(57)【要約】  従来知られているアミノ酸組成物等とは異なる有効成分を含有する、持久力の向上、体力低下および疲労の軽減または回復に効果を有し、経口摂取して安全な天然物由来の組成物を提供する。  ケツメイシの種子から水、水と相溶性の有機溶媒、またはこれらの任意の比率の混合物で抽出した成分を有効成分として含む持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ケツメイシの種子から水、水と相溶性の有機溶媒、またはこれらの任意の比率の混合物で抽出した成分を有効成分として含む持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項２】
ケツメイシの種子を必要なら破砕して、水、エタノールあるいはこれらの任意の比率の混合液で抽出した粗抽出物を、吸着用樹脂に吸着させ、10〜100％有機溶媒で溶出して得たケツメイシ抽出成分を有効成分とする、請求項1記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項３】
経口剤である、請求項1または2記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項４】
一回の摂取あたり、ルブロフサリンおよびその配糖体を、ルブロフサリンとして1〜300mg含有する、請求項3記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項５】
日常的に摂取するための、請求項4記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項６】
飲食品である請求項3〜5のいずれか1項記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項７】
ヒトを含む動物のための保健用またはスポーツ用の飲食品である請求項6記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項８】
固形状食品、キャンデー、ドロップ、トローチ、ガム、ビスケット状、シート状、タブレットやカプセルなどの錠剤、または顆粒粉末などの固形状剤；ペースト状、ゼリー状、またはゲル状などの半流動状の剤；または、ジュース、清涼飲料、茶、またはドリンク剤などの流動状の剤である請求項7記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項９】
包装、容器または説明書に、用途、効能、有効成分および／または摂取方法を表示した請求項8記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項１０】
医薬品である請求項4ないし6のいずれか1項記載の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物。
【請求項１１】
決明子抽出物を含む、ケトーシス改善剤。
【請求項１２】
請求項11記載のケトーシス改善剤を含有する、経口医薬または食品用組成物であって、一日当たりの投与量または摂取量中に、ルブロフサリンおよびその配糖体を、ルブロフサリンとして1mg以上含む、経口医薬または食品用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ケツメイシ抽出物を含むことを特徴とする持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
健康志向の中、日常的に摂取可能な保健用および／またはスポーツ用飲食品の開発が望まれており、なかでも持久力を向上させ、疲労を抑制する作用を有する飲食品は、運動や筋肉労作を繰り返し行う必要のある労働等を始めとする広義の運動を行うに際して求められている。持久力向上および抗疲労剤の多くは、ビタミン類や生薬からなり、科学的根拠の乏しい古来からの伝承により効果を謳っているものが多い。また、カフェインやアルコールを含有し、興奮、不眠などを伴うものもある。【０００３】
このような背景から、これまで体力または持久力を向上させる成分の探索が行われてきた。例えば、ある種のアミノ酸組成物（特許文献1）、L−カルニチンおよびヒスチジン関連ジペプチド（特許文献2）、サンザシ抽出物（特許文献3）などに体力増強作用があることが報告されている。また、運動等による体力の消耗や疲労時等における栄養補給を目的として、アスコルビン酸を含む栄養補給組成生物が有用であることが示されている（特許文献4）。【０００４】
一方、疲労は、社会生活の変化や高齢化に伴って多くの人々が日常に直面するようになった生体反応の一つである。1985年総理府の「健康に関する国民意識調査」では、約6割強の人が疲労を訴えているが、疲労を訴えている人の7割は「一晩の睡眠により疲労は回復する」と答えた。その後、1999年厚生省疲労調査研究班が実施した疫学調査によると、疲労を自覚している人の割合は約6割と変わっていないが、このうちの6割もの人が6ヶ月以上にわたって疲れを感じていることが報告された。すなわち、ここ14年で慢性的な疲労に悩む人が増加し、疲労の質が変化してきていることが明らかになってきた（非特許文献1）。疲労の形成には多くの因子が関与していると考えられるが、肉体的ストレスばかりではなく、精神的ストレスやウイルス感染などによっても疲労が形成されることがわかってきている。
【特許文献１】特開平９−１２４４７３号
【特許文献２】特開２００１−０４６０２１号
【特許文献３】特開平８−４７３８１号
【特許文献４】特開平６−３２７４３５号
【非特許文献１】疲労の科学、井上正康、倉恒弘彦、渡辺恭良編、講談社、222−228頁、2001
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
従来知られているアミノ酸組成物等とは異なる有効成分を含有する、持久力の向上、体力低下および疲労の軽減または回復に効果を有し、経口摂取して安全な天然物由来の組成物を提供する。特に、運動選手の成績向上のためのみならず、普通の人が仕事をする上での持久力維持や、活力あふれる生活を送るためのものとして日常的に摂取可能で、慢性的な疲労をも改善することができる、持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】ケツメイシ抽出物の体力増強、疲労軽減、疲労回復を促進する効果を示すグラフである。
【図２】ケツメイシ抽出物の断眠負荷による遊離脂肪酸産生を抑制する効果を示すグラフである。
【図３】ケツメイシ抽出物の断眠負荷によるケトン体産生を抑制する効果を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決すべく種々の食品成分を鋭意探索した結果、ケツメイシの抽出物に、持久力の向上、体力増強、疲労軽減、疲労回復を促進する活性があることを発見し、本発明を完成させた。すなわち、本発明は、ケツメイシの種子から水、水と相溶性の有機溶媒、またはこれらの任意の比率の混合物で抽出した成分を有効成分として含む持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物である。【０００８】
ケツメイシ
ケツメイシはマメ科に属する和名エビスグサ（Cassia obtusifoliaまたはCassia tora）の種子であり、焙煎したものが昔から煎じて飲用されている。『中薬大辞典』（上海科学技術出版社  小学館編）によれば、ケツメイシには「肝を清める、目を明らかにする、水を利す、便を通す、の効能がある」として紹介されている。日本薬局方では、整腸を目的として、成人1日量10gを煎じ、3分服することが推奨されている。【０００９】
しかしながら、ケツメイシを焙煎し、煎じて飲用しようとしても、特異なにおいやエグ味、苦みなどがあるため敬遠する向きも多く、現在のライフ・スタイルなどを考えてみると継続的に飲用することは容易ではない。また、近年市販されている配合茶にも香り付け、味付け等の目的でハブ茶として焙煎したケツメイシが配合されているものもあるが、ケツメイシの含有量は著しく低かった。【００１０】
ケツメイシの抽出物
本発明の有効成分であるケツメイシ抽出物を得る方法については、何ら限定されるものではなく、任意の抽出方法を採用することができる。【００１１】
持久力向上および抗疲労効果は、細胞内グルタチオン濃度の増加と相加的または相乗的に発揮すると考えられる。抽出はケツメイシの生種子、焙煎した種子のいずれから行ってもよいが、細胞内グルタチオン濃度を増加する活性成分であるルブロフサリン配糖体が加熱により破壊される性質を持つため、生種子を用いるか、焙煎した種子であっても強度な焙煎を行っていない種子を用いるのが好ましい。また、ケツメイシを破砕せずに抽出することも可能であるが、抽出の効率を高めるためには、ケツメイシは破砕してから用いることが好ましい。破砕の方法に特別な制限はない。【００１２】
抽出の溶媒は、水、水と相溶性の有機溶媒、またはこれらの任意の比率の混合物である。有機溶媒の例としては、エタノール、メタノールなどのアルコール類、酢酸エチルなどのエステル類、アセトンなどのケトン類、メチルエチルエーテルなどのエーテル類などを用いることができる。これらの水または有機溶媒は2種類以上組み合わせて使用してもよいが、飲食物をめざす場合には水あるいはエタノール水溶液を用いるのが妥当である。10〜100％エタノールの使用が好ましい。【００１３】
例えば約30分〜4時間の加温下あるいは1〜3日の室温下抽出を行い、抽出液をろ過し、粗抽出ろ液を得る。その際の加温の温度は、50℃〜95℃であることが好ましい。抽出のため添加する溶媒量は原材料に対して、例えば3〜10倍量が用いられる。【００１４】
上記のように、抽出方法は特に限定されないが、ケツメイシ抽出物は瀉下作用を有することから、瀉下作用を有する成分群に比較して、ルブロフサリン配糖体が比較的多く含有されるケツメイシ抽出物が好適に用いられる。具体的には、下記（A）および（B）
（A）エモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオンおよびオーランチオオブツシン、並びにそれらの配糖体；
（B）ルブロフサリンおよびその配糖体。の比が、を、重量比［（A）/（B）］2.00以下（好ましくは1.90以下、より好ましくは1.80以下、さらに好ましくは1.75以下）で含有する、決明子抽出物が好ましい。ここでいう（A）群は、エモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオン、オーランチオオブツシン、エモジン配糖体、アロエエモジン配糖体、クリソファノール配糖体、フィスシオン配糖体およびオーランチオオブツシン配糖体のうち、存在するもののすべてからなる成分群をいう。エモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオン、オーランチオオブツシンは、決明子およびその抽出物中では、通常、配糖体として存在する。また、ここでいう（B）群は、ルブロフサリンおよびルブロフサリン配糖体からなる。ルブロフサリンがすべて配糖体として存在する場合は、（B）群はルブロフサリン配糖体のみからなる。ルブルフサリンは決明子およびその抽出物中では、通常、配糖体として存在する。さらに、本明細書で「重量比［（A）/（B）］」というときの（A）の重量は、特別な場合を除き、エモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオンおよびオーランチオオブツシンとしての総重量を指す。すなわち、配糖体でないものはそのままで、また配糖体であるものは、配糖部分を除いたエモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオンおよびオーランチオオブツシンとして、それらを総じた重量を指す。また、本明細書で、「重量比［（A）/（B）］」というときの（B）の重量は、ルブロフサリンとしての重量を指す。すなわち、ルブロフサリンとして存在するものはそのままで、ルブロフサリン配糖体は配糖部分を除いたルブロフサリンとして、総じた重量を指す。（A）の重量および（B）の重量は、当業者であれば適宜求めることができる。例えば本明細書の実施例1に示した方法に準じて、決明子抽出物を加水分解酵素（例えば、β−グルコシダーゼ）で処理することにより配糖部分を除去し、HPLCにより配糖部分を除いた目的成分を定量することにより、（A）の重量および（B）の重量を求めることができる。このようなケツメイシ抽出物は、例えば、ケツメイシ種子に爆砕処理を施した後、熱水抽出を行うことことにより得ることができる。【００１５】
吸着樹脂による濃縮
ケツメイシ抽出物の純度をさらに高めることが望ましい場合は、例えば工業的に汎用されているダイヤイオンHP20（三菱化学社製）などの吸着用樹脂や活性炭を利用することができる。水で抽出を行った場合は、抽出ろ液を直接樹脂に、また、エタノール水溶液を溶媒として用いて抽出を行った場合は減圧濃縮操作などによりエタノール濃度を下げた後の抽出液を、樹脂と接触させる。エタノール濃度は好ましくは20％以下にまで低下させる。樹脂からの有効成分の溶出は、10〜100％有機溶媒で行うことができる。例えば、エタノール溶液を用いてエタノール濃度を徐々に高めるステップワイズや濃度勾配などの方法で溶出する。ステップワイズ溶出においては、非限定的例示として、20％エタノール洗浄／80％エタノール溶出、30％エタノール洗浄／60％エタノール溶出などの組み合せが可能である。【００１６】
このようにして得られた抽出液は通常の減圧濃縮、凍結乾燥などの方法により濃縮あるいは乾燥粉体化することができる。また、乾燥粉体化が容易でない濃縮物の場合には、常用のデキストリン、高分子澱粉加水分解物、あるいは高分子ペプチドなどを賦形剤として用いて乾燥粉体化物を製造することができる。ケツメイシ抽出物は、ケツメイシからフラボノイド配糖体を分取したもので、極性の高い増粘性の多糖類や極性の低いわずかに細胞毒の認められるフラボノイド・アグリコンを除去した分画物である。この抽出物には細胞内グルタチオン濃度を増加する活性成分であるルブロフサリン配糖体が約10重量％含有されている（特開2004−2231号）。【００１７】
持久力向上および抗疲労作用および剤
ケツメイシ抽出物を摂取すると、顕著な持久力向上および抗疲労効果が得られる。したがって、ケツメイシ抽出物あるいはルブロフサリン配糖体は、これを経口摂取すると持久力向上、体力増強、疲労軽減、疲労回復を促進するなどの効果を発揮し、持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物の有効成分として極めて有用である。【００１８】
また、疲労の原因物質については未だ不明であるが、候補物質の一つとして持久運動や絶食等食事制限状態に蓄積するケトン体（アセト酢酸、３ヒドロキシ酪酸とアセトンの総称）が挙げられる。ケトン体は、糖の利用性が低下した時、脂肪組織から動員された遊離脂肪酸がβ酸化を受けた結果として生成される代謝産物であることが知られている。ケトン体の生成が増加し、ケトン体生成がその処理能力を上回った場合、ケトン体の血中蓄積が起こり、ケトン血症（ケトーシス）となる。アセト酢酸や３ヒドロキシ酪酸は中等度の強酸であるため、生体の緩衝能を越えてケトン体が蓄積した場合、血液が酸性に傾きアシドーシス状態がもたらされ、疲労感が生じる。また、遊離脂肪酸の増加は、アルブミンと結合していたトリプトファンと競合し、代わりにアルブミンと脂肪酸が結合するため、血中の遊離型トリプトファンが上昇する。この遊離型トリプトファンが脳内に移行し、中枢疲労が引き起こされると言われている（医学のあゆみ  Vol.204  No.5：325−329, 2003）。ケツメイシ抽出物を摂取すると、この遊離脂肪酸およびケトン体の産生を抑制し、代謝的恒常性を維持することで疲労軽減を図ることができる。このように、ケツメイシ抽出物は、持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物の有効成分としてだけでなく、ケトーシスの予防および治療の有効成分としても極めて有用であるといえる。本発明は、ケツメイシ抽出物を含有する、ケトーシス改善剤をも提供するものである。【００１９】
アラニン、アスパラギン酸、グルタミンについて、生体内で血中ケトン濃度を減少させる効果が報告されている（Romano Nosadini, Biochem. J., 190, 323-332, 1980、Eugenio Cersosimo, Am. J. Physiol., 250, E248-E252, 1986）が、これらアミノ酸は、単回投与した場合のケトン体減少効果が一過性で、効果の持続時間が短いため、ケトーシス改善には単回投与を頻回に繰り返す必要があるという問題点があったが、本発明のケツメイシ抽出物を含むケトーシス改善剤は、一日一回、３日間の連続摂取でケトン体濃度減少作用が得られる（実施例３参照）ものであり、摂取の容易さからも優れたケトーシス改善剤であるといえる。【００２０】
上記のとおり、ケツメイシ抽出物を摂取すれば、持久力の向上、疲労軽減効果等の肉体的な生理効果等に加えて、生理的疲労に伴う全身の倦怠感、脱力感などの精神的疲労からも回復することができると期待される。したがって、本明細書において、持久力の向上とは肉体的持久力および精神的持久力の両方を意味し、抗疲労とは肉体的疲労および精神的疲労の両方の防止・軽減・回復を意味する。【００２１】
ケツメイシ抽出物は、pH、水分、酸化、光等に対する安定性が十分高く、幾分の苦みを呈する。そのため、ケツメイシ抽出物はそのままで本発明の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物として、あるいはケトーシス改善剤として用いてもよいが、目的に応じて飲食品、調味料、アルコール飲料、機能食品、医薬品等の種々の形態にすることもできる。それらの具体的形態としては、固形状、半流動状、流動状などを挙げることが出来る。固形状食品としては、キャンデー、ドロップ、トローチ、ガム、ビスケット状、シート状、タブレットやカプセルなどの錠剤、顆粒粉末などの形態の一般食品および健康食品があげられる。半流動状食品としては、ペースト状、ゼリー状、ゲル状などの、また、流動状食品としては、ジュース、清涼飲料、茶、ドリンク剤（例えば、スポーツドリンク）などの形態の一般食品および健康食品があげられる。【００２２】
なお、上記の特許文献1〜3の体力増強剤と本発明のケツメイシ抽出物とを、同時にまたは別々に組み合わせて経口摂取することにより、種々の体力増強剤、持久力向上剤、抗疲労剤の相加作用または相乗作用の発揮が期待できることから、これらを適宜組み合わせて用いてもよい。【００２３】
有効成分の量
本発明の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物のケツメイシ抽出物の含有量は、実施例1または2の抽出物として１回摂取量当たり、100〜30,000mg、好ましくは1,000〜10,000mg；またはルブロフサリンとして、1回摂取量当たり、1〜300mg、好ましくは10〜100mgである。しかし、ケツメイシは昔から常時、決明子煎液やハブ茶として一日に5〜30g生種子相当が飲用されており、経口摂取での実績もあり安全性が高いと考えられる。本発明のケツメイシ抽出物の含有量設定においてもこれらの知見が反映されるべきである。したがって、本発明の有効成分量としては、体力増強、疲労軽減、疲労回復を促進する作用を奏する量のケツメイシ抽出物を含有していて、経口摂取して味等に違和感のない量であること以外は、ケツメイシ抽出物の配合量に特別の制限はない。また、このように安全な有効成分であるため、本発明の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物は、持久力の向上および抗疲労効果の発揮を望む場合毎に摂取してもよく、日常的に摂取して持久力向上および抗疲労効果を発揮させることも可能である。本発明は、また、上述のケトーシス改善剤を含有する経口医薬または食品用組成物であって、一日当たりの投与量または摂取量中に、ルブロフサリンおよびその配糖体（ルブロフサリンを含まない場合は、ルブロフサリン配糖体）を、ルブロフサリンとして1mg以上、好ましくは10mg以上、より好ましくは20mg以上含む、経口医薬または食品用組成物も提供する。血中グルタチオン濃度の上昇という観点からは、一日当たりの投与量または摂取量中に、ルブロフサリンとして、30mg以上含むことが好ましい。【００２４】
本発明の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物は、ヒトのみならず、作業用家畜、猟犬、競走馬、愛玩動物、その他の動物にも効果を有する。【００２５】
本発明の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物は、包装、容器または説明書に有効成分の種類、剤の用途、持久力向上および抗疲労効果の効能、および／または摂取方法を表示してもよい。
【実施例】
【００２６】
以下、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００２７】
実施例1
＜ケツメイシ抽出物の調整例（エタノール抽出物）＞
ケツメイシ生種子（中国産）を40メッシュに粉砕処理し、10倍容の70％（v／v）エタノールを加え、50℃、2時間、攪拌抽出した。抽出液はフィルター濾過し、得られた濾液を減圧濃縮して5％（v／v）エタノール溶液に調整した後、ダイヤイオンHP20吸着カラム（三菱化学社製）にのせた。30％（v／v）エタノール溶液で非吸着物を充分に洗浄した後、50％（v／v）エタノール溶液で溶出させ、得られた溶離液を減圧濃縮した。この方法により、ケツメイシ100gより乾燥重量3.6gの抽出濃縮物が得られた。【００２８】
得られたケツメイシの抽出濃縮物について（A）エモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオンおよびオーランチオオブツシン、並びにそれらの配糖体、（B）ルブロフサリンおよびその配糖体を定量した。分析方法は以下のとおりである。【００２９】
まず、0.6M酢酸バッファー（pH4.9）に酵素のβーグルコシダーゼ（ヤクルト社製）を1mg/mlで溶解し、更にあらかじめエタノールに溶かしたケツメイシの抽出濃縮物を1mg/mlとなるように添加して、40℃、1.5時間反応させた。反応停止液として反応液と同量の0.1%TFA/ CH3CNを加え、ソニック後、0.45μmのフィルターでろ過した溶液を分析試料として調製し、下記条件のHPLCにより分析を行った。なお、この分析試料中では、配糖体でないものはそのままで、また配糖体であったものは配糖部分が除かれてアグリコンとなって存在している。【００３０】
HPLCの分析条件
カラム：Ascentis C18-3μm, 4.6mmφ x 150mm
移動相：A=0.1%TFA/H2O、 B= 0.1%TFA/100%CH3CN, 0.8ml/min
グラジエント： B40%→B80％（10min）、B80%iso10min
インジェクション：10μL、検出：A280nm（PDA：220-500nm）。【００３１】
溶出時間(min.)は、オーランチオオブツシン：7.7、アロエエモジン：8.7、エモジン：12.1、クリソファノール：15.5、フィスシオン：16.8、ルブロフサリン：13.4であった。それぞれ標準物質より検量線を作成して定量した結果、ケツメイシ抽出濃縮物中の（A）群は、エモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオンおよびオーランチオオブツシンとして214.7μg/mgであり、（B）群は、ルブロフサリンとして62.4μg/mgであった。【００３２】
実施例2
＜ケツメイシ抽出物の調整例（爆砕ケツメイシの熱水抽出物）＞
ケツメイシ種子（中国産）を爆砕処理し、20倍容の熱水（90℃）で1時間、攪拌抽出した。抽出液を60メッシュのフィルターで濾過し、α−アミラーゼによる酵素処理を施し、ダイヤイオンHP20吸着カラム（三菱化学社製）にのせた。30％（v／v）エタノール溶液で非吸着物を充分に洗浄した後、50％（v／v）エタノール溶液で溶出させ、得られた溶離液を減圧濃縮した。実施例1と同様にして、得られたケツメイシの抽出濃縮物について（A）エモジン、アロエエモジン、クリソファノール、フィスシオンおよびオーランチオオブツシンおよび（B）ルブロフサリンを定量した。その結果、（A）は88.7μg/mg、（B）は54.8μg/mgであった。【００３３】
実施例3
＜ケツメイシ抽出物の抗疲労効果−1＞
疲労に対する効果を判定する試験として、Tanakaらの方法（Neurosience  Let.352，159−162，2003）を一部改変した方法で実施した。すなわち、被検動物として8週齢の雄性Balb／cマウスを用い、平均体重が均等になるように1群4匹でマウスを4群に群分けした。そのうち、2群は断眠ストレス群として、床敷（ウッドチップ）のかわりに水温23℃の水道水を水深7mmになるように飼育ケージに入れて飼育することにより、マウスを断眠させた。3日間の断眠中に、被検サンプルとして実施例1で調整したケツメイシ抽出物（エタノール抽出物）を1日1回、1g／kg体重で3日間強制経口投与した（断眠ケツメイシ投与群）。対照群には生理食塩液を強制経口投与した（断眠対照群）。残りの2群は通常飼育群として、通常の床敷（ウッドチップ）を敷いた飼育ケージで飼育し、被検サンプルとしてケツメイシ抽出物を1日1回、1g／kg体重で3日間強制経口投与した（通常飼育ケツメイシ投与群）。対照群には生理食塩液を強制経口投与した（通常飼育対照群）。3日後、マウスの尾に体重の9％相当の重りをつけて遊泳させ、10秒以上水没するまでの時間を測定した。【００３４】
断眠群のマウスが通常飼育群のマウスよりも遊泳時間が短縮するのを、ケツメイシ投与群マウスがどれだけ遊泳時間を回復するかにより、疲労に対する効果を判定した。結果を図1に示す。図中、*はスチューデントt検定により危険率0.05％で、また、**は危険率0.01％で有意な差であることを示す。【００３５】
図1の結果から明らかなとおり、断眠対照群の遊泳時間は、通常飼育対照群にくらべ有意に短縮した。一方、断眠ケツメイシ投与群は、遊泳時間の短縮が有意に抑制されたことから、ケツメイシ抽出物は、断眠負荷による疲労を有意に軽減し、疲労回復効果があることが確かめられた。さらに、通常飼育ケツメイシ投与群は、通常飼育対照群にくらべ遊泳時間が有意に延長したことから、ケツメイシ抽出物は、正常マウスの疲労の蓄積を有意に改善し、体力増強に効果があることがわかった。すなわち、ケツメイシ抽出物は、体力増強、疲労軽減、疲労回復を促進することが明らかである。【００３６】
実施例4
＜ケツメイシ抽出物の抗疲労効果−2＞
生体の代謝物疲労をケトン体の変動を指標として検討した。ケツメイシ抽出物としては、実施例2で調整した爆砕ケツメイシの熱水抽出物を用いた。【００３７】
実施例3と同様の方法で疲労負荷動物を作成した。すなわち、被検動物として8週齢の雄性Balb／cマウスを用い、平均体重が均等になるように1群8匹でマウスを3群に群分けした。そのうち、2群は断眠ストレス群として、床敷（ウッドチップ）のかわりに水温23℃の水道水を水深7mmになるように飼育ケージに入れて飼育することにより、マウスを断眠させた。3日間の断眠中に、被検サンプルとしてケツメイシ抽出物（爆砕ケツメイシの熱水抽出物）を1日1回、1g／kg体重で3日間強制経口投与した（断眠ケツメイシ投与群）。対照群には生理食塩液を強制経口投与した（断眠対照群）。残りの1群は通常飼育群として、通常の床敷（ウッドチップ）を敷いた飼育ケージで飼育し、生理食塩液を強制経口投与した（通常飼育対照群）。【００３８】
3日後、マウスより採血した血液を用いて、血清中の遊離脂肪酸およびケトン体を酵素法によって小型生化学自動分析装置（株式会社日立製作所  7070形）で測定した。【００３９】
遊離脂肪酸およびケトン体の測定結果を図2および3に示す。図中、*はスチューデントt検定により危険率0.05％で、また、**は危険率0.01％で有意な差であることを示す。【００４０】
図2の結果から明らかなとおり、断眠対照群の遊離脂肪酸濃度は、通常飼育対照群にくらべ増加した。一方、断眠ケツメイシ投与群は、遊離脂肪酸濃度が顕著に抑制され、通常飼育対照群よりも抑制される傾向にあった。【００４１】
また、図3の結果から明らかなとおり、断眠対照群のケトン体濃度は、通常飼育対照群にくらべ有意に増加した。一方、断眠ケツメイシ投与群は、ケトン体濃度が有意に抑制された。【００４２】
以上の結果から、ケツメイシ抽出物は、断眠負荷による遊離脂肪酸およびケトン体産生を抑制し、疲労軽減および疲労回復効果、ケトーシスの予防および治療効果があることが示唆された。【００４３】
実施例5
＜ケツメイシ抽出物含有飲料の調製＞
実施例2のケツメイシ抽出濃縮物0.9gを189.1gの水に溶解させて缶に充填し、レトルト殺菌（121℃、15分）を行い、ケツメイシ抽出物含有飲料を調製した。淡茶褐色で、かすかなコクと苦味を有する飲料であった。【００４４】
実施例6
＜ケツメイシ抽出物含有食品の調製＞
実施例1のケツメイシ抽出物90.0mgと、賦形剤205.0mg、ショ糖脂肪酸エステル5.0mgとを混合し、打錠機でケツメイシ抽出物含有タブレットを調製した。【００４５】
発明の効果
ケツメイシ抽出物を有効成分とする本発明の持久力向上および／または抗疲労作用を有する組成物は、持久力向上を必要とする際、あるいは肉体疲労または精神疲労時に摂取することにより、血中遊離脂肪酸やケトン体の生成を抑制し、疲労軽減、疲労回復を促進する作用があることが示された。また、日常に摂取することにより、体力増強作用があることも示された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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