(57)【要約】  本発明は、モモルディカ（Momordica）属に属する植物を含む、ヒスタミン放出に関連した疾患又は状態を処置するための食品又は医薬組成物を提供する。モモルディカ属に属する植物の好ましい例は、ニガウリ、及びバングラディシュ周辺で生育するニガウリに似たカックロールである。植物中、果肉の水抽出物を用いることが特に好ましい。本発明の食品又は医薬品組成物は、ヒスタミン放出に関連した疾患又は状態、例えば、アトピー性皮膚炎、花粉症、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、気管支喘息、じんましん、膠原病、過敏性肺臓炎、アナフィラキシー、食物アレルギー、薬物アレルギー、ダニアレルギー、金属アレルギー、動物アレルギーに有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カックロール（モモルディカ・ディオイカ（Momordica dioica Roxb.））、及び食品又は医薬として許容可能な添加物を含む、食品又は医薬組成物。
【請求項２】
モモルディカ（Momordica）属に属する植物、及び食品又は医薬として許容可能な添加物を含む、ヒスタミン放出に関連した疾患又は状態を処置するための食品又は医薬組成物。
【請求項３】
モモルディカ属に属する植物の果肉の水抽出物を含む、請求項2に記載の食品又は医薬組成物。
【請求項４】
モモルディカ属に属する植物が、カックロールである、請求項3に記載の食品又は医薬組成物。
【請求項５】
疾患又は状態が、アトピー性皮膚炎、花粉症、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、気管支喘息、じんましん、膠原病、過敏性肺臓炎、アナフィラキシー、食物アレルギー、薬物アレルギー、ダニアレルギー、金属アレルギー、動物アレルギーである、請求項2〜4のいずれか1項に記載の食品又は医薬組成物。
【請求項６】
モモルディカ属に属する植物を摂取させることによりヒスタミン放出を抑制する、ヒスタミン放出に関連した疾患又は状態の処置方法。
【請求項７】
モモルディカ属に属する植物を含む、ヒスタミン放出抑制剤。
【請求項８】
カックロール、及びモモルディカ属に属する植物をヒスタミン放出抑制のために用いるための指針を含む、製品。
【請求項９】
カックロールを、青果の果肉の水抽出物の乾燥物として0.02〜20,000mg（好ましくは0.2〜2,000mg、より好ましくは2〜200mg）含む、請求項4に記載の食品又は医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ウリ科モモルディカ属の植物に関する。より詳細には、本発明は、ニガウリ、カックロール等のヒスタミン放出抑制剤としての新たな機能に関する。本発明は食品及び医薬品の分野で有用である。
【背景技術】
【０００２】
アレルギーの介在している疾患は数多い。主なものとしては、花粉症、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、気管支喘息、じんましん、膠原病、過敏性肺臓炎、免疫不全などがある。日本人の1/3が何らかのアレルギー症状に悩んでいるとも言われ、効果的な治療方法が切望されている。【０００３】
近年、アレルギー症状の改善に役立つとされる天然物由来の有効成分を含む食品等が続々と登場してきている。例えば、特定の乳酸菌を使ったヨーグルト、ペパーミントに含まれるミントポリフェノールを配合した飲料、トマトの果皮に含まれるポリフェノール、ナリンゲニンカルコンを配合した錠剤タイプの健康食品やドリンク剤などである。天然物由来の有効成分は、合成薬に比較して自然で安心感がある点で、日常的に利用する際に抵抗が少なく、また、繰り返し摂取することによって、不快な症状を対処的に和らげるのみならずアレルギー体質自体を改善する効果が期待できるなどの理由から、注目を集めている。【０００４】
ウリ科の植物とアレルギーとの関連に関しては、ニガウリ（Momordica属）の種子由来の成分が遅延型アレルギー反応を抑えたという報告（非特許文献1）、トウガンのメタノール抽出物がラット腹腔滲出細胞からのヒスタミン放出を阻害するという報告（非特許文献2）がされている一方で、ニガウリと分類学上近いと考えられるキュウリ及びメロン（Cucumis）、スイカ（Citrullus）カボチャ（Cucurbita）、ヘチマ（Luffa）にはアレルギー抑制に関する報告はなく、むしろキュウリ、メロン、スイカに関しては、アレルギーを誘引する（Oral Allergy Syndrome）物質として認知されている。
【非特許文献１】Immunopharmacology, 13, 159-171, 1987
【非特許文献２】薬学雑誌 118, 188-192, 1998
【発明の開示】
【０００５】
現在のところ、ニガウリの可食部とアレルギーとの関連を述べた報告は存在しない。
【０００６】
本発明者は、食品成分の生体調節機能に関する研究を行ってきた。そしてニガウリ及びカックロールにヒスタミン放出抑制作用があることを見いだし、本発明を完成した。
【０００７】
本発明は、すなわち、カックロール、及び食品又は医薬として許容可能な添加物を含む、食品又は医薬組成物を提供する。
【０００８】
本発明はまた、モモルディカ（Momordica）属に属する植物、及び食品又は医薬として許容可能な添加物を含む、ヒスタミン放出に関連した疾患又は状態を処置するための食品又は医薬組成物を提供する。
【０００９】
本明細書でいう「モモルディカ属に属する植物」には、モモルディカ・ディオイカ（Momordica dioica Roxb.（本明細書では、特別な場合を除き、これを「カックロール（kakrol）」という。））、モモルディカ・キャランティア（Momordica charantia L.（にがうり、ゴーヤ、つるれいしともいう。本明細書では、特別な場合を除き、これを「ニガウリ」という。））、モモルディカ・バルサミナ（Momordica balsamina）、モモルディカ・ボイビニー（Momordica boivinii）、モモルディカ・リットレア（Momordica littorea）、モモルディカ・ロストラータ（Momordica rostrata）、モモルディカ・セッシリフローラ（Momordica sessiliflora）、モモルディカ・スピノーサ（Momordica spinosa）が含まれる。
【００１０】
本発明に用いる場合に、好ましいモモルディカ属に属する植物の例は、カックロール又はニガウリであり、特に好ましい例は、カックロールである。
【００１１】
ニガウリは、日本国内では主として九州南部から沖縄で栽培されているウリ科モモルディカ属の植物である。ニガウリは、雌雄異花同株で、地下部には塊根を作らない。果実は卵形（日本では作られていない）から紡錘形であり、大きさも卵大から長さ50センチほどまでバラエティに富んでいる。成熟していない果実（青果）は野菜として流通され、食されているが、苦味が特徴的である。
【００１２】
カックロールは、ニガウリと同じウリ科モモルディカ属の植物である。カックロールは、蔓性多年草、雌雄異株であり、地下部に塊根を作る（図1〜4参照）。インド亜大陸ベンガル地方原産といわれており、高温多湿気候に適し、栽培は容易である。バングラデシュ国では雨季の重要な野菜となっている。果実はレモン型で、小突起に覆われ、1個の重さは50〜100gであり、ニガウリのような苦みを全く持たない。
【００１３】
カックロールについては、これまで、栽培法、単為結実、組織培養カルスからの植物体再生、及び形態学上・生理学上の特徴等の面から研究されている（Mohammad Ali, et al., Scientia Horticulturae, 47 335-343, 1991；Mohammad Nazmul Islam Mnik, et al., J. Fac. Agr., Kyushu Univ., 45(2) 459-463, 2001；Shaila Arifa Nabi, et al., J. Fac. Agr., Kyushu Univ., 46(2) 303-309, 2002；Mohammad Golam Rasul, et al., J. Fac. Agr., Kyushu Univ., 49(1) 1-11, 2004）。
【００１４】
本発明の食品又は医薬組成物に、ニガウリ又はカックロールを用いる場合、栽培法、形態学上・生理学上の特徴によらず、あらゆる品種を用いることができる。ニガウリに関しては、例えば、群星（むりぶし。「むるぶし」ということもある。）、アバシー、汐風（しおかぜ）、中長（ちゅうなが）、島風（しまかぜ）、太（ふと）、佐土原3号を用いることができる。カックロールの栽培法及び形態学上・生理学上の特徴に関しては、当業者は、上述の文献等を参照することができる。
【００１５】
本明細書で「モモルディカ属に属する植物」というとき、またモモルディカ属に属する具体的な植物種に言及するとき（例えば「カックロール」というとき。）は、特別な場合を除き、その植物体の全体又は一部を指し、果実（成熟していないものも成熟したものも含む。）、果肉、皮、種子、葉、茎、根、花、蕾が含まれる。本発明の食品又は医薬組成物には、青果が適している。青果は、必要に応じ、果皮、種などの食品として適さない部分を除いて用いてもよい。なお、一般には、食するのに適した段階の果実（青果）を指して「カックロール」ということもある。
【００１６】
本明細書で「モモルディカ属に属する植物」というとき、またモモルディカ属に属する具体的な植物種に言及するとき（例えば「カックロール」というとき）は、特別な場合を除き、加工の有無、程度を問わず、その植物を原料とした抽出物（例えば、水抽出物、5〜100％エタノール抽出物）、分画物、単離物、濃縮物、加工物、乾燥物を含む。抽出物は、単一の成分からなることもあり、混合物であることもある。乾燥物には、凍結乾燥物の粉末が含まれる。抽出物には、水又は水系溶媒による抽出物、メタノール、エタノール、ヘキサン、アセトン等の有機溶媒による抽出物が含まれる。
【００１７】
本発明の食品又は医薬組成物の原料として用いる場合は、果実が適している。果実は、果皮及び種子を除くことなく、そのまま用いてもよい。カックロールの食するのに適した果実の段階（青果）では種子はまだ柔らかく、果肉とともに食することができる。必要に応じ、果肉、皮若しくは種子を、単独又は組み合わせて用いてもよい。本発明の食品又は医薬組成物には、果肉の水抽出物を用いることができる。
【００１８】
本発明者等の検討によると、ニガウリ及びカックロールについては、果肉の水抽出物が、果皮の水抽出物、及び果皮又は果肉のエタノール抽出物に比較し、KU812細胞におけるヒスタミン放出抑制効果が高かった。したがって、本発明の食品又は医薬組成物においては、ニガウリ又はカックロールの果肉の水抽出物を好適に用いることができる。
【００１９】
本明細書で「水抽出物」というときは、特別な場合をのぞき、対象物に対して水を抽出溶媒として用いて抽出操作（例えば、必要に応じ細断した対象物を、適切な温度及び期間、必要に応じ撹拌しながら、溶媒に浸漬する、等）を行うことにより、得られた水可溶性成分を含む相をいう。抽出のための条件は、当業者であれば、適宜設定することができる。
【００２０】
本発明の食品又は医薬組成物は、ヒスタミン放出に関連した疾患又は状態を処置するために有用である。より特定すると、ヒスタミン放出を抑制することにより望ましい効果が生じうる疾患又は状態を処置するために有用である。すなわち、本発明の食品又は医薬組成物は、ヒスタミン放出抑制剤（単に、「ヒスタミン抑制剤」ということもある。）として用いることができる。
【００２１】
本発明の食品又は医薬組成物はまた、アレルギー反応のケミカルメディエーターであるヒスタミンの産生・遊離を阻害することができるから、アレルギー炎症を抑制する抗炎症剤として作用する。したがって、抗アレルギー剤として用いることができる。
【００２２】
本明細書で「アレルギー」というときは、特別な場合を除き、本発明の分野における通常の意味で用いている。すなわち、本明細書でいう「アレルギー」は、特別な場合を除き、免疫反応に基づく生体に対する全身的又は局所的な傷害と定義することができる。これには、血中抗体による液性免疫反応に基づくアレルギー（I、II、III型アレルギー）と感作リンパ球による細胞性免疫に基づくアレルギー（IV型アレルギー）とを含む。「アレルギー」又は「アレルギー疾患」には、アトピー性皮膚炎、花粉症、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、気管支喘息、じんましん、膠原病、過敏性肺臓炎、アナフィラキシー、食物アレルギー、薬物アレルギー、ダニアレルギー、金属アレルギー、動物アレルギーが含まれる。
【００２３】
本明細書において、疾患又は状態を「処置（する）」というときは、特別な場合を除き、対象となる疾患もしくは状態を、予防もしくは治療すること、軽度に抑えること、又は進行を抑えることを意味する。「処置」には、根本的な治療が含まれ、また長期的な予防及び／又は治療とが含まれる。
【００２４】
本発明の食品又は医薬組成物の有するヒスタミン放出抑制作用及び／又は抗アレルギー作用は、ヒト末梢血由来の好塩基球などを用いることにより、評価することができる。評価には、簡便には、ラットなどの実験動物由来のマスト細胞を用いてもよいが、そのような実験系で見いだされた抗アレルギー剤の中には、実際のヒトのアレルギー症状に対する効果が非常に弱いもの（中程度か軽度の症状にしか効果を示さない）が見られることがある。したがって、ヒト細胞（例えば、慢性骨髄性白血病患者の末梢血から樹立されたヒト好塩基球細胞株KU812等。実施例参照）により、評価することが好ましい。
【００２５】
KU812細胞での評価と臨床での効果とを関連づける報告として、緑茶カテキン（エピガロカテキンガレート）に関するものがある（Tachibana et al., Biosci. Biotechnol. Biochem. 2000;64:452-454及びSano et al., J. Agric. Food Chem. 1999;47:1906-1910）。また、KU812細胞からのヒスタミン放出抑制とin vivoの抗アレルギー効果とを関連づける報告として、柿の葉抽出物及びその中の有効成分であるアストラガリンについてのものがある（Kotani et al., J. Allergy Clin. Immunol. 2000;106:159-166）。
【００２６】
本発明者等の検討によれば、本明細書の実施例で得られたカックロール果肉水抽出物のKU812における効果（ヒスタミン抑制率40〜50%）は、緑茶カテキンについての効果（前掲Tachibana et al）と同程度であり、また、柿の葉抽出物についての効果（抑制率20〜30%）（前掲Kotani et al）を超えるものであった。したがって、モモルディカ属に属する植物を有効成分とする本発明の食品又は医薬品組成物は、ヒスタミン放出抑制及び／又はアレルギー症状の緩和・予防などに、充分な効果を発揮しうると考えられる。
【００２７】
本発明の食品又は医薬組成物のin vivo及び臨床における効果は、当業者であれば、上述した文献中に記載の方法等に準じて評価しうる。他に、メチル化カテキンを豊富に含む“べにふうき緑茶”の飲用とスギ花粉症状の緩和効果とに関する報告（山本（前田）ら, 日本食品科学工学会誌, 2005;52:584-593）も参考にすることができる。
【００２８】
本発明の食品組成物は、飲料の形態であるものも含む。本発明の食品組成物は、栄養機能食品、特定保健用食品、健康食品、栄養補助食品、ドリンク剤、ジュース等とすることができる。食品組成物はまた、乾燥品、加工品（例えば、漬け物。塩漬、しょうゆ漬、みそ漬、ぬかみそ漬、粕漬、麹漬、調味漬、酢漬）、エキスの形態とすることもできる。以下で説明する医薬品である場合に準じて、エキス、濃縮物等を含むカプセル剤、錠剤、丸剤、タブレット、散剤、顆粒剤等の形態とすることもできる。食品組成物として摂取する場合の植物の量は、以下で説明する医薬組成物である場合に準じて、適宜とすることができる。
【００２９】
本発明の食品組成物は、食品として許容可能な種々の添加物、例えば甘味料、着色料、保存料、酸化防止剤、香料、酸味料、調味料、防かび剤（防ばい剤）、ｐＨ調整剤、栄養強化剤、乳化剤、増粘剤、安定剤、ゲル化剤、糊剤、発色剤、漂白剤を含んでもよい。
【００３０】
本発明の組成物を医薬組成物とする場合、有効成分である植物の量、投与期間、間隔は、目的、症状、対象者の年齢、体重等に応じて適宜とすることができる。治療の目的では、例えば、カックロールを、数日〜数ヶ月の間、臨床上有効量継続して投与することができる。より具体的には、成人患者に対して、例えば、青果の果肉の水抽出物の乾燥物として一日当たり0.02〜20,000mg、0.2〜2,000mg、2〜200mg、青果（約60g）として一日当たり1/20〜5個、1/10〜2個、1/5〜1個）に相当する量を、単回又は複数回（例えば3回）に分割して投与することができる。このような量の1/10〜1/1（例えば1/3）を一単位剤形中に含むように設計された製剤は、本発明の好ましい態様の一つである。
【００３１】
また、健康維持及び／又は発症予防等の目的では、より少ない量での投与が効果的である場合がある。
【００３２】
カックロール青果の果肉の水抽出物乾燥物に相当する量は、当業者であれば、本明細書の実施例等を参考にして、他の植物、その青果全体、青果の抽出物、抽出物残滓、分画物、単離物、濃縮物もしくは加工物、又は青果の一部（例えば、果肉、皮、種子）、その乾燥物、抽出物、抽出物残滓、分画物、単離物、濃縮物もしくは加工物等について、それぞれ求めることができる。
【００３３】
投与経路、剤形も適宜設計することができ、例えば、全身的な投与のため、又は局所投与のために製剤化することができ、内服剤、外用剤、固形剤、液状製剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤、丸剤、タブレット、軟膏剤、硬膏剤、ハップ剤、ローション剤、リニメント剤、又は坐剤とすることができる。また、除放化製剤、放出制御型製剤とすることもできる。製剤化は、従来の方法にしたがって行うことができる。
【００３４】
本発明の医薬組成物は、医薬として許容できる種々の添加物、例えば、附形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、懸濁化剤、乳化剤、安定剤、保存剤、緩衝剤を含んでもよい。
【００３５】
本発明の食品又は医薬組成物は、他の食事療法、薬物療法、運動療法と併用して用いることができる。
【００３６】
本発明の組成物には、その具体的な用途（例えば、アレルギー予防のため、アレルゲンに対する過敏性改善のため、体質改善のため、長期的な治療のため、等。あるいは、ヒスタミン放出阻害のため、等）、及び／又はその具体的な用い方（例えば、量、回数、継続的に使用すべき旨、期間、等。）を表示することができる。
【００３７】
本発明はまた、モモルディカ属に属する植物を摂取させることによりヒスタミン放出を抑制する、ヒト又は非ヒト動物におけるヒスタミン放出に関連した疾患又は状態の処置方法、モモルディカ属に属する植物を含む、ヒスタミン放出抑制剤、及びモモルディカ属に属する植物をヒスタミン放出抑制のために用いるための指針（例えば、具体的な用途、及び／又はその具体的な用い方に関する情報、そのような情報を記載した書面）を含む、製品も提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】図1は、カックロール全体の写真である。
【図２】図2は、カックロール果実の写真である。
【図３】図3は、カックロール果実の写真である。
【図４】図4は、カックロール塊根の写真である。
【図５】図5は、A23187誘導性ヒスタミン放出に及ぼす抽出物の影響を示したグラフである。KU812細胞に、ニガウリ及びカックロールそれぞれの水抽出物又は100%エタノール抽出物を添加して、37℃、20分間インキュベートした。その後、終濃度10 μMとなるようにA23187を添加してさらに20分間インキュベートした。上清中に分泌されたヒスタミン量は部分精製蛍光法により測定した。データは Means±SD (n=3) で示し、水抽出物の未添加群（A23187刺激のみ）の値を100%としたときの相対値でそれぞれの結果を表記した。アスタリスクマークは有意に差があることを示す（p<0.01**、p<0.001***）。
【図６】図6は、A23187誘導性ヒスタミン放出に及ぼすカックロール果肉の水抽出物の影響を、ニガウリ果肉の水抽出物と比較して示したグラフである。データはMeans±SD (n=3) で示し、水抽出物の未添加群（A23187刺激のみ）の値を100%としたときの相対値でそれぞれの結果を表記した。アスタリスクマークは有意に差があることを示す（p<0.01**）。
【実施例】
【００３９】
方法：
1. 細胞及び細胞培養：
ヒト好塩基球細胞株KU812は慢性骨髄性白血病患者の末梢血から樹立された細胞株（JCRBより分譲）で、10％ウシ胎児血清 (FBS) (BIO SOURCE INTERNATIONAL, CA) 添加RPMI-1640培地 (NISSUI PHARMACEUTICAL Co. LTD. Tokyo)で、37℃、水蒸気飽和した5% CO2条件下で継代、維持した。RPMI-1640培地中には100 U/mLペニシリン (Meiji seika, Tokyo)、100 μg/mLストレプトマイシン (Meiji seika、Tokyo)、12.5 mM NaHCO3  (Wako Pure Chemical Industries, Osaka)、10 mM HEPES (Wako Pure Chemical Industries, Osaka) を添加した。細胞を継代するにあたり、細胞密度2.0 x 105 cells/mLで10 mLのプラスチックディッシュ (BIO-BIK INA OPTIKA CO., Osaka) に藩種し、3日毎に培地交換を行い細胞密度2.0 x 106 cells/mLを超えないよう対数増殖期で培養維持した。【００４０】
2. 試薬及び試薬の調製：
Calcium ionophore A23187 (Wako Pure Chemical Industries, Osaka) はジメチルスルホキシドに10 mMとなるように溶解し、-20℃で保存して使用直前にTyrode緩衝液（137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.8 mM CaCl2, 1.1 mM MgCl2, 11.9 mM NaHCO3, 0.4 mM NaH2PO4, pH 7.4）に希釈した。【００４１】
3. 抽出物の調製：
カックロール（九州大学内で栽培したもの：果皮10 g、果肉6 g）、ニガウリ（沖縄産  群星：果皮15 g、果肉 15 g）をそれぞれ脱イオン水、100% エタノール50 mLに浸し、4℃で約3時間抽出した。抽出後、軽くホモジネートし、ろ過後に3000 rpm、4℃で20分間遠心を行い、上清を回収した。水抽出物は凍結乾燥後、5 mg/mLとなるように脱イオン水で再溶解しフィルター滅菌を行った。エタノール抽出物はスピードバックで減圧乾燥させた後、得られた乾燥物の重量からスピードバックによる減圧乾燥前の上清の重量濃度を算出し、これをサンプルとした。カックロール果皮水抽出物の乾燥物は白色で無臭であった。果肉水抽出物の乾燥物も同様であった。他方、カックロール果皮エタノール抽出物の乾燥物は薄い黄緑色で青臭く、果肉エタノール抽出物の乾燥物は薄い黄色で青臭いものであった。【００４２】
4. 細胞のニガウリ抽出物処理：
細胞をTyrode緩衝液で洗浄後、細胞密度2.0 x 106 cells/mLとなるようにTyrode緩衝液に再懸濁した。1.5 mLのマイクロテストチューブ (Eppendorff, Germany) に110 μLの10 mM CaCl2、110μL の各種ニガウリ抽出物、500μLの細胞懸濁液 (1.0 x 106 cells)、270μLのTyrode緩衝液を添加し、20分間、37℃でインキュベートした。その後、110μLの100μM Calcium ionophore A23187を添加してさらに20分間、37℃でインキュベートした。そして、氷中に5分間静置して反応を停止させた後、300 x gで5分間遠心し、上清を回収（1 mL分）してサンプルとした。なお、細胞内に蓄積された全ヒスタミン量を測定するにあたって、Tyrode 緩衝液に懸濁した細胞を氷中で1分間超音波破砕を行い、これを10000 x gで遠心した上清を回収（1 mL分）してサンプルとした。これらは、アルカリ条件下でヒスタミンをo-Phtaldehyde (OPA; Wako Pure Chemical Industries, Osaka) により蛍光化して定量を行った。【００４３】
部分抽出以降の手順は以下の通りである。サンプル1 mL、Tyrode 緩衝液 1 mL、NaCl 0.75〜0.78 g、そして5 N NaOH 0.5 mLを混合して攪拌した。さらに、5 mLのn-Butanol: Chloroform混合液（3:2, v/v）を加えてボルテックスミキサーで2分間攪拌した。その後270 x gで5分間遠心を行った。次に上層のn-Butanol: Chloroform混合液を4 mL採取し、0.1 N HCl 1.5 mLとn-Heptan 2 mLを加えてボルテックスミキサーで2分間攪拌した。再び270 x gで5分間遠心した後、下層を1 mL採取して1 N NaOH 0.15 mLを添加した。遮光した環境で0.2% OPA (Methanolに溶解して調製) 0.1 mLを加えてボルテックスミキサーで攪拌して蛍光化反応を開始した。室温で5分間インキュベートした後、0.5 N H2SO4 0.14 mLを加えて反応を停止させた。蛍光強度は蛍光光度計RF-1500（Shimadzu Co., Kyoto, Japan）を用いて励起波長360 nm、蛍光波長440 nmの条件下で測定を行った。なお、実験結果の統計処理にはStudent'sのt検定を用いた。【００４４】
結果及び考察：
結果を図5及び6に示した。ニガウリ（図5A）、カックロール（図5B）とも果肉の水抽出物に、ヒスタミン放出を抑制する効果が見られた。果肉の水抽出物同士の比較では、カックロールの方がニガウリより抑制効果が高かった（図6）。なお、水抽出物の終濃度は、ニガウリ、カックロールとも、100 μg/mL (果皮、果肉とも。 50倍希釈で添加で添加した。）であり、ニガウリの100%エタノール抽出物の終濃度は、 34 μg/mL (果皮、果肉とも。100倍希釈で添加した。）であり、カックロールエタノール抽出物の終濃度は、 97 μg/mL (果皮。60倍希釈で添加した。)及び97 μg/mL (果肉。100倍希釈で添加した。）であった。なお、カックロール水抽出物（果肉）については、カックロール約1/1602個相当で、今回の効果が得られたと計算することができる（用いたカックロール果実は62 gであり、果肉が20.03 g、果皮が34.85 g、その他が7.12 gであり、果肉6 gあたりの水抽出物乾燥物重量は0.048 gであり、これを100μg/mLで細胞に添加（1 mL）しているので、その添加量は乾燥物重量の約480分の1に相当する量となる。1602 = 480 x 20.03 / 6 ）。同様に他の成分についても今回の評価に用いた量を計算すると、カックロール水抽出物（果皮）は、果皮の約1/1428個相当、カックロールエタノール（果肉）：約1/6185個相当、カックロールエタノール（果皮）約1/6107個相当量となる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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