(57)【要約】心筋梗塞の発生数を低減する際の抗炎症化合物の有効性を決定する方法が、本願明細書中において記載される。この方法は、心肺バイパスを含む手法を受けている少なくとも１人の患者を含む被検体群に、その化合物を投与する工程；およびその被検体群における梗塞の発生数を、コントロール患者サンプルにおける梗塞の発生数と、両方の群における血液中のＣＫ−ＭＢのピークレベルが５０ｎｇ／ｍｌより高い場合に比較する工程、を包含し、その被検体群における梗塞の発生数の減少が、その化合物の有効性を示す被検体において約５０ｎｇ／ｍｌより高いＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞を予防する方法もまた、本願明細書において提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
被検体において約５０ｎｇ／ｍｌより高いＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞を予防する方法であって、
心肺バイパスを含む手法を受けている該被検体に、有効心筋梗塞低減量の抗炎症化合物を投与する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、前記手法が、ＣＡＢＧ手術である、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約６０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約７０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約８０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項６】
請求項１に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約９０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１００ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項８】
請求項１に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１２０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項９】
請求項１に記載の方法であって、前記抗炎症化合物が、補体インヒビターである、方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、前記補体インヒビターが、
ａ）補体成分Ｃ−１に対する抗体、補体成分Ｃ−２に対する抗体、補体成分Ｃ−３に対する抗体、補体成分Ｃ−４に対する抗体、補体成分Ｃ−５に対する抗体、補体成分Ｃ−６に対する抗体、補体成分Ｃ−７に対する抗体、補体成分Ｃ−８に対する抗体、補体成分Ｃ−９に対する抗体、補体成分Ｄ因子に対する抗体、補体成分Ｂ因子に対する抗体、補体成分Ｐ因子に対する抗体、補体成分ＭＢＬに対する抗体、補体成分ＭＡＳＰ−１に対する抗体、もしくは補体成分ＭＡＳＰ−２に対する抗体；および
ｂ）天然に存在する形態もしくは可溶性形態の、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプレスタチン、もしくはＫ７６ＣＯＯＨ、
からなる群より選択される、方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法であって、前記抗体が、補体成分Ｃ５から補体成分Ｃ５ａおよび補体成分Ｃ５ｂへの変換を直接的または間接的に低減する、方法。
【請求項１２】
請求項１１に記載の方法であって、前記抗Ｃ５抗体は、少なくとも１つの抗体−抗原結合部位を含む抗体であり、該抗体は、ヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示し、該特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖に対して標的化されており、
該抗体は、１）ヒト体液における補体活性化を阻害し、２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４のいずれかへの精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し、そして３）Ｃ５ａについてのヒト補体活性化産物に特異的には結合しない、方法。
【請求項１３】
請求項９に記載の方法であって、前記補体インヒビターは、Ｃ５ｂ−９複合体を形成する成分に特異的に結合する、方法。
【請求項１４】
心筋梗塞の発生数を低減する際の抗炎症化合物の有効性を決定する方法であって、
心肺バイパスを含む手法を受けている少なくとも１人の患者を含む被検体群に、該化合物を投与する工程；および
該被検体群における梗塞の発生数を、コントロール患者サンプルにおける梗塞の発生数と、両方の群における血液中のＣＫ−ＭＢのピークレベルが５０ｎｇ／ｍｌより高い場合に比較する工程、
を包含し、
該被検体群における梗塞の発生数の減少が、該化合物の有効性を示す、方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、前記手法が、ＣＡＢＧ手術である、方法。
【請求項１６】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約６０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項１７】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約７０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項１８】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約８０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項１９】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約９０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項２０】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１００ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項２１】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１２０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項２２】
請求項１４に記載の方法であって、前記抗炎症化合物が、補体インヒビターである、方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法であって、前記補体インヒビターが、
ａ）補体成分Ｃ−１に対する抗体、補体成分Ｃ−２に対する抗体、補体成分Ｃ−３に対する抗体、補体成分Ｃ−４に対する抗体、補体成分Ｃ−５に対する抗体、補体成分Ｃ−６に対する抗体、補体成分Ｃ−７に対する抗体、補体成分Ｃ−８に対する抗体、補体成分Ｃ−９に対する抗体、補体成分Ｄ因子に対する抗体、補体成分Ｂ因子に対する抗体、補体成分Ｐ因子に対する抗体、補体成分ＭＢＬに対する抗体、補体成分ＭＡＳＰ−１に対する抗体、もしくは補体成分ＭＡＳＰ−２に対する抗体；ならびに
ｂ）天然に存在する形態もしくは可溶性形態の、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプレスタチン、およびＫ７６ＣＯＯＨ、
からなる群より選択される、方法。
【請求項２４】
請求項２２に記載の方法であって、前記抗体が、補体成分Ｃ５から補体成分Ｃ５ａおよび補体成分Ｃ５ｂへの変換を直接的または間接的に低減する、方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の方法であって、前記抗Ｃ５抗体は、少なくとも１つの抗体−抗原結合部位を含む抗体であり、該抗体は、ヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示し、該特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖に対して標的化されており、
該抗体は、１）ヒト体液における補体活性化を阻害し、２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４のいずれかへの精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し、そして３）Ｃ５ａについてのヒト補体活性化産物に特異的には結合しない、方法。
【請求項２６】
請求項２２に記載の方法であって、前記補体インヒビターは、Ｃ５ｂ−９複合体を形成する成分に特異的に結合する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（背景）
（技術分野）
本開示は、心筋梗塞の発生数の減少に対する抗炎症性化合物の有効性を決定する方法に関する。被験体において約５０ナノグラム／ｍｌより高いＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞に対する予防方法もまた、記載される。
【背景技術】
【０００２】
（関連技術の背景）
冠状動脈疾患は、しばしば、冠状動脈における病変または閉塞によって特徴付けられ、これは、心筋への不十分な血流をもたらし得るか、または心筋虚血をもたらし得、代表的に、狭心症、心組織の壊死（心筋梗塞）、および突然死のような合併症の一因である。幾つかの場合において、冠状動脈疾患は、薬物の使用および生活態度および食餌の変更によって処置され得る。他の場合において、冠状動脈の拡張は、血管形成術、レーザーアブレーション、アテレクトミー、カテーテル挿入術および脈管内ステントのような手順によって達成され得る。
【０００３】
特定の患者について、冠状動脈バイパスグラフト（ＣＡＢＧ）は、症状を軽減するための好ましい処置形態であり、しばしば、予測寿命を増加させる。ＣＡＢＧは、脈管セグメントから１つ以上の冠状動脈への直接的な吻合からなる。例えば、伏在静脈の逆のセグメントは、動脈血供給源として上行大動脈の一端および動脈閉塞を超えた点における冠状動脈への他端においてグラフトされ得る。あるいは、内胸動脈は、胸骨に隣接する胸郭の空洞に位置し、冠状動脈（例えば、左前下行枝）へのグラフトについて同様に適している。
【０００４】
ＣＡＢＧ手術の間、心臓は、通常、拍動を停止され、吻合手順を容易にする。心臓が拍動していない間、血液の体外循環は、患者の身体のほとんどを支持する（心臓を除く、ある程度までは肺も除く）。心肺バイパス（ＣＰＢ）機械は、患者の身体から脱酸素された血液を受け取り、酸素および種々の栄養分を血液に加え、そして酸素添加血液を患者の身体へとポンプ輸送する。
【０００５】
ＣＡＢＧ手術は、進行した心筋虚血を有する患者の治療結果を実質的に改善したが、この回復期間は、しばしば、かなりの付随の危険性を有する患者に対して外傷的であり得る。例えば、ＣＰＢが、組織傷害を引き起こしかつかなりの手術時および長期の臨床罹病率に寄与する全身炎症応答を惹起することが公知である。ＣＰＢの間、体外回路の生体適合性表面への血液の曝露、ならびにこの手順に関連した組織虚血および再灌流は、炎症のいくつかの主な体液経路の活性化を誘導する。この全身炎症応答に寄与する臨床的症状発現は、循環補助具を必要とする、心筋梗塞（心臓細胞の死）または重篤な心室機能不全として発現し得る、心筋傷害を含み得る。
【０００６】
血液化学を用いて心臓への損傷を測定する技術は、当該分野で公知である。心臓の細胞が死亡した場合、通常は生きた細胞内に保持されている特定の酵素が循環血液中に放出される。１つのこのような酵素は、クレアチンキナーゼ（ＣＫ）であり、クレアチンキナーゼは、クレアチンへのＡＴＰのリン酸基の可逆的移動を触媒する。これは、ＭサブユニットおよびＢサブユニットと通常指定される２つのサブユニットから構成される二量体として存在する。ＣＫ−ＭＢは、心筋梗塞に関連し、そしてこのようなエピソードが無ければ、血清中にほんの痕跡濃度で存在する（他のアイソザイムであるＣＫ−ＭＭおよびＣＫ−ＢＢは、骨格筋および脳細胞に見出される）。それゆえ、血清中でのＣＫ−ＭＢアイソザイムの出現は、心筋梗塞を示す。
【０００７】
それゆえ、薬物が、ＣＰＢを含め、ＣＡＢＧ手術の間および／または後の血液中のＣＫ−ＭＢレベルを低下させ得る場合、血中ＣＫ−ＭＢレベルの低下は、この薬物が、細胞死および組織損傷に対する心臓の保護を助けたことを示すことが当該分野で公知である。
【０００８】
Ｆｉｔｃｈら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ａ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ，Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ，Ｓｉｎｇｌｅ−Ｃｈａｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃ５  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  Ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｙ  Ｂｙｐａｓｓ  Ｇｒａｆｔ  Ｓｕｒｇｅｒｙ  Ｗｉｔｈ  Ｃａｒｄｉｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｂｙｐａｓｓ（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１９９９；１００：２４９９）は、組換え単鎖抗体Ｃ５インヒビターであるｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖが、ＣＰＢを受けた患者において、補体依存性溶血活性、ならびにより重要なことには、炎症促進（ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）活性化産物Ｃ５−９およびＣ５ｂ−９の生成の両方を阻害する、全身補体活性化の強力なインヒビターであると立証されたことを開示する。Ｆｉｔｃｈらは、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖの強力な補体阻害活性および抗炎症活性が、手術後のＣＫ−ＭＢの放出の顕著な低下、新たな認知欠損、および血液損失と関連したことをさらに開示する。ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖの強固な阻害効果および抗炎症効果は、手術後の心筋傷害における顕著な減少に関連した。さらに、Ｆｉｔｃｈは、活性化された好中球および単球についてＣＤ１１ｂを測定し、そして溶血活性および可溶性Ｃ５ｂ−９生成を完全にブロックするに充分な用量（例えば、１．０ｍｇ／ｋｇおよび２．０ｍｇ／ｋｇ）において、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖが、ピーク白血球ＣＤ１１ｂ発現を、プラセボと比較して顕著に低下させることを報告した。それにも拘わらず、Ｆｉｔｃｈら（Ｇｒａｙら，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１９８２：６６：１１８５−１１８９；ＣａｌｌｉｆｆらＪ．ＡｍＣｏｌｌ  Ｃａｒｄｉｏｌ，１９９８：３１：２４１−２５１；Ａｂｄｅｌｍｅｇｕｉｄら  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１９９５：９１：２７３３−２７４１；およびＫｏｎｇら、ＪＡＭＡ，１９９７：２７７：４６１−４６６を引用する）は、「閾値の効果が無いようであり、むしろ、ＣＫ−ＭＢ放出が多いほど、その後の罹病率、コスト、および死亡が多いようである…［そして］手術後の心筋傷害における顕著な減少は、改善された結果と関連し得るようである」と述べる。
【０００９】
しかし、手術後の血中のＣＫ−ＭＢのピークレベルに基づいて、ＣＰＢを含め、ＣＡＢＧを受けた患者における外傷性損傷による炎症損傷を検出する方法および／または識別する方法も、当該分野には存在しない。それゆえ、このような患者においてＣＫ−ＭＢピークレベルをモニタリングすることによって抗炎症薬物の効力を試験する方法は存在しない。従って、大きな心筋梗塞（これ（例えば、約５０ナノグラム／ｍｌよりも高いＣＫ−ＭＢレベルを示すもの）は、より頻繁に、死亡をもたらす）に対する予防方法は当該分野で公知でない。さらに、より小さなＣＡＢＧ後心筋梗塞とは対照的に、より大きなＣＡＢＧ後心筋梗塞を制限するための、抗炎症性薬物の相対的有用性は、公知ではない。
【００１０】
ＣＰＢを含め、ＣＡＢＧを受けた患者中のＣＫ−ＭＢピークレベルをモニタリングすることによって抗炎症薬物の効力を試験する方法を提供することは有利である。約５０ナノグラム／ｍｌ以上のピークＣＫ−ＭＢレベルによって示されるような大きな心筋梗塞に対する予防方法を提供することがさらに有利である。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（要旨）
ＣＡＢＧ後心筋梗塞の発生数の減少における抗炎症性化合物の効力を決定する方法は、現在驚くほど見出されている。この方法は、心肺バイパスを含む手順を受けた少なくとも一人の患者を含む被験体群に、抗炎症性化合物を投与する工程；この被験体群における梗塞の発生数と、患者のコントロールサンプルにおける梗塞の発生数とを、両方の群における所定のピークＣＫ−ＭＢ血中レベル（例えば、５０ｎｇ／ｍｌより上）について比較する工程、を包含し、ここで、この被験体群における梗塞の発生数の減少は、この化合物の効力を示す。
【００１２】
別の実施形態において、被験体において約５０ｎｇ／ｍｌより大きいピークＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞に対する予防方法が、提供される。この方法は、心肺バイパスを含む手順を受けた被験体に、有効量の心筋梗塞軽減量の抗炎症性化合物を投与する工程を包含する。
【００１３】
（好ましい実施形態の詳細な説明）
本開示に従う心筋梗塞の発生数の減少における抗炎症性化合物の効力を決定する方法は、心肺バイパスを含む手順を受けた少なくとも一人の患者を含む被験体群に、抗炎症性化合物を投与する工程を包含する。このような手順としては、ＣＡＢＧおよび心臓移植が挙げられるが、これらに限定されない。患者の血液中のＣＫ−ＭＢのレベルが測定され、そして約５０ｎｇ／ｍｌより大きいピークＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞の発生数が決定される。次いで、この被験体群におけるこのような梗塞の発生数は、患者のコントロールサンプル中のＣＫ−ＭＢの匹敵するレベルを示す梗塞の発生数と比較される。被験体群における梗塞の発生数の減少は、この化合物の効力を示す。
【００１４】
本明細書中で記載される方法によって評価され得る抗炎症性化合物としては、非ステロイド性抗炎症性活性剤または薬物（ＮＡＳＩＤＳ）が挙げられる。このＮＳＡＩＤＳは、以下のカテゴリーから選択され得る：プロピオン酸誘導体；酢酸誘導体；フェナム酸（ｆｅｎａｍｉｃ  ａｃｉｄ）誘導体；ビフェニルカルボン酸誘導体；およびオキシカム（ｏｘｉｃａｍ）。これらのＮＡＳＩＤＳの全ては、Ｓｕｎｓｈｉｎｅらの米国特許第４，９８５，４５９号（１９９１年１月１５日発行）（本明細書中に参考として援用される）に十分に記載されている。プロピオン酸ＮＡＳＩＤＳが最も好ましく、これには、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、ナプロキセン、ベノキサプロフェン、フルルビオフェン、フェノプロフェン、フェンブフェン、ケトプロフェン、インドプロフェン、ピルプロフェン、カルプロフェン、オキサプロジン、プラノプロフェン、ミロプロフェン（ｍｉｒｏｐｒｏｆｅｎ）、チオキサプロフェン（ｔｉｏｘａｐｒｏｆｅｎ）、スプロフェン、アルミノプロフェン（ａｌｍｉｎｏｐｒｏｆｅｎ）、チアプロフェン酸、フルプロフェン（ｆｌｕｐｒｏｆｅｎ）およびブクロキシ酸（ｂｕｃｌｏｘｉｃ  ａｃｉｄ）が挙げられるが、これらに限定されない。別の有用なクラスの抗炎症性化合物としては、シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）のインヒビターおよびシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）のインヒビターが挙げられる。ヒドロコルチゾンなどを含むステロイド性抗炎症性薬物もまた、有用である。好中球活性化または単球活性化を約３０％より多く低下させる抗炎症性化合物が、特に有用である。
【００１５】
好ましい抗炎症性化合物は、補体成分に結合するか、そうでなければこの補体成分の生成および／または活性をブロックする化合物である。特に有用な特定のクラスのこのような化合物は、ヒト補体成分に対して特異的な抗体である。
【００１６】
補体系は、身体の他の免疫系と共に作用して、細胞病原体およびウイルス病原体の侵入を防御する。少なくとも２５種の補体タンパク質が存在し、これらは、血漿タンパク質と膜補因子の複雑な集合物として見出されている。血漿タンパク質は、脊椎動物の血清中のグロブリンの約１０％までを構成する。補体成分は、一連の複雑だが正確な酵素的切断および膜結合事象と相互作用することによって、その免疫防御機能を果たす。生じる補体カスケードは、オプソニン機能、免疫調節機能および溶解機能を有する生成物の生成をもたらす。補体活性化に関連する生物学的活性の簡潔な要旨は、例えば、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ，第１６版において示される。
【００１７】
補体カスケードは、古典的な経路または代替的な経路を介して進行する。これらの経路は、多数の成分を共有し、そしてこれらの経路は、それらの初期段階において異なるが、これらの経路は、標的細胞の活性化および破壊を担う、同じ「末端補体」成分（Ｃ５〜Ｃ９）を収束しかつこれらの成分を共有する。古典的な補体経路は、代表的に、標的細胞上の抗原性部位の抗体認識およびこの抗原性部位への結合によって開始される。代替的な経路は、通常、抗体非依存性であり、病原体表面上の特定の分子によって開始され得る。さらに、レクチン経路は、代表的に、マンノース結合レクチン（ＭＢＬ）の、高マンノース基質への結合で開始される。これらの経路は、補体成分Ｃ３が活性プロテアーゼ（これは、各経路において異なる）によって切断されて、Ｃ３ａおよびＣ３ｂが生じた時点で収束する。補体攻撃を活性化する他の経路は、補体機能の種々の局面を誘導する事象の順序の後のほうで作用し得る。
【００１８】
Ｃ３ａは、アナフィラトキシンである（以下の議論を参照のこと）。Ｃ３ｂは、細菌細胞および他の細胞、ならびに特定のウイルスおよび免疫複合体に結合し、循環からの除去のために、それらをタグ付けする（この役割におけるＣ３ｂは、オプソニンとして知られている）。Ｃ３ｂのオプソニン機能は、一般に、補体系の最も重要な抗感染性活性であると考えられる。Ｃ３ｂ機能をブロックする遺伝的損傷を有する患者は、広範な種々の病原性生物による感染に対して傾向性であるが、補体カスケードの順序の後のほうに損傷を有する患者（すなわち、Ｃ５機能をブロックする損傷を有する患者）は、ナイセリア菌感染に対してのみ、より傾向性であり、それらのうちのいくつかのみが、より傾向性であることが見出される（Ｆｅａｒｏｎ、Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第２版、ＦａｎｔａおよびＭｉｎａｋｅｒ編、Ｂｒｉｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｏｍｅｎ’ｓ  ａｎｄ  Ｂｅｔｈ  Ｉｓｒａｅｌ  Ｈｏｓｐｉｔａｌｓ，１９８３）。
【００１９】
Ｃ３ｂはまた、各経路に特有な他の成分と複合体を形成し、古典的または代替的なＣ５コンバターゼ（これは、Ｃ５をＣ５ａおよびＣ５ｂに切断する）を形成する。従って、Ｃ３は、補体反応順序において、中心的なタンパク質とみなされる。なぜなら、Ｃ３は、代替的な経路および古典的な経路の両方に必須だからである（Ｗｕｒｚｎｅｒら、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｉｎｆｌａｍｍ．８：３２８−３４０，１９９１）。Ｃ３ｂのこの特性は、血清プロテアーゼ第Ｉ因子（これは、Ｃ３ｂ上で作用して、ｉＣ３ｂを生成する）によって調節される。ｉＣ３ｂは、なおオプソニンとして機能的であるが、活性Ｃ５コンバターゼを形成することができない。
【００２０】
Ｃ５ａは、別のアナフィラトキシンである（以下の議論を参照のこと）。Ｃ５ｂは、Ｃ６、Ｃ７およびＣ８と組み合わさって、その標的細胞表面にてＣ５ｂ−８複合体を形成する。いくつかのＣ９分子の結合の際に、膜攻撃複合体（ＭＡＣ、Ｃ５ｂ−９、末端補体複合体−−ＴＣＣ）が形成される。十分な数のＭＡＣが標的細胞膜に挿入された場合、それらが作製した開口部（ＭＡＣ孔）は、この標的細胞の迅速な浸透圧性溶解を媒介する。非溶解性のより低濃度のＭＡＣは、他の効果を生じ得る。特に、少量のＣ５ｂ−９複合体の、内皮細胞および血小板への膜挿入は、有害な細胞活性化を引き起こし得る。いくつかの場合において、活性化は、細胞溶解に先行し得る。
【００２１】
上で言及されるように、Ｃ３ａおよびＣ５ａは、アナフィラトキシンである。これらの活性化補体成分は、肥満細胞の脱顆粒を誘発し得る。これは、ヒスタミンおよび炎症の他のメディエーターを放出し、平滑筋収縮、脈管透過性の増加、白血球活性化、および他の炎症性現象（過剰細胞性（ｈｙｐｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｉｔｙ）を生じる細胞増殖が挙げられる）を生じる。Ｃ５ａはまた、補体活性化部位に対する炎症促進性（ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）顆粒球を攻撃する役目を果たす走化性ペプチドとしても機能する。
【００２２】
ヒト補体成分のいずれかに結合するか、またはヒト補体成分のいずれかの生成および／もしくは活性を別なようにブロックする任意の化合物（例えば、ヒト補体成分に得意的な抗体）が、本明細書中で有用である。いくつかの化合物としては、以下が挙げられる：１）補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、Ｄ因子、Ｂ因子、Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１およびＭＡＳＰ−２に対する抗体、ならびに２）補体阻害化合物（例えば、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプレスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）およびＫ７６  ＣＯＯＨ）の天然に存在する形態または可溶性形態。本明細書中での使用に適切な化合物は、補体成分Ｃ５の、補体成分Ｃ５ａおよびＣ５ｂへの転換を、直接的または間接的に低減する抗体である。１つのクラスの有用な抗体は、少なくとも１つの抗体−抗原結合部位を有し、そしてヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示す抗体であり、ここで、この特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖に標的化される。このような抗体は、１）ヒト体液中の補体活性を阻害し；２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４のいずれかへの、精製されたヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し；そして３）Ｃ５ａについてのヒト補体活性化産物に特異的に結合しない。特に有用な補体インヒビターは、約３０％より大きく、Ｃ５ａおよび／またはＣ５ｂ−９の生成を低減する化合物である。特に有用な抗Ｃ５抗体は、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖである。ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖの調製のための方法は、現在米国特許第＿＿＿＿＿＿号である米国特許出願番号０８／４８７，２８３（１９９５年６月７日出願）、および「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｂｙ  Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  Ａｎｔｉ−Ｃ５  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ａｎｄ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｆｖ」、Ｔｈｏｍａｓら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．３３、Ｎｏ．１７／１８、１３８９−１４０１頁、１９９６に記載される（これらの開示は、その全体が本明細書中で参考として援用される）。
【００２３】
以下の非限定的な実施例は、本発明を例示するために含まれるが、本発明の範囲を限定することを意図しない。
【実施例】
【００２４】
（心肺バイパスを受ける患者における、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖの、総死亡率および有害な心血管虚血の結果に対する効果の、無作為化した二重盲検プラシーボコントロール研究）
無作為化した多施設での二重盲検プラシーボコントロール研究を、ＣＡＢＧの一部としてＣＰＢを受ける、手術後の有害な虚血事象の危険性が中程度に増加した患者へ投与されたｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖで実施した。
【００２５】
研究集団は、弁手術なしに緊急の冠状動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）手術（これは、心肺バイパス（ＣＰＢ）機器の使用を必要とした）を受けるように選択された個体からなった。３つの処置部門の各々について、約２７０人の患者が存在した。
【００２６】
患者を、以下の３つの処置の組み合わせの１つを受けるように、無作為化した：ｉ）ボーラス２．０ｍｇ／ｋｇ  ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ、その後の２４時間にわたる０．０５ｍｇ／ｋｇ／時間のｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ；ｉｉ）ボーラス２．０ｍｇ／ｋｇ  ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ；およびｉｉｉ）プラシーボ。ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖまたは一致するプラシーボを、２ｍｇ／ｍｌの濃度で、３０ｍｌのバイアル中の注射用溶液として提供した。患者は、独自のラインを介する心肺バイパスの開始の前に、研究医薬のボーラスを１０分間受けた。この薬物は、この経路を介して与えられる他の医薬と組み合わせなかった。注入は、ボーラス投与後直ぐに開始し、そして一定の滴下速度で２４時間継続した。
【００２７】
患者を、研究医薬の最初の投与の前１４日以内に行った、最初のスクリーニング来院で評価した。血圧および心拍数を、麻酔の導入時に開始して、手術中の期間にわたって１５分毎に記録した。
【００２８】
ＣＫ−ＭＢ測定の目的のために、手術前および手術後の採血を、ＣＰＢの４時間後、８時間後、１６時間後、２０時間後、２４時間後、３０時間後および３６時間後に実施した。さらに、手術後日数（ＰＯＤ）２日目のＣＫ−ＭＢ採血を、ＣＰＢの４８時間後に実施した。ＯＲにおける採血を除いて、これらの採血の各々について３０分間のウインドウが存在し、これらは、正確であった。ＰＤＯ４  ＣＫ−ＭＢ採血を、慣用的な採血で収集した。ＣＫ−ＭＢの測定を、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ａｂｂｏｔｔ  Ｐａｒｋ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）から、商標名ＡｘＳＹＭシステムの下で市販される、微粒子酵素イムノアッセイを使用して行った。
【００２９】
この研究を、以下によって必要とされるＧｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＣＰ）の遵守を確実にするように設計した標準的な作業手順に従って実施した：Ｄｉｒｅｃｔｉｖｅ  ９１／５０７／ＥＥＣ：Ｔｈｅ  Ｒｕｌｅｓ  Ｇｏｖｅｒｎｉｎｇ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｉａｎ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ；臨床研究を扱うＣｏｄｅ  ｏｆ  Ｆｅｄｅｒａｌ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ（インフォームドコンセントおよびＩＲＢ規制に関する第５０部および第５６部を含む、２１  ＣＦＲ）；ならびにヒトにおける医学的研究に関するＤｅｃｌａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｅｌｓｉｎｋｉ（「Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  Ｇｕｉｄｉｎｇ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｕｂｊｅｃｔ」、Ｈｅｌｓｉｎｋｉ  １９６４、修正Ｔｏｋｙｏ  １９７５、Ｖｅｎｉｃｅ  １９８３、Ｈｏｎｇ  Ｋｏｎｇ  １９８９およびＳｏｍｅｒｓｅｔ  Ｗｅｓｔ  １９９６）。有効バージョンのＧｕｉｄａｎｃｅ  ｏｎ  Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅは、１９９６年７月にＣＰＭＰによって承認されたことに留意のこと。Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｈａｒｍｏｎｉｓａｔｉｏｎ；Ｇｏｏｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ：Ｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｅｄ  Ｇｕｉｄｌｉｎｅ；Ｎｏｔｉｃｅ  ｏｆ  Ａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，ｉｎ  Ｆｅｄｅｒａｌ  Ｒｅｇｉｓｔｅｒ，１９９７年５月９日。
【００３０】
各患者群についてのピークＣＫ−ＭＢレベルの分布を、百分率を計算するために，従来の統計分析に供した。これらの結果を、図１および２に要約する。図１に見られるように、＞６０ｎｇ／ｍｌ、＞７０ｎｇ／ｍｌ、＞８０ｎｇ／ｍｌ、＞９０ｎｇ／ｍｌ、＞１１０ｎｇ／ｍｌおよび＞１２０ｎｇ／ｍｌの各々のＣＫ−ＭＢレベルを示す、心筋梗塞の発生数における有意な減少が、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖによって提供された。図２に見られるように、抗炎症性化合物の投与の有効性は、驚くべきことに、約５０ｎｇ／ｍｌより高いピークＣＫ−ＭＢ値を示す、心筋梗塞を経た患者においてのみ、有意であることが観察された。
【００３１】
別の局面において、抗炎症性薬物の有効性およびＣＡＢＧ臨床試験における終点の処方を試験するための新規方法が、発見されている。具体的には、本明細書中に記載される方法を使用して、＞５０、＞６０、＞７０、＞８０、＞９０、＞１００または＞１２０のＣＫ−ＭＢピークレベルによって一部規定される心筋梗塞での、ＣＡＢＧ試験の終点は、抗炎症性薬物を評価するために、効果的に利用され得る。
【００３２】
本明細書中に記載される方法を用いて評価した抗炎症性化合物は、５０ｎｇ／ｍｌより大きいＣＫ−ＭＢレベルを示すこのような重篤度の心筋梗塞の発生を低減することが決定され得るので、別の局面において、本開示は、被験体において約５０ｎｇ／ｍｌよりも高いＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞に対する予防方法を企図する。この方法は、ＣＰＢを伴う手順を受けた被験体に、心筋梗塞減少有効量の抗炎症性化合物を投与する工程を包含する。どのような量が、心筋梗塞減少有効量の抗炎症性化合物を構成するかの確認は、本明細書中上記に記載される新規のスクリーニング手順を用いて、または当業者に公知の任意の技術により確認され得る。心筋梗塞減少有効量を構成する抗炎症性化合物の投薬量は、例えば、選択された特定の抗炎症性化合物およびその操作方法を含む多くの因子に依存する。しかし、代表的には、抗炎症性化合物は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２０．０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．１０ｍｇ／ｋｇ〜約１０．０ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与され得る。
【００３３】
本明細書中の方法を用いて評価され、そして心筋梗塞の発症を減少すると決定された任意の抗炎症性化合物が、本発明の予防方法において使用され得る。任意のヒト補体成分に結合するか、そうでなければその生成および／または活性をブロックする任意の化合物（例えば、ヒト補体成分に特異的な抗体）が、予防に有用である。いくつかの化合物として、１）補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、Ｄ因子、Ｂ因子、Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２に対する抗体、ならびに２）天然に存在するかまたは可溶性形態の補体阻害化合物（例えば、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプレスタチン、およびＫ７６  ＣＯＯＨ）が挙げられる。本明細書中での使用に適切な化合物は、補体成分Ｃ５の、補体成分Ｃ５ａおよびＣ５ｂへの変換を直接的または間接的に減少する抗体である。有用な抗体の１つのクラスは、少なくとも１つの抗体抗原結合部位を有し、ヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示す抗体である。ここで、特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖に標的化される。このような抗体は、１）ヒト体液において補体活性化を阻害し；２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４のいずれかへの純粋なヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し；そして３）Ｃ５ａについてのヒト補体活性化産物に特異的に結合しない。特定の有用な抗Ｃ５抗体は、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖである。
【００３４】
本発明の好ましい実施形態および他の実施形態が本明細書中に記載されているが、さらなる実施形態が、添付の特許請求の範囲により規定される本発明の範囲から逸脱することなく当業者に理解され得る。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１は、ＣＰＢと共にＣＡＢＧを受けた患者の制御された無作為化された臨床試験において、抗−Ｃ５抗体（すなわち、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ）により提供された、種々のＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞の発生数の減少を要約するグラフである。
【図２】図２は、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖの使用から生じるピークＣＫ−ＭＢ値における減少を示す、表１のデータのグラフ表示である。
【図１】
2006502089.tif 000002
【図２】
2006502089.tif 000003
【手続補正書】
【提出日】平成17年1月24日(2005.1.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
心肺バイパスを含む手法を受けている被検体において約５０ｎｇ／ｍｌより高いＣＫ−ＭＢレベルを示す心筋梗塞を予防するための組成物であって、
有効心筋梗塞低減量の抗炎症化合物、
を含む、組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の組成物であって、前記手法が、ＣＡＢＧ手術である、組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の組成物であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約６０ｎｇ／ｍｌより高い、組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の組成物であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約７０ｎｇ／ｍｌより高い、組成物。
【請求項５】
請求項１に記載の組成物であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約８０ｎｇ／ｍｌより高い、組成物。
【請求項６】
請求項１に記載の組成物であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約９０ｎｇ／ｍｌより高い、組成物。
【請求項７】
請求項１に記載の組成物であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１００ｎｇ／ｍｌより高い、組成物。
【請求項８】
請求項１に記載の組成物であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１２０ｎｇ／ｍｌより高い、組成物。
【請求項９】
請求項１に記載の組成物であって、前記抗炎症化合物が、補体インヒビターである、組成物。
【請求項１０】
請求項９に記載の組成物であって、前記補体インヒビターが、
ａ）補体成分Ｃ−１に対する抗体、補体成分Ｃ−２に対する抗体、補体成分Ｃ−３に対する抗体、補体成分Ｃ−４に対する抗体、補体成分Ｃ−５に対する抗体、補体成分Ｃ−６に対する抗体、補体成分Ｃ−７に対する抗体、補体成分Ｃ−８に対する抗体、補体成分Ｃ−９に対する抗体、補体成分Ｄ因子に対する抗体、補体成分Ｂ因子に対する抗体、補体成分Ｐ因子に対する抗体、補体成分ＭＢＬに対する抗体、補体成分ＭＡＳＰ−１に対する抗体、もしくは補体成分ＭＡＳＰ−２に対する抗体；および
ｂ）天然に存在する形態もしくは可溶性形態の、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプレスタチン、もしくはＫ７６ＣＯＯＨ、
からなる群より選択される、組成物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の組成物であって、前記抗体が、補体成分Ｃ５から補体成分Ｃ５ａおよび補体成分Ｃ５ｂへの変換を直接的または間接的に低減する、組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の組成物であって、前記抗Ｃ５抗体は、少なくとも１つの抗体−抗原結合部位を含む抗体であり、該抗体は、ヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示し、該特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖に対して標的化されており、
該抗体は、１）ヒト体液における補体活性化を阻害し、２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４のいずれかへの精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し、そして３）Ｃ５ａについてのヒト補体活性化産物に特異的には結合しない、組成物。
【請求項１３】
請求項９に記載の組成物であって、前記補体インヒビターは、Ｃ５ｂ−９複合体を形成する成分に特異的に結合する、組成物。
【請求項１４】
心筋梗塞の発生数を低減する際の抗炎症化合物の有効性を示すデータを収集する方法であって、
該化合物が投与されている被検体群に由来するサンプル中のＣＫ−ＭＢのピークレベルを測定する工程であって、該被験体群は、心肺バイパスを含む手法を受けている少なくとも１人の患者を含む、工程；
５０ｎｇ／ｍｌより大きいピークＣＫ−ＭＢレベルの発生数を決定する工程；および
該被検体群における発生数を、コントロール患者サンプルにおける発生数と比較する工程、
を包含し、
該被検体群における発生数の減少が、該化合物の有効性を示す、方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、前記手法が、ＣＡＢＧ手術である、方法。
【請求項１６】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約６０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項１７】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約７０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項１８】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約８０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項１９】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約９０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項２０】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１００ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項２１】
請求項１４に記載の方法であって、前記ＣＫ−ＭＢレベルが、約１２０ｎｇ／ｍｌより高い、方法。
【請求項２２】
請求項１４に記載の方法であって、前記抗炎症化合物が、補体インヒビターである、方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法であって、前記補体インヒビターが、
ａ）補体成分Ｃ−１に対する抗体、補体成分Ｃ−２に対する抗体、補体成分Ｃ−３に対する抗体、補体成分Ｃ−４に対する抗体、補体成分Ｃ−５に対する抗体、補体成分Ｃ−６に対する抗体、補体成分Ｃ−７に対する抗体、補体成分Ｃ−８に対する抗体、補体成分Ｃ−９に対する抗体、補体成分Ｄ因子に対する抗体、補体成分Ｂ因子に対する抗体、補体成分Ｐ因子に対する抗体、補体成分ＭＢＬに対する抗体、補体成分ＭＡＳＰ−１に対する抗体、もしくは補体成分ＭＡＳＰ−２に対する抗体；ならびに
ｂ）天然に存在する形態もしくは可溶性形態の、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプレスタチン、およびＫ７６ＣＯＯＨ、
からなる群より選択される、方法。
【請求項２４】
請求項２２に記載の方法であって、前記抗体が、補体成分Ｃ５から補体成分Ｃ５ａおよび補体成分Ｃ５ｂへの変換を直接的または間接的に低減する、方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の方法であって、前記抗Ｃ５抗体は、少なくとも１つの抗体−抗原結合部位を含む抗体であり、該抗体は、ヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示し、該特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖に対して標的化されており、
該抗体は、１）ヒト体液における補体活性化を阻害し、２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４のいずれかへの精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し、そして３）Ｃ５ａについてのヒト補体活性化産物に特異的には結合しない、方法。
【請求項２６】
請求項２２に記載の方法であって、前記補体インヒビターは、Ｃ５ｂ−９複合体を形成する成分に特異的に結合する、方法。
【国際調査報告】
2006502089.tif 000004
2006502089.tif 000005
2006502089.tif 000006
2006502089.tif 000007