【事件の表示】
　特願２０１６−５２５８２７「ＡＡＶベクター、及び抗ＡＡＶ（アデノ関連ウイルス）中和抗体についてのアッセイ」拒絶査定不服審判事件〔平成２７年　１月１５日国際公開、ＷＯ２０１５／００６７４３、平成２８年　８月２５日国内公表、特表２０１６−５２５３４７〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯
　本願は、２０１４年（平成２６年）　７月１１日（パリ条約による優先権主張外国庁受理２０１３年　７月１２日、米国）を国際出願日とする出願であって、その手続の主な経緯は以下のとおりである。
平成３０年　５月１１日付け：拒絶理由通知書
平成３０年１１月２２日　　：意見書、手続補正書の提出
平成３０年１１月２９日付け：拒絶査定
平成３１年　４月　４日　　：審判請求書、手続補正書の提出
令和　２年　２月２０日付け：拒絶理由通知書
令和　２年　８月２５日　　：意見書、手続補正書の提出
第２　本願発明
　本願の請求項１ないし６６に係る発明は、 令和　２年　８月２５日になされた手続補正により補正された特許請求の範囲の請求項１ないし６６に記載された事項により特定されるものと認められるところ、その請求項１及び請求項１４に係る発明（以下、それぞれ、「本願発明１」、「本願発明１４」といい、両者をまとめて「本願発明」という。）は、以下のとおりのものである。 
「【請求項１】
　ＡＡＶに結合する抗体を、測定及び定量するための方法において、以下：
（ａ）組換えベクターを包膜する感染性組換えＡＡＶ粒子を用意するステップであって、前記組換えベクターが、ベクターゲノムを含み、前記ベクターゲノムが、１つ又は複数の発現調節エレメントに作動可能に連結され、かつ１つ又は複数のフランキングエレメントによってフランキングされている自己相補的リポータトランスジーンを含む、ステップ；
（ｂ）前記感染性組換えＡＡＶ粒子に感染し得る細胞を用意するステップ；
（ｃ）（ａ）の感染性組換えＡＡＶ粒子を被験者からの生体サンプルと接触させるか、又はインキュベートし、これによって得られる混合物（Ｍ）を生成するステップ；
（ｄ）得られた混合物（Ｍ）と（ｂ）の細胞を、（ａ）の前記感染性組換えＡＡＶ粒子が、前記細胞中の前記リポータトランスジーンに感染して、これを発現させることを可能にする条件下で、接触させるステップ；
（ｅ）前記リポータトランスジーンの発現を測定するステップ；並びに
（ｆ）（ｅ）の前記リポータトランスジーン発現をＡＡＶに結合する抗体が欠失した陰性（−）対照のリポータトランスジーン発現と比較するステップであって、これによって、前記生体サンプルにおいてＡＡＶに結合する抗体を測定及び定量するステップ
　を含む方法。」
「【請求項１４】
　前記リポータトランスジーンが、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）又はアルカリホスファターゼをコードする、請求項１又は２に記載の方法。」
第３　原査定における拒絶の理由
　原査定の拒絶の理由は、この出願の請求項１−６９に係る発明は、本願の優先権主張の日（以下「優先日」という。）前に日本国内又は外国において、頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった下記の引用文献１−９に記載された発明に基づいて、その優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない、というものである。
引用文献１．Gene Therapy(2012.07.12, published online)Vol.20, p.417-424
引用文献２．Nature Medicine(2006)Vol.12, No.3, p.342-347
引用文献３．Nature Genetics(2000)Vol.24, p.257-261
引用文献４．特表２００４−５００８５８号公報
引用文献５．Molecular Therapy(2008)Vol.16, No.10, p.1648-1656
引用文献６．国際公開第２０１３／０７８４００号
引用文献７．特表２００２−５２９０９８号公報
引用文献８．特表２００６−５０５２４９号公報（周知技術を示す文献）
引用文献９．特表２００３−５１１０３７号公報（周知技術を示す文献）
第４　引用文献の記載
１　引用文献１の記載
　引用文献１は、「Prevalence and pharmacological modulation of humoral immunity to AAV vectors in gene transfer to synovial tissue」と題する学術論文であって、以下の事項が記載されている（翻訳及び下線は当審による。以下同様。）。 
（１）「アデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターに対する抗体は、ヒトにおいて非常に多く存在する。前臨床研究および臨床研究の両方で、AAVに対する抗体は、低力価であっても、特にベクターが血中に導入された場合には、トランスダクションを阻害することが示されている。ここでは、関節リウマチ患者の血清中の及びマッチした滑液（SF）中のAAV血清型2、5、6、8に対する中和抗体（NAb）の力価を測定した。滑液中の力価は、一致した血漿サンプル中の力価よりも低く、体液コンパートメントによってAAVに対するNAbの分布に違いがあることが示唆された。この違いはAAV2でより顕著であり、より高い力価が測定された。すべての血清型の中で、抗AAV5抗体は血清および体液コンパートメントの両方で最も低い頻度であった。次に、疾患管理の一環として抗CD20抗体リツキシマブを1コースまたは2コース受けた関節リウマチ患者における抗AAV抗体に対するB細胞枯渇の影響を評価した。NAb価がp1:1000の被験者の一部でNAb価の低下が観察されたが、1:5以下に低下したのは少数の被験者のみであった。本研究は、AAVベクターに対する既存の体液性免疫の限界を克服するための戦略についての洞察を提供するものである。」（要約）
（２）「次に、血清のNAb価を測定し、SFサンプルをAAV2、AAV5、AAV6、AAV8にマッチングさせた。
NAb力価は、b-ガラクトシダーゼリポーター遺伝子の残留活性を、NAbによるAAVベクター中和のサロゲートとして測定する、先に記載したin vitroアッセイ１２を用いて決定した。
　
血清およびSFにおけるNAb力価は、総抗AAV IgGを測定するために使用したキャプチャーアッセイの結果を確認した、すなわち、抗AAV NAb力価はSFよりも血清において高かった
（３）「細胞培養アッセイにおける
in vitroでのNAbの検出感度を向上させるために、我々はAAV導入遺伝子発現カセットをb-ガラクトシダーゼを発現する一本鎖ゲノム（ssAAV-LacZ）からルシフェラーゼリポーター導入遺伝子（scAAV-Luc）を発現する自己相補的なゲノムに切り替えた。一本鎖AAVと比較してin vitroでの自己相補的AAVの導入効率が高いこと、およびb-ガラクトシダーゼよりもルシフェラーゼの検出感度が高いことから、NAbアッセイでは50〜150倍低い感染の多重性を使用することが可能となった。
リポーター遺伝子発現の50％の阻害が測定される血清希釈として決定されたNAb力価（実施されたより多くの実験の代表セット）は、b-ガラクトシダーゼとルシフェラーゼベースのアッセイの両方について、図2に報告されている。
（４）「
」（表２）
（５）「血清検体とSF検体
　ヒトサンプルは、現地の倫理委員会によって承認されたプロトコルの下、オランダのアムステルダムにある学術医療センターで採取された。すべての被験者は、ヘルシンキ宣言プロトコルに従って、サンプル収集前に同意を得た。サンプルはコード化され、非識別化された。IgMリウマチ因子（範囲37〜200kU ml1）陽性の活動性疾患を有する11人のRA患者から、血清および一致するSFサンプルを採取した。…」（第４２２頁右側欄第６行−第１３行）
（６）「抗AAV抗体の決定（determination）
　
抗AAV2、5、6、および8 NAb力価は、in vitro中和アッセイを使用して、以前に記載されたように12決定
サイトメガロウイルスプロモーターの制御下でβガラクトシダーゼを発現している一本鎖ベクター（ssAAV-LacZ）、またはニワトリβ-アクチンプロモーター制御下でウミシイタケルシフェラーゼリポーター遺伝子を発現する自己相補的なベクター20,21（scAAV-Luc）
in vitroでのAAVベクターの形質導入の効率を高めるために、誘導性プロモーターの制御下、アデノウイルス遺伝子E4を発現する2V6.11細胞（ATCC、マナッサス、バージニア州、米国）を使用した
細胞を96ウェルプレートにウェルあたり1.25×10 4細胞の密度で播種
熱不活性化した試験血清の連続的な半ログ希釈物をウイルスを含む培地と混合
リポーター導入遺伝子の残存活性は、比色アッセイ（ssAAV-LacZ）またはルミノメーター（scAAV-Luc）のいずれかを使用して測定
（７）「ウイルスの生産
　
ＡＡＶ２のinverted terminal repeatsに挟まれたｂ-ガラクトシダーゼカセット（ｓｓＡＡＶ-ＬａｃＺ）、およびレニラ・ルシフェラーゼ発現のための自己相補的カセット（ｓｃＡＡＶ-Ｌｕｃ）を、ＡＡＶ２、５、６または８血清型のいずれかからのカプシドにパッケージ化した。
２　引用文献２の記載
　引用文献２は、引用文献１が参照する「文献１２」であり、
「AAVに対する中和抗体アッセイ
　AAV-2特異的NAB力価は、以前に記載されたように決定された6。」（第３４６頁右側欄下から第１９行−下から第１８行）
と記載されている。
３　引用文献３の記載
　引用文献３は、引用文献２が参照する「文献６」であり、
「抗体アッセイ
　
lacZを発現するAAVベクターを連続希釈した患者血清とインキュベートすることにより、AAV中和抗体価を決定し、この混合物をHEK293細胞に導入した。
サンプルは、β-ガラクトシダーゼ活性を測定
OD420がrAAV-lacZが陰性対照マウス血清とプレインキュベートされたときに観察される値の50％以下であった場合、血清はAAV抗体を中和するための陽性としてスコア付けされた。陽性サンプルは力価を測定した、AAV中和抗体の力価はONGPアッセイに基づいて50%でrAAV-LacZの感染を阻害する希釈物として示される。
と記載されている。
４　引用文献１において参照する文献Ａの記載
　文献Ａ（Gene Therapy(2003)Vol.10, p.2112-2118）は、前記摘記事項１（６）において、ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃに関し、引用文献１が参照する「文献２１」であり、以下の点が記載されている。
（１）「ｓｃＡＡＶベクターの効率的な生産のための変異ベクター
　
scAAVベクター株の生産を合理化し、二量体ゲノムと単量体ゲノムの混合集団の複雑さを排除するために、我々は二量体ゲノムを生成するための変異ベクターコンストラクトを作成
この構築物では、ローリングヘアピン複製が開始される末端分解部位（trs）が一方のTRから削除されている（図1a）。もう一方のTRは野生型（wt）
効果は、レプリケーションフォークがゲノムのwt末端から始まり、末端分解を行わずに変異末端を通過し、反対側の鎖を鋳型としてゲノムを横切って戻り、二量体を生成すること
生成物は、中央に変異体のTRがあり、各末端にwtのTRがある自己相補的なゲノム
（２）「
」（図１　ａ）
（３）「(a)図は本研究で使用した3つの新規コンストラクトを示している。 pHpa-trsSKとp-trsLSP-GFPはTRを欠失しており、二量体のみを作る。pTRdSM-LSP-GFPは2つのwt TRを有し、二量体としてパッケージ化するには大きすぎる。CMV、サイトメガロウイルス即時初期プロモーター；LSP、肝臓特異的プロモーター；SV40、SV40からのスプライスドナー／アクセプター；β-globin、ウサギβグロビン遺伝子からのイントロン；pA、ポリアデニル化シグナル；TR、AAV末端リピート；trs、AAV末端分解能サイト。」（図１　ａの説明）
５　引用文献１において参照する文献Ｂの記載
　文献Ｂ（Gene Therapy(2003)Vol.10, p.2105-2111）は、前記摘記事項１（６）において、ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃに関し、引用文献１が参照する「文献２０」であり、以下の点が記載されている。
（１）「最近の報告では、野生型ゲノムの半分のサイズのAAVベクターが、自己相補的である二本鎖・ヘアピンのようなゲノムをパッケージ化できることが示された。そのようなベクターは、一本鎖から二本鎖DNAへの変換を回避することができる。しかし、このベクターは、ssAAVベクター生産の副産物であるため、生産に効率が悪く、精製に手間がかかっていた。
dsDNAゲノムを優勢にパッケージングするAAVベクターを生成するために、AAV　inverted terminal repeats (ITR)の1つを変異させた。この変異は、ヘアピン状のdsAAV DNAゲノムをほぼ独占的にパッケージングすることにつながった。ｄｓＡＡＶベクターのインビトロおよびインビボでの検討、およびベクターＤＮＡの分子的特徴付けは、ｄｓＡＡＶベクターが従来のｓｓＡＡＶベクターよりも優れた遺伝子導入を行うという結論を支持するもの
（２）「1つのITRの変異後のdsAAVの効率的なパッケージング
　ssAAV DNAゲノムは、145塩基の2つのITRに挟まれている（図1aおよびb）。… AAVの複製中間体は、ヘッド・ツー・ヘッドおよびテール・ツー・テールの二量体DNA分子を含む。二量体は、ジャンクションＩＴＲでＡＡＶ Ｒｅｐタンパク質によって切断され、モノマーを得る。各モノマーは、その後、ssDNAとしてAAV粒子にパッケージングされる（図1b、左パネル）。しかしながら、ＩＴＲの１つ（例えば、左のＩＴＲ）が、隣接する末端分解部位（ｔｒｓ）とともにＤ配列（パッケージングシグナル）を欠失している場合（図１ａおよびｂ、右パネル）、二量体は単量体への分解に失敗する。それにもかかわらず、各二量体は、残りの野生型のITRを介して、大きなヘアピンDNAの形、つまり、二本鎖ゲノムの形でAAV粒子にパッケージ化することができる（図1b、右パネル）。
　
二本鎖ヘアピン様ダイマーＤＮＡを主にパッケージ化するＡＡＶベクターを生成するために、我々は、右のＩＴＲをそのまま維持しながら、ＡＡＶベクター上のＤ配列および左のＩＴＲのｔｒｓを削除
（３）「
」（図１　ａ）
（４）「
」（図１　ｂ）
第５　判断
１　引用発明の認定
　第４で示した摘記事項（当審注：以下の摘記事項もすべて同様。）１（１）から、引用文献１には、「関節リウマチ患者の血清中のＡＡＶ血清型２、５、６、８に対する中和抗体（ＮＡｂ）の力価を測定」する方法の発明が記載されているといえる。
　そして、摘記事項１（３）及び（６）から、引用文献１には、抗ＡＡＶ２、５、６、および８ ＮＡｂ力価を測定するにあたり、ｉｎ ｖｉｔｒｏ中和アッセイを使用したこと（摘記事項１（６）参照。）、及び、当該アッセイにおいて、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＮＡｂの検出感度を向上させるために（摘記事項１（３）参照。）、ニワトリβ−アクチンプロモーター制御下でウミシイタケルシフェラーゼリポーター遺伝子を発現する自己相補的なベクター（ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃ）であるＡＡＶ構築物ベクターが用いられたこと（摘記事項１（３）・（６）参照。）が記載されている。
　また、摘記事項１（７）から、引用文献１には、抗ＡＡＶ２、５、６、および８ ＮＡｂ力価を測定するためのＡＡＶの作成方法として、レニラ・ルシフェラーゼ発現のための自己相補的カセット（ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃ）を、ＡＡＶ２、５、６または８血清型のいずれかからのカプシドにパッケージ化したことが記載されている。
　以上からみて、引用文献１には、ＡＡＶ血清型２、５、６、８に対する中和抗体（ＮＡｂ）の力価をｉｎ ｖｉｔｒｏで測定するにあたり、ニワトリβ−アクチンプロモーター制御下でウミシイタケルシフェラーゼリポーター遺伝子を発現する自己相補的なベクター（ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃ）を、ＡＡＶ２、５、６または８血清型のいずれかからのカプシドにパッケージ化したものを用意することが記載されている。
　加えて、摘記事項１（５）及び（６）から、引用文献１には、ＡＡＶ血清型２、５、６、８に対する中和抗体（ＮＡｂ）の力価を測定するために１１人のＲＡ患者から血清サンプルを採取したこと（摘記事項１（５）参照。）、及び、それを熱不活性化した血清の連続的な半ログ希釈物をウイルスを含む培地と混合したこと（摘記事項１（６）参照。）が記載されている。そして、摘記事項１（６）から当該培地には、アデノウイルス遺伝子Ｅ４を発現する２Ｖ６．１１細胞及びＡＡＶが含まれているといえる。
　さらに、摘記事項１（６）から、引用文献１には、リポーター導入遺伝子の残存活性がルミノメーター（ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃ）のいずれかを使用して測定されたことが記載されている。
　そして、摘記事項１（２）−（４）及び（６）から、引用文献１には、ＡＡＶ２、５、６及び８ ＮＡｂ力価を、参照文献１２に記載されたｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイに準じた方法により決定したこと（摘記事項１（６）参照。）が記載されており、その結果が摘記事項１（３）及び（４）に記載されている。
　したがって、引用文献１には、以下の発明（以下、「引用発明」という。）が記載されている。
「ＡＡＶに結合する中和抗体の力価を確認するための方法において、
（ａ）ニワトリβ−アクチンプロモーター制御下でウミシイタケルシフェラーゼリポーター遺伝子を発現する自己相補的なベクター（ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃ）を、ＡＡＶ２、５、６または８血清型のいずれかからのカプシドにパッケージ化したものを用意するステップ、
（ｂ）アデノウイルス遺伝子Ｅ４を発現する２Ｖ６．１１細胞を用意するステップ、
（ｘ）ＲＡ患者から採取した血清サンプルを熱不活性化した半ログ希釈物をＡＡＶ及び２Ｖ６．１１細胞を含む培地と混合するステップ、
（ｅ）リポーター遺伝子の活性をルミノメーターにより測定するステップ
（ｆ）ＡＡＶ２、５、６及び８　ＮＡｂ力価を、参照文献１２に記載されたｉｎ　ｖｉｔｒｏアッセイに準じた方法により決定するステップ
を含む方法。」
２　本願発明１４についての判断
（１）対比
　本願発明１４と引用発明とを対比すると、引用発明における「ニワトリβ−アクチンプロモーター」、「ウミシイタケルシフェラーゼリポーター遺伝子」、「ＡＡＶ２、５、６または８血清型のいずれかからのカプシド」、「ＲＡ患者から採取した血清サンプル」及び「リポーター遺伝子の活性をルミノメーターにより測定する」ことは、それぞれ、本願発明１４における「発現調節エレメント」（本願明細書段落【００７７】参照。）、「リポータートランスジーン」（本願明細書段落【００６４】参照。）、「感染性ＡＡＶ粒子」、「被験者からの生体サンプル」及び「リポータトランスジーンの発現を測定する」ことに相当する。
　また、「ベクター「ゲノム」は、ウイルス（例えば、ＡＡＶ）によりパッケージング又は包膜され、異種（トランスジーン）ポリヌクレオチド配列を含むベクタープラスミドの部分を指す。」（本願明細書段落【００５３】参照。）という本願発明１４におけるベクターゲノムの定義からみて、引用発明における「ニワトリβ−アクチンプロモーター制御下でウミシイタケルシフェラーゼリポーター遺伝子を発現する自己相補的なベクター（ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃ）を、ＡＡＶ２、５、６または８血清型のいずれかからのカプシドにパッケージ化したもの」である「ベクター」は、本願発明１４における「ベクターゲノムを含」む「組換えベクター」に相当する。そして、引用発明における「ニワトリβ−アクチンプロモーター制御下でウミシイタケルシフェラーゼリポーター遺伝子を発現する自己相補的なベクター（ｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃ）を、ＡＡＶ２、５、６または８血清型のいずれかからのカプシドにパッケージ化したもの」は本願発明１４における「組換えベクターが、ベクターゲノムを含み、前記ベクターゲノムが、１つ又は複数の発現調節エレメントに作動可能に連結されているリポータトランスジーンを含む」、「組換えベクターを包膜する感染性組換えＡＡＶ粒子」に相当する。
　引用発明における「アデノウイルス遺伝子Ｅ４を発現する２Ｖ６．１１細胞」は、摘記事項１（６）からＡＡＶ粒子に感染していることは明らかであるから、本願発明１４における「感染性組換えＡＡＶ粒子に感染し得る細胞」に相当する。
　引用発明における「ＡＡＶに結合する中和抗体の力価を確認する」ことは、摘記事項１（４）のとおり、中和抗体の数値を決定しているから、本願発明１４における「ＡＡＶに結合する抗体を、測定及び定量する」ことに相当する。
　そうすると、本願発明１４と引用発明とは、
「ＡＡＶに結合する抗体を、測定及び定量するための方法において、以下：
（ａ）組換えベクターを包膜する感染性組換えＡＡＶ粒子を用意するステップであって、前記組換えベクターが、ベクターゲノムを含み、前記ベクターゲノムが、１つ又は複数の発現調節エレメントに作動可能に連結されているリポータトランスジーンを含む、ステップ；
（ｂ）前記感染性組換えＡＡＶ粒子に感染し得る細胞を用意するステップ；
・感染性組換えＡＡＶ粒子、被験者からの生体サンプル及び（ｂ）の細胞を、（ａ）の前記感染性組換えＡＡＶ粒子が、前記細胞中の前記リポータトランスジーンに感染して、これを発現させることを可能にする条件下で、接触させるステップ；
（ｅ）前記リポータトランスジーンの発現を測定するステップ
　を含む方法。」の点で一致し、以下の点で相違する。
（相違点１）本願発明１４が「組換えベクターが、ベクターゲノムを含み、前記ベクターゲノムが、かつ１つ又は複数のフランキングエレメントによってフランキングされている自己相補的リポータトランスジーンを含む」のに対し、引用発明は、リポータトランスジーンにフランキングエレメントによってフランキングされているかどうかが不明であり、かつ、リポータトランスジーンが自己相補的か否か不明である点。
（相違点２）本願発明１４が、「（ｃ）（ａ）の感染性組換えＡＡＶ粒子を被験者からの生体サンプルと接触させるか、又はインキュベートし、これによって得られる混合物（Ｍ）を生成するステップ；
（ｄ）得られた混合物（Ｍ）と（ｂ）の細胞を、（ａ）の前記感染性組換えＡＡＶ粒子が、前記細胞中の前記リポータトランスジーンに感染して、これを発現させることを可能にする条件下で、接触させるステップ；」という順序で行われるのに対し、引用発明は、感染性組換えＡＡＶ粒子、被験者からの生体サンプル及び（ｂ）の細胞の三者の混合順序が不明である点。
（相違点３）本願発明１４が、「（ｅ）の前記リポータトランスジーン発現をＡＡＶに結合する抗体が欠失した陰性（−）対照のリポータトランスジーン発現と比較するステップであって、これによって、前記生体サンプルにおいてＡＡＶに結合する抗体を測定及び定量するステップ」であるのに対し、引用発明は陰性対照と比較しているか否かが不明である点。
（相違点４）本願発明１４が「リポータトランスジーンが、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）又はアルカリホスファターゼをコードする」のに対し、引用発明のリポータートランスジーンはルシフェラーゼである点。
（２）判断
ア　相違点１について
　引用文献１において、ｓｃＡＡＶベクターの作り方を参照する文献Ａ及び文献Ｂには、ｓｃＡＡＶベクターの一方にはＴＲまたはＩＴＲが存在することが明らかにされている（第５の５の（１）−（３）、第５の６の（１）−（４）参照。）。したがって、引用発明においても１つ又は複数のフランキングエレメントによってフランキングされているから、１つ又は複数のフランキングエレメントによってフランキングされている点は実質的な相違点ではない。
　また、本願明細書の段落【００３９】−【００４１】の
「【００３９】
　従って、
「相補性」及び「相補体」という用語は、トランスジーンなどのポリヌクレオチド又は核酸分子に関して用いられる場合、二本鎖若しくは二重螺旋ポリヌクレオチド又は核酸分子が形成する物理的状態を示すか、あるいは、単に、各一本鎖分子が、他方と二本鎖を形成することができるような、２つのポリヌクレオチド又は核酸分子同士の配列関係
　【００４０】
　典型的には、ＡＡＶなどの一本鎖核酸をパッケージングするウイルスベクターの場合、逆方向末端反復配列（ＩＴＲ）配列は、複製に参加して、ヘアピンループを形成し、これが、第２のＤＮＡ鎖の開始及び合成を可能にするような自己プライミング（ｓｅｌｆ−ｐｒｉｍｉｎｇ）に寄与する。第２ＤＮＡ鎖の合成後、ＡＡＶ　ＩＴＲは、いわゆる末端分離部位（ＴＲＳ）を有し、これによって、ヘアピンループが、各々ウイルスパッケージングのための５’及び３’末端反復配列を有する２つの一本鎖に切断される。
　【００４１】
　
少なくとも１つのＩＴＲにおける、欠失、突然変異、修飾、又は非機能性ＴＲＳの使用によって、ＴＲＳで切断されていない二本鎖二重螺旋が形成される。自己相補的リポータトランスジーン二本鎖二重螺旋構造の実施形態では、典型的に、２つの相補鎖の間に位置する欠失、突然変異、又は変異型ＴＲＳを有するＩＴＲが存在する。
との記載によれば、「自己相補的リポータトランスジーン」とは二本鎖二重螺旋構造が形成されるリポータートランスジーンを含むものと解されるところ、引用文献１においてｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃについて参照する文献Ａの「効果は、レプリケーションフォークがゲノムのｗｔ末端から始まり、末端分解を行わずに変異末端を通過し、反対側の鎖を鋳型としてゲノムを横切って戻り、二量体を生成することにある。生成物は、中央に変異体のＴＲがあり、各末端にｗｔのＴＲがある自己相補的なゲノム」との記載、及び、同じく、引用文献１においてｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃについて参照する文献Ｂの図１　ｂのｄｓＡＡＶに関する図示を参照すれば、引用発明のｓｃＡＡＶ−Ｌｕｃのレポータートランスジーンであるルシフェラーゼ遺伝子部分は二本鎖二重螺旋を形成しており、自己相補的であるといえる。
　よって、相違点１は実質的な相違点ではない。
イ　相違点２について
　引用文献１が参照する引用文献２が更に参照する引用文献３には、「ｌａｃＺを発現するＡＡＶベクターを連続希釈した患者血清とインキュベートすることにより、ＡＡＶ中和抗体価を決定し、この混合物をＨＥＫ２９３細胞に導入した。」と記載されており、これは本願発明の（ｃ）及び（ｄ）のプロセスに相当する。
　よって、相違点２も実質的な相違点ではないか、相違点であるとしても引用文献３の記載に基づき、引用発明において（ｃ）及び（ｄ）のプロセスを採用することは、当業者であれば容易に想到し得たことである。
ウ　相違点３について
　引用文献１が抗体アッセイに関して参照する引用文献２が更に参照する引用文献３には、抗体アッセイに関して「ＯＤ４２０がｒＡＡＶ−ｌａｃＺが陰性対照マウス血清とプレインキュベートされたときに観察される値の５０％以下であった場合、血清はＡＡＶ抗体を中和するための陽性としてスコア付けされた。」と記載されており、陰性対照との比較により抗体を測定することは記載されている。
　よって、相違点３も実質的な相違点ではないか、相違点であるとしても引用文献３の記載に基づき陰性対照との比較により抗体を測定することは、当業者であれば容易に想到し得たことである。
エ　相違点４について
　文献Ａ及び文献Ｂに記載されるように、ＡＡＶで用いるレポーター遺伝子としてＧＦＰは周知のレポーター遺伝子である。
　引用発明において、ルシフェラーゼに替えてＧＦＰを用いることは、好適なレポーター遺伝子を選択した結果にすぎない。
　また、ＧＦＰを選択することによる効果も異質又は格別顕著なものでない。
オ　小括
　したがって、本願発明１４は、その出願前に日本国内又は外国において、頒布された又は電気通信回線を通じて公衆に利用可能となった引用文献１に記載された発明及び引用文献２−９、引用文献１が参照する文献Ａ並びに文献Ｂに記載された事項に基づいて、その出願前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
３　本願発明１についての判断
　本願発明１は、本願発明１４を含む上位概念であるので、前記２と同様の理由により、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
第６　むすび
　上記のとおりであるから、本願発明１および１４は、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。 
　よって、結論のとおり審決する。