(57)【要約】本発明は、公知の腫瘍崩壊物質の組合せを用いて癌を治療する方法に関する。詳しくは、本発明は、ＭＥＫ阻害剤およびカペシタビンの組合せを用いて癌を治療する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療を必要とする患者における癌を治療する方法であって、治療有効量のＭＥＫ阻害剤および治療有効量のカペシタビン(capecitabine)の組合せを患者に投与することを含む前記方法。
【請求項２】
ＭＥＫ阻害剤およびカペシタビンが同時に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＭＥＫ阻害剤がカペシタビンの前に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
カペシタビンがＭＥＫ阻害剤の前に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ＭＥＫ阻害剤がＣＩ−１０４０である、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
治療を必要とする患者における癌を治療する方法であって、治療有効量のカペシタビンを患者に投与し、続いて治療有効量のＣＩ−１０４０を患者に投与することを含む前記方法。
【請求項７】
ＭＥＫ阻害剤が、Ｎ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドである、請求項１、２、または４の方法。
【請求項８】
治療を必要とする患者における癌を治療する方法であって、治療有効量のＮ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドを患者に投与し、続いて治療有効量のカペシタビンを患者に投与するステップを含む前記方法。
【請求項９】
癌が、脳癌、乳癌、肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎臓癌、結腸癌、頚部癌、急性白血病、胃癌、又はそれらの組合せである、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
カペシタビン、ＣＩ−１０４０および薬学的に許容することのできる担体を含む医薬組成物。
【請求項１１】
カペシタビン、Ｎ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドおよび薬学的に許容することのできる担体を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、公知の腫瘍崩壊物質の組合せを用いて癌を治療する方法に関する。詳しくは、本発明は、ＭＥＫ阻害剤およびカペシタビンの組合せに関する。
【背景技術】
【０００２】
癌化学療法は、近年、劇的に進歩した。多くの腫瘍は、天然に存在する産物または合成物質のいずれかである化合物を用いて効果的に治療することができる。癌化学療法は、通常、単独で用いられる場合の個々の物質の毒性作用を軽減する手段として、そして或る場合には、その組合せがいずれかの物質を単独で用いる場合よりも高い治療効果があることから、物質の組合せの使用を伴うことがある。
【０００３】
腫瘍において、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路は、形質膜から核へのマイトジェンシグナル伝達のための唯一の最も重要な経路であると考えられる。活性化ｒａｆは、シグナリングキナーゼＭＥＫ１およびＭＥＫ２（ＭＥＫ１／２）をリン酸化により活性化する。これらは、トレオニンおよびチロシンの両方のリン酸化によりＥＲＫファミリーキナーゼＥＲＫ１およびＥＲＫ２を活性化する両特異性キナーゼ（dual-specificity
kinase）である。ＥＲＫ活性化は、リボソームＳ９キナーゼならびにｃ−Ｆｏｓ、ｃ−Ｊｕｎおよびｃ−Ｍｙｃのような転写因子のリン酸化および活性化に帰し、増殖に関与する多数の遺伝子のスイッチを入れることに帰する。ｅｒｂＢファミリー、ＰＤＧＦ、ＦＧＦおよびＶＥＧＦのような種々の増殖因子は、Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫ経路を通じたシグナルを伝達する。加えて、ｒａｓ癌原遺伝子における突然変異は、この経路の構造的活性化に帰すことがある。Ｒａｓ遺伝子は、ヒトの全癌のおよそ３０％で突然変異しており、ｒａｓ突然変異の頻度は、結腸および膵臓癌で特に高い（それぞれ、５０％および９０％）。種々のマイトジェン因子から下流の位置にあることから、ＭＥＫ１および２は、形質膜から核への増殖シグナルの伝達に中心的役割を有する。これは、それらの阻害が多数の異なるシグナリング経路を無効にするであろうことから、これらの蛋白質を癌治療の潜在的により良い標的にする。従って、ＭＥＫ阻害剤は、それらに限定される訳ではないが、乳癌、結腸癌、肺癌、卵巣癌および膵臓癌のような広い範囲の癌に対し有効であるかもしれない。
【０００４】
ＣＩ−１０４０としても知られている２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−３，４−ジフルオロ−ベンズアミドは、両方のＭＥＫアイソフォームＭＥＫ１およびＭＥＫ２の強力で高度な選択的阻害剤である。ＣＩ−１０４０によるＭＥＫ活性の阻害は、リン酸化ＥＲＫ１およびＥＲＫ２の水準の著しい減少に帰する。この減少は、培養およびマウスの両方においてＧ１ブロックをもたらし腫瘍細胞の増殖を阻害する。ＣＩ−１０４０は、結腸および膵臓由来のものを含む広いスペクトルの腫瘍タイプに対し抗癌活性を示してきた（セボルト−レオポルドＪ．(Sebolt-Leopold
J.)等,ＭＡＰキナーゼ経路の遮断は、インビボでの結腸腫瘍の成長を抑制する(Blockade of the MAP kinase pathway
suppresses growth of colon tumors in vivo). Nature Med 1999; 5:810-16;およびセボルト−レオポルドＪＳ，ＣＩ−１０４０の前臨床薬理学の概要(Summary
of the preclinical pharmacology of CI-1040).RR 700-00156,６月２７日，２０００）。
【０００５】
ＣＩ−１０４０は、参照により本明細書に含めるものとするＰＣＴ公開番号ＷＯ９９／０１４２６に、ＣＩ−１０４０の製法、それを剤形へと処方する方法、ならびに乳、結腸、前立腺、皮膚および膵臓癌のような充実性腫瘍の長期経口治療のためのその使用法のその教示について開示されている。ＣＩ−１０４０は、やはり、敗血症性ショックの治療または予防における使用について米国特許第６，２５１，９４３号に開示されている。
【０００６】
Ｎ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド（”化合物Ａ”）は、ＭＥＫ１／２の強力で高度な選択的阻害剤であり、ＥＲＫ１およびＥＲＫ２のリン酸化を著しく阻害する。化合物Ａは、参照により本明細書に含めるものとするＰＣＴ公開番号ＷＯ０２／０６２１３に、その製法、剤形へと処方する方法、ならびに乳癌、結腸癌、前立腺癌、皮膚癌および膵臓癌のような充実性腫瘍の長期経口治療のための使用法の教示について開示されている。それは、その前身ＣＩ−１０４０よりも効力があり、代謝的により安定である。
【０００７】
カペシタビンは、抗新生物活性を有するカルバミン酸フルオロピリミジンである。それは、５−フルオロウラシルに変換される５´−デオキシ−５−フルオロウリジン（５´−ＤＦＵＲ）の経口的に投与されるシステミックプロドラッグである。カペシタビンの化学名は、５´−デオキシ−５−フルオロ−Ｎ−［（ペンチルオキシ）カルボニル］−シチジンである。それは、ゼローダ(Xeloda)（商標）（Roche
Laboratories）として米国で市販されている。それは、転移性乳癌および結腸直腸腫瘍を有する患者の治療に適用される。それは、通常、各々２１日周期中に１４日間投与され、その後７日の休止期間が続く。カペシタビンは、米国特許第５，４７２，９４９号に開示されている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、そのような治療を必要とする患者における癌を治療する方法を提供し、この方法は、治療有効量のＭＥＫ阻害剤および治療有効量のカペシタビンの組合せを患者に投与することを含む。
【０００９】
本発明の組合せは同時に投与することができる、ＭＥＫ阻害剤はカペシタビンの前に投与することができる、またはカペシタビンはＭＥＫ阻害剤の前に投与することができる。
【００１０】
本発明の組合せまたは方法によれば、ＭＥＫ阻害剤は、ＣＩ−１０４０またはＮ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドであってもよい。
【００１１】
加えて、本発明の方法は、ＣＩ−１０４０もしくはＮ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドをカペシタビンの前に投与することができる、またはカペシタビンをＣＩ−１０４０もしくはＮ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドの前に投与することができることを提供するものである。
【００１２】
本発明は、また、そのような治療を必要とする患者における癌を治療する方法を提供し、この方法は、治療有効量のカペシタビンを患者に投与し、続いて治療有効量のＣＩ−１０４０を患者に投与することを含む。
【００１３】
本発明により更に提供されるのは、そのような治療を必要とする患者における癌を治療する方法であり、この方法は、治療有効量のＮ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドを患者に投与し、続いて治療有効量のカペシタビンを患者に投与する段階を含む。
【００１４】
本発明の態様は、カペシタビン、ＣＩ−１０４０および薬学的に許容することのできる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１５】
本発明の別の態様は、カペシタビン、Ｎ−［（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシ−プロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミドおよび薬学的に許容することのできる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１６】
本発明の別の態様は、一方の仕切られた部分に１用量のＣＩ−１０４０または化合物Ａを、および別の仕切られた部分に１用量のカペシタビンを含むキットである。例えば、本発明は、（ａ）各有効成分の別々の処方物、例えばＣＩ−１０４０または化合物Ａの錠剤またはカプセル剤形態、およびカペシタビンの錠剤形態を入れたブリスタパック；（ｃ）ならびに併用投与のための指示書を入れた箱の中に共に詰めた各有効成分の別々の処方物を入れたキットを含む。
【００１７】
本発明により治療される患者には、それらに限定される訳ではないが、ヒト、ウマ、イヌ、モルモット、またはマウスのようないずれの温血動物も含まれる。例えば、患者は、ヒトである。医術の当業者等は、癌に苦しめられ治療を必要としている個々の患者を容易に見分けることができる。本発明により治療される代表的癌としては、それらに限定される訳ではないが、脳癌、乳癌、非小細胞肺癌のような肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎臓癌、結腸癌、頚部癌、急性白血病、胃癌ならびにカペシタビンおよび／またはＭＥＫ阻害剤例えばＣＩ−１０４０および化合物Ａを用いる治療に感受性のある他の癌が挙げられる。本発明の目的において用語”治療”は、ひとたび命名された症状が確立されているならば、癌のような命名された症状の治療、阻害、制御、予防もしくは防止、改善または除去を含む。
【００１８】
ＣＩ−１０４０および化合物Ａは、選択的ＭＥＫ１およびＭＥＫ２阻害剤である。選択的ＭＥＫ１およびＭＥＫ２阻害剤は、ＭＫＫ３、ＥＲＫ、ＰＫＣ、Ｃｄｋ２Ａ、ホスホリラーゼキナーゼ、ＥＧＦおよびＰＤＧＦ受容体キナーゼ、ならびにＣ−ｓｒｃのような他の酵素を実質的に阻害することなくＭＥＫ１またはＭＥＫ２酵素を阻害する化合物である。通常、選択的ＭＥＫ１またはＭＥＫ２阻害剤は、上記で名前を挙げた他の酵素の一つに対するそのＩＣ５０のそれの少なくとも５０分の１（１／５０）であるＭＥＫ１またはＭＥＫ２に対するＩＣ５０を有する。選択的阻害剤は、上記で名前を挙げた他の酵素の一つ以上に対するそのＩＣ５０のそれの少なくとも１／１００、１／５００、またはさらに１／１０００、１／５０００もしくは未満であるＩＣ５０を有しても良い。
【００１９】
ＭＥＫ阻害剤である化合物は、ＭＥＫ阻害を測定する当業者に公知の測定法を用いることにより測定することができる。例えば、ＭＥＫ阻害は、米国特許第５，５２５，６２５号、６欄、３５行から始まる”酵素測定法(Enzyme Assays)”と題された測定法を用いて測定することができる。米国特許第５，５２５，６２５号の完全な開示を、参照により本明細書に含めるものとする。詳しくは、化合物が、米国特許第５，５２５，６２５号の６欄３６行から７欄４行の”ＭＡＰキナーゼ経路の阻害剤のためのカスケード測定法(Cascade
Assay for Inhibitors of the MAP Kinase Pathway)”と題された測定法で活性を示す、および／または上述した特許の７欄４行から２７行の”インビトロＭＥＫ測定法(In
Vitro MEK Assay)”と題された測定法で活性を示すならば、化合物はＭＥＫ阻害剤である。あるいは、ＭＥＫ阻害は、その完全な開示物を参照により本明細書に含めるものとするＷＯ０２／０６２１３Ａ１に開示された測定法で測定することができる。
【００２０】
本発明によるＭＥＫ阻害剤の例としては、以下のＰＣＴ公開番号：ＷＯ９９／０１４２６、ＷＯ９９／０１４２１、ＷＯ００／４２００２、ＷＯ００／４２０２２、ＷＯ００／４１９９４、ＷＯ００／４２０２９、ＷＯ００／４１５０５、ＷＯ００／４２００３、ＷＯ０１／６８６１９およびＷＯ０２／０６２１３に開示されたＭＥＫ阻害剤が挙げられるが、これらに限定される訳ではない。
【００２１】
ＣＩ−１０４０、化合物Ａまたはカペシタビンの薬学的または治療有効量または用量は、本発明の組合せで腫瘍細胞の増殖または癌転移の進行を予防または阻害するのに十分な量を含むと理解することができる。用量および投与方式の治療上または薬理学的効果は、また、特定の腫瘍を体験している患者における寛解を誘導、強化、維持または延長する能力として特徴付けることができる。
【００２２】
本発明の方法または組合せに用いられる化合物は、臨床的に普通に用いられる用法または用量で投与することができる。当業者等は、年齢、体重、全般的健康、投与される化合物、投与経路、治療を必要とする癌の性質および進行、ならびに他の医薬の存在のような要素を考慮に入れて、患者に投与する本発明の組合せに用いる各化合物の適切な治療上効果的な量を公知の方法に従って決定することができる。このような用量は、通常の様式、例えば体表面積に基づいて算定することができる。あるいは、効果的な量または治療有効量は、ｍｇ／ｋｇ体重として算定することができる。商業的に入手可能なカプセル剤、錠剤、または他の剤形（液剤およびフィルムコート錠のような）は、開示された方法により投与することができる。
【００２３】
単一療法のためのカペシタビンは、通常、１日に約２５００ｍｇ／ｍ２の用量で２週間経口的に投与され、その後１週間の休止期間が続く。製品は、１５０ｍｇおよび５００ｍｇ錠剤で商業的に供給される。錠剤は、治療期間の間１日に約１から約４回の割合で投与される。カペシタビンの毎日の用量は、本発明の組合せにおいて、例えば、１日に約１０００ｍｇ／ｍ２から約３５００ｍｇ／ｍ２にわたってもよい。
【００２４】
単一療法のためのＣＩ−１０４０は、通常、疾患状態の進行が観察されるまで投与することができ、例えば、ＣＩ−１０４０は、約２−４週間から患者の存命の間毎日投与することができる。ＣＩ−１０４０は、食物と共に又は無しに、１日１回（”ｑｄ”）約１００ｍｇから約１６００ｍｇ、または１日２もしくは３回（それぞれ、”ｂｉｄ”または”ｔｉｄ”）約４００から約８００ｍｇの用量で投与することができる。例えば、ＣＩ−１０４０は、食物と共に１日２回８００ｍｇで投与することができる。ＣＩ−１０４０は、代表的には、例えば１カプセルにつき５、２５および２００ｍｇの量で有効成分を有するカプセル剤として経口的に投与される。担当医ならびに治療される特定の患者および症状により指示される場合、複数の治療期間が実施されてもよい。
【００２５】
単一療法のための化合物Ａは、通常、疾患状態の進行が観察されるまで投与することができ、例えば、化合物Ａは、約２−４週間から患者の存命の間毎日投与することができる。化合物Ａは、約０．２ｍｇ／ｍ２から約２．５ｍｇ／ｍ２の用量で投与することができる。例えば、化合物Ａは、６０ｋｇの患者における１から３ｍｇに等しい約０．６ｍｇ／ｍ２から約１．８ｍｇ／ｍ２の用量で投与することができる。化合物Ａは、例えば１カプセルにつき０．２５、１、５、および２５ｍｇの量で有効成分を有する硬ゼラチンカプセル剤のようなカプセル剤として経口的に投与することができる。担当医ならびに治療される特定の患者および症状により指示される場合、複数の治療期間が実施されてもよい。
【００２６】
当業者等により決定される場合、ある場合には、前述の範囲の下限を下回る用量水準が非常に適切であってもよく、一方、別の場合には、尚もより大きい用量を用いてもよい。
【００２７】
更に詳しくは、本発明の方法によれば、ＭＥＫ阻害剤の効果的な用量水準は、カペシタビン無しに用いる場合、効果的な用量水準の約５％から約１００％にわたってもよい。加えて、カペシタビンの効果的な用量水準は、ＭＥＫ阻害剤無しに用いる場合、効果的な用量水準の約５％から約１００％にわたってもよい。
【００２８】
当業界で一般的に知られ行われている手法によれば、併用剤として用いる場合、カペシタビンおよびＭＥＫ阻害剤の用量水準は、最適な効果的用量水準を達成するよう調整することができる。
【００２９】
本発明の方法の実施は、種々の投与方式を通じて成し遂げることができる。本発明の癌細胞または腫瘍を治療または阻害する一方法は、このような治療を必要とする患者への薬学的または治療有効量のＭＥＫ阻害剤、例えばＣＩ−１０４０および化合物Ａ、ならびにカペシタビンの同時期または同時投与を含む。両化合物の複合投与は、問題の受容者にとって医師により適切であると考えられる期間にわたり実施することができる。一治療方式としては、２から４週間の期間にわたる両化合物の投与を挙げることができる。癌細胞の所望の減少または縮小を達成するのに必要である場合、複合投与の反復を一連の投薬期間実施することができる。任意に、複合投与の連続を、通常の患者の休息および回復を可能にするよう例えば２から６週間の非治療期間により分断してもよい。
【００３０】
本発明の方法には、また、特定の期間または治療方式の間、それを必要とする患者への薬学的または治療有効量のＣＩ−１０４０または化合物Ａの投与、続いて次の治療方式の薬学的または治療有効量のカペシタビンの患者への投与も含まれる。このような治療方式の一例には、１４から２８日間治療上または薬学的に効果的な量のＣＩ−１０４０の患者への投与、続いて次の連結した７から１４日の期間薬学的または治療有効量のカペシタビンの投与が含まれるであろう。カペシタビンの投与は、普通の患者の休息および回復を可能にするよう例えば２日から１週間の非治療期間により分断してもよい。
【００３１】
本発明を実施する別の方法は、カペシタビン連続投与に続いてＣＩ−１０４０または化合物Ａ投与方式の連続投与を含む。このような治療方式の例には、普通の患者の休息および回復を可能にするよう２日から１週間の非治療期間をともなう７から１４日間の薬学的または治療有効量のカペシタビンの初めの投与、続いて１４から２８日間の治療上または薬学的に効果的な量のＣＩ−１０４０の投与が含まれるであろう。カペシタビン治療方式の後にＣＩ−１０４０治療方式が続くこのタイプの反復的な配列は、必要に応じて医師により決定される任意の非治療期間と共に継続することができる。
【００３２】
本発明の方法または組合せは、投与の前に処方することができる。これらの化合物は、別々に又は当業界で知られるような薬学的に許容することのできる担体と組み合わせてのいずれかで処方し、当業界で知られるような種々の剤形で投与することができる。本発明の医薬組成物の製造において、有効成分は、通常、担体と混合するか、または担体により希釈するか、または担体中に封入する。このような担体としては、固形希釈剤または賦形剤、医薬品添加物、滅菌水性媒体および種々の無毒の有機溶媒が挙げられるが、これらに限定される訳ではない。単回投与剤形または医薬組成物としては、錠剤、ゼラチンカプセル剤のようなカプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤、水性および非水性経口液剤および懸濁剤、口内錠(lozenges)、トローチ剤(troches)、ハードキャンディー剤、噴霧剤、クリーム剤、膏薬剤、坐剤、ゼリー剤、ゲル剤、パスタ剤、ローション剤、軟膏剤、注射用液剤、エリキシル剤、シロップ剤、ならびに個々の用量へと細分するのに適合した容器に詰められた非経口液剤が挙げられる。
【００３３】
ＣＩ−１０４０および化合物ＡのようなＭＥＫ阻害剤は、経口または非経口経路による投与用に処方することができる。それらは、局所的に、例えば経皮的に、皮膚パッチ剤もしくはローション剤として、または坐剤として投与することもできる。ＭＥＫ阻害剤およびカペシタビンの同時投与は、同じ（局所または全身のいずれかの注射による両方の有効成分）または異なる経路によってもよい。例えばＣＩ−１０４０をカペシタビンと共に例えば静脈注射または輸液用液剤に処方することができるが、より代表的には、活性物質を、それらの通常の製剤に個々に処方し、個々に投与する。例えば、ＣＩ−１０４０およびカペシタビンを個々に処方し、例えば使用上の便宜のためにキットの中に共に詰めることができる。あるいは、活性物質は、単一処方物中に共に処方することができ、その場合、カペシタビンは、ＭＥＫ阻害剤に対して約１から約１０００重量部の範囲の濃度で存在し、そしてＭＥＫ阻害剤は、カペシタビンに対して約１０００から約１重量部の濃度で存在する。通常、活性物質は、ほぼ等しい用量で、または保健規制機関(health regulatory agencies)により承認される限り異なるように投与される。
【００３４】
皮下移植のような放出制御製剤を含め、種々の投与方法に合せて単回投与剤形を変えることができる。投与方法には、経口、経直腸、非経口（静脈、筋肉内および皮下）、大槽内、膣内、腹腔内、膀胱内、局所（滴剤、散剤、軟膏剤、ゲル剤、またはクリーム剤）、および吸入（口腔または鼻腔内噴霧）が含まれる。
【００３５】
経口投与には、微結晶セルロース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、燐酸二カルシウムおよびグリシンのような種々の医薬品添加物を含有する錠剤が、デンプン（好ましくはトウモロコシ、バレイショまたはタピオカデンプン）、アルギン酸および特定の複合珪酸塩類のような種々の崩壊剤、ならびにポリビニルピロリドン、白糖、ゼラチンおよびアラビアゴムのような造粒結合剤と共に用いられる。更に、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクのような滑沢剤は、錠剤化目的にはしばしば非常に有用である。同様の型の固形組成物を、ゼラチンカプセル剤中の賦形剤として用いることもでき、また、これに関連する好ましい材料としては、ラクトース即ち乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコール類が挙げられる。経口投与用に水性懸濁剤および／またはエリキシル剤を所望する場合、活性成分は、種々の甘味剤または着香剤、着色剤もしくは染料、ならびに、所望であれば、乳化剤および／または懸濁化剤と、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン及びそれらの種々の組み合わせのような希釈剤と組み合わせることができる。
【００３６】
非経口処方物としては、薬学的に許容することのできる水性または非水性液剤、分散剤、懸濁剤、乳剤、およびその調製のための滅菌散剤が挙げられる。担体の例としては、水、エタノール、ポリオール類（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、植物油、およびオレイン酸エチルのような注射用有機酸エステル類が挙げられる。流動性は、レシチンのような被覆剤、表面活性剤の使用により、または適切な粒子サイズを維持することにより維持することができる。
【００３７】
更に、本発明に従って用いる活性物質を局所的に投与することも可能であり、これは、標準製薬慣習に従いクリーム剤、ゼリー剤、ゲル剤、パスタ剤、パッチ剤、軟膏剤等により行うことができる。
【００３８】
固形剤形のための担体としては、（ａ）賦形剤または増量剤、（ｂ）結合剤、（ｃ）湿潤剤、（ｄ）崩壊剤、（ｅ）溶解抑制剤、（ｆ）吸収促進剤、（ｇ）吸着剤、（ｈ）滑沢剤、（ｉ）緩衝化剤、および（ｊ）噴射剤が挙げられる。
【００３９】
医薬組成物は、また、保存剤、湿潤剤、乳化剤、および分散化剤のような補助剤；パラベン類、クロロブタノール、フェノール、およびソルビン酸のような抗菌剤；糖または塩化ナトリウムのような等張化剤；モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような吸収を長引かせる物質；ならびに吸収徐放剤を含んでもよい。
【００４０】
以下の詳細な実施例は、上記で一般的に説明した本発明の方法を更に確立する。これらの実施例は、具体的説明のためだけのものであり、本発明を限定するものではない。
【実施例】
【００４１】
実施例１
腫瘍モデル．
Ｃ２６／クローン１０マウス結腸癌（”Ｃ２６／クローン１０腫瘍”とも称する）を用いて、ＣＩ−１０４０をカペシタビンと組み合わせて与えた場合にもたらされる抗腫瘍活性を評価した。コルベット(Corbett)等により説明された方法を、腫瘍移植および腫瘍成長の測定（下記に説明される）に用いた［コルベットＴ．等”腫瘍モデルならびに充実性腫瘍活性物質の発見および二次評価(Tumor
models and the discovery and secondary evaluation of solid tumor active
agents),”Int. J. Pharmacognosy, 1995; 33 (増補）:102-122;コルベットＴ．等,”Ｐ３８マウス腫瘍は、もはや薬物発見モデルとして適切ではないのか？(Is
the P38 murine tumor no longer adequate as drug discovery model?)”Invest New
Drugs 1987; 5:3-20; コルベットＴＨ等,”実験的癌治療における齧歯類動物腫瘍の使用：結果および推奨(The use of
rodent tumors in experimental cancer therapy: Conclusions and recommendations),”ＲＦカールマン(RF
Kallman)（編）, Rodent models in experimental chemotherapy, （パーガモン出版(Pergamon
Press), 1987), 233-247; コルベットＴ．、バレリオットＦ．(Valeriot F)等”薬物発見のための齧歯類動物充実性腫瘍の使用(Use
of rodent solid tumors for drug discovery)”ＢＡテイチャー(BA Teicher)（編）, Cancer
Drug Discovery, (ヒューマン出版社(Human Press Inc.), 1997) 75-99; コルベットＴＨ等”化学療法評価マウスにおける移植可能な結腸癌の発生における腫瘍誘導関係、発癌物質構造に関する注記付き(Tumor
induction relationships in development of transplantable cancers of the colon
in mice of chemotherapy assays, with a note on carcinogen structure)”Cancer
Res. 1975; 35 (9):2434-2439;およびコルベットＴＨ等”マウス結腸癌における化学療法物質の単一物質および併用の評価(Evaluation
of single agents and combinations of chemotherapeutic agents in mouse colon
carcinomas)”, Cancer, 1977; 40(5):2660-2690］。
【００４２】
チャールズリバー研究所(Charles Rivers Laboratories)（ウィルミントン(Wilmington),ＭＡ）から得た雌性Ｂａｌｂ／Ｃマウスを、腫瘍を維持するため及び抗腫瘍試験のために用いた。これらのマウスは、Ｃ２６／クローン１０腫瘍の同系宿主である。マウスは、食物および水を自由に与えられた。これらの研究におけるＣ２６／クローン１０腫瘍の平均の倍増時間は、３．６から４．５日に及んだ。試験動物は、０日に１２ゲージのトロカール針を用い３０から６０ｍｇの腫瘍断片を皮下的に移植された。腫瘍を、週に３回カリパスで測定した。腫瘍の重量を、以下の等式：
腫瘍重量（ｍｇ）＝（ａｘｂ２）／２
｛ここで、”ａ”は、ミリメートル（”ｍｍ”）での腫瘍の長さであり、そして”ｂ”は、ｍｍでの腫瘍の幅である｝によりカリパス測定から算定した。
【００４３】
腫瘍重量の中央値が２２０から２６０ｍｇになった７日目、試験動物を対照群および治療群に無作為抽出し、化学療法を開始した。これらの腫瘍サイズは、Ｃ２６／クローン１０腫瘍の進行期を表す。
【００４４】
抗腫瘍薬．
ＣＩ−１０４０を、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび０．２％Ｔｗｅｅｎ−８０水溶液に懸濁し、０．５ｍＬの薬物懸濁液中の種々の用量で経口的に投与した。カペシタビンを０．５％メチル−セルロース水溶液に懸濁し、０．５ｍＬの薬物懸濁液中の種々の用量水準で経口的に投与した。
【００４５】
用量および治療計画．
抗腫瘍薬ＣＩ−１０４０およびカペシタビンの用量水準および治療計画は、実験的充実性腫瘍を治療する前臨床試験に普通に用いられるものであった。これらの用量および計画は、ヒト用に相対成長学的基準で決めることができる。ＣＩ−１０４０を、１日３回（”ｔｉｄ”）連続１４日間経口的に投与した。ＣＩ−１０４０の用量は、３７．５、７５、１５０および３００ｍｇ／ｋｇ／回（１１２．５、２２５、４５０および９００ｍｇ／ｋｇ／日）であった。コースとコースの間に２日の休みを入れて、２回の５日コースの間、１日１回（”ｑｄ”）カペシタビンを経口的に投与した。カペシタビンの用量は、５００および７５０ｍｇ／ｋｇ／日であり、最も高い用量は最大許容量であった。これらの用量で単独で与えられるいずれの薬物も顕著な体重減少または中毒死を引き起こさなかった。全ての計画で、腫瘍が進行期である腫瘍移植の７日後に治療を開始した。
【００４６】
抗腫瘍活性の測定．
抗腫瘍活性を評価するのに用いた最終段階は、以下のもの：完全および部分的腫瘍応答、腫瘍の成長遅延、ならびに研究の最後に腫瘍のないマウスの数であった。完全応答を腫瘍量の１００％減少として分類し、部分的応答を腫瘍量の少なくとも５０％減少として分類した。腫瘍量の減少に加えて、腫瘍成長遅延（上記で挙げたコルベット等により説明された方法により測定されるような）を用いて、完全には応答しなかった、または完全応答後に再成長した腫瘍についての抗腫瘍活性を定量した。腫瘍成長遅延は、Ｔ−Ｃ値として表され、ここで”Ｔ”および”Ｃ”は、治療群および対照群（それぞれ）の腫瘍が所定のサイズ７５０ｍｇ（”評価サイズ”）に達するのに要した日数の中央値である。腫瘍成長遅延値から、正味のｌｏｇ１０腫瘍細胞死滅を、次の通りに算定した：
正味のｌｏｇ１０腫瘍細胞死滅＝［（Ｔ−Ｃ）−Ｒｘ］／３．３２ｘＴｄ
ここで、”Ｔｄ”は、腫瘍量が倍になる日数であり、”Ｒｘ”は、治療の全日数である。
【００４７】
Ｔｄを、指数関数的成長の対照群腫瘍の対数線形プロットの最もふさわしい直線から算出した。治療後再成長している腫瘍のＴｄが治療していない対照マウスのそれとほぼ同じであることから、Ｔ−Ｃ値のｌｏｇ１０細胞死滅への変換は可能である。正味のｌｏｇ１０死滅値は、種々の期間の治療方式の効力データを標準化する。正の値は、腫瘍量の実際の減少が起こったことを示す。負の値は、治療の間に腫瘍が実際に成長した（おそらく、より緩慢ではあるが）ことを示す。腫瘍がない生存動物は、これらの計算から排除した。
【００４８】
結果．
ＣＩ−１０４０およびカペシタビンを同時に投与した場合にもたらされた抗腫瘍活性を、表１に示す。７日目に開始し２０日目に終了するこの研究において、ＣＩ−１０４０を、１日３回経口的に投与した。ＣＩ−１０４０の用量は、３７．５から３００ｍｇ／ｋｇ／回（１１２．５から９００ｍｇ／ｋｇ／日）の範囲である。カペシタビンを、７日目から１１日目、および１４日目から１８日目を通して１日１回経口的に与えた。カペシタビンの用量は、５００および７５０ｍｇ／ｋｇ／日であった。表１に示すように、賦形剤投与対照群マウスは、治療中にそれらの初めの体重の１０．５％を失った。Ｃ２６／クローン１０癌は、非常に悪液質の腫瘍であり、この量の体重減少は予想された。賦形剤投与対照群マウスの腫瘍は、通常の速度で成長し、非治療対照群マウスの腫瘍の成長と大差なかった。ＣＩ−１０４０のみを投与された全ての動物が、治療の全コースを生き残り、遅発性死亡はなかった。投与したＣＩ−１０４０の用量範囲にわたり、これらのマウスは、それらの初めの体重の約５％を失ったが、それは、賦形剤投与対照群マウスにおいて見られたそれの約半分である。Ｃ２６／クローン１０結腸がんを有するマウスにおけるより少ない量の体重減少は、常にＣＩ−１０４０治療において一貫して見られる。ＣＩ−１０４０単独投与は、低用量の３．８日から高用量の１６．７日にわたる用量に依存した腫瘍成長遅延をもたらした。３００ｍｇ／ｋｇ／回で、ＣＩ−１０４０は、完全腫瘍応答はもたらさず、２０％の部分的腫瘍応答をもたらした。１５０ｍｇ／ｋｇ／回の用量では、１０パーセントの完全腫瘍応答がみられたが、部分的腫瘍応答はみられなかった。より低いＣＩ−１０４０用量では、完全腫瘍応答も部分的腫瘍応答もみられなかった。研究が終了した時点で、腫瘍のないマウスはいなかった。
【００４９】
カペシタビンのみを受領した全ての動物は、治療の全コースを生き残り、遅発性死亡はなかった。ＣＩ−１０４０と同様に、両方の用量でカペシタビンのみで治療したマウスは、それらの当初の体重のおよそ５％を失った。両方の用量のカペシタビンは、およそ１８日の同じ腫瘍成長遅延をもたらした。５００ｍｇ／ｋｇで、カペシタビンは、４０％の完全腫瘍応答および１０％の部分的腫瘍応答をもたらした。腫瘍が完全に応答したマウスの内３０％が、研究が９３日目に終了した時点でなおも腫瘍がなかった。最も高い用量のカペシタビンは、７０％の完全腫瘍応答および１０％の部分的腫瘍応答をもたらした。完全腫瘍応答があった全てのマウスが、研究が終了した時点で腫瘍がなかった。
【００５０】
表１に示すように、許容できない体重減少、または許容できない数の死のため、ＣＩ−１０４０は、カペシタビン７５０ｍｇ／ｋｇとともに１５０または３００ｍｇ／ｋｇ／回で投与することができなかった。許容できない数の死故に、やはり、５００ｍｇ／ｋｇのカペシタビンと共にその最も高い用量のＣＩ−１０４０を与えることができなかった。７５０ｍｇ／ｋｇのカペシタビンと組み合わせた７５ｍｇ／ｋｇ／回のＣＩ−１０４０は、１００％の完全腫瘍応答をもたらした。これらのマウスの６０パーセントは、研究が終了した時点で腫瘍がなかった。
【表１】
2006508974.tif 000002
【００５１】
実施例２
下記の表２は、実施例１の手法に従い、ＣＩ−１０４０をカペシタビンの前に投与した時にもたらされた抗腫瘍効果を示す。ＣＩ−１０４０は、３７．５、７５、１５０および３００ｍｇ／ｋｇ／回の用量で１日３回経口的に与えた。実施例１の結果と一致して、Ｃ２６／クローン１０マウス結腸癌を有する賦形剤投与対照群マウスは、それらの初めの体重の１０％を失った。３００ｍｇ／ｋｇ／回でＣＩ−１０４０のみを用いて治療したマウスの群で１匹が死んだ。（このマウスは、１９日目に死んでいるのが発見され、その初めの体重の２２％を失っていた。）この死は、薬物が関係しているとは考えられないが、その原因は分からなかった。やはり実施例１の結果と一致して、賦形剤投与対照群マウスの腫瘍は通常の速度で成長し、非治療対照群マウスの腫瘍の成長と著しく異なることはなかった。この群の残りのマウスは、１９日までに体重が５．３％増えた。他のＣＩ−１０４０投与群における死は見られず、実施例１と一致し、ＣＩ−１０４０は、抗悪液質作用を有した。ＣＩ−１０４０の単独投与は、０．８から９．９日にわたる腫瘍成長遅延における用量に依存した増加をもたらした。３００ｍｇ／ｋｇ／回で、ＣＩ−１０４０は、完全腫瘍応答はもたらさず、６０％の部分的腫瘍応答をもたらした。ＣＩ−１０４０の他の用量では、完全腫瘍応答も部分的腫瘍応答も見られなかった。
【００５２】
カペシタビンを単独投与した二つの群の各々で１匹が死んだ。高用量ＣＩ−１０４０群で見られた死のように、これらの死は、一般的にこれらの用量のカペシタビンが死をもたらさないことから、やはり異常であった。カペシタビンを単独投与した二つの群の死は、最後の投与の数日後に起き、それらの原因は分からなかった。カペシタビンは、１０．４から１９．１日にわたる腫瘍成長遅延における用量に依存した増加をもたらした。５００ｍｇ／ｋｇ／日で、カペシタビンは、完全腫瘍応答はもたらさず、１０％の部分的腫瘍応答をもたらした。最も高い用量のカペシタビンは、５０％の完全腫瘍応答および２０％の部分的腫瘍応答をもたらした。完全腫瘍応答を有するマウスの３０パーセントは、４１日目に実験が終了した時点でまだ腫瘍がなかった。
【００５３】
ＣＩ−１０４０をカペシタビンの前に投与した場合、これらの２種の薬物の全ての用量の組合せが十分許容された。最も大きい体重減少は、賦形剤投与対照群で見られたものと差がなく、たいていの場合、この対照群の体重減少より深刻ではなかった。死は、ＣＩ−１０４０およびカペシタビンを投与したいずれの併用群においても全く見られなかった。併用群において死がないということは、単一の薬物群における死が薬物と関係がないという見解を支持する。ＣＩ−１０４０を低用量のカペシタビンと組み合わせた群においては、完全腫瘍応答も部分腫瘍応答もなかった。腫瘍成長遅延は、最も低用量の併用の１．２日から高用量の併用の１７．５日までの範囲であった。最も高用量のＣＩ−１０４０および最も高用量のカペシタビンで治療した群では、完全腫瘍応答はなく、１０％の部分腫瘍応答があった。７５０ｍｇ／ｋｇ用量のカペシタビンを用いる他の併用群では、完全腫瘍応答も部分的腫瘍応答もなかった。高用量のカペシタビンを用いる併用群における腫瘍成長遅延は、低用量のカペシタビンを用いる併用群と同様であった。
【表２】
2006508974.tif 000003
【００５４】
実施例３
下記の表３は、実施例１の手法に従い、カペシタビンを用いる治療の後にＣＩ−１０４０を用いる治療が続く場合にもたらされた抗腫瘍効果を示す。実施例１と一致して、賦形剤投与対照群において腫瘍によりもたらされた１０．５％の体重減少があった。賦形剤投与対照群マウスの腫瘍は、通常の速度で成長し、非治療対照群マウスの腫瘍の成長と著しく異ならなかった。ＣＩ−１０４０は、全用量で十分許容された。マウスの体重の改善は、実施例１および２で見られたものほど良くなかった。体重減少は、５．３％から１０．５％にわたった。ＣＩ−１０４０単独を与えられた群のいずれにおいても完全腫瘍応答はなかった。しかしながら、４０％の部分腫瘍応答が、最も高い用量のＣＩ−１０４０を投与した群で見られ、そして１０％の応答が７５および１５０ｍｇ／ｋｇ／回のＣＩ−１０４０を投与した群で見られた。最も低用量のＣＩ−１０４０で治療した群では、完全腫瘍応答も部分腫瘍応答もみられなかった。ＣＩ−１０４０は、１．９日から１２．５日にわたる腫瘍成長遅延における用量に依存した増加をもたらした。
【００５５】
カペシタビン単独で治療した二つの群において、死はなく、体重減少は、ＣＩ−１０４０単独で治療した群に見られたものと同様であった。５００ｍｇ／ｋｇ用量のカペシタビンは、いずれの完全または部分的腫瘍応答ももたらさなかった。７５０ｍｇ／ｋｇのカペシタビンを投与した群においては、完全腫瘍応答はなく、４０％の部分的腫瘍応答があった。低用量および高用量のカペシタビンは、それぞれ１３．４および１４．６日の実質的に同じ腫瘍成長遅延をもたらした。
【００５６】
表３は、カペシタビンを用いる治療の後にＣＩ−１０４０を用いる治療が続く場合に観察された相乗効果を示す。マウスを５００ｍｇ／ｋｇのカペシタビンで初めに治療し、次いで３７．５から３００ｍｇ／ｋｇ／回の用量でＣＩ−１０４０を用いて治療した場合、死はなかった。やはり、体重減少は、賦形剤投与対照群で見られたものと同様であった。最善の抗腫瘍活性が、５００ｍｇ／ｋｇのカペシタビンを用いる治療の後に１５０または３００ｍｇ／ｋｇ／回のいずれかのＣＩ−１０４０を用いる治療が続く場合に見られた。１５０ｍｇ／ｋｇ／回のＣＩ−１０４０を受けた群において、４０％の完全腫瘍応答および１０％の部分腫瘍応答があった。この組み合わせによる腫瘍成長遅延は、合計より大きい２６．６日であった。完全腫瘍応答のマウスの２０パーセントは、５６日目に実験が終了した時尚も腫瘍がなかった。５００ｍｇ／ｋｇのカペシタビンで治療した後に３００ｍｇ／ｋｇ／回のＣＩ−１０４０での治療が続く群において、６０％の完全腫瘍応答および１０％の部分腫瘍応答があった。腫瘍成長遅延は、やはり合計より大きい２７．９日であった。１０パーセントのマウスは、研究が終了した時腫瘍がなかった。より低用量のＣＩ−１０４０を与えられた群では、カペシタビン５００ｍｇ／ｋｇに続いて３７．５ｍｇ／ｋｇ／回のＣＩ−１０４０を投与した際に、わずか１０％の完全腫瘍応答が見られた。カペシタビン５００ｍｇ／ｋｇと、３７．５または７５ｍｇ／ｋｇ／回のＣＩ−１０４０との併用による腫瘍成長遅延は、いずれかの薬物単独によるものより良かった。７５０ｍｇ／ｋｇのカペシタビンと、１５０または３００ｍｇ／ｋｇ／回のＣＩ−１０４０とを与えられた群における許容性は、それほど良くなかった。これらの組合せでは、１０％が死んだ。しかしながら、体重減少は、賦形剤対照群におけるものよりも少なかった。高用量のカペシタビンとの全ての組合せにおいて、腫瘍の縮小が見られた。これらの組合せにおいて、完全応答の割合は、２０％から６０％にわたり、実験が終了した時１０％から２０％のマウスは腫瘍がなかった。部分腫瘍応答の割合は、０％から４０％にわたり、腫瘍成長遅延は１９．２から３５．６日に及んだ。これらの腫瘍成長遅延は、いずれかの薬物単独によりもたらされたものより大きかった。共に用いる場合のこれらの物質の能力は、抗腫瘍薬として相乗作用がある組合せを確立する。
【表３】
2006508974.tif 000004
【００５７】
実施例４
腫瘍モデル．
ＣＯＬＯ−２０５ヒト結腸癌異種移植片を、雌性ＮＣｒ−ｎｕ無胸腺マウスの皮下移植片として連続移植により維持した。同様の移植片を用いて化合物Ａおよびカペシタビンの抗腫瘍作用を評価した。実施例１で説明した方法を、腫瘍移植および腫瘍成長の測定に用いた。実施例４、５、および６で説明される３種の実験を、それぞれ異なる組合せの治療方式を用いて実施した。全てのマウスは、治療開始時に≧１７グラムの体重があった。平均の群体重は、３種の実験の中で及びまたがって十分釣り合っていた。実施例４、５および６の初めの治療時の平均群体重および関連の範囲は、それぞれ、２１．１（２０−２２）、２２．４（２１−２４）、および２４．２（２４−２５）グラムであった。マウスは、食物および水を自由に供給された。試験動物は、０日に１２ゲージのトロカール針を用い３０から６０ｍｇの腫瘍断片を皮下的に移植された。腫瘍を、週に２回カリパスで測定した。腫瘍の重量を、以下の等式：
腫瘍重量（ｍｇ）＝（ａｘｂ２）／２
｛ここで、”ａ”および”ｂ”は、それぞれｍｍでの腫瘍の長さおよび幅の寸法である｝によりカリパス測定から算定した。
【００５８】
実施例４、５、および６の初めの腫瘍量は、やはり３種の研究の中で及びまたがって十分釣り合っていた。３種の実験の初めの腫瘍量中央値および関連の範囲は、それぞれ、２３０（２２１−２３７）、２２１（２１６−２７０）、および２２１（２１６−２７０）ｍｇであった。このように、治療は、進行腫瘍期で開始した。
【００５９】
抗腫瘍薬．
化合物Ａを、０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび０．２％Ｔｗｅｅｎ−８０水溶液に懸濁し、チューブによる強制栄養により０．５ｍＬを経口的（ｐ．ｏ．）に投与した。カペシタビンを０．５％メチル−セルロース中に注射用に調製し、チューブによる強制栄養により投与した。
【００６０】
抗腫瘍活性の測定．
抗腫瘍活性を評価するのに用いた指標は、以下のもの：完全および部分的腫瘍応答、腫瘍の成長遅延、ならびに研究の最後で腫瘍のないマウスの数であった。完全応答を腫瘍量の１００％減少として分類し、部分的応答を腫瘍量の少なくとも５０％減少として分類した。腫瘍量の減少に加えて、腫瘍成長遅延（上記で挙げたコルベット等により説明された方法により測定されるような）を用いて、完全には応答しなかった、または完全応答後に再成長した腫瘍についての抗腫瘍活性を定量した。腫瘍成長遅延は、Ｔ−Ｃ値として表され、ここで”Ｔ”および”Ｃ”は、治療群および対照群（それぞれ）の腫瘍が所定のサイズである７５０ｍｇ（”評価サイズ”）に達するのに要した日数の中央値である。腫瘍成長遅延値から、正味のｌｏｇ１０腫瘍細胞死滅を、次の通りに算定した：
正味のｌｏｇ１０腫瘍細胞死滅＝［（Ｔ−Ｃ）−Ｒｘ］／３．３２ｘＴｄ
ここで、”Ｔｄ”は、腫瘍量が倍になる日数であり、”Ｒｘ”は、治療の全日数である。
【００６１】
Ｔｄを、指数関数的成長（２００から８００ｍｇの範囲）の対照群腫瘍の対数線形プロットの最もふさわしい直線から算出した。実施例４、５および６の対照群の平均Ｔｄｓは、それぞれ、８．８、９、および１１．２日であった。個々の実験内で倍増時間における実質的変動を観察した。個々のマウスのＴｄｓの範囲は、実施例４、５、および６でそれぞれ３．８−１５．８、５．８−１３．９、および５．４−２０．１であった。治療後再成長している腫瘍のＴｄが治療していない対照マウスのそれとほぼ同じである場合のみ、Ｔ−Ｃ値のｌｏｇ１０細胞死滅への変換が成り立つ。正味のｌｏｇ１０死滅値は、種々の期間の治療方式の効力データおよび複数の実験またはモデル間の腫瘍成長速度における相違を標準化することにより、複数の実験プロトコールにまたがる及びモデルにまたがる効力の量的比較を可能にする。正の値は、前治療量と比較して治療の終点で腫瘍量の実際の減少が起こったことを示す。負の値は、治療の間に腫瘍が実際に成長した（おそらく、対照腫瘍より緩慢ではあるが）ことを示す。従って、負の正味死滅値は、必ずしも活性の完全な欠如を示唆するものではない。腫瘍がない生存動物は、正味の死滅の計算から排除した。
【００６２】
対照の腫瘍成長は、全ての実験で正常の境界内であった。賦形剤を投与した及び投与しなかった動物は、おそらく疾患の進行および／または薬物服用に関連した外傷のため、治療中に０から９％の間の体重を失った。これらの研究の結果を、表４−６にまとめる。
【００６３】
結果．
化合物Ａをカペシタビンの前に投与した場合にもたらされた抗腫瘍活性を、表４に示す。化合物Ａを、単一物質として腫瘍移植後１６−２９日にｑｄで３．１３から２５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で与えた。２５ｍｇ／ｋｇ水準は許容されず、１２．５ｍｇ／ｋｇが最大許容量（ＭＴＤ）と考えられた。治療方式の初期に起こった体重減少は概ね限られており（＜５％）、完全な回復は、代表的には、３．１３から２５ｍｇ／ｋｇの用量での継続治療中に観察された。化合物Ａは、この腫瘍モデルに対して活性であり、全ての許容量で＞５０％の完全な後退およびＭＴＤで４２日までの用量に依存した成長遅延をもたらした。正味の死滅算定は、＞１０％の腫瘍細胞が全ての許容量水準での治療を生き残ったことを示唆する。
【００６４】
カペシタビンを、単一物質として腫瘍移植後１６−２９日にチューブによる強制栄養により５００および６５０ｍｇ／ｋｇの用量で与えた。どちらの用量水準も致死的ではないが、体重の１９％減少が６５０ｍｇ／ｋｇ用量水準で観察された。６５０ｍｇ／ｋｇ用量水準は、この実験におけるＭＴＤだと言明された。カペシタビンは、この腫瘍モデルに対して用量依存的に活性であり、腫瘍量のおよそ１−ｌｏｇ減少を示唆する腫瘍後退および実質的腫瘍成長遅延をもたらした。
【００６５】
この実験は、カペシタビンのコースの前に与えられるＭＥＫ阻害剤を用いる連続治療を調査した。従って、併用治療方式において、カペシタビンは３０から４３日目にチューブによる強制栄養により与えられ、一方、化合物Ａは１６から２９日目に与えられた。２５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａを含む全ての併用治療方式が、毒性であった。全ての他の併用治療方式が、許容され（≦ＬＤ１０および／または＜２０％体重減少）、従って、効力を評価された。化合物Ａ単一物質の力の研究において認められた完全な後退の高い頻度故に、完全応答（”ＣＲ”）および部分的応答（”ＰＲ”）測定は、単一物質および併用療法間の有用な差別尺度を提供しなかった。しかしながら、腫瘍移植の１８８日後に腫瘍のない生存動物の頻度は、全ての併用治療方式のほうが、対応する単一物質治療方式で見られたものより一致して高かった。加えて、大抵の併用治療方式は、最善の単一物質治療方式によりもたらされたものよりも著しく長い腫瘍成長遅延をもたらした。６種の許容併用治療方式の内４種は、最適の単一物質療法より０．１から０．３ｌｏｇｓ良い正味の腫瘍細胞死滅値をもたらした。従って、化合物Ａの投与の後にカペシタビンの投与が続く連続併用療法は、同等の毒性を有する最適な単一物質療法よりも僅かに活性であると考えられる。低用量群の分析は、これら２種の物質の活性がこのプロトコールに関して実質的に合計であることを示唆する。
【表４】
2006508974.tif 000005
【００６６】
実施例５
下記の表５は、実施例４の手法に従いカペシタビンでの治療の後に化合物Ａでの治療が続いた場合にもたらされた抗腫瘍効果を示す。化合物Ａを、単一物質として腫瘍移植後１８−３１日目に３．１３から２５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で与えた。２５ｍｇ／ｋｇ水準は許容されず、１２．５ｍｇ／ｋｇはＭＴＤと考えられた。治療方式の初期に起こった体重減少は概ね限られており（０−５％）、完全な回復は、代表的には、３．１３から１２．５ｍｇ／ｋｇの用量での継続治療中に観察された。化合物Ａは、この腫瘍モデルに対して活性であり、全ての許容量で完全な後退および５０日までの用量に依存した成長遅延をもたらした。正味の死滅算定は、＞１０％の腫瘍細胞が大抵の許容量水準での治療を生き残ったことを示唆する。この実験における活性は、実施例４のそれに匹敵し、用量応答にわたり、実施例６のそれより僅かに勝っていた。
【００６７】
カペシタビンを、単一物質として腫瘍移植後１８−３１日目にチューブによる強制栄養により５００および６５０ｍｇ／ｋｇの用量で与えた。両方の用量水準が許容され、６５０ｍｇ／ｋｇは、この実験におけるＭＴＤだと言明された。カペシタビンは、やはり、用量依存様式で活性であり、腫瘍量のおよそ０．５ｌｏｇ減少を示唆する腫瘍後退および実質的腫瘍成長遅延をもたらした。活性は、実験実施例４で観察されたそれより概ね低く、実施例６のそれに匹敵した。
【００６８】
この実験は、ＭＥＫ阻害剤のコースの前に与えられるカペシタビンを用いる連続療法を調査した。従って、併用治療方式において、カペシタビンは１８−３１日目にチューブによる強制栄養により与えられ、一方、化合物Ａは３２−４５日目に与えられた。この実験の併用治療方式の多くが、毒性であった。６５０ｍｇ／ｋｇのカペシタビンで、低用量の化合物Ａのみが、併用において許容された。３．１３および６．２５ｍｇ／ｋｇ用量水準の化合物Ａのみが、５００ｍｇ／ｋｇのカペシタビンとの併用で許容された。従って、３種の併用治療方式のみが、効力を評価することができた。これらの２種は、観察された最善の単一物質活性よりも良い１．５ｌｏｇｓ、０．２ｌｏｇの正味細胞死滅値をもたらした。腫瘍のない生存動物の頻度は、これらの併用治療方式のほうが、単一物質の各効力の実験のそれより高くなかった。低用量群の分析によると、合計の活性よりも少ないことが示唆された。従って、カペシタビンの投与の後に化合物Ａの投与が続く連続併用は、最も活性な単一物質の最適な使用と比較して僅かな有益性を提供すると考えられる。
【表５】
2006508974.tif 000006
【００６９】
実施例６
下記の表６は、実施例４の手法に従い化合物Ａおよびカペシタビンを同時に投与した場合にもたらされた抗腫瘍活性を示す。
【００７０】
化合物Ａを、単一物質として腫瘍移植後１７−３０日目に３．１３から２５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で与えた。２５ｍｇ／ｋｇ水準は許容されず、１２．５ｍｇ／ｋｇはＭＴＤと考えられた。治療方式の初期に起こった体重減少は概ね限られており（４−８％）、完全な回復は、代表的には、３．１３から１２．５ｍｇ／ｋｇの用量での継続療法中に観察された。化合物Ａは、この腫瘍モデルに対してもう一度活性であり、全ての許容量で完全な後退および７０日までの用量に依存した成長遅延をもたらした。正味の死滅算定は、＜１０％の腫瘍細胞がＭＴＤでの治療を生き残ったことを示唆する。腫瘍量は、残りの用量水準で実質的に一定に保持された。この実験で、活性は、１２．５ｍｇ／ｋｇ未満の用量水準で急速に低下すると考えられる。実際の腫瘍成長曲線の精査は、１２．５ｍｇ／ｋｇ水準での腫瘍成長は治療後対照成長速度に戻ることができず、その代わり腫瘍がおよそ５００ｍｇに達した後横ばいになったことを示す。これは、実験の最終段階としての正味細胞死滅の使用を複雑にする。全体として、この実験における化合物Ａの活性は、実施例４および５におけるそれと同等か又は幾分低かった。
【００７１】
カペシタビンを、単一物質として腫瘍移植後１７−３０日目にチューブによる強制栄養により５００および６５０ｍｇ／ｋｇの用量で与えた。両方の用量水準が許容され、６５０ｍｇ／ｋｇは、この実験におけるＭＴＤだと言明された。カペシタビンは、この実験で活性であり、腫瘍量のおよそ０．５ｌｏｇ減少を示唆する腫瘍後退および実質的腫瘍成長遅延をもたらした。用量応答は、この研究においては逆転しており、より高い活性が５００ｍｇ／ｋｇ用量水準で見られた。全体として、カペシタビン活性は、実験実施例４のそれより概ね低く、実施例５のそれに匹敵した。
【００７２】
この実験は、両方とも１７−３０日目に与えられるカペシタビンおよびＰＤ３２５９０１を用いる同時療法を調査した。この実験の併用治療方式の多くが毒性であった。３種の併用治療方式のみが、効力を評価することができた。これらの１種、６．２５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａおよび６５０ｍｇ／ｋｇのカペシタビンは、１００％の完全な後退、１．９ｌｏｇｓの正味細胞死滅値および１２９日目での４０％の腫瘍のない生存動物をもたらした。これは、それらのＭＴＤｓでのどちらかの単一物質と比較して著しく卓越した活性である。他の併用治療方式は、最適の単一物質療法より劣っていた。
【表６】
2006508974.tif 000007
【国際調査報告】
2006508974.tif 000008
2006508974.tif 000009
2006508974.tif 000010
2006508974.tif 000011
2006508974.tif 000012
2006508974.tif 000013