(57)【要約】  本発明は、酪酸を産生して整腸作用に優れる酪酸菌と、酪酸菌の基質となり酪酸産生を助長するセロオリゴ糖を含有し、腸内における酪酸産生量を向上させ、腸内環境改善、感染症防御機能等に優れた飲食用組成物を提供することを課題とする。  すなわち、本発明は、酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飲食用組成物、前記酪酸菌が、クロストリジウム・ブチリカムである前記飲食用組成物、酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飼料、および酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する食品を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飲食用組成物。
【請求項２】
酪酸菌が、クロストリジウム・ブチリカムである請求項１に記載の飲食用組成物。
【請求項３】
酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飼料。
【請求項４】
酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する食品。
【請求項５】
酪酸菌およびセロオリゴ糖の、腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飲食用組成物としての利用。
【請求項６】
酪酸菌およびセロオリゴ糖の、腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飼料または食品としての利用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酪酸菌とセロオリゴ糖を含む飲食用組成物に関する。更に詳しくは、酪酸を産生して整腸作用に優れる酪酸菌と、酪酸菌の基質となり酪酸産生を助長するセロオリゴ糖を含有し、腸内における酪酸産生量を向上させ、腸内環境改善、感染症防御機能等に優れた飲食用組成物、及びその用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
腸管は生命維持に必要な栄養素を消化・吸収する役割のほか、有害細菌やウイルス、異物といった外敵から身を守る役割（腸管免疫機能）も有しており、健康維持に非常に重要な器官である。近年の生理機能に関する研究により、腸内フローラ（菌叢）をはじめとする腸内環境の改善が、疾病予防（消化器疾患予防、発ガンリスク低減等）、健康の維持増進に大きく関与する事が解明されている。腸管には１００種類以上・１００兆個の細菌が常在していることが知られており、ビフィズス菌、乳酸菌などの有用菌と、ウェルシュ菌、バクテロイデス菌、大腸菌などの腐敗菌に大別されている。有用菌増殖を促進し腐敗菌抑制作用を有する腸内細菌を整える素材としては、各種プロバイオティクス（腸内フローラのバランスを改善することにより宿主動物に有益に働く生菌剤）やプレバイオティクス（腸内において有用菌を増殖させる因子：オリゴ糖、食物繊維等）が上市されている。【０００３】
体内に本来生息するビフィズス菌等の有用菌を有意に増殖させる物質としてプレバイオティクスがあり、各種オリゴ糖や食物繊維等が用いられている。オリゴ糖としては、フラクトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、ビートオリゴ糖といった難消化性のオリゴ糖が挙げられる。難消化性オリゴ糖は、胃や小腸で分解されずに大腸に達し、大腸内の腸内細菌に資化され、酢酸、プロピオン酸、酪酸、乳酸等の短鎖脂肪酸が生成する。これら短鎖脂肪酸は、消化管血流粘膜血液量の増大、消化管粘膜上皮細胞の増殖、コレステロール合成の抑制等の生理活性を有する。【０００４】
短鎖脂肪酸の中でも乳酸が過剰に蓄積すると、粘膜障害を起こし大腸上皮細胞の新陳代謝に悪影響を及ぼす。一方、酪酸は、大部分は全身のエネルギープールに入る前に大腸上皮細胞に取り込まれ、新陳代謝を活発化させる。又、酪酸にはＤＮＡ修復や大腸ガン予防効果もある。更に、酢酸、プロピオン酸、酪酸は、腸内ｐＨの低下による有害菌の増殖抑制に関与するほか、エネルギー源として利用され、更に腸蠕動運動をも促進する働きがある。【０００５】
オリゴ糖のうち、代表的なプレバイオティクスであるフラクトオリゴ糖はシュークロースにフラクトースが１，４−結合したものである。フラクトオリゴ糖は、腸内の有用細菌、特にビフィズス菌に選択的に資化され、難消化性であるため、腸内菌叢改善に大きく寄与すると言われてきた。しかしながらフラクトオリゴ糖は安定性が十分ではなく、特に酸性溶液中で長時間保存するとグルコース、フラクトース、シュークロースに変化し、その生理活性も低下してしまうという問題があった。他のオリゴ糖についても、同様な欠点を有している。また、ビフィズス菌の増殖は、スカトール、インドール等の腐敗物質を減少させるが、ビフィズス菌から生成される短鎖脂肪酸は乳酸と酢酸が主であり、大腸内の菌叢が大きくビフィズス菌に偏ると酪酸濃度は低下してしまう。この様な背景から、酪酸菌に選択的に資化されるオリゴ糖が望まれていた。【０００６】
ところで、プレバイオティクスのみでは、腸内菌叢のバランスが腐敗菌に偏っている場合には、効果が非常に少ないという問題がある。このため、腸内の有用菌を効果的に増やすため、プロバイオティクス機能を有する生菌剤とプレバイオティクス機能を有するオリゴ糖を配合したシンバイオティクスなるものも商品化されている。【０００７】
特開２００３−９３０１９号公報（特許文献１）においては、プロバイオティクスとしてビフィズス菌を、プレバイオティクスとしてキシロオリゴ糖を含有する経口摂取用組成物が開示されており、コンパクトで保存性に優れた経口摂取用組成物を提供している。又、特開２００５−３４１３５号公報（特許文献２）においては、プロバイオティクス、プレバイオティクス、バイオジェニクスから１種又は２種以上を含む食品有効成分の生体内利用効率を向上させる機能増強組成物が開示されている。又、特開２００４−３５７５０５号公報（特許文献３）においては、ビール酵母、生菌剤、オリゴ糖、茶抽出物を含有する犬の胃腸疾患予防・軽減用サプリメントが開示されている。しかしながら、これらの先行技術においては、ビフィズス菌増殖因子に主眼が置かれており、酪酸の生成に着目したものは無く、腸内環境改善について十分満足のいくものではない。【０００８】
また、特開平７−１４５号公報（特許文献４）には、酪酸菌とグルコマンナンからなる酪酸菌組成物が開示されている。酪酸菌はグルコマンナンを資化するものの、酪酸の産生量は腸内環境を改善するには十分ではなかった。【０００９】
【特許文献１】特開２００３−９３０１９号公報
【特許文献２】特開２００５−３４１３５号公報
【特許文献３】特開２００４−３５７５０５号公報
【特許文献４】特開平７−１４５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、腸内環境を顕著に改善することができる飲食用組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、数ある生菌剤の中でも酪酸を産生して整腸作用に優れる酪酸菌と、セロオリゴ糖を組み合わせることにより、セロオリゴ糖が酪酸菌の基質となり、腸内において酪酸菌の酪酸産生を著しく高めることができることを見出した。そして同時に、腸内の有用菌を効果的に増やし、腐敗物質の量を減少するなど腸内環境の改善を実現できることを見出した。本発明者らは係る知見に基づき本発明を完成するに至り、具現化した態様として下記発明を提供するものである。【００１２】
〔１〕  酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飲食用組成物。
〔２〕  酪酸菌が、クロストリジウム・ブチリカムである〔１〕に記載の飲食用組成物。
〔３〕  酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飼料。
〔４〕  酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する食品。
〔５〕  酪酸菌およびセロオリゴ糖の、腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飲食用組成物としての利用。
〔６〕  酪酸菌およびセロオリゴ糖の、腸内環境改善機能および／または感染症防御機能を有する飼料または食品としての利用。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の飲食用組成物は、セロオリゴ糖が酪酸菌の基質となるだけでなく、腸内において酪酸菌の酪酸産生能を著しく高めることができる。更に、腐敗菌を減少させて有用菌を増加させるだけでなく、腐敗物質を減少させるなど腸内環境を向上させることもできる。よって、本発明の飲食用組成物を人や動物に給与すれば、大腸部位での酪酸菌を増加させ酪酸含量を高めることが出来、大腸上皮細胞を健全な状態に維持することが出来る。その結果、各種感染症に対する防御能が高まり、大腸癌や大腸疾患の予防にもつながり、健康を維持・増進をする事が出来る。また、畜産用動物に供与した場合は、疾病率が低下し、増体重効果に優れるため出荷日数を短縮する事が出来、コスト低減に繋げる事が可能で経済的にもメリットがある。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、実施例３における離乳３０日後の子ブタの糞便中フローラを示すグラフである。
【図２】図２は、実施例３における離乳３０日後の子ブタの糞便中スカトール（ＳＫＴ）量を示すグラフである。
【図３】図３は、実施例３における離乳３０日後の子ブタの糞便中有機酸組成を示すグラフである。
【図４】図４は、実施例３における離乳３０日後の子ブタの糞便中のアンモニア量を示すグラフである。
【図５】図５は、実施例３における離乳時および離乳３０日後の子ブタの血清中のアンモニア量を示すグラフである。
【図６】図６は、実施例４におけるニワトリ初生ヒナ（１８日令、４２日令）の盲腸内容物中の有機酸組成を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明の飲食用組成物は、酪酸菌とセロオリゴ糖を含有する。すなわち、本発明の飲食用組成物は、プロバイオティクスとして酪酸菌を、プレバイオティクスとしてセロオリゴ糖を含有するものであり、腸内、特に大腸において酪酸濃度を高め健全な状態を維持する効果を有する。すなわち、本発明の飲食用組成物は、生体内で腸内環境改善機能と感染症防御機能の両方、或いは少なくとも一方を発揮するものである。【００１６】
本発明の飲食用組成物の有効成分の第一は、酪酸菌である。一般に、プロバイオティクスとしては、ビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐ．）、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．)等が用いられている。乳幼児の腸内菌叢はビフィズス菌等の有用菌が優勢であるが、加齢と共に有用菌が減少し腐敗菌の割合が増加する。このため腐敗菌の抑制や有用菌の増加を目的に、ビフィズス菌や乳酸菌など多くの種類の生菌剤がプロバイオティクスとして用いられている。しかしながら、ビフィズス菌や乳酸菌は、経口摂取しても、胃液や胆汁などの酸に耐性がなく、生きたまま腸まで届くのはごくわずかに過ぎない。又、一部定着したとしても摂取を中止すれば、腸内菌叢はまた腐敗菌優勢のフローラに戻ってしまうといった問題もある。これに対し、本発明において用いる酪酸菌は、好気下では芽胞を形成し、経口的に投与された後、胃内において、蛋白消化液ペプシンと胃酸による低ｐＨ環境とに暴露されるが、芽胞として抵抗性のある酪酸菌は死滅することなくここを通過し、十二指腸に到達する。そこでｐＨ中性付近まで上昇し、食物は各種の消化液により消化され、栄養に富んだ環境が作られた後、酪酸菌は発芽増殖の機会を得る。経口摂取しても、胃液や胆汁で消化されることもなく、胞子状態のまま大腸に届き、大腸内で発芽増殖して酪酸を産生することができる。【００１７】
本発明で用いる酪酸菌は、酪酸を生成する菌であればいかなる菌種でも良い。中でもクロストリジウム属が好ましく、とりわけブチリカム種が好ましい。更にクロストリジウム・ブチリカムの好ましい菌株の代表的なものとしては、後述のようにクロストリジウム・ブチリカムＭＩＹＡＩＲＩ（ミヤイリ）株を挙げることができる。クロストリジウム・ブチリカムは、偏性嫌気性の芽胞形成性である。この菌株は、１９３３年に千葉医科大学衛生学教室（現・千葉大学医学部）宮入近治博士により、ヒト腸管内より、腐敗菌に対して強い拮抗作用がある酪酸菌として報告された。本菌株は腐敗菌をはじめとした種々の消化管病原体に対して拮抗作用を有し、ＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａやＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ等のいわゆる腸内有用菌と共生することにより、整腸効果を発揮する。また、本菌株は芽胞形成細菌であることから、製剤中における安定性および胃酸に対する抵抗性が乳酸菌群と比較し高いことが報告されている。【００１８】
本発明において用いられる酪酸菌としては、具体的には、ラクトバチルス・ブランクラム、クロストリジウム・ブチリカムＮＩＰ１００６、クロストリジウム・ブチリカムＮＩＰ１０１５、クロストリジウム・ブチリカムＮＩＰ１０１７、クロストリジウム・ブチリカム・ミヤイリ５８８が挙げられ、中でも特に酪酸産生能が高いクロストリジウム・ブチリカム・ミヤイリ５８８（ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７８９）が好ましい。クロストリジウム・ブチリカム・ミヤイリ５８８は、通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所（日本国茨城県つくば市東１丁目１番３号（郵便番号３０５））〔現在、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（〒３０５−８５６６  日本国茨城県つくば市東１−１−１  中央第６）に改称されている。〕に、１９８１年（昭和５６年）５月１日付で受託されており、その受託番号は、ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７８９である（昭和４７年５月１６日に寄託された微工研菌寄第−Ｐ  １４６７号より移管）。【００１９】
本発明の飲食用組成物においては、酪酸菌は、市販の生菌剤、例えばミヤリサン錠（ミヤリサン（株）製）などを用いても良いし、酪酸菌を適当な培地で液体培養した後、菌体を分離しそのまま用いても良いし、乾燥して乾燥菌体として用いても良い。市販の生菌剤を用いる場合は、含まれる酪酸菌の純度や含有量などを考慮し、下記の菌数が含まれるよう配合量を調整する。【００２０】
本発明の飲食用組成物においては、有効成分の第２としてセロオリゴ糖を用いる。セロオリゴ糖は、フラクトオリゴ糖などに比べ、腸内の酪酸菌に特に選択的に資化され、酪酸菌の増殖に対し効果が大きいので、酪酸の生成量増加につながる。また、酸性下での安定性も高い。従って、本発明の飲食用組成物においてプレバイオティクスとして有効に作用する。【００２１】
本発明において、セロオリゴ糖は、グルコースが２糖以上β−１，４結合したオリゴ糖である。セロオリゴ糖は通常様々な重合度のオリゴ糖の混合物であるが、単一或いは特定の範囲の重合度のもののみに精製されたものであってもよい。前記オリゴ糖の中でも、本発明においては、グルコース重合度が２〜６のセロビオース、セロトリオース、セロテトロース、セロペンタオース、セロヘキサオースのうちの少なくとも１種を豊富に含むことが好ましく、特にセロビオース、セロトリオース、およびセロテトロースのうちの少なくとも１種を豊富に含むことが好ましく、さらに、セロビオースおよびセロトリオースのうちの少なくとも１種を豊富に含むことが好ましい。具体的には、グルコース重合度が２〜６のセロオリゴ糖の含有率が、５０重量％以上、特に８０重量％以上、中でも９０重量％以上であることが好ましい。そして更に、セロビオースの含有率が７０重量％以上、好ましくは８５重量％以上、より好ましくは９０％重量％以上、さらに好ましくは９５重量％以上であることが望ましい。尚、セロオリゴ糖の立体異性については特に問わないが、一般にＤ体であることが多い。【００２２】
本発明で用いられるセロオリゴ糖は、公知の方法で製造することができる。例えば、化学的方法としては、発煙塩酸−濃硫酸によりセルロースを酸加水分解後、カーボンカラム等によりセロオリゴ糖を分画分取する方法（Ｍｉｌｌｅｒ，Ｇ．Ｌ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＩＩＩ（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ），１３４（１９６３））等が知られている。【００２３】
酵素的な方法としては、アモルファスなセルロースにセルビブリオ（Ｃｅｌｌｖｉｂｒｉｏ）属に属する微生物が生産するセルラーゼを作用させ、限外濾過反応器を組み合わせることにより生成物阻害を解除してセロオリゴ糖を生成させる方法（特開平１−２５６３９４号公報参照）、セルラーゼ中のβ−グルコシダーゼを選択的に除去したセルラーゼをセルロースに作用させて、セロオリゴ糖を製造する方法（特開平５−１１５２９３号公報参照）、湿潤状態の未晒しサルファイトパルプを原料にセルラーゼを作用させる系で限外濾過装置を組み合わせ、セロビオースを含むセロオリゴ糖を作る方法（特公平８−２３１２号公報参照）等が知られている。
又、糖質加リン酸分解酵素（セロデキストリンホスホリラーゼ）の逆反応を利用し、グルコース１リン酸をグルコース供与体として、セロビオースの存在下でセロオリゴ糖を製造する製法も知られている（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｖｏｌ．７７，Ｎｏ．３，２３９−２４２（１９９４））。【００２４】
本発明の飲食品組成物におけるセロオリゴ糖としては、上記のいずれかの方法により製造されたもののほか、市販のもの（ＣＭＳ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ社等）も用いることができる。本発明においては、セルロースをセルラーゼを用いてセロオリゴ糖に分解し、晶析工程などを経てグルコース重合度が２〜４のセロオリゴ糖の純度を高める方法が好適である。【００２５】
さらに、セロオリゴ糖は、酪酸菌の基質になるだけでなく、その他にも特有の生理作用を有する。例えば、脂質代謝への影響については、セロビオースを添加した高蔗糖食でラットを４週間飼育したところ、対照群と比べて体脂肪率が低下し、総コレステロールや中性脂肪も低下することが報告されている（渡辺隆司，Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  Ｃｏｍｍｕｎ．，５，９１（１９９８））。また、ブロイラーや産卵鶏にセロビオースを添加した飼料を与えることにより、脂肪酸合成酵素活性が抑制され、脂肪酸分解酵素活性が上昇することが報告されている（石田藍子、村上斉、山崎誠、大塚誠、眞許勝弘、本間秀彌、金井幸雄、高田良三、日本畜産学会第１０３回大会講演要旨集，５２（２００４）、石田藍子、大塚誠、勝俣昌也、高田良三、金井幸雄、日本畜産学会第１０４回大会講演要旨集，６９（２００５））。このように、セロビオースは、酪酸菌の基質となり、酪酸の生成に効果を発揮するのみでなく、それ自体も生体内の脂質代謝に好影響を及ぼし、生活習慣病予防に役立つと考えられている。本発明の飲食品組成物においてもこれらのセロビオース特有の優れた生理作用もあわせて発揮されるものと推測される。【００２６】
また、本発明者らは、各種腸内細菌のうち、酪酸菌であるクロストリジウム属の細菌が良好にセロオリゴ糖を資化できること、特に、クロストリジウム・ブチリカムは良好にセロオリゴ糖を資化できるとともに酪酸産生能も高いことを確認した。【００２７】
実際に人糞便中において、セロオリゴ糖を添加した場合に選択的に酪酸菌が増殖するかどうか観察するために、糞便懸濁液を調製し、これにコーンスターチもしくはセロオリゴ糖を添加し酪酸菌を接種、培養した結果、セロオリゴ糖添加液は、対照のコーンスターチ添加液と比較して、ｐＨは顕著に低下し、酪酸菌が増殖していることが観察された。
さらに、セロオリゴ糖を３日間自由に摂取させたラットに酪酸菌を投与し、その腸管内容物中の酪酸菌の菌数を調べたところ、セロオリゴ糖摂取ラットの方が非摂取ラットよりも腸内の酪酸菌の菌数の多いことが確認された。【００２８】
これらの実験結果は、消化管内においてセロオリゴ糖が常在腸内細菌により資化されず、併用した酪酸菌のみに選択的に資化されることを示唆するものであり、本発明のようにセロオリゴ糖と酪酸菌とを配合した組成物は、その菌数増大をもたらすといえる。【００２９】
本発明の飲食用組成物における酪酸菌及びセロオリゴ糖の配合量は、医療用であれば患者の年齢、疾患の症状に応じて、また、機能性食品用、動物用はそれぞれ目的に応じて、適宜、増減が可能である。
酪酸菌の量については、特別の制限はないが、典型的には、菌数として一日当たり１×１０5〜１×１０10ＣＦＵ（コロニー形成単位）の範囲であり、好ましくは１×１０6〜１×１０8ＣＦＵの範囲が適当である。この投与量を目安に、一日の投与回数との関係で、本発明の飲食用組成物中の酪酸菌の量を適宜調整すればよい。【００３０】
一方、セロオリゴ糖の配合量は、酪酸菌の基質となり、プレバイオティクスとして整腸作用を助長するために必要な量の範囲とすることができるが、セロオリゴ糖を過剰に摂取すると軟便を引き起こす可能性があることも考慮して定める必要がある。セロオリゴ糖の１日の最大摂取量は、体重１Ｋｇに対し、０．３６ｇ程度とした方が好ましい。通常、本発明の飲食用組成物においては、セロオリゴ糖は０．１〜５０重量％含有させることができ、好ましくは１．０〜３０重量％が適当である。
本発明の飲食用組成物の投与方法は、医薬品では１日、１回〜３回食後に服用することが好ましいが、適宜服用することも可能である。機能性食品用、動物用では、１日１回〜数回自由に摂取して良い。【００３１】
本発明の飲食用組成物の製造は、例えば以下のような方法で行うことができる。
公知のＣＳ培地（特開昭５９−１８７７８４号公報参照）によって培養した酪酸菌を、遠心分離により固液分離し得た菌ペーストを乾燥し得た乾燥菌末に、セロオリゴ糖を添加し、練合機で均一になるまで練合する。次に真空乾燥を行う。真空乾燥の条件は、具体的には例えば、棚式真空乾燥機により５０℃下、５時間、１０ｍｍＨｇとすることができる。得られた乾燥物は粉砕機により粉砕して該組成物を得た。このようにして、乳白色で均質な細粒状でほとんど無味無臭の組成物を得ることができる。【００３２】
本発明の飲食用組成物は、人を含めて全ての動物に適用する事が出来る。また、幼若期から高齢期まで全ての年齢の動物に制限無く用いることが出来ると共に、健康状態、体格などについても特に制限はない。ヒト以外の動物としては、ラット、マウス、ウサギ等の実験動物のほか、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ等の家畜、ニワトリ、アヒル、ウズラ、シチメンチョウ等の家禽、イヌ、ネコ等の愛玩動物などを挙げることができる。
本発明の飲食用組成物の投与方法は特に限定されないが、酪酸菌とセロオリゴ糖を混合し、錠剤、タブレット等にして経口投与しても良いし、粉状又は顆粒状にして飲食物に添加して投与しても良い。また、酪酸菌とセロオリゴ糖を個別の粉末その他の製剤として、添加または投与時には同時に利用する形としても良い。【００３３】
本発明の飲食用組成物を例えば、医薬品として用いる場合の剤型は、このまま各成分の粉末を製剤化せずに用いることができるが、散剤、顆粒剤、細粒剤、錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、タブレット、エンテリックコーティング剤等に製剤化してもよい。希釈剤には、一般の医薬品製剤に使用される賦形剤、結合剤、崩壊剤等が用いられ、これに加えて着色剤、矯味剤、安定化剤、保存剤、滑沢剤等を添加しても良い。【００３４】
本発明の飲食用組成物を食品として用いる場合は、このまま各成分の粉末を製剤化せずに用いることができるが、他の食物繊維、オリゴ糖、穀物類、ビタミン類等を加え、さらに、フレーバー、着色剤、矯味剤等を加え、食に適した形態に形成加工することも可能である。また、食品添加物として、他の食品に添加混合して用いることもできる。【００３５】
動物用飼料としては、酪酸菌とセロオリゴ糖を製剤化せずに粉末の状態で混合して用いてもよいが、食品用とする場合と同様に各種賦形剤、添加剤を加えてもよい。また形状も粉状のままでも良いし、剤型としても用いても良い。また、飼料成分である、とうもろこし粉、大豆かす、大麦粉、裸麦粉、大豆粉、米ぬか、脱脂米ぬか、もみがら、ばれいしょ粉、かんしょ粉、豆腐かす、デンプン、酵母、魚粉等と混合し用いることもできる。
【実施例】
【００３６】
以下、本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。【００３７】
［酪酸の測定方法］
盲腸内容物１５０ｍｇに蒸留水３５０μＬを添加してポリトロンR（キネマチカ社製）でホモジナイズ（Ｌｅｂｅｌ  ３０，３０ｓｅｃ，４℃）後、遠心分離（１５，０００ｒｐｍ・１５ｍｉｎ、４℃）により得られた上清０．５ｍＬにクロロホルム０．５ｍＬを添加した。その上清を、ＶｏｒｔｅｘRミキサーにて１分攪拌後、遠心分離（１５，０００ｒｐｍ・１５ｍｉｎ、４℃）し、得られた上層をミリポアR（ミリポア社製）でフィルターろ過し、１０μＬをＨＰＬＣにチャージした。【００３８】
「ＨＰＬＣ条件」
溶液搬出システム：島津ＬＣ−１０ＡＤ（島津製作所製）
カラム：Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋＳＣＲ−１０２（Ｈ）
検出器：ＣＤＤ−１０Ａ
移動相：５ｍＭ  ｐ−ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ
反応相：２０ｍＭ  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ（５ｍＭ  ｐ−ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ、１００ｍＭ  ＥＤＴＡ含有）
温度  ：４５℃【００３９】
［実施例１］
給水にセロオリゴ糖（セロビオース９６重量％、グルコース２重量％、セロトリオース２重量％）を５重量％混和し、これを３日間自由に摂取させたＩＣＲ系マウス（体重約３０ｇ）に、クロストリジウム・ブチリカム・ミヤイリ５８８（ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７８９）を一頭当り１．０×１０8個、経口投与した。投与３時間、６時間後に動物を屠殺に処し、全消化管を摘出し、嫌気性グローブボックス内において、その内容物中のクロストリジウム・ブチリカム・ミヤイリ５８８の生菌数をＧＡＭ平板培地を用い測定した。なお、対照としてセロオリゴ糖を摂取させていない系についても同様の操作を行った。結果を表１に示す。【００４０】
【表１】
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【００４１】
表１から分かるように、セロオリゴ糖を摂取させた動物において、対照よりも多くの菌が観察された。特に投与３時間後の対照に対する菌数の増加率が多かった。【００４２】
［実施例２］
Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（７週齢）を用い、７日間コーンスターチを炭水化物源とする標準飼料（表２の対照参照）で予備飼育して実験環境に馴化させ、異常のない個体を選別し、１群８匹として実験に供した。表２記載の組成の飼料を用い、セロオリゴ糖（セロビオース９６重量％、グルコース２重量％、セロトリオース２重量％）単独投与区（９重量％）、酪酸菌とセロオリゴ糖併用投与区（セロオリゴ糖９重量％＋酪酸菌粉体０．０３重量％、０．１重量％、０．３重量％）にて、試験を行った。酪酸菌は、クロストリジウム・ブチリカム  ＭＩＹＡＩＲＩ  ５８８（ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７８９）を用いた。酪酸菌粉体中の酪酸菌の菌数は４．１×１０10ＣＦＵ／ｇである。ブランクは標準飼料（表２の対照参照）を与えた区とした。飼料は自由摂取とし、１４日間飼育した後に屠殺し、盲腸内容物の酪酸含量をＨＰＬＣにて測定した。又、酪酸菌粉体の摂取に関しては混餌して自由摂取させる以外に、酪酸菌粉体を１日１回胃内に強制投与（投与量は、６．２×１０9ＣＦＵ／体重２００ｇ）した区も設定した。強制投与区は、餌にセロオリゴ糖を９重量％添加した。それぞれの区の盲腸内容物の酪酸含有量の結果を表３に示す。【００４３】
【表２】
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【００４４】
（表２の脚注）
＊  ビタミン混合物・ミネラル混合物はＡＩＮ−７６組成（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  １０７，１３４０（１９７７））に準じて調製。【００４５】
【表３】
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【００４６】
本実施例の結果から、セロオリゴ糖と酪酸菌を併用することで酪酸産生に相乗効果がみられ、更に酪酸菌投与法を混餌から胃内強制投与にすることで更に相乗効果が高まることが判明した。特に、参考例の結果と併せて考察すると、セロオリゴ糖の添加量を増加させた場合よりも、酪酸菌の添加量を増加させる本実施例の方が酪酸含量が飛躍的に増加したことから、セロオリゴ糖と酪酸菌を併用することにより、相乗効果が発揮され、腸内の酪酸含量を飛躍的に高めることができることが明らかとなった。【００４７】
［参考例１］
宮入菌（酪酸菌）のセロオリゴ糖資化性について他の腸内細菌と比較した。
供試菌株は、宮入菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ  ＭＩＹＡＩＲＩ  ５８８（ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７８９））、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＪＣＭ  ２４９９）、ビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ  ＪＣＭ１２７５）、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ  ＪＣＭ１１３４）の４菌株とした。【００４８】
供試培地は、下記の基礎培地にセロオリゴ糖（セロビオース９６重量％、グルコース２重量％、セロトリオース２重量％）を１重量％添加しｐＨ７．０に調整したもの（ＰＹＣ培地）を用いた。【００４９】
（基礎培地）ＰＹ培地
Ｐｅｐｔｏｎ                        ０．５ｇ
Ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ                ０．５ｇ
Ｙｅａｓｔ  ｅｘｔｒａｃｔ          １．０ｇ
Ｓａｌｔｓ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ        ４．０ｍｌ
Ｄｉｓｔｉｌｌｅｄ  ｗａｔｅｒ  １００．０ｍｌ
Ｈｅｍｉｎ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ        １．０ｍｌ
Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｋ1                 ０．０２ｍｌ
Ｃｙｓｔｅｉｎｅ  ＨＣｌ−Ｈ2Ｏ     ０．０５ｇ【００５０】
前培養した各菌株を、初発菌数が約１０5ＣＦＵ／ｍｌとなるようにＰＹＣ培地に接種した。対照としてＰＹ培地に接種した。宮入菌、ビフィズス菌、乳酸菌は嫌気培養し、枯草菌は好気培養と嫌気培養をした。培養温度は３７℃とした。尚、各菌の前培養については、以下の通りである。宮入菌は、ＧＡＭ  ｂｒｏｔｈに接種後、３７℃で６時間培養した。枯草菌、ビフィズス菌、乳酸菌は、ＧＡＭ  ｂｒｏｔｈに接種後、３７℃で１６時間培養した。【００５１】
セロオリゴ糖を代謝したときに産生される有機酸の産生量によって各菌株の資化性を比較した。培養開始から０，６，１２，２４，４８時間後にサンプルを採取しＨＰＬＣによって有機酸を測定した。ＰＹＣ培地中の有機酸から同じ培養時間のＰＹ培地中の有機酸を引いたものを算出し、有機酸の産生量とした。表４に、それぞれ培養開始から一定時間（６時間、１２時間、２４時間、４８時間）後の各細菌による有機酸産生量（ｍＭ）を示した。【００５２】
【表４】
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【００５３】
表４から明らかなように、宮入菌は他の細菌に比べ、早い時間から有機酸の産生が認められ産生量も多かった。また酪酸を産生したのは宮入菌だけであった。【００５４】
［実施例３］
ブタに対する本発明品の有効性を下記の項目について検討し評価した。
まず、対照区と、本発明品を投与した本発明品投与区（ＭＧＣ区）とから、母ブタを各３腹ずつ、群飼で試験を行った。各母ブタから出生した子ブタのうち各１０頭についてサンプルを採取した。【００５５】
出産日の近い母ブタが揃い次第試験を開始した。試験期間は出産前から離乳後３０日までとし、サンプル採取日は離乳後と試験最終日（離乳３０日後）とした。投与する飼料の組成はブタの成長に合わせ次のように調整した。【００５６】
（投与する飼料）
ａ）．授乳期子ブタ; 基本飼料（ミルク）に本発明品０．５重量％添加したものを離乳まで給餌。
ｂ）．離乳後子ブタ; 基本飼料に本発明品０．２重量％添加したものを約３０日間給餌。
ｃ）．母ブタ; 基本飼料に本発明品０．２重量％添加したものを給餌。
（本発明品）
・組成：
酪酸菌末            １０重量％
セロオリゴ糖        ２０重量％
デンプン            ２０重量％
ブドウ糖            ２０重量％
ケイ酸アルミニウム  ２０重量％
炭酸カルシウム      １０重量％
・セロオリゴ糖は、セロビオース９６重量％、グルコース２重量％、セロトリオース２重量％のものを用いた。
・酪酸菌末は、宮入菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ  ＭＩＹＡＩＲＩ５８８（ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７８９））の生菌体（芽胞）が本発明品１ｇあたり１０7個以上含まれるような割合とした。【００５７】
対照区のブタ（母ブタおよび子ブタ）は基本飼料に何も添加しないまま投与して飼育した。尚、基本飼料は、抗生剤（アビラマイシン、硫酸コリスチン、クエン酸モランテル）配合市販飼料とした。市販飼料とは、子ブタの場合、以下の配合飼料を意味する。【００５８】
（配合飼料）
・授乳期：「マル中印ほ乳期子豚育成用配合飼料プライマーＩ」（中部飼料株式会社製）
・授乳〜離乳期：「マル中印ほ乳期子豚育成用配合飼料プロＩＩ」（中部飼料株式会社製）
・離乳後：「マル中印ほ乳期子豚育成用配合飼料ウェルカムＩＩ」（中部飼料株式会社製）【００５９】
離乳３０日後のＭＧＣ区および対照区の子ブタの糞便を対象として、糞便中フローラと、糞便中の有機酸およびスカトール（ＳＫＴ）の量と、糞便中および血清中のアンモニア量とを測定した。【００６０】
〔糞便中フローラ〕
糞便中の、宮入菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、ウェルシュ菌（Ｃ．ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、腸内細菌科（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）、腸球菌、乳酸菌の菌数を、以下のようにして測定した。【００６１】
対照区およびＭＧＣ区の離乳３０日後の子ブタから採取した糞便を輸送培地に入れ懸濁した。希釈液を用いて１００倍段階希釈し各選択培地に塗抹した。菌数測定には、宮入菌にはＭＩＭ培地、ウェルシュ菌にはＮＮ培地、腸内細菌科にはＤＨＬ培地を用いた。また腸球菌はＴＡＴＡＣ培地、乳酸菌は変法ＬＢＳ培地を用いた。ＤＨＬ培地の場合は１日、ＴＡＴＡＣ培地，ＴＳ培地，ＭＩＭ培地およびＮＮ培地の場合は２日、ＢＬ培地およびＬＢＳ培地の場合は３日間培養し、形成したコロニーを計測して菌数（ｌｏｇＣＦＵ／ｇ）を算出した。尚、腸内細菌科細菌のうち大腸菌については、ＤＨＬ培地上に形成される淡桃色のコロニー数を菌数としてカウントした。【００６２】
さらに腸内細菌のうち、大腸菌毒素産生株の菌数も測定した。大腸菌毒素産生株の検出は、ＤＨＬ培地上の大腸菌による毒素産生をＶＴＥＣ−ＲＰＬＡ（デンカ生研（株））によって行った。【００６３】
実験成績は各試験区を構成する個体の測定値の平均値とその標準偏差で示し、各区間での有意検定はＳｔｕｄｅｎｔ'ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ及びＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ−ｔｅｓｔ法により行った。また、各試験区を構成する個体数に対する、それぞれの菌種が検出された個体数の割合を検出率として算出した。【００６４】
また、対照区についても離乳３０日後の糞便を対象として同様の測定および検定を行った。ＭＧＣ区および対照区における離乳３０日後の糞便中フローラを図１に示した。【００６５】
図１に示すように、対照区の４検体から宮入菌が検出された（対照区＝２．３±０．２２ｌｏｇＣＦＵ／ｇ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝４．０±０．５５ｌｏｇＣＦＵ／ｇ）。ウェルシュ菌はどちらの区からも検出されなかった。腸内細菌科および大腸菌の菌数はＭＧＣ区の方が有意に低かった（腸内細菌科；対照区＝７．１±１．３８  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝４．１±０．７３  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ，大腸菌；対照区＝７．０±１．３９  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝３．４±１．０４  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ）。腸球菌および乳酸菌に差は認められなかった（腸球菌；対照区＝２．６±０．５０  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝２．６±０．３５  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ，乳酸菌；対照区＝８．９±０．５１  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝９．０±０．５９  ｌｏｇＣＦＵ／ｇ）。又、この時分離した大腸菌は全株において毒素産生は確認されなかった。【００６６】
〔糞便中ＳＫＴ〕
対照区およびＭＧＣ区の離乳３０日後の糞便を、０．０３Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で４倍に希釈後、その０．３ｍｌをＳＫＴ測定用として別のチューブに分注した。そこに等量のアセトニトリルを添加してよく混合した後、−２０℃で１５分静置した。６０００ｒｐｍで１５分間遠心し、上清を０．４５μｌのフィルター（商品名：Ｍｉｎｉｓａｒｔ、メーカー名：ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）で濾過後、ＨＰＬＣに供試した。ＨＰＬＣの条件は以下の通りである。【００６７】
（ＨＰＬＣ条件）島津製作所、ＬＣ−１０シリーズ
カラム：ｐｈｅｎｎｏｍｅｎｅｘ  ＯＤＳ−Ｃ１８
カラム温度：４０℃
移動相：０．０２Ｍ酢酸    ６０ｖ／ｖ％
２−プロパノール  １５ｖ／ｖ％
アセトニトリル    ２５ｖ／ｖ％
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ
検出器：紫外分光光度計（島津製作所）
波長：２８０ｎｍ
分析時間：１５分【００６８】
このようにして糞便１ｇ中に占めるＳＫＴ量（μｇ／ｇ）を測定した。実験成績は各試験区を構成する個体の測定値の平均値とその標準偏差で示し、各区間での有意検定はＳｔｕｄｅｎｔ'ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ及びＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ−ｔｅｓｔ法により行った。また、各試験区を構成する個体数に対する、ＳＫＴ陽性の個体数の割合を検出率として算出した。測定結果を図２に示す。【００６９】
図２から明らかなように、糞便中ＳＫＴはＭＧＣ区の方が有意に低かった（対照区＝１３．１±５．７６μｇ／ｇ，ＭＧＣ区＝７．３±４．９３μｇ／ｇ）。【００７０】
〔糞便中有機酸〕
離乳３０日後の糞便を０．０３Ｍ  リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で４倍に希釈後、６０００ｒｐｍで１５分間遠心した。上清を０．４５μＬのフィルター（商品名Ｍｉｎｉｓａｒｔ、会社名ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）で濾過後、ＨＰＬＣに供試した。【００７１】
（ＨＰＬＣ条件）島津製作所、ＬＣ−１０シリーズ
カラム：Ｓｈｉｎ−ｐａｃｋ  ＳＣＲ−１０２Ｈ  ２本
カラム温度：４０℃
移動相：５ｍＭ  ｐ−トルエンスルホン酸水溶液
抽出相：５ｍＭ  ｐ−トルエンスルホン酸水溶液
１００μＭ  トルエンジアミン四酢酸を含む２０ｍＭ  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ
流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ
検出器：電気伝導度検出器  ＣＤＤ−６Ａ（島津製作所）
分析時間：６０分【００７２】
実験成績は各試験区を構成する個体の測定値の平均値とその標準偏差で示し、各区間での有意検定はＳｔｕｄｅｎｔ'ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ及びＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ−ｔｅｓｔ法により行った。測定結果を図３に示す。【００７３】
図３から明らかなように、ＭＧＣ区の方が対照区よりも酢酸、プロピオン酸および酪酸が有意に高かった（酢酸；対照区＝５０．７±９．２７ｍＭ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝６３．１±５．５５ｍＭ，プロピオン酸；対照区＝２６．４±４．０２ｍＭ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝３２．１±６．５３ｍＭ，酪酸；対照区＝８．６±３．０３ｍＭ  ｖｓ  ＭＧＣ区＝１３．１±４．１６ｍＭ）。このように、糞便中の有機酸のうち酢酸、プロピオン酸、酪酸はＭＧＣ区で有意に高かったことから、セロオリゴと宮入菌を配合した本発明品を摂取することで、シンバイオティクスの効果が発揮されたものと考えられる。【００７４】
〔糞便中のアンモニア〕
各試験区の個体の離乳３０日後の糞便を、生化学試験用チューブに採取し、アンモニアの測定をアンモニアテストワコーで行った。実験成績は各試験区を構成する個体の測定値の平均値で示した。測定結果を図４に示す。【００７５】
〔血清中のアンモニア〕
腸管内において腸内細菌により産生されるアンモニアの一部は、腸管から吸収され血液中に取り込まれる。すなわち、血清中のアンモニア量の減少は、腸管内アンモニア産生菌が減少して腸管内のアンモニア量が減少したことを意味し、腸内環境が改善されたことを示す。一方、血清中のアンモニア量の増加は、腸管内アンモニア産生菌が増加して腸管内のアンモニア量が増加したことを意味し、腸内環境が悪化したことを示す。
このように腸内環境の変化の指標と言える血清中のアンモニア量を、離乳時および離乳３０日後の子ブタを対象として以下のように測定した。すなわち、各個体から採血し、この血液をタングステン酸ナトリウムで除蛋白した。得られる上清を生化学試験用チューブに採取し、アンモニアテストワコーでアンモニアの測定を行った。実験成績は各試験区を構成する個体の測定値の平均値で示した。測定結果を図５に示す。【００７６】
図４から明らかなように、ＭＧＣ区においては対照区と比べて糞便中のアンモニア濃度が減少する傾向が確認できた。このことから、セロオリゴ糖と酪酸菌の組み合わせにより腸内環境が改善されること、および糞便の悪臭が抑制されることが分かった。
また、図５から明らかなように、ＭＧＣ区においては対照区と比べて、血清中においてもアンモニア濃度が減少する傾向が確認できた。このことから、セロオリゴ糖と酪酸菌の組み合わせにより腸管内のアンモニア量が減少し、腸内環境が改善されることが分かった。【００７７】
［実施例４］
家禽に対する本発明品の有効性を下記の項目について検討し評価した。
ブロイラーの初生ヒナを、２００００羽ずつ２グループ用意し、対照区および本発明品投与区（試験区）とした。【００７８】
試験区の個体に対しては、市販ブロイラー用飼料（抗生剤未添加）に、宮入菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ  ＭＩＹＡＩＲＩ５８８（ＦＥＲＭ  ＢＰ−２７８９））の芽胞を１×１０8ＣＦＵ／ｇ、セロオリゴ糖（セロビオース９６重量％、グルコース２重量％、セロトリオース２重量％）を２割（２０重量％）含有する本発明品を０．２重量％添加したものを投与した。一方、対照区の個体に対しては市販ブロイラー用飼料（抗生剤未添加）のみ（本発明品無添加）を投与した。
各個体が１８日令，４２日令に達した時点で各区から無作為に５羽選んで屠殺し、腸管（盲腸）内容物を採取した。同時に各区の鶏舎内の新鮮便を５検体ずつ採取した。【００７９】
〔飼養試験〕
各区の個体について増体重（各区の平均体重）、飼料要求率（増体１ｋｇに必要な飼料の量）、商品化率（廃棄されなかった個体の割合（％））を測定した。結果を表５に示す。【００８０】
【表５】
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【００８１】
表５から明らかなように、本発明品を使用した区は、対照区に比べ平均体重、飼料要求率、商品化率、廃棄率（廃棄された個体の割合）共に全て改善が見られた。【００８２】
〔腸管内有機酸〕
盲腸内容物は０．０３Ｍ  リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で４倍に希釈後、１００００ｒｐｍで１５分間遠心した。上清を０．４５μｌのフィルター（商品名Ｍｉｎｉｓａｒｔ、会社名ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）でろ過後、ＨＰＬＣに供試した。ＨＰＬＣの条件は以下の通りである。【００８３】
（ＨＰＬＣ条件）島津製作所、ＬＣ−１０シリーズ
カラム：Ｓｈｉｎ−ｐａｃｋ  ＳＣＲ−１０２Ｈ  ２本
カラム温度：４０℃
移動相：５ｍＭ  ｐ−トルエンスルホン酸水溶液
抽出相：５ｍＭ  ｐ−トルエンスルホン酸水溶液
１００μＭ  トルエンジアミン四酢酸を含む２０ｍＭ  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ
流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ
検出器：電気伝導度検出器  ＣＤＤ−６Ａ（島津製作所）
分析時間：６０分【００８４】
実験成績は各試験区を構成する個体の測定値の平均値とその標準偏差で示し、各区間での有意検定はＳｔｕｄｅｎｔ'ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ及びＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ−ｔｅｓｔ法により行った。測定結果を図６に示す。【００８５】
その結果、図６から明らかなように、盲腸内有機酸は酢酸が最も多かった。また、各有機酸についての、各試験区を構成する個体数に対する検出率については、プロピオン酸および酪酸の検出率が１００％であったほか、その他の各有機酸の検出率も１００％であった。１８日令、４２日令の個体から採取した盲腸内容物においては、いずれも、試験区の酢酸、プロピオン酸、酪酸の割合が対照区のそれよりも増加する傾向が認められ、この傾向は特に酢酸量において顕著であった（１８日令の酢酸量；対照区＝４２．８±１０．１８  ｖｓ  試験区＝５７．２±７．６６  μｍｏｌ／ｇ，４２日令の酢酸量；対照区＝３２．４±１１．６２  ｖｓ  試験区＝４６．７±３．８２μｍｏｌ／ｇ）。酢酸、プロピオン酸、酪酸などの短鎖脂肪酸は、腸内ｐＨの低下による有害菌の増殖抑制に関与するほか、エネルギー源として利用され、更に腸蠕動運動をも促進する働きがある。従って、本試験において対照区よりも試験区の方が腸内における前記短鎖脂肪酸が増加したことは、セロオリゴ糖と酪酸菌との組み合わせにより、腸内環境が改善されたことを示すものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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2007114378.tif 000014
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