(57)【要約】２’−または３’−分枝ヌクレオシドの選択的３’−アシル化のための一段法を提供する。これらの化合物は、抗ウイルス薬として有用であり、特に、この必要がある宿主においてフラビウイルス科ウイルス感染を治療するために使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）２’分枝リボフラノシルヌクレオシド；
ｂ）場合により保護されている有機酸；
ｃ）カップリング剤；および
ｄ）塩基、場合により塩基触媒存在下でのもの
を反応させることを含む、場合によりワンポットシステムで、２’−分枝リボフラノシルヌクレオシドの３’ヒドロキシル位を選択的にエステル化するための方法。
【請求項２】
前記２’分枝リボフラノシルヌクレオシドが、式：
【化１】
2006514038.tif 000040
（式中、Ｂａｓｅは、プリン、ピリミジン、ピロロピリミジン、トリアゾロピリジン、イミダゾロピリジンまたはピラゾロピリミジンである。）
の２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ｂａｓｅが、ピリジン塩基である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ピリミジン塩基が、チミン、シトシン、５−フルオロシトシン、５−メチルシトシン、６−アザピリミジン（６−アザシトシンを含む）、２−および／または４−メルカプトピリミジン、ウラシル、５−ハロウラシル、Ｃ５−アルキルピリミジン、Ｃ５−ベンジルピリミジン、Ｃ５−ハロピリミジン、Ｃ５−ビニルピリミジン、Ｃ５−アセチレン性ピリミジン、Ｃ５−アシルピリミジン、Ｃ５−ヒドロキシアルキルプリン、Ｃ５−アミドピリミジン、Ｃ５−シアノピリミジン、Ｃ５−ニトロピリミジンおよびＣ５−アミノピリミジンから成る群より選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記ピリミジンが、
【化２】
2006514038.tif 000041
から成る群より選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記Ｂａｓｅが、プリン塩基である、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記プリン塩基が、Ｎ６−アルキルプリン、Ｎ６−アシルプリン（この場合、アシルは、Ｃ（Ｏ）（アルキル、アリール、アルキルアリールまたはアリールアルキルである。）、Ｎ６−ベンジルプリン、Ｎ６−ハロプリン、Ｎ６−ビニルプリン、Ｎ６−アセチレン性プリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ヒドロキシアルキルプリン、Ｎ６−チオアルキルプリン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、５−アザシチジニル、グアニン、アデニン、ヒポキサンチン、２，６−ジアミノプリンおよび６−クロロプリンから成る群より選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記プリン塩基が、
【化３】
2006514038.tif 000042
から成る群より選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記Ｂａｓｅが、ピロロピリミジンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１０】
前記Ｂａｓｅが、トリアゾロピリジン、イミダゾロピリジンまたはピラゾロピリミジンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１１】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化４】
2006514038.tif 000043
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化５】
2006514038.tif 000044
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化６】
2006514038.tif 000045
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化７】
2006514038.tif 000046
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化８】
2006514038.tif 000047
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化９】
2006514038.tif 000048
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１０】
2006514038.tif 000049
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１１】
2006514038.tif 000050
（式中、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチルまたはネオペンチルである。）
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１２】
2006514038.tif 000051
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１３】
2006514038.tif 000052
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１４】
2006514038.tif 000053
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１５】
2006514038.tif 000054
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１６】
2006514038.tif 000055
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１７】
2006514038.tif 000056
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１８】
2006514038.tif 000057
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化１９】
2006514038.tif 000058
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２０】
2006514038.tif 000059
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２１】
2006514038.tif 000060
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２２】
2006514038.tif 000061
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２３】
2006514038.tif 000062
（式中、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチルまたはネオペンチルである。）
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２４】
2006514038.tif 000063
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２５】
2006514038.tif 000064
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２６】
2006514038.tif 000065
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３４】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２７】
2006514038.tif 000066
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３５】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２８】
2006514038.tif 000067
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３６】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化２９】
2006514038.tif 000068
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３７】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３０】
2006514038.tif 000069
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３８】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３１】
2006514038.tif 000070
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３２】
2006514038.tif 000071
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３３】
2006514038.tif 000072
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３４】
2006514038.tif 000073
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４２】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３５】
2006514038.tif 000074
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４３】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３６】
2006514038.tif 000075
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４４】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３７】
2006514038.tif 000076
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４５】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３８】
2006514038.tif 000077
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４６】
前記３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドが、
【化３９】
2006514038.tif 000078
であり、この反応が、場合により、遊離２’−および／または５’−ＯＨの保護を伴わずに行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４７】
前記場合により保護されている有機酸が、場合により保護されているアミノ酸である、請求項１に記載の方法。
【請求項４８】
前記場合により保護されているアミノ酸が、場合により保護されているＬ−バリノイルである、請求項５０に記載の方法。
【請求項４９】
前記場合により保護されているＬ−バリノイルが、Ｂｏｃ−Ｌ−バリノイルである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５０】
前記カップリング剤が、ＥＤＣ（塩酸１−［３−（ジメチルアミノ）−プロピル）］−３−エチル−カルボジイミド）；ＣＤＩ（カルボニルジイミダゾール）；ＢＯＰ試薬（ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウム）；およびトリフェニルホスフィンを有するミツノブ試薬から成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５１】
前記カップリング剤が、カルボジイミドである、請求項１に記載の方法。
【請求項５２】
前記カップリング剤が、ＣＤＩである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記塩基が、ＴＥＡ（トリエチルアミン）、ジイソプロピルエチルアミン、およびＮ−エチルモルホリンから成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５４】
前記塩基が、第三アミンである、請求項１に記載の方法。
【請求項５５】
前記第三アミンが、トリエチルアミンである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記塩基触媒が、ＤＭＡＰである、請求項１に記載の方法。
【請求項５７】
前記場合により保護されている有機酸と前記ヌクレオシドのモル比が、１．０対１．５である、請求項１に記載の方法。
【請求項５８】
前記モル比が、１．０対１．２である、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記カップリング剤と前記ヌクレオシドのモル比が、１．０対１．５である、請求項１に記載の方法。
【請求項６０】
前記モル比が、１．０対１．２である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記反応が、少なくとも８０℃の温度で少なくとも２０分間行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項６２】
前記反応が、アルゴンガス下で行われる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記２’−分枝リボフラノシルヌクレオシドが、溶媒に可溶性である、請求項１に記載の方法。
【請求項６４】
ａ）有機溶媒中の２’分枝リボフラノシルヌクレオシドの第一溶液を、このヌクレオシドを溶解するために充分な温度で、このヌクレオシドを溶解するために充分な時間、加熱する段階；
ｂ）第三アミンおよび塩基触媒を前記第一溶液に添加する段階；ならびに
ｃ）有機溶媒中の保護アミノ酸およびカルボジイミドカップリング剤を含む第二溶液を前記第一溶液に添加する段階
を含む、２’−分枝リボフラノシルヌクレオシドの３’ヒドロキシル位を選択的にエステル化するための方法。
【請求項６５】
段階ａ）において、前記第一溶液が、少なくとも８０℃で少なくとも２０分間加熱される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
段階ｃ）において、前記第一溶液が、少なくとも８０℃の温度で維持され、前記第二溶液が、少なくとも１時間の期間にわたって添加される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
併せた第一および第二溶液を少なくとも８０℃の温度で少なくとも約半時間加熱する段階をさらに含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記第一溶液における有機溶媒が、ＤＭＦである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６９】
前記第二溶液における有機溶媒が、ＴＨＦまたはＤＭＦである、請求項６４に記載の方法。
【請求項７０】
生成溶液を酸で中和する段階をさらに含む、請求項６４に記載の方法。
【請求項７１】
前記第三アミンが、トリエチルアミンであり、前記塩基触媒が、ＤＭＡＰである、請求項６４に記載の方法。
【請求項７２】
前記保護アミノ酸が、保護Ｌ−バリノイルアミノ酸である、請求項６４に記載の方法。
【請求項７３】
前記反応が、溶媒または溶媒混合物中で行われ、１つまたは複数の前記溶媒が、極性非プロトン性溶媒である、請求項１に記載の方法。
【請求項７４】
前記溶媒が、アセトン、酢酸エチル、ジチアン、ＴＨＦ、ジオキサン、アセトニトリル、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ジエチルエーテル、ピリジン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ＤＭＥ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトアミドおよびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項７３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２’−および３’−分枝リボフラノシルヌクレオシドの３’−アシル化プロドラッグの調製方法である。
【背景技術】
【０００２】
歴史的に、ヌクレオシドプロドラッグは、ヌクレオシドの５’−ヒドロキシル基のアシル化または他の修飾により、通常、設計されてきた。Ｎｏｖｉｒｉｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（現Ｉｄｅｎｉｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）は、一定の２’および３’分枝ヌクレオシド（すなわち、２’または３’位に水素以外の置換基を４個有するヌクレオシド）の安定性およびバイオアベイラビリティが、このヌクレオシドのアシル化形の投与により強化されることを発見した（例えば、ＷＯ０１／９０１２１（ＵＳＳＮ０９／８６４，０７８）；ＷＯ０１／９２２８２（ＵＳＳＮ０９／８６３，８１６）；ＰＣＴ／ＩＢ０３／０３９０１（ＵＳＳＮ１０／６０９，２９８）；ＰＣＴ／ＩＢ０３／０３２４６（ＵＳＳＮ１０／６０８，９０７）；およびＰＣＴ／ＵＳ０３／２０４３１（ＵＳＳＮ１０／６０７，９０９）参照）。ヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体のこれらのアミノ酸エステルを調製するために用いられた方法は、当業者には公知の方法（Ｚｈａｎｇら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９２，３３：１１７７−８０；  Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，第二版（１９９１）；  Ｋｅｒｒら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９９４，８３：５８２−６；  Ｔａｎｇら，Ｊ  Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９９，６４（３）：７４７−７５４；およびＣａｖｅｌｉｅｒら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９６，３７：５１３１−４）により例えばシリル基などの適切な保護基によって場合により保護し、後で脱保護することができる、適切に枝分かれしたβ−Ｄまたはβ−Ｌヌクレオシドで開始した。次いで、場合により保護されているこの分枝ヌクレオシドを、適切なプロトンまたは非プロトン性溶媒中、適する反応温度で、また場合により適するカップリング剤の存在下で、塩化アシルおよび／もしくはアシル無水物または活性化酸などの適するアシル供与体とカップリングさせて、この分枝ヌクレオシドの２’または３’プロドラッグを得た（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１９７８，８（５）：３２７−３３；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９９，１２１（２４）：５６６１−５；  Ｂｒｙａｎｔら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，２００１，４５，２２９−２３５；  Ｓｔａｎｄｒｉｎｇら，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｃｈｅｍ．＆  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，２００１，１２（Ｓｕｐｐｌ．１），１１９−１２９；  Ｂｅｎｚａｒｉａら，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．，２００１，５０，Ａ７９；  Ｐｉｅｒｒａら，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．，２００１，５０，Ａ７９；およびＣｒｅｔｔｏｎ−Ｓｃｏｔｔら，Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．，２００１，５０，Ａ４４参照）。カップリング剤の例は、様々なカルボジイミド、ＣＤＩ、ＢＯＰおよびカルボジイミダゾールを含む（しかし、これらに限定されない）化合物または部分を互いに結合させることができるあらゆる試薬であった。例えば、２’−分枝ヌクレオシドの３’−プロドラッグの合成中、このヌクレオシドを、好ましくは保護せずに、カルボジイミド−カップリング剤によりアルカン酸またはアミノ酸残基に直接カップリングさせた。
【０００３】
Ｍａｔｕｌｉｃ−Ａｄａｍｉｃら（米国特許第６，２４８，８７８号）は、酸素原子を介して３’位に結合しているリン含有基および置換ピリミジン塩基を有するリボフラノース環を含むヌクレオシド類似体の合成を報告した。前記リン含有基は、ジチオエートまたはホスホラミダイトを含み、またはオリゴヌクレオチドの一部であり得る。これらの化合物は、さらに反応させて所望の最終ヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体を生じさせるため、プロドラッグである。これらの化合物は、Ｃ−１にヒドロキシまたはアセトキシ基をならびにＣ−２、Ｃ−３およびＣ−５にベンゾイル保護基を有するリボフラノースと４−ＯＳｉＭｅ３を出発原料としてカップリングさせて、１−（２，３，５−トリ−Ｏ−ベンゾイル−リボフラノシル）−ピリミジン−４−オンを生成させ、続いて、第一反応の生成物にメタノール中のアンモニアを添加して、このベンゾイル保護基を除去し、次いで、この保護されていない生成化合物とＤＭＴ−Ｃｌ／Ｐｙｒを反応させ、その結果、リボフラノースの５’−Ｏ位にＤＭＦを付加させる、多段法で合成される。この５’−Ｏ−ＤＭＴ置換リボフラノース生成物をＴＢＤＭＳ−Ｃｌ、ＡｇＮＯ３およびＰｙｒ／ＴＨＦと反応させた。次いで、標準的なホスフィチル化を行って、３’−リン含有化合物を生成させた。提示されている合成の各々が、少なくとも４から７つの段階を含む。
【０００４】
１９９９年にＭｃＣｏｒｍｉｃｋらは、出発原料として未保護のリボースを使用する、グアノシンの３’−炭酸塩の調製を記載した（ＭｃＣｏｒｍｉｃｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９，１２１（２４）：５６６１−５）。ＭｃＣｏｒｍｉｃｋは、Ｏ−およびＮ−グリコシド結合の逐次的、段階的導入、一定の保護基の適用、スルホン化、および最終的な脱保護により、この化合物を合成することができた。ＭｃＣｏｒｍｉｃｋらは、未保護のグアノシンをＢＯＣ−無水物、ＤＭＡＰ、Ｅｔ３ＮおよびＤＭＳＯと室温で４時間反応させて、グアノシンの３’−炭酸塩を直接得た。
【０００５】
Ｔａｎｇらは、２’−Ｃ−β−メチル−シチジンリボヌクレオシドのホスホラミダイトプロドラッグの調製方法を開示した（Ｔａｎｇら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９９，６４：７４７−７５４）。Ｔａｎｇらは、この合成の第一段階として、ルイス酸、ＳｎＣｌ４の存在下で１，２，３，５−テトラ−Ｏ−ベンゾイル−２−Ｃ−メチル−β−Ｄリボフラノースを過シリル化４−Ｎ−ベンゾイルシトシンと反応させた（Ｉｄ．７４８における図式Ｉａ）。
【０００６】
２’−および３’−分枝ヌクレオシドの３’−アシル化プロドラッグは、フラビウイルス、ペスチウイルスおよび特にＣ型肝炎を含むウイルス疾患を治療するための薬剤として重要であるという事実に鑑みて、ヌクレオシドの３’−ＯＨにアシル基を選択的に付加させるための有効な方法を有するのは、有利であろう。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、本発明の目的は、工業規模の製造経路として用いることができる２’および３’−分枝ヌクレオシドの３’−アシル化誘導体の調製方法を提供することである。
【０００８】
もう１つの目的は、反応の段階数を最少にするこうした化合物の合成を提供することである。
【０００９】
もう１つの目的は、非毒性で安価な試薬のみを利用し、特別な設備または反応条件をほとんど必要とせず、および短時間に完了まで行く方法を有することである。
【００１０】
本発明のさらにもう１つの目的は、高い生成物収率をもたらす、こうした化合物の効率的な調製方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の要約）
本発明は、リボフラノシル２’または３’−分枝ヌクレオシドの選択的３’−アシル化のための一段法である。リボフラノシルヌクレオシドは、この２’および３’位にヒドロキシル基を有する。この方法は、２’−ヒドロキシル基ではなく３’−ヒドロキシル基をアシル化するという結果を達成する。
【００１２】
１つの実施態様において、本発明の方法は、安価な試薬を利用し、特別な反応条件および特別な装置をまったく必要としない。例えば、本発明の方法は、２’および３’−分枝ヌクレオシドの３’−ヌクレオシドプロドラッグを収率約５４％、純度約９８％で提供することができる。
【００１３】
本発明の有利な面は、一段階しか必要としないことである。１つの実施態様において、この反応には約１時間しかかからない。本発明の特定の実施態様では、本方法を用いて、５’−ヒドロキシルなどの他の遊離ヒドロキシルを保護せずに３’−ＯＨを選択的にエステル化することができる。発見したこの方法でかくも容易に多数のヒドロキシル基の選択的アシル化を達成できることは、まったく驚くべきことである。
【００１４】
カップリング剤（ＣＤＩなど）、および塩基（ＴＥＡなど）［場合により塩基触媒（ＤＭＡＰ）の存在下でのもの］の存在下、例えば極性溶媒（ＤＭＦおよび／またはＴＨＦ）中で、ヌクレオシドと保護有機酸を反応させると、このヌクレオシドの３’−ＯＨにこの保護有機酸が選択的に付加し、その結果、このヌクレオシドの３’−プロドラッグが形成されることになることが判明した。この方法は、たった一段階で行われ、プロドラッグ生成物の形成に必要な時間は、先行技術分野において見出せる方法より有意に短縮される。本発明の１つの実施態様では、生成物の収率が、５０％より高い。
【００１５】
１つの実施態様において、本発明の方法は、２’または３’−分枝リボフラノシルヌクレオシド類似体をアシル基、低級アルカノイル、または有機カルボン酸の誘導体と反応させて、３’−ヌクレオシド誘導体プロドラッグを生じさせることを含む。もう１つの実施態様において、本発明の方法は、対象となる基以外のすべての官能基に保護基を有するカルボン酸誘導体と前記ヌクレオシド類似体を反応させて、エステル部分を有するヌクレオシドプロドラッグを生じさせることを含む。さらにもう１つの実施態様において、前記カルボン酸誘導体は、天然または非天然アミノ酸である。
【００１６】
本発明の一例として、本発明の方法は、４−アミノ−１−（３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンなどの遊離３’−ＯＨを有するヌクレオシドを、ＢＯＣ−バリン／ＣＤＩおよびＤＭＡＰ／ＴＥＡ／ＤＭＦと反応させて、２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチル−酪酸５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−２−ヒドロキシメチル−４−メチル−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステルなどのこのヌクレオシドの３’−Ｏ−バリノイルエステルを形成する単一段階を含む。
【００１７】
１つの実施態様において、ＢＯＣ（ｔ−ブトキシカルボニル）をアミノ酸のための保護基として使用する。しかし、本方法は、ＢＯＣの使用に限定されず、例えばアシルまたはシリル基などのあらゆる窒素含有保護基を使用することができる（Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，第三版（１９９９）参照）。また、ＣＤＩ（カルボニルジイミダゾール）の代わりに、二極性ポリアミドおよびポリペプチドの合成に使用されるカルボジイミドなどのあらゆるカップリング剤を使用することができる。
【００１８】
この反応は、あらゆる極性溶媒中で行うことができる。１つの実施態様では、ＤＭＦまたはＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）のいずれかを使用する。補足的実施態様では、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）を補助溶媒として使用することができる。
【００１９】
同様に、ＴＥＡの代わりに、例えばジイソプロピルエチルアミンおよびＮ−エチルモルホリンなどのあらゆる第三アミンを使用することができる。
【００２０】
ヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体は、例示する化合物に限定されず、プリン塩基、ピリミジン塩基、ピロロピリミジン、トリアゾロピリジン、イミダゾロピリジン、ピラゾロピリミジンおよび下に記載の非天然塩基を含む置換および非置換ヌクレオシド塩基を包含する。場合により置換されている５員環は、フランのＯ原子の代わりにＯ、ＳまたはＣＨ２基を含有することができる。これらのヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体のすべての立体異性形および互変異性形もここに含まれる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
本発明は、選択的アシル化による医薬活性２’または３’−分枝リボフラノシルヌクレオシドの３’−プロドラッグの改善された調製方法を提供する。
【００２２】
カップリング剤（ＣＤＩなど）、塩基（ＴＥＡなど）［場合により塩基触媒（ＤＭＡＰなど）の存在下でのもの］、および極性溶媒（ＴＨＦおよび／またはＤＭＦなど）の存在下で２’または３’−分枝ヌクレオシドを保護有機酸と反応させると、このヌクレオシドの３’−ＯＨにこの保護有機酸が選択的に付加し、その結果、このヌクレオシドの３’−プロドラッグが形成されることになることを、予想外に発見した。本方法は、たった一段階で行われるので、プロドラッグ生成物を形成するために必要な時間が、先行技術分野において見出される方法より有意に短縮される。本発明の１つの実施態様では、生成物の収率が、５０％より高い。
【００２３】
本方法によりもたらされる他の予想外の利点には、使用する試薬のコストが低いことが挙げられる。本発明によりもたらされるもうひとつの予想外の利点には、極端な反応条件がないことが挙げられる。さらに、本方法は、特殊設備または装置を必要としないため、使用者には追加費用の節約となる。さらに、本方法は、製造を目的とした容易な規模拡大に好適である。
【００２４】
図１および２は、本発明の非限定的実施例の概略図である。図１に記載の方法では、４−アミノ−１−（３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラニル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンを、ＴＨＦまたはＤＭＦ中、ＣＤＩによって活性化されるＢＯＣ保護バリンと反応させる。この方法で使用する溶媒のうち、ＴＨＦは、補助溶媒としてＤＭＦとともに作用する。ＴＥＡの代わりに、例えばジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−エチルモルホリンなどのあらゆる第三アミンを使用することができ、ＤＭＦの代わりに、例えばＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）またはＮＭＰ（Ｎ−メチルピロリジノン）などの他の極性溶媒を使用することもできる。この方法の具体例は、約１時間の反応時間を有する。
【００２５】
この方法を使用して誘導することができるヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体は、例示した化合物に限定されず、例えば、プリン塩基、ピリミジン塩基、ピロロピリミジン、トリアゾロピリジン、イミダゾロピリジン、ピラゾロピリミジンおよび下に記載する非天然塩基を含む、置換および非置換ヌクレオシド塩基を包含する。場合により置換されている５員環は、フランのＯ原子の代わりにＯ、ＳまたはＣＨ２基を含有することができる。これらのヌクレオシドおよびヌクレオシド類似体のすべての立体異性形および互変異性形もここに包含される。
【００２６】
（本方法の段階の詳細な説明）
遊離または反応性３’−ＯＨ（または−ＳＨ）を有するヌクレオシドは、購入することができ、または標準的な還元、酸化、置換および／またはカップリング法を含む、出版物に掲載されている、もしくは掲載されていないあらゆる手段により調製することができる。主要な実施態様において、前記ヌクレオシドは、２’または３’−分枝ヌクレオシドである。別の実施態様において、前記遊離３’−ＯＨ（または−ＳＨ）を有するヌクレオシドは、２’−デオキシシチジンまたは２’−デオキシチミジンなどの２’−デオキシヌクレオシドであり、これらは、購入することができ、または標準的な還元およびカップリング法を含む、出版物に掲載されている、もしくは掲載されていないあらゆる手段により調製することができる。本発明のもう１つの実施態様において、前記遊離３’−ＯＨを有するヌクレオシドは、４−アミノ−１−（３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラニル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（β−Ｄ−２’−Ｃ−メチル−シチジン）または９−（２’−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−６−Ｎ−メチル−アデニンなどの２’−分枝ヌクレオシドであり、これらは、購入することができ、または標準的な酸化、置換およびカップリング法を含む、出版物に掲載されている、もしくは掲載されていないあらゆる手段により調製することができる。本発明のさらにもう１つの実施態様において、前記遊離３’−ＯＨを有するヌクレオシドは、３’−分枝ヌクレオシドであり、これは、購入することができ、または標準的な酸化、置換およびカップリング法を含む、出版物に掲載されている、もしくは掲載されていないあらゆる手段により調製することができる。出発原料のもう１つの例は、β−Ｄ−２’−Ｃ−メチル−Ｎ−メチル−プリンである。
【００２７】
前記場合により保護されている有機酸は、購入することができ、または出版物に掲載されている、もしくは掲載されていないあらゆる手段により調製することができる。本発明の１つの実施態様において、前記場合により保護されている有機酸は、Ｂｏｃ保護アミノ酸、好ましくはＢｏｃ保護Ｌ−バリンなどの場合により保護されているアミノ酸である。このアミノ酸の遊離アミノ基は、Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，第二版，１９９１に教示されているような、当業者には周知である方法により、適する保護基、好ましくは−（Ｃ＝Ｏ）−アラルキル、−（Ｃ＝Ｏ）−アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）−アリールなどのアシル基、好ましくはＢＯＣ（ブトキシカルボニル）で選択的に保護することができる。本発明の方法は、保護基としてＢＯＣを使用することに限定されない。例えば、置換または非置換シリル基、Ｃ−Ｏ−アラルキル、Ｃ−Ｏ−アルキルもしくはＣ−Ｏ−アリールのような置換または非置換エーテル基、直鎖または分枝鎖であるアルキル部分を有するアシルまたはアセチル基などの脂肪族の基、ならびに当業者に公知であるような、およびＧｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，第二版（１９９１）により教示されているような、本発明の材料、試薬および条件に対して悪影響を及ぼすことにならないようなあらゆる基などの、他の保護基を使用することができる。
【００２８】
３’−選択的アシル化ヌクレオシドは、場合により保護されている有機酸と遊離３’−ＯＨ（または−ＳＨ）を有するヌクレオシドとをカップリング剤および塩基（複数を含む）の存在下で反応させることにより調製することができる。適するカップリング剤には、ＥＤＣ（塩酸１−［３−（ジメチルアミノ）−プロピル］−３−エチル−カルボジイミド；ＤＥＣとも呼ばれる）、ＣＤＩ（カルボニルジイミダゾール）、ＢＯＰ試薬（ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウム）、およびトリフェニルホスフィンを有するミツノブ試薬（例えば、アゾジカルボン酸ジイソプロピルおよびアゾジカルボン酸ジエチル）ならびに当業者に公知であるような他のカルボジイミドまたは同様のカップリング剤、しかし好ましくはＣＤＩが挙げられる。適する塩基には、ＴＥＡ（トリエチルアミン）、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−エチルモルホリン、あらゆる脂肪族第三アミンもしくは他の適するアミン、またはそれらの組み合わせ、好ましくはＴＥＡが挙げられ、これらは、場合によりＤＭＡＰなどの塩基触媒と併用することができる。
【００２９】
場合により保護されている有機酸および／またはカップリング剤は、ヌクレオシドと、過度の副生成物を伴わず許容可能な速度で反応を進行させることができるあらゆるモル比で、例えば、ヌクレオシドに対して、カップリング剤の約１．０から約１．５モル過多、好ましくは約１．１モルから約１．２５モル過多、および／または場合により保護されている有機酸の約１．１から約１．２５過多、好ましくは約１．１から１．２５モル過多で、反応させることができる。１つの実施態様において、塩基（複数を含む）を過剰量使用して反応させることができる。塩基（複数を含む）をＤＭＡＰなどの塩基触媒と併用する場合は、１つの実施態様では、ＤＭＡＰなどの塩基触媒は、触媒量、例えばヌクレオシドに対して約０．１：１モル比で使用される。
【００３０】
１つの実施態様において、試薬は、同時に、または過剰な副生成物を伴わない許容可能な速度で反応を進行させることができる適切な期間および温度にわたって逐次的に添加することができる。
【００３１】
１つの実施態様において、場合により保護されている有機酸は、ヌクレオシドおよび／または塩基（複数を含む）の添加前にカップリング剤とともに攪拌する。例えば、場合により保護されているアミノ酸、例えばＢｏｃ−Ｌ−バリンなどの場合により保護されている有機酸をＣＤＩなどのカップリング剤と共に攪拌することができる。この反応は、分解を促進しない、または過剰な副生成物を伴わない許容可能な速度で反応を進行させることができるあらゆる温度で遂行することができる。好ましい条件は、ほぼ室温から約２５℃で、約１時間から１時間半であり、次いで、約２０から３０分間、好ましくは不活性条件下、例えばアルゴンガス下で、約４０から５０℃に加熱する。場合により保護されているこの活性化有機酸は、試薬の温度および溶解度に適するあらゆる溶媒中で調製することができる。溶媒は、あらゆる非プロトン性溶媒から成り得、これらには、アセトン、酢酸エチル、ジチアン、ＴＨＦ、ジオキサン、アセトニトリル、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ジエチルエーテル、ピリジン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ＤＭＥ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトアミドまたはそれらの組み合わせ、しかし好ましくはＴＨＦが挙げられる。
【００３２】
１つの実施態様において、２’−デオキシシチジン、２’−デオキシチミジン、４−アミノ−１−（３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラニル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンまたは９−（２’−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−６−Ｎ−メチル−アデニンまたは９−（２’−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−６−Ｎ−メチル−プリンなどの遊離３’−ＯＨ（または−ＳＨ）を有するヌクレオシドは、場合によりＭＤＡＰなどの塩基触媒の存在下で塩基（複数を含む）とともに攪拌した後、場合により保護されている有機酸および／またはカップリング剤に添加する。例えば、遊離３’−ＯＨ（または−ＳＨ）を有するヌクレオシドは、場合によりＤＭＡＰなどの塩基触媒の存在下で塩基（複数を含む）とともに攪拌することができる。この反応は、分解を促進しない、または過剰な副生成物を伴わない許容可能な速度で反応を進行させることができるあらゆる温度で遂行することができる。好ましい条件は、ヌクレオシドを溶媒に完全に可溶化することができる温度、例えば、約９５から１００℃で、約２０から３０分間、好ましくは不活性条件下、例えばアルゴンガス下である。この活性化ヌクレオシドは、試薬の温度および溶解度に適するあらゆる溶媒中で調製することができる。溶媒は、あらゆる非プロトン性溶媒から成り得、これらには、アセトン、酢酸エチル、ジチアン、ＴＨＦ、ジオキサン、アセトニトリル、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ジエチルエーテル、ピリジン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ＤＭＥ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトアミドまたはそれらの組み合わせ、しかし好ましくはＤＭＥが挙げられる。
【００３３】
本発明の１つの実施態様では、次に、この活性化有機酸（とカップリング剤）は、活性化ヌクレオシド（と塩基（複数を含む）、場合によりＤＭＡＰなどの塩基触媒の存在下でのもの）と共に攪拌する。これら２つの溶液は、すべて同時に添加してもよいし、過剰な副生成物を伴わない許容可能な速度で反応を進行させることができる適切な期間および温度にわたって漸増的に添加してもよい。１つの実施態様において、場合により保護されている活性化有機酸は、約２時間にわたって漸増的に添加する。本発明の別の実施態様において、場合により保護されている活性化有機酸は、迅速に、たとえば約２分にわたって添加する。この反応は、分解を促進しない、または過剰な副生成物を伴わない許容可能な速度で反応を進行させることができるあらゆる温度で遂行することができる。一例では、好ましくは不活性条件下、例えばアルゴンガス下で、反応溶液は、場合により保護されている活性化有機酸の添加中は約８０から１００℃、次に、約１時間、約８０から９０℃であり、次いで、ほぼ室温に冷却する。１つの実施態様において、場合により保護されている活性化有機酸の添加中は温度を８０℃未満に低下させない。
【００３４】
反応は、ヌクレオシドの実質的な量が消費されるまで進行させることができ、この間の反応の進行は、例えばＴＬＣまたはＨＰＬＣ分析のために一定量を定期的に取ることにより、モニターすることができる。
【００３５】
反応が所望の地点まで進行したら、揮発性が高い方の溶媒（例えばＴＨＦ）および塩基（複数を含む）（例えばＴＥＡ）の一部を、当該技術分野において公知のあらゆる手段により、例えば真空下、温度約３０℃で除去した後、酸で反応を停止させることができる。
【００３６】
好ましい実施態様において、本発明の方法は、中間精製段階を一切伴わない１つの閉鎖システム、すなわち「ワンポット」合成で遂行される。
【００３７】
次に、所望される場合には、反応溶液を酢酸などの酸でｐＨ約７．５から約７．７５に中和することができる。
【００３８】
次いで、前に除去されなかったあらゆる溶媒（例えばＤＭＦ）を、当該技術分野において公知のあらゆる手段により、例えば真空下、温度約３５℃で除去することができる。
【００３９】
標準的な抽出および結晶化法を含む当該技術分野において公知のあらゆる手段により、この粗製溶液から生成物を抽出することができる。例えば、この粗製溶液を、酢酸エチル、塩化メチレンまたはｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）などの有機溶媒および水と混合することができる。二層を分離し、水性層を酢酸エチル、塩化メチレンまたはｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）などの有機溶媒で再び抽出することができる。有機溶媒を添加し、得られた水性層を分離する工程は、必要なだけ多くの回数を繰り返すことができる。有機層を併せ、場合により飽和ブライン水溶液で洗浄することができる。次に、得られた有機層を酸の水溶液、例えば、マロン酸水溶液で抽出することができる。この有機層は、例えばＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）により、確実に所望の生成物のすべてが有機層から除去されたことをチェックすることができる。１つの実施態様では、次に、この酸の水性抽出物を併せて、例えば氷浴で約０から１０℃に冷却し、所望の生成物がこの溶液から沈殿し得るように例えばトリエチルアミンなどの塩基を使用してｐＨ約７．４に中和することができる。別の実施態様では、次に、この酸の水性抽出物を併せて、例えば氷浴で、約０から１０℃に冷却し、例えばトリエチルアミンなどの塩基を使用してｐＨ約７．４に中和することができ、水性層は、ＭＴＢＥなどの有機溶媒で中和する。有機溶媒を添加し、得られた水性層を分離する工程は、必要なだけ多くの回数を繰り返すことができる。併せた有機層は、硫酸マグネシウムまたは硫酸ナトリウムなどの乾燥剤で乾燥させ、続いて、例えば真空下で濃縮することができる。
【００４０】
所望される場合には、当該技術分野において公知のあらゆる手段を用いて、この３’−選択的エステル化ヌクレオシドを医薬適合性の塩にすることができる。医薬適合性の塩には、医薬適合性の無機または有機酸および塩基から誘導されるものが挙げられる。適する塩の非限定的な例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、重炭酸、炭酸などの無機酸から誘導されるもの、およびアミノ酸残基、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、マロン酸、アスコルビン酸、クエン酸、安息香酸、タンニン酸、パモ酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、トシル酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、α−ケトグルタル酸、α−グリセロリン酸およびポリガラクツロン酸などの有機酸とで形成された塩が挙げられる。適する塩には、製薬技術分野において周知である多数の酸の中でも、特に、リチウム、カリウムおよびナトリウムなどのアルカリ金属、カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属から誘導されたものが挙げられる。他の適する塩には、亜鉛、ビスマス、バリウム、アルミニウム、銅などの他の金属カチオンから誘導されたもの、またはアンモニア、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレン−ジアミン、Ｄ−グルコサミン、テトラエチルアンモニウムもしくはエチレン−ジアミンなどのアミンから形成されたカチオンを伴うものが挙げられる。さらに、適する塩には、酸と塩基の組み合わせから誘導されたもの、例えば、タンニン酸亜鉛塩などが挙げられる。従って、本発明の１つの実施態様において、３’位が３’選択的にエステル化されているヌクレオシドを、非プロトン性溶媒、例えばＥｔＯＨなどの溶媒中で、ＨＣｌなどの医薬適合性の無機または有機酸と反応させて、最終生成物として塩酸塩などの医薬適合性の塩を生じさせることができる。
【００４１】
（実施態様の実例）
１つの実施態様において、
ａ）有機溶媒中の２’分枝リボフラノシルヌクレオシドの第一溶液を、このヌクレオシドを溶解するために充分な温度で、このヌクレオシドを溶解するために充分な時間、加熱すること；
ｂ）第三アミンおよび塩基触媒を前記第一溶液に添加すること；ならびに
ｃ）有機溶媒中の保護アミノ酸およびカルボジイミドカップリング剤を含む第二溶液を前記第一溶液に添加すること
を含む、２’−分枝リボフラノシルヌクレオシドの３’ヒドロキシル位を選択的にエステル化するための方法を提供する。
【００４２】
前記第一溶液は、場合により、少なくとも２０分間、少なくとも８０℃に加熱する。場合により、段階ｃ）において、前記第一溶液を少なくとも８０℃で維持し、前記第二溶液を少なくとも１時間の期間にわたって添加する。場合により、本方法は、この併せた第一および第二溶液を、少なくとも約１時間半、少なくとも８０℃の温度で加熱する段階をさらに含む。前記第一溶液における有機溶媒は、例えば、ＤＭＦなどの極性非プロトン性である。前記第二溶液における有機溶媒は、例えば、ＴＨＦまたはＤＭＦなどの極性非プロトン性溶媒である。請求項６４に記載の方法は、この生成溶液を酸で中和する段階をさらに含む。前記第三アミンは、例えば、トリエチルアミンであり、前記塩基は、例えばＤＭＡＰである。前期保護アミノ酸は、保護Ｌ−バリノイルアミノ酸であり得る。
【００４３】
１つの実施態様において、無水ＴＨＦまたはＤＭＦ中のＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリンの溶液をＣＤＩに添加し、アルゴンガス下、２５℃で約１．５時間、４０から５０℃で２０分間攪拌する。アルゴンガスラインを装備した別のフラスコに、ＤＭＦに溶解したＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリンのものと比較して１：１モル比よりほんのわずか少ない量で、４−アミノ−１−（３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラニル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンを添加し、これに、ＴＥＡおよびＤＭＡＰを添加する。次に、この４−アミノ−１−（２，３−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−２−メチル−テトラヒドロ−フラニル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オンを約２０分間、外部温度１００℃に加熱するか、前記ピリミジン−２−オン誘導体化合物が完全に溶液状態になるまで加熱し、次いで、ＴＥＡおよびＤＭＡＰを添加する。この混合物を約９７℃（外部温度）で約２０分間加熱し、次いで、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリンを含有するＴＨＦ溶液を温度（内部温度）８２℃以上で約２時間にわたってゆっくりと添加する。次に、この反応混合物を約８２℃で約１時間加熱し、次いで、室温に冷却する。冷却したら、ＴＥＡおよびＴＨＦを真空下、温度約３０℃で除去する。
【００４４】
次に、この溶液を酢酸でｐＨ約７．６９に中和し、真空下、温度約３５℃でＤＭＦを除去する。この溶液を酢酸エチルでチェイスし、この粗製生成物を酢酸エチルおよび水とともに攪拌する。二層を分離し、水性層を酢酸エチルで再び抽出する。次に、これら２つの有機層を併せ、ブライン飽和水溶液で洗浄し、得られた有機層をマロン酸水溶液で抽出する。有機層は、ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）により、確かに所望の生成物のすべてが有機層から除去されたことをチェックすることができる。
【００４５】
次に、これらの酸の水性抽出物を併せ、氷浴で冷却して、ＴＥＡでｐＨ７．４に中和する。このｐＨでこの溶液から固体が沈殿する。酢酸エチルを水性層に添加して、白色の固体を回収し、吸引濾過により乾燥させて、プロドラッグ生成物を得る。
【００４６】
（エステル化方法に適するヌクレオシド）
遊離３’−ＯＨ（または−ＳＨ）を有するあらゆるヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体を本発明の方法で使用することができる。従って、本発明は、（ａ）遊離３’−ＯＨ（または−ＳＨ）を有するヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体；（ｂ）場合により保護されているアミノ酸、例えばＢｏｃ−Ｌ−バリンなどの、場合により保護されている有機酸；（ｃ）カップリング剤；および（ｄ）塩基、場合により塩基触媒存在下でのものを、単一閉鎖システム（すなわち、「ワンポット」システム）で反応させることを含む、ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体の３’−プロドラッグの調製方法を含む。補足的実施態様では、ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体の３’−プロドラッグの医薬適合性の塩が望ましい。前記ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体の３’−プロドラッグの医薬適合性の塩は、例えば、ヌクレオシドまたはヌクレオシド類似体の３’−プロドラッグに酸の塩をさらに付加させることを含む、当該技術分野において公知のあらゆる手段を用いて製造することができる。
【００４７】
１つの実施態様において、塩基は、プリン塩基である。もう１つの実施態様において、塩基は、ピリミジン塩基である。さらにもう１つの実施態様において、塩基は、ピロロピリミジンである。さらにもう１つの実施態様において、塩基は、トリアゾロピリジン、イミダゾロピリジンまたはピラゾロピリミジンである。特定の実施態様において、塩基は、チミン、シトシン、５−フルオロシトシン、５−メチルシトシン、６−アザ−ピリミジン（６−アザシトシンを含む）、２−および／または４−メルカプトピリミジン、ウラシル、５−ハロウラシル、Ｃ５−アルキルピリミジン、Ｃ５−ベンジルピリミジン、Ｃ５−ハロピリミジン、Ｃ５−ビニルピリミジン、Ｃ５−アセチレン性ピリミジン、Ｃ５−アシルピリミジン、Ｃ５−ヒドロキシアルキルプリン、Ｃ５−アミドピリミジン、Ｃ５−シアノピリミジン、Ｃ５−ニトロピリミジンおよびＣ５−アミノピリミジンから成る群より選択されるピリミジン塩基である。
【００４８】
特定の副次的実施態様において、塩基は、
【００４９】
【化４０】
2006514038.tif 000002
から成る群より選択される。
【００５０】
もう１つの実施態様において、塩基は、Ｎ６−アルキルプリン（Ｎ−メチルプリンを含む）、Ｎ６−アシルプリン（この場合、アシルは、Ｃ（Ｏ）（アルキル、アリール、アルキルアリールまたはアリールアルキルである。）、Ｎ６−ベンジルプリン、Ｎ６−ハロプリン、Ｎ６−ビニルプリン、Ｎ６−アセチレン性プリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ヒドロキシアルキルプリン、Ｎ６−チオアルキルプリン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、５−アザシチジニル、グアニン、アデニン、ヒポキサンチン、２，６−ジアミノプリンおよび６−クロロプリンから成る群より選択されるプリン塩基である。
【００５１】
もう１つの特定の副次的実施態様において、塩基は、
【００５２】
【化４１】
2006514038.tif 000003
から成る群より選択される。
【００５３】
本発明の１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００５４】
【化４２】
2006514038.tif 000004
である。
【００５５】
本発明のもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００５６】
【化４３】
2006514038.tif 000005
である。
【００５７】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００５８】
【化４４】
2006514038.tif 000006
である。
【００５９】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００６０】
【化４５】
2006514038.tif 000007
である。
【００６１】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００６２】
【化４６】
2006514038.tif 000008
である。
【００６３】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００６４】
【化４７】
2006514038.tif 000009
である。
【００６５】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００６６】
【化４８】
2006514038.tif 000010
である。
【００６７】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００６８】
【化４９】
2006514038.tif 000011
（式中、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチルまたはネオペンチルである。）
である。
【００６９】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００７０】
【化５０】
2006514038.tif 000012
である。
【００７１】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００７２】
【化５１】
2006514038.tif 000013
である。
【００７３】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００７４】
【化５２】
2006514038.tif 000014
である。
【００７５】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００７６】
【化５３】
2006514038.tif 000015
である。
【００７７】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００７８】
【化５４】
2006514038.tif 000016
である。
【００７９】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００８０】
【化５５】
2006514038.tif 000017
である。
【００８１】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００８２】
【化５６】
2006514038.tif 000018
である。
【００８３】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００８４】
【化５７】
2006514038.tif 000019
である。
【００８５】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００８６】
【化５８】
2006514038.tif 000020
である。
【００８７】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００８８】
【化５９】
2006514038.tif 000021
である。
【００８９】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００９０】
【化６０】
2006514038.tif 000022
である。
【００９１】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００９２】
【化６１】
2006514038.tif 000023
（式中、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチルまたはネオペンチルである。）
である。
【００９３】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００９４】
【化６２】
2006514038.tif 000024
である。
【００９５】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００９６】
【化６３】
2006514038.tif 000025
である。
【００９７】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【００９８】
【化６４】
2006514038.tif 000026
である。
【００９９】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１００】
【化６５】
2006514038.tif 000027
である。
【０１０１】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１０２】
【化６６】
2006514038.tif 000028
である。
【０１０３】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１０４】
【化６７】
2006514038.tif 000029
である。
【０１０５】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１０６】
【化６８】
2006514038.tif 000030
である。
【０１０７】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１０８】
【化６９】
2006514038.tif 000031
である。
【０１０９】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１１０】
【化７０】
2006514038.tif 000032
である。
【０１１１】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１１２】
【化７１】
2006514038.tif 000033
である。
【０１１３】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１１４】
【化７２】
2006514038.tif 000034
である。
【０１１５】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１１６】
【化７３】
2006514038.tif 000035
である。
【０１１７】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１１８】
【化７４】
2006514038.tif 000036
である。
【０１１９】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１２０】
【化７５】
2006514038.tif 000037
である。
【０１２１】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１２２】
【化７６】
2006514038.tif 000038
である。
【０１２３】
本発明のさらにもう１つの特に好ましい副次的実施態様において、３’−位で選択的エステル化される２’−Ｃ−メチル分枝ヌクレオシドは、遊離２’−および／または５’−ＯＨが保護されていない
【０１２４】
【化７７】
2006514038.tif 000039
である。
【０１２５】
（定義および代替試薬）
特に他の指示がない限り、ここで用いる用語「保護されている」は、さらなる反応を防止するために、または他の目的のために、酸素、窒素またはリン原子に付加させる基を指す。多種多様な酸素、窒素およびリン保護基が、有機合成技術分野の技術者に公知である。
【０１２６】
適する保護基の例には、ベンゾイル；置換または非置換アルキル基、置換または非置換アリール基、置換または非置換シリル基；例えば、ベンゾイル、トルイル（例えばｐ−トルイル）、ニトロベンゾイル、クロロベンゾイルのような芳香属性の基などの、置換または非置換芳香族または脂肪族エステル；例えば、Ｃ−Ｏ−アラルキル、Ｃ−Ｏ−アルキルまたはＣ−Ｏ−アリールなどのエーテル基；およびあらゆる置換または非置換芳香族または脂肪族アシル、−（Ｃ＝Ｏ）−アラルキル、−（Ｃ＝Ｏ）−アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）−アリール（この場合、アシル基の芳香族または脂肪族部分は、直鎖であってもよいし、分枝鎖であってもよい）を含むアシルまたはアセチル基のような脂肪族の基が挙げられる（これらは、すべて、改善された合成を含む反応による影響を受けない基によって場合によりさらに置換されていてもよい。）が、これらに限定されない（Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，第二版，１９９１参照）。保護基としてのエーテルの使用については、保護基としてのエーテルの、特にペントフラノシドの５’位での使用が、試薬および作業条件に対する安全性に有意な利点をもたらすことを報告している、Ｓａｉｓｃｈｅｋらの米国特許第６，２２９，００８号が注目される。この特許は、本明細書に参照により組込まれる。これは、所望の生成物の分離、単離および精製に、従って、この生成物の収率に対して究極の利点をもたらす。
【０１２７】
アミノ酸保護基は、好ましくは、ＢＯＣ（ブトキシカルボニル）、−（Ｃ＝Ｏ）−アラルキル、−（Ｃ＝Ｏ）−アルキルまたは−（Ｃ＝Ｏ）−アリールである。本発明の１つの実施態様において、アミノ酸保護基は、ＢＯＣ（ブトキシカルボニル）である。
【０１２８】
本出願全体を通して、用語「置換されている」は、１つ以上の指名置換基による一または多重置換度を意味する。単一の置換基が開示または特許請求の範囲に記載されている場合、この化合物は、この置換基により１回またはそれ以上置換されていることがある。複数の置換基が開示または特許請求の範囲に記載されている場合、この置換化合物は、開示または特許請求の範囲に記載の置換基部分により、独立して一回または複数回置換されていることがある。
【０１２９】
特に他の指示がない限り、ここで用いる用語「アルキル」は、一般にはＣ１からＣ１０の飽和直鎖、分枝鎖または環状第一級、第二級または第三級炭化水素を指し、具体的には、メチル、トリフルオロメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、メチルペンチルおよびジメチルブチルを包含する。この用語は、置換アルキル基と非置換アルキル基の両方を包含する。アルキル基を１ヵ所以上の位置で置換することができる部分は、ハロ（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を含む）、ヒドロキシル（例えば、ＣＨ２ＯＨ）、アミノ（例えば、ＣＨ２ＮＨ２、ＣＨ２ＮＨＣＨ３、またはＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２）、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、アジド（例えば、ＣＨ２Ｎ３）、シアノ（ＣＨ２ＣＮ）、スルホン酸、スルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートから成る群より選択され、これらのいずれかまたはすべてが、未保護であってもよいし、必要な場合には、当業者に公知であるように、および例えば、Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，第二版（１９９１）に教示されているように、さらに保護されていてもよい。
【０１３０】
用語「アルキルアミノ」および「アリールアミノ」は、１つまたはそれ以上のアルキルまたはアリール置換基をそれぞれ有するアミノ基を指す。
【０１３１】
用語「アルカリール」および「アルキルアリール」は、アリール置換基を有するアルキル基を指す。用語「アラルキル」および「アリールアルキル」は、アルキル置換基を有するアリール基を指す。
【０１３２】
用語「ハロ」は、クロロ、ブロモ、ヨードおよびフルオロを包含する。
【０１３３】
特に他の指示がない限り、ここで用いる用語「アリール」は、フェニル、ビフェニルまたはナフチルを指す。この用語は、置換部分と非置換部分の両方を包含する。アリール基は、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、スルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートから成る群より選択される１つまたはそれ以上の部分で置換されていてもよく、これらのいずれかまたはすべてが、未保護であってもよいし、必要な場合には、当業者に公知であるように、および例えば、Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，第二版（１９９１）に教示されているように、さらに保護されていてもよい。
【０１３４】
用語「アシル」は、１つの実施態様ではこのエステル基の非カルボニル部分が、直鎖、分枝鎖もしくは環状アルキルもしくは低級アルキル、アルコキシアルキル（メトキシメチルを含む）、アラルキル（ベンジルを含む）、アリールオキシアルキル（フェノキシメチルなど）、アリール（ハロゲン、Ｃ１からＣ４アルキルまたはＣ１からＣ４アルコキシで場合により置換されているフェニルを含む）、スルホン酸エステル（メタンスルホニルを含む、アルキルまたはアラルキルスルホニルなど）、一、二もしくは三リン酸エステル、トリチルもしくはモノメトキシトリチル、置換ベンジル、トリアルキルシリル（例えばジメチル−ｔ−ブチルシリルなど）、またはジフェニルメチルシリルから選択されるカルボン酸エステルを、数ある実施態様の中でも特に包含する。用語「カルボン酸」および「カルボン酸エステル」は、構造ＲＣ（＝Ｏ）ＯＨおよびＲＣ（＝Ｏ）Ｏ−Ｒ’をそれぞれ包含する。ここで、この非カルボニル部分は、Ｒであろうと、Ｒ’であろうと、例えば、直鎖、分枝鎖または環状アルキルまたは低級アルキル、アルコキシアルキル（メトキシメチルを含む）、アラルキル（ベンジルを含む）、アリールオキシアルキル（フェノキシメチルなど）、アリール（ハロゲン、Ｃ１からＣ４アルキルまたははＣ１からＣ４アルコキシで場合により置換されているフェニルを含む）である。スルホン酸エステル（メタンスルホニルを含む、アルキルまたはアラルキルスルホニルなど）、一、二もしくは三リン酸エステル、トリチルもしくはモノメトキシトリチル、置換ベンジル、トリアルキルシリル（例えばジメチル−ｔ−ブチルシリルなど）、またはジフェニルメチルシリルも、ここに包含されることが意図される。
【０１３５】
用語「アミノ酸」は、天然および合成α、β、γまたはδアミノ酸を包含し、および蛋白質に見出せるアミノ酸、すなわち、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパルテート、グルタメート、リシン、アルギニンおよびヒスチジンを包含するが、これらに限定されない。好ましい実施態様において、アミノ酸は、Ｌ−配置である。もう１つの好ましい実施態様において、アミノ酸は、Ｌ−バリニルである。また、アミノ酸は、アラニル、バリニル、ロイシニル、イソロイシニル、プロリニル、フェニルアラニニル、トリプトファニル、メチオニニル、グリシニル、セリニル、トレオニニル、システイニル、チロシニル、アスパラギニル、グルタミニル、アスパルトイル、グルタロイル、リシニル、アルギニニル、ヒスチジニル、β−アラニル、β−バリニル、β−ロイシニル、β−イソロイシニル、β−プロリニル、β−フェニルアラニニル、β−トリプトファニル、β−メチオニニル、β−グリシニル、β−セリニル、β−トレオニニル、β−システイニル、β−チロシニル、β−アスパラギニル、β−グルタミニル、β−アスパルトイル、β−グルタロイル、β−リシニル、β−アルギニニルまたはβ−ヒスチジニルの誘導体であり得る。
【０１３６】
用語「非天然アミノ酸」は、アミノ基末端を有するが、天然に存在しないカルボン酸を指す。この用語は、Ｄ−アミノ酸とＬ−アミノ酸の両方、およびこれらのあらゆる互変異性形または立体異性形を包含すると考える。
【０１３７】
用語「ヌクレオシド塩基」は、プリンまたはピリミジン塩基を包含するが、これらに限定されない。プリンまたはピリミジン塩基の例には、アデニン、Ｎ６−アルキルプリン、Ｎ６−アシルプリン（この場合、アシルは、Ｃ（Ｏ）（アルキル、アリール、アルキルアリールまたはアリールアルキル）である。）、Ｎ６−ベンジルプリン、Ｎ６−ハロプリン、Ｎ６−ビニルプリン、Ｎ６−アセチレン性プリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ヒドロキシアルキルプリン、Ｎ６−チオアルキルプリン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、チミン、シトシン、５−フルオロシトシン、５−メチルシトシン、６−アザピリミジン（６−アザシトシンを含む）、２−および／または４−メルカプトピリミジン、ウラシル、５−ハロウラシル（５−フルオロウラシルを含む）、Ｃ５−アルキルピリミジン、Ｃ５−ベンジルピリミジン、Ｃ５−ハロピリミジン、Ｃ５−ビニルピリミジン、Ｃ５−アセチレン性ピリミジン、Ｃ５−アシルピリミジン、Ｃ５−ヒドロキシアルキルプリン、Ｃ５−アミドピリミジン、Ｃ５−シアノピリミジン、Ｃ５−ニトロピリミジン、Ｃ５−アミノピリミジン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、５−アザシチジニル、５−アザウラシリル、トリアゾロピリジニル、イミダゾロピリジニル、ピロロピリミジニル、およびピラゾロピリミジニルが挙げられるが、これらに限定されない。プリン塩基には、グアニン、アデニン、ヒポキサンチン、２，６−ジアミノプリンおよび６−クロロプリンが挙げられるが、これらに限定されない。塩基上の酸素および窒素官能基は、必要なまたは所望される場合には、保護することができる。適する保護基は、当業者によく知られており、これらには、トリメチルシリル、ジメチルヘキシルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリルおよびｔ−ブチルジフェニルシリル、トリチル、アルキル基、アシル基（アセチルおよびプロピオニルなど）、メタンスルホニル、およびｐ−トルエンスルホニルが挙げられる。また、場合により、プリンまたはピリミジン塩基は、インビボで分解され得る生存可能なプロドラッグを形成するように置換されていてもよい。適切な置換基の例には、アシル部分、アミンまたはシクロプロピル（例えば、２−アミノ、２，６−ジアミノまたはシクロプロピルグアノシン）が挙げられる。
【０１３８】
本発明の方法は、例示するヌクレオシド、保護アミノ酸エステルおよび試薬に限定されない。本発明に適する別の試薬を、上で与えたものの代わりに使用することができる。例えば、ＴＥＡ（トリエチルアミン）の代わりに、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−エチルモルホリン、またはあらゆる脂肪族第三アミンを使用することができ；ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）の代わりに、例えばＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）などのあらゆる極性溶媒を使用することができるが、取り扱いの容易さおよび反応混合物からの除去性に基づき、ＤＭＦが好ましく；ならびにミツノブ試薬（例えば、アゾジカルボン酸ジイソプロピルおよびアゾジカルボン酸ジエチル）とトリフェニルホスフィン、またはカルボニルジイミダゾール以外のカルボジイミドを含む（しかし、これらに限定されない）カップリングを可能にするあらゆる試薬をＣＤＩの代わりに使用することができる。
【０１３９】
本発明の方法は、保護基としてＢＯＣを使用することに限定されない。例えば置換または非置換シリル基；Ｃ−Ｏ−アラルキル、Ｃ−Ｏ−アルキルまたはＣ−Ｏ−アリールのような置換または非置換エーテル基；直鎖または分枝鎖であるアルキル部分を有するアシルまたはアセチル基などの脂肪族の基；ならびに当業者に公知であるような、およびＧｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，第二版（１９９１）により教示されているような、本発明の材料、試薬および条件に悪影響を及ぼさないようなあらゆる基などの、他の保護基を使用することができる。
【０１４０】
本発明の方法は、例示するヌクレオシド、保護アミノ酸エステルおよび試薬に限定されない。本発明に適する別の試薬を、上で与えたものの代わりに使用することができる。例えば、ＴＥＡ（トリエチルアミン）の代わりに、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−エチルモルホリン、またはあらゆる脂肪族第三アミンを含む、他のあらゆる適切なアミンを使用することができ；ＤＭＥ（１，２−ジメトキシエタン）の代わりに、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）またはあらゆるエーテルなど適する極性非プロトン性溶媒を使用することができる。ＭｇＳＯ４の添加直前または直後、ＴＨＦで生成スラリーを洗浄する代わりに、アセトンで洗浄してもよい。実際、規模が拡大した手順には、アセトンは、好ましい溶媒である。
【０１４１】
加えて、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）の代わりに、例えばＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）などのあらゆる極性溶媒を使用することができるが、ＤＭＦは、取り扱いの容易さおよび反応混合物からの除去性に基づき、好ましい溶媒である。
【０１４２】
ＥＤＣ（塩酸１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル）］−３−エチル−カルボジイミド）；ＤＥＣとも呼ばれる）の代わりに、ＣＤＩ（カルボニルジイミダゾール）、ＢＯＰ試薬（ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウム）、または当業者に公知であるような同様のカップリング剤を含む（しかし、これらに限定されない）、カップリングを可能にするあらゆる試薬を使用することができる。
【０１４３】
例えばトルエンなど、あらゆる有機溶媒の代わりに、アセトニトリルを使用することができ、アンモニアは、メタノール中、ナトリウムメトキシドの代わりに使用するための代替試薬であり、およびＤＭＳＯなどのあらゆる極性溶媒をＤＭＦの代わりに使用することができる。多数の他のあらゆるシリル化試薬のいずれかをＴＢＤＰＳＣｌの代わりに使用することができ、あらゆるフッ化物塩をＮＨ４Ｆの代わりに使用することができ、およびＴＦＡなどの他の酸をＨＣｌの代わりに使用することができる。
【０１４４】
本発明の本質的な利点は、一段階として行うことができる能力である。他の利点には、安価な試薬を使用すること、ならびに複雑な段階および高価な装置ではなく当業者に周知である通常の方法および設備のみを要することが挙げられる。
【０１４５】
本発明を以下の非限定的な例でさらに説明する。本明細書に含まれている作業実施例は、本発明への理解を助けるために記載するものである。これらは、本発明の方法（複数を含む）および生成物（複数を含む）の実例となるものであり、如何なる点でも、後に続く特許請求の範囲に記載の本発明を制限するためのものではなく、制限すると解釈すべきでない。本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本明細書に記載する特定の溶媒、試薬および／または反応条件の代わりに、同等、同様のまたは適する溶媒、試薬または反応条件を用いることができる。
【実施例１】
【０１４６】
２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチル酪酸５−（４−アミノ−２−オキソ−２Ｈ−ピリミジン−１−イル）−４−ヒドロキシ−２−ヒドロキシメチル−４−メチル−テトラヒドロ−フラン−３−イルエステル
２Ｌ丸底フラスコの中のＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリン（４６．５０ｇ、２１４ｍｍｏｌ）、カルボニルジイミダゾール（３４．７０ｇ、２１４ｍｍｏｌ）および無水テトラヒドロフラン（１０００ｍＬ）の溶液を、アルゴン下、２５℃で１．５時間、次いで、４０から５０℃で２０分間攪拌した。オーバーヘッド・スターラー、冷却塔、温度プローブ、添加漏斗およびアルゴンラインを装備した別の５Ｌ五つ口フラスコに、４−アミノ−１−（３，４−ジヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−３−メチル−テトラヒドロ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピリミジン−２−オン（５０．０ｇ、１９５ｍｍｏｌ）および無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０００ｍＬ）を添加した。この混合物を、このピリミジン−２−オン誘導体のすべてが溶液になるまで、２０分間、１００℃で加熱し、次に、この溶液に、トリエチルアミン（５００ｍＬ）および４−ジメチルアミノピリジン（２．３８ｇ、１９ｍｍｏｌ）を添加した。次に、この混合物を９７℃で２０分間加熱し、温度を８２℃以上に維持しながら、２時間の期間にわたってテトラヒドロフラン溶液を添加漏斗によりゆっくりと添加した。この反応混合物を８２℃で１時間加熱し、ＨＰＬＣによりモニターした（生成物＝６８％、ＳＭ＝１１％、および約１２分の時点での不純物＝１７％（ジメチルアミノピリジンを除く））。この反応混合物を室温に冷却し、次いで、トリエチルアミンおよびテトラヒドロフランを真空下、３０℃で除去した。次に、この溶液を酢酸でｐＨ７．６９に中和した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを真空下、３５℃で除去し、酢酸エチル（２ｘ２００ｍＬ）でチェースした。この粗製生成物を酢酸エチル（５００ｍＬ）および水（３００ｍＬ）とともに攪拌した。二層を分離し、水性層を酢酸エチル（５００ｍＬ）で抽出した。併せた有機層をブライン飽和水溶液（５００ｍＬ）で洗浄した。次に、この有機層をマロン酸の水溶液（４ｘ４００ｍＬ、１０重量％）で抽出した。有機層をＴＬＣ（シリカ、ジクロロメタン中２０％メタノール）によりチェックして、所望の生成物すべてが有機層から除去されたことを確認した。これらの酸の水性抽出物を併せて、氷浴で冷却し、トリエチルアミンでｐＨ７．４０に中和して、固体を溶液から沈殿させた。次に、酢酸エチルをこの水性層に添加した。真空濾過により白色の固体を回収した。得られた固体を真空下で乾燥させることにより、純度９９．０１（ＨＰＬＣ）のものを８１．０８ｇ得た。
【実施例２】
【０１４７】
二塩酸９−（２’−Ｃ−メチル−３’−Ｏ−バリノイル−β−Ｄ−リボフラノシル）−６−Ｎ−メチル−アデニン
テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中のＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−バリン（８．８４ｇ、４１ｍｍｏｌ）、カルボニルジイミダゾール（６．６０ｇ、４１ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン下、室温で１時間、次いで、５０℃で３０分間攪拌した。オーバーヘッド・スターラー、冷却塔、温度プローブ、添加漏斗およびアルゴンラインを装備した別のフラスコの中で９−（２’−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−６−Ｎ−メチル−アデニン（１、図２、１０ｇ、３４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）に溶解した。この溶液を１００℃に加熱し、トリエチルアミン（１００ｍＬ）を添加して、温度を９６℃で安定させた。活性化Ｂｏｃ−バリン溶液を迅速に（２分間にわたって）添加し、温度を８１℃に低下させ、次いで、８５℃で安定させた。この反応混合物をこの温度で攪拌し、次いで、２５℃に冷却した。トリエチルアミンおよびテトラヒドロフランを減圧下、４３℃で除去した。次に、この溶液を１０℃に冷却し、酢酸でｐＨ７．７に中和した。次に、この混合物を塩化メチレン（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で希釈した。この混合物を１０分間かき混ぜ、層を分離させ、水性層を２ｘ１００ｍＬの塩化メチレンで逆抽出した。この有機層を水中１０％のマロン酸の溶液（４ｘ１００ｍＬ）で抽出した。併せたマロン酸抽出物にｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ、２００ｍＬ）を添加して、この混合物を１０℃に冷却し、トリエチルアミンを添加してｐＨ７．１にした。層を分離し、水性層をＭＴＢＥ（２ｘ２００ｍＬ）で抽出した。併せたＭＴＢＥ層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、黄色を帯びた白色の固体を得た。得られた固体を真空下で乾燥させることにより、１４．６４ｇ（収率８８％）の純度９７．８７％（ＨＰＬＣ  ＡＵＣ）Ｂｏｃ−ｖａｌヌクレオシドを得た（２、図２）。
【０１４８】
アルゴンラインおよび冷却塔を装備した丸底フラスコの中で、エタノール（１３０ｍＬ）中の化合物２（１３．０ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）の溶液を攪拌した。この溶液に、濃塩酸（３７％、６．５ｍＬ）を添加した。反応温度は、還流させながら加熱した。塩酸導入の１時間後、固体の形成が始まった。３時間後、ＨＰＬＣは、０．６％の出発原料しか示さなかった。次に、真空濾過により固体を回収し、フィルターケークをエタノール（８０ｍＬ）およびＭＴＢＥ（４０ｍＬ）で洗浄した。次いで、この粗製生成物を４０℃でＭＴＢＥ（１００ｍＬ）と研和した。生成物を真空下で３時間乾燥させた後、８．５０ｇ（７０％）の生成物（３、図２）を純度９８．５５％（ＨＰＬＣ、ＡＵＣ）で得た。
【０１４９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ  ９．７（ブロード  ｓ、１Ｈ）、８．９−８．８（ｍ、４Ｈ、）、８．４５（ｓ、１Ｈ）、６．０４（ｓ、１Ｈ、Ｈ−１’）、５．４３（ｄ、１Ｈ、Ｈ−３’、Ｊ＝５．１Ｈｚ）、４．３０−４．２８（ｍ、１Ｈ、Ｈ−４’）、３．９６−３．９５（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、３．８５−３．６４（ｍ、２Ｈ、Ｈ−５’、Ｈ−５”）、３．１０（ｄ、３Ｈ、ＣＨ３ＮＨ、Ｊ＝２．１Ｈｚ）、２．３−２．２（ｍ、１Ｈ、ＣＨ）、１．０２−０．９７（ｍ、６Ｈ、（ＣＨ３）２ＣＨ）、０．９２（ｓ、３Ｈ、ＣＨ３）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１６７．９９、１５０．２６、１４６．５８、１４０．６７、１１８．９９、９１．３２、８０．６１、７８．８９、７４．５６、２９．２９、２９．０、２５．５０、２０．４８、１８．５５、１７．７２。
【０１５０】
本発明をこの好ましい実施態様を参照しながら説明した。本発明の変形および変更は、当業者には上述の本発明の詳細な説明から明らかであろう。
【図面の簡単な説明】
【０１５１】
【図１】本発明のピリミジンヌクレオシドの３’−ＯＨの直接エステル化方法の非限定的な例である。
【図２】本発明のプリンヌクレオシドの３’−ＯＨの直接エステル化方法の非限定的な例である。
【図３】グアノシンの３’−ＯＨにおける誘導に関する先行技術の概略図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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