(57)【要約】本発明は，インドリノン化合物と追加の化学療法剤との組み合わせを投与することにより癌を治療する方法に関する。式Ｉ：【化１９】2006508981.tif 000029のインドリノン化合物と追加の化学療法剤との組み合わせは，癌患者の治療において増強された効果を与える。.
2006508981.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌を治療する方法であって，治療を必要とする患者に有効量の式Ｉ：
【化１】
2006508981.tif 000023
［式中，
各Ｒは，独立して，水素，ヒドロキシ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環またはアミノであり；
各Ｒ1は，独立して，アルキル，ハロ，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ8，−ＮＲ9Ｒ10，−ＮＲ9Ｃ（Ｏ）−Ｒ12または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ9Ｒ10であり；
各Ｒ2は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ8またはＳＯ2Ｒ"であり，ここで，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ9Ｎ10またはアルコキシであり；
各Ｒ5は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ8または（ＣＨＲ）rＲ11であり；
ＸはＯまたはＳであり；
ｊは０または１であり；
ｐは０，１，２または３であり；
ｑは０，１または２であり；
ｒは０，１，２または３であり；
Ｒ8は，ヒドロキシ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルまたは複素環であり；
Ｒ9およびＲ10は，独立して，水素，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルおよび複素環であるか，またはＲ9およびＲ10は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，ここで，環原子は，Ｃ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
Ｒ11は，ヒドロキシ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルまたは複素環であり；
Ｒ12は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルまたは複素環であり；および
Ｚは，ヒドロキシ，−Ｏ−アルキル，または−ＮＲ3Ｒ4であり，ここで，Ｒ3およびＲ4は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，または複素環であるか，またはＲ3およびＲ4は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，ここで，環原子は，ＣＨ2，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され，または
【化２】
2006508981.tif 000024
［式中，Ｙは，独立して，ＣＨ2，Ｏ，ＮまたはＳであり，Ｑは，ＣまたはＮであり，ｎは，独立して，０，１，２，３または４であり，およびｍは，０，１，２または３である］
である］
の化合物またはその薬学的に許容しうる塩，水和物または溶媒和物を，微小管干渉剤，トポイソメラーゼ阻害剤，アルキル化剤，チミジレートシンターゼ阻害剤，不可逆的ステロイドアロマターゼ不活性化剤，抗代謝剤，ピリミジンアンタゴニスト，プリンアンタゴニスト，リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤，およびキナーゼ阻害剤からなる群より選択される少なくとも１つの化学療法剤との組み合わせで投与することを含む方法。
【請求項２】
Ｒ1がハロであり，ｐが１である，請求項１記載の方法。
【請求項３】
Ｒ1がＦまたはＣｌであり，ｐが１である，請求項１記載の方法。
【請求項４】
Ｚが−ＮＲ3Ｒ4であり，ここで，Ｒ3およびＲ4は，低級アルキルであるか，またはモルホリン環を形成する，請求項１記載の方法。
【請求項５】
Ｚが，
【化３】
2006508981.tif 000025
［式中，各ＹはＣＨ2であり，各ｎは２であり，ｍは０であり，およびＲ3およびＲ4はモルホリン環を形成する］
である，請求項１記載の方法。
【請求項６】
Ｒ2がメチルであり，ｑが２であり，ここで，メチルは３位および５位に結合している，請求項１記載の方法。
【請求項７】
式Ｉの化合物が，
【化４】
2006508981.tif 000026
およびその薬学的に許容しうる塩，溶媒和物および水和物からなる群より選択される，請求項１記載の方法。
【請求項８】
式Ｉの化合物が，
【化５】
2006508981.tif 000027
およびその薬学的に許容しうる塩，溶媒和物および水和物からなる群より選択される，請求項１記載の方法。
【請求項９】
式（Ｉ）の化合物が，
【化６】
2006508981.tif 000028
またはその薬学的に許容しうる塩，溶媒和物または水和物である，請求項１記載の方法。
【請求項１０】
塩がリンゴ酸塩である，請求項９記載の方法。
【請求項１１】
少なくとも１つの化学療法剤が，タキサン，ビンカアルカロイド，トポイソメラーゼＩ阻害剤およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤からなる群より選択される，請求項１−１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
少なくとも１つの化学療法剤が，パクリタキセル，ドセタキセル，ビンブラスチン，ビンクリスチン，ビンデシン，イリノテカン，ドキソルビシン，エピルビシン，ロイコボリン，エトポシド，テニポシド，イダルビシン，ゲムシタビン，ダウノルビシン，カルボプラチン，シスプラチン，オキザリプラチン，クロラムブシル，メルファラン，シクロホスファミド，イフォスファミド，テモゾロミド，チオテパ，マイトマイシンＣ，ブルスファン，カルムスチン，ロムスチン，５−フルオロウラシル，カペシタビン，エクセメスタン，メトトレキセート，トリメトレキセート，フルオロウラシル，フルオロデオキシウリジン，アザシチジン，メルカプトプリン，チオグアニン，ペントスタチン，シタラビン，フルダラビン，ヒドロキシウレア，ベバシズマブ，セツキシマブ，ゲフィチニブおよびイマチニブからなる群より選択される，請求項１記載の方法。
【請求項１３】
癌が，乳癌，小細胞肺癌，結腸癌，非小細胞肺癌，腎臓細胞癌，胃腸間質性腫瘍，甲状腺癌，肉腫または神経内分泌腫瘍である，請求項１記載の方法。
【請求項１４】
癌が非小細胞肺癌であり，少なくとも１つの化学療法剤がカルボプラチンおよびパクリタキセルである，請求項１記載の方法。
【請求項１５】
癌が非小細胞肺癌であり，少なくとも１つの化学療法剤がカルボプラチン，タキソテレ，シスプラチン，ゲムシタビン，５−フルオロウラシル，イリノテカンまたはロイコボリンである，請求項１記載の方法。
【請求項１６】
癌が結腸癌であり，少なくとも１つの化学療法剤が５−フルオロウラシル，オキザリプラチンまたはロイコボリンである，請求項１記載の方法。
【請求項１７】
癌を治療する方法であって，治療を必要とする患者に，有効量の以下の化合物：
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミド；
（Ｓ）−５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
（Ｒ）−５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド；および
３−［３，５−ジメチル−４−（４−モルホリン−４−イル−ピペリジン−１−カルボニル）−１Ｈ−ピロール−２−メチレン］−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン，
からなる群より選択される化合物またはその薬学的に許容しうる塩，水和物または溶媒和物を，微小管干渉剤，トポイソメラーゼ阻害剤，アルキル化剤，チミジレートシンターゼ阻害剤，不可逆的ステロイドアロマターゼ不活性化剤，抗代謝剤，ピリミジンアンタゴニスト，プリンアンタゴニスト，リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤，およびキナーゼ阻害剤からなる群より選択される少なくとも１つの化学療法剤と組み合わせて投与することを含む方法。
【請求項１８】
少なくとも１つの化学療法剤が，タキサン，ビンカアルカロイド，トポイソメラーゼＩ阻害剤およびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤からなる群より選択される，請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
少なくとも１つの化学療法剤が，パクリタキセル，ドセタキセル，ビンブラスチン，ビンクリスチン，ビンデシン，イリノテカン，ドキソルビシン，エピルビシン，ロイコボリン，エトポシド，テニポシド，イダルビシン，ゲムシタビン，ダウノルビシン，カルボプラチン，シスプラチン，オキザリプラチン，クロラムブシル，メルファラン，シクロホスファミド，イフォスファミド，テモゾロミド，チオテパ，マイトマイシンＣ，ブルスファン，カルムスチン，ロムスチン，５−フルオロウラシル，カペシタビン，エクセメスタン，メトトレキセート，トリメトレキセート，フルオロウラシル，フルオロデオキシウリジン，アザシチジン，メルカプトプリン，チオグアニン，ペントスタチン，シタラビン，フルダラビン，ヒドロキシウレア，ベバシズマブ，セツキシマブ，ゲフィチニブおよびイマチニブからなる群より選択される，請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
癌が，乳癌，小細胞肺癌，結腸癌，非小細胞肺癌，腎臓細胞癌，胃腸間質性腫瘍，甲状腺癌，肉腫または神経内分泌腫瘍である，請求項１７記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は，インドリノン化合物と追加の化学療法剤の組み合わせを投与することにより癌等の細胞増殖疾患を治療する方法に関する。式Ｉのインドリノン化合物と追加の化学療法剤との組み合わせは，ある種のタイプの癌患者の治療において増強された効果を与える。
【背景技術】
【０００２】
乳癌は，乳組織の細胞が制御なく分裂し成長する癌の一種である。乳癌の症例の約８０パーセントは，乳管から始まり，約２０パーセントは小葉から生ずる。侵襲的乳癌は，小葉または乳管の内部からの異常な細胞が周囲の組織に吹き出したときに生ずる。ただし，この用語は必ずしも乳以外のいずれかに転移が見出されたことを意味しない。侵襲的癌が一般に最も治療可能であるとき，例えば，腫瘍が比較的小さく，リンパ節に広がっていないとき，これは"初期段階"であると考えられる。状態がより重症となり，治療が成功しそうもないとき，例えば，腫瘍が非常に大きいか，他の臓器（肝臓，肺，および骨など）に広がっているとき，これは"進行段階"であると考えられる。
【０００３】
異常な細胞が小葉ないし乳管の内部で成長しているが，細胞が周囲組織または外部に広がっている兆候がないとき，この状態は上皮内癌と呼ばれる。上皮内癌には２つの主要なカテゴリーがある：乳管上皮内癌および小葉上皮内癌。
【０００４】
通常は，乳管は中空であり，液体はこれを通り抜けることができる。乳管上皮内癌（ＤＣＩＳ）では，侵襲性癌細胞と非常に似た過剰な細胞が乳管の内部で成長する。ＤＣＩＳは侵襲性癌ではないが，乳癌のリスクの増大と関連しており，最終的には侵襲性癌に発達する可能性を有する前癌状態であると考えられる。
【０００５】
乳管と同様に，乳組織の小葉はその内部に空間を有する。多数の異常な細胞が小葉中で成長する場合，その状態は小葉上皮内癌（ＬＣＩＳ）と呼ばれる。ＬＣＩＳは侵襲性癌ではなく，直接の癌前駆体ではない。すなわち，小葉の内部に見出される異常な細胞が後に癌に変化することはあまりない。ただし，ＬＣＩＳは侵襲性癌のリスク因子である。
【０００６】
ステージ１または２の乳癌を有するほとんどの女性は，外科手術，放射線療法，および／または外科手術および放射線に加えて与えて，別の部位に広がっているかもしれない腫瘍を排除する治療であるアジュバント全身療法の組み合わせで治療する。これには２つのタイプ，すなわち，化学療法およびホルモン療法がある。
【０００７】
現在，３０を超える異なる薬剤が一般に化学療法のために用いられている。これらの薬剤のうち第１選択薬として知られる最も有効なものは，ドキソルビシン，エピルビシン，メトトレキセート，シクロホスファミド，５−フルオロウラシル，ドセタキセルおよびパクリタキセルである。これらの個々の薬剤は各々，それ自体ある程度の効力を示しているが，本出願人の研究によれば，異なる薬剤を組み合わせることにより，癌細胞を殺す能力がさらに増加することが示されている。アジュバント療法のための化学療法の現在利用可能な組み合わせの例は次のとおりである。
１．シクロホスファミドおよびドキソルビシン（アドリアマイシン）の組み合わせ
２．シクロホスファミド，メトトレキセートおよび５−フルオロウラシルの組み合わせ
３．ＣＡＦ（ＦＡＣ），シクロホスファミド，ドキソルビシン（アドリアマイシン）５−フルオロウラシルの組み合わせ
４．シクロホスファミド，ドキソルビシン（アドリアマイシン）およびパクリタキセル（タキソール）の組み合わせ
５．シクロホスファミド，ドキソルビシン（アドリアマイシン）およびタキソテレ（ドセタキセル）の組み合わせ
【０００８】
結腸癌には，結腸または直腸の内面における異常なまたは悪性の細胞の成長が関与する。結腸癌の大部分は腺腫として知られる非悪性成長から生ずる。場合によっては，腺腫はその大きさが増加し，細胞中で一連の変化が生じるために，機能，構造および形状が異常となる可能性を有している。これは一般に悪性または癌と称される。結腸癌の現在の治療計画は，腫瘍を除去する外科手術，放射線および化学療法を含む。結腸癌に対して与えられる化学療法は，通常，フルオロウラシル（５−ＦＵ）とレバミゾール，および５−ＦＵとロイコボリンの２薬剤投与計画の変形からなる。
【０００９】
小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）は，他の種類の肺癌とは区別され（発見の時に既に転移が存在する），年間約１１０，０００件が癌と診断される。１９８２年に小細胞肺癌細胞株において染色体３の一部の欠失が最初に見出された。他の癌におけるものと同様に，細胞成長および分裂を制御する種々の分子（オンコジンおよび腫瘍サプレッサー遺伝子）における変異が見出され，１つの変異が癌性の成長をもたらすのではないようである。３種類の治療が慣用的に用いられている：外科手術，放射線療法および化学療法。いずれの単独の化学療法治療計画も標準であるとは考えられていないが，活性を示しているものには，経口エトポシド，エトポシド／シスプラチン，シクロホスファミド／ドキソルビシン／ビンクリスチン（ＣＡＶ），ロムスチン／メトトレキセート，およびトポテカンおよびこれらの組み合わせが含まれる。
【００１０】
非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）は，扁平上皮癌（類表皮癌とも称される），腺癌，腺扁平上皮癌，大細胞癌，および未分化癌腫を含む肺癌の群である。
【００１１】
腎臓細胞癌（腎臓の癌または腎臓腺癌とも称される）は，癌（悪性）細胞が腎臓のある組織に見出される疾病である。
【００１２】
胃腸間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）は，通常は胃腸管の壁の細胞において始まる腫瘍の一種である。これは良性である場合も悪性である場合もある。
【００１３】
甲状腺癌は，甲状腺の悪性腫瘍を含む。
【００１４】
肉腫には，骨，関節，脂肪，筋肉，血管，または他の結合もしくは支持組織の任意の癌が含まれる。
【００１５】
神経内分泌腫瘍とは，腫瘍が存在する場所とは異なる場所から腫瘍が成長するタイプの細胞を表す。神経内分泌細胞はホルモンまたは制御蛋白質を産生し，したがってこれらの細胞の腫瘍は通常はこれらが産生する特定のホルモンに関連する症状を有する。
【００１６】
全体として，癌が薬剤に対して獲得した耐性のため，既知の化学療法剤が癌を根絶することができない多くの症例が存在する。式Ｉの化合物と追加の化学療法剤と組み合わせを，なお有益な効力を与え，おそらくは患者に対する化学療法剤の毒性を低下させながら，現在の標準より低い投与量で投与することができることを見出した。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１７】
発明の概要
本発明の１つの態様は，癌を治療する方法に関し，この方法は，治療を必要とする患者に，有効量の式Ｉ：
【化７】
2006508981.tif 000003
［式中，
各Ｒは，独立して，水素，ヒドロキシ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環またはアミノであり；
各Ｒ1は，独立して，アルキル，ハロ，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ8，−ＮＲ9Ｒ10，−ＮＲ9Ｃ（Ｏ）−Ｒ12または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ9Ｒ10であり；
各Ｒ2は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ8またはＳＯ2Ｒ"であり，ここで，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ9Ｎ10またはアルコキシであり；
各Ｒ5は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ8または（ＣＨＲ）rＲ11であり；
ＸはＯまたはＳであり；
ｊは０または１であり；
ｐは０，１，２または３であり；
ｑは０，１または２であり；
ｒは０，１，２または３であり；
Ｒ8は，ヒドロキシ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルまたは複素環であり；
Ｒ9およびＲ10は，独立して，水素，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルまたは複素環であり，あるいは，Ｒ9およびＲ10は，Ｎと一緒になって環を形成し，ここで，環原子は，Ｃ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
Ｒ11は，ヒドロキシ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルまたは複素環であり；
Ｒ12は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルまたは複素環であり；そして
Ｚは，ヒドロキシ，−Ｏ−アルキル，または−ＮＲ3Ｒ4であり，ここで，Ｒ3およびＲ4は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，または複素環であるか，またはＲ3およびＲ4は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，ここで，環原子は，ＣＨ2，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され，または
【化８】
2006508981.tif 000004
［式中，Ｙは，独立して，ＣＨ2，Ｏ，ＮまたはＳであり，Ｑは，ＣまたはＮであり，ｎは，独立して，０，１，２，３または４であり，ｍは，０，１，２または３である］
である］
の化合物またはその薬学的に許容しうる塩，水和物または溶媒和物を，微小管干渉剤，トポイソメラーゼ阻害剤，アルキル化剤，チミジレートシンターゼ阻害剤，不可逆的ステロイドアロマターゼ不活性化剤，抗代謝剤，ピリミジンアンタゴニスト，プリンアンタゴニスト，リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤，およびキナーゼ阻害剤からなる群より選択される少なくとも１つの化学療法剤と組み合わせて投与することを含む。式Ｉの化合物およびその製造は，ＷＯ０２／０６６４６３および米国特許６，５７３，２９３に記載されており，これらの開示の全体を本明細書の一部としてここに引用する。
【００１８】
別の態様においては，Ｒ1はハロであり，好ましくはＦまたはＣｌであり，ｐは１である。
【００１９】
別の態様においては，Ｚは−ＮＲ3Ｒ4であり，ここで，Ｒ3およびＲ4は，低級アルキルであるか，モルホリン環を形成する。
【００２０】
別の態様においては，Ｚは：
【化９】
2006508981.tif 000005
［式中，各ＹはＣＨ2であり，各ｎは２であり，ｍは０であり，Ｒ3およびＲ4はモルホリン環を形成する］
である。
【００２１】
別の態様においては，Ｒ2はメチルであり，ｑは２であり，ここで，メチルは３位および５位に結合している。
【００２２】
別の態様においては，式Ｉの化合物は，
【化１０】
2006508981.tif 000006
およびその薬学的に許容しうる塩，溶媒和物および水和物からなる群より選択される。
【００２３】
別の態様においては，式Ｉの化合物は，
【化１１】
2006508981.tif 000007
およびその薬学的に許容しうる塩，水和物または溶媒和物からなる群より選択される。
【００２４】
別の態様においては，化合物は，
【化１２】
2006508981.tif 000008
またはその薬学的に許容しうる塩，水和物または溶媒和物である。
【００２５】
この態様の好ましい観点においては，塩はリンゴ酸塩，好ましくはＬ−リンゴ酸塩である。
【００２６】
上述した態様のいずれかの好ましい観点においては，少なくとも１つの化学療法剤は，パクリタキセル，ドセタキセル，ビンブラスチン，ビンクリスチン，ビンデシン，イリノテカン，ドキソルビシン，エピルビシン，ロイコボリン，エトポシド，テニポシド，イダルビシン，ゲムシタビン，ダウノルビシン，カルボプラチン，シスプラチン，オキザリプラチン，クロラムブシル，メルファラン，シクロホスファミド，イフォスファミド，テモゾロミド，チオテパ，マイトマイシンＣ，ブルスファン，カルムスチン，ロムスチン，５−フルオロウラシル，カペシタビン，ＡＲＯＭＡＳＩＮ（商標）（エクセメスタン），メトトレキセート，トリメトレキセート，フルオロウラシル，フルオロデオキシウリジン，アザシチジン，メルカプトプリン，チオグアニン，ペントスタチン，シタラビン，フルダラビン，ヒドロキシウレア，ＡＶＡＳＴＩＮ（商標）（ベバシズマブ）セツキシマブ，ＩＲＥＳＳＡ（商標）（ゲフィチニブ）およびＧＬＥＥＶＥＣ（商標）（イマチニブ）からなる群より選択される。
【００２７】
別の態様においては，少なくとも２つの追加の化学療法剤が式Ｉの化合物と組み合わせて用いられる。
【００２８】
別の態様においては，少なくとも３つの追加の化学療法剤が式Ｉの化合物と組み合わせて用いられる。
【００２９】
本発明の１つの態様においては，追加の薬剤を本発明の方法において式Ｉの化合物とともに投与することができる。この追加の薬剤は，それ自体化学療法剤ではないが，治療効果を有するもの，例えば，慣用の化学療法からの副作用（悪液質等）を改善することができる自然薬（ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３０】
好ましい態様の詳細な説明
式Ｉの化合物は，癌を有する患者の治療に有用である。特に，これらは式Ｉの化合物のレセプターチロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤のとしての活性のため，癌患者の治療に有用である。特に，式Ｉの化合物は，ＫＩＴおよびＦＬＴ３およびＶＥＧＦおよびＰＤＧＦのレセプターの阻害剤である。式Ｉの化合物は，腫瘍細胞において直接発現されているＲＴＫおよび内皮細胞または間質性細胞において発現されているＲＴＫの両方をブロックし，これは腫瘍成長を阻害する能力につながる。
【００３１】
式Ｉのインドリノン化合物と共に投与することが企図される化学療法剤には，限定されないが，微小管干渉剤，トポイソメラーゼ阻害剤，アルキル化剤，チミジレートシンターゼ阻害剤，不可逆的ステロイドアロマターゼ不活性化剤，抗代謝剤，ピリミジンアンタゴニスト，プリンアンタゴニスト，リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤，およびキナーゼ阻害剤が含まれる。
【００３２】
微小管干渉剤は，無秩序な微小管形成を誘導し，有糸分裂およびＤＮＡ合成を破壊する薬剤であり，これには，タキサン，例えばパクリタキセルおよびドセタキセル；ビンカアルカロイド，例えばビンブラスチン，ビンクリスチンおよびビンデシンが含まれる。
【００３３】
ＤＮＡを破壊することにより作用するトポイソメラーゼ阻害剤には，トポイソメラーゼＩおよびトポイソメラーゼＩＩ阻害剤の２種類が含まれる。トポイソメラーゼＩ阻害剤には，限定されないが，イリノテカン（ＣＰＴ−１１）が含まれる。トポイソメラーゼＩＩ阻害剤には，例えば，ドキソルビシンおよびエピルビシンが含まれる。本発明において有用な他のトポイソメラーゼ阻害剤には，限定されないが，エトポシド，テニポシド，イダルビシンおよびダウノルビシンが含まれる。
【００３４】
ＤＮＡに損傷を与えることにより作用するアルキル化剤，例えば，クロラムブシル，メルファラン，シクロホスファミド，イフォスファミド，テモゾロミド，チオテパ，マイトマイシンＣ，ブルスファン，カルムスチン（ＢＣＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）は，化学療法剤として有用であることが見出されている。アルキル化剤にはまた，プラチン類，例えば，有用な化学療法剤であることが示されているカルボプラチンおよびシスプラチンが含まれる。ただしこれらは，アルキル化剤ではなく，ＤＮＡと共有結合することにより作用する。
【００３５】
ＤＮＡおよびＲＮＡの偽塩基に代謝されることにより転写を妨害するチミジレートシンターゼ阻害剤には，例えば，５−フルオロウラシルおよびカペシタビンが含まれる。
【００３６】
アロマターゼ酵素の偽基質として作用する不可逆的ステロイドアロマターゼ阻害剤には，限定されないが，ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）が含まれる。
【００３７】
抗代謝剤，例えば，葉酸アンタゴニスト，メトトレキセートおよびトリメトレキセート（Ａｌｉｍｔａ）は，化学療法剤として有用であることが見出されている。
【００３８】
ピリミジンアンタゴニスト，例えば，フルオロウラシル，フルオロデオキシウリジンおよびアザシチジンは，化学療法剤として有用であることが見出されている。
【００３９】
プリンアンタゴニストは，化学療法剤として有用であることが見出されており，例えば，メルカプトプリン，チオグアニンおよびペントスタチン等の薬剤が含まれる。また化学療法剤として有用な糖修飾類似体には，シタラビンおよびフルダラビンが含まれる。
【００４０】
リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤は，化学療法剤として有用であることが見出されており，例えば，ヒドロキシウレア等の薬剤が含まれる。
【００４１】
上述した慣用の化学療法剤に加えて，式Ｉの化合物は，他のキナーゼ阻害剤，例えば，ＡＶＡＳＴＩＮ（商標）（ベバシズマブ），セツキシマブ，ＩＲＥＳＳＡ（商標）（ゲフィチニブ）およびＧＬＥＥＶＥＣ（商標）（イマチニブ）と組み合わせて用いることができる。
【００４２】
本発明の好ましい態様においては，式Ｉの化合物と組み合わせて投与される追加の化学療法剤はタキサン，より好ましくはパクリタキセルまたはドセタキセルである。
【００４３】
本発明の好ましい態様においては，式Ｉの化合物と組み合わせて投与される追加の化学療法剤は，トポイソメラーゼ阻害剤，より好ましくはトポイソメラーゼＩまたはトポイソメラーゼＩＩ阻害剤であり，より好ましくはアントラサイクリンであり，より好ましくはドキソルビシンまたはエピルビシンおよびこれらの組み合わせである。
【００４４】
本発明の好ましい態様においては，式Ｉの化合物と組み合わせて投与される追加の化学療法剤は，チミジレートシンターゼ阻害剤，より好ましくは５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）またはカペシタビン，より好ましくは５−ＦＵである。
【００４５】
本発明の好ましい態様においては，小細胞肺癌用に式Ｉの化合物と組み合わせて投与される追加の化学療法剤は，アルキル化剤，より好ましくはシスプラチンである。
【００４６】
本発明の好ましい態様においては，式Ｉの化合物と組み合わせて投与される追加の化学療法剤は不可逆的ステロイドアロマターゼ不活性化剤，例えば，ＡＲＯＭＡＳＩＮ（商標）（エクセメスタン）である。
【００４７】
好ましい態様においては，そのような組み合わせ療法を必要とする患者に投与される式Ｉの化合物は，
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミド；
（Ｓ）−５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
（Ｒ）−５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミドおよび
３−［３，５−ジメチル−４−（４−モルホリン−４−イル−ピペリジン−１−カルボニル）−１Ｈ−ピロール−２−メチレン］−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン
からなる群より選択される。
【００４８】
本発明の方法において有用な式Ｉの化合物を明確に記述するために，以下の定義を説明する。
【００４９】
"アルキル"とは，１−２０個の炭素原子（本明細書において数値範囲，例えば，"１−２０"という場合，基（この場合にはアルキル基）が，１個の炭素原子，２個の炭素原子，３個の炭素原子，以下同様に２０個までの炭素原子を含んでいてもよいことを意味する）の飽和脂肪族炭化水素ラジカルを表し，直鎖および分枝鎖の基を含む。１−４個の炭素原子を含むアルキル基は低級アルキル基と称される。前記低級アルキル基が置換基を有しない場合，これらは未置換低級アルキル基と称される。より好ましくは，アルキル基は，１−１０個の炭素原子を有する中程度の大きさのアルキル，例えば，メチル，エチル，プロピル，２−プロピル，ｎ−ブチル，イソブチル，ｔｅｒｔ−ブチル，ペンチル等である。最も好ましくは，これは１−４個の炭素原子を有する低級アルキル，例えば，メチル，エチル，プロピル，２−プロピル，ｎ−ブチル，イソブチル，またはｔｅｒｔ−ブチル等である。アルキル基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリール；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリールオキシ；環中に１−３個の窒素原子を有し，環中の炭素は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい６員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素（存在する場合）原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員または６員の複素環；メルカプト；（未置換低級アルキル）チオ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたはアルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリールチオ；シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ13Ｒ14（Ｒ13およびＲ14は，独立して，水素，未置換低級アルキル，トリハロメチル，シクロアルキル，複素環および，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ��未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択される）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１−３個，さらに好ましくは，１または２個の置換基である。
【００５０】
好ましくは，アルキル基は，ヒドロキシ；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素（存在する場合）原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員または６員の複素環基；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員のヘテロアリール；環中に１−３個の窒素原子を有し，環中の炭素は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい６員のヘテロアリール；または−ＮＲ13Ｒ14（Ｒ13およびＲ14は，独立して，水素およびアルキルからなる群より選択される）からなる群より独立して選択される１または２個の置換基で置換されている。さらに好ましくは，アルキル基は，互いに独立して，ヒドロキシ，ジメチルアミノ，エチルアミノ，ジエチルアミノ，ジプロピルアミノ，ピロリジノ，ピペリジノ，モルホリノ，ピペラジノ，４−低級アルキルピペラジノ，フェニル，イミダゾリル，ピリジニル，ピリダジニル，ピリミジニル，オキサゾリル，トリアジニル等の１または２個の置換基で置換されている。
【００５１】
"シクロアルキル"とは，３−８員の全炭素単環，全炭素５員／６員または６員／６員縮合二環または縮合多環（"縮合"環系とは，系中の各環が系中の他の環と隣接する炭素原子の対を互いに共有することを意味する）基を表し，環の１またはそれ以上が１またはそれ以上の二重結合を含んでいてもよいが，完全に共役したπ電子系を有しない。
【００５２】
シクロアルキル基の例は，限定されないが，シクロプロパン，シクロブタン，シクロペンタン，シクロペンテン，シクロヘキサン，シクロヘキサジエン，アダマンタン，シクロヘプタン，シクロヘプタトリエン等である。シクロアルキル基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよいアリール；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよいアリールオキシ；環中に１−３個の窒素原子を有し，環中の炭素は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよい６員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基の炭素および窒素原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよい５員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基の炭素および窒素（存在する場合）原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよい５員または６員の複素環；メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよいアリールチオ；シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ13Ｒ14（上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１または２個の置換基である。
【００５３】
"アルケニル"とは，少なくとも２個の炭素原子および少なくとも１個の炭素−炭素二重結合からなる，本明細書において定義される低級アルキル基を表す。代表的例には，限定されないが，エテニル，１−プロペニル，２−プロペニル，１−，２−，または３−ブテニル等が含まれる。
【００５４】
"アルキニル"とは，少なくとも２個の炭素原子および少なくとも１個の炭素−炭素三重結合からなる，本明細書において定義される低級アルキル基を表す。代表的例には，限定されないが，エチニル，１−プロピニル，２−プロピニル，１−，２−，または３−ブチニル等が含まれる。
【００５５】
"アリール"とは，完全に共役したπ電子系を有する，１−１２個の炭素原子の全炭素単環または縮合多環（すなわち，隣接する炭素原子の対を共有する環）基を表す。アリール基の例は，限定されないが，フェニル，ナフタレニルおよびアントラセニルである。アリール基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ，メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ13Ｒ14（Ｒ13およびＲ14は上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される，１またはそれ以上，より好ましくは，１，２，または３個，さらに好ましくは，１または２個の基である。好ましくは，アリール基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。
【００５６】
"ヘテロアリール"とは，Ｎ，Ｏ，またはＳから選択される１，２，または３個の環複素原子を含み，残りの環原子はＣであり，さらに，完全に共役したπ電子系を有する５−１２個の環原子の単環または縮合環（すなわち，隣接する原子の対を共有する環）基を表す。未置換ヘテロアリール基の例は，限定されないが，ピロール，フラン，チオフェン，イミダゾール，オキサゾール，チアゾール，ピラゾール，ピリジン，ピリミジン，キノリン，イソキノリン，プリンおよびカルバゾールである。ヘテロアリール基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ，メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ13Ｒ14（Ｒ13およびＲ14は上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１，２，または３個，さらに好ましくは，１または２個の基である。好ましくは，ヘテロアリール基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。
【００５７】
"複素環"とは，環中に５−９個の環原子を有し，１または２個の環原子はＮ，Ｏ，またはＳ（Ｏ）ｎ（ｎは０−２の整数である）から選択される複素原子であり，残りの環原子はＣである単環または縮合環基を表す。環はまた１またはそれ以上の二重結合を有していてもよい。しかし，環は，完全に共役したπ電子系を有しない。未置換複素環の例は，限定されないが，ピロリジノ，ピペリジノ，ピペラジノ，モルホリノ，チオモルホリノ，ホモピペラジノ等である。複素環は，置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ，メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）2−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ13Ｒ14（Ｒ13およびＲ14は上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１，２または３個，さらに好ましくは，１または２個の基である。
【００５８】
好ましくは，複素環基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。
【００５９】
好ましくは，複素環基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。
【００６０】
"ヒドロキシ"とは，−ＯＨ基を表す。
【００６１】
"アルコキシ"とは，−Ｏ−（未置換アルキル）および−Ｏ−（未置換シクロアルキル）基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，例えば，メトキシ，エトキシ，プロポキシ，ブトキシ，シクロプロピルオキシ，シクロブチルオキシ，シクロペンチルオキシ，シクロヘキシルオキシ等が含まれる。
【００６２】
"アリールオキシ"とは，本明細書において定義される−Ｏ−アリールおよび−Ｏ−ヘテロアリール基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，フェノキシ，ピリジニルオキシ，フラニルオキシ，チエニルオキシ，ピリミジニルオキシ，ピラジニルオキシ等，およびその誘導体が含まれる。
【００６３】
"メルカプト"とは，−ＳＨ基を表す。
【００６４】
"アルキルチオ"とは，−Ｓ−（未置換アルキル）および−Ｓ−（未置換シクロアルキル）基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，例えば，メチルチオ，エチルチオ，プロピルチオ，ブチルチオ，シクロプロピルチオ，シクロブチルチオ，シクロペンチルチオ，シクロヘキシルチオ等が含まれる。
【００６５】
"アリールチオ"とは，本明細書において定義される−Ｓ−アリールおよび−Ｓ−ヘテロアリール基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，フェニルチオ，ピリジニルチオ，フラニルチオ，チエニルチオ，ピリミジニルチオ等，およびその誘導体が含まれる。
【００６６】
"アシル"とは，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ"基（Ｒ"は，水素，未置換低級アルキル，トリハロメチル，未置換シクロアルキル；未置換低級アルキル，トリハロメチル，未置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ13Ｒ14基からなる群より選択される１またはそれ以上，好ましくは，１，２または３個の置換基で任意に置換されていてもよいアリール；未置換低級アルキル，トリハロアルキル，未置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ13Ｒ14基からなる群より選択される１またはそれ以上，好ましくは，１，２，または３個の置換基で任意に置換されていてもよいヘテロアリール（環炭素を介して結合）；および未置換低級アルキル，トリハロアルキル，未置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ13Ｒ14基からなる群より選択される１またはそれ以上，好ましくは，１，２，または３個の置換基で任意に置換されていてもよい複素環（環炭素を介して結合）からなる群より選択される）を表す。代表的なアシル基には，限定されないが，アセチル，トリフルオロアセチル，ベンゾイル等が含まれる。
【００６７】
"アルデヒド"とは，Ｒ"が水素であるアシル基を表す。
【００６８】
"チオアシル"とは，−Ｃ（Ｓ）−Ｒ"基を表し，Ｒ"は本明細書において定義されるとおりである。
【００６９】
"エステル"とは，−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ"基を表し，Ｒ"は本明細書において定義されるとおりであるが，ただし，Ｒ"は水素ではありえない。
【００７０】
"アセチル"基とは−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3基を表す。
【００７１】
"ハロ"基とは，フッ素，塩素，臭素またはヨウ素を表し，好ましくはフッ素または塩素を表す。
【００７２】
"トリハロメチル"基とは，−ＣＸ3基を表し，ここで，Ｘは，本明細書において定義されるハロ基である。
【００７３】
"メチレンジオキシ"とは，−ＯＣＨ2Ｏ−基を表し，ここで，２つの酸素原子は隣接する炭素原子と結合している。
【００７４】
"エチレンジオキシ"基とは，−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−を表し，ここで２つの酸素原子は隣接する炭素原子と結合している。
【００７５】
"Ｓ−スルホンアミド"とは，−Ｓ（Ｏ）2ＮＲ13Ｒ14基を表し，Ｒ13およびＲ14は本明細書において定義されるとおりである。
【００７６】
"Ｎ−スルホンアミド"とは，−ＮＲ13Ｓ（Ｏ）2Ｒ基を表し，Ｒ13およびＲは本明細書において定義されるとおりである。
【００７７】
"Ｏ−カルバミル"基とは，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14基を表し，Ｒ13およびＲ14は本明細書において定義されるとおりである。
【００７８】
"Ｎ−カルバミル"とは，ＲＯＣ（Ｏ）ＮＲ14−基を表し，ＲおよびＲ14は本明細書において定義されるとおりである。
【００７９】
"Ｏ−チオカルバミル"とは，−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ13Ｒ14基を表し，Ｒ13およびＲ14は本明細書において定義されるとおりである。
【００８０】
"Ｎ−チオカルバミル"とは，ＲＯＣ（Ｓ）ＮＲ14−基を表し，ＲおよびＲ14は本明細書において定義されるとおりである。
【００８１】
"アミノ"とは，Ｒ13およびＲ14が両方とも水素である−ＮＲ13Ｒ14を表す。
【００８２】
"Ｃ−アミド"とは，−Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14基を表し，Ｒ13およびＲ14は本明細書において定義されるとおりである。
【００８３】
"Ｎ−アミド"とは，ＲＣ（Ｏ）ＮＲ14−基を表し，ＲおよびＲ14は本明細書において定義されるとおりである。
【００８４】
"ニトロ"とは，−ＮＯ2基を表す。
【００８５】
"ハロアルキル"とは，１またはそれ以上の同じまたは異なるハロ原子で置換された上述した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味し，例えば，−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＦ3，−ＣＨ2ＣＦ3，−ＣＨ2ＣＣｌ3等である。
【００８６】
"アラルキル"とは，上で定義したアリール基で置換されている，上で定義した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味し，例えば，−ＣＨ2フェニル，−（ＣＨ2）2フェニル，−（ＣＨ2）3フェニル，ＣＨ3ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2フェニル等，およびその誘導体である。
【００８７】
"ヘテロアラルキル"基とは，ヘテロアリール基で置換されている，上で定義した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味し，例えば，−ＣＨ2ピリジニル，−（ＣＨ2）2ピリミジニル，−（ＣＨ2）3イミダゾリル等，およびその誘導体である。
【００８８】
"モノアルキルアミノ"とは，ラジカル−ＮＨＲ’（Ｒ’は上で定義した未置換アルキルまたは未置換シクロアルキル基である）を意味し，例えば，メチルアミノ，（１−メチルエチル）アミノ，シクロヘキシルアミノ等である。
【００８９】
"ジアルキルアミノ"とは，ラジカル−ＮＲ’Ｒ’（各Ｒ’は，独立して，上で定義した未置換アルキルまたは未置換シクロアルキル基である）を意味し，例えば，ジメチルアミノ，ジエチルアミノ，（１−メチルエチル）−エチルアミノ，シクロヘキシルメチルアミノ，シクロペンチルメチルアミノ等である。
【００９０】
"シアノアルキル"とは，１または２個のシアノ基で置換されている，上で定義した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味する。
【００９１】
"任意"または"任意に"とは，次に記載されている事象または状況が生じてもよいがその必要はなく，その記述がその事象または状況が生じる場合および生じない場合を含むことを意味する。例えば，"アルキル基で任意に置換されていてもよい複素環基"とは，アルキルが存在してもよいがその必要はなく，この記述が，複素基がアルキル基で置換されている状況および複素環基がアルキル基で置換されていない状況を含むことを意味する。
【００９２】
"医薬組成物"とは，本明細書に記載される１またはそれ以上の化合物またはその生理学的に／薬学的に許容しうる塩またはプロドラッグと，他の化学成分，例えば，生理学的に／薬学的に許容しうる担体および賦形剤との混合物を表す。医薬組成物の目的は，化合物の生物への投与を容易にすることである。
【００９３】
式（Ｉ）の化合物はまたプロドラッグとしても作用することができる。"プロドラッグ"とは，インビボで親薬剤に変換される薬剤を表す。プロドラッグは，場合により，親薬剤より投与が容易であるかもしれないため，しばしば有用である。例えば，プロドラッグは経口投与により生物学的に利用可能であるが，親薬剤はそうではない。プロドラッグはまた，親薬剤よりも医薬組成物中で改良された溶解性を有するかもしれない。プロドラッグの例は，限定されないが，エステル（"プロドラッグ"）として投与されて，水溶性であることが移動に不利である細胞膜の通過を容易にし，次に，水溶性であることが有利である細胞内に入った後，代謝的に加水分解されて活性種のカルボン酸となるような，本発明の化合物であろう。
【００９４】
プロドラッグのさらに別の例は，短いポリペプチド，例えば，限定されないが，末端アミノ基を介して本発明の化合物のカルボキシ基に結合した２−１０アミノ酸のポリペプチドであり，ポリペプチドはインビボで加水分解されるかまたは代謝されて活性分子を放出する。式（Ｉ）の化合物のプロドラッグは本発明の範囲内である。
【００９５】
さらに，式（Ｉ）の化合物が生物，例えばヒトの体内で酵素により代謝されて，代謝産物を生成し，これが蛋白質キナーゼの活性を調節しうることが企図される。そのような代謝産物は本発明の範囲内である。
【００９６】
本明細書において用いる場合，"生理学的に／薬学的に許容しうる担体"とは，生物に有意な刺激を引き起こさず，投与された化合物の生物学的活性および特性を排除しない担体または希釈剤を表す。
【００９７】
"薬学的に許容しうる賦形剤"とは，医薬組成物に添加して化合物の投与をさらに容易にする不活性物質を表す。賦形剤の例には，限定されないが，炭酸カルシウム，リン酸カルシウム，種々の糖および各種のデンプン，セルロース誘導体，ゼラチン，植物油およびポリエチレングリコールが含まれる。
【００９８】
本明細書において用いる場合，"薬学的に許容しうる塩"との用語は，親化合物の生物学的効力および特性を保持している塩を表す。そのような塩には，以下のものが含まれる：（ｉ）親化合物の遊離塩基を，例えば塩酸，臭化水素酸，硝酸，リン酸，硫酸，および過塩素酸等の無機酸と，または酢酸，シュウ酸，（Ｄ）または（Ｌ）リンゴ酸，マレイン酸，メタンスルホン酸，エタンスルホン酸，ｐ−トルエンスルホン酸，サリチル酸，酒石酸，クエン酸，コハク酸またはマロン酸等の有機酸と，好ましくは，塩酸または（Ｌ）−リンゴ酸と反応させることにより得られる酸付加塩，例えば，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノエチル）アミドのＬ−リンゴ酸塩；または（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが，金属イオン，例えば，アルカリ金属イオン，アルカリ土類イオンで置き換えられているか；または有機塩基，例えば，エタノールアミン，ジエタノールアミン，トリエタノールアミン，トロメタミン，Ｎ−メチルグルタミン等と配位している場合に形成される塩。
【００９９】
"方法"とは，所与の作業を遂行するための様式，手段，技術，および手順を表し，限定されないが，化学，薬理学，生物学，生化学，および医学的技術の従業者には周知の，あるいは該従業者によって既知の様式，手段，技術，および手順から容易に開発される様式，手段，技術，および手順を含む。
【０１００】
"インビボ"とは，生きている生物，例えば，限定されないが，マウス，ラットまたはウサギの中で行われる手順を表す。
【０１０１】
"治療する"，"治療すること"および"治療"とは，式（Ｉ）の化合物を追加の化学療法剤と組み合わせて投与することにより治療しうる癌を緩和または排除する方法を表す。"治療する"との用語は，単に，癌に罹患した個体の予測生存率が増加するか，または疾病の１またはそれ以上の症状が軽減することを意味する。
【０１０２】
"癌"とは，すべての形の癌，特に，結腸癌，小細胞肺癌および乳癌（そのすべての形を含む）を表す。
【０１０３】
"患者"とは，少なくとも１つの細胞から構成される任意の生きた物体を表す。生きた生物は，例えば，単一の真核生物細胞程度の単純なものであってもよく，またはヒト等の哺乳動物程度の複雑なものであってもよい。
【０１０４】
"治療上有効量"とは，治療される疾患の１またはそれ以上の症状をある程度予防，軽減，改善または緩和するであろう，投与される化合物（式Ｉおよび追加の化学療法剤）の量を表す。癌の治療に関しては，治療上有効量は，
（１）腫瘍の大きさを減少させる；
（２）腫瘍の転移を阻害する（すなわち速度をある程度減じる，好ましくは停止する）；
（３）腫瘍の成長をある程度阻害する（すなわち速度をある程度減じる，好ましくは停止する）；
（４）芽球数を減少させる；および／または
（５）癌に関連する１またはそれ以上の症状をある程度緩和する（または，好ましくは除去する）という効果を有する量を表す。
【０１０５】
増強された治療効果とは，いずれかの薬剤単独の効果を超える組み合わせの効果を表す。
【０１０６】
投与および医薬組成物
本発明の方法は，式Ｉの化合物またはその薬学的に許容しうる塩を追加の化学療法剤と組み合わせてヒト患者に投与することを含む。あるいは，追加の化学療法剤と組み合わせた式Ｉの化合物は，上述の物質が適当な担体または賦形剤と混合されている医薬組成物中で投与することができる。薬剤の処方および投与の手法は，"Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，"Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ．，の最新版に見いだすことができる。
【０１０７】
本明細書において用いる場合，"投与する"または"投与"とは，追加の化学療法剤と組み合わせた式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容しうる塩，または追加の化学療法剤と組み合わせた式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容しうる塩を含む本発明の医薬組成物を，癌の治療の目的で生物にデリバリーすることを表す。追加の化学療法剤に関しては，投与量および投与のモードは，当業者に理解され実施されている標準的なプロトコルを含む。
【０１０８】
適当な投与経路には，限定されないが，経口，直腸内，経粘膜，または腸内投与，または筋肉内，皮下，骨髄内，髄腔内，直接心室内，静脈内，硝子体内，腹腔内，鼻腔内，または眼内注射が含まれる。好ましい投与経路は経口および非経口である。
【０１０９】
あるいは，化合物は，全身的方法ではなく局所に，例えば化合物を固形腫瘍内に直接，しばしばデポ剤または持続放出処方中で注射することにより投与してもよい。
【０１１０】
さらに，薬物はターゲティングされたドラッグデリバリーシステムにおいて，例えば腫瘍特異的抗体により被覆されたリポソーム中で投与してもよい。リポソームは腫瘍にターゲティングされ，選択的に取り込まれるであろう。
【０１１１】
本発明の医薬組成物は，当該技術分野においてよく知られる方法，例えば，慣用の混合，溶解，顆粒化，糖衣作成，研和，乳化，カプセル封入，捕捉，または凍結乾燥により製造することができる。
【０１１２】
本発明にしたがって使用するための医薬組成物は，活性化合物を薬剤として使用することができる製剤に加工することを容易にする賦形剤および補助剤を含む，１またはそれ以上の生理学的に許容しうる担体を用いて，慣用の方法で処方することができる。適切な処方は，選択される投与経路に依存する。
【０１１３】
注射用には，本発明の化合物を水性溶液，好ましくはハンクス溶液，リンゲル溶液，または生理的食塩緩衝液等の生理学的に適合性の緩衝液中で処方することができる。経粘膜投与用には，浸透すべき障壁に適した浸透剤が処方に用いられる。そのような浸透剤は当該技術分野において一般に知られている。
【０１１４】
経口投与のためには，活性化合物を当該技術分野においてよく知られる薬学的に許容しうる担体と混合することにより化合物を処方することができる。そのような担体は，本発明の化合物を，治療すべき患者による経口摂取のための錠剤，丸薬，糖衣剤，カプセル，液体，ゲル，シロップ，スラリー，懸濁液等として処方することを可能とする。経口で使用するための医薬製剤は，固体賦形剤を用いて，得られた混合物を任意にすりつぶし，所望の場合には適当な助剤を加えた後に，顆粒の混合物を加工して，錠剤または糖衣錠コアを得ることができる。適当な賦形剤には，特に，ラクトース，ショ糖，マンニトール，またはソルビトール等の糖類；トウモロコシデンプン，小麦デンプン，米デンプン，およびジャガイモデンプン等のセルロース製品，ゼラチン，トラガカントゴム，メチルセルロース，ヒドロキシプロピルメチルセルロース，カルボキシメチルセルロースナトリウム，および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）等の増量剤などの賦形剤が含まれる。所望の場合には，架橋されたポリビニルピロリドン，寒天，またはアルギン酸等の崩壊剤を加えてもよい。アルギン酸ナトリウム等の塩を用いることもできる。
【０１１５】
糖衣剤のコアは，適当なコーティングとともに供給される。この目的のためには，濃縮された糖溶液を用いることができる。これは，アラビアゴム，タルク，ポリビニルピロリドン，カルボポールゲル，ポリエチレングリコール，および／または二酸化チタン，ラッカー溶液，および適当な有機溶媒または溶媒混合物を任意に含むことができる。識別のため，あるいは活性化合物の用量の異なる組合せを特徴づけるため，染料または色素を錠剤または糖衣剤コーティングに添加してもよい。
【０１１６】
経口で使用することができる医薬組成物は，ゼラチンから作成されるプッシュフィットカプセル，ならびにゼラチンおよびグリセロール，ソルビトール等の可塑剤から作成される密封軟カプセルを含む。プッシュフィットカプセルは，活性成分を，ラクトース等の増量剤，デンプン等の結合剤，および／またはタルクおよびステアリン酸マグネシウム等の潤滑剤，さらに任意に安定剤との混合物中に含むことができる。軟カプセルにおいては，活性化合物は脂肪油，流動パラフィン，または液体ポリエチレングリコール等の適当な液体中に溶解または懸濁することができる。これらの処方にはさらに安定剤を添加してもよい。
【０１１７】
用いることができる医薬組成物にはまた，硬ゼラチンカプセルが含まれる。非限定的例として，カプセル経口薬剤製品処方中の化合物１は，５０および２００ｍｇの用量強度であることができる。２つの用量強度は，同じ顆粒から，異なるサイズの硬ゼラチンカプセルに，すなわち，５０ｍｇカプセル用にはサイズ３に，２００ｍｇカプセル用にはサイズ０に充填することにより，製造する。組み合わせ療法のプロトコルの決定は担当の医師の通常の能力の範囲内であり，特定の疾病状態および患者の状態，および患者が受けている化学療法治療計画により決定される。
【０１１８】
カプセルは，褐色のガラスまたはプラスチック瓶中に包装して，活性化合物を光から保護することができる。活性化合物のカプセル処方を含む容器は調節された室温（１５−３０℃）で保存しなければならない。
【０１１９】
吸入による投与用には，本発明に従って用いられる化合物は，噴射剤，例えば，ジクロロジフルオロメタン，トリクロロフルオロメタン，ジクロロテトラフルオロエタン，二酸化炭素または他の適当な気体を用いて，加圧されたパックまたはネブライザーからエアーゾルスプレイの形状で便利に輸送される。加圧されたエアーゾルの場合，用量単位は計量された量を送達するべく備えられたバルブにより調節することができる。例えば吸入器または注入器において使用するためのゼラチン製のカプセルおよびカートリッジは，化合物の粉末混合物と，ラクトースまたはデンプン等の適当な粉末基剤とを含むよう処方することができる。
【０１２０】
化合物は，例えばボーラス注射または連続注入による非経口投与用に処方することもできる。注射用の処方は，単位用量にて，例えばアンプルにて，あるいは添加された保存料と共に多用量容器中で提供することができる。組成物は油性または水性のベヒクル中で，懸濁液，溶液，または乳濁液等の形状をとることができ，懸濁剤，安定剤および／または分散剤等の製剤物質を含んでいてもよい。
【０１２１】
非経口投与用の薬剤処方は，水溶性の形態の活性化合物の水性溶液を含む。さらに，活性化合物の懸濁液は，親油性ベヒクル中に製造することができる。適切な親油性ベヒクルには，ゴマ油等の脂肪油，オレイン酸エチルまたはトリグリセリド等の合成脂肪酸エステル，またはリポソーム等を含む。水性の注射用懸濁液は，カルボキシメチルセルロースナトリウム，ソルビトール，またはデキストラン等の，懸濁液の粘度を増加させる物質を含んでいてもよい。任意に，懸濁液はまた，高度に濃縮された溶液の調製を可能にする，当該化合物の溶解性を増加させる適当な安定剤および／または薬剤を含んでいてもよい。
【０１２２】
あるいは，活性成分は粉体の形態であって，使用前に適当なベヒクル，例えば発熱物質を含まない滅菌水を用いて構成することができる。
【０１２３】
化合物はまた，例えばカカオバターまたは他のグリセリド等の慣用の坐剤基剤を用いて，坐剤または停留浣腸等の直腸用組成物に処方することができる。
【０１２４】
上述した処方に加えて，化合物はまたデポ製剤として処方することができる。そのような長時間作用性の処方は，埋込み（例えば皮下または筋肉内への）によるか，または筋肉内注射により投与することができる。本発明の化合物は，この投与経路用に，適当な高分子性または疎水性物質と共に（例えば許容される油剤中の乳濁液として），イオン交換樹脂と共に，溶けにくい塩等の溶けにくい誘導体として，処方することができる。
【０１２５】
本発明の疎水性化合物のための薬学的担体の非限定的例は，ベンジルアルコール，非極性界面活性剤，水混和性有機ポリマーおよび水性相を含む共溶媒系，例えばＶＰＤ共溶媒系である。ＶＰＤは，３％（ｗ／ｖ）ベンジルアルコール，８％（ｗ／ｖ）非極性界面活性剤ポリソルベート８０，および６５％（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコール３００を純粋エタノール中に作成した溶液である。ＶＰＤ共溶媒系（ＶＰＤ：Ｄ５Ｗ）は，ＶＰＤを５％デキストロースの水溶液中に１：１で希釈したものである。この共溶媒系は疎水性化合物をよく溶解し，それ自体，全身投与に際して低い毒性を示す。本来，そのような共溶媒系の比率は，その溶解性および毒性特性を破壊することなく相当変化させることができる。さらに，共溶媒成分の種類も変化させることができる。例えば，他の低毒性非極性界面活性剤をポリソルベート８０の代わりに用いることができ，ポリエチレングリコールの分画サイズは様々でありうる。他の生体適合性ポリマー，例えばポリビニルピロリドンをポリエチレングリコールの代わりに用いることができ，他の糖または多糖類をデキストロースの代わりに用いることができる。
【０１２６】
あるいは，疎水性の医薬化合物のための他のデリバリー系を用いてもよい。リポソームおよび乳剤は，疎水的薬剤のためのデリバリー用ベヒクルまたは担体の例としてよく知られている。さらに，ある種の有機溶媒，例えばジメチルスルホキシドもまた用いることができるが，しばしば毒性がより高くなる。
【０１２７】
さらに，化合物は，持続放出系，例えば治療薬剤を含む固体疎水性ポリマーの準透過性マトリックスを用いてデリバリーすることができる。種々の持続放出材料が確立されており，当業者にはよく知られている。持続放出カプセルはその化学的性質に応じて，数週間から１００日を越える期間，化合物を放出する。治療薬剤の化学的性質および生物学的安定性に応じて，さらに別の蛋白質安定化戦略を用いてもよい。
【０１２８】
本明細書に記載される医薬組成物は，適当な固体またはゲル相の担体または賦形剤を含んでいてもよい。そのような担体または賦形剤の例には，限定されないが，炭酸カルシウム，リン酸カルシウム，種々の糖，デンプン，セルロース誘導体，ゼラチン，およびポリエチレングリコールなどのポリマーが含まれる。
【０１２９】
式Ｉの化合物の多くは，化合物が負にまたは正に荷電した種を形成する，生理学的に許容しうる塩として提供することができる。化合物が正に荷電した成分を形成する塩の例には，限定されないが，四級アンモニウム，四級アンモニウム基の窒素原子が適切な酸と反応させた本発明の選択された化合物の窒素である塩，例えば，塩酸，硫酸，炭酸，乳酸，酒石酸，リンゴ酸，マレイン酸，コハク酸の塩が含まれる。本発明の化合物が負に荷電した種を形成している塩には，限定されないが，化合物中のカルボン酸基を適当な塩基（例えば水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ），水酸化カリウム（ＫＯＨ），水酸化カルシウム（Ｃａ（ＯＨ）2）等）と反応させることにより形成されるナトリウム，カリウム，カルシウムおよびマグネシウム塩が含まれる。
【０１３０】
本発明において使用するのに適した医薬組成物には，活性成分がその意図される目的，例えば，癌患者の治療を達成するのに有効な量で含まれている組成物が含まれる。
【０１３１】
より詳細には，"治療上有効量"とは，癌の症状を予防，緩和または改善するのに，または治療している被験者の生存を長くするのに有効な化合物の量を意味する。
【０１３２】
治療上有効量の決定は，特に本明細書に提供される詳細な開示に鑑みて，十分に当業者の能力の範囲内である。
【０１３３】
本発明の方法において用いられる任意の化合物について，治療上有効な量または用量は，最初は細胞培養アッセイから見積もることができる。次に，動物モデルにおいて，培養細胞において決定されたＩＣ50（すなわち標的レセプターチロシンキナーゼのリン酸化の最大阻害の半分を達成する試験化合物の濃度）を含む循環濃度範囲を達成するような用量を処方することができる。次にそのような情報を用いてヒトにおける有用な用量をさらに正確に決定することができる。
【０１３４】
本明細書に記載される化合物の毒性および治療有効性は，培養細胞または実験動物における標準的な薬理学的方法により，例えば対象化合物についてＩＣ50およびＬＤ50（ＬＤ50とは，被検化合物について，死亡率の最大阻害の半分を達成する試験化合物の濃度である）を決定することにより，決定することができる。これらの培養細胞アッセイおよび動物研究から得られるデータは，ヒトにおいて用いるためのある範囲の投与量を処方するために用いることができる。投与量は，用いる投与形態および用いる投与経路により様々でありうる。正確な処方，投与経路，および投与量は，個々の医師が，患者の状態を考慮して選択することができる（例えば，Ｆｉｎｇｌ  ｅｔ  ａｌ．１９７５，"Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ"，Ｃｈ．１，ｐ．１を参照）。
【０１３５】
投与量および間隔は，個々に，活性成分がキナーゼ調節効果を維持するのに十分な血漿レベルを与えるよう調節することができる。このような血漿レベルは最小有効濃度（ＭＥＣ）と称される。ＭＥＣは，各化合物について異なるが，インビトロのデータ，例えば，本明細書に記載されるアッセイを用いて，キナーゼの５０−９０％の阻害を達成するのに必要な濃度から見積もることができる。ＭＥＣを達成するのに必要な投与量は，個々の特性および投与経路に依存するであろう。しかし，血漿濃度はＨＰＬＣアッセイまたはバイオアッセイを用いて決定することができる。
【０１３６】
投与間隔もまた，ＭＥＣ値を用いて決定することができる。化合物は，１０−９０％の時間，好ましくは３０−９０％の時間，最も好ましくは５０−９０％の時間，ＭＥＣより高い血漿レベルを維持する投与計画を用いて投与すべきである。
【０１３７】
現在のところ，式（Ｉ）の化合物の治療上有効量は，１日あたり約２５ｍｇ／ｍ2−１５００ｍｇ／ｍ2の範囲内であり，好ましくは約３ｍｇ／ｍ2／ｄａｙである。さらにより好ましくは５０ｍｇ／ｑｍｑｄから４００ｍｇ／ｑｄである。治療上有効量の追加の化学療法剤は製造元の推奨にしたがって患者に投与される。しかし，２つの薬剤の組み合わせは，投与すべき追加の化学療法剤のより低い投与量を可能とするであろう。
【０１３８】
局所投与または選択的取り込みの場合には，薬剤の有効な局所濃度は血漿濃度とは関係ないであろう。当該技術分野において知られる他の方法を用いて，正確な投与量および間隔を決定することができる。
【０１３９】
投与される組成物の量は，もちろん，治療中の患者，苦痛の激しさ，投与方法，および担当医師の判断に依存するであろう。
【０１４０】
本発明の方法は，他の抗癌療法，骨髄移植およびホルモン療法と組み合わせて用いることができることが企図される。
【０１４１】
最後に，本発明の組み合わせは，抗血管新生剤，例えば，限定されないが，セレコキシブ等のシクロオキシゲナーゼ阻害剤とさらに組み合わせることができる。
【０１４２】
一般的合成方法
以下の一般的方法論を用いて本発明の化合物を製造することができる。
適切に置換された２−オキシインドール（１当量），適切に置換されたアルデヒド（１．２当量）および塩基（０．１当量）を溶媒（１−２ｍｌ／ｍｍｏｌ２−オキシインドール）中で混合し，次に混合物を約２から約１２時間加熱する。冷却した後，形成する沈澱物を濾過し，冷エタノールまたはエーテルで洗浄し，真空乾燥して，固体生成物を得る。沈澱物が形成しない場合には，反応混合物を濃縮し，残渣をジクロロメタン／エーテル中で砕き，得られる固体を濾過により回収し，次に乾燥する。生成物は任意にクロマトグラフィーによりさらに精製してもよい。
【０１４３】
塩基は有機塩基でも無機塩基でもよい。有機塩基を用いる場合には，好ましくはこれは窒素塩基である。有機窒素塩基の例には，限定されないが，ジイソプロピルアミン，トリメチルアミン，トリエチルアミン，アニリン，ピリジン，１，８−ジアザビシクロ［５．４．１］ウンデセ−７−エン，ピロリジンおよびピペリジンが含まれる。
【０１４４】
無機塩基の例としては，限定されないが，アンモニア，アルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物，リン酸塩，炭酸塩，重炭酸塩，酢酸塩，重硫酸塩およびアミドが挙げられる。アルカリ金属には，リチウム，ナトリウムおよびカリウムが含まれ，アルカリ土類金属にはカルシウム，マグネシウムおよびバリウムが含まれる。
【０１４５】
本発明の現在好ましい態様においては，溶媒がプロトン性溶媒，例えば水またはアルコールであるとき，塩基はアルカリ金属またはアルカリ土類の無機塩基，好ましくは，アルカリ金属またはアルカリ土類の水酸化物である。
【０１４６】
当業者には，有機合成の既知の一般原則と本明細書の記載の両方に基づいて，意図される反応にはいずれの塩基が最も適当であるかが明らかであろう。
【０１４７】
反応を実施する溶媒は，プロトン性溶媒であっても非プロトン性溶媒であってもよい。好ましくは，プロトン性溶媒である。"プロトン性溶媒"は，酸素または窒素原子に共有結合した水素原子を有する溶媒であり，これは水素原子をかなり酸性にし，このため水素結合を介して溶質と"共有"されることができる。プロトン性溶媒の例としては，限定されないが，水およびアルコールが挙げられる。
【０１４８】
"非プロトン性溶媒"は，極性であっても非極性であってもよいが，いずれの場合も，酸性水素を含まず，したがって，溶質と水素結合を形成することができない。非極性非プロトン性溶媒の例としては，限定されないが，ペンタン，ヘキサン，ベンゼン，トルエン，塩化メチレンおよび四塩化炭素が挙げられる。極性非プロトン性溶媒の例は，クロロホルム，テトラヒドロフラン，ジメチルスルホキシドおよびジメチルホルムアミドである。
【０１４９】
本発明の現在好ましい態様においては，溶媒はプロトン性溶媒，好ましくは，水またはエタノール等のアルコールである。
【０１５０】
反応は，室温より高い温度で行う。温度は一般に約３０℃−約１５０℃，好ましくは，約８０℃−約１００℃，最も好ましくは約７５℃−約８５℃であり，これはおよそエタノールの沸点である。"約"とは，温度範囲が，好ましくは示される温度の１０℃以内，より好ましくは示される温度の５℃以内，最も好ましくは示される温度の２℃以内であることを意味する。すなわち，例えば，"約７５℃"とは，７５℃±１０℃，好ましくは７５℃±５℃，最も好ましくは７５℃±２℃である。
【０１５１】
２−オキシインドールおよびアルデヒドは，化学の技術分野においてよく知られる手法を用いて容易に合成することができる。当業者には，本発明の化合物を形成するための他の合成経路が利用可能であり，以下の記載は例示のためにのみ提供されるものであって限定ではないことが理解されるであろう。
【０１５２】
本発明の化合物は，以下の方法論にしたがって，および，例えば，米国特許６，５７３，２９３，ＷＯ０１／６０８１４，ＷＯ００／０８２０２，米国特許公開２００３／００６９２９８，ＷＯ０３／０１６３０５，米国特許出願１０／３６７，００８（２００３年２月１４日出願），米国特許６，６４２，２３２，および米国特許出願１０／０７６，１４０（２００２年２月１５日出願）に記載されるように製造することができる（これらはすべて本明細書の一部としてここに引用する）。
【０１５３】
好ましい処方は，米国特許出願１０／６５８，８０１（９月１０日出願２００３年，この開示を本明細書の一部としてここに引用する）に記載されている。
【０１５４】
合成の方法論
方法Ａ：ピロールのホルミル化
ＰＯＣｌ3（１．１当量）を−１０℃でジメチルホルムアミド（３当量）に滴加し，次にジメチルホルムアミドに溶解した適当なピロールを加える。２時間撹拌した後，反応混合物をＨ2Ｏで希釈し，１０ＮＫＯＨでｐＨ１１に塩基性にする。形成した沈殿物を濾過により回収し，Ｈ2Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，所望のアルデヒドを得る。
【０１５５】
方法Ｂ：ピロールカルボン酸エステルのサポニン化
ＥｔＯＨ中のピロールカルボン酸エステルおよびＫＯＨ（２−４当量）の混合物を，薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により反応の完了が示されるまで還流する。冷却した反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ３に酸性にする。形成した沈殿物を濾過により回収し，Ｈ2Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，所望のピロールカルボン酸を得る。
【０１５６】
方法Ｃ：アミド化
ジメチルホルムアミド中に溶解したピロールカルボン酸（０．３Ｍ）の撹拌溶液に，１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）カルボジイミド（１．２当量），１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２当量），およびトリエチルアミン（２当量）を加える。適当なアミンを加え（１当量），反応液をＴＬＣにより完了が示されるまで撹拌する。次に酢酸エチルを反応混合物に加え，溶液を飽和ＮａＨＣＯ3およびブライン（過剰の塩を含む）で洗浄し，無水ＭｇＳＯ4で乾燥し，濃縮して，所望のアミドを得る。
【０１５７】
方法Ｄ：アルデヒドとカルボン酸置換基を含むオキシインドールとの縮合
エタノール中のオキシインドール（１当量），１当量のアルデヒドおよび１−３当量のピペリジン（またはピロリジン）の混合物（０．４Ｍ）を９０−１００℃でＴＬＣにより反応の完了が示されるまで撹拌する。次に混合物を濃縮し，残渣を２ＮＨＣｌで酸性にする。形成した沈殿物をＨ2ＯおよびＥｔＯＨで洗浄し，次に真空オーブン中で乾燥して，生成物を得る。
【０１５８】
方法Ｅ：アルデヒドとカルボン酸置換基を含まないオキシインドールとの縮合
エタノール中のオキシインドール（１当量），１当量のアルデヒドおよび１−３当量のピペリジン（またはピロリジン）の混合物（０．４Ｍ）を９０−１００℃でＴＬＣにより反応の完了が示されるまで撹拌する。混合物を室温に冷却し，形成した固体を真空濾過により回収し，エタノールで洗浄し，乾燥して，生成物を得る。反応混合物を冷却したときに沈殿物が形成されない場合には，混合物を濃縮して，カラムクロマトグラフィーにより精製する。
【実施例】
【０１５９】
以下の実施例は本発明を例示するために与えられる。しかし，本発明はこれらの実施例に記載される特定の条件または詳細に限定されるものではないことが理解されるべきである。明細書の全体を通して，公に入手可能な文献へのいずれかのおよびすべての参照は，本明細書の一部として明確に引用される。
【０１６０】
合成実施例
実施例１
（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（化合物９）の合成
【化１３】
2006508981.tif 000009
【０１６１】
工程１
５０℃に加熱した４−アミノ−１−ベンジルピペリジン（Ａｌｄｒｉｃｈ，１．５３ｍＬ，７．５ｍｍｏｌ），Ｋ2ＣＯ3（２．２８ｇ，１６．５ｍｍｏｌ），およびＤＭＦ（１５ｍＬ）の撹拌混合物に，６０分間かけてビス（２−ブロモエチル）エーテル（Ａｌｄｒｉｃｈ，ｔｅｃｈ．９０％，０．９６２ｍＬ，７．６５ｍｍｏｌ）を滴加した。８０℃で６時間撹拌した後，ＴＬＣ（９０：１０：１クロロホルム／ＭｅＯＨ／ａｑ．濃ＮＨ4ＯＨ）は新たなスポットの形成を示した。窒素流を吹き込むことにより溶媒を蒸発させながら２時間加熱を続けた。粗物質は比較的純粋であったが，比較的短いシリカゲルカラム（１％−６％の勾配，９：１ＭｅＯＨ／ａｑ．ＮＨ4ＯＨ／クロロホルム）に供した。純粋な画分を蒸発させて，約１．７ｇのジアミン４−（モルホリン−４−イル）−１−ベンジルピペリジンをワックス状固体として得た。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ6−ＤＭＳＯ）δ７．３１（ｍ，４Ｈ），７．２６（ｍ１Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，４Ｈ），３．４９（ｓ，２Ｈ），２．９４（ｂｒｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．５４（ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，４Ｈ），２．１９（ｔｔ，Ｊ＝１１．５，３．９Ｈｚ，１Ｈ），１．９６（ｔｄ，Ｊ＝１１．７，２．２Ｈｚ，２Ｈ），１．７８（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ）
【０１６２】
工程２
Ｐｄ（ＯＨ）2（２０％，炭素上（＜５０％湿潤），３９０ｍｇ，２５ｗｔ％），メタノール（５０ｍＬ），および１．７Ｍ以下のＨＣｌ（３当量，約１０．６ｍＬ，後に沈殿が認められたときに加えた水を含む）の撹拌混合物を，窒素風船を容器内に入れ，オイルバブラーを通して出すことによりフラッシング（約２０秒間）して，窒素下で１ａｔｍの水素雰囲気に交換した。２０分後，水素下の反応混合物を５０℃に加熱し，メタノール（８ｍＬ）中の４−（モルホリン−４−イル）−１−ベンジルピペリジン（１．５６ｇ，６．０ｍｍｏｌ）を３０分間かけて滴加した。１０時間後，ｔｌｃは，すべての出発アミンが消費されてより極性の高いスポット（ニンヒドリン活性）となったことを示した。次に，反応混合物をセライトを通して濾過し，蒸発させて，４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン二塩酸塩を灰白色固体として得た。この物質を過剰の塩基性樹脂（＞１６ｇ，Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＡＧ１−Ｘ８，２０−５０メッシュ，水酸化物型，２回メタノール洗浄）およびアミン塩酸塩のメタノール混合物を用いて遊離塩基とした。樹脂とともに３０分間渦巻回転させた後，メタノール溶液をデカントし，蒸発させて，９３２ｍｇの４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン遊離塩基をワックス状結晶固体として得た。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ6−ＤＭＳＯ）δ３．５３（ｂｒｓ，４Ｈ），３．３０（ｖｂｒｓ，１Ｈ（＋Ｈ2Ｏ）），２．９２（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），２．４１（ｓ，４Ｈ），２．３５（〜ｏｂｓｃｄ  ｔ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），２．１２（ｂｒｔ，１Ｈ），１．６５（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），１．１８（ｂｒｑ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ−ＡＰＣＩｍ／ｚ１７１［Ｍ＋１］+
【０１６３】
工程３
（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（１２０ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）（国際公開０１／６０８１４に記載されるようにして製造），ＢＯＰ（２２１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を室温でＤＭＦ（５ｍＬ）によく撹拌しながら懸濁し，トリエチルアミン（１３４μＬ，０．９６ｍｍｏｌ）を加えた。１０−１５分後，均一な反応混合物に４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン（８５ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応混合物を４８時間撹拌し（はるかに早く行ってもよい），次にクロロホルム−イソプロパノール（５／１）および５％水性ＬｉＣｌを含む漏斗に移した。濁った橙色の有機相を分離し，追加の５％水性ＬｉＣｌ（２Ｘ），１Ｍ水性ＮａＯＨ（３Ｘ），飽和水性ＮａＣｌ（１Ｘ）で洗浄し，次に乾燥し（Ｎａ2ＳＯ4），蒸発させて，粗生成物（９６．３％の純度；1ＨＮＭＲにより痕跡量のＨＭＰＡ）を得た。次にこの粗生成物を，シリカゲル（ＭｅＯＨ／ＤＣＭの５−１５％勾配）の非常に短いカラム（３ｃｍ）を通すことにより精製して，より早く移動する痕跡量の３Ｅ−異性体を除去した。純粋な画分を蒸発させ，飽和ＥｔＯＡｃ溶液から一晩再結晶させ，これをＥｔ2Ｏ（約３倍）で希釈し，０℃に冷却した。母液をデカントして，完全真空とした後に，所望の化合物を橙色結晶として得た（１５３ｍｇ，８５％）。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ6−ＤＭＳＯ）δ１３．６０（ｓ，１Ｈ），１０．８７（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｄｄ，Ｊ＝９．４，２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｓ，１Ｈ），６．９１（ｔｄ，Ｊ＝９．３，２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．６，４．７Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ａｐｐ  ｂｒ  ｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．３１（２ｘｓ，３Ｈ＋３Ｈ），２．４３（ｂｒｓ，４Ｈ），２．３６（ｍ，１Ｈ），２．２５（ｂｒｍ，６Ｈ），１．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２２（ｂｒｓ，２Ｈ）；ＬＣＭＳｍ／ｚ４５３［Ｍ＋１］+
【０１６４】
上述の実施例１に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ6−ＤＭＳＯ）δ１３．５５（ｓ，１Ｈ），１０．８７（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｓ，１Ｈ），７．１１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ａｐｐｂｒｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．３１（２ｘｓ，３Ｈ＋３Ｈ），２．４３（ｂｒｓ，４Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），２．２８（ｂｒｍ，６Ｈ），１．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２２（ｂｒｓ，２Ｈ）；ＬＣＭＳｍ／ｚ４３５［Ｍ＋１］+
【０１６５】
上述の実施例１に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ6−ＤＭＳＯ）δ３．５６（ｓ，１Ｈ），１０．９７（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．１１（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ａｐｐ  ｂｒ  ｔ，Ｊ＝〜４Ｈｚ，４Ｈ），３．３１（２ｘｓ，３Ｈ＋３Ｈ），２．４３（ｂｒｓ，４Ｈ），２．３７（ｍ，１Ｈ），２．２５（ｂｒｍ，６Ｈ），１．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２３（ｂｒｓ，２Ｈ）；ＬＣＭＳｍ／ｚ４７０［Ｍ＋１］+
【０１６６】
上述の実施例１に記載されるようにして，ただし，４−（モルホリン−４−イル）−ピペリジンの代わりに市販の４−（１−ピロリジニル）−ピペリジンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−［４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イル）メチリデン］−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ  Ｅ／Ｚ異性体混合物；ＬＣＭＳｍ／ｚ４３７［Ｍ＋１］+
上述の合成は，米国特許公開２００３／０１３０２８０（その全体を本明細書の一部としてここに引用する）の方法にしたがって行うことができる。
【０１６７】
実施例２
（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの合成
工程１
１−アザビシクロ［１．１．０］ブタン（２，３−ジブロモプロピルアミンヒドロブロミド（５８．８ｍｍｏｌ）からＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ４０（１９９９）３７６１−６４に記載される既知の方法にしたがって製造）の溶液を，無水無変性エタノール（２５０ｍｌ）中のモルホリン（１５．７ｍｌ；１８０ｍｍｏｌ）および硫酸（３．３ｇ，９６％溶液）の溶液に０℃でゆっくり加えた。反応混合物を氷浴上で３０分間，次に室温で８時間撹拌した。水酸化カルシウム（５．５ｇ）および１００ｍｌの水を加え，得られたスラリーを１時間撹拌し，次にセライトのパッドを通して濾過した。濾液を濃縮し，減圧下で（２０ｍｍＨｇ）蒸留して水および過剰のモルホリンを除去した。蒸留残渣をクーゲロー装置を用いて高真空下で再蒸留して，純粋な４−（アゼチジン−３−イル）モルホリンを３３％の収率（２．７５９ｇ）で無色油状液体として得た。
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，１００ＭＨｚ）：６６．７１（２Ｃ），５９．３７（１Ｃ），５１．４６（２Ｃ），４９．９５（２Ｃ）1Ｈ（ＣＤＣｌ3，４００ＭＨｚ）：３．７２７（ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，４Ｈ），３．６１９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），３．５６６（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），３．２２７（ｍ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），２．８９５（ｂｒｓ，１Ｈ），２．３２９（ｂｒｓ，４Ｈ）
【０１６８】
工程２
（３Ｚ）−３−（｛３，５−ジメチル−４−カルボキシ］１−Ｈ−ピロール−２−イル｝メチレン）−５−フルオロ−１．３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（０．５ｍｍｏｌ，２１０ｍｇ）の１−（８−アザベンゾトリアゾリル）−エステル［（３Ｚ）−３−（３，３−ジメチル−４−カルボキシ−１−Ｈ−ピロール−２−イルメチレン）−５−フルオロ−１．３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（４８０ｍｇ；１．６ｍｍｏｌ）を，ＤＭＦ（５ｍｌ）でヒューニッヒ塩基（３．０ｍｍｏｌ，０．５２５ｍｌ）の存在下でＨＡＴＵ試薬（５７０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）で活性化させ，クロロホルム（５ｍｌ）で沈殿させ，高真空下で乾燥することにより９２％の収率で（５７９ｍｇ）製造した］を無水ＤＭＡ（１．０ｍｌ）に懸濁した。無水ＤＭＡ（１．０ｍｌ）中の４−（アゼチジン−３−イル）−モルホリン（１４２．５ｍｇ，１ｍｍｏｌ）の溶液を一度に加え，得られた溶液を室温で２０分間撹拌した。反応混合物を室温でオイルポンプを用いて蒸発させ，粘稠な残渣を６ｍｌのメタノールとジエチルアミンとの混合物（２０：１；ｖ／ｖ）で希釈し，機械的に接種し，冷蔵庫（＋３℃）に８時間放置した。沈殿物を濾過し（氷冷メタノールで軽く洗浄），高真空下で乾燥して，所望の生成物を得た。７１．５％収率（１５２ｍｇの橙色固体）。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４２５；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４２３，19Ｆ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ，３７６．５ＭＨｚ）：−１２２．９４（ｍ，１Ｆ），1Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６５１（ｓ，１Ｈ），１０．９０７（ｓ，１Ｈ），７．７５４（ｄｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７００（ｓ，１Ｈ），６．９３５（ｄｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８４１（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｊ＝３．９Ｈｚ；１Ｈ），３．９６３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５８１（ｂｒｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．１３３（ｍ，１Ｈ），２．３６７（ｓ，３Ｈ），２．３４０（ｓ，３Ｈ），２．２９５（ｂｒｓ，４Ｈ）
【０１６９】
上述の実施例２に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを用いて（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを橙色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４４１；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４４０，４４１，1Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６０７（ｓ，１Ｈ），１１．００６（ｓ，１Ｈ），７．９７６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５６（ｓ，１Ｈ），７．１３６（ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８６９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９６４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５８２（ｂｒｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．１３４（ｍ，１Ｈ），２．３６９（ｓ，３Ｈ），２．３４７（ｓ，３Ｈ），２．２９６（ｂｒｓ，４Ｈ）
【０１７０】
上述の実施例２に記載されるようにして，ただし，４−（アゼチジン−３−イル）モルホリンの代わりに４−（アゼチジン−３−イル）−ｃｉｓ−３，５−ジメチルモルホリン［４−（アゼチジン−３−イル）−モルホリンの製造と同様の方法で，ただしモルホリンの代わりに）ｃｉｓ−３，５−ジメチルモルホリン（２０．７ｇ；１８０ｍｍｏｌ）を用いて製造した］を用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（２，５−ジメチルモルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを橙色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４５３；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４５１，19Ｆ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ，３７６．５ＭＨｚ）：−１２２．９４（ｍ，１Ｆ）1Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６５１（ｓ，１Ｈ），１０．９０７（ｓ；１Ｈ），７．７５８（ｄｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，Ｊ＝２．３Ｈｚ；１Ｈ），７．７００（ｓ，１Ｈ），６．９３５（ｄｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），６．８４２（ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），３．９６１（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９０（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５４６（ｂｒｍ，２Ｈ），３．０９２（ｍ，１Ｈ），２．６９０（ｂｒｓ；２Ｈ），２．３６４（ｓ，３Ｈ），２．３３８（ｓ，３Ｈ），１．４９２（ｂｒｍ，２Ｈ），１．０３８（ｂｒｓ，６Ｈ）
【０１７１】
上述の実施例２に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを，４−（アゼチジン−３−イル）モルホリンの代わりに４−（アゼチジン−３−イル）−ｃｉｓ−３，５−ジメチルモルホリンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（３，５−ジメチルモルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを橙色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４６９，４７０；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４６８，４６９，1Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６０６（ｓ，１Ｈ），１１．００８（ｓ，１Ｈ），７．９７９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５８（ｓ，１Ｈ），７．１３８（ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８７０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９６４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９０（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５４７（ｂｒｍ，２Ｈ），３．０９５（ｍ，１Ｈ），２．６９１（ｂｒｓ，２Ｈ），２．３６６（ｓ，３Ｈ），２．３４５（ｓ，３Ｈ），１．４９４（ｂｒｍ，２Ｈ），１．０３９（ｂｒｓ，６Ｈ）
【０１７２】
上述の実施例１に記載されるようにして，ただし４−（モルホリン−４−イル）−ピペリジンの代わりに，以下に記載されるようにして製造した２−（Ｒ）−ピロリジン−１−イルメチルピロリジンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−２Ｒ−（ピロリジン−１−イルメチル）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
【０１７３】
２（Ｒ）−ピロリジン−１−イルメチルピロリジンの合成
工程１
ＤＭＦ（２０ｍｌ）中の（＋）−カルボベンジルオキシ−Ｄ−プロリン（１．５ｇ，６．０ｍｍｏｌ），ＥＤＣ（２．３ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８００ｍｇ，１２．９ｍｍｏｌ）の溶液に，トリエチルアミン（１．５ｍｌ）およびピロリジン（１．０ｍｌ，１２．０ｍｍｏｌ）を加えた。これを室温で１８時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ3を加え，ＣＨ２ＣＬ２（３回）で抽出した。有機層を分離し，Ｎａ2ＳＯ4で乾燥した。溶媒を除去し，残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）で精製して，１−（Ｒ）−［Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−ピロリル］ピロリジンを白色固体として得た（９４％）。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3，すべての回転異性体）δ１．５７−１．６６（ｍ，１Ｈ），１．７１−２．０２（ｍ，５Ｈ），２．０４−２．１９（ｍ，２Ｈ），３．２６−３．４３（ｍ，３Ｈ），３．４４−３．７８（ｍ，３Ｈ），４．４１（ｄｄ，Ｊ＝４．５，７．６Ｈｚ，０．５Ｈ），４．５２（ｄｄ，Ｊ＝３．７，７．６Ｈｚ，０．５Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，０．５Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，０．５Ｈ），５．１３（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，０．５Ｈ），５．２０（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，０．５Ｈ），７．２７−７．３８（ｍ，５Ｈ）
【０１７４】
工程２
メタノール（１５ｍｌ）中の１−（Ｒ）−［Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）プロリル］ピロリジン（２．７ｇ，８．９ｍｍｏｌ）および５％Ｐｄ−Ｃ触媒（２７０ｍｇ）の混合物を水素雰囲気下で２０時間撹拌した。反応混合物をセライトを通して濾過し，溶媒を除去して，２（Ｒ）−プロリルピロリジンを粘稠な油状物として得て（８０％），これをさらに精製することなく次の工程で用いた。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ6−ＤＭＳＯ）δ１．５２−１．７８（ｍ，５Ｈ），１．８２−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．０４（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．７１（ｍ，１Ｈ），２．９７−３．０２（ｍ，１Ｈ），３．２２−３．３５（ｍ，３Ｈ），３．４８−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．７２（ｄｄ，Ｊ＝６．１，８．０Ｈｚ，１Ｈ）
【０１７５】
工程３
２−（Ｒ）−プロリルピロリジン（１．２ｇ，７．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解した。反応混合物を０℃に冷却し，ＢＨ3（１Ｍ，ＴＨＦ中（１０ｍｌ，１０ｍｍｏｌ））を０℃で滴加した。反応混合物を１６時間還流し，３ＭＨＣｌ（４．７ｍｌ）。ｐＨ１０となるまで２ＭＮａＯＨ溶液を加えた。生成物を５％ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（３回）で抽出した。有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥し，溶媒を除去して，標題化合物をわずかに黄色の液体（７３％）として得，これをさらに精製することなく次の工程で用いた。
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ6−ＤＭＳＯ）δ１．２２−１．３０（ｍ，１Ｈ），１．５５−１．６９（ｍ，６Ｈ），１．７１−１．７９（ｍ，１Ｈ），２．２６−２．３０（ｍ，１Ｈ），２．３３−２．３８（ｍ，１Ｈ），２．４０−２．４５（ｍ，４Ｈ），２．６５−２．７１（ｍ，１Ｈ），２．７８−２．８４（ｍ，１Ｈ），３．０２−３．０９（ｍ，１Ｈ）
【０１７６】
上述の実施例１と同様にして，ただし４−（モルホリン−４−イル）−ピペリジンの代わりに２−（Ｓ）−ピロリジン−１−イルメチルピロリジン（上述のように，ただし，（＋）−カルボベンジルオキシ−Ｄ−プロリンの代わりにカルボベンジルオキシ−Ｌ−プロリンを用いて製造），（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−２Ｓ−（ピロリジン−１−イルメチル）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
【０１７７】
実施例３
５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸の合成
工程１
ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ，３ｅｑ．）を氷浴中で撹拌しながら冷却した。これにＰＯＣｌ3（１．１ｅｑ．，１０．８ｍＬ）を加えた。３０分後，ＤＭＦ（２Ｍ，４０ｍＬ）中の３，５−ジメチル−４−エチルエステルピロール（１７．７ｇ，１０５．８ｍｍｏｌ）の溶液を反応液に加え，撹拌を続けた。２時間後，反応液を水（２５０ｍＬ）で希釈し，１Ｎ水性ＮａＯＨでｐＨ＝１１に塩基性にした。白色固体を濾過により除去し，水，次にヘキサンですすぎ，乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（１９．７５ｇ，９５％）を褐色固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．１１（ｂｒｓ，１Ｈ，ＮＨ），９．５９（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），４．１７（ｑ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ3），２．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3），２．４０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3），１．２６（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ，ＯＣＨ2ＣＨ3）
【０１７８】
工程２
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（２ｇ，１０ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍＬ）および水（１０ｍＬ）に溶解した水酸化カリウム（３ｇ，５３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合物を３時間還流し，室温に冷却し，６Ｎ塩酸でｐＨ３に酸性にした。固体を濾過により回収し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１．６ｇ，９３％）を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．０９（ｓ，ｂｒ，２Ｈ，ＮＨ＆ＣＯＯＨ），９．５９（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），２．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3），２．４０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3）
【０１７９】
工程３
５−フルオロイサチン（８．２ｇ，４９．７ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのヒドラジン水和物に溶解し，１時間還流した。次に反応混合物を氷水に注加した。次に沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブンで乾燥して，５−フルオロ−２−オキシインドール（７．５ｇ）を得た。
【０１８０】
工程４
エタノール（３ｍＬ）中の５−フルオロオキシインドール（１００ｍｇ，０．６６ｍｍｏｌ），５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１３３ｍｇ，０．７９ｍｍｏｌ），および１０滴のピペリジンの反応混合物を６０℃で一夜撹拌し，濾過した。固体を１Ｍの水性塩酸溶液，水で洗浄し，乾燥して，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２０１ｍｇ，定量的）を黄色固体として得た。
ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度，％）２９９（［Ｍ−１］+，１００）
【０１８１】
実施例４
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデン−メチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシ−プロピル）−アミドの合成
工程１
２−クロロメチルオキシラン（９５ｇ，１．０３ｍｏｌｅ）に３０℃で水（３．０８ｇ，０．１７ｍｏｌｅ）およびジエチルアミン（１０６．２ｍＬ，１．０３ｍｏｌｅ）の混合物を加えた。次に反応混合物を２８−３５℃で６時間撹拌し，２０−２５℃に冷却して，１−クロロ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オールを得た。
【０１８２】
工程２
７８ｍＬの水中の水酸化ナトリウム（４７．９ｇ，１．２ｍｏｌｅ）の溶液に１−クロロ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オールを加えた。生成物を２０−２５℃で１時間撹拌し，１７８ｍＬの水で希釈し，エーテルで２回抽出した。合わせたエーテル溶液を固体水酸化カリウムで乾燥し，蒸発させて，１３５ｇの粗生成物を得，これを分留して，純粋なグリシジルジエチルアミン（９８ｇ，７６％）を油状物として得た。
【０１８３】
工程３
２５％（ｗ／ｗ）の水酸化アンモニウム（２５ｍＬ，１５９ｍｍｏｌｅ）の氷冷溶液にグリシジルジエチルアミン（３．２ｇ，２４．８ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴加した。反応混合物を０−５℃で１時間撹拌し，次に室温で１４時間撹拌した。得られた反応混合物を蒸発させ，蒸留（８４−９０℃，５００−６００ｍＴ）して，１−アミノ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オール（３．３ｇ，９２％）を得た。
ＭＳ  ｍ／ｚ１４７（［Ｍ＋１］+）
【０１８４】
工程４
１．０ｍＬのＤＭＦ中の５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１００ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ），ＥＤＣ（１２２．７ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８６．５ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）の溶液に１−アミノ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オール（９３．２ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた反応溶液を室温で一夜撹拌し，蒸発させた。残渣を１０ｍＬの水に懸濁し，濾過した。固体を飽和炭酸水素ナトリウムおよび水で洗浄し，高真空オーブンで一夜乾燥して，粗生成物を得，これをカラムクロマトグラフィーで精製し，トリエチルアミンを含む６％メタノール−ジクロロメタン（２滴／１００ｍＬの６％メタノール−ジクロロメタン）で溶出して，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシ−プロピル）−アミド（６２ｍｇ，３４％）を黄色固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．７０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ−１’），１０．９０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ−１），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝２．３８，９．３３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−４），７．７２（ｓ，１Ｈ，ビニル−Ｈ），７．６０（ｍ，ｂｒ．，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ2Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2−４’），６．９３（ｄｔ，Ｊ＝２．３８，８．９９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−５），６．８５（ｄｄ，Ｊ＝４．５５，８．９９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−６），３．８３（ｍ，ｂｒ，１Ｈ，ＯＨ），３．３３（ｍ，４Ｈ），２．６７（ｍ，ｂｒ，５Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3），２．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3），１．０４（ｍ，ｂｒ，６Ｈ，ＣＨ3ｘ２）．ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度，％）４２７（［Ｍ＋１］+，１００）
【０１８５】
実施例５
５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（Ｒ），（Ｓ）および（Ｒ／Ｓ）（化合物４，５および６）の合成
工程１
エタノール（５０ｍＬ）中のモルホリン（２．６ｍＬ，３０ｍｍｏｌ）およびエピクロロヒドリン（２．３５ｍｌ，３０ｍｍｏｌ）の混合物を７０℃で一夜撹拌した。溶媒を除去した後，残渣を塩化メチレン（５０ｍＬ）で希釈した。沈殿した透明固体を真空濾過により回収して，１−クロロ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（２．０ｇ，３７％）を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ３．４９（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，２Ｈ），３．７５（ｍ，４Ｈ，２ｘＣＨ2），４．２０（ｄｄ，Ｊ＝５．２，１２Ｈｚ，２Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），４．６２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），６．６４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１８０．２（Ｍ＋１）
【０１８６】
工程２
１−クロロ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（２．０ｇ，１１ｍｍｏｌ）をメタノール中ＮＨ3（２５重量％，２０ｍＬ）の溶液で室温で処理した。窒素を反応混合物中に吹き込んでアンモニアを除去した。溶媒を蒸発させて，１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（２．０ｇ，９１％）の塩酸塩を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．３０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．３６（ｍ，４Ｈ，ＮＣＨ2），２．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５２（ｍ，４Ｈ，ＯＣＨ2），３．８７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），５．３２（ｓ，１Ｈ，ＯＨ），８．０２（ｂｒｓ．，３Ｈ，ＮＨ3+）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１６１．１（Ｍ＋１）
【０１８７】
工程３
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（７４ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（６５ｍｇ，３６％）を沈殿させた。母液を蒸発乾固させ，残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して，追加の２Ｎ（７０ｍｇ，３９％）を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．２８（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｍ，１Ｈ），２．４０（ｍ，４Ｈ），２．４０，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．３１（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７８（ｍ，１Ｈ），４．７３（ｂｒｓ，１Ｈ，ＯＨ），６．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．５，８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｔｄ，2Ｊ＝２．８，3Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｍ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，９．６Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．８７（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４４１．４（Ｍ−１）
【０１８８】
塩化２−ヒドロキシ−７−オキサ−４−アゾニアスピロ［３．５］ノナンの合成
【化１４】
2006508981.tif 000010
熱電対，窒素入口および２５０ｍｌの滴下漏斗を備えた１Ｌの３ツ口丸底フラスコに，モルホリン（９１．５ｇ，９１．５ｍｌ，１．０５ｍｏｌｅ，１．０ｅｑ．）および１００ｍｌのエタノールを入れた。エピクロロヒドリン（１００ｇ，８４．５ｍｌ，１．０８ｍｏｌｅ，１．０３ｅｑ．）を滴下漏斗から約３０分間かけて加えながら溶液を急速に撹拌した。温度をモニターし，フラスコの温度が２７℃に達したときに，反応液を氷水浴で冷却した。透明溶液を１８時間撹拌した。反応はＧＣにより測定した（５滴の反応混合物を１ｍｌのエタノールで希釈し，１５ｍＤＢ−５キャピラリーＧＣカラムに注入し，以下のパラメータで運転した：インジェクター２５０℃，検出器２５０℃，初期オーブン温度２８℃，１０℃／分で２５０℃に加熱）。反応が完了したとき，３％未満のモルホリンが残存していた。反応液を５０℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて回転蒸発器で蒸発物が凝縮しなくなるまで濃縮した。得られた油状物を室温で２４−４８時間，または有意な量の結晶が観察されるまで保存した（種晶を入れることにより工程を加速することができる）。スラリーを２５０ｍｌのアセトンで希釈し，濾過した。固体を真空オーブン中で６０℃で１８−２４時間乾燥した。８４ｇの結晶生成物が得られた。母液を濃縮し，結晶化工程を繰り返すことにより，回収率を増加することができる。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ６．５５（ｄ，１Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），４．５３（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｍ，４Ｈ），３．６０（ｍ，２Ｈ），３．４８（ｍ，２Ｈ）．13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７０．９，６１．３９，６１．０４，６０．２５，５８．５４，５７．８０
【０１８９】
１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノール（ラセミ体）の合成
【化１５】
2006508981.tif 000011
機械的撹拌子を備えた３Ｌの１ツ口丸底フラスコに塩化２−ヒドロキシ−７−オキサ−４−アゾニアスピロ［３．５］ノナン（１５０ｇ，８３５ｍｍｏｌｅ）を入れ，次にメタノール中２３重量％の無水アンモニア（２１２０ｍｌ）を加えた。フラスコに栓をし，得られた透明溶液を２０−２３℃で１８時間撹拌した。上述の条件のＧＣは，出発物質が残存していないことを示した。栓をはずし，アンモニアを溶液から３０分間曝気した。次にフラスコを回転蒸発器に移し，４５℃の油浴中でフルハウスバキュームで濃縮して，白色固体を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．３−３．５（ｍ，６Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），２．２−２．４（ｍ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７０．８，６７．１，６０．１，５３．８，４８．１
【０１９０】
上述の実施例３に記載される方法にしたがって，２−（ＲＳ）−１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オールを２−（Ｓ）−１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（以下に記載されるようにして製造）で置き換えて，所望の化合物５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−（Ｓ）−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミドを得た。
【０１９１】
１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノール（非ラセミ体）の合成
【化１６】
2006508981.tif 000012
機械的撹拌，熱電対および滴下漏斗を備えた１Ｌの３ツ口丸底フラスコにモルホリン（９１．５ｇ，９１．５ｍｌ，１．０５ｍｏｌｅ，１．０ｅｑ．）および４５ｍｌのｔ−ブタノールを入れた。Ｒ−エピクロロヒドリン（１００ｇ，８４．５ｍｌ，１．０８ｍｏｌｅ．１．０３ｅｑ．）を滴下漏斗から約３０分間かけて加えながら溶液を急速に撹拌した。温度をモニターし，フラスコの温度が２７℃に達したときに，反応液を氷水浴で冷却した。透明溶液を１８時間撹拌した。反応はＧＣにより測定した（５滴の反応混合物を１ｍｌのエタノールで希釈し，１５ｍＤＢ−５キャピラリーＧＣカラムに注入し，以下のパラメータで運転した：インジェクター２５０℃，検出器２５０℃，初期オーブン温度２８℃，１０℃／分で２５０℃に加熱）。反応が完了したとき，３％未満のモルホリンが残存していた。溶液を１０℃に冷却し，温度を１５℃未満に保持しながらＴＨＦ（５７６ｇ）中のカリウムｔ−ブトキシドの２０重量％溶液を滴加した。得られた白色スラリーを１０−１５℃で２時間撹拌し，上述の条件を用いてＧＣで調べた。クロロヒドリンは認められなかった。混合物を５０℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて回転蒸発器で濃縮した。得られた混合物を水（５００ｍｌ）および塩化メチレンで希釈した。相を分離し，水性相を塩化メチレン（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，透明無色油状物を得た。１４５ｇ（収率９７％）のエポキシドが得られた。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨz，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ３．３（ｄｄ，４Ｈ），３．１（ｍ，１Ｈ），２．６（ｄｄ，１Ｈ），２．５（ｄｄ，１Ｈ），２．４（ｍ，４Ｈ），２．２（ｄｄ，２Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨz，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ６５．４，６０．１，５３．１，４８．９，４３．４
【０１９２】
上述の粗エポキシドを機械的撹拌子を備えた３Ｌの１ツ口丸底フラスコに入れた。メタノール中の無水アンモニア（２４％ｗ／ｗ２．５Ｌ）を加え，フラスコに蓋をして，混合物を室温で２４時間撹拌した。上述の条件でのＧＣは，出発物質が残存していないことを示した。蓋をはずし，３０分間アンモニアを溶液から曝気した。次に，フラスコから回転蒸発器に移し，４５℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて濃縮して，透明無色油状物を得た。１２４ｇの生成物が得られた。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨz，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．３−３．５（ｍ，６Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），２．２−２．４（ｍ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨz，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７０．８，６７．１，６０．１，５３．８，４８．１
【０１９３】
１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−（Ｓ）−プロパノールの合成
機械的撹拌，熱電対および滴下漏斗を備えた１Ｌの３ツ口丸底フラスコに，モルホリン（９１．５ｇ，９１．５ｍｌ，１．０５ｍｏｌｅ，１．０ｅｑ．）および２００ｍｌのメタノールを入れた。Ｒ−エピクロロヒドリン（１００ｇ，８４．５ｍｌ，１．０８ｍｏｌｅ，１．０３ｅｑ．）を滴下漏斗から約３０分間かけて加えながら溶液を急速に撹拌した。温度をモニターし，フラスコの温度が２７℃に達したときに，反応液を氷水浴で冷却した。透明溶液を１８時間撹拌した。反応はＧＣにより測定した（５滴の反応混合物を１ｍｌのエタノールで希釈し，１５ｍＤＢ−５キャピラリーＧＣカラムに注入し，以下のパラメータで運転した：インジェクター２５０℃，検出器２５０℃，初期オーブン温度２８℃，１０℃／分で２５０℃に加熱）。反応が完了したとき，３％未満のモルホリンが残存していた。溶液を１０℃に冷却し，温度を１５℃未満に保持しながらメタノール（２３３ｇ，１．０８ｍｏｌｅ，２４７ｍｌ）中のナトリウムメトキシドの２５重量％溶液を滴加した。得られた白色スラリーを１０−１５℃で２時間撹拌し，ＧＣにより上述の条件を用いて調べた。クロロヒドリンは認められなかった。混合物を５０℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて回転蒸発器で濃縮した。得られた混合物を水（５００ｍｌ）および塩化メチレンで希釈した。相を分離し，水性相を塩化メチレン（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，透明な無色油状物を得た。これにより，１４５ｇ，収率９７％の１，２−エポキシ−３−モルホリン−４−イルプロパンを得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ３．３（ｄｄ，４Ｈ），３．１（ｍ，１Ｈ），２．６（ｄｄ，１Ｈ），２．５（ｄｄ，１Ｈ），２．４（ｍ，４Ｈ），２．２（ｄｄ，２Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ６５．４，６０．１，５３．１，４８．９，４３．４
【０１９４】
上述の粗１，２−エポキシ−３−モルホリン−４−イルプロパンを磁気撹拌子を有する３Ｌの１ツ口丸底フラスコに入れた。メタノール（２４％ｗ／ｗ２．５Ｌ）中の無水アンモニアを加え，フラスコに栓をし，混合物を室温で２４時間撹拌した。上述の条件のＧＣは，出発物質が残存していないことを示した。栓をはずし，アンモニアを３０分間溶液から曝気した。次にフラスコから回転蒸発器に移し，４５℃の浴でフルハウスバキュームで濃縮して，透明無色油状物を得た。１２４ｇの１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−（Ｓ）−プロパノールが得られた。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．３−３．５（ｍ，６Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），２．２−２．４（ｍ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ７０．８，６７．１，６０．１，５３．８，４８．１
【０１９５】
【化１７】
2006508981.tif 000013
イミダゾールアミド（７．０ｇ，３２．３ｍｍｏｌ），アミン（１５．０ｇ，６４．６ｍｍｏｌ），５−フルオロオキシインドール（４．９３ｇ，３２．６ｍｍｏｌ），トリエチルアミン（９．７９ｇ，９６．９ｍｍｏｌ），およびＴＨＦ（８８ｍｌ）を混合し，６０℃に加熱した。茶色溶液が形成した。６０℃で２４時間撹拌した後，黄色スラリーを室温に冷却し，濾過した。ケークを８０ｍｌのＴＨＦで洗浄し，５０℃でハウスバキュームで一夜乾燥した。茶色固体（２３．２ｇ）が得られた。固体を３５０ｍｌの水中で室温で５時間スラリー化し，濾過した。ケークを１００ｍｌの水で洗浄し，５０℃でハウスバキュームで一夜乾燥した。８．３１ｇが得られ，化学収率は５６％であった。
【０１９６】
【化１８】
2006508981.tif 000014
温度計，凝縮器，磁気撹拌，および窒素入口を備えた０．２５Ｌフラスコに４．９２ｇの５−フルオロオキシインドール，７．０ｇのイミダゾールアミド，１５．５ｇの（Ｒ）−１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノール，９．７８ｇのトリエチルアミンおよび８８ｍｌのテトラヒドロフランを入れた。混合物を６０℃で１６．５時間加熱した。反応液を周囲温度に冷却し，濾過した。得られた固体をアセトニトリル中で１１ｍｌ／ｇで３回連続してスラリー化し，真空下で乾燥して，３．６ｇ（２５．２５％）を得た［ＨＰＬＣ，ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳ，Ｃ−１８，５μ，（６：４），アセトニトリル：０．１Ｍ塩化アンモニウム，ＰＨＡ−５７１４３７＝４．０５分間］。Ｈ1ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ１０．８６（１Ｈ，ｂｓ）；７．７５（１Ｈ，ｄ）；７．７０（１Ｈ，ｓ）；７．５０（１Ｈ，ｍ）；６．８８（２Ｈ，ｍ）；４．７２（１Ｈ，ｂｓ）；３．７８（１Ｈ，ｂｓ）；３．５６（４Ｈ，ｍ）；３．３２（６Ｈ，ｍ）；３．１５（１Ｈ，ｍ）；２．４３（８Ｈ，ｂｍ）
【０１９７】
実施例６
２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１１３ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（７４ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（７７ｍｇ，４５．３％）を沈殿させた。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．２７（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｍ，１Ｈ），２．４０（ｍ，４Ｈ），２．４０，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．３２（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．８８（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２５．４（Ｍ＋１）
【０１９８】
実施例７
５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（化合物７）の合成
５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２６．６ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（７４ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（１０７ｍｇ，５８％）を沈殿させた。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．２９（ｍ，１Ｈ），２．３３（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｍ，４Ｈ），２．４０，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．３７（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．９９（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４５７．４（Ｍ−１）
【０１９９】
実施例８
５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（７２．２ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（３８ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（５５ｍｇ，５５％）を沈殿させた。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．２７（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｍ，４Ｈ），２．４１，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．１３（ｓ，１Ｈ），３．３５（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．９９（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）５０３．４（Ｍ−１）
【０２００】
実施例９
２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
工程１
エタノール（５０ｍＬ）中の３−［１，２，３］トリアゾール（２．０ｇ，２９ｍｍｏｌ），エピクロロヒドリン（３．４ｍｌ，４３．５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン（２．６ｍＬ，１５ｍｍｏｌ）の混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を除去した後，残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＯＨ＝１００／１−１００／２−１００／４）により精製して，１−クロロ−３−（１，２，３）−トリアゾール−２−イルプロパン−２−オール（２．１ｇ，４５％）［1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ３．５２（ｍ，２Ｈ，ＯＨおよびＣＨ2），３．６０（ｄｄ，Ｊ＝５．２，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），４．６８（ｍ，２Ｈ），７．６７（ｓ，２Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１６２．１（Ｍ＋１）］，および１−クロロ−３−（１，２，３）トリアゾール−１−イルプロパン−２−オール（２．３ｇ，４９％）［1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ３．５６（ｓ，１Ｈ），３．５７（ｓ，１Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），４．５３（ｄｄ，Ｊ＝７．２，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｄｄ，Ｊ＝３．８，１４Ｈｚ，１Ｈ），７．６７（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１６２．１（Ｍ＋１）］を得た。
【０２０１】
工程２
１−クロロ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イルプロパン−２−オール（２．３ｇ，１３ｍｍｏｌ）を，密封圧力容器中で６０℃で一晩メタノール（２５重量％，２０ｍＬ）中のＮＨ3の溶液で処理した。室温に冷却した後，窒素を反応混合物に吹き込んでアンモニアを除去した。溶媒を蒸発させて，１−アミノ−３−（１，２，３）トリアゾール−１−イルプロパン−２−オール（２．５７ｇ，１００％）の塩酸塩を得た。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．６８（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９７（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｄｄ，Ｊ＝６．４，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５７（ｄｄ，Ｊ＝４．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），７．７７（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｂｒｓ．，３Ｈ，ＮＨ3+），８．１２（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１４３．１（Ｍ＋１）
【０２０２】
工程３
５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１１３ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミド（７０ｍｇ，４１％）を沈殿させた。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．４５，２．４８（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．３５（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），４．３２（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５３（ｄｄ，Ｊ＝３．４，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．４３（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．９１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｓ，１Ｈ），１０．９３（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６８（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４０５．４（Ｍ−１）
【０２０３】
実施例１０
５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミド（１００ｍｇ，６２％）を沈殿させた。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．４２，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．２７（ｍ，２Ｈ），３．９８（ｍ，１Ｈ），４．２７（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄｄ，Ｊ＝３．４，１３．６Ｈｚ，１Ｈ），５．３８（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．４，８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｔｄ，2Ｊ＝２．４，3Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｍ，３Ｈ），７．７５（ｄｄ，Ｊ＝２．４，９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｓ．１Ｈ），１０．９３（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．７３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２３．４（Ｍ−１）
【０２０４】
実施例１１
５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２６．６ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を，１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドを沈殿させた（４８ｍｇ，２７％）。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．４２，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．２７（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝７．８，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｍ，２Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），１０．９９（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３９．４（Ｍ−１）
【０２０５】
実施例１２
５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１４４．４ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を，１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミド（１３０ｍｇ，６７％）を沈殿させた。
1ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6）δ２．４１，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），３．２７（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．４０（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｍ，２Ｈ），７．７７（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ．１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），１１．０（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６４（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４８５．４（Ｍ−１）
【０２０６】
実施例１３
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）アミド（化合物１）の合成
５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（０．５４ｇ，３．８ｍｍｏｌ）を，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノエチル）アミドと縮合させて，０．８３ｇ（５５％）の標題化合物を黄緑色固体として得た。
1ＨＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ6）δ１３．６６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１０．８３（ｓ，ｂｒ，１Ｈ，ＮＨ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝２．５＆９．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−ビニル），７．３７（ｔ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ2ＣＨ2），６．９１（ｍ，１Ｈ），６．８１−６．８５（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ，ＣＨ2），２．５１（ｍ，６Ｈ，３ｘＣＨ2），２．４３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3），２．４１（ｓ，３Ｈ，ＣＨ3），０．９６（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ，Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2）．ＭＳ−ＥＩｍ／ｚ３９８［Ｍ＋］
【０２０７】
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）アミドの合成の別法
ヒドラジン水和物（５５％，３０００ｍＬ）および５−フルオロイサチン（３００ｇ）を１００℃に加熱した。撹拌しながら１２０分間かけて追加の５−フルオロ−イサチン（５００ｇ）を少しずつ（１００ｇ）加えた。混合物を１１０℃に加熱し，４時間撹拌した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収して，粗（２−アミノ−５−フルオロ−フェニル）−酢酸ヒドラジド（７４８ｇ）を得た。ヒドラジドを水（７００ｍＬ）に懸濁し，１２Ｎ塩酸で混合物のｐＨを＜ｐＨ３に調節した。混合物を室温で１２時間撹拌した。固体を真空濾過により回収し，水で２回洗浄した。生成物を真空下で乾燥して，５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン（６００ｇ，７３％収率）を褐色粉体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ３．４６（ｓ，２Ｈ，ＣＨ2），６．７５，６．９５，７．０５（３ｘｍ，３Ｈ，芳香族），１０．３５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ１５２［Ｍ＋ｌ］
【０２０８】
３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２，４−ジカルボン酸２−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−エチルエステル（２６００ｇ）およびエタノール（７８００ｍＬ）を激しく撹拌しながら１０Ｎ塩酸（３６５０ｍＬ）をゆっくり加えた。温度は２５℃から３５℃に上昇し，ガスが発生し始めた。混合物を５４℃に暖め，さらに加熱しながら１時間撹拌し，このとき温度は６７℃であった。混合物を５℃に冷却し，３２Ｌの氷および水を撹拌しながらゆっくり加えた。固体を真空濾過により回収し，水で３回洗浄した。固体を恒量となるまで風乾して，２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（１４１８ｇ，８７％収率）をピンク色がかった固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ２．１０，２．３５（２ｘｓ．２ｘ３Ｈ，２ｘＣＨ3），４．１３（ｑ，２Ｈ，ＣＨ2），６．３７（ｓ，１Ｈ，ＣＨ），１０．８５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ１６７［Ｍ＋ｌ］
【０２０９】
ジメチルホルムアミド（３２２ｇ）およびジクロロメタン（３７００ｍＬ）を氷浴中で４℃に冷却し，オキシ塩化リン（６８４ｇ）を撹拌しながら加えた。固体の２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（６７０ｇ）を１５分間かけて少しずつゆっくり加えた。到達した最高温度は１８℃であった。混合物を１時間加熱還流し，氷浴中で１０℃に冷却し，激しく撹拌しながら１．６Ｌの氷水を急速に加えた。温度は１５℃に上昇した。激しく撹拌しながら１０Ｎ塩酸（１．６Ｌ）を加えた。温度は２２℃に上昇した。混合物を３０分間放置し，層を分離させた。温度は最高４０℃に達した。水性層を１０Ｎ水酸化カリウム（３．８Ｌ）で添加の間に温度が５５℃に達しこの温度で保たれるような速度でｐＨ１２−１３に調節した。添加が完了した後，混合物を１０℃に冷却し，１時間撹拌した。固体を真空濾過により回収し，水で４回洗浄して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（７７８ｇ，１００％収率）を黄色固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２５（ｔ，３Ｈ，ＣＨ3），２．４４，２．４８（２ｘｓ，２ｘ３Ｈ，２ｘＣＨ3），４．１６（ｑ，２Ｈ，ＣＨ2），９．５９（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），１２．１５（ｂｒｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ１９５［Ｍ＋１］
【０２１０】
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（８０６ｇ），水酸化カリウム（５４８ｇ），水（２４００ｍＬ）およびメタノール（３００ｍＬ）を撹拌しながら２時間還流し，次に８℃に冷却した。混合物をジクロロメタンで２回抽出した。温度を１５℃以下に保ちながら水性層を１０００ｍＬの１０Ｎ塩酸でｐＨ４に調節した。水を加えて撹拌を容易にした。固体を真空濾過により回収し，水で３回洗浄し，真空下で５０℃で乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（６４５ｇ，９３．５％収率）を黄色固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．４０，２．４３（２ｘｓ，２ｘ３Ｈ，２ｘＣＨ3），９．５７（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），１２．０７（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＨ＋ＣＯＯＨ）．ＭＳｍ／ｚ１６８［Ｍ＋１］
【０２１１】
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２０４ｇ）および６０２０ｍＬのジメチルホルムアミドを室温で撹拌し，その間に１−（３−ジメチル−アミノプロピル−３−エチルカルボジイミド塩酸（２０７１ｇ），ヒドロキシベンゾトリアゾール（１４６０ｇ），トリエチルアミン（２０１６ｍＬ）およびジエチルエチレンジアミン（１２１５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２０時間撹拌した。混合物を３０００ｍＬの水，２０００ｍＬのブラインおよび３０００ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し，１０Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨを１０より高く調節した。混合物を各５０００ｍＬのジクロロメタン中１０％メタノールで２回抽出し，抽出物を合わせ，無水硫酸マグネシウムで乾燥し，回転蒸発乾固させた。混合物を１９５０ｍＬのトルエンで希釈し，再び回転蒸発乾固させた。残渣を３：１ヘキサン：ジエチルエーテル（４０００ｍＬ）中で破砕した。固体を真空濾過により回収し，４００ｍＬの酢酸エチルで２回洗浄し，真空下で３４℃で２１時間乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）−アミド（８１９ｇ，４３％収率）を淡褐色固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ０．９６（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），２．３１，２．３８（２ｘｓ，２ｘＣＨ3），２．５１（ｍ，６Ｈ，３ｘＣＨ2），３．２８（ｍ，２Ｈ，ＣＨ2），７．３４（ｍ，１Ｈ，アミドＮＨ），９，５６（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），１１．８６（ｓ，１Ｈ，ピロールＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ２６６［Ｍ＋１］
【０２１２】
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノエチル）−アミド（８０９ｇ），５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン（４３８ｇ），エタノール（８０００ｍＬ）およびピロリジン（１３ｍＬ）を７８℃で３時間加熱した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収し，エタノールで洗浄した。固体をエタノール（５９００ｍＬ）とともに７２℃で３０分間撹拌した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，エタノールで洗浄し，真空下で５４℃で１３０時間乾燥して，５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）−アミド（１０１３ｇ，８８％収率）を橙色固体として得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ０．９８（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），２．４３，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），２．５０（ｍ，６Ｈ，３ｘＣＨ2），３．２８（ｑ，２Ｈ，ＣＨ2），６．８４，６．９２，７．４２，７．７１，７．５０（５ｘｍ，５Ｈ，芳香族，ビニル，ＣＯＮＨ），１０．８８（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６８（ｓ，１Ｈ，ピロールＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ３９７［Ｍ−１］
【０２１３】
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）アミドのリンゴ酸塩は，米国特許公開２００３／００６９２９８およびＷＯ０３／０１６３０５（その開示を本明細書の一部としてここに引用する）の開示にしたがって製造することができる。
【０２１４】
５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸，５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸，５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸の合成は，米国特許６，５７３，２９３（その開示を本明細書の一部としてここに引用する）に記載されている。
【０２１５】
実施例１４
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−アミド（化合物２）
５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドリン−２−オンを５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−アミドと縮合させて，標題化合物を得た。
ＭＳ＋ｖｅＡＰＣＩ３９７［Ｍ＋１］
【０２１６】
実施例１５
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド（化合物８）
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド（９９ｇ），エタノール（４００ｍｌ），５−フルオロ−２−オキシインドール（３２ｇ）およびピロリジン（１．５ｇ）を撹拌しながら３時間還流した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収した。固体をエタノール中で６０℃で撹拌し，室温に冷却し，真空濾過により回収した。生成物を真空下で乾燥して，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド（７５ｇ，９５％収率）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ6）(１．０３（ｔ，３Ｈ，ＣＨ3），２．４２，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ3），２．５６（ｑ，２Ｈ，ＣＨ2），２．７０，３．３０（２ｘｔ，４Ｈ，２ｘＣＨ2），６．８５，６．９２，７．５８，７．７２，７．７６（５ｘｍ，５Ｈ，芳香族，ビニル，およびＣＯＮＨ），１０．９０（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６５（ｂｒｓ，１Ｈ，ピロールＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ３６９［Ｍ−１］
【０２１７】
実施例１６
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミド（化合物３）
５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドリン−２−オンを５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−モルホリン−１−イル−エチル）−アミドと縮合させて，標題化合物を得た。
【０２１８】
生物学的実施例
ＭＸ１ヒト乳癌モデルについての方法
マウス／Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ：雌ｎｕ／ｎｕマウス（Ｈａｒｌａｎ），１３週齢（第１日のペアマッチングにおいて）を，水および放射線照射標準齧歯類食餌を自由に摂取させて飼育した。マウスは定位マイクロアイソレータで１２時間光サイクルで飼育した。動物の管理および使用のプログラムは，拘束，管理，手術方法，食餌および液体管理に関しては，Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  Ｃａｒｅａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓの推奨に特別にしたがい，獣医学的配慮については，ＡＡＡＬＡＣの認定を受けた。
【０２１９】
腫瘍移植：マウスの側腹部皮下に１ｍｍ3ＭＸ−１ヒト乳癌腫フラグメントを移植した。腫瘍は，最初は１週間に２回，その後新生物が所望の大きさである約１００ｍｇに達すると毎日監視した。癌腫が腫瘍重量の計算値で６２−１８０ｍｇのサイズになったとき，動物を種々の処置群にペアマッチングした（群平均腫瘍重量は９９−１０１ｍｇの範囲であった）。腫瘍重量の見積は以下の式を用いて計算した：
腫瘍重量（ｍｇ）＝ｗ2ｘＬ／２
ここで，ＭＸ−１癌腫の，ｗ＝幅，Ｌ＝長さ（ｍｍ）
【０２２０】
ＭＤＡ−ＭＢ−４３５ヒト乳癌モデルについての方法
１ｘ１０5個のＭＤＡ−ＭＢ−４３５腫瘍細胞を雌ｎｕ／ｎｕマウス（ｎ＝１０）の左心室に注射した。マウスは骨髄転移増殖の指標として体重減少（＞２０％）および後肢麻痺についてモニターした。
【０２２１】
ＮＣＩ−Ｈ５２６−ヒト小細胞肺癌モデルについての方法
１ｘ１０5−１ｘ１０6個の腫瘍細胞を雌ｎｕ／ｎｕマウス（ｎ＝１０）の後測腹部の皮下領域に注射した。腫瘍成長は，週に２回，２−４週間，カリパス測定によりモニターした。
【０２２２】
ＬＳ１７４ｔヒト結腸癌モデルについての方法
１ｘ１０5−１ｘ１０6個の腫瘍細胞を雌ｎｕ／ｎｕマウス（ｎ＝１０）の後測腹部の皮下領域に注射した。腫瘍成長は，週に２回，２−４週間，カリパス測定によりモニターした。
【０２２３】
ＨＴ−２９ヒト結腸癌モデルについての方法
１ｘ１０5−１ｘ１０6個の腫瘍細胞を雌ｎｕ／ｎｕマウス（ｎ＝１０）の後測腹部の皮下領域に注射した。腫瘍成長は，週に２回，２−４週間，カリパス測定によりモニターした。
【０２２４】
実施例１：
ＭＸ−１ヒト乳癌腫皮下腫瘍モデルにおけるドセタキセルと組み合わせた化合物１の増強された抗腫瘍効力の判定
この実施例は，ヒト乳癌モデルにおいて化合物１とドセタキセルとの組み合わせ治療が効力および毒性に及ぼす影響の評価を示す。
【０２２５】
投与前に，腫瘍を約１００ｍｍ3の体積に成長させた。表１はこのモデルを用いて得られたデータをまとめたものである（図１−３も参照）。
【０２２６】
【表１】
2006508981.tif 000015
【０２２７】
ＣＭＣ＝カルボキシメチルセルロース
ＱＤ＝毎日
ＱＷＫ＝週１回
Ｎ／Ａ＝非適用；ＮＳ＝有意ではない
＊スチューデントｔ検定用の比較
【０２２８】
ＭＸ−１ヒト乳癌腫皮下腫瘍モデルにおいては，化合物１を単独療法として４０ｍｇ／ｋｇ／日で経口投与したとき，第２０日に５２％の阻害（ｐ＝０．０２）が得られた。ドセタキセル処置により用量応答効果が得られ，投与の１６日後に，５ｍｇ／ｋｇでは効力がなく，１０ｍｇ／ｋｇでは６０％阻害（ｐ＝０．００５），１５ｍｇ／ｋｇでは９５％阻害（ｐ＜０．０００１）が得られた。１０および１５ｍｇ／ｋｇ処置群では，ドセタキセル投与が完了した後，腫瘍はベヒクル対照群と同様の傾きで再成長した。
【０２２９】
毎日の化合物１と週１回の５ｍｇ／ｋｇのドセタキセルとの３週間の組み合わせ投与により，非有効量の５ｍｇ／ｋｇドセタキセルと比較して，および４０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１と比較して，腫瘍成長の阻害が著しく増強された（第２７日：５５％阻害，ｐ＝０．０４）。
【０２３０】
毎日の化合物１と週１回の１０ｍｇ／ｋｇのドセタキセルの組み合わせを３週間投与すると，ドセタキセル単独（第２０日：６２％阻害，ｐ＝０．０４；第３７日：７７％阻害，ｐ＝０．００５）または化合物１単独（第２０日：７８％阻害，ｐ＝０．０１）と比較して腫瘍成長が顕著に阻害された。
【０２３１】
維持モデル：  週１回の化合物１と１５ｍｇ／ｋｇのドセタキセルの組み合わせを３週間投与すると，ドセタキセル投与を停止した後の腫瘍成長は，ドセタキセルのみで処置したマウスにおいて腫瘍が再成長したことと比較して顕著に遅延した（第５７日：８２％阻害，ｐ＝０．００８）。
【０２３２】
これらの実験においては，化合物１とドセタキセルとの組み合わせはよく許容された。
【０２３３】
実施例２：
ＭＸ−１乳癌効力実験（化合物１＆ドセタキセル）
ドセタキセルと組み合わせた化合物１のＭＸ−１ヒト乳癌腫皮下腫瘍モデルにおける増強された抗腫瘍効力の判定
この実施例は，ヒト乳癌モデルにおける化合物１とドセタキセルの組み合わせ治療が効力および毒性に及ぼす効果を評価する。投与前に腫瘍を約１００ｍｍ3の体積まで成長させた。表２は，このモデルを用いて得られたデータをまとめたものである（図４も参照）。
【０２３４】
【表２】
2006508981.tif 000016
【０２３５】
ＱＤ＝毎日
ＱＷＫ＝週１回
Ｎ／Ａ＝非適用；ＮＳ＝有意ではない
＊スチューデントｔ検定用の比較
【０２３６】
ＭＸ−１ヒト乳癌腫ｓｃ腫瘍モデルにおいては，単独療法として４０ｍｇ／ｋｇ／日で経口でデリバリーしたとき，化合物１での処置により，第１７日において６３％の阻害が得られた（ｐ＜０．０００１）。ドセタキセル処置により用量応答効果が得られた。すなわち，５ｍｇ／ｋｇでは効力がなく，１０ｍｇ／ｋｇでは３６％阻害（第１４日），および１５ｍｇ／ｋｇ（ｐ＜０．０００１）では投与の１７日後に９０％阻害が得られた。１５ｍｇ／ｋｇ処置群においては，ドセタキセル投与が完了した後，腫瘍はベヒクル対照群と同様の傾きで再成長した。
【０２３７】
毎日の化合物１と週１回の５ｍｇ／ｋｇのドセタキセルの組み合わせを３週間投与したところ，非有効量の５ｍｇ／ｋｇのドセタキセルと比較して，および４０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１と比較して，腫瘍成長の阻害が著しく増強された（第２８日：４３％阻害，ｐ＝０．０８−有意傾向）。
【０２３８】
毎日の化合物１と週１回の１０ｍｇ／ｋｇのドセタキセル組み合わせを３週間投与したところ，ドセタキセルまたは化合物１単独と比較して，腫瘍成長が著しく阻害された（第２８日：７７％阻害，ｐ＝０．００２）。
【０２３９】
維持モデル：化合物１と週１回の１５ｍｇ／ｋｇのドセタキセルとの組み合わせを３週間投与したところ，ドセタキセル単独で処置したマウスにおける腫瘍の再成長と比較して，顕著な腫瘍後退がみられた（第５２日：１００％阻害，ｐ＜０．０００１）。これらの実験において化合物１とドセタキセルとの組み合わせはよく許容された。
【０２４０】
実施例３：
ＭＸ−１乳癌効力実験（化合物１＆５−フルオロウラシル）
ＭＸ−１ヒト乳癌腫皮下腫瘍モデルにおける，５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）と組み合わせた化合物１の増強された抗腫瘍効力の判定
この実施例は，ヒト乳癌モデルにおいて化合物１と５−ＦＵとの組み合わせ治療が効力および毒性に及ぼす影響を評価する。
【０２４１】
投与前に，腫瘍を約１００ｍｍ3の体積に成長させた。表３はこのモデルを用いて得られた結果を示す（図５を参照）。
【０２４２】
【表３】
2006508981.tif 000017
【０２４３】
ＱＤ＝毎日
ＱＷＫ＝週１回
Ｎ／Ａ＝非適用；ＮＳ＝有意ではない
＊スチューデントｔ検定用の比較
【０２４４】
４０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１の経口投与と週１回１００ｍｇ／ｋｇで腹膜内投与した化学療法剤である５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）との３週間の組み合わせ療法により，それぞれの薬剤を単独療法として投与した場合と比較して，有意な腫瘍成長阻害がみられた：第２２日に化合物１単独と比較して７８％阻害（ｐ＝０．００６），第２２日に５−ＦＵ単独と比較して７６％阻害（ｐ＝０．０１）。臨床では，５−ＦＵはプロドラッグであるカペシタビンとして経口投与される。
【０２４５】
実施例４：
ＭＸ−１乳癌効力実験（化合物１＆ドキソルビシン塩酸）
ＭＸ−１ヒト乳癌腫皮下腫瘍モデルにおける，ドキソルビシン塩酸と組み合わせた化合物１の増強された抗腫瘍効力の判定
この実施例は，ヒト乳癌モデルにおいて化合物１とドキソルビシン塩酸との組み合わせ治療が効力および毒性に及ぼす影響を評価する。
【０２４６】
投与前に，腫瘍を約１００ｍｍ3の体積に成長させた。表４はこのモデルを用いて得られた結果を示す（図６を参照）。
【０２４７】
【表４】
2006508981.tif 000018
【０２４８】
ＱＤ＝毎日
ＱＯＤ＝１日おき
Ｎ／Ａ＝非適用；ＮＳ＝有意ではない
＊スチューデントｔ検定用の比較
【０２４９】
４０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１の経口投与と１日おきに４ｍｇ／ｋｇで腹膜内投与した化学療法剤であるドキソルビシン塩酸と組み合わせ療法の３回投与により，それぞれの薬剤を単独療法として投与した場合と比較して，有意なＭＸ１腫瘍成長阻害がみられた：第３１日に化合物１単独と比較して６０％阻害（ｐ＝０．０１），第３１日に５−ＦＵ単独と比較して８１％阻害（ｐ＝０．００１）。
【０２５０】
実施例５：
ＮＣＩ−Ｈ５２６小細胞肺癌効力実験（化合物１＆シスプラチン）
ＮＣＩ−Ｈ５２６ＳＣＬＣ細胞を，１０％ウシ胎児血清，２ｍＭグルタミン，１ｍＭピルビン酸ナトリウム（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）を補充したＲＰＭＩ１６４０中で標準的な手法で培養し，湿潤化チャンバで３７℃，５％二酸化炭素で維持した。マウスに移植する細胞は対数増殖期の間に細胞培養フラスコから回収し，滅菌リン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄し，計数し，移植前にＰＢＳに再懸濁して適当な濃度とした。
【０２５１】
すべての動物実験は，ＡＡＡＬＡＣ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ａｃｃｒｅｄｉｔｅｄ  ａｎｉｍａｌ  ｆａｃｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｉｎ  ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ）にしたがって行った。Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）から購入した９−１２週齢の雌無胸腺ｎｕ／ｎｕマウスを使用した。
【０２５２】
第０日に，マウスの後側腹部の皮下に５Ｘ１０6個のＮＣＩ−Ｈ５２６細胞を注射した。皮下腫瘍を有する無胸腺マウス（２５０−３００ｍｍ3腫瘍体積）を，化合物１でＰＯで１日に１回，実験終了まで，シスプラチンで腹膜内に１日に１回，最初の５日間，またはこれら２つの組み合わせのいずれかで処置した。シスプラチンは０．９％食塩水中で調製した。化合物またはこれらのベヒクルは，表５に示されるように投与した。細胞移植の１８日後に投与を開始したとき，腫瘍は２５０−３００ｍｍ3に達していた。腫瘍成長は，処置の経過中，ベニエカリパスを用いて週に２回測定した。腫瘍体積は，長さｘ幅ｘ高さの積として計算した。すべての実験について，両側スチューデントｔ検定を用いてｐ値を計算した。表５は，このモデルを用いて得られた結果を示す（図７を参照）
【０２５３】
【表５】
2006508981.tif 000019
【０２５４】
＊スチューデントｔ検定，両側
Ｎ／Ａ＝非適用
ＱＤ＝毎日
【０２５５】
ＫＩＴ−ポジティブＮＣＩ−Ｈ５２６ＳＣＬＣ腫瘍異種移植モデルにおいて，化合物１を４０ｍｇ／ｋｇで毎日経口投与し，シスプラチンを１．５ｍｇ／ｋｇで最初の５日間腹膜内投与した組み合わせにより，腫瘍が成長して９００ｍｍ3に到達するのが，化合物１単独療法と比較して２９日，シスプラチン単独療法と比較して２２日遅れた（それぞれ，ｐ＜０．０００１およびｐ＝０．００４）。
【０２５６】
実施例６：
ＭＤＡ−ＭＢ−４３５乳癌効力実験（化合物１＆ドセタキセル）
ＭＤＡ−ＭＢ−４３５同所移植ヒト乳癌腫骨髄転移増殖モデルにおける，ドセタキセルと組み合わせた化合物１の増強された抗腫瘍効力の判定
この実施例は，化合物１とドセタキセルとの組み合わせ治療がヒト乳癌モデルにおいて効力および毒性に及ぼす影響を評価する。効力は，生存の改善により示され，これは腫瘍細胞の骨髄転移増殖による後肢麻痺または体重減少（＞２０％）により示される。
【０２５７】
腫瘍細胞を雌ｎｕ／ｎｕマウスの乳脂肪パッドに注入し，腫瘍細胞の骨髄転移増殖の指標としてマウスを体重減少（＞２０％）および後肢麻痺についてモニターした。
【０２５８】
腫瘍細胞を雌ｎｕ／ｎｕマウスの左心室に注入し，骨髄転移増殖の指標として，体重減少（＞２０％）および後肢麻痺について，マウスをモニターした。
【０２５９】
【表６】
2006508981.tif 000020
【０２６０】
ＱＤ＝毎日
ＱＷＫ＝週１回
Ｎ／Ａ＝非適用；ＮＳ＝有意ではない
＊スチューデントｔ検定用の比較
【０２６１】
ＭＤＡ−ＭＢ−４３５同所ヒト乳癌腫腫瘍モデルにおいては，化合物１で処置することにより単独療法として４０ｍｇ／ｋｇ／日でデリバリーしたとき，ベヒクル処置単独と比較してマウスの生存が有意に改良された（５２ｖｓ．４６日間，ｐ＝０．０３）。ドセタキセルで５ｍｇ／ｋｇ／週で単独療法として３週間処置したとき，ベヒクル処置マウスと比較して生存は有意に改善されなかった（５２ｖｓ．４６日間，ｐ＝０．３）。
【０２６２】
４０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１と５ｍｇ／ｋｇ／週のドセタキセルとの組み合わせを３週間与えると，単独療法としての化合物１（生存中央値６０ｖｓ．５２日間，ｐ＝０．０１７）またはドセタキセル（生存中央値６０ｖｓ．５２日間，ｐ＝０．０００６）と比較して，生存が有意に増強された。
【０２６３】
実施例７：
ＬＳ１７４ｔ結腸癌効力実験（化合物１＆ＣＰＴ−１１）
ＣＰＴ−１１（イリノテカン）と組み合わせた化合物１のＬＳ１７４ｔヒト結腸癌腫皮下腫瘍モデルにおける増強された抗腫瘍効力の判定
この実施例は，ヒト結腸癌モデルにおける効力および毒性に対する化合物１とＣＰＴ−１１（イリノテカン）の組み合わせ治療の効果を評価する。
【０２６４】
投与前に腫瘍を約１００ｍｍ3の体積に成長させた。表７は，このモデルで得られた結果を示す。
【０２６５】
【表７】
2006508981.tif 000021
【０２６６】
ＱＤ＝毎日
ＱＷＫ＝週１回
Ｄ５Ｗ＝５％デキストロース，水中
Ｎ／Ａ＝非適用；ＮＳ＝有意ではない
＊スチューデントｔ検定用の比較
【０２６７】
ＬＳ１７４ｔヒト結腸癌腫皮下腫瘍モデルにおいては，化合物１で処置することにより，単独療法として４０ｍｇ／ｋｇ／日でデリバリーしたとき，腫瘍成長が有意に阻害された（６８％，第２３日）。２０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１で単独療法として処置すると，このモデルでは有意な成長阻害がみられなかった。１００ｍｇ／ｋｇ／週のＣＰＴ−１１（イリノテカン）で単独療法として３週間処置した場合も，有意な腫瘍成長阻害はみられなかった（６４％，第２３日）。実験の期間にわたり，化合物１は４０ｍｇ／ｋｇ／日で単独療法として腫瘍の成長を著しく阻害したが，２０ｍｇ／ｋｇ／日でまたは１００ｍｇ／ｋｇ／週のＣＰＴ−１１で３週間処置した腫瘍は，ベヒクル処置対照と比較してややゆっくりした速度で成長した。
【０２６８】
２０または４０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１と１００ｍｇ／ｋｇ／週のＣＰＴ−１１との組み合わせを３週間投与すると，実験の最初の３週間の間に単独療法としての化合物１またはＣＰＴ−１１と比較して腫瘍成長の阻害が増強された。準最適用量の２０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１と１００ｍｇ／ｋｇ／週のＣＰＴ−１１の組み合わせを３週間投与すると，化合物１またはＣＰＴ−１１単独（第２３日：化合物１：７４％阻害，ｐ＝０．０１４およびＣＰＴ−１１５１％阻害；ｐ＝０．０６−有意傾向）と比較して，腫瘍成長の阻害が増強された。さらに，４０ｍｇ／ｋｇ／日の化合物１と１００ｍｇ／ｋｇ／週のＣＰＴ−１１との組み合わせを３週間投与すると，化合物１またはＣＰＴ−１１単独と比較して腫瘍成長の阻害が増強された（第２３日：化合物１：６５％阻害，ｐ＝０．０７；ＣＰＴ−１１：６８％阻害，ｐ＝０．０２）。これらの実験において，化合物１とＣＰＴ−１１との組み合わせはよく許容された。
【０２６９】
実施例８：
ＨＴ−２９結腸癌効力実験（化合物１＆ＣＰＴ−１１）
ＨＴ−２９ヒト結腸癌腫皮下腫瘍モデルにおける，ＣＰＴ−１１（イリノテカン）と組み合わせた化合物１の抗腫瘍効力の増強の判定
この実施例は，別のヒト結腸癌モデルにおいて化合物１とＣＰＴ−１１（イリノテカン）との組み合わせ療法が効力および毒性に及ぼす効果を評価する。
【０２７０】
投与前に，腫瘍を約１００ｍｍ3の体積に成長させた。表８はこのモデルで得られた結果を示す。
【０２７１】
【表８】
2006508981.tif 000022
【０２７２】
ＱＤ＝毎日
ＱＷＫ＝週１回
Ｄ５Ｗ＝５％デキストロース，水中
Ｎ／Ａ＝非適用；ＮＳ＝有意ではない
＊スチューデントｔ検定による比較
【０２７３】
ＨＴ−２９ヒト結腸癌腫皮下腫瘍モデルにおいては，化合物１で処置することにより，２０ｍｇ／ｋｇ／日で単独療法としてデリバリーしたとき，腫瘍成長が有意に阻害された（第３８日で７８％）。ＣＰＴ−１１（イロノテカン）で１００ｍｇ／ｋｇ／週で単独療法として３週間処置すると，腫瘍成長阻害の傾向はみられたが，成長阻害は有意ではなかった。実験の期間にわたり，化合物１およびＣＰＴ−１１による処置は，単独療法としてそれぞれ全体的に腫瘍の成長を遅らせる傾向を示した。
【０２７４】
２０ｍｇ／ｋｇ／週の化合物１と１００ｍｇ／ｋｇ／週のＣＰＴ−１１との組み合わせを３週間投与すると，化合物１（第３８日：４２％阻害，ｐ＝０．０４）またはＣＰＴ−１１（第３８日：７１％阻害，ｐ＝０．０２）を単独療法として投与した場合と比較して，腫瘍成長の阻害が有意に増強された。さらに，化合物１とＣＰＴ−１１との組み合わせは，実験の期間にわたり，いずれかの単独療法と比較して，顕著な成長阻害および生存の利点を与える傾向を示した。これらの実験において，化合物１とＣＰＴ−１１との組み合わせはよく許容された。
【０２７５】
当業者には，本発明の精神および範囲から逸脱することなく本発明の方法および組成物において種々の改変および変更をなすことができることが明らかであろう。すなわち，本発明の改変および変更は，特許請求の範囲およびその均等物の範囲内にある限り，本発明によりカバーされることが意図される。
【図面の簡単な説明】
【０２７６】
【図１】図１は，５ｍｇ／ｋｇ／日で投与した化合物１とドセタキセルとの組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図２】図２は，１０ｍｇ／ｋｇ／日で投与した化合物１とドセタキセルとの組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図３】図３は，１５ｍｇ／ｋｇ／日で投与した化合物１とドセタキセルとの組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図４】図４は，５，１０および１５ｍｇ／ｋｇ／日で投与した化合物１とドセタキセルとの組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図５】図５は，化合物１と５−ＦＵとの組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図６】図６は，化合物１とドキソルビシンとの組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図７】図７は，化合物１とシスプラチンとの組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図８】図８は，２０ｍｇ／ｋｇ／日および４０ｍｇ／ｋｇ／日で投与した化合物１とＣＰＴ−１１との組み合わせが単独療法と比較して腫瘍の成長を遅らせることを示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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