(57)【要約】活性物質として、多形性チボロン及び医薬適合性の賦形剤を含有する即時放出性薬物剤形であって、多形性チボロンが、剤形中で２２．８μｍ以下の明細書中で定義されたような平均粒子サイズを有する薬物剤形。【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性物質として、多形性チボロン及び医薬適合性の賦形剤を含有する即時放出性薬物剤形であって、多形性チボロンが、剤形中で２２．８μｍ以下の平均粒子サイズを有する薬物剤形。
【請求項２】
剤形中の多形性チボロンの平均粒子サイズが２０μｍ以下である、請求項１に記載の薬物剤形。
【請求項３】
剤形中で２２．８μｍ以下の平均粒子サイズを有する多形性チボロンのチボロン粒子を得ること、該チボロン粒子を、少なくとも１種の医薬適合性の賦形剤と混合して、混合物を得ること、及び該混合物を圧縮して、固体薬物配合物を形成することを含む、請求項１又は２に記載の薬物剤形の製造方法。
【請求項４】
前記チボロン粒子を得ることが、固体多形性チボロンを粉砕して、剤形中で２２．８μｍ以下の平均粒子サイズを有するチボロン粒子を製造することを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記チボロン粒子を得ることが、剤形中で２２．８μｍ以下の平均粒子サイズを有する多形性チボロン粒子を合成することを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記チボロン粒子を得ることが、剤形中で２０μｍ以下の平均粒子サイズを有するチボロン粒子を得ることを含む、請求項３から５の何れか１項に記載の方法。
【請求項７】
骨粗鬆症を含む閉経期及び閉経後愁訴の治療又は予防のための薬物の製造のための多形性チボロンの使用であって、多形性チボロンが、剤形中で２２．８μｍ以下の明細書中に定義されたような平均粒子サイズを有する使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、活性物質として、（７α，１７α）−１７−ヒドロキシ−７−メチル−１９−ノル−１７−プレグン−５（１０）−エン−２０−イン−３−オン（チボロン）を含有する、即時放出性薬物剤形に関する。
【背景技術】
【０００２】
チボロンは、閉経期（閉経後）女性に於けるホルモン補充療法（ＨＲＴ）に於いて、更年期愁訴、血管運動症状、骨粗鬆症及び膣萎縮症を含む、閉経期及び閉経後異常症の治療のために使用することができる、組織特異的及び有効な薬剤として知られている。特に、米国特許第５，０３７，８１７号明細書及び国際特許出願公開第９８／４７５１７号明細書参照。
【０００３】
過去多年に亘って、チボロンが、比較的複雑な代謝パターンを示すことが知られるようになってきた。チボロン自体とは異なる幾つかの化合物は、活性代謝物としての役割を果たす。このことは、２種の異なったチボロン製品がお互いに生物学的同等であるかどうか予言することを困難にしている。代謝物によりその活性を発揮する化合物の生物学的同等性は、インビボで、代謝物の血漿レベルを分析することによって測定することができる。しかしながら、このことは、２種以上の代謝物を有する、チボロンのような化合物の場合には、遙かに複雑な事柄である。
【０００４】
経口投与での薬剤物質の相対バイオアベイラビリティーを分析するための基準を設定するために、一つの方法は、治療的ウィンドウ内の適切な投薬量のために、薬剤への最大曝露が与えられるモデルを選択することである。このような最大曝露を達成するための一つの実用的な方法は、溶液の形態で薬剤を提供することである。通常の予想は、固体形態にある薬剤のバイオアベイラビリティーが、溶液の場合のそれよりも低いことである。特に、Ｒｏｂｅｒｔ  Ｅ．Ｎｏｔａｒｉ、生物薬剤学及び臨床薬物動力学（Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ）、第４版（１９８７年）、第１４０頁参照。
【０００５】
チボロンの場合に、この実験は予想されない結果になることが見出された。異なった固体配合物について、分析が、２種の主な代謝物、即ち、３α−ＯＨチボロン及び３β−ＯＨチボロンでなされた。この発見は、これらの内の１種である３α−ＯＨチボロンが、チボロンの粒子サイズに依存して、チボロンの溶液に比較して、より良く生体利用可能となることが分かったことである。バイオアベイラビリティーに於けるこの増加は、他の上記の代謝物である３β−ＯＨチボロンについて適用されないので、明白な説明を与えることはできなかった。
【０００６】
予想されなかった結果自体であることと並んで、３α−ＯＨチボロンは、チボロンのエストロゲン様効果（これは、本来、ＨＲＴ薬としてのその顕著な有用性に於いて役割を演じる）の重要な部分に関連性であるので、これは、溶液に比較したとき固体薬物製品の改良である。
【０００７】
更に、この結果は、チボロンを含有する２種の異なった剤形の生物学的同等性を予測することの困難性を強調している。
【０００８】
欧州特許出願公開第３８９０３５号明細書に於いて、活性物質である（７α，１７α）−１７−ヒドロキシ−７−メチル−１９−ノル−１７−プレグン−５（１０）−エン−２０−イン−３−オン（チボロン）は、多形性であり、２種の結晶性純粋形で存在することが見出された。更に、欧州特許出願公開第３８９０３５号明細書には、多形性化合物を薬物として使用する場合、その結晶性純粋成分に比較して、大きい欠点がそれに付随することが示されている。結晶構造に於ける差異は、しばしば多形性化合物の結晶形によって強く影響される、安定性、溶解速度、融点、分析データなどのような物理化学的パラメーターに於ける差異を導き得る。欧州特許出願公開第３８９０３５号明細書には、それで、純度が９０％よりも高い結晶性純粋形を使用すべきであることが示されている。
【０００９】
活性物質として、（７α，１７α）−１７−ヒドロキシ−７−メチル−１９−ノル−１７−プレグン−５（１０）−エン−２０−イン−３−オン（チボロン）を含有する薬物剤形は、現在、欧州市場で、名称リビアル（Ｌｉｖｉａｌ）（登録商標）で２．５ｍｇチボロン経口用量単位として入手可能である。これらの用量単位には、少なくとも９８％の純度の結晶性純粋形（以下、形態Ｉと言う）で、（７α，１７α）−１７−ヒドロキシ−７−メチル−１９−ノル−１７−プレグン−５（１０）−エン−２０−イン−３−オン（チボロン）が含有されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
活性物質としてチボロン（チボロンは、結晶性純粋である）を含有する薬物用量単位の調製は、複雑で且つ面倒である。活性物質を特別の結晶性純度で製造しなくてはならないのみならず、結晶性純度を、薬物用量単位のための工業的規模製造方法を通して維持する必要がある。それで、活性性物質として、多形性チボロンを含有する薬物用量単位を提供することが望ましい。しかしながら、活性物質として多形性チボロンを含有するこの用量単位は、市場に出ている製品と同様の３α−ＯＨチボロンのバイオアベイラビリティーを有していなくてはならない。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
驚くべきことに、多形性チボロンが２２．８μｍ以下の平均粒子サイズで剤形中に存在する、多形性チボロンを含有する剤形が、市場に出ている製品と同様の３α−ＯＨチボロンのバイオアベイラビリティーを有することが見出された。この発見によって、大きい経済的利点を有し得る多形性化合物を使用することが可能になる。
【００１２】
そこで、本発明は、多形性化合物として活性物質チボロンを含有する薬物剤形であって、市場に出ている製品と同様の方法で、最大曝露を有する参照状態、即ち、チボロンの溶液に比較したとき、３α−ＯＨチボロンのアベイラビリティーの改善を示す薬物剤形にある。
【００１３】
本発明に従った即時放出性薬物剤形は、以下に記載する技術によって測定したとき、剤形中に２２．８μｍ以下の平均粒子サイズで多形性化合物としてのチボロンを含有することによって特徴付けられる。好ましくは、剤形中の多形性チボロンの平均粒子サイズは、２０μｍ以下である。好ましくは、この薬物剤形は固体の経口剤形である。
【００１４】
上記のことに加えて、３α−ＯＨチボロンが測定されない場合には、２種のチボロン製品の生物学的同等性の全ての評価は失敗することが認識された。これは、１種のチボロン製品が他のチボロン製品と生物学的同等であるかどうかを検査する方法であって、そこでは、生物学的同等性が、インビボで、チボロン（その一方は、３α−ＯＨチボロンである）の１種以上の代謝物の血漿レベルを分析することによって決定される方法である、本発明の他の局面を導く。
【００１５】
本発明のための主な必要条件には、多形性チボロンの薬物組成物が提供されること及びこの多形性チボロンが、剤形中に含有されるとき、前記定義された通りの粒子サイズを有することが含まれる。
【００１６】
「多形性」とは、活性物質が２種以上の異なった構造で結晶化したことであると理解される（例えば、メリアム−ウェブスター社（Ｍｅｒｒｉａｍ−Ｗｅｂｓｔｅｒ  Ｉｎｃ．）によって１９９３年に発行された、ウェブスターの第三版国際辞書（Ｗｅｂｓｔｅｒ’ｓ  ｔｈｉｒｄ  ｎｅｗ  ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ）参照）。更に特に、この活性物質には、それぞれ少なくとも１０重量％の量で存在する、少なくとも２種の異なった結晶構造物が含まれる。
【００１７】
チボロンの製造のために、米国特許第３，３４０，２７９号明細書が参照される。
【００１８】
必要な粒子サイズを有する多形性チボロンは、幾つかの方法で提供することができる。労力を要し経済的ではないけれども単純な方法は、任意の固体形で多形性チボロンを製造し、得られた粒子を、適切なメッシュサイズを使用して篩分けして、大きすぎる粒子を篩い分けるだけである。代替方法は、最初に、活性物質を医薬適合性の担体（例えば、錠剤化又はカプセルの充填のために通常使用されるベース粒状体）で希釈し、次いで、製品を篩分けすることである。この場合に、担体材料は、活性物質のサイズを減少する際の加工助剤として有効に働く（活性物質の最終最大粒子サイズは、スクリーンのメッシュサイズによって決定されたままである）。この必要な装置及びこれらの篩分け方法は、当業者に公知である。他の方法は、やはり、任意の固体形で多形性チボロンを製造し、次いで、これを粉砕工程に付し、そこで必要な粒子サイズを得ることだけである。適切な粉砕装置は、当業者に公知である。最初に多形性チボロンを製造し、次いで、それを正しい粒子サイズにする代わりに、合成の間、特に、結晶化の間に測定を行って、多形性チボロンを所望の粒子サイズで実際に得ることもできる。このために必要な正確な条件は、使用される装置及び反応環境に依存する。所望のサイズの粒子を提供する際の一般的な教科書文献として、Ｇｅｎｎａｒｏ他著、レミントンの薬科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、（第１８版、マック・パブリッシング社（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、１９９０年、第１４３６−１４３７頁及び第１６１５−１６３２頁）が参照される。
【００１９】
過度の実験を回避するために、多形性チボロンの粒子サイズが、即時放出性剤形（圧縮された錠剤、カプセル剤など）に一旦組込まれたとき、適切であるかどうかに関する比較的単純な試験を実施することができる。これは、２．５ｍｇチボロンの用量のために規格化された溶解試験である。試験すべき剤形を、溶解媒体（ラウリル硫酸ナトリウム水溶液０．２５重量％）の中に入れる。ＨＰＬＣのような適切な技術の手段によって、定められた時点で、どれだけの量のチボロンが媒体中に溶解されたかが測定される。これによって、ｔ５０％値、即ち、チボロンの５０％、即ち１．２５ｍｇが溶解された時点によって与えられる、チボロンの溶解速度を決定することが可能である。２３．１分以下のｔ５０％値が、本発明に従った多形性チボロンの粒子サイズに相関する。この試験が、２．５ｍｇの用量に対して規格化されることが不可欠である。図１に、多形性チボロンの粒子サイズと、チボロンを含有する固体即時放出性経口用量単位（錠剤）の溶解速度（ｔ５０％）との間の相関関係を示す。このような相関関係は、即時放出性剤形の場合に一般的に有効である。上記のように、ｔ５０％は、薬物の５０％がインビトロで溶解するために必要な時間である。ｔ５０％は、＞５０％の薬物が溶解した第１点と、前の点、即ち、開始後５、１０、１５、３０及び４５分であるサンプリング点との間の線形内挿手段によって計算することができる。
【００２０】
適用される皮膜により慎重に改変されていない活性チボロンの放出を示す単純な被覆錠剤は、多形性チボロンの粒子サイズに依存する溶解速度を評価するために、好ましくは破壊される。
【００２１】
崩壊は、飲み込む前に噛み砕くことが意図されるもの及び徐放性錠剤の幾つかの種類を除いて、口を介する投与のための即時放出性経口固体用量単位の本質的な属性である。崩壊した即時放出性経口用量単位によって、多形性チボロン粒子を胃腸内容物の中に懸濁させ、溶解させることが可能になる。
【００２２】
２２．８μｍ以下の平均粒子サイズでの固体多形性チボロン粒子の経口投与された液体即時放出性懸濁剤の使用も、胃腸管の中に溶解させるために固体チボロン粒子を直ちに分布させるために適用可能である。
【００２３】
多形性チボロンが、賦形剤と混合する前に、適切な粒子サイズで提供された場合には、その後これを賦形剤と混合することができる。最終的に、多形性チボロンと賦形剤との混合物は（どのようにして得られようとも）、公知の方法で固体薬物用量単位の中に含有させることができる。その中のチボロンの投薬量は、通常、０．３ｍｇから５．０ｍｇ／用量単位、更に特に０．６２５、１．２５又は２．５ｍｇのオーダーである。
【００２４】
本発明の即時放出型の薬物用量単位は、一般に、錠剤、単純被覆錠剤又はカプセル剤の形をとるが、他の固体又は乾式薬物製剤が含まれる。即時放出型の剤形は、チボロン粒子の液体懸濁液を包含することもできる。
【００２５】
このような用量単位の製造方法は公知である。例えば、前記のＧｅｎｎａｒｏ他著、レミントンの薬科学に於いて、第８部：薬物製剤及びそれらの製造（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ）が特に参照され、そこには、錠剤、カプセル剤及び丸剤の製造方法並びにそれらのそれぞれの成分が記載されている。
【００２６】
錠剤及びカプセル剤の３種の製造方法には、湿式顆粒化、乾式顆粒化及び直接圧縮方法が含まれる。
【００２７】
湿式顆粒化方法には、成分（活性物質及び賦形剤、溶媒を含む）を秤量すること、成分を混合すること、これらを顆粒化すること、これらを湿った状態で篩い分けすること、これらを乾燥させること、乾燥篩い分けすること、滑らかにすること及び得られた混合物を錠剤に圧縮すること又はそれをカプセルに充填することが含まれる。このような手順の結果、少なくとも適切な均一性及び安定性を有する錠剤又はカプセル剤になる。
【００２８】
直接圧縮方法には、直接圧縮ビヒクル（担体を含む）及び活性成分を秤量すること、これらの成分を混合すること、滑らかにすること及び得られた混合物を錠剤に圧縮すること又はそれをカプセルに充填することが含まれる。
【００２９】
薬物用量単位中の活性物質のための担体は、当業者に一般的に知られており、ここで別に説明する必要はない。
【００３０】
湿式顆粒化は、液体（例えば、好ましくはバインダーを含有する水）が、凝集体又は顆粒を製造するために、湿式顆粒化で適用される点で、乾式顆粒化及び乾式混合から区別される。
【００３１】
薬物工業に於いて最も広く使用されている顆粒化方法は、流動床顆粒化及び湿式塊状化（ｗｅｔ−ｍａｓｓｉｎｇ）方法（顆粒又は凝集体を与える任意の形式の攪拌を装着した容器内で、液体を粉末又は顆粒に添加する）である。賦形剤の粉砕、粉砕した粉末の混合、バインダー溶液の調製、湿潤塊を形成するためのバインダー溶液と粉末混合物との混合、この塊の顆粒化、湿った塊の粗い篩分け、湿った顆粒の乾燥及び乾燥顆粒の篩分けを含む種々の操作を、湿式（塊状化）顆粒化に於いて認めることができる。選択された賦形剤並びにバッチ及び選択された装置のサイズに依存して、操作の幾つかを組み合わせることができるか若しくは操作の幾つかは必要ないか又は特別の操作を含めることができることは自明である。顆粒を製造するための一般的な方法は、例えば、薬物剤形（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ）：錠剤（Ｔａｂｌｅｔｓ）（第Ｉ巻）、Ｈ．Ａ．Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ、Ｌ．Ｌａｃｈｍａｎ、Ｊ．Ｂ．Ｓｃｈｗａｒｔｚ編（１９８９年）、マルセル・デッカー社（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ  Ｉｎｃ．）、ニューヨーク及びバーゼル（Ｂａｓｅｌ）、第１３１−１９０頁に記載されている。
【００３２】
湿式顆粒化の利点には、粉末の凝集性及び圧縮性の改良、良好な粒子サイズ分布、大量のダスト及び空気中の汚染物質の減少、成分の凝離の防止が含まれる。
【００３３】
小規模製造は、乳鉢又はステンレススチールボウルの中で塊を混合し、湿らせることによって達成することができ、一方、大量の場合には、Ｖ形ブレンダー、ダブルコーンブレンダー、遊星形ミキサー、ロータリーグラニュレーター、高剪断ミキサー及び流動床顆粒化装置を適用することができる。一般的な混合方法は、薬物剤形（第２巻）、Ｈ．Ａ．Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ、Ｌ．Ｌａｃｈｍａｎ、Ｊ．Ｂ．Ｓｃｈｗａｒｔｚ編（１９９０年）、マルセル・デッカー社、ニューヨーク及びバーゼル、第１−７１頁に開示されている。乾燥賦形剤及び任意に活性成分を、適切なミキサー、好ましくは混合及び顆粒化の両方を実施できるミキサー、例えば、グラル（Ｇｒａｌ）高剪断ミキサー内で混合し、その後、水性バインダー溶液を添加する。他の好ましい方法は、活性成分をバインダー水溶液の中に懸濁させ、この懸濁液を、賦形剤の乾燥混合物に添加し、そして顆粒化させることである。
【００３４】
湿式顆粒化又は直接圧縮により製剤された顆粒剤、錠剤及びカプセル剤には、一般に慣用されている固体経口剤形の中に見出すことができる、数種の不活性物質が含まれる。この成分は、希釈剤、安定化剤、バインダー、グリダント（ｇｌｉｄａｎｔ）及び滑剤のような、配合物に満足できる加工及び圧縮特性を与えることを助ける賦形剤と、崩壊剤及び着色剤のような最終錠剤に望ましい物理的特性を与えるための賦形剤とに分類することができる。必要な場合、錠剤に、例えば、薬物剤形（第３巻）、Ｈ．Ａ．Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ、Ｌ．Ｌａｃｈｍａｎ、Ｊ．Ｂ．Ｓｃｈｗａｒｔｚ編（１９９０年）、マルセル・デッカー社、ニューヨーク及びバーゼル、第９３−１２５頁に開示されているような、フィルム皮膜又は糖衣を設けることができる。
【００３５】
希釈剤（「充填賦形剤」）は、通常、担体の主要部分を構成する。直接圧縮担体は、同じ教科書の、第１巻、第２版、第４章、第１９５−２４６頁に記載されている。直接圧縮担体は、ラクトース（噴霧乾燥したラクトース及び無水ラクトースを含む）のような水溶性ポリアルコール及びセルロースの群（例えば、アビセル（Ａｖｉｃｅｌ）（登録商標）ＰＨ１０１、ＰＨ１０２及びＰＨ２００、精製した木材セルロース）のような多糖類を含むグループと、本発明に従った水不溶性デンプン製品（例えば、変性デンプン、凝集したデンプン、顆粒化したデンプンを含む、スターチ１５００、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプン、コムギデンプン）のグループに分類することができる。
【００３６】
結合剤又は接着剤は、粉末を一緒に結合し、顆粒及び錠剤配合物に凝集性を与える物質として使用される。バインダーは乾式添加し、希釈剤及び任意に薬物とブレンドすることができる。この場合に、バインダーは、水又は他の溶媒の添加によって活性化される。他の製造手順に於いて、接着剤を液体中に溶解又はスラリー化し、この形で混合した粉末に添加する。一般的なバインダーには、ゼラチン、水溶性変性デンプン並びにスクロース、グルコース、デキストロース、糖蜜及びラクトースのような糖が含まれる。使用されてきた天然及び合成ゴムには、トラガカント、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、アカシア、アルギン酸カルシウムアンモニウム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール及びビーガム（Ｖｅｅｇｕｍ）のようなクレーが含まれる。
【００３７】
例えば、種々の液体中のバインダーの溶解度に依存して、水又は水−溶媒混合物中の溶液として、バインダーを粉末混合物に添加することができる。
【００３８】
所望により、チボロンの分解を減少させるために、安定化剤を添加することができる。このような安定化剤の例は、酸化防止剤のグループのもの（例えば、パルミチン酸アスコルビル及びステアリン酸アスコルビル）及び水溶性キレート化剤のグループのもの（例えば、ＥＤＴＡナトリウム及びアスコルビン酸ナトリウム）である。
【００３９】
流動特性を改良するための材料は、グリダントとして参照される。例として、二酸化ケイ素、ラウリル硫酸マグネシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、酸化マグネシウム、タルク又はクレーを、配合物の中に含有させて、微粒子間摩擦を減少させ、錠剤プレス内のより大きい開口からより小さい開口への材料の流れに付随する問題点を排除する。
【００４０】
崩壊剤（即時放出性剤形に於いて一般的に使用され、当業者に公知である）を、本発明の剤形に使用することもできる。
【００４１】
カプセル又はサシェに充填する前又は錠剤を圧縮する前に、加工の間の摩擦及び磨耗を防止するために、通常、滑剤が添加される。ある種の滑剤は、また、ポンチの表面及びダイ壁への錠剤顆粒化物の粘着の場合に関係し得る、接着防止特性を示す。滑剤のグループの例は、金属ステアリン酸塩（ステアリン酸マグネシウム）、タルカム、ステアリン酸、ステアリルフマル酸ナトリウム、水素化植物油及び高融点ワックスである。
【００４２】
懸濁液の製造方法は十分に確立されており、例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ他著、レミントンの薬科学（第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ及びＷｉｌｋｉｎｓ、米国バルチモア、第３９章：溶液、エマルジョン、懸濁液及び抽出物）に記載されている。
【００４３】
前記のように、本発明は、また、多形性チボロン製品が他のチボロン製品と生物学的同等であるかどうかを検査する方法に関する。更に完全に記載すると、これは、固体多形性チボロンを含有する薬物製品が、例えば、２．５ｍｇチボロン経口即時放出性用量単位リビアル（登録商標）のような、標準的チボロン製品として使用されている、チボロンを含有する他の薬物製品と生物学的同等であるかどうかの、インビボ生物学的同等性研究の手段による決定方法である。この方法は、比較試行に於いて適切な試験パネルに、その生物学的同等性を決定すべきチボロン製品及び標準的チボロン製品を投与する工程、インビボ生物学的同等性研究を実施する工程、並びに測定可能な活性化合物の血漿レベルを測定する工程を含み、活性化合物が３α−ＯＨチボロンであることを特徴とする。この方法は、チボロンを含有する現存する市場製品のコピーのマーケティング承認に於いて有用性を見出す。同じ活性物質をベースにしたオリジナル（標準）薬物製品を参照して、簡易新薬申請を提出することにより、新薬製品について規制承認を試み、そして得ることは、薬物技術分野に於いて公知である。そのために、比較試行の手段により、血液中に存在する活性物質の血漿レベルを分析し、比較することによって、新薬製品が標準薬物製品と生物学的同等であることが示される。活性物質自体が、（それ自体が測定できないために又はそれが代謝されるために）分析に適していない場合、分析のために、他の化合物（例えば、活性代謝物）を見出さなくてはならない。チボロンについてこれを行うことに伴う問題点は、代謝パターンが複雑すぎて、分析するための化合物を簡単に選択できないことである。本発明のおかげで、関連する分析は３α−ＯＨチボロンの分析であることが見出された。
【００４４】
アッセイ
上記のことから、幾つかのアッセイが、本発明を説明する際に使用されることが明らかである。これらは、任意の順序で、平均粒子サイズの測定、前記に参照した溶解試験、生物学的同等性の評価である。以下、これらを説明する。
【００４５】
粒子サイズ測定：
原理：
粒子サイズ分布は、レーザー回折分光法によって決定する。
【００４６】
装置：
サンプル分散装置を取り付けた、レーザー回折粒子サイザー。
【００４７】
試薬：
１．ポリソルベート８０、分析的等級。
２．水、精製品質（＞１０□ｍの粒子の濃度は＜１／ｍＬである）
３．ポリソルベート溶液０．０５％。
０．５グラムのポリソルベート８０（１）を、１．０リットルの水（２）中に溶解させる。
４．懸濁液体
５０ｍｇのチボロンサンプルを、５００ｍＬのポリソルベート溶液（３）に添加し、少なくとも６０分間攪拌して飽和させる。
上澄み液を濾過し、濾過した溶液を使用する。
【００４８】
器械条件：
粒子サイザー：モールバーン・マスターサイザー（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ）Ｓ又は同等物
レンズ型：３００ＲＦ（範囲０．０５μｍから９００μｍ）
活性ビーム長：２．４ｍｍ
サンプル分散装置：モールバーンＭＳ１又は同等物
サンプル流量：最大流量の３／４
スウィープ（Ｓｗｅｅｐｓ）
−サンプル数：１００００
−バックグラウンド数：１００００
表示：フラウンホーファー
分析モデル：多分散
サンプル懸濁液：
サンプルをサンプル容器内でホモジナイズする。
約３０ｍｇのサンプルを、１０ｍＬのガラス容器の中に移す。
約２ｍＬの懸濁液体（４）を添加し、容器を閉じる。
サンプルを超音波浴内で懸濁させて、脱アグロメレーションを完結する。
【００４９】
測定：
サンプル分散装置に、懸濁液体（４）を充填し、ブランクバックグラウンドを測定する。
必要な量の均質なサンプル懸濁液をサンプル分散装置の中に滴下により添加し、分析する。
【００５０】
計算：
平均粒子サイズ（但し、ｄ（４，３）＝μｍでの粒子の体積平均直径）を計算する。
【００５１】
チボロンの溶解速度
原理：
溶解後に、チボロンを、逆相液体クロマトグラフィーによって決定する。
【００５２】
装置：
１．温度制御したカラムコンパートメント及び可変波長吸収検出器を有する液体クロマトグラフ
２．米国薬局方（ＵＳＰ）−溶解＜７１１＞（櫂）に従った溶解装置２
【００５３】
試薬及び参照規格：
１．水、勾配溶離分析のために適したＨＰＬＣ等級ＵＳＰ／ＡＣＳ又は同等物（例えば、ミリ−Ｑ）。
２．メタノール、分析試薬。
３．ラウリル硫酸ナトリウム溶液９９％、メルク（Ｍｅｒｃｋ）又は同等物。
４．溶解媒体：ラウリル硫酸ナトリウム溶液０．２５重量％。
水（１）から、ヘリウム又は同等物でのパージによって、溶解している空気を除去し、その後、ラウリル硫酸ナトリウム（３）を添加する。
１０ｇのラウリル硫酸ナトリウム（３）を秤量し、２．０リットルの熱水（１）中に溶解させる。
室温にまで冷却し、室温で水（１）によって４．０リットルにまで希釈する。
泡の形成を防止するために、注意深く混合する。
５．チボロン、参照標準物質。
６．カプセルの場合に、適切なシンカー（ｓｉｎｋｅｒ）。
【００５４】
参照溶液（二重で）：
約２５ｍｇのチボロン（５）を正確に秤量し、５０ｍＬのメスフラスコの中に移す。
メタノール（２）中に溶解させ、メタノール（２）で体積にまで希釈する。
１．０ｍＬのこの溶液を、１００ｍＬのメスフラスコの中に移す。
溶解媒体（４）で体積にまで希釈する。
泡の形成を防止するために、注意深く混合する。
【００５５】
サンプル調製：
薬物物質：
約２．５ｍｇのチボロンを正確に秤量し、ゼラチンカプセルの中に移す。約２０個のガラスビーズを添加し、カプセルを閉じ、穏やかに混合する。
【００５６】
カプセルを、一対のピンセットを使用して、溶解媒体の中に入れ、カプセルを開き、溶解を開始する。
【００５７】
試験した薬物剤形のために、溶解媒体に添加するチボロンの最終量は、２．５ｍｇでなくてはならない。用量が、用量単位当たり２．５ｍｇより少ないチボロンを含有する場合には、余分の用量単位を媒体に添加しなくてはならない。
【００５８】
錠剤：
錠剤を溶解媒体に添加して、溶解を開始する。
【００５９】
カプセル剤：
カプセル剤を適切なシンカー内に置き、シンカーをカプセルと共に溶解媒体に添加し、溶解を開始する。
【００６０】
試験溶液：
米国薬局方−溶解＜７１１＞に従って試験溶液を調製する。
【００６１】
ステンレススチールカニューレを取り付けたガラス注射器（又は同等のガラス器具）を使用して、約１０ｍＬの試験溶液を取り出す。
【００６２】
溶液を直ちに遠心分離し、透明な上澄み液を使用する。
【００６３】
溶解条件：
装置：米国薬局方−溶解装置２。
溶解媒体：試薬４番を参照。
溶解媒体の体積：５００ｍＬ。
温度：３７±０．５℃。
速度：０．８３Ｈｚ（５０ｒ．ｐ．ｍ．）。
サンプリング時間：開始後、５、１０、１５、３０及び４５分。
【００６４】
クロマトグラフィー条件：
カラム：ハイパーシル（Ｈｙｐｅｒｓｉｌ）ＯＤＳ、５μｍ、１００×４．６ｍｍ又は同等物。
カラム温度：４０℃。
移動相：メタノール＋水（７７＋２３ｖ／ｖ）。
流速：０．５ｍＬ／分。
検出器：可変波長吸収検出器、２０５ｎｍ、絶対範囲  約０．１ＡＵＦＳ。
注入体積：２００μＬ。
注入の数：参照溶液：３、試験溶液：２。
溶解媒体：１。
【００６５】
システム適合性試験：
チボロンについての指示保持時間は５．０分である。
何れかの不純物がチボロンと共溶離する場合には、移動相の水濃度を変更する。
【００６６】
規準：
１．参照溶液の注入の相対標準偏差：ＲＳＤ  ３％。
２．２種の参照溶液の平均応答係数の比：０．９７  Ｑ  １．０３。
３．チボロンの位置での溶解媒体のクロマトグラムに於ける任意のピークの応答：参照溶液のクロマトグラムに於けるチボロンピークの応答に対して＜３％。
【００６７】
計算：
サンプル中に溶解したチボロンの量を計算する。
【００６８】
生物学的同等性
３α−ＯＨチボロンについてのアッセイ：
３α−ＯＨチボロンの測定のために、内部標準物質として重水素化３α−ＯＨチボロンを使用することができる。血漿サンプルを固相抽出により抽出し、その後シリル化し、そしてＣＩモードで質量分析検出付き毛管ガスクロマトグラフィーにより定量することができる。定量の下限は０．１ｎｇ／ｍＬであった。
【００６９】
インビボ研究
多形性チボロン製品（試験治療として示す）と参照治療（例えば、リビアル（登録商標））との間の生物学的同等性を評価するために、１回用量（２．５ｍｇ）２ウエイ交差研究を実施すべきである。２回の治療の間の洗出期間は、少なくとも７日間にすべきである。被検者の合計数は、少なくとも２２人、即ち、１系列当たり１１人の被検者にすべきである。被検者は、閉経後の女性、年齢５５才から６５才、そして肉体的に且つ精神的に健康でなくてはならない。１回用量投薬に続いて、血液サンプルを、投薬後、０（投薬前）、０．５、１、１．５、２、３、４、６、８、１２、１６、２０及び２４時間で採らなくてはならない。３α−ＯＨチボロン濃度は、前記の方法に従って血漿中で測定しなくてはならない。３α−ＯＨチボロン血漿濃度をベースにして、ピーク濃度（Ｃｍａｘ）及び０から最後の測定可能な濃度の時点までの、血漿−濃度−対−時間曲線の下の面積（ＡＵＣ０−ｔ最後）並びにゼロから無限大にまで外挿した血漿−濃度−対−時間曲線の下の面積（ＡＵＣ０−∞）を計算しなくてはならない。生物学的同等性は、ｌｏｇｅ−変換パラメーター値での分散分析法から誘導される、試験治療と参照治療との比についての９０％信頼区間を使用して、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０−ｔ最後及びＡＵＣ０−∞に基づいて評価しなくてはならない。Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０−ｔ最後及びＡＵＣ０−∞の上記の比についての９０％信頼区間が、許容範囲０．８０から１．２５内に完全に含まれる場合には、配合物は生物学的同等であると考えられる。
【００７０】
本発明を、以下の実施例及び図面を参照して、以下説明する。
【実施例１】
【００７１】
多形性チボロンの固体剤形を、米国特許第５，０３７，８１７号明細書に記載されているものと同様の方法によって製造する。
【００７２】
【表１】
2006514996.tif 000002
基本顆粒を、ラクトース（希釈剤）、ジャガイモデンプン（全量の９０％；崩壊剤）及びジャガイモデンプン粘質物（全量の１０％；バインダー）の混合物の、流動床グラニュレーター内での顆粒化によって製造する。顆粒化の後、基本顆粒を篩に通す。顆粒の一部（最終バッチサイズの約１０％ｗ／ｗ）を、適切なブレンダーを使用して、チボロン及びパルミチン酸アスコルビルと混合し、次いで、プレミックス篩を通過させる。チボロンプレミックスと基本顆粒の残りとを、適切なブレンダー内で混合する。ステアリン酸マグネシウムを添加し、混合する。この混合物を１００ｍｇの錠剤に圧縮する。
【００７３】
このようにして３個のバッチ（バッチＡ、Ｂ及びＣ）を調製し、これらの間の唯一の重要な差異を、使用した多形性チボロンの粒子サイズとして分析する。下記の表を参照。
【００７４】
この表には、更に、市場に出ている製品の代表である、チボロンを含有する固体剤形のバッチ（バッチＭ）が含まれる。
【実施例２】
【００７５】
チボロンの溶液を、下記のようにして製造する。チボロンをエタノール９６％中に溶解させる。溶液中のチボロンの最終濃度は１ｍｇ／ｍＬである。この溶液を混合し、５ｍＬのバイアル中に充填する（２．５ｍＬ／バイアル）。希釈指示：バイアルの内容物を、使用前に、２．５ｍＬの溶媒（注射用の水）で５ｍＬの全体積にまで希釈しなくてはならない。
【００７６】
【表２】
2006514996.tif 000003
【実施例３】
【００７７】
実施例１及び２のチボロンのバッチを、３α−ＯＨチボロンの相対バイオアベイラビリティーについて試験する。この試験は、それらの必要条件を正確に満たす、前記のような１回用量（２．５ｍｇ）２ウエイ交差研究の形で実施する。その結果を、図２及び３に示す。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】多形性チボロンの粒子サイズと実施例１に従って製造した錠剤の前記の錠剤−溶解との間の相関関係を示す。
【図２】３α−ＯＨチボロンの相対バイオアベイラビリティーを示す。Ｙ軸に、血漿−濃度対時間曲線の下の相対面積（ＡＵＣ）を示し、溶液（バッチＳ）は１００％での参照である。この図から、バッチＭ、Ａ及びＢが、溶液バッチＳのそれに少なくとも等しい、３α−ＯＨチボロンの予想外のバイオアベイラビリティーを示すことが明らかである。
【図３】３α−ＯＨチボロン及び３β−ＯＨチボロンのＡＵＣが、バッチＭ、Ａ及びＳについて、下記のように示される。（１）は、バッチＭの投与後の、３α−ＯＨチボロンについてのＡＵＣを示すバーである。（２）は、バッチＡの投与後の、３α−ＯＨチボロンについてのＡＵＣを示すバーである。（３）は、バッチＳの投与後の、３α−ＯＨチボロンについてのＡＵＣを示すバーである。（４）は、バッチＭの投与後の、３β−ＯＨチボロンについてのＡＵＣを示すバーである。（５）は、バッチＡの投与後の、３β−ＯＨチボロンについてのＡＵＣを示すバーである。（６）は、バッチＳの投与後の、３β−ＯＨチボロンについてのＡＵＣを示すバーである。バーの相対的高さから、バッチＭ及びＡの投与から得られる３α−ＯＨチボロンの増強されたバイオアベイラビリティーの効果が、３β−ＯＨチボロンについて観察されないことが分かる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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2006514996.tif 000008
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