(57)【要約】本発明は、プロスタグランジンＥ２受容体のＥＰ４サブタイプの潜在的な選択的作動薬、緑内障及び患者の目の眼圧上昇に関連するその他の状態の治療におけるそれらの使用又はそれらの製剤に関する。本発明はさらに、骨芽細胞及び破骨細胞の骨モデリング及びリモデリング過程を媒介するための本発明の化合物の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉを有する化合物
【化１】
2006520758.tif 000040
（式中、Ｑは（ＣＨ２）ｍ、（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、Ｃ（ハロ）２であり、前記シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基によって置換されており、
Ｘ及びＹは、独立して、ＣＨ２、Ｏ、ＮＲ９又はＳを表すが、但し、Ｘ及びＹは同時にＯ、ＮＲ９又はＳではなく、
ＵはＨ、Ｃ１〜３アルキルを表すか、又はＷが＝Ｏのときは存在せず、
ＷはＯＨ又は＝Ｏを表し、但し、Ｗが＝ＯのときＵは存在せず、
Ｒ１は、（ＣＨ２）ｐヒドロキシ、（ＣＨ２）ｐＣＮ、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０、（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｒ６、−（ＣＨ２）ｐＣＦ２ＳＯ２ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐＳＯ２ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＳＯ２Ｒ２、−（ＣＨ２）ｐＳＯ２ＮＨＣＯＲ２、−（ＣＨ２）ｐＰＯ（ＯＨ）２、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＲ８、（ＣＨ２）ｐＣ１〜４アルコキシ、−（ＣＨ２）ｐシクロアルキル、（ＣＨ２）ｐ−ヒドロキシメチルケトン又は（ＣＨ２）ｐヘテロシクリルを表し、前記ヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基によって置換されており、場合によって酸性水酸基を含有し、
Ｒ２は、独立して、Ｃ１〜１０アルキル、（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｏ−Ｃ６〜１０アリール、Ｏ−Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｏ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル、Ｏ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキルを表し、但し、Ｒ２がＯ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｏ−Ｃ６〜１０アリール、Ｏ−Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｏ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル、又はＯ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキルのとき、Ｒ３及びＲ４はハロゲンではなく、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、
Ｒ３及びＲ４は、独立して、水素、ハロゲン若しくはＣ１〜６アルキルを表し、又はＲ３及びＲ４は一緒になって、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２及びＮＲ９から選択された１個から２個のヘテロ原子が場合によって割り込んだ３員から７員の炭素環を形成することができ、
Ｒ６及びＲ７は、独立して、水素又はＣ１〜４アルキルを表し、
Ｒ８は、水素、アシル又はスルホニルを表し、
Ｒ９は、水素、Ｃ１〜６アルキルを表し、前記アルキルは、１個から３個のハロゲン、ＣＮ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アシルオキシ又はアミノで場合によって置換されており、
Ｒ１０は、水素、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキル、（ＣＨ２）ｐＣ６〜１０アリール、（ＣＨ２）ｐＣ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＲ６Ｒ７ＯＣ（Ｏ）ＯＣ３〜１０シクロアルキル又はＣＲ６Ｒ７ＯＣ（Ｏ）ＯＣ１〜１０アルキルを表し、
Ｚは、三重結合、Ｏ、Ｓ、（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎ又はＣＨ＝ＣＨを表し、
Ｒｂは、水素、Ｃ１〜６アルキル又はハロゲンを表し、
Ｒａは、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキル、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ハロゲンを表し、又は、Ｒａはさらにアリール及びヘテロシクリル、ＳＣ１〜６アルキル、ＳＣ６〜１０アリール、ＳＣ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＯ２Ｒ６、ＯＣ６〜１０アリール、ＯＣ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＨ２ＯＣ１〜６アルキル、ＣＨ２ＳＣ１〜６アルキル、ＣＨ２Ｏアリール、ＣＨ２Ｓアリールを表し、
---は、二重結合又は一重結合を表し、
ｐは、０から３を表し、
ｎは、０から４を表し、
ｍは、０から８を表す。）
又は薬剤として許容されるそれらの塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物。
【請求項２】
Ｒ１が、（ＣＨ２）ｐＣＮ、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０、−（ＣＨ２）ｐＰＯ（ＯＨ）２、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＲ８又は（ＣＨ２）ｎヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、その他の可変要素は全て最初に説明した通りである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｚが結合又はＳであり、ＹがＣＨ２であり、ＸがＯ、Ｓ又はＣＨ２である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０であり、Ｘ及びＹがＣＨ２であり、Ｚが（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎであり、Ｑが（ＣＨ２）ｍであり、Ｒ３及びＲ４がハロゲンであり、Ｒ２が（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリールであり、前記アリールは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロシクリルであり、ＵがＨ又はＣ１〜３アルキルであり、ＷがＯＨであり、Ｚが結合又はＳであり、Ｒ２が（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリールであり、前記アリールは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、前記ヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、その他の可変要素全てが最初に説明した通りである、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサジナン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアジナン−２−オン；
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−４−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］モルホリン−３−オン；
（６Ｓ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペラジン−２−オン；
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−４−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］チオモルホリン−３−オン；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝ピペリジン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−オキサジナン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−チアジナン−２−オン；
（６Ｒ）−６−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−１−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝ピペリジン−２−オン；
（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−オキサジナン−２−オン；
（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−チアジナン−２−オン；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
（５Ｅ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−チアゾール−５−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−チアゾール−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−オキサゾール−２−カルボン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−オキサゾール−５−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１Ｈ−イミダゾール−５−カルボン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−オキサゾール−５−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，２λ５，５λ５−オキサジアゾール−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボン酸；
５−（（１Ｅ）−３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロプ−１−エニル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロプ−１−イニル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（（１Ｚ）−３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロプ−１−エニル）チオフェン−２−カルボン酸；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛（２Ｚ）−４−［（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）チオ］ブト−２−エニル｝ピペリジン−２−オン；
［（４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブト−２−イニル）チオ］酢酸；
［（（２Ｚ）−４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブト−２−エニル）チオ］酢酸；
［（４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸；
［（４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸；
３−［（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオ］プロパン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−（２−ナフチル）ブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（１−ベンゾチエン−２−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
（６Ｒ）−６−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
（６Ｒ）−６−［（３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（１−ベンゾフラン−２−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（３−クロロフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（３−クロロフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−（３−メトキシフェニル）ブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
６−［（１Ｅ）−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピペリジン−２−オン；
７−｛（１Ｅ）−（２Ｒ）−２−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛［（１Ｅ）−（２Ｒ）−２−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（２Ｒ）−２−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝−プロピル）−チオフェン−２−カルボン酸メチル；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（１Ｅ）−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
６−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピペリジン−２−オン；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸メチル；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
６−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピペリジン−２−オン；
（５Ｚ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸イソプロピル；
（５Ｚ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸；
イソプロピル−７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタノエート；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸である化合物、
又は薬剤として許容されるそれらの塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物。
【請求項７】
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸、
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル、
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル、
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル、
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
イソプロピル−７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタノエート、
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸、
又は薬剤として許容されるそれらの塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ又は混合物。
【請求項８】
薬剤として許容される担体と請求項１から７のいずれか一項に記載した式Ｉの化合物とを含む、医薬品組成物。
【請求項９】
高眼圧症又は緑内障の治療を必要とする患者に、請求項１に記載の化合物の治療有効量を投与することを含み、前記化合物が液剤又は懸濁剤として局所製剤に入れて投与される、高眼圧症又は緑内障の治療方法。
【請求項１０】
β−アドレナリン作用遮断剤、副交感神経作動薬、交感神経作動薬、炭酸脱水素酵素阻害剤、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネル遮断薬、及びプロスタグランジン、抗高血圧脂質、神経保護薬、及び５−ＨＴ２受容体の作動薬から成る群に属する１種又は複数の活性成分が局所製剤に添加される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記β−アドレナリン作用遮断剤が、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール又はレボブノロールであり、前記副交感神経作動薬がピロカルピンであり、前記交感神経作動薬がエピネフリン、ブリモニジン、アイオピジン、クロニジン又はパラ−アミノクロニジンであり、前記炭酸脱水素酵素阻害剤がドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミドであり、ＣＯＳＯＰＴ（登録商標）、前記Ｍａｘｉ−ＫがＰｅｎｉｔｒｅｍ  Ａ、パスパリシン、チャリブドトキシン、イベリオトキシン、Ｐａｘｉｃｉｌｌａｎ、Ａｆｌｉｔｒａｍ、Ｖｅｒｒｏｃｕｌｏｇｅｎ、１−（１−イソブチル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル）−２−メチルプロパン−１−オン、１−［１−（２，２−ジメチルプロピル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］−２−メチルプロパン−１−オン、１−［１−（シクロヘキシルメチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］−２−メチルプロパン−１−オン、１−（１−ヘキシル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル）−２−メチルプロパン−１−オン、１−［１−（２−エチルヘキシル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］−２−メチルプロパン−１−オン、１−（３−イソブチリル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ブアン−２−オン、１−（３−イソブチリル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、１−（３−シクロペンチルカルボニル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−カルボン酸、及び１−［３−（３−ヒドロキシプロパノイル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル］−３，３−ジメチルブタン−２−オンであり、前記プロスタグランジンがラタノプラスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ又はＳ１０３３であり、前記抗高血圧脂質がルミガンであり、前記神経保護薬がエリプロディル、Ｒ−エリプロディル又はメマンチンであり、前記５−ＨＴ２受容体の作動薬が１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オール  フマレート又は２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
黄斑浮腫又は黄斑変性の治療、乾燥眼球の治療、網膜及び視神経乳頭の血流速度の増加、網膜及び視神経酸素分圧の増加並びに神経保護の提供を必要とする患者に、請求項１に記載されている化合物の化合物の薬剤有効量を投与することを含む、黄斑浮腫又は黄斑変性を治療し、乾燥眼球を治療し、網膜及び視神経乳頭の血流速度を増加し、網膜及び視神経酸素分圧を増加し、並びに神経保護を提供する方法。
【請求項１３】
前記局所製剤が、キサンタンガム又はゲランガムを場合によって含有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
骨形成の誘発、異常な骨吸収に関連した病状若しくは症状の治療又は罹患する危険性の減少を必要とする哺乳類に、請求項１に記載されている化合物の治療有効量を投与することを含む、前記哺乳類の骨形成の誘発方法、異常な骨吸収に関連した病状若しくは症状の治療方法又は罹患する危険性の減少方法。
【請求項１５】
前記病状又は症状が、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、パジェット病、骨代謝の異常増加、歯周病、歯牙損失、骨折、関節リウマチ、人工関節による骨溶解、骨形成不全、転移性骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発骨髄腫から成る群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
アレンドロネート、シマドロネート、クロドロネート、チルドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、ネリドロネート、オルパンドロネート、リセドロネート、ピリドロネート、パミドロネート、ゾレンドロネートからなる群から選択されるビスホスホネート活性物、薬剤として許容されるそれらの塩及びそれらの混合物が、場合によって添加される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
有機ビスホスホネート、カテプシンＫ阻害剤、エストロゲン、エストロゲン受容体修飾因子、アンドロゲン受容体修飾因子、破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害剤、インテグリン受容体拮抗薬、骨芽細胞蛋白質同化剤、カルシトニン、ビタミンＤ、合成ビタミンＤ類縁体又は薬剤として許容されるそれらの塩若しくはそれらの混合物から選択される他の薬剤を投与することを含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
高眼圧症又は緑内障を治療する薬剤の製造における、請求項１から７に記載された式Ｉの化合物又は薬剤としてそれらの許容される塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物の使用。
【請求項１９】
医学的治療に使用するための、請求項１から７に記載された式Ｉの化合物又は薬剤として許容されるそれらの塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物。
【請求項２０】
黄斑浮腫又は黄斑変性、乾燥眼球の治療、網膜及び視神経乳頭の血流速度の増加、網膜及び視神経酸素分圧の増加又は神経保護の提供のための薬剤の製造における、請求項１から７に記載された式Ｉの化合物又は薬剤として許容されるそれらの塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
緑内障は、眼圧が高すぎるために正常に目が機能しにくくなる眼の変性疾患である。その結果、視神経乳頭に障害が生じ、視覚機能が不可逆的に失われる可能性がある。治療しないと、緑内障は最終的に失明に至る可能性がある。高眼圧、すなわち視神経乳頭の障害又は緑内障に特徴的な視野欠損が見られない眼圧が高い状態は、緑内障発症の最も早い段階に過ぎないと眼科医により現在考えられている。
【０００２】
緑内障の治療に以前から使用されている薬剤の多くは、満足のいくものではないことが示されている。緑内障の現在の治療方法には、ピロカルピン、炭酸脱水素酵素阻害剤、β遮断薬、プロスタグランジンなどの治療薬使用が含まれる。しかし、これらの治療は、望ましくない局所的作用を生じることが多い。以上のように、現在のところ緑内障及び高い眼圧を治療する方法はいくつかあるが、これらの薬剤の効果及び副作用の特徴は理想的とは言えない。したがって、副作用がほとんどない、又は全くない効果的な新規治療が依然として必要とされている。
【０００３】
ヒト及びその他の哺乳類における様々な疾患には、異常な、又は過剰な骨量減少が伴うか、又は関連する。このような疾患には、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、パジェット病、骨代謝の異常増加、歯周病、歯牙損失、骨折、関節リウマチ、人工関節による骨溶解、骨形成不全、転移性骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発骨髄腫が含まれるが、それだけには限定されない。最も一般的なこれらの疾患の１つは、骨粗鬆症で、閉経後の女性に最も頻繁に発症する。ＰＧＥ２系列などのプロスタグランジンは、骨形成を刺激し、男性を含めた哺乳類の骨量を増加させることが知られている。ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３及びＥＰ４と称する４種類の異なる受容体サブタイプが骨芽細胞及び破骨細胞の骨モデリング及びリモデリング過程の媒介に関与することが信じられている。骨の主要なプロスタグランジン受容体はＥＰ４で、環状ＡＭＰを介した情報伝達によって効果をもたらすものと考えられている。本発明では、ＥＰ４サブタイプ受容体の式Ｉ作動薬は骨形成の刺激に有用であることを発見した。ＷＯ０２／２４６４７、ＷＯ０２／４２２６８、ＥＰ１１１４８１６、ＷＯ０１／４６１４０及びＷＯ０１／７２２６８は、ＥＰ４作動薬を開示している。しかし、本発明の化合物は開示していない。
【発明の開示】
【０００４】
本発明は、プロスタグランジンＥ２受容体のＥＰ４サブタイプの作動薬並びに緑内障及び患者の目の眼圧上昇に関連するその他の状態の治療におけるそれらの使用又はそれらの製剤に関する。特に、本発明は、一連の１，６−２置換ピペリジン−２−オン、３，４−二置換１，３−オキサジナン−２−オン、３，４−二置換１，３−チアジン−２−オン及び４，５−二置換モルホリン−３−オン誘導体並びに眼疾患を治療したり、哺乳類種、特にヒトの目に神経保護効果をもたらしたりするためのそれらの使用に関する。本発明はさらに、骨芽細胞及び破骨細胞の骨モデリング及びリモデリング過程を媒介するための本発明の化合物の使用に関する。
【０００５】
より具体的には、本発明は、構造式Ｉを有する新規ＥＰ４作動薬
【０００６】
【化２】
2006520758.tif 000002
（式中、Ｑは（ＣＨ２）ｍ、（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、Ｃ（ハロ）２であり、前記シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａで置換されており、
Ｘ及びＹは独立して、ＣＨ２、Ｏ、ＮＲ９又はＳを表すが、但し、Ｘ及びＹは同時にＯ、ＮＲ９又はＳではなく、
ＵはＨ、Ｃ１〜３アルキルを表すか、又はＷが＝Ｏのときは存在せず、
ＷはＯＨ又は＝Ｏを表し、但し、Ｗが＝ＯのときＵは存在せず、
Ｒ１は、（ＣＨ２）ｐヒドロキシ、（ＣＨ２）ｐＣＮ、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０、（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｒ６、−（ＣＨ２）ｐＣＦ２ＳＯ２ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐＳＯ２ＮＨ２、−（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＳＯ２Ｒ２、−（ＣＨ２）ｐＳＯ２ＮＨＣＯＲ２、−（ＣＨ２）ｐＰＯ（ＯＨ）２、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＲ８、（ＣＨ２）ｐＣ１〜４アルコキシ、−（ＣＨ２）ｐシクロアルキル、（ＣＨ２）ｐ−ヒドロキシメチルケトン又は（ＣＨ２）ｐヘテロシクリルを表し、前記ヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基によって置換されており、場合によって酸性水酸基を含有し、
Ｒ２は、独立して、Ｃ１〜１０アルキル、（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、Ｏ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｏ−Ｃ６〜１０アリール、Ｏ−Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｏ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル、Ｏ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキルを表し、但し、Ｒ２がＯ−Ｃ１〜１０アルキル、Ｏ−Ｃ６〜１０アリール、Ｏ−Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｏ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル又はＯ−Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキルのとき、Ｒ３及びＲ４はハロゲンではなく、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、
Ｒ３及びＲ４は独立して、水素、ハロゲン若しくはＣ１〜６アルキルを表し、又はＲ３及びＲ４は一緒になって、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２及びＮＲ９から選択された１個から２個のヘテロ原子が場合によって割り込んだ３員から７員炭素環を形成し、
Ｒ６及びＲ７は独立して水素又はＣ１〜４アルキルを表し、
Ｒ８は、水素、アシル又はスルホニルを表し、
Ｒ９は、水素、Ｃ１〜６アルキルを表し、前記アルキルは、１個から３個のハロゲン、ＣＮ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アシルオキシ又はアミノで場合によって置換されており、
Ｒ１０は、水素、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキル、（ＣＨ２）ｐＣ６〜１０アリール、（ＣＨ２）ｐＣ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＲ６Ｒ７ＯＣ（Ｏ）ＯＣ３〜１０シクロアルキル又はＣＲ６Ｒ７ＯＣ（Ｏ）ＯＣ１〜１０アルキルを表し、
Ｚは、三重結合、Ｏ、Ｓ、（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎ又はＣＨ＝ＣＨを表し、
Ｒｂは、水素、Ｃ１〜６アルキル又はハロゲンを表し、
Ｒａは、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６アルキル、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノ、ハロゲンを表し、又は、Ｒａはさらにアリール及びヘテロシクリル、ＳＣ１〜６アルキル、ＳＣ６〜１０アリール、ＳＣ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＯ２Ｒ６、ＯＣ６〜１０アリール、ＯＣ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＨ２ＯＣ１〜６アルキル、ＣＨ２ＳＣ１〜６アルキル、ＣＨ２Ｏアリール、ＣＨ２Ｓアリールを表し、
---は、二重結合又は一重結合を表し、
ｐは、０から３を表し、
ｎは、０から４を表し、
ｍは、０から８を表す。）
又はそれらの薬剤として許容される塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ又は混合物に関する。
【０００７】
本発明のこの態様及びその他の態様は、本発明を全体として調べれば実現されよう。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明について、他に特に指示しない限り以下に定義した用語を使用して、本明細書で詳細に説明する。
【０００９】
本明細書では、「治療有効量」という用語は、所望の治療計画に従って投与したとき、所望する治療効果又は応答を惹起するか、又は所望する利益をもたらす式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬の量又は本発明のその他の活性物質の量を意味する。異常な骨吸収の治療に関連する好ましい治療有効量は、骨形成を刺激する量である。同様に、高眼圧症又は緑内障の治療に関連する好ましい治療有効量は、眼圧を低下させ、かつ／又は高眼圧症及び／又は緑内障を治療するために有効な量である。
【００１０】
本明細書では、「薬剤として許容される」とは一般的に、毒性又は安全性の観点からヒトを含めた哺乳類に投与するのに適していることを意味する。
【００１１】
「プロドラッグ」という用語は、投与吸収後、特許請求した薬剤をインビボにおいてある種の代謝過程を介して放出する薬剤前駆体である化合物を意味する。本発明の化合物のプロドラッグの非限定的な例は、患者に投与した後で酸官能基が容易に加水分解される構造を有するピロリジノン基の酸である。プロドラッグの例には、遊離のＣＨ２ＣＯＯＨ基（場合によっては薬剤として許容される塩、たとえば、−ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋の形態であることができる）を有し、通常は環系、好ましくは芳香族環系又は複素環芳香族環系に結合した非麻酔性、非鎮痛性／非ステロイド性抗炎症薬である酢酸誘導体が含まれる。
【００１２】
「アルキル」という用語は、特に他に定義しない限り、１個から１０個の炭素原子を含有する１価のアルカン（炭化水素）由来の遊離基のことである。直線状、分枝状又は環状であることが可能である。好ましいアルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが含まれる。アルキル基がアルキル基で置換されているというとき、「分枝状アルキル基」と同義に使用される。
【００１３】
シクロアルキルは、炭素原子間の二重結合が交互になったり、共鳴したりしない３個から５個の炭素原子を含有するアルキル種である。融合した１個から４個の環を含有することが可能である。シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルが含まれる。
【００１４】
アルコキシとは、アルキル基が本明細書で説明したように場合によって置換されているＣ１〜６アルキル−Ｏ−のことである。アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ及びそれらの異性体基である。
【００１５】
「ハロゲン」（ハロ）とは、塩素、フッ素、ヨウ素及び臭素のことである。
【００１６】
アリールとは、芳香族環、たとえば、フェニル、置換フェニルなどの芳香環、並びにたとえば、ナフチル、フェナントレニルなどの融合環のことである。したがって、アリール基は、少なくとも６個の原子を有する少なくとも１個の環を含有し、このような環は５個まで存在し、それらには炭素原子が２２個まで含有されるが、隣接する炭素原子又は適切なヘテロ原子との間の二重結合は交互になる（共鳴する）。好ましいアリール基は、フェニル、ナフチル及びフェナントレニルである。アリール基は、定義したものと同様に置換されることが可能である。好ましい置換アリールには、フェニル及びナフチルが含まれる。
【００１７】
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、環内の炭素原子の１個がＯ、Ｓ又はＮから選択されたヘテロ原子によって置換され、他の３個までの炭素原子がヘテロ原子によって置換可能な３個から１０個の炭素原子を有するシクロアルキル基（非芳香）のことである。
【００１８】
「シクロアルキル」という用語は、３個から１０個の炭素原子を有する環状アルキル基（非芳香）のことである。
【００１９】
「ヘテロ原子」という用語は、独立して選択されるＯ、Ｓ又はＮを意味する。
【００２０】
「ヘテロアリール」という用語は、５個又は６個の原子を有する単環式芳香族炭化水素基又は８個から１０個の原子を有する二環式芳香基であって、少なくとも１個のヘテロ原子Ｏ、Ｓ又はＮを含有し、炭素又は窒素原子が結合点であり、１個又は２個の他の炭素原子がＯ又はＳから選択されたヘテロ原子によって場合によって置換され、１個から３個の他の炭素原子が窒素ヘテロ原子によって場合によって置換され、前記ヘテロアリール基は本明細書で説明したように場合によって置換されている。この種の例は、ピロール、ピリジン、オキサゾール、チアゾール、テトラゾール及びオキサジンである。本発明のためには、テトラゾールには互変異性体全てが含まれる。他の窒素原子は、最初の窒素及び酸素又は硫黄と一緒に存在することが可能で、たとえばチアジアゾールを生じる。
【００２１】
本明細書では、ヘテロシクリル又は複素環式という用語は、安定な５員から７員の単環又は安定な８員から１１員の二環を表し、飽和又は不飽和で、炭素原子並びにＮ、Ｏ及びＳから成る群から選択された１個から４個のヘテロ原子から構成され、前記で定義した複素環のいずれかがベンゼン環に融合した二環基を含む。複素環にはいずれかのヘテロ原子又は炭素原子が結合することが可能で、それによって安定構造がもたらされる。融合した複素環系は、炭素環を含むことが可能で、必要な複素環は１個のみである。複素環又は複素環式という用語は、ヘテロアリール部分を含む。このような複素環式要素の例には、アゼピニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンズオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、チアモルホリニル、チアモルホリニル、スルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル、チエニル及びトリアゾリルが含まれるが、それらだけには限定されない。
【００２２】
本発明の目的のためには、酸性水酸基を含有するヘテロシクリルは、酸性水酸原子を有し、ｐＫａの範囲が３から７であり得るヘテロシクリル基である。酸性水酸基を含有するヘテロシクリルの非限定的例は、
【００２３】
【化３】
2006520758.tif 000003
であり、式中、Ｇは、−Ｃ（Ｒｃ）３、
【００２４】
【化４】
2006520758.tif 000004
−Ｎ（Ｒｅ）２、Ｏ又はＳであり、
各Ｒｃは、独立してＨ、フッ素、シアノ又はＣ１〜４アルキルであり、
各Ｒｄは、独立してＨ、Ｃ１〜４アルキル又は薬剤として許容される陽イオンであり、
各Ｒｅは、独立してＨ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒｆ、又は−ＳＯ２Ｒｅであり、
ＲｆはＣ１〜４直鎖状アルキル又はフェニルである。
【００２５】
本明細書では、「作動薬」という用語は、式ＩのＥＰ４サブタイプ化合物がＥＰ４受容体と相互作用して、天然の作動薬ＰＧＥ２と比較して最大、超最大又は最大下の効果を生じることを意味する。Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｍａｎ、「Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」９版、１９９６、第２章を参照されたい。
【００２６】
本発明の１実施形態は、Ｒ１が（ＣＨ２）ｐＣＮ、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０、−（ＣＨ２）ｐＰＯ（ＯＨ）２、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＲ８、又は（ＣＨ２）ｎヘテロシクリルで、前記ヘテロシクリルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、その他の可変要素は全て最初に説明した通りであるときに実現される。本発明の副次的な実施形態は、Ｚが（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎのとき実現される。本発明の他の副次的な実施形態は、Ｚが硫黄のときである。Ｒ１が（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０のとき、Ｚは硫黄で、該硫黄は６価である。本発明の他の実施形態は、ＺがＯであるときである。
【００２７】
本発明の他の実施形態は、Ｒ１が（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０でその他の可変要素は全て最初に説明した通りであるときに実現される。本発明の副次的な実施形態は、Ｘ及びＹがＣＨ２であり、Ｚが（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎであり、Ｑが（ＣＨ２）ｍであり、Ｒ３及びＲ４がハロゲンであり、その他の可変要素全てが最初に説明した通りであるときに実現される。
【００２８】
本発明の他の実施形態は、Ｒ１が（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロシクリルで、前記ヘテロシクリルが非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、その他の可変要素全てが最初に説明した通りであるときに実現される。本発明の副次的な実施形態は、Ｚが（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎであるときに実現される。本発明の他の副次的な実施形態は、ＺがＳであるときである。本発明の他の実施形態は、ＺがＯであるときである。
【００２９】
本発明の他の実施形態は、Ｒ２が（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリールで、前記アリールが非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、その他の可変要素全てが最初に説明した通りであるときに実現される。
【００３０】
本発明の副次的な実施形態は、Ｒ１が（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ１０、−（ＣＨ２）ｐＰＯ（ＯＨ）２、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｐＣＯＮＨＲ８又は（ＣＨ２）ｐ−テトラゾリルであり、前記テトラゾリルが非置換であるか、又はＲａ基で置換されており、その他の可変要素全ては最初に説明した通りであるときに実現される。本発明の副次的な実施形態は、Ｚが（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎであるときに実現される。本発明の他の副次的な実施形態は、ＺがＳであるときに実現される。本発明の他の実施形態は、ＺがＯであるときである。
【００３１】
本発明のさらに他の実施形態は、Ｒ２が、非置換又は１個から３個のＲａ基で置換されたフェニルであり、その他の可変要素全てが最初に説明した通りであるときに実現される。
【００３２】
本発明のさらに他の実施形態は、Ｒ１が（ＣＨ２）ｐ−テトラゾリルであり、Ｒ２がフェニルであり、前記テトラゾリルが非置換であるか、又はＲａ基で置換されており、フェニルが非置換であるか、又は１個から３個のＲａで置換されており、その他の可変要素全ては最初に説明した通りであるときに実現される。本発明の副次的な実施形態は、Ｚが（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎであるときに実現される。本発明の他の副次的な実施形態は、ＺがＳであるときである。本発明の他の実施形態は、ＺがＯであるときである。
【００３３】
本発明のさらに他の実施形態は、ＵがＨであり、ＷがＯＨであるときに実現される。
【００３４】
本発明のさらに他の実施形態は、ＵがＣ１〜３アルキルであり、ＷがＯＨであるときに実現される。
【００３５】
本発明のさらに他の実施形態は、Ｑが（ＣＨ２）ｎ又はＣ（ハロ）２であり、その他の可変要素全てが最初に説明した通りであるときに実現される。本発明の副次的な実施形態は、Ｚが（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎであるときに実現される。他の副次的な実施形態は、ＺがＳであるときに実現される。さらに他の副次的な実施形態は、ＺがＯであるときに実現される。
【００３６】
本発明のさらに他の実施形態は、ＹがＣＨ２を表し、ＸがＯ、Ｓ又はＣＨ２であり、ＷがＯＨであり、ＵがＨ又はメチルであり、Ｒ３がＨ、Ｆ又はＣＨ２であり、Ｒ２がフェニル、チエニル、ナフチル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル又はビフェニルであり、前記フェニル、チエニル、ナフチル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル又はビフェニルは非置換であるか、又は１個から３個のＲａ基で置換されており、その他の可変要素全ては最初に説明した通りであるときに実現される。
【００３７】
本発明の化合物は、
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサジナン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアジナン−２−オン；
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−４−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］モルホリン−３−オン；
（６Ｓ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペラジン−２−オン；
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−４−［６−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］チオモルホリン−３−オン；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝ピペリジン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−オキサジナン−２−オン；
（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−チアジナン−２−オン；
（６Ｒ）−６−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−１−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝ピペリジン−２−オン；
（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−オキサジナン−２−オン；
（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−３−｛３−［５−（２Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−チアジナン−２−オン；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−（３−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
（５Ｅ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
（５Ｅ）−７−｛（４Ｓ）−４−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル］−２−オキソ−１，３−チアジナン−３−イル｝ヘプト−５−エン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−チアゾール−５−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−チアゾール−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−オキサゾール−２−カルボン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−オキサゾール−５−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１Ｈ−イミダゾール−５−カルボン酸；
２−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，３−オキサゾール−５−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−１，２λ５，５λ５−オキサジアゾール−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボン酸；
５−（（１Ｅ）−３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロプ−１−エニル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロプ−１−イニル）チオフェン−２−カルボン酸；
５−（（１Ｚ）−３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロプ−１−エニル）チオフェン−２−カルボン酸；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛（２Ｚ）−４−［（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）チオ］ブト−２−エニル｝ピペリジン−２−オン；
［（４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブト−２−イニル）チオ］酢酸；
［（（２Ｚ）−４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブト−２−エニル）チオ］酢酸；
［（４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸；
（４−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸；
３−［（３−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝プロピル）チオ］プロパン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−（２−ナフチル）ブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
（６Ｒ）−６−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（１−ベンゾチエン−２−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
（６Ｒ）−６−［（３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
（６Ｒ）−６−［（３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−３−メチル−４−フェニルブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］ピペリジン−２−オン；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（１−ベンゾフラン−２−イル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（３−クロロフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４−（３−クロロフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−（３−メトキシフェニル）ブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
６−［（１Ｅ）−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピペラジン−２−オン；
７−｛［（１Ｅ）−（２Ｒ）−２−（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
７−｛［（１Ｅ）−（２Ｒ）−２−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタノエート；
イソプロピル７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル）−チオフェン−２−カルボン酸メチル；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
６−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピペリジン−２−オン；
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸メチル；
５−｛３−｛（２Ｒ）−２−（（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸；
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル；
６−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピペリジン−２−オン；
（５Ｚ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸イソプロピル；
（５Ｚ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル；
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸；
又は薬剤として許容されるそれらの塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物である。
【００３８】
本発明の他の実施形態は、式ＩのＥＰ４作動薬及び薬剤として許容される担体を場合によって含有する組成物を対象とする。
【００３９】
本発明のさらに他の実施形態は、式ＩのＥＰ４作動薬及び薬剤として許容される担体を場合によって含有する組成物を投与、好ましくは局所的又は眼房内投与することによって、上昇した眼圧を減少させるか、又は緑内障を治療するための方法を対象とする。上昇した眼圧又は緑内障又はそれらの組み合わせを治療するための薬剤を製造するために式Ｉの化合物を使用することもまた、本発明に含まれる。
【００４０】
本発明はさらに、式Ｉの化合物を含む医薬品組成物の製造方法に関する。
【００４１】
本発明はさらに、式Ｉの化合物及び薬剤として許容される担体を含む医薬品組成物の製造方法に関する。
【００４２】
請求された化合物は、ＰＧＥ２受容体、特にＥＰ４サブタイプ受容体に強く結合して作用し、したがって、緑内障及び高眼圧症を予防及び／又は治療するために有用である。
【００４３】
眼球乾燥は、数百万もの人々を悩ます一般的な眼球表面の疾患である。眼球乾燥は、いくつかの関連のない病因から生じる可能性があると思われるが、最終的な結果は共通して涙液膜の破損であり、その結果曝露された眼球外面の乾燥が生じる（Ｌｅｍｐ、Ｒｅｐｏｒｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎ  Ｅｙｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ／Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  Ｗｏｒｋｓｈｏｐ  ｏｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  Ｄｒｙ  Ｅｙｅｓ、Ｔｈｅ  ＣＬＡＯ  Ｊｏｕｒｎｅｌ、２１（４）：２２１〜２３１（１９９５））。機能的なＥＰ４受容体は、ヒト結膜上皮細胞で発見され（参照により全体を組み込む米国特許第６３４４４７７号を参照されたい）、ヒト角膜上皮細胞（Ｐｒｏｇｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１６：８１〜９８（１９９７））及び結膜細胞（Ｄａｒｔｔ他、「ラット結膜の杯状細胞に隣接した神経の局在（Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｒｖｅｓ  ａｄｊａｃｅｎｔ  ｔｏ  ｇｏｂｌｅｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｃｏｎｊｕｃｎｔｉｖａ．）」Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１４：９９３〜１０００（１９９５））の両方が粘液を分泌できることは理解されている。したがって、式Ｉの化合物は乾燥眼球の治療に有用である。
【００４４】
黄斑浮腫は、眼球の後極にある非常に重要な中枢視覚領域における網膜内で肥大する。ＩＯＰを低下させるＥＰ４作動薬は、黄斑浮腫又は黄斑変性などの黄斑性疾患を治療するために有用であると考えられている。したがって、本発明の他の態様は、黄斑浮腫又は黄斑変性を治療する方法である。
【００４５】
緑内障の特徴は、視神経の進行性萎縮で、眼圧（ＩＯＰ）の上昇を伴うことが多い。しかし、神経保護作用をもたらす薬剤を使用することによって、ＩＯＰに必ずしも影響を及ぼすことなく緑内障を治療することが可能である。Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｏｌ．１１２、１９９４年１月、３４〜４４頁、Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｍｏｌ．＆Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、３２、５、１９９１年４月、１５９３〜９９頁を参照されたい。ＩＯＰを低下させるＥＰ４作動薬は、神経保護効果をもたらすために有用であると考えられている。それらはまた、ＩＯＰを低下させることによって、網膜及び視神経乳頭の血流速度を増加させ、かつ網膜視神経酸素を増加させるのに有効であると考えられ、両者が一緒になったとき、視神経の健康に有益なものとなる。その結果、本発明はさらに、式ＩのＥＰ４作動薬を使用することによって、網膜及び視神経乳頭の血流速度を増加させる方法、又は網膜及び視神経酸素分圧を増加させる方法、又は神経保護効果をもたらす方法又はこれらを組み合わせた方法に関する。
【００４６】
本発明で生成された化合物は、効果的なＩＯＰ低下を実現するために、適切かつ公知の薬剤として許容される賦形剤と容易に一緒にして、ヒトを含めた哺乳類に投与することができる組成物を形成する。したがって、本発明はまた、網膜及び視神経乳頭の血流速度を増加させるため、網膜及び視神経酸素分圧を増加させるため、神経保護効果をもたらすため、又はそれらの組み合わせのために、式Ｉの化合物の１つを単独で、或いは１種又は複数の以下の活性成分、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロールなどのβ−アドレナリン作用遮断剤、ピロカルピンなどの副交感神経作動薬、エピネフリン、アイオピジン、ブリモニジン、クロニジン、パラ−アミノクロニジンなどの交感神経作動薬、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミドなどの炭酸脱水素酵素阻害剤、コソプト（登録商標）、Ｐｅｎｉｔｒｅｍ  Ａ、パスパリシン、チャリブドトキシン、イベリオトキシン、Ｐａｘｉｃｉｌｌａｎ、Ａｆｌｉｔｒａｍ、ＶｅｒｒｏｃｕｌｏｇｅｎなどのＭａｘｉ−Ｋチャンネル遮断薬並びに、いずれも本明細書に参照により全体を組み込むＷＯ０３／１０５８６８（ＵＳＳＮ６０／３８９２０５）、ＷＯ０３／１０５７２４（６０／３８９２２２）、ＷＯ０３／１０５８４７（６０／４５８９８１）、２００２年１１月８日出願の６０／４２４７９０（整理番号２１２６０ＰＶ）、２００２年１１月８日出願６０／４２４８０８（整理番号２１２８１ＰＶ）、２００１年１月１７日出願０９／７６５７１６及びＰＣＴ公開ＷＯ０２／０７７１６８及びＷＯ０２／０２０６０８６３に特に記載されているように、特に、１−（１−イソブチル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル）−２−メチルプロパン−１−オン、１−［１−（２，２−ジメチルプロピル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］−２−メチルプロパン−１−オン、１−［１−（シクロヘキシルメチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］−２−メチルプロパン−１−オン、１−（１−ヘキシル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル）−２−メチルプロパン−１−オン、１−［１−（２−エチルヘキシル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−イル］−２−メチルプロパン−１−オン、１−（３−イソブチリル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）ブアン−２−オン、１−（３−イソブチリル−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、１−（３−シクロペンチルカルボニル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、１−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−３−カルボン酸及び１−［３−（３−ヒドロキシプロパノイル）−６−メトキシ−１Ｈ−インダゾール−１−イル］−３，３−ジメチルブタン−２−オンなどのＭａｘｉ−Ｋチャンネル遮断薬、ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ、Ｓ１０３３（米国特許５８８９０５２号、５２９６５０４号、５４２２３６８号及び５１５１４４４号に記載された化合物）などのプロスタグランジン、ルミガン及び米��特許第５３５２７０８号に記載された化合物などの抗高血圧脂質、米国特許第４６９０９３１号で開示された神経保護薬、特にメマンチンを含めたＷＯ９４／１３２７５で開示されたエリプロディル及びＲ−エリプロディル、及び／又はＰＣＴ／ＵＳ００／３１２４７に記載されたような５−ＨＴ２受容体の作動薬、特に１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オール  フマレート及び２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンと組み合わせて、式Ｉの化合物の１つを必要とする患者に投与することによって、高眼圧症、緑内障、黄斑浮腫、黄斑変性を治療する組成物及び方法に関する。
【００４７】
高眼圧症、緑内障、黄斑浮腫、黄斑変性を治療するため、網膜及び視神経乳頭の血流速度を増加させるため、網膜及び視神経酸素分圧を増加させるため、神経保護効果をもたらすため、又はそれらの組み合わせのための薬剤を製造するために式Ｉの化合物を使用することもまた、本発明に含まれる。
【００４８】
本発明で使用したＥＰ４作動薬は、静脈内、皮下、局所的、経皮的、非経口的又は当業者が公知のその他の任意の方法で治療有効量を投与することができる。眼科用医薬品組成物は、液剤、懸濁剤、軟膏、クリームの形態で、又は固形挿入物として目に局所投与できるように適合させることが好ましい。この化合物の眼科用製剤は、薬剤を０．００１％から５％、特に０．００１％から０．１％で含有することができる。眼圧を減少させ、緑内障を治療し、血流速度又は酸素分圧を増加させるために有効な用量であれば、より高い投与量、たとえば、約１０％までの投与量を使用することができる。単回用量としては、０．００１ｍｇから５．０ｍｇまで、好ましくは０．００５ｍｇから２．０ｍｇまで、特に０．００５ｍｇから１．０ｍｇまでの化合物をヒトの目に適用することができる。
【００４９】
化合物を含有する医薬品調製物は、無毒性の医薬品有機担体又は無毒性の医薬品無機担体と都合良く混合することができる。薬剤として許容される一般的な担体は、たとえば、水、水と低級アルカノール又はアラルカノールなどの水混和性溶媒との混合物、植物油、ラッカセイ油、ポリアルキレングリコール、ワセリン、エチルセルロース、オレイン酸エチル、カルボキシメチル−セルロース、ポリビニルピロリドン、ミリスチン酸イソプロピル及びその他の従来から使用されている許容可能な担体である。医薬品調製物はまた、乳化剤、保存剤、湿潤剤、粘度付与剤などの無毒性補助物質、たとえば、ポリエチレングリコール２００、３００、４００及び６００、カーボワックス１０００、１５００、４０００、６０００及び１００００、四級アンモニウム化合物などの抗菌成分、照射滅菌性を備えることが知られており、使用しても有害ではないフェニル水銀塩、チメロサール、メチル及びプロピルパラベン、ベンジルアルコール、フェニルエタノール、ホウ酸ナトリウムや酢酸ナトリウム、グルコン酸緩衝液などの緩衝成分、並びにモノラウリン酸ソルビタン、トリエタノールアミン、オレイン酸剤、モノパルミチン酸ポリオキシエチレンソルビタン、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、モノチオグリセロール、チオソルビトール、エチレンジアミン四酢酸などのその他の従来成分を含有することができる。さらに、本発明では、従来のリン酸緩衝ビヒクル系、等張性ホウ酸ビヒクル、等張性塩化ナトリウムビヒクル、等張性ホウ酸ナトリウムビヒクルなどを含めた適切な眼科用ビヒクルを担体媒体として使用することができる。医薬品調製物はまた、微粒子製剤の形態であることが可能である。医薬品調製物はまた、固形挿入物の形態であることが可能である。たとえば、該薬剤用の担体として固形水溶性ポリマーを使用することができる。挿入物を形成するために使用するポリマーは、任意の水溶性無毒性ポリマー、たとえば、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、（ヒドロキシ低級アルキルセルロース）、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのセルロース誘導体、ポリアクリル酸塩、アクリル酸エチル、ポリアクチルアミドなどのアクリレート、ゼラチン、アルギン酸塩、ペクチン、トラガカント、カラヤゴム、ツノマタ、寒天、アカシアゴムなどの天然産物、酢酸デンプン、ヒドロキシメチルデンプンエーテル、ヒドロキシプロピルデンプンなどのデンプン誘導体並びにポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、ポリエチレンオキシド、中和カルボポールなどのその他の合成誘導体、キサンタンゴム、ゲランガム及び前記ポリマーの混合物であってよい。
【００５０】
本発明の製剤を投与するために適した対象物は、霊長類、ヒト及びその他の動物、特にヒト並びにネコ、ウサギ及びイヌなどの飼い慣らされた動物を含む。
【００５１】
医薬品調製物は、使用する上で無害な、たとえば、チメロサール、塩化ベンザルコニウム、メチル及びプロピルパラベン、臭化ベンジルドデシニウム、ベンジルアルコール又はフェニルエタノールなどの抗菌成分、塩化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム又はグルコン酸緩衝液などの緩衝成分及びモノラウリン酸ソルビタン、トリエタノールアミン、モノパルミチン酸ポリオキシエチレンソルビタン、エチレンジアミン四酢酸などのその他の従来成分など無毒性補助物質を含有することができる。
【００５２】
眼科用液剤又は懸濁剤は、目に許容可能なＩＯＰレベルを維持するために必要な回数で投与することができる。哺乳類の目に対する投与は、１日１回から３回までとする。
【００５３】
目に局所投与するために、本発明の新規製剤は、単位用量が治療有効量の活性成分を含むように、又は併用治療の場合はその何倍かの量を含むように調合された液剤、ジェル、軟膏、懸濁剤又は固形挿入物の形態をとることができる。
【００５４】
本発明の化合物はまた、骨モデリングと骨芽細胞及び破骨細胞のリモデリング過程を媒介するために有用である。本明細書に参照により全体を組み込む１９９９年１０月１２日出願のＰＣＴ  ＵＳ９９／２３７５７を参照のこと。骨における主要なプロスタグランジン受容体はＥＰ４であり、これは環状ＡＭＰを介した情報伝達によってその効果をもたらすものと考えられている。本明細書に参照により全体を組み込むＩｋｅｄａ  Ｔ、Ｍｉｙａｕｒａ  Ｃ、Ｉｃｈｉｋａｗａ  Ａ、Ｎａｒｕｍｉｙａ  Ｓ、Ｙｏｓｈｉｋｉ  Ｓ及びＳｕｄａ  Ｔ  １９９５、「プロスタグランジンＥ受容体の３種類のサブタイプ（ＥＰ１、ＥＰ３及びＥＰ４）の胎仔及び新生仔マウスの生体位における局在（Ｉｎ  ｓｉｔｕ  Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｒｅｅ  ｓｕｂｔｙｐｅ（ＥＰ１、ＥＰ３  ａｎｄ  ＥＰ４）  ｏｆ  ｐｒａｓｔａｇｌａｎｄｉｎ  Ｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ａｎｄ  ｎｅｗｂｏｒｎ  ｍｉｃｅ．）」、Ｊ  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ  １０（前記１）：Ｓ１７２を参照のこと。骨モデリング及びリモデリング過程を媒介する薬剤を製造するための式Ｉの化合物の使用もまた、本発明に含まれる。
【００５５】
したがって、本発明の他の目的は、骨の形成、すなわち骨形成を刺激する方法を必要とする哺乳類に、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬の治療有効量を投与することを含む、哺乳類における骨の形成、すなわち骨形成を刺激する方法を提供することである。
【００５６】
本発明のさらに他の目的は、骨の形成の刺激方法を必要とする哺乳類に、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬の治療有効量を投与することを含む、前記哺乳類における骨の形成の刺激方法を提供することである。骨の形成を刺激するための薬剤を製造するための式Ｉの化合物の使用もまた、本発明に含まれる。
【００５７】
本発明のさらに他の目的は、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬の治療有効量及びビスホスホン酸活性物を含む医薬品組成物を提供することである。
【００５８】
本発明のさらに他の目的は、このような治療又は予防を必要とする哺乳類の異常な骨吸収に関連した病状又は症状を治療するか、又は罹患する危険性を減少させる方法であって、治療有効量の式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬を前記哺乳類に投与することを含む方法を提供することである。異常な骨吸収に関連した病状又は症状を治療するか、又は罹患する危険性を減少させる薬剤を製造するための式Ｉの化合物の使用もまた、本発明に含まれる。
【００５９】
異常な骨吸収に関連した疾患状態及び状態には、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、パジェット病、異常に増大した骨代謝、歯周病、歯の損失、骨折、関節リウマチ、人工関節周囲の骨溶解、骨形成不全、転移性骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発骨髄腫が含まれるが、それだけには限定されない。
【００６０】
式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬の治療有効量及びビスホスホン酸活性物を投与することを含む方法で、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬及びビスホスホネート活性成分の同時投与及び逐次投与はいずれも本発明の範囲内であると見なされる。一般的に、ビスホスホン酸活性成分をベースとしてビスホスホネート活性成分を５ｍｇから１０ｍｇ含有する製剤が調製される。逐次投与では、該作動薬及びビスホスホネートはどちらからでも投与されることができる。逐次投与のサブクラスでは、該作動薬及びビスホスホネートは一般的に、同じ２４時間位内に投与される。さらに別のサブクラスでは、該作動薬及びビスホスホネートは一般的に、互いに約４時間位内に投与される。
【００６１】
本発明に有用なビスホスホネート活性物の非限定的な種類は、アレンドロネート、シマドロネート、クロドロネート、チルドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、ネリドロネート、オルパンドロネート、リセドロネート、ピリドロネート、パミドロネート、ゾレンドロネート、薬学的に許容されるそれらの塩及びそれらの混合物からなる群から選択される。
【００６２】
この場合前記の種類の非限定的なサブクラスは、アレンドロネート、薬学的に許容されるその塩及びそれらの混合物から選択される。
【００６３】
該サブクラスの非限定的な例は、アレンドロネート一ナトリウム三水和物である。
【００６４】
本発明では、骨の刺激に関連するので、該作動薬は一般的に、所望する治療効果が実現するまで十分な期間にわたり投与される。「所望する治療効果が実現されるまで」という用語は、処置した疾患又は状態に求められる臨床上又は医療上の効果がもたらされたことが、臨床医又は研究者によって認められる時まで、選択した投与計画に従って治療剤又は治療剤類が継続的に投与されることを意味する。本発明の治療方法では、骨の重量又は構造において所望する変化が認められるまで、該化合物は継続的に投与される。このような場合、骨重量の増加又は異常な骨構造と正常な骨構造との置換の実現が所望する目標である。病状又は症状の危険性を減少する方法では、望ましくない状態を予防する必要性がある限り、該化合物は継続的に投与される。このような場合、骨重量密度の維持がしばしば目標となる。
【００６５】
投与期間の非限定的な例は、約２週間から哺乳類の寿命が存続するまでの範囲であり得る。ヒトの場合、投与期間は約２週間からヒトの寿命が存続するまで、好ましくは約２週間から約２０年まで、より好ましくは約１ヶ月から約２０年まで、より好ましくは約６ヶ月から約１０年まで、最も好ましくは約１年から約１０年までの範囲であり得る。
【００６６】
本発明の化合物はまた、骨減少、骨折、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、パジェット病、骨代謝の異常増加、歯周病、歯の損失、骨関節炎、関節リウマチ、人工関節周辺の骨溶解、骨形成不全、転移性骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発骨髄腫の治療又は予防に有用な公知の薬剤と組み合わせると有用である。本発明で開示した化合物と骨粗鬆症又はその他の骨疾患の治療又は予防に有用なその他の薬剤との組み合わせは、本発明の範囲内である。当業者であれば、どの薬剤の組み合わせが薬剤の特性及び関連する疾患を基にして有用であるか理解するであろう。このような薬剤には、以下の、有機ビスホスホネート、カテプシンＫ阻害剤、エストロゲン又はエストロゲン受容体修飾因子、アンドロゲン受容体修飾因子、破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害剤、インテグリン受容体拮抗薬、ＰＨＴなどの骨芽細胞蛋白質同化剤、カルシトニン、ビタミンＤ又は合成ビタミンＤ類縁体及び薬剤として許容されるそれらの塩及びそれらの混合物が含まれる。好ましい組み合わせは、本発明の化合物及び有機ビスホスホネートである。他の好ましい組み合わせは、本発明の化合物及びエストロゲン受容体修飾因子である。他の好ましい組み合わせは、本発明の化合物及びエストロゲンである。他の好ましい組み合わせは、本発明の化合物及びアンドロゲン受容体修飾因子である。他の好ましい組み合わせは、本発明の化合物及び骨芽細胞蛋白質同化剤である。
【００６７】
異常な骨吸収及び目の疾患の治療については、式Ｉ作動薬のＥＣ５０は一般的に、約０．００１ｎＭから約１００マイクロＭであるが、投与量及び投与経路に応じて、この範囲外の活性を有する作動薬が有用であり得る。本発明の他のサブクラスでは、該作動薬のＥＣ５０は約０．０１マイクロＭから約１０マイクロＭである。本発明のさらに他のサブクラスでは、該作動薬のＥＣ５０は約０．１マイクロＭから約１０マイクロＭである。ＥＣ５０とは、当業者に周知の作動薬活性の一般的な評価基準であり、最大効果の半分、すなわち、５０％を生じるために必要な作動薬の濃度又は用量として定義される。本明細書に全体を参照により組み込むＧｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ′ｓ、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第９版、１９９６、第２章、Ｅ．Ｍ．Ｒｏｓｓ、「薬理学、薬剤作用機構及び薬剤濃度と効果の関係（Ｐｈａｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ、Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｅｆｆｅｃｔ）」及び１９９９年１０月１２日ＰＣＴ  ＵＳ９９／２３７５７もまた参照されたい。
【００６８】
本明細書の実施例は、特許請求した本発明を例示するのであるが、限定するものではない。特許請求の範囲に記載される化合物はそれぞれはＥＰ４作動薬であり、いくつかの生理学的な眼及び骨の障害に有用である。
【００６９】
本発明の化合物は、いずれも本明細書に全体を参照により組み込む米国特許第６０４３２７５号、ＥＰ０８５５３８９、ＷＯ０３／０４７４１７（ＵＳＳＮ６０／３３７２２８）、ＷＯ０３／０４７５１３（ＵＳＳＮ６０／３３８１１７）、ＵＳＳＮ６０／４０６５３０（メルク文書番号ＭＣ０６０）及びＷＯ０１／４６１４０に従い、若干の修正を加えて作製することができる。例示として記載する以下の非限定的なスキームおよび実施例は、本発明を説明するものである。
【００７０】
【化５】
2006520758.tif 000005
【００７１】
調製例１
【化６】
2006520758.tif 000006
ＭｅＯＨ（１．８Ｌ）に溶かした（＋／−）ピペコリン酸（３９５ｇ、３．０６ｍｏｌｅ）のスラリーに６０℃でＬ−酒石酸（４５９ｇ、３．０６ｍｏｌｅ）を添加した。該スラリーを還流するまで温め、１ｈ（時間）熟成させた。該スラリーを２３℃まで冷却して、濾過して、所望する（Ｒ）−ピペコリン酸／Ｌ−酒石酸濾過ケークをＭｅＯＨ（２００ｍＬ）で洗浄した。該濾過ケークを空気乾燥して、白色固形物を単離した。該ピペコリン酸酒石酸塩は一般的に８５〜８９％ｅｅで測定された。
【００７２】
固形物全てが溶解するまで、Ｈ２Ｏ／アセトン  ２：１（３８０ｍＬ／１９０ｍＬ）に溶かした塩（３８３ｇ）のスラリーを還流するまで温めた（６０〜６５℃）。還流を維持しながらアセトン（１３３０ｍＬ）を２時間かけて添加した。該スラリーを１時間かけて１５℃から２０℃まで冷却し、次いで濾過して、アセトン／Ｈ２Ｏ  ４：１（３８０ｍＬ）で洗浄して、次いで真空下で空気乾燥した。ピペコリン酸酒石酸塩３１３ｇが単離された（＞９９％ｅｅ）。
【００７３】
ＭｅＯＨ（３．０Ｌ）に溶かした（Ｒ）−ピペコリン酸酒石酸塩（３１２ｇ）のスラリーに、０．５時間かけて２８％ＮＨ４ＯＨ（８３ｍＬ、１．１当量）を添加した。該白色スラリーを周囲温度で０．５時間熟成させて、次に酒石酸アンモニウムの沈殿を濾過した。該濾過ケーキをＭｅＯＨ（３００ｍＬ）ですすいだ。一緒にした濾液及び洗浄液を（１）の白色固形物になるまで濃縮した。
【００７４】
調製例２
【００７５】
【化７】
2006520758.tif 000007
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）／Ｈ２Ｏ  １：１（５５０／５５０ｍＬ）に溶かしたピペコリン酸（１０９．７ｇ）及びＢＯＣ２Ｏ（２２２．４ｇ）のスラリーに、５０％ＮａＯＨ（４５ｍＬ）を添加した。該スラリーを還流するまで温めて、還流して５時間熟成させた。該溶液を２３℃まで冷却して、次にヘプタン（５５０ｍＬ）で洗浄して、未反応のＢＯＣ２Ｏを除去した。次に、水性（ａｑ．）層を５Ｎ  ＨＣｌ（１７０ｍＬ）でｐＨ４からｐＨ５まで酸性化した。得られたスラリーをｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）５５０ｍＬで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥して、次いで（２）の白色固形物になるまで濃縮した。
【００７６】
調製例３
【００７７】
【化８】
2006520758.tif 000008
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）５００ｍＬに溶解したＮ−ＢＯＣ−ピペコリン酸（１６６．５ｇ、７２６ｍｍｏｌｅ）の溶液に、ＭｅＩ（１２３．７ｇ、８７１ｍｍｏｌｅ）及びＫ２ＣＯ３（１００．４ｇ、７２６ｍｏｌｅ）を添加した。該反応混合物をゆっくり４０℃まで加熱し、０．５時間後、周囲温度で４時間熟成期間をおいた。ＭＴＢＥ（８３０ｍＬ）を添加し、次いでＨ２Ｏ（２ｘ８３０ｍＬ）及び２０％食塩水（３００ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥して、油状物（３）になるまで濃縮した。
【００７８】
調製例４
【００７９】
【化９】
2006520758.tif 000009
ＭｅＣＮ（３０５ｍＬ）に溶かしたブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）−Ｍｅエステル（１５２．６ｇ、６２７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＲｕＣｌ３（２．６ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）を添加した。Ｈ２Ｏ（７６０ｍＬ）に溶かしたＮａＢｒＯ３（１４２．０ｇ、９４１ｍｍｏｌ）の溶液を２時間かけて添加した。該溶液を周囲温度で１２時間熟成させた。ＥｔＯＡｃ（７６０ｍＬ）を添加し、水層を除去した。暗色の有機層を１０％Ｎａ２ＳＯ３（３０５ｍＬ）で洗浄したところ、有機層が透明に変わり、水層が不透明な灰色に変わった。該有機層を飽和食塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で乾燥して油状物（４）を得た。
【００８０】
調製例５
【００８１】
【化１０】
2006520758.tif 000010
イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）１３５ｍＬに溶かしたＢＯＣ−ラクタム（１３５．４ｇ、５２６ｍｍｏｌ）の溶液に、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）２６３ｍＬ／１３１６ｍｍｏｌに溶かした５Ｎ  ＨＣｌを１５分かけて添加した。気体の激しい発生が１５分間生じた後で、該溶液を周囲温度で２．５時間熟成させた。ＥｔＯＡｃ（８００ｍＬ）を添加し、１５％Ｎａ２ＣＯ３（３５０ｍＬ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で抽出した。一緒にした有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥して、油状物（５）になるまで濃縮した。鏡像体純度を測定すると＞９９％ｅｅであった。
【００８２】
調製例６
【００８３】
【化１１】
2006520758.tif 000011
無水エタノール（５００ｍＬ）に溶かしたラクタムエステル（８．１０ｇ、５１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（２．５ｇ、１．２当量）を０．５ｇずつ増加させながら３０分かけて添加した。該溶液を室温で３．５時間撹拌した。次に、該混合物を氷酢酸（２．８当量）で処理して、セライトのプラグで濾過することによって沈殿を除去した。次に、濾液を真空中で濃縮して、得られた油状物を真空下に置くことによって固体化した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解して、ＫＨＣＯ３（１．５当量）で処理して、１時間熟成させて、セライトのプラグで濾過して、得られた濾液を真空中で濃縮して、表題化合物６を得て、さらに精製することなく次段階で直接使用した。
【００８４】
調製例７
【００８５】
【化１２】
2006520758.tif 000012
無水ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶かしたラクタムアルコール（１０ｇ、７７．５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｎ２雰囲気下において０℃でイミダゾール（６．９ｇ、１００．８ｍｍｏｌ、１．３当量、（イミダゾールの量は前段階からのＡｃＯＨを中和するために調節した）及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（ＴＢＳＣｌ）１４ｇ／９３．０ｍｍｏｌ／１．２当量を添加した。得られた混合物を室温（ＲＴ）まで温めて、４時間熟成させた。反応が完了したことが判断されたら、ＣＨ２ＣＨ２（１００ｍＬ）、次に１Ｎ  ＨＣｌ溶液（３０ｍＬ）を添加した。有機層を分離して、水層をＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ５０ｍＬ）で逆抽出した。一緒にした有機層を２０％ＮａＨＣＯ３溶液（４０ｍＬ）、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して真空中で濃縮し、所望する化合物を白色固形物として得た。シリコンを含有する副生成物は、固形物を冷ヘプタン（３ｍＬ／ｇ）で、−７８℃で洗浄することによって除去し、表題化合物７を得た。
【００８６】
調製例８
【００８７】
【化１３】
2006520758.tif 000013
ＴＨＦ（ＫＦ＜２００ｐｐｍ）に溶かしたラクタム７（２．０ｇ、８．２２ｍｍｏｌ）の１５℃の溶液に、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）２０ｍＬに溶かした固形カリウムビス［トリメチルシリル］アミド（ＫＨＭＤＳ）１．９０ｇ／９．０４ｍｍｏｌｅを添加し、室温（ｒｔ）で１０分間熟成させた。新たに調製したメシラート（０．９３ｇ、８．２２ｍｍｏｌｅ、ＫＦ＜８００ｐｐｍ）を純粋な油として該溶液に添加し、該反応物を５０℃まで加熱して、２．５時間から３．５時間熟成させた。該反応物を室温まで冷却して、ＭＴＢＥ（２０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）で希釈した。水性（ａｑ．）層を除去し、有機物を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、溶媒を除去して黄色の粗油状物８を得た。
【００８８】
調製例９
【００８９】
【化１４】
2006520758.tif 000014
乾燥ＭＴＢＥ（４０ｍＬ）に溶解したｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）保護ラクタム（１０ｇ、２４．２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、Ｎ２雰囲気下において０℃で１５分かけてＨＦ・ピリジン（４．８４ｇ、１６９ｍｍｏｌ、７当量）の７０％溶液を添加した。得られた混合物をＲＴまで温め、１２時間熟成して、その時点でＨＰＬＣ及び１Ｈ  ＮＭＲ分析によって反応の完了を判断した。次に、該混合物をＭＴＢＥ（１００ｍＬ）で希釈して、冷Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）で洗浄した。次に、有機層を飽和Ｎａ２ＣＯ３（２５ｍＬ）で処理して、ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して真空中で濃縮した。得られた粗油状物（９）は次段階に直接使用する。所望するならば、該アルコールはＳｉＯ２ゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ  ４０：１）で精製することができる。
【００９０】
調製例１０
【００９１】
【化１５】
2006520758.tif 000015
ジクロロメタン（９５ｍＬ）に溶かしたアルコール９（９．４６ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）、ＤＭＳＯ（２３７．３ｍｍｏｌ、１６．９ｍＬ、７．５当量）及びヒューニッヒ塩基（１６．５ｍＬ、９４．９ｍｍｏｌ、３当量）の冷溶液（０℃）に、ＳＯ３・ピリジン（１５ｇ、９４．９ｍｍｏｌ、３当量）を固形物として１５分かけて添加した。得られた溶液を０℃で１．５時間熟成させ、この時点で開始物質の完全な消費が認められた。次に、該反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈して、冷４Ｎ  ＨＣｌ（３５ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離して、飽和ＮａＨＣＯ３溶液及び食塩水で連続的に処理した。その後、該溶液をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過して、真空中で濃縮して、対応するアルデヒド（７．８ｇ、測定収率８３％）を得て、さらに精製することなく次段階で使用した。
【００９２】
調製例１１
リン酸ナトリウム１４の調製
【００９３】
段階１
【００９４】
【化１６】
2006520758.tif 000016
ベンゾイルギ酸メチル（ＰｈＣＯＣＯ２Ｍｅ、２５ｇ、０．１５ｍｏｌ、１当量）の純粋な溶液に、Ｎ２下において１５℃で、内部温度が４５℃未満に維持されるような速度で純粋なジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（ＤＡＳＴ、３４．４ｇ、０．２１ｍｏｌ、１．４当量）を添加した。添加終了後、得られた褐色の溶液をＲＴまで冷却し、３時間以上熟成し、その時点で高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）及びガスクロマトグラフィー／質量分析（ＧＣ／ＭＳ）によって開始物質の完全な消費が認められた。次に、該反応混合物をゆっくり氷／Ｈ２Ｏに注ぎ（注意：発熱！）、生成物をＭＴＢＥ（３ｘ）で抽出した。次に、一緒にした有機層を冷２０％Ｎａ２ＣＯ３水溶液でｐＨが７になるまでゆっくり中和し（注意：ガス発生）、食塩水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して真空中で濃縮した。粗生成物を真空蒸留で精製して（２４〜２５トールでｂｐ＝１０３℃から１０５℃）、所望する生成物（１３）を淡黄色油状物として得た。
【００９５】
段階２
【００９６】
【化１７】
2006520758.tif 000017
乾燥ＴＨＦ（４００ｍＬ、ＫＦ＝３０ｐｐｍ）に溶かしたメチルホスホン酸ジメチル（２８ｇ、０．２３ｍｏｌ、１．０５当量）の溶液に、ＴＨＦ（１１５ｍＬ、０．２３ｍｏｌ、１．０５当量）に溶かしたビス（トリメチルシリル）アミドナトリウム２Ｍ溶液をＮ２下において−７８℃でゆっくり１５分かけて添加した。得られた溶液を３０分間熟成し、その後純粋なメチルジフルオロエステル（ＰｈＣＦ２ＣＯ２Ｍｅ、４０ｇ、０．２２ｍｏｌ、１．０当量）で１５分間かけて処理した。該反応混合物を−７８℃で１時間熟成し、ＲＴまでゆっくり温め、元の量の約４分の１まで濃縮して、０．５時間かけてＭＴＢＥ（４００ｍＬ）を添加した。得られた懸濁液をさらにＲＴで０．５時間熟成して、濾過した。湿ったケークをＭＴＢＥ（１００ｍＬ）で洗浄して、真空中でＮ２流下において乾燥させた。生成物を白色固形物（１４）として単離した。
【００９７】
調製例１２
化合物１６の調製
【００９８】
段階１
【００９９】
【化１８】
2006520758.tif 000018
水（２５０ｍＬ）、ＩＰＡ（１２５０ｍＬ）及び濃縮硫酸（６００ｍＬ、１１．１ｍｏｌｅ）の１０℃溶液に、固形過硫酸カリウム（６００ｇ、２．２２ｍｏｌｅ）を１回で添加した。シクロヘプタノン（１３１．５ｍＬ）をＩＰＡで総量２５０ｍＬに希釈し、添加中の温度を＜１５℃に維持しながら、この溶液を添加漏斗によって過硫酸スラリーに１５分かけて添加した。該反応物を１５℃で１６時間から２０時間熟成させた。シクロヘプタノンが全て反応したら、濾液の冷却を維持しながら該反応物を濾過して塩を除去した。温度を＜３０℃に維持しながら、該濾液をＭＴＢＥ（１２５０ｍＬ）、飽和食塩水（１Ｌ）及び水（５００ｍＬ）で希釈した。分離漏斗に移してから、相を１時間静置して、水層を除去した。有機層を飽和Ｎａ２ＣＯ３（２ｘ１Ｌ）で、又は水性廃液が塩基性に維持されるまで洗浄した。該溶液をヘキサン（１．２５Ｌ）で希釈し、Ｎａ２ＳＯ４で１時間乾燥した。溶媒を真空下で除去して、油状物を真空蒸留して純粋なエステル（１６）を得た。（４ｍｍＨｇでｐｂ１２５℃）。
【０１００】
段階２
【０１０１】
【化１９】
2006520758.tif 000019
乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶かしたエステル（１０ｇ、０．０５ｍｏｌｅ）及びトリエチルアミン（１１．１ｍＬ、０．０８ｍｏｌｅ）の−１０℃溶液に、添加中の温度を＜１０℃に維持しながら、塩化メタンスルホニル（ＭｓＣｌ−４．７５ｍＬ、０．０６ｍｏｌｅ）を添加した。該反応物を０℃から５℃で３０分間熟成した。完了後、該反応物をヘキサン（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）で反応を停止した。水層を除去し、有機層をＮａ２ＳＯ４で３０分間乾燥させた。溶媒を真空下で除去して、黄色油状物（１６）を得た。不純物を最小限に抑えるためには、ラクタムのアルキル化の前にメシラートを新たに調製すべきであった。
【実施例１】
【０１０２】
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル
【０１０３】
【化２０】
2006520758.tif 000020
ＴＨＦ（１３０ｍＬ）に溶かしたホスホン酸ナトリウム１４（１３．７ｇ、４５．７ｍｍｏｌ、１．４当量）の溶液に、窒素下において０℃でＺｎＣｌ２（３．３３ｇ、２４．５ｍｍｏｌ、０．７５当量）を添加した。得られた混合物を室温で１５分間撹拌し、次にＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶かしたアルデヒド１０（９．７ｇ、３２．６６ｍｍｏｌ、１当量）の溶液で処理した。次に、得られた懸濁液を５０℃で５０時間加熱し、この時点で９４％から９７％の変換が認められた。次に、該混合物を約３分の１の量まで濃縮して、ＥｔＯＡｃ（１３０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）及び食塩水で洗浄した。その後、該有機層をＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して濃縮して、黄色油状物（１１）を得た。これはＳｉＯ２ゲルフラッシュクロマトグラフィー（トルエン：アセトン１９：１→９：１）によって精製することができる。
【実施例２】
【０１０４】
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタノエート
【０１０５】
【化２１】
2006520758.tif 000021
無水ＰｈＣＨ３又はジクロロメタン（ＤＣＭ）０．５Ｍ／約４．５ｍＬ／ｇに溶かしたエノン（４５０ｍｇ、１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、Ｎ２雰囲気下で、Ｅｔ３Ｎ（０．１４ｍＬ、１ｍｍｏｌ、１．０当量）及びＨＣＯ２Ｈ（０．０５ｍＬ、１，２ｍｍｏｌ、１．２当量）を室温（ＲＴ）で添加した。得られた溶液を１０分間撹拌して、次いで固形（Ｒ，Ｒ）−（−）−Ｒｕ−ＴｓＤＰＥＮ−シメン複合体１（１９ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ、０．０３当量）で同時に処理した。次に、該反応混合物をＲＴで２時間熟成させ、この時点で開始物質の完全な消費が認められた。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル−ＭＴＢＥ（５ｍＬ）を添加し、次に１Ｎ  ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加した。該有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ３、食塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して、真空下で濃縮し、最終化合物を粘稠な油状物として得た。
【０１０６】
触媒はまた、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）に溶かしたＫＯｔＢｕ  １Ｍ溶液０．０４モル当量の存在下で、ＤＣＭ（ジクロロメタン）中で［ＲｕＣｌ２（ｐ−シメン）２］０．０２モル当量及び（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−トシル−１，２−ジフェニルエチレン−１，２−ジアミン０．０４モル当量を混合することによって、原位置で発生させることができる。ＲＴで１０分間熟成後、Ｅｔ３Ｎを添加し、その後ＨＣＯ２Ｈ及びエノンのＤＣＭ溶液を添加した。）
該触媒は、ＰｒＯＨ中で、［ＲｕＣｌ２（ｐ−シメン）２］１モル当量、（Ｒ，Ｒ）−Ｎ−トシル−１，２−ジフェニルエチレン−１，２−ジアミン２モル当量及びＥｔ３Ｎ  ４．２モル当量を８０℃で１ｈ（時間）混合することによって調製した。溶媒を除去した後、固形物を冷Ｈ２Ｏで洗浄して、ＭｅＯＨで再結晶化して、該触媒をオレンジ色の固形物として得た。
【実施例３】
【０１０７】
７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸
【０１０８】
【化２２】
2006520758.tif 000022
段階１：７−［（２Ｒ）−２−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−６−オキソピペリジン−１−イル］ヘプタン酸イソプロピル
【０１０９】
【化２３】
2006520758.tif 000023
ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）１２ｍＬに溶かした７（１．０ｇ、４．１ｍｍｏｌ、文献の方法に従って７段階で合成、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９９８、１１４１〜１１４４）の溶液に、６０％水素化ナトリウム（１７２ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を５０℃で３０分間撹拌して、その後イソプロピル−７−ヨードヘプタノエート１７（１．９ｇ、１．６ｍＬ、８．２ｍｍｏｌ）及びヨウ化テトラブチルアンモニウム（５０ｍｇ）を添加した。該溶液を５０℃で一晩撹拌して、その後室温まで冷却して、飽和塩化アンモニウム水溶液にゆっくり注ぎ、エーテルで抽出した。次に、有機層を一緒にして、Ｈ２Ｏ、食塩水で連続的に洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、濾過して真空中で濃縮した。該化合物をフラッシュクロマトグラフィーで酢酸エチル／ヘキサン７５％から１００％を使用して精製して、９を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ４．９５（ｍ、１Ｈ）、３．７５（ｍ、３Ｈ）、３．５０（ｍ、１Ｈ）２．９７（ｍ、１Ｈ）、２．２５（２ｔ、４Ｈ）、２．００（ｍ、１Ｈ）、１．９３（ｍ、１Ｈ）、１．８２（ｍ、１Ｈ）、１．７０〜１．５６（ｍ、４Ｈ）、１．５２（ｍ、１Ｈ）、１．４０〜１．２８（ｍ、４Ｈ）、１．２２（２ｓ、６Ｈ）、０．９３（ｓ、９Ｈ）、０．１１（ｓ、６Ｈ）。
【０１１０】
段階２：７−［（２Ｒ）−２−（ヒドロキシメチル）−６−オキソピペリジン−１−イル］ヘプタン酸イソプロピル
【０１１１】
【化２４】
2006520758.tif 000024
８（０．８０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の１０ｍＬ溶液に、ＴＢＡＦ−フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦに溶かした１Ｍ溶液０．２５ｍＬ）を室温で添加し、１８時間撹拌した。次に、該溶液を飽和（ｓａｔｄ．）ＮａＨＣＯ３で反応停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層を一緒にして、水次いで食塩水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して、真空中で濃縮して、９を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ４．９５（ｍ、６Ｈ）、３．９７（ｔ、１Ｈ、ＯＨ）、３．７６（ｍ、１Ｈ）、３．６６（ｍ、２Ｈ）、３．４８（ｍ、１Ｈ）、２．９８（ｍ、１Ｈ）、２．２４（ｍ、４Ｈ）、２．０８（ｍ、１Ｈ）、１．９０（ｍ、１Ｈ）、１．７９（ｍ、１Ｈ）、１．７０〜１．５６（ｍ、４Ｈ）、１．５０（ｍ、１Ｈ）、１．４０〜１．２７（ｍ、４Ｈ）、１．２２（２ｓ、６Ｈ）。
【０１１２】
段階３：７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル
【０１１３】
【化２５】
2006520758.tif 000025
Ｎ２（ｇ）でパージしたフラスコに、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）を添加し、次いでジメチルスルホキシド（０．１１５ｇ、０．１０ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）を添加した。次に、該溶液を−７８℃まで冷却して、激しく撹拌しながら塩化オキサリル（０．１７ｇ、０．１２ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）を滴下した。３０分後、ＣＨ２ＣＬ２  ５ｍＬに溶かした９（０．３５ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液をカニューレによって添加した。さらに３０分間、−７８℃で撹拌を継続した。トリエチルアミン（０．３１ｇ、０．４３ｍＬ、３．１ｍｍｏｌ）を滴下し、１５分撹拌した後、槽を使用せずに真空中で濃縮した。ジエチルエーテル／酢酸エチル１：１の溶液（１００ｍＬ）を使用して、トリエチルアミン塩を濾過し、該溶液を真空中で濃縮した。次に、粗アルデヒド１０をＴＨＦ５ｍＬで希釈して、ＴＨＦ１５ｍＬに溶かし予め１時間混合した（２−オキソ−３−フェニル−プロピル）−ホスホン酸ジメチルエステル（０．３４ｇ、１．４ｍｍｏｌ）及び６０％水素化ナトリウム（５２ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で添加した。塩化亜鉛（ＴＨＦに溶かした１Ｍ溶液ｘｍＬを添加した）及び該反応混合物を一晩５０℃で撹拌した。該溶液を塩化アンモニウム飽和水溶液で反応停止し、酢酸エチルで抽出した。次に、有機相を一緒にして、Ｈ２Ｏ、食塩水で連続的に洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、濾過して、真空中で濃縮した。該化合物は、フラッシュクロマトグラフィーで５０％から８０％の酢酸エチル／ヘキサンを使用して精製して、１１を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ｍＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ７．６５〜７．５５（ｍ、５Ｈ）、７．１１（ｄｄ、１Ｈ）、６．６７（ｄ、１Ｈ）、４．９５（ｍ、１Ｈ）、４．４０（ｍ、１Ｈ）、３．７８（ｍ、１Ｈ）、２．６０（ｍ、１Ｈ）、２．２５（ｍ、４Ｈ）、２．０２（ｍ、１Ｈ）、１．９０（ｍ、１Ｈ）、１．６８（ｍ、２Ｈ）、１．５３〜１．３６（ｍ、４Ｈ）、１．３５〜１．１７（ｍ、１０Ｈ）。
【０１１４】
段階４：７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸イソプロピル
【０１１５】
【化２６】
2006520758.tif 000026
Ａ．トルエン中におけるブチル−（Ｓ）−ＣＢＳの合成：トルエン（１１０ｍＬ）に溶かした（Ｓ）−ＣＢＳリガンド（１１．５３ｇ、４５．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ブチルボロン酸（５．１ｇ、４７．８ｍｍｏｌ）を添加し、該混合物をディーンスタークで還流させて一晩加熱した。この最終溶液は０．４８Ｍで、直接使用した。
【０１１６】
Ｂ．還元：トルエン（４００ｍＬ）に溶かし、−７８℃まで冷却したカテコールボラン（３．３５ｍＬ、３１．４ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で（Ｓ）−２−ブチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジン溶液６８ｍＬ（３２．６ｍｍｏｌ）を添加し、該混合物を室温で１時間（ｈ）撹拌した。トルエン（４２０ｍＬ）に溶かしたケトン１１（７ｇ、１５．６ｍｍｏｌ）を窒素下で１時間かけて滴下し、開始物質が全て消失するまで（通常３０分）室温で該混合物を撹拌した。次に、該混合物に１Ｎ  ＨＣｌ  ２００ｍＬを添加して、該混合物を激しく撹拌しながら室温まで温めた。該混合物を酢酸エチルで抽出した（抽出中にエマルジョンが生じたので、該懸濁液をセライトで濾過してエマルジョンを除去した）。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。ＥＡ／ヘキサン（７０〜１００％）で溶出すると所望するアルコールが２種類のジアステレオマーの１２：１比の混合物として得られた。該混合物は、キラルＰａｋ  ＡＤ（登録商標）カラムを使用した調製用ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）によって、溶出液としてｉＰｒＯＨの５０％ヘキサン溶液を使用して容易に分離された（λ２１４ｍｍでモニターした）。所望しない異性体が最初に溶出し、その後所望する異性体１２が溶出した。
【０１１７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ７．６〜７．５（ｍ、２Ｈ）、７．５〜７．４（ｍ、３Ｈ）、５．８０（ｄｄ、１Ｈ）、５．６（ｄｄ、１Ｈ）、５．０〜４．９（ｍ、２Ｈ）、４．７〜４．６（ｍ、１Ｈ）、４．１〜４．０（ｍ、１Ｈ）、３．８〜３．７（ｍ、１Ｈ）、２．６〜２．５（ｍ、１Ｈ）、２．３〜２．２（ｍ、４Ｈ）、１．９〜１．８（ｍ、１Ｈ）、１．７５〜１．５５（ｍ、５Ｈ）、１．５５〜１．４（ｍ、２Ｈ）、１．４〜１．２２（ｍ、４Ｈ）、１．２２（ｄ、６Ｈ）。
【０１１８】
段階５：７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸
【０１１９】
【化２７】
2006520758.tif 000027
ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：水２．５：２．５：１、２．７５ｍＬに溶かした１２（３９ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で水酸化リチウム（２Ｍ水溶液１４５μＬ）を添加し、得られた溶液を室温まで温め、一晩撹拌した。該溶液に、ＨＣｌの１Ｍ水溶液（１ｍＬ）を添加し、該溶液を酢酸エチルで抽出した。次に、有機層を一緒にして、食塩水で連続的に洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して真空中で濃縮した。該混合物は、フラッシュクロマトグラフィーによって、ＣＨ２Ｃｌ２／メタノール／酢酸４９〜４５％／１〜５％／１滴を使用して精製し、１８を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ７．６〜７．５（ｍ、５Ｈ）、５．８（ｄｄ、１Ｈ）、５．６（ｄｄ、１Ｈ）、５．６（ｂｓ、１Ｈ）、４．６（ｍ、１Ｈ）、４．１（ｍ、１Ｈ）、３．７（ｍ、１Ｈ）、２．６（ｍ、１Ｈ）、２．４〜２．２（ｍ、４Ｈ）、１．９〜１．２（ｍ、１２Ｈ）。
【０１２０】
以下の実施例４から１３は、適切な変更を加えて実施例１〜３に従って生成することができる。
【実施例４】
【０１２１】
７−｛（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−４−（３−ブロモフェニル）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブチル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４９０．１（Ｍ＋１）＋。
【０１２２】
【化２８】
2006520758.tif 000028
【実施例５】
【０１２３】
７−｛［（２Ｒ）−２−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝ヘプタン酸
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨＺ、ＣＤ３ＯＤ）：δ７．３−７．１（Ｍ、５Ｈ）、３．８〜３．７（Ｍ、２Ｈ）、３．４（Ｍ、１Ｈ）、２．９〜２．７（Ｍ、３Ｈ）、２．３（Ｍ、４Ｈ）、１．９〜１．３（Ｍ、１６Ｈ）；ＭＳ（−ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ３７４．２（Ｍ−１）−。
【０１２４】
【化２９】
2006520758.tif 000029
【実施例６】
【０１２５】
５−｛３−［（２Ｒ）−２−［（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル］−６−オキソ−ピペリジン−１−イル｝−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸メチル
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ７．６（ｄ、１Ｈ）、７．２〜７．１（ｍ、５Ｈ）、６．７（ｄ、１Ｈ）、５．５（ｍ、２Ｈ）、４．３（ｍ、１Ｈ）、３．８〜３．７（ｍ、２Ｈ）、３．８（ｓ、３Ｈ）、２．８〜２．６（ｍ、６Ｈ）、２．３〜２．２（ｍ、２Ｈ）、１．９〜１．２（ｍ、６Ｈ）。
【０１２６】
【化３０】
2006520758.tif 000030
【実施例７】
【０１２７】
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（１Ｅ）−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨＺ、ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６（Ｄ、１Ｈ）、７．２〜７．１（Ｍ、５Ｈ）、６．９（Ｄ、１Ｈ）、５．５（Ｍ、２Ｈ）、４．３（Ｍ、１Ｈ）、３．９（Ｍ、１Ｈ）、３．７（Ｍ、１Ｈ）、２．９〜２．６（Ｍ、５Ｈ）、２．２（Ｍ、２Ｈ）、１．〜１．５（Ｍ、６Ｈ）；ＭＳ（−ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４１２．１（Ｍ−１）−。
【０１２８】
【化３１】
2006520758.tif 000031
【実施例８】
【０１２９】
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨＺ、ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６（Ｄ、１Ｈ）、７．３〜７．１（Ｍ、５Ｈ）、６．９（Ｄ、１Ｈ）、３．８（Ｍ、２Ｈ）、３．４（Ｍ、１Ｈ）、３．０〜２．９（Ｍ、１Ｈ）、２．８〜２．５（Ｍ、４Ｈ）、２．３（Ｍ、２Ｈ）、２．０〜１．３（Ｍ、１０Ｈ）；ＭＳ（−ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４１４．１（Ｍ−１）−。
【０１３０】
【化３２】
2006520758.tif 000032
【実施例９】
【０１３１】
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（１Ｅ）−（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブト−１−エニル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ７．６（ｄ、１Ｈ）、７．３〜７．１（ｍ、５Ｈ）、６．８（ｄ、１Ｈ）、５．５（ｍ、２Ｈ）、５．１（ｍ、１Ｈ）、４．４（ｍ、１Ｈ）、３．９〜３．８（ｍ、２Ｈ）、３．３（ｂｒｓ、１Ｈ）、２．８（ｍ、４Ｈ）、２．７（ｍ、１Ｈ）、２．３（ｍ、２Ｈ）、１．９〜１．６（ｍ、６Ｈ）、１．３（ｄｄ、６Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４５６．４（Ｍ＋１）＋。
【０１３２】
【化３３】
2006520758.tif 000033
【実施例１０】
【０１３３】
５−｛３−［（２Ｒ）−２−（（３Ｓ）３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル）−６−オキソ−ピペリジン−１−イル］−プロピル｝−チオフェン−２−カルボン酸イソプロピル
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ７．６（ｄ、１Ｈ）、７．３〜７．１（ｍ、５Ｈ）、６．８（ｄ、１Ｈ）、５．２（ｍ、１Ｈ）、３．９〜３．８（ｍ、２Ｈ）、３．３（ｍ、１Ｈ）、２．９〜２．８（ｍ、４Ｈ）、２．７〜２．６（ｍ、１Ｈ）、２．４〜２．３（ｍ、３Ｈ）、２．０〜１．２（ｍ、１０Ｈ）、１．３（ｄ、６Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４５８．２（Ｍ＋１）＋。
【０１３４】
【化３４】
2006520758.tif 000034
【実施例１１】
【０１３５】
６−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニル−ブチル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）−ヘキシル］−ピペリジン−２−オン
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）：δ７．３〜７．１（ｍ、５Ｈ）、３．８〜３．７（ｍ、２Ｈ）、３．３（ｍ、１Ｈ）、２．９〜２．７（ｍ、５Ｈ）、２．３（ｍ、２Ｈ）、１．９〜１．３（ｍ、１６Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４００．３（Ｍ＋１）＋。
【０１３６】
【化３５】
2006520758.tif 000035
【実施例１２】
【０１３７】
（５Ｚ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸イソプロピル
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４５０．３（Ｍ＋１）＋。
【０１３８】
【化３６】
2006520758.tif 000036
【実施例１３】
【０１３９】
（５Ｚ）−７−｛（２Ｒ）−２−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−６−オキソピペリジン−１−イル｝ヘプト−５−エン酸
ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４０６．１（Ｍ−１）−。
【０１４０】
【化３７】
2006520758.tif 000037
【実施例１４】
【０１４１】
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル
ＭＳ（＋ＥＳＩ）：Ｍ／Ｚ４５４（Ｍ＋１）＋。
【０１４２】
【化３８】
2006520758.tif 000038
【０１４３】
段階１
（４Ｓ）−４−［２−（４−メトキシフェノキシ）エチル］−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソランの調製
ＴＨＦに溶かした２−［（４Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル］エタノール（Ａｌｄｒｉｃｈ、５ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ナトリウム６０％（１．５０４ｇ、３７．６ｍｍｏｌ、１．１当量）を小分けして添加し、該混合物を１時間撹拌した（不透明な溶液）。該混合物を０℃まで冷却して、該混合物に４−メトキシベンジルクロリド（５．８９ｇ、３７．６ｍｍｏｌ、１．１当量（ｅｑ．））を１回で添加し、該混合物を室温で３０分間撹拌して、６５℃から７０℃で一晩加熱した。室温まで冷却した後、飽和ＮＨ４Ｃｌ／水で反応停止し、該混合物を酢酸エチル（２ｘ）で抽出して、有機抽出物を水、食塩水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥した。該混合物を濾過して、濾液を真空中で濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、所望する生成物を無色油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ７．２８（２Ｈ、ｄ）、６．９３〜６．９１（２Ｈ、ｍ）、４．４３（２Ｈ、ｓ）、４．２０〜４．１４（１Ｈ、ｍ）、４．０４〜３．９８（１Ｈ、ｍ）、３．８０（３Ｈ、ｓ）、３．５６〜３．５０（３Ｈ、ｍ）、１．８８〜１．７６（２Ｈ、ｍ）、１．３１（３Ｈ、ｓ）、１．２８（３Ｈ、ｓ）。
【０１４４】
段階２
（２Ｓ）−４−（４−メトキシフェノキシ）ブタン−１，２−ジオールの調製
ＡｃＯＨ／水に溶かした（４Ｓ）−４−［２−（４−メトキシフェノキシ）エチル］−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン（８．２ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）の溶液をｒｔで５時間撹拌して、真空中で濃縮した。残渣をトルエン（３ｘ）と共に留去して、次に高い真空状態下で吸引すると所望する生成物が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ７．２８（２Ｈ、ｄ）、６．９１（２Ｈ、ｄ）、４．４３（２Ｈ、ｓ）、３．８０（３Ｈ、ｓ）、３．７７（１Ｈ、ｍ）、３．６６〜３．４２（５Ｈ、ｍ）、１．８６〜１．７６（１Ｈ、ｍ）、１．６８〜１．６０（１Ｈ、ｍ）。
【０１４５】
段階３
（１Ｓ）−１−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−３−（４−メトキシフェノキシ）プロピルメタンスルホネート
ＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶かした（２Ｓ）−４−（４−メトキシフェノキシ）ブタン−１，２−ジオール（７ｇ、３０．９ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（４．２１ｇ）の溶液に、ｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（４．８８ｇ、３２．４ｍｍｏｌ、１．０５当量）を０℃で１回で添加し、該混合物を室温で１時間撹拌して、水／エーテルで希釈した。層を分離して、水層をエーテル（２ｘ）で抽出した。抽出物を一緒にして、水、食塩水で洗浄して、乾燥して濾過した。濾液を真空中で濃縮して、粗生成物（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−（４−メトキシフェノキシ）ブタン−２−オール１０．８ｇを無色油状物として得た。粗生成物のＮＭＲによって、該生成物は純度が９５％を上回ることが示されたので、生成せずに直接使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）δ７．２８（２Ｈ、ｄ）、６．９２〜６．９０（２Ｈ、ｍ）、４．４３（２Ｈ、ｓ）、３．８０（３Ｈ、ｓ）、３．７５（１Ｈ、ｍ）、３．６７〜３．５１（５Ｈ、ｍ）、１．８９〜１．８１（１Ｈ、ｍ）、１．６６〜１．５８（１Ｈ、ｍ）、０．９１（ｓ、９Ｈ）、０．０９（ｓ、６Ｈ）。
【０１４６】
ジクロロメタン（ＤＣＭ）（５０ｍＬ）に溶かした（２Ｓ）−１−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−４−（４−メトキシフェノキシ）ブタン−２−オール（１０．５ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）の溶液に０℃でトリエチルアミン（６．５ｍＬ）次いでＭｓＣｌ（２．９ｍＬ）を滴下し、該混合物（淡黄色懸濁物）を１時間撹拌して、水で反応を停止した。層を分離して、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥した。該混合物を濾過して、濾液を真空中で濃縮して、所望するメタンスルホネートを得た。１ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ７．２９（２Ｈ、ｄ）、６．９１（２Ｈ、ｄ）、４．８４〜４．７８（１Ｈ、ｍ）、４．４９〜４．４１（２Ｈ、ｍ）、３．９０（１Ｈ、ｄｄ）、３．８４（１Ｈ、ｄｄ）、３．８０（３Ｈ、ｓ）、３．６２〜３．５４（２Ｈ、ｍ）、３．０９（３Ｈ、ｓ）、２．０４〜１．９０（２Ｈ、ｍ）、０．９１（ｓ、９Ｈ）、０．１２〜０．０６（６Ｈ、ｍ）。
【０１４７】
段階４
｛［（２Ｒ）−２−アジド−４−（４−メトキシフェノキシ）ブチル］オキシ｝（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシランの調製
ＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶かした（１Ｓ）−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−３−（４−メトキシフェノキシ）プロピルメタンスルホネート（１３ｇ）及びＮａＮ３（１０ｇ）の溶液をＮ２下において６０℃から７０℃でｏ／ｎで加熱して、ｒｔまで冷却した。該混合物をエーテル／水で希釈して、エーテル（３ｘ）で抽出した。エーテル抽出物を水、食塩水で洗浄して、その後通常通り処理した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、所望するアジド生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ７．２９（２Ｈ、ｄ）、６．９２（２Ｈ、ｄ）、４．４５（２Ｈ、ｓ）、３．８７（１Ｈ、ｄｄ）、３．８０（３Ｈ、ｓ）、３．７０〜３．５４（４Ｈ、ｍ）、１．８５〜１．７７（１Ｈ、ｍ）、１．６８〜１．６０（１Ｈ、ｍ）、０．９３（９Ｈ、ｓ）、０．１１（６Ｈ、ｓ）。
【０１４８】
段階５
（３Ｒ）−３−アミノ−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ブタン−１−オールの調製
ＤＣＭ／水１９：１に溶かした｛［（２Ｒ）−２−アジド−４−（４−メトキシフェノキシ）ブチル］オキシ｝（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシリル（４．７ｇ、１２．８６ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＤＤＱ（２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン）（３．５ｇ、１５．４３ｍｍｏｌ、１．２当量）添加し、開始物質が全て消失したことがＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）分析で示されるまで該混合物を撹拌した（０℃からｒｔまで）。次に、ＤＣＭのほとんどを真空中で除去し、残渣を酢酸エチルに溶解した。淡黄色の有機溶液が得られるまで、該酢酸エチル溶液を水及び飽和ＮａＨＣＯ３で繰り返し洗浄した。該有機溶液を乾燥し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（５％アセトン／トルエン）で精製して、所望する生成物（３Ｒ）−３−アジド−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ブタン−１−オールを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ３．８９（１Ｈ、ｄｄ）、３．７３〜３．６５（５Ｈ、ｍ）、１．７６〜１．６８（１Ｈ、ｍ）、１．６２〜１．５４（１Ｈ、ｍ）、０．９４（９Ｈ、ｓ）、０．１３（６Ｈ、ｓ）。
【０１４９】
エタノール（５０ｍＬ）に溶かした（３Ｒ）−３−アジド−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ブタン−１−オール（２．９４ｇ）及びリンドラー触媒（５％Ｐｄ／ＣａＣＯ３、１．２７ｇ）の混合物を５１ｐｓｉＨ２で３．５時間水素化して、濾過した。濾液を濃縮して、粗生成物（３Ｒ）−３−アミノ−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ブタン−１−オールを良好な純度で得た。１ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）：３．８５（２Ｈ、ｔ）、３．５４（１Ｈ、ｄｄ）、３．４２（１Ｈ、ｄｄ）、３．０３〜２．９７（１Ｈ、ｍ）、２．４４（３Ｈ、ｂｒｓ）、１．６４〜１．５２（２Ｈ、ｍ）、０．９２（９Ｈ、ｓ）、０．０８（６Ｈ、ｓ）。
【０１５０】
段階６
（４Ｒ）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−１，３−オキサジナン−２−オンの調製
ＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶かした（３Ｒ）−３−アミノ−４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝ブタン−１−オール（２．６３ｇ、１２ｍｍｏｌ）の溶液に０℃でピリジン（３ｍＬ）次いでホスゲン（２０％トルエン溶液、１．９Ｍ、８．５ｍＬ）を滴下し、該混合物を３０分撹拌し、ｒｔまで加温して、水で反応を停止した。層を分離して、水層をＤＣＭで１回抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥して、濾過して濃縮した。所望する生成物（４Ｒ）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−１，３−オキサジナン−２−オンは、エーテル／ヘキサンから−２０℃で結晶化することによって淡黄色固形物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）５．５２（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．３８〜４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．２８〜４．２２（ｍ、１Ｈ）、３．７０〜３．５９（ｍ、２Ｈ）、３．４６（ｔ、１Ｈ）、１．９７〜１．９３（ｍ、１Ｈ）、１．７２〜１．６７（ｍ、１Ｈ）、０．９１（ｓ、９Ｈ）、０．９０（ｓ、６Ｈ）。
【０１５１】
段階７
７−［（４Ｒ）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル］ヘプタン酸イソプロピルの調製
ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶かした（４Ｒ）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−１，３−オキサジナン−２−オン（０．５１ｇ、２．０７８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下においてｒｔでＫＨＭＤＳ（０．５Ｍトルエン溶液、５ｍＬ）を滴下し（ゲル様沈殿の形成）、該混合物を１０分間撹拌した。次に、イソプロピル７−ヨードヘプタノエート（１．２４ｇ、４．１６ｍｍｏｌ、２当量）を１回で添加し、該混合物を６５℃でさらに５時間撹拌し、ｒｔまで冷却して、水／エーテルで希釈した。層を分離して、水性層をエーテルで抽出した。有機層を一緒にして、水及び食塩水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥して濾過した。濾液を真空中で濃縮して、残渣をカラムクロマトグラフィー（１５〜３０％アセトン／トルエン）によって精製して、所望する生成物イソプロピル７−［（４Ｒ）−４−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル］ヘプタノエートを無色油状物として得た。１ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ４．９８〜４．９０（１Ｈ、ｍ）、４．３８〜４．３０（１Ｈ、ｍ）、４．１６〜４．１２（１Ｈ、ｍ）、３．８３〜３．７７（２Ｈ、ｍ）、３．５６〜３．４８（２Ｈ、ｍ）、３．１５〜３．０７（１Ｈ、ｍ）、２．２６（２Ｈ、ｔ）、２．１１〜２．０９（２Ｈ、ｍ）、１．６９〜１．５３（４Ｈ、ｍ）、１．４１〜１．２７（４Ｈ、ｍ）、１．２１（６Ｈ、ｄ）、０．９２（９Ｈ、ｓ）、０．１２（６Ｈ、ｓ）。
【０１５２】
このようにして得られた生成物（０．６ｇ、１．４４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、ＡｃＯＨ（０．０６ｍＬ）及びＴＢＡＦ（１Ｍ  ＨＴＦ溶液、２．９ｍＬ）を添加し、該混合物をｒｔで３０分間撹拌して、次いで濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（３０〜５０％アセトン／トルエン）で精製して、所望する生成物イソプロピル７−［（４Ｒ）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル］ヘプタノエートを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン−ｄ６）：δ５．００〜４．９０（１Ｈ、ｍ）、４．３７〜４．３１（１Ｈ、ｍ）、４．１６〜４．１０（２Ｈ、ｍ）、３．７５〜３．６５（２Ｈ、ｍ）、３．５４〜３．４６（２Ｈ、ｍ）、３．１５〜３．０７（１Ｈ、ｍ）、２．２６（２Ｈ、ｔ）、２．１８〜１．９９（２Ｈ、ｍ）、１．６７〜１．５２（４Ｈ、ｍ）、１．４１〜１．２７（４Ｈ、ｍ）、１．２１（６Ｈ、ｄ、Ｊ＝６．２Ｈｚ）。
【０１５３】
段階８
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピルの調製
Ａ：アルコールの酸化：ＤＣＭ（５ｍＬ）に溶かしたＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）（１１３μＬ、１．５９２ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液に、−７８℃で塩化オキサリル（１２８μＬ、１．４６ｍｍｏｌ、１．１当量）を滴下し、該混合物を室温で１５分間撹拌した。ＤＣＭ（３ｍＬ）に溶かした７−［（４Ｒ）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル］ヘプタン酸イソプロピル（４００ｍｇ、１．３２７ｍｍｏｌ）をカニューレによって添加し、該混合物をさらに１５分間撹拌した。次に、トリエチルアミン（４２９μＬ、３．０５ｍｍｏｌ、２．３当量）を１回で添加し、該混合物を−７８℃で３０分間撹拌して、０℃までゆっくり温め、真空中で濃縮した。該混合物を酢酸エチルに再懸濁して、濾過した。濾液を真空中で濃縮して、粗アルデヒド、７−［（４Ｒ）−４−ホルミル−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル］ヘプタン酸イソプロピルを良好な純度で得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ９．６９（１Ｈ、ｄ）、５．０４〜４．９６（１Ｈ、ｍ）、４．２９〜４．２３（１Ｈ、ｍ）、４．１６〜４．００（２Ｈ、ｍ）、３．７９〜３．７１（１Ｈ、ｍ）、３．０２〜２．９４（１Ｈ、ｍ）、２．３０〜２．２４（４Ｈ、ｍ）、１．６６〜１．５８（４Ｈ、ｍ）、１．４２〜１．２８（４Ｈ、ｍ）、１．２４（６Ｈ、ｄ）。
【０１５４】
Ｂ：ジメチル（３，３−ジフルオロ−２−オキソ−３−フェニルプロピル）ホスホネートのナトリウム塩の調製：エーテル（５０ｍＬ）に溶かしたジメチル３，３−ジフルオロ−２−オキソ−３−フェニルプロピル）ホスホネート（５．２４ｇ、１８．８４ｍｍｏｌ）の溶液に、ｒｔで水素化ナトリウム（６０％油分散液、７９１ｍｇ、１９．７８ｍｍｏｌ、１．０５当量）を少量ずつ添加し、白色懸濁液をｒｔで１時間撹拌した。該混合物を濾過して、白色固形物をエーテル／ヘキサンで洗浄した。こうして得られた固形物を高い真空下で乾燥して、白色粉末を得た。
【０１５５】
Ｃ：ホーナー−エモンズ−スミス反応：ＴＨＦ（３ｍＬ）に溶かした７−［（４Ｒ）−４−ホルミル−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル］ヘプタン酸イソプロピル（２０７ｍｇ、０．６９１ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化亜鉛（０．５ＭＴＨＦ溶液、１．５２ｍＬ、０．７６ｍｍｏｌ、１．１当量）次いでジメチル（３，３−ジフルオロ−２−オキソ−３−フェニルプロピル）ホスホネートのナトリウム塩（２７０ｍｇ、０．８９８ｍｍｏｌ、１．３当量）を固形物として添加し、該混合物を６０℃でｏ／ｎで加熱して、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（８０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、所望する生成物７−［（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピルを淡黄色の油状物として得た。ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４５２（Ｍ＋１）＋。
【０１５６】
段階９
化合物２９：７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル
トルエン（１ｍＬ）に溶かしたカテコールボラン（１０７ｍｇ）の溶液に、Ｎ２下において−７８℃で（Ｓ）−２−メチル−ＣＢＳ−オキサボロリジン（１Ｍトルエン溶液、０．８９ｍＬ）を添加し、該混合物をその温度で１時間撹拌した。トルエン（２ｍＬ）に溶かした７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸イソプロピル（２００ｍｇ）をカニューレによってゆっくり添加し、該混合物をさらに１時間撹拌して、１Ｎ  ＨＣｌで反応を停止した。該混合物を室温まで温めて、ＤＣＭ（ｘ２）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥して、濾過した。濾液を真空中で濃縮して、残渣をカラムクロマトグラフィー（８０〜１００％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、表題化合物を得た。ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４５４（Ｍ＋１）＋。
【実施例１５】
【０１５７】
７−｛（４Ｒ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エン−１−イル］−２−オキソ−１，３−オキサジナン−３−イル｝ヘプタン酸
ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４１０（Ｍ−Ｉ）−
【０１５８】
【化３９】
2006520758.tif 000039
イソプロピルエステル化合物２９を最初にメタノール／水に溶かしたＬｉＯＨの混合物で処理し、次いで１Ｎ  ＨＣｌで酸性化して、酢酸エチルで抽出して表題化合物を得た。ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４１０（Ｍ−１）−。
【０１５９】
Ｉ．ウサギ及びサルにおける眼圧（ＩＯＰ）に対するＥＰ４作動薬の影響
動物
薬剤未処理の雄のＤｕｔｃｈ  Ｂｅｌｔｅｄウサギ及び雌のカニクイザルをこの研究に使用した。この研究の動物の管理及び処置は、アメリカ国立衛生研究所（ＮＩＨ）の指針及び視覚眼科学研究協会（Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｖｉｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ）（ＡＲＶＯ）の決議に従う。実験方法は全て、Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙの所内動物管理使用委員会によって承認された。
【０１６０】
薬剤の調製及び投与
薬剤濃度は、活性成分（ベース）に関して表す。本発明の化合物は、ウサギ用には０．０１、０．００１、０．０００１％で、サル用には０．０５、０．００５％で生理食塩水に溶解する。薬剤及びビヒクルの一定分量（２５μｌ）を局所的に、片側又は両側に投与する。片側に適用する場合、反対側の目には同量の生理食塩水を与える。眼圧測定前にプロパラカイン（０．５％）を角膜に適用して、不快感を最小限に抑える。眼圧（ＩＯＰ）は、気道眼圧計（Ａｌｃｏｎ  Ａｐｐｌａｎａｔｉｏｎ  Ｐｎｅｕｍａｔｏｎｏｇｒａｐｈ）又は同等物を使用して記録する。
【０１６１】
分析
結果は、薬剤又はビヒクルを投与する直前に測定した基準レベルからのＩＯＰ変化として表し、平均±標準偏差で示す。統計的な比較は、薬物処理動物の応答とビヒクル処理動物の応答との非対データ、さらに比較可能な時間間隔での同じ側の眼と反対側の眼との対データに関するステューデントｔ検定を使用して行う。アスタリスクは、ｐ＜０．０５の有意水準を表す。
【０１６２】
Ａ．ウサギの眼圧測定
体重２．５ｋｇから４．０ｋｇのオスのＤｕｔｃｈ  Ｂｅｌｔｅｄウサギを、１２時間の明／暗サイクルで維持し、食餌を与える。全ての実験は、日周リズムに関係したばらつきを最小限に抑えるため、１日のうちの同じ時間で実施する。ＩＯＰを、処理前に測定し、次いで本発明の化合物またはビヒクルを、片眼または両眼に点眼し（１滴２５ｕｌ）、点眼後３０、６０、１２０、１８０、２４０、３００、および３６０分でＩＯＰを測定する。場合によっては、ビヒクルのみで両眼を処理した同じ数の動物について評価し、並行対照として、薬物処理した動物と比較する。
【０１６３】
Ｂ．サルの眼圧測定
Ｌｅｅ他の方法（１９８５）を使用した、アルゴンレーザシステム（Ｃｏｈｅｒｅｎｔ  ＮＯＶＵＳ  ２０００、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、ＵＳＡ）による小柱網の光凝固によって、体重２ｋｇから３ｋｇの雌のカニクイザルの右眼に片側高眼圧症を誘発させる。眼圧（ＩＯＰ）の増加が長引くことによって、緑内障患者に見られるものと同様の変化が視神経乳頭に生じる。
【０１６４】
ＩＯＰ測定では、実験期間中、サルを拘束イスに座らせた位置に保つ。各ＩＯＰ測定の約５分前に、塩酸ケタミンを筋肉内注射（３〜５ｍｇ／ｋｇ）することによって動物を軽く麻酔し、０．５％プロパラカインを１滴点眼した後に、ＩＯＰを記録した。ＩＯＰは、気動眼圧計（Ａｌｃｏｎ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｔｏｎｏｍｅｔｅｒ）又はＤｉｇｉｌａｂ気動眼圧計（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して測定する。
【０１６５】
ＩＯＰは、処理前と、一般的に処理後の３０、６０、１２４、１８０、３００及び３６０分で測定する。基準値はまた、一般的に処理の２日または３日前のこれらの時点で得る。処理は、本発明の化合物（０．０５および０．００５％）またはビヒクル（生理食塩水）の１滴２５ｕｌを点眼することから成る。同じ動物について試験をする前に、少なくとも１週間の洗出し期間を設ける。正常圧（高眼圧とは反対側）の目を、高眼圧の目と全く同じ手法で処理する。両眼に関するＩＯＰ測定値を、同じ時点での対応する基準値と比較する。結果は、平均±標準偏差としてｍｍＨｇで表す。眼科用としての本発明の化合物の活性範囲は、０．０１ｎＭから１０００００ｎＭの間である。
【０１６６】
ＩＩ．放射リガンド結合測定法：
これらの化合物の試験に使用される測定法は、本質的に、Ａｂｒａｍｏｖｉｔｚ  Ｍ、Ａｄａｍ  Ｍ、Ｂｏｉｅ  Ｙ、Ｃａｒｒｉｅｒｅ  Ｍ、Ｄｅｎｉｓ  Ｄ、Ｇｏｄｂｏｕｔ  Ｃ、Ｌａｍｏｎｔａｇｎｅ  Ｓ、Ｒｏｃｈｅｔｔｅ  Ｃ、Ｓａｗｙｅｒ  Ｎ、Ｔｒｅｍｂｌａｙ  ＮＭ、Ｂｅｌｌｅｙ  Ｍ、Ｇａｌｌａｎｔ  Ｍ、Ｄｕｆｒｅｓｎｅ  Ｃ、Ｇａｒｅａｕ  Ｙ、Ｒｕｅｌ  Ｒ、Ｊｕｔｅａｕ  Ｈ、Ｌａｂｅｌｌｅ  Ｍ、Ｏｕｉｍｅｔ  Ｎ、Ｍｅｔｔｅｒｓ  ＫＭ、「プロスタグランジン及び関連類縁体の親和性および選択性を決定するための、組換えプロスタノイド受容体の利用（Ｔｈｅ  ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｔｏ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  ｔｈｅ  ａｆｆｉｎｉｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  ｒｅｌａｔｅｄ  ａｎａｌｏｇｓ．）」、Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  ２０００年１月１７日；１４８３（２）：２８５〜２９３に記載されたように、また以下に論じるように、実施した。
【０１６７】
ヒト胚腎臓（ＨＥＫ）２９３（ＥＢＮＡ）細胞系におけるプロスタノイド受容体の安定発現
完全長コード配列に対応するプロスタノイド受容体（ＰＧ）ｃＤＮＡを、哺乳動物発現ベクターｐＣＥＰ４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の適切な部位にサブクローニングし、製造業者の取扱説明書に従い、Ｑｉａｇｅｎプラスミド調製キット（ＱＩＡＧＥＮ）を使用してｐＣＥＰ４ＰＧプラスミドＤＮＡを調製し、ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ）を使用してＨＥＫ２９３（ＥＢＮＡ）細胞にトランスフェクトした。ハイグロマイシン耐性遺伝子と共にｃＤＮＡを発現するＨＥＫ２９３（ＥＢＮＡ）細胞を、１０％熱不活性化ウシ胎児血清、ピルビン酸ナトリウム  １ｍＭ、ペニシリン−Ｇ  １００Ｕ／ｍｌ、硫酸ストレプトマイシン  １００μｇ／ｍｌ、活性ＧＥＮＥＴＩＣＩＮ（商標）（Ｇ４１８）２５０μｇ／ｍｌ（全てＬｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．／ＢＲＬから）、及びハイグロマイシン（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）２００μｇ／ｍｌを補ったダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）で選択した。個々のコロニーを、クローニングリング法を使用して選択した状態で２〜３週間増殖させた後に単離し、その後、クローン細胞系内に増殖させた。受容体ｃＤＮＡの発現を、受容体結合測定法によって評価した。
【０１６８】
ＨＥＫ２９３（ＥＢＮＡ）細胞を、空気中６％ＣＯ２の加湿雰囲気中３７℃で、補われたＤＭＥＭ完全培地で増殖させ、次いで収集し、様々な遠心分離（１０００×ｇ  １０分間、次いで１６００００×ｇ  ３０分間、全て４℃）の後に、プロテアーゼ阻害剤（フェニルメチルスルホニルフルオリド  ２ｍＭ、Ｅ−６４  １０μＭ、ロイペプチン  １００μＭ及びペプスタチン  ０．０５ｍｇ／ｍｌ）の存在下で氷上で３０分間、８００ｐｓｉで窒素キャビテーションを行うことにより細胞溶解することによって膜を調製した。１６００００×ｇペレットを、Ｄｏｕｎｃｅホモジナイゼーション（Ｄｏｕｎｃｅ  Ａ；１０ストローク）によって、ＥＤＴＡ  １ｍＭを含有する１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ７．４）にタンパク質約５〜１０ｍｇ／ｍｌで再懸濁し、液体窒素中で凍結させ、−８０℃で貯蔵した。
【０１６９】
プロスタノイド受容体結合測定法
プロスタノイド受容体結合測定法は、ＥＤＴＡ  １ｍＭ、ＭｇＣｌ２  １０ｍＭ（ＥＰサブタイプ）又はＭｎＣｌ２  １０ｍＭ（ＤＰ、ＦＰ、ＩＰ、およびＴＰ）および放射リガンド［ＥＰサブタイプでは０．５〜１．０ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＥ２（１８１Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ＤＰでは０．７ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＤ２（１１５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ＦＰでは０．９５ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＦ２α（１７０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ＩＰでは５ｎＭ［３Ｈ］イロプロスト（１６Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ＴＰでは１．８ｎＭ［３Ｈ］ＳＱ２９５４８（４６Ｃｉ／ｍｍｏｌ）］を含有する１０ｍＭ  ＭＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ６．０）（ＥＰサブタイプ、ＦＰおよびＴＰ）又は１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ７．４）（ＤＰ及びＩＰ）において、最終インキュベーション量０．２ｍｌで行った。ＥＰ３アッセイはまた、ＧＴＰγＳ  １００μＭを含有していた。反応は、１６００００ｘｇ画分からの膜タンパク質（ＥＰ１では約３０μｇ、ＥＰ２では約２０μｇ、ＥＰ３では約２μｇ、ＥＰ４では約１０μｇ、ＦＰでは約６０μｇ、ＤＰでは約３０μｇ、ＩＰでは約１０μｇ、及びＴＰでは約１０μｇ）を添加することによって開始した。リガンドをジメチルスルホキシド（Ｍｅ２ＳＯ）に添加し、これを全インキュベーションにおいて１％（ｖ／ｖ）で一定に保った。対応する非放射性プロスタノイド１μＭの存在下で、非特異的結合を測定した。インキュベーションを６０分間（ＥＰサブタイプ、ＦＰ及びＩＰ）または３０分間（ＤＰ及びＴＰ）、３０℃（ＥＰサブタイプ、ＤＰ、ＦＰ及びＴＰ）または室温（ＩＰ）で実施し、Ｔｏｍｅｃ  Ｍａｃｈ  ＩＩＩ  ９６ウェル半自動化細胞収集機を使用して、ＥＤＴＡを含まないインキュベーション緩衝液で事前に湿潤させた９６ウェルＵｎｉｆｉｌｔｅｒ  ＧＦ／Ｃ（Ｃａｎｂｅｒｒａ  Ｐａｃｋａｒｄ）に（４℃で）通して急速濾過して終了させた。フィルターを、同緩衝液３ｍｌから４ｍｌで洗浄し、５５℃で９０分間乾燥し、個々のフィルターに結合した残留放射能を、１４５０  ＭｉｃｒｏＢｅｔａ（Ｗａｌｌａｃ）を使用してＵｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ  Ｆ（Ｃａｎｂｅｒｒａ  Ｐａｃｋａｒｄ）５０μｌを添加してシンチレーションカウントすることにより決定した。全結合から非特異的結合を差し引くことによって、特異的結合を算出した。特異的結合は全結合の９０％から９５％を占め、使用した放射リガンドおよびタンパク質の濃度に対して直線的であった。全結合は、インキュベーション培地に加えられた放射リガンドの５〜１０％を占めた。
【０１７０】
骨に使用される本発明の化合物の活性範囲は、０．０１ｎＭから１０００００ｎＭの間である。
【０１７１】
骨吸収測定法：
１．動物の処置：
ｍＲＮＡ局在化測定法では、５週齢のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ）をＣＯ２で安楽死させ、その脛骨および頭蓋冠を切除し、軟組織を取り除いてすぐに液体窒素で凍結させる。ＥＰ４調節実験では、６週齢のラットに対し、ビヒクル（エタノールの７％滅菌水溶液）又はタンパク質同化用量のＰＧＥ２（Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ、ＭＩ）（同ビヒクル中３〜６ｍｇ／ｋｇ）を、腹腔内に１回注射する。動物は、注射後の複数の時点で安楽死させ、その脛骨及び頭蓋冠、並びに肺及び腎臓組織の試料を液体窒素中で凍結させる。
【０１７２】
２．細胞培養
４週齢のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの脛骨の骨膜細胞の初代培養から、ＲＰ−１骨膜細胞を自発的に不死化させ、１０％ウシ胎児血清（ＪＲＨ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｌｅｎｅｘａ、ＫＳ）を含むＤＭＥＭ（ＢＲＬ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）で培養する。これらの細胞は、初期の培養では骨芽細胞表現型マーカーを発現しないが、集密状態になると、Ｉ型コラーゲン、アルカリホスファターゼ、及びオステオカルシンを発現し、ミネラル化細胞外基質を生成する。
【０１７３】
ＲＣＴ−１及びＲＣＴ−３は、コラゲナーゼ／ヒアルロニダーゼ消化の組合せによってラット胎児頭蓋冠から放出された細胞のＳＶ−４０ラージＴ抗原により不死化されたクローン細胞系である。消化の最初の１０分間で放出された細胞から得られたＲＣＴ−１細胞（画分Ｉ）を、１０％ウシ胎児血清及びＧ４１８（ＢＲＬ）０．４ｍｇ／ｍｌを含むＲＰＭＩ  １６４０培地（ＢＲＬ）で培養する。これらの細胞は、レチノイン酸処理によって分化し、骨芽細胞としての特徴を発現する。骨芽細胞に富む画分ＩＩＩ細胞から不死化されたＲＣＴ−３細胞は、５％ウシ胎児血清およびＧ４１８  ０．４ｍｇ／ｍｌを含むＦ−１２培地（ＢＲＬ）で培養する。ＴＲＡＢ−１１細胞もまた、成体ラット脛骨のＳＶ４０大型Ｔ抗原によって不死化し、１０％ＦＢＳおよびＧ４１８  ０．４ｍｇ／ｍｌを含んだＲＰＭＩ  １６４０培地で培養する。ＲＯＳ１７／２．８ラットの骨肉腫細胞は、５％ＦＢＳを含有するＦ−１２で培養する。骨芽細胞に富む（画分ＩＩＩ）初代ラット胎児頭蓋冠細胞は、１９日齢ラット胎児の頭蓋冠をコラゲナーゼ／ヒアルロニダーゼで消化することによって得られる。その全体を本明細書に参考として援用するＲｏｄａｎ他、「酸性ＦＧＦによるラット頭蓋冠骨芽細胞の増殖刺激（Ｇｒｏｗｔｈ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒａｔ  ｃａｌｖａｒｉａ  ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ａｃｉｄｉｃ  ＦＧＦ、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）」、１２１、１９１９〜１９２３（１９８７）を参照されたい。細胞は、３０〜５０分の消化で放出され（画分ＩＩＩ）、５％ＦＢＳを含有するＦ−１２培地で培養する。
【０１７４】
１０％ＦＢＳを含むイーグルＭＥＭで培養したＰ８１５（マウス肥満細胞腫）細胞及び１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭで培養したＮＲＫ（正常なラットの腎線維芽細胞）細胞それぞれを、ＥＰ４発現の陽性対照及び陰性対照として使用する。いずれもその全体を本明細書に参考として援用する、Ａｂｒａｍｏｖｉｔｚ他、「ヒトプロスタノイド受容体：クローニング及び特徴付け（Ｈｕｍａｎ  ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｃｌｏｎｉｎｇ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｎ）」：Ｓａｍｕｌｅｓｓｏｎ  Ｂ．他編）「プロスタグランジンの発達（Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ）」、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｚｎｅｓ  ａｎｄ  ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ  ｒｅｓｅａｒｃｈ、ｖｏｌ．２３、第４９９〜５０４頁（１９９５）、及びｄｅ  Ｌａｒｃｏ他、「上皮性及び繊維芽細胞性ラット腎細胞クローン：ＥＧＦ受容体及びマウス肉腫ウイルス形質転換の影響（Ｅｐｉｔｈｅｌｉｏｉｄ  ａｎｄ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｉｃ  ｒａｔ  ｋｉｄｎｅｙ  ｃｅｌｌ  ｃｌｏｎｅｓ：ＥＧＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｍｏｕｓｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ）」Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、９４、３３５〜３４２（１９７８）を参照されたい。
【０１７５】
３．ノザンブロット分析
凍結した骨試料を組織ホモジナイザによって微粉砕した後、イソチオシアン酸グアニジニウム−フェノール−クロロホルム法を使用して、脛骨の骨幹端又は骨幹及び頭蓋冠から全ＲＮＡを抽出する。その全体を本明細書に参考として援用する、Ｐ．Ｃｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉ他、「酸チオシアネートグアニジウム−フェノール−クロロホルム抽出によるＲＮＡの１段階精製法（Ｓｉｎｇｌｅ−ｓｔｅｐ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ＲＮＡ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａｃｉｄ  ｇｕａｎｉｄｉｕｍ  ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ−ｐｈｅｎｏｌ−ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ  ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．）」、Ａｎａｌｙｔ  Ｂｉｏｃｈｅｍ、１６２、１５６〜１５９（１９８７）を参照されたい。０．９％アガロース／ホルムアルデヒドゲル上でＲＮＡ試料（２０ｍｇ）を分離し、ナイロン膜（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ、ドイツ）に移す。膜を、Ｈｙｂｒｉｓｏｌ  Ｉ（Ｏｎｃｏｒ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）及び超音波処理したサケの精液ＤＮＡ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ）０．５ｍｇ／ｍｌ中において４２℃で３時間予備ハイブリダイズさせ、ｒｅｄｉｐｒｉｍｅキット（Ａｍｅｒｓｈａｍ）を使用したランダムプライミングによって［３２Ｐ］−ｄＣＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ、Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ、ＵＫ）で標識したラットＥＰ２およびマウスＥＰ４ｃＤＮＡプローブと４２℃でハイブリダイズさせる。ハイブリダイゼーション後、膜を、２×ＳＳＣ＋０．１％ＳＤＳで４回、合わせて１時間室温で洗浄し、０．２×ＳＳＣ＋０．１％ＳＤＳで１回、５５℃で１時間洗浄し、次いで増感紙を使用して、Ｋｏｄａｋ  ＸＡＲ２フィルムに−７０℃で露光する。フィルム現像後、結合したプローブを、８０℃の０．１％ＳＤＳで２回除去し、負荷対照用に、膜をヒトＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド３リン酸脱水素酵素）ｃＤＮＡプローブ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、ＣＡから購入）とハイブリダイズさせる。
【０１７６】
４．インサイツハイブリダイゼーション：
凍結した脛骨を７ｍｍの厚さで冠状に切り取り、その切片を荷電スライド（Ｐｒｏｂｅ  Ｏｎ  Ｐｌｕｓ、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ、ＮＪ）に載せ、ハイブリダイゼーションまで−７０℃に保つ。ｃＲＮＡプローブを、ＲｉｂｏｐｒｏｂｅＩＩキット（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を使用して３５Ｓ−ＵＴＰｇＳ（ＩＣＮ、Ｃｏｓｔａ  Ｍｅｓａ、ＣＡ）で標識する。ハイブリダイゼーションは５０℃で一晩実施する。いずれもその全体を本明細書に参考として援用する、Ｍ．Ｗｅｉｎｒｅｂ他、「インサイツハイブリダイゼーションによって視覚化したラット骨の発達中におけるアルカリホスファターゼ、オステオポンチン及びオステオカルシン発現の様々なパターン（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｐａｔｔｅｒｎ  ｏｆ  ａｌｋａｌｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ、ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ａｎｄ  ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  ｒａｔ  ｂｏｎｅ  ｖｉｓｕａｌｉｚｅｄ  ｂｙ  ｉｎ−ｓｉｔｕ  ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）」Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ．、５、８３１〜８４２（１９９０）及びＤ．Ｓｈｉｎｅｒ他、「ラット破骨細胞内のインサイツにおけるアルファｖ及びベータ３インテグリンサブユニットの発現（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａｌｐｈａｖ  ａｎｄ  ｂｅｔａ３  ｉｎｔｅｇｒｉｎ  ｓｕｂｕｎｉｔｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｓ  ｉｎ  ｓｉｔｕ）」Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．Ｒｅｓ．、８、４０３〜４１４（１９９３）を参照されたい。ハイブリダイゼーション及び洗浄の後、グリセロールの６％水溶液で２：１に希釈した４２℃のＩｌｆｏｒｄ  Ｋ５エマルジョンに切片を浸漬し、１２日から１４日の間、４℃で暗闇に曝す。水で１：１に希釈したＫｏｄａｋ  Ｄ−１９で１５°でスライドを現像し、固定し、蒸留水で洗浄し、ヘマトキシリン染色後にグリセロール−ゼラチン（Ｓｉｇｍａ）を施す。染色した切片を、明視野または暗視野光学部品を使用して、顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ、Ｈａｍｂｕｒｇ、ドイツ）で見る。
【０１７７】
５．骨芽細胞系及び骨組織でのＥＰ４の発現
骨芽細胞に富む初代ラット頭蓋冠細胞、ラット胎児頭蓋冠又は成体ラット脛骨からの不死化骨芽細胞系及び骨芽細胞骨肉腫細胞系を含む様々な骨由来細胞での、ＥＰ４およびＥＰ２  ｍＲＮＡの発現について調べる。ラット骨肉腫細胞系ＲＯＳ１７／２．８を除いて骨芽細胞及び細胞系のほとんどは、相当な量の３．８ｋｂ  ＥＰ４  ｍＲＮＡを示す。この知見と一致して、ＰＧＥ２によって、ＲＣＴ−３及びＴＲＡＢ−１１細胞では細胞内ｃＡＭＰが顕著に誘導されるが、ＲＯＳ１７／２．８細胞では影響を及ぼさない。レチノイン酸でＲＣＴ−１細胞を処理すると、その分化を促進するが、ＥＰ４ｍＲＮＡの濃度を低下させる。ＮＲＫ線維芽細胞はＥＰ４ｍＲＮＡを発現しないが、陽性対照として使用したＰ８１５肥満細胞腫細胞は大量のＥＰ４ｍＲＮＡを発現する。ＥＰ４ｍＲＮＡとは対照的に、検出可能な量のＥＰ２  ｍＲＡを全ＲＮＡ試料中に発現する骨芽細胞及び細胞系はない。骨芽細胞でのＥＰ４ｍＲＮＡの発現で、ＥＰ４はまた、５週齢のラットの脛骨及び頭蓋冠から単離された全ＲＮＡで発現する。これとは対照的に、脛骨幹のＲＮＡにＥＰ２ｍＲＮＡは見られない。
【０１７８】
６．ＰＧＥ２は、ＲＰ−１骨膜細胞及び成体ラットの脛骨で、ＥＰ４  ｍＲＮＡの発現を誘発する
ＰＧＥ２は、骨芽細胞及び骨組織においてシクロオキシゲナーゼ２発現を上方制御することによってそれ自体の生成を高め、したがってそれ自体の効果が自動増幅する。ＰＧＥ２はまた、ＥＰ４ｍＲＮＡ濃度を増大させる。ＲＰ−１細胞を、成体ラット脛骨膜の初代培養から不死化させ、調べる。これらの細胞は、集密化すると骨芽細胞表現型マーカーを発現し、ヌードマウスに移植すると、ミネラル化骨基質を形成する。試験したその他の骨芽細胞と同様に、ＲＰ−１骨膜細胞は、３．８ｋｂのＥＰ４転写物を発現する。ＰＧＥ２（１０−６Ｍ）で処理することにより、ＥＰ４ｍＲＮＡ濃度が急速に増大し、処理後２時間でピークに達する。ＰＧＥ２は、より分化したＲＣＴ−３細胞においてＥＰ４ｍＲＮＡ濃度に影響を及ぼさず、ＰＧＥ２によるＥＰ４発現は細胞型特異的調節であることを示している。ＥＰ２ｍＲＮＡは、ＰＧＥ２による処理の前後でＲＰ−１細胞において発現しない。
【０１７９】
ＰＧＥ２が、組織内でＥＰ４ｍＲＮＡ濃度をインビボ調節するかどうか調べるため、５週齢の雄ラットにＰＧＥ２を注射する（３〜６ｍｇ／Ｋｇ）。ＰＧＥ２を全身投与することにより、脛骨幹のＥＰ４ｍＲＮＡレベルが急速に増大し、注射後２時間でピークに達する。脛骨幹及び頭蓋冠では、ＥＰ４ｍＲＮＡに対してＰＧＥ２の同様の効果が観察される。ＰＧＥ２は、細胞型特異的及び組織特異的な様式で、骨原性骨膜細胞ではインビトロで、また骨組織ではインビボで、ＥＰ４ｍＲＮＡ濃度を引き上げる。ＰＧＥ２は、ＲＰ−１細胞においても骨組織においても、ＥＰ２ｍＲＮＡ濃度を引き上げない。
【０１８０】
７．骨組織におけるＥＰ４ｍＲＮＡ発現の局在化
骨中でＥＰ４を発現する細胞を局在化させるため、インサイツハイブリダイゼーションを使用する。対照実験（ビヒクル注射）のラットでは、骨髄細胞で検出されるＥＰ４発現は少ない。単回タンパク同化用量のＰＧＥ２を投与することにより、骨髄細胞内でのＥＰ４発現が増加した。骨髄全体の銀粒子の分布は均一ではなく、骨幹端の多くの領域で塊や斑が生じる。脛骨の骨幹端では、ＥＰ４発現は二次海綿質領域に限定され、一次海綿質には見られない。同様の切片とセンスプローブとのハイブリダイゼーション（陰性対照）は、いかなるシグナルも示さない。
【０１８１】
ＥＰ４は、骨芽細胞ではインビトロで、また骨髄細胞ではインビボで発現し、そのリガンド、ＰＧＥ２によって上方制御される。
【０１８２】
８．本発明の作動薬
作動薬活性を測定するための標準的な方法を使用して、以下の化合物を細胞培養及びＥＰ４受容体を含まない無細胞系で評価し、この化合物の作動薬活性をそのＥＣ５０値に関して決定する。
【国際調査報告】
2006520758.tif 000041
2006520758.tif 000042
2006520758.tif 000043