(57)【要約】  本発明は、亜鉛および３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類を有効成分とすることを特徴とする免疫機能増強組成物である。本発明の免疫機能増強組成物は、３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類または亜鉛をそれぞれ単独で使用する時よりも顕著に優れた免疫機能増強作用を発揮する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
亜鉛および3−O−α−D−グルコピラノシル−D−グルコースを構成単位として含有する糖類を有効成分とすることを特徴とする免疫機能増強組成物。
【請求項２】
糖類が、ニゲロース、ニゲロシルグルコースおよびニゲロシルマルトースのうち少なくとも１種を含有するニゲロオリゴ糖であることを特徴とする請求の範囲第１項に記載の免疫機能増強組成物。
【請求項３】
亜鉛とニゲロオリゴ糖の重量比が、１：２００〜２０００であることを特徴とする請求の範囲第２項に記載の免疫機能増強組成物。
【請求項４】
免疫機能増強が、免疫担当細胞の代謝活性上昇作用であることを特徴とする請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
【請求項５】
免疫機能増強が、免疫担当細胞の増殖能上昇作用であることを特徴とする請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
【請求項６】
免疫機能増強が、Ｔリンパ球の代謝活性上昇作用であることを特徴とする請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
【請求項７】
免疫機能増強が、Ｔリンパ球の増殖能上昇作用であることを特徴とする請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
【請求項８】
免疫機能増強が、Ｔリンパ球の細胞死抑制作用であることを特徴とする請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
【請求項９】
医薬または食品である請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
【請求項１０】
請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物を配合してなることを特徴とする食品。
【請求項１１】
請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物を配合してなることを特徴とする飼料。
【請求項１２】
請求の範囲第１項〜第８項のいずれかに記載の免疫機能増強組成物を配合してなることを特徴とする化粧品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、亜鉛および３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類を有効成分とすることを特徴とする免疫機能増強組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
これまで３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類についてその免疫賦活効果が報告されている（非特許文献１及び２参照）。これらの糖類を有効成分とする組成物は免疫賦活剤（特許文献１、２及び３参照）、ナチュラルキラー細胞活性化剤（特許文献４参照）、ＱＯＬ向上剤（特許文献５参照）等として公開されている。【０００３】
一方、亜鉛はヒトの生体内に存在する微量元素の中では鉄に次いで多い元素である。亜鉛の生理作用については様々な報告がなされており（非特許文献３参照）、酵素の成分や蛋白質の合成、味覚・嗅覚への関与、インスリンの生成や機能への関与、また生殖機能や免疫能の賦活に重要な役割を果たしている。特に、免疫機能全般に大きな役割を果たし、Ｔリンパ球やナチュラルキラー細胞の活性化といったリンパ球の機能を調節することが知られている（非特許文献４参照）。
【特許文献１】特開平９−５２８３４
【特許文献２】特開２００１−６４１７４
【特許文献３】特開２００２−８０３６４
【特許文献４】特開２００２−２６５３６６
【特許文献５】特開２００２−２６５３８５
【非特許文献１】Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９９，６３：３７３−３７８
【非特許文献２】Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００２，２：１５１−１５９
【非特許文献３】Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ．，２００２，７１：２５−２７
【非特許文献４】Ｊ．Ｎｕｔｒ．２００３，１３３：１４５２Ｓ−１４５６Ｓ
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、より優れた免疫増強作用を有する組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、鋭意研究を行なった結果、３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類と亜鉛を併用することで、それぞれを単独で摂取する時よりも顕著に優れた免疫機能増強作用を発揮することを知見し、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至った。【０００６】
すなわち、本発明は次の通りである。
（１）亜鉛および３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類を有効成分とすることを特徴とする免疫機能増強組成物。
（２）糖類が、ニゲロース、ニゲロシルグルコースおよびニゲロシルマルトースのうち少なくとも１種を含有するニゲロオリゴ糖であることを特徴とする前記（１）に記載の免疫機能増強組成物。
（３）亜鉛とニゲロオリゴ糖の重量比が、１：２００〜２０００であることを特徴とする前記（２）に記載の免疫機能増強組成物。
（４）免疫機能増強が、免疫担当細胞の代謝活性上昇作用であることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
（５）免疫機能増強が、免疫担当細胞の増殖能上昇作用であることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
（６）免疫機能増強が、Ｔリンパ球の代謝活性上昇作用であることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
（７）免疫機能増強が、Ｔリンパ球の増殖能上昇作用であることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
（８）免疫機能増強が、Ｔリンパ球の細胞死抑制作用であることを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
（９）医薬または食品である前記（１）〜（８）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物。
（１０）前記（１）〜（８）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物を配合してなることを特徴とする食品。
（１１）前記（１）〜（８）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物を配合してなることを特徴とする飼料。
（１２）前記（１）〜（８）のいずれかに記載の免疫機能増強組成物を配合してなることを特徴とする化粧品。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の免疫機能増強組成物は、３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類または亜鉛をそれぞれ単独で使用する時よりも顕著に優れた免疫機能増強作用を発揮する。このため、より効果的に健康を維持増進することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の免疫機能増強組成物は、亜鉛および３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類を有効成分とすることを特徴とする。
本発明で使用される３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類としては、特に限定されず、自体公知のものを用いてよい。具体的には、例えば、少なくとも１つ以上のα−１，３グルコシド結合を含むグルコース重合度２程度以上のオリゴ糖が挙げられ、好ましくはグルコース重合度２〜１０程度のオリゴ糖、より好ましくは重合度２〜７程度のオリゴ糖であるニゲロオリゴ糖が挙げられる。かかるニゲロオリゴ糖には、α−１，３グルコシド結合のみからなるオリゴ糖の他に、α−１，３グルコシド結合とそれ以外の結合（例えばα−１，１、α−１，２、α−１，４、α−１，６グルコシド結合など）とからなるオリゴ糖も包含される。中でも、本発明においては、下記式で表されるニゲロース、ニゲロシルグルコースまたはニゲロシルマルトースを用いるのがより好ましい。これらは単独で用いても、２種以上を併用してもよい。【０００９】
【化１】
2007144943.tif 000002
【００１０】
【化２】
2007144943.tif 000003
【００１１】
【化３】
2007144943.tif 000004
【００１２】
３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類は、自体公知の方法に従って容易に製造することができる。具体的には、例えば、ニゲロオリゴ糖は、下記のような公知の方法によって調製することができる。例えば、Ｍ．Ｓｔａｃｅｙ  ａｎｄ  Ｊ．Ｍ．Ｗｅｂｂｅｒ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉ，３３９−３４１，ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ（１９６２）には、微生物の生産する多糖類である、ニゲランまたはエルシナン等を基質として、酵素または酸類などを用いて加水分解してニゲロオリゴ糖を製造する方法が記載されている。また、公知のα−グルコシダーゼの糖転移・縮合反応を用いてニゲロースを調製する方法も知られている（金谷憲一他，日本農芸化学会誌，５３，３８５−３９０（１９７９）、Ｈ．Ｆｕｊｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，５２，１３４５−１３５１（１９８８）など）。更に、特開平３−２２９５８号公報には、澱粉加水分解物に、サイクロデキストリン生成酵素を作用させてニゲロースを製造する方法が開示されている。更にまた、特開平７−５９５５９号公報には、α−１，４グルコシド結合したポリサッカライドまたはオリゴサッカライドを含む基質にα−１，３グルコシド結合をもたらす糖転移酵素（具体的には、Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ属に属し、α−１，３結合をもたらす糖転移酵素を生産する真菌、例えばＡｃｒｅｍｏｎｉｕｍ  ｓｐ．Ｓ４Ｇ１３（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３７３）を常法に従い、培養することによって調製される糖転移酵素）を作用させてニゲロオリゴ糖を製造する方法が開示されている。本発明において用いるニゲロオリゴ糖は、いずれの方法で調製されたものでも良く、上記の方法に限定されない。ただし、現在までに知られている方法の中で最も経済的な面で優れていると考えられるのは、上記特開平７−５９５５９号公報に記載された糖転移酵素（ニゲロオリゴ糖生成酵素）を用いた方法であり、本発明においてもこの方法に従って調製したニゲロオリゴ糖を使用するのが好ましい。【００１３】
一方、本発明の免疫機能増強組成物の有効成分である亜鉛は、通常、亜鉛塩（例えば、硫酸亜鉛、硝酸亜鉛、リン酸亜鉛等）として供給される。
有効成分である亜鉛と３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類（以下、単に糖類ともいう。）の含有割合は、特に限定されないが、亜鉛：糖類（例えば、ニゲロオリゴ糖等）の重量比として、例えば、約１：１００〜５０００、好ましくは約１：２００〜２０００、より好ましくは約１：５００〜１５００である。本発明の免疫機能増強組成物は、亜鉛と糖類を自体公知の方法で混合（例えば、攪拌混合等）することにより製造できる。【００１４】
本発明の免疫機能増強組成物を哺乳動物や魚類に投与することによって、哺乳動物や魚類の免疫機能を増強することができる。該哺乳動物としては、ヒトが好ましいが、ヒトに限られることはなく、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ等の家畜、ニワトリ等の家禽、イヌ、ネコ等のペット動物であってもよい。該魚類としては、ハマチ等の養殖魚が好ましい。【００１５】
本発明の免疫機能増強組成物を医薬として用いる場合、経口的にも非経口的にも投与することができる。また、その投与量は、投与対象、投与ルート、患者の状態などにより差異はあるが、例えば、有効成分である糖類の量が、成人一人（体重約６０ｋｇ）に対して、一日につき、約４ｍｇ〜４０ｇ程度、好ましくは約１０ｍｇ〜２０ｇ程度、さらに好ましくは約５０ｍｇ〜１０ｇ程度であるのがよい。また、ヒト以外の哺乳動物や魚類に対しても、体重換算して同様の量を投与することができる。【００１６】
本発明の免疫機能増強組成物を医薬として使用する場合、その剤形は、経口剤（散剤、顆粒剤、丸剤、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤もしくはシロップ剤等）、または坐剤もしくは注射剤等の非経口剤であってもよい。これらの製剤は、自体公知の方法によって製造することができる。【００１７】
また、本発明の免疫機能増強組成物は、それ自体を食品（特に、機能性食品）として、あるいは飲食品または飼料に配合して使用することができる。飲食品としては、例えば、甘味料、菓子、ガム、キャンディ、ゼリー、茶またはジュース等が挙げられ、また飼料としては、ヒト以外の哺乳動物用飼料や魚類用飼料が挙げられる。【００１８】
本発明の免疫機能増強組成物の飲食品または飼料への配合量は、飲食品または飼料全体に対し、有効成分である糖類の量として、例えば、１〜８０％（W／W）程度が好ましい。【００１９】
また、本発明の免疫機能増強組成物は、化粧品に配合して使用することもできる。化粧品としては、例えば、外用ローション、外用乳液、外用クリームまたは外用ジェル等が挙げられる。【００２０】
本発明の免疫機能増強組成物の化粧品への配合量は、化粧品全体に対し、有効成分である糖類の量として、例えば、１〜２０％（W／W）程度が好ましい。【００２１】
本発明の免疫機能増強組成物が奏する免疫機能増強作用としては、例えば、免疫担当細胞の代謝活性上昇作用もしくは増殖能上昇作用、またはＴリンパ球の代謝活性上昇作用、増殖能上昇作用もしくは細胞死抑制作用等が挙げられる。【００２２】
本発明の免疫機能増強組成物は、ウイルス、バクテリア等の微生物による感染症、例えば、経口感染によるコレラ菌、毒素原性大腸菌、赤痢菌、サルモネラ、ウイルス等の感染性腸炎や、気道感染によるインフルエンザ、かぜ症候群や、口腔内感染による口内炎、歯周疾患等、また、各種悪性腫瘍、例えば、消化管や呼吸器粘膜、肝・腎等の実質臓器に発生する上皮性悪性腫瘍や、運動器や軟部組織などに発生する非上皮性悪性腫瘍の予防や治療に有効である。
【実施例】
【００２３】
以下に試験例および実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
［試験例１］
３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類であるニゲロオリゴ糖と亜鉛を用いて、免疫担当細胞の代謝活性に対するニゲロオリゴ糖と亜鉛の併用効果を検証した。亜鉛は、硫酸亜鉛を蒸留水に溶かした形で用いた。マウス（Ｂａｌｂ／ｃ、雌、１０週齢）から脾臓を無菌的に摘出し、ストレプトマイシン、ペニシリン（ＳＩＧＭＡ社製）を添加したＲＰＭＩ１６４０培地（ＧＩＢＣＯ社製）中で押しつぶし、＃２００メッシュに通して免疫担当細胞からなる脾臓細胞浮遊液を得た。脾臓細胞浮遊液の細胞数を自動血球計測装置（シスメックス社製：ＣＤＡ−５００）により測定した後、１×１０７細胞／ｍＬの濃度になるように上記のＲＰＭＩ１６４０培地で調整し、９６穴培養プレートに一穴あたり５０μＬを播種した。播種した細胞液に上記のＲＰＭＩ１６４０培地に溶解した細胞増殖刺激因子であるＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ  Ａ（ＳＩＧＭＡ社製）を最終濃度２．０μｇ／ｍＬとなるように１穴あたり５０μＬ添加した。さらに上記のＲＰＭＩ１６４０培地に溶解した亜鉛を最終濃度０または１ｎｇ／ｍＬになるように、さらに、ニゲロオリゴ糖を最終濃度０または１０００ｎｇ／ｍＬとなるように各々１穴あたり５０μＬずつ添加した。このようにして調整した培養用の免疫担当細胞を５％炭酸ガス培養器内にて３７℃で４８時間培養した。培養終了後、ＷＳＴ−１（２−（４−インドフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム，モノソジウム塩；同仁化学研究所製）を１０ｍＭの濃度になるように０．４ｍＭ  １−ｍｅｔｏｘｙ  ＰＭＳ（同仁化学研究所製）に溶解した溶液を１穴あたり１０μＬ添加し、炭酸ガス培養器内にて３時間培養して生細胞のミトコンドリアの脱水素酵素によりテトラゾリウム塩であるＷＳＴ−１から水溶性ホルマザンを形成させた。生成したホルマザン濃度を免疫担当細胞の代謝活性の指標とした。ホルマザン濃度は、マイクロプレートリーダー（コロナ電気社製：ＭＴＰ−３２）にて測定波長４１５ｎｍの吸光度により測定した（参照波長６３０ｎｍ）。その結果を表１に示す。【００２４】
【表１】
2007144943.tif 000005
表１中の数値は、吸光度（４１５ｎｍ）であり、例数３穴の平均値±標準偏差を示す。
＊：亜鉛およびニゲロオリゴ糖非添加群に対して有意差あり（ダネットの検定）。【００２５】
表１から明らかなように、免疫機能増強作用を有するニゲロオリゴ糖あるいは亜鉛単独ではマウス免疫担当細胞の代謝活性をほとんど上昇させない条件下で両者を併用すると、細胞代謝活性の有意な上昇が認められた。このような細胞代謝活性の上昇は細胞増殖を大きく反映することが知られており、免疫担当細胞、特にＴリンパ球やＢリンパ球などのリンパ球の機能発現には細胞増殖が必須であるので、ニゲロオリゴ糖と亜鉛の併用による明らかな免疫機能増強作用が示された。さらに、細胞代謝活性の上昇は細胞死の抑制も反映しており、このような機序を介した当該組成物の免疫増強作用も示された。【００２６】
［試験例２］
本試験例では、試験例１と同様にニゲロオリゴ糖と亜鉛を用いて、免疫担当細胞の長期間培養による代謝活性に対するニゲロオリゴ糖と亜鉛の併用効果を検証した。マウス（Ｂａｌｂ／ｃ、雌、１０週齢）から脾臓を無菌的に摘出し、ストレプトマイシン、ペニシリン（ＳＩＧＭＡ社製）を添加したＲＰＭＩ１６４０培地（ＧＩＢＣＯ社製）中で押しつぶし、＃２００メッシュに通して免疫担当細胞からなる脾臓細胞浮遊液を得た。脾臓細胞浮遊液の細胞数を自動血球計測装置（シスメックス社製：ＣＤＡ−５００）により測定した後、１×１０７細胞／ｍＬの濃度になるように上記のＲＰＭＩ１６４０培地で調整し、９６穴培養プレートに一穴あたり５０μＬを播種した。播種した細胞液に上記のＲＰＭＩ１６４０培地に溶解した細胞増殖刺激因子であるＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ  Ａ（ＳＩＧＭＡ社製）を最終濃度０．４μｇ／ｍＬとなるように１穴あたり５０μＬ添加した。さらに上記のＲＰＭＩ１６４０培地に溶解した亜鉛を最終濃度０または１または２ｎｇ／ｍＬになるように、さらに、ニゲロオリゴ糖を最終濃度０または１０００ｎｇ／ｍＬとなるように各々１穴あたり５０μＬずつ添加した。このようにして調整した培養用の免疫担当細胞を５％炭酸ガス培養器内にて３７℃で１４４時間培養した。培養終了後、ＷＳＴ−１（２−（４−インドフェニル）−３−（４−ニトロフェニル）−５−（２，４−ジスルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム，モノソジウム塩；同仁化学研究所製）を１０ｍＭの濃度になるように０．４ｍＭ  １−ｍｅｔｏｘｙ  ＰＭＳ（同仁化学研究所製）に溶解した溶液を１穴あたり１０μＬ添加し、炭酸ガス培養器内にて４．５時間培養して生細胞のミトコンドリアの脱水素酵素によりテトラゾリウム塩であるＷＳＴ−１から水溶性ホルマザンを形成させた。生成したホルマザン濃度を免疫担当細胞の代謝活性の指標とした。ホルマザン濃度は、マイクロプレートリーダー（コロナ電気社製：ＭＴＰ−３２）にて測定波長４１５ｎｍの吸光度により測定した（参照波長６３０ｎｍ）。その結果を表２に示す。【００２７】
【表２】
2007144943.tif 000006
表２中の数値は、吸光度（４１５ｎｍ）であり、例数３〜６穴の平均値を示す。【００２８】
表２から明らかなように、長期間の培養においてニゲロオリゴ糖あるいは亜鉛単独ではマウス免疫担当細胞の代謝活性をほとんど上昇させない条件下で、亜鉛とニゲロオリゴ糖を１対１０００あるいは１対５００の割合で併用すると亜鉛の濃度依存的に細胞代謝活性の上昇が認められた。すなわち、長期培養におけるマウス免疫担当細胞に対しても当該組成物による免疫増強作用が示された。【００２９】
［試験例３］
試験例１と同様にニゲロオリゴ糖と亜鉛を用いて、ヒト末梢血単核球細胞の細胞代謝活性に対するニゲロオリゴ糖と亜鉛の相乗効果を検証した。健常な成人男子より採取した血液２０ｍＬをカルシウム・マグネシウム不含リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で２倍に希釈した後、３０ｍＬのＦｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ（ＧＥヘルスケア  バイオサイエンス社製）上に界面を乱さないように静かに重層し、４００×ｇ、２０℃の条件で４０分間遠心分離を行った。遠心後、中間層に存在するリンパ球と単球をパスツールピペットで慎重に回収し、回収した細胞懸濁液を１０倍量のＰＢＳで２度洗浄した。得られた単核球細胞の細胞数を自動血球計測装置（シスメックス社製；ＣＤＡ−５００）により測定した後、２×１０６細胞／ｍＬの濃度になるように１０％ウシ胎児血清、ストレプトマイシン、ペニシリンを含有するＲＰＭＩ１６４０培地で調整し、９６穴培養プレートに一穴あたり５０μＬを播種した。播種した細胞液に上記のＲＰＭＩ１６４０培地に溶解したＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ  Ａ（ＳＩＧＭＡ社製）を最終濃度２．０μｇ／ｍＬとなるように１穴あたり５０μＬ添加した。さらに上記のＲＰＭＩ１６４０培地に溶解した亜鉛を最終濃度０および１０ｎｇ／ｍＬになるように、さらに、ニゲロオリゴ糖を最終濃度０および１０μｇ／ｍＬとなるように各々１穴あたり５０μＬずつ添加した。このようにして調整したヒト末梢血単核球細胞を５％炭酸ガス培養器内にて３７℃で４８時間培養した。培養終了後、ＷＳＴ−１（同人化学研究所製）を１０ｍＭの濃度になるように０．４ｍＭ  １−ｍｅｔｏｘｙ  ＰＭＳ（同仁化学研究所製）に溶解した溶液を１穴あたり１０μＬ添加し、炭酸ガス培養器内にて１．５時間培養して生細胞のミトコンドリアの脱水素酵素によりテトラゾリウム塩であるＷＳＴ−１から水溶性ホルマザンを形成させた。生成したホルマザン濃度をヒト末梢血単核球細胞の代謝活性の指標とした。ホルマザン濃度は、マイクロプレートリーダー（コロナ電気社製：ＭＴＰ−３２）にて測定波長４１５ｎｍの吸光度により測定した（参照波長６３０ｎｍ）。その結果を表３に示す。【００３０】
【表３】
2007144943.tif 000007
表３中の数値は、吸光度（４１５ｎｍ）であり、例数３穴の平均値±標準偏差を示す。
＊：亜鉛およびニゲロオリゴ糖非添加群に対して有意差あり（ダネットの検定）。【００３１】
表３から明らかなように、ニゲロオリゴ糖あるいは亜鉛単独ではヒト免疫担当細胞の代謝活性をほとんど上昇させないような条件下で、亜鉛とニゲロオリゴ糖を１対１０００の割合で併用すると細胞代謝活性の有意な上昇が認められた。すなわち、ヒト末梢血単核球細胞を用いた実験においてもニゲロオリゴ糖と亜鉛からなる組成物の免疫機能増強作用が示された。【００３２】
［実施例１］
下記表４に記載の配合量にて、１錠あたりの重量が７００ｍｇとなるように、各原料をよく混合した後、打錠して錠剤を製造した。【００３３】
【表４】
2007144943.tif 000008
【００３４】
［実施例２］
下記表５に記載の配合量にて各原料をよく混合し、粉末状の乳牛用濃厚飼料を製造した。【００３５】
【表５】
2007144943.tif 000009
【００３６】
［実施例３］
下記表６に記載の配合量にて、１粒あたりの重量が５ｇとなるように、各原料をよく混合した後、ソフトキャンディーを製造した。【００３７】
【表６】
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【産業上の利用可能性】
【００３８】
本発明の免疫機能増強組成物は、３−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコースを構成単位として含有する糖類または亜鉛をそれぞれ単独で使用する時よりも顕著に優れた免疫機能増強作用を発揮する。
【国際調査報告】
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