(57)【要約】本発明は、アリールシクロアルキル置換アルカン酸誘導体並びにその生理的に許容される塩及び生理的機能性誘導体に関する。式(Ｉ)  【化１】2006519200.tif 000048（式中の基は本明細書に記載した意味を有する）の化合物、その生理的に許容される塩、及びその製造方法が開示されている。該化合物は脂肪酸代謝障害、グルコース利用障害、及びインスリン抵抗性が関与する障害の治療及び／又は予防に適している。
2006519200.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2006519200.tif 000047
〔式中、
環Ａは、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルカンジイル又は(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルケンジイルであり、ここで、シクロアルカン- 又はシクロアルケンジイル環中の１個又はそれ以上の炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｒ１、Ｒ２は、互いに独立して、Ｈ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又は(Ｃ6-Ｃ10)-アリールであり；
Ｒ３は、(Ｃ3-Ｃ6)-シクロアルキル又は(Ｃ1-Ｃ12)-アルキルであり、これらは場合により(Ｃ6-Ｃ10)-アリール、(Ｃ5-Ｃ6)-へテロアリール又は(Ｃ3-Ｃ6)-シクロアルキルで置換されており、ここで、アリール、ヘテロアリール又はシクロアルキルはそれら自体が(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ1-Ｃ6)-アルコキシ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＯ-(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、ＣＯ-Ｏ-(Ｃ1-Ｃ6)アルキル、ＣＯ-ＮＨ(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル又はＣＯ-Ｎ((Ｃ1-Ｃ6)-アルキル)2で置換されていてもよく；
Ｘは、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個又はそれ以上の炭素原子は酸素原子で置き換えられていてもよく；
Ｙ1は、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2は、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ12)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置き換えられていてもよく；
Ｒ４は、(Ｃ1-Ｃ8)-アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ又は(Ｃ1-Ｃ6)-アルキルであり;
Ｒ６は、Ｈである〕
の化合物及びその生理的に許容される塩。
【請求項２】
環Ａが、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルカン-1,3-ジイルであり；
Ｒ１、Ｒ２が、互いに独立して、Ｈ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又は(Ｃ6-Ｃ10)-アリールであり；
Ｒ３が、(Ｃ1-Ｃ12)-シクロアルキルであり、これは場合によりフェニルで置換されており、ここで、フェニルはそれ自体が(Ｃ1-Ｃ6)-アルキルで置換されていてもよく；
Ｘが、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置き換えられていてもよく；
Ｙ1が、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2が、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置き換えられていてもよく；
Ｒ４が、(Ｃ1-Ｃ8)-アルキルであり；
Ｒ５が、Ｈ、 (Ｃ1-Ｃ6)-アルキルであり;
Ｒ６が、Ｈである、
請求項１に記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
環Ａが、シクロヘキサン-1,3-ジイルであり；
Ｒ１、Ｒ２が、互いに独立して、Ｈ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又はフェニルであり；；
Ｒ３が、(Ｃ1-Ｃ12)-アルキルであり、これは場合によりフェニルで置換されており、ここで、フェニルはそれ自体はメチルで置換されていてもよく；
Ｘが、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の環Ａに隣接する炭素原子は酸素原子で置き換えられていてもよく；
Ｙ1が、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2が、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置き換えられていてもよく；
Ｒ４が、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキルであり；
Ｒ５が、Ｈ又は(Ｃ1-Ｃ4)-アルキルであり;
Ｒ６が、Ｈである、
請求項１又は２に記載の式Ｉの化合物。
【請求項４】
環Ａが、シクロヘキサン-1,3-ジイルであり；
Ｒ１が、Ｈであり；
Ｒ２が、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又はフェニルであり；
Ｒ３が、(Ｃ1-Ｃ8)-アルキルであり、これは場合によりフェニルで置換されており、ここで、フェニルはそれ自体はメチルで置換されていてもよく；
Ｘが、((ＣＨ)2)2)Ｏであり；
Ｙ1が、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2が、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ4)-アルカンジイルであり；
Ｒ４が、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキルであり；
Ｒ５が、Ｈ又は(Ｃ1-Ｃ4)-アルキルであり;
Ｒ６が、Ｈである、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。
【請求項５】
結合Ｘ-環Ａ-Ｙ1が、cis-配置である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の１種又はそれ以上の式Ｉの化合物を含む医薬。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の１種又はそれ以上の式Ｉの化合物、及び代謝障害又はそれらに関連する疾患に有利に作用する１種又はそれ以上の活性化合物を含む医薬。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の１種又はそれ以上の式Ｉの化合物、及び１種又はそれ以上の抗糖尿病剤を含む医薬。
【請求項９】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の１種又はそれ以上の式Ｉの化合物、及び１種又はそれ以上の脂質モジュレーターを含む医薬。
【請求項１０】
脂肪酸代謝障害及びグルコース利用障害を治療及び／又は予防するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１１】
インスリン抵抗性が関与する障害を治療及び／又は予防するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１２】
糖尿病及びそれらに関連する続発症を治療及び／又は予防するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１３】
異常脂質血症及びそれらに関連する続発症を治療及び／又は予防するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１４】
代謝症候群に関連する症状を治療及び／又は予防するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１５】
脂肪酸代謝障害及びグルコース利用障害を治療及び／又は予防するための、少なくとも１種の他の活性化合物と組み合わせた、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１６】
インスリン抵抗性が関与する障害を治療及び／又は予防するための、少なくとも１種の他の活性化合物と組み合わせた、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
活性化合物を製薬に適する担体と混合し、そしてこの混合物を投与に適する形態にすることを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の１種又はそれ以上を含む医薬の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アリールシクロアルキル置換アルカン酸誘導体、並びにそれらの生理的に許容される塩及び生理的機能性誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
類似構造の化合物は、高脂血症及び糖尿病の治療に関する先行技術に既に記載されている（WO 2000/64876）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明の目的は、脂質及び／又は炭水化物代謝の治療上利用可能な調節を可能にし、従って２型糖尿病及びアテローム性動脈硬化症のような疾患並びにその種々の続発症の予防及び／又は治療に適する化合物を提供することであった。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
驚くべきことに、PPAR 受容体の活性を調節する一連の化合物を見いだした。特に、本化合物は PPAR アルファ及び PPAR ガンマの活性化に適しており、そして相対的な活性化の程度は化合物に応じて異なることがある。
【０００５】
従って、本発明は、式Ｉの化合物：
【化１】
2006519200.tif 000003
式中：
環Ａは、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルカンジイル又は(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルケンジイルであり、ここで、シクロアルカン- 又はシクロアルケンジイル環中の１個又はそれ以上の炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｒ１、Ｒ２は、互いに独立して、Ｈ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又は(Ｃ6-Ｃ10)-アリールであり；
Ｒ３は、(Ｃ3-Ｃ6)-シクロアルキル又は(Ｃ1-Ｃ12)-アルキルであり、これらは場合により(Ｃ6-Ｃ10)-アリール、(Ｃ5-Ｃ6)-へテロアリール又は(Ｃ3-Ｃ6)-シクロアルキルで置換されており、ここで、アリール、ヘテロアリール又はシクロアルキルはそれら自体が(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ1-Ｃ6)-アルコキシ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＯ-(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、ＣＯ-Ｏ-(Ｃ1-Ｃ6)アルキル、ＣＯ-ＮＨ(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル又はＣＯ-Ｎ((Ｃ1-Ｃ6)-アルキル)2で置換されていてもよく；
Ｘは、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個又はそれ以上の炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｙ1は、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2は、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ12)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｒ４は、(Ｃ1-Ｃ8)-アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ又は(Ｃ1-Ｃ6)-アルキルであり;
Ｒ６は、Ｈである；
及びその生理的に許容される塩に関する。
【０００６】
好ましいものは、その置換基Ｘ及びＹ1が環Ａに１位及び３位で結合している式Ｉの化合物である（Ｘ-環Ａ-Ｙ1）。
【０００７】
同様に好ましいものは、
環Ａが、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルカン-1,3-ジイルであり；
Ｒ１、Ｒ２が、互いに独立して、Ｈ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又は(Ｃ6-Ｃ10)-アリールであり；
Ｒ３が、(Ｃ1-Ｃ12)-シクロアルキルであり、これは場合によりフェニルで置換されており、ここで、フェニルはそれ自体が(Ｃ1-Ｃ6)-アルキルで置換されていてもよく；
Ｘが、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｙ1が、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2が、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｒ４が、(Ｃ1-Ｃ8)-アルキルであり；
Ｒ５が、Ｈ、 (Ｃ1-Ｃ6)-アルキルであり;
Ｒ６が、Ｈである、
式Ｉの化合物である。
【０００８】
特別に好ましいものは、
環Ａが、シクロヘキサン-1,3-ジイルであり；
Ｒ１、Ｒ２が、互いに独立して、Ｈ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又はフェニルであり；
Ｒ３が、(Ｃ1-Ｃ12)-アルキルであり、これは場合によりフェニルで置換されており、ここで、フェニルはそれ自体はメチルで置換されていてもよく；
Ｘが、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の環Ａに隣接する炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｙ1が、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2が、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ6)-アルカンジイルであり、ここで、アルカンジイル基中の１個の炭素原子は酸素原子で置換されていてもよく；
Ｒ４が、(Ｃ1-Ｃ8)-アルキルであり；
Ｒ５が、Ｈ又は(Ｃ1-Ｃ4)-アルキルであり;
Ｒ６が、Ｈである、
式Ｉの化合物である。
【０００９】
実に特別に好ましいものは、
環Ａが、シクロヘキサン-1,3-ジイルであり；
Ｒ１が、Ｈであり；
Ｒ２が、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキル、(Ｃ3-Ｃ8)-シクロアルキル又はフェニルであり；
Ｒ３が、(Ｃ1-Ｃ8)-アルキルであり、これは場合によりフェニルで置換されており、ここで、フェニルはそれ自体はメチルで置換されていてもよく；
Ｘが、((ＣＨ)2)2)Ｏであり；
Ｙ1が、ＣＯ又は結合であり；
Ｙ2が、ＮＨ、(Ｃ1-Ｃ4)-アルカンジイルであり；
Ｒ４が、(Ｃ1-Ｃ6)-アルキルであり；
Ｒ５が、Ｈ又は(Ｃ1-Ｃ4)-アルキルであり;
Ｒ６が、Ｈである、
式Ｉの化合物である。
【００１０】
環Ａに対する結合は cis 又は trans であってよく、cis-配置であることが好ましい。
【００１１】
本発明はまた、本明細書に記載する本発明の「好ましい実施形態」の全ての組み合わせを包含する。
【００１２】
置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６におけるアルキル、アルケニル、アルキニル基は、直鎖状又は分枝鎖状であってよい。
【００１３】
アリールは、芳香族の炭素環式の単環式又は二環式の環系であって、一個の環又は複数の環中に６〜１０個の原子を含むものを意味すると理解すべきである。
【００１４】
ヘテロアリールは、４〜１１個の環員を有する単環式又は二環式の芳香族環系であって、環系中の少なくとも１個の原子がＮ、Ｏ及びＳの群からのヘテロ原子であるものである。
【００１５】
式Ｉの化合物は少なくとも２個の不斉中心を含み、そしてより多数を含んでいてもよい。従って、式Ｉの化合物は、それらのラセミ体、ラセミ混合物、純粋なエナンチオマー、ジアステレオマー及びジアステレオマー混合物の形態で存在することができる。本発明は、式Ｉの化合物のこれら全ての異性体形態を包含する。これらの異性体形態は、それらの幾つかが明確な言葉で記載されていない場合であっても、公知の方法により得ることができる。
【００１６】
製薬上許容される塩は、それらの水溶性が出発又は基礎化合物と比較して大きいので、医学的応用に特に適している。これらの塩は製薬上許容されるアニオン又はカチオンを有する必要がある。本発明の化合物の好適な製薬上許容される酸付加塩は、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸及び硫酸の塩、並びに有機酸、例えば酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グリコール酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、コハク酸、ｐ−トルエンスルホン酸及び酒石酸の塩である。好適な製薬上許容される塩基塩は、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えばナトリウム及びカリウム塩）、及びアルカリ土類金属塩（例えばマグネシウム及びカルシウム塩)、並びにトロメタモール（2-アミノ-2-ヒドロキシメチル-1,3-プロパンジオール)、ジエタノールアミン、リジン又はエチレンジアミンの塩である。
【００１７】
製薬上許容されないアニオンとの塩、例えばトリフルオロ酢酸塩などもまた、製薬上許容される塩を製造又は精製するための、そして／又は非治療的な、例えばインビトロでの応用に使用するための有用な中間体として、本発明の範囲内に属する。
【００１８】
本明細書で用いられる「生理的機能性誘導体」という用語は、本発明の式Ｉの化合物の全ての生理的に許容される誘導体、例えば哺乳類に、例えばヒトに投与したときに、式Ｉの化合物又はその活性代謝物を（直接的又は間接的に）形成することができるエステルなどを指す。
【００１９】
生理的機能性誘導体はまた、例えば、H. Okada et al., Chem. Pharm. Bull. 1994, 42, 57-61 に記載されたような、本発明の化合物のプロドラッグを包含する。このようなプロドラッグは、インビボで代謝されて本発明の化合物になることができる。これらのプロドラッグは、それら自体が活性を有しても有しなくてもよい。
【００２０】
本発明の化合物はまた、種々の多形形態で、例えば非晶質又は結晶多形の形態として存在することができる。本発明の化合物の全ての多形形態は本発明の範囲内に属し、そして本発明のもう一つの態様である。
【００２１】
以下、「式Ｉの化合物」への全ての言及は、上記の式Ｉの化合物、並びに本明細書に記載するとおりの、その塩、溶媒和物及び生理的機能性誘導体を指す。
【００２２】
使用
本発明はさらに、PPAR受容体リガンドとしての、式Ｉの化合物及びそれらの医薬組成物の使用に関する。本発明の PPAR受容体リガンドは、PPAR受容体の活性のモジュレーターとして適している。
【００２３】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（PPAR）は、リガンドで活性化することのできる転写因子であり、そして核内ホルモン受容体のクラスに属する。PPARには三つのアイソフォーム、すなわち PPARアルファ、PPARガンマ及び PPARデルタがあり、これらは異なる遺伝子によりコードされる(Peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR): structure, mechanisms of activation and diverse functions: Motojima K, Cell Struct Funct., 1993 Oct; 18(5), 267-77)。
【００２４】
PPARガンマには二つの変異体、すなわち PPARガンマ１及びガンマ２があり、これらはプロモーター及びディファレンシャルmRNAスプライシングの選択的使用の結果である (Vidal-Puig et al., J. Clin. Invest., 97:2553-2561, 1996)。種々の PPAR受容体は異なる組織分布を有し、そして異なる生理的機能を調節する。PPAR受容体は、その遺伝子産物が脂質及び炭水化物代謝に直接的又は間接的に決定的に関与する多数の遺伝子の制御の異なる局面で中心的な役割を果たす。従って、例えば、PPARアルファ受容体は、肝臓における脂肪酸異化又はリポタンパク質代謝の制御において重要な役割を果たす一方で、PPARガンマは、例えば脂肪細胞分化の制御に決定的に関与する。
【００２５】
加えて、PPAR受容体は、他の多くの生理的過程（炭水化物又は脂質代謝とは直接に関係がないものを包含する）の制御にも関連する。異なる PPAR受容体の活性は、種々の脂肪酸、脂肪酸誘導体、及び合成化合物によって様々な程度で調節することができる。
【００２６】
機能、生理学的効果及び病態生理学に関する適切な概説につては、Joel Berger et al., Annu. Rev. Med., 2002, 53, 409-435; Timothy Wilson et al., J. Med. Chem., 2000, Vol. 43, No. 4, 527-550; Steven Kliewer et al., Recent Prog Horm Res., 2001, 56, 239-63 を参照されたい。
【００２７】
本発明は、PPAR受容体の活性、特に PPARアルファ及び PPARガンマ受容体の活性の調節に適する式Ｉの化合物に関する。調節のプロフィールに応じて、式Ｉの化合物は、以下に記載する適応症の治療、抑制及び予防に、そして一連の他の関連する薬物応用に適している (例えば、Joel Berger et al., Annu. Rev. Med., 2002, 53, 409-435; Timothy Wilson et al., J. Med. Chem., 2000, 43(4), 527-550; Steven Kliewer et al., Recent Prog Horm Res., 2001, 56, 239-63; Jean-Charles Fruchart, Bart Staels and Patrick Duriez: PPARS, Metabolic Disease and Arteriosclerosis, Pharmacological Research, Vol. 44, No. 5, 345-52, 2001; Sander Kersten, Beatrice Desvergne & Walter Wahli: Roles of PPARs in health and disease, NATURE, VOL. 405, 25 MAY 2000, 421-424; Ines Pineda Torra, Giulia Chinetti, Caroline Duval, Jean-Charles Fruchart and Bart Staels: Peroxisome proliferator-activated receptors: from transcriptional control to clinical practice, Curr Opin Lipidol 12:2001, 245-254 参照)。
【００２８】
この種類の化合物は、下記の治療及び／又は予防に特に適している：
１．-  脂肪酸代謝障害及びグルコース利用障害
-  インスリン抵抗性が関与する障害
２．糖尿病、特に２型糖尿病、関連する続発症の予防を包含する。
これに関して特別な態様は、次のものである。
-  高血糖、
-  インスリン抵抗性の改善、
-  耐糖能の改善、
-  膵臓のβ-細胞の保護
-  大血管及び微小血管障害の予防
３．異常脂質血症及びそれらの続発症、例えばアテローム性動脈硬化症、冠状動脈性心臓病、脳血管障害など、特に下記の要因の１つ又はそれ以上を特徴とするもの（しかし、これらに限定されない）：
-  高い血漿トリグリセリド濃度、高い食後血漿トリグリセリド濃度、
-  低い HDLコレステロール濃度
-  低い AopAリポタンパク質濃度
-  高い LDLコレステロール濃度
-  スモールデンス（small dense）小さい緻密な LDLコレステロール粒子
-  高い AopBリポタンパク質濃度
４．代謝症候群に関連することのある種々の他の状態は、例えば下記のものである：
-  肥満（過剰体重）、中心性肥満を包含する
-  血栓症、凝固性亢進及びプロ血栓症の段階（動脈及び静脈）
-  高血圧
-  心不全、例えば心筋梗塞、高血圧性心臓病又は心筋症の後の状態のものなど（しかし、これらに限定されない）
【００２９】
５．他の障害又は状態であって、例えば炎症過程又は細胞分化が関与する下記のもの：
-  アテローム性動脈硬化症、例えば、狭心症又は心筋梗塞を包含する冠状動脈硬化症、卒中など（しかし、これらに限定されない）
-  血管再狭窄又は再閉塞
-  慢性炎症性腸疾患、例えばクローン病及び潰瘍性大腸炎など
-  膵臓炎
-  他の炎症性状態
-  網膜症
-  脂肪細胞腫瘍
-  脂肪腫様癌、例えば脂肪肉腫など
-  充実性腫瘍及び新生物、例えば消化管の、肝臓の、胆管の及び膵臓の癌、内分泌腫瘍、肺の、腎臓の及び尿路の、生殖管の癌、前立腺癌など（しかし、これらに限定されない）
-  急性及び慢性の骨髄増殖性疾患及びリンパ腫
-  血管新生
-  神経変性疾患
-  アルツハイマー病
-  多発性硬化症
-  パーキンソン病
-  紅班落屑性皮膚疾患、例えば乾癬
-  尋常性座瘡
-  PPARにより調節される他の皮膚疾患及び皮膚科学的状態
-  湿疹及び神経皮膚炎
-  皮膚炎、例えば脂漏性皮膚炎又は光線皮膚炎
-  角膜炎及び角化症、例えば脂漏性角化症、老人性角化症、光線性角化症、光誘発角化症又は毛包性角化症など
-  ケロイド及びケロイド予防
-  いぼ、コンジローム又は尖圭コンジロームを包含する
-  ヒト乳頭腫ウイルス（HPV）感染、例えば性病乳頭種、ウイルス性いぼ、例えば伝染性軟属腫、白板症など
-  丘疹性皮膚疾患、例えば扁平苔癬など
-  皮膚癌、例えば基底細胞癌、黒色腫又は皮膚悪性リンパ腫など
-  限局性良性表皮性腫瘍、例えば角皮症、表皮母斑など
-  凍瘡
-  高血圧
-  Ｘ症候群
-  多嚢胞性卵巣症候群（PCOS）
-  喘息
-  骨関節炎
-  紅斑性狼瘡（LE）又は炎症性リウマチ障害、例えば関節リウマチなど
-  血管炎
-  消耗（悪液質）
-  通風
-  虚血／再灌流症候群
-  急性呼吸窮迫症候群（ARDS）（「ショック肺」）
【００３０】
製剤
所望の生物学的効果の達成に必要な式Ｉの化合物の量は、多数の要因、例えば選択した特定の化合物、意図する使用、投与方式及び患者の臨床状態に依存する。日用量は、一般的に１日当たり及び体重１kg 当たり 0.001 mg〜100 mg（典型的には 0.01 mg〜50 mg）の範囲、例えば 0.1〜10 mg/kg/日である。静脈内用量は、例えば 0.001 mg〜1.0 mg/kg の範囲であってよく、これは１kg 当たり及び毎分 10 ng〜100 ng の注入として好適に投与することができる。これらの目的のための好適な注入溶液は、例えば１ミリリットル当たり 0.1 ng〜10 mg、典型的には １ng〜10 mg を含有することができる。単回用量は、例えば １mg〜10ｇの活性化合物を含有することができる。従って、注射用アンプルは、例えば １mg〜100 mg を含有することができ、そして経口的投与できる単回投与製剤、例えばカプセル又は錠剤は、例えば 0.05〜1000 mg、典型的には 0.5〜600 mg を含有することができる。上記の状態を治療するために、式Ｉの化合物は化合物それ自体として使用できるが、それらは許容される担体との医薬組成物の形態であることが好ましい。担体は、当然ながら、組成物の他の成分と適合し、かつ患者の健康に有害でないという意味で許容されねばならない。担体は、固体若しくは液体又は両者であってよく、そして好ましくは本化合物を用いて単回投与形態として、例えば錠剤として製剤化され、これは 0.05％〜95 重量％の活性化合物を含有することができる。他の製薬的に活性な物質（他の式Ｉの化合物を包含する）が同様に存在していてもよい。本発明の医薬組成物は、成分を製薬上許容される担体及び／又は賦形剤と混合することから本質的になる公知の製薬方法の一つにより製造することができる。
【００３１】
本発明の医薬組成物は、経口、直腸、局所、口腔（例えば舌下）及び非経口（例えば皮下、筋肉内、皮内又は静脈内）投与に適するものであるが、最も適する投与方式は、それぞれの各場合に、治療すべき状態の性質及び重症度、並びにそれぞれの場合に用いられる式Ｉの化合物の性質に依存する。被覆した製剤及び被覆した徐放性製剤もまた、本発明の範囲内に属する。好ましいものは、耐酸及び耐胃液性製剤である。好適な耐胃液性コーティング剤は、セルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、並びにメタクリル酸及びメタクリル酸メチルのアニオンポリマーを含む。
【００３２】
経口投与に適する医薬製剤は、個別単位の形態、例えばカプセル剤、ウェハー剤、サッカブル錠剤（suckable tablet）若しくは錠剤であって、それぞれが一定量の式Ｉの化合物を含有するもの；散剤若しくは顆粒剤；水性若しくは非水性液体中の溶剤若しくは懸濁剤；又は水中油滴型若しくは油中水滴型エマルジョン剤などであってよい。これらの組成物は、上記のように、活性化合物及び担体（これは１種又はそれ以上の追加の成分からなっていてよい）を接触させる段階を含む全ての好適な製薬方法により製造することができる。組成物は、活性化合物を液体及び／又は微粉砕固体担体と一様かつ均質に混合し、その後に生成物を必要に応じて成型することによって一般的に製造される。従って、例えば、錠剤は、化合物の粉末又は顆粒を、適切ならば１種又はそれ以上の追加成分と共に圧縮又は成形することにより製造することができる。圧縮錠剤は、自由流動形態の化合物、例えば粉末又は顆粒を、適切ならば結合剤、流動促進剤、不活性希釈剤及び／又は界面活性剤／分散剤と混合して、好適な機械で打錠することにより製造することができる。湿製錠は、粉末形態であり不活性液体希釈剤で湿らせた化合物を好適な機械で成型することにより製造することができる。
【００３３】
口腔（舌下）投与に適する医薬組成物は、式Ｉの化合物を矯味矯臭剤、普通はショ糖及びアラビアゴム又はトラガントと共に含むサッカブル錠剤、並びに化合物を不活性基剤、例えばゼラチン及びグリセロール又はショ糖及びアラビアゴム中に含むトローチを包含する。
【００３４】
非経口投与に適する医薬組成物は、好ましくは、式Ｉの化合物の滅菌水性製剤を含み、これらは好ましくは意図するレシピエントの血液と等張性である。これらの製剤は好ましくは静脈内投与されるが、皮下、筋肉内又は皮内注射により投与することもできる。これらの製剤は、好ましくは、化合物を水と混合し、得られた溶液を滅菌し、そして血液と等張にすることにより製造することができる。本発明の注射用組成物は、一般的に 0.1〜５重量％の活性化合物を含有する。
【００３５】
直腸投与に適する医薬組成物は、好ましくは単回投与の坐剤の形態である。これらは、式Ｉの化合物を１種又はそれ以上の慣用の固体担体、例えばカカオ脂と混合し、そして得られた混合物を成形することにより製造することができる。
【００３６】
皮膚上の局所使用に適する医薬組成物は、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、スプレー、エアゾール又はオイルの形態である。使用できる担体は、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、アルコール及びこれらの物質の２種又はそれ以上の組み合わせである。活性化合物は、一般的に組成物の 0.1〜15 重量％、好ましくは 0.5〜２重量％の濃度で存在する。
【００３７】
経皮投与も可能である。経皮使用に適する医薬組成物は、患者の上皮との長期の密接な接触に適する単回プラスター剤の形態であってよい。このようなプラスター剤は、好適には、接着剤中に溶解及び／又は分散されたか又はポリマー中に分散された、適切ならば緩衝された水溶液中に活性化合物を含有する。好適な活性化合物濃度は、約１％〜35 ％、好ましくは約３％〜15 ％である。特別な可能性は、活性化合物を例えば Pharmaceutical Research, 2(6): 318 (1986) に記載されたようなエレクトロトランスポート又はイオントフォーレシスにより放出させることである。
【００３８】
式Ｉの化合物は代謝障害に有利に作用する。それらは脂質及び糖代謝に対してポジティブ効果を有し、特にトリグリセリドの濃度を低下させ、そして II型糖尿病及び動脈硬化症並びにそれらの種々の続発症の予防及び治療に適している。
【００３９】
他の医薬との組み合わせ
本発明の化合物は、単独で、又は１種又はそれ以上の他の薬理的活性物質と組み合わせて投与することができ、後者は、例えば、代謝障害又はしばしばそれらに関連する疾患に有利に作用するものである。このような組み合わせは、例えば下記のとおりである：
１．血糖値を低下させる医薬、抗糖尿病剤、
２．異常脂質血症を治療するための活性成分、
３．抗アテローム性動脈硬化症剤、
４．抗肥満剤、
５．抗炎症活性化合物、
６．悪性腫瘍を治療するための活性化合物、
７．抗血栓活性化合物、
８．高血圧を治療するための活性化合物、
９．心不全を治療するための活性化合物、及び
１０．糖尿病によるか又は糖尿病に関連して生じる合併症を治療及び／又は予防するための活性化合物。
【００４０】
それらは、本発明によれば、特に効果を相乗的に向上させるために式Ｉの化合物と組み合わせることができる。活性化合物の組み合わせの投与は、患者に活性化合物を個別に投与するか、又は複数の活性化合物が一つの医薬製剤中に存在する組み合わせ製品の形態で投与するかの何れかによって行うことができる。
【００４１】
一例として以下のものを挙げることができる：
抗糖尿病剤
好適な抗糖尿病剤は、例えば、the Rote Liste 2001 の第１２章、又は USP Dictionary of USAN and International Drug Names, US Pharmacopeia, Rockville 2003 に開示されている。抗糖尿病剤は、全てのインスリン及びインスリン誘導体、例えば、Lantus(登録商標) (www.lantus.com 参照) 又は Apidra(登録商標)及び他の速効性インスリン（US 6,221,633 参照）、WO 01/04146 記載されたような GLP-1 受容体モジュレーター、又はそのほかに例えば Novo Nordisk A/S の WO 98/08871 に開示されたものを包含する。経口活性血糖値低下活性化合物は、好ましくは、スルホニル尿素、ビグアニジン、メグリチニド、オキサジアゾリジンジオン、チアゾリジンジオン、グルコシダーゼ阻害剤、グルカゴン拮抗剤、経口 GLP-1 作用剤、DPP-IV 阻害剤、カリウムチャンネル開口剤、例えば WO 97/26265 及び WO 99/03861 に開示されたものなど、インスリン増感剤、グルコース新生及び／又はグリコーゲン分解の刺激に関与する肝臓酵素の阻害剤、グルコース取り込みのモジュレーター、脂質代謝を変更して血液中の脂質組成の変化に導く化合物、食物摂取又は食物吸収を減少させる化合物、PPAR 及び PXR モジュレーター、並びにベータ細胞の ATP 依存性カリウムチャンネルに作用する化合物を包含する。
【００４２】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、インスリンと組み合わせて投与される。
【００４３】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、肝臓グルコース産生に影響を与える物質、例えばグリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤（例えば、WO 01/94300、WO 02/096864、WO 03/084923、WO 03/084922、WO 03/104188 参照）などと組み合わせて投与される。一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、スルホニル尿素、例えばトルブタミド、グリベンクラミド、グリピジド又はグリメピリドなどと組み合わせて投与される。
【００４４】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、ベータ細胞の ATP 依存性カリウムチャンネルに作用する化合物、例えばトルブタミド、グリベンクラミド、グリピジド、グリメピリド又はレパグリニドなどと組み合わせて投与される。一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、ビグアニド、例えばメトホルミンなどと組み合わせて投与される。
【００４５】
別の実施形態において、式Ｉの化合物は、メグリチニド、例えばレパグリニドなどと組み合わせて投与される。
【００４６】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、チアゾリジンジオン、例えばシグリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン又は Dr. Reddy’s Research Foundationの WO 97/41097 に開示された化合物、特に 5-[[4-[(3,4-ジヒドロ-3-メチル-４-オキソ-2-キナゾリニルメトキシ)フェニル]メチル]-2,4-チアゾリジンジオンなどと組み合わせて投与される。
【００４７】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、例えば WO 98/19998、WO 99/61431、WO 99/67278、WO 99/67279、WO 01/72290、WO 02/38541、WO 03/040174 に記載された DPPIV 阻害剤、特に P 93/01（1-シクロペンチル-3-メチル-1-オキソ-2-ペンタンアンモニウムクロリド）、P-31/98、LAF237（1-[2-[3-ヒドロキシアダマント-1-イルアミノ)アセチル]ピロリジン-2-(S)-カルボニトリル）、TS021（(2S, 4S)-4-フルオロ-1-[[(2-ヒドロキシ-1,1-ジメチルエチル)アミノ]アセチル]ピロリジン-2-カルボニトリルモノベンゼンスルホネート）などと組み合わせて投与される。
【００４８】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、PPARガンマ作用剤、例えばロシグリタゾン、ピオグリタゾンなどと組み合わせて投与される。
【００４９】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、例えば PCT/EP03/06841、PCT/EP03/13454 及び PCT/EP03/13455 に直接的又は間接的に開示された、SGLT-1 及び／又は 2 阻害効果を有する化合物と組み合わせて投与される。
【００５０】
一つの実施形態において、本発明の化合物は、α−グルコシダーゼ阻害剤、例えばミグリトール又はアカルボースなどと組み合わせて投与される。
【００５１】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、上記の化合物の２種以上と組み合わせて、例えばスルホニル尿素及びメトホルミンとの、スルホニル尿素及びアカルボースとの、レパグリニド及びメトホルミンとの、インスリン及びスルホニル尿素との、インスリン及びメトホルミンとの、インスリン及びトログリタゾンとの、インスリン及びロバスタチンとの組み合わせなどとして投与される。
【００５２】
脂質モジュレーター
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、HMGCoA レダクターゼ阻害剤、例えばロバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、イバスタチン、イタバスタチン、アトロバスタチン、ロスバスタチンなどと組み合わせて投与される。
【００５３】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、胆汁酸吸収阻害剤（例えば、US 6,245,744、US 6,221,897、US 6,277,831、EP 0,683,773、EP 0,683,774 参照）と組み合わせて投与される。
【００５４】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、ポリマー性胆汁酸吸着剤、例えばコレスチラミン、コレセベラムなどと組み合わせて投与される。
【００５５】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、例えば WO 02/50027 に開示されたコレステロール吸収阻害剤、又はエゼチミブ、チクエシド、パマクエシドと組み合わせて投与される。
【００５６】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、LDL 受容体インデューサー（例えば、US 6,342,512 参照）と組み合わせて投与される。
【００５７】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、膨張性薬剤、好ましくは不溶性膨張性薬剤と組み合わせて投与される（例えば、カロブ/Caromax(登録商標)(Zunft H J; et al., Carob pulp preparation for treatment of hypercholesterolemia, ADVANCES IN THERAPY (2001 Sep-Oct), 18(5), 230-6) 参照。Caromax は Nutrinova, Nutrition Specialties & Food Ingredients GmbH, Industriepark Hoechst, 65926 Frankfurt/Main からのカロブ含有製品である）。Caromax(登録商標) との組み合わせは、一つの製剤中で、又は式Ｉの化合物及び Caromax(登録商標) の別個の投与により組み合わせることができる。さらに、Caromax (登録商標) は、食品の形態で、例えばベーカリー製品又はムースリバーなどの形態で投与することができる。
【００５８】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、PPARアルファ作用剤と組み合わせて投与される。  
【００５９】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、混合 PPAR アルファ／ガンマ作用剤、例えば AZ 242（テサグリタザル、(S)-3-(4-[2-(4-メタンスルホニルオキシフェニル)エトキシ]フェニル)-2-エトキシプロピオン酸）、BMS 298585（N-[(4-メトキシフェノキシ)カルボニル]-N-[[4-[2-(5-メチル-2-フェニル-4-オキサゾリル)エトキシ]フェニル]メチル]グリシン)、又は WO 99/62872、WO 99/62871、WO 01/40171、WO 01/40169、WO 96/38428、WO 01/81327、WO 01/21602、WO 03/020269、WO 00/64888 若しくは WO 00/64876 に記載されたものなどと組み合わせて投与される。
【００６０】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、フィブレート、例えばフェノフィブレート、ゲムフィブロジル、クロフィブレート、ベザフィブレートなどと組み合わせて投与される。
【００６１】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、ニコチン酸又はナイアシンと組み合わせて投与される。
【００６２】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、CETP 阻害剤、例えばCP-529,414（トルセトラピブ）などと組み合わせて投与される。
【００６３】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、ACAT 阻害剤と組み合わせて投与される。
【００６４】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、MTP 阻害剤、例えばインプリタピドなどと組み合わせて投与される。
【００６５】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、抗酸化剤と組み合わせて投与される。
【００６６】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、リポタンパク質リパーゼ阻害剤と組み合わせて投与される
【００６７】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、ATP クエン酸リアーゼ阻害剤と組み合わせて投与される。
【００６８】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、スクワレンシンテターゼ阻害剤と組み合わせて投与される。
【００６９】
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、リポタンパク質（a）拮抗剤と組み合わせて投与される。
【００７０】
抗肥満剤
本発明の一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、リパーゼ阻害剤、例えばオルリスタットなどと組み合わせて投与される。
【００７１】
一つの実施形態において、他方の活性化合物は、フェンフルラミン又はデクスフェンフルラミンである。
【００７２】
もう一つの実施形態において、他方の活性化合物は、シブトラミンである。
【００７３】
もう一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、CART モジュレーター（“Cocaine-amphetamine-regulated transcript influences energy metabolism, anxiety and gastric emptying in mice" Asakawa, A, et al., M.:Hormone and Metabolic Research (2001), 33(9), 554-558 参照）、NPY 拮抗剤（例えば N-｛4-[(4-アミノキナゾリン-2-イルアミノ)メチル]シクロヘキシルメチル｝ナフタレン-1-スルホンアミド；塩酸塩（CGP 71683A））、MC4 作用剤（例えば N-[2-(3a-ベンジル-2-メチル-3-オキソ-2,3,3a,4,6,7-ヘキサヒドロピラゾロ[4,3-c]ピリジン-5-イル)-1-(4-クロロフェニル)-2-オキソエチル]-1-アミノ-1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン-2-カルボキシアミド；（WO 01/91752） 参照）、オレキシン拮抗剤（例えば 1-(2-メチルベンゾオキサゾール-6-イル)-3-[1,5]ナフチリジン-4-イル尿素；塩酸塩（SB-334867-A））、H3 作用剤（例えば3-シクロヘキシル-1-(4,4-ジメチル-1,4,6,7-テトラヒドロイミダゾ[4,5-c]ピリジン-5-イル）プロパン-1-オンのシュウ酸塩（WO 00/63208））；TNF 作用剤、CRF 拮抗剤（例えば[2-メチル-9-(2,4,6-トリメチルフェニル)-9H-1,3,9-トリアザフルオレン-4-イル]ジプロピルアミン（WO 00/66585））、CRF BP 拮抗剤（例えばウロコルチン）、ウロコルチン作用剤、３β作用剤(例えば 1-(4-クロロ-3-メタンスルホニルメチルフェニル)-2-[2-(2,3-ジメチル-1H-インドール-6-イルオキシ)エチルアミノ]エタノール；塩酸塩（WO 01/83451））、MSH（メラノサイト刺激ホルモン）作用剤、CCK-A 作用剤（例えば ｛2-[4-(4-クロロ -2,5-ジメトキシフェニル)-5-(2-シクロヘキシルエチル)チアゾール-2-イルカルバモイル]-5,7-ジメチルインドール-1-イル｝酢酸のトリフルオロ酢酸塩（WO 99/15525））；セロトニン再吸収阻害剤（例えばデクスフェンフルラミン）、混合セロトニン作動性及びノルアドレナリン作動性化合物（例えばWO 00/71549）、5HT 作用剤（例えば 1-(3-エチルベンゾフラン-7-イル）ピペラジンのシュウ酸塩（WO 01/09111）、ボンベシン作用剤、ガラニン拮抗剤、成長ホルモン（例えばヒト成長ホルモン）、成長ホルモン放出化合物（6-ベンジルオキシ-1-（2-ジイソプロピルアミノエチルカルバモイル)-3,4-ジヒドロ-1H-イソキノリン-2-カルボン酸tert-ブチル(WO 01/85695））、TRH 作用剤（例えば、EP 0 462 884参照）、脱共役タンパク質２又は３モジュレーター、レプチン作用剤（例えば、Lee, Daniel W.; Leinung, Matthew C.; Rozhavskaya-Arena, Marina; Grasso, Patricia. Leptin agonists as a potential approach to the treatment of obesity. Drugs of the Future (2001), 26(9), 873-881 参照）、DA 作用剤 (ブロモクリプチン、ドプレキシン)、リパーゼ／アミラーゼ阻害剤（例えばWO 00/40569）、PPARモジュレーター（例えばWO 00/78312）、RXR モジュレーター又はTR-β作用剤と組み合わせて投与される。
【００７４】
本発明の一つの実施形態において、他方の活性化合物は、レプチンである。
【００７５】
一つの実施形態において、他方の活性化合物は、デクスアンフェタミン、アンフェタミン、マジンドール又はフェンテルミンである。
【００７６】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、冠循環及び血管系に対して効果を有する医薬、例えば、ACE 阻害剤（例えばラミプリル）、アンギオテンシン-レニン系に作用する医薬、カルシウム拮抗剤、ベータ遮断剤などと組み合わせて投与される。
【００７７】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、抗炎症効果を有する医薬と組み合わせて投与される。
【００７８】
一つの実施形態において、式Ｉの化合物は、癌療法及び癌予防のために採用される医薬と組み合わせて投与される。
【００７９】
本発明の化合物と、１種又はそれ以上の上記の化合物及び場合により１種又はそれ以上の他の薬学的活性物質との全ての好適な組み合わせは、本発明により与えられる保護範囲内に属すると考えられることは、自明である。
【００８０】
化合物の活性は下記のようにして試験した：
PPARアルファ細胞試験における PPAR 作用剤の EC50 値の決定
原理
ヒト PPARアルファに結合し、ヒトPPARアルファを作動的な手段で活性化する物質の効力は、「PPARアルファリポーター細胞系」と本明細書で表す安定的にトランスフェクトした HEK 細胞系 (HEK = human embryo kidney、ヒト胚性腎臓)を用いて分析される。それは二つの遺伝要素、すなわちルシフェラーゼリポーター要素 (pdeltaM-GAL4-Luc-Zeo)、及び PPAR アルファリガンドに応じてルシフェラーゼリポーター要素の発現を仲介する PPAR アルファ融合タンパク質 (GR-GAL4-humanPPARalpha-LBD) とを含有する。安定的かつ構成的に発現された融合タンパク質 GR-GAL4-humanPPARalpha-LBD は、PPARアルファリポーター細胞系の細胞核中で GAL4タンパク質部分を介して、細胞系のゲノムに組み込まれるルシフェラーゼリポーター要素のGAL4 DNA結合モチーフ５’-上流 に結合する。脂肪酸を除去したウシ胎児血清（cs-FCS）を試験に用いる場合に PPARアルファリガンドを加えないと、ルシフェラーゼリポーター遺伝子はほとんど発現されない。PPAR リガンドは PPAR融合タンパク質を結合して活性化し、これによってルシフェラーゼリポーター遺伝子の発現をもたらす。形成されるルシフェラーゼは、適切な基質を介した化学発光により検出することができる。
【００８１】
細胞系の構築
PPARアルファリポーター細胞を２段階で作製した。最初に、ルシフェラーゼリポーター要素を構築して HEK 細胞に安定的にトランスフェクトした。この目的で、酵母転写因子 GAL4 の五つの結合部位(それぞれの場合に5’-CGGAGTACTGTCCTCCGAG-3’)を、68 bp長の最小 MMTV プロモーター (Accession # V01175) の５’-上流にクローン化した。最小 MMTV プロモーター部分は、RNAポリメラーII による効率的な転写を可能にするために、CCAAT ボックス及び TATA 要素を含有する。GAL4-MMTV 構築物のクローン化及び配列決定を、Sambrook J. et. al. (Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989) の記載と同様に行った。次いで、完全なフォチヌス・ピラリス (Photinus pyralis) ルシフェラーゼ遺伝子 (Accession # M15077) を GAL4-MMTV 要素の３’-下流にクローン化した。配列決定した後、プラスミドpdeltaM-GAL4-Luc-Zeo を得るために、五つのGAL4結合部位、MMTV プロモーター及びルシフェラーゼ遺伝子からなるルシフェラーゼリポーター要素を、ゼオジン (zeozin) 耐性を与えるプラスミドに再クローン化した。このベクターを、Ausubel, F.M. et al. (Current protocols in molecular biology, Vol. 1-3, John Wiley & Sons, Inc., 1995) の記載に従ってHEK細胞にトランスフェクトした。次いで、ゼオジン含有培地 (0.5 mg/ml) を用いて、ルシフェラーゼ遺伝子の極めて低い基本的発現を示した好適な安定な細胞クローンを選択した。
【００８２】
第二段階において、PPARアルファ融合タンパク質(GR-GAL4-humanPPARalpha-LBD) を上記の安定な細胞クローンに導入した。この目的で、最初に、グルココルチコイド受容体のＮ末端 76 アミノ酸をコードする cDNA (Accession # P04150) を、酵母転写因子 GAL4のアミノ酸１〜147 をコードする cDNA部分 (Accession # P04386) に連結した。ヒト PPARアルファ受容体のリガンド結合ドメインの cDNA（アミノ酸Ｓ167〜Ｙ468; Accession # S74349）を、このGR- GAL4 構築物の 3'-末端にクローン化した。こうして作製した融合構築物 (GR-GAL4-humanPPARalpha-LBD) を、その中でのサイトメガロウイルスプロモーターによる構成的発現を可能にするために、プラスミド pcDNA3 (Invitrogen から) に再クローン化した。このプラスミドを制限エンドヌクレアーゼで線状化し、そしてルシフェラーゼリポーター要素を含有する上記の細胞クローンに安定的にトランスフェクトした。ルシフェラーゼリポーター要素を含有し、かつ PPARアルファ融合タンパク質 (GR-GAL4-human PPARalpha-LBD) を構成的に発現する完成した PPARアルファリポーター細胞系を、ゼオジン (0.5mg/ml) 及びG418 (0.5mg/ml) で選択することにより単離した。
【００８３】
試験手順
PPARアルファ作用剤の活性は、以下に記載する３日間の試験で決定される：
１日目
PPARアルファリポーター細胞系を、DMEM 培地 (# 41965-039, Invitrogen) 中で次の添加物： 10％のcs-FCS (ウシ胎児血清, #SH-30068.03, Hyclone)、0.5 mg/ml のゼオジン (#R250-01, Invitrogen)、0.5 mg/ml の G418 (#10131-027, Invitrogen)、１％のペニシリン-ストレプトマイシン溶液 (#15140-122, Invitrogen) 及び２mM のL-グルタミン (#25030-024, Invitrogen) と共に 80％密集度まで培養する。培養は、細胞培養インキュベーターに入れた標準的細胞培養ボトル (# 353112, Becton Dickinson) 中で、５％の CO2 の存在下に 37℃で行われる。80％の密集細胞を、15 mlのPBS (#14190-094, Invitrogen) で１回洗浄し、３ml のトリプシン溶液 (#25300-054, Invitrogen) を用いて37℃で２分間処理し、５ml の上記 DMEM 培地に吸収させ、細胞カウンターでカウントする。500 000 細胞/ml に希釈した後、それぞれの場合に35 000 細胞を、透明プラスチック底を有する 96 ウェルマイクロタイタープレート (#3610, Corning Costar) の各ウェルに播種する。プレートを細胞培養インキュベーターで、37℃及び５％の CO2 で 24 時間インキュベートする。
【００８４】
２日目
試験すべき PPARアルファ作用剤を、DMSO に10mM の濃度に溶解する。このストック溶液を、５％のcs-FCS (#SH-30068.03, Hyclone)、２mM の L-グルタミン (#25030-024, Invitrogen) 及び上記抗生物質（ゼオジン、G418、ペニシリン及びストレプトマイシン）を加えた DMEM 培地 (#41965-039, Invitrogen) で希釈する。
【００８５】
試験物質を、10μM〜100pMの範囲の 11 種の異なる濃度で試験する。より強力な化合物を、１μM〜10pM又は100nM〜１pM の濃度範囲で試験する。１日目に播種した PPARアルファリポーター細胞系の培地を吸引により完全に除去し、培地で希釈した試験物質を直ちに細胞に加える。物質の希釈及び添加はロボット (Beckman FX) を用いて行われる。培地で希釈した試験物質の最終体積は、96 ウェルマイクロタイタープレートのウェル当たり 100μl である。試験における DMSO 濃度は、この溶媒の細胞毒効果を防止するために0.1％v/v 未満である。
【００８６】
この試験が個々の各プレートで機能することを実証するために、同様に 11 種の異なる濃度に希釈した標準 PPARアルファ作用剤を各プレートに加えた。試験プレートをインキュベーターで、37℃及び５％の CO2 で 24 時間インキュベートする。
【００８７】
３日目
試験物質で処理した PPARアルファリポーター細胞をインキュベーターから取り出し、培地を吸引除去する。細胞を、96 ウェルマイクロタイタープレートの各ウェルに50μl の Bright Glo 試薬 (Promega から) をピペット処理することにより溶解する。室温で 10 分間暗所でインキュベートした後、マイクロタイタープレートを照度計（Wallac からの Trilux）で測定する。マイクロタイタープレートの各ウェル当たりの測定時間は１秒間である。
【００８８】
評価
ルミネッセンス測定用装置の生データを Microsoft Excel ファイルにエクスポートする。PPAR 作用剤の用量-活性曲線及び EC50 値を、プログラム XL.Fit を用いて製造業者
(IDBS) の指示に従って計算する。
【００８９】
このアッセイにおいて、実施例１〜１５の化合物の PPARアルファ EC50値は、0.04nM〜＞10μM の範囲である。
【００９０】
本発明に係る式Ｉの化合物の幾つかの活性に関する結果を下記表Ｉに示す：
【表１】
2006519200.tif 000004
【００９１】
表Ｉから、本発明に係る式Ｉの化合物が PPARアルファ受容体を活性化し、従って、例えば、臨床的に使用されるフィブレートと同様に、生体におけるトリグリセリド濃度を低下させることが明らかである（例えば、J.-Ch. Fruchard et al,: PPARS, Metabolic Disease and Atherosclerosis, Pharmacological Research, Vol. 44, No. 5, 345-52, 2001; S. Kersten et al.: Roles of PPARs in health and disease, NATURE, VOL 405, MAY 25 2000, 421-4; I. Pineda et al.: Peroxisome proliferator-activated receptors: from transcriptional control to clinical practice, Curr Opin Lipidol 12: 2001, 245-254 参照）。
【００９２】
細胞性 PPARガンマ試験における PPAR 作用剤の EC50 値の決定
原理
一時的なトランスフェクション系を採用して、PPAR 作用剤の細胞性PPARガンマ活性を決定する。これは、ルシフェラーゼリポータープラスミド (pGL3basic-5xGAL4-TK) 及び PPARガンマ発現プラスミド (pcDNA3-GAL4-humanPPARgammaLBD) の使用に基づく。両方のプラスミドをヒト胚性腎臓細胞（HEK細胞）に一時的にトランスフェクトする。そうすると、これらの細胞において、リポータープラスミドの GAL4結合部位に結合する融合タンパク質 GAL4-humanPPARgammaLBD が発現される。PPARガンマ活性リガンドの存在下で、活性化された融合タンパク質 GAL4-humanPPARgammaLBD はルシフェラーゼリポーター遺伝子の発現を誘発し、これはルシフェラーゼ基質の添加後に化学発光シグナルの形態で検出することができる。安定的にトランスフェクトした PPARアルファリポーター細胞系との相違として、細胞性 PPARガンマ試験では二つの成分（ルシフェラーゼリポータープラスミド及び PPARガンマ発現プラスミド）を HEK 細胞に一時的にトランスフェクトする。なぜならば、PPARガンマ融合タンパク質の安定的かつ永続的な発現は細胞毒性だからである。
【００９３】
プラスミドの構築
ルシフェラーゼリポータープラスミド pGL3basic-5xGAL4-TK は、Promega からのベクター pGL3basic を基礎とする。リポータープラスミドは、酵母転写因子 GAL4 の五つの結合部位 (それぞれ 5’-CTCGGAGGACAGTACTCCG-3’を有する結合部位) を、160 bp 長のチミジンキナーゼプロモーター切片 (Genbank Accession # AF027128) と一緒に 5’-上流で pGL3basic にクローン化することにより作製される。チミジンキナーゼプロモーターの 3’-下流は、フォチヌス・ピラリスからの完全なルシフェラーゼ遺伝子 (Genbank Accession # M15077) であり、これは既に使用したプラスミドpGL3basic の構成要素である。リポータープラスミドpGL3basic-5xGAL4-TK のクローン化及び配列決定は、Sambrook J. et. al. (Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989) の記載と同様に行われた。
【００９４】
PPARガンマ発現プラスミド pcDNA3-GAL4-humanPPARgammaLBD は、最初に、酵母転写因子 GAL4のアミノ酸１〜147 をコードする cDNA (Genbank Accession # P04386) をプラスミド pcDNA3 (Invitrogen から) にサイトメガロウイルスプロモーターの 3’-下流でクローン化することにより作製した。次いで、ヒト PPARガンマ受容体のリガンド結合ドメイン (LBD) の cDNAを、 GAL4 DNA結合ドメインの3’-下流にクローン化した（アミノ酸Ｉ152〜Ｙ475； Accession # g1480099）。PPARガンマ発現プラスミド pcDNA3-GAL4-humanPPARgammaLBD のクローン化及び配列決定を、再び Sambrook J. et. al. (Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989) の記載と同様に行った。ルシフェラーゼリポータープラスミド pGL3basic-5xGAL4-TK及び PPARガンマ発現プラスミド pcDNA3-GAL4-humanPPARgammaLBD のほかに、細胞性 PPARガンマ試験のために対照プラスミド pRL-CMV (Promega から) 及び Stratagene からのプラスミド pBluescript SK(+) も用いた。四つの全てのプラスミドは、Qiagen からのプラスミド作製用キットを用いて作製し、これらは HEK 細胞にトランスフェクトする前に最小エンドトキシン含有量によりプラスミド品質を確認した。
【００９５】
試験手順
PPARガンマ作用剤の活性は、以下に記載する４日間の試験で決定される。トランスフェクションの前に、HEK 細胞を、次の添加物：10％の FCS (#16000-044, Invitrogen)、１％のペニシリン-ストレプトマイシン溶液 (#15140-122, Invitrogen) 及び２mM の L-グルタミン (#25030-024, Invitrogen) と混合した DMEM (# 41965-039, Invitrogen) 中で培養した。
【００９６】
１日目
最初に、溶液Ａ、すなわち DMEM に加えて上記の四つのプラスミド全てを含むトランスフェクション混合物を作製する。一つの試験につき各 96 ウェルマイクロタイタープレート当たり３ml の溶液Ａを作るために、次の量：2622μl の抗生物質及び血清を含まない DMEM (# 41965-039, Invitrogen)、100μl の対照プラスミドpRL-CMV (１ng/μl)、100μl のルシフェラーゼリポータープラスミド pGL3basic-5xGAL4-TK (10 ng/μl)、100μl の PPARガンマ発現プラスミドpcDNA3-GAL4-humanPPARgammaLBD (100 ng/μl) 及び 78μl のプラスミドpBluescript SK(+) (500 ng/μl) を用いる。次いで、各 96 ウェルマイクロタイタープレート当たり、1.9 ml の DMEM (# 41965-039, Invitrogen) を100μl の PolyFect トランスフェクション試薬 (Qiagen から) と混合することにより、２ml の溶液Ｂを調製する。続いて、３ml の溶液Ａを２ml の溶液Ｂと混合して溶液Ｃを与え、これを数回のピペット処理でよく混合し、室温で 10 分間インキュベートする。
【００９７】
175 cm3 の容積を有する細胞培養ボトルからの 80％の密集 HEK 細胞を15 ml の PBS (#14190-094, Invitrogen) で１回洗浄し、３ml のトリプシン溶液  (#25300-054, Invitrogen) で 37℃で２分間処理する。次いで細胞を、10％の FCS (# 16000-044, Invitrogen)、１％のペニシリン-ストレプトマイシン (#15140-122, Invitrogen) 及び２mM のL-グルタミン (#25030-024, Invitrogen) と混合した15 ml の DMEM (# 41965-039, Invitrogen) に吸収させる。細胞懸濁液を細胞カウンターでカウントした後、この懸濁液を 250,000 細胞/ml に希釈する。一つのマイクロタイタープレート当たり、15 ml のこの細胞懸濁液を５ml の溶液Ｃと混合する。透明プラスチック底を有する 96 ウェルマイクロタイタープレート (#3610, Corning Costar) の各ウェルに 200μl の懸濁液を播種する。プレートを細胞培養インキュベーターで、37℃及び５％ CO2 で24時間インキュベートする。
【００９８】
２日目
試験すべき PPAR 作用剤を、DMSO に10mM の濃度に溶解する。このストック溶液を、２％の Ultroser (#12039-012, Biosepra)、１％のペニシリン-ストレプトマイシン溶液 (#15140-122, Invitrogen)  及び２mM の L-グルタミン (#25030-024, Invitrogen) と混合した DMEM (#41965-039, Invitrogen) で希釈する。試験物質を、10μM〜100pM の範囲の11 種の異なる濃度で試験する。より強力な化合物を、１μM〜10pM の濃度範囲で試験する。
【００９９】
１日目にトランスフェクトして播種したHEK細胞の培地を吸引により完全に除去し、培地で希釈した試験物質を直ちに細胞に加える。物質の希釈及び添加はロボット (Beckman FX) により行われる。培地で希釈した試験物質の最終体積は、96 ウェルマイクロタイタープレートのウェル当たり 100μl である。この試験が個々の各プレートで機能することを実証するために、同様に11 種の異なる濃度に希釈した標準 PPARガンマ作用剤を各プレートに加える。試験プレートをインキュベーターで、37℃及び５％ CO2 で 48 時間インキュベートする。
【０１００】
４日目
培地を吸引除去した後、細胞を溶解し、そして細胞中で形成された蛍ルシフェラーゼ（フォチヌス・ピラリス）に対する基質を供給するために、50μl の Dual-GloTM 試薬 (Dual-GloTM Luciferase Assay System; Promega) を各ウェルに製造業者の指示に従って加える。室温で 10 分間暗所でインキュベートした後、蛍ルシフェラーゼで仲介された化学発光を、測定装置で測定する（測定時間/ウェル１秒； Wallac からの Trilux）。次いで、蛍ルシフェラーゼの活性を停止し、そして対照プラスミド pRL-CMV により発現されたレニラ (Renilla) ルシフェラーゼに対する基質を供給するために、50μl の Dual-GloTM Stop & Glo 試薬 (Dual-GloTM Luciferase Assay System; Promega) を各ウェルに加える。室温でさらに 10 分間暗所でインキュベートした後、レニラルシフェラーゼで仲介された化学発光を、測定装置で１秒／ウェルで再び測定する。
【０１０１】
評価
ルミネッセンス測定装置からの生データを Microsoft Excel ファイルにエクスポートする。蛍／レニラルシフェラーゼ活性比を、マイクロタイタープレートの一つのウェルから誘導された各測定値について決定する。PPAR 作用剤の用量-活性曲線及び EC50 値を、これらの比から XL.Fit プログラムを用いて製造業者 (IDBS) の指示に従って計算する。
【０１０２】
本明細書に記載した PPAR 作用剤について、160nM〜＞10μM の範囲の PPARガンマ EC50 値が測定された。
【０１０３】
本発明の式Ｉの化合物は、以下の反応スキームに従って得ることができる：
【化２】
2006519200.tif 000005
【０１０４】
【表２】
2006519200.tif 000006
【０１０５】
【表３】
2006519200.tif 000007
【０１０６】
本発明はまた、以下の反応スキームＡ、Ｂ及びＣによる式Ｉの化合物の製造方法を提供する：
【０１０７】
方法Ａ： 
【化３】
2006519200.tif 000008
【０１０８】
Ｒ４が上記定義とおりである一般式Ａの化合物を、テトラヒドロフラン中のｎ−ブチルリチウムを用いて -78℃で脱プロトン化し、次いで化合物Ｂをこの温度で加えて一般式Ｃの化合物を与える。
【０１０９】
次いで、化合物Ｃを、テトラヒドロフラン中でフッ化テトラブチルアンモニウム溶液と反応させて化合物Ｄを与える。後者を、炭素上のパラジウムで水素により水素化して化合物Ｅを与える。化合物Ｅを、ジメチルホルムアミド中の水素化ナトリウムにより脱プロトン化し、臭化アリルを加え、この混合物を室温で数時間攪拌して化合物Ｆを与える。後者を、ジエチルエーテル中の四酸化オスミウム及び過ヨウ素酸ナトリウムと反応させてアルデヒドＧを与える。
【０１１０】
次いで、化合物Ｇを、Ｒ３が上記定義とおりである第一級アミンＲ３-ＮＨ２及びメタノール中の水素化ホウ素ナトリウムと共に０℃で攪拌し、仕上げ処理し、次いでジメチルホルムアミド中で、Ｒ２が上記定義とおりである一般式Ｒ２-ＮＣＯのイソシアネートと反応させて、一般式Ｈの化合物を与える。tert-ブチルエステルを開裂するために、化合物Ｈをトリフルオロ酢酸中で室温で数時間攪拌して、一般式Ｊの化合物を与える。
【０１１１】
この方法を用いて、実施例１〜８の化合物を合成することができる。
【０１１２】
方法Ｂ：
【化４】
2006519200.tif 000009
【０１１３】
化合物Ｂ（方法Ａ参照）を一般式Ｋの化合物と反応させて、Ｒ４＝Ｈである化合物Ｃ’を与える。後者の化合物を、炭素上のパラジウムで水素により水素化して化合物Ｌを与える。
【０１１４】
化合物Ｌを、テトラヒドロフラン中のリチウムジイソプロピルアミドにより０℃で脱プロトン化し、次いでＲ４が上記定義の意味を有してよい一般式Ｒ４-I のヨウ化アルキルと反応させる。仕上げ処理した後、この化合物を再びテトラヒドロフラン中のリチウムジイソプロピルアミドにより０℃で脱プロトン化し、次いでＲ５が上記定義の意味を有してよい一般式Ｒ５-I のヨウ化アルキルと反応させて、一般式Ｍの化合物を与える。
【０１１５】
化合物Ｍをテトラヒドロフラン中でフッ化テトラブチルアンモニウムと反応させて化合物Ｎを与え、これをジメチルホルムアミド中の水素化ナトリウムにより脱プロトン化し、臭化アリルと反応させて化合物Ｏを与える。後者を、ジエチルエーテル中の四酸化オスミウム及び過ヨウ素酸ナトリウムにより変換して化合物Ｐを与える。
【０１１６】
次いで、化合物Ｐを、Ｒ３が上記定義とおりである一般式Ｒ３-ＮＨ２の第一級アミン及びメタノール中の水素化ホウ素ナトリウムと共に０℃で攪拌し、仕上げ処理し、次いでジメチルホルムアミド中で、Ｒ２が上記定義とおりである一般式Ｒ２-ＮＣＯのイソシアネートと反応させて、一般式Ｑの化合物を与える。
【０１１７】
tert-ブチルエステルを開裂するために、化合物Ｑをトリフルオロ酢酸中で室温で数時間攪拌して、一般式Ｒの化合物を与える。
【０１１８】
この方法を用いて、実施例９〜１２の化合物を合成することができる。
【０１１９】
方法Ｃ： 
【化５】
2006519200.tif 000010
【０１２０】
化合物Ｓをメタノール中でナトリウムメトキシドと共に室温で攪拌する。仕上げ処理した後、生成物を、ジメチルホルムアミド中で tert-ブチルジフェニルシリルクロリド及びイミダゾールにより室温で化合物Ｔに変換する。
【０１２１】
化合物Ｔをイソプロパノール中で水酸化ナトリウムと共に 60℃で１時間攪拌する。仕上げ処理した後、生成物をジメチルホルムアミド中で、α-アミノ酸の tert-ブチルエステル、ヒドロキシベンゾトリアゾール、ジイソプロピルエチルアミン及び O-[シアノ(エトキシカルボニル)メチレンアミノ]-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート (TOTU) と反応させて、Ｒ４及びＲ５が上記定義とおりである一般式Ｕの生成物を与える。
【０１２２】
化合物Ｕを、テトラヒドロフラン中でフッ化テトラブチルアンモニウムと反応させて化合物Ｖを与える。後者を、ジメチルホルムアミド中の水素化ナトリウムと反応させ、臭化アリルでアルキル化して、化合物Ｗを与える。次いで、末端二重結合をジエチルエーテル中の四酸化オスミウム及び過ヨウ素酸ナトリウムにより開裂して、アルデヒドＸを与える。
【０１２３】
化合物Ｘを、Ｒ３が上記定義とおりである一般式Ｒ３-ＮＨ２の第一級アミンと、メタノール中の水素化ホウ素ナトリウムと共に反応させ、仕上げ処理し、次いでジメチルホルムアミド中で、Ｒ２が上記定義とおりである一般式Ｒ２-ＮＣＯのイソシアネートと反応させて、一般式Ｙの化合物に変換する。後者をトリフルオロ酢酸中で攪拌して、生成物Ｚに変換する。
【０１２４】
この方法を用いて、実施例１３〜１５の化合物を合成することができる。
【０１２５】
他の式Ｉの化合物は、公知方法と同様にして、又は公知方法により製造することができる。
【０１２６】
以下に挙げる実施例は本発明の説明に役立つものであって、本発明を限定するものではない。
【０１２７】
実施例の化合物の合成を以下に記載する。
【０１２８】
実施例１
4-[cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)-2-エチル酪酸
【化６】
2006519200.tif 000011
【０１２９】
2-(ジエトキシホスホリル)酪酸 tert-ブチル
【化７】
2006519200.tif 000012
9.3ml のジエチルホスホノ酢酸 tert-ブチルを 80ml のジメチルホルムアミドに溶解し、1.38ｇの水素化ナトリウム（パラフィン油中 60％ 濃度）を少量ずつ０℃で加える。この懸濁液を０℃で 15 分間攪拌し、次いで 0.42ml のヨウ化エチルを加える。この混合物を室温で 12 時間攪拌する。次いで 250ml の酢酸エチルを加え、それぞれの場合に150ml の水で３回洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧下に濃縮する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 5:1 を用いて精製する。これは 6.43ｇの 2-(ジエトキシホスホリル)酪酸 tert-ブチルを油状物として与える。C13H27O5P (294.33), 1H-NMR (CDCl3, d = ppm): 4.15 (q, 4H), 2.73 (ddd, 1H), 2
.0-1.8 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.35 (q, 6H), 1.00 (t, 3H)。
【０１３０】
cis-3-アリルシクロヘキサノール
【化８】
2006519200.tif 000013
ｎ-ヘキサン中の水素化リチウムジイソブチルアルミニウムの１モル溶液の 87 ml を 100ml のジエチルエーテルに溶解し、７ml のイソプロパノールを０℃で加える。ガスの発生が終わった後、50ml のジエチルエーテルに溶解した 12.4ｇの 3-アリルシクロヘキサノンを加える。この混合物を室温で 48 時間攪拌する。1M 塩酸を加えて反応混合物をクエンチし、水相を塩化ナトリウムで飽和し、それぞれの場合に200ml の酢酸エチルで５回抽出する。一緒にした有機相を２N 水酸化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 15:1 → 5:1 を用いて精製する。これは 6.8ｇの cis-3-アリルシクロヘキサノールを油状物として与える。C9H16O (140.23), MS(ESI): 141 (M+H+), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 2:1) = 0.22。
【０１３１】
(cis-3-アリルシクロヘキシルオキシ)-tert-ブチル-ジフェニルシラン
【化９】
2006519200.tif 000014
6.8ｇの cis-3-アリルシクロヘキサノール及び 15ml の tert-ブチルジフェニルシリルクロリド、５ｇのイミダゾール及び 200 mg のジメチルアミノピリジンを、100ml のジメチルホルムアミドに溶解し、室温で 12 時間攪拌する。400ml のメチル tert-ブチルエーテルを反応混合物に加え、この混合物を水で３回洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。これは20.5ｇの (cis-3-アリルシクロヘキシルオキシ)-tert-ブチル-ジフェニルシランを油状物として与える。C25H34OSi (378.64), MS(ESI): 379 (M+H+), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 2:1) = 0.93。
【０１３２】
[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒド
【化１０】
2006519200.tif 000015
5.5ｇの (cis-3-アリルシクロヘキシルオキシ)-tert-ブチル-ジフェニルシランを 100ml のジエチルエーテルに溶解し、100ml の水に溶解した 9.4ｇの過ヨウ素酸ナトリウムを加える。０℃で 15ml の四酸化オスミウム溶液（tert-ブタノール中 2.5 重量％）を加え、この混合物を室温で激しく攪拌する。５時間後、さらに５ｇの過ヨウ素酸ナトリウムを加え、この混合物を室温でさらに３時間攪拌する。次いで 300ml のメチル tert-ブチルエーテルを加えて反応混合物を希釈し、飽和チオ硫酸ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。これは６ｇの [cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒドを黄褐色油状物として与える。C24H32O2Si (380.61), MS(ESI): 381 (M+H+), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.44。
【０１３３】
tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]-2-エチルブタ-2-エノエート
【化１１】
2006519200.tif 000016
6.43ｇの 2-(ジエトキシホスホリル)酪酸 tert-ブチルを 90ml のテトラヒドロフランに溶解し、n-ヘキサン中の n-ブチルリチウムの 2.7M 溶液の 7.32 ml を -20℃で加える。-20℃で１時間攪拌した後、40ml のテトラヒドロフランに溶解した 4.36ｇの [cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒドを滴下して加える。反応混合物を徐々に室温に温まらせる。次いで 50ml の水を加え、この混合物をそれぞれの場合に 150ml の酢酸エチルで３回抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 30:1 を用いて精製する。これは 3.11ｇの tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]-2-エチルブタ-2-エノエートを油状物として与える。C32H46O3Si (506.81), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.73。
【０１３４】
tert-ブチル 2-エチル-4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)ブタ-2-エノエート
【化１２】
2006519200.tif 000017
1.3.11ｇの tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]-2-エチルブタ-2-エノエートを 20ml のテトラヒドロフランに溶解し、テトラヒドロフラン中のフッ化テトラブチルアンモニウムの 1M 溶液の 15.7 ml を加える。この混合物を 60℃で２時間攪拌する。反応混合物を減圧下で濃縮し、シリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 30:1 → 酢酸エチルを用いて精製する。これは 1.65ｇの tert-ブチル 2-エチル-4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)ブタ-2-エノエートを油状物として与える。C16H28O3 (268.40), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.07。
【０１３５】
2-エチル-4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)酪酸 tert-ブチル
【化１３】
2006519200.tif 000018
1.65ｇの tert-ブチル 2-エチル-4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)ブタ-2-エノエートを 50ml のメタノールに溶解し、100 mg の Perlmans 触媒を加える。この混合物を水素雰囲気下で 24 時間攪拌する。触媒をセライトに通して濾別し、次いで濾液を減圧下で濃縮する。これは 1.49ｇの tert-ブチル 2-エチル-4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)酪酸 tert-ブチルを無色油状物として与える。C16H30O3 (270.40), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.10。
【０１３６】
4-(cis-3-アリルオキシシクロヘキシル)- 2-エチル酪酸 tert-ブチル
【化１４】
2006519200.tif 000019
1.19ｇの tert-ブチル 2-エチル-4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)酪酸 を 50ml のジメチルホルムアミドに溶解し、210 mg の水素化ナトリウム（パラフィン油中 60％ 濃度）を加える。この懸濁液を室温で 15 分攪拌し、次いで 1.6ml の臭化アリルを加える。１時間後、さらに 320 mg の水素化ナトリウムを加える。室温で 12 時間攪拌した後、さらに 320 mg の水素化ナトリウム、次いで 1.6ml の臭化アリルを計量供給する。室温での攪拌をさらに 12 時間続ける。200ml のメチル tert-ブチルエーテルを加えた後、この混合物をそれぞれの場合に 100ml の水で３回洗浄し、有機相を分離し、硫酸マグネシウム上で乾燥する。溶媒を減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 60:1 → 30:1 を用いて精製する。これは 770 mg の4-(cis-3-アリルオキシシクロヘキシル)- 2-エチル酪酸 tert-ブチルを油状物として与える。C19H34O3 (310.48), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.48。
【０１３７】
2-エチル-4-[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキシル]酪酸 tert-ブチル
【化１５】
2006519200.tif 000020
770 mg の4-(cis-3-アリルオキシシクロヘキシル)- 2-エチル酪酸 tert-ブチルを 50ml のジエチルエーテルに溶解し、50ml の水に溶解した 1.59ｇの過ヨウ素酸ナトリウムを加える。０℃で 2.56ml の四酸化オスミウム溶液（tert-ブタノール中 2.5 重量％）を加え、この混合物を室温で激しく攪拌する。９時間後、さらに 12.8ml の四酸化オスミウム溶液を加え、室温での攪拌をさらに３時間続ける。200ml のメチル tert-ブチルエーテルを加え、この混合物を飽和チオ硫酸ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶剤を減圧下で除去する。これは 710 mg の 2-エチル-4-[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキシル)酪酸 tert-ブチルを黄褐色油状物として与える。C18H32O4 (312.45), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.15。
【０１３８】
4-(cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)-2-エチル酪酸 tert-ブチル
【化１６】
2006519200.tif 000021
380 mg のアルデヒド 2-エチル-4-[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキシル)酪酸 tert-ブチル及び 0.14ml の 4-メチルベンジルアミンを５mlのメタノールに溶解する。加熱して乾燥した 400 mg の４Åモレキュラーシーブを加え、この混合物を室温で２時間攪拌する。次いで 55 mg の水素化ホウ素ナトリウムを反応混合物に加える。30 分後、この混合物をセライトに通して濾過することにより、モレキュラーシーブを除去する。濾液を減圧下で濃縮する。残留物を８mlのジメチルホルムアミドに溶解し、0.11ml のシクロヘキシルイソシアネートを加える。12 時間後、ジメチルホルムアミドを減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 9:1 → 7:1 を用いて精製する。これは 160 mg の尿素 4-(cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)-2-エチル酪酸 tert-ブチルを油状物として与える。C33H54N2O4 (542.81), MS(ESI): 543 (M + H+)。
【０１３９】
4-(cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)-2-エチル酪酸
【化１７】
2006519200.tif 000022
160 mg の 4-(cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)-2-エチル酪酸 tert-ブチルを 16ml のジクロロメタンに溶解し、４ml のトリフルオロ酢酸を加える。この混合物を室温で 12 時間攪拌する。次いで 50ml のトルエンを加え、溶媒を減圧下で除去する。残留物を RP-HPLC により精製する。凍結乾燥は 123 mg の 4-(cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)-2-エチル酪酸を無色油状物として与える。C29H46N2O4 (486.70), MS(ESI): 487 (M + H+)。
【０１４０】
実施例２
実施例１と同様にして、2-エチル-4-[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキシル)酪酸 tert-ブチル、ヘプチルアミン及びブチルイソシアネートは、4-｛cis-3-[2-(3-ブチル-1-ヘプチルウレイド)エトキシ]シクロヘキシル｝-2-エチル酪酸を与えた。
【化１８】
2006519200.tif 000023
C26H50N2O4 (454.70), MS(ESI): 455 (M + H+)。
【０１４１】
実施例３
実施例１と同様にして、2-エチル-4-[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキシル)酪酸 tert-ブチル、ヘプチルアミン及びシクロヘキシルイソシアネートは、4-｛cis-3-[2-(3-シクロヘキシル-1-ヘプチルウレイド)エトキシ]シクロヘキシル｝-2-エチル酪酸を与えた。
【化１９】
2006519200.tif 000024
C28H52N2O4 (480.74), MS(ESI): 481 (M + H+)
【０１４２】
実施例４
実施例１と同様にして、2-エチル-4-[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキシル)酪酸 tert-ブチル、p-メチルベンジルアミン及びブチルイソシアネートは、4-(cis-3-｛2-[3-ブチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル｝-2-エチル酪酸を与えた。
【化２０】
2006519200.tif 000025
C27H44N2O4 (460.66), MS(ESI): 461 (M + H+)。
【０１４３】
実施例５
実施例１と同様にして、ジエチルホスホノ酢酸 tert-ブチル、ヨウ化イソプロピル、[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒド、ヘプチルアミン及びブチルイソシアネートは、2-(2-｛cis-3-[2-(3-ブチル-1-ヘプチルウレイド)エトキシ]シクロヘキシル｝エチル)-3-メチル酪酸を与えた。
【化２１】
2006519200.tif 000026
C27H52N2O4 (468.73), MS(ESI): 469 (M + H+)。
【０１４４】
実施例６
実施例１と同様にして、ジエチルホスホノ酢酸 tert-ブチル、ヨウ化イソプロピル、[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒド、ヘプチルアミン及びシクロヘキシルイソシアネートは、2-(2-｛cis-3-[2-(3-シクロヘキシル-1-ヘプチルウレイド)エトキシ]シクロヘキシル｝エチル)-3-メチル酪酸を与えた。
【化２２】
2006519200.tif 000027
C29H54N2O4 (494.76), MS(ESI): 495 (M + H+)。
【０１４５】
実施例７
実施例１と同様にして、ジエチルホスホノ酢酸 tert-ブチル、ヨウ化イソプロピル、[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒド、p-ベンジルアミン及びブチルイソシアネートは、2-[2-(cis-3-｛2-[3-ブチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)エチル]-3-メチル酪酸を与えた。
【化２３】
2006519200.tif 000028
C28H46N2O4 (474.69), MS(ESI): 475 (M + H+)。
【０１４６】
実施例８
実施例１と同様にして、ジエチルホスホノ酢酸 tert-ブチル、ヨウ化イソプロピル、[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒド、p-メチルベンジルアミン及びシクロヘキシルイソシアネートは、2-[2-(cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル)エチル]-3-メチル酪酸を与えた。
【化２４】
2006519200.tif 000029
C30H48N2O4 (500.73), MS(ESI): 501 (M + H+)。
【０１４７】
実施例９
tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]ブタ-2-エノエート
【化２５】
2006519200.tif 000030
3.4ｇの [cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]アセトアルデヒドを 100ml のジクロロメタンに溶解し、５ｇの(トリフェニルホスホラニリデン)酢酸 tert-ブチルを加える。この混合物を還流下で１時間沸騰させる。この混合物を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル = 20:1 を用いて精製する。これは 2.4ｇの tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]ブタ-2-エノエートを油状物として与える。C30H42O3Si (478.75), MS(ESI): 479 (M + H+), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.56。
【０１４８】
tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]ブタノエート
【化２６】
2006519200.tif 000031
2.4ｇの tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]ブタ-2-エノエートを 35 ｍｌ のメタノールに溶解し、200 mg の Pd（活性炭上 10％）を加える。この混合物を室温で水素雰囲気下で７時間攪拌する。触媒をセライトに通して除去し、濾液を減圧下での濃縮する。これは 2.3ｇの  tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]ブタノエートを油状物として与える。C30H44O3Si (480.75), MS(ESI): 481 (M+H+)。
【０１４９】
4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチル
【化２７】
2006519200.tif 000032
２ｇの tert-ブチル 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]ブタノエートを 20 ml のテトラヒドロフランに溶解し、テトラヒドロフラン中のリチウムジイソプロピルアミドの 2M 溶液の 3.1 ml を -78℃で加える。反応混合物を -78℃で２時間攪拌し、次いで -30℃に温め、1.6 ml のヨウ化メチルを加える。この混合物を12 時間にわたって室温に温まらせる。次いで 150 ml のメチル tert-ブチルエーテルを加えて反応混合物を希釈し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、溶媒を減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 10:1 を用いて精製する。これは 2.1ｇのモノメチル化生成物を与える。この生成物を 20 ml のテトラヒドロフランに溶解し、テトラヒドロフラン中のリチウムジイソプロピルアミドの 2M 溶液の６ｍｌ を -78℃で加える。反応混合物を -78℃で２時間攪拌し、次いで０℃に温め、10 分後に０℃で 2.5 ml のヨウ化メチルを加える。この混合物を 12 時間にわたって室温に温まらせる。次いで 150 ml のメチル tert-ブチルエーテルを加えて反応混合物を希釈し、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 10:1 を用いて精製する。これは1.8ｇの 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチルを油状物として与える。C32H48O3Si (508.82), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.49。
【０１５０】
4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル]-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチル
【化２８】
2006519200.tif 000033
２ｇの 4-[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキシル]-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチルを 10 ml のテトラヒドロフランに溶解し、テトラヒドロフラン中のフッ化テトラブチルアンモニウムの 1M 溶液の８ｍｌ を加える。この混合物を 60℃で２時間攪拌する。反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲル上で、移動相とし
て n-ヘプタン：酢酸エチル= 20:1 → 1:1 を用いて精製する。これは  730 mg の 4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル]-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチルを油状物として与える。C16H30O3 (270.42), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 5:1) = 0.22。
【０１５１】
実施例１と同様にして、4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチル、p-ヘプチルアミン及びブチルイソシアネートは、4-｛cis-3-[2-(3-ブチル-1-ヘプチルウレイド)エトキシ]シクロヘキシル｝-2,2-ジメチル酪酸を与えた。
【化２９】
2006519200.tif 000034
C26H50N2O4 (454.70), MS(ESI): 455 (M + H+)
【０１５２】
実施例１０
実施例９と同様にして、4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチル、p-メチルベンジルアミン及びブチルイソシアネートは、4-(cis-3-｛2-[3-ブチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル｝-2,2-ジメチル酪酸を与えた。
【化３０】
2006519200.tif 000035
C27H44N2O4 (460.66), MS(ESI): 461 (M + H+)。
【０１５３】
実施例１１
実施例９と同様にして、4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチル、p-ヘプチルアミン及びシクロヘキシルイソシアネートは、4-｛cis-3-[2-(3-シクロヘキシル-1-ヘプチルウレイド)エトキシ]シクロヘキシル｝-2,2-ジメチル酪酸を与えた。
【化３１】
2006519200.tif 000036
C28H52N2O4 (480.74), MS(ESI): 481 (M + H+)。
【０１５４】
実施例１２
実施例９と同様にして、4-(cis-3-ヒドロキシシクロヘキシル)-2,2-ジメチル酪酸 tert-ブチル、p-メチルベンジルアミン及びシクロヘキシルイソシアネートは、4-(cis-3-｛2-[3-シクロヘキシル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキシル｝-2,2-ジメチル酪酸を与えた。
【化３２】
2006519200.tif 000037
C29H46N2O4 (486.70), MS(ESI): 487 (M + H+)。
【０１５５】
実施例１３
cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキサンカルボン酸メチル
【化３３】
2006519200.tif 000038
22ｇの 6-オキサビシクロ[3.2.1]オクタン-7-オンを 200ml のメタノールに溶解し、10％ 濃度のナトリウムメトキシド溶液を pH が 10 に達するまで加える。この混合物を室温で 30 分間攪拌し、次いで希酢酸を加えて中和し、混合物を減圧下で濃縮する。残留物を酢酸エチルに溶解し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで減圧下に濃縮した。これは 21ｇのメチルエーテルを無色油状物として与える。これを 200ml のジメチルホルムアミドに溶解し、43ｇの tert-ブチルジフェニルシリルクロリド、13ｇのイミダゾール及び１ｇのジメチルアミノピリジンを加え、この混合物を室温で 12 時間攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、残留物をメチル tert-ブチルエーテルに吸収させ、水洗する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を除去する。これは 56.8ｇの cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキサンカルボン酸メチルを黄色油状物として与える。
C24H32O3Si (396.61), MS(ESI): 397 (M+H+)。
【０１５６】
cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキサンカルボニル]アミノ｝-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチル
【化３４】
2006519200.tif 000039
36.8ｇの cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキサンカルボン酸を 150ml のイソプロパノールに溶解し、50ml の水に溶解した８ｇの水素化ナトリウムを加える。この混合物を 60℃で１時間加熱する。反応混合物を冷却し、2N 塩酸を加えて中和する。反応混合物を減圧下で濃縮し、それぞれの場合に 200ml の酢酸エチルで抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。これは 34ｇの遊離酸を無色油状物として与える（Rf (酢酸エチル) = 0.63）。これを 250ml のジメチルホルムアミドに溶解し、18.6ｇの L-バリン tert-ブチル塩酸塩を加える。０℃で 29.1ｇの O-[シアノ(エトキシカルボニル)メチレンアミノ]-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートを加える。10 分後、氷浴を除去し、23.9ｇのヒドロキシベンゾトリアゾール及び 61.8ml の Huenig 塩基を加える。この混合物を室温で２時間攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、得られた残留物を酢酸エチルに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で３回洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶媒を減圧下で除去する。残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 2:1 を用いて精製する。これは 43.0ｇの 2-｛[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキサンカルボニル]-アミノ｝-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチルを黄色油状物として与える。C32H47NO4Si (537.82), MS(ESI): 538。
【０１５７】
2-[(cis-3-ヒドロキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル-酪酸 tert-ブチル
【化３５】
2006519200.tif 000040
43.0ｇの 2-｛[cis-3-(tert-ブチル-ジフェニルシラニルオキシ)シクロヘキサンカルボニル]-アミノ｝-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチルを 80ml のテトラヒドロフランに溶解し、テトラヒドロフラン中のフッ化テトラブチルアンモニウムの 1M 溶液の 80 ml を加える。この混合物を 60℃で３時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 5:1 → 1:1 を用いて精製する。これは 18ｇの白色固体を与える。これは僅かに不純物を含むので、この８ｇを別のシリカゲル上での精製に付する。これは 6.8ｇの 2-[(cis-3-ヒドロキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル-酪酸 tert-ブチルを白色固体として与える。C16H29NO4（299.41）, MS(ESI)：300（M+H+）。
2-[(cis-3-ヒドロキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル-酪酸 tert-ブチルは、キラル HPLC により分離することができる。これは 2-[((1R,3S)-3-ヒドロキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル-酪酸 tert-ブチル (Rt = 4.9 分) 及び 2-[((1S,3R)-3-ヒドロキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチル (Rt = 5.7分) を無色凍結乾燥物として与える。(Chiralpak AD/34 250×4.6; 移動相は n-ヘプタン：酢酸エチル：メタノール = 20:1:1 + 0.1％ トリフルオロ酢酸)。
【０１５８】
2-[(cis-3-アリルオキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチル
【化３６】
2006519200.tif 000041
2.8ｇの 2-[(cis-3-ヒドロキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル-酪酸 tert-ブチルを 20ml のジメチルホルムアミドに溶解し、450 mg の水素化ナトリウム（鉱油中 60％ 濃度の懸濁液）を加える。10 分後、3.4ml の臭化アリルを滴下して加える。室温で３時間攪拌した後、さらに 700 mg の水素化ナトリウムを加える。室温で２時間攪拌した後、さらに 3.4ml の臭化アリルを計量供給する。この混合物を室温で 12 時間攪拌し、次いで 200ml のメチル tert-ブチルエーテルを反応混合物に加え、この混合物をそれぞれの場合に 100ml の水で３回洗浄する。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 40:1 → 10:1 を用いて精製する。これは 900 mg の 2-[(cis-3-アリルオキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチルを無色油状物として与える。C19H33NO4 (339.48), MS(ESI): 340 (M+H+), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 1:1) = 0.58。
【０１５９】
(3S)-メチル-2-｛[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキサンカルボニル]アミノ｝酪酸 tert-ブチル
【化３７】
2006519200.tif 000042
900 mg の 2-[(cis-3-アリルオキシシクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチルを 20ml のジエチルエーテルに溶解し、20 mlの水に溶解した 1.7ｇの過ヨウ素酸ナトリウムを加える。０℃で tert-ブタノール中の 1.6ml の四酸化オスミウム溶液（2.5 重量％）を加える。反応混合物を室温で３時間激しく攪拌する。次いで、０℃で 50ml の飽和チオ硫酸ナトリウム溶液を加える。有機相を分離する。水相をそれぞれの場合に 50ml のメチル tert-ブチルエーテルで３回抽出する。一緒にした有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥し、次いで溶剤を減圧下で除去する。これは 1.0ｇの (3S)-メチル-2-｛[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキサンカルボニル]アミノ｝酪酸 tert-ブチルを無色油状物として与え、これを精製することなくさらに反応させる。
C18H31NO5 (341.45), Rf (n-ヘプタン：酢酸エチル = 1:1) = 0.19。
【０１６０】
2-[(cis-3-｛2-[3-エチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチル
【化３８】
2006519200.tif 000043
330 mg の (3S)-メチル-2-｛[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキサンカルボニル]アミノ｝酪酸 tert-ブチルを３ml のメタノールに溶解し、５ml のメタノールに溶解した 4-メチルベンジルアミンの 0.12 ml を加える。加熱して乾燥した 300 mg のモレキュラーシーブ（４Å）を加え、この混合物を室温で２時間攪拌する。次いで 50 mg の水素化ホウ素ナトリウムを加え、室温での攪拌をさらに 30 分間続ける。モレキュラーシーブを濾別し、濾液を減圧下で濃縮する。得られた残留物を 20ml のジメチルホルムアミドに溶解し、80μl を加える。反応混合物を室温で 12 時間攪拌する。ジメチルホルムアミドを減圧下で除去し、残留物をシリカゲル上で、移動相として n-ヘプタン：酢酸エチル= 9:1 → 2:1 を用いて精製する。これは 320 mg の 2-[(cis-3-｛2-[3-エチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチルを淡黄色油状物として与える。C29H47N3O5 (517.72), MS(ESI): 518。
【０１６１】
2-[(cis-3-｛2-[3-エチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸
【化３８】
2006519200.tif 000044
320 mg の 2-[(cis-3-｛2-[3-エチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸 tert-ブチルを 20 ml のジクロロメタンに溶解し、10 ml のトリフルオロ酢酸を加える。この混合物を室温で３時間攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、残留物を RP-HPLC により精製する。これは 115 mg の 2-[(cis-3-｛2-[3-エチル-1-(4-メチルベンジル)ウレイド]エトキシ｝シクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸を白色凍結乾燥物として与える。C25H39N3O5 (461.61), MS(ESI): 462。
【０１６２】
実施例１４
実施例１３と同様にして、(3S)-メチル-2-｛[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキサンカルボニル]アミノ｝酪酸 tert-ブチル、n-ヘプチルアミン及びフェニルイソシアネートは、2-(｛cis-3-[2-(1-ヘプチル-3-フェニルウレイド)エトキシ]シクロヘキサンカルボニル｝アミノ)-(3S)-メチル酪酸を与えた。
【化４０】
2006519200.tif 000045
C28H45N3O5 (503.69), MS(ESI): 504。
【０１６３】
実施例１５
実施例１３と同様にして、(3S)-メチル-2-｛[cis-3-(2-オキソエトキシ)シクロヘキサンカルボニル]アミノ｝酪酸 tert-ブチル、2,2-ジメチルプロピルアミン及びフェニルイソシアネートは、2-[(cis-3-｛2-(1-(2,2-ジメチルプロピル)-3-フェニルウレイド)エトキシ｝シクロヘキサンカルボニル)アミノ]-(3S)-メチル酪酸を与えた。
【化４１】
2006519200.tif 000046
C26H41N3O5 (475.63), MS(ESI): 476。
【国際調査報告】
2006519200.tif 000049
2006519200.tif 000050
2006519200.tif 000051
2006519200.tif 000052