(57)【要約】本発明は、血管新生阻害物質の効果を予測する方法を提供し、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価し、増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標とすることにより予測することができる。また、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性と相関することから、血管新生阻害物質は、ＥＧＦ阻害活性を有する物質と併用することにより優れた抗腫瘍効果を示すことができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法であって、
腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価する工程と、
評価されたＥＧＦ依存性を指標として、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程と、
を含む、前記方法。
【請求項２】
腫瘍細胞が癌患者から採取されたものである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＥＧＦ依存性の評価が、ＴＧＦ−α、ＨＢ−ＥＧＦ、ＥＧＦ、ＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎおよびＥＧＦレセプターからなる群から選択される少なくとも一つの発現量を指標に行うものである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＥＧＦ依存性の評価が、ＥＧＦレセプターのリン酸化の程度を指標に行うものである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ＥＧＦレセプターのリン酸化の測定が、免疫化学的方法により行うものである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
免疫化学的方法が、ウエスタンブロットである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
血管新生阻害物質が、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（Ｉ）
2007015578.tif 000067
［式（Ｉ）中、Ａは、式
2007015578.tif 000068
（式中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ａ１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する；
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する；
Ｒ１４は、式−Ｖａ１４−Ｖａ１５（式中、Ｖａ１４は、単結合またはカルボニル基を意味する；Ｖａ１５は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。）で表される基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｘは、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ｙは、式
2007015578.tif 000069
（式中、Ｒ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］
で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（ＩＩ）
2007015578.tif 000070
［式（ＩＩ）中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｙ１は、式
2007015578.tif 000071
（式中、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
Ｒ１がＣ１−６アルキル基（ただし、Ｒ１はＣ１−６アルキル基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、アミノ基、モノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基およびジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基からなる群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい）である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ１がメチル基または式
2007015578.tif 000072
（式中、Ｒａ３はメチル基を意味する；Ｒａ１は水素原子または水酸基を意味する；Ｒａ２は、メトキシ基、エトキシ基、１−ピロリジニル基、１−ピペリジニル基、４−モルホリニル基、ジメチルアミノ基またはジエチルアミノ基を意味する。）のいずれかで表される基である、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
Ｒ１がメチル基または２−メトキシエチル基である、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒ２がシアノ基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基である、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
Ｒ２がシアノ基または式−ＣＯＮＨＶａ１６（式中、Ｖａ１６は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基またはＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。ただし、Ｖａ１６は、ハロゲン原子、シアノ基、水酸基およびＣ１−６アルコキシ基からなる群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい。）で表される基である、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ２が式−ＣＯＮＨＶａ１７（式中、Ｖａ１７は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基またはＣ１−６アルコキシ基を意味する。）で表される基である、請求項９に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒ２が式−ＣＯＮＨＶａ１８（式中、Ｖａ１８は、水素原子、メチル基またはメトキシ基を意味する。）で表される基である、請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
Ｙ１が式
2007015578.tif 000073
（式中、Ｒ７１は、水素原子またはハロゲン原子を意味する。）で表される基である、請求項９に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ３およびＲ４が水素原子である、請求項９に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ５が水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基またはＣ６−１０アリール基（ただし、Ｒ５は、ハロゲン原子およびメタンスルホニル基からなる群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい）である、請求項９に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒ５がメチル基、エチル基またはシクロプロピル基である、請求項９に記載の方法。
【請求項２１】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（２−クロロ−４−（（６−シアノ−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−３−（ジエチルアミノ）−２−ヒドロキシプロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−シクロプロピル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−メトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−フルオロエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−エチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−ヒドロキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）オキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−エトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（２−フルオロ−４−（（６−カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ６−（２−ヒドロキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（１−プロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（ｃｉｓ−２−フルオロ−シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−（４−モルホリノ）エトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（２−フルオロエチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（（２Ｒ）テトラヒドロ−２−フラニルメチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ）−４−キノリル）オキシフェニル）−Ｎ’−（３−（メチルスルホニル）フェニル）ウレア、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（（２−フルオロエチルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−エトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（３−エチルウレイド）−３−フルオロ−フェノキシ）−７−メトキシキノリン−６−カルボキシリック  アシッド（２−シアノエチル）アミド
および
Ｎ−（４−（６−（２−シアノエチル）カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項２２】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド
および
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項２３】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項２４】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩である、請求項７に記載の方法。
【請求項２５】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（ＩＩＩ）
2007015578.tif 000074
［式（ＩＩＩ）中、Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する；
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する］
で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項２６】
Ｒ１１が置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
Ｒ１１が以下の置換基群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい式
2007015578.tif 000075
で表される基からなる群から選ばれるいずれか１の基である、請求項２５に記載の方法。
［置換基群］
水酸基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、式
2007015578.tif 000076
で表される基（式中、ＲＮ１およびＲＮ２はそれぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）
【請求項２８】
Ｒ１１が式
2007015578.tif 000077
で表される基からなる群から選ばれるいずれか１の基である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
Ｒ１２が水素原子である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
Ｖａ１３が酸素原子である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３１】
Ａ１１が炭素原子である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３２】
Ｒ４が水素原子である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３３】
Ｒ５がＣ１−６アルキル基またはＣ３−８シクロアルキル基である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３４】
Ｒ５がメチル基である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３５】
Ｒ９が水素原子である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３６】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
５−（２−（（（４−ヒドロキシ−４−メチルピペリジン−１−イル）カルボニル）アミノ）ピリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−インドール−１−カルボン酸  メチルアミド、
Ｎ１−メチル−５−（２−（（４−ヒドロキシピペリジノ）カルボニル）アミノ−４−ピリジル）オキシ−１Ｈ−１−インドールカルボキサミド、
Ｎ１−メチル−５−（２−（（（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）カルボニル）アミノ）ピリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−１−インドールカルボキサミド、
Ｎ１−メチル−５−（２−（（（４−（ピペリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）カルボニル）アミノ）ピリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−１−インドールカルボキサミド
および
Ｎ４−（４−（１−（メチルアミノ）カルボニル−１Ｈ−５−インドリル）オキシ−２−ピリジル）−４−モルホリンカルボキサミド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項３７】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
（１）Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［２−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エトキシ］キナゾリン−４−アミン、
（２）Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、
（３）３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチレン］−２−インドリノン、
（４）（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオニックアシッド、
（５）５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリック  アシッド（２−ジエチルアミノエチル）アミド、
（６）Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン  ３−｛５，６，７，１３−テトラヒドロ−９−［（１−メチルエトキシ）メチル］−５−オキソ−１２Ｈ−インデノ（２，１−ａ）ピロロ（３，４−ｃ）カルバゾール−１２−イル｝プロピルエステル、
（７）３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン−１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボキシリック  アシッド  アミド、
（８）Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キナゾリニル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−プロピルウレア、
（９）１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジン、
（１０）Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−（５−メチル−３−イソキサゾリル）ウレア、
（１１）４−［（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イル）オキシ］−６−メトキシ−７−［３−（ピロリジン−１−イル）プロポキシ］キナゾリン、
（１２）６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール、
（１３）５−（（Ｚ）−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル）−Ｎ−（（２Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イルプロピル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキサミド、
（１４）３−（（キノリン−４−イルメチル）アミノ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）チオフェン−２−カルボキサミド、
（１５）６−（２，６−ジクロロフェニル）−８−メチル−２−フェニルアミノ−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オン、
（１６）２−（（１，６−ジヒドロ−６−オキソ−ピリジン−３−イルメチル）アミノ）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−ピリジン−カルボキサミド、
（１７）４−（４−（４−クロロ−フェニルアミノ）−フロ［２，３−ｄ］ピリダジン−７−イルオキシメチル）−ピリジン−２−カルボキシリック  アシッド  メチルアミド、
（１８）Ｎ−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）−Ｎ’−（４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イル）オキシフェニル）ウレア、
（１９）４−アミノ−５−フルオロ−３−（６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−キノリン−２−オン、
（２０）４−（４−（１−アミノ−１−メチル−エチル）−フェニル）−２−（４−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−フェニルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル、
（２１）［６−［４−［（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン、
（２２）９−（１−メチルエトキシ）メチル−１２−（３−ヒドロキシプロピル）−６Ｈ，７Ｈ，１３Ｈ−インデノ［２，１−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５−オン、
（２３）Ｎ−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）−オキシ］−２−フルオロフェニル｝ウレア、
（２４）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ウレア、
（２５）２−メチル−６−［２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ］−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキシリック  アシッド  メチルアミド、
（２６）（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール、
（２７）（Ｓ）−（（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール）２−アミノプロパノエート
（２８）３−［（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−メチレン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
（２９）５−［［４−［（２，３−ジメチル−２Ｈ−インダゾール−６−イル）メチルアミノ］ピリミジン−２−イル］アミノ］−２−メチルベンゼンスルホンアミド
（３０）（３Ｚ）−３−［６−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）キノリン−２（１Ｈ）−イリデン］−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン
および
（３１）２−（（２−（（４−（４−（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）アニリノ）フェノキシ）−６−メトキシ−７−キノリル）オキシ）エチル）アミノ）−１−エタノール
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７に記載の方法。
【請求項３８】
血管新生阻害物質が、抗ＶＥＧＦレセプター抗体である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
抗ＶＥＧＦレセプター抗体が、２Ｃ３  ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＩＭＣ−１１２１ｂ、ＩＭＣ−１８Ｆ１、ＩＭＣ−１Ｃ１１およびＩＭＣ−２Ｃ６からなる群から選択される少なくとも一つの抗体である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
血管新生阻害物質が、抗ＶＥＧＦ抗体である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
抗ＶＥＧＦ抗体が、ベバシズマブである、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
血管新生阻害物質が、ＰＩ８８、ＡＶＥ−０００５、ＥＧ−３３０６、ＲＰＩ−４６１０、ＮＭ−３、ＶＧＡ−１１５５、ＶＥＧＦ  ｔｒａｐおよびｐｅｇａｐｔａｎｉｂ  ｓｏｄｉｕｍからなる群から選択される少なくとも一つである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
血管新生阻害物質が、ＦＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、ＰＤＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、抗ＦＧＦレセプター抗体、抗ＰＤＧＦレセプター抗体、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗ＦＧＦ抗体、抗ＰＤＧＦ抗体および抗ＥＧＦ抗体からなる群から選択される少なくとも一つである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
ＦＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
（１）１−［２−アミノ−６−（３，５−ジメトキシフェニル）−ピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−７−イル］−３−ｔｅｒｔ−ブチルウレア、
（２）１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−［２−（４−ジエチルアミノ）ブチルアミノ−６−（３，５−ジメトキシフェニル）−ピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−７−イル］ウレア、
（３）（Ｓ）−（（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，−２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール）２−アミノプロパノエート、
（４）４−［４−［Ｎ−（４−ニトロフェニル）カルバモイル］−１−ピペラジニル］−６，７−ジメトキシキナゾリン、
（５）４−アミノ−５−フルオロ−３−（６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−キノリン−２−オン、
（６）２−（（２−（（４−（４−（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）アニリノ）フェノキシ）−６−メトキシ−７−キノリル）オキシ）エチル）アミノ）−１−エタノール
および
（７）（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオニックアシッド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
ＰＤＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
（１）４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−［４−（３−ピリジル）ピリミジン−２−イルアミノ］フェニル］ベンゼンアミド、
（２）６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール、
（３）１−｛２−［５−（２−メトキシ−エトキシ）−ベンゾイミダゾール−１−イル］−キノリン−８−イル｝−ピペリジン−４−イルアミン、
（４）４−［４−［Ｎ−（４−ニトロフェニル）カルバモイル］−１−ピペラジニル］−６，７−ジメトキシキナゾリン、
（５）４−アミノ−５−フルオロ−３−（６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−キノリン−２−オン、
（６）（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）｛４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝メタンオン、
（７）５−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−イソキサゾールカルボキサミド、
（８）ｔｒａｎｓ−４−［（６，７−ジメトキシキノキサリン−２−イル）アミノ］シクロヘキサノール、
（９）（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオニック  アシッド、
（１０）５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリック  アシッド（２−ジエチルアミノエチル）アミド、
（１１）１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジン
および
（１２）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ウレア
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
（１）４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ−キナゾリン）、
（２）４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン、
（３）Ｎ−［３−クロロ−４−［（３−フルオロベンジル）オキシ］フェニル］−６−［５−［［［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］フラン−２−イル］キナゾリン−４−アミン、
（４）Ｎ−［４−［Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］キナゾリン−６−イル］アクリルアミド、
（５）（２Ｅ）−Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド、
（６）［６−［４−［（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン、
および
（７）（Ｅ）−Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（２−ピリジニルメトキシ）アニリノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル｝−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４７】
ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４８】
抗ＥＧＦレセプター抗体が、セツキシマブ、ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ、ｍａｔｕｚｕｍａｂ、ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ、ＩＭＣ−１１Ｆ８およびＭＤＸ−４４７からなる群から選択される少なくとも一つの抗体である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４９】
請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法において使用するためのキットであって、
抗ＴＧＦ−α抗体、抗ＨＢ−ＥＧＦ抗体、抗ＥＧＦ抗体、抗Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ抗体、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体および抗リン酸化抗体からなる群から選択される少なくとも一つを含む、前記キット。
【請求項５０】
請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法において使用するためのキットであって、
抗ＥＧＦレセプター抗体および／または抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体を含む、前記キット。
【請求項５１】
請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法において使用するためのキットであって、
ＴＧＦ−α遺伝子、ＨＢ−ＥＧＦ遺伝子、ＥＧＦ遺伝子、Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ遺伝子およびＥＧＦレセプター遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの遺伝子の転写産物であるＲＮＡの少なくとも一部に相補的な配列を含むポリヌクレオチドを含む、前記キット。
【請求項５２】
請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法において使用するためのキットであって、
ＥＧＦレセプター遺伝子の転写産物であるＲＮＡの少なくとも一部に相補的な配列を含むポリヌクレオチドを含む、前記キット。
【請求項５３】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害活性を有する物質とを組み合わせてなる医薬組成物であって、
前記ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（Ｉ）
2007015578.tif 000078
［式（Ｉ）中、Ａは、式
2007015578.tif 000079
（式中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ａ１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する；
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する；
Ｒ１４は、式−Ｖａ１４−Ｖａ１５（式中、Ｖａ１４は、単結合またはカルボニル基を意味する；Ｖａ１５は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。）で表される基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｘは、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ｙは、式
2007015578.tif 000080
（式中、Ｒ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］
で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、前記医薬組成物。
【請求項５４】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（ＩＩ）
2007015578.tif 000081
［式（ＩＩ）中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していでもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｙ１は、式
2007015578.tif 000082
（式中、Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
Ｒ１がＣ１−６アルキル基（ただし、Ｒ１はＣ１−６アルキル基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、アミノ基、モノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基およびジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基からなる群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい）である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
Ｒ１がメチル基または式
2007015578.tif 000083
（式中、Ｒａ３はメチル基を意味する；Ｒａ１は水素原子または水酸基を意味する；Ｒａ２は、メトキシ基、エトキシ基、１−ピロリジニル基、１−ピペリジニル基、４−モルホリニル基、ジメチルアミノ基またはジエチルアミノ基を意味する。）のいずれかで表される基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
Ｒ１がメチル基または２−メトキシエチル基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
Ｒ２がシアノ基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
Ｒ２がシアノ基または式−ＣＯＮＨＶａ１６（式中、Ｖａ１６は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基またはＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。ただし、Ｖａ１６は、ハロゲン原子、シアノ基、水酸基およびＣ１−６アルコキシ基からなる群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい。）で表される基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
Ｒ２が式−ＣＯＮＨＶａ１７（式中、Ｖａ１７は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基またはＣ１−６アルコキシ基を意味する。）で表される基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
Ｒ２が式−ＣＯＮＨＶａ１８（式中、Ｖａ１８は、水素原子、メチル基またはメトキシ基を意味する。）で表される基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
Ｙ１が式
2007015578.tif 000084
（式中、Ｒ７１は、水素原子またはハロゲン原子を意味する。）で表される基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
Ｒ３およびＲ４が水素原子である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
Ｒ５が水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基またはＣ６−１０アリール基（ただし、Ｒ５は、ハロゲン原子およびメタンスルホニル基からなる群から選ばれる少なくとも一つの置換基を有していてもよい）である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
Ｒ５がメチル基、エチル基またはシクロプロピル基である、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項６６】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（２−クロロ−４−（（６−シアノ−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−３−（ジエチルアミノ）−２−ヒドロキシプロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−シクロプロピル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−メトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−フルオロエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−エチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−ヒドロキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）オキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−エトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（２−フルオロ−４−（（６−カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ６−（２−ヒドロキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（１−プロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（ｃｉｓ−２−フルオロ−シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−（４−モルホリノ）エトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（２−フルオロエチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（（２Ｒ）テトラヒドロ−２−フラニルメチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ）−４−キノリル）オキシフェニル）−Ｎ’−（３−（メチルスルホニル）フェニル）ウレア、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（（２−フルオロエチルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−エトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（３−エチルウレイド）−３−フルオロ−フェノキシ）−７−メトキシキノリン−６−カルボキシリック  アシッド（２−シアノエチル）アミド
および
Ｎ−（４−（６−（２−シアノエチル）カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項６７】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドおよび
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項６８】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項６９】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩である、請求項５３に記載の医薬組成物。
【請求項７０】
ＥＧＦ阻害活性を有する物質が、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質である、請求項５３〜６９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７１】
ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
（１）４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ−キナゾリン）、
（２）４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン、
（３）Ｎ−［３−クロロ−４−［（３−フルオロベンジル）オキシ］フェニル］−６−［５−［［［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］フラン−２−イル］キナゾリン−４−アミン、
（４）Ｎ−［４−［Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］キナゾリン−６−イル］アクリルアミド、（５）（２Ｅ）−Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド、
（６）［６−［４−［（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン、
および
（７）（Ｅ）−Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（２−ピリジニルメトキシ）アニリノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル｝−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７０に記載の医薬組成物。
【請求項７２】
ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、請求項７０に記載の医薬組成物。
【請求項７３】
ＥＧＦ阻害活性を有する物質が、抗ＥＧＦレセプター抗体である、請求項５３〜６９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７４】
抗ＥＧＦレセプター抗体が、セツキシマブ、ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ、ｍａｔｕｚｕｍａｂ、ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ、ＩＭＣ−１１Ｆ８およびＭＤＸ−４４７からなる群から選択される少なくとも一つの抗体である、請求項７３に記載の医薬組成物。
【請求項７５】
抗ＥＧＦレセプター抗体が、セツキシマブである、請求項７３に記載の医薬組成物。
【請求項７６】
ＥＧＦ阻害活性を有する物質が、抗ＥＧＦ抗体である、請求項５３〜６９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７７】
医薬組成物が、癌治療用医薬組成物である、請求項５３〜７６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７８】
（ａ）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害活性を有する物質とを併用することを記載した、包装容器、取扱説明書および添付文書からなる群から選択される少なくとも１つと、
（ｂ）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含む医薬組成物と、
を含有するキットであって、
前記ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（Ｉ）
2007015578.tif 000085
［式（Ｉ）中、Ａは、式
2007015578.tif 000086
（式中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ａ１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する；
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する；
Ｒ１４は、式−Ｖａ１４−Ｖａ１５（式中、Ｖａ１４は、単結合またはカルボニル基を意味する；Ｖａ１５は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。）で表される基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｘは、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ｙは、式
2007015578.tif 000087
（式中、Ｒ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］
で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、前記キット。
【請求項７９】
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含んでなる製剤と、ＥＧＦ阻害活性を有する物質を含んでなる製剤とをセットにしたことを特徴とするキットであって、
前記ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（Ｉ）
2007015578.tif 000088
［式（Ｉ）中、Ａは、式
2007015578.tif 000089
（式中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ａ１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する；
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する；
Ｒ１４は、式−Ｖａ１４−Ｖａ１５（式中、Ｖａ１４は、単結合またはカルボニル基を意味する；Ｖａ１５は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。）で表される基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｘは、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ｙは、式
2007015578.tif 000090
（式中、Ｒ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］
で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、前記キット。
【請求項８０】
ＥＧＦ阻害活性を有する物質と併用投与するための、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含む医薬組成物であって、
前記ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質が、
一般式（Ｉ）
2007015578.tif 000091
［式（Ｉ）中、Ａは、式
2007015578.tif 000092
（式中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ａ１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する；
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する；
Ｒ１４は、式−Ｖａ１４−Ｖａ１５（式中、Ｖａ１４は、単結合またはカルボニル基を意味する；Ｖａ１５は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。）で表される基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｘは、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ｙは、式
2007015578.tif 000093
（式中、Ｒ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］
で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である、前記医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血管新生阻害物質、例えば、血管内皮細胞増殖因子（Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ（以下、「ＶＥＧＦ」と称する場合がある））阻害活性を有する物質（以下、「ＶＥＧＦ阻害物質」と称する場合がある）の効果を予測する新規方法に関するものである。
また、本発明は、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害活性を有する物質（以下、「ＥＧＦ阻害物質」と称する場合がある）とを組み合わせてなる医薬組成物およびキットならびに癌の治療方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
臨床試験において、血管新生阻害物質は、抗腫瘍剤として有用であることが明らかにされている。例えば、血管新生因子の中で重要な役割を担っているＶＥＧＦに対する中和抗体製剤であるベバシズマブは、臨床試験において、大腸癌に対して抗腫瘍効果を示したことが報告されている（文献５）。
また、血管新生阻害物質として、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドが知られている（文献１、２および３）。
ところで、血管新生阻害物質の効果を判定すること、血管新生阻害物質の効果のある濃度を決定すること、血管新生阻害物質の効果を投与前に予測することは、血管新生阻害物質を用いた治療を効率よく進め、患者のＱＯＬ向上に貢献するために、非常に有用である（文献６）。前二者については現在、数多くの研究がなされている（文献７）。具体的には、Ｄｙｎａｍｉｃ  Ｃｏｎｔｒａｓｔ−Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ（ＤＣＥ−ＭＲＩ），Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｙ（ＰＥＴ），Ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  Ｆｌｕｉｄ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｓｅｒｕｍ  ＶＥＧＦなどの方法が知られており、中でもＤＣＥ−ＭＲＩは、血管新生阻害物質の効果を判定する方法として有効であるとされつつある（文献８）。
一方で、血管新生阻害物質の効果を投与前に予測することは、治療を受ける患者にとって無効な薬剤の投与の回避、副作用の軽減などを可能とするために、非常に有益であり、かつ重要事項である（文献６）。しかしながら、血管新生阻害物質の効果を投与前に予測する方法については、未だ有効な方法は、見つかっていない。
近年、ＶＥＧＦ阻害活性を有する物質とＥＧＦ阻害活性を有する物質とを組み合わせた癌の治療方法が報告されている（文献４、９−１１）。しかしながら、具体的にどのようなＶＥＧＦ阻害活性を有する物質およびＥＧＦ阻害活性を有する物質を使用すれば癌を治療できるのかについては、未だ明らかではない。
文献：
１．国際公開第０２／３２８７２号パンフレット
２．国際公開第２００４／０８０４６２号パンフレット
３．国際公開第２００５／０６３７１３号パンフレット
４．国際公開第２００２／０４１８８２号パンフレット
５．Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ  ｐｌｕｓ  ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ，ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ，ａｎｄ  ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ  ｆｏｒ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２００４，３５０，２３３５−２３４２．
６．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ（ＶＥＧＦ）ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｃａｕｓｅｓ  ｌｏｓｓ  ｏｆ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｆｅｎｅｓｔｒａｔｉｏｎｓ，ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒｖｅｓｓｅｌｓ，ａｎｄ  ａｐｐｅａｒａｎｃｅ  ｏｆ  ｂａｓｅｍｅｎｔ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｇｈｏｓｔｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．，２００４，１６５，３５−５２．
７．Ｄｉｒｅｃｔ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｔｈａｔ  ｔｈｅ  ＶＥＧＦ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ  ｈａｓ  ａｎｔｉｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００４，１０，１４５−１４７．
８．Ｄｙｎａｍｉｃ  ｃｏｎｔｒａｓｔ−ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｉｍａｇｉｎｇ  ａｓ  ａ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｏｆ  ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４，ａｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅｓ，ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｌｉｖｅｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ：ｒｅｓｕｌｔｓ  ｆｒｏｍ  ｔｗｏ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｉｅｓ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ．，２００３，２１，３９５５−３９６４．
９．Ｔｈｅ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ａｎｄ  Ａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  Ｉｓ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｄ  ｂｙ  ＥｒｂＢ１  Ｂｌｏｃｋａｄｅ，  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２００５，１１，４５２１−４５３２．
１０．Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ａｎｔｉ−ｖａｓｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｎ  ａ  ｎｕｄｅ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ．２００２，３８，１１３３−１１４０．
１１．Ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｏｆ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｄ  Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｈｕｍａｎ  Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  Ｃａｎｃｅｒ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２００２，６２，１９９６−２００３．
【発明の開示】
【０００３】
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、その解決しようとする課題は、血管新生阻害物質の効果を予測する方法を見出すことにある。
また、本発明の解決しようとする課題は、優れた抗腫瘍効果を有する医薬組成物およびキットならびに癌の治療方法を見出すことにある。
本発明者らは、上記課題を解決するため、鋭意検討を重ねた結果、血管新生阻害物質である４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果は、上皮増殖因子（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ（以下、「ＥＧＦ」と称する場合がある）レセプターの発現量および／またはそのリン酸化の程度と相関することを見出した。
より詳細には、１５種類のヒト癌細胞株皮下移植モデル（ｉｎ  ｖｉｖｏ）における４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果を調べ、当該効果の強さにより、上記１５種類のヒト癌細胞株を高感受性３株、中感受性４株、低感受性８株に分類した。
次に、ヒト癌細胞株皮下移植モデルの皮下で増殖したそれぞれの細胞株におけるＥＧＦレセプターの発現量およびそのリン酸化の程度をウエスタンブロットにより解析した。
そして、各細胞株におけるＥＧＦレセプターの発現量およびそのリン酸化の程度と各細胞株における４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドに対する感受性とを比較したところ、高感受性および中感受性７株のうち６株においてＥＧＦレセプターの相当量の発現および／またはそのリン酸化が認められたのに対し、低感受性株においては、ＥＧＦレセプターの相当量の発現および／またはそのリン酸化が認められた株は８株のうち１株のみであった。
腫瘍細胞におけるＥＧＦレセプターの発現量および／またはそのリン酸化の程度は、それぞれの細胞株が増殖および／または生存する際のＥＧＦ依存性を示すと考えられることから、ＥＧＦへの依存性の高い癌細胞株ほど４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドに対する感受性が高いことが明らかとなった。
よって、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価し、増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標とすることにより、血管新生阻害物質を患者に投与せずに予測することができることを見出した。
また、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性と相関することから、血管新生阻害物質は、ＥＧＦ阻害物質と併用することにより優れた抗腫瘍効果を発揮することを見出した。
そして、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、ＥＧＦ阻害物質である４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン（以下、「エルロチニブ」と称する場合がある）と併用することにより、優れた抗腫瘍効果を示すことを確認した。
すなわち本発明は、以下に関する。
１．血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法であって、
腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価する工程と、
評価されたＥＧＦ依存性を指標として、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程と、
を含む、前記方法。
本発明において、腫瘍細胞は、癌患者から採取されたものを使用することができる。
本発明において、ＥＧＦ依存性の評価は、ＴＧＦ−α、ＨＢ−ＥＧＦ、ＥＧＦ、Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ、ＥＧＦレセプターからなる群から選択される少なくとも一つの発現量を指標に行うことができ、あるいは、ＥＧＦレセプターのリン酸化の程度を指標に行うことができる。ＥＧＦレセプターのリン酸化の測定は、例えば、ウエスタンブロットなどの免疫化学的方法により行われる。
本発明の方法において対象となる血管新生阻害物質は、例えばＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質である。ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の例を以下に示す。
一般式（Ｉ）：
2007015578.tif 000002
［式（Ｉ）中、Ａは、式
2007015578.tif 000003
（式中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する；
Ａ１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する；
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する；
Ｒ１３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する；
Ｒ１４は、式−Ｖａ１４−Ｖａ１５（式中、Ｖａ１４は、単結合またはカルボニル基を意味する；Ｖａ１５は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。）で表される基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｘは、酸素原子または硫黄原子を意味する；
Ｙは、式
2007015578.tif 000004
（式中、Ｒ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する；
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。）で表される基を意味する；
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する；
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する］で表される化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
さらに、本発明においてＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質として、以下の化合物を例示することができる。
（１）Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［２−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エトキシ］キナゾリン−４−アミン、
（２）Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン、
（３）３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチレン］−２−インドリノン、
（４）（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオニック  アシッド、
（５）５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリック  アシッド（２−ジエチルアミノエチル）アミド、
（６）Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン３−｛５，６，７，１３−テトラヒドロ−９−［（１−メチルエトキシ）メチル］−５−オキソ−１２Ｈ−インデノ（２，１−ａ）ピロロ（３，４−ｃ）カルバゾール−１２−イル｝プロピルエステル、
（７）３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン−１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボキシリック  アシッド  アミド、
（８）Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キナゾリニル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−プロピルウレア、
（９）１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジン、
（１０）Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−（５−メチル−３−イソキサゾリル）ウレア、
（１１）４−［（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イル）オキシ］−６−メトキシ−７−［３−（ピロリジン−１−イル）プロポキシ］キナゾリン、
（１２）６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール、
（１３）５−（（Ｚ）−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル）−Ｎ−（（２Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イルプロピル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキサミド、
（１４）３−（（キノリン−４−イルメチル）アミノ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）チオフェン−２−カルボキサミド、
（１５）６−（２，６−ジクロロフェニル）−８−メチル−２−フェニルアミノ−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オン、
（１６）２−（（１，６−ジヒドロ−６−オキソ−ピリジン−３−イルメチル）アミノ）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−ピリジン−カルボキサミド、
（１７）４−（４−（４−クロロ−フェニルアミノ）−フロ［２，３−ｄ］ピリダジン−７−イルオキシメチル）−ピリジン−２−カルボキシリック  アシッド  メチルアミド、
（１８）Ｎ−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）−Ｎ’−（４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イル）オキシフェニル）ウレア、
（１９）４−アミノ−５−フルオロ−３−（６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−キノリン−２−オン、
（２０）４−（４−（１−アミノ−１−メチル−エチル）−フェニル）−２−（４−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−フェニルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル、
（２１）［６−［４−［（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン、
（２２）９−（１−メチルエトキシ）メチル−１２−（３−ヒドロキシプロピル）−６Ｈ，７Ｈ，１３Ｈ−インデノ［２，１−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５−オン、
（２３）Ｎ−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）−オキシ］−２−フルオロフェニル｝ウレア、
（２４）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ウレア、
（２５）２−メチル−６−［２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ］−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキシリック  アシッド  メチルアミド、
（２６）（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール、
（２７）（Ｓ）−（（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール）２−アミノプロパノエート
（２８）３−［（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−メチレン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン
（２９）５−［［４−［（２，３−ジメチル−２Ｈ−インダゾール−６−イル）メチルアミノ］ピリミジン−２−イル］アミノ］−２−メチルベンゼンスルホンアミド
（３０）（３Ｚ）−３−［６−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）キノリン−２（１Ｈ）−イリデン］−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン
および
（３１）２−（（２−（（４−（４−（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）アニリノ）フェノキシ）−６−メトキシ−７−キノリル）オキシ）エチル）アミノ）−１−エタノール
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
本発明の方法において対象となる血管新生阻害物質は、例えば、抗ＶＥＧＦレセプター抗体、抗ＶＥＧＦ抗体、ＦＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、ＰＤＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、抗ＦＧＦレセプター抗体、抗ＰＤＧＦレセプター抗体、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗ＦＧＦ抗体、抗ＰＤＧＦ抗体および抗ＥＧＦ抗体からなる群から選択される少なくとも一つであってもよい。
２．本発明は、上記１．に記載の方法において使用するためのキットであって、以下の（１）〜（４）のキットを提供する。
（１）抗ＴＧＦ−α抗体、抗ＨＢ−ＥＧＦ抗体、抗ＥＧＦ抗体、抗Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ抗体、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体および抗リン酸化抗体からなる群から選択される少なくとも一つを含む、キット。
（２）抗ＥＧＦレセプター抗体および／または抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体を含む、キット。
（３）ＴＧＦ−α遺伝子、ＨＢ−ＥＧＦ遺伝子、ＥＧＦ遺伝子、Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ遺伝子およびＥＧＦレセプター遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの遺伝子の転写産物であるＲＮＡの少なくとも一部に相補的な配列を含むポリヌクレオチドを含む、キット。
（４）ＥＧＦレセプター遺伝子の転写産物であるＲＮＡの少なくとも一部に相補的な配列を含むポリヌクレオチドを含む、キット。
３．ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害活性を有する物質とを組み合わせてなる医薬組成物。
本発明の医薬組成物において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、上記１．の項で例示したものを使用することができる。また、ＥＧＦ阻害活性を有する物質は、例えば、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、抗ＥＧＦレセプター抗体および抗ＥＧＦ抗体からなる群から選択される少なくとも一つを挙げることができる。
また、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の具体例を以下に示す。
（１）４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ−キナゾリン）、
（２）４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン、
（３）Ｎ−［３−クロロ−４−［（３−フルオロベンジル）オキシ］フェニル］−６−［５−［［［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］フラン−２−イル］キナゾリン−４−アミン、
（４）Ｎ−［４−［Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］キナゾリン−６−イル］アクリルアミド、
（５）（２Ｅ）−Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド、
（６）［６−［４−［（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン、
および
（７）（Ｅ）−Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（２−ピリジニルメトキシ）アニリノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル｝−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド
からなる群から選択される少なくとも一つの化合物、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物。
ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物であることが好ましい。
抗ＥＧＦレセプター抗体としては、セツキシマブ、ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ、ｍａｔｕｚｕｍａｂ、ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ、ＩＭＣ−１１Ｆ８およびＭＤＸ−４４７からなる群から選択される少なくとも一つの抗体を例示することができる。
４．（ａ）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害活性を有する物質とを併用することを記載した、包装容器、取扱説明書および添付文書からなる群から選択される少なくとも１つと、
（ｂ）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含む医薬組成物と、
を含有するキット。
本発明のキットにおいて、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害活性を有する物質は、上記１．および３．の項で例示したものを使用することができる。
５．ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含んでなる製剤と、ＥＧＦ阻害活性を有する物質を含んでなる製剤とをセットにしたことを特徴とするキット。
本発明のキットにおいて、前記ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害活性を有する物質は、上記１．および３．の項で例示したものを使用することができる。
６．ＥＧＦ阻害活性を有する物質と併用投与するための、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含む医薬組成物。
本発明の医薬組成物において、前記ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害活性を有する物質は、上記１．および３．の項で例示したものを使用することができる。
７．本発明は、ＥＧＦ阻害活性を有する物質と組み合わせてなる医薬組成物の製造のためのＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の使用を提供する。本発明の使用において、前記ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害活性を有する物質、上記１．および３．の項で例示したものを使用することができる。
８．また、本発明は、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害活性を有する物質とを併用投与（例えば同時または別々に患者に投与）することを特徴とする癌の治療方法を提供する。本発明の癌の治療方法において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害活性を有する物質は、上記１．および３．の項で例示したものを使用することができる。
本発明により、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法が提供される。
より詳細には、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価し、増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標とすることにより予測することが可能となった。
本発明に係る方法は、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、抗腫瘍効果を予測することが可能となるため、より抗腫瘍効果を期待できる患者を選択して治療することができ、患者のＱＯＬに貢献することが可能となった。
また、本発明により、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質とを組み合わせてなる医薬組成物および／またはキットならびに癌の治療方法が提供され、これらの医薬組成物および／またはキットは、癌の治療に用いることが可能となった。
【図面の簡単な説明】
【０００４】
図１は、ヒト癌細胞株皮下移植モデルにおける４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果と腫瘍組織中におけるＥＧＦレセプターおよび当該ＥＧＦレセプターのリン酸化の程度との関連を示したものである。
図２は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（Ａ５４９）皮下移植モデルにおけるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質との併用効果を示す。図２において、化合物Ａは、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドを、化合物Ｂは、エルロチニブを示す。
図３は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（Ａ５４９）皮下移植モデルにおけるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質との併用効果を示す。図３において、化合物Ａは、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドを、化合物Ｂは、エルロチニブを示す。
図４は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（Ａ５４９）皮下移植モデルにおけるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質との併用効果を示す。図４において、化合物Ａは、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドを、化合物Ｂは、エルロチニブを示す。
図５は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（ＰＣ−９）皮下移植モデルにおけるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質との併用効果を示す。図５において、化合物Ａは、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドを、化合物Ｂは、エルロチニブを示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００５】
以下に本発明の実施の形態について説明する。以下の実施の形態は、本発明を説明するための例示であり、本発明をこの実施の形態にのみ限定する趣旨ではない。本発明は、その要旨を逸脱しない限り、さまざまな形態で実施をすることができる。
なお、本明細書において引用した文献、および公開公報、特許公報その他の特許文献は、参照として本明細書に組み込むものとする。
また、本明細書は、本願優先権主張の基礎となる特願２００５−２２４１７３号および特願２００６−１６４７００号明細書に記載の内容を包含する。
本発明は、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法であって、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価する工程と、増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標として、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程とを含む、前記方法を提供する。
また、本発明は、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質とを組み合わせてなる新規な医薬組成物およびキットならびに癌の治療方法を提供する。
１．腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価する工程
本工程において、腫瘍細胞は、癌患者より取り出された腫瘍細胞が好ましい。そして、癌患者より取り出された腫瘍細胞は、例えば、癌患者より外科的処置（例えば、バイオプシーなど）にて摘出することにより得ることができる。
なお、癌患者から採取される腫瘍の大きさは、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を測定できる大きさであればよい。例えば、固形癌の場合は、バイオプシーにより採取したときの大きさ（例えば、２〜３ｍｍ）でよく、メスにより組織片を切除したときの大きさ（例えば、米粒大）でもよく、限定されるものではない。
腫瘍の種類は、特に限定されず、例えば、脳腫瘍、頚癌、食道癌、舌癌、肺癌、乳癌、膵癌、胃癌、小腸または十二指腸の癌、大腸癌（結腸癌、直腸癌）、膀胱癌、腎癌、肝癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、甲状腺癌、胆嚢癌、咽頭癌、肉腫（例えば、骨肉腫、軟骨肉腫、カポジ肉腫、筋肉腫、血管肉腫、線維肉腫など）、白血病（例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）および急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、リンパ腫、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫（ＭＭ）など）およびメラノーマなどを挙げることができる。
腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性とは、ＥＧＦ等による増殖および／または生存に関するシグナルを枯渇することによって引き起こされる腫瘍細胞のアポトーシス誘導能を意味する。すなわち、ＥＧＦ依存性とは、ＥＧＦが存在しなければ生存できないことをいう。正常の上皮系細胞の生存は、接着による生存シグナルに大きく依存しており、当該細胞は、そのシグナル枯渇を感知してアポトーシス誘導を引き起こす機序を有している。一方、不死化細胞や腫瘍細胞など接着への依存性を消失している細胞の一部では、接着シグナルの代わりにＥＧＦなどの増殖因子のシグナル枯渇を感知して、正常細胞と同様の機序でアポトーシス誘導を引き起こすことが知られている（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．２７９，Ｎｏ．４０，ｐｐ．４１２８０−４１２８５，２００４）。リガンド依存的にＥＧＦレセプターが活性化されているある種の細胞株では、ＥＧＦシグナル枯渇を模倣する操作、例えば、リガンドの除去やＥＧＦシグナル阻害物質処理などを施すことによるアポトーシス誘導が報告されている（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．２００３  Ｍａｙ  ８；２２（１８）：２８１２−２２）。つまり、アポトーシス誘導の機序は、正常細胞も腫瘍細胞も同じであるが、アポトーシス誘導の原因が、正常細胞では接着シグナルの枯渇であるのに対し、腫瘍細胞ではＥＧＦの枯渇である点で両者は相違する。
ＥＧＦシグナルは、ＥＧＦシグナルを刺激する生体物質、例えば、ＥＧＦ、Ｈｅｐａｒｉｎ−Ｂｉｎｄｉｎｇ  ＥＧＦ  ｌｉｋｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ（以下、「ＨＢ−ＥＧＦ」と称する場合がある）、Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ−α（以下、「ＴＧＦ−α」と称する場合がある）、Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ（β−ｃｅｌｌｕｌｉｎ、Ａｍｐｈｉｒｅｇｕｌｉｎ（Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２，ｐｐ．１２７−１３７，２００１））などにより活性化される。そして、ＥＧＦ依存性の高い腫瘍細胞を有する生体においては、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−α、Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎなどの発現量が増加していると考えられる。従って、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性は、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−α、Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎなどの発現量を指標として評価することができる。ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎの発現量は、腫瘍細胞における発現量ばかりでなく、生体液（例えば、血液、髄液、浸潤液、尿、唾液、リンパ液、体腔液など）中における発現量もまた指標とすることができる。すなわち、腫瘍細胞または生体液におけるこれらの発現量の程度は、それぞれの腫瘍細胞が増殖および／または生存する際のＥＧＦ依存性を評価するための指標となる。
ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎの発現量は、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎのタンパク質および／またはｍＲＮＡを測定することにより解析することができる。
また、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性は、例えば、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプター（Ｐｒｏｃ  Ａｍ  Ａｓｓｏｃ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００２；４３：Ａ３９０１．）の発現量を指標として評価することができる。ＥＧＦレセプターの発現量は、ＥＧＦレセプターのタンパク質および／またはｍＲＮＡを測定することにより解析することができる。
タンパク質の測定方法は、公知の方法で行うことができ、例えば、免疫化学的方法（例えば、ＥＬＩＳＡ、ＥＩＡ、ＲＩＡ、免疫組織化学的方法、ウエスタンブロット、フローサイトメトリーなど）、質量分析による方法などがあげられ、好ましくは免疫化学的方法があげられ、特に好ましくはＥＬＩＳＡがあげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
−方、ｍＲＮＡの測定方法は、公知の方法で行うことができ、例えば、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、ノーザンブロット解析、ＤＮＡマイクロアレイ、ＲＴ−ＰＣＲ、定量的ＲＴ−ＰＣＲなどの方法があげられ、好ましくは定量的ＲＴ−ＰＣＲがあげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
さらに、腫瘍細胞におけるＥＧＦレセプターの発現量および／またはリン酸化の程度は、それぞれの腫瘍細胞が増殖および／または生存する際のＥＧＦ依存性を示す。従って、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性は、例えば、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプターのリン酸化の程度を指標として評価することができる。
ＥＧＦレセプターのリン酸化の測定方法は、公知の方法で行うことができ、例えば、免疫化学的方法（例えば、免疫組織化学的方法、ウエスタンブロットなど）、質量分析による方法などがあげられ、好ましくは免疫化学的方法であり、特に好ましくはウエスタンブロットである。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
以下、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプターのリン酸化の程度の測定方法の一例について記載する。
腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプターのリン酸化の程度は、免疫沈降法およびウエスタンブロットにより測定することができる。
免疫沈降法およびウエスタンブロットは、常法に従い行うことができる（細胞工学別冊  目で見る実験ノートシリーズ  バイオ実験イラストレイテッド５巻  タンパクなんてこわくない  第１章  ＳＤＳ−ＰＡＧＥ  ｐ１３−ｐ６２、第４章  ウエスタンブロッティング  ｐ１０５−ｐ１２６、第７章  免疫沈降  ｐ１７１−ｐ１８２、秀潤社、１９９７）。
初めに、癌患者より取り出された腫瘍細胞の細胞溶解液を作成する。腫瘍細胞の細胞溶解液は、常法に従い調製することができる。腫瘍細胞の細胞溶解液は、腫瘍細胞に対し、例えば、各種プロテアーゼ阻害剤（Ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ，ｐ−ＡＰＭＳＦ，ＥＤＴＡ，ｏ−ＮａＶＯ４）および１０％グリセロール含有の細胞溶解液などを加えることにより得ることができる。
次に、腫瘍細胞の細胞溶解液について、免疫沈降を行うことができる。
その一例として、まず、腫瘍細胞の細胞溶解液に、例えば、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗リン酸化抗体などを接触させ、一定時間インキュベートする。その後、腫瘍細胞の細胞溶解液に、例えば、プロテインＡを吸着させたアガロースビーズ、プロテインＡを吸着させたセファロースビーズなどを添加し、さらに一定時間インキュベートする。次に、抗体が結合する担体を添加された腫瘍細胞の細胞溶解液は、常法に従い遠心操作などにより、抗体が結合する担体を分離する。反応の諸条件（例えば、反応溶液、抗体濃度、反応時間、反応温度、洗浄操作など）は、測定するタンパク質および使用する抗体に応じて適宜選択することができる。
続いて、免疫沈降により得られた試料について、ウエスタンブロットを行うことができる。
その一例として、まず、免疫沈降により得られた試料に、例えば、ＳＤＳサンプルバッファーなどを添加し、免疫沈降の担体から試料を分離する。そして、当該試料を常法に従い電気泳動を行う。電気泳動は、例えば、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）、非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ｎａｔｉｖｅ−ＰＡＧＥ、等電点電気泳動、２次元電気泳動などがあげられ、好ましくはＳＤＳ−ＰＡＧＥである。電気泳動後、試料を常法に従いメンブレンに転写する。メンブレンは、例えば、ニトロセルロースメンブレン、ナイロンメンブレン、ＰＶＤＦメンブレンなどがあげられ、好ましくはニトロセルロースメンブレンである。
次に、メンブレンは、例えば、ＢＳＡ、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００、ｔｗｅｅｎ２０、スキムミルク（ｓｋｉｍｍｉｌｋ）、カゼインなどを含む溶液により前処理する。前処理の方法は、特に限定されず、測定するタンパク質および使用する抗体に応じて適宜選択することができる。
次に、前処理したメンブレンに、例えば、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体、抗リン酸化抗体など（以下、「一次抗体」と称する場合がある）を接触させる。免疫沈降において抗ＥＧＦレセプター抗体を用いた場合には、一次抗体としては、例えば、抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体、抗リン酸化抗体、抗リン酸化チロシン抗体などがあげられ、好ましくは抗リン酸化チロシン抗体があげられる。また、免疫沈降において抗リン酸化抗体を用いた場合には、一次抗体としては、例えば、抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体、抗ＥＧＦレセプター抗体などがあげられ、好ましくは抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体があげられる。一次抗体は、市販のものを使用してもよく、作製してもよい。また、一次抗体は、標識物質により標識されていてもよく、標識されていなくてもよい。一次抗体が標識されていない場合には、当該一次抗体を認識する抗体（以下、「二次抗体」と称する場合がある）を接触させることができる。二次抗体は、標識物質により標識されていることが好ましい。標識物質は、例えば、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼなどの酵素、ＦＩＴＣ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ  ｉｓｏｔｈｉｏｃｉａｎａｔｅ）、Ａｌｅｘａ４８８、ＰＥ、Ｒｈｏｄａｍｉｎ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ａｌｌｏｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ、ＰｈａｒＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ、ＡｍＣｙａｎ、ＺｓＧｒｅｅｎ、ＺｓＹｅｌｌｏｗ、ＡｓＲｅｄ、ＨｃＲｅｄなどの蛍光物質およびビオチンなどがあげられる。標識物質がビオチンである場合には、さらに、アビジン、ストレプトアビジンなどを接触させることができる。当該アビジン、ストレプトアビジンなどは、標識物質により標識されていることが好ましい。標識物質は、例えば、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼなどの酵素、ＦＩＴＣ、Ａｌｅｘａ４８８、ＰＥ、Ｒｈｏｄａｍｉｎ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ａｌｌｏｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ、ＰｈａｒＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ、ＡｍＣｙａｎ、ＺｓＧｒｅｅｎ、ＺｓＹｅｌｌｏｗ、ＡｓＲｅｄ、ＨｃＲｅｄなどの蛍光物質があげられる。反応の諸条件（例えば、反応溶液、抗体濃度、反応時間、反応温度、洗浄操作など）は、測定するタンパク質および使用する抗体に応じて適宜選択することができる。
標識物質が酵素である場合には、基質および／または発色試薬をメンブレンに接触させて発色させ、当該発色を観察することにより、ＥＧＦレセプターのリン酸化を測定することができる。
酵素がペルオキシダーゼの場合には、例えば、基質としてＨ２Ｏ２などを、発色試薬としてジアミノベンジジン（ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ；ＤＡＢ）などをメンブレンに接触させることができる。また、酵素がペルオキシダーゼの場合には、例えば、基質としてＨ２Ｏ２などを、発色試薬としてルミノールなどをメンブレンに接触させることにより化学発光反応を行うこともできる。
酵素がアルカリフォスファターゼの場合には、例えば、基質として５−ｂｒｏｍｏ−４−ｃｈｌｏｒｏ−３−ｉｎｄｏｌｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅなどを、発色試薬としてニトロブルーテトラゾリウム（ｎｉｔｒｏｂｌｕｅｔｅｔｒａｚｏｒｉｕｍ）などをメンブレンに接触させることができる。また、酵素がアルカリフォスファターゼの場合には、例えば、発色基質としてＣＳＰＤ（ｄｉｓｏｄｉｕｍ  ３−（４−ｍｅｔｈｏｘｙｓｐｉｒｏ｛１，２−ｄｉｏｘｅｔａｎｅ−３，２’−（５’−ｃｈｌｏｒｏ）ｔｒｉｃｙｃｌｏ［３．３．１．１３，７］ｄｅｃａｎ｝−４−ｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）などをメンブレンに接触させることにより化学発光反応を行うこともできる。
検出には、Ｘ線フィルムを用いることができ、ＣＣＤカメラにより発光を検出するイメージアナライザーなどを用いることもできる。
また、標識物質が蛍光物質の場合には、励起光をメンブレンに照射して発光させ、当該蛍光を観察することにより、ＥＧＦレセプターのリン酸化を測定することができる。
このようにして、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプターのリン酸化を測定することができる。
また、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプターのリン酸化を測定する方法の別の一例を以下に記載する。
腫瘍細胞のＥＧＦレセプターのリン酸化は、抗リン酸化抗体を用いて免疫組織化学的方法により測定することができる。
免疫組織化学的方法は、常法に従い行うことができる（細胞工学別冊  目で見る実験ノートシリーズ  バイオ実験イラストレイテッド  ５巻  タンパクなんてこわくない  第５章  免疫染色  ｐ１２７−ｐ１６３、秀潤社、１９９７）。
初めに、癌患者より取り出された腫瘍の組織切片を作成する。組織切片は、例えば、凍結切片、パラフィン切片などがあげられる。
癌患者より取り出された腫瘍は、例えば、未処理でもよく、固定化処理を行ってもよい。また、当該腫瘍は、例えば、ＯＣＴコンパウンドなどにより包埋することができる。
固定化処理は、ホルムアルデヒド、好ましくは４％ＰＦＡ／ＰＢＳ（−）で固定化処理することができ、その後、２０％ショ糖／リン酸緩衝液等で置換することができる。
これらの諸条件は、測定するタンパク質および使用する抗体等に応じて適宜選択することができる。
組織切片は、スライドガラスに保持し、染色が可能な状態に前処理することができる。前処理の方法は、特に限定されず、測定するタンパク質および使用する抗体に応じて適宜選択すればよい。例えば、キシレン、ホルムアルデヒド、アセトン、メタノールなどを含む溶液により組織切片を前処理することができる。また、組織切片は、例えば、ＢＳＡ、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００、ｔｗｅｅｎ２０、スキムミルク（ｓｋｉｍｍｉｌｋ）、カゼインなどを含む溶液により前処理することも可能である。
次に、前処理した組織切片に抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体（以下、「一次抗体」と称する場合がある）を接触させる。一次抗体は、市販のものを使用してもよく、作成してもよい。また、一次抗体は、標識物質により標識されていてもよく、標識されていなくてもよい。一次抗体が標識されていない場合には、当該一次抗体を認識する抗体（以下、「二次抗体」と称する場合がある）を接触させることができる。二次抗体は、標識物質により標識されていることが好ましい。標識物質は、例えば、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼなどの酵素、ＦＩＴＣ（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ  ｉｓｏｔｈｉｏｃｉａｎａｔｅ）、Ａｌｅｘａ４８８、ＰＥ、Ｒｈｏｄａｍｉｎ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ａｌｌｏｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ、ＰｈａｒＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ、ＡｍＣｙａｎ、ＺｓＧｒｅｅｎ、ＺｓＹｅｌｌｏｗ、ＡｓＲｅｄ、ＨｃＲｅｄなどの蛍光物質およびビオチンなどがあげられる。標識物質がビオチンである場合には、さらに、アビジン、ストレプトアビジンなどを接触させることができる。当該アビジン、ストレプトアビジンなどは、標識物質により標識されていることが好ましい。標識物質は、例えば、アルカリフォスファターゼ、ペルオキシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼなどの酵素、ＦＩＴＣ、Ａｌｅｘａ４８８、ＰＥ、Ｒｈｏｄａｍｉｎ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ａｌｌｏｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ、ＰｈａｒＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ、ＡｍＣｙａｎ、ＺｓＧｒｅｅｎ、ＺｓＹｅｌｌｏｗ、ＡｓＲｅｄ、ＨｃＲｅｄなどの蛍光物質があげられる。反応の諸条件（例えば、反応溶液、抗体濃度、反応時間、反応温度、洗浄操作など）は、測定するタンパク質および使用する抗体等に応じて適宜選択することができる。
標識物質が酵素である場合には、基質および／または発色試薬を組織切片に接触させて発色させ、当該発色を観察することにより、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプターのリン酸化を測定することができる。
酵素がペルオキシダーゼの場合は、例えば、基質としてＨ２Ｏ２などを、発色試薬としてジアミノベンジジン（ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ；ＤＡＢ）などを組織切片に接触させることができる。
酵素がアルカリフォスファターゼの場合には、例えば、基質として５−ｂｒｏｍｏ−４−ｃｈｌｏｒｏ−３−ｉｎｄｏｌｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅなどを、発色試薬としてニトロブルーテトラゾリウム（ｎｉｔｒｏｂｌｕｅｔｅｔｒａｚｏｒｉｕｍ）などを組織切片に接触させることができる。また、酵素がアルカリフォスファターゼの場合には、例えば、発色基質としてＣＳＰＤ（ｄｉｓｏｄｉｕｍ  ３−（４−ｍｅｔｈｏｘｙｓｐｉｒｏ｛１，２−ｄｉｏｘｅｔａｎｅ−３，２’−（５’−ｃｈｌｏｒｏ）ｔｒｉｃｙｃｌｏ［３．３．１．１３，７］ｄｅｃａｎ｝−４−ｙｌ）ｐｈｅｎｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）などを組織切片に接触させることにより化学発光反応を行うこともできる。
また、標識物質が蛍光物質の場合には、励起光を組織切片に照射して発光させ、当該蛍光を観察することにより、ＥＧＦレセプターのリン酸化を測定することができる。
このようにして、腫瘍細胞のＥＧＦレセプターのリン酸化を測定することができる。
また、前記処理をした組織切片は、ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて核染色を行うことができる。
さらに、前記処理をした組織切片は、水溶性封入剤で封入することができる。
さらに、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性は、例えば、ＥＧＦによって誘導される腫瘍細胞の増殖および／または生存を指標として評価することができる。ＥＧＦによって誘導される腫瘍細胞の増殖および／または生存の測定方法は、例えば、細胞増殖アッセイ、生存アッセイなどがあげられる。細胞増殖アッセイは、例えば、トリチウムチミジン取り込み法、ＭＴＴ法、ＸＴＴ法（ｃｅｌｌ  ｃｏｕｎｔｉｎｇ  ｋｉｔ−８（同仁化学株式会社））アラマーブルー法、ニュートラルレッド法、ＢｒｄＵ法、Ｋｉ６７染色法、ＰＣＮＡ染色法などがあげられ、好ましくはＰＣＮＡ染色法があげられる。生存アッセイは、例えば、ＴＵＮＮＥＬ染色法、Ｃａｓｐａｓｅ−３切断検出法、ＰＡＲＰ切断検出法などがあげられ、好ましくはＣａｓｐａｓｅ−３切断検出法があげられる。これらの方法は、常法に従い行うことができる。
２．癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する工程
この工程では、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標として、血管新生阻害物質に対して高感受性であるか否かを判断する。腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性は、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプタータンパク質および／またはｍＲＮＡ、腫瘍細胞に発現するＥＧＦレセプターのリン酸化、ＥＧＦによって誘導される腫瘍細胞の増殖および／または生存などの測定結果を指標とすることができる。腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性が高い場合に、癌患者が血管新生阻害物質に対して高感受性であると判断することができる。
腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性が高い場合としては、例えば、腫瘍細胞にＥＧＦレセプターが相当量発現している場合（例えば、ＥＧＦレセプターの発現が陽性であるなど）、ＥＧＦレセプターがリン酸化されている場合、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎなどが高発現している場合などを挙げることができる。ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎなどが高発現している場合とは、例えば、測定対象となる腫瘍細胞におけるＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎなどの発現量が、通常の細胞（非腫瘍細胞）または平均的な腫瘍細胞における発現量と比較して、１．５倍以上、好ましくは２倍以上、より好ましくは３倍以上、さらに好ましくは４倍以上発現している場合を挙げることができる。また、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎなどが高発現している場合とは、例えば、測定対象となる患者の生体液中におけるＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、ＴＧＦ−αおよびＥｐｉｒｅｇｕｌｉｎなどの発現量が、健常人または平均的な患者の生体液中の発現量と比較して、１．５倍以上、好ましくは２倍以上、より好ましくは３倍以上、さらに好ましくは４倍以上発現している場合を挙げることができる。
本発明の別の態様として、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標として、血管新生阻害物質に対して高感受性を示す患者を選択する方法をあげることができる。ＥＧＦ依存性の評価結果から、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性が高いときは、上記の通り、当該細胞を有する患者は、血管新生阻害物質に対する高感受性を示すと判断できる。したがって、このような患者を、血管新生阻害物質に対する高感受性を示す患者として選択することができる。
また、本発明の別の態様として、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標として、血管新生阻害物質の投与対象となる患者を選択する方法をあげることができる。腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性の高い患者は、血管新生阻害物質の投与対象となる。
また、本発明の別の態様として、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標として、患者に対する血管新生阻害物質の治療効果を予測する方法をあげることができる。本発明の方法において、ＥＧＦ依存性の評価の結果、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性が高い場合は、血管新生阻害物質に対して高い感受性を示すと判断できるため、当該細胞または当該細胞を有する患者における血管新生阻害物質の治療効果は高いと予測することができる。
また、本発明には、患者の血管新生阻害物質に対する感受性の程度を予測するために、当該患者由来の腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価する方法が含まれる。当該評価方法は、上記１．に示すとおりである。
本工程において、血管新生阻害物質は、前述のとおりであるが、好ましくは４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、もしくはその薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物である。
本発明に係る方法は、血管新生阻害物質を患者に投与する前に、当該患者における血管新生阻害物質の有効性の程度を予測するのに用いることができる。そして、血管新生阻害物質の有する効果をより期待できる患者を選択して、疾患の治療を行うことができる。したがって、本発明は、臨床上非常に有用である。
３．血管新生阻害物質
本発明において、血管新生阻害物質は、血管新生を阻害する活性を有するものであれば、特には限定されない。
血管新生阻害物質は、例えば、
ＶＥＧＦ阻害物質（例えば、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、抗ＶＥＧＦレセプター抗体、抗ＶＥＧＦ抗体（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，５５，５２９６−５３０１，１９９５））、
ＦＧＦ（繊維芽細胞増殖因子：ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ）阻害物質（例えば、ＦＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、抗ＦＧＦレセプター抗体、抗ＦＧＦ抗体（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，５１，６１８０−４，１９９１））、
ＰＤＧＦ（血小板由来増殖因子：ｐｌａｔｅｌｅｔ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ）阻害物質（例えば、ＰＤＧＦレセプターキナーゼ阻害物質（Ｊ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ．，１１１，１２８７−９５）、抗ＰＤＧＦレセプター抗体、抗ＰＤＧＦ抗体）、
ＥＧＦ（上皮成長因子：ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ）阻害物質（例えば、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，５１，６１８０−４，１９９１）、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗ＥＧＦ抗体）、
インテグリン阻害物質（例えば、αｖβ３インテグリン阻害物質、αｖβ５インテグリン阻害物質（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６，３０５６−６１，２０００））、
内因性阻害物質（例えば、ＩＬ−１２、Ｔｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ−１，Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ，Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．，７８，３６１−５，１９９８）、ＣＯＸ−２阻害物質（Ａｎｎｕａｌｓ  ｏｆ  Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．，８４−６，１９９９））、
マトリックスメタロプロテイン阻害物質（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊ．Ｐａｎｃｒｅａｔｏｌ．，２１，１−１２，１９９７）、
その他阻害物質（例えば、ｆａｒｎｅｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ阻害物質、一酸化窒素阻害物質、アンジオテンシン変換酵素阻害物質、ＨＭＧ−ＣｏＡ  ｒｅｄｕｃｔａｓｅ阻害物質、Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔ阻害物質、メチオニンアミノペプチダーゼ阻害剤（Ｓｃｉｅｎｃｅ．，２８２，１３２４−１３２７，１９９８））、
などがあげられ、好ましくはＶＥＧＦ阻害物質であり、より好ましくはＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、抗ＶＥＧＦレセプター抗体または抗ＶＥＧＦ抗体であり、特に好ましくはＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質である。
（Ａ）化合物の基の定義
本明細書において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。
「ハロゲン原子」の好適な例としては、フッ素原子、塩素原子をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ１−６アルキル基」とは、炭素数が１〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルキル基を意味し、具体例としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基（ｎ−プロピル基）、２−プロピル基（ｉ−プロピル基）、２−メチル−１−プロピル基（ｉ−ブチル基）、２−メチル−２−プロピル基（ｔ−ブチル基）、１−ブチル基（ｎ−ブチル基）、２−ブチル基（ｓ（ｓｅｃ）−ブチル基）、１−ペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチル−１−ブチル基、３−メチル−１−ブチル基、２−メチル−２−ブチル基、３−メチル−２−ブチル基、２，２−ジメチル−１−プロピル基、１−ヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基、２−メチル−１−ペンチル基、３−メチル−１−ペンチル基、４−メチル−１−ペンチル基、２−メチル−２−ペンチル基、３−メチル−２−ペンチル基、４−メチル−２−ペンチル基、２−メチル−３−ペンチル基、３−メチル−３−ペンチル基、２，３−ジメチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−１−ブチル基、２，２−ジメチル−１−ブチル基、２−エチル−１−ブチル基、３，３−ジメチル−２−ブチル基、２，３−ジメチル−２−ブチル基などがあげられる。
「Ｃ１−６アルキル基」の好適な例としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基、２−メチル−１−プロピル基、２−メチル−２−プロピル基、１−ブチル基、２−ブチル基、１−ペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチル−１−ブチル基、３−メチル−１−ブチル基、２−メチル−２−ブチル基、３−メチル−２−ブチル基、２，２−ジメチル−１−プロピル基をあげることができ、より好適な例としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基、２−メチル−１−プロピル基、２−メチル−２−プロピル基、１−ブチル基、２−ブチル基をあげることができ、さらに好適な例としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基をあげることができ、最も好適な例としては、メチル基、エチル基をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ１−６アルキレン基」とは、上記定義「Ｃ１−６アルキル基」からさらに任意の水素原子を１個除いて誘導される二価の基を意味し、具体例としては、メチレン基、１，２−エチレン基、１，１−エチレン基、１，３−プロピレン基、テトラメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ２−６アルケニル基」とは、二重結合を１個有する、炭素数が２〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルケニル基を意味し、具体例としては、エテニル基（ビニル基）、１−プロペニル基、２−プロペニル基（アリル基）、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ２−６アルキニル基」とは、三重結合を１個有する、炭素数が２〜６個の直鎖状または分枝鎖状のアルキニル基を意味し、具体例としては、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、１−ブチニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ３−８シクロアルキル基」とは、炭素数が３〜８個の単環または二環の飽和脂肪族炭化水素基を意味し、具体例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基、ビシクロ［２．１．０］ペンチル基、ビシクロ［３．１．０］ヘキシル基、ビシクロ［２．１．１］ヘキシル基、ビシクロ［４．１．０］ヘプチル基、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル基（ノルボルニル基）、ビシクロ［３．３．０］オクチル基、ビシクロ［３．２．１］オクチル基、ビシクロ［２．２．２］オクチル基などがあげられる。
「Ｃ３−８シクロアルキル基」の好適な例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基をあげることができ、より好適な例としては、シクロプロピル基があげられる。
本明細書において、「Ｃ６−１０アリール基」とは、炭素数が６〜１０個の芳香族性の炭化水素環式基を意味し、具体例としては、フェニル基、１−ナフチル基、２−ナフチル基、インデニル基、アズレニル基などがあげられる。
「Ｃ６−１０アリール基」の好適な例としては、フェニル基をあげることができる。
本明細書において、「ヘテロ原子」とは、窒素原子、酸素原子または硫黄原子を意味する。
本明細書において、「５〜１０員ヘテロアリール基」とは、環を構成する原子の数が５〜１０個であり、環を構成する原子中に１〜５個のヘテロ原子を含有する芳香族性の環式基を意味し、具体例としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、チアゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、フラザニル基、チアジアゾリル基、オキサジアゾリル基、ピリジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、トリアジニル基、プリニル基、プテリジニル基、キノリル基、イソキノリル基、ナフチリジニル基、キノキサリニル基、シンノリニル基、キナゾリニル基、フタラジニル基、イミダゾピリジル基、イミダゾチアゾリル基、イミダゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンズイミダゾリル基、インドリル基、イソインドリル基、インダゾリル基、ピロロピリジル基、チエノピリジル基、フロピリジル基、ベンゾチアジアゾリル基、ベンゾオキサジアゾリル基、ピリドピリミジニル基、ベンゾフリル基、ベンゾチエニル基、チエノフリル基などがあげられる。
「５〜１０員ヘテロアリール基」の好適な例としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イソチアゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基をあげることができる。
本明細書において、「３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基」とは、
（１）環を構成する原子の数が３〜１０個であり、
（２）環を構成する原子中に１〜２個のヘテロ原子を含有し、
（３）環中に二重結合を１〜２個含んでいてもよく、
（４）環中にカルボニル基、スルフィニル基またはスルホニル基を１〜３個含んでいてもよい、
（５）単環式または二環式である非芳香族性の環式基を意味し、環を構成する原子中に窒素原子を含有する場合、窒素原子から結合手が出ていてもよい。
具体例としては、アジリジニル基、アゼチジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、アゼパニル基、アゾカニル基、ピペラジニル基、ジアゼパニル基、ジアゾカニル基、ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプチル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、１，１−ジオキソチオモルホリニル基、オキシラニル基、オキセタニル基、テトラヒドロフリル基、ジオキソラニル基、テトラヒドロピラニル基、ジオキサニル基、テトラヒドロチエニル基、テトラヒドロチオピラニル基、オキサゾリジニル基、チアゾリジニル基などがあげられる。
「３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基」の好適な例としては、アジリジニル基、アゼチジニル基、ピロリジニル基、ピペリジニル基、アゼパニル基、ピペラジニル基、ジアゼパニル基、モルホリニル基、チオモルホリニル基、１，１−ジオキソチオモルホリニル基、テトラヒドロフリル基、テトラヒドロピラニル基をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ１−６アルコキシ基」とは、上記定義「Ｃ１−６アルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であることを意味し、具体的としては、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基（ｎ−プロポキシ基）、２−プロポキシ基（ｉ−プロポキシ基）、２−メチル−１−プロポキシ基（ｉ−ブトキシ基）、２−メチル−２−プロポキシ基（ｔ−ブトキシ基）、１−ブトキシ基（ｎ−ブトキシ基）、２−ブトキシ基（ｓ−ブトキシ基）、１−ペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、２−メチル−１−ブトキシ基、３−メチル−１−ブトキシ基、２−メチル−２−ブトキシ基、３−メチル−２−ブトキシ基、２，２−ジメチル−１−プロポキシ基、１−ヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、２−メチル−１−ペンチルオキシ基、３−メチル−１−ペンチルオキシ基、４−メチル−１−ペンチルオキシ基、２−メチル−２−ペンチルオキシ基、３−メチル−２−ペンチルオキシ基、４−メチル−２−ペンチルオキシ基、２−メチル−３−ペンチルオキシ基、３−メチル−３−ペンチルオキシ基、２，３−ジメチル−１−ブトキシ基、３，３−ジメチル−１−ブトキシ基、２，２−ジメチル−１−ブトキシ基、２−エチル−１−ブトキシ基、３，３−ジメチル−２−ブトキシ基、２，３−ジメチル−２−ブトキシ基などがあげられる。
「Ｃ１−６アルコキシ基」の好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基、２−プロポキシ基、２−メチル−１−プロポキシ基、２−メチル−２−プロポキシ基、１−ブトキシ基、２−ブトキシ基、１−ペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、２−メチル−１−ブトキシ基、３−メチル−１−ブトキシ基、２−メチル−２−ブトキシ基、３−メチル−２−ブトキシ基、２，２−ジメチル−１−プロポキシ基をあげることができ、より好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基、２−プロポキシ基、２−メチル−１−プロポキシ基、２−メチル−２−プロポキシ基、１−ブトキシ基、２−ブトキシ基をあげることができ、さらに好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基、１−プロポキシ基、２−プロポキシ基をあげることができ、最も好適な例としては、メトキシ基、エトキシ基をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ１−６アルキルチオ基」とは、上記定義「Ｃ１−６アルキル基」の末端に硫黄原子が結合した基であることを意味し、具体例としては、メチルチオ基、エチルチオ基、１−プロピルチオ基（ｎ−プロピルチオ基）、２−プロピルチオ基（ｉ−プロピルチオ基）、２−メチル−１−プロピルチオ基（ｉ−ブチルチオ基）、２−メチル−２−プロピルチオ基（ｔ−ブチルチオ基）、１−ブチルチオ基（ｎ−ブチルチオ基）、２−ブチルチオ基（ｓ−ブチルチオ基）、１−ペンチルチオ基、２−ペンチルチオ基、３−ペンチルチオ基、２−メチル−１−ブチルチオ基、３−メチル−１−ブチルチオ基、２−メチル−２−ブチルチオ基、３−メチル−２−ブチルチオ基、２，２−ジメチル−１−プロピルチオ基、１−ヘキシルチオ基、２−ヘキシルチオ基、３−ヘキシルチオ基、２−メチル−１−ペンチルチオ基、３−メチル−１−ペンチルチオ基、４−メチル−１−ペンチルチオ基、２−メチル−２−ペンチルチオ基、３−メチル−２−ペンチルチオ基、４−メチル−２−ペンチルチオ基、２−メチル−３−ペンチルチオ基、３−メチル−３−ペンチルチオ基、２，３−ジメチル−１−ブチルチオ基、３，３−ジメチル−１−ブチルチオ基、２，２−ジメチル−１−ブチルチオ基、２−エチル−１−ブチルチオ基、３，３−ジメチル−２−ブチルチオ基、２，３−ジメチル−２−ブチルチオ基などがあげられる。
「Ｃ１−６アルキルチオ基」の好適な例としては、メチルチオ基、エチルチオ基、１−プロピルチオ基（ｎ−プロピルチオ基）、２−プロピルチオ基（ｉ−プロピルチオ基）、２−メチル−１−プロピルチオ基（ｉ−ブチルチオ基）、２−メチル−２−プロピルチオ基（ｔ−ブチルチオ基）、１−ブチルチオ基（ｎ−ブチルチオ基）、２−ブチルチオ基（ｓ−ブチルチオ基）をあげることができる。
本明細書において、「Ｃ３−８シクロアルコキシ基」とは、上記定義「Ｃ３−８シクロアルキル基」の末端に酸素原子が結合した基であることを意味し、具体的としては、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロヘプチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基、ビシクロ［２．１．０］ペンチルオキシ基、ビシクロ［３．１．０］ヘキシルオキシ基、ビシクロ［２．１．１］ヘキシルオキシ基、ビシクロ［４．１．０］ヘプチルオキシ基、ビシクロ［２．２．１］ヘプチルオキシ基（ノルボルニルオキシ基）、ビシクロ［３．３．０］オクチルオキシ基、ビシクロ［３．２．１］オクチルオキシ基、ビシクロ［２．２．２］オクチルオキシ基などがあげられる。
「Ｃ３−８シクロアルコキシ基」の好適な例としては、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基、シクロペンチルオキシ基をあげることができ、より好適な例としては、シクロプロポキシ基をあげることができる。
本明細書において、「モノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基」とは、アミノ基中の１個の水素原子を、上記定義「Ｃ１−６アルキル基」で置換した基を意味し、具体例としては、メチルアミノ基、エチルアミノ基、１−プロピルアミノ基（ｎ−プロピルアミノ基）、２−プロピルアミノ基（ｉ−プロピルアミノ基）、２−メチル−１−プロピルアミノ基（ｉ−ブチルアミノ基）、２−メチル−２−プロピルアミノ基（ｔ−ブチルアミノ基）、１−ブチルアミノ基（ｎ−ブチルアミノ基）、２−ブチルアミノ基（ｓ−ブチルアミノ基）、１−ペンチルアミノ基、２−ペンチルアミノ基、３−ペンチルアミノ基、２−メチル−１−ブチルアミノ基、３−メチル−１−ブチルアミノ基、２−メチル−２−ブチルアミノ基、３−メチル−２−ブチルアミノ基、２，２−ジメチル−１−プロピルアミノ基、１−ヘキシルアミノ基、２−ヘキシルアミノ基、３−ヘキシルアミノ基、２−メチル−１−ペンチルアミノ基、３−メチル−１−ペンチルアミノ基、４−メチル−１−ペンチルアミノ基、２−メチル−２−ペンチルアミノ基、３−メチル−２−ペンチルアミノ基、４−メチル−２−ペンチルアミノ基、２−メチル−３−ペンチルアミノ基、３−メチル−３−ペンチルアミノ基、２，３−ジメチル−１−ブチルアミノ基、３，３−ジメチル−１−ブチルアミノ基、２，２−ジメチル−１−ブチルアミノ基、２−エチル−１−ブチルアミノ基、３，３−ジメチル−２−ブチルアミノ基、２，３−ジメチル−２−ブチルアミノ基などがあげられる。
本明細書において、「ジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基」とは、アミノ基中の２個の水素原子を、それぞれ同一のまたは異なる、上記定義「Ｃ１−６アルキル基」で置換した基を意味し、具体例としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｉ−プロピルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｉ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｓ−ブチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジ−ｔ−ブチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｎ−プロピル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｉ−プロピル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｉ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｓ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−ｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ２−７アシル基」とは、上記定義の「Ｃ１−６アルキル基」が結合したカルボニル基であることを意味し、具体例としては、例えば、アセチル基、プロピオニル基、イソプロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基などがあげられる。
本明細書において、「Ｃ２−７アルコキシカルボニル基」とは、上記定義の「Ｃ１−６アルコキシ基」が結合したカルボニル基であることを意味し、具体例としては、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、１−プロピルオキシカルボニル基、２−プロピルオキシカルボニル基、２−メチル−２−プロポキシカルボニル基などがあげられる。
本明細書において、「置換基を有していてもよい」とは、「置換可能な部位に、任意に組み合わせて１または複数個の置換基を有してもよい」ことを意味し、置換基の具体例としては、例えば、ハロゲン原子、水酸基、チオール基、ニトロ基、シアノ基、ホルミル基、カルボキシル基、アミノ基、シリル基、メタンスルホニル基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ６−１０アリール基、５〜１０員ヘテロアリール基、３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ１−６アルキルチオ基、Ｃ３−８シクロアルコキシ基、モノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、Ｃ２−７アシル基またはＣ２−７アルコキシカルボニル基などをあげることができる（ただし、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ６−１０アリール基、５〜１０員ヘテロアリール基、３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ１−６アルキルチオ基、Ｃ３−８シクロアルコキシ基、モノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、Ｃ２−７アシル基およびＣ２−７アルコキシカルボニル基はそれぞれ独立して下記置換基群からなる群から選ばれる１〜３個の基を有していてもよい）。
＜置換基群＞
ハロゲン原子、水酸基、チオール基、ニトロ基、シアノ基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ６−１０アリール基、５〜１０員ヘテロアリール基、３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、Ｃ１−６アルコキシ基およびＣ１−６アルキルチオ基。
（Ｂ）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質
（Ｂ−１）一般式（Ｉ）
本発明において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
一般式（Ｉ）
2007015578.tif 000005
で表される化合物を挙げることができる。
（ｉ）Ａ
Ａは、式
2007015578.tif 000006
で表される基を意味する。
式中、Ｒ１は、式−Ｖ１−Ｖ２−Ｖ３（式中、Ｖ１は、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキレン基を意味する；Ｖ２は、単結合、酸素原子、硫黄原子、カルボニル基、スルフィニル基、スルホニル基、式−ＣＯＮＲ６−で表される基、式−ＳＯ２ＮＲ６−で表される基、式−ＮＲ６ＳＯ２−で表される基、式−ＮＲ６ＣＯ−で表される基または式−ＮＲ６−で表される基を意味する（式中、Ｒ６は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。）；Ｖ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。）で表される基を意味する。
Ｒ２は、シアノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、カルボキシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基または置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する；Ｖａ１２は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。）で表される基を意味する。
Ａ１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。
Ｒ１１は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基を意味する。
Ｒ１２は、水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。
Ｖａ１３は、酸素原子または硫黄原子を意味する。
Ａ１１は、置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。
Ｒ１３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基または置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基を意味する。
Ｒ１４は、式−Ｖａ１４−Ｖａ１５（式中、Ｖａ１４は、単結合またはカルボニル基を意味する；Ｖａ１５は、水素原子、水酸基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、アミノ基、置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、置換基を有していてもよいジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基、ホルミル基、カルボキシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。）で表される基を意味する。
（ｉｉ）Ｘ
Ｘは、酸素原子または硫黄原子を意味する。
（ｉｉｉ）Ｙ
Ｙは、式
2007015578.tif 000007
で表される基を意味する。
式中、Ｒ３は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して水素原子、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、アミノ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルコキシ基、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキルチオ基、ホルミル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基または式−ＣＯＮＶｄ１Ｖｄ２（式中、Ｖｄ１およびＶｄ２は、それぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基を意味する。
Ｒ９は、水素原子、ハロゲン原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。
Ｗ１およびＷ２は、それぞれ独立して置換基を有していてもよい炭素原子または窒素原子を意味する。
（ｉｖ）Ｒ４
Ｒ４は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−７アシル基または置換基を有していてもよいＣ２−７アルコキシカルボニル基を意味する。
（ｖ）Ｒ５
Ｒ５は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルケニル基、置換基を有していてもよいＣ２−６アルキニル基、置換基を有していてもよいＣ３−８シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ６−１０アリール基、置換基を有していてもよい５〜１０員ヘテロアリール基、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基を意味する。
一般式（Ｉ）で表される化合物は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第０２／０３２８７２号パンフレット（ＷＯ０２／３２８７２）、国際公開第２００４／０２０４３４号パンフレット（ＷＯ２００４／０２０４３４）、および国際公開第２００５／０６３７１３号パンフレット（ＷＯ２００５／０６３７１３）のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
（Ｂ−２）一般式（ＩＩ）
本発明において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、好ましくは、
一般式（ＩＩ）
2007015578.tif 000008
で表される化合物を挙げることができる。一般式（ＩＩ）は、一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい例である。
（ｉ）Ｒ１
Ｒ１は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ１の好適な例としては、Ｃ１−６アルキル基があげられる。例えば、Ｒ１の定義においてＶ１がＣ１−６アルキレン基、Ｖ２が単結合、Ｖ３が水素原子のときは、Ｒ１はＣ１−６アルキル基となる。ただし、この場合、Ｒ１は、Ｃ１−６アルキル基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基、水酸基、Ｃ１−６アルコキシ基、アミノ基、モノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基およびジ−Ｃ１−６アルキルアミノ基から選ばれる置換基を有していてもよい。
Ｒ１のより好適な例としては、メチル基または式
2007015578.tif 000009
（式中、Ｒａ３はメチル基を意味する；Ｒａ１は水素原子または水酸基を意味する；Ｒａ２は、メトキシ基、エトキシ基、１−ピロリジニル基、１−ピペリジニル基、４−モルホリニル基、ジメチルアミノ基またはジエチルアミノ基を意味する。）のいずれかで表される基があげられる。
Ｒ１のさらに好適な例としては、メチル基または２−メトキシエチル基があげられる。
（ｉｉ）Ｒ２
Ｒ２は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ２の好適な例としては、シアノ基または式−ＣＯＮＶａ１１Ｖａ１２（式中、Ｖａ１１およびＶａ１２は、前記定義と同じ意味である。）で表される基があげられる。
Ｒ２のより好適な例としては、シアノ基、または式−ＣＯＮＨＶａ１６（式中、Ｖａ１６は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基またはＣ３−８シクロアルコキシ基を意味する。ただし、Ｖａ１６は、ハロゲン原子、シアノ基、水酸基およびＣ１−６アルコキシ基から選ばれる置換基を有していてもよい。）で表される基があげられる。
Ｒ２のさらに好適な例としては、式−ＣＯＮＨＶａ１７（式中、Ｖａ１７は、水素原子、Ｃ１−６アルキル基またはＣ１−６アルコキシ基を意味する。）で表される基があげられる。
Ｒ２のもっとも好適な例としては、式−ＣＯＮＨＶａ１８（式中、Ｖａ１８は、水素原子、メチル基またはメトキシ基を意味する。）で表される基があげられる。
（ｉｉｉ）Ｙ１
Ｙ１は、式
2007015578.tif 000010
（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｗ１およびＷ２は、前記定義と同じ意味である。）で表される基を意味する。
Ｙ１の好適な例としては、式
2007015578.tif 000011
（式中、Ｒ７１は、水素原子またはハロゲン原子を意味する。）で表される基があげられる。
（ｉｖ）Ｒ３およびＲ４
Ｒ３およびＲ４は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ３およびＲ４の好適な例としては、水素原子があげられる。
（ｖ）Ｒ５
Ｒ５は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ５の好適な例としては、水素原子、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基またはＣ６−１０アリール基（ただし、Ｒ５は、ハロゲン原子およびメタンスルホニル基から選ばれる置換基を有していてもよい）があげられる。
Ｒ５のより好適な例としては、メチル基、エチル基またはシクロプロピル基があげられる。
また、一般式（ＩＩ）で表される化合物の好適な例としては、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（２−クロロ−４−（（６−シアノ−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−３−（ジエチルアミノ）−２−ヒドロキシプロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
Ｎ−（４−（（６−シアノ−７−（（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロピル）オキシ）−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−（４−フルオロフェニル）ウレア、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−シクロプロピル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−メトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−フルオロエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−エチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−ヒドロキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）オキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−エトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（２−フルオロ−４−（（６−カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ）フェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ６−（２−ヒドロキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（１−プロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（ｃｉｓ−２−フルオロ−シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（２−メトキシエトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−（２−（４−モルホリノ）エトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（２−フルオロエチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（（２Ｒ）テトラヒドロ−２−フラニルメチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシプロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジノ）プロポキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メチル−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−（（１−メチル−４−ピペリジル）メトキシ）−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（２−メトキシエトキシ）−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレア、
Ｎ−（４−（６−シアノ−７−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ）−４−キノリル）オキシフェニル）−Ｎ’−（３−（メチルスルホニル）フェニル）ウレア、
４−（４−（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−フルオロ−４−（（２−フルオロエチルアミノ）カルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−（２−エトキシエチル）−４−（３−クロロ−４−（（（メチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（４−（３−エチルウレイド）−３−フルオロ−フェノキシ）−７−メトキシキノリン−６−カルボキシリック  アシッド（２−シアノエチル）アミド
および
Ｎ−（４−（６−（２−シアノエチル）カルバモイル−７−メトキシ−４−キノリル）オキシ−２−フルオロフェニル）−Ｎ’−シクロプロピルウレアを挙げることができる。
さらに、一般式（ＩＩ）で表される化合物のより好適な例としては、
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（エチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（シクロプロピルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド、
４−（３−クロロ−４−（メチルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド
および
Ｎ６−メトキシ−４−（３−クロロ−４−（（（エチルアミノ）カルボニル）アミノ）フェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドを挙げることができる。
また、一般式（ＩＩ）で表される化合物のさらに好適な例としては、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（式（ＩＶ）参照）を挙げることができる。ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の最も好適な例の一つとしては、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドのメタンスルホン酸塩を挙げることができる。
2007015578.tif 000012
一般式（ＩＩ）で表される化合物は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第０２／３２８７２号パンフレット（ＷＯ０２／３２８７２）および国際公開第２００５／０６３７１３号パンフレット（ＷＯ２００５／０６３７１３）のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
（Ｂ−３）一般式（ＩＩＩ）
本発明において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、好ましくは、
一般式（ＩＩＩ）
2007015578.tif 000013
で表される化合物を挙げることができる。一般式（ＩＩＩ）は、一般式（Ｉ）で表される化合物の好ましい例である。
（ｉ）Ｒ１１
Ｒ１１は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ１１の好適な例としては、置換基を有していてもよい３〜１０員非芳香族ヘテロ環式基または置換基を有していてもよいモノ−Ｃ１−６アルキルアミノ基があげられる。
Ｒ１１のより好適な例としては、以下の置換基群から選ばれる置換基を有していてもよい式
2007015578.tif 000014
で表される基から選ばれるいずれか１の基があげられる。
［置換基群］
水酸基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−８シクロアルキル基、式
2007015578.tif 000015
（式中、ＲＮ１およびＲＮ２はそれぞれ独立して水素原子または置換基を有していてもよいＣ１−６アルキル基を意味する。）で表される基
Ｒ１１のさらに好適な例としては、式
2007015578.tif 000016
で表される基から選ばれるいずれか１の基があげられる。
（ｉｉ）Ｒ１２
Ｒ１２は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ１２の好適な例としては、水素原子があげられる。
（ｉｉｉ）Ｖａ１３
Ｖａ１３は、前記定義と同じ意味である。
Ｖａ１３の好適な例としては、酸素原子があげられる。
（ｉｖ）Ａ１１
Ａ１１は、前記定義と同じ意味である。
Ａ１１の好適な例としては、炭素原子があげられる。
（ｖ）Ｒ４
Ｒ４は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ４の好適な例としては、水素原子があげられる。
（ｖｉ）Ｒ５
Ｒ５は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ５の好適な例としては、Ｃ１−６アルキル基またはＣ３−８シクロアルキル基があげられる。
Ｒ５のより好適な例としては、メチル基があげられる。
（ｖｉｉ）Ｒ９
Ｒ９は、前記定義と同じ意味である。
Ｒ９の好適な例としては、水素原子があげられる。
また、一般式（ＩＩＩ）で表される化合物の好適な例としては、
５−（２−（（（４−ヒドロキシ−４−メチルピペリジン−１−イル）カルボニル）アミノ）ピリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−インドール−１−カルボン酸  メチルアミド、
Ｎ１−メチル−５−（２−（（４−ヒドロキシピペリジノ）カルボニル）アミノ−４−ピリジル）オキシ−１Ｈ−１−インドールカルボキサミド、
Ｎ１−メチル−５−（２−（（（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）カルボニル）アミノ）ピリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−１−インドールカルボキサミド、
Ｎ１−メチル−５−（２−（（（４−（ピペリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）カルボニル）アミノ）ピリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−１−インドールカルボキサミド
および
Ｎ４−（４−（１−（メチルアミノ）カルボニル−１Ｈ−５−インドリル）オキシ−２−ピリジル）−４−モルホリンカルボキサミド
を挙げることができる。
一般式（ＩＩＩ）で表される化合物は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第２００４／０２０４３４号パンフレット（ＷＯ２００４／０２０４３４）に記載された方法によって製造することができる。
（Ｂ−４）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の具体例
また、本発明において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
（１）Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［２−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エトキシ］キナゾリン−４−アミン（以下、「ＺＤ４１９０」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６０，９７０−９７５，２０００、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４２：５３６９−５３８９，１９９９．）（式（Ｖ）参照）、
2007015578.tif 000017
（２）Ｎ−（４−ブロモ−２−フルオロフェニル）−６−メトキシ−７−［（１−メチルピペリジン−４−イル）メトキシ］キナゾリン−４−アミン（以下、「ＺＤ６４７４」および「ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ」ともいう。Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，４２，５８３，２００１、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４５：１３００−１３１２，２００２．）（式（ＶＩ）参照）、
2007015578.tif 000018
（３）３−［（２，４−ジメチルピロール−５−イル）メチレン］−２−インドリノン（以下、「ＳＵ５４１６」および「ｓｅｍａｘａｎｉｂ」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，５９，９９−１０６，１９９９、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４１：２５８８−２６０３，１９９８．、ＵＳ５７９２７８３）（式（ＶＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000019
（４）（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオニック  アシッド（以下、「ＳＵ６６６８」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６０，４１５２−４１６０，２０００、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４２：５１２０−５１３０，１９９９．）（式（ＶＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000020
（５）５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリックアシッド（２−ジエチルアミノエチル）アミド（以下、「ＳＵ１１２４８」ともいう。Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，９，３２７−３３７，２００３、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４６：１１１６−９，２００３．）（式（ＩＸ）参照）、
2007015578.tif 000021
（６）Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン  ３−｛５，６，７，１３−テトラヒドロ−９−［（１−メチルエトキシ）メチル］−５−オキソ−１２Ｈ−インデノ（２，１−ａ）ピロロ（３，４−ｃ）カルバゾール−１２−イル｝プロピルエステル（以下、「ＣＥＰ−７０５５」ともいう。Ｐｒｏ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４３，１０８０，２００２、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４６：５３７５−８８，２００３．）（式（Ｘ）参照）、
2007015578.tif 000022
（７）３−（４−ブロモ−２，６−ジフルオロ−ベンジルオキシ）−５−［３−（４−ピロリジン−１−イル−ブチル）−ウレイド］−イソチアゾール−４−カルボキシリック  アシッド  アミド（以下、「ＣＰ−５４７，６３２」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．６３：７３０１−９，２００３、ＷＯ  ９９／６２８９０）（式（ＸＩ）参照）、
2007015578.tif 000023
（８）Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キナゾリニル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−プロピルウレア（以下、「ＫＲＮ６３３」ともいう。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．，３：１６３９−４９，２００４．、ＷＯ００／４３３６６）（式（ＸＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000024
（９）１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジン（以下、「ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４」および「ｖａｔａｌａｎｉｂ」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６０，２１７９−２１８９，２０００、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４３：２３１０−２３，２０００．、ＷＯ９８／３５９５８）（式（ＸＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000025
（１０）Ｎ−｛２−クロロ−４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝−Ｎ’−（５−メチル−３−イソキサゾリル）ウレア（以下、「ＫＲＮ９５１」ともいう。ＷＯ２００２／０８８１１０）（式（ＸＩＶ）参照）、
2007015578.tif 000026
（１１）４−［（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イル）オキシ］−６−メトキシ−７−［３−（ピロリジン−１−イル）プロポキシ］キナゾリン（以下、「ＡＺＤ２１７１」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．６５：４３８９−４００，２００５、ＷＯ００／４７２１２）（式（ＸＶ）参照）、
2007015578.tif 000027
（１２）６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール（以下、「ＡＧ０１３７３６」ともいう。Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．１６５：３５−５２，２００４．、ＷＯ０１／００２３６９）（式（ＸＶＩ）参照）、
2007015578.tif 000028
（１３）５−（（Ｚ）−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−インドール−３−イリデン）メチル）−Ｎ−（（２Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イルプロピル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキサミド（以下、「ＳＵ１４８１３」ともいう。Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４６．（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ２０３１），２００５）（式（ＸＶＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000029
（１４）３−（（キノリン−４−イルメチル）アミノ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニル）チオフェン−２−カルボキサミド（以下、「ＯＳＩ９３０」ともいう。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．，４：１１８６−１１９７，２００５．）（式（ＸＶＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000030
（１５）６−（２，６−ジクロロフェニル）−８−メチル−２−フェニルアミノ−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（以下、「ＴＫＩ−２８」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ．，４，２００５．）（式（ＸＩＸ）参照）、
2007015578.tif 000031
（１６）２−（（１，６−ジヒドロ−６−オキソ−ピリジン−３−イルメチル）アミノ）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−ピリジン−カルボキサミド（以下、「ＡＢＰ３０９」ともいう。ＥＯＲＴＣ−ＮＣＩ−ＡＡＣＲ  Ｓｙｍｐ  Ｍｏｌ  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．，２，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  １７２），２００４．）（式（ＸＸ）参照）、
2007015578.tif 000032
（１７）４−（４−（４−クロロ−フェニルアミノ）−フロ［２，３−ｄ］ピリダジン−７−イルオキシメチル）−ピリジン−２−カルボキシリック  アシッド  メチルアミド（以下、「ＢＡＹ  ５７−９３５２」ともいう。ＷＯ０１／２３３７５）（式（ＸＸＩ）参照）、
2007015578.tif 000033
（１８）Ｎ−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）−Ｎ’−（４−（２−メチルカルバモイルピリジン−４−イル）オキシフェニル）ウレア（以下、「ＢＡＹ  ４３−９００６」および「ｓｏｒａｆｅｎｉｂ」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６４，７０９９−７１０９，２００４，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓ  Ｄｅｖ．，６，７７７−８１，２００２．）（式（ＸＸＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000034
（１９）４−アミノ−５−フルオロ−３−（６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−キノリン−２−オン（以下、「ＣＨＩＲ２５８」ともいう。Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，１１，３６３３−３６４１，２００５．）（式（ＸＸＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000035
（２０）４−（４−（１−アミノ−１−メチル−エチル）−フェニル）−２−（４−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−フェニルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル（以下、「ＪＮＪ１７０２９２５９」ともいう。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．，６６，６３５−６４７，２００４．）（式（ＸＸＩＶ）参照）、
2007015578.tif 000036
（２１）［６−［４−［（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン（以下、「ＡＥＥ−７８８」ともいう。Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６４，４９３１−４９４１，２００４．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６４，７９７７−７９８４，２００４．）（式（ＸＸＶ）参照）、
2007015578.tif 000037
（２２）９−（１−メチルエトキシ）メチル−１２−（３−ヒドロキシプロピル）−６Ｈ，７Ｈ，１３Ｈ−インデノ［２，１−ａ］ピロロ［３，４−ｃ］カルバゾール−５−オン（以下、「ＣＥＰ−５２１４」ともいう。Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４６，５３７５−５３８８，２００３．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６３，５９７８−５９９１，２００３．）（式（ＸＸＶＩ）参照）、
2007015578.tif 000038
（２３）Ｎ−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ’−｛４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）−オキシ］−２−フルオロフェニル｝ウレア（以下、「ＫＩ−８７５１」ともいう。Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４８，１３５９−１３６６，２００５．）（式（ＸＸＶＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000039
（２４）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ウレア（以下、「ＡＢＴ−８６９」ともいう。Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，４６，１４０７，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ５９８１），２００５．）（式（ＸＸＩＸ）参照）、
2007015578.tif 000040
（２５）２−メチル−６−［２−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−チエノ［３，２−ｂ］ピリジン−７−イルオキシ］−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキシリック  アシッド  メチルアミド（以下、「ＡＧ−０２８２６２」ともいう。ＷＯ０３／０６４６２、ＵＳ２００４／００９９６５）（式（ＸＸＸ）参照）、
2007015578.tif 000041
（２６）（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール（以下、「ＢＭＳ−５４０２１５」ともいう。Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，４６，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ３０３３），２００５．）（式（ＸＸＸＩ）参照）、
2007015578.tif 000042
（２７）（Ｓ）−（（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール）２−アミノプロパノエート（以下、「ＢＭＳ−５８２６６４」ともいう。Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，４６，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ３０３３），２００５．）（式（ＸＸＸＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000043
（２８）３−［（４−モルホリン−４−イル−フェニルアミノ）−メチレン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（以下、「ＡＧＮ−１９９６５９」ともいう。ＷＯ２００３／０２７１０２）（式（ＸＸＸＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000044
（２９）５−［［４−［（２，３−ジメチル−２Ｈ−インダゾール−６−イル）メチルアミノ］ピリミジン−２−イル］アミノ］−２−メチルベンゼンスルホンアミド（以下、「ｐａｚｏｐａｎｉｂ」または「ＧＷ−７８６０３４」ともいう。Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ３０５４），２００４．）（式（ＸＸＸＩＶ）参照）、
2007015578.tif 000045
（３０）（３Ｚ）−３−［６−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）キノリン−２（１Ｈ）−イリデン］−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（以下、「ＹＭ−２３１１４６」ともいう。Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ．２８：２０９６−２１０１，２００５．）（式（ＸＸＸＶ）参照）、
2007015578.tif 000046
（３１）２−（（２−（（４−（４−（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）アニリノ）フェノキシ）−６−メトキシ−７−キノリル）オキシ）エチル）アミノ）−１−エタノール（以下、「ＫＩ−２３０５７」ともいう。ＷＯ２００３／０３３４７２）（式（ＸＸＸＶＩ）参照）、
2007015578.tif 000047
などを挙げることができる。
上記ＺＤ４１９０、ＺＤ６４７４、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＣＥＰ−７０５５、ＣＰ−５４７，６３２、ＫＲＮ６３３、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４、ＫＲＮ９５１、ＡＺＤ２１７１、ＡＧ０１３７３６、ＳＵ１４８１３、ＯＳＩ９３０、ＴＫＩ−２８、ＡＢＰ３０９、ＢＡＹ  ５７−９３５２、ＢＡＹ  ４３−９００６、ＣＨＩＲ２５８、ＪＮＪ１７０２９２５９、ＡＥＥ−７８８、ＣＥＰ−５２１４、ＫＩ−８７５１、ＡＢＴ−８６９、ＡＧ−０２８２６２、ＢＭＳ−５４０２１５、ＢＭＳ−５８２６６４、ＡＧＮ−１９９６５９、ｐａｚｏｐａｎｉｂ、ＹＭ−２３１１４６およびＫＩ−２３０５７は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
また、本発明において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、ＢＩＢＦ１１２０（ＷＯ０１／２７０８１）、ＺＫ３０４７０９（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４６，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ５８４２），２００５．）、Ｅｘｅｌ７６４７（ＥＯＲＴＣ−ＮＣＩ−ＡＡＣＲ  Ｓｙｍｐ  Ｍｏｌ  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  １３４），２００４．）、ＡＭＧ７０６（ＥＯＲＴＣ−ＮＣＩ−ＡＡＣＲ  Ｓｙｍｐ  Ｍｏｌ  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．，２，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  １５１），２００４．）およびＧＷ−６５４６５２（Ｂｌｏｏｄ．，１０３，３４７４−３４７９，２００４．、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４４，９，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ３９），２００３．、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４４，９，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ４０），２００３．）などを挙げることができる。ＢＩＢＦ１１２０、ＺＫ３０４７０９、Ｅｘｅｌ７６４７、ＡＭＧ７０６およびＧＷ−６５４６５２は、公知の方法で製造することができる。
（Ｃ）抗ＶＥＧＦレセプター抗体
本発明において、ＶＥＧＦ阻害物質は、例えば、抗ＶＥＧＦレセプター抗体を挙げることができる。抗ＶＥＧＦレセプター抗体は、ＶＥＧＦレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＶＥＧＦレセプター抗体は、ＶＥＧＦレセプターを認識し結合することで、ＶＥＧＦの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗ＶＥＧＦレセプター抗体の作製は、後述の抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗ＶＥＧＦレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗ＶＥＧＦレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい（後述の抗ＶＥＧＦ抗体の記載を参照）。
抗ＶＥＧＦレセプター抗体は、好ましくは２Ｃ３  ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＵＳ６５２４５８３，ＵＳ６６７６９４１）、ＩＭＣ−１１２１ｂ（ＵＳ６８１１７７９）、ＩＭＣ−１８Ｆ１（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４５，６９４，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ３００５），２００４．）、ＩＭＣ−１Ｃ１１（ＵＳ５７４７６５１）、ＩＭＣ−２Ｃ６（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４４，１４７９，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ６４５４），２００３．）などを挙げることができる。２Ｃ３  ａｎｔｉｂｏｄｙ、ＩＭＣ−１１２１ｂ、ＩＭＣ−１８Ｆ１、ＩＭＣ−１Ｃ１１、ＩＭＣ−２Ｃ６は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
（Ｄ）その他のＶＥＧＦ阻害物質
本発明において、ＶＥＧＦ阻害物質は、例えば、ＰＩ８８、ＡＶＥ−０００５（Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，（Ａｂｓｔｒａｃｔ  ７７６），２００３．）、ＥＧ−３３０６（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．，３０２，７９３−７９９，２００３．）、ＲＰＩ−４６１０（Ａｎｇｉｏｚｙｍｅ（登録商標）、ＵＳ５１８０８１８、ＵＳ６３４６３９８）、２−（８−ハイドロキシ−６−メトキシ−１−オキソ−１Ｈ−２−ベンゾピラン−３−イル）プロピオニック  アシッド（以下、「ＮＭ−３」ともいう。ＷＯ９７／４８６９３）、５−［Ｎ−メチル−Ｎ−（４−オクタデシルオキシフェニル）アセチル］アミノ−２−メチルチオベンゾイック  アシッド（以下、「ＶＧＡ−１１５５」ともいう。Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，２４，３００９−３０１７，２００４．）（式（ＬＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000048
ＶＥＧＦ  ｔｒａｐ（Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ＆  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．８６（７），３３７７−３３８６，２００１．）、ｐｅｇａｐｔａｎｉｂ  ｓｏｄｉｕｍ（Ｍａｃｕｇｅｎ（登録商標））などを挙げることができる。ＰＩ８８、ＡＶＥ−０００５、ＥＧ−３３０６、ＲＰＩ−４６１０、ＮＭ−３、ＶＧＡ−１１５５およびＶＥＧＦ  ｔｒａｐは、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。また、ｐｅｇａｐｔａｎｉｂｓｏｄｉｕｍは、ファイザー社からＭａｃｕｇｅｎを購入することによって、入手することができる。
（Ｅ）ＦＧＦレセプターキナーゼ阻害物質
本発明において、ＦＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
（１）１−［２−アミノ−６−（３，５−ジメトキシフェニル）−ピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−７−イル］−３−ｔｅｒｔ−ブチルウレア（以下、「ＰＤ１６６８６６」ともいう。Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４０，２２９６−２３０３，１９９７）（式（ＸＸＸＶＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000049
（２）１−ｔｅｒｔ−ブチル−３−［２−（４−ジエチルアミノ）ブチルアミノ−６−（３，５−ジメトキシフェニル）−ピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−７−イル］ウレア（以下、「ＰＤ１７３０７４」ともいう。ＥＭＢＯ  Ｊ．，１７，５８９６−５９０４，１９９８、ＵＳ５７３３９１３）（式（ＸＸＸＶＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000050
（３）（Ｓ）−（（Ｒ）−１−（４−（４−フルオロ−２−メチル−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−メチルピロロ［１，２−ｆ］［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシ）プロパン−２−オール）２−アミノプロパノエート（ＢＭＳ−５８２６６４）（式（ＸＸＸＩＩ）参照）、
（４）４−［４−［Ｎ−（４−ニトロフェニル）カルバモイル］−１−ピペラジニル］−６，７−ジメトキシキナゾリン（以下、「ＣＴ−０５２９２３」ともいう。ＷＯ９８／１４４３７）（式（ＸＸＸＩＸ）参照）、
2007015578.tif 000051
（５）４−アミノ−５−フルオロ−３−（６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−キノリン−２−オン（ＣＨＩＲ２５８）（式（ＸＸＩＩＩ）参照）、
（６）２−（（２−（（４−（４−（４−（ｔｅｒｔ−ブチル）アニリノ）フェノキシ）−６−メトキシ−７−キノリル）オキシ）エチル）アミノ）−１−エタノール（ＫＩ−２３０５７）（式（ＸＸＸＶＩ）参照）、
（７）（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオニック  アシッド（ＳＵ６６６８）（式（ＶＩＩＩ）参照）などを挙げることができる。
ＰＤ１６６８６６、ＰＤ１７３０７４、ＢＭＳ−５８２６６４、ＣＴ−０５２９２３、ＣＨＩＲ２５８、ＫＩ−２３０５７およびＳＵ６６６８は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
（Ｆ）抗ＦＧＦレセプター抗体
本発明において、ＦＧＦ阻害物質は、例えば、抗ＦＧＦレセプター抗体を挙げることができる。抗ＦＧＦレセプター抗体は、ＦＧＦレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＦＧＦレセプター抗体は、ＦＧＦレセプターを認識し結合することで、ＦＧＦの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗ＦＧＦレセプター抗体の作製は、後述の抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗ＦＧＦレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗ＦＧＦレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい（後述の抗ＶＥＧＦ抗体の記載を参照）。
（Ｇ）ＰＤＧＦレセプターキナーゼ阻害物質
本発明において、ＰＤＧＦ阻害物質は、例えばＰＤＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を挙げることができる。ＰＤＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
（１）４−（４−メチルピペラジン−１−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−［４−（３−ピリジル）ピリミジン−２−イルアミノ］フェニル］ベンゼンアミド（以下、「イマチニブ」ともいう。）（式（ＸＬ）参照）、
2007015578.tif 000052
（２）６−［２−（メチルカルバモイル）フェニルスルファニル］−３−Ｅ−［２−（ピリジン−２−イル）エテニル］インダゾール（ＡＧ０１３７３６）（式（ＸＶＩ）参照）、
（３）１−｛２−［５−（２−メトキシ−エトキシ）−ベンゾイミダゾール−１−イル］−キノリン−８−イル｝−ピペリジン−４−イルアミン（以下、「ＣＰ−６７３４５１」ともいう。ＷＯ２００１／０４０２１７、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６５，９５７−９６６，２００５．）（式（ＸＬＩ）参照）、
2007015578.tif 000053
（４）４−［４−［Ｎ−（４−ニトロフェニル）カルバモイル］−１−ピペラジニル］−６，７−ジメトキシキナゾリン（ＣＴ−０５２９２３）（式（ＸＸＸＩＸ参照）、
（５）４−アミノ−５−フルオロ−３−（６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル）−１Ｈ−キノリン−２−オン（ＣＨＩＲ２５８）（式（ＸＸＩＩＩ）参照）、
（６）（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）｛４−［（６，７−ジメトキシ−４−キノリル）オキシ］フェニル｝メタンオン（以下、「ＫＩ−６８９６」ともいう。Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ．，７，２９３５−２９４０，１９９７．）（式（ＸＬＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000054
（７）５−メチル−Ｎ−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］−４−イソキサゾールカルボキサミド（以下、「ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ」ともいう。）（式（ＸＬＩＶ）参照）、
2007015578.tif 000055
（８）ｔｒａｎｓ−４−［（６，７−ジメトキシキノキサリン−２−イル）アミノ］シクロヘキサノール（以下、「ＲＰＲ−１２７９６３Ｅ」ともいう。）（式（ＸＬＶ）参照）、
2007015578.tif 000056
（９）（Ｚ）−３−［（２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオニック  アシッド（ＳＵ６６６８）（式（ＶＩＩＩ）参照）、
（１０）５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシリック  アシッド（２−ジエチルアミノエチル）アミド（ＳＵ１１２４８）（式（ＩＸ）参照）、
（１１）１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジン（ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４）（式（ＸＩＩＩ）参照）、
（１２）Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ウレア（ＡＢＴ−８６９）（式（ＸＸＩＸ）参照）などを挙げることができる。
イマチニブ、ＡＧ０１３７３６、ＣＰ−６７３４５１、ＣＴ−０５２９２３、ＣＨＩＲ２５８、ＫＩ−６８９６、ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ、ＲＰＲ−１２７９６３Ｅ、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４およびＡＢＴ−８６９は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
また、イマチニブは、ノバルティス社からグリベック（登録商標）を購入することによって、入手することができる。
（Ｈ）抗ＰＤＧＦレセプター抗体
本発明において、ＰＤＧＦ阻害物質は、例えば、抗ＰＤＧＦレセプター抗体を挙げることができる。抗ＰＤＧＦレセプター抗体は、ＰＤＧＦレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＰＤＧＦレセプター抗体は、ＰＤＧＦレセプターを認識し結合することで、ＰＤＧＦの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗ＰＤＧＦレセプター抗体の作製は、後述の抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗ＰＤＧＦレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗ＰＤＧＦレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい（後述の抗ＶＥＧＦ抗体の記載を参照）。
（Ｉ）ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質
本発明において、ＥＧＦ阻害物質は、例えばＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を挙げることができる。ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、ゲフィチニブおよびその誘導体を挙げることができる。ゲフィチニブとは、４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−（３−（４−モルホリノ）プロポキシ−キナゾリン）をいい、その構造式を以下の式（ＸＬＶＩ）に示す。
2007015578.tif 000057
また、ゲフィチニブの誘導体とは、国際公開第９６／３３９８０号パンフレット（ＷＯ９６／３３９８０）に記載されている化合物を挙げることができる。
ゲフィチニブおよびその誘導体は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第９６／３３９８０号パンフレット（ＷＯ９６／３３９８０）、特許第３０４０４８６号（ＪＰ３０４０４８６）および米国特許第５７７０５９９号明細書（ＵＳ５７７０５９９）のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
また、ゲフィチニブは、アストラゼネカ社からＩｒｅｓｓａ（登録商標）を購入することによって、入手することができる。
本発明において、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、エルロチニブおよびその誘導体を挙げることができる。エルロチニブとは、４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリンをいい、その構造式を以下の式（ＸＬＶＩＩ）に示す。
2007015578.tif 000058
また、エルロチニブの誘導体とは、国際公開第９６／３０３４７号パンフレット（ＷＯ９６／３０３４７）に記載されている化合物を挙げることができる。
エルロチニブおよびその誘導体は、公知の方法で製造でき、例えば、国際公開第９６／３０３４７号パンフレット（ＷＯ９６／３０３４７）、特許第３０８８０１８号（ＪＰ３０８８０１８）および特許３４２０５４９号（ＪＰ３４２０５４９）のいずれかに記載された方法によって製造することができる。
また、エルロチニブは、ジェネンテック社（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社）からＴａｒｃｅｖａ（登録商標）を購入することによって、入手することができる。
また、本発明において、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、
（１）Ｎ−［３−クロロ−４−［（３−フルオロベンジル）オキシ］フェニル］−６−［５−［［［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］フラン−２−イル］キナゾリン−４−アミン
（Ｎ−［３−ｃｈｌｏｒｏ−４−［（３−ｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｙｌ）ｏｘｙ］ｐｈｅｎｙｌ］−６−［５−［［［２−（ｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ）ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］ｍｅｔｈｙｌ］ｆｕｒａｎ−２−ｙｌ］ｑｕｉｎａｚｏｌｉｎ−４−ａｍｉｎｅ）（以下、「ｌａｐａｔｉｎｉｂ」ともいう。国際公開第９９／３５１４６号パンフレット（ＷＯ９９／３５１４６）、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６４，６６５２−６６５９．２００４．）（式（ＸＬＶＩＩＩ）参照）、
2007015578.tif 000059
（２）Ｎ−［４−［Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］キナゾリン−６−イル］アクリルアミド
（Ｎ−［４−［Ｎ−（３−ｃｈｌｏｒｏ−４−ｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）ａｍｉｎｏ］−７−［３−（４−ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｙｌ）ｐｒｏｐｏｘｙ］ｑｕｉｎａｚｏｌｉｎ−６−ｙｌ］ａｃｒｙｌａｍｉｄｅ）（以下、「ｃａｎｅｒｔｉｎｉｂ」ともいう。Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，１０：６９１−７００，２００４．、ＷＯ２０００／３１０４８）（式（ＸＬＩＸ）参照）、
2007015578.tif 000060
（３）（２Ｅ）−Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド
（（２Ｅ）−Ｎ−［４−［（３−ｃｈｌｏｒｏ−４−ｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）ａｍｉｎｏ］−３−ｃｙａｎｏ−７−ｅｔｈｏｘｙ−６−ｑｕｉｎｏｌｉｎｙｌ］−４−（ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）−２−ｂｕｔｅｎａｍｉｄｅ）（以下、「ｐｅｌｉｔｉｎｉｂ」ともいう。
ＷＯ２００３／５００９０）（式（Ｌ）参照）
2007015578.tif 000061
（４）［６−［４−［（４−エチルピペラジン−１−イル）メチル］フェニル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル］−（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン（ＡＥＥ−７８８）（式（ＸＸＶ）参照）、
（５）（Ｅ）−Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（２−ピリジニルメトキシ）アニリノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キノリニル｝−４−（ジメチルアミノ）−２−ブテンアミド
（（Ｅ）−Ｎ−｛４−［３−ｃｈｌｏｒｏ−４−（２−ｐｙｒｉｄｉｎｙｌｍｅｔｈｏｘｙ）ａｎｉｌｉｎｏ］−３−ｃｙａｎｏ−７−ｅｔｈｏｘｙ−６−ｑｕｉｎｏｌｉｎｙｌ｝−４−（ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）−２−ｂｕｔｅｎａｍｉｄｅ）（以下、「ＨＫＩ−２７２」ともいうＣａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，６４，３９５８−３９６５，２００４．、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．，４８，１１０７−１１３１，２００５．）（式（ＬＩ）参照）、
2007015578.tif 000062
などを挙げることができる。
本発明においては、４−（３−エチニルフェニルアミノ）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−キナゾリン（エルロチニブ：上記式（ＸＬＶＩＩ））であることが好ましい。
ｌａｐａｔｉｎｉｂ、ｃａｎｅｒｔｉｎｉｂ、ｐｅｌｉｔｉｎｉｂ、ＡＥＥ−７８８およびＨＫＩ−２７２は、公知の方法で製造することができ、例えば、それぞれの文献に記載された方法で製造することができる。
また、本発明において、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、例えば、ＡＲＲＹ−３３４５４３（Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ａ３３９９，２００５．）、ＭＰ−４１２（Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ａ３３９４，２００５．、Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ａ３４０５，２００５．）などを挙げることができる。ＡＲＲＹ−３３４５４３、ＭＰ−４１２は、公知の方法で製造することができる。
（Ｊ）抗ＥＧＦレセプター抗体
本発明において、ＥＧＦ阻害物質は、例えば、抗ＥＧＦレセプター抗体を挙げることができる。抗ＥＧＦレセプター抗体は、ＥＧＦレセプターまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＥＧＦレセプター抗体は、ＥＧＦレセプターを認識し結合することで、ＥＧＦの活性、例えば、血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗ＥＧＦレセプター抗体の作製は、後述の抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。抗ＥＧＦレセプター抗体は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体であってもよい。また、当該抗体のアイソタイプは特に限定されない。また、抗ＥＧＦレセプター抗体は、抗体の断片または一本鎖抗体であってもよい（後述の抗ＶＥＧＦ抗体の記載を参照）。
本発明において、抗ＥＧＦレセプター抗体は、好ましくはセツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）を挙げることができる。
セツキシマブは、特開２００２−１１４７１０号公報（ＪＰ２００４−１１４７１０）または特開平２−２９１２９５号公報（ＪＰ２−２９１２９５）に記載の方法により入手することができる。
また、セツキシマブは、Ｍｅｒｃｋ社からＥｒｂｉｔｕｘ（登録商標）を購入することによって、入手することができる。
また、本発明において、抗ＥＧＦレセプター抗体は、ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂを挙げることができる。ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂは、欧州特許第２０３１２６号明細書（ＥＰ２０３１２６）または米国特許第５８９１９９６号明細書（ＵＳ５８９１９９６）に記載の方法により入手することができる。
また、本発明において、抗ＥＧＦレセプター抗体は、ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ（ＣＡＳ３３９１７７−２６−３、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  Ｃａｎｃｅｒ．２００５；５（１）：２１−３．）、ｍａｔｕｚｕｍａｂ（ＣＡＳ  ３３９１８６−６８−４、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ．２００４；６（１）：９６−１０３．）、ＩＭＣ−１１Ｆ８（Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ａ５３５３，２００５．）、ＭＤＸ−４４７（ＡＳＣＯ  １８：４３３，１９９９）などを挙げることができる。
（Ｋ）血管新生阻害物質の塩および溶媒和物
本発明において、血管新生阻害物質は、酸または塩基と薬理学的に許容される塩を形成する場合もある。本発明における上記血管新生阻害物質は、これらの薬理学的に許容される塩をも包含する。酸との塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩およびギ酸、酢酸、乳酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、酒石酸、ステアリン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸塩などを挙げることができる。また、塩基との塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、アルギニン、リジンなどの有機塩基塩、アンモニウム塩などを挙げることができる。
また、本発明において、血管新生阻害物質は、これら化合物の溶媒和物および光学異性体が存在する場合には、それらの溶媒和物および光学異性体が含まれる。溶媒和物は、例えば、水和物、非水和物などを挙げることができ、好ましくは水和物を挙げることができる。溶媒は、例えば、水、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール）、ジメチルホルムアミドなどを挙げることができる。
さらに、本発明において、血管新生阻害物質は、結晶でも無結晶でもよく、また、結晶多形が存在する場合には、それらのいずれかの結晶形の単一物であっても混合物であってもよい。
また、本発明において、血管新生阻害物質は、生体内で酸化、還元、加水分解、抱合などの代謝を受ける血管新生阻害物質をも包含する。また、本発明において、血管新生阻害物質は、生体内で酸化、還元、加水分解などの代謝を受けて血管新生阻害物質を生成する化合物をも包含する。
（Ｌ）抗ＶＥＧＦ抗体、抗ＦＧＦ抗体、抗ＰＤＧＦ抗体、抗ＥＧＦ抗体
本発明において、抗ＶＥＧＦ抗体は、ＶＥＧＦまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＶＥＧＦ抗体は、ＶＥＧＦを認識し結合することで、ＶＥＧＦの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。本発明において、抗ＶＥＧＦ抗体は、例えば、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体（ｓｃＦＶ）（Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ｌａ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−８３；Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ（１９９４）ｐｐ．２６９−３１５）、ヒト化抗体、多特異性抗体（ＬｅＤｏｕｓｓａｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｕｐｐｌ．７：５８−６２；Ｐａｕｌｕｓ（１９８５）Ｂｅｈｒｉｎｇ  Ｉｎｓｔ．Ｍｉｔｔ．７８：１１８−３２；Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ（１９８３）Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７−９；Ｚｉｍｅｒｍａｎｎ（１９８６）Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１０５：１７６−２６０；Ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ４３：９４４−９）、ヒト抗体および、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｖなどの抗体断片などがあげられ、好ましくはモノクローナル抗体があげられる。さらに、抗ＶＥＧＦ抗体は、必要に応じ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等により修飾されていてもよい。その他、抗ＶＥＧＦ抗体は、β−ガラクトシダーゼ、ＭＢＰ、ＧＳＴ、ＧＦＰ等との融合タンパク質として製造されることができ、ＥＬＩＳＡ法などにおいて二次抗体を用いずに検出できるようにしてもよい。また、抗ＶＥＧＦ抗体は、ビオチン等により抗体を標識することによりアビジン、ストレプトアビジン等を用いて抗体の回収を行い得るように改変されていてもよい。
抗ＶＥＧＦ抗体は、ＶＥＧＦまたはその部分断片、もしくはそれらを発現する細胞を感作抗原として常法に従い製造することができる（「Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ」（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９８７）Ｓｅｃｔｉｏｎ  １１．４−１１．１３））。この場合、ＶＥＧＦまたはその部分断片は、Ｆｃ領域、ＧＳＴ、ＭＢＰ、ＧＦＰ、ＡＰなどとの融合タンパク質であってもよい。
ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体は、当業者に周知の方法で作製することができる（Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄ．Ｌａｎｅ，ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，１９８８））。
ポリクローナル抗体は、例えば、抗原をマウス、ウサギ、ラットなどの哺乳動物に投与し、該哺乳動物から血液を採取し、採取した血液から抗体を分離、精製することにより得ることができる。免疫感作の方法は当業者に公知であり、例えば抗原を１回以上投与することにより行うことができる。また、抗原（ＶＥＧＦまたはその部分断片）は、適当な緩衝液、例えば、完全フロイントアジュバントまたは水酸化アルミニウム等の通常用いられるアジュバントを含有する適当な緩衝液に溶解して用いることができるが、投与経路や条件等に応じてアジュバントを使用しない場合もある。
最後の免疫感作から１〜２ケ月後に当該哺乳動物から血液を採取して、該血液を、例えば、遠心分離、硫酸アンモニウムまたはポリエチレングリコールを用いた沈澱、各種クロマトグラフィー等の常法によって分離、精製することにより、ポリクローナル抗血清として、ポリクローナル抗体を得ることができる。
モノクローナル抗体を産生する方法としては、ハイブリドーマ法を挙げることができる。ハイブリドーマ法は、まず、ポリクローナル抗体の産生と同様に哺乳動物を免疫感作する。免疫後、適当な日数を経過した後に部分採血を行い、ＥＬＩＳＡ法などの公知方法で抗体価を測定することが好ましい。
次いで、感作の終了した免疫動物から脾臓を摘出し、Ｂ細胞を得る。次いで、Ｂ細胞を常法に従いミエローマ細胞と融合させて抗体産生ハイブリドーマを作製することができる。用いられるミエローマ細胞は特に限定されず、公知のものを使用できる。細胞の融合方法は、センダイウイルス法、ポリエチレングリコール法、プロトプラスト法等、当該分野で公知の方法を任意に選択して用いることができる。得られたハイブリドーマは、常法に従い、ＨＡＴ培地（ヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジン含有培地）中で適当な期間培養し、ハイブリドーマの選択を行うことができる。次いで、目的とする抗体産生ハイブリドーマのスクリーニングを行った後、当該ハイブリドーマのクローニングを行うことができる。
スクリーニング法としては、ＥＬＩＳＡ法やラジオイムノアッセイ法などの公知の抗体検出方法を用いることができ、また、クローニング法としては、当該分野で公知の方法を用いることができ、例えば、限界希釈法およびＦＡＣＳ法等を用いることができる。得られたハイブリドーマは、適当な培養液中で培養するか、あるいはハイブリドーマと適合性のある、例えばマウス腹腔内に投与することができる。こうして得られる培養液中または腹水中から、塩析、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過、アフィニティークロマトグラフィー等により、所望のモノクローナル抗体を単離精製することができる。
本発明において、抗ＶＥＧＦ抗体は、好ましくはベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）を挙げることができる。ベバシズマブは、ヒト抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体であり、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社からＡｖａｓｔｉｎ（登録商標）として販売されているものである。
ベバシズマブは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ社からＡｖａｓｔｉｎを購入することによって、入手することができる。
本発明において、抗ＦＧＦ抗体は、ＦＧＦまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＦＧＦ抗体は、ＦＧＦを認識し結合することで、ＦＧＦの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗ＦＧＦ抗体の作製は、前記抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。
本発明において、抗ＰＤＧＦ抗体は、ＰＤＧＦまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＰＤＧＦ抗体は、ＰＤＧＦを認識し結合することで、ＰＤＧＦの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗ＰＤＧＦ抗体の作製は、前記抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。
本発明において、抗ＥＧＦ抗体は、ＥＧＦまたはその部分断片と親和性を有する抗体である。抗ＥＧＦ抗体は、ＥＧＦを認識し結合することで、ＥＧＦの血管内皮細胞増殖活性を阻害する中和抗体であることが好ましい。抗ＥＧＦ抗体の作製は、前記抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。
４．キット
本発明は、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法において使用する
ための、抗ＴＧＦ−α抗体、抗ＨＢ−ＥＧＦ抗体、抗ＥＧＦ抗体、抗Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ抗体、抗ＥＧＦレセプター抗体、抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体および抗リン酸化抗体からなる群から選択される少なくとも一つを含む、キットを提供する。抗体は、好ましくはＥＧＦレセプター抗体または抗リン酸化ＥＧＦレセプター抗体である。抗体は、前記抗ＶＥＧＦ抗体の製造方法と同様にして作製することができる。キットに含まれる抗体は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性の測定に用いることができる。本発明のキットは、上記抗体に加えて、一般の測定において慣用的な成分を含んでいてもよい。
また、本発明は、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法において使用するための、ＴＧＦ−α遺伝子、ＨＢ−ＥＧＦ遺伝子、ＥＧＦ遺伝子、Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ遺伝子およびＥＧＦレセプター遺伝子からなる群から選択される少なくとも一つの遺伝子の転写産物であるＲＮＡの少なくとも一部に相補的なポリヌクレオチドを含む、キットを提供する。遺伝子は、好ましくはＥＧＦレセプター遺伝子である。当該キットの構成成分となるポリヌクレオチドは、例えば、ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、ノーザンブロット解析、ＤＮＡマイクロアレイ、ＲＴ−ＰＣＲなどに使用されるプライマーおよび／またはプローブであり、例えば、Ｐｒｉｍｅｒ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて設計することができる。所望のポリヌクレオチドは、公知の方法により作製することができる。キットに含まれるポリヌクレオチドは、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性の測定に用いることができる。本発明のキットは、上記ポリヌクレオチドに加えて、一般の測定において慣用的な成分を含んでいてもよい。
上記遺伝子の塩基配列は、各種データベースに登録されており、例えば、以下のＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号により塩基配列情報を入手することができる。
ＴＧＦ−α遺伝子：ＮＭ＿０３２３６
ＨＢ−ＥＧＦ遺伝子：ＮＭ＿００１９４５
ＥＧＦ遺伝子：ＮＭ＿００１９６３
Ｅｐｉｒｅｇｕｌｉｎ遺伝子：ＮＭ＿００１４３２
ＥＧＦレセプター遺伝子：ＮＭ＿００５２２８
ＲＮＡの少なくとも一部とは、塩基配列として少なくとも１５塩基、好ましくは１５〜５０塩基、より好ましくは２０〜３５塩基、さらに好ましくは２０〜３０塩基の配列を有するものであり、配列の長さは当業者が適宜設定することができる。
５．医薬組成物、キット、癌の治療方法
本発明は、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質とを組み合わせる点に特徴を有する医薬組成物、キット、癌の治療方法に関するものである。
本発明において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、「３．血管新生阻害物質」の項で記載したとおりであるが、例えば、一般式（Ｉ）で表される化合物が挙げられ、好ましくは４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドが挙げられる。
また、本発明において、ＥＧＦ阻害物質は、ＥＧＦを阻害する活性を有するものであれば、特に限定されない。ＥＧＦ阻害物質は、例えば、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質、抗ＥＧＦレセプター抗体などを挙げることができる。ＥＧＦ阻害物質は、好ましくはゲフィチニブ、エルロチニブ、ｌａｐａｔｉｎｉｂ、ｃａｎｅｒｔｉｎｉｂ、ｐｅｌｉｔｉｎｉｂ、ＡＥＥ−７８８、ＨＫＩ−２７２、セツキシマブ、ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ、ｍａｔｕｚｕｍａｂ、ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ、ＩＭＣ−１１Ｆ８およびＭＤＸ−４４７が挙げられ、より好ましくはゲフィチニブ、エルロチニブおよびセツキシマブが挙げられ、特に好ましくはエルロチニブが挙げられる。
本発明において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害物質には、その薬理学的に許容される塩、またはそれらの溶媒和物も包含される。
本発明において、「組み合わせてなる」とは、化合物を併用して用いるための組み合わせを意味し、別々の物質を投与時に併用する形態、および混合物としての形態の両方を含む。
本発明のキットに含まれる製剤は、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質および／またはＥＧＦ阻害物質を含む限り、その剤形は特に限定されない。本発明の医薬組成物および／またはキットは、癌治療用医薬組成物および／またはキットとして有用である。
本発明の医薬組成物および／またはキットならびに癌の治療方法には、さらに一または複数の他の抗癌剤を組み合わせてもよい。他の抗癌剤は、抗癌作用を有する製剤であれば、特に限定されない。他の抗癌剤としては、例えば、塩酸イリノテカン（ＣＰＴ−１１）、オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、塩酸ゲムシタビン（ジェムザール（登録商標））、ホリナートカルシウム（ロイコボリン）、ベバシズマブ（アバスチン（登録商標））などが挙げられる。また、前記他の抗癌剤としては、癌治療剤の対象となる癌種が、大腸癌である場合には、塩酸イリノテカン、オキサリプラチン、５−フルオロウラシル、ホリナートカルシウム、ベバシズマブであり、膵癌である場合には、塩酸ゲムシタビン、ベバシズマブであり、腎癌である場合には、ベバシズマブであり、肺癌である場合には、ドセタキセルが特に好ましい。
本発明の医薬組成物および／またはキットは、癌治療剤として使用することができる。
本発明において、癌治療剤とは、抗腫瘍剤、癌予後改善剤、癌再発予防剤、癌転移抑制剤などを含むものをいう。
癌治療の効果は、レントゲン写真、ＣＴ等の所見や生検の病理組織診断により、あるいは腫瘍マーカーの値により確認することができる。
本発明の医薬組成物および／またはキットは、哺乳動物（例、ヒト、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して、投与することができる。
癌治療剤の対象となる癌種は、特に限定されず、例えば、脳腫瘍、頚癌、食道癌、舌癌、肺癌、乳癌、膵癌、胃癌、小腸または十二指腸の癌、大腸癌（結腸癌、直腸癌）、膀胱癌、腎癌、肝癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、甲状腺癌、胆嚢癌、咽頭癌、肉腫（例えば、骨肉腫、軟骨肉腫、カポジ肉腫、筋肉腫、血管肉腫、線維肉腫など）、白血病（例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）および急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、リンパ腫、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫（ＭＭ）など）およびメラノーマなどを挙げることができる。
本発明の医薬組成物および／またはキットを使用する場合には、経口もしくは非経口的に投与することができる。本発明の医薬組成物および／またはキットを使用する場合、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の投与量は、症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与方法、投与時期、投与間隔、医薬製剤の性質、調剤、種類、有効成分の種類等によって異なり、特に限定されないが、通常成人（体重６０ｋｇ）１日あたり０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは０．５〜１００ｍｇ、さらに好ましくは１〜３０ｍｇでありこれを通常１日１〜３回に分けて投与することができる。
本発明の医薬組成物および／またはキットを使用する場合、ＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質は、特に限定されないが、通常成人１日あたり０．１〜６０００ｍｇ、好ましくは１０〜４０００ｍｇ、さらに好ましくは５０〜２０００ｍｇでありこれを通常１日１〜３回に分けて投与することができる。
また、本発明の医薬組成物および／またはキットを使用する場合、抗ＥＧＦレセプター抗体は、特に限定されないが、通常１〜６０００ｍｇ、好ましくは１０〜２０００ｍｇ、さらに好ましくは１０〜１０００ｍｇでありこれを通常１日から１週間に１回投与することができる。
本発明の医薬組成物および／またはキットを使用する場合、抗ＥＧＦ抗体は、特に限定されないが、通常１〜６０００ｍｇ、好ましくは１０〜２０００ｍｇ、さらに好ましくは１０〜１０００ｍｇでありこれを通常１日から１週間に１回投与することができる。
使用するＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の量は、特に限定されず、ＥＧＦ阻害物質との個々の組み合わせによって異なるが、例えば、ＥＧＦ阻害物質の約０．０１〜１００倍（重量比）である。さらに好ましくは約０．１〜１０倍（重量比）である。
本発明の医薬組成物は、経口用固形製剤、注射剤などにすることができる。
また、本発明のキットに含まれるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害物質は、それぞれ経口用固形製剤、注射剤などにすることができる。
経口用固形製剤を調製する場合には、主薬に賦形剤さらに必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤等とすることができる。
賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ぶどう糖、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素などが、結合剤としては、例えばポリビニルアルコール、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が、滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ等が、着色剤としては医薬品に添加することが許可されているものが、矯味矯臭剤としては、ココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、龍脳、桂皮末等が用いられる。これらの錠剤、顆粒剤には糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コーティングすることは勿論差し支えない。
注射剤を調製する場合には、必要により主薬にｐＨ調整剤、緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、安定化剤、等張化剤、保存剤などを添加し、常法により静脈、皮下、筋肉内注射剤とすることができる。その際必要により、常法により凍結乾燥物とすることもできる。
懸濁化剤としては、例えば、メチルセルロース、ポリソルベート８０、ヒドロキシエチルセルロース、アラビアゴム、トラガント末、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートなどを挙げることができる。
溶解補助剤としては、例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリソルベート８０、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マクロゴール、ヒマシ油脂肪酸エチルエステルなどを挙げることができる。
また安定化剤としては、例えば、亜硫酸ナトリウム、メタ亜硫酸ナトリウム等を、保存剤としては、例えばパラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、ソルビン酸、フェノール、クレゾール、クロロクレゾールなどを挙げることができる。
本発明のキットにおいて、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含んでなる製剤と、ＥＧＦ阻害物質を含んでなる製剤とは、混合されていてもよいし、あるいは、別個に収納されて一体に包装されていてもよい。これらの製剤が別個に収納されているときは、投与の順序は限定されるものではなく、同時に投与されてもよいし、いずれか一方を先に投与してもよい。
本発明の医薬組成物および／またはキットは、上記のＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害物質の他に、包装容器、取扱説明書、添付文書等を含んでいてもよい。包装容器、取扱説明書、添付文書等には、物質を併用して用いるための組み合わせを記載することができ、また、別々の物質を投与時に併用する形態または混合物としての形態について、用法、用量などを記載することができる。用法、用量は、上記を参照して記載することができる。
また、本発明のキットは、（ａ）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質とを併用して用いることを記載した包装容器、取扱説明書、および添付文書からなる群から選択される少なくとも１つと、（ｂ）ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含む医薬組成物とを含有する態様であってもよい。当該キットは、癌治療用キットとして有用である。ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含有する医薬組成物は、癌治療用医薬組成物として有用である。包装容器、取扱説明書、添付文書等には、化合物を併用して用いることを記載することができ、また、別々の物質を投与時に併用する形態または混合物としての形態について、用法、用量などを記載することができる。用法、用量は、上記を参照して記載することができる。
さらに、本発明には、ＥＧＦ阻害物質と組み合わせてなる医薬組成物の製造のためのＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の使用も含まれる。本発明の使用において、上記医薬組成物は、癌治療用医薬組成物として有用である。
さらにまた、本発明には、ＥＧＦ阻害物質と組み合わせてなる医薬組成物のためのＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質も含まれる。
また、本発明は、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質とを同時または別々に患者に投与する癌の治療方法をも含むものである。本発明の癌の治療方法において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害物質の投与経路および投与方法は特に限定されないが、上記本発明の医薬組成物の記載を参照することができる。
さらに、本発明は、ＥＧＦ阻害物質と同時または別々に患者に投与されることを特徴とするＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質を含む医薬組成物をも含むものである。本発明の医薬組成物において、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質およびＥＧＦ阻害物質の投与経路および投与方法は特に限定されないが、上記本発明の医薬組成物の記載を参照することができる。
【実施例】
【０００６】
以下に、具体的な例をもって本発明を示すが、本発明はこれに限られるものではない。
［実施例１］
ヒト癌細胞株皮下移植モデル（ｉｎ  ｖｉｖｏ）におけるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の抗腫瘍効果
ヒト癌細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＤＵ１４５、ＡｓＰＣ−１（以上、ＡＴＣＣより購入）、Ａ５４９（大日本製薬より購入）、Ｌｏｖｏ、ＳＫ−ＯＶ−３、Ｈ５２６、ＰＣ−３、ＤＬＤ−１、ＨＣＴ１１６（以上、ＡＴＣＣより購入）、ＳＥＫＩ、ＨＭＶ−１（以上、独立法人医薬基盤研究所ＪＣＲＢ  ｃｅｌｌ  ｂａｎｋより購入）、ＬＯＸ（ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒより購入）、Ａ３７５（大日本製薬より購入）を５％炭酸ガスインキュベーター内においてＲＰＭＩ１６４０（１０％ＦＢＳ含）で約８０％コンフルレントとなるまで培養した。培養後、常法に従いトリプシン−ＥＤＴＡにより、各細胞を回収した。各細胞をリン酸緩衝液で懸濁し、１×１０８ｃｅｌｌｓ／ｍＬまたは５×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ懸濁液を調製した。そして、細胞懸濁液を０．１ｍＬずつヌードマウス体側皮下に移植した。移植後、腫瘍体積が約１００−２００ｍｍ３になった時点から、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）（１００ｍｇ／ｋｇ、１日２回、１週間、経口投与）の投与を開始した。なお、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）は、国際公開第０２／３２８７２号パンフレット（ＷＯ０２／３２８７２）および国際公開第２００５／０６３７１３号パンフレット（ＷＯ２００５／０６３７１３）の記載に基づいて製造した。腫瘍長径および短径をデジマチックキャリパ（Ｍｉｔｓｕｔｏｙｏ）で測定し、以下の式で腫瘍体積、比腫瘍体積およびΔＴ／Ｃを算出した。
腫瘍体積（ＴＶ）＝腫瘍長径（ｍｍ）×腫瘍短径２（ｍｍ２）／２
比腫瘍体積（ＲＴＶ）＝測定日の腫瘍体積／投与開始日の腫瘍体積
ΔＴ／Ｃ＝（化合物投与群のｄａｙ８の腫瘍体積−化合物投与群のｄａｙ１の腫瘍体積）／（対照群のｄａｙ８の腫瘍体積−対照群のｄａｙ１の腫瘍体積）×１００
式中、ｄａｙ１は、投与開始日を示し、ｄａｙ８は、投与開始日から８日目を示す。
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの抗腫瘍効果の強さにより、各癌細胞株をそれぞれ高感受性株、中感受性株、低感受性株に分類した。なお、分類は、ΔＴ／Ｃ＜−３０％の癌細胞株（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＤＵ１４５）を高感受性株、−３０％＜ΔＴ／Ｃ＜１０％の癌細胞株（ＡｓＰＣ−１、Ａ５４９、Ｌｏｖｏ、ＳＫ−ＯＶ−３）を中感受性株、１０％＜ΔＴ／Ｃの癌細胞株（Ｈ５２６、ＰＣ−３、ＤＬＤ−１、ＨＣＴ１１６、ＳＥＫＩ、ＨＭＶ−１、ＬＯＸ、Ａ３７５）を低感受性株とした。
［実施例２］
ヒト癌細胞株皮下移植モデル（ｉｎ  ｖｉｖｏ）における癌細胞株中のＥＧＦレセプターの発現量およびそのチロシン残基リン酸化（ｐＹ１０６８，ｐＹ１１４８）状態の解析
ヒト癌細胞株ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＤＵ１４５、ＡｓＰＣ−１（以上、ＡＴＣＣより購入）、Ａ５４９（大日本製薬より購入）、Ｌｏｖｏ、ＳＫ−ＯＶ−３、Ｈ５２６、ＰＣ−３、ＤＬＤ−１、ＨＣＴ１１６（以上、ＡＴＣＣより購入）、ＳＥＫＩ、ＨＭＶ−１（以上、独立法人医薬基盤研究所ＪＣＲＢ  ｃｅｌｌｂａｎｋより購入）、ＬＯＸ（ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒより購入）、Ａ３７５（大日本製薬より購入）を５％炭酸ガスインキュベーター内においてＲＰＭＩ１６４０（１０％ＦＢＳ含）で約８０％コンフルレントとなるまで培養した。培養後、常法に従いトリプシン−ＥＤＴＡにより、各細胞を回収した。１５種類の癌細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＤＵ１４５、ＡｓＰＣ−１、Ａ５４９、Ｌｏｖｏ、ＳＫ−ＯＶ−３、Ｈ５２６、ＰＣ−３、ＤＬＤ−１、ＨＣＴ１１６、ＳＥＫＩ、ＨＭＶ−１、ＬＯＸ、Ａ３７５）３〜１０Ｘ１０６細胞をヌードマウスの皮下に移植し、腫瘍体積が約１００−２００ｍｍ３程度に増殖した時点で腫瘍を採取して各種プロテアーゼ阻害剤（Ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ，ｐ−ＡＰＭＳＦ，ＥＤＴＡ，ｏ−ＮａＶＯ４）および１０％グリセロール含有の細胞溶解液により腫瘍細胞の細胞溶解液を調製した。
それぞれの癌細胞溶解液について、等しいタンパク質量（２０μｇまたは８μｇ）をＳＤＳ−ＰＡＧＥにて分画し、ニトロセルロースメンブレン（Ｈｙｂｏｎｄ  ＥＣＬ、アマシャムバイオサイエンス社）にトランスファーした。そして、常法に従い、抗ＥＧＦレセプター抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、抗ＥＧＦレセプターｐＹ１０６８抗体（抗ＥＧＦレセプターチロシンリン酸化抗体）（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）、抗ＥＧＦレセプターｐＹ１１４８抗体（抗ＥＧＦレセプターチロシンリン酸化抗体）（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）の各抗体でウエスタンブロットを行った。
そして、各細胞株におけるＥＧＦレセプターの発現量およびそのリン酸化の程度と各細胞株における４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドに対する感受性とを比較したところ、高感受性および中感受性の癌細胞株７株のうち６株においてＥＧＦレセプターの相当量の発現および／またはそのリン酸化が認められたのに対し、低感受性の癌細胞株８株のうち１株においてのみＥＧＦレセプターの相当量の発現および／またはそのリン酸化が認められた（図１）。
腫瘍細胞におけるＥＧＦレセプターの発現量および／またはそのリン酸化の程度は、それぞれの細胞株が増殖および／または生存する際のＥＧＦ依存性を示すと考えられることから、ＥＧＦへの依存性の高い癌細胞株、すなわち実施例１において高感受性株及び中感受性株に分類された細胞株ほど４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドに対して高感受性であることが明らかとなった。
よって、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価し、増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標とすることにより予測することができることが明らかになった。
［実施例３］
ヒト非小細胞肺癌細胞株（Ａ５４９）皮下移植モデル（ｉｎ  ｖｉｖｏ）におけるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質との併用
ヒト非小細胞肺癌細胞株Ａ５４９（大日本製薬より購入）を３７℃下、５％炭酸ガスインキュベーター内においてＲＰＭＩ１６４０（１０％ＦＢＳ含）で約８０％コンフルレントとなるまで培養し、トリプシン−ＥＤＴＡにより、細胞を回収した。５０％マトリゲル含有リン酸緩衝液で、５×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ懸濁液を調製し、得られた細胞懸濁液を０．１ｍＬずつヌードマウス体側皮下に移植した。移植１０日目より、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）を３ｍｇ／ｋｇ，１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇ、１日１回、４週間、エルロチニブを５０ｍｇ／ｋｇ、１日１回、４週間のスケジュールで、単剤あるいは併用で経口投与した。腫瘍長径・短径をデジマチックキャリパ（Ｍｉｔｓｕｔｏｙｏ）で測定し、以下の式で腫瘍体積、比腫瘍体積を算出した。
腫瘍体積（ＴＶ）＝腫瘍長径（ｍｍ）×腫瘍短径２（ｍｍ２）／２
比腫瘍体積（ＲＴＶ）＝測定日の腫瘍体積／投与開始日の腫瘍体積
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（化合物Ａ）は、エルロチニブ（化合物Ｂ）と併用することにより、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドまたはエルロチニブ単独の効果に比べ、すぐれた抗腫瘍効果を示した（表１−３および図２−４）。また、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、エルロチニブと併用することにより、エルロチニブ単独では示すことができないような優れた抗腫瘍効果（例えば、腫瘍縮小効果）が認められた（表１−３および図２−４）。
【表１】
2007015578.tif 000063
表１は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（Ａ５４９）皮下移植モデルにおける、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（表１中、化合物Ａと示す）、エルロチニブおよび４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドとエルロチニブとの併用の抗腫瘍効果を示す。投与開始日をｄａｙ１とした。
【表２】
2007015578.tif 000064
表２は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（Ａ５４９）皮下移植モデルにおける、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（表２中、化合物Ａと示す）、エルロチニブおよび４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドとエルロチニブとの併用の抗腫瘍効果を示す。投与開始日をｄａｙ１とした。
【表３】
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表３は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（Ａ５４９）皮下移植モデルにおける、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（表３中、化合物Ａと示す）、エルロチニブおよび４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドとエルロチニブとの併用の抗腫瘍効果を示す。投与開始日をｄａｙ１とした。
［実施例４］
ヒト非小細胞肺癌細胞株（ＰＣ−９）皮下移植モデル（ｉｎ  ｖｉｖｏ）におけるＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質との併用
ヒト非小細胞肺癌細胞株ＰＣ−９（免疫生物研究所より購入）を３７℃下、５％炭酸ガスインキュベーター内においてＲＰＭＩ１６４０（１０％ＦＢＳ含）で約８０％コンフルレントとなるまで培養し、トリプシン−ＥＤＴＡにより、細胞を回収した。リン酸緩衝液で、５×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ懸濁液を調製し、得られた細胞懸濁液を０．１ｍＬずつヌードマウス体側皮下に移植した。移植１３日目より、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（メタンスルホン酸塩）を１０ｍｇ／ｋｇ、１日１回、４週間、エルロチニブを５０ｍｇ／ｋｇ、１日１回、４週間のスケジュールで、単剤あるいは併用で経口投与した。腫瘍長径・短径をデジマチックキャリパー（Ｍｉｔｓｕｔｏｙｏ）で測定し、以下の式で腫瘍体積、比腫瘍体積を算出した。
腫瘍体積（ＴＶ）＝腫瘍長径（ｍｍ）×腫瘍短径２（ｍｍ２）／２
比腫瘍体積（ＲＴＶ）＝測定日の腫瘍体積／投与開始日の腫瘍体積
併用群において、ｔｗｏ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ解析で統計的有意な相互作用が認められた場合、相乗効果と判定した。
その結果、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（化合物Ａ）は、エルロチニブ（化合物Ｂ）と併用することにより、相乗効果が認められ、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドまたはエルロチニブ単独の効果に比べ、すぐれた抗腫瘍効果を示した（表４および図５）。また、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドは、エルロチニブと併用することにより、エルロチニブ単独では示すことができないような優れた抗腫瘍効果（腫瘍縮小効果）が認められた（表４および図５）。
なお、ＰＣ−９は、ＥＧＦレセプターの活性化変異が認められており、ＥＧＦレセプターのリン酸化が亢進している癌細胞株である。
よって、本発明のＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質とを組み合わせてなる医薬組成物は、増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性の高い腫瘍細胞に対して、より抗腫瘍効果を発揮すると考えられる。
【表４】
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表４は、ヒト非小細胞肺癌細胞株（ＰＣ−９）皮下移植モデルにおける、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド（表４中、化合物Ａと示す）、エルロチニブおよび４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドとエルロチニブとの併用の抗腫瘍効果を示す。投与開始日をｄａｙ１とした。
以上の結果から、４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドとエルロチニブとを組み合わせることにより、すぐれた抗腫瘍活性を示す医薬組成物およびキットが提供され、癌の治療に用いることが可能となった。
［参考例］
ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質の一つである４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミドの製剤の製造法を以下に参考例として記載する。
（医薬組成物の製造）
（１）１ｍｇ錠
４−（３−クロロ−４−（シクロプロピルアミノカルボニル）アミノフェノキシ）−７−メトキシ−６−キノリンカルボキサミド  メタンスルホン酸塩の結晶（Ｃ）（以下、「結晶（Ｃ）」と称する場合がある。なお、結晶（Ｃ）は、ＷＯ２００５／０６３７１３の実施例７に記載の方法に従って製造したものである。）２４ｇと無水軽質ケイ酸（ゲル化防止剤、商品名ＡＥＲＯＳＩＬ（登録商標）２００、日本アエロジル株式会社）１９２ｇを２０Ｌスーパーミキサーで混合後、さらにＤ−マンニトール（賦形剤、東和化成工業株式会社）１２３６ｇ、結晶セルロース（賦形剤、商品名アビセルＰＨ１０１、旭化成工業株式会社）７２０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名ＨＰＣ−Ｌ、日本曹達株式会社）７２ｇを加えて混合した。その後、無水エタノールを適量添加し結晶（Ｃ）を含有する造粒物を得た。この造粒物を棚式乾燥機（６０℃）で乾燥後、パワーミルを用いて整粒し、顆粒を得た。この顆粒とともに、クロスカルメロースナトリウム（崩壊剤、商品名Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ、ＦＭＣ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．）１２０ｇ、フマル酸ステアリルナトリウム（滑沢剤、ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ  ＬＰ）３６ｇを２０Ｌタンブラーミキサーに入れて混合後、打錠機で製錠し、１錠あたり総質量１００ｍｇの錠剤を得た。さらに錠剤コーティング機で、コーティング液として１０％オパドライイエロー（ＯＰＡＤＲＹ  ０３Ｆ４２０６９  ＹＥＬＬＯＷ、日本カラコン株式会社）水溶液を用いて、錠剤にコーティングし、１錠あたり総質量１０５ｍｇのコーティング錠を得た。
（２）１０ｍｇ錠
結晶（Ｃ）６０ｇと無水軽質ケイ酸（ゲル化防止剤、商品名ＡＥＲＯＳＩＬ（登録商標）２００、日本アエロジル株式会社）１９２ｇを２０Ｌスーパーミキサーで混合後、さらにＤ−マンニトール（賦形剤、東和化成工業株式会社）１２００ｇ、結晶セルロース（賦形剤、商品名アビセルＰＨ１０１、旭化成工業株式会社）７２０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名ＨＰＣ−Ｌ、日本曹達株式会社）７２ｇを加えて混合した。その後、無水エタノールを適量添加し結晶（Ｃ）を含有する造粒物を得た。この造粒物を棚式乾燥機（６０℃）で乾燥後、パワーミルを用いて整粒し、顆粒を得た。この顆粒とともに、クロスカルメロースナトリウム（崩壊剤、商品名Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ、ＦＭＣＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．）１２０ｇ、フマル酸ステアリルナトリウム（滑沢剤、ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ  ＬＰ）３６ｇを２０Ｌタンブラーミキサーに入れて混合後、打錠機で製錠し、１錠あたり総質量４００ｍｇの錠剤を得た。さらに錠剤コーティング機で、コーティング液として１０％オパドライイエロー（ＯＰＡＤＲＹ  ０３Ｆ４２０６９  ＹＥＬＬＯＷ、日本カラコン株式会社）水溶液を用いて、錠剤にコーティングし、１錠あたり総質量４１１ｍｇのコーティング錠を得た。
（３）１００ｍｇ錠
結晶（Ｃ）３１．４ｇと無水軽質ケイ酸（ゲル化防止剤、商品名ＡＥＲＯＳＩＬ（登録商標）２００、日本アエロジル株式会社）４ｇを１Ｌスーパーミキサーで混合後、さらに、無水リン酸水素カルシウム（賦形剤、協和化学工業株式会社）４０．１ｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名Ｌ−ＨＰＣ（ＬＨ−２１）、信越化学工業株式会社）１０ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース（結合剤、商品名ＨＰＣ−Ｌ、日本曹達株式会社）３ｇを加えて混合した。その後、無水エタノールを適量添加し結晶（Ｃ）を含有する造粒物を得た。この造粒物を棚式乾燥機（６０℃）で乾燥後、パワーミルを用いて整粒し、顆粒を得た。この顆粒とともに、クロスカルメロースナトリウム（崩壊剤、商品名Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ、ＦＭＣ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．）１０ｇ、フマル酸ステアリルナトリウム（滑沢剤、ＪＲＳ  Ｐｈａｒｍａ  ＬＰ）１．５ｇを混合後、打錠機で製錠し、１錠あたり総質量４００ｍｇの錠剤を得た。
【産業上の利用可能性】
【０００７】
本発明により、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果を予測する方法が提供された。
より詳細には、血管新生阻害物質の抗腫瘍効果は、腫瘍細胞の増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を評価し、増殖および／または生存に対するＥＧＦ依存性を指標とすることにより予測することが可能となった。
本発明に係る方法は、患者に血管新生阻害物質を投与することなく、抗腫瘍効果を予測することが可能となるため、より抗腫瘍効果を期待できる患者を選択することができ、患者のＱＯＬに貢献することが可能となった。
また、本発明により、ＶＥＧＦレセプターキナーゼ阻害物質とＥＧＦ阻害物質とを組み合わせてなる医薬組成物および／またはキットが提供され、癌の治療に用いることが可能となった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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