(57)【要約】式（Ｉ）の化合物は、Ａｌｋ５および／またはＡｌｋ４に対して予想外に高い親和性を有し、そして多数の疾患（線維性の障害を含めて）を予防および／または治療するアンタゴニストとして、有用であり得る。１実施態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物に特徴がある。式（Ｉ）の化合物は、ＴＧＦβ系統Ｉ型レセプタであるＡｌｋ５および／またはＡｌｋ４の予想外に強力なアンタゴニストである。それゆえ、式（Ｉ）の化合物は、線維症（例えば、腎臓線維症、肺線維症および肝臓線維症）、進行性癌のような疾患、またはＴＧＦβ系統のシグナル伝達活性の低下が望ましい他の疾患の予防および／または治療で使用できる。
2006502165.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
2006502165.tif 000017
ここで、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４の各々は、独立して、ＣＲｘまたはＮであり；但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４のうちの２つのみが、同時にＮであり得；
Ｙ１およびＹ２の各々は、独立してＣＲｙまたはＮであり；但し、Ｙ１およびＹ２のうちの少なくとも１つは、Ｎでなければならず；
各Ｒ１は、独立して、以下：アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、カルボキシ、スルホ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、カルバモイル、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、シクロアルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルスルファニル、アリール、アリールオキシ、アリールスルファニル、アロイル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールスルファニル、もしくはヘテロアロイルであり；
各Ｒ２は、独立して、以下：アルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、ハロ、ヒドロキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（シクロアルキル）、−Ｎ（アルキル）（シクロカルキル）、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキル）、−ＮＨ（ヘテロアリール）、−ＮＨ−アルキル−ヘテロシクロアルキル、−ＮＨ−アルキル−ヘテロアリール、−ＮＨ（アラルキル）、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、アリール、アラルキル、アロイル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアロイル、ニトロ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、カルボキシ、スルホ、メルカプト、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、アリールオキシ、アリールアルコキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、（ヘテロシクロアルキル）アルコキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アルキルスルファニル、シクロアルキルスルファニル、（シクロアルキル）アルキルスルファニル、アリールスルファニル、アラルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキルスルファニル、（ヘテロシクロアルキル）アルキルスルファニル、ヘテロアリールスルファニル、ヘテロアリールアルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アミノスルホニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノアルキルアミノ、（ヘテロアリール）アリールカルボニルアミノアルキルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノアルキルアミノ、（ヘテロアリール）アリールスルホニルアミノアルキルカルボニルアミノアルキルアミノ、アリールスルホニルアミノアルキルアミノ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、もしくはカルバモイルであり；
ｍは、０、１、２、３、もしくは４から選択され；ここで、ｍ≧２の場合、２個の隣接したＲ１基は、結合して、４員〜８員の必要に応じて置換した環状部分を形成し得；
ｎは、０、１、２、もしくは３から選択され；ここで、ｎ≧２の場合、２個の隣接したＲ２基は、結合して、４員〜８員の必要に応じて置換した環状部分を形成し得；そして、
各ＲｘおよびＲｙは、独立して、以下：水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、カルボキシ、スルホ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、シクロアルキルカルボニル、（シクロアルキル）アルキルカルボニル、アロイル、アラルキルカルボニル、ヘテロシクロアルキルカルボニル、（ヘテロシクロアルキル）アシル、ヘテロアロイル、（ヘテロアリール）アシル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、（アミノ）アミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルスルホニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルスルホニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、アラルキルスルホニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）スルホニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルスルホニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアリールスルホニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルスルホニルアミノ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、カルバモイル、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、シクロアルキルスルファニル、（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルキル）アルコキシ、（シクロアルキル）アルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルスルファニル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルコキシ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルスルファニル、アリール、アリールオキシ、アリールスルファニル、アラルキル、アラルキルオキシ、アラルキルスルファニル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールスルファニル、ヘテロアラルキル、（ヘテロアリール）アルコキシ、もしくは（ヘテロアリール）アルキルスルファニルである、
化合物、またはそれらの薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシド。
【請求項２】
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の各々が、独立してＣＲｘである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
各Ｒｘが、独立して、水素、非置換のアルキル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、アルコキシ、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、アミノ、カルボキシ、（ヘテロアリール）アシル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルコキシ、（ヘテロアリール）アルコキシ、（ヘテロアリール）アルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、もしくはヘテロアラルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
各Ｒｘが、独立して、水素、非置換アルキル、ヒドロキシアルキル、トリフルオロメチル、アルコキシ、ハロ、ヒドロキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、−ＮＨ（非置換アルキル）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨ（アルコキシアルキル）、−ＮＨ（カルボキシアルキル）、−Ｎ（非置換アルキル）２、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキル）、−ＮＨ（ヘテロアリール）、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキルアルキル）、−ＮＨ（アラルキル）、−ＮＨ（ヘテロアラルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−アルキル、−ＮＨ−ＣＯ−ヘテロアリール、アミノカルボニル、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリールである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
各Ｒｘが、独立して、水素である、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４の各々が、−ＣＨ−、−Ｃ（ＣＨ３）−、−Ｃ（ＯＨ）−、−Ｃ（ＮＨ２）−、−Ｃ（ＣＯ−ＮＨ２）−、−Ｃ（ＣＯ−ＮＨＯＨ）−、−Ｃ（ＮＨ（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ヒドロキシアルキル）−、もしくは−Ｃ（カルボキシ）−であり、そしてＸ１が、−ＣＨ−である、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
ｍが、０、１、もしくは２から選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
各Ｒ１が、独立して、非置換アルキル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、非置換アルケニル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、アミノ、カルボキシ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アルキルスルホニル、スルファモイル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、もしくはヘテロアラルキルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
ｍが１であり、そしてＲ１が、６−アルキル、６−アルケニル、または６−シクロアルキルから選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ１およびＹ２の両方が、Ｎである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１１】
ｎが、１もしくは２であり、そして各Ｒ２が、独立して、非置換アルキル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノシクロアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキル−アミノ、モノヘテロアリール−アミノ、モノ（ヘテロシクロアルキルアルキル）アミノ、モノ（ヘテロアラルキル）アミノ、−Ｎ（アルキル）（シクロアルキル）、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、−ＣＯ−ＮＨ２、−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−ＣＯ−アルキル、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−アルキル、−ＣＯ２−アルキル、−Ｏ−ＣＯ−アルキル、−ＳＯ２−ＮＨ２、−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−ＳＯ２−アルキル、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−アルキル、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール、−ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリールである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ２が、その３位置で置換され、グアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノシクロアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキルアミノ、モノヘテロアリールアミノ、モノ（（ヘテロシクロアルキル）アルキル）アミノ、モノ（ヘテロアラルキル）アミノ、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール、−ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリールである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
ｍが１であり、そしてＲ１が、６−メチル、６−エチル、６−プロピル、６−トリフルオロメチル、６−ビニル、もしくは６−シクロプロピルである、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
ｍが、０、１もしくは２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ１が、５位もしくは６位で置換される、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ１が、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、ハロ、アミノ、アミノカルボニル、もしくはアルコキシカルボニルである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１が、非置換アルキル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、非置換アルケニル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキルアミノ、モノヘテロアリールアミノ、モノ（ヘテロシクリルアルキル）アミノ、モノ（アラルキル）アミノ、モノ（ヘテロアラルキル）アミノ、カルボキシ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−ＣＯ−アルキル、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−アルキル、−ＣＯ２−アルキル、−Ｏ−ＣＯ−アルキル、−ＳＯ２−ＮＨ２、−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２−Ｎ（アルキル）２、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリールから独立して選択される、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１８】
ｍが１であり、Ｒ１が、６−メチル、６−エチル、６−プロピル、６−クロロ、６−トリフルオロメチル、６−エチル、６−ビニル、もしくは６−シクロプロピルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｙ１およびＹ２が、Ｎである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
ｎが、１もしくは２であり、そして各Ｒ２が、独立して、非置換アルキル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノシクロアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキルアミノ、モノヘテロアリール−アミノ、モノ（ヘテロシクロアルキルアルキル）−アミノ、モノ（ヘテロアラルキル）アミノ、−Ｎ（アルキル）（シクロアルキル）、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−ＣＯ−アルキル、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−アルキル、−ＣＯ２−アルキル、−Ｏ−ＣＯ−アルキル、−ＳＯ２−ＮＨ２、−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−ＳＯ２−アルキル、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−アルキル、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリールである、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
ｎが１であり、そして各Ｒ２が、独立して、グアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノシクロアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキルアミノ、モノヘテロアリールアミノ、モノ（（ヘテロシクロアルキル）アルキル）アミノ、モノ（ヘテロアラルキル）アミノ、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＣＯ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール−ヘテロアリール、−ＮＨ−アルキル−ＮＨ−ＳＯ２−アリール、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリールである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ２が、３位で置換される、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の各々が、独立して、−ＣＨ−、−Ｃ（ＯＨ）−、−Ｃ（ＮＨ２）−、−Ｃ（ＮＨ（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ヒドロキシアルキル）−、−Ｃ（カルボキシ）−、もしくはＮである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｘ１が、−ＣＨ−である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｘ１が、Ｎである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｘ２が、Ｎである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｘ３が、Ｎである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｘ４が、Ｎである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】
請求項１に記載の化合物であって、該化合物が、以下：
４−（２−ピリジン−２−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−イル）−ピリミジン−２−イルアミン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−３−（２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン、４−［２−（６−クロロ−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−３−（２−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−ピラゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、またはその薬学的に受容可能な塩もしくはＮ−オキシドである、化合物。
【請求項３０】
請求項１に記載の化合物、および薬学的に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
【請求項３１】
請求項２９に記載の化合物、および薬学的に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
【請求項３２】
被験体におけるＴＧＦβシグナル伝達経路を阻害する方法であって、請求項１に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３３】
被験体におけるＴＧＦβシグナル伝達経路を阻害する方法であって、請求項２９に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３４】
細胞におけるＴＧＦβ  Ｉ型レセプタを阻害する方法であって、請求項１に記載の化合物の有効量を、該細胞に接触させる工程を包含する、方法。
【請求項３５】
細胞におけるＴＧＦβ  Ｉ型レセプタを阻害する方法であって、請求項２９に記載の化合物の有効量を、該細胞に接触させる工程を包含する、方法。
【請求項３６】
被験体においてＴＧＦβにより誘発された過剰な細胞外マトリックスの蓄積を減らす方法であって、請求項１に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３７】
被験体においてＴＧＦβにより誘発された過剰な細胞外マトリックスの蓄積を減らす方法であって、請求項２９に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３８】
被験体における線維性の状態を治療または予防する方法であって、請求項１に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項３９】
被験体における線維性の状態を治療または予防する方法であって、請求項２９に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項４０】
前記線維性の状態が、強皮症、ループス腎炎、結合織疾患、創傷治癒、外科手術の瘢痕、脊髄損傷、ＣＮＳ瘢痕、急性肺損傷、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫症候群、急性肺損傷、薬物誘発性肺損傷、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧症誘発腎症、肝臓線維症もしくは胆汁線維症、肝硬変、原発性胆汁性肝硬変、脂肪肝疾患、原発性硬化性胆管炎、再狭窄、心線維症、眼球の瘢痕、線維硬化症、線維性癌、類線維腫、線維腫、線維腺腫、線維肉腫、移植動脈疾患、およびケロイドから選択される、請求項３８または３９に記載の方法。
【請求項４１】
被験体における腫瘍細胞の転移を阻害する方法であって、請求項１に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項４２】
被験体における腫瘍細胞の転移を阻害する方法であって、請求項２９に記載の化合物の有効量を、該被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項４３】
ＴＧＦβの過剰発現により媒介される疾患もしくは障害を治療する方法であって、このような治療が必要な被験体に、請求項１に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
【請求項４４】
ＴＧＦβの過剰発現により媒介される疾患もしくは障害を治療する方法であって、このような治療が必要な被験体に、請求項２９に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
【請求項４５】
前記疾患もしくは障害が、多発性硬化症におけるニューロンの脱髄、アルツハイマー病、大脳の脈管障害、扁平上皮癌、多発性骨髄腫、黒色腫、神経膠腫、グリア芽細胞腫、白血病、そして肺、乳房、卵巣、子宮頸部、肝臓、胆管、胃腸管、膵臓、前立腺、ならびに頭部および頸部の癌腫からなる群から選択される、請求項４３または４５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この非仮出願は、米国仮出願第６０／４０８，８１１号（２００２年９月６日出願）の優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
ＴＧＦβ（トランスフォーミング成長因子β）は、２量体ポリペプチド成長因子（アクチビン，インヒビン、骨形態形成たん白質（ＢＭＰ）、成長・分化因子（ＧＤＦ）、およびミューラー阻害物質（ＭＩＳ）が挙げられる）の大きなファミリーのメンバーである。ＴＧＦβは、３つのアイソフォーム（ＴＧＦβ１、ＴＧＦβ２およびＴＧＦβ３）で存在し、レセプターと共に大部分の細胞に存在している。各アイソフォームは、組織特異的様式および発生的に制御された様式の両方で、発現する。各ＴＧＦβアイソフォームは、細胞内で切断されて、Ｃ末端領域（潜伏性結合ペプチド（ＬＡＰ））および、成熟または活性ＴＧＦβとして知られるＮ末端領域にされる、前駆体タンパク質として合成される。ＬＡＰは、代表的には、細胞から分泌される前は、成熟ＴＧＦβと非共有結合的に結合する。ＬＡＰ−ＴＧＦβ複合体は、ＴＧＦβレセプターとは結合し得ず、生物学的に活性ではない。ＴＧＦβは、一般的に、種々の機構（例えば、トロンボスポンジン−１またはプラスミンとの相互作用が挙げられる）によって、この複合体から放出され（そして活性化され）る。
【０００３】
活性化の後で、ＴＧＦβは、高い親和性でＩＩ型レセプター（ＴＧＦβＲＩＩ）、構成的に活性なセリン／スレオニンキナーゼに結合する。このリガンドが結合したＩＩ型レセプターは、ＴＧＦβ  Ｉ型レセプター（Ａｌｋ５）をグリシン／セリン豊富ドメインでリン酸化し、これによって、Ｉ型レセプターが、下流のシグナル伝達分子であるＳｍａｄ２またはＳｍａｄ３をリクルートし、リン酸化することが可能となる。例えば、Ｈｕｓｅ，Ｍら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．８：６７１−６８２（２００１）を参照のこと。次いで、リン酸化されたＳｍａｄ２またはＳｍａｄ３は、Ｓｍａｄ４と複合体を形成し得、その完全へテロＳｍａｄ複合体が、核内へと移動し、種々のＴＧＦβ応答性遺伝子の転写を調節する。例えば、Ｍａｓｓａｇｕｅ，Ｊ．Ａｎｎ，Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｅｄ．６７：７７３（１９９８）を参照のこと。
【０００４】
アクチビンもまた、ＴＧＦβスーパーファミリーのメンバーであり、それらはアクチビンβａまたはβｂのホモ二量体またはヘテロ二量体であるという点で、ＴＧＦβと異なる。アクチビンは、ＴＧＦβと類似の様式で、つまり、構成的なセリン−スレオニンレセプターキナーゼであるアクチビンＩＩ型レセプター（ＡｃｔＲＩＩＢ）と結合し、そして、Ｉ型セリン−スレオニンレセプターであるＡｌｋ４を活性化して、Ｓｍａｄ２またはＳｍａｄ３をリン酸化することによって、シグナルを伝達する。Ｓｍａｄ４を有するヘテロ−Ｓｍａｄ複合体の結果としての形成もまた、遺伝子転写のアクチビン誘導性の調節を起こす。
【０００５】
実際、ＴＧＦβおよび関連因子（例えば、アクチビン）は、広範囲の細胞内プロセス（例えば、上皮細胞および造血細胞における細胞周期の停止、間葉細胞の増殖および分化の制御、炎症細胞のリクルート、免疫抑制、創傷治癒、および細胞外マトリクスの生産）を調節する。例えば、Ｍａｓｓａｇｕｅ，Ｊ．Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．６：５９４−６４１（１９９０）；Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ａ．Ｂ．とＳｐｏｒｎ  Ｍ．Ｂ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，９５：４１９−４７２  Ｂｅｒｌｉｎ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ（１９９０）；Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ａ．Ｂ．とＳｐｏｒｎ  Ｍ．Ｂ．Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒｓ  ８：１−９（１９９３）；およびＡｌｅｘａｎｄｒｏｗ，Ｍ．Ｇ．，Ｍｏｓｅｓ，Ｈ．Ｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５５：１４５２−１４５７（１９９５）を参照のこと。ＴＧＦβのシグナル伝達経路の機能亢進は、多くのヒト障害（例えば、細胞外マトリクスの過剰蓄積
、異常に高いレベルの炎症性応答、繊維性障害、および進行性の癌）の原因である。同様に、アクチビンのシグナル伝達およびアクチビンの過剰発現も、以下を含む病理学的障害に関与している；細胞外マトリクスの蓄積および繊維症（例えば、Ｍａｔｓｕｓｅ，Ｔ．ら，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１３：１７−２４（１９９５）；Ｉｎｏｕｅ，Ｓ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２０５：４４１−４４８（１９９４）；Ｍａｔｓｕｓｅ，Ｔ．ら，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４８：７０７−７１３（１９９６）；Ｄｅ  Ｂｌｅｓｅｒら，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２６：９０５−９１２（１９９７）；Ｐａｗｌｏｗｓｋｉ，Ｊ．Ｅ．ら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１００：６３９−６４８（１９９７）；Ｓｕｇｉｙａｍａ，Ｍ．ら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １１４：５５０−５５８（１９９８）；Ｍｕｎｚ，Ｂ．ら，ＥＭＢＯ  Ｊ．１８：５２０５−５２１５（１９９９）を参照のこと）、炎症性応答（例えば、Ｒｏｓｅｎｄａｈｌ，Ａら，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｐｉｒ．Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５：６０−６８（２００１）を参照のこと）、研究によって、ＴＧＦβおよびアクチビンは、相乗的に作用し得、細胞外マトリクスを誘導することが示されている（例えば、Ｓｕｇｉｙａｍａ，Ｍ．ら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １１４：５５０−５５８，（１９９８）を参照のこと）。そのために、このシグナル伝達経路の機能不全に関する障害を予防および／または処置するために、ＴＧＦβファミリーのシグナル伝達成分に対する調節因子（例えば、アンタゴニスト）を開発することが所望される。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の要旨）
式（Ｉ）の化合物は、ＴＧＦβ系統Ｉ型レセプタであるＡｌｋ５および／またはＡｌｋ４の予想外に強力なアンタゴニストである。それゆえ、式（Ｉ）の化合物は、線維症（例えば、腎臓線維症、肺線維症および肝臓線維症）、進行性癌のような疾患、またはＴＧＦβ系統のシグナル伝達活性の低下が望ましい他の疾患の予防および／または治療で使用できる。
【０００７】
１局面では、本発明は、式（Ｉ）の化合物に特徴がある：
【０００８】
【化２】
2006502165.tif 000003
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４の各々は、独立して、ＣＲｘまたはＮであり；但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４のうちの２つのみが、同時にＮであり得る。Ｙ１およびＹ２の各々は、独立して、ＣＲｙまたはＮであり；但し、Ｙ１およびＹ２のうちの少なくとも１つは、Ｎでなければならない。言い換えると、Ｙ１環原子およびＹ２環原子を有する環は、ピリミジニルまたはピリジルであり得る。各Ｒ１は、独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、オキソ、チオキソ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、カルボキシ、スルホ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、カルバモイル、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、シクロアルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルスルファニル、アリール、アリールオキシ、アリールスルファニル、アロイル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールスルファニルまたはヘテロアロイルであり得る。各Ｒ２は、独立して、以下：アルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、ハロ、ヒドロキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（シクロアルキル）、−Ｎ（アルキル）（シクロアルキル）、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキル）、−ＮＨ（ヘテロアリール）、−ＮＨ−アルキル−ヘテロシクロアルキル、−ＮＨ−アルキル−ヘテロアリール、−ＮＨ（アラルキル）、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、アリール、アラルキル、アロイル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、ヘテロアロイル、ニトロ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、カルボキシ、スルホ、メルカプト、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、アリールオキシ、アリールアルコキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、（ヘテロシクロアルキル）アルコキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アルキルスルファニル、シクロアルキルスルファニル、（シクロアルキル）アルキルスルファニル、アリールスルファニル、アラルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキルスルファニル、（ヘテロシクロアルキル）アルキルスルファニル、ヘテロアリールスルファニル、ヘテロアリールアルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アミノスルホニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノアルキルアミノ、（ヘテロアリール）アリールカルボニルアミノアルキルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノアルキルアミノ、（ヘテロアリール）アリールスルホニルアミノアルキルカルボニルアミノアルキルアミノ、アリールスルホニルアミノアルキルアミノ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、もしくはカルバモイルである。ｍは、０、１、２、３、もしくは４であり；但し、ｍ≧２の場合、２個の隣接したＲ１基は、結合して、４員〜８員の必要に応じて置換した環状部分を形成し得る。ｎは、０、１、２、もしくは３であり；ここで、ｎ≧２の場合、２個の隣接したＲ２基は、結合して、４員〜８員の必要に応じて置換した環状部分を形成し得る。以下の４員〜８員の必要に応じて置換された環状部分の例を参照のこと。各ＲｘおよびＲｙは、独立して、以下：水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、カルボキシ、スルホ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、シクロアルキルカルボニル、（シクロアルキル）アルキルカルボニル、アロイル、アラルキルカルボニル、ヘテロシクロアルキルカルボニル、（ヘテロシクロアルキル）アシル、ヘテロアロイル、（ヘテロアリール）アシル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、（アミノ）アミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノカルボニル、アルキルスルホニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルスルホニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルスルホニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、アラルキルスルホニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）スルホニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルスルホニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアリールスルホニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルスルホニルアミノ、（ヘテロアリール）アリールカルボニルアミノアルキルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノアルキルアミノ、（ヘテロアリール）アリールスルホニルアミノアルキルカルボニルアミノアルキルアミノ、アリールスルホニルアミノアルキルアミノ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、カルバモイル、シクロアルキル、シクロアルキルオキシ、シクロアルキルスルファニル、（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルキル）アルコキシ、（シクロアルキル）アルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルスルファニル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルコキシ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルスルファニル、アリール、アリールオキシ、アリールスルファニル、アラルキル、アラルキルオキシ、アラルキルスルファニル、アリールアルケニル、アリールアルキニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールスルファニル、ヘテロアラルキル、（ヘテロアリール）アルコキシ、もしくは（ヘテロアリール）アルキルスルファニルである。
【０００９】
上記で定義されるように、ｍ≧２の場合、２個の隣接したＲ１基は、結合して、４員〜８員の必要に応じて置換した環状部分を形成し得る。すなわち、前記２−ピリジル環は、４員〜８員の環状部分と縮合して、１つの部分、例えば、７Ｈ−［１］ピリジニル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−［１］ピリジニル、５，６，７，８−テトラヒドロ−キノリニル、５，７−ジヒドロ−フロ［３，４−ｂ］ピリジニルまたは３，４−ジヒドロ−１Ｈ−チオピラノ［４，３−ｃ］ピリジニルを形成できる。この縮合された環状部分は、必要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）が挙げられる；以下の「アルキル」の定義を参照のこと）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、シクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイル）で置換され得る。
【００１０】
同様に、ｎ≧２の場合、２個の隣接したＲ２基は、結合して、４員〜８員の必要に応じて置換した環状部分を形成し得、これによって、ピリジルもしくはピリミジニル基と縮合した環を形成する。このような部分のいくつかの例は、以下に示される：
【００１１】
【化３】
2006502165.tif 000004
２個の隣接したＲ２基によって形成されたこの４員〜８員の環状部分は、必要に応じて、置換基（例えば、アルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）が挙げられる；以下の「アルキル」の定義を参照のこと）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、シクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイル）で置換され得る。
【００１２】
１実施態様では、Ｘ１、Ｘ２、およびＸ３は、独立して、ＣＲｘである。１実施態様では、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４の各々は、独立して、−ＣＨ−、−Ｃ（ＣＨ３）−、−Ｃ（ＯＨ）−、−Ｃ（ＮＨ２）−、−Ｃ（ＣＯ−ＮＨ２）−、−Ｃ（ＣＯ−ＮＨＯＨ）−、−Ｃ（ＮＨ（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＣＯ−（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（非置換アルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（ヘテロアリール））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アラルキル））−、−Ｃ（ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（ヘテロアリールアルキル））−、−Ｃ（ヒドロキシアルキル）−、もしくは−Ｃ（カルボキシ）−であり、そしてＸ１は、−ＣＨ−である。
【００１３】
１実施態様では、Ｙ１およびＹ２は、Ｎである。
【００１４】
１実施態様では、ｍは、０、１もしくは２である（例えば、ｍは、１である）。１実施態様では、Ｒ１は、５位もしくは６位で置換される（すなわち、Ｒ１は、５位もしくは６位のいずれかでモノ置換され得るか、またはＲ１は、５位および６位の両方でジ置換され得る）。１実施態様では、Ｒ１は、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルキルチオ、ハロ、アミノ、アミノカルボニル、もしくはアルコキシカルボニルである。
【００１５】
１実施態様では、ｎは、１もしくは２である（例えば、ｎは、１である）。
【００１６】
１実施態様では、各Ｒ１は、独立して、非置換アルキル（例えば、６−メチル、６−エチル、６−ｎ−プロピル、もしくは６−イソプロピル）、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル（例えば、６−トリフルオロメチル）、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、非置換アルケニル（例えば、６−ビニル）、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、アミノ（例えば、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキルアミノ、モノヘテロアリールアミノ、モノ（ヘテロシクリルアルキル）アミノ、モノ（アラルキル）アミノ、もしくはモノ（ヘテロアラルキル）アミノ）、カルボキシ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルカルボニル（例えば、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（アルキル）、もしくは−ＣＯ−Ｎ（アルキル）２）、アルキルカルボニルアミノ（−ＮＨ−ＣＯ−アルキル、もしくは−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−アルキル）、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルオキシ、アルキルスルホニル、スルファモイル（例えば、−ＳＯ２−ＮＨ２、−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、もしくは−ＳＯ２−Ｎ（アルキル）２）、シクロアルキル（例えば、６−シクロプロピル）、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、もしくはヘテロアラルキルである。
【００１７】
１実施態様では、各Ｒ２は、独立して、以下：非置換アルキル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル、アミノアルキル（例えば、アミノメチル）、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、アルコキシ、アシル、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノシクロアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキルアミノ（例えば、−ＮＨ−ピペリジニルもしくは−ＮＨ−モルフォリノ）、モノヘテロアリール−アミノ（例えば、−ＮＨ−テトラゾリル、−ＮＨ−ピラゾリル、もしくは−ＮＨ−イミダゾリル）、モノ（ヘテロシクロアルキルアルキル）アミノ（例えば、−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜３−ピペリジニルもしくは−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜３−モルフォリノ）、モノ（ヘテロアラルキル）アミノ（例えば、−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜３−テトラゾリル、−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜３−ピラゾリル、もしくは−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜３−イミダゾリル）、−Ｎ（アルキル）（シクロアルキル）、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−ＣＯ−アルキル、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−アルキル、−ＣＯ２−アルキル、−Ｏ−ＣＯ−アルキル、−ＳＯ２−ＮＨ２、−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ−ＳＯ２−アルキル、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−アルキル、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリール（例えば、イミダゾリル、ピラゾリル、テトラゾリル、もしくはピリジル）である。例えば、Ｒ２は、３位で置換され、かつグアナジノ、アミジノ、−ＮＨ２、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、モノシクロアルキルアミノ、モノヘテロシクロアルキルアミノ、モノヘテロアリールアミノ、モノ（（ヘテロシクロアルキル）アルキル）アミノ、モノ（ヘテロアラルキル）アミノ、−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＣＯ−ＮＨ（アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）−ＳＯ２−ＮＨ（アルキル）、ヘテロシクロアルキル、もしくはヘテロアリールである。
【００１８】
１実施態様では、各Ｒｘは、独立して、以下：水素、非置換アルキル、ヒドロキシアルキル（例えば、ヒドロキシエチルのようなヒドロキシ−Ｃ１〜４アルキル）、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、アルコキシ（例えば、Ｃ１〜４アルコキシ（例えば、メトキシもしくは−ＯＣＦ３のようなＣ１〜４ハロアルコキシ））、ハロ（例えば、クロロもしくはブロモ）、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、アミノ（例えば、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキル）、−ＮＨ（ヘテロアリール）、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキル−アルキル）、−ＮＨ（アラルキル）、もしくは−ＮＨ（ヘテロアラルキル））、カルボキシ、（ヘテロアリール）アシル、アミノカルボニル（例えば、−ＣＯ−ＮＨ２、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−ＯＨ、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−ヘテロアリール（例えば、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−テトラゾリル、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−ピラゾリル、もしくは−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−イミダゾリル）、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−ヘテロシクロアルキル（例えば、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−ピペリジニルもしくは−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−モルフォリノ）、または、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−アリール（例えば、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜３−フェニル））、ヘテロアリールカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルコキシ、（ヘテロアリール）アルコキシ、（ヘテロアリール）アルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキル（例えば、モルフォリノ、ピラジニル、もしくはピペリジニル）、（ヘテロシクロアルキル）アルキル（例えば、モルフォリノ−Ｃ１〜４アルキル、ピラジニル−Ｃ１〜４アルキル、もしくはピペリジニル−Ｃ１〜４アルキル）、ヘテロアリール（例えば、イミダゾリル、ピラゾリル、テトラゾリル、もしくはピリジル）、もしくはヘテロアラルキル（例えば、イミダゾリル−Ｃ１〜４アルキル、ピラゾリル−Ｃ１〜４アルキル、テトラゾリル−Ｃ１〜４アルキル、もしくはピリジル−Ｃ１〜４アルキル）。−ＮＨ（アルキル）のいくつかの例は、−ＮＨ（ハロアルキル）（例えば、−ＮＨＣＦ３）、−ＮＨ（カルボキシアルキル）（例えば、−ＮＨ（ＣＨ２）１〜３ＣＯＯＨ）、ａｎｄ−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）（例えば、−ＮＨ（ＣＨ２）１〜３ＯＨ）である。−ＮＨ（ヘテロアリール）のいくつかの例は、−ＮＨ（テトラゾリル）、−ＮＨ（ピラゾリル）、および−ＮＨ（イミダゾリル）である。−ＮＨ（ヘテロシクロアルキルアルキル）のいくつかの例は、−ＮＨ（ピペラジニルアルキル）（例えば、−ＮＨ（ＣＨ２）１〜３−ピペリジン）および−ＮＨ（モルフォリノ−アルキル）（例えば、−ＮＨ（ＣＨ２）１〜３−モルフォリン）である。−ＮＨ（ヘテロアラルキル）のいくつかの例は、−ＮＨ（テトラゾリルアルキル）（例えば、−ＮＨ（ＣＨ２）１〜３−テトラゾール）、−ＮＨ（ピラゾリル−アルキル）（例えば、−ＮＨ（ＣＨ２）０〜３−ピラゾール）、および−ＮＨ（イミダゾリル−アルキル）（例えば、−ＮＨ（ＣＨ２）０〜３−イミダゾール）である。
【００１９】
１実施態様では、Ｒｙは、水素、非置換アルキル、ヒドロキシアルキル、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、アミノアルキル、アリールオキシアルキル、ヘテロアラルキルオキシアルキル、アルコキシ、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、グアナジノ、アミジノ、アミノ（例えば、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２，−ＮＨ（シクロアルキル）、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキル）、−ＮＨ（ヘテロアリール）、−ＮＨ（ヘテロシクロアルキル−アルキル）、−ＮＨ（アラルキル）、もしくは−ＮＨ（ヘテロアラルキル））、カルボキシ、（ヘテロアリール）アシル、アミノカルボニル、ヘテロアリールカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルコキシ、（ヘテロアリール）アルコキシ、（ヘテロアリール）アルキルスルファニル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアラルキルである。
【００２０】
１実施態様では、Ｘ１は、Ｎである。例えば、Ｘ１は、Ｎであり、そしてＸ２、Ｘ３、およびＸ４は、独立してＣＲｘである。
【００２１】
１実施態様では、Ｘ２は、Ｎである。例えば、Ｘ２は、Ｎであり、そしてＸ１、Ｘ３、およびＸ４は、独立してＣＲｘである。
【００２２】
１実施態様では、Ｘ３は、Ｎである。例えば、Ｘ３は、Ｎであり、そしてＸ１、Ｘ２、およびＸ４は、独立してＣＲｘである。
【００２３】
１実施態様では、Ｘ４は、Ｎである。例えば、Ｘ４は、Ｎであり、そしてＸ１、Ｘ２、およびＸ３は、独立してＣＲｘである。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物のいくつかの例は、４−（２−ピリジン−２−イル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−イル）−ピリミジン−２−イルアミン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−３−（２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン、４−［２−（６−クロロ−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−３−（２−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−ピラゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピラジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミンである。
【００２５】
式（Ｉ）の化合物の各々のＮ−オキシド誘導体または薬学的に受容可能な塩はまた、本発明の範囲内である。例えば、そのイミダゾールコア環または窒素含有ヘテロシクリル置換基の窒素環原子は、適当な酸化剤（例えば、ｍ−クロロ過安息香酸またはＨ２Ｏ２）の存在下で、オキシドを形成できる。
【００２６】
事実上酸性である（例えば、カルボキシル基またはフェノール性水酸基を有する）式（Ｉ）の化合物は、薬学的に受容可能な塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩または金塩）を形成できる。薬学的に受容可能なアミン（例えば、アンモニア、アルキルアミン、ヒドロキシアルキルアミンおよびＮ−メチルグルカミン）で形成された塩もまた、本発明の範囲内である。式（Ｉ）の化合物は、酸で処理され、酸付加塩を形成できる。このような酸の例は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、メタンスルホン酸、リン酸、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、シュウ酸、マロン酸、サリチル酸、リンゴ酸、フマル酸、アスコルビン酸、マレイン酸、酢酸、および当業者に周知の無機酸および有機酸が挙げられる。これらの酸付加塩は、式（Ｉ）の化合物を、その遊離塩基形状にて、酸付加塩（例えば、塩酸塩）を生じるのに十分な量の酸（例えば、塩酸）で処理することにより、調製できる。この酸付加塩は、その塩を適当な希薄塩基水溶液（例えば、水酸化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウムまたはアンモニア）で処理することにより、その遊離塩基形状に戻して変換できる。式（Ｉ）の化合物はまた、例えば、キラル化合物、ラセミ混合物、光学活性化合物、純粋ジアステレオマーまたはジアステレオマー混合物の形状であり得る。
【００２７】
式（Ｉ）の化合物は、驚くべきことに、ＴＧＦβ系統Ｉ型レセプタであるＡｌｋ５および／またはＡｌｋ４に高い親和性を示し、例えば、実施例７および８にて以下で記述した条件下にて、１０μＭ未満のＩＣ５０値を有する。式（Ｉ）の一部の化合物は、０．１μＭ未満のＩＣ５０値を示す。
【００２８】
式（Ｉ）の化合物はまた、適当な官能基を付加して選択的な生体特性を高めることにより、変性できる。このような変性は、当該技術分野で公知であり、所定生体系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）への生体浸透性を高めるもの、経口バイオアベイラビリティーを高めるもの、注射により投与できるように溶解性を高めるもの、代謝を変えるもの、および／または排泄速度を変えるものが挙げられる。これらの変性の例には、ポリエチレングリコールによるエステル化、ピボレート（ｐｉｖｏｌａｔｅｓ）または脂肪酸置換基での誘導体化、カーバメートへの変換、芳香環の水酸化、および芳香環でのヘテロ原子置換が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物（または式（Ｉ）の２種またはそれ以上の化合物の組合せ）と薬学的に受容可能な担体との医薬組成物に特徴がある。また、本発明では、式（Ｉ）の化合物を単独でまたは適当な賦形剤と共に含有する医薬組成物も含まれる。
【００３０】
本発明はまた、細胞において、ＴＧＦβ系統Ｉ型レセプタであるＡｌｋ５および／またはＡｌｋ４（例えば、１０μＭ未満、好ましくは、１μＭ未満、より好ましくは、０．１μＭ未満のＩＣ５０値を有する）を阻害する方法に特徴があり、該方法は、該細胞に、式（Ｉ）の化合物の有効量を接触させる工程を包含する。また、本発明の範囲には、被験体（例えば、哺乳動物（例えば、ヒト））における細胞のＴＧＦβおよび／またはアクチビンシグナル伝達経路を阻害する方法が含まれ、該方法は、該被験体に、式（Ｉ）の化合物の有効量を接触させるか投与する工程を包含する。
【００３１】
また、本発明の範囲内には、（例えば、ＴＧＦβの過剰発現に由来する）高いＴＧＦβレベルおよび／またはアクチビン活性に特徴があるかそれが原因となっている病気に罹った被験体を治療または予防する方法が含まれる。この方法は、該被験体に、式（Ｉ）の１種またはそれ以上の化合物の有効量を投与する工程を包含する。これらの病気には、過剰な細胞外マトリックスの蓄積；線維性の病気（例えば、強皮症、ループス腎炎、結合織疾患、創傷治癒、外科手術の瘢痕、脊髄損傷、ＣＮＳ瘢痕、急性肺損傷、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、成人呼吸窮迫症候群、急性肺損傷、薬物誘発性肺損傷、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、高血圧症誘発腎症、肝臓線維症もしくは胆汁線維症、肝硬変、原発性胆汁性肝硬変、脂肪肝疾患、原発性硬化性胆管炎、再狭窄、心線維症、眼球の瘢痕、線維硬化症、線維性癌、類線維腫、線維腫、線維腺腫、線維肉腫、移植動脈疾患、およびケロイド）；多発性硬化症におけるニューロンの脱髄；アルツハイマー病；大脳の脈管障害；ならびに、腫瘍細胞および癌腫（例えば、扁平上皮癌、多発性骨髄腫、黒色腫、神経膠腫、グリア芽細胞腫、白血病、そして肺、乳房、卵巣、子宮頸部、肝臓、胆管、胃腸管、膵臓、前立腺、ならびに頭部および頸部の癌腫）のＴＧＦβ誘発転移。
【００３２】
本明細書中で使用する「アルキル」とは、１個〜８個（例えば、１個〜６個または１個〜４個）の炭素原子を含有する脂肪族炭化水素基を意味する。アルキル基は、直鎖または分枝であり得る。アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第二級ブチル、第三級ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘプチルおよび２−エチルヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル基は、必要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、スルホ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、シクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、アルコキシカルボニルまたはアルキルカルボニルオキシ）で置換できる。
【００３３】
本明細書中で使用する「アルケニル」とは、２個〜８個（例えば、２個〜６個または２個〜４個）の炭素原子および少なくとも１個の二重結合を含有する脂肪族炭素基を意味する。アルキル基と同様に、アルケニル基は、直鎖または分枝であり得る。アルケニル基の例には、アリル、イソプレニル、２−ブテニルおよび２−ヘキセニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル基は、必要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、スルホ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、シクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、アルコキシカルボニルまたはアルキルカルボニルオキシ）で置換できる。
【００３４】
本明細書中で使用する「アルキニル」とは、２個〜８個（例えば、２個〜６個または２個〜４個）の炭素原子を含有しかつ少なくとも１個の三重結合を有する脂肪族炭素基を意味する。アルキニル基は、直鎖または分枝であり得る。アルキニル基の例には、プロパルギルおよびブチニルが挙げられるが、これらに限定されない。アルキニル基は、必要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アミノ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、スルホ、メルカプト、アルキルスルファニル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、シクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、アルコキシカルボニルまたはアルキルカルボニルオキシ）で置換できる。
【００３５】
本明細書中で使用する「アミノ」基とは、−ＮＲｘＲｙを意味し、ここで、各ＲｘおよびＲｙは、独立して、水素、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアラルキルである。「アミノ」との用語は、末端基（例えば、アルキルカルボニルアミノ）ではないとき、−ＮＲｘ−で表わされる。Ｒｘは、上で定義した意味と同じ意味を有する。
【００３６】
本明細書中で使用する「アリール」基とは、フェニル、ナフチルまたはベンゾ縮合基（これは、２個〜３個の環を有する）を意味する。例えば、ベンゾ縮合基には、１個または２個のＣ４〜８炭素環部分で縮合したフェニル（例えば、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル、インダニルまたはフルオレニル）が挙げられる。アリールは、必要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル））、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカル
ボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイル）で置換されている。
【００３７】
本明細書中で使用する「アラルキル」基とは、アリール基で置換したアルキル基（例えば、Ｃ１〜４アルキル基）を意味する。「アルキル」および「アリール」の両方は、上で定義した。アラルキル基の一例には、ベンジルがある。
本明細書中で使用する「シクロアルキル」基とは、３個〜１０個（例えば、４個〜８個）の炭素原子を有する脂肪族炭素環を意味する。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチル、ノルボルニル、クビル（ｃｕｂｙｌ）、オクタヒドロ−インデニル、デカヒドロ−ナフチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．３．１］ノニルおよびビシクロ［３．２．３］ノニルが挙げられる。本明細書中で使用する「シクロアルケニル」基とは、３個〜１０個（例えば、４個〜８個）の炭素原子および１個またはそれ以上の二重結合を有する非芳香族炭素環を意味する。シクロアルケニル基の例には、シクロペンテニル、１，４−シクロヘキサ−ジ−エニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル、ヘキサヒドロ−インデニル、オクタヒドロ−ナフチル、ビシクロ［２．２．２］オクテニルおよびビシクロ［３．３．１］ノネニルが挙げられる。シクロアルキル基またはシクロアルケニル基は、必要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）を含めて）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイル）で置換できる。
【００３８】
本明細書中で使用する「ヘテロシクロアルキル」基とは、３員〜１０員（例えば、４員〜８員）の飽和環構造であり、ここで、その環原子の１個またはそれ以上は、ヘテロ原子（例えば、Ｎ、ＯまたはＳ）である。ヘテロシクロアルキル基の例には、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフリル、ジオキソラニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オクタヒドロ−ベンゾフリル、オクタヒドロ−クロメニル、オクタヒドロ−チオクロメニル、オクタヒドロ−インドリル、オクタヒドロ−ピリジニル、デカヒドロ−キノリニル、オクタヒドロ−ベンゾ［ｂ］チオフェニル、２−オキサ−ビシクロ［２．２．２］オクチル、１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクチル、３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチルおよび２，６−ジオキサ−トリシクロ［３．３．１．０３，７］ノニルが挙げられる。本明細書中で使用する「ヘテロシクロアルケニル」基とは、二重結合を有する３員〜１０員（例えば、４員〜８員）の非芳香環構造であり、ここで、その環原子の１個またはそれ以上は、ヘテロ原子（例えば、Ｎ、ＯまたはＳ）である。ヘテロシクロアルキル基またはヘテロシクロアルケニル基は、必
要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）を含めて）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイル）で置換できる。
【００３９】
本明細書中で使用する「ヘテロアリール」基とは、５個〜１５個の環原子を有する単環式、二環式または三環式の環構造を意味し、ここで、それらの環原子の１個またはそれ以上は、ヘテロ原子（例えば、Ｎ、ＯまたはＳ）であり、ここで、この二環式または三環式の環構造の１個またはそれ以上の環は、芳香族である。ヘテロアリールの一部の例には、ピリジル、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、インドリル、テトラゾリル、ベンゾフリル、ベンズチアゾリル、キサンテン、チオキサンテン、フェノチアジン、ジヒドロインドールおよびベンゾ［１，３］ジオキソールがある。ヘテロアリールは、必要に応じて、１個またはそれ以上の置換基（例えば、アルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）を含めて）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクロアルキル−カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）アルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、尿素、チオ尿素、スルファモイル、スルファミド、オキソまたはカルバモイル）で置換されている。本明細書中で使用する「ヘテロアラルキル」基とは、ヘテロアリール基で置換したアルキル基（例えば、Ｃ１〜４アルキル基）を意味する。「アルキル」および「ヘテロアリール」の両方は、上で定義した。
【００４０】
本明細書中で使用する「環状部分」には、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、アリールまたはヘテロアリールが挙げられ、これらの各々は、上で定義した。
【００４１】
本明細書中で使用する「アシル」基とは、ホルミル基またはアルキル−Ｃ（＝Ｏ）−を意味し、「アルキル」は、先に定義した。アセチルおよびピバロイルは、アシル基の例である。
【００４２】
本明細書中で使用する「カルバモイル」基とは、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲｘＲｙまたは−ＮＲｘ−ＣＯ−Ｏ−Ｒｚの構造を有する基を意味し、ここで、ＲｘおよびＲｙは、先に定義しており、そしてＲｚは、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアラルキルであり得る。
【００４３】
本明細書中で使用する「カルボキシ」基および「スルホ」基とは、それぞれ、−ＣＯＯＨおよび−ＳＯ３Ｈを意味する。
【００４４】
本明細書中で使用する「アルコキシ」基とは、アルキル−Ｏ−基を意味し、ここで、「アルキル」は、上で定義した。
【００４５】
本明細書中で使用する「スルホキシ」基とは、−Ｏ−ＳＯ−Ｒｘまたは−ＳＯ−Ｏ−Ｒｘを意味し、ここで、Ｒｘは、上で定義した。
【００４６】
本明細書中で使用する「ハロゲン」基または「ハロ」基とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００４７】
本明細書中で使用する「スルファモイル」基とは、−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲｘＲｙまたは−ＮＲｘ−Ｓ（Ｏ）２−Ｒｚの構造を意味し、ここで、Ｒｘ、ＲｙおよびＲｚは、上で定義した。
【００４８】
本明細書中で使用する「スルファミド」基とは、−ＮＲｘ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲｙＲｚの構造を意味し、ここで、Ｒｘ、ＲｙおよびＲｚは、上で定義した。
【００４９】
本明細書中で使用する「尿素」基とは、−ＮＲｘ−ＣＯ−ＮＲｙＲｚを意味し、そして「チオ尿素」基とは、−ＮＲｘ−ＣＳ−ＮＲｙＲｚの構造を意味する。Ｒｘ、ＲｙおよびＲｚは、上で定義した。
【００５０】
本明細書中で使用する有効量は、治療した患者に対して治療効果を与えるのに必要な量として定義され、典型的には、患者の年齢、体表面積、体重および健康状態に基づいて、決定される。動物およびヒトへの投薬量の相互関係は、（体表面積１平方メートルあたりのミリグラム数に基づいて）、Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐ．，５０：２１９（１９６６）により、記述されている。体表面積は、大体、患者の身長および体重から決定され得る。例えば、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｔａｂｌｅｓ，Ｇｅｉｇｙ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ａｒｄｓｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，５３７（１９７０）を参照。本明細書中で使用する「患者」とは、哺乳動物（ヒトを含めて）を意味する。
【００５１】
本明細書中で使用するアンタゴニストは、レセプタを活性化することなくレセプタに結合する分子である。それは、レセプタ上の結合部位について内因性リガンドまたは基質と競争し、それゆえ、レセプタが内因性リガンド結合に応答して細胞内シグナルを伝達する能力を阻害する。
【００５２】
式（Ｉ）の化合物は、ＴＧＦβレセプタＩ型（Ａｌｋ５）および／またはアクチビンレセプタＩ型（Ａｌｋ４）のアンタゴニストであり、それらの化合物は、ＴＧＦβおよび／またはアクチビンシグナル変換の結果（例えば、細胞外マトリックス（例えば、コラーゲンおよびフィブロネクチン）の産生、間質細胞の筋線維芽細胞への分化、および炎症細胞の刺激および移動）を阻害するのに有用である。それゆえ、式（Ｉ）の化合物は、炎症応答および線維応答を刺激し、そしてＴＧＦβおよび／またはアクチビン活性の低下が望ましい障害または疾患（例えば、種々の線維性癌または進行癌）を治療および／または予防するという有用性を有する。
【００５３】
他に定義されていなければ、本明細書中で使用する全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術の当業者に一般的に理解されている意味と同じ意味を有する。本明細書中で引用した全ての特許および出版物の内容は、本明細書中で参考として援用されている。それに加えて、物質、方法および実施例は、例示にすぎず、限定するつもりはない。
【００５４】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および請求の範囲から、明らかとなる。
【００５５】
（発明の詳細な説明）
一般に、本発明は、式（Ｉ）の化合物に特徴があり、これは、驚くべきことに、ＴＧＦβ系統Ｉ型レセプタであるＡｌｋ５および／またはＡｌｋ４に対して、高い親和性を示す。
【００５６】
（式（Ｉ）の化合物の合成）
式（Ｉ）の化合物は、市販の出発物質または公知の出発物質から、多数の方法により、調製され得る。１方法では、式（Ｉ）の化合物は、以下のスキーム１に従って、調製される。具体的には、式（ＩＩ）の化合物（ここで、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、各々、先に規定されている）は、適切な塩基（例えば、ＫＯＨ）を用いて、不活性溶媒（例えば、ＣＨ２Ｃｌ２）中で式（ＩＩＩ）のアセチレンでの極性環化付加を受けて、以下に示すように、中間体、式（ＩＶ）の化合物を形成し得る。この中間体は、次いで、式（Ｖ）のアミンと反応して（ここで、ＲＡは、低級アルキル（例えば、メチルのようなＣ１−４アルキル）であり、ＲＢが、適切な脱離基（例えば、エトキシのようなＣ１−４アルコキシ）である）、さらなる中間体、式（ＶＩ）の化合物を形成する。この中間体と試薬（例えば、必要に応じて置換されたグアニジン（ここで、スキーム１において以下に示すＲは、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクロアルキル、またはヘテロアリールであり得る）またはチオ尿素）とのさらなる反応は、式（Ｉ）の化合物を導く。
【００５７】
あるいは、式（ＩＶ）の中間体化合物は、高温（例えば、９０℃）で極性溶媒（例えば、ジオキサン）中でジエトキシケトンと反応することによってアルキル化されて、さらなる中間体、式（ＶＩＩ）の化合物を生じる。次いで、この中間体は、高温（例えば、１００℃）でグアニジンカルボネートのような試薬と反応して、アミノピリミジノン置換基を有する式（Ｉ）の化合物を形成し得る。この式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の他の化合物にさらに誘導体化され得る（例えば、スキーム１に示されるように、アミノピリミジノン置換基をジアミノピリミジン置換基に変換することによる）。
【００５８】
（スキーム１）
【００５９】
【化４】
2006502165.tif 000005
式（Ｉ）の化合物を誘導体化するためのいくつかの他の方法が、以下のスキーム２に示される。
【００６０】
（スキーム２）
【００６１】
【化５】
2006502165.tif 000006
スキーム３は、式（Ｉ）の化合物を調製するためのなお別の方法を示す。詳細には、式（ＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩ）のアセチレンで環化されて、式（ＩＸ）の中間体化合物を形成し得る。この中間体とＮａＯＨとの反応、続いて、臭素化剤（Ｎ−ブロモスクシンイミド）と反応して、式（Ｉ）の化合物を生じる。式（Ｘ）の化合物と式（ＸＩ）または式（ＸＩＩ）のいずれかの試薬とのさらなる反応は、式（Ｉ）の化合物を生じる。参照として、Ｓｔｉｌｌｅ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．ＩＮ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．２５，５０８（１９９６）およびＳｕｚｕｋｉら、Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．１１，５１３（１９８１）を参照のこと。
【００６２】
（スキーム３）
【００６３】
【化６】
2006502165.tif 000007
式（ＩＩＩ）および式（ＶＩＩＩ）のアセチレン（それぞれ、スキーム１および３に示される合成手順の開始化合物）を、以下の式４に従って調製し得る。詳細には、２−ハロピリジン（ＸＩＩＩ）は、最初に、トリメチルシリルアセチレンと反応して、トリメチルシラニルエチニル置換ピリジン（ＸＩＶ）を形成し得、これは、次いで、塩基（例えば、ＮａＯＨ、Ｋ２ＣＯ３、またはテトラブチルアンモニウムフルオリド）で脱保護されて、式（ＸＶ）の２−エチニルピリジンを生じる。この化合物と無水酢酸およびクロロギ酸メチルとのさらなる反応は、それぞれ、式（ＩＩＩ）および式（ＶＩＩＩ）の化合物を生じる。
【００６４】
（スキーム４）
【００６５】
【化７】
2006502165.tif 000008
なおさらに、式（Ｉ）の化合物は、以下のスキーム５に従って調製され得る。詳細には、式（ＸＶＩ）のジアリールアセチレンまたは式（ＸＶＩＩ）のケトンは、アミン化剤（例えば、Ｏ−（メシチルスルホニル）−ヒドロキシルアミン）で環化されて、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物を生じ、これは、臭素化（例えば、Ｎ−ブロモスクシンイミドを使用することによる）されて、式（Ｘ）の化合物を形成し得る。式（Ｘ）と式（ＸＩ）または式（ＸＩＩ）のいずれかの試薬とのさらなる反応は、式（Ｉ）の化合物を生じる。
【００６６】
（スキーム５）
【００６７】
【化８】
2006502165.tif 000009
式（ＸＶＩＩ）の開始化合物を、上記スキーム４に示される方法と類似の方法に従って、例えば、適切なピリジルアセチレンと２−ハロピリジンとを結合することによって調製され得る。参照として、Ｙａｍａｎａｋｅら、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１８９０（１９８８）を参照のこと。式（ＸＶＩＩ）の化合物はまた、公知の方法（例えば、Ｃａｓｓｉｔｙら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２２８６（１９７８）を参照のこと）に従って調製され得る。
【００６８】
スキーム２に加えて、式（Ｉ）の化合物を、スキーム６および７に従って、式（Ｉ）の他の化合物に改変され得る。Ｒｃは、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアラルキルを表すことに留意のこと。
【００６９】
【化９】
2006502165.tif 000010
当業者に明らかであるように、いくつかの中間体は、上記に記載されるような合成工程を行う前に、保護される必要があり得る。適切な保護基としては、例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８１）を参照のこと。
【００７０】
（式（Ｉ）の化合物の使用）
上記に議論されるように、ＴＧＦβファミリーシグナル伝達経路の過活動は、細胞外基質の過剰な沈着および炎症性応答の増加をもたらし、このことは、組織および器官（例えば、肺、腎臓、および肝臓）の線維症を引き起こし、最終的に器官不全をもたらす。例えば，Ｂｏｒｄｅｒ，Ｗ．Ａ．およびＲｕｏｓｌａｈｔｉ  Ｅ．ＪＣｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９０：１−７（１９９２）、ならびにＢｏｒｄｅｒ，Ｗ．Ａ．およびＮｏｂｌｅ，Ｎ．Ａ．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ  ３３１：１２８６−１２９２（１９９４）を参照のこと。ＴＧＦβ  ｍＲＮＡおよび／もしくはアクチビンｍＲＮＡの発現、ならびにＴＧＦβおよび／もしくはアクチビンのレベルが、種々の線維症障害（線維症性腎疾患、アルコール性および自己免疫性肝炎、骨髄線維症，ブレオマイシン誘導性肺線維症、および特発性肺線維症）に罹患する患者において増加されるという研究が示された
したがって、式（Ｉ）の化合物（これは、ＴＧＦβファミリーＩ型レセプター、Ａｌｋ５および／もしくはＡｌｋ４のアンタゴニストであり、そしてＴＧＦβおよび／もしくはアクチビンシグナル伝達経路を阻害する）は、線維性障害、または増加したＴＧＦβおよび／もしくはアクチビン活性によって媒介される疾患の処置ならびに／あるいは予防に有用である。本明細書中で使用される場合、化合物は、それがこの経路のレセプター（例えば、Ａｌｋ５および／もしくはＡｌｋ４）に（例えば、１０μＭより低いＩＣ５０値で；好ましくは、１μＭより低いＩＣ５０値で；より好ましくは、０．１μＭより低いＩＣ５０値で）結合する場合、ＴＧＦβシグナル伝達経路を阻害し、それによって、このレセプター上の結合部位に関して内在性のリガンドもしくは基質と競合して、このレセプターの、内在性のリガンドもしくは基質の結合に応答した細胞内シグナルを伝達する能力を低下させる。上記の障害もしくは疾患としては、以下：（ａ）異常な高レベルのＴＧＦβおよび／もしくはアクチビンの存在によって特徴付けられるあらゆる状態；および／もしくは（ｂ）細胞外基質の過剰な蓄積；および／もしくは（ｃ）筋線維芽細胞の数および合成活性の増加、が挙げられる。これらの障害もしくは疾患としては、線維症状態（例えば、強皮症、特発性肺線維症、糸球体腎炎，、糖尿病性腎症、ループス腎炎、高血圧症誘発腎症、眼球および角膜の瘢痕、肝臓線維症もしくは胆汁線維症、急性肺損傷、肺線維症、梗塞後心線維症、線維硬化症、線維性癌、類線維腫、線維腫、線維腺腫、線維肉腫）が挙げられる（限定ではない）。式（Ｉ）の化合物による予防処置に関する他の線維症状態は、放射線治療誘導性線維症、化学療法誘導性線維症、外科手術誘導性瘢痕（外科手術性の癒着、椎弓切除術、および冠状動脈再狭窄を含む）を含む治療有用性を有し得る。
【００７１】
増加したＴＧＦβ活性はまた、進行性癌を有する患者において、顕著に見られる。研究は、種々の癌の後期段階において、腫瘍内の腫瘍細胞および間質細胞の両方が、一般的にＴＧＦβを過剰発現することを示した。このことは、新脈管新生の刺激、細胞の運動性、免疫系の抑制、および腫瘍細胞と細胞外基質との相互作用の増加をもたらす。例えば、Ｈｏｊｏ，Ｍ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  ３９７：５３０−５３４（１９９９）を参照のこと。結果として、腫瘍細胞は、より侵襲的になり、離れた器官に転移する。例えば、Ｍａｅｈａｒａ，Ｙ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１７：６０７−６１４（１９９９）、およびＰｉｃｏｎ，Ａ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ．Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  Ｐｒｅｖ．７：４９７−５０４（１９９８）を参照のこと。したがって、式（Ｉ）の化合物（これは、ＴＧＦβ  Ｉ型レセプターのアンタゴニストであり、そしてＴＧＦβおよび／もしくは予防に有用である。このような後期段階の癌としては、肺、乳房、肝臓、胆管、胃腸管、頭部および頸部、膵臓、前立腺、頸部の癌腫、ならびに多発性骨髄腫、黒色腫、神経膠腫、およびグリア芽細胞腫が挙げられる。
【００７２】
重要なことには、ＴＧＦβおよび／もしくはアクチビンの過剰発現によって媒介される障害もしくは疾患（例えば、線維症もしくは癌）の慢性性質、およびいくつかの場合、局在性性質のため、低分子処置（例えば、本発明に開示される処置）が、長期処置のために好ましい。
【００７３】
式（Ｉ）の化合物は、高レベルのＴＧＦβおよび／もしくはアクチビン活性によって媒介される障害もしくは疾患を処置するのに有用なだけでなく、これらの化合物はまた、同じ障害もしくは疾患を予防するために使用され得る。ＴＧＦβおよび／もしくはアクチビン生成の増加をもたらす多型が、線維症および高血圧に関連することが知られている。実際、高い血清ＴＧＦβレベルは、放射線療法を受けた乳癌患者における線維症、慢性対宿主性移植片病、特発性間質性肺炎、移植レシピエントの静脈閉塞疾患、および連続的な歩行式腹膜透析を受けた患者における線維症の発生と相関している。従って、血清におけるＴＧＦβおよび／またはアクチビンのレベルならびに組織におけるＴＧＦβ  ｍＲＮＡおよび／またはアクチビンｍＲＮＡのレベルは、測定され得、かつＴＧＦβおよび／またはアクチビンの過剰発現により媒介される障害または疾患についての診断マーカーまたは予後マーカーとして使用され得、そしてＴＧＦβおよび／またはアクチビンの産生を決定するＴＧＦβ遺伝子における多形はまた、障害または疾患に対する感受性を予測するのに使用され得る。例えば、Ｂｌｏｂｅ，Ｇ．Ｃ．ら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２（１８）：１３５０−１３５８（２０００）；Ｍａｔｓｕｓｅ，Ｔ．ら，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１３：１７−２４（１９９５）；Ｉｎｏｕｅ，Ｓ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．２０５：４４１−４４８（１９９４）；Ｍａｔｓｕｓｅ，Ｔら，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４８：７０７−７１３（１９９６）；Ｄｅ  Ｂｌｅｓｅｒら，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２６：９０５−９１２（１９９７）；Ｐａｗｌｏｗｓｋｉ，Ｊ．Ｅ．ら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１００：６３９−６４８（１９９７）；およびＳｕｇｉｙａｍａ，Ｍ．ら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １１４：５５０−５５８（１９９８）を参照のこと。
【００７４】
（式（Ｉ）の化合物の投与）
上記の通り、有効量とは、処置される患者に対して治療効果を与えるのに必要な量である。式（Ｉ）の化合物について、有効量は、例えば、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ）の範囲であり得る。有効用量はまた、当業者に認識されているように、投与経路、賦形剤の使用、および他の治療処置の同時使用（他の治療剤および／もしくは放射線療法の使用を含む）の可能性に依存して変化する。
【００７５】
式（Ｉ）の化合物は、薬学的化合物の投与に適した任意の様式（ピル、錠剤、カプセル、エアロゾル、坐剤、経口摂取もしくは注射のためまたは点眼もしくは点耳として使用するための液体処方物、栄養補助食品、および局所用調製物を含むがこれらに限定されない）で投与され得る。薬学的に受容可能な組成物としては、等張性生理食塩水、５％グルコース、または他の周知の薬学的に受容可能な賦形剤中の活性剤の水溶液が挙げられる。可溶化剤（例えば、シクロデキストリンまたは当業者に周知の他の可溶化剤）が、治療化合物の送達のために薬学的賦形剤として使用され得る。投与経路に関して、この組成物は、経口的に、鼻内に、経皮的に、皮内に、膣内に、耳内に、眼内に、頬内に、直腸に、経粘膜的に、または吸入、移植（例えば、外科的に）、もしくは静脈内投与を通じて投与され得る。この組成物は、動物（例えば、哺乳動物（例えば、ヒト、非ヒト霊長類、ウマ、イヌ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、ハムスター、アレチネズミ、フェレット、トカゲ、爬虫類、または鳥類）に投与され得る。
【００７６】
必要に応じて、式（Ｉ）の化合物は、ＴＧＦβシグナル伝達経路を阻害するかまたは異なる作用機構により対応する病理学的障害（例えば、線維症または進行性癌）を処置する１つ以上の他の薬剤と組み合わせて投与され得る。これらの薬剤の例としては、アンジオテンシン変換酵素インヒビター、非ステロイドおよびステロイド抗炎症剤、および化学療法剤もしくは放射線、ならびにＴＧＦβレセプターのリガンド結合または活性化をアンタゴナイズする薬剤（例えば、抗ＴＧＦβ、抗ＴＧＦβレセプター抗体、またはＴＧＦβ  ＩＩ型レセプターのアンタゴニスト）が挙げられる。
【００７７】
本発明は、以下の実施例にさらに記載されており、これらの実施例は、特許請求の範囲に記載の本発明の範囲を限定しない。
【００７８】
上記スキーム１および２に説明される合成手順は、以下の表題化合物の調製において使用された。
【実施例】
【００７９】
（実施例１）
（４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−４−イル］−ピリミジン−２−イルアミン）
表題化合物の合成を、以下の部分（ａ）〜（ｆ）に記載する。
【００８０】
（ａ）２−メチル−６−トリメチルシラニルエチニル−ピリジン
無水トリエチルアミン（４５ｍＬ）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（０．４８ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）（１．４５ｍｍｏｌ）を、６−ブロモ−２−メチルピリジン（４８．２ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１１０ｍＬ）溶液に添加した。（トリメチルシリル）アセチレン（６２．６ｍｍｏｌ）を得られたオレンジ色溶液に滴下した。室温で一晩攪拌後、反応物を減圧下で濃縮し、そしてエーテル（１００ｍＬ）、ヘキサン（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で希釈した。このエマルジョンをセライトプラグを通して濾過し、エーテルでリンスした。分離した有機相を水（１×）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で濃縮して、２−メチル−６−トリメチルシラニルエチニル−ピリジンとして同定された、８．８６ｇの暗褐色油状物を得た。
【００８１】
【化１０】
2006502165.tif 000011
（ｂ）２−エチニル−６−メチル−ピリジン
２−メチル−６−トリメチルシラニルエチニル−ピリジン（４６．８ｍｍｏｌ）の飽和炭酸カリウム／メタノール（１１５ｍL)溶液を室温で１時間攪拌し、減圧下で濃縮し、エーテル（２００ｍL)中に溶解し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で濃縮して、２−エチニル−６−メチル−ピリジンとして同定された、４．８ｇの暗褐色油状物を得た。
【００８２】
【化１１】
2006502165.tif 000012
（ｃ）４−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ブト−３−イン−２−オン
２−エチニル−６−メチル−ピリジン（４１．００ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を、１．０Ｍ  エチルマグネシウムブロミド／ＴＨＦ（６１．５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、０℃で窒素雰囲気下で、ガスを放出させながら滴下した。３０分攪拌後、この溶液を、０℃で窒素雰囲気下で、無水酢酸（８２．０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、カニューレで移した。さらに４５分後、反応物を飽和塩化アンモニウムでクエンチした。室温で攪拌後、反応物を、水で希釈した。水相をエーテル（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩化アンモニウム（２×）で洗浄し、乾燥／脱色（ＭｇＳＯ４／チャコール）し、減圧下で濃縮して、４−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ブト−３−イン−２−オンとして同定される、６．５４ｇの褐色油状物を得た。
【００８３】
【化１２】
2006502165.tif 000013
（ｄ）１−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル−エタノン
ヨウ化１−アミノピリジニウム（８２．０ｍｍｌ）を、４−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ブト−３−イン−２−オン（４１．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（６０ｍＬ）溶液に、室温で添加した。０℃に冷却した後、水酸化カリウム（１０６．６ｍｍｏｌ）の水（６０ｍＬ）溶液を添加し、この二相混合物を活発に攪拌した。５分後、反応物を室温に温めた。３．５時間後、反応物を、１：１塩化メチレン／水（１２０ｍＬ）で希釈し、そしてｐＨを濃塩酸で７に調節した。水相を広範囲に塩化メチレンで抽出した。合わせた有機相を水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４)し、そして減圧下で濃縮して、暗褐色固体を得た。この固体を酢酸エチル（２０ｍＬ）中に溶解し、希１Ｎ塩酸で抽出した。合わせた水相を酢酸エチル（１×）で洗浄し、固体ビカルボネートでｐＨ８に調節し、そして酢酸エチル（３×）で抽出した。合わせた有機相を水（１×）、ブライン（１×）、乾燥／脱色（ＭｇＳＯ４／チャコール）し、減圧下で濃縮して、１−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル−エタノンとして同定される５．２４ｇの黄褐色固体を得た。
【００８４】
【化１３】
2006502165.tif 000014
（ｅ）３−ジメチルアミノ−１−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−プロペノン
１−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル−エタノン（２０．８５ｍｍｏｌ）の、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジエチルアセタール（８０ｍＬ）溶液を、窒素雰囲気下で１３５℃に温めた。３日後、この反応物を減圧下で一定質量に濃縮し、そして３−ジメチルアミノ−１−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−プロペノンとして同定した。
【００８５】
【化１４】
2006502165.tif 000015
（ｆ）４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミン
２１ｗｔ％のナトリウムエトキシド／エタノール（４８．９９ｍｍｏｌ）を、無水イソプロピルアルコール（５０ｍＬ）中のグアニジンＨＣｌ（４８．９９ｍｍｏｌ）のスラリーに添加した。塩化ナトリウムがすぐに沈殿した。この懸濁液に、３−ジメチルアミノ−１−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−プロペノン（２０．８５ｍｍｏｌ）の無水イソプロピルアルコール（５０ｍＬ）溶液を添加した。次いで、この暗い懸濁液を一晩加熱還流した。暖かい反応物を氷（１３０ｇ）上に注ぎ、フラスコを水でリンスし、リンスを氷スラリーに添加した。この懸濁液を１．５時間攪拌し、濾過し、冷水で洗浄し、空気乾燥して、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミンとして同定される、２．６３ｇの黄褐色固体を得た。水性母液を減圧下で濃縮し、イソプロピルアルコールでスラリー化し、濾過し、イソプロピルアルコール、水および塩化メチレンで洗浄し、空気乾燥して、４−［２−（６−メチル−ピリジン−２−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］−ピリミジン−２−イルアミンとして同定された１．２５ｇの黄褐色粉末を得た。収穫物を塩化メチレン中最終の再スラリーのために合わせ、固体を濾過し、そして空気乾燥して、３．６２ｇの黄褐色固体を得た。
【００８６】
【化１５】
2006502165.tif 000016
式（Ｉ）の化合物のＴＧＦβもしくはアクチビン抑制性活性は、以下の実施例に記載される方法によって、評価され得る。
【００８７】
（実施例２）
（ＴＧＦβ  Ｉ型レセプター自己リン酸化の抑制を評価するためのセルフリーアッセイ）
ＴＧＦβ  Ｉ型セリン−スレオニンキナーゼ活性を、Ｎ末端ポリヒスチジン、ＴＥＶ切断部位標識（例えば、Ｈｉｓ−ＴＧＦβＲＩ）を含有するレセプターの細胞質内ドメインの自己リン酸化活性として測定した。このＨｉｓ標識化レセプター細胞質内キナーゼドメインを、感染した昆虫細胞培養物から、Ｇｉｂｃｏ−ＢＲＬ  ＦａｓｔＢａｃ  ＨＴｂバキュロウイルス発現ベクターシステムを用いて精製した。
【００８８】
９６ウェルＮｉｃｋｅｌ  ＦｌａｓｈＰｌａｔｅ（ＮＥＮ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）に、アッセイ緩衝液（５０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、６０ｍＭ  ＮａＣｌ，１ｍＭ  ＭｇＣｌ２，２ｍＭ  ＤＴＴ，５ｍＭ  ＭｎＣｌ２，２％グリセロール、および０．０１５％  Ｂｒｉｊ  ３５）中の１．２５μＣｉ３３Ｐ−ＡＴＰ／２５μＭ  ＡＴＰを、２０μｌ添加した。５％ＤＭＳＯ溶液中に調製した式（Ｉ）の試験化合物１０μｌを、ＦｌａｓｈＰｌａｔｅに添加した。次いで、１２．５ｐｍｏｌのＨｉｓ−ＴＧＦβＲＩを含有するアッセイ緩衝液  ２０μｌの、各ウェルへの添加によって、アッセイを開始した。プレートを３０分間室温でインキュベートし、次いで、ＴＢＳによる単回リンスによって、反応を終了した。プレートの各ウェルからの放射を、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）上で読み取った。全結合（阻害なし）を試験化合物を含まないＤＭＳＯ溶液の存在下で測定された数値として定義し、そして非特異的結合を、ＥＤＴＡもしくはキナーゼを含まないコントロールの存在下で測定された数値として定義した。
【００８９】
あるいは、上記の試薬およびインキュベーション条件を用いて、しかし微量遠心管内で実施された反応を、４％〜２０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル上での分離によって分析し、そして４０ｋＤａ  Ｈｉｓ−ＴＧＦβＲＩ  ＳＤＳ−ＰＡＧＥバンドへの放射線標識の組み込みを、Ｓｔｏｒｍ  Ｐｈｏｓｐｈｏｉｍａｇｅｒ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｙｎａｍｉｃｓ）上で定量化した。
【００９０】
式（Ｉ）の化合物は、代表的に、１０μＭより低いＩＣ５０値を示した；いくつかは、０．１μＭより低いＩＣ５０値を示した。
【００９１】
（実施例３）
式（Ｉ）の試験化合物による、アクチビンＩ型レセプター（Ａｌｋ４）キナーゼ自己リン酸化活性の阻害は、同様にＨｉｓ標識された形態のＡｌｋ４（Ｈｉｓ−Ａｌｋ４）が、Ｈｉｓ−ＴＧＦβＲＩの代わりに用いられたことを除いて、上記の実施例７に記載されるのと同様の様式で決定され得る。
【００９２】
（実施例４）
（ＴＧＦβのシグナル伝達および細胞毒性の細胞性阻害を評価するためのアッセイ）
式（Ｉ）の化合物の生物学的活性を、ＨｅｐＧ２細胞における、それらのＴＧＦβ誘導性ＰＡＩルシフェラーゼレポーター活性を阻害する活性を測定することによって、決定した。
【００９３】
ＨｅｐＧ２細胞を、１０％ＦＢＳ、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、Ｌ−グルタミン（２ｍＭ）、ピルビン酸ナトリウム（１ｍＭ）、および非必須アミノ酸（１×）を含むＤＭＥＭ培地中で増殖したＰＡＩルシフェラーゼレポーターを用いて、安定にトランスフェクトした。次いで、トランスフェクトされた細胞を、９６ウェルプレート中に２．５×１０４細胞／ウェルの濃度で平板培養し、そして５％ＣＯ２インキュベーター内で、０．５％ＦＢＳを含む培地中で３７℃で３時間〜６時間飢餓状態においた。次いで、細胞を、リガンドの２．５ｎｇ／ｍｌ  ＴＧＦβ（１％ＤＭＳＯを含有する飢餓培地中）および式（Ｉ）の試験化合物の存在下、またはリガンドの２．５ｎｇ／ｍｌ  ＴＧＦβ（１％ＤＭＳＯを含有する飢餓培地中）および式（Ｉ）の試験化合物の非存在下のいずれかで刺激し、そして上記に記載するように２４時間インキュベートした。後日、この培地を洗浄し、そして、推奨されるようにＬｕｃＬｉｔｅ  Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ｒｅｐｏｒｔｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ａｓｓａｙ  ｋｉｔ（Ｐａｃｋａｒｄ，ｃａｔ．ｎｏ．６０１６９１１）を用いて、ルシフェラーゼレポーターを検出した。プレートを、Ｗａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａプレートリーダー上で読み取り、その読みを、ＨｅｐＧ２細胞におけるＴＧＦβ誘導性ＰＡＩルシフェラーゼレポーター活性の抑制に関する式（Ｉ）の化合物のＩＣ５０値を決定するのに使用した。式（Ｉ）の化合物は、代表的に、１０μＭより低いＩＣ５０値を示した。
【００９４】
上記に記載されるのと同じ細胞培養条件を用いて、細胞毒性を決定した。具体的には、ＣｙｔｏＬｉｔｅ  ｃｅｌｌ  ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  ｋｉｔ（Ｐａｃｋａｒｄ，ｃａｔ．ｎｏ．６０１６９０１）を用いた一晩のインキュベーションの後に、細胞の生存度を決定した。式（Ｉ）の化合物は、代表的に、１０μＭより高いＬＤ２５値を示した。
【００９５】
（実施例５）
（ＴＧＦβのシグナル伝達の細胞性阻害を評価するためのアッセイ）
式（Ｉ）の化合物によるアクチビンシグナル伝達活性の細胞性阻害を、血清飢餓細胞に２．５ｎｇ／ｍｌ  ＴＧＦβの代わりに１００ｎｇ／ｍｌのアクチビンを添加することを除いて、上記の実施例１１５に記載されるのと同様の様式で決定した。
【００９６】
（実施例６）
（ＴＧＦβ誘導性コラーゲン発現に関するアッセイ）
（不死化コラーゲンプロモーター−緑色蛍光タンパク質細胞の調製）
コラーゲン１Ａ１プロモーター（Ｋｒｅｍｐｅｎ，Ｋ．ら、Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐ．８：１５１−１６３（１９９９）を参照のこと）の制御下で、線維芽細胞を、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を発現する成体トランスジェニックマウスの皮膚から誘導した。細胞を、３３℃で活性な温度感受性巨大Ｔ抗原で不死化した。細胞を３３℃で増殖させ、次いで、３７℃に移動し、それによって巨大Ｔを不活性化した（Ｘｕ，Ｓ．ら、Ｅｘｐ．Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．２２０：４０７−４１４（１９９５）を参照のこと）。約４日の経過および１回の分裂を経て、細胞は増殖を停止する。次いで、細胞を単一の９６ウェルプレートに十分なアリコート中に凍結させる。
【００９７】
（ＴＧＦβ誘導性コラーゲン−ＧＦＰ発現のアッセイ）
細胞を解凍し、１０％ウシ胎仔を含む血清完全ＤＭＥＭ（非必須アミノ酸、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、および２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを含む）中で平板培養し、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。後日、細胞をトリプシン処理し、５０μｌの完全ＤＭＥＭ（２％ウシ胎仔を含むが、フェノールレッドを含まない）中に３００００細胞／ウェルとして、９６ウェル形式に移動する。細胞を３７℃で３時間〜４時間インキュベートし、それらをプレートに接着させ、次いで、式（Ｉ）の試験化合物を含む溶液を、ＴＧＦβを含まない３つのウェルに添加し、同様に１ｎｇ／ｍｌのＴＧＦβを含む３つのウェルに添加する。ＤＭＳＯをまた、０．１％の最終濃度で全てのウェルに添加する。ＣｙｔｏＦｌｕｏｒ  マイクロプレートリーダー（ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）上で、４８５ｎｍでの励起に続く、５３０ｎｍでのＧＦＰの蛍光放出を、試験化合物を含む溶液の添加の４８時間後に計測した。次いでデータを、各試験サンプルについて、ＴＧＦβ非誘導性に対するＴＧＦβ誘導性の比率として表現する。
【００９８】
（他の実施形態）
本発明が、それらの詳細な説明とともに記載されてきたが、上記の記載が、本発明の範囲を説明することを意図されており、本発明の範囲を限定することを意図されないということ、本発明の範囲が、添付の特許請求の範囲によって定義されるということは、理解されるべきである。他の局面、利点もよび改変は、以下の特許請求の範囲内である。
【国際調査報告】
2006502165.tif 000018
2006502165.tif 000019