(57)【要約】本発明は、特発性肺線維症（IPF）の治療方法；IPFを有する個体の生存時間を増す方法、及びIPFを有する個体の死亡の危険性を減らす方法を提供する。本方法は、一般的に、治療上有効量のIFN-γをIPFを有する個体に投与することを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
正常な予測値の少なくとも約55%である強制肺活量（FVC）を有する個体に有効量のIFN-γを投与することを含む、個体における特発性肺線維症（IPF）の治療方法。
【請求項２】
コルチコステロイドを前記個体に投与することをさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項３】
前記個体の生存率がIFN-γ投与なしで期待される生存率を少なくとも約10%上回る、請求項1記載の方法。
【請求項４】
前記個体の生存率がIFN-γ投与なしで期待される生存率を少なくとも約15%上回る、請求項1記載の方法。
【請求項５】
前記個体の死亡の危険性がIFN-γ投与なしで期待される死亡の危険性より少なくとも2倍小さい、請求項1記載の方法。
【請求項６】
前記個体の死亡の危険性がIFN-γ投与なしで期待される死亡の危険性より少なくとも4倍小さい、請求項1記載の方法。
【請求項７】
IFN-γを約80μg/m2〜約90μg/m2の用量で投与する、請求項1記載の方法。
【請求項８】
IFN-γを約200μgの用量で投与する、請求項1記載の方法。
【請求項９】
IFN-γを1週間に3回投与する、請求項7又は8記載の方法。
【請求項１０】
IFN-γを皮下投与により投与する、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
正常な予測値の少なくとも約55%である強制肺活量（FVC）を有する個体に有効量のIFN-γを投与することを含む、特発性肺線維症（IPF）を有する個体の生存率を高める方法。
【請求項１２】
コルチコステロイドを前記個体に投与することをさらに含む、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
前記個体の生存率がIFN-γ投与なしで期待される生存率を少なくとも約10%上回る、請求項11記載の方法。
【請求項１４】
前記個体の生存率がIFN-γ投与なしで期待される生存率を少なくとも約15%上回る、請求項11記載の方法。
【請求項１５】
IFN-γを約80μg/m2〜約90μg/m2の用量で投与する、請求項11記載の方法。
【請求項１６】
IFN-γを約200μgの用量で投与する、請求項11記載の方法。
【請求項１７】
IFN-γを1週間に3回投与する、請求項15又は16記載の方法。
【請求項１８】
IFN-γを皮下投与により投与する、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
正常な予測値の少なくとも約55%である強制肺活量（FVC）を有する個体に有効量のIFN-γを投与すること含む、個体における特発性肺線維症（IPF）を有する個体の死亡の危険性を減らす方法。
【請求項２０】
コルチコステロイドを前記個体に投与することをさらに含む、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
前記個体の死亡の危険性がIFN-γ投与なしで期待される死亡の危険性より少なくとも2倍小さい、請求項19記載の方法。
【請求項２２】
前記個体の死亡の危険性がIFN-γ投与なしで期待される死亡の危険性より少なくとも4倍小さい、請求項19記載の方法。
【請求項２３】
IFN-γを約80μg/m2〜約90μg/m2の用量で投与する、請求項19記載の方法。
【請求項２４】
IFN-γを約200μgの用量で投与する、請求項19記載の方法。
【請求項２５】
IFN-γを1週間に3回投与する、請求項23又は24記載の方法。
【請求項２６】
IFN-γを皮下投与により投与する、請求項25記載の方法。
【請求項２７】
（a）個体が正常な予測値の少なくとも約55%の強制肺活量（FVC）を有すること確認する段階；及び（b）前記個体に有効量のIFN-γを投与する段階を含む、個体における特発性肺線維症の治療方法。
【請求項２８】
前記個体の生存率がIFN-γ投与なしで期待される生存率を少なくとも約10%上回る、請求項27記載の方法。
【請求項２９】
前記個体の生存率がIFN-γ投与なしで期待される生存率を少なくとも約15%上回る、請求項27記載の方法。
【請求項３０】
前記個体の死亡の危険性がIFN-γ投与なしで期待される死亡の危険性より少なくとも約2倍小さい、請求項27記載の方法。
【請求項３１】
IFN-γを約80μg/m2〜約90μg/m2の用量で投与する請求項27記載の方法。
【請求項３２】
IFN-γを約200μgの用量で投与する、請求項27記載の方法。
【請求項３３】
IFN-γを1週間に3回投与する、請求項31又は32記載の方法。
【請求項３４】
IFN-γを皮下投与により投与する、請求項33記載の方法。
【請求項３５】
前記個体がヒトである、請求項1〜34のいずれか一項記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、特発性肺線維症を治療する治療分野に属する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
肺線維症は、類肉腫症、過敏性肺炎、膠原血管病、及び吸入曝露を含む多数の異なる症状によって起こることができる。これらの症状の診断は、通常、病歴の入念な審査、身体検査、高分解能コンピュータ断層撮影走査（HRCT）を含む胸部ラジオグラフィー、及び開胸的肺生検または経気管生検により行うことができる。しかし、有意な数の患者では、肺線維症の根本にある原因を見出すことはできない。不明な病因のこれらの症状は、特発性間質性肺炎と呼ばれている。開胸肺生検で得られた組織の組織学的検査が、これらの患者を通常型間質性肺炎（UIP）、剥離性間質性肺炎（DIP）、及び非特異性間質性肺炎（NSIP）を含むいくつかのカテゴリーに分類することを可能にする。
【０００３】
特発性間質性肺炎をこれらのカテゴリーに分ける理論は、組織学のみならず、これらの異なる実体のための治療及び予後に対する異なる応答にも基づく。DIPは喫煙に関連し、コルチコステロイドによる治療に応答する患者は70%を上回ることから予後は良好である。NSIP患者もしばしばステロイドに応答し、50%の患者が15年まで生存することから予後は良好である。対照的に、UIP組織学的パターンは、治療に対する不十分な応答及び不十分な予後に関連し、3〜5年しか生存しない。
【０００４】
特発性肺線維症（IPF）は、特発性間質性肺炎の最も一般的な形態であり、組織学上のUIPパターンにより特徴付けられる。IPFは潜伏性の発症を有するが、ひとたび症状が現れると、肺機能がひどく悪化し、診断後3〜5年内に死に至る。発症の平均年齢は60〜65歳であり、男性は女性の約2倍罹患する。有病率評価は、100,000あたり13.2〜20.2である。年間の罹患率は、1年あたり100,000の新たな症例につき7.4〜10.7であると見積もられる。
【０００５】
公開されている証拠は、IPF患者の20%未満しかステロイドに応答しないことを示唆する。ステロイドによる治療がうまくいなかった患者では、アザチオプリン又はシクロホスファミドなどの細胞障害性薬物をステロイド治療に加えることもある。しかし、非常に多くの研究が、これらの薬物には利益がほとんどないか全くないことを示している。現在では、IPF治療用に承認されている薬物はない。
【０００６】
当技術分野では、IPFの治療方法に対する要求がある。本発明は、この要求に対処する。
【０００７】
文献
国際公開公報第01/34180号; Ziesche et al. (1999) N.Engl. J. Med. 341: 1264-1269; du Bois (1999) N. Engl. J. Med. 341: 1302-1304; 米国特許第.6,294,350号；欧州特許第795,332号; King (2000) N. Engl. J Med. 342: 974-975; Ziesche and Block (2000) Wien. Klin Wochenschr. 112:785-790 ; Stern et al.(2001) Chest 120: 213-219; Gay et al. (1998) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 157: 1063-1072; Dayton et al. (1993) Chest 103: 69-73。
【発明の開示】
【０００８】
発明の概要
本発明は、特発性肺線維症（IPF）の治療方法；IPFを有する個体の生存時間を増す方法；及びIPFを有する個体の死亡の危険性を減らす方法を提供する。本方法は、一般的に、IPFを有する個体に治療上有効量のIFN-γを投与することを含む。
【０００９】
定義
本明細書で用いられる通り、「治療」、「治療すること」などの用語は、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることをいう。効果は、完全又は部分的に疾患又はその症状を予防するという点では予防的であることもできるし、疾患及び／又は疾患に帰因する有害な副作用に対する部分的又は完全な治癒という点では治療的であることもできる。本明細書に用いられる「治療」は、哺乳動物、特にヒトにおける疾患の治療を包含し、（a）生存時間を増すこと；（b）疾患による死亡の危険性を減らすこと；（c）罹患するおそれがあるが、まだ罹患しているとは診断されていない被検体で疾患が起こるのを予防すること；（d）疾患を阻害すること、すなわち、その発達を止めること（例えば、疾患の進行の速度を低下すること）；及び（e）疾患を軽減すること、すなわち、疾患の後退を引き起こすことを含む。
【００１０】
本発明をさらに記載する前に、本発明は記載された特定の態様に限定されず、そのようなものとして当然に変型してもよいと理解すべきである。また、本発明の範囲は特許請求の範囲のみによって限定されるので、本明細書に用いられる専門用語は、特定の態様を記載する目的のみに沿ったものであり、かつ、限定的であることを意図しないことを理解すべきである。
【００１１】
値の範囲が与えられている場合、その範囲の上限及び下限の間の介在する各値（文脈が明らかに別に指摘していない限り、下限の単位の10分の1まで）、及び他に言及した任意の値又はその言及した範囲中に介在する値は、本発明内に包含されると理解する。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、より小さい範囲内に独立して含まれてもよく、本発明内にも包含され、言及した範囲での具体的に除外された任意の限定を被る。言及した範囲が限定の一方又は双方を含む場合、それらの含まれる限定の一方又は双方を除く範囲も本発明に含まれる。
【００１２】
別に定義しない限り、本明細書で用いるすべての技術及び科学用語は、本発明の属する当業者によって一般的に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書に記載されたものと同様の又は同等である任意の方法及び材料を本発明の実施又は試験に用いることができるが、好ましい方法及び材料をここに記載する。本明細書に言及したすべての出版物は、出版物を引用することに関連する方法及び／又は材料を開示及び記載するために、参照により本明細書に組み入れられる。
【００１３】
本明細書及び特許請求の範囲で用いる通り、単数形は、文脈が明らかにそうではないことを指示しない限り、複数の指示対象を含むということに留意しなければならない。したがって、例えば、「方法」の参照には複数のそのような方法が含まれ、「IFN-γ用量」の参照には1回以上の用量及び当業者に既知であるその同等物の参照などが含まれる。
【００１４】
本明細書に記載された出版物は、本出願の出願日前のそれらの開示に関してのみ提供される。本明細書中のいずれも、が先の発明によって本発明そのような出版物に先行する権限を有しないことを認めたものとみなされてはならない。さらに、提供された出版物の日付は、独立して確認する必要があろう実際の出版物の日付と異なるかもしれない。
【００１５】
発明の詳細な説明
本発明は、特発性肺線維症（IPF）の治療方法;IPFを有する個体の生存時間を増す方法;及びIPFを有する個体の死亡の危険性を減らす方法を提供する。本方法は、一般的には、IPFを有する個体に治療上有効量のIFN-γを投与することを含む。本方法は、一般的に、IPFを有する個体に治療上有効量のIFN-γを投与することを含む。
【００１６】
特発性肺線維症の治療方法
本発明は、特発性肺線維症（IPF）の治療方法を提供する。本方法は、一般的に、治療上有効量のIFN-γをIPFを有する個体に投与することを含む。
【００１７】
いくつかの態様では、外科手術の生検により得られた肺組織の通常型間質性肺炎（UIP）を組織病理学的評価で見出すことによって、IPFの診断を確認する。IPFの診断の基準は公知である。Ryu et al. (1998) Mayo Clin. Proc. 73: 1085-1101。
【００１８】
他の態様では、IPFの診断は、高分解能コンピュータ断層撮影（HRCT）によって実施される明確な又は可能性が高いIPFである。HRCTによる診断では、以下の特徴の存在に留意する：（1）基底及び末梢性優位性を有する網状異常及び／又は牽引性気管支拡張症の存在；（2）基底及び末梢性優性を有する蜂巣の存在；及び（3）小結節、気管支血管周囲結節、硬化、単離された非蜂巣状の嚢胞（cysts）、すりガラス減弱（ground glass attenuation）（あるいは、存在する場合、網状影（reticular opacity）より程度が少ない）、及び縦隔腺症（あるいは、存在する場合、胸部x線上で見られるほど十分な広範囲ではない）などの異型特徴の非存在。特徴（1）、（2）、及び（3）を満たした場合、IPFの明確な診断がなされる。特徴（1）及び（3）を満たした場合、IPFの可能性が高い診断がなされる。
【００１９】
IFN-γは有効量で投与される。いくつかの態様では、IFN-γの有効量は、IFN-γの投与なしで期待される生存率と比較して、IPFを有する個体の生存率を少なくとも約10%、少なくとも約15%、少なくとも約20%、又は少なくとも約25%増加するのに有効な量である。したがって、IPFを有し、かつ、有効量のIFN-γを投与された個体の生存率の増大は、IFN-γの投与なしで期待される生存率と比較して、少なくとも約10%、少なくとも約15%、少なくとも約20%、又は少なくとも約25%である。
【００２０】
いくつかの態様では、IFN-γの有効量は、IPFを有する個体の死亡の危険性を減少する量である。IPFを有し、かつ、IFN-γで治療した個体での死亡の危険性は、IPFを有し、かつ、IFN-γにより治療されていない個体で期待される死亡の危険性と比較して、少なくとも2倍、少なくとも2.5倍、少なくとも3倍、少なくとも3.5倍、又は少なくとも4倍又はそれ未満まで減少する。
【００２１】
インターフェロン−ガンマ
IFN-γポリペプチドをコードする核酸配列には、例えばGenbank、学術出版物などの公知のデータベースからアクセスすることができる。種々の哺乳動物のIFN-γポリペプチドが対象となるが、ヒト疾患の治療用には一般的にヒトタンパク質を用いる。ヒトIFN-γコード配列は、Genbankアセッション番号X13274；V00543；及びNM_000619に見出すことができる。対応するゲノム配列は、Genbankアセッション番号J00219；M37265；及びV00536に見出すことができる。例えば、Gray et al. (1982) Nature 295: 501 (Genbank X13274)；及びRinderknecht et al. (1984) J.: Biol. Chem. 259: 6790を参照されたい。
【００２２】
IFN-γ1b（Actimmune（登録商標）；ヒトインターフェロン）は、140個のアミノ酸の一本鎖ポリペプチドである。これは大腸菌（E.coli）中で組換えにより作られ、グリコシル化されていない。Rinderknecht et al. (1984) J. Biol. Chem. 259: 6790-6797。
【００２３】
本発明の組成物中に用いられるIFN-γは、IFN-γ活性、特にヒトIFN-γ活性を有する限り、天然IFN-γ、組換えIFN-γ、及びそれらの誘導体のいずれでもあることができる。当技術分野で既知である通り、ヒトIFN-γは、インターフェロン及び多数の他の免疫調節活性に特徴的な抗ウイルス及び抗増殖特性を示す。IFN-γは先に提供したタンパク質の配列に基づいているが、タンパク質の産生及びタンパク分解プロセシングによってそのプロセシングの変型を生ずることができる。前記Gray et al.によって提供されるプロセシングされていない配列は、166個のアミノ酸（aa）から成る。大腸菌で産生された組換えIFN-γは、もともと146個のアミノ酸であった（アミノ酸20で開始する）と信じられているが、ネイティブなヒトIFN-γは、残基23の後で切断されて143個のアミノ酸のタンパク質又は細菌中での発現に必要である末端メチオニンが存在する場合には144個のアミノ酸を生成することが続いて見出された。最初のメチオニンが存在する場合、例えば、細菌発現が必要である場合、精製の際に、残基162の後のC末端で成熟タンパク質をさらに切断することができ（Grayらの配列を参照）、139個のアミノ酸又は140個のアミノ酸のタンパク質を生ずる。N末端メチオニンは、大腸菌発現の特定の場合ではプロセシングされないmRNA翻訳「出発」シグナルであるAUGによってコードされる人為産物である。他の微生物系又は真核生物発現系では、メチオニンを除くことができる。
【００２４】
対象方法での使用のため、ネイティブなIFN-γペプチド、その修飾体及び変異体、又は1つ以上のペプチドの組み合わせのいずれも用いることができる。対象のIFN-γペプチドはフラグメントを含み、全長配列に関してカルボキシ末端で種々に切断することができる。このようなフラグメントは、アミノ酸24〜約149（プロセシングされていないポリペプチドの残基からの番号付け）が存在する場合、ヒトガンマインターフェロンの特徴的な特性を継続して示す。外来配列をアミノ酸155に続くアミノ酸配列に活性の損失なく置換することができる。例えば、参照により本明細書に組み入れられる米国特許第5,690,925号を参照されたい。ネイティブなIFN-γ部分には、アミノ酸残基24〜150；24〜151、24〜152；24〜153,24〜155；及び24〜157から種々に伸長する分子が含まれる。これらの変異体のいずれも及び当技術分野で既知であり、かつ、IFN-γ活性を有する他の変異体を本発明の方法で用いることができる。
【００２５】
IFN-γポリペプチドの配列を当技術分野で既知である種々の方法で変えて、配列において標的の変化を生ずることができる。変異体ポリペプチドは、通常、本明細書で提供される配列と実質的に同様であり、すなわち、少なくとも1個のアミノ酸において異なり、少なくとも2個であるが約10個以下のアミノ酸において異なることができる。配列変化は、置換、挿入、又は欠失であることができる。全身にアラニン又はその他の導入することができる走査変異を用いて、鍵となるアミノ酸を決定することができる。対象の特異的なアミノ酸置換には、保存された及び保存されていない変化が含まれる。保存されたアミノ酸置換には、典型的には、以下の群内での置換が含まれる：（グリシン、アラニン）；（バリン、イソロイシン、ロイシン）；（アスパラギン酸、グルタミン酸）；（アスパラギン、グルタミン）；（セリン、トレオニン）；（リシン、アルギニン）；又は（フェニルアラニン、チロシン）。
【００２６】
一次アミノ酸配列を変えることができる又は変えることができない対象の修飾には、ポリペプチドの化学的誘導化、例えば、アセチル化又はカルボキシル化；グリコシル化部位を導入又は除去するアミノ酸配列の変化；PEG化に対して感受性のタンパク質を生成するアミノ酸配列の変化などが含まれる。いくつかの態様では、本発明は、減少した血清クリアランスを有するグリコシル及び／又はPEG誘導化ポリペプチドを提供するように工学操作される1つ以上の天然に存在しないグリコシル化及び／又はPGE化部位を有するIFN-γ変異体（国際特許出願公開第01/36001号に記載されるIFN-γポリペプチド変異体など）の使用を企図する。グリコシル化修飾、例えば、合成及びプロセシング中にあるいはさらなるプロセシング工程においてポリペプチドのグリコシル化パターンを修飾することによりなされるグリコシル化修飾；例えば、哺乳動物のグリコシル化又は脱グリコシル化酵素などのグリコシル化に影響を与える酵素にポリペプチドを暴露することによりなされるグリコシル化修飾も含まれる。リン酸化アミノ酸残基（例えば、ホスホチロシン、ホスホセリン、又はホスホトレオニン）を有する配列も包含される。
【００２７】
タンパク分解による変性に対する抵抗性を改善し、安定特性を最適化し、又は治療剤としてより好適にするように通常の化学技術を用いて修飾されたポリペプチドが対象発明に含まれる。例えば、ペプチドの骨格を環化して安定性を増大することができる（例えば、Friedler et al. (2000) J. Biol. Chem. 275: 23783-23789を参照されたい)。天然に存在するL-アミノ酸以外の残基（例えば、D-アミノ酸又は天然に存在しない合成アミノ酸）を含むアナログを用いることができる。タンパク質をPEG化して安定性を増大することができる。
【００２８】
ポリペプチドは、当技術分野で既知である慣用的な方法を用いて、組換え方法により、インビトロ合成によって調製することができ、あるいは誘導された若しくはタンパク質を天然で産生する細胞から単離することができる。特定の配列及び調製の形式は、便宜性、経済性、必要となる精製などにより決定する。所望する場合、種々の基を合成中又は発現中にポリペプチドに導入することができ、これにより他の分子又は表面に結合することが可能となる。したがって、システインを用いて、チオエーテル、金属イオン錯体への結合用のヒスチジン、アミド又はエステル形成用のカルボキシル基、アミド形成用のアミノ基などを作成することができる。
【００２９】
ポリペプチドも、慣用的な組換え合成方法に従って単離及び精製することができる。発現宿主から溶解物を調製することができ、該溶解物はHPLC、排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィー、又はその他の精製技術を用いて精製される。大半において、用いる組成物は、生成物の調製及びその精製方法に関連する汚染物質に関して、所望する生成物の少なくとも20重量％、より通常は少なくとも約75重量％、好ましくは少なくとも約95重量％を含み、治療目的では通常は少なくとも約99.5重量％を含む。通常、パーセンテージは全タンパク質に基づく。
【００３０】
投与量、製剤、及び投与経路
IFN-γは、薬学的に許容される賦形剤とともに製剤で個体に投与される。非常に種々の薬学的に許容される賦形剤が当技術分野で既知であり、本明細書中で詳細に議論する必要はない。薬学的に許容される賦形剤は、例えば、A. Gennaro (2000) "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", 20th edition, Lippincott, Williams, & Wilkins; Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (1999) H. C. Ansel et al. , eds 7th ed., Lippincott, Williams, & Wilkins及びHandbook of Pharmaceutical Excipients (2000) A. H. Kibbe et al., eds., 3rd ed. Amer. Pharmaceutical Assoc.を含む種々の出版物に十分に記載されている。
【００３１】
本対象方法において、所望の治療学的効果を生ずることができる任意の慣用的な手段を用いて、活性薬剤を宿主に投与することができる。したがって、薬剤を治療学的投与のために種々の製剤に導入することができる。より具体的には、本発明の薬剤は、適切な薬学的に許容される担体又は希釈剤と組み合わせることによって薬学的組成物に製剤化することができ、錠剤、カプセル剤、散剤、ガス状、軟膏剤、水剤、坐剤、注射剤、吸入剤、及びエーロゾル剤などの固体、半固体、液体、又はガス状の形態の調製物に製剤化することができる。
【００３２】
そのようなものとして、薬剤の投与は、経口、口腔、直腸、非経口、腹腔内、皮内、経皮、気管内（intracheal）などの投与を含む種々の方法で行うことができる。
【００３３】
薬学的投与形態では、薬剤をその薬学的に許容される塩の形態で投与することができ、あるいは薬剤を単独で若しくは適切な関連性で又はその他の薬学的に活性な化合物と組み合わせて用いることができる。以下の方法及び賦形剤は単に代表例であり、何ら限定するものではない。
【００３４】
経口調製では、薬剤を単独で又は適切な添加剤（例えば、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ、ポテトスターチなどの慣用的な添加剤；結晶セルロース、セルロース誘導体、アラビアゴム、コーンスターチ、ゼラチンなどの結合剤；コーンスターチ、ポテトスターチ、又はカルボキシメチルセルロースナトリウムなどの崩壊剤；タルク又はステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤；並びに所望する場合、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、及び香味剤）と組み合わせて用いて、錠剤、散剤、果粒剤又はカプセル剤を作ることができる。
【００３５】
薬剤は、水性又は非水性溶媒（植物又は他の同様のオイル、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸又はプロピレングリコールのエステルなど）中で（所望する場合には、可溶化剤、等張剤、懸濁剤、乳化剤、安定剤、及び保存剤などの慣用的な添加剤などとともに）溶解、懸濁、又は乳化することにより、注射用の調製物に製剤化することができる。
【００３６】
さらに、薬剤は、乳化基剤又は水溶性基剤などの種々の基剤と混合することにより、坐剤にすることができる。本発明の化合物は坐剤により直腸投与することができる。坐剤にはビヒクルが含まれる。坐剤は、体温で溶け、かつ、さらに室温で固体化するカカオ脂、カーボワックス、及びポリエチレングリコールなどのビヒクルを含むことができる。
【００３７】
シロップ剤、エリキシル剤、及び懸濁剤などの経口又は直腸投与用の単位剤形を提供することができ、各投薬単位（例えば、ティースプーンフル、テーブルスプーンフル、錠剤、又は坐剤）は1つ以上の阻害剤を含有する所定量の組成物を含む。同様に、注射又は静脈内投与用の単位剤形は、滅菌水、通常の生理食塩水、又は別の薬学的に許容される担体中の溶液としての組成物中に阻害剤を含む。
【００３８】
本明細書に用いられる「単位剤形」という用語は、ヒト及び動物被検体用の単位用量として好適な物理的に区別される単位をいい、各々の単位は、薬学的に許容される希釈剤、担体、又はビヒクルに関連して所望の効果を生じるのに十分な量で計算された所定量の本発明の化合物を含有する。本発明の新規な単位剤形のための特定は、用いる特定の化合物及び達成される効果、並びに宿主中での各化合物に関連する薬力学に依存する。
【００３９】
IFN-γの有効な投与量は、患者のサイズに依存して、約0.5μg/m2〜約500μg/m2、通常は約1.5μg/m2〜200μg/m2の範囲であることができる。この活性は、タンパク質50μgあたり106国際単位（IU）に基づく。
【００４０】
投与量レベルは、特定の化合物、症状の重症度、及び副作用に対する被検体の感受性の相関関係として変動することができることを当業者は容易に十分に理解している。所定の化合物に好ましい投与量は、種々の手段により当業者が容易に決定できる。好ましい手段は、所定の化合物の生理学的効力を測定することである。
【００４１】
対象となる特定の態様では、IFN-γは、約25μg〜約500μg、約50μg〜約400μg、又は約100μg〜約300μgの単位剤形で個体に投与される。対象となる特定の態様では、用量は約200μg IFN-γである。対象となる多くの態様では、IFN-γ1bが投与される。
【００４２】
投与量が用量あたり200μg IFN-γである場合、体重あたりのIFN-γの量（約45kg〜約135kgの体重の範囲と仮定）は、体重1kgあたり4.4μg IFN-γから体重1kgあたり約1.48μg IFN-γの範囲である。
【００４３】
対象個体の体表面積は、一般的に、約1.33m2〜約2.50m2の範囲である。したがって、投薬群（1用量あたりIFN-γ200μgの投与に基づく）は、約150μg/m2〜約80μg/m2の範囲である。例えば、投薬群は、約80μg/m2〜約90μg/m2、約90μg/m2〜約100μg/m2、約100μg/m2〜約110μg/m2、約110μg/m2〜約120μg/m2、約120μg/m2〜約130μg/m2、約130μg/m2〜約140μg/m2、又は約140μg/m2〜約150μg/m2の範囲である。
【００４４】
ビヒクル、補助剤、担体、又は希釈剤などの薬学的に許容される賦形剤は、一般の人が容易に入手可能である。さらに、pH調整剤及び緩衝剤、等張化剤、安定化剤、湿潤剤などの薬学的に許容される補助物質は、一般の人が容易に入手可能である。
【００４５】
薬剤がポリペプチド、ポリヌクレオチド（例えば、IFN-γをコードするポリヌクレオチド）である場合、ウイルス感染、マイクロインジェクション、又は小胞融合を含む任意数の経路により、該薬剤を組織又は宿主細胞に導入することがきる。Furth et al. (1992). Anal Biochem 205: 365-368により記載される通り、ジェットインジェクションも筋内投与に用いることができる。DNAを金微粒子上にコーティングすることができ、パーティクルボンバードメント装置又は文献に記載される「遺伝子銃」により（例えば、Tang et al. (1992)、Nature 356: 152-154を参照されたい）皮内で送達することができる（この場合、金微粒子を治療用DNAでコーティングし、皮膚細胞中へのボンバードメントを施す）。これらの態様では、操作可能に結合したIFN-γコード配列の転写を肝細胞中で優先的に駆動するための肝特異的なプロモーターの使用が特に対象となる。
【００４６】
用量レベルは、特定の化合物、症状の重症度、及び副作用に対する被検体の感受性の相関関係として変動できることを当業者は容易に十分に理解している。所定の化合物の好ましい投与量は、種々の手段によって当業者により容易に決定される。
【００４７】
対象となる特定の態様では、IFN-γが皮下注射に好適な溶液として投与される。例えば、IFN-γは、マンニトール40mg/mL、コハク酸ナトリウム0.72mg/mL、ポリソルベート20 0.10mg/mLを含有する製剤中にある。対象となる特定の態様では、200μg/用量の単一用量形態で皮下投与する。
【００４８】
IFN-γの多数投与量を投与することができ、例えば、IFN-γを約1日〜約1週間、約2週間〜約4週間、約1ヶ月〜約2ヶ月、約2ヶ月〜約4ヶ月、約4ヶ月〜約6ヶ月、約6ヶ月〜約8ヶ月、約8ヶ月〜約1年、約1年〜約2年、又は約2年〜約4年以上の範囲である期間にわたって、1ヶ月あたり1回、1ヶ月あたり2回、1ヶ月あたり3回、1週あたり1回、1週あたり2回、1週あたり3回、1週あたり4回、1週あたり5回、1週あたり6回、又は毎日投与することができる。対象となる特定の態様では、IFN-γを1週あたり3回少なくとも約1年にわたって投与する。
【００４９】
さらなる薬剤
いくつかの態様では、IFN-γは、1つ以上さらなる薬剤とともに投与される。好適なさらなる薬剤には、プレドニソンなどのコルチコステロイドが含まれる。IFN-γとともに投与する場合、プレドニソンを1日あたり7.5mg又は15mgの量で経口投与することができる。
【００５０】
治療に好適な被検体
本方法は、IPFを有すると診断された個体の治療に好適である。本方法は、直前の24ヶ月以内にコルチコステロイドにより先に治療された個体及びコルチコステロイドによる先の治療に対応しなかった個体を含むIPFを有する個体の治療にも好適である。方法による治療に特に従いやすい被検体は、予測FVCの少なくとも55%を有する被検体である。予測FVCの少なくとも60%、又は予測FVCの55%〜70%を有する被検体も治療に好適である。パーセント予測FVC値は、当技術分野で公知である正常値に基づく。例えば、Crapo et al. (1981) Am. Rev. Respir. Dis. 123: 659-664を参照されたい。FVCは、肺活量測定の標準の方法を用いて測定される。
【００５１】
実施例
以下の実施例は、当業者に本発明を如何に製造又は使用するかの完全な開示及び記載を提供するために示し、発明者らが発明であると考えるものの範囲を限定することを意図せず、以下の実験がすべて又は行った唯一の実験であることを表すことを意図するものではない。用いた数（例えば、量、温度など）に関する正確性を確実にするための努力はしているが、いくらかの実験誤差及び偏差は考慮されるべきである。別に指摘しない限り、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧又は大気圧付近である。
【００５２】
実施例1：IPFの治療
材料及び方法
研究集団
男性及び女性患者は、20〜79歳の特発性肺線維症を有する患者とした。20〜34歳の患者を開肺生検又はビデオ援用胸腔鏡下（VATS）肺生検又は経気管支生検により診断して適格とした。スクリーニング前30ヶ月以内に明確な又は可能性が高いIPFを示す高分解能コンピュータ断層撮影走査、及び明確な又は可能性が高い通常型間質性肺炎（UIP）を示す開肺生検又はVATS肺生検；又はスクリーニング前30ヶ月以内に他の状態を排除するための非診断経気管支生検、及び異常なPFT（減少したFVC、又は減少したDLco、又は安静時若しくは運動時での障害性ガス交換）、及び以下のうちの2つ：50歳を超える年齢、さもなくば説明できない労作時呼吸困難の潜行性発症、及びビバシラー（bibasilar）かつ呼吸時の断続性ラ音（乾性又は「ベルクロ」タイプの質）により、診断を行った。患者は、3ヶ月以下の期間においてIPFに合致する臨床症状を有し、過去年内では疾患が悪化した。
【００５３】
研究に含まれる患者は、本プロトコルにおける治療前24ヶ月以内に完了したステロイドの十分な過程後に改善を示さなかった。「改善」を示さないとは、ベースライン値（ステロイドを始める前）からステロイド投与期間後の任意の時点まで、かつ、無作為化（randomization）前にパーセント予測FVCにおいて10%以下の増加しか示さないことをいう。改善に関連したステロイドの同じ用量の継続にも関わらず、10%以下の改善を示し、次いでベースライン値に戻ってきた患者が適格であった。過去１年内に確立されたIPFの診断を有する患者に対しては、ステロイドの「十分な経過」は、1カ月以上及び3ヶ月未満の期間にわたって投与されるプレドニソン1800mg又はその均等物の全経口用量である。治療前1年を超えて確立されたIPFの診断を有する患者に対しては、ステロイドの「十分な経過」は、6ヶ月以内に投与されたプレドニソン1800mg又はその均等物の全経口用量である。
【００５４】
除外基準
以下のいずれの患者も研究から除外した；（1）肺線維症を引き起こすことが知られている臨床的に有意な環境暴露の病歴（薬物、石綿、ベリリウム、照射、家禽など）；（2）IPF以外の間質性肺疾患（照射、類肉腫症、過敏性肺炎、閉鎖性気管支梢炎器質化肺炎（BOOP）、及び癌が含まれるが、これらに限定されない）のための既知の説明；（3）米国医師会のリウマチ病学基準に従った任意の結合組織疾患（強皮症、全身性エリテマトーデス、リウマチ様関節炎など）の診断；（4）スクリーニング時の0.6未満の最初の1秒における強制呼気量（FEV1）/強制肺活量（FVC）比（気管支拡張後）；（5）スクリーニング時の120%を上回る予測残気量を有する患者（気管支拡張前（気管支拡張前）；（6）治療前1週間以内の気管支炎、静脈洞炎（sinusitis）、尿路感染（UTI）、及び蜂巣炎を含む活性な感染の証拠；（7）現場の治験責任医師（PI）の意見では次の年内に患者の死に至る可能性が高い、IPF以外の任意の状態；（8）不安定な又は悪化している心臓又は神経性疾患の病歴（a）過去6ヶ月以内の心筋梗塞、冠状動脈バイパス手術又は血管形成術；b）過去6ヶ月以内に入院が必要となった鬱血性心不全；c）制御できない不整脈；d）一過性虚血発作（TIAs）が含まれるが、これらに限定されない）;（9）現場のPIの意見ではIFN-γ1bの投与に関連した既知のインフルエンザ様症候群によって有意に悪化するであろう任意の心臓又は神経性状態；（10）現場のPIの意見ではIFN-γ1bの投与に関連した既知のンフルエンザ様症候群により有意に悪化するであろう末梢血管症の病歴；（11）現場のPIの意見ではIFN-γ1bの投与に関連した既知のインフルエンザ様症候群により有意に悪化するであろうCNS障害の病歴。さらに、以下の状態を有する患者を除外しなければならない：a）多発性硬化症の病歴；b）過去10年以内の発作又は抗発作薬物療法を受けたこと；（12）重度又は制御に乏しい糖尿病の病歴；（13）妊娠又は授乳（出産の可能性がある女性は、治療前に子供を陰性血清又は尿妊娠検査を受ける必要があり、研究期間中に禁欲を行うかあるいは少なくとも産児制限の障害式避妊法により妊娠を阻止することに同意しなければならない）；（14）指定された限定を上回る任意の以下の肝機能検査基準：1.5xULN以上の総ビリルビン；3xULNを上回るアスパラギン酸又はアラニンアミノトランスフェラーゼ（AST、SGOT又はALT、SGPT）；3xULNを上回るアルカリホスファターゼ；及びスクリーニング時の3.0mg/dL未満のアルブミン；（15）指定された限定以外の血液学：スクリーニング時の2,500/mm3未満のWBC、30%未満又は59%を上回るヘマトクリット値、100,000/mm3未満の血小板;（16）スクリーニング時の1.5xULNを上回るクレアチニン；（17）IFN-γ1b、ベータインターフェロン（Avonex）、又はその他のインターフェロンによる前治療；（18）治療前28日以内の任意の指標のための治験治療（Investigational therapy）；（19）治療前6週間以内のアザチオプリン、コルヒチン、シクロホスファミド、シクロスポリン、D-ペニシラミン、メトトレキセート、又はN-アセチルシステインの使用；（20）治療前6週間以内のピルフェニドンを含む治験治療；（21）現場のPIの意見では、登録に好適な候補でない患者又は研究の要求に従わないであろう患者。
【００５５】
第1終了点
第1終了点は、無進行の生存時間とした（例えば、ベースラインから死亡又は疾患進行までの時間）。疾患の進行を以下のいずれかが起こることとして定義した：4〜14週間離れた2つの継続的場合に対してベースラインを比較した場合の%予測FVCの10%以上の減少；4〜14週間離れた2つの継続的場合に対してベースラインを比較した場合の5mmHg以上のA-a勾配の増加。
【００５６】
第2の終了点
第2の終了点は、以下の通りである:（1）48週における遷移呼吸困難（Transitional dyspnea）指数（TDI）；（2）以下のうちの任意の2つの存在により定義される疾患進行を伴う無進行の生存時間：（a）パーセント予測FVCの10%以上の減少;（b）A-a勾配の5mmHg以上の増加；（c）単一呼吸DLcoの15%以上の減少；（3）ベースラインから48週までのDLco（数値）の変化；（4）ベースラインから48週間までのFVC（数値）の変化；（5）ベースラインから48週までのA-a勾配（数値）の変化；（6）ベースラインから週間48週までのSt. George's呼吸アンケートの合計スコアの変化によって評価される生活の質；（7）治療群によって纏められた臨床データの切捨て（cut off）による無作為化生存時間；（8）48週においてベースラインと比較してHRCTによって評価される肺線維症の応答状況（良好、同じ、悪化）；（9）治療群の間で比較して研究の各月中の外来患者の酸素使用に対する最も重度の必要性（なし、活動あり、安静時）。
【００５７】
安全性観察
副作用の事象を評価するため、患者を1週目及び2週目、その後の毎月の訪問で評価した。完全な血球計数を含む実験室検査；クレアチニンを含む日常行われる化学検査；肝機能検査；コレステロール；トリグリセリド及び尿分析を、ベースライン、1週目、2週目、4週目、12週目、及びその後の12週毎で測定した。甲状腺機能検査を、ベースライン、12週目（3カ月目）、24週目（6カ月目）、週48週目、及びその後の6ヶ月毎で測定した。任意の重度の副作用事象及びIV段階毒性が、研究薬物との関係に関わらず、後援者又はその被指名人にリアルタイムで報告された。
【００５８】
効力の観察
患者に肺機能検査（肺活量測定、DLco）を施し、安静時動脈血液ガスをベースライン及びその後の12週間（3ヶ月）毎で評価した。呼吸困難（改変したMRCスケール）をベースライン及びその後の4週間毎（毎月）で評価した。呼吸困難（BDI/TDI及びUCSD息切れアンケート）をベースライン及びその後の12週間（3ヶ月）毎で評価した。生活の質のアンケート（SF-36及びSGRQ）をベースライン及びその後の12週間（3ヶ月）毎で行った。酸素使用を毎日モニタリングした。HRCTスキャンをベースライン及び48週間で行った。
【００５９】
研究設計
研究部位により釣り合いが保たれ、かつ、喫煙状況に対してされた無作為化を伴う330人の患者の無作為化、二重盲検、プラセボ対照研究。患者を2つの群の一方に割り当てた：1群：1週間で3回のIFN-γ1b 200μgの皮下投与；2群：プラセボ、1週間で3回の生理食塩水の皮下投与（tiw）。
【００６０】
研究は3つの期間からなる：スクリーニング期間（最高で28日の期間）、研究期間（最高で37ヶ月の期間）、及び治療経過観察期間（5年）。研究期間中、患者には、最高で3年間、研究薬物を投薬した。最終分析は306人目の患者を48週間追跡したときに行い、すべての患者からのデータを含んでいた。早く研究治療から離脱した患者は、最後の治療後の12週目（3ヶ月目）に完全な治療後評価訪問を有し、第1及び第2終了点の評価のため及びIPFの治療に用いられる投薬のためにその後12週（3ヶ月）毎に訪問した。
【００６１】
研究治療を研究完了訪問まで継続し、研究期間は研究完了訪問後28日目に行った治療経過観察訪問で終了した。研究期間に引き続いて、長期治療経過観察期間中、患者の活力状態を6ヶ月毎に5年間評価した。データ及び安全性モニタリング委員会（DSMB）は、患者の安全性を定期的にモニタリングした。
【００６２】
患者は、研究に入ったときに1日あたり最高でプレドニソン15mgを接種することができ、研究全体を通して同じ用量（投入レベル）のステロイドを維持しなければならない。コルセチン、細胞障害性薬物、シクロスポリン、N-アセチルシステインによる治療、又はその他の実験的治療は許容しなかった。
【００６３】
データ分析
第１の効力終了点は、Cox比例ハザードモデルによって評価される疾患の進行又は死亡の最初に起こるまでの時間である。
【００６４】
結果
治療群及びプラセボ群の無進行の生存時間において、統計的に有意な相違は明らかでなかった。それにも関わらず、治療群及びプラセボ群のある種の亜集団での生存率において、統計的に有意な改善は明らかであった。
【００６５】
患者生存についての結果を図1及び図2に示す。図1は、治療開始時に55未満の%予測FVCを有する個体についてのデータを表す。IFN-γ1bにより治療され、かつ、55%未満の%予測FVCを有する個体（N=36）は72.2%の生存率を有する一方で、プラセボ対照（N=40）は82.5%の生存率（p=0.434）を有する。したがって、IPFを有し、かつ、予測正常値の55%未満のFVCを有する個体の間で観察された死亡の危険性は27.8%であった一方で、プラセボ対照の死亡の危険性は17.5%であった。IFN-γ1bがこれらの患者において生存効果があるとの統計的な証拠はない。
【００６６】
図2は、治療の開始時に55以上の%予測FVCを有する個体についての日付を示す。IFN-γ1bにより治療され、かつ、55以上の%予測FVCを有する個体（N=126）は95.2%の生存率を有する一方で、プラセボ対照（N=128）は83.6%の生存率（p=0.004）を有していた。したがって、IPFを有し、かつ、予測正常値の55%を上回るFVCを有する個体の間で観察された死亡の危険性は4.8%であった一方で、プラセボ対照の死亡の危険性は16.4%であった。したがって、この群では、観察された死亡の危険性は3倍を上回る減少があった。IFN-γ1bがこれらの患者において生存効果を有していたことの強力な統計的証拠がある。
【００６７】
本発明をその具体的な態様を参照して記載したが、本発明の真意及び範囲を逸脱することなく種々の変更を加えることができ、かつ、等価物に置き換えることができることは当業者により理解されるべきである。さらに、特定の状況、材料、物質の組成物、プロセス、プロセス工程を本発明の目的、真意、及び範囲に適合するために多くの改変を加えることができる。そのような改変はすべて、本明細書に付随する特許請求の範囲内にあることを意図している。
【図面の簡単な説明】
【００６８】
【図１】IFN-γ1b又はプラセボで治療された55%未満の予測強制肺活量を有する患者の生存率を表す。
【図２】IFN-γ1b又はプラセボで治療された少なくとも55%の予測強制肺活量を有する患者の生存率を表す。
【図１】
2006502153.tif 000002
【図２】
2006502153.tif 000003
【国際調査報告】
2006502153.tif 000004
2006502153.tif 000005
2006502153.tif 000006