拌してから、溶媒を減圧で除き、残留物を酢酸エチル（４０ｍＬ）に溶解した。有機層を水（２×２５ｍｌ）およびブライン（２５ｍｌ）で洗浄して硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。残留物を少量の酢酸エチルに溶解し、ヘキサンを加えて沈殿させた。白色の固体をろ別して高真空で乾燥した。収量１７５ｍｇ（９７％）１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、２７０ＭＨｚ）
【１１５９】
【化２８４−２】
2006521338.tif 000530
（スルファミン酸  １６−ベンジリデン−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル（ＣＡＢ０１１４８、ＳＴＸ３１４））
【１１６０】
【化２８５−１】
2006521338.tif 000531
減圧下（浴温３０℃）で、トルエン中の塩化スルファモイルの溶液（３．５ミリモル）を濃縮した。残留物を０℃（氷浴）に冷却し、ＤＭＡ（１０ｍｌ）および１６−ベンジリデン−３−ヒドロキシ−１４−メチル−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（７１７ｍｇ、２．０ミリモル、ＣＡＢ０１１２２）を加えた。得られた透明な溶液を０℃で１時間撹拌してから室温に戻し、一夜撹拌した。酢酸エチル（５０ｍｌ）を加え、溶液を水（２×３０ｍｌ）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。得られたほぼ白色の固体を少量の酢酸エチルに溶解し、ヘキサンを加えて沈殿させた。収量６８３ｍｇ（７８％）ほぼ白色の固体。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１６１】
【化２８５−２】
2006521338.tif 000532
（スルファミン酸  １６−ベンジリデン−１７−ヒドロキシ−１３−メチル−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル（ＣＡＢ０１１５２、ＳＴＸ３１５））
【１１６２】
【化２８６−１】
2006521338.tif 000533
０℃で、ＴＨＦ（２０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）中のスルファミン酸１６−ベンジリデン−１３−メチル−１７−オキソ−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル（４３８ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０１１４８）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ、２．６４ミリモル）を加えた。この混合物をこの温度で１時間撹拌し（ＴＬＣ確認）、酢酸エチル（１００ｍｌ）および水（５０ｍｌ）を加えた。有機層を分液し、水（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄して硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。残留物を少量の酢酸エチルに溶解し、ジエチルエーテルを加えて沈殿させた。収量４４０ｍｇ（定量的）白色の粉末。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１６３】
【化２８６−２】
2006521338.tif 000534
（スルファミン酸  １３−メチル−１７−オキソ−１６−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジリデン）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フ
ェナントレン−３−イルエステル（ＣＡＢ０２０６９、ＳＴＸ６９２）
【１１６４】
【化２８７−１】
2006521338.tif 000535
減圧下（水浴温度３０℃）で、トルエン中の０．５９Ｍ塩化スルファモイル溶液の５ｍｌ（２．９５ミリモル）を濃縮した。残留物を０℃（氷浴）に冷却し、ＤＭＡ（１０ｍｌ）および３−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジリデン）−６，７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６−デカヒドロ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−オン（８９９ｍｇ、２．０ミリモル、ＣＡＢ０１１２４）を加えた。得られた透明な溶液を０℃で１時間撹拌してから室温に戻し、一夜撹拌した。酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて溶液を水（２×３０ｍｌ）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。得られたほぼ白色の固体を少量のアセトンに溶解し、ヘキサンを加えて沈殿させた。収量９１３ｍｇ（８６％）淡黄色の固体。１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ、４００ＭＨｚ）
【１１６５】
【化２８７−２】
2006521338.tif 000536
（スルファミン酸  １７−ヒドロキシ−１３−メチル−１６−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジリデン）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル（ＣＡＢ０２０８４、ＳＴＸ６９３））
【１１６６】
【化２８８−１】
2006521338.tif 000537
０℃で、ＴＨＦ（２０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）中のＳ酸１３−メチル−１７−オキソ−１６−（３，４，５−トリメトキシ−ベンジリデン）−７，８，９，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルエステル（５２８ｍｇ、１．０ミリモル、ＣＡＢ０２０６９）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ、２．６４ミリモル）を加えた。この混合物をこの温度で１時間撹拌し（ＴＬＣ確認）、酢酸エチル（１００ｍｌ）および水（５０ｍｌ）を加えた。有機層を分液し、水（５０ｍｌ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄して硫酸ナトリウム上で脱水し、減圧で濃縮した。残留物を少量の酢酸エチルに溶解し、ジエチルエーテルを加えて沈殿させた。収量５２７ｍｇ（９９％）白色の粉末。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）
【１１６７】
【化２８８−２】
2006521338.tif 000538
（セクション６）
（Ｒａｄｌｅｙｓ  ＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ合成装置を用いる保護フェノール中間体の脱ベンジルの一般手順）
出発物質をＴＨＦ（１ｃｍ３）に溶解／懸濁し、各懸濁液にエタノール（１ｃｍ３）を加える。窒素を数分間バブリングさせて各懸濁液を脱気した後、Ｐｄ／Ｃ（５％、触媒量）を加え、各溶液／懸濁液をもう一度数分間脱気した。次に、反応混合物上に水素気体（バルーン）を流し、室温で水素雰囲気下、反応混合物を２４時間撹拌した。この段階で反応混合物の一つの１Ｈ  ＮＭＲを見ると反応が完結していなかったので、すべての反応混合物をもう一度脱気し、追加のＰｄを加えて、さらに２１時間水素下で撹拌した。それからセライトを通して各反応混合物をろ過し、セライトを酢酸エチルおよびメタノールで洗った。減圧で溶液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーによって生成物を精製した。
【１１６８】
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（テトラヒドロ−フラン−２−イルメチル）−アミド  ＳＴＸ８９２（ＧＭＡ０２０５８−２））
【１１６９】
【化２８９−１】
2006521338.tif 000539
【１１７０】
【化２８９−２】
2006521338.tif 000540
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸メチルアミド
ＳＴＸ８９３（ＧＭＡ０２０５８−４））
収率５７％。Ｒｆ０．４０（ＥｔＯＡｃ）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【１１７１】
【化２８９−３】
2006521338.tif 000541
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸エチル−メチル−アミド  ＳＴＸ８９４（ＧＭＡ０２０５８−５））
【１１７２】
【化２９０−１】
2006521338.tif 000542
収率７６％。Ｒｆ０．３３（ＥｔＯＡｃ）、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【１１７３】
【化２９０−２】
2006521338.tif 000543
、ＨＰＬＣ  ９３％（Ｒｔ＝１．６９、４：９６、Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値３８０．２３３８０３、実測値３８０．２３２９７９（Ｍ＋Ｈ＋）
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イルメチル）−アミド  ＳＴＸ８９５（ＧＭＡ０２０５８−８））
【１１７４】
【化２９１−１】
2006521338.tif 000544
【１１７５】
【化２９１−２】
2006521338.tif 000545
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（５−メチル−ピラジン−２−イルメチル）−アミド  ＳＴＸ８９６（ＧＭＡ０２０５８−９））
【１１７６】
【化２９２−１】
2006521338.tif 000546
【１１７７】
【化２９２−２】
2006521338.tif 000547
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン  ＳＴＸ８９７（ＧＭＡ０２０５８−１２））
【１１７８】
【化２９３−１】
2006521338.tif 000548
【１１７９】
【化２９３−２】
2006521338.tif 000549
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（ピリジン−２−イルメチル）−アミド  ＳＴＸ９１５（ＧＭＡ０２０７０−１））
【１１８０】
【化２９４−１】
2006521338.tif 000550
乾燥ＤＣＭ（６ｃｍ３）中の酸出発物質（０．０９５ｇ、０．２８ミリモル）の懸濁液に、ＤＭＡＰ（触媒量）、ＥＤＣ（０．０６５ｇ、０．３ミリモル）およびトリエチルアミン（０．０４ｃｍ３、０．３７ミリモル）を加えた。出発物質は溶解しなかったので、乾燥ＤＭＦ（２ｃｍ３）を加え、得られた溶液を室温で１５分間撹拌した。この溶液に２−（アミノメチル）ピリジンを加え、反応混合物を室温で４日間撹拌した。この溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、有機層を分液して減圧で濃縮した。ＤＣＭ、続いてＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、生成物のＤＭＦ溶液を得た。これにヘキサンを加え、続いて少量のＤＣＭを加えて、白色の粉末を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【１１８１】
【化２９４−２】
2006521338.tif 000551
（２−ヒドロキシ−６ａ−メチル−４ｂ，５，６，６ａ，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−カルボン酸（２−ピリジン−３−イルエチル）−アミド  ＳＴＸ９１６（ＧＭＡ０２０７０−２））
【１１８２】
【化２９５−１】
2006521338.tif 000552
ＳＴＸ９１５と同じ手順。沈殿によってクリーム色の粉末を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）
【１１８３】
【化２９５−２】
2006521338.tif 000553
（アルキル化反応）
（２−ベンジルオキシ−６ａ−メチル−７−フェネチル−４ｂ，５，６，６ａ，７，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−オール、ＧＭＡ０２０７６）
【１１８４】
【化２９６−１】
2006521338.tif 000554
乾燥ＤＭＦ（３ｃｍ３）中のベンジル保護ヒドロキシピラゾール出発物質（０．０５０ｇ、０．１２ミリモル）の撹拌、冷却（氷浴）溶液に、水素化ナトリウム（６０％分散体０．００６ｇ、０．１４ミリモル）を加え、０℃で１５分間撹拌した。これに、２−ブロモエチルベンゼン（０．０２４ｃｍ３、０．１８ミリモル）を加え、反応混合物を室温に戻して一夜撹拌した。水（５ｃｍ３）を加え、生成物を酢酸エチルで抽出した。ヘキサン、続いて酢酸エチルを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって、Ｒｆ０．８（ＥｔＯＡｃ）の二番目の画分としてアルキル化生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【１１８５】
【化２９６−２】
2006521338.tif 000555
（Ａ  ２−ベンジルオキシ−９−メトキシ−６ａ，７−ジメチル−４ｂ，５，６，６ａ，７，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン
（Ｂ  ２−ベンジルオキシ−６ａ，７，８−トリメチル−５，６，６ａ，７，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−４ｂＨ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−オン、ＧＭＡ０２１０７）
【１１８６】
【化２９７−１】
2006521338.tif 000556
乾燥ＴＨＦ（２．３ｃｍ３）中のベンジル保護ヒドロキシピラゾール出発物質（０．２００ｇ、０．５ミリモル）の撹拌溶液に、水素化ナトリウム（６０％分散体の０．０６ｇ、１．５ミリモル）を加え、この反応混合物を室温で３０分間撹拌した。これに、ヨードメタン（０．１ｃｍ３、１．５ミリモル）を加え、窒素下、室温で撹拌を６時間続けた。水を加えて、生成物を酢酸エチルで抽出した。合せた抽出液を減圧で濃縮した。ヘキサンから酢酸エチルへのグラジエントおよびそれに続くメタノール洗い出しを用いる２０ｇフラッシュカラム（Ｆｌａｓｈｍａｓｔｅｒ）でのクロマトグラフィーによって、Ｒｆ０．７（ＥｔＯＡｃ）の第２画分ならびにＲｆ〜ベースライン（ＥｔＯＡｃ）および０．６５（ＤＣＭ中１０％ＭｅＯＨ）の第５画分として、標題の化合物をそれぞれ得た。Ａの収量０．０４６ｇ、２１％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【１１８７】
【化２９７−２】
2006521338.tif 000557
、ＮＯＥＳＹ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）で１．０１および３．６５ｐｐｍのメチルピーク間の干渉を観測、ＨＰＬＣ  ９８％（Ｒｔ＝４．７０，４：９６、Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）、ＬＣＭＳ（ＥＳ−）４２７．４８（Ｍ−Ｈ＋）、高精度質量（ＦＡＢ＋）計算値４２９．２５４２０４、実測値４２９．２５４５１７（Ｍ＋Ｈ＋）
Ｂの収量０．０３１ｇ、１４％。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）
【１１８８】
【化２９７−３】
2006521338.tif 000558
（９−メトキシ−６ａ，７−ジメチル−４ｂ，５，６，６ａ，７，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−２−オール、ＧＭＡ０２１１４）
【１１８９】
【化２９８−１】
2006521338.tif 000559
窒素下−７８℃に冷却（ドライアイス／アセトン）した乾燥ＤＣＭ（３ｃｍ３）中のベンジル化された出発物質（０．０２５ｇ、０．０６ミリモル）の撹拌溶液に、三臭化ホウ素（ＤＣＭ中１Ｍ溶液の０．０６５ｃｍ３、０．０６５ミリモル）を加え、−７８℃での撹拌をさらに２．５時間続けた。水を加え、反応混合物を室温に戻し、得られた白色の沈殿物をろ過によって集めた。１Ｈ  ＮＭＲおよびＬＣＭＳによると、これは、ジメチル化生成物とモノメチル化生成物との３：１混合物からなっていた。ろ液のジクロロメタン層には出発物質が含まれていたのでの、これを再びＤＣＭに溶解して、前と同じように、−７８℃で三臭化ホウ素と１．５時間反応させた後、水で反応停止させた。こちらの場合に得られた沈殿物はジメチル化生成物だけであった。１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【１１９０】
【化２９８−２】
2006521338.tif 000560
（２−ヒドロキシ−６ａ，７，８−トリメチル−５，６，６ａ，７，８，１０，１０ａ，１０ｂ，１１，１２−デカヒドロ−４ｂＨ−７，８−ジアザ−ペンタレノ［２，１−ａ］フェナントレン−９−オン、ＳＴＸ９４２、ＧＭＡ０２１１６）
【１１９１】
【化２９９−１】
2006521338.tif 000561
窒素下−７８℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（３ｃｍ３）中のベンジル化された出発物質（０．０３１ｇ、０．０７ミリモル）の撹拌溶液に、三臭化ホウ素（ＤＣＭ中１Ｍ溶液の０．１５ｃｍ３（０．１５ミリモル）を加え、この反応混合物を−７８℃で２時間撹拌した。次に、水で反応を停止させ、得られた沈殿物をろ過によって集め、水およびＤＣＭで洗浄した。メタノールから再結晶して、かすかにオレンジ色の粉末を得た。これをろ過によって集め、ＤＣＭおよびヘキサンで洗浄した。収量０．０１２５ｇ、５３％、１Ｈ  ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）
【１１９２】
【化２９９−２】
2006521338.tif 000562
（生物データ）
１７Ｂ−ＨＳＤタイプＩおよびタイプＩＩ活性を決定する以下のアッセイを実施した。
【１１９３】
（１７Ｂ−ＨＳＤタイプＩおよびタイプＩＩアッセイ）
（目的）
調節剤の非存在下または存在下でヒト乳癌細胞（Ｔ−４７ＤおよびＭＤＡ）における１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性（タイプＩおよびＩＩ）を測定すること。
【１１９４】
（安全性に関する注意）
・  ヒト細胞系統で作業するときは、手袋および実験室用コートを着用すること。
・  ３Ｈ−Ｅ１，３Ｈ−Ｅ２，１４Ｃ−Ｅ１および１４Ｃ−Ｅ２は放射性である。
・  Ｅ１、Ｅ２および阻害剤には発癌性および／または催奇形性があるとみなすこと。
・  ＤＭＳＯは、皮膚を経る吸収を促進し、従って溶媒として用いるとき、溶質が容易に吸収されることがある。身体への接触を避けること。
・  ＴＨＦは、空気中に長期間放置すると、潜在的に爆発性の過酸化物を生成することがある。
・  ジエチルエーテルは、非常に燃えやすい液体および蒸気を有する。飲み込んだり、吸入したり、あるいは皮膚を通して吸収すると有害である。皮膚、眼および呼吸器官への刺激の原因となり、中枢神経系に影響を及ぼす。
・  固体ＣＯ２  生成物との接触は、露出した組織で凍傷または低温火傷の原因となることがある。
・  メタノールは、非常に燃えやすい。
・  ジクロロメタンは、注意して取り扱われなければならない。呼吸器官、皮膚および眼への刺激の原因となり、発癌物質の可能性がある。
・  酢酸エチル  飲み込み、または吸い込むと有害な可燃性液体および蒸気。皮膚、眼および呼吸器官への刺激の原因となり、中枢神経系に影響を及ぼす。
・  ＥｃｏｓｃｉｎｔＡ  接触障害−皮膚および眼を刺激する。
【１１９５】
（手順）
【１１９６】
【表６】
2006521338.tif 000563
（装備）
・  Ｂｅｃｋｍａｎ  ＬＳ６０００ＳＣシンチレーションスペクトロメータ。
・  ＳＭＩマルチチューブボーテクサ−モデル２６０１。
・  ドラフト。
・  ＴＬＣアルミニウムシートシリカゲル６０Ｆ２５４・ＭＥＲＣＫ
（３Ｈ−Ｅ１βＨ−Ｅ２の精製）
・  展開用に両側の外レーンおよび中央大レーンを有するＴＬＣプレートを準備する。
・  １００μＣｉ（１００μｌであるが、５×２０μｌの方がよい）３Ｈ−Ｅ１βＨ−Ｅ２を中央レーンに線状に引く。
・  外レーンに２０μｌのコールドＥ１／Ｅ２をスポットする。
・  プレートをＴＬＣタンク内に１〜１．５時間置く。
・  Ｅ１／Ｅ２のスポット（外レーン）を紫外線下で視覚化し、しるしで囲む。
・  標識化Ｅ１／Ｅ２があるはずの部分（ＴＬＣプレート上のコールドＥ１／Ｅ２の位置で判断）を削り取り、ガラスバイアルに入れる。
・  ５．０ｍｌのジエチルエーテルに溶出する。
・  バイアルの内容物をボルテックス混合し、４℃で１２時間静置する。
・  バイアルをもう一度ボルテックス混合し、内容物を沈降させる。
・  １ｍＬの蒸留水を加え（プレート粒子を完全に覆うように）、この水相を固体二酸化炭素／メタノール混合物中で凍結する。
・  ジエチルエーテル相を別のガラスバイアルにデカンテーションして移し、４０℃空気流下で濃縮乾固する。
・  残留物を１ｍｌエタノールに溶解し、試料５μｌの放射能を、液体シンチレーションカウンタを用いてカウントする。
【１１９７】
（計算法）
３Ｈ−Ｅ１βＨ−Ｅ２の比活性を用いて、フラスコあたり生理濃度（５ピコモル）とするために各フラスコに加える必要がある３Ｈ−Ｅ１βＨ−Ｅ２量を計算する。アッセイを２４−ウェルプレート方式で行なうときには、ウェルあたり生理濃度（３ピコモル）とするために各ウェルに加える必要がある量も計算する。
【１１９８】
（Ｔ−４７Ｄ細胞中の１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性（Ｅ１→Ｅ２）のアッセイ）
・  すべてのフラスコから成育培地を取り除く。
・  各フラスコに２．５ｍｌの基質［（アッセイ培地＋３Ｈ−Ｅ１）＋適切な阻害剤］を加える。
・  フラスコを３７℃で０．５時間インキュベートする。
・  各フラスコから２ｍｌを取り、１４Ｃ−エストラジオール（５０００ｃｐｍ）を含む試験管に直接加える。
・  ジエチルエーテル４ｍｌで各培地からステロイドを抽出する。
・  分配を良好にするために各試験管を３分間機械振とうする。
・  固体二酸化炭素／メタノール混合物中で水相を凍結して、エーテル相を分離し、ＴＬＣ時に標識生成物の可視化を容易にするために５０μｇの非標識生成物（１０ｍＭ溶液の２０μｌ）を含む試験管に、エーテル相を移す。
・  ４０℃の空気流下でエーテル相を濃縮乾固する。
・  残留物を６〜８滴のジエチルエーテルに溶解し、蛍光インジケータを含むＴＬＣプレートにスポットする。
・  ジクロロメタン／酢酸エチル（４：１、体積／体積）を溶媒として用いるＴＬＣによって、エストロンとエストラジオールとを分離する。
・  紫外線灯の下で生成物ステロイド（３Ｈ−Ｅ２）を可視化し、その部分を切り取ってシンチレーションバイアルに入れる。
・  バイアルにメタノール０．５ｍｌを加えてＴＬＣ片を溶出する。
・  体積補正するために、各バイアルに０．５ｍｌのアッセイ培地を加える。
・  各バイアルにＥｃｏｓｃｉｎｔＡ  １０ｍｌを加える。
・ ３Ｈ同位体（３Ｈ−Ｅ１）、メタノール０．５ｍｌおよびＥｃｏｓｃｉｎｔＡ  １０ｍｌを含む基質溶液０．５ｍｌをカウントすることによって、３Ｈ同位体の総活性を測定する。１４Ｃ−エストラジオール（５０００ｃｐｍ）、アッセイ培地０．５ｍｌ、メタノール０．５ｍｌおよびＥｃｏｓｃｉｎｔＡ  １０ｍｌをカウントすることによって、１４Ｃ同位体の総活性を測定する。
・  デュアル［３Ｈ／１４Ｃ］同位体用プログラムを用いて、シンチレーションカウンタ内で、生成物および回収物の放射能をカウントする。
【１１９９】
（計算）
生データに対して、
クロスオーバ補正
回収率補正
ブランク補正
希釈補正と、全部で４種類の補正を行なう。
マイクロソフトエクセルを使用する。
【１２００】
（ＢおよびＣは、３Ｈおよび１４Ｃの生データの列をそれぞれ表わす）
Ｄ．  Ｃ×０．１４                        ＝クロスオーバ
Ｅ．  Ｂ−Ｄ                              ＝クロスオーバ補正した量
Ｆ．  Ｃ／平均総活性１４Ｃ                ＝回収率
Ｇ．  Ｅ／Ｆ                              ＝回収率補正した量
Ｈ．  Ｇ−ブランク（平均）                ＝ブランク補正した量
Ｉ．  Ｈ×定数（下記参照）                ＝フェムトモル／フラスコ／０．５時間
Ｊ．  ［（（ｘ１＋ｘ２）×２７２）／１，０００，０００］  ＝細胞数／フラスコ／１００万
Ｋ．  Ｉ／Ｊ                              ＝フェムトモル／０．５時間／１００万細胞
Ｌ．  Ｋ×２                              ＝フェムトモル／時間／１００万細胞
Ｍ．  各三回測定の平均値                  ＝平均活性
Ｎ．  各三回測定の標準偏差                ＝標準偏差活性
Ｏ．  ［（１００／対照試料の平均活性）×Ｌ］  ＝％活性
Ｐ．  １００−Ｏ                          ＝％阻害率
Ｑ．  各三回測定の平均％阻害率            ＝平均％阻害率
Ｒ．  各三回測定のＳＤ％阻害              ＝標準偏差％阻害率
Ｓ．  標識処理法および濃度                ＝阻害剤コードおよび濃度
（必要に応じてグラフおよび統計処理）
希釈（２．５／２）
↓
定数＝［１．２５×（ピコモル３Ｈ−Ｅ１／全ｃｐｍ３Ｈ−Ｅ１／フラスコ）］
（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞中の１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ活性（Ｅ２→Ｅ１）のアッセイ）
・  すべてのフラスコから成育培地を取り除く。
・  各フラスコに２．５ｍｌの培地［（アッセイ培地＋３Ｈ−Ｅ２）＋適切な阻害剤］を加える。
・  フラスコを３７℃で３時間インキュベートする。
・  各フラスコから２ｍｌを取り、１４Ｃ−エストロン（５０００ｃｐｍ）を含む試験管に直接加える。
・  ジエチルエーテルで４ｍｌ各培地からステロイドを抽出する。
・  分配を良好にするために各試験管を３分間機械振とうする。
・  固体二酸化炭素／メタノール混合物中で水相を凍結して、エーテル相を分離し、ＴＬＣ時に標識生成物の可視化を容易にするために５０μｇの非標識生成物（１０ｍＭ溶液の２０μｌ）を含む試験管に、エーテル相を移す。
・  ４０℃の空気流下でエーテル相を濃縮乾固する。
・  残留物を６〜８滴のジエチルエーテルに溶解し、蛍光インジケータを含むＴＬＣプレートにスポットする。
・  ジクロロメタン／酢酸エチル（４：１、体積／体積）を溶媒として用いるＴＬＣによって、エストロンとエストラジオールとを分離する。
・  紫外線灯の下で生成物ステロイド（３Ｈ−Ｅ１）を可視化し、その部分を切り取ってシンチレーションバイアルに入れる。
・  バイアルにメタノール０．５ｍｌを加えてＴＬＣ試料を溶出する。
・  体積補正するために、各バイアルに０．５ｍｌのアッセイ培地を加える。
・  各バイアルにＥｃｏｓｃｉｎｔＡ  １０ｍｌを加える。
・  ３Ｈ同位体（３Ｈ−Ｅ２）、メタノール０．５ｍｌおよびＥｃｏｓｃｉｎｔＡ  １０ｍｌを含む基質溶液０．５ｍｌをカウントすることによって、３Ｈ同位体の総活性を測定する。１４Ｃ−エストロン（５０００ｃｐｍ）、アッセイ培地０．５ｍｌ、メタノール０．５ｍｌおよびＥｃｏｓｃｉｎｔＡ  １０ｍｌをカウントすることによって、１４Ｃ同位体の総活性を測定する。
・  デュアル［３Ｈ／１４Ｃ］同位体用プログラムを用いて、シンチレーションカウンタ内で、生成物および回収物の放射能をカウントする。
【１２０１】
（計算）
生データに対して、
クロスオーバ補正
回収率補正
ブランク補正
希釈補正と、全部で４種類の補正を行なう。
マイクロソフトエクセルを使用する。
（ＢおよびＣは、３Ｈおよび１４Ｃの生データの列をそれぞれ表わす）
Ｄ．  Ｃ×０．１４                        ＝クロスオーバ
Ｅ．  Ｂ−Ｄ                              ＝クロスオーバ補正した量
Ｆ．  Ｃ／平均総活性１４Ｃ                ＝回収率
Ｇ．  Ｅ／Ｆ                              ＝回収率補正した量
Ｈ．  Ｇ−ブランク（平均）                ＝ブランク補正した量
Ｉ．  Ｈ×定数                            ＝フェムトモル／フラスコ／３時間
Ｊ．  ［（（ｘ１＋ｘ２）×２７２）／１，０００，０００］  ＝細胞数／フラスコ／１００万
Ｋ．  Ｉ／Ｊ                              ＝フェムトモル／３時間／１００万細胞
Ｌ．  Ｋ／３                              ＝フェムトモル／時間／１００万細胞
Ｍ．  各三回測定の平均値                  ＝平均活性
Ｎ．  各三回測定の標準偏差                ＝標準偏差活性
Ｏ．  ［（１００／対照試料の平均活性）×Ｌ］  ＝％活性
Ｐ．  １００−Ｏ                          ＝％阻害率
Ｑ．  各三回測定の平均％阻害率            ＝平均％阻害率
Ｒ．  各三回測定のＳＤ％阻害              ＝標準偏差％阻害率
Ｓ．  標識処理法および濃度                ＝阻害剤コードおよび濃度
（必要に応じてグラフおよび統計処理）
ＴＨＥＲ注記
希釈（２．５／２）
↓
定数＝［１．２５×（ピコモル３Ｈ−Ｅ１／全ｃｐｍ３Ｈ−Ｅ１／フラスコ）］
・  すべての放射性同位元素使用の記録をとること。
・  Ｔ−４７Ｄ細胞における１７β−ＨＳＤタイプＩ活性のアッセイは、多くの場合、２４−ウェルプレート方式（Ｔ２５フラスコではなく）で行なわれる。これらの状況では、わずか１．５ｍｌの基質溶液（±阻害剤）が用いられ、培養時間を３時間に延ばす。培養後、各ウェルから１ｍｌだけ取る。
・  陽性対照物質について予測される平均％阻害率の値の例
Ｅ１→Ｅ２  １０μＭのＥ１を用いて得られる一般的な％阻害率は、９７％阻害と９９％阻害との間である。
Ｅ２→Ｅ１  １０μＭのＥ２を用いて得られる一般的な％阻害率は、３７％阻害と４３％阻害との間である。
【１２０２】
（結果）
【１２０３】
【表７】
2006521338.tif 000564
【１２０４】
【表８】
2006521338.tif 000565
【１２０５】
【表９】
2006521338.tif 000566
【１２０６】
【表１０】
2006521338.tif 000567
【１２０７】
【表１１】
2006521338.tif 000568
【１２０８】
【表１２】
2006521338.tif 000569
【１２０９】
【表１３】
2006521338.tif 000570
【１２１０】
【表１４】
2006521338.tif 000571
【１２１１】
【表１５】
2006521338.tif 000572
【１２１２】
【表１６】
2006521338.tif 000573
【１２１３】
【表１７】
2006521338.tif 000574
【１２１４】
【表１８】
2006521338.tif 000575
【１２１５】
【表１９】
2006521338.tif 000576
【１２１６】
【表２０】
2006521338.tif 000577
【１２１７】
【表２１】
2006521338.tif 000578
上記本明細書において言及したすべての出版物ならびに特許および特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。
【１２１８】
本発明の範囲および技術思想から逸脱しないさまざまな変更形および変化形は、当業者には自明であろう。特定の好ましい実施態様によって本発明を説明してきたが、請求される発明は、当然、そのような実施態様に限定されるものではないと理解するべきである。説明した発明を実体化する態様のさまざまな変更形は、実際、化学、生物学または関連する分野の当業者には明らかであり、以下の請求項の範囲内にあるものとする。
【１２１９】
【表２２】
2006521338.tif 000579
【１２２０】
【表２３】
2006521338.tif 000580
【１２２１】
【表２４】
2006521338.tif 000581
【１２２２】
【表２５】
2006521338.tif 000582
【１２２３】
【表２６】
2006521338.tif 000583
【図面の簡単な説明】
【１２２４】
【図１】記載なし
【図１】
2006521338.tif 000598
【国際調査報告】
2006521338.tif 000599
2006521338.tif 000600
2006521338.tif 000601
2006521338.tif 000602
2006521338.tif 000603
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