(57)【要約】  本発明は、疾患、例えば、非癌性増殖性疾患、神経変性疾患、糖尿病、高血圧など、の治療用のキット、方法及び組成物を提供する。ここで前記組成物は、種々の投与経路による、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤中に、例えばＮＤＧＡ等を含む、少なくとも１つのカテコールブタンの実質的に純粋な調合物を含む。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのカテコールブタンと、薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含み、前記疾患が、悪性、前悪性又は良性腫瘍以外で、かつ、ＨＩＶ，ＨＰＶ又はＨＳＶ感染以外である、対象体の疾患を治療するための薬用組成物。
【請求項２】
前記疾患が、炎症性疾患以外である請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３】
前記疾患が、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４】
前記疾患は、非癌性増殖性疾患である請求項１、２又は３に記載の薬用組成物。
【請求項５】
前記非癌性増殖性疾患が、乾癬である請求項１、２又は３に記載の薬用組成物。
【請求項６】
前記疾患が、神経変性疾患、障害又は症状である請求項１、２又は３に記載の薬用組成物。
【請求項７】
前記神経変性疾患が、パーキンソン病である請求項６に記載の薬用組成物。
【請求項８】
前記神経変性疾患が、アルツハイマー病、痴呆症、記憶喪失、精神機能障害及び健忘症から成るグループから選択される請求項６に記載の薬用組成物。
【請求項９】
前記疾患が、高血圧又は、高血圧から生じる又はそれに関連する症状である請求項１、２又は３に記載の薬用組成物。
【請求項１０】
前記疾患が、糖尿病である請求項１、２又は３に記載の薬用組成物。
【請求項１１】
前記疾患が、ＩＩ型糖尿病、代謝症候群又はインスリン抵抗性である請求項１０に記載の薬用組成物。
【請求項１２】
前記疾患が、ウイルス感染であり、前記ウイルスが、少なくとも１つの宿主転写因子を利用するものである請求項１、２又は３に記載の薬用組成物。
【請求項１３】
前記宿主転写因子が、Ｓｐ１である請求項１２に記載の薬用組成物。
【請求項１４】
前記疾患が、ＨＢＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項１２に記載の薬用組成物。
【請求項１５】
前記疾患が、ＥＢＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１６】
前記疾患が、ＨＴＬＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１７】
前記疾患が、ＪＣウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１８】
前記疾患が、水痘帯状疱疹ウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項１９】
前記疾患が、アデノウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２０】
前記疾患が、パルボウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２１】
前記組成物が、鼻腔内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、経口投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２３】
前記組成物が、遅効性及び速効性カプセル剤から成るグループから選択される１つとして製剤されている請求項２２に記載の薬用組成物。
【請求項２４】
前記組成物が、吸入用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２５】
前記組成物が、皮下投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２６】
前記組成物が、経皮投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２７】
前記組成物が、閉塞有り又は無しで、動脈内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２８】
前記組成物が、頭蓋内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項２９】
前記組成物が、脳室内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３０】
前記組成物が、静脈内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３１】
前記組成物が、口腔投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３２】
前記組成物が、腹腔内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３３】
前記組成物が、眼内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３４】
前記組成物が、筋肉内投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３５】
前記組成物が、移植用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３６】
前記組成物が、中心静脈投与用に製剤されている請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３７】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３８】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リン酸緩衝生理食塩水を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項３９】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生理食塩水を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４０】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、脂質系製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４１】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リポソーム製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ナノ粒子製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４３】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ミセル製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４４】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、水溶性製剤を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４５】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生物分解性重合体を含む請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４６】
前記カテコールブタンが、以下の式を有する、
【化１】
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Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、アルキレン又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、
Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルであり、そして、
Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又は任意の隣接する二つの基が共にジオキシアルキエンとすることができ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項４７】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、
Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、そして
Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である請求項４６に記載の薬用組成物。
【請求項４８】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、
Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、そして、
Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である請求項４７に記載の薬用組成物。
【請求項４９】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である請求項４８に記載の薬用組成物。
【請求項５０】
Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である請求項４８に記載の薬用組成物。
【請求項５１】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−であり、そして、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−である請求項４８に記載の薬用組成物。
【請求項５２】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡではないことを条件として、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、そして、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ又は−ＯＣＨ３である請求項４８に記載の薬用組成物。
【請求項５３】
Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３であり、そして、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３である請求項４８に記載の薬用組成物。
【請求項５４】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡである請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項５５】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡ以外である請求項１に記載の薬用組成物。
【請求項５６】
請求項１に記載の薬用組成物を製造する方法であって、以下の工程、
（ａ）請求項４６〜５３のいずれか一項に記載の少なくとも１つのカテコールブタンを提供する工程、
（ｂ）請求項３７〜４５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と提供する工程と、
（ｃ）前記カテコールブタンと前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤とを組み合わせる工程、とを含む薬用組成物を製造する方法。
【請求項５７】
対象体の疾患を治療する方法であって、以下の工程、
（ａ）少なくとも１つのカテコールブタンと薬学的に許容可能な担体とを含む組成物を提供する工程と、
（ｂ）前記組成物を、前記対象体に疾患組織に対する直接注入又は局所的適用以外の経路で投与する工程、を含む疾患を治療する方法。
【請求項５８】
前記疾患が、炎症性疾患以外である請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記疾患が、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記疾患が、非癌性増殖性疾患である請求項５７に記載の方法。
【請求項６１】
前記非癌性増殖性疾患が、乾癬である請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記疾患が、神経変性疾患、障害又は症状である請求項５７に記載の方法。  
【請求項６３】
前記神経変性疾患が、パーキンソン病である請求項５７に記載の方法。
【請求項６４】
前記神経変性疾患は、アルツハイマー病、痴呆症、記憶喪失、精神機能障害及び健忘症から成るグループから選択される請求項５７に記載の方法。
【請求項６５】
前記疾患が、高血圧又は高血圧から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項６６】
前記疾患が、糖尿病である請求項５７に記載の方法。
【請求項６７】
前記疾患が、ＩＩ型糖尿病、代謝症候群又はインスリン抵抗性である請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
前記疾患が、ＨＢＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項６９】
前記疾患が、ＥＢＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項７０】
前記疾患が、ＨＴＬＶ感染から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項７１】
前記疾患が、ＪＣウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項７２】
前記疾患が、水痘帯状疱疹ウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項７３】
前記疾患が、アデノウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項７４】
前記疾患が、パルボウイルス感染から生じる又はそれに関連する請求項５７に記載の方法。
【請求項７５】
前記方法が、前記組成物を鼻腔内投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７６】
前記方法が、前記組成物を経口投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７７】
前記方法が、前記組成物を吸入によって投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７８】
前記方法が、前記組成物を皮下投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記方法が、前記組成物を経皮投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
前記方法が、前記組成物を閉塞有り又は無しで、動脈内投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
前記方法が、前記組成物を頭蓋内投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
前記方法が、前記組成物を脳室内投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
前記方法が、前記組成物を静脈内投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
前記方法が、前記組成物を口腔投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８５】
前記方法が、前記組成物を腹腔内投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８６】
前記方法が、前記組成物を眼内投与することを含む５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８７】
前記方法が、前記組成物を筋肉内投与することを含む５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８８】
前記方法が、前記組成物を移植によって投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８９】
前記方法が、前記組成物を中心静脈経由で投与することを含む請求項５７〜７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リン酸緩衝生理食塩水を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生理食塩水を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、脂質系製剤を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９４】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、リポソーム製剤を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９５】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ナノ粒子製剤を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ミセル製剤を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９７】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、水溶性製剤を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、生物分解性重合体を含む請求項７５〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９９】
前記カテコールブタンが、請求項４６〜５３のいずれか一項に記載の式を有する請求項５７に記載の方法。
【請求項１００】
前記カテコールブタンが、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記カテコールブタンが、テトラグリシニルＮＤＧＡ又はテトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡである請求項９９に記載の方法。
【請求項１０２】
前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−メチルＮＤＧＡを含む請求項９９に記載の方法。
【請求項１０３】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡである請求項９９に記載の方法。
【請求項１０４】
前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡ以外である請求項９９に記載の方法。
【請求項１０５】
前記方法が、少なくとも二つのカテコールブタンを投与することを含む請求項９９に記載の方法。
【請求項１０６】
前記二つのカテコールブタンが、実質的に同時に投与される請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記二つのカテコールブタンが、異なる時間に投与される請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０８】
前記二つのカテコールブタンが、トリ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ及びテトラ−グリシニルＮＤＧＡ、テトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡから成るグループから選択される請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０９】
前記ナノ粒子製剤が、ポリ（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリビニルアルコール、ｄ−α−トコフェリル  ポリエチレングリコール１０００コハク酸塩、及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）−モノメトキシ−ポリ（ポリエチレングリコール）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項９５に記載の方法。
【請求項１１０】
前記リポソーム製剤は、ホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、ジステアロイルホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、及び１−２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン／１−２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−ｒａｃ−（１−グリセロール）ナトリウム塩／コレステロール／トリオレイン／トリカプリリンから成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項９４に記載の方法。
【請求項１１１】
前記方法が、前記組成物を一度以上投与する工程を含む請求項５７に記載の方法。
【請求項１１２】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、水性製剤である請求項５７に記載の方法。
【請求項１１３】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、疎水性製剤を含む請求項５７に記載の方法。
【請求項１１４】
前記疎水性製剤が、脂質系溶媒を含む請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ヒマシ油、ピーナッツ油、ジメチルスルホキシド、及びその他の食物脂肪又は油から成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項５７に記載の方法。
【請求項１１６】
前記組成物は、錠剤、散剤、ゲルカプセル剤、液剤及び洗口液から成るグループから選択される１つの形態に製剤される請求項５７に記載の方法。
【請求項１１７】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、重合体製剤を含む請求項５７に記載の方法。
【請求項１１８】
前記重合体製剤が、生物分解性重合体製剤である請求項１１７に記載の方法。
【請求項１１９】
前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、一定時間に渡って、高い局所的薬剤濃度と持続的放出を許容する請求項５７に記載の方法。
【請求項１２０】
前記重合体製剤が、１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン、セバシン酸、ポリ（エチレン−ｃｏ−酢酸ビニル）、及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２１】
前記カテコールブタンが、投与前に、生理食塩水、ＤＭＳＯ又はエタノールに溶解される請求項５７に記載の方法。
【請求項１２２】
前記組成物が、散剤、煙霧剤、水性製剤、リポソーム製剤、ナノ粒子製剤、及び疎水性製剤から成るグループから選択される少なくとも１つである請求項５７に記載の方法。
【請求項１２３】
前記組成物が、所定時間にわたって毎日投与される請求項５７に記載の方法。
【請求項１２４】
前記組成物が、間欠的に投与される請求項５７に記載の方法。
【請求項１２５】
前記組成物が、前記対象体内に注入される請求項５７に記載の方法。
【請求項１２６】
前記カテコールブタンが、水溶性化合物である請求項５７に記載の方法。
【請求項１２７】
前記カテコールブタンが、疎水性化合物である請求項５７に記載の方法。
【請求項１２８】
前記カテコールブタンが、液剤、煙霧剤、洗口液、懸濁液、錠剤、散剤、又はゲルカプセル剤として製剤される請求項５７に記載の方法。
【請求項１２９】
対象体のウイルス感染を治療する方法であって、請求項１に記載の組成物を前記対象体に投与する工程を有し、前記ウイルス感染が、ＨＢＶ、ＥＢＶ、ＨＴＬＶ、ＪＣウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、アデノウイルス、又はパルボウイルスから生じる、又はそれに関連するものである、ウイルス感染を治療する方法。
【請求項１３０】
前記カテコールブタンが、ヒトに対して、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で３７５ｍｇ／ｋｇ以下の範囲で投与される請求項５７に記載の方法。
【請求項１３１】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で２５０ｍｇ／ｋｇ以下である請求項５７に記載の方法。
【請求項１３２】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約２００ｍｇ／ｋｇ以下である請求項５７に記載の方法。
【請求項１３３】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１５０ｍｇ／ｋｇ以下である請求項５７に記載の方法。
【請求項１３４】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１００ｍｇ／ｋｇ以下である請求項５７に記載の方法。
【請求項１３５】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約７５ｍｇ／ｋｇ以下である請求項５７に記載の方法。
【請求項１３６】
前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約５０ｍｇ／ｋｇ以下である請求項５７に記載の方法。
【請求項１３７】
前記組成物が、静脈内投与される請求項１３０〜１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３８】
前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−ＮＤＧＡ又はテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである請求項１３０〜１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３９】
請求項１に記載の組成物と前記組成物の投与のための取扱指示とを含む疾患治療用のキット。
【請求項１４０】
対象体の血清トリグリセリドを低減する方法であって、以下の工程、
（ａ）少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物を含む組成物を提供する工程、そして（ｂ）前記対象体に前記組成物を有効量投与し、これによって、前記対象体における血清トリグリセリドレベルが低減される工程、ここで、前記ＮＤＧＡ誘導体は以下の式を有し、
【化２】
2006528701.tif 000010
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６は、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルである、を含む血清トリグリセリドを低減する方法。
【請求項１４１】
対象体の血清グルコースを低減する方法であって、以下の工程、
（ａ）少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物を含む組成物を提供する工程、そして（ｂ）前記対象体に前記組成物を有効量投与し、これによって、前記対象体における血清グルコースレベルが低減される工程、ここで、前記ＮＤＧＡ誘導体は以下の式を有し、
【化３】
2006528701.tif 000011
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６は、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルである、を含む血清グルコースを低減する方法。
【請求項１４２】
対象体の血清非エステル化脂肪酸を低減する方法であって、以下の工程、
（ａ）少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物を含む組成物を提供する工程、そして（ｂ）前記対象体に前記組成物を有効量投与し、これによって、前記対象体における血清非エステル化脂肪酸レベルが低減される工程、ここで、前記ＮＤＧＡ誘導体は以下の式を有し、
【化４】
2006528701.tif 000012
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６は、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルである、を含む血清非エステル化脂肪酸を低減する方法。
【請求項１４３】
対象体の低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を低減する方法であって、以下の工程、
（ａ）少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物を含む組成物を提供する工程、そして（ｂ）前記対象体に前記組成物を有効量投与し、これによって、前記対象体におけるＬＤＬ−Ｃレベルが低減される工程、ここで、前記ＮＤＧＡ誘導体は以下の式を有し、
【化５】
2006528701.tif 000013
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６は、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルである、を含む低密度リポタンパク質コレステロールを低減する方法。
【請求項１４４】
対象体の高血圧症を治療する方法であって、以下の工程、（ａ）少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物を含む組成物を提供する工程、そして（ｂ）前記対象体に前記組成物を有効量投与し、これによって、前記対象体の、血管収縮期および拡張期の全身性および肺性高血圧症のような高血圧症が低減される、ここで、前記ＮＤＧＡ誘導体は以下の式を有し、
【化６】
2006528701.tif 000014
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６は、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルである、を含む高血圧症を治療する方法。
【請求項１４５】
対象体のアルツハイマー病を治療する方法であって、以下の工程を有する、（ａ）下記の式を有する少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体を含む組成物を提供する工程、
【化７】
2006528701.tif 000015
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６は、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルである、そして
（ｂ）前記対象体に前記組成物を有効量投与する工程、を含むアルツハイマー病を治療する方法。
【請求項１４６】
少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物と薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含む組成物、及び前記組成物を血清トリグリセリドの低減のために投与するための取扱指示とを含み、前記組成物が血清トリグリセリドの低減用に製剤されている、キット。
【請求項１４７】
少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物と薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含む組成物、及び前記組成物を血清グルコースの低減のために投与するための取扱指示とを含み、前記組成物が血清グルコースの低減用に製剤されている、キット。
【請求項１４８】
少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物と薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含む組成物、及び前記組成物を血清非エステル化脂肪酸の低減のために投与するための取扱指示とを含み、前記組成物が、血清非エステル化脂肪酸の低減用に製剤されている、キット。
【請求項１４９】
少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調製物と薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含む組成物、及び前記組成物を高血圧症の治療のために投与するための取扱指示とを含み、前記組成物は、高血圧症の治療用に製剤されている、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、そのそれらすべての内容をここに参考文献として合体させる、２００３年５月２０日出願の「腫瘍の治療のためのＮＤＧＡ誘導体の投与のための方法と組成物」と称する米国仮出願第６０／４７２，１８８号、２００３年５月２０日出願の「腫瘍の治療のためのＮＤＧＡ誘導体の投与のための方法と組成物」と称する米国仮出願第６０／４７２，２９９号、２００３年５月２０日出願の「神経変性疾患、障害及び症状の治療のための方法と組成物」と称する米国仮出願第６０／４７２，００８号、２００３年５月２０日出願の「神経変性疾患、障害及び症状の治療のためのＮＤＧＡ組成物と方法」と称する米国仮出願第６０／４７２，１４４号、２００３年５月２０日出願の「高血圧症、糖尿病及び肥満治療のためのＮＤＧＡ誘導体」と称する米国仮出願第６０／４７２，２８２号、の優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、非限定的に、乾癬、神経変性疾患を含む疾患を治療するために、血清トリグリセリド、血清グルコース、血清非エステル型脂肪酸を低減し、インスリン感受性を改善し、高血圧を軽減するために、対象体に投与されるカテコールブタンを含有するキット、方法及び組成物に関する。本発明は、上記組成物の製造方法にも関する。そのような治療法において、単数又は複数のカテコールブタンがそれを必要とする対象体に投与される。本発明は、更に、そのような投与態様及治療に好適に製剤された単数又は複数のカテコールブタンを含む組成物にも関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
フロリッチ，エル（Frolich, L）及びリーダラー，ピー（Riederer, P.）(1995)に記載されているように、アルツハイマー病やパーキンソン病などの神経変性疾患は、ニューロンの伝達物質特異的損失と知性及び認識機能における進行性減少によって特徴付けられる。アルツハイマー病は、特に、痴呆、精神機能障害、記憶喪失、及び健忘症に関連している。ハーマン，シー（Hermann, C.）他 (1991)は、その当時、アルツハイマー病の原因と病態生理が知られていないことを示した。今日、１０年以上後になっても、原因はまだ知られていない。病態生理的には、アルツハイマー病患者の脳の顕微鏡検査時に、通常二種類の損傷、老人斑と神経原線維濃縮体、が存在する。これら両タイプの損傷は、痴呆症の無い老人の脳に観察されるものではあるが、それらは、ベネット，ディ・エイ（Bennet D.A.）及びエヴァンス，ディ・エイ（Evans, D.A.）(1992)に述べられているように、アルツハイマー病を有する患者の新皮質と海馬により多く見られる。導入されるのが最も近い痴呆症の認知障害に対する最も有望な治療法は、シュナイダー，エル・エス（Schneider, L.S. (1998)に記載されているもののような、コリン作動性に関する方法である。そのような疾患、障害及び症状の治療のためのその他の効果的な治療法が発見できることが望ましい。
【０００４】
オノ，ケイ（Ono, K.）他 (2002)は、ノルジヒドロゲアヤレチック酸（“ＮＤＧＡ”）は生体外でβ-アミロイド原線維（“ｆａβ”）形成を抑制したのみならず、それは、ｐＨ７．５、３７℃で、ｆａβ（１−４０）と“ｆａβ（１−４２）を投与量依存的に分解した、ことを報告している。しかし、ＮＤＧＡがアルツハイマー病やその他の神経変性疾患の治療に有効であるか否かは知られていない。
【０００５】
更に、たとえＮＤＧＡが、ある種の有用な特性を持つとしても、ランバート，ジェイ・ディ（Lambert, J.D.）他 (2002)に記載されているように、ＮＤＧＡが取り出される植物である、ラレア族三配座（tridentate）含有ハーブの高投与量は、ヒトにおいて肝毒性と腎毒性とを引き起こしうることが報告されている。従って、ＮＤＧＡが、正常組織に対する最小の毒性で、全身的に使用できるか、又は、脳に対して局所的に送達することが可能であるか否かは知られていない。
【０００６】
そのような神経疾患、障害又は症状の治療のために、有効かつ安全である別の治療法が発見されることが望まれている。
【０００７】
更に、糖尿病の治療のための新しい薬剤の開発にも拘わらず、これらの薬剤の多くは、副作用を有する。例えば、トログリタゾン（troglitazone）は、その肝臓毒性と、治療された患者の一部に死亡をもたらしたことにより、ＦＤＡの認可後に市場から取り除かれた。既存の抗糖尿病薬剤の問題の一部に対応する他の抗糖尿病薬剤を作り出すことが望まれている。
【０００８】
米国特許５，８２７，８９８におけるカンダーラ（Khandwala）他、そしてリード，エム・ジェイ（Reed, M.J.）他 (1999)は、げっ歯類において、血清グルコース、血清トリグリセリド、血清非エステル型脂肪酸を低減するためのノルジヒドロゲアヤレチック酸（“ＮＤＧＡ”）の使用について記載している。ガウリ，エム・エス（Gowri, M.S.）他 (1999)は、高血圧を低減するためのＮＤＧＡの使用について記載している。これらの疾患又は症状におけるＮＤＧＡの作用機序は判っていない。もしも、カテコールブタンをヒトに対して安全に投与することができれば、これらの化合物を、高血圧又はそれに関連する症状を治療し、血清グルコース、血清トリグリセリド、および／又は血清非エステル型脂肪酸を低減するために、使用することが可能となる。
【０００９】
ノルジヒドロゲアヤレチック酸（“ＮＤＧＡ”）を含むカテコールブタン、及びその誘導体は、ある種の実験動物において腫瘍の成長を抑制するために使用されてきた。例えば、米国特許５，００８，２９４でジョーダン（Jordan）他は、胸腺欠損ヌードＮＣｒマウスにおいて乳癌ＭＸ−１異種移植片に対して単回投与のＮＤＧＡを使用することを記載している。１つの実験において、前記マウスの腋窩領域への１４ｍｇフラグメントのヒト乳癌の皮下移植後、１日に、その腫瘍にＮＤＧＡを投与した。ジョーダン（Jordan）他は、更に、胸腺欠損マウスのヒト乳腺癌の移植の２３日後のＮＤＧＡの局所投与について記載している。それらの実験において腫瘍の成長の抑制の証拠が観察されたが、その抗腫瘍作用が望ましいものであったか否かは不明である。
【００１０】
米国特許６，４１７，２３４号及び６，２１４，８７４号においてフアン（Huang）他は、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ又はＭ４Ｎと命名されたＮＤＧＡ誘導体と、Ｇ４Ｎと命名された別のＮＤＧＡ誘導体とを別々又は一緒に、ＨＰＶ−１６形質転換不死化マウス上皮細胞（Ｃ３）を移植されたマウスに腫瘍内注射することについて記載している。フアン（Huang）他は、更に、これらＮＧＤＡ誘導体による腫瘍成長の抑制のいくつかの証拠も見出している。これらのＮＤＧＡ誘導体等のような組成物がヒトなどの他の動物に対して安全に投与可能であるか否かについては知られていない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
ＮＤＧＡ誘導体であるＭ４Ｎ等のある種のカテコールブタンは、ジメチルスルホキシド（“ＤＭＳＯ”）に溶解可能であることが判っている疎水性化合物である。ＤＭＳＯ中のＭ４Ｎの化合物を腫瘍に注入したとき、その組成物は、その腫瘍組織の全部ではないにしても、大半が浸透するようであった。その１つの可能な説明は、その組成物の疎水性によってその浸透が制限されるということである。それらの有効性を改善し、その有用性を押し広げながら、抗腫瘍活性などの、それらの生物活性を維持するようにこれらの疎水性化合物の安全な全身投与のための薬剤が発見されることが望ましい。又、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンが、疾患組織に対する直接注入や局所投与以外の投与経路によって安全に投与可能となることが望ましい。
【００１２】
更に、前記ＮＤＧＡ化合物等のカテコールブタンが、標的組織に対する送達と、その標的組織中においてある範囲の投与レベルの維持とを容易にするように製剤されることも望ましい。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
発明の要旨
従って、本発明の対象の一つは、背景に記載したもののような、従来技術の方法及び組成物の問題点に対応するような、疾患の予防又は治療のための方法と組成物とを提供することにある。
【００１４】
本発明の対象のもう一つは、アルツハイマー病、パーキンソン病、痴呆症、精神機能障害、記憶喪失、及び健忘症、などの神経変性疾患、障害又は症状の治療のための新規な方法と組成物とを発見することにある。
【００１５】
本発明の対象の更にもう一つは、そのような治療を必要とする対象体の糖尿病の治療のための新規な方法と組成物とを提供することにある。
【００１６】
本発明の対象の更にもう一つは、そのような治療を必要とする対象体の高血圧の治療のための新規な方法と組成物とを提供することにある。
【００１７】
本発明の対象の更にもう一つは、高血糖の治療、血清トリグリセリドの低減、及び血中グルコースの低減、のための新規な方法と組成物を提供することにある。
【００１８】
本発明の対象の更にもう一つは、標的組織に対する、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの分布の促進及び／又は最適化することができる、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンを含有する単数又は複数の製剤を提供することにある。
【００１９】
本発明の対象の更にもう一つは、標的組織に対する治療のための適切な諸法における、前記ＮＤＧＡ化合物を含む、単数又は複数のカテコールブタンを含む組成物を提供することにある。
【００２０】
本発明の前記対象の一つに拠れば、動物等、例えばヒト、のような対象体の疾患を治療するための薬用組成物が提供され、前記組成物が、少なくとも１つのカテコールブタンと、薬用的に許容可能な担体又は賦形剤とを含み、前記組成物は、疾患組織に対して、直接注入又は局所的適用以外の経路によって投与されるように製剤される。
【００２１】
前記対象のもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患、障害、又は症状が、炎症性疾患以外、例えば、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である。
【００２２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患が、非癌性増殖性疾患である。そのような増殖性疾患は、例えば、乾癬を含む。
【００２３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患が、ウイルス感染、例えば、ＨＢＶ感染、ＥＢＶ感染、ＨＴＬＶ感染、ＪＣウイルス感染、水痘帯状疱疹ウイルス感染、アデノウイルス感染又はパルボウイルス感染から生じる又はそれに関連するものである。
【００２４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患が、神経変性疾患、障害又は症状、例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病、痴呆症、記憶喪失、精神機能障害、及び健忘症である。
【００２５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患が、高血圧又は、高血圧から生じる又はそれに関連する。
【００２６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記疾患が、糖尿病、例えば、ＩＩ型糖尿病、代謝症候群又はインスリン抵抗性である。
【００２７】
前記対象のもう一つに拠れば、上述した組成物であって、該組成物が、鼻腔内投与、経口投与、遅効性又は速効性カプセル剤を介するものを含む、吸入、皮下投与、経皮投与、動脈内投与、閉塞有り又は無しで、頭蓋内投与、脳室内投与、静脈内投与、口腔投与、腹腔内投与、眼内投与、中心静脈投与、筋肉内投与、又は移植用に製剤された組成物が提供される。
【００２８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、生理食塩水、ヒマシ油やコーン油などの油、Cremaphor PL、及びエタノール、又はそのような単数又は複数を含有する混合物を含む。
【００２９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、脂質系製剤、リポソーム製剤、ナノ粒子製剤、ミセル製剤、水溶性製剤、又は上述のいずれかを生物分解性重合体中に含む。
【００３０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した組成物であって、前記カテコールブタンが、以下の構造式を有する。
【００３１】
【化８】
2006528701.tif 000003
【００３２】
ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、アルキレン又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルであり、そして、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又は任意の隣接する二つの基が共にジオキシアルキエン（alkyene dioxy）とすることができ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である。
【００３３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールアミンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、Ｒ７，Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩とすることができる。
【００３４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールアミンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩とすることができる。
【００３５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【００３６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３又は−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【００３７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−であり、そしてＲ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−である。
【００３８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、該カテコールブタンがＮＤＧＡではないことを条件として、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ又は−ＯＣＨ３である。
【００３９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、Ｒ１とＲ２が、独立的に、−ＣＨ３であり、そして、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３である。
【００４０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、該カテコールブタンがＮＤＧＡである。
【００４１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述したカテコールブタンであって、該カテコールブタンがＮＤＧＡ以外である。
【００４２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、カテコールブタンを含有する薬用組成物を製造する方法が提供され、前記方法は、（ａ）上述したカテコールブタンを提供する工程と、（ｂ）上述した薬学的に許容可能な担体又は賦形剤とを提供する工程と、（ｃ）前記カテコールブタンと前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤とを組み合わせる工程とを含む。
【００４３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、対象体の疾患を治療する方法が提供され、前記治療法は、上述した薬用組成物を提供する工程と、前記組成物を対象体、例えば、そのような治療を必要とする対象体に投与する工程とを含む。
【００４４】
前記対象のもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患が、炎症性疾患以外、例えば、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である。
【００４５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患が、乾癬等の非癌性増殖性疾患である。
【００４６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患が、パーキンソン病、アルツハイマー病、痴呆症、記憶喪失、精神機能障害、及び健忘症のような、神経変性疾患、障害又は症状、又は脳卒中又は外傷性脳損傷である。
【００４７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患は、高血圧又は、高血圧から生じる又はそれに関連する。
【００４８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患が、タイプＩ又はＩＩ型糖尿病、代謝症候群又はインスリン抵抗性のような糖尿病である。
【００４９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記治療が、対象体の低密度リポ蛋白質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を低減するものである。
【００５０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記治療が、対象体の血清トリグリセリドを低減するものである。
【００５１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記治療が、対象体の血清グルコースを低減するものである。
【００５２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記治療が、対象体の非エステル化脂肪酸を低減するものである。
【００５３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療法であって、前記疾患が、例えば、ＨＢＶ感染、ＥＢＶ感染、ＨＴＬＶ感染、ＪＣウイルス感染、水痘帯状疱疹ウイルス感染、アデノウイルス感染、又はパルボウイルス感染のような、ウイルス感染から生じる又はそれに関連するものである。
【００５４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、鼻腔内投与、経口投与、遅効性又は速効性カプセル剤を介するものを含む、吸入、皮下投与、経皮投与、動脈内投与、閉塞有り又は無しで、頭蓋内投与、脳室内投与、静脈内投与、口腔投与、腹腔内投与、眼内投与、中心静脈投与、筋肉内投与又は移植用に製剤される。
【００５５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、生理食塩水、油、エタノール、及びそのようないずれかの組み合わせを含む。
【００５６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的に許容可能な担体または賦形剤が、脂質系製剤、リポソーム製剤、ナノ粒子製剤、ミセル製剤、水溶性製剤、又は上述のいずれかを生物分解性重合体中に含む。
【００５７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが上記式を有する。
【００５８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである。
【００５９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、テトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡである。
【００６０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである。
【００６１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡである。
【００６２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、ＮＤＧＡ以外である。
【００６３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記方法が、少なくとも二つのカテコールブタンを投与する工程を含む。
【００６４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記二つのカテコールブタンが、実質的に同時に投与される。
【００６５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記二つのカテコールブタンが、異なる時間に投与される。
【００６６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記二つのカテコールブタンが、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ、トリ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ及びテトラ-ジメチルグリシニルＮＤＧＡから成るグループから選択される。
【００６７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記ナノ粒子製剤が、ポリ（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリビニルアルコール、ｄ−α−トコフェリル  ポリエチレングリコール  １０００  コハク酸塩、及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）−モノメトキシ−ポリ（ポリエチレングリコール）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００６８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記リポソーム製剤が、ホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、ジステアロイルホスファチジルコリン／コレステロール／ＰＥＧ−ＤＰＰＥ、及び１−２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン／１−２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−rac−（１−グリセロール）ナトリウム塩／コレステロール／トリオレイン／トリカプリリンから成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００６９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記方法が、前記組成物を一度以上投与する工程を含む。
【００７０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、水性製剤である。
【００７１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、疎水性製剤である。
【００７２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記疎水性製剤が、脂質系溶媒を含む。
【００７３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、ヒマシ油、ピーナッツ油、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、及びその他の食事性脂肪又は油から成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００７４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、錠剤、散剤、ゲルカプセル剤、液剤及び洗口液から成るグループから選択される少なくとも１つの形態に製剤される。
【００７５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、重合体製剤を含む。
【００７６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記重合体製剤が、生物分解性重合体製剤である。
【００７７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記薬学的に許容可能な担体又は賦形剤が、一定時間に渡って、高い局所的薬剤濃度と持続的放出を許容する。
【００７８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記重合体製剤が、１，３−ビス（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン、セバシン酸、ポリ（エチレン−ｃｏ−酢酸ビニル）及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から成るグループから選択される少なくとも１つを含む。
【００７９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、投与前に、食塩水、ＤＭＳＯ又はエタノールに溶解される。
【００８０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、散剤、煙霧剤、水性製剤、リポソーム製剤、ナノ粒子製剤、及び疎水性製剤から成るグループから選択される少なくとも１つである。
【００８１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、所定時間に渡って対象体に毎日投与される。
【００８２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、間欠的に投与される。
【００８３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、前記対象体内に注入される。
【００８４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、水溶性化合物である。
【００８５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、疎水性化合物である。
【００８６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、液剤、煙霧剤、洗口液、懸濁液、錠剤、散剤、又はゲルカプセル剤として製剤される。
【００８７】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、ヒトに対して、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約３７５ｍｇ／ｋｇ以下の範囲で投与される。
【００８８】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲は、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約２５０ｍｇ／ｋｇ以下の範囲で投与される。
【００８９】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約２００ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００９０】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１５０ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００９１】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約１００ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００９２】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約７５ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００９３】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記範囲が、毎投与当たり、約１０ｍｇ／ｋｇ以上で約５０ｍｇ／ｋｇ以下である。
【００９４】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記組成物が、例えば静脈内投与などで、全身投与される。
【００９５】
前記対象の更にもう一つに拠れば、上述した治療方法であって、前記カテコールブタンが、トリ−Ｏ−ＮＤＧＡ又はテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡである。
【００９６】
前記対象の更にもう一つに拠れば、疾患治療用のキットが提供され、これは、上述した薬用組成物と前記組成物の投与の取扱指示とを含む。
【００９７】
本発明のその他の対象、特徴及び利点は、本記載を読むことによって当業者に明らかとなるであろう。そのような他の対象、特徴及び利点も、本発明によって実施されるものと理解される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００９８】
図面の簡単な説明
図１は、異なる時点において異なる投与量のＭ４Ｎを与えられた犬におけるＭ４Ｎ血清濃度を示している。
【００９９】
図２は、脳疾患、障害または症状の治療のための脳への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図である。Ｍ４Ｎは、親水性ＮＤＧＡを示し、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを示す。ＯＤは脳血液関門の浸透性崩壊を示す。ＳＣは、皮下投与を示す。ＩＰは腹腔内投与を示す。ＩＭは、筋肉内投与を示す。
【０１００】
図３は、疾患の治療のための、脳以外の組織への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図である。Ｍ４Ｎは、親水性ＮＤＧＡを示し、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを示す。ＳＣは、皮下投与を示す。ＩＰは腹腔内投与を示す。ＩＭは、筋肉内投与を示す。
【０１０１】
発明の開示
本発明等は、下記の式（式Ｉ）のカテコールブタンを発見した。
【化９】
2006528701.tif 000004
【０１０２】
ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、アルキレン又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルであり、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又は任意の隣接する二つの基が共にジオキシアルキエンであってもよく、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である、が腫瘍、ＨＩＶ、ＨＳＶ及びＨＰＶ以外の疾患、例えば、高血圧、糖尿病、神経変性疾患、障害又は症状、及びその他のウイルス感染の治療のために有用である。そのようなカテコールブタンを、薬剤的に許容可能な担体又は賦形剤と組み合わせて、多様な投与経路用に製剤可能な薬用組成物を作り出すことができる。
【０１０３】
選択的に、本発明の一実施例において、治療される前記疾患は、肥満以外である。更に選択的に、治療される前記疾患は、小膠細胞活性化又は刺激に関連する炎症性疾患以外である。
【０１０４】
本発明者は、ＮＤＧＡ誘導体等のカテコールブタンは、腫瘍の成長を抑制する作用のみならず、その他の代謝性疾患、障害又は症状の治療にも多面発現性の作用を有するという驚くべき発見をした。したがって、本発明は、血中グルコース、血清トリグリセリド、及び血清非エステル型脂肪酸を低減し、インスリン感受性を増大させる方法及び組成物を提供し、前記組成物は、それぞれ、そのような治療を必要とする動物、特にヒト、に投与される場合、少なくとも１つのカテコールブタン（式Ｉ）又はＮＤＧＡ誘導体（式ＩＩ）（いずれかの単数又は複数の前記ＮＤＧＡ誘導体又はＮＤＧＡ、「ＮＤＧＡ化合物」）の実質的に純粋な調製物を含有し、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に、−ＯＨ，低級アルコキシ、例えば、−ＯＣＨ３、低級アシルオキシ、例えば、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、それぞれが同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６が、独立的に、−Ｈ又はアルキルである。本発明の一実施例において、Ｒ５及びＲ６が、共に、−Ｈ又はアルキル、例えば、低級アルキル、例えば、−ＣＨ３又は−ＣＨ２ＣＨ３、とすることができる。前記ＮＤＧＡ化合物は、ＩＩ型真性糖尿病等の糖尿病治療のために有用である。
【０１０５】
本発明者は、更に、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンは、血圧の低減に効果的であり、かつ、血管収縮期および拡張期の全身性および肺性高血圧症などの、高血圧症の治療に有用であるということも見出した。本発明者は、又、前記ＮＤＧＡ化合物は、摂食量の抑制に有効であり、肥満の治療のために対象体に投与することができる、ということも見出した。
【０１０６】
本発明者は、更に、前記ＮＤＧＡ誘導体等の前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンは、神経変性疾患、障害又は症状の治療にも有効であることを発見した。従って、本発明は、ＮＤＧＡ誘導体を含有する組成物、及びそのような組成物を神経変性疾患、障害又は症状、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、痴呆、精神機能障害、記憶喪失、健忘症及び注意欠陥等の治療のために使用する方法にも関する。
【０１０７】
本発明の一実施形態において、前記カテコールブタンは、上記式を有し、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、そしてＲ７、Ｒ８及びＲ９は、独立的に、−Ｈ、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である。
【０１０８】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ、低級アルキル、低級アシル、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であり、Ｒ３、Ｒ４が、独立的に、低級アルキルであり、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３が、独立的に、−Ｈであり、Ｒ８及びＲ９は、独立的に、−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩である。
【０１０９】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３又は−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【０１１０】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３又は−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又はその塩である。
【０１１１】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２とは、独立的に、−ＣＨ３、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は、−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−であり、そしてＲ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２又は−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ＋Ｈ（ＣＨ３）２．Ｃｌ−である。
【０１１２】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、前記カテコールブタンがＮＤＧＡではないことを条件として、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−Ｈ又は−ＣＨ３であり、そしてＲ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＨ又は−ＯＣＨ３である。
【０１１３】
本発明の更に別の実施形態において、前記薬用組成物は上記式を有し、ここで、Ｒ１及びＲ２が、独立的に、−ＣＨ３であり、Ｒ８及びＲ９が、独立的に、−ＯＣＨ３である。
【０１１４】
本発明の更に別の実施形態において、前記カテコールブタンはＮＤＧＡである。本発明の更に別の実施形態において、前記カテコールブタンはＮＤＧＡ以外である。
【０１１５】
【化１０】
2006528701.tif 000005
【０１１６】
本発明者は、少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体の実質的に純粋な調合物を含む組成物が腫瘍、ＨＩＶ感染、ＨＳＶ感染又はＨＰＶ感染以外の疾患の治療に有効であるという驚くべき発見をした。本発明に適用可能な前記疾患は、乾癬、神経変性疾患、例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病、痴呆、精神機能障害、記憶喪失、又は健忘症を含む。また、本発明は、疾患、例えば、高血圧症、糖尿病、ＨＢＶ、ＥＢＶ、ＪＣウイルス感染、ＨＴＬＶ、水痘帯状疱疹ウイルス感染、アデノウイルス感染、又はパルボウイルス感染のような他のウイルス感染にも利用可能である。ここでの前記ＮＤＧＡ化合物は、上述の式を有し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、−ＯＨ３のような低級アルコキシ、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３のような低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基、又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、そしてＲ５、Ｒ６が、独立的に、−Ｈ又はアルキル、例えば、−ＣＨ３又は−ＣＨ２ＣＨ３のような低級アルキル、を表す。一実施形態において、Ｒ５及びＲ６が、共に、−Ｈ, −ＣＨ３又は−ＣＨ２ＣＨ３とすることができる。
【０１１７】
本発明者等は、前記ＮＤＧＡ化合物を含む、適当な製剤形態の本発明のカテコールブタンが、鼻腔内投与によってそのような治療を必要とする単数又は複数の対象体に安全に投与することができることを発見した。選択的に、そのようなカテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物又は、吸入によって投与することができる。更に選択的に、そのようなカテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物は、経口、口腔、又は眼内投与することができる。更に、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物は、例えば、濯ぐ−そして−吐く治療（rinse-and-spit）における、洗口剤として、一日に単数又は複数回投与することができる。
【０１１８】
本発明者等は、更に、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物は、リポソーム系製剤、ナノ粒子製剤、又は、ミセル製剤として、追加的に、安全に全身的に、例えば、中心静脈への注射等による静脈内、又は腹腔内、間質内、皮下、経皮、筋肉内、動脈内、頭蓋内、又は脳室内によって投与することができるということを発見した。
【０１１９】
更に、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を、そのような治療を必要とする対象体用に、生体内分解性高分子中に埋め込まれた、リポソーム系製剤、ナノ粒子製剤又は、ミセル製剤、又は任意の製剤に製剤することが可能である。例えば、脳への移植が、脳又は神経変性疾患、障害又は症状の治療のために使用することができる。
【０１２０】
本発明の一実施形態において、ここに記載の目的のための投与経路は、非経口（parenteral）投与以外によるものであり、ここで、非経口投与とは、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下、経皮、及び腹腔内投与を意味する。
【０１２１】
本発明は、更に、上述した、非限定的に、乾癬、神経変性疾患、高血圧症、糖尿病、及びウイルス性疾患など非癌性増殖性疾患を含む上述した疾患の治療のための、カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を含有する薬用組成物に関し、ここで、前記組成物は、例えば、錠剤、親水性又は疎水性のいずれかである液剤、凍結乾燥から生じるものなどの散剤、煙霧剤、の形態で、又は、水性水溶性組成物、疎水性組成物、リポソーム組成物、ミセル組成物、例えばＴｗｅｅｎ８０又はジブロック共重合体をベースとするもの、ナノ粒子組成物、重合体組成物、シクロデキストリン錯体組成物、エマルジョン、「リポコア（lipocores）」と称される脂質系ナノ粒子、の形態で、上述の送達又は投与用に製剤される。
【０１２２】
本発明は、更に、本発明の前記薬用組成物を製造する方法を提供し、前記方法は、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を実質的に純粋な形態で製造又は提供する工程と、前記組成物を薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と組み合わせる工程と、前記組成物を、所望の投与形態に適合するように製剤する工程とを含む。
【０１２３】
本発明は、更に、非限定的に、鼻腔内投与、吸入、経口投与、静脈内投与、腹腔内投与、及びその他の非経口投与、又は、洗口剤等、を含む上述した投与のために製剤される組成物である、疾患の治療のための、上述した組成物又は製剤と、そのような投与のための取扱指示とを含む、キットを提供する。
【０１２４】
特に別の定義がされない限り、ここに使用される全ての技術及び科学用語は、本発明が属する技術の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本発明は、以下の特定の意味に鑑みてより良く理解されるであろう。
【０１２５】
定義
ここでの使用において「活性剤」、「化合物」及び「薬剤」という用語は、ＮＤＧＡ及びＮＤＧＡ誘導体を含む単数又は複数のカテコールブタンを意味する。
【０１２６】
ここでの使用において「ジオキシアルキレン」という用語は、ジオキシメチレン（又は置換メチレン）、又はジオキシエチレン（又は置換エチレン）を意味する。
【０１２７】
ここで、前記カテコールブタンに関する式中のＲ基の１つに言及して使用される「アミノ酸残基又はその置換物又は塩」という用語は、非限定的に、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニールアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、５−ヒドロキシリジン、４−ヒドロキシプロリン、チロキシン、３−メチルヒスチジン、ε−Ｎ−メチルリジン、ε−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルリジン、アミノアジピン酸、γ−カロキシグルタミン酸、ホスホセリン、ホスホトレオニン、ホスホチロシン、Ｎ−メチルアルギニン、Ｎ−アセチルリジン、及びＮ，Ｎ−ジメチル置換アミノ酸残基又はその塩、例えば塩化物塩を含む、アミノ酸残基、置換アミノ酸残基、またはアミノ酸残基の塩又は置換アミノ酸残基の塩である。
【０１２８】
「低級アルキル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【０１２９】
「低級アシル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アシルを意味する。
【０１３０】
「ＮＤＧＡ化合物」という用語は、ＮＤＧＡおよび／又はＮＤＧＡ誘導体、を別々又は総称的に意味する。
【０１３１】
「ＮＤＧＡ誘導体」という用語は、それぞれが下記の式を有するＮＤＧＡの誘導体を意味する。
【０１３２】
【化１１】
2006528701.tif 000006
【０１３３】
ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が、独立的に−ＯＨ、低級アルコキシ、低級アシルオキシ、又はアミノ酸残基又はその置換物又は塩であるが、夫々が同時に−ＯＨではなく、Ｒ５、Ｒ６が、独立的に、−Ｈ又は低級アルキルのようなアルキルである。前記用語は、例えば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４が、それぞれ−ＯＣＨ３、又は、それぞれが−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３であり、そしてＲ５、Ｒ６が、それぞれが−Ｈ又は−低級アルキルである組成物を含む。本発明の一実施形態において、Ｒ５、Ｒ６が、それぞれ−ＣＨ３又は−ＣＨ２ＣＨ３である。
【０１３４】
ここで、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物に言及する「実質的に純粋な」化合物とは、本発明の前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物ではない化合物（以下、「非ＮＤＧＡ物質」）を実質的に含まないものを意味する。実質的に含まないとは、少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７０％、更に好ましくは少なくとも８０％、更に好ましくは少なくとも９０％が非ＮＤＧＡ物質を含まないことを意味する。
【０１３５】
ここでの使用に適した「緩衝剤」は、トリス、リン酸、イミダゾール、重炭酸塩、等の当該技術における任意の従来の緩衝剤を含む。
【０１３６】
ここでの使用において、「治療」、「治療する」等の用語は、所望の薬理学および／又は生理学的効果を得ることを意味する。前記効果は、症状、疾患又はその徴候を完全又は部分的に防止する意味において予防的なものであってよく、及び／又は、症状又は疾患及び／又はその症状又は疾患に起因する有害作用の部分的又は完全な治癒の意味において治療的なものであってもよい。従って、「治療」は、哺乳動物、特にはヒト、の症状又は疾患の任意の治療をカバーし、（ａ）そのような症状または疾患を生まれつき有するかもしれないが、まだそれ有するものと診断されたことのない対象体においてそのような症状又は疾患が発生することを防止すること、（ｂ）そのような症状又は疾患の抑制、例えば、その発達の阻止、そして（ｃ）そのような症状又は疾患の緩和、軽減又は改善、例えば、そのような症状又は疾患の緩解、を含む。
【０１３７】
「薬剤的に許容可能な担体」とは、任意の従来タイプの、非毒性固体、半固体、液体充填剤、希釈剤、カプセル剤化剤、又は補助製剤を意味する。「薬剤的に許容可能な担体」は、使用される投与量及び濃度で受容者に対して非毒性であり、前記製剤のその他の成分と互換性のものである。例えば、本発明のカテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物を含有する製剤用の担体は、酸化剤や、そのようなものに対して有害であることが知られているその他の化合物を含まない。適当な担体は、非限定的に、水、ブドウ糖、グリセロール、生理食塩水、エタノール、緩衝剤、ジメチルスルホキシド、Cremaphor EI、及びこれらの組み合わせ、を含む。前記担体は、湿潤剤又は乳化剤又はｐＨ−緩衝剤、等の追加の物質を含むことができる。必要であれば、酸化防止剤、湿潤剤、粘度安定化剤、その他類似の物質を添加することができる。
【０１３８】
ここで、薬剤的に許容可能な塩は、例えば、塩酸塩やリン酸塩などの無機酸塩、又は、酢酸、マンデル酸、シュウ酸、酒石酸等の有機酸によって形成される酸付加塩（ポリペプチドの遊離アミノ基で形成される）を含む。前記遊離カルボキシル基で形成される塩は、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、又は水酸化鉄などの無機塩、及び、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、２−エチルアミノエタノール及びヒスチジンなどの有機塩から導くこともできる。
【０１３９】
「薬剤的に許容可能な賦形剤」という用語は、容易に大衆にとって入手可能な、当該技術において従来のものなどの、溶媒（vehicle）、アジュバント、又は希釈剤、又はその他の補助物質、を含む。例えば、薬学的に許容可能な補助物質には、ｐＨ調整及び緩衝剤、緊張調整剤、安定化剤、湿潤剤等を含む。
【０１４０】
ここで、互換的に使用される「対象体」、「ホスト」及び「患者」は、本発明の組成物によって治療される動物を称し、非限定的に、猿、ヒト、ネコ、イヌ、ウマ、げっ歯類、ウシ、ブタ、羊、ヤギ、哺乳家畜動物、哺乳スポーツ動物、哺乳ペット動物を含む。
【０１４１】
本発明を更に記載する前に、本発明は、ここに記載される実施形態に限定されるものではなく、勿論、改変可能である、と理解される。又、ここで使用される用語は、特定の実施形態を記載する目的のものであって、本発明の範囲は貼付のクレームによってのみ限定されるものであることから、限定を意図するものではないことも理解される。
【０１４２】
ある範囲の値が提供される場合、特に明確に記載されていない限り、その範囲の上限と下限との間の、下限の単位の１／１０までの各中間値、及び、その記載におけるいずれかの他の記載又は介入値が本発明の範囲に含まれると理解される。これらのより小さな範囲の上限及び下限は、その記載の範囲から特に具体的に除外されている限界値を除き、独立的にその小さな範囲に含まれ、従って、本発明の範囲に含まれる。記載の範囲がそれらの限界値の一方又は両方を含む場合、それらの含まれる限界値の一方又は両方を除く範囲も、本発明に含まれる。
【０１４３】
特許、特許出願、及び定期刊行物の記事を含む、ここに記載する全ての刊行物は、それらもここに参考文献として合体させるその中において引用されている文献を含めて、その全体がここに参考文献として合体される。
【０１４４】
ここでの使用において、“a”，“an”，“the”の単数形は、文脈からそうでないことが明らかである場合を除き、複数形も含むものであることが銘記されなければならない。したがって、例えば、“a compound”（「化合物」）は、複数のそのような化合物を含み、“the NDGA Compound” （「ＮＤＧＡ化合物」）は、単数又は複数のＮＤＧＡ化合物と、当業者に知られているそれらの均等物とに対する言及を含む。
【０１４５】
ここに記載の刊行物は、本出願の出願前にそれらを開示することを唯一の目的として提供されるものである。ここに記載のいずれも、本発明が前の発明によってそのような刊行物よりも以前のものである権利を有さないことの自白として解釈されてはならない。更に、提供される刊行物の日付は、独立的に確認を必要するかもしれない実際の公開日とは異なっているかもしれない。
【０１４６】
以下に記載する発明は、例示的にのみ提供されるものであって、いかなる意味においても本発明を限定するものと解釈されるものではない。
【０１４７】
カテコールブタンの調製
本発明のカテコールブタンは、任意の従来方法によって調製することができる。例えば、そのような化合物は、米国特許５，００８，２９４号に記載されているように調製することができる。
【０１４８】
ＮＤＧＡ化合物の調製
前記ＮＤＧＡ化合物及びその製剤は、任意の従来式の方法によって製造することができる。例えば、前記ＮＤＧＡ化合物は、米国特許５，００８，２９４号（ジョーダン（Jordan）他，１９９１年４月１６日発行）、米国特許６，２９１，５２４号（フアン（Huang）他、２００１年９月１８日発行）、フー，ジェイ・アール（Hwu, J.R.）(1998）又はマクドナルド，アール・ダブリュ（McDonald, R.W.）他 (2001）に記載されているように製造することができる。
【０１４９】
本発明の一実施形態において、ＮＤＧＡ化合物、テトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ、メソ−１，４−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）−２，３−ジメチルブタン、又はＭ４Ｎとしても知られている、は、以下のように製造される。反応フラスコ内で、メタノール中にＮＤＧＡと水酸化カリウムとを含む溶液を製造する。次に、この反応フラスコに硫酸ジメチルを添加し、反応を進行させる。反応を水によって最終的に終わらせ、生成物を沈殿させる。この沈殿物を、濾過によって分離し、真空炉内で乾燥させる。次に、この化合物を、塩化メチレンとトルエンの溶液に溶解させ、その後、アルミナカラムを通して精製する。溶媒を、回転蒸発によって除去し、固形物をイソプロバノール中で再懸濁させ、濾過によって分離する。濾滓を真空炉内で乾燥させる。得られたテトラ−Ｏ−メチルＮＤＧＡ（Ｍ４Ｎ）を、前記濾滓をイソプロパノール中で還流させることによって結晶化させ、結晶を濾過によって分離する。
【０１５０】
本発明のいくつかの実施形態において、メソ１，４−ビス[３，４−（ジメチルアミノアセトキシ）フェニル]−（２Ｒ，３Ｓ）−ジメチルブタンとしても知られているＧ４Ｎや、時として、テトラグリシナルＮＤＧＡとしても知られているテトラ−ジメチルグリシニルＮＤＧＡ、等の本発明のある種のＮＤＧＡ化合物、又は、その塩酸塩、及びアミノ酸置換物を有する類似の化合物、も、例えば、米国特許６，４１７，２３４に記載されているもののような従来方法によって調製することができる。
【０１５１】
組成物
本発明は、更に、前記ＮＤＧＡ化合物を含む前記カテコールブタンと、薬剤的に許容可能な担体又は賦形剤とを含有する薬用組成物を含む組成物をも提供する。これらの組成物は、前記カテコールブタン又はＮＤＧＡ化合物の所望の利用法に応じて選択可能な緩衝剤を含むことができ、更に、その意図される利用法に適したその他の物質も含むことができる。当業者は、意図される利用法に適した、多種多様なものが知られている緩衝剤を、容易に選択することができる。いくつかの場合、前記組成物は、多様なものが知られている薬剤的に許容可能な賦形剤を含むことができる。ここでの利用法に適した薬学的に許容可能な賦形剤は、例えば、エイ・ジェンナーロ（A. Gennaro）(1995）；アンセル，エイチ・シー（Ansel, H.C.）他 (1999）；およびキッベ，エイ・エイチ（Kibbe, A.H.）(2000）を含む、種々の刊行物に記載されている。
【０１５２】
ここでの前記組成物は、想定される投与形態に応じて製剤される。従って、もしも組成物が鼻腔内又は吸入によって投与されることが意図される場合、例えば、前記組成物を、そのような目的のために、従来行われているように、散剤又は煙霧剤に変えることができる。例えば、経口又は非経口投与などのその他の製剤も、従来と同様に使用される。
【０１５３】
ここでの投与用の組成物は、液剤、懸濁剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、持効性製剤又は散剤の形態とすることができる。
【０１５４】
治療法
本発明の前記ＮＤＧＡ化合物を含む前記カテコールブタン組成物は、乾癬、神経変性疾患、症状又は障害、高血圧症、糖尿病等の非癌性増殖性疾患を有する対象体に対する治療を提供することが望まれる状況、そして、ＨＩＶ，ＨＰＶ又はＨＳＶ以外のウイルス性疾患、例えば、ＨＢＶ、ＥＢＶ、ＨＴＬＶ、水痘帯状疱疹ウイルス感染、ＪＣウイルス感染、アデノウイルス感染、又はパルボウイルス感染等に対して治療を提供することが望まれる状況に、治療剤として使用される。
【０１５５】
本発明の方法によって、ヒト及びヒト以外の動物を含む、多様な動物ホストを治療することが可能である。一般に、それらのホストは、「哺乳類（mammal）」又は「哺乳類のもの（mammalian）」であり、ここで、これらの用語は、食肉目（例えば、犬と猫）、げっ歯目（例えば、モルモット、マウス及びラット）、及び、ウシ、ヤギ、馬、羊、ウサギ、ブタ、霊長類（例えば、ヒト、チンパンジー及びサル）を含むその他の哺乳類を含む、哺乳類のものに含まれる生物である。多くの実施形態において、前記ホストはヒトとされる。動物モデルは、ヒトの疾患の治療用のモデルの提供などの、実験調査のために興味深い。更に、本発明は、獣医的ケアにも適用可能である。
【０１５６】
製剤、投与量、及び投与経路
上述したように、有効量の前記活性物質が前記ホストに投与され、ここで、「有効量」とは、所望の結果を作り出すのに十分な投与量を意味する。いくつかの実施例において、前記所望の結果は、神経変性疾患、高血圧症、糖尿病、及びウイルス感染の低減又は進行の抑制である。
【０１５７】
通常、本発明の前記組成物は、前記活性成分、即ち、ここに記載の前記ＮＤＧＡ化合物を含む前記カテコールブタン、を、約１％以上約９９％まで、含むことになり、選択的に、本発明は、前記活性成分を約５％以上約９０％まで含むことになる。適当な投与量は、投与されるべき適切な投与量は、例えば、対象体の一般的健康状態、対象体の年齢、疾患または症状の状態、対象体の体重、損傷の寸法等、治療されるべき対象体に依存する。一般に、約０.１ｍｇ〜約５００ｍｇ以下を子供に投与することができ、そして、より一般的には、約０.１ｍｇ〜約５グラム以下を、成体に対して投与することができる。前記活性剤は、単回の投与、より一般的には、複数回の投与で投与することができる。所与の薬剤の好適投与量は、種々の手段によって当業者によって容易に決定することができる。その他好適な投与量は、用量反応曲線を形成するルーチン的試みを介して当業者によって容易に決定可能である。薬剤の量は、勿論、使用される特定の薬剤に応じて異なるであろう。
【０１５８】
投与量と同様、活性剤の投与の頻度は、年齢、体重、疾患状態、健康状態及び患者の反応性に基づき、介護人によって決定されるであろう。従って、これらの薬剤は、毎日、毎週、毎月、或いは従来式決定によって、単数又は複数回数投与することができる。これら薬剤は、数日間、数週間、数ヶ月間、間欠的に投与し、その後は、３ヶ月間や６ヶ月間などの一定期間が経過するまで、投与されず、更に、その後、再び、数日間、数週間、数ヶ月間、投与することができる。
【０１５９】
本発明の前記カテコールブタン又は活性剤は、種々の治療投与のための製剤に組み込むことができる。より具体的には、本発明のカテコールブタンは、適当な、薬学的に許容可能な担体、又は希釈剤と組み合わせて薬用組成物に製剤することができ、錠剤、カプセル剤、散剤、煙霧剤、リポソーム、ナノ粒子、顆粒剤、軟膏剤、液剤、座薬、注射、吸入剤、煙霧剤等、固体、半固体、液体、又は気体形状で製剤中に製剤することができる。
【０１６０】
従って、前記活性剤の投与は、経口、口腔、直腸、鼻腔内、静脈内、動脈内、導管内、脳室内、頭蓋内、間質内、経皮等の様々な方法で、あるいは、吸入又は移植、によって達成することができる。
【０１６１】
具体的には、ナノ粒子、ミセル及びリポソーム製剤を、非経口投与と鼻腔内投与を含む、全身投与によって、更に、薬剤標的化、薬剤の生物学的利用能の増強、薬剤の生理活性及び安定性の保護などのために、経口投与、局所投与、経皮投与で、吸入又は移植を介して、投与することができる。ここでのナノ粒子結合薬剤は、生体内において延長された薬剤保持を達成することが期待される。
【０１６２】
医薬品投与形態において、前記活性剤は、それらの薬学的に許容可能な塩の形態で投与することができ、又は、単体あるいは、その他の適当な薬学的に許容可能な活性化合物との会合、組み合わせ形態でとすることができる。以下の方法及び賦形剤は、単なる例示的なものであり、いかなる意味においても限定的なものではない。
【０１６３】
経口投与のために、前記活性剤は、単体で、又は、適当な添加物、例えば、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ又はポテトスターチなどの従来の添加剤、結晶セルロース、セルロース誘導体、アラビアゴム、コーンスターチ、又はゼラチンなどの結合剤、コーンスターチ、ポテトスターチ、カルボキシルメチルセルロースナトリウム等の崩壊剤、タルクやステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、そして所望の場合、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、及び香料、と組み合わせて、使用して、錠剤、散剤、顆粒剤、又はカプセル剤を製造することができる。洗口剤用として、その調製物は、例えば、エプスタイン，ジェイ・ビー（Epstein, J.B.）他 (2002)及びピッテン，エフ（Pitten, F.）他 (2003)に記載されているように、従来方法によって作成することができる。
【０１６４】
溶媒（vehicle）、アジュバント、担体又は希釈剤などの薬学的利用可能な賦形剤は、従来のものである。適当な賦形溶媒は、例えば、水、生理食塩水、ブドウ糖、グリセロール、エタノールなど、そしてそれらの組み合わせである。更に、所望の場合、前記溶媒は、ｐＨ調節および緩衝剤、張度調節剤、安定化剤、湿潤剤、又は乳化剤などの補助物質を少量含むことができる。そのような投与形態を調製するための実際の方法は、当業者に知られているか、又は明らかであろう。例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, イートン、ペンシルベニア、第１７版、１９８５を参照。投与される前記組成物又は製剤は、いずれの場合も、治療される対象体において望ましい状態を達成するのに適切な薬剤を一定量含むことになる。
【０１６５】
前記活性剤は、それらを、水溶液又は、コーン油、ひまし油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸又はプロピレングリコールのエステル、等の植物又はその他類似の油等の非水性溶液中に、所望の場合は、可溶化剤、等張剤、懸濁剤、乳化剤、安定化剤、保存剤などの従来式添加物と共に、溶解、懸濁又は乳化することによって、注射用の製剤に製剤することができる。
【０１６６】
前記活性剤は、吸入によって投与される煙霧剤製剤に利用することができる。本発明の前記化合物は、ジクロロジフロロメタン、プロパン、窒素のような加圧された許容可能な噴霧剤に製剤することができる。
【０１６７】
更に、前記活性剤は、乳化基材や水溶性基材などの種々の基材と混合することによって座薬にすることができる。本発明の前記化合物は、座薬を介して直腸投与することができる。前記座薬は、体温では溶けるが、室温では固体状態の、ココアバター、カーボワックス、ポリエチレングリコール、等の溶媒を含むことができる。
【０１６８】
シロップ、エリキシル、及び懸濁剤等の経口又は直腸投与用の単位投与形態を提供することができ、ここで、例えば、茶さじ一杯、匙一杯、錠剤又は座薬などの各投与単位は、単数又は複数の阻害剤を含有する前記組成物を所定量含有する。同様に、注射又は静脈内投与用の単位投与形態は、前記阻害剤（単数又は複数）を、組成物中に、滅菌水、通常の生理食塩水、又は、別の薬学的に許容可能な担体中の溶液として含むことができる。
【０１６９】
ここでの使用において「単位用量形態」という用語は、ヒト及び動物の対象体用の単位用量として適切な身体的な別個の単位を規定するものであり、各単位が、薬学的に許容可能な希釈剤、担体又は溶媒との組み合わせで、所望の作用を作り出すのに十分であると計算された所定量の本発明の化合物を含有している。本発明の新規な単位用量形態の仕様は、使用される特定の化合物、達成されるべき作用、ホスト内の、各化合物に関連する薬物動態学、に依存する。
【０１７０】
本発明は、前記活性剤を複数又は単位用量含むキットを含む。そのようなキットにおいて、複数又は単位用量の前記カテコールブタン又は前記ＮＤＧＡ誘導体を含有する組成物を含む容器に加えて、対象病理状態の治療に於ける薬剤の使用法及び付随する有用性を記載した説明書を備えた情報添付文書が含まれる。
【０１７１】
ここでの記載は、ＮＤＧＡ，ＮＤＧＡ化合物又は誘導体に言及するものではあるが、これらは本発明のある種のカテコールブタンの具体例を例示するものである、と理解される。
【０１７２】
ナノ粒子（“ＮＰ”）の調製
本発明は、ＮＰ製剤としてＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの製剤を含む。ここでの使用に適した様々なＮＰ製剤を、投与方法に応じて製造することができる。前記ＮＰ製剤は、分子量、共重合体比率、薬剤添加（drug loading）、マイクロ粒子寸法、多孔度、製造条件、を制御することによって、所望の薬剤放出プロファイルに基づいて、異なるものとすることができる。前記ＮＰ製剤は、又、製造工程に使用される重合体、安定化剤、及び界面活性剤に基づいても、異なるものとすることができる。異なる賦形剤によっても、薬剤吸収、体内での薬剤分布、血漿中での薬剤の残留率、に対して異なる影響を与えることができる。当業者は、所望の性質又は特性を決定することができ、従って、使用される適切なＮＰ製剤を決定することができるであろう。
【０１７３】
前記ＮＰの重合体マトリクスは、生体適合性、生物利用能、物理的強度及び処理の容易性、の要件を満たさなければならない。この目的のために最も良く知られている重合体は、生物分解性ポリ（ラクチド−co−グリコリド）（“ＰＬＧＡ”）である。
【０１７４】
ここでのＮＰは、任意の従来方法によって製造することができる。一実施形態において、ＮＰは、例えばロックマン，ピー・アール（Lockman, P.R.）他（2002）に記載されているようにして製造することができる。製造方法の種類は、例えば、エマルジョン重合、界面重合、脱溶媒和蒸発、溶剤析出、を含む。
【０１７５】
ここでのＮＰを製造するエマルジョン重合法において、この重合法は、例えば、クロイター，ジェイ（Kreuter, J.）(1994）に記載されているように、単一の単量体単位から重合体の鎖を構築することからなる。重合は、例えば、高エネルギー照射、ＵＶ光またはヒドロキシルイオンを使用することによって、フリーラジカル又はイオン形成のいずれかによる、惹起後に、室温で自発的に起こる。重合が完了すると、溶液を濾過し中和する。重合体は約１００〜１０７の重合体分子からなるミセルと小滴を形成する。この方法において、界面活性剤と安定化剤は一般に不要である。又、この方法は、水相ではなく、有機相中で達成することができる。
【０１７６】
ここでのＮＰは、例えば、クーリ，エイ・エル（Khouri, A.L.）他 (1986）に記載されているような界面重合法によっても製造することができる。この方法において、単量体を使用して重合体を形成し、水及び有機相が、高トルク機械的攪拌下での均質化、乳化、又は微少溶液操作によって互いに混合される時に重合が起こる。例えば、前記ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンを含有するポリアルキルシアノアクリレートのナノカプセル剤を、親油性ＮＤＧＡ化合物と前記単量体とを、有機相中で組み合わせ、この組み合わせを油中で溶解し、絶え間なく攪拌しながら、この混合物をゆっくりと、小管を通して水相に添加することによって製造することができる。これにより、前記単量体は、陰イオン重合によって２００〜３００ｎｍのカプセル剤を自然に形成することができる。この方法の１変形例は、例えば、フェッシ，エイチ（Fessi, H.）他 (1989）に記載されているように、前記単量体と前記薬剤とを含む前記有機相に、安息香酸ベンジルと、アセトンと、リン脂質との溶剤混合物を添加するものである。これによって、薬剤がカプセル剤化され、それが標的組織に到達するまで分解に対して保護された製剤が作り出される。
【０１７７】
アルブミンやゼラチンなどの巨大分子を、ＮＰの製造において油変性及び脱溶媒和工程に使用することができる。油エマルジョン変性工程において、大きな巨大分子は、均質化によって有機相に捕捉される。一旦捕捉されると、前記巨大分子は、絶え間ない攪拌を受けている水相にゆっくりと導入される。次に、二つの非混和性相の導入によって形成されるナノ粒子を、アルデヒド等との架橋化、又は熱変性によって硬化させることができる。
【０１７８】
或いは、巨大分子は、「脱溶媒和」によってもＮＰを形成することができる。この脱溶媒和工程において、巨大分子は、溶媒中に溶解され、その中で巨大分子は、膨潤したコイル状配位内に配置される。次に、膨潤した巨大分子を、ｐＨ、電荷、等の環境を変化させることによって、又は、エタノールなどの脱溶媒和剤を使用することによって、堅いコイルを形成するように誘導する。その後、巨大分子を、アルデヒドへの架橋化によって固定し硬化させる。誘導体が新たに形成された粒子内に捕捉されるように、架橋化の前に前記ＮＤＧＡ化合物は前記巨大分子に対して吸着又は結合することができる。
【０１７９】
固体脂質ＮＰを、高圧均質化によって作り出すことができる。固体脂質ＮＰは、殺菌、オートクレーブ消毒可能であり、制御された放出を提供する固体のマトリクスを有するという利点を有する。
【０１８０】
本発明は、更に、異なる薬剤添加法でのＮＰを含む。ＮＰは、その中に薬剤が均質に分散した固体コロイド状ＮＰとすることができる。ＮＰは、吸着等によって、ＮＰの外側に薬剤が結合された固体ＮＰとすることができる。ＮＰは、その中に薬剤が捕捉されたナノカプセル剤とすることができる。ＮＰは、更に、その内部に、適切な組織への標的投与のための細胞表面リガンドと共に薬剤が均質に分散された固体コロイド状ＮＰとすることができる。
【０１８１】
ＮＰの寸法は、所与の投与態様に対するそれらの有効性に関連しているかもしれない。ＮＰは通常、約１０ｎｍ〜約１０００ｎｍの範囲であり、選択的に、ＮＰは、約３０ｎｍ〜約８００ｎｍの範囲であり、一般的には、約６０ｎｍ〜約２７０ｎｍの範囲であり、更に一般的には、約８０ｎｍ〜約２６０ｎｍの範囲、又は約９０ｎｍ〜約２３０ｎｍ、又は約１００ｎｍ〜約１９５ｎｍである。重合中に使用される溶液のｐＨ、惹起トリガー（熱、放射線、等）の量、前記単量体単位の濃度、等、複数の要因がＮＰのサイズに影響を与え、それらの全ては、当業者によって調節可能である。ＮＰの寸法決定は、光散乱を使用した光子相関分光法によって行うことができる。
【０１８２】
多糖類ＮＰやアルブミンＮＰ等のここでのＮＰは、選択的に、脂質コーティングによってコーティングすることができる。例えば、多糖類ＮＰを、ジパルミトイルホスファチジルコリン及びコレステロールコーティングを含むもの等の、脂質二重層有り又は無しで、リン酸塩（陰イオン性）及び四級アンモニウム（陽イオン性）リガンドと架橋化することができる。その他の重合体／安定化剤は、非限定的に、大豆油、マルトデキストリン、ポリブチルシアノアクリレート、ブチルシアノアクリレート／デキストラン７０ｋＤａ、ポリソルベート８５、ポリブチルシアノアクリレート／デキストラン７０ｋＤａ、ポリソルベート８５、ステアリン酸、ポリメチルメチルアクリレートを含む。
【０１８３】
ＮＰに対する吸着によるものなどの、ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンを含有する前記ＮＰ調製物は、脳、心臓、及び、肝臓、脾臓及び骨髄などの細網内皮細胞（“ＲＥＳ”）含有器官、に、疾患の治療のために静脈投与することができる。これらのＮＰ製剤の細網内皮細胞による望ましくない取り込みを回避するために、前記ＮＰを、界面活性剤によってコーティングしたり、あるいは、磁力反応性材と共に製造したりすることができる。
【０１８４】
従って、選択的に、界面活性剤を前記ＮＰと組み合わせて使用することができる。例えば、ポリブチルシアノアクリレートＮＰを、デキストラン−７０，０００安定化剤と、界面活性剤としてのポリソルベート８０と共に使用することができる。その他の界面活性剤は、非限定的に、ポリソルベート２０，４０又は６０、ポロキサマー１８８、脂質コーティング−ジパルミトイルホスファチジルコリン、エピクロン（Epikuron）２００、ポロキサマー３３８、ポラキサミン（polaxamine）９０８、ポロキサマー４０７、を含む。例えば、ＮＰの、肝臓、脾臓、肺、骨髄のＲＥＳ内への取り込みを減少させるための界面活性剤としてポラキサミン（polaxamine）９０８を使用することができる。
【０１８５】
前記磁力反応性材は、前記ＮＰを製造するための前記組成物に組み込むことが可能なマグネタイト（Ｆｅ３Ｏ４）とすることができる。これらの磁力反応性ＮＰは、磁石によって外部から案内することが可能である。
【０１８６】
別実施形態において、ここでのＮＰは、ムー，エル（Mu, L.）及びフェン，エス・エス（Feng, S.S.）(2003）に記載されているように、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（“ＰＬＧＡ”）とｄ−α−トコフェリル  グリコール１０００コハク酸塩（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ又はＴＰＧＳ）とのブレンドを使用して製造することができる。後者は、マトリクス剤であることに加えて、乳化剤としても作用することができる。
【０１８７】
ミセル形成担体の調製
本発明は、ミセル形成担体に製剤される、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンを含み、ここで、前記ミセルは、従来の方法によって作られる。そのようなものの具体例は、例えば、リッギンズ，アール・ティ（Liggins, R.T.）及びバート，エイチ・エム（Burt, H.M.）(2002）、ツァン，エックス（Zhang, X.）他 (1996）及びチャーチル，ジェイ・アール（Churchill, J.R.）及びハッチンソン，エウ・ジー（Hutchinson, F.G.）(1988）に記載されている。そのような方法の１つにおいて、親水性（ポリエーテル）セグメントと疎水性（ポリエステル）セグメントとを有する両親媒性重合体であるポリエーテル−ポリエステルブロック共重合体がミセル形成担体として使用される。
【０１８８】
別のタイプのミセルは、例えば、トゥザール，ゼット（Tuzar, Z.）及びクラトクヴィル，ピー（Kratochvil, P）（1976）及びウィルヘルム，エム（Wilhelm, M.）他（1991）に記載されているように、親水性セグメントと疎水性セグメントとの両方を有するＡＢタイプのブロック共重合体によって形成され、それらの両親媒性により、水系媒体中においてミセル構造を形成することが知られているものである。これらの重合体系ミセルは、そのミセル内部コア内部に取り込まれる疎水性の薬剤の高い含有率にも拘わらず、満足できる水性安定性を維持することができる。約＜２００ｎｍのサイズ範囲のこれらのミセルは、非選択的なＲＥＳ捕集を減少させるのに有効であり、高い浸透性と保持率を示す。
【０１８９】
更に、例えば、ポリ（ＤＬ−ラクチド）−ｂ−メトキシポリエチレングリコール（ＭｅＰＥＧ：ＰＤＬＬＡ）ジブロック共重合体を、ＭｅＰＥＧ  １９００と５０００を使用して製造することができる。触媒としてオクチル酸スズ（０．２５％）を使用して、１６０℃で３時間反応を進行させることができる。しかし、もしも、反応を約６時間進行させることが許容されるのであれば１３０℃の低い温度を使用することが可能であり、もしも、反応が約２時間だけ行われる場合は、１９０℃の高い温度を使用することが可能である。
【０１９０】
一実施形態において、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド（“ＩＰＡＡｍ”）（興人、東京、日本）とジメチルアクリルアミド（“ＤＭＡＡｍ”）（和光純薬工業、東京、日本）を、コホリ，エフ（Kohori, F.）他 (1998）の方法を使用して、ラジカル重合法でヒドロキシ−末端ポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）を製造するために使用することができる。得られた共重合体は、冷水に溶解させ、１０，０００及び２０，０００分子量カットオフの二つの限外濾過膜を通して濾過することができる。前記重合体溶液は、先ず、２０，０００分子量カットオフの膜を通して濾過される。次に、この濾液を１０，０００分子量カットオフの膜を通して再度濾過する。その結果、低分子量、中分子量、高分子量の三つの分子量画分を得ることができる。次に、前記中分子量画分のポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）の末端ヒドロキシル基からのＤ，Ｌ−ラクチドの開環重合によってブロック共重合体を合成することができる。その結果得られるポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）−ｂ−ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）共重合体を、コホリ，エフ（Kohori, F.）他 (1999）に記載されているようにして精製することができる。
【０１９１】
前記ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンは、透析法によって、同時に調製されるミセル内部コアとミセル内に添加することができる。例えば、ＮＤＧＡ化合物の塩化物塩を、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセタミド（“ＤＭＡＣ”）中に溶解し、トリエチルアミン（“ＴＥＡ”）を添加することができる。ポリ（ＩＰＡＡｍ−co−ＤＭＡＡｍ）−ｂ−ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）ブロック共重合体をＤＭＡＣに溶解し、蒸留水を添加することができる。ＮＤＧＡ化合物の溶液と前記ブロック共重合体溶液を室温で混合し、その後、１２，０００−１４，０００分子量カットオフの透析膜（Spectra／Por（登録商標）２，spectrum Medical Indus., CA. U.S.A.）を２５℃で使用して、蒸留水に対する透析を行うことができる。ＮＤＧＡ化合物を取り込んだポリ（ＩＰＡＡｍ−ｃｏ−ＤＭＡＡｍ）−ｂ−ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）ミセルを、コホリ，エフ（Kohri, F）他 (1999）に記載されているように、２０ｍｍ孔径の精密濾過膜（ANODISCTM, Whatman International）での濾過によって精製することができる。
【０１９２】
ＮＤＧＡ化合物を含有する多小胞リポソームの調製
多小胞リポソーム（“ＭＶＬ”）を、例えば、マントリプルガダ，エス（Mantripragada, S.）(2002）に記載されている二重乳化法などの、任意の公知の方法によって調製することができる。簡単に説明すると、前記二重乳化法において、先ず「油中水」エマルジョンが、少なくとも１つのトリグリセリド等の中性脂肪を含有するリン脂質を、投与単数又は複数の揮発性有機溶剤中に溶解させ、この脂質成分を、非混合性の第１水性成分と、疎水性ＮＤＧＡ化合物などの親水性カテコールブタンに添加することによって作られる。次に、この混合物を、乳化して油水中エマルジョンを形成し、その後、第２の非混合性水性成分と混合し、その後、機械混合して、前記第２水性成分中に懸濁した状態の溶剤小球を形成し、水中油中水エマルジョンを形成する。前記溶剤小球は、その中に溶解した前記ＮＤＧＡ化合物などの、カテコールブタンを備える複数の水性小滴を含んだものとなる。次に、一般的に、蒸発、減圧、又はその懸濁液上又は中にガス流を通過させることによって、前記有機溶剤を前記小球から除去する。溶剤が完全に除去されると、前記小球は、ＤｅｐｏＦｏａｍ粒子などのＭＬＶとなる。前記中性脂肪がこの工程から省略される場合、前記ＭＬＶの代わりに、従来式の多重層小胞又は単層小胞が形成される。
【０１９３】
経口投与用の、ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンの製剤
Ｇ４Ｎ等のような、ＮＤＧＡ化合物などの一部のカテコールブタンは、水溶性親水性化合物である。本発明は、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤中の親水性化合物の製剤と、その化合物の水溶液形態などの、経口製剤などの投与を含み、或いは、前記化合物は、凍結乾燥して散剤として投与したり、錠剤にしたり、又は前記化合物はカプセル剤化することも可能である。
【０１９４】
ここでの前記錠剤は、腸内コーティング錠剤とすることができる。ここでの製剤は、持続効性、遅効性又は速効性製剤とすることができる。
【０１９５】
前記経口製剤中に含まれるＮＤＧＡ化合物などの前記カテコールブタンの量は、対象体に投与される所望の投与量に応じて調整することができる。そのような調整は、当業者の技量範囲内である。
【０１９６】
Ｍ４Ｎ等のような、ＮＤＧＡ化合物などの一部のカテコールブタンは、疎水性又は親油性化合物である。腸内での親油性化合物の吸収は、前記化合物の水性腸管流体内への溶解の速度又は程度を高めることが可能な薬学的に許容可能な担体を使用することによって改善することができる。脂質担体は、例えば、スタッチリック，エム（Stuchlik, M.）及びザック，エス（Zak, S.）(2001）に記載されているように公知である。ここでの製剤は、経口液として投与することができ、或いは、種々のタイプのカプセル剤にカプセル剤化することができる。
【０１９７】
本発明は、一実施形態において、そのような化合物のトリアクリルグリセロール中での溶解による経口投与用に製剤される前記親油性ＮＤＧＡ化合物を含有する製剤を含み、次に、前記製剤は、経口投与用にカプセル剤化される。トリアクリルグリセロールは、グリセロール分子に連結した長鎖および／又は中鎖脂肪酸を有する分子である。前記長鎖脂肪酸は、約Ｃ１４からＣ２４の範囲であり、これらは一般的な脂肪内に見られる。前記中鎖脂肪酸は、約Ｃ６からＣ１２の範囲であり、これらはココナッツ油又はヤシ核油中に見られる。ここでの使用に適したトリアクリルグリセロールは、同じグリセロール分子上にエステル化された、短鎖又は中鎖脂肪酸又はそれらの両方の混合物を含む構造脂質を含む。
【０１９８】
本発明の別実施形態において、単数又は複数の界面活性剤を、ＮＤＧＡ化合物と脂質担体とを含むカテコールブタンの混合物に対して、薬剤が油／界面活性剤の細かい小滴中に存在するように添加することができる。前記界面活性剤は、胃腸流体内での希釈時に前記油性製剤を分散するように作用することができる。
【０１９９】
本発明は、更に、親水性界面活性剤及び油からなるマイクロエマルジョン形態としての、ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの経口投与用製剤を含む。前記マイクロエマルジョン粒子は、安定化された油と薬剤を含有する界面活性剤ミセルとすることができる
【０２００】
ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの、固体脂質ナノ粒子調合物としての製剤も経口投与用に適している。固体脂質ナノ粒子は、例えば、スタッチリック，エム（Stuchlik, M）及びザック，エス（Zak, S.）(2001)に記載されているような、任意の従来方法で作成することができる。
【０２０１】
一実施形態において、前記固体脂質ナノ粒子は、昇温での溶解された脂質の均質化による高温均質化工程によって調製することができる。この工程において、前記固体脂質は、溶融され、ＮＤＧＡ化合物等のカテコールブタンがその溶融した脂質中に溶解される。次に、予め加熱された分散媒体を、その薬剤添加脂質溶融物と混合させ、この組み合わせを、均質化剤と混合して粗製の前エマルジョンを形成する。次に、脂質の溶融点以上の温度で高圧均一化を行い、油／水ナノエマルジョンを製造する。このナノエマルジョンを室温にまで冷却して固体脂質ナノ粒子を形成する。
【０２０２】
本発明の別実施形態において、前記固体脂質ナノ粒子は、低温均質化工程によって調製することができる。この工程において、脂質を溶融し、ＮＤＧＡ化合物などのカテコールブタンをこの溶融した脂質中で溶解させる。次に、その薬剤添加脂質を、液体窒素又はドライアイス中で固化させる。この固体薬剤−脂質を、粉砕機内で粉砕して５０−１００μｍの粒子を形成する。次に、脂質粒子を低温の水性分散媒体中に分散させ、室温又はそれ以下で均質化して固体脂質ナノ粒子を形成する。
【０２０３】
本発明は、更に、ＮＤＧＡ化合物などの親油性カテコールブタンの、経口投与用のリポソーム又はミセルとしての製剤を含む。これらの製剤は、任意の従来方法によって製造することができる。ミセルは、通常、疎水性薬剤が、単分子層上で疎水性領域と結合している脂質単分子膜小胞である。リポソームは、通常、リン脂質二分子膜小胞である。親油性ＮＤＧＡ化合物などの親油性カテコールブタンは、通常、これらの小胞の中心に位置する。
【０２０４】
動脈内投与
本発明は、脳血液関門崩壊（“ＢＢＢＤ”）を伴う、又は伴わない、例えば、ドゥーリトル，エヌ・ディ（Doolittle, N.D.）他 (2000)及びクラフェシー，ティ・エフ（Cloughesy, T.F.）他 (1997)に記載されているような、そして、ドロウガス，ジェイ・ジー（Drougas, J.G.）他 (1998)及びデサイ，ディ・シー（Desai, D.C.）他 (2001)に記載されているような、肝動脈化学閉塞療法等における、閉塞有り又は無しで、従来の動脈内投与用の、前記ＮＤＧＡ化合物を含むカテコールブタンの製剤を含む。簡単な説明すると、ＮＤＧＡ化合物が閉塞によって、動脈内投与される場合、標的部位にいたる主動脈にカテーテルが挿入され、ＮＤＧＡ化合物がカテーテルを通して与えられる。ＮＤＧＡ化合物を標的部位により長い時間保持するために、動脈の塞栓形成が、ポリビニルアルコールのみ、又は、そのコイルとの組み合わせ、を使用して行われる。ＮＤＧＡ化合物の動脈内送達は、水溶性組成物に限られる。Ｇ４Ｎ等の水溶性ＮＤＧＡ化合物、Ｍ４Ｎ等の疎水性ＮＤＧＡ化合物のリポソーム製剤、又は、疎水性のＮＤＧＡ化合物のナノ粒子製剤が、このタイプの送達に特に適している。ここでの薬剤又物質は、動脈内注射に先立って、食塩水に溶解させることができ、そのような注射の前に、ヘパリン処理と鎮静処理を行うことができる。
【０２０５】
従来技術のような脳血液関門（“ＢＢＢ”）の浸透性破壊を、例えば、ドゥーリトル，エヌ・ディ（Doolitle, N.D.）他 (2000), サトー，エス（Sato, S.）他, Acta Neuochir (Wien) 140: 1135-1141, disc 1141-1132 (1998)及びバッタチャージェー，エイ・ケイ（Bhattacharjee, A.K.）他  Brain Res Protocol 8: 126-131 (2001)に記載されているように、ここでの薬剤の動脈内送達に併用することができる。そのような処置を使用して、好ましくは動脈内送達の直前に、薬剤の中枢神経系（“ＣＮＳ”）内への移送を増大させることができる。そのような崩壊のために、カテーテルが、脳へといたる、通常は、浅側頭動脈である、動脈内に挿入され、ＢＢＢがマンニトール溶液によって崩壊される。この侵襲性処置は、通常、患者が全身麻酔されている状態で行われる。このような治療は、抗痙攣薬および／又はアトロピンの事前の水和及び投与を必要するかもしれない。
【０２０６】
鼻腔内投与用のＮＤＧＡ化合物の製剤
本発明は、鼻腔内投与用の、ＮＤＧＡ化合物によって例示されるカテコールブタンの製剤と、その鼻腔内投与とを含む。鼻腔内投与は、静脈内投与によって達成可能であるよりも、脳内での活性剤の濃度を有利に高めることができる。又、この投与形態は、その薬剤を受ける対象体の肝臓と腸とにおける初回通過代謝の問題を回避するものである。
【０２０７】
吸収可能な活性剤の量は、部分的には、血清タンパク質、糖タンパク質、脂質及び電解質の約９５％の水溶液から成る粘液中での薬剤の溶解度に依存する。一般に、活性剤の親油性が増加するにつれて、CSFの薬剤濃度も増加する。例えば、ミン，エイ（Minn, A.）他 (2002）を参照。
【０２０８】
前記親水性ＮＤＧＡ化合物は、生理食塩水、リン酸緩衝液、又はリン酸緩衝生理食塩水などの薬学的に許容可能な担体中で溶解可能である。一実施形態において、例えば、カオ，エイチ・ディ（Kao, H.D.）他 (2000）に記載されているように、ｐＨ７．４の０．０５Ｍリン酸緩衝液を、前記担体として使用することができる。
【０２０９】
本薬剤の鼻腔内投与は、それらの薬剤の投与時に、対象体の位置を調節することによって最適化することができる。例えば、患者の頭部を、直立−９０度、仰臥９０度、仰臥４５度、又は仰臥７０度に様々に位置させて最大の効果を得ることができる。
【０２１０】
前記ＮＤＧＡ化合物の組成物の担体は、薬学的に許容可能で、その組成物の活性物質と適合可能な任意の材料とすることができる。担体が液体である場合、それは、鼻流体に対して、低張又は等張のものであって、約４．５〜約７．５のｐＨ内のものとすることができる。担体が粉体形態である場合、それも、許容可能なｐＨ範囲内である。
【０２１１】
鼻腔内投与用の担体組成物は、選択的に、活性物質の鼻膜をわたって、そして嗅覚神経経路を経由した脳内への吸収を高めることが可能な親油性物質を含むことができる。そのような親油性物質の具体例は、非限定的に、ガングリオシド、及びホスファチジルセリンを含む。例えばミセル形態などの、前記組成物中には、単数又は複数の親油性アジュバントを含ませることができる。
【０２１２】
前記疾患、障害、又は症状の治療のための対象体への投与用の鼻腔内投与用の活性物質の前記薬用組成物は、例えば、Ｕ．Ｓ．６，１８０，６０３に記載されているような、従来方法によって製剤することができる。例えば、ここでの前記組成物は、散剤、顆粒、溶液、煙霧剤、液滴、ナノ粒子又はリポソームとして製剤することができる。前記活性物質に加えて、前記組成物は、適当なアジュバント、緩衝剤、保存剤、塩、を含むことができる。点鼻薬等の溶液は、酸化防止剤、緩衝剤、等を含むことができる。
【０２１３】
移植による投与
前記ＮＤＧＡ化合物によって例示されるここでのカテコールブタンは、前記ＮＤＧＡ化合物を含有する生物分解性ポリマーの移植などの、外科的移植によって治療のために対象体に投与することができる。一実施例において、この治療法は、例えば、フレミング，エイ・ビー（Fleming, A.B.）及びソールツマン，ダブリュ・エム（Saltzman, W.M.），Pharmacokinetics of the Carmustine Implant, Clin. Pharmacokinet, 41: 403-419 (2002)に記載されているようにして、行うことができる。
【０２１４】
したがって、ここで前記生物分解性重合体は、ホスト組織に対する毒性又は有害作用無く間質流体中に溶解する、任意の重合体又は共重合体とすることが出来る。好ましくは、前記重合体又は、この重合体がそれから合成される単量体は、ヒトへの投与がＦＤＡによって認可されているものである。溶解の速度を制御するために、ある単量体の他の単量体に対する比率を増加させる等、解重合の動態を制御するために、互いに異なる溶解特性の単量体を有する共重合体が好ましい。
【０２１５】
一実施形態において、前記重合体は、フレミング，エイ・ビー（Fleming, A.B.）及びソールツマン，ダブリュ・エム（Saltzman, W.M.）， Pharmacokinetics of the Carmustine Implant, Clin. Pharmacokinet, 41：403-419 (2002）及びブレム，エイチ（Brem, H）及びガビキアン，ピー（Gabikian, P.）(2001)に記載されているように、１，３−ビス−（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン及びセバシン酸[ｐ−（ＣＰＰ：ＳＡ）]の共重合体である。別実施形態において、前記重合体は、フー，ジェイ（Fu, J. ）他 (2002）に記載されているように、ポリエチレングリコール（“ＰＥＧ”）とセバシン酸との共重合体である。
【０２１６】
重合体投与システムは、ここでの疎水性ＮＤＧＡ化合物と親水性ＮＤＧＡ化合物との両方の投与に適用できる。これらＮＤＧＡ化合物は、前記生物分解性重合体と組み合わせられ、外科移植される。一部の重合体組成物は、ここでの静脈内又は吸入療法にも使用可能である。
【０２１７】
吸入による投与
前記ＮＤＧＡ化合物によって例示される前記カテコールブタンは、吸入による肺への投与によって、全身的および／又は局所的に投与することが出来る。薬剤の吸入投与は、大きな全身毒性を引き起こすことなく肺組織における高薬剤濃度を達成する方法として、又、薬剤の全身循環を達成する方法として、十分に受け入れられている。そのような製剤を製造するための技術は、従来のものである。肺疾患に対する有効性は、このように投与された疎水性ＮＤＧＡ化合物と親水性ＮＤＧＡ化合物とのいずれかで見ることができる。
【０２１８】
吸入を介した肺投与のために、ここでのＮＤＧＡ化合物は、乾燥散剤、水溶液、リポソーム、ナノ粒子、又は重合体に製剤することができ、例えば、煙霧剤として投与できる。親水性製剤は、肺胞表面を介して、全身投与のために血液流に取り込むことができる。
【０２１９】
一実施形態において、ここでの活性物質を含有する前記重合体は、フー，ジェイ（Fu, J.）他 (2002）に記載されているように作られ、使用される。例えば、ここでの重合体は、セバシン酸とポリエチレングリコール（“ＰＥＧ”）の重合体、又は、ポリ（乳酸−co−グリコール）酸（“ＰＬＧＡ”）、又は、ポリエチレンイミン（“ＰＥＩ”）とポリ−Ｌ−リジン（“ＰＬＬ”）の重合体、とすることができる。
【０２２０】
別実施形態において、吸入投与用のＮＤＧＡ化合物は、チョイ，ダブリュ・エス（Choi, W.S.）他 (2001）に記載されているように、噴霧化の前に生理食塩水又はエタノール中に分解され、投与される。
【０２２１】
更に別の実施形態において、ここでの薬剤は、例えば、パットン，ジェイ・エス（Patton, J.S.）他，Inhaled Insulin, ADv. Drug Deliv. Rev., 35：235-247に記載されているように、任意の従来方法で乾燥散剤として投与される場合も有効である。
【０２２２】
本発明は、前記ＮＤＧＡ化合物を、例えば、ゴンダ，アイ（Gonda, I.）他 (1998）に記載されているように、例えば、SmartMistTMやAEＲxTM等の薬剤投与装置に埋め込まれたマイクロプロセッサの補助で、投与することを含む。
【０２２３】
本開示を読了したあと、当業者は、本発明の製剤の投与によって治療および／又は緩和されるかもしれないその他の病状および／又は症候を認識するであろう。
【実施例】
【０２２４】
以下の例は、当業者に、本発明をいかに調製し使用するかの完全な開示及び説明を提供するものであって、本発明者等が、自らの発明であると見なす範囲を限定するものではなく、下記の実験が全てであるとか、行われた実験はこれらのみであるとかを表すことを意図するものでもない。使用されている数字（例えば、量、温度、等）については正確なものとなるように努力が払われているが、一部との実験上のエラーと誤差については考慮されるべきである。特に銘記されないかぎり、部は重量部であり、分子量は、重量平均分子量であり、温度は、摂氏単位であり、圧力は大気圧又はそれに近いものである。
【０２２５】
例１：テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡの調製用バッチの調製
ここでＭ４Ｎと称されるテトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを、ＮＤＧＡを、例えば、水酸化カリウム等の塩基の存在下で、過剰硫酸ジメチルと反応させることによって合成した。その生成物を、生成物の沈殿を引き起こす水の添加によって分離した。反応生成物を、塩基性アルミナのプラグを通過させて、微量フェノール不純物、主として、種々のジ−Ｏ−メチル及びトリ−Ｏ−メチル−置換ＮＤＧＡ、を取り除いた。反応混合物の溶液を前記アルミナプラグに通過させた後、溶媒を回転蒸発装置で除去し固体生成物を得た。これを、２−プロパノールで粉砕（triturated）し、真空炉で乾燥し、粗製テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを得た。２−プロパノールからの結晶化によって、９９．６６％以上の純度のテトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを得た。
【０２２６】
工程１：テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡの粗製製剤の合成
機械式攪拌装置、冷却器、不活性雰囲気用の入口を備えた２２Ｌのフラスコを冷却浴として使用されるタブ内にセットした。このフラスコを、アルゴン雰囲気下に置き、これに４８４．３グラムのＮＤＧＡ（Western Engineering & Research Co, El Paso, TX）と４８５０ｍＬのエタノールとを入れ、攪拌した。この攪拌されたスラリに、１２１０ｍＬの脱イオン水中の３８７．５グラムの水酸化カリウムの溶液を添加した。この反応混合物を含むフラスコを、氷浴を使用して冷却し、硫酸ジメチル（１２１０ｍＬ）をゆっくりと（滴下）添加した。添加は、発熱を避けるように制御した。この添加の最後において、温度は約１３℃であった。反応のｐＨをモニタし、５０％ＫＯＨ溶液を、塩基性ｐＨを維持すべくその日の間、一部分、添加した：５０％ＫＯＨ溶液の全１４００ｍＬを添加した。過剰塩基の反応混合物は、ｐＨ指示片の使用による検出で約１２のｐＨを示した。溶液は塩基性ｐＨでは暗色であったが、中性又は酸性ｐＨでは淡色に変化した。
【０２２７】
その日の最後に、追加の６００ｍＬの硫酸ジメチルを添加し、その反応混合物を一晩攪拌させた。翌朝、反応物はまだ塩基性であったが、反応は約９０％進行していた。
【０２２８】
前記反応混合物を、４８５０ｍＬの脱イオン水の添加によって急冷し、生成物を沈殿させた。この生成物を、濾過によって分離し、濾滓を、水で完全に洗浄し、その生成物を真空炉で５０℃にて約６５時間乾燥し、５３９．５gの粗製生成物を得た。この生成物を７５０ｍＬの塩化メチレン中で溶解し、この溶液に３７５ｍＬのトルエンを添加した。この溶液を、２２１５gの塩基性アルミナの短いカラムに通した。前記アルミナを、１２，０００ｍＬの塩化メチレン／トルエン溶液（２：１）で溶出させた。溶媒の回転蒸発装置上での真空での除去によって固体残滓が得られた。これを、１Ｌの２−プロパノールによって粉砕（triturated）した。得られたスラリを濾過して固体生成物を分離した。これを真空炉で５０℃、高真空状態で約２１時間乾燥させ、４２６．７g（７４％収率）の粗製テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡを得た。
【０２２９】
工程２：テトラ−Ｏ−メチル−ＮＤＧＡの結晶化
機械式攪拌装置、冷却器、不活性雰囲気用の入口を備えた３Ｌのフラスコを加熱マントルにセットした。このフラスコに４１５．５gの前記生成物を入れた。このフラスコに１２４５ｍＬの２−プロパノールを入れ、攪拌した混合物を加熱し、穏やかな還流を与え、溶液を得た。熱を止め、混合物を一晩冷却させた。結晶生成物を濾過によって分離し、濾過ケーキを２００ｍＬの低温２−プロパノールで洗浄した。この生成物を真空炉内で、５０℃にて高真空状態で４０４．７g（ＮＤＧＡからの７０．５％総収率）まで乾燥させた。
【０２３０】
例２：ＮＤＧＡ化合物を含有するＰＬＧＡナノ粒子の調製
前記ＮＤＧＡ化合物は、任意の従来方法によってナノ粒子製剤として製剤できる。例えば、前記ナノ粒子は、ランプレヒト，エイ（Lamprecht, A.）他（2001a）及びランプレヒト，エイ（Lamprecht, A.）他（2001b）に記載されているように、下記のようにして調製可能である。
【０２３１】
生物分解性重合体  ポリ［ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド］５０／５０（ＰＬＧＡ）（分子量５，０００又は２０，０００）は、和光（大阪、日本）から購入可能である。約４０ｍｇのＮＤＧＡ化合物を、２５０ｍｇの重合体  ポリ[ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド]５０／５０（ＰＬＧＡ）（分子量．５，０００又は２０，０００）を含有する４ｍｌの塩化メチレンに溶解することができる。その後、この溶液を、８ｍｌの水性ポリビニルアルコール溶液（１％）に注ぎ、超音波化装置（Ultrasonic DisruptorモデルＵＲ−２００Ｐ；トミー精工、東京、日本）によって氷浴中で３分間均質化した。塩化メチレンは、減圧下で蒸発させることができ、重合体を沈殿させることができる。非カプセル剤化薬剤と遊離の界面活性剤からナノ粒子を遠心分離（１４，０００ｇ、５分間）によって分離することができる。ナノ粒子は、再分散され、そして、凍結乾燥前に蒸留水中で三回、遠心分離することができる。経口投与前に、ナノ粒子は、ｐＨ６．８のリン酸緩衝液中で再分散させることができる。
【０２３２】
前記ナノ粒子の、粒径分布、表面電位を、光レーザ粒径解析装置（photal laser particle analyzer）ＬＰＡ３１００（大塚電子、大阪、日本）とＺｅｔａｓｉｚｅｒ  ＩＩ（Malvern Instruments, ウースターシャー州、英国）とをそれぞれ使用して分析することができる。ナノ粒子の外形態は、ＪＥＯＬ  ＪＳＭ−Ｔ３３０Ａ走査型顕微鏡（東京、日本）によって分析することができる。
【０２３３】
例３：ＮＤＧＡ化合物を有するＰＬＧＡ／ビタミンＥ  ＴＰＧＳナノ粒子の調製
ＰＬＧＡと別のマトリクス剤，ｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩（ビタミンＥ  ＴＰＧＳ又はＴＰＧＳ）とを含むＮＰを、ムー，エル（Mu, L.）及びフェン，エス・エス（Feng, S.S.）(2003）に記載されているように、改変の水中油の単一エマルジョン溶媒蒸発／抽出法で製造することができる。この方法において、既知量の重合体質量と、ＮＤＧＡ化合物とを塩化メチレン（ジクロロメタン）に添加する。前記重合体、例えば、ポリ−（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド （ＰＬＧＡ；Ｌ／Ｇ＝５０／５０，ＭＷ４０，０００−７５，０００；Ｌ／Ｇ＝７５／２５，ＭＷ９０，０００−１２０，０００及びＬ／Ｇ＝８５／１５，ＭＷ９０，０００−１２０，０００）を、Sigma（USA）から購入することができる。ビタミンＥ  ＴＰＧＳは、Eastman Chemical, USAから入手可能である。全ての原料が溶解されるように前記混合物を攪拌する。次に、有機相の溶液を、乳剤有り又は無しで、攪拌された水溶液にゆっくり注ぎ、同時に５０Ｗパルスモード（Misonix, USA）で超音波処理する。形成されたｏ／ｗエマルジョンを、一晩、磁気攪拌装置で室温（２２℃）にて、ゆっくりと攪拌して前記有機相を蒸発させることができる。得られたサンプルは、１０，０００ｒｐｍ、１０分間，１６℃（Eppendorfモデル５８１０Ｒ，Eppendorf，ハンブルグ、ドイツ）等での遠心分離によって収集することができ、一部のサンプルについては脱イオン水で１回又は２回洗浄することができる。調製された懸濁液を、凍結乾燥（Alpha-２，Martin Christ Freeze Dryers，ドイツ）し、ナノ粒子の細かい粉体を得て、これを真空乾燥器に入れ、そこに保存することができる。
【０２３４】
例４: ＮＤＧＡ化合物を含有するリポソームの調製
前記親油性薬剤等のＮＤＧＡ化合物は、従来方法によって持効性リポソーム中にカプセル剤化することができる。そのような方法のひとつは、例えば、シャルマ，ユー・エス（Sharma, U.S.）他 (1997）に記載されている。
【０２３５】
持効性リポソームは、延長された血液循環時間を有する。それらは、通常、高位相−転移Ｔｍ脂質、高コレステロール含有率で、ホスファチジルイノシトール、モノシアロガングリオシド（ＧＭ１）や、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ） 頭部基を有する合成リン脂質等の、リポソーム表面への血漿タンパク質の接近に対する立体障害を提供する、成分から構成される。
【０２３６】
一例において、ホスファチジルコリン（“ＰＣ”）：コレステロール（“Ｃｈｏｌ”）：ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンに結合したポリエチレングリコール（“ＰＥＧ−ＤＰＰＥ”）を、９：５：１のモル比で含むリポソームを調製することができる。前記脂質を最初、クロロホルム中で混合し、脂質の薄膜を、溶媒の蒸発によって製造することができる。次に、これらの脂質を、ＮａＣｌ（１４５ｍＭ），トリス[ヒドロキシメチル]−２−アミノエタン−スルホン酸（ＴＥＳ：１０ｍＭ）及びエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ：０．１ｍＭ）緩衝液、ｐＨ７．２中からなる緩衝液で水和する。次に、リポソームを、０．０８μｍのポリカーボネートフィルタを介して複数回抽出することができる。
【０２３７】
別の例において、ジステアロイルホスファチジルコリン（“ＤＳＰＣ”）：Ｃｈｏｌ：ＰＥＧ−ＤＳＰＥをモル比９：５：１で含むリポソームを、マッデン，ティ・ディ（Madden, T.D.）他（1990）に記載されているような「遠隔添加（remote loading）」法によって調製することができる。この遠隔装填法は、高濃度のＮＤＧＡ化合物をリポソーム水性コア内にカプセル剤化することを可能にする。簡単に説明すると、脂質の薄膜を、硫酸アンモニウム（２５０ｍＭ，ｐＨ５．５）中で水和することができる。脂質懸濁液を、０.０８μｍのポリカーボネートフィルタを通して６０℃で抽出し、等張のスクロースに対して一晩、透析して遊離の硫酸アンモニウムを除去することができる。親水性ＮＤＧＡ化合物を、１０％（ｗ／ｖ）のスクロース中で水和し、予め形成されたリポソームと、６５℃で１時間インキュベートすることができる。製剤を、等張のスクロースに対して透析して、カプセル剤化されていない薬剤の僅かな残り画分を除去することができる。この方法によって、初発のＮＤＧＡ化合物の９０％以上のカプセル剤化収率を得ることができる。
【０２３８】
ベレスティ，エイ（Belesti, A）他（1999）及びアヴゴウスタキス，ケイ（Avgoustakis, K.）他（2002）に記載されているように、触媒としてオクチル酸スズを使用した真空下での溶融重合法によって、モル比の異なる、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）−モノメトキシ−ポリ（ポリエチレングリコール）（ＰＬＧＡ-ｍＰＥＧ）共重合体を調製することができる。
【０２３９】
例５：ＮＤＧＡ化合物の鼻腔内製剤の調製
前記ＮＤＧＡ化合物は、例えば、マーティン，イー（Marttin, E.）他（1997）に記載されるもののような任意の従来方法によって鼻腔内投与用の乾燥散剤又は煙霧剤として製剤することができる。
【０２４０】
一実施例において、前記ＮＤＧＡ化合物は、ＭＱ水、即ち、Millipore （Etten-Leur，オランダ）のＭｉｌｉ−Ｑ  ＵＦプラス超純粋水システムによって濾過された水に、無作為化メチル化β−シクロデキストリン（“ＲＡＭＥＢ”）（置換度１．８）（Wacker, Burghausen,ドイツ）、マンニトール、又はグルコース、を含む溶液として製剤される。この製剤は、スプレー又は点鼻薬として投与することができる。前記液体製剤中のＮＤＧＡ化合物の投与量は、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５００ｍｇ／ｍｌ、又は、選択的に約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１２００ｍｇ／ｍｌ、更には選択的に、約１００ｍｇ／ｍｌ〜約１０００ｍｇ／ｍｌ、更には選択的に、約２００ｍｇ／ｍｌ〜約８００ｍｇ／ｍｌ、又は、これの範囲内に属する任意の値、とすることができる。これらの液体製剤は、鼻孔内に噴霧したり、点鼻薬として投与したりすることができる。
【０２４１】
別実施例において、本発明は、前記ＮＤＧＡ化合物と、種々の量の、ＲＡＭＥＢ、ラクトース、又はマンニトールをＭＱ水中に溶解させ、その混合物を、例えば、一晩、凍結乾燥させることによって調製される、ＮＤＧＡ化合物の凍結乾燥散剤製剤を含む。
【０２４２】
例６：生物分解性重合体移植片の調製
ここでのＮＤＧＡ化合物は、移植のために生物分解性重合体に組み入れることができる。そのような生物分解性重合体は、例えば、フレミング，エイ・ビー（Fleming, A.B.）及びソールツマン，ダブリュ・エム（Saltzman, W.M.）（2002）に記載されているもののような、任意の従来方法によって製造することができる。この生物分解性重合体の単数又は複数のウエハを、所望の化合物の投与量に応じて、一度に移植することができる。前記重合体の生物分解性マトリクスは、ポリフェプロサン（polifeprosan）２０、１，３−ビス−（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパンとセバシン酸[ｐ（ＣＣＰ：ＳＡ）]の共重合体を２０：８０のモル比で含むものとすることができる。前記重合体を移植用に形成するために、ｐ（ＣＰＰ：ＳＡ）とここでの化合物を、ジクロロメタン中で同時に溶解し、噴霧乾燥させて、約１μｍ〜約２０μｍの寸法範囲の球状粒子を形成することが出来る。その結果得られる「微小球体（microsphere）」を圧縮成形して、任意のサイズ、例えば、直径が約１４ｍｍで厚みが約１ｍｍのウエハを形成することができる。これらのウエハ、小さな空隙に取り囲まれた密につめられた微小球体から成る均質構造を有する。ＮＤＧＡ化合物の濃度は、例えば、３．８％活性化合物など、治療される対象体に適切な任意の量にすることができる。
【０２４３】
例７：ＰＬＧＡ−ｍＰＥＧナノ粒子の調製
前記ＮＤＧＡ化合物を含有するＰＬＧＡ−ｍＰＥＧナノ粒子を、ソン，シー・エックス（Song, C.X.）他（1997）によって記載されている二重エマルジョン法を少し改変した方法を使用して調製することができる。ここで、ＮＤＧＡ化合物の水溶液を、プローブ超音波処理（Bioblock Scientific，モデル７５０３８）を使用して、前記共重合体が溶解されたジクロロメタン中で乳化することができる。この水／油エマルジョンを、コール酸ナトリウムの水溶液に移し、その混合物をプローブ超音波処理することができる。結果形成された水／油／水エマルジョンを、有機相の蒸発が完了するまで、室温でゆっくりと攪拌することができる。このようにして作られたナノ粒子は、遠心分離によって精製し、脱イオン化され蒸留された水で再構成することができる。次に、これらのナノ粒子を、例えば、１.２μｍのフィルタ（Millex AP, Millipore）等を通して濾過することができる。
【０２４４】
例８： ＮＤＧＡ化合物を含有するプルロニックミセルの調製
プルロニックは、トリブロックＰＥＯ−ＰＰＯ−ＰＥＯ共重合体であり、ＰＥＯはポリ（エチレン酸化物）を表しＰＰＯはポリ（プロピレン酸化物）を表す。疎水性の中央のＰＰＯブロックはミセルコアを形成し、側方のＰＥＯブロックは、ミセルを細網内皮系（“ＲＥＳ”）による認識から保護する、シェル又はコロナを形成する。プルロニック共重合体は、BASF Corp,及びICIから市販されている。前記ＮＤＧＡ化合物を、例えば、ラポポート，エヌ・ワイ（Rapoport, N.Y.）他（1999）に記載されているもののような任意の従来方法でプルロニックミセルに導入することができる。
【０２４５】
簡単に説明すると、例えば、Ｇ４Ｎ等の前記ＮＤＧＡ化合物は、ＰＢＳやＲＰＭＩ培地に溶解させ、その後、６７ｋＨｚで作動する超音波処理浴中での短い、例えば１５秒間、の超音波処理を行うことができる。この溶液は、約２時間３７℃で保存し、これにより、溶解されていない薬剤を、１０００Ｄカットオフ膜を通して、３７℃で約１２時間、ＰＢＳ又はＲＰＭＩ培地に対する透析によって除去することができる（透析は、１０ｗｔ％と２０ｗｔ％のプルロニック溶液に対してのみ行われる）。
【０２４６】
例９：移植によるＮＤＧＡ化合物の投与
前記ＮＤＧＡ化合物の移植は、従来方法によって行うことができる。一実施例において、移植は、ブレム，エイチ（Brem, H.）及びガビキアン，ピー（Gabikian, P.）(2001)に記載されているように行われる。更に、脳脊髄液の漏出を無くし、感染のリスクを低減するために、硬膜を水密に閉じるべきである。又、神経学的妥協（neurological compromise）のために必要であれば、術前抗痙攣薬と高投与量ステロイドを使用することも望ましい。更に、ステロイド療法を、術後少なくとも２週間続けることが望ましい。
【０２４７】
例１０：吸入を介したエタノール中のＮＤＧＡ化合物の投与
ここでのＮＤＧＡ化合物は、乾燥散剤や水溶液を含む、任意の従来の製剤を使用して吸入を介して投与することができる。前者は、安定性、微生物の成長に対する低い感受性、及び、ひと吹き当たりの高い質量、の利点を有する。水溶液は、より良好な再現性を提供し、疑集塊の問題を回避する。
【０２４８】
一実施例において、ある種の前記ＮＤＧＡ化合物が、チョイ，ダブリュ・エス（Choi, W.S.）他（2001）に記載の方法によって投与される。特定の化合物及びその溶解性に応じて、前記化合物を、例えば、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１０００ｍｇ／ｍｌ、又は、その任意の中間値、例えば、約２ｍｇ／ｍｌ〜約８００ｍｇ／ｍｌ、約４ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、又は、約５ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、等のエタノール中の適当な濃度で製剤することができる。最大の深い肺投与のために、１−３μｍの粒径の煙霧剤粒子を作り出すことができる。前記化合物のエタノール中のより良好な溶解性のためには、ここでの化合物をまず凍結乾燥し、その後、必要であれば、又は望ましいのであれば、Ｈ３ＰＯ４等で酸性化することができる。その結果得られる組成物のｐＨを、望ましいのであれば、ＮａＯＨによってｐＨ７．４等に調節することができる。その後、得られる組成物を凍結乾燥させ、エタノール中に懸濁させ、超音波処理し、攪拌し、適当なサブミクロン粒径の粒子を製造することができる。次に、煙霧化された化合物を、コンプレッサ（空気噴流）、超音波式又は計量投与量吸入器などの標準的な市販の噴霧器を使用して投与することができる。一例は、ＰＡＲI  ＰＲＯＮＥＢコンプレッサとの組み合わせの、ＰＡＲＩ  ＬＣ  Ｊｅｔ＋噴霧器（PARI Respiratory Equipment,モントレー、カルフォルニア州）である。約９ｍｌの量を前記噴霧器の貯蔵器に投入し、約１０分間まで、噴霧することができる。
【０２４９】
別実施例において、吸入用の製剤は、ワン，ディ・エル（Wang, D.L.）他（2000）に記載されているように調製することができる。例えば、粉末化されたＮＤＧＡ化合物を、１０：９０（ｖ／ｖ）ポリエチレングリコール３００：０．５％（ｗ／ｖ）のアスコルビン酸と０．５％（ｗ／ｖ）のホスファチジルコリンとを含有する、１００％エタノールに溶解させることができる。次に、この薬剤を、ＰａｒｉＬＣ−ｐｌｕｓ噴霧器（Pari, Richmond, VA）を使用して噴霧化し、このようにして発生された煙霧剤に治療対象体を、その薬剤の投与量、達成されることが望まれる濃度、に応じて、異なる時間、晒すことができる。そのような時間は、約５分間、１０分間、１５分間以上とすることができる。
【０２５０】
例１１：特定設計された吸入装置を使用したＮＤＧＡ化合物の投与
前記ＮＤＧＡ化合物は、吸入の目的ためのその他多数の薬学的に許容可能な担体に製剤することができる。この例において、ここでの化合物のいくつかを、エンク，エイ・エイチ（Enk, A.H.）他（2000）に記載の方法によって投与することができる。そのような化合物は、約５％のグルコースと２％のヒトアルブミンとを含有する溶液に溶解することができる。次に、特別に設計された吸入装置を使用して吸入を行うことができる（Jetair, Fa,ホイヤー，ドイツ）。
【０２５１】
例１２：口部損傷の治療のための洗口剤としてのＮＤＧＡ誘導体の投与
口腔に対するＮＤＧＡ誘導体の投与は、例えば、アームストロング，ダブリュ・ビー（Armstrong, W.B.）他 (2000)に記載されているもののような、従来技術である賦形剤を使用した洗口剤としての使用に関する。ＮＤＧＡ誘導体を、使用の直前に、例えば、Roxane Saliva Substitute（Roxane Laboratories, コロンバス、オハイオ）等の適当な投与流体中に再構成された散剤として分散させる。次に、患者は、薬剤混合物を吐き出すか、飲み込む前に、ＮＤＧＡ誘導体懸濁液を約１分間口の中に保持する。この手順が、口腔へのＮＤＧＡ誘導体の局所投与のために、少なくとも一日に一回、行われる。
【０２５２】
或いは、口腔へのＮＤＧＡ誘導体の投与は、エプスタイン，ジェイ・ビー（Epstein, J.B.）他 (2001)に記載されているもののような洗口剤を利用するものとすることができる。簡単に説明すると、前記ＮＤＧＡ誘導体を、約０．１％のアルコールとソルビトールとを含有する洗口剤に調製する。患者は、例えば、一回の濯ぎにつき約５ｍｌ等の、適当な量を与えられ、これで口の中を約１分間濯ぎ、その後、吐き出す。この手順が、口腔へのＮＤＧＡ誘導体の局所投与のために、少なくとも一日に一回、行われる。
【０２５３】
例１３：ヒトにおける安全性の研究
この例において、本発明者等は、ヒトにおけるＮＤＧＡ誘導体投与の、頭部及び頸部癌の治療としての安全性及び有効性を明白に示した。この例は、患者年齢範囲、疾患発達段階、及び二つの異なる治療法にわたる二つの別々の臨床試験の結果を記載するものである。この例によって以下が示された（１）Ｍ４Ｎは、毎週約４９５ｍｇまでの投与量を三週間、又は、一日につき２０ｍｇで、５日間まで、で、薬剤関連毒性無く、投与可能である。この毎日のＭ４Ｎの投与は、Ｍ４Ｎを一日当たり２０ｍｇの投与量で５日間までの、併用療法有り又は無しで行うことができ、その後、病巣の外科的切除が行われる。（２）これらの治療法の両方が、これらの治療を完了した患者における壊死の誘発の点において８０％以上の有効性を提供した。（３）ＵＳ以外での試験（ex-US study）の長期経過追跡において、患者の６４％が、疾患がない状態に維持され、又、ＮＤＧＡ誘導体暴露に対する長期作用も無かった。
【０２５４】
ＵＳ第Ｉ相腫瘍内頭部及び頸部癌試験
第Ｉ相臨床試験が、ＵＳ  ＩＮＤのもとで完了された。平均対象体年齢は、６６歳（５３〜８２歳）であった。８名の男性対象体と１名の女性対象体が参加した。平均体重は１３９ポンド（１０２〜２１９ポンド）であって。すべての患者は、難治の頭部及び頸部癌と診断されていた。
【０２５５】
９名の患者に、Ｍ４Ｎの腫瘍内投与で、毎週、三週間、５ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（２名の対象体）、１０ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（２名の対象体）、１５ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（３名の対象体）、及び２０ｍｇ／ｃｍ３腫瘍体積（２名の対象体）、を投与した。週に４９５ｍｇまで三週間の投与量を投与した。
【０２５６】
３名の対象体はプロトコルによって研究を完了した。２名の対象体は、試験中に、試験投薬と関連する可能性が低いと考えられる原因で死亡した。１名の対象体は、プロトコルの要件を満たすために移動することが出来なかったために、Ｍ４Ｎの３回の投与後に、同意を撤回した。１名は、偶発的な神経周囲投与に関連する注射時の重篤な放散痛を経験した後、同意を撤回した。１名が、その腫瘍が安全な２回目の投与を可能とするには頚動脈に余りにも近いと見なされたために、１回の投与後に撤退された。１名は、腫瘍の進行の結果、撤回された。その他の点では投与に関連する有害事象は僅かなものであり、注射時における軽い又は中程度の痛みを含むものであった（４名の対象体）。Ｍ４Ｎ投与が原因とされるその他の有害事象は無かった。散発性で、そして非再現性の軽いＬＦＴの上昇が２名の対象体で見られ、これらは、まだ治療中に解消した。血液パラメータには、薬剤を原因とする変化は見られなかった。
【０２５７】
６件の重篤な有害事象（ＳＡＥ）が４名の対象体で報告された。これら重篤な有害事象は、上室性頻脈（１名の対象体における２つの別々の場合での２つの発症）、肺炎、脱水、および腫瘍の進行からの死亡（１名の対象体）、及び研究の１９日後の死亡（原因不明）を含むものであった。全症例において、ＳＡＥは、そのような投薬との関係が低い、又は無関係であると見なされた。
【０２５８】
三回の投与を受けた６名の対象体の内の５名において、注射後に薬剤に関連する腫瘍の壊死が起こった。腫瘍の回りの健全な組織には損傷はなかった。瘻孔の形成が、腫瘍が完全な厚さであったところで発生した。腫瘍は、又、やわらかくなった、又は、「平らに延びた」ことも銘記されたが、縁部における残りの腫瘍が成長し続け、このことは全身投与がより適切であるかもしれないということを示唆した。３回の投与を完了した前記６名の対象体のうちの３名において、腫瘍の体積減少が放射線によって確認された。投与量は、一般的に良好に許容された。
【０２５９】
例１４：Ｍ４Ｎの１４日間の静脈内注入後のビーグル犬での安全性の研究
この実験において、オス及びメスのビーグル犬に対するジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の最大耐容量（ＭＴＤ）を測定した。この例は、Ｍ４Ｎが、犬に対して、四時間にわたる静脈内注入で、ＤＭＳＯ賦形剤とともに、１００ｍｇ／ｋｇまで、安全に投与されたことを示している。これらの製剤で、最小の毒性で、１４，０００ｎｇ／ｍｌ  Ｍ４Ｎ以下の血中レベルが達成された。
【０２６０】
Ｍ４Ｎ−ＣＥＴ  グループの血管アクセスポート（Vascular Access Port：ＶＡＰ）移植外科手術
ＶＡＰをビーグル犬に対して、注入カテコールの先端が、上大静脈の準位に位置するように移植した。犬は、外科手術の日に、鎮痛剤と抗生物質とによって、又、手術後は、抗生物質および／又は鎮痛剤によって予防的に処理された（適切な場合には、Gene Logic Inc. SOP Nos. 324.0.2、325.0.1及び326.0.2によって）。その他の処置が、スタッフの獣医による推奨により、提供された。カテーテルラインを、研究指導者によって適切であると見なされた頻度で、術後の回復時期中に、生理食塩水によって洗浄した。
【０２６１】
ＶＡＰが、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの注入を受けるように指定された犬に移植されたが、ＤＭＳＯは、動物内のＶＡＰに付着した注入カテーテルに適合しないことがわかった。従って、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ動物には、４時間の時間にわたり３０分間毎に、非−ＶＡＰ頚静脈を介して、８回の静脈内注射によってＭ４Ｎ−ＤＭＳＯが投与された。この送達頻度は、注入ポンプを使用した試験物の送達を模したものであった。
【０２６２】
【表１】
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【０２６３】
ＤＭＳＯグループにおける犬は、頚静脈注入期間全体と、最後（８回目）の注入後の少なくとも１時間とに観察した。
【０２６４】
毒物動態学（ＴＫ）解析のための血液サンプルの収集
前記ＤＭＳＯグループ動物からの血液を、下記の時点、即ち、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの最終注入後の、投与前、０．２５，０．５，１，２，４，８及び１６時間後、ＳＤ１，ＳＤ３，ＳＤ６及びＳＤ８に頭部静脈を介して収集した。両動物グループから収集された血液サンプルを、血漿及び血清のＴＫ解析のために処理した。
【０２６５】
ＴＫ解析
前記血漿及び血清サンプルを、ＴＫ解析のために本提供者が指定した研究所である、MedTox Laboratoriesに送った。Ｍ４Ｎ血漿及び血清濃度−時間データのＴＫ解析を、MedTox Laboratoriesによる確証方法（Ｍ２００４０６）を使用して行い、非コンパートメント法によって分析し、毒物動態学的パラメータ（データによって可能である場合）、但し、Ｃｍａｘ，Ｔｍａｘ及びＡＵＣに必ずしも限定されるものではない、の推定値を得た。
【０２６６】
研究日１（ＳＤ１）：
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オス犬：ＤＭＳＯ注入に対して、軽度の紅斑、軽いそう痒、で反応した以外は、正常であった。最後の注入終了後直ぐに正常に挙動した。メス犬：オス犬と類似の反応。最後の注入終了後直ぐに振る舞いは正常になった。
４匹の犬全部がそのそれぞれの賦形剤処理の注入に生き残った。それらはすべて治療後、健康で正常に挙動した。
【０２６７】
研究日３（ＳＤ３）：
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オス犬：この犬によるなんら有害な臨床反応はなかった。予想されたように、頚静脈の沿った注射部位にいくらかの炎症があった。
メス犬：この犬によるなんら有害な臨床反応はなかった。予想されたように、頚静脈の沿った注射部位にいくらかの炎症があった。
４匹の犬全部がそのそれぞれの試験物治療に生き残った。それらはすべて治療後、健康で正常に挙動した。
【０２６８】
研究日６（ＳＤ６）：
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オス犬：この犬は、最初の３回の投与間隔（投与の間に１／２時間）において非−ＶＡＰ頚静脈を介してＭ４Ｎ−ＤＭＳＯをうまく静脈内注射された。前の投与日と同様、この犬も各注射後において、なんら有害な臨床的徴候又は症候群を示さなかった。４回目の注射に先立って、技術者は、注射部位の周りに「卵のサイズ」の腫れに気づいた。皮下投与ミスの可能性は、それは、３回目の注射中に容易に検出されたであろうため、除外することができた。それは、注射部位を通して血液がゆっくりと血管外放出した結果の血腫である可能性が最も高かった。この動物は、三回目の注射後、それ以上の投与を受けなかったが、但し、血液サンプルは収集され、三回目の注射投与後の血液収集の正確な時点は明確に記録された。血腫は、２時間以内に無くなり、注射部位領域をゆっくりマッサージしても動物に炎症を起こさせることはなかった。
メス犬：この犬は、４時間にわたる８回反復投与全体においてＭ４Ｎ−ＤＭＳＯをうまく注射された。前の投与日と同様、この犬もなんら有害な臨床的徴候又は症候群を示さなかった。
【０２６９】
研究日８（ＳＤ８）：
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループ
オスとメスの両方の犬が全投与を受けた。この高投与量に対するそれらの反応は、前の投与日に示されたものに類似していた。両方の犬が嘔吐の無い、いくらかの悪心反応を示し、それは通常よりも傾眠であったことからより多くの消化管炎症があったと思われた。しかし、両方の犬が、全高投与量の投与療法に生き残り、投与の完了後には回復したようであった。
【０２７０】
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯグループのための追加投与（２００ｍｇ／ｋｇ）
Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯを１００ｍｇ／Ｋｇ投与された動物はなんら有害な臨床的徴候又は症候群を示さなかったので、２匹の予備の犬（オス１匹とメス１匹）に、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯを２００ｍｇ／Ｋｇ投与した。２００ｍｇ／Ｋｇでは、メス犬は、８回の投与の最初のあとに既に呼吸困難（鼻からの泡立ち）を経験し、直ぐに虚脱したが、２回目の投与時では回復することができ。２回目の投与後、その反応は、類似していたが、更に深刻であった。従って、スタッフ獣医はこのメス犬を安楽死させることを提案した。オス犬は、それよりも僅かに耐性を示したが、類似の呼吸困難と虚脱症候群を示した。この動物は全部で３回の投与を受けたが、スタッフ獣医はそれ以上の投与を停止することを提案した。
この追加投与のためには投与後のＴＫ解析は行われず、当日に収集された全ての投与前血液サンプルは破棄された。
【０２７１】
【表２】
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【０２７２】
一般に、４時間の異なる投与レベルのＭ４Ｎ−ＤＭＳＯの反復静脈内投与によって、極度に高い血清濃度となった。表２に報告されている血清濃度データは、検出範囲に対応するための血清の全身希釈後の結果である。これらの結果は、一般的に、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの血清濃度が、初期の時点において高く、最後の注射の３０分後にピークに達したことを示している。試験物の血清濃度は、その後の１５時間で低下した。このグループからの血清濃度に基づき、反復静脈内投与による投与時の、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの半減期間は、約１．５〜２時間であった。このＭＴＤ相におけるＭ４Ｎ−ＤＭＳＯの投与前血清濃度から、血液中において試験物の僅かな増大があったが、この保持は一般に最高の血清濃度の０．３％以下であったことが銘記される。
【０２７３】
この研究のＭＴＤ相の目的は、オスとメスのビーグル犬に対するジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の最大耐容量を判断することにあった。Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの反復注射を受けた動物グループは、１００ｍｇ／ｋｇで、注射部位でのいくらかの炎症と、僅かな悪心を示した。しかし、両方の動物は、２００ｍｇ／ｋｇのＭ４Ｎ−ＤＭＳＯの２又は３回の注射後は虚脱した。このグループからのＴＫ解析は、Ｍ４Ｎ−ＤＭＳＯの半減期が１．５〜２時間の範囲であることを示唆している。このＭＴＤ相における試験物の僅かな増大があったが、この保持は一般に最高の血清濃度の０．３％以下であった。結論として、この研究のＭＴＤ相は、重篤な有害臨床徴候及び症候群をもたらした投与量が同定され、したがって、この相の目的が達成されたことで成功であった。
【０２７４】
例１５：ＮＤＧＡ誘導体治療後のアミロイド蓄積の検出
ＮＤＧＡ誘導体が、アルツハイマー病の特徴である、アミロイドとして知られているタンパク質沈着物の形成を抑制する能力を、例えば、米国特許５，１６４，２９５号に記載されているもののような、アミロイド形成の生体内マウスモデルを使用して測定することができる。簡単に説明すると、ＣＤ系のマウスに、皮下注射によってＡｇＮＯ３と、静脈内注射によって、アミロイド増強因子とを投与する。次に、これらの処理された動物に、単数又は複数のＮＤＧＡ誘導体を適当な製剤として毎日投与し、投与は、特定のＮＤＧＡ誘導体に応じて、例えば、６日間など、とする。６日間の終わりに、実験を終わらせ、動物を頚部脱臼によって犠牲にする。脾臓、肝臓及び腎臓を固定し、パラフィン包埋する。このパラフィンの断片を、コンゴーレッドで染色し、偏光下で観察する。画像解析を行ってアミロイドによって占有された脾臓の割合を測定する。ＮＤＧＡ誘導体を与えられたこれらの動物では、未処理の対照と比較してアミロイドによって占有されている脾臓の割合が低いことによって示されるように、アミロイド形成が減少していた。
【０２７５】
例１６： ＮＤＧＡ誘導体の生体外での神経保護能力の測定
ＮＤＧＡ誘導体が、神経細胞を、神経毒性アルツハイマーのＡβアミロイド原線維から保護する能力を、例えば、デフェリーチェ，エフ・ジー（DeFelice, F.G.）他 (2001)に記載されているもののような、生体外モデルを使用して測定することができる。アミロイド原線維は、水性緩衝液中に全長Ａβペプチドを溶解することによって生体外で形成される。次に、この原線維溶液は、Ｅ１８ラット海馬神経細胞の初代培養に添加される。最後に、ＮＤＧＡ誘導体の適当量を、培養培地に添加し、細胞を、標準条件下で５日間インキュベートする。その実験の結果を、光顕微鏡検査によって観察する。ＮＤＧＡ誘導体を与えられた前記培地は、アミロイド原線維神経毒性に対して保護され、長い分岐した神経突起を有する大きな細胞体を含んでいるのに対して、未保護の培地は、顕著な神経細胞の退化と、細胞死を示す。
【０２７６】
例１７：ＮＤＧＡ誘導体の生体外でのＡβ細胞毒性に対する細胞保護能力
ＮＤＧＡ誘導体が、細胞を、細胞毒性アルツハイマーのＡβアミロイド原線維から保護する能力を、例えば、クランク，ダブリュ・イー（Klunk, W.E.）他 (1998)に記載されているもののような、生体外モデルを使用して測定することができる。アミロイド原線維は、蒸留脱イオン水中にＡβペプチドを溶解し、７日間、３７℃でインキュベートすることによって生体外で形成される。次に、この原線維溶液を、ラットのクロム親和性細胞腫ＰＣ１２細胞と組み合わせ、培養培地に適当な量のＮＤＧＡ誘導体を添加する。２４時間後、細胞の生存性を、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ）アッセイを使用して評価する。アミロイド原線維細胞毒性に対して保護するＮＤＧＡ誘導体を与えられた培地は、未保護のサンプルよりも、５６０ｎｍの光をより多く吸収する。
【０２７７】
例１８：ＮＤＧＡ誘導体治療後の生体外でのβ−アミロイド原線維形成
ＮＤＧＡ誘導体が、β−アミロイドペプチドからのβ−アミロイド原線維の形成を抑制する能力を、ハウレット，ディ・アール（Howlett, D.R.）他 (1999)に記載されているもののような、アミロイド原線維形成の生体外モデルを使用して測定することができる。簡単に説明すると、β−アミロイドペプチドとＮＤＧＡ誘導体とをＰＢＳ中で希釈し、３７℃にてマイクロタイタープレートでインキュベートする。ペプチド／ＮＤＧＡ誘導体インキュベート物のアリコットを、酢酸ウラニルで染色し、その後、透過型電子顕微鏡観察によって調べる。ＮＤＧＡ誘導体での処理によってβ−アミロイド原線維形成が阻止されたサンプルは、未処理の対照よりも遥かに短い原線維を示す。
【０２７８】
例１９：ＮＤＧＡ誘導体処理後のアルツハイマー病関連炎症とプラーク関連病理の検出
ＮＤＧＡ誘導体の、炎症と、アルツハイマー病関連プラークの形成とを抑制する能力を、リム，ジー・ピー（Lim, G.P.）他 (2001)に記載されているものなどの、アルツハイマー病進行の生体内マウスモデルを使用して測定することができる。１０ヶ月齢のオスとメスのトランスジェニックＡＰＰＳｗマウス（Ｔｇ２５７６）を、処理グループにランダムに分け、マウス固型飼料とＮＤＧＡ誘導体を添加したマウス固型飼料とのいずれか一方を給飼する。６ヵ月後、これらのマウスに、生理食塩水と、プロテアーゼインヒビター、ロイペプチンとアプロチニンとを含有するＨＥＰＥＳ緩衝液とを還流する。これらの動物からの脳領域を、切開し、液体窒素中で瞬間凍結する。
【０２７９】
海馬から切り取った半脳クリオスタット断片を、アミロイドペプチド原線維に対する抗体、又は、げっ歯類小膠細胞マーカーとして作用するホスホチロシン（ＰＴ）に対する抗体とインキュベートする。一次抗体に続いて、二次ビオチン標識ヤギ抗ラビット抗体を使用して、反応シグナルを追加免疫する。サンプルに化学発光物質を添加し、写真用乳剤を使用してシグナルを可視化する。最終画像を、光顕微鏡検査で観察し、ＨＩＨ画像ソフトウエアによって解析する。ＮＤＧＡ誘導体によって保護された脳組織は、炎症及び濃縮した免疫染色（プラーク）の領域の不在によって、易損性の組織から明白に識別可能である。
【０２８０】
例２０：ＩＩ型糖尿病のラットモデルにおける、ＮＤＧＡ誘導体の使用による、血清グルコース、トリグリセリド及び非エステル型脂肪酸の低減
ＮＤＧＡ誘導体が、血清グルコース、トリグリセリド及び非エステル型脂肪酸を低減する能力を、ＩＩ型糖尿病のラットモデルにおいて、リード，エム・ジェイ（Reed, M.J.）他 (1999)に記載されているものなどの従来方法によって測定する。この方法において、６週齢のオスSprague-Dawleyラットに、約２０％の脂肪と、４６％の炭水化物と、２０％のタンパク質（ｗ／ｖ）とを含む高脂肪食餌（Harlan Teklad, Madison, WI, USA）を給飼する。この食餌の２週間後、動物を、ケタミン（約６５ｍｇ／ｋｇ）とキシラジン（約７ｍｇ／ｋｇ）等によって、麻酔をかけ、尾静脈にストレプトゾトシン（約０．１９ｍｍｏｌ／ｋｇ）を注射する。ストレプトゾトシン注射後の３日間、糖尿病の動物を食物と水に対する自由な接近を許容する。次の日から初めてその後の３日間、即ち、実験日１−４、に、糖尿病の動物を以下のように処理する。午前中に食物を取り除く（例えば０７００時において）、動物に、適当な賦形剤中に溶解させた少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体を、経口強制飼養（oral gavage）を介して二回（例えば、１１００時と１６００時）投与し、その後食物を動物に対して戻す（例えば、１７００時）。
【０２８１】
動物からの血液を、薬剤の投与後、約３時間、尾のミルキング（tail-milking）によって毎日サンプリングした。除去した血清を、血清分離管（Becton Dickinson, Franklin Lakes, N.J., USA）中の遠心分離によって分離し、種々のパラメータを、市販の酵素比色定量アッセイ、例えば、グルコース（トリンダー（Trinder）法, Sigma Diagnostics, Sigma Chemical Co., St. Louis, Mo., USA）、インスリン（ＲＩＡ，Linco Research, St. Charles, Mo., USA）、グリセロール及びトリグリセリド（ＧＰＯ−トリンダー法、Sigma）及び非エステル型脂肪酸、を使用して分析する。ＮＤＧＡ誘導体媒介、グルコース、トリグリセリド及び非エステル型脂肪酸低減の程度を、その結果得られる呈色強度の分光計測によって可視化する。
【０２８２】
次に、インスリン媒介性のグルコース堆積を、投与の５日目に測定することができる。食物を午前中、例えば０７００時、に取り除き、動物に少なくとも１つのＮＤＧＡ誘導体を０９３０時に投与する。１０００時に、動物を、ペントバルビタールナトリウム（６５ｍｇ／ｋｇ  ｉ．ｐ．）等によって麻酔をかけ、カニューラ（内径０．０６４ｃｍ、Braintree Scientific, Braintree, MA, USA）を、頚静脈に配置する。動物に、エピネフリン（０．０８ｍｇ．ｋｇ.分−１）とプロプラノロール（１．７ｍｇ．ｋｇ.分−１）を１時間、その後、追加として、グルコース（０．２２ｍｍｏｎｌ．ｋｇ．分−１）とインスリン（３０ｐｍｏｌ．ｋｇ．分−１）とを４時間、注入する。麻酔を維持するために必要であれば、ペントバルビタールナトリウムをｉ．ｐ．で再注射する。血液サンプルを、注入の最終的な時間の間に、例えば、３０分毎などで、周期的に採取する。これらの条件下において、グルコースとインスリンとの濃度は、最後の時間の注入中、定常状態である。各動物によって達成される定常状態グルコース濃度が、その全身のインスリン媒介性のグルコース処置の度合いである。
【０２８３】
分離された脂肪細胞による基礎及びインスリン誘導性のグルコース除去も、従来方法などによって測定することができる。例えば、正常ラットからの副睾丸脂肪を除去し、鋏によって細かく切り刻み、プラスチック製フラスコ内の２％ウシ血清アルブミン（“ＢＳＡ”）、３ｍｍｏｌ／ｌグルコース、及び１ｍｇコラゲナーゼ／ｍｌを含むＫｒｅｂｓ重炭酸塩緩衝液に入れる。コラゲナーゼ消化を、施回シェーカー内で３７℃にて１時間行う。次に、細胞を、新しい２％のＢＳＡを含むＫｒｅｂｓ緩衝液中で三回洗浄、浮遊法（floatation）によって下部浮遊物（infranatant）から分離させる。分離された脂肪細胞（２％リポクリット（lipocrit））を、インスリン（８ｎｍｏｌ／ｌ）の不在下及び存在下で、２％ のＢＳＡ、ＮＤＧＡ誘導体（約３０μｍｏｌ／ｌ）及びトレーサー（３００ｎｍｏｌ／ｌ）量のＤ−[Ｕ−１４Ｃ]−グルコースを含む２００μｌのＫｒｅｂｓ緩衝液中で、９０分間インキュベートする。細胞懸濁液を、４０ｒｐｍで連続振とうさせながら、３７℃の水浴中で１時間インキュベートし、その後、２００μｌの細胞懸濁液を、２００μｌのシリコーン油を含むマイクロ遠心分離管に添加する。このマイクロ遠心分離管の遠心分離によってアッセイを終わらせる。前記脂肪細胞と取り込まれたグルコースとを含む前記管の上澄み層を、シンチレーション瓶に入れ、前記脂肪細胞に関連する放射活性の量（及び、前記インキュベーション培地中の総放射活性）を液体シンチレーションによって測定する。
【０２８４】
分離された脂肪細胞を、２％の四酸化オスミウムで固定し、生理食塩水中で洗浄、希釈する。１００μｌのアリコット中の細胞を、対数域増幅チャネライザ（channelyser）を備える、４００μｍの開口のCoulter電子細胞計数装置（モデルＺＢ：Coulter Electronics, Inc. Hialeah, FL, USA）を使用して計数する。
【０２８５】
ＮＤＧＡ誘導体によって処理されたラットの血清グルコースは、対照ラットのそれよりも低いことが判った。また、ＮＤＧＡ誘導体を受けたラットの血清トリグリセリド濃度も、対照ラットのそれよりも低いことが判った。
更に、ＮＤＧＡ誘導体を受けたラットの血清非エステル型脂肪酸濃度も、対照ラットのそれよりも低いことが判った。
【０２８６】
例２１：ＮＤＧＡ誘導体によって誘導される血圧の低減
ＮＤＧＡ誘導体の収縮期血圧を低減させる能力をガウリ，エム・エス（Gowri, M.S.）他 (1999)に記載されているもののような、フルクトース誘導性高血圧症のラットモデルで測定することができる。このシステムにおいて、オスのSprague-Dawleyラットを、それらの総カロリーの６０％をフルクトースとして提供する食餌状態にする。この高フルクトース食餌を、例えば、１１日間などの所定期間与え、その間に、ラットを血圧測定の手順に順応させる。
【０２８７】
この食餌期間の終わりに、これらのラットの血圧を測定し、ラットを二つのグループ、一方は単数又は複数のＮＤＧＡ誘導体によって処理されたもの、他方は、対照として使用されたもの、に分けることができる。両グループを、前記高フルクトース食餌に維持する。一方のグループに、gelucire等の適当な賦形剤中に溶解されたＮＤＧＡ誘導体（約８０ ｍｇ／ｋｇで一日二回）を強制飼養する。他方のグループは、前記賦形剤のみで、同様に処理する。収縮期血圧を、直接動脈カニューレ挿入によって得られるものと類似することが示されている方法である、意識状態での、外部予熱無しのtail-cuff法によって、処理前と、処理の４日後とに測定する。測定は、３０℃に維持された環境気温で行われる。連続読取値の平均を、その日の各ラット（rate）の収縮期血圧の測定値として使用する。最終血圧測定を、ＮＤＧＡ誘導体又は溶媒の最後の午前中投与後の、午後に行う。
【０２８８】
この実験における一部のラットについて、食物除去の４時間後に、尾静脈血液を取り除き、遠心分離し、凍結し、その後、血漿グルコース、インスリン及びトリグリセリド濃度をアッセイすることができる。血漿遊離脂肪酸濃度も、市販キット（Waro Chemicals, Inc., Richmond, VA, USA）を使用したＡＣＳ−ＡＣＯＤ法によって酵素的に分析される。その結果を、平均値として表し、ＮＤＧＡ誘導体処理グループと対照との間の差の有意性を、差異（ＡＮＯＶＡ）分析の一方向分析によって測定することができる。
【０２８９】
その結果は、ＮＤＧＡ誘導体処理グループと対照グループとの間のベースライン血圧は類似しているが、それらは、ＮＤＧＡ誘導体処理が始まった後、劇的に分岐するものであることがわかった。対照グループの血圧は増加し続けるのに対して、ＮＤＧＡ誘導体処理グループの血圧は、ベースライン以下に低下する。
【０２９０】
その結果は、又、処理グループと対照グループの血漿グルコースは類似しているが、処理ラットのインスリン、遊離脂肪酸、及びトリグリセリドレベルは、対照ラットよりも遥かに低い、ことも示した。
【０２９１】
例２２：高コレステロール患者における血清トリグリセリド及びＬＤＬコレステロールの低下に対するＮＤＧＡ誘導体
高コレステロール血症患者の集団における血清トリグリセリドとＬＤＬコレステロールを低減させるＮＤＧＡ誘導体の能力を、ブランキ，エイ（Branchi, A.）他 (1999)に記載されているもののような、方法を使用して測定する。この研究において、二つの連続試験において、ＬＤＬコレステロールレベルが１６０ｍｇ／ｄｌ以上で、血清トリグリセリドレベルが４００ｍｇ／ｄｌ以下、であるものなどの、高コレステロール血症患者を研究のために選択する。糖尿病、甲状腺機能低下症、腎不全症及び肝臓疾患を有する患者は除外する。研究に入る前に、全ての患者は、低脂肪低コレステロール食に、三ヶ月以上従わなければならず、脂質代謝に影響を与える薬剤の使用を控えることが求められる。
【０２９２】
選択された患者は、例えば、約１，５，１０，２０，４０及び５０ ｍｇ／日から成るグループから選択される投与量で、二ヶ月間、ＮＤＧＡ誘導体の毎日の治療を受け、血液サンプルが、一晩の絶食後の次の朝に収集される。次に、血液を遠心分離し、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）が、リポタンパク質を含有するアポ−Ｂを、リンタングステン酸／Ｍｇ２＋（Boehringer Manneim Italia, S.p.A., Minano, Italy）で沈殿させることによって分離される。総及びＨＤＬコレステロールを、Ames-Bayer Diagnostics（ORCQ-Tournai, ベルギー）によって製造されているもののような、コレステロールオキシダーゼ法を使用して測定し、そして、血清トリグリセリドレベルを、グリセロールリン酸技術（Kallestad-Pasteur Diagnostici, ミラノ、イタリア）を使用して測定する。治療投与量のＮＤＧＡ誘導体は、血清トリグリセリド濃度を大幅に低下させることがわかる。
【０２９３】
例２３：冠状動脈心臓疾患を予防するための低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）及びトリグリセリド（ＴＧ）の低減のためのＮＤＧＡ誘導体
冠状動脈心臓疾患の予防のためのガイドラインは、治療の主要標的として、血漿低密度リポタンパク質コレステロール（“ＬＤＬ−Ｃ”）のレベルを低下させることを必要としてきた。更に、最近の証拠は、高いレベルのトリグリセリド（“ＴＧ”）が、ＣＨＤに対する追加の独立的なリスクファクタを構成するものであることを示している。従って、ＣＨＤのリスクの可能な限り最大の低減を達成するために、ＬＤＬ−ＣレベルとＴＧレベルとの両方を低減させるための治療を標的とすることが有用である。
【０２９４】
ヒトにおける冠状動脈心臓疾患の予防作用としてのＮＤＧＡ誘導体によるＬＤＬ−Ｃ及びＴＧの低減は、エイ・ジー・オルソン（A.G. Olsson）他 (2003)に記載されているものに類似の方法によって評価することができる。簡単に説明すると、心臓血管系疾患と異脂肪血症（２連続機会において、４ｍｍｏｌ／Ｌ以上、又は１５５ｍｇ／ｄＬ以上の血漿ＬＤＬ−Ｃ濃度を有するものとして定義される）を有する３５〜７５歳の成人患者を、ＮＤＧＡ誘導体によって治療する。
【０２９５】
治療される患者は、適当な溶媒中に含まれたＮＤＧＡ誘導体の一日一回の経口治療を受ける。患者の改善を、４，８，１２，２６および５２週間後に、絶食（１２時間）血液脂質レベルと臨床実験室値を測定することによってモニタする。所定レベルのＬＤＬ−Ｃおよび／又はＴＧが８週間で達成されない場合には、ＮＤＧＡ誘導体の投与量を１２週間後に増加させることができる。血中のＬＤＬ−Ｃ濃度は、Friedewaldの式を使用して算出される。ＴＧ濃度は、Technicon DAX-96分析装置によって酵素的に測定される。ＮＤＧＡ誘導体は、血漿ＬＤＬ−Ｃ及び血清ＴＧを低減させるものであることがわかる。
【０２９６】
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【図面の簡単な説明】
【０２９７】
【図１】異なる時点において異なる投与量のＭ４Ｎを与えられた犬におけるＭ４Ｎ血清濃度を示す図
【図２】脳疾患、障害または症状の治療のための脳への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図であり、Ｍ４Ｎは親水性ＮＤＧＡ、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを表し、ＯＤは脳血液関門の浸透性崩壊を表し、ＳＣは、皮下投与、ＩＰは腹腔内投与、ＩＭは筋肉内投与を表す。
【図３】疾患の治療のために、脳以外の組織への前記ＮＤＧＡ誘導体の送達の種々の態様の具体例の略図であり、Ｍ４Ｎは親水性ＮＤＧＡ、Ｇ４Ｎは親油性ＮＤＧＡを表し、ＳＣは皮下投与、ＩＰは腹腔内投与、ＩＭは筋肉内投与を表す。
【図１】
2006528701.tif 000016
【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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