【手続補正書】
【提出日】令和1年6月7日(2019.6.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）のインビボ送達のための組成物であって、
前記組成物は、リポソーム内に封入された、嚢胞性線維症膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）をコードするｍＲＮＡを含み、送達を必要とする対象に投与されることを特徴とし、前記組成物の投与により、前記ｍＲＮＡによってコードされたＣＦＴＲタンパク質の発現がインビボでもたらされ、
前記リポソームは、式Ｉ−ｃのカチオン性脂質：
【化７９】
2019073557.tif 000001
またはこれらの薬学的に許容可能な塩を含み、
式中、
ｐは、１であり、
Ｒ２のそれぞれは、独立して、水素または任意に置換されたＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ６及びＲ７のそれぞれは、独立して、式（ｉ）、（ｉｉ）または（ｉｉｉ）の基であり、
式（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）は、
【化８０】
2019073557.tif 000002
であり、
式中、
Ｒ’のそれぞれは、独立して、水素または任意に置換されたアルキルであり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲＸであり、式中、ＲＸは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールまたは窒素保護基であり、
Ｙは、Ｏ、ＳまたはＮＲＹであり、式中、ＲＹは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールまたは窒素保護基であり、
ＲＰは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、酸素原子に結合している場合は酸素保護基、硫黄原子に結合している場合は硫黄保護基または窒素原子に結合している場合は窒素保護基であり、
ＲＬは、任意に置換されたＣ１〜５０アルキル、任意に置換されたＣ２〜５０アルケニル、任意に置換されたＣ２〜５０アルキニル、任意に置換されたヘテロＣ１〜５０アルキル、任意に置換されたヘテロＣ２〜５０アルケニル、任意に置換されたヘテロＣ２〜５０アルキニルまたはポリマーであり、
前記ｍＲＮＡは約０．５ｋｂ以上の長さを有する、
組成物。
【請求項２】
前記カチオン性脂質がｃＫＫ−Ｅ１２：
【化８１】
2019073557.tif 000003
である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記リポソームが、１つ若しくは複数の非カチオン性脂質、１つ若しくは複数のコレステロール系脂質及び／または１つ若しくは複数のＰＥＧ修飾脂質をさらに含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記１つまたは複数の非カチオン性脂質が、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＰＣ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホチジルコリン）ＤＰＰＥ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＭＰＥ（１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＰＧ（，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール））から選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記１つまたは複数のコレステロール系脂質が、コレステロール及び／またはＰＥＧ化コレステロールである、請求項３または４に記載の組成物。
【請求項６】
前記１つまたは複数のＰＥＧ修飾脂質が、Ｃ６〜Ｃ２０長のアルキル鎖を有する脂質に共有結合した最大長５ｋＤａのポリ（エチレン）グリコール鎖を含む、請求項３〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記リポソームが、ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記カチオン性脂質が、モル比で、リポソームの約３０〜５０％を構成する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記カチオン性脂質が、モル比で、リポソームの約４０％を構成する、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
ｃＫＫ−Ｅ１２：ＤＯＰＥ：コレステロール：ＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋの比が、モル比で、およそ４０：３０：２０：１０である、請求項７〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
ｃＫＫ−Ｅ１２：ＤＯＰＥ：コレステロール：ＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋの比が、モル比で、およそ４０：３０：２５：５である、請求項７〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
ｃＫＫ−Ｅ１２：ＤＯＰＥ：コレステロール：ＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋの比が、モル比で、およそ４０：３２：２５：３である、請求項７〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記リポソームが、約２５０ｎｍ、２００ｎｍ、１５０ｎｍ、１００ｎｍ、７５ｎｍまたは５０ｎｍ未満の大きさを有する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が静脈投与されることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物が肺送達を介して投与されることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記肺送達が、エアロゾル化、吸入、噴霧化または点滴注入によってなされる、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物が髄腔内投与されることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記ｍＲＮＡによってコードされたタンパク質の発現が、肝臓、腎臓、心臓、脾臓、血清、脳、骨格筋、リンパ節、皮膚及び脳脊髄液にて検出可能である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記ｍＲＮＡによってコードされたタンパク質の発現が、前記投与後３時間で検出可能である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ｍＲＮＡによってコードされたタンパク質の発現が、前記投与後６時間で検出可能である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ｍＲＮＡによってコードされたタンパク質の発現が、前記投与後１２時間で検出可能である、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記ｍＲＮＡによってコードされたタンパク質の発現が、前記投与後２４時間で検出可能である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記ｍＲＮＡによってコードされたタンパク質の発現が、前記投与後１週間で検出可能である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ｍＲＮＡが、約１ｋｂ、１．５ｋｂ、２ｋｂ、２．５ｋｂ、３ｋｂ、３．５ｋｂ、４ｋｂ、４．５ｋｂまたは５ｋｂ以上の長さを有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
前記ｍＲＮＡが、約０．１〜２．０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の用量で投与されることを特徴とする、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記ｍＲＮＡが、約１．０ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されることを特徴とする、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２７】
前記ｍＲＮＡが、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されることを特徴とする、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２８】
前記ｍＲＮＡが、約０．３ｍｇ／ｋｇ体重以下の用量で投与されることを特徴とする、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ｍＲＮＡが、１つまたは複数の修飾ヌクレオチドを含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３０】
前記１つまたは複数の修飾ヌクレオチドが、プソイドウリジン、Ｎ−１−メチル−プソイドウリジン、２−アミノアデノシン、２−チオチミジン、イノシン、ピロロ−ピリミジン、３−メチルアデノシン、５−メチルシチジン、Ｃ−５プロピニル−シチジン、Ｃ−５プロピニル−ウリジン、２−アミノアデノシン、Ｃ５−ブロモウリジン、Ｃ５−フルオロウリジン、Ｃ５−ヨードウリジン、Ｃ５−プロピニル−ウリジン、Ｃ５−プロピニル−シチジン、Ｃ５−メチルシチジン、２−アミノアデノシン、７−デアザアデノシン、７−デアザグアノシン、８−オキソアデノシン、８−オキソグアノシン、Ｏ（６）−メチルグアニン及び／または２−チオシチジンを含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記ｍＲＮＡが非修飾である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
嚢胞性線維症を治療するための組成物であって、
前記組成物は、リポソーム内に封入された、嚢胞性線維症膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、治療を必要とする対象に投与されることを特徴とし、前記組成物の投与により、前記ｍＲＮＡによってコードされたＣＦＴＲタンパク質の発現が前記嚢胞性線維症によって影響を受ける１つまたは複数の組織中でもたらされ、
前記リポソームは、式Ｉ−ｃのカチオン性脂質：
【化８２】
2019073557.tif 000004
またはこれらの薬学的に許容可能な塩を含み、
式中、
ｐは、１であり、
Ｒ２のそれぞれは、独立して、水素または任意に置換されたＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ６及びＲ７のそれぞれは、独立して、式（ｉ）、（ｉｉ）または（ｉｉｉ）の基であり、
式（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）は、
【化８３】
2019073557.tif 000005
であり、
式中、
Ｒ’のそれぞれは、独立して、水素または任意に置換されたアルキルであり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲＸであり、式中、ＲＸは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールまたは窒素保護基であり、
Ｙは、Ｏ、ＳまたはＮＲＹであり、式中、ＲＹは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールまたは窒素保護基であり、
ＲＰは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、酸素原子に結合している場合は酸素保護基、硫黄原子に結合している場合は硫黄保護基または窒素原子に結合している場合は窒素保護基であり、
ＲＬは、任意に置換されたＣ１〜５０アルキル、任意に置換されたＣ２〜５０アルケニル、任意に置換されたＣ２〜５０アルキニル、任意に置換されたヘテロＣ１〜５０アルキル、任意に置換されたヘテロＣ２〜５０アルケニル、任意に置換されたヘテロＣ２〜５０アルキニルまたはポリマーであり、
前記ｍＲＮＡは約０．５ｋｂ以上の長さを有する、
組成物。
【請求項３３】
前記カチオン性脂質がｃＫＫ−Ｅ１２：
【化８４】
2019073557.tif 000006
である、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の送達のための組成物であって、リポソーム内に封入された、嚢胞性線維症膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、前記リポソームが、式Ｉ−ｃのカチオン性脂質：
【化８５】
2019073557.tif 000007
またはこれらの薬学的に許容可能な塩を含み、
式中、
ｐは、１であり、
Ｒ２のそれぞれは、独立して、水素または任意に置換されたＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ６及びＲ７のそれぞれは、独立して、式（ｉ）、（ｉｉ）または（ｉｉｉ）の基であり、
式（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）は、
【化８６】
2019073557.tif 000008
であり、
式中、
Ｒ’のそれぞれは、独立して、水素または任意に置換されたアルキルであり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲＸであり、式中、ＲＸは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールまたは窒素保護基であり、
Ｙは、Ｏ、ＳまたはＮＲＹであり、式中、ＲＹは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリールまたは窒素保護基であり、
ＲＰは、水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルケニル、任意に置換されたアルキニル、任意に置換されたカルボシクリル、任意に置換されたヘテロシクリル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、酸素原子に結合している場合は酸素保護基、硫黄原子に結合している場合は硫黄保護基または窒素原子に結合している場合は窒素保護基であり、
ＲＬは、任意に置換されたＣ１〜５０アルキル、任意に置換されたＣ２〜５０アルケニル、任意に置換されたＣ２〜５０アルキニル、任意に置換されたヘテロＣ１〜５０アルキル、任意に置換されたヘテロＣ２〜５０アルケニル、任意に置換されたヘテロＣ２〜５０アルキニルまたはポリマーであり、
前記ｍＲＮＡは約０．５ｋｂ以上の長さを有する、
組成物。
【請求項３５】
前記カチオン性脂質がｃＫＫ−Ｅ１２：
【化８７】
2019073557.tif 000009
である、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記リポソームは、１つ若しくは複数の非カチオン性脂質、１つ若しくは複数のコレステロール系脂質及び／または１つ若しくは複数のＰＥＧ修飾脂質をさらに含む、請求項３４または３５に記載の組成物。
【請求項３７】
前記１つまたは複数の非カチオン性脂質が、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＰＣ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホチジルコリン）ＤＰＰＥ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＭＰＥ（１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＰＧ（，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール））から選択される、請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
前記１つまたは複数のＰＥＧ修飾脂質が、Ｃ６〜Ｃ２０長のアルキル鎖を有する脂質に共有結合した最大長５ｋＤａのポリ（エチレン）グリコール鎖を含む、請求項３６〜３７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３９】
前記リポソームが、ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋを含む、請求項３６〜３８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４０】
前記カチオン性脂質が、モル比で、リポソームの約３０〜５０％を構成する、請求項３６〜３９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４１】
前記カチオン性脂質が、モル比で、リポソームの約４０％を構成する、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
ｃＫＫ−Ｅ１２：ＤＯＰＥ：コレステロール：ＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋの比が、モル比で、およそ４０：３０：２０：１０である、請求項３６〜４１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４３】
ｃＫＫ−Ｅ１２：ＤＯＰＥ：コレステロール：ＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋの比が、モル比で、およそ４０：３０：２５：５である、請求項３６〜４１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４４】
ｃＫＫ−Ｅ１２：ＤＯＰＥ：コレステロール：ＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋの比が、モル比で、およそ４０：３２：２５：３である、請求項３６〜４１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４５】
前記リポソームが、約２５０ｎｍ、２００ｎｍ、１５０ｎｍ、１００ｎｍ、７５ｎｍまたは５０ｎｍ未満の大きさを有する、請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４６】
静脈内投与用に製剤化される、請求項３４〜４５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４７】
肺送達投与用に製剤化される、請求項３４〜４５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４８】
呼吸用粒子、噴霧用脂質または吸入用乾燥粉末として製剤化される、請求項４７に記載の組成物。
【請求項４９】
髄腔内投与用に製剤化される、請求項３４〜４５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
前記ｍＲＮＡが、約１ｋｂ、１．５ｋｂ、２ｋｂ、２．５ｋｂ、３ｋｂ、３．５ｋｂ、４ｋｂ、４．５ｋｂまたは５ｋｂ以上の長さを有する、請求項３４〜４９のいずれか一項に記載の組成物。