(57)【要約】【化１】2006528164.tif 000018  本発明は、任意に置換された式（Ｉ）の化合物またはその塩を提供する。式中、Ｒ1は、環に二重結合している場合はＯまたはＳで、環に単結合している場合はＯＨ、ＳＨまたは保護された等価物であり、Ｒ2は、水素、より好ましくは、炭素原子により結合したＣ1−Ｃ10有機基であり、Ｘは、Ｈ、Ｏ、ＯＯ、ＳまたはＳＳであり、Ｒ3は、Ｘ＝Ｈの時は存在せず、水素またはヒドロキシルもしくはチオール保護基であり、Ｒ4は、さらなる基Ｒ5で任意に置換される複素環式、又は好ましくは、同素環式アリール基であり、基Ｔ1は、それぞれ、独立して、存在しないか、または水素もしくはＳ−Ｒ6基で、ここで任意の／各Ｒ6は、独立して、約５００ａｍｕ以下の分子量の有機基である。さらに、本発明は、このような化合物の合成方法、およびこのような化合物を哺乳類の被験者に投与することを含む治療方法を提供する。【選択図】なし
2006528164.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
任意に置換された式Ｉの化合物またはその塩。
【化１】
2006528164.tif 000013
式中、Ｒ1は、環に二重結合している場合はＯまたはＳで、環に単結合している場合はＯＨ、ＳＨまたは保護された等価物であり、Ｒ2は、水素、又はより好ましくは、炭素原子により結合したＣ1−Ｃ10有機基であり、Ｘは、Ｈ、Ｏ、ＯＯ、ＳまたはＳＳであり、Ｒ3は、Ｘ＝Ｈの時は存在せず、水素またはヒドロキシルもしくはチオール保護基であり、Ｒ4は、さらなる基Ｒ5で任意に置換される複素環式、又は好ましくは、同素環式アリール基であり、基Ｔ1は、それぞれ、独立して、存在しないか、または水素もしくはＳ−Ｒ6基で、ここで任意の／各Ｒ6は、独立して、約５００ａｍｕ以下の分子量の有機基である。
【請求項２】
Ｒ2が、任意に置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、アリールスルフォニルアルキルまたはアラルケニル基であり、Ｒ3が、水素またはＣ2−Ｃ7、アシルもしくはアルカリル基であり、Ｒ5が、アルキル、アルケニル、アルキニル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、チオ、チオアルキル、ハロまたは第一級、第二級、第三級もしくは第四級アミノ基であり、Ｒ6が、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、アルキルエステル、アルキルアミド、アルキル酸、ポリオール、糖、オリゴ（アルキルアミド）、オリゴ（アルキルエステル）またはオリゴペプチド基である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式ＩＩＩの請求項１または２に記載の化合物。
【化２】
2006528164.tif 000014
式中、Ｔ1、Ｒ2およびＲ3は、請求項１または２に記載したとおりであり、Ｒ5は、水素またはアルキル、アルケニル基、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｏ−アシル、ＳＨ、Ｓ−アルキル、Ｓ−アシル、ハロもしくはアミノ基である。Ｒ5基は、水素、ＯＨおよびＯ−アシルであることが好ましい。
【請求項４】
式ＩＶの請求項１〜３のいずれかに記載の化合物またはその塩。
【化３】
2006528164.tif 000015
式中、Ｒ5は、水素またはＯＨであり、各Ｔ1は、独立して、Ｈまたはその硫黄原子を介して結合したグルタチオン部分である。
【請求項５】
Ｔ1基が、両方とも、独立して、その硫黄原子により結合したチオールである請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
前記チオールが、両方とも、独立して、グルタチオンまたはシステインである請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｔ1基が、両方とも、水素である請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
二つのＴ1基が、独立して、基Ｒ1に対してオルト位またはメタ位にある請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
一つのＴ1基が、基Ｒ1に対してイプソ位にあり、一つのＴ1基が、基Ｒ1に対してパラ位にある請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
式Ｉａ、Ｉｂ、ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、ＩＶａおよび／またはＩＶｂを有する請求項１〜７のいずれかに記載の化合物。
【化４】
2006528164.tif 000016
式中、Ｒ1〜Ｒ5、Ｔ1およびＸは、請求項１〜７のいずれかに定義したとおりである。
【請求項１１】
式ＩＩの出発物質の開環により、請求項１〜１０のいずれかに定義した化合物を合成する方法。
【化５】
2006528164.tif 000017
式中、Ｔ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＸは、請求項１〜７のいずれかに定義したとおりであるか、またはその保護された誘導体もしくは前駆体である。
【請求項１２】
二つのＴ1基が、独立して、基Ｒ1に対してオルト位またはメタ位にある請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
両方のＴ1の位置に水素を有する式ＩＩの化合物を開環に付し、その後、チオールとの反応に付して、少なくとも一つのＴ1基がチオールである請求項１〜６または８〜１０のいずれかに記載の化合物を得る請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、哺乳類の被験者の治療方法。
【請求項１５】
請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、ウイルス性、自己免疫性、腫瘍性、炎症性および／またはアレルギー性状態の治療、予防または制御方法。
【請求項１６】
請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物を投与することを含む、老齢の哺乳類の被験者、または感染、疾患もしくは治療の後作用に苦しむ被験者の強壮治療方法。
【請求項１７】
療法に用いられる請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物。
【請求項１８】
請求項１４〜１６のいずれかに記載の方法において用いられる薬剤の製造における、請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１９】
請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物および少なくとも一つの医薬的に許容可能な賦形剤、担体または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項２０】
食品または飲料製品に配合された請求項１〜１０のいずれかに記載の化合物を含む機能性または強化食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定のキノン化合物、および治療におけるその化合物の使用に関する。特に、本発明は、このような化合物、ならびに抗炎症剤、抗ウイルス剤および免疫調節剤としてのその化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
環式ピラゾリジンジオン化合物であるフェンブタゾン、オキシフェンブタゾンおよび４−ヒドロキシオキシフェンブタゾンは、抗炎症特性、抗ウイルス特性および／または免疫調節特性を有するものとして知られ、又は示唆されている。
【０００３】
【化６】
2006528164.tif 000003
【０００４】
これらピラゾール系構造の誘導体は、誘導体（例えば、米国特許明細書第３９６８２１９号（特許文献１））およびプロドラッグ（例えば、米国特許明細書第４１１７２３２号（特許文献２）、米国特許明細書第３９５７８０３号（特許文献３）、米国特許明細書第４１６９１４７号（特許文献４）、米国特許明細書第４０３６８４５号（特許文献５）および米国特許明細書第４１３９７０９号（特許文献６））を含め、数多く研究されてきた。
【特許文献１】米国特許明細書第３９６８２１９号
【特許文献２】米国特許明細書第４１１７２３２号
【特許文献３】米国特許明細書第３９５７８０３号
【特許文献４】米国特許明細書第４１６９１４７号
【特許文献５】米国特許明細書第４０３６８４５号
【特許文献６】米国特許明細書第４１３９７０９号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、生物活性を示す全ての関連化合物は、中心の環式ピラゾリジン核を保持している。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
ここで、本発明者は、思いがけず、中心のピラゾラジンジオン部分が、二つの窒素および三つの炭素原子を含む５原子の置換直鎖に置き換えられた新たなクラスの関連化合物が存在することを確証した。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
第一の局面において、したがって本発明は、任意に置換された式Ｉの化合物（特に、式ＩａまたはＩｂの化合物）またはその塩を提供する。
【０００８】
【化７】
2006528164.tif 000004
【０００９】
式中、Ｒ1は、環に二重結合している場合はＯまたはＳで、環に単結合している場合はＯＨ、ＳＨまたは保護された等価物であり（適切な保護基は、Ｒ3に関してここに記載する基を含む）、Ｒ2は、水素、又はより好ましくは、炭素原子により結合したＣ1−Ｃ10有機基、例えば、任意に置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、アリールスルフォニルアルキルまたはアラルケニル基であり、Ｘは、Ｈ、Ｏ、ＯＯ、ＳまたはＳＳであり、Ｒ3は、（Ｘ＝Ｈの時は）存在せず、水素またはヒドロキシルもしくはチオール保護基（例えば、アセチルまたはベンジル基等、Ｃ2−Ｃ7、アシルまたはアルカリル基であることが好ましい）であり、Ｒ4は、さらなる基Ｒ5（例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、チオ、チオアルキル、ハロまたは第一級、第二級、第三級もしくは第四級アミノ基）で任意に置換される複素環式、又は好ましくは、同素環式アリール基であり、基Ｔ1は、それぞれ、独立して、（Ｒ1に対して１または４位において）存在しないか、または（任意の位置、特に２または３位において）水素もしくはＳ−Ｒ6基で、ここで各Ｒ6は、独立して、置換または非置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アルカリル、アラルキル、アルキルエステル、アルキルアミド、アルキル酸、ポリオール、糖、オリゴ（アルキルアミド）、オリゴ（アルキルエステル）またはオリゴペプチド基等、約５００ａｍｕ以下の分子量の有機基である。一つ以上のＳ−Ｒ6基が存在する場合、これらは、（独立して）基Ｒ1に対してイプソ位、オルト位、メタ位またはパラ位にあるが、最大で一つのイプソ基および最大で一つのパラ基のみが存在し得ることは明らかである。
【００１０】
基Ｔ1の好ましい配置は、式ＩａおよびＩｂに示す配置を含む。本発明の化合物は、Ｔ1基が、両方とも、Ｈである式Ｉａか、またはＴ1基が、両方とも、独立して、Ｓ−Ｒ6基である式Ｉｂが特に好ましい。
【００１１】
式Ｉの化合物の異性体が存在し得ることは、熟練者にとって明らかであろう。例えば、Ｒ1基に対してパラ位にあるＴ1として水素を有する（したがって、窒素が環に単結合している）が、Ｒ1基は環に二重結合している（もう一つのＴ1基は、例えば、メタ位またはオルト位にある）式Ｉの化合物において、対応するＡｒ−ＳＨまたはＡＲ−ＯＨ化合物（例えば、フェノール）に環を芳香族化する異性化が生じ得る。このような異性体は、式Ｉの化合物とある程度の平衡状態にあり、このような異性体が、全て、本発明の範囲内に含まれることは明らかであろう。Ｒ1基が環に単結合し、窒素が環に二重結合している場合、厳密に対応する異性化が生じ得る。同様に、一つのＴ1がＲ1に対してパラ位にある場合、Ｒ1に対してパラ位にある炭素において立体中心が生じ、式Ｉの化合物の光学異性体（Ｒ2に結合した炭素等、他の不斉中心(asymetric centres)が存在する場合は、鏡像異性体および／またはジアステレオ異性体）が可能である。これらの例、互変異性体および立体異性体の全て、ならびにその混合物は、式Ｉの化合物の範囲内に含まれる。このような化合物の少数の例（基Ｒ1−Ｒ6およびＴ1は、全て、ここに定義したとおりである）を以下に示す。これらの化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体が、本発明の範囲内に含まれることは自明である。
【００１２】
【化８】
2006528164.tif 000005
【００１３】
本発明者はまた、特定の周知の出発物質を開環することにより、本発明の化合物を都合よく調製できることを確証した。
【００１４】
さらなる局面において、本発明は、したがって、式ＩＩの出発物質の開環により、化合物を合成する方法を提供する。
【００１５】
【化９】
2006528164.tif 000006
【００１６】
式中、Ｔ1、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＸは、ここに記載したとおりであるか、またはその保護された誘導体もしくは前駆体である。このような出発物質は、通常、オキシフェンブタゾンまたは４−ヒドロキシ−オキシフェンブタゾンであり、ここに記載した方法および当該技術分野において周知の方法、例えば、ＷＯ０１／００５８５およびそこに引用されている引例による方法によって合成される。この文献およびそこに引用されている全ての引例に含まれる開示を本願に引用して援用する。
【００１７】
具体的に、４−ヒドロキシオキシフェンブタゾンは、Ｒ3Ｘの位置が水素で占められている対応する化合物を酸化することで、オキシフェンブタゾンから合成してもよく、また、Ｒ3Ｘがヒドロキシまたはチオール保護基を有するＨＸである対応する化合物を反応させて非水素Ｒ3基を導入したり、任意に保護された２−ヒドロキシ−プロパンジカルボン酸ハロゲン化物、エステル、もしくは、例えば、以下に示す類似する化合物とヒドラジン化合物とを縮合させることで、他の４−ＯＨ  ＯＰＢから合成してもよい。
【００１８】
【化１０】
2006528164.tif 000007
【００１９】
式中、Ｔ1、Ｒ1−Ｒ4およびＸは、前記出発材料に関して定義したとおりであり、基Ｌは、ハロゲン等の離脱基である。ＸがＨである場合、オキシフェンブタゾンが生じ、それが上記のように４−ＯＨ  ＯＰＢに変換され得る。ＸがＯである場合、４−ＯＨ  ＯＰＢが直接形成されるであろう。
【００２０】
容易に理解できるように、ヒドラジンは、対応するジアリールアゾ化合物（Ｒ4がアリールであるため）を水素付加することによって調製し得る。この化合物は、順々にＬｉＡｌＨ4の存在下、単純な芳香族ニトロ化合物から合成することができる。
【００２１】
基Ｔ1は、水素もしくは置換チオール等、本発明の直鎖状化合物におけるＴ1と同じでもよく、または最初は水素で、後の段階でグルタチオン等のチオールで置換され、次いで環化および任意に開環されてもよい。好ましい方法において、基Ｔ1は、存在しないか、または環形成段階において水素であり、最終化合物に存在する任意のＳ−Ｒ6基は、環化および任意に開環後に導入される。
【００２２】
さらなる局面において、本発明は、ここに定義した式ＩＩの出発物質の開環により得られる、または得られうる化合物を提供する。これらの化合物は、ここに定義した好ましい出発物質の開環により得られうることが好ましい。
【００２３】
さらに、本発明者は、思いがけず、本発明の化合物が体内の炎症および免疫反応のモジュレーターとして、また、特に、ウイルス性、炎症性、腫瘍性、アレルギー性および自己免疫性状態等の特定の状態の治療において非常に有用であることを確証した。本発明の化合物はまた、疲労、嗜眠または老化作用に苦しむ被験者において、これら症状の直接的で特定可能な原因が明らかであろうとなかろうと、「強壮」効果を提供し得る。
【００２４】
さらなる局面において、本発明は、したがって、ここに定義した式Ｉの化合物またはその塩を投与することを含む、哺乳類（好ましくは、ヒト）の被験者の治療方法を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、少なくとも一つの本発明の化合物を投与することにより、ウイルス性、炎症性、腫瘍性、アレルギー性もしくは自己免疫性状態（特に、疾患）、または疲労、嗜眠もしくは老年の症状を治療する方法を提供する。この化合物は、ここに記載した好ましい化合物であることが好ましい。
【００２５】
さらなる局面において、本発明は、療法に用いられる、ここに定義した式Ｉの化合物またはその塩を提供する。この化合物は、ここに記載した好ましい化合物であることが好ましい。
【００２６】
さらなる局面において、本発明は、薬剤の製造における、ここに定義した式Ｉの化合物またはその塩の使用を提供する。これは、ウイルス性、炎症性、腫瘍性、アレルギー性もしくは自己免疫性状態（特に、疾患）、または疲労、嗜眠もしくは老年の症状の治療のための薬剤であることが好ましい。この化合物は、ここに記載した好ましい化合物であることが好ましい。
【００２７】
本発明の化合物は、特に疾患の治療のため、医薬組成物の形で有効に投与してもよい。あるいは、本発明の化合物は、特に、疲労、嗜眠または老年の症状の軽減や、免疫システムの一般的な増強における「強壮」効果が望ましい場合、「機能性食品」や栄養補助食品の形、または強化食品や飲料として摂取してもよい。
【００２８】
【化１１】
2006528164.tif 000008
【００２９】
さらなる局面において、本発明は、したがって、ここに定義した本発明（すなわち、式Ｉ）の化合物またはその塩および少なくとも一つの医薬的に許容可能な賦形剤、担体または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。本発明はまた、食品または飲料に配合された式Ｉの化合物またはその塩を含む機能性または強化食品を提供する。
【００３０】
本発明の好ましい化合物は、式ＩＩＩの化合物およびその塩である。特に、式ＩＩａおよびＩＩＩｂの化合物（およびその塩）は、非常に好ましい。
【００３１】
【化１２】
2006528164.tif 000009
【００３２】
式中、Ｔ1、Ｒ2およびＲ3は、上記のとおりであり、Ｒ5は、水素またはアルキル、アルケニルもしくはアルキニル基（例えば、Ｒ2に関して以下に記載するもの）、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｏ−アシル、ＳＨ、Ｓ−アルキル、Ｓ−アシル、ハロまたは第一級、第二級、第三級もしくは第四級アミノ基である。好ましいＲ5基は、水素、ＯＨおよびＯ−アシル（例えば、Ｏ−アセチル）である。最も好ましくは、水素、ＯＨおよびＯ−アセチルである。
【００３３】
本発明の化合物および出発物質において、Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ6アルキル、アルケニルもしくはアルキニル基（例えば、メチル、エチル、エチレニル、アセチレニル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、プロパ−１−エニル、プロパ−２−エニル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ブタ−１−エニル、ブタ−２−エニル、ブタ−３−エニル、１−メチル−プロパ−１−エニル、１−メチル−プロパ−２−エニル、２−メチル−プロパ−１−エニル、２−メチル−プロパ−２−エニル、ｎ−ペンチル、ｉ−ペンチル等）、またはフェニルスルフォニルメチル等のアリールスルフォニルアルキル基であることが好ましい。より好ましくは、Ｒ2は、Ｃ2〜Ｃ6アルキル、特にｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチルまたはｔ−ブチルである。最も好ましいＲ2基は、ｎ−ブチルである。
【００３４】
ここに記載した化合物および出発物質におけるＲ3は、水素、または生理学的に許容可能な副生成物を生じる代謝的に不安定な保護基であることが好ましい。適切な保護基は、アシル基、特にアセチル、プロパノイル、メチルプロパノイルまたはｎ−ブタノイルである。しかしながら、多くのさらなるＯＨおよびＳＨ保護基が知られており（例えば、グリーン、「有機合成における保護基」、ウィリー インターサイエンス(Greene, "protective groups in organic synthesis", Wiley Interscience)、ＮＹ、１９８１参照）、これらは、生成物、又は特に中間生成物として有用であるかもしれない。最も好ましいＲ3基は、水素およびアセチルである。
【００３５】
本発明の化合物および出発物質において、Ｔ1は、Ｈまたはチオール基、特にＲ6基で置換されたもの（すなわち、−Ｓ−Ｒ6）であることが好ましい。ここでＲ6は、ターゲティング部分（targeting moiety）、またはエステル、アミド、カルボン酸、ヒドロキシル基およびアミンから選択される少なくとも二つの機能基を有する小さな（特に、ＭＷ＜５００）有機基である。（Ｒ6基は同一でも異なっていてもよいが）Ｔ1基は、両方とも、Ｈであるかチオールであることが好ましい。Ｒ6は、少なくとも一つの遊離酸および／またはアミン基を有するオリゴエステルまたはオリゴペプチド（すなわち、一つ以上のエステルまたはアミド結合を含む化合物）であることが好ましい。このような基は、例えば、抗体フラグメント等の特異的結合ペプチドである。より好ましくは、各Ｔ1は、独立して、水素、チオアミノ酸（例えば、システイン）または（硫黄原子を介して結合した）２−５残基オリゴペプチドである。最も好ましくは、Ｔ1は、独立して、水素またはグルタチオンである。つまり、Ｔ1基は、両方とも、水素もしくはグルタチオンであるか、または一方がグルタチオンで他方が水素であり得る。Ｔ1基は、結合された環周辺の任意の配置において存在し得るが、二つの好ましい構造を式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂとして示す。これらのうち、ＩＩＩａにおいて、Ｔ1基が両方ともＨであり、式ＩＩＩｂにおいて、Ｔ1基が両方とも独立してＳ−Ｒ6であることが最も好ましい。
【００３６】
最も好ましい本発明の化合物は、式ＩＶの化合物またはその塩である。特に好ましい例をＩＶａおよびＩＶｂとして示す。
【００３７】
【化１３】
2006528164.tif 000010
【００３８】
式中、Ｒ5は、水素またはＯＨであり、各Ｔ1は、独立して、Ｈまたはその硫黄原子を介して結合したグルタチオン部分である。
【００３９】
式Ｉの化合物の好ましい合成方法は、式（Ｖ）の出発物質の開環を含む。
【００４０】
【化１４】
2006528164.tif 000011
【００４１】
式中、基Ｔ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ5は、上記のとおりであり、前記好ましい基であることが好ましい。最も好ましい出発物質において、Ｒ1はＯＨであり、Ｒ2はＣ4Ｈ9（好ましくは、ｎ−ブチル）であり、Ｒ3はＨであり、Ｒ5はＨまたはＯＨである。
【００４２】
出発物質において、基Ｔ1は、存在しないか、または水素であることが好ましい。そして、式−Ｓ−Ｒ6のＴ1基は、式ＩＩ、特に式Ｖの化合物の開環中または開環後に導入してもよい。
【００４３】
出発物質の開環は、０〜１００℃、好ましくは２０〜６０℃の温度で水溶液、特に中性またはわずかに塩基性の水溶液中における、３０秒〜４時間、好ましくは４分〜１時間、最も好ましくは１０〜４５分間の転位によって行なうことができる。場合によって、開環反応の結果生じる式Ｉの化合物は、加水分解に対して不安定であるが、寿命は、一般的に、出発物質からの形成の速度より長くなるであろう。このような場合、反応時間は、反応条件において、生成物の半減期より短いことが好ましい。
【００４４】
開環反応の進行は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法、赤外（ＩＲ）分光法および／または質量分析法等、有機化学の分野において周知の技術により都合よく追跡できるであろう。特に、キノン部分の外観が、ＮＭＲおよび赤外スペクトルに特徴的なピークをもたらす。これにより、反応条件下における生成物の形成および安定性を容易に観察することができ、条件を最適化できる。
【００４５】
本発明の化合物、調合物、組成物または薬剤を投与することによる治療、予防または制御に適した病状には、他の状態に続発した状態、およびウイルス性、自己免疫性、腫瘍性、炎症性またはアレルギー性成分を有する状態を含む、ウイルス性、自己免疫性、腫瘍性、炎症性およびアレルギー性状態が含まれる。免疫性、自己免疫性、炎症性およびアレルギー性状態、またはこれらのメカニズムからの寄与を有する状態としては、例えば、アディソン病、枯草熱等のアレルギー性状態、食品（例えば、ナッツ、小麦または海産食物）アレルギーまたは皮膚アレルギー、アルツハイマー病、アミロイド症（例えば、関節炎または結核症等の状態に起因する症状）、強直性脊椎炎、喘息、組織形成を阻止する(antiplastic)貧血症、ベーチェット病、ベヒテレフ病、コーガン症候群、クローン病、皮膚筋炎、真性糖尿病、湿疹、腺疾患（例えば、糖尿病、特にＩＩ型、および甲状腺機能低下症または甲状腺機能亢進症）、糸球体腎炎、溶血性(haemolytic)貧血症、肝炎、ハンチントン病(Huntinton's disease)、過敏腸症候群等の炎症性腸疾患、（ＨＩＶ感染、骨髄機能不全、細胞毒性化学療法剤での治療等に起因する）免疫抑制、自己免疫肝炎または原発性胆汁性肝硬変等の肝臓疾患、間質性肺疾患等の肺疾患、紅斑性狼瘡、ライター病、腫瘍性疾患（例えば、良性腫瘍、または特に悪性腫瘍、例えば、癌（肉腫または癌腫）、白血病等）、多発性硬化症または重症筋無力症等の神経障害、強膜炎またはブドウ膜炎等の炎症性または自己免疫性眼障害、術後またはベーチェット病に起因する眼炎症、変形性関節症、パーキンソン病、天疱瘡、多内分泌腺機能低下、多発生筋炎、悪性貧血、乾癬、リウマチ様関節炎および他のリウマチ障害（例えば、ベスニエリウマチ、リウマチ熱、腰痛またはポンセーリウマチ）、ザルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、精巣障害(testicular failure)、血小板減少性紫斑病、組織拒絶およびその予防、潰瘍性大腸炎およびヴェグナー肉芽腫症がある。治療、予防および制御し得るウイルスおよびウイルス性状態としては、例えば、ＣＤ４細胞のウイルス性感染症（例えば、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩおよびヘルペスウイルス）、トガウイルス(togaviridea)、レオウイルス(reoviradea)、ピコルナウイルス(picornaviradea)、ハンタウイルス(hantaviridea)、オルトミクソウイルス(orthomyxoviridea)、パラミクソウイルス(paramyxoviridea)、モノネガウイルス(mononegaviralis)、ウイルス性肝炎、出血熱、フラビウイルス(flaviviridea)、ウイルス性脳炎、コロナウイルス(coronoviridea)、カルシウイルス(calciviridea)、アデノウイルス(adenoviridea)、パポバウイルス(papoviridea)、アルボウイルス(arboviridea)、ポックスウイルス、ラブドウイルス(rhabdoviridea)およびアレナウィルス(arenaviridea)の感染症がある。腫瘍性疾患としては、例えば、固形腫瘍および白血病等の腫瘍性血液疾患がある。
【００４６】
本発明のチオール置換化合物（少なくとも一つのＴ1基がＳ−Ｒ6である）は、一つまたは両方のＴ1基が水素である対応する化合物をチオール誘導体化することによって形成し得る。誘導体化は、試験管内で行なっても（以下の実施例を参照）、グルタチオン等、天然に産出するチオールと反応させて生体内で行なってもよい。一実施形態において、本発明は、Ｔ1基が両方とも水素である式Ｉの化合物を被験者に投与することで、少なくとも一つのＴ1基がＳ−Ｒ6である式Ｉの化合物を形成する方法を提供する。この方法は、第二のＴ1基をＳ−Ｒ6に変換させるために用いてもよい。ここでは、すでに一置換が行なわれている（つまり、一つのＴ1基はすでにＳ−Ｒ6である）。
【００４７】
チオールが誘導体化された本発明の化合物（つまり、少なくとも一つのＴ1基はＨでない）はさらに好都合であるかもしれない。なぜなら、チオール置換基を含む位置は、生体内におけるチオールとの反応に有効でないからである。グルタチオン等の天然に産出するチオールが過剰消費されると、細胞を損傷し、さらには殺してしまう可能性さえあるため、これら誘導体化された化合物は、低い毒性および／または少ない副作用を示し得る。
【００４８】
本発明の化合物、組成物または薬剤が、一次疾患または二次疾患を治療するために投与される場合、これらを他の活性剤との併用により、複合調合物として、または個々の調合物として同時または順次に投与してもよい。特に、本発明の組成物が二次疾患を治療するために投与される場合、投与は、通常、一次状態の治療と同時またはそれに引き続き行なわれるであろう。例えば、本発明の組成物は、ウイルス性疾患を治療して被験者の生活の質を向上させる目的で、抗ウイルス剤（例えば、ヌクレオシド類似物）と併用して投与してもよい。
【００４９】
本発明の化合物は、当該技術分野において周知の方法により、製薬として配合してもよい。これらの調合物は、通常、錠剤、コーティング錠剤（例えば、制御放出錠剤）、カプセル剤、懸濁液、液剤、シロップ剤、粉末剤または乳濁液等の経口製剤であるが、吸入（例えば、粉末剤やエアゾル剤）、経皮吸着（例えば、絆創膏）または非経口的（例えば、皮下、筋肉内または静脈内）経眼もしくは直腸投与に適した、例えば、無菌食塩液剤、滴剤または座薬の形の調合物であってもよい。例えば、喘息に関連する炎症反応を軽減するための治療の場合、吸入可能な製剤が最も適しており、枯草熱等のアレルギー性状態には、鼻内噴霧が最も効果的かもしれない。同様に、滴剤、クリームまたはゲル剤等の局所用製剤は、眼状態や限局性皮膚状態により適しているであろう。
【００５０】
式Ｉの化合物およびその塩は、水性担体（例えば、注射用の水）、結合剤、充填剤、安定化剤、重量オスモル濃度調整剤、発泡剤（effervescing agents）、ｐＨ緩衝剤および調整剤、粘度調整剤、甘味剤、滑沢剤、乳化剤、着香剤、コーティング剤（例えば、胃液耐性コーティング）等、従来の医薬的担体、希釈剤および／または賦形剤と共に配合してもよい。
【００５１】
被験者に対する式Ｉの化合物またはその塩の投与量は、被験者の種、大きさ、成熟度、健康状態および状態や、状態の重症度および選択した調合物に依存する。例えば、吸引可能または静脈内への調合物は、経口調合物に比べ、活性剤の大部分を被験者に送達することができ、局所治療は、通常、全身治療に比べ、服用量は少なくて済むであろう。一般的に、服用量は、０．０５〜２０００ｍｇ／日、より一般的には０．２〜１０００ｍｇ／日、特に０．５〜２００ｍｇ／日の範囲内であろう。投与は、通常、１日１回、２回、３回または４回行なわれるが、適切であれば、これより多くても少なくてもよい（例えば、１日５、６回、２、３日おきに１回、または症状が認められる度）。局所治療は、通常、全身治療に比べ、多くの回数投与が行なわれる。
【００５２】
本発明の化合物が、例えば、嗜眠や老年の症状の軽減または免疫システムの増強のために、強壮剤として投与される場合、これら化合物は、上記のように製薬として配合してもよい。あるいは、機能性食品または飲料として化合物を配合してもよい。この状態において、担体および賦形剤は、通常、食品または飲料製品であろう。このような製品は、インスタント食品等、加熱消費用の加工食品であってもよいが、より好ましくは、スプレッド（例えば、マーガリンや低脂肪スプレッド）、ジャム、非発泡性または炭酸飲料、フルーツジュース、朝食用シリアル、朝食用バー、パン、ビスケット、アイスクリーム、ヨーグルト、ムースまたはトライフル等のチルドデザート、牛乳または乳製飲料を含む冷たい食品であろう。
【００５３】
本発明の化合物が機能性食品または飲料として配合される場合、このような食品の過剰摂取によって誤って摂取されうる最大服用量は過大でないことが重要であろう。このような場合、このような機能性食品の一部分に存在する薬用量は、通常、致死量の５０００倍、より好ましくは、１００００倍、最も好ましくは、ヒトの致死量の１０００００倍少ないであろう。
【００５４】
ここで、本発明の化合物を塩とする場合、これらは、一般的に、医薬的に許容可能な塩、すなわち、生理学的に許容できる対イオンを有する塩であろう。このようなイオンには、ナトリウム、カルシウム、有機アミン、ハロゲン化物（特に、塩化物）、リン酸塩、炭酸水素塩等が含まれる。
【００５５】
理論に縛られなければ、本発明の化合物、組成物および薬剤の効果は、一つには、特に、例えば、マクロファージ活性、急性期タンパク（ＡＰＰ）レベルおよび白血球（ＷＢＣ）数を高めることによる、哺乳類の免疫および防御システムのある局面に対する刺激および変調効果の結果であると思われる。したがって、組成物の「強壮」効果は、少なくとも部分的には、体を刺激して感染性因子のみならず細胞残屑および他の不要物質をも除去する「クリーンアップ」効果に起因するかもしれない。さらに、本発明の化合物は、そのＷＢＣ刺激剤としての効果にもかかわらず、Ｔリンパ球および単球の活性化抑制剤およびインターロイキン(interlukins)変調剤としての効果を示し得る。このようなプロセスにより、免疫システムが、全体として、そして生物学的残屑に遭遇した結果、不要な炎症を引き起こす傾向は、自己免疫反応の危険性と共に、減少する。その結果、被験者の生活の質は向上し、免疫システムは刺激され、体から不要で有害でさえある抗原が除去される。この強壮効果は、例えば、感染、薬物治療または老化プロセスが、免疫機能不全や、システムにおける不要な免疫抗原性および／または炎症性物質の増加をもたらした時、一次疾患、状態または感染の治療中またはその治療後に適用することができ、それ自体が目的であってもよい。
【００５６】
特に、ＡＰＰ等のシステムの刺激作用は、さもなければ炎症を刺激する細胞残屑を除去してシステムのクリーンアップをもたらし、自己免疫反応を引き起こしうる天然抗原を提供することができると考えられている。宿主細胞の分解生成物はまた、周囲の細胞の死を引き起こし、これにより細胞死および炎症のカスケードが生じる。普通とは異なり、本発明の化合物は、通常、相当な熱を引き起こすことなく急性期タンパクを刺激し、通常、一般的な免疫抑制剤ではない。
【００５７】
生物学的残屑のクリーンアップをもたらす別の方法は、死細胞（生細胞ではない）の膜りん脂質に対して特異性を有する特定の免疫グロブリンＭｓ（ＩｇＭｓ）、ｂ２糖タンパクＩ、クラスタリン(clusterin)および血清アミロイドＰ等の特定の血漿タンパクによる結合である。このようなメカニズムもまた、本発明の化合物によって調節してもよい。
【００５８】
全身性紅斑性等の膠原病は、例えば、多くの場合、第一原因は細胞残屑の増加にあると考えられている。その結果、本発明の化合物は、膠原病、例えば、その病気の症状を示すもの、または遺伝や障害に起因する疾病素質を有するものの治療または予防に非常に適している。
【００５９】
同様に、生物学的残屑の増加は、多発性硬化症における特有の問題であり、βインターフェロン等、相当な副作用を有する現存する作用物質でしか治療し得ない。本発明の化合物は、より的確なＡＰＰの刺激作用、およびそれに伴う残屑の除去が可能となり、このような場合に非常に有用であり得る。細胞残屑はまた、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病の一因となると考えられている。
【００６０】
老齢の被験者における本発明の化合物の強壮効果は、クリーンアップメカニズムの結果としても説明し得る。被験者が老齢になるにつれ、細胞の大部分は、テロメアの減少およびアポトーシスによるプログラムされた細胞死に見舞われる。同時に、ＡＰＰおよび免疫システムの有効性等、クリーンアップメカニズムのレベルは、通常、低下する。これは、残屑の増加および罹病性の原因となり、そしてこのような要因は、心臓発作等の変性疾患および状態を引き起こす。本発明の化合物で予防的治療を行なうことにより、免疫システムおよびＡＰＰのレベルを刺激して残屑の増加を軽減し、血管破裂等の破局的事態が心臓発作等の状態を引き起こす前に、免疫システムが感染症を体から除去するようにする。
【００６１】
慢性疾患を患う被験者は、老齢の被験者と同じ方法で、宿主細胞および感染性因子の両方から、生物学的残屑の増加に直面するかもしれない。このような場合、本発明の化合物を、回復を速め、生活の質を向上させるために投与してもよい。このメカニズムは、マラリア、手術、火傷またはセプシス等の事態を経た任意の被験者の回復を速めるのにも適している。
【００６２】
本発明の化合物の免疫刺激作用およびクリーンアップ効果は、特に、一次状態またはその治療に起因する免疫機能不全を有する被験者の生活の質を向上させるため、他の薬物と併用してもよい。例えば、ＨＩＶおよび関連状態に苦しむ患者は、疾患の治療または制御のため、一つ以上の抗レトロウイルス(antireteroviral)剤で治療してもよい。これらは、例えば、ジドブジン、ジダノシン(didanovine)、ザルシタビン、スタブジン(stavudine)、ラミブジン(lamivudine)、ネビラピン(nevirapine)、デラビルジン(delavirdine)、インジナビア（indinavir）、リトナビア（ritonavir）、ネルフィナビア（nelfinavir）、ヒドロキシ尿素コルシチン、ＡＺＴおよび２’，３’−ジデオキシイノシン（ｄｄＩ）等の逆転写酵素阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤である。本発明の化合物、組成物または薬剤は、患者の残りの免疫機能を浄化および刺激するため、この治療と組み合わせて投与してもよい。
【００６３】
同様に、癌や白血病等の過形成性または腫瘍性疾患を患う被験者は、手術、外部ビーム照射および／または放射性核種療法により、一つ以上の細胞毒性薬（例えば、ヌクレオシド類似物）で治療することができる。このような場合、被験者の免疫システムは、一般的に、療法の副作用として抑制される。しかしながら、一次療法中または一次療法後における被験者の罹病性を低下させる目的で本発明の化合物を投与することにより、免疫システムを増強し得る。さらに、疾患のより完全な寛解のため、本発明の化合物または組成物を投与することで、（特に、例えば、マクロファージの刺激により）残りの腫瘍細胞、微小腫瘍または微小転位巣に対する免疫応答を促したり集中させることができる。このような治療は、他の作用物質または介入による治療中または治療後に行なうことができる。
【００６４】
本発明の化合物は、（特に、マクロファージにより）微小腫瘍の破壊を促して腫瘍性疾患の形成または拡散を予防するために用いることができる。これは、特に、老齢の被験者（以下を参照）または（例えば、遺伝；発癌物質や電離放射線等の素因となる化学物質や物理的環境への暴露；腫瘍性疾患に対する先の治療；遺伝子診断の結果等に起因する）腫瘍性疾患に対して素質を有すると考えられる被験者に適用されるであろう。
【００６５】
さらに好ましい局面において、本発明は、ここに定義した式Ｉの化合物またはその塩を、他の薬物および／または治療養生法と組み合わせて投与することを含む、哺乳類（好ましくは、ヒト）の被験者の治療方法を提供する。この方法は、好ましくは、ウイルス性、過形成性または腫瘍性疾患の治療方法、より好ましくは、ＨＩＶ、癌または白血病の治療方法である。他の薬物は、例えば、ここに記載した抗ウイルス物質、または放射性薬品や化学療法薬等の抗腫瘍性物質（例えば、アスパラギナーゼ、ブレオマイシン、シスプラチン、クラドリビン(cladribine)、シクロホスファミド(cyclophosphomide)、シタラビン(cytrabine)、ダカルバジン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、フルオロウラシル、ヒドロキシ尿素、メルカプトプリン、ムスチン、メトトレキセート、プロカルバジンまたはビンブラスチン）であることが好ましい。他の治療養生法は、手術および／または外部ビーム照射であることが好ましい。この方法において、本発明の化合物は、通常、単独の活性剤として、または少なくとも一つの他の薬剤との併用により、製薬として配合され、他の薬物または治療に先立ち、または、好ましくは、他の薬物または治療に連続して、あるいは他の薬物または治療の後に投与されるであろう。
【００６６】
好ましい実施形態において、本発明はまた、本発明の化合物を投与することを含む、癌または他の腫瘍性疾患の発生を予防する方法を提供する。
【００６７】
疲労または嗜眠等の症状が、老年、ウイルス性、細菌性もしくは菌性感染、または癌等の過形成性疾患の症状や治療の結果である場合、本発明の化合物は、製薬、または、例えば、「機能性食品」に含まれる添加剤として投与することができる。原因が内科的状態または治療である場合、本発明の化合物は、一般的に、製薬の形で摂取されるであろう。しかしながら、原因が、単に、老年における一般的な不要残屑の増加の結果である場合、本発明の化合物は、便宜上およびコンプライアンスを簡単にするため、機能性食品または栄養補助食品の形で摂取されることが好ましい。
【００６８】
好ましい局面において、本発明は、ここに定義した式Ｉの化合物またはその塩を投与することを含む、老齢の哺乳類（好ましくは、ヒト）の被験者、または感染、疾患もしくは治療の後作用に苦しむ被験者の強壮治療方法を提供する。被験者が老齢のヒトである場合、少なくとも６０歳であることが好ましく、少なくとも７０歳であることがより好ましく、少なくとも７５歳であることが最も好ましい。被験者は、特定可能なウイルス性、免疫不全性、自己免疫性もしくはアレルギー性疾患や状態を患っているか、または、一般的に、これらの点もしくは全ての点において健康で、体力や精神力もしくは免疫機能の増強、または疲労や嗜眠の軽減を所望する被験者であってもよい。本発明はまた、このような方法での使用に適した強壮薬の製造における、本発明の化合物の使用を提供する。（ここに定義したように）一つ、好ましくは両方のＴ1基がＳ−Ｒ6である式Ｉ（および、特に、式ＩＩＩｂまたはＩＶｂ）の化合物またはその塩が、この目的のために好ましい。
【００６９】
本発明のさらなる局面において、ここに記載した式Ｉの化合物は、任意の適切な位置においてさらに置換されていてもよい。特に、適切な置換パターンは、一方のＴ1基がＨで他方がＳ−Ｒ6である化合物の結合と比較して、Ｔ1基が両方ともＳ−Ｒ6である化合物の相対的な結合が制御されるように選択してもよい。これら二つの置換パターンは、生体内で異なって結合すると考えられ、ある環境において、二重チオ置換化合物のみを結合させることが好ましい。このような環境において、当業者であれば、モノチオール化合物の結合を阻害し、ジチオール化合物の結合を阻害しないよう、ここに記載した、特に、嵩高い基を有する化合物の構造を変更することを望むであろう。この目的に適した他の多くの置換基の中で、例えば、フェニル基や第三級アミン等の置換基がある。適切な置換パターンは、マルチプルパラレル(multiple-parallel)や（例えば、樹脂担体上における）コンビナトリアル合成等の通常の技術を、単離酵素、レセプターまたは適切なタンパク質の断片等の適切な生物学的ターゲットに対する高処理スクリーニングと組み合わせることで確立することができる。
【００７０】
本発明の所望の化合物が、式Ｉｂ、ＩＩＩｂまたはＩＶｂおよびここに記載した上記式の一つである場合、Ｒ1基に対してオルト位および／またはメタ位におけるチオール置換を阻害することが望ましい。式ＶＩに示すような本発明の化合物を提供するため、これは、式Ｉｂのオルト位および／またはメタ位における任意の適切な置換によって行なうことができる。
【００７１】
【化１５】
2006528164.tif 000012
【００７２】
この局面において、上記全ての基は、ここに定義したとおりであるが、Ｔ1基は、両方とも、Ｓ−Ｒ6部分であり、特にグルタチオンであることが好ましい。各Ｒ7基は、独立して、水素、またはＲ1に対してオルト位またはメタ位におけるチオール置換を防止する置換基である。例えば、Ｃ1〜Ｃ6アルキルまたはアルケニル（メチル、エチル(eithyl)、イソプロピル等）等の小さなアルキルまたはアルケニル基、（特に、上記のような小さなアルキル基を有する）ヒドロキシまたはアルコキシ基、ハロゲン（クロロ、ブロモ等）、アミン（第一級、第二級または第三級）、シアノ基等である。一般的に、Ｒ1に対するオルト位は、置換にとってより接近可能であると予想されるため、Ｒ1に対してメタ位にある基Ｒ7が両方とも水素である式ＶＩの化合物は、好ましい代替物である。式Ｉの最終的な化合物において、Ｒ7の位置に水素が所望される場合、水素を残すために後に除去することのできる封鎖基をＲ7に用いてもよい。適切な例としては、脱ジアゾ等の周知の方法で後に除去することのできるアミンおよびニトロ基がある。このような方法において、式ＶＩの化合物（特に、Ｔ1基が、両方とも、水素である）は、式Ｉ、特にＩｂの特定の所望の化合物への中間生成物として認識することができる。
【００７３】
さらに、本発明の化合物において、ここに定義したＴ1基に加え、さらなるチオール置換が存在してもよい。この実施形態において、ここに定義したように、Ｒ7がＴ1であり、特に、式ＶＩのＴ1およびＲ7の少なくとも３つの基がＳ−Ｒ6基である式ＶＩの化合物が提供される。
【００７４】
ここで、本発明を、以下の非限定的な実施例および添付図面により説明する。
【実施例】
【００７５】
ＣＤＣｌ3を溶媒として、１Ｈ−ＮＭＲをブルカー(Bruker)３００ＭＨｚスペクトロメータで記録した。シンメトリ(Symmetry)Ｃ−１８、５ｍｍ、３．９ｘ１５０ｍｍのカラムと２５４ｎｍに設定したジンコテク(Gynkotek)ＵＶＤ １７０Ｓ検出器とを備えたジンコテクポンプを用い、ＨＰＬＣを行った。勾配：１％ＴＦＡを含む水／アセトニトリルは、７０／３０から８分後、０／１００になった。
【００７６】
（実施例１）  出発物質の合成−４ＯＨ  ＯＰＢ
１リットルの丸底フラスコに、メタノール（４５０ｍｌ）とオキシフェンブタゾン水和物（９０．０ｇ、０．２６ｍｏｌ）とを、磁気攪拌しながら入れる。その溶液を周囲温度で攪拌し、水酸化ナトリウム溶液（２Ｍ、１３．５ｍｌ）を加える。過酸化水素（３０％、１８０ｍｌ）を、１０分以上、滴下しながら加える。その結果得られた透明な黄白色の溶液を、２４時間、攪拌した。その結果得られた懸濁液を、２．５時間、氷浴により冷却し、その混合液をガラスフィルターでろ過して乾燥するまで吸引した。淡褐色の結晶をフィルター上でＭｅＯＨ／水（１：２、２００ｍｌ）で慎重に洗浄し、乾燥するまで吸引し、１００ｍｌの同じ溶媒混合液でもう一度洗浄した。生成物をフィルター上で一晩乾燥させた。そして、その粗生成物を２００ｍｌの丸底フラスコに移し、ジエチルエーテル（２００ｍｌ）を加え、その結果得られた懸濁液を、約５分間、勢いよく攪拌した。その混合液を濾過し、フィルターでろ過して乾燥するまで吸引した。生成物の外観は、エーテルで処理した後、淡いピンク色になった。粗生成物の収量は、５３ｇであった。エーテルでの処理工程を、１５０ｍｌのエーテルでもう一度繰り返した。ここでほぼ白色の材料をメタノール（３３０ｍｌ）に溶解すると、赤色の溶液が得られた。水（３５０ｍｌ）を、３５分間の間、ゆっくり入れ、白色の懸濁液を得た。固形物をガラスフィルター上で回収し、３０℃の真空(vaccuo)中で一晩乾燥させ、３１ｇ、３５％の淡いピンク色の固体である４−ＯＨ  ＯＰＢを得た。ＨＰＬＣ＞９８％であった。1Ｈ ＮＭＲにより、参考試料と同一であることを確認した。
【００７７】
出発物質のプロトンＮＭＲを図１（スペクトルの全体）および図２（芳香族領域）に示す。
【００７８】
（実施例２）  開環
４−ヒドロキシ−オキシフェンブタゾン（４−ＯＨ−ＯＰＢ）を、ｐＨ７．４の緩衝液中で保温し、その後、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって精製することで、Ｎ−フェニル−２−ヒドロキシ−２ブチル１，３−プロパナールキノンイミン（ＰＨＢＰＱ）へ変換した。
【００７９】
保温
まず、１５分間、３７℃で保温する前に、４−ＯＨ−ＯＰＢ（３４ｍｇ）をＤＭＳＯ（１ｍｌ）に溶解し、ＰＢＳ中における濃度を１００μＭ（１００ｍｌ、ＰＢＳは以下のように構成した）とした。
【００８０】
精製
分析ＨＰＬＣ（Ｃ１８逆相カラム）の操作を行い、形成された生成物を確認した（質量分析法による判定）。そして、１００ｍＬの保温混合液全てを分取カラム（Ｃ１８、逆相カラム）に供給してＰＨＰＢＱを精製した。
【００８１】
分析操作および術前操作は共に、０．１％ＴＦＡの存在下、（脱イオン水中）０％アセトニトリルから６７％アセトニトリルで流し、ｐＨを２に保って流して、勾配溶離剤で溶離した。分取(preperative)操作中、画分を集め（ピーク）、的確な生成物であるか質量分析法によって調べた。最後に、同定された生成物を真空状態で乾燥させると、純度９９％の生成物であった。その結果得られた化合物の1Ｈ ＮＭＲスペクトルを図３（スペクトルの全体）および図４（芳香族領域）に示す。
【００８２】
ＰＢＳ＝（リン酸緩衝塩、ｐＨ７．４）
ＮａＣｌ、８．２ｇ；Ｎａ2ＨＰＯ4．２Ｈ2Ｏ、１．９ｇ；ＮａＨ2ＰＯ4．Ｈ2Ｏ、０．３ｇ；Ｎａ+、１６３、９ｍＭ；Ｃｌ-、１４０、３ｍＭ；ＨＰＯ42-、１０、９ｍＭ；Ｈ2ＰＯ4-、１、８ｍＭ；、ブラウン  メルスンゲン  エージー(Braun Melsungen AG)。
【００８３】
（実施例３）  開環した生成物の分析
実施例２の生成物（ＰＨＢＰＱ、Ｎ−フェニル−２−ヒドロキシ−２ブチル１，３−プロパナールキノンイミン）の水溶液中での安定性を調べ、その後、1Ｈ ＮＭＲ分光法により分析した。
【００８４】
その結果、ＰＨＢＰＱは、半減期が〜２〜２．５時間の４−ＯＨ−ＯＰＢよりも、ｐＨ７．４でより安定することが示された。ＰＨＢＰＱは、溶液が酸性化された時、４−ＯＨ−ＯＰＢに再転換されなかった。
【００８５】
（実施例４）  チオール誘導体化（Derivitisation）
ＰＨＢＰＱ（実施例２に記載したように調製し（５００μＭ）、ＰＢＳ溶液に残存している）に、１．５ｍＭのグルタチオンを加え、３０分間、３７℃で保温した。その混合液を、上記実施例２に記載した方法で精製した。一つのグルタチオン（ＰＨＢＰＱ−１ＧＨＳ）で誘導体化された生成物と二つのグルタチオン（ＰＨＢＰＱ−２ＧＨＳ）で誘導体化された生成物が、ほぼ同量で、混合液から分離された。
【００８６】
その実験を、チオール化合物としてαアミノ酸システインを用いて繰り返した。一つのシステインで誘導体化された生成物と二つのシステインで誘導体化された生成物とが生成された。
【００８７】
これらの実験において、ＧＨＳ基が除去され、環が芳香族化されてＮ−フェニル、Ｎ’−パラヒドロキシフェニル、２−ブチル、２−ヒドロキシマロンアミド（ＰＨＰＢＨＭ）が形成された本発明のさらなる混合物も生じた。この化合物のプロトンＮＭＲスペクトルを図５に示す。ＰＨＢＰＱ−１ＧＳＨおよびＰＨＢＰＱ−２ＧＳＨのスペクトルを、それぞれ、図６および図７に示す。
【００８８】
（実施例５）  サイトカイン産生の抑制
実施例２のように調製されたＰＨＢＰＱおよび実施例４のように調製されたＰＨＢＰＱ−２ＧＳＨを、健康ボランティアの末梢血から得た、分離したヒト単核細胞（ＭＮＣ）で保温した。サイトカインインターロイキン−６（ＩＬ−６）および顆粒球コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）の産生を測定した。その結果（図８および図９に示す）、測定されたサイトカインの産生を完全に阻止するためには、０．５−２μＭのＰＨＢＱまたはＰＨＢＱ−２ＧＳＨで十分であることが示された。
【図面の簡単な説明】
【００８９】
【図１】図１は、４−ＯＨ−ＯＰＢの（重水素化(dutero)ＤＭＳＯにおける）ＮＭＲスペクトルの全体を示している。
【図２】図２は、４−ＯＨ−ＯＰＢの（重水素化ＤＭＳＯにおける）ＮＭＲスペクトルの芳香族領域を拡大して示している。
【図３】図３は、ＰＨＢＰＱの（重水素化ＤＭＳＯにおける）ＮＭＲスペクトルの全体を示している。
【図４】図４は、ＰＨＢＰＱの（重水素化ＤＭＳＯにおける）ＮＭＲスペクトルの芳香族領域を拡大して示している。
【図５】図５は、ＰＨＰＢＨＭの（重水素化ＤＭＳＯにおける）ＮＭＲスペクトルの全体を示している。
【図６】図６は、ＰＨＢＰＱ−１ＧＳＨの（重水素化ＤＭＳＯにおける）ＮＭＲスペクトルの全体を示している。
【図７】図７は、ＰＨＢＰＱ−２ＧＳＨの（重水素化ＤＭＳＯにおける）ＮＭＲスペクトルの全体を示している。
【図８】図８は、ＰＨＢＰＱおよびＰＨＢＰＱ−２ＧＳＨで保温した後の単核細胞（ＭＮＣ）の、インターロイキン６（ＩＬ−６）の産生への影響を示している。
【図９】図９は、ＰＨＢＰＱおよびＰＨＢＰＱ−２ＧＳＨで保温した後の単核細胞（ＭＮＣ）の、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）の産生への影響を示している。
【図１】
2006528164.tif 000019
【図２】
2006528164.tif 000020
【図３】
2006528164.tif 000021
【図４】
2006528164.tif 000022
【図５】
2006528164.tif 000023
【図６】
2006528164.tif 000024
【図７】
2006528164.tif 000025
【図８】
2006528164.tif 000026
【図９】
2006528164.tif 000027
【国際調査報告】
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