(57)【要約】本発明は、式Ｉ（Ｖ−Ｌ−Ｚ）で表される造影剤に関する。式中、ＶはアンジオテンシンII受容体に親和性を有する非ペプチド系ベクターであり、Ｌは結合、スペーサー又はリンカー成分であり、Ｚはヒト又は動物の身体のインビボイメージング法で検出可能な成分を表す。
2006517539.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式Ｉの化合物又はその薬学的に許容される塩。
Ｖ−Ｌ−Ｚ                式Ｉ
式中、ＶはアンジオテンシンII受容体に親和性を有する非ペプチド系ベクターであり、Ｌは結合、スペーサー又はリンカー成分であり、Ｚはヒト又は動物の身体のインビボイメージング法で検出可能な成分を表す。
【請求項２】
Ｖがロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン又はこれらの誘導体である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｚがイメージング成分Ｍを担持した式IIのキレート剤である、請求項１又は請求項２記載の化合物。
【化１】
2006517539.tif 000035
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は各々独立にＲ基であり、
各Ｒ基は独立にＨ又はＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルキルアミン、Ｃ１−１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。
【請求項４】
Ｚが、イメージング成分Ｍを担持した次の式ｅのキレート剤である、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の化合物。
【化２】
2006517539.tif 000036
【請求項５】
Ｚがイメージング成分を含んでいて、該イメージング成分が金属放射性核種、常磁性金属イオン、蛍光性金属イオン、発色団、重金属イオン又はクラスターイオンを含む、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項６】
前記イメージング成分が、９０Ｙ、９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、４７Ｓｃ、６７Ｇａ、５１Ｃｒ、１７７ｍＳｎ、６７Ｃｕ、１６７Ｔｍ、９７Ｒｕ、１８８Ｒｅ、１７７Ｌｕ、１９９Ａｕ、２０３Ｐｂ、１４１Ｃｅ又は１８Ｆを含む、請求項３乃至請求項５のいずれか１項記載の化合物。
【請求項７】
一般式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を、インビボイメージングの画像コントラスト強調用又は疾患治療用の薬学的に許容される１種以上の補助剤、賦形剤又は希釈剤と共に含んでなる医薬組成物。
【請求項８】
造影剤をヒト又は動物の身体に投与して身体の少なくとも一部分の画像を生成させる診断法に用いられる造影剤の製造における請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項９】
造影剤をヒト又は動物の身体に投与して造影剤が分布した身体の少なくとも一部分の画像を生成させることを含むヒト又は動物の身体の画像を生成させる方法であって、造影剤が請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の化合物を含むことを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の化合物を含む造影剤組成物を予め投与しておいたヒト又は動物の身体の強調画像を生成させる方法であって、当該方法が身体の少なくとも一部分の画像を生成させることを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、造影剤を用いて病状を撮像し得る画像診断法に適した診断用造影剤に関する。さらに具体的には、本発明は、ターゲティングベクターがアンジオテンシンII受容体に結合する造影剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
オクタペプチド（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ）であるアンジオテンシンII（ＡｎｇＩＩ）は、２種類の異なる受容体：ＡｎｇＩＩタイプ１（ＡＴ１）及びタイプ２（ＡＴ２）受容体に結合する多面的な血管作用性ペプチドである。レニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）の活性化は、血管肥厚、血管収縮、塩分・水分の保持及び高血圧を生じる。これらの作用は主にＡＴ１受容体によって媒介される。逆に、細胞死、血管拡張及びナトリウム利尿を始めとするその他のＡｎｇＩＩ媒介作用はＡＴ２受容体の活性化によって媒介される。ＡｎｇＩＩ情報伝達メカニズムは未だ充分に理解されていない。ＡＴ１受容体の活性化は、チロシンキナーゼ誘導タンパク質リン酸化、アラキドン酸代謝物の産生、反応性酸化性種の活性変化及び細胞内Ｃａ２＋の流動など様々な細胞内系を引き起こす。ＡＴ２受容体の活性化はブラジキニンの刺激、一酸化窒素産生及びプロスタグランジン代謝を促進するが、これらの大部分はＡＴ１受容体の作用とは逆である（Ｂｅｒｒｙ  Ｃ，  Ｔｏｕｙｚ  Ｒ，  Ｄｏｍｉｎｉｃｚａｋ  ＡＦ，  Ｗｅｂｂ  ＲＣ，  Ｊｏｈｎｓ  ＤＧ．：  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００１  Ｄｅｃ；２８１（６）：Ｈ２３３７−６５．  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ，  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｃｅｒａｍｉｄｅ参照）。
【０００３】
ＡｎｇＩＩはレニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）の活性成分であり、血圧、血漿量、交感神経系及び口渇反応の調節に重要な生理学的役割を果たす。ＡｎｇＩＩは、心肥大、心筋梗塞、高血圧、慢性閉塞性肺疾患、肝線維症及びアテローム性動脈硬化症における病態生理学的役割も有する。ＡｎｇＩＩは、体系的には古典的ＲＡＡＳを介して産生され、局所的には組織ＲＡＡＳを介して産生される。古典的ＲＡＡＳでは、循環系中の腎由来のレニンが肝由来のアンジオテンシノーゲンを切断してデカペプチドであるアンジオテンシンＩ（ＡｎｇＩ）を生ずる。ＡｎｇＩは肺でアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）によって活性型ＡｎｇＩＩへと変換される。ＡｎｇＩは組織エンドペプチダーゼによってヘプタペプチドＡｎｇ−（１−７）へと分解されることもある。ＲＡＡＳ系を本明細書の図１でに図解するが、この図はＦｏｏｔｅ他の報文Ａｎｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．  ２７：  １４９５−１５０３  （１９９３）の図１に基づくものである。
【０００４】
ＲＡＡＳが正常な心血管ホメオスタシスに重要な役割を果たすことに加えて、ＲＡＡＳの過剰活性は高血圧、鬱血性心不全、冠動脈虚血及び腎不全などの様々な循環器疾患の発症に関与している。心筋梗塞（ＭＩ）後、ＲＡＡＳは活性化される。具体的には、ＭＩ後及び左心室機能障害においてＡＴ１受容体の発現が増大するので、ＡＴ受容体は心筋梗塞後のリモデリングに重要な役割を果たしているらしい。したがって、ＡＣＥ阻害剤やＡＴ１受容体拮抗剤のようなＲＡＡＳを阻害する薬剤は、かかる循環器疾患の処置に多大な治療効果をもつことが示されている。
【０００５】
心臓、腎臓、肺及び肝臓などでは、線維症がそれらの臓器不全に共通した経路である。そこで、臓器の線維症に関与する病態生理学的メカニズムを理解することは、特に予防的薬理戦略の可能性を前提とすると、極めて重要である。組織修復には、組織修復の開始に不可欠な単球／マクロファージ系の細胞、コラーゲン代謝及び線維組織形成を担う筋線維芽細胞、表現型形質転換間質性線維芽細胞を始めとする炎症細胞が関与する。修復の微小環境下でのこれらの細胞での各事象は、アンジオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）の新規産生を促す分子事象を伴う。このペプチドは、自己分泌／傍分泌により、アンジオテンシン（ＡＴ１）受容体−リガンド結合を介してＴＧＦ−β１の発現を調節する。線維芽細胞から筋線維芽細胞（ｍｙｏＦｂ）への表現型の変化に寄与し、筋線維芽細胞でのコラーゲン代謝を調節するのはこのサイトカインである。アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）の阻害又はＡＴ１受容体拮抗作用は各々、線維症を生ずるこれらの分子及び細胞応答の多くを阻害し、予防処置となることが判明している（Ｗｅｂｅｒ  ＫＴ．  Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｔｏ  ｏｒｇａｎ  ｆａｉｌｕｒｅ：  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｐａｉｒ．  Ｓｅｍｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  １９９７  Ｓｅｐ；１７（５）：４６７−９１及びその引用文献参照）。
【０００６】
ＡｎｇＩＩは、間葉細胞の活性化により組織線維症を制御し得る。例えば、ＡｎｇＩＩは、ＡＴ１の活性化を介してインビトロで心線維芽細胞の増殖を刺激する。ＡＴ１受容体の存在はインビトロで心線維芽細胞でも示されている。ＡｎｇＩＩの線維化促進作用の多くはこの受容体で媒介されると思われるが、心線維芽細胞でのＡＴ２の発現増大がヒトの肥大心臓で検出されており、これらの２つのサブタイプの発現のバランスがＡｎｇＩＩに対する応答を決定する上で重要となろう（Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  Ｖｏｌｕｍｅ  １６１，  Ｎｕｍｂｅｒ  ６，  Ｊｕｎｅ  ２０００，  １９９９−２００４：  Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｉｓ  Ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｕｎｇ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  ｖｉａ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｙｐｅ  １  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｐ．  Ｍａｒｓｈａｌｌ，  Ｒｏｂｉｎ  Ｊ．  ＭｃＡｎｕｌｔｙ，  ａｎｄ  Ｇｅｏｆｆｒｅｙ  Ｊ．  Ｌａｕｒｅｎｔ及びその引用文献参照）。
【０００７】
ＡｎｇＩＩ受容体は、特異的な拮抗剤による阻害によって識別することができる。ＡＴ１受容体は、ロサルタンなどのビフェニルイミダゾールによる選択的に拮抗作用を受けるのに対して、テトラヒドロイミダゾピリジンはＡＴ２受容体を特異的に阻害する。また、ＡＴ２受容体はＣＧＰ−４２１１２Ａによって選択的に活性化し得る。これはＡｎｇＩＩのヘキサペプチドアナログであり、濃度に応じてＡＴ２受容体を阻害し得る。その他ＡＴ３及びＡＴ４サブタイプという２種類のアンジオテンシン受容体が報告されている。
【０００８】
齧歯類では、ＡＴ１受容体には機能的に異なる２つのサブタイプＡＴ１Ａ及びＡＴ１Ｂがあり、これらは９５％を超えるアミノ酸配列相同性を有する。
【０００９】
アンジオテンシン受容体の第２の主要なアイソフォームはＡＴ２受容体である。これはＡＴ１Ａ及びＡＴ１Ｂ受容体とのアミノ酸配列相同性が低い（約３４％）。ＡＴ２受容体の正確な情報伝達経路及び機能的役割は不明であるが、これらの受容体は生理的条件下で、細胞増殖を阻害し、アポトーシス及び血管拡張を誘発することによってＡＴ１媒介作用と拮抗し得る。循環器疾患におけるＡＴ２受容体の正確な役割については、未だ解明されていない。ＡＴ１及びＡＴ２以外にも、ＡｎｇＩＩの受容体が知られており、一般にＡＴａｔｙｐｉｃａｌと呼ばれる（Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．  １２７：  １３８８−１４０１  （１９９４））。
【００１０】
関連する従来技術
国際公開第９８／１８４９６号（Ｎｙｃｏｍｅｄ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ＡＳ）には、インビボイメージング用の標識ＡｎｇＩＩ受容体拮抗剤を含む造影剤が開示されている。
【００１１】
米国特許第５１３８０６９号には、ＡｎｇＩＩ受容体遮断薬として用いられる置換イミダゾールが開示されている。さらに、米国特許第５２６４５８１号（Ｃａｒｉａｎｉ）には、放射性ヨウ化イミダゾール系ＡｎｇＩＩ拮抗剤が開示されている。
【特許文献１】国際公開第９８／１８４９６号パンフレット
【特許文献２】米国特許第５１３８０６９号明細書
【特許文献３】米国特許第５２６４５８１号明細書
【非特許文献１】Ｂｅｒｒｙ  Ｃ，  Ｔｏｕｙｚ  Ｒ，  Ｄｏｍｉｎｉｃｚａｋ  ＡＦ，  Ｗｅｂｂ  ＲＣ，  Ｊｏｈｎｓ  ＤＧ．，  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２００１  Ｄｅｃ；２８１（６）：Ｈ２３３７−６５
【非特許文献２】Ｆｏｏｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．  ２７：  １４９５−１５０３  （１９９３）
【非特許文献３】Ｗｅｂｅｒ  ＫＴ．  “Ｆｉｂｒｏｓｉｓ，  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｐａｔｈｗａｙ  ｔｏ  ｏｒｇａｎ  ｆａｉｌｕｒｅ：  ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  ａｎｄ  ｔｉｓｓｕｅ  ｒｅｐａｉｒ．”  Ｓｅｍｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  １９９７  Ｓｅｐ；１７（５）：４６７−９１
【非特許文献４】Ｍａｒｓｈａｌｌ  Ｒ．Ｐ．，  ＭｃＡｎｕｌｔｙ  Ｒ．Ｊ．，  Ｌａｕｒｅｎｔ  Ｇ．Ｊ．，  “Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ  ＩＩ  Ｉｓ  Ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｕｎｇ  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  ｖｉａ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｔｙｐｅ  １  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ”  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．，  Ｖｏｌｕｍｅ  １６１，  Ｎｕｍｂｅｒ  ６，  Ｊｕｎｅ  ２０００，  １９９９−２００４
【非特許文献５】Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｈｅａｒｔ  Ｊ．  １２７：  １３８８−１４０１  （１９９４）
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
今回、インビボで検出可能な１以上の成分で標識したＡｎｇＩＩ受容体拮抗剤（例えばロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン及びこれらの誘導体）が、ヒト又は動物の身体のインビボイメージングに有用な診断用造影剤であることが判明した。
【００１３】
本発明の造影剤はＡｎｇＩＩ受容体部位のインビボでのイメージングに有用であり、つまり、ターゲティングベクターがＡｎｇＩＩ受容体部位に親和性を有する標的指向化造影剤を用いたイメージングに有用である。ＡｎｇＩＩ受容体は心血管系に広く存在しており、血流中に投与した造影剤にアクセス可能である。したがって、かかる標的指向化造影剤を用いると、心不全、アテローム性動脈硬化症及び血流障害、その他の循環器疾患及び障害並びに線維症の顕著な疾患を検出することができ、かかる疾患及び障害の治療の進展をモニターすることもできる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
第１の態様では、本発明は、次の式Ｉで規定される造影剤を提供する。
【００１５】
Ｖ−Ｌ−Ｚ                式Ｉ
式中、ＶはアンジオテンシンII受容体に親和性を有する非ペプチド系ベクターであり、Ｌは結合、スペーサー又はリンカーであり、Ｚはヒト又は動物の身体のインビボイメージング法で検出可能な成分を表す。
【００１６】
ベクターＶはＡｎｇＩＩ受容体に親和性をもつ非ペプチド系ターゲティング成分である。Ｖはさらに、ロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン及びそれらの誘導体のようなイミダゾール系ＡｎｇＩＩ拮抗剤を表す。
【００１７】
リンカーＬの役割はベクターをイメージング成分に連結することであり、Ｌがスペーサー部分である場合には、Ｌの役割はベクターＶの活性部位から比較的嵩高いイメージング成分を離隔させることである。
【００１８】
リンカー部分は１個のベクターを１個のイメージング成分に連結させるのに役立ててもよいし、２以上のベクター及び／又は２以上のイメージング成分を連結させてもよい。同様に、イメージング成分又はベクターを２以上のリンカーに連結させてもよい。このように複数のイメージング成分を使用すると（例えば、１個のベクターに数個のリンカー−イメージング成分が結合している場合、又は１個のベクターに１個のリンカーが結合し、そのリンカーに数個のイメージング成分が結合している場合）、造影剤の検出性を（例えば放射線不透過性、エコー反射性又は緩和の増大によって）高めたり、或いは２以上の画像モダリティで検出できるようになる。このように複数のベクターを使用すると、例えば造影剤のターゲティング効率を高めたり、或いは造影剤／治療薬を２以上の部位（例えば受容体に異種性をもつ薬剤に対する各種受容体）にターゲティングできるようになる。
【００１９】
リンカー部分Ｌは単結合、グルタル酸、ジグリコール酸、ＰＥＧ単位又はＰＥＧ様リンカーのいずれでもよいし、或いは例えば国際公開第０１／７７１４５号第２３〜２７頁に記載の当技術分野で公知の他のリンカーであってもよく、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。Ｌはリンカー単位の組合せであってもよい。
【００２０】
本発明の化合物のイメージング成分（Ｚ）はインビボ画像診断で直接又は間接的に検出できる成分であれば、どのようなものでもよい。
【００２１】
診断、特に生体内診断に有用な医薬については、成分Ｚは、Ｍで表すイメージング可能成分を担持できるものでなければならない。担持とは、化学結合（例えば共有結合、電気原子価結合つまりイオン結合）又は吸着その他の種類の会合など、成分ＺとＭとのあらゆる形態の結合を意味する。
【００２２】
以下に示す式（II）及び（ｅ）のキレート剤が特に好ましい。
【００２３】
Ｍはどのようなイメージング成分であってもよい。Ｍの性状は、診断に利用される画像モダリティに依存する。Ｍはインビボ画像診断で直接又は間接的に検出できるものでなければならず、例えば、検出可能な放射線を放射もしくは（放射性崩壊、蛍光励起、スピン共鳴励起などによって）放射し得る成分、局所的電磁場に影響を与える成分（例えば、常磁性、超常磁性、フェリ磁性もしくは強磁性種）、放射線エネルギーを吸収又は散乱する成分（例えば、発色団、粒子（気体又は液体含有ベシクルを含む）、重元素及びその化合物など）、並びに検出可能な物質を生成する成分（例えば、気体マイクロバブル発生剤）などである。
【００２４】
多種多様な適当なイメージング成分が知られており、例えば国際公開第９８／１８４９６号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００２５】
以下、画像モダリティ及びイメージング成分Ｍに関してさらに詳しく説明する。
【００２６】
第１の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、Ｒａｄｉｏ及びＳＰＥＣＴ画像モダリティに有用な１以上のイメージング成分Ｍを担持した成分Ｚを含む。好ましくは、Ｍは、α線及びβ線をほとんど或いは全く放射しない半減期１時間以上のγ放射体である。好ましいＭ基は、放射性核種６７Ｇａ、１１１Ｉｎ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、８１ｍＫｒ、９９Ｍｏ、９９ｍＴｃ、２０１ＴＩ及び１３３Ｘｅである。最も好ましいのは９９ｍＴｃである。
【００２７】
Ｍが金属放射性核種を表す場合、Ｚは、Ｍとの安定なキレートの形成に適したキレート剤を含む。かかるキレート剤は当技術分野で周知であり、その典型例は国際公開第０１／７７１４５号の表Ｉに記載されている。
【００２８】
特に好ましいのは、次の式IIのキレート剤である。
【００２９】
【化１】
2006517539.tif 000003
【００３０】
式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は各々独立にＲ基であり、
各Ｒ基は独立にＨ又はＣ１−１０アルキル、Ｃ３−１０アルキルアリール、Ｃ２−１０アルコキシアルキル、Ｃ１−１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１−１０アルキルアミン、Ｃ１−１０フルオロアルキルであるか、或いは２以上のＲ基がそれらに結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和又は不飽和環を形成するものである。。
【００３１】
さらに好ましいのは、以下の式ａ、ｂ、ｃ及びｄで表されるキレート剤である。
【００３２】
【化２】
2006517539.tif 000004
【００３３】
さらに一段と好ましいキレート剤の例は次の式ｅで表され、本明細書では「ｃＰｎ２１６」という。Ｚについて最も好ましいのは、キレート剤がｃＰｎ２１６で、イメージング成分が９９ｍＴｃである場合である。
【００３４】
【化３】
2006517539.tif 000005
【００３５】
式IIのキレート剤を含むコンジュゲートは、中性ｐＨ付近の水性条件下室温で放射性標識することができ、良好な放射化学的純度（「ＲＣＰ」）のものが得られる。コンジュゲートを室温で放射性標識することの利点は病院薬局での操作が簡単なことである。式IIのキレート剤の合成に関しては、国際公開第０３／００６０７０号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００３６】
１２３Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉのような非金属放射性核種は、当技術分野で周知の置換又は付加反応によって成分Ｚに共有結合させることができる。
【００３７】
第２の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ＰＥＴ画像モダリティに有用な１以上のイメージング成分Ｍを担持した成分Ｚを含む。この場合、Ｍは陽電子放出性をもつ放射体を表す。好ましいＭ基は、放射性核種１１Ｃ、１３Ｆ、６８Ｇａ、１３Ｎ、１５Ｏ及び８２Ｒｂである。１８Ｆが特に好ましい。
【００３８】
Ｍが金属放射性核種を表す場合、Ｚは、Ｍとの安定キレートの形成に適したキレート剤を含む。かかるキレート剤は当技術分野で周知であり、かかるキレート剤の典型例は国際公開第０１／７７１４５号の表Ｉ、さらに上述のＲａｄｉｏ及びＳＰＥＣＴイメージングに関する説明に記載されている。
【００３９】
別の好ましい実施形態では、ＺはＤＯＴＡキレート剤であり、Ｍは６８Ｇａであってマイクロ波化学で容易にキレート剤に導入し得る。
【００４０】
１３Ｆのような非金属放射性核種は、当技術分野で周知の置換又は付加反応によって成分Ｚに共有結合させることができ、例えば国際公開第０３／０８０５４４にも記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００４１】
第３の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ＭＲ画像モダリティに有用な１以上のイメージング成分Ｍを担持した成分Ｚを含む。この場合、Ｍは米国特許第４６４７４４７号に記載されているような常磁性金属を表し、Ｇｄ３＋、Ｄｙ３＋、Ｆｅ３＋及びＭｎ２＋が特に好ましい。Ｚはキレート剤、特に米国特許第４６４７４４７号及び国際公開第８６／０２８４１号に記載されているような非環式又は環式ポリアミノカルボキシレートなどのキレート剤（例えば、ＤＴＰＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＯＴＡ及びＤＯ３Ａ）を含む。また、Ｍは、超常磁性種、フェリ磁性種又は強磁性種のような金属酸化物であってもよく、これらは例えばＺが金属酸化物のコーティングとして機能するようにＺに吸収される。ＭＲ造影剤として用いられる金属酸化物は、例えば米国特許第６２３０７７７号に記載されており、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００４２】
第４の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、Ｘ線画像モダリティに有用な１以上のイメージング成分Ｍを担持した成分Ｚを含む。ここでのＭはＷ、Ａｕ及びＢｉのような重金属であり、好ましくは酸化物の形態であって、Ｚに吸着し得るものである。ヨウ化アリール誘導体がＸ線造影剤として特に知られており、例えば、Ｉｏｐａｍｉｒｏｎ（商標）及びＯｍｎｉｐａｑｕｅ（商標）などがある。
【００４３】
ガス充填微小胞の形態の超音波造影剤は、例えば国際公開第９８／１８５００号などの先行文献に記載のベクターＶに結合するように官能化すると、受容体のイメージングに利用できる。
【００４４】
イメージング成分Ｚは光イメージング法に用いられる発色団を表すものでもよい。発色団とは、組成物中の光を吸収及び／又は放射する基、例えば有機又は無機基をいう。光とは、波長３００〜１３００ｎｍの電磁放射をいう。可視域乃至遠赤外域に吸収及び／又は発光極大を有する発色団が特に適している。生物学的ターゲットに親和性をもつ光学イメージング用造影剤も、例えば国際公開第９６／１７６２８号などの先行文献記載の方法に従って使用することができ、その開示内容は援用によって本明細書の内容の一部をなす。
【００４５】
ロサルタン誘導体で本発明を例示することができ、イミダゾールの５位にリンカー（Ｌ）及びイメージング成分（Ｚ）が結合している。この原理は、構造類似性を有する他の化合物、例えばロサルタンのイミダゾール環に対応する分子部分に適切なアンカー部位をもつバルサルタン、カンデサルタン及びエプロサルタンにも適用される。
【００４６】
【化４】
2006517539.tif 000006
【００４７】
スキーム１は、Ｔｃキレート用のロサルタン誘導体分子を得るため、式ｅのキレート剤と結合させるためイミダゾールの５位をどのように利用するかの具体例を示す。親ロサルタン分子をアジド誘導体に変換した後、対応アミンに還元する。アミンをジグリコール酸と反応させ、次いで式ｅのキレート剤の適当な誘導体で活性化及び反応させる。
【００４８】
【化５】
2006517539.tif 000007
【００４９】
スキーム２に、ロサルタンリンカーキレート剤コンジュゲートの固相合成の例を示す。
【００５０】
【化６】
2006517539.tif 000008
【００５１】
その他の関連構造の例を以下に示す。
【００５２】
【化７】
2006517539.tif 000009
【００５３】
式（Ｉ）の造影剤は、好ましくは、式（Ｉ）の化合物をヒトなどの哺乳類への投与に適した形態で含む医薬製剤として投与される。投与は好適には水溶液のような製剤の注射又は輸液によって行われる。製剤は、薬学的に許容される１種以上の添加物質及び／又は賦形剤、例えば緩衝剤、シクロデキストリンのような可溶化剤、又はＰｌｕｒｏｎｉｃ、Ｔｗｅｅｎ、リン脂質のような界面活性剤を含んでいてもよい。さらに、アスコルビン酸、ゲンチシン酸、パラアミノ安息香酸のような安定剤又は抗酸化剤、及び塩化ナトリウムやマンニトールのような凍結乾燥用構造形成剤を含んでいてもよい。
【００５４】
さらに、本発明は、有効量（例えば、インビボイメージング法での画像コントラスト強調に有効な量）の一般式（Ｉ）の化合物又はその塩を、薬学的に許容される１種以上の補助剤、賦形剤又は希釈剤と共に含んでなる医薬組成物を提供する。
【００５５】
別の態様では、本発明は、 造影剤をヒト又は動物の身体に投与して身体の少なくとも一部分の画像を生成させる診断法に用いられる造影剤の製造における式Ｉの組成の使用を提供する。
【００５６】
さらに別の態様では、本発明は、式Ｉに規定する化合物を含む造影剤組成物を予め投与しておいたヒト又は動物の身体の強調画像を生成させる方法であって、当該方法が身体の少なくとも一部分の画像を生成させることを含む方法を提供する。
【００５７】
本発明はさらに、心不全その他ＡＴ１受容体の上方制御に伴う疾患の治療効果をモニターする方法を提供する。
【００５８】
その他の態様では、本発明は、リガンド−キレートコンジュゲートと還元剤とを含む式（Ｉ）の放射活性医薬化合物の調製用キットを提供する。好ましくは、還元剤は第一スズ塩である。キットは、１以上の安定剤、抗酸化剤、凍結乾燥用構造形成剤及び可溶化剤を含んでいてもよい。
【００５９】
本明細書中で用いた略語の意味は以下の通りである。
ＤＯＴＡ    １，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸
ＰＥＧ      ポリエチレングリコール
ＤＩＥＡ    Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＰＰＡ    ジフェニルホスホリルアジド
ＤＢＵ      １，８−ジアザ−ビシクロ（５，４，０）ウンデカ−７−エン
ＤＭＦ      ジメチルホルムアミド
ＭＤＰ      メチレンジホスホネート
ＴＦＡ      トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
ＨＡＴＵ    Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］
ピリジノ−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウム  ヘキサフル
オロホスホネート  Ｎ−オキシド
Ｆｍｏｃ    ９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ｂｏｃ      ｔ−ブトキシカルボニル
ＴＢＴＵ    ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメ
チルウロニウム  テトラフルオロホウ酸塩
ＨＯＢｔ    Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＴＩＳ      トリイソプロピルシラン
ＮＭＰ      Ｎ−メチルピロリドン
ＭＤＰ      メチレンジホスホネート。
【００６０】
以下の非限定的な実施例で本発明をさらに例示する。
【実施例】
【００６１】
実施例１ ビオチンで誘導体化したロサルタン
【００６２】
【化８】
2006517539.tif 000010
【００６３】
ａ）ロサルタンヒドロキシル基のアジドによる置換
【００６４】
【化９】
2006517539.tif 000011
【００６５】
テトラヒドロフラン（８ｍｌ）中のロサルタン（ＭＳＤ社製、０．４２３ｇ、１．００ｍｍｏｌ）及びジフェニルホスホリルアジド（Ａｌｄｒｉｃｈ社製、０．２５９ｍｌ、１．２０ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、ＤＢＵ（０．３２９ｍｌ、２．２０ｍｍｏｌ）を添加した。一晩攪拌した後、水／アセトニトリル（１：１、４．８ｍｌ）を加え、混合物を濾過した。純ＴＦＡを（ｐＨ２に至るまで）添加した後、混合物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの３５〜４５％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）に数回流して精製し、凍結乾燥後９９ｍｇ（２２％）の白色結晶として生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの２０〜８０％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、上記構造に対応する７．３分、ｍ／ｚ  ４４８．１（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【００６６】
ｂ）アジド基のアミノ基への還元
【００６７】
【化１０】
2006517539.tif 000012
【００６８】
ａ）で得た化合物（５．０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）のメタノール（３ｍｌ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（Ｋｏｃｈ−Ｌｉｇｈｔ、約１０ｍｇ）を添加した。混合物を水素（１ａｔｍ）下で１０分間攪拌し、濾過し、濃縮した。残留物をそれ以上精製せずに次の工程に使用した。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの２０〜８０％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、アミンに相当する１．９分、ｍ／ｚ  ４２２．２（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【００６９】
ｃ）ビオチンの結合
ビオチン（Ｆｌｕｋａ社製、３．０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍｌ）中のＨＡＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製、４．０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ、１１μｌ、０．０２２ｍｍｏｌ）で１０分間活性化した。この混合物を、ｂ）の化合物（０．０１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍｌ）溶液に加えた。４５分間反応後に、生成物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの２０〜６０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後２．０ｍｇ（２８％）の生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜８０％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記構造に対応する１０．６分、ｍ／ｚ  ６４８．６（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【００７０】
実施例２ フルオレセインで誘導体化したロサルタン
【００７１】
【化１１】
2006517539.tif 000013
【００７２】
ＮＨＳ−フルオレセイン（Ｐｉｅｒｃｅ社製、６．０ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ、１４μｌ、０．０２８ｍｍｏｌ）を、実施例１ｂ）で得たアミノ官能化ロサルタン（０．０１４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍｌ）溶液に加えた。反応混合物を一晩放置した。生成物をＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの２０〜８０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後４．０ｍｇ（３７％）の生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの２０〜８０％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記構造に対応する１０．４分、ｍ／ｚ  ７８０．８（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【００７３】
実施例３ Ｔｃ−標識用のグルタル酸修飾ｃＰｎ２１６で誘導体化したロサルタン
【００７４】
【化１２】
2006517539.tif 000014
【００７５】
ａ）ｃＰｎ２１６−グルタル酸中間体の合成
【００７６】
【化１３】
2006517539.tif 000015
【００７７】
ｃＰｎ２１６（１００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、グルタルアルデヒド（３３ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を少しずつ攪拌しながら加えた。反応混合物を２３時間攪拌して、所望生成物への変換を完了させた。ＲＰ−ＨＰＬＣ後に純粋な酸が良好な収率で得られた。
【００７８】
ｂ）ｃＰｎ２１６−グルタル酸のテトラフルオロチオフェニルエステルの合成
【００７９】
【化１４】
2006517539.tif 000016
【００８０】
ｃＰｎ２１６−グルタル酸（３００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液にＨＡＴＵ（２４９ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（１３２μＬ、１・３２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５分間攪拌し、次いでテトラフルオロチオフェノール（０．６６ｍｍｏｌ、１１９ｍｇ）を添加した。溶液を１０分間攪拌し、次いで反応混合物を２０％アセトニトリル／水（８ｍＬ）で希釈し、生成物をＲＰ−ＨＰＬＣで精製して、凍結乾燥後に１１０ｍｇの所望生成物を得た。
【００８１】
ｃ）ｃＰｎ２１６−グルタル酸活性エステルとアミノ誘導体化ロサルタンとのカップリング
実施例１ｂ）で得たアミノ誘導体化ロサルタン（１０μｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（３．３μｌ、３０μｍｏｌ）とｂ）で得たｃＰｎ２１６−グルタル酸テトラフルオロチオフェニルエステル（６．８ｍｇ、１１μｍｏｌ、常法でｃＰｎ２１６と無水グルタル酸から調製）を添加した。４５分後、反応混合物を濃縮した。残留物をアセトニトリル／水で回収し、調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２  Ｃ１８  １０μｍ、２２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後４．２ｍｇ（４９％）の生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、予想された６．２分、ｍ／ｚ  ８６１．６（ＭＨ＋）のピークが得られた。構造確認のためＮＭＲ分光法でさらに特性決定を行った。
【００８２】
実施例４ Ｔｃ−標識用のジグリコール酸修飾Ｐｎ２１６で誘導体化したロサルタン
【００８３】
【化１５】
2006517539.tif 000017
【００８４】
ａ）無水ジグリコール酸でのアシル化
【００８５】
【化１６】
2006517539.tif 000018
【００８６】
実施例１ａ）で得たアジド誘導体化ロサルタン（０．１２ｍｍｏｌ）を、実施例１ｂ）に記載の通り、対応アミンへと還元した。触媒を濾過により除去し、無水ジグリコール酸（Ａｃｒｏｓ社製、７０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）をメタノール溶液に直接添加した。一晩攪拌した後に混合物を濃縮し、残留物をアセトニトリル／水で回収し、調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２  Ｃ１８  １０μｍ、２２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２５４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後３０ｍｇ（４６％、２ステップで）の白色綿毛状の物質を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜８０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記構造に合致する６．７分、ｍ／ｚ  ５３８．０（ＭＨ＋）のピークが得られた。ＮＭＲ分光法でさらに特性決定を行った。
【００８７】
ｂ）Ｐｎ２１６との結合
ａ）で得たロサルタン誘導体ａ）（５．４ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）溶液及びＨＡＴＵ（３．８ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、ＮＭＰ中の２Ｍ  ＤＩＥＡ溶液（１５μｌ、０．０３０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物は黄色に変色し、１５分間攪拌した。活性化カルボキシル酸に、Ｐｎ２１６（３．４ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．２５ｍｌ）溶液を添加した。反応の進行度は分析用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＬｕｎａＣ１８（２）、３μｍ、４．６×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速２．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）でモニターした。１時間反応後、新鮮なＨＡＴＵのアリコート（３ｍｇ）を添加した。２０分後、反応を完了した。混合物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｖｙｄａｃ  ２１８ＴＰ１０２２  Ｃ１８  １０μｍ、２２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２５４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後４．３ｍｇ（５０％）の生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記構造に対応する６．０分、ｍ／ｚ  ８６４．３（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【００８８】
実施例５ Ｔｃ−標識用のジグリコール酸修飾ｃＰｎ２１６で誘導体化したロサルタン
【００８９】
【化１７】
2006517539.tif 000019
【００９０】
実施例４ａ）で得たロサルタン誘導体ａ）（５．４ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）溶液及びＨＡＴＵ（３．８ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、ＮＭＰ中の２Ｍ  ＤＩＥＡ溶液（１５μｌ、０．０３０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物は黄色に変色し、１５分間攪拌した。活性化カルボキシル酸に、ｃＰｎ２１６（３．４ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．２５ｍｌ）溶液を添加した。反応の進行度は分析用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＬｕｎａＣ１８（２）、３μｍ、４．６×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速２．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）でモニターした。ＨＡＴＵをさらに２アリコート分添加した後、出発物質は完全に変換された。混合物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＬｕｎａＣ１８（２）５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製して、凍結乾燥後３．７ｍｇ（４３％）の生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、及び２５４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、上記構造に合致する６．１分、ｍ／ｚ  ８６３．２（ＭＨ＋）のピークが得られた。ＮＭＲ分光法でさらに特性決定を行った。
【００９１】
実施例６ ＰＥＧリンカーを介してビオチンで誘導体化したロサルタン
【００９２】
【化１８】
2006517539.tif 000020
【００９３】
ａ）ＰＥＧの結合
【００９４】
【化１９】
2006517539.tif 000021
【００９５】
Ｂｏｃ−アミノＰＥＧ酸（Ｐｏｌｙｐｕｒｅ、６．０ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍｌ）中のＨＡＴＵ（５．０ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ、１３μｌ、０．０２６ｍｍｏｌ）で５分間活性化した。混合物を実施例１ｂ）で得た化合物（０．０１３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍｌ）溶液に加えた。１．５時間反応後、溶液を３０％アセトニトリル水溶液（４ｍｌ）で希釈し、生成物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの３０〜６０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後５．５ｍｇ（４７％）の生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの３０〜１００％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記構造に対応する７．０分、ｍ／ｚ  ９００．９（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【００９６】
ｂ）Ｂｏｃ保護基の除去
【００９７】
【化２０】
2006517539.tif 000022
【００９８】
化合物ａ）（５．５ｍｇ、６．１μｍｏｌ）をジクロロメタン中の５０％ＴＦＡジクロロメタン溶液（４ｍｌ）に溶解した。反応の進行度は分析用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＬｕｎａＣ１８（２）、３μｍ、４．６×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速２．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）でモニターし、開裂が２０分後に完了したことを確認した（ｔＲ＝６．１分）。ＭＳ直接注入（溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；２分間で溶媒Ｂ５０％；流速０．３ｍｌ／分、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、アミンに相当するｍ／ｚ  ８００．７（ＭＨ＋）が得られた。溶液を濃縮し、生成物をそれ以上精製せずに次の工程に使用した。
【００９９】
ｃ）ビオチンの結合
ビオチン（Ｆｌｕｋａ社製、１．０ｍｇ、４．０μｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍｌ）中のＨＡＴＵ（１．５ｍｇ、４．０μｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ、４．５μｌ、９．０μｍｏｌ）で１０分間活性化し、ｂ）の化合物（３．０μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍｌ）溶液に加えた。反応混合物を１５分間攪拌し、２０％アセトニトリル水溶液で希釈し、調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの２０〜６０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、２．４ｍｇ（８１％）の生成物を得た。ＭＳ直接注入（溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；２分間で溶媒Ｂ５０％；流速０．３ｍｌ／分、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、上記構造に対応するｍ／ｚ  １０２６．８（ＭＨ＋）が得られた。
【０１００】
実施例７ ＰＥＧリンカーを介してフルオレセインで誘導体化したロサルタン
【０１０１】
【化２１】
2006517539.tif 000023
【０１０２】
ＮＨＳ−フルオレセイン（Ｐｉｅｒｃｅ社製、２ｍｇ、４μｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ、４．５μｌ、９．０μｍｏｌ）を、実施例６ｂ）で得た化合物（３μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍｌ）溶液に加えた。反応混合物を一晩放置した。３０％アセトニトリル水溶液で希釈し、ｐＨを２に調整した（ＴＦＡ）後、生成物をＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの３０〜６０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後２．５ｍｇ（７２％）の生成物を得た。ＭＳ直接注入（溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；２分間で溶媒Ｂ５０％；流速０．３ｍｌ／分、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、上記構造に対応するｍ／ｚ  １１５８．５（ＭＨ＋）が得られた。
【０１０３】
実施例８ Ｔｃ−標識用のＰＥＧ−グルタル酸−ｃＰｎ２１６で誘導体化したロサルタン
【０１０４】
【化２２】
2006517539.tif 000024
【０１０５】
ＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ、８μｌ、１６μｍｏｌ）及び、実施例３ｂ）で得たｃＰｎ２１６−コハク酸テトラフルオロチオフェニルエステル（５ｍｇ、８μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍｌ）溶液を、実施例６ｂ）で得た化合物（４μｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍｌ）溶液に加えた。一晩攪拌した後、反応混合物を水（３ｍｌ）で希釈し、ＴＦＡ添加でｐＨを２に調整した。生成物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの２０〜６０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後２．０ｍｇ（４０％）の生成物を得た。ＭＳ直接注入（溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；２分間で溶媒Ｂ５０％；流速０．３ｍｌ／分、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、上記構造に対応するｍ／ｚ  １２３９．８（ＭＨ＋）が得られた。
【０１０６】
実施例９ Ｔｃ−標識用のＰＥＧ−ジグリコール酸−ｃＰｎ２１６で誘導体化したロサルタン
【０１０７】
【化２３】
2006517539.tif 000025
【０１０８】
ａ）無水ジグリコール酸でのアシル化
【０１０９】
【化２４】
2006517539.tif 000026
【０１１０】
実施例６ｂ）で得た化合物（５．０μｍｏｌ）をメタノール（２．５ｍｌ）に溶解し、ＤＩＥＡの添加でｐＨを９に調整した。溶液に、無水ジグリコール酸（Ａｃｒｏｓ社製、１．２ｍｇ、１０μｍｏｌ）を加えた。５０分後に反応混合物を濃縮し、残留物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの２０〜６０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後４．５ｍｇ（９８％）の生成物を得た。ＭＳ直接注入による分析（溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；２分間で溶媒Ｂ５０％；流速０．３ｍｌ／分、ＥＳＩ−ＭＳ；ｍ／ｚ  ９１６．９（ＭＨ＋））は上記構造に合致していた。
【０１１１】
ｂ）ｃＰｎ２１６の結合
ａ）の化合物（５μｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍｌ）に溶解し、ＨＡＴＵ（２ｍｇ、５μｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ、５μｌ、１０μｍｏｌ）で５分間活性化した。ｃＰｎ２１６（３．４ｍｇ、１０μｍｏｌ）を添加し（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの２０〜６０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）、凍結乾燥後３．７ｍｇ（５７％）の生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ギ酸及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ギ酸；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記構造に対応する６．８分、ｍ／ｚ  １２４１．２（ＭＨ＋）のピークが得られた。
【０１１２】
実施例１０ ＰＥＧ−グルタル酸リンカーを介してｃＰｎ２１６で修飾したロサルタンの固相合成
【０１１３】
【化２５】
2006517539.tif 000027
【０１１４】
ａ）メトキシトリチル樹脂へのロサルタンの結合
【０１１５】
【化２６】
2006517539.tif 000028
【０１１６】
Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社から入手した４−メトキシトリチルクロリド樹脂（５３ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ相当）のジクロロメタン（１ｍｌ）懸濁液に、ロサルタン（ＭＳＤ社製、４２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍｌ）溶液及びＤＩＥＡ（ＮＭＰ中２Ｍ溶液、０．１０ｍｌ、０．２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を４日間回転台上に置いた。樹脂から液を除き、ＤＭＦ及びジクロロメタンで数回洗浄した。樹脂のアリコートを切断し（ジクロロメタン中５％ＴＦＡ及び５％ＴＩＳ、１５分間）、ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、４．６×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜８０％濃度勾配；流速２．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）で分析し、ロサルタンと同時に溶出されるピークを得た。
【０１１７】
ｂ）アジド形成
【０１１８】
【化２７】
2006517539.tif 000029
【０１１９】
反応は手動式窒素バブラー装置で実施した。ａ）で得た樹脂のＴＨＦ（約１ｍｌ）懸濁液に、ＤＢＵ（１６μｌ、０．１１ｍｍｏｌ）及びジフェニルホスホリルアジド（Ａｌｄｒｉｃｈ社製、１３μｌ、０．０６０ｍｍｏｌ）を加えた。約３０分後、ジフェニルホスホリルアジド（７μｌ）及びＤＢＵ（８μｌ）の新鮮なアリコートを加えた。４５分後、樹脂のアリコートを切断し（ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ／ＴＩＳ、９７．５：５：２．５）、ＬＣ−ＭＳ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜８０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）で分析したところ、アジドに相当する８．８分、ｍ／ｚ  ４４７．９（ＭＨ＋）のピークが得られた。出発物質の痕跡は観察されなかった。
【０１２０】
ｃ）アジドの対応アミンへの還元
【０１２１】
【化２８】
2006517539.tif 000030
【０１２２】
反応は手動式窒素バブラー装置で実施した。塩化スズ（II）二水和物（２３ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（０．５ｍｌ）に、チオフェノール（４１μｌ、０．４０ｍｍｏｌ）及びトリメチルアミン（４２μｌ、０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。沈殿がほぼ溶解するまでＴＨＦをさらに加えた。混合物を、ＴＨＦ（０．５ｍｌ）に表面が隠れるまで浸した上記ｂ）で得た樹脂（式上０．０５ｍｍｏｌのアジドに相当）のアリコートに移した。１時間後、試薬溶液を除き、樹脂をＴＨＦ、ＤＭＦ及びメタノールで洗浄した。樹脂のアリコートを切断し（ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ／ＴＩＳ、９７．５：５：２．５）、さらにＬＣ−ＭＳ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜８０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）で分析したところ、上記アミンに相当するｍ／ｚ  ４２１．７（ＭＨ＋）、４．６分で溶出する親水性の向上した生成物へと出発物質が完全に変換されたことが判明した。
【０１２３】
ｄ）ＰＥＧ−グルタリル−ｃＰｎ２１６単位のカップリング
反応は手動式窒素バブラー装置で実施した。ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中のＦｍｏｃ−アミノＰＥＧ−ジグリコール酸（Ｐｏｌｙｐｕｒｅ  ＡＳ、４０ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（２４ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１２ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）及び２Ｍ  ＤＩＥＡのＤＭＦ溶液（７５μｌ、０．１５ｍｍｏｌ）を樹脂に添加した。２時間後、樹脂から液を除き、ＤＭＦで洗浄した。Ｋａｉｓｅｒテストは陰性であった。ＤＭＦ中の２０％ピペリジン溶液での標準的な処理によって、Ｆｍｏｃ基を切断した。ＤＭＦ（２ｍｌ）に懸濁した樹脂のアリコート（形式上０．０２ｍｍｏｌ）に、実施例３ｂ）で得たｃＰｎ２１６−グルタル酸テトラフルオロチオフェニルエステル（２５ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（６ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）及び２Ｍ  ＤＩＥＡ（３０μｌ、０．０６０ｍｍｏｌ）を添加した。２時間反応後、生成物を樹脂から切断した（ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ／ＴＩＳ、９７．５：５：２．５）。切断した溶液を濃縮し、残留物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの２０〜３０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後０．１ｍｇの生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜８０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、正しい構造のＭＨ＋に相当する４．３分、ｍ／ｚ  １１５１．４のピークを得た。
【０１２４】
実施例１１ ＰＥＧ−グルタル酸リンカーを介してｃＰｎ２１６で修飾したロサルタンの固相合成
【０１２５】
【化２９】
2006517539.tif 000031
【０１２６】
ａ）トリチル誘導体化固体支持体へのロサルタンの結合
【０１２７】
【化３０】
2006517539.tif 000032
【０１２８】
ロサルタン（ＭＳＤ社製、０．２３６ｇ、０．５５８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（Ｆｌｕｋａ社製、０．２３３ｍｌ、１．６７ｍｍｏｌ）を、トリチルクロリド樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社製、置換１．２４ｍｍｏｌ／ｇ、０．３００ｇ）のＤＭＦ溶液（５ｍｌ）に添加した。４日後、樹脂から液を除き、洗浄した。樹脂のアリコートを切断した（ジクロロメタン／ＴＦＡ／トリイソプロピルシラン、９２．５：５．０：２．５、１５分間）。ＨＰＬＣ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、４．６×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速２．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ）で、ロサルタンに相当するｔＲ６．７分のピークを得た。樹脂をジクロロメタン／メタノール／ジイソプロピルエチルアミン溶液（１７：２：１、２０ｍｌ、１ｈ）で処理し、ジクロロメタンで洗浄後、乾燥させた。
【０１２９】
ｂ）アジドによるヒドロキシル基の置換
【０１３０】
【化３１】
2006517539.tif 000033
【０１３１】
ジフェニルホスホリルアジド（Ａｌｄｒｉｃｈ社製、０．４８１ｍｌ、２．２３ｍｍｏｌ）及びＤＢＵ（０．６１１ｍｌ、４．０９ｍｍｏｌ）を、ａ）で得た樹脂結合ロサルタン（０．３７２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）懸濁液に添加した。反応液を一晩放置した。樹脂のアリコートをａ）に記載の方法で切断した。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの２０〜８０％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記構造に対応するｔＲ７．３分、ｍ／ｚ  ４４８．１（ＭＨ＋）のピークを得た。
【０１３２】
ｃ）アジド基のアミンへの還元
【０１３３】
【化３２】
2006517539.tif 000034
【０１３４】
ｂ）で得た樹脂のＴＨＦ（４ｍｌ）懸濁液に、塩化スズ（II）（Ａｃｒｏｓ社製、０．１４１ｇ、０．７４４ｍｍｏｌ）、チオフェノール（Ｆｌｕｋａ社製、０．３０４ｍｌ、２．９７６ｍｍｏｌ）及びトリメチルアミン（Ｆｌｕｋａ社製、０．３１１ｍｌ、２．２３ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間後、樹脂のアリコートを上記ａ）記載の方法で切断した。ＬＣ−ＭＳ分析（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、５０×４．６０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；１０分間で溶媒Ｂの２０〜８０％濃度勾配；流速１ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）で、上記アミンで予測される１．９分、ｍ／ｚ  ４２２．２（ＭＨ＋）のピークを得た。  
【０１３５】
ｄ）ＰＥＧ−グルタリル−ｃＰｎ２１６単位のカップリング
反応は手動式窒素バブラー装置で実施した。Ｆｍｏｃ−ＰＥＧ−プロピオン酸（Ｐｏｌｙｐｕｒｅ  ＡＳ、７２ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製、３３ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（Ｆｌｕｋａ社製、２９μｌ、０．１７２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（２ｍｌ）をｃ）で得た樹脂（０．０４３ｍｍｏｌ）に添加した。２．５時間後、樹脂から溶液を除き、ＤＭＦで洗浄した。Ｋａｉｓｅｒテストは陰性であった。２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を用いた標準的処理でＦｍｏｃ基を切断した。ＤＭＦ（１．５ｍｌ）中の樹脂に、実施例３ｂ）で得たｃＰｎ２１６−グルタル酸テトラフルオロチオフェニルエステル（５３ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（１５μｌ、０．０８６ｍｍｏｌ）を添加した。反応を一晩実施し、カイザーテストは陰性であった。生成物を樹脂から切断した（ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ／ＴＩＳ、９７．５：５：２．５）。切断した溶液を濃縮し、生成物を調製用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ５μｍ、２１．２×２５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ；６０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後３．８ｍｇの生成物を得た。ＬＣ−ＭＳ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（２）  ３μｍ、２．０×５０ｍｍ、溶媒：Ａ＝水／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ；１０分間で溶媒Ｂの１０〜４０％濃度勾配；流速０．３ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４ｎｍ及び２５４ｎｍ、ＥＳＩ−ＭＳ）による分析で、正しい構造のＭＨ＋に相当する７．２分、ｍ／ｚ  １４６０．６のピークを得た。ＮＭＲ分光法でさらに特性決定を行った。
【０１３６】
一般的な９９ｍＴｃ−標識手順
調製は０．１ｍｇの凍結乾燥ｃＰｎ２１６由来化合物を０．２ｍｌの水（酸素を含まない蒸留水）に溶解して実施する。溶液を１０ｍｌ窒素充填バイアルに移す。０．５ｍｌの炭酸緩衝液、０．５ｍｌのＮａ９９ｍＴｃＯ４溶液及び０．１ｍｌのＳｎ−ＭＤＰを添加する。調製物を室温で２０分間放置する。
【０１３７】
炭酸緩衝液：炭酸緩衝液はｐＨ９．２であり、水１ｍｌ当たりり８．４ｍｇのＮａＨＣＯ３及び、１０．６ｍｇのＮａ２ＣＯ３を含む。使用前に１５分以上窒素ガスでパージする。
【０１３８】
Ｎａ９９ｍＴｃＯ４溶液：テクネチウム生成装置（例えばＩｆｅｔｅｃ  ｇｅｎｅｒａｔｏｒ）の溶出液であり、２ＧＢｑ／ｍｌの放射活性濃度に希釈。酸素を含まない。
【０１３９】
Ｓｎ−ＭＤＰ溶液：溶液は水１ｍｌ当たりり０．１３１ｍｇのＳｎＣｌ２＊２Ｈ２Ｏ及び０．９２５ｍｇのＭＤＰ（メチレンジホスホネート）を含む。溶液は窒素ガスで連続的にパージしながら新鮮なものを使用前に調製する。
【図面の簡単な説明】
【０１４０】
【図１】レニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（ＲＡＡＳ）を示す。
【図１】
2006517539.tif 000037
【国際調査報告】
2006517539.tif 000038
2006517539.tif 000039
2006517539.tif 000040
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