(57)【要約】  本明細書では、式（Ｉ）のアミノピラゾール化合物（式中、Ｒ１、Ｒ２、ＬおよびＡｒは、明細書で定義した通りである）について記載する。このような化合物は、チェックポイントキナーゼの活性を変調することができ、細胞増殖性障害を治療するためにそのような変調を利用するための方法。そのような化合物を含有する医薬組成物についても記載する。そのような化合物および組成物の治療的または予防的使用、および抗新生物剤と併用して有効量のそのような化合物を投与することにより、癌ならびに望ましくない細胞増殖を伴う他の障害を治療する方法についても記載する。    【化１】2006528661.tif 000120
2006528661.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはその薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物もしくは薬学的に許容できる塩
【化１】
2006528661.tif 000112
［式中、Ｌは、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい５または６員の炭素環または複素環基であり、
Ａｒは、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい５または６員の芳香族炭素環または複素環基であり、
Ｒ１は、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい−（ＣＲ３Ｒ４）ｔ−アリール、−（ＣＲ３Ｒ４）ｔ−複素環、−（ＣＲ３Ｒ４）ｔ−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択され、ｔは、０、１、２、または３であり、ｔが２または３である場合、ＣＲ３Ｒ４単位は、同一または異なってもよく、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、ならびにＹ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択され、
Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｆ、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立して選択されるか、あるいはＲ３およびＲ４は、一緒に選択されて炭素環を形成するか、あるいは隣接炭素原子上の２つのＲ３基は、一緒に選択されて炭素環を形成し、
各々のＹ１、Ｙ２、およびＹ３は、独立に選択され、
（ｉ）Ｈ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、テトラゾリル、グアニジノ、アミジノ、アジド、−Ｃ（Ｏ）Ｚ１、メチルグアニジノ、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＨ（ＣＦ３）２、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＦ３）２、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２Ｈ、−ＯＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＺ１、−ＯＣ（Ｏ）ＮＺ１Ｚ２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｚ１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ１Ｚ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＺ１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＺ１、−Ｃ（Ｏ）ＮＺ１Ｚ２、−Ｐ（Ｏ）３Ｈ２、−Ｐ（Ｏ）３（Ｚ１）２、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）ｍＺ１、−Ｚ１、−ＯＺ１、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＺ１、−ＮＺ１Ｚ２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＮＨ２、−Ｎ−モルホリノ、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）ハロアルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）ハロアルキニル、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルコキシ、−（ＣＺ３Ｚ４）ｒＮＨ２、−（ＣＺ３Ｚ４）ｒＮＨＺ１、−（ＣＺ３Ｚ４）ｒＮＺ１Ｚ２、および−Ｓ（Ｏ）ｍ（ＣＦ２）ｑＣＦ３からなる群から選択され、ｍは、０、１または２であり、ｑは、０〜５の整数であり、ｒは、１〜４の整数であり、Ｚ１およびＺ２は、炭素原子１〜１２個のアルキル、炭素原子３〜８個のシクロアルキル、炭素原子６〜１４個のアリール、環原子５〜１４個の複素環、炭素原子７〜１５個のアラルキル、および環原子５〜１４個のヘテロアラルキルからなる群から独立して選択され、Ｚ３およびＺ４は、水素、炭素原子１〜１２個のアルキル、炭素原子６〜１４個のアリール、環原子５〜１４個のヘテロアリール、炭素原子７〜１５個のアラルキル、および環原子５〜１４個のヘテロアラルキルからなる群から独立して選択され、
（ｉｉ）Ｙ１およびＹ２は、一緒に選択されて−Ｏ［Ｃ（Ｚ３）（Ｚ４）］ｒＯ−または−Ｏ［Ｃ（Ｚ３）（Ｚ４）］ｒ＋１−であるか、あるいは
（ｉｉｉ）Ｙ１、Ｙ２、またはＹ３のうち任意の２個が同一または隣接原子と結合している場合、それらは、一緒に選択されて炭素環または複素環を形成し、
ハロゲン、ＳＯもしくはＳＯ２基またはＮ、ＯまたはＳ原子と結合していないＣＨ３（メチル）、ＣＨ２（メチレン）、またはＣＨ（メチン）基を含む上述の置換基のいずれかは、ヒドロキシ、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシおよび−Ｎ［（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル］［（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル］から選択される置換基を前記基の上に持ってもよい］。
【請求項２】
Ｒ１が、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい５または６員のアリールまたはヘテロアリール基である請求項１に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩。
【請求項３】
式（ＩＩ）の構造を有する請求項１に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩
【化２】
2006528661.tif 000113
［式中、Ｙは、ＣＲ５またはＮであり、
Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０ならびにＹ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−アリール、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−複素環、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択される部分からなる群から選択され、ｕは、０、１、２、または３であり、ｕが２または３である場合、ＣＲ３Ｒ４単位は、同一または異なってもよく、
各々のＲ５、Ｒ７、およびＲ８は、Ｈ、ハロゲン、メチル、エチル、−ＣＮ、−ＣＦ３、および−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３からなる群から独立して選択され、
各々のＲ９およびＲ１０は、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−アリール、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−複素環、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択され、ｕは、０、１、２、または３であり、ｕが２または３である場合、ＣＲ３Ｒ４単位は、同一または異なってもよい］。
【請求項４】
Ｌが、下式からなる群から選択される請求項２に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩。
【化３】
2006528661.tif 000114
【請求項５】
ＬおよびＡｒが各々、置換されていてもよいフェニルまたはピリジル基から独立して選択される請求項１に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩。
【請求項６】
Ａｒｘが、下式である請求項５に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩。
【化４】
2006528661.tif 000115
【請求項７】
以下の構造を有する請求項６に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩。
【化５】
2006528661.tif 000116
【請求項８】
Ｒ１が、以下の構造を有し、ｖは、０、１、または２であり、Ｒ１１は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである請求項７に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩。
【化６】
2006528661.tif 000117
【請求項９】
下記化合物からなる群から選択される請求項１に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物もしくは薬学的に許容できる塩。
３−｛［３−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ベンゾニトリル；
４−｛［３−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ベンゾニトリル；
４’−［５−（３−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（４−イソプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（４−Ｎ−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−５−メチル−２，４−ジオール；
４’−［５−（４−Ｎ−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−６−メチル−２，４−ジオール；
４’−［５−（４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−６−クロロ−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（｛４−［（シクロプロピルアミノ）メチル］フェニル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−６−フルオロ−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（４−シクロプロピルメチルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
Ｎ−［３−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］ピリミジン−２−アミン；
４’−［５−（６−ヒドロキシメチル−ピリジン−３−イルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（２−ヒドロキシメチル−ピリジン−４−イルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（｛６−［（シクロペンチルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（｛６−［（ジメチルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
５−［５−（２’，４’−ジヒドロキシ−ビフェニル−４−イル）−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ］−ピリジン−２−カルボチオ酸メチルアミド；
Ｎ−［５−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン−２−アミン；
Ｎ−［５−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン−３−アミン；
４’−［５−（ピリジン−４−イルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（１，３−チアゾール−５−イルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−（３−アニリノ−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−｛５−［（６−｛［（シクロプロピルメチル）アミノ］メチル｝ピリジン−３−イル）アミノ］−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（｛６−［（シクロプロピルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（｛６−［（イソプロピルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；および
−［５−（｛６−［（エチルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール
【請求項１０】
下記化合物からなる群から選択される請求項１に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物もしくは薬学的に許容できる塩。
【化７−１】
2006528661.tif 000118
【化７−２】
2006528661.tif 000119
【請求項１１】
プロテインキナーゼ受容体の活性を変調する方法であって、キナーゼ受容体を、有効量の請求項１に記載の化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩と接触させることを含む方法。
【請求項１２】
プロテインキナーゼがＣＨＫ１である請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
哺乳類において過増殖性障害を治療するための医薬組成物であって、増強有効量の請求項１に記載の化合物、プロドラッグ、代謝物、塩または溶媒和物および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１４】
前記過増殖性障害が癌である請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記癌が、脳腫瘍、肺癌、腎癌、腎臓癌、卵巣癌、眼癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、婦人科癌、前立腺癌、結腸直腸癌または甲状腺癌である請求項１４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書では、ＣＨＫ１酵素の活性を変調するため、およびＣＨＫ１酵素の変調が患者に利益をもたらす障害を治療するための組成物および方法について記載する。
【背景技術】
【０００２】
細胞周期は、４つの連続する相を含むと考えられる。この過程の間に、細胞シグナルは、増殖、静止、分化またはアポトーシスを含む細胞の運命を決定する働きをする。Ｔ．Ｏｗａ他、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００１、８、１４８７〜１５０３の１４８７ページを参照されたい。
【０００３】
細胞周期が適切に機能するためには、明確に規定された順序で一連のイベントが開始され、終了されることが多い。同著者の１４８９ページを参照されたい。細胞周期の制御は、特定の細胞周期遅延すなわち「チェックポイント」によって維持されることが多い。キナーゼであることが多いチェックポイント酵素は、細胞周期の遅延を引き起こし、その間に、重要な細胞イベントが終了される。いったんそのようなイベントが終了されると、細胞周期を再開させることができる。
【０００４】
１つの重要なチェックポイントイベントは、ＤＮＡ複製に先立つＤＮＡ損傷の修復である。細胞機構によってＤＮＡが修復されない場合、複製に先立ってＤＮＡに対して発生した変異および損傷は、娘細胞に移動することになる。
【０００５】
知られているチェックポイントキナーゼの中で、ＣＨＫ１は、重要な調節的役割を果たしているようである。Ｔ．Ｏｗａ１４９０ページ；Ｌｉｕ他、Ｇｅｎｅ  ＆  Ｄｅｖ．１４：１４４８〜１４５９（２０００）；Ｔａｋａｉ他、Ｇｅｎｅ  ＆  Ｄｅｖ．１４：１４３９〜１４４７（２０００）；Ｚａｃｈｏｓ，Ｇ．他、「ＣＨＫ１−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｔｕｍｏｕｒ  ｃｅｌｌｓ  ａｒｅ  ｖｉａｂｌｅ  ｂｕｔ  ｅｘｈｉｂｉｔ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ａｎｄ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｄｅｆｅｃｔｓ」、ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ２２：７１３〜７２３（２００３）を参照されたい。ＣＨＫ１酵素は、ホスファターゼＣＤＤ２５Ｃをリン酸化することによって作用するようである。Ｓａｎｃｈｅｚ他「Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＣＨＫ１  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  Ｍａｍｍａｌｓ：Ｌｉｎｋａｇｅ  ｏｆ  ＤＮＡ  Ｄａｍａｇｅ  ｔｏ  Ｃｄｋ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  Ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｃｄｃ２５」、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９９７、２７７、１４９７〜１５０１；Ｓｕｇａｎｕｍａ，Ｍ．他、「Ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  ＤＮＡ  Ｄａｍａｇｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  ｂｙ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  Ｇ２  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ａｂｒｏｇａｔｉｏｎ」、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５９：５８８７〜５８９１（１９９９）；Ｈｕｔｃｈｉｎｓ，Ｊ．Ｒ．Ａ．他「Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｋｉｎａｓｅ  ＣＨＫ１」、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４６６：９１〜９５（２０００）；Ｌｕｏ，Ｙ．他、「Ｂｌｏｃｋｉｎｇ  ＣＨＫ１  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ａｂｒｏｇａｔｅｓ  ｔｈｅ  Ｇ２  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ」、Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  ３：４１１〜４１９（２００１）を参照されたい。別のチェックポイントキナーゼＣＨＫ２も確認されている。
【０００６】
特定の疾患、状態または障害の治療において、細胞のＤＮＡに損傷を与えることは、望ましい目標である。チェックポイントキナーゼの活性を変調することにより、ＤＮＡ損傷剤の効果を増強することができる。例えば、Ｒｈｉｎｄ，Ｎ．およびＲｕｓｓｅｌｌ，Ｐ．「ＣＨＫ１  ａｎｄ  Ｃｄｓ１：ｌｉｎｃｈｐｉｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＤＮＡ  ｄａｍａｇｅ  ａｎｄ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｐａｔｈｗａｙｓ」、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １１３：３８８９〜３８９６（２０００）；Ｓａｍｐａｔｈ，Ｄ．およびＰｌｕｎｋｅｔｔ，Ｗ．「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｎｅｗ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｐａｔｈｗａｙｓ」、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｏｎｃｏｌ．１３：４８４〜４９０（２００１）；Ｋｏｎｉａｒａｓ，Ｋ．他、「Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＣＨＫ１−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｇ２  ＤＮＡ  ｄａｍａｇｅ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚｅｓ  ｐ５３  ｍｕｔａｎｔ  ｈｕｍａｎ  ｃｅｌｌｓ」、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２０：７４５３〜７４６３（２００１）；Ｈａｐｋｅ，Ｇ．他、「Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌｓ  ｉｎ  ＣＨＫ１  ｐａｔｈｗａｙｓ  ａｓ  ａ  ｎｅｗ  ａｐｐｒｏａｃｈ  ｆｏｒ  ｏｖｅｒｃｏｍｉｎｇ  ｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ」、Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖ．２０：１０９〜１１５（２００１）；Ｌｉ，Ｑ．およびＺｈｕ，Ｇ．−Ｄ．「Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｓｅｒｉｎｅ／Ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｂ／Ａｋｔ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ−ｃｙｃｌｅ  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｋｉｎａｓｅｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ」、Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２：９３９〜９７１（２００２）を参照されたい。例示のためだけであるが、癌の多くの治療は、悪性細胞のＤＮＡに損傷を与えることによって作用する。癌細胞は、正常細胞に比べて一般に極めて増殖性が高いため、ＤＮＡ損傷に対してより敏感である。結果として、ＤＮＡ損傷を増強するか、あるいは損傷したＤＮＡを修復する細胞の能力を制限するための方法は、ＤＮＡ損傷剤の効果を増強するであろう。
【０００７】
ＣＨＫ１酵素の活性を阻害することができると主張されている化合物が報告されている。これらの阻害剤の多くは、ＡＴＰのＣＨＫ１との結合を変調することによって作用すると思われる。しかしながら、ＡＴＰのＣＨＫ１との結合部位は、他のキナーゼのＡＴＰ結合部位と類似している。少なくとも１０００種類の異なるキナーゼが細胞機構の調節において活性であることが知られているため（ＣＨＫ２、別のチェックポイントキナーゼを含む）、ＡＴＰのＣＨＫ１酵素との結合を阻害する化合物は、他のキナーゼの活性も阻害または変調する可能性が高い。この選択性の欠如は、ＣＨＫ１酵素に利用できる阻害剤の量を制限するばかりでなく、多くの望ましくない副作用または有害反応につながることもある。
【０００８】
結果として、細胞内のＤＮＡの修復を妨げることが患者に利益をもたらすであろう障害の治療には、ＣＨＫ１酵素に対して高い選択性を有する阻害剤が必要である。この点で、Ｘ線結晶学によって決定されているＣＨＫ１の構造は、有用性が認められる可能性がある。Ｃｈｅｎ，Ｐ．他、「Ｔｈｅ  １．７Å  Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  ＣＨＫ１：Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ＣＨＫ１  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ」、Ｃｅｌｌ  １００：６８１〜６９２（２０００）を参照されたい。
【０００９】
ＣＨＫ１阻害剤は、特許および特許出願にも記載されている。例えば、ＷＯ０２／０７０４９４「Ａｒｙｌ  ａｎｄ  Ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ  Ｕｒｅａ  Ｃｈｋ１  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  Ｆｏｒ  Ｕｓｅ  ａｓ  Ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ  ａｎｄ  Ｃｈａｍｏｓｅｎｓｉｔｉｚｅｒｓ」（ｓｉｃ）を参照されたい。
【００１０】
この項で引用したすべての参考文献は、全体として参照により、特に、引用を含む段落内の記述をサポートする背景材料として本明細書に組み込まれる。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本明細書では、チェックポイントキナーゼの活性を変調することができる化合物および細胞増殖性障害を治療するためにそのような変調を利用するための方法について記載する。プロテインキナーゼの活性を媒介および／または阻害するアミノピラゾール化合物、およびそのような化合物を含有する医薬組成物についても記載する。そのような化合物および組成物の治療的または予防的使用、ならびに有効量のそのような化合物を投与することによる癌ならびに望ましくない血管新生および／または細胞増殖を伴う他の疾患を治療する方法についても記載する。
【００１２】
一態様では、新規アミノピラゾール化合物である。別の態様では、アミノピラゾール部分が、レゾルシノールまたはレゾルシノール様部分とともに固定された直線的配置で保持されている化合物である。別の態様では、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよび／またはｉｎ  ｖｉｖｏにおいてＣＨＫ１酵素の活性を変調することができる化合物である。さらに別の態様では、ＣＨＫ１酵素の活性を選択的に変調することができる化合物である。さらに別の態様では、そのようなＣＨＫ１変調化合物の医薬組成物であり、それらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、または薬学的に許容できる塩が含まれる。別の態様では、そのようなＣＨＫ１変調化合物、およびそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、または薬学的に許容できる塩の合成について本明細書に記載する。さらに別の態様では、本明細書に記載のＣＨＫ１変調化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、もしくは薬学的に許容できる塩をＣＨＫ１酵素と接触させることを含むＣＨＫ１酵素を変調するための方法である。さらに別の態様では、治療有効量のＣＨＫ１変調化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、もしくは薬学的に許容できる塩を投与することを含む患者を治療するための方法である。さらに別の態様では、増強有効量のＣＨＫ１変調化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、もしくは薬学的に許容できる塩を患者に投与することを含む、患者においてＤＮＡ損傷剤の効果を増強するための方法である。
【００１３】
本発明の一態様では、式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物もしくは薬学的に許容できる塩であって、
【００１４】
【化１】
2006528661.tif 000003
式中、Ｌは、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい５または６員の炭素環または複素環基であり、
Ａｒは、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい５または６員の芳香族炭素環または複素環基であり、
Ｒ１は、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい−（ＣＲ３Ｒ４）ｔ−アリール、−（ＣＲ３Ｒ４）ｔ−複素環、−（ＣＲ３Ｒ４）ｔ−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択される部分であり、ｔは、０、１、２、または３であり、ｔが２または３である場合、ＣＲ３Ｒ４単位は、同一または異なってもよく、
Ｒ２は、水素、ハロゲン、ならびにＹ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択され、
Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｆ、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立して選択されるか、あるいはＲ３およびＲ４は、一緒に選択されて炭素環を形成するか、あるいは隣接炭素原子上の２つのＲ３基は、一緒に選択されて炭素環を形成することがあり、
各々のＹ１、Ｙ２、およびＹ３は、独立に選択され、
（ｉ）ハロゲン、シアノ、ニトロ、テトラゾリル、グアニジノ、アミジノ、メチルグアニジノ、アジド、−Ｃ（Ｏ）Ｚ１、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＨ（ＣＦ３）２、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＦ３）２、−ＯＣＦ３、−ＯＣＦ２Ｈ、−ＯＣＦ２ＣＦ３、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＺ１、−ＯＣ（Ｏ）ＮＺ１Ｚ２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｚ１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＺ１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ１Ｚ２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＺ１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＺ１、−Ｃ（Ｏ）ＮＺ１Ｚ２、−Ｐ（Ｏ）３Ｈ２、−Ｐ（Ｏ）３（Ｚ１）２、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）ｍＺ１、−Ｚ１、−ＯＺ１、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＺ１、−ＮＺ１Ｚ２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＮＨ２、−Ｎ−モルホリノ、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）ハロアルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）ハロアルキニル、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルコキシ、−（ＣＺ３Ｚ４）ｒＮＨ２、−（ＣＺ３Ｚ４）ｒＮＨＺ１、−（ＣＺ３Ｚ４）ｒＮＺ１Ｚ２、および−Ｓ（Ｏ）ｍ（ＣＦ２）ｑＣＦ３からなる群から選択され、ｍは、０、１または２であり、ｑは、０〜５の整数であり、ｒは、１〜４の整数であり、Ｚ１およびＺ２は、炭素原子１〜１２個のアルキル、炭素原子３〜８個のシクロアルキル、炭素原子６〜１４個のアリール、環原子５〜１４個のヘテロアリール、炭素原子７〜１５個のアラルキル、および環原子５〜１４個のヘテロアラルキルからなる群から独立して選択され、Ｚ３およびＺ４は、水素、炭素原子１〜１２個のアルキル、炭素原子６〜１４個のアリール、環原子５〜１４個のヘテロアリール、炭素原子７〜１５個のアラルキル、および環原子５〜１４個のヘテロアラルキルからなる群から独立して選択され、
（ｉｉ）Ｙ１およびＹ２は、一緒に選択されて−Ｏ［Ｃ（Ｚ３）（Ｚ４）］ｒＯ−または−Ｏ［Ｃ（Ｚ３）（Ｚ４）］ｒ＋１−であるか、あるいは
（ｉｉｉ）Ｙ１、Ｙ２、またはＹ３のうち任意の２個が同一または隣接原子と結合している場合、それらは、一緒に選択されて炭素環または複素環を形成し、
ハロゲン、ＳＯもしくはＳＯ２基またはＮ、ＯまたはＳ原子と結合していないＣＨ３（メチル）、ＣＨ２（メチレン）、またはＣＨ（メチン）基を含む上述の置換基のいずれかは、ヒドロキシ、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシおよび−Ｎ［（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル］［（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル］から選択される置換基を前記基の上に持つ。
【００１５】
別の実施形態では、Ｒ１が、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい５または６員のアリールまたはヘテロアリール基である化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩である。
【００１６】
別の実施形態では、Ａｒが、式（ＩＩ）の構造を与えるように選択される式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩であり、
【００１７】
【化２】
2006528661.tif 000004
式中、Ｙは、ＣＲ５またはＮであり、
Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０ならびにＹ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−アリール、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−複素環、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択される部分からなる群から選択され、ｕは、０、１、２、または３であり、ｕが２または３である場合、ＣＲ３Ｒ４単位は、同一または異なってもよく、
各々のＲ５、Ｒ７、およびＲ８は、Ｈ、ハロゲン、メチル、エチル、−ＣＮ、−ＣＦ３、および−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３からなる群から独立して選択され、
各々のＲ９およびＲ１０は、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−アリール、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−複素環、−（ＣＲ３Ｒ４）ｕ−（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から選択され、ｕは、０、１、２、または３であり、ｕが２または３である場合、ＣＲ３Ｒ４単位は、同一または異なってもよく、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３は、式（Ｉ）に関連して定義した通りである。
【００１８】
別の実施形態では、Ｌが、下式からなる群から選択される式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩である。
【００１９】
【化３】
2006528661.tif 000005
【００２０】
別の実施形態では、ＬおよびＡｒが各々、置換されていてもよいフェニルまたはピリジル基から独立して選択される式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩である。適当な置換には、式（Ｉ）に関連して定義したＹ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基による置換が含まれる。
【００２１】
他では、Ａｒが下式である式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩であり、
【００２２】
【化４】
2006528661.tif 000006
式中、Ｒ５、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７およびＲ８は、式（ＩＩ）に関連して定義した通りである。
【００２３】
別の実施形態では、Ｌ、Ａｒ、およびＲ２が、式（ＩＩＩ）の構造を与えるように選択される式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩であり、
【００２４】
【化５】
2006528661.tif 000007
式中、Ｒ１、Ｒ５、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７およびＲ８は、式（Ｉ）および（ＩＩ）に関連して定義した通りである。
【００２５】
他では、Ｒ１が以下の構造である式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物または薬学的に許容できる塩であり、
【００２６】
【化６】
2006528661.tif 000008
式中、ｖは、０、１、または２であり、Ｒ１１は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルである。
【００２７】
本発明の別の態様では、ＬがＬａであり、Ａｒが、式（ＩＶ）の構造を与えるように選択される式（Ｉ）の構造を有する化合物であり、
【００２８】
【化７】
2006528661.tif 000009
式中、Ｌａは、アミノピラゾール部分をレゾルシノールまたはレゾルシノール様部分に直線的またはほぼ直線的に向けるリジッドな連結基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７、Ｒ８およびＹは、式（Ｉ）および（ＩＩ）に関連して定義した通りである。一実施形態によれば、Ｒ６ａおよびＲ６ｂは、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０ならびにＹ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｕフェニル、−（ＣＨ２）ｕ複素環および（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルからなる群から選択される部分からなる群から選択され、Ｒ９およびＲ１０は、Ｙ１、Ｙ２およびＹ３からなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｕフェニルおよび（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から置換されていてもよく、各々のＲ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して水素またはハロゲンである。
【００２９】
別の態様では、下記化合物からなる群から選択される式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物もしくは薬学的に許容できる塩である。
３−｛［３−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ベンゾニトリル；
４−｛［３−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ベンゾニトリル；
４’−［５−（３−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（４−イソプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（４−Ｎ−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−５−メチル−２，４−ジオール；
４’−［５−（４−Ｎ−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−６−メチル−２，４−ジオール；
４’−［５−（４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−６−クロロ−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（｛４−［（シクロプロピルアミノ）メチル］フェニル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−６−フルオロ−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（４−シクロプロピルメチルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
Ｎ−［３−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］ピリミジン−２−アミン；
４’−［５−（６−ヒドロキシメチル−ピリジン−３−イルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（２−ヒドロキシメチル−ピリジン−４−イルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジオール酢酸塩；
４’−［５−（｛６−［（シクロペンチルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（｛６−［（ジメチルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
５−［５−（２’，４’−ジヒドロキシ−ビフェニル−４−イル）−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ］−ピリジン−２−カルボチオ酸メチルアミド；
Ｎ−［５−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン−２−アミン；
Ｎ−［５−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン−３−アミン；
４’−［５−（ピリジン−４−イルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（１，３−チアゾール−５−イルアミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−（３−アニリノ−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−｛５−［（６−｛［（シクロプロピルメチル）アミノ］メチル｝ピリジン−３−イル）アミノ］−１Ｈ−ピラゾール−３−イル｝−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（｛６−［（シクロプロピルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；
４’−［５−（｛６−［（イソプロピルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール；および
−［５−（｛６−［（エチルアミノ）メチル］ピリジン−３−イル｝アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−１，１’−ビフェニル−２，４−ジオール。
【００３０】
別の態様では、下記化合物からなる群から選択される式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物もしくは薬学的に許容できる塩である。
【００３１】
【化８−１】
2006528661.tif 000010
【００３２】
【化８−２】
2006528661.tif 000011
【００３３】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１変調化合物が式（Ｉ）の構造を有するｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてＣＨＫ１酵素の活性を変調することができる化合物を対象とする。
【００３４】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１酵素に対するＣＨＫ１変調化合物の選択性が他の天然キナーゼに対するよりも少なくとも１０倍高い、他のキナーゼを上回ってＣＨＫ１酵素の活性を選択的に変調することができる化合物を対象とする。
【００３５】
本発明の別の実施形態は、キナーゼ受容体を、有効量の式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる溶媒和物もしくは薬学的に許容できる塩と接触させることを含むプロテインキナーゼ受容体の活性を変調する方法である。他では、プロテインキナーゼがＣＨＫ１であるような方法である。
【００３６】
本発明の別の態様は、新生物を治療するため、ならびに抗新生物剤および治療用放射線の抗新生物効果を増強するための組成物を提供することである。
【００３７】
ある実施形態において、本発明は、新生物を治療する際の同時、個別または順次使用のための組合せ製剤としての、式（Ｉ）の構造を有する化合物、それらの薬学的に許容できる塩、溶媒和物、またはプロドラッグおよび抗新生物剤を含有する組成物に関する。
【００３８】
別の実施形態において、本発明は、新生物を治療する際の同時、個別または順次使用のための組合せ製剤としての、式（Ｉ）の構造を有する化合物、それらの薬学的に許容できる塩、溶媒和物、またはプロドラッグおよび抗新生物剤を含有し、抗新生物剤は、アルキル化剤、抗生物質および植物アルカロイド、ホルモンおよびステロイド、抗新生物活性を有する合成薬剤、代謝拮抗剤ならびに抗新生物活性を有する生体分子からなる群から選択される組成物に関する。
【００３９】
別の実施形態において、本発明は、新生物を治療する際の同時、個別または順次使用のための組合せ製剤としての、式（Ｉ）の構造を有する化合物、それらの薬学的に許容できる塩、溶媒和物、またはプロドラッグおよび抗新生物剤を含有し、抗新生物剤は、Ａｒａ−ｃ、ＶＰ−１６、シスプラチン、アドリアマイシン、２−クロロ−２−デオキシアデノシン、９−（３−Ｄ−アラビノシル−２−フルオロアデノシン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カンプトセシン、パクリタキセル、ＢＣＮＵ、５−フルオロウラシル、イリノテカン、およびドキソルビシンからなる群から選択される組成物に関する。
【００４０】
別の実施形態では、哺乳類において過増殖性障害を治療するための医薬組成物であって、増強有効量の式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらのプロドラッグ、代謝物、塩もしくは溶媒和物、および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物である。他では、前記過増殖性障害が癌であるような医薬組成物である。他では、癌が、脳腫瘍、肺癌、腎癌（ｋｉｄｎｅｙ  ｃａｎｃｅｒ）、腎臓癌（ｒｅｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ）、卵巣癌、眼癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、婦人科癌、前立腺癌、結腸直腸癌または甲状腺癌であるような医薬組成物である。他では、過増殖性障害が非癌性であるような医薬組成物である。他では、前記過増殖性障害が皮膚または前立腺の良性過形成であるような医薬組成物である。
【００４１】
別の実施形態では、哺乳類において過増殖性障害を治療するための医薬組成物であって、抗新生物剤と併用して増強有効量の式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらのプロドラッグ、代謝物、塩もしくは溶媒和物を含む医薬組成物である。他では、抗新生物剤が、悪性細胞においてＤＮＡに損傷を与えることができるような医薬組成物である。他では、抗新生物剤が、分裂抑制剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、インターカレート型（ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｉｎｇ）抗生物質、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的応答調整剤、抗ホルモン、および抗アンドロゲンからなる群から選択されるような医薬組成物、ならびに薬学的に許容できる担体である。
【００４２】
別の実施形態では、哺乳類において過増殖性障害を治療する方法であって、前記哺乳類に増強有効量の式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらのプロドラッグ、代謝物、塩もしくは溶媒和物を投与することを含む方法である。他では、前記過増殖性障害が癌であるような方法である。他では、前記癌が、脳腫瘍、肺癌、眼癌、扁平上皮癌、腎臓癌、腎癌、卵巣癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、前立腺癌、結腸直腸癌、婦人科癌または甲状腺癌であるような方法である。他では、過増殖性障害が非癌性であるような方法である。他では、前記過増殖性障害が皮膚または前立腺の良性過形成であるような方法である。
【００４３】
別の実施形態では、哺乳類において過増殖性障害を治療する方法であって、前記哺乳類に、抗新生物剤と併用して増強有効量の式（Ｉ）の構造を有する化合物、またはそれらのプロドラッグ、代謝物、塩もしくは溶媒和物を投与することを含む方法である。他では、抗新生物剤が、悪性細胞においてＤＮＡに損傷を与えることができるような方法である。他では、抗新生物剤が、分裂抑制剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、インターカレート型抗生物質、成長因子阻害剤、細胞周期阻害剤、酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、生物学的応答調整剤、抗ホルモン、および抗アンドロゲンからなる群から選択されるような方法である。
【００４４】
本発明の別の態様は、新生物を治療するための方法を提供することである。
【００４５】
別の実施形態において、本発明は、新生物を治療するための方法であって、それを必要とする哺乳類に、式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物、またはプロドラッグと併用して抗新生物剤を投与することを含み、抗新生物剤が、Ａｒａ−ｃ、ＶＰ−１６、シスプラチン、アドリアマイシン、２−クロロ−２−デオキシアデノシン、９−ｐ−Ｄ−アラビノシル−２−フルオロアデノシン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カンプトセシン、パクリタキセル、ＢＣＮＵ、５−フルオロウラシル、イリノテカン、およびドキソルビシンからなる群から選択される方法に関する。別の実施形態において、式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物、またはプロドラッグと併用して２種類以上の抗新生物剤を使用することができる。
【００４６】
本発明の別の態様は、治療用放射線の抗新生物効果を増強するための方法を提供することである。本発明において同定されるＣＨＫ−１阻害剤は、放射線治療の抗新生物効果を増強することもできる。通常、放射線は、固形腫瘍の部位を直接治療するために使用するか、あるいは近接照射療法のインプラントによって投与することができる。本発明による併用療法として企図される様々なタイプの治療用放射線は、Ｘ線、γ放射線、高エネルギー電子ならびに陽子、中性子、およびα粒子などの高ＬＥＴ（線エネルギー付与）放射線を含むが、これらに限定されない、癌の治療において使用される放射線であってよい。当業者によく知られている技法によって、電離放射線を用いることができる。例えば、Ｘ線およびγ線は、線形加速器または放射性線源からの外部および／または間隙手段によって印加される。高エネルギー電子は、線形加速器によって生み出すことができる。高ＬＥＴ放射線は、間隙に埋め込まれた放射性線源からも印加される。
【００４７】
したがって、別の実施形態において、本発明は、哺乳類において治療用放射線の抗新生物効果を増強するための方法であって、それを必要とする哺乳類に、抗新生物効果を有する治療用放射線と併用して式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを含む方法に関する。
【００４８】
ある実施形態において、本発明は、新生物を治療する方法であって、それを必要とする哺乳類に、式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物、またはプロドラッグと併用して抗新生物効果を有する治療用放射線を投与することを含む方法に関する。
【００４９】
別の態様によれば、本発明は、抗新生物剤の抗新生物効果を増強するための方法を提供する。
【００５０】
ある実施形態において、本発明は、哺乳類において抗新生物剤の抗新生物効果を増強するための方法であって、それを必要とする哺乳類に、抗新生物剤と併用しての、式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物、またはプロドラッグを投与することを含む方法に関する。抗新生物剤には、アルキル化剤、抗生物質および植物アルカロイド、ホルモンおよびステロイド、抗新生物活性を有する合成薬剤、代謝拮抗剤ならびに抗新生物活性を有する生体分子が含まれる。具体的な抗新生物剤には、Ａｒａ−ｃ、ＶＰ−１６、シスプラチン、アドリアマイシン、２−クロロ−２−デオキシアデノシン、９−β−Ｄ−アラビノシル−２−フルオロアデノシン、カルボプラチン、ゲムシタビン、カンプトセシン、パクリタキセル、ＢＣＮＵ、５−フルオロウラシル、イリノテカン、およびドキソルビシンが含まれる。
【００５１】
本発明の一態様は、患者を治療するための方法であって、治療有効量のＣＨＫ１変調化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、もしくは薬学的に許容できる塩を投与することを含み、ＣＨＫ１変調化合物は、式（Ｉ）の構造を有する方法を対象とする。
【００５２】
本発明の別の態様は、プロテインキナーゼの阻害によって治療することができる状態を治療するための方法を提供することである。本発明の一実施形態において、プロテインキナーゼは、チェックポイントキナーゼ１（ＣＨＫ−１）、チェックポイントキナーゼ２（ＣＨＫ−２）、サイクリン依存性キナーゼ１（ＣＤＫ１）、血清／糖質コルチコイド制御キナーゼ（ＳＧＫ）、アデノシン５’−一リン酸（ＡＭＰ）活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）、リンパ球Ｔ細胞チロシンキナーゼ（ＬＣＫ）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ２（ＭＡＰＫ−２）、マイトジェンストレス活性化プロテインキナーゼ１（ＭＳＫ１）、Ｒｈｏキナーゼ（ＲＯＣＫ−ＩＩ）、Ｐ７０  Ｓ６キナーゼ（ｐ７０Ｓ６Ｋ）、ｃＡＭＰ（環状アデノシン３’，５’一リン酸）依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡ）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ１（ＭＡＰＫ−１）、プロテインキナーゼＣ関連キナーゼ２（ＰＰＫ２）、３’−ホスホイノシチド依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）、Ｆｙｎキナーゼ（ＦＹＮ）、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）、プロテインキナーゼＣβ２（ＰＫＣβＩＩ）、プロテインキナーゼＣγ（ＰＫＣγ）、血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦＲ−２）、線維芽細胞成長因子受容体（ＦＧＦＲ）、ホスホリラーゼキナーゼ（ＰＨＫ）、Ｗｅｅ１キナーゼ（Ｗｅｅ１）、およびプロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ）からなる群から選択される。プロテインキナーゼは、チェックポイントキナーゼ１（ＣＨＫ−１）、チェックポイントキナーゼ２（ＣＨＫ−２）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ−１（ＭＡＰＫ−１）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ−２（ＭＡＰＫ−２）、血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦＲ−２）、線維芽細胞成長因子受容体（ＦＧＦＲ）、ホスホリラーゼキナーゼ（ＰＨＫ）、プロテインキナーゼＢα（ＰＫＢα）、およびＷｅｅ１キナーゼ（Ｗｅｅ１）からなる群から選択されることが好ましい。
【００５３】
ある実施形態において、本発明は、ヒトを含む哺乳類においてプロテインキナーゼの阻害によって治療することができる状態を治療するための方法であって、それを必要とする哺乳類に、式（Ｉ）の構造を有する化合物、薬学的に許容できるそれらの塩、溶媒和物、またはプロドラッグを投与することを含む方法に関する。
【００５４】
別の実施形態において、プロテインキナーゼの阻害によって治療することができる前記状態は、結合組織障害、炎症性障害、免疫／アレルギー障害、感染性疾患、呼吸器疾患、心血管疾患、眼疾患、代謝性疾患、中枢神経系（ＣＮＳ）疾患、肝臓／腎臓疾患、性と生殖に関する健康の障害、胃障害、皮膚障害および癌からなる群から選択される。
【００５５】
本発明の一態様は、患者においてＤＮＡ損傷剤の効果を増強するための方法であって、患者に、増強有効量のＣＨＫ１変調化合物、またはそれらの薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、もしくは薬学的に許容できる塩を投与することを含み、ＣＨＫ１変調化合物は、式（Ｉ）の構造を有する方法を対象とする。
【００５６】
本発明には、１個または複数の原子が、自然に通常見いだされる原子量または質量数と異なる原子量または質量数を有する原子によって置き換えられているということを除いて、式（Ｉ）で列挙される化合物と同一である同位体標識化合物も含まれる。本発明の化合物に組み入れることができる同位体の例には、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、および３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、および塩素の同位体が含まれる。上述の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する本発明の化合物、それらのプロドラッグ、および薬学的に許容できる前記化合物または前記プロドラッグの塩は、本発明の範囲内にある。本発明の特定の同位体標識化合物、例えば、３Ｈおよび１４Ｃなどの放射性同位体が組み入れられている化合物は、薬物および／または基質の組織分布アッセイに有用である。トリチウム化、すなわち３Ｈ、および炭素−１４、すなわち１４Ｃ同位体は、それらの調製の容易さおよび検出性で知られている。さらに、重水素、すなわち２Ｈなどのより重い同位体による置換は、より高い代謝安定性、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増加、または用量所要量の低減によるある種の治療上の利点を提供することがあるため、一部の環境において使用されることがある。一般的に、本発明の式（Ｉ）の同位体標識化合物およびそれらのプロドラッグは、以下のスキームおよび／または実施例で開示される手順を行い、非同位体標識試薬の代わりに容易に入手可能な同位体標識試薬を用いることによって調製することができる。
【００５７】
式（Ｉ）の化合物もしくはそれらのプロドラッグ、前記化合物および前記プロドラッグの薬学的に活性な代謝物、薬学的に許容できる塩、または薬学的に許容できる溶媒和物は、各々独立して、本明細書に列挙された疾患に伴う症状ならびに異常な細胞増殖に伴う症状を軽減する際に対症ネオアジュバント／アジュバント療法において使用することができる。そのような療法は、単独療法であるか、あるいは化学療法および／または免疫療法との併用であってよい。
【００５８】
置換基自体が本発明の合成方法に適合し得ない場合、これらの方法で使用される反応条件に対して安定である適当な保護基で置換基を保護することができる。その方法の反応順序における適当な時点で保護基を除去し、望ましい中間体または標的化合物を得ることができる。適当な保護基およびそのような適当な保護基を用いて様々な置換基を保護および脱保護するための方法は、当業者によく知られており、それらの例は、全体として参照により本明細書に組み込まれるＴ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（第３版）、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、ＮＹ（１９９９）に見いだすことができる。場合によっては、本発明の方法で使用される反応条件下において反応性であるように、置換基を具体的に選択することができる。これらの環境下で、この反応条件は、選択された置換基を、本発明の方法における中間化合物において有用であるか、あるいは標的化合物における望ましい置換基である別の置換基に変換する。
【００５９】
本発明の化合物は、不斉炭素原子を有することがある。そのようなジアステレオマー混合物は、例えば、クロマトグラフィーまたは分別結晶による当業者に知られている方法により、それらの物理的化学的相違に基づいてそれらの個々のジアステレオマーに分離することができる。鏡像体は、適切な光学活性化合物（例えば、アルコール）との反応によって鏡像体混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離して個々のジアステレオマーを対応する純粋な鏡像体に変換する（例えば、加水分解する）ことによって分離することができる。ジアステレオマー混合物および純粋な鏡像体を含むそのような異性体はすべて、本発明の一部と見なされる。
【００６０】
本発明の化合物は、場合によって互変異性体として存在することがある。本発明は、そのような互変異性体およびそれらの混合物すべての使用に関する。
【００６１】
本発明の化合物は、少なくとも９０％光学的に純粋である形態、すなわち、少なくとも９０％の単一異性体（８０％鏡像体過剰率（「ｅ．ｅ．」）またはジアステレオマー過剰率（「ｄ．ｅ．」））を含有する形態で使用されることが好ましく、より好ましくは少なくとも９５％（９０％ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、さらにより好ましくは少なくとも９７．５％（９５％ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、最も好ましくは少なくとも９９％（９８％ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）である。
【００６２】
さらに、式は、確認された構造の溶媒和ならびに非溶媒和形態を包含することを意図している。例えば、式Ｉには、溶媒和形態と非溶媒和形態双方の表示構造の化合物が含まれる。溶媒和物の追加例には、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、またはエタノールアミンと組み合わされた構造が含まれる。
【００６３】
固体である薬剤の場合、当業者には当然のことながら、本発明の化合物および塩は、様々な結晶形または多形相で存在することがあり、それらはすべて、本発明および指定された式の範囲内にあることが意図されている。
【００６４】
定義
本明細書で使用する以下の用語は、明示されていない限り、以下の意味を有する。
【００６５】
用語「アシル」には、カルボニル官能基を介して化合物と結合しているアルキル、アリール、またはヘテロアリール置換基（例えば、−Ｃ（Ｏ）−アルキル、−Ｃ（Ｏ）−アリールなど）が含まれる。
【００６６】
用語「アシルアミノ」は、アミノまたはアルキルアミノ基に追加されたアシル基を指し、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＲ”基（ＲおよびＲ’は、アルキルアミノに関連して定義した通りである）が含まれる。
【００６７】
用語「アシルオキシ」は、エステル基−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ（Ｒは、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアリールである）を指す。
【００６８】
用語「アルケニル」は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する置換されていてもよい不飽和脂肪族部分を指し、前記アルケニル部分のＥおよびＺ異性体が含まれる。この用語には、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有するシクロアルキル部分も含まれ、シクロアルキルは、上記で定義した通りである。アルケニル基の例には、エテニル、プロペニル、ブテニル、１，４−ブタジエニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニルなどが含まれる。
【００６９】
用語「アルケニレン」は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する置換されていてもよい二価の直鎖、分岐鎖または環状飽和脂肪族基を指し、前記アルケニレン部分のＥおよびＺ異性体が含まれる。
【００７０】
用語「アルコキシ」は、Ｏ−アルキル基を指す。アルコキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが含まれる。
【００７１】
用語「アルキル」は、直鎖、環状または分岐部分を有する置換されていてもよい一価の脂肪族基を指す。アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｔｅｒｔ−アミル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどが含まれる。
【００７２】
用語「アルキルアミノ」は、−ＮＲＲ’基を指し、ＲおよびＲ’は、水素（しかしながら、ＲおよびＲ’は、両方が水素であることはない）、アルキル、およびアリール基からなる群から独立して選択されるか、あるいはＲおよびＲ’は、一緒になって環式環系を形成することができる。
【００７３】
用語「アルキレン」は、置換されていてもよい二価の直鎖、分岐鎖または環状飽和脂肪族基を指す。後者の基は、より具体的にシクロアルキレン基と呼ばれることもある。
【００７４】
用語「アルキルチオ」は、単独または組合せで、アルキルチオ基、アルキル−Ｓ−を指す。
【００７５】
用語「アルキニル」は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有する置換されていてもよい不飽和脂肪族部分を指し、直鎖および分岐鎖アルキニル基が含まれる。アルキニル基の例には、エチニル、プロピニル、ブチニルなどが含まれる。
【００７６】
用語「アミノ」は、−ＮＨ２基を指す。
【００７７】
用語「アミノ酸」は、それらの構造が、そのような立体異性体を可能にする場合にはそれらのＤおよびＬ立体異性体の天然、非天然アミノ酸、およびそれらの類縁体を指す。天然アミノ酸には、アラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）およびバリン（Ｖａｌ）が含まれる。非天然アミノ酸には、アゼチジンカルボン酸、２−アミノアジピン酸、３−アミノアジピン酸、β−アラニン、アミノプロピオン酸、２−アミノ酪酸、４−アミノ酪酸、６−アミノカプロン酸、２−アミノヘプタン酸、２−アミノイソ酪酸、３−アミノイソ酪酸、２−アミノピメリン酸、２，４ジアミノイソ酪酸、デモシン（ｄｅｍｏｓｉｎｅ）、２，２’−ジアミノピメリン酸、２，３−ジアミノプロピオン酸、Ｎ−エチルグリシン、Ｎ−エチルアスパラギン、ヒドロキシリジン、アロヒドロキシリジン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、イソデスモシン、アロイソロイシン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、Ｎ−メチルバリン、ノルバリン、ノルロイシン、オルニチンおよびピペコリン酸が含まれるが、これらに限定されるものではない。アミノ酸類縁体には、例えば、メチオニンスルホキシド、メチオニンスルホン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システイン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システインスルホキシドおよびＳ−（カルボキシメチル）−システインスルホンのような、それらのＮ−末端アミノ基またはそれらの側鎖基上で可逆的または非可逆的に化学的にブロックされているか、あるいは修飾されている天然および非天然アミノ酸が含まれる。
【００７８】
本明細書で使用する用語「アミノピラゾール部分」は、以下の構造を有する基を指し、
【００７９】
【化９】
2006528661.tif 000012
式中、Ｒ１およびＲ２は、式（ＩＩ）に関連して定義した置換基などの置換基である。
【００８０】
用語「アラルケニル」は、アリール基で置換されているアルケニル基を指す。アルケニル基は、２から約６個までの炭素原子を有することが好ましい。
【００８１】
用語「アラルキル」は、アリール基で置換されているアルキル基を指す。適当なアラルキル基には、ベンジル、フェネチルなどが含まれる。アルキル基は、１から約６個までの炭素原子を有することが好ましい。
【００８２】
用語「アリール」は、共役π電子系を有する少なくとも１個の環を有する芳香族基を指し、炭素環アリール、複素環アリールおよびビアリール基が含まれ、それらはすべて、置換されていてもよい。
【００８３】
用語「アリールオキシ」は、式Ｒ−Ｏ−（Ｒは、アリール基である）を有する基を指す。
【００８４】
用語「アラルコキシ」は、式Ｒ−Ｏ−（Ｒは、アラルキル基である）を有する基を指す。
【００８５】
用語「芳香族」は、複数の共役二重結合を含む化合物または部分を指す。芳香族部分の例には、アリールまたはヘテロアリール環系が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００８６】
用語「アリールチオ」は、単独または組合せで、置換されていてもよいアリールチオ基、アリール−Ｓ−を指す。
【００８７】
用語「カルバモイル」または「カルバメート」は、基−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＲ”基を指し、ＲおよびＲ”は、水素、アルキル、およびアリール基から独立して選択され、ＲおよびＲ”は、一緒になって環式環系を形成することができる。
【００８８】
用語「炭素環」は、置換されていてもよいシクロアルキルおよびアリール部分を指す。用語「炭素環」には、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有するシクロアルケニル部分も含まれる。
【００８９】
用語「カルボキサミド」は、以下の基を指し、
【００９０】
【化１０】
2006528661.tif 000013
式中、各々のＲおよびＲ’は、Ｈ、アルキル、およびアリールからなる群から独立して選択される。
【００９１】
用語「カルボキシエステル」は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲを指し、Ｒは、アルキルまたはアリールである。
【００９２】
用語「シクロアルキル」は、環状配置を有する置換されていてもよい飽和の一価脂肪族基を指し、単環式、二環式、三環式、およびより高い多環式アルキル基が含まれ、多環式の場合には、縮合および架橋二環式およびスピロ環式部分が含まれ、各環式部分は、３〜約８個の炭素原子を有する。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが含まれる。
【００９３】
用語ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニルおよびハロアルコキシには、１個または複数のハロ基またはそれらの組合せで置換されているアルキル、アルケニル、アルキニルおよびアルコキシ構造が含まれる。
【００９４】
用語「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。好ましいハロゲン基は、フルオロ、クロロおよびブロモである。
【００９５】
用語「ヘテロアルキル」「ヘテロアルケニル」および「ヘテロアルキニル」には、炭素以外の原子、例えば、酸素、窒素、イオウ、リンまたはそれらの組合せから選択される１個または複数の骨格鎖原子を有するアルキル、アルケニルおよびアルキニル基が含まれる。
【００９６】
用語「ヘテロアラルキル」は、ピコリルなどのヘテロアリールで置換されているアルキル基を指し、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ」、第４９版、１９６８、Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ、編集者、Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｕｂｂｅｒ  Ｃｏ．、Ｃｌｅａｖｅｌａｎｄ、ＯＨに記載の複素環系が含まれる。特に、Ｓｅｃｔｉｏｎ  Ｃ、Ｒｕｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｎａｍｉｎｇ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ｂ．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍｓを参照されたい。アルキル基は、１〜約６個の炭素原子を有することが好ましい。
【００９７】
「ヘテロアリール」は、１〜１４個の炭素原子を有する置換されていてもよい芳香族基を指し、環原子の残りはヘテロ原子であり、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ」、第４９版、１９６８、Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ、編集者；Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｕｂｂｅｒ  Ｃｏ．、Ｃｌｅａｖｅｌａｎｄ、ＯＨに記載の複素環系が含まれる。特に、Ｓｅｃｔｉｏｎ  Ｃ、Ｒｕｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｎａｍｉｎｇ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ｂ．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｓｙｓｔｅｍｓを参照されたい。適当なヘテロ原子には、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）ｉ（ｉは、０、１または２である）が含まれ、適当な複素環アリールには、フラニル、チエニル、ピリジル、ピロリル、ピリミジル、ピラジニル、イミダゾリルなどが含まれる。
【００９８】
用語「複素環」は、Ｏ、ＳおよびＮから各々選択される１〜４個のヘテロ原子を含む置換されていてもよい芳香族および非芳香族複素環基を指し、各複素環基は、その環系内に４〜１０個の原子を有するが、ただし、前記基の環は、２個の隣接するＯまたはＳ原子を含まない。非芳香族複素環基には、それらの環系内に４個の原子のみを有する基が含まれるが、芳香族複素環基は、それらの環系内に少なくとも５個の原子を有さなければならない。複素環基には、ベンゾ縮合環系が含まれる。４員複素環基の一例は、アゼチジニル（アゼチジン由来）である。５員複素環基の一例は、チアゾリルである。６員複素環基の一例は、ピリジルであり、１０員複素環基の一例は、キノリニルである。非芳香族複素環基の例は、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジノ、モルホリノ、チオモルホリノ、チオキサニル、ピペラジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、２−ピロリニル、３−ピロリニル、インドリニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニル、３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタニル、３Ｈ−インドリルおよびキノリジニルである。芳香族複素環基の例は、ピリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、およびフロピリジニルである。上記に列挙した基から誘導される上記の基は、可能な場合、Ｃ結合またはＮ結合であってよい。例えば、ピロールから誘導される基は、ピロール−１−イル（Ｎ結合）またはピロール−３−イル（Ｃ結合）であってよい。さらに、イミダゾールから誘導される基は、イミダゾール−１−イルもしくはイミダゾール−３−イル（いずれもＮ結合）またはイミダゾール−２−イル、イミダゾール−４−イルもしくはイミダゾール−５−イル（すべてＣ結合）であってよい。（Ｃ２〜Ｃ１０）ヘテロシクリルの説明例は、以下の化合物から誘導されるが、これらに限定されるものではない。
【００９９】
【化１１−１】
2006528661.tif 000014
【０１００】
【化１１−２】
2006528661.tif 000015
【０１０１】
用語「員環」は、任意の環状構造を包含することができる。用語「員」は、環を構成する骨格原子の数を示すことを意図している。したがって、例えば、シクロヘキシル、ピリジン、ピランおよびチオピランは、６員環であり、シクロペンチル、ピロール、フラン、およびチオフェンは、５員環である。
【０１０２】
本明細書で使用する用語「求核試薬」および「求電子試薬」は、合成有機化学および／または物理有機化学でなじみの深い通常の意味を有する。通常、炭素求電子試薬は、炭素自体よりも大きなポーリングの電気陰性度を有する任意の原子または基で置換されている１個または複数のアルキル、アルケニル、アルキニルまたは芳香族（ｓｐ３、ｓｐ２、またはｓｐ混成）炭素原子を含む。炭素求電子試薬の例には、カルボニル（アルデヒドおよびケトン、エステル、アミド）、オキシム、ヒドラゾン、エポキシド、アジリジン、アルキル−、アルケニル−、およびアリールハライド、アシル、スルホネート（アリール、アルキルなど）が含まれるが、これらに限定されるものではない。炭素求電子試薬の他の例には、電子吸引基と電子的に共役している不飽和炭素が含まれ、例は、β不飽和ケトンにおける６−炭素またはフッ素置換アリール基における炭素原子である。炭素求電子試薬を、特に、正確に制御された生成物を得る方法で作成する方法は、有機合成に関わる当業者に知られている。
【０１０３】
一般に、炭素求電子試薬は、炭素求核試薬を含む相補的な求核試薬による攻撃を受けやすく、攻撃する求核試薬は、求核試薬と炭素求電子試薬の間に新たな結合を形成するために電子対を炭素求電子試薬に与える。
【０１０４】
適当な炭素求核試薬には、アルキル、アルケニル、アリールおよびアルキニルグリニャール、有機リチウム、有機亜鉛、アルキル−、アルケニル、アリール−およびアルキニル−スズ試薬（有機スタンナン）、アルキル−、アルケニル−、アリール−およびアルキニルボラン試薬（有機ボランおよび有機ボロネート）が含まれるが、これらに限定されるものではなく、これらの炭素求核試薬は、水または極性有機溶媒中で動力学的に安定であるという利点を有する。他の求核試薬には、リンイリド、エノールおよびエノレート試薬が含まれ、これらの炭素求核試薬は、合成有機化学に関わる当業者によく知られている前駆体から作成するのが比較的容易であるという利点を有する。炭素求核試薬は、炭素求電子試薬と併せて使用された場合、炭素求核試薬と炭素求電子試薬の間に新たな炭素−炭素結合を生じる。
【０１０５】
炭素求電子試薬とのカップリングに適している求核試薬には、１級および２級アミン、チオール、チオレート、およびチオエーテル、アルコール、アルコキシド、アジド、セミカルバジドなどが含まれるが、これらに限定されるものではない。通常、これらの求核試薬は、炭素求電子試薬と併せて使用された場合、ヘテロ原子結合（Ｃ−Ｘ−Ｃ）（Ｘは、ヘテロ原子、例えば酸素または窒素である）を生じる。
【０１０６】
「置換されていてもよい」基は、置換または非置換であってよい。置換されている場合、「置換されていてもよい」基の置換基には、以下の基またはそれらの指定サブセット、すなわち（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１〜Ｃ６）ヘテロアルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）ハロアルケニル、（Ｃ２〜Ｃ６）ハロアルキニル、（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル、フェニル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、フェノキシ、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロアルコキシ、アミノ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルチオ、フェニル−Ｓ−、オキソ、（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシエステル、（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキサミド、（Ｃ１〜Ｃ６）アシルオキシ、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｎ３、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、ＣＨ３、ＣＦ３、Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＣＯ２ＣＨ３、ＣＯ２Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、ピリジニル、チオフェン、フラニル、（Ｃ１〜Ｃ６）カルバメート、および（Ｃ１〜Ｃ６）尿素から独立して選択される１個または複数の置換が含まれるが、これらに限定されるものではない。置換されていてもよい基は、非置換（例えば、−ＣＨ２ＣＨ３）、完全置換（例えば、−ＣＦ２ＣＦ３）、一置換（例えば、−ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）、または完全置換と一置換の間のどこかのレベルにおける置換（例えば、−ＣＨ２ＣＦ３）であってよい。
【０１０７】
用語「オキソ」は、「Ｏ」基を意味する。
【０１０８】
用語「パーハロ」は、あらゆるＣ−Ｈ結合が、脂肪族またはアリール基上でＣ−ハロ結合により置換されている基を指す。パーハロアルキル基の例には、−ＣＦ３および−ＣＦＣｌ２が含まれる。
【０１０９】
本明細書で使用する用語「レゾルシノール」または「レゾルシノール様部分」は、以下の構造を有する基を指し、
【０１１０】
【化１２】
2006528661.tif 000016
式中、Ｙ、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７およびＲ８は、式（ＩＩ）に関連して定義した置換基などの置換基である。
【０１１１】
本明細書で使用する用語「Ｌ」または「リジッドな連結基」は、アミノピラゾール部分およびレゾルシノールまたはレゾルシノール様部分を直線的またはほぼ直線的な配向にさせる環状の化学的部分を指す。直線的またはほぼ直線的は、リジッドな連結基と結合する原子およびリジッドな連結基の中心がすべて、同一平面内、またはほぼ同一平面内（＋／−１０度の角度内）にある配向を指す。リジッドな連結基は、置換されていてもよい。ほんの一例として、「Ｌ」または「リジッドな連結基」は、以下の部分から選択することができる。
【０１１２】
【化１３】
2006528661.tif 000017
【０１１３】
用語「ウレイル（ｕｒｅｙｌ）」または「尿素」は、基−Ｎ（Ｒ）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ’Ｒ”を指し、Ｒ、Ｒ’、およびＲ”は、水素、アルキル、アリールから独立して選択され、各々のＲ−Ｒ’、Ｒ’−Ｒ”、またはＲ−Ｒ”は、一緒になって環式環系を形成することができる。
【０１１４】
用語「プロテインキナーゼ」は、タンパク質のチロシン、セリンおよびスレオニン残基上でヒドロキシ基のリン酸化を触媒する酵素を指す。この一見簡単な活性の帰結は、驚くべきもので、細胞の成長、分化、および増殖、すなわち細胞生活の事実上すべての側面は、いろいろな点でプロテインキナーゼ活性に依存している。さらに、異常なプロテインキナーゼ活性は、乾癬などの比較的生命にかかわらない疾患から神経膠芽腫（脳腫瘍）などの極めて悪性な疾患までの多くの障害に関係するとされている。プロテインキナーゼは、タンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）およびセリン−スレオニンキナーゼ（ＳＴＫ）という２つの主要な種類に都合よく分けることができる。さらに、チロシンとセリン−スレオニン残基の双方をリン酸化することができる第３の種類の二重特異的キナーゼが知られている。本発明内に企図されているプロテインキナーゼおよびそれらのアイソフォームの例には、チェックポイントキナーゼ１（ＣＨＫ−１）、チェックポイントキナーゼ２（ＣＨＫ−２）、サイクリン依存性キナーゼ１（ＣＤＫ１）、血清／糖質コルチコイド制御キナーゼ（ＳＧＫ）、アデノシン５’−一リン酸（ＡＭＰ）活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）、リンパ球Ｔ細胞チロシンキナーゼ（ＬＣＫ）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ−２（ＭＡＰＫ−２）、マイトジェンストレス活性化プロテインキナーゼ１（ＭＳＫ１）、プロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ）、プロテインキナーゼＢα（ＰＫＢα）、Ｒｈｏキナーゼ（ＲＯＣＫ−ＩＩ）、Ｐ７０  Ｓ６キナーゼ（ｐ７０Ｓ６Ｋ）、ｃＡＭＰ（環状アデノシン３’，５’一リン酸）依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡ）、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ−１（ＭＡＰＫ−１）、プロテインキナーゼＣ関連キナーゼ２（ＰＰＫ２）、３’−ホスホイノシチド依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）、Ｆｙｎキナーゼ（ＦＹＮ）、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）、プロテインキナーゼＣβ２（ＰＫＣβＩＩ）、プロテインキナーゼＣγ（ＰＫＣγ）、血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦＲ−２）、線維芽細胞成長因子受容体（ＦＧＦＲ）、ホスホリラーゼキナーゼ（ＰＨＫ）、Ｗｅｅ１キナーゼ（Ｗｅｅ１）、およびプロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ）が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０１１５】
チェックポイントキナーゼ２（ＣＨＫ−２）は、ＤＮＡ損傷に応答して細胞周期チェックポイントコントローラーとして作用する。ＣＨＫ−２は、ｐ５３タンパク質をリン酸化するＡＴＭの下流エフェクターであり、Ｇ１期からＳ期までの細胞周期進行に影響を及ぼす。ＣＨＫ−２活性化は、Ｓ期進行にも影響を及ぼす。さらに、ＣＨＫ−１と一緒に、ＣＨＫ−２は、Ｇ２／Ｍ移行に影響を及ぼし、損傷が修復できない場合、アポトーシスにおいて役割を果たす。ＣＨＫ−２は、ＤＮＡ損傷療法に対して癌細胞を感作する際に役割を果たすことがある。ＣＨＫ−２は、腫瘍サプレッサーとしての役割を果たす可能性もある。Ｂａｒｔｅｋ，Ｊ．他（２００１）Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｖｉｅｗｓ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ２：８７７〜８８６。
【０１１６】
サイクリン依存性キナーゼ１（ＣＤＫ１）は、酵母細胞におけるＣｄｃ２の別名でも知られている。細胞周期は、細胞の成長および増殖を制御する特異的イベントを指揮する。サイクリンＢ／Ｃｄｋ１複合体は、有糸分裂の開始を促進する。サイクリンＢ１の過剰発現は、結腸直腸癌の９０％で見いだされている。ヒト癌では細胞周期が調節解除されているため、ＣＤＫ活性の変調は、可能な療法である。ＣＤＫ阻害剤であるオロモウシン（Ｏｌｏｍｏｕｃｉｎｅ）は、ヒト癌細胞において細胞の増殖を阻害することが分かっている。リンパ腫細胞において、オロモウシンは、サイクリンＥ／ＣＤＫ２およびサイクリンＢ／ＣＤＫ１を阻害することによってＧ１期とＧ２期の双方で細胞周期を停止させる。Ｂｕｏｌａｍｗｉｎｉ，Ｊ．Ｋ．（２０００）ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ  ６：３７９〜３９２；Ｆａｎ，Ｓ．他（１９９９）Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ４５：４３７〜４４５。
【０１１７】
血清／糖質コルチコイド制御キナーゼ（ＳＧＫ）は、ｍＲＮＡレベルおよびタンパク質レベルでＡ６細胞においてコルチコステロイドによって迅速かつ高度に調節される。また、ＳＧＫは、副腎を切除されたラットの腎臓においてアルドステロンによって誘導される。ＳＧＫは、３’−ホスホイノシチド依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）によって活性化される。ＳＧＫは、アルドステロン標的細胞において重要な役割を果たしており、アルドステロンに対する初期応答において生理学的に重要である可能性がある。最近、アルドステロン受容体拮抗剤は、心不全患者の臨床試験において大いに有望であることが分かった。同様に、アルドステロンに対する生理学的応答を媒介する能力は、有益であることが立証される可能性がある。Ｌｅｓｌｉｅ，Ｎ．Ｒ．他（２００１）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １０１（８）：２３６５〜２３８０；Ｆｕｎｄｅｒ，Ｊ．Ｗ．（１９９９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １５１（１〜２）：１〜３；Ｖｅｒｒｅｙ，Ｆ．他（２０００）Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ５７（４）：１２７７〜１２８２を参照されたい。
【０１１８】
アデノシン５’−一リン酸（ＡＭＰ）活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）アイソフォームα２（ＡＭＰＫ  α２）は、骨格筋、心臓、および肝臓中に高濃度で存在するが、α１アイソフォームは、広く分布する。ＡＭＰＫ、おそらくα２アイソフォームは、アセチルＣｏＡカルボキシラーゼβアイソフォーム（ＡＣＣβ）をリン酸化し、電気刺激または運動の条件下で不活性化する。ラット骨格筋において、マロニルＣｏＡは、ＡＣＣβｉｓにより調節され、長鎖脂肪酸を、それらが酸化されるミトコンドリア中に移動する調節機構に関与している。したがって、ＡＭＰＫは、肥満症および／またはインスリン抵抗性と関係があり、ＡＭＰＫの変調は、これらの疾患の治療に役立つと思われる。ＡＭＰＫは、グリコーゲンおよびコレステロール合成に関与する酵素を阻害する。ＡＭＰＫは、アデノシン５’三リン酸（ＡＴＰ）の枯渇に応答し、ＡＴＰレベルの維持に向けられる細胞調整を開始することによってＡＴＰ消費をさらに低下させることができる調節酵素である。さらに、ＡＭＰＫは、転写、クレアチニンキナーゼの調節、アポトーシス、およびグルコース輸送に関係するとされている。Ｋｅｍｐ，Ｂ．Ｅ．（１９９９）Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｃｅｉｅｎｃｅｓ  ２４（１）：２２〜２５；Ｆｒｉｅｄｍａｎ，Ｊ．（２００２）Ｎａｔｕｒｅ  ４１５（６８６９）：２６８〜２６９；Ｒｕｄｅｒｍａｎ，Ｎ．Ｂ．他（１９９９）Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ２７６（１、Ｐｔ．１）：Ｅ１〜Ｅ１８を参照されたい。
【０１１９】
リンパ球Ｔ細胞チロシンキナーゼ（ＬＣＫ）は、サイトゾルの非受容体チロシンキナーゼおよびＳｒｃファミリーのＴリンパ球メンバーである。ＬＣＫは、抗原による初期Ｔ細胞受容体活性化に関係するとされており、Ｔ細胞媒介性免疫応答において重要な役割を果たしている。自己リン酸化により活性化されると、ＬＣＫは、Ｔ細胞受容体ξ鎖をリン酸化し、第２の細胞質タンパク質−チロシンキナーゼＺＡＰ−７０を動員してＴ細胞活性化を促進することができる。阻害剤は、関節リウマチ、免疫応答に関係する疾患ならびにＴ細胞性白血病およびリンパ腫の治療に使用される可能性がある。Ｇａｒｃｉａ−Ｅｃｈｅｖｅｒｒｉａ，Ｃ．（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ８（１３）：１５８９〜１６０４；Ｍａｊｏｌｉｎｉ，Ｍ．Ｂ．他（１９９９）Ｌｅｕｋｅｍｉａ  ＆  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ３５（３／４）：２４５〜２５４を参照されたい。
【０１２０】
マイトジェンストレス活性化プロテインキナーゼ１（ＭＳＫ１）は、Ｒａｓ−マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）経路の刺激で、さらにはｐ３８ストレスキナーゼ経路によっても活性化される。両経路は、腫瘍形成に関係している。成長因子またはホルボールエステルによるＲａｓ−ＭＡＰＫシグナル伝達経路の刺激は、ヒストンＨ３のリン酸化をもたらす。ＭＳＫ１は、Ｈ３の上皮成長因子（ＥＧＦ）またはＴＰＡ（１２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート、ホルボールエステル）誘導性リン酸化を媒介することが分かっている。Ｒａｓ−ＭＡＰＫ経路およびリン酸化Ｈ３レベルの上昇をもたらすＭＳＫ１の持続的活性化は、癌遺伝子形質転換細胞において観察される異常な遺伝子発現に寄与するという証拠がある。ＭＳＫ１の阻害は、親細胞および癌遺伝子形質転換細胞におけるｃ−ｆｏｓ（プロト癌遺伝子）およびｕＰＡ遺伝子の誘導を抑制した。ｃ−ｆｏｓとｕＰＡはともに、腫瘍浸潤および転移に関与している。Ｓｔｒｅｌｋｏｖ，Ｉ．他（２００２）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ６２（１）：７５〜７８；Ｚｈｏｎｇ，Ｓ．他（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（３５）：３３２１３〜３３２１９；Ｎｏｍｕｒａ，Ｍ．他（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（２７）：２５５５８〜２５５６７を参照されたい。
【０１２１】
Ｒｈｏキナーゼ（ＲＯＣＫ−ＩＩ）は、ＲＯＫαの別名でも知られている。ＲＯＣＫ−ＩＩを阻害することにより、アクチン動態、細胞周期進行、および細胞接着を含む多くの基本的細胞過程を調節する分子コントロールとして機能を果たすＲｈｏ  ＧＴＰアーゼに影響を及ぼす可能性がある。ＲＯＣＫの特異的阻害剤であるＹ−２７６３２のｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏにおける生物学的効果は、文献中に記載されており、高血圧ラットにおける血圧の降下、ストレスファイバーおよび局所接着のＲｈｏ誘導性形成の阻害、ならびに腫瘍成長の阻害が含まれる。Ｎａｒｕｍｉｙａ，Ｓ．他（２０００）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ３２５（Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｅｆｆｅｃｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｓｍａｌｌ  ＧＴＰａｓｅｓ、Ｐａｒｔ  Ｄ）：２７３〜２８４（およびその中に列挙された関連参考文献）；Ｂｉｓｈｏｐ他（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３４８：２４１〜２５５を参照されたい。
【０１２２】
Ｐ７０  Ｓ６キナーゼ（ｐ７０Ｓ６Ｋ）は、２種類のアイソフォームとして（一方は細胞質に、他方は核内に）見いだされる。それらは、Ｎ末端を除くと類似しており、どちらもｐ７０Ｓ６ＫまたはＳ６Ｋ１と呼ばれる。第２の機能性相同体Ｓ６Ｋ２も同定された。ｐ７０Ｓ６Ｋは、脂質キナーゼであるホスホイノシチド３−ＯＨキナーゼ（ＰＩ（３）Ｋ）の下流標的である。ｐ７０Ｓ６Ｋは、細胞周期コントロールおよび神経細胞分化に関係している。ｐ７０Ｓ６Ｋは、腫瘍転移、免疫応答、および組織修復に影響を及ぼすと考えられる細胞運動を調節する際に機能している可能性もある。ＰＫＢ／Ａｋｔと同様、ｐ７０Ｓ６Ｋは、発癌性のタンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）シグナル伝達における重要なエフェクターである。ｐ７０Ｓ６Ｋは、インスリン様成長因子１（ＩＧＦ−１）刺激に応答するＰＫＢ／Ａｋｔ（上記参照）より強力なＢＡＤのキナーゼである。したがって、ｐ７０Ｓ６Ｋは、重要な抗アポトーシスの役割を果たす可能性がある。Ｂｌｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ，Ｐ．他（２００１）Ｎａｔｕｒｅ  ４１１（６８３５）：３５５〜３６５；Ａｃｃｉｌｉ，Ｄ．（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  １０８（１１）：１５７５〜１５７６；Ｈｉｄａｌｇｏ，Ｍ．他（２０００）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９（５６）：６６８０〜６６８６；Ｂｅｒｖｅｎ，Ｌ．他（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ７８（４）：４４７〜４５１を参照されたい。
【０１２３】
ｃＡＭＰ（環状アデノシン３’，５’一リン酸）依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡ）は、ｃＡＭＰとの相互作用に続く広範囲の生理学的応答に関与している。ｃＡＭＰは、遺伝子転写、細胞の成長および分化、イオンチャンネル伝導性、および神経伝達物質の放出などの多くの様々な細胞活性を調節する第２のメッセンジャーである。ｃＡＭＰ／ＰＫＡ相互作用は、哺乳類における主要な調節機構として作用し、ＰＫＡは、無数の生理学的基質をリン酸化することが分かっている。ＰＫＡは、２種類の主要なアイソフォーム、ＰＫＡＩおよびＰＫＡＩＩを有する。ＰＫＡＩ阻害剤は、特定の細胞傷害性癌療法と併用した場合、効果の増強を示した。ＰＫＡＩのサブユニットＲＩαを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドは、タキソールと併用した場合、抗腫瘍効果の増強を示した。グルカゴンは、ＰＫＡを活性化し、ＰＫＡは、カルモジュリン依存性プロテインキナーゼおよびプロテインキナーゼＣと一緒にインスリン応答に影響を及ぼすことがある。ＰＫＡは、心臓のＬ型カルシウムチャンネルの調節に関与し、関係する調節経路の変調は、心疾患の治療に有用であると立証される可能性がある。さらに、ＨＩＶ患者から単離された機能障害性Ｔ細胞は、ＰＫＡＩ拮抗剤の添加によって回復されている。Ｓｋａｌｈｅｇｇ，Ｂ．Ｓ．他（２０００）Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ［Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ］５：Ｄ６７８〜Ｄ６９３；Ｂｒａｎｄｏｎ，Ｅ．Ｐ．他（１９９７）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ７（３）：３９７〜４０３；Ｎｅｓｈｅｒ，Ｒ．他（２００２）Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５１（Ｓｕｐｐｌ．１）：Ｓ６８〜Ｓ７３；Ｓｈａｂｂ，Ｊ．Ｂ．（２００１）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １０１（８）：２３８１〜２４１１；Ｋａｍｐ，Ｔ．Ｊ．他（２０００）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ８７（１２）：１０９５〜１１０２；Ｔｏｒｔｏｒａ，Ｇ．他（２００２）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ８：３０３〜３０４；Ｔｏｒｔｏｒａ，Ｇ．他（２０００）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ６：２５０６〜２５１２を参照されたい。
【０１２４】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ２（ＭＡＰＫ−２）は、ＥＲＫの別名でも知られている。腫瘍形成において、ｒａｓ癌遺伝子は、細胞外成長シグナルを伝達する。ＭＡＰＫ経路は、膜結合ｒａｓと核の間の重要なシグナル伝達経路である。３種類の重要なキナーゼを含むリン酸化カスケードが関与する。それらは、Ｒａｆ、ＭＥＫ（ＭＡＰキナーゼ）およびＭＡＰＫ／ＥＲＫである。Ｒａｆアイソフォームは、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２をリン酸化し活性化する。ＭＥＫ１および２は、ＭＡＰＫアイソフォームＭＡＰＫ１／ＥＲＫ１およびＭＡＰＫ２／ＥＲＫ２をリン酸化し活性化する二重特異性キナーゼである。線維芽細胞において、ＭＡＰＫ１／ＥＲＫ１とＭＡＰＫ２／ＥＲＫ２はともに、成長因子により、および腫瘍促進性ホルボールエステルにより強力に活性化される。ＭＡＰＫ１／ＥＲＫ１およびＭＡＰＫ２／ＥＲＫ２は、グルコース調節、神経伝達物質調節、およびセセタゴグ（ｓｅｃｅｔａｇｏｇｕｅ）調節（内分泌組織において）に関与している。ＭＡＰＫ経路は、サイクリンＤ１  ｍＲＮＡの誘導にも関係するとされており、したがって、細胞周期のＧ１期に関係するとされている。Ｗｅｂｂ，Ｃ．Ｐ．他（２０００）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ６０（２）、３４２〜３４９；Ｒｏｏｖｅｒｓ，Ｋ．他（２０００）ＢｉｏＥｓｓａｙｓ  ２２（９）：８１８〜８２６；Ｃｈｅｎ，Ｚ．他（２００１）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １０１（８）：２４４９〜２４７６；Ｌｅｅ，Ｊ．Ｃ．他（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ４７（２〜３）：１８５〜２０１、Ｓｅｂｏｌｔ−Ｌｅｏｐｏｌｄ  Ｊ．Ｓ．（２０００）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９：６５９４〜６５９９；Ｃｈｅｎｇ，Ｆ．Ｙ．他（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（３５）：３２５５２〜３２５５８；Ｃｏｂｂ，Ｍ．Ｈ．他（２０００）Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ２５（１）：７〜９；Ｃｏｂｂ，Ｍ．Ｈ（１９９５）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７０（２５）：１４８４３〜１４８４６；Ｄｅａｋ，Ｍ．他（１９９８）ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １７（１５）：４４２６〜４４４１；Ｄａｖｉｓ，Ｊ．Ｄ．（１９９３）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２６８（２０）：１４５５３〜１４５５６を参照されたい。
【０１２５】
ｃＳｒｃ（ｐ６０  ｃ−ｓｒｃの別名でも知られている）は、サイトゾルの非受容体チロシンキナーゼである。ｃ−Ｓｒｃは、上皮成長因子（ＥＧＦ）および血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）などの多くのポリペプチド成長因子からの分裂促進シグナルの伝達に関与している。ｃ−Ｓｒｃは、乳癌、膵臓癌、神経芽細胞種などで過剰発現される。変異ｃ−Ｓｒｃは、ヒト大腸癌で確認されている。ｃ−Ｓｒｃは、細胞外マトリックスと細胞質アクチン細胞骨格の間のクロストークの調節に関与している多くのタンパク質をリン酸化する。ｃＳｒｃ活性の変調は、細胞の増殖、分化および死に関係する疾患と関係がある可能性がある。Ｂｊｏｒｇｅ，Ｊ．Ｄ．他（２０００）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９（４９）：５６２０〜５６３５；Ｈａｌｐｅｒｎ，Ｍ．Ｓ．他（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３（２）、８２４〜７；Ｂｅｌｓｃｈｅｓ，Ａ．Ｐ．他（１９９７）Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ［Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ］  ２：Ｄ５０１〜Ｄ５１８；Ｚｈａｎ，Ｘ．他（２００１）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １０１：２４７７〜２４９６；Ｈａｓｋｅｌｌ，Ｍ．Ｄ．他（２００１）Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １０１：２４２５〜２４４０を参照されたい。
【０１２６】
プロテインキナーゼＣ関連キナーゼ２（ＰＰＫ２）は、Ｇタンパク質Ｒｈｏによって調節される。ＰＲＫ２は、大きなアクチンターンオーバーの領域に見いだされる。内因性ＰＲＫ２キナーゼ活性は、ケラチノサイト分化とともに増加し、ケラチノサイトの細胞−細胞接着およびＦｙｎキナーゼ活性化に関係する。Ｇｒｏｓｓ，Ｃ．他（２００１）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４９６（２、３）：１０１〜１０４；Ｃａｌａｕｔｔｉ，Ｅ．他（２００２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １５６（１）：１３７〜１４８を参照されたい。
【０１２７】
３’−ホスホイノシチド依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）は、ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の活性化下流であるＡＧＣ（ｃＡＭＰ依存性、ｃＧＭＰ依存性、およびプロテインキナーゼＣ）キナーゼファミリーのメンバーをリン酸化し活性化する。ＰＩ３Ｋは、インスリン刺激により活性になる。ＰＤＫ１は、多くのプロテインキナーゼを活性化し、多くのインスリン特異的イベントの調節に関係することがある。ＰＤＫ１リン酸化およびＰＫＣζの活性化は、インスリン依存性ＧＬＵＴ４転位に必要である。インスリン誘導性ＧＬＵＴ４転位は、アクチンをベースとした細胞骨格と生理学的に関係している。アクチンフィラメントの障害は、グルコース輸送に対するインスリン効果の喪失およびＧＬＵＴ４転位の増加に関係があるとされている。Ｗｉｃｋ，Ｋ．Ｌ．他（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ：Ｉｍｍｕｎｅ，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  １（３）：２０９〜２２１；Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｒ．Ｔ．他（１９９９）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ９（１４）：Ｒ５２１〜Ｒ５２４；Ｔｏｋｅｒ，Ａ．他（２０００）Ｃｅｌｌ  １０３（２）：１８５〜１８８；Ｌｅｓｌｉｅ，Ｎ．Ｒ．（２００１）Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１０１：２３６５〜２３８０を参照されたい。
【０１２８】
Ｆｙｎキナーゼ（ＦＹＮ）は、チロシンキナーゼのＳｒｃファミリーのメンバーである。Ｆｙｎは、ケラチノサイトの細胞−細胞接着の正の制御に関係するとされている。接着は、組織された組織の確立および維持において重要な役割を果たしている。Ｆｙｎノックアウトおよびトランスジェニックマウスは、ＦｙｎがＴ細胞受容体（ＴＣＲ）シグナル伝達に関与していることを立証した。ｆｙｎ（Ｔ）導入遺伝子の過剰発現は、ＴＣＲシグナル伝達に対する応答性が増強されたＴ細胞を産生する。逆に、不活性なキナーゼ型の発現は、阻害性である。Ｆｙｎは、自己免疫疾患の治療にとって適切な標的である可能性がある。Ｆｙｎ−／−マウスは、アルコールに対して過敏であり、このことは、Ｆｙｎがアルコール依存症治療の標的となる可能性を示唆している。Ｆｙｎレベルの変化は、皮膚障害の治療に役立つ可能性もある。Ｆｙｎは、プログラム細胞死の調節に関係しているとされ、Ｆｙｎ−／−マウスは、アポトーシスの減少を示す。ＰＰＫ２も参照されたい。Ｃａｌａｕｔｔｉ，Ｅ．他（２００２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １５６（１）：１３７〜１４８；Ｒｅｓｈ，Ｍ．Ｄ．（１９９８）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３０（１１）：１１５９〜１１６２を参照されたい。
【０１２９】
血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦＲ−２）は、ＦＬＫ−１およびＫＤＲ（キナーゼインサートドメイン受容体）の別名でも知られている。他のＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼには、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）およびＶＥＧＦＲ−３（Ｆｌｔ−４）が含まれる。血管新生すなわち新たな脈管構造の発生は、固形腫瘍が成長する過程の中心である。脈管構造化（ｖａｓｃｕｌａｔｕｒｉｚａｔｉｏｎ）の程度は、転移の可能性増加に関係するとされている。内皮細胞でのみ発現されるＶＥＧＦＲ−２は、強力な血管新生成長因子ＶＥＧＦと結合し、それに続くシグナル伝達を媒介する。ＶＥＧＦ−Ｒ２活性の阻害は、ｉｎ  ｖｉｖｏモデルにおいて血管新生および腫瘍成長の減少をもたらし、ＶＥＧＦＲ−１の阻害剤は、癌の治療のために現在臨床試験中である。Ｓｔｒａｗｎ他、（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５６：３５４０〜３５４５；Ｍｉｌｌａｕｅｒ他、（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５６：１６１５〜１６２０；Ｓａｋａｍｏｔｏ，Ｋ．Ｍ．（２００１）ＩＤｒｕｇｓ  ４（９）：１０６１〜１０６７；Ｅｌｌｉｓ，Ｌ．Ｍ．他（２０００）Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ  ５（Ｓｕｐｐｌ．１）：１１〜１５；Ｍｅｎｄｅｌ，Ｄ．Ｂ．他（２０００）Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  １５：２９〜４１；Ｋｕｍａｒ，Ｃ．Ｃ．他（２００１）Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｄｒｕｇｓ  ６（２）：３０３〜３１５；Ｖａｊｋｏｃｚｙ，Ｐ．他（１９９９）Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  １（１）：３１〜４１を参照されたい。
【０１３０】
線維芽細胞成長因子受容体（ＦＧＦＲ）は、血管新生成長因子ａＦＧＦおよびｂＦＧＦと結合し、それに続く細胞内シグナル伝達を媒介する。ｂＦＧＦなどの成長因子は、特定のサイズに達した固形腫瘍における血管新生を誘導する際に重要な役割を果たすことがある。ＦＧＦＲは、全身の多くの異なる細胞タイプにおいて発現され、成人のヒトにおける正常な生理学的過程では重要な役割を果たすかどうか分かっていない。ＦＧＦＲの小分子阻害剤の全身投与は、マウスにおけるｂＦＧＦ誘導性血管新生をブロックすると報告されている。Ｙｏｓｈｉｊｉ他、（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５７：３９２４〜３９２８；Ｍｏｈａｍｍａｄ他、（１９９８）ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １７：５９９６〜５９０４を参照されたい。
【０１３１】
ホスホリラーゼキナーゼ（ＰＨＫ）は、グリコーゲンホスホリラーゼを活性化する。この活性化の主な帰結は、グリコーゲンからグルコース１−リン酸を放出することである。グリコーゲンへの変換は、哺乳類においてグルコースが貯蔵される主要な手段である。細胞内グリコーゲン貯蔵は、絶食中に血糖恒常性を維持するのに使用され、筋収縮のエネルギー源である。Ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、ＰＨＫは、ｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡ）によってリン酸化され、ＰＨＫの特異的活性を増加させる。１型と２型糖尿病はともに、肝臓および筋肉細胞におけるグリコーゲンレベルの低下を示す。グリコーゲンレベルは、ホルモンおよび代謝性シグナル伝達によって厳重に調節される。細胞内グリコーゲンレベルを増やすと考えられるキナーゼ阻害剤は、糖尿病の治療に有益であることが立証される可能性がある。Ｂｒｕｓｈｉａ，Ｒ．Ｊ．他（１９９９）Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ［Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ］  ４：Ｄ６１８〜Ｄ６４１；Ｎｅｗｇａｒｄ，Ｃ．Ｂ．他（２０００）Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ４９：１９６７〜１９７７；Ｖｅｎｉｅｎ−Ｂｒｙａｎ，Ｃ．他（２００２）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  １０：３３〜４１；Ｇｒａｖｅｓ，Ｄ．他（１９９９）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．８２：（２〜３）１４３〜１５５；Ｋｉｌｉｍａｎ，Ｍ．Ｗ．（１９９７）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｈａｐｔｅｒ４：５７〜７５を参照されたい。
【０１３２】
Ｗｅｅ１キナーゼ（Ｗｅｅ１）は、Ｍｉｋ１キナーゼと一緒に、Ｃｄｃ２をリン酸化することが分かっている。Ｃｄｃ２のリン酸化は、有糸分裂の開始を妨げることが分かっている。Ｗｅｅ１は、細胞の正常な成長周期で重要な役割を果たしている可能性があり、細胞周期のチェックポイントコントロールに関係している可能性がある。Ｒｈｉｎｄ，Ｎ．他（２００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２１（５）：１４９９〜１５０８。
【０１３３】
プロテインキナーゼＢ（ＰＫＢ）は、Ａｋｔの別名でも知られている。ＰＫＢα、βおよびγ（またはＡｋｔ１、２、および３）として知られる３種類の極めて類似したアイソフォームが存在する。２９０〜３２０ｎＭ範囲の紫外線照射は、太陽光の有害な効果に関係があるとされている。この照射は、ＰＫＢ／Ａｋｔの活性化を引き起こし、腫瘍形成に関係している可能性がある。過剰発現したＰＫＢ／Ａｋｔは、卵巣癌、前立腺癌、乳癌および膵臓癌で分かっている。ＰＫＢ／Ａｋｔは、細胞周期進行にも関与している。ＰＫＢ／Ａｋｔは、多くの方法で細胞生存を促進する。ＰＫＢ／Ａｋｔは、アポトーシス誘導タンパク質ＢＡＤをリン酸化するため、抗アポトーシスタンパク質Ｂｃｌ−ｘｌと結合して不活性化することができない。ＰＫＢ／Ａｋｔは、カスパーゼ９およびフォークヘッド転写因子を阻害することにより、およびｌｋＢキナーゼを活性化することによりアポトーシスを阻害する役割も果たす。Ｂａｒｂｅｒ，Ａ．Ｊ．（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（３５）：３２８１４〜３２８２１；Ｍｅｄｅｍａ，Ｒ．Ｈ．他（２０００）Ｎａｔｕｒｅ  ４０４：７８２〜７８７；Ｍｕｉｓｅ−Ｈｅｌｍｅｒｉｃｋｓ，Ｒ．Ｃ．他（１９９８）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７３（４５）：２９８６４〜２９８７２；Ｎｏｍｕｒａ，Ｍ．他（２００１）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（２７）：２５５８〜２５５６７；Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ，Ｋ．Ｍ．他（２００２）Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  １４（５）：３８１〜３９５；Ｂｒａｚｉｌ，Ｄ．Ｐ．他（２００１）Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ２６（１１）：６５７〜６６４；Ｌｅｓｌｉｅ，Ｎ．Ｒ．（２００１）Ｃｈｅｍ  Ｒｅｖ  １０１：２３６５〜２３８０を参照されたい。
【０１３４】
プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）の古典的アイソフォームは、α、β１、β２およびγと命名され、すべてがＣａ２＋依存性である。ＰＫＣアイソフォームは、膜輸送、細胞の分化および増殖、細胞骨格タンパク質の組織化および遺伝子発現を含む多くの生理学的応答に関係するシグナル伝達経路に関与している。腫瘍促進性ホルボールエステルは、古典的ＰＫＣアイソフォームを活性化し、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、この活性化をブロックすることができる。ＰＫＣアイソフォームは、様々な癌において過剰発現されることが多い。ＰＫＣ阻害剤は、ｐ−糖タンパク質媒介性多剤耐性を逆転させることが分かっており、他の抗癌剤の細胞内濃度を増加させることができる。筋細胞において、ＰＫＣアイソフォームは、特定の心臓病理に関係するとされている。ＰＫＣ−γは、脳および脊髄において高度に発現され、樹状突起およびニューロン細胞体に主に集中している。ＰＫＣ−β２は、細胞増殖に関与し、過剰発現は、癌に対する感受性を増加させる。ＰＫＣβ阻害剤は、糖尿病性網膜症の新療法である可能性があり、臨床試験が進行中である。Ｍａｇｎｅｌｌｉ，Ｌ．他（１９９７）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  １２３（７）：３６５〜３６９；Ｃｌｅｒｋ，Ａ．他（２００１）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ８９（１０）：８４７〜８４９；Ｃａｒｔｅｒ，Ｃ．（２０００）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ  １（２）：１６３〜１８３；Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ，Ｓ．他（１９８９）Ａｌｃｏｈｏｌ  １６（２）：１６７〜１７５；Ｒｏｓｅｎｚｗｅｉｇ，Ｔ．他（２００２）Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５１（６）：１９２１〜１９３０；Ｄｅｕｃｈｅｒ，Ａ．他（２００２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７７（１９）：１７０３２〜１７０４０；Ｆｒａｎｋ，Ｒ．Ｎ．（２００２）Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｐｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  １３３（５）：６９３〜６９８；Ｐａｒｅｋｈ，Ｄ．他（２０００）ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １９（４）：４９６〜５０３；Ｎｅｗｔｏｎ，Ａ．Ｃ．（２００１）Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１０１：２３５３〜２３６４を参照されたい。
【０１３５】
他の定義
本明細書で使用する用語「抗新生物剤」は、他に指示がない限り、新生物の成長を阻害もしくは妨害する、または悪性（癌）細胞の成熟および増殖をチェックすることができる薬剤を指す。本発明に従って企図される抗新生物剤には、ブスルファン、クロラムブシル、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、ナイトロジェンマスタード、ストレプトゾシン、チオテパ、ウラシルナイトロジェンマスタード、トリエチレンメラミン、テモゾロマイド、およびＳＡＲＣｎｕなどのアルキル化剤；アクチノマイシンＤ、ブレオマイシン、クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎｓ）、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、イリノテカン、Ｌ−アスパラギナーゼ、マイトマイシンＣ、ミトラマイシン、ナベルビン、パクリタキセル、ドセタキセル、トポテカン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ＶＭ−２６、およびＶＰ−１６−２１３を含む抗生物質および植物アルカロイド；５α−レダクターゼ阻害剤、アミノグルテチミド、アナストロゾール、ビカルタミド、クロロトリアニセン、ＤＥＳ、ドロモスタノロン、エストラムスチン、エチニルエストラジオール、フルタミド、フルオキシメステロン、ゴセレリン、ヒドロキシプロゲステロン、レトロゾール、ロイプロリド、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メチルプレドニゾロン、メチルテストステロン、ミトタン、ニルタミド、プレドニゾロン、ＳＥＲＭ３、タモキシフェン、テストラクトン、テストステロン、トリアムシノロン、およびゾレデックスを含むホルモンおよびステロイド；オールトランス型レチノイン酸、ＢＣＮＵ（カルムスチン）、ＣＢＤＣＡカルボプラチン（パラプラチン）、ＣＣＮＵ（ロムスチン）、ｃｉｓ−ジアミンジクロロ白金（シスプラチン）、ダカルバジン、グリアデル、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシ尿素、レバミゾール、ミトキサントロン、ｏ，ｐ’−ＤＤＤ（リソドレン、ミトタン）、オキサリプラチン、ポルフィマーナトリウム、プロカルバジン、グリーベックを含む合成品；クロロデオキシアデノシン、シトシンアラビノシド、２’−デオキシコホルマイシン、リン酸フルダラビン、５−フルオロウラシル、５−ＦＵＤＲ、ゲムシタビン、カンプトセシン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、ＭＴＡ、およびチオグアニンなどの代謝拮抗剤；ならびにαインターフェロン、ＢＣＧ、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、インターロイキン−２、ハーセプチンを含む生物製剤などが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０１３６】
本明細書で使用する用語「癌」は、大腸癌、乳癌、肺癌および前立腺癌、腫瘍浸潤、腫瘍成長腫瘍転移、口腔および咽頭（唇、舌、口、咽頭）、食道、胃、小腸、大腸、直腸、肝臓および胆汁道、膵臓、喉頭、骨、結合組織、皮膚、子宮頸部、子宮内膜体、卵巣、精巣、膀胱、腎臓および他の泌尿器組織、眼、脳および中枢神経系、甲状腺および他の内分泌腺の癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫ならびにリンパ球性、顆粒球性および単球性を含む白血病およびリンパ腫を含む造血器悪性腫瘍を指す。
【０１３７】
本発明によって治療することができる追加の癌のタイプには、副腎癌（ａｄｒｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）、血管肉腫、星状細胞種、聴神経腫、未分化星状細胞腫、基底細胞癌、芽細胞神経膠腫（ｂｌａｓｔｏｇｌｉｏｍａ）、軟骨肉腫、絨毛癌、脊索腫、頭蓋咽頭腫、皮膚黒色腫、嚢胞腺癌、内皮肉腫（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、胚性癌腫、上衣腫、ユーイング腫瘍、上皮癌、線維肉腫、胃癌、尿生殖路癌、多形性膠芽腫、頭部および頸部癌、血管芽細胞腫、肝細胞癌、肝癌、カポジ肉腫、大細胞癌、喉頭癌、平滑筋肉腫、白血病、脂肪肉腫、リンパ系癌、リンパ腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、甲状腺髄様癌、髄芽腫、髄膜腫、中皮腫、骨髄腫、粘液肉腫、神経芽細胞腫、神経線維肉腫、乏突起膠腫、骨原性肉腫、上皮性卵巣癌、乳頭状癌、乳頭腺癌、上皮小体腫瘍、クロム親和細胞腫、松果体腫、プラズマ細胞腫、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、皮脂腺癌、精上皮腫、皮膚癌、黒色腫、小細胞肺癌、扁平上皮細胞癌、汗腺癌、滑膜腫、甲状腺癌、ブドウ膜黒色腫、胃癌、およびウィルムス腫瘍が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０１３８】
本明細書で使用する用語「増強する」または「増強すること」は、他に指示がない限り、望ましい効果の効力あるいは期間を増加あるいは延長することを意味する。したがって、「ＤＮＡ損傷剤の効果を増強すること」に関しては、用語「増強すること」は、系（例えば、腫瘍細胞）に対するＤＮＡ損傷剤の効果を効力あるいは期間において増加あるいは延長する能力を指す。本明細書で使用する用語「増強有効量」は、望ましい系（ほんの一例として、患者における腫瘍細胞を含む）においてＤＮＡ損傷剤の効果を増強するのに十分な量を指す。患者において使用される場合、この使用に有効な量は、増殖性障害（癌を含むが、これに限定されるものではない）の重症度および経過、以前の療法、患者の健康状態および薬物に対する反応、ならびに治療を行う医師の判断に左右される。個人として、ルーチンな実験によってそのような増強有効量を決定することは、当技術分野に関する技術の十分範囲内であると考えられる。
【０１３９】
一般的に、「賦形剤」は、薬理学的組成物に添加されるか、さもなければ化合物の投与をさらに容易にするための媒体として使用される物質、多くの場合不活性な物質を指す。賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖およびデンプン形態、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油およびポリエチレングリコールが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０１４０】
本明細書で使用する「眼疾患」は、異常血管新生、眼の血管新生、眼の炎症、円錐角膜、シェーグレン症候群、近視、眼の腫瘍、角膜移植片拒絶反応、角膜外傷、血管新生緑内障、角膜潰瘍、角膜瘢痕化、黄斑変性症（湿性型と乾性型の双方を含む「加齢黄斑変性症（ＡＲＭＤ）」を含む）、増殖性硝子体網膜症および未熟児網膜症などの障害を指す。
【０１４１】
用語「と併用して」は、式（Ｉ）の化合物を、他の抗新生物療法とその直前、直後、同時、または前、後、または同時の任意の組合せで投与できることを意味する。したがって、化合物および抗新生物剤は、単一組成物として、または２つの別々の組成物として同時に、あるいは２つの別々の組成物として順次、投与することができる。同様に、化合物および放射線療法は、同時、個別または順次に投与することができる。化合物は、２種類以上の抗新生物療法と併用して投与することができる。好ましい実施形態において、化合物は、任意の化学療法の２週間から１日前、または任意の放射線療法の２週間から１日前に投与することができる。別の好ましい実施形態において、ＣＨＫ−１阻害剤は、抗新生物化学療法および放射線療法の間に投与することができる。そのような化学療法または放射線療法の後に投与される場合、ＣＨＫ−１阻害剤は、一次治療後１〜１４日以内に投与することができる。ＣＨＫ−１阻害剤は、約２週間〜約５年の期間にわたり、長期的または半長期的に投与することもできる。当業者には当然のことながら、他の抗新生物剤または療法と併用して本発明に従って投与されるＣＨＫ−１阻害剤の量は、抗新生物剤または放射線療法の抗新生物効果を増強するのに十分な量であるか、あるいは抗新生物療法または放射線療法と一緒にアポトーシスまたは細胞死を誘導しかつ／または抗血管新生効果を維持するのに十分な量である。そのような量は、他にも要因はあるが、腫瘍形成のサイズおよびタイプ、治療用製剤中の化合物の濃度、使用される具体的な抗新生物剤、他の療法と比較したＣＨＫ−１阻害剤の投与のタイミング、ならびに患者の年齢、大きさおよび状態に応じて変わることがある。
【０１４２】
本明細書で使用する用語「新生物」は、他に指示がない限り、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ第２５版（１９９０）にあるように定義され、通常より速い細胞増殖によって成長し、新たな成長を開始させた刺激が終わった後も成長し続ける異常組織を指す。新生物は、正常組織に比べ、構造組織および機能協調の部分的または完全な欠如を示し、通常、良性（良性腫瘍）あるいは悪性（癌）のいずれかである組織の明瞭な塊を形成する。
【０１４３】
本明細書で使用する用語「腫瘍形成」は、他に指示がない限り、正常組織への浸潤、例えば原発腫瘍または遠隔臓器への広がり、例えば転移をもたらすことが多い細胞の異常な成長を指す。従来の非外科的抗新生物療法による任意の腫瘍形成の治療は、本発明によって増強することができる。そのような新生物成長には、原発性腫瘍、外科技術によって不完全に除去される原発性腫瘍、十分に治療されたが、その後に転移性疾患を発症するリスクが高い原発性腫瘍、および定着した転移性疾患が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０１４４】
「薬学的に許容できる塩」は、特定化合物の遊離酸および塩基の生物学的有効性を保ち、生物学的ではないか、さもなければ好ましくないことはない塩を意味することを意図している。本発明の化合物は、十分に酸性の、十分に塩基性の、または両方の官能基を有することがあり、したがって、多くの無機または有機塩基、ならびに無機および有機酸のいずれかと反応して薬学的に許容できる塩を形成することができる。例示的な薬学的に許容できる塩には、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、およびマンデル酸塩を含む塩などの、本発明の化合物と鉱酸もしくは無機酸または無機塩基との反応によって調製される塩が含まれる。
【０１４５】
本発明の化合物が塩基である場合、望ましい薬学的に許容できる塩は、当技術分野において利用可能な任意の適当な方法、例えば、遊離塩基の、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、硝酸、リン酸などの無機酸、または酢酸、フェニル酢酸、プロピオン酸、ステアリン酸、乳酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、イセチオン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、グルクロン酸またはガラクツロン酸などのピラノシジル酸、クエン酸または酒石酸などのα−ヒドロキシ酸、アスパラギン酸またはグルタミン酸などのアミノ酸、安息香酸、２−アセトキシ安息香酸または桂皮酸などの芳香族酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸またはエタンスルホン酸などのスルホン酸、または同種のものなどの有機酸による処理によって調製することができる。
【０１４６】
本発明の化合物が酸である場合、望ましい薬学的に許容できる塩は、任意の適当な方法、例えば、遊離酸の、アミン（１級、２級または３級）、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物、または同種のものなどの無機または有機塩基による処理によって調製することができる。適当な塩の説明例には、グリシンおよびアルギニンなどのアミノ酸、アンモニア、炭酸塩、重炭酸塩、１級、２級、および３級アミン、およびベンジルアミン、ピロリジン、ピペリジン、モルホリンおよびピペラジンなどの環状アミンから誘導される有機塩、ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウムおよびリチウムから誘導される無機塩が含まれる。
【０１４７】
「薬理学的組成物」は、本明細書に記載の１種または複数の化合物、または生理学的に許容できるそれらの塩の、生理学的に許容できる担体および／または賦形剤などの他の化学成分との混合物を指す。薬理学的組成物の目的は、生物体への化合物の投与を容易にすることである。
【０１４８】
「生理学的に許容できる担体」は、生物体に対して顕著であるか、さもなければ容認し難い刺激を引き起こさず、投与化合物の生物学的活性および特性を容認し難いほどには抑止しない担体または希釈剤を指す。
【０１４９】
用語「プロドラッグ」は、投与後に、いくつかの化学的または生理学的過程を介し、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて薬物を放出する薬物前駆体である（例えば、生理学的ｐＨにされたプロドラッグは、望ましい薬物形態に変換される）。
【０１５０】
プロドラッグには、アミノ酸残基、または２個以上（例えば、２、３または４個）のアミノ酸残基のポリペプチド鎖が、式（Ｉ）の化合物の遊離アミノ、ヒドロキシまたはカルボキシル基とのアミドまたはエステル結合を介して共有結合している化合物が含まれる。アミノ酸残基には、３文字記号により一般に表記される２０種類の天然に存在するアミノ酸が含まれるが、これらに限定されることはなく、４−ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、デモシン、イソデモシン（ｉｓｏｄｅｍｏｓｉｎｅ）、３−メチルヒスチジン、ノルバリン、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、シトルリン、ホモシステイン、ホモセリン、オルニチンおよびメチオニンスルホンも含まれる。他のタイプのプロドラッグも包含される。例えば、遊離カルボキシル基は、アミドまたはアルキルエステルとして誘導体化することができる。遊離ヒドロキシ基は、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、１９９６、１９、１１５に概説されているように、ヘミスクシネート、リン酸エステル、ジメチルアミノアセテート、およびホスホリルオキシメチルオキシカルボニルを含むが、それらに限定されない基を用いて誘導体化することができる。ヒドロキシおよびアミノ基のカルバメートプロドラッグも、カーボネートプロドラッグ、ヒドロキシ基のスルホン酸エステルおよび硫酸エステルと同様に含まれる。アシル基が、エーテル、アミンおよびカルボン酸官能基を含むが、これらに限定されない基で置換されていてもよいアルキルエステルであってよいか、あるいは、アシル基が、上述のアミノ酸エステルである（アシルオキシ）メチルおよび（アシルオキシ）エチルエーテルとしてのヒドロキシ基の誘導体化も包含される。したがって、プロドラッグには、生理学的条件下で加水分解し、レゾルシノールまたはレゾルシノール様部分を与える、式（Ｉ）の構造を有する化合物のレゾルシノールまたはレゾルシノール様部分に対する保護基の使用が含まれる。このタイプのプロドラッグは、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９６、３９、１０に記載されている。遊離アミンは、アミド、スルホンアミドまたはホスホンアミドとして誘導体化することができる。これらのプロドラッグ部分はすべて、エーテル、アミンおよびカルボン酸官能基を含むが、これらに限定されない基を組み込むことができる。
【０１５１】
「薬学的に許容できるプロドラッグ」は、生理学的条件下、または加溶媒分解により、特定の化合物または薬学的に許容できるそのような化合物の塩に変換することができる化合物である。「薬学的に活性な代謝物」は、特定の化合物またはその塩の体内における代謝を通して産生される薬理学的に活性な生成物を意味することを意図している。ある化合物のプロドラッグおよび活性な代謝物は、当技術分野において知られているルーチンな技法を用いて確認することができる。例えば、Ｂｅｒｔｏｌｉｎｉ他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、４０、２０１１〜２０１６（１９９７）；Ｓｈａｎ他、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、８６（７）、７６５〜７６７；Ｂａｇｓｈａｗｅ、Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．、３４、２２０〜２３０（１９９５）；Ｂｏｄｏｒ、Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．、１３、２２４〜３３１（１９８４）；Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｐｒｅｓｓ  １９８５）；およびＬａｒｓｅｎ、Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ他、編、Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９１）を参照されたい。
【０１５２】
本明細書で使用する用語「治療すること」は、他に指示がない限り、そのような用語があてはまる障害もしくは状態、またはそのような障害もしくは状態の１つまたは複数の症状の進行を逆転、軽減、阻害すること、またはそれらを予防することを意味する。本明細書で使用する用語「治療」は、他に指示がない限り、「治療すること」が直ぐ前で定義されているように、治療する行為を指す。
【０１５３】
本明細書に記載の１種または複数の化合物を含む組成物は、予防的および／または治療的処置のために投与することができる。治療的応用において、組成物は、増殖性障害または状態（癌を含むが、それに限定されない）にすでに苦しんでいる患者に対し、増殖性障害または状態の症状を治療するか、あるいは少なくとも部分的に抑えるのに十分な量で投与される。これを達成するのに十分な量は、「治療有効量または投与量」と定義される。この使用に有効な量は、増殖性障害または状態の重症度および経過、以前の療法、患者の健康状態および薬物に対する反応、ならびに治療を行う医師の判断に左右される。予防的応用において、本明細書に記載の化合物を含有する組成物は、特定の増殖性障害または状態にかかりやすいか、さもなければ危険性がある患者に投与される。そのような量は、「予防有効量または投与量」であると定義される。この使用において、正確な量は、患者の健康状態、体重などにも左右される。個人として、ルーチンな実験（例えば、用量漸増臨床試験）によってそのような治療有効量または予防有効量を決定することは、当技術分野に関する技術の十分範囲内であると考えられる。
【０１５４】
いったん患者の状態の改善が起きたら、必要に応じて維持量を投与する。続いて、投与の用量もしくは回数、または双方を、改善された増殖性障害または状態が保たれるレベルまで、症状に応じて減らすことができる。症状が望ましいレベルまで軽減された場合、治療を中止することができる。しかしながら、患者は、疾患症状のいかなる再発に対しても長期間の間欠的治療を必要とすることがある。
【０１５５】
本明細書に記載の方法において使用される化合物、および該当する場合には他の薬剤の投与の量および回数は、患者の年齢、状態およびサイズ、ならびに治療している疾患の重症度を考慮して、主治医である臨床家（医師）の判断に従って調節されるであろう。
【０１５６】
（例えば、治療、予防、および／または維持のために）投与される活性化合物の量は、治療されている対象、障害および状態の重症度、投与の速度、化合物の性質および処方する医師の裁量に左右されるであろう。しかしながら、有効量は、単回投与または分割投与において１日につき体重１ｋｇ当たり約０．００１〜約１００ｍｇ、好ましくは約１〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。７０ｋｇのヒトの場合、これは約０．０５〜約７ｇ／日、好ましくは約０．２〜約２．５ｇ／日に相当するであろう。場合によっては、上記範囲の下限以下の用量レベルで十分すぎることがあり、別の場合には、いかなる有害な副作用も引き起こすことなくさらに大用量が用いられることもあるが、ただし、そのような大用量は、１日を通して投与するためのいくつかの少量に分割される。
【０１５７】
本発明による医薬組成物は、別法として、または式（Ｉ）の化合物の他に、活性成分として、薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、ならびに薬学的に許容できるそのような化合物および代謝物の塩を含む。そのような化合物、プロドラッグ、多量体、塩、および代謝物は、本明細書において「活性剤」または「薬剤」と総称されることがある。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１５８】
本発明によれば、式Ｉの化合物は、以下に示す反応スキームによって調製することができる。
【０１５９】
【化１４】
2006528661.tif 000018
【０１６０】
【化１５】
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【０１６１】
【化１６】
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【０１６２】
【化１７】
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【０１６３】
【化１８】
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【０１６４】
【化１９】
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【０１６５】
スキーム１は、容易に入手可能な出発材料から本発明の化合物のための中間体を構築するのに使用される２種類の炭素−炭素結合形成反応の合成スキームを示している。図１における第１ステップは、新たなアリール−アリール結合を形成するための炭素求核試薬（アリールボロン酸）による炭素求電子試薬（ハロゲン化アリール）の遷移金属が触媒するカップリングを示している。図１における最初の反応は、事実上すべての相補的な炭素求電子試薬および炭素求核試薬対のカップリングを原則として可能にする汎用反応である鈴木カップリングの一例である。図１における第２ステップは、炭素求電子試薬（炭酸ジメチル）に対する炭素求核試薬（示したアセトフェノンから形成されるエノレート）の塩基が触媒するカップリングを示している。標準的処理により、示した１，３−ケトエステルが得られる。当業者には当然のことながら、図１に示す２つのカップリングステップは、逆の順序で行ってもよい。示した溶媒は、ほんの一例である。
【０１６６】
スキーム２は、本明細書に記載の化合物を調製するのに使用される３種類の他の合成ステップを有する合成スキームを示している。図２における第１ステップは、炭素求電子試薬（この場合は、１，３ケトエステルカルボニル炭素）に対する窒素求核試薬（この場合は、ｂｏｃ保護アニリン誘導体）のカップリングを示している。この場合は、示すような新たなアミド結合がもたらされる。この汎用反応は、最終生成物における多くのピラゾリル側鎖のカップリングを可能にする。図２における第２ステップは、ヘテロ原子源としてヒドラジンを使用するジケト前駆体からのピラゾリル部分の形成を示している。この反応は、示すように２つのステップで行われる。図２には唯一のピラゾリル互変異性体が示されているが、本方法は、ピラゾール部分の両互変異性体を製造することができる。図２における最終ステップは、ｂｏｃ保護アミンの脱保護と、続くカラムクロマトグラフィーを示している。示した溶媒および温度は、ほんの一例である。
【０１６７】
スキーム３は、ピラゾール生成物へのピリジルアセトアミドの４ステップ変換の合成スキームを示している。第１ステップは、アセトアミドのチオアセトアミドへの変換を示している。ローソン試薬（１，３，２，４−ジチアジホスフェタン−２，４−ジスルフィド）は、ケトン基をチオケトン基に変換する。図３における第２ステップは、炭素求電子試薬（ＬＧは、脱離基を示す）による炭素求核試薬（この場合は、ｉｎ  ｓｉｔｕにおいて作成されるエンチオレート）のカップリングを示している。図３における第３ステップは、ヘテロ原子源としてヒドラジンを使用するジケト前駆体からのピラゾリル部分の形成を示している。第４ステップは、フェニル水酸化物の脱保護を示している。
【０１６８】
スキーム４は、本発明のピラゾール化合物を合成する代替方法の合成スキームを示している。第１ステップにおいて、セミカルバジド求核試薬は、２−ブロモアセトフェノンの求電子性カルボニル炭素と反応する。酸性条件下で還流した後、中間体ピラゾールアミン（この場合は、ブロモ置換基を有することが示される）が単離される。第２のアリール部分は、鈴木カップリングを用いて臭化アリールとカップリングすることができる。ジメトキシアレーンの脱保護およびカラムクロマトグラフィーにより、望ましい化合物が得られる。
【０１６９】
スキーム５は、図２に示したような炭素求電子試薬とのカップリングに有用なアリールアミンを合成するための一般的方法の合成スキームを示している。第１ステップにおいて、市販の臭化トリル求電子試薬は、アミン求核試薬で処理される。第２ステップにおいて、２級アミンは、ｂｏｃ保護される。第３ステップにおいて、アリールニトロ基は、対応するアミンに還元される。示した溶媒および試薬は、ほんの一例である。
【０１７０】
スキーム６は、本発明のピラゾール化合物を合成するための一般的方法の合成スキームを示している。第１ステップは、カルボニル求電子試薬を有する保護されたピラゾール化合物Ｇの適当な１級アミンとの反応を示している。窒素中、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムによる還元アミノ化により、保護されたアミンが得られる。アリールメトキシ基の脱保護により、望ましい化合物が得られる。一般合成法
【０１７１】
一般合成法
以下に記載する実施例において、他に指示がない限り、すべての温度は、セ氏温度で示され、すべての部およびパーセントは、重量による。試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ＣｏｍｐａｎｙまたはＬａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｌｔｄ．などの市販品供給業者から購入し、他に指示がない限り、さらに精製することなく使用した。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジクロロメタン、トルエン、およびジオキサンは、シュアシール（Ｓｕｒｅ  ｓｅａｌ）ボトルでＡｌｄｒｉｃｈから購入し、受け取ったまま使用した。すべての溶媒は、他に指示がない限り、当業者に容易に知られている標準的方法を用いて精製した。
【０１７２】
以下に示す反応は、一般的に、無水溶媒中、周囲温度において（他に指示がない限り）、陽圧のアルゴンもしくは窒素中、または乾燥管を使用して行い、反応フラスコには、シリンジを介して基質および試薬を導入するためのゴムセプタムを取り付けた。ガラス器具は、オーブン乾燥および／または加熱乾燥した。分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、ガラス付きシリカゲル６０Ｆ  ２５４プレートＡｎａｌｔｅｃｈ（０．２５ｍｍ）で行い、適切な溶媒比（ｖ／ｖ）で溶出し、必要に応じて示す。反応は、ＴＬＣによりアッセイし、出発材料の消費によって判断して終了させた。
【０１７３】
ＴＬＣプレートの可視化は、ｐ−アニスアルデヒドスプレー試薬またはリンモリブデン酸試薬（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ２０ｗｔ％エタノール溶液）で行い、熱で活性化した。通常、処理は、反応溶媒または抽出溶媒で反応体積を倍加し、次いで、他に指示がない限り、抽出体積の２５体積％を用いて指示された水溶液で洗浄することにより行った。生成物溶液は、濾過およびロータリーエバポレーターによる減圧下での溶媒の蒸発に先立って無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空中で除去される溶媒を示した。フラッシュクロマトグラフィー（Ｓｔｉｌｌ他、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、４３、２９２３（１９７８））は、Ｂａｋｅｒグレードフラッシュシリカゲル（４７〜６１μｍ）、および他に指示がない限り、約２０：１〜５０：１のシリカゲル：粗製材料比を用いて行った。水素化分解は、実施例に示す圧力または周囲圧力で行った。
【０１７４】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、３００ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ機器で記録した。ＮＭＲスペクトルは、参照基準としてのクロロホルム（７．２５ｐｐｍおよび７７．００ｐｐｍ）もしくはＣＤ３ＯＤ（３．４および４．８ｐｐｍならびに４９．３ｐｐｍ）、または必要に応じて内部のテトラメチルシラン（０．００ｐｐｍ）を用い、ＣＤＣｌ３溶液（ｐｐｍで報告される）として取得した。必要に応じ、他のＮＭＲ溶媒を使用した。ピークの多重度を報告する場合、以下の略語を使用する。ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ（広がった）、ｄｄ（二重線の二重線）、ｄｔ（三重線の二重線）。結合定数を示す場合には、ヘルツ（Ｈｚ）で報告する。
【０１７５】
以下の調製および実施例においてＨＰＬＣクロマトグラフィーに言及する場合、使用される一般的条件は、他に指示がない限り、以下の通りである。使用されるカラムは、長さ１５０ｍｍおよび内径４．６ｍｍのＺＯＲＢＡＸ（商標）ＲＸＣ１８カラム（Ｈｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ製）である。サンプルは、Ｈｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ−１１００システムで実行する。１０分間にわたり１００パーセント酢酸アンモニウム／酢酸緩衝液（０．２Ｍ）〜１００パーセントアセトニトリルを流すグラジエント溶媒法を用いる。次いで、システムは、１．５分間の１００パーセントアセトニトリル、次いで３分間の１００％緩衝溶液による洗浄サイクルを続ける。この間の流速は、一定の３ｍｌ／分である。
【０１７６】
事実上酸性である式（Ｉ）の化合物は、様々な薬理学的に許容できる陽イオンと塩基塩を形成することができる。これらの塩は、対応する酸性化合物を、望ましい薬理学的に許容できる陽イオンを含有する水溶液で処理し、次いで得られる溶液を、好ましくは減圧下で蒸発乾固することによって容易に調製することができる。あるいは、酸性化合物の低級アルカノール溶液と望ましいアルカリ金属アルコキシドを一緒に混ぜ、次いで前と同じように得られる溶液を蒸発乾固することによっても調製してもよい。いずれにしても、反応の完全性および望ましい最終生成物の最高収率を保証するためには、化学量論的な量の試薬を用いることが好ましい。
【０１７７】
式（Ｉ）の特定の化合物は、不斉中心を有し、様々な鏡像体で存在することがある。式（Ｉ）の化合物のすべての光学異性体および立体異性体、ならびにそれらの混合物は、本明細書で十分に説明されていると考えられる。式（Ｉ）の化合物に関しては、ラセミ化合物、１種または複数の鏡像体、１種または複数のジアステレオマー体、またはそれらの混合物の使用も、本明細書で十分に説明されている。
【０１７８】
式（Ｉ）の化合物は、互変異性体として存在することもある。例えば、以下に示す化合物ＴおよびＴ’は、非等価な窒素のプロトン付加部位の関係にある互変異性体である。このような互変異性体は、Ｘ線結晶学（単結晶および粉末回折）、および分光学的方法、例えば、赤外分光法によって区別されることがある。このような互変異性体は、溶液および固体状態のＮＭＲ法で区別されることもあるが、互変異性体間のプロトン交換が速い場合には、溶液中で単一シグナルのみが観察されることがある。式（Ｉ）の化合物のどちらの互変異性体も、本明細書で十分に説明されていると考えられる。本明細書に記載の組成物および方法には、すべてのこのような互変異性体およびそれらの混合物の使用が含まれる。
【０１７９】
【化２０】
2006528661.tif 000024
【０１８０】
薬学的に許容できるプロドラッグ、薬学的に活性な代謝物、および薬学的に許容できるそのような化合物の塩を含む本明細書に記載の化合物には、１個または複数の原子が、自然に通常見いだされる原子量または質量数と異なる原子量または質量数を有する原子によって置き換えられているということを除いて、式（Ｉ）で列挙される化合物と同一である同位体標識化合物も含まれる。本発明の化合物に組み入れることができる同位体の例には、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、および３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、および塩素の同位体が含まれる。特定の同位体標識化合物、例えば、３Ｈおよび１４Ｃなどの放射性同位体が組み入れられている化合物は、薬物および／または基質の組織分布アッセイに有用である。ほんの一例として、トリチウム化、すなわち３Ｈ、および炭素−１４、すなわち１４Ｃ同位体は、それらの調製の容易さおよび検出性で好ましい。さらに、ほんの一例として、重水素、すなわち２Ｈを含むより重い同位体による置換は、より高い代謝安定性、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増加、または用量所要量の低減によるある種の治療上の利点を提供することがあるため、一部の環境において使用されることがある。一般的に、ほんの一例として、式（Ｉ）の化合物（ならびに代謝物、プロドラッグ、および薬学的に許容できるそれらの塩）を含む同位体標識化合物は、以下の図に、および／または実施例および調製で開示される手順を行い、非同位体標識試薬の代わりに同位体標識試薬を用いることによって調製することができる。
【０１８１】
固体である薬剤の場合、当業者には当然のことながら、本発明の化合物および塩は、様々な結晶形または多形相で存在することがあり、それらはすべて、本開示および指定された式の範囲内にあることが意図されている。
【０１８２】
以下に示す実施例および調製は、本明細書に記載のアミノピラゾール化合物およびそのような化合物を調製する方法をさらに説明し例示するものである。当然のことながら、本開示の範囲は、以下の実施例および調製の範囲によって決して限定されない。以下の実施例において、「Ａｃ」は、アセチルを意味し、「Ｅｔ」は、エチルを意味し、「Ｍｅ」は、メチルを意味し、「Ｂｕ」は、ブチルを意味する。
【０１８３】
合成法
本明細書に示す化合物の調製には、図１〜６に示す合成スキームを使用した。当業者には当然のことながら、代替合成法を使用して同じ化合物を調製してもよい。本明細書に記載の化合物についての追加データは、表１に見いだすことができる。本発明の特定の例示化合物についてのより詳細な説明を以下の「実施例」の項に示す。用語「中間体」および「化合物」は、互換的に使用される。米国特許４，８０３，２１６は、いくつかのピラゾール−３−アミンの合成について記載している。
【０１８４】
図１は、本明細書で開示される多くの実施例に特徴的な直線的ビフェニル部分を形成する炭素−炭素カップリング反応を扱っている。この汎用反応は、有機合成における幅広い使用を見いだし、通常は、有機ボランもしくはボロネート（または有機スタンナン）部分を、アリール、ビニル、またはアセチレンハロゲン化物、スルホネート、またはアセテートとカップリングさせる。通常、このような試薬は、感知されるほどの速度で反応しないが、触媒の存在下、例えば、低原子価遷移金属錯体の存在下で容易に反応し、好ましい遷移金属錯体は、パラジウム錯体（パラジウムは、ゼロ（０）または２（ＩＩ）の形式酸化状態を有する）である。遷移金属と結合する他の配位（ｌｉｇａｔｉｎｇ）基、例えば、ホスフィン、ホスホネート、アルシン、および当技術分野で知られている他の等価体も存在することもあり、これらの配位子は主に、Ｐｄ原子のパラジウム金属への核生成を妨げる働きをする。
【０１８５】
このようなカップリング反応では、ＣｕＩなどの共触媒が存在することも多い。炭素求電子試薬と求核試薬のカップリングに関する一般的説明については、参照により本明細書に組み込まれているＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔｒｏｓｔ他、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｈａｐｔｅｒ  ２．４：Ｃｏｕｐｌｉｎｇ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  ｓｐ２  ａｎｄ  ｓｐ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒｓ、ｐｐ５２１〜５４９、およびｐｐ９５０〜９５３を参照されたい。
【０１８６】
新たな炭素−炭素結合を得るための炭素求電子試薬による有機ボラン（上記でＥ＝Ｂ）のパラジウムが触媒するカップリングは、鈴木カップリングとして知られている［Ｓｕｚｕｋｉ他Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９８９、１１１、３１４］。有機スタンナン試薬（上記の図においてＥ＝Ｓｎ）と炭素求電子試薬のパラジウムが触媒するカップリングは、Ｓｔｉｌｌｅカップリング反応として知られている［Ｓｔｉｌｌｅ，Ｊ．Ｋ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９８６、２５、５０８およびＦａｒｉｎａおよびＲｏｔｈ、Ａｄｖ．Ｍｅｔ．−Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６、５，１〜５３を参照］。
【０１８７】
医薬組成物／製剤、用量決定（Ｄｏｓａｇｉｎｇ）、および投与方法
一定量の活性化合物を含む様々な医薬組成物を調製する方法は、当業者に知られているか、あるいは明らかであろう。さらに、当業者は、製剤および投与技法に精通している。そのようなトピックスは、例えば、Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒｐｅｕｔｉｃｓ、現行版、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（現行版）Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ中で議論されるであろう。これらの技法は、本明細書に記載の方法および組成物の適切な態様および実施形態で用いることができる。以下の実施例は、例示的目的のためのみに提供され、本開示の制限としての役割を果たすようには意図されていない。
【０１８８】
本明細書に記載の方法において利用される化合物は、標準的薬務に従い、単独か、あるいは医薬組成物中で薬学的に許容できる担体、賦形剤または希釈剤と併用して投与することができる。
【０１８９】
本明細書に記載の化合物（以後は「１種または複数の活性化合物」）の投与は、作用部位への化合物の送達を可能にする任意の方法によって行うことができる。これらの方法には、経口経路、十二指腸内経路、非経口注射（静脈内、皮下、筋肉内、血管内または注入を含む）、局所、および直腸投与が含まれる。例えば、本明細書に記載の治療用または医薬組成物は、治療の必要な領域へ局所的に投与することができる。このことは、例えば、手術中の局所注入、局所塗布、例えば、クリーム、軟膏、注射、カテーテル、またはインプラント（前記インプラントは、例えば、シアラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜などの膜を含む多孔性、非多孔性もしくはゼラチン状材料、または繊維でできている）によって行われるが、これらに限定されるものではない。投与は、腫瘍または腫瘍性もしくは前腫瘍性組織の部位（または元の部位）における直接注射によることもある。
【０１９０】
さらに、治療用または医薬組成物は、運搬体、例えばリポソームで送達することができる（例えば、Ｌａｎｇｅｒ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４９：１５２７〜１５３３（１９９０）；Ｔｒｅａｔ他、１９８９、Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ、Ｌｏｐｅｚ−ＢｅｒｎｓｔｅｉｎおよびＦｉｄｌｅｒ（編）、Ｌｉｓｓ、Ｎ．Ｙ．、ｐｐ．３５３〜３６５を参照）。治療用送達システムとしてのリポソームの調製および特徴が概説されている。ＶｅｍｕｒｉおよびＲｈｏｄｅｓ、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｃｔａ  Ｈｅｌｖｅｔｉａｅ、７０、９５〜１１１、（１９９５）を参照されたい。
【０１９１】
本明細書に記載の方法において使用される医薬組成物は、制御放出システムで送達することができる。一実施形態において、ポンプを使用することができる（Ｓｅｆｔｏｎ、１９８７、ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．１４：２０１；Ｂｕｃｈｗａｌｄ他、１９８０、Ｓｕｒｇｅｒｙ、８８：５０７；Ｓａｕｄｅｋ他、１９８９、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３２１：５７４を参照）。さらに、制御放出システムは、治療標的に近接して設置することができる（Ｇｏｏｄｓｏｎ、１９８４、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ、Ｖｏｌ．２、ｐｐ．１１５〜１３８を参照）。
【０１９２】
本明細書に記載の方法または組成物において使用される医薬組成物は、経口使用に適している形態で、例えば、錠剤、トローチ剤（ｔｒｏｃｈｅ）、糖剤コア、トローチ剤（ｌｏｚｅｎｇｅ）、水性もしくは油性懸濁剤、分散性の散剤または顆粒剤、乳剤、硬質もしくは軟質カプセル剤、またはシロップ剤またはエリキシール剤として、活性成分を含有することができる。経口使用を目的とする組成物は、医薬組成物の製造について当技術分野に知られている任意の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、薬学的に上品でかつ口当たりのよい調製物を提供するために甘味剤、矯味剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される１種または複数の薬剤を含有することができる。錠剤は、錠剤の製造に適している非毒性の薬学的に許容できる賦形剤との混合剤として活性成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウム、コーンスターチ、またはアルギン酸などの造粒剤および崩壊剤；結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、ポリビニルピロリドンまたはアカシア、および平滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクであってよい。錠剤は、コーティングされていないか、あるいは知られている技法によってコーティングし、薬物の味を隠すか、あるいは胃腸管における崩壊および吸収を遅延させることによって長期間にわたって持続的作用を提供することができる。例えば、ヒドロキシプロピルメチル−セルロースまたはヒドロキシプロピルセルロースなどの水溶性味マスキング剤、またはエチルセルロース、または酢酸酪酸セルロースなどの時間遅延材料を用いることができる。
【０１９３】
経口使用のための製剤は、活性成分が、不活性な固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合されている硬質ゼラチンカプセル剤として、または活性成分が、ポリエチレングリコールなどの水溶性担体または油媒体、例えば、ピーナッツ油、流動パラフィン、もしくはオリーブ油と混合されている軟質ゼラチンカプセル剤として提供することもできる。
【０１９４】
水性懸濁剤は、水性懸濁剤の製造に適している賦形剤との混合剤として活性材料を含有することができる。そのような賦形剤は、懸濁化剤としての役割を果たすことができ、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアラビアゴムが含まれ、分散剤または湿潤剤は、天然に存在するホスファチド、例えばレシチン、またはアルキレンオキシドの脂肪酸との縮合生成物、例えばステアリン酸ポリオキシエチレン、またはエチレンオキシドの長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレン−オキシセタノール、またはモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトールなどのエチレンオキシドの脂肪酸から誘導される部分エステルおよびヘキシトールとの縮合生成物、またはエチレンオキシドの脂肪酸から誘導される部分エステルおよびヘキシトール無水物との縮合生成物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンであってよい。また、水性懸濁剤は、１種または複数の保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｎ−プロピル、１種または複数の着色剤、１種または複数の矯味剤、ショ糖、サッカリンまたはアスパルテームなどの１種または複数の甘味剤を含有することができる。
【０１９５】
油性懸濁剤は、植物油、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油またはココナッツ油に、または流動パラフィンなどの鉱油に活性成分を懸濁することによって製剤化することができる。油性懸濁剤は、粘稠剤、例えば蜜蝋、固形パラフィンまたはセチルアルコールを含有することができる。上述のような甘味剤、および矯味剤を添加し、口当たりのよい経口調製物を提供することができる。これらの組成物は、抗酸化剤、例えば、ブチル化ヒドロキシアニソール、α−トコフェロール、またはアスコルビン酸の添加によって保存することができる。
【０１９６】
水の添加によって水性懸濁液を調製するのに適している分散性の散剤および顆粒剤は、分散剤または湿潤剤、懸濁化剤および１種または複数の保存剤との混合剤として活性成分を提供する。適当な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤は、上記ですでに述べた試剤によって例示されている。さらなる賦形剤、例えば、甘味剤、矯味剤および着色剤も存在することができる。これらの組成物は、１種または複数の抗酸化剤の添加によって保存することができる。
【０１９７】
本明細書に記載の組成物および方法において使用される医薬組成物は、水中油型乳剤の形態であってもよい。油相は、植物油、例えばオリーブ油もしくはラッカセイ油、または鉱油、例えば流動パラフィン、またはそれらの混合物であってよい。適当な乳化剤は、天然に存在するホスファチド、例えば、ダイズレシチン、ならびに脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導されるエステルまたは部分エステル、例えばモノオレイン酸ソルビタン、前記部分エステルのエチレンオキシドとの縮合生成物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンであってよい。また、乳剤は、甘味剤、矯味剤および着色剤および抗酸化剤を含有することができる。
【０１９８】
シロップ剤およびエリキシール剤は、甘味剤、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはショ糖とともに製剤化することができる。また、このような製剤は、粘滑剤、保存剤、矯味剤および着色剤ならびに抗酸化剤を含有することができる。
【０１９９】
吸入による肺投与は、液体または粉末エアロゾルを作り出す手段によって、例えば、噴霧器、定量吸入器、および粉末吸入器を含む当技術分野において知られている様々な装置のいずれかを用いることによって行うことができる（例えば、Ｎｅｗｍａｎ，Ｓ．Ｐ．１９８４、Ａｅｒｏｓｏｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｌｕｎｇ、ＣｌａｒｋｅおよびＰａｖｉａ（編）、Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈｓ、Ｌｏｎｄｏｎ、Ｅｎｇｌａｎｄ中、ｐｐ．１９７〜２２４；１９９２年１０月１日付けのＰＣＴ公開番号ＷＯ９２／１６１９２；１９９１年６月２７日付けのＰＣＴ公開番号ＷＯ９１／０８７６０；ＲｏｏｓｄｏｒｐおよびＣｒｙｓｔａｌによって１９９０年４月３日に出願されたＮＴＩＳ特許出願７−５０４−０４７を参照）。ほんの一例として、Ｕｌｔｒａｖｅｎｔ噴霧器（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｉｎｃ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ．）；Ａｃｏｒｎ  ＩＩ噴霧器（Ｍａｒｑｕｅｓｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｎｇｌｅｗｏｏｄ、Ｃｏｌｏ．）；Ｖｅｎｔｏｌｉｎ定量吸入器（Ｇｌａｘｏ  Ｉｎｃ．、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ、Ｎ．Ｃ．）；Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ粉末吸入器（Ｆｉｓｏｎｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｂｅｄｆｏｒｄ、Ｍａｓｓ．）またはＴｕｒｂｏｈａｌｅｒ（Ａｓｔｒａ）を含む様々な送達装置が市販されており、用いることができる。通常、このような装置は、そのような装置から投薬するのに適している製剤の使用を必要とし、噴射材料が存在してもよい。
【０２００】
噴霧器を使用してエアロゾル粒子を作り出すか、あるいは様々な生理学的に不活性なガスのいずれかをエアロゾル化剤として使用することができる。生理学的に許容できる界面活性剤（例えば、グリセリド）、賦形剤（例えば、ラクトース）、担体（例えば、水、アルコール）および希釈剤などの他の成分も含まれていてよい。超音波噴霧器も使用することができる。
【０２０１】
肺経路により医薬品を送達する当業者には当然のことながら、エアロゾルを作り出すための特定の装置を選択する主要な基準は、得られるエアロゾル粒子のサイズである。薬物粒子が、末梢肺、すなわち肺胞へ主に、または肺胞のみに送達されるように意図されている場合にはより小さな粒子（例えば、０．１〜３μｍ）が必要とされ、一方、送達が、上部気管支などの中心肺システムに対してのみであるか、あるいは主に中心肺システムに対してである場合、より大きな粒子（例えば、３〜１０μｍ）が必要とされる。一般的に、気道内の沈着部位に対する粒径の影響は、当業者に知られている。
【０２０２】
医薬組成物は、滅菌注射用水溶液の形態であってよい。用いることができる許容できる媒体および溶媒には、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。
【０２０３】
滅菌注射用調製物は、活性成分が油相に溶かされている滅菌注射用水中油型マイクロエマルジョンであってもよい。例えば、活性成分を、まずダイズ油とレシチンの混合物に溶かすことができる。次いで、油溶液を、水とグリセロールの混合物中に導入し、処理してマイクロエマルジョンを形成させる。
【０２０４】
注射用液剤またはマイクロエマルジョンは、局所ボーラス注射によって患者の血流中に導入することができる。あるいは、本発明の化合物の一定な循環濃度を維持するように、溶液またはマイクロエマルジョンを投与するのが有利なこともある。そのような一定濃度を維持するために、連続的静脈内送達装置を利用することができる。静脈内投与に適している担体製剤には、ほんの一例として、水とポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を、例えば５０／５０ｗ／ｗ含む混合物が含まれる。
【０２０５】
医薬組成物は、筋肉内および皮下投与のための滅菌注射用水性または油脂性懸濁液の形態であってよい。この懸濁液は、上記で述べた適当な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用い、知られている技術に従って製剤化することができる。滅菌注射用調製物は、非毒性の非経口的に許容できる希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液もしくは懸濁液、例えば、１，３−ブタンジオール溶液であってもよい。例示的な非経口投与形態には、滅菌水溶液、例えば、水性プロピレングリコールまたはブドウ糖溶液に溶かした活性化合物の液剤または懸濁剤が含まれる。そのような剤形はすべて、必要に応じて適当に緩衝化することができる。さらに、無菌固定油は、溶媒または懸濁化媒体として好都合に用いられる。この目的のため、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の刺激のない固定油が用いられる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製で使用される。
【０２０６】
本明細書に記載の方法および組成物において使用されるアミノピラゾールは、薬物を直腸投与するための坐剤の形態でも投与することができる。これらの組成物は、本明細書に記載のアミノピラゾールを、通常の温度では固体であるが直腸温度では液体であるため、直腸内で融解して薬物を放出する適当な非刺激性賦形剤と混ぜることによって調製することができる。そのような材料には、カカオ脂、グリセリンゼラチン、水素化植物油、様々な分子量のポリエチレングリコールとポリエチレングリコールの脂肪酸エステルとの混合物が含まれる。
【０２０７】
局所使用の場合、本明細書に記載の少なくとも１種類のアミノピラゾール化合物を含有するクリーム剤、軟膏剤、ゼリー剤、液剤または懸濁剤を使用することができる。本明細書で使用する局所塗布には、うがい薬（ｍｏｕｔｈ  ｗａｓｈ）および含嗽薬（ｇａｒｇｌｅ）が含まれることがある。
【０２０８】
本明細書に記載の方法および組成物において使用される化合物は、適当な鼻腔内媒体および送達装置の局所使用を介して、または当業者によく知られている経皮皮膚用パッチ剤の形態を用いる経皮経路を介して、鼻腔内形態で投与することができる。経皮送達システムの形態で投与するためには、投与計画全体にわたり、用量投与が間欠的よりはむしろ連続的でなければならないことは言うまでもない。
【０２０９】
本明細書に記載の方法および化合物は、治療されている状態に対する特定の有用性で選択される他のよく知られている治療薬と併用して使用してもよい。例えば、本発明の化合物は、本開示の他の場所に記載されているように、知られている抗癌剤および細胞傷害性薬剤との併用で有用なことがある。
【０２１０】
一般的に、本明細書に記載の化合物、および併用療法が用いられる実施形態における他の薬剤は、同一の医薬組成物で投与する必要はなく、異なる物理的および化学的特徴のため、異なる経路によって投与しなければならないことがある。可能な場合、同一の医薬組成物による投与方法の決定および投与の妥当性は、熟練した臨床家の知識の十分範囲内にある。初期の投与は、当技術分野において知られている確立したプロトコルに従って行うことができ、次いで、観察された効果に基づき、熟練した臨床家は、用量、投与方法および投与時間を修正することができる。使用される化合物の特定の選択は、主治医である医師の診断および患者の状態の判断および適切な治療プロトコルに左右される。化合物は、増殖性疾患の性質、患者の状態、および使用される化合物の実際の選択に応じて、同時に（例えば、同時に、基本的に同時に、または同一治療プロトコル内で）または順次投与することができる。
【０２１１】
投与順序の決定、および治療プロトコル中の各治療薬の投与の反復数は、治療されている疾患および患者の状態の評価後は、熟練した医師の知識の十分範囲内にある。
【０２１２】
併用療法
式（Ｉ）の化合物は、新生物のある哺乳類、特にヒトを治療するための従来の抗新生物療法と併用することができる。抗新生物剤および治療用放射線を用いる化学療法を含む従来の抗新生物療法の手順は、容易に利用可能であり、当技術分野においてルーチンに実施される。例えば、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  ＰＲＩＣＩＰＬＥＳ  ＯＦ  ＩＮＴＥＲＮＡＬ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ  第１１版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙを参照されたい。
【０２１３】
本明細書に記載の組成物および方法は、細胞増殖性疾患および癌を治療するためのＤＮＡ損傷剤と併用することができる。本明細書に記載の組成物は、ＣＨＫ１の活性を変調および／または阻害するため、本明細書に記載の組成物がＤＮＡ損傷剤とともに（例えば、前に、同時に、または後に）投与された場合、ＤＮＡ損傷剤によって引き起こされるＤＮＡに対する損傷が細胞機構によって完全には修復されない可能性がある。ＤＮＡ損傷剤とともに投与された場合、本明細書に記載の組成物は、ＤＮＡに対して発生した変異および損傷が娘細胞に移動するか、あるいは元の細胞に存在したままである可能性を増すであろう。結果として、細胞は、ＤＮＡ損傷剤によって引き起こされる損傷をより受けやすくなり、生存度が有意に低下する（例えば、アポトーシスに対する感受性の増加）はずである。
【０２１４】
細胞のＤＮＡに損傷を与えるための当技術分野において知られている多くの方法があり、そのような方法はすべて、本明細書に記載の方法の範囲内に含まれる。ほんの一例として、ＤＮＡ損傷剤には、放射線、細胞傷害性薬剤、抗体、熱、アポトーシスを誘導する薬剤、抗癌剤、化学療法剤、および他の抗増殖剤が含まれる。
【０２１５】
本明細書で使用する用語「化学療法剤」には、例えば、ホルモン剤、代謝拮抗剤、ＤＮＡ相互作用剤、チュービリン（ｔｕｂｉｌｉｎ）相互作用剤、およびアスパラギナーゼまたはヒドロキシ尿素などの他の薬剤が含まれる。
【０２１６】
ＤＮＡ相互作用剤には、シスプラチン、シクロホスファミド、アルトレタミンなどのアルキル化剤；ブレオマイシンなどのＤＮＡ鎖切断剤；インターカレート型トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えば、ダクチノマイシンおよびドキソルビシン；エトポシドおよびテニポシドなどの非インターカレート型トポイソメラーゼＩＩ阻害剤；およびＤＮＡ副溝結合剤、例えばプリカマイシンが含まれる。
【０２１７】
アルキル化剤は、細胞のＤＮＡ、ＲＮＡ、もしくはタンパク質分子、または小さなアミノ酸、グルタチオン、または類似の化学物質と共有結合性の化学的付加物を形成することができる。典型的なアルキル化剤の例には、クロラムブシル、シクロホスファミド、イソファミド、メクロレタミン、メルファラン、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；チオテパなどのアジリジン；ブスルファンなどのメタンスルホン酸エステル；カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシンなどのニトロソ尿素；シスプラチン、カルボプラチンなどの白金錯体；マイトマイシンなどの生体内還元性アルキル化剤、ならびにプロカルバジン、ダカルバジンおよびアルトレタミンが含まれるが、これらに限定されるものではない。ＤＮＡ鎖切断剤には、例えばブレオマイシンが含まれる。
【０２１８】
ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩ阻害剤には、以下のアムサクリン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、イダルビシン、およびミトキサントロンなどのインターカレーター；ならびにエトポシドおよびテニポシドなどの非インターカレーターが含まれる。
【０２１９】
ＤＮＡ副溝結合剤の一例は、プリカマイシンである。
【０２２０】
一般的に、代謝拮抗剤は、核酸の産生を妨害し、それによって２つの主要な機構のうち１つによって細胞の成長を妨害する。特定の薬物は、ＤＮＡ合成の前駆体であるデオキシリボヌクレオシド三リン酸の産生を阻害し、ＤＮＡ複製を阻害する。これらの化合物の例は、プリンまたはピリミジンの類縁体であり、同化ヌクレオチド経路に組み込まれる。次いで、これらの類縁体は、それらの正常な対応物の代わりにＤＮＡまたはＲＮＡ中に置換される。
【０２２１】
化学療法剤として有用な代謝拮抗剤には、メトトレキセートおよびトリメトレキサートなどの葉酸拮抗剤；フルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、ＣＢ３７１７、アザシチジン、シタラビン、およびフロクスウリジンなどのピリミジン拮抗剤；メルカプトプリン、６−チオグアニン、フルダラビン、ペントスタチンなどのプリン拮抗剤；ならびにヒドロキシ尿素などのリボヌクレオチド還元酵素阻害剤が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０２２２】
チューブリン相互作用剤は、重合して細胞の微小管を形成するタンパク質であるチューブリン上の特定の部位に結合することによって作用する。微小管は、重要な細胞構造単位であり、細胞分裂に必要とされる。これらの治療薬は、微小管の形成を妨害する。例示的なチューブリン相互作用剤には、ビンクリスチンおよびビンブラスチン、両アルカロイドおよびパクリタキセル（タキソール）が含まれる。
【０２２３】
ホルモン剤は、癌および腫瘍の治療にも有用であるが、Ｂ細胞悪性腫瘍の場合に過ぎない。ホルモン剤は、ホルモンに感受性の腫瘍において使用され、通常、自然源から誘導される。ホルモン剤には、エストロゲン、結合型エストロゲンおよびエチニルエストラジオールおよびジエチルスチルベステロール、クロルトリアニセン（ｃｈｌｏｒｔｒｉａｎｉｓｅｎ）およびイデネストロール（ｉｄｅｎｅｓｔｒｏｌ）；カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、メドロキシプロゲステロン、およびメゲストロールなどのプロゲスチン；ならびにテストステロン、プロピオン酸テストステロンなどのアンドロゲン；フルオキシメステロン、およびメチルテストステロンが含まれるが、これらの限定されるものではない。
【０２２４】
副腎コルチコステロイドは、天然の副腎コルチゾールまたはヒドロコルチゾンから誘導され、Ｂ細胞悪性腫瘍を治療するのに使用される。副腎コルチコステロイドは、それらの抗炎症性の有益性ならびに有糸分裂を阻害し、ＤＮＡ合成を停止させる能力のため使用される。これらの化合物には、プレドニゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、およびプレドニゾロンが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０２２５】
黄体形成ホルモン放出ホルモン剤またはゴナドトロピンホルモン放出ホルモン拮抗剤は、主に前立腺癌の治療のために使用される。これらには、酢酸ロイプロリドおよび酢酸ゴセレリンが含まれる。それらは、精巣におけるステロイドの生合成を妨害する。
【０２２６】
抗ホルモン剤には、例えば、タモキシフェンなどの抗エストロゲン剤、フルタミドなどの抗アンドロゲン剤；ならびにミトタンおよびアミノグルテチミドなどの抗副腎剤が含まれる。
【０２２７】
他の薬剤には、ヒドロキシ尿素（主に酵素リボヌクレオチド還元酵素の阻害によって作用するようである）、およびアスパラギナーゼ（アスパラギンをアスパラギン酸に変換し、タンパク質合成を阻害する酵素）が含まれる。
【０２２８】
癌治療剤の範囲内には、ゼバリン（商標）（ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．）およびベキサール（商標）（Ｃｏｒｉｘａ，Ｉｎｃ．）を含むが、それらに限定されない放射性標識抗体；新生物によって発現される抗原を認識する抗体または抗体断片に結合されたその他の放射性同位元素（例えば、９０Ｙおよび１３１Ｉ）の使用；外部ビーム放射線または患者に放射線を投与するためのその他の方法が含まれる。
【０２２９】
さらに、癌治療剤の範囲内には、細胞毒に結合された抗体または抗体断片を含むが、それに限定されない細胞毒、または腫瘍細胞に細胞傷害性の薬剤を選択的に送達するその他の方法が含まれる。
【０２３０】
さらに、癌治療剤の範囲内には、ＤＮＡを破壊するための選択的方法、または、ほんの一例として、ナノ粒子を含む腫瘍細胞に熱を送達するための任意の方法が含まれる。
【０２３１】
さらに、癌治療剤の範囲内には、ほんの一例として、リツキサン（商標）（ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏｒｐ．）およびハーセプチン（商標）（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）を含む腫瘍細胞を死亡または激減させることができる非標識抗体または抗体断片の使用が含まれる。
【実施例】
【０２３２】
図１に従って調製され、実施例１〜１６に記載の化合物の調製において使用される合成中間体
Ａ．中間体Ａの調製：２’，４’−ジメトキシ−４−アセチルビフェニル（Ａ）
【０２３３】
【化２１】
2006528661.tif 000025
４−ブロモアセトフェノン（７ｇ、３５．４ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（１３５ｍＬ）溶液中に、窒素中で２，４−ジメトキシフェニルボロン酸（８．４ｇ、４６．２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２．０３ｇ、１．８ｍｍｏｌ）、および２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３  ３７ｍＬを加えた。混合物を１７時間、攪拌しながら還流し、室温まで冷却させた。反応溶液を酢酸エチルで希釈した。有機層を分離し、水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。減圧下での溶媒除去により、粘稠な残渣が得られた。酢酸エチル：ヘキサン（１：４）溶離液によるシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて残渣を精製すると、白色の固体として１−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）エタノンが得られた。収量：７．４５ｇ（８２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９５（ｄ，２Ｈ）、７．５８（ｄ，２Ｈ）、７．２８（ｄ，１Ｈ）、６．６５（ｔ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７７（ｓ，３Ｈ）、２．５８（ｓ，３Ｈ）
【０２３４】
中間体ＢおよびＣは、対応するアリールボロン酸を用い、類似の手順を用いて調製した。改良鈴木カップリングの汎用性および信頼性は、多種多様な不飽和および飽和化合物のカップリングを可能にする。
【０２３５】
Ｂ．中間体Ｂの調製：２’，４’−ジメトキシ−５’−メチル−４−アセチルビフェニル（Ｂ）
【０２３６】
【化２２】
2006528661.tif 000026
中間体Ｂは、中間体Ａの手順と類似した手順を用いて調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ７．９７（ｄ，２Ｈ）、７．６２（ｄ，２Ｈ）、７．１４（ｓ，１Ｈ）、６．７５（ｓ，１Ｈ）、３．９１（ｓ，３Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、２．５８（ｓ，３Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）。
【０２３７】
Ｃ．中間体Ｃの調製：２’，４’−ジメトキシ−６’−メチル−４−アセチルビフェニル（Ｃ）
【０２３８】
【化２３】
2006528661.tif 000027
中間体Ｃは、中間体Ａの手順と類似した手順を用いて調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．９９（ｄ，２Ｈ）、７．３０（ｄ，２Ｈ）、６．４３（ｓ，１Ｈ）、６．４０（ｓ，１Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、２．６８（ｓ，３Ｈ）、２．０６（ｓ，３Ｈ）。
【０２３９】
Ｄ．中間体Ｄの調製：３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパン酸メチル（Ｄ）
【０２４０】
【化２４】
2006528661.tif 000028
ＮａＨ（３．４８ｇ、８７ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１５８ｍＬ）、炭酸ジメチル（２６．１ｇ、２９０ｍｍｏｌ）、および１−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）エタノンのＴＨＦ溶液の一部分（２９ｍＬ）の混合物を１５分間還流した。触媒量のＫＨの添加後、残りの１−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）エタノンのＴＨＦ溶液を滴加し、少なくとも３０分間還流し、次いで室温まで冷却させた。混合物を氷水中に注加し、ジエチルエーテルおよび酢酸エチルで希釈した。有機層を分離し、水および食塩水で２回洗浄した。減圧下で溶媒を除去した。残渣をヘキサンで洗浄して乾燥すると、黄色の固体として表題化合物３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパン酸メチルが定量的収率で得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９５（ｄ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，２Ｈ）、７．２９（ｄ，１Ｈ）、６．６６（ｔ，２Ｈ）、４．２１（ｓ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７７（ｓ，３Ｈ）、３．６６（ｓ，３Ｈ）。
【０２４１】
Ｅ．中間体Ｅの調製：３−（２’，４’−ジメトキシ−５’−メチル−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパン酸メチル（Ｅ）
【０２４２】
【化２５】
2006528661.tif 000029
中間体Ｅは、対応するアルキル置換ビフェニルを用い、類似の手順を用いて調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．９５（ｄ，２Ｈ）、７．６３（ｄ，２Ｈ）、７．１１（ｓ，１Ｈ）、６．５２（ｓ，１Ｈ）、４．０２（ｓ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７６（ｓ，３Ｈ）、２．１９（ｓ，３Ｈ）
【０２４３】
Ｆ．中間体Ｆの調製：３−（２’，４’−ジメトキシ−６’−メチル−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパン酸メチル（Ｆ）
中間体Ｆは、対応するアルキル置換ビフェニルを用い、類似の手順を用いて調製した。
【０２４４】
【化２６】
2006528661.tif 000030
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．９８（ｄ，２Ｈ）、７．３３（ｄ，２Ｈ）、６．４４（ｓ，１Ｈ）、６．４１（ｓ，１Ｈ）、４．０４（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）、３．６８（ｓ，３Ｈ）、２．０６（ｓ，３Ｈ）。
【０２４５】
（実施例１）
化合物１の合成
Ａ．中間体１ａの調製：Ｎ−（３−シアノフェニル）−３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパンアミド
【０２４６】
【化２７】
2006528661.tif 000031
３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパン酸メチル（４９９ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）のキシレン（３ｍＬ）溶液に、３−アミノベンゾニトリル（２０６ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）のキシレン（３ｍＬ）溶液を加えた。混合物を窒素中、１５０℃の油浴で６時間加熱した後、ＴＬＣは、反応の完了を示した。酢酸エチル：ヘキサン１：５を用いるトリチュレーションによりアミド生成物を精製した。不溶性の材料を濾過によって集め、酢酸エチル：ヘキサン１：５と、続いて酢酸エチル：ヘキサン１：３で数回洗浄した。次いで、この材料を一夜真空ポンプ乾燥すると、黄色の粉末として表題化合物（２６２ｍｇ、４１％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．７８（３Ｈ，ｓ）、３．８１（３Ｈ，ｓ）、４．１９（２Ｈ，ｓ）６．６４（１Ｈ，ｍ）、６．６０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．０８Ｈｚ）、７．２９（１Ｈ，ｍ）、７．５５（２Ｈ，ｍ）、７．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４７）、７．７８（１Ｈ，ｍ）、８．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ）、８．０９（１Ｈ，ｍ）、１０．５８（１Ｈ，ｓ）。
【０２４７】
Ｂ．中間体１ｂの調製：３−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ベンゾニトリル
【０２４８】
【化２８】
2006528661.tif 000032
前のステップのように調製した１ｂの攪拌した無水テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）懸濁液に、窒素中でローソン試薬（３１４ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を加えた。１５０℃で３時間加熱した後、反応物を濃縮して濃い琥珀色の油とした。粗製材料を無水エタノールに溶かし、次いで、これに氷酢酸（０．０６ｍＬ、０．９８ｍｍｏｌ）を加えた。系を真空にして窒素を流し、ヒドラジン一水和物（０．０５ｍＬ、０．９８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を２時間加熱還流し、次いで、２日間室温で攪拌した。酢酸エチル：ヘキサン１：３、１：２、１：１、次いでメタノール：クロロホルム１：２０を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィーにより生成物を精製すると、薄い琥珀色の油として表題化合物（１４６ｍｇ、５７％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．８０（３Ｈ，ｓ）、３．８６（３Ｈ，ｓ）、６．５６（２Ｈ，ｍ）、６．８４（１Ｈ，ｍ）、７．１（１Ｈ，ｍ）、７．２３（２Ｈ，ｍ）、７．６０（５Ｈ，ｍ）、７．８９（１Ｈ，ｍ）。
【０２４９】
Ｃ．化合物１の調製
【０２５０】
【化２９】
2006528661.tif 000033
化合物１は、図ＩＩの手順を用いて合成した（化合物３の調製（実施例３Ｃ）も参照）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＤ−ｄ３）δ：６．１８（１Ｈ，ｓ）、６．３１（２Ｈ，ｍ）、６．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ）、７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０９Ｈｚ）、７．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３２）、７．３８（１Ｈ，ｍ）、７．５７（５Ｈ，ｂｍ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３６９．１。
【０２５１】
（実施例２）
化合物２の合成。
Ａ．中間体２ａの調製：Ｎ−（４−シアノフェニル）−３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパンアミド
【０２５２】
【化３０】
2006528661.tif 000034
化合物２ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．７８（３Ｈ，ｓ）、３．８１（３Ｈ，ｓ）、４．２１（２Ｈ，ｓ）、６．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５９）、６．６９（１Ｈ，ｍ）、７．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３）、７．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５９）、７．７８（５Ｈ，ｍ）、８．００（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４）、１０．６５（１Ｈ，ｓ）。
【０２５３】
Ｂ．中間体２ｂの調製：４−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ベンゾニトリル
【０２５４】
【化３１】
2006528661.tif 000035
化合物２ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．８１（３Ｈ，ｓ）、３．８７（３Ｈ，ｓ）、６．５８（２Ｈ，ｍ）、６．９０（１Ｈ，ｍ）、７．２１（１Ｈ，ｍ）、７．２６（１Ｈ，ｍ）、７．４７（２Ｈ，ｂｍ）、７．６２（３Ｈ，ｂｍ）、７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２９）、７．８８（１Ｈ，ｍ）
【０２５５】
Ｃ．化合物２の調製
【０２５６】
【化３２】
2006528661.tif 000036
化合物２は、図ＩおよびＩＩの手順を用いて合成した（化合物３の一般的調製を参照）。１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ：６．３８（１Ｈ，ｓ）、６．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ）、６．５４（１Ｈ，ｍ）、７．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）、７．５７（５Ｈ，ｍ）、７．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５９）、７．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３）。
【０２５７】
（実施例３）
化合物３の調製。
Ａ．中間体３ａの調製：シクロプロピル−｛３−［３−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ベンジル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２５８】
【化３３】
2006528661.tif 000037
化合物３ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．４２（ｂ，１Ｈ）、８．０５（ｄ，２Ｈ）、７．６４（ｄ，２Ｈ）、７．５１（ｍ，２Ｈ）、７．２６（ｍ，２Ｈ）、６．９９（ｄ，１Ｈ）、６．５７（ｍ，２Ｈ）、４．４２（ｓ，２Ｈ）、４  １２（ｓ，２Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、２．４９（ｂ，１Ｈ）、１．４７（ｓ，９Ｈ）、０．７１（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５４５。
【０２５９】
Ｂ．中間体３ｂの調製：４’−［５−（Ｎ−Ｂｏｃ−３−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−２，４−ジメトキシビフェニル
【０２６０】
【化３４】
2006528661.tif 000038
化合物３ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．６３（ｄ，２Ｈ）、７．５９（ｄ，２Ｈ）、７．２７（ｓ，１Ｈ）、７．２０（ｔ，１Ｈ）、７．０７（ｂ，２Ｈ）、６．７６（ｄ，１Ｈ）、６．５７（ｄ，２Ｈ）、６．３４（ｓ，１Ｈ）、４．３９（ｓ，２Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、２．５０（ｂ，１Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）、０．７１（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５４１。
【０２６１】
Ｃ．化合物３の調製
【０２６２】
【化３５】
2006528661.tif 000039
ジメトキシビフェニル３ｂ（２４７ｍｇ、０．４５７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ１０ｍＬ溶液に、０℃でＢＢｒ３（１．８ｍｌ、１．８３ｍｍｏｌ、４．０当量、１Ｍ  ＤＣＭ溶液）を加えた。褐色の懸濁液を０℃で攪拌し、一夜室温までゆっくりと温めた。次いで、氷冷水を加え、Ｎａ２ＣＯ３により水層ｐＨを約ｐＨ６に調整した。望ましい生成物は、そのＬＣ／ＭＳにより判断されるように、水層に残っていた。水層を分離し、真空中で乾燥した。残渣をメタノール２ｍＬに溶かした。ダイオネクスにより生成物を精製すると、望ましい酢酸塩３として１０９ｍｇ（５８％）の白色の固体が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．６７（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，２Ｈ）、７．３８（ｓ，１Ｈ）、７．２６（ｔ，１Ｈ）、７．１６（ｓ，１Ｈ）、７．１３（ｔ，１Ｈ）、６．８５（ｄ，１Ｈ）、６．３９（ｓ，１Ｈ）、６．３６（ｄ，１Ｈ）、６．３０（ｓ，１Ｈ）、４．０８（ｓ，２Ｈ）、２．６０（ｂ，１Ｈ）、１．９４（ｓ，３Ｈ）、０．７３（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、４１３。
【０２６３】
（実施例４）
化合物４の合成。
Ａ．中間体４ａの調製：Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−シクロプロピル−｛３−［３−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ベンジル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２６４】
【化３６】
2006528661.tif 000040
化合物４ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．４０（ｂ，１Ｈ）、８．０５（ｄ，２Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．５０（ｄ，２Ｈ）、７．２９（ｄ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，２Ｈ）、６．５８（ｍ，２Ｈ）、４．３９（ｓ，２Ｈ）、４  １３（ｓ，２Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）、２．４４（ｂ，１Ｈ）、１．４６（ｓ，９Ｈ）、０．７０（ｍ，２Ｈ）、０．６４（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５４５。
【０２６５】
Ｂ．中間体４ｂの調製：４’−［５−（Ｎ−Ｂｏｃ−４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジメトキシ
【０２６６】
【化３７】
2006528661.tif 000041
化合物４ｂは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ７．７５（ｄ，２Ｈ）、７．６９（ｂ，１Ｈ）、７．５５（ｄ，２Ｈ）、７．３９（ｄ，２Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、７．１６（ｄ，２Ｈ）、６．６６（ｄ，１Ｈ）、６．６１（ｄｄ，１Ｈ）、６．３２（ｓ，１Ｈ）、４．３４（ｓ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、２．３７（ｂ，１Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、０．６７（ｍ，２Ｈ）、０．６２（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５４１。
【０２６７】
Ｃ．化合物４の調製
【０２６８】
【化３８】
2006528661.tif 000042
化合物４は、図ＩおよびＩＩの手順を用いて合成した（化合物３の一般的調製も参照）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．６７（ｄ，２Ｈ）、７．５９（ｄ，２Ｈ）、７．２８（ｄ，４Ｈ）、７．１０（ｄ，１Ｈ）、６．３９（ｄ，１Ｈ）、６．３７（ｄ，１Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０９（ｓ，２Ｈ）、２．６３（ｂ，１Ｈ）、１．９３（ｓ，３Ｈ）、０．８１（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、４１３、３５６。
【０２６９】
（実施例５）
化合物５の調製。
Ａ．中間体５ａの調製。Ｎ−Ｂｏｃ−Ｎ−イソプロピル−｛３−［３−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ベンジル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２７０】
【化３９】
2006528661.tif 000043
化合物５ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．３６（ｂ，１Ｈ）、８．０５（ｄ，２Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．５３（ｄ，２Ｈ）、７．２９（ｄ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，２Ｈ）、６．５７（ｍ，２Ｈ）、４  １３（ｓ，２Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）、３．５８（ｂ，１Ｈ）、１．４７（ｓ，９Ｈ）、１．０９（ｄ，６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５４７。
【０２７１】
Ｂ．中間体５ｂの調製：４’−［５−（Ｎ−Ｂｏｃ−４−イソプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−２，４−ジメトキシビフェニル
【０２７２】
【化４０】
2006528661.tif 000044
化合物５ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ７．７４（ｄ，２Ｈ）、７．６６（ｂ，１Ｈ）、７．５５（ｄ，２Ｈ）、７．３８（ｄ，２Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、７．１６（ｄ，２Ｈ）、６．６６（ｄ，１Ｈ）、６．６２（ｄｄ，１Ｈ）、６．３１（ｓ，１Ｈ）、４．３１（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）、２．８５（ｂ，１Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）、１．１（ｄ，６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５４３。
【０２７３】
Ｃ．化合物５の調製
【０２７４】
【化４１】
2006528661.tif 000045
化合物５は、図ＩおよびＩＩに従って合成した（化合物３の調製も参照）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，２Ｈ）、７．３１（ｄｄ，４Ｈ）、７．１２（ｄ，１Ｈ）、６．３８（ｍ，２Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０８（ｓ，２Ｈ）、３．３９（ｑ，１Ｈ）、１．９２（ｓ，３Ｈ）、１．３８（ｄ，６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、３５６。
【０２７５】
（実施例６）
化合物６の調製。
Ａ．中間体６ａの調製。Ｎ−Ｂｏｃ−イソプロピル−｛３−［３−（２’，４’−ジメトキシ−５’−メチルビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ベンジル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２７６】
【化４２】
2006528661.tif 000046
化合物６ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．３９（ｂ，１Ｈ）、８．０３（ｄ，２Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．５２（ｄ，２Ｈ）、７．２０（ｄ，２Ｈ）、７．１１（ｓ，１Ｈ）、６．５２（ｓ，１Ｈ）、４．３０（ｂ，２Ｈ）、４  １２（ｓ，２Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）、２．１９（ｓ，３Ｈ）、１．３８（ｂ，９Ｈ）、１．０９（ｄ，６Ｈ）。
【０２７７】
Ｂ．中間体６ｂの調製。４’−［５−（Ｎ−Ｂｏｃ−４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−２，４−ジメトキシ−５−メチルビフェニル
【０２７８】
【化４３】
2006528661.tif 000047
化合物６ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ７．６５（ｄ，２Ｈ）、７．５１（ｄ，２Ｈ）、７．１５（ｄ，１Ｈ）、７．１１（ｄ，２Ｈ）、６．６５（ｓ，１Ｈ）、６．２７（ｓ，１Ｈ）、４．３１（ｓ，２Ｈ）、３．８８（ｓ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）、１．４３（ｂ，９Ｈ）、１．１２（ｄ，６Ｈ）。
【０２７９】
Ｃ．化合物６の調製
【０２８０】
【化４４】
2006528661.tif 000048
化合物６は、図ＩおよびＩＩに従って合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ７．６５（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，２Ｈ）、７．２９（ｓ，４Ｈ）、６．９９（ｓ，１Ｈ）、６．４０（ｓ，１Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０４（ｓ，２Ｈ）、３．３５（ｍ，１Ｈ）、２．１３（ｓ，３Ｈ）、１．３５（ｄ，６Ｈ）。
【０２８１】
（実施例７）
化合物７の調製。
Ａ．中間体７ａの調製。Ｎ−Ｂｏｃ−イソプロピル−｛３−［３−（２’，４’−ジメトキシ−６’−メチルビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ベンジル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２８２】
【化４５】
2006528661.tif 000049
化合物７ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．３５（ｂ，１Ｈ）、８．０６（ｄ，２Ｈ）、７．５３（ｄ，２Ｈ）、７．３６（ｄ，２Ｈ）、７．２０（ｄ，２Ｈ）、６．４４（ｄ，１Ｈ）、６．４０（ｄ，１Ｈ）、４．３０（ｂ，２Ｈ）、４  １２（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．６７（ｓ，３Ｈ）、２．０６（ｓ，３Ｈ）、１．３８（ｓ，９Ｈ）、１．０８（ｄ，６Ｈ）。
【０２８３】
Ｂ．中間体７ｂの調製。４’−［５−（Ｎ−Ｂｏｃ−４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−２，４−ジメトキシ−６−メチルビフェニル
【０２８４】
【化４６】
2006528661.tif 000050
化合物７ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ７．６８（ｄ，２Ｈ）、７．１９（ｄ，２Ｈ）、７．１４（ｄ，１Ｈ）、７．１２（ｄ，２Ｈ）、６．４４（ｍ，２Ｈ）、６．２９（ｓ，１Ｈ）、４．３２（ｓ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．６６（ｓ，３Ｈ）、２．０５（ｓ，３Ｈ）、１．４３（ｂ，９Ｈ）、１．１２（ｄ，６Ｈ）。
【０２８５】
Ｃ．化合物７の調製
【０２８６】
【化４７】
2006528661.tif 000051
化合物７は、図ＩおよびＩＩに従って合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）７．６９（ｄ，２Ｈ）、７．３０（ｓ，４Ｈ）、７．３７（ｄ，１Ｈ）、６．３０（ｓ，１Ｈ）、６．２４（ｍ，２Ｈ）、４．０５（ｓ，２Ｈ）、３．３５（ｍ，１Ｈ）、２．００（ｓ，３Ｈ）、１．３５（ｄ，６Ｈ）。
【０２８７】
（実施例８）
化合物８の調製。
Ａ．中間体８ａの調製。シクロプロピル−｛３−［３−（６’−クロロ−２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ベンジル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２８８】
【化４８】
2006528661.tif 000052
化合物８ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．３６（ｂ，１Ｈ）、８．１０（ｄ，２Ｈ）、７．５５（ｄ，２Ｈ）、７．４５（ｄ，２Ｈ）、７．２３（ｄ，１Ｈ）、６．６５（ｄ，１Ｈ）、６．４６（ｄ，１Ｈ）、４．３９（ｓ，２Ｈ）、４  １５（ｓ，２Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、３．７１（ｓ，３Ｈ）、２．４２（ｂ，１Ｈ）、１．４６（ｓ，９Ｈ）、０．７０（ｍ，２Ｈ）、０．６３（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５８０。
【０２８９】
Ｂ．中間体８ｂの調製。４’−［５−（Ｎ−Ｂｏｃ−４−シクロプロピルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−５−クロロ−２，４−ジメトキシ
【０２９０】
【化４９】
2006528661.tif 000053
化合物８ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．６２（ｄ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，２Ｈ）、７．１７（ｄ，２Ｈ）、７．０９（ｄ，２Ｈ）、６．６５（ｄ，１Ｈ）、６．４７（ｄ，１Ｈ）、６．３３（ｓ，１Ｈ）、４．３６（ｓ，２Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、３．７１（ｓ，３Ｈ）、２．４３（ｂ，１Ｈ）、１．４７（ｓ，９Ｈ）、０．７０（ｍ，２Ｈ）、０．６４（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５７６。
【０２９１】
Ｃ．化合物８の調製
【０２９２】
【化５０】
2006528661.tif 000054
化合物８は、図ＩおよびＩＩの手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．６８（ｄ，２Ｈ）、７．３１（ｄ，２Ｈ）、７．２４（ｂ，４Ｈ）、６．４４（ｄ，１Ｈ）、６．３２（ｄ，１Ｈ）、６．３０（ｓ，１Ｈ）、３．９５（ｓ，２Ｈ）、２．４４（ｂ，１Ｈ）、１．９１（ｓ，３Ｈ）、０．６９（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、３９０。
【０２９３】
（実施例９）
化合物９の調製。
【０２９４】
【化５１】
2006528661.tif 000055
化合物９は、図ＩおよびＩＩに従って合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．６７（ｄ，２Ｈ）、７．４５（ｄ，２Ｈ）、７．３０（ｓ，４Ｈ）、６．３０（ｓ，１Ｈ）、６．２２（ｓ，１Ｈ）、６．１３（ｑ，１Ｈ）、４．１６（ｓ，２Ｈ）、２．７０（ｍ，１Ｈ）、０．８５（ｍ，４Ｈ）。
【０２９５】
（実施例１０）
化合物１０の調製。
Ａ．中間体１０ａの調製。シクロプロピルメチル−｛３−［３−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ベンジル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０２９６】
【化５２】
2006528661.tif 000056
化合物１０ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．４０（ｂ，１Ｈ）、８．０５（ｄ，２Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．５０（ｄ，２Ｈ）、７．２９（ｄ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，２Ｈ）、６．５８（ｍ，２Ｈ）、４．３９（ｓ，２Ｈ）、４  １３（ｓ，２Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）、２．４４（ｂ，１Ｈ）、１．４６（ｓ，９Ｈ）、０．７０（ｍ，２Ｈ）、０．６４（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）Ｍ＋＋１、５５９。
【０２９７】
Ｂ．中間体１０ｂの調製。４’−［５−（４−シクロプロピルメチルアミノメチル−フェニルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ビフェニル−２，４−ジメトキシ
【０２９８】
【化５３】
2006528661.tif 000057
化合物１０ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．５６（ｄ，２Ｈ）、７．２５（ｄ，１Ｈ）、７．１１（ｂ，２Ｈ）、６．５６（ｍ，２Ｈ）、６．２９（ｓ，１Ｈ）、４．４７（ｓ，２Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．０２（ｂ，２Ｈ）、１．４７（ｓ，９Ｈ）、０．９４（ｍ，１Ｈ）、０．４３（ｍ，２Ｈ）、０．１４（ｍ，２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）５５５
【０２９９】
Ｃ．化合物１０の調製
【０３００】
【化５４】
2006528661.tif 000058
化合物１０は、図ＩおよびＩＩの手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，２Ｈ）、７．２９（ｂ，４Ｈ）、７．１２（ｄ，１Ｈ）、６．４０（ｍ，２Ｈ）、６．２９（ｓ，１Ｈ）、４．０６（ｓ，２Ｈ）、２．８５（ｄ，２Ｈ）、１．８９（ｓ，２Ｈ）、１．０８（ｍ，１Ｈ）、０．６９（ｍ，２Ｈ）、０．３６（ｍ，２Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）３５６
【０３０１】
（実施例１１）
化合物１１の調製
Ａ．中間体１１ａの調製。３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−Ｎ−ピリミジン−２−イルプロパンアミド
【０３０２】
【化５５】
2006528661.tif 000059
化合物１１ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．７４（３Ｈ，ｓ）、３．７８（５Ｈ，ｓ）、３．８３（５Ｈ，ｓ）、６．５４（３Ｈ，ｍ）、７．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）、７．５９（３Ｈ，ｍ）、７．９４（２Ｈ，ｍ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）
【０３０３】
Ｂ．中間体１１ｂの調製。Ｎ−［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］ピリミジン−２−アミン
【０３０４】
【化５６】
2006528661.tif 000060
化合物１１ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．７８（３Ｈ，ｓ）、３．８４（３Ｈ，ｓ）、６．５５（４Ｈ，ｍ）、７．０５（１Ｈ，ｂｓ）、７．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８４Ｈｚ）、７．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ）、７．６２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ）、８．３０（１Ｈ，ｂｓ）、８．７２（１Ｈ，ｓ）。
【０３０５】
Ｃ．化合物１１の調製
【０３０６】
【化５７】
2006528661.tif 000061
化合物１１は、図ＩおよびＩＩの手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＤ−ｄ３）δ：６．３９（２Ｈ，ｍ）、６．７７（１Ｈ，ｓ）、７．１４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１０Ｈｚ）、７．６２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４８Ｈｚ）、７．７０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４６Ｈｚ）、８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ）、８．５９（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３４６．１。
【０３０７】
（実施例１２）
化合物１２の調製。
Ａ．中間体１２ａの調製。５−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパノイル］アミノ｝ピリジン−２−カルボン酸エチル
【０３０８】
【化５８】
2006528661.tif 000062
化合物１２ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８０（ｓ，１Ｈ）、８．７９（ｓ，１Ｈ）、８．２７（ｄ，１Ｈ）、８．０３（ｍ，３Ｈ）、７．６１（ｄ，２Ｈ）、７．２９（ｄ，１Ｈ）、６．６６（ｔ，２Ｈ）、４．３２（ｑ，２Ｈ）、４．２５（ｓ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）、１．３１（ｔ，３Ｈ）。
【０３０９】
Ｂ．中間体１２ｂの調製。５−［５−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ］−ピリジン−２−カルボン酸エチルエステル
【０３１０】
【化５９】
2006528661.tif 000063
化合物１２ｂは、化合物１ｂの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．５２（ｂ，１Ｈ）、８．６４（ｓ，１Ｈ）、７．９６（ｍ，２Ｈ）、７．７４（ｄ，１Ｈ）、７．５１（ｄ，２Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、６．６７（ｓ，１Ｈ）、６．６３（ｄｄ，１Ｈ）、６．３６（ｓ，１Ｈ）、４．２８（ｑ，２Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７７（ｓ，３Ｈ）、１．３０（ｔ，２Ｈ）。
【０３１１】
Ｃ．中間体１２ｃの調製。５−｛［３−（２’，４’−ジヒドロキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ピリジン−２−カルボン酸
【０３１２】
【化６０】
2006528661.tif 000064
化合物１２ｃは、５−［５−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ］−ピリジン−２−カルボン酸エチルエステルから出発し、図ＩＩの手順を用いて合成した。なお、エチルエステルは、ＢＢｒ３によって加水分解した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ９．２２（ｓ，１Ｈ）、８．４１（ｓ，２Ｈ）、７．７３（ｑ，５Ｈ）、７．２２（ｄ，１Ｈ）、６．４８（ｔ，３Ｈ）。
【０３１３】
Ｄ．化合物１２の調製
【０３１４】
【化６１】
2006528661.tif 000065
５−［５−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−２Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ］−ピリジン−２−カルボン酸エチルエステル（２６ｍｇ、０．０５８６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ１．２ｍＬ溶液に、室温でＬＡＨ（０．６ｍＬ、１．０Ｍジエチルエーテル溶液）を加えた。還元は、ＬＣ／ＭＳでモニターされるように１．５時間以内に終了した。氷水を加え、反応物を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離して濃縮し、油とした。溶媒として純粋な酢酸エチルを用いるカラムクロマトグラフィーにより生成物を精製すると、４’−「５−（６−ヒドロキシメチル−ピリジン−３−イルアミノ）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル」−ビフェニル−２，４−ジメトキシ９．７ｍｇが得られた。この化合物は、ＡＧ−１２１０１１の手順と同じ手順を用い、ＢＢｒ３を用いて脱メチル化した。１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ８．９９（ｂ，１Ｈ）、８．５８（ｓ，１Ｈ）、８．５３（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，１Ｈ）、７．７８（ｄ，２Ｈ）、７．６４（ｄ，２Ｈ）、７．４２（ｂ，１Ｈ）、７．１７（ｄ，１Ｈ）、６．６３（ｄ，１Ｈ）、６．４６（ｄｄ，１Ｈ）、６．４１（ｓ，１Ｈ）、４．８５（ｓ，２Ｈ）。
【０３１５】
（実施例１３）
化合物１３の調製。
Ａ．中間体１３ａの調製。４−［３−（２’，４’−ジメトキシ−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−プロピオニルアミノ］−ピリジン−２−カルボン酸エチルエステル
【０３１６】
【化６２】
2006528661.tif 000066
化合物１３ａは、化合物１ａの手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８５（ｓ，１Ｈ）、８．５６（ｄｄ，１Ｈ）、８．２５（ｄ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，２Ｈ）、７．７７（ｍ，１Ｈ）、７．６３（ｄ，２Ｈ）、７．３０（ｄ，１Ｈ）、６．６９（ｄ，１Ｈ）、６．６５（ｄｄ，１Ｈ）、４．３２（ｑ，２Ｈ）、４．２３（ｓ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）、１．３１（ｓ，３Ｈ）。
【０３１７】
Ｂ．化合物１３の調製
【０３１８】
【化６３】
2006528661.tif 000067
化合物１３は、化合物１２の手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．１２（ｄ，１Ｈ）、７．６８（ｄ，２Ｈ）、７．６２（ｄ，２Ｈ）、７．４７（ｓ，１Ｈ）、７．４１（ｍ，１Ｈ）、７．３２（ｄ，１Ｈ）、６．４３（ｓ，１Ｈ）、６．３９（ｍ，２Ｈ）、４．６９（ｓ，２Ｈ）、１．９５（ｓ，３Ｈ）。
【０３１９】
（実施例１４）
化合物１４の調製。
【０３２０】
【化６４】
2006528661.tif 000068
実施例１４は、化合物１３について使用した手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．５７（ｄ，１Ｈ）、７．８５（ｑ，１Ｈ）、７．６５（ｄ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，２Ｈ）、７．３３（ｄ，１Ｈ）、７．１２（ｄ，１Ｈ）、６．３９（ｑ，２Ｈ）、６．２７（ｓ，１Ｈ）、４．１９（ｓ，２Ｈ）、２．６４（ｍ，１Ｈ）、２．１５（ｍ，２Ｈ）、１．８３（ｍ，２Ｈ）、１．６８（ｍ，４Ｈ）。
【０３２１】
（実施例１５）
化合物１５の調製。
【０３２２】
【化６５】
2006528661.tif 000069
実施例１５は、化合物１４について使用した手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．５１（ｓ，１Ｈ）、９．４７（ｓ，１Ｈ）、９．３８（ｓ，１Ｈ）、８．７８（ｓ，１Ｈ）、８．５５（ｓ，１Ｈ）、７．８６（ｓ，１Ｈ）、７．６９（ｄ，２Ｈ）、７．５５（ｄ，２Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、７．１０（ｄ，１Ｈ）、６．４２（ｄ，１Ｈ）、６．３１（ｑ，１Ｈ）、６．２５（ｓ，１Ｈ）、３．３０（ｓ，２Ｈ）、２．３２（ｓ，６Ｈ）。
【０３２３】
（実施例１６）
化合物１６の調製
Ａ．中間体１６ａの調製。エチル５−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソプロパノイル］アミノ｝ピリジン−２−メチルアミド
【０３２４】
【化６６】
2006528661.tif 000070
化合物１６ａは、化合物１ａの手順と同じ手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．７１（ｂ，１Ｈ）、８．８０（ｄ，１Ｈ）、８．６６（ｄ，１Ｈ）、８．１７（ｄｄ，２Ｈ）、７．６３（ｄ，２Ｈ）、７．３０（ｄ，１Ｈ）、６．６９（ｄ，１Ｈ）、６．６５（ｍ，１Ｈ）、４．２３（ｓ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）、２．７９（ｄ，３Ｈ）。
【０３２５】
【化６７】
2006528661.tif 000071
化合物１６は、化合物１４に従って合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．０６（ｄ，１Ｈ）、９．０２（ｂ，１Ｈ）、８．９７（ｄ，１Ｈ）、８．５３（ｄｄ，１Ｈ）、８．２０（ｄ，２Ｈ）、８．１０（ｄ，２Ｈ）、７．６３（ｄ，１Ｈ）、６．９９（ｄ，１Ｈ）、６．９２（ｄ，１Ｈ）、６．８３（ｓ，１Ｈ）、３．７６（ｄ，３Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ）４１８。
【０３２６】
図ＩＩＩによる特定の中間体の調製は、実施例１７〜２０に記載する
【０３２７】
（実施例１７）
化合物１７の調製
Ａ．中間体１７ａの調製。Ｎ−ピリジン−２−イルアセトアミド
【０３２８】
【化６８】
2006528661.tif 000072
０℃まで冷却したピリジン−２−アミン（４．１４ｇ、４４．０ｍｍｏｌ）の無水ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）溶液に、無水ピリジン（４．４ｍＬ）を加え、続いて無水酢酸（４．６ｍＬ、４８．４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。添加が終了した後、反応物を室温まで温め、一夜攪拌した。酢酸エチル抽出による水性重炭酸ナトリウム処理後、有機層をプールして濃縮して黄色の油とし、素早く結晶化させると表題化合物（６．１５ｇ、定量的）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．１９（３Ｈ，ｓ）、７．０３（１Ｈ，ｍ）、７．６０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８４Ｈｚ）、８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ）、８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７９Ｈｚ）、８．５０（１Ｈ，ｂｓ）。
【０３２９】
Ｂ．中間体１７ｂの調製。Ｎ−ピリジン−２−イルエタンチオアミド
【０３３０】
【化６９】
2006528661.tif 000073
Ｎ−ピリジン−２−イルアセトアミド（１７ａ）（１．８８ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）のトルエン溶液に、ローソン試薬（６．７２ｇ、１６．６ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を１時間加熱還流し、次いで濃縮して黄色の油とし、フラッシュカラムにより精製すると、黄色の油として表題化合物（６２７ｍｇ、３３％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．７８（３Ｈ，ｓ）、７．２１（１Ｈ，ｂｓ）、７．８１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８３）、８．４２（１Ｈ，ｂｓ）、９．１４（１Ｈ，ｂｓ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）１５３．０。
【０３３１】
Ｃ．中間体１７ｃの調製。３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−Ｎ−ピリジン−２−イルプロパンチオアミド
【０３３２】
【化７０】
2006528661.tif 000074
−７８℃で攪拌したＮ−ピリジン−２−イルエタンチオアミド（１７ｂ）（３２５ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）溶液に、ｔ−ＢｕＬｉの１．７Ｍペンタン溶液（２．５ｍＬ、４．２７ｍｍｏｌ）を滴加した。反応物を１時間で０℃まで温め、次いで−７８℃まで冷却し直し、Ｎ，２’，４’−Ｎ−トリメトキシ−Ｎ−メチル−１，１’−ビフェニル−４−カルボキサミド（３２２ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（約５ｍＬ）溶液を滴加した。次いで、反応物を一夜攪拌しながら室温まで温めた。反応物をクエンチし、１：１メタノール：酢酸１ｍＬの添加によって生成物を沈殿させた。濾過により、黄色の粉末として表題化合物（２１０ｍｇ、４９％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．８１（３Ｈ，ｓ）、３．８６（３Ｈ，ｓ）、４．６３（２Ｈ，ｓ）、６．５６（２Ｈ，ｍ）、７．１６（２Ｈ，ｂｍ）、７．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）、７．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）、７．７５（１Ｈ，ｍ）、８．１１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）、８．４４（１Ｈ，ｍ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３９３．１。
【０３３３】
Ｄ．中間体１７ｄの調製。Ｎ−［５−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン−２−アミン
【０３３４】
【化７１】
2006528661.tif 000075
中間体１７ｄは、化合物２の合成で使用した手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３．８１（３Ｈ，ｓ）、３．８５（３Ｈ，ｓ）、６．２９（１Ｈ，ｓ）、６．５６（２Ｈ，ｍ）、６．８０（１Ｈ，ｍ）、７．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ）、７．１０（１Ｈ，ｂｓ）、７．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ）、７．５７（３Ｈ，ｍ）、７．７１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ）、８．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０５Ｈｚ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３７３．１。
【０３３５】
Ｅ．化合物１７の調製
【０３３６】
【化７２】
2006528661.tif 000076
化合物１７は、図ＩＩによる手順を用い、化合物１７ｄから合成した（実施例３Ｃも参照）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：６．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ）、６．４１（１Ｈ，ｓ）、６．７４（２Ｈ，ｂｍ）、７．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３３Ｈｚ）、７．２５（１Ｈ，ｂｓ）、７．５６（３Ｈ，ｍ）、７．６６（２Ｈ，ｍ）、８．１４（１Ｈ，ｓ）、９．３６（１Ｈ，ｂｍ）、１２．５４（１Ｈ，ｓ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３４５．１。
【０３３７】
（実施例１８）
化合物１８の調製
Ａ．中間体１８ａの調製。Ｎ−ピリジン−３−イルアセトアミド
【０３３８】
【化７３】
2006528661.tif 000077
中間体１８ａは、化合物１７ａの手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．０５（３Ｈ，ｓ）、７．３１（１Ｈ，ｍ）、７．９９（１Ｈ，ｍ）、８．２１（１Ｈ，ｍ）、８．６９（１Ｈ，ｓ）、１０．１３（１Ｈ，ｓ）。
【０３３９】
Ｂ．中間体１８ｂの調製。Ｎ−ピリジン−３−イルエタンチオアミド
【０３４０】
【化７４】
2006528661.tif 000078
中間体１８ｂは、化合物１７ｂの手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．７６（３Ｈ，ｓ）、７．３７（１Ｈ，ｍ）、８．４６（２Ｈ，ｍ）、８．６２（１Ｈ，ｓ）、９．２６（１Ｈ，ｂｓ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）１５３．０。
【０３４１】
Ｃ．中間体１８ｃの調製。３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−３−オキソ−Ｎ−ピリジン−３−イルプロパンチオアミド
【０３４２】
【化７５】
2006528661.tif 000079
中間体１８ｃは、化合物１７ｃの手順と類似した手順を用いて合成した。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３９３．１。
【０３４３】
Ｄ．中間体１８ｄの調製。Ｎ−［５−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］ピリジン−３−アミン
【０３４４】
【化７６】
2006528661.tif 000080
中間体１８ｄは、化合物１ｂについて前述した手順と類似した手順を用いて調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＤ−ｄ３）δ：３．７１（３Ｈ，ｓ）、３．７４（３Ｈ，ｓ）、６．１９（１Ｈ，ｓ）、６．５４（２Ｈ，ｍ）、７．１７（２Ｈ，ｍ）、７．４５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）、７．５９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０９Ｈｚ）、７．７４（１Ｈ，ｍ）、７．８４（１Ｈ，ｍ）、８．４０（１Ｈ，ｂｓ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３７３．１。
【０３４５】
Ｅ．化合物１８の調製
【０３４６】
【化７７】
2006528661.tif 000081
化合物１８は、化合物１７について示した手順と類似した手順に従って調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：６．３１（２Ｈ，ｍ）、６．４２（１Ｈ，ｓ）、７．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ）、７．５８（３Ｈ，ｍ）、７．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）、８．１１（２Ｈ，ｍ）、８．８３（１Ｈ，ｂｓ）、９．３２（１Ｈ，ｂｓ）、９．３８（１Ｈ，ｓ）、９．４７（１Ｈ，ｓ）、１２．６９（１Ｈ，ｂｓ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３４５．１。
【０３４７】
（実施例１９）
化合物１９の調製
【０３４８】
【化７８】
2006528661.tif 000082
化合物１９は、化合物１７の手順と類似した手順に従って調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．１９（ｄ，２Ｈ）、７．６８（ｄ，２Ｈ）、７．６２（ｄ，２Ｈ）、７．４１（ｄ，２Ｈ）、７．１３（ｄ，１Ｈ）、６．３９（ｔ，３Ｈ）。
【０３４９】
（実施例２０）
化合物２０の調製
Ａ．中間体２０ａの調製。Ｎ−（５−チアゾール）−チオアセタミド
【０３５０】
【化７９】
2006528661.tif 000083
中間体２０ａは、化合物１７ａの手順と類似した手順を用いて合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１２．４０（ｂ，１Ｈ）、７．４３（ｓ，１Ｈ）、６．９９（ｓ，１Ｈ）、２．３４（３Ｈ，ｓ）。
【０３５１】
Ｂ．中間体２０ｂの調製。Ｎ−［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］−１，３−チアゾール−５−アミン
【０３５２】
【化８０】
2006528661.tif 000084
中間体２０ｂは、化合物１９ｄとの類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．７６（ｓ，１Ｈ）、１０．６２（ｓ，１Ｈ）、７．７０（ｄ，２Ｈ）、７．５１（ｄ，２Ｈ）、７．２５（ｔ，２Ｈ）、６．８８（ｄ，１Ｈ）、６．６４（ｔ，２Ｈ）、６．３５（ｓ，１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７７（ｓ，３Ｈ）。
【０３５３】
Ｃ．化合物２０の調製
【０３５４】
【化８１】
2006528661.tif 000085
化合物２０は、化合物１７に従って調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．１４（ｂ，１Ｈ）、９．４５（ｂ，２Ｈ）、７．６８（ｄ，２Ｈ）、７．５７（ｄ，２Ｈ）、７．３３（ｄ，１Ｈ）、７．１１（ｄ，１Ｈ）、６．９８（ｄ，１Ｈ）、６．４１（ｔ，２Ｈ）、６．３２（ｑ，１Ｈ）。
【０３５５】
化合物２１は、図ＩＶに従って合成した。
【０３５６】
（実施例２１）
化合物２１の調製
Ａ．中間体２１ａの調製。５−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン
【０３５７】
【化８２】
2006528661.tif 000086
４−フェニル−３−チオセミカルバジド（１．００ｇ、６．０ｍｍｏｌ）の無水エタノール（３０ｍＬ）溶液に、２，４’−ジブロモアセトフェノン（１．６７ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を加えた。２．５時間攪拌した後、飽和エタノール性ＨＣｌ（２０ｍＬ）を加え、反応物を一夜加熱還流した。追加のエタノール性ＨＣｌ  ３０ｍＬを加え、還流をさらに９時間続けた後、反応物を室温で一夜攪拌した。０．５Ｍ  ＮａＯＨでｐＨを８に調整し、水性処理を行い、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル：ヘキサン１：１０、次いで１：５、最後に１：２を用いるカラムクロマトグラフィーにより生成物を精製した。表題化合物は、淡黄色の固体（５３３ｍｇ、２８％）として単離された。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：６．１９（１Ｈ，ｓ）、６．６８（１Ｈ，ｂｓ）、７．１０（４Ｈ，ｂｍ）、７．４７（４Ｈ，ｂｍ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３１５．０。
【０３５８】
Ｂ．中間体２１ｂの調製。５−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−Ｎ−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン
【０３５９】
【化８３】
2006528661.tif 000087
臭化物（上記）のジオキサン（１０ｍＬ）溶液に、２，４−ジメトキシボロン酸（３７１ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３５２ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．４ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）および水（０．３ｍＬ）を加えた。系に真空で窒素を流し、次いで、ジクロロ−ジ−トリフェニルホスホロパラジウム触媒（６０ｍｇ、５ｍｏｌ％）を加えた。反応物を９０℃で一夜加熱した。酢酸エチル：ヘキサン１：２を用いるカラムにより精製すると、琥珀色の油として表題化合物（４６ｍｇ、７％）が単離された。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：３．７０（３Ｈ，ｓ）、３．７４（３Ｈ，ｓ）、６．２０（１Ｈ，ｓ）、６．５４（２Ｈ，ｂｍ）、６．６９（１Ｈ，ｂｓ）、７．１１（６Ｈ，ｂｍ）、７．４４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ）、７．５７（２Ｈ，ｍ）。ＭＳ（ＡＰＣＩ主）３７２．２。
【０３６０】
Ｃ．化合物２１の調製
【０３６１】
【化８４】
2006528661.tif 000088
化合物２１は、図ＩＩの方法に従って合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：６．１９（１Ｈ，ｓ）、６．３０（２Ｈ，ｍ）、６．６８（１Ｈ，ｍ）、７．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ）、７．０９（４Ｈ，ｍ）、７．５１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ）、７．５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ）。
【０３６２】
（実施例２２）
化合物２２の調製
化合物２２は、中間体Ｄを、図Ｖに従って調製される対応するアミンと縮合させる図ＩＩの方法に従って調製した。
【０３６３】
Ａ．中間体２２ａの調製。Ｎ−（ｓｅｃ−ブチル）−（４−ニトロベンジル）アミン
【０３６４】
【化８５】
2006528661.tif 000089
ｓｅｃ−ブチルアミン（２．６ｍＬ、９０ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液に、室温で一夜攪拌しながら、添加漏斗を介して臭化４−ニトロ−ベンジル（１．９９ｇ、９．２ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を滴加した。酢酸エチル：ヘキサン１：５、１：２、１：１、およびメタノール：クロロホルム１：２０を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィーにより生成物を精製すると、表題化合物が定量的収率で得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  ０．９０（ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，３Ｈ）１．０６（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，３Ｈ）１．４４（ｍ，２Ｈ）２．５９（ｍ，１Ｈ）３．８８（ｍ，２Ｈ）７．５０（ｄ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ）８．１６（ｄ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ）
【０３６５】
Ｂ．中間体２２ｂの調製。Ｎ−（ｓｅｃ−ブチル）−Ｎ−Ｂｏｃ−（４−ニトロベンジル）アミン
【０３６６】
【化８６】
2006528661.tif 000090
Ｎ−（ｓｅｃ−ブチル）−Ｎ−（４−ニトロベンジル）アミン（２２ａ）（２．２ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）の無水アセトニトリル（３０ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（１．５ｍＬ、１０．６ｍｍｏｌ）と、続いて二炭酸ジ−ｔ−ブチル（２．３ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間攪拌した後、反応物をシリカゲルのプラグに通して濾過し、酢酸エチル：ヘキサン１：１で溶出し、淡黄色の油として表題化合物を単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  １．０６（ｂｓ，３Ｈ）１．２８（ｂｓ，５Ｈ）１．４９（ｓ，９Ｈ）４．３０（ｂｍ，３Ｈ）７．３８（ｄ，Ｊ＝５．５６Ｈｚ，２Ｈ）８．１４（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，２Ｈ）
【０３６７】
Ｃ．中間体２２ｃの調製。Ｎ−（ｓｅｃ−ブチル）−Ｎ−Ｂｏｃ−（４−アミノベンジル）アミン
【０３６８】
【化８７】
2006528661.tif 000091
真空で窒素を流した２２ｂのメタノール（１０ｍＬ）溶液に、小さなスパチュラの先の１０％パラジウム炭素を加えた。次いで、バルーン圧の下で水素を導入した。２時間後、完全に変換されないが、酢酸エチル：ヘキサン１：３および１：２を用いるフラッシュカラムクロマトグラフィーによりニトロおよびアニリン分子種を分離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  １．０４（ｄ，３Ｈ）１．３８（ｂｓ，９Ｈ）１．４９（ｂｍ，５Ｈ）３．５８（ｓ，２Ｈ）４．２６（ｓ，１Ｈ）６．６２（ｄ，２Ｈ）７．０４（ｂｓ，２Ｈ）。
【０３６９】
Ｄ．中間体２２ｄの調製。
【０３７０】
【化８８】
2006528661.tif 000092
中間体２２ｄは、化合物１ａについて記載した方法を用いて調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  ０．８１（ｂｓ，３Ｈ）、０．８７（ｔ，３Ｈ）、１．０４（ｂｓ，３Ｈ）、１．３５（ｍ，９Ｈ）、１．４９（ｍ，５Ｈ）、３．８０（ｍ，１Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、４．１１（ｓ，２Ｈ）、４．３３（ｂｍ，２Ｈ）、６．５７（ｍ，２Ｈ）、７．２５（ｂｍ，３Ｈ）、７．５３（ｄ，２Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、８．０５（ｄ，２Ｈ）。
【０３７１】
Ｅ．中間体２２ｅの調製。
【０３７２】
【化８９】
2006528661.tif 000093
中間体２２ｅは、化合物１ｂについて記載した方法を用いて調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  ０．８１（ｂｓ，３Ｈ）、０．８７（ｔ，３Ｈ）、１．０７（ｄ，２Ｈ）、１．２６（ｍ，５Ｈ）、１．４２（ｍｍ，９Ｈ）、１．６０（ｍ，１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．８３（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、６．２９（ｓｍ，１Ｈ）、６．５８（ｍ，２Ｈ）、７．０９（ｄ，２Ｈ）、７．１４（ｂｓ，２Ｈ）、７．２５（ｍ，１Ｈ）、７．５７（ｍ，４Ｈ）
【０３７３】
Ｆ．化合物２２の調製
【０３７４】
【化９０】
2006528661.tif 000094
化合物２２は、図Ｉによる手順を用い、化合物２２ｅから合成した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δ０．８８（ｍ，３Ｈ）、１．２３（ｄ，３Ｈ）１．４５（ｍ，１Ｈ）、１．７７（ｍ，１Ｈ）、３．０７（ｍ，１Ｈ）、３．９７（ｑ，２Ｈ）、６．１６（ｓ，１Ｈ）、６．２８（ｍ，２Ｈ）、７．００（ｄ，１Ｈ）、７．１８（ｍ，４Ｈ）、７．４９（ｄ，２Ｈ）、７．５５（ｄ，２Ｈ）
【０３７５】
（実施例２３〜２６）
実施例２３〜２６の化合物は、適切なアミノ誘導体を、ピリジルカルボニル前駆体の官能基の付いた共通のピラゾールビフェニル前駆体とカップリングさせることと、続く新たに形成されたアミド結合の還元により、図ＶＩに従って合成した。
【０３７６】
実施例２３〜２６の化合物を調製するのに有用なアルデヒド前駆体Ｇは、ケト−エノール互変異性体として平衡状態で存在する、対応するシアノ前駆体（中間体Ｈ）から調製する。
【０３７７】
【化９１】
2006528661.tif 000095
【０３７８】
中間体Ｈの調製。
中間体Ｈは、化合物１ａを調製するのに使用される方法との類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ８．８６（ｄｄ，１Ｈ）、８．４２（ｍ，１Ｈ）、８．０５（ｄ，１．３Ｈ）、７．９０（ｄｄ，１Ｈ）、７．８２（ｄ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，１．３Ｈ）、７．６１（ｄ，０．８Ｈ）、７．３０（ｄｄ，１Ｈ）、６．６５（ｍ，２Ｈ）、６．０７（ｓ，０．３Ｈ）、４．３０（ｓ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、６．６６（ｍ，２Ｈ）、６．４１（ｓ，１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）
【０３７９】
中間体Ｉの調製。５−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝−２−シアノピリジン
【０３８０】
【化９２】
2006528661.tif 000096
中間体Ｉは、化合物１ｂとの類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ８．１８（ｍ，１Ｈ）、８．７０（ｍ，１Ｈ）、７．７３（ｄ，２Ｈ）、７．７１（ｄ，１Ｈ）、７．５８（ｄ，２Ｈ）、７．２８（ｄ，１Ｈ）、６．６７（ｄ，１Ｈ）、６．６３（ｄｄ，１Ｈ）、６．４０（ｓ，１Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）。
【０３８１】
中間体Ｇの調製。５−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ピリジン−２−カルバルデヒド
【０３８２】
【化９３】
2006528661.tif 000097
アルデヒド中間体Ｇは、以下のようにシアノ前駆体から調製した。５−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝−２−シアノピリジン（７５０ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ３０ｍＬ溶液中に、窒素中−２０℃でＤＩＢＡＬの１．５Ｍトルエン溶液（１．４ｍＬ、２．０７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を−２０℃で４時間、連続的に攪拌した。反応混合物にメタノールを加えて反応をクエンチし、１Ｎ  ＨＣｌを用いてｐＨ４〜５に調整した。混合物を酢酸エチルで希釈し、Ｈ２Ｏで２回洗浄した。有機層を分離してＮａ２ＳＯ４で乾燥した。減圧下で溶媒を除去した。得られた残渣をジクロロメタンおよびヘキサンから再結晶すると、褐色の固体として５−｛［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アミノ｝ピリジン−２−カルバルデヒド３２７ｍｇ（収率４３％）が得られた。これは、さらに精製することなく次のステップに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ１２．８４（ｓ，１Ｈ）、９．７８（ｓ，１Ｈ）、９．６７（ｓ，１Ｈ）、８．７３（ｓ，１Ｈ）、８．０２（ｄ，１Ｈ）、７．８５（ｄ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，２Ｈ）、７．５３（ｄ，２Ｈ）、７．２７（ｄ，１Ｈ）、６．６６（ｍ，２Ｈ）、６．４１（ｓ，１Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｓ，３Ｈ）。
【０３８３】
実施例２３〜２６の合成のための一般手順
実施例２３〜２６の化合物は、以下の手順を用い、図ＶＩに従って合成した。ＤＣＥ、またはＴＨＦ、またはＤＣＭに溶かしたカルボニル化合物Ｇ（１ｍｍｏｌ）とアミン（１〜３ｍｍｏｌ）の混合物を、０．５〜９６時間、室温で窒素雰囲気中、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．４〜１．５ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物をＰｒｅｐ−ＨＰＬＣにより精製すると、望ましい化合物が得られた。
【０３８４】
（実施例２３）
化合物２３の調製
Ａ．中間体２３ａの調製。６−｛［（シクロプロピルメチル）アミノ］メチル｝−Ｎ−［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］ピリジン−３−アミン
【０３８５】
【化９４】
2006528661.tif 000098
化合物２３ａは、図ＶＩに従って調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）ｄ  ８．５４（ｄ，１Ｈ）、７．７８（ｑ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，２Ｈ）、７．５３（ｄ，２Ｈ）、７．３１（ｄ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，１Ｈ）、６．６３（ｍ，２Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０５（ｓ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、２．７４（ｄ，２Ｈ）、１．０６（ｍ，１Ｈ）、０．６３（ｑ，２Ｈ）、０．３０（ｑ，２Ｈ）。
【０３８６】
Ｂ．化合物２３の調製
【０３８７】
【化９５】
2006528661.tif 000099
化合物２３は、図ＩＩに従って調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ８．５６（ｄ，１Ｈ）、７．８３（ｑ，１Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，２Ｈ）、７．３１（ｄ，１Ｈ）、７．１２（ｄ，１Ｈ）、６．３９（ｍ，２Ｈ）、６．２７（ｓ，１Ｈ）、４．１４（ｓ，２Ｈ）、２．８６（ｄ，２Ｈ）、１．０９（ｍ，１Ｈ）、０．６８（ｑ，２Ｈ）、０．３５（ｑ，２Ｈ）。
【０３８８】
（実施例２４）
化合物２４の調製
Ａ．中間体２４ａの調製。６−［（シクロプロピルアミノ）メチル｝−Ｎ−［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］ピリジン−３−アミン
【０３８９】
【化９６】
2006528661.tif 000100
中間体２４ａは、２３ａとの類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ８．５２（ｄ，１Ｈ）、７．８０（ｑ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，２Ｈ）、７．５３（ｄ，２Ｈ）、７．３３（ｄ，１Ｈ）、７．２５（ｄ，１Ｈ）、６．６２（ｍ，２Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０３（ｓ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、２．４１（ｍ，１Ｈ）、０．６３（ｍ，４Ｈ）。
【０３９０】
Ｂ．化合物２４の調製
【０３９１】
【化９７】
2006528661.tif 000101
化合物２４は、化合物２３との類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．５２（ｄ，１Ｈ）、７．８１（ｑ，１Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，２Ｈ）、７．３１（ｄ，１Ｈ）、７．１２（ｄ，１Ｈ）、６．３９（ｍ，２Ｈ）、６．２７（ｓ，１Ｈ）、４．０３（ｓ，２Ｈ）、２．４３（ｓ，１Ｈ）、０．６２（ｍ，４Ｈ）。
【０３９２】
（実施例２５）
化合物２５の調製
Ａ．中間体２５ａの調製。Ｎ−［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］−６−［（イソプロピルアミノ）メチル］ピリジン−３−アミン
【０３９３】
【化９８】
2006528661.tif 000102
中間体２５ａは、化合物２４ａの調製との類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ８．５５（ｄ，１Ｈ）、７．８１（ｑ，１Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．５３（ｄ，２Ｈ）、７．３３（ｄ，１Ｈ）、７．２５（ｄ，１Ｈ）、６．６２（ｍ，２Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０９（ｓ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．２７（ｍ，１Ｈ）、１．３０（ｄ，６Ｈ）。
【０３９４】
Ｂ．化合物２５の調製
【０３９５】
【化９９】
2006528661.tif 000103
化合物２５は、化合物２４との類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ８．５５（ｄ，１Ｈ）、７．８３（ｑ，１Ｈ）、７．６６（ｄ，２Ｈ）、７．６１（ｄ，２Ｈ）、７．３２（ｄ，１Ｈ）、７．１２（ｄ，１Ｈ）、６．３８（ｍ，２Ｈ）、６．２７（ｓ，１Ｈ）、４．１３（ｓ，２Ｈ）、３．３１（ｍ，１Ｈ）、１．３４（ｄ，６Ｈ）。
【０３９６】
（実施例２６）
化合物２６の調製
Ａ．中間体２６ａの調製。Ｎ−［３−（２’，４’−ジメトキシ−１，１’−ビフェニル−４−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］−６−［（エチルアミノ）メチル］ピリジン−３−アミン
【０３９７】
【化１００】
2006528661.tif 000104
中間体２６ａは、化合物２３ａとの類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ８．５６（ｄ，１Ｈ）、７．８３（ｑ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，２Ｈ）、７．５４（ｄ，２Ｈ）、７．３２（ｄ，１Ｈ）、７．２５（ｄ，１Ｈ）、６．６２（ｍ，２Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０８（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．００（ｑ，２Ｈ）、１．２９（ｔ，３Ｈ）。
【０３９８】
化合物２６の調製
【０３９９】
【化１０１】
2006528661.tif 000105
化合物２６は、化合物２５との類似性によって調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ８．５６（ｄ，１Ｈ）、７．８３（ｑ，１Ｈ）、７．６７（ｄ，２Ｈ）、７．５４（ｄ，２Ｈ）、７．３２（ｄ，１Ｈ）、７．２５（ｄ，１Ｈ）、６．６２（ｍ，２Ｈ）、６．２８（ｓ，１Ｈ）、４．０８（ｓ，２Ｈ）、３．００（ｑ，２Ｈ）、１．２９（ｔ，３Ｈ）。
【０４００】
医薬組成物の実施例
（実施例Ｐ１）
非経口組成物
注射による投与に適している非経口医薬組成物を調製するため、式（Ｉ）の化合物の水溶性の塩１００ｍｇをＤＭＳＯに溶かし、次いで０．９％滅菌食塩水１０ｍＬと混ぜる。この混合物を、注射による投与に適している単位剤形に組み入れる。
【０４０１】
（実施例Ｐ２）
経口組成物
経口送達のための医薬組成物を調製するため、式（Ｉ）の化合物１００ｍｇをラクトース７５０ｍｇと混ぜる。この混合物を、経口投与に適している硬質ゼラチンカプセルなどの経口用量単位に入れる。
【０４０２】
（実施例Ｐ３）
眼内組成物
眼内送達のための持続放出性医薬組成物を調製するため、式（Ｉ）の化合物を、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）に溶かしたヒアルロン酸の中性等張溶液（１．５％濃度）に懸濁し、１％懸濁液を作製する。
【０４０３】
なお、本発明の代表的化合物を、他のキナーゼ、すなわちＣＨＫ２；ＰＫＣ−α；ｃ−ＳＲＣ；ＥＲＫ２；ＧＳＴ−ＬＣＫ；ＰＬＫおよびＣＤＫ２に対して試験した。結果は、本発明のアミノピラゾール化合物が、他のキナーゼに対してよりもＣＨＫ１に対して少なくとも２０倍選択的であることを示した。
【０４０４】
生物学的試験：酵素アッセイ：活性化合物の選択
（実施例Ａ）
ＣＨＫ１アッセイ（表Ｉ）
アッセイ用ＣＨＫ１構築物
Ｃ末端Ｈｉｓタグ付き完全長ヒトＣＨＫ１（ＦＬ−ＣＨＫ１）を、バキュロウイルス／昆虫細胞系を用いて発現させた。これは、４７６アミノ酸ヒトＣＨＫ１のＣ末端に６個のヒスチジン残基（６×Ｈｉｓタグ）を含んでいる。タンパク質は、従来のクロマトグラフ技法によって精製した。
【０４０５】
ＣＨＫ１アッセイ
合成基質ペプチドＳｙｎｔｉｄｅ−２（ＰＬＡＲＴＬＳＶＡＧＬＰＧＫＫ）へのリン酸基転移に伴うＡＴＰからのＡＤＰの産生は、ピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）および乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）の作用を介してホスホエノールピルビン酸（ＰＥＰ）を用いるＮＡＤＨの酸化と共役した。ＮＡＤＨの酸化は、ＨＰ８４５２分光光度計を用いて３４０ｎｍにおける吸光度（ε３４０＝６．２２ｃｍ−１ｍＭ−１）の減少を追跡することによってモニターした。典型的な反応溶液は、４ｍＮ  ＰＥＰ；０．１５ｍＭ  ＮＡＤＨ；ＬＤＨ２８単位／ｍＬ；ＰＫ１６単位／ｍＬ；３ｍＭ  ＤＴＴ；０．１２５ｍＭ  Ｓｙｎｔｉｄｅ−２；０．１５ｍＭ  ＡＴＰ；５０ｍＭ  ＴＲＩＳ、ｐＨ７．５中の２５ｍＭ  ＭｇＣｌ２；および４００ｍＭ  ＮａＣｌを含有していた。アッセイは、ＦＬ−ＣＨＫ１  １０ｎＭから開始させた。Ｋｉ値は、様々な濃度の試験化合物の存在下で初期酵素活性を測定することによって決定した。Ｅｎｚｙｍｅ  ＫｉｎｅｔｉｃおよびＫａｌｅｉｄａｇｒａｐｈソフトウェアを用いてデータを分析した。
【０４０６】
アッセイの結果を表Ｉに示す。式（Ｉ）の特定の化合物は、試験された他のキナーゼを上回るＣＨＫ１に対する選択性を示した。場合により、ＣＨＫ１に対する選択性は、他の試験キナーゼに対する選択性を少なくとも１０倍上回った。
【０４０７】
（実施例Ｂ）
ＣＨＫ１アッセイ
アッセイ用ＣＨＫ１構築物
すでに欧州特許出願番号１  ０９６  ０１４  Ａ２（２０００年１０月３１日出願）に詳述されているように、ヒトＣＨＫ−１のＣ末端Ｈｉｓタグ付きキナーゼドメイン（ＫＨ２８９）、アミノ酸残基１〜２８９は、バキュロウイルス／昆虫細胞系を用いて発現させることができる。この構築物は、完全長ＣＨＫ−１よりも約１０倍大きい触媒活性を有することが分かっている。Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃ系（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用い、説明書のように、ＫＨ２８９の発現のための組換えバキュロウイルスを作製することができる。組換えウイルスは、ＣＨＫ−１  ｃＤＮＡ挿入の存在についてのＰＣＲによって確認することができる。タンパク質発現は、ＣＨＫ−１ポリクローナル抗体によるＳＤＳ−ＰＡＧＥまたはウエスタンブロットによって確認することができる。組換えウイルスストックの初期増幅には、Ｓｆ９昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用することができる。組換えウイルスの高力価ストックは、Ｓｆ２１昆虫細胞を用いる２〜３回の増幅によって作製することができる。タンパク質産生には、Ｈｉ−Ｓ昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用することができる。Ｓｆ９とＨｉ−Ｓ細胞系はともに、１％ウシ胎児血清（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ、ＵＳＡ）を含有する昆虫培地で成長するように適合させることができる。ウイルスストックは、１０℃で保存し、ウイルスの不安定性を避けるため２ヶ月以内に大量タンパク質産生に使用した。タンパク質産生については、感染Ｈｉ−Ｓ細胞を遠心分離によって収集し、−８０℃で保存した。これらの細胞から、精製後に６×Ｈｉｓタグ付きＫＨ２８９（ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより確認した）を取得し、液体窒素中で瞬間冷凍し、−８０℃で保存することができる。精製および保存中にＣＨＫ−１タンパク質の凝集を防ぐには、５％グリセロールを含む約５００ｍＭ  ＮａＣｌの塩濃度を維持することが重要であることが判明した。
【０４０８】
ＣＨＫ１アッセイ
すでに欧州特許出願番号１  ０９６  ０１４  Ａ２（２０００年１０月３１日出願）に詳述されているように、キナーゼの酵素活性は、ヌクレオシド三リン酸から、選択されたタンパク質標的中のアミノ酸側鎖へのリン酸残基の転移を触媒する能力によって測定することができる。一般的に、ＡＤＰへのＡＴＰの変換は、触媒反応を伴う。本明細書では、アミノ酸配列ＰＬＡＲＴＬＳＶＡＧＬＰＧＫＫを有する合成基質ペプチドＳｙｎｔｉｄｅ−２を利用することができる。基質へのリン酸基転移に伴うＡＴＰからのＡＤＰの産生は、ピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）および乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）の作用を介してホスホエノールピルビン酸（ＰＥＰ）を用いるＮＡＤＨの酸化と共役させることができる。ＮＡＤＨの酸化は、ＨＰ８４５２分光光度計を用いて３４０ｎｍにおける吸光度（ｅ３４０＝６．２２ｃｍ−１  ｍＭ−１）の減少を追跡することによってモニターすることができる。典型的な反応溶液は、４ｍＭ  ＰＥＰ、０．１５ｍＭ  ＮＡＤＨ、ＬＤＨ２８単位／ｍＬ、ＰＫ１６単位／ｍＬ、３ｍＭ  ＤＴＴ、０．１２５ｍＭ  Ｓｙｎｔｉｄｅ−２、０．１５ｍＭ  ＡＴＰおよび５０ｍＭ  ＴＲＩＳ  ｐＨ７．５中の２５ｍＭ  ＭｇＣｌ２；４００ｍＭ  ＮａＣｌを含有していた。アッセイは、ＣＨＫ−１のキナーゼドメイン、ＫＨ２８９  １０ｎＭで開始させることができる。Ｋｉ値は、様々な濃度の阻害剤の存在下で初期酵素活性を測定することによって決定することができる。Ｅｎｚｙｍｅ  ＫｉｎｅｔｉｃおよびＫａｌｅｉｄａｇｒａｐｈソフトウェアを用いてデータを分析することができる。
【０４０９】
（実施例Ｂ）
ＶＥＧＦ−Ｒ２
アッセイ用ＶＥＧＦ−Ｒ２構築物
この構築物は、試験化合物がチロシンキナーゼ活性を阻害する能力を決定する。キナーゼインサートドメインの６８残基のうち５０個の中心残基を欠く（ヒト）血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦ−Ｒ２）のサイトゾルドメインの構築物（ＶＥＧＦ−Ｒ２Δ５０）は、バキュロウイルス／昆虫細胞系において発現させることができる。完全長ＶＥＧＦ−Ｒ２の１３５６残基のうち、ＶＥＧＦ−Ｒ２Δ５０は、残基８０６〜９３９および９９０〜１１７１、さらに野生型ＶＥＧＦ−Ｒ２と比べて、キナーゼインサートドメイン内に１ヶ所の点変異（Ｅ９９０Ｖ）も含む。精製された構築物の自己リン酸化は、４℃で２時間の、３ｍＭ  ＡＴＰならびに５％グリセロールおよび５ｍＭ  ＤＴＴを含有する１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５中の４０ｍＭ  ＭｇＣｌ２の存在下、４μＭの濃度における酵素のインキュベーションによって行うことができる。自己リン酸化後、この構築物は、野生型の自己リン酸化されたキナーゼドメイン構築物と本質的に等しい触媒活性を有することが分かった。Ｐａｒａｓｔ他（１９９８）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３７：１６７８８〜１６８０１を参照されたい。
【０４１０】
ＶＥＧＦ−Ｒ２アッセイ
ａ）共役（Ｃｏｕｐｌｅｄ）分光光度（ＦＬＶＫ−Ｐ）アッセイ
リン酸基転移を伴うＡＴＰからのＡＤＰの産生は、ホスホエノールピルビン酸（ＰＥＰ）を用いるＮＡＤＨの酸化ならびにピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）および乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）を有する系と共役させることができる。ＮＡＤＨの酸化は、Ｂｅｃｋｍａｎ  ＤＵ６５０分光光度計を用いて３４０ｎｍにおける吸光度（ｅ３４０＝６．２２ｃｍ−１ｍＭ−１）の減少を追跡することによってモニターすることができる。リン酸化されたＶＥＧＦ−Ｒ２Δ５０のアッセイ条件は以下の通りである。１ｍＭ  ＰＥＰ；２５０μＭ  ＮＡＤＨ；ＬＤＨ５０単位／ｍＬ；ＰＫ２０単位／ｍＬ；５ｍＭ  ＤＴＴ；５．１ｍＭポリ（Ｅ４Ｙ１）；１ｍＭ  ＡＴＰ；および２００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５中の２５ｍＭ  ＭｇＣｌ２。リン酸化されていないＶＥＧＦ−Ｒ２Δ５０のアッセイ条件は以下の通りである。１ｍＭ  ＰＥＰ；２５０μＭ  ＮＡＤＨ；ＬＤＨ５０単位／ｍＬ；ＰＫ２０単位／ｍＬ；５ｍＭ  ＤＴＴ；２０ｍＭポリ（Ｅ４Ｙ１）；３ｍＭ  ＡＴＰ；ならびに２００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５中の６０ｍＭ  ＭｇＣｌ２および２ｍＭ  ＭｎＣｌ２。アッセイは、酵素５〜４０ｎＭで開始させることができる。酵素阻害百分率値は、試験化合物０．０５μＭの存在下で酵素活性を測定することによって決定することができる。Ｅｎｚｙｍｅ  ＫｉｎｅｔｉｃおよびＫａｌｅｉｄａｇｒａｐｈソフトウェアを用いてデータを分析することができる。
【０４１１】
（実施例Ｃ）
ＦＧＦＲ
アッセイ用ＦＧＦ−Ｒ１構築物
（ヒト）ＦＧＦ−Ｒ１の細胞内キナーゼドメインは、Ｍｏｈａｍｍａｄｉ他（１９９６）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１６：９７７〜９８９の残基ナンバリングシステムによる内因性メチオニン残基４５６から始まってグルタミン酸７６６までのバキュロウイルスベクター発現系を用いて発現させることができる。さらに、この構築物は、以下の３つのアミノ酸置換、Ｌ４５７Ｖ、Ｃ４８８Ａ、およびＣ５８４Ｓも有する。
【０４１２】
ＦＧＦ−Ｒアッセイ
分光光度アッセイは、以下の濃度変更、すなわちＦＧＦ−Ｒ＝５０ｎＭ、ＡＴＰ＝２ｍＭ、およびポリ（Ｅ４Ｙ１）＝１５ｍＭを除き、ＶＥＧＦ−Ｒ２について上記で記載したように行った。Ｋｉ値は、様々な濃度の試験化合物の存在下で酵素活性を測定することにより決定することができる。
【０４１３】
（実施例Ｄ）
ＰＨＫ
アッセイ用ホスホリラーゼキナーゼ構築物
ホスホリラーゼキナーゼ（アミノ酸１〜２９８）の切断型触媒サブユニット（γサブユニット）は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）で発現させ、封入体から単離することができる。次いで、ホスホリラーゼキナーゼをリフォールディングし、グリセロール中に−２０℃で保存することができる。
【０４１４】
ホスホリラーゼキナーゼアッセイ
アッセイでは、精製された触媒サブユニットを用い、放射性標識ＡＴＰを用いてホスホリラーゼｂをリン酸化することができる。手短に言うと、ホスホリラーゼｂ１．５ｍｇ／ｍＬを、３７℃で１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．４中の１０ｎＭホスホリラーゼキナーゼとともにインキュベートすることができる。反応は、１００ｕＭまでＡＴＰを添加することで開始させ、２５℃または３７℃で１５分間インキュベートすることができる。反応を停止させ、１０％の最終濃度までＴＣＡを添加することによってタンパク質を沈殿させることができる。沈殿したタンパク質は、９６ウェルのＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  ＭＡＤＰ  ＮＯＢフィルタープレート上で単離することができる。フィルタープレートは、２０％ＴＣＡで完全に洗浄し、乾燥することができる。次いで、シンチレーション液をプレートに添加し、取り込まれた放射性標識をＷａｌｌａｃマイクロベータカウンターでカウントすることができる。次いで、化合物１０μＭの存在下でのＡＴＰからホスホリラーゼｂへのリン酸基転移の阻害％を測定することができる。
【０４１５】
（実施例Ｅ）
他のキナーゼアッセイ
ＣＨＫ−２アッセイ
ＣＨＫ−２酵素は、Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．から入手することができ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）で発現され、マストリプシンフィンガープリンティングによって確認されたヒトＣＨＫ−２のアミノ酸５〜５４３に対応するＮ末端ＧＳＴタグ付きおよびＣ末端Ｈｉｓタグ付き融合タンパク質であり、分子量は約８７ｋＤａである。ＣＨＫ−２のアッセイ条件は、ＫＨ２８９の代わりに酵素ＣＨＫ２（０．０５９μＭ）を利用できるということを除き、ＣＨＫ−１について上記に記載した通りである。さらに、ＮａＣｌは添加できない。
【０４１６】
ＣＤＫ−１アッセイ
ＣＤＫ−１／サイクリンＢ、活性複合体は、Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．から入手することができ、Ｓｆ２１細胞において個々に産生され、次いでｉｎ  ｖｉｔｒｏで複合体形成される、マストリプシンフィンガープリンティングおよびタンパク質配列決定によって確認されたＣ末端Ｈｉｓタグ付きＣＤＫ−１およびＮ末端ＧＳＴタグ付きサイクリンＢである。ＣＤＫ−１のアッセイ条件は、ＫＨ２８９の代わりに酵素複合体ＣＤＫ−１／サイクリンＢ（０．２μＭ）を利用することができることを除き、ＣＨＫ−１について上記に記載した通りであり、Ｓｙｎｔｉｄｅ−２の代わりに、基質としてヒストン−Ｈ１（Ｕｐｓｔａｔｅ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）（０．０５９μＭ）を利用することができる。さらに、ＮａＣｌは添加できない。
【０４１７】
ＷＥＥ−１アッセイ
ＷＥＥ−１用のＤｅｌｆｉａ（登録商標）アッセイプロトコル
ＷＥＥ−１酵素は、Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．から入手することができ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）で発現された完全長ラットＷＥＥ−１とのＮ末端ＧＳＴタグ付き融合タンパク質であり、分子量は約１００ｋＤａである。このキナーゼアッセイは、コーティングされたポリ（Ｇｌｕ−Ｔｙｒ）４：１（ランダムコポリマー）の９６ウェルフィルタープレート（ＮｏＡｂ  Ｄｉｇｎｏｓｔｉｃｓ）上で行うことができる。アッセイ体積は、ウェル当たり１００μｌで、ＤＭＳＯ２μｌ（対照）または化合物のＤＭＳＯ溶液２μｌをプラスする。緩衝液Ａは、１０％グリセロール、２０ｍＭ  ＴＲＩＳ（ｐＨ７．５）、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５０ｍＭ  ＮａＣｌおよび５ｍＭ  ＤＴＴであってよい。プレートは、自動化によって調製することができる。
【０４１８】
適当なウェルに、ＤＭＳＯ２μｌ（対照）または化合物のＤＭＳＯ溶液２μｌを添加することができる。陽性対照ウェルには０．５Ｍ  ＥＤＴＡ３０μｌを添加することができる。ＡＴＰアッセイ濃度が３３μＭとなるように、緩衝液Ａに溶かしたＡＴＰ５０μｌを各ウェルに添加することができる。反応を開始するため、Ｗｅｅ１アッセイ濃度が０．１ｎｇ／μｌとなるように、緩衝液Ａに溶かしたＷｅｅ１  ５０μｌを各ウェルに添加することができる。プレートは、振盪によって混合することができ、次いで、３０分間室温に保つ。反応を停止するため、ＥＬ４０５プレート洗浄器でＤｅｌｆｉａ  Ｗａｓｈによりプレートを１回洗浄することができる。ＥｕＰＹアッセイ濃度が０．０１４９ｎｇ／μｌとなるように、Ｄｅｌｆｉａ（登録商標）アッセイ緩衝液に溶かしたＥｕＰＹ１００μｌを各ウェルに添加することができる。プレートは、１時間または一夜、放置することができる。プレートは、Ｄｅｌｆｉａ（登録商標）Ｗａｓｈ（ＥＬ４０５プレート洗浄器）でもう１回洗浄し、乾燥させることができる。各ウェルに、Ｄｅｌｆｉａ（登録商標）Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ溶液１００μｌを添加することができ、プレートは、１０分間放置させることができる。Ｗａｌｌａｃ’ｓ  Ｖｉｃｔｏｒ蛍光リーダーでプレートを読み取ることができる（Ｅｕｒｏｐｉｕｍ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌ）。Ｋｉ値は、様々な濃度の試験化合物の存在下で酵素活性を測定することにより決定することができる。
【０４１９】
ＳＧＫアッセイ
ＳＧＫ（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、３０μＭ  Ｃｒｏｓｓｔｉｄｅ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、５０ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２０】
ＡＭＰＫアッセイ
ＡＭＰＫ（ラット）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．４、１ｍＭ  ＤＴＴ、０．０２％  Ｂｒｉｊ３５、２００μＭ  ＡＭＰ、２００μＭ  ＡＭＡＲＡＡＳＡＡＡＬＡＲＲＲ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２１】
ＬＣＫアッセイ
ＬＣＫ（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．１ｍＭ  ＮａＶａｎａｄａｔｅ、２５０μＭ  ＫＶＥＫＩＧＥＧＴＹＧＶＶＹＫ（ＣＤＣ２ペプチド）、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２２】
ＭＡＰＫ２アッセイ
ＭＡＰＫ２（マウス）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．０２ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．３３ｍｇ／ｍｌミエリン塩基性タンパク質、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２３】
ＭＳＫ１アッセイ
ＭＳＫ１（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、３０ｐＭ  Ｃｒｏｓｓｔｉｄｅ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、５０ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２４】
ＰＫＢαアッセイ
ＰＫＢα（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、３０μＭ  Ｃｒｏｓｓｔｉｄｅ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、５０ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２５】
ＲＯＣＫＩＩアッセイ
ＲＯＣＫＩＩ（ラット）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、３０μＭ  ＫＥＡＫＥＫＲＱＥＱＩＡＫＲＲＲＬＳＳＬＲＡＳＴＳＫＳＧＧＳＱＫ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［Ψ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２６】
ｐ７０  Ｓ６Ｋアッセイ
ｐ７０  Ｓ６Ｋ（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、１００μＭ  ＫＫＲＮＲＴＬＴＶ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２７】
ＰＫＡアッセイ
ＰＫＡ（ウシ）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、３０μＭ  ＬＲＲＡＳＬＧ（Ｋｅｍｐｔｉｄｅ）、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、５０ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２８】
ＭＡＰＫ１アッセイ
ＭＡＰＫ１（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．０２ｍＭ  ＥＧＴＡ、１ｍＭ合成ペプチド、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４２９】
ｃＳＲＣアッセイ
ｃＳＲＣ（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、２５０μＭ  ＫＶＥＫＩＧＥＧＴＹＧＶＶＹＫ（ＣＤＣ２ペプチド）、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４３０】
ＰＲＫ２アッセイ
ＰＲＫ２（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．１％β−メルカプトエタノール、３０μＭ  ＡＫＲＲＲＬＳＳＬＲＡ、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４３１】
ＰＤＫ１アッセイ
ＰＤＫ１（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、１００μＭ  ＫＴＦＣＧＴＰＥＹＬＡＰＥＶＲＲＥＰＲＩＬＳＥＥＥＱＥＭＦＲＤＦＤＹＩＡＤＷＣ（ＰＤＫｔｉｄｅ）、０．１％β−メルカプトエタノール、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４３２】
ＦＹＮアッセイ
ＦＹＮ（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．１ｍＭ  ＮａＶａｎａｄａｔｅ、２５０μＭ  ＫＶＥＫＩＯＥＧＴＹＧＶＶＹＫ（ＣＤＣ２ペプチド）、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４３３】
ＰＫＣβＩＩアッセイ
ＰＫＣβＩＩ（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．４、０．０３％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、０．１ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍｌホスファチジルセリン、１０μｇ／ｍｌジアシルグリセロール、０．１ｍｇ／ｍｌヒストンＨ１、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５μｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４３４】
ＰＫＣγアッセイ
ＰＫＣγ（ヒト）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．、ＫＩＮＡＳＥＰＲＯＦＩＬＥＲ（商標））（５〜１０ｍＵ）は、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．４、０．０３％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、０．１ｍＭ  ＣａＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍｌホスファチジルセリン、１０μｇ／ｍｌジアシルグリセロール、０．１ｍｇ／ｍｌヒストンＨ１、１０ｍＭ  ＭｇＡｃｅｔａｔｅおよび［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比放射能約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要とされる濃度）とともにインキュベートし、最終反応体積２５μｌを作製することができる。化合物は、１μＭで試験することができる。反応は、Ｍｇ２＋［γ−３３Ｐ−ＡＴＰ］の添加によって開始することができる。ＡＴＰ濃度は、１０μＭであってよい。室温で４０分間のインキュベーション後、３％リン酸溶液５γｌの添加によって反応を停止することができる。次いで、Ｐ３０フィルターマット上に反応物１０μｌをスポットし、乾燥およびシンチレーションカウンティングに先立って、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、およびメタノール中で１回洗浄することができる。結果は、２つの実験の平均および酵素活性が、試験化合物を使用しない対照インキュベーションにおける結果に対する割合として表すことができることを示している。
【０４３５】
（実施例Ｆ）
全細胞チェックポイント抑止アッセイ
ＣＨＫ−１分裂指数ＥＬＩＳＡアッセイ
ＣＨＫ１阻害化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ効果を調べるため、ＤＮＡ損傷誘導性チェックポイントコントロールの抑止をモニターするようにＥＬＩＳＡアッセイを設計することができる。このアッセイは、ＤＮＡ損傷誘導性静止後の有糸分裂細胞の捕捉および検出に基づくことができる。セリン１０上のヒストンＨ３のリン酸化は、有糸分裂と相関関係があることが分かっているため、染色体凝縮に必要である。したがって、ヒストンＨ３上の有糸分裂特異的リン酸化エピトープ（ｐｈｏｓｐｈｏ−ｅｐｉｔｏｐｅ）を、チェックポイント抑止のシグナルとして使用することができる。
【０４３６】
ＣＡ−４６（リンパ腫）細胞は、５０ｎＭで８時間、カンプトセシン（Ｓｉｇｍａ）などのＤＮＡ損傷剤で処理し、ＤＮＡ損傷を誘導することができる。次いで、対照化合物またはＣＨＫ１阻害剤を、０．１μｇ／ｍｌのノコダゾール（Ｓｉｇｍａ）ととも漸増濃度で添加し、プレートを１６時間インキュベートすることができる。ＣＨＫ１阻害剤のみが添加された対照細胞を同様に調製し、阻害剤単独では、細胞周期に影響を及ぼさないことを保証することができる。次いで、細胞を収集し、ＰＢＳで洗浄し、粗製酸抽出を行うことができる。ペレットを、Ａｃｉｄ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ（１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ  ｐＨ７．９、１．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＫＣｌ、０．５ｍＭ  ＤＴＴ、１．５ｍＭ  ＰＭＳＦ、０．４Ｎ硫酸）８０μｌに再懸濁し、短時間ボルテックスし、氷の上で３０分間インキュベートすることができる。次いで、サンプルを遠心分離し、上清７５μｌを、９６ウェル平底プレート（ＶＷＲ３５９６）に移すことができる。次に、Ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ（サンプル数×（１０μｌ  １０Ｎ  ＮａＯＨ＋５μｌ  １Ｍ  Ｔｒｉｓ  Ｂａｓｅ））１５μｌを各ウェルに添加することができ、混ぜた後、この５μｌを、各ウェル中の５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ塩基（ｐＨ９．６）１００μｌとともに別の９６ウェルプレートに移すことができる。サンプルを一夜乾燥することができる。次いで、ウェルを、ＥＬＩＳＡ洗浄用緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．０５％  Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳ）で５回洗浄し、室温で１時間、ブロッキング緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．５、０．０５％  Ｔｗｅｅｎ２０、３．５％ドライミルク、１．５％  ＢＳＡを含むＰＢＳ。調製後のｐＨ７．５）でブロックすることができる。洗浄およびブロック後、ブロック（ウェル当たり１００μｌ）中で０．５μｇ／ｍｌの抗ホスホＨｉｓｔｏｎｅＨ３抗体（Ｕｐｓｔａｔｅ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．、ウサギポリクローナル）を添加し、室温で２時間インキュベートすることができる。ウェルを再び洗浄して非結合一次抗体を除去することができ、ブロック中の０．３ｍｇ／ｍｌのアルカリホスファターゼ結合二次抗体（Ｐｉｅｒｃｅ、ヤギ抗ウサギＩｇＧ（ＨＯＵＲＳ＋Ｌ））１００μｌを室温で１時間、添加することができる。ウェルを５回洗浄して非結合二次抗体を除去し、ＰＢＳ単独で再び３回洗浄して界面活性剤を除去することができる。次いで、アルカリホスファターゼ基質（Ｐｉｅｒｃｅ  １−Ｓｔｅｐ  ｐＮＰＰ）１００μｌをウェルに添加することができる。プレートを光から保護し、室温で１時間インキュベートすることができる。ＯＤを、４０５ｎｍにおいてＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｖｍａｘ  Ｋｉｎｅｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒで読み取ることができる。ノコダゾールのみで処理したサンプル（約１００％有糸分裂または抑止）に対する化合物で処理したサンプルのＯＤ（光学密度）の比は、パーセンテージで表すことができ、チェックポイントの抑止パーセントを数量化する。化合物がチェックポイントの５０％抑止を引き起こす濃度は、ＥＣ５０と呼ぶことができる。生のＯＤ値をＥｘｃｅｌでグラフにすることができ、ＥＣ５０値は���Ｋａｌｅｉｄｏｇｒａｐｈソフトウェアを用いて得ることができる。強いシグナルは、ノコダゾールのみで処理した細胞から得られ、このアッセイにおける１００％有糸分裂に相当する。カンプトセシン＋ノコダゾールで処理した対照サンプルは、低いシグナルを有し、有糸分裂およびチェックポイント抑止を示さない。ノコダゾールとともに強力なＣＨＫ１阻害剤がカンプトセシンで処理した細胞に添加された場合、併用治療によって引き起こされるチェックポイント抑止活性により、高いシグナルを発生させることができる（一般に、用量依存的に）。
【０４３７】
上記の実施例は、式（Ｉ）による化合物および様々なキナーゼ複合体に対する活性レベルを決定するために容易に行うことができるアッセイを例示している。例えば、キナーゼ（例えば、ＣＨＫ１）に対する式（Ｉ）の化合物の選択性は、前述のアッセイにおいてキナーゼを阻害する式（Ｉ）の化合物の能力を比較することによって決定することができる。さらに、ほんの一例として、特定の抗新生物剤および／またはＤＮＡ損傷剤の効果を増強する式（Ｉ）の化合物の能力は、式（Ｉ）の化合物の存在下および非存在下で抗新生物剤および／またはＤＮＡ損傷剤に対する腫瘍細胞の応答を比較することによって決定することができる。腫瘍細胞を破壊する（数および／または応答速度において）抗新生物剤の能力および／またはＤＮＡに損傷を与えるＤＮＡ損傷剤の能力を増強する式（Ｉ）の化合物が好ましい。このようなアッセイまたは当技術分野において知られている他の適当なアッセイを用い、選択された標的に対して望ましいレベルの活性を有する阻害剤を選択できることは明らかであろう。
【０４３８】
なお、本発明の代表的化合物を、他のキナーゼ、すなわちＣＨＫ２；ＰＫＣ−α；ｃ−ＳＲＣ；ＥＲＫ２；ＧＳＴ−ＬＣＫ；ＰＬＫおよびＣＤＫ２に対して試験した。結果は、本発明のアミノピラゾールＣＨＫ１化合物が、他のキナーゼに対してよりもＣＨＫ１に対して少なくとも２０倍選択的であることを示した。
【０４３９】
（実施例Ｇ）
ＣＨＫＬ阻害剤は、癌治療による細胞の死滅を増強する
Ｃｈｋ−１の阻害が、ＤＮＡ損傷剤の殺効果を増強するという仮説を試験するため、選択的Ｄｈｋ１阻害剤および放射線または１０種類の化学的ＤＮＡ損傷剤の存在下で細胞をインキュベートすることができる。様々な細胞系（ＨＴ２９、ＭＶ５２２、Ｃｏｌｏ２０５など）は、９６ウェルプレート内で増殖させた。１００ｕｌ／ウェルの体積で、細胞を適切な培地にプレートした。阻害剤化合物の添加前に、プレートを４時間インキュベートした。９６ウェルプレートの最下部では、漸増濃度のＤＮＡ損傷剤により細胞を処理した。プレートの上部では、一定濃度のＡＧ（阻害剤）と組み合わせた漸増濃度のＤＮＡ損傷剤により細胞を処理した。細胞を３７℃（５％ＣＯ２）で４〜６日間（細胞タイプに応じて）インキュベートした。インキュベーション終了時、ＭＴＴを最終濃度０．２ｍｇ／ｍｌｍで添加し、細胞を３７℃で４時間インキュベートした。プレートの遠心分離および培地の除去後、ホルマザン（ジメチルスルホキシドに溶かした）の吸光度を５４０ｎｍで測定した。Ｃｈｋ１阻害剤の存在下および非存在下で５０％成長阻害を引き起こすＤＮＡ損傷剤の濃度を、阻害パーセント対阻害剤濃度の半対数プロットの直線部分から決定した。薬剤単独のＩＣ５０と併用治療のＩＣ５０の間の比は、ＰＦ５０（Ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  ５０）を表し、併用治療の効力および有効性の尺度である。
【０４４０】
すべての細胞系は、ヒト細胞系を指し、以下の２０種類を指す。
【０４４１】
【表１】
2006528661.tif 000106
【０４４２】
化学療法薬には、エトポシド、ドキソルビシン、シスプラチン、クロラムブシル、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）が含まれていた。０．５ｕＭ未満の濃度で、式Ｉの試験化合物は、シスプラチンの殺効果を２〜５倍増強した。
【０４４３】
式Ｉの化合物は、メトトレキセート、ヒドロキシ尿素、２−クロロアデノシン、フルダラビン、アザシチジン、およびゲムシタビンを含む追加の代謝拮抗剤について、薬剤の殺効果を増強する能力を試験することができる。０．５ｕＭ未満の濃度で、これらのＣｈｋ１阻害剤は、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素、フルダラビン、５−アザシチジン、およびメトトレキセートに対する細胞の死を１０倍まで増強することが判明し、Ｃｈｋ１の阻害とＤＮＡ合成のブロッキングの組合せが、これらの薬剤による細胞死の増加につながることを示唆している。さらに、照射による殺効果を増強するＣｈｋ１阻害剤の能力を試験することができる。ＨｅＬａ細胞において、式Ｉの試験化合物は、照射による殺効果を２〜３倍増強することが判明した。
【０４４４】
（実施例Ｈ）
動物腫瘍モデル
ゲムシタビン（ジェムザール）は、ピリミジン類縁体として作用する代謝拮抗剤である。マウスにおいてゲムシタビンによる腫瘍の死を増強するＣｈｋ１阻害剤の能力を試験するため、結腸腫瘍細胞系を用いる異種移植片腫瘍モデルを確立することができる。Ｃｏ１０２０５およびＨＴ２９細胞（ヒト結腸癌）を用い、６〜８週齢の雌性胸腺Ｂａｌｂ／ｃ（ｎｕ／ｎｕ）マウスにおいて異種移植片腫瘍を増殖させることができる。マウスは、無菌条件下、層流空気流キャビネット内で飼育し、滅菌した餌および水を自由に与えることができる。細胞系は、５％ＣＯ２の加湿環境において、１０％  ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、および１．５ｍＬ  Ｌ−グルタミンを添加したＲＰＭＩ１６４０培地中で、サブコンフルエンスに増殖させることができる。ＣＭＦ−ＰＢＳ中で単細胞懸濁液を調製し、細胞濃度を１ｍＬ当たり１×１０８個の細胞に調整することができる。マウスの右側または右足に合計２×１０６個の細胞（１００μｌ）を皮下（ｓ．ｃ．）接種することができる。
【０４４５】
マウスを治療群に無作為割り付けし（１群当たり１２匹のマウス）、腫瘍が１５０〜２００ｍｇの重量に達したとき（通常、接種後７〜１１日）に使用することができる。腫瘍は、ノギスで測定し、腫瘍重量は、経験的に導出された式：腫瘍重量（ｍｇ）＝腫瘍長（ｍｍ）×腫瘍幅（ｍｍ）２／３．３を用いて推定することができる。治療は、ｉ）５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、または１５０ｍｇ／ｋｇの５−ＦＵの腹腔内（ｉ．ｐ）注射１００μｌからなることができる。腫瘍成長の用量依存的遅延は、５−ＦＵで治療したマウスにおいて観察することができる。腫瘍サイズは、実験期間中、１日おきにモニターすることができる。
【０４４６】
本発明の精神および範囲を逸脱することなく、以上に示した本発明の多くの変更形態および変形形態を実施することができ、したがって、添付の特許請求の範囲によって示されるような制限のみが課されるべきであることは明らかである。
【０４４７】
【表２−１】
2006528661.tif 000107
【０４４８】
【表２−２】
2006528661.tif 000108
【０４４９】
【表２−３】
2006528661.tif 000109
【０４５０】
【表２−４】
2006528661.tif 000110
【０４５１】
【表２−５】
2006528661.tif 000111
【０４５２】
当然のことながら、上記の説明は、事実上例示的および説明的であって、本発明およびその好ましい実施形態を例示することを意図している。ルーチンな実験により、当業者は、本発明の精神を逸脱することなく実施することができる明らかな変更形態および変形形態を認識するであろう。したがって、本発明は、上記の説明によってではなく、以下の特許請求の範囲およびそれらの等価体によって定義されることを意図している。
【国際調査報告】
2006528661.tif 000121
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