【事件の表示】
　特願２０１８−２１２００「神経前駆細胞を用いた細胞治療における移植補助剤」拒絶査定不服審判事件〔平成３０年５月１７日出願公開、特開２０１８−７６３８５〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
　
第１　手続の経緯
　
　本願は、２０１３年（平成２５年）１１月１４日（国内優先権主張　平成２５年５月１６日）を国際出願日とする特願２０１５−５１６８７８号の一部を、平成３０年２月８日に新たな特許出願としたものであって、出願後の主な手続の経緯は次のとおりである。
　
　平成３０年１０月３０日付け　拒絶理由通知
　平成３１年　３月　５日　　　意見書の提出 
　平成３１年　３月２９日付け　拒絶査定
　令和　１年　６月１７日　　　審判請求書及び手続補正書の提出
　令和　２年　９月２４日付け　拒絶理由通知（当審による）
　令和　２年１１月２７日　　　意見書の提出
　
第２　本願発明
　
　本願の請求項１〜３に係る発明は、令和１年６月１７日提出の手続補正書によって補正された特許請求の範囲の請求項１〜３に記載された事項により特定されるとおりのものであるところ、その請求項１に係る発明（以下「本願発明」という。）は、次のとおりのものである。
　
「【請求項１】
　バルプロ酸を有効成分として含有する、神経前駆細胞移植後のドパミン作動性ニューロンの分化誘導向上剤。」
　
第３　当審が通知した拒絶理由
　
　令和２年９月２４日付けで当審が通知した拒絶理由（理由１）の概要は、次のとおりである。
　
［理由１］（進歩性）
　本願の請求項１〜３に係る発明は、その優先日前に日本国内又は外国において頒布された刊行物である下記の引用文献１に記載された発明、同文献に記載された事項及び周知技術に基いて、その優先日前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　
　上記拒絶理由においては、以下の引用文献１〜３が引用されている。
　
　１．佐俣文平，吉川達也，小倉綾，高橋淳，「バルプロ酸投与による中脳
　　　ドパミン神経細胞の成熟と保護作用」，第１２回　日本再生医療学会
　　　総会プログラム・抄録，日本再生医療学会雑誌，２０１３年２月２８
　　　日，１２巻，増刊号，３０１頁，演題Ｍ−４−１
　
　２．大隅典子，「脳に内在する神経幹細胞の活性化」，学術の動向，２０
　　　０９年，１４巻，８号，３０〜３５頁
　
　３．田中順一，福田隆浩，「パーキンソン病における黒質の細胞変性に
　　　ついて」，日本内科学会雑誌，平成６年４月１０日，８３巻，４号，
　　　５２８〜５３２頁
　
第４　引用文献等の記載事項及び引用発明
　
１　引用文献１の記載事項
　
　引用文献１は、本願発明者（高橋淳）らの学会発表（ポスター）の要旨であり、同文献には、以下の摘記１ａ〜１ｅの事項が記載されている。なお、下線は当審が付したものである（以下、本審決中の下線について同じ。）。
　
・摘記１ａ（本文１〜６行）
「パーキンソン病では
中脳腹側の黒質に存在するドパミン神経細胞
幹細胞移植治療
ドパミン神経細胞の生存性が極めて低い
　
・摘記１ｂ（本文７〜１２行）
「我々はパーキンソン病を対象とした
幹細胞移植治療
バルプロ酸（ＶＰＡ）
ドパミン神経細胞の生着に対する効果
　
・摘記１ｃ（本文１３〜１７行）
「
マウスｉＰＳ細胞
初期神経細胞マーカー（ＰＳＡ−ＮＣＡＭ）陽性細胞
ソート後の細胞
in vitroで
ＶＰＡ
を加えた群でドパミン神経細胞マーカー（ＴＨ）陽性細胞の増加
　
・摘記１ｄ（本文１７〜２０行）
「さらに
ソート後の細胞
ラットへ移植
ＶＰＡを処置した群で移植細胞の生着率向上
　
・摘記１ｅ（本文２１〜２３行）
「これらの結果から、
ＶＰＡにはドパミン神経細胞の成熟と保護効果が期待できる
　
２　引用文献２の記載事項
　
　引用文献２には、次の摘記２の事項が記載されている。
　
・摘記２（３４頁左欄下から７行〜同頁右欄４行）
「ＤＨＡ含有、ＡＲＡ含有および対照となる餌を作製してもらい、母乳を介して仔ラットに生後２日目から４週間にわたって多価不飽和脂肪酸を与えた。すると、とくにＡＲＡを摂取した仔ラットの海馬において増殖細胞数が約３０％増加するとともに、
神経前駆細胞のマーカーである
ポリシアル化神経細胞接着分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule：ＰＳＡ−ＮＣＡＭ）
　
３　引用文献３の記載事項
　
　引用文献３には、次の摘記３の事項が記載されている。
　
・摘記３（５３０頁左欄下から３行〜同頁右欄４行）
「パーキンソン病では黒質のドーパミン神経細胞の脱落が線条体のドーパミン量の減少をもたらすことはよく知られている．
ドーパミン神経細胞のマーカーであるチロシン水酸化酵素（ＴＨ）
　
４　参考文献の記載事項
　
　請求人が令和２年１１月２７日提出の意見書に添付して提出した参考文献「Stem Cells，2010，vol.28，pp.501-512」には、以下の摘記４ａ〜４ｃの事項が記載されている。なお、同文献は英語で記載されているため、当審による訳文で摘記する。
　
・摘記４ａ（５０２頁左欄２〜６行、１５〜１９行）
「パーキンソン病（ＰＤ）は最も一般的な運動障害であり、無動症、硬直、振戦を示す。運動症状に最も関連する神経病理は
中脳の黒質にあるドパミン（ＤＡ）ニューロン
ＤＡニューロンは
中脳腹側に由来する
　
・摘記４ｂ（５０２頁左欄２５〜２９行、４７〜５１行）
「
中脳ＤＡニューロン
Ｆｏｘａ
２などの細胞型特異化因子
　
Ｆｏｘａ２
中脳腹側で広く発現する
　
・摘記４ｃ（５０１頁「ABSTRCT」左欄４〜９行、１１〜１６行、右欄９〜
　　　　　　１３行）
「・・・。孤立した核内受容体であるＮｕｒｒ１は、インビトロにおいて非ドパミン作動性ＮＰＣからのＤＡニューロンの分化を促進する転写因子として報告されている。しかし、Ｎｕｒｒ１のみでは、完全な
ニューロンの成熟
中脳ＤＡニューロン発達における役割
Ｆｏｘａ２
ＤＡ表現型の獲得
ニューロンの成熟を誘導する
Ｆｏｘａ２で形質導入されたＮＰＣの移植
中脳型のＤＡニューロンが豊富な移植片が生成された
　
５　引用文献１に記載された発明
　
　上記１の摘記１ｄに記載された「ソート後の細胞」は、同摘記１ｃに記載された「マウスｉＰＳ細胞からＳＦＥＢ変法で神経誘導を行い、初期神経細胞マーカー（ＰＳＡ−ＮＣＡＭ）陽性細胞をソーティングして得た」ものであり、同摘記１ｂの記載から「ＶＰＡ」は「バルプロ酸」の略語であることは明らかであるから、同摘記１ａ〜１ｅ、特に同摘記１ｄの記載によれば、引用文献１には、次の発明（以下「引用発明」という。）が記載されていると認められる。
　
≪引用発明≫ 
「バルプロ酸を有効成分として含有する、マウスｉＰＳ細胞由来である初期神経細胞マーカー（ＰＳＡ−ＮＣＡＭ）陽性細胞のラットへの移植後の移植細胞の生着率向上剤。」
　
第５　対比・判断
　
１　本願発明と引用発明との対比
　
　本願発明と引用発明とを対比する。
　引用文献１の摘記１ｃに記載された「初期神経細胞マーカー（ＰＳＡ−ＮＣＡＭ）」は、神経前駆細胞のマーカーとして本願優先日前に周知のものであり（例えば、摘記２を参照。）、本願明細書の【００２１】においても、「
ＰＳＡ−ＮＣＡＭ
等の神経前駆細胞
に特異的に発現するマーカー分子
　また、引用発明における「ラットへの移植後」は、本願発明における「移植後」に相当する。
　そして、本願明細書の【００４７】に「
神経前駆細胞
ＮＰＣ
ＶＰＡは移植したＮＰＣの神経細胞への分化を促進する
ＶＰＡ
の全身投与によって
移植した神経前駆細胞から分化したドパミン作動性ニューロンの残存率が向上する
　
　そうすると、本願発明と引用発明との一致点及び相違点は、次のとおりであると認められる。
　
＜一致点＞
「バルプロ酸を有効成分として含有する、神経前駆細胞移植後の神経前駆細胞に作用する剤。」
　
＜相違点＞
　移植後の神経前駆細胞に作用する剤が、本願発明では「ドパミン作動性ニューロンの分化誘導向上剤」であるのに対し、引用発明では「移植細胞の生着率向上剤」である点。
　
２　判断
　
（１）相違点について
　
　上記相違点について検討する。
　
　引用文献１には、ソート後の初期神経細胞マーカー（ＰＳＡ−ＮＣＡＭ）陽性細胞にバルプロ酸を加えてインビトロで培養すると、ドパミン神経細胞マーカー（ＴＨ）陽性細胞の増加が認められたことが記載されている（摘記１ｃ）。ここでいう「ドパミン神経細胞マーカー（ＴＨ）」とは、ドパミン神経細胞のマーカーとして本願優先日前に周知の「チロシン水酸化酵素（チロシンヒドロキシラーゼ）（ＴＨ）」のことであると解され（例えば、摘記３を参照。）、ＴＨ陽性細胞の増加は、ドパミン神経細胞、即ちドパミン作動性ニューロンの分化誘導の向上を示したものと認められる。
　引用文献１に示された、上記のバルプロ酸によるドパミン作動性ニューロンの分化誘導の向上は、インビトロでの作用ではあるが、引用文献１には、インビボでの試験に関して、「
バルプロ酸（ＶＰＡ）
ドパミン神経細胞の生着に対する効果
ＶＰＡにはドパミン神経細胞の成熟と保護効果が期待できる
　そうすると、引用文献１の記載から、バルプロ酸の処置によって、インビボでの移植後の神経前駆細胞それ自体の生着率の向上に限らず、当該移植後の神経前駆細胞からドパミン作動性ニューロンへの分化誘導も期待できると理解できるから、そのような引用文献１の記載に接した当業者にとって、バルプロ酸の処置により神経前駆細胞の移植後に当該細胞がドパミン作動性ニューロンに分化誘導されることを、ＴＨをはじめとするドパミン神経細胞のマーカー等の発現についての試験を行うなどして実際に確認する動機付けは十分にあり、その結果として、引用発明の「移植細胞の生着率向上剤」を、「ドパミン作動性ニューロンの分化誘導向上剤」とすることは、容易になし得たことである。
　
（２）本願発明の効果について 
　
　本願明細書の【００３８】〜【００５５】に、【実施例】として、ｉＰＳ細胞由来の神経前駆細胞をラットに移植した場合のバルプロ酸の投与の影響に関する試験を含む幾つかの試験及びそれらの結果が記載されている。
　具体的には、ＳＦＥＢ法によってマウスｉＰＳ細胞から誘導した９日目の神経前駆細胞のＳＤラットの線条体への移植後４週間目の移植片において、成熟神経細胞のマーカーであるＮｅｕＮが陽性（ＮｅｕＮ＋）である細胞の割合が、バルプロ酸を移植２日前から毎日投与した群では、コントロールと比較して有意に増加したことから、バルプロ酸は移植された神経前駆細胞の神経細胞への分化を促進することが示唆された旨が記載されている（【００５２】〜【００５３】及び【図６】（Ｂ）を参照。）。
　また、ドパミン作動性ニューロンの特異的マーカーであるチロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）が陽性（ＴＨ＋）である細胞の数、及び、ＴＨとともに中脳マーカーであるＦＯＸＡ２が同時に陽性（ＴＨ＋ＦＯＸＡ２＋）である細胞の数が、バルプロ酸投与群では、コントロールと比較して有意に多かったことから、バルプロ酸の投与によって移植した神経前駆細胞から分化したドパミン作動性ニューロンの残存率が向上することが示唆された旨が記載されている（【００５４】及び【図７】（Ｂ）（Ｃ）を参照。）。
　
　しかしながら、上記（１）で説示したように、引用文献１には、神経前駆細胞であるマウスｉＰＳ細胞由来のＰＳＡ−ＮＣＡＭ陽性細胞を、バルプロ酸を加えてインビトロで培養すると、ドパミン神経細胞マーカー（ＴＨ）陽性細胞が増加したことが記載されていることに加えて、インビボでの実験結果に基づく同文献の記載からは、バルプロ酸にはインビボでの移植後の神経前駆細胞からのドパミン作動性ニューロンへの分化誘導も期待できることが理解できる。
　そうすると、バルプロ酸を処置したラットに移植された神経前駆細胞において、周知の成熟神経細胞のマーカーであるＮｅｕＮ（例えば、特開２００４−２３６６０７号公報の【００１８】、特開２００７−２８４４１０号公報の【００４９】及び再公表特許２００７／０１０９８９号の【００４６】を参照。）やドパミン作動性ニューロン特異的マーカーであるＴＨをはじめとする神経細胞のマーカーが陽性である細胞の数が増加することは、当業者が予測し得ることであって、その増加の程度も予測し得ない格別顕著なものとは認められない。
　また、引用発明はパーキンソン病を対象とした幹細胞移植治療の臨床応用を目的したものであって（摘記１ａ）、パーキンソン病が中脳の黒質に存在するドパミン作動性ニューロンの脱落変性に起因する疾病であることは本願優先日前に当業者に周知であったから（例えば、摘記１ａ、摘記３及び摘記４ａを参照。）、当業者ならば、バルプロ酸を処置したラットに移植された神経前駆細胞について、中脳腹側で広く発現する中脳マーカーとして周知であるＦＯＸＡ２（例えば、摘記４ａ〜４ｃを参照。）が発現する細胞の数が増加することも確認することは、容易になし得たことであって、その増加の程度も予測し得ない格別顕著なものとは認められない。
　
３　請求人の主張について
　
（１）請求人の主張の概要
　
　請求人は、令和２年１１月２７日提出の意見書において、概略、以下のア〜ウの主張をしている。
　
　ア
　引用文献１には、移植した細胞の生着率が向上したことが記載されているのに留まり、移植した細胞がドパミン作動性ニューロンに分化したか否かは記載されていない。また、引用文献１には、神経細胞の分化に関して、インビトロでの実験結果が記載されているが、インビボでの実験結果については記載も示唆もされていない。
　神経細胞の技術分野では、インビトロでの実験結果から必ずしもインビボでの実験結果を類推又は予測できない。実際、本願明細書の【００４８】〜【００４９】及び【図３】（Ｂ）に示すとおり、インビトロでは、ＰＳＡ−ＮＣＡＭ陽性細胞をエストラジオール（Ｅ２）の存在下で培養して得た細胞では、ＴＨ陽性細胞の割合がコントロールの細胞（Ｅ２なし）に対し約２倍にまで増加した一方で、同【００５２】及び【図７】（Ｂ）に示すとおり、インビボでは、神経前駆細胞（ＮＰＣ）をＳＤのラット線条体に移植しＥ２を投与したＳＤラットの移植片では、コントロールと比較して移植片当たりのＴＨ陽性細胞の割合に有意な増加はなかった。
　したがって、本願発明における「移植後のドパミン作動性ニューロンの分化誘導向上剤」（相違点）は、分化についてインビトロでの実験結果のみを言及している引用文献１から容易に想到し得るものではない。
（上記意見書の２頁６〜１３行、２頁下から９行〜３頁７行）
　
　イ
　引用文献１における「ＶＰＡにはドパミン神経細胞の成熟と保護効果が期待できると考えられる」との記載から必ずしも本願発明の「移植後のドパミン作動性ニューロンの分化誘導向上」の作用を予測できるわけではない。
　例えば、ゾニサミド（ＺＮＳ）を投与した場合では、移植片中の神経前駆細胞（ＮＰＣ）から新たな神経細胞（成熟神経細胞への分化マーカーであるＮｅｕＮ陽性細胞）への分化の割合は、コントロールと同程度であった（本願の【図６】（Ｂ））のに対し、移植片中の中脳ドパミン作動性ニューロン（ＴＨ＋ＦＯＸＡ２＋）の割合は、コントロールよりも顕著に増加した（本願の【図７】（Ｂ）（Ｃ））。
　これらの結果から、ＺＮＳの投与による、神経前駆細胞（ＮＰＣ）の神経細胞への分化の効率と、移植後の中脳ドパミン作動性ニューロンの残存率とは、互いに独立した関係にある（本願明細書の【００５４】）といえる。
　したがって、この観点からも、本願発明に係る「移植後のドパミン作動性ニューロンの分化誘導向上剤」（相違点）は、引用文献１から容易に想到し得るものではない。
（上記意見書の３頁８〜２６行）
　
　ウ
　本願実施例において、インビトロ（本願の【図４】（Ａ））及びインビボ（本願の【図７】（Ｃ））での実験結果として示したとおり、ＶＰＡの投与により分化した神経細胞に存在するＴＨ＋ＦＯＸＡ２＋細胞の割合は、コントロールよりも顕著に増加している。
　ＦＯＸＡ２は中脳で発現しており、ＦＯＸＡ２を発現させた細胞の移植がラットＰＤ（パーキンソン病）モデルにおいて症状の改善に有効であることが知られている（添付した参考文献を参照）。
　そうすると、ＴＨ＋ＦＯＸＡ２＋細胞の割合が増加するという本願発明によれば、パーキンソン病の治療により有効であるという効果も得られる。
　引用文献１には、ＴＨ＋細胞が記載されているに過ぎず、また引用文献２及び３にも当該効果に関する記載や示唆はない。
　したがって、本願発明による効果は、引用文献１〜３からは予測できない顕著な効果といえる。
（上記意見書の３頁２７〜３８行）
　
（２）請求人の主張についての判断
　
　しかしながら、請求人の上記主張ア〜ウは、いずれも採用できない。その理由は以下のとおりである。
　
　ア　上記主張アについて
　請求人が指摘する、エストラジオール（Ｅ２）を用いた場合にはＴＨ陽性細胞がインビトロでは有意に増加してもインビボの移植片では有意な増加がなかったことは、本願明細書に記載された一実験結果に過ぎず、本願優先日前の公知事実でないから、進歩性の判断において考慮することはできない。また、神経細胞のインビトロでの分化誘導の向上の実験結果からはインビボでの実験結果が全く類推又は予測できないともいえない。なお、引用文献１にも、インビトロではバルプロ酸（ＶＰＡ）やエストラジオール（Ｅ２）を加えた群ではドパミンＴＨ陽性細胞の増加が認められたことが記載されている（摘記１ｃ）一方で、インビボでの移植実験については、Ｅ２への言及はなく、ＶＰＡについてのみ記載されている（摘記１ｄ〜１ｅ）ことは、本願明細書における上記実験結果の記載と矛盾するものでもない。
　そして、上記２（１）で説示したように、引用文献１には、分化についてインビトロでの実験結果のみが記載されているわけではなく、インビボでの実験結果に基づく同文献の記載からは、バルプロ酸にはインビボでの移植後の神経前駆細胞からのドパミン作動性ニューロンへの分化誘導も期待できることが理解できるから、当業者にとってバルプロ酸の当該作用を実際に確認する動機付けは十分にあるというべきである。
　
　イ　上記主張イについて
　請求人は、ゾニサミド（ＺＮＳ）を投与した場合における、移植後の神経前駆細胞（ＮＰＣ）の神経細胞への分化の効率と、移植後の中脳ドパミン作動性ニューロンの残存率とは、互いに独立した関係にある旨を主張する。
　しかしながら、それは、本願明細書に記載されたバルプロ酸（ＶＰＡ）とは別異の化合物であるゾニサミド（ＺＮＳ）についての実験結果に基づいた考察であって、本願優先日前の公知事実でないため、進歩性の判断において考慮することはできない。
　そして、引用文献１の記載から、バルプロ酸の処置により、インビボでの移植後の神経前駆細胞がドパミン作動性ニューロンに分化誘導することについて、当業者が実際に確認する動機付けが十分にあるといえることは、上記２（１）で説示したとおりであって、本願明細書に記載の移植後のドパミン作動性ニューロンの分化誘導向上の実際の効果が、予測し得ない格別顕著なものとはいえないことも、上記２（２）で説示したとおりである。
　
　ウ　上記主張ウについて
　上記２（１）及び（２）でも説示したように、引用文献１の記載に接した当業者にとって、バルプロ酸を処置したラットに移植された神経前駆細胞のドパミン作動性ニューロンへの分化誘導を、ＴＨをはじめとする神経細胞のマーカーの発現について試験を行うなどして実際に確認する動機付けは十分にあるといえる。その際に、中脳マーカーであるＦＯＸＡ２の発現も確認の対象に加えることは、当業者が容易になし得たことであって、それらのマーカーの発現の程度も予測し得ない格別顕著なものとは認められない。
　また、引用発明はパーキンソン病を対象とした幹細胞移植治療の臨床応用を目的したものであって（摘記１ａ）、パーキンソン病は中脳の黒質に存在するドパミン作動性ニューロンの脱落変性に起因するものである（例えば、摘記１ａ、摘記３及び摘記４ａを参照。）。そして、上記２（２）で説示したとおり、バルプロ酸の処置によって移植後の神経前駆細胞においてドパミン作動性ニューロン特異的マーカーであるＴＨ及び中脳マーカーであるＦＯＸＡ２等の神経細胞マーカーが陽性である細胞の数が増加することは予測し得ることであるから、パーキンソン病の治療により有効となることも、当業者ならば予測し得ることであるといえる。
　
第６　むすび 
　
　以上のとおりであるから、本願請求項１に係る発明は、引用文献１に記載された発明、同文献に記載された事項及び周知技術に基いて、その優先日前に当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　したがって、他の請求項に係る発明について検討するまでもなく、本願は拒絶すべきものである。
　よって、結論のとおり審決する。