(57)【要約】本発明は、抗ざ瘡剤、抗脂漏のための製剤および抗５-α-レダクターゼ活性のための製剤の製造における植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用に関する。この抽出物は、タンパク質およびサポニン、特にアルガニンＡを含有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ざ瘡調製物の製造のための、植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用。
【請求項２】
抗脂漏調製物の製造のための、植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用。
【請求項３】
抗５-α-レダクターゼ活性を有する調製物の製造のための、植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用。
【請求項４】
婦人における望ましくない体毛成長の処置、より具体的には閉経後に起こる望ましくない体毛成長の処置のための抗５-α-レダクターゼ活性を有する調製物の製造のための、請求項３に記載の植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用。
【請求項５】
抽出物がタンパク質および／またはサポニンを含有することを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
抽出物が、アルガニンＡ、アルガニンＢ、アルガニンＣ、アルガニンＤ、アルガニンＥ、アルガニンＦ、アルガニンＧ、アルガニンＨ、アルガニンＪおよびミサポニンＡからなる群から選択されるサポニンを含有することを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の使用。
【請求項７】
抽出物が、サポニンとして、抽出物の乾燥重量を基準に、少なくとも６重量％の量でアルガニンＡを含有することを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の使用。
【請求項８】
抽出物が、抽出物の乾燥重量を基準に、少なくとも３重量％のタンパク質を含有することを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の使用。
【請求項９】
抽出物を、調製物を基準に乾燥重量として表して、０.０１〜２５重量％の量で使用することを特徴とする請求項１〜８のいずれかに記載の使用。
【請求項１０】
抽出物が、葉、茎、樹皮、花、果実、果肉および種子仁からなる群から選択される植物部分の抽出によって得られることを特徴とする請求項１〜９のいずれかに記載の使用。
【請求項１１】
抽出物が、植物の果実からの種子仁および／または脱脂した種子仁の抽出によって得られることを特徴とする請求項１〜１０のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、広くは化粧および／または皮膚薬ケア製品に、より具体的には、抗ざ瘡および／または抗脂漏調製物ならびに抗５-α-レダクターゼ活性を有する調製物の製造のための植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂肪の多いざ瘡の症状を有する皮膚は、脂腺の過活性による皮脂および脂肪の分泌の増加を示す。脂腺の分泌物中に存在するトリグリセリドは、皮膚において種々の微生物(例えば、Corynebacterium acnes、Staphylococcus epidermisおよびPytirosporum ovaleなど)のリパーゼによって分解され、遊離の脂肪酸が放出される。これら遊離脂肪酸の一部は、ざ瘡の急性段階の特徴的炎症現象を導く。
【０００３】
酵素 ５-α-レダクターゼによるテストステロンから５-ジヒドロテストステロン(５-ＤＨＴ)への変換が、脂腺分泌の増加の原因の１つであることがわかった。従って、酵素 ５-α-レダクターゼ(特に、脂腺およびアポクリン汗腺において、ならびに、ケラチノサイトおよび線維芽細胞において見い出すことができる)の活性が、ざ瘡または脂漏の症状を有する皮膚にとって特に重要である。
【０００４】
現在では、化粧品調製物は、消費者にとって種々の組合せで利用可能である。それでもなお、改善された性能スペクトルを有する製品が市場で必要とされている。これに関連して、消費者は、皮膚適合性および天然産物の使用を要求する。さらに、既に知られている活性成分の組合せによって、あるいは、既に知られている群の物質の新規用途の発見によって、明らかにより良好な製品を得るのが望ましい。より具体的には、植物の抽出物およびその成分が、化粧および医薬製品において、より普通に使用されている。しかし、これから発見されるにちがいない多くの植物およびその潜在的な効果が存在し、既に知られている群の物質の多くの新規用途が、しばしば驚きを引き起こしている。
【０００５】
種々の植物および微生物から得られる多くのサポニンが、抗ラジカル活性、鎮痛活性、さらに抗炎症活性を示すことが以前から知られていた。また、このような活性が、アルガニア・スピノーザから単離されたサポニンに対しても示されていた(非特許文献１)。さらに、ある種のサポニンは、抗生物質活性および静菌活性を示すことがわかっていた。サポニン、特にトリテルペンサポニンは、四環式または五環式トリテルペンアグリコンおよび１個または２個のグリコシド結合した糖鎖から構成される。
【０００６】
【非特許文献１】アラウィ(Alaoui K.)ら、Annales pharmaceutique francaices、１９９８年、第５６巻、ｐ.２２０〜２２８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明により解決しようとする課題は、活性成分、より具体的には、ざ瘡の症状および脂漏の症状を有する皮膚の処置のための活性成分に富む再生可能な植物粗原料の高適合性抽出物の新規用途を見い出すことであった。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、抗ざ瘡調製物の製造のため、抗脂漏調製物の製造のため、および、抗５-α-レダクターゼ活性を有する調製物の製造のための、植物 Argania spinosa (L.) Skeels (以下においては短縮してアルガニア・スピノーザと称する)の抽出物の使用に関する。
【発明の効果】
【０００９】
驚くべきことに、高い皮膚適合性と共に、抗ざ瘡調製物および抗脂漏調製物において優れた効果を有する調製物を、植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用によって製造しうることを見い出した。即ち、これらを、脂肪の多い皮膚、ざ瘡皮膚および脂肪の多い頭皮に対して、敏感な皮膚を有する人においても、顕著な効果を伴って使用することができる。製造した調製物は、明らかな抗５-α-レダクターゼ活性を示す。従って、本発明の特定の態様は、婦人における望ましくない体毛成長、より具体的には閉経後に起こる望ましくない体毛成長を処置するための調製物を製造するための、植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用である。この望ましくない体毛成長は、特に顔面において、とりわけ口の周りに、あるいは足において起こる。婦人における特に閉経後の望ましくない過度の体毛成長は、５-α-レダクターゼの過活性に関係している。即ち、この顔面の特定部分または足における望ましくない多くは過度である体毛成長を、植物アルガニア・スピノーザの抽出物の使用によって効果的に抑制することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
アルガニア・スピノーザ(Argania spinosa)
本発明に従って使用する抽出物は、アカテツ科(Sapotaceae)の植物から、特に、Argania spinosa (L.) Skeels (以下においては、単にアルガニア・スピノーザと称する)から得られる。この植物は、アトラス山脈の西側のモロッコにおいて主に見られる木である。この木は、その節(こぶ)のある幹および棘(とげ)のある枝に、１個または２個の種子仁を有するオリーブの大きさおよび形状のベリー(液果)を形成する。この種子仁からの木の実の味がする油は、特に食用油として利用されている。
【００１１】
本発明において、用語「植物」は、植物全体および植物部分(葉、根、茎、樹皮、花、果実、果肉および種子仁)ならびにその混合物を包含することが意図されている。本発明によれば、植物果実の種子仁、特に、脱脂した種子仁の残留物が、サポニンの抽出に特に好ましい。
【００１２】
サポニン
本発明におけるサポニンとは、基本的に、植物アルガニア・スピノーザから単離することができるあらゆるサポニンである。
他の植物からのサポニンとは構造が異なるサポニンが、アルガニア・スピノーザの種子仁からの油の抽出の際に蓄積する残留物から得られる[Charrouf Z.ら、Phytochemistry、1992、31、2079-2086]。当該サポニンは、アルガニンＡ、アルガニンＢ、アルガニンＣ、アルガニンＤ、アルガニンＥ、アルガニンＦおよびミサポニンＡとして知られる。有用なサポニンであるアルガニンＧ、アルガニンＨおよびアルガニンＪは、この植物の茎から単離することができる[Oulad-Ali A.ら、J.Nat.Prod.、1996、59、193-195]。これらサポニンのアグリコンは、以下に示す構造(Ｉ)を有する。言及したサポニンは、Ｒ1およびＲ3の糖単位ならびにＲ2のヒドロキシ基が異なる。Ｒ3は四糖であるが、Ｒ1は単糖または二糖である(例えば、アルガニンＡおよびＢについては１,６-ジグルコース)。
【化１】
2006511524.tif 000002
【００１３】
本発明に係るサポニンは、マウスおよびラットにおける毒性試験において低毒性を示す。また本発明者らは、ヒト線維芽細胞における試験において、他のサポニン、例えばGypsophila paniculataからのサポニンと比較して、はるかに低い毒性を示すことができた。
【００１４】
本発明に従って使用するサポニンは、アルガニンＡ、アルガニンＢ、アルガニンＣ、アルガニンＤ、アルガニンＥ、アルガニンＦ、ミサポニンＡに、ならびに、アルガニンＧ、アルガニンＨおよびアルガニンＪに対応する。これらを、２つまたはそれ以上の混合物として、または純粋な形態で、化粧および／または医薬調製物において使用することができる。アルガニンＡ、アルガニンＢ、アルガニンＣ、アルガニンＤ、アルガニンＥ、アルガニンＦ、ミサポニンＡの混合物[混合物中のこれらサポニンの割合(％)は変化してよい]が特に好ましい。高い割合(％)のアルガニンＡを含有する抽出物を使用するのが好ましい。抽出物の乾燥重量を基準に、少なくとも６重量％、好ましくは８重量％、特に少なくとも１０重量％のアルガニンＡを含有する抽出物を本発明に従って使用すると、特に顕著な効果により区別される。
【００１５】
タンパク質
本発明におけるタンパク質とは、植物アルガニア・スピノーザから単離することができるタンパク質であると解される。油抽出後の種子仁(特に、脱脂した種子仁)を抽出するのが好ましい。従って、アルガニア・スピノーザの種子仁(特に、脱脂した種子仁)の抽出物から得られる天然タンパク質を含有する調製物が、本発明の特定の態様である。
【００１６】
本発明において、脱脂した種子仁の好ましい抽出とは、アルガニア・スピノーザの種子仁からの油の抽出後の残留物(ある種のケーキ)を抽出するのが好ましいことを意味するものと解される。この抽出するのが好ましい油抽出残留物は、３〜１０重量％の残留油を含有する。この残留物中の本発明に係るタンパク質を、該残留油から完全に分離する。タンパク質の他に、アルガニア・スピノーザ植物において天然に存在する他の物質(これらも同じ条件下で抽出することができる)を、同時抽出することができる。
【００１７】
本発明の別の態様において、本発明に係る調製物は、ｐＨ１２またはそれ以下、好ましくは３.５〜６.５、特に５.５〜６.５または３.５〜５.５での水による抽出および所望によるその後の乾燥(例えば、噴霧または凍結乾燥)によって得られる天然タンパク質を含有する。選択されるｐＨ範囲は、単離しようとするタンパク質分画に依存する。
【００１８】
植物アルガニア・スピノーザ(特に、この植物の種子仁)から抽出することができる天然タンパク質は、１０,０００〜５００,０００Ｄａ以上の範囲内の分子量を有することができる。有利には、これらを以下の群の分子量範囲に分けることができる。即ち、５００,０００Ｄａを超える分子量を有する天然タンパク質、１７０,０００〜２５０,０００Ｄａの範囲内の分子量を有する天然タンパク質、ならびに、１０,０００〜１８,０００Ｄａの範囲内の分子量を有する天然タンパク質を抽出することができる。
【００１９】
従って、本発明の他の態様は、一方において、５００,０００Ｄａを超える分子量を有する天然タンパク質を含有する調製物、１７０,０００〜２５０,０００Ｄａの範囲内、好ましくは１７０,０００〜２１０,０００Ｄａの範囲内の分子量を有する天然タンパク質を含有する調製物、ならびに、１０,０００〜１８,０００の範囲内、好ましくは１３,０００〜１６,０００の範囲内の分子量を有する天然タンパク質を含有する調製物である。
【００２０】
本発明に従って使用される抽出物中のタンパク質の含量(％)は、抽出物の乾燥重量を基準に、少なくとも３重量％、好ましくは少なくとも４重量％、特に少なくとも５重量％であるべきである。
【００２１】
抽出
本発明に従って使用される抽出物は、植物またはその部分を抽出する既知の方法によって調製することができる。適する通常の抽出法、例えば、離解、再離解、温浸、撹拌離解、渦巻抽出、超音波抽出、向流抽出、パーコレーション、再パーコレーション、エバコレーション(減圧下での抽出)、ディアコレーションおよびソックスレー抽出器中での連続還流下での固／液抽出(これらは、専門家には周知であり、かつ原則的にその全てを使用することができる)の詳細は、例えば、Hagers Handbuch der pharmazeutischen Praxis(第５版、第２巻、第１０２６〜１０３０頁、Springer Verlag、Berlin-Heidelberg-New York、１９９１年)中に見ることができる。生もしくは乾燥した植物またはその部分が出発物質として適しているが、抽出前に機械的にサイズを小さくした植物および／または植物部分を使用するのが普通である。専門家には既知である任意のサイズを小さくする方法、例えば粉砕機による粉砕を使用することができる。１つの特定の態様において、使用される抽出物は、茎、根、葉、花または果実の抽出によって得られる。種子仁の抽出が特に好ましい。
【００２２】
抽出過程のための好ましい溶媒は、有機溶媒、水または有機溶媒と水の混合物であり、特に、多かれ少なかれ多量の水含量(蒸留水または未蒸留水)を有する、低分子量アルコール、エステル、エーテル、ケトンまたはハロゲン化炭化水素であり、好ましくは、２０℃(以下においては室温と言う)を超える温度の水性アルコール溶液である。水、メタノール、エタノール、アセトン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、酢酸エチル、ジクロロメタン、トリクロロメタンおよびこれらの混合物による抽出が特に好ましい。抽出過程は、通常は２０〜１００℃、好ましくは２０〜８５℃、特に室温で行う。１つの可能な態様において、抽出過程を、不活性ガス雰囲気中で行って、抽出物成分の酸化を避ける。抽出時間は、出発物質、抽出方法、抽出温度、溶媒と粗原料の比率などに依存して、専門家により選択される。抽出過程の後に、得られた粗抽出物を、所望により、他の通常の工程(例えば、精製、濃縮および／または脱色など)に付すことができる。必要なら、このように調製した抽出物を、例えば、個々の望ましくない成分の選択的除去に付すことができる。抽出過程を任意の程度まで行うことができるが、通常は完全に枯渇するまで続ける。乾燥植物または乾燥植物部分(所望により脱脂する)の抽出における通常の収率(＝抽出物の乾燥分／使用した粗原料の量)は、３〜２０重量％、特に４〜１６重量％の範囲内である。本発明は、抽出条件および最終抽出物の収率を、所望の応用に応じて選択することができるという観察を包含する。必要なら、次いで抽出物を、例えば、噴霧乾燥または凍結乾燥に付すことができる。
【００２３】
本発明によれば、この植物の抽出物は、１０〜９９重量％、好ましくは１５〜７０重量％のサポニンを含有する。抗ざ瘡調製物において、抗脂漏調製物において、および抗５-α-レダクターゼ活性を有する調製物において使用される植物抽出物の量は、個々の成分の濃度によって決定される。調製物中に存在する植物抽出物の合計量は、最終調製物を基準に、通常は０.０１〜２５重量％、好ましくは０.０３〜５重量％、特に０.０３〜０.４重量％である。
【００２４】
使用される植物抽出物は、タンパク質およびサポニンを、記載した量範囲で組合せて含有するのが好ましい。
【００２５】
産業上の利用
化粧および／または医薬調製物
抗ざ瘡調製物、抗脂漏調製物および抗５-α-レダクターゼ活性を有する調製物の製造のための植物アルガニア・スピノーザ由来の抽出物の使用は、化粧および／または医薬調製物、例えば、クリーム、ゲル、ローション、アルコールおよび水／アルコール溶液、エマルジョン、ヘアシャンプー、ヘアローション、発泡浴剤、シャワー浴剤、ワックス／油脂コンパウンド、スティック調製物、粉末または軟膏などを与える。これら調製物は、さらなる助剤および添加剤として、穏やかな界面活性剤、油成分、乳化剤、真珠光沢ワックス、稠度因子、増粘剤、超脂肪化剤、安定剤、ポリマー、シリコーン化合物、油脂、ワックス、レシチン、リン脂質、生物起源の物質、ＵＶ保護因子、酸化防止剤、皮膜形成剤、膨潤剤、ヒドロトロープ、可溶化剤、防腐剤、芳香油、染料などをさらに含有することができる。
【００２６】
助剤および添加剤の合計含量(％)は、化粧および／または医薬調製物の最終調製物を基準に、１〜７０重量％、好ましくは２０〜５０重量％、特に５〜４０重量％であってよい。これら調製物は、通常の熱間法または冷間法によって製造することができ、相反転温度法によって製造するのが好ましい。
【実施例】
【００２７】
実施例１：サポニン粗抽出物の製造
アルガニア・スピノーザのケーキ(油抽出後の種子に由来する)(０.３ｋｇ)を、ヘキサン(１.９８ｇ)で脱脂した(８０℃で１時間)。次いで、脱脂したケーキを室温で２４時間乾燥した。この脱脂および乾燥したケーキ(０.１２ｋｇ)を、撹拌容器において８０容量％エタノール(２Ｌ)を用いて調製した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、固体を濾過によって除去した。この濾過した溶液が粗抽出物を構成し、これからエタノールを蒸発によって除去した。最後に、残留物を凍結乾燥した。
【００２８】
試験の原理
再構築した表皮は、生きている皮膚と同等に、テストステロンの代謝に必要な全酵素機序を含んでいる。インビボの系に非常に近く、かつ、精製した酵素によっては創製することができない生物学的な系中に５-α-レダクターゼが残存しているので、インビトロでの再構築した表皮を用いる試験は、より適している。また、この試験は、分化段階にあるケラチノサイトが、ケラチノサイトを単層で使用したときよりもインビボ試験に近くなるので適切である[Bernard F.-X.ら、2000、Int.J.Cosmetic Science、22、397-407、「再構築したヒト表皮における５-α-レダクターゼ種の発現およびテストステロンの代謝SkinEthic：皮膚標的化アンドロゲン調節剤をスクリーニングするための新しいモデル」]。
【００２９】
試験設定
材料：
培養中の表皮 SkinEthic(１７日、０.６３ｃｍ2)、３７℃、５％ＣＯ2
参照物質：フィナステリド(Finasteride)
テストステロン：[４-14Ｃ]テストステロン(Amersham、CFA129、５６ｍＣｉ／ｍモル)、２５０ｎＣｉ／表皮
実施例１のArganiaサポニン抽出物
【００３０】
処理：
表皮を、２４個の位置を有するプレート上で２４時間にわたり予備培養した。生成物および参照物質フィナステリド(１０μＭ)を用いる実験を３回行った(１回の実験あたり３つの表皮)。２４時間の処理の後に、表皮下(subepidermis)の培地を新鮮な培養培地(３００μｌ)に交換した。放射活性標識したテストステロン溶液(１００μｌ)を、表皮の上部表面(角質層)に適用した(ＴＯ)。さらに２４時間の後に、表皮下の培地を分析用に取り出した。
種々の表皮試料におけるケラチノサイトの生存性を、試験終了時にＭＴＴ法によって測定した。
【００３１】
抽出および分析：
経表皮拡散を測定するために、それぞれの培養培地(２０μｌ量)を取り、液体シンチレーションカウンターで計数した。
培養培地中に存在するステロイドを、代謝の分析のために抽出し、薄層クロマトグラフィー(シリカゲル上)によってその分子誘導体に分離した。変換されたテストステロンの量を、リン系造影剤を用いて、種々のスポットの放射活性計数によって測定した。
【００３２】
結果：
処理した表皮の生存性および経表皮拡散を表１に示す。
【表１】
2006511524.tif 000003
【００３３】
未処理表皮(対照)およびフィナステリド処理した表皮の生存性は、抽出物処理した試料(２濃度)の生存性と同じであった。
経表皮拡散については、ほぼ平均の初期放射活性が、２４時間のインキュベート後の培養培地において検出された。フィナステリドによる処理は、表皮からのステロイドの拡散のわずかな増加を与えた(対照の１１０％)。
しかし、分析した抽出物は、表皮からのステロイドの拡散に影響を与えなかった(対照の９８〜１００％の値)。
【００３４】
テストステロンの代謝を表２にまとめる。
【表２】
2006511524.tif 000004
分析した抽出物は、ＤＨＴ生成の明らかな減少を示す(３９％および２６％の抑制)。わずか０.００１重量％の濃度において、細胞の生存性に影響を与える毒性作用のない、５-α-レダクターゼ活性の有意の抑制が既に明らかである(ＭＴＴ試験によって測定)。
【国際調査報告】
2006511524.tif 000005
2006511524.tif 000006
2006511524.tif 000007
2006511524.tif 000008
2006511524.tif 000009
2006511524.tif 000010
2006511524.tif 000011
2006511524.tif 000012