【手続補正書】
【提出日】平成30年12月3日(2018.12.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血清アルブミンに対する抗原結合フラグメント（Ｆａｂ）であって、
（ａ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５および配列番号６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）；および
（ｂ）配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１および配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）
を含み、
Ｆａｂは、血清アルブミン（ＳＡ）に特異的に結合する、
前記Ｆａｂ。
【請求項２】
血清アルブミン（ＳＡ）に対して結合する、抗原結合フラグメント（Ｆａｂ）であって、
（ａ）ＶＨドメインのＣＤＲを決定する配列番号１３（ＣＤＲ１）、１４（ＣＤＲ２）および１５（ＣＤＲ１５）のアミノ酸配列；および
（ｂ）ＶＬドメインのＣＤＲを決定する配列番号１６（ＣＤＲ１）、１７（ＣＤＲ２）および１８（ＣＤＲ３）のアミノ酸配列
を含む、前記Ｆａｂ。
【請求項３】
ＶＨドメインが重鎖定常１ドメイン（ＣＨ１ドメイン）に結合され、およびＶＬドメインが軽鎖定常ドメイン（ＣκＬドメイン）に結合されている、請求項２に記載のＦａｂ。
【請求項４】
ＶＨドメインが配列番号６のアミノ酸配列を有し、およびＶＬドメインが配列番号１２のアミノ酸配列を有する、請求項３に記載のＦａｂ。
【請求項５】
ＣＨ１ドメインおよびＣκＬドメインのシステインのアミノ酸が欠失しているか、またはセリンを含み、システインを除く、任意の他のアミノ酸残基で置換されている、請求項１〜４のいずれか一項に記載のＦａｂ。
【請求項６】
ＣＨ１ドメインのシステインのアミノ酸が、ＣＨ１ドメインのＮ末端から数えて２３３番のアミノ酸であり、およびＣκＬドメインのシステインがＣκＬドメインのＮ末端から数えて２１４番のアミノ酸である、請求項５に記載のＦａｂ。
【請求項７】
ＣＨ１ドメインのシステインのアミノ酸およびＦａｂのＣκＬドメインのシステインのアミノ酸は欠失しているか、またはセリンを含み、システインを除く任意の他のアミノ酸残基で置換され；および生理活性エフェクター部分がタンパク質または（ポリ）ペプチドであり；およびＦａｂと生理活性エフェクター部分とが遺伝子的融合によって共有結合されている、抗原結合フラグメント（Ｆａｂ）と生理活性エフェクター部分との融合コンストラクト。
【請求項８】
生理活性エフェクター部分がタンパク質または（ポリ）ペプチドであり；およびＦａｂと生理活性エフェクター部分とが遺伝子的融合によって共有結合されている、請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗原結合フラグメント（Ｆａｂ）と生理活性エフェクター部分との融合コンストラクト。
【請求項９】
Ｆａｂと生理活性エフェクター部分とが、０〜２０アミノ酸のペプチドリンカーを使用して遺伝子的融合によって共有結合されている、請求項７または８に記載の融合コンストラクト。
【請求項１０】
生理活性エフェクター部分が、ホルモン、サイトカイン、酵素、抗体、成長因子、転写因子、血液因子、ワクチン、構造タンパク質、リガンドタンパク質、およびレセプターからなる群から選択される１つである、請求項７〜９のいずれか一項に記載の融合コンストラクト。
【請求項１１】
請求項７〜９のいずれか一項に記載の融合コンストラクトであって、生理活性エフェクター部分が、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）、成長ホルモン放出ペプチド、インターフェロン、インターフェロンレセプター、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、グルカゴン様ペプチド、Ｇタンパク質結合レセプター、インターロイキン、インターロイキンレセプター、酵素、インターロイキン結合タンパク質、サイトカイン結合タンパク質、マクロファージ活性化因子、マクロファージペプチド、Ｂ細胞因子、Ｔ細胞因子、タンパク質Ａ、アレルギーインヒビター、細胞ネクローシス糖タンパク質、イムノトキシン、リンフォトキシン、腫瘍ネクローシス因子、腫瘍抑制因子、転移成長因子、アルファ−１抗トリプシン、アルブミン、アルファ−ラクトアルブミン、アポリポタンパク質Ｅ、エリトロポエチン、高グリコシル化エリトロポエチン、アンジオポエチン、ヘモグロビン、トロンビン、トロンビンレセプター活性化ペプチド、トロンボモジュリン、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第ＸＩＩＩ因子、プラズミノゲン活性化因子、フィブリン結合ペプチド、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ヒルジン、タンパク質Ｃ、Ｃ反応性タンパク質、レニンインヒビター、コラゲナーゼインヒビター、スーパーオキシドジスムターゼ、レプチン、血小板由来成長因子、上皮成長因子、表皮成長因子、アンギオスタチン、アンギオテンシン、骨成長因子、骨刺激タンパク質、カルシトニン、インシュリン、アトリオペプチン、軟骨誘導因子、エルカトニン、結合組織活性化因子、組織因子経路インヒビター、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、神経成長因子、副甲状腺ホルモン、リラキシン、セクレチン、ソマトメジン、インシュリン様成長因子、副腎皮質ホルモン、グルカゴン、コレシストキニン、膵臓ポリペプチド、ガストリン放出ペプチド、コルチコトロピン放出因子、甲状腺刺激ホルモン、オートタキシン、ラクトフェリン、ミオスタチン、レセプター、レセプターアンタゴニスト、細胞表面抗原、ウイルス由来ワクチン抗原、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および抗体フラグメントからなる群から選択される１つである、前記融合コンストラクト。
【請求項１２】
生理活性エフェクター部分が、ｈＧＨ、ＧＣＳＦ、またはＩＦＮである、請求項１１に記載の融合コンストラクト。
【請求項１３】
生理活性（ポリ）ペプチド（またはタンパク質）のＦａｂに対するモル比が、１：１と１０：１との間、好ましくは１：１と４：１との間である、請求項７〜１２のいずれか一項に記載の融合コンストラクト。
【請求項１４】
（ａ）プロモーター；（ｂ）請求項１〜５のいずれか一項に記載のＦａｂをコードする第一の核酸配列；および（ｃ）生理活性（ポリ）ペプチドまたはタンパク質および任意にリンカーをコードする第二の核酸配列を含む、発現ベクターであって、プロモーター、第一の核酸配列および第二の核酸配列が作動可能に連結されている、前記発現ベクター。
【請求項１５】
請求項１４に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１６】
宿主細胞が大腸菌である、請求項１５に記載の宿主細胞。
【請求項１７】
宿主細胞がＳＵＰＥＸ５（ＫＣＴＣ １２６５７ＢＰ）である、請求項１７に記載の宿主細胞。
【請求項１８】
大腸菌のペリプラズムにおける生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドの可溶性発現を増加させる方法であって、大腸菌中に発現ベクターを導入することを含み；ここで、発現ベクターが、（ａ）プロモーター、（ｂ）抗原結合フラグメント（Ｆａｂ）をコードする第一の核酸配列、および（ｃ）リンカーおよび生理活性（ポリ）ペプチドまたはタンパク質をコードする第二の核酸配列を含み；プロモーター、第一の核酸配列および第二の核酸配列が、作動可能に連結され；ならびにＦａｂのＣＨ１ドメインおよびＣκＬドメインのシステインのアミノ酸が、欠失しているか、またはセリン残基で置換されている、前記方法。
【請求項１９】
大腸菌がＳＵＰＥＸ５（ＫＣＴＣ １２６５７ＢＰ）である、請求項１８に記載の大腸菌のペリプラズムにおいて生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドの可溶性発現を増加させる方法。
【請求項２０】
請求項１３に記載の発現ベクターを大腸菌中に導入することを含む、大腸菌のペリプラズムにおいて生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドの可溶性発現を増加させる方法。
【請求項２１】
大腸菌がＳＵＰＥＸ５（ＫＣＴＣ １２６５７ＢＰ）である、請求項２０に記載の大腸菌のペリプラズムにおいて生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドの可溶性発現を増加させる方法。
【請求項２２】
生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドが、ホルモン、サイトカイン、酵素、抗体、成長因子、転写因子、血液因子、ワクチン、構造タンパク質、リガンドタンパク質、およびレセプターからなる群から選択される１つである、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の方法であって、生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドが、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）、成長ホルモン放出ペプチド、インターフェロン、インターフェロンレセプター、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、グルカゴン様ペプチド、Ｇタンパク質結合レセプター、インターロイキン、インターロイキンレセプター、酵素、インターロイキン結合タンパク質、サイトカイン結合タンパク質、マクロファージ活性化因子、マクロファージペプチド、Ｂ細胞因子、Ｔ細胞因子、タンパク質Ａ、アレルギーインヒビター、細胞ネクローシス糖タンパク質、イムノトキシン、リンフォトキシン、腫瘍ネクローシス因子、腫瘍抑制因子、転移成長因子、アルファ−１抗トリプシン、アルブミン、アルファ−ラクトアルブミン、アポリポタンパク質−Ｅ、エリトロポエチン、高グリコシル化エリトロポエチン、アンジオポエチン、ヘモグロビン、トロンビン、トロンビンレセプター活性化ペプチド、トロンボモジュリン、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第ＸＩＩＩ因子、プラズミノゲン活性化因子、フィブリン結合ペプチド、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ヒルジン、タンパク質Ｃ、Ｃ反応性タンパク質、レニンインヒビター、コラゲナーゼインヒビター、スーパーオキシドジスムターゼ、レプチン、血小板由来成長因子、上皮成長因子、表皮成長因子、アンギオスタチン、アンギオテンシン、骨成長因子、骨刺激タンパク質、カルシトニン、インシュリン、アトリオペプチン、軟骨誘導因子、エルカトニン、結合組織活性化因子、組織因子経路インヒビター、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、神経成長因子、副甲状腺ホルモン、リラキシン、セクレチン、ソマトメジン、インシュリン様成長因子、副腎皮質ホルモン、グルカゴン、コレシストキニン、膵臓ポリペプチド、ガストリン放出ペプチド、コルチコトロピン放出因子、甲状腺刺激ホルモン、オートタキシン、ラクトフェリン、ミオスタチン、レセプター、レセプターアンタゴニスト、細胞表面抗原、ウイルス由来ワクチン抗原、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および抗体フラグメントからなる群から選択される１つである、前記方法。
【請求項２４】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のＦａｂに対して生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドを遺伝子的融合によって連結させることを含む、生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドのインビボの半減期を増加させる方法。
【請求項２５】
Ｆａｂに対して生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドが０〜２０アミノ酸のペプチドリンカーによって連結されている、請求項２４に記載の生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドのインビボの半減期を増加させる方法。
【請求項２６】
請求項２４または２５に記載の方法であって、生理活性タンパク質または（ポリ）ペプチドが、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）、成長ホルモン放出ペプチド、インターフェロン（ＩＦＮ）、インターフェロンレセプター、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、グルカゴン様ペプチド、Ｇタンパク質結合レセプター、インターロイキン、インターロイキンレセプター、酵素、インターロイキン結合タンパク質、サイトカイン結合タンパク質、マクロファージ活性化因子、マクロファージペプチド、Ｂ細胞因子、Ｔ細胞因子、タンパク質Ａ、アレルギーインヒビター、細胞ネクローシス糖タンパク質、イムノトキシン、リンフォトキシン、腫瘍ネクローシス因子、腫瘍抑制因子、転移成長因子、アルファ−１抗トリプシン、アルブミン、アルファ−ラクトアルブミン、アポリポタンパク質−Ｅ、エリトロポエチン、高グリコシル化エリトロポエチン、アンジオポエチン、ヘモグロビン、トロンビン、トロンビンレセプター活性化ペプチド、トロンボモジュリン、第ＶＩＩ因子、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、第ＸＩＩＩ因子、プラズミノゲン活性化因子、フィブリン結合ペプチド、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ヒルジン、タンパク質Ｃ、Ｃ反応性タンパク質、レニンインヒビター、コラゲナーゼインヒビター、スーパーオキシドジスムターゼ、レプチン、血小板由来成長因子、上皮成長因子、表皮成長因子、アンギオスタチン、アンギオテンシン、骨成長因子、骨刺激タンパク質、カルシトニン、インシュリン、アトリオペプチン、軟骨誘導因子、エルカトニン、結合組織活性化因子、組織因子経路インヒビター、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、神経成長因子、副甲状腺ホルモン、リラキシン、セクレチン、ソマトメジン、インシュリン様成長因子、副腎皮質ホルモン、グルカゴン、コレシストキニン、膵臓（ポリ）ペプチド、ガストリン放出ペプチド、コルチコトロピン放出因子、甲状腺刺激ホルモン、オートタキシン、ラクトフェリン、ミオスタチン、レセプター、レセプターアンタゴニスト、細胞表面抗原、ウイルス由来ワクチン抗原、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、および抗体フラグメントからなる群から選択される１つである、前記方法。
【請求項２７】
請求項７〜１３のいずれか一項に記載の融合コンストラクト、および薬学的に許容された賦形剤を含む、医薬組成物。