(57)【要約】【課題】オキサルル酸誘導体又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する新規な線維性疾患用剤を提供することにある。【解決手段】本発明化合物オキサルル酸誘導体は、種々の臓器の線維化における中心的な役割を担っているＴＧＦ−βによって誘導される細胞外マトリックス産生の増加を有意に抑制し、線維症モデル動物における組織の線維化を抑制した。従って、本発明化合物は優れた線維化抑制作用を有する化合物であり、種々の線維性疾患、即ち、線維症並びに硬化症等の線維症関連疾患、例えば、肺線維症、肝線維症、腎硬化症、心筋線維症、動脈硬化、強皮症やケロイド等の皮膚の線維化疾患などに対して発症を抑制する予防剤、或いは該疾患における線維化進展を抑制する治療剤として非常に有用性の高いものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表されるオキサルル酸誘導体又はその薬学的に許容される塩の少なくとも一種を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
【化２】
2006134963.tif 000004
〔式中、Ｒ1、Ｒ2は同一若しくは異なって水素、アルキル基、シクロアルキル基を表すか又はＲ1及びＲ2がこれらを結合する窒素原子と共に複素環を形成し、Ｒ3は水素又はアルキル基を表す。〕
【請求項２】
肺線維症、肝線維症、腎硬化症、心筋線維症、動脈硬化又は皮膚の線維化疾患を予防又は治療するための請求項１記載の線維性疾患用剤。
【請求項３】
予防剤である請求項２記載の線維性疾患用剤。
【請求項４】
治療剤である請求項２記載の線維性疾患用剤。
【請求項５】
５−（１、３−ジメチルブチル）オキサルル酸又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
【請求項６】
５−イソペンチルオキサルル酸又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
【請求項７】
５−イソペンチルオキサルル酸エチルエステル又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
【請求項８】
５−イソペンチルオキサルル酸及びそのエステル体並びにそれらの薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はオキサルル酸誘導体又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
組織中の細胞間あるいは細胞集団間の隙間を満たす細胞外マトリックスは、主にコラーゲンやフィブロネクチンから構成されており、全身のあらゆる臓器に存在して、臓器を支持する以外に細胞の生存環境を形成している。この細胞外マトリックスが組織に過剰に沈着することを臓器の線維化と言い、組織の不可逆的な変化を引き起こして、慢性的に進行すると組織は硬化し、臓器の機能低下・機能不全に至り、肺線維症、肝硬変、動脈硬化、ケロイド等を誘発する。これらの線維性疾患に関して、現在、線維化の機序が分子生物学的に解明されつつあり、様々な薬剤の開発が進められている。【０００３】
線維化には、複数の因子が関与していることが報告されているが、その中心的役割を担う蛋白因子として、Transforming Growth Factor -β（ＴＧＦ-β）が最も重要視されている。このＴＧＦ-βはコラーゲンやフィブロネクチンといった細胞外マトリックス蛋白の産生を促進し、細胞外マトリックス分解を抑制する強い作用を有し、上記のような線維性疾患の病変局所においては、線維化を引き起こす増殖因子として過剰な発現が認められている。従って、ＴＧＦ−βで誘導される細胞外マトリックスの産生を抑制する物質は、様々な線維化病変が原因となる疾患の予防又は治療剤になりうるものである。【０００４】
本発明者らは、線維性疾患を予防・治療するための薬剤として有用な化合物を探求するうち、本発明オキサルル酸誘導体が、細胞外マトリックス産生抑制作用により線維化の進展を抑制する優れた薬理効果を有することを見出し本発明を完成した。本発明オキサルル酸誘導体が、血糖低下作用（特許文献１参照）及び腎不全進展抑制作用（特許文献２参照）を有することは知られていたが、抗線維化作用を有することはこれまで知られていなかった。【０００５】
【特許文献１】特公平６−６０１５２号公報
【特許文献２】特開２００４−１２３７３４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、オキサルル酸誘導体又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する新規な線維性疾患用剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らはオキサルル酸誘導体について鋭意研究を行った結果、オキサルル酸誘導体が優れた細胞外マトリックス産生抑制作用を有し、線維性疾患の予防・治療剤として有用性が高いものであることを見出し本発明を完成した。
【発明の効果】
【０００８】
種々の線維性疾患の原因となるＴＧＦ−βで誘導される細胞外マトリックス産生の増加を本発明化合物は有意に抑制し、線維症モデル動物における組織の線維化を抑制した。従って、本発明化合物は優れた線維化抑制作用を示す化合物であり、現在、有効な薬剤が求められている線維性疾患、即ち、線維症並びに硬化症等の線維症関連疾患、例えば、肺線維症、肝線維症、腎硬化症、心筋線維症、動脈硬化、強皮症やケロイド等の皮膚の線維化疾患などに対して発症を抑制する予防剤、或いは該疾患における線維化進展を抑制する治療剤として非常に有用性が高いものである。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、ラット腎線維芽細胞を用いた試験において、ＴＧＦ−βによって誘導される細胞外マトリックス産生に対する本発明化合物の抑制作用を調べた結果である。
【図２】図２は、培養ヒト正常メサンギウム細胞を用いた試験において、ＴＧＦ−βによって誘導される細胞外マトリックス産生に対する本発明化合物の抑制作用を調べた結果である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明は、下記一般式（Ｉ）で表されるオキサルル酸誘導体又はその薬学的に許容される塩の少なくとも一種を有効成分として含有する線維性疾患用剤である。
【化１】
2006134963.tif 000002
〔式中、Ｒ1、Ｒ2は同一若しくは異なって水素、アルキル基、シクロアルキル基を表すか又はＲ1及びＲ2がこれらを結合する窒素原子と共に複素環を形成し、Ｒ3は水素又はアルキル基を表す。〕【００１１】
上記一般式（Ｉ）においてＲ1、Ｒ2はそれぞれ同一若しくは異なって水素、アルキル基、好ましくは、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、t-ブチル、n-ペンチル、イソペンチル、neo-ペンチル、t-ペンチル、ヘキシル、ジメチルブチル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ステアリル等の直鎖又は分枝状の炭素数１乃至２０のアルキル基、又はシクロアルキル基、好ましくはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロへプチル、シクロオクチル等の炭素数３乃至８のシクロアルキル基を表すか又はＲ1及びＲ2がこれらを結合する窒素原子と共に複素環、好ましくはアジリジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルフォリノ等を形成する。Ｒ3は水素、アルキル基、好ましくはメチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、t-ブチル、n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、t-ペンチル、ヘキシル、ジメチルブチル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ステアリル等の直鎖又は分枝状の炭素数１乃至２０のアルキル基を表す。【００１２】
本発明化合物中、好ましい化合物は以下の通りである。
５−メチルオキサルル酸〔化合物１〕
５−エチルオキサルル酸〔化合物２〕
５−ｎ−ブチルオキサルル酸〔化合物３〕
５−イソブチルオキサルル酸〔化合物４〕
５−ｔ−ブチルオキサルル酸〔化合物５〕
５−ｎ−ヘキシルオキサルル酸〔化合物６〕
５−（１、３−ジメチルブチル）オキサルル酸〔化合物７〕
５−ｎ−デシルオキサルル酸〔化合物８〕
５−シクロペンチルオキサルル酸〔化合物９〕
５−シクロヘキシルオキサルル酸〔化合物１０〕
５−メチルオキサルル酸アンモニウム塩〔化合物１１〕
５−エチルオキサルル酸アンモニウム塩〔化合物１２〕
５−メチルオキサルル酸メチルエステル〔化合物１３〕
５−メチルオキサルル酸エチルエステル〔化合物１４〕
５−ｎ−ブチルオキサルル酸メチルエステル〔化合物１５〕
５−イソブチルオキサルル酸エチルエステル〔化合物１６〕
５、５−ジメチルオキサルル酸メチルエステル〔化合物１７〕
５、５−ジメチルオキサルル酸エチルエステル〔化合物１８〕
５−シクロヘキシルオキサルル酸エチルエステル〔化合物１９〕
５−シクロヘプチルオキサルル酸エチルエステル〔化合物２０〕
Ｎ−（１−ピペリジルカルボニル）オキサム酸メチルエステル〔化合物２１〕
Ｎ−（１−ピペリジルカルボニル）オキサム酸エチルエステル〔化合物２２〕
５−メチルオキサルル酸ｎ−ブチルエステル〔化合物２３〕
５−メチルオキサルル酸イソブチルエステル〔化合物２４〕
５−メチルオキサルル酸ｎ−オクチルエステル〔化合物２５〕
５−ｎ−ブチルオキサルル酸ｎ−ブチルエステル〔化合物２６〕
５−シクロヘキシルオキサルル酸イソプロピルエステル〔化合物２７〕
５−シクロヘキシルオキサルル酸ｎ−ブチルエステル〔化合物２８〕
５−イソペンチルオキサルル酸〔化合物２９〕
５−イソペンチルオキサルル酸エチルエステル〔化合物３０〕【００１３】
上記の本発明オキサルル酸誘導体及びその製造方法は特公平６−６０１５２号公報に開示されている。また、上記の本発明化合物中、特に優れた作用を示す５−イソペンチルオキサルル酸及びそのエチルエステルは、上記先行文献に記載されていない新規な化合物であり、下記実施例に記載した製法によって製造することができる。【００１４】
本発明オキサルル酸誘導体は、前記一般式（Ｉ）で表される化合物の薬学的に許容される塩を包含し、例えば、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属、カルシウム、マグネシウム、バリウム等のアルカリ土類金属又はアルミニウム、亜鉛等との金属及びアンモニウムとの塩などが挙げられる。又、有機アミンや酸との塩であってもよい。これらの塩は公知の方法により遊離の本発明オキサルル酸誘導体より製造でき、或いは相互に変換することができる。【００１５】
また本発明化合物においてシス−トランス体、光学異性体、配座異性体等の立体異性体が存在する場合、或いは水和物や錯化合物の状態で存在する場合においても、本発明はそのいずれの立体異性体、水和物、錯化合物をも包含する。【００１６】
本発明化合物は、適当な医薬用の担体若しくは希釈剤と適宜組み合わせて医薬とすることができ、通常の如何なる方法によっても製剤化可能であり、錠剤、カプセル剤、粉末剤、液剤等の経口剤として、又は皮下、静脈内、筋肉内、直腸内、鼻腔内投与用の非経口剤として製剤化できる。処方にあたっては、本発明化合物をその薬学的に許容される塩の形で用いてもよく、本発明化合物を単独で若しくは適宜組み合わせて用いることができ、又、他の医薬活性成分との配合剤としてもよい。【００１７】
経口投与製剤には、そのまま或いは適当な添加剤、例えば乳糖、マンニット、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、クエン酸カルシウム等の慣用の賦形剤と共に、結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等のセルロース誘導体、アラビアゴム、トウモロコシデンプン、ゼラチン等の結合剤、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、その他増量剤、湿潤化剤、緩衝剤、保存剤、香料等を適宜組み合わせて錠剤、散剤、顆粒剤或いはカプセル剤とすることができる。【００１８】
また注射剤としては、注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖注射液等の水性溶剤、又は植物油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸エステル、プロピレングリコール等の非水性溶剤の溶液、懸濁液若しくは乳化液とすることができ、必要に応じ溶解補助剤、等張化剤、懸濁化剤、乳化剤、安定剤、保存剤等の通常用いられる添加剤を適宜加えてもよい。【００１９】
さらに疾患の種類や患者に応じて、その治療に最適な上記以外の剤型、例えば坐剤、吸入剤、エアゾール剤、シロップ剤、点眼剤、軟膏等の外用剤等に製剤化することができる。【００２０】
本発明化合物の望ましい投与量は、投与対象、剤形、投与方法、投与期間等によって変わるが、所望の効果を得るには、一般に成人に対して有効成分量で一日に１０乃至５０００ｍｇ、好ましくは５０乃至３０００ｍｇ経口投与することができる。非経口投与（例えば注射剤）の場合は一般的に経口投与より少量で効果が期待できるため、例えば前記の経口投与量の３乃至１０分の１の用量レベルで十分と考えられる。【００２１】
以下に本発明の好ましい実施態様を挙げる。
（１）前記一般式（Ｉ）のＲ3が水素である化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（２）上記（１）記載の化合物のうち、Ｒ1又はＲ2が水素である化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（３）上記（２）記載の化合物のうち、水素でない残りのＲ1又はＲ2がアルキル基である化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（４）上記（３）記載の化合物のうち、Ｒ1又はＲ2のアルキル基がメチル、ｎ−ヘキシル又は１、３−ジメチルブチル基である化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（５）上記（２）記載の化合物のうち、水素でない残りのＲ1又はＲ2がシクロアルキル基である化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（６）前記一般式（Ｉ）のＲ3がアルキル基である化合物を有効成分として含有する線維性疾患治療剤。
（７）上記（６）記載の化合物のうち、Ｒ1又はＲ2が水素である化合物を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（８）上記（７）記載の化合物のうち、水素でない残りのＲ1又はＲ2がアルキル基である化合物を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（９）上記（７）記載の化合物のうち、水素でない残りのＲ1又はＲ2がシクロアルキル基である化合物を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（１０）上記（９）記載の化合物のうち、Ｒ1又はＲ2のシクロアルキル基がシクロヘキシルである化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
（１１）５−イソペンチルオキサルル酸エチルエステル又はその薬学的に許容される塩。
（１２）５−イソペンチルオキサルル酸エチルエステル又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する線維性疾患用剤。
【実施例】
【００２２】
実施例１．５−イソペンチルオキサルル酸の製造
（１）３−メチルブチルアミン（25 mL、215 mmol）、尿素（51.8 g、862 mmol）、水（86 mL）、濃塩酸（20 mL）、酢酸（2 mL）の混合物を20時間過熱還流した。放冷後、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下で溜去して得られた残渣油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール ＝ １９：１）で精製後、石油エーテルから結晶化して、(3-メチルブチル)尿素（20.11 g、72%）を得た。1H-NMR (DMSO-d6) δ: 0.85 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.21-1.27 (m, 2H), 1.51-1.61 (m, 1H), 2.91-2.99 (m, 2H), 5.32 (brs, 2H), 5.83 (t, J = 4.0 Hz, 1H).【００２３】
（２）(3-メチルブチル)尿素（6.51 g、50 mmol）のTHF（100 mL）溶液に、氷冷下で塩化オキサリル(5.2 mL)のTHF（30 mL）溶液を３０分かけて滴下した後、室温で２０時間かき混ぜた。不溶物を濾去した後、濾液を減圧下で溜去した。残渣を酢酸エチルに溶かし、クロマトグラフ用シリカゲルを詰めたショートカラムを通過させた。溶出液を減圧下で溜去して得られた結晶にｎ−ヘキサンを加えて濾取して得られた粗結晶を酢酸エチル-n-ヘキサンで再結晶して、1-(3-メチルブチル)イミダゾリジン-2,4,5-トリオン（6.28 g、68%）を得た。Mp. 113-114 ℃. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 0.89 (d, J = 6.6 Hz, 6), 1.40-1.46 (m, 2H), 1.52-1.62 (m, 1H), 3.44 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 11.97 (brs, 1H).【００２４】
（３）1-(3-メチルブチル)イミダゾリジン-2,4,5-トリオン（1.0 g、5.4 mmol）を0.5 mol/Lアンモニア水（25 mL）に室温で溶かし、１時間かき混ぜた。溶液を減圧下で約10 m Lに濃縮し、酢酸エチルで洗浄した。水層を再度減圧下で濃縮して析出した固体に水（10 mL）を加えて溶かした。氷冷下で濃塩酸（0.9 mL）を徐々に加えると結晶が析出したので、これを濾取し、氷冷水（5 mL）で洗浄した。結晶を五酸化リン上、減圧下、50 ℃で24時間乾燥して、[3-(3-メチルブチル)ウレイド]オキソ酢酸（５-イソペンチルオキサルル酸：化合物２９）（0.63 g、57%）を得た。 Mp. 199-200 ℃. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 0.88 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.32-1.38 (m, 2H), 1.52-1.61 (m, 1H), 3.13-3.20 (m, 2H), 7.83 (brs, 1H), 10.35 (brs, 1H).【００２５】
実施例２．５−イソペンチルオキサルル酸エチルエステルの製造
(3-メチルブチル)尿素（6.51 g、50 mmol）のTHF（100 mL）溶液に、氷冷下でクロロオキソ酢酸エチル(6.7 mL)のTHF（30 mL）溶液を３０分かけて滴下した後、室温で２０時間かき混ぜた。溶媒を減圧下で溜去した後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（n-ヘキサン：酢酸エチル ＝ ４：１）で精製して、[3-(3-メチルブチル)ウレイド]オキソ酢酸エチル（５-イソペンチルオキサルル酸エチルエステル：化合物３０）（10.36 g、95%）を結晶として得た。 Mp.69-70 ℃. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 0.87 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.31-1.37 (m, 2H), 1.52-1.62 (m, 1H), 3.11-3.20 (m, 2H), 4.25 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 7.70 (brs, 1H), 10.52 (brs, 1H).【００２６】
実施例３．抗線維化作用１
ラット腎線維芽細胞（ＮＲＫ−４９Ｆ）を４８wellプレートに４×１０4／ｃｍ2の密度で播種し、１０％ウシ胎児血清、ペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）及びストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）を含むＤＭＥＭ培地で２４時間培養した。
培地を無血清に交換して２４時間処理を行った後、被検物質として本発明化合物の化合物７、化合物２９及び化合物３０を各々０．２ｍｍｏｌ／Ｌ、１ｍｍｏｌ／Ｌ及び５ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で加え、０．５ｎｇ／ｍＬのＴＧＦ−βで２４時間刺激した。
培養終了後、培地を除去し、４ｍｏｌ／Ｌグアニジン塩酸を各wellに加え、プレート底面から細胞及び細胞外マトリックスを回収した後、溶解液を超音波処理した。【００２７】
フィブロネクチン（ＦＮ）量の測定は、抗ラットＦＮウサギＩｇＧ、抗ラットＦＮヤギＩｇＧ及びペルオキシダーゼ標識化抗ヤギＩｇＧロバＩｇＧを組み合わせたサンドイッチＥＬＩＳＡ法で行った。サンプル中のＤＮＡを定量し、ＤＮＡ当たりのＦＮ量を求めた。正常対照（Nor）のＦＮ量を１００とした場合の各被検物質の相対増加率を求めた結果を図１に示す。試験は各被検物質について４回行い、平均値±標準誤差を求め、Dunnett検定（*）によってＴＧＦ-β対照（Cont）との有意差検定を行った（p<0.05）。【００２８】
実施例４．抗線維化作用２
培養ヒト正常メサンギウム細胞（Strain No.7540）を４８wellプレートに３×１０4／ｃｍ2の密度で播種し、１０％ウシ胎児血清、ペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）及びストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）を含むＲＰＭＩ培地で２４時間培養した。
培地を無血清に交換して２４時間処理を行った後、被検物質として本発明化合物の化合物１、化合物６、化合物７、化合物１９及び化合物２７を各々０．４ｍｍｏｌ／Ｌの濃度で加え、０．２ｎｇ／ｍＬのＴＧＦ−βで４８時間刺激した。
培養終了後、培地を除去し、４ｍｏｌ／Ｌグアニジン塩酸を各wellに加え、プレート底面から細胞及び細胞外マトリックスを回収した後、溶解液を超音波処理した。【００２９】
フィブロネクチン（ＦＮ）量の測定は、抗ヒトＦＮヤギＩｇＧ及びペルオキシダーゼ標識化抗ヒトＦＮヤギＩｇＧを組み合わせたサンドイッチＥＬＩＳＡ法で行った。サンプル中のＤＮＡを定量し、ＤＮＡ当たりのＦＮ量を求めた。正常対照とＴＧＦ−β対照のＦＮ量を各々０と１００にした場合の各被検物質の相対ＦＮ率〔＝（被験物質処理検体−正常対照）÷（ＴＧＦ−β対照−正常対照）〕の結果を図２に示す。試験は各被検物質について５〜７回行い、平均値±標準誤差を求め、Student's t検定（*）によってＴＧＦ-β対照との有意差検定を行った（p<0.05）。【００３０】
実施例５．抗線維化作用３
Wistar系雄性ラットを用い、１８％カゼイン飼料で飼育し、入荷日から９日目にアデニン１５０ｍｇ／ｋｇの投与を開始して実験終了まで継続し、腎硬化症モデル動物を作製した。アデニンは０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）に懸濁して１日１回強制経口投与した。正常対照群は普通固型飼料にて飼育した。被験物質は１％ＣＭＣで懸濁して、アデニン投与開始後６日目から１日１回強制経口投与を行った。正常対照群と発症対照群は１％ＣＭＣを１日１回強制経口投与した。被験物質の投与開始８、１５、２２、２７日後に採血および採尿を行い、２９日後に解剖を実施し、腎臓を摘出し、各パラメーターを測定した。この線維症（腎硬化症）モデルラットにおいて、腎臓重量（湿重量）は肥大に伴って増加し、組織中のコラーゲン量の指標となるヒドロキシプロリン及び線維化を誘導するＴＧＦ−βも増加する。結果の一例を表１に示す。本発明化合物は腎臓重量、ヒドロキシプロリン及びＴＧＦ−βの増加を抑制した。【００３１】
【表１】
2006134963.tif 000003
【００３２】
実施例６．単回投与毒性試験
SD系ラット（６週齢、雄性・雌性各５匹）に７５乃至６００ｍｇ／ｋｇの５−メチルオキサルル酸を静脈内投与した。その結果、６００ｍｇ／ｋｇの投与量であっても、一般症状、体重、剖検所見に全く異常が認められず、勿論死亡例は全く無かった。また、５−イソペンチルオキサルル酸エチルエステルの場合には、in vitro試験におけるＩＣ50値に対して、毒性発現時の血中濃度は８乃至１０倍であった。
【産業上の利用可能性】
【００３３】
上記薬理試験の結果から明らかなように、種々の臓器の線維化における中心的な役割を担っているＴＧＦ−βによって誘導される細胞外マトリックス産生の増加を本発明化合物は有意に抑制し、線維症モデル動物における組織の線維化を抑制した。従って、本発明化合物は優れた線維化抑制作用を有する化合物であり、種々の線維性疾患、即ち、線維症並びに硬化症等の線維症関連疾患、例えば、肺線維症、肝線維症、腎硬化症、心筋線維症、動脈硬化、強皮症やケロイド等の皮膚の線維化疾患などに対して発症を抑制する予防剤、或いは該疾患における線維化進展を抑制する治療剤として非常に有用性の高いものである。
【図１】
2006134963.tif 000005
【図２】
2006134963.tif 000006
【国際調査報告】
2006134963.tif 000007
2006134963.tif 000008
2006134963.tif 000009
2006134963.tif 000010