(57)【要約】細菌のメチオニルｔ−ＲＮＡシンセターゼ（ＭＲＳ）の阻害剤である新規な置換されたチオフェンが開示される。それらの製造法及びそれらの抗菌剤としての治療における使用の方法も開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2006519261.tif 000016
（式中、
Ｒ１は、Ｃ（１−３）アルキル、Ｃ（２−３）アルケニル、Ｃ（２−３）アルキニルからなる群から選択され；
Ｒ２は、ハロゲンであり；
Ｒ３は、Ｂｒ，任意にフッ素置換されたＣ（１−３）アルキル、任意にフッ素置換されたＣ（２−３）アルケニル、及びＣ（２−３）アルキニルからなる群から選択され；
Ｒ４は、Ｈ，及びＣ（１−３）アルキルからなる群から選択され；
Ｙは、Ｃ（１−３）アルキルであり；そして
Ｚは、置換されたか又は置換されていないヘテロアリールイミダゾール、置換されたか又は置換されていないキノロン、置換されたか又は置換されていないベンズイミダゾール、置換されたか又は置換されていない融合されたヘテロアリールピリドン、置換されたか又は置換されていない融合されたアリールピリミドン、又は置換されか又は置換されていない融合されたヘテロアリールピリミドンからなる群から選択される）
の化合物。
【請求項２】
化合物が、式（ＩＩ）：
【化２】
2006519261.tif 000017
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは請求項１において定義されたとおりであり；そして
Ｒ５は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１−６）アルキル（任意にハロ、ヒドロキシ、アミノ、モノからパーフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、カルボキシ又は（Ｃ１−６）アルコキシカルボニルにより置換される）、（Ｃ３−７）シクロアルキル、Ｃ（１−６）アルコキシ、アミノ、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、アシルアミノ、カルボキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル、カルボキシ（Ｃ１−６）アルキルオキシ、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフォニル、スルファモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルスルファモイル、カルバモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルカルバモイル、及びヘテロシクリルからなる群から選択される１から３の置換基により任意に置換された５又は６員ヘテロアリール環の残基である。）
の化合物である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
化合物が、式（ＩＩＩ）：
【化３】
2006519261.tif 000018
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは請求項１において定義されたとおりであり；
Ｒ６は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１−６）アルキル（任意にハロ、ヒドロキシ、アミノ、モノからパーフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、カルボキシ又は（Ｃ１−６）アルコキシカルボニルからなる群から選択されるメンバーにより置換される）、（Ｃ３−７）シクロアルキル、Ｃ（１−６）アルコキシ、アミノ、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、アシルアミノ、カルボキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル、カルボキシ（Ｃ１−６）アルキルオキシ、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフォニル、スルファモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルスルファモイル、カルバモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルカルバモイル、及びヘテロシクリルからなる群から選択され；
ｍは、０又は１から３の整数である。）
の化合物である、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
化合物が、式（ＩＶ）：
【化４】
2006519261.tif 000019
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは式（Ｉ）にて定義されたとおりであり；そして
Ｒ６及びｍは、請求項３において定義されたとおりであり、イミダゾール環の互変体形を含む。）
の化合物である、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
化合物が、式（Ｖ）：
【化５】
2006519261.tif 000020
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは請求項１において定義されたとおりであり；
ＷはＮ又はＣであり、そして
Ｒ５及びｍは請求項２において定義されたとおりであり；
ＹはＣ（１−３）アルキレン又はＣ（４−６）シクロアルキレンである。）
の化合物であって、ピリミドン環の互変体形を含む化合物である（ＷがＮのとき）、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１がメチル、アリル、プロペン及びプロピンからなる群から選択され；
Ｒ２がＢｒであり；
Ｒ３がＢｒ，エチル、シクロプロピル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ビニル、フルオロビニル、及びエチンからなる群から選択され；
Ｒ４がＨであり；
ＹがＣ２アルキルであり；そして
Ｚがキノリン、ヘテロアリールイミダゾール、ベンズイミダゾール、及びヘテロアリールピリミドンからなる群から選択される
請求項１乃至５の何れか１項記載の化合物。
【請求項７】
請求項１乃至６の何れか１項記載の化合物の塩。
【請求項８】
薬学上受容可能な、請求項７記載の塩。
【請求項９】
Ｎ−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−５−エチニル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−ビニルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−５−エチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−５−シクロプロピル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−３−（１−プロピニル）−５−エチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−３−（１−プロペニル）−５−エチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾール）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾール）プロパン−１，３−ジアミン；
Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾール）プロパン−１，３−ジアミン；及び
Ｎ−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン
からなる群から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
細菌感染の治療における使用のための、請求項１乃至９の何れか１項記載の化合物。
【請求項１１】
請求項１乃至９の何れか１項記載の化合物及び薬学上受容可能な担体又は賦形剤を含む薬学組成物。
【請求項１２】
式：
【化６】
2006519261.tif 000021
の化合物
（式中、Ｒ１０はＨ，アルキル又は置換されたアルキルであり；そして
Ｒ９はアルキル、置換されたアルキル、又はアルキルブリッジ、例えばジオキサンである）
を、化合物：
【化７】
2006519261.tif 000022
と、パラジウム触媒及び塩基の存在下で反応させることを含む、ビニルチオフェン中間体を製造する方法。
【請求項１３】
ａ）式：
【化８】
2006519261.tif 000023
（式中、Ｒ１1は、フェニル又は置換されたフェニル、又はヘテロアリール、例えばチオフェン、フラン、ピリジル及びアルキルからなる群から別個に選択される）
の化合物を、式：
【化９】
2006519261.tif 000024
（式中、Ｒ１０はＨ，アルキル又は置換されたアルキルである）
の化合物とリチウムの存在下で反応させることにより
式：
【化１０】
2006519261.tif 000025
の化合物を生成し；そして
ｂ）式
【化１１】
2006519261.tif 000026
の化合物を式
【化１２】
2006519261.tif 000027
の化合物と、パラジウム触媒、例えば、あらゆるアルシン又はホスフィンリガンド、例えば、ＡｓＰｈ３又はＰＰｈ３、及び銅（Ｉ）触媒、例えばＣｕＩ，及びアルカリ土類金属フッ化物、例えば、ＣｓＦの存在下で反応させることにより、式：
【化１３】
2006519261.tif 000028
の化合物を生成することを含む、フルオロビニルチオフェン中間体を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の開示】
【０００１】
発明の分野
本発明は、細菌のメチオニルｔ−ＲＮＡシンセターゼ（ＭＲＳ）の阻害剤である新規の置換されたチオフェン、それらの製造方法及びそれらの抗菌剤としての使用のための方法に関する。
【０００２】
発明の背景
ｔ−ＲＮＡシンセターゼは蛋白質の生合成に関与することから、その阻害は細胞成長の停止を導くと予測してよい。即ち、例えば、シュードモナスフルオレセンスにより生産される化合物ムピロシンは抗菌剤であり、そしてグラクソスミスクラインにより市販されている製品バクトロバン中の活性成分として使用されている。ムピロシンは、イソロイシルｔ−ＲＮＡシンセターゼの阻害剤であることが示された。各ｔ−ＲＮＡシンセターゼは、薬剤開発のための別々の標的を代表する。細菌から哺乳類にわたり選択性のあるｔ−ＲＮＡシンセターゼ阻害剤は、それらが抗菌剤として使用される潜在性を有するため、計り知れない治療上の興味がある。
【０００３】
グラム陽性生物シュードモナスアウレウス内のｔ−ＲＮＡシンセターゼ遺伝子の配列は、最近決定され（例えば、スタフィロコッカスアウレウスのＭＲＳに関する欧州特許出願番号９７３００３１７．１，スミスクラインビーチャムを参照）、それにより、阻害剤を同定するプロセスが助けられた。さらに、他の病原性細菌、例えばグラム陰性生物ヘモフィルスインフルエンザ内のｔ−ＲＮＡシンセターゼ遺伝子の配列も公表された（Ｒ．Ｄ．Ｆｌｅｉｓｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６９，４９６−５１２，１９９５）。
【０００４】
Ｌｅｓｐａｇｎｏｌらは、降圧活性を有する、８−置換されたテオフィリン誘導体のグループ、特に８−［２−（ベンジルアミノ）エチルアミノ］テオフィリンを記載した（Ａｎｎ  Ｐｈａｒｍ  Ｆｒ，１９６８，２６（３），２０７−１４）。
【０００５】
本明細書に引用された全ての特許、特許出願公表、及び他の文献の開示は、それらの全体を引用により本明細書に取り込む。
【０００６】
発明の詳細な説明
我々は、細菌のメチオニルｔ−ＲＮＡシンセターゼの有力な阻害剤である、置換されたチオフェンの新規なクラスを今発見した。
【０００７】
発明は、式（Ｉ）：
【０００８】
【化１】
2006519261.tif 000002
【０００９】
（式中、
Ｒ１は、Ｃ（１−３）アルキル、Ｃ（２−３）アルケニル、Ｃ（２−３）アルキニルからなる群から選択され；
Ｒ２は、ハロゲン、好ましくはＢｒであり；
Ｒ３は、Ｂｒ，任意にフッ素置換されたＣ（１−３）アルキル、任意にフッ素置換されたＣ（２−３）アルケニル、及びＣ（２−３）アルキニルからなる群から選択され；
Ｒ４は、Ｈ，及びＣ（１−３）アルキルからなる群から選択され；
Ｙは、Ｃ（１−３）アルキルであり；そして
Ｚは、置換されたか又は置換されていないヘテロアリールイミダゾール、置換されたか又は置換されていないキノロン、置換されたか又は置換されていないベンズイミダゾール、置換されたか又は置換されていない融合されたヘテロアリールピリドン、置換されたか又は置換されていない融合されたアリールピリミドン、又は置換されか又は置換されていない融合されたヘテロアリールピリミドンからなる群から選択される）
の化合物を提供する。
【００１０】
発明の好ましい態様は、
Ｒ１が、メチル、アリル、プロペン、及びプロピンからなる群から選択され；
Ｒ２がＢｒであり；
Ｒ３が、Ｂｒ，エチル、シクロプロピル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ビニル、フルオロビニル、及びエチンからなる群から選択され；
Ｒ４がＨであり；
ＹがＣ２アルキルであり；そして
Ｚが、キノリン、ヘテロアリールイミダゾール、ベンズイミダゾール、及びヘテロアリールピリミドンから選択される
化合物である。
【００１１】
式（Ｉ）の化合物は、細菌のメチオニル、ｔ−ＲＮＡシンセターゼの阻害剤である。
塩は、無機酸及び有機酸から形成してよい。式（Ｉ）の化合物の薬学上受容可能な塩を形成してよい適切な無機酸及び有機酸の代表例は、マレイン酸、フマル酸、安息香酸、アスコルビン酸、パモイック酸、コハク酸、ビスメチレンサリチル酸、メタンスルフォン酸、エタンジスルフォン酸、酢酸、プロピオン酸、酒石酸、サリチル酸、クエン酸、グルコン酸、アスパラギン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、イタコン酸、グリコール酸、ｐ−アミノ安息香酸、グルタミン酸、ベンゼンスルフォン酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、シクロヘキシルスルファミン酸、リン酸及び硝酸を含む。
【００１２】
本明細書にて使用される場合、用語「アルキル」及び類似の用語、例えば「アルコキシ」は、全ての直鎖、分枝鎖、及び環状のアイソマーを含む。それらの代表例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、シクロプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル及びｎ−ヘキシルを含む。任意にフッ素置換されたアルキルは、アルキル鎖上に１又はそれより多いＦの置換基をＨの代わりに有してよい。任意にフッ素置換されたアルキルの代表例は、トリフルオロメチルである。
【００１３】
本明細書にて使用される場合、用語「アルケニル」と「アルキニル」は、全ての直鎖、分枝鎖及び環状アイソマーを含む。それらの代表例は、ビニル、エチニル及び１−プロピニルを含む。任意にフッ素置換されたアルケニルは、アルケニル鎖上に１又はそれより多いＦの置換基をＨの代わりに有してよい。任意にフッ素置換されたアルケニルの代表例は、フルオロビニルである。
【００１４】
アルキル及びアルケニル基のための好ましい置換基は、例えば、他に規定しない限り、ハロゲン、シアノ、アジド、ニトロ、カルボキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル、カルバモイル、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルカルバモイル、スルフォ、スルファモイル、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルスルファモイル、アミノ、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、アシルアミノ、ウレジド、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニルアミノ、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ、アリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、（Ｃ１−６）アルコキシ、アシルオキシ、オキソ、アシル、２−チエノイル、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフォニル、ヒドロキシイミノ、（Ｃ１−６）アルコキシアミノ、ヒドラジノ、ヒドラゾノ、ベンゾヒドロキシモイル、グアニジノ、アミジノ及びイミノアルキルアミノを含む。
【００１５】
本明細書にて使用される場合、用語「アリール（aryl）」は、他に規定しない限り、５まで、好ましくは３までの置換基により任意に置換されたフェニル又はナフチルを含む。
置換された場合、アリール基は、３までの置換基を有してよい。アリール基の好ましい置換基は、例えば、他に規定しない限り、ハロゲン、シアノ、（Ｃ１−６）アルキル、モノからパーフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−７）シクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ２−６）アルケノキシ、アリールＣ（１−６）アルコキシ、ハロ（Ｃ１−６）アルキル、ヒドロキシ、アミノ、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、アシルアミノ、ニトロ、カルボキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−６）アルケニルオキシカルボニル、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル（Ｃ１−６）アルキル、カルボキシ（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−６）アルキルカルボニルオキシ、カルボキシ（Ｃ１−６）アルキルオキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフォニル、スルファモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）−アルキルスルファモイル、カルバモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルカルバモイル、及びヘテロシクリルを含む。
【００１６】
本明細書にて使用される場合、用語「ヘテロアリール」は、酸素、窒素及び硫黄から選択される環の中に４つまでのヘテロ原子を含む単一又は融合の環を含む。好ましくは、ヘテロアリール環は、４から７、好ましくは５から６の環原子を含む。融合されたヘテロアリール環系は、炭素環式環を含んでよく、一つのヘテロ環式環を含むことを必要とする。
【００１７】
本明細書にて使用される場合、用語「ヘテロシクリル」は、酸素、窒素及び硫黄から選択される環の中に４つまでのヘテロ原子を含む、芳香族及び非芳香族の単一又は融合の環を含む。適切には、ヘテロシクリル環は、４から７、好ましくは５から６の環原子を含む。融合されたヘテロアリール環系は、炭素環式環を含んでよく、一つのヘテロ環式環を含むことのみを必要とする。
【００１８】
置換する場合、ヘテロアリール又はヘテロシクリル基は、３までの置換基を有してよい。好ましいそのような置換基は、アリール基並びにオキソに関して以前に記載されたものを含む。
【００１９】
本明細書にて使用される場合、用語「ハロゲン」及び「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素及びフルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードをそれぞれ含む。
発明による化合物は、実質上純粋な形態、例えば、少なくとも５０％純度、より適切には少なくとも６０％純度、有利には少なくとも７５％純度、好ましくは少なくとも８５％純度、より好ましくは少なくとも９５％純度、特別には少なくとも９８％純度にて適切に提供され、全てのパーセンテージは重量／重量として計算される。混ざり物が存在するか又は純度の劣る形態の発明の化合物は、例えば、薬学用途に適した同じ化合物又は関連する化合物（例えば、相当する誘導体）の、より純粋な形態の製造に使用してよい。
【００２０】
本発明のある化合物が一つ又はそれより多いキラル中心を有することにより、ジアステレオアイソマー及びエナンチオマーを含むステレオアイソマーとして存在してよいことが認識される。本発明は、全てのそのようなステレオアイソマー及びラセミ混合物を含むそれらの混合物をカバーする。
【００２１】
従って、本発明は、式（ＩＩ）の化合物を提供し、式（Ｉ）中のＺは、置換されたか又は置換されていないヘテロアリールイミダゾール：
【００２２】
【化２】
2006519261.tif 000003
【００２３】
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは式（Ｉ）にて定義されたとおりであり、
Ｒ５は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１−６）アルキル（任意にハロ、ヒドロキシ、アミノ、モノからパーフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、カルボキシ又は（Ｃ１−６）アルコキシカルボニルにより置換される）、（Ｃ３−７）シクロアルキル、Ｃ（１−６）アルコキシ、アミノ、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、アシルアミノ、カルボキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル、カルボキシ（Ｃ１−６）アルキルオキシ、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフォニル、スルファモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルスルファモイル、カルバモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルカルバモイル、及びヘテロシクリルから選択される１から３の置換基により任意に置換された５又は６員ヘテロアリール環の残基である。）
及びそれらの塩、好ましくは薬学上受容可能なそれらの塩である。
【００２４】
Ｒ５により形成される代表的なヘテロアリール環は、窒素含有ヘテロアリール環であって、６員環原子を有して１又は２の窒素原子を含み、例えば、ｂ−又はｃ−ピリド、ｄ−ピリジモ又はｃ−ピリダジノ；又は硫黄含有ヘテロアリール環であって、５員環原子を有し、例えば、ｃ−チエノである。好ましくは、ヘテロアリール環は置換されていない。好ましくは、当該環はｃ−ピリダジノである。
【００２５】
本発明は、式（Ｉ）の中のＺが置換されたか又は置換されていないキノリンである場合の、式（ＩＩＩ）：
【００２６】
【化３】
2006519261.tif 000004
【００２７】
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは式（Ｉ）にて定義されたとおりであり；
Ｒ６は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１−６）アルキル（任意にハロ、ヒドロキシ、アミノ、モノからパーフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、カルボキシ又は（Ｃ１−６）アルコキシカルボニルにより置換される）、（Ｃ３−７）シクロアルキル、Ｃ（１−６）アルコキシ、アミノ、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、アシルアミノ、カルボキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル、カルボキシ（Ｃ１−６）アルキルオキシ、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフォニル、スルファモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルスルファモイル、カルバモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルカルバモイル、及びヘテロシクリルから選択され；
ｍは、０又は１から３の整数である。）
の化合物
及びそれらの塩、好ましくは薬学上受容可能なそれらの塩も提供する。
【００２８】
本発明は、式（Ｉ）の中のＺが置換されたか又は置換されていないベンズイミダゾールである場合の式（ＩＶ）：
【００２９】
【化４】
2006519261.tif 000005
【００３０】
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは式（Ｉ）にて定義されたとおりであり；
Ｒ６及びｍは、式（ＩＩＩ）において定義されたとおりである。）
の化合物
及びそれらの塩、好ましくは薬学上受容可能なそれらの塩も提供する。
【００３１】
本発明は、式（Ｉ）の中のＺが置換されたか又は置換されていない融合ヘテロアリールピリドン又は融合ヘテロアリールピリミドンである場合の式（Ｖ）：
【００３２】
【化５】
2006519261.tif 000006
【００３３】
（式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹは式（Ｉ）にて定義されたとおりであり；
ＷはＣＨであり、そしてＲ５は５又は６員環のヘテロアリール環の残基であるか、又はＷはＮであり、そしてＲ５は５又は６員環のヘテロアリール環又はアリール環の残基であり、当該ヘテロアリール環又はアリール環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１−６）アルキル（任意にハロ、ヒドロキシ、アミノ、モノからパーフルオロ（Ｃ１−３）アルキル、カルボキシ又は（Ｃ１−６）アルコキシカルボニルにより置換される）、（Ｃ３−７）シクロアルキル、Ｃ（１−６）アルコキシ、アミノ、モノ−又はジ−（Ｃ１−６）アルキルアミノ、アシルアミノ、カルボキシ、（Ｃ１−６）アルコキシカルボニル、カルボキシ（Ｃ１−６）アルキルオキシ、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフォニル、スルファモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルスルファモイル、カルバモイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−６）アルキルカルバモイル、及びヘテロシクリルから選択される１から３の置換基により任意に置換される。）
の化合物
及びそれらの塩、好ましくは薬学上受容可能なそれらの塩も提供する。
【００３４】
ヘテロアリール環の残基が環を含み、ヘテロ原子が硫黄、例えばチオフェン又は窒素、例えばピリド、ピリミド及びピラゾロであるような場合のＲ５の代表例。アリール環の残基がフェニルを含むＲ５の代表例。よって、代表的な置換基は、ハロゲン、例えばクロロ又はブロモを含む。
【００３５】
モイエティ：
【００３６】
【化６】
2006519261.tif 000007
【００３７】
の代表例が含むのは、
Ｗ＝Ｎであり、そしてＲ５がアリール環の残基：１Ｈ−キナゾリン−４−オンである；Ｗ＝ＣＨであり、そしてＲ５がヘテロアリール環の残基：７Ｈ−チエノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン、４Ｈ−［３，２−ｂ］ピリジン−７−オン、４Ｈ−チエノ［３，４−ｂ］ピリジン−７オン、１Ｈ−８，−ナフチリジン−４−オンである；Ｗ＝Ｎであり、そしてＲ１がヘテロアリール環の残基：１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン、１Ｈ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オン、１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン、１Ｈピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン；１Ｈ−ピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−４−オン、及び１，７−ジヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オンである；
好ましくは、Ｒ５がチエノ環の残基を形成する。
【００３８】
式（Ｉ）の化合物の中で、ＷがＣＨであるピリドン化合物の第１セットと、ＷがＮであり、そしてＲ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４及びＹが前で定義されたとおりのピリミドン化合物の第２セットが存在することが、認識される。
【００３９】
式（ＩＩ）の好ましい化合物は、実施例１１−２１の化合物を含む。式（ＩＩＩ）の好ましい化合物は、実施例１−１０の化合物を含む。式（ＩＶ）の好ましい化合物は、実施例２２−２４の化合物を含む。式（Ｖ）の好ましい化合物は、実施例２５の化合物を含む。
【００４０】
式（Ｉ）の化合物は、本明細書の中で記載された方法、又は以下において本明細書に取り込まれた先行技術に記載された方法により製造してよい。
式（Ｉ）の化合物は、式（ＶＩ）：
【００４１】
【化７】
2006519261.tif 000008
【００４２】
の化合物（Ｒ５及びＹは前で定義されたとおりである）を、
（ａ）ＹがＣＨ２である式（Ｉ）の化合物に関しては、式（ＶＩＩ）：
【００４３】
【化８】
2006519261.tif 000009
【００４４】
のアルデヒド（式中、Ｒ１，Ｒ２，及びＲ３は前で定義されたとおりであり、そしてＲ４＝Ｈであり）と還元アルキル条件下で反応させるか；又は（ｂ）前で定義されたとおりのＲ４＝アルキルの式（Ｉ）の化合物に関しては、式（ＶＩＩ）のケトンと還元アルキル条件下で反応させることにより製造してもよい。
【００４５】
適切な還元アルキル化条件は当業界においてよく知られており、例えば、溶剤系、例えばＤＭＦ／酢酸中のトリアセトキシボロヒドリドナトリウムの使用又はメタノール／酢酸中のシアノボロヒドリロ中の使用を含む。アルデヒドとの還元アルキル化は、通常、室温において１−１６時間の間実施される。ケトンとの還元アルキル化は、通常、還流メタノール下において１６−４０時間の間実施される。
【００４６】
式（ＶＩ）の化合物は、式（ＶＩＩＩ）：
【００４７】
【化９】
2006519261.tif 000010
【００４８】
（式中、Ｒ５は前で定義されたとおりであり；そして
Ｒ７は離脱基、例えばハロ、例えばクロロであるか又はＣ（１−６）アルキルチオである）
のイミダゾール化合物を、式（ＩＸ）
Ｒ８ＮＨＹＣＨ２ＮＨ２                        （ＩＸ）
（Ｒ８＝Ｈであり、そしてＹは前で定義されたとおりである）のアミン化合物；
又はそれらの活性化誘導体と；求核性置換条件下で反応させることにより製造してよい。
【００４９】
適切な条件は、当業界においてよく知られており、大過剰量の式（ＩＸ）の化合物の使用により、反応が完了することを推進することを含む、そして６０−１３０℃において加熱する。塩基の追加は、いくつかの場合に有利であり、例えば、第三級塩基、例えば、Ｎ，Ｎ−ジ（シクロヘキシル）エチルアミンである。
【００５０】
式ＶＩＩの化合物は、アルキル、アルケニル、又はアルキニルボロネートエステルＸを適切な置換されたチオフェンアルデヒドＸＩと反応させること：
【００５１】
【化１０】
2006519261.tif 000011
【００５２】
により製造してよい。
式ＶＩＩのフルオロビニル化合物は、ビニルフルオロシリコン誘導体ＸＩＩを、適切な置換されたチオフェンアルデヒドＸＩと反応させること：
【００５３】
【化１１】
2006519261.tif 000012
【００５４】
により製造してよい。
式（ＩＸ）の化合物はアミンであり、そして市販されているか、又は例えば官能基相互交換によりアミンを製造するための当業界においてよく知られた方法を用いて、利用可能な出発物質から製造してよい。
【００５５】
式（ＩＩ）の化合物は、２００３年１２月５日に出願された米国特許出願連続番号６０／５２７，２２９に記載された方法を用いて製造することができる。
式（ＩＩＩ）の化合物は、Ｂｅｒｇｅらに対する米国特許第６，３２０，０５１号に記載された方法を用いて製造することができ、その全体を引用により本明細書に取り込む。
【００５６】
式（ＩＶ）の化合物は、国際特許出願公開ＷＯ００／７１５２２に記載された方法を用いて製造することができ、その全体を引用により本明細書に取り込む。
式（Ｖ）の化合物は、国際特許出願公開ＷＯ００／７１５２４に記載された方法を用いて製造することができ、その全体を引用により本明細書に取り込む。
【００５７】
この発明の化合物は、グラム陽性生物、例えば、ブドウ球菌、例えばスタフィロコッカスアウレウスオックスフォード及びブドウ球菌のコアグラーゼ陰性株、例えばスタフィロコッカスエピダミディス；連鎖球菌、例えばストレプトコッカスピオゲネスＣＮ１０及びストレプトコッカスニューモニエＲ６；及び腸球菌、例えばエンテロコッカスフェーカリスＩを含む、ある範囲の重要な病原性細菌に対して活性である。好ましくは、この発明の化合物は、グラム陰性細菌、例えば、ヘモフィルス属、例えば、ヘモフィルスインフルエンザＱ１；モラキセラ属、例えばモラキセラカタルハリス１５０２；及びエシェリヒア属、例えば、エシェリヒアコリＤＣ０にも活性である。本発明のもっとも好ましい化合物は、スタフィロコッカスアウレウス；ストレプトコッカスニューモニエ；エンテロコッカスフェーカリス；ヘモフィルスインフルエンザ及びモラキセラカタルハリスに対して活性になる。
【００５８】
さらに、この発明の化合物は、ブドウ球菌生物、例えばスタフィロコッカスアウレウス及びブドウ球菌のコアグラーゼ陰性株、例えば、他の抗菌剤、例えばβ−ラクタム抗生物質、例えば、メチシリン；マクロリド類；アミノグリコシド類、及びリンコサミド類に耐性の（多剤耐性を含む）スタフィロコッカスエピダミディスに対して活性である。本発明の化合物は、よって、ＭＲＳＡ及びＭＲＣＮＳの治療に有用である。
【００５９】
本発明の化合物は、バンコマイシン耐性株を含むエンテロコッカスフェーカリスの株に対しても活性であり、よって、ＶＲＥ生物に関連する感染を治療することにおける用途を有する。さらに、本発明の化合物は、ムピロシンに耐性のブドウ球菌生物の治療に有用である。
【００６０】
処置してよい細菌感染は、呼吸器感染、中耳炎、髄膜炎、心内膜炎、男性の皮膚及び軟組織の感染、畜牛の乳房炎、及びブタやウシ等の農園の動物における呼吸器感染も含む。従って、さらなる側面において、本発明は、ヒト及びヒト以外の動物において細菌感染を治療する方法を提供し、当該方法は、治療上有効な量の前で定義された式（Ｉ）の化合物をそのような治療を必要とするヒト又はヒト以外の動物に投与することを含む。グラム陽性及びグラム陰性細菌の両方を含む広い範囲の抗菌活性を有する本発明の化合物は、地域社会の後天的な感染の経験に基づく治療のための地域社会における一般的な用途を有することが認識される。比較において、より限定された範囲の、例えばグラム陽性細菌に対する活性を有する本発明の化合物は、原因として病原精製物が同定された状況において、おそらくは使用される。
【００６１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物を薬学上受容可能な担体又は賦形剤と共に含む薬学組成物を提供する。
本発明は、式（Ｉ）の化合物、又は発明による組成物を、その要求がある患者に対して投与することを含む、動物、特にヒト又は家畜動物における細菌感染を治療する方法も提供する。
【００６２】
発明は、さらに、細菌感染の治療における医薬組成物の製造における、式（Ｉ）の化合物の使用法を提供する。
発明による化合物及び組成物は、他の抗生物質との類似により、ヒト又は獣医師の医薬における用途のための何れかの便利な用途における投与のために製剤化してよい。
【００６３】
発明による化合物及び組成物は、何れかの経路、例えば、経口、局所又は非経口による投与のために製剤化してよい。組成物は、例えば、タブレット、カプセル、粉末、顆粒、トローチ剤、クリーム、シロップ又は液体製剤、例えば、溶液又は懸濁液の形態で製造してよく、経口投与のため又は注射又は注入により非経口投与のための滅菌形態において製剤化してよい。
【００６４】
経口投与のためのタブレット及びカプセルは、ユニット投薬形態であってよく、例えば結合剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントゴム、又はポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、糖、トウモロコシの澱粉、リン酸カルシウム、ソルビトール又はグリシン；錠剤化潤滑剤（tabletting lubricant）、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール又はシリカ；崩壊剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含む慣用の賦形剤を含んでよい。タブレットは、普通の薬学の実務においてよく知られた方法に従い被覆してよい。
【００６５】
経口の液体製造物は、例えば、水性又は油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップ又はエリキシルの形態であってよく、あるいは使用前に水又は適切な媒体により戻す乾燥製品として提示してよい。そのような液体製造物は、慣用の付加物（additives）を含んでよく、例えば、懸濁剤、例えば、ソルビトール、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル又は水素化食用油；乳化剤、例えばレシチン、モノオレイン酸ソルビタン又はアカシア；非水性媒体（食用油を含んでよい）、例えばアーモンドオイル、油性エステル（例えば、グリセリン）、プロピレングリコール、又はエチルアルコール；保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル又はプロピル又はソルビン酸；及び所望なら、慣用の芳香剤及び発色剤を含んでよい。
【００６６】
局所投与を意図した発明による組成物は、例えば、軟膏、クリーム、ローション、目の軟膏、耳のドロップ、浸透させた包帯及びエアロゾルの形態であってよく、そして適切な慣用の付加物を含んでよく、例えば、保存剤、薬剤の浸透を助ける溶剤及び軟膏及びクリーム中の皮膚軟化剤を含む。そのような局所製剤は、適合可能な慣用の担体、例えば、クリーム又は軟化のベース剤、及びローションのためのエタノール又はオレイルアルコールも含んでよい。そのような担体は、製剤の約１重量％から約９８重量％を構成してよく；より通常には、製剤の約８０重量％までを構成する。
【００６７】
発明による組成物は、座薬として製剤化してよく、慣用の座薬用ベース剤、例えばココアバター又は他のグリセリド類を含んでよい。
非経口投与を意図された発明による組成物は、便利に液体ユニット投薬形態にしてよく、化合物と滅菌媒体、好ましくは水を利用して調製してよい。化合物は、使用される媒体及び濃度に依存して、媒体中の懸濁するか又は溶解してよい。溶液を調製する際には、化合物を注射のために水に溶解して、適切なバイアル又はアンプルに充填する前にフィルター滅菌して、次に密封してよい。有利には、例えば、局所麻酔剤、保存剤、及び緩衝剤を含む慣用の付加物を媒体に溶解することができる。溶液の安定性を増加させるためには、組成物をバイアルに充填した後に凍結して、真空下で水を除去してよい；結果の凍結乾燥粉末を次にバイアル中で密封し、そして注射のための水の付属のバイアルを供給することにより、使用前に液体に戻す。非経口懸濁液は実質上同じ様式にて調製してよいが、化合物を溶解する代わりに媒体に懸濁して、滅菌が濾過により行えないことが異なる。化合物は、代わりに、滅菌媒体中に懸濁する前に酸化エチレンに暴露することにより、滅菌してよい。有利には、界面活性剤又は湿潤剤をそのような懸濁液に含ませることにより、化合物の均一な分配を促進させる。
【００６８】
発明による化合物又は組成物は、抗菌に有効な量にて患者に適切に投与してよい。
発明による組成物は、投与方法に依存して、発明による化合物の、０．１重量％から、好ましく１０から６０重量％を含んでよい（組成物の全重量の）。
【００６９】
発明による化合物は、１．０から１００ｍｇ／体重ｋｇの１日の用量にて患者に適切に投与してよい。成人のヒト（約７０ｋｇの体重の）に関しては、５０から３０００ｍｇ，例えば約１５００ｍｇの発明の化合物を毎日投与してよい。適切には、成人のヒトの用量は１日あたり約５から２０ｍｇ／ｋｇである。より高いか又はより低い用量を、しかしながら、通常の臨床の実務に従い使用してよい。
【００７０】
発明の組成物をユニット用量形態にて提示する場合、各ユニット用量は、２５から１０００ｍｇ、好ましくは５０から５００ｍｇの、発明の化合物を適切に含んでよい。
以下の例は、先行特許ＵＳ６，３２０，０５１に位置するチオフェンの活性を示す。
【００７１】
【表１】
2006519261.tif 000013
【００７２】
以下の例は、本発明の化合物に関する改善された抗菌活性を有するチオフェンを示す。
【００７３】
【表２】
2006519261.tif 000014
【００７４】
【表３】
2006519261.tif 000015
【００７５】
還元アミン化のための一般法  メタノール（２ｍｌ）中のアミン（０．２ｍｍｏｌ）（アミンがジヒドロクロリドとして存在するなら０．５ｍｍｏｌの酢酸ナトリウムを含む）の懸濁液に、メタノール（２ｍｌ）及び酢酸（０．０３３ｍｌ）中のアルデヒド（０．２ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴン下で１０分間撹拌後に、ＭｅＯＨ１ｍｌ）中のＮａＣＮＢＨ３（２４ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を加え、そして反応物を１６時間撹拌した。反応混合物を、ＭｅＯＨ（８ｍｌ）によりフラッシュした２ｇのＶａｒｉａｎ  Ｂｏｎｄ  Ｅｌｕｔｅ  ＳＣＸカートリッジに適用した。カートリッジを、次に、ＭｅＯＨ中の８ｍｌの０．２Ｍ  ＮＨ３により溶出して、この溶出物を蒸発により乾燥した。残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーによりＣＨ２Ｃｌ２中２−１０％（９：１  ＭｅＯＨ／２０Ｍ  ＮＨ３）にて精製した。生成物を含むフラクションを混合し、そして減圧下で蒸発させることにより、生成物を白色固形物として得た。これを相当するジヒドロクロリドに変換するため、上記固形物をメタノール（０．４ｍｌ）中の１．０Ｍ  ＨＣｌに溶解し、そして溶液を蒸発させることにより乾燥した。
【００７６】
実施例１．Ｎ−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）と４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒドの混合物の還元アミン化のための一般法を用いて、表題の化合物を白色固形物として得た（０．０３４ｇ，４９％）。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４８４（１００％Ｍ＋）
【００７７】
実施例２．Ｎ−（４−ブロモ−５−エチニル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）４−ブロモ−５−エチニル−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド．トリメチルシリルアセチレン（３．７ｍＬ，２６．４ｍｍｏｌ）、４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド（１．５０ｇ，５２．８ｍｍｏｌ）、第１ヨウ化銅（１９ｍｇ）及びビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（８０ｍｇ）のトリエチルアミン（３５ｍＬ）中の混合物を室温において撹拌した。２時間後に、混合物を濾過して、蒸発させた。粗生成物は、石油エーテル４０−６０含有増加濃度のジクロロメタン５０％までにより溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーを行った。結果として得られたトリメチルシリル保護されたアセチレンを１０％濃縮された水酸化アンモニウム含有メタノールで処理した。２０℃において１５分間撹拌後に、溶剤を蒸発させることにより、表題の化合物を明るい褐色の泡として生成した（０．７３ｇ）；δＨ（ＣＤＣｌ３）９９．９（１Ｈ，ｓ），３．８０（１Ｈ，ｓ），２．５５（３Ｈ，ｓ）。
【００７８】
ｂ）Ｎ−（４−ブロモ−３−エチニル−５−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び２ａの混合物が、表題の化合物を白色固体として提供した。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４３０（１００％  Ｍ＋）。
【００７９】
実施例３．Ｎ−（４−ブロモ−５−メチル−３−ビニルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）４−ブロモ−２−フォルミル−３−メチル−５−ビニルチオフェン．−不活性雰囲気下で７ｍＬの反応チューブ中で、１７５ｍｇ（０．６１６ｍｍｏｌ）の４，５−ジブロモ−２−フォルミル−３−メチルチオフェン、０．１３６ｍＬ（０．６１６ｍｍｏｌ）のジ−ｎ−ブトキシビニルボラン、１９９ｍｇ（０．６１６ｍｍｏｌ）のテトラ−ｎブチルアンモニウムブロミド、２１３ｍｇ（１．５４ｍｍｏｌ）の炭酸カリウム及び２．８ｍｇ（０．０１２ｍｍｏｌ）の酢酸パラジウム（最後に添加）を１ｍＬの脱イオン水に溶解した。混合物を周囲温度において３時間激しく撹拌し、次に、水で希釈して、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）により抽出した。有機抽出物及び統べての非水性可溶性物質を混合し、活性炭を加え、そして混合物を１０分間撹拌し、その後、セライトを通して濾過し、溶剤を減圧下で除去することにより、黄色結晶を得た。これらは、次に、還流されたヘキサン及び活性炭で処理し、そして熱いヘキサンをセライトを通して濾過により除去して、上記プロセスを２回繰り返した。混合されたヘキサン抽出物を蒸発させて、乾燥させたところ、１３０ｍｇ  （８７％、混在する出発物質に関して調節された）の表題の化合物を白色固体として（ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンを溶出剤として使用したフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより除去可能なチオフェン出発物質により〜１５％が混在）得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）２．５（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），５．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１１．０Ｈｚ，ＣＨ２），５．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１７．４Ｈｚ，ＣＨ２），６．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．０，１７．４Ｈｚ，ＣＨ），１０．００（１Ｈ，ｓ，ＣＨＯ）。
【００８０】
ｂ）Ｎ−（４−ブロモ−５−ビニル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び３ａの混合物が、表題の化合物を白色固体として提供した。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４３２（１００％  Ｍ＋）。
【００８１】
実施例４．Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）ジフェニル（１−フルオロビニル）メチルシラン．無水雰囲気下で炎により乾燥された１Ｌの３首丸底の中で、６５ｍＬ（３０９ｍｍｏｌ）のジフェニルメチルクロロシランを無水ＴＨＦ６５０ｍＬ中の４．３ｇ（６１８ｍｍｏｌ）のリチウムワイヤーに加えた。混合物を、周囲温度において２０時間撹拌した。混合物を、次に、−７８℃に冷却し、そして反応混合の温度が−５５℃又はそれ未満にとどまるように、雰囲気を１，１−ジフルオロエチレン（過剰）で置換した。ジフルオロエチレンの添加は反応温度が−７０℃又はそれ未満にとどまったときに、停止した。反応物が透明な明るい黄色に変わるまで、＜−７０℃において反応物を撹拌し、そして次に、周囲温度に温めた。残るリチウムワイヤーを除去し、そして添加に際してガスが放出されなくなるまで、混合物をＮａ２ＳＯ４−１０Ｈ２Ｏの一部で処理した。次に、混合物をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、シリカパッドを通して濾過し、そしてパッドをエーテルで洗浄した。混合した濾過物を真空乾燥し、結果の残渣をヘキサンに懸濁／溶解し、そして別のシリカパッドを通して濾過した。パッドをヘキサンで洗浄し、濾過物を混合し、そして溶剤を減圧下で除去することにより、明るい黄色の液体を得たが、いくつかの白色結晶物質が共に存在した。生成物を真空蒸留により精製した（〜２Ｔｏｒｒにて１１３−１１７℃）ところ、４４ｇ（５９％）の表題の化合物を透明な無色の液体として得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）：０．７２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），４．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．６，６１．２Ｈｚ，ＣＨ２），５．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．６，３３．３，ＣＨ２），７．３９（６Ｈ，ｍ，ＡｒＨ），７．５９（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，ＡｒＨ）：δＦ（ＣＤＣｌ３）：−１０３．１６（ｑ，ｄｄ，Ｊ＝３３．３，６１．２Ｈｚ）。
【００８２】
ｂ）４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド．２５ｍＬ丸底フラスコ中の不活性雰囲気下で、１６６ｍｇの４ａ（０．６８５ｍｍｏｌ），１３０ｍｇの４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド（０．４５９ｍｍｏｌ）、２０９ｍｇのＣｓＦ（１．３８ｍｍｏｌ）、８８ｍｇのＣｕＩ（０．４５９ｍｍｏｌ）、１０．５ｍｇのＰｄ２（ｄｂａ）３（０．０１１５ｍｍｏｌ）及び１４．１ｍｇのＡｓＰｈ３（０．０４５９ｍｍｏｌ）を混合した。上記固形物を含むフラスコをアイスバスにより〜０℃に冷やして２ｍＬを脱気し、無水ジメチルフォルムアミド（ＤＭＦ）を加えた。反応混合物を０から５℃において２時間撹拌し、次に２ｍＬの水を加えた。混合物を次に５ｍＬの１Ｎ  ＮａＯＨにより希釈して、２５％のジエチルエーテル／ヘキサン（４ｘ２０ｍＬ）により抽出した。混合された抽出物は、ブラインで洗浄し（１ｘ５ｍＬ）、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、そして溶剤を真空下で除去した。残りの残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した（ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン）ところ、５０％収量の表題の化合物を白色の固形物として得た。δＨ（ＣＤＣｌ３）：２．５７（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），５．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，１８．５Ｈｚ，ＣＨ２），５．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，４９．６Ｈｚ，ＣＨ２），１０．０６（１Ｈ，ｓ，ＣＨＯ）：δＦ（ＣＤＣｌ３）：−９２．２０（ｑ，ｄｄ，Ｊ＝１８．４，５０．４Ｈｚ）；ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（ＭＨ＋，２４９）。
【００８３】
ｃ）Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．乾燥雰囲気下及び周囲温度にて、１．００ｇ（３．４５ｍｍｏｌ）の２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジヒドロクロリド及び０．７７０ｇ（９．３９ｍｍｏｌ）のＮａＯＡｃを４０ｍＬの無水ＭｅＯＨに溶解して、１０分間周囲温度にて撹拌した。０．７８０ｇの４ｂ（３．１３ｍｍｏｌ）を次に加え、次に８ｍＬのトリメチルオルトフォルメート及び追加の１０ｍＬの無水ＭｅＯＨを加えた。混合物を周囲温度において２時間撹拌した。溶剤を次に減圧下で除去し、そして残りの残渣を５０ｍＬの無水ＭｅＯＨに溶解して、０．４７４ｇ（１２．５ｍｍｏｌ）のＮａＢＨ４を撹拌しながら周囲温度において加えた。衆院温度において３０分間撹拌後に、溶剤を減圧下で除去し、そして結果の粘着性の固形物を０．１Ｎ  ＮａＯＨ（１ｘ，生成物が固形化するのに必要な一晩撹拌），脱イオン水（２ｘ）及び１：１のＥｔ２Ｏ／ヘキサン（２ｘ）で粉砕した。残った固形物を真空乾燥し、そして生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＮＨ３飽和されたＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製したところ、９００ｍｇ（６４％）の所望の精製物を白色の泡として得た。δＨ（ＣＤ３ＯＤ／ＣＤＣｌ３）：１．８２（２Ｈ，ｑｕｉｎ．，Ｊ＝６．４Ｈｚ，ＣＨ２），２．１５（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），２．７４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，ＣＨ２），３．３３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，ＣＨ２），３．９２（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２），４．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．８，１８．６Ｈｚ，ＣＨ２），５．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．８，５０．６Ｈｚ，ＣＨ２），５．５８（１Ｈ，ｓ，ＣＨ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，ＡｒＨ），７．２０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．２，７．１，８．０，ＡｒＨ），７．４５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．４，７．１，８．３Ｈｚ，ＡｒＨ）８．０７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．２，８．３Ｈｚ，ＡｒＨ）；ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）（ＭＨ＋，４５０）。
【００８４】
実施例５．Ｎ−（４−ブロモ−５−エチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）４−ブロモ−５−エチニル−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド．トリメチルシリルアセチレン（３．７ｍＬ，２６．４ｍｍｏｌ）、４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド（１．５０ｇ，５２．８ｍｍｏｌ），第１ヨウ化銅（１９ｍｇ）及びビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（８０ｍｇ）のトリエチルアミン（３５ｍＬ）中の混合物を、室温において撹拌した。２時間後に、混合物を濾過して蒸発させた。粗生成物をシリカゲル上でクロリドして５０％まで濃度を増加させたジクロロメタンを含む石油エーテル４０−６０により溶出した。結果のトリメチルシリル保護されたアセチレンを濃縮された水酸化アンモニウムを含むメタノールにより処理した。２０℃において１５分間撹拌後に、溶剤を蒸発させたところ、表題の化合物を明るい褐色の泡として得た（０．７３ｇ）；δＨ（ＣＤＣｌ３）９．９９（１Ｈ，ｓ），３．８０（１Ｈ，ｓ），２．５５（３Ｈ，ｓ）。
【００８５】
ｂ）４−ブロモ−３−メチル−５−エチル−２−チオフェンカルバルデヒド
４−ブロモ−３−メチル−５−エチニル−２−チオフェンカルバルデヒド５ａ（０．０１ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）と硫酸バリウム上のパラジウム（０．０８ｇ）の酢酸エチル（５ｍＬ）中の混合物を周囲圧力及び室温において脱水素化した。３時間後に、混合物を濾過して、溶剤を蒸発させたところ、所望の生成物を黄色のオイルとして得た。ＣＩＭＳ＋２３３［ＭＨ＋］。
【００８６】
ｃ）Ｎ−（４−ブロモ−５−エチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び５ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４３４（１００％Ｍ＋）。
【００８７】
実施例６．Ｎ−（４−ブロモ−５−シクロプロピル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）４−ブロモ−５−シクロプロピル−３−メチル−２−チオフェンカルバルデヒド  ４，５−ジブロモ−３−メチル−２−チオフェンカルバルデヒド（０．１４ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）とテトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（０．０２ｇ，０．０１６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２ｍＬ）中の懸濁液を、均質な溶液が形成されるまで（約１時間）、室温において撹拌した。水性重炭酸ナトリウム溶液（２ｍＬ中０．１２３ｇ）中のシクロプロピルホウ酸（０．０５ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え、そして結果の混合物を還流下で３時間撹拌した。冷却して、酢酸エチル／水により希釈した。有機相を分離し、そして水性相を酢酸エチルのフレッシュな部分で抽出した。混合した有機相を乾燥し、蒸発させることにより、粗生成物を生じた。
【００８８】
ｂ）４−ブロモ−５−エチル−３−［（１Ｅ／Ｚ）−１−プロペン−１−イル］−２−チオフェンカルバルデヒド
３，４−ジブロモ−５−エチル−２−チオフェンカルバルデヒド（０．２５ｇ，１ｍｍｏｌ），トリブチル［（１Ｅ／Ｚ）−１−プロペン−１−イル］スタンナン（０．３９７ｇ，１．２ｍｍｏｌ），テトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（０．１２４ｇ，０．１ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）中の混合物を還流して加熱した。２時間後に、混合物を冷却し、溶剤を蒸発させ、残渣に、増加濃度のジクロロメタン（５から５５％）を含むヘキサンにより溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーを行い、表題の化合物を生じた  ＣＩＭＳ＋２５９［ＭＨ＋］。
【００８９】
実施例７．Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）２−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イル）−１，３−ジオキソラン．４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド（２．８４ｇ，１０ｍｍｏｌ）、１，２−ジヒドロキシエタン（１．３６ｇ，２２ｍｍｏｌ）及び樹脂でサポートされた４−トルエンスルフォン酸のトルエン（１００ｍＬ）中の溶液を、水の分離と共に還流して加熱した。３時間後に、混合物を冷却し、濾過し、そして溶剤を蒸発させることにより、表題の化合物（３．２８ｇ）を得た；ｍ／ｚ（ＡＰ＋）３２９（ＭＨ＋，１００％）。
【００９０】
ｂ）３−ブロモ−５−（１，３−ジオキソラン−２−イル）−４−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド．化合物７ａ（３．２８ｇ，１０ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下で−７８℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウムの溶液（シクロヘキサン中２．５Ｍ，４ｍＬ）を滴下した。−７８℃にて０．３時間撹拌後に、溶液を乾燥ＤＭＦ（０．０７５ｍＬ，１０ｍｍｏｌ）により処理し、そしてさらに０．６時間撹拌した。冷却バスを次に取り除き、溶液を３時間かけて室温に到達させた。反応混合物を２Ｎ水性ＨＣｌによりクエンチし、そして生成物をジクロロメタン中に抽出した。抽出物を混合し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして蒸発させることにより、表題の化合物を得た（２．４ｇ）；δＨ（ＣＤＣｌ３）２．２９（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），４．０７（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２ＣＨ２），６．１４（１Ｈ，ｓ，ＣＨ），９．９８（１Ｈ，ｓ，ＣＨＯ）。
【００９１】
ｃ）２−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イル）−１，３−ジオキソラン．化合物７ｂ（０．２７７ｇ，１ｍｍｏｌ）とデオキソフルオル（０．３７８ｇ，１．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１ｍｌ）中の溶液を還流して加熱した。１４時間後に、混合物をジクロロメタンで希釈し、続いて水性重炭酸ナトリウム及び１Ｎの水性ＨＣｌで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）そして蒸発させることにより、表題の化合物を得た（０．２８ｇ）；δＨ（ＣＤＣｌ３）２．２５（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），４．０６（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２ＣＨ２），６．１２（１Ｈ，ｓ，ＣＨ），６．８７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５４．８Ｈｚ，ＣＨＦ２）。
【００９２】
ｄ）４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド．化合物７ｃ（０．５９８ｇ，２ｍｍｏｌ）と樹脂でサポートされた４−トルエンスルフォン酸の、水（１ｍＬ）を含むアセトン（２０ｍＬ）中の溶液を、室温において撹拌した。１４時間後に、混合物を濾過し、そして溶剤を蒸発させることにより、表題の化合物を得た（０．３６５ｇ）；δＨ（ＣＤＣｌ３）２．５６（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３），６．９０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５６Ｈｚ，ＣＨＦ２），１０．０７（１Ｈ，ｓ，ＣＨＯ）。
【００９３】
ｅ）Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び７ｄの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４５６（１００％Ｍ＋）。
【００９４】
実施例８．Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−カルバルデヒド．４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド（２５０ｍｇ，０．８８ｍｍｏｌ）を、第１ヨウ化銅（２００ｍｇ，０．９６ｍｍｏｌ）及び２，２−ジフルオロ−２−フルオロスルフォニル酢酸メチルエステル（８７１ｍｇ，４．４ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（１０ｍＬ）とＮ−メチルピロリジン（０．５ｍＬ）の混合物中に溶解した。７０℃において激しく振盪しながら７時間撹拌後に、混合物を冷却し、一晩かけて室温まで冷やした。ＤＭＦを蒸発させ、残渣をジエチルエーテル（３０ｍＬ）と飽和塩化アンモニウム溶液の間に分離した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し、そして蒸発させることにより、粗生成物を得た。シリカゲルを通して濾過し、ヘキサン／ジエチルエーテル（１：１）により溶出したところ、表題の化合物をパールイエローの固形物として得た（１５５ｍｇ）；ｍ／ｚ（ＡＰ−）２７２（Ｍ−，２５％）。
【００９５】
ｂ）Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び８ｄの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４７４（１００％Ｍ＋）。
【００９６】
実施例９．Ｎ−（４−ブロモ−３−（１−プロピニル）−５−エチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）３，４−ジブロモ−５−エチルチオフェン−２−カルバルデヒド．２，３，４−トリブロモ−５−エチルチオフェン（１．４ｇ，４．１ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下で−７８℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウム（シクロヘキサン中１．６Ｍ，２．５６ｍＬ）の溶液を滴下した。−７８℃において０．５時間撹拌後に、溶液を乾燥ＤＭＦ（０．３２ｍＬ，４．１ｍｍｏｌ）で処理し、そしてさらに０．６時間撹拌した。冷却バスを次に取り除き、そして溶液を３時間かけて室温にした。反応混合物を２Ｍ水性ＨＣｌによりクエンチし、そして生成物をジクロロメタンにより抽出した。抽出物を混合し、乾燥し（ＭｇＳＯ４），そして蒸発させた。残渣に、ヘキサン中０−５０％のジクロロメタンにより溶出するＫｉｅｓｅｌｇｅｌ  ６０上でのクロマトグラフを行ったところ、表題の化合物を得た（０．６ｇ）；ｍ／ｚ（ＡＰ＋）２９９（ＭＨ＋，１００％）。
【００９７】
ｂ）４−ブロモ−３−（１−プロピニル）−５−エチルチオフェン−２−カルバルデヒド．メチルアセチレンを、トリエチルアミン（２ｍｌ）とＴＨＦ（２ｍｌ）を含む溶液中に泡立たせた。１０分後、溶液を迅速に、化合物９ａ（０．２２７ｇ，０．８ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（５．８ｍｇ，０．００８ｍｍｏｌ）及び第１ヨウ化銅（０．１５ｍｇ，０．０００８ｍｍｏｌ）を含む１０ｍＬの反応器に加えた。反応器を密封し、そして反応混合物を室温において撹拌した。６０時間後に、反応混合物をセライトで濾過して濃縮した。残渣に、ヘキサン中０−５０％のジクロロメタンにより溶出するＫｉｅｓｅｌ  ｇｅｌ  ６０上でのクロマトグラフを行ったところ、表題の化合物を得た（０．１２６ｇ）；ｍ／ｚ（ＡＰ＋）２５７（ＭＨ＋，１００％）。
【００９８】
ｃ）Ｎ−（４−ブロモ−３−（１−プロピニル）−５−エチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び９ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４５８（１００％Ｍ＋）。
【００９９】
実施例１０．Ｎ−（４−ブロモ−３−（１−プロペニル）−５−エチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）３，４−ジブロモ−５−エチル−２−チオフェンカルバルデヒド
テトラブロモチオフェン（２０ｇ，５０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）中の溶液を、アルゴンの雰囲気下で−７８℃に冷却し、そしてｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍの２０ｍＬ）で滴下により処理した。２０分後に、アニオンをヨードエタン（４ｍＬ，５０ｍｍｏｌ）によりクエンチし、そして結果の溶液を室温において２時間撹拌した。反応混合物を再び−７８℃に冷却し、別の等量のｎ−ブチルリチウムで処理した。さらに２０分後に、乾燥ＤＭＦ（３．８ｍＬ，５０ｍｍｏｌ）を加えて、混合物を一晩で室温に温めた。水を加え、そして有機物質をジクロロメタンにより抽出し、有機層を乾燥し、そして蒸発させたところ、粗生成物を生じた。増加濃度のジクロロメタンを含むヘキサンによる溶出によるシリカゲル上のクロマトグラフィーにより、表題の化合物をパールイエローの固形物として得た。ＣＩＭＳ＋２９７［ＭＨ＋］。
【０１００】
ｂ）Ｎ−（４−ブロモ−５−シクロプロピル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び６ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４４４（１００％Ｍ＋）。石油エーテル／ジエチルエーテル（０から２５％）による溶出によるシリカゲル上のクロマトグラフィーにより、表題の化合物を白色の結晶固形物として得た。ＣＩＭＳ＋２４５［ＭＨ＋］。
【０１０１】
ｃ）Ｎ−（４−ブロモ−３−（１−プロペニル）−５−エチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−キノリン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロプ−１−イルアミノ）−１Ｈ−キノリン−４−オンジアミン１ａ（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，４５，１９５９）及び１０ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４６０（１００％Ｍ＋）。
【０１０２】
実施例１１  Ｎ−（４−ブロモ−５−シクロプロピル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミンジヒドロクロリド．
ａ）［３−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イルアミノ）プロピル］カルバミン酸ｔ−ブチルエステル．１，１’−チオカルボニルジイミダゾール（１．３４ｇ，７．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中の溶液に、０℃において、アルゴン雰囲気下で、１５分間かけて、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中の（３−アミノプロピル）カルバミン酸ｔ−ブチルエステル（０．８７ｇ，５ｍｍｏｌ）を滴下した。室温において３時間後に、混合物を蒸発させ、乾燥ジメチルフォルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、そして３，４−ジアミノピリダジンで処理した。結果の混合物をアルゴン下で１００℃において加熱した。４８時間後に、混合物を冷却し、そしてＤＭＦを蒸発させた。濃度を増加させながらの１０％水酸化アンモニウム／メタノール（０−１２％）を含むジクロロメタンによる溶出による、シリカゲル上での粗生成物のクロマトグラフィーにより、表題の化合物をクリーム色の固形物として得た。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）２９３（５１％，ＭＨ＋）。
【０１０３】
ｂ）Ｎ−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミントリフルオロ酢酸塩．［３−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イルアミノ）プロピル］カルバミン酸ｔ−ブチルエステル（０．２７ｇ，０．９２ｍｍｏｌ）を、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で室温において処理した。２時間後に、混合物を蒸発させ、ジクロロメタンに溶解し、再度蒸発させ、そして真空下で乾燥したところ、パールイエローの泡を得た。
【０１０４】
ｃ）Ｎ−（４−ブロモ−５−シクロプロピル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミンジヒドロクロリド．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミン１１ｂ及び６ａの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４６０（１００％Ｍ＋）。
【０１０５】
実施例１２．Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミンジヒドロクロリド．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミントリフルオロ酢酸塩１１ｂ及び８ａの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４４９（１００％Ｍ＋）。
【０１０６】
実施例１３．Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−ビニルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミンジヒドロクロリド．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミン１１ｂ及び３ａの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４０７（１００％Ｍ＋）。
【０１０７】
実施例１４．Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミンジヒドロクロリド．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミン１１ｂ及び４ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４２５（１００％Ｍ＋）。
【０１０８】
実施例１５．Ｎ−（４−ブロモ−５−エチニル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミンジヒドロクロリド．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリダジン−６−イル）プロパン−１，３−ジアミン１１ｂ及び２ａの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４０５（１００％Ｍ＋）。
【０１０９】
実施例１６．Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）−プロパン−１，３−ジアミン
ａ）１，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−チオン．ピリジン（４０ｍＬ）中の２，３−ジアミノピリジン（４．３６ｇ，４０ｍｍｏｌ）に、二酸化炭素（３．６ｍｌ，６０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を５０℃にて６時間加熱し、次に減圧下で蒸発により低体積に濃縮し、そして残渣をテトラヒドロフランで粉砕した。パールブラウンの固形物を濾過により回収し、そして乾燥させることにより、３．６ｇの第１収穫物を得た。第２収穫物（２．４４ｇ）は、再蒸発及びテトラヒドロフランによる粉砕により濾過物から得た。ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）１５２（ＭＨ＋，１００％）。
【０１１０】
ｂ）２−メタンスルファニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン  乾燥テトラヒドロフラン（１００ｍｌ）中の化合物１６ａ（５．５５ｇ，３６．７５ｍｍｏｌ）に、アルゴン下で、トリエチルアミン（５．６６ｍｌ，４０ｍｍｏｌ）及びヨードエタン（２．５ｍｌ，４０ｍｍｏｌ）を加えた。２０時間２０℃において撹拌後に、固形物を濾過により取り出してＴＨＦにより洗浄した。混合した濾過物を蒸発させることにより乾燥し、そしてジクロロメタンにより粉砕した。固形物を濾過により回収した、（４．５５ｇ，７５％）。ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）１６６（ＭＨ＋，１００％）。
【０１１１】
ｃ）Ｎ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン．１６ｂからの生成物（４．５５ｇ）を、還流しながらアルゴン下で５０時間、１３−ジアミノプロパン（４０ｍＬ）により処理した。溶剤を蒸発により減圧下で除去し、残渣をジエチルエーテルにより粉砕することにより、褐色の固形物を得た。これを、５−２５％（９：１メタノール／．８８０水性アンモニア）ジクロロメタン中で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製することにより、要求される生成物を得た、（２．６ｇ，５０％）。
【０１１２】
ｄ）Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）−プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン１６ｃ及び７ｄの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４３０（１００％Ｍ＋）。
【０１１３】
実施例１７  Ｎ−（４−ブロモ−５（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２イル）−プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン１６ｃ及び４ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４２４（１００％Ｍ＋）。
【０１１４】
実施例１８  Ｎ−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）３，４−ジアミノチオフェン．濃ＨＣｌ（２９４ｍＬ）中の２，５−ジブロモ−３，４−ジニトロチオフェン（１０ｇ，３０．１２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、錫（２１．２ｇ，１７８ｍｍｏｌ）を滴下し、温度を３０℃未満に保持した。混合物を４時間室温において撹拌し、次に、２日間冷蔵庫内に保存した。固形物を濾過により回収し、ジエチルエーテル及びアセトンにより洗浄し、そして水（６０ｍＬ）及びジエチルエーテル（６０ｍＬ）に懸濁した。混合物をアイスバス中で冷却し、次に４Ｍ  ＮａＯＨを用いてアルカリにした。水性相を分離し、次に連続してジエチルエーテルにより抽出した。有機相を混合し、次に、濃縮して、２．３ｇの表題の化合物をベージュの固形物として得た；δＨ（ＣＤＣｌ３）６．１（２Ｈ，ｓ），３．３（４Ｈ，ｂｓ）。
【０１１５】
ｂ）｛３−［３−（４−アミノチオフェン−３−イル）チオウレイド］プロピル｝カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル．１８ａからの生成物（０．４２１ｇ，３．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１３ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（８９２ｕＬ，５．１４ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．１２５ｇ，１ｍｍｏｌ）及び（３−イソチオシアナート−プロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．１４ｇ，５．２８ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を室温において１６時間撹拌して、Ｋｉｅｓｅｌ  ｇｅｌ  ６０上に負荷し、そしてジクロロメタン中で０−２％（９：１  ＭｅＯＨ／２０Ｍ  ＮＨ３）により溶出するクロマトグラフィーを行った。表題の化合物を含むフラクションを混合し、濃縮し、そして残渣を再度Ｋｉｅｓｅｌ  ｇｅｌ  ６０上でヘキサン中の０−５０％酢酸エチルで溶出するクロマトグラフを行った。表題の化合物を含むフラクションを混合し、濃縮し、そして残渣をメタノールでフラッシュされた１０ｇ  Ｖａｒｉａｎ  Ｂｏｎｄ  Ｅｌｕｔｅ  ＳＣＸカートリッジにアプライした。カートリッジを次にメタノール中の０．２Ｍ  ＮＨ３により溶出し、そしてこの溶出物を蒸発させて乾燥することにより表題の化合物をパールイエローのオイルとして与えた（０．２６ｇ，２１％），ｍ／ｚ（ＣＩ＋）３３１（ＭＨ＋，１０％）。
【０１１６】
ｃ）［３−（１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−２−イルアミノ）プロピル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル．１８ｂからの生成物（０．１８０ｇ，０．５４ｍｍｏｌ）をジメチルフォルムアミド（４０ｍＬ）に溶解し、そしてトリエチルアミン（７６ｕＬ，０．５４ｍｍｏｌ）及び塩化水銀（０．１４９ｇ，０．５４ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を室温において１６時間撹拌して、次に酢酸エチルで希釈して、セライトを通して濾過した。濾過物を濃縮し、そして残渣をＫｉｅｓｅｌ  ｇｅｌ  ６０上でＣＨ２Ｃｌ２中の０−１０％（９：１  ＭｅＯＨ／２０Ｍ  ＮＨ３）により溶出するクロマトグラフィーを行ったところ、表題の化合物を褐色のオイルとして与えた（０．０５０ｇ，３１％），ｍ／ｚ（ＣＩ＋）２９７（ＭＨ＋，１００％）。
【０１１７】
ｄ）Ｎ−（１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−２−イル）プロパン−１，３−ジアミンビストリフルオロ酢酸塩．１８ｃからの生成物（０．０４５ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）に溶解した。反応混合物を室温において０．５時間撹拌して、濃縮することにより、表題の化合物を褐色のオイルとして与えた（０．０５６ｇ，８８％），ｍ／ｚ（ＣＩ＋）１９７（ＭＨ＋，８０％），３９３（２ＭＨ＋，１００％）。
【０１１８】
ｅ）Ｎ−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン．１８ｄからの生成物を４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒドと、０．０９ｍｍｏｌスケールにて還元アミン化のための一般法を用いてカップリングさせることにより、表題の化合物をピンクの固形物として与えた（０．０１５ｇ，３６％），ｍ／ｚ（ＣＩ＋）４６５（ＭＨ＋，１００％）。
【０１１９】
実施例１９  Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン１８ｄ及び７ｄの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４３５（１００％Ｍ＋）。
【０１２０】
実施例２０  Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン１８ｄ及び８ａの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４５３（１００％Ｍ＋）。
【０１２１】
実施例２１  Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、Ｎ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）プロパン−１，３−ジアミン１８ｄ及び４ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４２９（１００％Ｍ＋）。
【０１２２】
実施例２２  Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾール）プロパン−１，３−ジアミン．
ａ）２−（３−アミノプロピルアミノ）ベンズイミダゾール．２−クロロ−１Ｈ−ベンズイミダゾール（１．５３ｇ，１０ｍｍｏｌ）と１，３−ジアミノプロパン（２５ｍｌ，３００ｍｍｏｌ）をいっしょに１８時間９０Ｃにおいて加熱し、そして１２０Ｃにおいて７２時間加熱した。溶液を蒸発させて乾燥し、次にジクロロメタンにより粉砕することにより、パールブラウンの粉末を得た。この粉末を、メタノールに溶解し、シリカに前吸着させた。フラッシュクロマトグラフィーを、メタノール及びジクロロメタン中の１％アンモニアにより溶出することにより、表題の化合物を粉末として得た（１．４５ｇ，７６％）；δＨ（ＣＤ３ＯＤ）１．７３（２Ｈ，ｑｕｉｎｔｅｔ），２．６９（２Ｈ，ｔ），３．３４（２Ｈ，ｔ）６．８２−６．９２（２Ｈ，ｍ），及び７．０４−７．１３（２Ｈ，ｍ）；ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋）１９１（１００％，ＭＨ＋）
【０１２３】
ｂ）Ｎ−（４−ブロモ−５−（１−フルオロビニル）−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾール）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロピルアミノ）ベンズイミダゾール２２ａ及び４ｂの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４２３（１００％Ｍ＋）。
【０１２４】
実施例２３  Ｎ−（４−ブロモ−５−ジフルオロメチル−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾール）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロピルアミノ）ベンズイミダゾール２２ａ及び７ｄの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４２９（１００％Ｍ＋）。
【０１２５】
実施例２４  Ｎ−（４−ブロモ−３−メチル−５−トリフルオロメチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−ベンズイミダゾール）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロピルアミノ）ベンズイミダゾール２２ａ及び８ａの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４４７（１００％Ｍ＋）。
【０１２６】
実施例２５．Ｎ−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン
ａ）１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン−２−チオール酸カリウム−３−（３−ベンゾイルチオウレイド）−２−チオフェンカルボキシル酸メチルエステル（７５ｇ；Ｇｕｔｓｃｈｏｗ，Ｊ．Ｈｅｔ．Ｃｈｅｍ．１９９６，３３，３５５−３６０）を、エタノール（１Ｌ）中のＫＯＨ（２５ｇ）の溶液に加え、そして還流しながら２．５時間加熱した。レモン色の固形物を濾過により除去したところ、約８５％純度の表題の化合物を得て、次の工程ではさらに精製せずに使用した：（４６ｇ）。δＨ（ｄ６−ＤＭＳＯ）６．８７ｍｇ（ｍ，１Ｈ），７．２２（ｍ，１Ｈ），１０．３５（ｂｒ，１Ｈ）プラス安息香酸塩が夾雑。
【０１２７】
ｂ）２−メチルスルファニル−１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン−約８５％純度の１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン−２−チオール酸カリウム（４６ｇ）を水に加えた（１：１）。ヨウ化メチル（１３ｍｌ）を加え、そして混合物を３時間撹拌した。白色の沈殿物を濾過により除去して乾燥することにより、表題の化合物をオフホワイトの固形物を得た：（３０ｇ，８２％）。δＨ（ｄ６−ＤＭＳＯ）２．５５（ｓ，３Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），１２．７８（ｂｒ，１Ｈ）。
【０１２８】
ｃ）２−（３−アミノプロピルアミノ）−１Ｈ−チエノ［３，２−４ピリミジン−４−オン．
２−メチルスルファニル−１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン（２０ｇ）を１，３−ジアミノプロパン（１０４ｍｌ）で処理し、そして密封容器中で１４０Ｃにて４８時間加熱した。冷却後に、黄色の結晶固形物を濾過により除去した。残った反応混合物を真空にて濃縮し、メタノールで粉砕し、そしてカラムクロマトグラフィーにより精製した。クロマトグラフィーにより得られた結晶及び物質を混合して、表題の化合物を得た：（８．０ｇ，３５％）。δＨ（ｄ６−ＤＭＳＯ）１．９６（ｍ，２Ｈ），２．９６（ｍ，２Ｈ），３．６９（ｍ，２Ｈ），５．１６（ｂｒ，ｃａ．４Ｈ  ｕｎｄｅｒ  Ｈ２０  ｐｅａｋ），７．５４（ｄ，Ｊ＝５，１Ｈ），８．２８（ｄ，Ｊ＝５，１Ｈ）。
【０１２９】
ｄ）Ｎ−（４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−イルメチル）−Ｎ’−（１Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン）プロパン−１，３−ジアミン．還元アミン化のための一般法を用いて、２−（３−アミノプロピルアミノ）−１Ｈ−チエノ［３，２−４］ピリミジン−４−オン２５ｃ及び４，５−ジブロモ−３−メチルチオフェン−２−カルバルデヒドの混合物が、表題の化合物を白色固形物として与えた（０．０３４ｇ，４９％）。ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４９２（１００％Ｍ＋）。
【０１３０】
生物学データ
酵素阻害（スタフィロコッカスアウレウスＭＲＳ）−アミノアシル化アッセイ
本発明の化合物を、それらが酵素メチオニルｔＲＮＡシンセターゼ（ＭＲＳ）を阻害する能力について、組換えスタフィロコッカスアウレウスＭＲＳを用いて以下のとおりにアッセイした。
【０１３１】
反応混合物（１ｍｌあたり）
ストック                                    容量（μｌ）        最終濃度
１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ／Ｃｌ，ｐＨ７．９      ６００              ３０ｍＭ
２５０ｍＭ  ＫＣｌ                                              ７５ｍＭ
１２５ｍＭ  ＡＴＰ                            ４０            ２．５ｍＭ
２５０ｍＭ  ＭｇＣｌ２                        ８０              １０ｍＭ
５０ｍＭ  ＤＴＴ                              ８０                ２ｍＭ
１ｍＭ  Ｍｅｔ（Ｈ−３ホット及びコールド）    ４０              １０ｕＭ
固形ｔＲＮＡ                                ４ｍｇ／ｍｌ      ２ｍｇ／ｍｌ
（混合されたＥ．ｃｏｌｉのＭＲＥ６００）
Ｈ２Ｏ                                        １６０
１０ｘ阻害剤（０−１０μＭ）    ウエルあたり５μＭ    ０−１μＭ
【０１３２】
反応は、２０ｕｌの適切に希釈された純粋酵素（予め阻害剤とインキュベートされた）を２５μｌの反応混合物に１０分間室温において添加することにより開始する。反応は、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）ＳＰＡビーズ（０．８３３ｍｇ／ｍｌ）を含む１５０μｌの１６７ｍＭ、クエン酸ナトリウム，ｐＨ２．１５の添加により停止する。放射線標識された生成物のビーズへの結合は、アイソトープを十分近くに接近させ、トリチウムからの放射線がビーズ内でのシンチラントを励起する。全ての未結合の放射線標識はシンチラントに十分に近接しないため、このエネルギーの転移を可能にさせず、よってシグナルは生じない。反応の停止後に、プレートを２５００ｒｐｍにて５分間Ｍｉｓｔｒａｌ  ３０００Ｅプレート遠心分離器により回転させる（又は、１時間放置する）。アッセイは９６ウエルのＯｐｔｉｐｌａｔｅｓ（パッカード）内で実施する。プレートをＴｏｐＣｏｕｎｔ、上で計数する。（パッカード９６ウエルカウンター）。
【０１３３】
試薬
混合されたＥ．ｃｏｌｉのＭＲＥ  ６００  ｔＲＮＡ及びＡＴＰはベーリンガーマンハイムから購入し、Ｌ−［メチル−３Ｈ］メチオニン及びホスホジエステラーゼシンチレーション近接（ＳＰＡ）ビーズはアマシャムファルマシアバイオテックから購入し、そして他の試薬はシグマから購入した。
【０１３４】
純粋な組換えスタフィロコッカスアウレウスＭＲＳ（ＥＰ出願番号９７３００３１７．１，スミスクラインビーチャム）を標準精製手法により得た。酵素は、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／Ｃｌ，２ｍＭ  ＤＴＴ  ｐＨ７．９からなる希釈バッファーを用いて希釈する。
【０１３５】
結果
実施例１から２５は、スタフィロコッカスアウレウスのＭＲＳに対して＜３から２００ｎＭの範囲のＩＣ５０値を有する。全てが、哺乳類酵素に関して選択性が高い（ラットＭＲＳには１μＭまで阻害無し）。
【０１３６】
２．酵素阻害（ヘモフィルスインフルエンザＭＲＳ）−アミノアシル化アッセイ
本発明の化合物を、それらが酵素メチオニルｔＲＮＡシンセターゼ（ＭＲＳ）を阻害する能力について、組換えヘモフィルスインフルエンザＭＲＳ（Ｒ．Ｄ．Ｆｌｅｉｓｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６９，４９６−５１２，１９９５）を用いて以下のとおりにアッセイした。
【０１３７】
反応混合物（１ｍｌあたり）
ストック                                    容量（μｌ）        最終濃度
１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ／Ｃｌ，ｐＨ７．９      ６００              ３０ｍＭ
２５０ｍＭ  ＫＣｌ                                              ７５ｍＭ
１２５ｍＭ  ＡＴＰ                            ４０            ２．５ｍＭ
２５０ｍＭ  ＭｇＣｌ２                        ８０              １０ｍＭ
５０ｍＭ  ＤＴＴ                              ８０                ２ｍＭ
１ｍＭ  Ｍｅｔ（Ｈ−３ホット及びコールド）    ２０              １０μＭ
固形ｔＲＮＡ                                ４ｍｇ／ｍｌ      ２ｍｇ／ｍｌ
（混合されたＥ．ｃｏｌｉのＭＲＥ６００）
Ｈ２Ｏ                                        １８０
１０ｘ阻害剤（０−１００μＭ）    ウエルあたり５μＭ    ０−１０μＭ
【０１３８】
反応は、２０μｌの適切に希釈された純粋酵素（予め阻害剤とインキュベートされた）を２５μｌの反応混合物に１０分間室温において添加することにより開始する。反応は、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）ＳＰＡビーズ（０．８３３ｍｇ／ｍｌ）を含む１５０μｌの１６７ｍＭ、クエン酸ナトリウム，ｐＨ２．１５の添加により停止する。放射線標識された生成物のビーズへの結合は、アイソトープを十分近くに接近させ、トリチウムからの放射線がビーズ内でのシンチラントを励起する。全ての未結合の放射線標識はシンチラントに十分に近接しないため、このエネルギーの転移を可能にさせず、よってシグナルは生じない。反応の停止後に、プレートを２５００ｒｐｍにて５分間Ｍｉｓｔｒａｌ  ３０００Ｅプレート遠心分離器により回転させる（又は、１時間放置する）。アッセイは９６ウエルのＯｐｔｉｐｌａｔｅｓ（パッカード）内で実施する。プレートをＴｏｐＣｏｕｎｔ、上で計数する。（パッカード９６ウエルカウンター）。
【０１３９】
試薬
混合されたＥ．ｃｏｌｉのＭＲＥ  ６００  ｔＲＮＡ及びＡＴＰはベーリンガーマンハイムから購入し、Ｌ−［メチル−３Ｈ］メチオニン及びホスホジエステラーゼシンチレーション近接（ＳＰＡ）ビーズはアマシャムファルマシアバイオテックから購入し、そして他の試薬はシグマから購入した。
【０１４０】
結果
実施例１−８，１１−１５，１７，１８，２１，２２，２５は、ヘモフィルスインフルエンザのＭＲＳに対して＜３から２００ｎＭの範囲のＩＣ５０値を有する。全てが、哺乳類酵素に関して選択性が高い（ラットＭＲＳには１μＭまで阻害無し）。
【０１４１】
３．抗菌活性
本発明の化合物を、ある範囲の病原生物（スタフィロコッカスアウレウス、ストレプトコッカスニューモニエ、エンテロコッカスフェーカリス、ヘモフィルスインフルエンザ及びモラキセラカタルハリス）に対して、抗菌活性に関して、可溶性を高めるためにシクロデキストリンを含むように修飾された標準ＭＩＣアッセイにおいてアッセイした。
【０１４２】
実施例１−６、８−１０、１２−１４、１６−２２、２４、２５は、生物スタフィロコッカスアウレウス、ストレプトコッカスニューモニエ、及びエンテロコッカスフェーカリスのいくつかの株に対してＭＩＣ’ｓ０．０６−０．５０μｇ／ｍｌを有した。これは、従来技術のチオフェンに比較したとき、１０倍−５０倍の間の、主要なグラム陽性病原体に対する能力における予想外の改善である。実施例７、１１、１５及び２３は、スタフィロコッカスアウレウス、ストレプトコッカスニューモニエ、及びエンテロコッカスフェーカリスのいくつかの株に対してＭＩＣ’ｓ１−２μｇ／ｍｌを有した。実施例４、１０−１５、１８、２１、２３、２４は、モラキセラカタルハリス及びヘモフィルスインフルエンザのいくつかの株に対してＭＩＣ’ｓ０．１３−８μｇ／ｍｌを有した。これは、従来技術のチオフェンに比較したとき、１０倍−５００倍の間の、これら２つの主要なグラム陰性病原体に対する能力における予想外の改善である。
【国際調査報告】
2006519261.tif 000029
2006519261.tif 000030