(57)【要約】投与後に患者に、ペプチド又はペプチドアナログのような活性成分を長時間放出するのに適した埋込可能な又は注射可能な薬学的組成物を製造する方法において、（ａ）活性成分と乳酸・グリコール酸共重合体の混合物を湿式造粒し；（ｂ）このようにして形成された顆粒を乾燥させ；（ｃ）乾燥した顆粒を粉砕し；（ｄ）工程（ｃ）の粉砕産物を押出すことを含む方法が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
投与後に患者に活性成分を長時間放出するのに適した埋込可能な又は注射可能な薬学的組成物を製造する方法において、
（ａ）活性成分と乳酸・グリコール酸共重合体の混合物を湿式造粒し；
（ｂ）このようにして形成された顆粒を乾燥させ；
（ｃ）乾燥した顆粒を粉砕し；
（ｄ）工程（ｃ）の粉砕産物を押出す
ことを含む方法。
【請求項２】
活性成分がペプチド又はペプチドアナログである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
次に押出産物を所定長さに切断して筋肉内又は皮下投与用の植込剤を形成する、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
植込剤の長さが１０〜６０ｍｍの範囲にある、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
範囲が２０〜４０ｍｍである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
押出産物が包装の前及び／又は後に滅菌される、請求項１ないし５の何れか一項に記載の方法。
【請求項７】
ついで植込剤をシリンジの針の中に包装する、請求項３ないし６の何れか一項に記載の方法。
【請求項８】
押出産物が１．０〜３．０ｍｍの直径のものである、請求項１ないし７の何れか一項に記載の方法。
【請求項９】
直径が１．５〜２．０ｍｍである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
共重合体が、７０：３０から８０：２０の範囲の乳酸対グリコール酸単量体モル比を有する、請求項１ないし９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１】
共重合体が約５０μｍから約１５０μｍの範囲のサイズの粒子の形態で提供される、請求項１ないし１０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１２】
活性成分が、ＧｎＲＨ（ＬＨＲＨ）、成長ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン放出ペプチド、アンジオテンシン、ボンベシン、ブラジキニン、コレシストキニン、エンケファリン、ニューロキニン、タキキニン、又はそのレセプターのアゴニスト又はアンタゴニストである、請求項１ないし１１の何れか一項に記載の方法。
【請求項１３】
活性成分が、レニン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、メタロペプチダーゼ阻害剤、エンケファリナーゼ阻害剤、又は心房性又は脳性ナトリウム利尿因子分解酵素阻害剤である、請求項１ないし１２の何れか一項に記載の方法。
【請求項１４】
活性成分が、ブセレリン、デスロレリン、ヒストレリン、アヴォレリン、トリプトレリン、ゴセレリン、リュープロレリン、セトロレリックス、テベレリックス、ラモレリックス、アンティド、ニクチド、アザリンＢ、アザリンＣ、ガニレリックス又はヘキサレリンである、請求項１２又は１３に記載の方法。
【請求項１５】
活性成分がリュープロレリン又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
活性成分が酢酸リュープロレリンである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
重合体に対するリュープロレリンの重量比（対イオンの存在から生じる重量を除く遊離塩基の重量として計算）が約１：３ｗ／ｗ（つまり、２５％リュープロレリンｗ／ｗ）の範囲にある、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項１８】
活性成分が、湿式造粒工程の前にボールミルで前処理される、請求項１ないし１７の何れか一項に記載の方法。
【請求項１９】
湿式造粒工程で水を用いる、請求項１ないし１８の何れか一項に記載の方法。
【請求項２０】
用いられる水の体積が、活性成分／重合体混合物の全重量の２２％又はその近辺である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
乾燥工程が減圧下室温以上でなされる、請求項１ないし２０の何れか一項に記載の方法。
【請求項２２】
乾燥された顆粒が０％ｗ／ｗを越えるが２％ｗ／ｗ未満の水を含む、請求項１ないし２１の何れか一項に記載の方法。
【請求項２３】
粉砕工程が、乾燥された顆粒をボールミルで粉砕することを含む、請求項１ないし２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２４】
押出工程がスクリュープレスを使用して実施される、請求項１ないし２３の何れか一項に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１ないし２４の何れか一項に記載の方法によって得ることが可能な生成物。
【請求項２６】
少なくとも３から６ヶ月の期間にわたる活性成分の長期放出に適した請求項２５に記載の生成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の開示】
【０００１】
本発明は、とりわけ皮下植込剤（インプラント）としての使用又はその製造に適した薬学的組成物の製造のための新規方法に関する。  
【０００２】
薬学的に活性な化合物、特に生物活性ペプチド及びペプチドアナログを長期の期間にわたって放出することが望ましいことがよくある。
薬学的に活性な化合物の改変された放出をもたらす組成物は当該分野でよく知られている。確かに、最近の約三十年にわたって、改変された放出投薬形態は、次第に、患者に対するある種の薬剤の好ましい送達方法となった。
【０００３】
ペプチドの場合、マイクロ粒子（例えばミクロスフィア、マイクロカプセル及び微粒剤）に基づく長期放出薬剤送達系及び筋肉内又は皮下注射のための埋込形態がよく文献に記載されている。
生体内分解性重合体の円柱体に分散したペプチド／ペプチドアナログの形態の徐放埋込系がそのような活性物質の長期放出をもたらすことが知られている。特に、活性成分が乳酸及び／又はグリコール酸単位を含む重合体マトリックスに分散した植込剤が特に米国特許第５３６６７３４号に記載されている。しかしながら、米国特許第５３６６７３４号に記載された方法に従って調製された植込剤からの活性成分の放出に対して観察された最大時間は三ヶ月程度である。
【０００４】
米国特許第５４５６９１７号は、乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ）を粉砕し、予め定まったサイズの粒子を選択し、ＰＬＧＡが可溶性ではない溶媒にその医薬を溶解させ、その溶液にＰＬＧＡ粒子を添加し、ＰＬＧＡ粒子の孔にその溶液を充填するために真空をかけて放出し、充填された重合体粒子を濾過又はデカントによって分離した後、凍結乾燥又は真空乾燥させて孔内から残留した溶媒を除去する工程を含む医薬の徐放のための埋込可能な生体内分解性組成物を形成する方法を開示している。混合された混合物はついで押出装置に配されて植込剤が形成される。
【０００５】
英国特許出願第２２３４１６９号はＰＬＧＡ共重合体と天然又は合成の水不溶性ペプチドの塩を含有する徐放性薬学的ペプチド組成物を調製する方法を開示している。
国際特許出願ＷＯ９７／４１８３６は、タンパク質、ポリペプチド又はホルモンの不溶性塩と組み合わせて乳酸の単独重合体を含有せしめる、一ヶ月を越える期間にわたる活性剤の徐放用の埋込可能な薬学的組成物を開示している。
【０００６】
国際特許出願ＷＯ９８／０９６１３は、生物活性ペプチド及びＰＬＧＡを含有する皮下植込剤の調製方法を記載しており、該方法は、ＰＬＧＡ共重合体を粉砕し、ペプチドの水性スラリーを用いて共重合体を湿潤させ、この共重合体とスラリーを混合して、均質な混合物を得て、混合物を乾燥させ、ついで皮下使用のための植込剤を得るために押出すことを含む。
最後に、国際特許出願ＷＯ００／３３８０９は、ＰＬＧＡマトリックスに不均一に分散したペプチド粒子を含有する長期放出植込剤を得る方法を開示する。この方法は、ＰＬＧＡと共に乾燥したとき１〜６０μｍの直径を持つ粒子の形態のペプチドを均一に混合し、得られた混合物を湿式造粒し、０．５〜２．０重量％の残留液量になるまで顆粒を乾燥させた後、乾燥した顆粒を押出して植込剤を製造する必須の工程を含む。
【０００７】
しかしながら、例えば三ヶ月から六ヶ月（あるいはある場合には更に長期）の期間にわたってのペプチド及びペプチドアナログのような薬剤の長期の放出を維持することができる薬学的植込剤、及びそれを製造するための改良された方法に対する一般的な必要性がある。
ＷＯ００／３３８０９のどこにも、またこれまでに記載した他の先行技術文献の何れにも、円柱状植込剤に切断することができる形態に粉砕した材料の押出前に活性成分とＰＬＧＡの混合物を含有する予め形成された顆粒を粉砕する必須の工程を含む皮下植込剤の製造方法は記載されていない。
【０００８】
本発明によれば、投与後に患者にペプチド又はペプチドアナログのような活性成分を長時間放出するのに適した埋込可能（植込可能）な又は注射可能な薬学的組成物を製造する方法において、
（ａ）活性成分とＰＬＧＡの混合物を湿式造粒し；
（ｂ）このようにして形成された顆粒を乾燥させ；
（ｃ）乾燥した顆粒を粉砕し；
（ｄ）工程（ｃ）の粉砕産物を押出す
ことを含む方法が提供され、この方法を以下に「本発明の方法」と呼ぶ。
「ペプチドアナログ（ペプチド類似体）」という用語は生物学的に活性なペプチドと同じ又は類似の生物学的機能又は活性を有する任意の構造的に類似の化合物を含むと当業者によって理解される。
本発明の方法の押出産物は、必要に応じて、適切な長さに切断して筋肉内又は好ましくは皮下投与用の植込剤を形成してもよい。そのような投与に適した植込剤の適切な長さは１０〜６０ｍｍの範囲、例えば１２〜５５ｍｍ、例えば１５〜５０ｍｍ、好ましくは１８〜４５ｍｍ、より好ましくは２０〜４０ｍｍである。用いられる活性成分及び植込剤の直径に応じて、好適な植込剤長さは２４〜３８ｍｍの範囲、例えば約２６．６ｍｍ、約３３ｍｍ、約３５ｍｍ又は約３７ｍｍである。
【０００９】
本発明の方法の押出産物は標準的な技術と装置を使用してまた滅菌することができる。滅菌は押出産物及び／又はそれから得られた植込剤の包装の前又は後にで実施することができる。適した包装材料にはアルミニウム袋が含まれる。本発明の方法によって調製される植込剤はまたシリンジの針の中に提供することができ、そこから植込剤を患者に皮下的に送達することが意図される。そのようにして用いることができる適切なシリンジには欧州特許第ＥＰ７４９３３６号又は米国特許第５８１０７６９号に記載されたものが含まれる。シリンジと植込剤（その両方を予め滅菌することができる）を既知の方法を使用して互いに組み合わせることができ、（アルミニウム袋のような）標準的な包装材料に包装し、その後、適切ならば、標準的な技術／装置を使用して滅菌される。
【００１０】
本発明の方法は、実質的に円柱状で、１．０〜３．０ｍｍ、例えば１．２〜２．５ｍｍ、好ましくは１．４〜２．２ｍｍ、より好ましくは１．５〜２．０ｍｍ（例えば約１．６ｍｍ、約１．８ｍｍ又は約２．０ｍｍ）の直径である組成物を提供するために使用することができる。この点、植込剤の場合、用いられる活性成分及び投与が意図される用量に応じて、好適な植込剤寸法は約１．６ｍｍの直径と、約３３ｍｍ又は約３５ｍｍの何れかの長さ、約１．８ｍｍの直径と約３７ｍｍの長さ、及び約２．０ｍｍの直径と約２６．６ｍｍの長さを含みうる。上述の好適な寸法は概略であり、上に特定した数値から±２０％、例えば±１０％、例えば±５％だけ変動する長さ／直径の植込剤が「約」という用語の使用によって包含されることが意図されるものと理解される。いずれにせよ、とりわけ用いられる原材料と投与が意図される活性物質の用量に依存する適した植込剤寸法は当業者によって常套的に決定することができる。
【００１１】
本発明の方法に使用される好適なＰＬＧＡ共重合体は、４０：６０から９５：５、好ましくは６０：４０から９０：１０、より好ましくは７０：３０から８０：２０の範囲、例えば約７５：２５の乳酸対グリコール酸単量体モル比を有しうる。好適な分子量（例えば限外濾過、光散乱、固有粘度測定、又は好ましくはゲル透過クロマトグラフィーによって測定する例えば数平均、ｚ平均又は重量平均分子量）は５００００〜１５００００、好ましくは７５０００〜１５００００の範囲にある。
【００１２】
約３０μｍから約２００μｍ、例えば約４０μｍから約１７５μｍの範囲、特に約５０μｍから約１５０μｍの範囲のサイズの粒子の形態のＰＬＧＡを本発明の方法の湿式造粒工程で用いることが好ましい。この点、ＰＬＧＡは一又は複数の粉砕工程によって湿式造粒のために予め準備されうる。また、上述の好適な粒子サイズは概略であり、上に特定した数値から±２０％、例えば±１０％、例えば±５％だけ変動するサイズが「約」という用語の使用によって包含されることが意図されるものと理解される。粉砕工程は、例えば以下に記載するような標準的な粉砕装置を使用して低温貯蔵条件下（例えば１０〜１５℃、例えば約１２℃）で実施することができる。適切な潤滑剤、例えばエタノールをそのような重合体粉砕に用いることができる。予め粉砕された重合体の適切な画分を、例えば以下に記載するように、篩いのような標準的な方法を使用して収集することができる。ＰＬＧＡはまた湿式造粒の前に乾燥させることもできる。
【００１３】
本発明の方法に使用することができる活性成分には、ＧｎＲＨ（ＬＨＲＨ）、成長ホルモン放出ホルモン、成長ホルモン放出ペプチド、アンジオテンシン、ボンベシン、ブラジキニン、コレシストキニン、エンケファリン、ニューロキニン、タキキニン、又はこれらの任意のもののレセプターのアゴニスト又はアンタゴニストが含まれる。使用することができる活性成分には、また、レニン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、メタロペプチダーゼ阻害剤、エンケファリナーゼ阻害剤、又は心房性又は脳性ナトリウム利尿因子分解酵素阻害剤が含まれる。用いることができる更に特定の活性成分には、ブセレリン、デスロレリン、ヒストレリン、アヴォレリン、トリプトレリン、ゴセレリン、リュープロレリン、セトロレリックス、テベレリックス、ラモレリックス、アンティド、ニクチド、アザリンＢ、アザリンＣ、ガニレリックス又はヘキサレリンが含まれる。より好適な活性成分には、ヘキサレリン、アヴォレリン、トリプトレリン、ゴセレリン、特にリュープロレリン及びその薬学的に許容可能な塩が含まれる。
リュープロレリンの好適な薬学的に許容可能な塩には、パモン酸塩、グルコン酸塩、乳酸塩、好ましくは酢酸塩が含まれる。
【００１４】
用いられる活性成分がリュープロレリン、特に酢酸リュープロレリンである場合、本発明の方法の湿式造粒工程に使用される重合体に対するリュープロレリンの重量比（対イオンの存在から生じる重量を除く遊離塩基の重量として計算）が約１：１０から約１：２ｗ／ｗ、好ましくは１：５から約１：２．５、例えば約１：４から約１：２．７５、特に約１：３．５から約１：２．８５、例えば約１：３ｗ／ｗ（つまり、２５％リュープロレリンｗ／ｗ）の範囲にある。再び、上述の好適な重量比は概略であり、上に特定した数値から±２０％、例えば±１０％、例えば±５％だけ変動する比が「約」という用語の使用によって包含されることが意図されるものと理解される。いずれにせよ、原材料の好適な重量比はとりわけ患者への送達が意図される活性成分の用量、並びに製造が意図される植込剤の寸法に依存する。しかし、これらは当業者が常套的に決定することができる。
【００１５】
活性成分は、湿式造粒工程の前に粉砕又は緻密化によって前処理することができる。これは適当な装置、例えばボールミル及び／又は他の標準的な微粉化装置、例えば以下に記載のようなもので行うことができる。
いずれにせよ、重合体と活性成分は、例えば以下に記載されるように、好ましくは標準的な条件下で標準的な混合装置で湿式造粒前に乾式混合（つまり液体溶媒が実質的にない状態で）される。液体溶媒が「実質的にない」には、２％（ｗ／ｗ）以下の液体溶媒（有機又は水性）が湿式造粒の前に実施されうる任意の乾式混合工程において存在することが含まれる。乾式混合は、例えば以下に記載されるように、好ましくはボールミル及び／又は標準的なミキサーで、例えばタービュラ(Turbula)ミキサー等において実施される。
【００１６】
湿式造粒は、例えばエタノール又は好ましくは水のような適切な液体を使用して、当業者によく知られた標準的な条件下で標準的な装置を用いてなされうる。水が用いられる場合、それは、活性／重合体混合物の全重量の２０％〜２５％、例えば２２％又はその付近の体積になるまで加えられる。例えば、１００ｇの混合物が用いられる場合、２２ｍＬの水が造粒前に加えられる。水は、活性／重合体混合物との均一な混合を確実にするために造粒前に少しずつ加えることができる。例えば以下に記載するように、標準的な混合装置を用いて均一混合をなすことができる。その後、以下に記載されるような標準的な造粒装置を使用して湿式造粒を実施することができる。
【００１７】
ついで、湿った顆粒は、例えば乾燥空気流下、又は好ましくは減圧下で高い温度にて（例えば３０℃以上）標準的な方法を使用して乾燥させることができる。乾燥は、得られる顆粒中の水分量が０％ｗ／ｗを越えるが２％ｗ／ｗ未満となる程度までなされなければならない。ついで、乾燥顆粒は、好ましくは、次の処理工程の前と間に水の有意な進入がないように取り扱われる。
乾燥された顆粒はついで押出前に粉砕される。この別個の粉砕工程は好ましくはボールミル中で乾燥顆粒を粉砕することにより実施されるが、小さいサイズの粒子に顆粒が破砕される任意の装置を使用することができる。
【００１８】
粉砕された得た剤の押出は、以下に記載されるように、標準的な押出装置、例えば高圧ラム押出機又は好ましくはスクリュープレスを使用して実施されうる。用いられる押出機がスクリュー押出機である場合、押出機中での暴露時間は１〜１０分、好ましくは４〜６分である。温度特性は好ましくは押出機に入る際の室温から６０℃（例えば５０℃）から押出機出口の１２０℃以下（例えば１１０℃）までの範囲である。適切なスクリュー速度は８〜１２ｒｐｍの範囲、例えば１０ｒｐｍである。
【００１９】
本発明の方法によって製造される組成物、特に植込剤は、用いられる治療剤に応じて哺乳動物の患者の疾患／症状を治療／予防するために使用することができる。上述の薬剤に対して、挙げることができる疾患／症状には、当該治療剤が効果があることが知られているものが含まれ、Martindale, "The Extra Pharmacopoeia", 31st Edition, Royal Pharmaceutical Society (1996)に特に列挙されているものが含まれる。特に、組成物がリュープロレリンを含む場合、本発明の方法によって製造される植込剤は避妊に、また子宮内膜症、子宮筋腫、良性前立腺肥大症、性的早熟及び／又は癌、例えば乳癌、また特に前立腺癌の治療に使用することができる。我々は、驚いたことに、リュープロレリンを含む本発明の方法によって製造される植込剤がヒトの患者において予期せぬ遅延した去勢をもたらすことを見出した。よって、本発明の方法により得ることが可能な植込剤は、活性成分としてリュープロレリンを用いた場合、低用量のリュープロレリンで長期の去勢を可能にしうる。
本発明の方法によって製造される植込剤は、標準的な方法を用いて例えば皮下注射によって、又は好ましくは欧州特許第７４９３３６号又は米国特許第５８１０７６９号に記載されたようなシリンジを使用して、患者に投与することができる。植込剤の特性及び治療が意図されている症状の性質に応じて、任意の時間に一を越える植込剤を患者に投与する（又は存在させる）ことができる。
【００２０】
よって、本発明の方法は、哺乳動物の患者に対する活性成分、例えばペプチドの長期にわたる放出（つまり、少なくとも３から６ヶ月の期間にわたって連続する）をもたらしうるとりわけ皮下植込剤の生産に有用である。本発明の方法はまた樹立された製薬加工方法を利用することができ、食品又は医薬又は類似の規制状態において使用することが承認されている材料を使用することができるという利点を有しうる。
本発明の方法はまた製造された植込剤が先行技術に記載されている方法によって調製された植込剤よりも薬学的により有益な放出特性（例えば、より長期の、より制御された、及び／又はより一定の特性）をもたらしうるという驚くべき利点を有している。本発明の方法はまた皮下植込剤の調製のために先行技術で記載された方法よりも、様々な活性成分を用いて植込剤を調製するために使用でき、より標準的な手順を用いることができ、及び／又は当業者がより簡便に実施することができる等の利点を提供しうる。
【実施例】
【００２１】
本発明を次の実施例によって非限定的な形で例証する。
実施例１
酢酸リュープロレリンを含有する植込剤の調製
装置の準備
関連製造装置を洗浄し殺菌した。アイソレーター、製造方法のためにアイソレーター内で用いられることになる装置、及び原材料を、標準的な方法（例えば無水エタノール、イソプロピルアルコール又はSoproper(登録商標)（水性過酢酸；３．５％ｗ／ｗ）に浸したクロス）に従って、及び／又は、耐熱性がある装置の場合にはヒートシールプラスチック袋に入れて１５０℃に２時間加熱することで、殺菌した。
【００２２】
ＰＬＧＡの調製
ＩＫＡ２０製粉機の低温保持装置の温度を１２℃に調節して安定させた。１００ｍＬビーカーにラベルを付け、風袋重量を計った。３０ｇの粗ＰＬＧＡ（Purac(オランダ)；粒子サイズ＞１５０μｍ；７５：２５ラクチド(lactide)対グリコリド(glycolide)単位比）をビーカーに入れて計量し、粉末を製粉機に注いだ。３ｘ１ｍＬのエタノールをピペットでＰＬＧＡに対して均一に分散させた。製粉機ボウルを小さなカバーで覆い、３０秒間粉砕を始め、１分休止させた後、開けて分散した粉末を掻き集めた。更に粉砕をもう１分間実施して次の手順を繰り返した。この後に６分間粉砕し、次の手順を繰り返した。
ついで、粉砕したＰＬＧＡを、標準的な篩い機のベース、５０μｍの篩い及び１５０μｍの篩いを組み立て、１５０μｍの篩いに粉砕ＰＬＧＡを配し、カバーを取付けて全体を固定し、篩い機のパラメータを調節して１０秒の間隔、３の篩い時間及び２の強さにすることにより、篩いにかけた。ついで、５０から１５０μｍの画分を、風袋重量を計ったフラスコに収集し、＜５０μｍの画分と＞１５０μｍの画分を二つの他のフラスコに集めた。
【００２３】
（収集した＞１５０μｍの画分は次の条件下で二度目の再粉砕を行ってもよい：＞１５０μｍの画分３０ｇを計量してビーカーに入れ、製粉機中に粉末を注ぎ、１．５ｍＬのエタノールをピペットで取り、ＰＬＧＡに対して均一にそれを分散させ、製粉機ボウルを大きなカバーで覆い、３分間粉砕し、１分間待ってから開けて分散した粉末を掻き集めた。ついで、再粉砕した粉末を前述したようにして篩いにかけ、必要に応じて再び再粉砕してもよい。）
５０〜１５０μｍの画分を、−７００ｍｍＨｇの真空下で２４時間、３０℃のオーブンで加熱することにより乾燥させた（移送ボックスを用いて、アイソレーターと真空オーブンの間でＰＬＧＡを移送した）。ついで、乾燥したＰＬＧＡをアイソレーターのフラスコ中に配した。（残留エタノールを調べるために分析検査を実施した。）
【００２４】
ペプチドの調製
Pulverisetteモノプラネタリ製粉機（Laval Labs Inc.）を使用して酢酸リュープロレリン（Bachem(スイス)；１５ｇ）を高密度化した。３０ｍｍ直径の３個のボールを５００ｍＬジャーに配した。ついで、ジャーにペプチドを注意深く注いだ。シールとカバーをジャーに取り付け、ジャーをそのスタンド上に置いた。Pulverisetteのカウンターウェイトを４．６ｋｇに調節した。回転速度を３分の粉砕時間で１５０ｒｐｍに設定した。
【００２５】
混合
ついで、カバーをジャーから取り除き、予め調製したＰＬＧＡをジャーの中のペプチドに、ＰＬＧＡに対するリュープロレリン（遊離塩基として計算）が１：３の混合物を生じる量（ｗ／ｗ；つまり２５％リュープロレリンｗ／ｗ）で加えた。シールとカバーをジャーに取り付け、ジャーをそのスタンド上に置いた。Pulverisetteのカウンターウェイトを４．６ｋｇに調節した。回転速度を１５０ｒｐｍに設定して２分間粉砕した後、１分の休止と１分の逆粉砕を行い、その後その手順をもう一回繰り返した。
褐色ガラスフラスコにラベルを付け風袋重量を計量した。高密度化混合物をフラスコに移し、混合物の量をチェックした。ついで、そのフラスコを移送チャンバーを介してアイソレーターから取り除いた。
ついで、混合物を含むフラスコをTurbulaTMミキサー（WAB）に取り付けた。Turbula速度を４５ｒｐｍに調節し１５分間操作した。ついで、湿式造粒前の外部殺菌のためにフラスコを移送チャンバーに戻した。
【００２６】
混合物の湿式造粒
Ｋツールをケンウッドミキサーに装備した。前工程の乾燥混合物を注意深くミキサーボウル中に注いだ。造粒されるロイプロリド／ＰＬＧＡ混合物の量に比例する全量の水を（混合物の２２％体積：重量）、最初に水の体積の２／３を混合物に加え、ミキサーを位置１に調節し、１分間混合し、ミキサーとツールの底のものを掻き集めた後、残りの１／３の水を混合物に添加し、更に２分間混合し、ミキサーとツールの底のものを掻き集めることによって、添加した。
アルミフォイルのシートでカバーをした移送ボックスからのトレーをErweke造粒機に配した。造粒機速度を６０に調節した。ミキサーボウルの内容物を造粒機の１．６ｍｍスクリーン上に配し、造粒を開始した。造粒した粉末をトレーに集めた。
【００２７】
顆粒の乾燥
顆粒を含むトレーを移送ボックスに戻し、ついでそれを閉じてアイソレーターの移送チャンバーを経てアイソレーターから取り除いた。移送ボックスを、３０℃の温度に前もって加熱した溶媒オーブン内に配した。−７００ｍｍＨｇの真空をかけた。およそ１２時間の間、乾燥を進めた。
ついで、移送ボックスを、外部での滅菌のために移送チャンバーに戻した。
【００２８】
乾燥顆粒の粉砕
直径３０ｍｍを有する３個のボールをPulverisette粉砕ミルの５００ｍＬのジャーに配した。ついで、乾燥顆粒を注意深くジャー内に注いだ。ジャーにシールとカバーを取り付け、ジャーをそのスタンド上に配した。Pulverisette上のカウンターウェイトを４．６ｋｇに調節した。回転速度を３分の粉砕時間で１５０ｒｐｍに設定した。
褐色のガラスフラスコにラベルを付け、風袋重量を計った。粉砕混合物をフラスコに収集し、それを計量し、混合物の塊を認めた。
乾燥した粉砕混合物の試料について水分含量（Karl Fischer）、粒子サイズ、密度、均一性及びリュープロレリン含量を分析した。
【００２９】
次の処理
粉砕された結果物をScamiaスクリュー押出機を使用して薄い円柱形に押し出した。押出スクリュー数は１９０で、スクリュー速度は１０ｒｐｍでダイス数は４であった。押出機における加熱温度は次の通りであった：水浴５０℃；領域１−７０℃；領域２−９０℃；領域３−１１０℃。
押出体を１．５ｍ程度ごとに切断した。押出体の直径は、直径が次の仕様に一致する断面を選択するためにZumbaschレーザを使用して測定した：
直径１．６ｍｍ±５％の植込剤に対して、最小直径１．５２ｍｍ、最大直径１．６８ｍｍ。直径１．８ｍｍ±５％の植込剤に対して、最小直径１．７１ｍｍ、最大直径１．８９ｍｍ。
【００３０】
密度、含量の均一性、リュープロレリン含量及び押出体の分子量を標準的な方法を使用して決定した。分析結果に基づいて、（押出体を切断しなければならない）植込剤の長さを次の式を用いて計算した：
用量  ｘ  １００      
Ｌ＝  −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−            
３．１４ｘｒ２ｘＴｍｘｄｍｘ０．９８５
ここで、
ｒは植込剤の半径であり、
Ｔｍは平均含量（ペプチド遊離塩基のコア充填パーセント）であり、
ｄｍは平均密度である。
【００３１】
よって、２２．５ｍｇのリュープロレリン（遊離塩基として）を含有する植込剤を、１．６ｍｍの概略直径の押出体からおよそ３５ｍｍの長さに切り出した。各植込剤はおよそ９０ｍｇの重さで、２３．６〜２６．２ｍｇの酢酸リュープロレリンを含んでいた。同様にして、３０ｍｇのリュープロレリン（遊離塩基として）を含有する植込剤を、１．８ｍｍの概略直径の押出体からおよそ３７ｍｍの長さに切り出した。各植込剤はおよそ１２０ｍｇの重さで、３１．４〜３５ｍｇの酢酸リュープロレリンを含んでいた。
【００３２】
前に記載したようにしてシリンジの針の中に充填し、乾燥剤袋の存在下でアルミニウム袋に包装した。ついで、アルミニウム袋を熱融着させ照射殺菌した。
次の寸法で上述の方法で同様にして他の植込剤を調製した：２２．５ｍｇのリュープロレリン（遊離塩基として）を含有する１．６ｍｍの概略直径と約３３ｍｍの長さの植込剤；２７．５ｍｇのリュープロレリンを（遊離塩基として）含有する２．０ｍｍの概略直径と約２６．６ｍｍの長さの植込剤。
【国際調査報告】
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