(57)【要約】本発明は、新規なグリコシドおよび糖結合体、糖アミノ酸、およびその合成のための方法を提供する。別の局面において、本発明は、新規なクラスター化糖ペプチドおよびその合成のための方法を提供する。なお別の局面において、本発明は、癌の処置のため、好ましくは癌の再発の予防のための方法、ならびに被験体において抗体を誘導するための方法を提供し、これらの方法は、その必要性がある被験体に、本明細書中に開示される本発明の糖ペプチドのいずれかの有効量を、結合体化形態または非結合体化形態のいずれかで、適切な免疫原性キャリアと組み合わせて投与する工程を包含する。
2006507233.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造を有する化合物であって：
【化１】
2006507233.tif 000198
ここでＬ１は、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
Ｒｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり；
ここでＲは、水素；置換または非置換のアルキル；アルケニル；アリール；−ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、ここでＲ’またはＲ”は、各々独立して水素、保護基、置換または非置換のアルキル、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；あるいはＬ１に直接もしくは架橋剤を介して連結された免疫原性キャリアである、
化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、Ｌ１は、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−であり、該化合物は、以下の構造：
【化２】
2006507233.tif 000199
を有し、
ここでｎは、０〜９の整数であり、ＲおよびＲｘは、請求項１に規定されるとおりである、化合物。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物であって、Ｌ１はグリコシド部分を含む、化合物。
【請求項４】
請求項３に記載の化合物であって、前記グリコシド部分は単糖である、化合物。
【請求項５】
請求項４に記載の糖ペプチドであって、前記単糖は、以下の構造：
【化３】
2006507233.tif 000200
を有する部分であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して水素または保護基であり、Ｒｙは、窒素保護基である、化合物。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物であって、Ｒは、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）−であり、該化合物は、以下の構造：
【化４】
2006507233.tif 000201
を有し、
ここでＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素または適切な保護基であり、ＲｘおよびＬ１は、請求項１に規定される通りである、化合物。
【請求項７】
請求項６に記載の化合物であって、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−であり、該化合物は、以下の構造：
【化５】
2006507233.tif 000202
を有し、
ここでｎは、０〜８の整数であり、Ｒ’およびＲ”は、各々独立して、水素または適切な保護基である、化合物。
【請求項８】
請求項６または７に記載の化合物であって、Ｒ’およびＲ”は、各々、Ｆｍｏｃ、アセチル、ベンジル、Ｂｏｃ、ｔ−ブチル、ＣｂｚおよびＴＳＥからなる群より独立して選択される保護基である、化合物。
【請求項９】
ｎは３である、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒは、免疫原性キャリアである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の化合物であって、前記免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である、化合物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の化合物であって、前記キャリアは、ＫＬＨ、ポリペプチドまたはＢＳＡである、化合物。
【請求項１３】
請求項１１に記載の化合物であって、前記脂質は、以下の構造：
【化６】
2006507233.tif 000203
を有し、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の間の整数であり；Ｒｖは水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである、化合物。
【請求項１４】
請求項１３に記載の化合物であって、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、前記脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリンである、化合物。
【請求項１５】
２以上のアミノ酸から構成されるペプチド骨格を含む多重抗原性糖ペプチドであって、前記アミノ酸のうちの１以上は、以下の構造：
【化７】
2006507233.tif 000204
を有するグリコシド部分で独立して置換されており、
ここでＬ１は、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【化８】
2006507233.tif 000205
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【化９】
2006507233.tif 000206
を有する糖部分
であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＡの少なくとも１つの存在は、以下の構造：
【化１０】
2006507233.tif 000207
を有する糖質ドメインであり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基である、
多重抗原性糖ペプチド。
【請求項１６】
請求項１５に記載の糖ペプチドであって、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−である、糖ペプチド。
【請求項１７】
ｎは３である、請求項１６に記載の糖ペプチド。
【請求項１８】
請求項１５に記載の糖ペプチドであって、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、グリコシド部分を含む、糖ペプチド。
【請求項１９】
請求項１８に記載の糖ペプチドであって、前記グリコシド部分は単糖である、糖ペプチド。
【請求項２０】
請求項１９に記載の糖ペプチドであって、前記単糖は、以下の構造：
【化１１】
2006507233.tif 000208
を有する部分であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり、Ｒｙは、窒素保護基である、
糖ペプチド。
【請求項２１】
請求項１５に記載の糖ペプチドであって、該糖ペプチドは、以下の構造：
【化１２】
2006507233.tif 000209
を有する構築物であり、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜２０の整数であり；
Ｒは、水素または免疫原性キャリアであり；
該リンカーは、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和のアルキル、脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリール部分であり；ここでＲＤおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【化１３】
2006507233.tif 000210
を有するグリコシド部分であり、
ここでＬ１は、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【化１４】
2006507233.tif 000211
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【化１５】
2006507233.tif 000212
を有する糖部分
であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここで該グリコシド部分は、アミノ酸にα結合されるかまたはβ結合されるかのいずれかであり；ここでＡの少なくとも１つの存在は、以下の構造：
【化１６】
2006507233.tif 000213
を有する糖質部分であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基である、
化合物。
【請求項２２】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、前記リンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−（脂肪族）ＮＲＪ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり；ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分であり、そしてここで各脂肪族またはヘテロ脂肪族の部分は、独立して、置換もしくは非置換、直鎖状もしくは分枝状、環式もしくは非環式である、
糖ペプチド。
【請求項２３】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、前記リンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ−、−（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＩ−、−Ｏ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ、２〜約２０ヒドロキシアシル残基を含む脂肪族、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり、ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分である、糖ペプチド。
【請求項２４】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、ｑは１であり、前記架橋剤は、以下の構造：
【化１７】
2006507233.tif 000214
を有するフラグメントであり、
それにより、該構造は、マレイミド安息香酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルとリンカーとの結合の際に生成される、
糖ペプチド。
【請求項２５】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、Ｒは水素であり、ｑは０である、糖ペプチド。
【請求項２６】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、Ｒは、免疫原性キャリアである、糖ペプチド。
【請求項２７】
請求項２６に記載の化合物であって、前記免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である、化合物。
【請求項２８】
請求項２７に記載の化合物であって、前記キャリアは、ＫＬＨ、ポリリジンまたはＢＳＡである、化合物。
【請求項２９】
請求項２７に記載の化合物であって、ｑは０であり、前記脂質は、以下の構造：
【化１８】
2006507233.tif 000215
を有し、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の間の整数であり；Ｒｖは水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである、
化合物。
【請求項３０】
請求項２９に記載の化合物であって、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、前記脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリンである、化合物。
【請求項３１】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−であり、ｎは、０〜９の整数である、糖ペプチド。
【請求項３２】
ｎは３である、請求項３１に記載の糖ペプチド。
【請求項３３】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、グリコシド部分を含む、糖ペプチド。
【請求項３４】
請求項３３に記載の糖ペプチドであって、前記グリコシド部分は単糖である、糖ペプチド。
【請求項３５】
請求項３４に記載の糖ペプチドであって、前記単糖は、以下の構造：
【化１９】
2006507233.tif 000216
を有する部分であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり、Ｒｙは、窒素保護基である、
糖ペプチド。
【請求項３６】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、以下の構造：
【化２０】
2006507233.tif 000217
を有する糖質ドメインでないＡの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、ＳＴＮ、２，６−ＳＴｎ、（２，３）ＳＴ、Ｇｂ３またはＴＦであり、ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基である、
糖ペプチド。
【請求項３７】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、ｍは２であり、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−であり、ｎは０〜９の整数であり；そしてＡの各存在は、独立して、以下の構造：
【化２１】
2006507233.tif 000218
を有する糖質ドメインであり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基である、
糖ペプチド。
【請求項３８】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、ｍは２であり、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、グリコシド部分を含み、Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【化２２】
2006507233.tif 000219
を有する糖質ドメインであり、
ここでここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基である、
糖ペプチド。
【請求項３９】
請求項３８に記載の糖ペプチドであって、前記グリコシドは単糖である、糖ペプチド。
【請求項４０】
請求項３９に記載の糖ペプチドであって、前記単糖は、以下の構造：
【化２３】
2006507233.tif 000220
を有する部分であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり、Ｒｙは、窒素保護基である、
糖ペプチド。
【請求項４１】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、ｍは２であり、Ｌ１の各存在は、独立して、−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−であり、該糖ペプチドは、Ｇｂ３を含む、３つのＡが存在し、そして該糖ペプチドは、以下の構造：
【化２４】
2006507233.tif 000221
を有し、
ここでｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素またはキャリアタンパク質、ペプチドもしくは脂質であり、Ｒｘの各存在は、独立して、水素または保護基である、
糖ペプチド。
【請求項４２】
請求項２１に記載の糖ペプチドであって、ｍは２であり、Ｌ１の各存在は、独立して単糖を含み、該糖ペプチドは、Ｇｂ３を含む３つのＡが存在し、そして該糖ペプチドは、以下の構造：
【化２５】
2006507233.tif 000222
を有し、
ここでｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して０〜９の整数であり；Ｒは水素またはキャリアタンパク質、ペプチドもしくは脂質であり、Ｒｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり、Ｒｙは、窒素保護基である、
糖ペプチド。
【請求項４３】
ｎの各存在が０である、請求項４２に記載の糖ペプチド。
【請求項４４】
ｎの各存在が３である、請求項４１に記載の糖ペプチド。
【請求項４５】
ｑは０である、請求項４１または４２に記載の糖ペプチド。
【請求項４６】
請求項４１または４２に記載の糖ペプチドであって、ＲはＫＬＨ、ウシ血清アルブミンまたはポリリジンである、糖ペプチド。
【請求項４７】
請求項４１または４２に記載の糖ペプチドであって、前記リンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり；ｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数である、糖ペプチド。
【請求項４８】
Ｒｘの各存在は水素である、請求項４１または４２に記載の糖ペプチド。
【請求項４９】
Ｒｙの各存在はＡｃである、請求項４２に記載の糖ペプチド。
【請求項５０】
請求項４１または４２に記載の糖ペプチドであって、ｑは１であり、前記架橋剤は、以下の構造：
【化２６】
2006507233.tif 000223
を有する部分であり、
それによって、該構造は、マレイミド安息香酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルとリンカーとの結合の際に生成される、
糖ペプチド。
【請求項５１】
請求項４２に記載の糖ペプチドであって、ｎおよびｑは、各々０であり、Ｒは水素であり、前記リンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数である、糖ペプチド。
【請求項５２】
請求項４２に記載の糖ペプチドであって、ｎは０であり、ｑは１であり、ＲはＫＬＨであり、前記リンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数であり、前記架橋剤は、以下の構造：
【化２７】
2006507233.tif 000224
を有する部分である、糖ペプチド。
【請求項５３】
請求項４１に記載の糖ペプチドであって、ｑは０であり、ｎは３であり、Ｒは水素であり、前記リンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数である、糖ペプチド。
【請求項５４】
請求項４１に記載の糖ペプチドであって、ｑは１であり、ｎは３であり、ＲはＫＬＨであり、前記リンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数であり、前記架橋剤は、以下の構造：
【化２８】
2006507233.tif 000225
を有する、糖ペプチド。
【請求項５５】
請求項４７、５１〜５４のいずれか１項に記載の糖ペプチドであって、ｔは３であり、ｖは１である、糖ペプチド。
【請求項５６】
以下の構造：
【化２９】
2006507233.tif 000226
を有する糖ペプチドであって、
ここでｑは０または１であり；
ｍは５〜２０の整数であり；
Ｒは、水素または免疫原性キャリアであり；
前記リンカーは、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルもしくはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分あるいは置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリールの部分であり；そしてここでＲＤおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【化３０】
2006507233.tif 000227
を有するグリコシド部分であり、
ここでＬ１の各存在は、独立して、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【化３１】
2006507233.tif 000228
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【化３２】
2006507233.tif 000229
を有する糖部分
であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここで該グリコシド部分は、アミノ酸にα結合されるかまたはβ結合されるかのいずれかである、
糖ペプチド。
【請求項５７】
以下の構造：
【化３３】
2006507233.tif 000230
を有する合成構築物であって、
ここでｎは０〜８であり；ここで該キャリアは、直接または架橋剤を介して連結される脂質またはタンパク質であり；Ｒｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり；ここでｔ’は少なくとも１である、
合成構築物。
【請求項５８】
請求項５７に記載の構築物であって、ｔ’は、２０〜６００の範囲である、構築物。
【請求項５９】
ｎは４である、請求項５７に記載の構築物。
【請求項６０】
請求項２１または５６に記載の糖ペプチドであって、ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである、糖ペプチド。
【請求項６１】
糖アミノ酸の合成のための方法であって、該方法は、以下の工程：
（ａ）適切なアルケニルグリコシドを提供する工程；
（ｂ）適切に保護されたアルケニルアミノ酸を提供する工程；
（ｃ）該アルケニルグリコシドと該アルケニルアミノ酸とを、適切な触媒の存在下で適切な条件下で反応させて、糖エナミドエステルを生成する工程；および
（ｄ）該糖エナミドエステルを適切な条件に供して、糖アミノ酸を生成する工程、
を包含する、方法。
【請求項６２】
請求項６１に記載の方法であって、前記工程（ａ）のアルケニルグリコシドは、以下の構造：
【化３４】
2006507233.tif 000231
を有し、
ここでｎは０〜８であり；
Ａは、以下の構造：
【化３５】
2006507233.tif 000232
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【化３６】
2006507233.tif 000233
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
前記工程（ｂ）のアルケニルアミノ酸は、以下の構造：
【化３７】
2006507233.tif 000234
を有するアルケニルグリシンであり、
ここでＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素または保護基であり、ｑ’は１〜８の整数であり；前記工程（ｃ）において生成された糖エナミドエステルは、以下の構造：
【化３８】
2006507233.tif 000235
を有し、
ここでＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素または保護基であり、ｎおよびｑ’は、各々独立して、０〜８の整数であり；前記工程（ｄ）において生成された糖アミノ酸は、以下の構造：
【化３９】
2006507233.tif 000236
を有し、
ここでＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素または保護基であり、ｎおよびｑ’は、各々独立して、０〜８の整数である、
方法。
【請求項６３】
請求項６１に記載の方法であって、Ａは、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、ＳＴｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される、方法。
【請求項６４】
請求項６１に記載の方法であって、Ａは、以下の構造：
【化４０】
2006507233.tif 000237
を有する糖質決定基であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり、そしてＲｙの各存在は、独立して、水素または窒素保護基である、方法。
【請求項６５】
請求項６１に記載の方法であって、Ａは、以下の構造：
【化４１】
2006507233.tif 000238
を有する糖質決定基であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり、そしてＲｙの各存在は、水素または窒素保護基である、方法。
【請求項６６】
請求項６１に記載の方法であって、Ａは、以下の構造：
【化４２】
2006507233.tif 000239
を有する糖質決定基であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基である、方法。
【請求項６７】
請求項６１に記載の方法であって、前記工程（ａ）の触媒は、以下からなる群：
【化４３】
2006507233.tif 000240
より選択され、
ここでＣｙは、シクロヘキシル部分を表す、方法。
【請求項６８】
請求項６１に記載の方法であって、前記工程（ａ）の触媒は、以下の構造：
【化４４】
2006507233.tif 000241
を有し、
ここでＣｙは、シクロヘキシル部分を表す、方法。
【請求項６９】
請求項６１に記載の方法であって、前記糖エナミドエステルを、適切な条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程は、該エナミドエステルを水素化条件下で、その後、脱保護条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程を包含する、方法。
【請求項７０】
薬学的組成物であって、以下：
請求項１、１５、２１または５６に記載の化合物または糖ペプチド、および
薬学的に適切なキャリア、
を含む、薬学的組成物。
【請求項７１】
請求項７０に記載の薬学的組成物であって、前記化合物または糖ペプチドは、免疫原性キャリアに結合体化されている、薬学的組成物。
【請求項７２】
薬学的組成物であって、以下：
薬学的に受容可能なキャリア；
免疫原性キャリア；および
２以上のアミノ酸から構成されるペプチド骨格を含む多重抗原性糖ペプチド、
を含み、
ここで前記アミノ酸のうちの１以上は、以下の構造：
【化４５】
2006507233.tif 000242
を有するグリコシド部分で独立して置換されており、
ここでＬ１の各存在は、独立して、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【化４６】
2006507233.tif 000243
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【化４７】
2006507233.tif 000244
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
それによって、該糖ペプチドは、該免疫原性キャリアに結合されていない、
薬学的組成物。
【請求項７３】
請求項７２に記載の薬学的組成物であって、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、（２，３）ＳＴ、Ｇｂ３またはＴＦである、薬学的組成物。
【請求項７４】
請求項７１または７２に記載の薬学的組成物であって、前記免疫原性キャリアは、ウシ血清アルブミン、ポリリジンまたはキーホールリンペットヘモシアニンである、薬学的組成物。
【請求項７５】
請求項７１または７２に記載の薬学的組成物であって、ｑは０であり、前記免疫原性キャリアは、以下の構造：
【化４８】
2006507233.tif 000245
を有する脂質であり、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の整数であり；Ｒｖは、水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである、薬学的組成物。
【請求項７６】
請求項７５に記載の薬学的組成物であって、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、前記脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリンである、薬学的組成物。
【請求項７７】
請求項７１または７２に記載の薬学的組成物であって、１以上の免疫学的アジュバントをさらに含む、薬学的組成物。
【請求項７８】
請求項７７に記載の薬学的組成物であって、前記１以上の免疫学的アジュバントは、サポニンアジュバントである、薬学的組成物。
【請求項７９】
請求項７８に記載の薬学的組成物であって、前記サポニンアジュバントは、ＧＰＩ−０１００である、薬学的組成物。
【請求項８０】
請求項７７に記載の薬学的組成物であって、前記１以上の免疫学的アジュバントのうちの少なくとも１つは、細菌またはリポソームである、薬学的組成物。
【請求項８１】
請求項８０に記載の薬学的組成物であって、前記免疫学的アジュバントは、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａ細胞、カルメット−ゲラン杆菌またはＱＳ２１である、薬学的組成物。
【請求項８２】
癌に罹患しんた患者における癌を処置する方法であって、該方法は、以下の工程：
請求項１、１５、２１または５６に記載の化合物または糖ペプチドの有効量、および薬学的に適切なキャリアを被験体に投与する工程、
を包含する、方法。
【請求項８３】
請求項８２に記載の方法であって、前記化合物または糖ペプチドは、免疫原性キャリアに結合体化されている、方法。
【請求項８４】
請求項８２に記載の方法であって、前記化合物または糖ペプチドは、キャリアに結合体化されておらず、該方法は、免疫原性キャリアを投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項８５】
請求項８２に記載の方法であって、該方法は、被験体における癌の再発を予防する工程を包含する、方法。
【請求項８６】
請求項８２または８５に記載の方法であって、前記癌は固形腫瘍である、方法。
【請求項８７】
請求項８２または８５に記載の方法であって、前記被験体は、臨床的寛解状態にあるか、または前記被験体は、手術によって処置されており、制限された切除されていない疾患を有する、方法。
【請求項８８】
被験体において抗体を誘導する方法であって、該抗体は、腫瘍細胞と特異的に結合可能であり、該方法は、該抗体を誘導するに有効な量の請求項１、１５、２１または５６に記載の化合物または構築物を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項８９】
請求項８８に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、免疫原性キャリアに結合体化されている、方法。
【請求項９０】
被験体において抗体を誘導する方法であって、該抗体は、腫瘍細胞と特異的に結合可能であり、該方法は、
一定量の２以上のアミノ酸から構成されるペプチド骨格を含む多重抗原性糖ペプチドを豊洲留工程を包含し、
ここで該アミノ酸のうちの１以上は、以下の構造：
【化４９】
2006507233.tif 000246
を有するグリコシド部分で独立して置換されており、
ここでＬ１の各存在は、独立して、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【化５０】
2006507233.tif 000247
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【化５１】
2006507233.tif 000248
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
それによって、該糖ペプチドは、該免疫原性キャリアに結合されておらず、
ここで糖ポリペプチドの量は、該抗体を誘導するに有効である、
方法。
【請求項９１】
請求項９０に記載の方法であって、該方法は、免疫原性キャリアを投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項９２】
被験体において抗体を誘導する方法であって、該抗体は、腫瘍細胞と特異的に結合可能であり、該方法は、該抗体を誘導するに有効な量の多重抗原性糖ペプチドを該被験体に投与する工程を包含し、ここで該糖ペプチドは、以下の構造：
【化５２】
2006507233.tif 000249
を有し、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜２０の整数であり；
該リンカーは、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状または分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和のアルキル、脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリールの部分であり；ここでＲＤおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【化５３】
2006507233.tif 000250
を有するグリコシド部分であり、
ここでＬ１の各存在は、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【化５４】
2006507233.tif 000251
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【化５５】
2006507233.tif 000252
を有する糖部分
であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；そして
ここで該方法は、免疫原性キャリアを投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項９３】
請求項９０〜９２のいずれか１項に記載の方法であって、L１の少なくとも１つの存在は、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−であり、ｎは０〜９の整数である、方法。
【請求項９４】
ｎは３である、請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
請求項９０〜９２のいずれか１項に記載の方法であって、L1の少なくとも１つの存在は、グリコシド部分を含む、方法。
【請求項９６】
請求項９５に記載の方法であって、前記グリコシド部分は単糖である、方法。
【請求項９７】
請求項９６に記載の方法であって、前記単糖は、以下の構造：
【化５６】
2006507233.tif 000253
を有する部分であり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり、Ｒｙは、窒素保護基である、方法。
【請求項９８】
請求項９０または９２に記載の方法であって、前記糖ペプチドにおいて、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、（２，３）ＳＴ、またはＴＦ、以下の構造
【化５７】
2006507233.tif 000254
を有する糖質ドメインからなる群より選択される糖質ドメインであり、
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり；そしてＲｙの各存在は、独立して、水素または窒素保護基である、方法。
【請求項９９】
請求項９０または９２に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、少なくとも２つの異なる糖質抗原を含み、前記誘導される抗体は、前記ポリペプチド骨格上に存在する該糖質抗原を認識する、方法。
【請求項１００】
請求項９９に記載の方法であって、前記ペプチド骨格上に存在する糖質抗原は、独立して、腫瘍細胞上に存在する糖質ドメイン、またはその短縮化もしくは伸長化バージョンを含む、方法。
【請求項１０１】
請求項９０または９２に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、Ｔｎ、Ｇｌｏｂｏ−ＨおよびＬｅｙ抗原を含む３つのＡが存在し、前記誘導される抗体は、Ｔｎ、Ｇｌｏｂｏ−Ｈおよび／またはＬｅｙ抗原を認識する抗体である、方法。
【請求項１０２】
請求項１０１に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、以下の構造：
【化５８】
2006507233.tif 000255
を有し、
ここでｎは０〜９の整数であり、ｔおよびｖは、各々独立して、０〜６の整数である、方法。
【請求項１０３】
請求項９０または９２に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、Ｔｎ、ＴＦおよびＬｅｙを含む３つのＡが存在し、前記誘導される抗体は、Ｔｎ、ＴＦおよび／またはＬｅｙ抗原を認識する抗体である、方法。
【請求項１０４】
請求項１０３に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、以下の構造：
【化５９】
2006507233.tif 000256
を有し、
ここでｎは０〜９の整数であり、ｔおよびｖは、各々独立して、０〜６の整数である、方法。
【請求項１０５】
請求項９０または９２に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、Ｌｅｙ、ＳＴｎ、ＴＦおよびＴｎを含む５つのＡが存在し、前記誘導される抗体は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、Ｌｅｙ、ＳＴｎ、ＴＦおよび／またはＴｎ抗原を認識する抗体である、方法。
【請求項１０６】
請求項１０５に記載の方法であって、前記糖ペプチドは、以下の構造：
【化６０】
2006507233.tif 000257
を有し、
ここでｎは０〜９の整数であり、ｔおよびｖは、各々独立して、０〜６の整数である、方法。
【請求項１０７】
請求項８２、８５、８８、９０または９２に記載の方法であって、１以上の免疫学的アジュバントを同時投与する工程をさらに包含する、方法。
【請求項１０８】
請求項１０７に記載の方法であって、前記１以上の免疫学的アジュバントのうちの少なくとも１つは、サポニンアジュバントである、方法。
【請求項１０９】
請求項１０８に記載の方法であって、前記サポニンアジュバントは、ＧＰＩ−０１００である、方法。
【請求項１１０】
請求項１０７に記載の方法であって、前記１以上の免疫学的アジュバントのうちの少なくとも１つは、細菌またはリポソームである、方法。
【請求項１１１】
請求項１１０に記載の方法であって、前記免疫学的アジュバントは、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａ細胞、カルメット−ゲラン杆菌またはＱＳ２１である、方法。
【請求項１１２】
請求項１１０に記載の方法であって、前記免疫学的アジュバントは、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａ細胞、カルメット−ゲラン杆菌またはＱＳ２１である、方法。
【請求項１１３】
請求項８３、８４、８９、９１または９２に記載の方法であって、前記免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である、方法。
【請求項１１４】
請求項１１３に記載の方法であって、前記キャリアは、ＫＬＨ、ＢＳＡまたはポリリジンである、方法。
【請求項１１５】
請求項１１３に記載の方法であって、前記免疫原性キャリアは、以下の構造：
【化６１】
2006507233.tif 000258
を有する脂質であり、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の整数であり；Ｒｖは、水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである、方法。
【請求項１１６】
請求項１１５に記載の方法であって、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、前記脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリンである、方法。
【請求項１１７】
請求項９２に記載の方法であって、ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（優先権情報）
本出願は、米国特許出願第１０／２０９，６１８号（２００２年７月３１日出願）に対して優先権を主張し、この出願は、同時係属中の特許出願第０９／６４１，７４２（２０００年８月１８日出願）の一部継続出願であり、これは、米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づいて、仮特許出願第６０／１５０，０８８号（１９９９年８月２０日出願、標題「Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎ−Ｐｅｎｔｅｎｙｌ  Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｕｍｏｒ−Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ａｎｔｉｇｅｎ  ｆｕｃｏｓｙｌ  ＧＭ１」）に対する優先権を主張しており、これらの各々は、その全体が本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
（政府の援助）
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ助成金番号：ＡＩ１６９４３およびＣＡ２８８２４によって支援された。従って、政府は、本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
癌患者を処置し、そして／または生存を引き延ばす、既存の治療の重要性および新規な治療の開発は、科学界において継続した研究の主題を有する。これらの特定の取り組みは、悪性癌細胞を殺傷することによって作用する「伝統的化学療法（例えば、パクリタキセルならびに他の低分子および／または天然産物ベースの治療）に向けられてきており、抗癌免疫応答を誘導する抗ガンワクチンを開発することは、長年の目的でもあった（Ｌａｎｚａｖｅｃｈｉｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６０，９３７−９４４；Ｐａｒｄｏｌｌら，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９３，５，７１９−７２５；Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎら，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９２，４，２；Ｄｒａｎｏｆｆら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，ＵＳＡ  １９９３，９０，３５３９；Ｍ．Ｈ．Ｔａｏら、Ｎａｔｕｒｅ，１９９３，３６２，７５５；Ｔ．Ｂｏｏｎ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  １９９３，５４，１７７）。癌ワクチンは、現在までは、（例えば、増強された免疫学的応答を提供することによって）疾患の検出後の処置の様式として認められてきたが、例えば、腫瘍負荷が手術、放射線または化学療法による処置を通じて対処されてきた場合に、腫瘍再発および転移に対する増強された保護を提供し得る選択的ワクチンを開発することが最も好ましい。
【０００４】
一般に、腫瘍免疫療法は、腫瘍が、適切に訓練された免疫系に提示されるかまたはこの免疫系によって処理される場合に認識され得る特異的抗原を有するという理論に基づく。有効な抗癌ワクチンの開発の目的は、その免疫系が腫瘍によって主にまたはもっぱら発現されるこれらの抗原を有する寛容性を打ち破ることである。研究者が採った１つのアプローチは、抗原の糖結合体バージョンを提示して、有効な免疫応答を誘導することであった。この目的を達成する試みにおいて、同定された癌糖質抗原（例えば、ＴＦ、Ｔｎ、ｓＴＮ、ＫＨ−１、ＬｅｙおよびＧｌｏｂｏ−Ｈ）は、慎重に、種々の癌（乳癌、結腸癌、前立腺癌、卵巣癌、肝癌、小細胞肺癌、および腺癌)において悪性細胞の表面において過剰発現されていると同定された。さらに、これらの抗原は、モノクローナル抗体によって免疫的に特徴付けられており、従って、免疫学的研究に利用可能な、関連する血清学的マーカーを有する。このような研究は、糖質ベースのワクチンを伴うアジュバント設定において免疫される患者が、ヒト癌細胞と反応性の抗体を生成し、このような抗体の生成が腫瘍再発を妨げ、より有利な診断と相関する（Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎら，Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９８９，４９，７０４５；Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．Ｃａｆｚｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．１９９６，４３，１５２を参照のこと）。さらに、癌細胞において過剰発現される特異的糖質抗原の単離および注意深い構造同定によって、糖質ベースの腫瘍免疫療法を使用して攻撃するための骨組みが提供された（総説については、（ａ）Ｈａｋｏｍｏｒｉ，Ｓ．；Ｚｈａｎｇ，Ｙ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１９９７，４，９７；（ｂ）Ｔｏｙｏｋｕｎｉ，Ｔ．；Ｓｉｎｇｈａｌ，Ａ．Ｋ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．１９９５，２４，２３およびその文献中の参考文献を参照のこと）。
【０００５】
しかし、糖質エピトープを使用するにあたっての大きな欠点は、これらのエピトープが、一般に、天然源からの単離によって容易に入手可能でないことである。例えば、天然源からのそれらの生成に関連する非常な困難性により、これらのエピトープが、臨床プログラムのための均質な出発物質として実質的に利用可能でなくなっている。従って、治療的に有用な免疫学的応答を誘発するために、これらの天然に存在するエピトープをキャリアタンパク質もしくは任意の都合の良い分子部分に結合体化を介して組み込むことは、よく見ても非効率的であり、しばしば、実質的に不可能である。従って、治療剤としてこれらのワクチンを効率的に研究するためには、十分な材料が、化学的合成によって得られさえすればよい。
【０００６】
この問題を取り除くための試みにおいて、継続する研究の試みのうちの１つは、完全に合成の糖質部分を組み込んだ抗癌ワクチンの開発である（総説については、Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．；Ａｌｌｅｎ，Ｊ．Ｒ．Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０００，３９，８３６−８６３を参照のこと）。合成抗癌ワクチンの開発のための１つのストラテジーは、糖質エピトープの完全な合成およびその後のキャリアタンパク質配列への共有結合的生体結合体化（ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ）に関連する。次いで、そのワクチン構築物は、ヒト臨床試験へ進むという最終的な目的で、適切なマウス免疫研究に供される。このストラテジーは、いくつかの完全に合成の腫瘍関連糖質ベースのワクチンをもたらした。このワクチンは、進行した前臨床試験および臨床試験中の種々の段階にある。実際に、Ｇｌｏｂｏ−Ｈワクチンは、第ＩＩ相レベルで、前立腺および乳癌腫の処置の臨床的評価を受けている（ｓｅｅ，例えば、Ｒａｇｕｐａｔｈｉら，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９７，３６，１２５）一方で、卵巣癌において既に試験されたＬｅｗｉｓｙ抗原ベースのワクチンは、より広範な追跡評価を待っている（Ｋｕｄｒｙａｓｈｏｖら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．１９９８，４５，２８１を参照のこと）。
【０００７】
上記のように、および本明細書中に記載される他の文献において記載されるように、いくつかの合成構築物が近年開発されてきたものの、より持続性のまたは有効な（かつ好ましくは選択的な）免疫応答を誘発し得る新規な構築物を開発するためのさらなる研究が未だに必要である。明らかに、この目的を達成する試みにおいて、これまでに合成により利用可能でなかった抗原性化合物（たとえば、フコシルＧＭ１のようなより複雑な抗原性成分、クラスター化したエピトープ、および類似の構造）を評価するために、あるいはさらなる免疫学的研究および治療研究のための非天然構造［天然に存在する構築物に由来する］を入手するために、改善されたそして／または新規な合成方法を開発することは有用である。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
新規な構築物および改善された合成方法をさらに開発するために必要な認識において、本発明は、一局面において、新規なグリコシドおよび糖結合体糖アミノ酸、ならびにその合成方法および使用方法を提供する。別の局面において、本発明は、新規なクラスター化糖ペプチドならびにその合成方法および使用方法を提供する。なお別の局面において、本発明は、新規なグリコシドおよび新規なクラスター化糖ペプチドを含む薬学的組成物を提供する。なお別の局面において、本発明は、癌の処置のための方法、好ましくは、癌の再発の予防のための方法、ならびに被験体において抗体を誘導するための方法を提供し、この方法は、その必要性がある被験体に、有効量の任意の本明細書中に記載の本発明の糖結合体を投与する工程を包含する。
【０００９】
本発明の一局面において、新規なｎ−アルケニルグリコシドおよびｎ−アルケニル糖結合体である糖アミノ酸が提供される。特定の例示的実施形態において、本明細書中に開示される合成方法論は、糖質アクセプターの還元末端におけるｎ−アルケニルグリコシド保護基の組み込みが、増大したカップリング効率および複雑な糖質への接近可能性を可能にするという認識による。従って、本発明はまた、特定の保護された糖質のために、ｎ−アルケニル部分が有用な前駆体として働き得、複雑な糖ペプチドの合成のために最終的に利用され得るという認識を提供する。
【００１０】
従って、一局面において、本発明は、複雑な糖質の合成のための新規な合成方法論を提供し、この方法は、（１）還元末端アルケニル基を有する糖質アクセプターを提供する工程；（２）適切なドナー化合物を提供する工程；および（３）上記ドナーおよびアクセプターを適切な条件下でカップリングして、アルケニルグリコシドを生成する工程を包含する。この方法を使用すると、上記のように複雑な抗原性アルケニルグリコシドが提供され、その多くは、これまで、一度も提供されておらず、この抗原性アルケニルグリコシドは、次いで、本明細書中に記載されるように、結合体化され得るかまたはさらに反応されて、糖結合体および糖ペプチド構造を生成する。
【００１１】
とりわけ、本発明は、以下の構造を有する新規な化合物および／または結合体を提供する：
【００１２】
【化６２】
2006507233.tif 000003
【００１３】
ここでＬ１は、ここでＬ１は、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
Ｒは、水素；置換もしくは非置換のアルキル；アルケニル；アリール；−ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）−であり、ここでＲ’またはＲ狽ヘ、各々独立して、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ”’であり；ここでＲ”’は、直接的または架橋剤を介してかのいずれかでＬ１またはＮに連結された免疫原性キャリアであり；
Ａは、以下の構造：
【００１４】
【化６３】
2006507233.tif 000004
【００１５】
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【００１６】
【化６４】
2006507233.tif 000005
【００１７】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【００１８】
特定の実施形態において、Ｌ１は、−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−であり、ここでｎは０〜９であるか、またはグリコシド含有部分である。特定の例示的実施形態において、Ｌ１は単糖を含む。特定の好ましい実施形態において、Ｒはアリルであり、ｎは２であり、従って、本発明の化合物は、ｎ−ペンテニル部分を含む。特定の他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。本発明の特定の他の実施形態において、Ｒは、ＮＨＲ”’であり、キャリアＲ”’は、ＫＬＨまたはウシ血清アルブミンである。なお他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、グリコシド構築物に、そのアミノ基の一方（例えば、そのキャリアのアミノ基）を通じて結合体化される。本発明のなお他の実施形態において、ＲはＮＨＲ”’であり、そのキャリアＲ”’は、以下の構造：
【００１９】
【化６５】
2006507233.tif 000006
【００２０】
を有する脂質であり、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の間の整数であり；Ｒｖは水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである。特定の例示的な実施形態において、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、上記脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリン（例えば、ＰａｍＣｙｓ）である。そのタンパク質または脂質は、直接または架橋剤を介してかのいずれかで、ＮまたはＬ１に連結され得、従って、Ｒ”’は、タンパク質、ペプチド、および脂質、ならびに（架橋剤−タンパク質）、（架橋剤−ペプチド）および（架橋剤−脂質）部分を組み込むことが理解される。
【００２１】
他の実施形態において、本発明の化合物は、糖アミノ酸であり、従って、Ｒは、ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、この化合物は、以下の構造：
【００２２】
【化６６】
2006507233.tif 000007
【００２３】
を有し、ここでＬ１は、上記できていされるとおりであり、Ｒ’およびＲ狽ヘ、適切な保護基である。
【００２４】
特定の好ましい実施形態において、本発明の糖アミノ酸は、ｎ−ペンテニルグリコシドに由来し、従って、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）３−である。特定の他の好ましい実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々、ベンジル、ｔ−ブチル、ＴＳＥ（２−（トリメチルシリルエチル）、Ａｃ（アセチル）、Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）、ＣｂｚおよびＦｍｏｃ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）からなる群より独立して選択される保護基である。
【００２５】
特定の実施形態において、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−であり、本発明は、新規な化合物および／または下記の一般構造：
【００２６】
【化６７】
2006507233.tif 000008
【００２７】
を有する結合体を提供し、
ここでｎは、０〜９の整数であり；Ｒは、水素；置換または非置換のアルキル；アルケニル；アリール；−ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、ここでＲ’またはＲ”は、各々独立して水素、保護基、置換または非置換のアルキル、リンカー、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ煤fであり、ここでＲ”’は、直接または架橋剤を介してかのいずれかで、Ｎまたはアルキルリンカーに連結された、免疫原性キャリア、ペプチド、タンパク質または脂質である；
Ａは、以下の構造：
【００２８】
【化６８】
2006507233.tif 000009
【００２９】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【００３０】
【化６９】
2006507233.tif 000010
【００３１】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【００３２】
特定の実施形態において、ＡがＫＨ−１、Ｎ３、ｇｌｏｂｏ−Ｈ、グリコホリン、Ｔｎ、ＴＦ、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、２，６−ＳＴｎまたはＬｅｙである場合、およびＡが−Ｏ−連結されている場合、ｎは、少なくとも１である。特定の他の実施形態において、Ａはα−Ｏ−連結されているか、またはβ−Ｏ−連結されている。
【００３３】
本発明の特定の好ましい実施形態において、Ｒはアリルであり、ｎは２であり、従って、本発明の化合物は、ｎ−ペンテニル部分である。特定の他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチド、または脂質である。本発明の特定の他の実施形態において、ＲはＮＨＲ”’であり、そのキャリアＲ”’はＫＬＨまたはウシ血清アルブミンである。なお他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、そのアミノ基（例えば、そのキャリアのアミノ基）のうちの１つを介してグリコシド構築物に結合体化される。本発明のなお他の実施形態において、ＲはＮＨＲ”’であり、そのキャリアＲ”’は、以下の構造：
【００３４】
【化７０】
2006507233.tif 000011
【００３５】
を有する脂質であり、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の間の整数であり；Ｒｖは水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである。特定の例示的実施形態において、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、上記脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリン（例えば、ＰａｍＣｙｓ）である。そのタンパク質または脂質は、直接または架橋剤を介してかのいずれかでその構築物のＮまたは残りに連結され得、従って、Ｒ”’は、タンパク質、ペプチド、および脂質、ならびにならびに（架橋剤−タンパク質）、（架橋剤−ペプチド）および（架橋剤−脂質）部分を組み込むことが理解される。
【００３６】
他の実施形態において、本発明の化合物は、糖アミノ酸であり、従って、ＲはＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、この化合物は、以下の構造：
【００３７】
【化７１】
2006507233.tif 000012
【００３８】
を有する。
【００３９】
特定の好ましい実施形態において、本発明の糖アミノ酸は、ｎ−ペンテニルグリコシドに由来し、従って、ｎは３である。特定の他の実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々、ベンジル、ｔ−ブチル、ＴＳＥ（２−（トリメチルシリルエチル）、Ａｃ（アセチル）、Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）、ＣｂｚおよびＦｍｏｃ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）からなる群より独立して選択される保護基である。
【００４０】
上記の化合物の各々について、特定の好ましい実施形態において、その化合物の糖質決定基は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、Ｎ３、Ｔｎ、ＴＦ、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＬｅｙからなる群より選択される。他の特定の実施形態において、その化合物の糖質決定基は、その糖質決定基Ａの全てまたは一部として、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ決定基またはフコシルＧＭ１決定基を含む。
【００４１】
別の局面において、本発明は、新規のＮ−アルキル糖アミノ酸の合成し、Ｇｌｏｂｏ−ＨおよびフコシルＧＭ１およびその後の使用について以下でより詳細に記載されるように、新規な糖ペプチドおよびその合成構築物を生成するための方法を提供する。
【００４２】
特定の実施形態において、これらの新規な糖アミノ酸の生成のための本発明の方法は、以下を包含する：（１）本明細書中に記載のようなアルケニルグリコシド部分を提供する工程；（２）上記アルケニルグリコシド部分を酸化条件下に供して、アルデヒドを生成する工程；（３）上記アルデヒドを、オレフィン化条件に供して、エナミドエステルを生成する工程；（４）上記の得られたエナミドエステルを水素化して、保護された糖アミノ酸を提供するに十分な条件下に、そのエナミドエステルを供する工程；および（５）上記保護された糖アミノ酸を、適切な条件下で脱保護して、所望の糖アミノ酸を生成する工程。
【００４３】
特に、糖アミノ酸（その構造は、本明細書中に記載される）の合成方法が提供され、この方法は、
（ａ）以下の構造：
【００４４】
【化７２】
2006507233.tif 000013
【００４５】
を有するアルケニルグリコシドを提供する工程；
（ｂ）上記アルケニルグリコシドを適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【００４６】
【化７３】
2006507233.tif 000014
【００４７】
を有するエナミドエステルを生成する工程；
（ｃ）上記のエナミドエステルを適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【００４８】
【化７４】
2006507233.tif 000015
【００４９】
を有する糖アミノ酸を生成する工程であって、
ここで上記構造の各々について、ｎは０〜８であり、Ａは、以下の構造：
【００５０】
【化７５】
2006507233.tif 000016
【００５１】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【００５２】
【化７６】
2006507233.tif 000017
【００５３】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
そしてここで上記糖アミノ酸構造についてＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、リンカー、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ”’であり；ここでＲ”’は、直接的または架橋剤を介してかのいずれかで糖アミノ酸部分またはＮに連結された免疫原性キャリアである。好ましい実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々独立して水素または保護基である。特定の好ましい実施形態において、Ｒ”は、窒素保護基であり、これらとしては、アセチル、Ｆｍｏｃ、ＣｂｚまたはＢｏｃが挙げられるが、これらに限定されず、Ｒ’は、酸保護基（例えば、ベンジル、ｔ−ブチル、またはＴＳＥ）である。特定の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の好ましい実施形態において、その糖質決定基は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ，２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。特定の他の好ましい実施形態において、その化合物の糖質決定基は、その糖質決定基Ａの全てまたは一部として、本明細書中に記載されるように、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ決定基またはフコシルＧＭ１決定基を含む。
【００５４】
特定の好ましい実施形態において、ｎ−アルケニルグリコシドを適切な条件下で反応させて、エナミドエステルを生成する工程は、ｎ−アルケニルグリコシドを第１に酸化条件下で、第２に塩基（例えば、テトラメチルグアニジン）およびホスホネートの存在下でオレフィン化条件下で反応させて、エナミドエステルを生成する工程を包含する。
【００５５】
特定の実施形態において、上記エナミドエステルを適切な条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程は、上記エナミドエステルを水素化条件下で反応させる工程を包含する。
【００５６】
特定の他の実施形態において、これらの新規な糖アミノ酸の生成のための本発明の方法は、１）上記のアルケニルグリコシド部分を提供する工程；２）上記アルケニルグリコシド部分と、適切なアルケニルアミノ酸とを、適切な触媒の存在下で適切な条件下で反応させて、糖エナミドエステルを生成する工程；４）上記得られたエナミドエステルを水素化して、保護された糖アミノ酸を生成するに十分な条件に、上記エナミドエステルを供する工程；５）上記保護された糖アミノ酸を適切な条件下で脱保護して、適切に保護されたアリルグリシンを生成する工程、を包含する。
【００５７】
例えば、本発明は、糖アミノ酸（その構造は、本明細書中に記載される）の合成のための方法を提供し、この方法は、以下の工程を包含する：
（ａ）以下の構造：
【００５８】
【化７７】
2006507233.tif 000018
【００５９】
を有するアルケニルグリコシドを提供する工程；
（ｂ）上記アルケニルグリコシド部分を適切な触媒の存在下で適切な条件下で適切なアルケニルグリシンと反応させて、以下の構造：
【００６０】
【化７８】
2006507233.tif 000019
【００６１】
を有するエナミドエステルを生成する工程；
（ｃ）上記のエナミドエステルを適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【００６２】
【化７９】
2006507233.tif 000020
【００６３】
を有する糖アミノ酸を生成する工程であって、
ここで上記構造の各々について、ｎは０〜８であり、ｑ’は１〜８の整数であり；ここでＡは、以下の構造：
【００６４】
【化８０】
2006507233.tif 000021
【００６５】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【００６６】
【化８１】
2006507233.tif 000022
【００６７】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
そしてここで上記糖アミノ酸構造についてＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、リンカー、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ”’であり；ここでＲ”’は、直接的または架橋剤を介してかのいずれかで糖アミノ酸部分またはＮに連結された免疫原性キャリアである。特定の好ましい実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々独立して水素または保護基である。特定の好ましい実施形態において、Ｒ”は、窒素保護基であり、これらとしては、アセチル、Ｆｍｏｃ、ＣｂｚまたはＢｏｃが挙げられるが、これらに限定されず、Ｒ’は、酸保護基（例えば、ベンジル、ｔ−ブチル、またはＴＳＥ）である。特定の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の好ましい実施形態において、その糖質決定基は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ，２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。特定の他の好ましい実施形態において、その化合物の糖質決定基は、その糖質決定基Ａの全てまたは一部として、本明細書中に記載されるように、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ決定基またはフコシルＧＭ１決定基を含む。
【００６８】
特定の好ましい実施形態において、ｎ−アルケニルグリコシドを適切な条件下で反応させて、エナミドエステルを生成する工程は、ｎ−アルケニルグリコシドと、適切な触媒の存在下で、適切に保護されたアルケニルグリシンとを反応させる工程を包含する。特定の例示的実施形態において、その保護されたアルケニルグリシンは、以下の構造：
【００６９】
【化８２】
2006507233.tif 000023
【００７０】
を有する保護されたアリルグリシンである。
【００７１】
特定の好ましい実施形態において、その保護されたアリルグリシンは、以下の構造：
【００７２】
【化８３】
2006507233.tif 000024
【００７３】
を有する。
【００７４】
特定の他の好ましい実施形態において、その触媒は、以下：
【００７５】
【化８４】
2006507233.tif 000025
【００７６】
からなる群より選択され、
ここでＣｙは、シクロヘキシル部分を表す。
【００７７】
さらに、特定の実施形態において、上記エナミドエステルを適切な条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程は、上記エナミドエステルを水素化条件下で反応させる工程を包含する。
【００７８】
別の局面において、本発明は、２以上のアミノ酸から構成されるペプチド骨格を含む多重抗原性（ｍｕｌｔｉ−ａｎｔｉｇｅｎｉｃ）糖ペプチドを提供し、ここで上記アミノ酸のうちの１以上は、以下の構造：
【００７９】
【化８５】
2006507233.tif 000026
【００８０】
を有するグリコシド部分で独立して置換されており、
ここでＬ１は、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【００８１】
【化８６】
2006507233.tif 000027
【００８２】
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【００８３】
【化８７】
2006507233.tif 000028
【００８４】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【００８５】
特定の実施形態において、Ｌ１の各存在が構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であって、ここでｎの各存在は、独立して、０〜９である場合、およびｎの各存在についてｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の実施形態において、ｎ−アルキルグリコシド部分は、その骨格のアミノ酸残基に、α−連結しているかまたはβ−連結しているかのいずれかである。特定の実施形態において、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、独立して、グリコシド含有部分である。特定の例示的実施形態において、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、独立して、単糖を含む。これらの本発明のクラスター化糖ペプチドは、ｎ−アルキルに限定されず、ここでｎは１以上であり；むしろ多重抗原性クラスター化糖ペプチドは、伝統的な直接的連結（ｎ＝０）を介して、ｎ−アルキル（例えば、ペンチル）を介して、またはグリコシド部分を介して、あるいはそれらの任意の組み合わせを介して連結され得ることが理解される。他の実施形態において、Ａの各存在は、同じであってもよいが、ｎ−アルケニル（ｎは１を超える）連結またはグリコシド含有連結が、次いで利用される。好ましい実施形態において、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。
【００８６】
特定の実施形態において、多重抗原性糖ペプチドが提供され、これは、少なくとも３つの糖アミノ酸から構成されるペプチド骨格を含み、ここでそのアミノ酸のうちの１以上は、以下の構造：
【００８７】
【化８８】
2006507233.tif 000029
【００８８】
を有するｎ−アルキルグリコシド部分で置換され、
ここでＡの各存在は、独立して、以下の構造：
【００８９】
【化８９】
2006507233.tif 000030
【００９０】
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【００９１】
【化９０】
2006507233.tif 000031
【００９２】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
ここでｎの各存在は、０〜８である。特定の実施形態において、ｎの各存在について、ｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の他の実施形態において、ｎ−アルキルグリコシド部分の各存在は、独立して、その骨格のアミノ酸残基にα−連結されているかまたはβ−連結されているかのいずれかである。これらの本発明のクラスター化糖ペプチドは、ｎ−アルキルに限定されず、ここでｎは１以上であり；むしろ多重抗原性クラスター化糖ペプチドは、伝統的な直接的連結（ｎ＝０）を介して、ｎ−アルキル（例えば、ペンチル）を介して、またはグリコシド部分を介して、あるいはそれらの任意の組み合わせを介して連結され得ることが理解される。他の実施形態において、Ａの各存在は、同じであってもよいが、ｎ−アルケニル（ｎは１を超える）連結が、次いで利用される。好ましい実施形態において、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。
【００９３】
特定の実施形態において、本発明の糖ペプチドは、以下の構造：
【００９４】
【化９１】
2006507233.tif 000032
【００９５】
を有する構築物であり、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜２０の整数であり；
Ｒは水素または免疫原性キャリアであり；
そのリンカーは、遊離カルボン酸、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和のアルキル、脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリールの部分であり；ここでＲＤおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【００９６】
【化９２】
2006507233.tif 000033
【００９７】
を有するグリコシド部分であり、
ここでＬ１は、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【００９８】
【化９３】
2006507233.tif 000034
【００９９】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０１００】
【化９４】
2006507233.tif 000035
【０１０１】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここで該グリコシド部分は、アミノ酸にα−連結されるかまたはβ−連結されるかのいずれかである。特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、独立して、構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であって、ここでｎは、０〜９の整数である。特定の実施形態において、ＲＡおよびＲＣの各存在は、水素またはメチルである。特定の実施形態において、その糖ペプチドは、リンカーを介して適切な免疫原性キャリアに結合され、その糖ペプチドは、以下の構造：
【０１０２】
【化９５】
2006507233.tif 000036
【０１０３】
を有する。
【０１０４】
特定の実施形態において、３以上の抗原を有する多重抗原性クラスターが所望され、従って、本発明はまた、以下の構造：
【０１０５】
【化９６】
2006507233.tif 000037
【０１０６】
を有する構築物を提供し、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜１９の整数であり；
Ｒは、水素または免疫原性キャリアであり；
そのリンカーは、遊離カルボン酸、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の部分、または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリール部分であり；ここでＲＤ、ＲＥおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【０１０７】
【化９７】
2006507233.tif 000038
【０１０８】
を有するグリコシド部分であり、
ここでＬ１の各存在は、独立して、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【０１０９】
【化９８】
2006507233.tif 000039
【０１１０】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０１１１】
【化９９】
2006507233.tif 000040
【０１１２】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【０１１３】
特定の実施形態において、Ｌ１の各存在が構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であって、ここでｎの各存在は、独立して、０〜９である場合、およびｎの各存在についてｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の他の実施形態において、ｎ−アルキルグリコシド部分の各存在は、独立して、その骨格のアミノ酸残基に、α−連結しているかまたはβ−連結しているかのいずれかである。特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、独立して、構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有し、ここでｎの各存在は、独立して、０〜９である。特定の実施形態において、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、独立して、グリコシド含有部分である。特定の例示的実施形態において、Ｌ１の少なくとも１つの存在は、独立して、単糖を含む。特定の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。これらの本発明のクラスター化糖ペプチドは、ｎ−アルキルに限定されず、ここでｎは１以上であり；むしろ多重抗原性クラスター化糖ペプチドは、伝統的な直接的連結（ｎ＝０）を介して、ｎ−アルキル（例えば、ペンチル）を介して、またはグリコシド部分を介して、あるいはそれらの任意の組み合わせを介して連結され得ることが理解される。他の実施形態において、Ａの各存在は、同じであってもよいが、ｎ−アルケニル（ｎは１を超える）連結またはグリコシド含有連結が、次いで利用される。好ましい実施形態において、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。特定の他の実施形態において、ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである。
【０１１４】
特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、独立して、構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有し、多重抗原性糖ペプチドは、以下の構造：
【０１１５】
【化１００】
2006507233.tif 000041
【０１１６】
を有し、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜１９の整数であり；
Ｒは、水素または免疫原性キャリアであり；
上記リンカーは、遊離カルボン酸、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族またはヘテロ脂肪族の部分、または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリール部分であり；ここでＲＤ、ＲＥおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【０１１７】
【化１０１】
2006507233.tif 000042
【０１１８】
を有するアルキルグリコシド部分であり、
ここでＡの各存在は、独立して、以下の構造：
【０１１９】
【化１０２】
2006507233.tif 000043
【０１２０】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０１２１】
【化１０３】
2006507233.tif 000044
【０１２２】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９である。特定の実施形態において、ｎの各存在についてｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の他の実施形態において、ｎ−アルキルグリコシド部分の各存在は、独立して、その骨格のアミノ酸残基に、α−連結しているかまたはβ−連結しているかのいずれかである。特定の実施形態において、ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである。なお他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。
【０１２３】
特定の実施形態において、その糖ペプチドは、リンカーを介して適切な免疫原性キャリアに結合され、その糖ペプチドは、以下の構造：
【０１２４】
【化１０４】
2006507233.tif 000045
【０１２５】
を有する。
【０１２６】
好ましい実施形態において、Ａの各存在は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。しかし１つの好ましい実施形態において、本発明は、新規なトリマー抗原性化合物を生成するために、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、Ｌｅｙ、およびＴｎを組み込む新規なトリマー抗原性糖ペプチドを提供する。特定の他の例示的実施形態において、本発明は、新規なトリマー抗原性化合物を生成するために、ＴＦ、Ｌｅｙ、およびＴｎを組み込む新規なトリマー抗原性糖ペプチドを提供する。なお他の例示的実施形態において、本発明は、新規なペンタマー抗原性化合物を生成するために、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、ＳＴｎ、ＴＦ、Ｌｅｙ、およびＴｎを組み込む新規なペンタマー抗原性糖ペプチドを提供する。
【０１２７】
本明細書中に詳述されるように、本発明の別の局面において、本発明の化合物のいずれかが結合体化されて、糖結合体を生成し得、癌の処置および／または癌の再発の予防のために、単独で、免疫原性キャリア（例えば、キャリアタンパク質、ペプチドまたは脂質）とともに、または免疫学的アジュバントまたはこれらの任意の組み合わせとともに投与され得るか、または単独で、もしくは免疫学的アジュバントとともに投与されて、被験体において抗体を誘導し得る。特定の例示的実施形態において、その糖ペプチドが多重抗原性糖ペプチド（例えば、少なくとも２つの異なる抗原性糖質抗原をペプチド骨格上に含むもの）である場合、誘導される抗体は、上記ポリペプチド骨格上に存在する糖質抗原を認識する。特定の実施形態において、上記ペプチド骨格上に存在する糖質抗原は、腫瘍細胞上に存在する糖質ドメイン、またはその短縮化もしくは伸長化バージョンを含む。
【０１２８】
（定義）
本発明の特定の化合物、および具体的な官能基の定義はまた、以下により詳細に記載される。本発明の目的のために、化学的要素は、Ｅｌｅｍｅｎｔｓ，ＣＡＳ  ｖｅｒｓｉｏｎ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ，第７５版，内表紙の周期表に従って同定され、具体的な官能基は、そこに記載されるように定義される。さらに、有機化学の原則、および特定の官能部分および反応性は、「Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ，Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：１９９９（その全体の内容が、本明細書中に参考として援用される）に記載される。
【０１２９】
化合物は、本明細書中に記載される場合、任意の数の置換基または官能部分で置換され得ることが理解される。一般に、用語「必要に応じて」が前についていようがいまいが、用語「置換されている」、および本発明の式に含まれる置換基とは、所定の構造における水素ラジカルを特定の置換基のラジカルで置換することをいう。任意の所定の構造にける１つを超える位置が、特定された基から選択される１つを超える置換基で置換され得る場合、その置換基は、別段記載されない限り、あらゆる位置で同じであっても異なっていてもよい。本明細書中で使用される場合、用語「置換された」とは、有機化合物の全ての許容可能な置換基を含むことが企図される。広い局面において、その許容可能な置換基としては、有機化合物の非環式および環式の、分枝状および非分枝状の、炭素環式または複素環式の、芳香族または非芳香族の置換基が挙げられる。本発明の目的のために、ヘテロ原子（例えば、窒素）は、本明細書中に記載される有機化合物の水素置換基および／または任意の許容可能な置換基を有し得る。これは、ヘテロ原子の結合価を満たし得る。さらに、本発明は、有機化合物の許容可能な置換基によって、いかなる様式においても制限されることは意図されない。本発明によって想定される置換基および変数の組み合わせは、好ましくは、本明細書中に記載されるように、癌の処置において、または抗体の誘導において、有用な安定な化合物の処方をもたらす。用語「安定な」とは、本明細書中で使用される場合、好ましくは、製造を可能にし、本明細書中に記載される目的に有用であるに十分な時間にわたって、化合物の完全性を維持するに十分な安定性を有する化合物をいう。
【０１３０】
本明細書中で使用される場合、用語「脂肪族」とは、飽和および不飽和の、直鎖状（すなわち、非分枝状）、分枝状、環式、または多環式の脂肪族炭化水素の両方を含み、これらの炭化水素は、必要に応じて、１以上の官能基で置換される。当業者に理解されるように、「脂肪族」は、アルキル、アルケニル、アルキニル、四来るアルキル、シクロアルケニル、およびシクロアルキニルの部分を含むが、これらに限定されないことが本明細書中で意図される。従って、本明細書中で使用される場合、用語「アルキル」とは、直鎖状、分枝状、および環式のアルキル基をともに含む。類似の慣習を、他の包括的用語（例えば、「アルケニル」、「アルキニル」などに適用する。さらに、本明細書中で使用される場合、用語「アルキニル」、「アルケニル」、「アルキニル」などは、置換および非置換の基の両方を含む。
【０１３１】
用語「アルキルアミノ」とは、本明細書中で規定される場合、構造−ＮＨＲ’（ここでＲ’はアルキルである）を有する基をいう。アルキルアミノの例としては、メチルアミノ、エチルアミノ、イソ−プロピルアミノなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３２】
本発明の化合物の上記の脂肪族（および他の）部分の置換基のいくつかの例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＯ２、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ（Ｏ）−アリール、Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＣＯ２−アルキル、ＣＯ２−アリール、ＣＯ２−ヘテロアリール、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＣＯＮＨ−アリール、ＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＯＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＯＣ（Ｏ）−アリール、ＯＣ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＯＣＯ２−アルキル、ＯＣＯ２−アリール、ＯＣＯ２−ヘテロアリール、ＯＣＯＮＨ２、ＯＣＯＮＨ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＯＣＯＮＨ−アリール、ＯＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）−アリール、ＮＨＣ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＮＨＣＯ２−アルキル、ＮＨＣＯ２−アリール、ＮＨＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＳＯ２−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＳＯ２−アリール、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨＣｌ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、アリール、ヘテロアリール、ベンジル、ベンジルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ１〜Ｃ６−アルコキシ、メトキシメトキシ、メトキシエトキシ、アミノ、ベンジルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、Ｃ１〜Ｃ３−アルキル−アミノ、チオ、アリール−チオ、ヘテロアリールチオ、ベンジル−チオ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル−チオ、またはメチルチオメチル。一般に適用可能な置換基のさらなる例は、本明細書中に記載される実施例に示される具体的実施形態により例示される。
【０１３３】
一般に、用語「アリール」および「ヘテロアリール」とは、本明細書中で使用される場合、好ましくは、３〜１４個の炭素原子を有し、その各々が置換されていても置換されていなくてもよい、単環式もしくは多環式、複素環式、および多複素環式の不飽和部分をいう。置換基としては、安定な化合物の形成をを生じる、先に言及した置換基のいずれか（すなわち、脂肪族部分または本明細書中に開示されるような他の部分について記載される置換基）が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の特定の実施形態において、「アリール」とは、１つ以上の芳香族環を有する単環式または二環式の炭素環式環系をいい、これらの芳香族環としては、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３４】
本発明の特定の実施形態において、用語「ヘテロアリール」とは、本明細書中で使用される場合、５〜１０個の環原子を有し、そのうち、１つの環原子がＳ、Ｏ、およびＮから選択され；０、１または２個の環原子は、Ｓ、Ｏ、およびＮから独立して選択されるさらなるヘテロ原子であり；残りの環原子は、炭素である環式芳香族ラジカルをいい、そのラジカルは、環原子のいずれかを介して分子の残りに結合され、これらのヘテロアリールは、例えば、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニルなどである。
【０１３５】
アリール基およびヘテロアリール基（二環式アリール基を含む）が置換れていないかもしくは置換され得ることが理解され、ここで置換は、その基の上の水素原子の１つ、２つまたは３つが、独立して、以下が挙げられるが、これらに限定されない以下の部分の任意の１つ以上での置換を含む：Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＯ２、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ（Ｏ）−アリール、Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＣＯ２−アルキル、ＣＯ２−アリール、ＣＯ２−ヘテロアリール、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＣＯＮＨ−アリール、ＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＯＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＯＣ（Ｏ）−アリール、ＯＣ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＯＣＯ２−アルキル、ＯＣＯ２−アリール、ＯＣＯ２−ヘテロアリール、ＯＣＯＮＨ２、ＯＣＯＮＨ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＯＣＯＮＨ−アリール、ＯＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）−アリール、ＮＨＣ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＮＨＣＯ２−アルキル、ＮＨＣＯ２−アリール、ＮＨＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＳＯ２−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＳＯ２−アリール、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨＣｌ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、アリール、ヘテロアリール、ベンジル、ベンジルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ１〜Ｃ６−アルコキシ、メトキシメトキシ、メトキシエトキシ、アミノ、ベンジルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、Ｃ１〜Ｃ３−アルキル−アミノ、チオ、アリール−チオ、ヘテロアリールチオ、ベンジル−チオ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル−チオ、またはメチルチオメチル。一般に適用可能な置換基のさらなる例は、本明細書中に記載される実施例に示される具体的実施形態により例示される。
【０１３６】
用語「シクロアルキル」とは、本明細書中で使用される場合、具体的には、３〜７個、好ましくは３〜１０個の炭素原子を有する基をいう。適切なシクロアルキルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。この基は、他の脂肪族、ヘテロ脂肪族または複素環式の部分の場合のように、必要に応じて、以下で置換され得る：Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＯ２、ＣＮ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ（Ｏ）−アリール、Ｃ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＣＯ２−アルキル、ＣＯ２−アリール、ＣＯ２−ヘテロアリール、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＣＯＮＨ−アリール、ＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＯＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＯＣ（Ｏ）−アリール、ＯＣ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＯＣＯ２−アルキル、ＯＣＯ２−アリール、ＯＣＯ２−ヘテロアリール、ＯＣＯＮＨ２、ＯＣＯＮＨ−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＯＣＯＮＨ−アリール、ＯＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＮＨＣ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）−アリール、ＮＨＣ（Ｏ）−ヘテロアリール、ＮＨＣＯ２−アルキル、ＮＨＣＯ２−アリール、ＮＨＣＯＮＨ−ヘテロアリール、ＳＯ２−Ｃ１〜Ｃ６−アルキル、ＳＯ２−アリール、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨＣｌ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３、アリール、ヘテロアリール、ベンジル、ベンジルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ１〜Ｃ６−アルコキシ、メトキシメトキシ、メトキシエトキシ、アミノ、ベンジルアミノ、アリールアミノ、ヘテロアリールアミノ、Ｃ１〜Ｃ３−アルキル−アミノ、チオ、アリール−チオ、ヘテロアリールチオ、ベンジル−チオ、Ｃ１〜Ｃ６−アルキル−チオ、またはメチルチオメチル。一般に適用可能な置換基のさらなる例は、本明細書中に記載される実施例に示される具体的実施形態により例示される。
【０１３７】
用語「ハロ」および「ハロゲン」とは、本明細書中で使用される場合、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素から選択される原子をいう。
【０１３８】
一般に適用可能な置換基のさらなる例は、本明細書中に記載される実施例に示される特定の実施形態によって例示されるが、これらの実施例に限定されないことが理解される。
【０１３９】
（発明の特定の好ましい実施形態の詳細な説明）
上記で議論されるように、合成ワクチンの調整のための改善された方法を開発する要望により、天然に存在する複雑な糖質抗原、およびこれらの抗原性構造を組み込む新規な複雑な構造（例えば、糖ペプチド）の合成に対する研究取り組みが増大してきた。任意のこのような大きな合成の経過が着手されている間の場合にしばしばあるように、普遍的に適用され得る改善された合成方法は、しばしば、開発される。特に、天然に存在する抗原性構造の合成研究は、これまでの利用可能でない合成糖質ベースのワクチンの開発を可能にする新規な方法論の開発をもたらした。総説については、Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．；Ａｌｌｅｎ，Ｊ．Ｒ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．２０００，３９，８３６−８６３、およびそこに引用される参考文献を参照のこと。
【０１４０】
重要なことには、本発明は、複雑な糖質および関連した治療化合物（例えば、糖結合体および／または糖ペプチド）の合成のための改善された方法論を提供する。特に、フコシルＧＭ１およびＧｌｏｂｏ−Ｈのｎ−ペンテニルグリコシドの全体的な合成について開発された合成研究の状況において、一般化された方法論が、複雑な糖質構造の改善された合成について開発された。この一般的合成方法は、糖質アクセプターの還元末端におけるｎ−アルケニルグリコシド保護基の組み込みにより、増大したカップリング効率および複雑な糖質への利用性を可能にする。なお別の局面において、本発明はまた、特定の保護された糖質について、ｎ−アルケニル部分が複雑な糖ペプチドの合成について最終的に利用され得る有用な前駆物質として働き得るという認識を提供する。
【０１４１】
さらに、本発明はまた、ｎ−アルケニル部分の存在が、抗原性ｎ−ペンテニルグリコシドまたは糖ペプチドの状況においてであるか否かに拘わらず、改善された糖質ベースの治療（例えば、合成ワクチン）の開発のために有利であるという認識を提供する。なぜなら、結合体前駆物質のより効率的な合成が調整され得（および最終的には結合体化され得）、そのｎ−アルケニル糖質はまた、本明細書中に記載されるように、新規なｎ−アルキル糖アミノ酸の合成のための前駆物質として働く。これらの糖アミノ酸を容易に利用する能力は、複雑なクラスター化糖ペプチドの最終的な合成を可能にする。同様に、本発明により提供される方法論は、上記におよび本明細書中により詳細に記載されるように、糖質決定基の１つを超える型を有する複雑な糖ペプチド構造の効率的な調製を可能にする。
【０１４２】
具体的例は、特に、フコシルＧＭ１の全体的な合成およびＧｌｏｂｏ−Ｈのｎ−ペンテニルグリコシドの合成のための新規な合成スキームに関して、これらの合成の過程で開発された特定の一般的方法論とともに、以下により詳細に記載される。これらの例が、限定されるとは意図されず；むしろ、全ての等価物が本発明の範囲内に組み込まれることが意図されることは、当業者によって理解される。
【０１４３】
（本発明の化合物およびその合成方法）
上記のように、複雑な抗原性構造の全体的な合成は、複雑な糖質合成についての方法論において大きな発展をもたらした。特に最近興味深いのは、図１（１ａ）に示される天然に存在する抗原性構造、フコシル化ＧＭ１ガングリオシドである。このガングリオシドは、これまで、合成されていなかった。Ｎｉｌｓｓｏｎらは、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）細胞と関連する特異的マーカーとしてフコシルＧＭ１を同定した（Ｎｉｌｓｓｏｎら，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｊ．１９８４，１，４３；Ｂｒｅｚｉｃｋａら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９８９，４９，１３００）。これらの研究者は、ヒトＳＣＬＣ組織に含まれる主要ガングリオシド成分として糖スフィンゴ脂質フコシルＧＭ１（１ａ）を単離した。さらに、抗原に対するモノクローナル抗体（Ｆ１２）は、ＳＣＬＣ患者の組織および血清においてフコシルＧＭ１を検出するように働く（Ｎｉｌｓｓｏｎら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９８６，４６，１４０３；Ｖａｎｇｓｔｅｄら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９１，５１，２８９７）。免疫組織化学研究は、正常組織におけるその非常に制限された分布に起因して、フコシルＧＭ１が、ＳＣＬＣに対する免疫攻撃のための優れた標的であり得ることを示唆した。顕著なことには、フコシルＧＭ１は、ｈａｓ  これまで任意の他のヒト癌細胞株に対して見出されておらず、非常にＳＣＬＣ腫瘍特異的であることを示した（Ｚｈａｎｇら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  １９９７，７３，４２）。
【０１４４】
ＳＣＬＣ抗原の糖質部分の構造的割り当ては、酵素分解および化学分解の組み合わせに基づいた（Ｎｉｌｓｓｏｎら，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｊ  １９８４，１，４３）。この割り当てを問題にする特別な理由は何らないが、ＳＣＬＣに対する糖質ベースの攻撃の開発は、種々の単糖（各グリコシド結合における立体化学を含む）の結合様式の明確な割り当てから利益を得ることができる。さらに、この糖質セクタの合成は、文献中に見られない。好ましい実施形態において、合成スキームは、Ｆ１２ｍＡｂに対するセラミドとは無関係に、六糖エピトープの提示を可能にして、全ての特異性が糖質セクタに関することを確実にする。他の好ましい実施形態において、その構築物は、有効な抗腫瘍ワクチンを構築するという予測において、キャリアタンパク質に対するその結合体化の必要性を理解するために、そのように官能化されるべきである。本明細書中により詳細に記載されるように、ｎ−アルケニルグリコシドを生成する能力により、このエピトープの効率的な合成が可能になり、有効な抗腫瘍ワクチンを構築するために、その有効な改変および／または結合体化を可能にする。
【０１４５】
従って、本発明の一局面において、複雑なフコシルＧＭ１糖質セクタの合成が達成され、以下に示されるその構造を有する化合物が提供される：
【０１４６】
【化１０５】
2006507233.tif 000046
【０１４７】
ここでＲ’の各存在は、独立して、水素または保護基であり；ここでＲ狽フ各存在は、独立して、水素または窒素保護基であり；ここでＲは水素、置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル、−ＮＨＲ煤fであり、ここでＲ煤fは、Ｎもしくはその構築物の残りに、直接的またはリンカーを介してかのいずれかで連結されたタンパク質、ペプチドまたは脂質、アミノアシル部分、ペプチドのアミノアシル残基、タンパク質のアミノアシル残基（これらのアミノアシル部分または残基、すなわち、−ＮＨＲ”’）は、構造−（ＣＨ２）ｒを有するポリメチレン鎖を介してＯに連結される。ここでｒは、１〜９の間の整数であるか、またはＲは、以下の構造：
【０１４８】
【化１０６】
2006507233.tif 000047
【０１４９】
を有する部分で置換されている。
【０１５０】
特定の好ましい実施形態において、Ｒ’の各存在は、水素である。本発明の特定の他の好ましい実施形態において、Ｒはｎ−アルケニルであり、これらのｎ−アルケニルとしては、アリル、プロペニル、ブテニル、およびペンテニルが挙げられるが、これらに限定されない。特に好ましい実施形態において、Ｒは、ｎ−ペンテニルである。特定の他の好ましい実施形態において、Ｒは、上記のように、−ＮＨＲ”’、アミノアシル部分、ペプチドのアミノアシル残基、またはタンパク質のアミノアシル残基である。ここでｒは、好ましくは４である。なお他の好ましい実施形態において、上記の化合物が提供されるが、ただしその化合物は、糖スフィンゴ脂質構造ではない。
【０１５１】
本発明の別の局面において、フコシルＧＭ１グリコシドの合成のための方法が提供され、この方法は、以下の工程：
（ａ）以下の構造：
【０１５２】
【化１０７】
2006507233.tif 000048
【０１５３】
を有するチオエチルドナーを提供する工程であって、ここでＰは保護基である、工程；
（ｂ）以下の構造：
【０１５４】
【化１０８】
2006507233.tif 000049
【０１５５】
を有する三糖アクセプターを提供する工程であって、ここでｎは０〜８であり、Ｐは保護基である工程；
（ｃ）上記チオエチルドナーと上記三糖アクセプターとを、保護された六糖を生成する条件下で反応させ、その後、上記保護された六糖を、適切な条件下で脱保護して、ｎ−アルケニルフコシルＧＭ１グリコシドを生成する工程、
を包含する。
【０１５６】
本発明のなお別の局面において、Ｇｌｏｂｏ−Ｈの新規な誘導体、およびその合成のための新規な一般的合成方法論が提供される。そのＧｌｏｂｏ−Ｈの誘導体は、以下に示される：
【０１５７】
【化１０９】
2006507233.tif 000050
【０１５８】
ここでＲ’の各存在は、水素または保護基であり、ここでＲ狽ヘ水素または窒素保護基であり；ここでＲは、水素、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルケニル（ここでそのアルケニル部分は、４以上の炭素を有する）；−ＮＨＲ”’（ここでＲ”’は、直接または架橋剤を介してかのいずれかでその構築物のＮまたは残りに連結された、タンパク質、ペプチドまたは脂質である）；アミノアシル部分；ペプチドのアミノアシル残基；タンパク質のアミノアシル残基であり；このアミノアシル部分または残基または−ＮＨＲ”’は、構造−（ＣＨ２）ｒを有するポリメチレン鎖を介してＯに連結される。ここで上記糖質部分がα−連結を介してＯに連結される場合、ｒは、２〜９の間の整数であるか、あるいは上記糖質部分が、β−連結を介してＯに連結される場合、ｒは、１〜９の整数であるか；またはＲが、以下の構造：
【０１５９】
【化１１０】
2006507233.tif 000051
【０１６０】
を有する部分で置換されている。
【０１６１】
特定の好ましい実施形態において、Ｒ’の各存在は、水素である。本発明の特定の他の好ましい実施形態において、Ｒはｎ−アルケニルであり、ｎ−アルケニルとしては、アリル、プロペニル、ブテニル、およびペンテニルが挙げられるが、これらに限定されない。特に好ましい実施形態において、Ｒは、ｎ−ペンテニルである。特定の他の好ましい実施形態において、Ｒは、上記のように、アミノアシル部分、ペプチドのアミノアシル残基、またはタンパク質のアミノアシル残基である。ここでｒは、好ましくは４である。なお他の好ましい実施形態において、上記の化合物が提供されるが、ただしその化合物は、糖スフィンゴ脂質構造ではない。
【０１６２】
実施例２において本明細書中により詳細に記載されるように、フコシルＧＭ１について記載されたものに対する類似の方法論は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈおよびその誘導体の合成について使用される。従って、本発明の別の局面において、Ｇｌｏｂｏ−Ｈおよびその誘導体の改善された合成のための方法が提供され、この方法は、以下の工程：
（ａ）以下の構造：
【０１６３】
【化１１１】
2006507233.tif 000052
【０１６４】
を有するチオエチルドナーを提供する工程であって、ここでＰは保護基である、工程；および
（ｂ）以下の構造：
【０１６５】
【化１１２】
2006507233.tif 000053
【０１６６】
を有する三糖アクセプターを提供する工程であって、ここでｎは０〜８であり、Ｐは保護基である工程；および
（ｃ）上記チオエチルドナーと上記三糖アクセプターとを、保護された六糖を生成する条件下で反応させ、その後、上記保護された六糖を、適切な条件下で脱保護して、ｎ−アルケニルＧｌｏｂｏ−Ｈを生成する工程、
を包含する。
【０１６７】
本発明のなお別の局面において、Ｇｂ３の新規な誘導体が提供され、その合成のための新規な一般的合成方法論は、本明細書中に記載される。Ｇｂ３は、糖スフィンゴ脂質であり、この脂質は、Ｇｂ３の三糖部分が、Ｇｌｏｂｏ−Ｈの還元末端における三糖部分と同一であるという点で、Ｇｌｏｂｏ−Ｈに構造的に関連している。Ｇｂ３は、バーキットリンパ腫細胞株、ヒト卵巣癌、ヒト奇形癌、ヒト胎生期癌、および他の型の腫瘍細胞（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ，Ｓ．；Ｓａｋａｍｏｔｏ，Ｈ．；Ｈｏｎｄａ，Ｔ．；Ａｂｅ，Ｈ．；Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｓ．；Ｉｋｅｇａｍｉ，Ｓ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９７，３８，８９６９−８９７２およびそこに引用される参考文献を参照のこと）において過剰発現されることが最近示された。結論として、Ｇｂ３は、新規なワクチン構築物を調製するという視点から理想的な標的として明らかになった。
【０１６８】
【化１１３】
2006507233.tif 000054
【０１６９】
本発明において提供されるＧｂ３の誘導体は、以下に示される：
【０１７０】
【化１１４】
2006507233.tif 000055
【０１７１】
ここでＲ’の各存在は、水素または保護基であり；ここでＲは、水素、置換もしくは非置換のアルキルもしくはアルケニル；グリコシド含有部分；グリコシド−リンカー部分；Ｒ”’、−ＮＨＲ”’；−（グリコシド−リンカー）−Ｒ”’（ここでＲ”’は、直接または架橋剤を介してかのいずれかで構築物の残りに連結された免疫原性キャリアである）；アミノ部分；ペプチドのアミノアシル残基；タンパク質のアミノアシル残基（このアミノアシル部分または残基または−ＮＨＲ”’は、構造−（ＣＨ２）ｒを有するポリメチレン鎖を介してＯに連結される。ここで上記糖質部分がα−連結を介してＯに連結される場合、ｒは、２〜９の間の整数であるか、代わりに上記糖質部分が、β−連結を介してＯに連結される場合、ｒは、１〜９の整数であるか；またはＲが、以下の構造：
【０１７２】
【化１１５】
2006507233.tif 000056
【０１７３】
を有する部分である。
【０１７４】
特定の好ましい実施形態において、Ｒ’の各存在は、水素である。本発明の特定の他の好ましい実施形態において、Ｒは、ｎ−アルケニルであり、ｎ−アルケニルとしては、アリル、プロペニル、ブテニル、およびペンテニルが挙げられるが、これらに限定されない。特定の例示的実施形態において、Ｒは、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特に好ましい実施形態において、Ｒは、ｎ−ペンテニルである。特定の他の好ましい実施形態において、Ｒは、上記のように、アミノアシル部分、ペプチドのアミノアシル残基、またはタンパク質のアミノアシル残基である。ここでｒは、好ましくは４である。特定の好ましい実施形態において、Ｒはグリコシドである。特に好ましい実施形態において、Ｒは単糖である。なお他の好ましい実施形態において、上記の化合物が提供されるが、ただしその化合物は、糖スフィンゴ脂質構造ではない。
【０１７５】
別の局面において、本発明は、Ｇｂ３  ｎ−アルケニル、糖アミノ酸、それらの誘導体および結合体を提供する。
【０１７６】
本発明の別の局面において、Ｇｂ３、およびその誘導体のための方法が提供され、上記の方法は、以下の工程を包含する：
（ａ）以下の構造：
【０１７７】
【化１１６】
2006507233.tif 000057
【０１７８】
を有するフルオロ単糖ドナーを提供する工程であって、
ここでＰの各存在は、独立して、適切な保護基である、工程；および
（ｂ）以下の構造：
【０１７９】
【化１１７】
2006507233.tif 000058
【０１８０】
を有する二糖アクセプターを提供する工程であって、ここでＰの各存在は、独立して、適切な保護基である、工程；
（ｃ）上記フルオロ単糖ドナーおよび上記二糖アクセプターとを、保護された三糖を生成する条件下で反応させる工程であって、該保護された三糖は、以下の構造：
【０１８１】
【化１１８】
2006507233.tif 000059
【０１８２】
を有する工程；
（ｄ）上記保護された三糖とアルケノールとを適切な条件下で反応させて、その後、保護された六糖を適切な条件下で脱保護して、ｎ−アルケニルＧｂ３を生成する工程。
【０１８３】
本発明の別の局面において、Ｇｂ３糖アミノ酸およびその誘導体の合成のための方法が提供され、この方法は、以下の工程を包含する：
（ａ）以下の構造：
【０１８４】
【化１１９】
2006507233.tif 000060
【０１８５】
を有するアルケニル三糖を提供する工程であって、ここでＰの各存在は、独立して、適切な保護基であり、ｎは１〜８である、工程；
（ｂ）以下の構造：
【０１８６】
【化１２０】
2006507233.tif 000061
【０１８７】
を有する適切に保護されたアルケニルグリシンを提供する工程であって、ここでＲ’およびＲ狽ヘ、適切な保護基であり；ｑ’は０〜８である、工程；
（ｃ）上記アルケニル三糖および上記アルケニルグリシンを、適切な触媒の存在下で適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【０１８８】
【化１２１】
2006507233.tif 000062
【０１８９】
を有するエナミドエステルを生成する工程、
（ｃ）上記エナミドエステルを適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【０１９０】
【化１２２】
2006507233.tif 000063
【０１９１】
を有する糖アミノ酸を生成する工程であって、
ここで、上記構造の各々についてｎは０〜８であり、ｑ’は、０〜８の整数であり、Ｐ、Ｒ’およびＲ”の各存在は、独立して適切な保護基である、工程。
【０１９２】
本明細書中に記載される方法の各々について、有機合成の分野において公知の保護基の完全な集積が利用され得、例えば、「Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ：Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｒｏｕｓｈ，Ｗ．Ｒ．およびＰｅａｒｓｏｎ，Ａ．Ｊ．，編，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ：１９９９；ならびに「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．およびＷｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：１９９９（これらの内容全体が、本明細書中に参考として援用される）に示されることが理解される。いくつかの単なる例示において、本明細書中で利用される適切な保護基としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：Ｂｎ（ベンジル）、ＴＩＰＳ（トリイソプロピルシリル）、およびＡｃ（アセチル）。本発明の好ましい実施形態において、上記チオエチルドナーおよび上記三糖アクセプターは、本明細書中に記載されるように、ＭｅＯＴｆ活性化の下で反応される。しかし、有機合成の分野において公知の種々の条件が、これらの部分のカップリングをもたらすために利用され得ることが、当業者によって理解される。
【０１９３】
本明細書中に提供される新規なｎ−アルケニル部分が、有用な化合物（例えば、アルキル誘導体および糖アミノ酸）またはその構築物（例えば、糖ペプチドおよび結合体化誘導体）を生成するためにその後改変され得ることもまた理解される。
【０１９４】
フコシルＧＭ１の第１の合成を提供することに加えて、上記のようなＧｂ３の合成およびＧｌｏｂｏ−Ｈのための改善された合成方法論は、より一般的な局面において、本発明は、複雑な糖質の合成のための新規な胞性方法論を提供し、この方法論は、以下の工程を包含する：
（１）還元末端アルケニル基を有する糖質アクセプターを提供する工程；（２）適切なドナー化合物を提供する工程；および（３）上記ドナーおよびアクセプターを適切な条件下でカップリングして、アルケニルグリコシドを生成する工程。この方法を使用すると、上記のように複雑な抗原性アルケニルグリコシドが提供され、その多くは、これまで、一度も提供されておらず、この抗原性アルケニルグリコシドは、次いで、本明細書中に記載されるように、結合体化され得るかまたはさらに反応されて、糖結合体および糖ペプチド構造を生成する。
【０１９５】
従って、一局面において、本発明は、以下の構造：
【０１９６】
【化１２３】
2006507233.tif 000064
【０１９７】
を有する新規な化合物および／または結合体を提供し、
ここでＬ１は、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；
Ｒは、水素；置換または非置換のアルキル；アルケニル；アリール；−ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、ここでＲ’またはＲ”は、各々独立して水素、保護基、置換または非置換のアルキル、リンカー、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ”’であり、ここでＲ”’は、Ｎまたは構築物の残りに直接もしくは架橋剤を介して連結された、免疫原性キャリア、ペプチド、タンパク質または脂質であり；
Ａは、以下の構造：
【０１９８】
【化１２４】
2006507233.tif 000065
【０１９９】
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０２００】
【化１２５】
2006507233.tif 000066
【０２０１】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【０２０２】
特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、構造−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であり、そしてｎの各存在について、ｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、構造−Ｏ−（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であり、ここでｎは０〜９であるか、グリコシド含有部分（例えば、単糖）である。特定の好ましい実施形態において、Ｒはアルキルであり、ｎは２であり、従って、本発明の化合物は、ｎ−ペンテニル部分を含む。特定の他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチド、または脂質である。本発明の特定の他の実施形態において、ＲはＮＨＲ”’であり、そのキャリアＲ”’はＫＬＨまたはウシ血清アルブミンである。本発明のなお他の実施形態において、ＲはＮＨＲ”’であり、そのキャリアＲ”’は、以下の構造：
【０２０３】
【化１２６】
2006507233.tif 000067
【０２０４】
を有する脂質であり、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の間の整数であり；Ｒｖは水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである。特定の例示的実施形態において、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、その脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリンである（例えば、ＰａｍＣｙｓ）。そのキャリアは、直接または架橋剤を介して構築物の残りに連結され得、従って、Ｒ”’は、タンパク質、ペプチド、および脂質、ならびに（架橋剤−タンパク質）、（架橋剤−ペプチド）および（架橋剤−脂質）部分を組み込むことが理解される。
【０２０５】
他の実施形態において、本発明の化合物は、糖アミノ酸であり、従って、Ｒは、ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、この化合物は、以下の構造：
【０２０６】
【化１２７】
2006507233.tif 000068
【０２０７】
を有する。
【０２０８】
特定の好ましい実施形態において、本発明の糖アミノ酸は、ｎ−ペンテニルグリコシドに由来し、従って、Ｌ１は、−Ｏ（ＣＨ２）３−である。特定の他の好ましい実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々、ベンジル、ｔ−ブチル、ＴＳＥ（２−（トリメチルシリルエチル）、Ａｃ（アセチル）、Ｂｏｃ（ｔ−ブトキシカルボニル）、ＣｂｚおよびＦｍｏｃ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）からなる群より独立して選択される保護基である。
【０２０９】
特定の実施形態において、本発明は、以下の構造：
【０２１０】
【化１２８】
2006507233.tif 000069
【０２１１】
を有する新規な化合物および／または結合体を提供し、
ここでＲは、水素；置換または非置換のアルキル；アルケニル；アリール；−ＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、ここでＲ’またはＲ”は、各々独立して水素、保護基、置換または非置換のアルキル、リンカー、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ”’であり、ここでＲ”’は、Ｎまたは構築物の残りに直接もしくは架橋剤のいずれかを介して連結された、免疫原性キャリア、タンパク質、ペプチド、または脂質であり；ここでｎは０〜９であり；ここでＡは、以下の構造：
【０２１２】
【化１２９】
2006507233.tif 000070
【０２１３】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０２１４】
【化１３０】
2006507233.tif 000071
【０２１５】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【０２１６】
特定の例示的実施形態において、ＡがＫＨ−１、Ｎ３、ｇｌｏｂｏ−Ｈ、グリコホリン、Ｔｎ、ＴＦ、ＳＴＮ、（２，３−ＳＴ）、２，６−ＳＴｎまたはＬｅｙであり、Ａがα−Ｏ−連結される場合、ｎは少なくとも１である。特定の実施形態において、Ａはα−連結またはβ−連結される。本発明の特定の好ましい実施形態において、Ｒはアリルであり、ｎは２であり、従って、本発明の化合物は、ｎ−ペンテニル部分である。特定の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチド、または脂質である。本発明の特定の他の実施形態において、ＲはＮＨＲ煤fであり、そのキャリアＲ煤fはＫＬＨまたはウシ血清アルブミンである。本発明のなお他の実施形態において、ＲはＮＨＲ煤fであり、そのキャリアＲ煤fは、以下の構造：
【０２１７】
【化１３１】
2006507233.tif 000072
【０２１８】
を有する脂質であり、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の間の整数であり；Ｒｖは水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである。特定の例示的実施形態において、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、その脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリン（例えば、ＰａｍＣｙｓ）である。そのタンパク質または脂質は、直接または架橋剤を介してかのいずれかでその構築物のＮまたは残りに連結され得、従って、Ｒ”’は、タンパク質、ペプチド、および脂質、ならびにならびに（架橋剤−タンパク質）、（架橋剤−ペプチド）および（架橋剤−脂質）部分を組み込むことが理解される。特定の好ましい実施形態において、その架橋剤は、ＭＭＣＣＨ（４−（マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシヒドラジド）である。
【０２１９】
なお他の実施形態において、本発明の化合物は、糖アミノ酸であり、従って、ＲはＣＨ２ＣＨ（ＣＯ２Ｒ’）（ＮＨＲ”）であり、この化合物は、以下の構造：
【０２２０】
【化１３２】
2006507233.tif 000073
【０２２１】
を有する。
【０２２２】
特定の好ましい実施形態において、本発明の糖アミノ酸は、ｎ−ペンテニルグリコシドに由来し、従って、０は３である。特定の他の好ましい実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々、ベンジル、ｔ−ブチル、ＴＳＥ、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｃｂｚおよびアセチルからなる群より独立して選択される保護基である。
【０２２３】
上記の化合物の各々について、特定の好ましい実施形態において、その糖質決定基は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、Ｎ３、グリコホリン、Ｔｎ、ＴＦ、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＬｅｙからなる群より選択される。他の好ましい実施形態において、その化合物の糖質決定基は、糖質決定基Ａの全てまたは一部として、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ決定基またはフコシルＧＭ１決定基を含む。
【０２２４】
本発明に適した架橋剤は、当該分野で広く公知であり（例えば、１９９４  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐｉｅｒｃｅｎｅｔ．ｃｏｍ／ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ／ｂｒｏｗｓｅ．ｃｆｍ？ｆｌｄＩＤ＝ｌ８４において利用可能な架橋剤を参照のこと）、これらの架橋剤としては、以下が挙げられる：ブロモ酢酸ＮＨＳエステル、６−（ヨードアセトアミド）カプロン酸ＮＨＳエステル、マレイミド酢酸ＮＨＳエステル、マレイミド安息香酸ＮＨＳエステルなど。特定の好ましい実施形態において、その架橋剤は、ＭＭＣＣＨ（４−（マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシヒドラジド）である。特定の他の好ましい実施形態において、その架橋剤は、ＭＢＳ（ｍ−マレイミド安息香酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル）である。
【０２２５】
上記のように、具体的に、ＭＢｒｌ抗原（ＧｌｏｂｏＨ）の第２の合成およびＧＭ１のフコシル化ガングリオシド（フコシルＧＭ１）およびＧｂ３の全体的な合成の状況において、その還元末端ｎ−アルケニル部分（具体的には、ｎ−ペンテニル）を組み込むことにより、特定の利点が提供される。第１に、そのアノマーｎ−ペンテニルグリコシド連結は、キャリアタンパク質ＫＬＨに対する免疫結合体化のための有効なリンカーとして働き、そしてまた、合成収束に関して、いくつかの利点を提供する。保護された糖質の状況において、そのｎ−アルケニル部分はまた、グリコシル化のドナーとして作用し得る（例えば、Ｆｒａｓｅｒ−Ｒｅｉｄら，ＳｙｎＬｅｔｔ，１９９２，９２７を参照のこと）。
【０２２６】
この状況において、本発明は、Ｇｌｏｂｏ−ＨおよびフコシルＧＭ１ならびに糖ペプチドおよびそれらの合成構築物を生成するためのそれらのその後の用途について以下により詳細に記載されるように、ｎ−アルキル糖アミノ酸の合成のための方法をさらに提供する。
【０２２７】
特定の実施形態において、これらの新規な糖アミノ酸の生成のための本発明の方法は、以下の工程を包含する：（１）本明細書中に記載されるようなアルケニルグリコシド部分を提供する工程；（２）上記アルケニルグリコシド部分を酸化条件下に供して、アルデヒドを生成する工程；（３）上記アルデヒドを、オレフィン化条件に供して、エナミドエステルを生成する工程；（４）上記の得られたエナミドエステルを水素化して、保護された糖アミノ酸を提供するに十分な条件下に、そのエナミドエステルを供する工程；および（５）上記保護された糖アミノ酸を、適切な条件下で脱保護して、所望の糖アミノ酸を生成する工程。
【０２２８】
特に、糖アミノ酸（その構造は、本明細書中に記載される）の合成のための方法が提供され、この方法は、以下の工程を包含する：
（ａ）以下の構造：
【０２２９】
【化１３３】
2006507233.tif 000074
【０２３０】
を有するアルケニルグリコシドを提供する工程；
（ｂ）上記アルケニルグリコシドを適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【０２３１】
【化１３４】
2006507233.tif 000075
【０２３２】
を有するエナミドエステルを生成する工程；
（ｃ）上記のエナミドエステルを適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【０２３３】
【化１３５】
2006507233.tif 000076
【０２３４】
を有する糖アミノ酸を生成する工程であって、
ここで上記構造の各々について、ｎは０〜８であり、Ａは、以下の構造：
【０２３５】
【化１３６】
2006507233.tif 000077
【０２３６】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０２３７】
【化１３７】
2006507233.tif 000078
【０２３８】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
そしてここで上記糖アミノ酸構造についてＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、リンカー、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ”’であり；ここでＲ”’は、直接的または架橋剤を介してかのいずれかでその構築物のＮまたは残りの部分に連結された免疫原性キャリア、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。好ましい実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々独立して水素または保護基である。特定の好ましい実施形態において、Ｒ”は、窒素保護基であり、これらとしては、アセチル、Ｆｍｏｃ、ＣｂｚまたはＢｏｃが挙げられるが、これらに限定されず、Ｒ’は、酸保護基（例えば、ベンジル、ｔ−ブチル、またはＴＳＥ）である。しかし、有機合成の分野において公知の種々の保護基が、本明細書中で言及されるように使用され得ることが理解される。
【０２３９】
特定の好ましい実施形態において、その糖質決定基は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。特定の他の好ましい実施形態において、その化合物の糖質決定基は、その糖質決定基Ａの全てまたは一部として、本明細書中に記載されるように、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ決定基またはフコシルＧＭ１決定基を含む。
【０２４０】
一般に、好ましい実施形態において、ｎ−アルケニルグリコシドを適切な条件下で反応させて、エナミドエステルを生成する工程は、ｎ−アルケニルグリコシドを第１に酸化条件下で、第２に塩基（例えば、テトラメチルグアニジン）およびホスホネートの存在下でオレフィン化条件下で反応させて、エナミドエステルを生成する工程を包含する。有機合成の分野で公知の酸化条件が使用され得、その条件としては、ＯｓＯ４および過ヨウ化物、またはＯｓＯ４およびＰｂ（ＯＡｃ）４が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、他の周知の塩基が、本発明において利用され得、それらとしては、リチウムｔ−ブトキシドまたはリチウムヘキサメチルジシリルアジドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４１】
特定の例示的実施形態において、上記エナミドエステルを適切な条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程は、上記エナミドエステルを水素化条件下で反応させ、その後、脱保護条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程を包含する。その使用される水素化条件は、非対称水素化条件であることが特に好ましい。好ましい実施形態において、非対称水素化は、本明細書中でより詳細に記載されるように、エチルＤｕＰＨＯＳ触媒前駆物質を利用することにより達成され得る（Ｂｕｒｋら，Ａｃｃｔｓ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．２０００，３３，３６３１；Ｂｕｒｋら，Ｐｕｒｅ＆Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．１９９６，６８，３７を参照のこと）。
【０２４２】
特定の他の実施形態において、これらの新規な糖アミノ酸の生成のための本発明の方法は、以下の工程を包含する：（ｉ）適切なアルケニルグリコシドを提供する工程；（ｉｉ）適切に保護されたアルケニルアミノ酸を提供する工程；（ｉｉｉ）そのアルケニルグリコシドとそのアルケニルアミノ酸とを、適切な触媒の存在下で適切な条件下で反応させて、糖エナミドエステルを生成する工程；および（ｉｖ）上記糖エナミドエステルを適切な条件に供して、糖アミノ酸を生成する工程。
【０２４３】
好ましい実施形態において、アルケニルグリコシドを適切な条件下で反応させて、エナミドエステルを生成する工程は、ｎ−アルケニルグリコシドと、適切な触媒の存在下で、適切に保護されたアルケニルアミノ酸とを交差複分解条件下で反応させる工程を包含する。特定の例示的実施形態において、その保護されたアルケニルアミノ酸は、以下の構造：
【０２４４】
【化１３８】
2006507233.tif 000079
【０２４５】
を有するアルケニルグリシンであり、
ここでＲ’およびＲ’’は、各々独立して、水素または保護基である。特定の実施形態において、上記エナミドエステルを適切な条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程は、上記エナミドエステルを水素化条件下で反応させ、その後脱保護条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程を包含する。特定の例示的実施形態において、糖アミノ酸の合成のための方法は、以下の工程を包含する：
（ａ）以下の構造：
【０２４６】
【化１３９】
2006507233.tif 000080
【０２４７】
を有するアルケニルグリコシドを提供する工程；
（ｂ）上記アルケニルグリコシド部分を適切な触媒の存在下で適切な条件下で適切なアルケニルグリシンと反応させて、以下の構造：
【０２４８】
【化１４０】
2006507233.tif 000081
【０２４９】
を有するエナミドエステルを生成する工程；
（ｃ）上記のエナミドエステルを適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【０２５０】
【化１４１】
2006507233.tif 000082
【０２５１】
を有する糖アミノ酸を生成する工程であって、
ここで上記構造の各々について、ｎは０〜８であり、
ｑ’は０〜８の整数であり；
Ａは、以下の構造：
【０２５２】
【化１４２】
2006507233.tif 000083
【０２５３】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０２５４】
【化１４３】
2006507233.tif 000084
【０２５５】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
そしてここで上記糖アミノ酸構造についてＲ’およびＲ”は、各々独立して、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、リンカー、アリール、ペプチド、タンパク質または脂質；Ｒ”’またはＮＨＲ”’であり；ここでＲ”’は、直接的または架橋剤を介してかのいずれかでその構築物の残りに連結された、免疫原性キャリア、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。好ましい実施形態において、Ｒ’およびＲ”は、各々独立して、水素または保護基である。特定の好ましい実施形態において、特定の好ましい実施形態において、Ｒ”は、窒素保護基であり、これらとしては、アセチル、Ｆｍｏｃ、ＣｂｚまたはＢｏｃが挙げられるが、これらに限定されず、Ｒ’は、酸保護基（例えば、ベンジル、ｔ−ブチル、またはＴＳＥ）である。特定の好ましい実施形態において、その糖質決定基は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ，２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。特定の他の好ましい実施形態において、その化合物の糖質決定基は、その糖質決定基Ａの全てまたは一部として、本明細書中に記載されるように、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ決定基またはフコシルＧＭ１決定基を含む。
【０２５６】
特定の好ましい実施形態において、その保護されたアルケニルグリシンは、以下の構造：
【０２５７】
【化１４４】
2006507233.tif 000085
【０２５８】
を有する。
【０２５９】
特定の他の実施形態において、その触媒は、以下からなる群：
【０２６０】
【化１４５】
2006507233.tif 000086
【０２６１】
より選択され、
ここでＣｙは、シクロヘキシル部分を表す（例えば、Ｆｕｒｓｔｎｅｒ，Ａ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．２０００，３９，３０１３−３０４３を参照のこと）。
【０２６２】
特定の例示的実施形態において、その触媒は、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ルテニウムＧｒｕｂｂｓ触媒：
【０２６３】
【化１４６】
2006507233.tif 000087
【０２６４】
である。
【０２６５】
さらに、特定の実施形態において、上記糖エナミドエステルを、適切な条件下で反応させて、糖アミノ酸を生成する工程は、触媒水素化を包含する。特定の例示的実施形態において、その水素化反応は、同時に、ｒｅｍｏｖｅｓ  そのアミノ酸部分上のその窒素保護基を除去し、従って、ペプチド構築物に組み込むために適した糖アミノ酸ユニットを生成する。
【０２６６】
本明細書中に記載されるように、糖アミノ酸を生成する能力は、最終的に、抗癌ワクチンとして本明細書中に記載される用途に望ましい、新規なクラスター化糖ペプチド、癌細胞の表面に一般に見いだされるモチーフ（ムチン様構造）の合成を可能にすることが理解される。例えば、免疫学的研究により、一般に、糖ペプチドにおける抗原のクラスター化は、単にグリコシル化されたペプチドを用いるよりも治療的に免疫応答を生じることを示す（Ｌｏ−Ｍａｎ，Ｒ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９９，５９，１５２０；Ｒｅｄｄｉｓｈら，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｊ．１９９７，１４，５４９を参照のこと）。
【０２６７】
今日まで、α−Ｏ−連結抗原のクラスター化は、同時係属中の米国特許出願第０９／０８３，７７６号および同第０９／２７６，５９５号（これらの内容全体は、本明細書中に参考として援用される）に記載されるように、伝統的なアリル連結を介してペプチド骨格にまたがって、同じ抗原を用いて達成されてきた。しかし、本発明は、クラスター化形式において同時に異なる抗原を有するペプチドを効率的に提供する。従って、一局面において、本発明は、多重抗原性糖ペプチドを提供し、この多重抗原性糖ペプチドは、２以上のアミノ酸から構成されるペプチド骨格を含み、ここで上記アミノ酸のうちの１以上は、独立して、以下の構造：
【０２６８】
【化１４７】
2006507233.tif 000088
【０２６９】
を有するグリコシド部分で置換されており、
ここでＬ１の各存在は、独立して、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【０２７０】
【化１４８】
2006507233.tif 000089
【０２７１】
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０２７２】
【化１４９】
2006507233.tif 000090
【０２７３】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【０２７４】
特定の実施形態において、Ｌ１の各存在が構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であって、ｎの各存在について、ｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、独立して、−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−（ここでｎは、０〜９である）またはグリコシド含有部分（例えば、単糖または二糖）である。
【０２７５】
上記の構造から、多重抗原性構造を提供することに加えて、本発明は、１以上の糖連結を有するクラスター化構造をさらに提供することが理解される。従って、本発明のなお別の局面において、糖連結クラスター化糖ペプチドが提供され、この糖ペプチドは、複数の抗原性構造を組み込み得るか、または同じ抗原性構築物の全てもまた組み込み得る。
【０２７６】
特定の実施形態において、多重抗原性糖ペプチドが提供され、この多重抗原性ペプチドは、少なくとも３つまでの糖アミノ酸から構成されるペプチド骨格を含み、ここで上記アミノ酸のうちの１以上は、以下の構造：
【０２７７】
【化１５０】
2006507233.tif 000091
【０２７８】
を有するｎ−アルキルグリコシド部分で置換され、
ここでＡの各存在は、独立して、以下の構造：
【０２７９】
【化１５１】
2006507233.tif 000092
【０２８０】
を有する糖質決定基であり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０２８１】
【化１５２】
2006507233.tif 000093
【０２８２】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である；
ここでｎの各存在は、独立して、０〜８である。特定の実施形態において、ｎの各存在について、ｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の他の実施形態において、ｎ−アルキルグリコシド部分の各存在は、独立して、その骨格のアミノ酸残基にα−連結またはβ−連結されるかのいずれかである。これらの本発明のクラスター化糖ペプチドは、ｎ−アルキルに限定されず、ここでｎは１以上であり；むしろ多重抗原性クラスター化糖ペプチドは、伝統的な直接的連結（ｎ＝０）を介して、ｎ−アルキル（例えば、ペンチル）を介して、またはそれらの任意の組み合わせを介して連結され得ることが理解される。好ましい実施形態において、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。
【０２８３】
上記に示される構造から、多重抗原性構造を提供することに加えて、本発明は、ｎ−アルキル連結を有するクラスター化構造をさらに提供することも理解される。従って、本発明のなお別の局面において、ｎ−アルキル連結された（ここでｎは、１以上である）クラスター化糖ペプチドが提供され、このクラスター化糖ペプチドは、多重抗原性構造を組み込み得るか、または同じ抗原性構造の全てを組み込み得る。
【０２８４】
上記に示される構造から、本発明は、ｎ−アルキル連結もしくはグリコシド含有連結、またはこれらの組み合わせを有するクラスター化構造をさらに提供することも理解される。従って、本発明のなお別の局面において、ｎ−アルキル連結された（ここでｎは、１以上である）そして／または単糖が連結されたクラスター化糖ペプチドが提供される。このクラスター化糖ペプチドは、多重抗原性構造を組み込み得るか、または同じ抗原性構造の全てを組み込み得る。
【０２８５】
特定の好ましい実施形態において、本発明の糖ペプチドの生成は、第１の糖アミノ酸を、脱保護剤で処理して、対応するカルボン酸を露出し、次いで、上記カルボン酸を適切な条件下でスペーサー部分および保護基とカップリングさせて、保護されたアミドを生成する工程を包含する。第２の糖アミノ酸は、次いで、標準的な条件（例えば、ＢＯＰ助触媒または他のペプチドカップリングの分野で公知のカップリング試薬）下でカップリングされ得、これらのカップリングは、所望の長さのペプチドが得られるまで、続けられ得る。当該分野で公知のペプチド合成の固相方法はまた、本発明の糖ペプチドを生成するために、本発明の方法において使用され得ることが理解される。
【０２８６】
特定の実施形態において、本発明の糖ペプチドは、以下の構造：
【０２８７】
【化１５３】
2006507233.tif 000094
【０２８８】
を有する構築物であり、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜２０の整数であり；
Ｒは水素または免疫原性キャリアであり；
そのリンカーは、遊離カルボン酸、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和のアルキル、脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリールの部分であり；ここでＲＤおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【０２８９】
【化１５４】
2006507233.tif 000095
【０２９０】
を有するグリコシド部分であり、
ここでＬ１の各存在は、独立して、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【０２９１】
【化１５５】
2006507233.tif 000096
【０２９２】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０２９３】
【化１５６】
2006507233.tif 000097
【０２９４】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただし該ｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；そしてここでｎの各存在は、０〜８であり；そしてここで各グリコシド部分は、アミノ酸にα−連結されるかまたはβ−連結されるかのいずれかである。特定の実施形態において、ＲＡおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである。なお他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。
【０２９５】
特定の実施形態において、その糖ペプチドは、適切な免疫原性キャリアにリンカーを介して結合され、その糖ペプチドは、以下の構造：
【０２９６】
【化１５７】
2006507233.tif 000098
【０２９７】
を有する。
【０２９８】
特定の実施形態において、上記の２つの構築物について、ｍは少なくとも４である。特定の他の実施形態において、ｍは少なくとも５である。なお他の実施形態において、ｍは少なくとも６である。
【０２９９】
本発明の糖ペプチドは、サイズにおいて限定されることは意図されず、特定の好ましい実施形態において、３以上の抗原を有する多重抗原性クラスターが望ましく、従って、本発明はまた、以下の構造：
【０３００】
【化１５８】
2006507233.tif 000099
【０３０１】
を有する構築物を提供し、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜１９の整数であり；
Ｒは水素または免疫原性キャリアであり；
そのリンカーは、遊離カルボン酸、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の部分、アルキル、脂肪族またはヘテロ脂肪族の部分であるか、または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリールの部分であり；ここでＲＤ、ＲＥおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【０３０２】
【化１５９】
2006507233.tif 000100
【０３０３】
を有するグリコシド部分であり、
ここでＬ１の各存在は、独立して、置換もしくは非置換の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分であり；
Ａの各存在は、独立して、以下の構造：
【０３０４】
【化１６０】
2006507233.tif 000101
【０３０５】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０３０６】
【化１６１】
2006507233.tif 000102
【０３０７】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基である。
【０３０８】
特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、独立して、構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であり（ここでｎの各存在は、独立して、０〜９である）、ｎの各存在について、ｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の他の実施形態において、そのグリコシド部分は、その骨格のアミノ酸残基にα−連結されているか、またはβ−連結されているかのいずれかである。特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、独立して、構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であるか（ここでｎの各存在は、独立して、０〜である）またはグリコシド含有部分である。特定の例示的実施形態において、Ｌ１の各存在において、単糖を含む。これらの本発明のクラスター化糖ペプチドは、ｎ−アルキルに限定されず、ここでｎは、１以上であり；むしろ多重抗原性クラスター化糖ペプチドは、伝統的な直接的連結（ｎ＝０）を介して、ｎ−アルキル（例えば、ペンチル）を介して、またはグリコシド部分を介して、あるいはそれらの任意の組み合わせを介して連結され得ることが理解される。他の実施形態において、Ａの各存在は、同じであってもよいが、ｎ−アルケニル（ｎは１を超える）連結またはグリコシド含有連結が、次いで利用される。好ましい実施形態において、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＴＦからなる群より選択される。特定の他の実施形態において、ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである。なお他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。
【０３０９】
特定の実施形態において、Ｌ１の各存在は、独立して、構造−Ｏ（ＣＨ２）ｎ−を有する部分であり、多重抗原性糖ペプチドは、以下の構造：
【０３１０】
【化１６２】
2006507233.tif 000103
【０３１１】
を有し、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜１９の整数であり；
Ｒは水素または免疫原性キャリアであり；
そのリンカーは、遊離カルボン酸、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分、または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリールの部分であり；ここでＲＤ、ＲＥおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【０３１２】
【化１６３】
2006507233.tif 000104
【０３１３】
を有するアルキルグリコシド部分であり、
ここでＡの各存在は、独立して、以下の構造：
【０３１４】
【化１６４】
2006507233.tif 000105
【０３１５】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０３１６】
【化１６５】
2006507233.tif 000106
【０３１７】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；そしてここでｎの各存在は、独立して、０〜８である。特定の実施形態において、ｎの各存在についてｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の他の実施形態において、ｎ−アルキルグリコシド部分の各存在は、独立して、その骨格のアミノ酸残基に、α−連結しているかまたはβ−連結しているかのいずれかである。特定の実施形態において、ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである。なお他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。
【０３１８】
特定の実施形態において、その糖ペプチドは、適切な免疫原性キャリアにリンカーを介して結合され、その糖ペプチドは、以下の構造：
【０３１９】
【化１６６】
2006507233.tif 000107
【０３２０】
を有し、
ここでｑは０または１であり；
ｍは１〜１９の整数であり；
そのリンカーは、遊離カルボン酸、−Ｏ−、（カルボキサミド）アルキルカルボキサミド、ＭＢＳ、１級カルボキサミド、モノアルキルカルボキサミドもしくはジアルキルカルボキサミド、モノアリールカルボキサミドもしくはジアリールカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキル−カルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（カルボキシ）アリールアルキルカルボキサミド、直鎖状もしくは分枝状の（アルコキシカルボニル）アルキルカルボキサミド、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリールカルボン酸エステルのいずれかであり；
そのキャリアは、免疫原性キャリアであり；
ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素、置換もしくは非置換の、直鎖状もしくは分枝状の、環式もしくは非環式の、飽和もしくは不飽和の脂肪族もしくはヘテロ脂肪族の部分、または置換もしくは非置換のアリールもしくはヘテロアリールの部分であり；ここでＲＤ、ＲＥおよびＲＦの各存在は、独立して、以下の構造：
【０３２１】
【化１６７】
2006507233.tif 000108
【０３２２】
を有するアルキルグリコシド部分であり、
ここでＡの各存在は、独立して、以下の構造：
【０３２３】
【化１６８】
2006507233.tif 000109
【０３２４】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、該ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０３２５】
【化１６９】
2006507233.tif 000110
【０３２６】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；そしてここでｎの各存在は、独立して、０〜８である。特定の実施形態において、ｎの各存在についてｎ＝０である場合、Ａの少なくとも１つの存在は、Ａの他の存在とは異なる構造を有する。特定の他の実施形態において、ｎ−アルキルグリコシド部分の各存在は、独立して、その骨格のアミノ酸残基に、α−連結しているかまたはβ−連結しているかのいずれかである。特定の実施形態において、ＲＡ、ＲＢおよびＲＣの各存在は、独立して、水素またはメチルである。なお他の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。
【０３２７】
特定の実施形態において、上記の３つの構築物について、ｍは、少なくとも３である。特定の他の実施形態において、ｍは、少なくとも４である。なお他の実施形態において、ｍは、少なくとも５である。なお他の実施形態において、ｍは、少なくとも６である。
【０３２８】
特定の実施形態において、上記の４つの構築物について、ｑは１であり、その架橋剤は、以下の構造：
【０３２９】
【化１７０】
2006507233.tif 000111
【０３３０】
を有するフラグメントであり、
それによって、上記構造は、マレイミド安息香酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルとリンカーとの結合体化の際に生成される。
【０３３１】
特定の実施形態において、上記の５つの構築物について、そのリンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−（脂肪族）ＮＲＪ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり；ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分であり、そしてここで各脂肪族またはヘテロ脂肪族の部分は、独立して、置換もしくは非置換、直鎖状もしくは分枝状、環式もしくは非環式である。
【０３３２】
特定の実施形態において、上記の５つの構築物について、そのリンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ−、−（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＩ−、−Ｏ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり；ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分である。
【０３３３】
特定の実施形態において、上記の５つの構築物について、Ａの各存在は、独立して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、フコシルＧＭ１、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｌｅｙ、Ｎ３、Ｔｎ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３またはＴＦからなる群より選択される。
【０３３４】
特定の例示的実施形態において、本発明は、以下の構造を有する新規なトリマー抗原性化合物を生成するために、３つのＧｂ３の存在を組み込む新規なトリマー抗原性糖ペプチドを提供する：
【０３３５】
【化１７１】
2006507233.tif 000112
【０３３６】
ここでＲｘの各存在は、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチド、または脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は、３である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、RはＫＬＨ、ウシ血清アルブミンまたはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数である。特定の実施形態において、ｔは３であり、ｖは１である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素である。特定の例示的実施形態において、ｎおよびｑは、各々０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３３７】
特定の例示的実施形態において、本発明は、以下の構造を有する新規なトリマー抗原性化合物を生成するために、Ｇｂの３つの存在を組み込む新規なトリマー抗原性糖ペプチドを提供し：
【０３３８】
【化１７２】
2006507233.tif 000113
【０３３９】
ここでＲｘおよびＲｙは、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は０である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、Ｒは、ＫＬＨ，ウシ血清アルブミン、またはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素であり、Ｒｙの各存在はＡｃである。特定の例示的実施形態において、ｎおよびｑは、各々０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３４０】
特定の例示的実施形態において、本発明は、以下の構造を有する新規なトリマー抗原性化合物を生成するために、ＴＦ、Ｌｅｙ、およびＴｎを組み込む新規なトリマー抗原性糖ペプチドを提供し：
【０３４１】
【化１７３】
2006507233.tif 000114
【０３４２】
ここでＲｘおよびＲｙは、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は０である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、Ｒは、ＫＬＨ、ウシ血清アルブミン、またはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の例示的実施形態において、ｔは３であり、ｖは１である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素であり、Ｒｙの各存在はＡｃである。特定の例示的実施形態において、ｎおよびｑは、各々０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々独立して、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３４３】
特定の他の例示的実施形態において、本発明は、以下により詳細に記載される、新規なトリマー抗原性化合物を生成するために、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、Ｌｅｙ、およびＴｎを組み込む新規なトリマー抗原性糖ペプチドを提供する。特定の他の例示的実施形態において、その多重抗原性糖ペプチドは、以下の構造：
【０３４４】
【化１７４】
2006507233.tif 000115
【０３４５】
を有し、
ここでＲｘおよびＲｙの各存在は、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は３である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、Ｒは、ＫＬＨ、ウシ血清アルブミン、またはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の例示的実施形態において、ｔは３であり、ｖは１である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素であり、Ｒｙの各存在はＡｃである。特定の例示的実施形態において、ｎは３であり、ｑは０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３４６】
特定の他の例示的実施形態において、本発明は、以下により詳細に記載される、新規なペンタマー抗原性化合物を生成するために、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、Ｌｅｙ、ＳＴｎ、ＴＦおよびＴｎを組み込む新規なペンタマー抗原性糖ペプチドを提供する。特定の他の例示的実施形態において、その多重抗原性糖ペプチドは、以下の構造：
【０３４７】
【化１７５】
2006507233.tif 000116
【０３４８】
を有し、
ここでＲｘおよびＲｙの各存在は、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は３である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、Ｒは、ＫＬＨ、ウシ血清アルブミン、またはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の例示的実施形態において、ｔは３であり、ｖは１である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素であり、Ｒｙの各存在はＡｃである。特定の例示的実施形態において、ｎは３であり、ｑは０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３４９】
特定の実施形態において、上記の５つの構築物の各々について、そのリンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−（脂肪族）ＮＲＪ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状の歩きしもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり；ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分であり、そしてここで各脂肪族またはヘテロ脂肪族の部分は、独立して、置換もしくは非置換、直鎖状もしくは分枝状、環式もしくは非環式である。
【０３５０】
特定の実施形態において、上記の５つの構築物の各々について、そのリンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ−、−（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＩ−、−Ｏ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり；ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分である。
【０３５１】
特定の実施形態において、上記の５つの構築物について、ｑは１であり、その架橋剤は、以下の構造：
【０３５２】
【化１７６】
2006507233.tif 000117
【０３５３】
を有するフラグメントであり、
それによって上記構造は、マレイミド安息香酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルとリンカーとの結合体化の際に生成される。
【０３５４】
（薬学的組成物、構築物およびその使用）
上記のように、本発明は、新規な治療剤の開発において、特に完全に合成の癌ワクチンおよび／または治療剤のために有用な化合物および合成方法論を提供する。一般に、本明細書中で開示されるように調製される化合物および糖ペプチドは、タンパク質キャリアまたは脂質に結合体化されて、癌に罹患した被験体における癌の処置および／または予防（好ましくは、再発の予防）のために有用な糖結合体を生成し得る。さらに、本明細書中に開示されるように調製される糖結合体は、種々の腫瘍細胞と免疫反応性の抗体を誘導し得るワクチンとして、アジュバント治療において有用である。このようなアジュバント治療は、特定の癌の再発率を減少し得、および手術後の生存率を増大し得る。癌のために外科的に処置され、次いで、免疫の前に抗体を欠いていた患者において見出された細胞表面の分化抗原から調製されたワクチンで処置された患者に対する臨床試験により、疾患がない期間が非常に有意に増大することが観察され得る。Ｃｆ．Ｐ．Ｏ．Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎら，Ｊ  Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，１９９４，１２，１０３６。
【０３５５】
従って、本発明は、癌を処置するための、好ましくは、癌の再発を予防するための薬学的組成物を提供し、この組成物は、活性成分として、本明細書中に開示される本発明の化合物のいずれかを、必要に応じて、しかし代表的には、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、含む。本発明の薬学的組成物は、他の治療的に活性な成分（例えば、化学療法剤および／または待期的療法剤（ｐａｌｌｉａｔｉｖｅ））をさらに含み得る。本発明の目的で、用語「待期的」とは、疾患の症状および／または治療レジメンの副作用の寛解に焦点を当てているが、治癒的ではない処置をいう。例えば、待期的処置は、鎮痛剤、制吐剤、および抗疾患薬物を包含する。さらに、化学療法、放射線療法および手術は、全て、待期的に使用され得る（すなわち、治癒しなくても、症状を軽減するため；例えば、腫瘍の縮小および圧力、出血、疼痛および癌の他の症状の低下）。
【０３５６】
特定の実施形態において、処置の方法が提供され、この方法は、治療的有効量の本明細書中に開示される糖結合体のいずれか、必要に応じて、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、その被験体に投与する工程を包含する。この方法は、その癌が固形癌または上皮腫瘍である場合に適用され得る。上記で言及されるように、癌の処置のための（好ましくは、癌の再発の予防のための）方法、ならびにヒト被験体において抗体（ここでこの抗体は、ヒト腫瘍細胞と特異的に結合し得る）を誘導するための方法が提供され、この方法は、抗体を誘導するに有効な量の、上記で開示される糖結合体のいずれかを、被験体に投与する工程を包含する。特定の実施形態において、その糖質抗原は、直接または架橋剤を介してかのいずれかで、免疫原性キャリアに連結され、そのキャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、そのキャリアは、ウシ血清アルブミン、ポリリジンまたはＫＬＨである。特定の他の実施形態において、そのキャリアは、以下の構造：
【０３５７】
【化１７７】
2006507233.tif 000118
【０３５８】
を有する脂質であり、
ここでｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々独立して、約８〜２０の整数であり；Ｒｖは水素、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状の低級アルキルまたは置換もしくは非置換のフェニルである。特定の例示的実施形態において、ｍ’、ｎ’およびｐ’は、各々１４であり、その脂質は、トリパルミトイル−Ｓ−グリセリルシステイニルセリン（例えば、ＰａｍＣｙｓ）である。
【０３５９】
特定の他の実施形態において、この方法は、免疫原性キャリアと組み合わせて、必要に応じて、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて、本明細書中に開示される化合物および／または糖ペプチドのいずれかの治療有効量を被験体に投与する工程を包含する。具体的には、特定の例示的実施形態において、本発明は、免疫原性キャリアに結合体化された糖質抗原を投与する工程を包含する。特定の実施形態において、この方法は、結合体化されていない糖質抗原および免疫原性キャリアを投与する工程を包含する。むしろ、それらは、同時に、または連続的に、別個の実体として、投与され得る。特定の他の例示的実施形態において、この方法は、免疫原性キャリアに結合体化された本発明の糖ペプチドを投与する工程を包含する。特定の実施形態において、この方法は、免疫原性キャリアに結合体化されていない本発明の糖ペプチドを投与する工程を包含する。むしろ、その糖ペプチドおよび免疫原性キャリアは、同時に、または連続的に、別個の実体として投与される。特定の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたえは脂質である。特定の例示的実施形態において、そのキャリアは、ウシ血清アルブミン、ポリリジンまたはＫＬＨである。特定の他の実施形態において、そのキャリアは、ＰａｍＣｙｓである。本発明の目的のために、化合物／糖ペプチドおよびキャリアは、それらが、（ｉ）その化合物／糖ペプチドおよびキャリアを含む１つの組成物として、（ｉｉ）２つの別個の組成物として、投与されるか、または（ｉｉｉ）有効な結果が、両方の化合物／糖ペプチドおよびキャリアが、１つの組成物として投与される場合に得られる効果と等しい、十分短い時間内に別個の経路により送達される場合に、同時に投与されるといわれる。
【０３６０】
なお他の実施形態において、本発明は、抗体を誘導する関連方法を提供し、この方法は、免疫学的アジュバント、または免疫学的アジュバントの組み合わせを同時投与する工程をさらに包含する。具体的に、少なくとも２つの異なる抗原性糖質ドメインを含む多重抗原性糖ペプチドが使用される場合、少なくとも２つの異なる型の抗体を誘導し得ることが可能である。特定の実施形態において、ペプチド骨格に存在する各糖質抗原は、その等質抗原に特異的な抗体型を誘起する。特定の他の実施形態において、生成される抗体は、糖ペプチドに存在する少なくとも１つの糖質抗原を認識する抗体である。特定の実施形態において、本発明の多重抗原性糖ペプチドは、被験体に投与される場合、糖ペプチド骨格に存在する糖質抗原のサブセットに対する抗体を生成する。特定の実施形態において、生成される抗体のいくつかは、その糖ペプチドの２以上の糖質抗原を認識する。特定の例示的実施形態において、本発明の糖ペプチドは、腫瘍細胞上で見出される、糖質ドメイン、またはその短縮化もしくは伸長化バージョンを含む。
【０３６１】
特定の例示的実施形態において、その多重抗原性糖ペプチドは、以下の構造：
【０３６２】
【化１７８】
2006507233.tif 000119
【０３６３】
を有するトリマー構築物であり、
ここでＲｘおよびＲｙの各存在は、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は０である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、Ｒは、ＫＬＨ、ウシ血清アルブミン、またはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の実施形態において、ｔは３であり、ｖは１である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素であり、Ｒｙの各存在はＡｃである。特定の例示的実施形態において、ｎおよびｑは、各々０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインのうちの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３６４】
特定の他の例示的実施形態において、その多重抗原性糖ペプチドは、以下の構造：
【０３６５】
【化１７９】
2006507233.tif 000120
【０３６６】
を有し、
ここでＲｘおよびＲｙの各存在は、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は３である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、Ｒは、ＫＬＨ、ウシ血清アルブミン、またはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の実施形態において、ｔは３であり、ｖは１である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素であり、Ｒｙの各存在はＡｃである。特定の例示的実施形態において、ｎは３であり、ｑは０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインのうちの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３６７】
特定の他の例示的実施形態において、その多重抗原性糖ペプチドは、以下の構造：
【０３６８】
【化１８０】
2006507233.tif 000121
【０３６９】
を有し、
ここでＲｘおよびＲｙの各存在は、独立して、水素または保護基であり；ｑは０または１であり；ｎの各存在は、独立して、０〜９の整数であり；Ｒは水素または免疫原性キャリアである。特定の例示的実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質である。特定の実施形態において、ｎの各存在は３である。特定の他の実施形態において、ｑは０である。なお他の実施形態において、Ｒは、ＫＬＨ、ウシ血清アルブミン、またはポリリジンである。なお他の実施形態において、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の例示的実施形態において、ｔは３であり、ｖは１である。特定の例示的実施形態において、Ｒｘの各存在は水素であり、Ｒｙの各存在はＡｃである。特定の例示的実施形態において、ｎは３であり、ｑは０であり、ＲはＫＬＨであり、そのリンカーは、構造−ＮＨ（ＣＨ２）ｔＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｖＳ−を有する部分であり、ここでｔおよびｖは、各々、１〜６の整数である。特定の実施形態において、その糖質ドメインのうちの１以上は、ペプチド骨格にα−連結されている。
【０３７０】
特定の実施形態において、上記の３つの構築物の各々について、そのリンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−（脂肪族）ＮＲＪ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ−、−Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ−、−ＮＲＧ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−Ｏ（脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、Ｏ（ヘテロ脂肪族）ＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状の歩きしもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり；ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分であり、そしてここで各脂肪族またはヘテロ脂肪族の部分は、独立して、置換もしくは非置換、直鎖状もしくは分枝状、環式もしくは非環式である。
【０３７１】
特定の実施形態において、上記の３つの構築物の各々について、そのリンカーは、−Ｏ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ−、−ＮＲＧ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ（Ｃ＝Ｏ）（ＣＲＨＲＩ）ｋＳ−、−ＮＲＧ−、−（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＩ−、−Ｏ（ＣＲＨＲＩ）ｋＮＲＪ、２〜約２０個のヒドロキシアシル残基を含むオリゴエステルフラグメント、２〜約２０個のアミノアシル残基を含むペプチドフラグメント、または直鎖状もしくは分枝状のアルキルもしくはアリールカルボン酸エステルであり、ここでｋの各存在は、独立して、１〜５であり；ここでＲＧ、ＲＨ、ＲＩまたはＲＪの各存在は、独立して、水素、直鎖状もしくは分枝状の、置換もしくは非置換の、環式もしくは非環式の部分、あるいは置換もしくは非置換のアリール部分である。
【０３７２】
特定の実施形態において、上記の３つの構築物の各々について、ｑは１であり、その架橋剤は、以下の構造：
【０３７３】
【化１８１】
2006507233.tif 000122
【０３７４】
を有するフラグメントであり、
それによって上記構造は、マレイミド安息香酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルとリンカーとの結合体化の際に生成される。
【０３７５】
特定の実施形態において、そのアジュバントは、サポニンアジュバントである（例えば、Ｍａｒｃｉａｎｉら，Ｖａｃｃｉｎｅ，２０００，１８，３１４１，米国特許第６，０８０，７２５号および同第５，９７７，０８１号（これらの内容全体は、本明細書中に参考として援用される）。好ましいサポニンアジュバントの一例としては、選択された天然サポニンを改変することによって得られる半合成アジュバントであるＧＰＩ−０１００、（Ｇａｌｅｎｉｃａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ，ＭＤ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３７６】
【化１８２】
2006507233.tif 000123
【０３７７】
Ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓｏｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａから単離されたサポニンは、２つのアシル部分、ノルモノテルペンカルボン酸およびノルモノテルペンカルボン酸グリコシドを含み、これらは、Ｃ−２８位において結合されたフコシル残基に直鎖状に連結される。これらの親油性アシル基は、これらのサポニンの毒性および外因性抗原に対してそれらの細胞傷害性Ｔ細胞を刺激する能力を担い得ると仮定されてきた。フコシル残基とアシル基との間の結合は不安定であり、細胞媒介性免疫応答を刺激するサポニンの能力の喪失に付随して、温和な条件（ｐＨ≧６）下で加水分解する。それらのサポニン前駆物質とは異なり、ＧＰＩ−０１００アジュバントは、サポニンのグルコン酸残基において安定な非毒性親油性部分を含む。これらの半合成アジュバントを調製するための方法は、当該分野で周知である。例えば、ＧＰＩ−０１００アジュバントは、ｑｕｉｌｌａｊａ  ｓａｐｏｎｉｎｓ（これは、市販されている）を塩基性条件下で加水分解して、対応する脱アシル化生成物を得ることによって調製され得る。その脱アシル化中間体を、次いで、標準的なカルボン酸部分活性化方法論を使用して、適切なアミン試薬と反応させて、所望の化合物を得る。広範な手順が、サポニン化合物を抽出する（ｅｘｔｒａｔｉｎｇ）ために有効である。それらは、以下のように一般化される（ｉ）疎水性有機溶媒（例えば、石油エーテル）での誘起物質の脱脂；（ｉｉ）適切なアルコール（例えば、メタノールまたはエタノール）またはアルコール−水混合物での抽出；（ｉｉｉ）カリノール溶媒のエバポレーション；および（ｉｖ）水と水で飽和させたｎ−ブタノールとの間での乾燥アルコール抽出物の分配、続いて、適切な溶媒（例えば、ジエチルエーテル）を用いる、粗サポニンのｎ−ブタノール／水からの沈澱。サポニン抽出物の精製は、複数の分離工程を要し得る。例えば、予備分画が、より洗練されたクロマトグラフィー技術（例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、液滴カウンター−電流液体クロマトグラフィー（ＤＣＣＣ）または遠心分離液体クロマトグラフィー（ＲＬＣＣ））と組み合わせて、従来の開放系カラムクロマトグラフィーまたはシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーを用いて行われ得る。これらの技術を分取用ＴＬＣ統合すると、代表的には、分離され、精製されたサポニンが得られる。
【０３７８】
特定の他の好ましい実施形態において、そのアジュバントは、細菌またはリポソームである。特定の例において、アジュバントとしては、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｍｉｎｎｅｓｏｔａ細胞、カルメット−ゲラン杆菌またはＱＳ２１が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３７９】
本発明の化合物の治療的用量の大きさは、処置される状態の性質および重篤度ならびに特定の化合物およびその投与経路にともなって変化することが理解される。一般に、抗癌活性の一日用量範囲は、哺乳動物において０．０００１〜１．０ｍｇ／体重１ｋｇの範囲にあるが、本発明は、この範囲によって制限されることは意図されない。
【０３８０】
任意の適切な投与経路は、哺乳動物、特に、ヒトに、有効投薬量の、本明細書中に開示される化合物を提供するために使用され得、例えば、経口経路、直腸経路、局所的経路、非経口経路、眼科的経路、肺経路、経鼻経路などが使用され得る。投薬形態としては、錠剤、トローチ剤、分散剤、懸濁剤、液剤、カプセル剤、クリーム剤、軟膏、エアロゾルなどが挙げられる。好ましい実施形態において、その有効投薬量は、シリンジ注射を使用して使用される。
【０３８１】
本発明の組成物は、経口投与、直腸投与、局所的投与（経皮デバイス、エアロゾル、クリーム剤、軟膏、ローション剤およびダスティング散剤（ｄｕｓｔｉｎｇ  ｐｏｗｄｅｒｓ）が挙げられる）、非経口投与（皮下投与、筋肉内投与、および静脈内投与が挙げられる）、眼科的投与（眼への投与）、肺投与（経鼻的吸入または経口吸入）または経鼻的投与に適切な組成物を含む。任意の所定の場合において最も適切な経路は、主に、処置される状態の性質および重篤度ならびに活性成分の性質に依存する。それらは、便宜的に、単位投薬形態において提示され得、薬学分野で周知の方法のいずれかによって調製され得る。
【０３８２】
経口投薬形態を調製するにあたって、通常でない薬学的媒体のいずれかが、使用され得、例えば、水、グリコール、油、アルコール、矯味矯臭剤、保存剤、着色剤などが、経口液体調製物（例えば、懸濁液、エリキシル剤および液剤）の場合に使用され得る；またはキャリア（例えば、デンプン、糖、微結晶性セルロース、希釈剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤など）が、経口固体調製物の場合において、例えば、散剤、カプセル剤および錠剤のような、液体経口調製物より好ましい。所望される場合、カプセル剤は、標準的な水性技術または非水性技術によってコーティングされ得る。上記の投与形態に加えて、本発明の化合物は、制御放出手段および制御放出デバイスによって投与され得る。
【０３８３】
経口投与に適切な本発明の薬学的組成物は、カプセル剤、カシェ剤または錠剤（各々、所定の量の活性成分を、粉末形態または顆粒形態において、あるいは水性液体もしくは非水性液体中の液剤または懸濁液として、あるいは水中油型エマルジョンもしくは油中水型エマルジョンにおいて含む）のような別個の単位として調製され得る。このような組成物は、薬学分野で公知の方法のいずれかによって調製され得る。一般に、組成物は、活性成分と液体キャリア、微細に分けられた固体キャリアを、またはその両方とを均質かつ密に混合し、次いで、必要な場合、その生成物を所望の形態に形作るすることによって調製される。例えば、錠剤は、必要に応じて、１以上の補助成分とともに、圧縮または成形することによって調製され得る。圧縮された錠剤は、必要に応じて、結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤または界面活性剤もしくは分散剤と混合した、自由流動形態（例えば、散剤または顆粒）の活性成分を適切な機械中で圧縮することによって調製され得る。成形された錠剤は、不活性希釈剤で水分を与えられた粉末化化合物の混合物を、適切な機械中で成形されることによって生成され得る。
【０３８４】
しかし、最も適切な投与経路は、主に、処置される状態の性質および重篤度ならびに活性成分の性質に依存することが、当業者により理解される。上記で議論されるように、本発明の治療剤は、便宜的に単位投薬形態において提示され得るか、または薬学分野において周知の方法のいずれかによって調製され得る。
【０３８５】
上記で議論されるように、本発明の一実施形態において、本発明のｎ−アルケニルグリコシドは、直接または架橋剤を介してかのいずれかで、適切なキャリア（例えば、ＫＬＨ）に結合体化されて、合成腫瘍抗原が生成され得る。一般に、使用され得る代表的な結合体化ストラテジーは、糖アルデヒドにおいて終結するグリコシドの、おそらく露出されたリジンのε−アミノ酸残基における意図されるタンパク質キャリア、または脂質との還元的カップリングを含む。（Ｍ．Ａ．Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ；Ｌ．Ｄ．Ｈａｌｌ，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９８０，７８，Ｃ１；Ｒ．Ｖ．Ｌｅｍｉｅｕｘ  Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．１９７８，７，４２３）。
【０３８６】
従って、別の局面において、本発明は、合成構築物を提供し、それによって、本明細書中に記載されるように、新規な抗原性構造が、免疫原性キャリア（例えば、タンパク質、ペプチドまたは脂質）に結合体化される。ことは、当業者によってやはり理解される。ｔｈａｔ，合成構築物の生成において、１つを超えるｎ−アルケニル部分または糖ペプチド部分は、最終的に、キャリアタンパク質に結合体化されて、合成ワクチンが生成され得る。従って、本明細書中に提供される結合体化糖ペプチド構造に加えて、以下に記載される一般的構造を有する構築物もまた、提供され：
【０３８７】
【化１８３】
2006507233.tif 000124
【０３８８】
ここでＡは、以下の構造：
【０３８９】
【化１８４】
2006507233.tif 000125
【０３９０】
を有する糖質ドメインであり、
ここでａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ、ｘ、ｙおよびｚは、独立して、０、１、２または３であり、ただし、ｘ、ｙおよびｚの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、ｂおよびｃの合計は１または２であり、ｄおよびｆの合計は１または２であり、ｇおよびｉの合計は１または２であり、かつただしｘ、ｙおよびｚは、同時には０でなく；ここでＲ０は水素、直鎖状または分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉ、ＮＨＲｉ、ＮＨＣＯＲｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲｉの各存在は、独立して、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、アシル基、アリールアルキル基もしくはアリール基あるいは以下の構造：
【０３９１】
【化１８５】
2006507233.tif 000126
【０３９２】
を有する糖部分であり、
ここでＹおよびＺは、独立して、ＮＨまたはＯであり；ここでｋ、ｌ、ｒ、ｓ、ｔ、ｕ、ｖおよびｗは、各々独立して、０、１または２であり；ただしｖおよびｗの括弧内の構造は、フラノース部分またはピラノース部分を表し、１およびｋの合計は１または２であり、ｓおよびｕの合計は１または２であり、かつただしｖおよびｗは、同時には０でなく；ここでＲ’０は、水素、直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５の各存在は、独立して、水素、ＯＨ、ＯＲｉｉｉ、ＮＨＲｉｉｉ、ＮＨＣＯＲｉｉｉ、Ｆ、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＲｉｉｉ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキルもしくはトリヒドロキシアルキル、モノアシルオキシアルキル、ジアシルオキシアルキルもしくはトリアシルオキシアルキル、アリールアルキル基またはアリール基であり；ここでＲ１６の各存在は、水素、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲｉｉ、ＣＯＮＨＲｉｉ、置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉｉの各存在は、水素、ＣＨＯ、ＣＯＯＲｉｖ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アシル、アリールアルキルまたはアリール基であり；ここでＲｉｉおよびＲｉｖの各存在は、それぞれ独立して、Ｈ、または置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状のアルキル、アリールアルキルまたはアリール基であり；
ここでｍは０〜８であり；ここでそのキャリアは、免疫原性キャリアであり、ここでそのキャリアは、直接または架橋剤を介して連結され；そしてここでｔ’は少なくとも１である。特定の好ましい実施形態において、ｎは４である。特定の実施形態において、その免疫原性キャリアは、タンパク質、ペプチドまたは脂質であり、ウシ血清アルブミン、ＫＬＨおよびＰａｍＣｙｓが挙げられるが、これらに限定されない。特定の例示的実施形態において、ｔ’は、２０〜６００の範囲である。なお他の好ましい実施形態において、その糖質決定基は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、ＫＨ−１、グリコホリン、ＳＴＮ、（２，３）ＳＴ、Ｎ３、Ｔｎ、ＴＦ、２，６−ＳＴｎ、Ｇｂ３およびＬｅｙからなる群より選択される。なお他の好ましい実施形態において、その糖質決定基は、フコシルＧＭ１であり、これは、上記のような構造を有し、図１に示される。特定の実施形態において、そのアルキルグリコシド部分のうちの１以上は、そのキャリアに存在する−ＮＨ−部分を介して、そのキャリアに結合される。
【０３９３】
生成される特定の本発明の化合物は、アルケニル連結において終結するので、本発明に従う代表的なプロトコルにおいて、アルデヒドへの変換が、まず必要とされることが理解される。従って、１つの例示的実施形態において、本発明の合成ｇｌｏｂｏ−Ｈ腫瘍抗原は、ｎ−アルケニルｇｌｏｂｏ−Ｈグリコシドから調製される。実施例２において記載されるように、この手順は、オゾン分解の場合、そのｎ−アルケニルｇｌｏｂｏ−Ｈグリコシドを酸化条件に曝し、その後、還元的ワークアップに曝して、アルデヒド中間体を生成して、ワクチン糖結合体を生成することを包含する。その後の加水分解糖質分析は、実施例２に記載されるように、キャリアタンパク質の約３５０の糖質残基／分子を明らかにする。
【０３９４】
なお別の例において、フコシルＧＭ１−ＫＬＨ糖結合体は、実施例１において議論されるように、本発明の方法に従って生成される。顕著には、結合体化研究の前に、合成ｎ−ペンテニルフコシルＧＭ１は、ＥＬＩＳＡおよび免疫薄層クロマトグラフィーアッセイにおいて、モノクローナル抗体Ｆ１２に結合することが示された。阻害研究により、Ｆ１２を抗体と予めインキュベートすると、天然のフコシルＧＭ１とその抗体との反応性そ完全に阻害することが明らかになった。明らかに、その合成フコシルＧＭ１ペンテニルグリコシドは、Ｆ１２がＳＣＬＣ細胞上で反応する抗原性エピトープを提供する。
【０３９５】
さらに、一旦合成ワクチンが得られ、特徴付けされると、マウス免疫学的研究が行われて、本明細書中の実施例６に記載されるように、新規な腫瘍ワクチンの効力および／または特異性が評価され得る。
【０３９６】
（等価物）
以下に示される代表例は、本発明の例示に役立つことが意図されるのであって、本発明の範囲を限定するとは意図されず、限定されると解釈されるべきではない。実際に、本発明の種々の改変および多くのさらなるその実施形態が、本明細書中に示され、記載されるものに加えて、以下の実施例および本明細書中に引用される科学文献および特許文献を含め、本文書の全体の内容から当業者に明らかになる。単なる１つの例示的実施例において、保護基は、本明細書中に記載されるように、糖質ドメインおよび合成結合体の合成において役割を果たす；しかし、本発明は、当該分野で公知の種々の代替的保護基の使用を包含することが当業者によって理解される。以下の実施例を含む開示において使用されるそれらの保護基は、単に例示に過ぎない。
【０３９７】
それらの引用される参考文献の内容は、本明細書中に参考として援用され、当該分野の技術水準を示すのに役立てられることがさらに理解されるべきである。以下の実施例は、その種々の実施形態およびその等価物において本発明の実施に適合され得る、重要なさらなる情報、例示およびガイダンスを含む。
【実施例】
【０３９８】
Ａ．実施例１：フコシルＧＭ１ペンテニルグリコシドの合成
１）合成の議論：
上記で議論されるように、本発明の一局面において、フコシルＧＭ１ペンテニルグリコシドの合成が提供される。本発明の一実施形態において、これは、ＭＢｒｌ抗原、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ（ｓｅｅ，Ｐａｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６，１１８，１１４８８を参照のこと）の合成において使用される方法論と同様に達成される。例えば、図２に示されるように、既知の保護された乳酸誘導体（ｌａｃｔａｌ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）２から出発するＡＢＣ三糖の合成が、まず行われる（Ｋｗｏｎ，Ｏ．；Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ．Ｓ．Ｊ．、Ｊ  Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９８，１２０，１５８８）。２におけるＣ３’赤道結合ヒドロキシ（ｅｑｕａｔｏｒｉａｌ  ｈｙｄｒｏｘｙｌ）の選択的シアル化を、ホスファイトドナー３を用いて順調に進めて（Ｓｉｍら，Ｊ  Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９３，１１５，２２６０；Ｃｈａｐｐｅｌｌら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９７，５３，１１１０９）、観察可能なアイソマーとして、収率７５％でグリカル４を得た。さらに、低温で反応を行う必要があったので、プロピオニトリルを溶媒として使用した。溶媒としてのアセトニトリル中で高温を使用すると、減少したアノマー選択性、レジオ選択性、および低下した化合物収率を生じた。重要なＤＥＦ三糖を、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ合成（Ｐａｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６，１１８，１１４８８）に以前に記載されたように合成した。必須のチオエチルドナー５を図２に示す。以前の経験に基づくと、この特定のドナーは、「近位ヒドロキシル」指向性効果（アスタリスクを参照のこと）の厳密なガイダンスの下でスルホンアミドの関与を介するβ−グリコシド化に都合がよい（Ｐａｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６，１１８，１１４８８；Ｋｗｏｎら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９８，１２０，１５８８もまた参照のこと）ことが予測され、その結果により、この予測を確認した。「原則の証明」において施行される実験において、４の存在下で５と５．０当量のＭｅＯＴｆとの反応（Ｌｏｎｎ，Ｈ．Ｃａｒｂｏ．Ｒｅｓ．１９８５，１３４，１０５；Ｌｏｎｎ，Ｈ．Ｊ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．１９８７，６，３０１）により、図３に示されるように、２３％収率において所望される六糖６が与えられる。この化合物の直接的脱保護が、所望される化合物を得るために達成されなかったが、全体的な脱保護に適した六糖を見出す試みにおいて、還元末端グリカルの置換を検討した。このような置換はまた、タンパク質キャリアまたは脂質に対する結合体化を可能にするように修飾され得るリンカーとして潜在的に有用である。
【０３９９】
単なる一例において、ｎ−ペンテニルグリコシドの使用を検討した（ｎ−ペンテニルグリコシドの総説については、Ｆｒａｓｅｒ−Ｒｅｉｄら，Ｓｙｎｌｅｔｔ，１９９２，９２７；Ｕｄｏｄｏｎｇら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９３，１１５，７８８６；Ｍｅｒｒｉｔｔら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９４，１１６，８３３４；Ｆｒａｓｅｒ−Ｒｅｉｄら，１９９０，５５，６０６８；Ｍｏｏｔｏｏら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８８，１１０，２６６２；Ｍｏｏｔｏｏら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８９，１１１，８５４０およびこれらで引用される参考文献を参照のこと）。Ｎ−ペンテニルグリコシドは、一定範囲の反応条件および試薬に安定であるが、ハロゲン酸化剤を用いた処理によるグリコシド化反応のために容易に活性化される。それらの安定性およびそれらの活性化に必要とされる中性条件の結果として、ペンテニルグリコシドが、機構的研究および合成研究のための価値ある連結であることが実証された。さらに、末端ペンテニル基、またはより一般には、末端アルケニル基はまた、生体結合体化のための手がかりを提供し得る。従って、一実施形態において、グリカル６ａを、３，３−ジメチルジオキシランを用いた標準的手順下でのエポキシド化に供した（図３）。ペンテニルアルコールおよび無水塩化亜鉛との反応（Ｇｏｒｄｏｎら，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓ．１９９０，２０６，３６１）により、グリコシド７を６５％収率で得た。実際に、ペンテニルグリコシドを適所で用いると、７の全体的な脱保護が可能であった。図３に示す順序は、過酢酸化六糖ラクトン８を４６％収率で与えた（５工程）。ナトリウムメトキシドで酢酸を除去し、続いて得られたメチルエステルを鹸化すると、標的であるフコシルＧＭ１ペンテニルグリコシド，１ｂが得られた。構造１ｂの割り当ては、最終的な構造までの途中での中間体の特徴付けとともに、１ｂの１Ｈ  ＮＭＲおよび１３Ｃ  ＮＭＲ分析に基づいており、高分離能質量分析によって補助される。
【０４００】
なお別の実施形態において、前臨床的、かつ最終的には臨床評価のためのこのエピトープの有意な量を生成しようとする試みにおいて、グリカルよりもむしろ、そのアクセプターの還元末端においてグリコシドを利用する、より効率的な合成経路を開発した。図４に示されるように、ペンテニルラクトシドを、まず研究した。この目的で、ラクトースオクタアセテートを、既知のブロミド９に変換した（Ｒｅｉｔｈａｌ，Ｙ．  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９５２，７４，４２１０；Ｄａｓｇｕｐｔａら，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９９４，２６４，１５５）。炭酸銀による促進下でのこの化合物とペンテニルアルコールとの反応は、１００ｇスケールで、所望のペンテニルグリコシド１０を達成した（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚら，Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９９０，４３，６６５）。助触媒としての銀トリフレート（ｓｉｌｖｅｒ  ｔｒｉｆｌａｔｅ）を使用して９を生成する類似のカップリングにより、所望の生成物を１７％収率で得た。アセテートの除去により、ラクトシド１１を得た。繰り返すと、Ｃ３’およびＣ４’ヒドロキシル基を結合し、今度は、ジメチルケタール１２として結合した。この反応は、正確に行ったとき、少量の４，６−アセトニドの形成が付随した（Ｃａｔｅｌａｎｉら，Ｃａｒｂ．Ｒｅｓ．１９８８，１８２，２９７）。１２を過ベンジル化して、１３を得、続いて、アセトニドを酢酸水溶液で除去すると、所望のＡＢアクセプター１４が生じた。ホスファイトドナー３を使用するシアル化（図２）を、匹敵する収率で進め、三糖アクセプター１５を得た。
【０４０１】
最終的に、所望のフコシルＧＭ１に戻ると、ドナー５とペンテニルリンカーを含む２．０モル過剰のアクセプター１５とのカップリングを、ＭｅＯＴｆ促進（１．５当量×２）で進行させると、優れた収率で得られた（７０％；図５を参照のこと）。図４に示される同一条件下での全体的な脱保護により、特徴付けされた六糖１ｂを得た。
【０４０２】
その後、頭結合体を開発するという最終的な目的に注意を払った。合成物１ｂを、図６に示されるように、キャリアタンパク質ＫＬＨへの結合体化に供した。そのプロトコルは、オゾン分解で開始し、それによって、特徴付けられていないアルデヒド誘導体を生成した。この工程の次に、シアノ水素化ホウ素ナトリウムの作用で、還元的アミノ化を使用するＫＬＨへのカップリングを行った。おそらく、糖質のカップリングは、ＫＬＨにおけるリジン残基のε−アミノ基で起こった。加水分解糖質分析により、１ｃを生成するＫＬＨの１分子あたり約３３１の糖質残基が明らかになった。
【０４０３】
２）実験
過アセチルペンテニル−β−Ｄ−ラクトシド（１０）。ラクトースオクタアセテート（１００．０ｇ、１４７．７ｍｍｏｌ）の冷却した（氷浴）懸濁液に、氷酢酸（３０ｍＬ）および無水酢酸（３０ｍＬ）を添加し、ＡｃＯＨ中３０％  ＨＢｒを１００ｍＬ、６０分間かけて滴下した。その反応混合物を、１時間攪拌し、氷浴を外した。さらに室温で２時間攪拌すると、その反応系は、均質な黄色の溶液になった。その溶液を、Ｈ２Ｏ（１０００ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（３×４００ｍＬ）で抽出した。その有機抽出物をＨ２Ｏ（２×１０００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（３×５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。そのα−ブロモ生成物９を、無水ベンゼンとともに共沸させ、減圧下で乾燥させて、９８．８ｇ（９６％）のラクトシルブロミドを得た。これをさらに生成することなく使用した。
【０４０４】
Ａｇ２ＣＯ３（１００ｇ、３６２．６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、新たに活性化したモレキュラーシーブ（１５ｇ）および４００ｍＬ  ＣＨＵＣＫ中の結晶Ｉ２、ペンテニルアルコール（５．０当量、７３．４ｍL）、次いで、４００ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中のラクトシルブロミド９（９８．８ｇ、１４１．４ｍｍｏｌ）を添加した。室温にて遮光して１６時間攪拌した後、その反応物を、さらなるＣＨ２Ｃｌ２でセライトのプラグを通して濾過し、黄色オイルになるまで濃縮した。これを、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により生成して、７４．７ｇ（７５％）のペンテニルラクトシド１０を白色発泡体として得た。
【０４０５】
【化１８６】
2006507233.tif 000127
【０４０６】
ペント−４−エニル３’，４’−Ｏ−アセトニド−β−Ｄ−ラクトシド（１２）。過アセチル化ペンテニルラクトシド１０（１８．２ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）を、３００ｍＬの無水ＭｅＯＨに溶解し、２．０ｍＬのＮａＯＭｅ（ＭｅＯＨ中２５％）を添加した。その反応系を、室温で１６時間攪拌し、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ＋で中和した（ｐＨ５〜６）。この反応物をさらなるＭｅＯＨで濾過し、白色固体（１０．６ｇ、定量）になるまで濃縮した。これを、さらに生成することなく使用した。ペンテニル−β−Ｄ−ラクトシド１１：
【０４０７】
【化１８７】
2006507233.tif 000128
【０４０８】
ペンテニルラクトシド１１（１０．６ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）に、２００ｍＬ  アセトン、２６ｍＬのジメトキシプロパンおよびｐ−トルエンスルホン酸（４９１ｍｇ、０．１当量）を添加した。その懸濁液を、室温にて一晩攪拌し、その時点で、反応物は、均質であった。その反応物を濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１００％  ＥｔＯＡｃ→ＥｔＯＡｃ中２％  ＭｅＯＨ）により精製して、５．１ｇ（４４％）の３，４−アセトニドを白色固体として、および１．２７ｇの４，６−アセトニドを白色固体として得た。
【０４０９】
【化１８８】
2006507233.tif 000129
【０４１０】
ペント−４−エニル２，３，６，２’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−３’，４’−Ｏ−アセトニド−β−Ｄ−ラクトシド（１３）。アセトニド１２（３．４０ｇ、７．５４ｍｍｏｌ）を無水ベンゼンとともに共沸させ、無水ＤＭＦ（６０ｍＬ、０．１２Ｍ）中に溶解し、０℃に冷却した。臭化ベンジル（明礬石を通した、１０．０当量、８．９７ｍＬ）を添加し、続いて、固体ＮａＨ（９５％、７．５当量、１．７６ｇ）を一度に入れた。この反応系を室温まで一晩温め、次いで、氷冷Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）中に注ぎ、ＣＨＣｌ３（２００ｍＬ、２×１００ｍＬ）で抽出した。その有機抽出物をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮して、黄色オイルを得た。これを、フラッシュカラムクロマトグラフィー（５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、５．７０ｇ（８４％）の生成物を粘稠性オイルとして得る。
【０４１１】
【化１８９】
2006507233.tif 000130
【０４１２】
ペント−４−エニル２，３，６，２’，６’−ペンタ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ラクトシド（１４）。アセトニド１３（５．７ｇ、６．３２ｍｍｏｌ）を、Ｈ２Ｏ中の８０％  ＡｃＯＨ（６０ｍＬ）中に溶解し、７５℃で３時間加熱した。その反応系を室温まで冷却し、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）で希釈し、ＣＨＣｌ３（２００ｍＬ、２×１００ｍＬ）で抽出した。その有機抽出物を、Ｈ２Ｏ（５００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（３×３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、オイルになるまで濃縮した。これを、フラッシュカラムクロマトグラフィー（２５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、５．２１ｇ（９６％）の白色固体を得た。
【０４１３】
【化１９０】
2006507233.tif 000131
【０４１４】
三糖１５。ホスファイトドナー３（１．０ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）およびラクトシルアクセプター１４（２．５ｇ、２．９０ｍｍｏｌ）を合わせて、無水ベンゼンとともに共沸させ、高減圧下に２時間置いた。その混合物を、無水ＣＨ３ＣＨ２ＣＮ（ＣａＨ２から蒸留）中に溶解し、新たに活性化したモレキュラーシーブを添加し、その反応系を−４０℃に冷却した。ＴＭＳＯＴｆ（０．１当量、２７μＬ）の一部を添加し、その反応系を−４０℃にて一晩攪拌した。その反応系を、次いで、−３０℃まで温め、別の０．１当量のＴＭＳＯＴｆを添加した。さらに２時間−３０℃にて攪拌して、その反応系を、固体ＮａＨＣＯ３をさらに添加することによってクエンチし、ＥｔＯＡｃの助けをかりてセライトのプラグを通して濾過した。その有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３（２×４００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。有機層をエバポレートすると、濁ったオイルが得られ、これを、注意深い勾配溶出を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーに供して、アクセプターおよび生成物三糖を回収した（２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→７５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。その生成物（１．３５ｇ，７５％）は、白色発泡体として得られ、０．９５ｇの出発アクセプターを回収した：
【０４１５】
【化１９１】
2006507233.tif 000132
【０４１６】
六糖７（Ｒ＝Ｂｎ）。チオエチルドナー５（３１１ｍｇ、０．２４３ｍｍｏｌ）およびアクセプター１５（６２７ｍｇ、０．４８７ｍｍｏｌ）を合わせ、無水ベンゼンとともに共沸させ（５×５ｍＬ）、高減圧下に５時間おいた。その混合物を、次いで、１．６ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２および３．２ｍＬのＥｔ２Ｏ（計０．０５Ｍ）に溶解し、新たに調製したモレキュラーシーブで処理し、０℃に冷却した。メチルトリフレート（１．５当量、４１μＬ）を、一度に添加し、その反応系を０℃にて一晩攪拌した。朝に、さらに２０μＬのＭｅＯＴｆを添加し、その反応系を５℃にてさらに２時間攪拌した。その反応を、固体ＮａＨＣＯ３を添加することによってクエンチし、セライトを通してＥｔＯＡｃで濾過し、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（勾配溶出  ２５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→５０％→７５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、４３７ｍｇ（７０％）の六糖を白色発泡体として得、３００ｍｇの三糖アクセプターを回復した：
【０４１７】
【化１９２】
2006507233.tif 000133
【０４１８】
化合物１ｂ。ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中の六糖（１３０ｍｇ、０．０５０９ｍｍｏｌ）の溶液に、氷酢酸（１０．０当量、２９μＬ）およびＴＢＡＦ（１．０Ｍ  ＴＨＦ、１０．０当量、０．５０９ｍＬ）を添加した。その反応系を室温にて一晩攪拌し、氷水に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。その有機抽出物を、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、オイルになるまで濃縮した。これを、シリカゲルの短いプラグを通してＥｔＯＡｃで精製した。得られたチオールを、無水ＭｅＯＨ（２．５ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシドを添加した（ＭｅＯＨ中の２５％溶液を０．２５０ｍＬ）。この反応系を室温にて１８時間攪拌し、次いで、０．５ｍＬのＴＨＦおよび０．５ｍＬのＨ２Ｏを添加した。室温にてさらに２４時間攪拌し、続いて、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ＋で中和し、ＭｅＯＨ洗浄で濾過し、濃縮した。その粗物質を、高減圧下で１日乾燥させた。得られた白色固体にＴＨＦ（０．５ｍＬ）を添加し、液体ＮＨ３（約１０ｍＬ）を−７８℃にて凝縮させた。ナトリウム（約５０ｍｇ）を添加し、得られた青色溶液を、−７８℃にて１．５時間攪拌した。その反応系を、無水ＭｅＯＨ（約５ｍＬ）でクエンチし、室温にし、乾燥Ｎ２のストリームで約２ｍＬ容量まで濃縮した。この反応系を、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ＋で中和し、ＭｅＯＨ洗浄で濾過し、白色固体になるまで濃縮した。この白色固体を、１．０ｍＬ  ピリジンおよび１．０ｍＬ  ＣＨ２Ｃｌ２中に溶解し、０℃に冷却した。結晶ＤＭＡＰを添加し、続いて、無水酢酸（１．０ｍＬ）を添加した。氷浴を外し、その反応系を室温で一晩攪拌した。濃縮して、フラッシュカラムクロマトグラフィー（勾配溶出  ７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→１００％ＥｔＯＡｃ−：→５％  ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）により精製し、４４ｍｇ（４６％）の８を白色固体として得た：
【０４１９】
【化１９３】
2006507233.tif 000134
【０４２０】
パーアセテート（４０ｍｇ）を無水ＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）に溶解し、１５０μｌのナトリウムメトキシドを添加した（ＭｅＯＨ中２５％溶液）。その反応系を室温で１８時間攪拌し、次いで、０．５ｍＬのＴＨＦおよび０．５ｍＬのＨ２Ｏを添加した。その反応系を室温でさらに２４時間攪拌した。Ｄｏｗｅｘ−Ｈ＋での中和（約ｐＨ６〜７）を行い、続いてＭｅＯＨ洗浄で濾過し、Ｐ−２ゲル（Ｈ２Ｏ溶出）を使用して、濃縮および精製して、２４ｍｇ（９６％）の白色固体を得た：
【０４２１】
【化１９４】
2006507233.tif 000135
【０４２２】
グリカル六糖６ａ。チオエチルドナー５（１２０ｍｇ、０．０９３８ｍｍｏｌ）およびアクセプター４（１２２ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）を合わせ、無水ベンゼン（５×５ｍＬ）とともに共沸し、高減圧下に一晩置いた。その混合物を、Ｅｔ２Ｏ：ＣＨ２Ｃｌ２（計２．７ｍＬ）の２：１混合物に溶解し、モレキュラーシーブを添加し、その混合物を、室温にて１時間攪拌した。その反応系を、０℃に冷却し、１．０当量のＭｅＯＴｆ（０．０２０ｍＬ）を添加した。０℃にて４時間後、さらに当量のＭｅＯＴｆを添加し（０．０２０ｍＬ）、その反応系を１０℃にてさらに４時間攪拌し続けた。その反応系を固体ＮａＨＣＯ３でクエンチし、セライトを通してｓらにＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）で濾過し、濃縮した。得られた混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、５０ｍｇ（２３％）の六糖グリカル６および８５ｍｇの出発アクセプター４を得た：Ｒｆ  ０．３５（６６％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）；
【０４２３】
【化１９５】
2006507233.tif 000136
【０４２４】
イミド−六糖６ｂ。一度に１０当量のＭｅＯＴｆを添加して上記の反応を他の同様の条件下で行って、２８％の以下の化合物を得る。これは、親Ｎ−アセチル化六糖６ａより極性が遙かに低い。Ｒｆ  ０．３５（２５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）；
【０４２５】
【化１９６】
2006507233.tif 000137
【０４２６】
３）結合体化研究：
本明細書中で記載され、図６において示されるように、ＦｕｃＧＭ１におけるそのペンテニル基を、オゾン分解によってアルデヒド基に変換し、ｇｌｏｂｏ  Ｈについて記載される（Ｒａｇｕｐａｔｈｉ  Ｇ，Ｐａｒｋ  ＴＫ，Ｚｈａｎｇ  Ｓ，Ｋｉｍ  ＩＪ，Ｇｒａｅｂｅｒ  Ｌ，Ａｄｌｕｒｉ  Ｓ，Ｌｌｏｙｄ  ＫＯ，Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ  ＳＪおよびＬｉｖｉｎｇｓｔｏｎ  ＰＯを参照のこと）に記載される、シアノ水素化ホウ素ナトリウムの存在下での還元的アミノ化によって、ＫＬＨの−ＮＨ２基に連結した。完全に合成的な六糖ｇｌｏｂｏ  Ｈでのマウスの免疫により、ヒト癌細胞に対する抗体が生じる：抗癌ワクチンの作製に対する組み合わされた化学的免疫学的アプローチ。Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ  Ｅｎｇｌ．３６：１２５−１２８．１９９７）。架橋法の場合において、オゾン分解を介して得られたアルデヒド基を、まずＭＭＣＣＨ（４−（マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシヒドラジド）のヒドラジドと反応させ、Ｒａｇｕｐａｔｈｉ  Ｇ，Ｋｏｇａｎｔｙ  ＲＲ，Ｑｉｕ  Ｄ，Ｌｌｏｙｄ  ＫＯおよびＬｉｖｉｎｇｓｔｏｎ  ＰＯ、Ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｄ  ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｓｉａｌｙｌ  Ｔｎ−ＫＬＨ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ４−（４−Ｎ−ｍａｌｅｉｍｉｄｏｍｅｔｈｙｌ）ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ−１−ｃａｒｂｏｘｙｌ  ｈｙｄｒａｚｉｄｅ（ＭＭＣＣＨ）  ｌｉｎｋｅｒ  ａｒｍ．Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｊ．，１５：２１７−２２１，１９９８に記載されるように、チオール化ＫＬＨと反応させた。例えば、メタノール中の４ｍｇのＦｕｃＧＭ１ペンテニルグリコシドを、ドライアイス／エタノール浴に入れて−７８℃にて攪拌し、オゾンガスを、激しく攪拌しながら溶液に１０分間通した。次いで、過剰なオゾンを、５分間かけて窒素と置換した。硫化メチルを、（１００μｌ）を添加し、その反応混合物を、室温にて２時間攪拌し、２つのバイアルに等しく分配した。その溶媒を窒素ストリーム下で除去した。得られた白色固体を、その後の結合体化工程において直接使用した。
【０４２７】
ａ）ＦｕｃＧＭ１−アルデヒドとＫＬＨの直接結合体化
２ｍｇのＦｕｃＧＭ１−アルデヒドを、１ｍｌの０．１Ｍ  リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）ｐＨ７．２中に溶解し、４ｍｇのＫＬＨをＰＢＳに溶解した。２ｍｇのシアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加し、その混合物を、３７℃にて４８時間穏やかに攪拌しながらインキュベートした。１６時間後、さらに１．０ｍｇのシアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加し、インキュベートを続けた。その未反応ＦｕｃＧＭ１−アルデヒドを、分子量カットオフ値３００００ダルトンを有するＡｍｉｃｏｎ  Ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐで、４℃にてＰＢＳを６〜７回交換して、数回洗浄して完全に除去した。
【０４２８】
ｂ）チオール化ＫＬＨへのＭＭＣＣＨ：を介したＦｕｃＧＭ１−アルデヒドの結合体化
ＦｕｃＧＭ１−ＭＭＣＣＨの調製
２ｍｇのＦｕｃＧＭ１−アルデヒドを、１ｍｌの０．１Ｍ  酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．５）に溶解し、１００μｌのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の４ｍｇのＭＭＣＣＨを添加した。その反応混合物を、穏やかに攪拌しながら、室温にて１５分間インキュベートした。１５分間の最後に、２ｍｇの固体シアノ水素化ホウ素ナトリウムを添加し、室温にて２時間、インキュベートを続けた。未反応ＭＭＣＣＨを、５ｍＭ  ＥＤＴＡを含む０．１Ｍ  リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０）で予め平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ１０カラムで除去し、同じ緩衝液で溶出した。オルシノールを用いるＴＬＣによる、ＦｕｃＧＭ１について陽性の画分を、合わせた。
【０４２９】
（ＫＬＨへのスルフヒドリル基の付加）
チオール化緩衝液（５０ｍＭ  トリエタノールアミン、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ８．０）中に溶解した２−イミノチオラン（２ｍｇ）を、４ｍｇのＫＬＨに添加し、室温にて２時間攪拌しながらインキュベートした。未反応の２−イミノチオランを、５ｍＭ  ＥＤＴＡを含む０．１Ｍ  リン酸緩衝液（ｐＨ７．２）で予め平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ１５カラムによって除去し、同じ緩衝液で溶出した。ＢｉｏＲａｄタンパク質アッセイ色素試薬でＫＬＨについて陽性の画分を合わせた。少量を使用し、先に記載されるように（Ｒｉｄｄｌｅｓ  ＰＷ，Ｂｌａｃｋｅｌｅｙ  ＲＬ，Ｚｅｒｎｅｒ  Ｂ  Ｅｌｌｍａｎ’ｓ  ｒｅａｇｅｎｔ：５，５’−ｄｉｔｈｉｏｂｉｓ（２−ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ）−−ａ  ｒｅｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ，Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ９４：７５−８１，１９７９）、標準物質としてＥｌｌｍａｎ’ｓ試薬およびシステインを使用してチオール化ＫＬＨ中のスルフヒドリル基を予測した。そのＫＬＨを、ＢｉｏＲａｄ色素試薬を使用する色素法により、製造業者の指示に従って予測した。
【０４３０】
（チオール化ＫＬＨへのＦｕｃＧＭ１−ＭＭＣＣＨの結合体化）
そのＦｕｃＧＭ１−ＭＭＣＣＨ生成物およびチオール化ＫＬＨを混合し、０．１Ｍ  リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．０）を使用して、ｐＨ７．２に調節した。その反応混合物を、次いで、室温にて一晩インキュベートした。ＦｕｃＧＭ１−ＭＭＣＣＨ−ＫＬＨ反応バイアルの中身を、Ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｒ  ３０（Ａｍｉｃｏｎ：分子量カットオフ３００００ダルトン）に移し、未反応のＦｕｃＧＭ１−ＭＭＣＣＨを、複数回洗浄して完全に除去した。その結合体を、上記のように、未反応ＦｕｃＧＭ１がないことについて、ＨＰＴＬＣによってチェックした。結合体の２つのバッチのエピトープ比を、ＢｉｏＲａｄ色素結合タンパク質アッセイによってタンパク質含有量を、およびＨＰＡＥＣ−ＰＡＤアッセイによって糖質を予測することによって決定した。ＦｕｃＧＭ１−ＫＬＨおよびＦｕｃＧＭ１−ＭＭＣＣＨ−ＫＬＨのエピトープ比（直接法による）は、それぞれ、１４９／１および１５２７／１であった。
【０４３１】
（Ｂ．実施例２：Ｇｌｏｂｏ−Ｈおよびその結合体の合成）
１）合成の考察：
本発明のなお別の実施形態において、Ｇｌｏｂｏ−Ｈの改善された合成は、本明細書中に提示されるように、新規な合成方法論を利用して提供される。本発明者らによって記載される（Ｐａｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６，１１８，１１４８８；Ｂｉｌｏｄｅａｕら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９５，１１７，７８４０；Ｋｉｍら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９５，６０，７７１６）ｇｌｏｂｏ−Ｈの以前の合成は、この複雑なオリゴ糖の迅速な構築のために、全てグリカル構築ブロック（Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙら，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．１９９６，１０８，１４８２；Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９６，３５，１３８０）を利用した。これらの研究は、最終的な標的に含まれる六糖コアを生成するために、非常に集束性の［３＋３］カップリングに依存した。このアプローチにおいて、可撓性の末端グリカルを、六糖構築全体を通して維持した。次いで、そのグリカルを使用して、ｇｌｏｂｏ−Ｈ糖脂質１６ａまたはそのアリルグリコシド１６ｂへの途中に存在するセラミド側鎖を組み込んだ。１６ａの合成は、ｇｌｏｂｏ−Ｈの構造および免疫特徴付けの証拠を容易にするように働いた。そのアリルグリコシド１６ｂを、生体キャリアタンパク質への免疫結合体化のために使用した。以前のプロトコルは、構造、免疫特徴付け、結合体化、マウスワクチン接種および第Ｉ相ヒト臨床試験の証拠のために適切な量の合成材料を生成するにおいて有効であった。しかし、改善された合成方法論は、効率的な生体結合体化を可能にすること、および臨床目的で適切な材料を提供することも望まれた。
【０４３２】
アリルグリコシドアプローチと関連した難題は、代替溶液（これは、一般用語において、本明細書中に記載される）をもたらし、より具体的には、上記のフコシルＧＭ１、さらに以下のＧｌｏｂｏ−Ｈについて記載される（図７）。従って、既に定位置にあるキャリアタンパク質に対する連結を可能にするグリコシドを含む六糖を構築することができたと考えた（図８を参照のこと）。実際に、この基は、その［３＋３］カップリング工程においてアクセプターの還元末端において既に組み込まれている。ｇｌｏｂｏ−Ｈ（および他の複雑な腫瘍関連抗原）合成のこの重要な新たなバリエーションの首尾よい実行のために、１）グリコシド構築物を含む三糖アクセプターが容易に合成可能であること；２）そのグリコシド構築物がその［３＋３］カップリングと適合すること；３）その構築物は、アリルグリコシドとは対照的に、全体的な脱保護に耐えること；および４）効率的な結合体化が、実行可能であることが好ましい。
【０４３３】
最初のレトロ合成分析は、図９に示される。最大収束性について、その先に議論したペンテニルグリコシドリンカーを含むＡＢＣアクセプターを、想定した。さらに、同じＤＥＦ三糖ドナーセクタを、先に記載されるように利用した。六糖コアを、次いで、スルホンアミドグリコシド化プロトコル（Ｇｒｉｆｆｉｔｈら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９０，１１２，５８１１；Ｇｒｉｆｆｉｔｈら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９１，１１３，５８６３）を使用して、収束性［３＋３］ＡＢＣ＋ＤＥＦカップリング反応を介して組み立てた。以前の結果は、ＤＥＦドナーにおいてその還元末端ガラクトースのＣ４において遊離ヒドロキシルが存在する（図９、アスタリスクを参照のこと）ことが、そのスルホンアミドグリコシド化において必要とされるβ−連結の形成を指向するために必要であることを示した（Ｐａｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６，１１８，１１４８８；Ｋｗｏｎら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９８，１２０，１５８８）。その［３＋３］カップリングの配列決定は、そのドナー三糖における必要な軸結合のＣ４ヒドロキシル基と比較して、そのアクセプターにおける赤道結合のＣ３ヒドロキシル基（太字を参照のこと）のより高い反応性が原因で、示されるように起こると予測された。本明細書中に記載されるストラテジーに重要なことは、一端その六糖が組み立てられると、保護基の操作のみが、プロワクチン（ｐｒｏ−ｖａｃｃｉｎｅ）抗原に達するために必要であったことである。
【０４３４】
一般に、そのＤＥＦ三糖セクタの合成は、かなり簡潔であり、６−Ｏ−ＴＩＰＳガラクタルおよびトリ−Ｏ−ベンジルフルオロフコースから出発する６回の変換を必要とする（Ｐａｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６，１１８，１１４８８；Ｂｉｌｏｄｅａｕら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９５，１１７，７８４０；Ｋｉｍら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９５，６０，７７１６）。第２の生成アプローチの目的のために、そのアクセプター三糖成分は、Ｃ４’の差別されたヒドロキシルおよび適切なＣ環ドナーを有する所望のＮＰＧを含むラクトース誘導体に分離され得る（ｄｉｓｓｅｃｔｅｄ）（図９）。そのガラクトースドナー単糖はまた、最終的なＡＢＣ＋ＤＥＦカップリングのためにＣ３での差別的な保護を必要とし、ＡＢ＋Ｃドメインを結合する、必要とされるβ−グリコシド連結を効率的に可能にする慎重な注意の必要性がある。
【０４３５】
図１０に示されるように、必須のＡＢＣアクセプターの合成を、容易に利用可能なラクトースオクタアセトン１７を利用して、行った。１７の既知のα−ブロモドナー１８への変換（Ｒｅｉｔｈａｌ，Ｙ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９５２，７４，４２１０；Ｄａｓｇｕｐｅｔら，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９９４，２６４，１５５）の後に、アクセプターとしてのペンテニルアルコールでの炭酸銀媒介グリコシル化を行って、１００ｇスケールで１９（ペント＝ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）を７５％収率で得た（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚら、Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９９０，４３，６６５）。１８の助触媒としての銀トリフレートでの同様の処理により、所望の生成物の１７％収率を得た。従って、１９の形成で、合成の初期段階において、そのリンカーを、後期段階生体結合体化のために使用されるように、首尾良く組み込んだ。
【０４３６】
その後の工程を、結局のＡＢ＋Ｃカップリングして、ＡＢＣ三糖を与えるために、１９のＣ４’での遊離アクセプター部位を生成するように設計した（図１０）。１９においてエステル保護基を除去して、ペンテニルラクトシドを与えた後に、水酸化スズ媒介性モノベンジル化を行って、Ｃ３’ベンジルエーテルを選択的に与えた（Ｄａｖｉｄら，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．Ｉ  １９８１，１７９７；Ｍａｒａｎｄｕｂａら，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９８６，１５１，１０５）。第２の工程において、そのＣ４’およびＣ６’ヒドロキシルを、ベンジリデンアセタールとして結合して、わずかに観察可能な生成物として化合物２０を得た（Ｊａｎｎｓｏｎら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８，５３，５６２９；Ｋｏｅｍａｎら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９３，４９，５２９１；Ｑｉｕら，Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．１９９２，２１７）。最終的に、２０における残りのヒドロキシル基の過ベンジル化およびシアノ水素化ホウ素ナトリウムおよび無水ＨＣｌでのベンジリデンのレジオ選択的還元切断により、Ｃ４’アルコール２１が得られた（Ｇａｒｅｇｇ，Ｐ．Ｊ．  Ｐｕｒｅ  Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．１９８４，５６，８４５）。従って、ラクトースオクタアセテート１７から出発すると、そのＡＢペンテニルグリコシドアクセプター２１は、７工程および２０％の全体収率で得られた。
【０４３７】
大量の利用可能な保護されたペンテニルグリコシド２１を用いて、ＡＢ＋Ｃカップリングに注意して、三糖アクセプター２４を形成した。グリカル２７の以前の合成（図１０）は、グリカル２２からの非常に活性化されたｐ−フルオロドナー２３の注意深い調製を要した。２２に含まれるそのＣ３  ＰＭＢエーテルを、戦略的に組み込んで、この基の選択的脱保護の際に、結局のＡＢＣ＋ＤＥＦカップリングを可能にした。この研究の経過において、α−２３が、高収率かつ大スケールで、都合良く形成することができたことを発見した。従って、α−ドナー２３を、シスフルオロ−ヒドリン誘導体およびその後の、得られたＣ２−ヒドロキシルのそのベンジルエーテルへの変換を生じるエポキシド化、ＨＦ：ピリジンへの曝露によって差別的に保護されたグリカル２２から調製した。そのアノマーα：βの選択性は、１０：１であり、２２を２３へ変換するにあたってのその全体的な収率は、７６％であることが証明された。
【０４３８】
以前に調製された２３およびその新たに調製されたα−２３を使用する、そのＡＢアクセプター２１とのＡＢ＋Ｃカップリングの効率を研究した。モデルケースとしてのグリカル三糖２７の合成最適化（２３＋２６→２７を参照のこと）もまた、カップリング助触媒を過度に要求することに対するその予測される選択性に起因して、試験した。これらの研究において、α−フルオロドナーの減少した反応性を、表１にまとめるように、慎重に選択された溶媒における非常にフルオロ親和性の（ｆｌｕｏｒｏｐｈｉｌｉｃ）助触媒でのカップリングを行うことによって、減らすことができたことが分かった。主にｐ−フルオロドナー２３およびグリカル２６を使用して、グリカル三糖２７を得る以前のカップリング手順は、Ｍｕｙｋｉｙａｍａカップリング条件（Ｍｕｋａｉｙａｍａら，Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１９８１，４３１；Ｎｉｃｏｌａｏｕら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９０，１１２，３６９３；Ｎｉｃｏｌａｏｕら，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９１，８７０）を使用し、中程度のアノマー選択性を伴って５４％収率で進行した（エントリー１，表１）。α−２３での他の助触媒を使用する研究を、エントリー２および３に示すが、全体的な効率に関して、ほとんど満足いくものではなかった。しかし、グリカル２７の調製は、強くフルオロ親和性Ｃｐ２Ｚｒ（ＯＴｆ）２促進を使用すると、記載されたα−ドナー２３を含むことが首尾良く示された（７３％収率，エントリー４）。満足なことに、２７の形成のためにこれらの最適化されたグリコシド化条件は、首尾良く、ペンテニルグリコシド２１を使用するＡＢ＋Ｃカップリングに適用されて、親反応と関連した収率で三糖２４を得た（８０％収率、エントリー６）。２１でのβ−２３のＭｕｙｋｉｙａｍａカップリングは、４２％の三糖２４を得た（エントリー５）。大量の２４の円滑な形成をもたらす事象に満足して、その［３＋３］カップリングを調査した。２４における孤立ＰＭＢ基の放出（ｄｉｓｃｈａｒｇｅ）を、優れた収率（９２％）で行うことができた。そのようにして、所望のＡＢＣペンテニルアクセプター２５の組立が完了した。
【０４３９】
（ＡＢＣ三糖を生成するために使用したカップリング条件）
【０４４０】
【化１９７】
2006507233.tif 000138
【０４４１】
重要な工程および１６ｃの合成を完了する最終的な変換を、図１１に示す。アクセプター２５の存在下での既知のＤＥFドナー２８（図１０を参照のこと）のＭｅＯＴｆ（Ｌｏｎｎ，Ｈ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９８５，１３４，１０５；Ｌｏｎｎ，Ｈ．  Ｊ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．１９８７，６，３０１）の処理は、６０％収率で六糖２９を円滑に提供した。２９の新たなアノマー中心の配置は、β配置であることを確認した。三糖アクセプター２５を使用するその［３＋３］カップリング収率は、２７に対応するグリカルベースのアクセプターを使用する［３＋３］手順に匹敵した。しかし、１５を使用するすばらしい利点は、続く工程において現れる。
【０４４２】
全体的な脱保護は、シリルエーテルおよび環式炭酸を除去するために、２９をＴＢＡＦに供することで始まった。得られたペンタ−オール上のそのベンジルおよびスルホンアミド保護基を、次いで、溶存金属還元の作用の下で切断した。このプロトコルの次に、過アセチル化を行って、単離可能な六糖パーアセテート３０を得た。先の工程のように、そのペンテニル連結は、列挙された脱保護条件下で非常に信頼性があることが判明した。繰り返すと、対応するアリルグリコシド（最終的には、１６ｂを得る）が、全体的な脱保護に必要な還元金属条件下で安定でなく、従って、脱保護の後に組み込まれなければならないことは、極めて対照的である。メトキシドでの３０の脱アセチル化は、生体結合体化について顕著に平衡がとれて、完全に脱保護されたｇｌｏｂｏ−Ｈのペンテニルグリコシド，１６ｃを生じた。重要なことには、第２の生成バリエーションにおいて、六糖構築物２９からの１６ｄに向かう経過は、非常に単純化された。なぜなら、結合体かを可能にするためのさらなる官能化の必要性が排除されたからである。
【０４４３】
合成ｇｌｏｂｏ−Ｈの臨床評価を容易にするという目的に向かって、１６ｃを、機能的ワクチンを作製する目的で、キャリアタンパク質ＫＬＨに結合体化した。この手順の第１の工程は、図１２に示されるように、特徴付けられていないアルデヒド中間体３１を得るために、ペンダントオレフィンのオゾン分解、続いて、還元的ワークアップを包含した。ＫＬＨおよびリン酸緩衝液中のシアノ水素化ホウ素ナトリウムを用いた還元的アミノ化により、ワクチン糖結合体１６ｄ（ｎ＝３）を得た。そのタンパク質に対する糖質の共有結合は、おそらく、ＫＬＨにおける露出されたリジン残基上のε−アミノ基を介して存在する。１６ｄの加水分解糖質分析により、キャリアタンパク質１分子あたり約３５０の糖質残基が現れた。
【０４４４】
（２）実験：
（ペルアセチルペンテニル−β−Ｄ−ラクトシド（１９））  ラクトースオクタアセテート（１００．０ｇ、１４７．７ｍｍｏｌ）、氷酢酸（３０ｍＬ）および無水酢酸（３０ｍＬ）の冷やした（氷浴）懸濁液に、３０％ＨＢｒのＡｃＯＨ（１００ｍＬ）を６０分間かけて滴下した。この反応混合物を１時間攪拌して、氷浴を外した。さらなる２時間室温にて攪拌した際に、均一な黄色溶液になった。この溶液を、Ｈ２Ｏ（１０００ｍＬ）で希釈して、ＣＨＣｌ３（３×４００ｍＬ）で抽出した。有機相をＨ２Ｏ（２×１０００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（３×５００ｍＬ）で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥して濃縮した。この生成物を、無水ベンゼンと共に共沸して、高減圧下で乾燥させて、９８．８ｇ（９６％）のラクトシルブロミドを得た。これを、精製せずに使用した。
【０４４５】
Ａｇ２ＣＯ３（１００ｇ、３６２．６ｍｍｏｌ）、新しく活性化させたモレキュラーシーブ
（１５ｇ）およびＩ２の結晶のＣＨ２Ｃｌ２懸濁液（４００ｍＬ）に、ペンテニルアルコール（５．０当量、７３．４ｍＬ）を加えて、次いで、ラクトシルブロミド（９８．８ｇ、１４１．４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍＬ）を加えた。暗所で室温にて１６時間攪拌した後、この反応を、さらなるＣＨ２Ｃｌ２を用いてセルライトのプラグ（ｐｌｕｇ）に通して濾過して、濃縮して、黄色油状物を得、これを、フレッシュカラムクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、白色形状として７４．７ｇ（７５％）のペンテニルラクトシドを得た。
【０４４６】
【化１９８】
2006507233.tif 000139
【０４４７】
（ペント−４−エチル３’−Ｏ−ベンジル−４’，６’−Ｏ−ベンジルイデニル−β−Ｄ−ラクトシド（２０））
ペルアセチル化ペンテニルラクトシド、８（１８．２ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）を、３００ｍＬの無水メタノールに溶解して、２．０ｍＬのＮａＯＭｅ（２５％のメタノール）を加えた。反応物を室温にて１６時間攪拌して、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ＋（ｐＨ５〜６）を用いて中和した。この反応物を、さらなるメタノールを用いて濾過して、白色固体、１９ａ（１０．６ｇ、定量）を得て、これをさらに精製せずに使用した：
【０４４８】
【化１９９】
2006507233.tif 000140
【０４４９】
へプタ−オール１９ａ（１．１４ｇ、２．８ｍｍｏｌ）およびジブチルチンオキシド（０．７６ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を共沸性水除去のためにベンゼン（７０ｍＬ）中で１５時間過熱還流した。この混合物を、２回濃縮して、室温まで冷まし、そしてベンジルブロマイド（０．６９ｍＬ、５．８ｍｍｏｌ）およびＢｕ４ＮＩ（１．０３ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を、３．５時間過熱還流して、冷まして、シリカゲルをこのフラスコに加えて、溶媒をエバポレートした。この残渣を、シリカゲルのカラムに適用してスズ副生成物を、ヘキサンおよび溶出液（５％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２）を用いて流すことにより除去して、白色形状として純粋な３’−Ｏ−ベンジルエーテル（０．７６ｇ、５４％）を得た：
【０４５０】
【化２００】
2006507233.tif 000141
【０４５１】
３’−Ｏ−ベンジルエーテル（０．６ｇ、１．２０ｍｍｏｌ）を、アセトニトリルおよびＤＭＦ（５：２、７ｍＬ）に溶解して、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（０．４７ｍＬ，３．１ｍｍｏｌ）およびＣＳＡ（１４ｍｇ、６０μｍｏｌ）を加えた。１６時間室温で攪拌した後、混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈して飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。この有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、エバポレートして、得られる残渣にエーテル（１００ｍＬ）を加えた後、濾過により純粋な２０（０．５１ｇ、７２％）を回収した：
【０４５２】
【化２０１】
2006507233.tif 000142
【０４５３】
（ペント−４−エニル２，２’，３，３’，６，６’−ヘキサ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ラクトシド（２１））
テトラオール  ２０（０．５１ｇ、０．８７ｍｏｌ）およびＥｔ４ＮＩ（０．１２ｇ、０．４３ｍｏｌ）を乾燥させ（ベンゼンと共沸蒸留）、ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解して、０℃まで冷ました。ベンジルブロミド（０．８３ｍＬ，７．０ｍｍｏｌ）を加えて、その後ＮａＨ（０．２２ｇ、６０％、５．６ｍｍｏｌ）を加えて、この混合物を１４時間かけて室温まで温めた。この混合物を、酢酸エチルで希釈して、水で洗浄して、有機相を乾燥して（ＭｇＳＯ４）、エバポレートした。シリカゲルのクロマトグラフィー（４：１→２：１ヘキサン：酢酸エチル）による残渣の精製から、白色形状として純粋なペンタベンジルラクトシド（０．８０ｇ、９７％）を得た：
【０４５４】
【化２０２】
2006507233.tif 000143
【０４５５】
ベンジリデン（０．６３ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６．６ｍＬ）に溶解して、新しく活性化した４ÅＭＳ（０．２５ｇ）と共に、室温にて１０分間攪拌した。一滴のＮａＣＮＢＨ（０．２１ｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、その後、無水ＨＣｌ（２．０Ｍ  Ｅｔ２Ｏ）を、混合物が泡立たなくなるまで（約２ｍＬ）滴下した。さらに１０分間攪拌後、この混合物を、酢酸エチルで洗いながらセルライトのプラグに通して、濾液を飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄して、有機相を乾燥して（ＭｇＳＯ４）、エバポレートした。カラムクロマトグラフィー（９：１ヘキサン：酢酸エチル）による精製から、白色固体として純粋な２１（０．４９ｇ、７９％）を得た：
【０４５６】
【化２０３】
2006507233.tif 000144
【０４５７】
（α−フルオロドナー（２３））  ３−Ｏ−ＰＭＢ−４，６−Ｄｉ−Ｏ−ベンジルガラクタール（２．２４ｇ、５．０２ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）溶液を、Ｎ２下０℃にてジメチルジオキサン（０．１１Ｍ、４７ｍＬ）で処置して、この混合物を、グリカールが全て消費されるまで攪拌した（約１時間、ＴＬＣ  ３０％ＥｔＯＡｃのヘキサン）。注釈：高い温度および／または過剰のＤＭＤＯは、ＰＭＢ基の酸化を促進させ、低反応収率となる。この溶媒を減圧下０℃でエバポレートして、この残基を、高減圧下で維持した。ガラクタ−ルエポキシドを含むフラスコを、新しく調製した４Ａモレキュラーシーブ（２ｇ）、乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）を用いて荷電させて、０℃まで冷ました。ＨＦ／Ｐｙｒ混合物（０．７９ｍＬ、約５当量）を、シリンジを介して滴下した。この反応混合物を一晩放置して、ゆっくりと室温に戻して、ｐＨ約７に達するようにＥｔ３Ｎ（１．２７ｇ、約２．５当量）を用いて反応を止めた。この混合物を、無水ＭｇＳＯ４のパッドに通して濾過して、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回リンスした。濾液を、水（５０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で洗浄して、乾燥して（ＭｇＳＯ４）、乾燥状態になるまで濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン、２／１）から、アノマーα：β＝１０：１としてフルオロヒドリン（２．０６ｇ、８５％収率）を得た：
【０４５８】
【化２０４】
2006507233.tif 000145
【０４５９】
上記混合物（８．２９ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下０℃にて、新しく調製した４Ａモレキュラーシーブ（３ｇ）を含む乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解して、ベンジルブロミド（４．４１ｇ、２５．８ｍｍｏｌ、１．５当量）および、最終的にＮａＨ（１．２４ｇ。６０％分散の油状物、３０．８６ｍｍｏｌ、１．８当量）で処理し、室温で一晩攪拌した。この反応を、氷酢酸（０．９３ｇ、０．９当量）で止めて、この混合物を、ＥｔＯＡｃ（４×５０ｍＬ）を用いて、無水ＭｇＳＯ４のパッドに通して濾過した。この有機相を水（４×５０ｍＬ）で洗浄して、乾燥して（ＭｇＳＯ４）、減圧下で濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン、４／１）から、出発フルオロヒドリンとして同一比のアノマーα：β＝１０：１の無色液体として表題化合物（９．３６ｇ、９５％収率）を得た。分析のために、５０ｍｇの純粋なαアノマーを、分取ＨＰＬＣを使用して得た。
【０４６０】
【化２０５】
2006507233.tif 000146
【０４６１】
（ＰＭＢ三糖（２４））  ラクトシド（２１）（４０２ｍｇ、０．２４３ｍｍｏｌ）およびフルオロドナー（２３）（４８５ｍｇ、０．８４６ｍｍｏｌ、２当量）の混合物を、無水ベンゼン（３×１０ｍＬ）で共沸させて、高減圧にて３時間さらに乾燥させた。上の混合物を、トルエン（３．８ｍｌ）に溶解して、カニューレを介してＮ２下、新しく調製した４Ａモレキュラーシーブ（０．６８ｇ）を含むフラスコに移して、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルピリジン（１４３μｌ）で処理して、−２０℃まで冷ました。（Ｃｐ）２Ｚｒ（ＯＴｆ）２（２２５ｍｇ、０．３８１ｍｍｏｌ、０．９当量）を、ＴＨＦ（０．３８ｍＬ）中で懸濁して、カニューレを介して反応混合物に加えた。この反応物を、暗所で７２時間７℃にて攪拌した。この混合物を、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈して、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）を用いて、無水ＭｇＳＯ４のパッドに通して濾過した。この濾液を飽和ＮａＨＣＯ３（２×１０ｍＬ）で洗浄して、乾燥して（ＭｇＳＯ４）、乾燥状態まで濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（２％Ｅｔ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２）から５０９ｍｇ（８０％）の所望のα−生成物（２４）および５１ｍｇ（８％）のβ−生成物を得た。
【０４６２】
【化２０６】
2006507233.tif 000147
【０４６３】
（三糖アクセプタ−（２５））  ＰＭＢ三糖（２４）（４４５ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍｌ）溶液を、０℃にて、リン酸緩衝液（１．５ｍｌ、ｐＨ＝７．４）およびＤＤＱ（８９ｍｇ、１．３当量）で処理して、０℃で５時間攪拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈して、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２×２０ｍＬ）および水（２０ｍｌ）で洗浄して、乾燥して（ＭｇＳＯ４）、乾燥状態まで濃縮した。粗物質を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（４％Ｅｔ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、無色油状物として３４４ｍｇ（８４％）の脱保護された三糖（２５）を得た。
【０４６４】
【化２０７】
2006507233.tif 000148
【０４６５】
（六糖（２９））チオエチルドナー２８（５４３ｍｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）およびアクセプタ−（２５）（５８７ｍｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）を合わせて、無水ベンゼン（５×５ｍｌ）で共沸させて、高減圧下に５時間置いた。次いで、混合物を３．５ｍｌＣＨ２Ｃｌ２および７．０ｍｌＥｔ２Ｏに溶解して、０℃に冷まして新しく調製した４Ａモレキュラーシーブで処理した。メチルトリフレート（３．０当量、１４４μｌ）を１滴加え、反応物を０℃にて３時間攪拌した。さらなる１４４μｌのＭｅＯＴｆを加え、反応物をさらに２時間５℃にて攪拌した。反応を、固体ＮａＨＣＯ３を加えることにより止めて、ＥｔＯＡｃを用いてセルライトに通して濾過して、濃縮して、ＨＰＬＣ（１７％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して、白色形状として６０ｍｇ（６０％）の六糖を得た。
【０４６６】
【化２０８】
2006507233.tif 000149
【０４６７】
（Ｇｌｏｂｏ−Ｈ  ペンテニル  グリコシドのペルアセテート（３０））
六糖（５８５ｍｇ、０．２２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、ＴＢＡＦ（１．０Ｍ  ＴＨＦ、１０当量、１．２４ｍｌ）を加えた。この反応物を室温にて３日間攪拌して、氷水に注いで、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍｌ）で洗浄して、乾燥して（ＭｇＳＯ４）、油状物まで濃縮し、これを、ＥｔＯＡｃを用いてシリカゲルのショートプラグに通して精製した。得られるトリオールを、無水メタノールに溶解して、ナトリウムメトキシド（０．２５ｍｌの２５％メタノール溶液）を加えた。この反応物を室温で１８時間攪拌して、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ−を用いて中和して、メタノールで洗浄濾過して濃縮した。得られる白色固体に、ＴＨＦ（２．０ｍＬ）および濃液体ＮＨ３（約２５ｍｌ）を、−７５℃にて加えた。ナトリウム（約５００ｍｇ）を加えて、得られる青色溶液を−78℃にて2時間攪拌した。反応を、無水メタノール（約１０ｍｌ）で止めて、室温にして、乾燥Ｎ２の雰囲気下で濃縮して、約５ｍｌの容量にした。反応物を、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ−を用いて中和して、メタノールで洗浄濾過して濃縮して、白色固体を得た。この白色固体を、５．０ｍｌピリジンおよび５．０ｍｌＣＨ２Ｃｌ２に溶解して、０℃に冷やした。結晶ＤＭＡＰを加えて、その後、無水酢酸（５．０ｍｌ）を加えた。氷浴を外して、反応物を一晩室温で攪拌した。濃縮後、フラッシュカラムクロマトグラフィー（勾配７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→１００％ＥｔＯＡｃ→５％メタノール／ＥｔＯＡｃ）により精製して、白色固体として３０（１６８ｍｇ、４２％）を得た。
【０４６８】
【化２０９】
2006507233.tif 000150
【０４６９】
（Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、ペンテニルグリコシド（１６ｃ））  ペルアセテート（２０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を無水メタノール（２．０ｍｌ）に溶解して、１００μＬのナトリウムメトキシドを加えた（２５％メタノール溶液）。反応物を、室温にて１８時間攪拌して、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ−（約ｐＨ６〜７）を用いて中和して、メタノールで洗浄濾過して濃縮してＲＰシリカゲル（Ｈ２Ｏ→１％メタノール／Ｈ２Ｏ）を使用して精製して、次いでＰ−２ゲル（Ｈ２Ｏ勾配）で精製して、白色固体の１２ｍｇ（９９％）を得た。
【０４７０】
【化２１０】
2006507233.tif 000151
【０４７１】
（Ｃ．実施例３：糖アミノ酸および本発明の糖ペプチド−ｎ−ペンテニル糖アミノ酸の調製）
（１）合成方法の考察：）
（ａ．保護されたグリシン誘導ホスホネートを用いたＨｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓオレフィン化）
一般に、上記の２つの抗原（フコシルＧＭ１およびｇｌｏｂｏ−Ｈ）を糖ペプチド中に組み込むことが所望された。１つの実施形態では、図１３に示すとおり、グリコシル化アミドエステルの触媒不斉水素添加を利用する変換が用いられる。新たなアプローチは、エナミドエステルを生じる、保護されたアルデヒドの、適切に保護されたグリシン由来ホスホネートを用いたＨｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓオレフィン化を予測する。その後の触媒不斉水素添加は、ジアステレオマーとして純粋な糖アミノ酸を生じる。
【０４７２】
しかし、１つの例では、過アセチル化ラクトース誘導体に基づいて、本発明の糖アミノ酸が調製された。特に、必要とされるラクトース由来エナミドエステル基質を調製した。必要とされるラクトース由来エナミドエステル基質を、図１４に従って調製した。ＮＰＧ  ３２のオゾン分解（Ａｌｌｅｎら，Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２０００，６，１３６６）、続いて還元的溶解により、対応するアルデヒド誘導体を得た。次いで、この粗製アルデヒドを、テトラメチルグアニジンおよびホスホネート３３を用いたＨｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓオレフィン化に供した。Ｎ−Ｂｏｃおよび２−（トリメチルシリル）エチルエステル（ＴＳＥ）を有するホスホネート３３（Ｓｃｈｍｉｄｔら，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９８４，５３；Ｋａｗａｉら，Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１９９０，５７７）を、アセテート炭水化物保護基の存在下で、ペプチドカップリングについての直交的に適切である、得られる糖アミノ酸についての必要性に起因して選択した。エナミドエステル３４を、２工程手順について８８％の収率で、単一の幾何異性体として得た。
【０４７３】
１つの好ましい実施形態では、エナミドエステル３４の不斉水素添加についての条件を詳述する。エチルＤｕＰＨＯＳ触媒前駆体の（Ｓ，Ｓ）リガンド異性体を利用した。この異性体は、これらの型の系において、（Ｓ）異性体をアミノ酸産物中に生じることが充分に特徴付けられている。保護された糖アミノ酸は、９８％の収率で得られ、そして２０：１よりも高いジアステレオマー比（ｄｒ）で形成されたことが決定された。顕著なことに、ｔ−Ｂｏｃプロトンは、ほぼベースラインに分離され、不斉反応においては、微量の異性体は、検出され得ない。１３Ｃ分析はまた、微量の異性体が、ＮＭＲの検出限界内で形成されないという結論を支持する。アキラル触媒（Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ）を用いた３４の水素添加は、Ｒ配置およびＳ配置３５の１：１混合物を生じ、ジアステレオマー比決定についての比較を提供する。この反応はまた、３５を生じるキラリティーの移行が、キラルなリガンドから生じ、炭水化物由来基質コントロールから生じないことを示す。腫瘍抗原の合成およびアセンブリに移る前に実施される最終工程は、アミノ酸側鎖中に含まれるブロッキング基の脱保護性を実証するものであった。最終的に、ペプチドカップリングについて適切に調製された、ＴＨＦ中での３５とＴＢＡＦとの反応により、９３％の収率で酸３６を得た。
【０４７４】
ラクトースモデルにおいて実証した一般的方法論を用いて、他の好ましい実施形態では、進行した六糖３７および３８、ならびに目的の他の抗原を、調査した。表２に示すように、図１４において用いたのと同じＧｌｏｂｏ−Ｈの過アセチル化ｎ−ペンテニルグリコシド３７のオレフィン化により、対応するエナミドエステル４１が７２％の収率で単一の異性体として得られ、そしてフコシルＧＭ１六糖１６が１０〜２２％の収率で得られた。顕著なことに、（Ｓ，Ｓ）−Ｅｔ−ＤｕＰＨＯＳ−Ｒｈ＋触媒系の使用を通して、４１および４２の水素添加は、優れた収率で進行して、１Ｈ  ＮＭＲ分析によれば、４５および４６が単一のジアステレオマーとして得られた。化合物４５および４６は、複合オリゴ糖Ｇｌｏｂｏ−ＨおよびフコシルＧＭ１のの合成糖アミノ酸の第１の例を表す。
【０４７５】
対応する糖アミノ酸を生じる、臨床的に有望な他の２つの抗原についての同様の変換をまた、特定の他の実施形態において実施した。上記で考察した通り、Ｌｅｗｉｓｙ（Ｌｅｙ）オリゴ糖が、結腸癌、肝臓癌、前立腺癌および卵巣癌に対する抗体を惹起するための重要な抗原として同定された（Ｌｌｏｙｄら，Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈ．１９８７，８７，１２９；Ｌｌｏｙｄら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．１９９１，２，４２１；Ｙｉｎら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１９９６，６５，４０６）。以前に、糖脂質またはＫＬＨのいずれかに結合したＬｅｙ−ＫＬＨ結合体ワクチン（ＤａｎｉｓｈｅｆｓｋｙらＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９５，１１７，５７０１）およびクラスター化Ｌｅｙ糖ペプチド（天然のα−Ｏ−結合型配置の）糖結合体の両方が調製され、そしてこれらのワクチンを用いて卵巣癌に対するヒト臨床試験が開始され（Ｋｕｄｒｙａｓｈｏｖら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．１９９８，４５，２８１；Ｓａｂｂａｔｉｎｉら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ２０００，８７，７９）。
【０４７６】
Ｌｅｙ  ｎ−ペンテニルグリコシド３９およびＴｎ抗原４０（ＧａｌＮＡｃ）のα−結合型ｎ−ペンテニルグリコシドの両方を用いて開始した結果を、表２に提示する。五糖３９は、Ｌｅｙ糖ペプチドクラスターの合成において中間体として入手可能であった。それゆえ、このストラテジーの潜在的利点を図示する。従って、免疫原性が人工構築物において保持される場合、これらのＮＰＧ由来糖アミノ酸は、それらのネイティブな対応物よりも短い、ワクチン糖結合体合成系路を提供する。表２に示す通り、３９および４０のオレフィン化は平凡であり、そしてエナミドエステル４３および４４が、再度単一異性体として、それぞれ、８５％および７５％の収率で得られた。上記の通り、不斉水素添加もまた、ジアステレオマーとして純粋な糖アミノ酸４７および４８を優れた収率で生じた。
【０４７７】
表２：糖アミノ酸の調製に適用されるＨｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓオレフィン化：
【０４７８】
【化２１２】
2006507233.tif 000152
【０４７９】
（ｂ．適切に保護されたアリルグリシンを用いた適切なアリルグリコシドの交差複分解反応）
特定の他の実施形態では、以下のスキーム１に示される通り、新規の交差複分解手順を利用する変換が用いられ得る。新たなアプローチは、対応するエナミドエステル付加物を生じる、適切に保護されたアリルグリシン中間体を用いた、アリルグリコシド構築物のＲｕｔｈｅｎｉｕｍ触媒交差複分解反応を含む。その後の触媒水素添加は、ジアステレオマーとして純粋な所望の糖アミノ酸を生じる。Ｒは、本明細書中に記載される炭水化物ドメインを表す。
【０４８０】
【化２１３】
2006507233.tif 000153
【０４８１】
最初の研究を、ペルアセチルα−Ｏ−アリル−Ｄ−ガラクトース５７およびＦｍｏｃ−Ｌ−アリルグリシンベンジルエステル５６（表３を参照のこと）を用いて実施した。
【０４８２】
表３：交差複分解反応の条件。
【０４８３】
【化２１４】
2006507233.tif 000154
【０４８４】
Ｆｍｏｃ−Ｌ−アリルグリシンベンジルエステル５６を、そのＦｍｏｃエステルとしての、市販のＬ−アリルグリシン５５のＮ−保護、続いてそのベンジルエステルとしてのカルボン酸部分の保護により調製した（図１８を参照のこと）。２倍過剰のアリルグリシン５６は、触媒５８ｂの存在下で、所望のエナミドエステル５９を２６％の収率で、両方の基質のダイマーを伴って生じた。触媒５８ａを用いた場合、この反応は、４９％の収率で進行し、この収率は、過剰のアリルグリシン５６を５当量まで増加させることにより、７０％の収率まで改善された。これらの条件はまた、アリルグリコシド５７のダイマー化における顕著な減少をもたらし、一方、交差複分解反応の収率を上昇させた。５９の触媒的水素添加により、所望のガラクトース由来エナミドエステル基質６０が、単一の幾何異性体として、８７％の収率で得られる。表４にまとめるように、この方法論は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈアリルグリコシド３７を含め、他の糖（ｇｌｙｃｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ）に成功裏に適用された。
【０４８５】
表４：糖アミノ酸の調製に適用される、交差複分解反応：
【０４８６】
【化２１５】
2006507233.tif 000155
【０４８７】
当業者は、この一般的方法論が、目的の種々の他の抗原に適用され得ることを認識する。特に、Ｏ−アリル構築物として利用可能な（または合成される）任意の炭水化物ドメインが、上記の反応工程により、対応する糖アミノ酸構築物へと変換され得る。適切な糖構築物の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：
【０４８８】
【化２１６】
2006507233.tif 000156
【０４８９】
上記のａ）およびｂ）において記載される通りの糖アミノ酸を掌中において、従って、新規の糖ペプチドを生成することが所望される。特に、１つの実施形態では、ｇｌｏｂｏ−Ｈ、ＬｅｙおよびＴｎを取り込んだ新規の糖ペプチドが提供される。特に、Ｃ末端は、キャリアタンパク質ＫＬＨについての結合体のハンドルを含むように改変される。メルカプトアセトアミド単位は、この目的のために有効であることが証明された。図１５に示されるように、Ｔｎ  糖アミノ酸４８をＴＢＡＦで処理して、対応するカルボン酸を示した。ＢＯＰ試薬（ベンゾトリアゾール−１−オキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）の作用下での、保護されたメルカプトアセトアミドが末端のジアミノスペーサー（ＡｃＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）３ＮＨ２）とのカップリングにより、対応するアミドが２工程で５０％の収率で得られた。Ｎ末端Ｂｏｃ基の除去により、アミン４９が、そのトリフルオロ酢酸塩として得られた。次の抗原Ｌｅｙを、４７とＴＢＡＦとのカップリングのために調製して、酸５０が得られた。ＢＯＰプロモーターを再度用いたアミン４９とＬｅｙ酸５０とのカップリングにより、Ｔｎ−Ｌｅｙジペプチド５１を８６％の収率で得た。最後に、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ糖アミノ酸４５を、ＴＢＡＦで処理して、その対応する酸５２を得た。５１中のＢｏｃ保護基の除去、続いて酸５２とのカップリングにより、Ｔｎ−Ｌｅｙ−Ｇｌｏｂｏ−Ｈトリペプチドを６４％収率で得た。最後に、Ｎ末端Ｂｏｃ基を除去し、そして得られるアミン（ａｎｉｍｅ）は、そのアセテートとしてキャップされて、トリペプチド５３を９５％の収率で得た。適所で全ての成分を用いることにより、エステル保護基を、脱気したメタノール中でヒドラジンを用いて除去して、完全に脱保護された糖ペプチド５４を優れた収率で得た（図１６）。以下に考察する通り、本明細書中に詳述される通りに調製した本発明の糖ペプチドはまた、適切なキャリアタンパク質または脂質へと結合体化され得る。
【０４９０】
２）実験についての概要。ＤｕＰＨＯＳ−Ｒｈ＋触媒を、Ｓｔｒｅｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｎｅｗｂｕｒｙｐｏｒｔ，ＭＡから購入した。他の市販の物質（Ａｌｄｒｉｃｈ−Ｓｉｇｍａから購入した）を全て、さらなる精製を行わずに用いた。以下の溶媒を、乾燥溶媒系から得た（アルミナのカラムを通過される）：ＴＨＦ、ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）、ＣＨ２Ｃｌ２、トルエンおよびベンゼン。全ての反応を、他に述べない限り、乾燥Ｎ２の雰囲気下で実施した。ＮＭＲ（１Ｈおよび１３Ｃ）スペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＭＸ−４００  ＭＨｚまたはＢｒｕｋｅｒ  Ａｄｖａｎｃｅ  ＤＲＸ−５００  ＭＨｚについて記録し、そして他に述べない限り、残りの溶媒を参照とした。ＩＲスペクトルを、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  １６００シリーズ−ＦＴＩＲスペクトロメーターを用いて記録し、そして光学回転を、１０ｃｍパス長セルを用いて、Ｊａｓｃｏ  ＤＩＰ−３７０ディジタル偏光計を用いて測定した。低解像度の質量スペクトル分析を、ＪＯＥＬ  ＪＭＳ−ＤＸ−３０３  ＨＦ質量スペクトルメーターを用いて実施した。分取ＴＬＣを、Ｅ．Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０  Ｆ２５４プレートについて実施し、そしてフラッシュカラムクロマトグラフィーを、Ｅ．Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０（４０〜６３ｍｍ）またはＳｉｇｍａ  Ｈ型シリカゲル（１０〜４０ｍｍ）について示した溶媒を用いて実施した。
【０４９１】
（４０の合成についての手順（図１７に示す通り））
トリクロロアセトイミデートドナー。図１７に示す通りのアジドニトレート（１．６６ｇ、４．４１ｍｍｏｌ）の混合物を、ＣＨ３ＣＮ（１５ｍＬ）中に０℃へと冷却した。攪拌した溶液に、Ｈｕｎｉｇ塩基（１．２当量、０．９２５ｍＬ）およびベンゼンチオール（３．０当量、１．３５ｍＬ）を添加した。反応混合物を、０℃にて１時間攪拌し、そして氷浴を除去した。室温にてさらに１時間の後、この反応物を乾燥窒素流れ下で濃縮した。得られた物質を、最小量のＣＨＣｌ３中に溶解し、そしてフラッシュカラムクロマトグラフィー（５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に供して、ヘミアセタール（１．４１、９７％）を得た。（注１：このフラッシュを、フード中で実施する。注２：両方のアノマーを単離する、これらのアノマーは、ＴＬＣ／フラッシュにおいて分離する）。ヘミアセタールの混合物（１．４１ｇ  ｍｇ、４．２５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（８．５ｍＬ）中に溶解し、そそてトリクロロアセトニトリル（４．２５ｍＬ）を添加し、続いてＫ２ＣＯ３（５．０当量、２．９３ｇ）を添加した。この反応物を、室温で一晩攪拌し、そしてさらなる塩化メチレンを用いて、セライトのプラグを通して濾過した。有機層の濃縮、続いてフラッシュカラムクロマトグラフィー（１０→２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により、β−トリクロロアセトイミデート（１．３０ｍｇ、７７％）が、黄色オイルとして得られた（注：α−アノマーが最初に溶出し、次いでβ−アノマーが溶出する）。
【０４９２】
（α−Ｔｎのペンテニルグリコシド）
図１７に示されるようなＴＣＡドナー（１，３０ｇ，２．７２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（０．２Ｍ，１３．６ｍＬ）およびペンテニルアルコール（５．０等量，１．２ｍＬ）に溶解し、−１０℃に冷却した（アセトン−氷浴）。ＴＭＳＯＴｆの部分（０．１等量，０．０４９ｍＬ）を添加し、反応物を１時間撹拌した。固体ＮａＨＣＯ３を添加し、そして反応物をセライトを通して濾過し、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に供した。（注記１：ジアステレオマーアノマーは分離しない。これらの比は、１Ｈ  ＮＭＲにより決定される。注記２：ＴＬＣ−勾配ＴＬＣ（最初は１０％、次いで５０％）による出発物質および生成物の同時溶出を使用して、反応の進行を可視化し得る。）単離したグリコシドを、１０ｍＬのＡｃＳＨで採取して、室温で２時間撹拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（５％アセトン／トルエン＞１０％アセトン／トルエン）を行う前の乾燥窒素の流れによる溶媒の蒸発により、６２０ｍｇのα−グリコシド（５５％）および未決定の量のβ−グリコシドを得た。（注記：酢酸エチル／ヘキサン混合物はまた、アノマーを分離するが、アセトン／トルエンは、上部であると決定した。）
（オレフィン化の一般的手順、４１）
エナミド４１（Ｇｌｏｂｏ−Ｈ）の調製は、この手順の代表的なものである。ｎ−ペンテニルグリコシド３７（５８ｍｇ，０．０３２２ｍｍｏｌ）は、１０：１０：１  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２：ピリジン（３ｍＬ，代表的に０．０５Ｍ−０．０１Ｍ）に溶解され、そして−７８℃に冷却される。乾燥オゾンの流れを、淡い青色が残存するまで反応混合物中を通した。オゾン源を除去し、反応物をさらに１５分間−７８℃で撹拌し、この時乾燥窒素の流れを加えて過剰なオゾンを除去した。ジメチルスルフィド（５０等量、０．１１８ｍＬ）を、冷却した混合物に加え、氷浴を、取り除き、反応物を室温で４時間撹拌させた。反応物を、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）で洗浄し、追加のＣＨ２Ｃｌ２（２×１０ｍＬ）で逆抽出した。合わされた有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。未精製のアルデヒドを、代表的に、精製しなかったが、無水ベンゼン（３×３ｍＬ）でアゼオトロープ化し、次の工程で直接使用した。
【０４９３】
ホスホネート３３（１．２０等量、１４ｍｇ）を、無水ＴＨＦ（０．３ｍＬ）中に溶解し、−７８℃に冷却し、テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）（１．２５等量、０．００５ｍＬ）を一滴ずつ加えた。反応物を−７８で３０分間撹拌し、続いて追加のＴＨＦ（２×０．３ｍＬ、代表的に０．１Ｍ〜０．０１Ｍ総反応容積）中の未精製アルデヒド（０．０３２２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を、室温まで終夜（１０〜１５時間）撹拌し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で抽出し、０．０５Ｍ水性ＨＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、追加のＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で逆抽出した。（注記：全てのＴＭＧは、非対称水素化の前に取り除かなければならない。）合わされた有機層を、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＞１００％ＥｔＯＡｃ）で精製し、単一の異性体として所望のエナミドエステル４１を得た。７２％、白い発泡体；
【０４９４】
【化２１７】
2006507233.tif 000157
【０４９５】
（ラクトースエナミド３４）
８８％、白い発泡体；
【０４９６】
【化２１８】
2006507233.tif 000158
【０４９７】
（ルイスｙエナミド４３）
８５％、白い発泡体；
【０４９８】
【化２１９】
2006507233.tif 000159
【０４９９】
（Ｔｎエナミド４４）
７５％、白い発泡体；
【０５００】
【化２２０】
2006507233.tif 000160
【０５０１】
（フコシルＧＭ１エナミド４２）
１０〜２２％；
【０５０２】
【化２２１】
2006507233.tif 000161
【０５０３】
（非対称水素付加の一般的手順）
不活性な脱酸素化大気下で、［（ＣＯＤ）Ｒｈ−（（Ｓ，Ｓ）−Ｅｔ−ＤｕＰＨＯＳ）］＋ＯＴｆ−（０．００５ｍｍｏｌ，５ｍｏｌ％）および所望のエナミドエステル（０．１００ｍｍｏｌ）を、Ｆｉｓｃｈｅｒ−Ｐｏｒｔｅｒチューブ中で脱酸素化無水ＴＨＦ中に溶解した。３回の真空／Ｈ２サイクルの後で、反応容器を５０ｐｓｉのＨ２で加圧し、２５℃で２４〜３６時間の間か、または反応物の色が明るいオレンジ色から茶色に変わるまで、撹拌した。この容器を、減圧にし、混合物を濃縮し、短いシリカのプラグを通して精製し、グリコアミノ酸を生じた。
【０５０４】
（ラクトースグリコアミノ酸３５）
９８％；
【０５０５】
【化２２２】
2006507233.tif 000162
【０５０６】
（Ｇｌｏｂｏ−Ｈグリコアミノ酸４５）
９８％；
【０５０７】
【化２２３】
2006507233.tif 000163
【０５０８】
（ルイスｙグリコアミノ酸４２）
【０５０９】
【化２２４】
2006507233.tif 000164
【０５１０】
（Ｔｎグリコアミノ酸４３）
【０５１１】
【化２２５】
2006507233.tif 000165
【０５１２】
（交差メタセシス反応の一般的手順）
エナミド６０（ガラクトース）の調製は、この手順の代表的なものである。
【０５１３】
（工程１：Ｌ−アリルグリシンの保護）
【０５１４】
【化２２６】
2006507233.tif 000166
【０５１５】
Ｌ−アリルグリシン（５５，２．５ｇ，２１．７ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ−Ｏ−スクシンイミド（８．６ｇ，２５．５ｍｍｏｌ，１．２等量）を、２００ｍＬアセトン：水（３：１）混合物中で混合し、固体ＮａＨＣＯ３（１８．２ｇ，２１７ｍｍｏｌ，１０．０等量）で処理した。この反応物を、室温で２４時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（３００ｍＬ）およびブライン（３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。未精製のカルバメートを、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中に溶解し、ＮａＨＣＯ３（５．５ｇ，６５．１ｍｍｏｌ，３．０等量）およびベンジルブロミド（２５．４ｍＬ，２１７ｍｍｏｌ，１０．０等量）で処理した。反応混合物を、室温で２４時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈し、そして水（２×２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、シリカゲルクロマトグラフィー（１２〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製し、白い固体として７．９ｇ（８６％）の５５を得た：
【０５１６】
【化２２７】
2006507233.tif 000167
【０５１７】
（工程２：交差メタセシス反応）
【０５１８】
【化２２８】
2006507233.tif 000168
【０５１９】
ペルアセチル化Ｏ−アリル−Ｄ−ガラクトース（５７，１８５ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２中Ｆｍｏｃ−Ｌ−アリルグリシン−ＯＢｎ（５６，１．０１ｇ，２．３８ｍｍｏｌ，５．０等量）で混合し、そしてビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ルテニウムＧｒｕｂｂｓ触媒５８（３９ｍｇ，０．０４７ｍｍｏｌ，０．１等量）で処理した。反応物を加熱して還流させた。６時間後、さらなる０．１等量の触媒をさらに加えた。反応物を、１２時間（全てで）後室温まで冷却し、シリカゲルクロマトグラフィー（２０−２８−３２−４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製し、３９２ｍｇ（５．０等量の３９％）の回収された５８と共に、メタセシス生成物５９（２５０ｍｇ，７０％）を得た。
【０５２０】
（工程３：触媒水素添加：）
【０５２１】
【化２２９】
2006507233.tif 000169
【０５２２】
Ｅ：Ｚ混合物５９（２６ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）を、１．１ｍＬメタノール：水（１０：１）中に溶解し、３％Ｐｔ／Ｃ（２６ｍｇ）で処理した。反応フラスコを、水素バルーン下で１２時間撹拌し、その後濾過して固体触媒を除いた。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（６４％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１％ＡｃＯＨを含む）により精製し、アミノ酸６０（２０ｍｇ，８７％）を得た：
【０５２３】
【化２３０】
2006507233.tif 000170
【０５２４】
（Ｇｌｏｂｏ−Ｈグリコアミノ酸１０３）
塩化メチレン（０．０５ｍＬ）中、ペルアセチル化Ｇｌｏｂｏ−Ｈアリルグリコシド（２０ｍｇ，０．０１１ｍｍｏｌ，Ｒｅｆ：Ｐａｒｋ，Ｔ．Ｋ．；Ｋｉｍ，Ｉ．Ｊ．；Ｈｕ，Ｓ．；Ｂｉｌｏｄｅａｕ，Ｍ．Ｔ．；Ｒａｎｄｏｌｐｈ，Ｊ．Ｔ．；Ｋｗｏｎ，Ｏ．；Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ。１９９６、１１８、１１４８８−１１５００）およびＦｍｏｃ−Ｌ−アリルグリシンベンジルエステル（２４ｍｇ，０．０５６ｍｍｏｌ，５．０等量）を、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ルテニウムＧｒｕｂｂｓ触媒（２ｍｇ，０．００１ｍｍｏｌ，０．１等量）で処理した。反応物を、加熱して還流した。６時間後、さらなる０．１等量の触媒をさらに加えた。反応物を、１２時間（全てで）後室温まで冷却し、シリカゲルクロマトグラフィー（８０〜９０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製し、メタセシス生成物（１１６ｍｇ，６９％）を得た。Ｅ：Ｚ混合物（２０ｍｇ，０．００９ｍｍｏｌ）を、０．５５ｍＬのメタノール：水（１０：１）中に溶解し、そして３％Ｐｔ／Ｃ（２０ｍｇ）で処理した。反応フラスコを、１２時間の間水素バルーン下で撹拌し、続いて濾過により固体の触媒を除いた。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ−１％ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ）により精製し、白色固体としてＧｌｏｂｏ−Ｈアミノ酸（１７ｍｇ，９０％）を得た：
【０５２５】
【化２３１】
2006507233.tif 000171
【０５２６】
（Ｎ−Ｂｏｃ脱保護のための一般的手順）
所望のグリコアミノ酸（０．１００ｍｍｏｌ）を、撹拌しながらＣＨ２Ｃｌ２中に溶解した。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（３．０ｍＬ）を、滴下して加え、そして反応物を室温で１時間撹拌した。次いで、この混合物を、乾燥Ｎ２の気流で濃縮し、無水ベンゼン（２×５ｍＬ）でアゼオトロープ化して、ＴＦＡ塩として未精製のアミンを得、これを、代表的にさらなる精製なしで使用した。
【０５２７】
（ＴＳＥエステル脱保護の一般的手順）
所望のグリコアミノ酸（０．１００ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１．０ｍＬ〜３．０ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却した。ＴＢＡＦの１．０ｍＭのＴＢＦ溶液（０．２５０ｍｍｏｌ，２．５等量）を、滴下で加え、氷浴を取り除き、反応物をＴＬＣにより判断されるように１〜２時間の間室温で撹拌した。（注記：延長された反応時間、すなわち、＞１０時間は、脱アセチル化を生じ得る。）この反応混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）で希釈し、０．０５Ｍ水性ＨＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、追加のＣＨ２Ｃｌ２（２×１０ｍＬ）で逆抽出した。合わされた有機層を、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。未精製の酸を、さらなる精製なしに代表的に使用した。酸３６：
【０５２８】
【化２３２】
2006507233.tif 000172
【０５２９】
（ＢＯＰ試薬で促進されたペプチド結合のための一般的手順）
所望のアミンおよび酸（モル等量）を、無水ベンゼンと共にアゼオトロープ化し、高度な真空で乾燥した。この混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（０．１〜０．０５Ｍ）中に溶解し、ＢＯＰ試薬（１．２５等量）を追加し、溶液を１５分間の間０℃に冷却した。Ｈｕｎｉｇ塩基（１５等量）の滴下に続いて、氷浴を取り除いた。反応物を、ＴＬＣにより判断しながら、室温で２〜４時間撹拌した。反応混合物の濃縮に続いて、フラッシュクロマトグラフィーによる精製を行った。副生成物ＨＭＰＡを除去するのが困難である場合、ペプチドを、セファデックス精製（ＬＨ−２０，ＭｅＯＨ）に供した。
【０５３０】
（メルカプトアセトアミドスペーサーを有するＮ−Ｂｏｃ  Ｔｎ）
５４％、無色オイル；
【０５３１】
【化２３３】
2006507233.tif 000173
【０５３２】
（ＬｅＹ／Ｔｎジペプチド５１）
８６％、白色フィルム；
【０５３３】
【化２３４】
2006507233.tif 000174
【０５３４】
（Ｎ−Ｂｏｃ  Ｇｌｏｂｏ−Ｈ／Ｌｅｙ／Ｔｎトリペプチド）
６４％、白色フィルム；
【０５３５】
【化２３５】
2006507233.tif 000175
【０５３６】
（Ｎ−Ａｃキャップ化Ｂｌｏｂｏ−Ｈ／Ｌｅｙ／Ｔｎトリペプチド５３）
９５％、白色フィルム；
【０５３７】
【化２３６】
2006507233.tif 000176
【０５３８】
（完全に脱保護されたＧｌｏｂｏ−Ｈ／ＬｅＹ／Ｔｎトリペプチド５４）
９８％、白色フィルム；
【０５３９】
【化２３７】
2006507233.tif 000177
【０５４０】
（３）二官能性架橋方法を使用するポリ炭水化物（ｇｌｏｂｏ  Ｈ，Ｌｅｙ，Ｔｎ）クラスター−ＫＬＨ結合体の調製：）
ポリ炭水化物（ｇｌｏｂｏ  Ｈ，Ｌｅｙ，Ｔｎ）クラスターを、ヘテロ二官能性試薬であるマレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）を使用して以下で記載されるように結合体化した。中性のｐＨで、これは、アミノ基をスクシンイミドと架橋させ、次いで、チオール基をマレイミドと架橋させる。チオール基は、クラスターのペプチドバックボーンのシステイン残基により提供され、そしてアミノ基は、ＫＬＨのＮ末端およびリシン側鎖により提供される。ＭＢＳのＫＬＨへの結合後、反応していないＭＢＳは、カラムにより精製され、そして合成ポリ炭化水素クラスター上のシステインに架橋される。結合していない抗原は、３０，０００分子量カットオフを有するＣｅｎｔｒｉＰｒｅｐ  ３０フィルターを通って反応混合物の経路により取り除かれる。次いで、エピトープ比は、標準的方法によるタンパク質含有量を概算し、パルス化電流測定検出（ＨＰＡＥＣ−ＰＡＤ）法を用いて高ｐＨアニオン交換クロマトグラフィーにより炭水化物含量を概算することにより算出される。
【０５４１】
（４）二官能性架橋剤法を使用するポリ炭水化物（ＴＦ，Ｌｅｙ，Ｔｎ）クラスター−ＫＬＨ結合体の調製：）
ポリ炭水化物（ＴＦ，Ｌｅｙ，Ｔｎ）クラスターを上の３）で記載されるものと類似の様式で調製した。
【０５４２】
（Ｄ．実施例４：ｎ−アルキレンＧｂ３およびその結合体の合成）
（１）合成の議論：）
上で議論されるように、本発明の一つの局面において、Ｇｂ３ペンテニルグリコシド８０の合成が、提供される（スキーム２を参照のこと）。本発明の１つの実施形態において、公知の単糖類６８および７０から出発する二糖類７３の合成が、第一に着手された。糖類６８は、ジオキソピラノン６９として保護された。７０の選択的な保護は、ジベンジルエーテル７１を与えた。
【０５４３】
適切な条件の下での７０と７１とのカップリングから所望の二糖７２を得て、これは、ＮａＨの存在下でのＢｎＢｒとの反応によって、二糖７３を生成する。７３の部分的な脱保護後、ベンジルエーテルが中間体７５を生じるように第一級ヒドロキシル基および赤道結合ヒドロキシル基の再保護化を行い、適切な条件の下で、フッ化単糖ドナー７６との反応によって、三糖構築物７７を生じる。
【０５４４】
【化２３８】
2006507233.tif 000178
【０５４５】
しかし、一実施例において、ｎ−ペンテニルグリコシドの使用が、検討された（ｎ−ペンテニルグリコシドの総説については、Ｆｒａｓｅｒ−Ｒｅｉｄら、Ｓｙｎｌｅｔｔ、１９９２、９２７；Ｕｄｏｄｏｎｇら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９３、１１５、７８８６；Ｍｅｒｒｉｔｔら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９４、１１６、８３３４；Ｆｒａｓｅｒ−Ｒｅｉｄら、１９９０、５５、６０６８；Ｍｏｏｔｏｏら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８８、１１０、２６６２；Ｍｏｏｔｏｏら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８９、１１１、８５４０およびその中の参考文献を参照のこと）。Ｎ−ペンテニルグリコシドは、種々の反応条件および試薬に対して安定であるが、ハロゲン酸化剤との処理によるグリコシド化反応に対して容易に活性化される。それらの安定性およびそれらの活性化に必要な中性条件の結果として、ペンテニルグリコシドは、力学的研究および合成研究に対する有用な結合となることが示されている。従って、末端ペンテニル基、またはより一般的には、末端アルケニル基はまた、生物結合体化に対する機会を提供する。従って、一実施形態において、三糖７７を、ペンテニルアルコールおよび無水塩化亜鉛と反応させ（Ｇｏｒｄｏｎら、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓ．１９９０、２０６、３６１）、所望のＧｂ３  ｎ−ペンテニルグリコシド８０を生じ得る。実際、適切にペンテニルグリコシドを用いると、８０の全体的な脱保護化が可能である。
【０５４６】
特定の実施形態において、Ｇｂ３複合糖質は調製され得る。中間体８０のオゾン分解、それによって対応するアルデヒド誘導体を生成し、その後、シアノホウ化水素ナトリウムの媒介の下で、還元性アミノ化を用いてＫＬＨにカップリングさせ、全体的な脱保護化によって、所望のＧｂ３−ＫＬＨ複合糖質を生成する。
【０５４７】
（（２）実験）
（Ｎ−ペンテニルＧｂ３−ＫＬＨ複合糖質）
【０５４８】
【化２３９】
2006507233.tif 000179
【０５４９】
ナトリウム（３８ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ、６０．０当量）を、濃アンモニア液体（２５ｍＬ）に、−７８℃で添加した。ＴＨＦ（０．５ｍＬ）中のペンテニル三糖１（３７ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ；参照：Ａｌｌｅｎ，Ｊ．Ｒ．；Ａｌｌｅｎ，Ｊ．Ｇ．；Ｚｈａｎｇ，Ｘ．Ｆ．；Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｌ．Ｊ．；Ｚａｔｏｒｓｋｉ，Ａ；Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．；Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．；Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２０００、６、１３６６−１３７５）を生じる青色の溶液に添加し、この反応物を−７８℃で４５分間攪拌した。反応をクエンチするために、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）を添加し、その後、室温まで加温し、濃アンモニアをエバポレートした。固体ＮＨ４Ｃｌ（１００ｍｇ）を添加し、その後、固体のろ過を行なった。濾液を濃縮し、粗製糖を１：１：１  ＤＭＦ：ＴＨＦ：Ｅｔ３Ｎ（１．５ｍＬ）に溶解し、その後、ＤＭＡＰ（１ｍｇ）およびＡｃ２Ｏ（０．１４ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ、５３．０当量）を添加した。この反応物を室温で１５時間攪拌し、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、その後、水（５ｍＬ）で洗浄した。水相をＥｔＯＡｃ（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、シリカゲルクロマトグラフィー（７２％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって濃縮および精製し、ペルアセテート２（２０ｍｇ、８４％）を、無色の油として得た。
【０５５０】
【化２４０】
2006507233.tif 000180
【０５５１】
ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中のペルアセテート２（１８ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）を固体ＮａＯＭｅ（２４ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、２５．０当量）で処理し、室温で２４時間攪拌した。この反応物を、アンバーライトＩＲ−２０酸性樹脂（２０ｍｇ）でクエンチし、濾過し、逆相クロマトグラフィー（ＲＰ−１８  シリカゲル、２０％  ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ）によって精製し、Ｇｂ３三糖３（１１ｍｇ、９９％）を白色固体として得た。
【０５５２】
【化２４１】
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【０５５３】
（Ｅ．実施例５：Ｇｂ３−グリコシド−グリコアミノ酸および三量体Ｇｂ３グリコペプチド９０および９２の調製）
（１）Ｇｂ３グリコアミノ酸１０の合成（図２０Ｂ））
【０５５４】
【化２４２】
2006507233.tif 000182
【０５５５】
ナトリウム（１９３ｍｇ、８．４１ｍｍｏｌ、６０．０当量）を濃アンモニア液体（３０ｍＬ）に、−７８℃で添加した。ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中のグリカール４（１６２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ；参照：Ｐａｒｋ，Ｔ．Ｋ．；Ｋｉｍ，Ｉ．Ｊ．；Ｈｕ，Ｓ．；Ｂｉｌｏｄｅａｕ，Ｍ．Ｔ．；Ｒａｎｄｏｌｐｈ，Ｊ．Ｔ．；Ｋｗｏｎ，Ｏ．；Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９６、１１８、１１４８８−１１５００）を生じる青色の溶液に添加し、この反応混合物を−７８℃で４５分間攪拌した。反応をクエンチするために、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）を添加し、その後、室温まで加温し、濃アンモニアをエバポレートした。固体ＮＨ４Ｃｌ（４４５ｍｇ、８．４１ｍｍｏｌ、６０．０当量）を添加し、その後、固体のろ過を行なった。濾液を濃縮し、粗製糖を１：１：１  ＤＭＦ：ＴＨＦ：Ｅｔ３Ｎ（６．９ｍＬ）に溶解し、その後、ＤＭＡＰ（１０ｍｇ）およびＡｃ２Ｏ（０．７ｍＬ、７．４２ｍｍｏｌ、５３．０当量）を添加した。この反応物を室温で１５時間攪拌し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、その後、水（２５ｍＬ）で洗浄した。水相をＥｔＯＡｃ（２×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、シリカゲルクロマトグラフィー（９０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって濃縮および精製し、ペルアセテート５（１１２ｍｇ、９８％）を、白色のフォームとして得た。
【０５５６】
【化２４３】
2006507233.tif 000183
【０５５７】
ジクロロメタン（１ｍＬ）中グリカール５（１８１ｍｇ，０．２１３ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃まで冷却し、その後、２，２’−ジメチルジオキシラン（アセトン中０．０６Ｍ溶液を７ｍＬ、２．０当量）で処理した。この反応混合物を、減圧下で４５分間濃縮し、その後、ジクロロメタン（１ｍＬ）の添加、続くエバポレートによって、さらに乾燥させた。その間、温度を０℃に維持した。粗グリカールエポキシドを、１：１  ＴＨＦ：アリルアルコール混合物（４ｍＬ）中に溶解し、−７８℃まで冷却し、その後、ＺｎＣｌ２（ジエチルエーテル中１．０Ｍ溶液を０．２６ｍＬ、１．２当量）で処理した。この反応物を室温までゆっくりと加温し、その温度で１５時間維持した。ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を添加し、この溶液を、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、シリカゲルクロマトグラフィー（６０〜７６％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって濃縮および精製し、アリルグリコシド６（９９ｍｇ、５２％）を、無色の油として、６４ｍｇ（３４％）の対応する −マンノジアステレオマーとともに得た。
【０５５８】
【化２４４】
2006507233.tif 000184
【０５５９】
塩化メチレン（２．５ｍＬ）中アルコール６（８０ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｅｔ３Ｎ（０．０６ｍＬ、０．４３ｍｍｏｌ、５．０当量）、ＤＭＡＰ（１０ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ、１．０当量）および無水酢酸（０．０３５ｍＬ、０．３４６ｍｍｏｌ、４．０当量）で処理し、その後、室温で攪拌した。５時間後、この反応混合物をＮａＨＣＯ３の飽和溶液（１０ｍＬ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、シリカゲルクロマトグラフィー（６０〜６８％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、濃縮および精製し、ペルアセテート７（８１ｍｇ、９９％）を、無色のフォームとして得た。
【０５６０】
【化２４５】
2006507233.tif 000185
【０５６１】
塩化メチレン（０．０５ｍＬ）中のペルアセチル化Ｇｂ３アリルグリコシド７（１０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）とＦｍｏｃ−Ｌ−アリルグリシンベンジルエステル８（２５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、５．０当量）を、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ルテニウムＧｒｕｂｂｓ触媒（１ｍｇ、０．００１ｍｍｏｌ、０．１当量）処理した。この反応物を、灌流するまで、加熱した。６時間後、さらに０．１当量の触媒をさらに、添加した。この反応物を、１２時間（合計）後、室温まで冷却し、その後、シリカゲルクロマトグラフィー（４０％  アセトン／ヘキサン）によって精製し、複分解生成物９（９ｍｇ、７０％）を得た。Ｅ：Ｚ混合物９（７８ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）を、０．５５ｍＬのメタノール：水（１０：１）に溶解し、その後、３％  Ｐｔ／Ｃ（７０ｍｇ）で処理した。反応フラスコを、水素バルーンの元で１２時間攪拌し、その後濾過して固体触媒を除去した。このろ液を、濃縮し、その後シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ  １％  ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ）によって精製し、Ｇｂ３アミノ酸１０（５８ｍｇ、８１％）を白色固体として得た。
【０５６２】
【化２４６】
2006507233.tif 000186
【０５６３】
（２）三量体Ｇｂ３グリコペプチド９０および９２の合成）
以下に示すように、中間体１０のペプチドカップリングの後、生じた三量体ペプチドを適切なリンカーに結合させ、その後全体的な脱保護化によって、所望の三量体グリコペプチド９０を得る。適切な条件下でのＫＬＨへの結合によって、三量体グリコペプチド９２を得る。
【０５６４】
【化２４７】
2006507233.tif 000187
【０５６５】
（２）三量体Ｇｂ３グリコペプチド９１および９３（図２１）の合成−合成方法の考察）
上記のように、Ｇｂ３グリコアミノ酸を調製し得る。特定の実施形態において、単糖部分を介して脂肪族アミノ酸部分に結合したＧｂ３エピトープを含むＧｂ３グリコアミノ酸構築物を提供する。この末端に対して本発明者らが研究した合成経路は、適切に防御されたＧｂ３グリカール（７７）の初期合成に依存し、この合成を、本明細書に詳述する（図２０Ａおよび図２０Ｂ）ように実施した。進行中のグリカールとともに、本発明者らは、単糖アミノ酸８２受容体を還元末端に組み込む研究を開始した。いくつかの種々のドナー型（７８、７９、８０、８１）に関わらず、Ｇｂ３三糖と受容体８２のカップリングに関する努力は、成功しなかった（スキーム２）。
【０５６６】
【化２４８】
2006507233.tif 000188
【０５６７】
従って、本発明者らは、結局別のアプローチを研究した。そのアプローチによって、単糖アミノ酸受容体８２を、Ｇｂ３のＡＢ二糖部分にカップリングし、ついで、生じる付加物をＣ残基とカップリングさせ、それによって必要とするＧｂ３−ＧａｌＮＡｃグリコアミノ酸を生じる。この特質における最初の実験は、カップリングが実際ペルアシル化乳糖ドナー８４を使用して可能であることを示した（スキーム３）。
【０５６８】
【化２４９】
2006507233.tif 000189
【０５６９】
従って、直交性に保護されたラクタール（ｌａｃｔａｌ）残基８７を、このピースへの単糖アミノ酸アクセプター８２の導入のために調製した（スキーム４）。スキーム４（および図２１により詳細に）に示されるように、８７の対応するドナーへの変換、その後の、単糖アミノ酸アクセプター８２とのカップリング、ＰＭＢ基の除去および適切なガラクトースドナーとのカップリングにより、所望の糖アミノ酸８８を生じる。従って、特定の実施形態において、クラスター化したＧｂ３の改変体が提供される。Ｇｂ３のＧｌｏｂｏ−Ｈの還元端部に対する構造類似性を考慮すると、Ｇｂ３−ＧａｌＮＡｃ糖アミノ酸を合成するために開発されたアプローチは、潜在的に、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ由来の対応する糖アミノ酸の合成に適用可能である。
【０５７０】
【化２５０】
2006507233.tif 000190
【０５７１】
（Ｆ．実施例６：免疫学的研究）
本明細書中に提供されるような、本発明の糖結合体および糖ペプチドが、癌の処置に有用であり、被験体における抗体応答を誘導するのに有用であることが理解される。このような糖結合体および糖ペプチドの使用のための代表的なプロトコールは、以下により詳細に記載され、そしてまた、本明細書中に援用される特定の参考文献に詳述される。
【０５７２】
（１）ワクチンの調製）
結合体ワクチン６３および６４（図２３）を、以下のようにして調製した。ＫＬＨ（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ，ＭＯ，ＭＷ  ８．６×１０６）を、ｍ−マレミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＭＢＳ）（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）を使用して、記載されるように修飾した（Ｚｈａｎｇ，Ｓ．，Ｇｒａｅｂｅｒ，Ｌ．Ａ．，Ｈｅｌｌｉｎｇ，Ｆ．，Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．，Ａｄｌｕｒｉ，Ｓ．，Ｌｌｏｙｄ，Ｋ．Ｏ．＆Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５６，３３１５−３３１９）。ＴＦ、ＬｅｙおよびＴｎを含有する構築物６１、ならびに、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、ＬｅｙおよびＴｎを含有する構築物６２を、適切に保護された構成的糖アミノ酸からの溶液相ペプチド合成を使用する、全合成により調製した（Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｌ．Ｊ．，Ｈａｒｒｉｓ，Ｃ．Ｒ．，Ｇｌｕｎｚ，Ｐ．Ｗ．＆Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．（２０００）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．４１，９５０５−９５０８．Ａｌｌｅｎ，Ｊ．Ｒ．，Ｈａｒｒｉｓ，Ｃ．Ａ．＆Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．（２００１）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２３，１８９０−１８９７）。スルフヒドリル官能性を導入して、ＫＬＨへの接着を容易にした。合成材料の全体的な脱保護は、化合物６１および６２を明らかにした。マレイミド誘導体化ＫＬＨへの構築物６１および６２の添加は、混合物を室温で３時間インキュベートし、その後、３０，０００モレキュラーカットオフＣｅｎｔｒｉｐｒｅｐフィルターを使用して、未反応の合成糖ペプチドを取り除いた（Ｚｈａｎｇ，Ｓ．，Ｇｒａｅｂｅｒ，Ｌ．Ａ．，Ｈｅｌｌｉｎｇ，Ｆ．，Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．，Ａｄｌｕｒｉ，Ｓ．，Ｌｌｏｙｄ，Ｋ．Ｏ．＆Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５６，３３１５−３３１９）。
【０５７３】
（２）マウスの免疫化）
５匹のマウス（Ｃ５７ＢＬ；雌性、６週齢、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）の群を、以下のようにして皮下に免疫する：第１群−構築物６３（１０μｇ）＋ＱＳ−２１（１０μｇ）（Ａｎｔｉｇｅｎｉｃ  Ｉｎｃ．，ＮＹ，ＹＮ）で免疫；第２群−６２（１０μｇ）＋ＫＬＨ（６２に結合体化していない）＋ＱＳ−２１（１０μｇ）で免疫；第３群−４（３μｇ）＋ＱＳ−２１（１０μｇ）で免疫；第４群−６４（３μｇ）＋ＧＰＩ−０１００（１００μｇ）（Ｇａｌｅｎｉｃａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ）で免疫；第５群−１０４、１０５および１０６（各３μｇ）を含有する混合物＋ＱＳ−２１（１０μｇ）で免疫。マウスを、１日目、７日目、および１４日目に免疫し、３回目のワクチン接種の後１０日目に採血した。抗体の存在を、以前に記載されたように、適切な標的抗原（例えば、標的抗原としてｇｌｏｂｏ−Ｈ−セラミド、Ｌｅｙセラミドおよび／またはＴｎ（ｃ）−pamcys）を使用する酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によりアッセイした（Ｒａｇｕｐａｔｈｉら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９７，３６，１２５）。次いで、細胞表面反応性を試験し得、例えば、抗ｇｌｏｂｏＨ、ＬｅｙおよびＴｎ抗体の細胞表面活性が、フローサイトメトリーアッセイ（ＦＡＣＳ）により、ｇｌｏｂｏＨ、ＬｅｙおよびＴｎ陽性細胞について試験される。
【０５７４】
（３）血清学分析）
（酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ））
ＥＬＩＳＡを、以前に記載されたように実施した（Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．，Ｐａｒｋ，Ｔ．Ｋ．，Ｚｈａｎｇ，Ｓ．，Ｋｉｍ，Ｉ．Ｊ．，Ｇｒａｂｅｒ，Ｌ．，Ａｄｌｕｒｉ，Ｓ．，Ｌｌｏｙｄ，Ｋ．Ｏ．，Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．＆Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．（１９９７）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３６，１２５−１２８）。簡潔には、ＥＬＩＳＡプレートを、糖脂質については０．３μｇ／ウェル、糖タンパク質については０．２μｇ／ウェルで、合成Ｇｌｏｂｏ−Ｈ−セラミド、もしくは、卵巣嚢腫流体から精製されたＬｅｙおよびＬｅｂを発現するムチン、または、０．１Ｍの炭酸緩衝液（ｐＨ１１）中のＴｎ−ＨＡＳもしくはＧｌｏｂｏ−Ｈ−Ｌｅｙ−Ｔｎ−ＨＳＡのいずれかでコーティングした（Ｌｌｏｙｄ，Ｋ．Ｏ．，Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，Ｌａｙｕｇ，Ｅ．Ｊ．＆Ｇｒｕｅｚｏ，Ｆ．（１９６６）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ５，１４８９−１５０１）。連続希釈した抗血清を各ウェルに添加し、アルカリホスファターゼ結合体化ヤギ抗マウスＩｇＭまたは抗マウスＩｇＧを１：２００の希釈で添加した（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ，Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ）。４１４ｎｍにて吸光度を測定した。ＥＬＩＳＡ力かを、０．１または、正常コントロールであるマウス血清の吸光度以上のを得る最も高い希釈として規定する。
【０５７５】
（４）ＦＡＣＳにより決定される細胞表面反応性）
免疫血清の細胞表面反応性を、以前に記載されたように、ヒト細胞株に対して試験した（Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．，Ｐａｒｋ，Ｔ．Ｋ．，Ｚｈａｎｇ，Ｓ．，Ｋｉｍ，Ｉ．Ｊ．，Ｇｒａｂｅｒ，Ｌ．，Ａｄｌｕｒｉ，Ｓ．，Ｌｌｏｙｄ，Ｋ．Ｏ．，Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．＆Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．（１９９７）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３６，１２５−１２８）。簡潔には、反応性を、試験される抗Ｇｌｏｂｏ−Ｈ抗体、抗Ｌｅｙ抗体および抗Ｔｎ抗体を使用して、ＭＣＦ−７（Ｇｌｏｂｏ−ＨおよびＬｅｙ陽性）およびＬＳ−Ｃ（ＴｎおよびＬｅｙ陽性）細胞（Ｄｒ．Ｓ．Ｈ．Ｉｔｚｋｏｗｉｔｚ，（Ｍｔ．Ｓｉｎａｉ  Ｈｏｓｐｉｔａｌ，ＮＹ）により提供された）に対して評価した（Ｏｇａｔａ，Ｓ．，Ｃｈｅｎ，Ａ．＆Ｉｔｚｋｏｗｉｔｚ，Ｓ．Ｈ．（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５４，４０３６−４０４４）。単一の２×１０５細胞／チューブの細胞懸濁物を、３％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）および０．０１Ｍ  ＮａＮ３を補充したＰＢＳ中で洗浄し、２０μｌの１：２０希釈した抗血清またはモノクローナル抗体と共に、氷上で３０分間インキュベートした。陽性コントロールであるｍＡｂは、合成Ｇｌｏｎｏ−Ｈに対するＶＫ−９（Ｋｕｄｒｙａｓｈｏｖ，Ｖ．，Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．，Ｋｉｍ，Ｉ．Ｊ．，Ｂｒｅｉｍｅｒ，Ｍ．Ｅ．，Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．，Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．＆Ｌｌｏｙｄ，Ｋ．Ｏ．（１９９８）ＧｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＪｏｕｒｎａｌ  １５，２４３−２４９）、Ｌｅｙに対する３Ｓ１９３（Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．，Ｇａｒｒｉｇｕｅｓ，Ｈ．Ｊ．，Ｇａｒｒｉｇｕｅｓ，Ｕ．＆Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｋ．Ｅ．（１９９０）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５０，２１８３−２１９０）およびＴｎに対するαＴｎ（ＤＡＫＯ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ）であった。ＰＢＳ中の３％  ＦＣＳで２回洗浄した後、２０μｌの１：１５希釈した、フルオレセインチオシアネート（ＦＩＴＣ）標識化ヤギ抗マウスＩｇＭまたはＩｇＧを、添加し、混合物を３０分間インキュベートした。最後の洗浄の後、陽性集団および平均蛍光強度の染色された細胞を、ＦＡＣＳｃａｎ（Ｂｅｃｔｏｎ＆Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，ＣＡ）を使用して区別した。
【０５７６】
（５）免疫学研究の考察）
上記のように、本発明の１つの局面において、多重抗原性糖ペプチドが提供される。特定の例示的な実施形態において、本発明の多重抗原性糖ペプチドは、斜方晶系の構造であり、腫瘍細胞表面上に見出される３つの異なる炭化水素ドメインを含む。１つの実施形態において、図２３に示されるように、本発明の糖ペプチドは、Ｔｆ、ＴｎおよびＬｅｙのエピトープを含む（構築物６１）。別の実施形態において、本発明の糖ペプチドは、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、ＴｎおよびＬｅｙのエピトープを含む（構築物６３）。
【０５７７】
本明細書中に記載される研究において、ＱＳ−２１の存在下で投与される場合に（Ｋｅｎｓｉｌ，Ｃ．Ｒ．，Ｐａｔｅｌ，Ｕ．，Ｌｅｎｎｉｃｋ，Ｍ．＆Ｍａｒｃｉａｎｉ，Ｄ．（１９９１）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６，４３１−４３７）、または、比較の目的で、関連するが、毒性の少ないア襦袢後ＧＰＩ−０１００の存在下で投与される場合に（Ｍａｒｃｉａｎｉ，Ｄ．Ｊ．，Ｐｒｅｓｓ，Ｊ．Ｂ．，Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，Ｒ．Ｃ．，Ｐａｔｈａｋ，Ａ．Ｋ．，Ｐａｔｈａｋ，Ｖ．，Ｇｕｎｄｙ，Ｌ．Ｅ．，ｆａｒｍｅｒ，Ｊ．Ｔ．，Ｋｏｒａｔｉｃｈ，Ｍ．Ｓ．＆Ｍａｙ，Ｒ．Ｄ．（２０００）Ｖａｃｃｉｎｅ  １８，３１４１−３１５１）６４の免疫学的特性が試験される。コントロールとして、結合体化していない化合物６２の免疫原性を評価し、ＫＬＨに結合体化された単量体抗原の各々を含有する混合物（１０４、１０５および１０６、図２５）についても同時に調査を行った。後者の実験を、多価の構築物  対  単量体の混合物を用いるワクチンに応答する、個々の抗原の各々に対する単一のマウスによる応答を比較する目的で実施した。ワクチンの形成に関連する問題に取り組むために、構築物内での各抗原に対する免疫応答のレベルを決定した。さらに、臨床治験の予想において、このようにした作製された抗体の、インビトロでの、個々の抗原を発現することが知られているヒト細胞株と反応する能力を評価した。
【０５７８】
特定の他の実施形態において、本発明の糖ペプチドを、適切なキャリアに、直接または、リンカーもしくはリンカー−クロカー部分を介して間接的に結合体化する。上記のように、キャリアは、タンパク質、ポリペプチドまたは脂質であり得る。特定の例示的な実施形態において、本発明の糖ペプチドは、非常に免疫原性なタンパク質キャリアであるＫＬＨと結合体化される。ワクチン候補物６３および６４は、それぞれ、全て合成の糖ペプチド６１および６２を、非常に免疫原性なタンパク質キャリアであるＫＬＨと結合体化することによって調製した。構築物中に存在する腫瘍関連抗原に対する免疫応答を増強するために、ＱＳ−２１または関連する化合物ＧＰＩ−０１００をアジュバントとして使用した。２つの可能性のある結合体ワクチン最初のＥＬＩＳＡ実験（データ示さず）は、構築物６４が、免疫学的な観点から６３より優れていることが示され、引き続いて、構築物６４を徹底的に調べた。著しく、６４に応答して惹起される抗体は、ＥＬＩＳＡにおいて個々の抗原を同定し得るだけでなく、ＦＡＣＳ分析により決定されるように、この抗体はまた、各腫瘍関連抗原を選択的に発現することが知られている腫瘍細胞と強力に反応する。
【０５７９】
１つ以上の抗原が、ワクチン接種の間に投与される場合、個々の抗原に対する抗体応答の程度に、多数の因子が影響し得る。別々の病原ワクチン（例えば、ジフテリア、破傷風、無細胞百日咳、Ａ型肝炎、インフルエンザ菌、ｂ型破傷風毒素結合体、および不活性化灰白髄炎）の組み合わせは、一般に、別々に投与されても、同時に投与されても、または、連続的に投与されても、個々の成分に対して類似の抗体応答を生じる。
【０５８０】
【化２５０Ａ】
2006507233.tif 000191
【０５８１】
同様に、精製された細菌カプセル多糖を合わせることによって、個々の多糖成分の免疫原性を減少するようには見えない。対照的に、結合体ワクチンについて、いくつかの因子が、特に、単量体結合体ワクチンが、カクテル様アプローチを用いて合わせられ、投与される場合に、潜在的に、個々の抗原に応答する抗体に影響を及ぼし得る。
【０５８２】
【化２５０Ｂ】
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【０５８３】
いくつかの例において、キャリアへの曝露が、引き続くチャレンジの際に増幅された応答を生じ、それによって、同じキャリアタンパク質と結合体化された抗原に対する抗体産生の増加を生じるようである（Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｐ．（１９８３）Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ＆Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３９，２３３−２３８；Ｋｕｒｉｋａ，Ｓ．（１９９６）Ｖａｃｃｉｎｅ  １４，１２３９−１２４２を参照のこと）。他の場合において、キャリアへの曝露の前に、キャリアのみに対し、結合体化した抗原には効かない抗体レベルの増加が生じる。
【０５８４】
【化２５０Ｃ】
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【０５８５】
同じキャリアを含有する結合体ワクチンまたは、結合体化していない形態のキャリアの同時投与を併用することによって、標的抗原に対する抗体応答の減少が生じ得る。
【０５８６】
【化２５０Ｄ】
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【０５８７】
任意の特定の理論に束縛されることは望まないが、出願人は、これらの合併症が、同じ結合体ワクチン上の種々の抗原の組み合わせにより回避され得ることを提案する。いくつかの抗原を同じ構築物内で合わせる際に、１つ以上のメンバーに対する免疫応答が抑制され得る可能性があった。さらに、１つ以上の抗原に関連する交差反応性が観察され得、これは、細胞表面上に示される特定の抗原に対する減少した親和性を有する抗体集団の部分を生じることが予想される。このことを考慮して、被験体における免疫応答に対して異なる抗原を有する糖ペプチドの投与の効果を調べた。驚くべきことに、化合物６４を用いる研究は、６４を用いる免疫化の全行程にわたって抗体力価の実質的な減少がなかったことを明らかにした。さらに、ＥＬＩＳＡおよびＦＡＣＳでの分析により評価されるように、構築部内の個々の抗原に対する抗体応答の現弱の徴候は見られなかった。実際、クラスター化した構築物内の各個々の抗原についての抗体応答は、個々の単量体の混合物を投与した場合に観察されるものと類似した。潜在的な治療の観点からさらにより有意なのは、単量体の混合物と比較して、多価の構築物に対して惹起される抗体は、ＦＡＣＳ分析により決定されるように、ネイティブな抗原を発現するヒト細胞株と等しいか、または、非常に反応性を示したことである。興味深いことに、多価の構築物を用いてワクチン接種から生じる血清を、多価の構築物自体に対してスクリーニングする場合、比較的高いＥＬＩＳＡベースの抗体力価が観察されるが（表５を参照のこと）、ＦＡＣＳベースの分析（表６を参照のこと）は、単量体由来の血清とちょうど同じ程度に反応したことを示した。この場合、ＥＬＩＳＡベースのデータは、多価の構築物において抗原の間で抗体の交差反応が実際に存在したことを示唆するようである。しかし、ＦＡＣＳのデータは、この交差反応が、細胞表面上の抗原の認識に影響を及ぼさないことを明確に示唆する。
【０５８８】
（Ｇｌｏｂｏ−Ｈ−Ｌｅｙ−Ｔｎ構築物（６２）に対する抗体応答）
６４で免疫化したマウス由来の血清における、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ−Ｌｅｙ−Ｔｎに対するＥＬＩＳＡ抗体力価を決定し、結果を表５にまとめる。ＩｇＧおよびＩｇＭ力価を示さない、予めワクチン接種した血清と比較して、比較的強いＩｇＭおよびＩｇＧの力価が、６４でワクチン接種したマウスにおいて検出された。構築物６４は、ＩｇＭおよびＩｇＧ抗体の両方を誘導し、ＧＰＩ−０１００群が、ＱＳ−２１群と比較して、有意に高い力価を誘導した。第５群は、第３群および第４群と比較した場合、多価の構築物に対して非常に低いＩｇＭおよびＩｇＧ力価を誘導した（表５を参照のこと）。
【０５８９】
（Ｇｌｏｂｏ−Ｈセラミドに対する抗体応答）
６４を用いて免疫したマウス由来の血清におけるＧｌｏｂｏ−Ｈ−セラミドに対するＥＬＩＳＡ抗体力価を決定した。表５にまとめるように、弱いＩｇＭ力価が、予めワクチン接種した血清において検出され、その一方で、６４を用いてワクチン接種した後に得られた血清は、ＩｇＭおよびＩｇＧの増加した力価を示した。第３群と第４群との間にはＩｇＭ力価に差は検出されなかった。しかし、ＱＳ−２１を受けた群は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈに対するしてＩｇＧを誘導したが、ＧＰＩ−０１００を受けた群は、誘導しなかった。第５群から得られた血清は、全ての他の群と比較して、Ｇｌｏｂｏ−Ｈと強力に反応した。
【０５９０】
（Ｌｅｙに対する抗体応答）
６４を用いて免疫したマウス由来の血清においてＬｅｙに対するＥＬＩＳＡ抗体力価を試験し、結果を表５にまとめる。第１群を除いて、検出可能な抗Ｌｅｙ抗体は、予めワクチン接種した血清中に存在しなかった。一般に、６４または３つのワクチンの混合物でのワクチン接種後に得られる血清は、ＥＬＩＳＡによりＬｅｙと比較的強く反応した。構築物６４は、Ｌｅｙに対してＩｇＭとＩｇＧの両方を誘導した。抗体産生においては、それぞれＱＳ−２１およびＧＰＩ−０１００を受けた第３群と第４群との間には差が認められなかった。構築物６３または単量体構築物１０４、１０５および１０６を含有する混合物で免疫したマウスの間には、抗体力価の差は認められなかった。
【０５９１】
（Ｔｎ抗原に対する抗体応答）
６４ならびに１０４、１０５および１０６の混合物を用いて免疫したマウス由来の血清におけるＴｎ−ＨＳＡに対するＥＬＩＳＡ抗体力価を決定した。表５にまとめるように、予めワクチン接種した血清においては、ＩｇＭまたはＩｇＧ活性は検出されなかった。第３群および第４群は、ともに、Ｔｎに対してＩｇＭおよびＩｇＧ力価の両方を誘導したが、アジュバンＧＰＩ−０１００は、アジュバントＱＳ−２１によりも１倍高い力価を誘導した。第５群はまた、Ｔｎ抗原に対して高いＩｇＧ力価を示した。
【０５９２】
（細胞表面の反応性）
血清の細胞表面の反応性を、ＭＣＦ−７細胞株（Ｇｌｏｂｏ−ＨおよびＴｎ陽性）およびＬＳ−Ｃ細胞株（ＴｎおよびＬｅｙ陽性）を使用するフローサイトメトリーにより試験した。結果を表６にまとめ、第３、４および５群についてのＭＣＦ−７に対するＦＡＣＳのヒストグラムを図２５に示す。全ての予めワクチン接種したマウスから得られた血清は、最低の反応性（＜１０％陽性細胞）を示した。ワクチン接種の後、第３、４および５群は、ＭＣＦ−７細胞に対して有意なＩｇＭ反応性および低いＩｇＧ反応性を示した。ＭＣＦ−７に対する細胞表面反応性における有意な差は、構築物６４（第３群）または構築物１０４、１０５および１０６の混合物（第５群）でワクチン接種した後に得られる血清で観察されなかった。そしてまた、アジュバントＱＳ−２１（第３群）とＧＰＩ−０１００（第５群）との間の細胞表面反応性には、差は明らかでなかった。
【０５９３】
任意の特定の理論に束縛されることは望まないが、出願にンは、これらの多重抗原性ワクチンに対する抗体応答の抑制の欠如が、ＫＬＨ／アジュバント併用に起因し得ることを提案する。
【０５９４】
【化２５０Ｅ】
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【０５９５】
キャリアとしてのＫＬＨ、アジュバントとしてのＱＳ−２１の使用は、強力なヘルパーＴ細胞型１応答を生じることが示されている（Ｈｅｌｌｉｎｇ，Ｆ．，Ｓｈａｎｇ，Ａ．，Ｃａｌｖｅｓ，Ｍ．，Ｚｈａｎｇ，Ｓ．，Ｒｅｎ，Ｓ．，Ｙｕ，Ｒ．Ｋ．，Ｏｅｔｔｇｅｎ，Ｈ．Ｆ．＆Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５４，１９７−２０３を参照のこと）。このことは、ＧＰＩ−０１００についての場合と同様に、ＱＳ−２１に対するその密接な構造的関係性を考慮する傾向にある。ＫＬＨは、種々の他の標準的なタンパク質よりも免疫原性キャリアとしてより有効であることが報告されている。ＧＤ３−ＫＬＨ結合体およびＭＵＣ１−ＫＬＨ結合体について、ＱＳ−２１のようなアジュバントが、マウスにおいて、結合体単独の使用と比較して、１０００〜１００，０００倍の抗体応答の増強を誘導することが示されている（Ｋｉｍ，Ｓ．Ｋ．，Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．，Ｍｕｓｓｅｌｌｉ，Ｃ．，Ｃｈｏｉ，Ｓ．Ｊ．，Ｐａｒｋ，Ｙ．Ｓ．＆Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．（２０００）Ｖａｃｃｉｎｅ  １８，５９７−６０３；およびＫｉｍ，Ｓ．，Ｒａｇｕｐａｔｈｉ，Ｇ．，Ｃａｐｐｅｌｌｏ，Ｓ．，Ｋａｇａｎ，Ｅ．＆Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ，Ｐ．Ｏ．（２０００）Ｖａｃｃｉｎｅ  １９，５３０−５３７を参照のこと）。しかし、本研究における本発明者らの目的は、主に、多価の結合対ワクチンが、個々の成分に対する免疫原性を明らかに欠くことなく投与され得るか否かを決定することであるので、本発明者らは、この系を飽和することを意図しなかった。
【０５９６】
いくつかの他の観察が特筆すべきである。ＧＰＩ−０１００は、ＱＳ−２１よりも毒性が低いので、より多い量のＧＰＩ−０１００が、マウスに安全に投与され得、このことは、抗体産生において比例した増加を生じた。また、抗体産生に関して、一般に、構築物６３は、６４よりも低い力価を生じた。６３と６４との間の構造的な相違が、これらのワクチンについて観察される免疫学的変化の説明となり得る。化合物６３は、ムチン糖タンパク質のより正確な模倣物である。ムチン−Ｏ−結合ＧａｌＮＡｃコアを含有するクラスター化した糖アミノ酸は、グリカンとペプチド骨格との間の特定の相互作用の結果として、非常に短い糖ペプチドの場合でさえ、非常に剛性である（Ｄｏｎ  Ｍ．Ｃｏｌｔａｒｔ，Ａｊａｙ  Ｋ．Ｒｏｙｙｕｒｕ，Ｌａｗｒｅｎｃｅ  Ｊ．Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｐｅｔｅｒ  Ｗ．Ｇｌｕｎｚ，Ｄａｌｉｂｏｒ  Ｓａｍｅｓ，Ｓｃｏｔｔ  Ｄ．Ｋｕｄｕｋ，Ｊａｃｏｂ  Ｂ．Ｓｃｈｗａｒｚ，Ｘｉａｏ−Ｔａｏ  Ｃｈｅｎ，Ｓａｍｕｅｌ  Ｊ．Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｄａｖｉｄ  Ｈ．ＬｉｖｅＪ  Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．印刷中）。従って、このような構造ベースの相互作用の結果として、細胞表面分子の公知の構築的特性に忠実なムチン模倣物の使用は、免疫応答の間にペプチド骨格上に提示される個々の構成的抗原の同定を妨害し得る。さらに、ムチンベースのワクチン構築物（６３）のマウスにおけるその自己抗原に対する密接な類似性は、寛容を中断することをより困難にし得る。
【０５９７】
まとめると、本明細書中に記載されるようないくつかの異なる炭化水素抗原を有する単一のワクチン構築物は、特定の癌の型に関連する細胞の異種集団の最適な標的化に必要とされる、多面的な免疫応答を刺激する能力を有する。従って、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、ＬｅｙおよびＴｎは各々、前立腺癌において過剰発現しているので、６４でのワクチン接種は、広範囲の抗体を強力に誘導し得、これらの抗体は、より広範囲の異常細胞に対する免疫サーベイランスを達成する可能性が高い。当業者は、本明細書中に開示されるこれらの構築物の調製のために、本明細書中に開示される方法、ならびに、本明細書中以外に開示される方法（例えば、Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｌ．Ｊ．，Ｈａｒｒｉｓ，Ｃ．Ｒ．，Ｇｌｕｎｚ，Ｐ．Ｗ．＆Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．（２０００）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．４１，９５０５−９５０８；Ａｌｌｅｎ，Ｊ．Ｒ．，Ｈａｒｒｉｓ，Ｃ．Ａ．＆Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ，Ｓ．Ｊ．（２００１）Ｊ  Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２３，１８９０−１８９７ならびに米国特許出願番号０９／０８３，７７６および同０９／２７６，５９５を参照のこと）が、グリコシル化のより複雑なパターンおよびより精巧なペプチドモチーフを含めることに容易に適合可能であり、これらが、免疫系の他の要素を活性化し得ることを理解する。
【０５９８】
【化２５１】
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【０５９９】
【化２５２】
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【図面の簡単な説明】
【０６００】
【図１】図１は、フコシルＧＭ１、その誘導体および構築物を示す。
【図２】図２は、ＡＢＣ三糖４の合成を示し、チオエチルドナー５を示す。
【図３】図３は、六糖６ａの合成およびｔｈｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  フコシルＧＭ１ペンチルグリコシド１ｂの合成を示す。試薬：（ａ）ＭｅＯＴｆ、ＣＨ２Ｃｌ２：Ｅｔ２Ｏ（２：１）、０℃、２３％；（ｂ）（ｉ）ＤＭＤＯ、ＣＨ２Ｃｌ２；（ｉｉ）ＰｎＯＨ、ＺｎＣｌ２、−７８℃、６５％；（ｃ）ＴＢＡＦ、ＡｃＯＨ、ＴＨＦ；（ｄ）ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ；（ｅ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ；（ｆ）Ｎａ／ＮＨ３、ＴＨＦ  −７８℃、次いでＭｅＯＨ；（ｇ）Ａｃ２Ｏ、ピリジン、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃ１２、４６％  ５工程。
【図４】図４は、三糖アクセプター１５の合成を示す。試薬：（ａ）Ａｇ２ＣＯ３、触媒Ｉ２、ＰｎＯＨ、ＣＨ２Ｃｌ２、７５％；（ｂ）ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ；（ｃ）アセトン、触媒ＰＰＴＳ、４４％  ２工程；（ｄ）ＢｎＢｒ、ＮａＨ、ＤＭＦ；８４％；（ｅ）８０％  ＡｃＯＨ：Ｈ２Ｏ、９０％；（ｆ）３，ＴＭＳＯＴｆ、ＥｔＣＮ、モレキュラーシーブ、−４０℃、７７％。
【図５】図５は、フコシルＧＭ１ペンテニルグリコシドの合成を示す。試薬：（ａ）ＭｅＯＴｆ、ＣＨ２Ｃｌ２：Ｅｔ２Ｏ、０℃、７０％；（ｂ）ＴＢＡＦ、ＡｃＯＮ、ＴＨＦ；（ｃ）ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ；（ｄ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ；（ｅ）Ｎａ／ＮＨ３、ＴＨＦ、−７８℃、次いで、ＭｅＯＨ；（ｆ）Ａｃ２Ｏ、ピリジン、ＤＭＡＰ、ＣＨ２Ｃｌ２、４５％  ５工程、（ｇ）工程ｃ〜ｄ、９６％。
【図６】図６は、フコシルＧＭ１  ＫＬＨ結合体１ｃの合成を示す。
【図７】図７は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、その誘導体および構築物を示す。
【図８】図８は、ｇｌｏｂｏ−Ｈおよびその構築物の第２の合成のための合成スキームを示す。
【図９】図９は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈおよびその結合体のレトロ合成的分析を示す。
【図１０】図１０は、グリコシド２５およびチオエチルドナー２８の合成を示す。試薬：（ａ）ＨＢｒ、Ａｃ２Ｏ、ＡｃＯＨ、９６％；（ｂ）ＰｅｎｔＯＨ、Ａｇ２ＣＯ３、ＣＨ２Ｃｌ２、４Ａモレキュラーシーブ、７５％；（ｃ）ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ；次いで、Ｄｏｗｅｘ−Ｈ＋；（ｄ）ＢｎＢｒ、Ｂｕ２ＳｎＯ、Ｂｕ４ＮＩ、Ｃ６Ｈ６、５４％  ２工程；ｅ）ＰｈＣＨ（ＯＭｅ）２、ＣＳＡ、ＣＨ３ＣＮ、７２％；（ｆ）ＢｎＢｒ、ＮａＨ、ＤＭＦ、Ｅｔ４ＮＩ、９７％；（ｇ）ＮａＣＮＢＨ３、ＨＣｌ、Ｅｔ２Ｏ、ＴＨＦ、７９％；（ｈ）ＤＭＤＯ、ＣＨ２Ｃｌ２；（ｉ）HＦ／ピリジン、８５％  ２工程；（３）ＢｎＢｒ、ＮａＨ、ＤＭＦ、９５％；（ｋ）Ｃｐ２Ｚｒ（ＯＴｆ）２、トルエン／ＴＨＦ  ５：１、８０％  （α）、α：β  １０：１；（ｊ）ＤＤＱ、ＣＨ３ＣＮ、H２Ｏ、８４％。
【図１１】図１１は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈペンテニルグリコシド（１６ｃ）の合成を示す。
【図１２】図１２は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈのキャリアタンパク質ＫＬＨへの結合体化を示す。
【図１３】図１３は、腫瘍抗原Ｇｌｏｂｏ−ＨおよびフコシルＧＭ１の免疫結合体およびその開発した糖アミノ酸配列を示す。
【図１４】図１４は、過酢酸化ラクトースアミノ酸誘導体の合成を示す。
【図１５】図１５は、Ｔｎ抗原、Ｌｅｗｉｓｙ抗原、およびＭＢｒ１抗原を含むペプチドの合成を示す。試薬：（ａ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ；（ｂ）ＡｃＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）３ＮＨ２、ＢＯＰ試薬、ｉＰｒ２ＮＥｔ、５４％、２工程；（ｃ）ＴＦＡ、ＣＨ２Ｃｌ２；（ｄ）ＢＯＰ試薬、ｉＰｒ２ＮＥｔ、８６％、２工程；（ｅ）５２、ＢＯＰ試薬、ｉＰｒ２ＮＥｔ、６４％、２工程；（ｆ）Ａｃ２Ｏ、Ｅｔ３Ｎ、触媒ＤＭＡＰ、９５％、２工程。
【図１６】図１６は、完全に脱保護された糖ペプチド５４の調整を示す。
【図１７】図１７は、α−Ｔｎペンテニルグリコシド４０の合成を示す。
【図１８】図１８は、交差複分解反応を使用する糖アミノ酸６０の合成を示す。
【図１９】図１９は、例示的結合体化トリマー抗原性Ｇｂ３糖ペプチドおよび非結合体かトリマー抗原性Ｇｂ３糖ペプチドを示す。
【図２０Ａ】図２０Ａは、トリマー抗原性Ｇｂ３糖ペプチド９０および９２の例示適合性を示す。
【図２０Ｂ】図２０Ｂは、トリマー抗原性Ｇｂ３糖ペプチド９０および９２の例示適合性を示す。
【図２１】図２１は、トリマー抗原性Ｇｂ３糖ペプチド９１および９３の例示的合成を示す。
【図２２】図２２は、Ｇｌｏｂｏ−Ｈ、Ｌｅｙ、ＳＴｎ、ＴＦおよびＴｎ抗原を含むペンタマー抗原性糖ペプチドを示す。
【図２３】図２３は、ワクチン接種研究において使用されるマルチ抗原性構築物を示す。
【図２４】図２４は、ワクチン接種研究において使用されるモノマーコントロールを示す。
【図２５】図２５は、ＭＣＦ−７に対して構築物６４で免疫したマウス由来の血清中のＩｇＭおよびＩｇＧ抗体の細胞表面反応性の分析に対応するＦＡＣＳヒストグラムを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【国際調査報告】
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