(57)【要約】  本発明は優れた抗癌活性を有し、また、副作用が少ない新規なホスフィン遷移金属錯体を提供する。  本発明の新規なホスフィン遷移金属錯体は下記一般式（１）2007066557.tif 000028（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｂ1 およびＢ2 はそれぞれＡと共有結合しかつＭに配位結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表し、Ｃはアニオン原子を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体である。
2007066557.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）
【化１】
2007066557.tif 000023
（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｂ1 およびＢ2 はそれぞれＡと共有結合しかつＭに配位結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表し、Ｃはアニオン原子を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体。
【請求項２】
下記一般式（２）
【化２】
2007066557.tif 000024
（式中、Ａ、ＭおよびＣは前記定義どおりであり、Ｄ1 およびＤ2 はそれぞれアルキレン基を表し、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 およびＲ4 はそれぞれ水素原子、アルキル基、ヒロドキシアルキル基、フェニル基、ベンジル基、カルボニル基、アミノ基またはヒドロシル基を表す）で示される請求項１に記載のホスフィン遷移金属錯体。
【請求項３】
Ｄ1 およびＤ2 はテトラメチレン基であり、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 およびＲ4 はそれぞれ低級アルキル基である、請求項２に記載のホスフィン遷移金属錯体。
【請求項４】
Ｍは金原子である請求項１〜３のいずれか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体。
【請求項５】
ビス（１，２−ビス（２，５−ジメチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−ジエチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−ジイソプロピルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジエチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジイソプロピルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチル）−３，４−（ジヒドロキシ）ホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリドまたはビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチル）−３，４−（ジベンジルオキシ）ホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリドである請求項１〜４のいずれか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体の光学活性体。
【請求項７】
下記一般式（３）
【化３】
2007066557.tif 000025
（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｂ1 およびＢ2はそれぞれＡと共有結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表す）で示されるビスホスフィン誘導体と、金、銀、銅または白金の金属塩とを反応させることを特徴とする下記一般式（１）
【化４】
2007066557.tif 000026
（式中、Ａ、Ｂ1 およびＢ2 は前記定義どおりであり、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｃはアニオン種を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体の製造方法。
【請求項８】
下記一般式（１）
【化５】
2007066557.tif 000027
（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｂ1 およびＢ2 はそれぞれＡと共有結合しかつＭに配位結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表し、Ｃはアニオン原子を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体を含有する抗癌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なホスフィン遷移金属錯体、その製造方法およびそれを含有する抗癌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
シスプラチン（ｃｉｓ−ジクロロジアンミン白金（ＩＩ））、カルボプラチン（ｃｉｓ−１，１−シクロブタンジカルボキシラートジアンミン白金（ＩＩ））、ネダプラチン（シス−Ｏ，Ｏ'−グリコラートジアンミン白金（ＩＩ））等の白金錯体は強い抗癌活性を有し、現在主要な抗癌剤として利用されている。【０００３】
また、下記一般式（４）
【化１】
2007066557.tif 000003
において、Ｒ1'〜Ｒ8'が同一または異なってフェニル基、置換フェニルまたはピリジル基であり、Ａ'が直鎖状のアルキレン基またはシスビニレン基であり、Ｍ'が金、銀または銅原子であり、Ｂ'がアニオン種であるホスフィン遷移金属錯体（特許文献１参照）や、Ｒ1'〜Ｒ8'が同一でフェニル基、置換フェニル基もしくはエチル基であるか、またはＲ1'、Ｒ2'、Ｒ7'およびＲ8'がフェニル基でＲ3'〜Ｒ6'がエチル基であり、Ａが直鎖状のアルキレン基またはシスビニレン基であり、Ｍ'が金、銀または銅原子であり、Ｂ'がアニオン種であるホスフィン遷移金属錯体（特許文献２参照）が、シスプラチンに匹敵する抗癌作用を有することが知られている。
【特許文献１】特表平１０−５０９９５７号公報
【特許文献２】特開昭６１−１０５９４号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし、一般に化合物の抗癌活性と抗癌スペクトルは化学構造に大きく依存し、僅かな構造の違いがこれらの特性に大きな差異をもたらすことが知られている。さらに、抗癌剤の効果は人によって様々であり、例えば、最高の抗癌剤とされるタキソールに至っても、有効率は３０％程度である。従って、化学構造の異なる種々の新規な抗癌剤の開発が望まれている。【０００５】
本発明は、かかる実情に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、優れた抗癌性を有する新規なホスフィン遷移金属錯体、その製造方法およびそれを含有する抗癌剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、抗癌作用を有する新規なホスフィン遷移金属錯体について鋭意研究を重ねた結果、特定の構造を有するホスフィン遷移金属錯体が優れた抗癌性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。【０００７】
すなわち、本発明は、下記一般式（１）
【化２】
2007066557.tif 000004
（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｂ1 およびＢ2 はそれぞれＡと共有結合しかつＭに配位結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表し、Ｃはアニオン原子を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体である。【０００８】
本発明はまた、下記一般式（２）
【化３】
2007066557.tif 000005
（式中、Ａ、ＭおよびＣは前記定義どおりであり、Ｄ1 およびＤ2 はそれぞれアルキレン基を表し、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 およびＲ4 はそれぞれ水素原子、アルキル基、ヒロドキシアルキル基、フェニル基、ベンジル基、カルボニル基、アミノ基またはヒドロシル基を表す）で示される前記ホスフィン遷移金属錯体である。【０００９】
本発明はまた、Ｄ1 およびＤ2 はテトラメチレン基であり、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 およびＲ4 はそれぞれ低級アルキル基である、前記ホスフィン遷移金属錯体である。【００１０】
本発明はまた、Ｍは金原子である前記ホスフィン遷移金属錯体である。【００１１】
本発明また、ビス（１，２−ビス（２，５−ジメチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−ジエチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−ジイソプロピルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジエチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジイソプロピルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチル）−３，４−（ジヒドロキシ）ホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリドまたはビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチル）−３，４−（ジベンジルオキシ）ホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリドである前記ホスフィン遷移金属錯体である。【００１２】
また、本発明は、前記ホスフィン遷移金属錯体の光学活性体である。【００１３】
さらに、本発明は、下記一般式（３）
【化４】
2007066557.tif 000006
（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｂ1 およびＢ2はそれぞれＡと共有結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表す）で示されるビスホスフィン誘導体と、金、銀、銅または白金の金属塩とを反応させることを特徴とする下記一般式（１）
【化５】
2007066557.tif 000007
（式中、Ａ、Ｂ1 およびＢ2 は前記定義どおりであり、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｃはアニオン種を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体の製造方法である。【００１４】
さらに、本発明は、下記一般式（１）
【化６】
2007066557.tif 000008
（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｂ1 およびＢ2 はそれぞれＡと共有結合しかつＭに配位結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表し、Ｃはアニオン原子を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体を含有する抗癌剤である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下、本発明をその好ましい実施形態に基づいて詳細に説明する。【００１６】
本発明に係るホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（１）
【化７】
2007066557.tif 000009
（式中、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基を表し、Ｍは金、銀、銅または白金原子を表し、Ｂ1 およびＢ2 はそれぞれＡと共有結合しかつＭに配位結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基を表し、Ｃはアニオン原子を表す）で示されるものである。【００１７】
一般式（１）において、Ａはアルキレン基、フェニレン基またはシスビニレン基である。このうち、アルキレン基としては、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、プロピレン基、エチルエチレン基等の直鎖状または分岐状のアルキレン基が挙げられる。これらの中では、エチレン基又はフェニレン基が特に好ましい。【００１８】
また、Ｍは、金、銀、銅または白金原子である。これらの中では、金原子が特に好ましい。【００１９】
さらに、Ｂ1 およびＢ2 は、それぞれＡと共有結合しかつＭに配位結合しうる３価のリン原子を含む置換基を有してもよい複素環基である。このような複素環基の例としては、ホスフェタニル基、ホスホラニル基、ホスフィナニル基、ホスフェパニル基、ホスホカニル基等が挙げられ、置換基としては、例えばカルボニル基、アミノ基、ヒドロキシル基等の官能基やメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等のアルキル基、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基等のヒドロキシアルキル基、ベンジル基等が挙げられる。【００２０】
なお、Ｂ1 およびＢ2 は、置換基の種類および位置により立体的に異なる構造を採り得るが、Ｂ1 およびＢ2 の立体的構造は同一であっても異なっていてもよい。例えば、Ｂ1が不斉点を１個または複数個持ち、その立体表記がそれぞれＲまたはＲＲ等と表記される場合、Ｂ2 はＢ1 と同一の構造であるＲ、ＲＲであってもよいし、その逆の構造であるＳ、ＳＳであってもよい。但し、本発明のホスフィン遷移金属錯体が光学活性体である場合には、Ｂ1 およびＢ2 は、立体的に同一の構造であることが特に好ましい。【００２１】
また、Ｃはアニオン種であり、具体的には塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子、四フッ化ホウ素、六フッ化リン酸、過塩素酸等が挙がられる。これらの中では、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子が特に好ましい。【００２２】
本発明のホスフィン遷移金属錯体のうち特に好適なものは、下記一般式（２）
【化８】
2007066557.tif 000010
（式中、Ａ、ＭおよびＣは前記定義どおりであり、Ｄ1 およびＤ2 はそれぞれアルキレン基を表し、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 およびＲ4 はそれぞれ水素原子、アルキル基、ヒロドキシアルキル基、フェニル基、ベンジル基、カルボニル基、アミノ基またはヒドロシル基を表す）で示されるホスフィン遷移金属錯体である。【００２３】
一般式（２）において、Ｄ1 およびＤ2 は、同一のまたは互いに異なるアルキレン基である。アルキレン基としては、エチレン基、トリメチレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基等の炭素数２〜１０、好ましくは炭素数３〜６の直鎖状のアルキレン基が挙げられ、中でもテトラメチレン基が好ましい。【００２４】
また、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 およびＲ4 は、同一のまたは互いに異なる水素原子、アルキル基、ヒロドキシアルキル基、フェニル基、ベンジル基、カルボニル基、アミノ基またはヒドロシル基である。このうち、アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基等の炭素数１〜１０、好ましくは炭素数１〜５の直鎖状または分岐状のアルキル基が挙げられ、ヒロドキシアルキル基としては、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基等が挙げられる。これらの中では、メチル基が特に好ましい。【００２５】
本発明のホスフィン遷移金属錯体の好ましい化合物の例としては、ビス（１，２−ビス（２，５−ジメチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−ジエチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−ジイソプロピルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジエチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジイソプロピルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチル）−３，４−（ジヒドロキシ）ホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド、ビス（１，２−ビス（２，５−（ジメチル）−３，４−（ジベンジルオキシ）ホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド等が挙げられる。【００２６】
また、本発明のホスフィン遷移金属錯体は光学活性体であってもよく、特に好ましい光学活性体としては、下記一般式（５）〜（１０）のホスフィン遷移金属錯体の（Ｓ，Ｓ）−体、（Ｒ，Ｒ）−体、メソ体が挙げられる。【００２７】
【化９】
2007066557.tif 000011
2007066557.tif 000012
【化１１】
2007066557.tif 000013
【化１２】
2007066557.tif 000014
【化１３】
2007066557.tif 000015
【化１４】
2007066557.tif 000016
（式中、Ｍ、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 およびＣは前記定義どおりである）。【００２８】
次に、本発明のホスフィン遷移金属錯体の製造方法について説明する。本発明のホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（３）
【化１５】
2007066557.tif 000017
（式中、Ａ、Ｂ1 およびＢ2 は前記定義どおりである）で示されるビスホスフィン誘導体と、金、銀、銅または白金の金属塩とを反応させることにより製造することができる。【００２９】
原料の一般式（３）で示されるビスホスフィン誘導体は、公知の化合物であり、公知の方法により製造することができる。その一例を示せば、下記反応式（Ｉ）
【化１６】
2007066557.tif 000018
（式中、Ａ、Ｂ1 およびＢ2 は前記定義どおりであり、Ｒ5 はメチル基、エチル基、イソプロピル基等の低級アルキル基を表し、Ｄ3 は炭素数１〜５のアルキレン基を表す）に従って、まず、ジオール（化合物（１１））と塩化チオニルと反応させて対応するジオール環状亜硫酸エステルを生成させ、引き続いてこれとＮａＩＯ4 を触媒量のＲｕＣｌ3 の存在下に反応させて原料となるジオール環状硫酸エステル（化合物（１２））を得る。次に、ビスホスフィン化合物（化合物（１３））をｎ―ブチルリチウム等の強塩基と反応させた後、前記で調製したジオール環状硫酸エステル（化合物（１２））を反応液に加え、更にｎ−ブチルリチウム等の強塩基を加えて反応を行うことにより目的とするビスホスフィン誘導体（化合物（１４））を製造することができる（例えば、特表平６−５０８８４８号公報、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｖｏｌ．１１５，Ｎｏ．２２，１９９３，ｐ１０１２５、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，Ｖｏｌ．３８，１９９７，ｐ２９４７、Ｓｙｎｌｅｔｔ，１９９７，ｐ１９７５、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ６３，１９９８，ｐ８０３１、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒｏ．Ｊ．，Ｖｏｌ５，１９９９，ｐ１１６０、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２０００，ｐ４６１５、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ６５，２０００，ｐ６００、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ６５，２０００，ｐ３４８９等参照）。【００３０】
また、本発明において、一般式（１）で示されるホスフィン遷移金属錯体の光学活性体を得るには、一般式（２）で示されるビスホスフィン誘導体の光学活性体を原料として用いて、該光学活性体と後述する金、銅、白金又は銀の遷移金属塩との反応を行えばよい。なお、一般式（２）で示されるビスホスフィン誘導体の光学活性体を得るには、反応式（１）において、出発原料の１，４−ジオール（化合物（１１））の光学活性体を用いればよい。【００３１】
もう一方の原料の金、銀、銅または白金の金属塩は、例えば、これらの金属のハロゲン化物や硝酸塩、過塩素酸塩、四フッ化ホウ素酸塩、六フッ化リン酸塩等を使用することができる。好ましい金の金属塩としては、例えば、塩化金（Ｉ）酸、塩化金（Ｉ）またはテトラブチルアンモニウムクロリド・塩化金（Ｉ）等（社団法人日本化学会編「第５版  実験化学講座２１」平成１６年３月３０日丸善株式会社発行、ｐ３６６〜３８０、Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｃｈｅｍｍ．，１９９７，５０，７７５−７７８頁参照）が挙げられる。好ましい銅の金属塩としては、例えば、塩化銅（Ｉ）、臭化銅（Ｉ）、ヨウ化銅（Ｉ）等（社団法人日本化学会編「第５版  実験化学講座２１」平成１６年３月３０日丸善株式会社発行、ｐ３４９〜３６１）が挙げられる。好ましい白金の金属塩としては、例えば、塩化白金（ＩＩ）、テトラクロロ白金（ＩＩ）酸ナトリウム、テトラクロロ白金（ＩＩ）酸カリウム等（社団法人日本化学会編「第５版  実験化学講座２１」平成１６年３月３０日丸善株式会社発行、ｐ３２７〜３４８）が挙げられる。また、好ましい銀の金属塩としては、例えば、塩化銀（Ｉ）、臭化銀（Ｉ）、ヨウ化銀（Ｉ）等（社団法人日本化学会編「第５版  実験化学講座２１」平成１６年３月３０日丸善株式会社発行、ｐ３６１〜３６６）が挙げられる。なお、これらの金属塩は無水物であっても含水物であってもよい。【００３２】
通常、一般式（２）で示されるビスホスフィン誘導体と、前記金属塩との反応は、前記金属塩に対するモル比で１〜５倍モル、好ましくは１．８〜２．２倍モル量の前記一般式（２）で示されるビスホスフィン誘導体とを、反応温度−２０〜６０℃、好ましくは０〜２５℃、反応時間０．５〜４８時間、好ましくは１〜３時間で、多くの場合、アセトン、アセトニトリル、メタノール、エタノール等の溶媒中で反応させることにより製造することができる。反応終了後、必要により常法の精製を行って製品とする。【００３３】
なお、本発明のホスフィン遷移金属錯体は、一般式（１）で示されるホスフィン遷移金属錯体の式中のＣがハロゲン原子のものを合成し、次いで所望の無機酸、有機酸またはそれらのアルカリ金属塩を溶媒中で反応させることにより、式中のＣを他のアニオンに誘導することができる（特開平１０−１４７５９０号公報、特開平１０−１１４７８２号公報、特開昭６１−１０５９４号公報参照）。【００３４】
本発明のホスフィン遷移金属錯体は、後述するように優れた抗癌作用を有し、抗癌剤として利用することができる。【００３５】
すなわち、本発明の抗癌剤は、一般式（１）で示されるホスフィン遷移金属錯体またはその光学活性体の１種または２種以上を含有してなるものである。【００３６】
本発明の抗癌剤が適用される癌の種類は特に限定されるものではなく、例えば、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、消化器癌、肺癌、食道癌、胃癌、大腸癌、直腸癌、結腸癌、尿管腫瘍、胆嚢癌、胆管癌、胆道癌、乳癌、肝臓癌、膵臓癌、睾丸腫瘍、上顎癌、舌癌、口唇癌、口腔癌、咽頭癌、喉頭癌、卵巣癌、子宮癌、前立腺癌、甲状腺癌、脳腫瘍、カポジ肉腫、血管腫、白血病、真性多血症、神経芽腫、網膜芽腫、骨髄腫、膀胱腫、肉腫、骨肉腫、筋肉腫、皮膚癌、基底細胞癌、皮膚付属器癌、皮膚転移癌、皮膚黒色腫などが挙げられ、さらに悪性腫瘍ばかりでなく良性腫瘍にも適用することができる。また、本発明の抗癌剤は、癌転移を抑制するために使用することもでき、特に、術後の癌転移抑制剤としても有用である。【００３７】
本発明の抗癌剤は、種々の形態でヒトまたは動物に投与することができ、経口投与でもよいし、静脈内、筋肉内、皮下または皮内等への注射、直腸内投与、経粘膜投与等の非経口投与でもよい。経口投与に適する製剤形態としては、例えば、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤などを挙げることができ、非経口投与に適する医薬組成物としては、例えば、注射剤、点滴剤、点鼻剤、噴霧剤、吸入剤、坐剤、または軟膏、クリーム、粉状塗布剤、液状塗布剤、貼付剤等の経皮吸収剤等を挙げることができる。さらに、埋め込み用ペレットや公知の技術により持続性製剤としてもよい。上述したうち、好ましい投与形態や製剤形態等は、患者の年齢、性別、体質、症状、処置時期等に応じて、医師によって適宜選択される。【００３８】
本剤を錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤等の固形製剤とする場合には、前記ホスフィン遷移金属錯体を、常法に従って適当な添加剤、例えば、乳糖、ショ糖、Ｄ−マンニトール、トウモロコシデンプン、合成もしくは天然ガム、結晶セルロース等の賦形剤、デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボシキメチルセルーロースカルシウム、カルボシキメチルセルーロースナトリウム、デンプン、コーンスターチ、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム等の滑沢剤、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム等の充填剤または希釈剤等と適宜混合して製造することができる。錠剤等は、必要に応じて、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、白糖、ポリエチレングリコール、酸化チタン等のコーティング剤を用いて、糖衣、ゼラチン、腸溶被覆、フイルムコーティング等を施しても良い。【００３９】
本剤を注射剤、点眼剤、点鼻剤、吸入剤、噴霧剤、ローション剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の液状製剤とする場合には、前記ホスフィン遷移金属錯体を、精製水、リン酸緩衝液等の適当な緩衝液、生理的食塩水、リンゲル溶液、ロック溶液等の生理的塩類溶液、カカオバター、ゴマ油、オリーブ油等の植物油、鉱油、高級アルコール、高級脂肪酸、エタノール等の有機溶媒等に溶解して、必要に応じてコレステロール等の乳化剤、アラビアゴム等の懸濁剤、分散助剤、浸潤剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油系、ポリエチレングリコール系等の界面活性剤、リン酸ナトリウム等の溶解補助剤、糖、糖アルコール、アルブミン等の安定化剤、パラベン等の保存剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖、グリセリン等の等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、吸着防止剤、保湿剤、酸化防止剤、着色剤、甘味料、フレーバー、芳香物質等を適宜添加することにより、滅菌された水溶液、非水溶液、懸濁液、リポソームまたはエマルジョン等として調整できる。この際、注射剤は、生理学的なｐＨ、好ましくは６〜８の範囲内のｐＨを有することが好ましい。【００４０】
本剤を、ローション剤、クリーム剤、軟膏等の半固形製剤とするには、前記ホスフィン遷移金属錯体を脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、パラフィン、蝋、硬膏剤、樹脂、プラスチック、グリコール類、高級アルコール、グリセリン、水、乳化剤、懸濁化剤等と適宜混和することにより製造することができる。【００４１】
本発明の抗癌剤に含まれる前記ホスフィン遷移金属錯体の含有量は、投与形態、重篤度や目的とする投与量などによって様々であるが、一般的には、製剤の全重量に対して０．００１〜８０重量％、好ましくは０．１〜５０重量％である。【００４２】
本発明の抗癌剤の投与量は、例えば患者の年齢、性別、体重、症状、および投与経路などの条件に応じて適宜医者が決定するものであるが、一般的には、成人一日あたりの有効成分の量として１μｇ／ｋｇから１，０００ｍｇ／ｋｇ程度の範囲であり、好ましくは１０μｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ程度の範囲である。上記投与量の薬剤は一日一回に投与してもよいし、数回（例えば、２〜４回程度）に分けて投与してもよい。【００４３】
本発明の抗癌剤は、既知の化学療法、外科的治療法、放射線療法、温熱療法や免疫療法などと組み合わせて用いてもよい。
【実施例１】
【００４４】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。【００４５】
［実施例１］
ビス（（＋）−１，２−ビス（（２Ｒ，  ５Ｒ）−２，  ５−ジメチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリドの合成【００４６】
窒素気流下、よく脱気乾燥した２口フラスコに、（＋）−１，２−ビス（（２Ｒ，５Ｒ）−２，５−ジメチルホスホラノ）エタン（Ｓｔｒｅｍ社製）４３６ｍｇ（１．６９ｍｍｏｌ）を秤量し、ここに脱気したクロロホルム２５ｍＬを加えて溶解した。次いでテトラブチルアンモニウム金（Ｉ）ジクロリド４３０ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）を一度に加え、室温（２５℃）にて３時間攪拌し反応させた。この反応液を５０ｍＬ分液ロートに移し、１規定塩酸水溶液５ｍＬ、純水１０ｍＬ×３、飽和食塩水１０ｍＬの順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶媒をエバポレーターで留去して５９０ｍｇの表題化合物が白色粉末として得られた。収率は９４％であった。【００４７】
（同定データ）
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）；δ＝１．０−１．３（ｍ，２４Ｈ），１．２−１．４（ｍ
，４Ｈ），１．３−１．５（ｍ，４Ｈ），１．５−１．７（ｍ，４Ｈ），１．９−２．１（ｍ，８Ｈ），２．１−２．３（ｍ，８Ｈ），２．２−２．４（ｍ，４Ｈ）
13Ｃ  ＮＭＲ；δ＝１３．７８（ｓ），２１．３（ｍ），２５．１（ｍ），３４．１，３４．７，３６．５（ｍ），３６．９（ｍ）
31Ｐ  ＮＭＲ（１Ｈ  ｄｅｃｏｕｐｌｅｄ，  ＣＤＣｌ3 ）；δ＝３７．２（ｓ）
ＩＲ（ＫＢｒ）；２９２７，２８６５，１４５４，１４０７，１３７５ｃｍ-1
ＭＳ（ＦＡＢ，ＰＯＳ）；ｍ／ｚ  ７１３．（Ｍ+ −Ｃｌ- ）【００４８】
[実施例２］
ビス（（−）−１，２−ビス（（２Ｓ，  ５Ｓ）−２，  ５−ジメチルホスホラノ）エタン）金（Ｉ）クロリド【００４９】
窒素気流下、よく脱気乾燥した２口フラスコに、（−）−１，２−ビス（（２Ｓ，５Ｓ）−２，５−ジメチルホスホラノ）エタン（Ｓｔｒｅｍ社製）４２３ｍｇ（１．６４ｍｍｏｌ）を秤量し、ここに脱気したクロロホルム２５ｍＬを加えて溶解した。次いでテトラブチルアンモニウム金（Ｉ）ジクロリド４１８ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）を一度に加え、室温（２５℃）にて３時間攪拌し反応させた。この反応液を５０ｍＬ分液ロートに移し、１規定  塩酸水溶液５ｍＬ、純水１０ｍＬ×３、飽和食塩水１０ｍＬの順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶媒をエバポレーターで留去して５６６ｍｇの表題化合物が白色粉末として得られた。収率は９４％であった。【００５０】
（同定データ）
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）；δ＝１．０−１．３（ｍ，２４Ｈ），１．２−１．４（ｍ
，４Ｈ），１．３−１．５（ｍ，４Ｈ），１．５−１．７（ｍ，４Ｈ），１．９−２．１（ｍ，８Ｈ），２．１−２．３（ｍ，８Ｈ），２．２−２．４（ｍ，４Ｈ）
13Ｃ  ＮＭＲ；δ＝１３．７８（ｓ），２１．３（ｍ），２５．１（ｍ），３４．１，３４．７，３６．５（ｍ），３６．９（ｍ）
31Ｐ  ＮＭＲ（１Ｈ  ｄｅｃｏｕｐｌｅｄ，  ＣＤＣｌ3 ）；δ＝３７．２（ｓ）
ＩＲ（ＫＢｒ）；２９２７，２８６５，１４５４，１４０７，１３７５ｃｍ−１
ＭＳ（ＦＡＢ，ＰＯＳ）；ｍ／ｚ  ７１３．（Ｍ+ −Ｃｌ- ）【００５１】
［実施例３］
ビス（１，２−ビス（（２Ｓ，５Ｓ）−２，５−（ジメチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド【００５２】
窒素ガスで置換した５０ｍｌ二口フラスコに１，２−ビス（（２Ｓ，５Ｓ）−２，５−（ジメチルホスホラノ）ベンゼン（Ｓｔｒｅｍ社製）０．５０ｇ（１．６０ｍｍｏｌ）の脱気クロロホルム溶液を入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．４２ｇ（０．８０ｍｍｏｌ）を加え室温（２５℃）で４時間撹拌した。得られた溶液を乾固しメタノール―ジエチルエーテルで再結晶した。得られたうす黄針状晶を洗浄し、減圧下乾燥後、表題化合物０．６４ｇを得た（収率９３％）。【００５３】
（同定データ）
1Ｈ  ＮＭＲ（３００．４ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３  ）；δ＝０．７４−０．８１（ｍ，１２Ｈ），１．１６−１．２５（ｍ，１２Ｈ），１．５２−１．６３（ｍ，４Ｈ），１．７４−１．８８（ｍ，４Ｈ），２．２１−２．３４（ｍ，８Ｈ），２．５４−２．６８（ｍ，８Ｈ），７．５８−７．６２（ｍ，４Ｈ），７．７１−７．７４（ｍ，４Ｈ）
13Ｃ  ＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）；δ＝１４．４（ｓ），２１．３（ｍ），３５．７（ｓ），３５．９（ｓ），３７．５（ｍ），４０．３（ｍ），１３０．６（ｓ），１３３．２（ｍ），１４２．２（ｓ）
31Ｐ  ＮＭＲ（１２１．５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3 ）δ＝３８．９（ｓ）
Ｍａｓｓ（ＦＡＢ，ＰＯＳ）；ｍ／ｚ  ８０９．（Ｍ+ −Ｃｌ- ）【００５４】
［実施例４］
ビス（１，２−ビス（（２Ｒ，５Ｒ）−２，５−（ジメチルホスホラノ）ベンゼン））金（Ｉ）クロリド【００５５】
窒素ガスで置換した５０ｍｌ二口フラスコに１，２−ビス（（２Ｒ，５Ｒ）−２，５−（ジメチルホスホラノ）ベンゼン（Ｓｔｒｅｍ社製）０．５０ｇ（１．６０ｍｍｏｌ）の脱気クロロホルム溶液を入れた。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド０．４２ｇ（０．８０ｍｍｏｌ）を加え室温（２５℃）で４時間撹拌した。得られた溶液を乾固しメタノール―ジエチルエーテルで再結晶した。得られたうす黄針状晶を洗浄し、減圧下乾燥後、表題化合物０．６１ｇを得た（収率８９％）。【００５６】
（同定データ）
Ｍａｓｓ（ＦＡＢ，  ＰＯＳ）；ｍ／ｚ  ８０９．（Ｍ+ −Ｃｌ- ）【００５７】
なお、実施例１〜４で得られた化合物を下記一般式（１５）および表１にまとめた。
【化１７】
2007066557.tif 000019
【表１】
2007066557.tif 000020
【００５８】
［実施例５］
抗癌性の評価【００５９】
実施例１〜４で得られたホスフィン金錯体の腫瘍細胞に対する活性を以下の方法により評価した。なお、比較例としてシスプラチン（比較例１）についても同様に評価した。【００６０】
癌細胞としてＨＬ−６０（ヒト急性骨髄性白血病細胞）を使用し、１０％ウシ胎児血清および１％抗生物質、抗真菌剤を補足したＲｏｓｅｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ培地（ＲＰＭＩ１６４０）中で、５％二酸化炭素雰囲気下、湿潤インキュベーター中、３７℃で培養した。【００６１】
細胞はＰＢＳで洗浄し、細胞数を算定後、同じ培地を用いて１×１０6 細胞／ｍｌ懸濁液を調製した。滅菌９６ウエルのマイクロプレートに前記の懸濁液を５００００細胞／ウエルの密度となるように加えた。【００６２】
つぎに、水もしくはジメチルスルホキシドに完全に溶解させた実施例１〜４で調製したホスフィン金錯体溶液またはシスプラチン溶液（比較例１）を加え、引き続き２４時間インキュベータ中で培養した。【００６３】
その後、生存細胞数をＭｏｓｍａｎｎ（Ｔ．Ｍｏｓｍａｎｎ，  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄ（１９８３））６５，５５−６３）変法により評価した。即ち、テトラゾリウム塩（３，［４，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｅ−２−ｙｌ］−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ，ＭＴＴ）溶液を加え、さらに３時間、同条件で培養した。細胞内のミトコンドリアの酵素活性により生成したホルマザン結晶を０．０４ｍｏｌ／ＨＣｌ／イオソプロピルアルコールで溶解し、マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  ５５０）を用い、５９５ｎｍの吸光度を測定した。バックグランドを排除するために６３０ｎｍの吸光度を測定し、実測値から差し引いた。これを生存細胞数として評価し、５０％細胞発育抑制濃度（ＩＣ50）を算出した。なお、ＩＣ50値の算出に当たっては、同様に実施した少なくとも３回以上の実験値の平均値を採用した。この結果を表２に示す。
【表２】
2007066557.tif 000021
【００６４】
表２の結果から明らかなように、本発明のホスフィン遷移金属錯体はシスプラチンよりも優れた抗癌作用を有することがわかった。【００６５】
［実施例５］
毒性試験【００６６】
実施例４で得られたホスフィン金錯体試料ついてラットによる単回経口投与によるシスプラチン（比較例１）との毒性比較試験を行った。【００６７】
Ｓｐｒａｕｇｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ＳＰＦラット（ＣｒＪ：ＣＤ（ＳＤ））の雌を約１週間検疫・馴化飼育した後、健康な８週齢のラットを選び、選ばれたラット５匹を１群とした。投与前一晩絶食させたラットに、溶媒としてコーンオイルを用い、ホスフィン金錯体は２０、５０、１００、３００ｍｇ／ｋｇ、シスプラチンは１０、２０、５０、１００ｍｇ／ｋｇで単回経口投与し、投与後、１０、３０分、１、２、４時間および以後毎日、１４日目まで観察し、ラットの生存率から５０％致死量（ＬＤ50）を求めた。この結果を表３に示す。
【表３】
2007066557.tif 000022
【００６８】
表３の結果より、本発明のホスフィン金錯体を投与したラットは１４日経過後も死亡は認められなく、また、この間、一般状態、体重推移及び内臓所見において特記すべき変化もないことから、本発明のホスフィン金錯体は低毒性であることが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００６９】
本発明のホスフィン遷移金属錯体は優れた抗癌活性を有し、各種癌の予防および治療剤として極めて有用である。また、本発明のホスフィン遷移金属錯体は、副作用が少なく、極めて安全に利用することができる。また、本発明の製造方法によれば、かかるホスフィン遷移金属錯体を工業的に有利な方法で提供することができる。<span
【国際調査報告】
2007066557.tif 000029
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