(57)【要約】R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラ-デシルカルバモイル)-アミノブチラートおよびメトホルミンの組み合わせが開示される。該抗糖尿病薬の組み合わせは相乗作用を発揮し、副作用の出現を避け、あるいは低減するような用量での２つの薬剤の投与を可能とする。この組み合わせはまた治療範囲の向上にも有用であり、食事時だけでなく、吸収後および絶食条件にも用いられる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシル-カルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩の１つ、および、メトホルミンまたはその医薬上許容される塩の１つの組み合わせ。
【請求項２】
請求項1の組み合わせの、医薬としての使用。
【請求項３】
請求項1の組み合わせの、2型糖尿病の治療用医薬の調製のための使用。
【請求項４】
24時間にわたる糖血症を制御するための抗糖尿病活性を有する医薬の調製のための請求項3の使用。
【請求項５】
医薬が、食事時から離れた、吸収後および絶食条件における糖血症の制御に有用である請求項4の使用。
【請求項６】
該医薬が、該組み合わせの個々の成分に典型的な副作用がない、または、そのタイプの副作用が実質的に低減している、抗糖尿病活性を有する医薬の調製のための請求項2-5のいずれかの使用。
【請求項７】
該医薬が、メトホルミンが禁忌または推奨されない糖尿病患者の治療に用いられる請求項6の使用。
【請求項８】
該医薬が、腎臓障害、心不全、慢性肝臓障害、臨床的タンパク尿、末梢血管障害または肺障害からなる群に属する１以上の合併症を患う患者のためのものである請求項6または7の使用。
【請求項９】
請求項1の組み合わせを含む医薬組成物。
【請求項１０】
薬理活性量以下のR-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩の１つ、および薬理活性量以下のメトホルミンまたはその医薬上許容される塩の１つをそれぞれ含む請求項 9の医薬組成物。
【請求項１１】
薬理活性量のR-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩の１つ、および薬理活性量以下のメトホルミンまたはその医薬上許容される塩の１つを含む請求項 9の医薬組成物。
【請求項１２】
薬理活性量以下のR-4-トリメチル-アンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩の１つ、および薬理活性量のメトホルミンまたはその医薬上許容される塩の１つをそれぞれ含む請求項 9の医薬組成物。
【請求項１３】
薬理活性量のR-4-トリメチル-アンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩の１つ、および薬理活性量のメトホルミンまたはその医薬上許容される塩の１つをそれぞれ含む請求項 9の医薬組成物。
【請求項１４】
R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシル-カルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩の１つ、および、メトホルミンまたはその医薬上許容される塩の１つを、単一用量形態において含む請求項9-13のいずれかの医薬組成物。
【請求項１５】
１用量単位が夜間絶食時の治療適用範囲に好適な請求項14の医薬組成物。
【請求項１６】
ST 1326が用量範囲10 mg〜1 g、またはその医薬上許容される塩の１つが同等用量存在し、メトホルミンが用量範囲50 mg〜2.5 g、またはその医薬上同等の塩の１つが同等用量存在する請求項9-15のいずれかの医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書に開示する本発明は、医薬、具体的には糖尿病治療薬の調製、さらに具体的にはこの疾患に相乗効果を有する活性成分の組み合わせに関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
糖尿病は広範な疾患であり、WHOによると、場合によっては流行伝染病のような勢いに達する。
【０００３】
それは現在では工業国における第四番目の主要な死因であり、開発途上国においても急速に増加しつつある。
【０００４】
世界における糖尿病の見積もられている発生は1985年の3000万名の患者から1995年の1億3500万名に増加しており、2001年には2億4000万名、そして2025年には3億名になると予測される。
【０００５】
糖尿病の様々な臨床形態が知られており、もっとも一般的なのは1型および2型糖尿病である。
【０００６】
1型糖尿病は膵島の自己免疫破壊によって起こり、インスリン分泌の欠損に至る。欧州および北米においては、1型糖尿病は若年患者における第三に高頻度の慢性疾患である。
【０００７】
2型糖尿病は西洋に広くみられ、老人および肥満の人々においてより一般的である。2型糖尿病の発生率は人口のおよそ5%と見積もられ、国によっては10-20%という高い率のこともある。2型糖尿病の増加速度が最も高いのは開発途上国またはそれらの地域社会であり、生活水準の向上に西欧様式への適合および社会経済の現代化が関係する。極端な状況では、該疾患が人口の30%以上に影響を与えうる。
【０００８】
2型糖尿病は糖尿病の症例の85%を占める。それは遺伝および環境要因を含む多因子性の障害である。
【０００９】
該疾患の遺伝子的原因の理解の進歩は、不均一な特性と環境要因との相互作用のために遅い。にもかかわらず、疾患の原因となる候補遺伝子の分析により、広く採用されたアプローチが構成され、この分野の研究の指針が整備されている。
【００１０】
加齢の他に、疾患の発症は、食事のタイプ、運動不足および特に肥満によって加速され、症例の90%と関連する。
【００１１】
米国などの国では、人口の30%が肥満または体重過剰であり、2型糖尿病の発生率は7%であるが、肥満がまれである日本においては、発生率は1%であると見積もられている。発生率は寿命の延長および人々の豊かさの成長に比例して上昇する傾向にある。
【００１２】
2型糖尿病は高血糖によって特徴付けられ、これはインスリンの欠損およびインスリン抵抗性によってもたらされる。疾患の発病の初期段階がインスリン欠損にあるかインスリン抵抗性にあるのか研究者の間で議論されている。一般に、インスリン抵抗性は2型糖尿病における原発性欠損であると考えられており、疾患と肥満の関係を構成するといわれている。ここ数年に主に提唱されたクランプ技術に基づく仮説によると、インスリン抵抗性は脂肪酸の放出の上昇および組織の脂肪酸への曝露過多により引き起こされるベータ細胞の欠陥である。
【００１３】
糖尿病には臨床上重要な合併症が伴い、例えば、大血管障害 (動脈硬化症、心筋梗塞、末梢動脈障害)および微小血管障害 (網膜症、腎症および神経障害)が含まれる。糖尿病の後期の合併症は疾患の避けられない特徴であり、個人の福祉および正常な生活の質に対する深刻な脅威である。
【００１４】
40歳以上の患者の死因の30-40%である冠動脈障害のリスクは、糖尿病の男女において正常対象と比べて３倍大きい (UK Prospective Diabetes Study、UKPDS 1976-1997)。
【００１５】
技術水準
抗糖尿病療法の第一の目的は高血糖レベルを低下させ、糖血症を管理することである。
【００１６】
現状では、市場で入手できる薬剤は古典的な薬剤、例えば、メトホルミンやスルホニルウレア、および最近導入された薬剤、例えばα-グルコシダーゼ阻害剤やチアゾリジオンなどである。理解されるように、2型糖尿病におけるグルコース恒常性を管理するための戦略は異なり、糖尿病によって提示される様々な異常に対応する。
【００１７】
スルホニルウレアはベータ細胞によるインスリンの分泌を促進し、2型糖尿病に欠損しているインスリンの急性放出を増加させることが出来、それゆえ食後グルコースの制御を改善することが出来る。
【００１８】
低糖血症がスルホニルウレアのもっとも一般的な副作用であり、重篤であり持続性である。さらにスルホニルウレアは、虚血の場合の心臓の血管拡張を妨害することがあり、不整脈を引き起こすことがある。
【００１９】
ビグアナイドは50年代に上市され、もっともよく知られているのはメトホルミンであり、以下に詳細に説明するが、その技術的問題が本発明により解決されるものである。
【００２０】
α-グルコシダーゼ阻害剤、例えば、アカルボースおよびボグリボースは腸における炭水化物の吸収を遅延させることにより食後高血糖の問題を解決しようとするものである。これら物質は、デンプンおよびスクロースを単糖へと分解する酵素である胃腸管α-グルコシダーゼの競合阻害剤である。メトホルミンと同様に、そしてスルホニルウレアとは異なり、それらは低糖血症および体重増加を引き起こさない。α-グルコシダーゼ阻害剤は個々の患者のための用量調整を必要とし、用量は小腸における消化を遅延させるのに十分高くなければならないが、同時に大腸に炭水化物が入る前に消化が完了するように十分に低くなければならない(腸の副作用を避けるため)。報告されている主な副作用は、膨満 (19%)、次いで下痢(3.8%)である。α-グルコシダーゼ阻害剤は食事時から離れて、吸収後および絶食条件において活性であるグルコースの肝臓による産生を低減しない。
【００２１】
チアゾリジンジオン(トログリタゾン、ピオグリタゾンおよびロシグリタゾン)は経口血清-グルコース-降下薬であり、最近上市されて非常に成功している。1998年に、トログリタゾン (Rezulin)の米国における売り上げは7億4800万ドルであり、これは米国の市場でトップの抗糖尿病薬であるメトホルミン (Glucophage)の8億6100万ドルの売り上げより僅かに低いだけである。チアゾリジンジオンは組織のインスリン感受性を上昇させる。それらは高血糖を抑制することが出来、部分的には糖尿病性高脂血症を抑制でき、そしてインスリンレベルを低下させる。これら化合物は脂肪組織で多く存在する核内受容体であるPPARγのアゴニストであり、インスリンによって制御される遺伝子、例えば、リポタンパク質リパーゼ(LPL)遺伝子の転写を誘導することが観察されている。これら化合物の血清-グルコース-低下効果はおそらくそれらの血流からの脂肪酸およびトリグリセリドの動員活性およびアディポサイトカイン産生に二次的なものであるが、しかし、これら化合物が筋肉組織に直接作用している可能性を排除することは出来ない。これら化合物は、実際、筋肉におけるグルコースの取り込みと輸送をインビボおよびインビトロで改善することが出来る。これら化合物のもっとも恐ろしい副作用は肝不全に至るまでの肝臓損傷である。これら化合物の使用はまた体重増加、体液うっ滞、血清体積の希釈による貧血、およびその他の重篤な副作用を起こす。
【００２２】
したがって、スルホニルウレア、ビグアナイド、α-グルコシダーゼ阻害剤およびチアゾリジンジオンは2型糖尿病におけるグルコースを制御するために今日市販されている薬剤の群である。
【００２３】
糖尿病の有効な治療に到達するためのかなりの研究努力にもかかわらず、当業者には、疾患の長期進展を予防することが出来る活性成分は未だに得られていないことが明らかである。したがって、本発明者らの知識によると、いずれの単剤治療もうまくいかないことが必至であり、併用療法が必要である。組み合わせは単剤治療に対する十分な応答が無い場合最初から必要となることがある。
【００２４】
メトホルミンについては、50年代に欧州に、そして米国には1994年に導入され、2型糖尿病の治療に広く用いられており、肥満を伴う2型糖尿病の治療において選択される薬剤である。メトホルミンはグルコースの腸内吸収、その肝臓による生産を低下させ(Cusi and De Fronzo、Diabetes Rev.,6: 89-131、1998; Hundal et al.、Diabetes、49: 2063-2069、2000)、そしてその組織における輸送と利用を促進し、インスリンに刺激された場合筋肉への取り込みを促進する(Galuska et al.、Diabetologia、37:、826-832、1994; Bailey et al.、New England J. Med.、334: 574-579、1996)。その作用は血中脂肪酸およびトリグリセリドレベルの低下を介して脂質代謝にも関係している（Cusi et al.、J. Clin. Endocrinol. Metab.、81: 4059-4067、1996; Kim et al.、Diabetes、51: 443-448、2002)。さらにメトホルミンは、脂肪酸および高レベルのグルコースに慢性的に曝されることによって変化していたインスリン分泌を正常に修復することが出来(Patane et al,. Diabetes、49: 735-740、2000)、カテコールアミンによって刺激される脂肪組織リパーゼを阻害することが出来ると考えられている（Flech-tner-Mors et al.、Diabetes Med.、16: 1000-1006、1999)。血清-グルコース-低下作用の機構は十分に説明されておらず、メトホルミンの分子作用部位はいまだにほとんど不明である(Wiernsperger and Bailey、Drug、58: 31-39、1999; Hundal et al,. Diabetes、49: 2063-2069、2000 ; Musi et al.、Diabetes、51: 2074-2081、2002; Hawley et al、Diabetes、 51: 2420-2425、2002)。メトホルミンによるグルコースの肝臓での生産の低下は、グルコース生成の鍵となる酵素（例えばグルコース-6-ホスファターゼ、ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ (PEPCK)、およびフルクトース-1,6-ビホスファターゼ (Fulgencio et al.、Biochem. Pharmacol.、62: 439-446、2001; Song et al.、Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab.、281: E275-E282、2001)）のレベルの低下に関連しており、部分的には脂肪酸酸化の抑制によって媒介されているようである(Perriello et al.、Diabetes、43: 920-928、1994)。しかし、その機構とプロセスの本発明者らの知識が足りないことの他に、メトホルミンはグルコースの利用および脂質プロフィールを改善させることが出来、それによってインスリン抵抗性を低減させるということが判明した(Bailey、Diabetes Care、15: 755-742、1992; Cusi and  De Fronzo、Diabetes Rev.、6: 89-131、1998)。最近、メトホルミンおよび近代的なチアゾリジンジオンの比較からこのことがわかった(Kim et al.、Diabetes、51: 443-448、2002; Ciaraldi et al.、51: 30-36、Diabetes、2002)。脂質プロフィールを改善することにより、メトホルミンは結果的に心血管系危険因子、特に心筋梗塞の発生率を低下させ、これはメトホルミンとスルホニルウレアおよびインスリンを比較するUKPDSにより示されている(UKPDS Group、Lancet 352: 837-853、1998)。そしてメトホルミンはまた、肥満の糖尿病患者における全体の死亡率を低下させる(O'Connor et al.、J. Fam. Pract. 47 Suppl5: S13-S22、1998)。脂質プロフィールの改善に関連するこの側面は、糖尿病における異脂肪血症が、糖尿病患者の50% 以上が患っている心血管障害の危険を上昇させることを考慮すると非常に重要である (Wilson et al.、Drug Aging、58: 248-251、 2001)。メトホルミンは食事制限および運動の失敗後に単剤治療として用いた場合に高血糖を20% (範囲: 13-37%)減少させ(UKPDS II、Diabetes、34: 793-798、1985; De Fronzo et al.、J. Clin. Endocrinol. Metab.、73: 1294-1301、1991; Ciaraldi et al.、Diabetes、51: 30-36、2002)、スルホニルウレアと組み合わせると25%減少させる(Reaven et al.、J. Clin. Endocrinol. Metab.、74: 1020-1026、1992)。
【００２５】
しかしメトホルミンの作用は、一定の制限を示し、それゆえ改善の余地がある。メトホルミン療法はその効力の持続の低下によって制限されている (Guay、Pharmacotherapy、18: 1095-1204、1998; Riddle、Am. J. Med.、108 Suppl. 6a: S15-S22、2000; Charpentier、Diab. Metab. Res. Rev.、18 Suppl. 3: S70-S76、2002)。
【００２６】
この問題は最も重要な副作用である乳酸アシドーシスにも関係する。さらに、患者は下痢、悪心および胃腸障害を起こすことがあり、これらの発生率は高く (およそ20%)、この薬剤を許容できる患者を減らしている。
【００２７】
腎臓障害、肝機能障害および心不全の症状は、体内のメトホルミンレベルの過剰の上昇の危険により乳酸アシドーシスのリスクを増大させる(Krentz、Drug Saf.、11: 223-241、1994) (Jennings、Drug Aging、10: 323-331、1997)。
【００２８】
しかし、メトホルミン療法は、単剤治療計画におけるその失敗の連続およびその副作用の問題を解決する必要があるにもかかわらず、基本的には重要である。 
【００２９】
R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラート(以下ST1326とも称する)は肝臓CPT1の可逆的選択的阻害剤であり、脂肪酸酸化が糖新生に対して有する影響を低減させることが出来る。脂肪酸酸化はピルビン酸カルボキシラーゼの刺激により糖新生を支持し、アセチルCoaレベルを上昇させ、グルコース合成の細胞内工程を豊富なATPと高いNADH/NAD+比によって促進する。本出願人の出願によるWO 99/59957に開示のこの化合物は、非可逆的非選択的阻害剤、例えば、エトモキシルとは異なっている。エトモキシルは心肥大をもたらすことが判明している(Lesniak et al.、Mol. Cell. Biochem.、142: 25-34、1995; Vetter et al.、Eur. Heart. J.、16 Suppl C: 15-19、1995)。該化合物の抗糖尿病活性は特に吸収後と絶食時の脂肪酸酸化と関係がある。
【００３０】
グルコースの肝臓による生産は、糖尿病の発病の開始からの異常な性質だが(Osei、Diabetes、39: 597-601、1990)、疾患の進行につれて大幅に上昇し、明らかな(frank)糖尿病患者の高血糖を増幅する(De Fronzo et al.、Diabetes Care、15: 318-368、1992)。高血糖は、脂肪酸酸化の上昇によって持続し(Golay et al.、Metabolism、36: 692-696、1987)、インスリンレベルの低下および肝臓インスリン抵抗性によって促進される(De Fronzo et al.、Metabolism、338: 387-395、1989)。
【００３１】
上記のように糖尿病治療に薬剤の組み合わせを導入する理由は、第一に疾患がいくつかの工程と臓器を伴うという複雑性である; おそらくこのために、一定の率の患者では、疾患の満足できる管理が現在入手できる薬剤では達成できない(Rutten、Ned. Tijdschr. Geneeskd.、145: 1547-1550、2001)。糖尿病患者においては、さらに、最初は有効にみえる経口単剤治療は不幸にも高い二次障害率を伴う(Brown et al.、Clin. Ther.、21: 1678-1687、1999; Riddle、Am. J. Med.、108 Suppl. 6a: S15-S22、2000)。さらに、一次障害は単剤治療の開始時には高い血液グルコースレベルの患者に珍しいことではない(Charpentier、Diabetes Metab. Res. Rev.、18 Suppl3: S70-S76、2002)。したがって薬物治療の最初から薬剤の組み合わせを用いる考えは確実に受け入れられつつある(Charpentier、Diab. Metab. Res. Rev.、18 Suppl3: S70-S76、2002)。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３２】
しかし今日でも、食事および運動の失敗後、糖尿病治療はほぼつねに単剤治療から開始され、後期にいたって初めて、糖血症が制御できず、単剤治療が不適切であるとわかってから、薬剤の組み合わせの手段がとられ、第二および場合によっては第三の薬剤、例えばメトホルミンおよびスルホニルウレア (Riddle、Am. J. Med.、108 Suppl. 6a: S15-S22、2000)、メグリチニドおよび/またはチアゾリジンジオンおよびメトホルミン、およびその他のタイプの組み合わせが追加される。
【００３３】
組み合わせの使用は疾患の複雑性と単剤治療の失敗によってだけでなく、より高い効力の探究(相加および/または相乗効果)および低用量の使用により副作用を減らす可能性によって、動機づけられている。
【００３４】
当業者であれば相乗効果は事前に推測できないという事実に精通している。 
【課題を解決するための手段】
【００３５】
発明の概要
このたび驚くべきことに、R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラート (ST1326)とメトホルミンとの組み合わせが２４時間にわたって糖血症の制御を向上することに成功し、特に食事時と離れた、吸収後および絶食条件においても向上するということが見いだされた。
【００３６】
それゆえ本発明の１つの目的は、R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩のいずれかとメトホルミンまたはその医薬上許容される塩の１つの組み合わせ、そして該組み合わせの抗糖尿病医薬としての使用、特に2型糖尿病の治療用抗糖尿病薬の調製のための使用である。該医薬は２４時間にわたる糖血症の管理に有用であり、特に食事時から離れた、特に夜中、吸収後期間および絶食条件での管理に有用である。本発明のさらなる目的は副作用がないか、大幅に低減された糖尿病治療用医薬を提供することであり、さらに、メトホルミンが禁忌または推奨されない患者にも用いることが出来る医薬を提供することである。かかる患者は例えば、以下からなる群に属する１以上の合併症を患うかその危険にある患者である：腎臓障害、心不全、慢性肝臓障害、臨床的タンパク尿、末梢血管障害または肺障害。
【００３７】
本発明のさらなる目的は、該組み合わせを含む医薬組成物である。
【００３８】
本発明による組み合わせは薬理活性量以下(subpharmacological dose)の各成分を用いた有効な抗糖尿病療法を可能とする驚くべき相乗効果を示し、副作用の点で患者に明らかに有利であり、該組み合わせには副作用は実質的に無く、あるとしても低減されている。所望により、薬理活性量の R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラ-デシルカルバモイル)-アミノブチラートまたはその医薬上許容される塩のいずれかと薬理活性量以下のメトホルミンまたはその医薬上許容される塩、あるいはその逆を含む組み合わせの使用、あるいは両方を薬理活性量含む使用も本発明の範囲で可能である。
【００３９】
上記WO 99/59957は、化合物ST1326およびその医薬上許容される塩、ならびにその調製および薬理活性を開示する。この文献において、ST1326 とその他の抗糖尿病薬、例えばメトホルミンとの組み合わせの可能性については、一般的に記載されているが、本発明による課題および解決手段は少しもふれられておらず、特にメトホルミンの副作用の低減または排除、あるいは、組み合わせの相乗効果、糖尿病患者における全治療範囲の向上についてはなんらふれられていない。
【００４０】
本発明を以下に、また実施例によりさらに詳細に説明する。
【００４１】
発明の詳細な説明
上記の考察に鑑み、該組み合わせは、単剤治療が不成功であることが判明した際に、第二の薬剤の使用に訴える必要を満たす。 
【００４２】
ST1326 とメトホルミンの組み合わせの使用は、以下に示す実施例に記載のように相乗的機構によって発揮される活性の上昇によって支持される。両方の化合物が、実際、糖新生に関与しているが、異なるプロセスおよび酵素活性に関するものである:メトホルミンの場合、標的はおそらく糖新生の酵素であり、一方ST1326の場合、標的は脂肪酸酸化および輸送系のCPT1である。この異なる作用により、本発明による組み合わせの相乗効果、特に用量について予測することは不可能であった。
【００４３】
本発明者らは特定の理論に拘束される意図はないが、結果の分析から、事後的に、相乗作用はインスリン感受性に対して有する、脂質プロフィールの向上に関するメトホルミンの作用の面に由来すると考える可能性がある。実際、脂肪酸酸化の低下、そしてそれによる肝臓によるグルコース生産の低下をねらうST1326の活性は、脂肪分解および糖新生に有利に作用する対抗制御的なホルモン(グルカゴン、GH、コルチコステロン)によって調整され、対抗されうる (Fery et al.、Am. J. Physiol.、270: E822-E830、1996)。対抗制御的な活性はしかし、インスリンによって調整され、したがってインスリン感受性によって調整される:したがって全体として、メトホルミンの作用に由来するインスリン感受性が大きいほど、ST1326が発現する活性は、組み合わせの効果においてST1326のみよりも大きくなる。しかしこの仮定は、当業者に入手可能な知識に基づいてなせるものではない。言い換えると、本発明者らは、インスリン感受性の向上の結果として、対抗制御的な応答が部分的に抑制され、ST1326の脂肪酸酸化と糖新生に対する阻害作用が増強されることを見いだした。というのはそれは競合的には拮抗されないからである。
【００４４】
それゆえ相乗効果はより低用量の使用を可能とし、したがって個々の化合物の副作用は低減あるいは排除できる。
【００４５】
特に、メトホルミン用量を低下させることによって、それが禁忌であるかあるいは使用に注意を要する症状、例えば、腎臓障害、心不全、慢性肝臓障害、臨床的タンパク尿、末梢血管障害、肺障害等に対する重大さが低減される。
【００４６】
これら障害の発生は珍しくない。英国のuniversity Diabetes clinicにおける患者の研究の遡及的分析によると、メトホルミンの使用が禁忌または危険因子とされる症状の発生率は 54%にも達する (Sulkin et al.、Diabetes Care、20: 925-928、1997)。
【００４７】
さらにメトホルミンを用いる1993年1月から1995年6月にわたるスコットランドでの患者の遡及的研究により、該薬剤の使用は24.5%において禁忌であった(Emslie-Smith et al.、Diabet Med 、18: 483-488、 2001)。
【００４８】
最後に、1995年1月から1998年5月の期間、最初自宅で、そしてドイツの総合病院でメトホルミンで治療された306名の患者の分析において、急性障害または治療の最適化の結果として、入院患者の73%が禁忌、危険因子または合併症を示し、メトホルミンを中止する必要があった(Holstein et al.、Diabet. Med.、16: 692-696、1999)。
【００４９】
結論として、乳酸アシドーシスはまれな減少ではあるが(Howlett and  Bailey、Drug. Saf.、20: 489-503、1999)、メトホルミンとST1326を組み合わせることにより治療用量を低下させることにより、メトホルミンの使用が禁忌であるか疾患の進行においてかなりの注意を要する症状の問題を低減することが出来る可能性がある。
【００５０】
ST1326のみによる単剤治療の使用と比較しても副作用の低減の点で、同じ理由から同様の利益が得られる。
【００５１】
ST1326のみの可能性のある有害作用は最近ラットおよびマウスにおけるこの化合物の作用に基づいて提唱されているものであるが、血中脂肪酸の上昇および肝臓における脂質沈着である。
【００５２】
しかしサルで得られたデータは、かかる作用はげっ歯類代謝モデルに関連するものであり、それゆえ、ヒトに近いその他の種には同様には当てはまらないことを示唆している。
【００５３】
産業上の利用可能性の観点については、本発明による組み合わせは常套手段により医薬組成物に製剤すればよい。この組成物は個々の活性成分の既知の医薬形態の単なる組み合わせであってよく、その用量は本発明の教示の用途に由来する様式により確立される。即ち、相乗作用を確実にし、所望により特にメトホルミンの副作用が低下または無くなるような低用量とすればよい。この場合、本発明による組成物はキットの形態でもよい。即ち、活性成分の個々の製剤とその同時または逐次投与のための説明書を含むパックとすればよい。あるいは、本発明は２つの活性成分を単一用量形態中に含有する新規医薬組成物を提供する。有利なことに、この剤形には有効量の活性成分が含まれ、一日あたり投与回数を最小にする治療保護が提供される。本発明の１つの好ましい態様において、医薬組成物は一晩に渡って治療保護が維持される用量単位を含む。
【００５４】
用量および投与様式は臨床医または一次療法医などの当業者がその一般知識および経験に基づいて決めることが出来る。考えられる用量の好ましい例は、R-4-トリメチルアンモニオ-3-(テトラデシルカルバモイル)-アミノブチラート用量範囲10 mg〜1 gまたはそれと同等量のその医薬上許容される塩の１つ、およびメトホルミン用量範囲50 mg〜2.5 gまたはそれと同等量のその医薬上許容される塩の１つである。
【００５５】
本発明による医薬組成物は完全に常套的なものであり特に説明を要しない。いずれにせよ、医薬組成物の説明は上記WO 99/59957 およびより詳細には、Remington's Pharmaceutical Sciences、latest edition、Mack Publishing and Coに記載されている。
【００５６】
以下の実施例により本発明をさらに説明する。
【実施例】
【００５７】
ob/ob マウス、db/db マウスおよびC57BL/6 マウスにおける高脂肪食に対するST1326とメトホルミンの相乗的な血清-グルコース-降下活性
実験動物における突然変異により、肥満、高脂血症（hyperliperlipidaemia）およびインスリン抵抗性を伴う非-インスリン-依存的糖尿病を示し、新規抗糖尿病化合物の効果の試験を可能とする、モデルの開発が可能となった(Reed and Scribner、Diabetes、Obesity and Metabolism、1: 75- 86、1999)。
【００５８】
遺伝的糖尿病マウスのよく使用されているモデルは、ob/ob マウスおよびdb/db マウスモデルである。これらモデルの遺伝的基礎はレプチン遺伝子の欠損(ob/ob マウス) またはレプチン受容体遺伝子の欠損(db/db マウス)であり、これによってレプチン抵抗性が生じ、過食症、肥満、高インスリン血症およびインスリン抵抗性が導かれ、その結果高血糖となる(Hummel et al.、Science 153: 1127-1128、1996; Coleman、Diabetologia 14: 141-148、1978; Kodama et al.、Diabetologia 37: 739 - 744、1994; Zhang et al.、Nature 372: 425-432、1994; Halaas et al.、Science 269: 543-546、1995; Chen et al.、Cell 84: 491 - 495、1996)。
【００５９】
高血糖には肥満およびインスリン抵抗性が伴うため、ob/obおよびdb/dbマウスはヒト対象における2型糖尿病と類似の特徴を有する。
【００６０】
糖尿病の遺伝的モデルに加えて、その他のよく用いられているモデルは、環境因子は糖尿病の病因に重要であるため、環境因子、例えば食事の種類を含むものである。 
【００６１】
一例はC57BL/6 マウスであり、これは高脂肪食にさらされた結果、インスリン抵抗性だけでなく穏やかな高血糖も示す(Surwit et al.、37: 1163-1167、1988; Luo et al.、Metabolism 47: 663-668、1998)。
【００６２】
実験に用いたB6. V-Lep ob/ob、C57BL/KsJ db/dbおよびC57BL/6マウスをはJackson Lab. (via  Charles River)から得た。
【００６３】
以前の実験から得られたST1326-メトホルミン組み合わせに用いたST1326用量は、db/dbマウスにおける血清グルコースの降下において用量100 mg/kg/日は有効であり、用量40 mg/kg/日は無効であるというものであった(表1)。
【００６４】
使用すべきメトホルミン用量は文献(Meglasson et al.、J. Pharmacol. Exp. Ther. 266: 1454-1462、1993)に記載されており、用量900 mg/kg/日はKKAy マウスにおける高血糖を50%低下させるのに有効であるとされている。KKAy マウスは、 db/dbおよびob/ob マウスモデルと類似の肥満の高インスリン血性および高血糖性糖尿病の遺伝的モデルである。一方、200 mg/kg/日の用量は無効であった。本発明者らの以前の実験は600 mg/kg/日の用量(表2)はインスリン抑制試験 (IST)においてob/ob マウスにおいて22%高血糖を低下させるのに有効であり、200 mg/kg/日の用量は無効であることを示したのと同様である。
【００６５】
血液サンプルを標準環境条件で通常食 (4 RF21、Mucedola)のob/obおよびdb/dbマウスから、そして、高脂肪食 (D-12331、Research Diets)のC57BL/6Jマウスから3ヶ月間吸収後条件(絶食午前8.30〜午後4.30)で尾側静脈からJelco 22G カテーテル (Johnson and Johnson)を用いて採取した。
【００６６】
血液をグルコースレベル試験に供し、処置群のマウスの分布をよく一致させた。
【００６７】
処置の開始時にマウスの体重を測定し、水と飼料の消費のモニタリングを計画した。
【００６８】
マウスを経口で一日二回(午前8.30および午後6.30) 30 mg/kg用量のST1326 と200 mg/kg用量のメトホルミンで単独でまたは組み合わせて処置した。
【００６９】
血液サンプルを、化合物の投与後様々な日数で、血清グルコース測定、OGTT (Oral Glucose Tolerance Test)およびIST (Insulin Suppression Test: Fujita et al.、Diabetes 32: 804-810、1983; Meglasson et al.、J. Pharm. Exp. Therap. 266: 1454-1462、1993; Luo et al.、J. Pharm. Exp. Therap. 288: 529-534、1999)について異なる栄養条件で採取した。
【００７０】
OGTTにおいて、血液サンプルはグルコース負荷 (3 g/kg)後、0、30、60および120分後に採取した。
【００７１】
得られた結果により、実験に用いた用量では単一の成分のみでは有意な血清-グルコース-降下活性を発揮しないが、組み合わせて使用すると相乗作用により高血糖を有意に低下させることが出来ることが判明した(表3-8)。
【００７２】
ISTにおいては、血液サンプルをグルコース (3 g/kg)、インスリン (Humulin R.、Lilly 2 U/kg)およびソマトスタチン (0.5 mg/kg)の皮下負荷の60分後に採取した。
【００７３】
表 1
DB/DB マウス
吸収後条件(絶食午前8.00〜午後5.30)および最後の処置の8時間後における、ST1326または媒体 (脱イオンH2O)で、経口用量20および50 mg/kg、１日２回(午前8.30 および午後 5.30)、45 日間処置した後の雄性 db/db マウスの血清グルコースレベル(mg/dl)(平均値 ± s.e.)。
【表１】
2006517223.tif 000002
【００７４】
群あたり例数: 8
スチューデントt検定: △はコントロール群に対してP < 0.01を示す。
【００７５】
表2
OB/OB マウス
ISTにおいて吸収後条件(絶食午前8.00〜午後4.30)および最後の処置の8時間後における、メトホルミン 300 mg/kgまたは 媒体(脱イオンH2O)で、経口で、１日２回(午前8.30 および午後6.30)、8日間処置した、雄性 ob/ob マウスの血液グルコースレベル(mg/dl)(平均値 ± s.e.)。
【表２】
2006517223.tif 000003
【００７６】
群あたり例数: 6.
スチューデントt検定: □はコントロール群に対して P < 0.05を示す。
【００７７】
表 3
OB/OB マウス
ST1326 (30 mg/kg)およびメトホルミン (200 mg/kg)を単独でまたは組み合わせて１日２回11日間、給餌条件で処置した、最後の処置の15時間後の雄性 ob/ob マウスの血液グルコースレベル (mg/dl) (平均値 ± s.e.)。
【表３】
2006517223.tif 000004
【００７８】
群あたり例数:6
スチューデントt検定: □はコントロール 群に対してP < 0.02 を示す。
【００７９】
表 4
ISTにおけるST1326 (30 mg/kg)およびメトホルミン (200 mg/kg)で単独または組み合わせて１日２回18日間処置した吸収後条件(絶食午前8.30〜午後4.30)および最後の処置の8時間後の雄性 ob/ob マウスの血液グルコースレベル (mg/dl)(平均値 ± s.e.)。
【表４】
2006517223.tif 000005
【００８０】
群あたり例数: 6
スチューデントt検定: □はコントロール群に対して P < 0.05を示す。
【００８１】
表 5
DB/DB マウス
ST1326 (30 mg/kg)およびメトホルミン (200 mg/kg)で単独または組み合わせて、１日２回16日間処置した、吸収後条件(絶食午前9.00〜午後3.00) および最後の処置の6時間後における雄性 db/db マウスの血液グルコースレベル(mg/dl)(平均値 ± s.e.)。
【表５】
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【００８２】
群あたり例数: 6
スチューデントt検定: □はコントロール 群に対してP < 0.02を示す。
【００８３】
表 6
ST1326 (30 mg/kg)およびメトホルミン (200 mg/kg)で単独でまたは組み合わせて１日２回37日間処置したOGTTにおける絶食条件(一晩)および最後の処置の15時間後の雄性 db/dbの血液グルコースレベル(mg/dl) (平均値 ± s.e.)。
【表６】
2006517223.tif 000007
【００８４】
群あたり例数:6
スチューデントt検定: □、△および▽はコントロール 群に対してそれぞれP < 0.02、P < 0.01およびP < 0.001を示す。
【００８５】
表 7
高脂肪食のC57BL/6J マウス
ST1326 (30 mg/kg)およびメトホルミン (200 mg/kg)で単独でまたは組み合わせて１日２回15日間処置した、吸収後条件(絶食午前9.00〜午後3.00)および最後の処置後6時間の高脂肪食の雄性 C57BL/6J マウスの血液グルコースレベル(mg/dl)(平均値 ± s.e.)
【表７】
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【００８６】
群あたり例数: 6
スチューデントt検定: □および△はそれぞれ高脂肪食のコントロール群に対して P < 0.05およびP < 0.01を示す。
【００８７】
表 8
ST1326 (30 mg/kg)およびメトホルミン (200 mg/kg)で単独または組み合わせて１日２回35日間処置した高脂肪食の雄性 C57BL/6 マウスのOGTTにおける吸収後条件(絶食午前9.00〜午後3.00) および最後の処置後6時間での血液グルコースレベル (mg/dl)(平均値 ± s.e.)。
【表８】
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【００８８】
群あたり例数: 6
スチューデントt検定: △および▽はそれぞれ高脂肪食コントロール 群に対してP < 0.01およびP < 0.001を示す。
【国際調査報告】
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