(57)【要約】一般式：  【化１】2006507296.tif 000022  式中、Ｒ1およびＲ2は本明細書において定義されるとおりである、の化合物、並びにその塩、エナンチオマー、および該化合物を含む医薬組成物が製造される。これらは治療において、特に疼痛の管理において有用である。
2006507296.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2006507296.tif 000017
［式中、
Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、置換されているアリールまたは置換されているヘテロアリールであり；そして
Ｒ2は水素、場合により置換されているＣ1-12アルキル、場合により置換されているＣ612アリール、または場合により置換されているＣ2-12ヘテロシクリルである］
の化合物、医薬として許容し得るその塩、またはその混合物。
【請求項２】
式Ｉにおいて、
Ｒ1は、場合によりＣ1-6アルキル、ハロゲン化Ｃ1-6アルキル、−ＮＯ2、−ＣＦ3、Ｃ1-6アルコキシ、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードから選択される１またはそれ以上の基で置換されている、フェニル；ピリジル；チエニル；フリル；イミダゾリル；トリアゾリル；ピロリル；チアゾリル；およびＮ−オキシド−ピリジルから選択され；そして
Ｒ2は水素またはメチルである；
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式Ｉにおいて、
Ｒ1は、場合によりＣ1-6アルキル、ハロゲン化Ｃ1-6アルキル、−ＮＯ2、−ＣＦ3、Ｃ1-6アルコキシ、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードから選択される１またはそれ以上の基で置換されている、フェニル；ピリジル；チエニル；フリル；イミダゾリル；ピロリル；およびチアゾリルから選択され；そして
Ｒ2は水素またはメチルである；
請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
式Ｉにおいて、
Ｒ1はフェニル；ピリジル；チエニル；フリル；イミダゾリル；ピロリル；およびチアゾリルから選択され；そして
Ｒ2は水素またはメチルである；
請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
化合物が次のもの：
３−［（４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル）（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンズアミド;
３−｛（４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル）［４−（２−フリルメチル）−ピペラジン−１−イル］メチル｝ベンズアミド；
３−［［４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル］［４−（フェニルメチル）−１−ピペラジニル］メチル］−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
から選択される、請求項１に記載の化合物、そのエナンチオマーおよび医薬として許容し得るその塩。
【請求項６】
医薬として使用するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
疼痛または機能性胃腸障害の治療用医薬の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物および医薬として許容し得る担体を含む医薬組成物。
【請求項９】
疼痛の治療を必要とする温血動物に治療有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を投与することからなる、温血動物において疼痛を治療する方法。
【請求項１０】
機能性胃腸障害の治療を必要とする温血動物に治療有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を投与することからなる、温血動物において機能性胃腸障害を治療する方法。
【請求項１１】
式II：
【化２】
2006507296.tif 000018
の化合物の製造方法であって、式III：
【化３】
2006507296.tif 000019
（式中、Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、置換されているアリールまたは置換されているヘテロアリールである）の化合物を、Ｒ1−ＣＨＯと反応させて、式IIの化合物を形成することからなる方法。
【請求項１２】
式IV：
【化４】
2006507296.tif 000020
の化合物の製造方法であって、式II：
【化５】
2006507296.tif 000021
（式中、Ｒ1はアリール、ヘテロアール、置換されているアリールまたは置換されているヘテロアリールである）の化合物を、非水性溶媒中でアルカリ金属水酸化物と反応させて、式IVの化合物を形成することからなる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物、その製造方法、その使用および該新規化合物を含む医薬組成物に関する。該新規化合物は、治療、特に疼痛、不安症および機能性胃腸障害の処置に有用である。
【背景技術】
【０００２】
δ受容体は、循環系および疼痛系のような、多くの生体機能に役割を有することが明らかになっている。従って、δ受容体のリガンドは、鎮痛剤としておよび／または抗高血圧剤として使用され得る。δ受容体のリガンドはまた、免疫調節活性を有することが示されている。
現在、少なくとも３種の異なる群のオピオイド受容体（μ、δおよびκ）が明らかになっており、３種全てが、ヒトを含む多くの種の中枢および末梢神経系の両方において見出されている。１種またはそれ以上のこれらの受容体が活性化されている場合、様々な動物モデルにおいて痛覚脱失が観察されている。
一部の例外を除いて、現在利用できる選択的オピオイドδリガンドは、本来ペプチド性であり、全身経路による投与には適さない。非ペプチド性δ−アゴニストの一例として、ＳＮＣ８０（Bilsky E.J.ら，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics，273(1)，359-366頁(1995)）が挙げられる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
先行技術において同定されている多くのδアゴニスト化合物は、薬物動態性能に乏しく、全身経路により投与された場合、鎮痛性ではないという多くの欠点を有する。また、これらのδアゴニスト化合物の多くは、全身投与時に有意の痙攣性作用を示すことが文献に記載されている。
米国特許６,１３０,２２２からRobertsらは、いくつかのδアゴニストを記載している。
しかしながら、改良されたδアゴニストが今もなお必要とされている。
【０００４】
定義
この明細書において特に規定のない限り、この明細書で用いられる命名法は一般に、Nomenclature of Organic Chemistry，Sections A，B，C，D，E，FおよびH，Pergamon Press，Oxford，1979,に記載される例および規則に従い、この文献は、その例示された化学構造名および化学構造の命名規則について、参照により本明細書に加入される。
単独でまたは接頭辞として使用される「Ｃm-n」または「Ｃm-n基」という用語は、ｍ〜ｎ個の炭素原子を有する任意の基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「炭化水素」という用語は、１４個までの炭素原子を含み、炭素および水素原子のみを含む任意の構造を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「炭化水素基」または「ヒドロカルビル」という用語は、炭化水素から１個またはそれ以上の水素を除去した結果として生じる任意の構造を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アルキル」という用語は、１〜約１２個の炭素原子を含む１価の直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。「アルキル」は、場合により１またはそれ以上の不飽和炭素−炭素結合を含んでよい。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アルキレン」という用語は、２つの構造を連結する、１〜約１２個の炭素原子を含む２価の直鎖または分枝鎖の炭化水素
基を指す。
【０００５】
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アルケニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有し、そして少なくとも２個〜約１２個の炭素原子を含む１価の直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アルキニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有し、そして少なくとも２個〜約１２個の炭素原子を含む１価の直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「シクロアルキル」という用語は、少なくとも３個〜約１２個の炭素原子を含む１価の環含有炭化水素基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「シクロアルケニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有し、そして少なくとも３個〜約１２個の炭素原子を含む１価の環含有炭化水素基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「シクロアルキニル」という用語は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有し、そして約７個〜約１２個の炭素原子を含む１価の環含有炭化水素基を指す。
【０００６】
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アリール」という用語は、芳香族特性（例えば４ｎ＋２個の非局在化電子）を有する１またはそれ以上の多不飽和炭素環を有し、そして５〜約１４個の炭素原子を含む１価の炭化水素基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アリーレン」という用語は、芳香族特性（例えば４ｎ＋２個の非局在化電子）を有する１またはそれ以上の多不飽和炭素環を有し、２つの構造を連結する５〜約１４個の炭素原子を含む２価の炭化水素基を指す。
【０００７】
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「複素環」という用語は、環構造の部分としてＮ、Ｏ、ＰおよびＳから独立して選択される１またはそれ以上の多価ヘテロ原子を有し、そして環内に少なくとも３個〜約２０個の原子を含む、環含有構造または分子を指す。複素環は、飽和していても、または１またはそれ以上の二重結合を含む不飽和のものであってもよく、また、複素環は１より多くの環を含んでよい。複素環が１より多くの環を含む場合、環は縮合していてもしていなくてもよい。縮合環とは一般的に、少なくとも２個の環がその間に２個の原子を共有しているものを指す。複素環は、芳香族特性を有してもよく、または芳香族特性を有していなくてもよい。
【０００８】
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「複素芳香族」という用語は、環構造の部分としてＮ、Ｏ、ＰおよびＳから独立して選択される１またはそれ以上の多価ヘテロ原子を有し、そして環内に少なくとも３個から約２０個までの原子を含む、環含有構造または分子を指し、ここで環含有構造または分子は芳香族特性（例えば４ｎ＋２個の非局在化電子）を有している。
【０００９】
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「複素環式基」、「複素環式部分」、「複素環式」または「ヘテロシクロ」という用語は、複素環から１またはそれ以上の水素を除去することによって誘導される基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「ヘテロシクリル」という用語は、複素環から水素１個を除去することによって誘導される１価の基を指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「ヘテロシクリレン」という用語は、２つの構造を連結する、複素環から水素２個を除去することによって誘導される２価の基を指す。
【００１０】
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「ヘテロアリール」という用語は
、芳香族特性を有するヘテロシクリルを指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「ヘテロシクロアルキル」という用語は、芳香族特性を有しないヘテロシクリルを指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「ヘテロアリーレン」という用語は、芳香族特性を有するヘテロシクリレンを指す。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「ヘテロシクロアルキレン」という用語は、芳香族特性を有しないヘテロシクリレンを指す。
【００１１】
接頭辞として使用される「６員の」という用語は、環原子６個を含む環を有する基を指す。
接頭辞として使用される「５員の」という用語は、環原子５個を含む環を有する基を指す。
【００１２】
５員環のヘテロアリールは、環原子５個の環を有するヘテロアリールであって、ここで１、２または３個の環原子はＮ、ＯおよびＳから独立して選択される。
５員環のヘテロアリールの例としては、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、１,２,３−トリアゾリル、テトラゾリル、１,２,３−チアジアゾリル、１,２,３−オキサジアゾリル、１,２,４−トリアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、１,２,４−オキサジアゾリル、１,３,４−トリアゾリル、１,３,４−チアジアゾリルおよび１,３,４−オキサジアゾリルが挙げられる。
【００１３】
６員環のヘテロアリールは、環原子６個の環を有するヘテロアリールであって、ここで１、２または３個の環原子はＮ、ＯおよびＳから独立して選択される。
６員環のヘテロアリールの例としては、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、トリアジニルおよびピリダジニルである。
【００１４】
接頭辞として使用される「置換された」という用語は、１またはそれ以上の水素原子が、１またはそれ以上のＣ1-6炭化水素基により、またはＮ、Ｏ、Ｓ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＰから選択される１またはそれ以上のヘテロ原子を含む１またはそれ以上の化学基により置き換えられている構造、分子または基を指す。１またはそれ以上のヘテロ原子を含む化学基の例としては、−ＮＯ2、−ＯＲ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｆ、−ＣＦ3、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、−ＮＨ2、−ＳＨ、−ＮＨＲ、−ＮＲ2、−ＳＲ、−ＳＯ3Ｈ、−ＳＯ2Ｒ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、−ＣＮ、−ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ2、−ＮＲＣ（＝Ｏ）Ｒ、オキソ（＝Ｏ）、イミノ（＝ＮＲ）、チオ（＝Ｓ）、およびオキシイミノ（＝Ｎ−ＯＲ）であり、ここで各「Ｒ」はＣ1-6ヒドロカルビルである。例えば、置換されたフェニルとはニトロフェニル、メトキシフェニル、クロロフェニル、アミノフェニル等であり、ここでニトロ、メトキシ、クロロおよびアミノ基はフェニル環上の何れかの適当な水素を置き換えていてよい。
【００１５】
１またはそれ以上の化学基名が後に続く第１の構造、分子または基の接尾辞として使用される「置換された」という用語は、１またはそれ以上の該化学基で、第１の構造、分子または基の１またはそれ以上の水素を置き換えた結果として生じる第２の構造、分子または基を指す。例えば「ニトロで置換されたフェニル（phenyl substituted by nitro）」とはニトロフェニルである。
【００１６】
複素環としては、例えば単環式複素環、例えば：アジリジン、オキシラン、チイラン、アゼチジン、オキセタン、チエタン、ピロリジン、ピロリン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ピラゾリン、ジオキソラン、スルホラン、２,３−ジヒドロフラン、２,５−ジヒドロフラン、テトラヒドロフラン、チオファン、ピペリジン、１,２,３,６−テトラヒドロ
−ピリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピラン、チオピラン、２,３−ジヒドロピラン、テトラヒドロピラン、１,４−ジヒドロピリジン、１,４−ジオキサン、１,３−ジオキサン、ジオキサン、ホモピペリジン、２,３,４,７−テトラヒドロ−１Ｈ−アゼピン、ホモピペラジン、１,３−ジオキセパン、４,７−ジヒドロ−１,３−ジオキセピンおよびヘキサメチレンオキシドが挙げられる。
【００１７】
更に、複素環としては、芳香族複素環、例えばピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、チオフェン、フラン、フラザン、ピロール、イミダゾール、チアゾール、オキサゾール、ピラゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、１,２,３−トリアゾール、テトラゾール、１,２,３−チアジアゾール、１,２,３−オキサジアゾール、１,２,４−トリアゾール、１,２,４−チアジアゾール、１,２,４−オキサジアゾール、１,３,４−トリアゾール、１,３,４−チアジアゾールおよび１,３,４−オキサジアゾールが挙げられる。
更に、複素環としては、多環式複素環、例えばインドール、インドリン、イソインドリン、キノリン、テトラヒドロキノリン、イソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、１,４−ベンゾジオキサン、クマリン、ジヒドロクマリン、ベンゾフラン、２,３−ジヒドロベンゾフラン、イソベンゾフラン、クロメン、クロマン、イソクロマン、キサンテン、フェノキサチイン、チアントレン、インドリジン、イソインドール、インダゾール、プリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、フェナントリジン、ペリミジン、フェナントロリン、フェナジン、フェノチアジン、フェノキサジン、１,２−ベンズイソオキサゾール、ベンゾチオフェン、ベンズオキサゾール、ベンズチアゾール、ベンズイミダゾール、ベンズトリアゾール、チオキサンチン、カルバゾール、カルボリン、アクリジン、ピロリジジンおよびキノリジジンが包含される。
【００１８】
上述の多環式複素環のほかに、複素環として、２またはそれ以上の環の間の環縮合が、両環に共通の１より多くの結合および両環に共通の２より多くの原子を含んでいる多環式複素環が包含される。このような架橋された複素環の例としては、キヌクリジン、ジアザビシクロ［２.２.１］ヘプタンおよび７−オキサビシクロ［２.２.１］ヘプタンが挙げられる。
【００１９】
ヘテロシクリルとしては、例えば単環式ヘテロシクリル、例えば：アジリジニル、オキシラニル、チイラニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ジオキソラニル、スルホラニル、２,３−ジヒドロフラニル、２,５−ジヒドロフラニル、テトラヒドロフラニル、チオファニル、ピペリジニル、１,２,３,６−テトラヒドロ−ピリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピラニル、チオピラニル、２,３−ジヒドロピラニル、テトラヒドロピラニル、１,４−ジヒドロピリジニル、１,４−ジオキサニル、１,３−ジオキサニル、ジオキサニル、ホモピペリジニル、２,３,４,７−テトラヒドロ−１Ｈ−アゼピニル、ホモピペラジニル、１,３−ジオキセパニル、４,７−ジヒドロ−１,３−ジオキセピニルおよびヘキサメチレンオキシジルが挙げられる。
【００２０】
更に、ヘテロシクリルとしては、芳香族ヘテロシクリルまたはヘテロアリール、例えばピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、チエニル、フリル、フラザニル、ピロリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、１,２,３−トリアゾリル、テトラゾリル、１,２,３−チアジアゾリル、１,２,３−オキサジアゾリル、１,２,４−トリアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、１,２,４−オキサジアゾリル、１,３,４−トリアゾリル、１,３,４−チアジアゾリルおよび１,３,４−オキサジアゾリルが挙げられる。
【００２１】
更に、ヘテロシクリルとしては、多環式ヘテロシクリル（芳香族および非芳香族の両方を含む）、例えばインドリル、インドリニル、イソインドリニル、キノリニル、テトラヒ
ドロキノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、１,４−ベンゾジオキサニル、クマリニル、ジヒドロクマリニル、ベンゾフラニル、２,３−ジヒドロベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、クロマニル、イソクロマニル、キサンテニル、フェノキサチイニル、チアントレニル、インドリジニル、イソインドリル、インダゾリル、プリニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、プテリジニル、フェナントリジニル、ペリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、１,２−ベンズイソオキサゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンズオキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、チオキサンチニル、カルバゾリル、カルボリニル、アクリジニル、ピロリジジニルおよびキノリジジニルが包含される。
【００２２】
上述の多環式ヘテロシクリルのほかに、ヘテロシクリルとして、２またはそれ以上の環の間の環縮合が、両環に共通の１より多くの結合および両環に共通の２より多くの原子を含んでいる多環式ヘテロシクリルが包含される。このような架橋されたヘテロシクリルの例としては、キヌクリジニル、ジアザビシクロ［２.２.１］ヘプチルおよび７−オキサビシクロ［２.２.１］ヘプチルが挙げられる。
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アルコキシ」という用語は、Ｒが炭化水素基から選択される一般式−Ｏ−Ｒの基を指す。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔ−ブトキシ、イソブトキシ、シクロプロピルメトキシ、アリルオキシおよびプロパルギルオキシが挙げられる。
【００２３】
単独でまたは接尾辞もしくは接頭辞として使用される「アミン」または「アミノ」という用語は、ＲおよびＲ’が独立して水素または炭化水素基から選択される一般式−ＮＲＲ’の基を指す。
ハロゲンとしては、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素が挙げられる。
基の接頭辞として使用される「ハロゲン化された」とは、基上の１またはそれ以上の水素が１またはそれ以上のハロゲンで置き換えられていることを意味する。
「ＲＴ」または「ｒｔ」とは室温を意味する。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
１つの態様において、本発明は式Ｉの化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマーおよびその医薬として許容し得る塩を提供する：
【化１】
2006507296.tif 000003
式中、
Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、置換されているアリールまたは置換されているヘテロアリールであり；そして
Ｒ2は水素、場合により置換されているＣ1-12アルキル、場合により置換されているＣ6-12アリール、または場合により置換されているＣ2-12ヘテロシクリルである。
【００２５】
１つの態様において、本発明は、式Ｉにおいて、
Ｒ1は、場合によりＣ1-6アルキル、ハロゲン化Ｃ1-6アルキル、−ＮＯ2、−ＣＦ3、Ｃ1-6アルコキシ、クロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードから選択される１またはそれ以上の基で置換されている、フェニル；ピリジル；チエニル；フリル；イミダゾリル；トリアゾリル；ピロリル；チアゾリル；およびＮ−オキシド−ピリジルから選択され；そして
Ｒ2は水素またはメチルである；
式Ｉの化合物を提供する。
【００２６】
１つの態様において、本発明は、式Ｉにおいて、
Ｒ1は、場合によりＣ1-6アルキル、ハロゲン化Ｃ1-6アルキル、−ＮＯ2、−ＣＦ3、Ｃ1-6アルコキシ、クロロ、フルオロ、ブロモ、およびヨードから選択される１またはそれ
以上の基で置換されている、フェニル；ピリジル；チエニル；フリル；イミダゾリル；ピロリル；およびチアゾリルから選択され；そして
Ｒ2は水素またはメチルである；
式Ｉの化合物を提供する。
【００２７】
１つの態様において、本発明は、式Ｉにおいて、
Ｒ1はフェニル；ピリジル；チエニル；フリル；イミダゾリル；ピロリル；およびチアゾリルから選択され；そして
Ｒ2は水素またはメチルである；
式Ｉの化合物を提供する。
【００２８】
本発明の化合物が１またはそれ以上のキラル中心を有する場合、本発明の化合物は、エナンチオマーもしくはジアステレオマー形態またはラセミ混合物として存在し、単離できることは理解されよう。本発明は、式Ｉの化合物のあらゆる可能なエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ化合物またはこれらの混合物を包含する。本発明の化合物の光学活性型は、例えばラセミ化合物のキラルクロマトグラフィー分離によるか、光学活性の出発物質からの合成によるか、または、後述の手順に基づく不斉合成により製造できる。
また、本発明の特定の化合物が、幾何異性体、例えばアルケンのＥおよびＺ異性体として存在し得ることも理解されよう。本発明は、式Ｉの化合物のあらゆる幾何異性体を包含する。更に、本発明が式Ｉの化合物の互変体を包含することも理解されよう。
また、本発明の特定の化合物が、非溶媒形態と同様に溶媒和形態、例えば水和形態で存在し得ることも理解されよう。更に、本発明が式Ｉの化合物の全てのこのような溶媒和形態を包含することも理解されよう。
【００２９】
式Ｉの化合物の塩もまた、本発明の範囲である。一般的に、本発明の化合物の医薬として許容し得る塩は、当分野で周知の標準的手順を用いて、例えば、十分に塩基性の化合物、例えばアルキルアミンを適当な酸、例えばＨＣｌまたは酢酸と反応させて、生理学的に許容し得るアニオンを得ることにより得られる。また、相当するアルカリ金属（例えばナトリウム、カリウムまたはリチウム）またはアルカリ土類金属（例えばカルシウム）の塩は、適当な酸性プロトンを有する本発明の化合物、例えばカルボン酸またはフェノールを、１当量のアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属の水酸化物もしくはアルコキシド（例えばエトキシドもしくはメトキシド）または適当な塩基性の有機アミン（例えばコリンもしくはメグルミン）で水性媒体中で処理し、次いで従来の精製操作を行うことにより製造することができる。
【００３０】
１つの実施形態において、上記の式Ｉの化合物は、医薬として許容し得るその塩または溶媒和物、特に酸付加塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、またはｐ−トルエンスルホン酸塩に変換してよい。
本発明の新規化合物は、治療、特に慢性疼痛、神経障害性疼痛、急性疼痛、癌疼痛、リウマチ性関節炎により生じる疼痛、偏頭痛、内臓痛などのような、種々の疼痛状態の処置に有用である。しかしながら、この例を網羅的なものとして解釈するべきではない。
本発明の化合物は免疫調節剤として、特に関節炎のような自己免疫疾患のために、皮膚移植、臓器移植および類似した外科的要求のために、膠原病、種々のアレルギーのために、抗腫瘍剤および抗ウイルス剤としての使用のために、有用である。
本発明の化合物は、そのパラダイムにオピオイド受容体の変性または機能不全が存在するかまたは関与するような疾患状態に有用である。これは、診断技術および陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）のような画像化における、本発明の化合物の同位元素標識体の使用を包含し得る。
【００３１】
本発明の化合物は、下痢、うつ病、不安障害およびストレス関連障害、例えば心的外傷後ストレス障害、パニック障害、全般性不安障害、対人恐怖症および強迫性障害、尿失禁、早漏、種々の精神障害、咳、肺浮腫、種々の胃腸障害、例えば便秘、過敏性腸症候群および機能性消化不良のような機能性胃腸障害、パーキンソン病および他の運動障害、外傷性脳損傷、卒中、心筋梗塞後の心臓の保護、脊髄損傷および薬物中毒、例えばアルコール、ニコチン、オピオイドおよび他の薬物濫用の治療に有用であり、そして交感神経系の障害、例えば高血圧に有用である。
【００３２】
本発明の化合物は、全身麻酔およびモニター麻酔処置中に使用するための鎮痛剤として有用である。異なる特性を有する薬剤の組合せが、麻酔状態（例えば、記憶消失、痛覚脱失、筋肉弛緩、および鎮静）を維持することが必要とされる効果のバランスを得るために、しばしば使用される。この組合せに含まれるものとしては、吸入麻酔剤、睡眠剤、抗不安剤、神経筋遮断剤およびオピオイドがある。
また、上述したいずれかの状態を治療する医薬の製造のための、上記式Ｉのいずれかの化合物の使用も、本発明の範囲に含まれる。
【００３３】
本発明の更なる態様は、治療が必要な患者に有効量の上記式Ｉの化合物を投与することによる、上述したいずれかの状態に罹った患者の治療方法である。
即ち、本発明は、治療に使用するための上述した式Ｉの化合物、または医薬として許容し得るその塩もしくは溶媒和物を提供する。
更なる態様において、本発明は、治療に使用するための医薬の製造における、上述した式Ｉの化合物、または医薬として許容し得るその塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００３４】
本明細書において、「治療」という用語は、特にそれに反する記載のない限り「予防」を含む。「治療の」および「治療上」という用語はそれに応じて解釈されるべきである。本発明の範囲内の「治療」という用語は更に、既存の疾患状態、急性もしくは慢性または再発性の状態の何れかを軽減するために、有効量の本発明の化合物を投与することを包含する。この定義はまた、再発状態の防止のための予防的治療、および慢性障害の持続的治療を包含する。
【００３５】
本発明の化合物は、治療、特に種々の疼痛状態、例えば慢性疼痛、神経障害性疼痛、急性疼痛、背部痛、癌疼痛および内臓痛の治療に有用であるが、ただしこれらに限定されない。
ヒトのような温血動物の治療のための使用において、本発明の化合物は従来の医薬組成物の形態において、任意の投与経路、例えば経口、筋肉内、皮下、局所、鼻内、腹腔内、胸腔内、静脈内、硬膜外、硬膜下、脳室内に、および関節内への注射により投与してよい。
【００３６】
本発明の１つの実施形態において、投与経路は経口、静脈内または筋肉内である。
用量は、投与経路、疾患の重篤度、患者の年齢および体重、並びに特定の患者にとって最適な個々の投薬計画および用量レベルを決定する際に担当医が通常考慮するその他の因子に応じて決まる。
本発明の化合物から医薬組成物を製造するには、不活性な、医薬として許容し得る担体は、固体または液体のいずれであってもよい。固体形態の製剤としては、粉剤、錠剤、分散性粒剤、カプセル剤、カシェ剤および坐剤が挙げられる。
固体担体は１またはそれ以上の物質であってよく、これは希釈剤、矯味矯臭剤、可溶化剤、滑沢剤、懸濁化剤、結合剤、または錠剤崩壊剤としても作用し得、またカプセル化材であることもできる。
【００３７】
粉剤において、担体は微細分割された固体であり、これは微細分割された本発明の化合
物または活性成分との混合物として存在する。錠剤において、活性成分は適当な比率で必要な結合特性を有する担体と混合され、所望の形状およびサイズに圧縮される。
坐剤組成物を製造するには、まず、低融点ワックス、例えば脂肪酸グリセリドおよびカカオ脂の混合物を溶融し、活性成分を例えば撹拌によりその中に分散させる。次に溶融した均質な混合物を好都合な大きさの型に注ぎ込み、冷まして固化させる。
適当な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ラクトース、糖、ペクチン、デキストリン、デンプン、トラガント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、カカオ脂等である。
【００３８】
組成物という用語はまた、カプセルを与える担体としてのカプセル化材と共に活性成分を処方したものも包含することが意図され、ここで、活性成分は（他の担体を伴うか伴うことなく）担体により取り巻かれており、このようにして担体は成分と共存している。同様に、カシェ剤が含まれる。
錠剤、粉剤、カシェ剤、およびカプセル剤は、経口投与に適当な固体投薬形態として用いることができる。
液体形態の組成物としては、液剤、懸濁剤および乳剤が挙げられる。例えば活性化合物の滅菌水または水プロピレングリコール溶液が、非経口投与に適当な液体製剤の例として挙げられ得る。液体組成物はまた、ポリエチレングリコール水溶液の液剤として処方することもできる。
【００３９】
経口投与用水性液剤は、活性成分を水中に溶解し、所望により適当な着色剤、矯味矯臭剤、安定剤および増粘剤を加えることにより製造できる。経口用途の水性懸濁剤は、微細分割された活性成分を、粘稠物質、例えば天然または合成ガム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および医薬製剤分野で既知の他の懸濁化剤と共に、水中に分散させることにより製造できる。
投与様式に応じて、医薬組成物は好ましくは０.０５％〜９９％ｗ（重量百分率）、より好ましくは０.１０〜５０％ｗの本発明の化合物を含み、ここで重量百分率は全て総組成物に基づく。
本発明の実施のための治療有効量は、当業者により、個々の患者の年齢、体重および応答を含む既知の基準を用いて決定することができ、そして処置されるかまたは予防される疾患との関連で解釈され得る。
【００４０】
医薬の製造のための上記式Ｉの化合物のいずれかの使用は、本発明の範囲内である。
また、疼痛の治療用医薬の製造のための式Ｉの化合物のいずれかの使用は、本発明の範囲内である。
更に、種々の疼痛状態、例えば慢性疼痛、神経障害性疼痛、急性疼痛、背部痛、癌疼痛および内臓痛（ただしこれらに限定されない）の治療用医薬の製造のための式Ｉの化合物のいずれかの使用が提供される。
本発明の別の態様は、治療の必要な患者に有効量の上記式Ｉの化合物を投与することによる、上述のいずれかの状態に罹った対象の治療方法である。
更に、医薬として許容し得る担体と共に式Ｉの化合物または医薬として許容し得るその塩を含む医薬組成物が提供される。
特に、治療、より特定には疼痛の治療のための、医薬として許容し得る担体と共に式Ｉの化合物または医薬として許容し得るその塩を含む医薬組成物が提供される。
更に、上述のいずれかの状態において用いるための、医薬として許容し得る担体と共に式Ｉの化合物または医薬として許容し得るその塩を含む医薬組成物が提供される。
【００４１】
更なる態様において、本発明は式Ｉの化合物の製造方法を提供する。
１つの態様において、本発明は式II
【化２】
2006507296.tif 000004
の化合物の製造方法を提供し、該方法は、式III：
【化３】
2006507296.tif 000005
の化合物を、Ｒ1−ＣＨＯと反応させて、式IIの化合物を形成する工程からなり、
式中、
Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、置換されているアリールまたは置換されているヘテロアリールである。
【００４２】
もう１つの態様において、本発明は式IV
【化４】
2006507296.tif 000006
の化合物の製造方法を提供し、該方法は、式II
【化５】
2006507296.tif 000007
の化合物を、非水性溶媒中でアルカリ金属水酸化物と反応させて、式IVの化合物を形成する工程からなり、
式中、
Ｒ1はアリール、ヘテロアリール、置換されているアリールまたは置換されているヘテロアリールである。
【００４３】
特に、本発明の化合物は、スキーム１および２に例示されるような合成経路に従って製造できる。
【化６】
2006507296.tif 000008
【化７】
2006507296.tif 000009
【００４４】
もう１つの態様において、本発明の化合物は、スキーム３および４に例示されるような合成経路に従って製造できる。
【化８】
2006507296.tif 000010
【００４５】
生物学的評価
本発明の化合物は、温血動物、例えばヒトのδ受容体に対して活性であることが見出された。特に、本発明の化合物は効果的なδ受容体リガンドであることが見出された。後述のインビトロアッセイは、特に、ラット脳機能アッセイおよび／またはヒトδ受容体機能アッセイ（低）において示されたようなアゴニスト効力および有効性に関して、これらの驚くべき活性を証明した。この特性は生体内の活性に関連すると考えられ、結合親和性に直線的に相関するものではないかもしれない。これらのインビトロアッセイにおいて、化合物をそのδ受容体に対する活性について試験し、ＩＣ50を得て、特定の化合物のδ受容体に対する選択的活性を決定した。本発明との関連において、一般にＩＣ50とは、標準的放射活性δ受容体リガンドの５０％置換が観察される化合物濃度を指す。
κおよびμ受容体に対する本化合物の活性もまた、同様のアッセイにおいて測定した。
【００４６】
インビトロモデル
細胞培養
クローン化されたヒトκ、δおよびμ受容体、並びにネオマイシン耐性を発現するヒト２９３Ｓ細胞を、カルシウムを含まないＤＭＥＭ１０％ＦＢＳ、５％ＢＣＳ、０.１％プルロニックＦ−６８、および６００μｇ／ｍＬゲネチシンを入れた振蕩フラスコ中で、３７℃および５％ＣＯ2で懸濁培養した。
ラット脳を計量し、氷冷ＰＢＳ（２.５ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ ７.４を含む）でリンスした。脳を、氷冷リシスバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７.０、２.５ｍＭ  ＥＤＴＡ、使用直前にフェニルメチルスルホニルフルオリドをＤＭＳＯ：エタノール中の０.５Ｍストックから０.５ｍＭとなるように添加）中で、ポリトロンで３０秒間（ラット）ホモジナイズした。
【００４７】
膜調製
細胞をペレット化して、リシスバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７.０、２.５ｍＭ  ＥＤＴＡ、使用直前にＰＭＳＦをエタノール中の０.１Ｍストックから０.１ｍＭとなるように添加）に再懸濁し、氷上で１５分間インキュベートし、ポリトロンで３０秒間ホモジナイズした。懸濁液を、４℃で１０分間、１０００ｇ（最大）で遠心分離した。上清を氷上に保存し、ペレットを再懸濁して前と同様に遠心分離した。両方の遠心分離からの上清を合わせて、３０分間４６,０００ｇ（最大）で遠心分離した。ペレットを冷Ｔｒｉｓバッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／Ｃｌ、ｐＨ７.０）に再懸濁し、再び遠心分離した。最終的なペレットを、膜バッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、０.３２Ｍスクロース、ｐＨ７.０）に再懸濁した。ポリプロピレンチューブ中のアリコート（１ｍＬ）をドライアイス／エタノール中で冷凍し、使用するまで−７０℃で保存した。タンパク質濃度を、ナトリウムドデシルスルフェートを用いた改変Ｌｏｗｒｙアッセイで測定した。
【００４８】
結合アッセイ
膜を、３７℃で解凍し、氷上で冷却し、２５ゲージ針に３回通して、結合バッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、３ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ（Sigma  A-7888）、ｐＨ７.４、これに５μｇ／ｍＬアプロチニン、１０μＭベスタチン、１０μＭジプロチンＡを新たに添加（ＤＴＴは加えない）した後に、０.２２ｍフィルターを通して濾過し、４℃で保存）に希釈した。アリコート１００μＬを、適当な放射性リガンド１００μＬおよび試験化合物１００μＬを様々な濃度で含む氷冷１２×７５ｍｍポリプロピレンチューブに加えた。全体の（ＴＢ）および非特異的（ＮＳ）結合を、ナロキソン  １０μＭの非存在下および存在下のそれぞれで測定した。チューブをボルテックスし、２５℃で６０〜７５分間インキュベートした後、内容物を０.１％ポリエチレンイミンに少なくとも２時間浸したＧＦ／Ｂフィルター（Whatman）を通して、迅速に吸引濾過し、氷冷洗浄バッファー（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７.０、３ｍＭ  ＭｇＣｌ2）、約１２ｍＬ／チューブで洗浄した。フィルターをシンチレーション流体６〜７ｍＬを含むミニバイアル中に少なくとも１２時間浸した後に、フィルター上に残った放射活性（dpm）をベータカウンターで計測した。９６−深穴プレートでアッセイを行う場合は、９６−ＰＥＩ−浸漬ユニフィルター上で濾過し、これを洗浄バッファー  １ｍＬ×３で洗浄し、５５℃のオーブンで２時間乾燥した。各ウェルについてＭＳ−２０シンチレーション流体５０μＬを加えた後に、フィルタープレートをTopCount（Packard）で計数した。
【００４９】
機能アッセイ
化合物受容体複合体が、受容体が結合するＧタンパク質へのＧＴＰの結合を活性化する度合いを決定することで、化合物のアゴニスト活性を測定した。ＧＴＰ結合アッセイにおいて、ＧＴＰ[γ]35Ｓを、試験化合物と、クローン化されたヒトオピオイド受容体を発現するＨＥＫ−２９３Ｓ細胞からの膜、またはホモジナイズされたラットおよびマウス脳からの膜と混合した。アゴニストは、ＧＴＰ[γ]35Ｓのこれらの膜における結合を促す。化合物のＥＣ50値およびＥmax値を、用量−反応曲線から決定した。アゴニスト活性がデルタ受容体を介していることを確認するために、デルタアンタゴニストナルトリンドールにより、用量反応曲線の右シフトを行った。ヒトδ受容体機能アッセイのために、アッセイに用いるヒトδ受容体を、ＥＣ50（高）を測定する際に用いられるレベルと比べて低いレベルで発現させた場合に、ＥＣ50（低）を測定した。標準δアゴニストＳＮＣ８０に関してＥmax値を測定した、即ち１００％より高い化合物は、ＳＮＣ８０よりも良好な有効性を有する。
【００５０】
ラット脳ＧＴＰについての手順
ラット脳の膜を３７℃で融解し、２５ゲージ鈍端針に３回通して、ＧＴＰγＳ結合バッファー（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、２０ｍＭ ＮａＯＨ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、５ｍＭ ＭｇＣｌ2、ｐＨ７.４、新たに：１ｍＭ ＤＴＴ、０.１％ＢＳＡを添加）に希釈した。膜希釈物中に終濃度１２０μＭとなるようにＧＤＰを加えた。化合物のＥＣ50およびＥmaxを、適当量の膜タンパク質（２０μｇ／ウェル）およびウェル当たりＧＴＰγ35Ｓ１０００００〜１３００００ｄｐｍ（０.１１〜０.１４ｎＭ）を含む３００μＬ中で行った１０点用量反応曲線から評価した。基礎結合および最大誘導結合を、３μＭ ＳＮＣ−８０の非存在下および存在下で決定した。
【００５１】
データ分析
特異的結合（ＳＢ）をＴＢ−ＮＳとして計算し、種々の試験化合物の存在下におけるＳＢを、対照ＳＢの百分率で表した。特異的結合を放射性リガンドで置換することにおける、リガンドのＩＣ50 およびＨｉｌｌ係数（ｎH）の値を、ロジットプロット、またはLigand、GraphPad Prism、SigmaPlotもしくはReceptorFitのような曲線当てはめプログラムから算出した。Ｋi値を、Cheng−Prussoff式から計算した。ＩＣ50、ＫiおよびｎHの平均±S.E.M.値を、少なくとも３つの置換曲線において試験したリガンドについて記録した。本発明の化合物の生物学的活性を、表１および２に示す。
【００５２】
【表１】
2006507296.tif 000011
【００５３】
受容体飽和実験
放射性リガンドＫδ値を、適当な放射性リガンドをＫδの推定値の０.２〜５倍（放射性リガンドの必要量が可能である場合は最大１０倍）の濃度で用いて、細胞膜上で結合アッセイを行うことによって測定した。特異的な放射性リガンド結合を、ｐｍｏｌ／ｍｇ膜タンパク質として表した。個々の実験のＫδおよびＢmax値を、一部位モデル（one-site model）に従い、個々の特異的結合（Ｂ）対ｎＭ遊離（Ｆ）放射性リガンドの非線形適合により得た。
【００５４】
Von Frey試験を用いたMechano−Allodyniaの測定
Chaplanら（１９９４）により記載されている方法を使用して、０８：００から１６：００時間で試験を行った。ラットを、肢に接触できるようなワイヤーメッシュ底の上のPlexiglasケージ中に入れ、１０〜１５分間そのままにして慣らした。試験される区域は、左後肢の足底中央であり、感度の低い肢パッドは避けた。対数的に増加する剛性を有する一連のVon Frey 毛８種（０.４１、０.６９、１.２０、２.０４、３.６３、５.５０、８.５１、および１５.１４グラム；Stoelting、III、USA）を、肢に接触させた。Von Frey 毛を、メッシュ床の下から足底へ垂直に、肢に対し、わずかに締めつけ（buckling）を引き起こすのに充分な力で用いて、約６〜８秒間保持した。肢が鋭敏に引っ込められる場合に、陽性反応を記録した。毛の除去に対し即座に肢を縮める（flinching）ことも、陽性反応とみなした。動き回ること（ambulation）は、不明瞭な反応とみなし、この場合は、刺激を繰り返した。
【００５５】
試験プロトコル
ＦＣＡ−処理群の動物を術後１日に試験した。Dixon（１９８０）の上下方法（up-down method）を用いて、５０％引っ込み閾値を測定した。試験は、系列の中央である、２.０４ｇ毛で開始した。刺激を連続的に上げていくか、または下げていくかして、常に存在させた。最初に選択された毛に対する肢の引っ込み反応が無いときは、より強い刺激を与え；肢の引っ込み反応が現れたときは、次により弱い刺激を選択した。この方法による至適閾値計算は、５０％閾値の近似値における６回の反応を必要とし、この６回の反応を、反応が起こる最初の変化、例えば閾値が最初に交差したときに計測し始めた。閾値が刺激の範囲の外にあった場合は、１５.１４（正常の感度）または０.４１（最重度アロディニア）の値を、それぞれ用いた。得られた陽性および陰性反応のパターンを、慣例、Ｘ＝引っ込みなし；Ｏ＝引っ込み、を用いて表にして、５０％引っ込み閾値を式：
５０％ｇ閾値＝１０(Xf+kδ)／１０,０００
［ここで、Ｘｆ＝最後に使用したVon Frey 毛の値（ログ単位）；ｋ＝陽性／陰性反応パターンのための表計算値（Chaplanら(１９９４)）；および、δ＝刺激間の差の平均値（ログ単位）である。ここでδ＝０.２２４］
を用いて内挿した。
【００５６】
Von Frey 閾値を、Chaplanら１９９４に従い、最大可能効果の百分率（％ＭＰＥ）に変換した。下記の式を％ＭＰＥを算出するのに用いた：
％ＭＰＥ＝薬剤処理した閾値（ｇ）−アロディニアの閾値（ｇ）×１００
対照の閾値（ｇ）−アロディニアの閾値（ｇ）
【００５７】
試験物質の投与
Von Frey試験前に、ラットに試験物質を（皮下に、腹腔内に、静脈内に、または経口的に）注入し、試験化合物投与から、von Frey試験までの時間は、試験化合物の性質に応じて変化させた。
【００５８】
もだえ（writhing）試験
酢酸をマウスに腹腔内投与した場合、腹部収縮が引き起こされる。これらは次いで、典型的傾向において、その体に拡がっていく。鎮痛剤が投与される場合、この記載された動きはあまり見られなくなり、そして、薬剤は可能性のある優れた候補として選択される。
以下の要素：動物は移動しない；腰部をわずかに押し下げる；両肢の足底面が見られる；が現れたときのみ、完全で典型的なもだえ反射とみなされる。このアッセイにおいて、本発明の化合物は、１〜１００μｍｏｌ／ｋｇで経口投与後に、もだえ反応の有意な阻害を示した。
【００５９】
（ｉ）溶液調製
酢酸（ＡｃＯＨ）：酢酸１２０μＬを蒸留水１９.８８ｍＬに加え、終量２０ｍＬ、終濃度０.６％のＡｃＯＨを得た。次いで溶液を混合（ボルテックス）して、注射用とした。
化合物（薬剤）：各化合物を製造し、標準の手順に従い最も適当なビヒクルに溶解した。
【００６０】
（ii）溶液の投与
化合物（薬剤）を、経口で、腹腔内に（ｉ.ｐ.）、皮下に（ｓ.ｃ.）または静脈内に（ｉ.ｖ.）、１０ｍＬ／ｋｇ（平均マウス体重を考慮して）で、試験の２０、３０または４０分前（化合物のクラスおよびその特性に従い）に投与した。化合物を中枢に供給する場合は、５μＬの容量を、脳室内に（ｉ.ｃ.ｖ.）、または髄膜下に（ｉ.ｔ.）投与した。
ＡｃＯＨを、試験の直前に、１０ｍＬ／ｋｇ（マウスの平均体重を考慮して）で２箇所に腹腔内（ｉ.ｐ.）投与した。
【００６１】
（iii）試験
動物（マウス）を、２０分間観測し、事象（もだえ反射）の回数を記録し、実験の最後に集計した。マウスは、個々に、接触床（contact bedding）を有する「靴箱型」ケージに入れて保持した。通常、全部で４匹のマウスを同時に観察し：１匹は対照であり、３匹には薬剤を投与した。
不安症および不安症様兆候については、ラットのgeller−seifterコンフリクト試験において、有効性を示した。
機能性胃腸障害については、Coutinho SVらにより、American Journal of Physiology-Gastrointestinal & Liver Physiology．282 (2):G307-16, 2002年2月に記載されたラットにおけるアッセイで 、有効性を示すことができる。
【００６２】
更なる生体内試験プロトコル
対象および収容
未投与の雄Sprague Dawleyラット（１７５〜２００ｇ）を 、温度制御された室内（２２℃、湿度４０〜７０％、１２時間明／暗）に５群に分けて収容した。サイクルの明期に実験を行った。動物には食物および水を自由に摂取させ、データ収集後すぐに犠牲にした。
【００６３】
試料
化合物（薬剤）試験は、まったく処理を受けないラット群、およびその他の、E.coliリポ多糖（ＬＰＳ）処理群を含む。ＬＰＳ処理実験について、４群にＬＰＳを注射し、次いで４群のうちの１群をビヒクル処理し、一方他の３群は薬剤およびそのビヒクルを注射した。実験の第２のセットは、５群のラットで行い；全ての郡でＬＰＳ処理を行わなかった。未投与の群は化合物（薬剤）またはビヒクルをまったく投与しなかった；その他の４群は薬剤と共にまたはこれを含まずに、ビヒクルで処理した。これらは、ＵＳＶの低減に寄与し得る薬剤の抗不安効果または鎮静効果を決定するために行った。
【００６４】
ＬＰＳの投与
ラットを処理の前１５〜２０分間実験室に馴化させた。炎症をＬＰＳ（グラム陰性E.coli細菌のエンドトキシン 抗原型0111：B4, Sigma）の投与によって誘導した。ＬＰＳ（２.４μｇ）をイソフルラン麻酔下で、標準的定位外科技術を用いて、１０μＬの容量で脳室内（i.c.v.）に注射した。耳の間の皮膚を頭側に（rostrally）押し、縦に約１ｃｍ切開して頭蓋表面を露出させた。穿孔部位は、座標：ブレグマの後方０.８mm、ラムダに対して側方（左）１.５mm（矢状縫合）および側部脳室内の頭蓋表面下５mm（垂直）によって決定した。ＬＰＳをポリエチレンチューブ（PE20; 10〜15cm）により１００μＬ Hamiltonシリンジに連結させた５ｍｍ長の滅菌ステンレス鋼の注射針（26-G 3/8）により注射した。切断した注射針（20-G）で作った４mmのストッパーで覆い、シリコン接着剤で２６−Ｇ注射針に固定して所望の深さ５mmにした。
ＬＰＳの注射後さらに１０秒間注射針をそのままにして化合物を拡散させ、次いで取り除いた。切開部を閉じてラットを元のケージに戻し、試験まで最低３.５時間休ませた。
【００６５】
空気パフ刺激のための実験のセットアップ
ラットを、ＬＰＳ注射および化合物（薬剤）投与の後、実験室に残した。試験時にすべてのラットを取り出して実験室の外に置いた。一度に一匹のラットを試験室に入れ、透明なボックス（9×9×18ｃｍ）内に置き、ついでこれを、音を減弱し、換気口を設けたサイズ６２(ｗ)×３５(ｄ)×４６(ｈ)cmの小室（BRS/LVE, Div. Tech-Serv Inc）に置いた。空気パフは０.３２cmの空気送出ノズルを通して送達し、１０秒に１回の頻度で、一定時間（０.２秒）および一定強度で空気パフを送達できるシステム（AirStim，San Diego Instruments）により制御した。最大１０回のパフを与えるかまたは最初の鳴声が始まるまで与えた。最初の空気パフを記録開始の印とした。
【００６６】
超音波記録の実験の設定
鳴声は各小室の内側に置いたマイクロフォン（G.R.A.S. sound and vibration, Vedbaek, Denmark）を用いて１０分間記録し、ＬＭＳ（LMS CADA-X 3.5B, Data Acqusition Monitor, Troy, Michigan）ソフトウエアによって制御した。０〜３２０００Hzの振動数を記録し、保存し、同じソフトウエア（LMS CADA-X 3.5B, Time Data Processing Monitor and UPA（User Programming and Analysis））により解析した。
【００６７】
化合物（薬剤）
全ての化合物（薬剤）は、６.５〜７.５にｐＨ調節し、４ｍＬ／ｋｇで投与した。化合物（薬剤）の投与に続いて、動物を試験時まで元のケージに戻した。
【００６８】
分析
記録は、一連の統計的分析およびフーリエ分析によって行い、フィルター処理（２０〜２４ｋＨｚ）して、所望のパラメータを計算した。データは平均±ＳＥＭで表した。統計的有意性は、未投与のラットとＬＰＳ処理ラットとを比較するためにＴ試験を用いて、および薬剤有効性に関して１元ＡＮＯＶＡ続けてＤｕｎｎｅｔｔ多重比較試験（post-hoc）を用いて評価した。群間の差は、最小ｐ値≦０.０５を有意とした。実験は最低２回繰り返した。
【実施例】
【００６９】
本発明は更に、以下の実施例により詳細に説明される。当該実施例は、本発明の化合物の製造方法、精製方法、分析方法および生物学的試験方法を説明するが、これらは本発明を制限するものとして解釈されるべきではない。
【００７０】
中間体１： Ｎ，Ｎ−ジエチル−４−ホルミルベンズアミド
トルエン１００ｍＬ中の４−カルボキシベンズアルデヒド（３０ｇ、０.２モル）の懸濁液に、ＳＯＣｌ2（９７ｍＬ、１.３モル）を６０℃で加えた。反応混合物をガスの発生が止まるまで加熱し、続けてトルエン（３ｘ５０ｍＬ）を用いて蒸発させて、乾固させた。この得られた残留物をＣＨ2Ｃl2（２００ｍＬ）に溶解した。この溶液を氷浴中で撹拌しながら冷却し、これにジエチルアミン（５０ｍＬ）を加えた。撹拌を１時間続け、次いで混合物を更に１時間加熱還流した。冷却後、混合物を続けて、Ｈ2Ｏ、２Ｎ ＨＣl、Ｈ2Ｏ、次いで２Ｎ ＮaＯＨ、そして最後にＨ2Ｏで洗浄した。溶液をＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過し、そして濃縮して乾燥させて、油状物質４１ｇを得た。１４０〜１５０℃／１.５トールで蒸留し、中間体１、３６.９ｇ、９０ ％を得た。
【００７１】
中間体２：１−ピペラジンカルボン酸、４−［（３−シアノフェニル）［４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル］メチル］−、１,１−ジメチルエチルエステル
Ｎ,Ｎ−ジエチル−４−ホルミル−ベンズアミド（中間体１）（１.６０ｇ、１当量）、ベンゾトリアゾール（９２９ｍｇ、１当量）および１−ピペラジンカルボン酸、１,１−ジメチルエチルエステル（１.４５ｇ、１当量）を入れた乾燥したフラスコに、乾燥トルエン（５０ｍＬ）を加え、反応混合物を加熱還流し、水を除去した。３.５時間後、反応混合物を冷却し、約５ｍＬに濃縮した。溶液をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）で希釈し、３−シアノフェニル亜鉛ヨージド（テトラヒドロフラン中の０.３７Ｍ溶液、４２ｍＬ、２当量）を含むフラスコにゆっくりと加えた。反応混合物を２０時間５０℃に加熱し、次いで冷却し、塩化アンモニウム飽和水溶液（５０ｍＬ）でクエンチした。１０分後、混合物をジクロロメタン（２ｘ１００ｍＬ）で抽出し、次いで合体した有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物を、ジクロロメタン中３％メタノールで溶離させてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、黄色油状物質として中間体２を得た（２.１２０ｇ）。
【００７２】
中間体３：４−［（３−シアノフェニル）−１−ピペラジニルメチル］−Ｎ，Ｎ−ジエチル−ベンズアミド
ジクロロメタン（４０ｍＬ）中の中間体２（２.１２０ｇ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（６.５ｍＬ、１５当量）を加えた。室温で３時間後、反応を水酸化ナトリウム水溶液（１Ｎ、４０ｍＬ）でクエンチし 、有機層を分離した。水層をジクロロメタン（２ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、合体した有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物を、ジクロロメタン中の１０％〜２０％メタノールで溶離させて、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、無色泡状物質として中間体３を得た（１.１１３ｇ、３工程で３９％）。
【００７３】
中間体４ａ：３−［（４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル）（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル
【化９】
2006507296.tif 000012
１,２−ジクロロエタン（１５ｍＬ）中の中間体３（６０６ｍｇ）の溶液に、ベンズアルデヒド（２２０μＬ、１.３当量）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（４８０ｍｇ、１.４当量）を加えた。３日後、反応混合物を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液で洗浄した。水層をジクロロメタン（２ｘ２５ｍＬ）で洗浄し、合体した有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物を、ジクロロメタン中の５％メタノールで溶離させてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、無色泡状物質として中間体４ａを得た（４２８ｍｇ、５７％）。
【００７４】
中間体４ｂ：３−｛（４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル）［４−（２−フリルメチル）−ピペラジン−１−イル］メチル｝ベンゾニトリル
【化１０】
2006507296.tif 000013
１，２−ジクロロエタン（１５ｍＬ）中の中間体３（５６７ｍｇ）の溶液に、２−フルアルデヒド（１６０μＬ、１.３当量）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（４５０ｍｇ、１.４当量）を加えた。３日後、反応混合物を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液で洗浄した。水層をジクロロメタン（２ｘ２５ｍＬ）で洗浄し、合体した有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物を、ジクロロメタン中の５％メタノールで溶離させてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、無色泡状物質として中間体４ｂを得た（３６７ｍｇ、５３％）。
【００７５】
中間体５：４−ヨード−Ｎ,Ｎ−ジエチルベンズアミド
ＣＨ2Ｃｌ2５００ｍＬ中の４−ヨード−ベンゾイルクロリド（７５ｇ）の混合物に、Ｅｔ3Ｎ（５０ｍＬ）およびＥｔ2ＮＨ（１００ｍＬ）の混合物を０℃で加えた。添加後、得られた反応混合物を１時間室温に温め、次いで飽和塩化アンモニウムで洗浄した。有機抽出物を乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物を、熱ヘキサンから再結晶し、中間体５（８０ｇ）を得た。
【００７６】
中間体６：３−［［４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル］ヒドロキシメチル］−安息香酸，メチルエステル
中間体５（２.８ｇ、９.０ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下で−７８℃に冷却した。次いでｎ−ＢｕＬｉ（８.４ｍＬ、ヘキサン中の１.０７Ｍ溶液、９.０ｍｍｏｌ）を、−６５〜−７８℃で１０分間かけて滴下して加えた。溶液を、トルエン／ＴＨＦ（約１：１、５０ｍＬ）中の３−カルボメトキシベンズアルデヒド（１.４９ｇ、９.１ｍｍｏｌ）に−７８℃でカニューレで挿入した。ＮＨ4Ｃｌ水溶液を３０分後に加えた。真空下で濃縮後、ＥｔＯＡｃ／水で抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ4）そして有機相を蒸発させて、残留物をシリカ上のクロマトグラフィー（０〜７５％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）により精製して、中間体６（１.５ｇ、４９％）を得た。
【００７７】
中間体７：１−ピペラジンカルボン酸，４−［［４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル］［３−（メトキシカルボニル）フェニル］メチル］−，１,１−ジメチルエチルエステル
ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の中間体６（１.５ｇ、４.４ｍｍｏｌ）の溶液に、臭化チオニル（０.３６ｍＬ、４.６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間後に、反応混合物を重炭酸ナトリウム飽和水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、有機層を分離した。水層をジクロロメタン（３ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、合体した有機抽出物を乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。
臭化ベンジルをアセトニトリル（３５ｍＬ）およびＮ−Ｂｏｃ ピペラジン（０.９ｇ、４.８ｍｍｏｌ）に溶解し、トリエチルアミン（０.６７ｍＬ、４.８ｍｍｏｌ）を加えた
。反応混合物を１時間６５℃で加熱した後、反応混合物を冷却し、飽和塩化アンモニウム／酢酸エチルで洗浄し、そして有機層を分離した。水層を、酢酸エチル（３ｘ１００ｍＬ）で抽出し、合体した有機抽出物を乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、中間体７（２.０４ｇ、９１％）を得た。
【００７８】
中間体８：３−［［４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル］［４−（フェニルメチル）−１−ピペラジニル］メチル］−安息香酸，メチルエステル
ジクロロメタン（３０ｍＬ）中の中間体７（２.０ｇ、３.９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）を加えた。１０分後、反応混合物を濃縮し、残留物をジクロロメタンに溶解し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液で洗浄した。有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。
残留物をアセトニトリル（２５ｍＬ）に溶解し、臭化ベンジル（４７５μＬ、４.０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５５０μＬ、４.０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間後、反応混合物を濃縮し、残留物をジクロロメタンに溶解し、水で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮して、中間体８（１.６６ｇ、８５％）を得た。
【００７９】
中間体９：３−［［４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル］［４−（フェニルメチル）−１−ピペラジニル］メチル］−安息香酸
メタノール（１５ｍＬ）および水（５ｍＬ）中の中間体８（１.６６ｇ、３.３ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化リチウム（０.６９ｇ、１６.５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で５時間後、メタノールを除去し、２Ｍ塩酸を添加することによって中間体９を水溶液から沈殿させた。
【００８０】
化合物１、１ａおよび１ｂ：３−［（４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル）（４−ベンジル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンズアミド
【化１１】
2006507296.tif 000014
ｔｅｒｔ−ブタノール（１０ｍＬ）中の中間体４ａ（４２８ｍｇ）の溶液に、砕いた水酸化カリウム（１２９ｍｇ、２.５当量）を加え、反応混合物を還流加熱した。９０分後、反応混合物を冷却し、ジクロロメタン（４０ｍＬ）で希釈した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で洗浄し、有機層を分離した。水層を２Ｎ塩酸で中性化し、ジクロロメタン（２ｘ２５ｍＬ）で洗浄した。合体した有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物を、ジクロロメタン中の３％メタノールで溶離させてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、無色泡状物質として化合物１を得た（３７４.５ｍｇ、８４％）。1H NMR (CD3OD) δ 1.06 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.20 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 3.15-3.40 (m, 6H), 3.545-3.54 (m, 2H), 3.57-3.67 (m, 4H), 4.44 (s, 2H), 5.39 (br s, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.43-7.59 m, 6H), 7.82 (d, J = 7.8 Hz, 3H), 7.93 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H).
【００８１】
化合物１を、溶離剤として３０％イソプロパノール７０％ヘキサンを用いて、キラルＡＤカラムを用いて、キラルＨＰＬＣにより分離し、化合物１ａおよび１ｂを得た。保持時間は化合物１ａおよび１ｂについてそれぞれ１１.３分および１６.５分であった。
化合物１ａについて、純度（ＨＰＬＣ）：＞９９％；光学純度（キラルＨＰＬＣ）：＞９９％；検出値 C, 58.93; H, 6.65; N, 8.82。C30H36N4O2 x 3.2HCl x 0.6H2OはC, 58.87; H, 6.65; N, 9.15％である。
化合物１ｂについて、純度（ＨＰＬＣ）：＞９９％；光学純度（キラルＨＰＬＣ）：＞９９％；検出値C, 58.88; H, 6.68; N, 8.94。C30H36N4O2 x 3.1HCl x 0.8H2OはC, 58.87; H, 6.70; N, 9.15％である。
【００８２】
化合物２、２ａおよび２ｂ：３−｛（４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル）
［４−（２−フリルメチル）−ピペラジン−１−イル］メチル｝ベンズアミド
【化１２】
2006507296.tif 000015
ｔｅｒｔ−ブタノール（１０ｍＬ）中の中間体４ｂ（３６５ｍｇ）の溶液に、砕いた水酸化カリウム（１１２ｍｇ、２.５当量）を加え、反応混合物を加熱還流した。９０分後に反応混合物を冷却し、ジクロロメタン（４０ｍＬ）で希釈した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で洗浄し、有機層を分離した。水層を２Ｎ塩酸で中性化し、ジクロロメタン（２ｘ２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機抽出物を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過し、そして濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、無色泡状物質としてラセミ化合物２を得た。1H NMR (遊離アミン) (400 MHz, CDCl3):δ1.09 (br s, 3H), 1.20
br s, 3H),  2.47 (m, 8H),  3.23 (br s, 2H),  3.52 (br s, 2H), 3.55 (s, 2H), 4.31 (s, 1H),  5.63 (br s, 1H), 6.10 (br s, 1H), 6.19 (d, J = 2.9 Hz, 1 H), 6.30 (m, 1H), 7.27 (d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.35 (m, 2H), 7.41 (d, J = 8.2 Hz, 2 H) 7.59 (m, 2H), 7.84 (s, 1H).
【００８３】
化合物２を、溶離剤として３０％イソプロパノール７０％ヘキサンを用いて、キラルＡＤカラムを用いて、キラルＨＰＬＣにより分離し、化合物２ａおよび２ｂを得た。保持時間は化合物２ａおよび２ｂについてそれぞれ９.９分および１２.９分であった。
化合物２ａについて、純度（ＨＰＬＣ）：＞９９％；光学純度（キラルＨＰＬＣ）：＞９９％。検出値: C, 56.79; H, 6.65; N, 9.60。C28H34N4O3 x 2.6 HCl x 1.3 H2OはC, 56.73; H, 6.67; N, 9.45％である。
化合物２ｂについて、純度（ＨＰＬＣ）：＞９９％；光学純度（キラルＨＰＬＣ）：＞９９％。検出値: C, 57.86; H, 6.54; N, 9.56。C28H34N4O3 x 0.7 HCl x 3.1H2OはC, 57.86; H, 6.76; N, 9.18％である。
【００８４】
化合物１の合成の別法
ジクロロメタン（３ｍＬ）中の中間体９（１００ｍｇ、０.２１ｍｍｏｌ）の溶液に、−２０℃でイソブチルクロロホルメート（４１μＬ、０.３１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４３μＬ、０.３１ｍｍｏｌ）を加えた。１０分後、ジクロロメタン中のアンモニア溶液（１.５Ｍ、４.５ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温に温め、塩水で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過しそして濃縮して、化合物１を得た。
【００８５】
化合物３、３ａおよび３ｂ：３−［［４−［（ジエチルアミノ）カルボニル］フェニル］［４−（フェニルメチル）−１−ピペラジニル］メチル］−Ｎ−メチル−ベンズアミド
【化１３】
2006507296.tif 000016
ＤＭＦ２ｍＬ中の中間体９（０.１２０ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（０.１３２ｍｇ、０.３５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１７３μＬ、０.９９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３０分間撹拌し、その後これにＭｅＯＨ中の２Ｎ ＨＮＣＨ3（２５０μＬ、０.５０ｍｍｏｌ）を加え、１晩撹拌を続けた。反応混合物を濃縮し、ＮａＨＣＯ3飽和溶液と酢酸エチルの間に分配した。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで５回抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ4）、濾過しそして濃縮して、化合物３を得た。1H NMR (400 MHz, CD3OD):  δ 1.07 (m, 3H), 1.21 (m, 3H),  2.32 (m, 2H), 2.90 (s, 3H), 3.02 (m, 2H), 3.24 (m, 4H), 3.40 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 4.34 (s, 2H), 4.55 (s, 1H), 7.33 (d, J = 8.2 Hz, 2 H), 7.41 (m, 1H), 7.48 (m, 5H), 7.56 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.63 (m, 2H), 7.93 (m, 1H) 
【００８６】
化合物３を、溶離剤として３５％イソプロパノール６５％ヘキサンを用いて、Chiralpak ADカラムを用いて、キラルＨＰＬＣにより分離し、化合物３ａおよび３ｂを得た。保持時間は化合物３ａおよび３ｂについてそれぞれ７.１分および１７.３分であった。
化合物３ａについて、純度（ＨＰＬＣ）：＞９９％；光学純度（キラルＨＰＬＣ）：＞
９９％。検出値: C, 59.20; H, 5.94; N, 8.26。C31H38N4O2  x 1.6 C2HO2F3 x 0.7 H2OはC, 59.21; H, 5.96; N, 8.08％である。
化合物３ｂについて、純度（ＨＰＬＣ）：＞９７％；光学純度（キラルＨＰＬＣ）：＞９７％。検出値: C, 59.73; H, 5.91; N, 8.32。C31H38N4O2  x 1.6C2HO2F3 x 0.4 H2O: C, 59.68; H, 5.92; N, 8.14％。
【国際調査報告】
2006507296.tif 000023
2006507296.tif 000024
2006507296.tif 000025
2006507296.tif 000026