(57)【要約】本発明は、ペルオキシニトライト転位触媒としての一般式Iの芳香族スルホンアミドの使用、その調製、及び種々の疾患の処理のための薬剤としてのその使用に関する。2006522762.tif 000010
2006522762.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式I：
【化１】
2006522762.tif 000008
［式中、R1は、C5-C6−シクロアルキル（任意には、C1-C6−アルキルにより１又は複数回、置換されていてもよく、そしてそれらの環は、任意には、１又は複数の窒素、硫黄又は酸素原子により中断されていてもよく、そして/又は環に１又は複数の可能な二重結合を含むことができる）、又はC3-C7−アリールもしくはC3-C12−ヘテロアリール（任意には、ハロゲン、ヒドロキシル、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシにより、等しく又は異なって、１又は複数回、置換されていてもよい）であり；
R2及びR3は、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシであり；あるいは
R2及びR3は、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換されていてもよく；そして
R4は、水素、ヒドロキシル、ニトロ、ハロゲン、C1-C6−アルキル、又は基COOH、CF3もしくはC1-C6−アルコキシである］
で表される化合物、及びその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩。
【請求項２】
R1が、C5-C6−シクロアルキル（任意には、メチルにより１又は複数回、置換されていてもよく、そしてそれらの環は、任意には、１又は複数の窒素、硫黄又は酸素原子により中断されていてもよく、そして/又は環に１又は複数の可能な二重結合が環に存在することができる）、又はC3-C6−アリールもしくはC3-C12−ヘテロアリールであり；
R2及びR3が、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキルであり；あるいは
R2及びR3が、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換されていてもよく；そして
R4が、水素、又は基CF3、−O−CH3もしくはニトロである；
式Iの化合物、及びその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩。
【請求項３】
R1が、下記式：
【化２】
2006522762.tif 000009
で表され；
R2及びR3が、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキルであり；あるいは
R2及びR3が、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換されていてもよく；そして
R4が、水素、又は基CF3、−O−CH3もしくはニトロである；
式Iの化合物、及びその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩。
【請求項４】
R1が、C1-C6−アルキル、C5-C6−シクロアルキル（任意には、C1-C6−アルキルにより１又は複数回、置換されていてもよく、そしてそれらの環は、任意には、１又は複数の窒素、硫黄又は酸素原子により中断されていてもよく、そして/又は環に１又は複数の可能な二重結合を含むことができる）、又はC3-C7−アリールもしくはC3-C12−ヘテロアリール（任意には、ハロゲン、ヒドロキシル、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシにより、等しく又は異なって、１又は複数回、置換されていてもよい）であり；
R2及びR3が、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシであり；あるいは
R2及びR3が、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換されていてもよく；そして
R4が、水素、ヒドロキシル、ニトロ、ハロゲン、C1-C6−アルキル、又は基COOH、CF3もしくはC1-C6−アルコキシである；
式Iの化合物、又はその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩を含んで成る組成物。
【請求項５】
慢性及び急性神経変性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、感染疾患、癌、ウィルス感染、心血管障害、及び腎疾患の処理及び予防のための薬物の生成のためへの請求項１〜３のいずれか１項記載の一般式Iの化合物の使用。
【請求項６】
慢性神経変性疾患がハンチングトン病、ALS(筋萎縮性側索硬化症)、パーキンソン病、痴呆例えば、アルツハイマー病、HIV痴呆及び初老期痴呆、Korksakoff病、癲癇、分裂病、鬱病であり、そして急性神経変性疾患が大脳虚血及び神経外傷であり、自己免疫疾患及び/又は炎症疾患が低血圧、ARDS(成人呼吸促窮迫症候群)、ゼプシスと敗血症ショック、リウマチ様関節炎、変形性関節症、骨盤/腸管の炎症性疾患(腸疾患)、脳膜炎、多発性硬化症、脱毛症、及び乾癬であり、感染性疾患が単細胞の寄生体によって引き起こされた疾病であり、癌が固形腫瘍及び白血病であり、ウィルス感染がサイトメガロウイルス感染、肝炎、B型肝炎、C、及びHIV疾患であり、心血管障害が虚血性の再潅流疾患、狭穿症、アテローム硬化症、及び再狭窄であり、そして腎疾患が糸球体腎炎である請求項５記載の使用。
【請求項７】
少なくとも１つの請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物を含んで成る薬剤。
【請求項８】
慢性及び急性神経変性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、感染疾患、癌、ウィルス感染、心血管障害、及び腎疾患の処理及び予防のためである請求項７記載の薬剤。
【請求項９】
適切な配合物質及びキャリヤーと共に、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物及び請求項７及び８記載の薬剤。
【請求項１０】
請求項１〜３のいずれか１項記載の一般式Iの化合物及び請求項４及び５記載の医薬組成物のペルオキシニトライト転位触媒としての使用。
【請求項１１】
経腸、非経口及び経口投与のための医薬製品の形での請求項１〜３のいずれか１項記載の一般式Iの化合物の使用。
【請求項１２】
経腸、非経口及び経口投与のための製品の形での請求項４記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ペルオキシニトライト−転位触媒としてのスルホンアミド、その調製、及び種々の疾患の処理のための薬剤の生成のためへのその使用に関する。
【０００２】
ペルオキシニトライト（peroxynitrite）は、酸化窒素（NO）とスーパーオキシド（O2-）との間の拡散調節された反応に起因する毒性代謝物として、Beckman など. (Beckman など., 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 87, 1620-1624)により、すでに記載されている。ペルオキシニトライトは、患者、例えばアルツハイマー痴呆、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症において重要な部分を演じ、そして細胞死及びアポプトシスの誘発を担当すると思われる多くの炎症工程に関与している。
【０００３】
ペルオキシニトライトは、アミノ酸残基を酸化するか又はニトロ化することにより多数のタンパク質と反応する。ニトロチロシン残基は、ペルオキシニトライトが運動ニューロンのフィラメントのチロシン残基のニトロ化を引起すので、多発性硬化症を有する患者の組織において高められることが見出される。この場合において損なわれるフィラメントの収縮が、ニューロン機能不全をもたらす（Estevez など., 1999, Science 286,2498-2500）。発作後の損なわれた血管収縮についての１つの理由は、内皮損傷、及びそれに起因する、水腫及び好中球の形成を導く、細胞膜における脂質残基のペルオキシニトライト−誘発性酸化である。
【０００４】
ペルオキシニトライト−介在性効果を妨げるための薬理学的介在性は、反応体（NO及びO2-）又は生成物（ペルオキシニトライト）のいずれかで可能である。
【０００５】
生成物ペルオキシニトライトの部分上への１つのアプローチは、最初にSalvemini など. (Salvemini など., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. , 95,2659-2663)により記載された。このアプローチにおいては、ペルオキシニトライトは、無害な最終生成物に、触媒により転位される。多量のペルオキシニトライトを転換することは、低濃度のペルオキシニトライトにより可能である。このアプローチの利点は、それが不都合な分解生成物、例えば反応性酸素種の形成をもたらさず、そしてペルオキシニトライトによるスーパーオキシドジスムターゼ（SOD）の阻害が廃止されることである。従って、新規化合物による処理方法は、疾患の処理において２倍の利点を有する。従って、一方では、ペルオキシニトライトの転換速度が早められ、そして他方では、SODがペルオキシニトライトによる不活性化から保護される。
【０００６】
今日までに開示される可能な転位触媒は、金属含有複合体である（WO 95/31197号,アメリカ特許第6,245, 758号, WO 98/04132号, アメリカ特許第5,872, 124号, WO 00/75144号, WO 01/26655号, アメリカ特許第6,372, 727号）。Salveminiなどにより記載される金属ポリフィリンは、炎症モデルにおいて保護効果を示す（Salvemini など., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 95,2659-2663 及び British J. Pharmacol. , 1999, 127,685-692）。
【０００７】
同じ種類の化合物が、Cuzzocrea など. (Cuzzocrea など., 2000, FASEB J. 14 (9), 1061-1072 及び Cuzzocrea など., 2001, Pharmacology Rev. 53,135-159)により、腸動脈閉塞モデルにおいて効果的であるとして記載されている。Crossなどは、マウスにおけるMSモデル（“実験自己免疫脳脊髄塩”＝EAE）におけるこの物質の効果を示した（Cross など. , 2000, J. Neuroimmunology 107,21-28）。Mackensenなどは、病巣虚血症モデル、すなわち病巣MCAO（大脳中央動脈閉塞）におけるマンガン含有ポリフィリンの効能を最初に示した（Mackensen など., 2001, J. Neurosci. 21,4582-4592）。
【０００８】
それらの既知の転位触媒の副作用、例えば毒性、耐性及びインビボ利用能、及び血液−脳バリヤー透過性について、今日ではほとんど知られていない。
【０００９】
スルホンアミド及びその類似体は、すでに広く使用されており、そして例えば、色素（アメリカ特許第5,591,833号）として、光化学（JP 2001092091号, JP 2001033922号, EP 610653号, JP 04346338号）について、及び放射性−又は化学−増感剤（JP09263581号）として、十分に特徴づけられている。しかしながら、それらはまた、活性成分、例えば第Xa因子インヒビター（アメリカ特許第6,187,797号, WO 99/32454号, WO 98/57937号, WO 98/57951号, WO 98/28269号, WO97/38984号, WO 97/23212号）として、肥満及び関連する障害の処理のためのモジュレーター（WO 01/62737号, WO 99/10320号）として記載されている。
【００１０】
アリールスルホンアミドは、5HT6受容体への結合を通してそれらの効果を達成するCNS−活性物質として記載されている（WO98/27081号）。置換されたイミダゾールは、サイトカイン−阻害活性を示し（アメリカ特許第5,859,041号）、そしてWO97/36580号は、プロテアーゼインヒビターとして置換されたスルホンアミドを記載する。スルホンアミドのフェニル誘導体は、脳梗塞及び脳水腫の処理及び予防のラジカルスカベンジャーとして、アメリカ特許第6,083,987号に記載される。
【００１１】
従って、ペルオキシニトライト介在性反応により引起される疾病の処理及び予防のために、無害な生成物へのペルオキシニトライトの転位を高めるために、十分に耐性で、化学的に安定し、且つインビボで利用できる物質（触媒）についての高い必要性が存在する。インビボ活性を有するそれらの物質は、疾病の処理のための薬剤を開発するために使用され得る。
【００１２】
下記式I：
【化１】
2006522762.tif 000003
【００１３】
［式中、R1は、C5-C6−シクロアルキル（任意には、C1-C6−アルキルにより１又は複数回、置換されていてもよく、そしてそれらの環は、任意には、１又は複数の窒素、硫黄又は酸素原子により中断されていてもよく、そして/又は環に１又は複数の可能な二重結合を含むことができる）、又はC3-C7−アリールもしくはC3-C12−ヘテロアリール（任意には、ハロゲン、ヒドロキシル、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシにより、等しく又は異なって、１又は複数回、置換されていてもよい）であり；
【００１４】
R2及びR3は、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシであり；あるいは
R2及びR3は、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換されていてもよく；そして
R4は、水素、ヒドロキシル、ニトロ、ハロゲン、C1-C6−アルキル、又は基COOH、CF3又はC1-C6−アルコキシである］
で表される化合物、及びその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩が、既知欠点を克服し、すなわちペルオキシニトライト−転位性質を有する本発明の化合物が、ペルオキシニトライトにより引起される障害についての標的化された処理を可能にすることが現在見出された。
【００１５】
アルキルとは、個々の場合、直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル及びデシルを意味する。
アルコキシとは、個々の場合、直鎖又は枝分かれ鎖のアルコキシ基、例えばメチルオキシ、エチルオキシ、プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ブチルオキシ、イソブチルオキシ、sec−ブチルオキシ、tert−ブチルオキシ、ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ又はヘキシルオキシを意味する。
【００１６】
シクロアルキルとは、個々の場合、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルを意味する。
１又は複数の可能な二重結合が任意には、環に存在することができる環システムは、例えばシクロアルケニル、例えばシクロプロペンチル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロプテニルを意味し、ここで結合は二重結合又は単結合のいずれかで生じることができる。
【００１７】
アリール基は、個々の場合、６〜12個の炭素原子を有し、そして例えば、ナフチル、ビフェニルイル及び特にフェニルを意味する。
ヘテロアリール基は、個々の場合、３〜16の環原子を含んでなり、そして環に１又は複数の同一の又は異なったヘテロ原子、例えば酸素、窒素又は硫黄を、炭素の代わりに含むことができ、そして単一、二−又は三環式であり得、そして個々の場合、さらにベンゾ−融合され得る。
【００１８】
言及され得る例は次のものである：チエニル、フラニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、等、及びそれらのベンゾ誘導体、例えばベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾキサゾリル、ベンズイミダゾリル、インダゾリル、インドリル、イソインドリル、等；又はピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、等、及びそれらのベンゾ誘導体、例えばキノリル、イソキノリル、等；又はアゾシニル、インドリジニル、プリニル、等、及びそれらのベンゾ誘導体；又はキノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、キサンテニル、オキセピニル、等。
【００１９】
酸性官能基が存在する場合、適切な塩は、有機及び無機塩基の生理学的耐性の塩、例えば容易に溶解できるアルカリ金属及びアルカリ土類金属塩、及びN−メチルグルカミン、ジメチルグルカミン、エチルグルカミン、リシン、１，６−ヘキサンジアミン、エタノールアミン、グルコサミン、サルコシン、セリノール、トリヒドロキシメチルアミノメタン、アミノプロパンジオール、Sovak塩基、１−アミノ−２，３，４−ブタントリオールである。
【００２０】
塩基性官能基が存在する場合、有機及び無機酸の生理学的耐性の塩は、塩酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸及び他のものの塩である。
本発明によるペルオキシニトライト−転位触媒として作用する芳香族スルホンアミドの供給が、疾病の処理のための薬剤の開発のための十分に耐性の化学的に安定し、且つインビトロ活性の触媒の利用能の問題を解決する。
【００２１】
本発明の化合物が無害な最終生成物、すなわちニトレート（nitrate）及びニトライト（nitite）へのペルオキシニトライトの転位を触媒することを、UV/VISの分光計により示すことが本発明において可能である。本発明の化合物がペルオキシニトライトドナーSIN−１により誘発されるペルオキシニトライト損傷から細胞を保護することが、細胞損傷のモデルにより示され得る。本発明の化合物が副作用を有さず、水における良好な溶解性、化学的安定性及び良好なインビボ利用能、及び良好な脳侵入性を有することが同様に示されている。
【００２２】
一般式Iの特に効果的な化合物は、
R1が、C5-C6−シクロアルキル（任意には、メチルにより１又は複数回、置換されていてもよく、そしてそれらの環は、任意には、１又は複数の窒素、硫黄又は酸素原子により中断されていてもよく、そして/又は環に１又は複数の可能な二重結合が環に存在することができる）、又はC3-C6−アリールもしくはC3-C12−ヘテロアリールであり；
R2及びR3が、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキルであり；あるいは
R2及びR3が、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換されていてもよく；そして
R4が、水素、又は基CF3、−O−CH3もしくはニトロである；
それら、及びその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩である。
【００２３】
特に非常に効果的であることがわかっている一般式Iの化合物は、
R1が、下記式：
【化２】
2006522762.tif 000004
【００２４】
で表され；
R2及びR3が、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキルであり；あるいは
R2及びR3が、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換されていてもよく；そして
R4が、水素、又は基CF3、−O−CH3もしくはニトロである；
それら、及びその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩である。
【００２５】
本発明の化合物は、無害な生成物へのペルオキシニトライトの転位の速度を実質的に早め、そして従って、遊離基−介在性細胞損傷の処理及び予防のための薬剤の生成のために使用され得る。
【００２６】
本発明の化合物が無害な最終生成物、すなわちニトレート及びニトライトへのペルオキシニトライトの転位を触媒することを、NMR及びUV/VIS分光計により示すことが可能であった。ペルオキシニトライトは、酸化窒素（NO）及びスーパーオキシドアニオン（O2-）の反応により生成される強酸化剤である。NOが多くの細胞、例えばマクロファージ、好中球細胞、肝細胞及び内皮細胞において生成されることを示すことが可能である。NO及びO2-の直接的な反応が、酸化中間体に生理学的条件下で急速に分解する、ペルオキシニトライトの形成をもたらす。それらの酸化中間体は、生物学的標的物に対する損傷を担当できる。
【００２７】
この損傷の結果は、タンパク質、脂質及びDNAの酸化及びニトロ化を包含する病理学的結果に関連している。ペルオキシニトライトは、他の酸化剤よりも明らかに早い速度で細胞膜を通過することができ、そしてペルオキシニトライトは、生物学的膜の存在下でさえ、細胞の内部に急速に浸透することができる。ペルオキシニトライトは、タンパク質におけるチロシン残基をニトロ化することが知られており、そしてそれはスルフヒドリル基、メチオニン及び高分子、例えば金属酵素、DNA及び脂質を酸化する。
【００２８】
高い反応性のために、ペルオキシニトライトは、多くの障害に関連していると思われる。本発明は、慢性及び急性神経変性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、感染疾患、癌、ウィルス感染、心血管障害、及び腎疾患の処理及び予防のための薬物の生成のためへの本発明の化合物の使用に関する。
【００２９】
慢性神経変性疾患がハンチングトン病、ALS(筋萎縮性側索硬化症)、パーキンソン病、痴呆例えば、アルツハイマー病、HIV痴呆及び初老期痴呆、Korksakoff病、癲癇、分裂病、鬱病であり、そして急性神経変性疾患が大脳虚血及び神経外傷であり、自己免疫疾患及び/又は炎症疾患が低血圧、ARDS(成人呼吸促窮迫症候群)、ゼプシスと敗血症ショック、リウマチ様関節炎、変形性関節症、骨盤/腸管の炎症性疾患(腸疾患)、脳膜炎、多発性硬化症、脱毛症、及び乾癬であり、感染性疾患が単細胞の寄生体によって引き起こされた疾病であり、癌が固形腫瘍及び白血病であり、ウィルス感染がサイトメガロウイルス感染、肝炎、B型肝炎、C、及びHIV疾患であり、心血管障害が虚血性の再潅流疾患、狭穿症、アテローム硬化症、及び再狭窄であり、そして腎疾患が糸球体腎炎である。
【００３０】
薬剤としての本発明の化合物の使用のために、それらは、活性成分の他に、経腸又は非経口投与のために適切である有機又は無機不活性医薬キャリヤー材料、例えば水、ゼラチン、アラビアガム、ラクトース、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ポリアルキレングリコール、等を含む医薬製品の形に転換される。医薬製品は、固体形で、例えば錠剤、被服された錠剤、坐剤、カプセルとして、又は液体形で、例えば溶液、懸濁液又はエマルジョンとして存在することができる。それらはさらに、適切な場合、賦形剤、例えば保存剤、安定剤、湿潤剤又は乳化剤、浸透圧を変えるための塩、又は緩衝液を含む。
【００３１】
本発明は同様に、それらの医薬製品にも関する。
本発明は同様に、慢性及び急性神経変性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、感染疾患、癌、ウィルス感染、心血管障害、及び腎疾患を包含する疾患の処理及び予防のための薬物の生成のためへの一般式Iの化合物の使用にも関する。
【００３２】
慢性神経変性疾患がハンチングトン病、ALS(筋萎縮性側索硬化症)、パーキンソン病、痴呆例えば、アルツハイマー病、HIV痴呆及び初老期痴呆、Korksakoff病、癲癇、分裂病、鬱病であり、そして急性神経変性疾患が大脳虚血及び神経外傷であり、自己免疫疾患及び/又は炎症疾患が低血圧、ARDS(成人呼吸促窮迫症候群)、ゼプシスと敗血症ショック、リウマチ様関節炎、変形性関節症、骨盤/腸管の炎症性疾患(腸疾患)、脳膜炎、多発性硬化症、脱毛症、及び乾癬であり、感染性疾患が単細胞の寄生体によって引き起こされた疾病であり、癌が固形腫瘍及び白血病であり、ウィルス感染がサイトメガロウイルス感染、肝炎、B型肝炎、C、及びHIV疾患であり、心血管障害が虚血性の再潅流疾患、狭穿症、アテローム硬化症、及び再狭窄であり、そして腎疾患が糸球体腎炎である。
【００３３】
特に、注射用溶液、又は懸濁液、特にポリエトキシル化されたヒマシ油中、活性成分の水溶液が、非経口使用のために適切である。
界面活性剤賦形剤、例えば胆汁酸又は動物又は植物リン脂質、又はそれらの混合物、及びリポソーム又はそれらの構成成分がまた、キャリヤーシステムとして使用され得る。
特に、タルク及び/又は炭水化物キャリヤー又は結合剤、例えばラクトース、トウモロコシ澱粉又はジャガイモ澱粉による錠剤、被覆された錠剤又はカプセルが、経口使用のために適切である。液体形、例えば適切な場合、甘味剤が添加される経口溶液の使用がまた可能である。
【００３４】
本発明は同様に、経腸、非経口及び経口投与にも関する。
活性成分の用量は、投与の経路、患者の年齢及び体重、処理される障害の性質及び重症度、及び類似する要因に依存して変化することができる。毎日の用量は、0.5〜1000mg、好ましくは50〜200mgであり、１回で投与される単一用量として与えられるか、又は複数回の毎日の用量に分割されることが可能である。
本発明は同様に、少なくともｌつの一般式Iの化合物及び適切な配合物質及びキャリヤーを含んで成る、上記損害の処理のための薬剤にも関する。
【００３５】
一般式Iの本発明の化合物は、ペルオキシニトライト転位触媒である。
出発化合物の調製が記載されていない場合、それらは知られているか、又は本明細書に記載される既知の化合物又は方法に類似して調製され得る。同様の反応体において、又は組合せ技法を用いて、本明細書に記載されるすべての変動を実施するととが同様に可能である。
【００３６】
異性体の混合物は、従来の方法、例えば結晶化、クロマトグラフィー又は塩形成により、鏡像異性体又はE/Z異性体に分別され得る。
塩は、式Iの化合物の溶液に、適切な場合、溶液で存在する、等量又は過剰量の塩基又は酸を添加し、そして沈殿物を除去するか、又は従来の手段で、その溶液を作業することにより、従来の手段で調製される。
【００３７】
本発明の化合物の調製：
次の例は、本発明の化合物の調製を例示するが、但し本発明の化合物を制限するものではない。
一般式Iの本発明の化合物は、次の一般工程スキームに示されるようにして調製され得る：
【００３８】
【化３】
2006522762.tif 000005
【００３９】
一般式Iの任意に置換されたフルオロニトロベンゼンから出発して、アミンを、弗素の求核置換により導入することができる。タイプIIの化合物における導入されたアミンに対してパラ位置での芳香族ニトロ基が、一般式III の芳香族アミンに、水素化により転換され得る。それらのアミンは、本出願に関係する一般式IVのその対応するスルホンアミドに、塩化スルホニルによるスルホン化により転換され得る。
【００４０】
一般反応方法：
一般方法A：
求核置換によるアミンの導入：
任意に置換されたフルオロニトロベンゼンをエタノール中に導入し、そして３当量のアミンを、氷浴において冷却しながら、滴下する。次に、その混合物を室温で攪拌する。反応が起こらない場合、それを100℃に加熱する。反応が完結した後、2NのHClを、その反応混合物に添加し、そしてジクロロメタンによる抽出、洗浄、乾燥及び濃縮の後、通常、さらに精製しないで、反応せしめる。
【００４１】
一般方法B：
ニトロ基の還元：
還元されるべき化合物を、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、メタノール又はエタノール、又はそれらの溶媒の混合物に溶解し、そして大気圧下で、炭素上、２〜５％（ニトロ化合物に基づいて）パラジウム（10％）上で水素化する。水素摂取が停止した後、混合物を吸引により濾過し、残渣を酢酸エチル、メタノール又はエタノールにより洗浄し、そして濾液を真空下で濃縮する。その粗生成物を通常、さらに精製しないで反応せしめる。
【００４２】
一般方法C：
芳香族アミンのスルホン化：
アミンをジクロロメタンに溶解し、そして1.1当量の４−ジメチルアミノピリジン（大きなパッチに関しては、４−ジメチルピリジンは、1.1当量のピリジン及びスパチュラ先端の量の４−ジメチルアミノピリジンにより置換される）及び1.1当量の塩化スルホニルの添加の後、室温で攪拌する。反応の完結の後、反応混合物を水に注ぎ、ジクロロメタン又は酢酸エチルにより抽出し、洗浄し、乾燥し、そして濃縮する。精製をカラムクロマトグラフィーにより行う。
【実施例】
【００４３】
例１．３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ピロリジン−１−イルフェニルアミドの調製：
80mgの４−ピロリジン−１−イルフェニルアミンから出発し、そして３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホニルクロリドとの反応により、140mgの３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ピロリジン−１−イルフェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
MS(EI)＝321（分子イオンピーク）
【００４４】
例２．３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ピロリジン−１−イル−２−トリフルオロメチルフェニルアミドの調製：
80mgの５−フルオロ−２−ニトロベンゾトリフルオリドから出発し、及びピロリジンとの反応により、138mgの５−ピロリジニル−２−ニトロベンゾトリフルオリドを、一般方法Aにより調製する。粗生成物を、一般方法Bにより水素化する。97mgの５−ピロリジニル−２−アミノベンゾトリフルオリドを得る。これから出発し、及び一般方法Cによる３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホニルクロリドとの反応により、80mgの３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ピロリジン−１−イル−２−トリフルオロメチルフェニルアミドを調製する。
MS(EI)＝389（分子イオンピーク）。
【００４５】
例３．３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ピペリジン−イルフェニルアミドの調製：
25mgの４−ピペリジノアニリンから出発し、及び３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホニルクロリドとの反応により、21mgの３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ピペリジン−イルフェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
MS(EI)＝335（分子イオンピーク）。
【００４６】
例４．キノリン−８−スルホン酸４−ピペリジン−イルフェニルアミドの調製：
25mgの４−ピペリジノアニリンから出発し、及びキノリン−８−スルホニルクロリドとの反応により、11mgのキノリン−８−スルホン酸４−ピペリジン−イルフェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
MS(EI)＝367（分子イオンピーク）。
【００４７】
例５．チオフェン−２−スルホン酸２−メトキシ−４−ピロリジン−１−イルフェニルアミドの調製：
3gの５−フルオロ−２−ニトロフェノールをDMFに溶解し、そして1.1当量の個々のヨードメタン及び炭酸セシウムの添加の後、室温で攪拌する。反応の完結の後、その反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルにより抽出し、洗浄し、そして濃縮する。3.2gの２−メトキシ−４−フルオロニトロベンゼンを生成する。これから出発して、4.2gの２−メトキシ−４−ピロリジニルニトロベンゼンを、一般反応方法Aにより、ピロリジンとの反応により調製する。粗生成物を、一般方法Bにより水素化する。3.6gの２−メトキシ−４−ピロリジニルアミノベンゼンを得る。150mgの粗生成物から出発し、及び２−チオフェンスルホニルクロドとの反応により、154mgのチオフェン−２−スルホン酸２−メトキシ−４−ピロリジン−２−イルフェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
【００４８】
例６．キノリン−８−スルホン酸４−ピロリジン−１−イルフェニルアミドの調製：
80mgの４−（１−ピロリジニル）から出発し、及びキノリン−８−スルホニルクロリドとの反応により、45mgのキノリン−８−スルホン酸４−ピロリジン−１−イルフェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
MS(EI)＝353（分子イオンピーク）。
【００４９】
例７．チオフェン−２−スルホン酸４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）フェニルアミドの調製：
80mgの４−（４−メチルピペラジノ）アニリンから出発し、及びチオフェン−２−スルホニルクロリドとの反応により、52mgのチオフェン−２−スルホン酸４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）フェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
MS（EI）＝337（分子イオンピーク）。
【００５０】
例８．チオフェン−２−スルホン酸−４−ジメチル−アミノ−２−ニトロフェニルアミドの調製：
100mgの４−アミノ−N, N−ジメチル−３−ニトロアニリンから出発し、及びチオフェン−２−スルホニルクロリドとの反応により、12mgのチオフェン−２−スルホン酸−４−ジメチル−アミノ−２−ニトロフェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
MS(EI)＝327（分子イオンピーク）。
【００５１】
例９．３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ジメチルアミノ−２−ニトロフェニルアミドの調製：
100mgの４−アミノ−N, N−ジメチル−３−ニトロアニリンから出発し、及び３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホニルクロリドとの反応により、56mgの３，５−ジメチルイソキサゾール−４−スルホン酸４−ジメチルアミノ−２−ニトロフェニルアミドを、一般方法Cにより調製する。
MS(EI)＝340（分子イオンピーク）。
【００５２】
本発明はさらに、
R1が、C1-C6−アルキルであり又はC5-C6−シクロアルキル（任意には、C1-C6−アルキルにより１又は複数回、置換されていてもよく、そしてそれらの環は、任意には、１又は複数の窒素、硫黄又は酸素原子により中断されていてもよく、そして/又は環に１又は複数の可能な二重結合を含むことができる）、又はC3-C7−アリールもしくはC3-C12−ヘテロアリール（任意には、ハロゲン、ヒドロキシル、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシにより、等しく又は異なって、１又は複数回、置換されていてもよい）であり；
R2及びR3が、お互いそれぞれ独立して、C1-C6−アルキル又はC1-C6−アルコキシであり；あるいは
【００５３】
R2及びR3が、窒素原子と一緒に、C5-C6−シクロアルキル環（任意には、環中で追加の窒素原子により中断されていてもよい）を形成し、ここで前記C5-C6−シクロアルキル環は任意には、C1-C4−アルキルにより置換され得；そして
R4が、水素、ヒドロキシル、ニトロ、ハロゲン、C1-C6−アルキル、又は基COOH、CF3もしくはC1-C6−アルコキシである一般式Iの化合物、又はその異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体及び塩を含んで成る医薬組成物にも関する。
【００５４】
本発明の組成物は、慢性及び急性神経変性疾患、自己免疫疾患、炎症性疾患、感染疾患、癌、ウィルス感染、心血管障害、及び腎疾患を包含する疾患の処理及び予防のために使用される。
【００５５】
慢性神経変性疾患がハンチングトン病、ALS(筋萎縮性側索硬化症)、パーキンソン病、痴呆例えば、アルツハイマー病、HIV痴呆及び初老期痴呆、Korksakoff病、癲癇、分裂病、鬱病であり、そして急性神経変性疾患が大脳虚血及び神経外傷であり、自己免疫疾患及び/又は炎症疾患が低血圧、ARDS(成人呼吸促窮迫症候群)、ゼプシスと敗血症ショック、リウマチ様関節炎、変形性関節症、骨盤/腸管の炎症性疾患(腸疾患)、脳膜炎、多発性硬化症、脱毛症、及び乾癬であり、感染性疾患が単細胞の寄生体によって引き起こされた疾病であり、癌が固形腫瘍及び白血病であり、ウィルス感染がサイトメガロウイルス感染、肝炎、B型肝炎、C、及びHIV疾患であり、心血管障害が虚血性の再潅流疾患、狭穿症、アテローム硬化症、及び再狭窄であり、そして腎疾患が糸球体腎炎である。
【００５６】
次の例は、本発明の化合物の生物学的効果を記載するが、それらは本発明を制限するものではない。
例１．ニトレートへのペルオキシニトライトの転換の運動学のUV分光計による測定：
次のものを使用する：UV分光計；溝を付けられたキュベットを備えた遮断された流動装置；容量作業のための実験用装置；試薬（緩衝液、ペルオキシニトライト溶液、触媒）。
濃縮されたペルオキシニトライト溶液中のペルオキシニトライト包含量を決定する。ε＝1670のモル吸光係数を基礎として使用する。溶液を水により希釈し、301nmの観察波長で約1.6の吸光度に達する。この手段で生成された原液のpHは、11以下に下降すべきでない。
【００５７】
調査されるべき触媒の溶液を、遮断された流動装置における与えられた条件を考慮して、所望する量の触媒溶液及びペルオキシニトライトが反応のために一緒にされ得るような態様で、設定されるペルオキシニトライト濃度のために適切なリン酸緩衝液において調製する。触媒溶液の緩衝液は、強いアルカリ性であるペルオキシニトライト溶液が、所望するpHに調節され、そしてそのpHで維持されるのに十分な能力を有すべきである。触媒を、理論量の1/10で添加する（図１）。
【００５８】
遮断された流動システムの計量注射器を、２種の溶液により充填し、そしてUV分光計に存在するキュベットを充填するために使用する。301nmでの吸光度を同時に測定する。ニトレートへのペルオキシニトライトの転位は、ある時間の後、一定の値を仮定する、吸光度の低下をもたらす。転位はこの時点で完結し、そして記録するデータを停止する。
【００５９】
測定されるデータを分析し、そしてペルオキシニトライト濃度を、それに起因するプロットの特徴的運動データから計算することができる。それらのデータは、調査されるべき触媒を特徴づけるよう作用する。ペルオキシニトライトの自発的分解を考慮するために、最初に使用される個々のペルオキシニトライト調製物に関して、ペルオキシニトライト溶液の分解挙動性を、触媒含有を伴わないで、緩衝液の添加に基づいて見出し、そしてその特徴的データと触媒を伴っての測定から得られるそれらのデータとの関係を見出す。
相対的速度定数＝記載されるpHで使用されるペルオキシニトライトの固有分解/触媒される分解（図１）。
【００６０】
例２．ローダミンへのジヒドロローダミンの酸化：
ペルオキシニトライトの濃度を、ローダミンを得るために、ジヒドロローダミン（DHR）との反応により決定する。ローダミン蛍光発光を、485nmの波長の光による励起の後、520nmで測定する。試験物質によるペルオキシニトライトの触媒転位が、ペルオキシニトライト濃度の低下を導き、そして従ってまた、ほとんどのDHRがローダミンに転換し得ないので、ローダミン蛍光の低下を導く。ペルオキシニトライト−分解触媒について調査を、中間pHで行う。ペルオキシニトライトは、中性pHでわずか数秒の間、安定する。従って、ペルオキシニトライトが、試験物質及び検出試薬としてのDHRと接触されるまで、アルカリ性を維持することが必要である。触媒についての調査は、次の成分の急速な混合により生じる：
【００６１】
10μlの10μMのDHR；
pH5.6での75mMのリン酸ナトリウム緩衝液中、100μmのジエチレントリアミン五酢酸；
9mMのNaOH中、5μlのペルオキシニトライト；
30％DMSO/水中、0.75μlの試験物質。測定は、標準のマイクロタイタープレート蛍光測定装置において行われる。
【００６２】
例３．新生児ラット小脳からの一次ニューロン培養物によるSIN−１損傷アッセイ：
新生児ラット小脳からの細胞の一次培養物を、ペルオキシニトライトにより誘発される損傷に対する神経保護についての物質のインビトロ試験のために設定する。この培養物におけるニューロンの細胞死又は生存の測定を、Alamarブルーのその還元された蛍光形への転換の測定を通して、間接的に行う。ペルオキシニトライトドナーSIN−１（３−モルホリノシンドノンイミン）を、損傷のために使用する。
【００６３】
細胞を得るために、Wistarラット（p8）を断頭により殺し、小脳を得、髄膜を小脳から除去し（HBSS（CIBCO、14025−050）4℃）、切断し、そして15mlのFalcon管に移し、上清液を吸引除去し、そして次に、小脳を、小脳当たり500μlのトリプシン/EDTA溶液（GIBCO #2530-054）を添加することにより、トリプシン処理する。インキュベーション（20分、37℃）の後、トリプシン処理された小脳を、10mlのHBSSにより3度、洗浄する。これを、続いて、小脳当たり500μlの0.05％DNAsel (BOEHRINGER MANNHEIM, #14953000)の添加により粉砕する。
【００６４】
次に、5mlのピペット、火炎により磨かれたパスツールピペット及び最終的に（必要なら）、洗い流された、火炎により磨かれたパスツールピペットを用いて、細胞を単離し、そして10mlの完全培地(100 ml の神経基底 (GIBCO#21103-049), 1 mlのB27 サプリメント(GIBCO #17504-044), 0.4 mlの pen/strep (10 000 IU/ml/10 000 UG/ml) (GIBCO #15140-160), 0.8 ml のKC1原液(MERCK, 1.04936.0500), 1 ml のL-グルタミン(100x-200 mM) (GIBCO #15140-106)と共に混合する。次に、単離された細胞を、遠心分離し（600rpmで10分）、完全培地により１度、洗浄し、そして20mlの完全培地に再懸濁し、計数し、２×106mlに希釈する。
【００６５】
100μlの完全培地を、96−ウェルマイクロタイタープレート中の個々のウェルに導入し、そして100μlの細胞懸濁液を添加する（＝インビトロでの１日目）。マイクロタイタープレートを、次の手段で前もって被覆する：50μlのポリ−L−リシン（MW 70〜105kD）（SIGMA #P-6282）を、個々のウェルに適用し、そして次に、プレートをインキュベーターにおいて約90分間インキュベートする。細胞をプレートする前、溶液を再び、吸引し、そしてHBSSにより２度及び無菌の２重蒸留された水により洗浄する。
【００６６】
プレートの24時間後、細胞を、SIN−１の添加により損傷を与える。試験物質を、SIN−１の添加の１時間前、適用する（10又は30μmの単一濃度、又は一連の濃度として、CALBIOCHEM、567028）。細胞機能を、Alamarブルー（10μl/ウェル）（BIOSOURCE INT., DAL1100）により、２日目（インビトロでの２日目）、測定する。３時間のインキュベーション、続いて蛍光リーダー（Victor, Wallac, 吸光度544nm/蛍光590nm）により測定する。IC50値を、Excel plug-in XLfitにより計算する。
【００６７】
例の結果が、次の表に示される：
【表１】
2006522762.tif 000006
【００６８】
【表２】
2006522762.tif 000007
【００６９】
本発明の化合物は、既知の金属ポリフィリンに比較して、良好な性質、例えば良好な脳侵入を示した。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】図１は、理論量の1/10で投与される触媒の存在及び不在下でのペルオキシニトライトの時間−依存性分解を示す。
【図１】
2006522762.tif 000011
【国際調査報告】
2006522762.tif 000012
2006522762.tif 000013
2006522762.tif 000014
2006522762.tif 000015