(57)【要約】本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するためのマーカー、キット、方法を提供する。本発明は、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との関係を予想外に見出し、その正常な結合が阻害されると、軸索突起成長および／または束形成が正常に行われないことを予想外に発見したことによって達成された。したがって、本発明は、ＤＩＳＣ１およびその遺伝子産物に特異的に相互作用する因子、ＦＥＺ１およびその遺伝子産物に特異的に結合する因子、ＫＩＡＡ０８４４およびその遺伝子産物に特異的に結合する因子に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子。
【請求項２】
前記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、請求項１に記載の因子。
【請求項３】
少なくとも８の連続するヌクレオチド長を有する核酸分子である、請求項１に記載の因子。
【請求項４】
前記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子である、請求項１に記載の因子。
【請求項５】
前記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子である、請求項１に記載の因子。
【請求項６】
プライマーとして使用される、請求項３に記載の因子。
【請求項７】
プローブとして使用される、請求項３に記載の因子。
【請求項８】
前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリペプチドは、配列番号１のヌクレオチド１０９５〜２６１５をコードする範囲または配列番号２のアミノ酸３４８〜８５４位の範囲を含む、請求項１に記載の因子。
【請求項９】
前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリペプチドは、配列番号１のヌクレオチド１０９５〜１８４４、ヌクレオチド１８４５〜２６１５、ヌクレオチド１０９５〜１９５２、ヌクレオチド１０９５〜１６５２、ヌクレオチド１６５３〜１９５２、ヌクレオチド１３９１〜１６５２およびヌクレオチド１３９１〜１９５２からなる群より選択される範囲をコードする範囲、あるいは配列番号２のアミノ酸３４８〜５９７位、アミノ酸５９８〜８５４位、アミノ酸３４８〜６３３位、アミノ酸３４８〜５３３位、アミノ酸５３４〜６３３位、アミノ酸４４６〜５３３位およびアミノ酸４４６〜６３３位からなる群より選択される範囲を含む、請求項１に記載の因子。
【請求項１０】
前記因子は、標識されているかまたは標識され得る、請求項１に記載の因子。
【請求項１１】
（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子。
【請求項１２】
前記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、請求項１１に記載の因子。
【請求項１３】
抗体またはその誘導体である、請求項１１に記載の因子。
【請求項１４】
プローブとして使用される、請求項１１に記載の因子。
【請求項１５】
前記ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸３４８〜８５４位の範囲を含む、請求項１１に記載の因子。
【請求項１６】
前記ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸３４８〜５９７位、アミノ酸５９８〜８５４位、アミノ酸３４８〜６３３位、アミノ酸３４８〜５３３位、アミノ酸５３４〜６３３位、アミノ酸４４６〜５３３位およびアミノ酸４４６〜６３３位からなる群より選択される範囲を含む、請求項１１に記載の因子。
【請求項１７】
前記因子は、標識されているかまたは標識され得る、請求項１１に記載の因子。
【請求項１８】
（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子。
【請求項１９】
前記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、請求項１８に記載の因子。
【請求項２０】
少なくとも８の連続するヌクレオチド長を有する核酸分子である、請求項１８に記載の因子。
【請求項２１】
前記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子である、請求項１８に記載の因子。
【請求項２２】
前記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子である、請求項１８に記載の因子。
【請求項２３】
プライマーとして使用される、請求項２０に記載の因子。
【請求項２４】
プローブとして使用される、請求項２０に記載の因子。
【請求項２５】
前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリペプチドは、配列番号３のヌクレオチド４７８〜１２６９をコードする範囲または配列番号４のアミノ酸１２９〜３９２位の範囲を含む、請求項１８に記載の因子。
【請求項２６】
前記ポリヌクレオチドまたは前記ポリペプチドは、配列番号３のヌクレオチド８３２〜１２６９をコードする範囲、あるいは配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２位の範囲を含む、請求項１８に記載の因子。
【請求項２７】
前記因子は、標識されているかまたは標識され得る、請求項１８に記載の因子。
【請求項２８】
（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子。
【請求項２９】
前記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、請求項２８に記載の因子。
【請求項３０】
抗体またはその誘導体である、請求項２８に記載の因子。
【請求項３１】
プローブとして使用される、請求項２８に記載の因子。
【請求項３２】
前記ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸１２９〜３９２位の範囲を含む、請求項２８に記載の因子。
【請求項３３】
前記ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２位の範囲を含む、請求項２８に記載の因子。
【請求項３４】
前記因子は、標識されているかまたは標識され得る、請求項２８に記載の因子。
【請求項３５】
ＦＥＺ１またはＫＩＡＡ０８４４の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
【請求項３６】
ＤＩＳＣ１またはＫＩＡＡ０８４４の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
【請求項３７】
軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するための組成物であって、該組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；
（Ｂ）（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子；
（Ｃ）（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｄ）（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
【請求項３８】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、
（ａ）被験体に由来するサンプル中のＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定する工程；および
（ｂ）該結合を、正常レベルの結合と比較する工程であって、該測定された結合が該正常レベルの結合より低い場合、軸索突起成長および／または束形成のレベルは正常より劣っていることを示す、工程、
を包含する、方法。
【請求項４０】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、該方法は、
（ａ）軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定する工程；
（ｂ）正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定する工程；および
（ｃ）該（ａ）の結合レベルと該（ｂ）の結合レベルとを比較する工程
を包含し、
ここで、該（ａ）の結合レベルが該（ｂ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態の異常、障害または疾患を有すると診断される、方法。
【請求項４２】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記結合を測定する工程において、配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体を使用する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
前記結合を測定する工程において、配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体を使用する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
前記結合を測定する工程において、配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体、および配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体を使用する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４６】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患に関連する遺伝子変異を検出する方法であって、サンプル中のＤＩＳＣ１遺伝子および／またはＦＥＺ１遺伝子のポリヌクレオチド配列中の変異を検出する工程を包含する、方法。
【請求項４７】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記変異は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患と連鎖する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するためのキットであって、該キットは、
（ａ）請求項３７に記載の組成物；ならびに
（ｂ）指示書、
を備え、該指示書は、
（ｉ）該組成物を用いて、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；
（ｉｉ）該組成物を用いて、正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；および
（ｉｉｉ）該（ｉ）の結合レベルと該（ｉｉ）の結合レベルとを比較すること
を指示し、
ここで、該（ｉ）の結合レベルが該（ｉｉ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を有すると診断される、
キット。
【請求項５０】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、請求項４９に記載のキット。
【請求項５１】
被験体における軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットであって、該キットは、以下：
（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、
該プライマーは、それぞれ：
（ｉ）配列番号１に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および
（ｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに
（ｂ）該被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号１に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、
を備える、キット。
【請求項５２】
前記検出される核酸配列は、配列番号１のヌクレオチド５４〜２６１５である、請求項５１に記載のキット。
【請求項５３】
被験体における軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットであって、該キットは、以下：
（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、
該プライマーは、それぞれ：
（ｉ）配列番号３に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および
（ｉｉ）配列番号４に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに
（ｂ）該被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号３に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、
を備える、キット。
【請求項５４】
前記検出される核酸配列は、配列番号３のヌクレオチド９４〜１２６９である、請求項５３に記載のキット。
【請求項５５】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を調節する因子を同定するための方法であって、該方法は、以下：
（ａ）配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントおよび配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントを、試験因子の存在下で接触させる工程、および
（ｂ）該第１のポリペプチドと該第２のポリペプチドとの間の結合レベルを、該試験因子の非存在下における結合レベルと比較する工程、
を包含し、
ここで、該試験因子の非存在下における結合と比較して、試験因子の存在下における減少した結合は、該試験因子は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患の負の調節因子であることを示し、そして試験因子の存在下における増大した結合は、該試験因子は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患の正の調節因子であることを示す、方法。
【請求項５６】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記第１のポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸４４６〜５９７を含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５８】
前記第２のポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２を含む、請求項５５に記載の方法。
【請求項５９】
前記第２のポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２を含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記ポリペプチドを接触させる工程は、前記ポリペプチドを発現する細胞を接触させることを包含する、請求項５５に記載の方法。
【請求項６１】
請求項５５に記載の方法によって同定される、調節因子。
【請求項６２】
請求項６１に記載の調節因子を含む、薬学的組成物。
【請求項６３】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を処置または予防する方法であって、該方法は、請求項６２に記載の薬学的組成物を被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項６４】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子。
【請求項６６】
前記配列番号１３に記載の塩基配列は、ＫＩＡＡ０８４４として提供される、請求項６５に記載の因子。
【請求項６７】
前記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、請求項６５に記載の因子。
【請求項６８】
少なくとも８の連続するヌクレオチド長を有する核酸分子である、請求項６５に記載の因子。
【請求項６９】
前記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子である、請求項６５に記載の因子。
【請求項７０】
前記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子である、請求項６５に記載の因子。
【請求項７１】
プライマーとして使用される、請求項６７に記載の因子。
【請求項７２】
プローブとして使用される、請求項６７に記載の因子。
【請求項７３】
前記因子は、標識されているかまたは標識され得る、請求項６５に記載の因子。
【請求項７４】
（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子。
【請求項７５】
前記配列番号１３に記載の塩基配列は、ＫＩＡＡ０８４４として提供される、請求項７４に記載の因子。
【請求項７６】
前記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、請求項７４に記載の因子。
【請求項７７】
抗体またはその誘導体である、請求項７４に記載の因子。
【請求項７８】
プローブとして使用される、請求項７４に記載の因子。
【請求項７９】
前記因子は、標識されているかまたは標識され得る、請求項７４に記載の因子。
【請求項８０】
ＦＥＺ１の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
【請求項８１】
ＤＩＳＣ１の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
【請求項８２】
軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するための組成物であって、該組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、該配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、該改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、該配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
【請求項８３】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、請求項８２に記載の組成物。
【請求項８４】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、
（ａ）被験体に由来するサンプル中のＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；および
（ｂ）該結合を、正常レベルの結合と比較する工程であって、該測定された結合が該正常レベルの結合より低い場合、軸索突起成長および／または束形成のレベルは正常より劣っていることを示す、工程、
を包含する、方法。
【請求項８５】
前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、該方法は、
（ａ）軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；
（ｂ）正常な被験体におけるＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；
（ｃ）該（ａ）の結合レベルと該（ｂ）の結合レベルとを比較する工程
を包含し、
ここで、該（ａ）の結合レベルが該（ｂ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態の異常、障害または疾患を有すると診断される、方法。
【請求項８７】
軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するためのキットであって、該キットは、
（ａ）請求項８２に記載の組成物；ならびに
（ｂ）指示書、
を備え、該指示書は、
（ｉ）該組成物を用いて、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；
（ｉｉ）該組成物を用いて、正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；および
（ｉｉｉ）該（ｉ）の結合レベルと該（ｉｉ）の結合レベルとを比較すること
を指示し、
ここで、該（ｉ）の結合レベルが該（ｉｉ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を有すると診断される、
キット。
【請求項８８】
被験体における軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットであって、該キットは、以下：
（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、
該プライマーは、それぞれ：
（ｉ）配列番号１３に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および
（ｉｉ）配列番号１４に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに
（ｂ）該被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号１３に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、
を備える、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断および検出するための方法、マーカー、キットに関する。さらに本発明は、ＤＩＳＣ１および／またはＦＥＺ１および／またはＫＩＡＡ０８４４として知られる分子（以下本明細書においてＫＩＡＡ０８４４ともいう）の間の相互作用を利用して、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患に関連する因子を同定する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
統合失調症は、人口の約１％が罹患する消耗性の精神疾患である。他の多くの精神疾患／障害と同様に、統合失調症は、複数の遺伝的素因が複雑に影響していると考えられている（例えば、非特許文献１および２を参照のこと）。連鎖解析および関連する研究などの調査によっても、この疾患の原因となる決定的な遺伝子は未だ同定されていない（例えば、非特許文献３〜１２を参照のこと）。
【０００３】
スコットランド人の大家族において、平衡転座（１；１１）（ｑ４２．１；ｑ１４．３）が見出された。この平衡転座は、７．１のＬＯＤスコアで統合失調症および情動障害とともに分離した（例えば、非特許文献１３および１４を参照のこと）。この転座によって破壊された新規遺伝子として第１染色体上のＤＩＳＣ１が、同定された（例えば、非特許文献１３を参照のこと）。この家族の構成員は、精神医学的表現型が無関係の症例から識別され得るような特徴的な症状は何ら示さなかった（非特許文献１４）。さらに、上記転座を保有する被験体は、Ｐ３００事象関連電位の振幅を有意に減少することが示された。この減少は、統合失調症と無関係の患者においても観察された（例えば、非特許文献１４を参照のこと）。これらの知見は、この遺伝子の機能の破壊が、これらの精神障害に対する罹病性を与え得ることを示唆する。フィンランド人家族を研究対象とした別の連鎖解析の報告によってもまた、統合失調症についての可能性のある座位として１ｑ４２が示されている（例えば、非特許文献１５を参照のこと）。
【０００４】
ＦＥＺ１は、軸索突起成長および束形成に関与するＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ  ＵＮＣ−７６タンパク質の哺乳動物ホモログである。ＦＥＺ１は、軸索突起成長および束形成に関与し得ることが報告されている（例えば、非特許文献１６および１７を参照のこと）。
【０００５】
近年の研究によって、統合失調症は、神経発生の障害の結果であるという信頼性のある証拠が提示されている（例えば、非特許文献３、２０、２１を参照のこと）。海馬における細胞構造変化は、統合失調症において種々の神経病理学状態が顕著に異常であることが報告されている（例えば、非特許文献２２〜２４を参照のこと）。ニューロンサイズの減少ならびにシナプス前部マーカーおよび樹状細胞マーカーにおける変化は、神経分裂病における海馬ニューロン回路の異常と関連することが示されている（例えば、非特許文献２４を参照のこと）。
【０００６】
近年の研究によって、ラット脳におけるＤＩＳＣ１の２つの形態の存在、および発生段階における全長形態のアップレギュレートされた発現が報告されており、神経系の発生に関する全長形態の重要性を示唆する（例えば、非特許文献２５を参照のこと）。
【０００７】
細胞骨格におけるＤＩＳＣ１の可能性のある関係もまた、近年の研究（例えば、非特許文献２５を参照のこと）および予備的な研究（例えば、非特許文献２６、２７を参照のこと）によって推定されている。
【０００８】
指向された神経突起成長に必須であるアクチン細胞骨格中の調和した変化を調整するためのシグナル伝達タンパク質としては、Ｒｈｏ  ＧＴＰａｓｅが挙げられる（例えば、非特許文献１８および１９を参照のこと）。興味深いことに、発生中の神経系におけるアクチン細胞骨格の調節は、精神遅滞の病因に関与する（例えば、非特許文献３０を参照のこと）。変異した場合に、Ｘ連鎖精神遅滞の原因となる７つの遺伝子が同定されている（例えば、非特許文献２９を参照のこと）。これらの遺伝子のうちの３つが、ｏｌｉｇｏｐｈｒｅｎｉｎ−１、ＰＫＡ３、およびαＰＩＸをコードする（例えば、それぞれ、非特許文献３０、３１、および３２を参照のこと）。これらのタンパク質は、Ｒｈｏ  ＧＴＰａｓｅと直接相互作用する。
【０００９】
また、かずさＤＮＡ研究所が種々のライブラリーからヒト遺伝子の配列を決定しているが、その機能はほとんど明らかにされていない。ＫＩＡＡ０８４４もまた、決定された遺伝子配列に含まれているが、その機能は全く明らかにされていなかった（非特許文献３３）。
【００１０】
しかし、上記のような状況にもかかわらず、統合失調症のような精神疾患の原因および診断マーカーとして使用することができる遺伝子は同定されていない。したがって、当該分野において、そのようなマーカー遺伝子の同定が渇望されている。
【００１１】
決定的な医薬品が現在利用可能でない、統合失調症のような精神疾患の処置または予防のための薬剤を同定するためのシステムの同定もまた渇望されている．
以下に、好ましい実施形態によって本発明を記載する。本発明の実施形態は、本明細書の説明および当該分野において公知な一般的に使用される方法に基づき、適切に作製および実施され得ることが理解される。本発明の機能および効果は、当業者によって容易に認識され得る。
【非特許文献１】ＭｃＧｕｆｆｉｎ  Ｐ．，Ｏｗｅｎ  Ｍ．Ｊ．，Ｆａｒｍｅｒ  Ａ．Ｅ．，Ｌａｎｃｅｔ，１９９５；３４６：６７８−６８２
【非特許文献２】Ｒｉｌｅｙ  Ｂ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ  Ｒ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２０００；６：２５３−２５５
【非特許文献３】Ｓａｗａ  Ａ．，Ｓｎｙｄｅｒ  Ｓ．Ｈ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００２；２９６：６９２−６９５
【非特許文献４】Ｋａｒａｙｉｏｒｇｏｕ  Ｍ，Ｇｏｇｏｓ  Ｊ．Ａ．，Ｎｅｕｒｏｎ，１９９７；１９：９６７−９７９
【非特許文献５】Ｒｉｌｅｙ  Ｂ．Ｐ．，ＭｃＧｕｆｆｉｎ  Ｐ．，Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．，２０００；９７：２３−４４
【非特許文献６】Ｂｅｒｒｅｔｔｉｎｉ  Ｗ．Ｈ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，２０００；４８：５３１−５３８
【非特許文献７】Ｂｒｚｕｓｔｏｗｉｃｚ  Ｌ．Ｍ．，Ｈｏｄｇｋｉｎｓｏｎ  Ｋ．Ａ．，Ｃｈｏｗ  Ｅ．Ｗ．Ｃ．，Ｈｏｎｅｒ  Ｗ．Ｇ．，Ｂａｓｓｅｔｔ  Ａ．Ｓ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０００；２８８：６７８−６８２
【非特許文献８】Ｓｔｒａｕｂ  Ｒ．Ｅ．，ＭａｃＬｅａｎ  Ｃ．Ｊ．，Ｏ’Ｎｅｉｌｌ  Ｆ．Ａ．，Ｂｕｒｋｅ  Ｊ．，Ｍｕｒｐｈｙ  Ｂ．，Ｄｕｋｅ  Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．，１９９５；１１：２８７−２９３
【非特許文献９】Ｂｌｏｕｉｎ  Ｊ．Ｌ．，Ｄｏｍｂｒｏｓｋｉ  Ｂ．Ａ．，Ｎａｔｈ  Ｓ．Ｋ．，Ｌａｓｓｅｔｅｒ  Ｖ．Ｋ．，Ｗｏｌｙｎｉｅｃ  Ｐ．Ｓ．，Ｎｅｓｔａｄｔ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．，１９９８；２０：７０−７３
【非特許文献１０】Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｊ．，Ｓｐｕｒｌｏｃｋ  Ｇ．，ＭｃＧｕｆｆｉｎ  Ｐ．，Ｍａｌｌｅｔ  Ｊ．，Ｎｏｔｈｅｎ  Ｍ．Ｍ．，Ｇｉｌｌ  Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，１９９６；３４７：１２９４−１２９６
【非特許文献１１】Ｓｋｌａｒ  Ｐ．，Ｓｃｈｗａｂ  Ｓ．Ｇ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｎ．Ｍ．，Ｄａｌｙ  Ｍ．，Ｓｃｈａｆｆｎｅｒ  Ｓ．，Ｍａｉｅｒ  Ｗ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２００１；２８：１２６−１２８
【非特許文献１２】Ａｎｎｅｙ  Ｒ．Ｊ．，Ｒｅｅｓ  Ｍ．Ｉ．，Ｂｒｙａｎ  Ｅ．，Ｓｐｕｒｌｏｃｋ  Ｇ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｎ．，Ｎｏｒｔｏｎ  Ｎ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，２００２；７：４９３−５０２
【非特許文献１３】Ｍｉｌｌａｒ  Ｊ．Ｋ．，Ｗｉｌｓｏｎ−Ａｎｎａｎ  Ｊ．Ｃ．，Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｓ．，Ｃｈｒｉｓｔｉｅ  Ｓ．，Ｔａｙｌｏｒ  Ｍ．Ｓ．，Ｓｅｍｐｌｅ  Ｃ．Ａ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．，２０００；９：１４１５−１４２３
【非特許文献１４】Ｂｌａｃｋｗｏｏｄ  Ｄ．Ｈ．Ｒ．，Ｆｏｒｄｙｃｅ  Ａ．，Ｗａｌｋｅｒ  Ｍ．Ｔ．，Ｓｔ．Ｃｌａｉｒ  Ｄ．Ｍ．，Ｐｏｒｔｅｏｕｓ  Ｄ．Ｊ．，Ｍｕｉｒ  Ｗ．Ｊ．，Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．，２００１；６９：４２８−４３３
【非特許文献１５】Ｅｋｅｌｕｎｄ  Ｊ．，Ｈｏｖａｔｔａ  Ｉ．，Ｐａｒｋｅｒ  Ａ．，Ｐａｕｎｉｏ  Ｔ．，Ｖａｒｉｌｏ  Ｔ．，Ｍａｒｔｉｎ  Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．，２００１；１０：１６１１−１６１７
【非特許文献１６】Ｂｌｏｏｍ  Ｌ．，Ｈｏｒｖｉｔｚ  Ｈ．Ｒ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９９７；９４：３４１４−３４１９
【非特許文献１７】Ｋｕｒｏｄａ  Ｓ．，Ｎａｋａｇａｗａ  Ｎ．，Ｔｏｋｕｎａｇａ  Ｃ．，Ｔａｔｅｍａｔｓｕ  Ｋ．，Ｔａｎｉｚａｗａ  Ｋ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，１９９９；１４４：４０３−４１１
【非特許文献１８】Ｈａｌｌ  Ａ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９８；２７９：５０９−５１４
【非特許文献１９】Ｌｕｏ  Ｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２０００；１：１７３−１８０
【非特許文献２０】Ｗｅｉｎｂｅｒｇｅｒ  Ｄ．Ｒ．，Ａｒｃｈ．Ｇｅｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，１９８７；４４：６６０−６６９
【非特許文献２１】Ｌｅｗｉｓ  Ｄ．Ａ．，Ｌｅｖｉｔｔ  Ｐ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００２；２５：４０９−４３２
【非特許文献２２】Ｈａｒｒｉｓｏｎ  Ｐ．Ｊ．，Ｂｒａｉｎ，１９９９；１２２：５９３−６２４
【非特許文献２３】Ｈｅｃｋｅｒｓ  Ｓ．，Ｋｏｎｒａｄｉ  Ｃ．，Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ．Ｔｒａｎｓｍ．，２００２；１０９：８９１−９０５
【非特許文献２４】Ｈａｒｒｉｓｏｎ  Ｐ．Ｊ．，Ｅａｓｔｗｏｏｄ  Ｓ．Ｌ．，Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ，２００１；１１：５０８−５１９
【非特許文献２５】Ｏｚｅｋｉ  Ｙ．，Ｔｏｍｏｄａ  Ｔ．，Ｋｌｅｉｄｅｒｌｅｉｎ  Ｊ．，Ｋａｍｉｙａ  Ａ．，Ｂｏｒｄ  Ｌ．，Ｆｕｊｉｉ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（Ｊａｎ．２００３）
【非特許文献２６】Ｍｉｌｌａｒ  Ｊ．Ｋ．，Ｊａｍｅｓ  Ｒ．，Ｃｈｒｉｓｔｉｅ  Ｓ．，Ｔａｙｌｏｒ  Ｍ．Ｓ．，Ｄｅｖｏｎ  Ｒ．Ｓ．，Ｈｏｇｇ  Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ｆｒｏｍ  Ｘｔｈ  Ｗｏｒｌｄ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ  ｏｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２００２
【非特許文献２７】Ｋａｎｄｐａｌ  Ｇ．，Ｍａ  Ｌ．，Ａｃｔｏｎ  Ｐ．，Ａｕｓｔｉｎ  Ｃ．Ｐ．，Ｍｏｒｒｉｓ  Ｊ．Ａ．，Ａｂｓｔｒａｃｔ  ｆｒｏｍ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ３２ｎｄ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，２００２
【非特許文献２８】Ｒａｍａｋｅｒｓ  ＧＪＡ．，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００２；２５：１９１−１９９
【非特許文献２９】Ｃｈｅｌｌｙ  Ｊ．，Ｍａｎｄｅｌ  Ｊ．Ｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．，２００１；２：６６９−６８０
【非特許文献３０】Ｂｉｌｌｕａｒｔ  Ｐ．，Ｂｉｅｎｖｅｎｕ  Ｔ．，Ｒｏｎｃｅ  Ｎ．，ｄｅｓ  Ｐｏｒｔｅｓ  Ｖ．，Ｖｉｎｅｔ  Ｍ．Ｃ．，Ｚｅｍｎｉ  Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９８；３９２：９２３−９２６
【非特許文献３１】Ａｌｌｅｎ  Ｋ．Ｍ．，Ｇｌｅｅｓｏｎ  Ｊ．Ｇ．，Ｂａｇｒｏｄｉａ  Ｓ．，Ｐａｒｔｉｎｇｔｏｎ  Ｍ．Ｗ．，ＭａｃＭｉｌｌａｎ  Ｊ．Ｃ．，Ｃｅｒｉｏｎｅ  Ｒ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，１９９８；２０：２５−３０
【非特許文献３２】Ｋｕｔｓｃｈｅ  Ｋ．，Ｙｎｔｅｍａ  Ｈ．，Ｂｒａｎｄｔ  Ａ．，Ｊａｎｔｋｅ  Ｉ．，Ｎｏｔｈｗａｎｇ  Ｈ．Ｇ．，Ｏｒｔｈ  Ｕ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２０００；２６：２４７−２５０
【非特許文献３３】Ｎａｇａｓｅ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，ＤＮＡ  Ｒｅｓ．，１９９８，５（６）：３５５−６４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するためのマーカー、キット、方法を提供すること。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
上記課題は、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４の関係を予想外に見出し、その正常な結合が阻害されると、軸索突起成長および／または束形成が正常に行われないことを予想外に発見したことによって達成された。
【００１４】
特に、神経性疾患の分子レベルでの解析は、分子生物学、細胞生物学の発展にも関わらず、未だ解明されていない部分が多い。神経性疾患の１つである統合失調症には、ＤＩＳＣ１と呼ばれる遺伝子の関与が示唆されている。現在のところ、転座によるＤＩＳＣ１の破壊が、スコットランド系の１家族において見出されているが、ＤＩＳＣ１を取り巻く分子環境はほとんど明らかではなかった。本発明において、分子レベルおよび生体レベルでの分析に基づくＤＩＳＣ１の病態生理学的役割の解明を行った結果、神経性疾患（例えば、統合失調症）について、ＤＩＳＣ１がＦＥＺ１と密接に関連することおよびＦＥＺ１への結合と軸索突起成長および／または束形成との関係が明らかになったことによって、病態生理学的な役割が明らかになった。
【００１５】
本発明はさらに、ＫＩＡＡ０８４４とＤＩＳＣ１および／またはＦＥＺ１とが予想外に関連していることを発見したことによってＫＩＡＡ０８４４の軸索突起成長および／または束形成との関係を見出した。
【００１６】
従って、本発明は、以下を提供する。
（１）  （ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子。
（２）  上記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、項目１に記載の因子。
（３）  少なくとも８の連続するヌクレオチド長を有する核酸分子である、項目１に記載の因子。
（４）  上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子である、項目１に記載の因子。
（５）  上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子である、項目１に記載の因子。
（６）  プライマーとして使用される、項目３に記載の因子。
（７）  プローブとして使用される、項目３に記載の因子。
（８）  上記ポリヌクレオチドまたは上記ポリペプチドは、配列番号１のヌクレオチド１０９５〜２６１５をコードする範囲または配列番号２のアミノ酸３４８〜８５４位の範囲を含む、項目１に記載の因子。
（９）  上記ポリヌクレオチドまたは上記ポリペプチドは、配列番号１のヌクレオチド１０９５〜１８４４、ヌクレオチド１８４５〜２６１５、ヌクレオチド１０９５〜１９５２、ヌクレオチド１０９５〜１６５２、ヌクレオチド１６５３〜１９５２、ヌクレオチド１３９１〜１６５２およびヌクレオチド１３９１〜１９５２からなる群より選択される範囲をコードする範囲、あるいは配列番号２のアミノ酸３４８〜５９７位、アミノ酸５９８〜８５４位、アミノ酸３４８〜６３３位、アミノ酸３４８〜５３３位、アミノ酸５３４〜６３３位、アミノ酸４４６〜５３３位およびアミノ酸４４６〜６３３位からなる群より選択される範囲を含む、項目１に記載の因子。
（１０）  上記因子は、標識されているかまたは標識され得る、項目１に記載の因子。
（１１）  （ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子。
（１２）  上記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、項目１１に記載の因子。
（１３）  抗体またはその誘導体である、項目１１に記載の因子。
（１４）  プローブとして使用される、項目１１に記載の因子。
（１５）  上記ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸３４８〜８５４位の範囲を含む、項目１１に記載の因子。
（１６）  上記ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸３４８〜５９７位、アミノ酸５９８〜８５４位、アミノ酸３４８〜６３３位、アミノ酸３４８〜５３３位、アミノ酸５３４〜６３３位、アミノ酸４４６〜５３３位およびアミノ酸４４６〜６３３位からなる群より選択される範囲を含む、項目１１に記載の因子。
（１７）  上記因子は、標識されているかまたは標識され得る、項目１１に記載の因子。
（１８）  （ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子。
（１９）  上記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、項目１８に記載の因子。
（２０）  少なくとも８の連続するヌクレオチド長を有する核酸分子である、項目１８に記載の因子。
（２１）  上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子である、項目１８に記載の因子。
（２２）  上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子である、項目１８に記載の因子。
（２３）  プライマーとして使用される、項目２０に記載の因子。
（２４）  プローブとして使用される、項目２０に記載の因子。
（２５）  上記ポリヌクレオチドまたは上記ポリペプチドは、配列番号３のヌクレオチド４７８〜１２６９をコードする範囲または配列番号４のアミノ酸１２９〜３９２位の範囲を含む、項目１８に記載の因子。
（２６）  上記ポリヌクレオチドまたは上記ポリペプチドは、配列番号３のヌクレオチド８３２〜１２６９をコードする範囲、あるいは配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２位の範囲を含む、項目１８に記載の因子。
（２７）  上記因子は、標識されているかまたは標識され得る、項目１８に記載の因子。
（２８）  （ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子。
（２９）  上記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、項目２８に記載の因子。
（３０）  抗体またはその誘導体である、項目２８に記載の因子。
（３１）  プローブとして使用される、項目２８に記載の因子。
（３２）  上記ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸１２９〜３９２位の範囲を含む、項目２８に記載の因子。
（３３）  上記ポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２位の範囲を含む、項目２８に記載の因子。
（３４）  上記因子は、標識されているかまたは標識され得る、項目２８に記載の因子。
（３５）  ＦＥＺ１またはＫＩＡＡ０８４４の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
（３６）  ＤＩＳＣ１またはＫＩＡＡ０８４４の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
（３７）  軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは上記レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するための組成物であって、上記組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；
（Ｂ）（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子；
（Ｃ）（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｄ）（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
（３８）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、項目３７に記載の組成物。
（３９）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、
（ａ）被験体に由来するサンプル中のＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定する工程；および
（ｂ）上記結合を、正常レベルの結合と比較する工程であって、上記測定された結合が上記正常レベルの結合より低い場合、軸索突起成長および／または束形成のレベルは正常より劣っていることを示す、工程、
を包含する、方法。
（４０）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、項目３９に記載の方法。
（４１）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、上記方法は、
（ａ）軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定する工程；
（ｂ）正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定する工程；および
（ｃ）上記（ａ）の結合レベルと上記（ｂ）の結合レベルとを比較する工程
を包含し、
ここで、上記（ａ）の結合レベルが上記（ｂ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、上記被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態の異常、障害または疾患を有すると診断される、方法。
（４２）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、項目４１に記載の方法。
（４３）  上記結合を測定する工程において、配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体を使用する、項目４１に記載の方法。
（４４）  上記結合を測定する工程において、配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体を使用する、項目４１に記載の方法。
（４５）  上記結合を測定する工程において、配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体、および配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体を使用する、項目４１に記載の方法。
（４６）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患に関連する遺伝子変異を検出する方法であって、サンプル中のＤＩＳＣ１遺伝子および／またはＦＥＺ１遺伝子のポリヌクレオチド配列中の変異を検出する工程を包含する、方法。
（４７）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、項目４６に記載の方法。
（４８）  上記変異は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患と連鎖する、項目４６に記載の方法。
（４９）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するためのキットであって、上記キットは、
（ａ）項目３７に記載の組成物；ならびに
（ｂ）指示書、
を備え、上記指示書は、
（ｉ）上記組成物を用いて、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；
（ｉｉ）上記組成物を用いて、正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；および
（ｉｉｉ）上記（ｉ）の結合レベルと上記（ｉｉ）の結合レベルとを比較すること
を指示し、
ここで、上記（ｉ）の結合レベルが上記（ｉｉ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、上記被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を有すると診断される、
キット。
（５０）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、項目４９に記載のキット。
（５１）  被験体における軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットであって、上記キットは、以下：
（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、
上記プライマーは、それぞれ：
（ｉ）配列番号１に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および
（ｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに
（ｂ）上記被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号１に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、
を備える、キット。
（５２）  上記検出される核酸配列は、配列番号１のヌクレオチド５４〜２６１５である、項目５１に記載のキット。
（５３）  被験体における軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットであって、上記キットは、以下：
（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、
上記プライマーは、それぞれ：
（ｉ）配列番号３に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および
（ｉｉ）配列番号４に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに
（ｂ）上記被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号３に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、
を備える、キット。
（５４）  上記検出される核酸配列は、配列番号３のヌクレオチド９４〜１２６９である、項目５３に記載のキット。
（５５）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を調節する因子を同定するための方法であって、上記方法は、以下：
（ａ）配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントおよび配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントを、試験因子の存在下で接触させる工程、および
（ｂ）上記第１のポリペプチドと上記第２のポリペプチドとの間の結合レベルを、上記試験因子の非存在下における結合レベルと比較する工程、
を包含し、
ここで、上記試験因子の非存在下における結合と比較して、試験因子の存在下における減少した結合は、上記試験因子は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患の負の調節因子であることを示し、そして試験因子の存在下における増大した結合は、上記試験因子は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患の正の調節因子であることを示す、方法。
（５６）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、項目５５に記載の方法。
（５７）  上記第１のポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸４４６〜５９７を含む、項目５５に記載の方法。
（５８）  上記第２のポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２を含む、項目５５に記載の方法。
（５９）  上記第２のポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２を含む、項目５７に記載の方法。
（６０）  上記ポリペプチドを接触させる工程は、上記ポリペプチドを発現する細胞を接触させることを包含する、項目５５に記載の方法。
（６１）  項目５５に記載の方法によって同定される、調節因子。
（６２）  項目６１に記載の調節因子を含む、薬学的組成物。
（６３）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を処置または予防する方法であって、上記方法は、項目６２に記載の薬学的組成物を被験体に投与する工程を包含する、方法。
（６４）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、項目６３に記載の方法。
（６５）  
（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子。
（６６）
上記配列番号１３に記載の塩基配列は、ＫＩＡＡ０８４４として提供される、項目６５に記載の因子。
（６７）  上記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、項目６５に記載の因子。
（６８）  少なくとも８の連続するヌクレオチド長を有する核酸分子である、項目６５に記載の因子。
（６９）  上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子である、項目６５に記載の因子。
（７０）  上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子である、項目６５に記載の因子。
（７１）  プライマーとして使用される、項目６７に記載の因子。
（７２）  プローブとして使用される、項目６７に記載の因子。
（７３）  上記因子は、標識されているかまたは標識され得る、項目６５に記載の因子。
（７４）  （ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子。
（７５）
上記配列番号１３に記載の塩基配列は、ＫＩＡＡ０８４４として提供される、項目７４に記載の因子。
（７６）  上記因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される、項目７４に記載の因子。
（７７）  抗体またはその誘導体である、項目７４に記載の因子。
（７８）  プローブとして使用される、項目７４に記載の因子。
（７９）  上記因子は、標識されているかまたは標識され得る、項目７４に記載の因子。
（８０）  ＦＥＺ１の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
（８１）  ＤＩＳＣ１の機能を判定するための組成物であって、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
（８２）  軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは上記レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するための組成物であって、上記組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
（８３）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患が統合失調症または精神遅滞である、項目８２に記載の組成物。
（８４）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、
（ａ）被験体に由来するサンプル中のＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；および
（ｂ）上記結合を、正常レベルの結合と比較する工程であって、上記測定された結合が上記正常レベルの結合より低い場合、軸索突起成長および／または束形成のレベルは正常より劣っていることを示す、工程、
を包含する、方法。
（８５）  上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症または精神遅滞である、項目８４に記載の方法。
（８６）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、上記方法は、
（ａ）軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；
（ｂ）正常な被験体におけるＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；
（ｃ）上記（ａ）の結合レベルと上記（ｂ）の結合レベルとを比較する工程
を包含し、
ここで、上記（ａ）の結合レベルが上記（ｂ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、上記被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態の異常、障害または疾患を有すると診断される、方法。
（８７）  軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するためのキットであって、上記キットは、
（ａ）項目８２に記載の組成物；ならびに
（ｂ）指示書、
を備え、上記指示書は、
（ｉ）上記組成物を用いて、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；
（ｉｉ）上記組成物を用いて、正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；および
（ｉｉｉ）上記（ｉ）の結合レベルと上記（ｉｉ）の結合レベルとを比較すること
を指示し、
ここで、上記（ｉ）の結合レベルが上記（ｉｉ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、上記被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を有すると診断される、
キット。
（８８）  被験体における軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットであって、上記キットは、以下：
（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、
上記プライマーは、それぞれ：
（ｉ）配列番号１３に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および
（ｉｉ）配列番号１４に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに
（ｂ）上記被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号１３に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、
を備える、キット。
【発明の効果】
【００１７】
軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患（統合失調症または精神遅滞を含む）を判定するための組成物、キット、方法、ならびに、このような状態、障害または疾患を、処置または予防するための薬剤を同定するための方法、キットおよびシステムが提供された。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下、本発明を説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。
【００１９】
（ＤＩＳＣ１）
本明細書において「ＤＩＳＣ１」（Ｄｉｓｒｕｐｔｅｄ−Ｉｎ−Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ  １）は、統合失調症で分離された（１；１１）（ｑ４２．１；ｑ１４．３）転座によって破壊されたものとして同定された遺伝子ならびにそのホモログおよび対応する遺伝子をいう。ＤＩＳＣ１は、代表的に、
（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、を含む。
【００２０】
好ましくは、ＤＩＳＣ１は、配列番号１に記載の塩基配列からなる核酸分子または配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドである。
【００２１】
ＤＩＳＣ１は、スコットランド人の家族における統合失調症で分離された、（１；１１）（ｑ４２．１；ｑ１４．３）転座によって破壊された新規遺伝子として同定された遺伝子である。ＤＩＳＣ１産物は、他の公知のタンパク質と有意な相同性を有さない。
【００２２】
本発明者らは、ＤＩＳＣ１タンパク質の存在を実証し、束形成および酵母ツーハイブリッド研究によってＤＩＳＣ１の相互作用パートナーとしてｆａｓｃｉｃｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｚｅｔａ−１（ＦＥＺ１）を予想外に同定した。ＦＥＺ１およびその線虫ホモログは、軸索突起成長および束形成に関与する新規タンパク質ファミリーを表すことが報告されている。本発明において培養海馬ニューロンにおいて、ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１は、成長円錐に同時局在したことが判明した。これらのタンパク質の相互作用は、Ｆ−アクチンと関連したことがわかった。ＰＣ１２細胞の神経への分化の間に、ＤＩＳＣ１／ＦＥＺ１相互作用のアップレギュレーションに、ＤＩＳＣ１の過剰発現による神経突起の伸長の増強が伴うことが、観察された。本発明は、ＤＩＳＣ１がＦＥＺ１との相互作用を通して神経突起の成長に関与することを示す。従って、本発明により統合失調症が神経発生の障害である信頼できる証拠が提供された。発生中のラット脳において高レベルのＤＩＳＣ１発現が存在するので、ＤＩＳＣ１の破壊は、神経系の異常な発生を介して精神病の罹病性を与え得る。本発明者らは、最初に、発生段階においてラット脳でＤＩＳＣ１の発現レベルが増強されたことを示した。また、特異的抗体を用いることによってＤＩＳＣ１タンパク質の存在が実証された。さらに、本発明者らは、ＦＥＺ１がＤＩＳＣ１の相互作用パートナーであることを初めて実証した。ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１の相互作用は、アクチン細胞骨格に関与し、そして神経突起の成長の間にアップレギュレートされることも見出された。
【００２３】
（ＦＥＺ１）
本明細書中に使用される場合、用語「ＦＥＺ１」（ｆａｓｃｉｃｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｚｅｔａ−１）は、軸索突起成長および束形成に関与するＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ  ＵＮＣ−７６タンパク質の哺乳動物ホモログおよび対応する遺伝子をいう。ＦＥＺ１およびそのホモログは、軸索突起成長および束形成に関与する新規タンパク質ファミリーを表すことが報告されている。ＦＥＺ１は、代表的に、
（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、を含む。
【００２４】
好ましくは、ＦＥＺ１は、配列番号３に記載の塩基配列からなる核酸分子または配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドである。
【００２５】
（ＫＩＡＡ０８４４）
本明細書において「ＫＩＡＡ０８４４」とは、非特許文献３３において初めて核酸配列が決定されたヒト遺伝子をいい、代表的には、
（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４にに記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、を含む。
【００２６】
代替的には、ＫＩＡＡ０８４４は、アクセッション番号Ｏ９４９３０で示されるデータにおいて含まれる配列を含む。
【００２７】
好ましくは、ＫＩＡＡ０８４４は、配列番号１３に記載の塩基配列からなる核酸分子または配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドである。
【００２８】
ＫＩＡＡ０８４４は、これまで、その機能が明らかにされていなかったが、本発明において、初めてＤＩＳＣ１および／またはＦＥＺ１との関係が明らかになった。従って、本発明において、ＫＩＡＡ０８４４が軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連することが明らかになった。
【００２９】
（用語の定義）
以下に本明細書において特に使用される用語の定義を列挙する。
【００３０】
本明細書において使用される用語「タンパク質」、「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」および「ペプチド」は、本明細書において同じ意味で使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマーをいう。このポリマーは、直鎖であっても分岐していてもよく、環状であってもよい。アミノ酸は、天然のものであっても非天然のものであってもよく、改変されたアミノ酸であってもよい。この用語はまた、複数のポリペプチド鎖の複合体へとアセンブルされたものを包含し得る。この用語はまた、天然または人工的に改変されたアミノ酸ポリマーも包含する。そのような改変としては、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化または任意の他の操作もしくは改変（例えば、標識成分との結合体化）。この定義にはまた、例えば、アミノ酸の１以上のアナログを含むポリペプチド（例えば、非天然のアミノ酸などを含む）、ペプチド様化合物（例えば、ペプトイド）および当該分野において公知の他の改変が包含される。ＤＩＳＣ１、ＦＥＺ１の遺伝子産物は、通常ポリペプチド形態をとる。
【００３１】
本明細書において使用される用語「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」および「核酸」は、本明細書において同じ意味で使用され、任意の長さのヌクレオチドのポリマーをいう。この用語はまた、「誘導体オリゴヌクレオチド」または「誘導体ポリヌクレオチド」を含む。「誘導体オリゴヌクレオチド」または「誘導体ポリヌクレオチド」とは、ヌクレオチドの誘導体を含むか、またはヌクレオチド間の結合が通常とは異なるオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドをいい、互換的に使用される。そのようなオリゴヌクレオチドとして具体的には、例えば、２’−Ｏ−メチル−リボヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のリン酸ジエステル結合がホスホロチオエート結合に変換された誘導体オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のリン酸ジエステル結合がＮ３’−Ｐ５’ホスホロアミデート結合に変換された誘導体オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のリボースとリン酸ジエステル結合とがペプチド核酸結合に変換された誘導体オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のウラシルがＣ−５プロピニルウラシルで置換された誘導体オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のウラシルがＣ−５チアゾールウラシルで置換された誘導体オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のシトシンがＣ−５プロピニルシトシンで置換された誘導体オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のシトシンがフェノキサジン修飾シトシン（ｐｈｅｎｏｘａｚｉｎｅ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｃｙｔｏｓｉｎｅ）で置換された誘導体オリゴヌクレオチド、ＤＮＡ中のリボースが２’−Ｏ−プロピルリボースで置換された誘導体オリゴヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチド中のリボースが２’−メトキシエトキシリボースで置換された誘導体オリゴヌクレオチドなどが例示される。他にそうではないと示されなければ、特定の核酸配列はまた、明示的に示された配列と同様に、その保存的に改変された改変体（例えば、縮重コドン置換体）および相補配列を包含することが企図される。具体的には、縮重コドン置換体は、１またはそれ以上の選択された（または、すべての）コドンの３番目の位置が混合塩基および／またはデオキシイノシン残基で置換された配列を作成することにより達成され得る（Ｂａｔｚｅｒら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．１９：５０８１（１９９１）；Ｏｈｔｓｕｋａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５−２６０８（１９８５）；Ｒｏｓｓｏｌｉｎｉら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ  ８：９１−９８（１９９４））。ＤＩＳＣ１、ＦＥＺ１などの遺伝子は、通常、このポリヌクレオチド形態をとる。
【００３２】
用語「核酸分子」もまた、本明細書において、「核酸」、「オリゴヌクレオチド」、および「ポリヌクレオチド」と互換可能に使用され、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡ、ゲノムＤＮＡなどを含む。本明細書では、核酸および核酸分子は、用語「遺伝子」の概念に含まれ得る。ある遺伝子配列をコードする核酸分子はまた、「スプライス変異体（改変体）」を包含する。同様に、核酸によりコードされた特定のタンパク質は、その核酸のスプライス改変体によりコードされる任意のタンパク質を包含する。その名が示唆するように「スプライス変異体」は、遺伝子のオルタナティブスプライシングの産物である。転写後、最初の核酸転写物は、異なる（別の）核酸スプライス産物が異なるポリペプチドをコードするようにスプライスされ得る。スプライス変異体の産生機構は変化するが、エキソンのオルタナティブスプライシングを含む。読み過し転写により同じ核酸に由来する別のポリペプチドもまた、この定義に包含される。スプライシング反応の任意の産物（組換え形態のスプライス産物を含む）がこの定義に含まれる。したがって、本明細書では、たとえば、ＤＩＳＣ１遺伝子には、ＤＩＳＣ１のスプライス変異体もまた包含され得る。
【００３３】
本明細書において、「遺伝子」とは、遺伝形質を規定する因子をいう。通常染色体上に一定の順序に配列している。タンパク質の一次構造を規定するものを構造遺伝子といい、その発現を左右するものを調節遺伝子（たとえば、プロモーター）という。本明細書では、遺伝子は、特に言及しない限り、構造遺伝子および調節遺伝子を包含する。したがって、ＤＩＳＣ１遺伝子というときは、通常、ＤＩＳＣ１の構造遺伝子、ＤＩＳＣ１のプロモーターおよびそれらに関連する調節因子を包含する。本明細書では、「遺伝子」は、「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」「核酸」および「核酸分子」ならびに／または「タンパク質」「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」および「ペプチド」を指すことがある。本明細書においてはまた、「遺伝子産物」は、遺伝子によって発現された「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」「核酸」および「核酸分子」ならびに／または「タンパク質」「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」および「ペプチド」を包含する。当業者であれば、遺伝子産物が何たるかはその状況に応じて理解することができる。
【００３４】
本明細書において遺伝子（例えば、核酸配列、アミノ酸配列など）の「相同性」とは、２以上の遺伝子配列の、互いに対する同一性の程度をいう。従って、ある２つの遺伝子の相同性が高いほど、それらの配列の同一性または類似性は高い。２種類の遺伝子が相同性を有するか否かは、配列の直接の比較、または核酸の場合ストリンジェントな条件下でのハイブリダイゼーション法によって調べられ得る。２つの遺伝子配列を直接比較する場合、その遺伝子配列間でＤＮＡ配列が、代表的には少なくとも５０％同一である場合、好ましくは少なくとも７０％同一である場合、より好ましくは少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一である場合、それらの遺伝子は相同性を有する。本明細書において、遺伝子（例えば、核酸配列、アミノ酸配列など）の「類似性」とは、上記相同性において、保存的置換をポジティブ（同一）とみなした場合の、２以上の遺伝子配列の、互いに対する同一性の程度をいう。従って、保存的置換がある場合は、その保存的置換の存在に応じて同一性と類似性とは異なる。また、保存的置換がない場合は、同一性と類似性とは同じ数値を示す。
【００３５】
本明細書では、アミノ酸配列および塩基配列の類似性、同一性および相同性の比較は、配列分析用ツールであるＢＬＡＳＴを用いてデフォルトパラメータを用いて算出される。
【００３６】
本明細書において、「アミノ酸」は、本発明の目的を満たす限り、天然のものでも非天然のものでもよい。
【００３７】
「誘導体アミノ酸」または「アミノ酸アナログ」とは、天然に存在するアミノ酸とは異なるがもとのアミノ酸と同様の機能を有するものをいう。そのような誘導体アミノ酸およびアミノ酸アナログは、当該分野において周知である。
【００３８】
用語「天然のアミノ酸」とは、天然のアミノ酸のＬ−異性体を意味する。天然のアミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、メチオニン、トレオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、プロリン、ヒスチジン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、γ−カルボキシグルタミン酸、アルギニン、オルニチン、およびリジンである。特に示されない限り、本明細書でいう全てのアミノ酸はＬ体であるが、Ｄ体のアミノ酸を用いた形態もまた本発明の範囲内にある。
【００３９】
用語「非天然アミノ酸」とは、タンパク質中で通常は天然に見出されないアミノ酸を意味する。非天然アミノ酸の例として、ノルロイシン、パラ−ニトロフェニルアラニン、ホモフェニルアラニン、パラ−フルオロフェニルアラニン、３−アミノ−２−ベンジルプロピオン酸、ホモアルギニンのＤ体またはＬ体およびＤ−フェニルアラニンが挙げられる。
【００４０】
「アミノ酸アナログ」とは、アミノ酸ではないが、アミノ酸の物性および／または機能に類似する分子をいう。アミノ酸アナログとしては、例えば、エチオニン、カナバニン、２−メチルグルタミンなどが挙げられる。アミノ酸模倣物とは、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様な様式で機能する化合物をいう。
【００４１】
アミノ酸は、その一般に公知の３文字記号か、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎにより推奨される１文字記号のいずれかにより、本明細書中で言及され得る。ヌクレオチドも同様に、一般に認知された１文字コードにより言及され得る。
【００４２】
本明細書において、「対応する」アミノ酸とは、あるポリペプチド分子またはポリヌクレオチド分子において、比較の基準となるポリペプチドまたはポリヌクレオチドにおける所定のアミノ酸またはヌクレオチドと同様の作用を有するか、または有することが予測されるアミノ酸またはヌクレオチドをいい、特に酵素分子にあっては、活性部位中の同様の位置に存在し触媒活性に同様の寄与をするアミノ酸をいう。例えば、アンチセンス分子であれば、そのアンチセンス分子の特定の部分に対応するオルソログにおける同様の部分であり得る。本発明のＤＩＳＣ１またはＦＥＺに対し、対応するアミノ酸または核酸は、例えば、それぞれＦＥＺまたはＤＩＳＣ１と相互作用する部位、あるいはそれをコードする部位であり得る。別の実施形態において、本発明のＤＩＳＣ１またはＦＥＺに対し、対応するアミノ酸は、複合体生成において役割を果たすアミノ酸であり得る。このような「対応する」アミノ酸または核酸は、特定の範囲に及ぶ領域またはドメインであり得る。従って、このような領域またはドメインは、「対応する」領域またはドメインとして本明細書中に参照される。
【００４３】
本明細書において、「対応する」遺伝子（例えば、ポリペプチド分子またはポリヌクレオチド分子）とは、ある種において、比較の基準となる種における所定の遺伝子と同様の作用を有するか、または有することが予測される遺伝子をいい、そのような作用を有する遺伝子が複数存在する場合、進化学的に同じ起源を有するものをいう。従って、ある遺伝子の対応する遺伝子は、その遺伝子のオルソログであり得る。したがって、マウスＤＩＳＣ１遺伝子に対応する遺伝子は、他の動物においても見出すことができる。そのような対応する遺伝子は、当該分野において周知の技術を用いて同定することができる。したがって、例えば、ある動物における対応する遺伝子は、対応する遺伝子の基準となる遺伝子（例えば、マウスＤＩＳＣ１遺伝子）の配列をクエリ配列として用いてその動物（例えばヒト、ラット）の配列データベースを検索することによって見出すことができる。
【００４４】
本明細書において「ヌクレオチド」は、天然のものでも非天然のものでもよい。「誘導体ヌクレオチド」または「ヌクレオチドアナログ」とは、天然に存在するヌクレオチドとは異なるがもとのヌクレオチドと同様の機能を有するものをいう。そのような誘導体ヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログは、当該分野において周知である。そのような誘導体ヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログの例としては、ホスホロチオエート、ホスホルアミデート、メチルホスホネート、キラルメチルホスホネート、２−Ｏ−メチルリボヌクレオチド、ペプチド−核酸（ＰＮＡ）が含まれるが、これらに限定されない。
【００４５】
本明細書において、「フラグメント」とは、全長のポリペプチドまたはポリヌクレオチド（長さがｎ）に対して、１〜ｎ−１までの配列長さを有するポリペプチドまたはポリヌクレオチドをいう。フラグメントの長さは、その目的に応じて、適宜変更することができ、例えば、その長さの下限としては、ポリペプチドの場合、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５，２０、２５、３０、４０、５０およびそれ以上のアミノ酸が挙げられ、ここの具体的に列挙していない整数で表される長さ（例えば、１１など）もまた、下限として適切であり得る。また、ポリヌクレオチドの場合、５、６、７、８、９、１０、１５，２０、２５、３０、４０、５０、７５、１００およびそれ以上のヌクレオチドが挙げられ、ここの具体的に列挙していない整数で表される長さ（例えば、１１など）もまた、下限として適切であり得る。本明細書において、ポリペプチドおよびポリヌクレオチドの長さは、上述のようにそれぞれアミノ酸または核酸の個数で表すことができるが、上述の個数は絶対的なものではなく、同じ機能を有する限り、上限または加減としての上述の個数は、その個数の上下数個（または例えば上下１０％）のものも含むことが意図される。そのような意図を表現するために、本明細書では、個数の前に「約」を付けて表現することがある。しかし、本明細書では、「約」のあるなしはその数値の解釈に影響を与えないことが理解されるべきである。
【００４６】
本明細書においてポリヌクレオチドまたはポリペプチドに対して「特異的に相互作用する因子」とは、そのポリヌクレオチドまたはそのポリペプチドに対する親和性が、他の無関連の（特に、同一性が３０％未満の）ポリヌクレオチドまたはポリペプチドに対する親和性よりも、代表的には同等またはより高いか、好ましくは有意（例えば、統計的に有意に）に高いものをいう。そのような親和性は、例えば、ハイブリダイゼーションアッセイ、結合アッセイなどによって測定することができる。本明細書において「因子」としては、意図する目的を達成することができる限りどのような物質または他の要素（例えば、エネルギー）でもあってもよい。そのような物質としては、例えば、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチド、ペプチド、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡのようなＤＮＡ、ｍＲＮＡのようなＲＮＡを含む）、ポリサッカリド、オリゴサッカリド、脂質、有機低分子（例えば、ホルモン、リガンド、情報伝達物質、コンビナトリアルケミストリで合成された分子、医薬品として利用され得る低分子（例えば、低分子リガンドなど）など）、これらの複合分子が挙げられるがそれらに限定されない。ポリヌクレオチドに対して特異的な因子としては、代表的には、そのポリヌクレオチドの配列に対して一定の配列相同性を（例えば、７０％以上の配列同一性）もって相補性を有するポリヌクレオチド、プロモーター領域に結合する転写因子のようなポリペプチドなどが挙げられるがそれらに限定されない。ポリペプチドに対して特異的な因子としては、代表的には、そのポリペプチドに対して特異的に指向された抗体またはその誘導体あるいはそのアナログ（例えば、単鎖抗体）、そのポリペプチドがレセプターまたはリガンドである場合の特異的なリガンドまたはレセプター、そのポリペプチドが酵素である場合、その基質などが挙げられるがそれらに限定されない。
【００４７】
本明細書において「有機低分子」とは、有機分子であって、比較的分子量が小さなものをいう。通常有機低分子は、分子量が約１０００以下のものをいうが、それ以上のものであってもよい。有機低分子は、通常当該分野において公知の方法を用いるかそれらを組み合わせて合成することができる。そのような有機低分子は、生物に生産させてもよい。有機低分子としては、例えば、ホルモン、リガンド、情報伝達物質、コンビナトリアルケミストリで合成された分子、医薬品として利用され得る低分子（例えば、低分子リガンドなど）などが挙げられるがそれらに限定されない。
【００４８】
本明細書において用いられる用語「抗体」は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、多重特異性抗体、キメラ抗体、および抗イディオタイプ抗体、ならびにそれらのフラグメント、例えばＦ（ａｂ’）２およびＦａｂフラグメント、ならびにその他の組換えにより生産された結合体を含む。さらにこのような抗体を、酵素、例えばアルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、αガラクトシダーゼなど、に共有結合させまたは組換えにより融合させてよい。
【００４９】
本明細書中で使用される用語「モノクローナル抗体」は、同質な抗体集団を有する抗体組成物をいう。この用語は、それが作製される様式によって限定されない。この用語は、全免疫グロブリン分子ならびにＦａｂ分子、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆｖフラグメント、およびもとのモノクローナル抗体分子の免疫学的結合特性を示す他の分子を含む。ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を作製する方法は当該分野で公知であり、そして以下でより十分に記載される。
【００５０】
モノクローナル抗体は、当該分野で周知の標準的な技術（例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ（１９７５）２５６：４９５）またはその改変（例えば、Ｂｕｃｋら（１９８２）Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  １８：３７７）を使用して調製される。代表的には、マウスまたはラットを、タンパク質キャリアに結合したタンパク質で免疫化し、追加免疫し、そして脾臓（および必要に応じていくつかの大きなリンパ節）を取り出し、そして単一細胞を解離する。必要に応じて、この脾臓細胞は、非特異的接着細胞の除去後、抗原でコーティングされたプレートまたはウェルに細胞懸濁液を適用することにより、スクリーニングされ得る。抗原に特異的なイムノグロブリンを発現するＢ細胞がプレートに結合し、そして懸濁液の残渣でもリンス除去されない。次いで、得られたＢ細胞（すなわちすべての剥離した脾臓細胞）をミエローマ細胞と融合させて、ハイブリドーマを得、このハイブリドーマを用いてモノクローナル抗体を産生させる。
【００５１】
本明細書において「抗原」（ａｎｔｉｇｅｎ）とは、抗体分子によって特異的に結合され得る任意の基質をいう。本明細書において「免疫原」（ｉｍｍｕｎｏｇｅｎ）とは、抗原特異的免疫応答を生じるリンパ球活性化を開始し得る抗原をいう。
【００５２】
本明細書において「単鎖抗体」とは、Ｆｖ領域の重鎖フラグメントおよび軽鎖フラグメントがペプチド架橋を介して連結されれることによって形成され、単鎖ポリペプチドを生じたものをいう。
【００５３】
本明細書において「複合分子」とは、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、脂質、糖、低分子などの分子が複数種連結してできた分子をいう。そのような複合分子としては、例えば、糖脂質、糖ペプチドなどが挙げられるがそれらに限定されない。本明細書では、ＤＩＳＣ１遺伝子またはその産物あるいは本発明の因子と同様の機能を有する限り、それぞれＤＩＳＣ１遺伝子またはその産物あるいは本発明の因子としてそのような複合分子も使用することができる。
【００５４】
本明細書において「単離された」生物学的因子（例えば、核酸またはタンパク質など）とは、その生物学的因子が天然に存在する生物体の細胞内の他の生物学的因子（例えば、核酸である場合、核酸以外の因子および目的とする核酸以外の核酸配列を含む核酸；タンパク質である場合、タンパク質以外の因子および目的とするタンパク質以外のアミノ酸配列を含むタンパク質など）から実質的に分離または精製されたものをいう。「単離された」核酸およびタンパク質には、標準的な精製方法によって精製された核酸およびタンパク質が含まれる。単離された核酸およびタンパク質はまた、化学的に合成した核酸およびタンパク質を包含する。
【００５５】
本明細書において「精製された」生物学的因子（例えば、核酸またはタンパク質など）とは、その生物学的因子に天然に随伴する因子の少なくとも一部が除去されたものをいう。したがって、通常、精製された生物学的因子におけるその生物学的因子の純度は、その生物学的因子が通常存在する状態よりも高い（すなわち濃縮されている）。
【００５６】
本明細書中で使用される用語「精製された」および「単離された」は、好ましくは少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも８５重量％、よりさらに好ましくは少なくとも９５重量％、そして最も好ましくは少なくとも９８重量％の、同型の生物学的因子が存在することを意味する。  
【００５７】
本明細書において遺伝子、ポリヌクレオチド、ポリペプチドなど遺伝子産物の「発現」とは、その遺伝子などがインビボで一定の作用を受けて、別の形態になることをいう。好ましくは、遺伝子、ポリヌクレオチドなどが、転写および翻訳されて、ポリペプチドの形態になることをいうが、転写されてｍＲＮＡが作製されることもまた発現の一形態であり得る。より好ましくは、そのようなポリペプチドの形態は、翻訳後プロセシングを受けたものであり得る。
【００５８】
従って、本明細書において遺伝子、ポリヌクレオチド、ポリペプチドなどの「発現」の「減少」とは、本発明の因子を作用させたときに、作用させないときよりも、発現の量が有意に減少することをいう。好ましくは、発現の減少は、ポリペプチドの発現量の減少を含む。本明細書において遺伝子、ポリヌクレオチド、ポリペプチドなどの「発現」の「増加」とは、本発明の因子を作用させたときに、作用させないときよりも、発現の量が有意に増加することをいう。好ましくは、発現の増加は、ポリペプチドの発現量の増加を含む。本明細書において遺伝子の「発現」の「誘導」とは、ある細胞にある因子を作用させてその遺伝子の発現量を増加させることをいう。したがって、発現の誘導は、まったくその遺伝子の発現が見られなかった場合にその遺伝子が発現するようにすること、およびすでにその遺伝子の発現が見られていた場合にその遺伝子の発現が増大することを包含する。
【００５９】
本明細書において、遺伝子が「特異的に発現する」とは、その遺伝子が、特定の部位または時期において他の部位または時期とは異なる（好ましくは高い）レベルで発現されることをいう。「特異的に発現する」とは、ある部位（特異的部位）にのみ発現してもよく、それ以外の部位においても発現していてもよい。好ましくは「特異的に発現する」とは、ある部位においてのみ発現することをいう。
【００６０】
本明細書において「生物学的活性」とは、ある因子（例えば、ポリヌクレオチドまたはタンパク質）が、生体内において有し得る活性のことをいい、種々の機能（例えば、転写促進活性）を発揮する活性が包含される。例えば、２つの因子が相互作用する（例えば、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とが結合する）場合、その生物学的活性は、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合およびそれによって生じる生物学的変化（軸索突起成長および／または束形成など）などを包含する。別の例では、ある因子が酵素である場合、その生物学的活性は、その酵素活性を包含する。さらに別の例では、ある因子がリガンドである場合、そのリガンドが対応するレセプターへの結合を包含する。そのような生物学的活性は、当該分野において周知の技術によって測定することができる。
【００６１】
本明細書において「アンチセンス（活性）」とは、標的遺伝子の発現を特異的に抑制または低減することができる活性をいう。アンチセンス活性は、通常、目的とする遺伝子（例えば、ＤＩＳＣ１、ＦＥＺ１、ＫＩＡＡ０８４４など）の核酸配列と相補的な、少なくとも８の連続するヌクレオチド長の核酸配列によって達成される。このようなアンチセンス活性を有する分子は、アンチセンス分子と呼ばれる。そのような核酸配列は、好ましくは、少なくとも９の連続するヌクレオチド長の、より好ましく１０の連続するヌクレオチド長の、さらに好ましくは１１の連続するヌクレオチド長の、１２の連続するヌクレオチド長の、１３の連続するヌクレオチド長の、１４の連続するヌクレオチド長の、１５の連続するヌクレオチド長の、２０の連続するヌクレオチド長の、３０の連続するヌクレオチド長の、４０の連続するヌクレオチド長の、５０の連続するヌクレオチド長の、核酸配列であり得る。そのような核酸配列には、上述の配列に対して、少なくとも７０％相同な、より好ましくは、少なくとも８０％相同な、さらに好ましくは、９０％相同な、もっとも好ましくは９５％相同な核酸配列が含まれる。そのようなアンチセンス活性は、目的とする遺伝子の核酸配列の５’末端の配列に対して相補的であることが好ましい。そのようなアンチセンスの核酸配列には、上述の配列に対して、１つまたは数個あるいは１つ以上のヌクレオチドの置換、付加および／または欠失を有するものもまた含まれる。
【００６２】
一般的なアンチセンス技術については、教科書に記載されている（例えば、Ｍｕｒｒａｙ，ＪＡＨ  ｅｄｓ．，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ＲＮＡ  ａｎｄ  ＤＮＡ，Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ  Ｉｎｃ，１９９２）。さらに最新の研究でＲＮＡ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ（ＲＮＡｉ）と呼ばれる現象が明らかになり、アンチセンス技術の発展をもたらした。ＲＮＡｉは、標的遺伝子に相同な配列をもつ短い長さの２本鎖ＲＮＡ（２０ベ−ス程度）を細胞内に導入すると、そのＲＮＡ配列に相同な標的遺伝子のｍＲＮＡが特異的に分解されて発現レベルが低下する現象である。当初線虫において発見されたこの現象は、植物を含めて生物に普遍的な現象であることがわかってきて、アンチセンス技術で標的遺伝子の発現が抑制される分子レベルのメカニズムは、このＲＮＡｉと同様のプロセスを経ることが解明された。従来は、標的遺伝子のヌクレオチド配列に相補的である１つのＤＮＡ配列を適当なプロモーターに連結して、その制御下に人工ｍＲＮＡを発現させるような発現ベクターを構築して、細胞内に導入することが行われた。最近の知見においては、細胞内に２本鎖ＲＮＡを構成できるようにデザインされた発現ベクターが用いられる。基本構造はある標的遺伝子に相補的な１種のＤＮＡ配列をプロモーター下に１つを連結し、それと同じ物をさらに逆向きにもう１つ連結してつくられる。この構築遺伝子から転写された１本鎖のｍＲＮＡでは、逆向きにつながれた１種類のヌクレオチド配列部分が相補的な関係にあるため対合してヘアピン様の二次構造を持つ２本鎖ＲＮＡ状態をとり、これがＲＮＡｉのメカニズムに従って標的遺伝子のｍＲＮＡ分解を引き起こすわけである。またＲＮＡｉ全般については、最近の総説にまとめられている（森田と吉田、蛋白質・核酸・酵素４７、１９３９−１９４５、２００２）。これらの文献に記載された内容は、本明細書おいてその全体を参考として援用する。
【００６３】
本明細書において「ＲＮＡｉ」とは、ＲＮＡ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅの略称で、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡともいう）のようなＲＮＡｉを引き起こす因子を細胞に導入することにより、相同なｍＲＮＡが特異的に分解され、遺伝子産物の合成が抑制される現象およびそれに用いられる技術をいう。本明細書においてＲＮＡｉはまた、場合によっては、ＲＮＡｉを引き起こす因子と同義に用いられ得る。
【００６４】
本明細書において「ＲＮＡｉを引き起こす因子」とは、ＲＮＡｉを引き起こすことができるような任意の因子をいう。本明細書において「遺伝子」に対して「ＲＮＡｉを引き起こす因子」とは、その遺伝子に関するＲＮＡｉを引き起こし、ＲＮＡｉがもたらす効果（例えば、その遺伝子の発現抑制など）が達成されることをいう。そのようなＲＮＡｉを引き起こす因子としては、例えば、標的遺伝子の核酸配列の一部に対して少なくとも約７０％の相同性を有する配列またはストリンジェントな条件下でハイブリダイズする配列を含む、少なくとも１０ヌクレオチド長の二本鎖部分を含むＲＮＡまたはその改変体が挙げられるがそれに限定されない。ここで、この因子は、好ましくは、３’突出末端を含み、より好ましくは、３’突出末端は、２ヌクレオチド長以上のＤＮＡ（例えば、２〜４ヌクレオチド長のＤＮＡであり得る。
【００６５】
あるいは、本発明において用いられるＲＮＡｉとしては、例えば、短い逆向きの相補的配列（例えば、１５ｂｐ以上であり、例えば、２３ｂｐなど）のペアが挙げられるがそれらに限定されない。
【００６６】
本明細書において、「ストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド」とは、当該分野で慣用される周知の条件をいう。本発明のポリヌクレオチド中から選択されたポリヌクレオチドをプローブとして、コロニー・ハイブリダイゼーション法、プラーク・ハイブリダイゼーション法あるいはサザンブロットハイブリダイゼーション法等を用いることにより、そのようなポリヌクレオチドを得ることができる。具体的には、コロニーあるいはプラーク由来のＤＮＡを固定化したフィルターを用いて、０．７〜１．０ＭのＮａＣｌ存在下、６５℃でハイブリダイゼーションを行った後、０．１〜２倍濃度のＳＳＣ（ｓａｌｉｎｅ−ｓｏｄｉｕｍ  ｃｉｔｒａｔｅ）溶液（１倍濃度のＳＳＣ溶液の組成は、１５０ｍＭ  塩化ナトリウム、１５ｍＭ  クエン酸ナトリウムである）を用い、６５℃条件下でフィルターを洗浄することにより同定できるポリヌクレオチドを意味する。ハイブリダイゼーションは、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  ２ｎｄ  ｅｄ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １〜３８、ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  １：Ｃｏｒｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ（１９９５）等の実験書に記載されている方法に準じて行うことができる。ここで、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする配列からは、好ましくは、Ａ配列のみまたはＴ配列のみを含む配列が除外される。「ハイブリダイズ可能なポリヌクレオチド」とは、上記ハイブリダイズ条件下で別のポリヌクレオチドにハイブリダイズすることができるポリヌクレオチドをいう。ハイブリダイズ可能なポリヌクレオチドとして具体的には、本発明で具体的に示されるアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするＤＮＡの塩基配列と少なくとも６０％以上の相同性を有するポリヌクレオチド、好ましくは８０％以上の相同性を有するポリヌクレオチド、さらに好ましくは９５％以上の相同性を有するポリヌクレオチドを挙げることができる。
【００６７】
本明細書において「プローブ」とは、インビトロおよび／またはインビボなどのスクリーニングなどの生物学的実験において用いられる、検索の対象となる物質をいい、例えば、特定の塩基配列を含む核酸分子または特定のアミノ酸配列を含むペプチドなどが挙げられるがそれに限定されない。
【００６８】
通常プローブとして用いられる核酸分子としては、目的とする遺伝子の核酸配列と相同なまたは相補的な、少なくとも８の連続するヌクレオチド長の核酸配列を有するものが挙げられる。そのような核酸配列は、好ましくは、少なくとも９の連続するヌクレオチド長の、より好ましく１０の連続するヌクレオチド長の、さらに好ましくは１１の連続するヌクレオチド長の、１２の連続するヌクレオチド長の、１３の連続するヌクレオチド長の、１４の連続するヌクレオチド長の、１５の連続するヌクレオチド長の、２０の連続するヌクレオチド長の、２５の連続するヌクレオチド長の、３０の連続するヌクレオチド長の、４０の連続するヌクレオチド長の、５０の連続するヌクレオチド長の、核酸配列であり得る。プローブとして使用される核酸配列には、上述の配列に対して、少なくとも７０％相同な、より好ましくは、少なくとも８０％相同な、さらに好ましくは、９０％相同な、９５％相同な核酸配列が含まれる。
【００６９】
本明細書において、「検索」とは、電子的にまたは生物学的あるいは他の方法により、ある核酸塩基配列を利用して、特定の機能および／または性質を有する他の核酸塩基配列を見出すことをいう。電子的な検索としては、ＢＬＡＳＴ（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０（１９９０））、ＦＡＳＴＡ（Ｐｅａｒｓｏｎ  ＆  Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ  ８５：２４４４−２４４８（１９８８））、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ法（Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１４７：１９５−１９７（１９８１））、およびＮｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ法（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３（１９７０））などが挙げられるがそれらに限定されない。生物学的な検索としては、ストリンジェントハイブリダイゼーション、ゲノムＤＮＡをナイロンメンブレン等に貼り付けたマクロアレイまたはガラス板に貼り付けたマイクロアレイ（マイクロアッセイ）、ＰＣＲおよび  ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーションなどが挙げられるがそれらに限定されない。
【００７０】
本明細書における「プライマー」とは、高分子合成酵素反応において、合成される高分子化合物の反応の開始に必要な物質をいう。核酸分子の合成反応では、合成されるべき高分子化合物の一部の配列に相補的な核酸分子（例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡなど）が用いられ得る。
【００７１】
通常プライマーとして用いられる核酸分子としては、目的とする遺伝子の核酸配列と相補的な、少なくとも８の連続するヌクレオチド長の核酸配列を有するものが挙げられる。そのような核酸配列は、好ましくは、少なくとも９の連続するヌクレオチド長の、より好ましく１０の連続するヌクレオチド長の、さらに好ましくは１１の連続するヌクレオチド長の、１２の連続するヌクレオチド長の、１３の連続するヌクレオチド長の、１４の連続するヌクレオチド長の、１５の連続するヌクレオチド長の、１６の連続するヌクレオチド長の、１７の連続するヌクレオチド長の、１８の連続するヌクレオチド長の、１９の連続するヌクレオチド長の、２０の連続するヌクレオチド長の、２５の連続するヌクレオチド長の、３０の連続するヌクレオチド長の、４０の連続するヌクレオチド長の、５０の連続するヌクレオチド長の、核酸配列であり得る。プローブとして使用される核酸配列には、上述の配列に対して、少なくとも７０％相同な、より好ましくは、少なくとも８０％相同な、さらに好ましくは、少なくとも９０％相同な、そして最も好ましくは少なくとも９５％相同な核酸配列が含まれる。プライマーとして適切な配列は、合成（増幅）が意図される配列の性質によって変動し得るが、当業者は、意図される配列に応じて適宜プライマーを設計することができる。そのようなプライマーの設計は当該分野において周知であり、手動でおこなってもよくコンピュータプログラム（例えば、ＬＡＳＥＲＧＥＮＥ，Ｐｒｉｍｅｒ  Ｓｅｌｅｃｔ，ＤＮＡＳｔａｒ）を用いて行ってもよい。
【００７２】
本明細書において、「エピトープ」とは、抗原決定基をいう。従って、「エピトープ」には特定の免疫グロブリンによる認識に関与するアミノ酸残基のセット、または、Ｔ細胞の場合は、Ｔ細胞レセプタータンパク質および／もしくは主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）レセプターによる認識について必要であるアミノ酸残基のセットが包含される。この用語はまた、「抗原決定基」または「抗原決定部位」と交換可能に使用される。免疫系分野において、インビボまたはインビトロで、エピトープは、分子の特徴（例えば、一次ペプチド構造、二次ペプチド構造または三次ペプチド構造および電荷）であり、免疫グロブリン、Ｔ細胞レセプターまたはＨＬＡ分子によって認識される部位を形成する。ペプチドを含むエピトープは、エピトープに独特な空間的コンフォメーション中に３つ以上のアミノ酸を含み得る。一般に、エピトープは、少なくとも５つのこのようなアミノ酸からなり、代表的には少なくとも６つ、７つ、８つ、９つ、または１０のこのようなアミノ酸からなる。エピトープの長さは、より長いほど、もとのペプチドの抗原性に類似することから一般的に好ましいが、コンフォメーションを考慮すると、必ずしもそうでないことがある。アミノ酸の空間的コンフォメーションを決定する方法は、当該分野で公知であり、例えば、Ｘ線結晶学、および２次元核磁気共鳴分光法を含む。さらに、所定のタンパク質におけるエピトープの同定は、当該分野で周知の技術を使用して容易に達成される。例えば、Ｇｅｙｓｅｎら（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：３９９８（所定の抗原における免疫原性エピトープの位置を決定するために迅速にペプチドを合成する一般的な方法）；米国特許第４，７０８，８７１号（抗原のエピトープを同定し、そして化学的に合成するための手順）；およびＧｅｙｓｅｎら（１９８６）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２３：７０９（所定の抗体に対して高い親和性を有するペプチドを同定するための技術）を参照されたい。同じエピトープを認識する抗体は、単純な免疫アッセイにおいて同定され得る。このように、ペプチドを含むエピトープを決定する方法は、当該分野において周知であり、そのようなエピトープは、核酸またはアミノ酸の一次配列が提供されると、当業者はそのような周知慣用技術を用いて決定することができる。
【００７３】
従って、ペプチドを含むエピトープとして使用するためには、少なくとも３アミノ酸の長さの配列が必要であり、好ましくは、この配列は、少なくとも４アミノ酸、より好ましくは５アミノ酸、６アミノ酸、７アミノ酸、８アミノ酸、９アミノ酸、１０アミノ酸、１５アミノ酸、２０アミノ酸、２５アミノ酸の長さの配列が必要であり得る。エピトープは、直線でもコンフォメーションでも良い。
【００７４】
（遺伝子の改変）
本明細書中に使用されるように、本発明は改変された形態で使用され得る。あるタンパク質分子において、配列に含まれるあるアミノ酸は、相互作用結合能力の明らかな低下または消失なしに、例えば、カチオン性領域または基質分子の結合部位のようなタンパク質構造において他のアミノ酸に置換され得る。あるタンパク質の生物学的機能を規定するのは、タンパク質の相互作用能力および性質である。従って、特定のアミノ酸の置換がアミノ酸配列において、またはそのＤＮＡコード配列のレベルにおいて行われ得、置換後もなお、もとの性質を維持するタンパク質が生じ得る。従って、生物学的有用性の明らかな損失なしに、種々の改変が、本明細書において開示されたペプチドまたはこのペプチドをコードする対応するＤＮＡにおいて行われ得る。
【００７５】
上記のような改変を設計する際に、アミノ酸の疎水性指数が考慮され得る。タンパク質における相互作用的な生物学的機能を与える際の疎水性アミノ酸指数の重要性は、一般に当該分野で認められている（Ｋｙｔｅ，Ｊ．およびＤｏｏｌｉｔｔｌｅ，Ｒ．Ｆ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７（１）：１０５−１３２，１９８２）。アミノ酸の疎水的性質は、生成したタンパク質の二次構造に寄与し、次いでそのタンパク質と他の分子（例えば、酵素、基質、レセプター、ＤＮＡ、抗体、抗原など）との相互作用を規定する。各アミノ酸は、それらの疎水性および電荷の性質に基づく疎水性指数を割り当てられる。それらは：イソロイシン（＋４．５）；バリン（＋４．２）；ロイシン（＋３．８）；フェニルアラニン（＋２．８）；システイン／シスチン（＋２．５）；メチオニン（＋１．９）；アラニン（＋１．８）；グリシン（−０．４）；スレオニン（−０．７）；セリン（−０．８）；トリプトファン（−０．９）；チロシン（−１．３）；プロリン（−１．６）；ヒスチジン（−３．２）；グルタミン酸（−３．５）；グルタミン（−３．５）；アスパラギン酸（−３．５）；アスパラギン（−３．５）；リジン（−３．９）；およびアルギニン（−４．５）である。
【００７６】
あるアミノ酸を、同様の疎水性指数を有する他のアミノ酸により置換して、そして依然として同様の生物学的機能を有するタンパク質（例えば、酵素活性において等価なタンパク質）を生じさせ得ることが当該分野で周知である。このようなアミノ酸置換において、疎水性指数が±２以内であることが好ましく、±１以内であることがより好ましく、および±０．５以内であることがさらにより好ましい。疎水性に基づくこのようなアミノ酸の置換は効率的であることが当該分野において理解される。
【００７７】
本明細書において、親水性指数はまた、タンパク質の改変に対しても有用であることが理解される。米国特許第４，５５４，１０１号に記載されるように、以下の親水性指数がアミノ酸残基に割り当てられている：アルギニン（＋３．０）；リジン（＋３．０）；アスパラギン酸（＋３．０±１）；グルタミン酸（＋３．０±１）；セリン（＋０．３）；アスパラギン（＋０．２）；グルタミン（＋０．２）；グリシン（０）；スレオニン（−０．４）；プロリン（−０．５±１）；アラニン（−０．５）；ヒスチジン（−０．５）；システイン（−１．０）；メチオニン（−１．３）；バリン（−１．５）；ロイシン（−１．８）；イソロイシン（−１．８）；チロシン（−２．３）；フェニルアラニン（−２．５）；およびトリプトファン（−３．４）。アミノ酸が同様の親水性指数を有しかつ依然として生物学的等価体を与え得る別のものに置換され得ることが理解される。このようなアミノ酸置換において、親水性指数が±２以内であることが好ましく、±１以内であることがより好ましく、および±０．５以内であることがさらにより好ましい。
【００７８】
本発明において、「保存的置換」とは、アミノ酸置換において、元のアミノ酸と置換されるアミノ酸との親水性指数または／および疎水性指数が上記のように類似している置換をいう。保存的置換の例としては、例えば、親水性指数または疎水性指数が、±２以内のもの同士、好ましくは±１以内のもの同士、より好ましくは±０．５以内のもの同士のものが挙げられるがそれらに限定されない。従って、保存的置換の例は、当業者に周知であり、例えば、次の各グループ内での置換：アルギニンおよびリジン；グルタミン酸およびアスパラギン酸；セリンおよびスレオニン；グルタミンおよびアスパラギン；ならびにバリン、ロイシン、およびイソロイシン、などが挙げられるがこれらに限定されない。
【００７９】
本明細書において、「改変体」とは、もとのポリペプチドまたはポリヌクレオチドなどの物質に対して、一部が変更されているものをいう。そのような改変体としては、置換改変体、付加改変体、欠失改変体、短縮（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）改変体、対立遺伝子変異体などが挙げられる。対立遺伝子（ａｌｌｅｌｅ）とは、同一遺伝子座に属し、互いに区別される遺伝的改変体のことをいう。従って、「対立遺伝子変異体」とは、ある遺伝子に対して、対立遺伝子の関係にある改変体をいう。そのような対立遺伝子変異体は、通常その対応する対立遺伝子と同一または非常に類似性の高い配列を有し、通常はほぼ同一の生物学的活性を有するが、まれに異なる生物学的活性を有することもある。「種相同体またはホモログ（ｈｏｍｏｌｏｇ）」とは、ある種の中で、ある遺伝子とアミノ酸レベルまたはヌクレオチドレベルで、相同性（好ましくは、６０％以上の相同性、より好ましくは、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上の相同性）を有するものをいう。そのような種相同体を取得する方法は、本明細書の記載から明らかである。「オルソログ（ｏｒｔｈｏｌｏｇ）」とは、オルソロガス遺伝子（ｏｒｔｈｏｌｏｇｏｕｓ  ｇｅｎｅ）ともいい、二つの遺伝子がある共通祖先からの種分化に由来する遺伝子をいう。例えば、多重遺伝子構造をもつヘモグロビン遺伝子ファミリーを例にとると、ヒトおよびマウスのαヘモグロビン遺伝子はオルソログであるが，ヒトのαヘモグロビン遺伝子およびβヘモグロビン遺伝子はパラログ（遺伝子重複で生じた遺伝子）である。オルソログは、分子系統樹の推定に有用である。オルソログは、通常別の種においてもとの種と同様の機能を果たしていることがあり得ることから、本発明のオルソログもまた、本発明において有用であり得る。
【００８０】
「保存的（に改変された）改変体」は、アミノ酸配列および核酸配列の両方に適用される。特定の核酸配列に関して、保存的に改変された改変体とは、同一のまたは本質的に同一のアミノ酸配列をコードする核酸をいい、核酸がアミノ酸配列をコードしない場合には、本質的に同一な配列をいう。遺伝コードの縮重のため、多数の機能的に同一な核酸が任意の所定のタンパク質をコードする。例えば、コドンＧＣＡ、ＧＣＣ、ＧＣＧ、およびＧＣＵはすべて、アミノ酸アラニンをコードする。したがって、アラニンがコドンにより特定される全ての位置で、そのコドンは、コードされたポリペプチドを変更することなく、記載された対応するコドンの任意のものに変更され得る。このような核酸の変動は、保存的に改変された変異の１つの種である「サイレント改変（変異）」である。ポリペプチドをコードする本明細書中のすべての核酸配列はまた、その核酸の可能なすべてのサイレント変異を記載する。当該分野において、核酸中の各コドン（通常メチオニンのための唯一のコドンであるＡＵＧ、および通常トリプトファンのための唯一のコドンであるＴＧＧを除く）が、機能的に同一な分子を産生するために改変され得ることが理解される。したがって、ポリペプチドをコードする核酸の各サイレント変異は、記載された各配列において暗黙に含まれる。好ましくは、そのような改変は、ポリペプチドの高次構造に多大な影響を与えるアミノ酸であるシステインの置換を回避するようになされ得る。このような塩基配列の改変法としては、制限酵素などによる切断、ＤＮＡポリメラーゼ、Ｋｌｅｎｏｗフラグメント、ＤＮＡリガーゼなどによる処理等による連結等の処理、合成オリゴヌクレオチドなどを用いた部位特異的塩基置換法（特定部位指向突然変異法；Ｍａｒｋ  Ｚｏｌｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｓｍｉｔｈ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１００，４６８−５００（１９８３））が挙げられるが、この他にも通常分子生物学の分野で用いられる方法によって改変を行うこともできる。好ましくは、本明細書において、このように保存的に改変された改変体が、本発明のポリペプチドまたはポリヌクレオチドとして使用され得ると理解される。
【００８１】
本明細書中において、機能的に等価なポリペプチドを作製するために、アミノ酸の置換のほかに、アミノ酸の付加、欠失、または修飾もまた行うことができる。アミノ酸の置換とは、もとのペプチドを１つ以上、例えば、１〜１０個、好ましくは１〜５個、より好ましくは１〜３個のアミノ酸で置換することをいう。アミノ酸の付加とは、もとのペプチド鎖に１つ以上、例えば、１〜１０個、好ましくは１〜５個、より好ましくは１〜３個のアミノ酸を付加することをいう。アミノ酸の欠失とは、もとのペプチドから１つ以上、例えば、１〜１０個、好ましくは１〜５個、より好ましくは１〜３個のアミノ酸を欠失させることをいう。アミノ酸修飾は、アミド化、カルボキシル化、硫酸化、ハロゲン化、短縮化、脂質化、アルキル化、グリコシル化、リン酸化、水酸化、アシル化（例えば、アセチル化）などを含むが、これらに限定されない。置換、または付加されるアミノ酸は、天然のアミノ酸であってもよく、非天然のアミノ酸、またはアミノ酸アナログでもよい。天然のアミノ酸が好ましい。
【００８２】
本明細書において使用される用語「ペプチドアナログ」または「ペプチド誘導体」とは、ペプチドとは異なる化合物であるが、ペプチドと少なくとも１つの化学的機能または生物学的機能が等価であるものをいう。したがって、ペプチドアナログには、もとのペプチドに対して、１つ以上のアミノ酸アナログまたはアミノ酸誘導体が付加または置換されているものが含まれる。ペプチドアナログは、その機能が、もとのペプチドの機能（例えば、ｐＫａ値が類似していること、官能基が類似していること、他の分子との結合様式が類似していること、水溶性が類似していることなど）と実質的に同様であるように、このような付加または置換がされている。そのようなペプチドアナログは、当該分野において周知の技術を用いて作製することができる。したがって、ペプチドアナログは、アミノ酸アナログを含むポリマーであり得る。
【００８３】
同様に、「ポリヌクレオチドアナログ」、「核酸アナログ」は、ポリヌクレオチドまたは核酸とは異なる化合物であるが、ポリヌクレオチドまたは核酸と少なくとも１つの化学的機能または生物学的機能が等価であるものをいう。したがって、ポリヌクレオチドアナログまたは核酸アナログには、もとのペプチドに対して、１つ以上のヌクレオチドアナログまたはヌクレオチド誘導体が付加または置換されているものが含まれる。
【００８４】
本明細書において使用される核酸分子は、発現されるポリペプチドが天然型のポリペプチドと実質的に同一の活性を有する限り、上述のようにその核酸の配列の一部が欠失または他の塩基により置換されていてもよく、あるいは他の核酸配列が一部挿入されていてもよい。あるいは、５’末端および／または３’末端に他の核酸が結合していてもよい。また、ポリペプチドをコードする遺伝子をストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、そのポリペプチドと実質的に同一の機能を有するポリペプチドをコードする核酸分子でもよい。このような遺伝子は、当該分野において公知であり、本発明において利用することができる。
【００８５】
このような核酸は、周知のＰＣＲ法により得ることができ、化学的に合成することもできる。これらの方法に、例えば、部位特異的変位誘発法、ハイブリダイゼーション法などを組み合わせてもよい。
【００８６】
本明細書において、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドの「置換、付加または欠失」とは、もとのポリペプチドまたはポリヌクレオチドに対して、それぞれアミノ酸もしくはその代替物、またはヌクレオチドもしくはその代替物が、置き換わること、付け加わることまたは取り除かれることをいう。このような置換、付加または欠失の技術は、当該分野において周知であり、そのような技術の例としては、部位特異的変異誘発技術などが挙げられる。置換、付加または欠失は、１つ以上であれば任意の数でよく、そのような数は、その置換、付加または欠失を有する改変体において目的とする機能（例えば、ホルモン、サイトカインの情報伝達機能など）が保持される限り、多くすることができる。例えば、そのような数は、１または数個であり得、そして好ましくは、全体の長さの２０％以内、１０％以内、または１００個以下、５０個以下、２５個以下などであり得る。
【００８７】
（一般技術）
本明細書において用いられる分子生物学的手法、生化学的手法、微生物学的手法は、当該分野において周知であり慣用されるものであり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（１９８９），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒおよびその３ｒｄ  Ｅｄ．（２００１）；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９８７），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９８９），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：  Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；Ｉｎｎｉｓ，Ｍ．Ａ．（１９９０），ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：  Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９２），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：  Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９５），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：  Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ；Ｉｎｎｉｓ，Ｍ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５），ＰＣＲ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９９），Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：  Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ，ａｎｄ  ａｎｎｕａｌ  ｕｐｄａｔｅｓ；Ｓｎｉｎｓｋｙ，Ｊ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（１９９９）．ＰＣＲ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ：  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、別冊実験医学「遺伝子導入＆発現解析実験法」羊土社、１９９７などに記載されており、これらは本明細書において関連する部分（全部であり得る）が参考として援用される。
【００８８】
人工的に合成した遺伝子を作製するためのＤＮＡ合成技術および核酸化学については、例えば、Ｇａｉｔ，Ｍ．Ｊ．（１９８５），Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬＰｒｅｓｓ；Ｇａｉｔ，Ｍ．Ｊ．（１９９０），Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ｅｃｋｓｔｅｉｎ，Ｆ．（１９９１），Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｄａｍｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔａｌ．（１９９２），Ｔｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，Ｃｈａｐｍａｎ＆Ｈａｌｌ；Ｓｈａｂａｒｏｖａ，Ｚ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４），Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ；Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ，Ｇ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６），Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．（Ｉ９９６），Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓなどに記載されており、これらは本明細書において関連する部分が参考として援用される。
【００８９】
（遺伝子工学）
本明細書において遺伝子について言及する場合、「ベクター」または「組み換えベクター」とは、目的のポリヌクレオチド配列を目的の細胞へと移入させることができるベクターをいう。そのようなベクターとしては、原核細胞、酵母、動物細胞、植物細胞、昆虫細胞、動物個体および植物個体などの宿主細胞において自立複製が可能、または染色体中への組込みが可能で、本発明のポリヌクレオチドの転写に適した位置にプロモーターを含有しているものが例示される。ベクターのうち、クローニングに適したベクターを「クローニングベクター」という。そのようなクローニングベクターは通常、制限酵素部位を複数含むマルチプルクローニング部位を含む。そのような制限酵素部位およびマルチプルクローニング部位は、当該分野において周知であり、当業者は、目的に合わせて適宜選択して使用することができる。そのような技術は、本明細書に記載される文献（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、前出）に記載されている。
【００９０】
本明細書において「発現ベクター」とは、構造遺伝子およびその発現を調節するプロモーターに加えて種々の調節エレメントが宿主の細胞中で作動し得る状態で連結されている核酸配列をいう。調節エレメントは、好ましくは、ターミネーター、薬剤耐性遺伝子のような選択マーカーおよび、エンハンサーを含み得る。
【００９１】
原核細胞に対する「組み換えベクター」としては、ｐｃＤＮＡ３（＋）、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ−ＳＫ（＋／−）、ｐＧＥＭ−Ｔ、ｐＥＦ−ＢＯＳ、ｐＥＧＦＰ、ｐＨＡＴ、ｐＵＣ１８、ｐＦＴ−ＤＥＳＴＴＭ４２ＧＡＴＥＷＡＹ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）などが例示される。
【００９２】
動物細胞に対する「組み換えベクター」としては、ｐｃＤＮＡＩ／Ａｍｐ、ｐｃＤＮＡＩ、ｐＣＤＭ８（いずれもフナコシより市販）、ｐＡＧＥ１０７［特開平３−２２９（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ｐＡＧＥ１０３［Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０１，１３０７（１９８７）］、ｐＡＭｏ、ｐＡＭｏＡ［Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６８，２２７８２−２２７８７（１９９３）］、マウス幹細胞ウイルス（Ｍｕｒｉｎｅ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉｒｕｓ）（ＭＳＣＶ）に基づいたレトロウイルス型発現ベクター、ｐＥＦ−ＢＯＳ、ｐＥＧＦＰなどが例示される。
【００９３】
本明細書において「ターミネーター」は、遺伝子のタンパク質をコードする領域の下流に位置し、ＤＮＡがｍＲＮＡに転写される際の転写の終結、ポリＡ配列の付加に関与する配列である。ターミネーターは、ｍＲＮＡの安定性に関与して遺伝子の発現量に影響を及ぼすことが知られている。
【００９４】
本明細書において「プロモーター」とは、遺伝子の転写の開始部位を決定し、またその頻度を直接的に調節するＤＮＡ上の領域をいい、通常ＲＮＡポリメラーゼが結合して転写を始める塩基配列である。プロモーターの領域は、通常、推定タンパク質コード領域の第１エキソンの上流約２ｋｂｐ以内の領域であることが多いので、ＤＮＡ解析用ソフトウエアを用いてゲノム塩基配列中のタンパク質コード領域を予測すれば、プロモータ領域を推定することはできる。推定プロモーター領域は、構造遺伝子ごとに変動するが、通常構造遺伝子の上流にあるが、これらに限定されず、構造遺伝子の下流にもあり得る。好ましくは、推定プロモーター領域は、第一エキソン翻訳開始点から上流約２ｋｂｐ以内に存在する。
【００９５】
本明細書において「エンハンサー」とは、目的遺伝子の発現効率を高めるために用いられる配列をいう。そのようなエンハンサーは当該分野において周知である。エンハンサーは複数個用いられ得るが１個用いられてもよいし、用いなくともよい。
【００９６】
本明細書において「作動可能に連結された（る）」とは、所望の配列の発現（作動）がある転写翻訳調節配列（例えば、プロモーター、エンハンサーなど）または翻訳調節配列の制御下に配置されることをいう。プロモーターが遺伝子に作動可能に連結されるためには、通常、その遺伝子のすぐ上流にプロモーターが配置されるが、必ずしも隣接して配置される必要はない。
【００９７】
本明細書において、核酸分子を細胞に導入する技術は、どのような技術でもよく、例えば、形質転換、形質導入、トランスフェクションなどが挙げられる。そのような核酸分子の導入技術は、当該分野において周知であり、かつ、慣用されるものであり、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  Ｆ．Ａ．ら編（１９８８）、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｓａｍｂｒｏｏｋ  Ｊ．ら（１９８７）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ  Ｅｄ．およびその第三版，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ、別冊実験医学「遺伝子導入＆発現解析実験法」羊土社、１９９７などに記載される。遺伝子の導入は、ノーザンブロット、ウェスタンブロット分析のような本明細書に記載される方法または他の周知慣用技術を用いて確認することができる。
【００９８】
また、ベクターの導入方法としては、細胞にＤＮＡを導入する上述のような方法であればいずれも用いることができ、例えば、トランスフェクション、形質導入、形質転換など（例えば、リン酸カルシウム法、リポソーム法、ＤＥＡＥデキストラン法、エレクトロポレーション法、パーティクルガン（遺伝子銃）を用いる方法など）が挙げられる。
【００９９】
「形質転換体」とは、形質転換によって作製された細胞などの生命体の全部または一部をいう。形質転換体としては、原核細胞、酵母、動物細胞、植物細胞、昆虫細胞などが例示される。形質転換体は、その対象に依存して、形質転換細胞、形質転換組織、形質転換宿主などともいわれる。本発明において用いられる細胞は、形質転換体であってもよい。
【０１００】
本発明において遺伝子操作などにおいて原核生物細胞が使用される場合、原核生物細胞としては、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属、Ｓｅｒｒａｔｉａ属、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属、Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属などに属する原核生物細胞、例えば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＸＬ１−Ｂｌｕｅ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＸＬ２−Ｂｌｕｅ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＤＨ１が例示される。
【０１０１】
本明細書において使用される場合、動物細胞としては、マウス・ミエローマ細胞、ラット・ミエローマ細胞、マウス・ハイブリドーマ細胞、チャイニーズ・ハムスターの細胞であるＣＨＯ細胞、ＢＨＫ細胞、アフリカミドリザル腎臓細胞、ヒト白血病細胞、ＨＢＴ５６３７（特開昭６３−２９９）、ヒト結腸癌細胞株などを挙げることができる。マウス・ミエローマ細胞としては、ｐｓ２０、ＮＳＯなど、ラット・ミエローマ細胞としてはＹＢ２／０など、ヒト胎児腎臓細胞としてはＨＥＫ２９３（ＡＴＣＣ：ＣＲＬ−１５７３）など、ヒト白血病細胞としてはＢＡＬＬ−１など、アフリカミドリザル腎臓細胞としてはＣＯＳ−１、ＣＯＳ−７、ヒト結腸癌細胞株としてはＨＣＴ−１５、ヒト神経芽細胞腫ＳＫ−Ｎ−ＳＨ、ＳＫ−Ｎ−ＳＨ−５Ｙ、マウス神経芽細胞腫Ｎｅｕｒｏ２Ａなどが例示される。
【０１０２】
本明細書において使用される場合、組換えベクターの導入方法としては、ＤＮＡを導入する方法であればいずれも用いることができ、例えば、塩化カルシウム法、エレクトロポレーション法［Ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１９４，１８２（１９９０）］、リポフェクション法、スフェロプラスト法［Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８４，１９２９（１９７８）］、酢酸リチウム法［Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．，１５３，１６３（１９８３）］、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７５，１９２９（１９７８）記載の方法などが例示される。
【０１０３】
本明細書において、レトロウイルスの感染方法は、例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  前出（特にＵｎｉｔｓ  ９．９−９．１４）などに記載されるように、当該分野において周知であり、例えば、トリプシナイズして胚性幹細胞を単一細胞懸濁物（ｓｉｎｇｌｅ−ｃｅｌｌ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）にした後、ウイルス産生細胞（ｖｉｒｕｓ−ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ  ｃｅｌｌｓ）（パッケージング細胞株＝ｐａｃｋａｇｉｎｇ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ）の培養上清と一緒に  １−２  時間共培養（ｃｏ−ｃｕｌｔｕｒｅ）することにより、十分量の感染細胞を得ることができる。
【０１０４】
本明細書において使用されるゲノムまたは遺伝子座などを除去する方法において用いられる、Ｃｒｅ酵素の一過的発現、染色体上でのＤＮＡマッピングなどは、細胞工学別冊実験プロトコールシリーズ「ＦＩＳＨ実験プロトコール  ヒト・ゲノム解析から染色体・遺伝子診断まで」松原謙一、吉川  寛  監修  秀潤社（東京）などに記載されるように、当該分野において周知である。
【０１０５】
本明細書において遺伝子発現（たとえば、ｍＲＮＡ発現、ポリペプチド発現）の「検出」または「定量」は、例えば、ｍＲＮＡの測定および免疫学的測定方法を含む適切な方法を用いて達成され得る。分子生物学的測定方法としては、例えば、ノーザンブロット法、ドットブロット法またはＰＣＲ法などが例示される。免疫学的測定方法としては、例えば、方法としては、マイクロタイタープレートを用いるＥＬＩＳＡ法、ＲＩＡ法、蛍光抗体法、ウェスタンブロット法、免疫組織染色法などが例示される。また、定量方法としては、ＥＬＩＳＡ法またはＲＩＡ法などが例示される。アレイ（例えば、ＤＮＡアレイ、プロテインアレイ）を用いた遺伝子解析方法によっても行われ得る。ＤＮＡアレイについては、（秀潤社編、細胞工学別冊「ＤＮＡマイクロアレイと最新ＰＣＲ法」）に広く概説されている。プロテインアレイについては、Ｎａｔ  Ｇｅｎｅｔ．２００２  Ｄｅｃ；３２  Ｓｕｐｐｌ：５２６−３２に詳述されている。遺伝子発現の分析法としては、上述に加えて、ＲＴ−ＰＣＲ、ＲＡＣＥ法、ＳＳＣＰ法、免疫沈降法、ｔｗｏ−ｈｙｂｒｉｄシステム、インビトロ翻訳法などが挙げられるがそれらに限定されない。そのようなさらなる分析方法は、例えば、ゲノム解析実験法  ・  中村祐輔ラボ・マニュアル、編集・中村祐輔  羊土社（２００２）などに記載されており、本明細書においてそれらの記載はすべて参考として援用される。
【０１０６】
「発現量」とは、目的の細胞などにおいて、ポリペプチドまたはｍＲＮＡが発現される量をいう。そのような発現量としては、本発明の抗体を用いてＥＬＩＳＡ法、ＲＩＡ法、蛍光抗体法、ウェスタンブロット法、免疫組織染色法などの免疫学的測定方法を含む任意の適切な方法により評価される本発明ポリペプチドのタンパク質レベルでの発現量、またはノーザンブロット法、ドットブロット法、ＰＣＲ法などの分子生物学的測定方法を含む任意の適切な方法により評価される本発明のポリペプチドのｍＲＮＡレベルでの発現量が挙げられる。「発現量の変化」とは、上記免疫学的測定方法または分子生物学的測定方法を含む任意の適切な方法により評価される本発明のポリペプチドのタンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルでの発現量が増加あるいは減少することを意味する。
【０１０７】
（ポリペプチドの製造方法）
本発明のポリペプチドをコードするＤＮＡを組み込んだ組換え体ベクターを保有する微生物、動物細胞などに由来する形質転換体を、通常の培養方法に従って培養し、本発明のポリペプチドを生成蓄積させ、本発明の培養物より本発明のポリペプチドを採取することにより、本発明のポリペプチドを製造することができる。
【０１０８】
本発明の形質転換体を培地に培養する方法は、宿主の培養に用いられる通常の方法に従って行うことができる。大腸菌等の原核生物あるいは酵母等の真核生物を宿主として得られた形質転換体を培養する培地としては、本発明の生物が資化し得る炭素源、窒素源、無機塩類等を含有し、形質転換体の培養を効率的に行える培地であれば天然培地、合成培地のいずれを用いてもよい。
【０１０９】
炭素源としては、それぞれの微生物が資化し得るものであればよく、グルコース、フラクトース、スクロース、これらを含有する糖蜜、デンプンあるいはデンプン加水分解物等の炭水化物、酢酸、プロピオン酸等の有機酸、エタノール、プロパノール等のアルコール類を用いることができる。
【０１１０】
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等の各種無機酸または有機酸のアンモニウム塩、その他含窒素物質、ならびに、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーンスチープリカー、カゼイン加水分解物、大豆粕および大豆粕加水分解物、各種発酵菌体およびその消化物等を用いることができる。
【０１１１】
無機塩としては、リン酸第一カリウム、リン酸第二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、炭酸カルシウム等を用いることができる。培養は、振盪培養または深部通気攪拌培養等の好気的条件下で行う。
【０１１２】
培養温度は１５〜４０℃がよく、培養時間は、通常５時間〜７日間である。培養中ｐＨは、３．０〜９．０に保持する。ｐＨの調整は、無機あるいは有機の酸、アルカリ溶液、尿素、炭酸カルシウム、アンモニア等を用いて行う。また培養中必要に応じて、アンピシリンまたはテトラサイクリン等の抗生物質を培地に添加してもよい。
【０１１３】
プロモーターとして誘導性のプロモーターを用いた発現ベクターで形質転換した微生物を培養するときには、必要に応じてインデューサーを培地に添加してもよい。例えば、ｌａｃプロモーターを用いた発現ベクターで形質転換した微生物を培養するときにはイソプロピル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド等を、ｔｒｐプロモーターを用いた発現ベクターで形質転換した微生物を培養するときにはインドールアクリル酸等を培地に添加してもよい。遺伝子を導入した植物の細胞または器官は、ジャーファーメンターを用いて大量培養することができる。培養する培地としては、一般に使用されているムラシゲ・アンド・スクーグ（ＭＳ）培地、ホワイト（Ｗｈｉｔｅ）培地、またはこれら培地にオーキシン、サイトカイニン等、植物ホルモンを添加した培地等を用いることができる。
【０１１４】
例えば、動物細胞を用いる場合、本発明の細胞を培養する培地は、一般に使用されているＲＰＭＩ１６４０培地［Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，１９９，５１９（１９６７）］、ＥａｇｌｅのＭＥＭ培地［Ｓｃｉｅｎｃｅ，１２２，５０１（１９５２）］、ＤＭＥＭ培地［Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，８，３９６（１９５９）］、１９９培地［Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，７３，１（１９５０）］またはこれら培地にウシ胎児血清等を添加した培地等が用いられる。
【０１１５】
培養は、通常ｐＨ６〜８、２５〜４０℃、５％ＣＯ２存在下等の条件下で１〜７日間行う。また培養中必要に応じて、カナマイシン、ペニシリン、ストレプトマイシン等の抗生物質を培地に添加してもよい。
【０１１６】
本発明のポリペプチドをコードする核酸配列で形質転換された形質転換体の培養物から、本発明のポリペプチドを単離または精製するためには、当該分野で周知慣用の通常の酵素の単離または精製法を用いることができる。例えば、本発明のポリペプチド製造用形質転換体の細胞外に本発明のポリペプチドが分泌される場合には、その培養物を遠心分離等の手法により処理し、可溶性画分を取得する。その可溶性画分から、溶媒抽出法、硫安等による塩析法脱塩法、有機溶媒による沈澱法、ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ、ＤＩＡＩＯＮ  ＨＰＡ−７５（三菱化成）等樹脂を用いた陰イオン交換クロマトグラフィー法、Ｓ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）等の樹脂を用いた陽イオン交換クロマトグラフィー法、ブチルセファロース、フェニルセファロース等の樹脂を用いた疎水性クロマトグラフィー法、分子篩を用いたゲルろ過法、アフィニティークロマトグラフィー法、クロマトフォーカシング法、等電点電気泳動等の電気泳動法等の手法を用い、精製標品を得ることができる。
【０１１７】
本発明のポリペプチドが本発明のポリペプチド製造用形質転換体の細胞内に溶解状態で蓄積する場合には、培養物を遠心分離することにより、培養物中の細胞を集め、その細胞を洗浄した後に、超音波破砕機、フレンチプレス、マントンガウリンホモジナイザー、ダイノミル等により細胞を破砕し、無細胞抽出液を得る。その無細胞抽出液を遠心分離することにより得られた上清から、溶媒抽出法、硫安等による塩析法脱塩法、有機溶媒による沈澱法、ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ、ＤＩＡＩＯＮ  ＨＰＡ−７５（三菱化成）等樹脂を用いた陰イオン交換クロマトグラフィー法、Ｓ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＦＦ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）等の樹脂を用いた陽イオン交換クロマトグラフィー法、ブチルセファロース、フェニルセファロース等の樹脂を用いた疎水性クロマトグラフィー法、分子篩を用いたゲルろ過法、アフィニティークロマトグラフィー法、クロマトフォーカシング法、等電点電気泳動等の電気泳動法等の手法を用いることによって、精製標品を得ることができる。
【０１１８】
本発明のポリペプチドが細胞内に不溶体を形成して発現した場合は、同様に細胞を回収後破砕し、遠心分離を行うことにより得られた沈澱画分より、通常の方法により本発明のポリペプチドを回収後、そのポリペプチドの不溶体をポリペプチド変性剤で可溶化する。この可溶化液を、ポリペプチド変性剤を含まないあるいはポリペプチド変性剤の濃度がポリペプチドが変性しない程度に希薄な溶液に希釈、あるいは透析し、本発明のポリペプチドを正常な立体構造に構成させた後、上記と同様の単離精製法により精製標品を得ることができる。
【０１１９】
また、通常のタンパク質の精製方法［Ｊ．Ｅｖａｎ．Ｓａｄｌｅｒら：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，８３，４５８］に準じて精製できる。また、本発明のポリペプチドを他のタンパク質との融合タンパク質として生産し、融合したタンパク質に親和性をもつ物質を用いたアフィニティークロマトグラフィーを利用して精製することもできる［山川彰夫，実験医学（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ），１３，４６９−４７４（１９９５）］。例えば、Ｌｏｗｅらの方法［Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８６，８２２７−８２３１（１９８９）、Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖｅｌｏｐ．，４，１２８８（１９９０）］に記載の方法に準じて、本発明のポリペプチドをプロテインＡとの融合タンパク質として生産し、イムノグロブリンＧを用いるアフィニティークロマトグラフィーにより精製することができる。
【０１２０】
また、本発明のポリペプチドをＦＬＡＧペプチドとの融合タンパク質として生産し、抗ＦＬＡＧ抗体を用いるアフィニティークロマトグラフィーにより精製することができる［Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８６，８２２７（１９８９）、Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖｅｌｏｐ．，４，１２８８（１９９０）］。
【０１２１】
さらに、本発明のポリペプチド自身に対する抗体を用いたアフィニティークロマトグラフィーで精製することもできる。本発明のポリペプチドは、公知の方法［Ｊ．Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＮＭＲ，６，１２９−１３４、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４２，１１６２−１１６４；Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１１０，１６６−１６８（１９９１）］に準じて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ転写・翻訳系を用いて生産することができる。
【０１２２】
上記で取得されたポリペプチドのアミノ酸情報を基に、Ｆｍｏｃ法（フルオレニルメチルオキシカルボニル法）、ｔＢｏｃ法（ｔ−ブチルオキシカルボニル法）等の化学合成法によっても本発明のポリペプチドを製造することができる。また、Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ、Ｓｙｎｔｈｅｃｅｌｌ−Ｖｅｇａ、ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ、島津製作所等のペプチド合成機を利用し化学合成することもできる。
【０１２３】
精製した本発明のポリペプチドの構造解析は、タンパク質化学で通常用いられる方法、例えば遺伝子クローニングのためのタンパク質構造解析（平野久著、東京化学同人発行、１９９３年）に記載の方法により実施可能である。本発明のポリペプチドの生理学的活性は、公知の測定方法に従って測定することができる。
【０１２４】
（変異型ポリペプチドの作製方法）
本発明ポリペプチドのアミノ酸の欠失、置換もしくは付加は、周知技術である部位特異的変異誘発法により実施することができる。かかる１もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ（１９８９）；Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １〜３８，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９８７−１９９７）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１０，６４８７（１９８２）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，７９，６４０９（１９８２）；Ｇｅｎｅ，３４，３１５（１９８５）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１３，４４３１（１９８５）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２，４８８（１９８５）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８１，５６６２（１９８４）；Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２４，１４３１（１９８４）；ＰＣＴ  ＷＯ８５／００８１７（１９８５）；Ｎａｔｕｒｅ，３１６，６０１（１９８５）等に記載の方法に準じて調製することができる。
【０１２５】
（免疫化学）
本発明のポリペプチドを認識する抗体の調製もまた当該分野において周知である。例えば、ポリクローナル抗体の調製は、取得したポリペプチドの全長または部分断片精製標品、あるいは本発明のタンパク質の一部のアミノ酸配列を有するペプチドを抗原として用い、動物に投与することにより行うことができる。
【０１２６】
抗体を生産する場合、投与する動物として、ウサギ、ヤギ、ラット、マウス、ハムスター等を用いることができる。その抗原の投与量は動物１匹当たり５０〜１００μｇが好ましい。ペプチドを用いる場合は、ペプチドをスカシガイヘモシアニン（ｋｅｙｈｏｌｅ  ｌｉｍｐｅｔ  ｈａｅｍｏｃｙａｎｉｎ）またはウシチログロブリン等のキャリアタンパク質に共有結合させたものを抗原とするのが望ましい。抗原とするペプチドは、ペプチド合成機で合成することができる。その抗原の投与は、１回目の投与の後１〜２週間おきに３〜１０回行う。各投与後、３〜７日目に眼底静脈叢より採血し、その血清が免疫に用いた抗原と反応することを酵素免疫測定法［酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ法）：医学書院刊  １９７６年、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ−Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｖｏｒａｔｏｒｙ（１９８８）］等で確認する。
【０１２７】
免疫に用いた抗原に対し、その血清が充分な抗体価を示した非ヒト哺乳動物より血清を取得し、その血清より、周知技術を用いてポリクローナル抗体を分離、精製することができる。モノクローナル抗体の作製もまた当該分野において周知である。抗体産性細胞の調製のために、まず、免疫に用いた本発明のポリペプチドの部分断片ポリペプチドに対し、その血清が十分な抗体価を示したラットを抗体産生細胞の供給源として使用し、骨髄腫細胞との融合により、ハイブリドーマの作製を行う。その後、酵素免疫測定法になどより、本発明のポリペプチドの部分断片ポリペプチドに特異的に反応するハイブリドーマを選択する。このようにして得たハイブリドーマから産生されたモノクローナル抗体は種々の目的に使用することができる。
【０１２８】
このような抗体は、例えば、本発明のポリペプチドの免疫学的検出方法に使用することができ、本発明の抗体を用いる本発明のポリペプチドの免疫学的検出法としては、マイクロタイタープレートを用いるＥＬＩＳＡ法・蛍光抗体法、ウェスタンブロット法、免疫組織染色法等を挙げることができる。
【０１２９】
また、本発明ポリペプチドの免疫学的定量方法にも使用することができる。本発明ポリペプチドの定量方法としては、液相中で本発明のポリペプチドと反応する抗体のうちエピトープが異なる２種類のモノクローナル抗体を用いたサンドイッチＥＬＩＳＡ法、１２６Ｉ等の放射性同位体で標識した本発明のタンパク質と本発明のタンパク質を認識する抗体とを用いるラジオイムノアッセイ法等を挙げることができる。
【０１３０】
本発明ポリペプチドのｍＲＮＡの定量方法もまた、当該分野において周知である。例えば、本発明のポリヌクレオチドあるいはＤＮＡより調製した上記オリゴヌクレオチドを用い、ノーザンハイブリダイゼーション法またはＰＣＲ法により、本発明のポリペプチドをコードするＤＮＡの発現量をｍＲＮＡレベルで定量することができる。このような技術は、当該分野において周知であり、本明細書において列挙した文献にも記載されている。
【０１３１】
当該分野で公知の任意の方法によって、これらのポリヌクレオチドが得られ得、そしてこれらポリヌクレオチドのヌクレオチド配列が、決定され得る。例えば、抗体のヌクレオチド配列が公知である場合、この抗体をコードするポリヌクレオチドは、化学的に合成されたオリゴヌクレオチドからアセンブルされ得（例えば、Ｋｕｔｍｅｉｅｒら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １７：２４２（１９９４）に記載されるように）、これは、手短に言えば、抗体をコードする配列の部分を含むオーバーラップするヌクレオチドの合成、それらのオリゴヌクレオチドのアニーリングおよび連結、ならびに次いでＰＣＲによるこの連結されたオリゴヌクレオチドの増幅を含む。
【０１３２】
抗体をコードするポリヌクレオチドは、適切な供給源由来の核酸から作製することができる。ある抗体をコードする核酸を含むクローンは入手不可能だが、その抗体分子の配列が既知である場合、免疫グロブリンをコードする核酸は、化学的に合成され得るか、あるいは適切な供給源（例えば、抗体ｃＤＮＡライブラリーまたは抗体を発現する任意の組織もしくは細胞（例えば、本発明の抗体の発現のために選択されたハイブリドーマ細胞）から生成されたｃＤＮＡライブラリー、またはそれから単離された核酸（好ましくはポリＡ＋ＲＮＡ））から、例えば、抗体をコードするｃＤＮＡライブラリーからのｃＤＮＡクローンを同定するために、その配列の３’末端および５’末端にハイブリダイズ可能な合成プライマーを使用するＰＣＲ増幅によって、またはその特定の遺伝子配列に特異的なオリゴヌクレオチドプローブを使用するクローニングによって得ることができる。ＰＣＲによって作製された増幅された核酸は、当該分野で周知の任意の方法を用いて、複製可能なクローニングベクターにクローニングされ得る。
【０１３３】
一旦、抗体のヌクレオチド配列および対応するアミノ酸配列が決定されると、抗体のヌクレオチド配列は、ヌクレオチド配列の操作について当該分野で周知の方法（例えば、組換えＤＮＡ技術、部位指向性変異誘発、ＰＣＲなど（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９９０，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，第２版、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹおよびＡｕｓｕｂｅｌら編、１９９８，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹに記載の技術を参照のこと。これらは両方がその全体において本明細書に参考として援用される。））を用いて操作され、例えば、アミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を生成するように異なるアミノ酸配列を有する抗体を作製し得る。
【０１３４】
特定の実施形態において、重鎖可変ドメインおよび／または軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、相補性決定領域（ＣＤＲ）の配列の同定のために、当該分野において周知の方法によって（例えば、配列超可変性の領域を決定するために、他の重鎖可変領域および軽鎖可変領域の既知のアミノ酸配列と比較することによって）調べられ得る。慣用的な組換えＤＮＡ技術を用いて、１つ以上のＣＤＲが、前述のようにフレームワーク領域内に（例えば、非ヒト抗体をヒト化するために、ヒトフレームワーク領域中に）挿入され得る。このフレームワーク領域は天然に存在し得るか、またはコンセンサスフレームワーク領域であり得、そして好ましくはヒトフレームワーク領域であり得る（例えば、列挙したヒトフレームワーク領域については、Ｃｈｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７８：４５７−４７９（１９９８）を参照のこと）。好ましくは、フレームワーク領域およびＣＤＲの組み合わせによって生成されたポリヌクレオチドは、本発明のポリペプチドに特異的に結合する抗体をコードする。好ましくは、上記に議論されるように、１つ以上のアミノ酸置換は、フレームワーク領域内で作製され得、そして好ましくは、そのアミノ酸置換は、抗体のその抗原への結合を改善する。さらに、このような方法は、１つ以上の鎖内ジスルフィド結合が欠如した抗体分子を生成するように、鎖内ジスルフィド結合に関与する１つ以上の可変領域のシステイン残基のアミノ酸置換または欠失を作製するために使用され得る。ポリヌクレオチドへの他の変更は、本発明によって、および当該分野の技術において包含される。
【０１３５】
さらに、適切な抗原特異性のマウス抗体分子由来の遺伝子を、適切な生物学的活性のヒト抗体分子由来の遺伝子と共にスプライシングさせることによって、「キメラ抗体」の産生のために開発された技術（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８１：８５１−８５５（１９８４）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：６０４−６０８（１９８４）；Ｔａｋｅｄａら、Ｎａｔｕｒｅ  ３１４：４５２−４５４（１９８５））が使用され得る。上記のように、キメラ抗体は、異なる部分が異なる動物種に由来する分子であり、このような分子は、マウスｍＡｂおよびヒト免疫グロブリンの定常領域由来の可変領域を有する（例えば、ヒト化抗体）。
【０１３６】
単鎖抗体を製造する場合、単鎖抗体の産生に関する記載された公知の技術（米国特許第４，９４６，７７８号；Ｂｉｒｄ、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２（１９８８）；Ｈｕｓｔｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３（１９８８）；およびＷａｒｄら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３４：５４４−５４（１９８９））が、利用され得る。単鎖抗体は、Ｆｖ領域の重鎖フラグメントおよび軽鎖フラグメントがアミノ酸架橋を介して連結されれることによって形成され、単鎖ポリペプチドを生じる。Ｅ．ｃｏｌｉにおける機能性Ｆｖフラグメントのアセンブリのための技術もまた、使用され得る（Ｓｋｅｒｒａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：１０３８−１０４１（１９８８））。
【０１３７】
（抗体を産生する方法）
本発明の抗体は、抗体の合成のために当該分野で公知の任意の方法によって、化学合成によって、または、好ましくは、組換え発現技術によって産生され得る。
【０１３８】
本発明の抗体、またはそのフラグメント、誘導体もしくはアナログ（例えば、本発明の抗体の重鎖または軽鎖）の組換え発現は、その抗体をコードするポリヌクレオチドを含有する発現ベクターの構築を必要とする。一旦、本発明の抗体分子または抗体の重鎖もしくは軽鎖、あるいはそれらの部分（好ましくは、重鎖または軽鎖の可変ドメインを含有する）をコードするポリヌクレオチドが得られると、抗体分子の産生のためのベクターは、当該分野で周知の技術を用いる組換えＤＮＡ技術によって生成され得る。従って、抗体をコードするヌクレオチド配列を含有するポリヌクレオチドの発現によってタンパク質を調製するための方法は、本明細書に記載される。当業者に周知の方法は、抗体をコードする配列ならびに適切な転写制御シグナルおよび翻訳制御シグナルを含有する発現ベクターの構築のために使用され得る。これらの方法としては、例えば、インビトロの組換えＤＮＡ技術、合成技術、およびインビボの遺伝子組換えが挙げられる。従って、本発明は、プロモーターに作動可能に連結された、本発明の抗体分子、あるいはその重鎖もしくは軽鎖、または重鎖もしくは軽鎖の可変ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む、複製可能なベクターを提供する。このようなベクターは、抗体分子の定常領域（例えば、ＰＣＴ公開  ＷＯ８６／０５８０７；ＰＣＴ公開  ＷＯ８９／０１０３６；および米国特許第５，１２２，４６４号を参照のこと）をコードするヌクレオチド配列を含み得、そしてこの抗体の可変ドメインは、重鎖または軽鎖の全体の発現のためにこのようなベクターにクローニングされ得る。
【０１３９】
この発現ベクターは、従来技術によって宿主細胞へと移入され、次いで、このトランスフェクトされた細胞は、本発明の抗体を産生するために、従来技術によって培養される。従って、本発明は、異種プロモーターに作動可能に連結された、本発明の抗体、あるいはその重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む宿主細胞を含む。二重鎖抗体の発現についての好ましい実施形態において、重鎖および軽鎖の両方をコードするベクターは、以下に詳述されるように、免疫グロブリン分子全体の発現のために宿主細胞中に同時発現され得る。
【０１４０】
（スクリーニング）
本明細書において「スクリーニング」とは、目的とするある特定の性質をもつ生物または物質などの標的を、特定の操作／評価方法で多数を含む集団の中から選抜することをいう。スクリーニングのために、本発明の因子（例えば、抗体）、ポリペプチドまたは核酸分子を使用することができる。スクリーニングは、インビトロ、インビボなど実在物質を用いた系を使用してもよく、インシリコ（コンピュータを用いた系）の系を用いて生成されたライブラリーを用いてもよい。本発明では、所望の活性を有するスクリーニングによって得られた化合物もまた、本発明の範囲内に包含されることが理解される。また本発明では、本発明の開示をもとに、コンピュータモデリングによる薬物が提供されることも企図される。
【０１４１】
（疾患）
本明細書において「軸索突起」および「神経突起」とは、交換可能に使用され、神経細胞の突起をいう。軸索突起は、刺激を受けたときに成長する。このことを軸索突起成長という。軸索突起が成長したかどうかは、最も長い軸索の長さを刺激前と刺激後に測定し、その比を確認することによって判定することができる。
【０１４２】
本明細書において「束形成」とは、軸索突起が複数集まって束状になったものをいう。束形成したかどうかは、アクチン免疫染色像および電子顕微鏡によるファイバー形成の観察を確認することによって判定することができる。
【０１４３】
本明細書において「軸索突起成長および／または束形成のレベル」は、上記判定アッセイの結果によって記述および比較することができる。そのようなレベルは、上述のアッセイのほか、例えば、軸索突起成長および／または束形成のレベルを測定することが可能な、当該分野において公知のいかなる技術を用いることによっても確認することができる。
【０１４４】
本明細書において「軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態」は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する生体の状態をいう。従って、そのような状態は、その生体が障害または疾患を有しているとそうでない（いわゆる健常状態を含む）とにかかわらず、そのレベルが影響を与えるすべての状態を包含することが意図される。従って、そのような状態には、例えば、精神状態なども包含され得る。
【０１４５】
本明細書において「軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する障害および／または疾患」とは、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する生体の障害および／または疾患をいい、心理的、生理的または解剖学的な構造または機能が喪失または異常を生じている状態および／またはその生体においてはっきりと指摘することができる徴候または症候群あるいは一致した解剖学的変化がある状態をいう。そのような疾患としては、例えば、統合失調症、精神遅滞、うつ病、てんかんが挙げられるがそれらに限定されない。
【０１４６】
（遺伝子治療）
特定の実施形態において、本発明の正常な遺伝子の核酸配列、抗体またはその機能的誘導体をコードする配列を含む核酸は、本発明のポリペプチドの異常な発現および／または活性に関連した疾患または障害を処置、阻害または予防するために、遺伝子治療の目的で投与される。遺伝子治療とは、発現されたか、または発現可能な核酸の、被験体への投与により行われる治療をいう。本発明のこの実施形態において、核酸は、それらにコードされるタンパク質を産生し、そのタンパク質は治療効果を媒介する。
【０１４７】
当該分野で利用可能な遺伝子治療のための任意の方法が、本発明に従って使用され得る。例示的な方法は、以下のとおりである。
【０１４８】
遺伝子治療の方法の一般的な概説については、Ｇｏｌｄｓｐｉｅｌら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  １２：４８８−５０５（１９９３）；ＷｕおよびＷｕ，Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ３：８７−９５（１９９１）；Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３２：５７３−５９６（１９９３）；Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６０：９２６−９３２（１９９３）；ならびにＭｏｒｇａｎおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１−２１７（１９９３）；Ｍａｙ，ＴＩＢＴＥＣＨ  １１（５）：１５５−２１５（１９９３）を参照のこと。遺伝子治療において使用される一般的に公知の組換えＤＮＡ技術は、Ａｕｓｕｂｅｌら（編），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９３）；およびＫｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ（１９９０）に記載される。
【０１４９】
（治療活性または予防活性の証明）
本発明の化合物または薬学的組成物は、好ましくは、ヒトでの使用の前にインビトロで、そして次いでインビボで、所望の治療活性または予防活性について試験される。例えば、化合物または薬学的組成物の、治療有用性または予防有用性を証明するためのインビトロアッセイとしては、細胞株または患者組織サンプルに対する化合物の効果が挙げられる。細胞株および／または組織サンプルに対する化合物または組成物の効果は、当業者に公知である技術（細胞溶解アッセイが挙げられるがこれらに限定されない）を利用して決定され得る。本発明に従って、特定の化合物の投与が示されるか否かを決定するために用いられ得るインビトロアッセイとしては、インビトロ細胞培養アッセイが挙げられ、このアッセイでは、患者組織サンプルが培養物において増殖し、そして化合物に曝されるか、そうでなければ化合物が投与され、そして、組織サンプルに対するそのような化合物の効果が観察される。
【０１５０】
（治療的／予防的な投与および組成物）
本発明は、被験体への有効量の本発明の化合物または薬学的組成物の投与による処置、阻害および予防の方法を提供する。好ましい局面において、化合物は実質的に精製されたものであり得る（例えば、その効果を制限するかまたは望ましくない副作用を生じる物質が実質的に存在しない状態が挙げられる）。
【０１５１】
本発明が対象とする動物は、神経系または類似の系を有するものであれば、どの生物（たとえば、脊椎動物、無脊椎動物）でもよい。好ましくは、脊椎動物（たとえば、メクラウナギ類、ヤツメウナギ類、軟骨魚類、硬骨魚類、両生類、爬虫類、鳥類、哺乳動物など）であり、より好ましくは、哺乳動物（例えば、単孔類、有袋類、貧歯類、皮翼類、翼手類、食肉類、食虫類、長鼻類、奇蹄類、偶蹄類、管歯類、有鱗類、海牛類、クジラ目、霊長類、齧歯類、ウサギ目など）であり得る。例示的な被験体としては、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌなどの動物が挙げられるがそれらに限定されない。さらに好ましくは、霊長類（たとえば、チンパンジー、ニホンザル、ヒト）が用いられる。最も好ましくはヒトが用いられる。
【０１５２】
本発明の核酸分子またはポリペプチドが医薬として使用される場合、そのような組成物は、薬学的に受容可能なキャリアをさらに含み得る。本発明の医薬に含まれる薬学的に受容可能なキャリアとしては、当該分野において公知の任意の物質が挙げられる。
【０１５３】
そのような適切な処方材料または薬学的に受容可能なキャリアとしては、抗酸化剤、保存剤、着色料、風味料、および希釈剤、乳化剤、懸濁化剤、溶媒、フィラー、増量剤、緩衝剤、送達ビヒクルおよび／または薬学的アジュバント挙げられるがそれらに限定されない。代表的には、本発明の医薬は、単離された多能性幹細胞、またはその改変体もしくは誘導体を、１つ以上の生理的に受容可能なキャリア、賦形剤または希釈剤とともに含む組成物の形態で投与される。例えば、適切なビヒクルは、注射用水、生理的溶液、または人工脳脊髄液であり得、これらには、非経口送達のための組成物に一般的な他の物質を補充することが可能である。
【０１５４】
本明細書で使用される受容可能なキャリア、賦形剤または安定化剤は、好ましくは、レシピエントに対して非毒性であり、そして好ましくは、使用される投薬量および濃度において不活性であり、好ましくは、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、または他の有機酸；アスコルビン酸、α−トコフェロール；低分子量ポリペプチド；タンパク質（例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン）；親水性ポリマー（例えば、ポリビニルピロリドン）；アミノ酸（例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリジン）；モノサッカリド、ジサッカリドおよび他の炭水化物（グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む）；キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）；糖アルコール（例えば、マンニトールまたはソルビトール）；塩形成対イオン（例えば、ナトリウム）；ならびに／あるいは非イオン性表面活性化剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ、プルロニック（ｐｌｕｒｏｎｉｃ）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ））などが挙げられるがそれらに限定されない。
【０１５５】
例示の適切なキャリアとしては、中性緩衝化生理食塩水、または血清アルブミンと混合された生理食塩水が挙げられる。好ましくは、その生成物は、適切な賦形剤（例えば、スクロース）を用いて凍結乾燥剤として処方される。他の標準的なキャリア、希釈剤および賦形剤は所望に応じて含まれ得る。他の例示的な組成物は、ｐＨ７．０−８．５のＴｒｉｓ緩衝剤またはｐＨ４．０−５．５の酢酸緩衝剤を含み、これらは、さらに、ソルビトールまたはその適切な代替物を含み得る。
【０１５６】
本発明の医薬は、経口的または非経口的に投与され得る。あるいは、本発明の医薬は、静脈内または皮下で投与され得る。全身投与されるとき、本発明において使用される医薬は、発熱物質を含まない、薬学的に受容可能な水溶液の形態であり得る。そのような薬学的に受容可能な組成物の調製は、ｐＨ、等張性、安定性などを考慮することにより、当業者は、容易に行うことができる。本明細書において、投与方法は、経口投与、非経口投与（例えば、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、皮内投与、粘膜投与、直腸内投与、膣内投与、患部への局所投与、皮膚投与など）であり得る。そのような投与のための処方物は、任意の製剤形態で提供され得る。そのような製剤形態としては、例えば、液剤、注射剤、徐放剤が挙げられる。
【０１５７】
本発明の医薬は、必要に応じて生理学的に受容可能なキャリア、賦型剤または安定化剤（日本薬局方第１４版またはその最新版、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０などを参照）と、所望の程度の純度を有する有効成分とを混合することによって、凍結乾燥されたケーキまたは水溶液の形態で調製され保存され得る。
【０１５８】
本発明の処置方法において使用される有効成分の量は、使用目的、対象疾患（種類、重篤度など）、患者の年齢、体重、性別、既往歴、有効成分の形態または種類などを考慮して、当業者が容易に決定することができる。本発明の処置方法を被験体（または患者）に対して施す頻度もまた、使用目的、対象疾患（種類、重篤度など）、患者の年齢、体重、性別、既往歴、および治療経過などを考慮して、当業者が容易に決定することができる。頻度としては、例えば、毎日−数ヶ月に１回（例えば、１週間に１回−１ヶ月に１回）の投与が挙げられる。１週間−１ヶ月に１回の投与を、経過を見ながら施すことが好ましい。
【０１５９】
本明細書において「指示書」は、本発明の医薬などを投与する方法または診断する方法などを医師、患者など投与を行う人、診断する人（患者本人であり得る）に対して記載したものである。この指示書は、本発明の診断薬、医薬などを投与する手順を指示する文言が記載されている。この指示書は、本発明が実施される国の監督官庁（例えば、日本であれば厚生労働省、米国であれば食品医薬品局（ＦＤＡ）など）が規定した様式に従って作成され、その監督官庁により承認を受けた旨が明記される。指示書は、いわゆる添付文書（ｐａｃｋａｇｅ  ｉｎｓｅｒｔ）であり、通常は紙媒体で提供されるが、それに限定されず、例えば、電子媒体（例えば、インターネットで提供されるホームページ（ウェブサイト）、電子メール）のような形態でも提供され得る。
【０１６０】
（ＤＩＳＣ１に関する詳細な説明）
本研究において、本発明者らは、酵母ツーハイブリッド研究によってＦＥＺ１をＤＩＳＣ１の相互作用パートナーとして同定した。ＦＥＺ１は、軸索突起成長および束形成に関与するＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ  ＵＮＣ−７６タンパク質の哺乳動物ホモログである（非特許文献１８、１９）。ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用は、ニューロン分化の間にＰＣ１２細胞においてアップレギュレートされた。さらに、神経突起成長が、ＤＩＳＣ１の過剰発現によって増強され、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用の阻害が、この増強された神経突起成長を妨害した。これらの結果は、ＤＩＳＣ１が、ＦＥＺ１とのその相互作用を介して神経突起伸長機構に関与することを示唆する。転座ブレークポイントのＣ末端下流を欠く短縮形態のＤＩＳＣ１が、ＦＥＺ１との相互作用について減少された能力を示したこと（図３ａ）に注意すべきである。なぜなら、この短縮ＤＩＳＣ１タンパク質の産生は、転座保有者において可能性があるからである（非特許文献１３）。
【０１６１】
スコットランド人家族において、転座は、いかなる身体の障害にも関与していなかった（非特許文献１４）。転座によるＤＩＳＣ１の破壊が、その体のいたるところでの発現にもかかわらず、選択的に精神病を引き起こす理由は不明である（非特許文献１３）が、脳に対して発現が制限されている相互作用パートナーが、この選択性を好都合に説明し得る。ＦＥＺ１の発現は、脳に対して高度に特異的であり（非特許文献１９）、そして上昇したレベルのＦＥＺ１発現が、胚性１８日目および生後７日目のラット脳のニューロンにおいて観察された（未公開データ）。線虫における研究において、新しく孵化したｕｎｃ−７６変異体幼生の重篤な欠損は、神経系発生におけるＵＮＣ−７６の重要性を示唆する（非特許文献１８）。発生段階におけるラット脳での増強されたＤＩＳＣ１発現（図１ｂ）と組合わせると、これらの知見は、ＦＥＺ１／ＤＩＳＣ１相互作用が、哺乳動物神経系の発達において重要な役割を果たすことを示す。
【０１６２】
近年の研究によって、統合失調症が神経発生の障害であるという信頼性のある証拠が提供された（非特許文献３、２２、２３）。海馬における細胞構造変化は、統合失調症において報告された種々の神経病理学的異常の間で顕著であった（非特許文献２４〜２６）。減少したニューロンサイズならびにシナプス前部マーカーおよび樹状細胞マーカーにおける変化は、統合失調症における海馬ニューロン回路の異常を示唆する（非特許文献２６）。これに関して、ＤＩＳＣ１の発現が、特に発生段階の海馬ニューロンにおいて豊富であった（図１ａ、ｂ）ことに注意すること。これは、海馬ニューロン回路の形成におけるＤＩＳＣ１の潜在的な関与を示唆する。これは、ＤＩＳＣ１の破壊が、神経系の異常な発生を与え得、精神病に対する罹病性を導くという可能性を高まらせる。
【０１６３】
ウエスタンブロット分析において、ＤＩＳＣ１に対して惹起された抗体は、ヒト細胞株由来の溶解物中で少なくとも２つのバンドを検出した（図２ａ）。１０５ｋのバンドは、ＤＩＳＣ１の推定サイズと一致した。過剰発現された７８ｋのタンパク質を、全長のＤＩＳＣ１  ｃＤＮＡで一過性にトランスフェクトした細胞からの溶解物中で検出したので、この小さい形態のＤＩＳＣ１は、翻訳後修飾から生じたものと考えられた。７８ｋタンパク質の起源に関してさらに調べる必要がある。近年の研究（非特許文献２７）は、ラット脳におけるＤＩＳＣ１の２つの形態の存在、および発生段階における全長形態のアップレギュレートされた発現を報告し、神経系の発生に関する全長形態の重要性を示唆する。
【０１６４】
ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１を含む全経路は、未だ不明であるが、これらの成分を、本発明者らの発見によって細胞骨格関連タンパク質として同定した。細胞骨格におけるＤＩＳＣ１の可能性のある関係もまた、近年の研究（非特許文献２７）および予備的な研究（非特許文献２８、２９）によって推定されている。指向された神経突起成長に必須であるアクチン細胞骨格中の調和した変化を調整するためのシグナル伝達タンパク質であるＲｈｏ  ＧＴＰａｓｅ（非特許文献２０、２１）は、ＤＩＳＣ１／ＦＥＺ１複合体の生物学的役割を描写するためのさらなる研究において、重要な分子であり得る。興味深いことに、発生中の神経系におけるアクチン細胞骨格の調節は、精神遅滞の病因に関与する（非特許文献３０）。変異した場合に、Ｘ連鎖精神遅滞の原因となる７つの遺伝子が同定されている（非特許文献３１）。これらの遺伝子のうちの３つが、ｏｌｉｇｏｐｈｒｅｎｉｎ−１（非特許文献３２）、ＤＫＡ３（Ａｌｌｅｎ  Ｋ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，１９９８，２０：２５−３０）、およびαＰＩＸ（Ｋｕｔｓｃｈｅ  Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２０００，２６：２４７−２５０）をコードする。これらは、Ｒｈｏ  ＧＴＰａｓｅと直接相互作用する。現在のところ、転座によるＤＩＳＣ１の破壊は、スコットランドからの１家族において見出されている。ＤＩＳＣ１の破壊は、統合失調症の小さな部分集団の病因となり得るが、ＤＩＳＣ１の病態生理学的役割の解明によって、統合失調症の全体的な病因が理解されることとなる。
【０１６５】
また、ＫＩＡＡ０８４４もまた、ＤＩＳＣ１を用いたツーハイブリッド法によって同定された分子であることから、神経伝達経路において役割を果たしていることが明らかになった。従って、ＫＩＡＡ０８４４もまた、ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１と同様、軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するためのマーカー、キット、方法に有用である。
【０１６６】
（好ましい実施形態の説明）
以下に本発明の好ましい実施形態を説明する。以下に提供される実施形態は、本発明のよりよい理解のために提供されるものであり、本発明の範囲は以下の記載に限定されるべきでないことが理解される。従って、当業者は、本明細書中の記載を参酌して、本発明の範囲内で適宜改変を行うことができることは明らかである。
【０１６７】
１つの局面において、本発明は、ＤＩＳＣ１をコードするポリヌクレオチドまたはそのフラグメントに対して特異的に相互作用する因子に関する。ここで、ＤＩＳＣ１は、代表的に、
（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
を含む。
【０１６８】
１つの好ましい実施形態において、上記（ｃ）における置換、付加および欠失の数は、限定され、例えば、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、１５以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下であることが好ましい。より少ない数の置換、付加および欠失が好ましいが、生物学的活性を保持する（好ましくは、ＤＩＳＣ１遺伝子産物と類似するかまたは実質的に同一の活性を有する）限り、多い数であってもよい。
【０１６９】
別の好ましい実施形態において、上記改変体ポリペプチドが有する生物学的活性としては、例えば、配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントに対して特異的な抗体との相互作用、ＦＥＺ１との相互作用などが挙げられるがそれらに限定されない。
【０１７０】
別の好ましい実施形態において、対立遺伝子変異体は、配列番号１に示す核酸配列と少なくとも９９％の相同性を有することが好ましい。
【０１７１】
上記種相同体は、その種の遺伝子配列データベースが存在する場合、そのデータベースに対して、本発明のＤＩＳＣ１をクエリ配列として検索することによって同定することができる。あるいは、本発明のＤＩＳＣ１の全部または一部をプローブまたはプライマーとして、その種の遺伝子ライブラリーをスクリーニングすることによって同定することができる。そのような同定方法は、当該分野において周知であり、本明細書において記載される文献にも記載されている。種相同体は、例えば、配列番号１に示す核酸配列と少なくとも約３０％の相同性を有することが好ましい。
【０１７２】
好ましい実施形態において、上記（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性は、少なくとも約８０％であり得、より好ましくは少なくとも約９０％であり得、さらに好ましくは少なくとも約９８％であり得、もっとも好ましくは少なくとも約９９％であり得る。
【０１７３】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される。
【０１７４】
好ましい実施形態では、本発明の因子は、核酸分子である。本発明の因子が核酸分子である場合、そのような核酸分子は、少なくとも８の連続するヌクレオチド長であり得る。本発明の核酸分子は、本発明の使用目的によってその適切なヌクレオチド長が変動し得る。より好ましくは、本発明の核酸分子は、少なくとも１０の連続するヌクレオチド長であり得、さらに好ましくは少なくとも１５の連続するヌクレオチド長であり得、なお好ましくは少なくとも２０の連続するヌクレオチド長であり得る。これらのヌクレオチド長の下限は、具体的に挙げた数字のほかに、それらの間の数（例えば、９、１１、１２、１３、１４、１６など）あるいは、それ以上の数（例えば、２１、２２、．．．３０、など）であってもよい。本発明の核酸分子は、目的とする用途（例えば、マーカー、プライマー、プローブ）として使用することができる限り、その上限の長さは、配列番号１に示す配列の全長であってもよく、それを超える長さであってもよい。あるいは、プライマーとして使用する場合は、通常少なくとも約８のヌクレオチド長であり得、好ましくは約１０ヌクレオチド長であり得る。プローブとして使用する場合は、通常少なくとも約１５ヌクレオチド長であり得、好ましくは約１７ヌクレオチド長であり得る。
【０１７５】
従って、１つの例示的な実施形態において、本発明の因子は、上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して相補的な配列またはそれに対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子であり得る。
【０１７６】
別の例示的な実施形態において、本発明の因子は、（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子であり得る。
【０１７７】
好ましい実施形態において、本発明の因子が特異的に相互作用するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、配列番号１のヌクレオチド１０９５〜２６１５をコードする範囲または配列番号２のアミノ酸３４８〜８５４位の範囲を含む。別の好ましい実施形態において、上記好ましい範囲は、配列番号１のヌクレオチド１０９５〜１８４４、ヌクレオチド１８４５〜２６１５、ヌクレオチド１０９５〜１９５２、ヌクレオチド１０９５〜１６５２、ヌクレオチド１６５３〜１９５２、ヌクレオチド１３９１〜１６５２およびヌクレオチド１３９１〜１９５２からなる群より選択される範囲をコードする範囲、あるいは配列番号２のアミノ酸３４８〜５９７位、アミノ酸５９８〜８５４位、アミノ酸３４８〜６３３位、アミノ酸３４８〜５３３位、アミノ酸５３４〜６３３位、アミノ酸４４６〜５３３位およびアミノ酸４４６〜６３３位からなる群より選択される範囲を含む。
【０１７８】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、標識されているかまたは標識され得るものであることが有利であり得る。そのように標識がされている場合、本発明の因子によって測定することができる種々の状態を直接および／または容易に測定することができる。そのような標識は、識別可能に標識される限り、どのような標識でもよく、例えば、蛍光標識、化学発光標識、放射能標識などが挙げられるがそれらに限定されない。あるいは、その因子が抗体などの免疫反応を利用して相互作用する場合、ビオチン−ストレプトアビジンのような免疫反応においてよく利用される系を用いてもよい。
【０１７９】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、ＦＥＺ１との結合レベルを測定するために使用される。
【０１８０】
別の局面において、本発明は、ＤＩＳＣ１ポリペプチドに特異的に相互作用する因子に関する。本明細書においてＤＩＳＣ１ポリペプチドは、代表的に、
（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、を含む。
【０１８１】
１つの好ましい実施形態において、上記（ｂ）における置換、付加および欠失の数は限定されていてもよく、例えば、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、１５以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下であることが好ましい。より少ない数の置換、付加および欠失が好ましいが、生物学的活性を保持する（好ましくは、ＤＩＳＣ１遺伝子産物と類似するかまたは実質的に同一の活性を有する）限り、多い数であってもよい。
【０１８２】
別の好ましい実施形態において、上記（ｃ）における対立遺伝子変異体は、配列番号２に示すアミノ酸配列と少なくとも９９％の相同性を有することが好ましい。
【０１８３】
別の好ましい実施形態において、上記種相同体は、本明細書中上述のように同定することができ、配列番号２に示すアミノ酸配列と少なくとも約３０％の相同性を有することが好ましい。
【０１８４】
別の好ましい実施形態において、上記（ｅ）における上記改変体ポリペプチドが有する生物学的活性としては、例えば、配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントに対して特異的な抗体との相互作用、ＦＥＺ１との相互作用などが挙げられるがそれらに限定されない。
【０１８５】
好ましい実施形態において、上記（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性は、少なくとも約８０％であり得、より好ましくは少なくとも約９０％であり得、さらに好ましくは少なくとも約９８％であり得、もっとも好ましくは少なくとも約９９％であり得る。
【０１８６】
本発明の因子が特異的に相互作用するポリペプチドは、通常、少なくとも３の連続するアミノ酸配列を有する。本発明のポリペプチドが有するアミノ酸長は、目的とする用途に適合する限り、どれだけ短くてもよいが、好ましくは、より長い配列が使用され得る。従って、好ましくは、少なくとも４アミノ酸長、より好ましくは５アミノ酸長、６アミノ酸長、７アミノ酸長、８アミノ酸長、９アミノ酸長、１０アミノ酸長であってもよい。さらに好ましくは少なくとも１５アミノ酸長であり得、なお好ましくは少なくとも２０アミノ酸長であり得る。これらのアミノ酸長の下限は、具体的に挙げた数字のほかに、それらの間の数（例えば、１１、１２、１３、１４、１６など）あるいは、それ以上の数（例えば、２１、２２、．．．３０、など）であってもよい。本発明のポリペプチドは、ある因子と相互作用することができる限り、その上限の長さは、配列番号２に示す配列の全長と同一であってもよく、それを超える長さであってもよい。
【０１８７】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される。より好ましくは、本発明の因子は、抗体またはその誘導体（例えば、単鎖抗体）である。従って、本発明の因子は、プローブとして使用することができる。
【０１８８】
好ましい実施形態において、本発明の因子が特異的に相互作用するポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸３４８〜８５４位の範囲を含む。別の好ましい実施形態において、上記好ましい範囲は、配列番号２のアミノ酸３４８〜５９７位、アミノ酸５９８〜８５４位、アミノ酸３４８〜６３３位、アミノ酸３４８〜５３３位、アミノ酸５３４〜６３３位、アミノ酸４４６〜５３３位およびアミノ酸４４６〜６３３位からなる群より選択される範囲を含む。
【０１８９】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、標識されているかまたは標識され得るものであることが有利であり得る。そのように標識がされている場合、本発明の因子によって測定することができる種々の状態を直接および／または容易に測定することができる。そのような標識は、識別可能に標識される限り、どのような標識でもよく、例えば、蛍光標識、化学発光標識、放射能標識などが挙げられるがそれらに限定されない。あるいは、その因子が抗体などの免疫反応を利用して相互作用する場合、ビオチン−ストレプトアビジンのような免疫反応においてよく利用される系を用いてもよい。
【０１９０】
好ましい実施形態において、本発明のこの因子は、ＦＥＺ１との結合レベルを測定するために使用される。
【０１９１】
別の局面において、本発明は、ＦＥＺ１をコードするポリヌクレオチドまたはそのフラグメントに対して特異的に相互作用する因子に関する。ここで、ＦＥＺ１は、代表的に、
（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
を含む。
【０１９２】
１つの好ましい実施形態において、上記（ｃ）における置換、付加および欠失の数は、限定され、例えば、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、１５以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下であることが好ましい。より少ない数の置換、付加および欠失が好ましいが、生物学的活性を保持する（好ましくは、ＦＥＺ１遺伝子産物と類似するかまたは実質的に同一の活性を有する）限り、多い数であってもよい。
【０１９３】
別の好ましい実施形態において、上記改変体ポリペプチドが有する生物学的活性としては、例えば、配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントに対して特異的な抗体との相互作用、ＦＥＺ１との相互作用などが挙げられるがそれらに限定されない。
【０１９４】
別の好ましい実施形態において、対立遺伝子変異体は、配列番号３に示す核酸配列と少なくとも９９％の相同性を有することが好ましい。
【０１９５】
上記種相同体は、その種の遺伝子配列データベースが存在する場合、そのデータベースに対して、本発明のＦＥＺ１をクエリ配列として検索することによって同定することができる。あるいは、本発明のＦＥＺ１の全部または一部をプローブまたはプライマーとして、その種の遺伝子ライブラリーをスクリーニングすることによって同定することができる。そのような同定方法は、当該分野において周知であり、本明細書において記載される文献にも記載されている。種相同体は、例えば、配列番号３に示す核酸配列と少なくとも約３０％の相同性を有することが好ましい。
【０１９６】
好ましい実施形態において、上記（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性は、少なくとも約８０％であり得、より好ましくは少なくとも約９０％であり得、さらに好ましくは少なくとも約９８％であり得、もっとも好ましくは少なくとも約９９％であり得る。
【０１９７】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される。
【０１９８】
好ましい実施形態では、本発明の因子は、核酸分子である。本発明の因子が核酸分子である場合、そのような核酸分子は、少なくとも８の連続するヌクレオチド長であり得る。本発明の核酸分子は、本発明の使用目的によってその適切なヌクレオチド長が変動し得る。より好ましくは、本発明の核酸分子は、少なくとも１０の連続するヌクレオチド長であり得、さらに好ましくは少なくとも１５の連続するヌクレオチド長であり得、なお好ましくは少なくとも２０の連続するヌクレオチド長であり得る。これらのヌクレオチド長の下限は、具体的に挙げた数字のほかに、それらの間の数（例えば、９、１１、１２、１３、１４、１６など）あるいは、それ以上の数（例えば、２１、２２、．．．３０、など）であってもよい。本発明の核酸分子は、目的とする用途（例えば、マーカー、プライマー、プローブなど）として使用することができる限り、その上限の長さは、配列番号３に示す配列の全長であってもよく、それを超える長さであってもよい。あるいは、プライマーとして使用する場合は、通常少なくとも約８のヌクレオチド長であり得、好ましくは約１０ヌクレオチド長であり得る。プローブとして使用する場合は、通常少なくとも約１５ヌクレオチド長であり得、好ましくは約１７ヌクレオチド長であり得る。
【０１９９】
従って、１つの例示的な実施形態において、本発明の因子は、上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して相補的な配列またはそれに対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子であり得る。
【０２００】
別の例示的な実施形態において、本発明の因子は、（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子であり得る。
【０２０１】
好ましい実施形態において、本発明の因子が特異的に相互作用するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、配列番号３のヌクレオチド４７８〜１２６９をコードする範囲または配列番号４のアミノ酸１２９〜３９２位の範囲を含む。別の好ましい実施形態において、上記好ましい範囲は、配列番号３のヌクレオチド８３２〜１２６９位をコードする範囲、あるいは配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２位の範囲を含む。
【０２０２】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、標識されているかまたは標識され得るものであることが有利であり得る。そのように標識がされている場合、本発明の因子によって測定することができる種々の状態を直接および／または容易に測定することができる。そのような標識は、識別可能に標識される限り、どのような標識でもよく、例えば、蛍光標識、化学発光標識、放射能標識などが挙げられるがそれらに限定されない。あるいは、その因子が抗体などの免疫反応を利用して相互作用する場合、ビオチン−ストレプトアビジンのような免疫反応においてよく利用される系を用いてもよい。
【０２０３】
好ましい実施形態において、本発明のこの因子は、ＤＩＳＣ１との結合レベルを測定するために使用される。
【０２０４】
別の局面において、本発明は、ＦＥＺ１ポリペプチドに特異的に相互作用する因子に関する。本明細書においてＦＥＺ１ポリペプチドは、代表的に、
（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、を含む。
【０２０５】
１つの好ましい実施形態において、上記（ｂ）における置換、付加および欠失の数は限定されていてもよく、例えば、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、１５以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下であることが好ましい。より少ない数の置換、付加および欠失が好ましいが、生物学的活性を保持する（好ましくは、ＦＥＺ１遺伝子産物と類似するかまたは実質的に同一の活性を有する）限り、多い数であってもよい。
【０２０６】
別の好ましい実施形態において、上記（ｃ）における対立遺伝子変異体は、配列番号４に示すアミノ酸配列と少なくとも９９％の相同性を有することが好ましい。
【０２０７】
別の好ましい実施形態において、上記種相同体は、本明細書中上述のように同定することができ、配列番号４に示すアミノ酸配列と少なくとも約３０％の相同性を有することが好ましい。
【０２０８】
別の好ましい実施形態において、上記（ｅ）における上記改変体ポリペプチドが有する生物学的活性としては、例えば、配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントに対して特異的な抗体との相互作用、ＤＩＳＣ１との相互作用などが挙げられるがそれらに限定されない。
【０２０９】
好ましい実施形態において、上記（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリヌクレオチドに対する同一性は、少なくとも約８０％であり得、より好ましくは少なくとも約９０％であり得、さらに好ましくは少なくとも約９８％であり得、もっとも好ましくは少なくとも約９９％であり得る。
【０２１０】
本発明の因子が特異的に相互作用するポリペプチドは、通常、少なくとも３の連続するアミノ酸配列を有する。本発明のポリペプチドが有するアミノ酸長は、目的とする用途に適合する限り、どれだけ短くてもよいが、好ましくは、より長い配列が使用され得る。従って、好ましくは、少なくとも４アミノ酸長、より好ましくは５アミノ酸長、６アミノ酸長、７アミノ酸長、８アミノ酸長、９アミノ酸長、１０アミノ酸長であってもよい。さらに好ましくは少なくとも１５アミノ酸長であり得、なお好ましくは少なくとも２０アミノ酸長であり得る。これらのアミノ酸長の下限は、具体的に挙げた数字のほかに、それらの間の数（例えば、１１、１２、１３、１４、１６など）あるいは、それ以上の数（例えば、２１、２２、．．．３０、など）であってもよい。本発明のポリペプチドは、ある因子と相互作用することができる限り、その上限の長さは、配列番号４に示す配列の全長と同一であってもよく、それを超える長さであってもよい。
【０２１１】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される。より好ましくは、本発明の因子は、抗体またはその誘導体（例えば、単鎖抗体）である。従って、本発明の因子は、プローブとして使用することができる。
【０２１２】
好ましい実施形態において、本発明の因子が特異的に相互作用するポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸１２９〜３９２位の範囲を含む。別の好ましい実施形態において、上記好ましい範囲は、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２位の範囲を含む。
【０２１３】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、標識されているかまたは標識され得るものであることが有利であり得る。そのように標識がされている場合、本発明の因子によって測定することができる種々の状態を直接および／または容易に測定することができる。そのような標識は、識別可能に標識される限り、どのような標識でもよく、例えば、蛍光標識、化学発光標識、放射能標識などが挙げられるがそれらに限定されない。あるいは、その因子が抗体などの免疫反応を利用して相互作用する場合、ビオチン−ストレプトアビジンのような免疫反応においてよく利用される系を用いてもよい。
【０２１４】
好ましい実施形態において、本発明のこの因子は、ＤＩＳＣ１との結合レベルを測定するために使用される。
【０２１５】
別の局面において、本発明は、ＫＩＡＡ０８４４をコードするポリヌクレオチドまたはそのフラグメントに対して特異的に相互作用する因子に関する。ここで、ＫＩＡＡ０８４４は、代表的に、
（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
を含む。
【０２１６】
１つの好ましい実施形態において、上記（ｃ）における置換、付加および欠失の数は、限定され、例えば、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、１５以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下であることが好ましい。より少ない数の置換、付加および欠失が好ましいが、生物学的活性を保持する（好ましくは、ＫＩＡＡ０８４４遺伝子産物と類似するかまたは実質的に同一の活性を有する）限り、多い数であってもよい。
【０２１７】
別の好ましい実施形態において、上記改変体ポリペプチドが有する生物学的活性としては、例えば、配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントに対して特異的な抗体との相互作用、ＫＩＡＡ０８４４との相互作用などが挙げられるがそれらに限定されない。
【０２１８】
別の好ましい実施形態において、対立遺伝子変異体は、配列番号１３に示す核酸配列と少なくとも９９％の相同性を有することが好ましい。
【０２１９】
上記種相同体は、その種の遺伝子配列データベースが存在する場合、そのデータベースに対して、本発明のＫＩＡＡ０８４４をクエリ配列として検索することによって同定することができる。あるいは、本発明のＫＩＡＡ０８４４の全部または一部をプローブまたはプライマーとして、その種の遺伝子ライブラリーをスクリーニングすることによって同定することができる。そのような同定方法は、当該分野において周知であり、本明細書において記載される文献にも記載されている。種相同体は、例えば、配列番号１３に示す核酸配列と少なくとも約３０％の相同性を有することが好ましい。
【０２２０】
好ましい実施形態において、上記（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性は、少なくとも約８０％であり得、より好ましくは少なくとも約９０％であり得、さらに好ましくは少なくとも約９８％であり得、もっとも好ましくは少なくとも約９９％であり得る。
【０２２１】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される。
【０２２２】
好ましい実施形態では、本発明の因子は、核酸分子である。本発明の因子が核酸分子である場合、そのような核酸分子は、少なくとも８の連続するヌクレオチド長であり得る。本発明の核酸分子は、本発明の使用目的によってその適切なヌクレオチド長が変動し得る。より好ましくは、本発明の核酸分子は、少なくとも１０の連続するヌクレオチド長であり得、さらに好ましくは少なくとも１５の連続するヌクレオチド長であり得、なお好ましくは少なくとも２０の連続するヌクレオチド長であり得る。これらのヌクレオチド長の下限は、具体的に挙げた数字のほかに、それらの間の数（例えば、９、１１、１２、１３、１４、１６など）あるいは、それ以上の数（例えば、２１、２２、．．．３０、など）であってもよい。本発明の核酸分子は、目的とする用途（例えば、マーカー、プライマー、プローブなど）として使用することができる限り、その上限の長さは、配列番号１３に示す配列の全長であってもよく、それを超える長さであってもよい。あるいは、プライマーとして使用する場合は、通常少なくとも約８のヌクレオチド長であり得、好ましくは約１０ヌクレオチド長であり得る。プローブとして使用する場合は、通常少なくとも約１５ヌクレオチド長であり得、好ましくは約１７ヌクレオチド長であり得る。
【０２２３】
従って、１つの例示的な実施形態において、本発明の因子は、上記（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対して相補的な配列またはそれに対して少なくとも７０％の同一性を有する配列を有する核酸分子であり得る。
【０２２４】
別の例示的な実施形態において、本発明の因子は、（ａ）〜（ｇ）のいずれかのポリヌクレオチドの核酸配列に対してストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子であり得る。
【０２２５】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、標識されているかまたは標識され得るものであることが有利であり得る。そのように標識がされている場合、本発明の因子によって測定することができる種々の状態を直接および／または容易に測定することができる。そのような標識は、識別可能に標識される限り、どのような標識でもよく、例えば、蛍光標識、化学発光標識、放射能標識などが挙げられるがそれらに限定されない。あるいは、その因子が抗体などの免疫反応を利用して相互作用する場合、ビオチン−ストレプトアビジンのような免疫反応においてよく利用される系を用いてもよい。
【０２２６】
好ましい実施形態において、本発明のこの因子は、ＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１との結合レベルを測定するために使用される。
【０２２７】
別の局面において、本発明は、ＫＩＡＡ０８４４ポリペプチドに特異的に相互作用する因子に関する。本明細書においてＫＩＡＡ０８４４ポリペプチドは、代表的に、
（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、を含む。
【０２２８】
１つの好ましい実施形態において、上記（ｂ）における置換、付加および欠失の数は限定されていてもよく、例えば、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、１５以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下であることが好ましい。より少ない数の置換、付加および欠失が好ましいが、生物学的活性を保持する（好ましくは、ＫＩＡＡ０８４４遺伝子産物と類似するかまたは実質的に同一の活性を有する）限り、多い数であってもよい。
【０２２９】
別の好ましい実施形態において、上記（ｃ）における対立遺伝子変異体は、配列番号１４に示すアミノ酸配列と少なくとも９９％の相同性を有することが好ましい。
【０２３０】
別の好ましい実施形態において、上記（ｅ）における上記改変体ポリペプチドが有する生物学的活性としては、例えば、配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントに対して特異的な抗体との相互作用、ＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１との相互作用などが挙げられるがそれらに限定されない。
【０２３１】
好ましい実施形態において、上記（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性は、少なくとも約８０％であり得、より好ましくは少なくとも約９０％であり得、さらに好ましくは少なくとも約９８％であり得、もっとも好ましくは少なくとも約９９％であり得る。
【０２３２】
本発明の因子が特異的に相互作用するポリペプチドは、通常、少なくとも３の連続するアミノ酸配列を有する。本発明のポリペプチドが有するアミノ酸長は、目的とする用途に適合する限り、どれだけ短くてもよいが、好ましくは、より長い配列が使用され得る。従って、好ましくは、少なくとも４アミノ酸長、より好ましくは５アミノ酸長、６アミノ酸長、７アミノ酸長、８アミノ酸長、９アミノ酸長、１０アミノ酸長であってもよい。さらに好ましくは少なくとも１５アミノ酸長であり得、なお好ましくは少なくとも２０アミノ酸長であり得る。これらのアミノ酸長の下限は、具体的に挙げた数字のほかに、それらの間の数（例えば、１１、１２、１３、１４、１６など）あるいは、それ以上の数（例えば、２１、２２、．．．３０、など）であってもよい。本発明のポリペプチドは、ある因子と相互作用することができる限り、その上限の長さは、配列番号１４に示す配列の全長と同一であってもよく、それを超える長さであってもよい。
【０２３３】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、核酸分子、ポリペプチド、脂質、糖鎖、有機低分子およびそれらの複合分子からなる群より選択される。より好ましくは、本発明の因子は、抗体またはその誘導体（例えば、単鎖抗体）である。従って、本発明の因子は、プローブとして使用することができる。
【０２３４】
好ましい実施形態において、本発明の因子は、標識されているかまたは標識され得るものであることが有利であり得る。そのように標識がされている場合、本発明の因子によって測定することができる種々の状態を直接および／または容易に測定することができる。そのような標識は、識別可能に標識される限り、どのような標識でもよく、例えば、蛍光標識、化学発光標識、放射能標識などが挙げられるがそれらに限定されない。あるいは、その因子が抗体などの免疫反応を利用して相互作用する場合、ビオチン−ストレプトアビジンのような免疫反応においてよく利用される系を用いてもよい。
【０２３５】
好ましい実施形態において、本発明のこの因子は、ＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１との結合レベルを測定するために使用される。
【０２３６】
別の局面において、本発明は、ＦＥＺ１またはＫＩＡＡ０８４４の機能を判定するための組成物を提供する。ここで、この組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、を含む。この組成物において含まれる因子は、本明細書において記載されるどの形態をとってもよい。
【０２３７】
別の局面において、本発明は、ＤＩＳＣ１またはＫＩＡＡ０８４４の機能を判定するための組成物を提供する。この組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、を含む。
【０２３８】
この組成物において含まれる因子は、本明細書において記載されるどの形態をとってもよい。
【０２３９】
別の局面において、本発明は、ＦＥＺ１またはＤＩＳＣ１の機能を判定するための組成物を提供する。この組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、
を含む、組成物。
【０２４０】
この組成物において含まれる因子は、本明細書において記載されるどの形態をとってもよい。
【０２４１】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するための組成物を提供する。この組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号２に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；
（Ｂ）（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号２に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子；
（Ｃ）（ａ）配列番号３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｄ）（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、を含む。
【０２４２】
この組成物において含まれる因子は、本明細書において記載されるどの形態をとってもよい。
【０２４３】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベル、あるいは該レベルに関連する状態、障害または疾患を判定するための組成物を提供する。この組成物は、
（Ａ）（ａ）配列番号１３に記載の塩基配列またはそのフラグメント配列を有するポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有する改変体ポリペプチドまたはそのフラグメントをコードするポリヌクレオチドであって、この配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、この改変体ポリヌクレオチドが生物学的活性を有する、ポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体である、ポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドの種相同体をコードする、ポリヌクレオチド；
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェント条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｇ）（ａ）〜（ｅ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列からなり、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
と特異的に相互作用する、
因子；および／または
（Ｂ）（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドまたはそのフラグメントであって、この配列において、１以上のアミノ酸が置換、付加および欠失からなる群より選択される１つの変異を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号１３に記載の塩基配列のスプライス変異体または対立遺伝子変異体によってコードされる、ポリペプチド；
（ｄ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列の種相同体である、ポリペプチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｄ）のいずれか１つのポリペプチドに対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、
ポリペプチドに対して特異的に相互作用する、因子、を含む。
【０２４４】
この組成物に含まれる因子は、本明細書において記載されるどの形態をとってもよい。
【０２４５】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法を提供する。この方法は、（ａ）被験体に由来するサンプル中のＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；および（ｂ）該結合を、正常レベルの結合と比較する工程であって、該測定された結合が該正常レベルの結合より低い場合、軸索突起成長および／または束形成のレベルは正常より劣っていることを示す、工程、を包含する。
【０２４６】
別の好ましい実施形態において、上記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患は、統合失調症、精神遅滞、うつ病、てんかんからなる群より選択される。
【０２４７】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法を提供する。この方法は、（ａ）被験体に由来するサンプル中のＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つとの間の結合を測定する工程；および（ｂ）該結合を、正常レベルの結合と比較する工程であって、該測定された結合が該正常レベルの結合より低い場合、軸索突起成長および／または束形成のレベルは正常より劣っていることを示す、工程、を包含する。ここで、ＤＩＳＣ１、ＦＥＺ１およびＫＩＡＡ０８４４は、本明細書において詳述されたものであれば、どのようなものでもよいが、好ましくは、天然に存在するもの（すなわち、生体内にあるもの）である。そのようなサンプルは、ＤＩＳＣ１、ＦＥＺ１およびＫＩＡＡ０８４４のすべてまたは任意の複合体を測定可能なレベルで含むものであれば、どのようなものを用いることができ、例えば、血液、尿、リンパ液、髄液、神経細胞、神経組織、生検サンプルなどが挙げられるがそれらに限定されない。好ましくは、神経細胞を含むサンプルが使用され得る。サンプルの調製方法は公知の技術を用いることができる。そのような調製方法としては、例えば、被験体から上述のサンプルを抽出または摘出したものをそのまま利用するかあるいはそれを緩衝液または培養液中に懸濁することが挙げられるがそれらに限定されない。結合の比較もまた、当該分野において周知の技術を用いて実施することができる。そのような技術としては、例えば、免疫沈降法、プルダウンアッセイ法、免疫染色法による共局在の証明が挙げられるがそれらに限定されない。本発明のこの方法では、測定された結合が正常レベルの結合より低い場合、軸索突起成長および／または束形成のレベルは正常より劣っていることの指標となる。このようなことは、本発明より前には明らかではなかったことであり、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルを測定するのに正確かつ／または簡便な方法を提供するといえる。ここで使用される正常レベルは、異常な軸索突起成長および／または束形成のレベルを示していない被験体のものが使用される。
【０２４８】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法を提供する。この方法は、（ａ）軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つとの間の結合を測定する工程；（ｂ）正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つとの間の結合を測定する工程；および（ｃ）該（ａ）の結合レベルと該（ｂ）の結合レベルとを比較する工程を包含する。ここで、該（ａ）の結合レベルが該（ｂ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態の異常、障害または疾患を有すると診断される。
【０２４９】
ここで、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体ならびに正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つとの間の結合の測定は、サンプルを抽出して行ってもよいし、体内を直接測定してもよい。体内で直接測定する場合、例えば、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれかに特異的に相互作用する因子を、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つにおける互いの結合部位（特に、配列番号２のアミノ酸３４８〜８５４位、アミノ酸３４８〜５９７位、アミノ酸５９８〜８５４位、アミノ酸３４８〜６３３位、アミノ酸３４８〜５３３位、アミノ酸５３４〜６３３位、アミノ酸４４６〜５３３位およびアミノ酸４４６〜６３３位からなる群より選択される範囲の部位、ならびに配列番号４のアミノ酸１２９〜３９２およびアミノ酸２４７〜３９２からなる群より選択される範囲の部位）と相互作用するかどうかを判定することにより測定することができる。そのような場合、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つにおいて互いに結合する部位以外の部分に対して特異的に相互作用する因子を用いてネガティブコントロールとすることができる。そのような場合、使用される因子は、体外から測定可能なもの（例えば、放射能標識、磁気共鳴に反応する標識）などに連結されていることが好ましい。
【０２５０】
好ましい実施形態において、本発明の診断方法では、統合失調症、精神遅滞、うつ病、てんかんを診断することができる。
【０２５１】
好ましくは、本発明の診断方法で使用される因子は、配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体であり得る。
【０２５２】
別の好ましい実施形態では、本発明の診断方法で使用される因子は、配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントに対する抗体であり得る。これらの抗体は両方が用いられてもよい。
【０２５３】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患に関連する遺伝子変異を検出する方法に関する。この方法は、サンプル中のＤＩＳＣ１遺伝子および／またはＦＥＺ１遺伝子および／またはＫＩＡＡ０８４４遺伝子のポリヌクレオチド配列中の変異を検出する工程を包含する。
【０２５４】
好ましくは、変異は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患と連鎖する。ここで、変異を検出する技術は、当該分野において周知であり、どのような技術を用いてもよい。例えば、ＤＮＡチップを用いた変異検出法が挙げられるがそれらに限定されない。ＤＮＡアレイについては、（秀潤社編、細胞工学別冊「ＤＮＡマイクロアレイと最新ＰＣＲ法」）に広く概説されている。
【０２５５】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するためのキットを提供する。このキットは、（ａ）本発明の組成物；ならびに（ｂ）指示書を備える。この指示書は、（ｉ）本発明の組成物を用いて、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つとの間の結合を測定すること；（ｉｉ）該組成物を用いて、正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つとの間の結合を測定すること；および（ｉｉｉ）該（ｉ）の結合レベルと該（ｉｉ）の結合レベルとを比較することを指示する。この方法では、該（ｉ）の結合レベルが該（ｉｉ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を有すると診断される。
【０２５６】
上述のＤＩＳＣ１、ＦＥＺ１、ＫＩＡＡ０８４４などは、本明細書において記載されるどの形態であってもよい。上述のＤＩＳＣ１とＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４のすべてまたはいずれか２つの結合を測定する方法もまた、当該分野において周知であり、本明細書において他の場所に記載されるとおり、種々の方法が使用され得る。本発明のキットにおいて提供される指示書は、指示を伝えることができる限り、どのような形態をとってもよく、紙、コンピュータ読み取り可能な記録媒体（例えば、フレキシブルディスク、ＣＤ−Ｒ）、電子メール、ウェブサイトなどであり得る。
【０２５７】
好ましい実施形態において、本発明は、被験体における前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットを提供する。このキットは、（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、  該プライマーは、それぞれ：（ｉ）配列番号１に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および（ｉｉ）配列番号２に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに（ｂ）該被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号１に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、を備える。
【０２５８】
この場合の好ましい実施形態において、検出される核酸配列は、配列番号１のヌクレオチド５４〜２６１５であり得る。
【０２５９】
別の好ましい実施形態において、本発明は、被験体における前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットを提供する。このキットは、（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、  該プライマーは、それぞれ：（ｉ）配列番号１３に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および（ｉｉ）配列番号１４に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに（ｂ）該被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号１３に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、を備える。
【０２６０】
別の好ましい実施形態において、本発明は、被験体における前記軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットを提供する。このキットは、以下：（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、該プライマーは、それぞれ：（ｉ）配列番号３に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および（ｉｉ）配列番号４に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに（ｂ）該被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号３に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書を備える。
【０２６１】
この場合の好ましい実施形態において、検出される核酸配列は、配列番号３のヌクレオチド９４〜１２６９であり得る。
【０２６２】
これら上記２つの本発明において、プライマーを用いて増幅反応を行い、増幅産物の配列を配列決定することによって変異を検出することができる。配列決定は、ゲルまたはキャピラリー電気泳動を利用する方法（例えば、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから市販される配列決定機を利用する）、あるいはＤＮＡチップを用いた変異の検出方法を適用することができるがそれらに限定されない。
【０２６３】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を調節する因子を同定するための方法を提供する。この方法は、（ａ）配列番号２に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第１のポリペプチドまたはそのフラグメントおよび配列番号４に少なくとも７０％相同性であるアミノ酸配列を有する第２のポリペプチドまたはそのフラグメントを、試験因子の存在下で接触させる工程、および（ｂ）該第１のポリペプチドと該第２のポリペプチドとの間の結合レベルを、該試験因子の非存在下における結合レベルと比較する工程、を包含する。この方法では、該試験因子の非存在下における結合と比較して、試験因子の存在下における減少した結合が、該試験因子は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患の負の調節因子であることを示し、そして試験因子の存在下における増大した結合が、該試験因子は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患の正の調節因子であることを示す。
【０２６４】
好ましくは、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するための方法であって、該方法は、
（ａ）軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；
（ｂ）正常な被験体におけるＤＩＳＣ１またはＦＥＺ１とＫＩＡＡ０８４４との間の結合を測定する工程；および
（ｃ）該（ａ）の結合レベルと該（ｂ）の結合レベルとを比較する工程
を包含し、
ここで、該（ａ）の結合レベルが該（ｂ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態の異常、障害または疾患を有すると診断される、方法を提供する。
【０２６５】
このようなスクリーニングの方法は、当該分野において周知であり、例えば、そのようなスクリーニングは、マイクロタイタープレート、ＤＮＡまたはタンパク質などの生体分子アレイまたはチップを用いて行うことができる。スクリーニングの試験因子を含む対象としては、例えば、遺伝子のライブラリー、コンビナトリアルライブラリーで合成した化合物ライブラリーなどが挙げられるがそれらに限定されない。
【０２６６】
したがって、好ましい実施形態では、本発明は、統合失調症、精神遅滞、うつ病、てんかんのような疾患の調節因子を同定する方法を提供する。このような調節因子は、それぞれの疾患の医薬またはそのリード化合物として用いることができる。そのような調節因子ならびにその調節因子を含む医薬およびそれを利用する治療法もまた、本発明の範囲内にあることが意図される。
【０２６７】
したがって、本発明では、本発明の開示をもとに、コンピュータモデリングによる薬物が提供されることも企図される。
【０２６８】
本発明は、他の実施形態において、本発明の化合物に対する調節活性についての有効性のスクリーニングの道具として、コンピュータによる定量的構造活性相関（ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ＝ＱＳＡＲ）モデル化技術を使用して得られる化合物を包含する。ここで、コンピューター技術は、いくつかのコンピュータによって作成した基質鋳型、ファーマコフォア、ならびに本発明の活性部位の相同モデルの作製などを包含する。一般に、インビトロで得られたデータから、ある物質に対する相互作用物質の通常の特性基をモデル化することに対する方法は、最近ＣＡＴＡＬＹＳＴＴＭ  ファーマコフォア法（Ｅｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔｉｃｓ，９：４７７〜４８９，１９９９；Ｅｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．＆  Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２８８：２１〜２９，１９９９；Ｅｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．＆  Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２９０：４２９〜４３８，１９９９；Ｅｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．＆  Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２９１：４２４〜４３３，１９９９）および比較分子電界分析（ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｆｉｅｌｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ；ＣｏＭＦＡ）（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ＆  Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ，２４：１〜６，１９９６）などを使用して示されている。本発明において、コンピュータモデリングは、分子モデル化ソフトウェア（例えば、ＣＡＴＡＬＹＳＴＴＭバージョン４（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）など）を使用して行われ得る。
【０２６９】
活性部位に対する化合物のフィッティングは、当該分野で公知の種々のコンピュータモデリング技術のいずれかを使用してで行うことができる。視覚による検査および活性部位に対する化合物のマニュアルによる操作は、ＱＵＡＮＴＡ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ，１９９２）、ＳＹＢＹＬ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｔｒｉｐｏｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，１９９２）、ＡＭＢＥＲ（Ｗｅｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０６：７６５−７８４，１９８４）、ＣＨＡＲＭＭ（Ｂｒｏｏｋｓ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｃｏｍｐ．Ｃｈｅｍ．，４：１８７〜２１７，１９８３）などのようなプログラムを使用して行うことができる。これに加え、ＣＨＡＲＭＭ、ＡＭＢＥＲなどのような標準的な力の場を使用してエネルギーの最小化を行うこともできる。他のさらに特殊化されたコンピュータモデリングは、ＧＲＩＤ（Ｇｏｏｄｆｏｒｄ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２８：８４９〜８５７，１９８５）、ＭＣＳＳ（Ｍｉｒａｎｋｅｒ  ａｎｄ  Ｋａｒｐｌｕｓ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１１：２９〜３４，１９９１）、ＡＵＴＯＤＯＣＫ（Ｇｏｏｄｓｅｌｌ  ａｎｄ  Ｏｌｓｅｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，８：１９５〜２０２，１９９０）、ＤＯＣＫ（Ｋｕｎｔｚ  ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１６１：２６９〜２８８，（１９８２））などを含む。さらなる構造の化合物は、空白の活性部位、既知の低分子化合物における活性部位などに、ＬＵＤＩ（Ｂｏｈｍ，Ｊ．Ｃｏｍｐ．Ａｉｄ．Ｍｏｌｅｃ．Ｄｅｓｉｇｎ，６：６１〜７８，１９９２）、ＬＥＧＥＮＤ（Ｎｉｓｈｉｂａｔａ  ａｎｄ  Ｉｔａｉ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４７：８９８５，１９９１）、ＬｅａｐＦｒｏｇ（Ｔｒｉｐｏｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）などのようなコンピュータープログラムを使用して新規に構築することもできる。このようなモデリングは、当該分野において周知慣用されており、当業者は、本明細書の開示に従って、適宜本発明の範囲に入る化合物を設計することができる。
【０２７０】
好ましい実施形態において、第１のポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸４４６〜５９７を含む。
【０２７１】
別の好ましい実施形態において、第２のポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２を含む。
【０２７２】
さらに好ましい実施形態において、第１のポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸４４６〜５９７を含み、かつ、第２のポリペプチドは、配列番号４のアミノ酸２４７〜３９２を含む。
【０２７３】
好ましい実施形態において、本発明における上記ポリペプチドを接触させる工程は、本発明のポリペプチドを発現する細胞を接触させることを包含する。そのような接触方法はどのような方法を用いてもよく、例えば、ポリペプチドを発現する細胞を含む調製物と、接触させるべき対象を含む調製物とを混合する方法が挙げられるがそれに限定されない。
【０２７４】
別の局面において、本発明はまた、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を処置または予防する方法を提供する。この方法は、本発明の方法によって同定された調節因子を含む薬学的組成物を被験体に投与する工程を包含する。したがって、好ましい実施形態では、本発明は、統合失調症、精神遅滞、うつ病、てんかんの処置または予防のための方法を提供する。
【０２７５】
別の局面において、本発明は、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を診断するためのキットを提供する。このキットは、
（ａ）本発明のＫＩＡＡ０８４４に関する組成物；ならびに
（ｂ）指示書、
を備える。この指示書は、（ｉ）該組成物を用いて、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患について診断されるべき被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；（ｉｉ）該組成物を用いて、正常な被験体におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の結合を測定すること；および（ｉｉｉ）該（ｉ）の結合レベルと該（ｉｉ）の結合レベルとを比較することを指示し、ここで、該（ｉ）の結合レベルが該（ｉｉ）の結合レベルよりも高いかまたは低い場合、該被験体は軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を有すると診断される。
【０２７６】
別の局面において、被験体における軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患を検出するためのキットを提供する。このキットは、以下：
（ａ）少なくとも２つの連続する少なくとも１０ヌクレオチド長のプライマーであって、
該プライマーは、それぞれ：
（ｉ）配列番号１３に記載のポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチド；および
（ｉｉ）配列番号１４に記載のアミノ酸をコードするポリヌクレオチドに少なくとも７０％相同性である、ポリヌクレオチドの配列内の異なる位置にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、プライマー；ならびに
（ｂ）該被験体由来のサンプル中の核酸配列を（ａ）に記載のプライマーを用いて検出し、配列番号１３に記載のポリヌクレオチド中の変異を検出することを指示する指示書、
を備える。
【０２７７】
統合失調症、精神遅滞などの精神疾患は、根本的な治療が困難といわれてきた。しかし、本発明の上述のような効果によって、従来では不可能とされていた根本治療が統合失調症、精神遅滞などでも可能になることが明らかとなった。したがって、本発明は、従来の診断薬でも医薬でも達成不可能であった有用性を有するといえる。
【０２７８】
以下に、実施例に基づいて本発明を説明するが、以下の実施例は、例示の目的のみに提供される。従って、本発明の範囲は、実施例のみに限定されるものではなく、請求の範囲によってのみ限定される。
【実施例】
【０２７９】
（実施例１）
以下の実施例では、動物の取り扱いは、大阪大学において規定される基準を遵守した。
【０２８０】
（材料および方法）
（インサイチュハイブリダイゼーション）
保存された周辺のゲノム構造を有するＤＩＳＣ１のマウスホモログを、第８Ｄ染色体上に同定し、そしてマウスホモログの部分ｃＤＮＡ（配列番号５）およびラットホモログの部分ｃＤＮＡ（配列番号９）を、明らかにした。ヒトＤＩＳＣ１  ｃＤＮＡ（配列番号１）のヌクレオチド１１７６〜１６４４に対応する、ラットｃＤＮＡのヌクレオチド１１０５〜１５６４のフラグメントを、以下のプライマーを用いてＰＣＲによって得た：
５’−ＡＣＡＣＴＧＡＧＡＣＡＧＡＧＡＴＴＧＧＡＡＧＡＣＣＴＧＧ−３’（配列番号１１）；および
５’−ＴＧＧＣＡＧＡＧＧＴＣＡＧＡＧＴＣＴＣＴＣＣＣＡＡＧＧＣ−３’（配列番号１２）。
【０２８１】
次いで、このフラグメントをｐＧＥＭ−Ｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ）にサブクローニングした。ジゴキシゲニン標識したｃＲＮＡプローブ（アンチセンスおよびセンス）を、ジゴキシゲニン標識したｄＵＴＰ（Ｒｏｃｈｅ，Ｓｙｄｎｅｙ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）の存在下で、テンプレートとしてそのｃＤＮＡフラグメントを用いたインビトロ転写によって生成した。ハイブリダイゼーション手順およびハイブリダイゼーション後の手順を、Ｋａｔａｙａｍａら（Ｂｒａｉｎ．Ｒｅｓ．Ｍｏｌ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．，１９９８；５６：６６−７５）によって記載されたように実行した。
【０２８２】
（酵母ツーハイブリッドスクリーニング）
ＤＩＳＣ１  Ｃ末端ドメイン（アミノ酸３４８〜８５４）を、ｐＡＳ２−１（ＧＡＬ４  ＤＮＡ結合ドメインベクター、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）中にベイトとしてクローニングした。酵母ＡＨ１０９株を、ベイトプラスミドで形質転換し、ヒト成人脳ｃＤＮＡライブラリー（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）で予め形質転換したＹ１８７株と接合させ、アデニン、ヒスチジン、ロイシン、トリプトファンが４重に欠損した培地上に播種した。α−ガラクトシダーゼアッセイを用いて達成するスクリーニング手順を、記載されるように（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｐｒｅｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ  ＭＡＴＣＨＭＡＫＥＲ  Ｌｉｂｒａｒｉｅｓ  Ｕｓｅｒ  Ｍａｎｕａｌ）実行した。
【０２８３】
相互作用に関与する領域を決定するために、ＡＨ１０９を、ｐＡＳ２−１またはｐＡＣＴ２（ＧＡＬ４  活性化ドメインベクター、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）にそれぞれサブクローニングしたＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１の短縮形態を用いて、同時に形質転換し、次いで、アッセイした。
【０２８４】
（プラスミド）
全長ＤＩＳＣ１  ｃＤＮＡおよびそのスプライシング改変体形態を、ｐｃＤＮＡ３．１（＋）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）にクローニングし、そして内因性ＤＩＳＣ１の検出のためにウエスタンブロットに使用した。全長タンパク質、ＦＥＺ−１結合領域（アミノ酸４４６〜６３３）、および結合領域を欠く欠失タンパク質をコードするＤＩＳＣ１  ｃＤＮＡを、ＦＬＡＧ配列によってその３’末端にタグをつけた。ヒト  ＦＥＺ１  ｃＤＮＡを、ＨＡ配列によってその３’末端にタグをつけた。これらのタグをつけた構築物を、ｐｃＤＮＡ３．１（＋）にクローニングし、そして免疫沈降アッセイに使用した。ＤＩＳＣ１  ｃＤＮＡをまた、ｐＥＧＦＰ−Ｎ１（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）にクローニングし、そして免疫細胞化学分析に使用した。ＦＥＺ１結合領域をコードするＤＩＳＣ１  ｃＤＮＡもまた、２シストロン発現ベクターであるｐＩＲＥＳ２−ＥＧＦＰ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）にクローニングし、そして安定なＰＣ１２細胞にトランスフェクトした。
【０２８５】
（細胞培養およびトランスフェクション）
ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、ＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞およびＰＣ１２細胞を、１０％  ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を含むＤＭＥＭ、αＭＥＭ／１０％  ＦＣＳおよびＤＭＥＭ／１０％  ウマ血清／５％  ＦＣＳ中で、それぞれ培養した。海馬ニューロンを、Ｎｅｕｍａｎｎ  Ｈ．ら（Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９５；２８：５４９−５５２）に記載されるように、胚性の生後１８日のＷｉｓｔａｒラットから調製し、そしてＤＭＥＭ／１０％  ＦＣＳ中で２４時間培養した。次いで、この培地を、ＤＭＥＭ／Ｂ２７補充培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で置き換えた。安定にＤＩＳＣ１を発現するＰＣ１２細胞を作製するために、ｐｃＤＮＡ３．１（＋）中のＦＬＡＧでタグをつけたＤＩＳＣ１  ｃＤＮＡを、ＳｃａＩによって線状にし、ＰＣ１２細胞にトランスフェクトした。トランスフェクションの４８時間後、ジェネティシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を、４００μｇ／ｍｌの濃度で添加した。いくつかのクローンを選択し、選択培地中で増殖させ、次いで、発現について調べた。ｍｏｃｋ安定株もまた、同じ手順によって作製した。ニューロン分化に関して、ＰＣ１２細胞を、４時間血清に対して欠乏させ、次いで、５０ｎｇ／ｍｌの濃度でＮＧＦを用いて処理した。上記の細胞のトランスフェクトに関して、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を、製造業者らの指示書に従って使用した。
【０２８６】
（抗体）
ウサギ抗ＤＩＳＣ１ポリクローナル抗体およびウサギ抗ＦＥＺ１ポリクローナル抗体を、それぞれ、ヒトＤＩＳＣ１のＳＣＭＴＡＧＶＨＥＡＱＡならびにヒトおよびラットのＦＥＺ１のＫＶＰＴＬＬＴＤＹＩＬＫＶＬに対して惹起させ、そしてアフィニティー精製した。モノクローナル抗ＦＬＡＧ抗体（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）、ポリクローナル抗ＨＡ抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）およびモノクローナル抗アクチン抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ，Ｔｅｍｅｃｕｌａ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を、免疫沈降アッセイに使用した。
【０２８７】
（ウエスタンブロット）
細胞を、プロテアーゼインヒビターの存在下、１％  ＮＰ４０を含むＴＮＥ緩衝液（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）中でホモジナイズし、氷上で１時間インキュベートし、そして１５，０００×ｇで２０分間遠心分離した。溶解物を、ＳＤＳサンプル緩衝液と共に５分間煮沸し、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）に供し、そしてＰＶＤＦ膜に転写させた。５％の膜ブロッキング剤（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ，ＵＫ）を用いてブロッキングした後、膜を、一次抗体を用いて４℃で１２時間インキュベートした。ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１の検出のために、これらのタンパク質に対して惹起された抗体を、それぞれ、１：５００および１：２５０の希釈率で使用した。次いで、これらの膜を、ＨＲＰ連結した抗ウサギＩｇＧ抗体またはＨＲＰ連結した抗マウスＩｇＧ抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）を１：１０，０００の希釈率で用いて、室温で１時間インキュベートした。免疫ブロッティングを、ＥＣＬキット（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いた化学発光によって可視化した。
【０２８８】
（免疫細胞化学）
細胞を、４％  パラホルムアルデヒドで固定し、そして０．３％  Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を用いて透過処理した。３％  ウシ血清アルブミンを用いたブロッキングの後、精製したＤＩＳＣ１抗体および精製したＦＥＺ１抗体を、それぞれ、１：１００および１：５０の希釈率において４℃で２４時間適用した。次いで、二次抗体（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｏｕｒ  ５９４で標識したヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇｏｎ）を、１：５００の希釈率において室温で１時間適用した。Ｆ−アクチンの検出のために、ＦＩＴＣ標識したファロイジン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を、１：１，０００の希釈率で使用した。ＬＳＭ−５１０レーザー走査顕微鏡（Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて、共焦点顕微鏡検査法を実行した。
【０２８９】
（免疫沈降）
ＤＩＳＣ１−ＦＬＡＧおよびＦＥＺ１−ＨＡを個々または組合わせて用いて、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞をトランスフェクトした。上記のプラスミドの節で言及したＦＬＡＧでタグをつけた短縮形態のＤＩＳＣ１もまた、ＦＥＺ−ＨＡと組合わせてトランスフェクトした。細胞を、ＴＮＥ緩衝液／１％  ＮＰ４０中に溶解した。調製した溶解物を、抗ＦＬＡＧ抗体を用いて４℃で２時間インキュベートし、次いで、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｇアガロース（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて４℃で１時間インキュベートした。次いで、アガロースビーズを、ＴＮＥ緩衝液を用いて５回洗浄した。免疫沈降物を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し、そして抗ＨＡ抗体によってブロットした。逆に、抗ＨＡ抗体による免疫沈降物を、抗ＦＬＡＧ抗体によってブロットした。ＰＣ１２細胞を、ＦＥＺ１−ＨＡまたはｍｏｃｋでトランスフェクトし、次いで、ＴＮＥ緩衝液／１％  ＮＰ４０中に溶解した。溶解物を、抗ＨＡ抗体によって免疫沈降した。免疫沈降物を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し、そして抗アクチン抗体によってブロットした。安定にＤＩＳＣ１−ＦＬＡＧを発現するＰＣ１２細胞およびｍｏｃｋ安定細胞を、ＮＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）を用いて２４時間刺激させ、次いで、ＴＮＥ緩衝液／１％  ＮＰ４０中に溶解させた。溶解物を、抗ＦＬＡＧ抗体によって免疫沈降した。免疫沈降物を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し、そして抗ＦＥＺ１抗体によってブロットした。細胞溶解手順およびブロッティング手順は、上記のウエスタンブロットの節に記載した手順と同様に実施した。
【０２９０】
（ＤＩＳＣ１モノクローナル抗体およびＦＥＺ１モノクローナル抗体の作製）
ＤＩＳＣ１モノクローナル抗体およびＦＥＺ１モノクローナル抗体を、当該分野で周知の標準的な技術（例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ（１９７５）２５６：４９５）またはその改変（例えば、Ｂｕｃｋら（１９８２）Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  １８：３７７）を使用して調製した。ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１を特異的に認識するモノクローナル抗体が作製されたことの確認は、ウエスタンブロット方法を用い、それぞれの抗体が単一のバンドを認識することによって確認した。
【０２９１】
（実施例２：ラット脳におけるＤＩＳＣ１の発現）
ＤＩＳＣ１は、体のいたるところで発現することが報告されている（非特許文献１３）。本発明者らはまず、インサイチュハイブリダイゼーション分析によってラット脳におけるＤＩＳＣ１  ｍＲＮＡの分布を調べた（図１）。ＤＩＳＣ１は、成体の脳において海馬、皮質、小脳および嗅ニューロンに優先的に発現する（図１ａ）。海馬で相対的に高いレベルの発現が観察されたので、本発明者らは、発生段階の海馬領域におけるＤＩＳＣ１の発現パターンを調べた。ＣＡ１〜３の錐体細胞および歯状回の顆粒細胞におけるシグナルは、成体よりも生後７日でより強力であった（図１ｂ）。これは、通常、若年性の成体に発症する統合失調症の病因に関して興味深い知見である。
【０２９２】
（実施例３：ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との相互作用）
ＤＩＳＣ１のオープンリーディングフレームによってコードされる８５４アミノ酸の推定タンパク質（図２ａ）は、他の既知タンパク質と有意な相同性を有さない（非特許文献１３）。ＤＩＳＣ１のＮ末端領域（アミノ酸１〜３４７）は、１つ以上の球状タンパク質からなることが推定されている（非特許文献１３）。らせん状のＣ末端領域（アミノ酸３４８〜８５４）は、転位のブレークポイントおよび他のタンパク質との相互作用によってコイルドコイル形成の可能性を有する３つのストレッチを含むことが推定される（非特許文献１３）。ＤＩＳＣ１タンパク質の存在を確認するために、本発明者らは、推定配列のＣ末端１２アミノ酸に対する抗体を惹起した。この抗体は、ＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞およびＨＥＫ２９３Ｔ細胞からの溶解物において２つの主要なバンド（相対分子量Ｍｒ；推定サイズ、約１０５Ｋおよび約７８Ｋ）を指向した（図２ｂ）。過剰発現させたＤＩＳＣ１および２２アミノ酸を欠くそのスプライシング改変体（非特許文献１３）のサイズを比較すると、内因性ＤＩＳＣ１は、全長形態およびその誘導体として存在するようであった。
【０２９３】
ＤＩＳＣ１タンパク質のいくつかの生物学的役割を反映し得るＤＩＳＣ１の相互作用パートナーを同定するために、本発明者らは、酵母ツーハイブリッド研究を実行した。ヒト成人脳ｃＤＮＡライブラリーを、ＤＩＳＣ１のＣ末端領域（アミノ酸３４８〜８５４）をベイトとして使用してスクリーニングした。陽性クローンのうちの１つがＦＥＺ１の部分配列（アミノ酸１２９〜３９２）をコードし、このＦＥＺ１は、軸索突起成長および束形成に関与するＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ  ＵＮＣ−７６タンパク質の哺乳動物ホモログである（非特許文献１８）。ＵＮＣ−７６およびＦＥＺ１は、以前に特徴付けられたいずれのタンパク質とも類似せず、そして新規タンパク質ファミリーを表す（非特許文献１８）。ヒトＦＥＺ１タンパク質は、線虫においてＵＮＣ−７６の機能を補完し得る（非特許文献１８）。ＦＥＺ１および構成性に活性なＰＫＣζ変異体の同時発現は、ＰＣ１２細胞のニューロン分化を誘導した（非特許文献１９）。これらの観察から、ＦＥＺ１は、哺乳動物の軸索誘導機構において重要な役割を果たすことが想定されるが、ＦＥＺ１を含む分子機構は、未だ不明である。ＦＥＺ１およびＤＩＳＣ１の相互作用に関与するＦＥＺ１およびＤＩＳＣ１中の領域を決定するために、酵母ツーハイブリッドアッセイを、ＦＥＺ１およびＤＩＳＣ１の種々の短いフラグメントを用いて実行した（図３ａ）。線虫のＵＮＣ−７６と非常に保存されているＦＥＺ１のＣ末端領域（アミノ酸２４７〜３９２）は、ＤＩＳＣ１との相互作用に必要とされた。コイルドコイル形成の可能性を有する２つのストレッチおよび転位ブレークポイントを含むＤＩＳＣ１領域（アミノ酸４４６〜６３３）は、ＦＥＺ１との相互作用に重要であることが示された。このアッセイにおいて、転位ブレークポイントのＣ末端下流を欠く短縮形態のＤＩＳＣ１（アミノ酸３４８〜５９７）が、ＦＥＺ１と弱く相互作用したことに注意すること。なぜなら、この短縮ＤＩＳＣ１タンパク質の産生は、転移保有者において可能性があるからである（非特許文献１３）。
【０２９４】
ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用を、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を用いた免疫沈降アッセイによって確認した（図３ｂ）。細胞を、ＦＬＡＧでタグをつけたＤＩＳＣ１の発現ベクターおよびＨＡでタグをつけたＦＥＺ１の発現ベクターを用いて、個々にかまたは組合わせて、トランスフェクトした。細胞溶解物を調製し、そして抗ＦＬＡＧ抗体または抗ＨＡ抗体によって免疫沈降した。ＨＡでタグをつけたＦＥＺ１を、ウエスタンブロット分析において抗ＦＬＡＧ抗体による免疫沈降物において検出した。逆に、ＦＬＡＧでタグをつけたＤＩＳＣ１を、抗ＨＡ抗体による免疫沈降物において検出した。ＦＥＺ１はまた、酵母ツーハイブリッドアッセイによってＦＥＺ１結合領域として同定されたＤＩＳＣ１フラグメント（アミノ酸４４６〜６３３）と同時に免疫沈降されたが、この結合領域を欠くＤＩＳＣ１とは同時に免疫沈降されなかった。これらの結果は、哺乳動物細胞におけるＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用を実証する。
【０２９５】
（実施例４：ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１の細胞内局在）
ＤＩＳＣ１は、構造タンパク質に対する構造的な類似性が制限されている（非特許文献１３）。一方、ＦＥＺ１の特徴づけの間に、ラット脳の溶解物を用いたプルダウンアッセイによって、ＦＥＺ１がアクチンと相互作用することが明らかになった（Ｔ．Ｆ．およびＳ．Ｋ．，未公開データ）。本発明者らは、次に、細胞骨格構造の観点からＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１の細胞内局在を決定した。本発明者らは、ＦＥＺ１に対する抗体を惹起させ、この抗体は、ＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞からの溶解物中で４６Ｋのタンパク質を検出した（図４ｍ）（このサイズは、インビトロ合成によって明らかになった）（非特許文献１９）。ＤＩＳＣ１は、ＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞の細胞質中で点状の分布を示し、核周囲の領域の密度が高かった（図４ａ）。ＤＩＳＣ１はまた、ファロイジン染色によって検出される張線維としてのＦ−アクチンと重複する、いくつかの線維状構造上に局在した（図４ａ〜ｃ）。ＦＥＺ１は、ＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞の細胞質において、点状に染色されたか、または張線維と顕著に重複した組織化された線維状構造に沿って分布したかのいずれかであった（図４ｄ〜ｆ）。培養ラット海馬ニューロンにおいて、ＦＥＺ１およびＦ−アクチンの同時局在が、神経突起成長円錐中に明らかであり（図４ｇ〜ｉ）、ここで、Ｆ−アクチンは、軸索伸長に関与する動的な構造であるラメリポディウムおよび糸状足を形成する（非特許文献２０、２１）。トランスフェクトされたＧＦＰ融合ＤＩＳＣ１もまた、成長円錐においてＦＥＺ１と同時に局在した（図４ｊ〜ｌ）。これらの結果は、ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１の相互作用が、おそらくアクチンへのＦＥＺ１の直接的な結合によってＦ−アクチンと関連することを示唆する。ＦＥＺ１とアクチンとの間の相互作用を、免疫沈降アッセイによって確認した（図４ｎ）。ＰＣ１２細胞を、ＨＡでタグ化したＦＥＺ１またはｍｏｃｋでトランスフェクトし、次いで細胞溶解物を、抗ＨＡ抗体によって免疫沈降した。アクチンおよびＦＥＺ１の同時免疫沈降を、抗アクチン抗体を用いたブロッティングによって検出した。
【０２９６】
（実施例５：ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との相互作用を介した、ＤＩＳＣ１の神経突起成長への関与）
ＦＥＺ１は、軸索突起成長および束形成に関与することが報告されている（非特許文献１８、１９）。本発明者らは、ＦＥＺ１がＦ−アクチンと同時局在することを示した。アクチンに基づく細胞骨格構造の再編成は、ニューロンの軸索突起成長に必要とされる（非特許文献２１）。本発明者らは、ニューロン細胞における（特にＰＣ１２細胞を用いて神経突起成長の段階において）ＤＩＳＣ１／ＦＥＺ１相互作用の生理学的な役割を評価した。神経成長因子（ＮＧＦ）を用いた刺激の後、ＰＣ１２細胞は、増殖を停止し、神経突起を伸ばし始めた。この特徴は、ニューロン分化および神経突起成長のモデル系として広範に使用されている。本発明者らは、ＦＬＡＧでタグをつけたＤＩＳＣ１を安定に発現するＰＣ１２細胞株を樹立し、次いで、ニューロン分化の段階におけるＦＬＡＧ−タグ化ＤＩＳＣ１と内因性ＦＥＺ１との間の相互作用を調べた。図５ａに示されるように、抗ＦＬＡＧ抗体による免疫沈降物中のＦＥＺ１の量は、ＮＧＦ刺激の際に劇的に増加した。ＮＧＦ刺激は、内因性ＦＥＺ１の発現レベル（図５ａ、下のパネル）およびＦＬＡＧ−タグ化ＤＩＳＣ１の発現レベル（データには示さず）を変更しなかったので、この結果は、ＤＩＳＣ１／ＦＥＺ１相互作用が、ニューロン分化の間にアップレギュレーションされたことを示す。ｍｏｃｋ安定細胞において、ＦＥＺ１は、免疫沈降されなかった（図５ａ）。ＮＧＦを用いて刺激した場合、ＤＩＳＣ１安定株は、ｍｏｃｋ安定細胞と比較して増強された神経突起伸長を示した（図５ｂ〜ｍ）。
【０２９７】
ＢＤＮＦ、血清除去、またはＰＡＣＡＰを用いた同様の刺激実験においても、ＤＩＳＣ１／ＦＥＺ１相互作用が、ニューロン分化の間にアップレギュレーションされたことが示された。ｍｏｃｋ安定細胞において、このような変化は観察されなかった。ＢＤＮＦ、血清除去、またはＰＡＣＡＰを用いて刺激した場合、ＤＩＳＣ１安定株は、ｍｏｃｋ安定細胞と比較して増強された神経突起伸長を示した。
【０２９８】
図３に示されるように、ＤＩＳＣ１領域（アミノ酸４４６〜６３３）は、ＦＥＺ１との相互作用に必須であり、従って、ＦＥＺ１と全長ＤＩＳＣ１との間の結合阻害を介してＤＩＳＣ１のドミナントネガティブ形態として機能することが推定される。この領域を、２シストロンの発現ベクターにクローン化し、そしてＤＩＳＣ１安定細胞にトランスフェクトした。この領域を発現するＧＦＰ標識細胞は、ＮＧＦ刺激の際に神経突起伸長の阻害を示したが（図６ｃ、ｄ）、ｍｏｃｋのトランスフェクションの効果は観察されなかった（図６ａ、ｂ）。これらの結果は、ＤＩＳＣ１とＥＦＺ１との相互作用が、神経突起成長に重要な役割を果たすことを示唆する。
【０２９９】
（実施例６；ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用を調節する因子の同定）
本発明者らは次に、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用を調節する因子を同定した。約１０００個の化合物を用いて、本発明を実施した。ＰＣ１２細胞株を種々の化合物を用いて刺激し、次いで、これらのＰＣ１２細胞が神経突起を伸ばし始めた場合に、その化合物を第１の候補化合物として選択した。次いで、候補化合物のうち、化合物を用いて刺激していない細胞と比較して、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用を増強または低減した化合物を、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用を調節する因子として同定した。コントロール実験として、ＮＧＦを用いて、ＤＩＳＣ１を安定に発現するＰＣ１２細胞株を刺激した。この相互作用の変化の検出は、ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１に対するモノクローナル抗体を用いた免疫沈降およびウエスタンブロットを用いた。上記の方法によって、ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用を調節する因子が同定された。
【０３００】
（実施例７：ＤＩＳＣ１の発現の挙動およびＫＩＡＡ０８４４との関連）
本発明者らは、次に、ＤＩＳＣ１の発現挙動および関連分子を調べるための実施例を行った。使用したプロトコールは以下のとおりである。
【０３０１】
（使用したプラスミド）
ＤＩＳＣ１−ＨＡ：ｈｕｍａｎＤＩＳＣ１配列のカルボキシ末端側（ＤＮＡではＤＩＳＣ１配列の３’端）にＨｅｍａｇｌｕｔｉｎｉｎ（ＨＡ）配列を付加した配列（配列番号１５）をｐｃＤＮＡ３．１（＋）にサブクローンニングした。
【０３０２】
ＫＩＡＡ−ＧＦＰ：ｈｕｍａｎ  ＫＩＡＡ０８４４配列（配列番号１３）のカルボキシ末端側（ＤＮＡではＫＩＡＡ０８４４の３’末端側）にＧｒｅｅｎ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＦＰ）配列を付加した配列（配列番号１７）をｐｃＤＮＡ３．１（＋）にサブクローンニングあるいはａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ  ｖｅｃｔｏｒにサブクローニングした。
【０３０３】
（細胞培養と遺伝子導入）
ＰＣ１２細胞：ラット褐色細胞腫ＰＣ１２細胞を１０％ウシ胎児血清、５％ウマ血清を含むＤＭＥＭ培地で培養した。このＰＣ１２細胞は、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１７２１  大阪大学薬学研究科馬場明道博士から供与された細胞を使用したが、市販のＰＣ１２細胞（例えば、アメリカンティシュカルチャーコレクション受託番号ＣＲＬ−１７２１など）を用いても同様の実験を行うことが可能である。
【０３０４】
ＤＩＳＣ１−ＨＡ構成的発現細胞（Ｍｉｙｏｓｈｉら、ＭｏｌＰｓｙｃｈｉａｔ，２００３）：上記ＰＣ１２細胞に上記ｐｃＤＮＡ３（＋）−ＤＩＳＣ１−ＨＡプラスミドをｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて導入し、Ｇ４１８（Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ：Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）８００μｇ／ｍｌで選択培養し、生き残った細胞が形成するコロニーを単一クローンとして数個取得し、取得順に＃１，＃２・・とクローン名をつけ、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法によってＤＩＳＣ１蛋白質が定常的に発現している細胞をＤＩＳＣ１−ＨＡ構成的発現細胞として保存した。
【０３０５】
遺伝子導入は、ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いるか、アデノウイルスベクターにサブクローニングしたプラスミドを用い、製造業者が供与するマニュアル（ＶｉｒａＰｏｗｅｒＴＭ、Ａｄｅｎｏｖｉｒａｌ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ，Ｉｎｖｔｒｏｇｅｎ）に従って作製したアデノウィルスを感染させ導入した。
【０３０６】
（ＰＡＣＡＰ，ＮＧＦ刺激時のＤＩＳＣ１−ＫＩＡＡの相互作用）
１０ｃｍ直径ｄｉｓｈにＤＩＳＣ１−ＨＡまたはｍｏｃｋの構成的発現ＰＣ１２細胞を播種４８時間後にアデノウイルスＫＩＡＡ−ＧＦＰ（約２０ｍｏｉ）を１００μｌ／１０ｃｍ  ｄｉｓｈ加えた。
【０３０７】
上記アデノウイルス感染２４時間後に、ｄｉｓｈ中の培地を無血清培地（ウマ血清（ＨＳ）１％，ＤＭＥＭ）に交換した。
【０３０８】
上記培地交換４時間後に神経成長因子（ＮＧＦ：５０ｎｇ／ｍｌ）（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｉｎｃ．）、下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド（Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ  Ａｄｅｎｙｌａｔｅ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）（Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ペプチド研究所）、Ｏｓａｋａ、Ｊａｐａｎ）（ＰＡＣＡＰ：１０−７Ｍ）あるいは両者（ＮＧＦ＋ＰＡＣＡＰ）を無血清培地に添加した。
【０３０９】
上記神経栄養因子刺激２４時間後に細胞を下記バッファー１ｍｌ（ＮＰ４０  １％／ＴＮＥ（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７．５，１５０ｍＭ  ＮａＣｌ，１ｍＭ  ＥＤＴＡ、プロテアーゼインヒビターを含む）にて可溶化し、回収した。
【０３１０】
（免疫沈降実験）
ＨＡ抗体（αＨＡ：Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）またはＧＦＰ抗体（αＧＦＰ：Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を１ｍｌ可溶化液あたり５μｌ加え４℃で一晩回転しながらインキュベートした。
【０３１１】
プロテインＧ（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｇ）−Ｓｅｐｈｒｏｓｅビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を上記各チューブに３５μｌ添加し、４℃で３時間回転しながらインキュベートした。その後、ＴＮＥバッファー１ｍｌで５回洗浄した。
【０３１２】
還元型Ｌａｅｍｍｌｉ系ＳＤＳサンプル緩衝液（製造業者が提供）で９５℃、５分間煮沸、遠心後上清を回収し電気泳動サンプルとした。
【０３１３】
（ウェスタンブロット法）
Ｔｒｉｓ−グリシンＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル（Ｓｉｇｍａから入手可能なＡｃｔｒｉｌａｍｉｄｅを用いて作製した）で電気泳動した。泳動終了後ＰＶＤＦ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｉｎｃ．）に移した。５％スキムミルクでブロッキングを３０分した。ＧＦＰ抗体（１／２０００）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ），ＨＡ抗体（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）（１／１０００）を４℃一晩撹拌インキュベーションした。
【０３１４】
ＰＢＳ−Ｔ（０．１Ｍ  ＰＢＳ（０．１Ｍ  リン酸緩衝液および９ｇ／Ｌ  ＮａＣｌ）＋０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０）液にて１５分間×５回洗浄した。
【０３１５】
α−マウスＩｇＧ  ＨＲＰ結合抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）１／１００００を４℃で２時間撹拌しながらインキュベーションした。
【０３１６】
ＰＢＳ−Ｔ（０．１Ｍ  ＰＢＳ、９ｇ／Ｌ  ＮａＣｌ＋０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０）液にて１５分間×５回洗浄した。
【０３１７】
ＥＣＬｋｉｔ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて、メーカー推奨方法にて可視化した。
【０３１８】
（結果）
結果を図７に示す。図７に示すように、ｍｏｃｋ形質転換体では何らＤＩＳＣ１に相互作用する分子は見出されなかったのに対して、ＤＩＳＣ１−ＨＡを感染したものでは、ＮＧＦおよびまたはＰＡＣＡＰでの刺激によって誘導されている分子が存在することが明らかになった。この分子を同定したところ、ＫＩＡＡ０８４４であることが明らかになった。
【０３１９】
（実施例８：ＮＧＦ，ＰＡＣＡＰ刺激時のＤＩＳＣ１−ＨＡ発現レベル）
次に、ＤＩＳＣ１の発現が、ＮＧＦ、ＰＡＣＡＰなどの神経関連分子での刺激によって増加されるかどうかを確認した。そのプロトコールを以下に示す。
【０３２０】
使用細胞、使用プラスミド、遺伝子導入および薬剤刺激方法は上記実施例７に準ずる。免疫沈降（ＩＰ）には上記αＨＡ抗体を用いた。検出（ＷＢ）には，αＨＡ抗体を用いた。
【０３２１】
（結果）
図８に示されるように、ＤＩＳＣ１発現は顕著に増加していた。
【０３２２】
（実施例９：ＮＧＦ／ＰＡＣＡＰ刺激時のＫＩＡＡ−ＧＦＰ発現量）
ツーハイブリッド法によって、ＤＩＳＣ１の感染によって発現が変化するタンパク質を調べたところ、ＫＩＡＡ０８４４が同定された。この知見をもとに、ＫＩＡＡ０８４４の発現が神経関連の因子による刺激によって発現が変化するかどうかを確認した。以下にそのプロトコールを示す。
【０３２３】
使用細胞、使用プラスミド、遺伝子導入および薬剤刺激方法は上記実施例７および８に準ずる。免疫沈降（ＩＰ）には上記αＧＦＰ抗体を用いた。検出（ＷＢ）には，αＧＦＰ抗体を用いた。
【０３２４】
（結果）
図９に示されるように、ＫＩＡＡ０８４４は、ＮＧＦおよびＰＡＣＡＰの刺激によって発現が増強しており、その発現は、実施例７および８に示されるＤＩＳＣ１と等価であった。従って、ＫＩＡＡ０８４４もまた、ＤＩＳＣ１と同様に、軸索突起成長および／または束形成のレベルに関連する状態、障害または疾患に関連することが示された。
【０３２５】
（実施例１０：ＮＧＦ／ＰＡＣＡＰ刺激時のＫＩＡＡ０８４４  ＲＮＡ量の分析）
次に、ＫＩＡＡ０８４４のｍＲＮＡ転写量が神経関連の因子による刺激により増加しているかどうかもまた同様に確認した。そのプロトコールを以下に示す。
【０３２６】
１０ｃｍ直径ディッシュＤＩＳＣ１−ＨＡまたはｍｏｃｋ構成的発現ＰＣ１２細胞を播種４８時間後にアデノウイルスＫＩＡＡ−ＧＦＰ（約２０ｍｏｉ）を１００μｌ／１０ｃｍ  ｄｉｓｈ加えた。
【０３２７】
上記アデノウイルス感染２４時間後に、ｄｉｓｈの培地を無血清培地（ウマ血清（ＨＳ）１％，ＤＭＥＭ）に交換した。
【０３２８】
上記培地交換４時間後に神経成長因子（ＮＧＦ  ：  ５０ｎｇ／ｍｌ）、下垂体のアデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド（ＰＡＣＡＰ：１０−７Ｍ）  あるいは両者（ＮＧＦ＋ＰＡＣＡＰ）を培地に添加した。
【０３２９】
上記薬剤刺激２４時間後にＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）付属のＲＬＴ溶液にβ−メルカプトエタノール（終濃度１％）を添加し、細胞を回収した。
【０３３０】
ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を用い、メーカー推奨方法にてＲＮＡを分離した。
【０３３１】
ホルマリン変性ゲル（Ａｇａｒｏｓｅ  １％，ＭＯＰＳ  ０．０２Ｍ，ホルムアルデヒド１８％、エチヂウムブロマイド１μｇ／ｍｌ）にて電気泳動した。
【０３３２】
泳動終了後ナイロン膜Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｎｙ＋（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に定法に従って移した。
【０３３３】
ＫＩＡＡ０８４４の部分配列（配列番号１９）を３２Ｐ−ＲＩラベルし、ＲｅａｄｙｐｒｉｍｅＩＩ  Ｒａｎｄｏｍ  Ｐｒｉｍｅ  Ｌａｂｅｌｌｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）にてプローブを合成し、精製し、定法に従ってノーザンブロット法を行った。
【０３３４】
（結果）
図１０に示されるように、ＫＩＡＡ０８４４のｍＲＮＡ分子は、ＮＧＦおよびＰＡＣＡＰでの刺激によって誘導されることが明らかになった。
【０３３５】
以上のように、本発明の好ましい実施形態を用いて本発明を例示してきたが、本発明は、この実施形態に限定して解釈されるべきものではない。本発明は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。当業者は、本発明の具体的な好ましい実施形態の記載から、本発明の記載および技術常識に基づいて等価な範囲を実施することができることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願および文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。
【産業上の利用可能性】
【０３３６】
本発明は、統合失調症などの精神疾患を診断、処置および予防することにおいて重要な因子を提供することによって、従来達成できなかったそのような診断、処置および予防を実現する。従って、医薬品製造、探索などの産業において有用である。
【図面の簡単な説明】
【０３３７】
【図１】図１は、ラット脳におけるＤＩＳＣ１  ｍＲＮＡのインサイチュハイブリダイゼーション分析である。（ａ）成体ラットの脳全体の矢状切断。シグナルを、可視化試薬の室温で６時間のインキュベーションによって観察した。嗅領域、海馬領域および小脳領域についての高倍率の視野を、それぞれ下のパネルに示す。ＯＢ：嗅球、ＣＸ：大脳皮質、Ｈｉｐ：海馬、ＣＢ：小脳、ＴＨ：視床、ＳＮ：黒質。（ｂ）生後７日（左のパネル）および成体（右のパネル）における海馬領域の冠状切断。シグナルを、可視化試薬の室温で２時間のインキュベーションによって観察した。海馬ＣＡ１錐体細胞の高倍率の視野を、各々下のパネルに示す。これらのシグナルが、ニューロン中に存在したことを確認するために、この切片を、チオニンで対比染色した。ＤＧ：歯状回、ｓｏ：上昇層、ｓｐ：錐体細胞層、ｓｒ：放射状層。
【図２】図２は、特異的抗体によるＤＩＳＣ１タンパク質の検出である。（ａ）上部：ＤＩＳＣ１の推定タンパク質構造。ＤＩＳＣ１は、Ｎ末端球状領域（黒色の長方形）およびコイルドコイル形成の可能性を有する３つのストレッチ（灰色の長方形）を含むらせん状Ｃ末端領域（白色の長方形）からなる。垂直線は、転座ブレークポイントの位置を示す。ポリクローナル抗体を、下線の配列に対して惹起させた。下部：ＤＩＳＣ１のスプライシング改変体。三角形は、選択的スプライシングされた２２アミノ酸の位置を示す。（ｂ）ＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞およびＨＥＫ２９３Ｔ細胞からの溶解物を用いた、ＤＩＳＣ１に対して惹起された抗体によるウエスタンブロット。予想サイズのタンパク質（黒色の矢印）および小さいサイズのタンパク質（白色の矢印）を検出した。ＤＩＳＣ１またはそのスプライシング改変体を用いてトランスフェクトしたＨＥＫ２９３Ｔ細胞からの溶解物もまた、ブロットした。
【図３】図３は、ＤＩＳＣ１がＦＥＺ１と相互作用することを示す。（ａ）ＦＥＺ１（上部のパネル）およびＤＩＳＣ１（下部のパネル）の結合領域を決定するための酵母ツーハイブリッドアッセイ。白色のバーは、スクリーニングによって得たＦＥＺ１クローンおよびベイトとして使用したＤＩＳＣ１クローンを示す。黒色のバーは、短いフラグメントを示す。酵母を、ベイトおよびＦＥＺ１フラグメントのうちの１つ、またはＦＥＺ１  Ｃ末端フラグメント（アミノ酸２４７〜３９２）およびＤＩＳＣ１フラグメントのうちの１つと共に同時形質転換した。酵母形質転換体のα−ガラクトシダーゼ活性をアッセイした。＋＋＋は、ポジティブコントロールと同じ強力な陽性であることを示す。＋＋、＋および−は、それぞれ、中程度に陽性、弱く陽性、および陰性であることを示す。（ｂ）ＤＩＳＣ１は、ＦＥＺ１と同時に免疫沈降した。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、ＤＩＳＣ１−ＦＬＡＧおよびＦＥＺ１−ＨＡを用いて、個々にかまたは組合わせてトランスフェクトした。ＤＩＳＣ１のＦＥＺ１結合領域（アミノ酸４４６〜６３３、ＤＩＳＣ１／ＢＲ）および結合領域を欠く欠失ＤＩＳＣ１（ＤＩＳＣ１／ΔＢＲ）もまた、ＦＬＡＧを用いてタグ付けし、そしてＤＩＳＣ１−ＦＬＡＧの代わりに試験した。抗ＦＬＡＧ抗体または抗ＨＡ抗体による免疫沈降物を、相互の抗体を用いてブロットした。
【図４】図４は、ＤＩＳＣ１およびＦＥＺ１の細胞内局在を示す。（ａ、ｄ）それぞれ、抗ＤＩＳＣ１抗体または抗ＦＥＺ１抗体によって染色したＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞。（ｂ、ｅ）Ｆ−アクチンの検出のためにファロイジンによって染色した（ａ）または（ｄ）と同じ細胞。（ｃ、ｆ）（ａ）および（ｂ）、（ｄ）および（ｅ）の拡大画像。（ｃ）の中の矢印は、ＤＩＳＣ１およびＦ−アクチンの同時局在を示す。（ｇ、ｊ）抗ＦＥＺ１抗体によって染色した培養ラット海馬ニューロン。（ｈ、ｋ）それぞれ、ファロイジンによって染色した（ｇ）と同じニューロンまたはＧＦＰ−融合ＤＩＳＣ１でトランスフェクトした（ｊ）と同じニューロン。（ｉ、ｌ）（ｇ）および（ｈ）、（ｊ）および（ｋ）の拡大画像。（ｇ〜ｌ）の中の矢印は、成長円錐を示す。（ｍ）ＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞からの溶解物を用いた、ＦＥＺ１に対して惹起された抗体によるウエスタンブロット。（ｎ）ＦＥＺ１とアクチンとの間の相互作用の検出についての免疫沈降アッセイ。ＰＣ１２細胞を、ＦＥＺ１−ＨＡまたはｍｏｃｋでトランスフェクトし、次いで、溶解物を調製した。抗ＨＡ抗体による免疫沈降物を、抗アクチン抗体によってブロットした。
【図５】図５は、ＤＩＳＣ１がＦＥＺ１への結合を介して神経突起成長に関与することを示す。（ａ）ＤＩＳＣ１とＦＥＺ１との間の相互作用は、神経突起成長の間にアップレギュレートされた。ＤＩＳＣ１−ＦＬＡＧを安定に発現するＰＣ１２細胞を、ＮＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）を用いて２４時間刺激し、そして収集した。溶解物を、抗ＦＬＡＧ抗体によって免疫沈降した。免疫沈降した複合体を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し、そして抗ＦＥＺ１抗体を用いてブロットした。（ｂ〜ｍ）ＤＩＳＣ１を安定に発現するＰＣ１２細胞（ｈ〜ｊおよびｋ〜ｍは、それぞれ、株番号１および株番号２を示す）は、ｍｏｃｋ安定細胞（ｂ〜ｄおよびｅ〜ｇは、それぞれ、株番号１および株番号２を示す）と比較して、ＮＧＦでの刺激の際に神経突起の増強された伸長を示した。細胞を、０時間（ｂ、ｅ、ｈ、ｋ）、２４時間（ｃ、ｆ、ｉ、ｌ）、および４８時間（ｄ、ｇ、ｊ、ｍ）ＮＧＦ（５０ｎｇ／ｍｌ）を用いて刺激し、そしてそれらの神経突起を、顕微鏡で観察した。
【図６】図６は、神経突起成長がＤＩＳＣ１のＦＥＺ１結合領域の過剰発現によって阻害されることを示す。ＤＩＳＣ１を安定に発現するＰＣ１２細胞（図５中の株番号１）に、ｍｏｃｋを用いて一過性にトランスフェクトさせるか（ａ、ｂ）、またはｐＩＲＥＳ２−ＥＧＦＰベクター中のＤＩＳＣ１のＦＥＺ１結合領域（アミノ酸４４６〜６３３）用いて一過性にトランスフェクトさせ（ｃ、ｄ）、次いで、ＮＧＦを用いて刺激した。トランスフェクトした細胞を、ＧＦＰの蛍光によって観察した（ａ、ｃ）。同じ視野の顕微鏡写真もまた示す（ｂ、ｄ）。各々ａ〜ｄの上下２つのパネルは、同じ処理を実施した、別の視野での写真を示す。
【図７】図７は、アデノ−ＫＩＡＡ−ＧＦＰ感染下ＮＧＦ，ＰＡＣＡＰ刺激時のＤＩＳＣ１−ＫＩＡＡ相互作用を示す。ｍｏｃｋは偽遺伝子（ＭＯＣＫ）の感染、ＤＩＳＣ１−ＨＡ＃４は、ＤＩＳＣ１−ＨＡを感染させたもののうち４番目のサンプルを示す。ＮはＮＧＦを示し、ＰはＰＡＣＡＰを示す。
【図８】図８は、ＮＧＦおよびＰＡＣＡＰでの刺激時のＤＩＳＣ１−ＨＡの発現量を示す。ＰＣ１２Ｄは、ＰＣ１２細胞を示す。ＤＩＳＣ１−ＨＡ＃４は、ＤＩＳＣ１−ＨＡを感染させたもののうち４番目のサンプルを示す。ｎはＮＧＦを示し、ｐはＰＡＣＡＰを示す。ｎｐは、ＮＧＦおよびＰＡＣＡＰの両方の刺激を示す。
【図９】図９は、アデノ−ＫＩＡＡ−ＧＦＰ感染下でのＮＧＦおよびＰＡＣＡＰ刺激時のＫＩＡＡ０８４４ＧＦＰの発現量を示す。１２ｈおよび４８ｈは、刺激後１２時間後および４８時間後を示す。ｎはＮＧＦを示し、ｐはＰＡＣＡＰを示す。ｎｐは、ＮＧＦおよびＰＡＣＡＰの両方の刺激を示す。Ｍｏｃｋ＃４およびＤＩＳＣ＃４は、それぞれ偽遺伝子およびＤＩＳＣ１−ＨＡを感染させたもののうち４番目のサンプルを示す。
【図１０】図１０は、アデノ−ＫＩＡＡ−ＧＦＰ感染下でのＫＩＡＡ０８４４のノーザンブロット分析の結果を示す。ｎはＮＧＦを示し、ｐはＰＡＣＡＰを示す。ｎｐは、ＮＧＦおよびＰＡＣＡＰの両方の刺激を示す。Ｍｏｃｋ＃４ならびにＤＩＳＣ＃４およびＤＩＳＣ＃１３は、それぞれ偽遺伝子およびＤＩＳＣ１−ＨＡを感染させたもののうち４番目のサンプル（ＤＩＳＣ１−ＨＡについては１３番目も）を示す。
【配列表フリーテキスト】
【０３３８】
（配列表の説明）
配列番号１は、ヒトＤＩＳＣ１の核酸配列である
配列番号２は、ヒトＤＩＳＣ１のアミノ酸配列である
配列番号３は、ヒトＦＥＺ１の核酸配列である
配列番号４は、ヒトＦＥＺ１のアミノ酸配列である
配列番号５は、ラットＤＩＳＣ１の部分核酸配列である
配列番号６は、ラットＤＩＳＣ１の部分アミノ酸配列である
配列番号７は、ラットＦＥＺ１の部分核酸配列である
配列番号８は、ラットＦＥＺ１の部分アミノ酸配列である
配列番号９は、マウスＤＩＳＣ１の部分核酸配列である
配列番号１０は、マウスＤＩＳＣ１の部分アミノ酸配列である
配列番号１１は、実施例１で使用したプライマー１
配列番号１２は、実施例１で使用したプライマー２
配列番号１３は、ＫＩＡＡ０８４４の核酸配列である
配列番号１４は、ＫＩＡＡ０８４４のアミノ酸配列である
配列番号１５は、実施例７で使用したＤＩＳＣ１−ＨＡの核酸配列である
配列番号１６は、実施例７で使用したＤＩＳＣ１−ＨＡのアミノ酸配列である
配列番号１７は、実施例７で使用したＫＩＡＡ−ＧＦＰの核酸配列である
配列番号１８は、実施例７で使用したＫＩＡＡ−ＧＦＰのアミノ酸配列である
配列番号１９は、実施例１０でプローブとして使用したＫＩＡＡ０８４４の部分配列である。
【図１】
2006518214.tif 000002
【図６】
2006518214.tif 000003
【図８】
2006518214.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2006518214.tif 000008
【図７】
2006518214.tif 000009
【図９】
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【図１０】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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2006518214.tif 000013
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