(57)【要約】  本発明は、還元型補酵素Ｑ１０を有効成分とする延命用組成物、並びに、還元型補酵素Ｑ１０を有効成分とする組成物を投与することを特徴とする寿命の延長方法に関する。  本発明において、還元型補酵素Ｑ10を含有する飼料を長期間摂取させることで老化促進モデルマウスの寿命を延長できることがわかった。また、還元型補酵素Ｑ10を長期に摂取した老化促進モデルマウスには、毒性的な兆候は全く認められなかった。以上のことから、還元型補酵素Ｑを有効成分とする組成物は、長期間の摂取に耐えうる安全な延命用組成物となりうることを見出した。本発明によれば、ヒトあるいは動物の寿命を延長し、かつ元気で健康的な老齢期をおくることを可能とし、長期間摂取しても安全性の高い組成物を提供することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）：
【化１】
2007034852.tif 000008
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す) で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする延命用組成物。
【請求項２】
還元型補酵素Ｑが還元型補酵素Ｑ10である請求項１に記載の延命用組成物。
【請求項３】
組成物中の還元型補酵素Ｑの含有量が０．００１〜９９重量％である請求項１に記載の延命用組成物。
【請求項４】
下記一般式（２）：
【化２】
2007034852.tif 000009
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される酸化型補酵素Ｑをさらに含有する請求項１に記載の延命用組成物。
【請求項５】
酸化型補酵素Ｑが酸化型補酵素Ｑ10である請求項４に記載の延命用組成物。
【請求項６】
下記一般式（１）：
【化３】
2007034852.tif 000010
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す) で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする組成物を投与することを特徴とする、寿命の延長方法。
【請求項７】
還元型補酵素Ｑが還元型補酵素Ｑ10である請求項６に記載の寿命の延長方法。
【請求項８】
組成物中の還元型補酵素Ｑの含有量が０．００１〜９９重量％である請求項６に記載の寿命の延長方法。
【請求項９】
組成物中に、下記一般式（２）：
【化４】
2007034852.tif 000011
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される酸化型補酵素Ｑをさらに含有する請求項６に記載の寿命の延長方法。
【請求項１０】
酸化型補酵素Ｑが酸化型補酵素Ｑ10である請求項９に記載の寿命の延長方法。
【請求項１１】
投与する対象が哺乳動物である、請求項６〜１０いずれか１項に記載の寿命の延長方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、延命用組成物及びそれを用いた寿命の延長方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
寿命の延長は人類の大きな課題であり、近年、医学の発達、環境や衛生面の改善等により飛躍的に延長されてきた。しかし、最近はその延びにも限界がみられる。また、ペットなどの愛玩動物をはじめとしたヒト以外の哺乳動物でも、同様の課題を有する。さらに、ヒトをはじめとする高齢哺乳動物は、寿命の最後の数年間に虚弱になることが多い。医学的な処置により命を長らえることができても、生活の質（ＱＯＬ）が落ちた状態での延命はヒトをはじめとした哺乳動物にとって、本当の幸せとは言えない。この事に加えて高齢化社会を迎えた現在では、単に寿命の延伸だけでなく、健康寿命（私たち一人ひとりが生きている長さの中で、元気で活動的に暮らすことができる長さ）をいかに延ばすかが大きな課題である。【０００３】
最近の動物を用いた研究では、摂取エネルギーを制限（カロリー制限）することで、寿命が延長できることがわかってきている（非特許文献１）。しかし、ヒトやペットの食事を長期間にわたって制限することは生活の質を落とすことにつながり、実際的ではない。【０００４】
先の研究を元にして、カロリー制限の効果に類似した効果が得られる食品組成物について報告されている（特許文献１）。これによると、カロリー制限せずに、Ｌ−カルニチン、クレアチン、脂肪酸（モノ不飽和及び多不飽和、特にオメガ−３脂肪酸）、カルジオリピン、ニコチンアミド又は炭水化物、及びその天然供給源を含む食品組成物が、哺乳動物の高齢化に伴う機能障害を予防又は修復するとしている。ただし、実際に哺乳動物を用いた寿命の延長に関する効果は確認されていない。【０００５】
ＥＦ−２キナーゼを特異的に抑制することで寿命を延ばす方法について報告されているが（特許文献２）、哺乳動物ではない線虫を用いた評価により寿命の延長を確認しており、実際にヒトやペットなどの哺乳動物で効果があるかは確認されていない。また、特殊な油脂を用いて寿命を延長させる方法が報告されている（特許文献３）。【０００６】
生体内のユビキノン（酸化型補酵素Ｑ）を増加させる化合物を投与することで、臓器機能障害、臓器不全ならびに肥満およびその続発症の予防治療作用について報告されている（特許文献４）。さらには、不飽和脂肪酸を多く与えた餌で飼育したラットにユビキノンを投与することによって寿命が延びることが報告されている（非特許文献２）。反対に、マウスを用いた実験ではユビキノンの投与によって寿命に対して影響しない事も報告されている（非特許文献１）。また、ユビキノン及びユビキノール（還元型補酵素Ｑ）が老化を抑制する効果を有することが報告されている（特許文献５）。
【特許文献１】公表特許公報２００４−５１９２４１
【特許文献２】公表特許公報２００３−５０８３４７
【特許文献３】公開特許公報２００５−２１０９７８
【特許文献４】公表特許公報２００３−８１８７３
【特許文献５】国際公開  ＷＯ２００５／０６５６７２
【非特許文献１】Free Radical Biology & Medicine, Vol.36, No 8, pp.1043-1057(2004)
【非特許文献２】Experimental Gerontology, Vol.36, pp.189-194 (2004)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、副作用がなく、寿命を延長することのできる組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上述したように、酸化型補酵素Ｑが哺乳動物の寿命を延長するという報告（非特許文献２）もある一方、延長しないという報告もある（非特許文献１）。また、還元型補酵素Ｑについては、老化を抑制することの報告があるが、寿命を延長する効果については一切述べられておらず、他にもそのような報告はない。一般に、いわゆる抗老化作用（老化に伴う各諸症状の緩和や改善・抑制）と、実質的に寿命を延長させる延命効果とは異なる作用であり、抗老化作用を有するものが延命効果を有するとは限らない。本発明者らは鋭意検討の結果、初めて還元型補酵素Ｑ10（ユビキノール）に寿命を延長する明確な効果を見出し、本発明を完成させた。【０００９】
すなわち、本発明は、下記一般式（１）：【００１０】
【化１】
2007034852.tif 000002
【００１１】
（式中、ｎは１〜１２の整数を表す）で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする延命用組成物である。【００１２】
また本発明は、下記一般式（１）：【００１３】
【化２】
2007034852.tif 000003
【００１４】
（式中、ｎは１〜１２の整数を表す）で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする組成物を投与することを特徴とする、寿命の延長方法である。【００１５】
また、本発明を別の側面からとらえれば、本発明は、前記式（１）で表される還元型補酵素Ｑ10を有効成分とする延命剤（寿命延長剤）と言うこともできる。この場合、本願明細書の「延命用組成物」は、適宜「延命剤（寿命延長剤）」と読み替えることができる。【００１６】
更に、本発明を別の側面からとらえれば、本発明は、前記式（１）で表される還元型補酵素Ｑ10の延命剤（寿命延長剤）製造のための使用、と言うこともできる。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の還元型補酵素Ｑを有効成分とする延命用組成物は、動物、特に哺乳動物の寿命を延長するという優れた効果を発揮する。また本発明の延命用組成物は、副作用もなく、安全性の高い組成物である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
補酵素Ｑは、細菌から哺乳動物まで広く生体に分布する必須成分であり、生体内の細胞中におけるミトコンドリアの電子伝達系構成成分として存在していることが知られている。補酵素Ｑは、ミトコンドリア内において酸化と還元を繰り返すことで電子伝達系における伝達成分としての機能を担っているほか、還元型補酵素Ｑは抗酸化作用を示すことが知られている。ヒトでは、補酵素Ｑの側鎖が繰り返し構造を１０個持つ、補酵素Ｑ10が主成分である。前記のように、還元型補酵素Ｑ10は、試験管内で抗酸化活性を示すが、酸化型補酵素Ｑ10は抗酸化活性は示さない。しかし、酸化型補酵素Ｑ10は、生体内で還元酵素により還元型に変換されると考えられている。【００１９】
補酵素Ｑ10の重要な特徴として、その安全性が高いことが挙げられる。ラットに対する慢性毒性試験では、１２００ｍｇ／Ｋｇ／日、５２週間の連日投与でも、全く毒性的影響はなかったことが報告されている（K. D. Williams, et al.  J. Agric. Food Chem., 47, 3756-3763, 1999）。１２００ｍｇ／ｋｇ／日は、ヒト（体重５０Ｋｇ）に換算すると、６０ｇ／日となる。健康食品として欧米で用いられている酸化型補酵素Ｑ10の常用量が１００〜３００ｍｇ／日であるので、補酵素Ｑ10は非常に安全性の高いサプリメント素材であることが判る。【００２０】
補酵素Ｑには、上述したとおり、下記一般式（１）：【００２１】
【化３】
2007034852.tif 000004
【００２２】
（式中、ｎは１〜１２の整数を表す）で表される還元型補酵素Ｑ（ユビキノール）と、下記一般式（２）：【００２３】
【化４】
2007034852.tif 000005
【００２４】
（式中、ｎは１〜１２の整数を表す）で表される酸化型補酵素Ｑ（ユビキノン）の二つの形態がある。補酵素Ｑは、生体内においては通常約４０〜９０％程度が還元型で存在することが知られている。しかし、還元型補酵素Ｑは、空気中の酸素により容易に酸化されるため、従来、一般的に医薬・食品として用いられてきた補酵素Ｑは酸化型補酵素Ｑである。酸化型補酵素Ｑは市販品として、または合成、発酵、天然物からの抽出等の従来公知の方法により容易に入手することが出来る。【００２５】
還元型補酵素Ｑを得る方法としては特に限定されず、例えば、合成、発酵、天然物からの抽出等の従来公知の方法により酸化型を主成分とする補酵素Ｑを得た後、クロマトグラフィーにより流出液中の還元型補酵素Ｑ区分を濃縮する方法などを採用することが出来る。この場合においては、必要に応じて上記補酵素Ｑに対し、水素化ほう素ナトリウム、亜ジチオン酸ナトリウム(ハイドロサルファイトナトリウム)、アスコルビン酸等の一般的な還元剤を添加し、常法により上記補酵素Ｑ中に含まれる酸化型補酵素Ｑを還元して還元型補酵素Ｑとした後にクロマトグラフィーによる濃縮を行っても良い。また、既存の高純度酸化型補酵素Ｑに、上記還元剤を作用させる方法によっても得ることが出来る。あるいは、還元型補酵素Ｑを含有する菌体等を使用することも可能である。【００２６】
補酵素Ｑ中の酸化型と還元型の割合は、通常、ＵＶ検出器を用いたＨＰＬＣシステムにより、試料中の酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑを定量し、その量比をもって算出する方法、または、ＨＰＬＣに電気化学的検出器を組み込んだシステムにより、酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑの割合をピーク面積から算出する方法などにより求めることができる。電気化学的検出器を組み込んだシステムでは、酸化還元物質を特異的に測れることおよび感度が高いことから、生体あるいは試料に微量に存在する還元型の割合を測定する場合は、有用性が高い。具体的には、島津社製のＨＰＬＣ分析装置に資生堂社製の電気化学的検出器を組み込み、以下のＨＰＬＣの条件で測定できる。例えば、カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ（ＯＤＳ−Ａ３０３）、検出波長：２７５ｎｍ、移動相：メタノール（８８％）、ヘキサン（１２％）、流速：１ｍｌ／ｍｉｎの条件である。【００２７】
本発明の延命用組成物は、還元型補酵素Ｑを有効成分とする組成物である。さらに、もう一つの有効成分として、酸化型補酵素Ｑを含んでいても良い。即ち、酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑの混合物である補酵素Ｑを有効成分とする組成物であっても良い。補酵素Ｑとして、還元型と酸化型の混合物を使用する場合、還元型補酵素Ｑを補酵素Ｑ全量の２０重量％以上含有するのが好ましい。より好ましくは４０重量％以上であり、さらに好ましくは５０重量％以上である。上限は、一般に９９．５重量％以下が好ましいが９５重量％以下でもよい。本明細書において、単に「補酵素Ｑ」と記載した場合には、還元型補酵素Ｑ単独、あるいは酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑの混合物の両者を意味する。【００２８】
本発明で使用出来る還元型補酵素Ｑまたは酸化型補酵素Ｑは、前記一般式（１）または（２）で表されるように側鎖の繰り返し単位（式中ｎ）が１〜１２のものを使用することが出来る。ヒトをはじめイヌなどの多くの愛玩動物で十分な効果が得られる観点から、中でも側鎖繰り返し単位が１０のもの、すなわち還元型補酵素Ｑ10あるいは酸化型補酵素Ｑ10が特に好適に使用出来る。【００２９】
本発明の延命用組成物は、補酵素Ｑ以外にも医学上あるいは食品衛生法上等、許容される各種添加剤を含むことが出来る。また、延命目的だけでなく各種疾患の対策としても用いられる場合には、その疾患に対する薬剤と併用することもできる。【００３０】
このような各種添加剤としては特に限定されず、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、コーティング剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶解補助剤、安定化剤、健康食品素材、栄養補助食品素材（サプリメント素材）などが挙げられる。【００３１】
上記賦形剤としては特に限定されず、例えば、白糖、乳糖、ブドウ糖、コーンスターチ、マンニト−ル、結晶セルロース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウムなどが挙げられる。上記崩壊剤としては特に限定されず、例えば、澱粉、寒天、クエン酸カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン、結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース、トラガント等が挙げられる。【００３２】
上記滑沢剤としては特に限定されず、例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油等が挙げられる。【００３３】
上記結合剤としては特に限定されず、例えば、エチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、トラガント、シェラック、ゼラチン、アラビアゴム、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ソルビトール等が挙げられる。【００３４】
上記コーティング剤としては特に限定されず、アラビアゴム、オパドライ、カゴソウ、カスターワックス、カルボキシビニルポリマー、カルメロース、含水二酸化ケイ素、ケイ酸マグネシウム、酢酸ビニル樹脂、ステアリン酸、セタノール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられる。【００３５】
上記着色剤としては特に限定されず、例えば、医薬品あるいは食品に添加することが許可されているものなどを使用することができる。【００３６】
上記凝集防止剤としては特に限定されず、例えばステアリン酸、タルク、軽質無水ケイ酸、含水二酸化ケイ酸などが挙げられる。【００３７】
上記吸収促進剤としては特に限定されず、例えば高級アルコール類、高級脂肪酸類、グリセリン脂肪酸エステルなどの界面活性剤などが挙げられる。【００３８】
上記溶解補助剤としては特に限定されず、例えばフマル酸、コハク酸、りんご酸などの有機酸などが挙げられる。【００３９】
上記安定化剤としては特に限定されず、例えば安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エチルなどが挙げられる。【００４０】
上記健康食品素材としては特に限定されず、漢方薬（例えば、胃苓湯、温経湯、温清飲、黄耆建中湯、黄連解毒湯、黄連湯、葛根湯、加味帰脾湯、加味逍遙散、甘麦大棗湯、桔梗湯、帰脾湯、九味檳榔湯、荊芥連翹湯、桂枝加芍薬大黄湯、桂皮加芍薬湯、桂皮加竜骨牡蛎湯、桂枝湯、桂枝人参湯、桂枝茯苓丸、啓脾湯、香蘇散、五虎湯、五積散、牛車腎気丸、五淋散、柴陥湯、柴胡加竜骨牡蛎湯、柴胡桂枝乾姜湯、柴胡桂枝湯、柴胡清肝湯、柴朴湯、柴苓湯、酸棗仁湯、滋陰降火湯、四逆散、四君子湯、四物湯、炙甘草湯、芍薬甘草湯、十全大補湯、十味敗毒湯、小建中湯、小柴胡湯、小青竜湯、消風散、辛夷清肺湯、神秘湯、真武湯、清上防風湯、清暑益気湯、清心蓮子飲、清肺湯、疎経活血湯、大黄甘草湯、大黄牡丹皮湯、大建中湯、大柴胡湯、大柴胡湯去大黄、大承気湯、大防風湯、治打撲一方、調胃承気湯、釣藤散、腸癰湯、猪苓湯、猪苓湯合四物湯、通導散、桃核承気湯、当帰飲子、当帰建中湯、当帰芍薬散、当帰湯、二陳湯、女神散、人参湯、人参養栄湯、排膿散及湯、麦門冬湯、八味地黄丸、半夏厚朴湯、半夏瀉心湯、白虎加人参湯、茯苓飲、茯苓飲合半夏厚朴湯、平胃散、防已黄耆湯、防風通聖散、補中益気湯、麻黄湯、麻黄附子細辛湯、麻杏甘石湯、麻子仁丸、木防已湯、抑肝散、抑肝散加陳皮半夏、六君子湯、立効散、竜胆瀉肝湯、苓甘姜味辛夏仁湯、六味丸など）、茶葉（例えば、緑茶、玄米茶、抹茶、煎茶、ほうじ茶、焙茶、ジャスミン茶、ウーロン茶、紅茶、黒茶、花茶、青茶、白茶、など）、ハーブ（例えばイタリアンパセリ、エリキャンペーン、オリーブ、オレガノ、カールドン、カモミール、カレープラント、キャットニップ、キャラウェイ、クリスマスローズ、クリムソンクローバ、コーンフラワー、コモンマロウ、サラダバーネット、サントリナ、シナモン、ジャスミン、ステビア、セージ、セイヨウボダイジュ、センテッドゼラニウム、セントジョーンズワート、ソープワート、ソロモンズシール、タイム、タンジー、チャービル、チャイブ、ナスタチウム、ナツメ、バジル、ハニーサックル、ヒソップ、フラックス、フェンネル、フォックスグローブ、ブラックリーホーリーホック、フレンチマリーゴールド、ベトニー、ヘリオトロープ、ベルガモット、ヘンプアグリモニー、ヘンルーダ、ポットマリーゴールド、ボリジ、ホワイトホアハウンド、マートル、マーレイン、マジョラム、ミント、ヤロウ、ラベンダー、レディースベッドストロー、レモングラス、レモンバーベナ、レモンバーム、ローズ、ローズマリー、ロケット、ワイルドストロベリー、ワイルドパンジー、わすれな草など）、ピクノジェノール、フラバンジェノール、プロポリス、イチョウ葉、ローヤルゼリー、カルニチン、きのこ類、青汁、および、これらの抽出物などが挙げられる。【００４１】
上記栄養補助食品素材としては特に限定されず、アミノ酸類、金属イオン類、蛋白質類、糖類、脂肪酸類、酵母抽出物、野菜抽出物、魚肉抽出物、果実、果実抽出物などが挙げられる。【００４２】
更に、他の抗酸化物質や、ビタミン類などを含ませることも出来る。【００４３】
上記抗酸化物質としては、例えば、クエン酸、クエン酸誘導体、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、リコペン、ビタミンＡ、カロテノイド類、ビタミンＢ、ビタミンＢ誘導体、フラボノイド類、ポリフェノール類、グルタチオン、セレン、チオ硫酸ナトリウム、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、ピロロキノリンキノン、ピロロキノリンキノン誘導体、スーパーオキサイドディスムターゼ（ＳＯＤ）、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、グルタチオン還元酵素、カタラーゼ、アスコルビン酸ペルオキシダーゼ、およびこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。【００４４】
上記ビタミン類としては特に限定されず、例えば、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＢ群、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫおよびこれらの誘導体などが挙げられる。【００４５】
本発明の延命用組成物の形態は、液状、固体状のいずれの形態であってもよく、その投与方法は、経口、注射、点鼻、点眼、坐剤による投与、補酵素Ｑ含有食品を食する、など様々な方法を用いることができる。一般的には、経口による投与が投与量などの点から最も有効であると考えられるが、経口投与が困難である場合は、経口以外の投与方法で本発明の延命用組成物を投与することに何ら問題はない。例えば、栄養物の経口摂取が困難な患者あるいは老人への坐剤、皮膚外用剤などが考えられるが、これらに限定されるわけではない。【００４６】
本発明の延命用組成物は、それを対象となるヒトやその他動物に投与することで、その寿命を延長することができる。動物としては、哺乳動物、魚類、鳥類、爬虫類、昆虫類を含むが、そのなかでも哺乳動物が好ましく、特にヒトが好ましい。ここでの寿命とは単に生まれてから死亡するまでの期間だけでなく、元気で活動的に暮らすことができる期間も意味する。例えば、本発明の寿命を延長する組成物を摂取することで、老化により認められる能動性の低下、受動性の低下等の行動面での鈍化などの症状を予防改善することができ、高齢になった後にも健康で元気な生活を送ることができる。ユビキノールが老化を抑制する効果の１つとして、老化に伴う行動低下を抑制するという報告（ＷＯ２００５／０６５６７２）はあるが、この場合は本来の寿命期間内での効果である。本発明で、初めて、さらに延長された寿命期間においても活動的で元気な生活をおくることができることが明らかとなった。【００４７】
これら寿命延長効果を評価するには、例えば、in vivo評価モデルとして、一般のマウスよりも寿命の短い、特殊な老化促進モデルマウス（例えば、ＳＡＭＰ８）を用いることができる。このマウスは京都大学で発見、育種された、老化状態を早期に、また顕著に発現するモデルマウスであり、寿命に対する効果を評価するには極めて有用なモデルである。また、このマウスが呈する老化状態は極めてヒトの老化状態に類似しており、ヒトの老齢期の健康状態を評価するうえでも有用なモデル動物である。【００４８】
本発明の延命用組成物を経口投与する場合の投与量は、還元型補酵素Ｑの量として、成人ヒト１日当り３０〜１２００ｍｇであるのが好ましい。更に好ましくは、５０〜８００ｍｇであり、最も好ましくは、１００〜３００ｍｇである。ヒト以外の哺乳動物に対しては、上記好ましい投与量を体重あたりに換算して投与することが出来る。【００４９】
本発明の寿命を延長する組成物においては、組成物全体に対して、還元型補酵素Ｑの含有量が０．００１〜９９重量％であるのが好ましく、０．０１〜７０重量％であるのがより好ましく、０．１〜５０重量％であるのがさらに好ましい。
【実施例】
【００５０】
以下に実施例を挙げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるものではない。尚、補酵素Ｑ10の純度及び還元型補酵素Ｑ10／（還元型補酵素Ｑ10＋酸化型補酵素Ｑ10）の比率（重量比）は下記ＨＰＬＣ分析により求めた。【００５１】
（ＨＰＬＣ分析条件）
カラム：ＳＹＭＭＥＴＲＹ  Ｃ１８（Ｗａｔｅｒｓ製）２５０ｍｍ（長さ）４．６ｍｍ（内径）、移動相；Ｃ2Ｈ5ＯＨ：ＣＨ3ＯＨ＝４：３（ｖ：ｖ）、検出波長；２１０ｎｍ、流速；１ｍｌ／ｍｉｎ、還元型補酵素Ｑ10の保持時間；９．１ｍｉｎ、酸化型補酵素Ｑ10の保持時間；１３．３ｍｉｎ。【００５２】
（製造例１）還元型補酵素Ｑ10の製造
１０００ｇのエタノール中に、１００ｇの酸化型補酵素Ｑ10（純度９９．４％、株式会社カネカ製）と、６０ｇのＬ−アスコルビン酸を加え、７８℃にて攪拌し、還元反応を行った。３０時間後、５０℃まで冷却し、同温を保持しながらエタノール３３０ｇと水７０ｇを添加した。このエタノール溶液（還元型補酵素Ｑ10を１００ｇ含む）を攪拌しながら、１０℃／時間の冷却速度で２℃まで冷却し、白色のスラリーを得た。得られたスラリーを減圧濾過し、湿結晶を冷エタノール、冷水、冷エタノールで順に洗浄（洗浄に用いた冷溶媒の温度は２℃）して、さらに湿結晶を減圧乾燥（２０〜４０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色の乾燥結晶９７ｇ（純度９９％、還元型補酵素Ｑ10／（還元型補酵素Ｑ10＋酸化型補酵素Ｑ10）＝約９９重量％）を得た。減圧乾燥を除く全ての操作は窒素雰囲気下で実施した。【００５３】
（製造例２）還元型補酵素Ｑ10の製造
１００ｇの酸化型補酵素Ｑ10（純度９９．４％、株式会社カネカ製）を２５℃で１０００ｇのヘプタン溶液に溶解させた。攪拌しながら、還元剤として次亜硫酸ナトリウム（純度７５％以上）１００ｇに１０００ｍｌの水を加えて溶解させた水溶液を徐々に添加し、２５℃、ｐＨ４〜６で還元反応を行った。２時間後、反応液から水相を除去し、脱気した飽和食塩水１０００ｇでヘプタン相を６回水洗した。以上、すべての操作は窒素雰囲気下で実施した。このヘプタン相を減圧下にて溶媒置換し、５０℃の還元型補酵素Ｑ10の７％（ｗ／ｗ）エタノール溶液を調製した（還元型補酵素Ｑ10を１００ｇ含む）。このエタノール溶液に水５０ｇを添加し、攪拌しながら、１０℃／時間の冷却速度で２℃まで冷却して結晶を析出させた。全ての操作は窒素雰囲気下で実施した。得られたスラリーを減圧濾過し、湿結晶を冷エタノール、冷水、冷エタノールで順に洗浄（洗浄に用いた冷溶媒の温度は２℃）して、さらに、湿結晶を減圧乾燥（２０〜４０℃、１〜３０ｍｍＨｇ）することにより、白色の乾燥結晶９７ｇ（純度９９％、還元型補酵素Ｑ10／（還元型補酵素Ｑ10＋酸化型補酵素Ｑ10）＝約９９重量％）を得た。【００５４】
（実施例１）老化促進モデルマウスに対する寿命延長効果
老化促進モデルマウス（ＳＡＭＰ８、３週齢、雄、各群Ｎ＝８〜１０）に、製造例１で得られた還元型補酵素Ｑ10（但し、約１重量％の酸化型補酵素Ｑ10を含む）を０．４％含有する飼料（ＣＥ−２、日本クレア社製）を与えた群、市販の酸化型補酵素Ｑ10（酸化型１００％、株式会社カネカ製）を０．４％含有する飼料（ＣＥ−２、日本クレア社製）を与えた群、及び対照群として基礎飼料（ＣＥ−２、日本クレア社製）のみを与えた群を設定した。各群共に飼料は自由摂取させた。試験期間中、定期的に自発運動量の測定及び死亡数の記録を行った。飼料の摂取量と動物の体重から得られた還元型補酵素Ｑ10及び酸化型補酵素Ｑ10の投与量は、概ね３００〜５００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙに相当した。【００５５】
結果を表１及び表２に示す。表１は、試験開始後１３ヶ月目での対照群、還元型補酵素Ｑ10摂取群及び酸化型補酵素Ｑ10摂取群での生存率を表した表である。各データはｎ＝８〜１０である。生存率の検定はKaplan-Meier法で実施した。＊は危険率５％で対照群に対して有意であることを表している。表２は、試験開始後１１ヶ月目での対照群、還元型補酵素Ｑ10摂取群及び酸化型補酵素Ｑ10摂取群での１６時から翌日９時までの自発運動量（測定装置：ＳＵＰＥＲＭＥＸ、室町機械製）の平均値と対照群を１００としたときの値を表した表である。各データはｎ＝４〜７で、有意差検定はt-testで実施し、p値を示した。【００５６】
【表１】
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【００５７】
【表２】
2007034852.tif 000007
【００５８】
以上の結果より、酸化型補酵素Ｑ10にも、寿命の延長と自発運動量の低下抑制が若干ながら認められたが、還元型補酵素Ｑ10の摂取により、酸化型補酵素Ｑ10の効果からは予想も出来ない、明らかな寿命の延長と自発運動量の低下抑制が認められた。【００５９】
（製剤例１）  散剤
還元型補酵素Ｑ10（但し、１重量％の酸化型補酵素Ｑ10を含む）をプロパノールに溶解し、次いでこれを微結晶セルロースに吸着させた後、減圧下で乾燥した。これを窒素気流下でトウモロコシ澱粉と混合し、散剤とした。
還元型補酵素Ｑ10      ９．９重量部
酸化型補酵素Ｑ10      ０．１重量部
微結晶セルロース      ４０重量部
トウモロコシ澱粉      ５５重量部【００６０】
（製剤例２）  カプセル剤
製剤例１と同様に下記処方で散剤を作製した後、常法によりゼラチンカプセルに充填した。充填したカプセルはシールをした後、窒素雰囲気下でパッキングし、冷蔵保存した。
還元型補酵素Ｑ10      １９．８重量部
酸化型補酵素Ｑ10        ０．２重量部
微結晶セルロース          ４０重量部
トウモロコシ澱粉          ２０重量部
乳糖                      ６５重量部
ステアリン酸マグネシウム    ３重量部
ポリビニルピロリドン        ２重量部【００６１】
（製剤例３）  ソフトカプセル剤
コーン油を５０℃に加温し、同温度で溶融した還元型補酵素Ｑ10（但し、約１重量％の酸化型補酵素Ｑ10を含む）を加えて溶解した。これを常法によりソフトカプセル化した。
還元型補酵素Ｑ10      ４９．５重量部
酸化型補酵素Ｑ10        ０．５重量部
コーン油                ３５０重量部【００６２】
（製剤例４）  錠剤
還元型補酵素Ｑ10（但し、約１重量％の酸化型補酵素Ｑ10を含む）をプロパノールに溶解し、これを微結晶セルロースに吸着させた後、減圧下で乾燥した。これに窒素雰囲気下でトウモロコシ澱粉、乳糖、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウムを混合し、次いでポリビニルピロリドンの水溶液を結合剤として加えて常法により顆粒化した。これに滑沢剤としてタルクを加えて混合した後、錠剤に打錠した。錠剤は窒素雰囲気下でパッキングし、冷蔵保存とした。
還元型補酵素Ｑ10                      １９．８重量部
酸化型補酵素Ｑ10                        ０．２重量部
トウモロコシ澱粉                          ２５重量部
乳糖                                      １５重量部
カルボキシメチルセルロースカルシウム      １０重量部
微結晶セルロース                          ４０重量部
ポリビニルピロリドン                        ５重量部
ステアリン酸マグネシウム                    ３重量部
タルク                                    １０重量部
【国際調査報告】
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