(57)【要約】  本発明によれば、経口摂取にて顕著な腫瘍抑制作用を発揮する、キク科植物、詳細にはナツシロギクの抽出物を含む飲食物および医薬組成物が提供される。さらに、キク科植物、詳細にはナツシロギクの抽出物を患者に投与することを特徴とする腫瘍の抑制方法、および腫瘍を抑制するための医薬組成物の製造におけるキク科植物、詳細にはナツシロギクの抽出物の使用なども提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
キク科植物の抽出物を含有する、腫瘍を抑制するための飲食物。
【請求項２】
キク科植物がナツシロギクである、請求項１記載の飲食物。
【請求項３】
腫瘍が転移性のものである、請求項１または２記載の飲食物。
【請求項４】
サプリメントである、請求項１〜３のいずれか１項記載の飲食物。
【請求項５】
キク科植物の抽出物を含有する、腫瘍を抑制するための医薬組成物。
【請求項６】
キク科植物がナツシロギクである、請求項５記載の医薬組成物。
【請求項７】
腫瘍が転移性のものである、請求項５または６記載の医薬組成物。
【請求項８】
キク科植物の抽出物を摂食することを特徴とする、腫瘍を抑制する方法。
【請求項９】
キク科植物の抽出物が飲食物またはサプリメントとして提供される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
キク科植物がナツシロギクである、請求項８または９記載の方法。
【請求項１１】
腫瘍が転移性のものである、請求項８ないし１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
キク科植物の抽出物を患者に投与することを特徴とする、患者における腫瘍の抑制方法。
【請求項１３】
キク科植物がナツシロギクである、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
腫瘍が転移性のものである、請求項１２または１３記載の方法。
【請求項１５】
腫瘍の抑制のための飲食物の製造における、キク科植物の抽出物の使用。
【請求項１６】
飲食物がサプリメントである請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
キク科植物がナツシロギクである、請求項１５または１６記載の方法。
【請求項１８】
腫瘍が転移性のものである、請求項１５ないし１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１９】
腫瘍の抑制のための医薬組成物の製造における、キク科植物の抽出物の使用。
【請求項２０】
キク科植物がナツシロギクである、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
腫瘍が転移性のものである、請求項１９または２０記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍抑制作用を有する飲食物および医薬組成物、ならびに腫瘍の抑制方法などに関する。詳細には、キク科植物の抽出物を含有する飲食物および医薬組成物、ならびにキク科植物の抽出物を患者に投与することを特徴とする腫瘍の抑制方法、および腫瘍を抑制するための医薬組成物の製造におけるキク科植物の抽出物の使用などに関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍は最も治療が困難な疾病の１つとされ、その治療に関して様々な研究がなされ、新たな治療法や治療薬が開発され、治療成績も向上している。しかしながら、これらの治療法や治療薬の多くは患者への負担が大きく、副作用も大きい。とりわけ、転移性の腫瘍は治療が困難であり、多くの研究がなされている（非特許文献１等参照）。最近になって、体に優しい癌治療として、免疫細胞療法や漢方を用いた治療、あるいはキノコ抽出物や植物抽出物に由来する健康食品等が開発されているが、有効性が疑問視されている。
【非特許文献１】Ann F. Chambers et al. "Clinical Targets for Anti-Metastasis Therapy" in Advances in CANCER RESEARCH (2000), pages 91-121 (Academic Press).
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明の解決課題は、有効でしかも患者に優しい腫瘍の治療を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
上記事情および課題に鑑みて本発明者らは鋭意研究を重ね、キク科植物、詳細にはナツシロギクの抽出物を動物に経口投与した場合に顕著な腫瘍抑制作用を見出し、本発明を完成するに至った。
【発明の効果】
【０００５】
本発明によれば、経口摂取にて顕著な腫瘍抑制作用を発揮し、しかも安全性の高い、キク科植物、詳細にはナツシロギクの抽出物を含む飲食物および医薬組成物が提供される。さらに、キク科植物、詳細にはナツシロギクの抽出物を患者に投与することを特徴とする腫瘍の抑制方法、および腫瘍を抑制するための医薬組成物の製造におけるキク科植物、詳細にはナツシロギクの抽出物の使用なども提供される。したがって、有効で体に優しい腫瘍抑制治療が提供される。【０００６】
すなわち、本発明は、下記のものを提供する：
（１）キク科植物の抽出物を含有する、腫瘍を抑制するための飲食物；
（２）キク科植物がナツシロギクである、（１）記載の飲食物；
（３）腫瘍が転移性のものである、（１）または（２）記載の飲食物；
（４）サプリメントである、（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物；
（５）キク科植物の抽出物を含有する、腫瘍を抑制するための医薬組成物；
（６）キク科植物がナツシロギクである、（５）記載の医薬組成物；
（７）腫瘍が転移性のものである、（５）または（６）記載の医薬組成物；
（８）キク科植物の抽出物を摂食することを特徴とする、腫瘍を抑制する方法；
（９）キク科植物の抽出物が飲食物またはサプリメントとして提供される、（８）記載の方法；
（１０）キク科植物がナツシロギクである、（８）または（９）記載の方法；
（１１）腫瘍が転移性のものである、（８）ないし（１０）のいずれかに記載の方法；
（１２）キク科植物の抽出物を患者に投与することを特徴とする、患者における腫瘍の抑制方法；
（１３）キク科植物がナツシロギクである、（１２）記載の方法；
（１４）腫瘍が転移性のものである、（１２）または（１３）記載の方法；
（１５）腫瘍の抑制のための飲食物の製造における、キク科植物の抽出物の使用；
（１６）飲食物がサプリメントである（１５）記載の方法；
（１７）キク科植物がナツシロギクである、（１５）または（１６）記載の方法；
（１８）腫瘍が転移性のものである、（１５）ないし（１７）のいずれかに記載の方法；
（１９）腫瘍の抑制のための医薬組成物の製造における、キク科植物の抽出物の使用；
（２０）キク科植物がナツシロギクである、（１９）記載の方法；
（２１）腫瘍が転移性のものである、（１９）または（２０）記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、腫瘍マウスにナツシロギク抽出物またはパルテノライドを投与した場合の生存率の経時変化を示すグラフである。実線はビヒクル対照群、破線はパルテノライド４０ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群、１点破線はナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群である。ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日投与群はビヒクル対照群との間で有意差を示した（ｐ＜０．０５，Ｌｏｇ−Ｒａｎｋ  ｔｅｓｔ）。
【図２】図２は、腫瘍原発巣の大きさを経時的に観察した結果を示すグラフである。黒丸はビヒクル対照群、白四角はパルテノライド４０ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群、黒三角はナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群である。縦棒は標準偏差を示す。
【図３】図３は、腫瘍マウスにナツシロギク抽出物またはシスプラチンを投与した場合の体重の経時変化を示すグラフである。黒丸はビヒクル対照群、白四角はナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群、黒四角はナツシロギク抽出物８８８ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群、白三角はシスプラチン１０ｍｇ／ｋｇ／日腹腔内投与群である。＊はｐ＜０．０５で、＊＊はｐ＜０．０１で対照群との有意差があることを示す（Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ−検定の後Ｆ−検定）。
【図４】図４は、腫瘍マウスにナツシロギク抽出物またはシスプラチンを投与した場合の生存率の経時変化を示すグラフである。実線はビヒクル対照群、１点破線はナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群、２点破線はナツシロギク抽出物８８８ｍｇ／ｋｇ／日経口投与群、点線はシスプラチン１０ｍｇ／ｋｇ／日腹腔内投与群である。ナツシロギク抽出物８８８ｍｇ／ｋｇ／日投与群はビヒクル対照群との間で有意差を示した（ｐ＜０．０５，Ｌｏｇ−Ｒａｎｋ  ｔｅｓｔ）。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明は、セスキテルペンラクトン類を含む植物の抽出物を含有する、腫瘍を抑制するための飲食物に関するものである。ここで、腫瘍を抑制するとは、腫瘍の治療のみならず予防も包含する。本発明の飲食物に使用される植物抽出物はセスキテルペンラクトン類を含む植物の抽出物であれば、植物の種類は特に制限はない。セスキテルペンラクトンを多く含む植物の例としては、キク科植物が挙げられ、例えばヨモギ属の植物やタンポポなどが挙げられる。したがって、本発明は１の態様において、キク科植物の抽出物を含有する、腫瘍を抑制するための飲食物を提供する。セスキテルペンラクトン類のなかでもパルテノライドはこれまで種々の生理活性を有することが報告されている物質であり、特開２００５−３５９５１に示すように腫瘍の転移を抑制し、動物の延命効果を発揮することが示されている。したがって、パルテノライド含有量の高い植物を用いることが好ましい。そのような植物としてはキク科植物、好ましくはヨモギ属の植物、特に好ましくはナツシロギク（Tanacetum parthenium）（フィーバーフュ−ともいう）が挙げられる。したがって、本発明に使用される特に好ましい植物抽出物はナツシロギクの抽出物である。ナツシロギクの植物体、特に葉には通常０．２〜０．９％程度のパルテノライドが含まれている。驚くべきことに、ナツシロギク抽出物を動物に経口投与した場合に、パルテノライドに換算すると極めて少量のパルテノライドしか投与しない場合であっても、パルテノライド単品の場合よりも優れた腫瘍抑制効果が得られることが判明した（実施例参照）。【０００９】
植物の抽出物は一般的方法により得ることができる。抽出部位は植物の地上部であればいずれの部位でもよいが、ナツシロギクなどのキク科植物の場合、好ましい抽出部位は葉である。植物をそのまま溶媒に浸漬して抽出物を得てもよいが、破砕してから内容物を抽出するほうが抽出効率が高い。植物は生のままでも、乾燥したものであってもよい。乾燥には、温風乾燥、風乾などの公知の乾燥方法を用いることができる。植物の破砕手段は各種のものが使用可能である。例えば、手もみ、ポッター−エルベージェムホモジナイザーなどのホモジナイザー、ワーリングブレンダーなどのブレンダー、ダイノーミルなどの破砕器、フレンチプレス、乳鉢および乳棒、らいかい器、液体窒素による凍結および破砕、超音波処理などの手段により植物を破砕することができる。植物の破砕物を適当な媒体に懸濁し、内容物の抽出を行う。所望により、抽出時に撹拌してもよい。懸濁・抽出媒体としては、エーテル、メタノール、エタノール、あるいはエタノールと水の混合物などが挙げられる。懸濁媒体は、毒性の低いもの、あるいは無毒であるものが好ましい。かかる観点から、エタノール、あるいはエタノールと水の混合物が特に好ましい懸濁・抽出媒体として挙げられる。懸濁・抽出時の温度、時間などの抽出条件は植物の種類、量などに応じて選択することができる。通常には、常温・常圧で、数時間ないし数日間抽出する。また、植物の地上部、例えば、葉や茎などをそのまま、温風乾燥、風乾などの公知の乾燥方法により乾燥させ、粉砕することにより粉末化したものを、本発明の飲食物や医薬組成物に使用してもよい。【００１０】
得られた抽出物をそのまま使用してもよく、必要ならば、得られた抽出物を、デカンテーション、ろ過、または遠心分離などの公知方法に付して固形分および粒子状物質を除去することができる。得られた抽出物を、例えばエバポレーションなどの公知方法により濃縮してもよい。得られた抽出物を、公知方法により乾燥させて、粉末等の固体としてもよい。また、得られた抽出物を、例えば各種クロマトグラフィーや沈殿法などの公知方法により、さらに精製して用いてもよい。【００１１】
本発明の飲食物に使用する植物抽出物は上記のようにして得ることができるが、ナツシロギク抽出物は市販もされており、これを使用してもかまわない。これらの抽出物は、使用形態や目的等に応じて、公知方法を用いて種々の形態とすることができ、液体、半固体、固体（例えば凍結乾燥粉末などの粉末）などに調製することができる。【００１２】
キク科植物抽出物、特にナツシロギク抽出物を種々の飲食物に配合して、本発明の飲食物を得ることができる。これらのキク科植物抽出物は天然物由来のため毒性が低く、あるいは無毒であり、あらゆる飲食物に配合することができる。例えば、抽出物をジュースやハーブ系調味料などに配合してもよい。本発明の飲食物は、健康食品、栄養機能食品、あるいは特定保健用食品（いわゆる「トクホ」）などにすることができる。【００１３】
とりわけ、本発明の飲食物の好ましい形態として、サプリメントが挙げられる。サプリメントの形状は、経口摂取可能な形状であればいずれの形状であってもよく、例えば、一般の食品の形状であってもよく、錠剤、カプセル剤、顆粒、粉末（例えば凍結乾燥粉末等）、懸濁液、ドリンク剤、エリキシル、チュアブル形態、ゼリー状などの形状であってもよい。これらのサプリメントは、食品分野や製薬分野で用いられているプロセスに準じて製造することができる。例えば、錠剤形状のサプリメントを製造する場合には、製薬分野で用いられている混合、乾燥、打錠等の一般的なプロセスを用いることができる。また例えば、カプセル剤の形状の場合には、混合、カプセル封入等の一般的なプロセスを用いることができる。ソフトカプセル、ハードカプセルも目的に応じて適宜選択することができる。液体のサプリメントを製造するにはエタノール等の毒性の低い媒体に抽出物を溶解ないし懸濁することができる。粉末や顆粒のサプリメントを製造するには、やはり通常の混合、乾燥、粉砕、ふるい分けなどのプロセスを用いることができる。サプリメントの製造に担体や賦形剤を用いる場合には、その種類や量は製薬分野の慣習に準じて選択することができる。固体の担体または賦形剤としては、例えばタルク、カルボキシメチルセルロース、ショ糖、小麦粉などがある。液体の担体としては、例えば水、エタノール、食用油脂などがある。【００１４】
本発明の飲食物はあらゆる腫瘍の抑制に効果がある。本発明の植物抽出物中にセスキテルペンラクトンが含まれていることから、特開２００５−３５９５１の場合と同様に、本発明の飲食物もまた、腫瘍の抑制、特に腫瘍の転移抑制に効果を発揮し、動物の延命を促進する。【００１５】
１日あたりのキク科植物抽出物の摂取量または摂食量は、含有されるセスキテルペンラクトン類、特にパルテノライド量に依存する。ナツシロギク抽出物であれば、成人（体重７０ｋｇ）の場合１日あたり、０．０５ｇ〜５０ｇ程度を摂取するのが一般的であり、０．１５ｇ〜１５ｇ程度を摂取または摂食するのが適当である。【００１６】
本発明の飲食物やサプリメント中には、キク科植物抽出物のみならず、１種またはそれ以上の他の有効成分が混合されていてもよい。例えば、抗腫瘍剤（例えば、フルオロウラシル、ブレオマイシン、パクリタキセル、シスプラチンなど）、ホルモン剤（例えば、タモキシフェン、ホスフェストロールなど）、免疫賦活剤（例えば、アラビノキシラン、キトサン、エゾウコギなど）等の化学療法剤と本発明の飲食物とを併用してもよい。例えば、すでに化学療法、外科療法、放射線療法、ホルモン療法、免疫療法などの治療を受けている人が、本発明の飲食物を摂食することにより、治療効果を促進することも可能である。本発明の飲食物を併用すれば、薬物の投与量を低減でき、患者に優しい治療を実現することができる。【００１７】
本発明の飲食物はヒト用のみならず、ヒト以外の動物の飼料も包含する。【００１８】
本発明は、さらなる態様において、キク科植物抽出物、好ましくはナツシロギク抽出物を含有する腫瘍抑制用の医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物中の有効成分は、上記のキク科植物抽出物、好ましくはナツシロギク抽出物である。また、有効成分として、これらの抽出物を精製してパルテノライド含量を高めたものを用いてもよい。【００１９】
本発明の医薬組成物を種々の剤形に処方することができる。有効成分としてナツシロギク抽出物などのキク科植物の抽出物を用いる場合には、本発明の医薬組成物は経口投与に適した剤形とすることが好ましく、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒、粉末、ドリンク剤などとすることができる。また、有効成分としてパルテノライドのようなセスキテルペンラクトン類を用いる場合には、本発明の医薬組成物は経口投与および局所投与に適した剤形とするのが好ましいが、他の投与経路による投与も可能である。これらの剤形は製薬分野において公知の方法により製造することができる。【００２０】
本発明の医薬組成物はあらゆる腫瘍の抑制に効果がある。本発明の植物抽出物中にセスキテルペンラクトンが含まれていることから、特開２００５−３５９５１の場合と同様に、本発明の医薬組成物もまた、腫瘍の抑制、特に腫瘍の転移抑制に効果を発揮し、動物の延命を促進する。【００２１】
本発明の医薬組成物中の有効成分がキク科植物抽出物の場合、ナツシロギク抽出物を例にとるとその１日の投与量は、成人（体重７０ｋｇ）の場合１日あたり、０．０５ｇ〜５０ｇ程度が一般的であり、０．１５ｇ〜１５ｇ程度が適当である。これらの投与量は、患者の症状、疾患部位、性別、年齢、体重、副作用の有無、他に受けている治療等の因子に応じて医師が適宜変更できるものである。【００２２】
本発明の医薬組成物中には、キク科植物抽出物やパルテノライドのみならず、１種またはそれ以上の他の有効成分が混合されていてもよい。例えば、抗腫瘍剤（例えば、フルオロウラシル、ブレオマイシン、パクリタキセル、シスプラチンなど）、ホルモン剤（例えば、タモキシフェン、ホスフェストロールなど）、免疫賦活剤（例えば、アラビノキシラン、キトサン、エゾウコギなど）等の化学療法剤と本発明の医薬組成物とを併用してもよい。例えば、すでに化学療法、外科療法、放射線療法、ホルモン療法、免疫療法などの治療を受けている人が、本発明の医薬組成物を投与することにより、治療効果を促進することも可能である。本発明の医薬組成物を併用すれば、薬物の投与量を低減でき、患者に優しい治療を実現することができる。【００２３】
本発明の医薬組成物はヒト用のみならず、ヒト以外の動物用の医薬組成物、例えば、獣医用の医薬組成物も包含する。【００２４】
本発明は、さらなる態様において、キク科植物の抽出物を摂食することを特徴とする、腫瘍を抑制する方法に関する。摂食とは、口から飲食することをいう。通常には、キク科植物の抽出物は飲食物の形態で提供されるが、サプリメントの形態で提供されてもよい。飲食物やサプリメントの形態については上で説明したとおりである。【００２５】
上記方法におけるキク科植物の抽出物の摂食量は上で説明したとおりである。【００２６】
上記方法において好ましいキク科植物の抽出物はナツシロギク抽出物である。【００２７】
上記方法において、キク科植物抽出物のみならず、１種またはそれ以上の他の有効成分を併用してもよい。他の有効成分は上で列挙したものであってもよい。【００２８】
上記方法により抑制される好ましい腫瘍は転移性腫瘍である。【００２９】
上記方法はヒトのみならずヒト以外の動物にも適用できる。【００３０】
本発明は、さらなる態様において、キク科植物の抽出物を患者に投与することを特徴とする、患者における腫瘍の抑制方法に関する。キク科植物の抽出物をそのまま患者に与えてもよいが、好ましくは医薬組成物の形態として患者に与える。医薬組成物の剤形および投与経路は、本発明の医薬組成物に関して上で説明したとおりである。【００３１】
上記方法におけるキク科植物の抽出物の投与量は上で説明したとおりである。【００３２】
上記方法において好ましいキク科植物の抽出物はナツシロギク抽出物である。【００３３】
上記方法において、キク科植物の抽出物のみならず、１種またはそれ以上の他の有効成分を併用してもよい。他の有効成分は上で列挙したものであってもよい。【００３４】
上記方法により抑制される好ましい腫瘍は転移性腫瘍である。【００３５】
上記方法はヒトのみならずヒト以外の動物にも適用できる。【００３６】
本発明は、さらなる態様において、腫瘍の抑制のための飲食物の製造における、キク科植物の抽出物の使用を提供する。飲食物はサプリメントの形態であってもよい。飲食物やサプリメントの形態については上で説明したとおりである。【００３７】
上記使用におけるキク科植物の抽出物の摂取量は上で説明したとおりである。【００３８】
上記使用において好ましいキク科植物の抽出物はナツシロギク抽出物である。【００３９】
上記使用において、キク科植物抽出物のみならず、１種またはそれ以上の他の有効成分を併用してもよい。他の有効成分は上で列挙したものであってもよい。【００４０】
上記使用により抑制される好ましい腫瘍は転移性腫瘍である。【００４１】
上記使用はヒトのみならずヒト以外の動物にも適用できる。【００４２】
本発明は、さらなる態様において、腫瘍の抑制のための医薬組成物の製造における、キク科植物の抽出物の使用を提供する。この使用により製造される医薬組成物の形態、投与経路、投与すべきキク科植物の抽出物の量は上で説明したとおりである。【００４３】
上記使用において好ましいキク科植物の抽出物はナツシロギク抽出物である。【００４４】
上記使用において、キク科植物抽出物のみならず、１種またはそれ以上の他の有効成分を併用してもよい。他の有効成分は上で列挙したものであってもよい。【００４５】
上記使用により抑制される好ましい腫瘍は転移性腫瘍である。【００４６】
上記使用はヒトのみならずヒト以外の動物にも適用できる。【００４７】
なお、本明細書において、腫瘍の抑制とは、腫瘍の発生を予防、防止または抑制すること、腫瘍の発達を抑制または停止させること、腫瘍の転移を抑制または無くすことを包含する。【００４８】
以下に実施例を示して本発明をより具体的かつ詳細に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
【実施例１】
【００４９】
実施例１：ナツシロギク抽出物およびパルテノライドの腫瘍マウス生存率上昇効果
実験方法および材料
ナツシロギク抽出物はHANDA FINE CHEMICALS社製のFeverfew Extract（バッチ番号：０５１０１６−１０７）を使用した。この抽出物中のパルテノライド含量は約０．９％であった。パルテノライドはsigma社製のもの（純度９０％以上）を用いた。ナツシロギク抽出物を０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液中に溶解して動物に金属製ゾンデを用いて経口投与した（１日１回、投与体積１０ｍＬ／ｋｇ／回）。ナツシロギク抽出物の投与量は２２２ｍｇ／ｋｇ／日、パルテノライドの投与量は４０ｍｇ／ｋｇ／日とした。ビヒクル対照群には０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液を与えた。各実験あたりの動物数は１０匹とした。【００５０】
使用動物はオスのC3H/HeN Slcマウス（三協ラボサービス株式会社）であり、３週齢、体重９〜１４ｇのものを馴化して４週齢で実験に使用した。実験期間中は動物に固形飼料ＭＦ（オリエンタル酵母株式会社製）およびフィルター滅菌した水道水を自由に与えた。【００５１】
腫瘍モデルを以下のようにして作製した。４週齢のあらかじめ除毛したマウスの背部に１ｘ１０５個（１００μＬ中）のマウス腫瘍細胞（骨肉腫細胞株のＬＭ８細胞）を皮下注射して腫瘍モデルを作製した。腫瘍モデルを作製した後、８週間にわたり１日１回ナツシロギク抽出物およびビヒクルを経口投与し、生存率を算出した。【００５２】
実験結果
実験結果を図１に示す。ナツシロギク抽出物投与群において延命効果が見られ、特にナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日投与群における延命効果が大きく、パルテノライド４０ｍｇ／ｋｇ／日投与群よりも延命効果が大きかった（５０日目でビヒクル対照群の生存率が約０．１であるのに対し、ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日投与群の生存率は約０．４５であった）。ナツシロギク抽出物中のパルテノライド含量を０．９％とすると、ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日という投与量はパルテノライド２．０ｍｇ／ｋｇ／日に相当する。抽出物を経口投与した場合に高い腫瘍抑制効果が得られたことは驚くべきことである。その理由としてはナツシロギク抽出物中に含まれる他の成分による相乗作用が考えられる。また、抽出物中の精油成分がうまく作用したとも考えられる。【００５３】
上記実験に用いたナツシロギク抽出物の安全性について調べた。試験方法はＯＥＣＤ化学テストガイドライン（ＴＧ４２０）の固定用量法とし、Ｓｌｃ：ＩＣＲ系のメスのマウスを用いた。その結果、ナツシロギク抽出物２０００ｍｇ／ｋｇ用量でも動物の死亡例はなく、一般状態にも異常は認められず、体重増加も順調であった。これらの結果から、ナツシロギク抽出物のＬＤ５０値は２０００ｍｇ／ｋｇ用量以上と評価された。【００５４】
また、上記実験に用いたナツシロギク抽出物の変異原性を、検定菌としてSalmonella typhimurium TA100, TA1535, TA98, TA1537およびEscherichia coli WP2 uvrAを用い、Ｓ９mix非存在下および存在下で調べた。その結果、用量５０００μｇ／プレートでも変異原性は認められなかった。これらの結果から、ナツシロギク抽出物はきわめて安全性の高いものであることがわかった。
【実施例２】
【００５５】
実施例２：ナツシロギク抽出物およびパルテノライドの腫瘍転移抑制効果
実験方法および材料
ナツシロギク抽出物およびパルテノライドは実施例１と同じものを使用した。動物への投与方法も実施例１と同じであった。投与量はナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日、パルテノライド４０ｍｇ／ｋｇ／日とし、ビヒクル対照群には０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液を経口投与した。【００５６】
使用動物はオスのC3H/HeN Slcマウス（三協ラボサービス株式会社）であり、３週齢、体重１０．３〜１３．６ｇのものを馴化して５週齢で実験に使用した。実験期間中は動物に固形飼料ＭＦ（オリエンタル酵母株式会社製）およびフィルター滅菌した水道水を自由に与えた。【００５７】
腫瘍モデルを以下のようにして作製した。５週齢のあらかじめ除毛したマウスの背部に１ｘ１０５個（１００μＬ中）のマウス腫瘍細胞（骨肉腫細胞株のＬＭ８細胞）を皮下注射して腫瘍モデルを作製した。腫瘍モデルを作製した後、１日１回ナツシロギク抽出物、パルテノライドおよびビヒクルを経口投与し、死亡例が認められ、なおかつ肺への転移が認められた時点（処置開始から３４日目）で動物の原発性腫瘍、肺および肝臓を取り出し、パラフィン包埋を行った。肺の標本は左葉の中心部を水平方向に薄切し、ヘマトキシリン・エオジン（ＨＥ）染色を行い、顕微鏡下で写真を撮り、写真をコンピューターに取り込み、画像解析ソフト（Image Tool ver.3.00, UTHSCSA）を用いて肺面積および転移巣面積を求め、肺面積に対する転移巣面積の割合（％）を算出した。【００５８】
実験結果
実験結果を表１に示す。【００５９】
【表１】
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【００６０】
ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日投与群において肺への転移面積が最も小さく、転移巣面積の割合はわずか０．２４％であった。パルテノライド４０ｍｇ／ｋｇ／日投与群においても肺への転移抑制効果が見られたが、ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日投与群よりも効果が劣っており、転移巣面積の割合は９．３５％であった。一方、ビヒクル対照群においては転移巣面積の割合は２１．４８％であった。ナツシロギク抽出物中のパルテノライド含量を０．９％とすると、ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日という投与量はパルテノライド２．０ｍｇ／ｋｇ／日に相当する。この実験においても抽出物を経口投与した場合に顕著な腫瘍転移抑制効果が得られることがわかった。
【実施例３】
【００６１】
実施例３：ナツシロギク抽出物およびパルテノライドの原発巣縮小効果
実験方法および材料
ナツシロギク抽出物およびパルテノライドは実施例１および２と同じものを使用した。動物への投与方法も実施例１および２と同じであった。投与量はナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日、パルテノライド４０ｍｇ／ｋｇ／日とし、ビヒクル対照群には０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液を与えた。使用動物も実施例２と同じであり、一群につき８匹を使用した。【００６２】
使用動物はオスのC3H/HeN Slcマウス（三協ラボサービス株式会社）であり、３週齢、体重１０〜１４ｇのものを馴化して５週齢で実験に使用した。実験期間中は動物に固形飼料ＭＦ（オリエンタル酵母株式会社製）およびフィルター滅菌した水道水を自由に与えた。【００６３】
腫瘍モデルの作製は実施例２と同じ方法で行った。腫瘍モデルを作製した後、１日１回ナツシロギク抽出物、パルテノライドおよびビヒクルを経口投与し、腫瘍細胞移植２週間後より３３日目まで、１週間に３回腫瘍サイズ（長径および短径）をノギス（CD-15PS, Mitutoyo）で計測し、腫瘍体積を算出した。体積は楕円球体と仮定し、下式にて算出した：
腫瘍体積＝４／３π（短径／２ｘ短径／２ｘ長径／２）【００６４】
実験結果
実験結果を図２に示す。ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日投与群において原発巣腫瘍体積の増加が最も抑制され、２６日目あたりから顕著な効果が出始め、３３日目においてナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日投与群ではビヒクル対照群の原発巣腫瘍体積の約４０％であった。パルテノライド４０ｍｇ／ｋｇ／日投与群においてはビヒクル対照群との有意差は見られなかった。ナツシロギク抽出物中のパルテノライド含量を０．９％とすると、ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ／日という投与量はパルテノライド２．０ｍｇ／ｋｇ／日に相当する。この実験においても抽出物を経口投与した場合に顕著な原発巣体積減少効果が得られることがわかった。
【実施例４】
【００６５】
実施例４：ナツシロギク抽出物投与群の体重変化とシスプラチン投与群の体重変化の比較
実験方法および材料
ナツシロギク抽出物はHANDA FINE CHEMICALS社製のFeverfew Extract（バッチ番号：０５１０１６−１０７）を使用した。この抽出物中のパルテノライド含量は約０．９％であった。ナツシロギク抽出物を０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液中に溶解して動物に金属製ゾンデを用いて経口投与した（１日１回、投与体積１０ｍＬ／ｋｇ／回）。ナツシロギク抽出物の投与量は２２２ｍｇ／ｋｇ／日および８８８ｍｇ／ｋｇ／日とした。シスプラチンとしては０．５ｍｇ／ｍｌの注射剤を、動物の体重を基に必要量を算出して投与した。シスプラチン投与量は１０ｍｇ／ｋｇとし、注射針（２６Ｇ、テルモ社製）および注射筒（１ｍＬ容量、テルモ社製）を用いて腹腔内注射した。ビヒクル対照群には０．５ｗ／ｖ％メチルセルロース水溶液を経口投与した。各実験あたりの動物数は１０匹とした。【００６６】
使用動物はオスのC3H/HeN Slcマウス（三協ラボサービス株式会社）であり、３週齢、体重９．９〜１３．８ｇのものを馴化して４週齢で実験に使用した。実験期間中は動物に固形飼料ＭＦ（オリエンタル酵母株式会社製）およびフィルター滅菌した水道水を自由に与えた。【００６７】
腫瘍モデルを以下のようにして作製した。４週齢のあらかじめ除毛したマウスの背部に１ｘ１０５個（１００μＬ中）のマウス腫瘍細胞（骨肉腫細胞株のＬＭ８細胞）を皮下注射して腫瘍モデルを作製した。腫瘍モデルを作製した後、最長で６週間にわたり１日１回ナツシロギク抽出物およびビヒクルを経口投与し、各動物の体重を測定し、生存率を算出した。シスプラチンは腫瘍モデル作製１週間後に腹腔内投与を行った。【００６８】
実験結果
実験結果を図３に示す。シスプラチン投与群では、対照群と比較して投与後６日目以降体重の低下が見られ、実験期間終了時までその傾向が持続した。一方、ナツシロギク抽出物８８８ｍｇ／ｋｇ投与群および２２２ｍｇ／ｋｇ投与群では、対照群と比較して体重の低下は見られなかった。これらの結果から、ナツシロギク抽出物は副作用がなく、あるいはあったとしてもごく僅かであると考えられ、安全性が高いことがわかった。
【実施例５】
【００６９】
実施例５：ナツシロギク抽出物投与群の生存率とシスプラチン投与群の生存率の比較
実験方法および材料
実施例４に記載したのと同じであった。【００７０】
実験結果
実験結果を図４に示す。ナツシロギク抽出物８８８ｍｇ／ｋｇ投与群では、４２日間にわたり生存率の有意な低下は認められなかった。ナツシロギク抽出物２２２ｍｇ／ｋｇ投与群でも生存率の低下がよく抑えられ、４２日目の生存率は０．７であった。一方、シスプラチン投与群では、４０日目に生存率が０．４となり（この時点で対照群の生存率と同じ）、ナツシロギク抽出物投与群よりも生存率が低かった。【００７１】
これらの結果より、ナツシロギク抽出物は、腫瘍動物の生存率の低下を極めて効果的に抑制することがわかった。シスプラチンの毒性および副作用を考慮すると、ナツシロギク抽出物と同程度あるいはそれ以上の腫瘍抑制効果を狙って大量に投与することができない。しかも、シスプラチンは高価である。一方、ナツシロギク抽出物は、実施例４に示すように安全性が高く、しかも腫瘍抑制効果が優れている。さらにナツシロギク抽出物は経口投与にて優れた腫瘍抑制作用を発揮する。そのうえナツシロギク抽出物はシスプラチン等の抗癌剤よりもずっと安価である。これらの点も考慮すると、ナツシロギク抽出物は従来の抗癌剤にはない優れた効果および有用性を有するといえる。
【産業上の利用可能性】
【００７２】
本発明は、健康食品の分野および医薬品の分野等において有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【手続補正書】
【提出日】平成19年5月16日(2007.5.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キク科植物の抽出物を含有する、骨肉腫を抑制するための飲食物。
【請求項２】
キク科植物がナツシロギクである、請求項１記載の飲食物。
【請求項３】
骨肉腫の転移を抑制するものである、請求項１または２記載の飲食物。
【請求項４】
サプリメントである、請求項１〜３のいずれか１項記載の飲食物。
【請求項５】
キク科植物の抽出物を含有する、骨肉腫を抑制するための経口医薬組成物。
【請求項６】
キク科植物がナツシロギクである、請求項５記載の医薬組成物。
【請求項７】
骨肉腫の転移を抑制するものである、請求項５または６記載の医薬組成物。
【請求項８】
骨肉腫の抑制のための飲食物の製造における、キク科植物の抽出物の使用。
【請求項９】
飲食物がサプリメントである請求項８記載の使用。
【請求項１０】
キク科植物がナツシロギクである、請求項８または９記載の使用。
【請求項１１】
飲食物が骨肉腫の転移を抑制するためのものである、請求項８ないし１０のいずれか１項記載の使用。
【請求項１２】
骨肉腫の抑制のための経口医薬組成物の製造における、キク科植物の抽出物の使用。
【請求項１３】
キク科植物がナツシロギクである、請求項１２記載の使用。
【請求項１４】
骨肉腫の転移を抑制するものである、請求項１２または１３記載の使用。
【国際調査報告】
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