(57)【要約】【課題】新規な 3,9-ジアザビシクロ[3.3.1]ノネン誘導体, テトラヒドロピリジン誘導体、および関連化合物の提供、および医薬組成物の製造における活性成分としての同化合物の使用を提供する 。  【解決手段】本発明は新規な 3,9-ジアザビシクロ[3.3.1]ノネン誘導体, テトラヒドロピリジン誘導体,および関連化合物および医薬組成物の製造における活性成分としての同化合物の使用に関する 。本発明はまた同化合物の製造方法、同化合物の一種または一種以上を含む医薬組成物および特にレニン阻害剤としてのそれらの使用にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉの化合物
【化１】
2006524656.tif 000011
式中、
Ｚ、Ｙ、ＸおよびＷは、窒素原子または-ＣＨ-基を独立して表し;Ｚ、Ｙ、ＸおよびＷの少なくとも２つは-ＣＨ-基を表す;
Ｖは、結合;-(ＣＨ２)ｒ-;-Ａ-(ＣＨ２)ｓ-;-ＣＨ２-Ａ-(ＣＨ２)ｔ-;-(ＣＨ２)ｓ-Ａ-;-(ＣＨ２)２-Ａ-(ＣＨ２)ｕ-;-Ａ-(ＣＨ２)ｖ-Ｂ-;-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-;-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-ＣＨ２-;-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-;-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-; -ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-;-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-ＣＨ２-ＣＨ２-;-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-ＣＨ２-;-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-;または-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-を表す;
ＡおよびＢは、-Ｏ-; -Ｓ-; -ＳＯ-; -ＳＯ２-を独立して表す;
Ｕは、アリール;ヘテロアリールを表す;
Ｔは、-ＣＯＮＲ１-;-(ＣＨ２)ｐＯＣＯ-;-(ＣＨ２)ｐＮ(Ｒ１)ＣＯ-;-(ＣＨ２)ｐＮ(Ｒ１)ＳＯ２-;または-ＣＯＯ-を表す;
Ｑは、低級アルキレン; 低級アルケニレンを表す;
Ｍは、水素;シクロアルキル;アリール;ヘテロシクリル;ヘテロアリールを表す;
Ｌは、-Ｒ３;-ＣＯＲ３;-ＣＯＯＲ３;-ＣＯＮＲ２Ｒ３;-ＳＯ２Ｒ３;-ＳＯ２ＮＲ２Ｒ３;-ＣＯＣＨ(アリール)２を表す;
Ｒ１は、水素;低級アルキル;低級アルケニル;低級アルキニル;シクロアルキル;アリール; シクロアルキル-低級アルキルを表す;
Ｒ２およびＲ２'は、水素;低級アルキル;低級アルケニル;シクロアルキル;シクロアルキル-低級アルキルを独立して表す;
Ｒ３ は、水素; 低級アルキル;低級アルケニル;シクロアルキル;アリール;ヘテロアリール;ヘテロシクリル;シクロアルキル-低級アルキル;アリール- 低級アルキル;ヘテロアリール- 低級アルキル;ヘテロシクリル- 低級アルキル;アリールオキシ-低級アルキル; ヘテロアリールオキシ-低級アルキルを表し、これらの基は、非置換またはヒドロキシ、 -ＯＣＯＲ２、-ＣＯＯＲ２、低級アルコキシ、シアノ、-ＣＯＮＲ２Ｒ２'、-ＣＯ-モルホリン-４-イル、-ＣＯ-((４-低級アルキル)ピペラジン-１-イル)、-ＮＨ(ＮＨ)ＮＨ２、-ＮＲ４Ｒ４' または低級アルキルの基でモノ-、ジ-またはトリ置換されていてもよい。但し、炭素原子がｓｐ３混成軌道の場合、この炭素原子は多くても１個のヘテロ原子に結合していることを条件とする;
Ｒ４およびＲ４'は、水素;低級アルキル;シクロアルキル;シクロアルキル-低級アルキル; ヒドロキシ-低級アルキル;-ＣＯＯＲ２;-ＣＯＮＨ２を独立して表す;
ｋは、整数０または１を表す;
ｍおよびｎは、整数０または１を表す、但し、ｍが整数１を表す場合、ｎは整数０であり;ｎが整数１を表す場合、ｍは整数０であり;ｋが整数０を表す場合、ｎは整数０であることを条件とする;
ｐは、整数１、２、３または４である;
ｒは、整数１、２、３、４、５、または６である;
ｓは、整数１、２、３、４、または５である;
ｔは、整数１、２、３、または４である;
ｕは、整数１、２、または３である;
ｖは、整数２、３、または４である;
および医薬品として許容可能な塩類、溶媒コンプレックスおよび形態学的形状と同様に、光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体の混合物などのエナンチオマーの混合物、およびそのメソ形。
【請求項２】
請求項１に従う一般式Ｉの化合物、但し、一般式Ｉにおいて、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｕ、 Ｔ、Ｑ、Ｌ、およびＭは、一般式Ｉで定義したものと同義であり、
ｋは１であり、
ｎは０であり、
ｍは１であり、
および医薬品として許容可能な塩類、溶媒コンプレックスおよび形態学的形状と同様に、光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、 ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体の混合物などのエナンチオマーの混合物、およびそのメソ形。
【請求項３】
請求項１に従う一般式Ｉの化合物、但し、一般式Ｉにおいて、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｕ、Ｔ、Ｑ、Ｍ、ｋ、ｍ、およびｎは一般式Ｉに定義したものと同義であり、
Ｌは、Ｈ;-ＣＯＲ３'';-ＣＯＯＲ３'';-ＣＯＮＲ２''Ｒ３''を表し;
Ｒ２''およびＲ３''は、低級アルキル;低級シクロアルキル-低級アルキルを独立して表し、前記低級アルキルおよび低級シクロアルキル-低級アルキルは、非置換またはハロゲン、-ＣＮ、-ＯＨ、-ＯＣＯＣＨ３、-ＣＯＮＨ２、-ＣＯＯＨ、または-ＮＨ２でモノ-置換されている、但し、炭素原子がｓｐ３混成軌道の場合、この炭素原子は多くても１個のヘテロ原子に結合していることを条件とする;
および医薬品として許容可能な塩類、溶媒コンプレックスおよび形態学的形状と同様に、光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、 ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体の混合物などのエナンチオマーの混合物、およびそのメソ形。
【請求項４】
請求項１に従う一般式Ｉの化合物、但し、一般式Ｉにおいて、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｕ、 Ｌ、ｋ、ｍ、およびｎは、一般式Ｉで定義したものと同義であり、
Ｔは-ＣＯＮＲ１-を表し;
Ｑはメチレンを表し;
Ｍはアリールまたはヘテロアリールを表し;
および医薬品として許容可能な塩類、溶媒コンプレックスおよび形態学的形状と同様に、光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、 ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体の混合物などのエナンチオマーの混合物、およびそのメソ形。
【請求項５】
請求項１に従う一般式Ｉの化合物、但し、一般式Ｉにおいて、Ｖ、Ｕ、Ｔ、Ｑ、Ｍ、Ｌ、ｋ、ｍ、およびｎは一般式Ｉで定義したものと同義であり、
Ｚ、Ｙ、ＸおよびＷは-ＣＨ-を表し;
および医薬品として許容可能な塩類、溶媒コンプレックスおよび形態学的形状と同様に、光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体の混合物などのエナンチオマーの混合物、およびそのメソ形。
【請求項６】
請求項１に従う一般式Ｉの化合物、但し、一般式Ｉにおいて、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｑ、Ｔ、Ｍ、Ｌ、ｋ、ｍ、およびｎは一般式Ｉにおいて定義したものと同義であり、 
Ｕ は、モノ-、ジ-、またはトリ置換フェニルまたはヘテロアリールであり、置換基は、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ＣＦ３であり、
および医薬品として許容可能な塩類、溶媒コンプレックスおよび形態学的形状と同様に、光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、 ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体の混合物などのエナンチオマーの混合物、およびそのメソ形。
【請求項７】
下記化合物から選ばれる請求項１乃至６のいずれか一つに従う化合物：
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-(３-アセチル-７-{３-[２-(２-ブロモ-５-フルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-tert-ブチルフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３,６-トリフルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,５-ジフルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-o-トリルオキシエチル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３-ジクロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロ-５-メチルフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(３-クロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[３-(２-ブロモ-５-フルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-tert-ブチルフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３,６-トリフルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,５-ジフルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-o-トリルオキシプロピル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３-ジクロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロ-５-メチルフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(３-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(４-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(２,６-ジクロロ-４-メチルフェノキシ)エトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２-フルオロ-３-トリフルオロメチルフェノキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２,６-ジクロロ-４-メチルフェノキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２-クロロ-６-フルオロ-３-メチルフェノキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド.
【請求項８】
心臓血管症および腎臓症、 高血圧、 うっ血性心不全、 肺高血圧、 心不全、 腎臓機能障害、 腎または心筋虚血、 アテローム性動脈硬化症、 腎不全、 勃起障害、 糸球体腎炎、 腎仙痛、緑内障、 糖尿病合併症、 血管または心臓外科手術後の合併症、再狭窄、臓器移植後の免疫反応抑制剤使用による合併症を含むレニン-アンギオテンシン系(ＲＡＳ)の調節不全に関連する疾患、およびＲＡＳに関連する既知のその他の疾患の治療または予防のための請求項１乃至７のいずれか一つの少なくとも一つの化合物および通常の担体物質および補助剤を含む医薬組成物。
【請求項９】
高血圧、うっ血性心不全、肺高血圧、心不全、 腎臓機能障害、腎または心筋虚血、アテローム性動脈硬化症、腎不全、勃起障害、糸球体腎炎、腎仙痛、緑内障、糖尿病合併症、血管または心臓外科手術後の合併症、再狭窄、臓器移植後の免疫反応抑制剤使用による合併症を含むＲＡＳに関連する疾患、およびＲＡＳに関連する既知のその他の疾患の治療または予防のための方法であり、該方法は請求項１乃至７のいずれか一つに従う化合物をヒトまたは動物に投与することからなる。
【請求項１０】
高血圧、うっ血性心不全、肺高血圧、心不全、腎臓機能障害、腎臓または心筋虚血、 アテローム性動脈硬化症、腎不全、勃起障害、糸球体腎炎、腎仙痛、緑内障、糖尿病合併症、血管または心臓外科手術後の合併症、再狭窄、臓器移植後の免疫反応抑制剤使用による合併症を含むＲＡＳに関連する疾患およびＲＡＳに関連する既知のその他の疾患の治療または予防のために請求項１乃至７のいずれか一つに従う化合物の使用。
【請求項１１】
請求項９乃至１１のいずれか一つに記載した疾患の治療のために、ＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬、エンドセリン受容体拮抗薬、血管拡張薬、カルシウム拮抗薬、カリウム活性化剤、利尿薬、交感神経遮断薬、β-アドレナリン拮抗薬、 α-アドレナリン拮抗薬、および中性エンドペプチダーゼ抑制剤を含むその他の薬理学的に活性な化合物と組み合わせた請求項１乃至７のいずれか一つに記載の一種または一種以上の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般式Ｉの新規化合物に関する。本発明はまた、該化合物類の調製法、式Ｉの化合物の１種または２種以上を含有する医薬組成物およびとりわけ心臓血管障害および腎不全におけるレニン阻害剤としてのそれらの使用を含む関連様相に関する。さらに、これらの化合物は、他のアスパルチルプロテアーゼ類の阻害剤であるとみなすことができ、それゆえ、マラリア治療用のプラスメプシン阻害剤として、また真菌感染症治療のためのカンジダ・アルビカンス分泌アスパルチルプロテアーゼの阻害剤として有用であろう。    
【０００２】
レニン・アンギオテンシン系（ＲＡＳ）において、生理活性物質であるアンギオテンシンＩＩ（ＡｎｇＩＩ）が、２段階機構によって生成される。特異性の高い酵素であるレニンがアンギオテンシノーゲンを切断して、アンギオテンシンＩ（ＡｎｇＩ）とする。これがさらに、それほど特異的ではないアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）によって処理されて、ＡｎｇＩＩになる。ＡｎｇＩＩは、ＡＴ１およびＡＴ２と呼ばれる少なくとも２つの受容体サブタイプに作用することが知られている。ＡＴ１は、ＡｎｇＩＩの既知の機能のほとんどを伝達するようであるが、ＡＴ２の役割はいまだ不明である。          
【０００３】
ＲＡＳの調節は、心臓血管疾患の治療における大きい進歩を意味している。ＡＣＥ阻害剤およびＡＴ１遮断剤は、高血圧の治療のためにすでに受入れられている（例えば、非特許文献１および２参照。）。さらに、ＡＣＥ阻害剤は、腎保護のために（非特許文献３、４参照）、うっ血性心不全の予防に（例えば、非特許文献５および６参照。）および心筋梗塞の予防に（例えば、非特許文献７参照。）および使用されている。
【非特許文献１】Ｗ・Ｈ・ベルケンハーゲル(Berkenhager)、Ｊ・Ｌ・リード(Reid)（編）：高血圧(Hypertension)、アムステルダム、エルセヴィア・サイエンス・パブリッシング・カンパニー(Elsevier Science Publishing Co)、１９９６、４８９−５１９のＢ・ウェーバー(Waeber)ら、「レニン・アンギオテンシン系：実験的高血圧およびヒトの高血圧における役割」
【非特許文献２】Ｍ・Ａ・ウェーバー(Weber)、アメリカン・ジャーナル・オブ・ハイパーテンション(Am. J. Hypertens.)、１９９２、５、２４７Ｓ
【非特許文献３】Ｍ・Ｅ・ローゼンベルク(Rosenberg)ら、キドニー・インタナショナル(Kidney International)、１９９４、４５、４０３
【非特許文献４】Ｊ・Ａ・ブライヤー(Breyer)ら、キドニー・インタナショナル、１９９４、４５、Ｓ１５６
【非特許文献５】Ｄ・Ｅ・ヴォーン(Vaughan)ら、カーディオヴァスキュラー・リサーチ(Cardiovasc. Res.)、１９９４、２８、１５９
【非特許文献６】Ｆ・フォウアド-タラジ(Fouad-Tarazi)ら、アメリカン・ジャーナル・オブ・メディシン(Am. J. Med.)、１９８８、８４（補遺３Ａ）、８３
【非特許文献７】Ｍ・Ａ・ファイファー(Pfeffer)ら、ニューイングランド・ジャーナル・オブ・メディシン(N. Eengl. J. Med.)、１９９２、３２７、６６９
【０００４】
レニン阻害剤開発の理論的根拠は、レニンの特異性である（例えば、非特許文献８参照。）。レニンに対して既知の唯一の基質が、アンギオテンシノーゲンであり、これはレニンによって（生理的条件下で）プロセシングを受けうるだけである。これに対し、ＡＣＥは、ＡｎｇＩ以外にブラジキニンをも切断でき、セリンプロテアーゼであるキマーゼによって代替されうる（例えば、非特許文献９参照。）。かくして、患者でのＡＣＥ阻害はブラジキニン蓄積に至らしめ、これが咳（５−２０％）ならびに致命的となる可能性のある血管神経性浮腫（０．１−０．２％）の原因となる（例えば、非特許文献１０参照。）。キマーゼはＡＣＥ阻害剤によって阻害されない。それゆえ、ＡＣＥ阻害剤処置患者において、ＡｎｇＩＩの生成がなお可能である。他方、ＡＴ１受容体の（例えばロサルタンによる）遮断は、ＡＴ１受容体の遮断によってその濃度が劇的に上昇したＡｎｇＩＩに他のＡＴ−受容体サブタイプを過剰暴露させることになる。このことは、ＡＴ１受容体拮抗物質の安全性および効果のプロフィールに関して深刻な問題を提起するかもしれない。要するに、レニン阻害剤は、安全性に関してＡＣＥ阻害剤およびＡＴ１遮断剤と異なると期待されるだけでなく、より重要なことであるが、それらのＲＡＳ遮断効果についても異なると期待される。
【非特許文献８】Ｈ・Ｄ・クライネルト(Kleinert)、カーディオヴァスキュラー・ドラッグズ(Cardiovasc. Drugs)、１９９５、９、６４５
【非特許文献９】Ａ・フサイン(Husain)、ジャーナル・オブ・ハイパテンション（J. Hypertens.）、１９９３、１１、１１５５
【非特許文献１０】Ｚ・Ｈ・イズレイリ(Israili)ら、アナルズ・オブ・インターナル・メディシン(Annals of Internal Medicine)、１９９２，１１７，２３４
【０００５】
レニン阻害剤は、それらのペプチド擬似性のために経口活性が不十分であるので（例えば、非特許文献１１参照。）、それらを用いたきわめて限られた臨床経験（例えば、非特許文献１２および１３参照。）が得られているだけである。数種の化合物の臨床開発が、この問題ならびに製品の高価格のゆえに中止されている。４つのキラル中心をもつ１種の化合物のみが、臨床試験に入っている（例えば、非特許文献１４および１５参照。）。このように、大規模に調製でき、代謝に対して安定で、経口で生体利用率がよく、可溶性が十分なレニン阻害剤は、見つかっておらず、探索されている。最近、高いガラス器内活性を示す最初の非ペプチドレニン阻害剤類が記載されている（例えば、非特許文献１６、特許文献１および非特許文献１７参照。）。しかしながら、これらの化合物の開発状況は不明である。
【非特許文献１１】Ｈ・Ｄ・クライネルト(Kleinert)、カーディオヴァスキュラー・ドラッグズ、１９９５，９，６４５
【非特許文献１２】Ｍ・アジジ(Azizi)ら、ジャーナル・オブ・ハイパテンション、１９９４，１２，４１９
【非特許文献１３】Ｊ・Ｍ・ニューテル(Neutel)ら、アメリカン・ハート(Am. Heart )、１９９１，１２２，１０９４
【非特許文献１４】Ｊ．ラフエル(Rahuel)ら、ケミストリー・アンド・バイオロジー(Chem. Biol.)、２０００、７、４９３
【非特許文献１５】Ｎ・Ｅ・ミーリー(Mealy)、ドラッグズ・オブ・ザ・フューチャー(Drugs of the Future)、２００１、２６、１１３９
【非特許文献１６】Ｃ・エフナー(Oefner)ら、ケミストリー・アンド・バイオロジー（Chem. Biol.)、１９９９、６，１２７
【特許文献１】国際公開第９７／０９３１１
【非特許文献１７】Ｈ・Ｐ・メルキ(Marki)ら、イル・ファルマコ(Il Farmaco)、２００１、５６，２１
【発明の開示】
【０００６】
本発明は、非ペプチド性で、低分子量のレニン阻害剤の同定・確認に関するものである。組織のレニン・キマーゼ系が活性化されて、腎、心臓および血管のリモデリング、アテローム性動脈硬化、あるいは再狭窄などの病的に変化した局所機能に至らしめる可能性のある血圧調節の範囲を超えた適応症において活性な持続性の経口活性レニン阻害剤を記述する。      
【０００７】
本発明は、非ペプチド性レニン阻害剤を記載する。
【０００８】
特に、本発明は、一般式Ｉの新規な化合物に関する。
【化２】
2006524656.tif 000002
式中、
Ｚ、Ｙ、ＸおよびＷは、窒素原子または-ＣＨ-基を独立に表し;Ｚ、Ｙ、ＸおよびＷの少なくとも２つは-ＣＨ-基を表す;
Ｖは、結合;-(ＣＨ２)ｒ-;-Ａ-(ＣＨ２)ｓ-;-ＣＨ２-Ａ-(ＣＨ２)ｔ-;-(ＣＨ２)ｓ-Ａ-;-(ＣＨ２)２-Ａ-(ＣＨ２)ｕ-;-Ａ-(ＣＨ２)ｖ-Ｂ-;-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-;-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-ＣＨ２-;-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-;-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-; -ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-;-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-ＣＨ２-ＣＨ２-;-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-ＣＨ２-;-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-;または-ＣＨ２-ＣＨ２-Ａ-ＣＨ２-ＣＨ２-Ｂ-を表す;
ＡおよびＢは、-Ｏ-; -Ｓ-; -ＳＯ-; -ＳＯ２-を独立して表す;
Ｕは、アリール;ヘテロアリールを表す;
Ｔは、-ＣＯＮＲ１-;-(ＣＨ２)ｐＯＣＯ-;-(ＣＨ２)ｐＮ(Ｒ１)ＣＯ-;-(ＣＨ２)ｐＮ(Ｒ１)ＳＯ２-;または-ＣＯＯ-を表す;
Ｑは、低級アルキレン; 低級アルケニレンを表す;
Ｍは、水素;シクロアルキル;アリール;ヘテロシクリル;ヘテロアリールを表す;
Ｌは、-Ｒ３;-ＣＯＲ３;-ＣＯＯＲ３;-ＣＯＮＲ２Ｒ３;-ＳＯ２Ｒ３;-ＳＯ２ＮＲ２Ｒ３;-ＣＯＣＨ(アリール)２を表す;
Ｒ１は、水素;低級アルキル;低級アルケニル;低級アルキニル;シクロアルキル;アリール; シクロアルキル-低級アルキルを表す;
Ｒ２およびＲ２'は、水素;低級アルキル;低級アルケニル;シクロアルキル;シクロアルキル-低級アルキルを独立して表す;
Ｒ３ は、水素; 低級アルキル;低級アルケニル;シクロアルキル;アリール;ヘテロアリール;ヘテロシクリル;シクロアルキル-低級アルキル;アリール- 低級アルキル;ヘテロアリール- 低級アルキル;ヘテロシクリル- 低級アルキル;アリールオキシ-低級アルキル; ヘテロアリールオキシ-低級アルキルを表し、これらの基は、非置換またはヒドロキシ、 -ＯＣＯＲ２、-ＣＯＯＲ２、低級アルコキシ、シアノ、-ＣＯＮＲ２Ｒ２'、-ＣＯ-モルホリン-４-イル、-ＣＯ-((４-低級アルキル)ピペラジン-１-イル)、-ＮＨ(ＮＨ)ＮＨ２、-ＮＲ４Ｒ４' または低級アルキルでモノ-、ジ-またはトリ置換されていてもよい。但し、炭素原子がｓｐ３混成軌道の場合、この炭素原子は多くても１個のヘテロ原子に結合していることを条件とする;
Ｒ４およびＲ４'は、水素;低級アルキル;シクロアルキル;シクロアルキル-低級アルキル; ヒドロキシ-低級アルキル;-ＣＯＯＲ２;-ＣＯＮＨ２を独立して表す;
ｋは、整数０または１を表す;
ｍおよびｎは、整数０または１を表す、但し、ｍが整数１を表す場合、ｎは整数０であり;ｎが整数１を表す場合、ｍは整数０であり;ｋが整数０を表す場合、ｎは整数０であることを条件とする;
ｐは、整数１、２、３または４である;
ｒは、整数１、２、３、４、５、または６である;
ｓは、整数１、２、３、４、または５である;
ｔは、整数１、２、３、または４である;
ｕは、整数１、２、または３である;
ｖは、整数２、３、または４である;
および医薬品として許容可能な塩類、溶媒コンプレックスおよび形態学的形状と同様に、光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマー、ジアステレオマーの混合物、ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体の混合物などのエナンチオマーの混合物、およびそのメソ形。
【０００９】
一般式Ｉの定義において、もし他のところで述べられていないなら、用語の低級アルキルは、単独でまたは他の基と組み合わせて、１乃至７個、好ましくは１乃至４個の炭素原子をもつ飽和の直鎖および分岐鎖の基を意味し、これはハロゲンによって任意に置換されうる。低級アルキルの例はメチル、エチル、ｎ-プロピル、イソ-プロピル、ｎ-ブチル、イソ-ブチル、ｓｅｃ-ブチル、ｔｅｒｔ-ブチル、ペンチル、ヘキシルおよびヘプチルである。メチル、エチルおよびイソプロピル基が好ましい。      
【００１０】
用語の低級アルコキシは、Ｒ-Ｏ基で示され、Ｒは低級アルキルである。低級アルコキシ基の例はメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソ-プロポキシ、イソ-ブトキシ、ｓｅｃ-ブトキシおよびｔｅｒｔ-ブトキシである。      
【００１１】
用語の低級アルケニルは、単独であるいは他の基と一緒に、オレフィン結合を含み、２乃至７個、好ましくは２乃至４個の炭素原子からなる直鎖および分岐鎖基を意味し、このものはハロゲンで任意に置換されてもよい。低級アルケニルの例は、ビニル、プロペニルまたはブテニルである。      
【００１２】
用語の低級アルキニルは、単独でまたは他の基と一緒に、三重結合を含み、２乃至７個、好ましくは２乃至４個の炭素原子からなる直鎖および分岐鎖基を意味し、このものはハロゲンで任意に置換されてもよい。低級アルキニルの例は、エチニル、プロピニルまたはブチニルである。              
【００１３】
用語の低級アルキレンは、単独でまたは他の基と共に、１乃至７個、好ましくは１乃至４個の炭素原子の直鎖および分岐鎖の２価の基を意味し、ハロゲンで任意に置換されてもよい。低級アルキレンの例はエチレン、プロピレンまたはブチレンである。  
【００１４】
用語の低級アルケニレンは、単独でまたは他の基と共に、オレフィン結合を有し、２乃至７個、好ましくは２乃至４個の炭素原子からなる直鎖および分岐鎖の２価の基を意味し、ハロゲンで任意に置換されていてもよい。低級アルケニレンの例はビニレン、プロペニレンおよびブテニレンである。      
【００１５】
用語の低級アルキレンジオキシは、低級アルキレンの両末端が酸素原子で置換されたものを意味する。低級アルキレンジオキシ基の例は、メチレンジオキシおよびエチレンジオキシが好ましい。      
【００１６】
用語の低級アルキレンオキシは、低級アルキレンの１末端が酸素原子で置換されているものを意味する。低級アルキレンオキシ基の例はメチレンオキシ、エチレンオキシおよびプロピレンオキシが好ましい。      
【００１７】
用語のハロゲンは、フッ素、塩素、臭素または沃素を意味し、好ましくはフッ素、塩素および臭素である。      
【００１８】
用語のシクロアルキルは、単独でまたは組み合わせて、３乃至７個の炭素原子をもつ飽和環式炭素環系を意味し、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルであり、これらは低級アルキル、低級アルケニル、低級アルケニレン、低級アルコキシ、低級アルキレンオキシ、低級アルキレンジオキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、-ＣＦ３、-ＮＲ１Ｒ１'、-ＮＲ１Ｃ(Ｏ)Ｒ１'、-ＮＲ１Ｓ(Ｏ２)Ｒ１'、Ｃ(Ｏ)ＮＲ１Ｒ１'、低級アルキルカルボニル、-ＣＯＯＲ１、-ＳＲ１、-ＳＯＲ１、-ＳＯ２Ｒ１、ＳＯ２  ＮＲ１Ｒ１’、但し、Ｒ１は、水素；低級アルキル；低級アルケニル；低級アルキニル；シクロアルキル；アリール；シクロアルキル-低級アルキルを表す、により任意にモノ-または多置換されていてもよい。シクロプロピル基が好ましい基である。
【００１９】
用語のアリールは、単独であるいは組み合わせて、フェニル、ナフチルまたはインダニル基、好ましくはフェニル基を言い、これらは、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アリール環と５員または６員環を形成する低級アルケニレンまたは低級アルキレン、低級アルコキシ、低級アルキレンジオキシ、低級アルキレンオキシ、ヒドロキシ、ヒドロキシ-低級アルキル、ハロゲン、シアノ、-ＣＦ３-、-ＯＣＦ３-、ＮＲ１Ｒ１、-ＮＲ１Ｒ１-低級アルキル、-ＮＲ１Ｃ(Ｏ)Ｒ１’、-ＮＲ１Ｓ(Ｏ２)Ｒ１、-Ｃ(Ｏ)ＮＲ１Ｒ１、-ＮＯ２、低級アルキルカルボニル、-ＣＯＯＲ１、-ＳＲ１、-ＳＯＲ１、-ＳＯ２Ｒ１、-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ１’、ベンジルオキシ、但しＲ１’は上記に示した意味を有する、によって任意にモノ-または多置換されていてもよい。      
【００２０】
用語のアリールオキシはＡｒ-Ｏを言い、ここでＡｒはアリールである。低級アリールオキシ基はフェノキシである。      
【００２１】
用語のヘテロシクリルは、単独でまたは組み合わせて、１個または２個の窒素、酸素または硫黄原子を含み、これらは同一または異なってもよい、飽和または不飽和（ただし、芳香族でない）の５、６または７員環を意味する。これらの環は、低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシおよびハロゲンで任意に置換されてもよい。窒素原子は、もし存在するなら、-ＣＯＯＲ２基で置換されてもよい。このような環の例は、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、１,４-ジオキサニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロピロリル、イミダゾリジニル、ジヒドロピラゾリル、ピラゾリジニル、ジヒドロキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニルである。      
【００２２】
用語のヘテロアリールは、単独でまたは組み合わせて、１個乃至４個の窒素原子を含む６員の芳香族環；１個乃至３個の窒素原子を含むベンゼン縮合６員芳香族環；１個の酸素、１個の窒素または１個の硫黄原子を含む５員芳香族環；１個の酸素、１個の窒素または１個の硫黄原子を含むベンゼン縮合５員芳香族環；１個の酸素および１個の窒素原子を含む５員芳香族環およびこれらのベンゼン縮合誘導体；硫黄および窒素または酸素原子を含む５員芳香族環およびこれらのベンゼン縮合誘導体；２個の窒素原子を含む５員芳香族環およびこれらのベンゼン縮合誘導体；３個の窒素原子を含む５員芳香族環およびこれらのベンゼン縮合誘導体、またはテトラゾリル環を意味する。このような環の例は、フラニル、チオフェニル、ピロリル、ピリジニル、ピリミジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、イミダゾリル、トリアジニル、チアジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピリダジニル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、クマリニル、ベンゾチオフェニル、キナゾリニル、キノキサリニルである。これらの環は、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルキレン、低級アルケニレン、低級アルキレンジオキシ、低級アルキレンオキシ、ヒドロキシ-低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、-ＣＦ３、-ＯＣＦ３、-ＮＲ１Ｒ１'、-ＮＲ１Ｒ１'-低級アルキル、-Ｎ(Ｒ１)ＣＯＲ１、-Ｎ(Ｒ１)ＳＯ２Ｒ１、-ＣＯＮＲ１Ｒ１'、-ＮＯ２、低級アルキルカルボニル、-ＣＯＯＲ１、-ＳＲ１、-ＳＯＲ１、-ＳＯ２Ｒ１、-ＳＯ２ＮＲ１Ｒ１'、別のアリール、別のヘテロアリール、または別のヘテロシクリル等、但しＲ１'は上記に記載した意味を有する、で適当に置換されていてもよい。      
【００２３】
用語のヘテロアリールオキシはＨｅｔ-Ｏ基を言い、ここで、Ｈｅｔはヘテロアリールである。      
【００２４】
用語のｓｐ３-混成とは、炭素原子についていい、この炭素原子はこの原子の周りに正方晶型に配置された４個の置換基に対して４個の結合を形成する。
【００２５】
用語の医薬品として許容し得る塩は、塩酸または臭化水素酸、硫酸、リン酸、クエン酸、蟻酸、酢酸、マレイン酸、酒石酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ｐ-トルエンスルホン酸等で、生きている生体に対して非毒性である無機酸または有機酸、または一般式Ｉの化合物がアルカリまたはアルカリ土類塩基とで事実上酸性である場合、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム等、のいずれかを包含する。
【００２６】
本発明の化合物は、また酸素（水酸基縮合）、硫黄（スルフィドリル縮合）および/または窒素などの１個またはそれ以上の部位を介してニトロソ化された一般式Ｉのニトロソ化合物を含む。本発明のニトロソ化合物は当該技術に熟練した者に知られている通常の方法で製造できる。例えば、化合物をニトロソ化する方法は米国特許第５,３８０,７５８および５,７０３,０７３；国際公開第９７／２７７４９；国際公開第９８／１９６７２；国際公開第９８／２１１９３；国際公開第９９／００３６１およびOaeら、Org. Prep. Proc. Int., １５(３):１６５-１９８ (１９８３)に記載されている。これらの文献の開示はその全部がここに組み入れられる。
【００２７】
一般式Ｉの化合物は２個またはそれ以上の不斉炭素原子を含有することができ、また光学的に純粋なエナンチオマー、ラセミ体などのエナンチオマー混合物、ジアステレオマー、ジアステレオマー混合物、ジアステレオマーラセミ体、ジアステレオマーラセミ体混合物、およびメソ形、およびこれらの医薬品として許容し得る塩の形で製造してもよい。本発明はこれらのすべての形を包含する。混合物はそれ自体既知の方法、すなわち、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、ＨＰＬＣまたは結晶化により分離してもよい。            
【００２８】
好ましい化合物のグループは、一般式Ｉの化合物で、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｕ、Ｔ、Ｑ、ＬおよびＭが上記一般式Ｉで定義したものと同一であり、ｋが１、ｎが０、ｍが１の化合物である。      
【００２９】
一般式Ｉの好ましい化合物の別のグループは、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｕ、Ｔ、Ｑ、Ｍ、ｋ、ｍおよびｎが上記一般式Ｉで定義されたものと同じであり、ＬがＨ；-ＣＯＲ３''；-ＣＯＯＲ３''；-ＣＯＮＲ２''Ｒ３''を表し；ここで、Ｒ２''およびＲ３''が、低級アルキル；低級シクロアルキル-低級アルキルを独立に表し、低級アルキルおよび低級シクロアルキル-低級アルキルは未置換またはハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、-ＯＣＯＣＨ３、‐ＣＯＮＨ２、-ＣＯＯＨまたは-ＮＨ２でモノ置換されており、ただし、炭素原子がｓｐ３-混成の場合、この炭素原子は多くても１個のヘテロ原子に結合しているものである。      
【００３０】
上記一般式Ｉの好ましい化合物の別のグループは、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｕ、Ｌ、ｋ、ｍ、およびｎが上記一般式Ｉで定義されたものと同じであり、そして、Ｔが-ＣＯＮＲ１を表し；Ｑがメチレンを表し；Ｍがアリール；ヘテロアリールを表す化合物である。    
【００３１】
一般式Ｉのさらに好ましい化合物の別のグループは、Ｖ、Ｕ、Ｔ、Ｑ、Ｍ、Ｌ、ｋ、ｍ、およびｎが上記一般式Ｉで定義したものと同じであり、そして、Ｚ、Ｙ、ＸおよびＷが-ＣＨ-を表す化合物である。      
【００３２】
一般式Ｉのさらに好ましい化合物は、Ｚ、Ｙ、Ｘ、Ｗ、Ｖ、Ｑ、Ｔ、Ｍ、Ｌ、ｋ、ｍ、およびｎが上記一般式Ｉで定義したものと同じであり、Ｕがモノ、ジ、またはトリ置換フェニルまたはヘテロアリールであって、置換基がハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ＣＦ３である化合物である。
【００３３】
一般式Ｉの特に好ましい化合物は、下記のグループから選ばれる化合物である：
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-(３-アセチル-７-{３-[２-(２-ブロモ-５-フルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*,５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-ｔｅｒｔ-ブチルフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３,６-トリフルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,５-ジフルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*,５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-o-トリルオキシエチル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３-ジクロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロ-５-メチルフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(３-クロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[３-(２-ブロモ-５-フルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-ｔｅｒｔ-ブチルフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３,６-トリフルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,５-ジフルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-o-トリルオキシプロピル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３-ジクロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロ-５-メチルフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(３-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(４-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザ−ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(２,６-ジクロロ-４-メチルフェノキシ)エトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２-フルオロ-３-トリフルオロメチルフェノキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド;
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２,６-ジクロロ-４-メチルフェノキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド; および
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２-クロロ-６-フルオロ-３-メチルフェノキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド.
【００３４】
一般式Ｉの化合物および医薬品として許容可能な同化合物の塩は、例えば医薬組成物の形で治療として用いることができる。これらの医薬組成物は、一般式Ｉの化合物を少なくとも１種および通常の担体物質および補助剤を含み、特に、心臓血管疾患および腎疾患を含むレニン・アンギオテンシン系（ＲＡＳ）の調節不全に関連する疾患の治療または予防に使用することができる。このような疾患の例としては、高血圧、うっ血性心不全、肺心不全、冠状動脈性心臓病、心不全、腎不全、腎または心筋虚血、アテローム性動脈硬化症、腎不全がある。これらの医薬組成物は、また、バルーンまたはステントによる血管形成後の再狭窄の予防、勃起障害、糸球体腎炎、腎仙痛、緑内障の治療にも用いることができる。さらに、これらは、糖尿病性合併症、血管手術または心臓手術後の合併症、臓器移植後の免疫抑制剤による治療の合併症、サイクロスポリン治療の合併症、およびＲＡＳに関連していることが現在知られている他の疾患の治療および予防にも用いることができる。
【００３５】
別の実施例においては、本発明は、高血圧、うっ血性心不全、肺高血圧、心不全、腎不全、腎または心筋虚血、アテローム性動脈硬化症、腎不全、勃起障害、糸球体腎炎、腎仙痛、緑内障、糖尿病性合併症、血管手術または心臓手術後の合併症、再狭窄、臓器移植後の免疫抑制剤による治療の合併症を含むＲＡＳに関連する疾患、およびＲＡＳに関連している他の疾患の治療および／または予防のための方法に関し、該方法は一般式Ｉに従う化合物をヒトまたは動物に投与することを含む。
【００３６】
本発明は、さらに、高血圧、うっ血性心不全、肺高血圧、心不全、腎不全、腎または心筋虚血、アテローム性動脈硬化症、腎不全、勃起障害、糸球体腎炎、腎仙痛、緑内障、糖尿病性合併症、血管手術または心臓手術後の合併症、再狭窄、臓器移植後の免疫抑制剤による治療の合併症を含むＲＡＳに関連する疾患、およびＲＡＳに関連していることが知られている他の疾患の治療および／または予防のために上記に定義したのと同じ一般式Ｉの化合物の使用に関する。
【００３７】
加えて、本発明は、高血圧、冠疾患、心不全、腎臓機能障害、腎臓または心筋虚血、および腎不全などのＲＡＳに関連する疾患の治療および／または予防のための医薬の製造のために上記に定義したのと同じ化合物の使用に関する。
【００３８】
一般式Ｉの化合物は、また、上記した疾患または障害の治療のために、ＡＣＥ阻害剤、アンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬、エンドセリン受容体拮抗薬、血管拡張薬、カルシウム拮抗薬、カリウム賦活剤、利尿剤、交感神経遮断薬、β-アドレナリン拮抗薬、α-アドレナリン拮抗薬、および中性エンドペプチターゼ阻害薬からなる一種または一種以上のその他の薬理学的に活性な化合物と組み合わせて使用することができる。      
【００３９】
上記の一般式Ｉによって包含される活性成分をもたらすあらゆる形のプロドラッグは本発明に含まれる。
【００４０】
一般式Ｉの化合物は、以下に説明する方法、実施例中に記載する方法もしくは類似の方法により製造することができる。
前駆体物質の製造:
前駆体物質は、主要な中間物質および／または成分として製造された化合物で並発化学反応におけるさらなる転換に適したものである。
スキーム１で説明するように、(４-ベンジル-６-エトキシカルボニルメチル-１-メチルピペラジン-２-イル)酢酸エチルエステル(特許出願 WO９２/０５１７４)からビシクロノナン(Bicyclononanone)Ａを製造した。誘導体Ａは、エノール型として存在する可能性もある。ビシクロノナンＡの７位で臭化アリールとのカップリングを可能にするため、ビニルトリフラート誘導体Ｂが製造された。
【化３】
2006524656.tif 000003
化合物Ｂは、ついで根岸カップリング（スキーム２）によってタイプＣの化合物に転換できる。なお、Ｒｂ は、１回または数回の基本的な化学変換を経由してＵ−Ｖ鎖を形成するのに適した側鎖前駆体を表す。Ｒｂ置換基は、合成の途中に変えるできる。タイプＤの化合物を導入する保護基の操作後に Ｌ１-置換基を化合物に置くことができ(タイプEの化合物)、なお、Ｌ１ は、一般式Ｉで定義されたと同義の置換基Ｌまたはこのような置換基の前駆体を表す。エステル官能基は、タイプＦの化合物にケン化できる。アミドカップリング後に例えばタイプＧの前駆体を得ることができる。
【化４】
2006524656.tif 000004
一般式Ｉに記載した化合物のその他のタイプは特許出願WO０３/０９３２６７Oに記載された化学を用いて製造することができる。
その他、ヘテロ環系は類似化合物について記載する文献に従って製造可能である。例えば、ピリジン誘導体Ｈは、２,６-ジブロモピリジンから製造できる、なお、Ｒa は式Ｉに記載したと同義のＵ−Ｖ鎖に容易に転換できる置換基である（スキーム３；Bitman, R.ら; J. Org. Chem., ２０００, ６５, ７６３４)。ピリジンＪ は、４-ブロモピリジンにグリニヤール試薬を付加し、その後酸化して製造することができる(Comins, D.ら; J. Org. Chem., １９８５, ５０, ４４１０参照)。既知の３,５-ジブロモピリジンからタイプＫの化合物が製造できる。最後に、タイプＬのピリジンは類似の化合物を記載した文献に従い市場で入手できる２-(ピリジン-４-イル)-アルコールから製造できる(Taylor, S. L.ら; J. Org. Chem., １９８３, ４８, ４１５６)。
【化５】
2006524656.tif 000005
タイプＭのピリジン誘導体は文献に従い製造できる(スキーム４, Newkome, G. R.ら; J. Am. Chem. Soc., １９７５, ９７, ３２３２)。既知の(４-ブロモピリジン-２-イルオキシ)酢酸は、還元により化合物Ｎをもたらすことができる。タイプＯの化合物は、D. C.Harrowvenらのテトラへドロン（Tetrahedron, ２００１, ５７, ４４４７）に従って３,５-ジブロモピリジンから製造できる。既知の(２-ブロモピリジン-４-イル)酢酸(Den Hertog, H. J.ら; Chem. Pharm. Bull., １９７５, ２３, ３００８)もまた還元により化合物Ｐをもたらすことができる。
【化６】
2006524656.tif 000006
既知の(４-ブロモピリミジン-２-イル)酢酸メチルエステルを還元することにより(Brown, D. J.ら; Australian J. Chem., １９７８, ３１, ６４９) 、所望のピリミジン中間体Ｑ(スキーム５)を製造することができる。同様に、パラジウム触媒を用いたカップリング反応により２,４-ジブロモピリミジンをタイプＲの化合物に転換することができる(Gronowitz, S.ら; Chem. Scripta, １９８６, ２６, ３０５参照)。タイプＳの化合物もまた６-アルキル-１Ｈ-ピリミジン-４-オンから製造することができる。
【化７】
2006524656.tif 000007
ビシクロノネンＢを用いて２,４-ジブロモピリミジンをパラジウム触媒でカップリングしてタイプＴの中間体にし、これをタイプＵの中間体に転換することができる(スキーム６)。６-クロロピラジン-２-イルアミンは、数段階でタイプＶのピラジンに転換できる(Ghosh, A. K.ら; J. Med. Chem., １９９３, ３６, ２３００またはJovanovic, M. V.ら, Heterocycles, １９８３, ２０, ２０１１,またはHartman, G. D.ら; J. Heteroclyclic Chem.; １９８３, ２０, １０８９参照)。タイプＷのピリミジン類は標準的な方法に従って製造することができる。最後に、タイプＸの化合物は、４,６-ジクロロピリミジンから製造することができる。
【化８】
2006524656.tif 000008
ピリダジニル誘導体は、スキーム７に記載したと同様に製造できる。例えば、既知の２-ピリダジン-３-イルエタノールＹ (Rodriguez, L.ら; Synlett, １９９０, ２２７) は、既知の化学(Sauer, J.ら; Tetrahedron, １９９８, ５４, ４２９７)に従ってピリダジニル誘導体Zに転換できる。 既知の６-ブロモ-ピリダジン-４-カルボン酸エチルエステルＡＡ (Dulayyi, A.ら; Tetrahedron, １９９８, ５４, １２８９７; Barlin, G. B.ら; Australian J. Chem., １９７７, ３０, ２３１９) は、アルキル化され、ついで所望のＲa-置換基を有する誘導体ＡＢに還元する。既知の化合物ＡＣ (Brundish, D. E.ら; J. Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals, １９８８, ２５, １３７１)もまたピリダジニル誘導体ＡＥに還元することのできる誘導体ＡＤに転換できる。加水分解すると誘導体ＡＦとすることができ、最後にＯ-アルキル化を行なって所望の中間体ＡＧにすることができる。
【化９】
2006524656.tif 000009
最終生成物の製造
ミツノブ反応条件下を用いて前駆体Ｇを対応するアリールエステルに転換した(スキーム８)。脱保護した後、最終化合物を得る。
【化１０】
2006524656.tif 000010
【００４１】
式Iの化合物および医薬品として許容可能な同化合物の酸付加塩を、例えば経腸投与、非経口投与、あるいは局所投与の医薬品の形で、薬剤として用いることができる。例えば、これらは、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬ゼラチンカプセルおよび軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤もしくは懸濁剤等の形で経口的に、坐薬等の形で直腸から、注射液や輸液の形で非経口的に、あるいは軟膏、クリームまたはオイル等の形で局所的に投与（塗布）できる。      
【００４２】
医薬品の製造は、説明している式Iの化合物および医薬品として許容可能な同化合物の酸付加塩を、任意で他の治療的に有用な物質と組合わせて、当該技術に熟練した者によく知られている方法で、適切で、無毒性で、不活性な治療的に適合性のある固形または液体のキャリアー物質とともに、もし必要な場合は、通常の製薬補助剤を加えて、製剤形態にして、達成できる。      
【００４３】
適しているキャリアー物質としては、無機的なキャリアー物質だけではなく、有機的なキャリアー物質もある。したがって、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠および硬ゼラチンカプセルのキャリアー物質として、ラクトース、コーンスターチまたはその誘導体、タルク、ステアリン酸またはその塩を用いることができる。軟ゼラチンカプセルに適したキャリアー物質には、例えば、植物油、ワックス、脂肪、半固形ポリオールおよび液体ポリオールがある（ただし、軟ゼラチンカプセルでは、有効成分の性質によってはキャリアーが不要の場合がある）。液剤およびシロップの製造に適したキャリアー物質には、例えば、水、ポリオール、蔗糖、転化糖がある。注射液に適したキャリアー物質には、例えば水、アルコール、ポリオール、グリセロールおよび植物油がある。坐薬に適したキャリアー物質には、例えば、天然油および硬化油、ワックス、脂肪および半固形または液体ポリオールがある。局所用製剤に適したキャリアー物質は、グリセリド、半合成グリセリドおよび合成グリセリド、硬化油、液体ワックス、液体パラフィン、液体脂肪アルコール、ステロール、ポリエチレングリコールおよびセルロース誘導体である。      
【００４４】
製薬補助剤として考慮対象となるのは、通常の安定剤、保存料、湿潤剤および乳化剤、コンシステンシー改善剤、フレーバー改善剤、浸透圧を変化させるための塩、緩衝物質、可溶化剤、着色剤、マスキング剤および酸化防止剤である。      
【００４５】
式Iの化合物の用量は、コントロールの対象となる疾患、患者の年齢および個人的な条件、投与方法に応じて幅の広い範囲内で変化し、もちろん、個々の具体的な事例の個別要件に合わせることになる。成人患者の場合は、約１ｍｇから約１０００ｍｇ、特に約５０ｍｇから約５００ｍｇの１日投与量が検討対象となる。      
【００４６】
医薬品は、式Iの化合物を、通常は約１〜５００ｍｇ含む、好ましくは５〜２００ｍｇ含む。      
【００４７】
以下の実施例は、本発明をより詳細に説明する働きをする。ただし、これらは、いかなる方法によっても、その範囲を制限することを意図するものではない。
【実施例】
【００４８】
全般注記
該当化合物は、少なくともＬＣ-ＭＳおよび１Ｈ-ＮＭＲにより特徴付けられている。ここではＬＣ-ＭＳデータのみを提示する。
略記
ＡｃＣｌ    塩化アセチル
ＡＣＥ      アンギオテンシン変換酵素
ＡｃＯＨ    酢酸
Ａｎｇ      アンギオテンシン
ａｑ.       水性の、水を含む
Ｂｎ        ベンジル
Ｂｏｃ      ｔｅｒｔ-ブチルオキシカルボニル
ＢＳＡ      ウシ血清アルブミン
ＢｕＬｉ    n-ブチルリチウム
ＤＩＰＥＡ  ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ    ４-Ｎ,Ｎ-ジメチルアミノピリジン
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ.ＨＣｌ  エチル-Ｎ,Ｎ-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩
ＥＩＡ      酵素免疫測定法
ｅｑ.       当量
Ｅｔ        エチル
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＦＣ        フラッシュ・クロマトグラフィー
ＨＯＢｔ    ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＭｅＯＨ    メタノール
ｏｒｇ.     有機的な、有機の
ＰＧ        保護基
Ｐｈ        フェニル
ＲＡＳ      レニン・アンジオテンシン系
ＲＰ１８    Ｃ１８炭化水素を充填した逆相カラム
ｒｔ        室温
ｓｏｌ.     溶液、水溶液、水剤
ＴＢＡＦ    テトラブチルアンモニウムフルオライド
ＴＢＤＭＳ  ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシリル
ｔＢｕＯＫ  カリウムｔｅｒｔ.-ブトキシド
Ｔｆ        トリフルオロメチルスルホニル
ＴＦＡ      トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
ＴＬＣ      薄層クロマトグラフィー
ＴＭＡＤ    Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'-テトラメチルアゾジカルボキサミド      
【００４９】
前駆体の製造
[４-(３-ブロモフェノキシ)ブトキシ]-ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラン
３-ブロモフェノール (１０.０ g, ５６.６ ｍｍｏｌ)、ＫI (５０ ｍｇ)およびＫ２ＣＯ３ (１２.５ g, ９０.６ ｍｍｏｌ)をＤＭＦ (１００ ｍＬ)中に含有する混合物を８５℃で３０分撹拌した。４-ブロモブタノール (８.７５ ｇ, ５７.２ ｍｍｏｌ)を加え、混合物を８５℃で１６時間撹拌した。４-ブロモブタノール (８.７５ ｇ, ５７.２ ｍｍｏｌ)を再び加え、混合物を８５℃で一晩撹拌した。この混合物を、氷水混合液(５００ ｍＬ)に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。一緒にした有機抽出物を１ＭのＮａＯＨ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、 濾過し、溶媒を減圧下で除去した。ＦＣにより精製して４-(３-ブロモフェノキシ)-ブタン-１-オール(４.６６ ｇ, ３４％)を得た。
この化合物をＤＭＦ (７５ ｍＬ)中に溶解し、イミダゾール (３.２７ ｇ, ４７.５ ｍｍｏｌ)、ついでＴＢＤＭＳ-Ｃｌ (３.０２ ｇ, １９.０ ｍｍｏｌ)を加えた。この混合物を室温で一晩撹拌した。 この混合物を、ＮａＨＣＯ３ (０.５ ｇ)を水(１２５ ｍＬ)に溶解した溶液に注いだ。 この混合物をＥｔ２Ｏ(２ｘ)で抽出した。一緒にした有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、 溶媒を減圧下で除去した。ＦＣにより精製して表題化合物を得た(６.７８ ｇ, 定量的収量)。
【００５０】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-９-メチル-７-オキソ-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノナン-３,６-ジカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ａ)
(４-ベンジル-６-エトキシカルボニルメチル-１-メチル-ピペラジン-２-イル)酢酸エチルエステル(特許WO ９２/０５１７４) (７１.０ ｇ, ０.１９６ mol)をＭｅＯＨ (４００ ｍＬ)に溶解させた。  ＴＦＡ (７７.８ ｍＬ, １.０２ mol)を加え、フラスコを窒素でパージした。  Ｐｄ/Ｃ (１０％, ５０％ 湿度, ３.６ ｇ) を添加した。  フラスコを閉じ水素でパージした(３ｘ)。１日後、混合物をセライトで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。 溶媒を減圧下で除去し、泡状残留物(９２.７ ｇ) を高真空条件下で乾燥した。 ｔＢｕＯＫ (１１７.２ ｇ, １.０４ mol)をトルエン(３.０７ Ｌ)中に溶解した溶液を還流温度まで加熱した。 先に得られた粗ピペラジンをＴＨＦ(３００ ｍＬ)中に溶解した溶液を５０分かけて滴状にして添加した。  黒色の混合物をさらに１０分間撹拌し、室温にまで放置して冷却した。この混合物を０℃まで冷却し、ＡｃＯＨ (３６.６ ｍＬ, ０.６３５ mol)を添加した。 減圧下で溶媒を除去した。この粗製物質をＣＨ２Ｃｌ２ (４００ ｍＬ) に縣濁し０℃にまで冷却した。ＤＩＰＥＡ (１９.１ ｍＬ, １１２ ｍｍｏｌ) を添加した。  Ｂｏｃ２Ｏ (２４.３ ｇ, １１３ ｍｍｏｌ)をＣＨ２Ｃｌ２ (２００ ｍＬ)中に溶解した溶液を滴状にして添加した。 この混合物を０℃で１時間、ついで室温で１時間撹拌した。この混合物を１０％のＮａ２ＣＯ３ (２ｘ)水溶液で洗浄した。 有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物をＦＣ (ＥｔＯＡｃ/ヘプタン １:１ →ＥｔＯＡｃ)で精製した。表題化合物の油状物を得た(２４.５ ｇ, ３８％)。Ｒf = ０.０５ (ＥｔＯＡｃ/ヘプタン １:１) または０.５６ (ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃｌ２ １:９)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ２.９４; ＥＳ+: ３２５.１９。
【００５１】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-９-メチル-７-トリフルオロメタンスルフォニルオキシ-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-３,６-ジカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ｂ)
ビシクロノナン Ａ (２.２２ ｇ, ６.８０ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (５０ ｍＬ)中に溶解した溶液を０℃にまで冷却し、ＮａＨ(鉱油中に約６０％, ３２６ ｍｇ, 約８.２ ｍｍｏｌ)を加えた。 気体の発生を観察した。  ２０分後に、 Ｔｆ２ＮＰｈ (３.２２ ｇ, ９.００ ｍｍｏｌ)を加えた。１０分後に、氷浴を取り除いた。３時間後に、この溶液をＥｔＯＡｃ で希釈し、塩水で１回洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で溶媒を除去した。ＦＣ (ＥｔＯＡｃ/ヘプタン ３:１→ＥｔＯＡｃ) により精製して表題化合物を油として得た(２.５０ ｇ, ８０％)。Ｒf = ０.１５ (ＥｔＯＡｃ/ヘプタン １:１)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ４.７３; ＥＳ+: ４５８.９５。
【００５２】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)エチル]フェニル}-９-メチル-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６-ジカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ｃ１)
ＢｕＬｉ(ヘキサン中に１.６Ｍ , ８.５２ ｍＬ, １３.６ ｍｍｏｌ)を、[２-(３-ブロモフェニル)エトキシ]-ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラン(４.２８ ｇ, １３.６ ｍｍｏｌ, ２-(３-ブロモフェニル)エタノールをシリル化して製造)をＴＨＦ(６０ ｍＬ)中に溶解した溶液に-７８ ℃で添加した。混合物をこの温度で３０分間撹拌し、ＺｎＣｌ２ (ＴＨＦ中に１Ｍ、１６０ ℃で３時間乾燥したＺｎＣｌ２から調製、ＴＨＦ, １５.９ ｍＬ, １５.９ ｍｍｏｌ)を加えた。  この混合物を放置して室温まで温め、ビシクロノネンＢ (２.５０ ｇ, ５.４５ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (１５ ｍｌ)中に溶解した溶液、それからＰｄ(ＰＰｈ３)４ (１４７ ｍｇ, ０.１３ ｍｍｏｌ)を加えた。この混合物を４０℃まで加熱し、この温度で３０分間撹拌した。この混合物を放置して室温まで冷却し、１ＭのＨＣｌ水溶液(２ ｍＬ)を添加した。この混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１ＭのＮａＯＨ水溶液で一回洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。ＦＣで精製し(ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃｌ２ １０:４９０→１５:４８５→２０:４８０→２５:４７５→５０:４５０)、表題化合物を得た(２.４１ ｇ, ８０％)。ＬＣ-ＭＳ; Ｒt =５.０２ ＥＳ+: ５４５.３１。
【００５３】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)プロピル]フェニル}-９-メチル-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６-ジカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ｃ２)
ＢｕＬｉ (ヘキサン中に１.６Ｍ, １０.２２ ｍＬ, １６.４ ｍｍｏｌ)を、[２-(３-ブロモフェニル)プロポキシ]-ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラン(４.９５ ｇ, １６.３ ｍｍｏｌ, ２-(３-ブロモフェニル)プロパノールをシリル化することにより製造、 P. Beakら, J. Org. Chem., １９８９, ５４, ５５７４)をＴＨＦ (６０ ｍＬ)中に溶解した溶液に-７８℃で添加した。この混合物をこの温度で３０分間撹拌し、ＺｎＣｌ２(ＴＨＦ中に１Ｍ, １６０℃で３ 時間乾燥したＺｎＣｌ２から製造、ＴＨＦ, １９.０ ｍＬ, １９.０ ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を放置し室温にまで温め、ビシクロノネンＢ (３.００ ｇ, ６.５４ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (１５ ｍｌ)中に溶解した溶液、ついでＰｄ(ＰＰｈ３)４ (１８９ ｍｇ, ０.１６ ｍｍｏｌ) を添加した。この混合物を４０℃にまで加熱し、この温度で３０分間撹拌した。この混合物を放置し室温にまで冷却し、１ＭのＨＣｌ水溶液(２ ｍＬ)を加えた。この混合物をＥｔＯＡｃ で希釈し、１ＭのＮａＯＨ水溶液(１ｘ)で洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥、濾過し、有機溶媒を減圧条件下で除去した。ＦＣで精製し (ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃｌ２ １０:４９０ → １５:４８５ → ２０:４８０ → ２５:４７５ → ５０:４５０)表題化合物を得た(２.７４ ｇ, ７５％)。ＬＣ-ＭＳ; Ｒｔ = ５.１０ ＥＳ+: ５５９.３２。
【００５４】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)エトキシ]フェニル}-９-メチル-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６-ジカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ｃ３)
ＢｕＬｉ(ヘキサン中に１.６Ｍ, １９.２ ｍＬ, ３０.７ ｍｍｏｌ)を、[２-(４-ブロモ-フェノキシ)エトキシ]-ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラン(９.４０ ｇ, ２８.４ ｍｍｏｌ, Morita, C.ら, Heterocycles, ２０００, ５２, １１６３)をＴＨＦ(５５ ｍＬ)中に溶解した溶液に、-７８℃で添加した。混合物をこの温度で３０分間撹拌し、ＺｎＣｌ２(ＴＨＦ中に１Ｍ,１６０℃で３時間乾燥したＺｎＣｌ２から製造、ＴＨＦ, ３５.５ ｍＬ, ３５.５ ｍｍｏｌ) を加えた。この混合物を放置し室温にまで温め、ビシクロノネンＢ (１０.８ ｇ, ２３.６ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (２０ ｍｌ)中に溶解した溶液、ついでＰｄ(ＰＰｈ３)４ (０.７０ ｇ, ０.５９ ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を４０℃にまで加熱し、この温度で３０分間撹拌した。 この混合物を放置し室温にまで冷却し、１ＭのＨＣｌ水溶液(２ ｍＬ)を加えた。この混合物をＥｔＯＡｃで希釈し１ＭのＮａＯＨ水溶液で洗浄した(１ｘ)。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。  ＦＣで精製して (ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃｌ２ １０:４９０ → １５:４８５ → ２０:４８０ → ２５:４７５ → ５０:４５０)表題化合物を得た(１１.７ ｇ, ８９％)。  ＬＣ-ＭＳ; Ｒｔ = ０.９８ ＥＳ+: ５６１.１０。
【００５５】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)ブトキシ]フェニル}-９-メチル-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６-ジカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ｃ４)
ＢｕＬｉ(ヘキサン中に１.６Ｍ, １２.７５ ｍＬ, ２０.４ ｍｍｏｌ)を、[４-(３-ブロモフェノキシ)ブトキシ]-ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラン(６.７８ ｇ, １８.８ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ(１００ ｍＬ)中に溶解した溶液に-７８℃で添加した。この混合物をこの温度で３０分間撹拌し、それからＺｎＣｌ２ (ＴＨＦ中に１Ｍ,１６０℃で３時間乾燥したＺｎＣｌ２から製造、ＴＨＦ, ２３.６ ｍＬ, ２３.６ ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を放置し室温にまで温め、ビシクロノネンＢ(７.２ ｇ, １５.７ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (２０ ｍｌ)中に溶解した溶液、 ついでＰｄ(ＰＰｈ３)４ (０.４６８ ｇ, ０.３９３ ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を室温で１時間撹拌した。  混合物を放置し室温にまで冷却し、１ＭのＨＣｌ水溶液(２ ｍＬ)を加えた。この混合物をＥｔＯＡｃ で希釈し、１ＭのＮａＯＨ水溶液で洗浄した(１ｘ)。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。ＦＣで精製し (ＭｅＯＨ/ＣＨ２Ｃｌ２ １０:４９０ → １５:４８５ → ２０:４８０ → ２５:４７５ → ５０:４５０)表題化合物を得た(２.６０ ｇ, ２８％)。ＬＣ-ＭＳ; Ｒｔ = １.０２ ＥＳ+: ５８９.１０。
【００５６】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６,９-トリカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル９-(２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチルエチル)エステル(Ｄ１)
ビシクロノネンＣ１(２.３ ｇ, ４.２２ ｍｍｏｌ)およびβ,β,β-トリクロロ-ｔｅｒｔ-クロロギ酸ブチル(１０.４ ｇ, ４３.３ ｍｍｏｌ)をＣＨ２ＣｌＣＨ２Ｃｌ(４０ ｍｌ)中に溶解した溶液を還流温度にまで３時間加熱した。この混合物を放置し室温まで冷却し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣ(ＥｔＯＡｃ/ヘプタン１:９ →１:４→２:３)で精製し、表題化合物を得た(２.７３ ｇ, ８８％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ８.００ｍｉｎ.
【００５７】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６,９-トリカルボン酸３-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル９-(２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチルエチル)エステル(Ｄ２)
ビシクロノネンＣ２ (２.７４ ｇ, ４.９０ ｍｍｏｌ)およびβ,β,β-トリクロロ-ｔｅｒｔ-クロロギ酸ブチル(１１.７６ ｇ, ４９.０ ｍｍｏｌ)をＣＨ２ＣｌＣＨ２Ｃｌ(５０ ｍｌ)中に溶解した溶液を還流にまで３時間過熱した。この混合物を放置し、室温にまで冷却し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣ(ＥｔＯＡｃ/ヘプタン１:９ →１:４→２:３)で精製して表題化合物を得た(３.０１ ｇ, ８５％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt =８.０５ｍｉｎ。
【００５８】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-[３-(２-ヒドロキシエトキシ)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６,９-トリカルボン酸３,９-ジ-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ｄ３)
ビシクロノネンＣ３(１１.６５ ｇ,２０.８ ｍｍｏｌ)を１,２-ジクロロエタン(１８０ ｍＬ)中に溶解した溶液に、ＮａＨＣＯ３ (１７.４ ｇ,２０８ｍｍｏｌ)および１-クロロエチルクロロギ酸塩(２２.４ ｍＬ, ２０８ ｍｍｏｌ)を添加した。この溶液を加熱して還流した。４.５時間後、反応混合物を放置し室温にまで冷却し、溶媒を減圧条件下で除去した。ＭｅＯＨ(１８０ ｍＬ)を添加した。この混合物を室温で３０分間撹拌し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２ (２２０ ｍＬ)中に溶解させ、ＤＩＰＥＡ (１７.８ ｍＬ, １０４ ｍｍｏｌ)を添加し、それからこの混合物を０ ℃に冷却した。  Ｂｏｃ２Ｏ (１３.６ ｇ, ６２.４ ｍｍｏｌ)を加え、この混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物を１ＭのＨＣｌ水溶液で１回、さらにＮａＨＣＯ３飽和水溶液で１回洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣで精製し標題化合物を得た(９.５７ ｇ, ８７％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = １.０２ｍｉｎ; ＥＳ+: ４７７.０２。
【００５９】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-[３-(４-ヒドロキシブトキシ)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６,９-トリカルボン酸３,９-ジ-ｔｅｒｔ-ブチルエステル６-エチルエステル(Ｄ４)
ビシクロノネンＣ４ (２.６０ ｇ, ４.４１ ｍｍｏｌ)を１,２-ジクロロエタン(３０ ｍＬ)中に溶解した溶液に、ＮａＨＣＯ３ (３.７４ ｇ, ４４.２ ｍｍｏｌ)および１-クロロエチルクロロギ酸塩(４.８５ ｍＬ, ４４.２ ｍｍｏｌ) を添加した。この溶液を加熱して還流させた。３時間後に、反応混合液を放置して室温にまで冷却し、それから溶媒を減圧条件下で除去した。ＭｅＯＨ (３０ ｍＬ)を添加した。この混合液を室温で３０分間撹拌し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２ (５０ ｍＬ)に溶かし、 ＤＩＰＥＡ (３.７５ ｍＬ, ２２.１ ｍｍｏｌ)を加え、この混合物を０℃に冷却した。  Ｂｏｃ２Ｏ (２.９５ ｇ, １３.２ ｍｍｏｌ)を加え、この混合物を室温で２時間撹拌した。この混合物を１Ｍの ＨＣｌ水溶液で１回、 さらにＮａＨＣＯ３飽和水溶液で１回洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣで精製し表題化合物を得た(１.７１ ｇ, ６９％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = １.０５ｍｉｎ; ＥＳ+: ５０５.０８。
【００６０】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-ヒドロキシエチル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６,９-ジカルボン酸６-エチルエステル９-(２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチルエチル)エステル(E１)
ＨＣｌ (ジオキサン中に４Ｍ, ３０ ｍＬ)を、ビシクロノネンＤ１(２.７３ ｇ, ３.７２ ｍｍｏｌ)をＣＨ２Ｃｌ２ (３０ ｍｌ)中に溶解させた溶液に０℃で添加した。 この混合物を０℃で２０ 分間撹拌し、それから室温で２.５時間撹拌した。  溶媒を減圧条件下で蒸発させ、残留物を高真空条件下で乾燥した。この残留物、ＤＭＡＰ (２３ ｍｇ, ０.１９ ｍｍｏｌ)およびＤＩＰＥＡ ( ２.５４ ｍｌ, １５.３ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (１５ ｍＬ)中に含む混合物を-７８℃に冷却した。ＡｃＣｌ(０.２９ ｍＬ, ３.７０ ｍｍｏｌ)をゆっくり添加した。この混合物を３０分間撹拌し、次にＭｅＯＨ (２ ｍＬ)を加えた。 この混合物を放置し室温にまで温め、それからＥｔＯＡｃで希釈した。１ＭのＨＣｌ水溶液(２ｘ)およびＮａＨＣＯ３飽和水溶液 (１ｘ)で洗浄した。 有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、それから溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣで精製し(ＥｔＯＡｃ/ヘプタン １:１→ＥｔＯＡｃ → ＥｔＯＡｃ/ＭｅＯＨ １:９) 表題化合物を得た(１.２５ ｇ, ６０％).  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ６.６２。
【００６１】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-ヒドロキシプロピル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６,９-ジカルボン酸６-エチルエステル９-(２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチルエチル)エステル(E２)
ＣＨ２Ｃｌ２ (３０ ｍｌ)中にビシクロノネンＤ２(３.０１ ｇ, ４.０２ ｍｍｏｌ)を溶解させた溶液に、ＨＣｌ(ジオキサン中に４Ｍ, ３０ ｍＬ)を０℃で添加した。 この混合物を０℃で２０分間、ついで室温で２.５時間撹拌した。溶媒を減圧条件下で蒸発させ、残留物を高真空条件下で乾燥した。この残留物、ＤＭＡＰ (２５ ｍｇ, ０.２０ ｍｍｏｌ, ) およびＤＩＰＥＡ (２.７５ ｍｌ, １６ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (２０ ｍＬ) 中に含む混合物を-７８℃にまで冷却した。ＡｃＣｌ (０.３１ ｍＬ, ４.１０ ｍｍｏｌ)をゆっくりと加えた。 この混合物を３０分間撹拌し、それからＭｅＯＨ(２ ｍＬ)を添加した。 この混合物を放置し室温にまで温め、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｍ ＨＣｌ水溶液 (２ｘ) およびＮａＨＣＯ３ 飽和水溶液(１ｘ)で洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣで精製し(ＥｔＯＡｃ/ヘプタン １:１ → ＥｔＯＡｃ→ ＥｔＯＡｃ/ＭｅＯＨ １:９)、表題化合物を得た(１.５６ ｇ, ６９％)。
【００６２】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-ヒドロキシエチル)フェニル]-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６,９-ジカルボン酸９-(２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチル-エチル)エステル(Ｆ１)
ＥｔＯＨ(５６ ｍｌ)中のビシクロノネンE１(１.２５ ｇ, ２.２２ ｍｍｏｌ)および１Ｍ ＮａＯＨ水溶液(５６ ｍＬ)の混合物を８０℃で２.５時間撹拌した。この混合物を放置して室温にまで冷却し、１ＭのＨＣｌ水溶液で酸性にした。混合物をＥｔＯＡｃ(３ｘ)で抽出し、有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。粗生成物をＦＣで精製し(ＥｔＯＡｃ →ＭｅＯＨ/ＥｔＯＡｃ １:１９ →１:９)、 表題化合物を得た(３６０ ｍｇ ３５％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt =４.６６; ＭＳ-: ５３０.８２。
【００６３】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-ヒドロキシプロピル)フェニル]-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６,９-ジカルボン酸９-(２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチル-エチル)エステル(Ｆ２)
ＥｔＯＨ(７０ ｍｌ)中のビシクロノネンE２ (１.５６ ｇ, ２.７０ ｍｍｏｌ)および１Ｍ ＮａＯＨ水溶液(７０ ｍＬ)の混合物を８０℃で２.５時間撹拌した。この混合物を放置して室温にまで冷却し、１ＭのＨＣｌ水溶液で酸性にした。この混合物をＥｔＯＡｃ (３ｘ) で抽出し、有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。  粗生成物をＦＣで精製して(ＥｔＯＡｃ → ＭｅＯＨ/ＥｔＯＡｃ １:１９ → １:９) 表題化合物を得た(１.１８ ｇ ８０％)。
【００６４】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-[３-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)エトキシフェニル]-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６,９-トリカルボン酸３,９-ジ-ｔｅｒｔ-ブチルエステル(Ｆ３)
ビシクロノネンＤ３ (６.２７ ｇ, １１.８ ｍｍｏｌ)を含むＥｔＯＨ (２１０ ｍｌ)および１Ｍの ＮａＯＨ水溶液 (９０ ｍＬ)の混合物を８０℃で５.５時間撹拌した。この混合物を放置して室温にまで冷却し、１Ｍの ＨＣｌ水溶液で酸性にした。この混合物をＥｔＯＡｃ (３ｘ)で抽出し、有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。 粗化合物(５.２１ ｇ １０.４ ｍｍｏｌ)、イミダゾール (２.１２ ｇ, ３１.２ ｍｍｏｌ)およびＴＢＤＭＳ-Ｃｌ(３.４５ ｇ, ２２.９ ｍｍｏｌ)を含むＤＭＦ (５０ ｍＬ)を室温で一晩撹拌した。ＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液を添加し、混合物をヘキサン(３ｘ)で抽出した。一緒にした有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、 減圧条件下で溶媒を蒸発させた。この粗生成物およびＫ２ＣＯ３ (０.６ ｇ)を含むＴＨＦ (３０ ｍｌ)、 ＭｅＯＨ (１０ ｍｌ)、およびＨ２Ｏ (１０ ｍｌ)の混合物を室温で３時間撹拌した。  ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を加え、この混合物をＥｔ２Ｏ (３ｘ)で抽出した。一緒にした有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、 溶媒を減圧条件下で除去した。 表題化合物 (６.２１ ｇ, ８５％)を得、これをさらに精製せずに用いた。
【００６５】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(ｔｅｒｔ-ブチルジメチルシラニルオキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,６,９-トリカルボン酸３,９-ジ-ｔｅｒｔ-ブチルエステル(Ｆ４)
ビシクロノネンＤ４(１.７１ ｇ, ３.０５ ｍｍｏｌ)を含むＥｔＯＨ(３５ ｍｌ)および１ＭのＮａＯＨ水溶液(１５ ｍＬ)の混合物を８０℃で４時間撹拌した。この混合物を放置して室温にまで冷却し、１ＭのＨＣｌ水溶液で酸性にした。この混合物をＥｔＯＡｃ (３ｘ)で抽出し、有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。 粗生成物(１.６５ ｇ ３.０５ ｍｍｏｌ)、イミダゾール (０.８５ ｇ, １２.４ ｍｍｏｌ) およびＴＢＤＭＳ-Ｃｌ (２.５０ ｇ, ７.７ ｍｍｏｌ)をＤＭＦ(３５ ｍＬ)中に含む混合物を室温で一晩撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、この混合物をヘキサン(３ｘ)で抽出した。一緒にした有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、 溶媒を減圧条件下で蒸発させた。この粗生成物およびＫ２ＣＯ３(０.６ ｇ)を含むＴＨＦ(３０ ｍｌ)、 ＭｅＯＨ (１０ ｍｌ)、およびＨ２Ｏ (１０ ｍｌ)の混合物を室温で３時間撹拌した。  ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液を添加し、この混合物をＥｔ２Ｏ(３ｘ)で抽出した。一緒にした有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。これにより表題化合物(１.７９ ｇ, ８７％)を得、これをさらに精製せずに用いた。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = １.３５; ＥＳ+: ７８３.３１。
【００６６】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-ヒドロキシエチル)フェニル]-６-(メチル-フェネチル-カルバモイル)-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-９-カルボン酸２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチルエチルエステル(Ｇ１)
ビシクロノネンＦ１ (３６０ ｍｇ, ０.６７ ｍｍｏｌ)、メチルフェネチルアミン (０.２８ ｍＬ, ２.０１ ｍｍｏｌ)、ＤＭＡＰ (２０ ｍｇ, ０.１７ ｍｍｏｌ)、ＤＩＰＥＡ (０.７４ ｍＬ, ４.３０ ｍｍｏｌ)、ＨＯＢｔ (２２ ｍｇ, ０.１６ ｍｍｏｌ) およびＥＤＣ.ＨＣｌ (３１０ ｍｇ, １.６８ ｍｍｏｌ)をＣＨＣｌ３ (１０ ｍＬ)中に含む混合物を３日間撹拌した。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２中に希釈し、１ＭのＨＣｌ水溶液(２ｘ)、およびＮａＨＣＯ３飽和水溶液(１ｘ)で洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。  ＦＣで精製し(ＥｔＯＡｃ/ヘプタン １:４ → １:１ → ４:１ → ＥｔＯＡｃ →ＭｅＯＨ/ＥｔＯＡｃ １:１９ → ９０:１０)、表題化合物を得た(３５０ ｍｇ, ８０％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ５.３７; ＥＳ+: ６５０.１９。
【００６７】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-ヒドロキシプロピル)フェニル]-６-(メチル-フェネチルカルバモイル)-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-９-カルボン酸２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチルエチルエステル(Ｇ２)
ビシクロノネンＦ２(７９０ ｍｇ, １.４４ ｍｍｏｌ)、メチルフェネチルアミン (０.６３ ｍＬ, ４.３３ ｍｍｏｌ)、ＤＭＡＰ (４４ ｍｇ, ０.３６ ｍｍｏｌ)、ＤＩＰＥＡ (０.９９ ｍＬ, ５.９４ ｍｍｏｌ)、ＨＯＢｔ (４８ ｍｇ, ０.３６ ｍｍｏｌ)およびＥＤＣ.ＨＣｌ(６９０ ｍｇ, ３.６０ ｍｍｏｌ)をＣＨＣｌ３ (２０ ｍＬ)中に含む混合物を３日間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２ に希釈し、１ＭのＨＣｌ水溶液(２ｘ)、 およびＮａＨＣＯ３ 飽和水溶液(１ｘ)で洗浄した。  有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。ＦＣで精製し (ＥｔＯＡｃ/ヘプタン １:４ → １:１ → ４:１ →ＥｔＯＡｃ →ＭｅＯＨ/ＥｔＯＡｃ １:１９ → ９０:１０)、表題化合物を得た(７５０ ｍｇ, ７８％)。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ５.４３; ＥＳ+: ６６４.１３。
【００６８】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-６-[シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)カルバモイル]-７-[３-(２-ヒドロキシエトキシ)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,９-ジカルボン酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチルエステル(Ｇ３)
化合物Ｆ３ (６.５ ｇ, １０.５ ｍｍｏｌ)をＣＨ２Ｃｌ２ (１００ ｍＬ)中に溶解させた溶液に、(１-クロロ-２-メチルプロペニル)ジメチルアミン (１.５０ ｍＬ, １１.６ ｍｍｏｌ)を室温で添加した。この混合物を２０分間撹拌した。シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミン (３-メトキシ-２-メチルベンズアルデヒドから還元アミノ化により製造, Comins, D. L.; Brown, J. D., J. Org. Chem., １９８９, ５４, ３７３０ およびシクロプロピルアミン, ２.０１ ｇ, １０.５ ｍｍｏｌ)、およびＤＩＰＥＡ (１１.０ ｍＬ, ３１.５ ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を３５分間撹拌し、ついで１０％のクエン酸水溶液を加えた。相を分離し、有機相を１０％のクエン酸水溶液で洗った。一緒にした水性相をＣＨ２Ｃｌ２で逆抽出した。一緒にした有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。粗表題化合物(８.３０ ｇ, １０.５ ｍｍｏｌ)をＴＨＦ (１７０ ｍＬ)に溶解し、ＴＢＡＦ (３.７０ ｇ, １１.５ ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を２５分間撹拌した。溶媒を減圧条件下で除去し、残留物をＥｔＯＡｃで希釈した。この混合物を水、塩水で洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣで精製し標題化合物を得た(４.６９ ｇ, ６６％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = １.０７; ＥＳ+: ６７８.３２。
【００６９】
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-６-[シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)カルバモイル]-７-[３-(４-ヒドロキシブトキシ)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-３,９-ジカルボン酸ジ-ｔｅｒｔ-ブチルエステル(Ｇ４)
(１-クロロ-２-メチルプロペニル)ジメチルアミン(０.４２ ｍＬ, ３.０４ ｍｍｏｌ)を、化合物Ｆ４ (１.７９ ｇ, ２.７６ ｍｍｏｌ)をＣＨ２Ｃｌ２ (５０ ｍＬ)中に溶解した溶液に室温で添加した。この混合物を３０分間撹拌した。シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミン (３-メトキシ-２-メチルベンズアルデヒドから還元アミノ化により製造, Comins, D. L.; Brown, J. D., J. Org. Chem., １９８９, ５４, ３７３０ およびシクロプロピルアミン, ０.５３ ｇ, ２.７６ ｍｍｏｌ)、およびＤＩＰＥＡ (１.４４ ｍＬ, ８.３０ ｍｍｏｌ)を加えた。この混合物を１時間撹拌し、１０％のクエン酸水溶液を添加した。相を分離し、有機相を１０％のクエン酸水溶液で洗浄した。一緒にした水性相をＣＨ２Ｃｌ２で逆抽出した。一緒にした有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。粗表題化合物(２.２９ ｇ)をＴＨＦ (５０ ｍＬ)に溶解させ、ＴＢＡＦ (１.８２ ｇ, ５.５８ ｍｍｏｌ)を加えた。この混合物を２ h時間撹拌した。溶媒を減圧条件下で除去し、残留物をＥｔＯＡｃで希釈した。この混合物を水、ついで塩水で洗浄した。有機抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧条件下で除去した。残留物をＦＣで精製して表題化合物を得た(１.２２ ｇ, ６２％)。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = １.０９; ＥＳ+: ７０６.２８。
【００７０】
最終化合物の製造
アリルエーテル形成の一般的な方法(Ａ) (ミツノブ反応)
前駆体 (０.０５ ｍｍｏｌ)をトルエン(１.００ ｍＬ)に溶解または縣濁させた。フェノール誘導体(０.０７５ ｍｍｏｌ)を含むトルエン(０.５０ ｍＬ)を添加した。ＴＭＡＤ (０.０７５ ｍｍｏｌ)を含むトルエン (０.５０ ｍＬ)を添加し、その後トリブチルホスフィン(０.１５ ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、ついで６０℃で２時間撹拌した。時々、２度目のトリブチルホスフィンを添加し、一晩中撹拌することが必要であった。時々、反応物質を溶解するために 共溶媒としてＴＨＦが必要であった。反応混合物を放置し室温にまで冷却し、ついで水を加えた。この反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機抽出物を減圧条件下で蒸発させた。
【００７１】
２,２,２-トリクロロ-１,１-ジメチルエチルカルバメート保護基を開裂させる一般的方法(Ｂ) :
別の一般的方法からの粗生成物をＴＨＦ/ＡｃＯＨ (１:０.１)に溶解し、亜鉛(２０ ｅｑ.)で処理した。この縣濁液を５時間撹拌し、セライトで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を減圧条件下で蒸散し、残留物をＨＰＬＣで精製した。
【００７２】
実施例:
実施例 １
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩 
一般的方法ＡおよびＢに従い、化合物Ｇ１および２-クロロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８３ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５５８.１１。
【００７３】
実施例 ２
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-ｔｅｒｔ-ブチルフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢに従い、化合物Ｇ１および２-ｔｅｒｔ-ブチルフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.９３ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５８０.２０。
【００７４】
実施例 ３
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３,６-トリフルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ１および２,３,６-トリフルオロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８２ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７８.１１。
【００７５】
実施例 ４
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,５-ジフルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩 
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ１および２,５-ジフルオロフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８１ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５６０.１１。
【００７６】
実施例 ５
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-o-トリルオキシエチル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、 化合物Ｇ１および２-メチルフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８４ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５３８.１５。
【００７７】
実施例 ６
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３-ジクロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩 
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ１および２,３-ジクロロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８７ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５９２.０６。
【００７８】
実施例 ７
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロ-５-メチルフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ１および２-クロロ-５-メチルフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８７ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１１。
【００７９】
実施例 ８
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(３-クロロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザ-ビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ１および３-クロロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８５ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５５８.１１。
【００８０】
実施例 ９
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-(３-アセチル-７-{３-[２-(２-ブロモ-５-フルオロフェノキシ)エチル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ１および２-ブロモ-５-フルオロフェノールから出発して製造。
【００８１】
実施例 １０
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[３-(２-ブロモ-５-フルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および２-ブロモ-５-フルオロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８９ｍｉｎ, ＥＳ+ = ６３６.０３。
【００８２】
実施例 １１
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および２-クロロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８６ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１０。
【００８３】
実施例 １２
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-ｔｅｒｔ-ブチルフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および２-ｔｅｒｔ-ブチルフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.９７ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５９４.２３。
【００８４】
実施例 １３
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３,６-トリフルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および２,３,６-トリフルオロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８５ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５９２.１３。
【００８５】
実施例 １４
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,５-ジフルオロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および２,５-ジフルオロフェノールから出発して製造。ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８４ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７４.１４。
【００８６】
実施例 １５
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-[３-(２-o-トリルオキシプロピル)フェニル]-３,９-ジアザビシクロ-[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２(５０ ｍｇ)および２-メチルフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８８ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５５２.１７。
【００８７】
実施例 １６
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２,３-ジクロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩 
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および２,３-ジクロロフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.９１ｍｉｎ, ＥＳ+ = ６０６.０８。
【００８８】
実施例 １７
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(２-クロロ-５-メチルフェノキシ)プロピル]-フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチル-アミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および２-クロロ-５-メチルフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.９０ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５８６.１２。
【００８９】
実施例 １８
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(３-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｘ２(５０ ｍｇ)および３-クロロフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８８ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１２。
【００９０】
実施例 １９
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-３-アセチル-７-{３-[２-(４-クロロフェノキシ)プロピル]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸メチルフェネチルアミド ギ酸塩
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ２および４-クロロフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８８ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１１。
【００９１】
実施例 ２０
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[２-(２,６-ジクロロ-４-メチルフェノキシ)エトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ３および２,６-ジクロロ-４-メチルフェノール から出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８８ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１１。
【００９２】
実施例 ２１
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２-フルオロ-３-トリフルオロメチルフェノキシ)ブトキシ]-フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ４および２-フルオロ-３-トリフルオロメチルフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８８ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１１。
【００９３】
実施例 ２２
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２,６-ジクロロ-４-メチルフェノキシ)ブトキシ]フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ４および２,６-ジクロロ-４-メチルメチルフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８８ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１１。
【００９４】
実施例 ２３
(ｒａｃ.)-(１Ｒ*, ５Ｓ*)-７-{３-[４-(２-クロロ-６-フルオロ-３-メチルフェノキシ)ブトキシ]-フェニル}-３,９-ジアザビシクロ[３.３.１]ノン-６-エン-６-カルボン酸シクロプロピル-(３-メトキシ-２-メチルベンジル)アミド
一般的方法ＡおよびＢにしたがって、化合物Ｇ４および２-クロロ-６-フルオロ-３-メチルフェノールから出発して製造。  ＬＣ-ＭＳ: Ｒt = ０.８８ｍｉｎ, ＥＳ+ = ５７２.１１。
【００９５】
一般式Ｉの化合物およびそれらの塩の活性を決定するために次の試験法を実施した。本発明の化合物によるヒト組換えレニンの阻害
ガラス器内酵素アッセイを、３８４ウエルのポリプロピレン製プレート（ヌンク社）を用いて実施した。アッセイ用緩衝液は、１ｍＭのＥＤＴＡと０．１％のＢＳＡを含有する１０ｍＭのＰＢＳ（ギブコＢＲＬ社）からなっていた。培養物は、各ウエル当り５０μＬの酵素含有混合物および２．５μＬのレニン阻害剤のＤＭＳＯ溶液からなっていた。酵素含有混合物を４℃で予備混合した。それは次の成分からなる：
・ヒト組換えレニン（０．１６ｎｇ／ｍＬ）
・合成ヒトアンギオテンシン（１−１４）（０．５μＭ）
・ヒドロキシキノリン硫酸塩（１ｍＭ）。次に、それらの混合物を３７℃で３時間インキュベートした。        
【００９６】
酵素活性およびその阻害率を求めるために、３８４ウエルのプレート（ヌンク）での酵素免疫アッセイ（ＥＩＡ）によって、蓄積ＡｎｇＩを検出した。５μＬの培養物または標準を、事前にＡｎｇＩとウシ血清アルブミンとの共有結合複合体（ＡｎｇＩ−ＢＳＡ）でコーティングした免疫プレートに移した。０．０１％のトゥイーン（Ｔｗｅen）２０を含有する上記アッセイ緩衝液中のＡｎｇＩ抗体溶液７５μＬを加え、４℃で一夜一次インキュベーションを行った。プレートを０．０１％トゥイーン２０含有ＰＢＳで３回洗い、次に、抗ウサギペルオキシダーゼ結合抗体（ＷＡ９３４、アマーシャム社）とともに室温で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄後、ペルオキシダーゼ基質ＡＢＴＳ（２，２’−アジノ-ジ（３−エチルベンズチアゾリンスルホネート）を加え、プレートを室温で６０分間インキュベートした。０．１Ｍクエン酸（ｐＨ４．３）で反応を停止させたのち、マイクロプレートリーダーを用い、４０５ｎｍでプレートを評価した。各濃度点について阻害百分率を計算し、酵素活性を５０％阻害するレニン阻害濃度（ＩＣ５０）を求めた。試験したすべての化合物のＩＣ５０値は、１０μＭ未満である。
【国際調査報告】
2006524656.tif 000012
2006524656.tif 000013