(57)【要約】本発明は光子相関分光法で測定した平均直径が約300nmから約900nmの範囲にあるナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤に関する。ナノ粒子は、親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出した極性脂質の、固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系に、取り込まれる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
極性脂質の固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系に取り込まれた、光子相関分光法で測定した平均直径が約300nmから約900nmの範囲にあるナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤であって、脂質はその親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出している、ナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤。
【請求項２】
光子相関分光法で測定した平均直径が約400nmから約600nmの範囲にあるナノ粒子を含む、請求項1記載の製剤。
【請求項３】
脂質が20℃と100℃の間の結晶化温度を有する、請求項1または2記載の製剤。
【請求項４】
脂質結晶が、12〜18炭素原子を有する脂肪酸のモノグリセリド、または脂肪酸のアスコルビン酸エステル、リン酸エステル、または乳酸エステル、またはモノグリセロールエーテル、またはその混合物のβ結晶である、請求項1〜3のいずれか一項記載の製剤。
【請求項５】
モノグリセリドが1-モノラウリン、1-モノミリスチン、1-モノパルミチン、または1-モノステアリン、またはこれらの2つまたはそれ以上の混合物である、請求項4記載の製剤。
【請求項６】
極性脂質の結晶性ネットワーク構造が、極性液体内で形成される、請求項1〜5のいずれか一項記載の製剤。
【請求項７】
極性脂質が、水、グリセロール、エチレングリコール、またはプロピレングリコール、またはそれらの混合物を含む群より選択される、請求項6記載の製剤。
【請求項８】
ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さの局所治療に使用される、請求項1〜7のいずれか一項記載のナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤。
【請求項９】
活性薬剤がナノ懸濁液の形態で取り込まれている、請求項1〜8のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１０】
ナノ懸濁液が水性ナノ懸濁液である、請求項9記載の製剤。
【請求項１１】
ナノ懸濁液が安定化剤を含む、請求項10記載の製剤。
【請求項１２】
安定化剤がドクセートナトリウムである、請求項11記載の製剤。
【請求項１３】
抗アンドロゲンに反応する状態の治療用薬剤の製造における、光子相関分光法で測定した平均直径が約300nmから約900nmの範囲にあるナノ粒子を含むスピロノラクトンナノ懸濁液の使用。
【請求項１４】
状態が、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さから選択される、請求項13記載の使用。
【請求項１５】
薬剤が局所適応に適合している、請求項13または14記載の使用。
【請求項１６】
ナノ粒子がクリーム基剤に取り込まれている、請求項13〜15のいずれか一項記載の使用。
【請求項１７】
クリーム基剤が、水または他の極性液体中のモノグリセリドの結晶性ネットワークで構成されている、請求項16記載の使用。
【請求項１８】
治療を必要とする患者に請求項1〜6記載のナノ粒子状スピロノラクトン製剤を投与する段階を含む、抗アンドロゲンに反応する状態の治療方法。
【請求項１９】
状態が、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さから選択される、請求項18記載の方法。
【請求項２０】
極性脂質の固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系であって、脂質はその親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のざ瘡の局所治療に使用するために取り込まれた物質側に露出している、結晶性ネットワーク系。
【請求項２１】
光子相関分光法で測定した平均直径が300nmから約900nmの範囲にあるナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤の調製プロセスであって、親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出した極性脂質の固体結晶の水性分散中に、スピロノラクトンのナノ懸濁液を取り込む段階を含む、調製プロセス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗アンドロゲンに反応する状態の局所治療における、ナノ粒子の形態のスピロノラクトンの使用に関する。そのような状態には、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さが含まれる。
【背景技術】
【０００２】
スピロノラクトンは、カリウム保持性利尿剤として利用される、アルドステロン阻害剤として知られている。例えば、アルダクトンとして市販されており、例えば、うっ血性心不全の治療に利用できる。スピロノラクトンは水に対する溶解性が極度に低く、2.8 mg/100 mlである。溶解性が低いことは、インビボにおける本原薬の吸収に不利な影響を与え、バイオアベイラビリティは低い。したがって、望ましい血中濃度を達成するためには、より多くの原薬が必要である。スピロノラクトンの溶解度が低いために、原薬の製剤化の選択肢も制限される。
【０００３】
他の薬学的用途では、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、および酒さのような様々な皮膚疾患の治療に、スピロノラクトンの抗アンドロゲン効果を利用している。これらの疾患のための局所投与は、全身性副作用が大幅低下するために、好ましい経路である。しかし、やはり薬剤の低い溶解度のために、有効で、審美的に許容される局所製剤の開発が限定される。
【０００４】
経口投与後、腸管からの薬剤の吸収は、主に腸液における溶解性とその腸管透過性に依存する。溶解度の低い薬剤は、一般に溶解速度も低く、腸粘膜を通して小さな濃度勾配しか生まれないため、吸収レベルも低く、不確実である。溶解度の低い原薬は、例えば局所のような他の投与経路においても、不利である。
【０００５】
微粒子およびナノ粒子の形態での原薬を生産するために、多くの努力がなされてきた。しかし、そのような小さな粒子の調製はありふれたことではなく、プロセスの技術的な局面、および満足できる産物を得るといういずれの点でも、さらなる困難を生じる。例えば、一貫した狭い範囲のサイズを有する粒子を特に製造スケールで生産するのは困難な可能性がある。さらに、安定した産物、例、ナノ懸濁液、を得る必要があるが、微粒子およびナノ粒子は凝集し、塊になる傾向があり、これは産物の安定性に不利な結果をもたらす。微粒子およびナノ粒子の調製のためには、様々な手法が探られてきた。
【０００６】
米国特許第5,091,188号は水に不溶性の薬剤の注射用溶液の調製方法を記述しており、この方法では、結晶性の原薬を、リン脂質または他の膜形成性の両親媒性脂質の存在下で音波処理または高剪断を含む他のプロセスにより、50 nmから10μmの範囲の寸法に低下させることにより、脂質によって薬剤の微結晶を被覆する。
【０００７】
米国特許第5,145,684号は、表面に吸着した非架橋性表面修飾物質をもつ、有効平均粒子サイズが約400nm未満の結晶性原薬の粒子について記述している。これらの粒子は、たとえばボールミル、アトリションミル、振動ミル、またはメディアミルを用いて粉砕媒体の存在下で粉砕することによって調製される。
【０００８】
国際公開広報WO 96/14830 (米国特許第5,858,410号)は水に不溶性または難溶性の純粋な活性化合物の粒子を含む薬剤担体を記述しており、その平均直径は10nmから1,000nmであり、全体に対する5μmより大きな粒子の割合は0.1％ 未満である。キャビテーション（例、ピストンギャップホモジナイザーを用いる）による、または剪断力もしくは衝撃力（すなわちジェット気流の原理）による、界面活性剤を用いた、または好ましくは用いない粒子の調製も記述されている。
【０００９】
局所投与のための薬剤の処方の問題を克服するスピロノラクトンナノ粒子の局所製剤が必要である。
【発明の開示】
【００１０】
本発明者らは、局所投与のために、ナノ粒子の形態のスピロノラクトンを水中のモノグリセリドの結晶性ネットワークを含むクリーム基剤にうまく取り込むことができることを示した。
【００１１】
したがって本発明の第1の局面では、親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子に露出した極性脂質の、固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系に取り込まれた、光子相関分光法によって測定した平均の直径が約300nmから約900nm、好ましくは400nmから600nmのナノ粒子を含む、ナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤を提供する。
【００１２】
本製剤は、抗アンドロゲンで治療可能なことが知られている皮膚疾患、例、ざ瘡、男性ホルモン性脱毛、多毛、および酒さの治療において、皮膚に塗布するために適している。モノグリセリドの結晶性ネットワークを含むクリーム基剤は、WO87/02582, WO82/03173, およびWO93/20812に記述されている。そのようなモノグリセリドの結晶性ネットワークの例は、Crystalip（商標）として知られている。
【００１３】
脂質は、20℃と100℃の間の結晶化温度を有する可能性がある。好ましい脂質結晶は、鎖の長さが12〜18炭素原子の脂肪酸のモノグリセリド、または対応する長さのエーテル鎖をもつモノグリセロールエーテル、または12〜18炭素原子の長さの脂肪酸鎖とのアスコルビン酸の脂肪酸エステル、またはその混合物のβ結晶である。脂肪酸もエーテルも、飽和または不飽和で良いが、好ましくは飽和である。
【００１４】
したがって脂肪酸はラウリン酸（C12）、ミリスチン酸（C14）、パルミチン酸（C16）、またはステアリン酸（C18）を含むが、C13、C15、またはC17の酸も使用できる。
【００１５】
好ましいモノグリセリドは1-または2-モノグリセリド、好ましくは1-モノラウリン、1-モノミリスチン、1-モノパルミチン、および1-モノステアリン、または1-モノラウリンと1-モノミリスチンの混合物のような、これらの2つまたはそれ以上の混合物である可能性がある。不飽和モノグリセリドの例は、モノパルミトレイン、モノオレイン、モノリノレイン（monolinolein）、モノリノレニン（monoliniolenin）である。
【００１６】
本組成物は、基本的に水中もしくは結晶形成を可能にする他の極性液体中またはその混合物中の、上記の脂質結晶の分散を含む。本発明に従って使用する極性脂質の例は、水、グリセロール、プロピレングリコール、およびエチレングリコール、またはその混合物であるが、他の適当な極性脂質も使用できる。
【００１７】
スピロノラクトンは、使用時までネットワーク中で保護されるが、皮膚に塗布されると、シェルの結晶構造の軟化または融解の結果、スピロノラクトンは皮膚表面と接触する。
【００１８】
一般に、親水性および親油性の構造を含むマトリックス中に非常に細かい固体粒子が取り込まれた後、保存すると、粒子サイズが顕著に増加すると期待される。驚くべきことに、これはおこらず、7ヶ月の期間にわたり、スピロノラクトンの結晶の顕著な成長は見られなかった。さらに、非ナノ粒子状スピロノラクトンを含むクリームに対して、本クリームでは膜モデルにおける流量の増加が見られた。
【００１９】
製薬分野では周知のように、粒子サイズは様々な方法で測定できるが、それにより見掛け上は異なる粒子サイズが報告される可能性がある。そのような方法には、光子相関分光法（PCS）およびレーザー回折が含まれる。さらに、粒子サイズは平均の粒子サイズ（例、数平均、重量平均、または容量平均の粒子サイズ）として報告される場合がある。本明細書では、他に記載がない限り、粒子サイズは容量平均の粒子サイズとして記載される。したがって、例えば、D50が500nmというのは、粒子の容積の50％が500nm未満の直径をもつことを示す。または、500nm未満の直径をもつ粒子が、粒子全体の占める総体積の50％を占めるとも述べることができる。
【００２０】
本発明に係るスピロノラクトンの粒子サイズがレーザー回折によって測定されると、D50は350〜750nmの範囲であり、D99は500〜900nmの範囲である。
【００２１】
本発明に係るスピロノラクトンを含むナノ懸濁液およびナノ粒子は、好ましくはナノ粒子の凝集を防ぐために安定化剤を取り込んでいる。当技術分野で周知のそのような安定化剤は、以下にさらに詳細に記述されている。
【００２２】
本明細書では、本発明に係るスピロノラクトンを含むナノ粒子およびスピロノラクトンを含むナノ懸濁液は、ナノ粒子状スピロノラクトンと呼ぶ。この用語は、安定化剤と共にスピロノラクトンを含むナノ粒子およびナノ懸濁液も含むことを理解する必要がある。
【００２３】
本発明に係るナノ粒子状スピロノラクトンは、ナノ粒子の調製のための任意の既知の方法、特に高圧均質化によって調製できる。
【００２４】
ナノ粒子状スピロノラクトンは、スピロノラクトンの粗い分散にキャビテーションを行なって調製できる。好ましくは、ナノ粒子は高圧ピストンギャップホモジナイザーを用いて調製する。ナノ粒子は、安定化剤を伴う場合がある。当技術分野で周知のそのような安定化剤は、以下にさらに詳細に記述されている。
【００２５】
ナノ粒子の調製には、スピロノラクトン開始材料は、好ましくは約100μm未満の粒子サイズを有する、粗い粒子の形態で使用することが好ましい。必要ならば、スピロノラクトンの粒子サイズは、粉砕のような通常の手段によって、このレベルに低下させることができる。スピロノラクトンの粗い粒子は、好ましくは原薬が本質的に不溶性の溶媒を含む液体媒体中に分散している。スピロノラクトンの場合は、液体媒体は水性の溶媒を含み、最も好ましくは本質的に水である。粗い粒子の分散中のスピロノラクトンの濃度は、0.1から50％の範囲である可能性がある。粗い分散は、ナノ粒子を得るための任意の既知の方法で使用できる。
【００２６】
好ましい方法は、高圧均質化であり、この場合、粒子サイズは主にキャビテーションによって低下する。これは最も好ましくは高圧ピストンギャップホモジナイザーを用いて行われる。この方法では、約25μmの幅のギャップを通して、高い流速で粗い粒子の分散を押し進ませる。液体にかけられる静圧は、液体の蒸気圧より低くなる。したがって、液体は沸騰し、ギャップの部分で気泡が形成される。しかし、液体がギャップから出ると、通常の圧力となり、気泡は崩壊する。その結果得られる強力な内破力は、原薬の粗い粒子を破壊するために充分強く、その結果ナノ粒子が形成される。
【００２７】
高圧均質化は、100バールから3000バールの範囲、好ましくは1000バールから2000バール(107から3 x 108 Pa、好ましくは108から2 x 108 Pa)の範囲の圧力で、温度は0から50℃、好ましくは10から20℃、例、約15℃において、実施できる。均質化は、望ましい粒子サイズが得られるまで、一連のサイクルとして実行するか、連続プロセス、例、2〜30時間、好ましくは2〜10時間、として行なうことができる。
【００２８】
本発明に係るスピロノラクトンのナノ懸濁液は、好ましくはナノ粒子の凝集を予防するために、安定化剤を組み込んでいる。安定化剤は、ナノ粒子の製造中の任意の適当な段階で、導入できる。たとえば、界面活性剤はナノ粒子の形成の前に、最初の粗い分散に添加するか、または例えば高圧均質化による粒子サイズの低下が行われた後に添加できる。または、安定化剤の一部を粒子サイズの低下段階の前に添加し、一部を後に添加してもよい。好ましくは、安定化剤は粗い分散中に存在している。安定化剤の濃度は、粗い分散またはナノ懸濁液のいずれにしろ、0から10％の範囲で良い。
【００２９】
本発明のナノ懸濁液の調製に利用できる安定化剤は、通常の安定化剤から選択でき、界面活性剤および表面修飾物質とも記述される。利用できる可能性のある安定化剤の例には、ポリエチレンソルビタン脂肪酸エステル、例、TweensおよびSpans；ステアリン酸ポリオキシエチレン；ポリオキシエチレンアルキルエステル；ポリエチレングリコール；ポロキサマー、例、Lutrol F68、およびポロキサミンのようなブロックポリマーおよびブロックコポリマー；種々の由来のレシチン（例、卵レシチンまたは大豆レシチン）、化学修飾されたレシチン（例、水化レシチン）、ならびにリン脂質およびスフィンゴ脂質、ステロール（例、コレステリン誘導体、およびスチグマステリン）、糖または糖アルコールと脂肪酸または脂肪酸アルコールのエステルまたはエーテル（例、モノステアリン酸サッカロース）；
エトキシル化モノおよびジグリセリド、エトキシル化脂質およびリポイド、リン酸ジセチル、ホスファチジルグリセリン、コール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム；クエン酸ナトリウム；
セルロースエーテルおよびセルロースエステル（例、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、酢酸ポリビニルのようなポリビニル誘導体、アルギン酸塩、ポリアクリレート（例、カルボポール）、キサンザン、ペクチン、ゼラチン、カゼイン、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセリル、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム（ドクセートナトリウム）；ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、アルキルアリルポリエーテルスルホン酸塩、ポリエチレングリコール；
コロイド状2酸化ケイ素、ケイ酸アルミニウムマグネシウム；およびリン酸塩が含まれる。
【００３０】
好ましい安定化剤は、ドクセートナトリウムであり、これはOctowet 70PG（商標）（スルホコハク酸ジオクチルナトリウム）という名称で、プロピレングリコール中の70％溶液として、市販されている。
【００３１】
上記より、本プロセスは液体媒体中で実施され、したがってナノ粒子状スピロノラクトン産物はナノ懸濁液の形態で最初に入手されることが理解されるだろう。必要ならば、液体媒体は、例えば、凍結乾燥またはスプレー乾燥によって除去し、固体の形態のナノ粒子状スピロノラクトンを提供できる。ナノ懸濁液の製造中に安定化剤が存在する場合は、対応する乾燥ナノ粒子状産物は安定化剤を伴うことが理解されるだろう。
【００３２】
ナノ粒子状スピロノラクトンの調製後、本発明に係る製剤は、以下のように調製できる。極性脂質を、極性脂質から結晶性ネットワーク構造を形成する能力をもつ水および/または任意の他の極性液体（グリセロール、エチレングリコール、またはプロピレングリコールのような）と混合する。形成された混合物は、水および/または極性液体の濃度が、それぞれ、重量で50〜95％である。混合物を、脂質の転移温度より高温に加熱する。転移温度は、過剰の水または極性液体と接触している脂質粒子がそれぞれ水または極性液体を吸収し、強い複屈折をもつ円柱状または球状の結晶構造に転換する最低温度と定義される。転換が起きるまで、混合物を攪拌しながら転移温度より高い温度に維持する。その後、攪拌を続けながら混合物を周囲温度または所望の温度まで冷却し、固体の結晶性ネットワークを形成させる。この冷却時に、約30〜35℃の温度において、特徴的な結晶構造が形成される。
【００３３】
ナノ粒子状スピロノラクトンは、液体が結晶性の構造に変換する前または変換中に、極性脂質と水または極性液体の混合物中に分散させる。ナノ粒子状スピロノラクトンが結晶構造に確実に取り込まれるためには、液体が30から35℃以下に冷却される前に、スピロノラクトンを添加する必要がある。
【００３４】
混合物が30から35℃以下に冷却された後にナノ粒子状スピロノラクトンが添加されると、物理的な混合物は形成されるが、スピロノラクトンは結晶構造の一部を形成しない。したがって、活性粒子の周囲に結晶層が形成されないので、ナノ粒子状スピロノラクトンは、活性成分の再結晶化および粒子サイズの成長からの保護および予防を受けなくなってしまう。
【００３５】
局所製剤の形成において本発明で使用されるナノ懸濁液は、加熱にはうまく反応しない。加熱時には塊が形成され、より高い温度で活性成分は溶液に入る可能性がある。これにより、冷却時の再結晶化が起こり、粒子サイズが相当上昇することになる可能性がある。
【００３６】
しかしながら、出願者らは、ナノ懸濁液の熱への露出を最低限に抑えながら、ナノ粒子の添加後に結晶構造の形成を可能にするための取り込みの製剤、プロセス、および温度を決定した。
【００３７】
本発明に係るナノ粒子状スピロノラクトンの局所製剤は、最も好ましくは水性溶液中で、都合良くナノ懸濁液の形態で活性の薬剤を取り込んでいる。本発明に係る薬学適性剤は、当技術分野で周知の方法に従って調製できる。
【００３８】
本発明に係る局所製剤は、軟膏、クリーム、ゲル、液体、スプレー、またはムースとして提供できる。水性製剤は、それ自体がナノ懸濁液を含む可能性がある；非水性製剤は、代わりに乾燥ナノ粒子を含む可能性がある。
【００３９】
本発明の第2の局面では、抗アンドロゲンで治療可能なことが知られている状態、例、ざ瘡、男性ホルモン性脱毛、多毛、および酒さの局所治療において使用するための、ナノ粒子性スピロノラクトン局所製剤が提供される。
【００４０】
第3の局面では、本発明は、例、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、および酒さのような抗アンドロゲンに反応する状態の治療のための薬剤の製造における、光子相関分光法によって測定した平均の直径が約300nmから約900nm、好ましくは400nmから600nmのナノ粒子を含むスピロノラクトンナノ懸濁液の使用が提供される。薬剤は、局所適用のために適応させることができる。ナノ粒子は、水または他の極性液体中のモノグリセリドの結晶性ネットワークを含むクリーム基剤中に取り込まれ得る。
【００４１】
本発明の局面は、そのような治療を必要とする患者に上記のナノ粒子状スピロノラクトン製剤を投与する段階を含む、抗アンドロゲンに反応する状態を治療する方法の提供にも及ぶ。状態は、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さである可能性がある。
【００４２】
第4の局面では、本発明は、親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のざ瘡の局所治療に使用するために取り込まれた物質側に露出した極性脂質の、固体結晶の結晶性ネットワーク系を含む調製物を提供する。極性脂質の固体結晶の結晶性ネットワーク系は、以前WO 87/02582においてマイクロカプセルと呼ばれていたものである。
【００４３】
第5の局面では、光子相関分光法によって測定した平均の直径が300nmから約900nmの範囲のナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤の調製プロセスが提供され、このプロセスには、親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出した極性脂質の、固体結晶の水性分散中にスピロノラクトンのナノ懸濁液を取り込む段階が含まれる。
【００４４】
ナノ懸濁液は、混合物が、結晶点に達する前で、60℃と35℃の間、より好ましくは55℃から45℃、適切には50℃に冷却されされた時に、取り込まれることができる。取り込み時点でのナノ懸濁液の温度は、好ましくは室温と同等、すなわち20℃から25℃である。
【００４５】
本発明の第2およびその後の局面の好ましい特徴は、第1の局面の特徴に必要に応じて変更を加えたものである。
【００４６】
本発明は、以下の1つまたは複数の非限定的実施例および図に関して説明する。
【００４７】
実施例
実施例1：局所製剤としてのナノ粒子状スピロノラクトンの調製
ナノ粒子状スピロノラクトンの調製
表1は、本発明に係る結晶構造に取り込むためのナノ粒子状スピロノラクトンの代表的な調製物を示す。ナノ粒子状スピロノラクトンは、以下のようにして調製できる：
安定剤の水溶液の調製物を、透明な溶液が得られるまで磁石で攪拌しながら、注射用水または緩衝液に取り込んだ。適当な量の界面活性剤の水溶液を用いてスピロノラクトンを湿らせ、スラリーを形成した。得られた懸濁液を、高速剪断-分散装置を用いて、分散させた。懸濁液の泡立ちを排除するために、磁石攪拌を続けた。得られた懸濁液は、高圧ピストンギャップホモジナイザーを通して、ナノ懸濁液を得た。製剤1〜7は、Avestin C5（商標）を用いて調製し、製剤8および9はAvestin C50（商標）を用いて調製した。均質化の際には、薬剤粒子はキャビテーション効果および剪断力のために破壊され、小さな微粒子およびナノ粒子が形成する。粒子サイズは、Zetasizer 3000 HS（商標）(Malvern)を用いて光子相関分光法（PCS）によって決定した。D50およびD90は、Coulter LS230を用いてレーザー回折によって測定した。
【００４８】
（表１）
2006511525.tif 000002
【００４９】
Crystalip（商標）組成物の調製
表2は表1に示される製剤7、8、および9を用いた局所用クリームとしてのナノ粒子状スピロノラクトンの代表的な調製物を示す。局所用ナノ懸濁液調製物は、以下のようにして調製した：
水を70℃に加熱し、プロピレングリコールを添加した。モノグリセリドを70℃で融解し、その後、融解したモノグリセリドを70rpmで攪拌しながら水相に添加した。その後、混合物の冷却を開始した。混合物が約50℃に達し、粘性が上昇した時に攪拌速度を95rpmに上昇して、冷たいナノ懸濁液を添加した。35℃でβ結晶構造が形成し始めた時に、攪拌速度を75rpmに低下させた。
【００５０】
（表２）
2006511525.tif 000003
【００５１】
以下の実験は、本発明に係るナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤を生産するための最適の組成および方法を決定するために行なった。
【００５２】
最適Crystalip（商標）組成の選択
Crystalip（商標）組成物の2つのバッチを、以下の表のようにして作製した。
【００５３】
（表３）Crystalip（商標）プラセボの複製
2006511525.tif 000004
【００５４】
最初のバッチについては、冷却中に特徴的な発熱ピークが観察された。冷却段階の終わりに、クリームは非常に粘性が高かったが、β結晶構造に典型的な光沢のある外観は示さなかった。保存中に、この光沢のある様相を呈し始めた。
【００５５】
第2のバッチでは、発熱ピークが観察されなかったが、光沢のある外観が観察された。粘性は第1のバッチよりも低いと思われた。高濃度のプロピレングリコールによる刺激に関していくらかの懸念があったため、その後、プロピレングリコールの含量のより少ない組成物が試験された（表4）。プロピレングリコールは、基剤の抗菌力の有効性を上昇させ、皮膚への活性成分の浸透性を増加させるため、組成物中に保持すると有用である。以下のバッチを製造した。
【００５６】
（表４）Crystalip（商標）バッチ
2006511525.tif 000005
【００５７】
20％のモノグリセリド（MG）を含むバッチでは、粘性は約40℃で低下し、粘性が上昇し始めた後に、混合物は再び液体になった。
【００５８】
したがってMGレベルを24％に上昇させた。やはり粘性は約40℃で低下したが、さらに冷却すると粘性は再び上昇した。33℃で発熱ピークが観察され、最終的なクリームは光沢のある外観を持っており、これは最終的にβ結晶構造が生成したことを意味する。
【００５９】
界面活性剤とCrystalip（商標）の間の適合性試験
Crystalip（商標）は、いずれも非イオン性界面活性剤であるMyrj 59およびSpan 20と適合することが以前に決定されていた。しかし、スピロノラクトンナノ懸濁液にはOctowet 70PGが使用されており、これは陰イオン性界面活性剤である。Octowet 70PGは、スルホコハク酸ジオクチルナトリウムとしても知られており、水およびプロピレングリコールの70％（70％ DOSS）溶液である。
【００６０】
ナノ懸濁液は10％の活性スピロノラクトンおよび0.5％の界面活性剤を含むので、2％のスピロノラクトンを含むクリームでは、20％のスピロノラクトンナノ懸濁液が取り込まれる必要がある。したがってCrystalip（商標）製剤とOctowet溶液との適合性の検定では、20％Octowet溶液が使用され、これにより水相の一部を置換した。
【００６１】
Octowet 70PG溶液と選択されたCrystalip（商標）製剤（10％PG + 24％MG）との適合性が検定された。Crystalip（商標）3バッチ（表5）を製造し、これに20％の0.5％ Octowet 70PG溶液を異なる温度、70℃、50℃、および室温で導入した。
【００６２】
（表５）Octowet溶液を含むCrystalip（商標）バッチ
2006511525.tif 000006
*  T ℃：界面活性剤溶液を導入した温度
【００６３】
3つのバッチのいずれも発熱ピークを示し、光沢のある外観を呈した。バッチ番号05および06の粘性は許容できたが、Octowet溶液の導入後のバッチ番号07の粘性は充分ではなかった。
【００６４】
したがって、選択されたCrystalip（商標）製剤は20％の0.5％ Octowet溶液と適合すると結論付けられた。Octowet溶液は、室温ではなく、結晶点よりも高い温度で取り込まれる方が良い。
【００６５】
スピロノラクトンナノ懸濁液のCrystalip（商標）への導入
ナノ懸濁液の組成は、10％スピロノラクトンおよび0.5％ Octowet 70PGであった。
【００６６】
新しいナノ懸濁液の、レーザー回折を用いた粒子サイズは以下のとおりであった。
(COULTER)：
D50 = 0.686
D90 = 1.033
D99 = 1.033
光子相関分光法（Zetasizer 3000HS）を用いた粒子サイズは、Z平均 = 476nmであった。
【００６７】
上記の適合性検定から、室温で材料を組み入れることは良くないことが分かった。したがって、ナノ懸濁液の加熱を検討する必要があった。懸濁液の加熱前後の粒子サイズを測定した。
【００６８】
実験は以下のようにして実施した：
ナノ懸濁液の試料2つを、それぞれ50℃および70℃に加熱した。温度を10分間保った後、試料を冷却して室温に戻した。粒子サイズは、以下の時点で光子相関分光法およびレーザー回折によって測定した：
- 超音波処理後、加熱前（参照）
- 冷却後（t0）
- 24時間後（t24h）
【００６９】
（表６）レーザー回折（Coulter）による粒子サイズの決定
2006511525.tif 000007
【００７０】
表6の結果は、図8および9に示されている。
【００７１】
（表７）光子相関分光法（Zetasizer 3000HS）による粒子サイズの決定
2006511525.tif 000008
(*)：レーザー回折測定によりサイズが大きすぎたためPCSは実施しなかった
【００７２】
ナノ懸濁液の加熱の結果、70℃では粒子サイズがかなり劇的に増加し、特に24時間後に顕著であることが示されたが、これは薬剤の一部が溶液化し、再結晶したことを示唆する。粒子サイズは50℃でも上昇したが、その後の24時間ではあまり再結晶化は起こらないと思われた。
【００７３】
50℃に非常に短時間露出することは許容できると判断された。したがって、最終バッチは以下のように調製すると結論づけた：
水相を減少させたCrystalip（商標）を調製する。ナノ懸濁液は音波処理するが、加熱は行なわない。Crystalip（商標）の温度が50℃に達したら、冷たいナノ懸濁液を添加し、これにより温度が素早く低下し、スピロノラクトン懸濁液の熱への露出が最低限に抑えられる。このプロセスは、より低い温度で起こるCrystalip（商標）の結晶化には影響を与えない。
【００７４】
50℃でCrystalip（商標）に冷たいナノ懸濁液を添加する上記の推奨手順に従って、1つのバッチを調製した（表8）。
【００７５】
（表８）スピロノラクトンナノ懸濁液を含むCrystalip（商標）バッチ
2006511525.tif 000009
【００７６】
このバッチは成功であった。最終的なクリームは適切な粘性を持ち、光沢のある、均質な外観を呈した。
【００７７】
粘性の測定
2006511525.tif 000010
上記の表に示された組成物の粘性の結果は、図10および11に示されている。
【００７８】
第2のバッチのナノ懸濁液3011-05an1を用いた試験
以前の試験のナノ懸濁液は新しくなかったため、スピロノラクトンの新しいナノ懸濁液を調製して、製造後、数日でCrystalip（商標）に導入するとことにした。使用したナノ懸濁液の組成は、10％スピロノラクトンおよび0.5％ Octowet 70PGである。また、Crystalip（商標）に10％ではなく30％でナノ懸濁液を導入することができるかどうかも検討された。
【００７９】
調製直後のナノ懸濁液の、レーザー回折を用いた粒子サイズは以下のとおりであった。
(COULTER)：
D50 = 0.443
D90 = 0.657
D99 = 0.738
光子相関分光法（Zetasizer 3000HS）を用いた粒子サイズは、
2006511525.tif 000011
【００８０】
それぞれ20％および30％のナノ懸濁液を含む2つの新しいCrystalip（商標）のバッチ、4014-000/01acおよび014-000/02acが調製された。調製プロセスは、4011-001/08acと同一だった（冷却段階で50℃でナノ懸濁液を取り込む）。ナノ懸濁液は、Crystalip（商標）を作製する前日に調製された。この2つのバッチについて、pHを市販のクリーム（Spiroderm 5％、pH = 4.16）と同一に調整した。2つのバッチは、以下の表にまとめられている。
2006511525.tif 000012
【００８１】
2つのクリームは光沢があったが、第2の4014-000/02acのほうが粘性が高かった。冷たいナノ懸濁液を導入すると、30％のナノ懸濁液を含むバッチのほうが、粘性が早く上昇した。さらに、30％ナノ懸濁液を含むバッチは、粘性が上昇したために、均一性が低下していると思われた。
【００８２】
これらのバッチのpHおよび密度は、調製の翌日に測定されたが、以下の表に示されている。
2006511525.tif 000013
【００８３】
実施例2：保存前後でのスピロノラクトンの粒子サイズ
図1、2、および3は本発明に係るスピロノラクトンの調製直後、7ヶ月保存後の顕微鏡写真、および市販のスピロノラクトンとの比較を示す。図は、各バーの間隔が0.01mmまたは10マイクロメートルである目盛りを含んでいる。
【００８４】
図1および2に示す粒子は、光学顕微鏡ではほとんど見えないほど小さい。7ヶ月間にわたり、粒子の成長はない。反対に、市販のスピロノラクトン「Spiroderm」（図3）では、サイズが最大20マイクロメートルのスピロノラクトン結晶の存在が見られる。
【００８５】
実施例3：流量試験
「Crystalip（商標）」マトリックスに取り込まれたナノ懸濁液製剤からのスピロノラクトン（2％）の、人工膜を通した流量が、フランツセル装置で測定され、コンパレーターの水性クリームB.P.中の2％ w/wスピロノラクトンと比較された。
2006511525.tif 000014
【００８６】
流量試験の方法
Crystalip（商標）製剤はSkyePharma AGから供給された。本実験時には、市販のスピロノラクトンコンパレーターはすでに使用できなかった。したがって、標準的なクリームマトリックス中のコンパレーターは以下のようにして調製された。簡単に述べると、100 mgのスピロノラクトン粉末を正確に測り取り、4.90 gの水性（Aqueous）クリームB.P.と混合して、水性クリーム製剤中の2％ w/w非ナノ粒子状スピロノラクトンを得た。
【００８７】
インビトロ拡散試験
スピロノラクトンおよびシンク（sink）条件の安定性を維持するために、エタノール：リン酸「緩衝液」（20:80 v/v, pH 4.5）がレシーバー液として使用された。使用された人工膜は、再生セルロース膜であった。
【００８８】
フランツセル拡散試験
拡散実験の実施には、平均拡散表面積が0.56±0.03 cm2で、平均レシーバー容積が1.83±0.02 mlの、個々に較正されたフランツ拡散セルが用いられた。Spectra/Por（登録商標）セルロース膜を適当なサイズに切り、30分間脱イオン水に浸して、保存剤（0.1％アジ化ナトリウム）を除去し、ティシュで拭いて表面の液体を取り除き、フランスセルに取り付けた。レシーバー液をフランツセルに取り込み、マグネチックスターラーで常に攪拌し、32℃に保った。膜は、製剤に密着させる前に、30分間レシーバー相と平衡化させた。各製剤（200μl）を、容積式（positive displacement）Finnpipette（登録商標）を用いて、膜に密着させた。5つのサンプリング時点で（1、2、4、6および8時間）、レシーバー液200μlを注意深く取り出し、新しい、同じ容積のあらかじめ温めた（32℃）レシーバー液で置き換えた。実験全体を通して、容積を一定に保つために、フランツセルから蒸発によるレシーバー液の損失があれば、補充された。試料は以下のクロマトグラフィー条件を用いて、HPLCによって分析した。
カラム：Hypersil 3μm フェニルBDSカラム（s/no.182862）
カラム長：150 x 4.60 mm
カラム温度：30℃
移動相：50mMリン酸緩衝液：アセトニトリル（70:30 v/v）
流速：1.0 ml/分
UV波長：238 nm
注入量：10μl
実行時間：15分
【００８９】
スピロノラクトン標準曲線の作製
標準スピロノラクトンをレシーバー液中で作製し、0.93〜59.2μg/mlの範囲で検量線を作製した。r2>0.999の検量線が許容できると見なされ、典型的な曲線は図4に示されている。
【００９０】
データ解析
レシーバー液中のスピロノラクトンの量は、試料除去に関して補正された。単位膜表面積あたりの透過したスピロノラクトンの累積量を、時間の平方根に対してプロットし、グラフの線形部分の傾きを、定常状態の流量として見積もった。スチューデントのt検定を利用して、2％スピロノラクトンナノ懸濁液と2％スピロノラクトン水性クリームの間のスピロノラクトンの放出の有意差を統計的に決定した。
【００９１】
結果
図5は2つのスピロノラクトン製剤から、単位面積あたり透過したスピロノラクトンの平均の累積量（μg/cm2）をグラフで表したものである。このプロファイルは、両方の製剤の定常状態の流量を示す。スピロノラクトンナノ懸濁液（2％ w/w）からのスピロノラクトンの放出速度は、水性クリーム製剤よりも有意に速いことが示された（p=0.08）。
【００９２】
実施例4：阻止ゾーンの測定
2つのスピロノラクトン製剤、すなわちスピロノラクトンナノ懸濁液2％ w/wおよび粗いスピロノラクトン2％ w/w、ならびにそれぞれのプラセボの抗菌活性を比較した。水性クリームB.P.中の2％ w/w製剤（社内製）をコンパレーターとして使用した。以下の材料が使用された。
2006511525.tif 000015
【００９３】
方法
Crystalip（商標）スピロノラクトンおよびプラセボ製剤は、以下の表のようにして調製した。市販のスピロノラクトンコンパレーターはすでに使用できなくなっていたので、標準的なクリーム基剤中のコンパレーターを以下のようにして調製した。簡単に述べると、スピロノラクトン粉末100 mgを正確に測り取り、4.90 gの水性クリームB.P.と混合して、水性クリーム中の2％ w/w非ナノ粒子状スピロノラクトンを得た。
【００９４】
バッチサイズは500gで、実験室用反応器IKA-LR1000.2を用いて製造された。
2006511525.tif 000016
【００９５】
以下に列挙する試料各20±1 mgを1/4インチの抗菌アッセイディスクの表面に注意深く移した。
1. SkyePharma AG, Crystalip（商標）、スピロノラクトン懸濁液2％ w/w 4014-000/06atc
2. 水性クリームBP中の2％ w/wスピロノラクトン
【００９６】
各製剤によって被覆した抗菌ディスクを、無菌鉗子を用いて、微生物を播いた寒天プレートの表面に乗せた。
【００９７】
表皮ブドウ球菌（S. epidermidis）プレートは、37℃で24時間インキュベートした。
【００９８】
P.アクネ（P. acne）プレートは嫌気性ジャー中でインキュベートし、72時間インキュベートした。
【００９９】
阻止ゾーンは、カリパスを用いて測定した。
【０１００】
結果
図6および7はそれぞれ表皮ブドウ球菌およびP.アクネス（P. acnes）を播いたプレートを用いた、両方の製剤の平均の阻止ゾーンを示す。スピロノラクトンナノ懸濁液を含むCrystalip（商標）製剤は、ざ瘡関連細菌に対して、相当な効果を示した。2％ w/wスピロノラクトンを含む水性クリームB.P.（コンパレーター）は、阻止曾オーンを示さなかった。
【０１０１】
したがって、基剤マトリックスは、製剤に抗菌効果（表皮ブドウ球菌およびP.アクネス）を与え、これはスピロノラクトンによるものではない。製剤は、他に抗生物質または保存剤を含まない。コンパレーター産物は、ざ瘡関連微生物に対して抗菌効果を示さないが、フェノキシエタノールで保存されている。したがって、出願者らの製品は、薬剤のホルモン活性と、それを含む基剤の抗菌効果の2つにより、ざ瘡を改善する。
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】調製直後の、本発明に係るナノ粒子状スピロノラクトンの顕微鏡写真である。目盛りは各バーの間隔が0.01mmとなっている。
【図２】室温で7ヶ月保管した後の、本発明に係るナノ粒子状スピロノラクトンの顕微鏡写真である。目盛りは各バーの間隔が0.01mmとなっている。
【図３】非ナノ粒子状の市販のスピロノラクトンの顕微鏡写真である。目盛りは各バーの間隔が0.01mmとなっている。
【図４】0.93〜59.2μg/mlのスピロノラクトンの典型的な標準曲線である。
【図５】ナノ懸濁液（2％ w/w）および水性クリーム（2％ w/w）からのスピロノラクトンの平均流量を示すグラフである（n=4, 平均±SE）y = 35.552x - 20.258 r2 = 0.991スピロノラクトン水性クリーム2％y = 42.097x - 26.784 r2= 0.989 スピロノラクトンナノ懸濁液2％
【図６】Crystalip（商標）スピロノラクトン製剤と水性クリームB.P.中の2％ w/wスピロノラクトンの表皮ブドウ球菌の平均ゾーン直径の比較である。（平均±S.D.; n=5）
【図７】コンパレーターである水性クリームB.P.中の2％ w/wスピロノラクトンと比較した、Crystalip（商標）スピロノラクトン製剤のP.アクネスの平均ゾーン直径である。（平均±S.D.; n=5）
【図８】50℃（黒）または70℃（白）に加熱後、冷却したスピロノラクトンナノ懸濁液と、非加熱ナノ懸濁液（灰色）の粒子サイズを比較したものである。
【図９】50℃（黒）または70℃（白）に加熱後、冷却した24時間後のスピロノラクトンナノ懸濁液と、非加熱ナノ懸濁液（灰色）の粒子サイズを比較したものである。
【図１０】50℃、70℃、または室温においてOctowet（商標）を導入した後の混合物の粘性を示す。
【図１１】粘性に対する混合物の組成の効果を示す。
【図１】
2006511525.tif 000017
【図２】
2006511525.tif 000018
【図３】
2006511525.tif 000019
【図４】
2006511525.tif 000020
【図５】
2006511525.tif 000021
【図６】
2006511525.tif 000022
【図７】
2006511525.tif 000023
【図８】
2006511525.tif 000024
【図９】
2006511525.tif 000025
【図１０】
2006511525.tif 000026
【図１１】
2006511525.tif 000027
【手続補正書】
【提出日】平成17年8月17日(2005.8.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
極性脂質の固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系に取り込まれた、光子相関分光法で測定した平均直径が約300nmから約900nmの範囲にあるナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤であって、脂質はその親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出している、ナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤。
【請求項２】
光子相関分光法で測定した平均直径が約400nmから約600nmの範囲にあるナノ粒子を含む、請求項1記載の製剤。
【請求項３】
脂質が20℃と100℃の間の結晶化温度を有する、請求項1または2記載の製剤。
【請求項４】
脂質結晶が、12〜18炭素原子を有する脂肪酸のモノグリセリド、または脂肪酸のアスコルビン酸エステル、リン酸エステル、または乳酸エステル、またはモノグリセロールエーテル、またはその混合物のβ結晶である、請求項1〜3のいずれか一項記載の製剤。
【請求項５】
モノグリセリドが1-モノラウリン、1-モノミリスチン、1-モノパルミチン、または1-モノステアリン、またはこれらの2つまたはそれ以上の混合物である、請求項4記載の製剤。
【請求項６】
極性脂質の結晶性ネットワーク構造が、極性液体内で形成される、請求項1〜5のいずれか一項記載の製剤。
【請求項７】
極性脂質が、水、グリセロール、エチレングリコール、またはプロピレングリコール、またはそれらの混合物を含む群より選択される、請求項6記載の製剤。
【請求項８】
ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さの局所治療に使用される、請求項1〜7のいずれか一項記載のナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤。
【請求項９】
活性薬剤がナノ懸濁液の形態で取り込まれている、請求項1〜8のいずれか一項記載の製剤。
【請求項１０】
ナノ懸濁液が水性ナノ懸濁液である、請求項9記載の製剤。
【請求項１１】
ナノ懸濁液が安定化剤を含む、請求項10記載の製剤。
【請求項１２】
安定化剤がドクセートナトリウムである、請求項11記載の製剤。
【請求項１３】
抗アンドロゲンに反応する状態の治療用薬剤の製造における、光子相関分光法で測定した平均直径が約300nmから約900nmの範囲にあるナノ粒子を含むスピロノラクトンナノ懸濁液の使用。
【請求項１４】
状態が、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さから選択される、請求項13記載の使用。
【請求項１５】
薬剤が局所適応に適合している、請求項13または14記載の使用。
【請求項１６】
ナノ粒子がクリーム基剤に取り込まれている、請求項13〜15のいずれか一項記載の使用。
【請求項１７】
クリーム基剤が、水または他の極性液体中のモノグリセリドの結晶性ネットワークで構成されている、請求項16記載の使用。
【請求項１８】
極性脂質の固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系であって、脂質はその親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のざ瘡の局所治療に使用するために取り込まれた物質側に露出している、結晶性ネットワーク系。
【請求項１９】
光子相関分光法で測定した平均直径が300nmから約900nmの範囲にあるナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤の調製プロセスであって、親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出した極性脂質の固体結晶の水性分散中に、スピロノラクトンのナノ懸濁液を取り込む段階を含む、調製プロセス。
【手続補正書】
【提出日】平成17年11月30日(2005.11.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
極性脂質の固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系に取り込まれた、光子相関分光法で測定した平均直径が300nmから900nmの範囲にあるナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤であって、脂質は親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出している、ナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤。
【請求項２】
光子相関分光法で測定した平均直径が400nmから600nmの範囲にあるナノ粒子を含む、請求項1記載の製剤。
【請求項３】
脂質が20℃と100℃の間の結晶化温度を有する、請求項1または2記載の製剤。
【請求項４】
結晶が、12〜18炭素原子を有する脂肪酸のモノグリセリド、または脂肪酸のアスコルビン酸エステル、リン酸エステル、または乳酸エステル、またはモノグリセロールエーテル、またはそれらの任意の2つまたはそれ以上の混合物のβ結晶を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の製剤。
【請求項５】
モノグリセリドが、1-モノラウリン、1-モノミリスチン、1-モノパルミチン、1-モノステアリン、またはそれらの任意の2つまたはそれ以上の混合物を含む、請求項4記載の製剤。
【請求項６】
極性脂質の結晶性ネットワーク系が、極性液体内で形成される、請求項1〜5のいずれか一項記載の製剤。
【請求項７】
極性脂質が、水、グリセロール、エチレングリコール、プロピレングリコール、またはそれらの任意の2つまたはそれ以上の混合物を含む、請求項6記載の製剤。
【請求項８】
安定化剤をさらに含む、請求項1〜7のいずれか一項記載の製剤。
【請求項９】
安定化剤がドクセートナトリウムを含む、請求項8記載の製剤。
【請求項１０】
抗アンドロゲンに反応する状態の治療のための薬剤の製造における、請求項1〜9のいずれか一項記載のナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤の使用。
【請求項１１】
状態が、ざ瘡、多毛、男性ホルモン性脱毛、または酒さのうちの少なくとも1つである、請求項10記載の使用。
【請求項１２】
極性脂質の固体結晶の分散を含む結晶性ネットワーク系であって、脂質は親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のざ瘡の局所治療に使用するために取り込まれた物質側に露出している、結晶性ネットワーク系。
【請求項１３】
光子相関分光法で測定した平均直径が300nmから900nmの範囲にあるナノ粒子を含むナノ粒子状スピロノラクトン局所製剤の調製プロセスであって、親水性の側面を外側に、疎水性の側面を内側のスピロノラクトンナノ粒子側に露出した極性脂質の固体結晶の水性分散中に、スピロノラクトンのナノ懸濁液を取り込む段階を含む、調製プロセス。
【国際調査報告】
2006511525.tif 000028
2006511525.tif 000029
2006511525.tif 000030
2006511525.tif 000031
2006511525.tif 000032
2006511525.tif 000033