(57)【要約】本発明は、脂肪性肝炎、とりわけ非アルコール性脂肪性肝炎、もしくは脂肪肝を予防または治療する医薬、およびこれらの疾患を予防または改善するための飲食品を提供する。具体的には、ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝の予防または治療薬、ならびにルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝を予防または改善する飲食品、好ましくは、前記疾患を予防または改善するために用いるものであるという表示を付した飲食品を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する脂肪性肝炎の予防または治療薬。
【請求項２】
ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する非アルコール性脂肪性肝炎の予防または治療薬。
【請求項３】
ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する脂肪肝の予防または治療薬。
【請求項４】
請求の範囲１〜３いずれかに記載の予防または治療薬、および当該予防または治療薬を脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝の予防または治療のために使用し得るか、または使用すべきであることを記載した書類を含む商業的パッケージ。
【請求項５】
ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、脂肪性肝炎を予防または改善する飲食品。
【請求項６】
ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、非アルコール性脂肪性肝炎を予防または改善する飲食品。
【請求項７】
ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、脂肪肝を予防または改善する飲食品。
【請求項８】
脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝を予防または改善するために用いるものであるという表示を付した、請求の範囲５〜７いずれかに記載の飲食品。
【請求項９】
保健機能食品またはダイエタリーサプリメントである、請求の範囲５〜８いずれかに記載の飲食品。
【請求項１０】
保健機能食品が特定保健用食品または栄養機能食品である、請求の範囲９に記載の飲食品。
【請求項１１】
ルテオリンおよび／またはその配糖体の有効量を対象に投与することを含む、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝の予防または治療方法。
【請求項１２】
請求の範囲１〜３いずれかに記載の予防または治療薬の製造のための、ルテオリンおよび／またはその配糖体の使用。
【請求項１３】
ルテオリンおよび／またはその配糖体を有効成分として含有してなる、脂肪肝の抑制剤。
【請求項１４】
飲食品添加用である、請求の範囲１３に記載の抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂肪性肝炎、とりわけ非アルコール性脂肪性肝炎、もしくは脂肪肝を予防または治療する医薬およびこれらの疾患を予防または改善するための飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
肝臓に中性脂肪がたまってしまう病気である脂肪肝の主な原因としては、肥満、アルコールの過剰摂取、糖尿病がある。肝臓は、食事中の脂肪や糖質から中性脂肪を合成し、この中性脂肪はタンパク質と結合して、肝臓から血管に入り、主にエネルギー源として利用される。しかし、中性脂肪を運び出す肝臓の処理能力には限界があり、その能力を超えて中性脂肪が合成されると、肝細胞内に中性脂肪がたまり脂肪肝となる。脂肪肝では自覚症状はほとんどなく、診断は軽度の肝機能異常をきっかけに、主として超音波検査によって、一部ＣＴ検査によってもおこなわれている。脂肪の蓄積が特に顕著な脂肪肝が長引くと肝障害をきたし、一部は肝線維症や慢性肝炎、肝硬変に進展すると想像されていたが、確定的エビデンスに欠け、従来脂肪肝は進展することのない良性な病態と考えられていた。
脂肪肝の中には炎症を伴わない単純性脂肪肝（ｓｉｍｐｌｅ  ｓｔｅａｔｏｓｉｓ）と炎症を伴う進行性の病態である非アルコール性脂肪性肝炎（ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：以下、ＮＡＳＨと記載することがある）があり、近年注目を集めている。ＮＡＳＨは飲酒歴がないにもかかわらず（１日エタノール換算で２０ｇ以下）、アルコール性肝障害に類似した所見を呈し、約半数が進行性で１０年間に約２０％が肝硬変へ進展していく病態であり、その病態は肥満や、糖尿病、高脂血症など生活習慣病と大きくかかわっていることが知られている。その有病率として、欧米では、人口の２０−３０％が脂肪肝（非アルコール性脂肪性肝炎を含む）を、約３％程度が非アルコール性肝炎を罹患していると推測されている。目本でも、食生活の欧米化により肥満人口、生活習慣病患者の増加に伴い（１９５５年〜１９９９年で肥満人口は男性で約４倍、女性で約３倍に増加）、脂肪肝患者、非アルコール性脂肪肝患者も増加してくることが想定され、欧米と同等の患者が存在すると推測されている。例えば、１５歳以上の日本人肥満者が男性１５００万人、女性１０００万人であり、高度肥満者（ＢＭＩ  ３０以上）が２５０万人いることから推定して、現在本邦では約７５万人のＮＡＳＨ患者がいるとの推計もある（Ａｄｉｐｏｓｃｉｅｎｃｅ  １，３０５，２００５）。ＮＡＳＨの頻度が３〜５％と極めて高い米国では、単純性脂肪肝をＮＡＳＨ予備群と見なし、ＮＡＳＨでも単純性脂肪肝でも治療の第１選択が減量であることに着目し、包括的にＮＡＦＬＤ（ｎｏｎ−ａｌｃｏｈｏｌｉｃ  ｆａｔｔｙ  ｌｉｖｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ）として治療する場合も少なくない。こうした背景のもと、脂肪肝（非アルコール性脂肪性肝炎を含む）の予防または治療薬の開発が切望されているが、臨床現場では充足されていないのが現状である。
ところで、フラボノイドの一種であり、セロリ、ピーマン、春菊、カモミール、紫蘇などに含まれている天然物であるルテオリン（３’，４’，５，７−テトラヒドロキシフラボン）またはその配糖体（３’−グルクロニド、６−Ｃ−フコシド、６−Ｃ−キノボシド、７−Ｏ−ルチノシド等）が様々な薬効を示すことは知られている。たとえば、特開平５−４３４６９号公報には、ルテオリン−３’−グルクロニド等が抗腫瘍薬であるカンプトテシン誘発の下痢を軽減することが、特開平６−１７２１９５号公報には、ルテオリンおよびルテオリン−３’−グルクロニド等にＵＤＰ−グルクロニルトランスフェラーゼ阻害活性を有することが、特開平８−７３３３７号公報には、抗炎症、抗かゆみ作用を示すルテオリン−７−ルチノシド等を含有する外用剤が、特開平１０−２９８０９８号公報にはエゴマやシソの種子またはその脱脂種子から得られるルテオリン等がリポキシゲナーゼ阻害作用を有し、アレルギー性疾患、炎症、循環器系疾患または癌の転移の予防または治療に有効であることが、特開２０００−８６５１０号公報には、エゴマやシソの種子またはその脱脂種子から得られるルテオリン等がヒスタミン遊離抑制作用を有し、たとえば、アレルギー疾患を予防および治療するための医薬品、医薬部外品、化粧品、食品等に適用しうることが、特開２０００−２３９１３６号公報には、シソおよびエゴマの種子または葉から得られるルテオリン等が口腔内細菌に対し、優れた抗菌作用を有し、口腔内抗菌剤として飲食品および口腔用製品に適用しうることが、特開２００１−１１４６７５号公報には、ビタミンＫにルテオリン等フラボノイド類を配合した組成物が、特開２００２−１０７５３号公報には、オリーブ葉から得られるルテオリン等がアミラーゼ阻害作用を有し、アミラーゼ阻害剤、血糖値上昇抑制剤、血糖値上昇抑制作用を有する食品またはダイエット食品として用いうることが、特開２００２−２５５７７８号公報には、ルテオリン−７−グリコシド等が光によるシトラール製品中のシトラールの減少またはシトラール由来の劣化臭の抑制に用いうることが、特開２００３−４０７８１号公報には、ルテオリン自体が抗腫瘍作用を有することから、抗腫瘍活性ヘスペリジン配糖体剤と併用できることが、特開２００３−１２８５５８号公報には、ルテオリン−Ｏ−ルチノシドがアレルギー性鼻炎治療薬として、また当該治療薬を食品に配合することによりアレルギー予防食品として用いうることが、特開２００３−２０１２０８号公報には、ルテオリンまたはその配糖体、またはそれらを含有する植物（モクセイソウ科モクセイソウ属植物であるダイヤーズ  ロケット（Ｄｙｅｒ’ｓ  Ｒｏｃｋｅｔ，Ｗｅｌｄ）、シノブモクセイソウ、モクセイソウ）からの抽出物がメラニン生成抑制作用を示し、化粧料組成物として用いうることが、特開２００４−９１３３８号公報には、ルテオリン等のフラボン類等がウレアーゼ阻害剤としてアンモニア臭抑制剤またはおむつかぶれ防止剤として用いうることが、特開２００４−２１５５５９号公報には、ルテオリンが加工食品（油ちょう食品を含む）からのアクリルアミド生成を抑制しうることが、特開２００５−７５７６６号公報には、ルテオリンおよび／また��その配糖体を含有するエンドセリン−１産生抑制剤として、心臟病または高血圧の治療剤として、種々の食品中に添加して特定保健用食品または機能性食品として、ペットフード、飼料などに添加してペットや家畜の心臓病、高血圧症の改善に、または化粧品に添加して美白用化粧品として用いうることが、および特開２００５−８９３８５号公報には、ニガナ植物の発酵処理物としてルテオリン含量が１００×１０−５ｗｔ％以上となるまで発酵させた発酵処理物からなるリポキシゲナーゼ阻害剤が、炎症やアレルギー症状、循環器疾患、または頭髪の成長阻害や抜毛の調整剤、または化粧品用組成物等に適用しうることが記載されている。
一方、特表２００２−５４２１９２号公報には、イソフラボンを含有している組成物が肝臓の脂肪症、脂肪性肝炎、インシュリン耐性、損傷したグルコース寛容性、Ｘ症候群、異常な血小板機能、または異常な血管反応性の状態を処置または予防する方法が開示されている。ここで、イソフラボンとしては、ダイズに由来するゲニステイン、ゲニスチン、６’’−Ｏ−マロニルゲニスチン、６’’−Ｏ−アセチルゲニスチン；ダイドゼイン、ダイドジン、６’’−Ｏ−マロニルダイドジン、６’’−Ｏ−アセチルゲニスチン；グリシテイン、グリシチン、６’’−Ｏ−マロニルグリシチン、６’’−Ｏ−アセチルグリシチン、Ｂｉｏｃｈａｎｉｎ  Ａ、またはホルモノネチンが記載されている。
従来、ルテオリンまたはその配糖体が脂肪性肝炎または非アルコール性脂肪性肝炎または脂肪肝を予防または治療し得ることは知られていない。
【発明の開示】
【０００３】
本発明は、脂肪性肝炎、とりわけ非アルコール性脂肪性肝炎、もしくは脂肪肝を予防または治療する医薬、およびこれらの疾患を予防または改善するための飲食品を提供することを課題とする。
本発明者は、鋭意検討した結果、エビデンスに基づくルテオリンの脂肪性肝炎に対する予防または治療効果を見出し、本発明を完成するに至った。本願発明は、以下に示す通りである。
（１）ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する脂肪性肝炎の予防または治療薬。
（２）ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する非アルコール性脂肪性肝炎の予防または治療薬。
（３）ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する脂肪肝の予防または治療薬。
（４）前記（１）〜（３）いずれかに記載の予防または治療薬、および当該予防または治療薬を脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝の予防または治療のために使用し得るか、または使用すべきであることを記載した書類を含む商業的パッケージ。
（５）ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、脂肪性肝炎を予防または改善する飲食品。
（６）ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、非アルコール性脂肪性肝炎を予防または改善する飲食品。
（７）ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、脂肪肝を予防または改善する飲食品。
（８）脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝を予防または改善するために用いるものであるという表示を付した、前記（５）〜（７）いずれかに記載の飲食品。
（９）保健機能食品またはダイエタリーサプリメントである、前記（５）〜（８）いずれかに記載の飲食品。
（１０）保健機能食品が特定保健用食品または栄養機能食品である、前記（９）に記載の飲食品。
（１１）ルテオリンおよび／またはその配糖体の有効量を対象に投与することを含む、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝の予防または治療方法。
（１２）前記（１）〜（３）いずれかに記載の予防または治療薬の製造のための、ルテオリンおよび／またはその配糖体の使用。
（１３）ルテオリンおよび／またはその配糖体を有効成分として含有してなる、脂肪肝の抑制剤。
（１４）飲食品添加用である、前記（１３）に記載の抑制剤。
【図面の簡単な説明】
【０００４】
図１は、コリン欠乏・高脂肪・低タンパク食によって生じるマウス脂肪肝および／または脂肪性肝炎改善作用を示す図である。図中Ａは、ルテオリン非投与群の肝組織像を、Ｂはルテオリン投与群の肝組織像を示す。
図２は、ルテオリン非投与群およびルテオリン投与群の肝組織由来のタンパク質の発現を示すウエスタンブロット図である。図中、レーン１および２はリン酸化（Ｔｙｒ７０５）ＳＴＡＴ３を、レーン３および４はＳＴＡＴ３を、レーン５および６はＳＲＥＢＰ１ｃを、レーン７および８はＦＡＳを示し、奇数レーンはルテオリン非投与群を、偶数レーンはルテオリン投与群を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００５】
以下、上記本発明について詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらの説明に拘束されることはなく、以下の例示以外についても、本発明の主旨を損なわない範囲で適宜実施し得る。
本発明者は、有効性および安全性の高い脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎、または脂肪肝の予防または治療薬を求めて鋭意研究を行った結果、ルテオリンおよび／またはその配糖体がコリン欠乏・高脂肪・低タンパク食によって生じる脂肪肝および／または脂肪性肝炎を改善する作用を有することを見出した。
すなわち本発明は、ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する、脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎または脂肪肝の予防または治療薬に関する。また、本発明は、前記予防または治療薬、および当該予防または治療薬を脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎または脂肪肝の予防または治療のために使用し得るか、または使用すべきであることを記載した書類を含む商業的パッケージに関する。
脂質合成経路の中で、近年ＳＲＥＢＰｓ（Ｓｔｅｒｏｌ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  ｅｌｅｍｅｎｔ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ）という転写因子が極めて重要な役割を果たしていることがわかった（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  １０９，１１２５，２００２）。すなわちＳＲＥＢＰｓのｉｓｏｆｏｒｍのひとつであるＳＲＥＢＰ−１（とりわけＳＲＥＢＰ−１ｃ）がＦＡＳ（ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｓｙｎｔｈａｓｅ）遺伝子のプロモーター領域に結合し、ＦＡＳの転写を亢進させる。ＦＡＳは遊離脂肪酸や中性脂肪の合成を司っているため、ＳＲＥＢＰ−１ｃの発現が肝で増強すれば、ＦＡＳを介して脂肪肝が惹起される。さらに最近、ＳＲＥＢＰ−１ｃの転写因子としての成熟および核内移行は、別の転写因子であるＳＴＡＴ３（ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｏｆ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ）のリン酸化（Ｔｙｒ７０５）に依存していることが示された（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １１７，１９３７，２００４）。したがって、ＳＴＡＴ３リン酸化抑制が脂肪肝の抑制につながると考えられる。以前本発明者を含む研究グループは、シソ種子から抽出・精製したルテオリンがユビキチン依存性にリン酸化（Ｔｙｒ７０５）ＳＴＡＴ３の分解を亢進させることを報告した（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４６，７２２，２００５）。その後、当該報告に基づいて、本発明者はルテオリンがリン酸化（Ｔｙｒ７０５）ＳＴＡＴ３の分解亢進を介して脂肪肝を抑制しうるのではないかと考察し、今回の知見に至った。
本発明において、有効成分であるルテオリンは、市販品を用いることもできるが、種々の植物（たとえば、セロリ、ピーマン、春菊、カモミール、シソ、エゴマ、マツの実など。ここでシソまたはエゴマの種子が好ましく、特に脱脂種子が好ましい）から単離して用いてもよい。モクセイソウ科モクセイソウ属植物であるダイヤーズ  ロケット（Ｄｙｅｒ’ｓ  Ｒｏｃｋｅｔ，Ｗｅｌｄ）、シノブモクセイソウ、モクセイソウや、クダモノトケイソウからも単離精製することができる（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０，３４８６，１９９１）。さらに、特開２００５−８９３８５号公報に開示のニガナ植物をルテオリン含量が１００×１０−５ｗｔ％以上となるまで発酵させた発酵処理物から単離精製して使用することもできる。
本発明で使用可能な有効成分であるルテオリン配糖体は、天然に存在し、ルテオリンと糖（例えばグルコース、フコース、ガラクトース、６−デオキシグルコース）との配糖体である。また、糖の結合位置は例えばルテオリン分子の６−Ｃ、８−Ｃ、７−０、または４’−０であり、好ましいルテオリンの配糖体はルテオリン−６−Ｃ−グルコシドである。また、３’−グルクロニド、６−Ｃ−フコシド、６−Ｃ−キノボシド、７−０−ルチノシド等も用いることができる。
ルテオリンおよびルテオリン配糖体は、以下のようにして単離することができる。ルテオリンおよびその配糖体を含有する植物からの単離は、植物の全部または根、茎、葉、花、果実、種子などの一部を、ミキサー等で細かく破砕した後、水、エタノール、メタノール、酢酸エチルなどの抽出溶媒（抽出溶媒は、１種または任意の２種以上を混合して用いることができる）中で攪拌し、遠心分離または濾過により不溶物を除去し、上清または濾液を減圧下で適宜乾燥させ、常法（カラムクロマトグラフィー法等）により行うことができる。本発明には、ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する限り任意の植物の抽出物を用いることができ、たとえば、青ジソ、赤ジソ、エゴマなどのシソ科植物、セリ、アシタバなどのセリ科の植物、セロリ、レタス、春菊、ピーマンなどの野菜、大豆の葉、ピーナッツ種皮、イチョウ、スイカズラ、西洋サクラソウ、カモミール、ペパーミントのほかに、クダモノトケイソウなどの抽出物を用いることができる。
一般に、自然界に存在するフラボノイドは配糖体の形をとることが多いが、シソ種子にはアグリコンの形のルテオリンが多量に含まれている。アグリコンは配糖体よりも抗酸化活性が強いことが知られていることから（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，３９，６９，１９８８）、脂肪性肝炎または非アルコール性脂肪性肝炎予防または治療薬に供するルテオリンは、アグリコンを豊富に含む植物種子から精製されたものを用いることが望ましい。なかでも青ジソ、赤ジソ、エゴマなどのシソ科植物の種子からの抽出が好ましい。当該種子としては、脱脂種子を用いることがより好ましい。
本発明の、ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎、または脂肪肝の予防または治療薬は、ルテオリンおよび／もしくはその配糖体それ自体であっても、または通常用いられる固体または液体の担体、乳化分散剤等により錠剤、粉剤、乳剤、カプセル剤、注射剤、点滴剤、外用剤等の剤形に製剤化されたものであってもよい。上記担体としては、水、ゼラチン、澱粉、ラクトース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油等が挙げられ、製薬上使用が許容されている色素、保存剤、安定剤等補助剤が添加され得る。該脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎、または脂肪肝の予防または治療薬は、禁忌が回避されうる範囲内で他の有効成分を配合してもよく、他の薬物と同時または間隔を置いて使用することができる。
本発明の脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎、または脂肪肝の予防または治療薬中でのルテオリンおよび／またはその配糖体の含有量は、投与目的、投与経路、剤形等によって適宜変更しうるが、例えば、製剤全重量に対して０．０５〜１重量％である。
本発明の脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎、または脂肪肝の予防または治療薬の投与量は、特に限定されるものではなく、例えば、病気の種類、患者の年齢、性別、体重、症状の程度、または投与方法などに応じて適宜決定することができる。たとえば、男子成人に経口投与する場合には、その投与量が１日当たり０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１００００ｍｇ／ｋｇであることが好ましく、１日に１回または複数回に分けて投与することができる。前記投与量は、より好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇ、さらにより好ましくは０．５ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇである。
また、本発明は、上記ルテオリンおよび／またはその配糖体を含有する飲食品に関する。本発明の飲食品は、脂肪性肝炎、とりわけ非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝を予防または改善する目的で摂取される。
本発明の飲食品とは、食品および飲料を包含するものであり、例えば、特定保健用食品および栄養機能食品を含む保健機能食品、ならびにダイエタリーサプリメントなどのいわゆる健康食品を含む一般食品などがあげられる。形態としては、乳飲料、ジュース、スポーツドリンク、日本茶、ウーロン茶、コーヒー、紅茶、ダイエットドリンク、和菓子、洋菓子、パン、アイスクリーム、シャーベット、ハンバーガー、ピザ等に添加して供することもできる。
本発明の飲食品を保健機能食品として使用する場合、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎もしくは脂肪肝を予防または改善するために用いるものであるという表示を付すことができる。表示方法としては、好ましくは、当該飲食品の包装材料に記載する方法、当該飲食晶に添付文書として表示する方法などがあげられる。
本発明の飲食品中に含まれるルテオリンおよび／またはその配糖体の含有量は特に制限されないが、本発明の目的を達成するためには天然の植物中に存在する含有量以上であることが望ましく、例えば、０．００５〜２０重量％程度、好ましくは０．０１〜１０重量％程度、より好ましくは０．０５〜５重量％含有するのが望ましい。
本発明の飲食品から摂取される有効成分の量は、摂取目的、対象の年齢、性別、体重、症状の程度などに応じて適宜決定することができる。たとえば、成人の場合、その摂取量は１日当たり０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１００００ｍｇ／ｋｇであることが好ましく、１日に１回または複数回に分けて摂取することができる。前記摂取量は、より好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇ、さらにより好ましくは０．５ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇである。
本発明の薬品および飲食品は、ヒト以外の動物、例えば、イヌ、ネコ、ハムスター、サル等のペットにも獣医薬として、また飼料に配合して摂取させることができる。
本発明の飲食品を提供するため、あるいは、脂肪肝に関する研究目的のため、ルテオリンおよび／またはその配糖体を有効成分として含有する脂肪肝の抑制剤を提供する。
本発明の脂肪肝の抑制剤は、研究用試薬または飲食品添加物として使用することができるが、好ましくは飲食品添加用である。
本発明の脂肪肝の抑制剤中に含まれるルテオリンおよび／またはその配糖体の含有量は特に制限されないが、通常、０．００５〜１００重量％、好ましくは０．０１〜１００重量％、より好ましくは０．０５〜１００重量％含有するのが望ましい。
本発明の脂肪肝の抑制剤には、担体を含有していてもよい。かかる担体としては、水、ゼラチン、澱粉、ラクトース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油等が挙げられ、食品衛生上使用が許容されている色素、保存剤、安定剤等補助剤が添加され得る。
【実施例】
【０００６】
以下、試験例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
試験例１  ルテオリンのコリン欠乏・高脂肪・低タンパク食によって生じる脂肪肝および／または脂肪性肝炎改善作用
まず、ＢＡＬＢ／ｃマウス６匹にコリン欠乏・高脂肪・低タンパク食（コリン欠乏餌、日本クレア株式会社）を１０週間与え、脂肪肝および／または脂肪性肝炎を発症させた。これらのマウスにルテオリン投与群（ｎ＝３）とルテオリン非投与群（ｎ＝３）を設定した。通常食（ＣＥ−２；日本クレア株式会社）を与えた同系マウス（ｎ＝３）との比較もおこなった。ルテオリン投与群には、シソ種子から抽出・精製された純度９７．２％のルテオリンを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に適量溶解し給水中の最終濃度が約２００ｐｐｍになるよう調整し投与した（この際、多少の析出物が生じることがある）。ルテオリン含有水は隔日に交換した。実験開始１０週後、体重、肝重量を測定し、肝組織を採取、標本を作製した。コリン欠乏・高脂肪・低タンパク食を与えたマウスの体重は、通常食群（３１．１ｇ）よりやや軽かったが、ルテオリン投与群、ルテオリン非投与群間で体重の差はなく、ともに平均２９．２ｇであった。しかしルテオリン非投与群のマウス肝は腫大しており、肉眼的に黄色調を呈していた。肝重量はルテオリン非投与群で２．２３ｇ、ルテオリン投与群で１．８６ｇと、ルテオリン投与群では肝重量の増加が抑制されていた（通常食群の肝重量は１．８４ｇ）。組織学的検討では、ルテオリン非投与群の肝組織肝細胞内に大脂肪滴を有する脂肪変性が顕著に確認され、炎症細胞の浸潤も認められた。これらの組織学的変化が肝腫大・肝重量増加の原因と考えられた。ルテオリン非投与群におけるこれらの組織学的変化は、通常のヒト脂肪肝・脂肪性肝炎の組織像と酷似しており、中心静脈域（Ｚｏｎｅ  ３）に優位に出現していた。一方、ルテオリン投与群では上記の脂肪変性や炎症所見が明らかに乏しく、ルテオリンによって脂肪肝および／または脂肪性肝炎が著しく抑制されたことが示された（図１）。
本試験例における肉眼所見（ルテオリン投与群における脂肪肝抑制）の分子機序を解明するために、脂質代謝を決定的に制御するＳＴＡＴ３分子やＳＲＥＢＰ−１分子について、マウス肝組織を用いＷｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔ法にて検討した。その結果、ルテオリン投与群マウス肝組織においてＳＴＡＴ３リン酸化（Ｔｙｒ７０５）の減弱を認め、その下流の成熟型ＳＲＥＢＰ−１ｃ（ｐ６８）やさらに下流のＦＡＳの発現低下を認めた（図２）。すなわちルテオリンは、ＳＲＥＢＰ−１ｃカスケードを介した脂肪肝形成経路をＳＲＥＢＰ−１ｃより上流に位置するＳＴＡＴ３シグナルを遮断することによって、脂肪肝の発生を抑制したものと考えられた。
【産業上の利用可能性】
【０００７】
本発明によると、安全性が高く、かつ有効な脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎、または脂肪肝の予防または治療薬が提供される。また、本発明によると、安全性が高く、かつ有効な脂肪性肝炎もしくは非アルコール性脂肪性肝炎、または脂肪肝を予防または改善する飲食品が提供される。
本出願は、日本で出願された特願２００５−１７３８１３（出願日：２００５年６月１４日）を基礎としており、その内容は本明細書に全て包含されるものである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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