(57)【要約】  本発明は、式Ｉの化合物ならびにそれの製薬上許容される塩を包含する。その化合物は、骨髄、臓器および組織移植片拒絶などの免疫が介在する疾患および状態を治療する上で有用である。医薬組成物および使用方法が含まれる。2006528980.tif 000082
2006528980.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉによって表される化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
【化１】
2006528980.tif 000061
［式中、
Ａは、Ｃ−Ｒ３またはＮであり；
Ｄは、Ｃ−Ｒ４またはＮであり；
Ｅは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり；
Ｇは、Ｃ−Ｒ７またはＮであり；
ただし、Ａ、Ｄ、ＥおよびＧのうちの少なくとも一つはＮではなく；
Ｘ、ＹおよびＺは独立に、ＮおよびＣ−Ｒ８からなる群から選択され；ただし、Ｘ、ＹおよびＺのうちの少なくとも一つはＮではなく；
Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に、
（１）水素および
（２）１〜３個のハロ基で置換されていても良いＣ１−６アルキル
からなる群から選択されるか、
あるいはＲ１およびＲ２は、それらが結合している窒素原子と一体となって、３〜６員の飽和単環式環を形成していても良く；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立に、
（１）水素、
（２）ハロ、
（３）シアノおよび
（４）それぞれ１〜３個のハロ基で置換されていても良いＣ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシ
からなる群から選択され；
Ｒ５は、
（１）Ｃ１−６アルキル、
（２）Ｃ２−６アルケニル、
（３）Ｃ２−６アルキニル、
（４）Ｃ３−６シクロアルキル、
（５）Ｃ１−６アルコキシ、
（６）Ｃ３−６シクロアルコキシ、
（７）Ｃ１−６アシル、
（８）ハロ、
（９）アリールおよび
（１０）ＨＥＴ
からなる群から選択され；
上記の基（１）〜（７）は、１個〜最大数の置換可能位置でハロによって置換されていても良く；
上記の基（９）および（１０）は、
（ａ）ハロ、および
（ｂ）それぞれオキソ、ヒドロキシまたは１〜３個のハロ基で置換されていても良いＣ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシ
からなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていても良く；
あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している原子と一体となって、Ｏ、ＳおよびＮＲ８から選択される１〜３個のヘテロ原子を有していても良い５または６員の単環式環を形成していても良く；前記環は、独立に、ハロ、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されていても良く；前記Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシは、１〜３個のハロ基で置換されていても良く；
各Ｒ８は独立に、水素、ハロおよびＣ１−４アルキルからなる群から選択され；前記Ｃ１−４アルキルは、１〜３個のハロ基で置換されていても良く；
ＨＥＴは、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロチエニルからなる群から選択される。］
【請求項２】
ＡがＮであり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７である請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘ、ＹおよびＺがＣ−Ｒ８である請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３、Ｒ６およびＲ７が水素である請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４がトリフルオロメチルまたはシアノである請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１およびＲ２がそれぞれ独立に、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択される請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５が
（１）Ｃ２−６アルキル、
（２）Ｃ３−６シクロアルキル、
（３）Ｃ２−６アルコキシ、
（４）Ｃ３−６シクロアルコキシおよび
（５）Ｃ３−６アシル
からなる群から選択され；
上記の基（１）〜（５）が１〜５個のフルオロ基で置換されていても良い請求項３に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５が１〜５個のフルオロ基で置換されていても良いＣ２−６アルコキシである請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ５が
（１）独立にハロ、メチル、メトキシおよびヒドロキシメチルからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されていても良いフェニル、
（２）オキサジアゾリル、
（３）オキサゾリル、
（４）フラニルおよび
（５）チエニル
からなる群から選択される請求項３に記載の化合物。
【請求項１１】
ＸがＮであり；ＹおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８である請求項３に記載の化合物。
【請求項１２】
ＸおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８であり；ＹがＮである請求項３に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ１およびＲ２がそれぞれ独立に、水素およびメチルからなる群から選択され、
Ｒ３、Ｒ６およびＲ７が水素であり、
Ｒ４がトリフルオロメチルまたはシアノであり、
Ｒ５が１〜５個のフルオロ基で置換されていても良いＣ２−６アルコキシである請求項３に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ５が２，２，２−トリフルオロエトキシおよび２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエトキシから選択される請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｘ、ＹおよびＺがＣ−Ｒ８であり；各Ｒ８が独立に水素、メチルおよびハロから選択される請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
ＸがＮであり；ＹおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８であり；各Ｒ８が独立に水素、メチルおよびハロから選択される請求項１４に記載の化合物。
【請求項１７】
ＸおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８であり；ＹがＮであり；各Ｒ８が独立に水素、メチルおよびハロから選択される請求項１４に記載の化合物。
【請求項１８】
下記の表から選択される化合物または該化合物のいずれかの製薬上許容される塩。
【表１】
2006528980.tif 000062
2006528980.tif 000063
2006528980.tif 000064
2006528980.tif 000065
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2006528980.tif 000067
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2006528980.tif 000069
2006528980.tif 000070
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2006528980.tif 000073
2006528980.tif 000074
2006528980.tif 000075
2006528980.tif 000076
2006528980.tif 000077
2006528980.tif 000078
2006528980.tif 000079
2006528980.tif 000080
2006528980.tif 000081
【請求項１９】
処置を必要とする哺乳動物患者における免疫調節異常の治療方法であって、前記患者に対して、前記免疫調節異常を治療する上で有効な量で請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
【請求項２０】
前記免疫調節異常が、全身紅斑性狼瘡、慢性関節リウマチ、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症、クローン病、潰瘍性大腸炎、類天疱瘡、サルコイドーシス、乾癬、自己免疫筋肉炎、ヴェグナー肉芽腫、魚鱗癬、グレーブス眼症および喘息からなる群から選択される自己免疫疾患または慢性炎症性疾患である請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
前記免疫調節異常が、骨髄もしくは臓器の移植片拒絶または移植片対宿主病である請求項１９に記載の化合物。
【請求項２２】
前記免疫調節異常が、臓器もしくは組織の移植、移植によって生じる移植片対宿主病、慢性関節リウマチなどの自己免疫症候群、全身紅斑性狼瘡、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、ブドウ膜炎、後部ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、リウマチ熱および感染後糸球体腎炎などの感染後自己免疫疾患、炎症性および高増殖性皮膚疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、類天疱瘡、表皮水疱症、蕁麻疹、血管浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、紅斑性狼瘡、アクネ、円形脱毛症、角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、円錐角膜、角膜上皮異栄養症、角膜白斑、眼天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブス眼症、フォークト−小柳−原田症候群、サルコイドーシス、花粉アレルギー、可逆的閉塞性気道疾患、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、塵埃喘息、慢性もしくは難治性喘息、遅発性喘息および気道過敏症、気管支炎、胃潰瘍、虚血性疾患および血栓症によって生じる血管損傷、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患、壊死性小腸大腸炎、熱傷に関連する腸病変、腹腔疾患、直腸炎、好酸球性胃腸炎、肥満細胞症、クローン病、潰瘍性大腸炎、片頭痛、鼻炎、湿疹、間質性腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血尿毒症症候群、糖尿病性腎症、多発性筋炎、ギランバレー症候群、メニエール病、多発性神経炎、多発性神経炎、単発神経炎、神経根症、甲状腺機能亢進、バセドー病、純赤血球無形成症、無形成性貧血、形成不全性貧血、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫性溶血性貧血、無顆粒球症、悪性貧血、巨大赤芽球性貧血、赤血球形成不全、骨粗鬆症、サルコイドーシス、肺線維症、特発性間質性肺炎、皮膚筋炎、尋常性白斑、尋常魚鱗癬、光アレルギー性過敏、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、大動脈炎症候群、結節性多発動脈炎、心筋症、強皮症、ヴェグナー肉芽腫、シェーグレン症候群、脂肪過多症、好酸球増加症性筋膜炎、歯肉，歯周組織，歯槽骨，歯のセメント質の病変、糸球体腎炎、脱毛防止もしくは毛髪萌芽の提供および／または毛髪発生および毛髪成長の促進による男性型脱毛症もしくは老人性脱毛、筋ジストロフィー、膿皮症およびセザール症候群、アジソン氏病、防腐、移植もしくは虚血疾患時に起こる臓器の虚血−再潅流損傷、内毒素ショック、偽膜性大腸炎、薬剤もしくは放射線照射によって生じる大腸炎、虚血性急性腎機能不全、慢性腎機能不全、肺−酸素もしくは薬剤によって生じる中毒症、肺癌、肺気腫、白内障、鉄肺症、色素性網膜炎、老年斑点性変性、ガラス体瘢痕化、角膜アルカリやけど、多形紅斑性皮膚炎、線状ＩｇＡ水疱症およびセメント皮膚炎、歯肉炎、歯周炎、敗血症、膵炎、環境汚染，加齢，癌発生，癌の転移および高山病によって生じる疾患、ヒスタミンもしくはロイコトリエン−Ｃ４放出によって生じる疾患、ベーチェット病、自己免疫肝炎、原発性胆汁性肝硬変、硬化性胆管炎、部分肝臓切除術、急性肝臓壊死、毒物，ウィルス性肝炎，ショックもしくは無酸素によって生じる壊死、Ｂ型ウィルス肝炎、非Ａ非Ｂ肝炎、肝硬変、アルコール性肝硬変、肝不全、激症肝不全、遅発性肝不全、「慢性急性化」肝不全、化学療法効果の増強、サイトメガロウイルス感染、ＨＣＭＶ感染、ＡＩＤＳ、癌、老人性痴呆、外傷ならびに慢性細菌感染からなる群から選択される請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記免疫調節異常が、
１）多発性硬化症、
２）関節リウマチ、
３）全身紅斑性狼瘡、
４）乾癬、
５）移植臓器もしくは組織の拒絶、
６）炎症性腸疾患、
７）リンパを起源とする悪性腫瘍、
８）急性および慢性のリンパ球性白血病およびリンパ腫、
９）インシュリン依存型および非インシュリン依存型の糖尿病
からなる群から選択される請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
免疫抑制を必要とする哺乳動物患者での免疫系の抑制方法であって、その患者に対して免疫抑制上有効量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
【請求項２５】
製薬上許容される担体との組み合わせで請求項１に記載の化合物からなる医薬組成物。
【請求項２６】
処置を必要とする哺乳動物患者での呼吸器の疾患または状態を治療する方法であって、該患者に対して、前記呼吸器の疾患または状態を治療する上で有効な量の請求項１に記載の化合物を投与する段階を有する方法。
【請求項２７】
前記呼吸器の疾患または状態が、喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫性症候群、乳児呼吸窮迫性症候群、咳、好酸球性肉芽腫、呼吸器合包体ウィルス細気管支炎、気管支拡張症、特発性肺線維症、急性肺傷害および閉塞性細気管支炎器質化肺炎からなる群から選択される請求項２６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体作働薬である化合物、従って、白血球の往来を調節し、二次リンパ組織においてリンパ球隔離を生じさせ、効率的な免疫応答に必要な細胞：細胞相互作用を妨害することによって免疫抑制活性を有する化合物に関する。本発明はまた、そのような化合物を含有する医薬組成物、および処置方法または防止方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫抑制剤は、非常に多様な自己免疫および慢性炎症疾患において有用であることが明らかになっており、それには全全身性紅斑性狼瘡、慢性関節リウマチ、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症ならびにクローン疾患、潰瘍性大腸炎、類天疱瘡、サルコイドーシス、乾癬、自己免疫性筋肉炎、ヴェグナー肉芽腫症、魚鱗癬、グレーブス眼症、アトピー性皮膚炎および喘息などの他の障害などがある。それらはまた、癌、リンパ腫および白血病用の化学療法投与法の一部として有用であることも明らかになっている。
【０００３】
それら各状態の基礎となる病因はかなり異なっている可能性があるが、それらには共通して、各種の自己抗体および／または自己反応性リンパ球の出現がある。そのような自己反応性は一部には、正常な免疫系が働く恒常性制御の喪失が原因である場合がある。同様に、骨髄移植または臓器移植後に、宿主リンパ球が外来組織抗原を認識し、抗体、サイトカインおよび細胞傷害性リンパ球などの細胞応答および体液応答の両方を生じ始めることで、移植片拒絶反応に至る。
【０００４】
自己免疫または拒絶プロセスの一つの最終結果は、炎症細胞およびそれらが放出する介在物質によって生じる組織破壊である。ＮＳＡＩＤ類などの抗炎症剤は主として、それらの介在物質の効果または分泌を遮断することで作用するが、疾患の免疫的基礎を変えることはない。他方、シクロホスファミドなどの細胞傷害剤は、正常な応答および自己免疫応答の両方を停止させるという非特異的な形で作用する。実際、そのような非特異的免疫抑制剤を投与した患者は、自己免疫疾患に対してと同様に、感染に負ける可能性がある。
【０００５】
シクロスポリンＡは、移植臓器の拒絶を予防するのに使用される。ＦＫ−５０６は、移植臓器拒絶、特に肝臓移植について承認された別の薬剤である。シクロスポリンＡおよびＦＫ−５０６は、身体の免疫系が自然の保護剤の膨大な兵器庫を動員して移植片の外来タンパク質を拒絶するのを阻害することで作用する。シクロスポリンＡは重度の乾癬の治療用に承認されており、アトピー性皮膚炎の治療について欧州の規制当局による承認を受けている。
【０００６】
シクロスポリンＡおよびＦＫ−５０６は、移植片の拒絶を遅らせるか、または抑制することにおいて有効であるが、腎毒性、神経毒性および胃腸障害を含む望ましくない副作用をいくつか生じさせることが知られている。従って、これらの副作用を有しない免疫抑制剤は依然として開発されておらず、そのような免疫抑制剤が非常に望ましい。
【０００７】
免疫抑制化合物ＦＴＹ７２０は、臨床試験が現在行われているリンパ球隔離剤である。ＦＴＹ７２０は、哺乳動物では、スフィンゴシン１−リン酸受容体の強力な作働薬である化合物に代謝される。スフィンゴシン１−リン酸受容体の作働薬作用により、白血球の往来が調節され、リンパ節およびパイエル板におけるリンパ球（Ｔ細胞およびＢ細胞）の隔離がリンパ枯渇を伴うことなく誘発され、脾臓の構造が崩壊することで、Ｔ細胞依存性および非依存性の抗体応答が妨害される。そのような免疫抑制は、臓器移植後の拒絶を防止するために望ましく、また、自己免疫障害を処置することにおいて望ましい。
【０００８】
スフィンゴシン１−リン酸は、造血細胞によって分泌され、保存され、活性化された血小板から放出される生理活性スフィンゴ脂質代謝物である（Yatomi, Y., T. Ohmori, G. Rile, F. Kazama, H. Okamoto, T. Sano, K. Satoh, S. Kume, G. Tigyi, Y. Igarashi, and Y. Ozaki. 2000. Blood. 96: 3431-8）。それは、Ｇ蛋白結合受容体のファミリーに対して作働薬として働いて、細胞の増殖、分化、生存および運動性を調節する（Fukushima, N., I. Ishii, J. J. A. Contos, J. A. Weiner, and J. Chun. 2001. Lysophospholipid receptors. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 41: 507-34; Hla, T. , M. -J. Lee, N. Ancellin, J. H. Paik, and M. J. Kluk. 2001. Lysophospholipids-Receptor revelations. Science. 294: 1875-1878; Spiegel, S., and S. Milstien. 2000. Functions of a new family of sphingosine-1-phosphate receptors. Biochim. Biophys. Acta. 1484: 107-16; Pyne, S., and N. Pyne. 2000. Sphingosine 1-phosphate signalling via the endothelial differentiation gene family of G-protein coupled receptors. Pharm. & Therapeutics. 88: 115-131）。５種類のスフィンゴシン１−リン酸受容体が確認されており（Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５、内皮分化遺伝子Ｅｄｇ１、Ｅｄｇ５、Ｅｄｇ３、Ｅｄｇ６、Ｅｄｇ８とも称される）、それらは広い細胞および組織分布を有し、ヒトおよび齧歯類で良好に保存されている（表を参照）。Ｓ１Ｐ受容体への結合は、Ｇｑ−、Ｇｉ／ｏ、Ｇ１２−、Ｇ１３−およびＲｈｏ−依存性の経路による信号変換を誘発する。Ｓ１Ｐ１およびＳ１Ｐ３のリガンド誘発活性化が、血管形成、走化性およびＲａｃ−およびＲｈｏ−による接着結合組立を促進することが明らかになっているが（Lee, M. -J., S. Thangada, K. P. Claffey, N. Ancellin, C. H. Liu, M. Kluk, M. Volpi, R. I. Sha′afi, and T. Hla. 1999. Cell. 99: 301-12参照）、Ｓ１Ｐ２の作働作用が神経突起収縮を促進し（Van Brocklyn, J. R., Z. Tu, L. C. Edsall, R. R. Schmidt, and S. Spiegel. 1999. J. Biol. Chem. 274: 4626-4632参照）、Ｒａｃ活性化を遮断することで走化性を阻害する（Okamoto, H., N. Takuwa, T. Yokomizo, N. Sugimoto, S. Sakurada, H. Shigematsu, and Y. Takuwa. 2000. Mol. Cell. Biol. 20: 9247-9261参照）。Ｓ１Ｐ４は、造血細胞および組織に局在しているが（Graeler, M. H., G. Bernhardt, and M. Lipp. 1999. Curr. Top. Microbiol. Immunol. 246: 131-6）、Ｓ１Ｐ５は主としてリンパ組織である程度発現されるニューロン受容体である（Im, D. S. , C. E. Heise, N. Ancellin, B. F. O′Dowd, G. J. Shei, R. P. Heavens, M. R. Rigby, T. Hla, S. Mandala, G. McAllister, S. R. George, and K. R. Lynch. 2000. J. Biol. Cheer. 275: 14281-6参照）。
【０００９】
動物へのスフィンゴシン１−リン酸の投与は、二次リンパ器官への末梢血リンパ球の全身的な隔離を誘発し、従って、治療的に有用な免疫抑制をもたらす（Mandala, S., R. Hajdu, J. Bergstrom, E. Quackenbush, J. Xie, J. Milligan, R. Thornton, G. -J. Shei, D. Card, C. Keohane, M. Rosenbach, J. Hale, C. L. Lynch, K. Rupprecht, W. Parsons, H. Rosen. 2002. Science. 296: 346-349.参照）。しかしながら、スフィンゴシン１−リン酸はまた、治療剤としてのその有用性を制限する心臓血管作用および気管支収縮作用を有している。スフィンゴシン１−リン酸の静脈内投与は、ラットにおいて心拍、血管収縮および血圧を低下させる（Sugiyama, A. , N. N. Aye, Y. Yatomi, Y. Ozaki, and K. Hashimoto. 2000. Jpn. J. Pharmacol. 82: 338-342.参照）。ヒト気道平滑筋細胞では、スフィンゴシン１−リン酸は、喘息における気管支収縮、気道炎症および再構築を促進する収縮、細胞成長およびサイトカイン産生を調節する（Ammit, A. J., A. T. Hastie, L. C. Edsall, R. K. Hoffman, Y. Amrani, V. P. Krymskaya, S. A. Kane, S. P. Peters, R. B. Penn, S. Spiegel, R. A. Panettieri. Jr. 2001, FASEB J. 15: 1212-1214.参照）。スフィンゴシン１−リン酸の望ましくない作用は、すべてのＳ１Ｐ受容体に対するその非選択的かつ強力な作働薬活性に伴うものである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体と比較して選択性を有するＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体の作働薬である化合物を含む。Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体選択的作働薬は、現行の治療法にまさる長所を有し、リンパ球隔離剤の治療の幅を広げ、比較的高い用量でより良好な耐容性を可能とすることから、単独療法としての効力を高めるものである。
【００１１】
免疫抑制剤の主要な用途は、骨髄、臓器および組織移植片拒絶を治療する点にあるが、そのような化合物の他の用途には、関節炎、特には慢性関節リウマチ、インシュリンおよび非インシュリン依存型糖尿病、多発性硬化症、乾癬、炎症性腸疾患、クローン疾患、紅斑性狼瘡などの治療等がある。
【００１２】
そこで本発明は、先行技術の化合物より安全かつ有効な免疫抑制化合物を提供することに関するものである。上記および他の目的は、本明細書の記載から当業者には明らかであろう。
【００１３】
【表２】
2006528980.tif 000003
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、下記式Ｉの化合物およびその化合物の製薬上許容される塩を包含する。
【００１５】
【化２】
2006528980.tif 000004
【００１６】
前記化合物は、骨髄、臓器および組織移植片拒絶などの免疫が介在する疾患および状態を治療する上で有用である。医薬組成物および使用方法も含まれる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明は、下記式Ｉによって表される化合物またはその化合物の製薬上許容される塩を包含する。
【００１８】
【化３】
2006528980.tif 000005
式中、
Ａは、Ｃ−Ｒ３またはＮであり；
Ｄは、Ｃ−Ｒ４またはＮであり；
Ｅは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり；
Ｇは、Ｃ−Ｒ７またはＮであり；
ただし、Ａ、Ｄ、ＥおよびＧのうちの少なくとも一つはＮではなく；
Ｘ、ＹおよびＺは独立に、ＮおよびＣ−Ｒ８からなる群から選択され；ただし、Ｘ、ＹおよびＺのうちの少なくとも一つはＮではなく；
Ｒ１およびＲ２はそれぞれ独立に、
（１）水素および
（２）１〜３個のハロ基で置換されていても良いＣ１−６アルキル
からなる群から選択されるか、
あるいはＲ１およびＲ２は、それらが結合している窒素原子と一体となって、３〜６員の飽和単環式環を形成していても良く；
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６およびＲ７はそれぞれ独立に、
（１）水素、
（２）ハロ、
（３）シアノおよび
（４）それぞれ１〜３個のハロ基で置換されていても良いＣ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシ
からなる群から選択され；
Ｒ５は、
（１）Ｃ１−６アルキル、
（２）Ｃ２−６アルケニル、
（３）Ｃ２−６アルキニル、
（４）Ｃ３−６シクロアルキル、
（５）Ｃ１−６アルコキシ、
（６）Ｃ３−６シクロアルコキシ、
（７）Ｃ１−６アシル、
（８）ハロ、
（９）アリールおよび
（１０）ＨＥＴ
からなる群から選択され；
上記の基（１）〜（７）は、１個〜最大数の置換可能位置でハロによって置換されていても良く；
上記の基（９）および（１０）は、
（ａ）ハロ、および
（ｂ）それぞれオキソ、ヒドロキシまたは１〜３個のハロ基で置換されていても良いＣ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシ
からなる群から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていても良く；
あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している原子と一体となって、Ｏ、ＳおよびＮＲ８から選択される１〜３個のヘテロ原子を有していても良い５または６員の単環式環を形成していても良く；前記環は、独立に、ハロ、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルコキシからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されていても良く；前記Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシは、１〜３個のハロ基で置換されていても良く；
各Ｒ８は独立に、水素、ハロおよびＣ１−４アルキルからなる群から選択され；前記Ｃ１−４アルキルは、１〜３個のハロ基で置換されていても良く；
ＨＥＴは、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロチエニルからなる群から選択される。
【００１９】
本発明の１実施形態は、
ＡがＮであり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７である式Ｉの化合物を包含する。
【００２０】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７である式Ｉの化合物を包含する。
【００２１】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり、
Ｘ、ＹおよびＺがＣ−Ｒ８である式Ｉの化合物を包含する。
【００２２】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり
Ｒ３、Ｒ６およびＲ７が水素である式Ｉの化合物を包含する。この実施形態には、Ｒ４がトリフルオロメチルまたはシアノである式Ｉの化合物が包含される。
【００２３】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり、
Ｒ１およびＲ２がそれぞれ独立に、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択される式Ｉの化合物を包含する。
【００２４】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり、
Ｒ５が
（１）Ｃ２−６アルキル、
（２）Ｃ３−６シクロアルキル、
（３）Ｃ２−６アルコキシ、
（４）Ｃ３−６シクロアルコキシおよび
（５）Ｃ３−６アシル
からなる群から選択され；
上記の基（１）〜（５）が１〜５個のフルオロ基で置換されていても良い式Ｉの化合物を包含する。この実施形態には、Ｒ５が１〜５個のフルオロ基で置換されていても良いＣ２−６アルコキシである式Ｉの化合物が包含される。
【００２５】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり、
Ｒ５が
（１）独立にハロ、メチル、メトキシおよびヒドロキシメチルからなる群から選択される１〜３個の置換基で置換されていても良いフェニル、
（２）オキサジアゾリル、
（３）オキサゾリル、
（４）フラニルおよび
（５）チエニル
からなる群から選択される式Ｉの化合物を包含する。
【００２６】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり、
ＸがＮであり；ＹおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８である式Ｉの化合物を包含する。
【００２７】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり、
ＸおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８であり；ＹがＮである式Ｉの化合物を包含する。
【００２８】
本発明の別の実施形態は、
ＡがＣ−Ｒ３であり、
ＤがＣ−Ｒ４であり、
ＥがＣ−Ｒ６であり、
ＧがＣ−Ｒ７であり、
Ｒ１およびＲ２がそれぞれ独立に、水素およびメチルからなる群から選択され、
Ｒ３、Ｒ６およびＲ７が水素であり、
Ｒ４がトリフルオロメチルまたはシアノであり、
Ｒ５が１〜５個のフルオロ基で置換されていても良いＣ２−６アルコキシである式Ｉの化合物を包含する。この実施形態には、Ｒ５が２，２，２−トリフルオロエトキシおよび２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエトキシから選択される発明も包含される。この実施形態には、Ｒ５が２，２，２−トリフルオロエトキシおよび２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエトキシから選択され；Ｘ、ＹおよびＺがＣ−Ｒ８であり；各Ｒ８が独立に水素、メチルおよびハロから選択される発明も包含される。この実施形態には、Ｒ５が２，２，２−トリフルオロエトキシおよび２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエトキシから選択され；ＸがＮであり；ＹおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８であり；各Ｒ８が独立に水素、メチルおよびハロから選択される発明も包含される。この実施形態には、Ｒ５が２，２，２−トリフルオロエトキシおよび２，２，２−トリフルオロ−１−メチルエトキシから選択され；ＸおよびＺがいずれもＣ−Ｒ８であり；ＹがＮであり；各Ｒ８が独立に水素、メチルおよびハロから選択される発明も包含される。
【００２９】
本発明の例には、以下の化合物あるいはこれらのいずれかの製薬上許容される塩がある。
【００３０】
【表３】
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【００３１】
本発明には、処置を必要とする哺乳動物患者における免疫調節異常の治療方法であって、前記患者に対して、前記免疫調節異常を治療する上で有効な量で式Ｉの化合物を投与する段階を有する方法も包含される。
【００３２】
この実施形態には、前記免疫調節異常が、全身紅斑性狼瘡、慢性関節リウマチ、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症、クローン病、潰瘍性大腸炎、類天疱瘡、サルコイドーシス、乾癬、自己免疫筋肉炎、ヴェグナー肉芽腫、魚鱗癬、グレーブス眼症および喘息からなる群から選択される自己免疫疾患または慢性炎症性疾患である上記方法が包含される。
【００３３】
この実施形態には、前記免疫調節異常が、骨髄もしくは臓器の移植片拒絶または移植片対宿主病である上記方法が包含される。
【００３４】
この実施形態には、前記免疫調節異常が、臓器もしくは組織の移植、移植によって生じる移植片対宿主病、慢性関節リウマチなどの自己免疫症候群、全身紅斑性狼瘡、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、ブドウ膜炎、後部ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、リウマチ熱および感染後糸球体腎炎などの感染後自己免疫疾患、炎症性および高増殖性皮膚疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、類天疱瘡、表皮水疱症、蕁麻疹、血管浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、紅斑性狼瘡、アクネ、円形脱毛症、角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、円錐角膜、角膜上皮異栄養症、角膜白斑、眼天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブス眼症、フォークト−小柳−原田症候群、サルコイドーシス、花粉アレルギー、可逆的閉塞性気道疾患、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、塵埃喘息、慢性もしくは難治性喘息、遅発性喘息および気道過敏症、気管支炎、胃潰瘍、虚血性疾患および血栓症によって生じる血管損傷、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患、壊死性小腸大腸炎、熱傷に関連する腸病変、腹腔疾患、直腸炎、好酸球性胃腸炎、肥満細胞症、クローン病、潰瘍性大腸炎、片頭痛、鼻炎、湿疹、間質性腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血尿毒症症候群、糖尿病性腎症、多発性筋炎、ギランバレー症候群、メニエール病、多発性神経炎、多発性神経炎、単発神経炎、神経根症、甲状腺機能亢進、バセドー病、純赤血球無形成症、無形成性貧血、形成不全性貧血、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫性溶血性貧血、無顆粒球症、悪性貧血、巨大赤芽球性貧血、赤血球形成不全、骨粗鬆症、サルコイドーシス、肺線維症、特発性間質性肺炎、皮膚筋炎、尋常性白斑、尋常魚鱗癬、光アレルギー性過敏、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、大動脈炎症候群、結節性多発動脈炎、心筋症、強皮症、ヴェグナー肉芽腫、シェーグレン症候群、脂肪過多症、好酸球増加症性筋膜炎、歯肉，歯周組織，歯槽骨，歯のセメント質の病変、糸球体腎炎、脱毛防止もしくは毛髪萌芽の提供および／または毛髪発生および毛髪成長の促進による男性型脱毛症もしくは老人性脱毛、筋ジストロフィー、膿皮症およびセザール症候群、アジソン氏病、防腐、移植もしくは虚血疾患時に起こる臓器の虚血−再潅流損傷、内毒素ショック、偽膜性大腸炎、薬剤もしくは放射線照射によって生じる大腸炎、虚血性急性腎機能不全、慢性腎機能不全、肺−酸素もしくは薬剤によって生じる中毒症、肺癌、肺気腫、白内障、鉄肺症、色素性網膜炎、老年斑点性変性、ガラス体（vitreal）瘢痕化、角膜アルカリやけど、多形紅斑性皮膚炎、線状ＩｇＡ水疱症およびセメント皮膚炎、歯肉炎、歯周炎、敗血症、膵炎、環境汚染，加齢，癌発生，癌の転移および高山病によって生じる疾患、ヒスタミンもしくはロイコトリエン−Ｃ４放出によって生じる疾患、ベーチェット病、自己免疫肝炎、原発性胆汁性肝硬変、硬化性胆管炎、部分肝臓切除術、急性肝臓壊死、毒物，ウィルス性肝炎，ショックもしくは無酸素によって生じる壊死、Ｂ型ウィルス肝炎、非Ａ非Ｂ肝炎、肝硬変、アルコール性��硬変、肝不全、激症肝不全、遅発性肝不全、「慢性急性化（acute-on-chronic）」肝不全、化学療法効果の増強、サイトメガロウイルス感染、ＨＣＭＶ感染、ＡＩＤＳ、癌、老人性痴呆、外傷ならびに慢性細菌感染からなる群から選択される上記方法も包含される。
【００３５】
この実施形態には、前記免疫調節異常が、
１）多発性硬化症、
２）関節リウマチ、
３）全身紅斑性狼瘡、
４）乾癬、
５）移植臓器もしくは組織の拒絶、
６）炎症性腸疾患、
７）リンパを起源とする悪性腫瘍、
８）急性および慢性のリンパ球性白血病およびリンパ腫、
９）インシュリン依存型および非インシュリン依存型の糖尿病
からなる群から選択される上記方法も包含される。
【００３６】
本発明には、免疫抑制を必要とする哺乳動物患者での免疫系の抑制方法であって、その患者に対して免疫抑制上有効量の式Ｉの化合物を投与する段階を有する方法も包含される。
【００３７】
本発明には、製薬上許容される担体との組み合わせで式Ｉの化合物からなる医薬組成物も包含される。
【００３８】
本発明はまた、処置を必要としている哺乳動物患者における呼吸器の疾患または状態を処置する方法であって、前記の呼吸器の疾患または状態を処置するために有効である量で式Ｉの化合物を前記患者に投与することを含む前記方法を包含する。この実施態様には、呼吸器の疾患または状態が、喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫性症候群、乳児呼吸窮迫性症候群、咳、好酸球性肉芽腫、呼吸器合包体ウィルス細気管支炎、気管支拡張症、特発性肺線維症、急性肺傷害および閉塞性細気管支炎器質化肺炎からなる群から選択される上記方法が含まれる。
【００３９】
この実施態様にはまた、前記患者がまた呼吸器の疾患または状態を有する上記方法が含まれる。
【００４０】
この実施態様にはまた、前記患者がまた心臓血管の疾患または状態を患っている上記方法が含まれる。
【００４１】
別段の断りがない限り、下記の定義を用いて本発明を説明する。
【００４２】
本明細書の式において窒素原子がある場合、その窒素原子の原子価を満足させるだけの水素原子または置換基が存在することは明らかである。
【００４３】
「ハロゲン」または「ハロ」という用語は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを含む。
【００４４】
「アルキル」という用語は、指定数の炭素原子を有する直鎖もしくは分岐の構造およびそれらの組み合わせを意味する。そこで例えば、Ｃ１−６アルキルにはメチル、エチル、プロピル、２−プロピル、ｓ−およびｔ−ブチル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、１，１−ジメチルエチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルなどがある。
【００４５】
「アルコキシ」という用語は、指定数の炭素原子を有する直鎖、分岐もしくは環状の形状のアルコキシ基を意味する。例えばＣ１−６アルコキシには、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシなどがある。
【００４６】
「アルキルチオ」という用語は、直鎖、分岐または環状の形状の指定数の炭素原子を有するアルキルチオ基を意味する。、例えばＣ１−６アルキルチオには、メチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオなどがある。
【００４７】
「アルケニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有し、水素がさらに別の炭素−炭素二重結合によって置き換わっていても良い指定数の炭素原子の直鎖もしくは分岐の構造およびそれらの組み合わせを意味する。例えばＣ２−６アルケニルには、エテニル、プロペニル、１−メチルエテニル、ブテニルなどがある。
【００４８】
「アルキニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有する指定数の炭素原子の直鎖もしくは分岐の構造およびそれらの組み合わせを意味する。例えばＣ３−６アルキニルには、プロペニル、１−メチルエテニル、ブテニルなどがある。
【００４９】
「シクロアルキル」という用語は、直鎖もしくは分岐の構造を組み合わせても良い指定数の炭素原子を有する単環式、二環式もしくは三環式の構造を意味する。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘプチル、アダマンチル、シクロドデシルメチル、２−エチル−１−ビシクロ［４．４．０］デシル、シクロブチルメチルなどがある。
【００５０】
「シクロアルコキシ」という用語は、シクロアルキルが上記で定義の通りであるシクロアルキル−Ｏ−を意味する。
【００５１】
「アシル」という用語は、１位がオキソで置換された上記で定義のアルキル基を意味する。例としては、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリルおよびヘキサノイルなどがある。
【００５２】
「アリール」という用語は、単環式もしくは二環式芳香環系と定義され、例えばフェニル、ナフチルなどを含む。
【００５３】
「アラルキル」という用語は、アルキル水素原子の一つに代えて上記で定義のアリール基を有する１〜６個の炭素原子の上記で定義のアルキル基を意味し、例えばベンジルなどがある。
【００５４】
「アリールオキシ」という用語は、酸素原子によって分子に結合している上記で定義のアリール基（アリール−Ｏ）を意味し、例えば、フェノキシ、ナフトキシなどがある。
【００５５】
「アラルコキシ」という用語は、酸素原子によって分子に結合した上記で定義のアラルキル基（アラルキル−Ｏ）を意味し、例えばベンジルオキシなどがある。
【００５６】
「アリールチオ」という用語は、硫黄原子によって分子に結合した上記で定義のアリール基（アリール−Ｓ）を意味し、例えばチオフェニオキシ（thiophenyoxy）、チオナフトキシなどがある。
【００５７】
「アロイル」という用語は、カルボニル基によって分子に結合した上記で定義のアリール基（アリール−Ｃ（Ｏ）−）を意味し、例えば、ベンゾイル、ナフトイルなどがある。
【００５８】
「アロイルオキシ」という用語は、酸素原子によって分子に結合した上記で定義のアロイル基（アロイル−Ｏ）を意味し、例えばベンゾイルオキシまたはベンゾキシ、ナフトイルオキシなどがある。
【００５９】
「治療」という用語は、患者に処置を行って、患者の疾患または状態の徴候および症状を改善することだけでなく、無症候の患者を予防的に処置して、疾患または状態の発症もしくは進行を防止することをも包含する。「治療上有効量」という用語は、研究者、獣医、医師その他の臨床関係者が追求する組織、系、動物またはヒトの生理的もしくは医学的応答を誘発する薬剤または医薬の量を意味する。その用語は、研究者、獣医、医師その他の臨床関係者が追求する組織、系、動物またはヒトで予防すべき生理的もしくは医学的事象の発生を防止またはリスク低下させる医薬の量をも包含する。
【００６０】
本明細書に記載の本発明は、製薬上許容される塩および水和物を含むものである。製薬上許容される塩には、金属（無機）塩および有機塩の両方があり、そのリストがレミングトンの著作にある（Remington′s Pharmaceutical Sciences, 17th Edition, pg.1418 (1985)）。適切な塩の形態は、物理的および化学的安定性、流動性、含水性および溶解性に基づいて選択されることは、当業者には公知である。当業者には明らかなように、製薬上許容される塩には、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、臭化水素酸塩および硝酸塩などの無機酸の塩、あるいはリンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩もしくはパモ酸塩、サリチル酸塩およびステアリン酸塩などの有機酸の塩などがあるが、これらに限定されるものではない。同様に製薬上許容されるカチオンには、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウムおよびアンモニウム（特に、２級アミンとのアンモニウム塩）などがあるが、これらに限定されるものではない。上記で記載の理由で好ましい本発明の塩には、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩およびアンモニウム塩などがある。本発明の範囲には、式Ｉの化合物の結晶型、水和物および溶媒和物も含まれる。
【００６１】
本明細書に関して、「製薬上許容される水和物」とは、１以上の水分子によって結晶化して水和型を形成する本発明の化合物を意味する。
【００６２】
本発明はまた、１以上の立体異性体の形態、実質的に純粋な形態、または立体異性体の混合物の形態で式Ｉの範囲に包含される化合物をも含むものである。そのような異性体はいずれも、本発明の範囲に包含される。
【００６３】
Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１作働薬活性があることで本発明の化合物は、自己免疫または慢性炎症性疾患の治療または予防に有用な免疫調節剤である。本発明の化合物は、骨髄、臓器もしくは移植片拒絶、全身紅斑性狼瘡、慢性関節リウマチ、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、胆汁性肝硬変、ブドウ膜炎、多発性硬化症、クローン病、潰瘍性大腸炎、類天疱瘡、サルコイドーシス、乾癬、自己免疫筋肉炎、ヴェグナー肉芽腫、魚鱗癬、グレーブス眼症および喘息などの自己免疫および慢性炎症性疾患での場合のように、免疫抑制が望ましい場合において免疫系を抑制する上で有用である。
【００６４】
より詳細には本発明の化合物は、臓器もしくは組織の移植、移植によって生じる移植片対宿主病、慢性関節リウマチなどの自己免疫症候群、全身紅斑性狼瘡、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型糖尿病、ブドウ膜炎、後部ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、糸球体腎炎、リウマチ熱および感染後糸球体腎炎などの感染後自己免疫疾患、炎症性および高増殖性皮膚疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、類天疱瘡、表皮水疱症、蕁麻疹、血管浮腫、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、紅斑性狼瘡、アクネ、円形脱毛症、角結膜炎、春季結膜炎、ベーチェット病に関連するブドウ膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、円錐角膜、角膜上皮異栄養症、角膜白斑、眼天疱瘡、モーレン潰瘍、強膜炎、グレーブス眼症、フォークト−小柳−原田症候群、サルコイドーシス、花粉アレルギー、可逆的閉塞性気道疾患、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、塵埃喘息、慢性もしくは難治性喘息、遅発性喘息および気道過敏症、気管支炎、胃潰瘍、虚血性疾患および血栓症によって生じる血管損傷、虚血性腸疾患、炎症性腸疾患、壊死性小腸大腸炎、熱傷に関連する腸病変、腹腔疾患、直腸炎、好酸球性胃腸炎、肥満細胞症、クローン病、潰瘍性大腸炎、片頭痛、鼻炎、湿疹、間質性腎炎、グッドパスチャー症候群、溶血尿毒症症候群、糖尿病性腎症、多発性筋炎、ギランバレー症候群、メニエール病、多発性神経炎、多発性神経炎、単発神経炎、神経根症、甲状腺機能亢進、バセドー病、純赤血球無形成症、無形成性貧血、形成不全性貧血、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫性溶血性貧血、無顆粒球症、悪性貧血、巨大赤芽球性貧血、赤血球形成不全、骨粗鬆症、サルコイドーシス、肺線維症、特発性間質性肺炎、皮膚筋炎、尋常性白斑、尋常魚鱗癬、光アレルギー性過敏、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、動脈硬化、アテローム性動脈硬化、大動脈炎症候群、結節性多発動脈炎、心筋症、強皮症、ヴェグナー肉芽腫、シェーグレン症候群、脂肪過多症、好酸球増加症性筋膜炎、歯肉，歯周組織，歯槽骨，歯のセメント質の病変、糸球体腎炎、脱毛防止もしくは毛髪萌芽の提供および／または毛髪発生および毛髪成長の促進による男性型脱毛症もしくは老人性脱毛、筋ジストロフィー、膿皮症およびセザール症候群、アジソン氏病、防腐、移植もしくは虚血疾患時に起こる臓器の虚血−再潅流損傷、内毒素ショック、偽膜性大腸炎、薬剤もしくは放射線照射によって生じる大腸炎、虚血性急性腎機能不全、慢性腎機能不全、肺−酸素もしくは薬剤によって生じる中毒症、肺癌、肺気腫、白内障、鉄肺症、色素性網膜炎、老年斑点性変性、ガラス体（vitreal）瘢痕化、角膜アルカリやけど、多形紅斑性皮膚炎、線状ＩｇＡ水疱症およびセメント皮膚炎、歯肉炎、歯周炎、敗血症、膵炎、環境汚染，加齢，癌発生，癌の転移および高山病によって生じる疾患、ヒスタミンもしくはロイコトリエン−Ｃ４放出によって生じる疾患、ベーチェット病、自己免疫肝炎、原発性胆汁性肝硬変、硬化性胆管炎、部分肝臓切除術、急性肝臓壊死、毒物，ウィルス性肝炎，ショックもしくは無酸素によって生じる壊死、Ｂ型ウィルス肝炎、非Ａ非Ｂ肝炎、肝硬変、アルコール性肝硬変、��不全、激症肝不全、遅発性肝不全、「慢性急性化（acute-on-chronic）」肝不全、化学療法効果の増強、サイトメガロウイルス感染、ＨＣＭＶ感染、ＡＩＤＳ、癌、老人性痴呆、外傷ならびに慢性細菌感染からなる群から選択される疾患または障害を治療または予防する上で有用である。
【００６５】
本発明の化合物は、アルツハイマー病の治療または予防においても有用である。
【００６６】
本発明の実施形態には、処置を必要とする哺乳動物患者での臓器もしくは組織の移植に対する抵抗または移植拒絶を予防または治療する方法において、治療上有効量の式Ｉの化合物を投与する段階を有する方法もある。
【００６７】
処置を必要とする哺乳動物患者で免疫系を抑制する方法において、その患者に対して免疫系を抑制する量の式Ｉの化合物を投与する段階を有する方法が、さらに別の実施形態である。
【００６８】
特に詳細には本明細書に記載の方法は、骨髄もしくは臓器移植片拒絶の治療または予防方法において、そのような治療または予防を必要とする哺乳動物患者に対して、骨髄もしくは臓器移植片拒絶の治療または予防において有効な量で式Ｉの化合物またはそれの製薬上許容される塩もしくは水和物を投与する段階からなる方法を包含する。
【００６９】
本発明の化合物はまた、喘息、慢性気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫性症候群、乳児呼吸窮迫性症候群、咳、好酸球性肉芽腫、呼吸器合包体ウイルス細気管支炎、気管支拡張症、特発性肺線維症、急性肺傷害および閉塞性細気管支炎器質化肺炎などの呼吸器の疾患または状態を処置する上で有用である。
【００７０】
さらに、本発明の化合物は、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体を上回る選択性を有する、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体の選択的作働薬である。Ｅｄｇ１選択的作働薬は、現在の治療法を上回る様々な利点を有しており、また、リンパ球隔離剤の治療範囲を広げ、これにより、より高用量に関してより良好な耐容性を得ることができ、従って、単独療法としての効力が向上する。
【００７１】
本発明はまた、製薬上許容される担体および式Ｉの化合物またはそれの製薬上許容される塩もしくは水和物を含む医薬組成物をも包含する。その製剤の好ましい実施形態は、第２の免疫抑制剤も含まれているものである。そのような第２の免疫抑制剤の例には、アザチオプリン、ブレキナー（brequinar）ナトリウム、デオキシスペルグアリン（deoxyspergualin）、ミザリビン（mizaribine）、マイコフェノール酸モルホリノエステル、シクロスポリン、ＦＫ−５０６、ラパマイシン、ＦＴＹ７２０およびＩＳＡｔｘ２４７（Isotechnika）があるが、これらに限定されるものではない。上記の１以上のものを含む第２の免疫抑制剤との式Ｉの化合物の同時投与方法も、本発明の範囲に包含される。
【００７２】
塩および水和物を含む本発明の化合物は、骨髄移植物、外来臓器移植物の拒絶および／または関連する苦痛、疾患および病気の予防を含めた自己免疫疾患の治療において有用である。
【００７３】
本発明の化合物は、温血動物の身体における作用部位と有効成分化合物との接触を行うあらゆる手段によって投与することができる。例えば投与は、経口、局所（経皮など）、眼球、口腔内、経鼻、吸入、膣、直腸、大槽内および非傾向投与であることができる。本明細書で使用される「非経口」という用語は、皮下、静脈、筋肉、関節内の注射もしくは注入、胸骨内および腹腔内投与などの投与形態を指す。
【００７４】
前記化合物は、個々の治療薬としてあるいは併用治療薬での医薬と組み合わせて使用するのに利用可能な従来の手段によって投与することができる。その化合物は単独で投与することができるが、通常は選択される投与経路および標準的な医薬上の実務に基づいて選択される医薬担体とともに投与される。
【００７５】
投与される用量は、被投与者の年齢、健康状態および体重、疾患の程度、行っている場合には併用治療の種類、投与回数および所望の効果の性質によって決まる。通常、有効成分化合物の１日用量は約０．１〜２０００ｍｇ／日である。通常では、１以上の用途において１〜１００ｍｇ／日が所望の結果を得る上で効果的である。その用量は、自己免疫疾患の治療、外来臓器移植物の拒絶および／または関連する苦痛、疾患および病気の予防に有効な量である。
【００７６】
前記有効成分は、カプセル、錠剤、トローチ、糖衣丸、粒剤および粉剤などの固体製剤で、あるいはエリキシル剤、シロップ、乳濁液、分散液および懸濁液などの液体製剤で経口投与することができる。有効成分はまた、分散液、懸濁液または液剤などの無菌液体製剤の形態で非経口投与することもできる。有効成分を投与するのにやはり用いることができる他の製剤には、軟膏、クリーム、滴剤、局所投与用の経皮貼付剤もしくは粉剤として、眼科溶液または懸濁液の形態、すなわち眼球投与用の点眼剤として、吸入もしくは経鼻投与用のエアロゾル噴霧剤もしくは粉末組成物として、あるいは直腸投与もしくは膣投与用のクリーム、軟膏、噴霧剤もしくは坐剤としてのものがある。
【００７７】
ゼラチンカプセルは、有効成分ならびに乳糖、デンプン、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などの粉末担体を含む。同様の希釈剤を用いて、圧縮錠を製造することができる。錠剤およびカプセルのいずれも、徐放剤として製造して、長時間にわたる医薬品の連続放出を行うことができる。圧縮錠は、糖コーティングまたは薄膜コーティングを施して、不快な味覚を隠し、雰囲気から錠剤を保護したり、あるいは消化管での選択的崩壊のために腸溶コーティングすることができる。
【００７８】
経口投与用の液体製剤は、着色剤および香味剤を含んで、患者による許容度を高めることができる。
【００７９】
通常、水、好適なオイル、生理食塩水、水性ブドウ糖（グルコース）および関連する糖溶液ならびにプロピレングリコールもしくはポリエチレングリコール類などのグリコール類が、非経口液剤に好適な担体である。非経口投与用の液剤は好ましくは、有効成分の水溶性塩、好適な安定剤、および必要に応じて緩衝物質を含む。単独または組み合わせでの重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムもしくはアスコルビン酸などの酸化防止剤が、好適な安定剤である。クエン酸およびそれの塩ならびにナトリウムＥＤＴＡも使用される。さらに非経口溶液は、塩化ベンザルコニウム、メチルもしくはプロピルパラベンおよびクロロブタノールなどの保存剤を含むことができる。
【００８０】
好適な医薬担体は、当該分野での標準的な参考文献であるレミングトンの著作（Remington′s Pharmaceutical Sciences, A. Osol）に記載されている。
【００８１】
吸入による投与の場合、本発明の化合物は簡便には、加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾル噴霧剤の形態で投与することができる。その化合物は、製剤可能な粉剤として投与することもでき、その粉末組成物を通気粉剤吸入装置の助けを借りて吸入することができる。吸入に好ましい投与系は、フルオロカーボン類または炭化水素などの好適な推進剤中の式Ｉの化合物の懸濁液もしくは溶液として製剤することができる計量吸入（ＭＤＩ）エアロゾルである。
【００８２】
眼球投与の場合、適切な眼科媒体中の式Ｉの化合物の適切な重量パーセントの溶液もしくは懸濁液を用いて眼科製剤を調製して、その化合物が眼球の角膜領域および内部領域を透過できるだけの期間にわたり、その化合物が眼球表面と接触状態に維持されるようにすることができる。
【００８３】
本発明の化合物の投与に有用な医薬製剤は、下記のように示すことができる。
【００８４】
カプセル
標準的な２ピース硬ゼラチンカプセルそれぞれに粉末状の有効成分１００ｍｇ、乳糖１５０ｍｇ、セルロース５０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム６ｍｇを充填することで、多数の単位カプセルを製造する。
【００８５】
軟ゼラチンカプセル
大豆油、綿実油またはオリーブ油などの食用油中の有効成分の混合物を調製し、容積移送式ポンプによってゼラチン中に注入して、有効成分１００ｍｇが入った軟ゼラチンカプセルを形成する。カプセルを洗浄および乾燥する。
【００８６】
錠剤
従来法によって多数の錠剤を製造し、単位製剤が有効成分１００ｍｇ、コロイド状二酸化ケイ素０．２ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム５ｍｇ、微結晶セルロース２７５ｍｇ、デンプン１１ｍｇおよび乳糖９８．８ｍｇとなるようにする。適切なコーティングを施して、嗜好性を高めたり、吸収を遅らせることができる。
【００８７】
注射剤
注射による投与に好適な非経口組成物は、１０体積％のプロピレングリコール中で１．５重量％の有効成分を撹拌することで調製される。その溶液を注射用水で規定量とし、滅菌する。
【００８８】
懸濁液
各５ｍＬが微粉砕した有効成分１００ｍｇ、カルボキシメチルセルロースナトリウム１００ｍｇ、安息香酸５ｍｇ、ソルビトール溶液ＵＳＰ１．０ｇおよびバニリン０．０２５ｍＬを含むように、経口投与用に水系懸濁液を調製する。
【００８９】
本発明の化合物を段階的にまたは別の治療薬との併用で投与する場合には、同じ製剤を用いることができる。薬剤を物理的に組み合わせて投与する場合、製剤および投与経路は、組み合わせる薬剤の適合性に応じて選択すべきである。従って、共投与という用語は、２薬剤を同時または順次に投与すること、あるいは２種類の活性成分の固定用量の組み合わせとして投与することを含むものと理解される。
【００９０】
合成方法
本発明の化合物の製造方法は、下記の実施例に説明している。当分野の専門家であれば、別の経路は容易にわかるであろう。
【００９１】
本発明における一般構造ｉの化合物を製造する簡便な方法を図式１に示した。カルボン酸ｉｉは、１，２−ジクロロエタン、トルエン、キシレン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはＮ−メチルピロリジノンなどの溶媒中、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンまたは重炭酸ナトリウムなどの好適な塩基（必要に応じて）の存在下にＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド、１，１′−カルボニルジイミダゾールまたはビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロライドなどの試薬でアシル化のために活性化することができる。次に、一般構造ｉｉｉの２−（アミノ）アリールＮ−ヒドロキシアミジンを加えることで、アシルＮ−ヒドロキシアミジンｉｖを形成することができる。その中間体を、当業者には公知の方法（例：結晶化、シリカゲルクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ）を用いて単離することができ、そして次の段階で、好適な溶媒（例：１，２−ジクロロエタン、トルエン、キシレン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはＮ−メチルピロリジノン）中で加熱することで環化／脱水して、構造ｉの１，２，４−オキサジアゾールを得ることができる。ｉｉｉのｉｖへの変換では追加の塩基が必要な場合があるが、その場合にはピリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンまたはフッ化テトラブチルアンモニウムなどの試薬を用いることができる。Ｎ−ヒドロキシアミジンｉｖを単離しないことがより簡便または望ましい場合があるが、その場合にはｉｉからｉへの変換を連続工程として行うことができる。
【００９２】
活性化カルボン酸ｉｉ以外のアシル化剤を用いて化合物ｉを得ることが可能である。具体的には、カルボン酸ｉｉおよびアシル活性化剤に代えてカルボン酸クロライド、カルボン酸無水物、カルボキサミドまたはカルボニトリルを用いて、上記の１，２，４−オキサジアゾール化合物ｉを得ることが有利または望ましいものと考えられる。それらの他のアシル化剤を用いる１，２，４−オキサジアゾール類の製造方法ならびに本発明に関係する他の方法は当業者には公知であり、文献に総説が記載されている（Clapp, L. B.,″1,2,3- and 1,2,4-Oxadiazoles″, pp. 366-91 in Comprehensive Heterocyclic Chemistry, Volume 6, Potts, K. T., Editor, Pergamon Press, 1984参照）。
【００９３】
【化４】
2006528980.tif 000027
【００９４】
本発明における一般構造ｉの化合物の製造に用いることができる第２の方法を図式２に示した。カルボン酸ｉｉを図式１に記載の方法に従って活性化し、２−（置換）アリールＮ−ヒドロキシアミジンｖのアシル化に用いることができ、式中において官能基Ｘはフッ素、塩素、臭素、ヨウ素、シアノ、アルキルスルホニルオキシまたはアリールスルホニルオキシなどの脱離基である。化合物ｉｖへの変換および閉環によるｉの取得は、上記の方法を用いて行う。脱離基Ｘの置き換えを、室温以上にて好適な溶媒（例：メタノール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド）中アンモニア、アルキルアミンまたはジアルキルアミンでｖｉを処理することで行って、１，２，４−オキサジアゾールｉを得る。別法として、パークらの報告（Park and Cho, Tetrahedron Letters, 1997, 38, 8331-34）に報告されている方法によって、高温でジエタノールアミンの存在下にｖｉをＮ−メチルホルムアミドで処理することで、−ＮＲ１Ｒ２が−ＮＨＣＨ３である化合物ｉを得ることができる。
【００９５】
【化５】
2006528980.tif 000028
【００９６】
基Ｒ３〜Ｒ８の化学構造を化合物ｉで操作できることは明らかである。その例には、１）Ｒ３〜Ｒ８のうちの１以上が−ＯＨである場合、室温以上で好適な溶媒（塩化メチレン、アセトニトリル、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）中にて適切な塩基（例：Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、炭酸ナトリウム）の存在下にアルキルハライドまたはアルキルスルホン酸エステルでｉを処理することで、Ｒ３〜Ｒ８のうちの１以上がアルコキシである化合物ｉを得ることができる場合；２）Ｒ３〜Ｒ８のうちの１以上が−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３である場合、室温以上で好適な溶媒（例：エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジオキサン、トルエン）中にてパラジウム触媒（例：テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムまたはジクロロパラジウムビス（トリフェニルホスフィン）の存在下にアリールボロン酸および好適な塩基（水酸化ナトリウム、重炭酸カリウム）でｉを処理することで、Ｒ３〜Ｒ８のうちの１以上がアリールである化合物ｉを得ることができる場合などがある（それらに限定されるものではない）。
【００９７】
本発明の化合物の製造で使用されるＮ−ヒドロキシアミジン中間体ｉｉｉまたはｖを製造する上での簡便な方法を図式３に示した。いずれの中間体においても、室温以上で適切な溶媒（メタノール、エタノール、水、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）中にてヒドロキシルアミン（ヒドロキシルアミン水溶液から、あるいはトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンまたは重炭酸ナトリウムなどの塩基でヒドロキシルアミン塩酸塩を処理することで発生）によって相当するカルボニトリルｖｉｉｉまたはｉｘを処理する。カルボニトリルｖｉｉｉまたはｉｘならびにカルボン酸ｉｉのうちの多くが、商業的入手先から入手可能であるか、あるいは報告されている文献法を用いて当業者が製造することができる。
【００９８】
【化６】
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【００９９】
一般構造ｉはアキラルであるが、基Ｒ１〜Ｒ８のいずれかが不斉中心を有する可能性があることは明らかであり、その場合にはｉの個々の立体異性体は、立体特異的合成、エナンチオマー的に純粋な酸もしくは塩基を用いるｉの塩またはそれの製造で用いられるいずれかの中間体の分割、エナンチオマー的に純粋な固定相を用いるＨＰＬＣによるｉまたはそれの製造で用いられるいずれかの中間体の分割など（これらに限定されるものではない）の当業者には公知の方法によって得ることができる。
【０１００】
代表例
本発明の化合物を以下に例示する。
【０１０１】
全般的説明
溶液の濃縮は、減圧下にロータリーエバポレータによって行った。従来のフラッシュクロマトグラフィーは、シリカゲル（２３０〜４００メッシュ）で行った。フラッシュクロマトグラフィーは、記載された大きさのプレパックカートリッジ中のシリカゲル（３２〜６３ｍＭ、孔径６０Å）でのバイオテージ（Biotage）フラッシュクロマトグラフィー装置（ダイアクス（Dyax）社）を用いても行った。別段の記載がない限り、ＮＭＲスペクトラムはＣＤＣｌ３溶液中で得たものである。カップリング定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）単位である。略称：ジエチルエーテル（エーテル）、トリエチルアミン（ＴＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）、飽和水溶液（ｓａｔ′ｄ）、室温（ｒｔ）、時間（ｈ）、分（ｍｉｎ）。
【０１０２】
ＨＰＬＣ法
ＨＰＬＣ  Ａ：ＹＭＣ  ＯＤＳ  Ａ、５μ、４．６×５０ｍｍカラム、勾配：４．５分間かけて１０：９０から９５：５（体積比）ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ、次に９５：５（体積比）ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡで１．５分間保持；２．５ｍＬ／分、ダイオードアレイ検出２００〜４００ｎＭ。
【０１０３】
ＨＰＬＣ  Ｂ：アナリティカル・セールズ・アンド・サービス（Analytical Sales and Service）のアーマー（ARMOR）Ｃ１８  ５ｍ、２×２５ｍｍカラム、勾配：１５分かけて１０：９０から１００：０（体積比）ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡ、次に１００：０（体積比）ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ＋０．０５％ＴＦＡで１０分間保持；２０ｍＬ／分、ダイオードアレイ検出２００〜４００ｎＭ。
【０１０４】
Ｎ−ヒドロキシアミジン中間体の製造
Ｎ−ヒドロキシアミジン１
２−クロロ−Ｎ−ヒドロキシ−ニコチンアミジン
２−クロロ−３−ピリジン−カルボニトリル（５．００ｇ、３７ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（３．７３ｇ、５４ｍｍｏｌ）および重炭酸ナトリウム（９．１０ｇ、１０８ｍｍｏｌ）の混合物を一緒に、ＣＨ３ＯＨ（２５０ｍＬ）中で５０℃にて１６時間攪拌した。反応液を冷却し、濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄し、濾液を濃縮して、黄色固体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．４３（ｄｄ、Ｊ＝１．９，７．６、１Ｈ）、７．８８（ｄｄ、Ｊ＝１．９，７．６、１Ｈ）、７．４４（ｄｄ、Ｊ＝４．５、７．５、１Ｈ）。
【０１０５】
Ｎ−ヒドロキシアミジン２〜６
２−クロロ−３−ピリジン−カルボニトリルに代えて適切なニトリルを用い、Ｎ−ヒドロキシアミジン１について記載のものと同様の手順を用いて下記のＮ−ヒドロキシアミジン中間体を製造した。
【０１０６】
【表４】
2006528980.tif 000030
2006528980.tif 000031
【０１０７】
Ｎ−ヒドロキシアミジン７
２−（Ｎ−メチルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ニコチンアミジン
２−クロロ−３−ピリジン−カルボニトリル１０ｇ（７２ｍｍｏｌ）、４０％メチルアミンのＨ２Ｏ溶液４０ｍＬおよびｉＰｒＯＨ  ２０ｍＬの混合物を、５５℃で１．５時間攪拌した。ヒドロキシルアミン水溶液（６．０ｍＬ、５０重量％／Ｈ２Ｏ）を加え、得られた混合物を５５℃で１時間攪拌した。溶液を冷却して室温とした。沈殿した固体を濾過し、冷（０℃）１：１（体積比）ｉＰｒＯＨ／Ｈ２Ｏ  ５０ｍＬで洗浄し、乾燥して、標題化合物７．５２ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ９．８８（ｂｒｓ、１Ｈ）、８．１１（ｑ、Ｊ＝４．５、１Ｈ）、８．０２（ｄｄ、Ｊ＝１．５，５．０、１Ｈ）、７．７５（ｄｄ、Ｊ＝１．５、７．５、１Ｈ）、６．５４（ｄｄ、Ｊ＝５．０、７．５、１Ｈ）、５．９０（ｓ、２Ｈ）、２．８９（ｄ、Ｊ＝４．５、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ１６７（Ｍ＋Ｈ）。
【０１０８】
Ｎ−ヒドロキシアミジン８
２−（アミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ニコチンアミジン
２−アミノ−３−ピリジン−カルボニトリル（０．５０ｇ、４．２ｍｍｏｌ）およびヒドロキシルアミン（０．４２ｇ、５０％Ｈ２Ｏ溶液）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）溶液を、５０℃で１６時間攪拌した。反応液を冷却し、濃縮した。溶離液としてＥｔＯＡｃを用いるバイオテージ４０Ｓカートリッジでのクロマトグラフィーによって、標題化合物０．５０ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ７．９１（ｄｄ、Ｊ＝１．８、５．０、１Ｈ）、７．７６（ｄｄ、Ｊ＝１．９，７．８、１Ｈ）、６．６６（ｄｄ、Ｊ＝５．２、７．７、１Ｈ）。
【０１０９】
Ｎ−ヒドロキシアミジン９
３−（Ｎ−メチルアミノ）−ピラジン−２−（Ｎ−ヒドロキシアミジン）
段階Ａ：２−（Ｎ−メチルアミノ）−３−シアノピラジン
４０％メチルアミン水溶液３．０ｍＬおよびＴＥＡ  ３．８ｍＬ（２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を、ピラジン−２，３−ジカルボニトリル１．３５ｇ（１０．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液に４５分間かけて滴下した。得られた混合物を１５分間攪拌し、濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２１００ｍＬと１Ｎ  ＨＣｌ  ５０ｍＬとの間で分配した。層を分離し、水層をＣＨ２Ｃｌ２１００ｍＬで抽出した。有機抽出液を合わせ、脱水し、濃縮した。９：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるバイオテージ４０Ｓカートリッジでのクロマトグラフィーによって、標題化合物４４６ｍｇを得た。ＥＳＩ−ＭＳ１３５（Ｍ＋Ｈ）；ＨＰＬＣ  Ａ：３．０３分。
【０１１０】
段階Ｂ：３−（Ｎ−メチルアミノ）−ピラジン−２−（Ｎ−ヒドロキシアミジン）
３−（Ｎ−メチルアミノ）−ピラジン−２−（Ｎ−ヒドロキシアミジン）（段階Ａから）４４６ｍｇ（３．３ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩４８６ｍｇ（７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ  １．２ｍＬ（７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中混合物を、３０分間加熱還流した。混合物を冷却して０℃とした。沈殿した固体を濾過し、冷ＥｔＯＨで洗い、乾燥させて、標題化合物３４０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１０．２（ｓ、１Ｈ）、８．３６（ｑ、Ｊ＝４．５、１Ｈ）、８．０７（ｄ、Ｊ＝２．５、１Ｈ）、７．７７（ｄ、Ｊ＝２．５、１Ｈ）、５．９７（ｓ、２Ｈ）、２．９３（ｄ、Ｊ＝４．５、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ１３５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１１】
Ｎ−ヒドロキシアミジン１０
２−（Ｎ−メチルアミノ）−５−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシニコチンアミジン
段階Ａ：２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチンアミド
２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチンアミド（５．５０ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５０ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（２滴）中混合物を冷却して０℃とし、それにオキサリルクロライド（６．７２ｍＬ、７８．６ｍｍｏｌ）を滴下し、冷却浴を外した。２時間後、反応混合物を減圧下に濃縮し、残留物をトルエンとともに共沸脱水した（１０ｍＬで１回）。得られた褐色残留物をジオキサン（５０ｍＬ）に溶かし、濃ＮＨ４ＯＨを滴下した。混合物を室温で１６時間攪拌し、減圧下に濃縮し、５０％Ｅｔ２Ｏ／ｉ−ＰｒＯＨ（３０ｍＬ）から０℃で磨砕して、標題化合物５．４８ｇをベージュ固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ６．２７（ｂｒ、１Ｈ）、６．７８（ｂｒ、１Ｈ）、８．１１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）。
【０１１２】
段階Ｂ：２−クロロ−５−フルオロニコチンアミド
Ｎ２雰囲気下に、２，６−ジクロロ−５−フルオロニコチンアミド（５００ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（２５８ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）およびＰｔＯ２（２５ｍｇ）を合わせた。ＥｔＯＡｃ（２．５ｍＬ）およびＣＨ３ＯＨ（２．５ｍＬ）を加え、次に風船で１気圧の水素を加えた。２６時間後、反応混合物をセライト（登録商標）で濾過し、減圧下に濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で処理し、濾過し、濾液を減圧下に濃縮した。残留物をＳｉＯ２でのフラッシュクロマトグラフィー（１、２％ＣＨ３ＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、標題化合物１３０ｍｇを白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ７．７９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８、７．７Ｈｚ）、８．３７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．８Ｈｚ）。
【０１１３】
段階Ｃ：２−クロロ−５−フルオロピリジン−３−カルボニトリル
２−クロロ−５−フルオロニコチンアミド（８８０ｍｇ、５．０４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５５ｍＬ、１１．１ｍｍｏｌ）および塩化メチレン（１５ｍＬ）の混合物を冷却して０℃とし、それに無水トリフルオロ酢酸（７８３μＬ、５．５５ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた黄色溶液を０℃で１時間攪拌し、塩化メチレン（５ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬで２回）、ブライン（１０ｍＬで１回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水した。混合物を濾過し、減圧下に濃縮し、ＳｉＯ２でのフラッシュクロマトグラフィー（５，１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、標題化合物７７０ｍｇを白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．７７（ｄｄ、１ＨＪ＝３．０、６．９Ｈｚ）、８．４９（ｄ、１ＨＪ＝３．０Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１１１．３、１１３．３、１２９．４（Ｊ＝２１．１Ｈｚ）、１４１．５、（Ｊ＝２６．９Ｈｚ）、１４７．６、１５７．２（Ｊ＝２６０Ｈｚ）。
【０１１４】
段階Ｄ：５−フルオロ−２−メチルアミノピリジン−３−カルボニトリル
封管中、２−クロロ−５−フルオロピリジン−３−カルボニトリル（５９ｍｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）をジオキサン（１．５ｍＬ）に溶かした。２．０Ｍ  メチルアミンのＴＨＦ溶液（２８３μＬ、０．５６５ｍｍｏｌ）を加え、管を封止し、加熱して６０℃とした。３時間後、追加のメチルアミンのＴＨＦ溶液（２８３μＬ、０．５６５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１６時間加熱した。反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、ＳｉＯ２でのフラッシュクロマトグラフィー（５，７、１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、標題化合物２１ｍｇを白色フィルム状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ２．９３、（ｓ、３Ｈ）、７．６８（ｄｄ、１ＨＪ＝３．０、７．９Ｈｚ）、８．１９（ｄ、１ＨＪ＝３．０、Ｈｚ）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（ＨＰＬＣＡ）：１５２（Ｍ＋Ｈ）＋、１．９７分。
【０１１５】
段階Ｅ：２−（Ｎ−メチルアミノ）−５−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシニコチンアミジン
５−フルオロ−２−メチルアミノピリジン−３−カルボニトリルの純粋エタノール（１ｍＬ）およびトリエチルアミン（２８μＬ、０．１９８ｍｍｏｌ）中溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（１２ｍｇ、０．１７２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を加熱還流した。６時間後、反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、ＳｉＯ２でのフラッシュクロマトグラフィー（１０，２０、４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、標題化合物８．０ｍｇを白色フィルム状物として得た。ＨＰＬＣ／ＭＳ（ＨＰＬＣ  Ａ）：１５２（Ｍ＋Ｈ）＋、０．３３分。
【０１１６】
Ｎ−ヒドロキシアミジン１１
２−アミノ−５−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシニコチンアミジン
段階Ａ：２−アミノ−５−フルオロピリジン−３−カルボニトリル
封管中、２−クロロ−５−フルオロピリジン−３−カルボニトリル（１００ｍｇ、０．６３９ｍｍｏｌ、Ｎ−ヒドロキシアミジン１０段階Ｃから）のジオキサン（１ｍＬ）溶液に濃アンモニア（０．６ｍＬ）を加え、反応混合物を加熱して１１０℃とした。５時間後、反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（１０，２０、３０、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、標題化合物３１ｍｇを白色フィルム状物として得た（３５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ５．１６（ｂｒ、２Ｈ）、７．４５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．４、７．６Ｈｚ）、８．１５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．１Ｈｚ）。
【０１１７】
段階Ｂ：２−アミノ−５−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシニコチンアミジン
２−アミノ−５−フルオロピリジン−３−カルボニトリル（３８ｍｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍＬ）およびトリエチルアミン（５８μＬ、０．４１６ｍｍｏｌ）溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２３ｍｇ、０．３３３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を加熱還流した。６時間後、反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、ＳｉＯ２でのフラッシュクロマトグラフィー（３０，５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、標題化合物３５ｍｇを白色フィルム状物として得た（７４％）。ＨＰＬＣ／ＭＳ（ＨＰＬＣ  Ａ）：１７１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１１８】
カルボン酸中間体の製造
カルボン酸１
３−フルオロ−４−シクロペンチル−安息香酸
３−フルオロ−４−ブロモ−安息香酸ベンジル０．４５ｇ（１．４５ｍｍｏｌ）（０．４５ｇ、１．４５ｍｍｏｌ）の０．５Ｍシクロペンチル亜鉛ブロマイドのＴＨＦ溶液（４．４ｍＬ）中溶液を、ビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）約５ｍｇで処理し、得られた混合物を室温で２４時間攪拌した。反応混合物を、溶離液として１：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを用いるバイオテージ４０Ｓカートリッジで直接精製した。得られた固体（０．２７ｇ、０．９１ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／ＣのＭｅＯＨ（５ｍＬ）中混合物を、１気圧のＨ２下に３時間攪拌した。反応液を濾過し、濃縮した。ＨＰＬＣ  Ｂによる精製によって、標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．８３（ｄｄ、Ｊ＝１．６、８．０、１Ｈ）、７．７２（ｄｄ、Ｊ＝１．６、１０．５、１Ｈ）、７．３６（ｔ、Ｊ＝７．７、１Ｈ）、３．３０（ｍ、１Ｈ）、２．０５〜２．１４（ｍ、２Ｈ）、１．５８〜１．９０（ｍ、６Ｈ）。
【０１１９】
カルボン酸２
（＋／−）−４−（１−オキソ−２−メチルブチル）安息香酸
段階Ａ：（＋／−）−４−（１−オキソ−２−メチルブチル）安息香酸エチル
（＋／−）−２−メチルブチリルクロライド０．５８ｇ（４．５ｍｍｏｌ）の０．５Ｍの４−（エトキシカルボニル）フェニル亜鉛ヨージドのＴＨＦ溶液（１０ｍＬ）中溶液を、ビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）約５ｍｇで処理し、得られた混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ酢酸エチル５０ｍＬと２Ｎ  ＨＣｌ  ２５ｍＬとの間で分配し、層を分離した。有機層を飽和ＮａＣｌ  ２５ｍＬで洗浄し、脱水し、濃縮した。１５：１（体積比）ヘキサン／酢酸エチル（１５：１）を溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．１２（ｄ、Ｊ＝８．４、２Ｈ）、７．９８（ｄ、Ｊ＝８．５、２Ｈ）、４．４０（ｑ、Ｊ＝７．２、２Ｈ）、３．４０（ｍ、１Ｈ）、１．８３（ｍ、１Ｈ）、１．５１（ｍ、１Ｈ）、１．４１（ｔ、Ｊ＝７．２、３Ｈ）、１．２０（ｄ、Ｊ＝６．８３Ｈ）、０．９１（ｔ、Ｊ＝７．５、３Ｈ）。
【０１２０】
段階Ｂ：（＋／−）−４−（１−オキソ−２−メチルブチル）安息香酸
（＋／−）−４−（１−オキソ−２−メチルブチル）安息香酸エチル（段階Ａから）０．５７ｇ（２．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）、ＴＨＦ（３ｍＬ）および５Ｎ  ＮａＯＨ（２．４ｍＬ）溶液を、室温で１６時間攪拌した。混合物をＨ２Ｏ  ２０ｍＬで希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２２５ｍＬで抽出した。水層を酸性とし（ｐＨ１）、ＥｔＯＡｃ  ５０ｍＬで抽出した。有機層を飽和ＮａＣｌ  ２５ｍＬで洗浄し、脱水し、濃縮して、標題化合物０．４１ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．２１（ｄ、Ｊ＝８．４、２Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝８．５、２Ｈ）、３．４１（ｍ、１Ｈ）、１．８５（ｍ、１Ｈ）、１．５２（ｍ、１Ｈ）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６．９、３Ｈ）、０．９３（ｔ、Ｊ＝７．５、３Ｈ）。
【０１２１】
カルボン酸３
４−（１−オキソ−２−メチルプロピル）安息香酸
段階Ａで（＋／−）−２−メチルブチリルクロライドに代えてイソブチリルクロライドを用い、カルボン酸２について記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．２１（ｄ、Ｊ＝８．５、２Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝８．５，２Ｈ）、３．５７（ｍ、１Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．９、６Ｈ）。
【０１２２】
カルボン酸４
４−（シクロブチルジフルオロメチル）安息香酸
段階Ａ：４−（シクロブチルカルボニル）安息香酸エチル
段階Ａで（＋／−）−２−メチルブチリルクロライドに代えてシクロブタンカルボニルクロライドを用い、カルボン酸２について記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．１０（ｄ、Ｊ＝８．２、２Ｈ）、７．９３（ｄ、Ｊ＝８．５，２Ｈ）、４．４０（ｑ、Ｊ＝７．２、２Ｈ）、４．０１（ｍ、１Ｈ）、２．３７〜２．４６（ｍ、２Ｈ）、２．２８〜２．３６（ｍ、２Ｈ）、２．０４〜２．１５（ｍ、１Ｈ）、１．８８〜１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．４１（ｔ、Ｊ＝７．１、３Ｈ）。
【０１２３】
段階Ｂ：４−（シクロブチルジフルオロメチル）安息香酸エチル
４−（シクロブチルカルボニル）安息香酸エチル（段階Ａから）８１０ｍｇ（３．５ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）溶液を［ビス（２−メトキシエチル）アミノ］硫黄トリフルオリド１．３０ｇ（５．９ｍｍｏｌ）およびＥｔＯＨ  ０．４１ｍＬ（０．７ｍｍｏｌ）で処理し、得られた混合物を８０℃で１８時間加熱した。反応液を濃縮した。２０：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．０７（ｄ、Ｊ＝８．２、２Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝８．５、２Ｈ）、４．３９（ｑ、Ｊ＝７．２，２Ｈ）、２．９６（ｍ、１Ｈ）、２．１５〜２．２７（ｍ、２Ｈ）、１．８０〜１．９９（ｍ、４Ｈ）、１．４０（ｔ、Ｊ＝７．１，３Ｈ）。
【０１２４】
段階Ｃ：４−（シクロブチルジフルオロメチル）安息香酸
４−（シクロブチルジフルオロメチル）安息香酸エチル（段階Ｂから）３６０ｍｇ（１．４ｍｍｏｌ）の１：１（体積比）ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を、１．０Ｎ  ＮａＯＨ  ２．１ｍＬで処理した。得られた混合物を５０℃で３時間攪拌し、冷却し、濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと２Ｎ  ＨＣｌとの間で分配した。有機層を２Ｎ  ＨＣｌ（２５ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ  ２５ｍＬで洗浄し、脱水し、濃縮して、標題化合物２８０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．１５（ｄ、Ｊ＝８．５，２Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝８．４，２Ｈ）、２．９７（ｍ、１Ｈ）、２．１７〜２．２７（ｍ、２Ｈ）、１．８０〜２．０２（ｍ、４Ｈ）。
【０１２５】
カルボン酸５
４−（１，１−ジフルオロ−２−メチルプロピル）安息香酸
段階Ｂで４−（シクロブチルカルボニル）安息香酸エチルに代えて４−（イソプロピルカルボニル）安息香酸エチルを用い、カルボン酸４について記載のものと同様の手順を用いて、標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．１７（ｄ、Ｊ＝８．３、２Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝８．４、２Ｈ）、２．３４（ｍ、１Ｈ）、１．００（ｄ、Ｊ＝６．８，６Ｈ）。
【０１２６】
カルボン酸６
３−フルオロ−４−（２−メチルプロピオニル）安息香酸
段階Ａ：１−ブロモ−３−フルオロ−４−（２′−メチル）プロピオフェノン
Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル（４−ブロモ−２−フルオロ）ベンズアミド１．００ｇ（３．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−７８℃で、２．０ＭイソプロピルマグネシウムクロライドのＴＨＦ溶液２．３ｍＬで処理した。反応液を昇温させて室温とし、３時間攪拌した。反応液をエチルエーテル５０ｍＬで希釈し、２Ｎ  ＨＣｌ  ２５ｍＬ、飽和ＮａＣｌ  ２５ｍＬで洗浄し、脱水し、濃縮した。５０：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物１４３ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ７．６７（ｔ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．３８（ｄｄ、Ｊ＝１．８、８．４、１Ｈ）、７．３３（ｄｄ、Ｊ＝１．６、１０．３、１Ｈ）、３．３５（ｍ、１Ｈ）、１．１９（ｄ、Ｊ＝６．９、６Ｈ）。
【０１２７】
段階Ｂ：３−フルオロ−４−イソブチリル安息香酸
１−ブロモ−３−フルオロ−４−（２′−メチル）プロピオフェノン（段階Ａから）１４３ｍｇ（０．５８ｍｍｏｌ）、シアン化亜鉛４１ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）−ジパラジウム（０）１１ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）および１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン（１５ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）１５ｍｇ（０．０２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）および水（０．０３０ｍＬ）中溶液を、８５℃で３時間加熱した。反応液を冷却し、シリカゲルに乗せ、ヘキサン／酢酸エチル（２０：１）で溶離して、生成物を黄色固体として得た（３６ｍｇ）。その固体のメタノール（２ｍＬ）溶液を、過剰の５Ｎ  ＮａＯＨで処理し、６０℃で３時間加熱した。反応液を冷却し、ＥｔＯＡｃ  ５０ｍＬで希釈し、２Ｎ  ＨＣｌ  ２５ｍＬで洗浄し、脱水し、濃縮して、標題化合物を得た。
【０１２８】
カルボン酸７
３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
段階Ａ：３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゾニトリル
４−フルオロ−３−トリフルオロメチルベンゾニトリル１．１ｇ（５．９ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−（＋）−２−ブタノール４８５ｍｇ（６．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−１０℃で、水素化ナトリウム２３５ｍｇ（５．９ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を冷却下に２時間攪拌し、Ｈ２Ｏ  １０ｍＬで反応停止した。反応停止した溶液をＥｔ２Ｏ  ３０ｍＬで抽出し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮した。４：１（体積比）ヘキサン／酢酸エチルを溶離液として用いるバイオテージ４０Ｍカートリッジでのクロマトグラフィーによって、標題化合物５５０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ０．９９（ｔ、Ｊ＝７．６、３Ｈ）、１．３５（ｄ、Ｊ＝６．２、３Ｈ）、１．５８〜１．８３（ｍ、２Ｈ）、４．５１（７重線、１Ｈ）、７．０４（ｄ、Ｊ＝８．７、１Ｈ）、７．７５（ｄ、Ｊ＝８．７，１Ｈ）、７．８５（ｓ、１Ｈ）。
【０１２９】
段階Ｂ：３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−メチルプロピルオキシ）ベンゾニトリル（段階Ａから）５５０ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液を、５．０Ｎ  ＮａＯＨ  １．５ｍＬで処理し、８０℃で３時間加熱した。反応液を濃縮し、２Ｎ  ＨＣｌで処理し、ＥｔＯＡｃ３０ｍＬで抽出し、脱水し、濃縮して、標題化合物６００ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ０．９９（ｔ、Ｊ＝７．３、３Ｈ）、１．４３（ｄ、Ｊ＝５．９、３Ｈ）、１．７３〜１．８３（ｍ、２Ｈ）、４．５４（７重線、１Ｈ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝８．９、１Ｈ）、８．２１（ｄ、Ｊ＝８．９、１Ｈ）、８．３２（ｓ、１Ｈ）。
【０１３０】
カルボン酸８〜１４
段階Ａで（Ｓ）−２−ブタノールに代えて適切なアルコールを用い、カルボン酸７について記載のものと同様の手順を用いて、下記の中間体を製造した。
【０１３１】
【表５】
2006528980.tif 000032
2006528980.tif 000033
【０１３２】
カルボン酸１５
３−トリフルオロメチル−４−（１−（Ｓ）−メチル−２，２，２−トリフルオロエトキシ）安息香酸
段階Ａ：１−（Ｓ）−メチル−２，２，２−トリフルオロエタノール
標題化合物を、ラマチャンドランら（Ramachandran, P. V. , et. al. in Tetrahedron, 1993, 49 (9), 1725-38）が報告している手順を用いて製造した。
【０１３３】
段階Ｂ：３−トリフルオロメチル−４−（１−（Ｓ）−メチル−２，２，２−トリフルオロエトキシ）安息香酸
カルボン酸７段階Ａで（Ｓ）−２−ブタノールに代えて１−（Ｓ）−メチル−２，２，２−トリフルオロエタノール（段階Ａから）を用い、カルボン酸７について記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。標題化合物を相当するメチルエステル（過剰の２．０Ｍトリメチルシリルジアゾメタンのシクロヘキサン溶液、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ、５分）に変換し、ＨＰＬＣによって定量することで、標題化合物のエナンチオマー純度を求めた。条件：キラルセルＯＤ４．６×２５０ｍｍカラム、９８：２（体積比）ヘプタン／ｉＰｒＯＨ、１．０ｍＬ／分、λ＝２５４ｎＭ。（Ｒ）−エナンチオマー＝８．５分、（Ｓ）−エナンチオマー＝１０．４分。
【０１３４】
カルボン酸１６
３−フルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ安息香酸
段階Ａ：３−フルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンズアルデヒド
３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド７５０ｍｇ（５．４ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（−）−２−ブタノール４０３ｍｇ（５．４ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン２ｇ（７．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート１．５ｍＬで処理した。得られた
【０１３５】
段階Ｃ：３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−メチルプロピルオキシ）ベンゾニトリルに代えて３，５−ジフルオロ−４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）ベンゾニトリル（段階Ｂから）を用い、カルボン酸７段階Ｂに記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ１．０（ｔ、Ｊ＝７．３、３Ｈ）、１．３２（ｄ、Ｊ＝５．９、３Ｈ）、１．６８（ｍ、１Ｈ）、１．７９（ｍ、１Ｈ）、４．４５（ｍ、１Ｈ）、７．６５（ｄ、Ｊ＝８．３，２Ｈ）。
【０１３６】
カルボン酸１８
４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
段階Ａ：４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸メチル
３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒドに代えて４−ヒドロキシ安息香酸メチルを用い、カルボン酸１６段階Ａに記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。
【０１３７】
段階Ｂ：４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸
４−（２−（Ｓ）−ブトキシ）安息香酸メチル１．０ｇ（４．８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）溶液を、室温で１時間にわたり５．０Ｎ  ＮａＯＨ  １ｍＬで処理した。溶液を濃縮し、２Ｎ  ＨＣｌ  ６ｍＬで酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出し、脱水し、濃縮して、標題化合物８００ｍｇ（８６％）を得た。
【０１３８】
カルボン酸１９
４−（２−（Ｓ）−ブトキシ−２−フルオロ−安息香酸
段階Ａ：４−（２−（Ｓ）−ブトキシ−２−フルオロ−ベンゾニトリル
３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアルデヒドに代えて２−フルオロ−４−ヒドロキシ−ベンゾニトリルを用い、カルボン酸１６段階Ａに記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。
【０１３９】
段階Ｂ：４−（２−（Ｓ）−ブトキシ−２−フルオロ−安息香酸
４−（２−（Ｓ）−ブトキシ−２−フルオロ−ベンゾニトリル（段階Ａから）７７０ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ  ２０ｍＬおよび５Ｎ  ＮａＯＨ  ８ｍＬ（８ｍＬ）の混合物を、８０℃で２０時間攪拌した。溶液を濃縮し、２Ｎ  ＨＣｌで酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出し、脱水し、濃縮して、標題化合物０．５７ｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ７．９９（ｔ、Ｊ＝８．８、１Ｈ）、６．７５（ｄｄ、Ｊ＝２．０、６．９、１Ｈ）、６．６６（ｄｄ、Ｊ＝２．１、１１．０、１Ｈ）、４．３８〜４．４４（ｍ、２Ｈ）、１．７５〜１．８５（ｍ、１Ｈ）、１．６５〜１．７５（ｍ、１Ｈ）、１．３７（ｄ、Ｊ＝６．０、３Ｈ）、１．０２（ｔ、Ｊ＝７．４，３Ｈ）。
【０１４０】
カルボン酸２０
３，５−ジフルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）安息香酸
段階Ａ：５−ブロモ−１，３−ジフルオロ−２−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）ベンゼン
４−ブロモ−２，６−ジフルオロフェノール１．２５ｇ（６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム３．９３ｇ（１２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中混合物を、トリフルオロメタンスルホン酸２，２，２−トリフルオロエチル１．４ｇ（６ｍｍｏｌ）で処理し、室温で２時間攪拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、２Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機層を脱水し、濃縮した。９：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物２３０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ７．１６（ｄ、Ｊ＝７．３、２Ｈ）、４．４１〜４．５０（ｍ、２Ｈ）。
【０１４１】
段階Ｂ：３，５−ジフルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）ベンゾニトリル
５−ブロモ−１，３−ジフルオロ−２−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）ベンゼン（段階Ａから）２３０ｍｇ（１．８ｍｍｏｌ）、シアン化亜鉛６３ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）４１ｍｇ（０．０９ｍｍｏｌ）および１，１′−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン６０ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）および水（１５μＬ）中混合物を、９５℃で２時間加熱した。反応混合物を冷却し、濃縮した。９：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物５０ｍｇを得た。
【０１４２】
段階Ｃ：３，５−ジフルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）安息香酸
３−トリフルオロメチル−４−（２−（Ｓ）−メチルプロピルオキシ）ベンゾニトリルに代えて３，５−ジフルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）ベンゾニトリルを用い、カルボン酸７段階Ｂに記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ７．７１（ｄ、Ｊ＝８．１、２Ｈ）、４．５８〜４．６４（ｍ、２Ｈ）。
【０１４３】
カルボン酸２１
５−（２−メチル−１−オキソプロピル）ピリジン−２−カルボン酸
段階Ａ：（＋／−）−５−（２−メチル−１−ヒドロキシプロピル）−２−ブロモピリジン
２，５−ジブロモピリジン１．００ｇ（４．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を０℃で、２ＭイソプロピルマグネシウムクロライドのＴＨＦ溶液２．５ｍＬで処理し、得られた混合物を冷却下に１時間攪拌した。混合物をイソブチルアルデヒド０．４６ｍＬ（５．１ｍｍｏｌ）で処理し、昇温させて室温とし、１６時間攪拌した。混合物をＥｔＯＡｃ５０ｍＬと水５０ｍＬとの間で分配し、層を分離した。有機層を飽和ＮａＣｌ  ２５ｍＬで洗浄し、脱水し、濃縮した。３：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物２９０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．２９（ｄ、Ｊ＝２．３，、１Ｈ）、７．５５（ｄｄ、Ｊ＝２．３、８．０、１Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝８．３、１Ｈ）、４．４５（ｄ、Ｊ＝６．７、１Ｈ）、１．９４（ｍ、１Ｈ）、０．９７（ｄ、Ｊ＝６．６、３Ｈ）、０．８５（ｄ、Ｊ＝６．９、３Ｈ）。
【０１４４】
段階Ｂ：５−（２−メチル−１−オキソプロピル）−２−ブロモピリジン
５−（２−メチル−１−ヒドロキシプロピル）−２−ブロモピリジン（段階Ａから）２９０ｍｇ（１．２５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキサイド２２０ｍｇ（１．９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中混合物を、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム２０ｍｇで処理した。混合物を室温で３時間攪拌した。１０：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いる反応混合物のシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物２３０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．２９（ｄ、Ｊ＝２．５、１Ｈ）、８．０７（ｄｄ、Ｊ＝２．６、８．３、１Ｈ）、７．６１（ｄ、Ｊ＝８．５、１Ｈ）、３．４５（ｍ、１Ｈ）、１．２３（ｄ、Ｊ＝６．８、６Ｈ）。
【０１４５】
段階Ｃ：５−（２−メチル−１−オキソプロピル）ピリジン−２−カルボニトリル
５−（２−メチル−１−オキソプロピル）−２−ブロモピリジン（段階Ｂから）３００ｍｇ（１．３ｍｍｏｌ）、シアン化亜鉛（０．０９３ｇ、０．７８９ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）−ジパラジウム（０）（２４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）および１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）−フェロセン（３３ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）および水（０．０３ｍＬ）溶液を、８０℃で２．５時間加熱した。反応液を冷却し、シリカゲルに乗せ、５：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃで溶離して、生成物２２４ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ９．２１（ｄ、Ｊ＝１．８、１Ｈ）、８．３４（ｄｄ、Ｊ＝２．３、８．０、１Ｈ）、７．８３（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、３．５０（ｍ、１Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．８、６Ｈ）。
【０１４６】
段階Ｄ：５−（２−メチル−１−オキソプロピル）ピリジン−２−カルボン酸
５−（２−メチル−１−オキソプロピル）ピリジン−２−カルボニトリル（段階Ｃから）１２５ｍｇ（０．７ｍｍｏｌ）および５．０Ｎ  ＮａＯＨ  ０．７ｍＬのＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）溶液を７５℃で１時間攪拌した。反応液を冷却し、ＥｔＯＡｃ  ５０ｍＬで希釈し、２Ｎ  ＨＣｌ  ２０ｍＬ、飽和ＮａＣｌ  ２５ｍＬで洗浄し、脱水し、濃縮して、標題化合物１０８ｍｇを得た。
【０１４７】
カルボン酸２２
５−（１，１−ジフルオロ−２−メチルプロピル）ピリジン−２−カルボン酸
カルボン酸４段階ＢおよびＣに記載のものと同様の手順を用いて、５−（２−メチル−１−オキソプロピル）ピリジン−２−カルボニトリル（カルボン酸２１段階Ｃから）から標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．７１（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、８．０１（ｄｄ、Ｊ＝２．１、８．３、１Ｈ）、２．３７（ｍ、１Ｈ）、１．０４（ｄ、Ｊ＝６．９、６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ：２１６．７（Ｍ＋Ｈ）。
【０１４８】
カルボン酸２３
（Ｓ）−４−（３，３−ジフルオロシクロペンチル）安息香酸
段階Ａ：（Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）シクロペンタノン
４−ブロモフェニルボロン酸７．２ｇ（３５．８ｍｍｏｌ）、アセチルアセトナトビス（エチレン）ロジウム（Ｉ）１８６ｍｇ（０．７２ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−２，２′−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１′−ビナフチル（ＢＩＮＡＰ）４４６ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）のジオキサン（６０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）中混合物に窒素下にて、２−シクロペンテン−１−オン１．０ｍＬ（１１．９ｍｍｏｌ）を加えた。５．５時間還流させた後、反応液を濃縮した。残留物を、ＥｔＯＡｃ３００ｍＬと１Ｎ  ＮａＨＣＯ３３００ｍＬとの間で分配した。相を分離した後、有機層をブライン３００ｍＬで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮した。残留物を、９：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いる４０Ｍバイオテージカラムで精製して、標題化合物１．９０ｇを白色固体として得た。１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ１．９７（ｍ、１Ｈ）、２．２９〜２．３７（ｍ、２Ｈ）、２．４３〜２．５２（ｍ、２Ｈ）、２．６９（ｍ、１Ｈ）、３．４０（ｍ、１Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝８．５，２Ｈ）、７．４９（ｄ、Ｊ＝８．５、２Ｈ）。
【０１４９】
段階Ｂ：（Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）−１，１−ジフルオロシクロペンタン
［ビス（２−メトキシエチル）アミノ］硫黄トリフルオリド２．１ｍＬ（１１．４ｍｍｏｌ）および三フッ化ホウ素・エーテラート０．１０ｍＬ（０．７ｍｍｏｌ）のトルエン（７ｍＬ）中混合物を０℃で、時々攪拌しながら１．３時間放置した。（Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）シクロペンタノン（段階Ａから）１．９ｇ（７．９ｍｍｏｌ）のトルエン（１３ｍＬ）溶液を加えた。反応液を５５℃で２日間攪拌した。冷却後、混合物を、２Ｎ  ＮａＯＨ  ２５０ｍＬおよびＥｔ２Ｏ  ２５０ｍＬに０℃で加えた。３０分間攪拌後、相を分離した。有機層を１Ｎ  ＮａＯＨ  ２５０ｍＬおよびＨ２Ｏ  ２５０ｍＬで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濃縮した。残留物を、４９：１（体積比）ヘキサン／Ｅｔ２Ｏを溶離液として用いる４０Ｍバイオテージカラムで精製して、標題化合物１．４７ｇを得た。１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）δ１．８５（ｍ、１Ｈ）、２．０９〜２．２６（ｍ、３Ｈ）、２．３５（ｍ、１Ｈ）、２．５６（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｍ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、Ｊ＝８．３、２Ｈ）、７．４６（ｄ、Ｊ＝８．３、２Ｈ）。
【０１５０】
段階Ｃ：（Ｓ）−４−（３，３−ジフルオロシクロペンチル）安息香酸
（Ｓ）−３−（４−ブロモフェニル）−１，１−ジフルオロシクロペンタン（段階Ｂから）１．０ｇ（３．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−７８℃で、２．５Ｍ  ＢｕＬｉのヘキサン溶液１．６ｍＬ（４．０ｍｍｏｌ）で処理した。１５分間攪拌後、反応液をドライアイスのＥｔ２Ｏ２００ｍＬ中の懸濁液に加えた。混合物を昇温させて室温とした。反応混合物を１Ｎ  ＮａＯＨ  １００ｍＬで抽出した。相を分離した後、水層を濃ＨＣｌでｐＨ１〜２の酸性とした。水相を、ＣＨ２Ｃｌ２１００ｍＬで３回抽出した。合わせた有機相を脱水し、濃縮して、標題化合物０．６７ｇを得た。１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ１．８７（ｍ、１Ｈ）、２．１３〜２．３７（ｍ、４Ｈ）、２．５４（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｍ、１Ｈ）、７．３９（ｄ、Ｊ＝８．２，２Ｈ）、７．９７（ｄ、Ｊ＝８．２，２Ｈ）。
【０１５１】
カルボン酸２４
（Ｒ）−４−（３，３−ジフルオロシクロペンチル）安息香酸
段階Ａで（Ｓ）−２，２′−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１′−ビナフチル（ＢＩＮＡＰ）に代えて（Ｒ）−２，２′−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１′−ビナフチル（ＢＩＮＡＰ）を用いた以外は、カルボン酸２３におけるものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。
【実施例】
【０１５２】
実施例化合物の製造
実施例１
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
段階Ａ：３−（２−（クロロ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
４−（２−メチルプロピル）安息香酸５００ｍｇ（２．８ｍｍｏｌ）、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩６００ｍｇ（３．１ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．４２ｇ、３．０９ｍｍｏｌ）４２０ｍｇ（３．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中混合物を、室温で１０分間攪拌した。Ｎ−ヒドロキシアミジン１（６２０ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１２０℃で３時間加熱した。反応液を冷却し、濃縮した。３：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物１０３ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．５６（ｄｄ、Ｊ＝２．０，４．８、１Ｈ）、８．３８（ｄｄ、Ｊ＝２．１，７．６、１Ｈ）、８．１２（ｄ、Ｊ＝８．２、２Ｈ）、７．４２（ｄｄ、Ｊ＝４．８、７．６、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．２，２Ｈ）、２．５９（ｄ、Ｊ＝７．１，２Ｈ）、１．９４（ｍ、１Ｈ）、０．９４（ｄ、Ｊ＝６．７、６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３１４．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５３】
段階Ｂ：３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（２−（クロロ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２−メチルプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール（段階Ａから）５０ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）およびジエタノールアミン０．０５ｍＬのＮ−メチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液を、１２０℃で１６時間攪拌した。反応液を冷却し、濃縮した。５：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルでのクロマトグラフィーによって、標題化合物２０ｍｇを白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．４３（ｄｄ、Ｊ＝２．１、７．８、１Ｈ）、８．３３（ｄｄ、Ｊ＝１．８、８．３、１Ｈ）、８．１２（ｄ、Ｊ＝８．３、２Ｈ）、７．３３（ｄ、Ｊ＝８．２，２Ｈ）、７．１４−７．２０（ｂｓ、１Ｈ）、６．７０（ｄｄ、Ｊ＝５．０，７．５、１Ｈ）、３．１８（ｄ、Ｊ＝４．６、３Ｈ）、２．５８（ｄ、Ｊ＝７．１、２Ｈ）、１．９４（ｍ、１Ｈ）、０．９４（ｄ、Ｊ＝６．６、６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３０９．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５４】
実施例２〜９
段階Ａで４−（２−メチルプロピル）安息香酸に代えて４−（シクロヘキシル）安息香酸を、そしてＮ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジンを用い、段階ＢでＮ−メチルホルムアミドに代えて適切なアミンを用い、実施例１に記載のものと同様の手順を用いて、下記の化合物を製造した。
【０１５５】
【表６】
2006528980.tif 000034
2006528980.tif 000035
【０１５６】
実施例１０〜１３
段階Ａで４−（２−メチルプロピル）安息香酸に代えて適切なカルボン酸を、そしてＮ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジン３を用い、実施例１に記載のものと同様の手順を用いて、下記の化合物を製造した。
【０１５７】
【表７】
2006528980.tif 000036
2006528980.tif 000037
【０１５８】
実施例１４〜１７
段階Ａで４−（２−メチルプロピル）安息香酸に代えて適切なカルボン酸を、段階ＢでＮ−メチルホルムアミドに代えて適切なアミンを用い、実施例１に記載のものと同様の手順を用いて、下記の化合物を製造した。
【０１５９】
【表８】
2006528980.tif 000038
2006528980.tif 000039
【０１６０】
実施例１９
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２，２−ジフルオロプロピル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸５０ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシアミジン１  ５０ｍｇ（０．３ｍｍｏｌ）および１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩７２ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（１ｍＬ）中混合物を、室温で６時間、次に８０℃で１６時間攪拌した。反応液を冷却し、濃縮した。１０：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物１９ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．４５（ｄ、Ｊ＝６．７，１Ｈ）、８．３４（ｄｄ、Ｊ＝１．９，４．８、１Ｈ）、８．１８（ｄ、Ｊ＝８．２，２Ｈ）、７．４８（ｄ、Ｊ＝８．３、２Ｈ）、６．７２（ｄｄ、Ｊ＝４．８，７．６、１Ｈ）、３．２０〜３．３０（ｍ、５Ｈ）、１．６０（ｄ、Ｊ＝１８．３、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３３１．３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６１】
実施例２０〜４６
４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えて適切なカルボン酸を、そしてＮ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジンを用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１６２】
【表９】
2006528980.tif 000040
2006528980.tif 000041
2006528980.tif 000042
2006528980.tif 000043
2006528980.tif 000044
2006528980.tif 000045
【０１６３】
実施例４７〜５６
４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えて適切なカルボン酸を、そしてＮ−ヒドロキシアミジン１に代えてＮ−ヒドロキシアミジン７を用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１６４】
【表１０】
2006528980.tif 000046
2006528980.tif 000047
2006528980.tif 000048
【０１６５】
実施例５８
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（５−（２−メチルプロピル）ピリジン−２−イル）−１，２，４−オキサジアゾール
段階Ａ：３−（２−（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）ピリジン−３−イル）−５−（５−ブロモピリジン−２−イル）−１，２，４−オキサジアゾール
５−ブロモピリジン−２−カルボン酸３００ｍｇ（１．４５ｍｍｏｌ）、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩３１０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．２２ｇ、１．６４ｍｍｏｌ）２２０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を、室温で２時間攪拌した。混合物をＮ−ヒドロキシアミジン１  ３１０ｍｇ（１．８ｍｍｏｌ）で処理し、室温で１時間、８０℃で１６時間攪拌した。反応液を冷却し、濃縮した。１：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物１９０ｍｇを得た。ＥＳＩ−ＭＳ４３７．９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６６】
段階Ｂ：３−（２−（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）ピリジン−３−イル）−５−（５−（２−メチルプロピル）ピリジン−２−イル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（２−（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）ピリジン−３−イル）−５−（５−ブロモピリジン−２−イル）−１，２，４−オキサジアゾール（段階Ａから）１９０ｍｇ（０．４３ｍｍｏｌ）の（１．０ｍＬ）０．Ｍイソブチル亜鉛ブロマイドのＴＨＦ溶液を、ビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）約２ｍｇで処理し、得られた混合物を室温で２時間攪拌した。３：２（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ４１４．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６７】
段階Ｃ：３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（５−（２−メチルプロピル）ピリジン−２−イル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（２−（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）ピリジン−３−イル）−５−（５−（２−メチルプロピル）ピリジン−２−イル）−１，２，４−オキサジアゾール（段階Ｂから）１００ｍｇ（０．２４ｍｍｏｌ）、ジエタノールアミン１００ｍｇのＮ−メチルホルムアミド（０．５ｍＬ）（０．５ｍＬ）中混合物を、１３０℃で１６時間攪拌した。反応液を冷却し、濃縮した。ＨＰＬＣ  Ｂによる精製によって標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．９１（ｄｄ、Ｊ＝１．３、７．５、１Ｈ）、８．７０（ｂｓ、１Ｈ）、８．４８（ｄ、Ｊ＝６．２、１Ｈ）、８．４３（ｂｓ、１Ｈ）、８．２５（ｄ、Ｊ＝８．０，１Ｈ）、７．７７（ｄｄ、Ｊ＝１．６、８．１、１Ｈ）、７．０２（ｔ、Ｊ＝６．２、１Ｈ）、３．４４（ｓ、３Ｈ）、２．６５（ｄ、Ｊ＝７．１、２Ｈ）、１．９７（ｍ、１Ｈ）、０．９８（ｄ、Ｊ＝６．６、６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３１０．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６８】
実施例５９
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−ブロモフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
Ｎ−ヒドロキシアミジン７  ５．０ｇ（３１．６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン４．６ｍＬ（３３．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を０℃で、４−ブロモベンゾイルクロライド６．９ｇ（３１．６ｍｍｏｌ）で処理した。反応液を０℃で１時間攪拌し、次に加熱して１２０℃で２時間経過させた。反応液を冷却し、メタノール（５０ｍＬ）で希釈し、生成物を濾過によって回収した（３．１ｇ）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．４１（ｄｄ、Ｊ＝１．８、７．６、１Ｈ）、８．３４（ｄｄ、Ｊ＝１．９、４．８、１Ｈ）、８．０８（ｄ、Ｊ＝８．５，２Ｈ）、７．７１（ｄ、Ｊ＝８．７，２Ｈ）、７．０８〜７．１４（ｂｓ、１Ｈ）、６．７０（ｄｄ、Ｊ＝４．８、７．５、１Ｈ）、３．１８（ｄ、Ｊ＝４．８、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３３３．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６９】
実施例６０
３−（（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
段階Ａ：３−（２−（クロロ）ピリジン−３−イル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
４−（２−メチルプロピル）安息香酸に代えて４−ヒドロキシ安息香酸を用い、実施例１段階Ａに記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。
【０１７０】
段階Ｂ：３−（２−（クロロ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（２−（クロロ）ピリジン−３−イル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール（段階Ａから）３５ｍｇおよび炭酸セシウム２１０ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（０．７ｍＬ）およびＴＨＦ（０．３ｍＬ）中混合物を、２，２，２−トリフルオロエトキシトリフルオロメタンスルホネート９０ｍｇ（０．３８ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を室温で２時間攪拌した。３：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物１５ｍｇを得た。ＥＳＩ−ＭＳ３５６．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７１】
段階Ｃ：３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（２−（クロロ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２，２，２−トリフルオロエトキシ）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール（段階Ｂから）１５ｍｇ、２ＭメチルアミンのＴＨＦ溶液０．１１ｍＬおよびメチルアミン（２．０ＭのＴＨＦ溶液）（０．１１ｍｏｌ、０．２１ｍｍｏｌ）および０．０３７ｍＬ（０．２１ｍｍｏｌ）の混合物を、６５℃で４８時間攪拌した。反応液を冷却し、濃縮した。８：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物６．２ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．５５（ｓ、１Ｈ）、８．３９（ｄ、Ｊ＝４．１、１Ｈ）、８．２４（ｄ、Ｊ＝８．５、２Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝８．５，２Ｈ）、６．８２（ｓ、１Ｈ）、４．４６〜４．５４（ｍ、２Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３５１．１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７２】
実施例６０ａ
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２−フルオロ−１−フルオロメチル）エトキシ−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
段階Ａ：３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−フルオロ−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
Ｎ−ヒドロキシアミジン７  ２００ｍｇおよびＴＥＡ  ０．４４ｍＬ（３．１ｍｍｏｌ）のトルエン（０．４ｍＬ）およびＤＭＦ（１．４ｍＬ）中混合物を０℃で、３−トリフルオロメチル−４−フルオロベンゾイルクロライド３６０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を１２０℃で２．５時間攪拌した。混合物を冷却し、ＣＨ２Ｃｌ２と水との間で分配した。有機層を分離し、脱水し、濃縮した。４：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物１５０ｍｇを得た。ＥＳＩ−ＭＳ３４０．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７３】
段階Ｂ：３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２−フルオロ−１−フルオロメチル）エトキシ−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
２−（Ｓ）−ブタノールに代えて１，３−ジフルオロ−２−プロパノールを用い、カルボン酸７段階Ａに記載のものと同様の手順を用いて、３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−フルオロ−３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール（段階Ａから）から標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．５１（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｄ、Ｊ＝７．１，３Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝８．７、２Ｈ）、６．８０（ｓ、１Ｈ）、４．９５〜５．０９（ｍ、１Ｈ）、４．８４（ｓ、２Ｈ）、４．７５（ｓ、２Ｈ）、３．２１〜３．３０（ｍ、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ４１５．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７４】
実施例６１
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル））−５−（４−（３−チエニル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−ブロモフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール（実施例６１から）５０ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）、３−チオフェンボロン酸２９ｍｇ（０．２３ｍｍｏｌ）およびフッ化カリウム２６ｍｇ（０．４５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を、酢酸パラジウム（ＩＩ）７ｍｇ（０．００３ｍｍｏｌ）および２−（ジシクロヘキシルホスフィノ）ビフェニル２．１ｍｇ（０．００６ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を５０℃で２時間攪拌し、冷却し、濃縮した。７：１（体積比）ヘキサン／ＥｔＯＡｃを溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物３０ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．４４（ｄｄ、Ｊ＝１．９、７．８、１Ｈ）、８．３４（ｄｄ、Ｊ＝１．８、４．８、１Ｈ）、８．２３（ｄ、Ｊ＝８．５、２Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝８．５，２Ｈ）、７．６３（ｄｄ、Ｊ＝１．４、２．７、１Ｈ）、７．４５〜７．４８（ｍ、２Ｈ）、７．１６〜７．２０（ｂｓ、１Ｈ）、６．７１（ｄｄ、Ｊ＝５．０、７．８、１Ｈ）、３．２０（ｄ、Ｊ＝４．８、３Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３３５．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７５】
実施例６２〜７１
チオフェン−３−ボロン酸に代えて適切なアリールボロン酸を用い、実施例６１に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１７６】
【表１１】
2006528980.tif 000049
2006528980.tif 000050
【０１７７】
実施例７２
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−（２−メチルプロピル）−３−（トリフルオロメチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）ピリジン−３−イル）−５−（４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール（実施例２４から）３０ｍｇ（０．０８５ｍｍｏｌ）の０．５Ｍイソブチル亜鉛ブロマイドのＴＨＦ溶液（１．０ｍＬ）中混合物を、ビス（トリ−ｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）２ｍｇ（結晶２個）で処理した。得られた混合物を室温で２０時間攪拌し、濃縮した。９：１ヘキサン／ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルクロマトグラフィーによって、標題化合物２．５ｍｇを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ８．５１（ｓ、１Ｈ）、８．４７（ｄ、Ｊ＝６．４、１Ｈ）、８．３８（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝７．３、１Ｈ）、７．５７（ｄ、Ｊ＝７．８、１Ｈ）、７．１４（ｓ、１Ｈ）、３．２３（ｓ、３Ｈ）、２．８０（ｄ、Ｊ＝６．６、２Ｈ）、２．００〜２．１０（ｍ、１Ｈ）、１．０１（ｄ、Ｊ＝６．２，６Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３７７．３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７８】
実施例７３〜８０
Ｎ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジンを、そして４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えて適切なカルボン酸を用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１７９】
【表１２】
2006528980.tif 000051
2006528980.tif 000052
【０１８０】
実施例８１〜８７
Ｎ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジンを、４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えてそして適切なカルボン酸を用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１８１】
【表１３】
2006528980.tif 000053
2006528980.tif 000054
【０１８２】
実施例８８〜９０
Ｎ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジンを、４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えてそして適切なカルボン酸を用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１８３】
【表１４】
2006528980.tif 000055
【０１８４】
実施例９１
３−（４−アミノピリミジン−５−イル）−５−（４−シクロヘキシルフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
Ｎ−ヒドロキシアミジン１に代えてＮ−ヒドロキシ（４−アミノピリミジン−５−イル）アミジンを、そして４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えて適切な４−シクロヘキシル安息香酸を用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ１．３１〜１．５６、（ｍ、５Ｈ）、１．７７〜１．９０（ｍ、５Ｈ）、２．６６（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、７．４９（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、８．１６（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、８．６９（ｓ、１Ｈ）、９．１０（ｓ、１Ｈ）；ＥＳＩ−ＭＳ３２２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１８５】
実施例９２〜１０２
Ｎ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジンを、そして４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えて適切なカルボン酸を用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１８６】
【表１５】
2006528980.tif 000056
2006528980.tif 000057
2006528980.tif 000058
【０１８７】
実施例１０３〜１０６
Ｎ−ヒドロキシアミジン１に代えて適切なＮ−ヒドロキシアミジンを、そして４−（２，２−ジフルオロプロピル）安息香酸に代えて適切なカルボン酸を用い、実施例１９に記載のものと同様の手順を用いて下記の化合物を製造した。
【０１８８】
【表１６】
2006528980.tif 000059
2006528980.tif 000060
【０１８９】
実施例１０７
３−（２−アミノ−５−フルオロピリジン−３−イル）−５−（３−トリフルオロメチル−４−（１，１，１−トリフルオロ−２−（Ｓ）−プロピルオキシ−１，２，４−オキサジアゾール
カルボン酸１５（５３ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１．０ｍＬ）中混合物に、ＥＤＣ−ＨＣｌ（３４ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、得られた溶液を、封管中のＮ−ヒドロキシアミジン１１とアセトニトリル（１．０ｍＬ）の混合物に加え、加熱して４０℃とした。４時間後、反応混合物を１２０℃で２０時間加熱した。反応混合物を冷却して室温とし、減圧下に濃縮し、ＳｉＯ２でのフラッシュクロマトグラフィー（１０，１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、標題化合物４０ｍｇを白色フィルム状物として得た。この取得物を、ＨＰＬＣによってさらに精製した。条件：キラルセルＯＤ４．６×２５０ｍｍカラム、６０：４０（体積比）ヘプタン／ｉＰｒＯＨ、１．０ｍＬ／分、λ＝２１０ｎＭ。（Ｒ）−エナンチオマー＝１２．６分、（Ｓ）−エナンチオマー＝１３．７分。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１．６１（ｄ、３Ｈ、Ｊ＝６．４Ｈｚ）、４．９１（７重線、１Ｈ、Ｊ＝６．１Ｈｚ）、６．０６（ｂｒ、２Ｈ）、７．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．９Ｈｚ）、８．１３、（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．０Ｈｚ）、８．２０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．０、８．７Ｈｚ）、８．３７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０、８．７Ｈｚ）、８．４８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０Ｈｚ）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（ＨＰＬＣ  Ａ）：４３７（Ｍ＋Ｈ）＋、３．８９分。
【０１９０】
実施例１０８
３−（２−（Ｎ−メチルアミノ）−５−フルオロピリジン−３−イル）−５−（３−トリフルオロメチル−４−（１，１，１−トリフルオロ−２−（Ｓ）−プロピルオキシ））フェニル）−１，２，４−オキサジアゾール
Ｎ−ヒドロキシアミジン１１に代えてＮ−ヒドロキシアミジン１０を用い、実施例１０７に記載のものと同様の手順を用いて標題化合物を製造した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１．６２（ｄ、３Ｈ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）、３．１５（ｄ、３Ｈ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）、４．９１（７重線、１Ｈ、Ｊ＝６．０Ｈｚ）、６．９５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．１Ｈｚ）、７．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．９Ｈｚ）、８．１９（ｄｄ、Ｊ＝３．０、８．７Ｈｚ）、８．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．９Ｈｚ）、８．３６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．１、８．７Ｈｚ）、８．４７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．１Ｈｚ）；ＨＰＬＣ／ＭＳ（ＨＰＬＣ  Ａ）：４５１（Ｍ＋Ｈ）＋、４．１８分。
【０１９１】
生理活性
本発明の化合物のＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３、Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５、Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６またはＳ１Ｐ５／Ｅｄｇ８活性を、下記のアッセイを用いて評価することができる。
【０１９２】
Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体へのリガンド結合アッセイ
５０ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４、１ｍＭメルカプトエタノール、１ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４、２５ｍＭ  ＫＦ、２ｍＭセミカルバジド、１ｍＭ  Ｎａ２ＥＤＴＡ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５０ｍＭスフィンゴシン、０．１％トリトン（Triton）Ｘ−１１４および１ｍＣｉγ３３Ｐ−ＡＴＰ（ＮＥＮ；比放射能３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を含む反応混合物中で、スフィンゴシンキナーゼ活性を有する粗酵母抽出物を用いて、γ３３Ｐ−ＡＴＰおよびスフィンゴシンから３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸を酵素的に合成した。反応生成物をブタノールで抽出し、３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸をＨＰＬＣによって精製した。
【０１９３】
Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体を発現する細胞を、酵素を含まない解離溶液（Specialty Media, Lavallette, NJ）で回収した。それを冷ＰＢＳで１回洗浄し、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ−Ｎａ、ｐＨ７．５、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＣａＣｌ２および０．５％脂肪酸非含有ＢＳＡからなる結合アッセイ緩衝液に懸濁させた。３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸を結合アッセイ緩衝液中で、０．１ｎＭスフィンゴシン−１−リン酸とともに超音波処理した。リガンド混合物１００μＬを、９６ウェル微量定量皿中の細胞１００μＬ（細胞１×１０６個／ｍＬ）に加えた。緩やかに混和しながら、室温で６０分間結合を行った。次に、細胞をパッカード（Packard）フィルターメート・ユニバーサル・ハーベスタ（Filtermate Universal Harvester）でＧＦ／Ｂフィルタープレート上に回収した。フィルタープレートを３０分間乾燥後、マイクロシンチ（Microscint）２０  ４０μＬを各ウェルに加え、ワラック（Wallac）マイクロベータ（Microbeta）シンチレーションカウンタで結合を測定した。非特異的結合は、０．５μＭの冷スフィンゴシン−１−リン酸存在下での残留放射能の量と定義した。
【０１９４】
別法として、リガンド結合アッセイを、Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体を発現する細胞から得た膜で実施した。細胞を、酵素を含まない解離溶液で回収し、冷ＰＢＳで１回洗浄した。キネマティカ（Kinematica）ポリトロン（polytron）（設定５、１０秒間）を用いて氷冷２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭ  ＥＤＴＡ中での均質化によって、細胞を破壊した。ホモジネートを４８０００×ｇで４℃にて１５分間遠心し、ペレットを２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ中に懸濁させた。第２の遠心後に、最終ペレットを、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２に懸濁させた。膜タンパク質０．５〜２μｇを用いて、上記の方法に従ってリガンド結合アッセイを行った。
【０１９５】
Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体の作働薬および拮抗薬は、３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸結合アッセイで確認することができる。ＤＭＳＯ、メタノールその他の溶媒に溶解させた化合物を、微量定量皿中で３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸および結合アッセイ緩衝液を含むプローブと混合した。Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体を発現する細胞から得た膜を加え、３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸に対する結合を上記の方法に従って実施した。各種濃度の化合物存在下での結合量の測定およびＭＲＬＣａｌｃ（Merck Research Laboratories）またはＰＲＩＳＭ（GraphPad Software）などの非線形回帰ソフトウェアによるデータ解析を用いて、受容体に対する化合物の親和性を測定した。各個々の受容体（Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３、Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５、Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６、Ｓ１Ｐ５／ＥＤＧ８）でトランスフェクションした細胞から得た膜を用いて、化合物存在下での３３Ｐ−スフィンゴシン−１−リン酸結合のレベルを測定することで、Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体についての化合物の選択性を確認した。
【０１９６】
３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイ
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体のＧタンパク質への機能的カップリングを、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで測定した。Ｅｄｇ／Ｓ１Ｐ受容体に対するリガンド結合アッセイに記載の方法に従って製造される膜（膜タンパク質１〜１０μｇ）を、９６ウェル微量定量皿で、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳｐＨ７．４、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５μＭ  ＧＤＰ、０．１％脂肪酸非含有ＢＳＡ（Sigma、カタログ番号Ａ８８０６）、各種濃度のスフィンゴシン−１−リン酸および１２５ｐＭ３５Ｓ−ＧＴＰγＳ（ＮＥＮ；非放射能１２５０Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を含む容量２００μＬ中でインキュベートした。緩やかに混合しながら結合を室温で１時間行い、パッカード・フィルターメート・ユニバーサル・ハーベスタによってＧＦ／Ｂフィルタープレート上に膜を回収することで終了した。フィルタープレートを３０分間乾燥後、マイクロシンチ２０  ４０μＬを各ウェルに加え、結合をワラック・マイクロベータ・シンチレーションカウンタで測定した。
【０１９７】
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体の作働薬および拮抗薬を、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで識別することができる。ＤＭＳＯ、メタノールその他の溶媒で希釈した化合物を微量定量皿に加えて、０．０１ｎＭ〜１０Ｍの最終アッセイ濃度を得た。Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体を発現する細胞から得た膜を加え、３５Ｓ−ＧＴＰγＳへの結合を上記の方法に従って行った。天然リガンドその他の公知の作働薬の非存在下でアッセイを行った場合に、内因性レベルより高く３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合を刺激する化合物は作働薬と見なし、３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合の内因性レベルを阻害する化合物を逆作働薬と見なした。亜最大レベルの天然リガンドまたは公知のＳ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体作働薬の存在下での３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで拮抗薬を検出し、その化合物は３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合のレベルを低下させた。各種濃度の化合物の存在下での結合量の測定を用いて、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体の作働薬、逆作働薬または拮抗薬としての化合物の効力を測定した。作働薬を評価するため、基底線レベルを超えての刺激パーセントを、化合物存在下での結合をリガンド非存在下での結合で割り、それに１００を掛けた値として計算した。非線形回帰曲線適合プログラムＭＲＬＣａｌｃ（Merck Research Laboratories）を用いて用量応答曲線をプロットし、ＥＣ５０値を作働薬の最大刺激の５０％を与えるのに必要なその作働薬の濃度と定義した。Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体に対する化合物の選択性を、各個々の受容体でトランスフェクションした細胞から得られた膜を用いて化合物存在下での３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合のレベルを測定することで求めた。
【０１９８】
細胞内カルシウムフラックスアッセイ
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体のＧタンパク質に対する機能的結合に関連する細胞内カルシウム動員を、ＦＬＩＰＲ（蛍光画像プレート読取装置（Fluorescence Imaging Plate Reader）、Molecular Devices）を用いて測定した。Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体を発現する細胞を回収し、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、０．１％ＢＳＡおよび７１０μｇ／ｍＬプロベニシド（probenicid）（Sigma））を含むアッセイ緩衝液（ハンクス緩衝生理食塩水溶液（ＢＲＬ）で１回洗浄した。５００ｎＭのカルシウム感受性色素Ｆｌｕｏ−４（Molecular Probes）を含む同じ緩衝液中で、３７℃および５％ＣＯ２で１時間にわたって細胞を標識した。細胞を緩衝液で２回洗浄してから、９６ウェルのポリリジンコーティングを施した黒色の微量定量皿で１．５×１０５個／ウェル（９０μＬ）で平板培養した。スフィンゴシン−１−リン酸その他の作働薬をアッセイ緩衝液２００μＬで希釈することで９６ウェルリガンドプレートを作製して、最終試験濃度の２倍の濃度を得た。リガンドプレートと細胞プレートをＦＬＩＰＲ装置に入れて分析を行った。プレートを、３７℃で平衡状態とした。等量のリガンドを細胞プレートに移すことでアッセイを開始し、３分間の間隔をかけてカルシウムフラックスを記録した。細胞応答を、面積（合計）または最大ピーク高さ（最大）として定量した。適切な溶媒での化合物の希釈およびＦｌｕｏ−４標識細胞への移動によって、天然リガンドの非存在下で作働薬を評価した。Ｆｌｕｏ−４標識細胞を各種濃度の化合物で１５分間前処理してから、天然リガンドその他のＳ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体作働薬を加えることでカルシウムフラックスを開始することによって、拮抗薬を評価した。
【０１９９】
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体を発現する細胞の取得
各種方法のいずれかを用いて、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３、Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５、Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６またはＳ１Ｐ５／Ｅｄｇ８をクローニングすることができる。その方法には、（１）ＲＡＣＥ  ＰＣＲクローニング法（Frohman, et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 8998-9002）［５′および／または３′ＲＡＣＥを行って、全長ｃＤＮＡ配列を形成することができる］；（２）適切な発現ベクター系におけるＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリの構築後のＥｄｇ／Ｓ１ＰｃＤＮＡの直接機能的発現；（３）Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質のアミノ酸配列から設計された標識縮重オリゴヌクレオチドプローブを用いたバクテリオファージもしくはプラスミドベクター中で構築されたＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリのスクリーニング；（４）Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質をコードする部分ｃＤＮＡを用いたバクテリオファージもしくはプラスミドベクター中で構築されたＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリのスクリーニング［この部分ｃＤＮＡは、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質に関連する他のタンパク質について知られているアミノ酸配列からの縮重オリゴヌクレオチドプライマーの設計によるＳ１Ｐ／ＥｄｇＤＮＡ断片の特異的ＰＣＲ増幅によって得られる］；（５）哺乳動物Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇタンパク質に対する相同性を有する部分ｃＤＮＡまたはオリゴヌクレオチドを用いたバクテリオファージもしくはプラスミドベクター中で構築されたＳ１Ｐ／Ｅｄｇ含有ｃＤＮＡライブラリのスクリーニング［この戦略では、Ｓ１Ｐ／ＥｄｇｃＤＮＡのＰＣＲ増幅において遺伝子特異的オリゴヌクレオチドプライマーを使用する場合もある］；あるいは（６）Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇヌクレオチド配列を鋳型として用いて５′および３′遺伝子特異的オリゴヌクレオチドを設計して、公知のＲＡＣＥ法によって全長ｃＤＮＡを形成することができるか、あるいはその同じ公知のＲＡＣＥ法によってコード領域の一部を形成して、コード領域の一部を形成および単離して、多くの種類のｃＤＮＡおよび／またはゲノムライブラリのうちのひとつをスクリーニングするためのプローブとして用いて、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇをコードするヌクレオチド配列の全長版を単離する方法などがあるが、これらに限定されるものではない。
【０２００】
他の種類のライブラリならびに他の細胞種もしくは動物種から構築されたライブラリが、Ｓ１Ｐ／ＥｄｇをコードするＤＮＡまたはＳ１Ｐ／Ｅｄｇ同族体を単離する上で有用となり得ることは、当業者には容易に理解されるものである。他の種類のライブラリには、他の細胞由来のｃＤＮＡライブラリなどがあるが、それに限定されるものではない。
【０２０１】
好適なｃＤＮＡライブラリがＳ１Ｐ／Ｅｄｇ活性を有する細胞または細胞系から取得可能であることは、当業者には容易に理解されるものである。Ｓ１Ｐ／ＥｄｇをコードするｃＤＮＡを単離するためのｃＤＮＡライブラリを得るのに使用される細胞または細胞系の選択は、最初にそのような目的に利用可能な公知のアッセイを用いて細胞関連のＳ１Ｐ／Ｅｄｇ活性を測定することで行うことができる。
【０２０２】
ｃＤＮＡライブラリの取得は、当業界で公知の標準的な方法によって行うことができる。公知のｃＤＮＡライブラリ構築法は、例えばサムブロックらの著作（Sambrook et al., 1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual; Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York）に記載されている。相補的ＤＮＡライブラリは、クローンテク・ラボラトリーズ社（Clontech Laboratories, Inc.）およびストラタジーン（Stratagene）など（それらに限定されるものではない）の多くの商業的入手先からも得ることができる。
【０２０３】
Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ様タンパク質をコードするＤＮＡを含む発現ベクターを、組換え宿主細胞におけるＳ１Ｐ／Ｅｄｇの発現に用いることができる。そのような組換え宿主細胞を公的な条件下で培養することで、Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇまたは生物学的に等価なものを得ることができる。発現ベクターには、クローニングベクター、変性クローニングベクター、特異的に設計されたプラスミドまたはウィルスなどがあり得るが、これらに限定されるものではない。商業的に入手可能な哺乳動物発現ベクターが、組換えＳ１Ｐ／Ｅｄｇ発現に好適である場合がある。
【０２０４】
組換え宿主細胞は、原核細胞または真核細胞であることができ、大腸菌などの細菌、酵母などの真菌細胞、ウシ、ブタ、サルおよび齧歯類起源の細胞系など（それらに限定されるものではない）の哺乳動物細胞；ならびにショウジョウバエおよびカイコ由来の細胞系など（それらに限定されるものではない）の昆虫細胞などがあるが、これらに限定されるものではない。
【０２０５】
各種Ｓ１Ｐ／Ｅｄｇ受容体についてのヌクレオチド配列が当業界では公知である。例えば下記のものを参照する。
【０２０６】
Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１ヒト
Hla, T. and T. Maciag 1990 An abundant transcript induced in differentiating human endothelial cells encodes a polypeptide with structural similarities to G-protein coupled receptors. J. Biol Chem. 265: 9308-9313（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９１年１０月１７日公開のＷＯ９１／１５５８３（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）； 
１９９９年９月１６日公開のＷＯ９９／４６２７７（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２０７】
Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１マウス
２０００年１０月１２日公開のＷＯ００５９５２９（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２００１年１１月２７日認可の米国特許第６３２３３３３号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２０８】
Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１ラット
Lado, D. C. , C. S. Browe, A. A. Gaskin, J. M. Borden, and A. J. MacLennan. 1994 Cloning of the rat EDG-1 immediate-early gene: expression pattern suggests diverse functions. Gene 149: 331-336（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９６年１２月１７日認可の米国特許第５５８５４７６号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９９年１月５日認可の米国特許第５８５６４４３号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２０９】
Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３ヒト
An, S. , T. Bleu, W. Huang, O. G. Hallmark, S. R. Coughlin, E. J. Goetzl 1997 Identification of cDNAs encoding two G protein-coupled receptors for lysosphingolipids FEBS Lett. 417: 279-282（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９９年１１月２５日公開のＷＯ９９／６００１９（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２０００年１０月１０日認可の米国特許第６１３００６７号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１０】
Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３マウス
２００１年２月１５日公開のＷＯ０１／１１０２２（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１１】
Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３ラット
２００１年４月１９日公開のＷＯ０１／２７１３７（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１２】
Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５ヒト
An, S., Y. Zheng, T. Bleu 2000 Sphingosine 1-Phosphate-induced cell proliferation, survival, and related signaling events mediated by G Protein-coupled receptors Edg3 and Edg5. J. Biol. Chem 275: 288-296（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９９年７月１５日公開のＷＯ９９／３５２５９（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９９年１０月２８日公開のＷＯ９９／５４３５１（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２０００年９月２８日公開のＷＯ００／５６１３５（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１３】
Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５マウス
２０００年１０月１２日公開のＷＯ００／６００５６（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１４】
Ｓ１Ｐ２／Ｅｄｇ５ラット
Okazaki, H. , N. Ishizaka, T. Sakurai, K. Kurokawa, K. Goto, M. Kumada, Y. Takuwa 1993 Molecular cloning of a novel putative G protein-coupled receptor expressed in the cardiovascular system. Biochem. Biophys. Res. Comm. 190: 1104-1109（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
MacLennan, A. J., C. S. Browe, A. A. Gaskin, D. C. Lado, G. Shaw 1994 Cloning and characterization of a putative G-protein coupled receptor potentially involved in development. Mol. Cell. Neurosci. 5: 201-209（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９６年１２月１７日認可の米国特許第５５８５４７６号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９９年１月５日認可の米国特許第５８５６４４３号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１５】
Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６ヒト
Graler, M. H., G. Bernhardt, M. Lipp 1998 Edg6, a novel G-protein-coupled receptor related to receptors for bioactive lysophospholipids, is specifically expressed in lymphoid tissue. Genomics 53: 164-169（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９８年１０月２９日公開のＷＯ９８／４８０１６（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９９年６月１５日認可の米国特許第５９１２１４４号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９８年１１月１２日公開のＷＯ９８／５０５４９（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２０００年５月９日日認可の米国特許第６０６０２７２号（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
１９９９年７月１５日公開のＷＯ９９／３５１０６（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２０００年３月２３日公開のＷＯ００／１５７８４（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２０００年３月１６日公開のＷＯ００／１４２３３（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１６】
Ｓ１Ｐ４／Ｅｄｇ６マウス
２０００年３月２０日公開のＷＯ００／１５７８４（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１７】
Ｓ１Ｐ５／Ｅｄｇ８ヒト
Im, D. -S., J. Clemens, T. L. Macdonald, K. R. Lynch 2001 Characterization of the human and mouse sphingosine 1-phosphate receptor, S1P5 (Edg-8): Structure-Activity relationship of sphingosine 1-phosphate receptors. Biochemistry 40: 14053-14060（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２０００年３月２日公開のＷＯ００／１１１６６（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２０００年６月２日公開のＷＯ００／３１２５８（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２００１年１月１８日公開のＷＯ０１／０４１３９（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２００１年４月１１日公開のＥＰ１０９０９２５（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１８】
Ｓ１Ｐ５／Ｅｄｇ８ラット
Im, D. -S., C. E. Heise, N. Ancellin, B. F. O′Dowd, G. -J. Shei, R. P. Heavens, M. R. Rigby, T. Hla, S. Mandala, G. McAllister, S. R. George, K. R. Lynch 2000 Characterization of a novel sphingosine 1-phosphate receptor, Edg-8. J. Biol. Chem. 275: 14281-14286（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）；
２００１年１月２５日公開のＷＯ０１／０５８２９（参照によってその全内容が本明細書に組み込まれる）。
【０２１９】
心血管効果の測定
心血管パラメータに対する本発明の化合物の効果を、以下の手順によって評価することができる。成体雄ラット（体重約３５０ｇ）に、それぞれ動脈血圧測定および静脈化合物投与のための大腿動脈および静脈カテーテルを取り付けた。ネンブタール（５５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内投与）で動物に麻酔を施した。血圧および心拍数を、グールド（Gould）Ｐｏ−Ｎｅ−Ｍａｈデータ獲得系で記録した。心拍数は、動脈パルス波由来であった。馴致期間後、基底線値読み取りを行い（約２０分）、データの平均を求めた。化合物を静脈投与し（約５秒間のボラス注射または１５分間の注入）、データを化合物投与後に１分ごとに６０分間にわたって記録した。データを、心拍数におけるピーク変化または平均動脈血圧として計算するか、あるいは時間に対する心拍数もしくは血圧における変化における曲線下の面積として計算する。データは、平均ＳＥＭとして表現する。片側の対応のあるスチュデントのｔ検定を基底線値に対する統計的比較に用い、ｐ＜０．０５で有意と見なした。
【０２２０】
ラット心血管系に対するＳ１Ｐ効果がスギヤマらの報告に記載されている（Sugiyama, A., N. N. Aye, Y. Yatomi, Y. Ozaki, K. Hashimoto 2000 Effects of Sphingosine-1-Phosphate, a naturally occurring biologically active lysophospholipid, on the rat cardiovascular system. Jpn. J. Pharmacol. 82: 338-342；参照によって全体が本明細書に組み込まれる）。
【０２２１】
マウス急性毒性の測定
１匹のマウスに、無毒性媒体に溶かした被験化合物０．１ｍＬを静脈投与し（尾静脈）、毒性の徴候を評価する。重度の徴候には、死亡、発作、麻痺または意識喪失などがあり得る。比較的軽度の徴候も記録し、それには運動失調、荒い呼吸、苛立ちまたは正常と比較して低下した活動などがあり得る。徴候を記録する際、投与溶液は同じ媒体で希釈する。希釈用量液を第２のマウスに同様にして投与し、同様に徴候の観察を行う。徴候を生じない用量に達するまでそのプロセスを繰り返す。それを、推定無効果レベルと見なす。別のマウスにそのレベルで投与を行って、徴候がないことを確認する。
【０２２２】
リンパ球減少症の評価
マウス急性毒性の評価に記載の方法に従って化合物を投与し、リンパ球減少症を以下にように投与３時間後にマウスで評価する。ＣＯ２によってマウスの意識を喪失させた後、胸部を開き、直接心臓穿刺によって血液０．５ｍＬを抜き取り、ＥＤＴＡによって血液を直ちに安定化させ、マウス百分率実施用に較正した臨床血液検査値自動分析装置（H2000, Careside, Culver City CA）を用いて、血液検査値を評価する。試験処置によるリンパ球減少を、マウス３匹と媒体投与マウス３匹の血液学パラメータを比較することで確認する。その評価に用いる用量は、上記の希釈方法の変法を用いた耐容性によって決定する。それに関しては、効果なしが望ましく、軽度の効果は許容され、重度に有毒な用量については一連の希釈を行って、ごく軽度の効果を生じるレベルとする。
【０２２３】
実施例化合物のin vitro活性
本明細書中に開示された実施例化合物は、上記に記載されるアッセイによる測定で、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体を上回る、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体の強力かつ選択的な作働薬としての活性によって示される免疫調節剤としての有用性を有している。特に、本明細書中に開示された実施例化合物は、上記に記載された３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイで評価した場合のＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対するＥＣ５０とＳ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体に対するＥＣ５０との比率による測定で、Ｓ１Ｐ３／Ｅｄｇ３受容体よりＳ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対して１００倍を超える選択性を有し、上記に記載された３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイでの評価では、Ｓ１Ｐ１／Ｅｄｇ１受容体に対する結合について５０ｎＭ未満のＥＣ５０を有する。
【国際調査報告】
2006528980.tif 000083
2006528980.tif 000084
2006528980.tif 000085