(57)【要約】本発明は、プロスタグランジンＥ２受容体のＥＰ４サブタイプの強力な選択的作動薬である式（Ｉ）の化合物、緑内障および患者の目の眼内圧上昇に関連する他の病気の治療におけるそれらの使用または調合物に関する。    【化２７】2006504679.tif 000029
2006504679.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化１】
2006504679.tif 000023
（式中、
Ｘは、ＯまたはＳであり；
Ｙ１は、
１）ＣＨ２ＣＨ２、
２）ＣＨＣＨ、または
３）下記：
【化２】
2006504679.tif 000024
であり、
Ｙは、Ｃ（Ｏ）またはＣＨ（ＯＨ）であり；
ＡおよびＷは、
１）結合、および
２）非置換または１、２、３もしくは４個のハロゲン原子で置換されているＣ１〜６アルキレン
から成る群より独立して選択され；
Ｚは、
１）Ｏ、
２）Ｓ、
３）下記：
【化３】
2006504679.tif 000025
４）ＣＨ２、
５）ＨＣ＝ＣＨ、
６）Ｃ≡Ｃ、または
７）二置換アリールまたはヘテロアリール（この場合、環の１つの環原子は、下記部分：
【化４】
2006504679.tif 000026
に結合しており、もう一つの環原子は、下記部分：
【化５】
2006504679.tif 000027
に結合している）
であり、
但し、ＺがＯまたはＳである時には、ＡおよびＷは、非置換または１、２、３もしくは４個のハロゲン原子で置換されているＣ１〜６アルキレンから成る群より独立して選択され；
Ｒ１は、
ＣＯＲ５、
ＯＨ、
ＣＮ、
（ＣＨ２）１〜３ＣＯ２Ｒ６、
（ＣＨ２）０〜４ＳＯ３Ｒ６、
ＣＦ２ＳＯ２ＮＨ２、
ＳＯ２ＮＨ２、
ＳＯ２ＮＨＣＯＲ８、
ＰＯ（ＯＨ）２、
Ｃ１〜４アルコキシ、
ヒドロキシメチルケトン、
（ＣＨ２）０〜４ヘテロシクリル（この場合のヘテロシクリルは、非置換であるか、１から３個のＲａ基で置換されている）、または
テトラゾール
であり；
Ｒ２は、
１）Ｃ１〜６アルキル（但し、Ｒ２が、ｎ−ペンチルでないことを条件とする）、
２）（ＣＨ２）０〜８Ｃ６〜１０アリール、
３）（ＣＨ２）０〜８Ｃ５〜１０ヘテロアリール、
４）（ＣＨ２）０〜８Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル、
５）（ＣＨ２）０〜８Ｃ３〜８シクロアルキル、
６）Ｏ−Ｃ１〜１０アルキル、
７）Ｏ−Ｃ６〜１０アリール、
８）Ｏ−Ｃ５〜１０ヘテロアリール、
９）Ｏ−Ｃ５〜１０ヘテロシクロアルキル、
１０）Ｏ−Ｃ３〜１０シクロアルキル
（この場合、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルおよびシクロアルキルは、非置換であるか、１から３個のＲｂ基で置換されている）
であり；
Ｒ３およびＲ４は、
１）水素、
２）ハロゲン、および
３）Ｃ１〜６アルキル
から成る群より独立して選択されるか、
Ｒ３およびＲ４はこれらが結合している炭素原子と一緒に、Ｃ３〜７シクロアルキル環を形成しており；
Ｒ５は、
１）水素、
２）ＯＨ、
３）ＣＨ２ＯＨ、
４）Ｃ１〜６アルコキシ、
５）ＮＨＰＯ２Ｒ６、
６）ＮＨＲ９、
７）ＮＨＳＯ２Ｒ８、または
８）ＮＲ６Ｒ７
であり；
Ｒ６およびＲ７は、水素およびＣ１〜６アルキルから成る群より独立して選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ６〜１０アリール、およびＣ１〜４アルキルから成る群より選択され；
Ｒ９は、アシルまたはスルホニルであり；ならびに
ＲａおよびＲｂは、
１）Ｃ１〜６アルコキシ、
２）非置換または
ａ）Ｃ１〜６アルコキシ、
ｂ）Ｃ１〜６アルキルチオ、
ｃ）ＣＮ、
ｄ）ＯＨ、もしくは
ｅ）ＣＦ３
で置換されているＣ１〜６アルキル、
３）ＣＦ３、
４）ニトロ、
５）アミノ、
６）シアノ、
７）Ｃ１〜６アルキルアミノ、
８）ハロゲン、
９）ＯＲｃ、
１０）ＯＣＨ２Ｒｃ、および
１１）ＣＨ２ＯＲｃ
から成る群より独立して選択され；
Ｒｃは、
１）Ｃ６〜１０アリール、
２）Ｃ５〜１０ヘテロアリール、
３）Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル、または
４）Ｃ３〜８シクロアルキル
である）
を有する化合物またはその医薬適合性の塩。
【請求項２】
Ｒ２が、
１）シクロヘキシル、
２）非置換アリール、または
３）ａ）非置換Ｃ１〜６アルキル、
ｂ）Ｃ１〜６アルコキシで置換されているＣ１〜６アルキル、
ｃ）ハロゲン、もしくは
ｄ）ＣＦ３
で置換されているアリール
である、請求項１に記載の化合物またはその医薬適合性の塩。
【請求項３】
Ｒ１が、テトラゾールまたはＣＯＲ５（この場合、Ｒ５は、ＣＨ２ＯＨまたはＯＨである）である、請求項２に記載の化合物またはその医薬適合性の塩。
【請求項４】
Ａが、結合、（ＣＨ２）１〜４、または（ＣＨ２）１〜５ＣＦ２であり、Ｗが、結合または（ＣＨ２）１〜６である、請求項３に記載の化合物またはその医薬適合性の塩。
【請求項５】
Ｚが、
１）ＣＨ２、
２）ＣＨ＝ＣＨ、
３）Ｃ≡Ｃ、
４）Ｏ、
５）Ｓ、
６）下記：
【化６】
2006504679.tif 000028
７）二置換チオフェン、
８）二置換フラン、または
９）二置換ベンゼン
であり；ならびに
Ｒ３およびＲ４が、水素およびＦから成る群より独立して選択されるか、
Ｒ３およびＲ４が、それらが結合している炭素原子と一緒に、シクロプロピルまたはシクロヘキシル環を形成している、請求項４に記載の化合物またはその医薬適合性の塩。
【請求項６】
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ−３−ヒドロキシ−３−（１−フェニルシクロプロピル）プロプ−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
７−（４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）フェニル］ブト−１−エニル｝−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル）ヘプタン酸、
４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）  フェニル］ブト−１−エニル｝−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［２−（２，２−ジフルオロ−１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−「２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（７−ヒドロキシ−６−オキソヘプチル）−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−イニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−イニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−イニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）−２−フランカルボン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
２−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−２，２−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−５，５−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−６，６−ジフルオロヘプタン酸、
４−（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝エトキシ）酪酸、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロポキシ）プロパン酸、
（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ブトキシ）酢酸、
［（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
３−［（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）チオ］プロパン酸、
４−［（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝エチル）チオ］酪酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−３−（１−フェニルシクロプロピル）プロプ−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
７−（４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）フェニル］ブト−１−エニル｝−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル）ヘプタン酸、
４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）  フェニル］ブト−１−エニル｝−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［２−（２，２−ジフルオロ−１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（７−ヒドロキシ−６−オキソヘプチル）−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−イニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−イニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−イニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）−２−フランカルボン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシｄ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
２−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−２，２−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−５，５−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−６，６−ジフルオロヘプタン酸、
４−（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝エトキシ）酪酸、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロポキシ）プロパン酸、
（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ブトキシ）酢酸、
［（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
３−［（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）チオ］プロパン酸、
４−［（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝エチル）チオ］酪酸
から成る群より選択される、請求項５に記載の化合物またはその医薬適合性の塩。
【請求項７】
治療有効量の請求項１に記載の化合物を下記治療が必要な患者に投与することを含む、高眼圧症の治療、緑内障の治療、黄斑浮腫の治療、黄斑変性の治療、網膜および視神経乳頭血速度の上昇、網膜および視神経圧の増加、神経保護作用の提供または眼乾燥症の治療により眼内圧上昇に関連した疾患を治療するための方法。
【請求項８】
眼用調合物が、キサンタンガムまたはゲランガムを場合によって含有する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記眼用調合物が、溶液または懸濁液である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記調合物に添加されるβ−アドレナリン遮断薬、副交感神経様作用薬、交感神経様作用薬、炭酸脱水酵素阻害薬、プロスタグランジン、降圧脂質、神経保護物質および５−ＨＴ２受容体作動薬から成る群より選択された活性成分を患者に投与することをさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記β−アドレナリン遮断薬が、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロールまたはレボブノロールであり；前記副交感神経様作動薬が、ピロカルピンであり；前記交感神経作動薬が、エピネフリン、ブリモニジン、イオピジン、クロニジンまたはｐ−アミノクロニジンであり；前記炭酸脱水酵素阻害薬が、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミドまたはブリンゾラミドであり；前記プロスタグランジンが、ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラまたはＳ１０３３であり；前記降圧脂質が、ルミガンであり；前記神経保護物質が、エリプロジル、Ｒ−エリプロジルまたはメマンチネルであり；および前記５−ＨＴ２受容体作動薬が、フマル酸１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールまたは２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１から６のいずれか一項において定義されている式Ｉの化合物またはその医薬適合性の塩、および医薬適合性の担体を含む医薬調合物。
【請求項１３】
プロスタグランジンＥ２受容体のＥＰ４サブタイプの選択的作動薬として使用するための、請求項１から６のいずれか一項において定義されている式Ｉの化合物またはその医薬適合性の塩。
【請求項１４】
高眼圧症の治療、緑内障の治療、黄斑浮腫の治療、黄斑変性の治療、網膜および視神経乳頭血速度の上昇、網膜および視神経圧の増加、神経保護作用の提供または眼乾燥症の治療により眼内圧上昇に関連した疾患を治療するための薬物の製造における、請求項１から６のいずれか一項において定義されている式Ｉの化合物またはその医薬適合性の塩の使用。
【請求項１５】
高眼圧症の治療、緑内障の治療、黄斑浮腫の治療、黄斑変性の治療、網膜および視神経乳頭血速度の上昇、網膜および視神経圧の増加、神経保護作用の提供または眼乾燥症の治療により上昇眼内圧に関連した疾患を治療するための、局所投与用形態の請求項１２に記載の調合物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本出願は、２００２年８月２８日出願の米国特許仮出願番号第６０／４０６，５３０号の恩典を請求するものである。
【０００２】
緑内障は、眼内圧が高すぎて目が正常に機能できない目の変性疾患である。結果として、視神経乳頭に障害が発生し、回復不能な視覚機能の欠損が生じる。治療しなければ、緑内障は、最終的には失明につながることもある。大多数の眼科医は現在、高眼圧症（すなわち、視神経乳頭の損傷または特徴的な緑内障性視野欠損を伴わない眼内圧上昇状態）は単に緑内障の発症の早期を表すものと考えている。
【０００３】
緑内障を治療するためにかつて使用されていた薬の多くは、不満足であると判明した。緑内障の初期治療法にはピロカルピンが利用され、この薬を価値はあるが第一線の薬としては不満なものにする望ましくない局所効果が生じた。最近、臨床医は、多くのβ−アドレナリン作用拮抗薬が、眼内圧の低下に有効であることに注目している。これらの薬剤の多くはこの目的に有効であるが、この治療が有効でない、または充分には有効でない患者も存在する。これらの薬剤の多くは、用量増加に伴って明らかになる、またそれらを長期にわたる目への使用に不適格にする、また心臓血管作用を生じることもある他の特徴（例えば、膜安定活化活性）も有する。
【０００４】
炭酸脱水酵素阻害薬と呼ばれる薬剤は、この酵素（炭酸脱水酵素）を阻害することにより眼房水の生成を減少させる。こうした炭酸脱水酵素阻害薬は、全身および局所経路による眼内圧上昇の治療に現在使用されているが、望ましくない作用を伴わずにこれらの薬剤を使用する現行の治療法、特に全身経路を用いるものは、未だない。局所的に有効な炭酸脱水酵素阻害薬は、米国特許第４，３８６，０９８号、同第４，４１６，８９０号、同第４，４２６，３８８号、同第４，６６８，６９７号、同第４，８６３，９２２号、同第４，７９７，４１３号、同第５，３７８，７０３号、同第５，２４０，９２３号および同第５，１５３，１９２号に開示されている。
【０００５】
プロスタグランジンおよびプロスタグランジン誘導体も眼内圧を低下させることが知られている。プロスタグランジンには、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、ＩおよびＪ系列（欧州特許第０５６１０７３  Ａ１号）を含む幾つかのタイプがある。Ｂｉｔｏの米国特許第４，８８３，８１９号は、眼内圧の低下に関わるＰＧＡ、ＰＧＢおよびＰＧＣの使用および合成を記載している。Ｇｏｈらの米国特許第４，８２４，８５７号は、眼内圧の低下に関わるＰＤＧ２およびそれらの誘導体（Ｃ−１０が窒素に置き換えられている誘導体を含む）の使用および合成を記載している。Ｕｅｎｏらの米国特許第５，００１，１５３号は、眼内圧を低下させるための１３，１４−ジヒドロ−１５−ケトプロスタグランジンおよびプロスタグランジン誘導体の使用および合成を記載している。米国特許第４，５９９，３５３号は、眼内圧低下に関わるエイコサノイドおよびエイコサノイド誘導体（プロスタグランジンおよびプロスタグランジン阻害剤を含む）の使用を記載している。国際公開公報第００／３８６６７号、同第９９／３２４４１号、同第９９／０２１６５号、同第００／３８６６３号、同第０１／４６１４０号、欧州特許第０８５５３８９号、特開２０００−１４７２、米国特許第６，０４３，２７５号および国際公開公報第００／３８６９０号も参照されたし。
【０００６】
プロスタグランジンおよびプロスタグランジン誘導体は、ブドウ膜強膜流出を増加させることにより眼内圧を低下させることが知られている。これは、ＦタイプおよびＡタイプのプロスタグランジンについて当てはまる。本発明は、ブドウ膜強膜流出経路、およびＥ系列のプロスタグランジン（ＰＧＥ２）がＩＯＰ低下を促進し得る他のメカニズムによってＩＯＰを低下させる化合物に特に関係がある。ＥＰ受容体の認知されている四つのサブタイプは、ＩＯＰを低下させる作用を調節すると考えられている（ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３およびＥＰ４；  Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，Ｖｏｌ．１４，ｐａｇｅｓ  ８３−８７（１９９６））。Ｊ．Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４，１，ｐａｇｅｓ  １３−１８（１９８８）；Ｊ．Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｖｏｌ．１１，３，ｐａｇｅｓ  ４４７−４５４（１９９５）；Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ，Ｖｏｌ．６，ｐａｇｅｓ  ５４５−５５３（１９９３）；米国特許第５，６９８，５９８号および同第５，４６２，９６８号、ならびにＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．３１，１２，ｐａｇｅｓ  ２５６０−２５６７（１９９０）も参照されたし。ＥＰ４サブタイプ受容体の作動薬である化合物が、本発明に特に関係がある。
【０００７】
眼内圧を低下させるためのプロスタグランジンまたはそれらの誘導体の使用に伴う問題は、これらの化合物が、しばしば眼内圧の初期上昇を誘導すること、目着色の色を変化させ得ること、および目の周囲の組織を多少増殖させることである。
【０００８】
知られているように、緑内障および眼内圧上昇を治療するための現行の治療法は幾つかあるが、これらの薬剤の有効性と副作用のプロフィールは、理想的なものではない。従って、副作用が殆どまたは全くない、新しい、有効な治療法が未だ必要とされている。
【０００９】
ヒトおよび他の哺乳動物の様々な疾患は、異常なまたは過剰な骨損失を伴う、または随伴する。そうした疾患には、骨粗鬆症、糖質コルチコイド誘発性骨粗鬆症、ページェット病、骨交換異常増加、歯周病、歯牙喪失、骨折、リウマチ様関節炎、人工器官周囲骨溶解、骨形成不全、転移性骨疾患、悪性高カルシウム血症、および多発性骨髄腫が挙げられるが、これらに限定されない。これらの疾患のうちの最も一般的なものの一つが、骨粗鬆症であり、それが最も頻繁に発現するのは、閉経後女性である。骨粗鬆症は、低い骨質量および骨組織微小構築低下を特徴とする全身性骨格疾患であり、結果的に骨形成不全が増し、骨折しやすくなる。骨粗鬆症性骨折は、老年人口における罹患率および死亡率の主因である。女性の５０％もが、および男性の三分の一もが、骨粗鬆症性骨折を経験するであろう。老年人口の大部分の骨密度はすでに低く、また、骨折の危険度はすでに高い。骨粗鬆症、および骨吸収を随伴する他の病気の予防および治療の両方が、有意に必要とされている。骨粗鬆症、ならびに骨損失を随伴する他の疾患は、一般に、慢性的な病気であるため、適切な治療法には長期の治療が通常必要となる。
【００１０】
骨芽細胞および破骨細胞と呼ばれる二つの異なるタイプの細胞が、骨の形成および吸収プロセスにそれぞれ関与する。Ｈ．Ｆｌｅｉｓｃｈ，Ｂｉｓｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ  Ｉｎ  Ｂｏｎｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｆｒｏｍ  Ｔｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｔｏ  Ｔｈｅ  Ｐａｔｉｅｎｔ，３ｒｄ  Ｅｄｔｉｏｎ，Ｐａｒｔｈｅｎｏｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（１９９７）参照。この文献は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる。骨芽細胞は、骨表面に位置する細胞である。これらの細胞は、骨有機基質を分泌し、その後それを石灰化する。フッ化物、副甲状腺ホルモンおよび一定のサイトカイン（プロスタグランジンなど）は、骨芽細胞に対する刺激作用を生じることが知られている。しかし、本研究の目的は、骨芽細胞の骨形成活性を選択的に増大させる、または刺激する治療薬の開発である。
【００１１】
破骨細胞は、皮質骨もしくは骨梁骨の表面または皮質骨内に位置する通常は大型の多核細胞である。破骨細胞は、細胞と骨の間に位置する閉鎖された、封じ込められた微小環境に骨を吸収する。破骨細胞の漸増および活性が一連のサイトカインおよびホルモンによる影響を受けることは知られている。ビスホスホネートが破骨細胞による骨吸収を選択的に抑制することはよく知られており、このことが、骨吸収異常によって生じる、または骨吸収異常を随伴する様々な全身性または局所性骨疾患の治療または予防においてこれらの化合物を重要な治療薬にしている。しかし、ビスホスホネートのそうした有用性にもかかわらず、研究者の間では破骨細胞の骨吸収活性を抑制するさらなる治療薬の開発が未だ望まれている。
【００１２】
ＰＧＥ２系列などのプロスタグランジンが骨形成を刺激することおよびヒトを含む哺乳動物の骨質量を増加させることは、知られている。ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３およびＥＰ４と呼ばれる、その四つの異なる受容体サブタイプが、骨芽細胞および破骨細胞の骨のモデリングおよびリモデリングプロセスの媒介に関与すると考えられている。骨内の主要なプロスタグランジン受容体はＥＰ４であり、これは、サイクリックＡＭＰによるシグナリングによってその効果を生じると考えられている。
【００１３】
式ＩのＥＰ４サブタイプ受容体作動薬は骨形成の刺激に有用であることが、本発明においてさらに判明する。
【００１４】
国際公開公報第０２／２４６４７号、同第０２／４２２６８号、欧州特許第１１３２０８６号、同第８５５３８９号、同第１１１４８１６号、国際公開公報第０１／４６１４０号および同第０１／７２２６８は、ＥＰ４作動薬を開示している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、プロスタグランジンＥ２受容体のＥＰ４サブタイプの強力な選択的作動薬、緑内障および患者の目の眼内圧上昇に関する他の病気の治療におけるそれらの使用または調合物に関する。本発明のもう一つの側面は、哺乳動物種、特にヒトの目に神経保護作用をもたらすためのそうした化合物の使用に関する。さらに、本発明は、骨芽細胞および破骨細胞の骨のモデリングおよびリモデリングプロセスを媒介するための本発明の化合物の使用に関する。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
さらに特に、本発明は、一般構造Ｉ：
【００１７】
【化７】
2006504679.tif 000003
（式中、
Ｘは、ＯまたはＳであり；
Ｙ１は、
１）ＣＨ２ＣＨ２、
２）ＣＨＣＨ、または
３）下記：
【００１８】
【化８】
2006504679.tif 000004
であり、
Ｙは、Ｃ（Ｏ）またはＣＨ（ＯＨ）であり；
ＡおよびＷは、
１）結合、および
２）非置換または１、２、３もしくは４個のハロゲン原子で置換されているＣ１〜６アルキレン
から成る群より独立して選択され；
Ｚは、
１）Ｏ、
２）Ｓ、
３）下記：
【００１９】
【化９】
2006504679.tif 000005
４）ＣＨ２、
５）ＨＣ＝ＣＨ、
６）Ｃ≡Ｃ、または
７）二置換アリールまたはヘテロアリール（この場合、環の１つの環原子は、下記部分：
【００２０】
【化１０】
2006504679.tif 000006
に結合しており、もう一つの環原子は、下記部分：
【００２１】
【化１１】
2006504679.tif 000007
に結合している）
であり、
但し、ＺがＯまたはＳである時には、ＡおよびＷは、非置換または１、２、３もしくは４個のハロゲン原子で置換されているＣ１〜６アルキレンから成る群より独立して選択され；
Ｒ１は、
ＣＯＲ５、
ＯＨ、
ＣＮ、
（ＣＨ２）１〜３ＣＯ２Ｒ６、
（ＣＨ２）０〜４ＳＯ３Ｒ６、
ＣＦ２ＳＯ２ＮＨ２、
ＳＯ２ＮＨ２、
ＳＯ２ＮＨＣＯＲ８、
ＰＯ（ＯＨ）２、
Ｃ１〜４アルコキシ、
ヒドロキシメチルケトン、
（ＣＨ２）０〜４ヘテロシクリル（この場合のヘテロシクリルは、非置換であるか、１から３個のＲａ基で置換されている）、または
テトラゾール
であり；
Ｒ２は、
１）Ｃ１〜６アルキル（但し、Ｒ２が、ｎ−ペンチルでないことを条件とする）、
２）（ＣＨ２）０〜８Ｃ６〜１０アリール、
３）（ＣＨ２）０〜８Ｃ５〜１０ヘテロアリール、
４）（ＣＨ２）０〜８Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル、
５）（ＣＨ２）０〜８Ｃ３〜８シクロアルキル、
６）Ｏ−Ｃ１〜１０アルキル、
７）Ｏ−Ｃ６〜１０アリール、
８）Ｏ−Ｃ５〜１０ヘテロアリール、
９）Ｏ−Ｃ５〜１０ヘテロシクロアルキル、
１０）Ｏ−Ｃ３〜１０シクロアルキル
（この場合、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルおよびシクロアルキルは、非置換であるか、１から３個のＲｂ基で置換されている）
であり；
Ｒ３およびＲ４は、
１）水素、
２）ハロゲン、および
３）Ｃ１〜６アルキル
から成る群より独立して選択されるか、
Ｒ３およびＲ４はこれらが結合している炭素原子と一緒に、Ｃ３〜７シクロアルキル環を形成しており；
Ｒ５は、
１）水素、
２）ＯＨ、
３）ＣＨ２ＯＨ、
４）Ｃ１〜６アルコキシ、
５）ＮＨＰＯ２Ｒ６、
６）ＮＨＲ９、
７）ＮＨＳＯ２Ｒ８、または
８）ＮＲ６Ｒ７
であり；
Ｒ６およびＲ７は、水素およびＣ１〜６アルキルから成る群より独立して選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ６〜１０アリール、およびＣ１〜４アルキルから成る群より選択され；
Ｒ９は、アシルまたはスルホニルであり；ならびに
ＲａおよびＲｂは、
１）Ｃ１〜６アルコキシ、
２）非置換または
ａ）Ｃ１〜６アルコキシ、
ｂ）Ｃ１〜６アルキルチオ、
ｃ）ＣＮ、
ｄ）ＯＨ、もしくは
ｅ）ＣＦ３
で置換されているＣ１〜６アルキル、
３）ＣＦ３、
４）ニトロ、
５）アミノ、
６）シアノ、
７）Ｃ１〜６アルキルアミノ、
８）ハロゲン、
９）ＯＲｃ、
１０）ＯＣＨ２Ｒｃ、および
１１）ＣＨ２ＯＲｃ
から成る群より独立して選択され；
Ｒｃは、
１）Ｃ６〜１０アリール、
２）Ｃ５〜１０ヘテロアリール、
３）Ｃ３〜１０ヘテロシクロアルキル、または
４）Ｃ３〜８シクロアルキル
である）
を有する新規ＥＰ４作動薬またはその医薬適合性の塩に関する。
【００２２】
本発明の化合物は、キラル中心を有することがあり、ラセミ体、ラセミ混合物として、および個々のジアステレオマー、またはエナンチオマーとして発生することがある。そうしたすべての異性体形が、本発明に包含される。本発明の化合物は、多型結晶形を有することもある。そうしたすべての多型結晶形が、本発明に包含される。本発明の化合物は、互変異性形も含む。そうしたすべての互変異性形が、本発明に包含される。
【００２３】
本発明は、上記化合物のプロドラッグ形も含む。活性薬物のエステル誘導体などのプロドラッグは、温血動物の血流に吸収されると、その薬物形を放出し、その薬物が治療有効度を改善できるような方式で分解する化合物誘導体である。プロドラッグは、通常投与される拮抗薬の量と比して少ない量で投与することができる。プロドラッグは、経口投与することができる。プロドラッグは、胃腸系を通過している間、構造の完全性を保ち、細胞に有効に送達される。それらは、代謝反応を受けて活性酸を生成し、その後それが血小板受容体部位と相互作用する。
【００２４】
本発明のこの側面および他の側面は、本発明の明細書全体を基に理解される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
本発明の化合物および医薬適合性の塩の一つの類において、
Ｒ２は、
１）シクロヘキシル、
２）非置換アリール、または
３）ａ）非置換Ｃ１〜６アルキル、
ｂ）Ｃ１〜６アルコキシで置換されているＣ１〜６アルキル、
ｃ）ハロゲン、もしくは
ｄ）ＣＦ３
で置換されているアリールである。
【００２６】
この類の下位分類において、Ｒ１は、テトラゾールまたはＣＯＲ５（この場合、Ｒ５は、ＣＨ２ＯＨまたはＯＨである）である。
【００２７】
この下位分類の中の一つの群において、Ａは、結合、（ＣＨ２）１〜４、または（ＣＨ２）１〜５ＣＦ２であり、Ｗは、結合または（ＣＨ２）１〜６である。
【００２８】
この群の下位分類において、
Ｚは、
１）ＣＨ２、
２）ＣＨ＝ＣＨ、
３）Ｃ≡Ｃ、
４）Ｏ、
５）Ｓ、
６）下記：
【００２９】
【化１２】
2006504679.tif 000008
７）二置換チオフェン、
８）二置換フラン、または
９）二置換ベンゼン
であり；ならびに
Ｒ３およびＲ４は、水素およびＦから成る群より独立して選択されるか、Ｒ３およびＲ４は、それらが結合している炭素原子と一緒に、シクロプロピルまたはシクロヘキシル環を形成している。
【００３０】
本発明の具体例としての化合物には、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ−３−ヒドロキシ−３−（１−フェニルシクロプロピル）プロプ−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
７−（４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）フェニル］ブト−１−エニル｝−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル）ヘプタン酸、
４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）  フェニル］ブト−１−エニル｝−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−（３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［２−（２，２−ジフルオロ−１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−「２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（７−ヒドロキシ−６−オキソヘプチル）−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−イニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−イニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−イニル］−１，３−チアゾリジン−２−オン、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）−２−フランカルボン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
２−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−チアゾリジン−２−オン、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−２，２−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−５，５−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝−６，６−ジフルオロヘプタン酸、
４−（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝エトキシ）酪酸、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロポキシ）プロパン酸、
（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ブトキシ）酢酸、
［（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
３−［（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝プロピル）チオ］プロパン酸、
４−［（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝エチル）チオ］酪酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−３−（１−フェニルシクロプロピル）プロプ−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
７−（４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）フェニル］ブト−１−エニル｝−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル）ヘプタン酸、
４−｛（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−［３−（メトキシメチル）  フェニル］ブト−１−エニル｝−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４−シクロヘキシル−３−ヒドロキシブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−（３−オキソ−４−フェニルブチル）−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［２−（２，２−ジフルオロ−１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［２−（１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）シクロプロピル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（７−ヒドロキシ−６−オキソヘプチル）−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｅ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（２Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（３Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［（４Ｚ）−６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−エニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−４−イニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−２−イニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へクス−３−イニル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）チオフェン−２−カルボン酸、
５−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）−２−フランカルボン酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシｄ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｅ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）チエン−２−イル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛（２Ｚ）−３−［５−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）−２−フリル］プロプ−２−エニル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
２−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）安息香酸、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛３−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）フェニル］プロピル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［３−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［４−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛２−［２−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イルメチル）フェニル］エチル｝−１，３−オキサゾリジン−２−オン、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−２，２−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−５，５−ジフルオロヘプタン酸、
７−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝−６，６−ジフルオロヘプタン酸、
４−（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝エトキシ）酪酸、
３−（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロポキシ）プロパン酸、
（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ブトキシ）酢酸、
［（４−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
３−［（３−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝プロピル）チオ］プロパン酸、
４−［（２−｛４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝エチル）チオ］酪酸、および
それらの医薬適合性の塩が挙げられる。
【００３１】
特に別段の指定がない限り以下に定義する用語を用いて、本発明を詳細に説明する。
【００３２】
本明細書で用いられる場合、用語「治療有効量」は、望ましい治療方式に従って投与されたとき、望ましい治療効果もしくは応答を惹起すか、望ましい利点を生じる、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬または本発明の他の活性物質の量を意味する。骨吸収異常の治療に関する好ましい治療有効量は、骨形成刺激量である。同様に、高眼圧症または緑内障の治療に関する好ましい治療有効量は、眼内圧の低下、ならびに／または高眼圧症および／もしくは緑内障の治療に有効な量である。
【００３３】
本明細書で用いられる場合、用語「医薬適合性」は、毒性または安全性の見地から、ヒトを含む哺乳動物への投与に適することを一般には意味する。
【００３４】
用語「プロドラッグ」は、投与および吸収後に本特許請求の範囲に記載の化合物を何らかの代謝プロセスにより放出する薬物前駆体である化合物を指す。本発明の化合物のプロドラッグの非限定的な例は、酸官能基が、患者に投与後に容易に加水分解されるようにする構造を有する、ピロリジノン基の酸である。具体例としてのプロドラッグには、典型的には環構造、好ましくは芳香族またはヘテロ芳香族環構造に結合している遊離ＣＨ２ＣＯＯＨ基（場合によっては医薬適合性の塩の形、例えば、−ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋であり得る）を有する、非麻薬系鎮痛薬／非ステロイド性抗炎症薬である酢酸誘導体が挙げられる。
【００３５】
特に別段の指定がない限り、用語「アルキル」は、特に別様に定義されていない限り炭素原子を１から１０個含有する一価のアルカン（炭化水素）由来ラジカルを指す。好ましいアルキル基には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。アルキル基が、アルキル基で置換されていると言う場合、これは、「分枝鎖アルキル基」と区別なく用いられる。
【００３６】
用語「アルコキシ」は、アルキル基が本明細書に記載されているように場合によって置換されているＣ１〜Ｃ６アルキル−Ｏ−を指す。アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシおよびそれらの異性基である。
【００３７】
用語「ハロゲン」または「ハロ」は、塩素、フッ素、ヨウ素または臭素を指す。
【００３８】
用語「アリール」は、芳香族環、例えば、フェニル、置換フェニルおよびこれらに類するもの、ならびに融合している環、例えば、ナフチル、フェナントレニルおよびこれらに類するものを指す。従って、アリール基は、隣接する炭素原子または適するヘテロ原子の間に交互（共鳴）二重結合を有する原子数少なくとも６の環を少なくとも一つ含有し、こうした環は、５個以下存在し、それらの中に２２個以下の原子を含有する。好ましいアリール基は、フェニル、ナフチルおよびフェナントレニルである。特に別段の指定がない限り、アリール環は、非置換であってもよいし、−ＣＦ３、−ＣＮ、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシ、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）、−ＮＯ２、−ＮＲｄＲｆ、−ＳＯ２Ｒｄ、ＳＯ２ＮＲｄＲｆ、−ＣＯＮＲｄＲｆ、またはＣＯＲｄ（この場合、ＲｄおよびＲｆは、独立して選択された水素およびＣ１〜４アルキルである）のうちの一つ以上で置換されていてもよい。好ましい置換アリールには、フェニルおよびナフチルが挙げられる。
【００３９】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、環内の炭素原子のうちの一つが、Ｏ、ＳまたはＮから選択されたヘテロ原子に置き換えられており、および、３個以下のさらなる炭素原子がヘテロ原子に置き換えられていてもよい、炭素原子数３から１０のシクロアルキル基（非芳香族性のもの）を指す。特に別段の指定がない限り、ヘテロシクロアルキル環は、非置換であってもよいし、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノおよびハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）のうちの一つ以上で置換されていてもよい。
【００４０】
用語「シクロアルキル」は、特に別段の指定がない限り、指定数の炭素原子を有する環状アルキル基（非芳香族性のもの）を指し、例えば、Ｃ３〜７シクロアルキルは、炭素原子を３、４、５、６または７個有する。特に別段の指定がない限り、シクロアルキル環は、非置換であってもよいし、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノおよびハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）のうちの一つ以上で置換されていてもよい。例には、シクロプロピル、シクロブチルおよびシクロペンチルが挙げられる。
【００４１】
用語「ヘテロ原子」は、独立して選択されたＯ、ＳまたはＮを意味する。
【００４２】
用語「ヘテロアリール」は、炭素または窒素原子が結合点であり、場合によって１または２個のさらなる炭素原子が、ＯまたはＳから選択されたヘテロ原子に置き換えられており、場合によって１から３個のさらなる炭素原子が、窒素へテロ原子に置き換えられている、へテロ原子（Ｏ、ＳもしくはＮ）を少なくとも１個含有する環原子数５もしくは６の単環式芳香族炭化水素または原子数８から１０の二環式芳香族環を指し、前記ヘテロアリール基は、本明細書に記載されているように場合によって置換されている。このタイプの例は、ピロール、ピリジン、オキサゾール、チアゾール、テトラゾールおよびオキサジンである。特に別段の指定がない限り、ヘテロアリール環は、非置換であってもよいし、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノおよびハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）のうちの一つ以上で置換されていてもよい。本発明ために、テトラゾールは、すべての互変異性形を包含する。さらなる窒素原子が第一の窒素および酸素または硫黄とともに存在してもよく、それによって例えばチアジアゾールが得られる。
【００４３】
本明細書で用いられる場合、用語「複素環」および「複素環式」は、飽和しているか不飽和であり、炭素原子とＮ、ＯおよびＳから成る群より選択される１から４個のへテロ原子とから成る、安定な５から７員単環式または安定な８から１１員二環式複素環を表し、また、上で定義した複素環のいずれかがベンゼン環と融合しているあらゆる二環式の基を包含する。複素環は、結果として安定な構造をもたらすあらゆるへテロ原子または炭素原子で結合することができる。融合へテロ環構造は、炭素環を含んでもよいが、複素環一つだけは含む必要がある。用語「複素環」または「複素環式」は、ヘテロアリール部分を包含する。このような複素環成分の例には、アゼピニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニルおよびチエニルが挙げられるが、これらに限定されない。このような複素環成分の例には、アゼピニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナルチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、２−ピリジノニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル、チエニルおよびチアゾリルが挙げられるが、これらに限定されない。特に別段の指定がない限り、ヘテロシクリル環は、非置換であってもよいし、Ｃ１〜４アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシ、アミノおよびハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩ）のうちの一つ以上で置換されていてもよい。
【００４４】
用語「二置換アリールまたは二置換ヘテロアリール環」は、２個の環炭素原子が、結合した置換基を有し、結合した水素原子を有さないアリールおよびヘテロアリール環、例えば、２，５−置換チオフェン、フランおよびチアゾール、ならびに１，２−、１，３−および１，４−置換ベンゼンを包含する。このような二置換環には、下記：
【００４５】
【化１３】
2006504679.tif 000009
のように構造描写されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４６】
一つの好ましい実施態様において、二置換アリール環は、下記：
【００４７】
【化１４】
2006504679.tif 000010
である。
【００４８】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００４９】
【化１５】
2006504679.tif 000011
である。
【００５０】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００５１】
【化１６】
2006504679.tif 000012
である。
【００５２】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００５３】
【化１７】
2006504679.tif 000013
である。
【００５４】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００５５】
【化１８】
2006504679.tif 000014
である。
【００５６】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００５７】
【化１９】
2006504679.tif 000015
である。
【００５８】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００５９】
【化２０】
2006504679.tif 000016
である。
【００６０】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００６１】
【化２１】
2006504679.tif 000017
である。
【００６２】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００６３】
【化２２】
2006504679.tif 000018
である。
【００６４】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００６５】
【化２３】
2006504679.tif 000019
である。
【００６６】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００６７】
【化２４】
2006504679.tif 000020
である。
【００６８】
もう一つの好ましい実施態様において、二置換ヘテロアリール環は、下記：
【００６９】
【化２５】
2006504679.tif 000021
である。
【００７０】
本明細書で用いられる場合、用語「置換されている」は、指定の原子上の一つ以上のいずれかの水素原子が、指示された群から選択されたものに置き換えられていることを意味するが、その指定の原子の正常な原子価を越えないこと、および置換が、結果として安定な化合物を生じることを条件とする。置換基がケト（すなわち、＝Ｏ）である時には、原子上の水素原子２個が置き換えられる。
【００７１】
本明細書で用いられる場合、用語「作動薬」は、天然作動薬、ＰＧＥ２と比較して最大、最大上または最大下の作用を生じるようにＥＰ４受容体と相互作用する、式ＩのＥＰ４サブタイプ化合物を意味する。Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ，Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，９ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９６，ｃｈａｐｔｅｒ  ２参照。
【００７２】
本発明のもう一つの実施態様は、式ＩのＥＰ４作動薬および場合によって医薬適合性の担体を含有する組成物に関する。
【００７３】
本発明のさらにもう一つの実施態様は、式ＩのＥＰ４作動薬および場合によって医薬適合性の担体を含有する組成物の投与、好ましくは局所または眼房内投与による、上昇した眼内圧の低下方法または緑内障の治療方法に関する。眼内圧上昇もしくは緑内障またはそれらの合併症の治療薬を製造するための式Ｉの化合物の使用も、本発明に包含される。
【００７４】
さらに、本発明は、式Ｉの化合物を含む医薬組成物の製造方法に関する。
【００７５】
さらに、本発明は、式Ｉの化合物および医薬適合性の担体を含む医薬組成物の製造方法に関する。
【００７６】
本特許請求の範囲に記載の化合物は、ＰＧＥ２受容体、特にＥＰ４サブタイプ受容体に強く結合し、作用する。それ故、緑内障および高眼圧の予防および／または治療に有用である。
【００７７】
眼乾燥症は、何百万人もの人々を悩ませている一般的な目表面の疾病である。眼乾燥症は、多数の無関係な病因から生じ得るように見えるが、共通の結末は涙液膜の損傷であり、その結果、目の漏出外面の水分欠乏が生じる。（Ｌｅｍｐ，Ｒｅｐｏｒｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎ  Ｅｙｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ／Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  Ｗｏｒｋｓｈｏｐ  ｏｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  Ｄｒｙ  Ｅｙｅｓ，Ｔｈｅ  ＣＬＡＯ  Ｊｏｕｒｎｅｌ，２１（４）：２２１−２３１（１９９５））。眼乾燥症の一つの原因は、眼表面を保護および潤滑するムチンの結膜細胞および／または角膜上皮細胞による生産低下である（Ｇｉｐｓｏｎ  ａｎｄ  Ｉｎａｔｏｍｉ，Ｍｕｃｉｎ  ｇｅｎｅｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｂｙ  ｏｃｕｌａｒ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ．  Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１６：８１−９８（１９９７））。機能的ＥＰ４受容体が、結膜上皮細胞において見出されており（米国特許第６，３４４，４７７号参照。その全文が本明細書に参照して組み込まれる）、ヒト角膜上皮細胞（Ｐｒｏｇｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１６：８１−９８（１９９７））および結膜細胞（Ｄａｒｔｔら，Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｒｖｅｓ  ａｄｊａｃｅｎｔ  ｔｏ  ｇｏｂｌｅｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｃｏｎｊｕｃｎｔｉｖａ．  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１４：９９３−１０００（１９９５））の両方が、ムチンを分泌できることがわかる。このように、式Ｉの化合物は、眼乾燥症の治療に有用である。
【００７８】
黄斑浮腫は、目の後極の極めて重要な中心視覚帯内の網膜内部の腫脹である。網膜内の液体の蓄積は、神経成分を互いからおよびそれらの局所血液供給から剥離させる傾向があり、それによって、その領域における視覚機能の活動停止が引き起こされる。ＩＯＰを低下させるＥＰ４作動薬は、黄斑浮腫または黄斑変性などの黄斑領域の疾病の治療に有用であると考えられる。それ故、本発明のもう一つの側面は、黄斑浮腫または黄斑変性の治療方法である。
【００７９】
緑内障は、視神経の進行性萎縮を特徴とし、多くの場合、眼内圧（ＩＯＰ）上昇を随伴する。しかし、神経保護作用を付与する薬物を用いることにより、必ずしもＩＯＰに作用せずとも緑内障を治療することができる。Ａｒｃｈ．  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｏｌ．１１２，Ｊａｎ  １９９４，ｐｐ．３７−４４；  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｍｏｌ．＆  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，３２，５，Ａｐｒｉｌ  １９９１，ｐｐ．１５９３−９９参照。ＩＯＰを低下させるＥＰ４作動薬は、神経保護作用をもたらすために有用であると考えられる。これらは、ＩＯＰを低下させることにより、網膜および視神経乳頭血速度の増大ならびに網膜および視神経酸素の増加（これらを一緒にすると、視神経の健康に有益である）に有効でもあると考えられる。結果として、本発明は、式ＩのＥＰ４作動薬の使用による網膜および視神経乳頭血速度の増大または網膜および視神経酸素張力の増加または神経保護作用の提供またはそれらを組合せのための方法にさらに関する。
【００８０】
本発明において生成される化合物は、適する既知医薬適合性賦形剤と容易に併用して、哺乳動物（ヒトを含む）に投与して有効なＩＯＰ低下を達成することができる組成物を生じる。それ故、本発明は、その必要がある患者に式Ｉの化合物の一つを単独で、またはチモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロールなどなどのβ遮断薬；ピロカルピンなどの副交感神経様作用薬；エピネフリン、イオピジン、ブリモニジン、クロニジン、ｐ−アミノクロニジンなどの交感神経様作用薬；ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミドまたはブリンゾラミドなどの炭酸脱水酵素阻害薬；ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラまたはＳ１０３３（米国特許第５，８８９，０５２号、同第５，２９６，５０４号、同第５，４２２，３６８号および同第５，１５１，４４４号に記載の化合物）などのプロスタグランジン；ルミガンおよび米国特許第５，３５２，７０８号に記載の化合物などの降圧脂質；米国特許第４，６９０，９３１号に開示されている神経保護物質、特に、メマンチンを含む国際公開公報第９４／１３２７５号に記載されているようなエリプロジルおよびＲ−エリプロジル；またはＰＣＴ／ＵＳ００／３１２４７に記載されているような５−ＨＴ２受容体作動薬、特に、フマル酸１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールおよび２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンと併用で投与することによる、高眼圧の治療方法にも関する。
【００８１】
本発明は、その必要がある患者に式Ｉの化合物の一つを単独で、またはチモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロールなどなどのβ遮断薬；ピロカルピンなどの副交感神経様作用薬；エピネフリン、イオピジン、ブリモニジン、クロニジン、ｐ−アミノクロニジンなどの交感神経様作用薬；ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミドまたはブリンゾラミドなどの炭酸脱水酵素阻害薬；ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラまたはＳ１０３３（米国特許第５，８８９，０５２号、同第５，２９６，５０４号、同第５，４２２，３６８号および同第５，１５１，４４４号に記載の化合物）などのプロスタグランジン；ルミガンおよび米国特許第５，３５２，７０８号に記載の化合物などの降圧脂質；米国特許第４，６９０，９３１号に開示されている神経保護物質、特に、メマンチンを含む国際公開公報第９４／１３２７５号に記載されているようなエリプロジルおよびＲ−エリプロジル；またはＰＣＴ／ＵＳ００／３１２４７に記載されているような５−ＨＴ２受容体作動薬、特に、フマル酸１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールおよび２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンと併用で投与することによる、網膜および視神経乳頭血速度の増大または網膜および視神経酸素張力の増加または神経保護作用の提供またはそれらを組合せのための方法にも関する。網膜および視神経乳頭血速度の増大または網膜および視神経酸素張力の増加または神経保護作用の提供またはそれらを組合せのための薬物を製造するための式Ｉの化合物の使用も本発明に包含される。
【００８２】
本発明は、その必要がある患者に式Ｉの化合物の一つを単独で、またはチモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロールなどなどのβ遮断薬；ピロカルピンなどの副交感神経様作用薬；エピネフリン、イオピジン、ブリモニジン、クロニジン、ｐ−アミノクロニジンなどの交感神経様作用薬；ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミドまたはブリンゾラミドなどの炭酸脱水酵素阻害薬；ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラまたはＳ１０３３（米国特許第５，８８９，０５２号、同第５，２９６，５０４号、同第５，４２２，３６８号および同第５，１５１，４４４号に記載の化合物）などのプロスタグランジン；ルミガンおよび米国特許第５，３５２，７０８号に記載の化合物などの降圧脂質；米国特許第４，６９０，９３１号に開示されている神経保護物質、特に、メマンチンを含む国際公開公報第９４／１３２７５号に記載されているようなエリプロジルおよびＲ−エリプロジル；またはＰＣＴ／ＵＳ００／３１２４７に記載されているような５−ＨＴ２受容体作動薬、特に、フマル酸１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールおよび２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンと併用で投与することによる、黄斑浮腫または黄斑変性の治療方法にさらに関する。黄斑浮腫または黄斑変性用の薬物を製造するための式Ｉの化合物の使用も本発明に包含される。
【００８３】
本発明の化合物は、神経障害性疼痛の治療に用いることもできる。神経障害性疼痛症候群は、神経損傷後に発現し得、結果として生じる疼痛は、元々の損傷が治癒した後でさえ何ヶ月も、または何年も残存する。神経損傷は、末梢神経、背根、脊髄、または脳内の一定領域において発生し得る。神経障害性疼痛症候群は、それらを突然引き起こす疾病または事象に従って伝統的に分類される。神経障害性疼痛症候群には、糖尿病性ニューロパシー；坐骨神経痛；非特異性下背痛；多発性硬化症疼痛；線維筋痛症；ＨＩＶ関連ニューロパシー；ヘルペス後神経痛；三叉神経痛；および身体的外傷、切断、癌、毒または慢性炎症性状態の結果生じる疼痛が挙げられる。これらの状態は、治療が困難であり、幾つかの薬が限られた効能を有することは知られているが、完全な疼痛制御は、めったに達成されない。神経障害性疼痛の症状は、途方もなく多岐にわたり、突発性の電撃痛（ずきずきする痛みおよび刺すような痛み）、または進行性灼熱痛とよく説明される。加えて、「しびれてじんじんする感じ」（知覚異常および知覚不全）などの通常は痛くない感覚、有害刺激対する感受性増大（温熱、寒冷、機械的痛覚過敏）、刺激排除後の継続的疼痛感覚（痛覚過敏）または選択感覚経路の不在もしくは欠損（痛覚鈍麻）に関連した痛みがある。
【００８４】
本発明の化合物は、急性腎不全、慢性腎不全、大腸癌、大腸炎、およびＨＩＶ潜時の治療にも用いることができる。
【００８５】
本発明において用いられるＥＰ４作動薬は、治療有効量で静脈内投与、皮下投与、局所投与、経皮投与、非経口投与または当業者には公知の他のあらゆる方法で投与することができる。好ましくは、眼科用医薬組成物は、溶液、懸濁液、軟膏、クリームの形態での、または固形挿入物としての眼への局所投与に適合したものである。本化合物の眼科用調合物は、０．００１から５％、とりわけ０．００１から０．１％の薬物を含有し得る。その用量が、眼内圧の低下、緑内障の治療、血流速度または酸素張力の増大に有効であるならば、例えば約１０％までのようなより高い投薬量、またはより低い投薬量を用いることができる。一回量には、０．００１から５．０ｍｇの間、好ましくは０．００５から２．０ｍｇの間、とりわけ０．００５から１．０ｍｇの間の本化合物をヒトの目に適用することができる。
【００８６】
本化合物を含有する製剤は、製薬用非毒性有機担体または製薬用非毒性無機担体と適便に混合することができる。医薬適合性の担体の代表は、例えば、水、水と水混和性溶媒（低級アルカノールもしくはアラルカノール、植物油、ラッカセイ油、ポリアルキレングリコール、石油ベースのゼリー、エチルセルロース、オレイン酸エチル、カルボキシメチル−セルロース、ポリビニルピロリドン、ミリスチン酸イソプロピルなど）の混合物、および許容される他の常用担体である。本製剤は、例えば、ポリエチレングリコール２００、３００、４００および６００、カーボワックス１，０００、１，５００、４，０００、６，０００および１０，０００のような乳化剤、保存薬、湿潤剤、増粘剤およびこれらに類するもの；第四アンモニウム化合物、フェニル水銀塩（低音殺菌特性を有することが知られており、使用に際し有害でないもの）、チメロサール、メチルおよびプロピルパラベン、ベンジルアルコール、フェニルエタノールなどの抗菌成分；ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、グルコネート緩衝液などの緩衝成分；ならびにソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、オレエート、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチレート、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、モノチオグリセロール、チオソルビトール、エチレンジアミン四酢酸などの他の通常成分；ならびにこれらに類するものような非毒性補助物質も含有することができる。加えて、本発明のために、通常のリン酸緩衝液ビヒクル系、等張ホウ酸ビヒクル、等張食塩水ビヒクル、等張ホウ酸ナトリウムビヒクルおよびこれらに類するものを含む適する眼科用ビヒクルを担体媒体として用いることができる。本製剤は、微粒子調合物の形態であることもできる。本製剤は、固形挿入物の形態であることもできる。例えば、薬物用の担体として固体水溶性ポリマーを用いることができる。挿入物の形成に用いられるポリマーは、あらゆる水溶性非毒性ポリマー、例えば、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、（ヒドロキシ低級アルキルセルロース）、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのセルロール誘導体；ポリアクリル酸塩、アクリル酸エチル、ポリアセチルアミドなどのアクリレート；ゼラチン、アルジネート、ペクチン、トラガカントゴム、インドゴム、ツノマタ、寒天、アラビアゴムなどの天然産物；酢酸デンプン、ヒドロキシメチルデンプンエーテル、ヒドロキシプロピルデンプンなどのデンプン誘導体；ならびにポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、ポリエチレンオキシド、中和カルボポールおよびキサンタンガム、ゲランゴム、および前記ポリマーの混合物などの他の合成誘導体であることができる。
【００８７】
本発明の調合物の投与に適する被験者には、霊長類、ヒトおよび他の動物、特にヒト、ならびにネコ、ウサギおよびイヌなどの家庭向き動物が挙げられる。
【００８８】
本製剤は、使用に際して有害でない抗菌成分、例えば、チメロサール、塩化ベンズアルコニウム、メチルおよびプロピルパラベン、臭化ベンジルドデシニウム、ベンジルアルコールまたはフェニルエタノール；塩化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムまたはグルコネート緩衝液などの緩衝成分；およびソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチレート、エチレンジアミン四酢酸他の通常成分；ならびにこれらに類するもののような非毒性補助物質を含有することができる。
【００８９】
眼科用溶液または懸濁液は、目の許容可能なＩＯＰレベルを維持するために必要とされるたびに投与することができる。哺乳動物の目への投与は、一日一回から３回までであろうと考えられる。
【００９０】
目への局所適用のための本発明の新規調合物は、単位投薬量が治療有効量の活性成分または併用療法の場合にはそれらの何倍かを含むように調合された溶液、ゲル、軟膏、懸濁液または固形挿入物の形態を取ることができる。
【００９１】
本発明の化合物は、骨芽細胞および破骨細胞の骨のモデリングおよびリモデリングプロセスの媒介にも有用である。１９９９年１０月１２日出願のＰＣＴ  ＵＳ９９／２３７５７（その全文を本明細書に参照して組み込まれる）参照。骨における主要プロスタグランジン受容体はＥＰ４であり、これは、サイクリックＡＭＰによるシグナリングによってその作用を生じると考えられている。Ｉｋｅｄａ  Ｔ，Ｍｉｙａｕｒａ  Ｃ，Ｉｃｈｉｋａｗａ  Ａ，Ｎａｒｕｍｉｙａ  Ｓ，Ｙｏｓｈｉｋｉ  Ｓ  ａｎｄ  Ｓｕｄａ  Ｔ  １９９５，「マウス胎仔および新生仔におけるプロスタグランジンＥ受容体の三つのサブタイプ（ＥＰ１、ＥＰ３およびＥＰ４）のインサイチュー局在定位（Ｉｎ  ｓｉｔｕ  ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｒｅｅ  ｓｕｂｔｙｐｅｓ（ＥＰ１，ＥＰ３  ａｎｄ  ＥＰ４）ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ  Ｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ａｎｄ  ｎｅｗｂｏｒｎ  ｍｉｃｅ）」，Ｊ  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ  １０（ｓｕｐ  １）：Ｓ１７２参照。この文献は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる。骨のモデリングおよびリモデリングプロセスを媒介する薬物を製造するための式Ｉの化合物の使用も本発明に包含される。
【００９２】
それ故、本発明のもう一つの目的は、その必要がある哺乳動物に治療有効量の式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬を投与することを含む、哺乳動物における骨の形成、すなわち骨形成を刺激するための方法を提供することである。
【００９３】
本発明のさらにもう一つの方法は、その必要がある哺乳動物における骨形成の刺激方法を提供することであり、この方法は、治療有効量の式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬およびビスホスホネート活性物質を前記哺乳動物に投与することを含む。骨形成を刺激する薬物を製造するための式Ｉの化合物の使用も本発明に包含される。
【００９４】
本発明のさらにもう一つの目的は、治療有効量の式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬およびビスホスホネート活性物質を含む医薬組成物を提供することである。
【００９５】
そうした治療または予防が必要な哺乳動物における骨吸収異常に関連した疾病状態または容態を治療する方法またはそれらに罹患する危険性を低下させる方法を提供することが、本発明のもう一つの目的であり、この方法は、前記哺乳動物に治療有効量の式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬を投与することを含む。骨吸収異常に関連した疾病状態または容態を治療するまたはそれらに罹患する危険性を低下させる薬物を製造するための式Ｉの化合物の使用も本発明に包含される。
【００９６】
骨吸収異常に関連した疾病状態または容態には、骨粗鬆症、糖質コルチコイド誘発性骨粗鬆症、ページェット病、骨交換異常増加、歯周病、歯牙喪失、骨折、リウマチ様関節炎、人工器官周囲骨溶解、骨形成不全、転移性骨疾患、悪性高カルシウム血症、および多発性骨髄腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
治療有効量の式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬およびビスホスホネート活性物質を投与することを含む方法の中で、前記式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬および前記ビスホスホネート活性物質の同時投与および逐次投与、両方が、本発明の範囲内であると考えられる。一般に、ビスホスホン酸活性物質ベースで５または１０ｍｇのビスホスホネート活性物質を含む調合物を調製する。逐次投与では、前記作動薬およびビスホスホネートは、いずれの順序で投与してもよい。逐次投与の下位分類では、前記作動薬およびビスホスホネートは、典型的に、２４時間同時限内に投与される。いっそうさらなる下位分類では、前記作動薬およびビスホスホネートは、典型的に、互いに約４時間以内に投与される。
【００９８】
本明細書において有用なビスホスホネート活性物質の非限定的な例には、以下のものが挙げられる：
アレンドロン酸、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸；
アレンドロネート（アレンドロン酸ナトリウムまたはアレンドロン酸一ナトリウム・三水和物としても知られている）、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸一ナトリウム・三水和物；
アレンドロン酸およびアレンドロネートは、１９９０年５月１日発行のＫｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉらの米国特許第４，９２２，００７号；１９９１年５月２８日発行のＫｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉらの第５，０１９，６５１号；１９９６年４月２３日発行のＤａｕｅｒらの第５，５１０，５１７号；１９９７年７月１５日発行のＤａｕｅｒらの第５，６４８，４９１号に記載されている（これらはすべて、これら全文を本明細書に参照して組み込まれる）；
１９９０年１１月１３日発行のＩｓｏｍｕｒａらの米国特許第４，９７０，３３５号（前記は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる）に記載されているような、シクロヘプチルアミノメチレン−１，１−ビスホスホン酸、ＹＭ  １７５、山之内製薬株式会社（シマドロネート）；
１，１−ジクロロメチレン−１，１−ジホスホン酸（クロドロン酸）およびその二ナトリウム塩（クロドロネート、Ｐｒｏｃｔｅｒ  ａｎｄ  Ｇａｍｂｌｅ）は、ベルギー特許第６７２，２０５号（１９６６）およびＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ  ３２，４１１１（１９６７）（これらは両方とも、それら全文を本明細書に参照して組み込まれる）に記載されている；
１−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジニル）−プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（ＥＢ−１０５３）；
１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（エチドロン酸）；
１−ヒドロキシ−３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸は、ＢＭ−２１０９５５、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ（イバンドロネート）としても知られており、１９９０年５月２２日発行の米国特許第４，９２７，８１４号（前記は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる）に記載されている；
６−アミノ−１−ヒドロキシヘキシリデン−１，１−ビスホスホン酸（ネリドロネート）；
３−（ジメチルアミノ）−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（オルパドロネート）；
３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（パミドロネート）；
［２−（２−ピリジニル）エチリデン］−１，１−ビスホスホン酸（ピリドロネート）は、米国特許第４，７６１，４０６号（前記は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる）に記載されている；
１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジニル）−エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（リセドロネート）；
１９８９年１０月２４日、Ｂｒｅｌｉｅｒｅらの米国特許第４，８７６，２４８号（前記は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる）に記載されているような（４−クロロフェニル）チオメタン−１，１−ジホスホン酸（チルドロネート）；および
１−ヒドロキシ−２−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ゾレンドロネート）。
【００９９】
本発明において有用なビスホスホネート活性物質の非限定的な類は、アレンドロネート、シマドロネート、クロドロネート、チルドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、ネリドロネート、オルパンドロネート、リセドロネート、ピリドロネート、パミドロネート、ゾレンドロネート、それらの医薬適合性の塩、およびそれらの混合物から成る群より選択される。
【０１００】
本件における上述の類の非限定的な下位分類は、アレンドロネート、その医薬適合性の塩、およびその混合物から成る群より選択される。
【０１０１】
前記下位分類の非限定的な例は、アレンドロン酸一ナトリウム・三水和物である。
【０１０２】
本発明では、骨刺激に関する場合、作動薬は、所望の治療効果が達成されるまで充分な期間にわたって通常投与される。本明細書で用いられる場合、用語「所望の治療効果が達成されるまで」は、媒介される疾病または状態に対して要求される臨床または医療作用が臨床家または研究者によって観察される時まで、選択された投与計画に従って一つまたは複数の治療薬が継続的に投与されることを意味する。本発明の治療方法のために、本化合物は、骨の質量または構造に所望の変化が観察されるまで、継続的に投与される。このような場合、骨質量の増加または異常な骨構造を正常な骨構造に戻すことを達成することが、所望の目的である。疾病状態または容態の危険性を低下させる方法については、望ましくない容態を予防するために必要な限り本化合物を継続的に投与する。このような場合、骨質量密度の維持が、多くの場合、その目的となる。
【０１０３】
投与期間の非限定的な例は、約２週間からその哺乳動物の残りの寿命までの範囲であり得る。ヒトについての投与期間は、約２週間からそのヒトの残りの寿命まで、好ましくは約２週間から約２０年、さらに好ましくは約１ヶ月から約２０年、さらに好ましくは約６ヶ月から約１０年、および最も好ましくは約１年から約１０年の範囲であり得る。
【０１０４】
本発明は、骨損失、骨折、骨粗鬆症、糖質コルチコイド誘発性骨粗鬆症、ページェット病、骨交換異常増加、歯周病、歯牙喪失、変形性関節症、リウマチ様関節炎、人工器官周囲骨溶解、骨形成不全、転移性骨疾患、悪性高カルシウム血症、および多発性骨髄腫の治療または予防に有用な公知薬剤との併用にも有用である。骨粗鬆症または他の骨疾患の治療または予防に有用な他の薬剤と本開示化合物の併用は、本発明の範囲内である。当業者は、関係する薬物または疾病の特定の特徴に基づき、どの薬剤併用が有用であるかを識別することができる。そうした薬剤には、次のものが挙げられる：有機ビスホスホネート；カテプシンＫ阻害剤；エストロゲンまたはエストロゲン受容体モジュレータ；アンドロゲン受容体モジュレータ；破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害剤；ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害剤；インテグリン受容体拮抗薬；ＰＴＨなどの骨芽細胞同化物質；カルシトニン；ビタミンＤまたは合成ビタミンＤ類似体；ならびにそれらの医薬適合性の塩および混合物。好ましい併用は、本発明の化合物と有機ビスホスホネートである。もう一つの好ましい併用は、本発明の化合物とエストロゲン受容体モジュレータである。もう一つの好ましい併用は、本発明の化合物とエストロゲンである。もう一つの好ましい併用は、本発明の化合物とアンドロゲン受容体モジュレータである。もう一つの好ましい併用は、本発明の化合物と骨芽細胞同化物質である。
【０１０５】
骨吸収異常および眼疾患の治療に関して言えば、式Ｉの作動薬は、一般に、約０．００１ｎＭから約１００μＭのＥＣ５０値を有するが、投薬量および投与経路によっては、この範囲外の活性を有する作動薬が有用であり得る。本発明の下位分類において、本作動薬は、約０．０１μＭから約１０μＭのＥＣ５０値を有する。本発明のさらなる下位分類において、本作動薬は、約０．１μＭから約１０μＭのＥＣ５０値を有する。ＥＣ５０は、当業者によく知られている作動薬活性の共通尺度であり、最大作用の半分、すなわち５０％を生じるために必要な作動薬の濃度または用量と定義される。Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  ＧＩＬＭＡＮＳ，Ｔｈｅ  Ｐｈａｎｎａｃｏｌｏｇｉｃ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，９ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９６，ｃｈａｐｔｅｒ  ２，Ｅ．  Ｍ．  Ｒｏｓｓ，「薬力学、薬物作用のメカニズムおよび薬物濃度と作用の間の関係（Ｐｈａｎｎａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｄｒｕｇ  Ｃｏｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｅｆｆｅｃｔ）」、および１９９９年１０月１２日出願のＰＣＴ  ＵＳ９９／２３７５７も参照されたし。これらは、それら全文を本明細書に参照して組み込まれる。
【０１０６】
本明細書中の実施例は、特許請求の範囲に記載の本発明を説明するものであって、限定するものではない。本特許請求の範囲に記載の各化合物はＥＰ４作動薬であり、多数の生理学的眼および骨疾患に有用である。
【０１０７】
本発明の化合物は、多少の変更はあるが、米国特許第６，０４３，２７５号、欧州特許第０８５５３８９号、および国際公開公報第０１／４６１４０号（これらはすべて、それら全文を本明細書に参照して組み込まれる）に従って製造することができる。実例として与える以下の非限定的な実施例は、本発明の例証となるものである。
【０１０８】
本発明で述べる化合物は、以下の一般図式に従って調製することができる。
【０１０９】
【化２６】
2006504679.tif 000022
可変項は、式Ｉにおいて定義したとおりである。
【０１１０】
本出願に出現し得る幾つかの略語は、次のとおりである：
略語
名称
ＣＤＩ    １，１’−カルボニルジイミダゾール
ＤＨＰ    ４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン
ＬｉＯＨ    水酸化リチウム
ＮａＢＨ４    水素化ホウ素ナトリウム
ＮａＨ    水素化ナトリウム
ｎＢｕ３ＳｎＮ３    アゾジトリブチル錫
ＰＧ    保護基
ＴＢＳＣｌ    塩化ｔ−ブチルジメチルシリル
ＴｓＯＨ    ｐ−トルエンスルホン酸
本発明における化合物の調製を以下の特定の実施例によってさらに説明する。
【実施例１】
【０１１１】
７−｛４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸（１−１０）および７−｛４−［（１Ｅ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸（１−１１）
段階１：  ４−メトキシカルボニルオキサゾリジン−２−オン（１−１）
１−１の調製は、文献手順（参照：Ｓｉｂｉ，Ｍ．Ｐ．ら，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１  １９９４，１６７５）に従って行った。従って、３９．５ｇの塩酸セリンメチルエステルをホスゲン（トルエン中２０％溶液、１７５ｍＬ）と反応させて、４２ｇの所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ），４．６４−４．５６（ｍ，２Ｈ），４．４４（ｄｄ，１Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ）。
【０１１２】
段階２：  Ｎ−Ｂｏｃ−４−メトキシカルボニルオキサゾリジン−２−オン（１−２）
この化合物の調製は、ＩｓｈｉｚｕｋａおよびＫｕｎｉｅｄａによって記載された方法（参照：Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９８７，２８，４１８５）に従って行った。従って、ＴＨＦ中の１−１（１ｇ、６．９ｍｍｏｌ）の溶液に、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（１．８１ｇ）、トリエチルアミン（１．１６ｍＬ）およびＤＭＡＰ（８４ｍｇ）を添加した。その溶液を室温で一晩攪拌し、水／酢酸エチルで希釈した。有機層を分離し、１ＮのＨＣ１、半飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄した。こうして得られた粗製生成物をさらに精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ４．９２（ｄｄ，１Ｈ），４．６２（ｔ，１Ｈ），４．３５（ｄｄ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）。
【０１１３】
段階３：  炭酸ｔ−ブチル（２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−４−イル）メチル（１−３）
０℃でエタノール／ＴＨＦ中の１−２（６．９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＢＨ４（５２２ｍｇ）を添加し、その混合物を放置して、ゆっくりと室温に温め、その後、飽和ＮＨ４Ｃｌで反応を停止させて、酢酸エチルで抽出した。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中、７０％〜１００％酢酸エチル）による精製によって、化合物１−３を白色の固体として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ６．８１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ），４．５０（ｔ，１Ｈ），４．２０（ｍ，３Ｈ），４．１０（ｄｄ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ２１８．１［Ｍ＋１］＋。
【０１１４】
段階４：  ７−（４−｛［（ｔ−ブトキシカルボニル）オキシ］メチル｝−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル）ヘプタン酸エチル（１−４）
ＤＭＦ（１６ｍＬ）中の１−３（３４０ｍｇ）およびＫＩ（２４０ｍｇ）の溶液にＮａＨ（６９ｍｇ）を添加し、その混合物を室温で１時間攪拌した。その後、その混合物に７−ブロモヘプタン酸エチル（２４７ｍｇ）を添加し、その混合物を一晩、７０℃に加熱した。室温に冷却後、混合物をエーテル／水で希釈して、エーテルで抽出した（３ｘ）。有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。その粗製材料をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン中５０％酢酸エチルで溶離することによって、所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ４．４３−４．３４（ｍ，２Ｈ），４．１９−４．１１（ｍ，３Ｈ），４．０９（ｑ，２Ｈ），３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｔ，２Ｈ），１．７０−１．５０（ｍ，４Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．４０−１．３０（ｍ，４Ｈ），１．２２（ｔ，３Ｈ）。
【０１１５】
段階５：  ７−［４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］ヘプタン酸エチル（１−５）
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中１０％ＴＦＡの混合物中の１−４（４４６ｍｇ）の溶液を室温で２時間攪拌して、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン中７０〜１００％酢酸エチルで溶離することによって、アルコール１−５（２６４ｍｇ）を生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ４．３３（ｔ，１Ｈ），４．１９（ｔ，１Ｈ，ＯＨ），４．１４（ｄｄ，１Ｈ），４．０９（ｑ，２Ｈ），３．９５（ｍ，１Ｈ），３．７８（ｍ，１Ｈ），３．６５（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｍ，１Ｈ），３．１６（ｍ，１Ｈ），２．２９（ｔ，２Ｈ），１．７０−１．５５（ｍ，４Ｈ），１．４５−１．３０（ｍ，４Ｈ），１．２１（ｔ，３Ｈ）。
【０１１６】
段階６：  ７−｛４−［（１Ｅ）−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸エチル（１−６）
ジクロロメタン（５ｍＬ）中のアルコール１−５（２７３ｍｇ）の溶液にＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎパーヨージナン（４５１ｍｇ）を添加し、その混合物を室温で１時間攪拌して、濃縮した。混合物をエーテルに再び懸濁させて、濾過し、濾液を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過および真空下での濃縮によって、粗製アルデヒド７−（４−ホルミル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル）ヘプタン酸エチル（１−７）を生じ、それをさらに精製せずに直接用いた。ＴＨＦ（６ｍＬ）中のＮａＨ（４７ｍｇ）の懸濁液に、０℃で２−オキソ−３−フェニルプロピルホスホン酸ジメチル（２８２ｍｇ）を添加し（白色のスラリーを生成）、その混合物をさらに１時間攪拌した。その後、その混合物にＴＨＦ（４ｍＬ）中のアルデヒド１−７（１４５ｍｇ）をカニューレによって添加し、得られた混合物を室温で２時間攪拌して、飽和ＮＨ４Ｃｌで反応を停止させた。その後、その混合物を酢酸エチルで抽出し（３ｘ）、有機層をブラインで洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物を、溶離剤として酢酸エチル／ヘキサン（１：１）を用いるクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物１−６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ｍｇ，アセトン−ｄ６）：δ７．３６−７．２６（ｍ，５Ｈ），６．８６（ｄｄ，１Ｈ），６．４３（ｄ，１Ｈ），４．５７（ｍ，１Ｈ），４．５０（ｔ，１Ｈ），４．１２−３．９６（ｍ，５Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ），２．９６（ｍ，１Ｈ），２．２８（ｔ，２Ｈ），１．６５−１．４５（ｍ，４Ｈ），１．３５−１．２５，ｍ，４Ｈ），１．２２（ｔ，３Ｈ）。
【０１１７】
段階７：  ７−｛４−（１Ｅ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸エチル（１−８）および７−｛４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸エチル（１−９）
メタノール／ＡｃＯＨ（２．５：１、３．５ｍＬ）中のケトン１−６（１２８ｍｇ）の溶液に、Ｎａ（ＣＮ）ＢＨ３（２５ｍｇ）を添加して、その混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ヒートガンで短時間加熱した。その後、その混合物の反応を水で停止させて、酢酸エチルえ抽出し（３ｘ）、有機層を濃縮して、クロマトグラフィーにより精製した。先ず、ヘキサン中５０〜７５％酢酸エチルで溶離することによって、異性体１−８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．３５−７．１５（ｍ，５Ｈ），５．９２（ｄｄ，１Ｈ），５．５０（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．３０（ｍ，３Ｈ），４．１８（ｄ，１Ｈ），４．０８（ｑ，２Ｈ），３．７５（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｍ，１Ｈ），３．００−２．８０（ｍ，３Ｈ），２．２９（ｔ，２Ｈ），１．６５−１．４５（ｍ，４Ｈ），１．４０−１．３０（ｍ，４Ｈ），１．２１（ｔ，３Ｈ）。便宜上、極性が低いほうの異性体を任意にエピマー１−８とする。継続的な溶離によって、極性が大きいほうのエピマー１−９を生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．３５−７．１５（ｍ，５Ｈ），５．９１（ｄｄ，１Ｈ），５．５０（ｍ，１Ｈ），４．４６−４．２９（ｍ，３Ｈ），４．１５（ｄ，１Ｈ），４．０８（ｑ，２Ｈ），３．８２（ｄｄ，１Ｈ），３．１５（ｍ，１Ｈ），２．９５−２．７５（ｍ，３Ｈ），２．２９（ｔ，２Ｈ），１．６５−１．２５（ｍ，８Ｈ），１．２２（ｔ，３Ｈ）。
【０１１８】
メタノール（０．７ｍＬ）および水（０．１５ｍＬ）およびＬｉＯＨ（０．０６２ｍＬ、１Ｎ）中のエステル１−９（２２ｍｇ）の混合物をＮ２下、室温で一晩攪拌し、濃縮して、表題化合物１−１０をリチウム塩として得た。ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ３６０．１  （Ｍ−１）−。同様に、エピマー１−８を処理して、表題化合物１−１１をした。ＭＳ（−  ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ３６０．１（Ｍ−１）−。
【実施例２】
【０１１９】
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン（２−８）および（４Ｓ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）へキシル］−１，３−オキサゾリジン−２−オン（２−９）
段階１：  Ｎ−（６−カルボキシ）−Ｄ−セリン酸メチル（２−１）
エタノール（１８ｍＬ）中の塩酸Ｄ−セリンメチルエステル（０．９１ｇ）の溶液に、７−オキソヘプタンニトリル（０．６７ｇ）およびトリエチルアミン（０．６ｍＬ）を添加し（参照：  Ｋｕｂｏｄｅｒａ，Ｎ．ら，Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ  １９８２，１９，１２８５）、その混合物をＮ２下で１時間攪拌した。その後、その溶液にＮａ（ＣＮ）ＢＨ３（０．４ｇ）を添加し、得られた混濁懸濁液をＮ２下で１時間さらに攪拌した。その混合物の反応を水で停止させ、真空下で濃縮して、残留物を酢酸エチル／飽和ＮａＨＣＯ３で希釈した。有機層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した（３ｘ）。有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過した。濾液を濃縮し、残留物をクロマトグラフィーによって精製した。ジクロロメタン中５〜１０％（ｖ）メタノールで溶離することによって、所望の生成物２−１（６２０ｍｇ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ３．７８（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｄｄ，１Ｈ），３．３８（ｄｄ，１Ｈ），２．７２（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｍ，１Ｈ），２．３６（ｔ，２Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），１．５５−１．３５（ｍ，６Ｈ）。
【０１２０】
段階２：  （４Ｒ）−３−（６−シアノへキシル）−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−４−カルボン酸メチル（２−２）
０℃でジクロロメタン（１０ｍＬ）中のアミン２−１（６２０ｍｇ）およびピリジン（０．４８ｍＬ）の溶液に、トルエン中のホスゲンの溶液（１．７２ｍＬ、１．９Ｍ）を添加し、その混合物を室温で１時間攪拌した。混合物をジクロロメタンで希釈し、１ＮのＨＣｌおよびブラインで洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過して、濾液を濃縮することによって、粗製生成物を得、それをクロマトグラフィーによって精製した。ヘキサン中６０％酢酸エチルで溶離することによって、所望の生成物２−２（５６０ｍｇ）を生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ４．６１（ｄｄ，１Ｈ），４．５２（ｔ，１Ｈ），４．３５（ｄｄ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｍ，１Ｈ），３．１５（ｍ，１Ｈ），２．４７（ｔ，２Ｈ），１．７５−１．３５（ｍ，８Ｈ）。
【０１２１】
段階３：  ７−［（４Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］ヘプタンニトリル（２−３）
０℃でエタノール（５ｍＬ）中のエステル２−２（５６０ｍｇ）の溶液にＮａＢＨ４（３８ｍｇ）を添加し、その混合物を室温で１時間攪拌して、半飽和ＮａＣｌで反応を停止させた。その混合物を真空下で濃縮してエタノールを除去し、残留物を酢酸エチルで抽出した（３ｘ）。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮して、所望のアルコール２−３（４８０ｍｇ）を生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ４．３３（ｔ，１Ｈ），４．２０−４．１２（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．７９（ｍ，１Ｈ），３．６５（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｍ，１Ｈ），２．４７（ｔ，２Ｈ），１．７０−１．３５（ｍ，８Ｈ）。
【０１２２】
段階４：  ７−｛（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタンニトリル（２−４）
ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のアルコール２−３（４８０ｍｇ）の溶液にＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎパーヨージナン（１ｇ）を添加して、その混合物を室温で１時間攪拌し、濃縮した。残留物をトルエンと共に数回蒸発させて、酢酸エチルに再び懸濁させ、５℃で一晩放置した。その混合物を濾過し、濾液を濃縮して、粗製アルデヒド７−［（４Ｓ）−４−ホルミル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］ヘプタンニトリル（２−５）を得、それを直接用いた。ＴＨＦ中のＮａＨ（１６８ｍｇ）の懸濁液に、０℃で、３，３−ジフルオロ−２−オキソ−３−フェニルプロピルホスホン酸ジメチル（１．１ｇ）を一滴ずつ添加し、その混合物を室温で３０分間攪拌した。混合物にＴＨＦ中の粗製アルデヒド２−５をカニューレによって添加し、その混合物を室温で５時間攪拌して、飽和ＮＨ４Ｃｌで反応を停止させた。その混合物を酢酸エチルで希釈し、有機層を乾燥させて、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、所望の生成物２−４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．７０−７．５５（ｍ，５Ｈ），７．０８（ｄｄ，１Ｈ），６．９５（ｄ，１Ｈ），４．７０（ｍ，１Ｈ），４．５２（ｔ，１Ｈ），３．３０（ｍ，１Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），２．４８（ｔ，２Ｈ），１．７０−１．２５（ｍ，８Ｈ）。
【０１２３】
段階５：７−｛（４Ｓ）−４−［（１Ｅ，３Ｒ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタンニトリル（２−６）および７−｛（４Ｓ）−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル｝ヘプタンニトリル（２−７）
−２０℃でエタノール／水（４：１）中のケトン２−４（１００ｍｇ）およびＣｅＣｌ３・７Ｈ２Ｏ（１当量）の溶液に、ＮａＢＨ４（１．２当量）を添加し、その混合物をゆっくりと室温にあたためて、半飽和ＮａＣｌで反応を停止させた。その混合物を記載したとおり処理し、その粗製生成物をＨＰＬＣ（ｐｏｒａｓｉｌ（商標））によって精製した。先ず、ヘキサン中６０％酢酸エチルで溶離することによって、エピマー２−７を生じ、便宜上、任意にそのＯＨ基をβ配向とした。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．５７−７．４８（ｍ，５Ｈ），５．９６（ｄｄ，１Ｈ），５．７７（ｍ，１Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．７０（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．３５（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｍ，１Ｈ），３．１８（ｍ，１Ｈ），２．８５（ｍ，１Ｈ），２．４７（ｔ，２Ｈ），１．６８（ｍ，２Ｈ），１．５５−１．２５（ｍ，６Ｈ）。
【０１２４】
継続的な溶離によって、異性体２−６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．５７−７．４８（ｍ，５Ｈ），５．９３（ｄｄ，１Ｈ），５．７７（ｍ，１Ｈ），５．１２（ｄ，１Ｈ），４．７０（ｍ，１Ｈ），４．４５−４．３５（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｍ，１Ｈ），３．２０（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｍ，１Ｈ），２．４７（ｔ，２Ｈ），１．６８（ｍ，２Ｈ），１．５５−１．２５（ｍ，６Ｈ）。
【０１２５】
段階６：
トルエン（１ｍＬ）およびトリブチル錫アジド（０．２ｍ）中のニトリル２−６（２４ｍｇ）の溶液を５時間、１２０℃に加熱し、室温に冷却した。その混合物を酢酸エチルで希釈し、ＫＦの５％水溶液とともに１時間激しく攪拌した。その混合物を濾過し、濾液を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層をブラインで洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製した。ジクロロメタン中０〜１０％メタノールで溶離することによって、表題化合物２−８を得た。ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ４２０．３（Ｍ−１）−。同様に、極性が低いほうのニトリル２−７から化合物２−９を調製した。ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  ４２０．３（Ｍ−１）−。
【実施例３】
【０１２６】
７−｛（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸（３−９）：
段階１：  Ｄ−システイン酸エチル（３−１）：
無水エタノール２００ｍＬ中のＤ−システイン（１２ｇ）の溶液を１５分間、無水塩化水素中でバブリングした。その溶液を室温で一晩攪拌させておき、その後、真空下で濃縮して、１３ｇ（９３％）の３−１を白色の固体として生じた。その１Ｈ  ＮＭＲデータは、文献に報告されているものと同じであった。
【０１２７】
段階２：  （４Ｒ）−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−４−カルボン酸エチル（３−２）：
ＴＨＦ  ２００ｍＬ中の３−１（８．５ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）の溶液にカルボニルジイミダゾール（１２．５ｇ）を添加し、その溶液を室温で一晩攪拌した。溶液を真空下で濃縮し、２００ｍＬの５％Ｎａ２ＣＯ３を添加して、その溶液を１時間攪拌し、その後、その溶液のｐＨが２に維持されるまで、６ＭのＨＣ１を添加した。その溶液をＥｔＯＡｃで抽出し、その後、有機層を併せ、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮した。その化合物を、４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、６．７ｇの３−２を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．５（ｄｄ，１Ｈ），４．２（ｑ，２Ｈ），３．８（ｄｄ，１Ｈ），３．６（ｄｄ，１Ｈ），１．２（ｔ，３Ｈ）。
【０１２８】
段階３：  （４Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−１，３−チアゾリジン−２−オン（３−３）：
エタノール１００ｍＬ中の３−２（６．８ｇ、３８．６ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、水素化ホウ素ナトリウム（３．８ｇ、１００ｍｍｏｌ）を添加した。その溶液を、室温に温まるように２時間攪拌した。その溶液を塩化アンモニウム飽和水溶液にゆっくりと注入し、その溶液を酢酸エチルで抽出した（５ｘ）。その後、有機層を併せ、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮した。その化合物を、０〜１０％メタノール／酢酸エチルを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３．３ｇの３−３を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．２（ｔ，１Ｈ），４．０（ｍ，１Ｈ），３．６（ｍ，２Ｈ），３．５（ｄｄ，１Ｈ），３．３（ｄｄ，１Ｈ）。
【０１２９】
段階４：  （４Ｓ）−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）メチル］−１，３−チアゾリジン−２−オン（３−４）：
ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中の３−３（３．３ｇ、２５ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（２０ｍｇ）の溶液に、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（２．７ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を室温で３０分間攪拌した。トリエチルアミン（０．１ｍＬ）を添加し、その溶液を真空下で濃縮した。その化合物を、４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４ｇの３−４を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ７．０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．６（ｓ，１Ｈ），４．０（ｍ，１Ｈ），３．８（ｍ，２Ｈ），３．６（ｍ，３Ｈ），３．３（ｄｄ，１Ｈ），１．９−１．４（ｍ，６Ｈ）。
【０１３０】
段階５：  ７−｛（４Ｓ）−２−オキソ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）メチル］−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸エチル（３−５）：
ＤＭＦ  １０ｍＬ中の３−４（０．５ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の溶液に６０％水素化ナトリウム（１００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を添加して、得られた溶液を１時間攪拌し、その後、エチル−７−ブロモへプタノエート（１．２ｇ、５ｍｍｏｌ）を添加した。その溶液を７０℃に加熱して、一晩攪拌した。その後、溶液を室温に冷却し、塩化アンモニウム飽和溶液にゆっくりと注入して、９：１  ヘキサン：ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。その後、有機層を併せ、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮した。その化合物を、２０〜５０％酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５００ｍｇの３−５を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ４．７（ｓ，１Ｈ），４．１（ｍ，３Ｈ），３．８（ｍ，２Ｈ），３．５（ｍ，４Ｈ），３．２（ｍ，２Ｈ），２．３（ｍ，２Ｈ），１．９−１．３（ｍ，１４Ｈ），１．２（ｍ，３Ｈ）。
【０１３１】
段階６：  ７−［（４Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル］ヘプタン酸エチル（３−６）：
ＥｔＯＨ  １０ｍＬ中の３−５（０．５ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の溶液にｐ−トルエンスルホン酸（５０ｍｇ）を添加し、得られた溶液を一晩室温で攪拌した。トリエチルアミン（０．１ｍＬ）を添加し、その溶液を真空下で濃縮した。その化合物を８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、０．４ｇの３−６を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ４．２（ｔ，１Ｈ），４．１（ｑ，３Ｈ），３．９（ｍ，１Ｈ），３．７（ｍ，２Ｈ），３．６（ｍ，１Ｈ），３．４（ｄｄ，１Ｈ），３．３（ｄｄ，１Ｈ），３．１（ｍ，１Ｈ），２．３（ｔ，２Ｈ），１．３−１．７（ｍ，８Ｈ），１．２（ｔ，２Ｈ）。
【０１３２】
段階７：  ７−｛（４Ｓ）−２−オキソ−４−［（１Ｅ）−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸エチル（３−７）：
ＣＨ２Ｃｌ２  １０ｍＬ中の３−６（０．５６ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液にＤｅｓｓ  Ｍａｒｔｉｎパーヨージナン（０．９８ｇ、２．３ｍｍｏｌ）を少しずつ添加し、得られた溶液を２時間攪拌した。その溶液を真空下で濃縮して、それにトルエンを添加し、３回濃縮して、酢酸を除去した。その後、その濃縮物をＣＨ２Ｃｌ２でセライトに通して濾過し、真空下で濃縮した。その後、その粗製生成物を５ｍＬのＴＨＦで希釈して、０℃でＴＨＦ  ５ｍＬ中のＷｉｔｔｉｇ試薬  ２−オキソ−３−フェニルプロピルホスホン酸ジメチル（０．７５ｇ、３．１ｍｍｏｌ）および６０％水素化ナトリウム（０．１２ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の溶液（半時間予備混合したもの）に添加した。その反応混合物を最初の温度で１５分間攪拌し、１時間放置して室温まで温めて、４℃で一晩保管した。その後、塩化アンモニウム飽和水溶液で反応を停止させて、酢酸エチルで抽出した。その後、有機層を併せ、Ｈ２Ｏ、ブラインで順次洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過して、真空下で濃縮した後、その化合物を、５０％酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４００ｍｇの３−７を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．４０−７．２１（ｍ，５Ｈ），６．７５（ｄｄ，１Ｈ），６．３１（ｄ，１Ｈ），４．１４（ｑ，２Ｈ），３．８９（ｓ，２Ｈ），３．５７−３．４５（ｍ，３Ｈ），３．０１（ｄｄ，１Ｈ），２．７５（ｍ，１Ｈ），２．３１（ｔ，２Ｈ），１．６４−１．２２（ｍ，８Ｈ），１．２８（ｔ，３Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４０４．２（Ｍ＋１）＋。
【０１３３】
段階８：  ７−｛（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−ｙｌ｝ヘプタン酸エチル（３−８）：
５：１  ＭｅＯＨ：酢酸（１２ｍＬ）中の３−７（０．４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液にシアノ水素化ホウ素ナトリウム（１００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を室温で一晩攪拌した。その溶液の反応を水で停止させて、真空下で濃縮した。その濃縮物を酢酸エチルで抽出し、２ＭのＮａ２ＣＯ３で洗浄して、次にブラインで洗浄し、その後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過し、真空下で濃縮した。その化合物を６０％酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、４００ｍｇの３−８を無色の油として生じた。示すデータは、主ジアステレオマーのものである。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．３５−７．２１（ｍ，５Ｈ），５．８４（ｄｄ，１Ｈ），５．６６（ｄｄ，１Ｈ），４．４６（ｑ，１Ｈ），４．２３（ｑ，１Ｈ），４．１４（ｑ，２Ｈ），３．６８−３．３７（ｍ，２Ｈ），２．９７（ｄｄ，１Ｈ），２．８８（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｔ，２Ｈ），１．６４−１．３０（ｍ，８Ｈ），１．２７（ｔ，３Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４０６．２（Ｍ＋１）＋。
【０１３４】
段階９：  ７−｛（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタン酸（３−９）：
０℃で、２：２：１  ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：水（５．５ｍＬ）中の３−８（４５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に水酸化リチウム（水中２Ｍ溶液１７０μＬ）を添加し、得られた溶液を放置して室温に温め、一晩攪拌した。その溶液にＨＣｌの１Ｍ水溶液（１ｍＬ）を添加し、その溶液を酢酸エチルで抽出した。その後、有機層を併せ、ブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空下で濃縮した。その化合物を５０〜１００％酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３７ｍｇの３−９を白色の固体として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ７．３０−７．１８（ｍ，５Ｈ），５．８１（ｄｄ，１Ｈ），５．５３（ｄｄ，１Ｈ），４．３９（ｑ，１Ｈ），４．３３（ｑ，１Ｈ），３．４５（ｄｄ，１Ｈ），３．３３（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，２Ｈ），２．７７（ｄｄ，１Ｈ），２．６７（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｔ，２Ｈ），１．６５−１．２１（ｍ，８Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ３７８．２（Ｍ＋１）＋。
【実施例４】
【０１３５】
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン（４−５）：
段階１  ：  ７−｛（４Ｓ）−２−オキソ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）メチル］−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタンニトリル（４−１）：
ＤＭＦ  １０ｍＬ中の３−４（０．７３ｇ、３．４ｍｍｏｌ）の溶液に、６０％水素化ナトリウム（１４０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を添加して、得られた溶液を１時間５０℃で攪拌し、その後、７−ブロモへプタノニトリル（１．１ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）およびヨウ化テトラブチルアンモニウム（５０ｍｇ）を添加した。その溶液を５０℃で一晩攪拌し、その後、室温に冷却して、塩化アンモニウム飽和水溶液にゆっくりと注入し、エーテルで抽出した。その後、有機層を併せ、Ｈ２Ｏ、ブラインで順次洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空下で濃縮した。その化合物を、４０〜５０％酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、９７０ｍｇの４−１を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ４．６３（ｍ，１Ｈ），４．０４−３．６８（ｍ，３Ｈ），３．６８−３．５８（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｄｄ，１Ｈ），３．２２−３．０４（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｔ，２Ｈ），１．８６−１．４４（ｍ，１２Ｈ），１．３８−１．３０（ｍ，２Ｈ）；  ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ３２７．２（Ｍ＋１）＋。
【０１３６】
段階２：  ７−［（４Ｓ）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル］ヘプタンニトリル（４−２）：
ＥｔＯＨ  １０ｍＬ中の４−１（０．９７ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液にｐ−トルエンスルホン酸（５０ｍｇ）を添加し、得られた溶液を室温で一晩攪拌した。トリエチルアミン（０．１ｍＬ）を添加し、その溶液を真空下で濃縮した。その化合物を、５０〜８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、０．６５ｇの４−２を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ３．９２−３．７３（ｍ，３Ｈ），３．６８−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．４２（ｄｄ，１Ｈ），３．２８（ｄｄ，１Ｈ），３．１０（ｍ，１Ｈ），２．３７（ｔ，２Ｈ），１．７１−１．４６（ｍ，６Ｈ），１．３９−１．３３（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ２４３．１（Ｍ＋１）＋。
【０１３７】
段階３：  ７−｛（４Ｓ）−２−オキソ−４−［（１Ｅ）−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタンニトリル（４−３）：
ＣＨ２Ｃｌ２  １５ｍＬ中の４−２（０．６５ｇ、２．７ｍｍｏｌ）の溶液にＤｅｓｓ  Ｍａｒｔｉｎパーヨージナン（１．４ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を少しずつ添加し、得られた溶液を２時間攪拌した。その溶液を真空下で濃縮して、それにトルエンを添加し、３回濃縮して、酢酸を除去した。その後、その濃縮物をＣＨ２Ｃｌ２でセライトに通して濾過し、真空下で濃縮した。その後、その粗製生成物を７ｍＬのＴＨＦで希釈して、０℃でＴＨＦ  ７ｍＬ中のＷｉｔｔｉｇ試薬  ２−オキソ−３−フェニルプロピルホスホン酸ジメチル（１．３ｇ、５．３ｍｍｏｌ）および６０％水素化ナトリウム（０．２ｇ、５．１ｍｍｏｌ）の溶液（３０分間予備混合しておいたもの）に添加した。その反応混合物を最初の温度で１５分間攪拌し、１時間放置して室温まで温めた。その溶液を、４℃で一晩保管し、塩化アンモニウム飽和水溶液で反応を停止させて、酢酸エチルで抽出した。その後、有機相を併せ、Ｈ２Ｏ、ブラインで順次洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空下で濃縮した。その化合物を、４０％酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、３５０ｍｇの４−３を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＮＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．３７−７．２０（ｍ，５Ｈ），６．７４（ｄｄ，１Ｈ），６．３１（ｄ，１Ｈ），４．３４（ｑ，１Ｈ），３．８８（ｓ，２Ｈ），３．５４−３．４４（ｍ，２Ｈ），３．０１（ｄｄ，１Ｈ），２．７７（ｍ，１Ｈ），２．３３（ｔ，２Ｈ），１．６７−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４７−１．３０（ｍ，４Ｈ），１．２８−１．２３（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ３５６．９（Ｍ＋１）＋。
【０１３８】
段階４：  ７−｛（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソ−１，３−チアゾリジン−３−イル｝ヘプタンニトリル（４−４）：
ＣＨ２Ｃｌ２  ８ｍＬ中の４−３（０．１５ｇ、０．４ｍｍｏｌ）の溶液に、トルエン中１Ｍの（Ｒ）−ＣＢＳ（０．４５ｍＬ、０．４５ｍｍｏｌ）を添加して、−４０℃に冷却し、それに、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のホウ酸カテコール（０．１３ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液を一滴ずつ添加した。その溶液を−４０℃で１時間攪拌し、その後２時間の間放置して、−２０℃まで温めた。その反応混合物の反応を、−２０℃で、１ＮのＨＣｌを用いて停止させ、室温で４時間攪拌した。相を分離し、有機相を１ＮのＨＣｌ、Ｈ２Ｏ、１ＮのＮａＯＨ、ブラインで順次洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空下で濃縮した。その化合物を、４０〜５０％酢酸エチル／ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１２５ｍｇの４−４を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．３７−７．２１（ｍ，５Ｈ），５．８４（ｄｄ，１Ｈ），５．６５（ｄｄ，１Ｈ），４．４６（ｑ，１Ｈ），４．２２（ｑ，１Ｈ），３．８６−３．３５（ｍ，２Ｈ），２．９７（ｄｄ，１Ｈ），２．８８（ｍ，２Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ），２．３６（ｔ，２Ｈ），１．７０−１．２７（ｍ，８Ｈ）；ＭＳ（＋ＥＳＩ）：ｍ／ｚ３５９．０（Ｍ＋１）＋。
【０１３９】
段階５：  （４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラアゾール−５−イル）ヘキシル］−１，３−チアゾリジン−２−オン（４−５）：
トルエン０．２ｍＬ中の４−４（７０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液にトリブチル錫アジド（０．２７ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を４時間、還流させながら攪拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加し、その溶液の反応を５％ＫＦ水溶液（３０ｍＬ）および１ＮのＨＣ１（３０ｍＬ）で停止させた。層を分離し、有機層をブラインで洗浄して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して、真空下で濃縮した。その化合物を、０〜５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５０ｍｇの４−５を無色の油として生じた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ７．２９−７．１７（ｍ，５Ｈ），５．８１（ｄｄ，１Ｈ），５．５３（ｄｄ，１Ｈ），４．３８（ｑ，１Ｈ），４．３３（ｑ，１Ｈ），３．４５（ｄｄ，１Ｈ），３．３３（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｍ，４Ｈ），２．７８（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），１．８３−１．２１（ｍ，８Ｈ）；ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４００．２（Ｍ−１）−。
【０１４０】
Ｉ．ウサギおよびサルにおける眼内圧（ＩＯＰ）に対するＥＰ４作動薬の効果
動物
特定の投薬を受けたことがない雄のダッチベルテッド種のウサギおよび雌のカニクイザルをこの研究で用いた。この研究における動物の世話および取扱いは、米国国立衛生研究所（ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（ＮＩＨ））によるガイドラインおよびｔｈｅ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｖｉｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ（ＡＲＶＯ）決議に従うものである。すべての実験手順は、Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏｍａｐｎｙの施設内動物実験委員会（ｔｈｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）によって承認されている。
【０１４１】
薬物の調製および投与
薬物濃度は、活性成分（基剤）の点から見て表す。本発明の化合物は、ウサギの研究については０．０１、０．００１、０．０００１％、およびサルの研究については０．０５、０．００５％で生理食塩水に溶解する。薬物またはビヒクルの一定量（２５ｕＬ）を片側または両側に局所投与する。片側適用では、反対側の目に同量の食塩水を与える。眼圧測定前にプロパラカイン（０．５％）を角膜に適用して、不快感を最小にする。気動眼圧計（Ａｌｃｏｎ  Ａｐｐｌａｎａｔｉｏｎ  Ｐｎｅｕｍａｔｏｎｏｇｒａｐｈ）または同等のものを用いて、眼内圧（ＩＯＰ）を記録する。
【０１４２】
統計分析
結果は、薬物またはビヒクルを投与する直前に測定した基底レベルからのＩＯＰの変化として表現し、平均値＋／−標準偏差を示す。薬物治療動物の応答とビヒクル治療動物の応答の間の対にならないデータおよび比較できる時間間隔での同側の目と反対側の目の間の対のデータについてのスチューデントｔ検定を用いて、統計的比較を行う。ダンネットの「ｔ」検定を用い、「ｔ−０」値からの差として、データの有機性も判定した。
【０１４３】
Ａ．ウサギにおける眼内圧測定
体重２．５〜４．０ｇの雄のダッチベルテッド種のウサギを、１２時間昼／夜サイクルおよびウサギ用固形飼料を用いて飼う。すべての実験は、昼の同じ時間に行って、昼間リズムに関連した変動を最小にする。治療前にＩＰＯを測定し、その後、本発明の化合物またはビヒクルを一方または両方の目に点眼（一滴２５ｕＬ）して、点眼から３０、６０、１２０、１８０、２４０、３００および３６０分後にＩＯＰを測定する。場合によっては、ビヒクルで両目を治療した同数の動物を評価し、並行対照として薬物治療動物と比較する。
【０１４４】
Ｂ．サルにおける眼内圧測定
Ｌｅｅらの方法（１９８５）を用いてアルゴンレーザーシステム（Ｃｏｈｅｒｅｎｔ  ＮＯＶＵＳ  ２０００，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＵＳＡ）で線維柱網を光凝固させることにより、体重が２ｋｇと３ｋｇの間の雌カニクイザルにおいて右目の一側性高眼圧症を誘発する。眼内圧（ＩＯＰ）の持続性増加によって、視神経乳頭に緑内障患者に見られるものと類似の変化が生じる。
【０１４５】
ＩＯＰ測定のために、実験継続中はサルを拘束イスで座位にしておく。各ＩＯＰ測定の約５分前に塩酸ケタミン（３〜５ｍｇ／ｋｇ）を筋肉内注射することによって動物を軽度に麻酔する。ＩＯＰを記録する前に０．５％のプロパラカインを一滴点眼した。ＩＯＰは、気動眼圧計（Ａｌｃｏｎ  Ａｐｐｌａｎａｔｉｏｎ  Ｔｏｎｏｍｅｔｅｒ）またはＤｉｇｉｌａｂ気動眼圧計（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ，ＵＳＡ）を用いて測定する。
【０１４６】
ＩＯＰは、治療前ならびに一般に治療から３０、６０、１２４、１８０、３００および３６０分後に測定する。一般には治療の二日または三日前のこれらの時点での基線値も得る。治療は、２５ｕＬの本発明の化合物（０．０５および０．００５％）一滴またはビヒクル（食塩水）一滴を点眼することから成る。同じ動物に対して試験する前には、少なくとも一週間のウォッシュアウト期間を用いる。正常血圧の目（高血圧目とは反対側の目）を高血圧の目と厳密に同様に治療する。両目のＩＯＰ測定値を同じ時点での対応する基線値と比較する。結果は、平均値＋／−標準偏差（単位：ｍｍＨｇ）として表す。眼用の本発明の化合物の活性範囲は、０．０１ｎＭと１００，０００ｎＭの間である。
【０１４７】
ＩＩ．放射リガンド結合アッセイ：
これらの化合物を試験するために用いたアッセイは、本質的には、Ａｂｒａｍｏｖｉｔｚ  Ｍ，Ａｄａｍ  Ｍ，Ｂｏｉｅ  Ｙ，Ｃａｒｒｉｅｒｅ  Ｍ，Ｄｅｎｉｓ  Ｄ，Ｇｏｄｂｏｕｔ  Ｃ，Ｌａｍｏｎｔａｇｎｅ  Ｓ，Ｒｏｃｈｅｔｔｅ  Ｃ，Ｓａｗｙｅｒ  Ｎ，Ｔｒｅｍｂｌａｙ  ＮＭ，Ｂｅｌｌｅｙ  Ｍ，Ｇａｌｌａｎｔ  Ｍ，Ｄｕｆｒｅｓｎｅ  Ｃ，Ｇａｒｅａｕ  Ｙ，Ｒｕｅｌ  Ｒ，Ｊｕｔｅａｕ  Ｈ，Ｌａｂｅｌｌｅ  Ｍ，Ｏｕｉｍｅｔ  Ｎ，Ｍｅｔｔｅｒｓ  ＫＭ．「プロスタグランジンおよび関連類似体の親和性および選択性を判定するための組換えプロスタノイド受容体の利用（Ｔｈｅ  ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｔｏ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  ｔｈｅ  ａｆｆｉｎｉｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  ｒｅｌａｔｅｄ  ａｎａｌｏｇｓ）」．Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  ２０００  Ｊａｎ  １７；１４８３（２）：２８５−２９３に記載されているとおり行い、以下を考察した：
ヒト胎児腎（ＨＥＫ）２９３（ＥＢＮＡ）細胞系統におけるプロスタノイド受容体の安定な発現。
【０１４８】
完全長コード配列に対応するプロスタノイド受容体（ＰＧ）ｃＤＮＡを哺乳動物発現ベクターｐＣＥＰ４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の適切な部位にサブクローニングした。Ｑｉａｇｅｎプラスミド作成キット（ＱＩＡＧＥＮ）を用いてｐＣＥＰ４ＰＧプラスミドＤＮＡを作成し、ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ＠（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ）を製造業者のインストラクションに従って用いてＨＥＫ  ２９３（ＥＢＮＡ）にトランスフェクトした。１０％熱不活性ウシ胎仔血清、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１００Ｕ／ｍＬのペニシリンＧ、１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシン、２５０μｇ／ｍＬの活性ＧＥＮＥＴＩＣＩＮ（商標）（Ｇ４１８）（すべて、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．／ＢＲＬからのもの）、および２００μｇ／ｍＬのヒグロマイシン（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）を補足したダルベッコの変性イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で、ヒグロマイシン耐性遺伝子とともにそのｃＤＮＡを発現しているＨＥＫ  ２９３（ＥＢＮＡ）細胞を選択した。２〜３週間成長させた後、クローニングリング法を用いて選択しながら個々のコロニーを単離し、その後、クローン細胞系列に拡張させた。受容体ｃＤＮＡの発現を受容体結合アッセイによって評定した。
【０１４９】
ＨＥＫ  ２９３（ＥＢＮＡ）細胞を空気中６％ＣＯ２の加湿雰囲気下、３７℃、補足ＤＭＥＭ完全培地中で成長させ、その後、回収して、プロテアーゼ阻害剤（２ｍＭのフッ化フェニルメチルスルホニル、１０μＭのＥ−６４、１００μＭのロイペプチンおよび０．０５ｍｇ／ｍＬのペプスタチン）の存在下、氷上で３０分間、８００ｐｓｉでの窒素キャビテーションにより細胞を溶解した後、分画遠心分離（１０分間１０００ｘｇ、その後３０分間１６０，０００ｘｇ、すべて４℃）により膜を作成した。１ｍＭのＥＤＴＡを含有する１０ｍＭのＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ７．４）に１６０，０００ｘｇペレットをＣｏｕｎｃｅ型均質化（Ｄｏｕｎｃｅ  Ａ；１０工程）により蛋白質約５−１０ｍｇ／ｍＬで再び懸濁させ、液体窒素中で凍結させて、−８０℃で保管した。
【０１５０】
プロスタノイド受容体結合アッセイ
プロスタノイド受容体結合アッセイは、１ｍＭのＥＤＴＡ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２（ＥＰサブタイプ）または１０ＭのＭｎＣｌ２（ＤＰ、ＦＰ、ＩＰおよびＴＰ）および放射リガンド［ＥＰサブタイプについては０．５〜１．０ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＥ２（１８１Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ＤＰについては０．７ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＤ２（１１５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ＦＰについては０．９５ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＦ２α（１７０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、ＩＰについては５ｎＭ［３Ｈ］イロプロスト（１６Ｃｉ／ｍｍｏｌ）およびＴＰについては１．８ｎＭ［３Ｈ］ＳＱ  ２９５４８（４６Ｃｉ／ｍｍｏｌ）］を含有する、１０ｍＭのＭＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ６．０）（ＥＰサブタイプ、ＦＰおよびＴＰ）または１０ｍＭのＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ７．４）（ＤｐおよびＩＰ）中、最終インキュベーション容量０．２ｍＬで行った。ＥＰ３アッセイは、１００μＭのＧＴＰγＳも含有した。１６０，０００ｘｇ画分からの膜蛋白の添加（ＥＰ１については約３０μｇ、ＥＰ２については２０μｇ、ＥＰ３については約２μｇ、ＥＰ４については１０μｇ、ＦＰについては６０μｇ、ＤＰについては３０μｇ、ＩＰについては１０μｇおよびＴＰについては１０μｇ）により反応を開始させた。リガンドをジメチルスルホキシド（Ｍｅ２ＳＯ）に添加し、すべてのインキュベーション物中１％（ｖ／ｖ）で一定させた。１μＭの対応する非放射性プロスタノイドの存在下で非特異的結合を決定した。インキュベーションは、６０分間（ＥＰサブタイプ、ＦＰおよびＩＰ）または３０分間（ＤＰおよびＴＰ）、３０℃（ＥＰサブタイプ、ＤＰ、ＦＰおよびＴＰ）または室温（ＩＰ）で行い、また、Ｔｏｍｔｅｃ  Ｍａｃｈ  ＩＩＩ  ９６ウエル半自動セル・ハーベスターを用い、（４℃で）ＥＤＴＡを含有しないアッセイインキュベーションバッファ中で予備湿潤した９６ウエルＵｎｉｆｉｌｔｅｒ  ＧＦ／Ｃ（Ｃａｎｂｅｒｒａ  Ｐａｃｋａｒｄ）に通して迅速に濾過することによって終わらせた。フィルターを３〜４ｍＬの同バッファで洗浄して、５５℃で９０分間乾燥させ、１４５０  ＭｉｃｒｏＢｅｔａ（Ｗａｌｌａｃ）を使用して５０μＬのＵｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ  Ｆ（Ｃａｎｂｅｒｒａ  Ｐａｃｋａｒｄ）を添加しながらシンチレーションカウンティングすることにより、個々のフィルターへの残留放射性結合を決定した。全結合から非特異的結合を減算することにより、特異的結合を算出した。特異的結合は、全結合の９０〜９５％に相当し、用いた放射リガンドおよび蛋白質の濃度に対して線形であった。全結合は、インキュベーション培地に添加した放射リガンドの５〜１０％に相当した。
【０１５１】
骨用の本発明の化合物の活性範囲は、０．０１ｎＭと１００，０００ｎＭの間である。
【０１５２】
骨吸収アッセイ
１．動物の処置：
ｍＲＮＡ局在定位試験のために、週齢５週のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ）をＣＯ２により安楽死させ、それらの脛骨および頭蓋冠を切除して、軟組織を洗浄し、直ちに液体窒素中で凍結させる。ＥＰ４調節試験のために、週齢６週のラットにビヒクル（滅菌水中７％エタノール）または同化用量のＰＧＥ２（Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ，Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ，ＭＩ）、同ビヒクル中３〜６ｍｇ／ｋｇ）、いずれかの腹腔内注射を一回施す。注射後幾つかの時点で動物を安楽死させ、それらの脛骨および頭蓋冠、ならびに肺および腎組織からのサンプルを液体窒素中で凍結させる。
【０１５３】
２．細胞培養
週齢４週のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットの脛骨の骨膜細胞の初代培養物からＲＰ−１骨膜細胞を自然に不死化し、１０％ウシ胎仔血清（ＪＲＨ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｌｅｎｅｘａ，ＫＳ）を含有するＤＭＥＭ  （ＢＲＬ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）中で培養する。これらの細胞は、初期培養では骨芽細胞表現型マーカーを発現しないが、集密になると、Ｉ型コラーゲン、アルカリホスファターゼおよびオステオカルシンを発現し、鉱物化した細胞外マトリクスを生成する。
【０１５４】
ＲＣＴ−１およびＲＣＴ−３は、コラゲナーゼ／ヒアルロニダーゼ併用消化によってラット胎仔頭蓋冠から遊離された細胞からＳＶ−４０大型Ｔ抗原により不死化したクローン細胞系統である。消化の最初の１０分の間に放出された細胞（分画Ｉ）由来のＲＣＴ−１細胞を、１０％ウシ胎仔血清および０．４ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（ＢＲＬ）を含有するＲＰＭＩ  １６４０培地（ＢＲＬ）中で培養する。これらの細胞は分化し、レチノイン酸で処理すると骨芽細胞の特徴を発現する。骨芽細胞富化分画ＩＩＩ細胞から不死化したＲＣＴ−３細胞を、５％ウシ胎仔血清および０．４ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含有するＦ−１２培地（ＢＲＬ）中で培養する。ＴＲＡＢ−１１細胞も、成体ラット脛骨からＳＶ４０大型Ｔ抗原によって不死化し、１０％ＦＢＳおよび０．４ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含有するＲＰＭＩ  １６４０培地中で培養する。５％ＦＢＳを含有するＦ−１２中で、ＲＯＳ  １７／２．８ラット骨肉腫細胞を培養する。日齢１９日のラット胎仔の頭蓋冠のコラゲナーゼ／ヒアルロニダーゼ消化によって、骨芽細胞富化（分画ＩＩＩ）初代ラット胎仔頭蓋冠細胞を得る。Ｒｏｄａｎら，「酸性ＦＧＦによるラット頭蓋冠骨芽細胞の成長刺激（Ｇｒｏｗｔｈ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒａｔ  ｃａｌｖａｒｉａ  ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ａｃｉｄｉｃ  ＦＧＦ）」，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１２１，９１９−１９２３（１９８７）参照。前記論文は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる。細胞は、３０〜５０分の消化の間に放出させ（分画ＩＩＩ）、５％ＦＢＳを含有するＦ−１２培地中で培養する。
【０１５５】
１０％ＦＢＳを含有するイーグルＭＥＭ中で培養したｐ８１５（マウス肥満細胞腫）細胞、および１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ中で培養したＮＲＫ（正常なラット腎蔵線維芽細胞）を、それぞれ、ＥＰ４発現のための陽性および陰性対照として用いる。Ａｂｒａｍｏｖｉｔｚら，「ヒトプロスタノイド受容体：クローニングおよび特性付け（Ｈｕｍａｎ  ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｃｌｏｎｉｎｇ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ）」．Ｉｎ：Ｓａｍｕｌｅｓｓｏｎ  Ｂ．ら編，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｚｎｅｓ  ａｎｄ  ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｖｏｌ．２３，ｐｐ．４９９−５０４（１９９５）、および  ｄｅ  Ｌａｒｃｏら，「ラット類上皮および腎細胞クローン：ＥＧＦ受容体およびマウス肉腫ウイルス形質転換の影響（Ｅｐｉｔｈｅｌｉｏｉｄ  ａｎｄ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｉｃ  ｒａｔ  ｋｉｄｎｅｙ  ｃｅｌｌ  ｃｌｏｎｅｓ：ＥＧＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｍｏｕｓｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ）」，Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．，９４，３３５−３４２（１９７８）参照。これらは両方とも、それら全文を本明細書に参照して組み込まれる。
【０１５６】
３．ノーザンブロット分析：
組織ホモジナイザーにより凍結骨サンプルを微粉砕した後、イソチオシアン酸グアニジニウム−フェノール−クロロホルム法を用いて、脛骨骨幹端または骨幹および頭蓋冠から全ＲＮＡを抽出する。Ｐ．Ｃｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉら，「酸性イソチオシアン酸グアニジニウム−フェノール−クロロホルム抽出による一段階ＲＮＡ単離法（Ｓｉｎｇｌｅ−ｓｔｅｐ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ＲＮＡ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａｃｉｄ  ｇｕａｎｉｄｉｕｍ  ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ−ｐｈｅｎｏｌ−ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ  ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）」，Ａｎａｌｙｔ  Ｂｉｏｃｈｅｍ，１６２，１５６−１５９（１９８７）参照。この論文は、その全文を本明細書に参照して組み込まれる。０．９％アガロース／ホルムアルデヒドゲルを用いてＲＮＡ（２０ｍｇ）を分離し、ナイロン膜（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に転移させる。３時間、４２℃のＨｙｂｒｉｓｏｌ  Ｉ（Ｏｎｃｏｒ，  Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）および０．５ｍｇ／ｍＬの超音波処理サーモン精子ＤＮＡ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ）中で膜をプレハイブリダイズさせ、レジプライムキット（Ａｍｅｒｓｈａｍ）を用いてランダムプライムすることにより［３２Ｐ］−ｄＣＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ，ＵＫ）で標識したラットＥＰ２およびマウスＥＰ４  ｃＤＮＡプローブを用いて４２℃でハイブリダイズさせる。ハイブリダイズさせた後、膜を２ｘＳＳＣ＋０．１％ＳＤＳ中、室温で四回、計１時間にわたって洗浄して、０．２ｘＳＳＣ＋０．１％ＳＤＳ中、５５℃で一回、１時間洗浄し、その後、増感紙を用いて−７０℃でＫｏｄａｋ  ＸＡＲ  ２フィルムに露出する。フィルムを現像した後、結合しているプローブを８０℃、０．１％ＳＤＳで二回除去し、負荷調節のために膜をヒトＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド３−リン酸脱水素酵素）ｃＤＮＡプローブ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡから購入したもの）とハイブリダイズさせる。
【０１５７】
４．インサイチュウ・ハイブリダイゼイション：
凍結脛骨を７ｍｍ厚に冠状切断し、切片を荷電スライドガラス（Ｐｒｏｂｅ  Ｏｎ  Ｐｌｕｓ，Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ，ＮＪ）に載せて、ハイブリダイゼーションまで−７０℃で保持する。Ｒｉｂｏｐｒｏｂｅ  ＩＩ  ｋｉｔ  （Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用い、３５Ｓ−ＵＴＰｇＳ（ＩＣＮ，Ｃｏｓｔａ  Ｍｅｓａ，ＣＡ）でｃＲＮＡプローブを標識する。ハイブリダイゼーションは、５０℃で行う。Ｍ．Ｗｅｉｎｒｅｂら，「インサイチュウ・ハイブリダイゼーションにより視覚化された発育期ラット骨における異なるパタンのアルカリホスファターゼ、オステオポンチンおよびオステオカルシンの発現（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｐａｔｔｅｒｎ  ｏｆ  ａｌｋａｌｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ａｎｄ  ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  ｒａｔ  ｂｏｎｅ  ｖｉｓｕａｌｉｚｅｄ  ｂｙ  ｉｎ−ｓｉｔｕ  ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）」，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ．，５，８３１−８４２（１９９０）およびＤ．Ｓｈｉｎａｒら，「インサイチューでのラット破骨細胞におけるανおよびβ３インテグリンサブユニットの発現（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａｌｐｈａν  ａｎｄ  ｂｅｔａ３  ｉｎｔｅｇｒｉｎ  ｓｕｂｕｎｉｔｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｓ  ｉｎ  ｓｉｔｕ）」，Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．ＲＥＳ．，８，４０３−４１４（１９９３）参照。これらの論文は両方とも、それら全文を本明細書に参照して組み込まれる。ハイブリダイゼーションおよび洗浄後、切片を、４２℃の水中６％グリセロールで２：１希釈したＩｌｆｏｒｄ  Ｋ５乳剤に浸漬し、暗所、４℃で１２〜１４日間露出する。スライドガラスを、１５℃の水で１：１希釈したＫｏｄａｋ  Ｄ−１９中で現像し、固定して、蒸留水で洗浄し、ヘマトキシリン染色後にグリセロール−ゼラチン（Ｓｉｇｍａ）でマウントする。明視野または暗視野いずれかの光学部品用い、顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）のもとで染色切片を目視する。
【０１５８】
５．骨芽細胞系統および骨組織におけるＥＰ４の発現
骨芽細胞富化初代ラット頭蓋冠細胞、胎仔ラット頭蓋冠または成体ラット脛骨からの不死化骨芽細胞系統、および骨芽細胞性骨肉腫細胞系統を含む様々な骨由来細胞において、ＥＰ４およびＥＰ２  ｍＲＮＡの発現を検査する。ラット骨肉腫細胞系統ＲＯＳ  １７／２．８を除く大部分の骨芽細胞および細胞系統が、有意な量の３．８ｋｂ  ＥＰ４  ｍＲＮＡを示す。この研究結果と一致して、ＲＯＳ  １７／２．８細胞では、ＰＧＥ２は、細胞内ｃＡＭＰに対して影響を及ぼさない。これは、ＲＣＴ−３およびＴＲＡＢ−１１細胞では著しく誘導される。分化を促進するレチノイン酸でのＲＣＴ−１細胞の処理は、ＥＰ４  ｍＲＮＡレベルを低下させる。ＮＲＫ線維芽細胞は、ＥＰ４  ｍＲＮＡを発現しないが、陽性対照として用いられるＰ８１５肥満細胞腫細胞は、大量のＥＰ４  ｍＲＮＡを発現する。ＥＰ４  ｍＲＮＡとは対照的に、全ＲＮＡサンプルにおいて検出可能な量のＥＰ２  ｍＲＡを発現する骨芽細胞および細胞系統はない。骨芽細胞におけるＥＰ４  ｍＲＮＡの発現では、ＥＰ４は、週齢５週のラットの脛骨および頭蓋冠から単離された全ＲＮＡにおいても発現される。対照的に、ＥＰ２  ｍＲＮＡは、脛骨幹からのＲＮＡには見られない。
【０１５９】
６．ＰＧＥ２は、ＲＰ−１骨膜細胞および成体ラット脛骨におけるＥＰ４  ｍＲＮＡの発現を誘発する
ＰＧＥ２は、骨芽細胞および骨組織においてシクロオキシゲナーゼ２の発現をアップレギュレーションすることによりそれ自体の生産を増大させ、そのようにしてそれ自体の作用を自己増幅する。ＰＧＥ２は、ＥＰ４  ｍＲＮＡレベルも上昇させる。成体ラット頚骨骨膜の初代培養物からＲＰ−１細胞を不死化し、それを検査する。ヌードマウスに移植した時、これらの細胞は、集密になると骨芽細胞表現型マーカーを発現し、鉱物化骨基質を形成する。検査した他の骨芽細胞と同様に、ＲＰ−１骨膜細胞は、３．８ｋｂ  ＥＰ４転写体を発現する。ＰＧＥ２（１０−６Ｍ）での処理は、処理後２時間の時点をピークにＥＰ４  ｍＲＮＡレベルを急速に上昇させる。ＰＧＥ２は、さらに分化したＲＣＴ−３細胞ではＥＰ４  ｍＲＮＡレベルに対して影響を及ぼさず、これは、ＰＧＥ２によるＥＰ４発現の細胞タイプ特異的レギュレーションの証拠となる。ＥＰ２  ｍＲＮＡは、ＰＧＥ２での処理前も、処理後も、ＲＰ−１細胞では発現されない。
【０１６０】
ＰＧＥ２が、骨組織におけるＥＰ４  ｍＲＮＡレベルをレギュレートするかを検査するために、週齢５週の雄のラットにＰＧＥ２（３〜６ｍｇ／Ｋｇ）を注射する。ＰＧＥ２の全身投与は、注射後２時間の時点をピークに脛骨骨幹におけるＥＰ４  ｍＲＮＡレベルを急速に上昇させる。ＥＰ４  ｍＲＮＡに対するＰＧＥ２の同様の効果が、脛骨骨幹端および頭蓋冠において観察される。ＰＧＥ２は、細胞タイプ特異的および組織特異的な方式でインビトロでは骨原性骨膜細胞においておよびインビボでは骨組織においてＥＰ４  ｍＲＮＡレベルを誘導する。ＰＧＥ２は、ＲＰ−１細胞においても、骨組織においても、ＥＰ２  ｍＲＮＡを誘導しない。
【０１６１】
７．骨組織におけるＥＰ４  ｍＲＮＡ発現の局在定位
インサイチュー・ハイブリダイゼーションを用いて、骨における細胞発現ＥＰ４を局在定位する。対照実験（ビヒクルを注射した）ラットでは、骨髄細胞において低いＥＰ４発現が検出される。一回分の同化用量のＰＧＥ２の投与によって、骨髄細胞におけるＥＰ４の発現が増大した。骨髄上の銀粒子の分布は均一ではなく、骨幹端の多数の領域に集塊または斑が出現する。脛骨骨幹端内でのＥＰ４の発現は、二次海綿領域領域に限定され、一次海綿体領域では見られない。センスプローブ（陰性対照）での同様の切片のハイブリダイゼーションは、なんのシグナルも示さない。
【０１６２】
ＥＰ４は、インビトロでは骨芽細胞において、およびインビボでは骨髄細胞において発現され、そのリガンド、ＰＧＥ２によってアップレギュレートされる。
【０１６３】
８．本発明の作動薬
作動薬活性を測定する標準的な方法を用い、以下の化合物を細胞培養物およびＥＰ４受容体細胞非含有系において評価して、それらのＥＣ５０値でそれらの化合物の作動薬活性を判定する。
【国際調査報告】
2006504679.tif 000030
2006504679.tif 000031
2006504679.tif 000032