(57)【要約】本発明は、電離放射線と併用してＺＤ６４７４を投与することを含むヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらす方法、特に癌、特に固形腫瘍に関する癌の治療法；及び電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらすのに使用するための医薬品製造におけるＺＤ６４７４の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらす方法であって、前記動物に、有効量の４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（ＺＤ６４７４としても知られる）：
【化１】
2006502132.tif 000006
又はその製薬学的に許容しうる塩を、有効量の電離放射線の前、後又は同時に投与することを含む方法。
【請求項２】
ヒトのような温血動物における癌の治療法であって、前記動物に、有効量のＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩を、有効量の電離放射線の前、後又は同時に投与することを含む方法。
【請求項３】
ヒトのような温血動物における固形腫瘍を含む癌の治療法であって、前記動物に、有効量のＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩を、有効量の電離放射線の前、後又は同時に投与することを含む方法。
【請求項４】
電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらすのに使用するための医薬品の製造における、ＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩の使用。
【請求項５】
電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗癌効果をもたらすのに使用するための医薬品の製造における、ＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩の使用。
【請求項６】
電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗腫瘍効果をもたらすのに使用するための医薬品の製造における、ＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、電離放射線と併用してＺＤ６４７４を投与することを含むヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらす方法、特に癌、特に固形腫瘍に関する癌の治療法；及び電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらすのに使用するための医薬品の製造におけるＺＤ６４７４の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
正常の血管新生は、胚発生、創傷治癒、及びいくつかの女性生殖機能の要素を含む様々なプロセスに重要な役割を果たしている。望まざる又は病的な血管新生は、糖尿病性網膜症、乾癬、癌、リウマチ様関節炎、アテローム、カポジ肉腫及び血管腫などの疾患状態に随伴している（Ｆａｎら、１９９５，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．１６：５７−６６；Ｆｏｌｋｍａｎ，１９９５，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １：２７−３１）。血管透過性の変化は、正常及び病的な生理的プロセスの両方に役割を果たしていると考えられている（Ｃｕｌｌｉｎａｎ−Ｂｏｖｅら、１９９３，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １３３：８２９−８３７；Ｓｅｎｇｅｒら、１９９３，Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，１２：３０３−３２４）。インビトロで内皮細胞増殖促進活性を有するいくつかのポリペプチドが確認されている。例えば、酸性及び塩基性線維芽細胞増殖因子（ａＦＧＦ＆ｂＦＧＦ）及び血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）などである。ＶＥＧＦの増殖因子活性は、その受容体の発現が限られているため、ＦＧＦのそれとは対照的に、比較的内皮細胞に対して特異的である。最近示されたエビデンスによれば、ＶＥＧＦは、正常及び病的血管新生（Ｊａｋｅｍａｎら、１９９３，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１３３：８４８−８５９；Ｋｏｌｃｈら、１９９５，Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，３６：１３９−１５５）と血管透過性（Ｃｏｎｎｏｌｌｙら、１９８９，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４：２００１７−２００２４）の両方の重要な刺激因子である。抗体でＶＥＧＦを隔離してＶＥＧＦの作用を拮抗すると、腫瘍成長を抑制することができる（Ｋｉｍら、１９９３，Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：８４１−８４４）。
【０００３】
受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）は、細胞質膜を通過する生化学シグナルの伝達に重要である。これらの膜貫通分子は、細胞膜内のセグメントを介して接続している細胞外リガンド結合ドメインと細胞内チロシンキナーゼドメインからなることを特徴とする。リガンドが受容体に結合すると、受容体に付随するチロシンキナーゼ活性が刺激され、受容体及びその他の細胞内分子のチロシン残基のリン酸化がもたらされる。チロシンリン酸化におけるこうした変化が様々な細胞応答をもたらすシグナリングカスケードを開始する。
【０００４】
これまで、アミノ酸配列相同性によって定義される少なくとも１９種類の異なるＲＴＫサブファミリーが確認されている。これらのサブファミリーの一つは、現在のところ、ｆｍｓ様チロシンキナーゼ受容体Ｆｌｔ−１、キナーゼ挿入ドメイン含有受容体ＫＤＲ（Ｆｌｋ−１とも言われる）、及び別のｆｍｓ様チロシンキナーゼ受容体Ｆｌｔ−４からなる。これらの関連ＲＴＫのうちの二つ、Ｆｌｔ−１及びＫＤＲは、ＶＥＧＦに高い親和性で結合することが示されている（Ｄｅ  Ｖｒｉｅｓら、１９９２，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５５：９８９−９９１；Ｔｅｒｍａｎら、１９９２，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１９９２，１８７：１５７９−１５８６）。異種細胞に発現されたこれらの受容体へのＶＥＧＦの結合は、細胞タンパク質のチロシンリン酸化の状態及びカルシウム流出入における変化に関連している。
【０００５】
ＶＥＧＦは血管形成及び脈管形成の主たる刺激因子である。このサイトカインは、内皮細胞の増殖、プロテアーゼ発現及び移動（遊走）、続いて細胞の組織化による毛細血管の形成を誘導することによって血管発芽表現型を誘導する（Ｋｅｃｋ，Ｐ．Ｊ．，Ｈａｕｓｅｒ，Ｓ．Ｄ．，Ｋｒｉｖｉ，Ｇ．，Ｓａｎｚｏ，Ｋ．，Ｗａｒｒｅｎ，Ｔ．，Ｆｅｄｅｒ，Ｊ．，及びＣｏｎｎｏｌｌｙ，Ｄ．Ｔ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ（ワシントンＤＣ），２４６：１３０９−１３１２，１９８９；Ｌａｍｏｒｅａｕｘ，Ｗ．Ｊ．，Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ，Ｍ．Ｅ．，Ｒｅｉｎｅｒ，Ａ．，Ｈａｓｔｙ，Ｋ．Ａ．，及びＣｈａｒｌｅｓ，Ｓ．Ｔ．，Ｍｉｃｒｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．，５５：２９−４２，１９９８；Ｐｅｐｐｅｒ，Ｍ．Ｓ．，Ｍｏｎｔｅｓａｎｏ，Ｒ．，Ｍａｎｄｒｏｉｔａ，Ｓ．Ｊ．，Ｏｒｃｉ，Ｌ．及びＶａｓｓａｌｌｉ，Ｊ．Ｄ．，Ｅｎｚｙｍｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ，４９：１３８−１６２，１９９６）。さらにＶＥＧＦは顕著な血管透過性を誘導し（Ｄｖｏｒａｋ，Ｈ．Ｆ．，Ｄｅｔｍａｒ，Ｍ．，Ｃｌａｆｆｅｙ，Ｋ．Ｐ．，Ｎａｇｙ，Ｊ．Ａ．，ｖａｎ  ｄｅ  Ｗａｔｅｒ，Ｌ．，及びＳｅｎｇｅｒ，Ｄ．Ｒ．，Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１０７：２３３−２３５，１９９５；Ｂａｔｅｓ，Ｄ．Ｏ．，Ｈｅａｌｄ，Ｒ．Ｉ．，Ｃｕｒｒｙ，Ｆ．Ｅ．及びＷｉｌｌｉａｍｓ，Ｂ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（Ｌｏｎｄ．），５３３：２６３−２７２，２００１）、病的血管新生の特徴である超透過性の未熟な血管ネットワークの形成を促進する。
【０００６】
ＫＤＲの活性化だけでＶＥＧＦに対する主な表現型的応答の全て、すなわち内皮細胞の増殖、遊走、及び生存、並びに血管透過性の誘導を促進するのに十分であることが示されている（Ｍｅｙｅｒ，Ｍ．，Ｃｌａｕｓｓ，Ｍ．，Ｌｅｐｐｌｅ−Ｗｉｅｎｈｕｅｓ，Ａ．，Ｗａｌｔｅｎｂｅｒｇｅｒ，Ｊ．，Ａｕｇｕｓｔｉｎ，Ｈ．Ｇ．，Ｚｉｃｈｅ，Ｍ．，Ｌａｎｚ，Ｃ．，Ｂｕｔｔｎｅｒ，Ｍ．，Ｒｚｉｈａ，Ｈ−Ｊ．，及びＤｅｈｉｏ，Ｃ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１８：３６３−３７４，１９９９；Ｚｅｎｇ，Ｈ．，Ｓａｎｙａｌ，Ｓ．及びＭｕｋｈｏｐａｄｈｙａｙ，Ｄ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７６：３２７１４−３２７１９，２００１；Ｇｉｌｌｅ，Ｈ．，Ｋｏｗａｌｓｋｉ，Ｊ．，Ｌｉ，Ｂ．，ＬｅＣｏｕｔｅｒ，Ｊ．，Ｍｏｆｆａｔ，Ｂ，Ｚｉｏｎｃｈｅｃｋ，Ｔ．Ｆ．，Ｐｅｌｌｅｔｉｅｒ，Ｎ．及びＦｅｒｒａｒａ，Ｎ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７６：３２２２−３２３０，２００１）。
【０００７】
いくつかのマウス異種移植モデルにおける電離放射線とＶＥＧＦ抗体の使用が報告されている（Ｇｏｒｓｋｉら、１９９９，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５９，３３７４−３３７８及び国際特許出願公開番号ＷＯ００／６１１８６）。
【０００８】
マウス神経膠腫異種移植モデルにおける電離性放射性と可溶性ＶＥＧＦ受容体（可溶性Ｆｌｋ−１）の使用、及び電離放射線とＫＤＲ阻害薬ＳＵ５４１６の使用が報告されている（Ｇｅｎｇら、２００１，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．６１，２４１３−２４１９）。
【０００９】
ＶＥＧＦ受容体型チロシンキナーゼの阻害薬であるキナゾリン誘導体は、国際特許出願公開番号ＷＯ９８／１３３５４及びＷＯ０１／３２６５１に記載されている。ＷＯ９８／１３３５４及びＷＯ０１／３２６５１には、ＶＥＧＦ受容体型チロシンキナーゼに対して活性を有し、その一方でＥＧＦ受容体型チロシンキナーゼに対してもいくらかの活性を有する化合物が記載されている。本発明の化合物ＺＤ６４７４は、ＷＯ９８／１３３５４の広範な一般的開示に包含されるものであり、ＷＯ０１／３２６５１では例示されている。
【００１０】
ＷＯ０１／３２６５１では、本発明の化合物のことを、“単独療法として適用されうる、又は当該発明の化合物に加えて一つ以上のその他の物質及び／又は治療として含まれうる。そのような併用療法は、治療の個々の成分の同時、順次又は分離投与によって達成されうる”と述べている。
【００１１】
ＷＯ０１／３２６５１は、次に、手術、放射線療法及び各種の化学療法薬を含むそのような併用療法の例の記載に進んでいる。ＷＯ０１／３２６５１のどこにも、該発明中に記載されている本発明のいずれかの化合物を他の治療と共に使用することで驚くべき有益な効果が生ずるという記載はない。
【発明の開示】
【００１２】
思いがけず、そして驚くべきことに、我々は今回、ＷＯ０１／３２６５１にリストアップされている併用療法から特別に選んだ療法、すなわち電離放射線と組み合わせて使用する特別の化合物ＺＤ６４７４は、ＺＤ６４７４及び電離放射線のいずれか一つを単独で使用するよりも著しく優れた効果を発揮することを見出した。
【００１３】
本発明の一側面によれば、電離放射線と組み合わせて使用するＺＤ６４７４は、ＺＤ６４７４及び電離放射線のいずれか一つを単独で使用するよりも著しく優れた抗癌効果を発揮する。
【００１４】
本発明の一側面によれば、電離放射線と組み合わせて使用するＺＤ６４７４は、ＺＤ６４７４及び電離放射線のいずれか一つを単独で使用するよりも固形腫瘍に対して著しく優れた効果を発揮する。
【００１５】
本発明の治療法の抗癌効果は、抗腫瘍効果、応答速度、疾患進行までの時間及び生存率などであるが、これらに限定されない。本発明の治療法の抗腫瘍効果は、腫瘍成長の阻害、腫瘍成長の遅延、腫瘍の退行、腫瘍の縮小、治療中止後腫瘍再成長までの時間の増加、疾患進行の緩徐化などであるが、これらに限定されない。本発明の治療法を、固形腫瘍の有無に拘わらず癌の治療を必要としているヒトのような温血動物に投与した場合、前記治療法は、例えば、抗腫瘍効果の程度、応答速度、疾患進行までの時間及び生存率の一つ以上によって測定される効果を生じるであろうと期待される。
【００１６】
本発明に従って、ヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらす方法を提供する。該方法は、前記動物に、有効量の４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（ＺＤ６４７４としても知られる）：
【００１７】
【化１】
2006502132.tif 000002
【００１８】
又はその製薬学的に許容しうる塩を、有効量の電離放射線の前、後又は同時に投与するこ
とを含む。
本発明の更なる側面に従って、ヒトのような温血動物における癌の治療法を提供する。該方法は、前記動物に、有効量のＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩を、有効量の電離放射線の前、後又は同時に投与することを含む。
【００１９】
本発明の更なる側面に従って、ヒトのような温血動物における固形腫瘍に関する癌の治療法を提供する。該方法は、前記動物に、有効量のＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩を、有効量の電離放射線の前、後又は同時に投与することを含む。
【００２０】
本発明の更なる側面に従って、電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗血管新生及び／又は血管透過性減少効果をもたらすのに使用するための医薬品の製造における、ＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩の使用を提供する。
【００２１】
本発明の更なる側面に従って、電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗癌効果をもたらすのに使用するための医薬品の製造における、ＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩の使用を提供する。
【００２２】
本発明の更なる側面に従って、電離放射線で治療されるヒトのような温血動物に抗腫瘍効果をもたらすのに使用するための医薬品の製造における、ＺＤ６４７４又はその製薬学的に許容しうる塩の使用を提供する。
【００２３】
電離放射線で治療されるヒトのような温血動物とは、ＺＤ６４７４を含む医薬品の投与の前、後又は同時に電離放射線で治療されるヒトのような温血動物のことである。例えば、前記電離放射線は、前記ヒトのような温血動物に、ＺＤ６４７４を含む医薬品の投与の１週間前から１週間後の期間内に照射されうる。本発明の一側面によれば、ＺＤ６４７４は、温血動物に、該動物が電離放射線で治療された後に投与される。該温血動物は、ＺＤ６４７４及び電離放射線のそれぞれの効果を同時に経験できる。
【００２４】
前述のように、本明細書中で定義している本発明の併用療法は、抗血管新生及び／又は血管透過性効果があるために興味深い。本発明のそのような併用療法は、癌及びカポジ肉腫を含む不適切な血管新生が発生する様々な疾患状態の予防及び治療に有用であると期待される。癌はあらゆる組織を冒すことができ、白血病、多発性骨髄腫及びリンパ腫も含む。特に本発明のそのような併用療法は、例えば、結腸、乳房、前立腺、肺及び皮膚の原発性及び再発性の固形腫瘍の成長を都合よく緩徐化すると期待される。とりわけ本発明の併用療法は、肺癌、特に非小細胞性肺癌（ＮＳＣＬＣ）の腫瘍の成長を都合よく緩徐化すると期待される。殊に本発明のそのような併用療法は、ＶＥＧＦが関係する任意の形態の癌（白血病、多発性骨髄腫及びリンパ腫を含む）を抑制し、また、例えば、ＶＥＧＦが関係する原発性及び再発性の固形腫瘍、特にそれらの成長及び拡散がＶＥＧＦに著しく依存している腫瘍、例えば結腸、乳房、前立腺、肺、外陰及び皮膚のある種の腫瘍、特にＮＳＣＬＣの成長を抑制すると期待される。
【００２５】
本発明の別の側面において、ＺＤ６４７４及び電離放射線は、ＥＧＦが関係する原発性及び再発性の固形腫瘍、特にそれらの成長及び拡散がＥＧＦに著しく依存している腫瘍の成長を抑制すると期待される。
【００２６】
本発明の別の側面において、ＺＤ６４７４及び電離放射線は、ＶＥＧＦ及びＥＧＦの両方が関係する原発性及び再発性の固形腫瘍、特にそれらの成長及び拡散がＶＥＧＦ及びＥＧＦに著しく依存している腫瘍の成長を抑制すると期待される。
【００２７】
本発明の別の側面によれば、本発明の治療法の効果は、前記治療の各成分を単独で使用
した場合、すなわちＺＤ６４７４及び電離放射線のそれぞれを単独で使用した場合の効果の和に少なくとも等しいと期待される。
【００２８】
本発明の別の側面によれば、本発明の治療法の効果は、前記治療の各成分を単独で使用した場合、すなわちＺＤ６４７４及び電離放射線のそれぞれを単独で使用した場合の効果の和よりも大きいと期待される。
【００２９】
本発明の別の側面によれば、本発明の治療法の効果は相乗効果であると期待される。
本発明によれば、併用療法は、例えば応答の程度、応答速度、疾患進行までの時間又は生存期間で測定した効果が、併用療法の成分の一方又は他方をその従来的用量で投与した場合に達成可能な効果に治療的に優る場合に、相乗効果をもたらすと定義されることは理解されるべきである。例えば、併用療法の効果は、その効果が、ＺＤ６４７４又は電離放射線単独で達成可能な効果に治療的に優る場合、相乗的である。さらに、併用療法の効果は、ＺＤ６４７４又は電離放射線単独には応答しない（又は応答不良である）患者群において有益な効果が得られる場合、相乗的である。さらに、併用療法の効果は、一方の成分が従来的用量で投与され、他方の成分が削減された用量で投与された場合、その治療効果が、例えば応答の程度、応答速度、疾患進行までの時間又は生存期間による測定で、併用療法の成分を従来量で投与した場合に達成可能な効果と等しければ、相乗効果をもたらすと定義される。特に、応答の程度、応答速度、疾患進行までの時間及び生存データの一つ以上を損なわずにＺＤ６４７４又は電離放射線の従来量を削減できれば、特に応答期間を損なわず、従来量の各成分を使用した場合に発生する厄介な副作用が量的及び／又は質的に少なければ、相乗作用があるとみなされる。
【００３０】
本明細書中で定義した本発明の併用療法は、前記治療の個々の成分を同時、順次又分離投与することによって達成できる。本明細書中で定義した併用療法は、単独療法として適用しても、本発明の併用療法に加えて手術を伴ってもよい。手術は、本明細書中に記載のＺＤ６４７４を用いる併用療法の前、中又は後に、部分的又は完全な腫瘍切除のステップを含みうる。
【００３１】
本明細書中に記載の組成物は、例えば錠剤又はカプセルとして経口投与用に、例えば粉末又は溶液として経鼻投与又は吸入投与用に、例えば無菌溶液、懸濁液又はエマルジョンとして非経口注射（静脈内、皮下、筋肉内、血管内又は注入を含む）用に、例えば軟膏又はクリームとして局所投与用に、例えば坐剤として直腸投与用に適切な形態であり得る。又は投与経路は、腫瘍への直接注射又は区域送達もしくは局所送達によるものであってもよい。本発明の他の態様において、併用療法のＺＤ６４７４は、内視鏡的、気管内、病巣内、経皮、静脈内、皮下、腹腔内又は腫瘍内に送達してもよい。好ましくはＺＤ６４７４は経口投与される。一般的に、本明細書中に記載の組成物は、従来の賦形剤を用いて従来の様式で製造できる。本発明の組成物は都合よく単位剤形で提供される。
【００３２】
ＺＤ６４７４は通常、温血動物に、動物の体表面積１平方メートル当たり１０〜５００ｍｇの範囲内、例えばヒトでは約０．３〜１５ｍｇ／ｋｇの単位用量で投与される。例えば、０．３〜１５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．５〜５ｍｇ／ｋｇの範囲の単位用量を想定しており、これが通常治療上有効な量である。錠剤又はカプセルのような単位剤形は、通常、例えば２５〜５００ｍｇの活性成分を含有することになる。好ましくは、０．５〜５ｍｇ／ｋｇの範囲の日用量が使用される。
【００３３】
本発明の特別の態様において、使用される電離放射線は、Ｘ線、γ線又はβ線であり得る。
電離放射線の線量は、臨床放射線療法での使用に適切な公知の量となろう。使用される放射線療法は、例えばγ線、Ｘ線、及び／又は放射性同位体からの放射線の定方向送達の
使用などであろう。その他の形態のＤＮＡ損傷因子、例えばマイクロ波及びＵＶ照射も本発明に包含される。これらの因子はいずれも、ＤＮＡに対して、ＤＮＡの前駆体に対して、ＤＮＡの複製及び修復に対して、及び染色体の集合及び維持に対して広範な損傷を及ぼすとみられる。例えば、Ｘ線は、１日量１．８〜２．０Ｇｙを週５日、５〜６週間照射されうる。通常、総分割線量は４５〜６０Ｇｙの範囲に入るであろう。１回の高線量、例えば５〜１０Ｇｙを放射線療法のコースの一環として照射することもある。１回量を術中に照射することもある。多分割放射線療法を使用することもある。その場合、低線量のＸ線を規則的にある期間、例えば１時間当たり０．１Ｇｙを数日間照射する。放射性同位体の線量範囲は様々で、同位体の半減期、放出される放射線の強度及び種類、そして細胞による取込みに左右される。
【００３４】
前述のように、特定の疾患状態の治療的又は予防的治療に必要な各療法の用量の規模は、治療される宿主、投与経路、治療される疾患の重症度によって必然的に変動するであろう。従って、最適な用量は、任意の特定の患者を治療する医師が決定できる。例えば、毒性を削減するために併用療法の成分の上記用量を削減するのが必要又は望ましい場合もある。
【００３５】
本発明は、電離放射線とＺＤ６４７４又はＺＤ６４７４の塩との組合せに関する。
医薬組成物に使用される塩は、製薬学的に許容しうる塩であろうが、ＺＤ６４７４及びその製薬学的に許容しうる塩の製造に他の塩が有用なこともある。そのような塩は、製薬学的に許容しうるカチオンを提供できる無機又は有機塩基を用いて形成できる。無機又は有機塩基とのそのような塩は、例えば、ナトリウム又はカリウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウム又はマグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、又はメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリンもしくはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンとの塩などである。
【００３６】
ＺＤ６４７４は、例えば、実施例（ａ）〜（ｃ）によって示した以下の製造方法のいずれかに従って製造できる。製造方法中、別途記載のない限り、
（ｉ）蒸発は、真空下、回転蒸発により実施し、後処理は乾燥剤のような残留固体をろ過除去した後に実施した；
（ii）操作は、周囲温度すなわち１８〜２５℃の範囲、及びアルゴンのような不活性ガスの雰囲気下で実施した；
（iii）カラムクロマトグラフィー（フラッシュ法）及び中圧液体クロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）は、ドイツ、ダルムシュタットのＥ．Ｍｅｒｃｋより入手した、Ｍｅｒｃｋ
Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌシリカ（Ａｒｔ．９３８５）又はＭｅｒｃｋ  Ｌｉｃｈｒｏｐｒｅｐ  ＲＰ−１８（Ａｒｔ．９３０３）逆相シリカで実施した；
（iv）収率（収量）は例示のためだけに提供したものであって、必ずしも達成可能な最大値ではない；
（ｖ）融点は補正せず、Ｍｅｔｔｌｅｒ  ＳＰ６２自動融点装置、油浴装置又はＫｏｆｆｌｅｒホットプレート装置を用いて測定した；
（vi）式Ｉの最終生成物の構造は、核（一般的にプロトン）磁気共鳴（ＮＭＲ）及び質量スペクトル技術によって確認した；プロトン磁気共鳴の化学シフト値はデルタスケールで測定し、ピークの多重度は以下に示すとおりである：ｓ、一重線；ｄ、二重線；ｔ、三重線；ｍ、多重線；ｂｒ、ブロード；ｑ、四重線；ＮＭＲスペクトルは４００ＭＨｚ装置、２４℃で実施した；
（vii）中間体は一般的に十分に特性分析せず、純度は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、赤外線（ＩＲ）又はＮＭＲ分析によって評価した；
（viii）以下の略号を使用した：
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド；
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン；
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸；
ＮＭＰ  １−メチル−２−ピロリジノン。
【００３７】
製造方法（ａ）
３７％ホルムアルデヒド水溶液（５０μｌ、０．６ｍｍｏｌ）、次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を、４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（ピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（１３９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／メタノール（１．４ｍｌ／１．４ｍｌ）混合物中溶液に加えた。周囲温度で１時間撹拌後、水を加え、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水で粉砕し、ろ過、水洗して真空下で乾燥させた。固体を、中性アルミナ上クロマトグラフィーで、塩化メチレン、次いで塩化メチレン／酢酸エチル（１／１）、次いで塩化メチレン／酢酸エチル／メタノール（５０／４５／５）で溶離して精製した。期待生成物を含有する画分を真空下で蒸発させた。得られた白色固体を塩化メチレン／メタノール（３ｍｌ／３ｍｌ）に溶解し、エーテル中３Ｎ塩化水素（０．５ｍｌ）を加えた。揮発性物質を真空下で除去した。固体をエーテルで粉砕し、ろ過し、エーテルで洗浄して真空下で乾燥させて４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン塩酸塩（１２０ｍｇ、６９％）を得た。
MS-ESI:475〜477[MH]+
【００３８】
プロトン化形の４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン塩酸塩のＮＭＲスペクトルは、Ａ及びＢの２形態がＡ：Ｂ＝約９：１の比率で存在することを示している。
【００３９】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6; CF3COOD) 1.55-1.7 (m, A形 2H) ; 1.85-2.0 (m, B形 4H) ; 2.03 (d, A形 2H) ; 2.08-2.14 (br s, A形 1H) ; 2.31-2.38 (br s, B形 1H) ; 2.79 (s, A形 3H) ; 2.82 (s, B形 3H) ; 3.03 (t, A形 2H) ; 3.21 (br s, B形 2H) ; 3.30 (br s, B形 2H) ; 3.52 (d, A形 2H) ; 4.02 (s, 3H) ; 4.12 (d, A形 2H) ; 4.30 (d, B形 2H) ; 7.41 (s, 1H) ; 7.5-7.65 (m, 2H) ; 7.81 (d, 1H) ; 8.20 (s, 1H) ; 8.88 (s, 1H)
元素分析:  実測値  C 46.0  H 5.2  N 9.6；
C22H24N4O2BrF 0.3H2O 2.65HCl  理論値  C 45.8  H 4.8  N 9.7%
出発物質は以下のように製造した。
【００４０】
７−ベンジルオキシ−４−クロロ−６−メトキシキナゾリン塩酸塩（８．３５ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）（例えば、ＷＯ９７／２２５９６の実施例１に記載のようにして製造）、及び４−ブロモ−２−フルオロアニリン（５．６５ｇ、２９．７ｍｍｏｌ）の２−プロパノール（２００ｍｌ）中溶液を４時間加熱還流した。得られた沈殿物をろ過により回収し、２−プロパノール、次いでエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて７−ベンジルオキシ−４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシキナゾリン塩酸塩（９．４６ｇ、７８％）を得た。
【００４１】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6; CD3COOD) 4.0(s, 3H); 5.37(s, 2H); 7.35-7.5(m, 4H); 7.52-7.62(m, 4H); 7.8(d, 1H); 8.14(9s, 1H); 8.79(s, 1H)；
MS - ESI: 456 [MH]+ ；
元素分析:  実測値  C 54.0  H 3.7  N 8.7；
C22H17N3O2BrF 0.9HCl  理論値  C 54.2  H 3.7  N 8.6%
【００４２】
７−ベンジルオキシ−４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシキナ
ゾリン塩酸塩（９．４ｇ、１９．１ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（９０ｍｌ）中溶液を５０分間加熱還流した。該混合物を冷却させてから氷上に注いだ。得られた沈殿物をろ過により回収し、メタノール（７０ｍｌ）に溶解した。該溶液を濃アンモニア水溶液でｐＨ９〜１０に調整した。該混合物を蒸発により初期容積の半分に濃縮した。。得られた沈殿物をろ過により回収し、水、次いでエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−７−ヒドロキシ−６−メトキシキナゾリン（５．６６ｇ、８２％）を得た。
【００４３】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6; CD3COOD) 3.95(s, 3H); 7.09(s, 1H); 7.48(s, 1H); 7.54(t, 1H); 7.64(d, 1H); 7.79(s, 1H); 8.31(s, 1H)
MS - ESI: 366 [MH]+ ；
元素分析:  実測値  C 49.5   H 3.1       N 11.3；
C15H11N3O2BrF  理論値  C 49.5    H 3.0  N 11.5%
【００４４】
温度を０〜５℃の範囲に維持している間、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（４１．７ｇ、０．１９ｍｏｌ）の酢酸エチル（７５ｍｌ）中溶液を、５℃に冷却したエチル４−ピペリジンカルボキシレート（３０ｇ、０．１９ｍｏｌ）の酢酸エチル（１５０ｍｌ）中溶液に少しずつ加えた。周囲温度で４８時間撹拌後、該混合物を水（３００ｍｌ）に注いだ。有機層を分離し、水（２００ｍｌ）、０．１Ｎ塩酸水溶液（２００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２００ｍｌ）及び食塩水（２００ｍｌ）で順に洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び蒸発させてエチル４−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン）カルボキシレート（４８ｇ、９８％）を得た。
【００４５】
1H NMRスペクトル: (CDCl3) 1.25(t, 3H); 1.45(s, 9H); 1.55-1.70(m, 2H); 1.8-2.0(d,
2H); 2.35-2.5(m, 1H); 2.7-2.95(t, 2H); 3.9-4.1(br s, 2H); 4.15 (q, 2H)
１Ｍの水素化アルミニウムリチウムのＴＨＦ中溶液（１３３ｍｌ、０．１３３ｍｏｌ）を、０℃に冷却したエチル４−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン）カルボキシレート（４８ｇ、０．１９ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１８０ｍｌ）中溶液に少しずつ加えた。０℃で２時間撹拌後、水（３０ｍｌ）、次いで２Ｎ水酸化ナトリウム（１０ｍｌ）を加えた。沈殿物を、珪藻土を通してろ過除去し、酢酸エチルで洗浄した。ろ液を水、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び蒸発させて１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシメチルピペリジン（３６．３ｇ、８９％）を得た。
【００４６】
MS (EI): 215 [M.]+；
1H NMRスペクトル: (CDCl3) 1.05-1.2(m, 2H); 1.35-1.55(m, 10H); 1.6-1.8(m, 2H); 2.6-2.8(t, 2H); 3.4-3.6(t, 2H); 4.0-4.2(br s, 2H)
【００４７】
１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（４２．４ｇ、０．３７８ｍｏｌ）を、１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシメチルピペリジン（５２．５ｇ、０．２４４ｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（５２５ｍｌ）中溶液に加えた。周囲温度で１５分間撹拌後、該混合物を５℃に冷却し、トルエンスルホニルクロリド（６２．８ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（５２５ｍｌ）中溶液を２時間かけて、温度を０℃に維持しながら少しずつ加えた。周囲温度で１時間撹拌後、石油エーテル（１リットル）を加えた。沈殿物をろ過により除去した。ろ液を蒸発させて固体を得た。該固体をエーテルに溶解し、０．５Ｎ塩酸水溶液（２×５００ｍｌ）、水、飽和炭酸水素ナトリウム及び食塩水で順に洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び蒸発させて１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（４−メチルフェニルスルホニルオキシメチル）ピペリジン（７６．７ｇ、８５％）を得た。
【００４８】
MS (ESI): 392 [MNa]+；
1H NMRスペクトル: (CDCl3) 1.0-1.2(m, 2H); 1.45(s, 9H); 1.65(d, 2H); 1.75-1.9(m, 2H); 2.45(s, 3H); 2.55-2.75(m, 2H); 3.85(d, 1H); 4.0-4.2(br s, 2H); 7.35(d, 2H);
7.8(d, 2H)
【００４９】
炭酸カリウム（４１４ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を、４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−７−ヒドロキシ−６−メトキシキナゾリン（５４６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）中懸濁液に加えた。周囲温度で１０分間撹拌後、１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（４−メチルフェニルスルホニルオキシメチル）ピペリジン（６３６ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）を加え、該混合物を９５℃で２時間加熱した。冷却後、該混合物を冷却した水（２０ｍｌ）に注いだ。沈殿物をろ過により回収し、水洗し、真空下で乾燥させて４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−７−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルメトキシ）−６−メトキシキナゾリン（６６５ｍｇ、７９％）を得た。
【００５０】
MS - ESI: 561-563 [MH]+；
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.15-1.3 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.8 (d, 2H), 2.0-2.1 (m, 1H), 2.65-2.9 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 4.02 (br s, 2H), 4.05 (d, 2H), 7.2 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.55 (t, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.8 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 9.55 (br s, 1H)
【００５１】
ＴＦＡ（３ｍｌ）を、４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−７−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルメトキシ）−６−メトキシキナゾリン（６７３ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍｌ）中懸濁液に加えた。周囲温度で１時間撹拌後、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水／エーテルの混合物で粉砕した。有機層を分離した。水性層を再度エーテルで洗浄した。水性層を２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１０に調整した。水性層を塩化メチレンで抽出した。有機層を、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を真空下で除去した。固体をエーテル／石油エーテル（１／１）混合物で粉砕し、ろ過し、エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（ピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（３９０ｍｇ、７０．５％）を得た。
【００５２】
MS - ESI: 461-463 [MH]+；
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.13-1.3 (m, 2H), 1.75 (d, 2H), 1.87-2.0 (m, 1H), 2.5
(d, 2H), 3.0 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.98 (d, 2H), 7.2 (s, 1H), 7.5 (dd, 1H), 7.55 (t, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.80 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 9.55 (br s, 1H)
元素分析:  実測値  C 54.5  H 4.9  N 12.1；
C21H22N4O2BrF  理論値  C 54.7  H 4.8  N 12.1%
；
【００５３】
製造方法（ｂ）
３７％ホルムアルデヒド水溶液（３．５ｍｌ、４２ｍｍｏｌ）を、４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−７−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルメトキシ）−６−メトキシキナゾリン（３．４９ｇ、６．２２ｍｍｏｌ）（上記製造方法（ａ）での出発物質に関する記載通りに製造）のギ酸（３５ｍｌ）中溶液に加えた。９５℃で４時間加熱後、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水中に懸濁させ、該混合物を２Ｎ水酸化ナトリウム溶液をゆっくり加えることによってｐＨ１０．５に調整した。該懸濁液を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、乾燥ＭｇＳＯ４及び蒸発させて４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（２．６１ｇ、８８％）を得た。
【００５４】
MS - ESI: 475-477 [MH]+；
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.3-1.45 (m, 2H), 1.8 (d, 2H), 1.7-1.9 (m, 1H), 1.95 (t, 2H), 2.2 (s, 3H), 2.85 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.05 (d, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.5 (d, 1H), 7.55 (t, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.81 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 9.54 (s, 1H)；
元素分析:  実測値  C 55.4  H 5.1  N 11.6；
C22H24N4O2BrF  理論値  C 55.6  H 5.1  N 11.8%
【００５５】
製造方法（ｃ）
４−クロロ−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（２００ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）及び４−ブロモ−２−フルオロアニリン（１４２ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（３ｍｌ）（イソプロパノール中６Ｎ塩化水素（１１０μｌ、０．６８ｍｌ）を含有する）中懸濁液を１．５時間加熱還流した。冷却後、沈殿物をろ過により回収し、イソプロパノール、次いでエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン塩酸塩（３０４ｍｇ、９０％）を得た。
【００５６】
元素分析:  実測値  C 47.9  H 4.9  N 10.0；
C22H24N4O2BrF 0.5H2O 1.8HCl  理論値  C 48.2  H 5.0  N 10.1%；
0.08 イソプロパノール
【００５７】
プロトン化形の４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン塩酸塩のＮＭＲスペクトルは、Ａ及びＢの２形態がＡ：Ｂ＝約９：１の比率で存在することを示している。
【００５８】
1H NMR スペクトル: (DMSOd6) 1.6-1.78 (m, A形 2H); 1.81-1.93 (br s, B形 4H); 1.94-2.07 (d, A形 2H); 2.08-2.23 (br s, A形 1H); 2.29-2.37 (br s, B形 1H); 2.73 (d, A形 3H); 2.77 (d, B形 3H); 2.93-3.10 (q, A形 2H); 3.21 (br s, B形 2H); 3.27 (br s, B形 2H); 3.42-3.48 (d, A形 2H); 4.04 (s, 3H); 4.10 (d, A形 2H); 4.29 (d, B形 2H); 7.49 (s, 1H) ; 7.53-7.61 (m, 2H); 7.78 (d, 1H); 8.47 (s, 1H); 8.81 (s, 1H);
10.48 (br s, A形 1H); 10.79 (br s, B形 1H); 11.90 (br s, 1H)
【００５９】
別のＮＭＲ読み取りのために、いくらかの固体炭酸カリウムを上記４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン塩酸塩のＤＭＳＯ溶液に加え、遊離塩基をＮＭＲ管に放出させた。その後、ＮＭＲスペクトルを再度記録したところ、下記のように一つの形態しか示さなかった。
【００６０】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6; 固体炭酸カリウム) 1.3-1.45 (m, 2H) ; 1.75 (d, 2H) ; 1.7-1.9(m, 1H) ; 1.89 (t, 2H) ; 2.18 (s, 3H) ; 2.8 (d, 2H) ; 3.98 (s, 3H) ; 4.0 (d, 2H) ; 7.2 (s, 1H) ; 7.48 (d, 1H) ; 7.55 (t, 1H) ; 7.68 (d, 1H) ; 7.8 (s, 1H) ; 8.35 (s, 1H) ; 9.75 (s, 1H)
【００６１】
４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（遊離塩基）のサンプルは、４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン塩酸塩（上記のようにして製造）から、以下のようにして製造した。
【００６２】
４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン塩酸塩（５０ｍｇ）を塩化メチレン（２ｍｌ）中に懸濁させ、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。該塩化メチレン溶液を乾燥させ（ＭｇＳ
Ｏ４）、揮発性物質を蒸発によって除去して４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（遊離塩基）を得た。このようにして製造した遊離塩基のＮＭＲは、下記のように一つの形態しか示さない。
【００６３】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.3-1.45 (m, 2H) ; 1.76 (d, 2H) ; 1.7-1.9(m, 1H) ; 1.9 (t, 2H) ; 2.19 (s, 3H) ; 2.8 (d, 2H) ; 3.95 (s, 3H) ; 4.02 (d, 2H) ; 7.2 (s, 1H) ; 7.48 (d, 1H) ; 7.55 (t, 1H) ; 7.68 (dd, 1H) ; 7.8 (s, 1H) ; 8.38 (s, 1H) ; 9.55(br s, 1H)
【００６４】
別のＮＭＲ読み取りのために、いくらかのＣＦ３ＣＯＯＤを上記４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（遊離塩基）のＮＭＲ  ＤＭＳＯ溶液に加え、ＮＭＲスペクトルを再度記録した。このようにして得られたプロトン化形の４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリントリフルオロ酢酸塩のスペクトルは、Ａ及びＢの２形態がＡ：Ｂ＝約９：１の比率で存在することを示している。
【００６５】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6; CF3COOD) 1.5-1.7 (m, A形 2H); 1.93 (br s, B形 4H); 2.0-2.1 (d, A形 2H); 2.17 (br s, A形 1H); 2.35 (br s, B形1H); 2.71 (s, A形 3H); 2.73 (s, B形 3H); 2.97-3.09 (t, A形 2H); 3.23 (br s, B形 2H); 3.34 (br s, B形 2H);
3.47-3.57 (d, A形 2H); 4.02 (s, 3H); 4.15 (d, A形 2H); 4.30 (d, B形 2H); 7.2 (s, 1H); 7.3-7.5 (m, 2H); 7.6 (d, 1H); 7.9 (s, 1H); 8.7 (s, 1H)
【００６６】
出発物質は以下のように製造した。
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（４−メチルフェニルスルホニルオキシメチル）ピペリジン（４０ｇ、０．１１ｍｏｌ）（上記製造方法（ａ）での出発物質に関する記載通りに製造）を、エチル４−ヒドロキシ−３−メトキシベンゾエート（１９．６ｇ、０．１ｍｏｌ）及び炭酸カリウム（２８ｇ、０．２ｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２００ｍｌ）中溶液に加えた。９５℃で２．５時間撹拌後、該混合物を周囲温度に冷却し、水と酢酸エチル／エーテルとの間で分配させた。有機層を水、食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）及び蒸発させた。得られた油を石油エーテルから結晶化し、懸濁液を５℃で一晩貯蔵した。固体をろ過により回収し、石油エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させてエチル４−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルメトキシ）−３−メトキシベンゾエート（３５ｇ、８９％）を得た。
【００６７】
m.p. 81-83°C；
MS (ESI): 416 [MNa]+ ；
1H NMRスペクトル: (CDCl3) 1.2-1.35(m, 2H); 1.4(t, 3H); 1.48(s, 9H); 1.8-1.9(d, 2H); 2.0-2.15(m, 2H); 2.75(t, 2H); 3.9(d, 2H); 3.95(s, 3H); 4.05-4.25(br s, 2H); 4.35(q, 2H); 6.85(d, 1H); 7.55(s, 1H); 7.65(d, 1H)；
元素分析:  実測値  C 63.4  H 8.0  N 3.5；
C21H31NO60.3H2O  理論値  C 63.2  H 8.0  N 3.5%
【００６８】
ホルムアルデヒド（１２Ｍ、水中３７％、３５ｍｌ、４２０ｍｍｏｌ）を、エチル４−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルメトキシ）−３−メトキシベンゾエート（３５ｇ、８９ｍｍｏｌ）のギ酸（３５ｍｌ）中溶液に加えた。９５℃で３時間撹拌後、揮発性物質を蒸発により除去した。残渣を塩化メチレンに溶解し、エーテル中３Ｍ塩化水素（４０ｍｌ、１２０ｍｍｏｌ）を加えた。エーテルで希釈後、該混合物を固体が形成されるまで粉砕した。該固体をろ過により回収し、エーテルで洗浄し、真空
下で一晩５０℃で乾燥させてエチル３−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）ベンゾエート（３０．６ｇ、定量）を得た。
【００６９】
MS (ESI): 308 [MH]+ ；
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.29(t, 3H); 1.5-1.7(m, 2H); 1.95(d, 2H); 2.0-2.15(br
s, 1H); 2.72(s, 3H); 2.9-3.1(m, 2H); 3.35-3.5(br s, 2H); 3.85(s, 3H); 3.9-4.05(br s, 2H); 4.3(q, 2H); 7.1(d, 1H); 7.48(s, 1H); 7.6(d, 1H)
【００７０】
エチル３−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）ベンゾエート（３０．６ｇ、８９ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（７５ｍｌ）中溶液を０〜５℃に冷却した。ＴＦＡ（３７．５ｍｌ）を加え、続いて１５分かけて２４Ｎ発煙硝酸（７．４２ｍｌ、１７８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１５ｍｌ）中溶液を滴下添加した。添加完了後、該溶液を温まらせ、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を真空下で除去し、残渣を塩化メチレン（５０ｍｌ）に溶解した。該溶液を０〜５℃に冷却し、エーテルを加えた。沈殿物をろ過により回収し、真空下５０℃で乾燥させた。固体を塩化メチレン（５００ｍｌ）に溶解し、エーテル中３Ｍ塩化水素（３０ｍｌ）を加え、次いでエーテル（５００ｍｌ）を加えた。固体をろ過により回収し、真空下５０℃で乾燥させてエチル３−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−６−ニトロベンゾエート（２８．４ｇ、８２％）を得た。
【００７１】
MS (ESI): 353 [MH]+ ；
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.3(t, 3H); 1.45-1.65(m, 2H); 1.75-2.1(m, 3H); 2.75(s, 3H); 2.9-3.05(m, 2H); 3.4-3.5(d, 2H); 3.95(s, 3H); 4.05(d, 2H); 4.3(q, 2H); 7.32(s, 1H); 7.66(s, 1H)
【００７２】
活性炭素（５０％ｗｅｔ）上１０％白金（３８９ｍｇ）を含有するメタノール（８０ｍｌ）中のエチル３−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−６−ニトロベンゾエート（３．８９ｇ、１０ｍｍｏｌ）懸濁液を、１．８気圧で水素の取込みが止むまで水素化した。該混合物をろ過し、ろ液を蒸発させた。残渣を水（３０ｍｌ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ１０に調整した。該混合物を酢酸エチル／エーテル（１／１）で希釈し、有機層を分離した。水性層はさらに酢酸エチル／エーテルで抽出し、有機層を合わせた。該有機層を水、食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過及び蒸発させた。得られた固体をエーテル／石油エーテルの混合物で粉砕し、ろ過し、石油エーテルで洗浄し、真空下６０℃で乾燥させてエチル６−アミノ−３−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）ベンゾエート（２．５８ｇ、８０％）を得た。
【００７３】
m.p. 111-112°C；
MS (ESI): 323 [MH]+ ；
1H NMRスペクトル: (CDCl3) 1.35(t, 3H); 1.4-1.5(m, 2H); 1.85(m, 3H); 1.95(t, 2H);
2.29(s, 3H); 2.9(d, 2H); 3.8(s, 3H); 3.85(d, 2H); 4.3(q, 2H); 5.55(br s, 2H); 6.13(s, 1H); 7.33(s, 1H)
元素分析:  実測値  C 62.8  H 8.5  N 8.3；
C17H26N2O40.2H2O     理論値  C 62.6  H 8.2  N 8.6%
【００７４】
酢酸ホルムアミジン（５．２ｇ、５０ｍｍｏｌ）を含有する２−メトキシエタノール（１６０ｍｌ）中のエチル６−アミノ−３−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）ベンゾエート（１６．１ｇ、５０ｍｍｏｌ）溶液を１１５℃で２時間加熱した。酢酸ホルムアミジン（１０．４ｇ、１００ｍｍｏｌ）を４時間にわたって３０分毎に少しずつ加えた。最後の添加後、加熱を３０分間延長した。冷却後、揮発性物質を真空
下で除去した。固体をエタノール（１００ｍｌ）及び塩化メチレン（５０ｍｌ）に溶解した。沈殿物をろ過により除去し、ろ液を濃縮して最終体積１００ｍｌとした。懸濁液を５℃に冷却し、固体をろ過により回収し、冷エタノール、次いでエーテルで洗浄し、真空下６０℃で一晩乾燥させて６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（１２．７ｇ、７０％）を得た。
【００７５】
MS (ESI): 304 [MH]+
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.25-1.4(m, 2H); 1.75(d, 2H); 1.9(t, 1H); 1.9(s, 3H);
2.16(s, 2H); 2.8(d, 2H); 3.9(s, 3H); 4.0(d, 2H); 7.11(s, 1H); 7.44(s, 1H); 7.97(s, 1H)
【００７６】
ＤＭＦ（２８０μｌ）を含有する塩化チオニル（２８ｍｌ）中の６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（２．８ｇ、９．２４ｍｍｏｌ）溶液を８５℃で１時間加熱還流した。冷却後、揮発性物質を蒸発により除去した。沈殿物をエーテルで粉砕し、ろ過し、エーテルで洗浄して真空下で乾燥させた。固体を塩化メチレンに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。有機層を分離し、水、食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させて４−クロロ−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（２．９ｇ、９８％）を得た。
【００７７】
MS (ESI): 322 [MH]+ ;
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.3-1.5(m, 2H); 1.75-1.9(m, 3H); 2.0(t, 1H); 2.25(s, 3H); 2.85(d, 2H); 4.02(s, 3H); 4.12(d, 2H); 7.41(s, 1H); 7.46(s, 1H); 8.9(s, 1H)
【００７８】
あるいは、６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オンは、以下のように製造することもできる。
水素化ナトリウム（鉱油中６０％懸濁物１．４４ｇ、３６ｍｍｏｌ）を、７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（８．４６ｇ、３０ｍｍｏｌ）（例えばＷＯ９７／２２５９６の実施例１に記載のようにして製造）のＤＭＦ（７０ｍｌ）中溶液に２０分間かけて少しずつ加え、該混合物を１．５時間撹拌した。ピバル酸クロロメチル（５．６５ｇ、３７．５ｍｍｏｌ）を分割して加え、該混合物を周囲温度で２時間撹拌した。該混合物を酢酸エチル（１００ｍｌ）で希釈し、氷／水（４００ｍｌ）及び２Ｎ塩酸（４ｍｌ）に注いだ。有機層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出し、合わせた抽出物を食塩水で洗浄、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発により除去した。残渣をエーテルと石油エーテルの混合物で粉砕し、固体をろ過により回収し、真空下で乾燥させて７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（１０ｇ、８４％）を得た。
【００７９】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.11(s, 9H); 3.89(s, 3H); 5.3(s, 2H); 5.9(s, 2H); 7.27(s, 1H); 7.35(m, 1H); 7.47(t, 2H); 7.49(d, 2H); 7.51(s, 1H); 8.34(s, 1H)
【００８０】
７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（７ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム担持木炭触媒（７００ｍｇ）の、酢酸エチル（２５０ｍｌ）、ＤＭＦ（５０ｍｌ）、メタノール（５０ｍｌ）及び酢酸（０．７ｍｌ）中混合物を、水素下、大気圧で４０分間撹拌した。触媒をろ過により除去し、溶媒をろ液から蒸発により除去した。残渣をエーテルで粉砕し、ろ過により回収し、真空下で乾燥させて７−ヒドロキシ−６−メトキシ−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（４．３６ｇ、８０％）を得た。
【００８１】
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.1(s, 9H); 3.89(s, 3H); 5.89(s, 2H); 7.0(s, 1H); 7.48(s, 1H); 8.5(s, 1H)
【００８２】
トリフェニルホスフィン（１．７ｇ、６．５ｍｍｏｌ）を窒素下で７−ヒドロキシ−６−メトキシ−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（１．５３ｇ、５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２０ｍｌ）中懸濁液に加え、次いで１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（ヒドロキシメチル）ピペリジン（１．２９ｇ、６ｍｍｏｌ）（上記製造方法（ａ）での出発物質に関する記載通りに製造）、そしてジエチルアゾジカルボキシレート（１．１３ｇ、６．５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍｌ）中溶液を加えた。周囲温度で３０分間撹拌後、反応混合物をシリカのカラムに注ぎ、酢酸エチル／石油エーテル（１／１から６／５、６／４及び７／３）で溶離した。期待生成物を含有する画分の蒸発により油が得られた。これをペンタンでの粉砕後結晶化した。該固体をろ過により回収し、真空下で乾燥させて７−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルメトキシ）−６−メトキシ−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（２３２ｇ、９２％）を得た。
【００８３】
MS - ESI: 526 [MNa]+；
1H NMRスペクトル: (CDCl3) 1.20 (s, 9H), 1.2-1.35 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.87 (d,
2H), 2.05-2.2 (m, 1H), 2.75 (t, 2H), 3.96 (d, 2H), 3.97 (s, 3H), 4.1-4.25 (br s, 2H), 5.95 (s, 2H), 7.07 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 8.17 (s, 1H)
元素分析:  実測値  C 61.8  H 7.5  N 8.3；
C26H37N3O7  理論値  C 62.0  H 7.4  N 8.3%
【００８４】
ＴＦＡ（５ｍｌ）を含有する塩化メチレン（２３ｍｌ）中の７−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イルメトキシ）−６−メトキシ−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（２．３２ｇ、４．６ｍｍｏｌ）溶液を周囲温度で１時間撹拌した。揮発性物質を真空下で除去した。残渣を酢酸エチルと炭酸水素ナトリウムの間で分配させた。有機溶媒を真空下で除去し、残渣をろ過した。沈殿物を水で洗浄し、真空下で乾燥させた。該固体をトルエンと共沸させ、真空下で乾燥させて６−メトキシ−７−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（１．７ｇ、９２％）を得た。
【００８５】
MS - ESI: 404 [MH]+
1H NMRスペクトル: (DMSOd6; CF3COOD) 1.15 (s, 9H), 1.45-1.6 (m, 2H), 1.95 (d, 2H), 2.1-2.25 (m, 1H), 2.95 (t, 2H), 3.35 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 4.1 (d, 2H), 5.95 (s, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 8.45 (s, 1H)
【００８６】
ホルムアルデヒドの３７％水溶液（５０１μｌ、６ｍｍｏｌ）、次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２２８ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）を、６−メトキシ−７−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（１．２１ｇ、３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／メタノール（１０ｍｌ／１０ｍｌ）混合物中溶液に少しずつ加えた。周囲温度で３０分間撹拌後、有機溶媒を真空下で除去し、残渣を塩化メチレンと水の間で分配させた。有機層を分離し、水及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、揮発性物質を蒸発により除去した。残渣をエーテルで粉砕し、得られた固体をろ過により回収し、エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（１．０２ｇ、８２％）を得た。
【００８７】
MS - ESI: 418 [MH]+
1H NMRスペクトル: (CDCl3) 1.19 (s, 9H), 1.4-1.55 (m, 2H), 1.9 (d, 2H), 2.0 (t, 2H), 1.85-2.1 (m, 1H), 2.3 (s, 3H), 2.92 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.99 (d, 2H), 5.94 (s, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 8.17 (s, 1H)
【００８８】
メタノール中アンモニア飽和溶液（１４ｍｌ）を、６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−３−（（ピバロイルオキシ）メチル）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（１．３８ｇ、３．３ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍｌ）中溶液に加えた。周囲温度で２０時間撹拌後、懸濁液を塩化メチレン（１０ｍｌ）で希釈した。該溶液をろ過した。ろ液を真空下で蒸発させ、残渣をエーテルで粉砕し、ろ過により回収し、エーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−３，４−ジヒドロキナゾリン−４−オン（９１０ｍｇ、８３％）を得た。
【００８９】
MS - ESI: 304 [MH]+
1H NMRスペクトル: (DMSOd6) 1.3-1.45 (m, 2H), 1.75 (d, 2H), 1.7-1.85 (m, 1H), 1.9
(t, 2H), 2.2 (s, 3H), 2.8 (d, 2H), 3.9 (s, 3H), 4.0 (d, 2H), 7.13 (s, 1H), 7.45
(s, 1H), 7.99 (s, 1H)
【００９０】
以下の試験を用いて、電離放射線と併用したＺＤ６４７４の活性を示した。
Ｃａｌｕ−６異種移植モデル：
Ｃａｌｕ−６（肺癌）細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（バージニア州マナッサス）から入手した。全ての細胞培養試薬は、明記していない場合、英国ペイズリーのＬｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手した。細胞は、１０％ＦＣＳ（Ｌａｂｔｅｃｈ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、英国リングマー）、２ｍＭのＬ−グルタミン（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、英国プール）、１％ピルビン酸ナトリウム（１００ｍＭ）及び１％非必須アミノ酸を含有するイーグルの最少必須培地（ＥＭＥＭ）で、指数増殖単層として維持した。細胞は、インビボでのルーチン使用に先立ち、培養物中のマイクロプラズマの存在について定期的にスクリーニングし、マウス抗体産生試験（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ  Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、英国アルダリーパーク,Alderley Park）で１５種類のウィルスについて分析した。
【００９１】
Ｃａｌｕ−６細胞（２×１０７細胞／ｍｌ）は、無血清Ｒｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＲＰＭＩ）−１６４０培地中５０％（ｖ／ｖ）マトリゲル（Ｆｒｅｄ  Ｂａｋｅｒ、英国リバプール）の混合物中で移植用に調製された。腫瘍の異種移植は、０．１ｍｌの細胞懸濁液（すなわち２×１０６細胞／マウス）を雌のアルダリーパークヌードマウス（ｎｕ／ｎｕ遺伝子型；８〜１０週齢）に皮下注射することによって定着させた。触知可能な腫瘍が明らかになったら、腫瘍容積を毎日カリパス測定によって査定し、長さ×幅×高さの式を用いて計算した。
【００９２】
マウスは、腫瘍が２２５〜３１５ｍｍ３と測定されたら、治療の前に無作為に８群に分けられた。電離放射線は、照射する場合、１分当たり２Ｇｙの線量で、一側性ビーム（Ｐａｎｔａｃ  Ｘ線セット）による腫瘍の局所照射を可能にするために鉛のシールドとそれを切取った部分を備えたポリビニル製治具に拘束された非麻酔マウスに照射した。治具は、均一な照射を提供するために放射線暴露時間の半ばで１８０°回転させた。放射線は単回照射（第１日に５Ｇｙ）又は複数日毎照射（第１〜３日に２Ｇｙ／日）のいずれかで照射した。放射線の最終照射の３０分後にＺＤ６４７４（２５ｍｇ／ｋｇ）、又はビヒクルを経口胃管投与（０．１ｍｌ／１０ｇ体重）によって、その後さらに１３日間１日１回投与した（すなわち合計１４日間の経口治療）。ＺＤ６４７４は、１％ポリソルベート８０中懸濁液として調製した（すなわちポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエー
トの脱イオン水中１％（ｖ／ｖ）溶液）。マウスは腫瘍の相対容積が治療開始時の４倍に達したら（ＲＴＶ４）、人道的に殺した。両側２標本ｔ検定を用いて、得られた結果の有意性を評価した。
【００９３】
【表１−１】
2006502132.tif 000003
【００９４】
データは図１及び図２にグラフ表示してある。
データは、各例とも（５Ｇｙ又は３×２Ｇｙの実験）、放射線とＺＤ６４７４の併用でいずれか単独療法の場合よりも良好な治療効果が提供されたことを示している。
【００９５】
【表１−２】
2006502132.tif 000004
【００９６】
＊２標本ｔ検定によるＰ値（等しくない分散を仮定）
前述のＣａｌｕ−６異種移植モデルを用いる類似の実験で、異なるスケジュールを調査した。
【００９７】
Ｃａｌｕ−６腫瘍（２２０〜３００ｍｍ３）を持つマウスを８つの群に無作為に分け、ＺＤ６４７４（５０ｍｇ／ｋｇ、１日１回経口投与）又はビヒクルのみ（脱イオン水中１
％ポリソルベート）のいずれかを実験期間中投与した。ＺＤ６４７４又はビヒクルは、放射線療法（治療の最初の３日間に２４時間間隔で３×２Ｇｙ）を併用し又は併用せずにも投与した。マウスが５０ｍｇ／ｋｇのＺＤ６４７４プラス放射線療法を受けた場合、２種類の治療スケジュールについて検査した。
【００９８】
ａ）同時併用療法：最初の放射線照射の２時間前にＺＤ６４７４を投与する；及び
ｂ）順次併用療法：放射線療法の最終照射の３０分後にＺＤ６４７４を投与する。
Ｃａｌｕ−６異種移植片を持つマウスの追加の群を、ビヒクルと２４時間間隔の５×２Ｇｙ放射線療法で治療した。
【００９９】
治療効果は、腫瘍が治療前の大きさから４倍の容積になる時間（ＲＴＶ４）を測定し、相対的成長遅延を計算する（すなわち、各治療群のＲＴＶ４値を対照のそれと比較する）ことによって評価した。
【０１００】
【表２】
2006502132.tif 000005
【０１０１】
＊ｎ＝７に基づく；一つの腫瘍／群は治療後１００日以内にＲＴＶ４に達しなかった。
データを図３にグラフ表示する。
データは、５０ｍｇ／ｋｇのＺＤ６４７４投与と３×２Ｇｙの放射線を併用した治療が、いずれかの単独治療のみよりも著しく大きい成長遅延をもたらしたことを示している。
【０１０２】
放射線と５０ｍｇ／ｋｇのＺＤ６４７４による順次併用療法は、同一因子を同時に併用した場合より腫瘍成長を著しく抑制した（成長遅延はそれぞれ３６±１．０日及び２２±１．１日）。
【０１０３】
３×２Ｇｙの放射線と５０ｍｇ／ｋｇのＺＤ６４７４の順次併用療法によって生じる抗腫瘍効果は、個々の療法によって誘導される成長遅延の和より大きく、５×２Ｇｙの放射線のみによる治療に匹敵する。
【図面の簡単な説明】
【０１０４】
【図１】単回の放射線を照射した場合のデータを示すグラフである。放射線の最終照射の３０分後にＺＤ６４７４又はビヒクルを投与した。
【図２】複数日毎に放射線を照射した場合のデータを示すグラフである。放射線の最終照射の３０分後にＺＤ６４７４又はビヒクルを投与した。
【図３】順次対同時のＺＤ６４７４治療スケジュールが放射線治療の応答の相対的増強に影響を及ぼすことを示すグラフである。各治療群における腫瘍サイズの平均値（±ＳＥ）が与えられている。同時スケジュール：ＺＤ６４７４を連続投与（５０ｍｇ／ｋｇ／日、第１日以降）、最初の用量は、放射線療法（２Ｇｙ／日、第１日〜３日）の初回照射の２時間前に投与。順次スケジュール：ＺＤ６４７４を連続投与（５０ｍｇ／ｋｇ／日、第３日以降）、最初の用量は、放射線療法（２Ｇｙ／日、第１日〜３日）の最終回照射の０．５時間後に投与。
【図１】
2006502132.tif 000007
【図２】
2006502132.tif 000008
【図３】
2006502132.tif 000009
【国際調査報告】
2006502132.tif 000010
2006502132.tif 000011
2006502132.tif 000012