(57)【要約】本発明は、一般に、血管新生、細胞移動、細胞侵入及び細胞増殖を阻害するペプチド、血管新生、細胞移動、細胞侵入及び細胞増殖を阻害するペプチドを調製する方法、これらペプチドの医薬組成物並びにこれらのペプチド及び医薬組成物を使用して異常な血管新生に関連した疾患を治療する方法に関連する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式（Ｉ）：
【化１】
2006514116.tif 000006
（式中、
ａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚは０又は１であり；
Ａは環状アミノ酸であり；
Ｂは塩基性アミノ酸であり；
Ｃは小アミノ酸（small amino acid）であり；
Ｒ1はアルキル、置換されたアルキル、アシル、置換されたアシル、アルキルスルホニル、置換されたアルキルスルホニル、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、アリールスルホニル、置換されたアリールスルホニル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリールスルホニル、置換されたヘテロアリールスルホニル、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルであり；
Ｒ2はアルキル、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）oＲ5又は−（ＣＭｅ）mＳ（Ｏ）nＲ5であり；
ｍは、１、２、３又は４であり；
ｎ及びｏは独立して０、１又は２であり；
Ｒ3は−ＣＨ2ＣＯＮＨ2又は−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ2であり；
Ｒ4はアルキル、−ＮＲ6Ｒ7又は−ＯＲ8であり；
Ｒ5はアルキル、置換されたアルキル、アシル、置換されたアシル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルであり；
Ｒ6及びＲ7は独立して水素又はアルキルであり；そして
Ｒ8はアルキル、置換されたアルキル、アリール置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又は置換されたヘテロアリールアルキルであり；
但し：
Ｒ5はｍが１である場合にメチルではなく；
ａは、Ａがプロリンであり、Ｂがヒスチジンであり、Ｃがセリンでなければ１であり、そしてｂはａが０である場合に０であり；そして
Ｒ2はｂ、ｘ、ｙ及びｚが１でなければ、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5又は−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）oＲ5である）
の化合物又はその医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物又はＮ−酸化物。
【請求項２】
Ａがプロリンであり、Ｂがヒスチジンであり、Ｃがセリンであり、そしてＲ3が−ＣＨ2ＣＯＮＨ2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1がアシル、置換されたアシル、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、オキシカルボニル及び置換されたオキシカルボニルである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1がアシル、置換されたアシル、オキシカルボニル及び置換されたオキシカルボニルである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ2が−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5又は−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）ｏＲ5であり、そしてｍが１又は２である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ4がＮＲ7Ｒ8であり且つＲ7及びＲ8は水素である、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項７】
ａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
ｘが０であり、ａ、ｂ、ｙ及びｚが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
ｘ及びｙが０であり、そしてａ、ｂ及びｚが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
ｘ、ｙ及びｚが０であり、そしてａ及びｂが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
ｘ、ｚ、ａ及びｂが１であり、そしてｙが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
ｘ、ａ及びｂが１であり、そしてｙ及びｚが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
ｙ、ａ及びｂが１であり、そしてｘ及びｚが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
ｘ、ｙ、ｚ及びａが１であり、そしてｂが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
ｙ、ｚ及びａが１であり、そしてｘ及びｂが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
ｘ、ｙ、ｚ及びｂが１であり、そしてａが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
ｚ及びａが１であり、そしてｘ、ｙ及びｂが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
ａが１であり、そしてｘ、ｙ、ｚ及びｂが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
ＡがＤアミノ酸である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
Ａ、Ｂ及びＣがＬアミノ酸及びＲ2及びＲ3に対してそれぞれ結合しているα炭素原子であり、Ｌ配置を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ1がアシル、置換されたアシル、オキシカルボニル及び置換されたオキシカルボニルであり；
ａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚが１であり；
ｍが１又は２であり；そして
Ｒ4がＮＲ7Ｒ8であり、そしてＲ7とＲ8が水素である、
請求項２に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ1がアシルである、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3でありＲ2がアルキルである、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ2がメチル又はアリルである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3であり、Ｒ2が−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5であり、そしてｍが１である請求項２２に記載の化合物。
【請求項２６】
ｎが０であり、そしてＲ5はアルキル又は置換されたアルキルである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｒ5がエチル、ｔ−ブチル又は−ＣＨ2ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ3である、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
ｎが０であり、そしてＲ5がアリールアルキル又は置換されたアリールアルキルである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ5が
【化２】
2006514116.tif 000007
である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
ｎが０であり、そしてＲ5がアシル又は置換されたアシルである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ5が
【化３】
2006514116.tif 000008
である、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
ｎが０であり、そしてＲ5がオキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ5が
【化４】
2006514116.tif 000009
である、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3であり、Ｒ2が−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）oＲ5あり、ｍが１である請求項２２に記載の化合物。
【請求項３５】
ｎ及びｏが０であり、そしてＲ5がアルキル又はアリールである、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
Ｒ5がメチル、エチル又はフェニルである、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3であり、Ｒ2が−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5であり、そしてｍが２である請求項２２に記載の化合物。
【請求項３８】
ｎが０であり、そしてＲ5がアルキル又はアリールアルキルである、請求項３７に記載の化合物。
【請求項３９】
Ｒ5がメチル又はベンジルである、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
ｎが１又は２であり、そしてＲ5がアルキルである、請求項３７に記載の化合物。
【請求項４１】
Ｒ5がメチルである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４２】
ｎが０であり、そしてＲ5がアシルである、請求項３７に記載の化合物。
【請求項４３】
Ｒ5がピバロイル又は
【化５】
2006514116.tif 000010
である、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４４】
Ｒ1がアシル、置換されたアシル、オキシカルボニル及び置換されたオキシカルボニルであり；
ｍが１又は２であり；そして
Ｒ4がＮＲ7Ｒ8であり、そしてＲ7及びＲ8が水素である、
請求項２に記載の化合物。
【請求項４５】
ｘが０であり、そしてａ、ｂ、ｙ及びｚが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項４６】
ｘ及びｙが０であり、そしてａ、ｂ及びｚが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項４７】
ｘ、ｙ及びｚが０であり、そしてａ及びｂが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項４８】
ｙが０であり、そしてａ、ｂ、ｘ及びｚが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項４９】
ｙ及びｚが０であり、そしてａ、ｂ及びｘが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項５０】
ｘ及びｚが０であり、そしてａ、ｂ及びｙが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項５１】
ｂが０であり、そしてａ、ｘ、ｙ及びｚが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項５２】
ｂ及びｘが０であり、そしてａ、ｙ及びｚが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項５３】
ｂ、ｘ及びｙが０であり、そしてａ及びｚが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項５４】
ｂ、ｘ、ｙ及びｚが０であり、そしてａが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項５５】
Ｒ1がアシルであり、Ｒ2が−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5であり、ｍが１でありそしてＲ5がアルキルである、請求項４５〜５４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５６】
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3であり、Ｒ5がメチルである、請求項５５に記載の化合物。
【請求項５７】
ａが０であり、そしてｂ、ｘ、ｙ及びｚが１である、請求項４４に記載の化合物。
【請求項５８】
Ｒ1が−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3である、請求項５７に記載の化合物。
【請求項５９】
請求項１もしくは請求項２に記載の化合物及び医薬的に許容できる希釈剤、賦形剤もしくはアジュバントを含んで成る、医薬組成物。
【請求項６０】
患者のガンを治療もしくは予防するための方法であって、かかる治療を必要とする患者に対して、治療上有効な量の請求項１もしくは２に記載の化合物を投与することを含んで成る方法。
【請求項６１】
患者のガンを治療又は予防するための方法であって、かかる治療を必要とする患者に対して、治療上有効な量の請求項５９に記載の医薬組成物を投与することを含んで成る方法。
【請求項６２】
治療を必要とする患者に対して、治療上有効な量の他の抗ガン剤又は当該他の抗ガン剤及び医薬的に許容できる希釈剤、賦形剤もしくはアジュバントを含んで成る医薬組成物を投与することを更に含んで成る、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
治療を必要とする患者に対して、治療上有効な量の他の抗ガン剤又は当該他の抗ガン剤及び医薬的に許容できる希釈剤、賦形剤又はアジュバントを含んで成る医薬組成物を投与することを更に含んで成る、請求項６０に記載の方法。
【請求項６４】
前記ガンが、乳ガン、腎ガン、脳のガン、結腸ガン、前立腺ガン、軟骨肉腫又は血管肉腫である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６５】
前記ガンが、乳ガン、腎ガン、脳のガン、結腸ガン、前立腺ガン、軟骨肉腫又は血管肉腫である、請求項６１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、一般に、血管形生、細胞移動、細胞侵入及び細胞増殖を阻害するペプチド、血管形生、細胞移動、細胞侵入及び細胞増殖を阻害するペプチドを調製する方法、これらペプチドの医薬組成物並びにこれらのペプチド及び医薬組成物を使用して異常な血管新生に関連した疾患を治療する方法に関連する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
ガンの形態の大部分は固形腫瘍に由来し（Shockeyら、Ann. N.Y. Acad. Sci. 1991, vol.617: pp.367〜382）、そのことは、臨床における治療の例えば、モノクローナル抗体及び抗毒素の使用に対する耐性で証明されている。ガンを治療するための抗血管形成療法は、固形腫瘍が持続的に増殖するためには血管形成（即ち、新たなる血管の形成）を必要とするという認識から展開して来た（Folkman, Ann. Surg. 1972, vol.175: pp.409〜416; Folkman, Mol. Med. 1995, vol.1 (No.2): pp.120〜122; Folkman, Breast Cancer Res. Treat. 1995, vol.36 (No.2): pp.109〜118; Hanahanら、Cell 1996, vol.86 (No.3): pp.353〜364）。動物モデルにおける抗血管新成療法の有効性が当業界で示されている（Millauerら、Cancer Res. 1996, vol.56: pp.1615〜1620; Borgstromら、Prostrate 1998, vol.35: pp.1〜10; Benjaminら、J. Clin. Invest. 1999, vol.103: pp.159〜165; Merajverら、Proceedings of Special AACR Conference on Angiogenesis and Cancer 1998, Abstract #B-11、1月号 pp.22〜24）。血管形生の不在下では、固形腫瘍の内部細胞層は栄養状態が不十分である。更に、血管形生（即ち、異常な血管新成）にも、非固形状の血液学的な腫瘍の増殖が必要であることが示されており、そして他の多くの疾患（例えば、眼性新血管形生疾患、黄斑変性症、リューマチ性関節炎など）に関係している。
【０００３】
対照的に、正常な組織は特別な状況下（例えば、創傷の治癒、月経周期の間の子宮内膜の増殖など）にある以外は血管形成を必要としない。従って、血管形成のための要件は、腫瘍細胞と正常細胞の間で有意な差異である。重要なことに、腫瘍細胞の、血管形成に対する依存性は、正常な細胞と比較した場合に、正常組織と腫瘍の組織間の細胞の複製及び細胞死においての違いよりも大きく、その違いは、ガンの治療において往々にして利用される。
【０００４】
腫瘍血管形成は、局所脈管構造中、低酸素条件下で、内皮細胞上の特異的なレセプターに対して結合するサイトカインの例えば、血管内皮細胞増殖因子及び／又は繊維芽細胞増殖因子によって開始されうる。活性化された内皮細胞は、酵素を分泌し、その酵素は、結合した組織マトリクスを改造し、そしてインテグリンなどの接着分子の発現を調節する。マトリクスが分解した後、内皮細胞が増殖し、そして腫瘍の方へと移動し、それにより新たなる血管の生成及び成熟がもたらされる。
【０００５】
興味深いことに、タンパク質断片の、血管形成を阻害する例えば、エンドスタチン、クリングル５及びＰＥＸは、マトリクスタンパク質の分解によって生産されている（O'Reillyら、Cell 1997, vol.88: pp.277〜285; O'Reillyら、Cell, 994, vol.79: pp.315〜328; Brooksら、Cell, 1998, vol.92: pp.391〜400）。従って、これらのタンパク質断片は新たなる血管形生を阻害し、故に腫瘍増殖及び転移を阻む。
【０００６】
しかし、タンパク質断片はそれらの使用に有意な欠点（即ち、大量の生産が困難且つ高額であること、薬理学的な特性に乏しく、分解しやすいなど）を伴う。これらのより大きなタンパク質の小ペプチド断片を同定するための１つの方法が行われており、その小ペプチド断片は、親タンパク質の抗血管形生活性の有意な部分を維持しているだろう。
【０００７】
血管新生を阻害するペプチドについての調査により、新たな血管の生長を阻害することにおいて有意に有効な化合物が提供されているが、優れた活性プロファイルを有する分子には、依然として要請がある。従って、新規ペプチドは、血管形生を阻害することにおいてペプチドの有効性を十分に探ることが要求されている。新規ペプチドはより長いプラズマ半減期、分解に対するより一層の耐性、生体利用効率の増加、より高い親和性、より高い選択性などを従来技術に記載されたペプチドに比べて有する（Livant、米国特許第６，００１，９６５号；Livant、米国特許第６，４７２，３６９号）。かかる新規ペプチドは、血管形生に関連した様々な疾患の例えば、細胞移動、細胞侵入及び細胞の増殖を治療することにおいて有効でありうる。
【発明の開示】
【０００８】
概要
本発明は、これら及び他の要請を、血管形成、細胞移動、細胞増殖及び細胞侵入を阻害するペプチド、これらのペプチド、これらのペプチドの医薬組成物を調製する方法並びにこれらのペプチド及びこれらのペプチドの医薬組成物を異常な血管新成に関連した疾患を治療するために使用する方法を供することによって満足する。
【０００９】
本発明は第一の観点において構造式（Ｉ）：
【化１】
2006514116.tif 000002
（式中、
ａ、ｂ、ｘ及びｚは０又は１であり；
Ａは環状アミノ酸であり；
Ｂは塩基性アミノ酸であり；
Ｃは小アミノ酸であり；
Ｒ1はアルキル、置換されたアルキル、アシル、置換されたアシル、アルキルスルホニル、置換されたアルキルスルホニル、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、アリールスルホニル、置換されたアリールスルホニル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリールスルホニル、置換されたヘテロアリールスルホニル、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルであり；
Ｒ2はアルキル、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）oＲ5又は−（ＣＭｅ）mＳ（Ｏ）nＲ5であり；
ｍは、１、２、３又は４であり；
ｎ及びｏは独立して０、１又は２であり；
Ｒ3は−ＣＨ2ＣＯＮＨ2又は−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ2であり；
Ｒ4はアルキル、−ＮＲ6Ｒ7又は−ＯＲ8であり；
Ｒ5はアルキル、置換されたアルキル、アシル、置換されたアシル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルであり；
Ｒ6及びＲ7は独立して水素又はアルキルであり；そして
Ｒ8はアルキル、置換されたアルキル、アリール置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又は置換されたヘテロアリールアルキルであり；
但し、
Ｒ5はｍが１である場合にメチルではなく；
ａは１（Ａがプロリンであり、Ｂがヒスチジンであり、Ｃがセリンである場合を除いて）であり、そしてｂは０（ａが０である場合）であり；
そして
Ｒ2は、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5又は−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）oＲ5（ｂ、ｘ、ｙ及びｚが１である場合を除いて）
である）
の化合物もしくはその医薬的に利用できる塩、溶媒和物、水和物もしくはＮ酸化物を提供する。
【００１０】
第二の観点において、本発明は化合物の医薬組成物を提供する。医薬組成物は一般に１もしくは複数の化合物もしくはその医薬的に許容できる塩、水和物、溶媒和物もしくはＮ酸化物及び医薬的に許容できるビヒクルを含んで成る。ビヒクルの選択は、他の因子の中でも、所望の投与方法に依存するだろう。
【００１１】
第三の観点において、本発明は、異常な血管新成を特徴とする疾患もしくは病気を治療もしくは予防するための方法を供する。この方法は一般に、かかる治療もしくは予防を必要とする患者に対して、治療上有効な量の化合物及び／もしくはその医薬組成物を投与することを伴う。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
詳細な説明
定義
「アルキル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として、親アルカン、アルケン又はアルキンの１つの炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導された、飽和もしくは未飽和、分枝状、直鎖状もしくは環状の一価炭化水素基を意味する。典型的なアルキル基としては、限定されないが、メチル；エチルの例えば、エタニル、エテニル、エチニル；プロピルの例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル（アリル）、シクロプロパ−１−エン−１−イル；シクロプロパ−２−エン−１−イル、プロパ−１−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなど；ブチルの例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルなどが挙げられる。
【００１３】
用語「アルキル」とは、任意の程度又はレベルの飽和を有する基、即ち、炭素−炭素単結合を専ら有する基、１又は複数の炭素−炭素二重結合を有する基、１又は複数の炭素−炭素三重結合を有する基及び炭素−炭素の単、二重、三重結合の混合を有する基が挙げられる。特定のレベルの飽和が意図されている場合、「アルカニル」、「アルケニル」及び「アルキニル」が使用されている。好適に、アルキル基は１〜２０個の炭素原子、一層好適には、１〜１０個の炭素原子、一層更に好適には１〜６個の炭素原子を含んで成る。
【００１４】
「アルカニル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として、親アルカンの１つの炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導された飽和した分枝状、直鎖状又は環状のアルキル基を意味する。典型的なアルカニル基としては、限定されないが、メタニル；エタニル；プロパニルの例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなど；ブタニルの例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル）、シクロブタン−１−イルなど；が挙げられる。
【００１５】
「アルケニル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として親アルカンの１つの炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導された炭素−炭素二重結合を１つ以上有する未飽和分枝状、直鎖状又は環状アルキル基を意味する。この基は１又は複数の二重結合についてシス又はトランスのいずれかの配座にあって良い。典型的なアルケニル基としては、限定されないが、エテニル；プロペニルの例えば、プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル（アリル）、プロパ−２−エン−２−イル、シクロプロパ−１−エン−１−イル；シクロプロパ−２−エン−１−イル；ブテニルの例えば、ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなどが挙げられる。
【００１６】
「アルキニル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として、親アルキンの１つの炭素原子から１つの水素原子を除去することによって誘導された炭素−炭素三重結合を１つ以上有する未飽和の分枝状、直鎖状又は環状のアルキル基を意味する。典型的なアルキニル基としては、限定ではないが、エチニル；プロピニルの例えば、プロパ−１−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなど；ブチニルの例えば、ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルなどが挙げられる。
【００１７】
「アシル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として、基−Ｃ(Ｏ)Ｒ30（式中、Ｒ30は本明細書中で規定したとおり、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルである）である。代表的な例としては、限定はされないが、ホルミル、アセチル、シクロヘキシルカルボニル、シクロヘキシルメチルカルボニル、ベンゾイル、ベンジルオキシカルボニルなどである。
【００１８】
「アルコキシ」とは、それ自身又は他の置換基の一部として、基−ＯＲ31（式中、Ｒ31は本明細書中で規定したとおり、アルキル又はシクロアルキル基である）を意味する。代表的な例としては、限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロヘキシルオキシなどが挙げられる。
【００１９】
「アルキルスルホニル」とは、基−Ｓ(Ｏ)2Ｒ32（式中、Ｒ32は本明細書中で規定したとおり、アルキル又はシクロアルキル基である）を意味する。代表的な基としては、限定はされないが、メチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル、ブチルスルホニルなどが挙げられる。
【００２０】
「アリール」とは、それ自身又は他の置換基の一部として、親芳香族環系の１つの炭素原子から水素原子を１つ除去することによって誘導された一価芳香族炭化水素基を意味する。典型的なアリール基としては、限定されないが、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、ピレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどから誘導された基が挙げられる。好適に、アリール基は６〜２０個の炭素原子、一層好適には６〜１２個の炭素原子を含んで成る。
【００２１】
「アリールアルキル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として非環式アルキル基を意味し、水素原子の１つが炭素原子に対して結合しており、典型的に末端又はｓｐ3炭素原子に対して結合している水素原子の１つはアリール基で置換されている。典型的なアリール基としては、限定ではないが、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエタン−１−イル、ナフチレンメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどが挙げられる。特異的なアルキル成分が意図されている場合、命名アリールアルカニル、アリールアルケニル及び／又はアリールアルキニルが使用されている。好適にアリールアルキル基は、（Ｃ6〜Ｃ30）アリールアルキルであり、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニル又はアルキニル成分は（Ｃ1〜Ｃ10）であり、そしてアリール成分は（Ｃ6〜Ｃ20）であり、一層好適にアリールアルキル基は（Ｃ6〜Ｃ20）アリールアルキルであり、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニル又はアルキニル成分は（Ｃ1〜Ｃ8）であり、そしてアリール成分は（Ｃ6〜Ｃ12）である。
【００２２】
「診断上有効な量」とは、疾患の検出をするために患者に対して投与された場合、疾患を検出するための十分な化合物の量を意味する。「診断上有効な量」とは、化合物、疾患及びその症度及び治療される患者の年齢、体重などに依存して変化するだろう。
【００２３】
「有効な量」とは、例えば、特定の特性又は条件を検出、誘導又は阻害するために投与された場合の化合物の量を意味し、それは、特性又は条態を検出、誘導又は阻害するために十分な量である。「有効な量」とは、抗体及び特定の特性又は条件に依存して変化するだろう。
【００２４】
「化合物」とは、本明細書中に開示された化合物を意味し、例えば、本明細書中に開示された一般式によって包含されるもの及び構造が本明細書中で開示されている化合物を意味する。特に化合物とは、本明細書中で開示された全てのアミノ酸配列の多重形態、その治療結合体及びその診断結合体が挙げられる。化合物は、それらの化学構造及び／又は化学名のいずれかによって同定されて良い。化学構造及び化学名が対立した場合、化学構造が化合物を同定する手掛りとなる。前記化合物は１又は複数のキラル中心及び／又は二重結合を含んで良く、それ故に、立体異性体の例えば二重結合異性体（即ち、幾何異性体）、エナンチオマー又はジアステレオマーとして依存して良い。従って、キラル中心における立体化学が特定されていない場合、本明細書に記載の化学構造は、そのキラル中心において考えられる全ての立体配置、例えば、立体化学的に純粋な形態（例えば、幾何学的に純粋な、エナンチオマー上純粋な又はジアステレオマー上純粋な）及びエナンチオマー及びステレオイソマー混合物を包含する。エナンチオマー混合物及び立体異性体混合物は、当業者に周知の分離技術又はキラル合成技術を使用することで、それらの成分のエナンチオマー又は立体異性体へと分割されて良い。前記化合物はいくつかの互変異性形態の例えば、エノール形態、ケト形態及びそれらの混合物としても依存して良い。従って、本明細書中で記載された化学構造は例に挙げた化合物の全ての考えられる互変異性形態を包含する。化合物には同位体標識された化合物も含まれ、ここで１又は複数の原子量が通常天然に見られる原子量とは異なる原子量を有する。本発明の化合物中に組み込まれて良い同位体の例としては、限定されないが、2Ｈ、3Ｈ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、18Ｏ、17Ｏ、31Ｐ、32Ｐ及び35Ｓが挙げられる。化合物は、溶媒和していない形態並びに溶媒和形態の例えば、水和形態及びＮ酸化物として存在して良い。一般に、水和した形態、溶媒和した形態及びＮ酸化物形態は本発明の範囲内である。所定の化合物が複数の結晶質又は非晶質形態で存在して良い。一般に、全ての物理形態は本発明によって熟考された使用について同等であり、そして本発明の範囲内であることが意図されている。更に、化合物の部分的構造が説明されている場合、［  ］は、当該部分的構造が残りの分子に対して結合する点を示していると解されるべきである。
【００２５】
「シクロアルキル」とは、それ自身もしくは他の置換基の一部として、飽和もしくは未飽和の環状アルキル基を意味する。特異的なレベルの飽和が意図されている場合、命名「シクロアルカニル」又は「シクロアルケニル」が使用されている。典型的なシクロアルキル基としては、限定されないが、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサンなどから誘導された基が挙げられる。好適に、シクロアルキル基は（Ｃ3〜Ｃ10）シクロアルキルであり、一層好適には（Ｃ3〜Ｃ7）シクロアルキルである。
【００２６】
「シクロヘテロアルキル」とは、それ自身もしくは他の置換基の一部として、飽和もしくは不飽和の環状アルキル基を意味し、１又は複数の炭素原子（及び任意の結合した水素原子）が独立して同じ又は異なるヘテロ原子で置換されている。１又は複数の炭素原子を置換するための典型的なヘテロ原子としては、限定されないが、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉが挙げられる。特異的なレベルの飽和が意図されている場合、命名「シクロヘテロアルカニル」又は「シクロヘテロアルケニル」が使用されている。典型的なシクロヘテロアルキル基としては限定されないが、エポキシド、アジリン、チイラン、イミダゾリジン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ピラゾリジン、ピロリジン、キヌクリジンなどが挙げられる。
【００２７】
「ヘテロアルキル、ヘテロアルカニル、ヘテロアルケニル及びヘテロアルキニル」とは、それら自身又は他の置換基の一部としてアルキル、アルカニル、アルケニル及びアルキニル基をそれぞれ意味し、ここで１又は複数の炭素原子（及び任意に結合した水素原子）が、独立して同じ又は異なるヘテロ原子集団で置換されている。これらの基に含まれて良い典型的なヘテロ原子基としては、限定されないが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ−Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｏ−Ｓ−、−ＮＲ34Ｒ35、＝Ｎ−Ｎ＝、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｎ−ＮＲ36Ｒ37、−ＰＲ38−、−Ｐ(Ｏ)2−、−ＰＯＲ39−、−Ｏ−Ｐ(Ｏ)2−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−ＳｎＲ40Ｒ41などが挙げられ、ここでＲ34、Ｒ35、Ｒ36、Ｒ37、Ｒ38、Ｒ39、Ｒ40及びＲ41は独立して水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロヘテロアルキル、置換されたシクロヘテロアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又は置換されたヘテロアリールアルキルである。
【００２８】
「ヘテロアリール」とは、それ自身又は他の置換基の部分として、親ヘテロ芳香族環系の１つの原子から１つの水素原子を除去することによって誘導された一価芳香族基を意味する。典型的なヘテロアリール基としては、限定されないが、アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、インベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリンジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどから誘導された基が挙げられる。好適にヘテロアリール基は、５〜２０員のヘテロアリール、一層好適には５〜１０員のヘテロアリールである。好適なヘテロアリール基としては、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾール及びピラジンから誘導されたものが挙げられる。
【００２９】
「ヘテロアリールスルホニル」とは、基−Ｓ(Ｏ)2Ｒ42（式中、Ｒ42は本明細書中で規定されたとおりヘテロアリールである）である。代表的な例としては、限定されないが、ピリジルスルホニル、インドリルスルホニル、イミダゾリルスルホニルなどが挙げられる。
【００３０】
「ヘテロアリールアルキル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として非環式アルキル基を意味し、ここで炭素原子、典型的には、末端又はｓｐ3炭素原子に対して結合している水素原子がヘテロアリール基で置換されている。特異的なアルキル成分が意図されている場合、命名ヘテロアリールアルカニル、ヘテロアリールアルケニル及び／又はヘテロアリールアルキルが使用されている。好適な実施態様において、ヘテロアリールアルキル基は、６〜３０員のヘテロアリールアルキルであり、例えば、当該ヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニル又はアルキニル成分は、１〜１０員であり、そしてヘテロアリール成分は、５〜２０員のヘテロアリールであり、一層好適には、６〜２０員のヘテロアリールアルキルであり、例えば、ヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニル又はアルキニル成分は、１〜８員であり、そして当該ヘテロアリール成分は、５〜１２員のヘテロアリールである。
【００３１】
「オキシカルボニル」とは、それ自身又は他の置換基の一部として基−Ｃ(Ｏ)−ＯＲ43（式中、Ｒ43は本明細書中に記載のとおりアルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロヘテロアルキル、置換されたシクロヘテロアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又は置換されたヘテロアリールアルキル基である）である。代表的な例としては、限定されないが、メトキシカルボニル、ピペルジンオキシカルボニル、フェノキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルなどが挙げられる。
【００３２】
「親芳香族環系」とは、結合したπ電子系を有する不飽和の環状又は多環状の環を意味する。定義「親芳香族環系」に含まれているものは詳細に、縮合環系であり、ここで１又は複数の環が芳香族環であり、そして１又は複数の環が、飽和又は不飽和の例えば、フルオレン、インダン、インデン、フェナレンなどである。典型的な親芳香族環系とは、限定はされないが、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどが挙げられる。
【００３３】
「親芳香族環系」とは、１もしくは複数の炭素原子（及び任意の結合した水素原子）が独立して同じもしくは異なるヘテロ原子で置換されている親芳香族環系を意味する。炭素原子を置換するための典型的なヘテロ原子としては、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉなどが挙げられる。定義「親ヘテロ芳香族環系」に含まれるものとしては詳細に、１又は複数の環が芳香族であり且つ１又は複数の環が飽和もしくは不飽和の、例えば、アルシンドール、ベンゾジオキサン、ベンゾフラン、クロマン、クロメン、インドール、インドリン、キサンテンなどである。典型的な親芳香族環系としては、限定されないが、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリンジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどが挙げられる。
【００３４】
「医薬組成物」とは、それと共に化合物が患者に対して投与される１種類以上の化合物及び医薬的に許容できるビヒクルをいう。
【００３５】
「医薬的に許容できる塩」とは、親化合物の所望の薬理活性を有する化合物の塩を意味する。かかる塩としては：（１）酸付加塩であって、無機酸の例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などによって形成された；又は有機酸の例えば、酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、リンゴ酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、４−メチルビシクロ［２．２．２］−オクタ−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコンなどにより形成されたもの；又は（２）塩であって、親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオンの、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、又はアルミニウムイオンで置換されている場合に形成された塩；又は有機塩基の例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミンなどにより置換されている塩が挙げられる。
【００３６】
「医薬的に許容できるビヒクル」とは希釈剤、アジュバント、賦形剤又は担体であって、それと共に化合物が投与されるものをいう。
【００３７】
「患者」とはヒトを意味する。用語「ヒト」及び「患者」は本明細書に同義語として使用されている。
【００３８】
「予防すること」又は「予防」とは病気又は疾患になるリスクを下げること（即ち、疾患に曝される又は予め曝されうるのみならず、まだ疾患を経験していないかあるいは疾患の症状を示していない患者において疾患の１以上の臨床的症状が進行しないようにすること）を意味する。
【００３９】
「プロドラッグ」とは活性薬物を放出するために体内での転換を必要とする薬物分子の誘導体を意味する。プロドラッグは往々にして、必ずではないが、親薬物へと転換されるまでは、薬理学的に不活性である。ヒドロキシル含有薬物は、例えば、スルホン酸塩、エステル又は炭酸塩プロドラッグに転換されて良く、そのプロドラッグはヒドロキシル化合物を提供するために、in vivoで加水分解されて良い。アミノ酸含有化合物は、例えば、カルバメート、アミド、エナミン、イミン、Ｎ−フォスホニル、Ｎ−フォスホリル又はＮ−スルフェニルプロドラッグへ転換されて良く、それらはin vivoでアミノ化合物を供するために加水分解されて良い。カルボン酸薬物は、エステル（シリルエステル及びチオエステルなど）、アミド又はヒドラジトプロドラッグに転換されて良く、それはカルボン酸化合物を供するためにin vivoで加水分解されて良い。上に列挙したの薬物とは官能基が異なる薬物のプロドラッグも当業者に周知である。
【００４０】
「プロ成分（Promoiety）」とは、薬物分子内の官能基をマスクするために使用された場合、薬物をプロドラッグへと転換する保護基の形態をいう。典型的に、プロ成分は、薬物に対して、in vivoで酵素的又は非酵素的手段によって開裂された１又は複数の結合を介して結合するだろう。
【００４１】
「保護基」とは、分子マスク中の反応性の官能基に対して結合した場合、官能基の反応性を下げるかあるいは阻む原子の集団を意味する。保護基の例は、Greenら、“Protective Groups in Organic Chemistry”,（Wiley、第２版1991）及びHarrisonら、“Compendium of Synthetic Organic Methods”, vols. 1〜8（John Wiley and Sons, 1971〜1996）に見られる。代表的なアミノ保護基としては、限定されないが、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（「ＣＢＺ」）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、トリメチルシリル（「ＴＭＳ」）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（「ＳＥＳ」）、トリチル及び置換したトリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（「ＦＭＯＣ」）、ニトロベラトリルオキシカルボニル（「ＮＶＯＣ」）が挙げられる。代表的なヒドロキシ保護基としては、限定されないが、ヒドロキシ基がアシル化又はアルキル化されているものの例えば、ベンジル、及びトリチルエーテル並びにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル及びアリルエーテルである。
【００４２】
「置換された」とは、１もしくは複数の水素原子が独立して、同じもしくは異なる１もしくは複数の置換基で置換されている基を意味する。典型的な置換基としては、限定されないが、−Ｍ、−Ｒ60、−Ｏ-、＝Ｏ、−ＯＲ60、−ＳＲ60、−Ｓ-、＝Ｓ、−ＮＲ60Ｒ61、＝ＮＲ60、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ2、＝Ｎ2、−Ｎ3、−Ｓ(Ｏ)2Ｏ-、−Ｓ(Ｏ)2ＯＨ、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ60、−ＯＳ(Ｏ2)Ｏ-、−ＯＳ(Ｏ)2Ｒ60、−Ｐ(Ｏ)(Ｏ-)2、−Ｐ(Ｏ)(ＯＲ60)(Ｏ-)、−ＯＰ(Ｏ)(ＯＲ60)(ＯＲ61)、−Ｃ(Ｏ)Ｒ60、−Ｃ(Ｓ)Ｒ60、−Ｃ(Ｏ)ＯＲ60、−Ｃ(Ｏ)ＮＲ60Ｒ61、−Ｃ(Ｏ)Ｏ-、−Ｃ(Ｓ)ＯＲ60、−ＮＲ62Ｃ(Ｏ)ＮＲ60Ｒ61、−ＮＲ62Ｃ(Ｓ)ＮＲ60Ｒ61、−ＮＲ62Ｃ(ＮＲ63)ＮＲ60Ｒ61及び−Ｃ(ＮＲ62)ＮＲ60Ｒ61が挙げられ、ここでＭは独立してハロゲンであり；Ｒ60、Ｒ61、Ｒ62及びＲ63は独立して水素、アルキル、置換されたアルキル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロヘテロアルキル、置換されたシクロヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールであるかあるいは任意にＲ60及びＲ61は一緒に窒素原子に対して結合しシクロヘテロアルキル又は置換されたシクロヘテロアルキル環を形成し；そしてＲ64及びＲ65は独立して水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロヘテロアルキル、置換されたシクロヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールであるかあるいは任意にＲ64とＲ65は一緒に窒素原子に対して結合しシクロヘテロアルキル又は置換されたシクロヘテロアルキル環を形成する。好適に、置換基としては、−Ｍ、−Ｒ60、＝Ｏ、−ＯＲ60、−ＳＲ60、−Ｓ-、＝Ｓ、−ＮＲ60Ｒ61、＝ＮＲ60、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ2、＝Ｎ2、−Ｎ3、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ60、−ＯＳ(Ｏ2)Ｏ-、−ＯＳ(Ｏ)2Ｒ60、−Ｐ(Ｏ)(Ｏ-)2、−Ｐ(Ｏ)(ＯＲ60)(Ｏ-)、−ＯＰ(Ｏ)(ＯＲ60)(ＯＲ61)、−Ｃ(Ｏ)Ｒ60、−Ｃ(Ｓ)Ｒ60、−Ｃ(Ｏ)ＯＲ60、−Ｃ(Ｏ)ＮＲ60Ｒ61、−Ｃ(Ｏ)Ｏ-、−ＮＲ62Ｃ(Ｏ)ＮＲ60Ｒ61が挙げられ、一層好適には、−Ｍ、−Ｒ60、＝Ｏ、−ＯＲ60、−ＳＲ60、−ＮＲ60Ｒ61、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ60、−Ｐ(Ｏ)(ＯＲ60)(Ｏ-)、−ＯＰ(Ｏ)(ＯＲ60)(ＯＲ61)、−Ｃ(Ｏ)Ｒ60、−Ｃ(Ｏ)ＯＲ60、−Ｃ(Ｏ)ＮＲ60Ｒ61、−Ｃ(Ｏ)Ｏ-が挙げられ、最も好適には、−Ｍ、−Ｒ60、＝Ｏ、−ＯＲ60、−ＳＲ60、−ＮＲ60Ｒ61、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−Ｓ(Ｏ)2Ｒ60、−ＯＰ(Ｏ)(ＯＲ60)(ＯＲ61)、−Ｃ(Ｏ)Ｒ60、−Ｃ(Ｏ)ＯＲ60、−Ｃ(Ｏ)Ｏ-が挙げられ、ここでＲ60、Ｒ61及びＲ62は上に規定したとおりである。
【００４３】
任意の病気又は疾患の「治療」又は「処置」とは、ある実施態様において、これらの疾患又は病気を改善すること（即ち、疾患の進行又は１種以上の臨床症状を抑制するかあるいは減らすこと）を意味する。他の実施態様において「治療」又は「処置」とは、患者によって認識されえない生理的パラメータを１つ以上改善することをいう。更に他の実施態様において、「治療」又は「処置」とは、病気又は疾患を、肉体的（例えば、認識不可能な症状の安定化）、生理的（生理パラメーターの安定化）のいずれか又は両方で阻害することを意味する。更に他の実施態様において「治療」又は「処置」とは疾患又は病気の開始を遅らせることを意味する。
【００４４】
「治療上有効な量」とは、疾患を治療するために患者に対して投与された場合、当該疾患の治療を行うのに十分である化合物の量を意味する。この「治療上有効な量」は、化合物、疾患及びその症度及び治療される患者の年齢及び体重に依存して変わるだろう。
【００４５】
本発明の好適な実施態様に対して参照が更に作成されるだろう。本発明が好適で実施態様との結合において記載されている一方で、それは本発明の好適な実施態様は限定されることを意味しない。反対に、それは添付した特許請求の範囲によって規定された本発明の範囲内に含まれうるので代替、変更及び同等なものを網羅することを意味している。
【００４６】
「化合物」
第一の観点において、本発明は構造式（Ｉ）：
【化２】
2006514116.tif 000003
（式中、
ａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚは０又は１であり；
Ａは環状アミノ酸であり；
Ｂは塩基性アミノ酸であり；
Ｃは小アミノ酸（small amino acid）であり；
Ｒ1はアルキル、置換されたアルキル、アシル、置換されたアシル、アルキルスルホニル、置換されたアルキルスルホニル、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、アリールスルホニル、置換されたアリールスルホニル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリールスルホニル、置換されたヘテロアリールスルホニル、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルであり；
Ｒ2はアルキル、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）oＲ5又は−（ＣＭｅ）mＳ（Ｏ）nＲ5であり；
ｍは、１、２、３又は４であり；
ｎ及びｏは独立して０、１又は２であり；
Ｒ3は−ＣＨ2ＣＯＮＨ2又は−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ2であり；
Ｒ4はアルキル、−ＮＲ6Ｒ7又は−ＯＲ8であり；
Ｒ5はアルキル、置換されたアルキル、アシル、置換されたアシル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、置換されたヘテロアリールアルキル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルであり；
R6及びR7は独立して水素又はアルキルであり；そして
R8はアルキル、置換されたアルキル、アリール、置換されたアリール、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル又は置換されたヘテロアリールアルキルであり；
但し、
Ｒ5はｍが１である場合にメチルではなく；
ａは１（Ａがプロリンであり、Ｂがヒスチジンであり、Ｃがセリンである場合を除いて）であり、そしてｂは０（ａが０である場合）であり；
そして
Ｒ2は、−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）nＲ5又は−（ＣＨ2）mＳ（Ｏ）n−Ｓ（Ｏ）oＲ5（ｂ、ｘ、ｙ及びｚが１である場合を除いて）
である）
の化合物もしくはその医薬的に利用できる塩、溶媒和物、水和物もしくはＮ酸化物などを提供する。
【００４７】
環状アミノ酸としては、例えば、天然アミノ酸（例えば、プロリン）及び非天然のアミノ酸（例えば、プロリンの４及び６員の類似物）が挙げられる。塩基性アミノ酸とは、限定ではないが、天然のアミノ酸の例えばアルギニン、ヒスチジン及びリジン並びに非天然のアミノ酸の例えば、ホモリジン及びオルニチンが挙げられる。小アミノ酸としては例えば、グリシン、セリン、アラニン及びトレオニンが挙げられる。
【００４８】
化合物中での天然のアミノ酸の使用が詳細に熟考されている。かかるアミノ酸としては、例えば、天然に生ずるアミノ酸のＤアミノ酸、β−アラニン、３−アミノプロピオン酸、２，３−ジアミノプロピオン酸、４−アミノブチル酸など、サルコシン、オルニチン、Ｎ−メチルグリシン、シトルリン、ｔ−ブチルアラニン、ホモアルギニンなどである。
【００４９】
化合物中の１又は複数のアミド結合は、任意に、当業者に周知である同配体の例えば、ＣＨ2−ＮＨ−、−ＣＨ2−Ｓ−、−ＣＨ2−Ｓ(Ｏ)−、−ＣＨ2−Ｓ(Ｏ)2−、−ＣＯＣＨ2−、−ＣＨ＝ＣＨ−、ＣＨ(ＯＨ)ＣＨ2によって置換されて良い（例えば、Spatola,“Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins,”B. Weinstein, (eds.), Marcel Dekker, New York, 1983; Spatolaら、Life Sci. 1986, vol.38: pp.1243〜1249; Almquistら、J. Med. Chem. 1980, vol.23: p.1392; Holladayら、Tetrahedron Lett. 1983, vol.24: p.4401; Hruby, Life Sci. 1982, vol.4; p.189: p.199; Jennings-Whiteら、Tetrahedron Lett. 1982, vol.23: p.2533; Hruby, Biopolymers 1993; vol.33: pp.1073〜1082; Wileyら、Med. Res. Rev. 1993 vol.13: pp.327〜384; Mooreら、Adv. in Pharmacol 1995, vol.33: pp.91〜141; Giannisら、1997, Adv. Drug Res. vol.29: pp.1〜78を参照のこと）。前記ペプチドはOlsonら、J. Med. Chem. 1993, vol.36: p.3039及びChorevら、Science 1979, vol.204: p.1210に記載の擬ペプチドも含んで良い。
【００５０】
第２の実施態様において、Ａはプロリンであり、Ｂはヒスチジンであり、ＣはセリンでありそしてＲ3は−ＣＨ2ＣＯＮＨ2である。
【００５１】
好適に、これら最初の２つの実施態様では、Ｒ1はアシル、置換されたアシル、アリールアルキル、置換されたアリールアルキル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルである。一層好適に、Ｒ1はアシル、置換されたアシル、オキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルである。
【００５２】
本発明の最初の２つの実施態様において、Ｒ2は−(ＣＨ2)mＳ(Ｏ)nＲ5又は−(ＣＨ2)mＳ(Ｏ)n−Ｓ(Ｏ)oＲ5でありｍは１又は２である。最初の２つの実施態様の他の実施態様において、Ｒ4はＮＲ7Ｒ8でありそしてＲ7とＲ8水素である。
【００５３】
第一の実施態様の１つの実施態様において、ａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚは１である。他の実施態様において、ｘは０でありそしてａ、ｂ、ｙ及びｚは１である。更に他の実施態様において、ｘ及びｙは０であり、そして、ｂ及びｚは１である。更に他の実施態様において、ｘ、ｙ及びｚは０でありそしてａ及びｂは１である。更に他の実施態様において、ｘ、ｚ、ａ及びｂは１でありｙは０である。更に他の実施態様において、ｘ、ａ及びｂは１でありそしてｙ及びｚは０である。更に他の実施態様において、ｙ、ａ及びｂは１でありそしてｘ及びｚは０である。更に他の実施態様において、ｘ、ｙ、ｚ及びａは１でありそしてｂは０である。更に他の実施態様において、ｙ、ｚ及びａは１でありｘ及びｂは０である。更に他の実施態様において、ｘ、ｙ、ｚ及びｂは１でありａは０である。更に他の実施態様において、ｚ及びａは１でありそしてｘ、ｙ及びｂは０である。更に他の実施態様において、ａは１でありそしてｘ、ｙ、ｚ及びｂは０である。更に他の実施態様において、ＡはＤアミノ酸である。更に他の実施態様において、Ａ、Ｂ及びＣはＬアミノ酸でありそしてＲ2及びＲ3にそれぞれ隣接するα炭素はＬ配置を有する。
【００５４】
第三の実施態様において、Ａはプロリンであり、Ｂはヒスチジンであり、ＣはセリンでありそしてＲ3は−ＣＨ2ＣＯＮＨ2であり；Ｒ1はアシル、置換されたアシル、オキシカルボニル及び置換されたオキシカルボニルであり、ａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚは１であり、ｍは１又は２であり、そしてＲ4はＮＲ7Ｒ8でありそしてＲ7とＲ8は水素である。好適に、Ｒ1はアシルであり、一層好適に、Ｒ1は−Ｃ(Ｏ)ＣＨ3であり、そしてＲ2はアルキルであ。好適に、Ｒ2はアリル又はメチルである。
【００５５】
第三の実施態様の一層特異的な実施態様において、Ｒ1は−Ｃ(Ｏ)ＣＨ3であり；Ｒ2は−(ＣＨ2)mＳ(Ｏ)nＲ5でありｍは１である。１つの実施態様において、ｎは０でありＲ5はアルキル又は置換されたアルキルである。他の実施態様において、ｎは０であり、そしてＲ5はアリールアルキル又は置換されたアリールアルキルである。更に他の実施態様において、ｎは０でありＲ5はアシル又は置換されたアシルである。他の実施態様において、ｎは０であり、そしてＲ5はオキシカルボニル又は置換されたオキシカルボニルである。
【００５６】
第三の実施態様の他の一層特異的な実施態様において、Ｒ1は−Ｃ(Ｏ)ＣＨ3であり；Ｒ2は−(ＣＨ2)mＳ(Ｏ)n−Ｓ(Ｏ)oＲ5でありｍは１である。好適に、ｎ及びｏは０でありそしてＲ5はアルキル又はアリールである。
【００５７】
第三の実施態様の一層特異的な実施態様において、Ｒ1は−Ｃ(Ｏ)ＣＨ3であり、Ｒ2は−(ＣＨ2)mＳ(Ｏ)nＲ5であり、そしてｍは２である。１つの実施態様において、ｎは０でありＲ5はアルキル又はアリールアルキルである。他の実施態様において、ｎは１又は２でありＲ5はアルキルである。更に他の実施態様において、ｎは０であり、そしてＲ5はアシルである。
【００５８】
第四の実施態様において、Ａはプロリンであり、Ｂはヒスチジンであり、ＣはセリンでありそしてＲ3は−ＣＨ2ＣＯＮＨ2であり、Ｒ1はアシル、置換されたアシル、オキシカルボニル及び置換されたオキシカルボニルであり、ｍは１又は２でありＲ4はＮＲ7Ｒ8でありＲ7及びＲ8は水素である。１つの実施態様においては、ｘは０であり、ａ、ｂ、ｙ及びｚは１である。他の実施態様において、ｘ及びｙは０であり、そしてａ、ｂ及びｚは１である。更に他の実施態様において、ｘ、ｙ及びｚは０であり、ａ及びｂは１である。更に他の実施態様において、ｙは０であり、そしてａ、ｂ、ｘ及びｚは１である。更に他の実施態様において、ｙ及びｚは０であり、そしてａ、ｂ及びｘは１である。更に他の実施態様において、ｘ及びｚは０でありａ、ｂ及びｙは１である。更に他の実施態様において、ｂは０であり、ａ、ｘ、ｙ及びｚは１である。更に他の実施態様において、ｂ及びｘは０であり、そしてａ、ｙ及びｚは１である。更に他の実施態様において、ｂ、ｘ及びｙは０であり、そしてａ及びｚは１である。更に他の実施態様において、ｂ、ｘ、ｙ及びｚは０であり、そしてａは１である。好適に、上記の実施態様において、Ｒ1はアシルであり、Ｒ2は−(ＣＨ2)mＳ(Ｏ)nＲ5であり、ｍは１であり、そしてＲ5はアルキルである。
【００５９】
第五の実施態様において、Ａがプロリンである場合、Ｂはヒスチジンであり、Ｃはセリンであり、そしてＲ3は−ＣＨ2ＣＯＮＨ2であり、ａは０でありそしてｂ、ｘ、ｙ及びｚは１である。
【００６０】
図１〜５は構造式（Ｉ）の化合物の例を示す。本発明の化合物の他の例は、Ａｃ−Ｐｏｒ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（β，β−ジメチル）−Ａｓｎ−ＮＨ2である。
【００６１】
式（Ｉ）の化合物の共有結合修飾物は本発明の範囲内であり、そして溶解度、吸収率、生物学的半減期などを向上しうる。かかる修飾は、特異的アミノ酸残基と有機試薬との選択的反応によって行われて良い。例えば、ヒスチジン残基は、ジエチルピロカーボネートとpH５．５〜７で、そしてｐ−ブロモフェナシルブロミドとpH６．０で選択的に反応しうる。遊離アミノ基を含む試薬は、選択的に、カルボン酸無水物、イミドエステル、リン酸ピリドキサール、トリニトロベンゼンスルホン酸、Ｏ−メチルイソウレア、２，４−ペンタンジオン、グリオキシレートなどと反応しうる。アルギニン残基は、フェニルグリオキサール、及び様々なジオンと反応しうる。グルタミニル及びアスパラギニル残基は、対応するグルタミル及びアスパルチル残基を供するよう、弱酸性条件下で脱アミノ化されて良い。プロリン及びリジンは選択的にヒドロキシル化されて良く、一方でセリン及びトレオニン残基は選択的にリン酸化されて良い。ヒスチジン及びリジンのαアミノ基は選択的にメチル化されて良い（Creighton, Proteins: Structure and Molecule Properties, W.H. Freeman & Co., San Francisco, pp.79-86 (1983)）。
【００６２】
二官能性架橋剤（例えば、１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミドエステル、４−アジドサリチル酸のエステル、ホモ二官能性イミドエステル（例えば、ジスクシニミジルエステルの例えば３，３’−ジチオビス（スクシニミジルプロピオネート））、二官能性マレイミド（例えば、ビス−Ｎ−マレイミド−１，８−オクタンなど）による誘導体化は、化合物と非水溶性支持マトリクス又は他のマクロ分子担体を結合させるために使用されて良い。光活性可能物質の例えば、メチル−３−［（ｐ−アジドフェニル）ジチオ］プロピオイミデートも、化合物と非水溶性支持マトリクスを結合させるために使用されて良い。代わりに、化合物は反応性非水溶性マトリクス（例えば、臭化シアン化活性化炭化水系）と直接反応させられて良い。
【００６３】
本発明は、構造式（Ｉ）の化合物のアミノ酸配列の繰り返しユニットからなるより長いペプチドをも含む。１つの実施態様において、かかる多量体の繰り返し単位は、化合物のアミノ酸配列であり、ここでａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚは１である。他の実施態様において、前記繰り返し単位は、構造式（Ｉ）の化合物のアミノ酸配列であり、ここで、ａ、ｂ、ｘ、ｙ及びｚの１つのみが０であり残りが１である。
【００６４】
多量体は、構造式（Ｉ）の化合物のアミノ酸配列からなる繰り返し単位の同じ又は異なるいずれかの組み合わせからなりうる。かかる多量体ペプチドは、化学合成によって又は組み替えＤＮＡ技術のいずれかによって合成され、しかる後にシステイン残基の化学的修飾によって調製されて良い。好適に、合成多量体は、コアペプチド配列の２〜１２リピート、一層好適には、２〜８リピートを有する。従って、多量体中のアミノ酸の総数は約１１０残基（又はそれと同程度、リンカー又はスペサーを含む場合）を越えるべきではない。
【００６５】
好適な多量体は式Ｐ1n（式中、Ｐ1はペンタペプチドであり、ｎは２〜８である）を有する。他の実施態様において、多量体は式(Ｐ1−Ｘm)n−Ｐ2（式中、Ｐ1及びＰ2はペンタペプチドである）を有する。Ｐ1及びＰ2は同じ又は異なっていて良く、そして各Ｐ1は、構造式（Ｉ）の異なるペンタペプチド誘導体を示しうる。ＸはＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5ポリエーテルであり最大４個の酸素原子又はＧｌｙZを含み、ここで、ｚ＝１〜６、ｍ＝０又は１でありそしてｎ＝１〜７である。
【００６６】
組み換え技術により生産された好適なペプチド多量体は式：(Ｐ1−Ｇｌｙz)n−Ｐ2を有し、ここで、Ｐ1及びＰ2は、ペンタペプチドであり、それらは同じ又は異なっていて良く、そして多量体の各Ｐ1は異なるペンタペプチドであって良く、ｎ＝１〜１００であり且つｚ＝０〜６である。多量体はＮ−及びＣ−末端の両方が任意に官能基になっていて良い。
【００６７】
構造式（Ｉ）の化合物は、修飾することで生物機能（即ち、血管形成、細胞侵入、細胞増殖など）が抑制又は阻害されない限り、任意の種類の分子の共有結合による修飾を受けて良い。例えば、構造式（Ｉ）の化合物はグリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、タンパク質分解解製、細胞リガンド又はタンパク質に対する結合などによって修飾されて良い。好適に、式（Ｉ）の化合物は、治療剤もしくは診断剤に対して直接もしくは結合成分を介して結合させられている。
【００６８】
好適に、結合成分は最初に、診断又は治療剤に対して結合して結合成分中間体を形成し、それは次いで、更に構造式（Ｉ）の化合物に対して結合している。当業者に明らかであるように、結合成分は、最初に構造式（Ｉ）の化合物に対して結合し、結合成分中間体を形成し、次いでそれは、診断剤又は治療剤に対して結合して良い。
【００６９】
典型的に、結合成分には、治療剤又は診断剤をペプチドに対して結合させるためのリンカー及び結合基が挙げられるだろう。リンカーの性質は特定の用途に依存するだろうし、そしてリンカーとして所望の結合の種類は、疎水性又は親水性、長又は短、硬又は軟性であって良い。リンカーは任意に同じ又は異なるいずれかの１もしくは複数の結合基により置換されていて良く、従って、多価結合成分を提供し、それは、複数の治療剤又は診断剤を抗体と結合させることができる。
【００７０】
結合基をアミノニトロ化合物から離すために適した安定な結合を含んで成る様々なリンカーが当業界で公知であり、そして例としては、限定ではないが、アルキル、ヘテロアルキル、非環式ヘテロ芳香族ブリッヂ、アリール、アリールアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリール−ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール−ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリール−ヘテロアルキルなどが挙げられる。従って、リンカーとしては、単結合、二重結合、三重結合、又は芳香族炭素−炭素結合、窒素−窒素結合、炭素−窒素、炭素−酸素結合及び／又は炭素−硫黄結合が挙げられる。従って、カルボニル、エーテル、チオエーテル、カルボキサミド、スルホンアミド、尿素、ウレタン、ヒドラジンなどがリンカーに含まれて良い。
【００７１】
適切なリンカーを選択することは当業者の能力の範囲内である。例えば、硬いリンカーが望まれている場合、当該リンカーは堅いポリ不飽和アルキル又はアリール、ビアリール、ヘテロアリールなどであって良い。柔軟性のあるリンカーが望まれている場合、リンカーは柔軟性のあるペプチドの例えば、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ又は柔軟性のある飽和アルカニル又はヘテロアルカニルであって良い。親水性リンカーは、例えば、ポリアルコール又はポリエーテルの例えば、ポリアルキレングリコールである。疎水性リンカーは、例えば、アルキル又はアリールであって良い。
【００７２】
好適に、結合基は、構造式（Ｉ）の化合物の相補的反応性官能基との共有結合の形成を介在し、ペプチドに対して結合した治療剤又は診断剤を提供することができる。従って、結合基はペプチド中で発見される共通の化学基と反応するだろう当業者に公知の全ての反応性官能基（例えば、アミノ、スルフヒドリル、ヒドロキシル、カルボキシレート、イミジザロイル（imidizaloyl）、グアニジウム、アミドなど）であって良い。従って、結合基は、例えば、光学活性基、電子化学活性基、遊離ラジカル供与体、遊離ラジカル受容体、求核基又は求電子基であって良い。しかし、当業者は、所定の反応条件下で典型的に不活性である様々な官能器が賦活化されて反応性を有するようになって良いことに気づくだろう。賦活化されて反応性を有するようになりうる基としては、例えばアルコール、カルボン酸及びエステル、例えばそれらの塩であって良い。
【００７３】
結合基は、−ＮＨＲ1、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＳＨ、ハロゲン、−ＣＨＯ、−Ｒ1ＣＯ、−ＳＯ2Ｈ、−ＰＯ2Ｈ、−Ｎ3、−ＣＮ、−ＣＯ2Ｈ、−ＳＯ3Ｈ、−ＰＯ3Ｈ、−ＰＯ2(ＯＲ1)Ｈ、−ＣＯ2Ｒ1、−ＳＯ3Ｒ1又は−ＰＯ(ＯＲ1)2であって良く、ここでＲ1はアルキルである。好適に、結合基は−ＮＨＲ1、−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ2Ｈ、Ｒ1ＣＯ−、ハロゲン及び−ＣＯ2Ｒ1である。
【００７４】
リンカー及び結合基のいくつかの実施態様としては、例えば、リンカーが−(ＣＨ2)n−（ｎは１及び８の整数である）であり、結合基が−ＮＨ2、−ＯＨ、−ＣＯ2Ｈであり、そして−ＣＯ2Ｒ1及び全ての適切なハロゲンが置換されている対応する類似物である化合物が挙げられる。結合成分の他の実施態様としては、例えば、Ｄ又はアミノ酸であって良い全てのアミノ酸が挙げられる。従って、結合成分はアミノ酸の全ての組み合わせからなるジペプチド、トリペプチド又はテトラペプチドであって良い。これらのペプチド中の複数のペプチド結合は、Ｃ−Ｎ又はＮ−Ｃのいずれかであって良い。
【００７５】
治療剤及び診断剤は、構造式（Ｉ）の化合物へと直接、当業者に公知の常用の様々な反応条件を直接使用することで結合させられて良い。例えば、凝縮剤（例えば、カルボジイミド、カルボニルジイミダゾールなど）が、治療又は診断剤のアミノ基とグルタミン酸、アスパラギン酸などの残基のカルボン酸残基及び構造式（Ｉ）の化合物のＣ末端カルボキシル基との間でアミド結合を形成させるために使用されて良い。
【００７６】
類似する方法が、リンカー及び結合基を含む治療剤及び診断剤を構造式（Ｉ）の化合物に対して、結合させるために使用されて良い。例えば、リンカー及び結合基を含む診断剤及び治療剤は、当業者に公知の常用の方法を使用することで、リジンのアミノ基、グルタミン酸及びアスパラギン酸のカルボン酸基、システインのスルフヒドリル基、トレオニン及びセリンのヒドロキシル基並びに構造式（Ｉ）の化合物芳香族アミノ酸の様々な成分に対して結合させられて良い。一般に、診断剤又は治療剤を構造式（Ｉ）の化合物に対して、直接又はリンカー及び結合基を介して結合させるための戦略が当業者に公知である。
【００７７】
構造式（Ｉ）の化合物に対して結合させられて良い治療剤としては、限定ではないが、放射性核種、毒性タンパク質（例えば、リシン、シュードモナス（Pseudomonas）外毒系、ジフテリア毒、サポリン、ヤマゴホウ抗ウィルスタンパク質、ボウガニン（bouganin）など）、細胞毒ガン剤、カンプトテンシン（例えば、９−ニトロカンプトテンシン（９ＮＣ）、９−アミノカンプトテンシン（９ＡＣ）、１０−アミノカンプトテンシン、９−クロロカンプトテンシン、１０，１１−メチレンジオキシカンプトテンシン、イリノテンシン、芳香族カンプトテンシンエステル、アルキルカンプトテンシンエステル、トポテカン、（１Ｓ，９Ｓ）−１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ−ベンゾ［デ］ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１５Ｈ）−ジオンメタンスルホネートジハイドレート（ＤＸ−８９５１ｆ）、７−［（２−トリメチル−シリル）エチル］−２０（Ｓ）カンプトテンシン（ＢＮＰ１３５０）、ルビテカン、エクサテカン、ルロトテカン、ジフロモテカン（Diflomotecan）及び他のホモカンプトテンシンなど）、テキサン（例えばタキソール）、エピチロン、カリケアマイシン、ヒドロキシウレア、シタラビン、シクロフォサミド、イフォサミド、ニトロウレア、シスプラチン、マイトマイシンマイタンシン、カルボプラチン、デカルバジン、プロカルバジン、エトポシド、テノポシド、ブレオマイシン、ドキリルビシン、２−ピロリノドキソルビシン、ダウノマイシン、イダルビカン、ダウノルビシン、ダクムノマイシン、プリカマイシン、ミトキサントロン、アスパラギナーゼ、ジヒドロキン、アントラシンジオン、ミトリマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン、シトクラシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、パクリタキセル、ドセタキセル、グラミシジンＤ、グルココルチコイド、アントラシリン、プロカイン、テラカイン、リドカイン、プロパノロール、ビューロマイシン、メトトレキセート、６−メルカプトプリン、６−チオグアニジン、マスタード毒、アンチリマイシン、パクリタキセル、アルキル化剤（例えば、メコレメタミン（mechoremethamine）、チオエパクロラムブシル、メルファラン、カルムスチン、ロウスチン、シクロチオスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシンなど）類似物及びその相同物が挙げられる。好適に、治療剤は細胞傷害性ガン剤の例えば、タキサン、カンプトテンシン、エビチオロン及びアントラシリンが挙げられる。１つの実施態様において、治療剤はドキソルビシンである。他の実施態様において、治療剤は放射性核種である。
【００７８】
用語「診断用に標識した」とは、構造式（Ｉ）の化合物が、診断上検出可能な標識に結合していることを意味する。多くの様々な標識が当業界で存在し、そして様々な標識方法が当業者に周知である。本発明において使用されて良い一般的な種類の標識としては、限定ではないが、放射性同位体、常磁性同位体、陽子放出断層撮影（ＰＥＴ）によって画像化されて良い化合物、蛍光又は着色した化合物、核磁器共鳴によって画像化されて良い化合物、化学発光化合物、生物発光化合物などが挙げられる。適切な検出可能標識としては、限定されないが、放射性、蛍光、蛍光発生又は発色標識が挙げられる。γ線カウンター、シンチレーションカウンター又はオートラジオグラフィーなどによって単に検出される有用な放射性標識（放射性核種）としては、限定されないが、3Ｈ、125Ｉ、131Ｉ、35Ｓ及び14Ｃである。
【００７９】
ペプチドに対して金属を錯体化させるための方法及び組成物は当業者に周知である。金属は、好適に、検出可能な金属原子（求核電子を含む）であり、そしてタンパク質及び他の分子と錯体化される（例えば、米国特許第５，６２７，２８６号、５，６１８，５１３号、５，５６７，４０８号、５，４４３，８１６号及び５，５６１，２２０号参照のこと）。
【００８０】
共通する蛍光標識の例えば、限定されないが、フルオレセイン、ローダミン、ダンシル、フィコエリトリン、フィコシアニン、アロフィコシアニン、ｏ−フタルアルデヒド及びフルオレスカミン（Haugland, Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals、第６版、Molecular Probes, Eugene, OR, 1996）が構造式（Ｉ）の化合物を標識するために使用されて良い。フルオレセイン、フルオレセイン誘導体及びフルオレセイン様分子の例えば、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ（登録商標）及びその誘導体、Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ  Ｇｒｅｅｎ（登録商標）及びＲｈｏｄｏｌ  Ｇｒｅｅｎ（登録商標）がアミン基に対して、イソチオシアネート、スクシニミジルエステル又はジクロロトリアジニル反応性基を使用することで結合させられて良い。類似して、フルオロファアがチオールに対して、マレイミド、ヨードアセトアミド、及びアジリジン反応性基を使用することで結合させられて良い。長波長ローダミン（基本的に窒素上での置換基を有するローダミングリーン（登録商標）である）は、好適な標識試薬である。このような基としては、テトラメチルローダミン、Ｘ−ローダミン及びテキサスレッド（登録商標）誘導体が挙げられる。他の好適なフルオロフォアとしては、ＵＶ光によって励起されるものが挙げられる。例としては、限定されないが、カスケードブルー、クマリン誘導体、ナフタレン（塩化ダルシルがメンバーである）、ピレン及びピリジルオキサゾール誘導体が挙げられる。
【００８１】
無機物質の例えば、半導体ナノ結晶（Bruchezら、1998, Science vol.281: pp.2013〜2016）及び量子ドットの例えば、亜鉛硫化物キャプドＣｄセレン化物（Chanら、Science 1998, vol.281: 2016〜2018）も診断ラベルとして使用されて良い。
【００８２】
構造式（Ｉ）の化合物は蛍光放射性物質の例えば、152Ｅｕ又は他のランタニド系で標識されても良い。これらの金属は、構造式（Ｉ）の化合物に対して、アシルキレート基の例えば、ジエチレントリアミンペンタン酢酸（ＤＴＰＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などを介して結合させられて良い。
【００８３】
放射性核種は構造式（Ｉ）の化合物に対して、直接又はアシルキレート基の例えば、ＤＴＰＡ及びＥＤＴＡを使用することで関接的にin vivo診断のために結合させられて良い。キレート化の化学は当業者に周知であり、そしてペプチドに対して様々な範囲のキレート剤が、標識されたペプチドを提供するために使用されて良い。勿論、標識されたペプチドは天然ペプチドの生物活性を維持していなければならない。
【００８４】
診断又は治療的価値を有する全ての放射性核種が、本発明中、放射性標識として使用されて良い。好適な実施態様において、放射性核種は、γ放射性又はβ−放射性核種であり、例えば、ランタノイド又はアクチニド系の要素から選択されたものである。ポリシストロン放射性核種の例えば、68Ｇａ又は64Ｃｕも使用されて良い。適切なγ放射性核種としては、画像診断用途において有用であるものが挙げられる。γ放射性核種は好適に、１時間〜４０日、好適には１２時間〜３日の半減期を有する。適切なγ放射性核種としては、67Ｇａ、111Ｉｎ、99mＴｃ、169Ｙｂ及び186Ｒｅが挙げられる。最も好適には、放射性核種は、99mＴｃである。
【００８５】
好適な放射性核種の例は、（原子番号により並べると）67Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａ、72Ａｓ、89Ｚｒ、90Ｙ、97Ｒｕ、99Ｔｃ、111Ｉｎ、123Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、169Ｙｂ、186Ｒｅ、及び201Ｔ１である。標識としての陽電子放射性核金属は限定されているが、所定のタンパク質、例えば、トランスフェリン及びヒト血清アルブミンが、68Ｇａで標識されて良い。
【００８６】
核磁器共鳴画像化のために有用な多くの金属（放射性同位体ではない）としては、ガドリニウム、マンガン、銅、鉄、金及びユーロピウムが挙げられる。ガドリニウムが最も好適である。一般に、診断使用の検出性のために要される標識されたペプチドの量は、患者の性別、年齢、症度、禁忌に依存して変化するだろうし、もし何かあれば他の変量にもより、そして個々の医者又は診断を下す者によって調整をされて良い。投与量は０．０１mg／kg〜１００mg／kgで変化して良い。
【００８７】
構造式（Ｉ）の化合物は、リン光又は化学発光化合物に対して結合させることによって検出されても良く、これは当業者に周知である。好適な化学発光化合物としては、限定されないが、ルミノール、イソルミノール、セロマチック（theromatic）アクリジニウムエステル、イミダゾール、アクリジニウム塩及びオキサレートエステルが挙げられる。類似して生物発光化合物も、その抗体及び／又は結合体を検出するために使用されて良く、そして、限定ではないが、ルシフェリン、ルシフェラーゼ及びエクオリンが挙げられる。
【００８８】
高消散係数を有する発色物質を有するかあるいはもたらすに基づく比色検出も、構造式（Ｉ）の化合物を検出するために使用されて良い。
【００８９】
構造式（Ｉ）の化合物の合成
構造式（Ｉ）の化合物は、常用の合成方法を使用することで獲得されて良い。化合物及びそれらの中間体を調製するために有用な出発物質は、商業上入手可能であるかあるいは、周知の合成技術によって調製されて良い。
【００９０】
ペプチドは、一般に、Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. 1963, vol.85: pp.2149〜54によって記載されたような、化学物質供給者（例えば、Applied Biosystems,Foster City,CA）から購入されて良い自動化された装置を使用し、固相合成を使用することで調製されて良い。固相ペプチド合成は、ペプチドのＣ末端から、保護されたαアミノ酸（Boc又はFMOC保護された）を適切な樹脂に対して結合させることによって開始されて良い。かかる出発物質は、αアミノ保護されたアミノ酸を、エステル結合によってクロロメチル化された樹脂、ヒドロキシメチル樹脂、BHA樹脂、MBHA樹脂又はRink樹脂に対してエステル結合させることによって調製されて良い。かかる当業者に周知の方法は、例えば、米国特許第5,994,309号に開示されている。代わりに、化合物は、保護されたアミノ酸を使用することで液相合成（例えば、Bodanszky,“Methods of Peptide Synthesis,”Springer Verlag, New York, 1984を参照のこと）によって調製されて良い。当業者には明らかであるように、非天然のアミノ酸は化学合成の上記標準的な方法において容易に使用されて良く、そして当業者に公知の常用の方法によって調製されて良い。
【００９１】
当業者は、２つの一般的な合成方法が構造式（Ｉ）の化合物を合成するために存在することを理解するだろう。イオウ含有アミノ酸を伴う化合物は、上記の標準的な化学合成法へと、適切なイオウ含有アミノ酸を導入することによって直接、又は適切なチオール含有ペプチド前駆体の選択的官能基化によって間接的に、そしてもし必要なら生じるチオエーテル含有ペプチドの選択的酸化により合成されて良い。遊離チオールを、様々な有機官能物質の存在下で選択的に官能化するための方法（例えば、選択的アルキル化、アシル化、ジスルフィド形成など）は当業者に周知であり、それらは例えば、スルフィドのスルホキシド（例えば、ＮａＢａ3、アセトニトリル：水、ＮａＩＯ4、アセトニトリル：水など）及びスルホン（例えば、Ｈ2Ｏ2、Ｈ2ＣＯ2Ｈ）へ酸化する方法が挙げられる。
【００９２】
化合物のアッセイ
当業者は、本明細書中に記載された化合物の活性を測定するために有用であるin vivo及びin vitroアッセイが包括的であるよりも例示的であることを理解するだろう。
【００９３】
内皮細胞移動に関するアッセイ
内皮細胞（ＥＣ）移動に関して、トランスウェルを、２００μＬコラーゲン溶液/トランスウェルを加え、次いで一晩３７℃でインキュベートすることによってＩ型のコラーゲン（５０μｇ／ｍＬ）で覆っている。トランスウェルを２４ウェルプレートに集め、そして化学誘引物質（例えば、ＦＧＦ−２）を総体積０．８ｍＬの培地におけるチャンバーの底に対して加える。ＥＣ、例えば、ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）（トリプシンを使用して単層培養から剥がした）を、無血清培地で希釈して最終濃度約１０6細胞/mLにして、０．２mLのこの細胞懸濁を各トランスウェルの上方チャンバーに対して加える。試験される阻害物質を上方及び下方チャンバーの両方に対して加えて良く、そして移動を湿気のある雰囲気下３７℃で５時間に渡り進める。トランスウェルを、ＤｉｆｆＱｕｉｃｋ（登録商標）を使用して染色したプレートから取り除く。移動しなかった細胞を、上方チャンバーから綿棒を使用することでこすり取り、そしてメンブレンを取り外し、スライド上に置き、そして高力場（×４００）の下で計測し、移動した細胞の数を特定する。
【００９４】
抗侵入活性の生物学的アッセイ
ＥＣ又は腫瘍細胞（例えば、ＰＣ−３ヒト前立腺ガン細胞）の、マトリゲル（登録商標）アッセイシステムとして知られているこのアッセイにおける再構築基底膜（マトリゲル（登録商標））を侵入して通る能力は従来技術に詳細が記されている（Kleinmanら、Biochemistry 1986, vol.25: pp.312〜318; Parishら、1992, Int. J. Cancer vol.52: pp.378〜383）。マトリゲル（登録商標）は、IV型のコラーゲン、ラミニン、ヘパリン硫酸塩プロテオグリカンの例えば、bFGFに対して結合して局在するペルレカン、ビトロネクチン並びに形質転換増殖因子β（ＴＧＦβ）、ウロキナーゼ型プラスミノゲン賦活物質（ｕＰＡ）、組織プラスミノゲン賦活物質（ｔＰＡ）及びプラスミノゲン賦活物質阻害１型物質（ＰＡＩ−１）などを含む再構築基底膜である（Chambersら、Canc. Res. 1995, vol.55: pp.1578〜1585）。細胞外レセプター又は酵素を標的とする化合物に関するこのようなアッセイにいて獲得される結果は、in vivoでのこれら化合物の効率を予測するものであることが当業界で受け入れられている（Rabbaniら、Int.J.Cancer,1995,vol.63：pp.840〜845）。
【００９５】
かかるアッセイは、トランスウェル組織培養挿入物を使用する。侵入性細胞は、マトリゲル（登録商標）及びポリカーボネートメンブレンの上方の面を通過してメンブレンの底部に対して接着できる細胞として規定されている。ポリカーボネートメンブレン（孔経８．０μm）を含むトランスウェル（Ｃｏｓｔａｒ）をマトリゲル（登録商標）（Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅｒｃｈ）（無菌ＰＢＳ中最終濃度７５μｇ／ｍＬ（６０μＬの希釈したマトリゲル（登録商標）/挿入物））でコーティングし、そして２４ウェルプレートのウェル内に配置している。メンブレンを生物学的に安全なキャビネットで一晩乾燥させ、次いで抗体を含むＤＭＥＭを１００μＬ加えて１時間に渡りシェーカーテーブル上で再水和させた。DMEMを各挿入体から吸引によって取り除き、そして、０．８ｍＬのＤＭＥＭ/１０％ＦＢＳ／抗生物質を２４ウェルプレートの各ウェルに対して、それがトランスウェルの外側（「下方チャンバー」）を取り囲むように、加える。新鮮ＤＭＥＭ／抗体（１００μL）、ヒトGlu-プラスミノーゲン（５μｇ／ｍＬ）、及び試験される任意の阻害物質をトランスウェル内部の頂部（ｔｏｐ）（「上方チャンバー」）に対して加える。試験される細胞をトリプシン処理してＤＭＥＭ／抗体中で再懸濁させ、次いでトランスウェルの頂部チャンバーに対して最終濃度８００，０００細胞／ｍＬで加える。上方チャンバーの最終体積を２００μLに調節する。次いで、集めたプレートを５％ＣＯ2湿雰囲気下で７２時間に渡りインキュベートする。インキュベーション後、細胞を固定化し、そしてＤｉｆｆＱｕｉｃｋ（登録商標）（ギムザ染色）を使用し染色して、次いで、上方チャンバーを綿棒を使用してマトリゲル（登録商標）、及びメンブレンに浸入しなかった全ての細胞を取り除くために剥がした。メンブレンをＸ−アクト（登録商標）ブレードを使用することでトランスウェルからはずし、Ｐｅｒｍｏｕｎｔ（登録商標）及びカバースリップを使用することでスライド上にマウントさせ、次いで高力場（×４００）で計測した。侵入した細胞の平均を、計算した５〜１０場から特定し、そして阻害物質濃度の関数としてプロットする。
【００９６】
抗血管形成活性の管形成アッセイ
内皮細胞、例えば、ヒト臍帯血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）又はヒト毛細血管内皮細胞（ＨＭＶＥＣ）（調製されて良いかあるいは商業的に獲得されて良い）を２×１０5細胞／ｍＬの濃度でフィブリノゲン（リン酸緩衝塩類溶液（ＰＢＳ）中５ｍｇ／ｍＬ）と１：１（ｖ/ｖ）の体積で混合する。トロンビン（５Ｕ／ｍＬ最終濃度）を加え、そしてこの混合物をすぐに２４ウェルプレート（０．５ｍＬ／ウェル）に移す。フィブリンゲルを形成可能にし、次いでＶＥＧＦ及びｂＦＧＦをこのウェルに対して（各５ｎｇ／ｍＬの最終濃度）で試験化合物と共に加える。細胞を３７℃、５％ＣＯ2下４日に渡りインキュベートし、この時間で各ウェル中の細胞を計測して分類（丸い、枝分かれなく細長い、枝分かれを１つ有し細長い、又は２以上の枝分かれを有し細長い）している。結果を、化合物の各濃度について５つの異なるウェルの平均として表している。典型的に、血管形成阻害物質の存在下では、細胞は丸いかあるいは未分化管（例えば枝分かれが０又は１個）のいずれかのままである。このアッセイは当業界で、in vivo血管形成効率（又は抗血管形成効率）を予測するものであると認識されている（Minら、Cancer Res. 1996, vol.56: pp.2428〜2433）。
【００９７】
代わりのアッセイにおいて、内皮細胞管形成は、内皮細胞がマトリゲル（登録商標）上で培養されている場合に確認されている（Schnapenら、J. Cell. Physiol. 1995, vol.165: pp.107〜108）。内皮細胞（１×１０4細胞/ウェル）をマトリゲル（登録商標）コーティングした２４ウェルプレート上に移して管形成を４８時間後に定量化する。阻害物質を、それらを同時に内皮細胞に対して加えるかるいはこの後の様々な時点において加えることによって試験する。管形成も（a）血管形成因子の例えば、ｂＦＧＦ又はＶＥＧＦ、（b）分化刺激因子（例えば、ＰＭＡ）又は（c）それらの組み合わせを加えることによって刺激されても良い。
【００９８】
任意の理論にとらわれることが望ましくない一方で、このアッセイモデルは、内皮細胞に対して特定の型の基底メンブレン（即ち、内皮細胞を移動及び分化させるマトリクスの層が最初に遭遇することが予測される）を提示することによって血管形成する。結合した増殖因子に加えて、マトリゲル（登録商標）（及びin situでの基底膜）中で見出されるマトリクス成分又はそれらのタンパク質分解産物も、内皮細胞管形成について刺激性であり、このことにより、従来の記載されている（Bloodら、Biochim. Biophys. Acta 1990, vol.1032: pp.89〜118; Odedrら、Pharmac. Ther. 1991, vol.49: pp.111〜124）ような、フィブリンゲル血管形成モデルに対して相補的なモデルが作り上がる。
【００９９】
増殖の阻害についてのアッセイ
化合物がＥＣの増殖を阻害する能力は、９６ウェル形態にて特定されて良い。Ｉ型コラーゲン（ゼラチン）を使用し、プレートのウェル（ＰＢＳ中０．１〜１ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍＬ／ウェル、室温で３０分に渡る）をコーティングする。プレート（×３ｗ／ＰＢＳ）を洗浄した後、３-６，０００個の細胞/ウェルを播いて、４時間（３７℃／５％ＣＯ2）に渡り内皮細胞増殖培地（ＥＧＭ：Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）中又は０．１〜２％のＦＢＳを含むＭ１９９培地で接着させる。培地及び接着しなかった全ての細胞を４時間の最後に取り除き、そしてｂＦＧＦ（１〜１０ｎｇ／ｍＬ）又はＶＥＧＦ（１〜１０ｎｇ／ｍＬ）を含む新鮮培地を各ウェルに対して加える。試験される化合物を最後に加え、そしてプレートを２４〜４８時間に渡りインキュベート（３７℃／５％ＣＯ2）せしめる。ＭＴＳ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を各ウェルに対して加え、そして１〜４時間に渡りインキュベートせしめる。次いで、４９０ｎｍでの吸光度（細胞数に比較する）を測定して、増殖における違いをコントロールウェルと試験化合物を含むものとの間で特定した。類似のアッセイ系が培養した接着性腫瘍細胞により設定されて良い。しかし、この形態では、コラーゲンは省かれて良い。腫瘍細胞（例えば、３０００〜１０，０００個／ウェル）を播いて、そして一晩に渡り接着せしめる。次いで、無血清培地をこのウェルに対して加え、そして細胞を２４時間に渡り同期化させる。次いで、１０％ＦＢＳを含む培地を各ウェルに対して加え、増殖を刺激した。試験される化合物をいくつかのウェルに含ませる。２４時間後、ＭＴＳをプレートに対して加え、そしてアッセイを展開し、そして上記のようにして読む。
【０１００】
細胞障害性のアッセイ
化合物の抗増殖及び細胞傷害効果は、腫瘍細胞、ＥＣ、繊維芽細胞及びマクロファージなどの様々な種類の細胞について特定されて良い。これは、放射性治療又は毒素などの治療成分に対して結合している化合物を試験する際、特に有用である。例えば、化合物の１つと131Ｉでヨウ素化されているボルトン−ハンター試薬との結合は、ＰＨＳＣＮ結合部位／レセプターを発現する細胞の増殖を阻害（大抵はアポトーシスを誘導することによって）することが期待されている。抗増殖効果は、腫瘍細胞及び刺激された内皮細胞のみならず、ある条件下では、静止内皮細胞及び正常なヒトの皮膚繊維芽細胞に対して期待されて良い。正常な細胞において確認される任意の抗増殖又は細胞傷害性効果は、結合体の非特異的細胞傷害性を示しうる。典型的なアッセイには、細胞を５-１０，０００細胞/ウェルで９６ウェルプレート中に播くことを伴うであろう。試験される化合物を、結合アッセイにおいてＩＣ50測定する場合、１０倍の濃度で加えられ（これは結合体に依存して変わるだろう）そして細胞と３０分に渡りインキュベートせしめる。細胞を培地で３回洗浄し、次いで［3Ｈ］チミジン（１μＣｉ／ｍＬ）を含む新鮮培地を当該細胞に対して加え、そしてそれらを３７℃（５％ＣＯ2）で２４時間及び４８時間に渡りインキュベートさせる。細胞を、１ＭのＮａＯＨを使用することで様々な時点で溶解させ、そしてウェルあたりβカウンターを使用することで計測した。増殖を、ＭＴＳ試薬又はＣｙＱｕａｎｔ（登録商標）を使用することで、合計細胞数を測定するために非放射性物質を測定する。細胞傷害性アッセイ（細胞の溶解性を測定すること）に関して、Ｐｒｏｍｅｇａ９６ウェル細胞傷害性キットを使用する。もし、抗増殖活性の証拠があれば、アポトーシスの誘導は腫瘍ＴＡＣＳ（Ｇｅｎｚｙｍｅ）を使用することで測定されて良い。
【０１０１】
カスパーゼ−３活性
ＥＣのアポトーシスを促すための化合物の能力は、カスパーゼ−３の活性化を測定することによって特定されて良い。Ｉ型のコラーゲン（ゼラチン）を、Ｐ１００プレートをコーティングするために使用し、そして５×１０5個のＥＣを、１０％ＦＢＳを含有するＥＭＧを中に播いている。２４時間（５％ＣＯ2中、３７℃）後、培地を、２％ＦＢＳ、１０ｎｇ／ｍｌのｂＦＧＦ及び所望の試験化合物を含むＥＭＧによって置換する。細胞を６時間後に収穫し、細胞溶解物を１％トリトン中で調製し、そしてEnzChek（登録商標）カスパーゼ−３アッセイキット＃￥１（Molecular Probe）を使用することで、製造説明書に従いアッセイする。
【０１０２】
角膜血管形成モデル
使用されるプロトコールは本質的にVolpertら、J. Clin. Invest. 1996, vol.98: pp.671〜679によって記載されたものと同じである。メスのFischerラット（１２０〜１４０ｇ）に手早く麻酔をかけ、そしてＨｙｄｒｏｎ（登録商標）、ｂＦＧＦ（１５０ｎＭ）、及び試験される化合物を含んで成るペレット（５μl）を、角膜輪部から１．０〜１．５mm離れた、角膜において作った小さな切開部中に移植する。移植後、５〜７日で新血管形成を評価する。７日目に動物に麻酔をし、そしてコロイド状炭素などの色素を注入して血管を染色する。次いで、動物を安楽死させ、角膜をホルマリンで固定化し、そして角膜を扁平化させ、そして新血管形生の程度を評価するために写真を撮った。新生血管を、総血管領域もしくは長さを画像化すること又は単に血管を計測することによって定量化して良い。
【０１０３】
マトリゲル（登録商標）プラグアッセイ
このアッセイを、本質的に、Passanitiら、1992, Lab Invest. vol.67: pp.519〜528によって記載されたようにして行う。氷冷マトリゲル（登録商標）（例えば５００μL）（Collaborative Biomedical Products Inc. Bedford,MA）をヘパリン（例えば、５０μｇ／ｍｌ）、ＦＧＦ−２（例えば４００ｎｇ／ｍｌ）及び試験される化合物と混合する。いくつかのアッセイにおいて、ｂＦＧＦは血管形成刺激物として腫瘍細胞と置き換えられて良い。マトリゲル（登録商標）混合物を４〜８週齢胸腺欠損マウスに、腹部中心線に近い部分で皮下的に、好適には３回の注射／マウスで注射する。注射したマトリゲルは明らかな固体状ゲルを形成する。注射部位は、各動物がポジティブコントロールプラグ（例えば、ＦＧＦ−２＋ヘパリン）、ネガティブコントロールプラグ（例えば、バッファー＋ヘパリン）及び血管形成に対する効果を試験される化合物を含むプラグ（例えば、ＦＧＦ−２＋ヘパリン＋化合物）を受けるように選択している。全ての処理を好適に三重に行った。動物を、注射後７日で又は血管形成を確認するために最適である別の時に子宮頚部脱臼によって犠牲にした。マウスの皮膚を腹部中心線に沿って剥がし、そしてマトリゲル（登録商標）を回収して即座に高い分解能で走査する。次いで、プラグを水中で分散させそして３７℃で一晩インキュベートする。ヘモグロビン（Ｈｂ）レベルをＤｒａｂｋｉｎの溶液（例えば、Ｓｉｇｍａから獲得される）を、製造説明書に従って使用することで、測定する。プラグ中のHbの量は、血管形成の間接的な基準であり、何故ならそれは試料中の血液の量を反映するからだ。加えて、又は代替的に、動物には、フルオロフォアが結合されている高分子量のデキストランを含む０．１ｍｌ緩衝剤（好適にはＰＢＳ）を、犠牲にする前に注射して良い。分散プラグ中の、蛍光測定された蛍光の量も、プラグ中での血管形成の測定値としても働く。ｍＡｂ抗ＣＤ３１（ＣＤ３１とは「血小板内皮細胞接着分子又はＰＥＣＡＭである」）で染色することが、プラグ中での新血管形成及び毛細血管密度を確かめるために使用されて良い。
【０１０４】
幼鳥絨毛尿膜（ＣＡＭ）血管形成アッセイ
このアッセイは本質的に、Nguyenら、Microvascular Res. 1994, vol.47: pp.31〜40によって記載されたようにして行う。血管形成因子（ｂＦＧＦ）又腫瘍細胞のいずれか＋阻害物質を含むメッシュを８日齢幼鳥胚のＣＡＭ上に配置して当該ＣＡＭを試料の移植後３〜９日に渡り確認する。血管形成を、血管を含む平方メッシュ％を測定することによって定量化する。
【０１０５】
腫瘍細胞を伴いマトリゲル（登録商標）プラグアッセイを使用することでの血管形成阻害及び抗腫瘍効果のin vivo評価
このアッセイでは、細胞、例えば、１-５×１０6個の３ＬＬルイス肺ガン細胞又はラット前立腺ガン細胞系統ＭａｔＬｙＬｕをマトリゲル（登録商標）と混合して、上記節Ｂで記載したプロトコール後にマウスの脇腹に注射する。腫瘍の塊及び強力な血管形成反応を約５〜７日後にプラグ中で確認できうる。実際の腫瘍環境における化合物の抗腫瘍及び抗血管形成作用を、それをプラグ中に含ませることによって評価できうる。次いで、腫瘍重量、Ｈｂレベル又は蛍光レベル（犠牲にする前のデキストラン−フルオロフォア結合体の）の測定を行う。Ｈｂ又は蛍光を測定するために、プラグを最初に組織ホモジナイザーでホモジナイズする。
【０１０６】
皮下（ｓ．ｃ．）腫瘍増殖の異種移植片モデル
ヌードマウスにＭＤＡ−ＡＢ−２３１細胞（ヒト乳ガン細胞）又は他の適切なヒト腫瘍細胞系統を接種させ、そしてマトリゲル（登録商標）（０．２ｍＬ中１×１０6個の細胞）を動物の右脇腹に注射した。腫瘍を２００ｍｍ3のステージにし、そして試験組成物での処置を開始する（１００□ｇ／動物／日１回、腹腔内）。腫瘍体積を１日おきに獲得し、そして動物を処理の２〜６日後に犠牲にした。腫瘍を切り出し、重量を量り、そしてパラフィン包埋した。腫瘍の組織学的切片を、Ｈ及びＥ、抗ＣＤ３１、Ｋｉ−６７、ＴＵＮＥＬ、ＣＤ６又は他の組織化学的染色により分析した。
【０１０７】
転移の異種移植片モデル
前記化合物を、実験的な転移モデル（Crowleyら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1993, vol.90, pp.5021〜5025）を使用して晩期転移（lateme tastasis）の阻害についても試験した。晩期転移には、腫瘍細胞の接着及び溢出、局所浸入、播種、増殖及び血管新生が伴う。レポーター遺伝子、好適には、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）遺伝子、しかし代わりに、酵素クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、ルシフェラーゼ又はLacZをトランストランスフェクションさせたヒト前立腺ガン細胞（ＰＣ−３）をヌードマウス中に接種させる。この方法により、これらのマーカー（ＧＦＰの蛍光検出又は酵素活性の組織化学的比色検出）のいずれかを使用することが可能になり、これらの細胞が減退することを追跡することが可能になる。細胞は、好適に、静脈内に注射され、そして約１４日後に転移が、特に肺のみならず、リンパ節、大腿部及び脳においても確認されて良い。これはヒトの前立腺ガン細胞において天然に生ずる転移の向性を模擬する。例えば、ＧＦＰ発現ＰＣ−３細胞（１×１０6個の細胞／マウス）を、ヌード（nu／nu）マウスの尾の静脈へと静脈内注射している。動物を試験組成物（１００μｇ／動物／日で１日１回腹腔内に）で処理している。単一の転移細胞及び病巣を、蛍光顕微鏡又は光学顕微鏡組織化学によって又は組織を粉砕することによって及び検出可能標識の比色アッセイによって視覚化して定量化する。
【０１０８】
ＰＨＳＣＮ及び機能的誘導体によるIn vivo突発性転移の阻害
ラット同系乳ガン細胞系にはＭａｔＢIIIラット乳ガン細胞（Xingら、Int. J. Camcer 1996, vol.67: pp.423〜429）を使用する。０．１ｍＬのＰＢＳ中で懸濁させた約１０6個の腫瘍細胞を、メスのFisherラットの乳房脂肪体へと接種する。接種するときに、１４日Ａｌｚａ浸透性ミニポンプを腹腔内に移植し、試験化合物を分注する。この化合物をＰＢＳ（例えば２００ｍＭストック）中に溶かして、フィルター滅菌してミニポンプ中に配置して、約４ｍｇ／ｋｇ／日の放出速度を達成した。コントロールの動物はビヒクル（ＰＢＳ）を単独でかあるいはミニポンプ中のビヒクルコントロールペプチドを受ける。動物を約１４日目に犠牲にする。本発明の化合物で処理したラットにおいては一次腫瘍のサイズが有意に減少し、そして脾臓、肺、肝臓、腎臓及びヘンパ節（明らかな病巣として列挙されている）における転移の数の有意な減少が確認されて良い。組織学的及び免疫組織化学的分析によりネクローシスの増加及びアポトーシスの徴候が、処理された動物の腫瘍において確認されて良い。巨大なネクローシス領域が、腫瘍の、新血管形生を欠いている領域で見られる、ヒト又はウサギＰＨＳＣＮ及びそれらの誘導体（それらに対して131Ｉが結合している）（１又は２個のＩ原子／ペプチド）は有効な放射性治療物であり、そして結合していないポリペプチドに比べて２倍以上有力であることが発見されている。対照的に、コントロールペプチドでの処置は、腫瘍サイズ及び転移において有意な変化を生じるに欠いた。
【０１０９】
３ＬＬルイス肺ガン：一次腫瘍細胞増殖
この細胞系統はＣ５７ＢＬ／６マウスにおける肺ガンとして突然生じる（Malaveら、J. Nat'l Conc. Inst. 1979, vol.62: pp.83〜88）。それをＣ５７ＢＬ／６マウスにおいて皮下注入により増殖させ、そして半異質遺伝子Ｃ５７ＢＬ／６×ＤＢＡ／２Ｆ1マウス又は異質遺伝型Ｈ３Ｃマウスにおいて試験する。典型的に６匹のマウス／群を皮下（ｓｃ）移植のために、又は１０匹を筋肉（ｉ．ｍ．）移植のために使用している。腫瘍は２〜４ｍｍ断片としてｓ．ｃ．に、又は約０．５〜２×１０6細胞の懸濁細胞の接種物としてｉ．ｍ．もしくはｓ．ｃ．に移植されて良い。移植２４時間後に処置を開始するかあるいは腫瘍の特定のサイズ（通常約４００mg）が確認されるまで遅らせる。試験化合物を毎日ｉ．ｐ．に１１日に渡り投与する。
【０１１０】
動物の重量を量って、触診した後に腫瘍のサイズを測定した。未処理のコントロール受容者の典型的な腫瘍重量はｉ．ｍ．接種の１２日後、５００〜２５００mgである。典型的な中央値生存時間は、１８〜２８日である。陽性コントロール化合物の例えば、シクロフォスファミドを２０ｍｇ／ｋｇ／注射／日で１〜１１日目で使用している。計算した結果には、平均動物重量、腫瘍サイズ、腫瘍重量、生存時間に含まれる。確かな治療活性のために、試験化合物は、２つの多重投与アッセイで試験されるべきである。
【０１１１】
３LLルイス肺ガン：一次増殖及び転移モデル
このアッセイは当業界で周知である（Gorelikら、J. Nat'l. Canc. Inst. 1980, vol.65: pp.1257〜1264; Gorelikら、Rec. Results Canc. Res. 1980, vol.75: pp.20〜28; Isakovら、Invasion Metas. vol.2: pp.12〜32 (1982); Talmadgeら、J. Nat'l Canc. Inst. 1982, vol.69: pp.975〜980; Hilgardら、Br. J. Cancer 1977, vol.35: pp.78〜86）。試験マウスはオスＣ５７ＢＬ／６マウス、２〜３月齢である。ｓ．ｃ．、ｉ．ｍ．又は足蹠移植の後、この腫瘍は転移を生産し、好適には肺において転移を生み出す。いくつかの系統の腫瘍に伴い、一次腫瘍は抗転移効果を発揮し、そして最初に、転移段階の研究をする前に切り出されなければならない（米国特許第5,639,725号を参照のこと）。
【０１１２】
単一種細胞懸濁を、細分化した腫瘍組織を０．３％トリプシン溶液で処理することによって固形腫瘍から調製した。細胞を３回、ＰＢＳ（pH７．４）で洗浄し、そしてＰＢＳ中で懸濁させた。この方法により調製した３ＬＬ細胞の生存可能性は、一般に約９５〜９９％（トリパンブルー色素抽出により）である。０．０５mlのＰＢＳ中で懸濁させた生存可能な腫瘍細胞（３×１０4〜５×１０6）を、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの背部領域において又は１つの後部足蹠のいずれかにおいて皮下に注射する。１０6個の細胞を背部ｓ．ｃ．注射した３〜４日後に明らかな腫瘍が出現する。腫瘍出現の日及び確立された腫瘍の直径を２日おきに、のぎすで測定する。治療を、１週間につき１〜５用量のペプチド又は誘導体を投与することで行う。他の実施態様において、ペプチドは浸透圧ミニポンプによりデリバリーされる。
【０１１３】
背部腫瘍の腫瘍切除を伴う実験において、腫瘍が約１５００ｍｍ3のサイズに到達した場合、マウスをランダムに２つの群：（１）一次腫瘍が完全に切り出されている:又は（２）偽手術を行って腫瘍を完全に残している、に分ける。５００〜３０００ｍｍ3の腫瘍は転移の増殖を阻むが、１５００ｍｍ3が、高い生存率を伴い且つ局所増殖なく安全に摘出できる最も大きなサイズの一次腫瘍である。２１日後、全てのマウスを犠牲にして検視した。
【０１１４】
肺を除去して重量を測定する。肺をBouin溶液中で固定化して、目で確認できる転移を記録する。転移の直径を、８倍の倍率で、マイクロメーターを含む接眼レンズを備えた双眼立体顕微鏡を使用することでも測定する。記録された直径に基づいて、各転移の体積を計算することが可能である。転移の総体積/肺を特定するために、目に見える転移の平均数に転移の平均体積を掛けている。転移増殖を更に特定するために、肺細胞中への125ＩｄＵｒｄの組み込みを速定することも可能である（Thakurら,J.Lab.Clin.Med.1977,vol.89：pp.217〜218）。腫瘍切断の１０日後、２５μgのフルオロデオキシウリジンを、腫瘍（そしてもし使用するなら、腫瘍を切除したマウス）を担持する腹膜へと接種する。３０分後、マウスに１μＣｉ125ＩｄＵｒｄ（ヨードデオキシウリジン）を与える。１日後、肺及び脾臓を除去して重量を量り、そして125ＩｄＵｒｄ組み込みの程度をγカウンターを使用することで測定する。
【０１１５】
足蹠に腫瘍を有するマウスにおいて、腫瘍が直径約８〜１０ｍｍのサイズに到達した場合、マウスをランダムに２つの群：（１）腫瘍を伴う脚を膝関節の上で結紮した後、切断している:又は（２）マウスは切断を行っていないので完全なままであり腫瘍を担持しているコントロールに分ける。（腫瘍を有するマウスの腫瘍を伴わない脚の切断は後の転移に公知の効果を及ぼさず、麻酔、ストレス又は手術の効果の可能性を除外する）。マウスを切断の１０〜１４日後に殺す。転移を上記のようにして評価する。
【０１１６】
統計：腫瘍担持マウスの肺における転移及びそれらの増殖の発生を示す値は、通常、分散していない。従って、非パラメーター統計の例えば、Mann-Whitney U-Testが分析のために使用されて良い。
【０１１７】
上記Gorelikらによるこのモデル研究により、腫瘍細胞注入物のサイズが転移増殖の程度を決定することが示された。手術したマウスの肺における転移の速度は、一次腫瘍担持マウスとは異なった。従って、より多用量の３ＬＬ細胞(１-５×１０6)を接種することによって一次腫瘍が誘導されており、しかる後に外科的除去されているマウスの肺において、転移の数は手術していない腫瘍を担持するマウスよりも少ないが、転移の体積は、手術していないコントロールのマウスよりも低い。肺転移の測定として125ＩｄＵｒｄ組み込みを使用することで、最初に１０6個の３ＬＬ細胞を接種した腫瘍切除マウスの肺と腫瘍担持マウスの肺の内で有意な差が確認された。１０5個の腫瘍細胞を接種した後に生産された腫瘍の切除により、転移増殖が劇的に加速した。これらの結果は、局所腫瘍を切り出した後のマウスの生存率に従った。局所腫瘍を切り出した後の転移増殖の加速化の現象が繰り返し確認されている（例えば、米国特許第5,639,725）号。これらの観察には、ガン手術を受ける患者の診断をするための意味がある。
【０１１８】
組み換えDNAモデル
分子生物学の一般的な方法は、十分に当業界で記載されている（Sambrookら、Molecular Cloning: A Laboratory Manual、第２版以降、Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989; Ausubeら、Current Protocols in Molecular Biology, Vol.2, Wiley-Interscience, New York, (現行版); Kriegler, Gene Transfer and Expression: A Laboratory Manual (1990); Glover, DM、著、DNA Cloning: A Practica Approach, vol.I＆II, IRL Press, 1985; Albertsら、Molecular Biology of the Cell、第２版以降、Garland Publishing, Inc., New York, NY (1989); Watsonら、Recombinant DNA、第２版以降、Scientific American Books, New York, 1992; 及びOldら、Principles of Gene Manipulation: An Introduction to Genetic Engineering、第２版以降、University of California Press, Berkeley, CA (1981)）ものをあてはめる。
【０１１９】
特に示されていない限り、特定の核酸配列は、それらの保存的置換変異（例えば、縮重コドン置換）及び相補的配列を包含する。用語「核酸」とは、「ポリヌクレオチド」と同義的に使用されており、そして遺伝子、ｃＤＮＡ分子、ｍＲＮＡ分子並びに、オリゴヌクレオチド、及び更に、それらの同等物（下で更に十分詳説している）などの任意の断片をも含むことを意味する。核酸のサイズは、キロベース（ｋｂ）又はベースペア（ｂｐ）のいずれかで記載されている。これらは、アガロースゲル又ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）に由来する、使用者又は刊行物によって特定された核酸に由来する推定値である。タンパク質のサイズは、キロダルトン（ｋＤａ）の分子質量としてかあるいは長さ（アミノ酸残基の数）として記載されている。タンパク質のサイズは、ＰＡＧＥから、配列決定から、コード核酸配列に基づく推定アミノ酸は配列から又は刊行物に記載されたアミノ酸配列からの推定されている。
【０１２０】
詳細に、本発明のペプチド多量体に対応するアミノ酸配列をコードするＤＮＡ分子、又はそれらの活性変異体は、本明細書中に記載のタンパク質の配列に由来するプライマーを使用することでポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって合成されて良い（例えば、米国特許第4,683,202を参照のこと）。次いで、これらｃＤＮＡ配列は真核又は原核発現ベクター中へと集成され、そして生じるベクターは、適切な宿主細胞、例えばＣＯＳ又はＣＨＯ細胞による、融合ペプチドもしくはその断片もしくは誘導体の合成に向けるために使用されて良い。
【０１２１】
用語「核酸」とは、本明細書中で使用された場合、かかる断片又は同等物を含むことを意味する。本発明の核酸配列は、ＤＮＡ又はＲＮＡであって良い。多量体を発現させるために形質転換もしくはトランスフェクションされた真核もしくは原核の宿主細胞は、本発明の範囲内である。例えば、ペプチド多量体は、細菌細胞の例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、昆虫細胞（バキュロウィルス）、酵母、又は哺乳類細胞の例えば、チャイニーズハムスターオバレイ細胞（ＣＨＯ）又はヒト（トランスフェクションした細胞のヒト治療使用のために好適である）中で発現されて良い。他の適切な宿主も当業者に公知である。真核細胞中での発現は、組み換えポリペプチドの部分的又は完全な糖化及び/又は関連する鎖内もしくは鎖間ジスルフィド結合の形成につながる。酵母Sセレビシアエ（S.cerevisiae）中での発現のためのベクターとしては、pYepSecl（Baldariら、1987, EMBO J. vol.6: pp.229〜234），pMFa（Kurjanら、1982 Cell. vol.30: pp.933〜943），pJRY88（Schultzら、1987, Gene vol.54: pp.113〜123）、及びpYES2（Invitrogen Corporation, San Diego, Calif.）。培養した昆虫細胞（ＳＦ９細胞）中でタンパク質の発現をさせるために入手可能なバキュロウィルスベクターとしてはｐＡｃ系（Smithら、1983, Mol. Cell Biol. vol.3: pp.2156〜2165）及びｐＶＬ系（Lucklowら、(1989) Virology vol.170: pp.31〜39である）が挙げられる。一般に、ＣＯＳ細胞（Gluzman，1981,Cell vol.23：pp.175〜182）は、かかるベクターのｐＣＤＭ８（上記Aruffoら）と結合させて哺乳類細胞中での一過的な増幅/発現のために使用されており、一方でＣＨＯ（ｄｈｆｒ-ネガティブＣＨＯ）は、ベクターのpMT2PC（Kaufmanら,1987,EMBO J.vol.pp.187〜195）などと共に、哺乳類細胞中での安定な増殖/発現のために使用されている。ＮＳ０ミエローマ細胞系統（グルタミンシンターゼ発現系）は、Colltech Ltdから入手可能である。
【０１２２】
所望のコーディング及びコントロール配列を含む適切なベクターの構築には、当業界で周知の標準的なライゲーション及び制限技術を使用する。単離された、プラスミド、ＤＮＡ配列、又は合成されたオリゴヌクレオチドを解裂させ、編成し、そして所望の形態で再度ライゲーションする。ベクターを形成するＤＮＡ配列は、多くの源から入手可能である。バックボーンベクター及びコントロールシステムは一般に、構築体中配列の大部分について使用されている使用可能な「宿主」ベクター上で見出される。例えば、適切なコーディング配列のために、初期構築とは、適切な配列をｃＤＮＡ又はゲノムＤＮＡライブラリーから回収することである又はそうであって良い。しかし、一度配列が開示されれば、個々のヌクレオチド誘導体から出発しin vitroで全体の遺伝子配列を合成することが可能である。サイズを測ることができる長さ、例えば、５００〜１０００ｂｐの遺伝子の全体遺伝子配列は、デオキシリボヌクレオチド三リン酸の存在下でＤＮＡポリメラーゼを使用することで、個々のオーバーラップする相補的オリゴヌクレオチド配列を合成すること及び単一の標準的なオーバーラップしていない部分を充填するによって調製されて良い。この方法は、いくつかの公知の配列の構築において首尾良く使用されてきた。例えば、Edge, Nature 1981, vol.292: p.756; Nambairら、Science 1984, vol.223: p.1299; 及びJay, J. Biol. Chem. 1984, vol.259: p.6311を参照のこと。
【０１２３】
合成ヌクレオチドは、上記引用された参照に記載のホスホトリエステル法又はBeaucageら、Tetrahedron Lett. 1981, vol.22: p.1859; 及びMatteucciら、J. Am. Chem. Soc. 1981, vol.103: p.3185によって記載にされたフォスフォラミダイト法のいずれかによって調製されており、そして市販されて入手可能な自動化されたオリゴヌクレオチド合成装置によって調製できる。単鎖をアニーリングする前又はラベリングするためのキナーゼ処理は周知の方法を使用することで達成されている。
【０１２４】
一度、所望のベクターの成分がこのようにして入手できれば、それらを、標準的な制限及びライゲーション法を使用することで切り出してライゲーションできる。部位特異的ＤＮＡ解裂は、一般に当業界で理解されており、そしてそれらの詳細は市販されて入手可能な制限酵素の説明書に特定されている条件下で、適切な制限酵素（又は酵素）により処理することによって行われている。例えば、New England Biolabs,Product Catalogを参照のこと。もし望まれれば、解裂された断片のサイズ分離は、標準的な方法を使用するポリアクリルアミドゲル又はアガロースゲル電気泳動を使用することで行われて良い。サイズ分離に関する一般的な記載は、Meth. Enzymol.（1980）vol.65：pp.499〜560を参照中に見出される。
【０１２５】
変異体が組替えにより生産されるなら、変異体を生じさせるためにコード配列中に変異を導入するため多くの方法が使用されている。これらの突然変異としては、単純な欠失又は挿入、全体的な欠失、塩基のクラスターの挿入もしくは置換又は単一の塩基の置換が挙げられる。ＤＮＡ配列の修飾は、部位特異的突然変異誘発によって生み出され、それはプロトコールと試薬が市販されて入手可能である周知の技術である（Zollerら、Nucleic Acid Res. 1982, vol.10: pp.6487〜6500及びAdelmonら、DNA 1983, vol.2: 183〜193）。単離されたＤＮＡは、制限法によって及び/もしくは更にSanger, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1977, 74: 5463) Messingら、Nucleic Acids Res. 1981, 9: 309によって記載されたダイデオキシ法による配列決定によってもしくは上記Maxamら、Meth. Enzymol., supraの方法によって分析されている。
【０１２６】
ベクターDNAは哺乳類細胞へと、常用の技術、例えば、リン酸カルシウム又は塩化カルシウム共沈殿、ＤＥＡＥデキストラン介在トランスフェクション、リポフェクション、又はエレクトロポレーションを介して導入されて良い。宿主細胞を形質転換させるための適切な方法は、上記Sambrookら及び他の標準的な教科書に記載されている。融合発現ベクターにおいて、タンパク質分解解裂部位は、レポーター集団からの標的タンパク質の分離、その後の融合タンパク質の精製を可能にするためにレポーター集団と標的タンパク質の連結部に導入されている。かかる解裂のためのタンパク質分解解裂酵素及びそれらの認識配列としては、因子Ｘａ、トロンビン及びエンテロキナーゼが挙げられる。
【０１２７】
治療上の使用
本発明によれば、化合物及び／又はその医薬組成物は患者に対して、好適にはヒト、異常な血管新成を特徴とする疾患を患っている患者に対して投与されている。異常な血管新生は、異常な新血管形成の例えば、新たなる血管、より巨大な血管、一層枝分かれした血管の形成及び他の任意のメカニズムを伴い、それらは患部組織もしくは部位への血液担持能力を不適切にもしくは高めている。化合物及び／又はそれらの医薬組成物は異常な血管新成を治療するために使用されて良い。
【０１２８】
好適に、異常な血管新成を特徴とする疾患としてはガン（例えば、任意の血管新成腫瘍、好適には、固形腫瘍、例えば限定されないが、肺、乳房、卵巣、胃、膵臓、喉頭、食道、精巣、肝臓、耳下腺、胆道、結腸、直腸、頸部、子宮、子宮内膜、腎臓、膀胱、プロストレート（prostrate）、甲状腺のガン、扁平上皮細胞ガン、腺ガン、小細胞ガン、メラノーマ、グリオーマ、神経芽細胞腫、肉腫（例えば、血管肉腫、軟骨肉腫））、関節炎、糖尿病、動脈硬化症、動静脈疾患、奇形、角膜移植新血管形成、創傷治癒の遅延、糖尿病性レチノパシー、年齢に関連した黄斑変性、肉芽形成、やけど、同種親和性関接（nemophilic jomts）、リューマチ性関節炎、肥大性瘢痕、血管新生緑内症、癒着不能骨折、Osier Weber症候群、乾癬、化膿、肉芽腫、水晶体後腺維増殖症架状片、翼状片、強皮症、トラコーマ、血管接着、眼球新血管形成、寄生虫病、手術後の肥大、毛の生長の阻害、黄斑変性症（湿型と乾燥型）、リューマチ性関節炎及び変形性関節炎が挙げられる。一層好適に、異常な血管新成を特徴とする疾患としては、ガン、黄斑変性症及びリューマチ性関節炎である。
【０１２９】
そしてまた、不都合な細胞移動、侵入、増殖に関連した症状又は状態を有する患者を治療するための方法であって、対象者に対して治療上有効な量の化合物及び/又はその医薬組成物を投与することを含んで成る方法も考えられている。上記の方法において、患者は腫瘍を有し、そして血管形成を阻害することにより腫瘍のサイズもしくは増殖の減少又は腫瘍の破壊がもたらされる。好適に、対象者はヒトである。
【０１３０】
本発明の方法が有効である疾患又は症状の例としては、固形腫瘍の一次増殖、白血病又はリンパ腫、腫瘍侵潤、転移又は腫瘍転移の増殖；良性の過形成；アテローム性動脈硬化症、心筋血管形成；バルーン血管形成術後の血管再狭窄、血管外傷後の新生内膜形成、血管移植片再狭窄、冠状動脈側枝形成、深部静脈血栓症、虚血性四肢血管形成；毛細血管拡張症、発熱性肉芽腫、角膜疾患、ルベオーシス、新血管形生緑内症、糖尿症性及び他の網膜症、水晶体後方繊維増殖症、糖尿症性新血管形成、黄斑変性、子宮内膜症、関節炎、慢性の炎症症状を伴う繊維芽症、外傷性脊髄損傷の例えば、虚血、瘢痕化又は線維症、肺線維症、化学療法により誘導された線維症；瘢痕化及び線維症を伴う創傷の治癒、消化性潰瘍、骨折、ケロイド、又は血管形成、病原性細胞侵入又は血管形成に関連した造血、排卵、月経、妊娠又は胎盤形成の病気が挙げられる。
【０１３１】
上記方法によって治療される好適な疾患又は症状は、腫瘍増殖、侵入又は転移であり、特に脳腫瘍である。かかる脳腫瘍の例は、星状細胞腫、未分化星状細胞腫、グリア芽腫、多形性膠芽腫、毛様細胞性星状細胞腫、多形性黄色星状膠細胞腫、上衣下星巨大星状細胞腫、繊維性星状細胞腫、ゲミストサイト（gemistocytic）星状細胞腫、原形質星状細胞腫、希突起グリオーマ、未分化希突起グリオーマ、上衣細胞膜、未分化上衣腫、粘液乳頭型脳室上衣腫、上衣下腫、オリゴ星状細胞腫と悪性星状細胞腫の混合体が挙げられる。
【０１３２】
上記方法は、増殖性糖尿病性網膜症に関連した又はそれが原因の子宮内膜症及び病原性眼性新血管形成、血管新生性年齢に関連した黄斑変性、未熟網膜症、鎌状細胞貧血症又は網膜血管閉塞などの子宮疾患を治療するためにも使用されて良い。
【０１３３】
更に、所定の実施態様において、化合物及び/又はその医薬組成物は、患者、好適にヒトに対して、異常な血管新成を特徴とする様々な疾患又は病気に対する予防的手段として投与されている。従って、前記化合物及び/又はそれらの医薬組成物は、異常な血管新成を特徴とする疾患の傾向を有する患者に対して予防的手段として投与されて良い。従って、化合物及び/又はその医薬組成物は、ある疾患又は病気の予防をするためにそして現在治療されている他の疾患（例えば、ガンを治療する間に関節炎を予防する）のために使用されて良い。
【０１３４】
化合物及び/もしくはその医薬組成物の、異常な血管新成を特徴とする様々な疾患もしくは病気を治療もしくは予防することにおける適切性は、本明細書中に記載の方法及び当業界の方法によって評価されて良い。従って、それは当業者の能力の範囲内であり、そして異常な血管形成を特徴とする疾患もしくは病気を治療もしくは予防するための化合物及び/もしくはその医薬組成物を使用する。
【０１３５】
診断使用及び方法
化合物及び/又はその医薬組成物は患者、好適にはヒトに対して、上記節５．６において列挙したような疾患を検出又はイメージングするために診断上有効な量で投与されている。更に、化合物及び/又はその医薬組成物は、上記節５．６に列挙した不都合な細胞移動、侵入もしくは増殖に関連した疾患もしくは症状を、診断上有効な量の化合物及び/もしくはその医薬組成物を対象者に対して投与することによって検出もしくはイメージングをするために使用されて良い。
【０１３６】
化合物は、診断上標識され、そして細胞移動、細胞侵入及び細胞増殖を検出するために使用されて良い。化合物の結合する間及び後の動態には、in vitro又はin vivoで標識を検出するために適切な方法を使用することが続いて良い。診断用に標識された化合物は、診断及び予測をするためにin vivoで使用されて良く、例えば、in situ評価において不顕性転移窩巣及び他の種類のものをイメージングするために利用されて良い。診断用途のために、化合物には、当業者に周知の結合したリンカー成分が挙げられる。
【０１３７】
標識された化合物をin situ検出することは、組織標本を対象者から取り出し、そしてそれを、標識を検出するために適切な条件下で顕微鏡によって検査することによって達成されて良い。当業者は、任意の様々な組織学的方法（例えば、染色手順）は、かかるin situ検出を達成するために変更を加えられて良いことに気付くだろう。
【０１３８】
in vivoラジオイメージング診断をするために、使用できる検出装置の種類は放射性核種を選択することにおける主要な因子である。選定の放射性核種は、特定の装置によって検出可能である種類の崩壊を有さなければならない。一般に、診断イメージングを視覚化するための全ての常用の方法が本発明と共に使用されて良い。in vivo診断のための放射性核種を選択することにおける他の因子とは、標識が標的組織によって最大吸収された時間で検出するために十分長いが、宿主に対する有害放射を最小化するために十分に短い半減期である。好適な実施態様において、in vivo画像化のために使用される放射性核種は粒子を放射せず、しかし多量のフォトン（１４０〜２００ＫｅＶ、常用のγ線カメラで容易に検出されて良い）を生産する。
【０１３９】
in vivoイメージングは他の方法によっては確認できない不顕性転移窩巣を検出するために使用されて良い。本発明の化合物は、診断、予測又は調査手順において、所望の動物種の適切な任意の細胞、組織、器官又は生物学的な試料と組み合わせて使用されて良い。用語「生物学的試料」とは、正常又は疾患を有する対象者の体に由来する任意の流体又は他の物質の例えば、血液、血清、血しょう、リンパ、尿、唾液、涙、脳脊髄液、乳、羊膜流体、胆汁、腹水流体、膿汁などを意味する。そしてまたこの用語の意味に含まれているのは、器官又は組織抽出物及び対象者由来の任意の細胞又は組織調製物がインキュベートされてきた培養流体である。
【０１４０】
有用な投与量は、特定の診断基準のための有効な量の化合物として規定されている。従って、有効な量とは、核磁気共鳴画像診断装置、γ線カメラなどの適当な検出システムを使用することで検出されるために十分な量を意味する。最小検出可能量は、腫瘍（シグナル）に対して特異的に結合した標識された化合物の、非特異的に結合している又は血しょう中もしくは細胞外流体中で遊離状態で発見される標識された化合物の量に対する比に依存するだろう。
【０１４１】
投与される組成物の量は、選定の厳格な化合物、疾患又は症状、投与の経路、及び画像診断の専門家による判断に依存するだろう。一般に、診断において検出能のために必要とされる化合物の量は、年齢、症状、性別、及び患者の疾患の程度、禁忌、もし他にあれば、他の変化成分を考慮すること依存して変化するだろうし、そして個々の医者又は診断により調節されるだろう。投与量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇで多彩であって良い。
【０１４２】
治療/予防投与
化合物及び/又はその医薬組成物は、ヒトの医療において有利に使用されて良い。上記節５．６において有利に記載されているように、構造式（Ｉ）の化合物及び/又はその医薬組成物は、異常な血管新生を特徴とする疾患もしくは病気の治療もしくは予防をするために有用である。
【０１４３】
化合物及び/又はその医薬組成物は、上記疾患もしくは病気を治療もしくは予防するために使用される場合、単独でもしくは他の剤との組み合わせにおいて投与もしくは適用されて良い。化合物及び/又はそれらの医薬組成物は、単独でかあるいは他の医薬的に許容できる活性剤（例えば、他の抗ガン剤、他の抗血管形成剤の例えば、キレート物質の亜鉛、ペニシリン、チオモリブデン酸塩など）、例えば、他の化合物などとの組み合わせにおいて投与もしくは適用されて良い。
【０１４４】
本発明は、患者に対して治療上有効な量の化合物及び/又はそれらの医薬組成物を投与することによる治療及び予防の方法を提供する。患者は、動物であって良く、一層好適には、哺乳動物であり、そして最も好適にはヒトである。
【０１４５】
本発明の化合物及び/又はその医薬組成物は、経口的に投与されて良い。化合物及び／又はそれらの医薬組成物は、他の任意の都合良い経路、例えば、注入又はボーラス注入によって、上皮又は皮膚と粘膜の裏層（例えば、口内粘膜、直腸及び腸粘膜など）を介する吸収によって投与されても良い。投与は全身的かあるいは局所的であって良い。様々なデリバリーシステム（例えば、リポソーム、マイクロ粒子、マイクロカプセル、カプセル中の封入など）が、化合物及び/又はその医薬組成物を投与するために使用されて良い。投与の方法としては、限定されないが、皮内、筋肉、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、上皮、経口、舌下、鼻腔内、大脳内、膣内、経皮、直腸、吸入によって、又は局所に、特に、耳、鼻、目又は皮膚が挙げられる。好適な投与の方法は、実際に行う者の判断に委ねられ、そしてある程度、医療状態の部位に依存するだろう。多くの場合、投与は化合物及び/又はその医薬組成物が血流中へと放出することをもたらすだろう。
【０１４６】
特定の実施態様において、１もしくは複数の化合物及び/もしくはその医薬組成物を、それが必要となる領域に対して局所的に投与することが望まれている。このことは、例えば、限定ではないが、手術の間の局所注入、局所適用（例えば、手術後の創傷ドレッシングと関係して）、注射によって、カレーテルの手段によって、座薬の手段によって、移植の手段（当該移植は、多孔質、非孔質、又はゲル状の物質、例えば膜の、シアラスト膜（sialastic membrane）又は繊維）によって達成されて良い。１つの実施態様において、投与は、ガン又は関節炎の部位（又は前者の部位）において直接注射することによって行われて良い。
【０１４７】
所定の実施態様において、１又は複数の化合物及び/又はその医薬組成物を、任意の適切な経路、例えば、脳室内、くも膜下及び硬膜外注射によって中枢神経系へと導入することが好適である。脳室内注射は、例えば、Ｏｍｍａｙａリザーバーなどのリザーバーに対して接続した脳室内カテーテルによって促されて良い。
【０１４８】
化合物及び/又はその医薬組成物は、吸入によって肺に対し直接投与されて良い。吸入による投与のために、化合物及び/又はその医薬組成物は、多くの様々な装置によって肺へと都合良くデリバリーされて良い。例えば、計量式吸入器（「ＭＤＩ」）（適切な低沸点推進剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は任意の他の適切なガス）が入っている容器を利用する）が、化合物を肺に直接デリバリーするために使用されて良い。
【０１４９】
代わりに、乾燥粉末吸入器（「ＤＰＩ」）装置も、化合物及び/又はその医薬組成物を肺に対して投与するために使用されて良い。ＤＰＩ装置は典型的に、容器内で乾燥粉末の雲（次いで患者によって吸入されて良い）を作り出すためにガスの爆発などのメカニズムを使用する。ＤＰＩ装置も当業界で周知である。主要な変形は、多重投与ＤＰＩ（「ＭＤＤＰＩ」）システムであり、それは治療用量一服以上をデリバリーすることを可能にする。ＭＤＤＰＩ装置は、AstraZenecs、Glaxo Wellcome、IVAX、Schering Plough、SkyePharma及びVecturaなどの会社から入手可能である。例えば、吸入器（inhaler）又は吸入器（insufflator）中で使用するためのゼラチンのカプセル及びカートリッジは、化合物と適切な粉末基剤のラクトース又はデンプンなどの粉末混合物をこのシステムのために含むように処方されて良い。
【０１５０】
化合物及び/又はその医薬組成物を肺に対してデリバリーするための他の種類の装置は、例えば、Aradigm Corporation, Hayward, CAによって供給されている液体スプレー装置である。液体スプレーシステムは極端に小さいノズル穴を使用し、液体薬物製剤をエアロゾル化し、それは次いで肺へと直接吸入されて良い。
【０１５１】
１つの実施態様において、ネブライザーが化合物及び/又はその医薬組成物を肺に対して投与するために使用されている。ネブライザーは、液体薬物製剤から、例えば、容易に吸入されうる微粒子を形成するために、超音波エネルギーを使用することによってエアロゾル作り出す（例えば、本明細書参照によって組み込まれているVerschoyleら、British J. Cancer, 1999, vol.80, Suppl.2, p.96を参照のこと）。ネブライザーの例としては、Batelle Pulmonary Therapeutics, Columbus, OHにより供給される装置が挙げられる（See, Armerら、米国特許第５，９５４，０４７号；van der Lindenら、米国特許第５，９５０，６１９号；van der Lindenら、米国特許第５，９７０，９７４号を参照のこと）。
【０１５２】
他の実施態様において、電気流体力学（「ＥＨＤ」）エアロゾル装置が、化合物及び/又はその医薬組成物を肺に対してデリバリーするために使用されている。ＥＨＤエアロゾル装置は、液体薬物溶液又は懸濁をエアロゾル化するために電気エネルギーを使用する（例えば、Noakesら、米国特許第4,765,539号を参照のこと）。製剤の電気化学的特性は、化合物及び/又はその医薬組成物を、ＥＨＤデリバリー装置により肺に対してデリバリーするのを最適化するための重要なパラメーターであり、そしてかかる至適化は通常当業者によって行われている。ＥＨＤエアロゾルデリバリー装置は、既存の肺デリバリー技術よりも一層効率的に薬物を肺に対してデリバリーする。
【０１５３】
他の実施態様において、化合物及び/又はその医薬組成物は、小胞において、特にリポソームにおいてデリバリーされて良い（Langer, 1990, Science,“Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer,”vol.249: pp.1527〜1533; Treatら、Lopez-Berestein and Fidler (著), Liss, New York, pp.353〜365 (1989); 一般に“Liposomes in the Therapy of Infectious Disease and Cancer,”Lopez-Berestein及びFidler (著), Liss, New York, pp.353〜365 (1989) を参照のこと）。
【０１５４】
他の実施態様において、化合物及び/又はその医薬組成物は、持続放出システム、好適には、経口持続放出システムを介してデリバリーされて良い。ある実施態様において、ポンプが使用されて良い（Langer, supra; Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. vo.14: p.201; Saudekら、1989, N. Engl. J Med. vol.321: p.574）。
【０１５５】
他の実施態様において、ポリマー物質が使用されて良い（“Medical Applications of Controlled Release,”Langer and Wise (著), CRC Pres., Boca Raton, Florida (1974);“Controlled Drug Bioavailability,”Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (著), Wiley, New York (1984); Langerら、1983, J Macromol. Sci. Rev. Macromol Chem. vol.23: p.61; Levyら、1985, Science vol.228: p.190; Duringら、1989, Ann. Neurol. vol.25: p.351; Howardら、1989, J. Neurosurg. vol.71: p.105を参照のこと）。他の実施態様において、ポリマー性物質が経口持続放出デリバリーのために使用されて良い。好適なポリマーとしては、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びヒドロキシエチルセルロース（最も好適には、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）が挙げられる。他の好適なセルロースエーテルが記載されている（Alderman, Int. J. Pharm Tech. & Prod. Mfr. 1984, vol.5 No.(3) pp.1〜9）。薬物放出に影響を及ぼす因子は、当業者に周知であり、そして当業界で記載されている（Bambaら,Int.J.Pharm.1979 vol.2,p.307）。
【０１５６】
他の実施態様において、腸溶コート製剤が経口持続放出投与のために使用されて良い。好適なコーティング物質としては、ｐＨ依存溶解性（即ち、ｐＨ調節放出）を有するポリマー、飲み込み、溶解又は侵食の緩やかな速度又はｐＨ依存型速度（即ち、時間制御放出）を有するポリマー、酵素によって分解される（即ち、酵素制御放出）ポリマー及び圧力の増加によって破壊される安定した膜の層を形成する（即ち、圧力制御放出）ポリマーが挙げられる。
【０１５７】
更に他の実施態様において、浸透圧デリバリーシステムが経口持続放出のために使用されている。更に他の実施態様において、ＯＲＯＳ（登録商標）浸透圧装置が、経口持続放出デリバリー装置のために使用されている（Theeuwesら、米国特許第３，８４５，７７０号；Theeuwesら、米国特許第３，９１６，８９９号）。
【０１５８】
更に他の実施態様において、持続放出システムが、化合物及び/又はその医薬組成物の標的の近傍に配置されて良く、従って、小量の全身投与量のみが必要となる（例えば、Goodson, in“Medical Applications of Controlled Release,”supra, vol.2, pp.115〜138 (1984) を参照のこと）。Langer,1990,Science vol.249:pp.1527〜1533において論じられている他の持続放出システムも使用されて良い。
【０１５９】
医薬組成物
本発明の医薬組成物は、治療上有効な量の１又は複数の化合物を、好適には、精製された形態で、適切な量の治療上許容できるビヒクルと一緒に、患者に対して投与するために適切な形態を提供するように含んでいる。化合物及び医薬的に許容できるビヒクルは、患者に対して投与される場合、好適に滅菌されている。水は、化合物が静脈内に投与される場合に好適なビヒクルである。塩類溶液及び水性デキストロース及びグリセロール溶液も、液体ビヒクルとして、特に注射可能溶液のために使用されて良い。適切な医薬ビヒクルには例えば、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、イネ、コムギ、胡粉、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどの賦形剤をも含む。本発明の医薬組成物は、もし所望されれば、少量の湿潤剤もしくは乳化剤、又はｐＨ緩衝剤をも含んで良い。加えて、助剤、安定化剤、増粘剤、潤滑剤及び着色剤も使用されて良い。
【０１６０】
化合物を含んで成る医薬組成物は、常用、混合、溶解、顆粒化、ドラジェー調製、すりつぶし、乳化、封入、封じ込め又は凍結乾燥方法によって製造されて良い。医薬組成物は、化合物を医薬的に使用できる製剤へと加工することを促す、１又は複数の生理学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤又は助剤を使用する常用の方法において処方されて良い。適切な処方は、選択された投与経路に依存している。
【０１６１】
本発明の医薬組成物は、溶液、懸濁、エマルション、錠剤、ピル、ペレット、カプセル、液体を含有するカプセル、粉末、持続放出製剤、座薬、エマルション、エアロゾル、スプレー、懸濁又は任意の他の使用に適した形態をとることができる。１つの実施態様において、医薬的に許容できるビヒクルはカプセルである（例えば、Grosswaldら,米国特許第5,698,155号を参照のこと）。他の適切な医薬ビヒクルの例は、当業界で記載されている（Remington's Pharmaceutical Sciences, Philadelphia College of Pharmacy and Science、第１９版、1995を参照のこと）。
【０１６２】
局所投与のために、化合物は、当業界で周知のように、溶液、ゲル、軟膏、クリーム、懸濁などとして処方されて良い。全身製剤としては、注射、例えば皮下、静脈内、筋内、くも膜下又は腹腔内注射によって投与するために設計されたもの、並びに経皮、経粘膜、経口又は肺投与のために設計されたものが挙げられる。全身製剤は、気道粘膜の粘膜毛様体クリアランスを改善する又は粘膜の粘性を下げる更なる活性剤との組み合わせにおいて処方されて良い。これら活性剤としては、限定されないが、ナトリウムチャネル遮断薬、抗生物質、Ｎアセチルシステイン、ホモシステイン及びリン脂質が挙げられる。
【０１６３】
１つの実施態様において、化合物は、通常の手順に従い、ヒトに対して静脈内投与するために適した医薬組成物として処方されている。典型的に、静脈内投与するための化合物は、滅菌アイソトニック水性バッファー中の溶液である。注射のために、化合物は水性溶液において、好適には、生理的に許容できるバッファーの、例えばＨａｎｋ溶液、Ｒｉｎｇｅｒ溶液、又は生理的塩類緩衝液として処方されて良い。溶液は、処方剤（formulatory agent）の例えば、懸濁、安定化及び/又は分散剤をも含んで良い。必要な場合、医薬組成物は、可溶化剤を含んでも良い。静脈内投与するための医薬組成物は、任意に、注射の部位における痛みを緩和するために、リグノカインなどの局所麻酔をも含んで良い。一般に、成分は、個別に又は単位投与形態で一緒に混合したいずれかにおいて、例えば、活性剤の量を示すアンプルもしくはシャッセなどのハーメチックシールした容器中、水を伴わない濃縮物もしくは凍結乾燥粉末として供給されている。化合物が注入により投与される場合、それは、分散されていて良く、例えば、滅菌医薬等級水又は塩類溶液で分散させられていて良い。化合物が注射により投与される場合、注射のための滅菌水又は塩類溶液のアンプルは、投与前に成分が混合されて良いように提供されていて良い。
【０１６４】
経粘膜投与のために、バリアーを浸透するために適切な浸透剤が製剤中で使用されている。かかる浸透剤は一般に当業界で周知である。
【０１６５】
経口デリバリーのための医薬組成物は、錠剤、ロゼンジ、水性又は油性懸濁、顆粒、粉末、エマルション、カプセル、シロップ又はエリキシルなどの形態であって良い。経口的に投与される医薬組成物は、１又は複数の任意の剤、例えば、甘味料の例えば、フルクトース、アスパルテーム又はサッカリン；香味剤の例えば、ペパーミント、ウィンターグリーン油、又はチェリー着色剤及び防腐剤を、医薬的に口当たりの良い製剤を提供するために含んで良い。更に、組成物が錠剤又はピル形態の場合、胃腸管での分解及び吸収を遅らせ、それによって長時間に渡る持続的な作用を提供するためにコーティングされていて良い。浸透活性駆動化合物を取り囲む選択的浸透膜も経口的に投与される化合物のために適している。これら後者のプラットフォームにおいて、カプセルを取り囲む環境に由来する流体は、化合物を駆動させることによって水分を吸収され、化合物は膨らんで、剤又は剤組成物を、開口部を通じて追い出す。これらデリバリープラットフォームは、即時放出製剤の急増プロファイルとは反対に、本質的に０次デリバリープロファイルを提供しうる。時間遅延物質の例えば、グリセロール一水和物又はステアリン酸グリセロールも使用されて良い。経口組成物としては、標準的なビヒクルの例えば、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、セルロース、炭酸マグネシウムなどが挙げられる。かかるビヒクルは好適に、医薬等級である。
【０１６６】
経口液体製剤の例えば、懸濁、エリキシル及び溶液に関して、適切な担体、賦形剤又は希釈剤の例えば、水、塩類溶液、アルキレングリコール（例えば、プロピレングリコール）、ポリアルキレングリコール（例えば、ポリエチレングリコール）油、アルコール、若干酸性（ｐＨ４〜６）の緩衝剤（例えば、酢酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩（約５．０ｍＭ〜約５０．０ｍＭ））などが挙げられる。加えて、香味料、防腐剤、着色剤、胆汁塩、アシルカルニチンなどが加えられて良い。
【０１６７】
頬投与のために、医薬組成物は、錠剤、ロゼンジなど常用の方法で処方された形態をとって良い。
【０１６８】
ネブライザー及び液体スプレー装置及びＥＨＤエアロゾル装置により使用するために適した液体医薬組成物は、典型的に医薬的に許容できるビヒクルを伴う化合物を含むだろう。好適に、医薬的に許容できるビヒクルは液体の、例えば、アルコール、水、ポリエチレングリコール又はペルフルオロカーボンである。任意に、他の物質が化合物の溶液又は懸濁のエアロゾル特性を変えるために加えられて良い。好適に、この物質は、液体の例えば、アルコール、グリコール、ポリグリコール又は脂肪酸などのである。エアロゾル装置中で使用するために適した液体薬物溶液又は懸濁を処方するための他の方法は、当業者に公知である（例えば、Biesalski、米国特許第５，１１２，５９８号；Biesalski、米国特許第５，５５６，６１１号を参照のこと）。
【０１６９】
化合物は、直腸又は膣医薬組成物の例えば、常用の支持基剤の例えば、ココアバター又は他のグリセリドを含む座薬又は保留浣腸などにおいて処方されても良い。
【０１７０】
先に記載した製剤に加えて、化合物は、デポット製剤としても処方されて良い。かかる長期作用型製剤は、移植（例えば、皮下又は筋内）によって又は筋肉注射によって投与されて良い。従って、例えば、化合物は適切なポリマーもしくは疎水性物質（例えば、許容できる油中のエマルションとして）もしくはイオン交換樹脂を伴い、又はやや溶けにくい誘導体、例えば、やや溶けにくい塩として処方されて良い。
【０１７１】
化合物が酸性である場合、それは、遊離酸又は医薬的に許容できる塩として上記製剤のいずれかの中に含まれていて良い。遊離酸の活性を実質上維持している医薬的に許容できる塩は、塩基との反応によって調製されて良く、そして水中及び他の極性溶媒中で対応する遊離酸形態よりも一層可溶性である。
【０１７２】
投与量
化合物及び／又はその医薬組成物は、一般に目的を達成するために有効な量で使用されるだろう。異常な血管新生を特徴とする疾患もしくは病気を治療もしくは予防するために、化合物及び／もしくはその医薬組成物は、治療上有効な量で投与もしくは適用されている。
【０１７３】
本明細書中で開示された特定の疾患もしくは症状の治療において有効であろう化合物の量は、病気の性質もしくは症状に依存するだろうし、先に記載した記載したような当業界で公知の標準的な臨床技術により決定されるだろう。加えて、in vivo又はin vitroアッセイは、任意に、最適な投与量範囲を特定するために使用されて良い。投与される化合物の量は、勿論、とりわけ、治療される対象者、対象者の体重、苦痛の程度、投与の方法及び処方箋を書く医者の判断に依存するだろう。
【０１７４】
例えば、投与量は、医薬組成物において、単回投与によって、多重適用又は持続放出によってデリバリーされて良い。１つの実施態様において、化合物は、経口持続放出投与によってデリバリーされている。好適に、この実施態様において、本発明の化合物は、１日につき２回（一層好適には、１日につき１回）投与されている。投与は、間隔をあけて繰り返されて良く、単独でかあるいは他の薬物との組み合わせにおいて提供されて良く、そして疾患状態又は病気の有効な治療に必要とされる限り続けられて良い。
【０１７５】
経口投与のための適切な投与範囲は、薬物の有効性に依存するが、一般には、約０．００１ｍｇ〜約２００ｍｇの本発明の化合物／ｋｇ体重である。投与範囲は当業者に公知の方法によって容易に特定されて良い。
【０１７６】
静脈内（ｉ．ｖ．）投与のための適切な投与量範囲は、約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。鼻腔内投与のための適切な投与範囲は一般に約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重である。座薬は一般に、本発明の化合物を約０．０１ｍｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重を含んで成り、そして活性成分を約０．５重量％〜約１０重量％の範囲で含んで成って良い。皮内、筋肉、腹腔内、皮下、硬膜外、舌下又は大脳内投与のための推薦される投与量は、約０．００１ｍｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。有効な投与量は、in vitroで又は動物モデル試験系から導かれた、用量反応曲線から外挿されて良い。
【０１７７】
本発明の化合物は、好適に、上記のように、所望の治療又は予防活性ついて、ヒトにおいて使用する前に、in vitro及びin vivoでアッセイされて良い。例えば、in vitroアッセイは、特異的な化合物又は化合物の組み合わせの投与がガンを治療するために好適であるかどうかを特定するために使用されて良い。化合物は、動物モデル系を使用することで有効且つ安全であると証明されても良い。
【０１７８】
好適に、本明細書中で記載の治療上有効な投与量は、有意な毒性を生じることなく治療上の利点を供するだろう。化合物の毒性は、標準的な医薬的手順を使用することで特定されて良く、そして当業者によって容易に確かめられるだろう。毒性と治療効果との投与量比は治療上の指標である。化合物は好適に、疾患及び病気を治療することにおいて特に高い治療指標を示すだろう。本明細書中に記載の化合物の投与量とは、好適に、毒性が無いかあるいは殆ど無い有効な投与量を含む流動的な濃度の範囲内だろう。
【０１７９】
併用療法
所定の実施態様において、化合物及び/又はその医薬組成物は、１種類以上の他の治療剤との併用療法において使用されて良い。化合物及びそれらの医薬組成物及び治療剤は、相加的に、又は一層好適には、相乗的に作用できる。１つの実施態様において、化合物及び/又はその医薬組成物は、他の治療剤（同じ治療組成物の一部又は異なる医薬組成物の一部であって良い）と同時に投与されている。他の実施態様において、医薬組成物は、他の治療剤を投与する前又は後に投与されている。
【０１８０】
特に、１つの好適な実施態様において、化合物及び／又はその医薬組成物は、他の化学療法剤（例えば、アルキル化剤（例えば、窒素マスタード（例えば、シクロフォスファミド、イフォスファミド、メクロレタミン、メルファレン、クロラムブシル、ヘキサメチルメラミン、チオテパ）、アルキルスルホネートの例えば（例えば、ブスルファン）、ニトロソウレア、トリアジン）、抗体謝物質（例えば、ギ酸類似物、ピリミジン類似物（例えば、フルオロウラシル、フロクスウリジン、シトシンアラビノシドなど）、プリン類似物（例えば、メルカプトウリン、チオグアニン、ペントスタチンなど）、天然産物（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、エトポシド、テルチポシド、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、ミトルマイシン、マイトマイシンＣ、Ｌ−アスパラギナーゼ、インターフェロンα）、白金配位錯体（例えば、シスプラチナ、カルボプラチンなど）、ミトキサントロン、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、ホルモン及びアンタゴニスト（例えば、プレドニゾン、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、ジエチルスチルベストロール、エチニルエストラジオール、タモキシフェン、プロピオン酸テストステロン、フルオキシメステロン、フルタミド、ロイプロリドなど）、抗血管形成剤又は阻害物質（例えば、アンジオスタチン、レチノイン酸及びパクリタキセル、エストラジオール誘導体、チアゾロピリミジン誘導体など）、アポトーシス誘導剤（例えば、アポトーシスを阻害するガン遺伝子を遮断するアンチセンスヌクレオチド、腫瘍抑制物質、ＴＲＡＩＬ、ＴＲＡＩＬポリペプチド、Ｆａｓ−関連因子１、インターロイキン−１β−転換酸素、ホスホチロシン阻害物質、ＲＸＲレチノイドレセプターアゴニスト、カルボスチリル誘導体など）及びキレート物質（ペニシラミン、亜鉛、トリエンチンなど））との組み合わせ療法において使用されて良い。
【０１８１】
治療キット
本発明は、本発明の化合物及び/又はその医薬組成物を含んで成る治療キットを提供する。この治療キットは他の化合物（例えば、化学療法剤、天然産物、ホルモン又はアンタゴニスト、抗血管形成因子又は阻害物質、アポトーシス誘導因子又はキレート物質）及び／又はこれら他の化合物の医薬組成物をも含む。
【０１８２】
治療キットは、化合物及び/又はその医薬組成物が他の成分（例えば、他の化合物又はこれら他の化合物の医薬組成物）有無で入っている容器を有して良く、又は各成分のための個別の容器を有して良い。好適に、本発明の治療キットは、第２の化合物（好適には、化学療法剤、天然産物、ホルモン、アンタゴニスト、抗血管形成剤もしくは阻害物質、アポトーシス誘導剤もしくはキレート物質）及び／又はその医薬組成物の共投与と組みあわせて使用するためにパッケージングされた化合物及び／又はその医薬組成物を含む。キットの成分は、患者に対して投与される前に、予め複合化されているかあるいは個々の容器に分けられていて良い。
【０１８３】
キットの成分は、１又は複数の液体溶液において提供されており、好適には、水溶液、一層好適には、滅菌水溶液において提供されている。キットの成分は、固体として提供されても良く、それは、適切な溶媒の添加によって液体へと転換されて良く、それは好適に他の個別の容器中で提供されていて良い。
【０１８４】
治療キットの容器は、バイアル、試験管、フラスコ、ボトル、シリンジ、又は他の、固体もしくは液体を入れるための任意の他の手段であって良い。通常、キットは、１超の成分がある場合、第２のバイアル又は他の容器を含むだろうし、それにより個別投与が可能になる。キットは、医薬的に許容できる液体のための他の容器を含んでも良い。
【０１８５】
好適に、治療キットは装置（例えば、１又は複数の針、シリンジ、点眼容器、ピペットなど）を含んで良く、それらによりキットの成分を投与することが可能になる。
【実施例】
【０１８６】
実施例
本発明は更に、以下の例を参照することによって規定されて良く、それは詳細に、本発明の化合物の調製及び生物活性を評価するための方法を詳説する。多くの変更が材料及び方法において、本発明の範囲を逸脱することなく行われてよいことが当業者には明らかだろう。
【０１８７】
下の例において、下記の意味を有する。もし略記が規定されていなければ、それは一般的に受け入れられている意味である。
【０１８８】
【表１】
2006514116.tif 000004
【０１８９】
実施例１：標準樹脂アミノ酸結合
Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂（Novabiochem）をＤＭＦ中２０％のピペリジン（１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）で３分に渡り撹拌しながら処理し、そして反応混合物をろ過してＤＭＦで１回洗浄した。この段階を更なる２回繰り返した。次いでＲｉｎｋ樹脂をＤＭＦで３回、メタノールで３回、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。所望のFmoc保護された、トリチル化されたアミノ酸（４当量）、ＨＢＴＵ（４当量）、及びＨＯＢｔ（４当量）をＤＭＦ（１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）中に溶かし、そして上記の樹脂に対して加え、しかる後の添加（ＮＭＭ）（８当量）をし、そして混合物を１時間に渡り撹拌した。反応混合物をろ過して樹脂をＤＭＦで３回洗浄し、メタノールで３回、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。この結合（coupling）段階をペプチド合成が完了するまで繰り返した。Ｎ末端のアセチル化を、Ａｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（４当量）、ＨＢＴＵ（４当量）、ＨＯＢＴ（４当量）及びＮＭＭ（８当量）と結合させることによってかあるいは末端Fmoc基を脱保護して無水酢酸（５当量）及びピリジン（５当量）でキャッピングすることのいずれかによって行った。Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９５：２．５：５．５、１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）で処理して１時間に渡り撹拌した。反応混合物をろ過し、樹脂をＴＦＡ／ＴＩＳ／水で１回洗浄し、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。溶媒をin vacuoで除去し、そして生じる残留物をエーテルで粉砕した。
【０１９０】
実施例２：ペプチドの精製
最少量のメタノールと水に溶かした天然のペプチドを、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ ハイドロ逆相Ｃ１８カラム（２５０ｍｍ×２１．２ｍｍ）を伴う調製用（preparative）逆相ＨＰＬＣ（Bechman）によって精製した。ペプチドを勾配（０〜５０％Ｂで１５分に渡り流速２０ｍＬ／分、溶媒Ａは０．１％ＴＦＡを含む水であり、そして溶媒Ｂは０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリルであった）を使用することで溶出させた。検出を２２０nmで行った。ＨＰＬＣ分析（Phenomenexハイドロ逆相カラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）、勾配６〜６６％を使用する）により純度９５％超の画分を組み合わせ、in vacuoでの蒸発によって約２〜４ｍｌの体積に濃縮し、そして凍結乾燥させた。試料を水中で再度溶かし、そして風袋処理した２ドラムのバイアルに移し、そして２度目の凍結乾燥をさせた。段部（shoulder）を度々これらのぺプチドについて確認し、そしてそれは配座異性体によると推定した。
【０１９１】
実施例３：ぺプチドの精製
最少量のメタノールと水に溶かした天然のペプチドを、調製用カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ ハイドロ逆相ＲＰＣ１８カラム（２５０ｍｍ×２１．２ｍｍ）上にロードした。ペプチドを勾配（０〜５０％ＡｃＮ／０．１％ＴＦＡ及びｍｉｌｌｉＱ  Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡ）を使用することで溶出させた。ＨＰＬＣ分析（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘハイドロ逆相カラム（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）、勾配６〜６６％ＡｃＮ／０．１％ＴＦＡ及びｍｉｌｌｉＱ  Ｈ2Ｏ／０．１％ＴＦＡを使用する）により純度９５％超の画分を組み合わせ、ロータリー蒸発によって約２〜４ｍｌの体積に濃縮し、そして凍結乾燥させた。試料を水中で再度溶かし、そして風袋処理した２ドラムのバイアルに移し、そして２度目の凍結乾燥をさせた。
【０１９２】
実施例４：標準樹脂結合アミノ酸結合
Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂（Novabiochem）をＤＭＦ中２０％ピペリジン（１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）で３分に渡り窒素撹拌又は振動させ処理し、そして反応混合物をろ過してＤＭＦで１回洗浄した。この段階を更なる２回繰り返した。樹脂をＤＭＦで３回、メタノールで３回、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。所望のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（３当量）、ＨＢＴＵ（４当量）、及びＨＯＢｔ（７当量）をＤＭＦ（１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）中に溶かし、そして上記の樹脂に対して加え、しかる後ＮＭＭの添加（８当量）をし、そして混合物を１時間に渡り撹拌した。反応混合物をろ過して樹脂をＤＭＦで３回洗浄し、メタノールで３回、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。このアミノ酸カップリング段階を繰り返した。N末端のアセチル化を、Ａｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（３当量）、ＨＢＴＵ（４当量）、ＨＯＢＴ（７当量）及びＮＭＭ（８当量）により結合させることによってかあるいは末端Fmoc基を脱保護して無水酢酸（５当量）及びピリジン（５当量）でキャッピングすることのいずれかによって行った。Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂をＴＦＡ／ＴＩＳ/水（９５：２．５：５．５、１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）で処理して１時間に渡り窒素で撹拌させる又は振動させた。反応混合物をろ過し、樹脂をＴＦＡ／ＴＩＳ／水で１回洗浄し、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。溶媒をin vacuoで除去し、そして生じる残留物をエーテルで粉砕した。
【０１９３】
実施例５：ペプチドアシル化
適切なＮ−アシルペプチドアミドをＤＭＦ（０．０５Ｍ）中で懸濁させた。ＮＭＭ（２当量）を加え、しかる後に塩化アシル（４当量）を加えた。この懸濁は、約１０分後に均一になった。分析用ＨＰＬＣにより、約１時間後、出発物質のロスが示された。この混合物をin vacuoで濃縮し、水/メタノール中に溶かし（溶解させるためにもし必要なら加熱し）そして調製用ＨＰＬＣ（例２及び３における標準精製手順）によって精製した。
【０１９４】
実施例６：ペプチドアルキル化
適切なＮ−アシルペプチドアミドをDMF（０．０５Ｍ）中で懸濁させた。炭酸セシウム（２．０当量）を加えて、しかる後に臭化アルキル（１．０当量）を加えた。１度反応が完了（分析ＨＰＬＣによって判断した場合）すれば、混合物をin vacuoで濃縮し、１ＮのＨＣｌ中に溶かし、そして調製用ＨＰＬＣ（例２及び３の標準的調製手段を参照のこと）によって精製した。
【０１９５】
実施例７：ジスルフィドの形成
適切なＮ−アシルペプチドアミドをＤＭＦ（０．０５Ｍ）中で懸濁させた。市販されて入手可能なチオ流酸塩（１．２当量）を加えた。１度反応が完了（分析ＨＰＬＣによって判断した場合）すれば、混合物をin vacuoで濃縮し、水／メタノール中に溶かし、そして調製用ＨＰＬＣ（例２及び３の標準的調製手段を参照のこと）によって精製した。
【０１９６】
実施例８：チオ炭酸塩の形成
適切なＮ−アセチルペプチドアミドを５％水性ＮａＨＣＯ3（０．０５Ｍ）中に溶かして氷水浴中で懸濁させた。適切なクロロホルム（１．２当量）を加えた。１時間後、反応混合物を氷浴から取り出して更なる２時間に渡り室温で撹拌した（沈殿が形成された）。次いで、反応混合物を１ＮのＨＣｌでｐＨ＜４（紙）になる迄処理し、そして調製用ＨＰＬＣによって直接精製した（例２及び３における標準的な精製手段を参照のこと）。
【０１９７】
実施例９：標準樹脂アミノ酸結合
適切なRink Amide AM樹脂に結合したＦｍｏｃアミノ酸を側枝（side arm）を伴うBuchner漏斗へと加え、そしてDMF中２０％ピペリジン（１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）で窒素撹拌を伴い５分に渡り処理した。反応混合物をろ過してこの段階を繰り返した。樹脂を３回ＤＭＦで洗浄し、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。ＤＭＦ（１ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）、所望のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（側鎖をトリチルで保護した）（４当量）、ＨＢＴＵ（４当量）、及びＨＯＢｔ（４当量）を樹脂に対して加えた。Ｎ−メチルピロリドン（８当量）を加えてこの混合物を窒素で１時間に渡り撹拌した。反応混合物をろ過して樹脂をＤＭＦで３回洗浄し、そしてジクロロメタンで３回洗浄した。この最終の結合をＡｃ−Ｐｒｏ−ＯＨにより行い、アセチルキャッピングしたペプチドを提供した。ペプチドを、ＴＦＡ、ＴＩＳ、Ｈ2Ｏ（９５:２．５：２．５;１〜５ｍＬ／１００ｍｇの樹脂）により、１時間に渡りＮ2撹拌を伴い処理して樹脂から解裂させた。この反応混合物をろ過して樹脂を少体積のＴＦＡで洗浄した。この溶液をin vacuoで濃縮して、生じる残留物を３回、エチルエーテルで粉砕した。
【０１９８】
実施例１０：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ベンジル）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（７４ｍｇ、９７％）を白色粉末として獲得した。このＮＭＲデータは２つの物質の約８０：２０の比における混合物を示す：1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.96, 8.95 (d, d, 1H, J=1.2 Hz), 7.90-8.45 (m, 4H), 7.23-7.39 (m, 7H), 7.13 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.08 (bs, 1H), 4.60-4.80 (m, 1H), 4.25-4.53 (m, 5H), 3.77 (s, 2H), 3.64-3.66 (m, 2H), 3.15-3.20 (m, 1H), 2.93-3.01 (m, 1H), 2.78-2.84 (dd, 1H, J=5.4, 14.1 Hz), 2.56-2.67 (m, 1H), 2.38-2.49 (dd, 1H, J=7.5, 15.6 Hz), 2.00 (s, 3H), 1.84 (m, 3H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ172.57, 171.8, 171.5, 170.2, 169.7, 169.6, 169.2, 138.2, 133.6, 129.4, 128.9, 128.3, 126.8, 117.0, 61.6, 59.3, 55.2, 52.7, 51.2, 49.8, 47.8, 36.8, 35.3, 32.8, 29.3, 24.3, 22.2, 21.8; MS m/z (C30H41N9O8S+H)+ 688.8;。C30H41N9O8Sの分析計算値：N, 18.33. 実測値：N, 14.52（ペプチド含有率：79％）。
【０１９９】
実施例１１：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（４−メチル−ベンジル）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（８７ｍｇ、９９％）を白色粉末として獲得した。このＮＭＲデータは２つの物質の約８０：２０の比における混合物を示す：1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.96 (m, 1H), 7.90-8.45 (m, 4H), 6.91-7.09 (m, 7H), 7.00 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.10 (bs, 1H), 4.60-4.75 (m, 1H), 4.46-4.50 (m, 2H), 4.27-4.40 (m, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 3.15-3.21 (m, 1H), 2.93-3.02 (m, 1H), 2.76-2.82 (m, 1H), 2.56-2.65 (m, 1H), 2.37-2.45 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.73-1.86 (m, 3H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ172.5, 171.8, 171.5, 170.1, 169.6, 169.5, 169.1, 135.8, 135.0, 133.6, 129.3, 128.8, 128.7, 116.8, 61.6, 59.2, 55.1, 52.6, 51.2, 49.7, 47.7, 36.8, 34.9, 32.7, 29.2, 24.2, 22.1, 21.8, 20.6; MS m/z (C31H43N9O8S+H)+ 703.0;。C31H43N9O8Sの分析計算値：N, 17.96. 実測値：N, 14.21（ペプチド含有率：79％）。
【０２００】
実施例１２：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ（Ｏ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（３０ｍｇ、２９％）を白色微粉末として獲得した。このＮＭＲデータは２つの物質の約８０：２０の比における混合物を示す：1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.97 (s, 1H), 7.95-8.44 (m, 5H), 7.40 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.09 (s, 2H), 6.91 (s, 1H), 4.59-4.77 (m, 1H), 4.25-4.49 (m, 4H), 3.45-3.54 (m, 1H), 3.26-3.37 (m, 1H), 3.14-3.21 (m, 1H), 2.95-3.03 (m, 1H), 2.64-2.83 (m, 2H), 2.52 (m, 3H), 2.38-2.45 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.84-2.06 (m, 2H), 1.68-1.83 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ172.7, 171.8, 171.5, 170.3, 170.1, 169.7, 169.2, 133.6, 129.3, 116.9, 61.4, 59.3, 55.1, 52.0, 51.2, 49.7, 49.0, 47.8, 37.8, 36.8, 29.3, 26.4, 24.9, 24.3, 22.3; MS m/z (C25H39N9O9S+H)+ 642.9;。C25H39N9O9Sの分析計算値：N, 19.64. 実測値：N, 14.79（ペプチド含有率：75％）。
【０２０１】
実施例１３：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ（Ｏ2）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（９２．５ｍｇ、８８％）を白色微粉末として獲得した。このNMRデータは２つの物質の約８０：２０の比における混合物を示す：1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.68 (d, 1H, J=1.4 Hz), 7.38 (m, 1H), 4.73-4.86 (m, 2H), 4.65 (dd, 1H, J=5.3, 3.5 Hz), 4.50 (t, 1H, J=5.4 Hz), 4.41 (dd, 1H, J=5.1, 3.6 Hz), 3.93 (t, 2H, J=5.7 Hz), 3.68 (t, 2H, J=7.0 Hz), 3.37-3.42 (m, 3H), 3.21-3.29 (m, 1H), 3.18 (s, 3H), 2.75-2.94 (m, 2H), 2.42-2.47 (m, 1H), 2.24-2.35 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.86-2.04 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ174.2, 174.1, 173.9, 172.7, 171.3, 171.2, 171.1, 132.9, 127.9, 116.7, 60.4, 59.6, 55.1, 51.6, 51.4, 49.8, 49.5, 48.2, 39.2, 35.7, 29.3, 25.5, 23.7, 23.1, 20.9; MS m/z (C25H39N9O10S+H)+ 658.7;C25H39N9O10Sの分析計算値：N, 19.17. 実測値：N, 14.80（ペプチド含有率：77％）。
【０２０２】
実施例１４：アセチル−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（メチル）−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（１２１．６ｍｇ、６１％）を白色微粉末として獲得した：1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ14.1 (bs, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.18-8.21 (d, 2H, J=8.13 Hz), 8.10 (d, 1H, J=6.8 Hz), 7.42 (s, 1H), 7.37 (bs, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.19 (bs, 1H), 4.65-4.72 (m, 1H), 4.32-4.42 (m, 2H), 3.57-3.71 (m, 2H), 2.68-3.13 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 1.85 (s, 3H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ171.9, 170.1, 169.9, 169.5, 129.3, 116.8, 61.5, 55.0, 52.4, 51.4, 35.3, 27.1, 22.4, 15.2; MS m/z (C15H24N6O5S+H)+ 401.5.;。C15H24N6O5Sの分析計算値：N, 20.99. 実測値：N, 15.23（ペプチド含有率：72％）。
【０２０３】
実施例１５：アセチル−Ｃｙｓ（メチル）−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（９．７ｍｇ、２６％）を白色微粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ4.55 (dd, 1H, J=4.9, 3.4 Hz), 2.90-3.08 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.12 (s, 3H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ174.8, 173.9, 52.0, 34.4, 21.2, 14.1; MS m/z (C6H12N2O2S+Na)+ 199.3;。C6H12N2O2Sの分析計算値：N, 15.90. 実測値：N, 13.04（ペプチド含有率：82％）。
【０２０４】
実施例１６：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（メチル）−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（１０６．１ｍｇ、４３％）を白色粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.96-8.97 (m, 1H), 7.85-8.46 (m, 3H), 7.34-7.41 (m, 2H), 7.24 (s, 1H), 4.59-4.78 (m, 1H), 4.25-4.42 (m, 3H), 3.64-3.69 (m, 1H), 3.15-3.21 (m, 1H), 2.93-3.02 (m, 1H), 2.85 (dd, 1H, J=5.0, 13.7 Hz), 2.65-2.72 (m, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.67-1.85 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ171.9, 171.8, 169.8, 169.7, 169.1, 129.3, 116.6, 61.6, 60.2, 59.2, 55.0, 52.3, 51.2, 47.7, 38.6, 35.4, 29.3, 24.3, 22.3, 15.5; MS m/z (C20H31N7O6S+H)+ 498.6;C20H31N7O6Sの分析計算値：N, 19.71. 実測値：N, 14.79（ペプチド含有率：75％）。
【０２０５】
実施例１７：アセチル−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（メチル）−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（３２．１ｍｇ、４９％）を白色粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.03 (d, 1H, J=8.2 Hz), 7.98 (1H, J=7.6 Hz), 7.35, (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.03 (bs, 1H), 4.27-4.38 (m, 2H), 3.49-3.61 (m, 2H), 2.85 (dd, 1H, J=4.9, 13.7 Hz), 2.69 (dd, 1H, J=8.5, 13.7 Hz), 2.06 (s, 3H), 1.87 (s, 3H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ172.0, 170.2, 169.5, 61.7, 55.0, 52.2, 35.3, 22.5, 15.1; MS m/z (C9H17N3O4S+Na)+ 286.2;。C9H17N3O4Sの分析計算値：N, 15.96. 実測値：N, 15.31（ペプチド含有率：96％）。
【０２０６】
実施例１８：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＯ−フェニル）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を、以下の変更を除き、例１及び２の方法に従い調製した。その変更とはモノマーＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＯ−フェニル）をＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＯ−ベンジル）から２段階で合成したことである。表題の化合物（２８．０mg、５０％）を白色微粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.90-8.92 (m, 1H), 8.42-8.51 (m, 1H), 8.30 (d, 1H, J=1 Hz), 8.09 (d, 1H, J=1H), 7.88 (m, 1H), 7.33-7.39 (m, 4H), 712 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.90 (m, 2H), 6.51 (bs, 1H), 5.04-5.19 (m, 1H), 4.58-4.82 (m, 2H), 4.23-4.47 (m, 4H), 3.75 (s, 3H), 3.59-3.71 (m, 2H), 2.95-3.03 (m, 2H), 2.36-2.44 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.67-1.95 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ172.5, 171.9, 171.6, 170.3, 169.8, 169.4, 169.1, 158.7, 133.1, 129.5, 125.0, 116.9, 114.8, 61.6, 59.3, 55.2, 52.6, 51.3, 49.8, 47.8, 36.9, 36.7, 29.3, 26.5, 24.3, 22.2; MS m/z (C30H41N9O9S+H)+ 704.8;C30H41N9O9Sの分析計算値：N, 17.91. 実測値：N, 13.11（ペプチド含有率：73％）。
【０２０７】
実施例１９：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（３７．７ｍｇ、５０％）を白色微粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.96 (d, 1H, J=1.3 Hz), 8.24-8.43 (m, 1H), 7.77-7.82 (m, 1H), 7.37-7.42 (m, 2H), 7.19 (m, 1H), 4.57-4.76 (m, 2H), 4.15-4.34 (m, 2H), 3.63-3.64 (m, 2H), 3.14-3.24 (m, 2H), 2.95-3.05 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.67-1.91 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ171.9, 171.8, 169.5, 169.2, 129.3, 116.9, 61.5, 59.3, 55.1, 51.4, 47.8, 29.3, 26.4, 24.3, 22.2; MS m/z (C16H24N6O5+H)+ 381.4;C16H24N6O5Sの分析計算値：N, 22.09. 実測値：N, 14.50（ペプチド含有率：66％）。
【０２０８】
実施例２０：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ｐＭｅＯＢｚｌ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例１及び２の方法に従い調製し、表題の化合物（７９．１ｍｇ、４６％）を白色粉末として、そして６７：３３の割合における２つの化合物の混合物として獲得した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.97 (s, 1H), 8.46-8.19 (m, 3H), 8.00-7.90 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.25-7.21 (m, 2H), 7.13 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.87-6.82 (m, 2H), 4.79-4.25 (m, 17H, 水のピークとオーバラップする), 3.72-3.58 (m, 7H), 3.57-3.46 (m, 2H), 3.40-3.24 (m, 1H), 3.23-3.13 (m, 1H), 3.05-2.94 (m, 1H), 2.84-2.75 (m, 1H), 2.66-2.37 (m, 2H, DMSOとオーバラップする), 2.00 (s, 3H), 1.88-1.65 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ172.5, 172.0, 171.8, 171.5, 170.1, 169.7, 169.64, 169.61, 169.56, 169.1, 168.5, 158.3, 158.1, 157.8, 133.8, 133.6, 130.0, 129.9, 129.4, 129.3, 116.9, 113.7, 61.6, 59.2, 55.1, 54.9, 52.6, 51.2, 49.7,47.7, 36.8, 34.6, 32.7, 31.5, 29.2, 26.4, 24.3, 22.24, 22.17, 21.8; ES MS m/z (M+H)+ 718.8.C31H43N9O9Sの分析計算値：N, 17.56. 実測値：N, 13.00（ペプチド含有率：74％）。
【０２０９】
実施例２１：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ベンジル）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を、以下の変更を除き、例１及び２の方法に従い調製した。その変更は、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｐｅ）−ＯＨ（４−ＭｅＯ−ベンジル）を樹脂に結合したトリチル化されたアスパラギンに対して合成させることを例１に与えられた試薬の１／２当量を用いて行ったことである。表題の化合物（３６．９ｍｇ、２９％）を白色微粉末としてそして２つの化合物の６５：３５の割合における混合物として獲得した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.96 (s, 1H), 8.55-8.42 (m, 1H), 8.31 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.17 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.98-7.81 (m, 1H), 7.40-7.28 (m, 6H), 7.24-7.17 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.79-4.60 (m, 2H), 4.48-4.25 (m, 6H, 水のピークとオーバーラップする), 3.71-3.46 (m, 4H), 3.42-3.28 (m, 2H), 3.23-3.08 (m, 2H), 3.05-2.93 (m, 1H), 2.56-2.36 (m, 2H, DMSOのピークとオーバーラップする), 2.00 (s, 3H), 1.89-1.65 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6)δ172.4, 172.0, 171.8, 171.5, 170.3, 169.74, 169.66, 169.2, 169.15, 169.08, 168.5, 158.1, 157.7, 135.5, 133.8, 133.5, 129.4, 129.3, 129.0, 128.6, 126.0, 116.8, 61.5, 60.2, 59.2, 55.1, 54.8, 52.5, 51.24, 51.17, 49.7, 47.7, 36.7, 34.6, 31.5, 29.2, 26.8, 26.4, 24.2, 22.23, 22.16, 21.7; ES MS m/z (M+H)+ 674.7.C29H39N9O8Sの分析計算値：N, 18.71 実測値：N, 13.52（ペプチド含有率：72％）。
【０２１０】
実施例２２：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ベンジル）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例１及び３の方法に従い調製し、表題の化合物を白色粉末として獲得した。このNMRデータは２つの物質の２：１の比における混合物を示した：1H NMR (300 MHz, MeOD-d4)主要（major）配座異性体δ8.77 (d, 1H, J=1.4), 7.41 (bs, 1H), 4.77-4.57 (m, 3H), 4.46-4.36 (m, 2H), 3.95-3.80 (m, 2H), 3.70-3.57 (m, 2H), 3.39-3.14 (m, 2H), 3.07-2.97 (m, 1H), 2.79-2.65 (m, 3H), 2.26-1.86 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.35 (s, 9H), 非主要配座異性体について), 8.78 (d, J=1.4), 1.34 (s, 9); 13C NMR (75 MHz, MeOD-d4)δ175.0, 173.3, 172.7 (2C), 172.2, 172.0 (2C), 135.0, 130.8, 119.1, 62.9, 61.6, 57.5, 57.2, 53.5, 51.7, 42.3, 42.2, 37.7 (2C), 31.1, 30.4 (3C), 28.0, 26.0, 22.5; MS m/z (C27H43N9O8S2+H)+ 686.8;。C27H43N9O8S2の分析計算値：N, 18.38. 実測値：N, 13.87（ペプチド含有率：76％）。
【０２１１】
実施例２３：アセチル−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ｔＢｕｔ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例１及び３の方法に従い調製し、表題の化合物（１８．５ｍｇ、２３％）を白色微粉末として獲得した。このNMRデータは２つの物質の混合物を示した：1H NMR (300 MHz, MeOD-d4)主要配座異性体δ8.78 (br s, 1H), 7.42 (br s, 1H), 4.75-4.71 (m, 1H), 4.54-4.34 (m, 4H), 3.90 (dd, 1H, J=11.6), 3.82 (dd, 1H, J=11.6), 3.71-3.57 (m, 2H), 3.36 (dd, 1H, J=15.5), 3.17 (dd, 1H, J=15.5), 3.05 (dd, 1H, J=11.6), 2.93 (dd, 1H, J=11.6), 2.81 (m, 2H), 2.25-1.86 (m, 4H), 2.11 (s, 3H), 1.33 (s, 9H), 非主要 (minor) 配座異性体についてのデータ 2.01 (s, 3H), 1.30 (s, 9H); 13C NMR (75 MHz, MeOD-d4)δ175.5, 175.3, 175.0, 173.0, 172.7, 172.4, 172.0, 135.0, 62.9, 61.6, 57.1, 55.8, 53.5, 51.6, 49.8, 43.8, 37.7, 31.3 (3C), 30.8, 27.9, 26.0, 24.3, 22.5; MS m/z (C27H43N9O8S+H)+ 654.7;C27H43N9O8Sの分析計算値：N, 19.28. 実測値：N, 16.25（ペプチド含有率：73％）。
【０２１２】
実施例２４：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ（ＳＭｅ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例２及び４の方法に従い、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ−ＡＭ樹脂（ＳＭＯ−０７２−０５４、２００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ／ｇ）から出発して調製し、１３ｍｇ（１８．５μｍｏｌ、２．２５％）の最終産物を白色微粉末として獲得した。このNMRデータは２つの物質の２：１の比における混合物を示した：1H NMR (300 MHz, D2O)δ4.78-4.72 (m, 1H), 4.66-4.56 (m, 1H), 4.49-4.45 (m, 1H), 3.73-3.67 (m, 2H), 3.07-3.01 (m, 1H), 2.96-2.78 (m, 3H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.19 (d, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.08-1.98 (m, 3H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ177.4 (主要), 177.4 (非主要), 177.1, 175.9, 174.9, 62.7, 55.4, 52.9, 51.3, 38.7, 36.8, 34.4, 32.5, 26.9, 24.0 (主要), 24.0 (非主要), 17.2 (主要), 17.1 (非主要); MS m/z (C15H25N5O5S+H)+ 704;C15H25N5O5Sの分析計算値：N, 18.08. 実測値：N, 13.56（ペプチド含有率：75.0％）。
【０２１３】
実施例２５：Ａｃ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ＳＭｅ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例２及び４の方法に従い、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ−ＡＭ樹脂（ＳＭＯ−０７２−０５４、２００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ／ｇ）から出発して調製し、２３ｍｇ（４０．８μｍｏｌ、４９．７％）の最終産物を白色微粉末として獲得した。このNMRデータは２つの物質の２：１の比における混合物を示した：1H NMR (300 MHz, D2O)δ8.68-8.67 (m, 1H), 7.32 (s, 2H), 4.78-4.72 (m, 2H), 4.70-4.65 (dd, J=8.82, 5.91 Hz, 1H), 4.60-4.55 (dd, J=7.92, 6.18 Hz, 1H), 3.36-3.19 (m, 2H), 3.16-3.11 (m, 1H), 3.04-2.99 (m, 2H), 2.97-2.77 (m, 2H), 2.17 (d, 3H), 2.00 (s, 3H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ176.0, 175.7, 175.2, 173.1, 173.0, 172.5, 134.8, 134.7, 129.7, 129.5, 118.6, 118.4, 53.9, 53.6, 53.5, 51.6, 37.4, 35.9, 27.5, 27.4, 22.8, 15.9; MS m/z (C22H32N10O6S+H)+ 565;。C22H32N10O6Sの分析計算値：N, 24.81. 実測値：N, 14.74（ペプチド含有率：59.4％）。
【０２１４】
実施例２６：Ａｃ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ＳＭｅ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例２及び４の方法に従い、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ−ＡＭ樹脂（２００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ／ｇ）から出発して調製し、１４．１ｍｇ（２７．４μｍｏｌ、３３．４％）の最終産物を白色微粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ8.67 (d, J=1.32 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 4.78-4.72 (m, 2H), 4.64-4.60 (dd, J=7.71, 6.03 Hz, 1H), 4.55 (t, J=5.49 Hz, 1H), 3.98-3.85 (m, 2H), 3.34 (dd, J=15.51, 5.97 Hz, 1H), 3.19 (dd, J=15.57, 8.37 Hz, 1H), 3.04 (dd, J=13.98, 6.00 Hz, 1H), 2.96-2.75 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.05 (s, 3H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ176.0, 175.7, 175.4, 173.2 (2C), 173.0, 134.8, 129.7, 118.5, 62.3, 56.6, 54.2, 53.7, 51.6, 37.5, 35.8, 27.7, 23.0, 16.0; MS m/z (C19H30N8O7S+H)+ 515;C19H30N8O7Sの分析計算値：N, 21.78. 実測値：N, 14.53（ペプチド含有率：66.7％）。
【０２１５】
実施例２７：Ａｃ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ＳＭｅ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例２及び４の方法に従い、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ−ＡＭ樹脂（２００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ／ｇ）から出発して調製し、６．５ｍｇ（１７．２μｍｏｌ、２１．０％）の最終産物を白色微粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ4.78-4.74 (dd, J=8.22, 5.61 Hz, 1H), 4.66-4.62 (dd, J=7.74, 6.18 Hz, 1H), 4.52 (t, J=5.61 Hz, 1H), 3.97-3.82 (m, 2H), 3.09-2.76 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 2.13 (s, 3H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ176.0, 175.8, 175.7, 173.5, 173.4, 62.3, 56.8, 54.2, 51.6, 37.5, 35.7, 23.0, 16.0; MS m/z (C13H23N5O6S+Na)+ 400;C13H23N5O6Sの分析計算値：N, 18.56. 実測値：N, 15.96（ペプチド含有率：86.0％）。
【０２１６】
実施例２８：Ａｃ−Ｃｙｓ（ＳＭｅ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例２及び４の方法に従い、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ−ＡＭ樹脂（ＳＭＯ−０７２−０５４、２００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ／ｇ）から出発して調製し、８．９ｍｇ（３０．７μｍｏｌ、３７．４％）の最終産物ＷＨＹ−３６を白色微粉末として獲得した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ4.79-4.73 (m, 1H), 4.58-4.54 (dd, J=7.98, 6.60 Hz, 1H), 3.05-2.78 (dd, J=14.01, 6.09 Hz, 4H), 2.19 (s, 3H), 2.11 (s, 3H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ176.0, 175.9, 175.8, 173.8, 54.3, 51.6, 37.4, 35.8, 23.0, 16.0; MS m/z (C10H18N4O4S+Na)+ 313;C10H18N4O4Sの分析計算値：N, 19.30. 実測値：N, 16.80（ペプチド含有率：87.4％）。
【０２１７】
実施例２９：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（ＳＯ2Ｂｎ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
１０ｍｇの例１１の化合物（１４．５μｍ）を２ｍＬのギ酸（９６％）に溶かして、０．４ｍＬのＨ２Ｏ２（Ｈ２０中３０％）を室温で加えてこの混合物を一晩撹拌した。この溶媒をin vacuoで取り除き、そして生じる白色固体を例２の手順に従い精製し、７．１ｍｇ（９．８７μｍｏｌ、６８％）の所望のスルホンＷＨＹ−３７を白色微粉末として獲得した。NMRデータは２つの物質の約５:１における混合物を示した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ8.66 (d, J=1.35 Hz, 1H, 非主要), 8.62 (d, J=1.38 Hz, 1H, 主要), 7.55-7.50 (m, 4H), 7.38 (s, 1H, 非主要), 7.34 (s, 1H, 主要), 5.12-5.07 (dd, J=8.52, 4.41 Hz, 1H), 4.90-4.83 (m, 1H), 4.77-4.72 (m, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.52 (t, J=5.49 Hz, 1H), 4.41-4.37 (dd, J=8.82, 5.13 Hz, 1H), 3.76-3.64 (m, 3H), 3.76-3.64 (m, 3H), 3.40-3.17 (m, 2H), 2.93-2.74 (m, 2H), 2.31-2.23 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.05-1.84 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ175.9, 175.7, 174.5, 172.8, 172.7, 170.9, 164.5, 134.7, 132.5, 130.8, 130.4, 129.7, 127.5, 118.5, 62.2, 61.4, 61.0, 56.7, 53.4, 52.7, 51.8, 50.0, 49.3, 37.4, 31.1, 27.4, 25.6, 22.7; MS m/z (C30H41N9O10S+H)+ 720;C30H41N9O10Sの分析計算値：N, 17.51. 実測値：N, 10.72（ペプチド含有率：61.2％）。
【０２１８】
実施例３０：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−ＨｏＣｙｓ（ＳＯ2Ｐｈ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物を例２９の手順に従い、１０ｍｇ（１４．５μｍｏｌ）のスルフィド前駆体から出発し、３．３ｍｇ（４．５８μｍｏｌ、３１．６％）の所望のスルホンを白色微粉として調製した。ＮＭＲデータは２つの物質の約６:１の混合物を示した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ8.71 (d, J=1.41 Hz, 1H, 非主要), 8.68 (d, J=1.41 Hz, 1H, 主要), 8.02-7.99 (m, 2H), 7.90-7.85 (m, 1H), 7.78-7.73 (m, 2H), 7.40 (bs, 1H, 非主要), 7.37 (bs, 1H, 主要), 4.87-4.82 (m, 1H), 4.73-4.68 (m, 1H), 4.60-4.55 (dd, J=8.85, 5.10 Hz, 1H), 4.48-4.44 (m, 1H), 4.40-4.35 (dd, J=8.70, 5.16 Hz, 1H), 3.96-3.85 (m, 2H), 3.69 (t, J=6.66 Hz, 2H), 3.51 (t, J=7.38 Hz, 2H), 3.41-3.34 (dd, J=15.45, 5.55 Hz, 1H), 3.27-3.19 (dd, J=15.69, 8.70 Hz, 1H), 2.90-2.83 (dd, J=15.6, 5.49 Hz, 1H), 2.80-2.72 (dd, J=15.6, 8.28 Hz, 1H), 2.34-2.25 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.13-2.11 (m, 1H), 2.08-1.82 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ175.9, 175.7, 174.5, 172.8, 172.7, 170.9, 164.5, 134.7, 132.5, 130.8, 130.4, 129.7, 127.5, 118.5, 62.2, 61.4, 61.0, 56.7, 53.4, 52.7, 51.8, 50.0, 49.3, 37.4, 31.1, 27.4, 25.6, 22.7; MS m/z (C30H41N9O10S+H)+ 720.
【０２１９】
実施例３１：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−ＨｏＣｙｓ（ＳＯＢｎ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
１０ｍｇの例１１の化合物（１４．５μｍｏｌ）を１ｍＬのアセトニトリル及び０．５ｍＬのＭｉｌｌｉＱ水中に溶かした。２．５ｍｇのＮａＢＯ3・４Ｈ2Ｏをこの溶液に対して室温で加え、それを一晩撹拌した。反応混合物を例２の手順により精製して、３．６ｍｇ（５．１１μｍｏｌ、３５．２％）の所望のスルホキシドを獲得した。NMRデータは２つの物質の約４：１の比における混合物を示した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ8.65 (d, J=6.21 Hz, 1H, 非主要), 8.62 (d, J=6.21 Hz, 1H, 主要), 7.52-7.43 (m, 4H), 7.36 (s, 1H, 非主要), 7.34 (s, 1H, 主要), 4.95-4.84 (m, 1H), 4.76-4.72 (m, 1H), 4.53-4.49 (m, 1H), 4.43-4.36 (s, 1H), 4.27-4.21 (dd, J=13.2, 5.88 Hz, 1H), 4.00-3.88 (m, 2H), 3.67 (m, 3H), 3.37-3.17 (m, 4H), 2.92-2.74 (m, 2H), 2.33-2.24 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.05-1.83 (m, 4H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ175.9 (2C), 175.7, 174.5, 172.9, 172.9, 171.8, 134.7, 131.8, 130.4, 130.2, 129.7, 118.6, 118.5, 62.2, 61.4, 57.9, 56.7, 53.4, 51.7, 50.0, 37.5, 31.1, 27.4, 25.6, 22.7; MS m/z (C30H41N9O9S+H)+ 704.
【０２２０】
実施例３２：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−ＨｏＣｙｓ（ＳＯＢｎ）−Ａｓｎ−ＮＨ2
１０ｍｇのスルフィド（１４．５μｍｏｌ）を２ｍＬのアセニトリル/水（３:５）中に溶かした。水性ＮａＩＯ4溶液（６．２ｍｇ/１００μＬ）を加え、そして混合物を２４時間に渡り室温で撹拌した。この反応混合物をそれぞれ１ｍＬに濃縮し、そして例２の手順に従い５．７（８．１μｍｏｌ、５５．９％）の所望のスルホキシドを獲得した。ＮＭＲデータは２つの物質の約６：１の比における混合物を示した。1H NMR (300 MHz, D2O)δ8.69 (bs, 1H, 非主要), 8.66 (m, 1H, 主要), 7.75-7.68 (m, 5H), 7.36 (bs, 1H, 非主要), 7.34 (bs, 1H, 主要), 4.86-4.82 (m, 1H), 4.74-4.68 (m, 1H), 4.61-4.46 (m, 2H), 4.36-4.34 (m, 1H), 3.93-3.86 (m, 2H), 3.67 (t, J=6.69 Hz, 2H), 3.38-3.31 (dd, J=15.33, 5.61 Hz, 4H), 3.24-3.13 (m, 3H), 2.91-2.71 (m, 2H), 2.33-2.24 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.13-1.83 (m, 5H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ175.9, 175.8, 174.4, 172.9, 172.8 (2C), 137.7, 136.1, 134.7, 130.9 (2C), 129.7, 129.0 (2C), 118.4, 62.1, 61.3, 56.8, 53.3, 53.0, 52.6, 51.4, 49.9, 37.4, 31.0, 25.5, 25.4, 22.6; MS m/z (C30H41N9O9S+H)+ 704.
【０２２１】
実施例３３：Ａｃ−ＰＨＳＣ（Ｂｚ）−ＮＨ2
この化合物を、Ａｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（５０ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）及び塩化ベンジル（８．６μＬ、０．０７５ｍｍｏｌ）から例２及び５の方法に従って（ＤＭＦをアセトニトリルに置き換え、そして第２当量の塩化ベンジル及びＮＭＭを最初の１時間後に加えたことを除いて）調製した。収率：１８７．７ｍｇ  （３１．７％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.81-1.892 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.27 (m, 1H), 2.83 (m, 2H), 3.15 (m, 2H), 3.49-3.72 (m, 4H), 3.89 (m, 2H), 4.35 (dd, J=8.5 Hz, J=5.6 Hz, 1H), 4.51 (m, 1H), 7.27及び7.28 (s, s, 1H), 7.56 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.72 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.99 (d, J=7.5 Hz, 2H), 8.61-8.64 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.5, 25.4, 27.2, 30.8, 30.9, 37.3, 49.8, 51.4, 53.1, 54.3, 56.7, 61.2, 62.0, 118.3, 128.3 (2C), 129.5, 130.1 (2C), 134.5, 135.6, 137.0, 172.2, 172.6, 172.9, 174.3, 175.5, 175.6, 175.7, 195.5; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 702, 実測値 702.C30H39N9O9Sの分析計算値：N, 17.96. 実測値：N, 12.91（ペプチド含有率：71.8％）。
【０２２２】
実施例３４：Ａｃ−ＰＨＳＣ（（フェニルチオ）アセチル）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（２５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）及び（フェニルチオ）アセチルクロリド（１２．０μＬ、０．０８４ｍｍｏｌ）から例２及び５の手順に従い調製した。収率：１６．１ｍｇ  （５１．２％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.93 (m, 4H), 2.15 (s, 3H), 2.23 (m, 1H), 2.76 (m, 2H), 3.23-3.48 (m, 4H), 3.65 (m, 2H), 3.86 (m, 2H), 4.03 (s, 2H), 4.42 (m, 2H), 4.57 (m, 1H), 4.70 (m, 1H), 7.28-7.41 (m, 6H), 8.72-9.0 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.5, 25.8, 27.5, 31.0, 31.2, 37.7, 45.3, 49.8, 51.6, 53.4, 54.7, 57.0, 61.5, 62.6, 118.7, 128.3, 130.4 (2C), 130.5, 130.6 (2C), 134.7, 135.7, 171.7, 172.3, 172.8, 173.4, 175.2 (2C), 175.4, 199.1; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 748, 実測値 748.
【０２２３】
実施例３５：Ａｃ−ＰＨＳＣ（アロカ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（２５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）及びアリルクロロホルメート（４．２μＬ、０．０５０ｍｍｏｌ）から例２及び８の手順に従い調製した。収率：４．３ｍｇ（１５．０％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.85-1.93 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.28 (m, 1H), 2.82 (m, 2H), 3.21-3.53 (m, 4H), 3.68 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 5.37 (m, 2H), 6.00 (m, 1H), 7.38及び7.41 (s, s, 1H), 8.68-8.71 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ21.4, 24.3, 26.1, 29.8, 31.6, 36.3, 48.7, 50.3, 52.1, 53.2, 55.4, 60.0, 61.0, 68.9, 117.2, 119.2, 128.4, 131.2, 133.5, 170.9, 171.5, 171.64, 171.68, 173.2, 174.4, 174.5; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 682, 実測値 682.
【０２２４】
実施例３６：Ａｃ−ＰＨＳＣ（Ｐｉｖ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（１００ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）及び塩化ピバロイル（４１．０μＬ、０．３３４ｍｍｏｌ）から例２及び５の手順に従い調製した。収率：６５．７ｍｇ（５７．７％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.25 (s, 9H), 1.84-2.03 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.28 (m, 1H), 2.82 (m, 2H), 3.29 (m, 2H), 3.90 (m, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.89 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.50 (m, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.76 (m, 1H), 4.85 (m, 1H), 7.39及び7.42 (s, s, 1H), 8.68-8.72 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ21.5, 24.4, 26.2, 26.6, 29.3, 29.9, 36.4, 46.5, 48.8, 50.4, 52.2, 53.2, 55.5, 60.2, 61.2, 117.3, 128.6, 133.6, 171.2, 171.6, 171.6, 173.3, 174.5,174.7, 174.7, 210.8; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 682, 実測値 682.
【０２２５】
実施例３７：Ａｃ−ＰＨＳＣ（シクロヘキサノイル）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（１００ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）及び塩化シクロヘキサノイル（４５．０μＬ、０．３３４ｍｍｏｌ）から方法E-B従い調製した。収率：７０．７ｍｇ（５９．８％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.37 (m, 5H), 1.75-2.04 (m, 9H), 2.16 (s, 3H), 2.31 (m, 1H), 2.66 (m, 1H), 2.84 (m, 2H), 3.25-3.32 (m, 2H), 3.37-3.43 (m, 2H), 3.68 (m, 2H), 3.90 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.65 (m, 1H), 7.39及び7.42 (s, s, 1H), 8.69-8.73 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ21.5, 24.4, 25.0, 29.2, 29.4, 29.9, 36.4, 48.8, 50.4, 52.2, 52.4, 53.3, 55.5, 60.2, 61.1, 117.4, 128.6, 133.6, 171.2, 171.4, 171.6, 173.3, 174.5, 174.7, 207.3; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 708, 実測値 708.C30H45N9O9Sの分析計算値：N, 17.81. 実測値：N, 14.14（ペプチド含有率：79.4％）。
【０２２６】
実施例３８：Ａｃ−ＰＨＳＣ（ニコチノイル）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（１００ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）及び塩化ニコチル（５９ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）から例２及び５の手順に従い調製した。収率：４９．５ｍｇ（４２．０％）。1H NMR (300 MHz, D2O/MeOD)δ1.80-2.01 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.28 (m, 1H), 2.81 (m, 2H), 3.23 (m, 1H), 3.33 (m, 1H), 3.64 (m, 3H), 3.78 (dd, J=15 Hz, J=6 Hz, 1H), 3.89 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.74 (m, 1H), 7.36及び7.39 (s, s, 1H), 8.27 (t, J=6 Hz, 1H), 8.66及び8.70 (s, s, 1H), 9.07 (m, 2H), 9.36 (s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ21.0, 24.4, 26.0, 29.9, 30.1, 36.4, 48.8, 50.5, 52.2, 52.8, 55.6, 60.3, 61.2, 117.3, 127.9, 128.7, 133.6, 135.0, 140.9, 144.7, 145.2, 170.8, 171.7, 171.7, 173.4, 174.5, 174.6, 174.7, 188.9; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 703, 実測値 703.C29H38N10O9Sの分析計算値：N, 19.93. 実測値：N, 13.95（ペプチド含有率：70.0％）。
【０２２７】
実施例３９：Ａｃ−ＰＨＳＣ（チオフェン−２−カルボニル）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（１００ｍｇ、０．１６７ｍｍｏｌ）及び２−チオフェンカルボニルクロリド（３６．０μＬ、０．３３４ｍｍｏｌ）から例２及び５の手順に従い調製した。収率：３５．６ｍｇ（３０．１％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.04 (m, 4H), 2.14 (s, 3H), 2.28 (m, 1H), 2.83 (m, 2H), 3.13-3.31 (m, 2H), 3.52 (m, 1H), 3.68 (m, 3H), 3.90 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 7.24 (t, J=4.2 Hz, 1H), 7.32及び7.33 (s, s, 1H), 7.92 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.98 (d, J=3.0 Hz), 8.64及び8.67 (s, br s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ21.3, 24.2, 26.1, 29.7, 29.8, 36.2, 48.6, 50.2, 52.0, 53.3, 55.5, 60.0, 60.9, 117.2, 128.4, 128.7, 133.1, 133.4, 135.0, 140.1, 171.0, 171.5, 171.7, 173.1, 174.4, 174.5 (2C), 185.9; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 708, 実測値 708.C28H37N9O9S2の分析計算値：N, 17.81. 実測値：N, 13.66（ペプチド含有率：76.6％）。
【０２２８】
実施例４０：Ａｃ−ＰＨＳＣ（アリル）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（２５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）及び臭化アリル（３．６μＬ、０．０４２ｍｍｏｌ）から例２及び６の手順に従い（産物を予め２回精製したことを除いては）調製した。収率：１１．９ｍｇ（４４．５％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.02 (m, 4H), 2.15 (s, 3H), 2.74-3.00 (m, 4H), 3.23-3.36 (m, 4H), 3.66 (m, 2H), 3.90 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.59 (m, 1H), 5.20 (m, 2H), 5.87 (m, 1H), 7.36及び7.40 (s, s, 1H), 8.66-8.70 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O/MeOD)δ22.5, 25.4, 27.2, 30.9, 32.3, 35.3, 37.3, 49.8, 51.4, 53.3, 54.3, 56.5, 61.2, 62.2, 118.4, 119.1, 129.7, 134.6, 134.7, 172.6 (2C), 172.7, 172.8, 174.2, 175.5, 175.7; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 638, 実測値 638.C26H39N9O8Sの分析計算値：N, 19.77. 実測値：N, 14.5（ペプチド含有率：73.3％）。
【０２２９】
実施例４１：Ａｃ−ＰＨＳＣ（メトキシエタン）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（５０ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）及び２−ブロモエチルメチルエーテル（８．０μＬ、０．０８３ｍｍｏｌ）から例２及び６の手順に従い調製した。収率：２２．４ｍｇ（４１．１％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.82-2.03 (m, 4H), 2.14 (s, 3H), 2.25 (m, 1H), 2.78-3.35 (m, 8H), 3.39 (s, 3H), 3.66 (m, 2H), 3.90 (br m, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 4.71 (m, 1H), 7.36及び7.39 (s, s, 1H), 8.66及び8.69 (s, s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.5, 25.4, 27.2, 31.0, 32.3, 33.7, 37.4, 49.8, 51.4, 53.3, 54.5, 56.6, 59.0, 61.2, 62.2, 71.7, 118.4, 129.7, 134.6, 172.7 (2C), 172.9, 174.4, 175.6, 175.8, 175.9; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 656, 実測値 656.。C26H41N9O9Sの分析計算値：N, 19.22. 実測値：N, 13.83（ペプチド含有率：72.0％）。
【０２３０】
実施例４２：Ａｃ−ＰＨＳＣ（ＳＭｅ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（２５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）及びS-メチルメタンスルホネート（４．３μＬ、０．０４２ｍｍｏｌ）から例２及び７の手順に従い調製した。収率：１３．８ｍｇ（５１．１％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.84-2.03 (m, 4H), 2.15 (s, 3H), 2.27 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.79-2.86 (m, 2H), 3.07 (m, 1H), 3.24-3.36 (m, 3H), 3.67 (m, 2H), 3.92 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 7.36及び7.39 (s, s, 1H), 8.67及び8.70 (s, s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.5, 23.1, 25.4, 27.2, 31.0, 37.4, 38.5, 49.8, 51.5, 53.3, 54.0, 56.5, 61.2, 62.2, 118.4, 129.7, 134.6, 172.6, 172.9 (2C), 174.3, 175.5, 175.7 (2C); ES MS m/z (M+H)+ 計算値 644, 実測値 644.C24H37N9O8S2の分析計算値：N, 19.58. 実測値：N, 14.41（ペプチド含有率：73.6％）。
【０２３１】
実施例４３：Ａｃ−ＰＨＳＣ（ＳＰｈ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（２５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）及びS-フェニルベンゼンチオスルホネート（１０．５ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）から例２及び７の手順に従い調製した。収率：９．９ｍｇ（３３．４％）〜約９０％（1H NMRによる純度）：1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.04 (m, 4H), 2.15 (s, 3H), 2.26 (m, 1H), 2.74-2.89 (m, 2H), 3.07-3.42 (m, 4H), 3.66 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.73 (m, 1H), 7.35-7.45 (m, 4H), 7.63 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 8.64及び8.67 (s, s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.5, 25.5, 27.3, 31.0, 37.4, 39.8, 49.8, 51.5, 53.3, 54.1, 56.3, 61.2, 62.3, 62.4, 118.4, 129.0, 129.6 (2C), 129.7, 130.6 (2C), 134.6, 137.2, 172.5, 172.61, 172.66, 174.4, 175.6, 175.7, 175.8; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 708, 実測値 708.
【０２３２】
実施例４４：Ａｃ−ＰＨＳＣ（ＳＣＨ2−（Ｒ）−ＣＨ（ＮＨ2）ＣＯ2Ｈ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（５０ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）及びシステインメチルチオスルホネート（Toronto Reserch Chemicals）（１６．６ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）から例２及び７の手順に従い調製した。収率：３７．２ｍｇ（６２．６％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.01 (m, 4H), 2.14 (s 3H), 2.25 (m, 1H), 2.78-3.35 (m, 8H), 3.65 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.73 (m, 1H), 7.35及び7.38 (s, s, 1H), 8.66及び8.69 (s, s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.5, 25.4, 27.1, 31.0, 37.4, 38.1, 38.9, 49.8, 51.5, 53.0, 53.3, 53.8, 56.6, 61.3, 62.2, 118.4, 129.7, 134.6, 171.7, 172.6, 172.8, 172.9, 174.5, 175.5, 175.7, 175.8; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 717, 実測値 717.C26H40N10O10S2の分析計算値：N, 19.54. 実測値：N, 11.89（ペプチド含有率：60.9％）。
【０２３３】
実施例４５：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（Ｂｚ）−ＮＨ2
この化合物をＡｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ2（５０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）及び塩化ベンジル（１９．０μＬ、０．１６３ｍｍｏｌ）から例２及び７の手順に従い調製した。収率：９．８ｍｇ（１６．７％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.00 (m, 4H), 2.14及び2.15 (s, s, 3H), 2.26 (m, 2H), 2.77-2.88 (m, 2H), 3.14-3.31 (m, 4H), 3.64 (m, 2H), 3.93 (m, 2H), 4.38 (m, 1H), 4.53 (m, 2H), 7.31-7.35 (s, 1H), 7.58 (m, 2H), 7.72 (m, 1H), 7.99 (m, 2H), 8.61-8.65 (s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.6, 22.7, 26.2 (2C), 27.2, 27.3, 31.1, 31.6, 31.8, 37.6 (2C), 50.0 (2C), 51.5, 51.6, 53.4, 54.1, 54.5, 56.8, 57.0, 61.4 (2C), 62.3, 62.4, 118.4, 128.3, 129.7, 129.8, 130.2, 134.7, 135.6 (2C), 137.6 (2C), 172.8, 172.9, 173.0, 173.1, 174.0, 174.2, 174.5, 174.55, 175.6, 175.7, 175.9, 176.0, 176.2; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 716, 実測値 716.C31H41N9O9Sの分析計算値：N, 17.61. 実測値：N, 11.81（ペプチド含有率：67.1％）。
【０２３４】
実施例４６：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（Ｐｉｖ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物を粗製のＡｃ−ＰＨＳＨｏＣＮ−ＮＨ2（ＳＡＨ−１５）（５０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）及び塩化ピバロイル（２０．０μＬ、０．１６３ｍｍｏｌ）から例２及び５の手順に従い調製した。収率：１２．５ｍｇ（２２．２％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.25 (s, 9H), 1.83-2.09 (m, 4H), 2.15 (s, 3H), 2.30 (m, 1H), 2.78-2.95 (m, 4H), 3.31 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 4.40-4.52 (m, 3H), 7.66m (m, 1H), 8.66 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.6, 25.5, 25.55, 27.2, 27.7, 31.0, 31.6, 31.7, 37.4, 37.5, 47.5, 49.9, 51.42, 51.47, 53.3, 54.0, 54.2, 56.6, 56.8, 61.3, 62.25, 62.26, 118.4, 129.7, 134.6, 172.7, 172.9, 173.9, 174.2, 174.4, 175.5, 175.6, 175.85, 175.89, 176.1, 212.8; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 696, 実測値 696.C29H45N9O9Sの分析計算値：N, 18.12. 実測値：N, 13.77（ペプチド含有率：76.0％）。
【０２３５】
実施例４７：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（チオフェン−２−カルボニル）Ｎ−ＮＨ2
この化合物を粗製のＡｃ−ＰＨＳＨｏＣＮ−ＮＨ2（ＳＡＨ−１５）（５０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）及び２-チオフェンカルボニルクロリド（１７．５μＬ、０．１６３ｍｍｏｌ）から例２及び５の手順に従い調製した。収率：１１．４ｍｇ（１９．５％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.84-2.01 (m, 4H), 2.15及び2.16 (s, s, 3H), 2.12-2.30 (m, 3H), 2.78-2.89 (m, 2H), 3.20 (m, 3H), 3.66 (m, 2H), 3.93 (m, 2H), 4.56 (m, 1H), 4.79 (m, 2H), 7.27 (m, 1H), 7.34-7.37 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.97 (m, 1H), 8.64-8.68 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O/MeOD)δ22.5, 25.4, 26.2, 27.1, 27.2, 30.9, 31.7, 31.8, 37.4, 37.5, 49.8, 51.3, 51.4, 53.3, 53.9, 54.2, 54.3,, 56.6, 56.9, 61.2, 62.1, 62.2, 64.9, 118.3, 129.7, 129.7, 133.7, 134.5, 135.6, 141.8, 172.6, 172.7, 172.9, 172.94, 173.7, 173.9, 174.2, 175.4, 175.5, 175.6, 175.7, 176.0, 187.9; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 722, 実測値 722.C29H39N9O9S2の分析計算値：N, 17.46. 実測値：N, 13.54（ペプチド含有率：77.6％）。
【０２３６】
実施例４８：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（メトキシエタン）Ｎ−ＮＨ2
この化合物を粗製のＡｃ−ＰＨＳＨｏＣＮ−ＮＨ2（１００ｍｇ、０．１６３ｍｍｏｌ）及び２-ブロモエチルメチルエーテル（１５．５μＬ、０．１６３ｍｍｏｌ）から例２及び６の手順に従い調製した。収率：５３．３ｍｇ（４８．８％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.29 (m, 7H), 2.14 (s, 3H), 2.71-2.88 (m, 6H), 3.23-3.39 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.65 (m, 4H), 3.88 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 7.33-7.37 (m, 1H), 8.64-8.69 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.5, 25.4, 27.2, 28.5, 31.0, 31.6, 37.4, 37.5, 49.9, 51.4, 53.3, 53.4, 56.7, 58.9, 61.3, 62.2, 62.3, 71.9, 118.4, 129.6, 129.7, 134.6, 172.7, 172.8, 172.9, 173.0, 174.2, 174.4 (2C), 175.5, 175.6, 175.8, 175.87, 176.1, 176.2; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 670, 実測値 670.C27H43N9O9Sの分析計算値：N, 18.82. 実測値：N, 14.64（ペプチド含有率：77.8％）。
【０２３７】
実施例４９：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（Ｂｎ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物を粗製のＡｃ−ＰＨＳＨｏＣＮ−ＮＨ2（ＳＡＨ−１５）（７６．２ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）及び臭化ベンジル（１４．８μＬ、０．１２４ｍｍｏｌ）から例２及び５の手順に従い（反応混合物を氷水中でＢｎＢｒを添加する前に冷却したことを除いて）調製した。収率：２９．４ｍｇ（３３．７％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.84-2.07 (m, 5H), 2.15 (s, 3H), 2.29 (m, 1H), 2.54-2.90 (m, 4H), 3.23-3.34 (m, 2H), 3.66 (m, 2H), 3.84-3.91 (m, 4H), 4.38-4.48 (m, 3H), 4.73 (m, 1H), 7.34-7.45 (m, 6H), 8.64-8.66 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.6, 25.4, 27.2, 27.9 (2C), 31.0, 31.3, 36.33, 36.36, 37.4, 37.5, 49.8, 51.3, 51.4, 53.3 (2C), 54.0, 54.3, 56.6, 56.7, 61.3, 62.2, 62.3, 118.4, 128.4, 129.6 (2C), 130.00, 130.08, 134.6, 139.6, 172.7, 172.8, 172.9, 174.1, 174.3, 174.4 (2C), 175.5, 175.6, 175.8 (3C), 176.1; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 702, 実測値 702.C31H43N9O8Sの分析計算値：N, 17.96. 実測値：N, 13.07（ペプチド含有率：72.2％）。
【０２３８】
実施例５０：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（ＳＭｅ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物を粗製のＡｃ−ＰＨＳＨｏＣＮ−ＮＨ2（５０ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）及びＳ−メチルメタンチオスルホネート（８．４μＬ、０．０８１ｍｍｏｌ）から例２及び７の手順に従い調製した。収率：２４．６ｍｇ（４６．２％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.84-2.33 (m, 7H), 2.15 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.72-2.95 (m, 4H), 3.19-3.41 (m, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.91 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.48-4.58 (m, 2H), 4.73 (m, 1H), 7.35-7.39 (m, 1H), 8.66-8.70 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.6, 23.3, 25.5, 27.2, 31.0, 31.1, 33.9, 34.0, 37.4, 37.5, 49.9, 51.42 ,51.47, 53.3, 53.4, 53.7, 24.0, 56.71, 56.78, 61.3, 62.1, 62.2, 118.4, 129.6, 134.6, 172.7, 172.8, 172.9, 173.0, 174.1, 174.4, 175.5, 175.6, 175.83, 175.88, 176.2; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 658, 実測値 658.C25H39N9O8S2の分析計算値：N, 19.16. 実測値：N, 14.48（ペプチド含有率：75.6％）。
【０２３９】
実施例５１：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（ＳＰｈ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物を粗製のＡｃ−ＰＨＳＨｏＣＮ−ＮＨ2（ＳＡＨ−１５）（５０ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）及びＳ−フェニルベンゼンチオスルホネート（２０．５ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）から例２及び７の手順に従い調製した。収率：２０．８ｍｇ（３５．６％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.31 (m, 7H), 2.14 (s, 3H), 2.66-2.93 (m, 4H), 3.15-3.35 (m, 2H), 3.65 (m, 2H), 3.85 (m, 2H), 4.36-4.52 (m, 3H), 7.32-7.47 (m, 4H), 7.62 (m, 1H), 8.64及び8.67 (s, s, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.6, 25.5, 27.2, 30.9, 31.0, 35.1, 35.3, 37.4, 37.5, 49.8, 51.3, 51.4, 53.3, 53.6, 53.9, 56.6, 56.8, 61.3, 62.23, 62.27, 118.3, 128.7, 129.33, 129.39, 129.6, 130.6, 130.61, 134.6, 137.7, 137.8, 172.7 (2C), 172.8, 173.9, 174.1, 174.42, 174.44, 175.5, 175.6, 175.7, 175.85, 175.88, 176.1; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 720, 実測値 720.C30H41N9O8S2の分析計算値：N, 17.51. 実測値：N, 12.93（ペプチド含有率：73.9％）。
【０２４０】
実施例５２：Ｆｍｏｃ−Ｓ−ベンジル−Ｌ−システインスルホン−ＯＨ
Ｓ−ベンジル−Ｌ−システインスルホン（Toronto Reserch Chemical）（１．０ｇ、４．１１ｍｍｏｌ）を１，４-ジオキサン（３．０ｍＬ）及び１０％Ｎａ2ＣＯ3（４．３ｍＬ、４．１１ｍｍｏｌ）に溶かした。この溶液に対して、５．０ｍＬの１，４−ジオキサン中に溶かしたＦｍｏｃ−Ｏｓｕ（１．３ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）を、漏斗を介して加えた。反応混合物は濃白色のスラリーだった。３時間の撹拌後、１ＮのＨＣｌをｐＨが約３．０になる迄加えた。固体はろ過可能ではなく、従って酢酸エチルを加えてその層を個別に漏斗中で振った。上方の有機層を底の沈殿からデカンテーションした。有機層を減圧下で濃縮し、次の結合反応にいて使用するために、NMRによる適当な純度の固体にした。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ3.45 (dd, J=9.33 Hz, J=14.55 Hz, 1H), 3.59 (dd, J=3.0 Hz, J=14.5 Hz, 1H), 4.23-4.33 (m, 3H), 4.50 (m, 3H), 7.30 (q, J=8.97 Hz, J=16.3 Hz, 4H), 7.38 (br s, 5H), 7.69 (d, J=7.39 Hz, 2H), 7.86 (d, J=7.35 Hz, 2H); ES MS m/z (M+Na)+ 計算値 488, 実測値 488.
【０２４１】
実施例５３：Ａｃ−ＰＨＳＡ（β−ＳＯ2Ｂｎ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物を２００ｍｇ（０．６３ｍｍｏｌ／ｇ）のＦｍｏｃ−Ａｓｎ（ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋから、例２及び９の手順に従って（プレ精製を２回行ったことを除いて）調製した。Ｆｍｏｃ−Ａｌａ（β−ＳＯ2Ｂｎ）−ＯＨ（ＳＡＨ−１３）を直接Ａｓｎに対して結合させた。収率：２２．９ｍｇ（２５．２％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.01 (m, 3H), 2.15 (s, 1H), 2.27 (m, 1H), 2.79-2.90 (m, 2H), 3.19-3.37 (m, 2H), 3.63-3.75 (m, 3H), 3.89-3.96 (m, 3H), 4.39 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 5.10 (m, 1H), 7.34及び7.37 (s, s, 1H), 7.51 (br s, 5H), 8.62-8.66 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.7, 25.5, 27.3, 31.1, 37.4, 49.3, 50.0, 51.8, 52.7, 53.3, 56.7, 60.9, 61.4, 62.2, 118.5, 127.5, 129.7, 130.4, 130.7, 132.5, 134.7, 170.9, 172.7, 172.8, 173.0, 174.5, 175.7, 175.9; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 721, 実測値 721. 分析。C30H41N9O10Sの計算値：N, 19.17. 実測値：N, 12.70（ペプチド含有率：66.3％）。
【０２４２】
実施例５４：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣＮ−ＮＨ2
この化合物を２．０ｇ（０．６３ｍｍｏｌ／ｇ）のＦｍｏｃ−Ａｓｎ（ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋから、例２及び９の手順に従って調製し、７６４.５ｍｇ（７９．３％）の粗製の物質を獲得した。Ｆｍｏｃ−ＨｏＣ（ｔｒｔ）−ＯＨ（Ｃｈｅｎ−Ｉｍｐｅｘ）を直接Ａｓｎに対して結合させた。このペプチドは分析的HPLCによって、０．１分で分離されたピークが９０％超の、１：１混合物であった。２つのピークは構造異性体であると考えられた。粗製の物質を類似物合成に使用した。ESMS m/z（M＋H）+計算値６１２、実測値６１２。
【０２４３】
実施例５５：２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−４−フェニルスルファニル−酪酸アリルエステル
丸底フラスコに窒素を充填し、そしてＮａＳＰｈ（６１．５ｍｇ、０．４６５ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（１ｍＬ）を加えた。この混合物を氷水中で冷却し、そしてＤＭＦ（１ｍＬ）中に溶かした４-ブロモ-２-tert-ブトキシカルボニルアミノ酪酸アリルエステル（１００ｍｇ、０．３１０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を０〜５℃の冷蔵庫に移し、それを一晩置いた。次の朝（１６時間）、この溶液をin vacuoで濃縮して、そして残留物をＥｔＯＨ及び水で希釈した。層を分離し、そして有機層を水、０．１MのＫＨＳＯ4及び塩水で洗浄し、そしてＮａ2ＳＯ4上で乾燥させた。酢酸エチルを除去して油：９５．７mg（８７．８％）を獲得した。この化合物を更なる精製をせずに使用した。1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ1.51 (s, 9H), 2.02 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 3.0 (m, 2H), 4.50 (br s, 1H), 4.67 (t, J=1.29 Hz, 1H), 4.69 (t, J=1.29 Hz, 1H), 5.20 (br s, 1H), 5.34 (m, 2H), 5.93 (m, 1H), 7.25-7.41 (m, 5H); 13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ22.2, 29.5, 31.0, 33.7, 61.6, 67.2, 120.2, 127.5, 129.2, 130.2, 130.6, 130.9, 132.6, 156.5, 173.0。
【０２４４】
実施例５６：２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−４−フェニルスルファニル−酪酸
（Ｌ）−４−フェニルスルファニル-酪酸（１５６．６ｍｇ、０．４８１ｍｍｏｌ）のTFA塩を水（１．０ｍＬ）中に溶かした。Ｎａ2ＣＯ3（１０２ｍｇ、０．９６２ｍｍｏｌ）を加えて沈殿がすぐに形成された。ジオキサン（２．０ｍＬ）中に溶かしたＦｍｏｃＯｓｕ（１６２．２ｍｇ、０．４８１ｍｍｏｌ）をアミノ酸に対して加えた。濃密なスラリーを希釈するために更なる２．０ｍＬの水を加えた。１時間後、更なる０．１当量のジオキサン（０．５ｍＬ）中の０．１当量ＦｍｏｃＯｓｕ（１６．２ｍｇ、０．０４８１ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間後、この反応を酢酸エチルで希釈し、１ＮのＨＣｌ及び塩素で洗浄した。有機層を濃縮して残留物にし、そしてクロマトグラフィー（６．０gのＳｉＯ2、１０％のＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）に委ね、明黄色の固体：１６４．４mg（７８．８％）を獲得した。この物質は、ＮＭＲによる純度が約９０％だった。1H NMR (300 MHz, CDCl3/MeOD)δ1.95 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 4.17 (br t, J=6.78 Hz, 1H), 4.36 (m, 3H), 7.13-7.72 (m, 13H)。
【０２４５】
実施例５７：Ａｃ−ＰＨＳＨｏＣ（Ｐｈ）Ｎ−ＮＨ2
この化合物をＦｍｏｃ−Ａｓｎ（ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ（２１５ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ／ｇ）から、例２及び９の手順に従って調製し、ここで例５５の化合物をＡｓｎに対して結合させている。収率：２９．４ｍｇ（３３．７％）。1H NMR (300 MHz, D2O)δ1.83-2.32 (m, 6H), 2.14 (s, 3H), 2.71-2.90 (m, 2H), 3.02-3.37 (m, 4H), 3.65 (m, 2H), 3.90 (m, 2H), 4.36 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 4.73 (m, 1H), 7.29-7.48 (m, 6H), 8.64-8.67 (m, 1H); 13C NMR (75 MHz, D2O)δ22.6, 25.4, 27.2, 30.2, 31.0, 31.3, 37.4, 49.8, 51.4, 53.4, 53.9, 56.6, 61.3, 62.1, 118.3, 127.9, 129.6, 130.5, 130.59, 134.6, 135.7, 172.7, 172.9, 174.0, 174.4, 175.6, 175.8; ES MS m/z (M+H)+ 計算値 688, 実測値 688. 分析C30H41N9O8Sの計算値：N, 18.33. 実測値：N, 13.30（ペプチド含有率：72.5％）。
【０２４６】
実施例５８：Ａｃ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（β，β−ジメチル）−Ａｓｎ−ＮＨ2
この化合物をＲｉｎｋアミドＡＭ樹脂（０．５５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ／ｇ、０．４０７ｍｍｏｌのロード）から、例１及び２の手順に従い、しかし次の数の同等物：２当量のアミノ酸、２当量のＨＢＴＵ、２当量のＨＯＢｔ及び４当量のＮＭＭを二重結合化（double coupling）を使用することで調製した。ＰＬＧ−９４（１０８ｍｇ、４３％）を、白色の、綿状の固体そして、そして８４：１６の比における２つの化合物の混合物として単離した。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ8.98-8.96 (m, 1H), 8.46-8.19 (m, 2H), 8.14-7.93 (m, 2H), 7.39-7.34 (m, 2H), 7.07 (s, 2H), 6.92 (s, 1H), 4.78-4.25 (m, 4H), 3.23-3.12 (m, 1H), 3.05-2.93 (m, 2H), 2.58-2.38 (m, 2H, DMSOのピークをオーバーラップする), 2.07-1.97 (m, 3H), 1.90-1.62 (m, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.32 (s, 3H); ES MS m/z (M+H)+ 626.6; 分析C25H39N9O8Sの計算値：N, 20.15. 発見値：14.84（ペプチド含有率：74％）。
【０２４７】
実施例５９：in vitro侵入に対するペプチドの効果
ペプチドをそれらの、ＦＧＦ−２介在血管形成を阻害する有効性についてマトリゲル（登録商標）プラグモデルにおいて試験した。天然又は誘導体化されたペプチドを約１μMの濃度でマトリゲルプラグ中へと加えた。この結果を下の表にまとめている。
【０２４８】
【表２】
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【０２４９】
実施例６０：Ａｃ−ＰＦＳＣＮＧＧＫ（ビオチン）−ＮＨ2の局在化
マウスに、マトリゲル（登録商標）中１×１０6個のルイス肺ガン（３ＬＬ）細胞を１匹のマウスにつき２回接種した。５日後、マウスには尻尾の静脈を介して５０μgのＡｃ−ＰＦＳＣＮＧＧＫ（ビオチン）−ＮＨ２又はＰＦＳＣＮのいずれかを注射した。２時間後、結合しなかったペプチドを明らかにするために、動物を犠牲にしてプラグ及び様々な器官を取り出し、そして亜鉛固定剤（zink fixative）中に２４時間に渡り置き、そして４mmのパラフィン包埋切片を調製した。いくつかの実験において、動物を４回の後注射（post injection）後に犠牲にした。スライドをキシレン中で脱パラフィン化し、再水和させそして１％ＢＳＡ中で３０分に渡りブロッキングした。次いで、スライドを、ＰＢＳ中１：５０希釈におけるＣＤ３１（BD Biosciences）に対するモノクローナル抗体及び１：５００希釈における抗ビオチンマウスモノクローナルＣｙ３結合抗体（Sigma）とインキュベートした。他の実験において、抗ビオチンヤギポリクローナルＦＩＴＣ抗体（Sigma）を使用した。試料を第二の抗体：抗ラットIgG FITC接合抗体（BD Bioscience）（ＢＢＳ中で１：５００の希釈における）及びＤＡＰＩ（３００ｎＭ）と２時間に渡りインキュベートした。ＰＢＳ中４０μMにおけるＡｃ−ＰＦＳＣＮＧＧＫ（ビオチン）を、１：５００希釈の抗ビオチンヤギポリクローナルＦＩＴＣ結合抗体（Sigma）と３０分に渡り氷上でインキュベートした。混合物を、６ウェルプレートのカバースリップ上に予め播いておいたＢ１６メラノーマ細胞に対して加え、そして氷上で４時間に渡りインキュベートした。細胞を固定化し、そして顕微鏡下で確認し、それにより、腫瘍内のＣＤ３１陽性新生血管にＡｃ−ＰＦＳＣＮＧＧＫ（ビオチン）−ＮＨ2が局在し且つ他の細胞を伴わないことが示され、そしてＡｃ−ＰＦＳＣＮＧＧＫ（ビオチン）−ＮＨ2は、注射の４時間後も腫瘍内皮に結合したままであることも示された。
【０２５０】
最後に、本発明を行うための様々な方法があることに気付くべきである。従って、本発明の実施態様は、例示的であり限定的ではないと考えられるべきであり、そして本発明は、本明細書中に与えられた詳細に限定されるべきではないが、しかし添付した特許請求の範囲の範囲及びそれと同等なものの中で変更されて良い。本明細書中で引用された全ての刊行物及び特許は参照によって組み込まれている。
【図面の簡単な説明】
【０２５１】
【図１】本発明の化合物の例を示す。
【図２】本発明の化合物の例を示す。
【図３】本発明の化合物の例を示す。
【図４】本発明の化合物の例を示す。
【図５】本発明の化合物の例を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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