(57)【要約】本発明はパラチノース、水及び有機酸の溶融物で二糖パラチノースを縮合することによって得られる新規なパラチノース縮合物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
溶融によりパラチノースから縮合パラチノースを調製する方法であって、触媒として働く酸物質の水溶液にパラチノースを加え、得られた混合物を加熱し、縮合パラチノースの溶融物を得る方法。
【請求項２】
混合物に４重量％〜１２重量％の割合の水が含まれている請求項１に記載の方法。
【請求項３】
触媒として働く酸物質が混合物中にパラチノース仕込み量基準で０．０５重量％〜０．５重量％、とりわけ０．１重量％の割合で含まれている請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
触媒として働く酸物質が有機酸、又はホウ酸、又はリン酸とリン酸二水素カリウムの組合せ、又は硫酸アンモニウムである請求項１〜３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５】
有機酸が低揮発性の有機酸である請求項１〜４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６】
低揮発性の有機酸がクエン酸である請求項５に記載の方法。
【請求項７】
パラチノースを、触媒として働く酸物質の水溶液に攪拌しつつ加える請求項１〜６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項８】
混合物を溶融するまで攪拌しつつ加熱する請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９】
溶融物を温度１３０℃〜２００℃、特に１４０℃〜１５５℃に加熱する請求項１〜８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１０】
２分以上の時間の後に溶融物中に縮合パラチノースが得られる請求項１〜９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１】
反応時間の経過の後に溶融物を水で急冷して、シロップを得る請求項１〜１０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１２】
溶融物の急冷のために、溶融物と水の重量比１０：１〜１：２、とりわけ５：１〜１：１で水を加える請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
加熱した押出機に混合物を給送し、少なくとも１分の接触時間の後に縮合パラチノースを連続的に得る請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１４】
加熱した押出機が１５０〜２５０℃、とりわけ１８０〜２２０℃、特に好ましくは約２００℃の温度を有する請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
接触時間が１〜１５分、とりわけ１〜６分、特に好ましくは２分である請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
得られた縮合パラチノースから少なくとも１つの随伴成分を分離する請求項１〜１５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１７】
得られた縮合パラチノースから少なくとも１つの随伴成分をクロマトグラフィー分離によって分離する請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
クロマトグラフィー分離を陽イオン交換体で行う請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
随伴成分がグルコシルメチルフルフラールである請求項１６〜１８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２０】
得られた縮合パラチノース中の未縮合パラチノースの割合を低減する請求項１〜１９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２１】
得られた縮合パラチノースから未縮合パラチノースをクロマトグラフィーで分離することにより未縮合パラチノースを低減する請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
クロマトグラフィー分離を陽イオン交換体で行う請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
請求項１〜２２のいずれか１つに記載の方法によって得られる縮合パラチノース。
【請求項２４】
未縮合パラチノースが１５重量％〜４５重量％、パラチノース二量体が３５重量％〜６０重量％、パラチノース三量体が１０重量％以下、パラチノース四量体及びパラチノース五量体が５重量％以下、三糖が少なくとも５重量％の割合で含まれる縮合パラチノース。
【請求項２５】
未縮合パラチノースの割合が２５重量％〜３５重量％である請求項２４に記載の生成物。
【請求項２６】
パラチノース二量体の割合が４０重量％〜５３重量％である請求項２４又は２５に記載の生成物。
【請求項２７】
パラチノース三量体の割合が１重量％〜５重量％である請求項２４〜２６のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項２８】
パラチノース四量体及びパラチノース五量体の割合が１重量％〜４重量％である請求項２４〜２７のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項２９】
三糖の割合が７重量％〜１０重量％である請求項２４〜２８のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項３０】
０．４重量％未満、とりわけ０．２５重量％未満の割合のグルコシルメチルフルフラールが含まれている請求項２４〜２９のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項３１】
パラチノース二量体の少なくとも７０％、特に８０％〜９０％が複縮合ジパラチノース二無水物である請求項２４〜３０のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項３２】
１重量％〜２５重量％の割合の未縮合パラチノース、４５重量％〜８０重量％の割合のパラチノース二量体、１０重量％以下の割合のパラチノース三量体、５重量％以下の割合のパラチノース四量体及び五量体、少なくとも５重量％の割合の三糖を含む縮合パラチノース。
【請求項３３】
未縮合パラチノースの割合が５重量％〜２０重量％である請求項３２に記載の生成物。
【請求項３４】
パラチノース二量体の割合が５４重量％〜７５重量％である請求項３２又は３３に記載の生成物。
【請求項３５】
パラチノース三量体の割合が２重量％〜９重量％である請求項３２〜３４のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項３６】
パラチノース四量体及び五量体の割合が０．５重量％〜３．５重量％である請求項３２〜３５のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項３７】
三糖の割合が８重量％〜１２重量％である請求項３２〜３６のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項３８】
０．４重量％未満、とりわけ０．２５重量％未満の割合のグルコシルメチルフルフラールが含まれている請求項３２〜３７のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項３９】
パラチノース二量体の８０％〜９０％が複縮合ジパラチノース二無水物である請求項３２〜３８のいずれか１つに記載の生成物。
【請求項４０】
パラチノース二量体の割合が７３重量％未満であって、パラチノース二量体の少なくとも７０％が複縮合ジパラチノース二無水物である縮合パラチノース。
【請求項４１】
パラチノース二量体の８０％〜９０％が複縮合ジパラチノース二無水物である請求項４０に記載の生成物。
【請求項４２】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノース及びビフィズス菌培養物を含む組成物。
【請求項４３】
請求項２３〜４２のいずれか１つに記載の生成物と、短鎖フルクトオリゴ糖、長鎖フルクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、加水分解グアーガム、ラクツロース、キシロオリゴ糖、ラクトスクロース、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、ゲンチオオリゴ糖、グルコシルスクロース、大豆オリゴ糖、キトオリゴ糖、キトサンオリゴ糖、耐性デンプン、カラスムギ繊維、小麦繊維、野菜繊維、果実繊維、セルロース及びテンサイ繊維からなる群から選ばれる少なくとも１つの別のバラスト物質とを含む組成物。
【請求項４４】
請求項２３〜４３のいずれか１つに記載の生成物を含む食品、食糧又は嗜好品。
【請求項４５】
乳製品及びミルク製品、特にチーズ、バター、ヨーグルト、ケフィア、凝乳、サワーミルク、バターミルク、クリーム、コンデンスミルク、ドライミルク、乳清、乳糖、乳タンパク質、混合乳、低脂肪乳、乳清混合物又は乳脂肪の製品又は調製品である請求項４４に記載の食品。
【請求項４６】
焼き菓子類、特にクッキーを含むパン、並びに保存用焼き菓子、ビスケット及びワッフルを含む上質焼き菓子類である請求項４４に記載の食品。
【請求項４７】
スプレッドである請求項４４に記載の食品。
【請求項４８】
マーガリン製品及びショートニングである請求項４４に記載の食品。
【請求項４９】
インスタント製品及びブイヨン製品である請求項４４に記載の食品。
【請求項５０】
果物製品又は調製品、特に砂糖漬、マーマレード、ゼリー、果物缶詰、果物ジャム、果物ピューレ、果汁、濃縮果汁、果物ネクター及び果実粉末である請求項４４に記載の食品。
【請求項５１】
野菜製品又は調製品、特に野菜缶詰、野菜ジュース及び野菜ピューレである請求項４４に記載の食品。
【請求項５２】
スパイス混合物である請求項４４に記載の食品。
【請求項５３】
ミュースリ及びミュースリ混合物並びに調理済みミュースリを含む製品である請求項４４に記載の食品。
【請求項５４】
非アルコール飲料、飲料原料及び飲料粉末である請求項４４に記載の食品。
【請求項５５】
請求項２３〜４３のいずれか１つに記載の生成物を含む甘味品。
【請求項５６】
チョコレート、ハードキャラメル、ソフトキャラメル、チューインガム、ボンボン、フォンダン製品、ゼリー製品、甘草エキス、マシュマロ製品、フレーク、圧縮製品、砂糖漬け果物、糖果、ヌガー製品、アイスキャンデー、マーチパン、ミュースリバー、アイスクリーム又はアルコール及び非アルコール甘味飲料である請求項５５に記載の甘味品。
【請求項５７】
請求項２３〜４３のいずれか１つに記載の生成物を含む動物飼料。
【請求項５８】
特にグルコース不耐性がある人のための、請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースを含む食餌療法用特別食。
【請求項５９】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースを含む幼児食。
【請求項６０】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースを含む甘味料。
【請求項６１】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースを含む医薬組成物。
【請求項６２】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの、食品、食糧、嗜好品又は動物飼料の製造のための使用。
【請求項６３】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの甘味料としての使用。
【請求項６４】
ｐＨ値２〜５、とりわけ２〜４の酸性食品、特に果汁又は果汁調製品の製造のための、請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項６５】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの食餌療法用繊維源としての使用。
【請求項６６】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの、腸疾患の治療のための作用物質としての使用。
【請求項６７】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの、腸疾患の治療のための医薬品の製造のための使用。
【請求項６８】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの、便秘の治療及び／又は予防、消化管内の健全な微生物フロラの回復及び保全のための作用物質としての使用。
【請求項６９】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの、便秘の治療及び／又は予防、消化管内の健全な微生物フロラの回復及び保全のための医薬品の製造のための使用。
【請求項７０】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの、動物又はヒトの消化管の食物成分の吸収の改善のための作用物質としての使用。
【請求項７１】
請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの、動物又はヒトの消化管の食物成分の吸収の改善のための医薬品の製造のための使用。
【請求項７２】
下痢疾患、特に微生物感染により引き起こされる下痢疾患の予防及び／又は治療のための作用物質としての請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項７３】
下痢疾患、特に微生物感染により引き起こされる下痢疾患の防止及び／又は治療のための医薬品の製造のための請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項７４】
可溶性バラスト物質、特にプレバイオティクス（Prebiotics）的バラスト物質としての請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項７５】
食品又は嗜好品、特に特別食、幼児食又はグルコース不耐性をもつ人のための食餌の血糖的性質の調節のための作用物質としての請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項７６】
感染症の予防、腸疾患の予防、大腸発癌の予防、炎症性疾患の予防及び／又は骨粗しょう症の予防のための作用物質としての請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項７７】
一般感染症に対する免疫防御の強化のための作用物質としての請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項７８】
一般感染症に対する免疫防御の強化のための医薬品の製造のための請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項７９】
酸化的ストレスによって引き起こされる疾病の予防及び／又は治療のための作用物質としての請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項８０】
酸化的ストレスによって引き起こされる疾病の予防及び／又は治療のための医薬品の製造のための請求項２３〜４１のいずれか１つに記載の縮合パラチノースの使用。
【請求項８１】
疾病が癌疾患、１型及び２型糖尿病、高血圧、卒中発作、男性不妊症、リウマチ性疾患、冠動脈疾患、急性心不全及び慢性炎症性疾病である請求項７８又は７９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は溶融物から二糖パラチノースの縮合によって得られるパラチノース縮合物、縮合パラチノースの製造方法及びその使用並びにパラチノース縮合物を含む食品及び医薬品に関する。
【従来技術】
【０００２】
グルコース及びフルクトースのα−１，６−結合から二糖パラチノースが生じる。パラチノースはイソマルツロースとも呼ばれる。パラチノースの化学名は６−０−α−Ｄ−グルコピラノシル・フルクトフラノースである。工業的にパラチノースは例えばサッカロースと、例えば微生物によって調製される酵素、グルコシルトランスフェラーゼとの反応によって製造される。
【０００３】
パラチノース及びパラチノース縮合物はう蝕原性がなく、しかも食品中のサッカロースのう蝕原性を減少するというう蝕防止効果がある。パラチノースは高い甘味力を持つので、う蝕防止甘味料として様々な食品に使用される。またパラチノースは食品及び食糧の血糖指標を減少する性質があるから、食餌療法用製品の製造に使用される。
【０００４】
ところが食品技術の分野では純パラチノース二糖、即ち未縮合パラチノースの使用の可能性は限られている。そこで特に食品工業、飼料製造業及び製薬業で使用するのに大変好都合な性質をもつパラチノース及びその縮合物、例えばパラチノース二量体／三量体／四量体の混合物を入手したいという要望がある。それというのは、食品、飼料、医薬品、食糧及び嗜好品の製造で多数の含糖出発製品に代わるとともに、例えば治療及び／又は予防効果に関してパラチノース及びその縮合物の有利な性質を一層よく利用するためである。
【０００５】
この点に関連して用語「縮合パラチノース」は、二糖パラチノースとその縮合物の混合物を意味し、これはパラチノースオリゴ糖（ＰＯＳ）とも呼ばれる。
【０００６】
特に慣用のう蝕原性麦芽糖蜜の代わりに、例えば食品の粘度の増加、食品の凍結点の低下、食品の含水量の増加、食品の乾燥防止又は腐敗の原因となる微生物の食品への定住の抑制のために使用されることも、縮合パラチノースの有利な性質である。
【０００７】
パラチノースの酸性化水溶液で温度１００〜１７０℃で熱縮合によりパラチノースから縮合パラチノースを製造する方法が先行技術により周知である。その場合水、有機酸及びパラチノースの出発混合物の含水量は、使用するパラチノースの重量基準で通常約３３％である。独国特許出願公開第３８１８８８４Ａ１号明細書では上記のようにして約５４％未縮合パラチノース（ＤＰ［重合度］＝２）、約２９．８％パラチノース二量体（ＤＰ＝４）、約１１．５％パラチノース三量体（ＤＰ＝６）及び約５％パラチノース四量体（ＤＰ＝８）の組成を有する縮合パラチノースが得られる。同様の方法でクエン酸を含むパラチノース水溶液から約５２．４％未縮合パラチノース、約２６％パラチノース二量体、約１２％パラチノース三量体及び約５．７％パラチノース四量体の組成を有する縮合パラチノースが得られる（M-utsuo ら、1993, Journal of Carbohydrate Chemistry）。そこで例えばチューインガムで使用するための市販の縮合パラチノース（ＰＯＳ）は、４８％の未縮合パラチノースと５０％のパラチノース縮合物を含む。その場合ＰＯＳにしばしば純パラチノースが混合されるから、使用する混合物中の未縮合パラチノースの割合が一層高くなる（米国特許第5,298,263号明細書）。
【０００８】
酸性化水溶液からの縮合パラチノースの製造は、パラチノース二量体（ＤＰ＝４）が主として即ち５０％以上単縮合二量体として存在する生成物をもたらす。これはジパラチノース一無水物と呼ばれる。縮合の際にそれぞれ1個の水分子が分離される。従ってそれぞれ２個の水分子が分離して生じる複縮合ジパラチノース分子（ジパラチノース二無水物と呼ばれる）は５０％以下である。
【０００９】
上記の方法で酸性化水溶液から得られた生成物はグルコシルメチルフルフラール（ＧＭＦ）の含量が約０．６％と高いため苦味があるから、食品での使用にあまり適さない。
【００１０】
また動物飼料で縮合パラチノースを純パラチノースの完全な代替物として使用できることが知られている。その場合使用される縮合パラチノースは前述の方法で製造され、上記の組成のパラチノース及び縮合物を含んでいた（Kashimuraら、1990, Journal of the Japanese Society for Nutrition and Foodscience）。
【００１１】
パラチノースを無水フッ化水素酸（ＨＦ）と反応させて、おおむねパラチノース二量体（ＤＰ＝４）からなる混合物を作る、パラチノースからの縮合パラチノースの第２の製造方法が先行技術により周知である。この方法で得られるパラチノース二量体は、それぞれ２個の水分子が分離されて生じる複縮合ジパラチノース二無水物である。この方法では無水媒質中でとりわけ０〜２０℃で反応（縮合）が行われる。そのとき得られる縮合パラチノースは、約９４％のパラチノース二量体と約２％の未縮合パラチノースを含む（仏国特許出願公開第２６８０７８９Ａ１号明細書）。別の刊行物でもＨＦによる無水縮合でパラチノース二量体の含量が７３％以上の縮合パラチノースが得られる（Defayeら、1994, Carbohydrate Research 251:1-15）。しかしＨＦ及びそこでさらに用いられる有機溶媒の使用は、食品に使われる製品には許されない。従ってこうして製造された縮合パラチノースは、特に食品、食糧、医薬品及び嗜好品に使用できない。
【００１２】
縮合パラチノースは周知のように優れた非う蝕原性効果と、さらにう蝕防止効果を有する。う蝕原性がないのは、口腔フロラに存在するう蝕原性微生物によって発酵されず、特に有害な酸を生じることがないからである。う蝕防止性があるのは、歯の再無機質化を直接促進することができ、こうしてう蝕の病像を抑制することができるからである。
【００１３】
食品、食糧、医薬品及び嗜好品で縮合パラチノースを使用する上で、縮合パラチノースの別の肯定的な栄養生理学的性質が重要である。
【００１４】
食品に縮合パラチノースを添加することによって、この食品の血糖的性質、即ちヒト又は動物の身体の血糖反応を調節することが可能である。これは特に従来使用された炭水化物、例えばサッカロース、マルトース又は可溶性デンプンの消化管内での分解性を減少することによって得られる。血糖反応とは、消化される（消化しやすい）炭水化物の摂取後の血中グルコース濃度の変化を意味する。従って経口的摂取の後に唾液、膵臓又は小腸の酵素によって急速にグルコースが放出され、血液に吸収されるような炭水化物は、極めて強い血糖反応の原因となる。変性（加熱）デンプン、マルトース、マルトオリゴ糖、マルトデキストリン及びブドウ糖自体が特にそうである。サッカロースは比較的小さな血糖反応を引き起こす。サッカロース分子にグルコースとともに含まれるフルクトースは、一部しかグルコースに転化されないからである。健常者では血中グルコースの上昇はインスリン分泌をもたらす。インスリンは抹消組織、例えば骨格筋によるグルコースの摂取を刺激するから、血液値が再び基準値に低下する。
【００１５】
バラスト物質、特に発酵可能な可溶性又は不溶性バラスト物質が動物又はヒトの身体にとって肯定的な性質を有することも周知である。これは特に大腸内のバラスト物質の発酵によって発生する短鎖脂肪酸、例えば酪酸、ブチレートの作用によるものである。この点に関連して、グルタチオン／グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ複合体が重要な役割を果たす。
【００１６】
グルタチオン（ＧＳＨ）はシステイン含有トリペプチドであり、哺乳動物細胞で最も一般的なチオール化合物である。ＧＳＨは、生体内異物化合物の解毒並びに反応性酸素分子及びその他の遊離基の阻害反応を触媒する酵素、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ及びＧＳＨ−ペルオキシダーゼの基質である。グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）の基質として、ＧＳＨは可逆的酸化により当該の二硫化物ＧＳＳＧに移行する。グルタチオンは抗酸化剤の働きをし、それによって特に細胞の酸化還元状態に対する緩衝系をなす。ＧＳＴは特に細胞分裂の第２段階でも、細胞の最も重要な解毒系をなす。解毒は例えば発癌物質の代謝時に、グルタチオンを求電子性成分に転移することによって行われる。求電子性基質に対するグルタチオンの求核的作用をＧＳＴが触媒することによって、細胞高分子に関するその反応性が大幅に減少される。こうしてＧＳＴは一連の化学的発癌物質の効果を著しく減少することができる。従ってＧＳＴは酸化的ストレス及びそれに付随する疾患、特に癌疾患に対する防護において重要な生理的役割を果たす。
【００１７】
多環芳香族炭化水素、フェノール系抗酸化剤、反応性酸素分子、イソチオシアネート、３価ヒ素化合物、バルビツール酸塩及び合成グルココルチコイドのような化合物はＧＳＴ活性を誘導することができ、その際ＧＳＴ酵素をコードする遺伝子が活性化される（Ha- yes and Pulford, 1995）。ＧＳＴ誘導は主として種々の転写機構によって行われる。ＧＳＴコード遺伝子の調節領域は、上記の物質が結合し、遺伝子転写を誘導することができるエレメントを含む。食物成分、例えば植物化学的物質もＧＳＴ活性を誘導することができ、その場合腸領域で特にπクラスのＧＳＴ形態が誘導される。従って食物成分による腸管内のＧＳＴ誘導は腸癌疾患の予防機構とみなされる（Peters and Roelofs, Cancer Res., 52(1992), 1886-1890）。
【００１８】
ＧＳＴ誘導にとって特に重要なのは、消化しにくい又は不消化の食品成分、即ちヒトの酵素による消化に耐えるが、大腸で発酵される食物繊維又はバラスト物質である。幾つかの炭水化物、例えばペクチン、「グアーガム」（グアー極上粉末）及び耐性デンプンがこれに属する。これらは腸管内で初めて大腸細菌フロラによって発酵され、短鎖脂肪酸、特に酢酸、プロピオン酸及び酪酸を生じる（Bartramら、Cancer Res., 53(1993), 3238-3288）。
【００１９】
消化耐性であり且つ発酵性の食物繊維及びバラスト物質の食物における実際の割合は、多くの要因、例えば食品の種類と調理法に左右される。たいていの食品、飼料又は嗜好品はバラスト物質に乏しい。これに対して野菜、ある種の果物、堅果類、種子及びとりわけ未精製の穀物製品はバラスト物質に富む。食品加工によって生じるバラスト物質不足又はバラスト物質に乏しい食餌を補償し、特に癌疾患及び感染症を食物供給によって予防する道は、理想的には不消化だがよく発酵されるバラスト物質で食品を富化することである。ところが食品の富化のために従来使用されたバラスト物質の多くは一連の決定的な欠点があり、特に大腸の癌疾患及び感染症の防止及び／又は治療に関して負わされた期待を満たしていない。長期的研究、とりわけ米国国立癌研究所及びアリゾナ大学での研究で確認されたところでは、例えばミュースリ製品を含むバラスト物質に富む食事による多年の食餌療法は、大腸癌の頻度に何ら影響を与えなかった。しかしこの研究では大腸領域で発酵されないバラスト物質しか採用されなかったのである。
【００２０】
しばしば例えば小麦ふすまが低バラスト食の添加物として使用される。ところが大腸の腫瘍発生に関するラットでの研究が示したところでは、小麦ふすまの適用は癌防止にほとんど適さない。小麦ふすまはセルロースと同様に、大腸フロラによってほとんど発酵されない。むしろ小麦ふすま及び他の穀物繊維はたいてい高い割合の接着性タンパク質グルテンと小腸粘膜の重い異変を招く有毒成分を有する。吸収上皮の損傷は消化酵素の損失及び極めて重い形態的機能的障害をもたらす（ミネラル、ビタミン等を含むすべての栄養素の吸収障害を伴う吸収不良、腹痛）。
【００２１】
原則として発酵可能とみなされる耐性デンプンも一連の欠点を有する。市販の耐性デンプンはたいてい部分的にしか発酵されない。特殊な押出法を使用して製造した耐性デンプンだけがとりわけ酪酸をもたらす。ところがこのポリマー保護押出し条件で製造された耐性デンプンはしばしば不安定である。
【００２２】
公知の縮合パラチノースは大腸で発酵可能であり、上記の目的のために食品成分として使用することができる。
【００２３】
縮合パラチノースは理想的には消化管に現れる酵素、例えばα−アミラーゼもしくは小腸−α−グルコシダーゼ、例えばサッカラーゼ／イソマルターゼ複合体又はグルコミラーゼ／マルターゼ複合体に対して完全な耐性を有し、同時に胃通路の酸性環境で加水分解に対して安定でなければならない。
【００２４】
ところが先行技術に基づき酸性パラチノース水溶液から熱縮合によって得られた縮合パラチノースは、上記の消化酵素によりある程度分解されることが知られている。分解生成物として単糖が発生し、吸収される。このことは、縮合パラチノースを含む食品の血糖指数を有利に変化する公知の縮合パラチノースの性質に負の影響を及ぼす。従って僅かな割合の未消化縮合パラチノースしか大腸で発酵のために利用されないから、大腸内の発酵に関連する正の効果が低下する。しかも食糧、食品又は嗜好品に添加された在来の縮合パラチノースはｐＨ安定性が低いため、すでに消化管の外部で、例えば煮込んで調理する時や熱消毒の際に加水分解が起こる。そのため食物とともに摂取された在来の縮合パラチノースの大腸部分での利用度が小さい。
【００２５】
この理由から例えば腸疾患の治療及び防止並びに感染症の防止のための治療用作用物質としての在来の縮合パラチノースの使用は限られている。それ故公知の縮合パラチノースは改善の余地がある。
【００２６】
縮合パラチノースは理想的には消化管に現れる酵素、例えばα−アミラーゼもしくは小腸−α−グルコシダーゼ、例えばサッカラーゼ／イソマルターゼ複合体又はグルコアミラーゼ／マルターゼ複合体に対して完全な耐性を有し、同時に胃通路の酸性環境で加水分解に対して安定であり、大腸で良好な発酵性を示さなければならない。また縮合パラチノースは食品の調理の際に、例えば酸性食品成分と共に煮込むときに加水分解に耐えなければない。
【発明の開示】
【００２７】
そこで本発明の課題は、先行技術で公知の縮合パラチノースに比して例えば消化に対して高い化学的安定性を有する生成物及びこの生成物の製造方法を提供し、さらに食品成分としてのこの生成物の使用、並びに特に腸疾患及び／又は感染症の治療及び予防用医薬の製造のためのこの生成物の使用を提供することである。
【００２８】
本発明は、パラチノース溶融物から縮合パラチノースを調製する方法であって、触媒として働く酸物質(aziden Substanz)の水溶液にパラチノースを加え、得られた混合物を加熱し、こうして得られた溶融物から縮合パラチノースを得る方法を提供することによってこの課題を解決する。
【００２９】
意外なことに発明者は、パラチノース、酸物質（＝酸触媒）及び水の混合物から、その混合物中の水の割合が明らかに１２重量％以下であり、よって混合物を熱すると縮合パラチノースの溶融物が得られる場合でも、縮合パラチノースが得られることを確認した。このことは混合物中の含水量が約３分の１である先行技術で公知の方法と対照的である。
【００３０】
特に意外なのは、この本発明方法で得られた縮合パラチノースが先行技術と著しく相違する組成を含むことである。
【００３１】
本発明に基づく反応生成物中にあるパラチノース二量体（ＤＰ＝４）の割合は、パラチノース水溶液から得られる在来の縮合パラチノースと比較して１．５倍以上に増加している。また本発明に基づき得られるパラチノース二量体は主な割合、特に少なくとも７０重量％、とりわけ８０〜９０重量％の割合が複縮合ジパラチノース二無水物からなる。
【００３２】
また本発明に基づく反応生成物中の未縮合パラチノース（ＤＰ＝２）の割合は、公知の縮合パラチノースの割合の約６４％以下に減少している。こうして本発明に基づく反応生成物中の未縮合パラチノースの、パラチノース二量体の縮合物に対する比は常に１未満、特に０．７未満である。これに対してパラチノース水溶液から得られる在来の縮合パラチノースでは、未縮合パラチノースの割合が常にパラチノース二量体の割合より大きい。従って比は必ず１より著しく大きい。
【００３３】
本発明によれば本発明縮合パラチノース中の未縮合パラチノースの割合はせいぜい４５重量％、特にせいぜい３５重量％である。パラチノース二量体の割合は本発明に基づき常に少なくとも３５重量％、特に少なくとも４０重量％である。
【００３４】
本発明に基づき本発明縮合パラチノースをさらに前述のようにクロマトグラフィーにより精製及び濃縮することが好ましい。このことは有利な組成を一層改善する。こうして得られた濃縮縮合パラチノースでは、未縮合パラチノースの割合がせいぜい２５重量％、特にせいぜい２０重量％である。精製した本発明縮合パラチノースのパラチノース二量体の割合は、常に少なくとも４５重量％、特に少なくとも５４重量％である。
【００３５】
本発明縮合パラチノースの意外にも判明した上記の組成は、多数の有利な性質をもたらす。
【００３６】
本発明に基づき得られる縮合パラチノースの研究から、意外にも次のことが明らかになった。即ち先行技術で周知の縮合パラチノースに比して、本発明の縮合パラチノースは、例えば酸性食品成分と共に調理した時や酸性の胃通路において生じる高い温度にて、ｐＨ安定性が高いという利点を有し、しかも小腸−α−グルコシダーゼによる分解の可能性が低いのである。
【００３７】
低い酵素分解性と胃通路での高いｐＨ安定性が相俟って、食物と共に摂取された本発明縮合パラチノースははるかに高い濃度で大腸に存在し、そこで例えば大腸疾患の治療及び防止のための作用物質として、従来使用された縮合パラチノースで知られているよりもはるかに大規模に利用される。
【００３８】
また本発明に基づく縮合パラチノースは、特に在来の縮合パラチノースに比して消化管での利用度がはるかに高いため、例えばヒト及び動物の上皮細胞への病原菌の滞留を防止又は減少させることにより、感染症及び腸疾患をいっそう上手く克服及び／又は防止することができ、炎症性慢性腸疾患を克服及び／又は防止し、腸癌例えば大腸癌の発生を抑制及び／又は克服することができる特徴がある。こうして本発明に基づく縮合パラチノースは一般感染症に対する免疫防御をはるかによく強化し、炎症性疾患又は酸化的ストレスに起因するその他の疾患を克服及び／又は防止することができる。また本発明に基づく縮合パラチノースは在来の縮合パラチノースと比較して、食品成分、特にミネラル例えばカルシウムの生体への摂取を特に効果的に改善する。
【００３９】
ヒトと、もちろん哺乳動物、特に単胃型動物の健康に対するこれらのプラスの効果は、抗酸化剤の働きをするグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ活性及びグルタチオン含量を高めるという本発明縮合パラチノースの性質によるものである。
【００４０】
本発明に基づく縮合パラチノースは胃通路や小腸で加水分解されないで、そのまま大腸に到達し、そこで大腸に存在する微生物によって発酵され、短鎖脂肪酸、特に酪酸（ブチレート）を生じる利点がある。この発酵によって起こるｐＨ値の酸性域への低下は病原性微生物、例えばクロストリジウムの生活条件を悪化させ、同時に好酸性微生物、例えばビフィズス菌や乳酸菌のようなビフィズスフロラの生活条件を改善する。こうして本発明に基づく縮合パラチノースはビフィズス原性効果、即ちビフィズス菌の数を増加させる効果がある。。従って本発明に基づく縮合パラチノースは、在来の縮合パラチノースに比して大幅に強化されたプレバイオオティクス的活性を有する。その場合生成される短鎖脂肪酸、特にブチレートは大腸細胞のための基質としても利用され、とりわけ大腸癌の発生と成長を抑制する。本発明縮合パラチノースの発酵で産生される発酵生成物の量は、例えば耐性デンプンの発酵の場合より著しく高い。この発酵生成物の公知の効果、特に細胞を発癌物質及び酸化剤から保護することができる抗酸化剤、グルタチオン及びグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼの細胞内合成に対する誘導作用、癌細胞に対する増殖抑制作用、抗腫瘍作用及び細胞分化を増進する能力に基づき、本発明縮合パラチノースはこれらの疾病の治療及び／又は予防のための薬剤としてはなはだ好適である。
【００４１】
また消化管での分解性が低いことにより、本発明に基づく縮合パラチノースは食糧、食品及び嗜好品の血糖指数を特に効果的に調節する。
【００４２】
本発明に関連して「疾病」又は「疾患」とは、主観的に感じられ及び／又は客観的に確認し得る身体的及び／又は精神的異変を伴う臓器又は全身の生活過程の障害及び／又は欠乏状態を意味する。
【００４３】
本発明に関連して「作用物質」とは、生きている生体又はその一部に生物学的効果を引き起こすことができる物質を意味する。その場合この作用物質は特に疾病の予防、緩和、治癒又は診断のために利用することができる。「治療用作用物質」とは、疾病の防止又は予防、緩和又は治癒のために利用される物質を意味する。
【００４４】
本発明に関連して医薬品（薬剤）とは、ヒト又は動物で適用するための作用物質の調剤形態を意味する。
【００４５】
本発明に関連して「食品又は食糧」とは、基本的に生活機能の維持のために役立つ手段を意味し、「嗜好品」とは、基本的に特に摂取の際に生じる快楽のために役立つ手段を意味する。
【００４６】
この点に関連して「ビフィズス菌」又は「ビフィズスフロラ」とは、とりわけヒトの大腸に定住する従来公知の１１の種、特にB.bifidum（＝Lactobacillus bifidus）、B.adolescentis、 B.breve、 B.longum及びB.infantisを含むグラム陽性、非運動性、無芽胞性及び嫌気性桿菌属を意味する。これらは炭水化物を分解して、短鎖脂肪酸、特に酢酸（酢酸塩）、乳酸（乳酸塩）及び酪酸（酪酸塩）を生成する。
【００４７】
本発明に基づく方法の好ましい実施形態では、パラチノース、触媒作用性酸物質及び水からなり、溶融のために加熱されるの混合物中の水の割合は、４重量％〜１２重量％である。別の好ましい実施形態では触媒作用性酸物質のこの混合物中の割合は、混合物中のパラチノース仕込み量基準で０．０５重量％〜０．５重量％、とりわけ０．１重量％である。
【００４８】
本発明に基づき、水、触媒作用性酸物質及びパラチノースの混合物中の触媒作用性酸物質として、有機酸、ホウ酸、リン酸とリン酸二水素カリウムの組合せ及び／又は酸性塩、硫酸アンモニウムを使用する。好ましい変法では有機酸として低揮発性の有機酸、特に好ましくはクエン酸を使用する。
【００４９】
上記の方法の好ましい実施形態では、パラチノースの添加の前及び／又は間に触媒作用性酸物質の水溶液を５５℃〜９５℃、とりわけ約７５℃の温度に熱する。その場合パラチノースをこの溶液に攪拌しつつ加えることが好ましい。
【００５０】
本発明によればパラチノース、有機酸及び水の混合物を１３０℃〜２００℃、とりわけ１４０℃〜１５５℃、特に好ましくは約１４５℃の反応温度に、溶融するまで加熱する。その場合特に混合物をとりわけ極めて激しく攪拌し、さらに上記の反応温度になるべく短時間で到達させる。
【００５１】
本発明に基づき２分以上、とりわけ２０〜１００分、特に好ましくは３０〜６０分の時間の後に溶融物から縮合パラチノースを得ることが好ましい。その場合溶融物の反応温度をこの期間のあいだ１３０℃〜２００℃、とりわけ１４０℃〜１５５℃、特に好ましくは約１４５℃に保つ。
【００５２】
上記の方法の別の好ましい実施形態では、こうして得られた溶融物を反応時間の経過の後に水で急冷し、特に本発明縮合パラチノースを含むシロップを得る。なお溶融物の急冷のための水は、溶融物と水の重量比が１０：１〜１：２、とりわけ５：１〜１：１になるように加える。
【００５３】
上記の方法の変法では、溶融物から得られる本発明縮合パラチノースは、温度調整した押出機内で連続プロセスにてパラチノースとクエン酸（パラチノース重量に対して０．１重量％）の混合物から連続的に得られる。その場合加熱した押出機に混合物を送り、少なくとも１分の接触時間、特に１〜１５分、とりわけ１〜６分、特に好ましくは２分の接触時間の後に、縮合パラチノースが押出機から連続的に得られる。なお加熱した押出機は１５０〜２５０℃、とりわけ１８０〜２２０℃、特に好ましくは約２００℃の温度を有する。ジパラチノース二無水物の割合が５４％を超える本発明縮合パラチノースを得るのに２分の接触時間で十分なことが特に有利である。
【００５４】
また本発明の主題は、１５〜４５重量％の未縮合パラチノース（ＤＰ＝２）、３５〜６０重量％のパラチノース二量体（ＤＰ＝４）、１０重量％以下のパラチノース三量体（ＤＰ＝６）、５重量％以下のパラチノース四量体（ＤＰ＝８）及び五量体（ＤＰ＝１０）並びに少なくとも５重量％の三糖（ＤＰ＝３）を含む縮合パラチノース、特に未縮合パラチノースの割合が２５〜３５重量％、特に好ましくは２９〜３３重量％の縮合パラチノースである。別の好ましい主題は、パラチノース二量体の割合が４０〜５３重量％、とりわけ４１〜４７重量％の上記の縮合パラチノースである。別の好ましい主題は、パラチノース三量体の割合が１〜５重量％、とりわけ２．５〜４重量％の上記の縮合パラチノースである。別の好ましい主題は、パラチノース四量体及びパラチノース五量体の割合が１〜４重量％の上記の縮合パラチノースである。別の好ましい主題は、三糖の割合が７重量％〜１０重量％の上記の縮合パラチノースである。
【００５５】
本発明に基づき得られる反応生成物の未縮合パラチノース含量を低減する補足的処理法によって、本発明縮合パラチノースの上記の利点、特にｐＨ及び酵素安定性をさらに高めることが好ましい。これはとりわけクロマトグラフィー分離法によって行われる。この実施形態の好ましい変法では、クロマトグラフィー分離法のためにカルシウムイオン（Ｃａ２＋）を持つ陽イオン交換体が使用される。
【００５６】
本発明に基づき上記の分離・低減法によって、とりわけパラチノース二量体含量がパラチノース水溶液から得られる在来の縮合パラチノースに比して約２．５倍（２５５％）に増加され、未縮合パラチノース（ＤＰ＝２）の含量が約５分の１（２２％）に減少された縮合パラチノースが得られる。
【００５７】
こうして本発明の別の好ましい主題は、１〜２５重量％の未縮合パラチノース（ＤＰ＝２）、４５〜８０重量％のパラチノース二量体（ＤＰ＝４）、１０重量％以下のパラチノース三量体（ＤＰ＝６）、５重量％以下のパラチノース四量体（ＤＰ＝８）及び五量体（ＤＰ＝１０）並びに少なくとも５重量％の三糖（ＤＰ＝３）を含む濃縮縮合パラチノース、特に未縮合パラチノースの割合が５〜２０重量％、特に好ましくは９〜１３重量％の濃縮縮合パラチノースである。一変型では、濃縮縮合パラチノースが５４〜７５重量％、とりわけ６５〜７３重量％の割合のパラチノース二量体及び／又は２〜９重量％、とりわけ４〜６重量％の割合のパラチノース三量体及び／又は０．５〜３．５重量％の割合のパラチノース四量体とパラチノース五量体及び／又は６重量％〜１５重量％、とりわけ８〜１２重量％の割合の三糖を含む。
【００５８】
上記の本発明縮合パラチノース又は濃縮縮合パラチノースの変型では、パラチノース二量体中の複縮合パラチノース二量体、ジパラチノース二無水物の割合が少なくとも７０％、とりわけ８０〜９０％である。
【００５９】
そこでパラチノース二量体（ＤＰ＝４）の割合が７３重量％未満であって、パラチノース二量体の少なくとも７０重量％、とりわけ８０重量％以上、特に９０重量％、特に好ましくは９５重量％以上が複縮合ジパラチノース二無水物である縮合パラチノースも本発明の好ましい主題である。
【００６０】
この点に関連してジパラチノース二無水物とは、２個の水分子が脱離した２個のパラチノース分子の縮合物を意味する。それはとりわけ図１に示す下記の化合物である。図１は本発明に基づく縮合パラチノースに含まれる種々のジパラチノース二無水物を示す。
【表１】
2006502103.tif 000002
【００６１】
この点に関連してジパラチノース一無水物とは、１個の水分子が脱離した２個のパラチノース分子の縮合物を意味する。
【００６２】
本発明に基づく上記のすべての縮合パラチノースの三糖は、加水分解されたパラチノースの単糖とパラチノース二糖の縮合物からなる。
【００６３】
別の好ましい実施形態では上記の本発明縮合パラチノース又は本発明に基づく濃縮縮合パラチノースから少なくとも１つの随伴成分を除去する。その場合少なくとも１つの随伴成分は、得られた本発明の縮合パラチノースからクロマトグラフィー法により分離される。この実施形態の一変型ではクロマトグラフィー分離法のために、特にカルシウムイオン（Ｃａ２＋）をもつ陽イオン交換体が使用される。少なくとも１つの随伴成分は、特にグルコシルメチルフルフラール（ＧＭＦ）である。ＧＭＦは苦味があり、精製することによって本発明縮合パラチノースの味が著しく改善される。そこでグルコシルメチルフルフラールの割合が０．４重量％未満、とりわけ０．２５重量％未満の縮合パラチノースも本発明の好ましい主題である。
【００６４】
また上記の方法によって得られる縮合パラチノースも本発明の好ましい主題である。
【００６５】
本発明に基づく縮合パラチノースは食品、食糧又は嗜好品の血糖指数を調節する能力があるから、本発明に基づく縮合パラチノースを糖尿病（２型）及び／又は代謝疾患の予防及び／又は治療のため、とりわけ食餌療法用食品、食糧又は嗜好品の成分として使用することができる。そこで血糖的性質の調節、特に血糖指数の調節のための食品、食糧又は嗜好品、特に食餌療法用食品、食糧又は嗜好品の成分としての本発明縮合パラチノースの使用が本発明の主題である。
【００６６】
本発明に基づく縮合パラチノースは、特に胃腸通路でおおむね不消化の可溶性バラスト物質、特にプレバイオティクス的バラスト物質として使用することが好ましい。本発明に基づきプレバイオティクス的バラスト物質としての使用が好ましい。こうして本発明縮合パラチノースは本発明に基づき食餌療法用繊維源として利用される。
【００６７】
好ましい実施形態では、本発明に基づく縮合パラチノースは他の可溶性又は不溶性の発酵可能又は発酵不能なバラスト物質と組み合わせて使用される。この実施形態の好ましい変型では、本発明縮合パラチノースは可溶性バラスト物質例えば短鎖フルクトオリゴ糖、長鎖フルクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、加水分解グアーガム例えば“Sunfibre”又は“Benefibre”、ラクツロース、キシロオリゴ糖、ラクトスクロース、マルトオリゴ糖、例えばMatsutaniの“Fibersol-2”、イソマルトオリゴ糖、ゲンチオオリゴ糖、グルコシルスクロース例えばHayashibaraの“Coupling Sugar”、大豆オリゴ糖、キトオリゴ糖、キトサンオリゴ糖並びに不溶性バラスト物質、例えば耐性デンプン、カラスムギ繊維、小麦繊維、例えばエンドウマメ、トマトの野菜繊維、例えばリンゴ、イチゴ、イナゴマメの果実繊維、例えばNutrinovaの“Caromax”、セルロース及びテンサイ繊維、例えばDaniscoの“Fibrex”からなるバラスト物質群から選ばれた少なくとも１つのバラスト物質と組み合わせて使用される。
【００６８】
また本発明縮合パラチノースと上記のバラスト物質の少なくとも１つとの混合物のほかに、本発明に基づき本発明縮合パラチノース（単独で又は上記のバラスト物質の少なくとも１つとの組合せとして）と、プロバイオティクス（Probiotics）的乳酸菌、ビフィズス菌の培養との混合物、いわゆる「シンバイオティクス（Synbiotics）」を調製することが好ましい。添加されるプロバイオティクス的ビフィズス菌培養物は、使用と投薬形態に応じて生培養物又は乾燥培養蚋又は長期培養物として調製される。
【００６９】
本発明に基づく縮合パラチノース（単独で又は上記のバラスト物質の少なくとも１つ及び／又はプロバイオティクス的ビフィズス菌の培養との組合せとして）は、本発明に基づき食餌療法用繊維源として便秘の治療及び／又は予防、消化管内の健全な微生物フロラの回復と保全、動物又はヒトの消化管内の食物成分、例えばミネラルの利用度と吸収の改善、一般に特に回復期の健康の促進と回復に役立ち、前述のように大腸腫瘍及び炎症性腸疾患の発生を防止する。本発明に基づき本発明縮合パラチノースは動物及びヒトの身体の免疫系の調節及び促進にも役立つ。
【００７０】
そこで上記の本発明縮合パラチノースを単独で又は上記のバラスト物質の少なくとも１つ及び／又はプロバイオティクス的ビフィズス菌の培養物との組合せとして含む食品、食糧、嗜好品又は動物飼料並びにこのような食品、食糧、嗜好品又は動物飼料の製造のための本発明縮合パラチノースの使用も本発明の別の主題である。
【００７１】
また本発明は本発明縮合パラチノースを単独で又は上記のバラスト物質の少なくとも１つ及び／又はプロバイオティクス的ビフィズス菌の培養物との組合せとして含む食品、食糧又は嗜好品に関する。一変型では、これは乳製品及びミルク製品例えばチーズ、バター、ヨーグルト、ケフィア、凝乳、サワーミルク、バターミルク、クリーム、コンデンスミルク、ドライミルク、乳清、乳糖、乳タンパク質、混合乳、低脂肪乳、乳清混合物又は乳脂肪の製品又は調製品である。別の変型では、これは焼き菓子類、特にクッキーを含むパンもしくは保存用焼き菓子、ビスケット又はワッフルを含む上質焼き菓子類である。別の変型では、これはスプレッド、マーガリン製品又はショートニングである。別の変型では、これはインスタント製品及びブイヨン製品である。別の変型では、これは果物製品又は果物調製品、例えば砂糖漬、マーマレード、ゼリー、果物缶詰、果物ジャム、果物ピューレ、果汁、濃縮果汁、果物ネクター又は果物粉末である。別の変型では、これは野菜製品又は調製品、例えば野菜缶詰、野菜ジュース又は野菜ピューレである。別の変型では、これはスパイス混合物である。別の変型では、これはミュースリ及びミュースリ混合物並びに調理済みミュースリを含む製品である。別の変型では、これは非アルコール飲料、例えばスポーツドリンク及び食餌療法用レモナード、飲料原料及び飲料粉末である。
【００７２】
別の実施形態は本発明に基づく縮合パラチノースを単独で又は上記のバラスト物質の少なくとも１つとの組合せとして含む甘味品、例えばチョコレート、ハードキャラメル、ソフトキャラメル、チューインガム、ボンボン、フォンダン製品、ゼリー製品、甘草エキス、マシュマロ製品、フレーク、圧縮製品、砂糖漬果物、糖果、ヌガー製品、アイスキャンデー、マーチパン、ミュースリバー及びアイスクリーム又はアルコール及び非アルコール甘味飲料等並びに本発明縮合パラチノースを単独で又は上記のバラスト物質の少なくとも１つ及び／又はプロバイオティクス的ビフィズス菌の培養と組み合わせて使用するこの甘味品の製造である。
【００７３】
別の好ましい実施形態では、本発明に基づく縮合パラチノースが特に血糖的性質の調節のための作用物質として、単独で又は上記のバラスト物質の少なくとも１つ及び／又はプロバイオティクス的ビフィズス菌の培養と組み合わせて、特別食、グルコース不耐性を有する人の食事又は幼児食に使用される。
【００７４】
別の好ましい実施形態では、本発明に基づく縮合パラチノースがｐＨ値１〜５、とりわけ２〜４の酸性食品、特に果汁又は果汁調製品、酸性砂糖漬に使用される。
【００７５】
発明の別の主題は、甘味料としての上記の本発明縮合パラチノースの使用である。本発明に基づく縮合パラチノースはサッカロース（１００％）に比して約３４％の甘味力を有するから、上記のプラスの特性を具備する可溶性バラスト物質として特に有利であるだけでなく、砂糖代用品及び／又は甘味料としても使用される。従って本発明縮合パラチノースを含む甘味料も発明の主題である。
【００７６】
本発明の別の好ましい主題は、特に医薬品、医薬品に類する調製品、食品、食糧及び／又は嗜好品の作用物質として、並びに疾患の治療のための動物飼料の添加物としての本発明縮合パラチノースの使用である。特にこれは本発明縮合パラチノースを含む医薬組成物、医薬品及びこのような医薬品の製造のための本発明縮合パラチノースの使用である。
【００７７】
一変型では、本発明に基づく縮合パラチノースが腸疾患の治療のための作用物質として使用される。従ってこうして製造された医薬品は腸疾患の治療のために使用される。
【００７８】
別の変型では、本発明に基づく縮合パラチノースが便秘の治療及び／又は予防、消化管内の健全な微生物フロラの回復と保全並びに便秘の治療及び／又は予防、消化管内の健全な微生物フロラの回復と保全の作用物質として利用される。
【００７９】
別の変型では、本発明に基づく縮合パラチノースが動物又はヒトの消化管での食物成分、特にミネラル、例えばカルシウムの吸収を改善する作用物質として利用され、こうして栄養不足症状を防止及び／又は軽減する。
【００８０】
別の変型では、本発明に基づく縮合パラチノースは腸の多くの微生物感染（＝細菌性又はウイルス性腸炎）で起こるイオン分泌の増大及び／又はイオン吸収不足に特に起因する下痢疾患（分泌性下痢）、例えば毒素原性大腸菌株やその他の腸病原性細菌及び寄生虫に原因する急性下痢、さらにはアメーバ赤痢の防止及び／又は治療の作用物質として利用される。
【００８１】
そこで本発明の別の主題は、感染症の予防、腸疾患の予防、大腸発癌の予防、炎症性疾患の予防及び／又は骨粗しょう症の予防のための作用物質としての本発明縮合パラチノースの使用である。
【００８２】
また本発明の別の主題は、一般感染症に対する免疫防御の強化のための作用物質としての本発明縮合パラチノースの使用である。
【００８３】
本発明の別の好ましい主題は、酸化的ストレスに起因する疾病、特に癌、１型及び２型糖尿病、高血圧、卒中発作、男性不妊症、リウマチ性疾患、冠動脈疾患、急性心不全及び慢性炎症性疾病のような疾病の予防及び／又は治療のための作用物質としての本発明縮合パラチノースの使用である。
【００８４】
また発明は、上記の本発明縮合パラチノースを場合によっては製薬上適当な担体、添加剤、助剤と共に含む医薬品に関する。このような担体、添加剤又は助剤は例えば潤滑剤、離型剤、増稠剤、安定剤、乳化剤、保存剤、レシチン、強力甘味料、甘味料、着色料、調味料、香料及び／又は増量剤である。その場合こうして得られた医薬品は特に口中錠、カプセル剤、糖衣錠、錠剤、溶液、懸濁剤、乳剤、滴剤、ジュース、ゼリーの形もしくは注射液又は注入液の形になっている。本発明に基づく縮合パラチノースは、胃腸管を経て大腸に到達し得るように、経口的に投与することが好ましい。別の変型では、作用物質が直腸投与される。
【００８５】
また発明は、とりわけ上記の目的の１つのための作用物質としての本発明縮合パラチノースとともに、特に複合治療のために同じ投薬又は別個の投薬で投与される少なくとも１つの別の作用物質を含む医薬品に関する。縮合パラチノースと少なくとも１つの補助作用物質の併用は、治療又は予防効果の強化を目指すことができるが、生体の種々の生物学的系に作用して、全体的効果を強化することもできる。補助作用物質の選択は、主として治療される疾病とその重度に関係する。疾患が例えば顕性大腸癌であれば、場合によって医師が指示する、例えば５−フルオロウラシルを使用する基本化学療法を縮合パラチノースの同時投与によって支援することができる。疾患が顕性糖尿病であれば、血小板凝結阻害剤を使用する糖尿病患者の大血管病の薬物治療を、本発明に基づく縮合パラチノースの同時投与によって支援することができる。
【００８６】
もちろん本発明に基づく縮合パラチノースは、実際上前述と同じ作用及び適用領域をもつ作用物質として動物、とりわけ哺乳動物、特に単胃型動物に使用することができる。そこで上記の疾病又は動物での獣医学的同等物を治療する医薬品の製造のための本発明縮合パラチノースの使用も、発明の別の主題である。
【００８７】
さらに発明を下記の実施例２〜１２で詳述する。
【実施例１】
【００８８】
先行技術による縮合パラチノースの調製（対照例）
スチール容器内で３００ｇの結晶性パラチノースに９０ｇの完全脱塩水を加えて１０５℃で攪拌しつつ溶解し、続いてクエン酸（使用するパラチノース基準で０．０２重量％）を加えて真空下で最終温度１３５℃まで濃縮する。１３５℃に到達した後、この温度を３０分間保ち、続いて冷却し、完全脱塩水で反応生成物を溶解する。
【００８９】
基準物質としてRaftilose(登録商標)Stを使用するゲル浸透クロマトグラフィーによって、反応生成物の組成と重合度領域を決定する。その場合領域ＤＰ２はほぼ未縮合パラチノース（イソマルツロース）に相当する。
【表２】
2006502103.tif 000003
【００９０】
未縮合パラチノースの、パラチノース二量体の縮合物に対する比は約１．７であり、従って明らかに１より高い。
【００９１】
ガスクロマトグラフィー分析（ＧＣ）によりパラチノース二量体の下記の組成が明らかになる。
【表３】
2006502103.tif 000004
【実施例２】
【００９２】
溶融による縮合パラチノースの調製（本発明）
１０ｇの無水クエン酸を含む８００ｇの完全脱塩水をまず攪拌装置付き最大処理容積約２０リットルのカラメル鍋に仕込んで、７５℃に温める。攪拌しつつ１０ｋｇのパラチノースを少しずつ加える。添加の終了の後にカラメル鍋の最大発熱電力（４．４ＫＷ）、攪拌装置の最大回転数で１４５℃に加熱し、反応温度を４５分間１４５℃に保つ。得られた溶融物を続いて４ｋｇの完全脱塩水で急冷し、生じるシロップを排出する。シロップから周知のように縮合パラチノースが得られる。
【００９３】
基準物質としてRaftilose(登録商標)L40及びRaftilose(登録商標)Stを使用するゲル浸透クロマトグラフィーによる分析でＤＰ領域の割合を決定する。
【表４】
2006502103.tif 000005
【００９４】
反応生成物に含まれる三糖は、基本的にパラチノースの部分加水分解に由来する単糖とパラチノース二糖の縮合物である。
【００９５】
未縮合パラチノースの、パラチノース二量体の縮合の主生成物に対する比は約０．７であり、従って１より明らかに低い。
【００９６】
得られるパラチノース縮合物は約８５％の複縮合パラチノース分子、即ちジパラチノース二無水物を含み、二量体への縮合はそれぞれ２個の水分子の脱離で行われる。
【００９７】
副生物として、溶融物中に８．３重量％の割合のグルコシルメチルフルフラール（ＧＭＦ）が生じる。ＧＭＦはクロマトグラフィーによりＣａ＋２型陽イオン交換体で分離することができる。
【実施例３】
【００９８】
クロマトグラフィーによるパラチノース縮合物の濃縮及びカルシウムイオンを有する陽イオン交換体による不純物の分離
実施例２で得られた反応生成物中のパラチノース縮合物に含まれる未縮合パラチノースの分離によるパラチノース縮合物の濃縮及び／又は不純物の分離のために、実施例２の方法に続いてＣａ＋２型の強酸性陽イオン交換体（例えばAmberlite XE594）でクロマトグラフィーを行う。
【００９９】
クロマトグラフィー：
分離設備：              長さ１０ｍ、直径２５ｃｍ
温度：                  ５５℃
流量：                  １００ｌ／ｈ
溶離媒質：              脱気した脱イオン水
給入溶液：              反応生成物の５０％乾物重量を含む３４．４ｋｇ（乾燥物１７．４ｋｇに相当）
【表５】
2006502103.tif 000006
【０１００】
クロマトグラフィー法での分画の仕方に応じて不純物、グルコシルメチルフルフラール（ＧＭＦ）が事実上完全に分離され（ＧＭＦなし）、又は得られた混合物中のパラチノース縮合物の割合がさらに約１．５倍（１５０％）に増加する。未縮合パラチノースの割合を約３分の１に減少することができる。得られた縮合パラチノース溶液はこうしてＧＭＦ無しであるか、又はＧＭＦ無しでパラチノースが濃縮されている。
【０１０１】
実施例２で得られた縮合パラチノースからＧＭＦ及び未縮合パラチノースをクロマトグラフィーにより分離した後、ゲル浸透クロマトグラフィーによる分析（実施例２を参照）で下記の組成を有する本発明縮合パラチノースが得られる。
【表６】
2006502103.tif 000007
【０１０２】
未縮合パラチノースの、縮合主生成物（パラチノース二量体）に対する比は、実施例２よりさらに減少しており、約０．１６である。このようにして本発明に基づく縮合パラチノースではパラチノース二量体の割合が未縮合パラチノースの割合の約６．２５倍である。
【０１０３】
ガスクロマトグラフィー分析（ＧＣ）によりパラチノース二量体の下記の組成が明らかになる。
【表７】
2006502103.tif 000008
【０１０４】
ジパラチノース二無水物の割合は、対照例（実施例１）の縮合パラチノースに比して約６倍である。
【実施例４】
【０１０５】
縮合パラチノースのｐＨ安定性
パラチノース縮合物のｐＨ安定性を比較するために、実施例１（対照）又は実施例２（本発明）によって得られた反応混合物をそれぞれ０．１Ｎ塩酸中の０．９％溶液（ｐＨ１．０）として、８０℃で１５〜１２０分インキュベーションする。その際縮合物（ＤＰ３〜ＤＰ１０）の割合のほかに、未縮合パラチノース（ＤＰ＝２）及び縮合パラチノース反応生成物に同じく含まれる単糖の割合も決定する。
【表８】
2006502103.tif 000009
【０１０６】
８０℃、ｐＨ１．０で１２０分の反応時間の後に在来の縮合パラチノース（実施例１、対照例）と比較して、本発明に基づき調製された縮合パラチノース（実施例２）は依然として１０倍の割合のパラチノース縮合物（ＤＰ３〜ＤＰ１０）を有し、本発明に基づきＧＭＦ及びパラチノースの分離の後に得られる縮合パラチノース（実施例３）はおよそ１３倍の割合のパラチノース縮合物（ＤＰ３〜ＤＰ１０）を有する。
【０１０７】
上記の結果がはっきり示すように、公知の縮合パラチノースと比較してパラチノース二量体の含量が増加され、未縮合パラチノースの含量が低減された本発明のパラチノースは著しく高いｐＨ安定性を有する。
【実施例５】
【０１０８】
胃及び小腸内の縮合パラチノースの安定性
ａ）胃内の安定性
ｐＨ２．０で加水分解率を決定することによって、胃通路での物質の安定性をシミュレートすることができる。対照としてサッカロース及び１−ケストースを使用する。
【０１０９】
縮合パラチノースの１％溶液を１０ｍＭの塩酸（ｐＨ２．０）とともに３７℃で３時間インキュベーションする。それぞれ６０、１２０及び１８０分後に反応調合物から試料を採取し、塩基性陰イオン交換体クロマトグラフィー、ＨＰＡＥＣにより分析する。
【表９】
2006502103.tif 000010
【０１１０】
実施例１により先行技術で調製された縮合パラチノースは、本発明に基づき実施例２により溶融によって調製された縮合パラチノースよりｐＨ安定性が低い。比較すると、加水分解率８％のサッカロース、３６％の１−ケストースもｐＨ安定性が低い。
【０１１１】
ｂ）膵臓酵素に対する安定性
膵臓分泌物は大量のヒドロラーゼ、とりわけ炭水化物分解酵素、例えばα−アミラーゼを含む。α−アミラーゼはα−１，４−グルカン（デンプン、グリコーゲン）をとりわけマルトース及びマルトオリゴ糖に分解する。
【０１１２】
この膵臓酵素に対する糖類の安定性の試験を次のように行う。
【０１１３】
使用した溶液：
溶液１：２０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）と６ｍＭのＮａＣｌ
溶液２：実施例２により調製した本発明縮合パラチノースの溶液１中の１％溶液
溶液３：実施例１により調製した在来の縮合パラチノースの溶液１中の１％溶液
溶液４：溶液１中の１％デンプン溶液（Zulkowskiによる可溶性デンプン）
溶液５：溶液１に溶解した０．２％の膵臓酵素（Sigma社）
調合物ごとに各々３．０ｍｌの炭水化物溶液（溶液２〜溶液４）に０．１ｍｌの酵素溶液（溶液５）を混合する。
【０１１４】
サーモミキサー（間欠振とう）で３７℃で２１０分のインキュベーションの後に、９５℃に１５分加熱して反応を終了し、試料をＨＰＡＥＣにより分析する。デンプン含有試料（溶液４＋溶液５）をＨＰＡＥＣ分析の前に１Ｍの塩酸中で９５℃に３時間加熱することによって完全に加水分解し、試料のデンプン含量を算定するために、こうして生じるグルコースを決定する。
【表１０】
2006502103.tif 000011
【０１１５】
本発明に基づく縮合パラチノースも在来の縮合パラチノースも、使用した膵臓酵素によって分解されない。これに対して可溶性デンプンは８５％が分解される。
【０１１６】
ｃ）小腸−α−グルコシダーゼに対する安定性
小腸内にある粘膜耐性酵素複合体サッカラーゼ／イソマルターゼ及びグルコアミラーゼ／マルターゼは生体内で小腸に到達した二糖、例えばマルトース及びサッカロース、さらに部分的にマルトオリゴ糖も単糖に分解して、そのまま腸壁を通って血液循環に吸収されるように作用する。
【０１１７】
これらの酵素に対する縮合パラチノースの安定性の試験を次のように行った。
【０１１８】
酵素複合体サッカラーゼ／イソマルターゼ（ＳＩ複合体）及びグルコアミラーゼ／マルターゼ（ＧＭ複合体）をH.Heymann(ハノーファー大学学位請求論文、１９９１年)の方法でブタ小腸から単離する。
【０１１９】
溶液１：０．１Ｍトリエタノールアミン（ＴＥＡ）緩衝液、ｐＨ７．０
溶液２：実施例２により調製した本発明縮合パラチノースの溶液１中の１％溶液
溶液３：実施例３により調製し、ＧＭＦ及びパラチノースを分離した本発明縮合パラチノースの溶液１中の１％溶液  
溶液４：実施例１により調製した在来の縮合パラチノースの溶液１中の１％溶液（対照例）
溶液５：溶液１中のマルトースの１%溶液
溶液６：溶液１中のサッカロースの１%溶液
溶液７：溶液１中のサッカラーゼ／イソマルターゼ酵素複合体
溶液８：溶液１中のグルコアミラーゼ／マルターゼ酵素複合体
３７℃に温度調整した炭水化物溶液（溶液２〜溶液６）各々１．２ｍｌにそれぞれ０．７単位の酵素複合体サッカラーゼ／イソマルターゼ（溶液７）又はグルコアミラーゼ／マルターゼ（溶液８）を加え、混合し、３７℃でインキュベーションする。２時間後に９５℃に１５分加熱して反応を停止する。各調合物のそのとき生成された単糖及び未分解の糖類をＨＰＡＥＣにより定量的に決定する。
【表１１】
2006502103.tif 000012
【０１２０】
選んだ条件下でサッカロース及びマルトースはサッカラーゼ／イソマルターゼ酵素複合体により、マルトースはグルコアミラーゼ／マルターゼ酵素複合体によりほぼ完全に加水分解される。実施例１、実施例２及び実施例３の縮合パラチノースは２つの酵素複合体によってごく僅かしか分解されない。ところが実施例２及び実施例３の本発明縮合パラチノースは実施例１の在来の縮合パラチノースと比較して、特に有利な点としてそれぞれ分解の程度が少ないことが示される。このようにして実施例２、とりわけ実施例３の本発明縮合パラチノースは小腸−α−グルコシダーゼに対してより安定である。従って大腸での利用度が公知の縮合パラチノースより高い。
【０１２１】
本発明に基づき実施例２又は実施例３により得られる縮合パラチノースの消化系に対する高い安定性という、明らかになった本発明の利点は、在来の縮合パラチノースに比してパラチノース二量体含量が増加し、未縮合パラチノース含量が低下していることによるものである。実験で明らかなころでは、実施例３による別の処理法でパラチノース二量体が一層増加し、未縮合パラチノース含量が一層低下した本発明縮合パラチノースの酵素安定性はさらに高くなっている。
【実施例６】
【０１２２】
ヒトの糞便中の縮合パラチノースの発酵
炭水化物をヒトの糞便とともに発酵させれば、細菌集団による代謝の速度及び短鎖脂肪酸、酪酸の生成について記述することができる。
【０１２３】
in vitro発酵実験で発酵性を研究するために、縮合パラチノースのほかに、周知のように急速に発酵する炭水化物としてのRaftilose(登録商標)P95（フルクトオリゴ糖）及び周知のように発酵が遅い炭水化物としての耐性デンプンを比較のために使用する。
【０１２４】
使用した耐性デンプンはNovelose(登録商標)240（National Starch社）である。あらかじめα−アミラーゼ／アミログルコシダーゼで酵素処理し、不溶分を回収することによって、その割合を８３％に増加する。
【０１２５】
実施例１による縮合パラチノース（対照）と本発明に基づく縮合パラチノースで、未縮合パラチノースの残留含量が２．３％になるように、あらかじめゲル浸透クロマトグラフィーによりＧＭＦと単糖及び二糖を分離する（実施例３）。生きている生体の大腸の発酵条件に相当するin vitro条件がこうして作り出される。通常小腸ですでに完全又は部分的に消化されている単糖及び二糖は、大腸でもはや代謝のために利用されないからである。
【０１２６】
in vitro発酵実験のために下記の組成の嫌気性培地を使用する。
【０１２７】
トリプトン：１．５ｇ
酵母抽出物：１．５ｇ
ＫＨ２ＰＯ４：０．２４ｇ
Ｎａ２ＨＰＯ４：０．２４ｇ
（ＮＨ４）２ＳＯ４：１．２４ｇ
ＮａＣｌ：０．４８ｇ
ＭｇＳＯ４ｘ７Ｈ２Ｏ：０．１０ｇ
ＣａＣｌ２ｘ２Ｈ２Ｏ：０．０６ｇ
ＦｅＳＯ４ｘ７Ｈ２Ｏ：２．０ｍｇ
レゾアズリン：１．０ｍｇ
システイン／HCｌ：０．５ｇ
ビタミン溶液（ＤＳＭ１４１による）：０．５ｍｌ
痕跡元素溶液（ＤＳＭ１４１による）：９．０ｍｌ
ＮａＨＣＯ３：２．０ｇ
蒸留水：１０００ｍｌになるような量、ｐＨ７．０
被検オリゴ糖での大腸菌の培養：
前記１項で述べた嫌気性培地９ｍｌに０．５％（ｗ／ｖ）の被検オリゴ糖を混合し、続いて還元剤として０．５ｇ／ｌのシステイン／ＨＣｌをあらかじめ加えた５０ｍＭの嫌気性リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）中の１０％糞便懸濁液（２人の被験者の混合糞便）１ｍｌを接種する。
【０１２８】
続いて“Hungate”試験管を３７℃で振とうしつつ最大４８時間インキュベーションする。種々の時点でこれから試料を採取し、残留オリゴ糖の割合、短鎖脂肪酸、乳酸及びｐＨ値について検査する。
【０１２９】
結果：
フルクトオリゴ糖（Raftilose(登録商標)P95）はすでに７時間後に完全に代謝されている。在来の縮合パラチノース（実施例１により調製）は単糖及び二糖の分離後２８時間以内に９７％とほぼ完全に発酵される。本発明に基づく縮合パラチノース（実施例２により調製）は単糖／二糖の分離の後に８５％が分解されるだけであり、８３％に濃縮した耐性デンプンは８９％の同様に低い代謝率を有する。本発明縮合パラチノースも耐性デンプンも２８時間後に依然としてかなりの含量の未発酵炭水化物を有する。
【表１２】
2006502103.tif 000013
【０１３０】
発酵の終点（最大４８時間後）で生成されたブチレートの含量は、耐性デンプンでも、それぞれ単糖／二糖を分離した本発明及び在来の縮合パラチノースでも同様に高い。これに対してRaftilose(登録商標)P95では著しく少ない量のブチレートが生成される。
【０１３１】
実施例２で得られる本発明縮合パラチノースの利点は、基本的に在来の縮合パラチノースと比較して縮合パラチノース二量体の含量が高く、未縮合パラチノースの含量が低いことによるものである。従ってパラチノース二量体の含量がさらに増加し、未縮合パラチノースの含量がさらに減少した実施例３で得られる本発明縮合パラチノースに見られる有利な効果は、実施例２による本発明縮合パラチノースに比してさらに高くなっている。
【実施例７】
【０１３２】
細胞ラインＨＴ２９のグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ活性及びグルタチオン含量に対する縮合パラチノース（ＤＰ＞２）の発酵上澄み液の影響
ＨＴ２９細胞を４８時間プレインキュベーションしてから、発酵上澄み液（１０容積％）又は１０容積％の培地（対照）を加える。引続きＨＴ２９を発酵上澄み液とともにさらに７２時間インキュベーションする。
【０１３３】
ＧＳＴ（グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ）活性及びＧＳＨ（グルタチオン）含量の決定の前に、ＨＴ２９細胞を次のように処理する。即ち処理したインキュベーション調合物の細胞（調合物２．５ｍｌにつき細胞約６ｘ１０６個）を抽出緩衝液（２０ｍＭトリス−ＨＣｌ、２５０ｍＭサッカロース、１ｍＭジチオトレイトール、１ｍＭ  ＰＭＳＦ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）に懸濁させ、Ultra−Turraxで１分間処理する。
【０１３４】
Habigら（J. Biol.Chem. 249, 7130-7139, 1974）により１−クロル−２，４−ジニトロベンゼン（１ｍＭ）でＧＳＴ全活性を決定する。ＧＳＨ（１ｍＭ）の存在下３０℃、ｐＨ６．５で反応が起こる。生成された共役体を分光測光法により３４０ｎｍで検出し、活性の算定のために利用する。毎分１μMolの共役体は任意活性単位に相当する。
【０１３５】
細胞間ＧＳＨを比色テスト（グルタチオン検定キット、Calbiochem/Novabiochem社）により決定する。
【表１３】
2006502103.tif 000014
【０１３６】
縮合パラチノースでは細胞間グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ活性もグルタチオン含量も、対照に比して７０％又は６０％高い。比較のために使用した耐性デンプンはこうした大幅な増加がない。
【実施例８】
【０１３７】
酸触媒の存在下で溶融による縮合パラチノースの調製（本発明）
５０ｇのパラチノースを５０ｍｇの酸性触媒とともごく細かくすりつぶす。続いてその２ｇを特殊鋼製円筒管に移し、油浴で１６０℃に６０分間加熱する。次に溶融物を冷却して、１０ｍｌの完全脱塩水に溶解する。
【０１３８】
溶液を適当に希釈してＨＰＡＥＣで分析し、複縮合パラチノース二量体、ジパラチノース二無水物のＤＰ４領域のピーク面積を実施例１（対照）及び実施例２（本発明）の当該のピーク面積と比較する。
【表１４】
2006502103.tif 000015
【０１３９】
結果は、パラチノース溶融物が別の酸触媒の存在下でも比較的高いジパラチノース二無水物含量をもたらすことを物語っている。
【実施例９】
【０１４０】
縮合パラチノースの連続的調製（本発明）
パラチノースとクエン酸（パラチノースに対して約０．１重量％）のよくすりつぶした混合物を、２００℃に温度調整した押出機に連続的に供給する。試験の際に接触時間を０．５分から５分まで変える。その時生じる生成物をＨＰＡＥＣで分析する。
【表１５】
2006502103.tif 000016
【０１４１】
結果が示すところでは、ジパラチノース二無水物の割合が５４％を超える縮合パラチノースを生産するのに、２分の接触時間ですでに十分である。
【実施例１０】
【０１４２】
縮合パラチノースのビフィズス原性
ヒトの糞便のビフィズス菌を栄養培地（組成は下記を参照）で嫌気性条件のもとでインキュベーションし、実施例３により調製した縮合パラチノースに唯一の炭素源として加える。５７８ｎｍで測定した光学密度ＯＤ578の増加により、細菌の成長を追跡する。４８時間のインキュベーション時間の後に光学密度（ＯＤ578）のパラメータ、ｐＨ値、酢酸塩及び乳酸塩の生成及び使用した本発明縮合パラチノースの残留含量を決定する。
【０１４３】
発酵培地：
使用した栄養培地はＤＳＭＺ培地Ｎｏ．５８に相当し、組成は次の通りであった。
【０１４４】
カゼインペプトン、トリプシンで消化：１０．０ｇ
肉抽出物：５．０ｇ
酵母抽出物：５．０ｇ
Ｋ２ＨＰＯ４：３．０ｇ
Tween 80：１．０ｍｌ
痕跡元素溶液、ＤＳＭ培地１４１による：９．０ｍｌ
ビタミン溶液、ＤＳＭ培地１４１による：１．０ｍｌ
レゾアズリン：１．０ｍｇ
システイン／ＨＣｌ：０．５ｇ
脱塩水：１０００ｍｌになるような量、ｐＨ６．８
結果：
次表で分かるように、試験した２５のヒト・ビフィズス菌（ビフィズスフロラ）の内７菌株は縮合パラチノースを代謝することができる。個々の菌株の培養中に炭水化物の分解によって短鎖脂肪酸、例えば酢酸塩及び乳酸塩の生成を検出することができる。そこでこの発酵の過程で、ｐＨ６．８に調整したｐＨ値が４８時間後にｐＨ４．５〜５．０に減少する。栄養培地に光学密度ＯＤ約０．１５で接種を行い、４８時間のインキュベーション時間の後にＯＤ１．０〜ＯＤ２．３への値の上昇が観察される。このことは、培養容器内のビフィズス菌含量が増加しており、本発明縮合パラチノースがビフィズス原性の働きをすることを意味する。
【表１６】
2006502103.tif 000017
【実施例１１】
【０１４５】
味覚試験
１０人（検査員）のパネルで味覚に関する差別試験を行う。次の２つの試料をそれぞれ２０％水溶液として互いに比較する。
【０１４６】
試料１：実施例１による在来の縮合パラチノース
試料２：実施例３により調製された本発明縮合パラチノース
１０人（検査員）中１０人が試料１を苦いと評価する。検査員の供述によれば、試料１はさらに不快な、長く持続する混じり物の味がする。これに対して試料２は程よく甘い、特にカラメルのような感じの味がする。
【実施例１２】
【０１４７】
縮合パラチノースの甘味力の決定
縮合パラチノースの甘味力の決定のために、縮合パラチノースを飲料水でそれぞれ１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％及び２８％溶液に希釈し、続いてこれを０．４５μｍメンブランフィルターに通す。比較基準として８％サッカロース水溶液を調製する。
【０１４８】
最初の試飲で試料を上記の順序で渡す。９人の検査員はまず比較基準、続いて試料のそれぞれ１つを試飲し、砂糖基準液と試料のどちらが甘いか、あるいは差を認めることができないか、を申告することになっている。各試飲の間で中和のために飲料水を使用する。
【０１４９】
最初の試飲の結果に基づき２回目の試飲のための被検試料の数を減らすことができる。上記の条件のもとで、最も高い濃度から始まって２７％〜２０％縮合パラチノース水溶液を比較基準と対比して８人が試飲する。
【０１５０】
甘味力の計算：
Ｘｌ＝「基準のほうが甘い」から「甘味力の差が認められない」へ、又は「甘味力の差が認められない」から「基準のほうが甘い」への変化が起こる転移点。
【０１５１】
Ｘu＝「甘味力の差が認められない」から「試料のほうが甘い」へ、又は「試料のほうが甘い」から「甘味力の差が認められない」への変化が起こる転移点。
【０１５２】
下限値：Ｌｌ＝ΣＸｌ／Ｎ
上限値：Ｌｕ＝ΣＸｕ／Ｎ
相当刺激＝（Ｌｕ＋Ｌｌ）／２
不確定領域＝Ｌｕ−Ｌｌ
甘味力＝砂糖濃度／相当刺激・１００％
結果：
２回の試飲の結果、本発明に基づく縮合パラチノースの甘味力は約３４％±２％であることが確かめられた。
【０１５３】
応用例１：甘味品
【表１７】
2006502103.tif 000018
【０１５４】
ゼラチンを水で軟化又は溶解する。砂糖、グルコースシロップ及び縮合パラチノースを所定の温度まで煮て、幾らか冷やす。ゼラチン、果実酸及びグリセリンを加える。生地を注型し、保温室に入れ、散粉し、塗油する。
【０１５５】
アラビアゴムを一晩水に溶かし、毛編ふるいに通す。砂糖、グルコースシロップ及び縮合パラチノースを所定の温度まで煮て、幾らか冷やす。ゴム溶液、グリセリン及び果実酸を加える。生地を注型し、保温室に入れ、散粉し、塗油する。
【０１５６】
ゼリーフルーツ
２５ｋｇ          砂糖
２５ｋｇ          縮合パラチノース
０．８ｋｇ        寒天
３０ｋｇ          水
１１ｋｇ          アップルピューレ
０．５ｋｇ        酒石酸
０．０６ｋｇ      香料、エッセンス又は着色料
寒天を水で軟化し、溶解し、砂糖及びその他の添加物を加え、１０５℃で煮る。生地を適当な型に流し込む。
【表１８】
2006502103.tif 000019
【０１５７】
配合表１：
縮合パラチノースと水を１６０℃まで煮て、真空処理する（−０．９バール）。１２０℃に冷却した後、あらかじめ溶解したＤＬ−リンゴ酸、香料及び着色料を混入する。溶融物を型押し又は注型する。
【０１５８】
配合表２：
サッカロース、グルコースシロップ、縮合パラチノース及び水を１３５℃まで煮て、真空処理する。１２０℃に冷却した後、あらかじめ溶解したＤＬ−リンゴ酸、香料及び着色料を混入する。溶融物を型押し又は注型する。
【表１９】
2006502103.tif 000020
【０１５９】
縮合パラチノース、Lycasin、甘味料及び水を溶解する。１２０℃でToffix、レシチン及びMonomulsを混入する。１２５℃でゼラチン、炭酸カルシウム及び香料を混入し、成形する。
【０１６０】
応用例２：ドッグフード
ドッグビスケット
１５０ｇ      凝乳
９０ｇ        牛乳
９０ｇ        食用油
１個          卵黄
７５ｇ        縮合パラチノース
２００ｇ      ドッグフレーク
添加物を混合し、小さな玉を作り、２００℃で２０分焼く。
【０１６１】
クッキー
１５０ｇ      あらびき小麦粉
２００ｇ      あらびきカラスムギフレーク
３０ｇ        蜂蜜
５０ｇ        縮合パラチノース
５ｇ          粒状ブイヨン
１００ｇ      全卵
１５０ｇ      牛乳
添加物を混合し、玉を作り、２２０℃で１５分焼く。
【０１６２】
応用例３：ミュースリ
ミュースリバー
２００ｇ      カラスムギフレーク
１００ｇ      コーンフレーク
１００ｇ      ハシバミの実
５０ｇ        ヒマワリの種
３０ｇ        ココナツのすりおろし
７５ｇ        黒砂糖
７５ｇ        蜂蜜
１００ｇ      縮合パラチノース
５０ｇ        バター
半個          レモン
砂糖、蜂蜜、縮合パラチノース、バター及びレモン半個のジュースをカラメルにする。カラスムギフレーク、コーンフレーク、ナッツ、ヒマワリの種及びココナツのすりおろしを混合して、それに加える。生地をよく混ぜ合わせて、ベーキングプレートの上に置く。バーを切断して、乾燥貯蔵する。
【０１６３】
ビルヒャー風ウィンターミュースリ
４ＥＬ        カラスムギフレーク
２ＥＬ        キビフレーク
１ＥＬ        コムギ麦芽フレーク
レモン１個のジュース
１５０ｇ      ヨーグルト
１ＥＬ        ヒッポフェア
５０ｇ        割ったナッツ
１０ｇ        干しぶどう
４００ｇ      リンゴ
２００ｇ      ナシ
３００ｇ      オレンジ
１５０ｇ      バナナ
８０ｇ        縮合パラチノース
（ＥＬ＝大さじに僅かに山盛り）
フレーク、ヨーグルト及びヒッポフェアを混合し、ナッツを加える。リンゴを粗くすりおろし、残りの果実を細かくさいの目にし、レモンジュースをリンゴに掛け、縮合パラチノースを加える。
【０１６４】
サマーミュースリ
１５０ｇ      アンズ、さいの目
１５０ｇ      低脂肪ヨーグルト
４０ｇ        縮合パラチノース
３０ｇ        コーンフレーク
朝食用オートミール
６９．３ｇ    小麦粉、４０５型
１５ｇ        カラスムギ粉
１ｇ          麦芽、白
２．１ｇ      麦芽、黒
０．６ｇ      塩
１０ｇ        水
１２ｇ        縮合パラチノース
小麦粉、カラスムギ粉、白及び黒麦芽、縮合パラチノース及び塩を混合する。水の添加は押出機で行う。ねり粉がそこで混合され、せん断され、煮込まれ、塑性化され、リングダイを通って押出される。続いてリングを乾燥し、冷却する。
【０１６５】
応用例４：飲物
パワードリンク
３個          オレンジ
２ＥＬ        コムギ麦芽   
３５ｇ        縮合パラチノース
２００ｇ      ヨーグルト
（ＥＬ＝大さじに僅かに山盛り）
オレンジを絞り、泡だて器でコムギ麦芽及び縮合パラチノースと混ぜ合わせ、ヨーグルトを混ぜあわせる。
【０１６６】
ホビーテークドリンク
１５０ｍｌ    オレンジジュース
５０ｍｌ      ミネラルウォーター
１つまみ      マルチビタミン粉末ＨＴ
１ＴＬ        マルチミネラル粉末ＨＴ
５ｇ          リンゴ・小麦バラストＨＴ
７．５ｇ      縮合パラチノース
（ＴＬ＝小さじに僅かに山盛り）
ドライバー１
２００ｍｌ    野ばらの実の茶
１００ｍｌ    グレープジュース
５ｇ          リンゴ・小麦バラストＨＴ
１ＴＬ        蜂蜜
５ｇ          縮合パラチノース
（ＴＬ＝小さじに僅かに山盛り）
ドライバー２
３００ｍｌ    野ばらの実の茶
５ｇ          リンゴ・小麦バラストＨＴ
１ＥＬ        凝乳
１００ｍｌ    グレープジュース
１０ｇ        縮合パラチノース
（ＥＬ＝大さじに僅かに山盛り）
バラスト飲料  アロニア・アップル
２００ｍｌ    ミネラルウォーター
１．５ＴＬ    フルーツシロップ、アロニア
１ＴＬ        フルーツシロップ、リンゴ
２ＴＬ        リンゴ繊維ＨＴ
１０ｇ        縮合パラチノース
（ＴＬ＝小さじに僅かに山盛り）
スポーツカクテル
２個          トマト
半分          サラダ用キュウリ
２５０ｇ      ニンジン
２５０ｇ      リンゴ
４ＥＬ        クリーム
パセリ
５０ｇ        縮合パラチノース
（ＥＬ＝大さじに僅かに山盛り）
トマト、キュウリ、ニンジン及びリンゴの汁を搾り、クリーム、パセリ及び縮合パラチノースを加える。
【０１６７】
トマトカクテル
６個          トマト
４ＥＬ        クリーム
オレンジ１個のジュース
１つまみ      塩
７．５ｇ      縮合パラチノース
１つまみ      パプリカ
２回ふり掛け  タバスコ
（ＥＬ＝約１２ｍｌ）
トマトをピューレにし、残りの添加物とかき混ぜる。
【０１６８】
果実含量５０％のオレンジネクター
１２０ｋｇ    オレンジネクター原料５０：１１
果汁含量４００％、抽出物含量５０％
４８ｋｇ      砂糖シロップ、６５％乾燥物
６０ｋｇ      縮合パラチノース
８２０ｋｇ    飲料水
レモナード
４．５ｋｇ    レモナード原料３：１００
抽出物含量４０％
６０ｋｇ      砂糖シロップ、６５％乾燥物
７５ｋｇ      縮合パラチノース
８８８．５ｋｇ飲料水
８ｋｇ        ＣＯ２
応用例５：果実調製品
果汁入りプディング
３３０ｇ      酸果サクランボ
１５０ｇ      コケモモ
３００ｇ      ラズベリー
３００ｇ      イチゴ
６０ｇ        デンプン
１リットル    果汁
６０ｇ        砂糖
５０ｇ        縮合パラチノース
デンプンとやや冷たい果汁をかき混ぜ、沸騰する果汁に混入する。５分間沸騰させる。果実、砂糖及び縮合パラチノースを加える。
【０１６９】
冷製ダイオウスープ
７５０ｇ      ダイオウ
０．５ｌ      水    
レモン半個分のジュース
１２０ｇ      砂糖
７５ｇ        縮合パラチノース
０．２ｌ      白ワイン
ダイオウを洗浄し、切断し、水及びレモンジュースで軟らかく蒸す。温かい内に砂糖及び縮合パラチノースをかき混ぜ、冷やし、白ワインを混入する。
【０１７０】
果物ピューレ
７５０ｇ      果実
３０ｇ        果汁
５０ｇ        縮合パラチノース
３ｍｌ        ラム酒
添加物をミキサーでピューレにする。
【０１７１】
イチゴクリーム
３７５ｇ      イチゴ
５０ｇ        縮合パラチノース
１パック      バニラシュガー
２枚          白ゼラチン
２枚          赤ゼラチン
２５０ｍｌ    クリーム
イチゴをピューレにし、縮合パラチノースとバニラシュガーを加え、溶かしたゼラチンを加え、冷やしておく。クリームを固くなるまで泡立て、混ぜ合わせる。
【０１７２】
アンズクリーム
１００ｇ      アンズ
３７５ｍｌ    水
３０ｇ        砂糖
５０ｇ        縮合パラチノース
１パック      バニラシュガー
４枚          白ゼラチン
１枚          赤ゼラチン
２５０ｍｌ    クリーム
アンズ、水、砂糖、縮合パラチノース及びバニラシュガーを３０分煮込む。ゼラチンをアンズコンポートに溶かし、生地をピューレにし、冷やしておく。クリームを固くなるまで泡立て、混ぜ合わせる。
【０１７３】
応用例６：ヨーグルト
ヨーグルト・レモンシェーク
６００ｇ      低脂肪ヨーグルト
レモン４個分のジュース
４ＴＬ        蜂蜜
３０ｇ        縮合パラチノース
４個          卵黄
添加物を混合する。
【０１７４】
レモン・ヨーグルトクリーム
４個          卵
４０ｇ        砂糖
４０ｇ        縮合パラチノース
２５ｍｌ      レモンジュース
３００ｇ      ヨーグルト
６ｇ          ゼラチン粉末
ゼラチンを軟化する。卵黄を卵白から分離する。ヨーグルト、卵黄、砂糖、縮合パラチノース及びレモンジュースを混合する。ゼラチンを溶かして加える。卵白を泡立てて泡雪にし、混ぜ合わせる。
【０１７５】
応用例７：砂糖漬
【表２０】
2006502103.tif 000021
【表２１】
2006502103.tif 000022
【０１７６】
アマレット及びバニラ入り酸果サクランボ砂糖漬
１ｋｇ        酸果サクランボ
３本          バニラスティック
５００ｇ      ゼリーシュガー２：１
４０ｍｌ      アマレット（アーモンドリキュール）
酸果サクランボの半分をミキサーでよく粉砕する。フルーツムースと残りの酸果サクランボ、バニラスティックの髄及びゼリーシュガーを混合し、かき混ぜながら煮る。４分間沸騰させる。アマレットを加える。砂糖漬を熱いうちに瓶に詰め、直ちに密閉する。
【０１７７】
ダイオウ・イチゴ砂糖漬
７５０ｇ      ダイオウ
２５０ｇ      イチゴ
１０００ｇ    ゼリーシュガー１：１
３パック      バニラシュガー
１ＥＬ        細かく刻んだレモンメリッサ
ダイオウとイチゴをぶつ切りにする。果物とゼリーシュガー及びバニラシュガーを混合し、蓋をして３〜４時間よく浸み込ませる。次にかき混ぜながら煮込み、４分間沸騰させる。レモンメリッサを混ぜ込む。熱い砂糖漬を瓶に詰め、直ちに密閉する。
【０１７８】
カボチャゼリー
１．５ｋｇ    カボチャ
１．２ｌ      水
１ｋｇ        ゼリーシュガー１：１
レモン２個分のジュース
１ＴＬ        刻んだハッカ
カボチャをさいの目に切って、水とともに２０〜３０分軟らかく煮る。汁を布で濾す。７５０ｍｌの冷たい汁とゼリーシュガー及びレモンジュースを混合し、かき混ぜながら煮込む。４分間沸騰させる。ハッカを混ぜ込む。熱いゼリーを瓶に詰め、直ちに密閉する。
【０１７９】
グランマルニエ入りイチゴ砂糖漬
１ｋｇ        イチゴ
１ｋｇ        ゼリ−シュガー
１個          未処理のオレンジ
６５ｇ        グランマルニエ（オレンジリキュール）
イチゴを押しつぶし、ゼリーシュガー及びすりおろしたオレンジの皮を加え、全体をよく混合する。かき混ぜながら煮込み、４分間沸騰させる。グランマルニエを混ぜ込む。熱いうちに瓶に詰め、直ちに密閉する。
【０１８０】
応用例８：焼き菓子類
列記する配合表で酵母は製パン膨張剤として使用される。本発明に基づく縮合パラチノースは製パン酵母によって基質としてごく限定的にしか利用されない。従って砂糖の一部だけを縮合パラチノースで代用する。
【表２２】
2006502103.tif 000023
【０１８１】
酵母、生クリーム、１つまみの塩及び１つまみの小麦粉をかき混ぜる。１０分間放置する。その他の添加物とともにこね混ぜ、２０分間放置する。ねり粉をよく練り、ロールで延ばし、１５個の三角形を切り取り、巻いてクロワッサンにする。短時間膨張させて、２００℃で１０分焼く。
【表２３】
2006502103.tif 000024
【０１８２】
酵母と砂糖をなまぬるい温度のミルクに混入し、１０分間放置する。その他の添加物とともにこね混ぜ、２０分間放置する。パン焼き型に入れて、１７５℃で４５分焼く。
【表２４】
2006502103.tif 000025
【表２５】
2006502103.tif 000026
【０１８３】
すべての添加物をこね器により最低段階でざっと混合し、次に高い段階でよくこね混ぜる。焼く前に生地を冷やしておく。
【表２６】
2006502103.tif 000027
【０１８４】
すべての添加物を泡だて器によりまず低い段階で、次に最高段階でかき混ぜる。こうして調製された２つのかき混ぜ生地は砂糖入りかき混ぜ生地より濃い焼け色を呈し、甘味が少ない。従って上記の２つのかき混ぜ生地は必要に応じて甘味料で甘味づけすることが望ましい。
【表２７】
2006502103.tif 000028
【０１８５】
卵黄、水、砂糖、縮合パラチノース及び塩を泡だて器で泡立たせる。ごく固くなるまで泡立てた卵白を卵黄に加える。小麦粉、食用デンプン及びベーキングパウダーを混合し、泡雪の上にふるい掛けして、入念に混ぜ合わせる。
【図面の簡単な説明】
【０１８６】
【図１】本発明に基づく縮合パラチノースに含まれる種々のジパラチノース二無水物の構造式を示す図である。
【図１】
2006502103.tif 000029
【国際調査報告】
2006502103.tif 000030
2006502103.tif 000031
2006502103.tif 000032
2006502103.tif 000033
2006502103.tif 000034
2006502103.tif 000035