(57)【要約】本発明は、風味物質の混合物である風味組成物であって、当該風味組成物は風味組成物の全重量の少なくとも８重量％の、以下からなる群より選択される風味物質を含むことを特徴とする：（ａ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の１以上から選択される風味物質：１重量％〜４重量％の１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン、８重量％〜１３重量％の５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含むペパーミント油；７０重量％未満のカルボン及び少なくとも１４重量％のリモネンを含むスペアミント油；またはこれらの混合物；及び（ｂ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の２以上から選択される風味物質：デカノール、オクタナール、ヘキサン酸アリル、アネトール、精製アニシード、メボウキ油、酪酸ベンジル、カモミール油、桂皮アルデヒド、シス−３−酢酸ヘキセニル、天然シトラール、セイロンシトロネラ、ヘプタン酸エチル、オイゲノール、フェンネル・スイート、酢酸ゲラニル、アルファイオノン、ライム、オレンジ香味料、パラクレシルメチルエーテル、アルファピネン。これらの物質は口腔内に存在する微生物による臭気性揮発性硫黄化合物の生成を抑制することができるものとして同定され、今まで望ましくなかった口臭を減少させる特性を有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
風味物質の混合物である風味組成物であって、当該風味組成物は風味組成物の全重量の少なくとも８重量％の、以下からなる群より選択される風味物質を含むことを特徴とする：
（ａ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の１以上から選択される風味物質：１重量％〜４重量％の１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン、８重量％〜１３重量％の５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含むペパーミント油；７０重量％未満のカルボン及び少なくとも１４重量％のリモネンを含むスペアミント油；またはこれらの混合物；及び
（ｂ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の２以上から選択される風味物質：デカノール、オクタナール、ヘキサン酸アリル、アネトール、精製アニシード、メボウキ油、酪酸ベンジル、カモミール油、桂皮アルデヒド、シス−３−酢酸ヘキセニル、天然シトラール、セイロンシトロネラ、ヘプタン酸エチル、オイゲノール、フェンネル・スイート、酢酸ゲラニル、アルファイオノン、ライム、オレンジ香味料、パラクレシルメチルエーテル、アルファピネン。
【請求項２】
ペパーミント油及び／またはスペアミント油が天然または合成起源、好ましくは天然起源である、請求項１に記載の風味組成物。
【請求項３】
ペパーミント油が、１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノンを１．５重量％〜３重量％、５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノンを８．５重量％〜１２．５重量％、及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含む、請求項１または２に記載の風味組成物。
【請求項４】
ペパーミント油が、精製ペパーミント・インディアン（Ｐｅｐｐｅｒｍｉｎｔ  Ｉｎｄｉａｎ  Ｒｅｃｔｉｆｉｅｄ）（全グレード）、ペパーミント・アメリカン・ファーウエスト・バルク（Ｐｅｐｐｅｒｍｉｎｔ  ＡｍｅｒｉｃａｎＦａｒ  Ｗｅｓｔ  Ｂｕｌｋｅｄ）、ペパーミント・アメリカン・ウィラミット・ナチュラル（Ｐｅｐｐｅｒｍｉｎｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｗｉｌｌａｍｅｔｔｅ  Ｎａｔｕｒａｌ）の１以上から選択される、請求項２または３に記載の風味組成物。
【請求項５】
スペアミント油が、スペアミント・アメリカン・ファーウエスト・スコッチ（Ｓｐｅａｒｍｉｎｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｒ  Ｗｅｓｔ  Ｓｃｏｔｃｈ）、スペアミント・バルク・エキストラ（Ｓｐｅａｒｍｉｎｔ  Ｂｕｌｋｅｄ  Ｅｘｔｒａ）及び再精製天然スペアミント・アメリカン・ファーウエスト（Ｓｐｅａｒｍｉｎｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｒ  Ｗｅｓｔ  Ｎａｔｉｖｅ  Ｒｅｄｉｓｔｉｌｌｅｄ）の１以上から選択される、請求項２に記載の風味組成物。
【請求項６】
組成物が少なくとも３、好ましくは少なくとも５の風味物質をグループ（ｂ）から含む、先行請求項のいずれかに記載の風味組成物。
【請求項７】
組成物が風味組成物の少なくとも５重量％、好ましくは少なくとも１５重量％のグループ（ａ）風味物質を含む、先行請求項のいずれかに記載の風味組成物。
【請求項８】
組成物が風味組成物の少なくとも７重量％、好ましくは少なくとも１０重量％、より好ましくは少なくとも２０重量％、及びさらにより好ましくは少なくとも３０重量％のグループ（ｂ）風味物質を含む、先行請求項のいずれかに記載の風味組成物。
【請求項９】
グループ（ａ）及びグループ（ｂ）の風味物質は合わせて、風味組成物の全重量の少なくとも２０重量％を含み、好ましくは少なくとも４０重量％含む、先行請求項のいずれかに記載の風味組成物。
【請求項１０】
組成物がさらに、ティー・ツリー油、アルデヒド  Ｃ９、テルペン非含有オレンジ油及びアルデヒド  Ｃ１０の１以上を含む、先行請求項のいずれかに記載の風味組成物。
【請求項１１】
先行請求項のいずれかに記載の風味組成物を含む消費者製品。
【請求項１２】
消費者製品が口腔ケア製品である、請求項１１に記載の消費者製品。
【請求項１３】
口臭を減少及び／または防止するための、以下の１以上の風味物質の使用：オクタナール、ヘキサン酸アリル、アネトール、精製アニシード、メボウキ油、酪酸ベンジル、カモミール油、桂皮アルデヒド、シス−３−酢酸ヘキセニル、ヘプタン酸エチル、フェンネル・スイート、アルファイオノン、ライム、オレンジ香味料、パラクレシルメチルエーテル、アルファピネン、７０重量％未満のカルボン及び少なくとも１４重量％のリモネンを含むスペアミント油、１重量％〜４重量％の１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン、８重量％〜１３重量％の５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含むペパーミント油。
【請求項１４】
口腔内に請求項１〜１２のいずれかに記載の風味組成物または消費者製品を導入することによる口臭を減少または防止する方法及び化粧方法。
【請求項１５】
口腔内の臭気性揮発性硫黄化合物の生成を減少または防止する方法及び化粧方法であって、当該方法が口腔内に請求項１〜１２のいずれかに記載の風味組成物または消費者製品を導入する工程を含む方法。
【請求項１６】
請求項１〜１０のいずれかに記載の風味組成物を細菌培養基に導入することにより、臭気性揮発性硫黄化合物の細菌性生成をｉｎ  ｖｉｔｒｏで抑制する方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、風味組成物に関し、当該風味組成物を含む製品、及び口臭に有益な効果を与える風味物質または風味組成物の使用に関する。特に、本発明は口臭を減少または防止するための風味物質及び風味組成物に関する。
【０００２】
発明の背景
口臭は口腔内の細菌及び細菌活性により生じる。口臭の主要な要素は揮発性硫黄化合物（簡略のため、以下“ＶＳＣ”とする）、特に硫化水素（Ｈ２Ｓ）及びメチルメルカプタン（ＣＨ３ＳＨ）などの硫化メチルである。これらの臭気化合物は、タンパク性物質由来の、例えば、口腔内に存在する、食べかす、唾液、歯肉溝滲出液、剥離上皮組織唾液分泌小体または血液由来の、外来及び内生アミノ酸を細菌が分解することにより生じる。このプロセスにおいて、細菌はまず（タンパク性物質由来の）タンパク質をその構成アミノ酸に加水分解する。チオール基含有アミノ酸、例えばシステイン、シスチン及びメチオニンは次に分解されてＶＳＣを生じる。
【０００３】
３００種以上の細菌が口内から単離されているが、硫化水素及びメチルメルカプタンなどのＶＳＣの生成は特定グループの細菌、特にグラム陰性種に関連する。例えば、グラム陰性微生物、フゾバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）・ｎｕｃｌｅａｔｕｍ菌はＶＳＣ生成に大きく関係している（ＭｃＮａｍａｒａ  ＴＦ，Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  ＪＦ，Ｌｅｅ  Ｍ．（１９７２）Ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏ−ｏｒｇａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｒａｌ  ｍａｌｏｄｏｕｒ（口臭生成における微生物の役割）．Ｏｒａｌ  Ｓｕｒｇ．Ｏｒａ  Ｍｅｄ．Ｏｒａｌ  Ｐａｔｈｏｌ．；３４（１）：４１−８；Ｐｅｒｓｓｏｎ  Ｓ，Ｅｄｌｕｎｄ  ＭＢ，Ｃｌａｅｓｓｏｎ  Ｒ，Ｃａｒｌｓｓｏｎ  Ｊ．（１９９０）Ｔｈｅ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｙｄｒｏｇｅｎ  ｓｕｌｆｉｄｅ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｙｌ  ｍｅｒｃａｐｔａｎ  ｂｙ  ｏｒａｌ  ｂａｃｔｅｒｉａ（口内細菌による硫化水素及びメチルメルカプタンの形成）．Ｏｒａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．５（４）：１９５−２０１；Ｓｏｌｉｓ−Ｇａｆｆａｒ  ＭＣ，Ｆｉｓｃｈｅｒ  ＴＪ  ａｎｄ  Ｇａｆｆａｒ  Ａ．（１９７９）Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｄｏｒ  ｐｒｏｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｏｒａｌ  ｍｉｃｒｏ−ｏｒｇａｎｉｓｍｓ（特定の口内微生物により生成される臭気の機器評価）．Ｊ  Ｓｏｃ．Ｃｏｓｍｅｔ．Ｃｈｅｍ．３０：２４１−７）。
【０００４】
ＶＳＣ生成に関係する微生物が歯肉溝、舌皮、及びその他の口腔部分に見られること科学文献から公知であり、口臭の大部分は舌背部から生じると考えられている。
【０００５】
多数の手段が口臭を止めるために用いられている。
【０００６】
簡単な手段は機械的に舌表面を擦り、通常分解されてＶＳＣを形成するタンパク性残物質を取除く。しかしながら、このような物質は口腔粘膜に強力に付着するので、舌表面を激しく擦りすぎた場合、下層組織に損傷を与える可能性がある。
【０００７】
さらなる手段は、効果的な物質を用いて口臭を単純に覆う方法である。臭気マスキング方法は、臭気が目立たないような濃度で心地よい匂いを有する物質を用いることを含む。ほとんどの場合、この手段は特に臭気に対しては一時的な解決策であり、少量のマスキング着臭剤（通常、ミント風味）を製品から口腔に投与するだけなので、その性能は長続きしない。
【０００８】
種々の抗菌薬剤は口臭を減少させるために口腔内で使用する製品中で使用できる。口腔ケア製品において使用する抗菌薬剤は、口腔内に存在する微生物の集団を減少させ、成長を阻害または代謝活性を縮小するために設計される。この特性を有する一般的な薬剤はトリクロサン（２’，４，４’−トリクロ−２−ヒドロキシジフェニルエーテル）、二酸化塩素、クロルヘキシジン、及びメトロニダゾールを含む。多数の主要な油状体、例えばシトラールも特定の細菌に対して抗菌効果を示すことが知られる。口腔ケア製品中、適当な濃度で当該薬剤を使用することにより非選択的抗菌作用を生じるが、当該作用は口腔内の大部分の天然微小植物に影響を及ぼす。すなわち、抗菌剤は無差別に、天然微小植物を含む口腔内に存在する微生物の全集団を標的とし、影響を与える。これは、天然微小植物は潜在的に病原性の細菌による侵入に対して保護壁（入植抵抗）を提供するので、望ましくない不利な点である。
【０００９】
米国特許出願第２００２／００６４５０５号は高級アルコール及び味マスキング添加剤を含む抗臭組成物に関する。
【００１０】
ＷＯ９８／４４９０１はセダー油、クロラムフェニコール、シトロネラ油、リコリス抽出物、多肉果メボウキ油、レモンメボウキ油、及びローズマリー・オフィシナリス油から選択される抗菌剤を含む口腔衛生組成物に関する。
【００１１】
米国特許第５，４７２，６８４号は、チモール及びオイゲノールの組み合わせまたはリモール、オイゲノール及びセスキテルペンの組み合わせを口腔製品中に含む組成物に関する。オーストラリアティー・ツリー油、カモミールチンキ及びオイカリプトールなどの風味剤も味改善のために加えることができる。
【００１２】
米国特許第６，１９７，２８８号は、感覚的に効果的な量の１以上の特定の悪臭拮抗剤を口腔ケア賦形剤中に含む悪臭拮抗組成物に関する。
【００１３】
米国特許第５，７１１，９３７号は、カルボン、アネトール、シネオール、メチルサリチル酸、オイゲノール、酪酸エチル、及び桂皮アルデヒドから選択される風味成分及び１−メントールを含む抗体含有口腔組成物に関し、当該風味成分及び１−メントールは１：９〜８：２の重量比でブレンドされる。
【００１４】
先行文献には口臭を減少または防止するための一般的な広範囲の手段が開示されているのとは対照的に、本発明は風味物質またはこれらの混合物によるＶＳＣ生成微生物の選択的抑制に基づくものである。
【００１５】
発明の概要
本発明は、従って、特定の物質が、口腔中に存在する微生物による臭気性ＶＳＣの生成を抑制することができるかを決定するための、風味物質の広範囲な試験に基づくものである。この試験に基づき、今までの望ましくない口臭を減少する性質を有し得ることが知られる風味物質を同定した。本発明は従って、口臭を減少または防止する風味組成物を明確にすることを可能にする。さらに、好ましい実施態様において、本発明は風味組成物を、残存する保護性口腔微小植物を維持しつつ、臭気性ＶＳＣを生成する細菌を選択的に標的及び不活性化させる風味物質を含むように設計できる。
【００１６】
従って、１の側面において、本発明は風味物質の混合物である風味組成物を提供し、当該風味組成物が風味組成物の全重量の少なくとも８重量％の、以下からなる群より選択される風味物質を含むことを特徴とする：
（ａ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の１以上から選択される風味物質：１重量％〜４重量％の１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン、８重量％〜１３重量％の５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含むペパーミント油；７０重量％未満のカルボン及び少なくとも１４重量％のリモネンを含むスペアミント油；またはこれらの混合物；及び
（ｂ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の２以上から選択される風味物質：デカノール、オクタナール、ヘキサン酸アリル、アネトール、精製アニシード、メボウキ油、酪酸ベンジル、カモミール油、桂皮アルデヒド、シス−３−酢酸ヘキセニル、天然シトラール、セイロンシトロネラ、ヘプタン酸エチル、オイゲノール、フェンネル・スイート、酢酸ゲラニル、アルファイオノン、ライム、オレンジ香味料、パラクレシルメチルエーテル、アルファピネン。
【００１７】
当該組成物の成分は様々な意図目的に適したグレードで容易に入手可能な公知の風味物質である。当該風味物質及び考えられる供給業者の詳細は、例えば、“Ａｌｌｕｒｅｄ’ｓ  Ｆｌａｖｏｒ  ａｎｄ  Ｆｒａｇｒａｎｃｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２００２”、Ａｌｌｕｒｅｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．，Ｃａｒｏｌ  Ｓｔｒｅａｍ、イリノイ、米国、ＩＳＢＮ  ０−９３１７１０−８４−７に記載されている。
【００１８】
好ましくは、グループ（ａ）及びグループ（ｂ）の物質は合わせて、風味組成物の全重量の少なくとも２０重量％を含み、好ましくは少なくとも４０重量％である。
【００１９】
ペパーミント油及び／またはスペアミント油は通常、天然または合成起源であり、好ましくは天然起源である。
【００２０】
特定のペパーミント油またはスペアミント油の成分、及び各成分の相対量は当業者により、例えば公知の分析技術を用いて容易に決定できる。
【００２１】
ここでの使用に適したペパーミント油の例としては、精製ペパーミント・インディアン（Ｐｅｐｐｅｒｍｉｎｔ  Ｉｎｄｉａｎ  Ｒｅｃｔｉｆｉｅｄ）（全グレード）、ペパーミント・アメリカン・ファーウエスト・バルク（Ｐｅｐｐｅｒｍｉｎｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｒ  Ｗｅｓｔ  Ｂｕｌｋｅｄ）、ペパーミント・アメリカン・ウィラミット・ナチュラル（Ｐｅｐｐｅｒｍｉｎｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｗｉｌｌａｍｅｔｔｅ  Ｎａｔｕｒａｌ）が挙げられる。
【００２２】
好ましくは、ペパーミント油は１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン（プレゴン）を１．５重量％〜３重量％、５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン（イソ−メントン）を８．５重量％〜１２．５重量％、及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含む。
【００２３】
１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン、５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン及びオイカリプトールを特定量で含む１以上のペパーミント油が風味組成物中に存在できる。当該ペパーミント油はここに有用なペパーミント油の要件を満たさないその他のペパーミント油と混合してもよい。
【００２４】
ここで使用できる適当なスペアミント油の例としては、スペアミント・アメリカン・ファーウエスト・スコッチ（Ｓｐｅａｒｍｉｎｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｒ  Ｗｅｓｔ  Ｓｃｏｔｃｈ）、スペアミント・バルク・エキストラ（Ｓｐｅａｒｍｉｎｔ  Ｂｕｌｋｅｄ  Ｅｘｔｒａ）及び再精製天然スペアミント・アメリカン・ファーウエスト（Ｓｐｅａｒｍｉｎｔ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｒ  Ｗｅｓｔ  Ｎａｔｉｖｅ  Ｒｅｄｉｓｔｉｌｌｅｄ）が挙げられる。
【００２５】
７０重量％未満のカルボン及び少なくとも１４重量％のリモネンを含む１以上のスペアミント油が風味組成物中に存在できる。これらの要件を満たさないその他のスペアミント油も存在できる。
【００２６】
ここで有用なグループ（ｂ）風味物質は以下を含む：
デカノール（アルコール  Ｃ１０）；
オクタナール（アルデヒド  Ｃ８）；
ヘキサン酸アリル；
アネトール（ｐ−メトキシプロペニルベンゼン）；
精製アニシード；
メボウキ油（適宜、バジルコモール（ｂａｓｉｌ  ｃｏｍｏｒｅｓ））；
酪酸ベンジル；
カモミール油（適宜、精製イングリッシュカモミール（ｃａｍｏｍｉｌｅ  Ｅｎｇｌｉｓｈ  Ｄｉｓｔｉｌｌｅｄ））；
桂皮アルデヒド（適宜、桂皮アルデヒド抽出物（クエスト・インターナショナルから市販））；
シス−３−酢酸ヘキセニル；
天然シトラール；
セイロンシトロネラ；
ヘプタン酸エチル；
オイゲノール；
フェンネル・スイート；
酢酸ゲラニル；
アルファイオノン（４−（２，６，６−トリメチルシクロヘキシ−２−エン−１−イル）ｂｕｔ−３−エン−２−オン）（クエスト・インターナショナルから市販））；
ライム；
オレンジ香味料、特にＧｉｖａｕｄａｎから市販のオレンジ物質の商品名であるオレンジフレーバー・アーティフィシャル（Ｏｒａｎｇｅ  Ｆｌａｖｏｕｒ  Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ）；
パラクレシルメチルエーテル；
アルファピネン（Ｐｉｎｅｎｅ  ａｌｐｈａ）。
【００２７】
本発明に従う風味組成物はグループ（ｂ）から好ましくは少なくとも３、より好ましくは少なくとも５の風味物質を含む。
【００２８】
本発明の風味組成物は好ましくは少なくとも５重量％、より好ましくは少なくとも１５重量％の風味組成物をグループ（ａ）の風味物質から含む。
【００２９】
本発明の風味組成物は好ましくは少なくとも７重量％、より好ましくは少なくとも１０重量％、さらにより好ましくは少なくとも２０重量％及び最も好ましくは少なくとも３０重量％の風味組成物をグループ（ｂ）の風味物質から含む。
【００３０】
また、本発明の範囲内に含まれるものは、風味物質の混合物である風味組成物を口腔内に導入することにより口臭を減少または防止するための方法、特に化粧的方法であり、当該組成物は風味組成物の全重量の少なくとも８重量％の、以下からなる群より選択される風味物質を含むことを特徴とする：
（ａ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の１以上から選択される風味物質：１重量％〜４重量％の１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン、８重量％〜１３重量％の５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含むペパーミント油；７０重量％未満のカルボン及び少なくとも１４重量％のリモネンを含むスペアミント油；またはこれらの混合物；及び
（ｂ）風味組成物の少なくとも０．５重量％の、以下の２以上から選択される風味物質：デカノール、オクタナール、ヘキサン酸アリル、アネトール、精製アニシード、メボウキ油、酪酸ベンジル、カモミール油、桂皮アルデヒド、シス−３−酢酸ヘキセニル、天然シトラール、セイロンシトロネラ、ヘプタン酸エチル、オイゲノール、フェンネル・スイート、酢酸ゲラニル、アルファイオノン、ライム、オレンジ香味料、パラクレシルメチルエーテル、アルファピネン。
【００３１】
例えば、本発明の風味組成物が口臭を減少または防止する効果は以下の実施例５に記載の通り測定でき、例えば、臭気拮抗作用パネルテストにおいて組成物を試験することにより測定できる。
【００３２】
さらなる側面において、本発明は口腔内の臭気性揮発性硫黄化合物の生成を減少または防止するための、方法、特に化粧的方法を提供し、当該方法は本発明に従う風味組成物を口腔内に導入する工程を含む。
【００３３】
例えば、本発明に従う特定の風味組成物が臭気性ＶＳＣの生成を減少または防止する効果は以下の実施例６に記載の通り、Ｈａｌｉｍｅｔｅｒ  ｄｅｖｉｃｅ（ここでＨａｌｉｍｅｔｅｒは登録商標）を用いて測定できる。
【００３４】
さらなる側面において、本発明は、本発明に従う風味組成物を細菌培養基に導入することにより、臭気性揮発性硫黄化合物の細菌性生成を抑制するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法を提供する。
【００３５】
例えば、細菌（例えば、クレブシエラ・ニューモニエ及びフゾバクテリウム・ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）による臭気性ＶＳＣのｉｎ  ｖｉｔｒｏ生成の抑制は、本発明の組成物に有用な風味物質により、または本発明の組成物自身により、以下の実施例１（ａ）及び１（ｂ）に記載の通り測定できる。通常、細菌は当該細菌の風味物質／風味組成物のＭＩＣ値以下の濃度で抑制される。
【００３６】
本発明の風味組成物に有用な風味物質は口腔内に存在する微生物による臭気性ＶＳＣの生成を抑制することにより口臭を減少または防止できる。特に、風味物質は硫化水素の生成を抑制できる。通常、特定の風味物質は、口腔内に存在するグラム陰性細菌であるクレブシエラ・ニューモニエ及びフゾバクテリウム・ｎｕｃｌｅａｔｕｍによる臭気性ＶＳＣ、特に硫化水素の生成を抑制する。
【００３７】
口腔内の特定の微生物により生成されるＶＳＣの生成を抑制する化合物、例えば風味物質の効果を特徴付ける１の特性は、化合物の最小抑制濃度またはＭＩＣである。ＭＩＣは細菌成長が見られない化合物の最小量である（例えば、ｐｐｍ）。通常、細菌に関する化合物のＭＩＣが低ければ低いほど、化合物の細菌成長の抑制効果が大きい。濃度がＭＩＣ以上であれば、化合物は存在する生存細菌を直接殺傷、または細菌の成長及び繁殖の抑制に作用することができる（抗菌効果）。濃度がＭＩＣ以下であれば、化合物は、例えば悪臭化合物を生成する細菌を不活性化することにより代謝過程を妨げる可能性はあるが、通常、細菌の成長及び繁殖は抑制しない（低致死効果、または低ＭＩＣ効果）。
【００３８】
本発明で有用な風味物質を含む風味組成物の抑制効果は抗菌的に、またはさらに驚くべきことに低致死的に達成することができる。
【００３９】
化合物、例えば風味物質の抗菌効果は、通常２つのタイプに分けられる：細菌成長を抑制できる（静菌作用）または存在する生存細菌を直接殺傷できる（殺菌作用）。
【００４０】
特定の細菌に対する化合物“Ｘ”（風味物質など）の静菌作用は、少量の標準細菌を適当な範囲の濃度でＸを含む培養液内に接種することによりｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験できる。当該培養液を次に適当な時間で培養し、阻害因子を含まない対照と成長を比較する。対照培養液と比較して成長の減少を示す最も低い濃度のＸを含む培養液は、最小抑制濃度（ＭＩＣ）として定義される。
【００４１】
化合物“Ｙ”（風味物質など）の殺菌作用の測定は、種々の濃度の化合物Ｙを加えることにより行われ、比較的高い標準数の細菌を含む培養液を複製する。抗菌作用を起こさせた所定時間後、細菌培養基のアリコートを希釈し（通常、１０倍工程で）及び寒天プレート上に分注する。当該プレートを生存細胞が目に見えるコロニーを生成するという見込みのもと培養する。希釈を考慮に入れてコロニーの数を増殖させ、培養液中の生存細胞数を定着させる。再度、化合物Ｙを含有する培養液を未処理の対照培養液と比較する。生存細菌数の減少を生じた化合物Ｙの最小濃度が最小殺菌濃度（ＭＢＣ）である。ＭＢＣは所定の殺菌度を生じるために必要なＭＢＣに関しても表すことができる（例えば、３ｌｏｇ１０減少数、９９．９％殺菌に等しい）。さらに、ＭＢＣは速度に関して、すなわち所定のＭＢＣ効果のために必要な薬剤曝露時間で表すこともできる。
【００４２】
さらに、抑制プロセスが低致死（または低ＭＩＣ）の可能性もあり、それにより風味物質は代謝過程を妨げるが、通常細菌成長は抑制しない。
【００４３】
通常、細菌が生成するＶＳＣは少なくとも４０％減少される。例えば、グループ（ａ）及びグループ（ｂ）風味物質は、実施例１（ａ）または１（ｂ）に記載の通り測定して、５００ｐｐｍの風味物質濃度で少なくとも４０％のＶＳＣ減少値が得られる。グループ（ａ）及びグループ（ｂ）風味物質は驚くべきことに、特定の細菌に対して優れた活性を示す。例えば、クレブシエラ・ニューモニエ及びフゾバクテリウム・ｎｕｃｌｅａｔｕｍ細菌に関してグループ（ｂ）の各風味物質のＭＩＣ値は通常１０００ｐｐｍ（０．１％）以上であり、一方、グループ（ａ）のペパーミント及びスペアミント油は通常、クレブシエラ・ニューモニエ細菌に関してＭＩＣ値が２５００ｐｐｍ（０．２５％）または約５０００ｐｐｍ（０．５％）である。このようなＭＩＣ値を有する物質は通常、ＶＳＣ生成微生物の抑制には効果がないと考えられ、従って口臭活性が低い。上述の通り、通常、物質のＭＩＣが低いほど、物質の細菌成長を抑制する効果が高い。
【００４４】
臭気性ＶＳＣ生成の減少を達成するには３つの方法が可能である。第１の方法において、風味物質（または風味組成物）は、口腔内細菌を直接（明白な抗菌）殺菌することができ（例えば、１０倍以上で）、第２の方法において、少なくとも７０％の微生物細胞の生存を維持しながら臭気性ＶＳＣ生成に作用することができ、第３の方法において、以下の実施例２に記載の通り測定して最小抑制濃度（ＭＩＣ）以下の濃度で臭気性ＶＳＣ生成を抑制できる。第３の方法は、天然口腔微小植物に影響を及ぼさずに、口臭拮抗作用の利点が得られるので好ましい。従って、好ましくは、臭気性ＶＳＣの細菌生成は口腔の天然微小植物を著しく荒らすことなく減少または除去できる。このことは、臭気性ＶＳＣの生成に関係する細菌、特にクレブシエラ・ニューモニエ及びフゾバクテリウム・ｎｕｃｌｅａｔｕｍを、ＭＩＣ以下の濃度で抑制することにより達成できる。
【００４５】
抗菌作用に関して、１以上の以下の物質を含むことは本組成物にとって有用である：ティー・ツリー油、アルデヒド  Ｃ９（ノナナール）、テルペン非含有オレンジ油及びアルデヒド  Ｃ１０（デカナール）。Ｃｉｔｒａｌｄｏｎｅ（Ｃｉｔｒａｌｄｏｎｅは登録商標であり、Ｃｉｔｒａｌｄｏｎｅ  ＮＡ４０６５としてＢｕｓｈ  Ｂｏａｋｅ  Ａｌｌｅｎから市販）も有用である。当該物質は風味組成物の全重量の０．０１重量％〜１．０重量％の範囲またはそれ以上の量で存在することができ、通常、実施例１（ａ）または１（ｂ）に記載の方法により測定して５００ｐｐｍの濃度で少なくとも４０％のＶＳＣ減少値を示し、一方、対応するＭＩＣは１０００ｐｐｍ未満である。
【００４６】
さらに別の側面において、本発明は口臭を減少及び／または防止する目的で、１以上の以下の風味物質の使用を提供する：オクタナール、ヘキサン酸アリル、アネトール、精製アニシード、メボウキ油、酪酸ベンジル、カモミール油、桂皮アルデヒド、シス−３−酢酸ヘキセニル、ヘプタン酸エチル、フェンネル・スイート、アルファイオノン、ライム、オレンジ香味料、パラクレシルメチルエーテル、アルファピネン、７０重量％未満のカルボン及び少なくとも１４重量％のリモネンを含むスペアミント油、１重量％〜４重量％の１−イソプロピリデン−４−メチル−２−シクロヘキサノン、８重量％〜１３重量％の５−メチル−２−（１−メチルエチル）−１−シクロヘキサノン及び０．５重量％未満のオイカリプトールを含むペパーミント油。
【００４７】
風味組成物は通常、組成物に全体として望ましい風味特性を与えるように選択されるその他の風味成分（風味組成物を処方する際に現在使用されている４００〜５００程度の風味物質から選択できる）も含む。
【００４８】
本発明の風味組成物は当業者に公知の通り、特定の成分を簡単に混合することにより容易に作ることができる。
【００４９】
本発明の風味組成物は広い範囲の消費者製品の用途において有用であり、特に、歯磨き粉、マウスウオッシュ、チューイングガム（“チューイングガム”の語は風船ガムも含む）、デンタルフロス、溶解性マウスフィルム、口臭予防スプレー及び口臭予防タブレットなどの口腔ケアに有用である。
【００５０】
本発明はその範囲内に消費者製品、特に口腔ケア製品、本発明に従う風味組成物などを含む。
【００５１】
本発明に従う風味組成物を含む消費者製品、特に口腔ケア製品は当業者に公知の従来方法において処方できる。例えば、歯磨き粉処方は通常、０．３重量％〜２．０重量％、好ましくは０．５重量％〜１．５重量％及びより好ましくは０．８重量％〜１．２重量％の風味組成物を含む。マウスウオッシュは通常、０．０５重量％〜２．０重量％、好ましくは０．１重量％〜１．０重量％、及びより好ましくは０．１５重量％〜０．５重量％の範囲で風味組成物を含む。チューイングガムに関しては、本発明の組成物は０．５重量％〜３．５重量％、好ましくは０．７５重量％〜２．０重量％及びより好ましくは１．０重量％〜１．７５重量％の範囲で存在することができる。
【００５２】
消費者製品は適宜、亜鉛塩、トリクロサン、銅塩、ストロンチウム、錫（第一錫）、過酸化物、亜塩素酸塩、ピロリン酸塩、ドデシル硫酸ナトリウム／ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ／ＳＬＳ）、フッ化物、パラベン、塩化セチルピリジニウム、サンギナリンまたはクロルヘキシジンなどの成分を含むこともでき、使用中に口臭拮抗作用の利点をもたらすことを助ける。
【００５３】
本発明を以下の実施例により、及び添付の図面を参照することにより説明する。
【００５４】
以下の実施例１、５及び６に記載の方法は本発明に従う風味組成物（またはここで有用な風味物質）の性能を簡単に示す。商業的に有用である風味組成物は、ここに記載の方法全てにおいて優れた性能を示す組成物である必要はなく、すなわち、１の方法で優れた性能を示すが、他の方法ではそうではない風味組成物は必ずしも劣った組成物であるというわけではない。
【００５５】
実施例１：ＶＳＣ  減少分析
実施例１（ａ）：好気性ＶＳＣ減少分析
好気性条件下で硫化水素の生成を抑制する風味物質（または風味組成物）の能力を以下の方法を用いて測定した。
【００５６】
微生物クレブシエラ・ニューモニエ  ＡＴＣＣ  １００３１（アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）、Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  １５４９、マナッサス、バージニア州、２０１０８、米国）の細菌培養物をトリプトン大豆培養基（ＴＳＢ）（Ｏｘｏｉｄ，Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ、英国）中、３７℃で一晩中成長させた。当該細菌培養基を３５５５ｇで１０分間遠心することにより集菌した。得られた細菌をそれから消毒０．３％ＴＳＢを用いて３回洗浄し、１２ｍｌの０．３％  ＴＳＢ中に再懸濁させた。懸濁液の光学密度をＰｙｅ  Ｕｎｉｃａｍ  ８６２０分光光度計（Ｐｙｅ  Ｕｎｉｃａｍ，ケンブリッジ、英国）を用いて測定し、次に０．３％  ＴＳＢを加えることにより調節し、６１０ｎｍの波長で３９の光学密度が得られた。消毒システインを次に加え、反応容器中の最終的濃度は５．０％  ｗ／ｖであった。当該混合物を続いて、２００ｒｐｍ、３時間で振とうさせながら３７℃で培養し、微生物中にシステイン代謝を誘導した。この後、１ｍｌの細菌懸濁液のアリコートを１１．５５ｍｌの０．３  ＴＳＢを含むガラス瓶内に注ぎ、続いて２００μｌの風味物質または風味組成物３２，０００ｐｐｍ原液を加え、ガラス容器の最終濃度５００ｐｐｍを得た。２５０μｌの２％  ｗ／ｖシステイン溶液を次に各ガラス瓶に加え、当該ガラス瓶に蓋をし、気密シールを作った。当該ガラス瓶を次に３７℃でさらに１時間、２００ｒｐｍで振とうさせながら培養した。この後、５００μｌの上部空間の気体を除去し、サンプル中に存在する硫化水素（Ｈ２Ｓ）の量をＧＣ分析を用いて評価した。
【００５７】
分析用ＧＣ条件：−
ＧＣ：  Ｃａｒｌｏ  Ｅｒｂａ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ＧＣ  Ｍｅｇａ２シリーズ
カラム：      ＣＰ−ＳＩＬ  ８カラム
２５ｍ×０．３２ｍｍ（内径）×０．４μｍ（フィルム厚さ）
検出器：      ＳＳＤ  ２５０
オーブン温度：      ７０℃
注入温度：      １５０℃
分割比：      ５０：１
【００５８】
実施例１（ｂ）：嫌気性ＶＳＣ減少分析
嫌気性条件下で硫化水素の生成を抑制する風味物質（または風味組成物）の能力を以下の方法を用いて測定した。
【００５９】
微生物フゾバクテリウム・ｎｕｃｌｅａｔｕｍ  ＡＴＣＣ  １０９５３（アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）、Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ  １５４９、マナッサス、バージニア州、２０１０８、米国）の培養物を２５０ｍｌの前もって還元したＳｃｈａｅｄｌｅｒ  Ａｎａｅｒｏｂｉｃ培養基（ＳＡＢ）（Ｏｘｏｉｄ、Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ、英国）内に植菌し、４８時間、嫌気性条件で培養した。
【００６０】
嫌気性キャビネット（コンパクト嫌気性ワークステーション、Ｄｏｎ  Ｗｈｉｔｌｅｙ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｓｈｉｐｌｅｙ，Ｗｅｓｔ  Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ）内で、上部空間ガラス瓶に９ｍｌのフゾバクテリウム・ｎｕｃｌｅａｔｕｍ培養物（６１０ｎｍで培養物のおおよその光学密度０．５（ＯＤ６１０＝０．５））を用いて植菌した。各ガラス瓶に１．０ｍｌの２％  ｗ／ｖシステイン溶液を加え、ガラス瓶中の最終体積を１０ｍｌとした。濃度３２，６００ｐｐｍの風味物質／風味組成物原液を５ｍｌの０．３％  ＳＡＢを１６３ｍｇの風味物質／風味組成物に加えることにより調製した。風味物質／風味組成物を次に、ガラス瓶に加え（対照を除く）、最終濃度を５００ｐｐｍとした。消毒ガラス瓶用蓋で当該ガラス瓶上をふさぎ、そしてこれらのガラス瓶を１６０ｒｐｍで４時間振とうさせながら３７℃で培養させた。培養時間経過後、ガラス瓶中の上部空間気体の硫化水素含量を上記に示した条件を用いてＧＣにより分析した。
【００６１】
実施例は、実施例１（ａ）及び１（ｂ）に記載の分析の結果は、風味物質（または風味組成物）によるＶＳＣ生成、特に硫化水素の抑制を測定するために用い、試験物質の９５％以上に匹敵することを示した。
【００６２】
実施例２：風味物質または風味組成物の最小抑制濃度（ＭＩＣ）の決定
風味物質または風味組成物のＭＩＣは以下の方法により測定した。
【００６３】
試験接種材料クレブシエラ・ニューモニエ（上記）の新しい培養物を殺菌０．１％特別ペプトン溶液中で希釈し、ｍｌ当り約１０６コロニー形成単位（ｃｆｕ）の濃度を得た。
【００６４】
風味物質または風味組成物の試験サンプルを殺菌トリプトン大豆培養基（ＴＳＢ）中で希釈し、最初の原液を得た（通常、濃度４０，０００ｐｐｍ（４％  ｖ／ｖ））。しかしながら、風味物質／風味組成物の最初の原液の濃度は、種々の範囲の濃度を調べたい場合、様々であってよい。１のサンプルに対して標準、９６−ウェルマイクロタイタープレート（標識Ａ−Ｈ）の各列を配置した（すなわち、プレート毎に８サンプル）。列Ｈは試験物質を含まない細菌成長から得た混濁度を示す細菌対照として使用するためのＴＳＢのみを含んだ。無菌で、２００μｌの風味物質／風味組成物の最初の希釈物を適当な列の第１及び第７ウェルに移した。その他全てのウェルを８チャネルマイクロピペットを用いて１００μｌの殺菌ＴＳＢで満たした。カラム１の各ウェルの含有物を、１００μｌをカラム２に移す前に、ピペットの先でサンプルを吸引し上下させることにより混合した。同じ消毒ピペットの先を用いて、カラム７中の１００μｌの各ウェルをカラム８の適当なウェル中に移した。それからこれら８個のピペットの先を消毒液内に廃棄した。８個の新しい消毒したピペットの先を用いて当該過程は１００μｌをカラム２からカラム３内（及び８及び９内）に移動させることにより繰り返した。当該過程をカラム６及び１２内の全てのウェルが２００μｌ含むまで繰り返した。混合後、１００μｌをカラム６及び１２のウェルから取除いて廃棄した。最終的に、１００μｌの前もって希釈した細菌試験培養物（約１０６ｃｆｕ／ｍｌ）を加え、従って各ウェルにおいて最終体積２００μｌを得た。
【００６５】
全く同様にして８個のサンプルの各セット用に空のプレートを用意し、例外として１００μｌの消毒０．１％  ＴＳＢを細菌培養物の代わりに加えた。このプレートを対照プレートとして用い、それに対して試験プレートを示す。
【００６６】
試験プレート及び対照プレートを次に加圧滅菌テープを用いて密封し、２４時間、３７℃で培養した。２４時間後、当該ウェルを濁度について調べ、当該物質が成長を抑制したかどうかを測定した。
【００６７】
マイクロタイター・プレートリーダー（モデルＭＲＸ、ダイナテック・ラボラトリーズ（Ｄｙｎａｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）をプレートを穏やかに攪拌して含有物を混合するように設置した。５４０ｎｍでの吸光度（以下、簡略のため“Ａ５４０”とする）を細菌成長から生じる濁度の指標として用いた。サンプルの各セットの非植菌プレートである対照を最初に読み取り、それからプレートリーダーを対照測定値を使用するようにプログラムし、試験物質の同じセットの植菌プレートに関するその他の全てのプレート測定値を削除した（すなわち、培養中の風味変化及び考えられる色変化に起因する濁度を除去する）。従って、得られた補正測定値は細菌成長による濁度から得られた吸収である。培養時間中の吸収変化が０．２Ａ５４０未満となるように、ＭＩＣを成長を抑制するために必要な風味物質／風味組成物の最も低い濃度とした。
【００６８】
実施例３：風味組成物
風味組成物Ａ
ペパーミント、スペアミント、ウィンター・グリーン、シナモン系の本発明に従う風味組成物は以下の成分を混合することにより調製した。
【表１】
2006517797.tif 000002
【００６９】
当該組成物は上述の実施例１（ａ）に記載の方法を用いて試験したとき、６７％のＶＳＣ減少値を与えた。
【００７０】
風味組成物Ｂ
ペパーミント、ウィンター・グリーン系の本発明に従う風味組成物は以下の成分を混合することにより調製した。
【表２】
2006517797.tif 000003
【００７１】
当該組成物は上述の実施例１（ａ）に記載の方法を用いて試験したとき、７５％のＶＳＣ減少値を与えた。
【００７２】
風味組成物Ｃ
ペパーミント系の本発明に従う風味組成物は以下の成分を混合することにより調製した。
【表３】
2006517797.tif 000004
【００７３】
当該組成物は上述の実施例１（ａ）に記載の方法を用いて試験したとき、８３％のＶＳＣ減少値を与えた。
【００７４】
風味組成物Ｄ
ペパーミント、ウィンター・グリーン系の本発明に従う風味組成物は以下の成分を混合することにより調製した。
【表４】
2006517797.tif 000005
【００７５】
当該組成物は上述の実施例１（ａ）に記載の方法を用いて試験したとき、８２％のＶＳＣ減少値を与えた。
【００７６】
風味組成物E
ペパーミント、ウィンター・グリーン、スパイス系の本発明に従う風味組成物は以下の成分を混合することにより調製した。
【表５】
2006517797.tif 000006
【００７７】
当該組成物は上述の実施例１（ａ）に記載の方法を用いて試験したとき、７９％のＶＳＣ減少値を与えた。
【００７８】
風味組成物F
スペアミント、ペパーミント系の本発明に従う風味組成物は以下の成分を混合することにより調製した。
【表６】
2006517797.tif 000007
【００７９】
当該組成物は上述の実施例１（ａ）に記載の方法を用いて試験したとき、７２％のＶＳＣ減少値を与えた。
【００８０】
実施例４：処方
上記ＣまたはＦの風味組成物は、当業者に公知の従来方法に従って調製する以下の白亜（ｃｈａｌｋ）歯磨き粉中に含めることができる。
【００８１】
白亜歯磨き粉
【表７】
2006517797.tif 000008
【００８２】
上記Ａ−Ｆの風味組成物は、当業者に公知の従来方法に従って調製される、以下の歯磨き粉、マウスウオッシュまたはチューイングガム処方中に含めることができる。
【００８３】
不透明シリカ歯磨き粉
【表８】
2006517797.tif 000009
【００８４】
インスタント（Ｒｅａｄｙ−ｔｏ−Ｕｓｅ）マウスウオッシュ
混合物Ａ−アルコール相
％  ｗ／ｗ
エタノール９６％、二回精製                                １２．０００
ＰＥＧ４０水添化ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＲＨ４０）    ０．２５０
風味組成物                                                  ０．２００
混合物Ｂ−水相
％  ｗ／ｗ
ソルビトール７０％シロップ                                １２．０００
サッカリン２５％溶液                                        ０．２００
塩化セチルピリジニウム                                      ０．０２５
蒸留水                                                    ７５．３２５
Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＲＨ４０は商標である。
【００８５】
アルコール相（混合物Ａ）及び水相（混合物Ｂ）を別個に調製し、それから混合してマウスウオッシュを得た。
【００８６】
チューイングガム
【表９】
2006517797.tif 000010
【００８７】
実施例５：臭気拮抗作用パネルテスト
本発明を用いて風味組成物E及びFを作り、口臭パネルテストにおいて口臭を減少及び／または防止する効果を試験した。
【００８８】
パネルテストは風味組成物を含む口腔ケア製品の口臭への効果を評価及び対照（風味組成物を含まない対応する口腔ケア製品）と比較する客観検査である。
【００８９】
当該試験は二重盲検法で行い、従って、鑑定士及び参加者のいずれも対照歯磨き粉（風味組成物を含まない歯磨き粉）または本発明の風味組成物を含む歯磨き粉のどちらを試験しているのかがわからないようにして行われる。パネルテストは無作為に行うが、４または５週間交差（ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ）実験計画で調整し、例えば、４週間試験において、通常、風味組成物を含む３つの試験製品及び１の対照（風味組成物を含まない）製品を用い、各参加者は次週毎に各製品を試験する。“洗い流し（ｗａｓｈｏｕｔ）”歯磨き粉を各試験全体を通して用いる。すなわち、参加者は公知の風味剤の歯磨き粉が与えられ、試験全体を通して自宅で使用し、当該歯磨き粉は細菌活性、例えばトリクロサンなどを含まない。このようにして、ヒト口臭評価に関して本発明に従う風味組成物の効果を試験できる。
【００９０】
口腔ケア製品の口臭の効果は息評価の訓練全過程を受けた２、３人の鑑定士により評価する。試験中、鑑定士は他の鑑定士のスコアがわからないようにして、参加者のスコアをつけ、これらの結果を統計的に評価し、鑑定士のスコアが同程度であることを確認する。
【００９１】
参加者は２４人のヒト被験者から構成される。参加者は各試験日の前夜に香辛料の入った料理（例えば、ニンニク、玉ねぎ）を避けなければならない。彼らは試験日の朝に全ての衛生措置を避けることも要求され、コーヒーを飲んではならず、または香水または化粧料の使用も避けなければならない。
【００９２】
試験中、標準量（約２ｇ）の歯磨き粉：１の風味組成物を含む上記実施例４に記載の処方の不透明シリカ歯磨き粉または風味組成物を含まない対照を歯ブラシにつけ、参加者は通常のやり方で１分間歯磨きする。各参加者は試験製品または対照製品を統計的計画に従って配分される。
【００９３】
息を歯磨き直前（ｔ＝０）及び、続いて歯磨き後２０分、４０分及び６０分に官能評価する。当該評価は各参加者について行い、各参加者は１の鑑定士からまず指定時間、２分間、口を閉じるように指示される。２分後、参加者は頭を後ろに傾け、呼吸せずに口をあける。そして各鑑定士が順次参加者からの口臭を嗅ぎ、標準尺度０〜５で官能的に口臭の点をつける。ここで０は口臭なしであり、５は極度の口臭である。
【００９４】
息を官能評価した各２０分について、鑑定士により標準尺度０〜５で得点付けられた口臭をパーセントとして表すことができる。簡潔に言うと、口臭スコアは以下のようにおおよそのパーセンテージとして計算できる：
【数１】
2006517797.tif 000011
【００９５】
例えば、ｔ＝０での参加者の官能スコアが３だとすれば、例えば風味組成物Ｅを含む歯磨き粉で歯磨きした後のｔ＝６０での２をここから引き、従って臭気スコアは１００−（（３−２）／３ｘ１００）＝６６．６％となる。臭気減少は従って３３．３３％である。臭気減少はｔ＝０での基準臭気スコア１００％に関してパーセントで表し、１００％（ｔ＝０での基準）−臭気スコア（％）として計算する。
【００９６】
実際に、官能スコアを各時間、すなわち、歯磨き直前（ｔ＝０）及び歯磨き後２０、４０分等について、ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．，ＳＡＳ  Ｃａｍｐｕｓ  Ｄｒｉｖｅ  Ｃａｒｙ，ＮＣ２７５１３−２４１４、米国により製造されているコンピューター統計パッケージＳＡＳ（ＰＲＯＣ  ＧＬＭ）中の一般線形モデルを用いて、鑑定士、参加者、製品、試験セッション及び関連相互作用に関する母数効果を使用して統計的に分析する。官能スコアはＡＮＯＶＡによっても分析し、これは試験における各製品に関する、製品使用前及び製品使用後の各時間の３人の鑑定士の官能スコアに基づいて（内部参加者の変動に関して補正）分散分析を提供し、平均値を与える。それから減少率を口臭スコアの相加平均を用いて処理前平均（時間ゼロ）または同じ時間の風味組成物を含まない対照歯磨き粉に対して計算できる。ＡＮＯＶＡ統計の他に、モデル期間（ｍｏｄｅｌ  ｔｅｒｍｓ）、平均及び信頼区間（ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅ  ｉｎｔｅｒｖａｌｓ）を各製品に関して計算する。数組の製品の事後比較をｔ−検定（ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ−ｔｅｓｔ）を用いて評価する。例えば、風味組成物Ｅ及びＦは、基準（処理前／時間ゼロ）と比較して６０分でそれぞれ３５％及び４０％の臭気減少率である。
【００９７】
図１及び２は、対照として風味組成物を含まない歯磨き粉と比較した風味組成物Ｅ（図１）及び風味組成物Ｆ（図２）を含む歯磨き粉の時間（分）に関しての臭気スコア（％）を計算した結果を示す。ヒト対象において使用した風味組成物Ｅ及びＦを含む歯磨き粉は、風味組成物を含まない歯磨き粉と比較して改善された口臭減少率を与えることがグラフからわかる。
【００９８】
実施例６：臭気拮抗作用パネルテストにおけるＨａｌｉｍｅｔｅｒ（ＨＡＬＩＭＥＴＥＲは商標である）デバイス評価口臭スコア
本発明に従う風味組成物を含む歯磨き粉の口臭効果をＨａｌｉｍｅｔｅｒ（登録商標）デバイス（Ｉｎｔｅｒｓｃａｎ社、ＰＯ  Ｂｏｘ  ２４９６、Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ、カリフォルニア州、９１３１３−２４９６、米国）を用いて調べた。
【００９９】
Ｈａｌｉｍｅｔｅｒ測定を以下の方法で行った。
【０１００】
各参加者は標準供給元から“曲げ易い”新しいストローを選択した。これをＨｅｌｉｍｅｔｅｒデバイスのシリコーン・チューブ内にしっかりと挿入した。それから参加者は２分間、口を開けないようにした。２分経過後、参加者はチューブの末端を口内に入れ、ストローを軽く噛みながら、ストローが口内の標準深さまで挿入されているかを確かめる。
【０１０１】
歯磨き前に口臭測定をＨａｌｉｍｅｔｅｒデバイス上で行った。実施例５のように、参加者が対照歯磨き粉または風味組成物を含む歯磨き粉を用いて１分間、通常のやり方で歯磨きした場合、Ｈｅｌｉｍｅｔｅｒデバイス上で測定値を歯磨き後２０分、４０分、及び６０分で記録した。
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】図１は風味組成物Ｅ（実施例を参照）（三角印を結ぶ実線により表す）を含む歯磨き粉及び風味組成物を含まない歯磨き粉（四角印を結ぶ破線により表す）に関する臭気スコア（パーセント）対時間（分）のグラフであり、各歯磨き粉で磨く前（ｔ＝０）及び後の口臭スコアの結果を示す。ここで口臭スコアはｔ＝０、１００％に対して設定した基準と比較する。
【図２】図２は図１に類似のグラフであるが、風味組成物Ｆ（実施例を参照）を含む歯磨き粉（バツ印を結ぶ実線により表す）及び風味組成物を含まない歯磨き粉（四角を結ぶ破線により表す）に関する結果を示す。
【図１】
2006517797.tif 000012
【図２】
2006517797.tif 000013
【国際調査報告】
2006517797.tif 000014
2006517797.tif 000015
2006517797.tif 000016