(57)【要約】  式(I)（式中、aは0または1を表し、nは0〜2の整数を表し、mは0〜5の整数を表し、X1およびX2はそれぞれ独立して、水素原子またはヒドロキシを表し、Yは酸素原子または硫黄原子を表し、-Q1-は-O-等を表し、-Q2-は-O-等を表し、-Z-は-O-等を表し、R1、R3およびR4はそれぞれ独立して、ヒドロキシ等を表し、R2およびR5はそれぞれ独立して、水素原子、ヒドロキシ等を表し、Aは6-アミノプリン-9-イル等を表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するTLR9作動薬等を提供する。2007119815.tif 000031
2007119815.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)
【化１３】
2007119815.tif 000027
（式中、aは0または1を表し、
nは0〜2の整数を表し、
mは0〜5の整数を表し、
X1およびX2はそれぞれ独立して、水素原子またはヒドロキシを表し、
Yは酸素原子または硫黄原子を表し（nが1または2のとき、2つまたは3つのYは同一でも異なっていてもよい）、
-Q1-は-O-、-CH2-または-CF2-を表し、
-Q2-は単結合、-O-、-CH2-O-または-CH2-を表し、
-Z-は-O-または-CH2-を表し、
R1、R3およびR4はそれぞれ独立して、ヒドロキシ、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルケニルオキシ、置換もしくは非置換のアラルキルオキシまたは置換もしくは非置換の複素環アルキルオキシを表し、
R2およびR5はそれぞれ独立して、水素原子、ヒドロキシ、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルケニルオキシ、置換もしくは非置換のアラルキルオキシまたは置換もしくは非置換の複素環アルキルオキシを表し、
Aは下記の置換基群(A)から選ばれる基を表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【化１４】
2007119815.tif 000028
【請求項２】
mが1である請求項１記載のToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【請求項３】
aが1である請求項１または２記載のToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【請求項４】
aが0である請求項１または２記載のToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【請求項５】
R2が水素原子である請求項１〜４のいずれかに記載のToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【請求項６】
R1およびR2がそれぞれ独立して、ヒドロキシまたは低級アルカノイルオキシである請求項１〜４のいずれかに記載のToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【請求項７】
X1およびX2がヒドロキシである請求項１〜６のいずれかに記載のToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【請求項８】
式(IA)
【化１５】
2007119815.tif 000029
（式中、maは1〜5の整数を表し、
X1、X2、Y、Q1、Q2およびAはそれぞれ前記と同義であり、
R1A、R3A、R4AおよびR5Aはそれぞれ独立して、ヒドロキシ、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシまたは置換もしくは非置換の低級アルコキシを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項９】
maが1である請求項８記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１０】
X1およびX2がヒドロキシである請求項８または９記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１１】
R1Aがヒドロキシまたは低級アルカノイルオキシである請求項８〜１０のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１２】
Aが
【化１６】
2007119815.tif 000030
である請求項８〜１１のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
【請求項１３】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するToll様受容体9（TLR9）作動薬。
【請求項１４】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。
【請求項１５】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
【請求項１６】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗感染症剤。
【請求項１７】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する免疫促進剤。
【請求項１８】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するToll様受容体9（TLR9）が関与する疾患の治療および／または予防剤。
【請求項１９】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。
【請求項２０】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
【請求項２１】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗感染症剤。
【請求項２２】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する免疫促進剤。
【請求項２３】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するToll様受容体9（TLR9）が関与する疾患の治療および／または予防剤。
【請求項２４】
Massilia sp. KY13101株（受託番号：NITE BP-348）。
【請求項２５】
請求項２４記載の微生物を利用した請求項１〜１２のいずれかに記載の化合物の製造法。
【請求項２６】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むToll様受容体9（TLR9）の作動方法。
【請求項２７】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むアレルギーの治療方法。
【請求項２８】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む腫瘍の治療方法。
【請求項２９】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む感染症の治療方法。
【請求項３０】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む免疫促進方法。
【請求項３１】
請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むToll様受容体9（TLR9）が関与する疾患の治療および／または予防方法。
【請求項３２】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むToll様受容体9（TLR9）の作動方法。
【請求項３３】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むアレルギーの治療方法。
【請求項３４】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む腫瘍の治療方法。
【請求項３５】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む感染症の治療方法。
【請求項３６】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む免疫促進方法。
【請求項３７】
請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むToll様受容体9（TLR9）が関与する疾患の治療および／または予防方法。
【請求項３８】
Toll様受容体9（TLR9）作動薬の製造のための、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項３９】
抗アレルギー剤の製造のための、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４０】
抗腫瘍剤の製造のための、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４１】
抗感染症剤の製造のための、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４２】
免疫促進剤の製造のための、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４３】
Toll様受容体9（TLR9）が関与する疾患の治療および／または予防剤の製造のための、請求項１〜７のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４４】
Toll様受容体9（TLR9）作動薬の製造のための、請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４５】
抗アレルギー剤の製造のための、請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４６】
抗腫瘍剤の製造のための、請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４７】
抗感染症剤の製造のための、請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４８】
免疫促進剤の製造のための、請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【請求項４９】
Toll様受容体9（TLR9）が関与する疾患の治療および／または予防剤の製造のための、請求項８〜１２のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は免疫促進剤、Toll様受容体9（TLR9）作動薬等に関する。
【背景技術】
【０００２】
CpG-オリゴデオキシヌクレオチドはToll様受容体の一つであるToll様受容体9（TLR9）に認識されることが明らかとなっている（例えば「ネーチャー（Nature）」、2000年、第408巻、p.740等）。TLR9は、例えばB細胞、樹状細胞等に存在しており、細菌やウイルスのDNA中に存在する非メチル化CpGモチーフを有するオリゴヌクレオチドにより活性化されることが知られている。つまり、TLR9はMyD88等のアダプター分子を介して細胞内にシグナルを伝達し、サイトカイン遺伝子発現を制御するNF-κB等の転写因子群を活性化し、サイトカインの産生を惹起する。また、リンパ球活性化に重要な副刺激分子であるCD40、CD80、CD86等の表面分子の発現を亢進させる。【０００３】
また、CpG-オリゴデオキシヌクレオチド等のTLR9作動薬は、免疫促進活性を有し、抗アレルギー作用、抗腫瘍作用、抗感染症作用を示すことが知られている（例えばEP0468520；WO96/02555；WO98/18810；WO98/37919；WO98/40100；WO99/51259；WO99/56755；「ネーチャー・レビューズ・ドラッグ・ディスカバリー（Nature Reviews Drug Discovery）」、2002年、第１巻、p.797；「ネーチャー・レビューズ・イムノロジー（Nature Reviews Immunology）」、2004年、第4巻、p.1；「クリニカル・キャンサー・リサーチ（Clinical Cancer Research）」、2003年、第9巻、p.2693；「クリニカル・キャンサー・リサーチ（Clinical Cancer Research）」、2003年、第9巻、p.3105；「ザ・ジャーナル・オブ・イムノロジー（The Journal of Immunology）」、1998年、第160巻、p.3627；「プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・オブ・ザ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ（Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America）」、1999年、第96巻、p.6970；「ジャーナル・オブ・アレルギー・アンド・クリニカル・イムノロジー（Journal of Allergy & Clinical Immunology）」、2002年、第110巻、p.867；「アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピレイトリー・アンド・クリティカル・ケア・メディシン（American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine）」、2004年、第170巻、p.1153；「アメリカン・ソサイエティー・オブ・クリニカル・オンコロジー（American Society of Clinical Oncology：ASCO）」、2005年、アニュアル・ミーティング（Annual Meeting）、アブストラクト、#7039；「ジャーナル・オブ・アレルギー・アンド・クリニカル・イムノロジー（Journal of Allergy & Clinical Immunology）」、2004年、第113巻、p.235；「ネーチャー（Nature）」、2000年、第408巻、p.740；「ブラッド（Blood）」、1997年、第89巻、p.2635；「ジャーナル・オブ・エクスペリメンタル・メディシン（Journal of Experimental Medicine）」、1996年、第184巻、p.981；「ロイケミア・リンフォーマ（Leukemia Lymphoma）」、1995年、第19巻、p.267；「ジャーナル・オブ・エクスペリメンタル・メディシン（Journal of Experimental Medicine）」、1993年、第178巻、p.1057等）。【０００４】
モノヌクレオチド=5’-ジホスフェートとしては、例えばアデノシン=5’-(L-グリセロ-β-D-マンノピラノシル)ジホスフェート、アデノシン=5’-(D-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスフェート等がグラム陰性細菌の細胞壁成分であるリポ多糖（LPS）の生合成中間体として知られており（非特許文献１参照）、後述の表中に記載の化合物18〜23等が市販されている。また、後述の表中に記載の化合物9〜17等の製造法が知られている（非特許文献2参照）。
【非特許文献１】「ジャーナル・オブ・バクテリオロジー（Journal of Bacteriology）」、2002年、第184巻、p.363
【非特許文献２】「カルボハイドレイト・リサーチ（Carbohydrate Research）」、2003年、第338巻、p.2571
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、例えばTLR9作動薬、免疫促進剤、抗アレルギー剤、抗腫瘍剤、抗感染症剤等として有用なTLR9の作動活性を有する化合物等を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、以下の（1）〜（49）に関する。
（1）式(I)【０００７】
【化１】
2007119815.tif 000003
【０００８】
（式中、aは0または1を表し、
nは0〜2の整数を表し、
mは0〜5の整数を表し、
X1およびX2はそれぞれ独立して、水素原子またはヒドロキシを表し、
Yは酸素原子または硫黄原子を表し（nが1または2のとき、2つまたは3つのYは同一でも異なっていてもよい）、
-Q1-は-O-、-CH2-または-CF2-を表し、
-Q2-は単結合、-O-、-CH2-O-または-CH2-を表し、
-Z-は-O-または-CH2-を表し、
R1、R3およびR4はそれぞれ独立して、ヒドロキシ、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルケニルオキシ、置換もしくは非置換のアラルキルオキシまたは置換もしくは非置換の複素環アルキルオキシを表し、
R2およびR5はそれぞれ独立して、水素原子、ヒドロキシ、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルケニルオキシ、置換もしくは非置換のアラルキルオキシまたは置換もしくは非置換の複素環アルキルオキシを表し、
Aは下記の置換基群(A)から選ばれる基を表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するTLR9作動薬。【０００９】
【化２】
2007119815.tif 000004
【００１０】
（2）mが1である前記（1）記載のTLR9作動薬。
（3）aが1である前記（1）または（2）記載のTLR9作動薬。
（4）aが0である前記（1）または（2）記載のTLR9作動薬。
（5）R2が水素原子である前記（1）〜（4）のいずれかに記載のTLR9作動薬。
（6）R1およびR2がそれぞれ独立して、ヒドロキシまたは低級アルカノイルオキシである前記（1）〜（4）のいずれかに記載のTLR9作動薬。
（7）X1およびX2がヒドロキシである前記（1）〜（6）のいずれかに記載のTLR9作動薬。
（8）式(IA)【００１１】
【化３】
2007119815.tif 000005
【００１２】
（式中、maは1〜5の整数を表し、
X1、X2、Y、Q1、Q2およびAはそれぞれ前記と同義であり、
R1A、R3A、R4AおよびR5Aはそれぞれ独立して、ヒドロキシ、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシまたは置換もしくは非置換の低級アルコキシを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩。
（9）maが1である前記（8）記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
（10）X1およびX2がヒドロキシである前記（8）または（9）記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
（11）R1Aがヒドロキシまたは低級アルカノイルオキシである前記（8）〜（10）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
（12）Aが【００１３】
【化４】
2007119815.tif 000006
【００１４】
である前記（8）〜（11）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩。
（13）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するTLR9作動薬。
（14）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。
（15）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
（16）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗感染症剤。
（17）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する免疫促進剤。
（18）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するTLR9が関与する疾患の治療および／または予防剤。
（19）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。
（20）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
（21）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗感染症剤。
（22）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する免疫促進剤。
（23）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有するTLR9が関与する疾患の治療および／または予防剤。
（24）Massilia sp. KY13101株（受託番号：NITE BP-348）。【００１５】
（25）前記（24）記載の微生物を利用した前記（1）〜（12）のいずれかに記載の化合物の製造法。
（26）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むTLR9の作動方法。
（27）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むアレルギーの治療方法。
（28）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む腫瘍の治療方法。
（29）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む感染症の治療方法。
（30）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む免疫促進方法。
（31）前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むTLR9が関与する疾患の治療および／または予防方法。
（32）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むTLR9の作動方法。
（33）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むアレルギーの治療方法。
（34）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む腫瘍の治療方法。
（35）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む感染症の治療方法。
（36）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む免疫促進方法。
（37）前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含むTLR9が関与する疾患の治療および／または予防方法。【００１６】
（38）TLR9作動薬の製造のための、前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（39）抗アレルギー剤の製造のための、前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（40）抗腫瘍剤の製造のための、前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（41）抗感染症剤の製造のための、前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（42）免疫促進剤の製造のための、前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（43）TLR9が関与する疾患の治療および／または予防剤の製造のための、前記（1）〜（7）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（44）TLR9作動薬の製造のための、前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（45）抗アレルギー剤の製造のための、前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（46）抗腫瘍剤の製造のための、前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（47）抗感染症剤の製造のための、前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（48）免疫促進剤の製造のための、前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
（49）TLR9が関与する疾患の治療および／または予防剤の製造のための、前記（8）〜（12）のいずれかに記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用。
【発明の効果】
【００１７】
本発明により、例えばTLR9作動薬、免疫促進剤、抗アレルギー剤、抗腫瘍剤、抗感染症剤等として有用なTLR9の作動活性を有する化合物等が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図1は、本願で使用される化合物の製造に用いたグラム陰性桿菌の16S rDNA部分配列を用いた系統解析の結果を示す図である。
【図２】図2は、代表的な化合物(I)によるNF-κBの活性促進効果を示したものである。結果は、各化合物の濃度におけるルシフェラーゼ活性値（RLU）で示す。縦軸はRLUを表し、横軸は試験化合物の濃度（mol/L）を表す。−■−：化合物1、−□−：化合物2、−◇−：化合物10、−×−：化合物12、−＋−：化合物14、−△−：化合物16、−●−：化合物23
【００１９】
【図３】図3は、化合物30によるNF-κBの活性促進効果を示したものである。比較のために、化合物16の結果とともに記載してある。結果は、各化合物の濃度におけるルシフェラーゼ活性値（RLU）で示す。縦軸はRLUを表し、横軸は試験化合物の濃度（mol/L）を表す。−△−：化合物16、−▼−：化合物30
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
以下、式(I)で表される化合物を化合物(I)という。他の式番号の化合物についても同様である。
式(I)および式(IA)の各基の定義において、
低級アルコキシの低級アルキル部分としては、例えば直鎖または分枝状の炭素数1〜8のアルキルがあげられ、具体的にはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル等があげられる。【００２１】
低級アルケニルオキシの低級アルケニル部分としては、例えば直鎖または分枝状の炭素数2〜8のアルケニルがあげられ、具体的にはビニル、アリル、1-プロペニル、メタクリル、クロチル、1-ブテニル、3-ブテニル、2-ペンテニル、4-ペンテニル、2-ヘキセニル、5-ヘキセニル、2-ヘプテニル、2-オクテニル等があげられる。
低級アルカノイルオキシの低級アルカノイル部分としては、例えば直鎖または分枝状の炭素数1〜7のアルカノイルがあげられ、具体的にはホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、ヘキサノイル、ヘプタノイル等があげられる。【００２２】
アラルキルオキシおよび複素環アルキルオキシにおけるアルキレン部分は前記低級アルキルから水素原子を1つ除いた基を表す。
アラルキルオキシのアリール部分としては、例えば炭素数6〜14の単環式、二環式または三環式のアリールがあげられ、具体的にはフェニル、インデニル、ナフチル、アントリル等があげられる。【００２３】
複素環アルキルオキシの複素環基部分としては、例えば芳香族複素環基、脂環式複素環基等があげられる。芳香族複素環基としては、例えば窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる少なくとも1個の原子を含む5員または6員の単環性芳香族複素環基、3〜8員の環が縮合した二環または三環性で窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる少なくとも1個の原子を含む縮環性芳香族複素環基等があげられ、具体的にはピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、キノリル、イソキノリル、フタラジニル、キナゾリル、キノキサリル、ナフチリジニル、シンノリニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チエニル、フリル、チアゾリル、オキサゾリル、インドリル、インダゾリル、ベンゾピラニル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾピラゾリル、ベンゾジオキサニル、ベンゾオキサゾリル、プリニル、ベンゾジオキソラニル等があげられる。脂環式複素環基としては、例えば窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる少なくとも1個の原子を含む5員または6員の単環性脂環式複素環基、3〜8員の環が縮合した二環または三環性で窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる少なくとも1個の原子を含む縮環性脂環式複素環基等があげられ、具体的にはピロリジニル、ピペリジノ、ピペラジニル、モルホリノ、モルホリニル、チオモルホリノ、チオモルホリニル、ホモピペリジノ、ホモピペラジニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロベンゾフラニル、オキソピペラジニル、2-オキソピロリジニル等があげられる。【００２４】
置換低級アルカノイルオキシ、置換低級アルコキシおよび置換低級アルケニルオキシは、同一または異なって、例えば置換数1〜置換可能な数の、好ましくは置換数1〜5の、より好ましくは置換数1〜3の置換基(a)を有する。具体的な置換基(a)としては、ヒドロキシ、ハロゲン、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、低級アルカノイル、低級アルカノイルオキシ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、カルバモイル、モノ低級アルキルアミノカルボニル、ジ低級アルキルアミノカルボニル、シアノ、アミノ、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ等があげられる。【００２５】
置換アラルキルオキシおよび置換複素環アルキルオキシは、同一または異なって、例えば置換数1〜置換可能な数の、好ましくは置換数1〜5の、より好ましくは置換数1〜3の置換基(b)を有する。具体的な置換基(b)としては、置換基(a)の例示に加えて置換もしくは非置換の低級アルキル等があげられる。
該置換基(a)および置換基(b)で例示した置換低級アルキルおよび置換低級アルコキシは、同一または異なって、例えば置換数1〜置換可能な数の、好ましくは置換数1〜3の置換基(i)を有する。具体的な置換基(i)としては、ハロゲン等があげられる。【００２６】
該置換基(a)、置換基(b)および置換基(i)の例示において、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、モノ低級アルキルアミノカルボニル、ジ低級アルキルアミノカルボニル、モノ低級アルキルアミノおよびジ低級アルキルアミノの低級アルキル部分は、前記低級アルコキシの低級アルキル部分と同義であり、低級アルカノイルおよび低級アルカノイルオキシの低級アルカノイル部分は、前記低級アルカノイルオキシの低級アルカノイル部分と同義であり、ハロゲンはヨウ素、臭素、塩素またはフッ素の各原子を意味する。ジ低級アルキルアミノおよびジ低級アルキルアミノカルボニルの2つの低級アルキル部分は同一でも異なっていてもよい。【００２７】
化合物(I)の薬理学的に許容される塩は、例えば薬理学的に許容される酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩等を包含する。
化合物(I)の薬理学的に許容される酸付加塩としては、例えば塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩等の有機酸塩があげられる。化合物(I)の薬理学的に許容される金属塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩等があげられる。化合物(I)の薬理学的に許容されるアンモニウム塩としては、例えばアンモニウム、テトラメチルアンモニウム等の塩があげられる。化合物(I)の薬理学的に許容される有機アミン付加塩としては、例えばモルホリン、ピペリジン等の付加塩があげられる。化合物(I)の薬理学的に許容されるアミノ酸付加塩としては、例えばグリシン、フェニルアラニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸等の付加塩があげられる。【００２８】
本発明で使用される化合物(I)の中には種々の立体異性体、位置異性体、互変異性体等が存在し得るものがある。本発明はこれらの可能な全ての異性体およびそれらの混合物を使用でき、その混合比についても任意の比率でよい。
次に、化合物(I)の製造法について説明する。
なお、以下に示した製造法において、定義した基が反応条件下変化するか、または方法を実施するのに不適切な場合、有機合成化学で常用される方法、例えば官能基の保護、脱保護等［例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第三版（Protective Groups in Organic Synthesis, third edition）、グリーン（T.W.Greene）著、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ・インコーポレイテッド（John Wiley & Sons Inc.）（1999年）等］の手段に付すことにより容易に製造を実施することができる。また、必要に応じて置換基導入等の反応工程の順序を変えることもできる。【００２９】
化合物(I)は、市販品として入手することが可能なものも含まれるが、例えば以下に示す製造法1〜4等によって得ることができる。
製造法1：
化合物(I)のうちnが1、-Q1-が-O-、Y及びZが酸素原子、X2がヒドロキシである化合物(Ia)は、コスマ（P. Kosma）らの方法［「カルボハイドレイト・リサーチ（Carbohydrate Research）」、2003年、第338巻、23号、p.2571-2589］またはそれに準じた方法により製造することができる。【００３０】
具体的には、以下に記載の方法等により製造することができる。
工程1-1：
化合物(Ia)は以下の工程により製造することができる。【００３１】
【化５】
2007119815.tif 000007
【００３２】
［式中、a、m、X1、Q2およびAはそれぞれ前記と同義であり、R1a、R3aおよびR4aはそれぞれ独立して、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルケニルオキシ、置換もしくは非置換のアラルキルオキシまたは置換もしくは非置換の複素環アルキルオキシを表し、R2aおよびR5aはそれぞれ独立して、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルカノイルオキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルケニルオキシ、置換もしくは非置換のアラルキルオキシまたは置換もしくは非置換の複素環アルキルオキシを表し、R2bおよびR5bはそれぞれ独立して、水素原子またはヒドロキシを表し、B1はモノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジノまたは-OPO(OR6)2（式中、R6は水素原子、低級アルキルまたはアリールを表す）を表す］
工程1-1-1
化合物(Ia)のうち、化合物(Ia-i)は溶媒中、必要により塩基または酸の存在下、化合物(IIIa)を1〜3当量の化合物(IVa)と通常-20〜250 ℃の間の温度、好ましくは0〜40 ℃の間の温度で、1〜72時間反応させることにより得ることができる。溶媒としては、例えばピリジン、ジメチルホルムアミド（DMF）、ジメチルアセタミド（DMA）、ジメチルスルホキシド（DMSO）、スルホラン、N-メチルピロリドン（NMP）等があげられる。塩基としては、例えば炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、トリアゾール等があげられ、酸としては例えばテトラゾール等があげられ、通常、それぞれ化合物(IIIa)に対して0.1〜3当量用いられる。
工程1-1-2
また、化合物(Ia)のうち、R1、R3およびR4がヒドロキシ、R2およびR5がそれぞれ独立して水素原子またはヒドロキシである化合物(Ia-ii)は、（1）溶媒中、塩基存在下、化合物(Ia-i)の加水分解反応を行うか、または（2）溶媒中、パラジウム、酸化白金、ロジウム、ラネーニッケル等の触媒で、水素雰囲気下、または適当な水素源の存在下、必要により好ましくは1〜5当量の添加剤の存在下、-20 ℃と用いる溶媒の沸点の間の温度で、5分間〜72時間、化合物(Ia-i)を加水素分解することにより得ることができる。これらの方法は、化合物(Ia-i)の構造、置換基等に応じて適当なものを選択して、実施することができる。【００３３】
（1）において、溶媒としては、含水溶媒があげられ、例えばメタノール、エタノール、ピリジン、DMF、DMA、DMSO、スルホラン、NMP、これらの混合溶媒等に水を添加して用いられる。
塩基としては、例えばアンモニア、トリエチルアミン、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等があげられ、通常、化合物(Ia-i)に対して0.3〜100当量用いられる。【００３４】
（2）において、溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、酢酸エチル、水等があげられる。
触媒は、化合物(Ia-i)に対し、好ましくは0.001〜10当量、より好ましくは0.01〜1当量用いられる。
添加剤としては、塩基または酸等があげられ、化合物(Ia-i)に対し、好ましくは0.01〜2当量用いられる。塩基としては、例えばアンモニア、ジエチルアミン等があげられ、酸としては、例えば酢酸等があげられる。
水素源としては、例えばギ酸、ギ酸アンモニウム、ギ酸ナトリウム、シクロヘキセノン等があげられ、これらは好ましくは2当量〜大過剰量用いられる。
工程1-2：
化合物(IVa)は、市販品としてまたは以下の方法により得ることができる。【００３５】
【化６】
2007119815.tif 000008
【００３６】
（式中、X1、AおよびB1はそれぞれ前記と同義である）
化合物(IVa)は、（1）化合物(Va)を無溶媒でまたは溶媒中、必要により好ましくは0.1〜10当量の適当な添加剤の存在下、好ましくは1当量から大過剰量の塩素化剤または臭素化剤で、-20〜150 ℃の間の温度で、5分間〜72時間処理し、（2）得られた化合物を好ましくは1〜10当量のH-B1（式中、B1は前記と同義である）と、無溶媒でまたは溶媒中、必要により好ましくは1〜10当量の塩基の存在下、-20〜150 ℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより得ることができる。【００３７】
（1）において、塩素化剤としては、例えば塩化チオニル、塩化オキザリル、オキシ塩化リン等があげられ、臭素化剤としては、例えば臭化チオニル、オキシ臭化リン等があげられる。
添加剤としては、例えばDMF、ピリジン等があげられる。
溶媒としては、例えばジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（THF）、1,2-ジメトキシエタン（DME）、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、ピリジン等があげられ、これらを単独でまたは混合して用いられる。【００３８】
（2）において、塩基としては、例えば炭酸カリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、カリウム tert-ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、N-メチルモルホリン、ピリジン、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]-7-ウンデセン（DBU）、4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）等があげられる。
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、THF、DME、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、ピリジン、水等があげられ、これらを単独でまたは混合して用いられる。【００３９】
また、別法として、化合物（IVa）は、化合物（Va）を好ましくは1〜5当量のH-B1（式中、B1は前記と同義である）と、溶媒中、好ましくは1〜5当量の縮合剤の存在下、必要により好ましくは1〜5当量の添加剤の存在下、-20 ℃と用いる溶媒の沸点の間の温度で、5分間〜72時間反応させることによっても得ることができる。
縮合剤としては、例えば1,3-ジシクロヘキサンカルボジイミド（DCC）、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド・塩酸塩（EDC）、カルボニルジイミダゾール（CDI）等があげられる。【００４０】
添加剤としては、例えば1-ヒドロキシベンズトリアゾール・一水和物（HOBt）等があげられる。
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、THF、DME、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、ピリジン、水等があげられ、これらを単独でまたは混合して用いられる。
工程1-3：
化合物(IIIa)は、市販品としてまたは以下の記載の方法により得ることができる。【００４１】
【化７】
2007119815.tif 000009
【００４２】
（式中、a、m、R1a、R2a、R3a、R4a、R5aおよびQ2はそれぞれ前記と同義であり、R7は低級アルキル、置換もしくは非置換のフェニルまたはベンジルを表す）
化合物(IIIa)は、化合物(VIa)または化合物(VIb)を、溶媒中、好ましくは2当量〜大過剰量の添加剤の存在下、0 ℃と用いる溶媒の沸点の間の温度で、5分間〜72時間処理することにより製造することができる。【００４３】
添加剤としては、例えば、塩酸などの酸、炭酸カリウム、水酸化リチウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、ナトリウムメトキシド等の塩基、もしくは、臭化トリメチルシリルおよびヨウ化トリメチルシリル等があげられる。これらの添加剤は、化合物の構造、置換基等に応じて適当なものを選択して、実施することができる。
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、THF、DME、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、ピリジン等があげられ、これら単独か、もしくはこれらに水を添加して用いられる。【００４４】
また、別法として、化合物（IIIa）は、化合物（VIa）または化合物（VIb）を溶媒中、パラジウム、酸化白金、ロジウム、ラネーニッケル等の触媒で、水素雰囲気下、または適当な水素源の存在下、必要により好ましくは1〜5当量の添加剤の存在下、-20 ℃と用いる溶媒の沸点の間の温度で、5分間〜72時間、加水素分解することにより得ることができる。これらの方法は、化合物の構造、置換基等に応じて適当なものを選択して、実施することができる。触媒は、化合物（VIa）または化合物（VIb）に対し、好ましくは0.001〜10当量、より好ましくは0.01〜1当量用いられる。【００４５】
水素源としては、例えばギ酸、ギ酸アンモニウム、ギ酸ナトリウム、シクロヘキセノン等があげられ、これらを好ましくは2当量〜大過剰量用いられる。
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、THF、DME、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、水等があげられ、これらを単独でまたは混合して用いられる。【００４６】
添加剤としては例えばアンモニア、ジエチルアミン等の塩基または酢酸等の酸があげられる。
工程1-4：
化合物(VIa)または化合物(VIb)は、市販品としてまたは以下に記載の方法により得ることができる。
例えば、化合物(VIa)または化合物(VIb)のうち、-Q2-が-O-もしくは-CH2-O-である化合物(VIa-i)または化合物(VIb-i)は以下の方法により得ることができる。【００４７】
【化８】
2007119815.tif 000010
【００４８】
［式中、Q3は-CH2-または単結合を表し、a、m、R1a、R2a、R3a、R4a、R5aおよびR7はそれぞれ前記と同義であり、B2はハロゲン、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジノまたは-OPO(OR6)2（式中、R6は前記と同義である）を表す］
化合物(VIa-i)または化合物(VIb-i)は、それぞれ溶媒中、塩基または酸の存在下、化合物(VII)を通常1〜10当量、より好ましくは1〜3当量の化合物(VIIIa)または化合物(VIIIb)と反応させることにより得ることができる。反応は、通常-20〜250 ℃の間の温度、好ましくは20〜40 ℃の間の温度で、1〜120時間行われる。溶媒としては、例えばジクロロメタン、酢酸エチル、DMF等があげられる。塩基としては、例えばトリエチルアミン、ピリジン、DMAP、トリアゾール等があげられ、酸としては例えばテトラゾール等があげられ、通常、それぞれ化合物(VII)に対して0.1〜3当量用いられる。【００４９】
また、化合物(VIa-i)または化合物(VIb-i)は、それぞれ溶媒中、添加剤の存在下、化合物(VII)を通常1〜10当量、より好ましくは1〜3当量の化合物(IXa)または化合物(IXb)と反応させ、続いて例えば通常1〜10当量、より好ましくは1〜3当量の過酸化水素水等の酸化剤で処理することによっても得ることができる。化合物(VII)と化合物(IXa)または化合物(IXb)との反応は、通常-20〜250 ℃の間の温度、好ましくは20〜40 ℃の間の温度で、1〜120時間行われ、酸化剤での処理は通常-20〜50 ℃の間の温度、好ましくは0〜40 ℃の間の温度で、1〜120時間行われる。【００５０】
これらの方法は、化合物(VII)の構造、置換基等に応じて適当なものを選択して、実施することができる。
溶媒としては、例えばジクロロメタン、酢酸エチル、DMF等があげられる。
添加剤としては、例えばトリエチルアミン、ピリジン、DMAP、トリアゾール、テトラゾール等があげられ、通常、化合物(VII)に対して0.1〜3当量用いられる。【００５１】
化合物(VIIIa)または化合物(VIIIb)および化合物(IXa)または化合物(IXb)は、市販品としてまたはタング（C. C. Tang）らの方法［「シンセティック・コミュニケーション（Synthetic Communication）」、1998年、第28巻、第15号、p.2769］もしくはそれに準じた方法により得ることができる。
工程1-5：
また、化合物(VIa)のうち-Q2-が-CH2-である化合物(VIa-ii)は、フィールド（R.A.Field）らの方法［「テトラへドロン・レターズ（Tetrahedron Letters）」、2001年、第42巻、p.2231-2234］またはそれに準じた方法により得ることができる。
具体的には以下の方法により得ることができる。【００５２】
【化９】
2007119815.tif 000011
【００５３】
（式中、a、m、R1a、R2a、R3a、R4a、R5aおよびR7はそれぞれ前記と同義であり、B3はヨウ素、臭素等のハロゲン、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、メタンスルホニルオキシ、p-トルエンスルホニルオキシ等の脱離基を表す）
化合物(VIa-ii)は、（1）化合物(VIIa)を溶媒中、必要に応じ触媒量〜10当量の添加剤の存在下、-20〜150 ℃の間の温度で、1当量〜大過剰量のハロゲン化剤または1〜10当量のスルホニル化剤で、5分間〜72時間処理することにより化合物(XI)を得、（2）この化合物(XI)を-20〜150 ℃の間の温度で、溶媒量の化合物(XII)で5分間〜72時間処理し、アルブゾフ（Arbuzov）反応に付すことにより得ることができる。
（1）において、ハロゲン化剤としては、例えば臭素、ヨウ素、臭酸等があげられ、スルホニル化剤としては、例えば無水トリフルオロメタンスルホン酸、無水メタンスルホン酸、塩化メタンスルホニル、塩化p-トルエンスルホニル等があげられる。【００５４】
添加剤としては、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジンなどの塩基、トリフェニルホスフィン等があげられる。
溶媒としては、例えばジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、THF、DME、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、ピリジン等があげられ、これらを単独でまたは混合して用いられる。【００５５】
化合物(XII)は、市販品として得ることができる。
化合物(VIIa)のうち、例えばmが0である化合物(VIIa-i)はヘッド（M. J. Hadd）らの方法［「ジャーナル・オブ・オルガニック・ケミストリー（Journal of Organic Chemistry）」、1997年、第62巻、p.6961-6967］で、またmが1である化合物(VIIa-ii)は、村井（A. Murai）らの方法［「テトラへドロン（Tetrahedron）」、1998年、第54巻、p.21-44］で合成することができる。
工程1-6：
化合物(VIa)のうち-Q2-が単結合である化合物(VIa-iii)は、バッセラ（A.Vasella）らの方法［「ヘルベチカ・ケミカ・アクタ（Helvetica Chimica Acta）」、1986年、第69巻、p.25-34］またはそれに準じた方法により得ることができる。
具体的には以下の方法により得ることができる。【００５６】
【化１０】
2007119815.tif 000012
【００５７】
（式中、a、m、R1a、R2a、R3a、R4a、R5aおよびR7はそれぞれ前記と同義であり、B4は低級アルカノイルオキシを表す）
化合物(Via-iii)は、（1）化合物(VIIb)を溶媒中、好ましくは1〜10当量のアシル化剤で、必要に応じ好ましくは触媒量〜10当量の塩基の存在下、-20〜150 ℃の間の温度で、5分間〜72時間処理することにより化合物(XIII)を得、（2）化合物(XIII)を溶媒中、0.1〜10当量の化合物(XII)と必要に応じ好ましくは触媒量〜10当量の添加剤の存在下、-20〜150 ℃の間の温度で、5分間〜72時間処理することにより得ることができる。【００５８】
（1）において、アシル化剤としては、例えば塩化アセチル、無水酢酸等があげられる。塩基としては、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等があげられる。
（1）および（2）において、溶媒としては、例えばジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、THF、DME、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、ピリジン等があげられ、これらを単独でまたは混合して用いられる。【００５９】
（2）において、添加剤としては、例えばトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルエーテル等があげられ、通常、化合物(XIII)に対して0.1〜3当量用いられる。
化合物(VIIb)は市販品として得ることができる。mおよびaが1である化合物(VIIb-i)は、ソード（R. K. Sood）らの方法［「カナディアン・ジャーナル・オブ・ケミストリー（Canadian Journal of Chemistry）」、1994年、第72巻、p.247-251］、バーティル（S. Bertil）らの方法［「カルボハイドレート・リサーチ（Carbohydrate Research）」、1978年、第67巻、p.263-236］、マニット（P. Manitto）らの方法［「テトラヘドロン・レターズ（Tetrahedron Letters）」、1987年、第28巻、第42号、p.5047-5048］、もしくはアケピロッティ（Akepilotti）らの方法［「アクタ・ケミカ・スカンジナビア（Acta Chemica Scandinavica）」、1972年、第26巻、p.4143-4146］、またはそれらに準じた方法により得ることができ、mが2、aが1である化合物(VIIb-ii)は、岸らの方法［「ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティ（Journal of American Chemical Society）」、1996年、第118巻、第34号、p.7946-7968］もしくはボーン（J.H. van Boom）らの方法［「オルガニック・レターズ（Organic Letters）」、2000年、第2巻、第9号、p.1275-1277］、またはそれらに準じた方法により得ることができる。
製造法2：
化合物(I)のうちnが1、-Q1-が-CH2-、Q2、YおよびZが酸素原子である化合物(Ib)は、例えば以下に記載の方法により製造することができる。【００６０】
【化１１】
2007119815.tif 000013
【００６１】
（式中、a、m、R1a、R2a、R3a、R4a、R5a、X1、X2およびAはそれぞれ前記と同義であり、R9は置換もしくは非置換のベンジルを表す）
工程2-1：
化合物(XVII)は、ミオスコフスキ−（C. Mioskowski）らの方法［「ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Journal of Organic Chemistry）」、2002年、第67巻、第1号、p.146-153］またはそれに準じた方法により得ることができる。具体的には、化合物(XV)を、例えば溶媒中、好ましくは1〜10当量のホスフィン化合物および好ましくは1〜10当量のアゾ化合物の存在下、または1〜10当量のホスホラン化合物の存在下で、化合物(XVI)と-78 ℃と用いる溶媒の沸点との間の温度で、5分間〜72時間光延反応に付すことにより得ることができる。これらの方法は、化合物(XV)の構造、置換基等に応じて適当なものを選択して、実施することができる。【００６２】
溶媒としては、例えばジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、THF、DME、ジオキサン、DMF、DMA、NMP、ピリジン等があげられ、これらを単独でまたは混合して用いられる。
アゾ化合物としては、ジエチルアゾジカルボキシレート（DEAD）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（DIAD）、N,N,N’,N’-テトラメチルアザジカルボキサミド、1,1’-(アザジカルボニル)ジピペラジン、N,N,N’,N’-テトライソプロピルアザジカルボキサミド等があげられ、通常、化合物(XV)に対し、1〜10当量用いられる。
ホスフィン化合物としては、トリフェニルホスフィン、トリブチルホスフィン等があげられ、通常、化合物(XV)に対し、1〜10当量用いられる。
また、ホスホラン化合物としては、シアノメチレントリブチルホスホラン、シアノメチレントリメチルホスホラン等の角田試薬があげられ、通常、化合物(XV)に対し、1〜10当量用いられる。【００６３】
化合物(XV)は、例えば、R9がベンジルである化合物(XV-i)は、ミオスコフスキー（C. Mioskowski）らの方法［「ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Journal of Organic Chemistry）」、1995年、第60巻、p.2946-2947］またはそれに準じた方法により得ることができる。
工程2-2：
化合物(XVIII)は、ミオスコフスキー(C. Mioskowski)らの方法［「ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Journal of Organic Chemistry）」、1995年、第60巻、p.2946-2947］またはそれに準じた方法により得ることができる。
具体的には、化合物(XVII)を、（1）溶媒中、3級アミンで処理するか、または（2）溶媒中、パラジウム、酸化白金、ロジウム、ラネーニッケル等の触媒で、水素雰囲気下、または適当な水素源の存在下、必要により好ましくは1〜5当量の添加剤の存在下、-20 ℃と用いる溶媒の沸点の間の温度で、5分間〜72時間、加水素分解することにより得ることができる。これらの方法は、化合物の構造、置換基等に応じて適当なものを選択して、実施することができる。【００６４】
（1）において、反応は通常-20〜250 ℃の間の温度、好ましくは70〜120 ℃の間の温度で、1〜24時間行われる。溶媒としては、トルエン、DMF、ジクロロエタン等があげられる。3級アミンとしては、例えばキヌクリジン、ジアザビシクロ[2,2,2]オクタン、N-メチルモルホリン等があげられ、通常、化合物(XVII)に対し1当量用いられる。
（2）において、溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、酢酸エチル、水等があげられる。水素源としては、例えばギ酸、ギ酸アンモニウム、ギ酸ナトリウム、シクロヘキセノン等があげられ、これらを好ましくは2当量〜大過剰量用いられる。触媒は、化合物(XVII)に対し、好ましくは0.001〜10当量、より好ましくは0.01〜1当量用いられる。添加剤としては、アンモニア、ジエチルアミン、酢酸等があげられ、化合物(XVII)に対し、好ましくは0.01〜2当量用いられる。
工程2-3：
化合物(XIX)は、化合物(XVIII)を、光延らの方法［「シンセシス（Synthesis）」、1981年、p.1］、もしくは工程2-1と同様な条件で、化合物(VIIb)と反応させることにより得ることができる。
工程2-4：
化合物(Ib)は、化合物(XIX)を、工程1-1-2と同様な条件で、処理することにより、得ることができる。
製造法3：
化合物(XIX)は、例えば以下の方法により製造することもできる。【００６５】
【化１２】
2007119815.tif 000014
【００６６】
（式中、a、m、R1a、R2a、R3a、R4a、R5a、R9、X1、X2およびAはそれぞれ前記と同義である）
工程3-1：
化合物(XX)は、化合物(XV)を、工程2-1と同様な条件で化合物(VIIb)と反応させることにより得ることができる。
工程3-2：
化合物(XXI)は、化合物(XX)を、工程2-2と同様な条件で反応させることにより得ることができる。  
工程3-3：
化合物(XIX)は、化合物(XXI)を、工程2-1と同様な条件で、化合物(XVI)と反応させることにより得ることができる。【００６７】
化合物(I)、特に化合物16［アデノシン=5’-(D-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスフェート：ADP-D-glycero-β-D-mannoheptose］等は、以下の培養法により製造することもできる。
製造法4：
化合物(I)、特に化合物16は、ADP-D-glycero-β-D-mannoheptose生産能を有する微生物を培地に培養し、培養物中に生成、蓄積させ、該培養物から採取することによって製造される。ADP-D-glycero-β-D-mannoheptose生産能を有する微生物としては、グラム陰性細菌に属し、ADP-D-glycero-β-D-mannoheptose生産能を有する微生物であればいずれの微生物でも用いることができる。またこれらの微生物を人工的変異方法、例えば紫外線照射、X線照射、変異誘起剤処理等によって変異させた変異株あるいは自然的に変異した変異株でもADP-D-glycero-β-D-mannoheptose生産能を有するものであれば本発明に用いることができる。
例えば、ADP-D-glycero-β-D-mannoheptose生産能を有する微生物としては、本発明者らが土壌より新たに分離したMassilia属に属するグラム陰性桿菌Massilia sp. KY13101を挙げることができる。
本発明のADP-D-glycero-β-D-mannoheptose生産蓄積菌の培養に際しては、通常の微生物の培養法が適用される。培地としては、微生物の資化し得る炭素源、窒素源、無機物および必要な生育、生産促進物質等を程よく含有する培地であれば合成培地、天然培地いずれでも使用できる。【００６８】
炭素源としては、例えばグルコース、澱粉、デキストリン、マンノース、フルクトース、シュクロース、ラクトース、キシロース、アラビノース、マンニトール、糖蜜等が単独または組合せて用いられる。さらに、菌の資化能によっては炭化水素、アルコール類、有機酸等も用いられる。
窒素源としては、例えば塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーン・スチープ・リカー、大豆粉、カザミノ酸等が単独でまたは組合せて用いられる。【００６９】
そのほか、必要に応じて塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、リン酸二水素カリウム、硫酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅等の無機塩類が加えることができる。
さらに、使用菌の生育やADP-D-glycero-β-D-mannoheptoseの生産蓄積を促進する微量成分を適当に添加することができる。
培養法としては、液体培養法、特に深部攪拌培養法が適している。培養は、16〜37 ℃、好ましくは25〜32 ℃の温度で、pH 4〜10、好ましくはpH 6〜8で行われ、通常1〜7日で完了し、ADP-D-glycero-β-D-mannoheptoseが培養液中および菌体中に生成蓄積される。培地のpH調整にはアンモニア水や炭酸アンモニウム溶液等が用いられる。培養物中の生成量が最大に達したときに培養を停止する。【００７０】
培養物中に蓄積したADP-D-glycero-β-D-mannoheptoseを培養物から単離精製するに際しては、通常の微生物代謝産物を培養物から単離精製するために常用される方法に従って行われる。例えば、培養物をエタノール、2-プロパノール等の溶剤で抽出する。ついで、ポリスチレン系吸着剤、ODSカラムクロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相高速液体クロマトグラフィー等に順次付すことにより、ADP-D-glycero-β-D-mannoheptoseが得られる。
培養物中に蓄積したADP-D-glycero-β-D-mannoheptoseの培養物からの単離精製は、通常の微生物代謝産物を培養物から単離精製するために常用される方法に従って行われる。例えば、培養物を濾過により培養濾液と菌体とに分け、菌体からクロロホルム、アセトン、メタノール、エタノール等の溶剤で菌体成分を抽出する。ついで、抽出液と培養濾液とを併せて、ポリスチレン系吸着剤、例えばダイヤイオンHP-20（三菱化学社製）等に通塔して活性成分を吸着させ、ついで酢酸水溶液、酢酸アンモニウム水溶液、メタノール、エタノール、アセトン等で溶出する。溶出液を濃縮し、オクタデシル基結合型シリカゲル（ODS）によるカラムクロマトグラフィー、順相または逆相の高速液体クロマトグラフィー、シリカゲル等によるカラムクロマトグラフィー等により、ADP-D-glycero-β-D-mannoheptoseを得る。【００７１】
以下に、ADP-D-glycero-β-D-mannoheptose生産蓄積能を有する微生物として本発明者らが土壌より新たに分離したプロテオバクテリア綱ベータ亜綱オキサロバクターグループMassilia属に属するグラム陰性桿菌Massilia sp. KY13101株の菌学的特徴および同定の準拠を示す。
(A) 形態的性質
普通栄養寒天培地および普通栄養液体培地で生育したKY13101株の形態学的特徴を以下に示す。【００７２】
(1) 細胞の形；桿状
大きさ；0.8〜1.3μm x 1.4〜3.1μm
(2) 細胞の多形性；無
(3) 運動性；有
(4) 胞子；無
(B)  培養的性質
(1) 肉汁寒天平板培養
1. 生育の様相；良好に生育し、粘性のコロニーを形成する。30℃で3日培養時のコロニー直径は約8 mm。【００７３】
2. 色；クリーム色
3. 拡散性色素；無
(2) 肉汁液体培養
1. 表面生育；無
2. 濁度；有
3. 菌体の凝集；有
(3) リトマスミルク
1. 反応；アルカリ化
2. 凝固；無
3. 液化；有
(C) 生理学的性質
(1) グラム染色性；陰性
(2) 硝酸塩の還元；亜硝酸塩へ還元する
(3) ＭＲテスト；陰性
(4) ＶＰテスト；陰性
(5) インドールの生成；陰性
(6) 硫化水素の生成；陰性
(7) デンプンの加水分解；陽性
(8) クエン酸の利用；弱陽性
(9) 無機窒素源の利用
1. 硝酸塩；陽性
2. アンモニア；陽性
(10) 色素の生成；水溶性色素は産生しない
(11) ウレアーゼ；陰性
(12) オキシダーゼ；陽性
(13) カタラーゼ；陽性
(14) β-ガラクトシダーゼ；陰性
(15) 生育の範囲
1. ｐＨ；6 〜 8
2. 温度；13 〜 42℃
(16) 酸素に対する態度；好気性
(17) Ｏ−Ｆテスト；酸化【００７４】
(18) 糖類からの酸生成の有無
1. 酸の生成が見られる糖類；D-アラビノース, L-アラビノース, D-キシロース, グルコース, フルクトース, マンノース, アミグダリン, セロビオース, マルトース, ラクトース, メリビオース, サリシン, トレハロース, スターチ, グリコーゲン
2. 酸の生成が見られない糖類；グリセロール, エリスリトール, リボース, L-キシロース, アドニトール, β-メチル-D-キシロシド, ガラクトース, ソルボース, ズルシトール, イノシトール, マンニトール, ソルビトール, α-メチル-D-マンノシド, α-メチル-D-グルコシド, N-アセチル−グルコサミン, アルブチン, サリシン, イヌリン, メレチトース, ラフィノース, キシリトール, D-ツラノース, D-リキソース, D-タガトース, L-フコース, D-アラビトール, L-アラビトール
(19) エスクリンの分解；陽性
(20) アルギニンの分解；陰性
(21) 塩化ナトリウムの耐性；４％NaCl耐性なし
(22) リジンの脱炭酸反応；陰性
(23) オルニチンの脱炭酸反応；陰性
(D) 化学的性質
(1) イソプレノイド・キノン；ユビキノン−８
(2) DNAのG+C含量；65.4 mol%
(3) 菌体脂質
1. リン脂質；主要成分：フォスファチヂルエタノールアミン
副成分：  フォスファチヂルグリセロール、
フォスファチヂルコリン、カルジオリピン
2. 脂肪酸；主成分：C16:1  36%,
C16:0  33%,
C18:1   8%【００７５】
(E) その他の性質
KY13101株の16SリボゾーマルDNA（16S rDNA）の部分塩基配列（約1.5kb）をPCRで増幅することにより配列を決定し、既知の細菌の16S rRNAまたは16S rDNA配列を用いて、配列アライメントプログラムClustal Wを用いて配列を多重整列し、Phylip version3.6プログラムを用いて近隣結合法により分子系統解析を行った。その結果、KY13101株はプロテオバクテリア綱ベータ亜綱オキサロバクターグループに属し、Massilia属に含まれた。16S rDNA部分配列を用いた系統解析の結果を図1に示す。
本細菌株は、グラム陰性好気性の運動性桿菌であり、16SリボゾーマルDNA分子系統解析の結果、プロテオバクテリア綱ベータ亜綱オキサロバクターグループに属し、Massilia属に位置した。Massilia属の中ではMassilia timonaeにもっとも近縁であった。Massilia timonaeは臨床サンプル由来の運動性をもつ好気性桿菌である。KY13101株とMassilia timonae基準株との間の16S rDNA配列類似度は96%（1361/1405 bp）であり、同種とするには低い類似度しか示さなかった。また、Massilia timonaeは臨床由来の菌であるがKY13101株は土壌由来である。生息域の違い、16S rDNA塩基配列の類似度が低いこと、等から両者は異なる種に分類されると判断した。【００７６】
以上の結果より、KY13101株は、プロテオバクテリア綱ベータ亜綱オキサロバクターグループMassilia属に属する新種のグラム陰性桿菌Massilia sp.と同定した。KY13101株は独立行政法人製品評価技術基盤機構  特許微生物寄託センター（日本国千葉県木更津市かずさ鎌足2-5-8）に、受託番号NITE BP-348として2007年3月30日付けで寄託した。【００７７】
化合物(I)におけるA、X1、X2またはAに含まれる官能基の変換は、公知の方法［例えば、コンプリヘンシブ・オーガニック・トランスフォーメーションズ第2版（Comprehensive Organic Transformations 2nd edition）、R. C. ラロック（Larock）著、Vch Verlagsgesellschaft Mbh（1999年）等に記載の方法］またはそれに準じた方法により行うこともできる。
上記各製造法における中間体および目的化合物は、有機合成化学で常用される精製法、例えば、濾過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等に付して単離精製することができる。また、中間体においては特に精製することなく次の反応に供することも可能である。
化合物(I)の塩を取得したいとき、化合物(I)が塩の形で得られる場合にはそのまま精製すればよく、また遊離の形で得られる場合には、通常の方法により、すなわち適当な溶媒に溶解または懸濁し、所望の酸または塩基を添加し塩を形成させ単離精製すればよい。
また、化合物(I)およびその薬理学的に許容される塩は、水または各種溶媒との付加物の形で存在することもあるが、これら付加物も本発明に抱含される。
以下、表1〜表4に本発明のTLR9作動薬、免疫促進剤等に用いられる化合物(I)の具体例を示すが、本発明の化合物はこれらに限定されることはない。なお各表中のAcはアセチルを表し、Meはメチルを表す。【００７８】
【表１】
2007119815.tif 000015
【００７９】
【表２】
2007119815.tif 000016
【００８０】
【表３】
2007119815.tif 000017
【００８１】
【表４】
2007119815.tif 000018
【００８２】
次に、代表的な化合物(I)の免疫促進活性について、試験例により具体的に説明する。
試験例1：NF-κBプロモーター依存的な転写活性の促進効果
NF-κBの活性を定量する評価系を構築する目的で、以下のような安定形質転換細胞株を用いた。細胞に導入したNF-κBルシフェラーゼレポータープラスミドpIF-luc（ハイグロマイシン耐性遺伝子発現ユニット含有）は特開2000-169479に記載の方法により作成した。該プラスミドをヒトB細胞株Namalwa（KJM-1株）［「サイトテクノロジー（Cytotechnology）」、1988年、第1巻、p.151］に導入した後、0.3 mg/mLのハイグロマイシンBを添加して培養することによってハイグロマイシン耐性細胞を選択した。該ハイグロマイシン耐性細胞の中からTNF-α（10 ng/mL）刺激によってルシフェラーゼ活性の増大が確認された細胞株（以下、BGERKB5細胞という）を以下の試験に用いた。【００８３】
BGERKB5細胞を利用した、NF-κBの活性促進試験は以下のようにして行うことができる。ただし、これは一例でありこの方法に限定されるわけではない。
下記の組成を有するRPMI1640・ITPSG培地を用いて、該BGERKB5細胞を1×106細胞/mLの濃度になるように懸濁した（以下、BGERKB5細胞の懸濁液という）。化合物は、リン酸バッファー（pH5）に溶解し、RPMI1640・ITPSG培地で所望の濃度に希釈することにより、水溶液として調製した。各試験濃度を有する化合物の水溶液（10μL）の入った96穴プレートに、該BGERKB5細胞の懸濁液を90μLずつ添加し、CO2インキュベーター中、37℃で5時間培養した。
＜RPMI1640・ITPSG培地の組成＞
RPMI1640培地（日水製薬社製）に、該培地に対してそれぞれ下記の濃度または比率で添加した（以下、該培地をRPMI1640・ITPSG培地という）。【００８４】
7.5%炭酸水素ナトリウム（インビトロジェン社製）：1/40容量
200 mmol/L L-グルタミン溶液（ナカライテスク社製）：3%
ペニシリン・ストレプトマイシン溶液（インビトロジェン社製、5000 units/mL ペニシリン、5000μg/mL ストレプトマイシン）：0.5%
N-2-ヒドロキシエチルピペラジン-N’-2-エタンスルホン酸（HEPES、インビトロジェン社製）：10 mmol/L
インシュリン（シグマ社製）：3μg/mL
トランスフェリン（シグマ社製）：5μg/mL
ピルビン酸ナトリウム（ナカライテスク社製）：0.55 mg/mL
亜セレン酸（ナカライテスク社製）：17 ng/mL
ガラクトース（ナカライテスク社製）：1 mg/mL
該96穴プレートに、Steady-Glo（プロメガ社製）を100 μL添加し、各穴におけるルシフェラーゼ活性値（RLU）を、マルチラベルカウンターARVO（パーキンエルマー社製）を用いて測定した。その結果を図2および3に示す。
図2、3によれば、例えば化合物1、2、10、12、14、16、23および30等で、ルシフェラーゼ活性の増大が確認された。つまり、化合物(I)はNF-κBの活性化を促進し、明らかな免疫促進作用を有することが判明した。【００８５】
試験例2：CD40、CD80およびCD86の発現亢進効果
リンパ球活性化に重要な副刺激分子であるCD40、CD80およびCD86等のフローサイトメトリー法は以下のように行うことができる。ただし、これは一例でありこの方法に限定されるわけではない。
試験例１に記載の方法に準じて調製した試験化合物の水溶液10μL（終濃度50 nmol/L）の入った96穴プレートに、試験例1で得られた1.1 x 106細胞/mLの濃度を有するBGERKB5細胞の懸濁液を90μLずつ添加し、CO2インキュベーター中、37 ℃で12時間培養した（試験化合物群）。対照試験として、試験化合物を添加しない対照群も設定した。
以下の操作は4 ℃以下で行った。1%のウシ血清アルブミン（フラクションV、シグマ社製）および0.05%のアジ化ナトリウムを含むリン酸緩衝溶液（PBS）200μLを用いて、該細胞を2回洗浄し、同緩衝溶液100μLで置換した。該細胞に、フィコエリスリン標識マウス抗ヒトCD40モノクローナル抗体溶液（BDバイオサイエンス社製）、フィコエリスリン標識マウス抗ヒトCD80モノクローナル抗体溶液（BDバイオサイエンス社製）またはフィコエリスリン標識マウス抗ヒトCD86モノクローナル抗体溶液（BDバイオサイエンス社製）を2μL添加し、攪拌した後、暗所に50分間静置した。【００８６】
1%のウシ血清アルブミン（フラクションV、シグマ社製）および0.05%のアジ化ナトリウムを含むリン酸緩衝溶液（PBS）200μLで該細胞を2回洗浄し、同緩衝液500μLで置換した。
フローサイトメーターとしてEPICS XL-MCL（ベックマン コールター社製、励起波長488 nmアルゴンレーザー）を用いて、細胞数を測定し、陽性細胞率を算出した。測定用ソフトウェアはシステム2バージョン3.0（ベックマン コールター社製）を用いた。陽性細胞率の結果を表5に示す。【００８７】
【表５】
2007119815.tif 000019
表5によれば、例えば化合物16等はCD40、CD80およびCD86のいずれにおいても陽性細胞率の向上がみられた。つまり、化合物(I)はCD40、CD80およびCD86の発現を亢進し、明らかな免疫促進作用を有することが判明した。【００８８】
試験例3：IP-10産生誘導効果
IP-10の酵素標識免疫吸着（ELISA）法は以下のように行うことができる。ただし、これは一例でありこの方法に限定されるわけではない。
試験例1で得られた1.1 x 106細胞/mLの濃度を有するBGERKB5細胞の懸濁液（3 mL）に、試験化合物を終濃度50 nmol/Lになるように添加し、CO2インキュベーター中、37 ℃で48時間培養した（試験化合物群）。対照試験として、試験化合物を添加しない対照群も設定した。
BGERKB5細胞が産生したIP-10の量の測定は、イムノアッセイキット（バイオソース インターナショナル社製）を用いて行った。キットに添付されている標品を用いて検量線を作成し、培養上清中のIP-10量を測定した。
その結果、IP-10の産生量は対照群では検出限界以下であったのに対し、化合物16では1441 pg/mL、化合物30では821 pg/mLであった。
つまり、化合物(I)はIP-10の産生を誘導し、明らかに免疫促進作用を有することが判明した。【００８９】
試験例4：siRNAを用いたTLR9のノックダウンによる免疫促進作用の抑制
BGERKB5細胞を利用した、siRNAを用いたTLR9のノックダウン試験は以下のようにして行うことができる。ただし、これは一例でありこの方法に限定されるわけではない。
試験例1に記載の方法に準じて得られた4×105細胞/mLのBGERKB5細胞の懸濁液0.5 mLを24穴プレートの6穴に播き（細胞総数1.2×106細胞）、CO2インキュベーター中、37 ℃で24時間培養した。
TLR9に対するsiRNA（アンビオン社製pre-designed siRNA, ID#6055、Cat. 16704、Lot. 047951si）を各穴100 pmolずつ、リポフェクタミン2000（インビトロジェン社製）を用いて導入した。【００９０】
siRNA導入後、24時間で培地を交換し、さらに48時間培養した後、得られた細胞を滅菌チューブに回収した。RPMI1640・ITPSG培地を用いて、該細胞を1×106細胞/mLの濃度になるように懸濁した（TLR9 kd群）。また、「TLR9 kd群」と同様にしてsiRNAを含まない「Mock群」を設定した。
該TLR9 kd群またはMock群の懸濁液（3 mL）に、試験例１に記載の方法に準じて調製した試験化合物の水溶液を、それぞれ添加した（終濃度50 nmol/L）（試験化合物群）。また、対照試験として、試験化合物を添加しない溶媒対照群をそれぞれ設定した。
各群（4群）の細胞懸濁液3 mLのうち400μLを100μLずつ4連で96穴プレートにそれぞれ播種し、5時間培養した。Steady−Glo（プロメガ社製）を100 μL添加し、各穴におけるルシフェラーゼ活性値（RLU）を、マルチラベルカウンターARVO（パーキンエルマー社製）を用いて測定した。その結果を表6に示す。表中、MockはsiRNA非添加の細胞、TLR9 kdはTLR9をターゲットとするsiRNAを添加した細胞を意味する。【００９１】
【表６】
2007119815.tif 000020
表6によれば、例えば化合物16等が有するNF-κB活性能は、TLR9をノックダウンすることにより減弱した。つまり、化合物(I)が有するNF-κB活性能はTLR9を介しており、化合物(I)が有する免疫促進作用は明らかにTLR9を介していることが判明した。【００９２】
試験例5：TLR関連遺伝子群についての発現変動の確認
また、試験例4で残った各群の細胞懸濁液2.6 mLについても、それぞれ15 mLの滅菌チューブ中で5時間培養した後、細胞を回収し、この時のglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)、luciferase (NF-κB promoter-derived) (NF-κB-LUC)、interleukin 12B (IL12B)、CD80 antigen (CD80)の各遺伝子の発現量を、SYBR-Greenを用いた定量RT-PCR法［「バイオテクニックス（BioTechniques）」、1997年、第22巻、p.130-131, p.134-138参照］により測定した。
つまり、上記の試験で残った各群の細胞懸濁液について、それぞれ以下の操作を行った。
各群の1 x 106細胞/mLの細胞懸濁液（2.6 mL：細胞総数2.6×106細胞）をhimac CF702遠心機（日立工機社製）を用いて、4 ℃で800 rpm、10分間遠心し、ピペットマンを用いて上清を取り除いた後、PBS（2 mL）を加えた。得られた細胞懸濁液を、さらにhimac CF702遠心機（日立工機社製）を用いて4 ℃で800 rpm、10分間遠心し、ピペットマンを用いて上清を取り除き、細胞を得た。【００９３】
回収した細胞から、RNeasy Mini Kit（登録商標：キアゲン社製）を用い、キット添付のマニュアルに従ってtotal RNAを抽出した。得られたtotal RNAを鋳型として、SuperScript First-strand Synthesis System for RT-PCR（インビトロジェン社製）を用い、キット添付のマニュアルに従い、以下のようにしてcDNAを合成した。
Total RNA（5 μg）に、10 mmol/L dNTPs混合溶液（1.0 μL）および0.5 μg/μL Oligo(dT)12−18プライマー(1.0 μL)を添加し、ピロ炭酸ジエチル（DEPC）の水溶液を用いて、全量が10.0 μLとなるように希釈した。得られた溶液を65 ℃で5分間加熱した後、氷上で急冷し、1分間以上静置して変性させた。得られたmRNA溶液に、10×RT buffer（2.0 μL）、25 mmol/L塩化マグネシウム（4.0 μL）、0.1 mol/L DTT（2.0 μL）およびRNaseOUT（1.0 μL）を添加し、全量を19.0 μLとし、42 ℃で2分間保温した。さらにSuperScript II Reverse Transcriptase（インビトロジェン社製）1.0 μL (50 U) を加えて、42 ℃で50分間の逆転写反応を行い、70 ℃で15分間加熱して酵素を失活させた。得られた混合物にRNaseH（1.0 μL）を添加して37 ℃で20分間反応した後、TEバッファー（pH 8.0）（アンビオン社製）を加えて全量を200 μLとした。リアルタイムPCRの反応には、該溶液を5倍希釈して用いた。【００９４】
上記で調製したcDNA（10.0 μL：total RNA量として50 ngに相当）に、下記の配列からなるフォワードプライマー（FW）およびリバースプライマー（RV）のセット（つまり、配列番号1と2、配列番号3と4、配列番号5と6および配列番号7と8のセット：いずれもプロフリゴ社製）をそれぞれ終濃度が300 nmol/Lになるように加えた。
遺伝子名： glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)
FW： 5’−ACCAGGGCTGCTTTTAACTCT−3’（配列番号1）
RV： 5’−TCATGAGTCCTTCCACGATAC−3’（配列番号2）
遺伝子名： luciferase (NF−κB promoter−derived) (NF-κB-LUC)
FW： 5’−CCTATGATTATGTCCGGTTATG−3’（配列番号3）
RV： 5’−GGATCTCTCTGATTTTTCTTGC−3’（配列番号4）
遺伝子名： interleukin 12B (IL12B)
FW： 5’−ATAAAGCAATTTAGGGCCACTTAC−3’（配列番号5）
RV： 5’−TGACAATTTCATGTCCTTAGCC−3’（配列番号6）
遺伝子名： CD80 antigen (CD80)
FW： 5’−TAGAAGGATAATTTGCTCAACCTC−3’（配列番号7）
RV： 5’−GCTACCTTCAGATCTTTTCAGC−3’（配列番号8）
さらに、得られた溶液に、10×R-PCR buffer Mg2+ free（2.0 μL：タカラバイオ社製）、250 mmol/L Mg2+溶液（0.2 μL）、10 mmol/L dNTPs（0.6 μL）、ExTaq-PCR（0.2 μL：タカラバイオ社製）、SYBR Green I（1.0 μL：BMA社製、製品原液を2,500倍希釈したもの）および滅菌水を加えて、全量を20.0 μLとした。得られた溶液を94 ℃で5分間加熱した後、94 ℃で30秒間、65 ℃で30秒間および72 ℃で30秒間の組み合わせからなる反応を45サイクルで実施した。増幅産物にインターカレートしたSYBR Green Iが発する蛍光強度をABI PRISM7700（PEアプライドバイオシステムズ社製）を用いて測定し、同機器付属のソフトウエアSequence detector ver.1.7aによりデータ解析を行った。【００９５】
試験化合物添加時の各遺伝子のmRNA発現量の変動は、試験化合物群のサンプルと溶媒対照群のサンプルとの比率で示した。すなわち、ABI PRISM7700 で測定したシグナル値が500に達した時のサイクル数をCtとし、試験化合物群と溶媒対照群とのCt値の差（ΔCt）を求め、1サイクルの差を2倍の差として、下記の計算式を用いて変動値を「相対的な発現量」として算出した。尚、上記反応によって得られたシグナルが目的の増幅断片であるかどうかは、反応終了後の液をアガロースゲル電気泳動に供し、主な増幅断片のサイズによって判断した。【００９６】
【数１】
2007119815.tif 000021
さらに、GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）を内部標準として、つまりGAPDHを1として試験化合物群での各遺伝子のmRNA発現量を補正した後、「溶媒対照群における各遺伝子のmRNA発現量」に対する、「試験化合物群における各遺伝子のmRNA発現量」の比率を計算した（つまり、「溶媒対照群における各遺伝子のmRNA発現量」を1とする）。試験化合物として化合物16を用いた場合の、計算結果を表7に示す。【００９７】
【表７】
2007119815.tif 000022
表7に示したとおり、BGERKB5細胞において、NF-κB-LUC、IL12BおよびCD80の各遺伝子の発現量が、化合物16の添加により亢進された。また、化合物16により亢進されたこれらの遺伝子の発現量が、TLR9をノックダウンすることにより減弱した。
つまり、化合物(I)はNF-κB-LUC、IL12BおよびCD80の各遺伝子の発現を亢進し、この転写亢進はTLR9を介していることが判明した。
免疫促進剤としてはOK432（ピシバニール）、PSK（クレスチン）、レンチナン等が知られており、抗腫瘍剤として臨床で用いられている。【００９８】
細菌由来DNAも免疫促進作用があることが知られている。細菌DNAに存在するCpGジヌクレオチド配列はヒトのCpGジヌクレオチド配列と違ってシトシン塩基の5位がメチル化されていない。また、ヒトのDNAではCpGジヌクレオチド配列の頻度は低い。この非メチル化CpGモチーフが免疫促進作用に重要と考えられている。本モチーフを含む合成オリゴDNA（CpG-オリゴデオキシヌクレオチド）は細菌由来DNAと同様に強い免疫促進作用を有する。【００９９】
ヘルパーT細胞にはサイトカイン産生能の異なるTh1細胞とTh2細胞が存在する。Th1細胞は細胞性免疫を制御し、細菌・ウィルス感染等に関与し強い細胞障害活性を示す（Th1免疫）。Th2細胞は体液性免疫を制御しアレルギー等に関与する（Th2免疫）。CpG-オリゴデオキシヌクレオチドは強いTh1免疫を誘導し、抗腫瘍活性や抗細菌・ウィルス活性を示し、またアレルギー促進性のTh2免疫を抑制する。これらCpG-オリゴデオキシヌクレオチドの抗腫瘍剤、抗感染症剤および抗アレルギー剤等の医薬用途が知られており、動物モデルおよび臨床試験で有用性が確認されている［「ネーチャー・レビューズ・ドラッグ・ディスカバリー（Nature Reviews Drug Discovery）」、2002年、第1巻、p.797；「ネーチャー・レビューズ・イムノロジー（Nature Reviews Immunology）」、2004年、第4巻、p.1；
EP0468520；WO96/02555；WO98/18810；WO98/37919；WO9/40100；WO99/51259；WO99/56755等」。【０１００】
例えば、子宮頸部がんのマウスモデルにおいて、CpG-オリゴデオキシヌクレオチドは抗腫瘍効果および延命効果を示した［「クリニカル・キャンサー・リサーチ（Clinical Cancer Research）」、2003年、第9巻、p.2693］。また、横紋筋肉腫のマウスモデルにおいて、外科的切除および化学療法（シクロフォスファミドまたはトポテカン）による延命率をCpG-オリゴデオキシヌクレオチドは併用により上昇させた［「クリニカル・キャンサー・リサーチ（Clinical Cancer Research）」、2003年、第9巻、p.3105］。
例えば、リーシュマニア症のマウスモデルにおいてCpG-オリゴデオキシヌクレオチドは有効であった［「ザ・ジャーナル・オブ・イムノロジー（The Journal of Immunology）」、1998年、第160巻、p.3627；「プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・オブ・ザ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ（Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America）」、1999年、第96巻、p.6970］。【０１０１】
例えば、OVA感作マウス慢性喘息モデルにおいてCpG-オリゴデオキシヌクレオチドは、気道炎症、気道過敏性および気道リモデリングを抑制した［「ジャーナル・オブ・アレルギー・アンド・クリニカル・イムノロジー（Journal of Allergy & Clinical Immunology）」、2002年、第110巻、p.867］。また、ハウスダストダニアレルゲンで感作したアカゲサルの喘息モデルにおいて、CpG-オリゴデオキシヌクレオチドは気道過敏性および気道リモデリングを抑制した［「アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピレイトリー・アンド・クリティカル・ケア・メディシン（American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine）」、2004年、第170巻、p.1153］。
例えば、臨床試験においてCpG-オリゴデオキシヌクレオチドはタキサンおよび白金製剤との併用で非小細胞肺がんに対して有効であった［「アメリカン・ソサイエティー・オブ・クリニカル・オンコロジー（American Society of Clinical Oncology：ASCO）」、2005年、アニュアル・ミーティング（Annual Meeting）、アブストラクト、#7039］。また、臨床試験においてブタクサ花粉抗原とCpG−オリゴデオキシヌクレオチドのコンジュゲートはTh1免疫を増強しTh2免疫を抑えアレルギー性鼻炎の症状を改善した［「ジャーナル・オブ・アレルギー・アンド・クリニカル・イムノロジー（Journal of Allergy & Clinical Immunology）」、2004年、第113巻、p.235］。【０１０２】
CpG-オリゴデオキシヌクレオチドはToll様受容体の一つであるToll様受容体9（TLR9）に認識されることが明らかとなっている［「ネーチャー（Nature）」、2000年、第408巻、p.740］。TLR9はB細胞や樹状細胞等に存在している。TLR9はMyD88等のアダプター分子を介して細胞内にシグナルを伝達し、サイトカイン遺伝子発現を制御するNF-κB等の転写因子群を活性化し、サイトカインの産生を惹起する。また、リンパ球活性化に重要な副刺激分子であるCD40、CD80やCD86等の表面分子の発現を亢進させる。
ケモカインIP-10（interferon-gamma inducible protein 10 kDa）（CXCL10）は、強力な血管新生阻害作用を有し抗腫瘍活性を示すことが知られている（「ブラッド（Blood）」、1997年、第89巻、p.2635；「ジャーナル・オブ・エクスペリメンタル・メディシン（Journal of Experimental Medicine）」、1996年、第184巻、p.981；「ロイケミア・リンフォーマ（Leukemia Lymphoma）」、1995年、第19巻、p.267；「ジャーナル・オブ・エクスペリメンタル・メディシン（Journal of Experimental Medicine）」、1993年、第178巻、p.1057）。また、IP-10はナチュラルキラー細胞活性化能やT細胞遊走性を有する。【０１０３】
これらの事実と上記の試験例1〜5の結果から、TLR9の作動活性および／または免疫促進活性を有する化合物(I)は、TLR9作動薬、免疫促進剤、抗アレルギー剤、抗腫瘍剤、抗感染症剤等として有用であると考えられる。【０１０４】
化合物(I)またはその薬理学的に許容される塩は、その薬理作用およびその投与目的に応じ、そのままあるいは各種の製薬形態で使用することができる。本発明の製薬組成物は、活性成分として有効な量の化合物(I)またはその薬理学的に許容される塩を薬理学的に許容される担体と均一に混合して製造できる。この担体は投与に対して望ましい製剤の形態に応じて、広い範囲の形態をとることができる。これらの製薬組成物は、経口的または軟膏、注射等の非経口的投与に対して適する単位服用形態にあることが望ましい。
錠剤の調製にあたっては、例えば乳糖、グルコース、ショ糖、マンニット、メチルセルロース等の賦形剤、デンプン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、結晶セルロース等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、ゼラチン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース等の結合剤、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビット脂肪酸エステル等の界面活性剤等を常法に従って用いればよい。錠剤1個あたり1〜300 mgの活性成分を含有する錠剤が好適である。【０１０５】
顆粒剤の調製にあたっては、例えば乳糖、ショ糖等の賦形剤、澱粉等の崩壊剤、ゼラチン等の結合剤等を常法により用いればよい。粉剤の調製にあたっては、例えば乳糖、マンニット等の賦形剤等を常法に従って用いればよい。カプセル剤の調製にあたっては、例えばゼラチン、水、ショ糖、アラビアゴム、ソルビット、グリセリン、結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、タルク等を常法により用いればよい。カプセル1個あたり1〜300 mgの活性成分を含有するカプセルが好適である。
シロップ剤の調製にあたっては、例えばショ糖等の糖、水、エタノール等を常法により用いればよい。
軟膏の調製にあたっては、例えばワセリン、液体パラフィン、ラノリン、マクロゴール等の軟膏基剤、ラウリル乳酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、ソルビタンモノ脂肪酸エステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アラビアゴム等の乳化剤等を常法により用いればよい。
注射剤の調製にあたっては、水、生理食塩水、植物油（例えばオリーブ油、落花生油等）、オレイン酸エチル、プロピレングリコール等の溶剤、安息香酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、ウレタン等の可溶化剤、食塩、グルコース等の等張化剤、フェノール、クレゾール、p-ヒドロキシ安息香酸エステル、クロロブタノール等の保存剤、アスコルビン酸、ピロ亜硫酸ナトリウム等の抗酸化剤等を常法により用いればよい。【０１０６】
化合物(I)またはその薬理学的に許容される塩は、経口的方法、吸引的方法または軟膏、注射剤等の非経口的方法で投与可能である。その有効用量および投与回数は投与形態、患者の年齢、体重、症状等により異なるが、投与量は通常一日当たり、0.0001〜20 mg/kgを1〜4回投与するのが好ましい。
以下、本発明を実施例および参考例によりさらに具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されることはない。なお、実施例および参考例で用いられるプロトン核磁気共鳴スペクトル（1H-NMR）は、300MHz、400MHzまたは500MHzで測定されたものであり、化合物および測定条件によって交換性プロトンが明瞭には観測されないことがある。なお、シグナルの多重度の表記としては通常用いられるものを用いるが、brとは見かけ上幅広いシグナルであることを表す。
後述の実施例および参考例で用いた合成中間体の構造を表8-1〜表8-4に示す。なお各表中のMeはメチルを表し、Acはアセチルを表し、Bnはベンジルを表し、Phはフェニルを表す。【０１０７】
【表８−１】
2007119815.tif 000023
【０１０８】
【表８−２】
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【０１０９】
【表８−３】
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【０１１０】
【表８−４】
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【０１１１】
参考例1〜20および34〜36に、化合物(I)の合成に用いた中間体の合成法を示す。
参考例1：2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-α-D-マンノピラノース（化合物A）の合成
[工程1]
D-マンノース（5.0 g, 28 mmol）の無水酢酸溶液（24 mL）にトリメチルシリルクロリド（0.80 mL, 7.0 mmol）を加え、80 ℃で2時間攪拌した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝2/1）で精製し、ペンタ-O-アセチル体（5.5 g, 収率51%）を得た。
FAB-MS m/z: 391 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られたペンタ-O-アセチル体（5.5 g, 14 mmol）のDMF溶液（50 mL）にヒドラジン酢酸塩（2.0 g, 22 mmol）を加え、室温で1時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝2/1）で精製し、化合物A（3.5 g, 収率36%）を得た。
FAB-MS m/z: 349 (M+H)+.
参考例2：2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-α-D-マンノピラノシルホスファート（化合物B）の合成
[工程1]
化合物A（1.8 g, 5.2 mmol）とトリアゾール（0.18 g, 2.6 mmol）のジクロロメタン溶液（20 mL）にビス(ベンジルオキシ)(ジイソプロピルアミノ)ホスフィン（1.8 g, 5.2 mmol）を加え、室温で12時間攪拌した。反応混合物にt-ブチルヒドロペルオキシドのノナン溶液（5.5 mol/L, 1.5 mL）を注ぎいれ、水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層をチオ硫酸ナトリウム水溶液および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝2/1）で精製し、ジベンジルリン酸エステル体（2.2 g, 収率70%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.36-7.27 (m, 10H), 5.61 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 5.22 (br s, 1H), 5.11-5.07 (m, 4H), 4.21-4.05 (m, 2H), 3.93 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.04 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.99 (s, 3H).
FAB-MS m/z: 609 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られたジベンジルリン酸エステル体（1.1 g, 1.8 mmol）をメタノールとトリエチルアミンの混合溶媒（20/1，21 mL）に溶解し、10%パラジウム炭素（0.80 mL, 7.0 mmol）を加え、水素雰囲気下、室温で2日間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別した。濾液を濃縮し、化合物Bのトリエチルアミン塩（0.88 g, 収率78%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.61 (s, J = 6.6 Hz, 1H), 5.30-5.22 (m, 2H), 4.47-4.37 (m, 2H), 4.38 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.14 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.15 (q, J = 7.2 Hz, 6H), 2.17 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 9H).
FAB-MS m/z: 427 (M-H)-.【０１１２】
参考例3：ジフェニル(2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-β-D-マンノピラノシル)ホスファート（化合物C）の合成
化合物A（0.75 g, 2.2 mmol）のジクロロメタン溶液（20 mL）にDMAP（0.60 g, 4.9 mmol）を加え、クロロリン酸ジフェニル（1.0 mL, 4.9 mmol）のジクロロメタン溶液（10 mL）を室温で1時間かけて滴下し、室温で1時間攪拌した。反応混合物に水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下で溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝2/1）で精製し、化合物C（0.72 g, 収率56%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.37-7.11 (m, 10H), 5.60 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.48 (m, 1H), 5.26 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 9.6, 3.3 Hz, 1H), 4.27 (dd, J = 12.3, 5.5 Hz, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.70 (m, 1H), 2.06 (s, 3H), 2.052 (s, 3H), 2.049 (s, 3H), 1.99 (s, 3H).
FAB-MS m/z: 581 (M+H)+.
参考例4：2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-β-D-マンノピラノシルホスファート（化合物D）の合成
化合物C（0.029 g, 0.05 mmol）を酢酸エチルとエタノールの混合溶媒（1/1, 5.0 mL）に溶解し、酸化白金（0.029 g）を加え、水素雰囲気下、室温で2日間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別した。濾液を濃縮し、化合物D（0.017 g, 収率78%）を得た。
FAB-MS m/z: 427 (M-H)-.【０１１３】
参考例5：2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-L-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノース（化合物E）の合成
[工程1]
L-グリセロ-D-マンノヘプトピラノース（0.7 g, 3.3 mmol）の無水酢酸溶液（3.1 mL, 3.3 mmol）より、トリメチルシリルクロリド（0.11 mL, 0.83 mmol）を用い、参考例1の工程1と同様にして、ヘキサ-O-アセチル体（1.0 g, 収率65%）を得た。
FAB-MS m/z: 461 (M-H)-.
[工程2]
工程1で得られたヘキサ-O-アセチル体（1.5 g, 32 mmol）より、ヒドラジン酢酸塩（2.0 g, 22 mmol）を用い、参考例1の工程2と同様にして、化合物E（0.60 g, 収率38%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.9 (dd, J = 10.0, 3.5 Hz, 1H), 5.33-5.22 (m, 4H), 4.41 (dd, J = 11.4, 5.9 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 9.9, 1.9 Hz, 1H), 4.14 (dd, J = 11.4, 7.0 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.03 (s, 3H).
FAB-MS m/z 421 (M+H)+.
参考例6：ジフェニル(2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-L-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノシル)ホスファート（化合物Fa）およびジフェニル（2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-L-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル）ホスファート（化合物Fb)の合成
化合物E（0.42 g, 1.0 mmol）より、DMAP（0.20 g, 1.6 mmol）およびクロロリン酸ジフェニル（0.33 mL, 1.6 mmol）を用い、参考例3と同様にして、化合物Fa（0.18 g, 収率28%）および化合物Fb（0.21 g, 収率32%）を得た。
化合物Fa：
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.40-7.35 (m, 4H), 7.26-7.20 (m, 6H), 5.88 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.37-5.28 (m, 4H), 4.26 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.15-4.13 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.92 (s, 3H).
FAB-MS m/z 653 (M+H)+.
化合物Fb：
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.39-7.13 (m, 10H), 5.56 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.51 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 5.35-5.26 (m, 2H), 5.05 (dd, J = 9.9, 3.3 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 11.3, 5.1 Hz, 1H), 4.15-4.06 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.052 (s, 3H), 2.049 (s, 3H), 1.99 (s, 3H).
FAB-MS m/z 653 (M+H)+.【０１１４】
参考例7：2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-L-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノシルジホスファート（化合物Ga）の合成
化合物Fa（0.18 g, 0.28 mmol）より、酸化白金（0.090 g）を用い、参考例4と同様にして、化合物Ga（0.16 g, 定量的）を得た。
FAB-MS m/z 499 (M-H)-.
参考例8：2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-L-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシルジホスファート（化合物Gb）の合成
化合物Fb（0.21 g, 0.32 mmol）より、酸化白金（0.029 g）を用い、参考例4と同様にして、化合物Gb（0.18 g, 定量的）を得た。
FAB-MS m/z 499 (M-H)-.
参考例9：2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-D-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノース（化合物H）の合成
[工程1]
D-グリセロ-D-マンノヘプトピラノース（0.1 g, 0.47 mmol）の無水酢酸溶液（0.44 mL, 0.27 mmol）より、トリエチルシラン（0.016 mL, 0.12 mmol）を用い、参考例1の工程1と同様にして、ヘキサ-O-アセチル体（0.17 g, 収率78%）を得た。
FAB-MS m/z 461 (M-H)-.
[工程2]
工程1で得られたヘキサ-O-アセチル体（0.17 g, 0.38 mmol）より、ヒドラジン酢酸塩（0.22 g, 2.4 mmol）を用い、参考例1の工程2と同様にして、化合物H（0.086 g, 収率54%）を得た。
FAB-MS m/z 421 (M+H)+.【０１１５】
参考例10：ジフェニル(2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-D-グリセロ−α-D-マンノヘプトピラノシル）ホスファート（化合物Ia）およびジフェニル(2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-D-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ホスファート（化合物Ib）の合成
化合物H（0.42 g, 1.0 mmol）より、DMAP（0.22 g, 1.5 mmol）およびクロロリン酸ジフェニル（0.31 mL, 1.5 mmol）を用い、参考例3と同様にして、化合物Ia（0.15 g, 23%）、化合物Ib（0.12 g, 18%）および化合物Iaと化合物Ibの混合物（0.30 g, 46%）を得た。
化合物Ia：
1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.39-7.30 (m, 4H), 7.26-7.18 (m, 6H), 5.85 (dd, J = 6.5, 2.1 Hz, 1H), 5.38 (dd, J = 9.1, 3.2 Hz, 1H), 5.35 (dd, J = 9.7, 9.1 Hz, 1H), 5.29 (dd, J = 3.2, 2.1 Hz, 1H), 5.15 (ddd, J = 7.6, 3.8, 2.5 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 12.0, 3.8 Hz, 1H), 4.24 (dd, J = 9.7, 2.5 Hz, 1H), 4.22 (dd, J = 12.0, 7.6 Hz, 1H), 2.14 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.83 (s, 3H).
31P-NMR (202.5 MHz, CDCl3)δ(ppm): -13.49 (br s).
FAB-MS m/z 653 (M+H)+.
化合物Ib：
1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.47-7.30 (m, 4H), 7.28-7.26 (m, 2H), 7.23-7.17 (m, 4H), 5.56 (dd, J = 7.4, 1.4 Hz, 1H), 5.44 (dd, J = 3.3, 1.7 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 5.25 (dd, J = 8.6, 8.4 Hz, 1H), 5.07 (dd, J = 8.6, 3.3 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 12.2, 3.3 Hz, 1H), 4.19 (dd, J = 12.2, 6.5 Hz, 1H), 3.87 (dd, J = 8.6, 4.6 Hz, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.99 (s, 3H).
31P-NMR (202.5 MHz, CDCl3)δ(ppm): -13.27 (br s).
FAB-MS m/z 653 (M+H)+.【０１１６】
参考例11：2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-D-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノシルホスファート（化合物Ja）の合成
化合物Ia（0.21 g, 0.32 mmol）のエタノール溶液（2.0 mL）に酸化白金（0.10 g）を加え、水素雰囲気下、室温で5日攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮し化合物Ja（0.011 g, 収率45%）を得た。
FAB-MS m/z 499 (M-H)-.
参考例12：2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-D-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシルホスファート（化合物Jb）の合成
化合物Ib（0.21 g, 0.32 mmol）のエタノール溶液（1.0 mL）に酸化白金（0.100 g）を加え、水素雰囲気下、室温で5日間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮し、化合物Jb（0.037 g, 収率73%）を得た。
FAB-MS m/z 499 (M-H)-.【０１１７】
参考例13：2,3,4,6-テトラ-O-メチル-α-D-マンノピラノース（化合物K）の合成
[工程1]
D-マンノース（1.8 g, 10 mmol）をDMSOと水の混合溶媒（20/1, 10 mL）に溶解し、得られた溶液に水酸化ナトリウム（4.0 g, 100 mmol）およびヨウ化メチル（3.0 mL, 46 mmol）を室温で1日に1度、合計3回加え、3日間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を希塩酸および飽和食塩水順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝3/1）で精製し、ペンタ-O-メチル体（1.3 g, 収率52%）をアノマー立体異性体の混合物（α/β＝2.5/1）として得た。
FAB-MS m/z: 273 (M+Na)+.
[工程2]
工程1で得られたペンタ-O-メチル体（1.3 g, 5.2 mmol）の無水酢酸溶液（20 mL）に濃硫酸(0.050 mL)を0 ℃で加え、同温度で5時間攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、粗アセチル体（1.0 g）を得た。
FAB-MS m/z: 301 (M+Na)+.【０１１８】
[工程3]
工程2で得られた粗アセチル体（1.0 g, 4.0 mmol）をメタノール、30%アンモニア水および水の混合溶液（3/1/1, 20 mL）に溶解し、30分間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、化合物K（0.88 g, 収率72%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.33 (br s, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.65-3.49 (m, 13H), 3.39 (s, 3H), 3.38 (m, 1H).
FAB-MS m/z: 259 (M+Na)+.
参考例14：2,3,4,6-テトラ-O-メチル-D-マンノピラノシルジホスファート（化合物L）の合成
[工程1]
化合物K（0.033 g, 0.25 mmol）のジクロロメタン溶液（10 mL）にDMAP（0.033 g, 0.30 mmol）を加え、さらにクロロリン酸ジフェニル（0.060 mL, 0.30 mmol）のジクロロメタン溶液（7.0 mL）を室温で1時間かけて滴下し、同温度で1時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、粗リン酸エステル体（0.040 g, 収率60%）をアノマー立体異性体の混合物（α/β＝1/1）として得た。
[工程2]
工程1で得られた粗リン酸エステル体（0.040 g, 0.015 mmol）を酢酸エチルとメタノールの混合溶媒（1/1, 5.0 mL）に溶解し、酸化白金（0.040 g）を加え、水素雰囲気下、室温で1日間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮し、化合物L（0.013 g, 収率47%）をアノマー立体異性体の混合物（α/β＝2/1）として得た。
FAB-MS m/z 315 (M-H)-.【０１１９】
参考例15：1-O-メチル-6-O-トリチル-D-マンノピラノース（化合物M）の合成
メチルマンノース（3.9 g, 20 mmol）のピリジン溶液（10 mL）に塩化トリチル（5.6 g, 20 mmol）を加え、40 ℃で4時間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝1/1）で精製し、化合物M（7.1 g, 収率81%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.47-7.43 (m, 6H), 7.34-7.21 (m, 9H), 4.71 (d, J = 0.3 Hz, 1H), 3.90 (dd, J = 3.1, 2.5 Hz, 1H), 3.77-3.66 (m, 2H), 3.44-3.41 (m, 3H), 3.37 (s, 3H).
FAB-MS m/z 435 (M-H)-.
参考例16：1-O-メチル-2,3,4-トリ-O-ベンジル-6-デオキシ-D-マンノヘプトピラノース（化合物N）の合成
[工程1]
水素化ナトリウム（2.0 g, 60%, 50 mmol）のDMF溶液（10 mL）に、氷冷下、化合物M（7.1 g, 16 mmol）および臭化ベンジル（5.7 mL, 48 mmol）を加え、室温まで昇温し、同温度で12時間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝9/1）で精製し、トリ-O-ベンジル体（7.2 g, 収率60%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.50-7.17 (m, 30H), 4.71-4.56 (m, 6H), 4.26 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.01 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.86 (dd, J = 9.4, 3.1 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 3.1, 1.8 Hz, 1H), 3.78 (m, 1H), 3.53 (dd, J = 9.7, 1.7 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 3.26 (dd, J = 9.7, 5.4 Hz, 1H).
FAB-MS m/z 705 (M-H)-.
[工程2]
工程1で得られたトリ-O-ベンジル体（35 g, 50 mmol）を1,4-ジオキサンとメタノールの混合溶媒（1/1, 200 mL）に溶解し、氷冷下、トリフルオロ酢酸（20 mL）を加え、室温で12時間攪拌した。反応混合物に炭酸カリウムを加え、析出した塩を濾別し、濾液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝4/1）で精製し、6-ヒドロキシ体（15.2 g, 収率71%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.38-7.29 (m, 15H), 4.95(d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.09-3.75 (m, 5H), 3.65 (m, 1H), 3.31 (s, 3H) .
FAB-MS m/z 463 (M-H)-.【０１２０】
[工程3]
塩化オキサリル（45 mL, 520 mmol）のTHF溶液（135 mL）にジメチルスルフィド（41 mL, 540 mmol）のTHF溶液（86 mL）を-78 ℃で加え、同温度で1時間攪拌した。-78 ℃で、工程2で得られた6-ヒドロキシ体（120 g, 260 mmol）のTHF（120 mL）溶液をゆっくり滴下し、同温度で1時間攪拌した。反応混合物にトリエチルアミン（150 mL, 1.1 mol）を加え、室温まで昇温し、セライトを通して濾過した。濾液を減圧濃縮し、粗アルデヒド体を得た。
[工程4]
臭化メチルトリフェニルホスホニウム（570 g, 1.6 mol）をTHF（1.5 L）に懸濁し、氷冷下、ブチルリチウム（12 mL, 2.6 mol/Lヘキサン溶液）を滴下し、同温度で30分間攪拌した。反応混合物に、工程3で得られた粗アルデヒド体のTHF懸濁液（500 mL）を注ぎいれ、室温で1時間攪拌した。反応混合物に水を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝9/1）で精製し、ビニル体（48 g, 収率39%）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.52-7.27 (m, 15H), 6.04 (ddd, J = 17.2, 10.5, 6.6 Hz, 1H), 5.47 (ddd, J = 17.2, 1.7, 1.2 Hz, 1H), 5.29 (ddd, J = 10.5, 1.7, 1.0 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.69-4.62 (m, 3H), 4.04 (m, 1H), 3.89 (dd, J = 9.4, 3.1 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 3.1, 1.9 Hz, 1H), 3.76 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H).
FAB-MS m/z 459 (M-H)-.
[工程5]
工程4で得られたビニル体（3.4 g, 7.4 mmol）のTHF溶液（100 mL）にボラン-THF錯体のTHF溶液（11 mL, 1.0 mol/L）を-20 ℃で滴下した後、0 ℃まで昇温し、同温度で1時間攪拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（11 mL）および過酸化水素水（1.1 mL, 30%）を加え、室温で2.5時間攪拌した後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝2/1）で精製し、化合物N（2.3 g, 収率66%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.38-7.67 (m, 15H), 4.96 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.87-3.74 (m, 6H), 3.31 (s, 3H), 2.12 (m, 1H), 1.85 (m, 1H).
FAB-MS m/z: 501 (M+Na)+, 447 (M-MeO)+.【０１２１】
参考例17：2,3,4,7-テトラ-O-アセチル-6-デヒドロ-D-マンノヘプトピラノース（化合物O）の合成
[工程1]
化合物N（0.84 g, 1.8 mmol）の無水酢酸溶液（20 mL）に0 ℃で硫酸（20 mL）を滴下し、同温度で30分間攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣（0.85 g）を酢酸エチル（20 mL）に溶解し、10%パラジウム炭素（0.2 g）を加え、水素雰囲気下、室温で1日攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮し、粗2,3,4-トリオール体（0.88 g）を得た。
FAB-MS m/z: 277 (M-H)-.
[工程2]
工程1で得られた粗2,3,4-トリオール体（0.88 g）のピリジン溶液（6.0 mL）に無水酢酸（5.0 mL）を滴下し、0 ℃で1時間攪拌した後、濃縮した。残渣をDMF（10 mL）に溶解し、ヒドラジン酢酸塩（0.19 g, 2.0 mmol）を加え、室温で2時間反応した。反応混合物を冷水に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝2/1）で精製し、化合物O（0.24 g, 収率38%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.38 (dd, J = 10.1, 3.5 Hz, 1H), 5.27 (dd, J = 3.5, 1.7 Hz, 1H), 5.15-5.08 (m, 2H), 4.31-4.03 (m, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.06 (s, 6H), 1.99 (s, 3H), 1.89-1.75 (m, 2H).
FAB-MS m/z: 385 (M+Na)+.
参考例18：2,3,4,7-テトラ-O-アセチル-6-デオキシ-D-マンノヘプトピラノシルホスファート（化合物P）の合成
[工程1]
化合物O（0.24 g, 0.74 mmol）より、DMAP（0.16 g, 1.3 mmol）およびクロロリン酸ジフェニル（0.23 mL, 1.1 mmol）を用い、参考例3と同様にして、りん酸エステル（0.054 g, 収率22%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.32-7.04 (m, 10H), 5.51 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 5.41 (br s, 1H), 5.07 (dd, J = 10.6, 9.6 Hz, 1H), 4.99 (dd, J = 9.6, 2.9 Hz, 1H), 4.09-4.02 (m, J = 12.3, 5.5 Hz, 2H), 3.60 (m, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.01 (s, 6H), 1.97 (s, 3H), 1.84-1.78 (m, 2H).
FAB-MS m/z 617 (M+Na)+.
[工程2]
工程1で得られたりん酸エステル（0.054 g, 0.091 mmol）より、酸化白金（0.020 g）用い、参考例4と同様にして、化合物P（0.035 g, 収率88%）を得た。
FAB-MS m/z 441 (M-H)-.【０１２２】
参考例19：1,2,3,4-テトラ-O-メチル-6-デオキシ-D-マンノヘプトピラノース（化合物Q）の合成
[工程1]
化合物M（3.9 g, 8.9 mmol）をDMSOと水の混合溶媒（20/1, 10 mL）に溶解し、水酸化ナトリウム（7.2 g, 180 mmol）およびヨウ化メチル（3.0 mL, 46 mmol）を加え、室温で30分間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を希塩酸および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、粗テトラ-O-メチル体（3.8 g, 収率89%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.51-7.49 (m, 6H), 7.30-7.21 (m, 9H), 4.86 (d, J= 0.7 Hz, 1H), 3.59-3.37 (m, 5H), 3.52 (s, 3H), 3.47 (s, 3H), 3.44 (s, 3H), 3.18 (dd, J = 9.9, 5.1 Hz, 1H).
FAB-MS m/z: 501 (M+Na)+.
[工程2]
工程1で得られた粗テトラ-O-メチル体（3.8 g, 0.0093 mmol）より、トリフルオロ酢酸（18 mL）を用い、参考例16の工程2と同様にして、6-ヒドロキシ体（1.1 g, 収率54%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 4.77 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.84 (dd, J = 11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.75 (dd, J = 11.7, 4.2 Hz, 1H), 3.58 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.54-3.41 (m, 3H), 3.494 (s, 3H), 3.492 (s, 3H), 3.36 (s, 3H).
FAB-MS m/z 259 (M+Na)+.【０１２３】
[工程3]
工程2で得られた6-ヒドロキシ体（1.5 g, 6.2 mmol）より、塩化オキザリル（1.1 mL, 12 mmol）、ジメチルスルフィド（1.0 mL, 13 mmol）、トリエチルアミン（3.7 mL, 26 mmol）、臭化メチルトリフェニルホスホニウム（19 g, 53 mmol）およびn-ブチルリチウム（20 mL, 2.4 mol/L in hexane）を用い、参考例16の工程3および4と同様にして、ビニル体（0.43 g, 収率30%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.96 (ddd, J = 17.2, 10.6, 6.5 Hz, 1H), 5.41 (d, J = 17.2 Hz, 1H), 5.25 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.77 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 3.87 (dd, J = 9.5, 6.4 Hz, 1H), 3.57 (dd, J = 3.2, 1.8 Hz, 1H), 3.50 (m, 1H), 3.498 (s, 3H), 3.496 (s, 3H), 3.490 (s, 3H), 3.36 (s, 3H), 3.25 (t, J = 9.5 Hz, 1H).
[工程4]
工程3で得られたビニル体（3.4 g, 7.4 mmol）より、ボラン-THF錯体のTHF溶液（5.3 mL, 1.0 mol/L）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（5.3 mL）および過酸化水素水（2.0 mL, 30%）を用い、参考例16の工程5と同様にして、化合物Q（0.22 g, 収率24%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 4.73 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 3.81 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 9.4, 6.8 Hz, 1H), 3.57 (dd, J = 3.4, 1.7 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.50 (s, 3H), 3.48 (s, 3H), 3.47 (dd, J = 6.8, 3.4 Hz, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.24 (dd, J = 9.4, 9.3 Hz, 1H), 2.10 (m, 1H), 1.81 (m, 1H).
FAB-MS m/z 251 (M+H)+.【０１２４】
参考例20：2,3,4-トリ-O-メチル-6-デオキシ-D-マンノヘプトピラノースホスファート（化合物R）の合成
[工程1]
化合物Q（0.22 g, 0.88 mmol）の無水酢酸溶液（4.0 mL）に0 ℃で硫酸（0.020 mL）を滴下し、室温で3.5時間攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎいれ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、粗ジアセチル体（0.10 g）を得た。
FAB-MS m/z 343 (M+Na)+.
[工程2]
工程1で得られた粗ジアセチル体（1.5 g, 14 mmol）より、ヒドラジン酢酸塩（0.10 g, 1.1 mmol）を用い、参考例1の工程2と同様にして、1-ヒドロキシ体（0.039 g, 収率16%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.24 (br s, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.72 (td, J= 9.9, 2.4 Hz, 1H), 3.60 (dd, J= 3.3, 1.7 Hz, 1H), 3.539 (s, 3H), 3.535 (m ,1H), 3.49 (s, 6H), 3.18 (dd, J = 9.9, 9.3 Hz, 1H), 2.15 (m, 1H), 2.04 (s, 3H), 1.78 (m, 1H).
FAB-MS m/z 301 (M+Na)+.
[工程3]
工程2で得られた1-ヒドロキシ体（0.039 g, 0.14 mmol）のジクロロメタン溶液（1.0 mL）にDMAP（0.021 g, 0.17 mmol）を加え、さらにクロロリン酸ジフェニル（0.35 mL, 0.17 mmol）のジクロロメタン溶液（1.0 mL）を室温で1時間かけて滴下し、同温度で1時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をエタノール（1.0 mL）に溶解し、酸化白金（0.035 g）を加え、水素雰囲気下、室温で5日間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮し、化合物R（0.027 g, 収率56%）をアノマー立体異性体混合物（α/β＝1/1）として得た。
FAB-MS m/z 315(M-H)-.【０１２５】
参考例21：アデノシン=5’-(2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-α-D-マンノピラノシル）ジホスファート（化合物5）の合成
化合物B（0.40 g, 0.63 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.45 g, 0.63 mmol）をピリジン（3.0 mL）に溶解し、減圧濃縮した。残渣にピリジン（5.0 mL）、トリアゾール（0.084 g, 1.2 mmol）およびモレキュラシーブス4A（1.0 g）を加え、室温で1時間攪拌した。反応混合物からモレキュラシーブスを濾別し、濾液を減圧下濃縮した。残渣をDEAE Sephadex A-25カラムクロマトグラフィー（アマシャムバイオサイエンス社製、酢酸でpH5.0に調整した酢酸アンモニウム溶液0.2-0.3 mmol/Lで溶出）で精製し、化合物5のアンモニウム塩（0.97 g, 定量的）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.56 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 6.11 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.55 (d, JHP = 7.7 Hz, 1H), 5.35 (br s, 1H), 5.28 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 5.17 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.75-4.66 (m, 2H), 4.47 (m, 1H), 4.36-4.22 (m, 4H), 3.98 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.95 (s, 3H), 1.91 (s, 3H).
FAB-MS m/z 756 (M-H)-.
参考例22：アデノシン=5’-(α-D-マンノピラノシル）ジホスファート（化合物6）の合成
化合物5（0.070 g, 0.092 mmol）をメタノール、水およびトリエチルアミンの混合溶媒（7/3/1, 50 mL）に溶解し、室温で4時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をさらに凍結乾燥し、化合物6（0.10 g, 定量的）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.48 (s, 1H), 8.19(s, 1H), 6.07 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 5.26 (dd, JHH = 1.8 Hz, JHP = 7.4 Hz, 1H), 4.71 (m, 1H), 4.47 (dd, J = 5.1, 3.7 Hz, 1H), 4.34 (m, 1H), 4.19-4.15 (m, 2H), 4.00 (m, 1H), 3.86 (dd, J = 9.5, 3.3 Hz, 1H), 3.89-3.75 (m, 2H), 3.68 (dd, J = 12.9, 5.9 Hz, 1H), 3.15 (q, J = 7.4 Hz, 6H), 1.23 (t, J = 7.4 Hz, 9H).
FAB-MS m/z 588 (M-H)-.【０１２６】
参考例23：アデノシン=5’-(2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-β-D-マンノピラノシル)ジホスファート（化合物7）の合成
化合物D（0.43 g, 1.0 mmol）とアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.71 g, 1.0 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物7のアンモニウム塩（0.020 g, 2.4%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.57 (s, 1H), 8.33(s, 1H), 6.13 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 5.51-5.47 (m, 2H), 5.15-5.12 (m, 2H), 4.60 (m, 1H), 4.47 (dd, J = 4.7, 4.4 Hz, 1H), 4.35-4.29 (m, 2H), 4.30-4.29 (m, 2H), 4.05 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.81 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.03 (s, 3H).
FAB-MS m/z 756(M-H)-.
参考例24：アデノシン=5’-(β-D-マンノピラノシル)ジホスファート（化合物8）の合成
化合物7のアンモニウム塩（0.018 g, 0.023 mmol）をメタノール、重炭酸トリエチルアンモニウムバッファー液（pH=8.0, 0.1 mol/L）及びトリエチルアミンの混合溶液（14/13/1, 14 mL）に溶解し、-30 ℃で2週間攪拌した。反応混合物を水で希釈しDowex 50(H+ form)を加え、pHを約4.0に調整した。レジンを濾別し、濾液をDEAE Sephadex A-25カラムクロマトグラフィー（アマシャムバイオサイエンス社製、酢酸でpH5.0に調整した酢酸アンモニウム溶液0.2-0.3 mmol/Lで溶出）で精製し、化合物8（0.054 g, 13%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.53 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.12 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.20 (d, JHP = 8.7 Hz, 1H), 4.77 (m, 1H), 4.50 (dd, J = 5.0, 3.8 Hz, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.22-4.17 (m, 2H), 4.09 (dd, J = 2.9, 1.9 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.68-3.60 (m, 2H), 3.50 (dd, J = 9.9, 9.5 Hz, 1H), 3.30 (m, 1H).
31P-NMR (202.5 MHz, D2O)δ(ppm): -10.64(d, J = 20.8 Hz), -12.54 (d, J = 20.8 Hz).
FAB-MS m/z 588 (M-H)-.【０１２７】
参考例25：アデノシン=5’-(2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-L-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物9）の合成
化合物Ga（0.11 g, 0.23 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.16 g, 0.23 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物9のアンモニウム塩（0.083 g, 41%）を得た。
FAB-MS m/z 828 (M-H)-.
参考例26：アデノシン=5’-(2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-L-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物10）の合成
化合物Gb（0.046 g, 0.10 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.070 g, 0.10 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物10のアンモニウム塩（0.012 g, 15%）を得た。
FAB-MS m/z 828 (M-H)-.
参考例27：アデノシン=5’-(L-グリセロ-α-D-マンノピラノシル)ジホスファート（化合物11）の合成
参考例25で得られた化合物9のアンモニウム塩（0.083 g, 0.023 mmol）より、参考例22と同様にして、化合物11（0.017 g, 21%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.46 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.09 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.44 (dd, J = 7.5 Hz, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.47 (dd, J = 5.0, 3.7 Hz, 1H), 4.34 (m, 1H), 4.18-4.15 (m, 2H), 3.96-3.91 (m, 2H), 3.87-3.78(m, 3H), 3.67 (dd, J = 11.4, 6.1 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 11.4, 7.1 Hz, 1H).
FAB-MS m/z 618 (M-H)-.【０１２８】
参考例28：アデノシン=5’-(L-グリセロ-β-D-マンノピラノシル)ジホスファート（化合物12）の合成
参考例26で得られた化合物10のアンモニウム塩（0.0080 g, 0.0093 mmol）をメタノール、重炭酸トリエチルアンモニウムバッファー液（pH = 8.0, 0.1 mol/L）およびトリエチルアミンの混合液（14/13/1, 7.2 mL）に溶解し、-30 ℃で2週間攪拌した。反応混合物を水で希釈しDowex 50(H+ form)を加え、pHを約4.0に調整した。レジンを濾別し、濾液を高速液体クロマトグラフィー［カラム；Develosil RPAQURUS（野村化学株式会社）、直径；4.6 mmx25 cm、検出波長；260nm、流出溶媒；0.5%酢酸水溶液（1.0 mL/分）、検出時間10-15分間]で分取精製し、化合物12（0.0025 g, 38%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.58 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 6.15 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 4.5, 3.7 Hz, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 4.05 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.92 (dd, J = 7.4, 6.2 Hz, 1H), 3.79 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 3.73-3.64 (m, 3H), 3.34 (d, J = 9.8 Hz, 1H).
FAB-MS m/z 618 (M-H)-.
参考例29：アデノシン=5’-(2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-D-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物13）の合成
化合物Ja（0.11 g, 0.23 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.16 g, 0.23 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物13のアンモニウム塩（0.059 g, 30%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.57 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 6.12 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 5.57 (dd, J = 1.2, 7.7 Hz, 1H), 5.33 (m, 1H), 5.27-5.11 (m, 2H), 4.67 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 4.49 (dd, J = 4.9, 4.0 Hz, 1H), 4.37-4.28 (m, 4H), 4.27-4.14 (m, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.92 (s, 3H).
FAB-MS m/z 828 (M-H)-.
参考例30：アデノシン=5’-(2,3,4,6,7-ペンタ-O-アセチル-D-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物14）の合成
化合物Jb（0.037 g, 0.074 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.070 g, 0.10 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物14のアンモニウム塩（0.042 g, 49%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm):  8.63 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 6.17 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 5.19 (d, JHP = 8.6 Hz, 1H), 5.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.24-5.19 (m, 2H), 5.11 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.74 (dd, J = 5.5, 5.2 Hz, 1H), 4.50 (m, 1H), 4.39-4.37 (m, 2H), 4.26-4.22 (m, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 6H), 2.04 (s, 3H), 1.97 (s, 3H).
FAB-MS m/z 828 (M-H)-.【０１２９】
参考例31：アデノシン=5’-(D-グリセロ-α-D-マンノヘプトピラノシル）ジホスファート（化合物15）の合成
参考例29で得られた化合物13のアンモニウム塩（0.028 g, 0.034 mmol）より、参考例22と同様にして、化合物15（0.030 g, 定量的）を得た。
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.63 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 6.17 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 5.19 (d, JHP = 8.6 Hz, 1H), 5.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.24-5.19 (m, 2H), 5.11 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.74 (dd, J = 5.5, 5.2 Hz, 1H), 4.50 (m, 1H), 4.39-4.37 (m, 2H), 4.26-4.22 (m, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 6H), 2.04 (s, 3H), 1.97 (s, 3H).
FAB-MS m/z 618 (M-H)-.
参考例32：アデノシン=5’-(D-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル）ジホスファート（化合物16）の合成
参考例30で得られた化合物14のアンモニウム塩（0.021 g, 0.023 mmol）より、参考例28と同様にして、化合物16（0.0023 g, 15%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.58 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 6.16 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.19 (d, JHP = 8.6 Hz, 1H), 4.78 (dd, J = 5.9, 4.7 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 4.7, 3.6 Hz, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.24-4.20 (m, 2H), 4.05 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.75-3.73 (m, 2H), 3.68-3.61 (m, 2H), 3.44 (dd, J = 9.1, 2.9 Hz, 1H).
FAB-MS m/z 618 (M-H)-.
参考例33：アデノシン=5’-(2,3,4,6-テトラ-O-メチル-D-マンノピラノシル)ジホスファート（化合物17）の合成
化合物L（0.030 g, 0.040 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.029 g, 0.040 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物17のアンモニウム塩（0.0025 g, α/β＝2/1, 収率38%）を得た。
FAB-MS m/z 644 (M-H)-.
なお、化合物18〜21及び23はシグマ社から購入した。化合物22はフルカ社から購入した。【０１３０】
参考例34：1-ヒドロキシメチル-2,3,4,6-テトラ-O-ベンジル-D-マンノース（化合物S）の合成
[工程1]
メチル-D-マンノピラノース（5.0 g, 26 mmol）のジオキサン溶液（15 mL）に、80 ℃にて水酸化カリウム（25 g, 450 mmol）の粉末を少しずつ加え、同温度で1時間攪拌した。反応混合物に臭化ベンジル（16 mL, 130 mmol）を40分かけて滴下した後、3時間還流した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝6/1）で精製し、テトラ-O-ベンジル体（7.0 g, 収率49%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.38-7.26 (m, 18H), 7.19-7.16 (m, 2H), 4.89 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.56 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.99 (dd, J = 9.9, 9.2 Hz, 1H), 3.89 (dd, J = 9.2, 3.0 Hz, 1H), 3.79 (dd, J = 3.0, 1.8 Hz, 1H), 3.76-3.71 (m, 4H), 3.33 (s, 3H).
FAB-MS m/z: 555 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られたテトラ-O-ベンジル体（10 g, 18 mmol）の無水酢酸溶液（10 mL）に濃硫酸（0.020 mL）を0 ℃で加え、同温度で15分攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝1/1）で精製し、1-O-アセチル体（6.9 g, 収率63%）を得た。【０１３１】
1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.40 (m, 1H), 7.38-7.22 (m, 17H), 7.19-7.16 (m, 2H), 6.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.07 (dd, J = 9.9, 9.6 Hz, 1H), 3.88-3.82 (m, 2H), 3.78 (dd, J = 11.0, 4.7 Hz, 1H), 3.74 (dd, J = 3.0, 2.0 Hz, 1H), 3.71 (dd, J = 11.0, 1.8 Hz, 1H), 2.02 (s, 3H).
FAB-MS m/z: 605 (M+Na)+.【０１３２】
[工程3]
工程2で得られた1-O-アセチル体（580 mg, 1.0 mmol）のジクロロメタン溶液（10 mL）に、ヨウ化トリメチルシリル（0.14 mL, 1.1 mmol）を0 ℃で加え、同温度で40分攪拌した後、溶媒を減圧留去し、さらに、トルエン（1.0 mL）を加え、再び溶媒を減圧留去した。残渣をTHF（10 mL）に溶解し、シアノテトラブチルアンモニウム(0.54 g, 2.0 mmol)のTHF溶液（1.0 mL）を加えて、室温で2時間攪拌した。その後、得られた反応液に氷水に注ぎいれ、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝3/1）で精製し、シアノ体（0.30 g, 収率65%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.52-7.45 (m, 2H), 7.37-7.29 (m, 16H), 7.18-7.15 (m, 2H), 4.98 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.92 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.61 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.54 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.02 (dd, J = 2.9, 1.4 Hz, 1H), 3.93 (dd, J = 9.5, 9.3 Hz, 1H), 3.76-3.68 (m, 2H), 3.54 (dd, J = 9.3, 2.9 Hz, 1H), 3.44 (m, 1H).
FAB-MS m/z 550 (M+H)+.
[工程4]
工程3で得られたシアノ体（140 mg, 0.26 mmol）のエタノール溶液（5.0 mL）に水酸化ナトリウム水溶液（1.2 mL, 2 mol/L）を加え、80 ℃で12時間攪拌した。反応混合物を塩酸（10 mL, 2 mol/L）に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、カルボン酸（110 mg, 収率72%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.30-7.22 (m, 20H), 4.97 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.54 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.91 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 3.83-3.61 (m, 3H), 3.51-3.35 (m, 2H).
FAB-MS m/z 569 (M+H)+.
[工程5]
水素化リチウムアルミニウム（110 mg, 0.19 mmol）のTHF懸濁液（20 mL）に窒素雰囲気下、工程4で得られたカルボン酸（110 mg, 0.19 mmol）を加え、80 ℃で6時間攪拌した。反応混合物を塩酸（20 mL, 2 mol/L）に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、化合物S（80 mg, 収率77%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.38-7.22 (m, 20H), 4.97 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H), 4.60-4.51 (m, 4H), 3.91 (dd, J = 9.6, 9.5 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 3.83-3.70 (m, 2H), 3.62 (dd, J = 9.5, 2.5 Hz, 1H), 3.50-3.35 (m, 2H).
FAB-MS m/z 555 (M+H)+.【０１３３】
参考例35：1-ヒドロキシメチル-2,3,4,7-テトラ-O-ベンジル-6-デオキシ-D-マンノヘプトース（化合物T）の合成
[工程1]
L-ガラクトース（0.51 g, 2.8 mmol）のメタノール溶液（2.0 mL）に、塩化アセチル（0.26 mL）を加え、室温で20時間攪拌した後、溶媒を減圧留去した。得られた粗1-O-メチル体、臭化ベンジル（2.6 mL, 4.4 mmol）および水素化ナトリウム（55% in oil, 0.53 g, 4.4 mmol）より、参考例16の工程1と同様にして、1-O-メチル-2,3,4,6-テトラ-O-ベンジル体（0.69 g, 44%）をアノマー位立体異性体混合物（α/β混合比不明）として得た。
FAB-MS m/z 555 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られたテトラベンジル体（76 g, 140 mmol）の酢酸溶液（700 mL）に、トリフルオロメタンスルホン酸（2.0 mol/L in water, 280 mL）を2度に分けて加え、80 ℃で6時間攪拌した後、溶媒を減圧留去した。その後、室温で16時間攪拌した後、反応混合物を氷水に注ぎいれ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝5/1）で精製し、1-ヒドロキシ体（48 g, 収率64%）をアノマー位立体異性体混合物（α/β＝2/1）として得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.60-7.25 (m, 20H), 5.28 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.03 (dd, J = 9.8, 3.6 Hz, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.90 (dd, J = 9.8, 2.7 Hz, 1H), 3.61-3.46 (m, 2H), 1.98 (d, J = 1.8 Hz, 1H).
FAB-MS m/z 535 (M+H)+.【０１３４】
[工程3]
水素化ナトリウム（55% in oil, 3.2 g, 81 mmol）のTHF懸濁液（32 mL）に、氷冷下、トリエチルりん酸アセテート（16 mL, 81 mmol）を加え、1時間攪拌した後、工程2で得られた1-ヒドロキシ体（4.4 g, 8.1 mmol）を加え、室温で18時間攪拌した後、70 ℃で2時間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝3/1）で精製し、エチルエステル体（3.9 g,収率79%）をアノマー位立体異性体混合物（α/β＝1/11）として得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.53-7.22 (m, 20H), 4.95 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.90 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.44-4.21 (m, 3H), 3.77-3.51 (m, 6H), 2.73 (dd, J= 15.3, 3.0 Hz, 1H), 2.44 (dd, J= 15.3, 8.0 Hz, 1H), 1.14 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
ESI-MS m/z 611 (M+H)+.
[工程4]
工程3で得られたエチルエステル体（3.9 g, 8.1 mmol）の酢酸/無水酢酸溶液（1/1, 20 mL）に濃硫酸（0.030 mL）を0 ℃で加え、同温度で15分攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝1/1）で精製し、アセチル体（2.7 g, 収率58%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.37-7.21 (m, 15H), 4.97 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 4.80 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.64 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.14-3.98 (m, 4H), 3.88 (m, 1H), 3.76-3.53 (m, 4H), 2.78 (dd, J = 15.4, 3.1 Hz, 1H), 2.48 (m, 1H), 1.96 (s, 3H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
[工程5]
工程4で得られたアセチル体（2.7 g, 4.7 mmol）のエタノール溶液（300 mL）にナトリウムエトキシド（0.45 g, 6.6 mmol）を加え、室温で30分攪拌した。反応混合物を塩酸（10 mL, 1.0 mol/L）に注ぎいれ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下で溶媒を留去しヒドロキシ体（2.8 g, 定量的）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.20-7.13 (m, 15H), 4.89 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.98 (qd, J = 7.2, 1.6 Hz, 2H), 3.79 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 3.69-3.53 (m, 4H), 3.36-3.31 (m, 2H), 2.69 (dd, J = 15.4, 2.8 Hz, 1H), 2.34 (m, 1H), 1.09 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
ESI-MS m/z 521 (M+H)+.【０１３５】
[工程6]
工程5で得られたヒドロキシ体（5.5 g, 14 mmol）のDMF溶液（10 mL）に塩化tert-ブチルジメチルシリル（0.71 g, 4.7 mmol）およびイミダゾール（0.64 g, 9.4 mmol）を氷冷下で加え、室温で1日攪拌した。反応混合物に水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝20/1）で精製し、シリル体（2.4 g, 収率81%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.33-7.25 (m, 15H), 4.95 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.92 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.03 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.96 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.75-3.61 (m, 5H), 3.39 (m, 1H), 2.72 (dd, J = 15.3, 2.6 Hz, 1H), 2.43 (m, 1H), 1.15 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.068 (s, 3H), 0.070 (s, 3H).
ESI-MS m/z 635 (M+H)+, 657 (M+Na)+.
[工程7]
水素化リチウムアルミニウム（0.16 g, 4.2 mmol）のTHF懸濁液（120 mL）に窒素雰囲気下、工程6で得られたシリル体（2.4 g, 3.8 mmol）を氷冷下加え、同温度で1.5時間攪拌した。反応混合物に硫酸ナトリウム10水和物（3,2 g, 10 mmol）を加え、室温で1時間攪拌した後、沈殿を濾別して、濾液を減圧濃縮し、粗ヒドロキシ体（2.3 g）を得た。
FAB-MS m/z 591 (M-H)-.
[工程8]
工程7で得られた粗ヒドロキシ体（2.3 g, 3.9 mmol）、臭化ベンジル（0.93 mL, 7.8 mmol）および水素化ナトリウム（55% in oil, 0.31 g, 7.8 mmol）より、参考例16の工程1と同様にして、粗テトラベンジル体を得た。得られた粗テトラベンジル体の塩化メチレン溶液（10 mL）にトリフルオロ酢酸（1.0 mL）を加え、室温で1時間攪拌した。反応混合物を氷冷水に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝4/1）で精製し、化合物T（0.47 g, 収率22%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.37-7.27 (m, 20H), 4.97 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.95 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.74 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 11.4 Hz, 2H), 4.51 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.71 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.68-3.56 (m, 4H), 3.43-3.31 (m, 3H), 2.21 (m, 1H), 1.79 (m, 1H).【０１３６】
参考例36：2,3,4,8-テトラ-O-アセチル-6,7-ジデオキシ-D-オクトース（化合物U）の合成
[工程1]
水素化ナトリウム（2.0 g, 60%, 50 mmol）のDMF懸濁液（10 mL）に、氷冷下、化合物M（7.1 g, 16 mmol）および臭化ベンジル（5.7 mL, 48 mmol）を加え、室温まで昇温し、同温度で12時間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝9/1）で精製し、トリ-O-ベンジル体（7.2 g, 収率60%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.50-7.17 (m, 30H), 4.71-4.56 (m, 6H), 4.26 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.01 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.86 (dd, J = 9.4, 3.1 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 3.1, 1.8 Hz, 1H), 3.78 (m, 1H), 3.53 (dd, J = 9.7, 1.7 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 3.26 (dd, J = 9.7, 5.4 Hz, 1H).
FAB-MS m/z 705 (M-H)-.
[工程2]
工程1で得られたトリ-O-ベンジル体（35 g, 50 mmol）を1,4-ジオキサンとメタノールの混合溶媒（1/1, 200 mL）に溶解し、氷冷下、トリフルオロ酢酸（20 mL）を加え、室温で12時間攪拌した。反応混合物に炭酸カリウムを加え、析出した塩を濾別し、濾液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝4/1）で精製し、6-ヒドロキシ体（15.2 g, 収率71%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.38-7.29 (m, 15H), 4.95(d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.09-3.75 (m, 5H), 3.65 (m, 1H), 3.31 (s, 3H).
FAB-MS m/z 463 (M-H)-.【０１３７】
[工程3]
塩化オキサリル（2.2 mL, 24 mmol）のTHF溶液（100 mL）にジメチルスルフィド（2.0 mL, 26 mmol）のTHF溶液（5.0 mL）を-78 ℃で加え、同温度で1時間攪拌した。-78 ℃で、反応混合物に工程2で得られた6-ヒドロキシ体（3.0 g, 12 mmol）のTHF（20 mL）溶液をゆっくり滴下し、同温度で1時間攪拌した。反応混合物にトリエチルアミン（7.4 mL, 52 mmol）を加え、室温まで昇温し30分攪拌した後、トリフェニルホスホラニリデン酢酸メチル（10 g, 30 mmol）を加え、1時間攪拌した。反応混合物に水を加え、10分間攪拌した後、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝4/1）で精製し、α,β-不飽和エステル（5.1 g, 収率82%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.37-7.28 (m, 15H), 7.14 (dd, J = 15.8, 4.7 Hz, 1H), 6.24 (dd, J = 15.8, 1.7 Hz, 1H), 4.90 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.61 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.92 (dd, J = 9.3, 3.0 Hz, 1H), 3.82-3.71 (m, 4H), 3.62 (s, 3H), 3.15 (s, 3H).
API-MS m/z 536 (M+H2O)+, 487 (M-MeO)+.
[工程4]
工程3で得られたα,β-不飽和エステル（3.3 g, 6.4 mmol）のTHF溶液（100 mL）に、窒素雰囲気下、水素化リチウムジイソプロピルアルミニウムのTHF溶液（13 mL,1.0 mol/L）を-78 ℃で滴下し、同温度で1時間攪拌し、さらに水素化リチウムジイソプロピルアルミニウムのTHF溶液（13 mL,1.0 mol/L）を滴下し、同温度で30分間攪拌した。反応混合物を氷冷下、1.0 mol/L塩酸（50 mL）に注ぎいれ、2.5時間攪拌し、酢酸エチルとヘキサンの混合液（1/1）で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮し、アルコール体（4.1 g）を得た。【０１３８】
得られたアルコール体（4.1 g）のメタノール溶液（20 mL）に10%パラジウム炭素（90 mg）を加え、水素雰囲気下、室温で14時間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別した。濾液を濃縮し、テトラヒドロキシ体（1.4 g）を得た。
得られたテトラヒドロキシ体（1.4 g）のピリジン溶液（15 mL）に無水酢酸（15 mL）を加え、室温で1時間攪拌した。その後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝3/1）で精製し、テトラアセトキシ体（0.53 g, 収率21%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.29 (dd, J= 9.9, 3.4 Hz, 1H), 5.23 (dd, J= 3.4, 1.7 Hz, 1H), 5.11 (t, J= 9.9 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.75 (ｍ, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.05 (s, 6H), 1.99 (s, 3Ｈ) 1.71-1.54 (m, 4H).
FAB-MS m/z: 413 (M+Na)+,391 (M+H)+, 359 (M-OMe)-.
[工程5]
工程3で得られたテトラアセトキシ体（0.25 g, 0.64 mmol）の無水酢酸溶液（6.0 mL）に0 ℃で濃硫酸（0.010 mL）を加え、30分攪拌後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。残渣をDMF（15 mL）に溶解し、ヒドラジンアセテート（0.51 g, 5.6 mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応混合物を水に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝4/1）で精製し、化合物U（0.52 g, 定量的）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 5.39 (dd, J = 9.9, 3.4 Hz, 1H), 5.27 (dd, J = 3.4, 1.6 Hz, 1H), 5.15-5.05 (m, 2H), 4.07 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.46 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.91 (m, 1H), 1.70-1.56 (m, 3H).
FAB-MS m/z: 359 (M-OH)+, 399 (M+Na)+.【０１３９】
参考例37：アデノシン=5’-(2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-β-D-マンノピラニルメトキシ)ジホスファート（化合物24）の合成
[工程1]
化合物S（70 mg, 0.12 mmol）、DMAP（18 mg, 0.14 mmol）およびクロロリン酸ジフェニル（0.030 mL, 0.14 mmol）より、参考例3と同様にして、ジフェニルリン酸エステル（90 mg, 収率96%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.61-7.21 (m, 30H), 4.95 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.52 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.41-4.91 (m, 3H), 3.88 (m, 1H), 3.72-3.68 (m, 2H), 3.50 (m, 1H), 3.41 (m, 1H).
ESI-MS m/z 787 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られたジフェニルリン酸エステル（90 mg, 0.12 mmol）のメタノール溶液（10 mL）に10%パラジウム炭素（90 mg）を加え、水素雰囲気下、室温で14時間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別した。濾液を濃縮し、テトラヒドロキシ体（51 mg）を得た。
ESI-MS m/z 427 (M+H)+.【０１４０】
[工程3]
工程2で得られたテトラヒドロキシ体（51 mg）のピリジン溶液（1.0 mL）に無水酢酸（1.0 mL）を加え、室温で1時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝3/1）で精製し、アセチル体（22 mg, 収率31%）を得た。
ESI-MS m/z 595 (M+H)+.
［工程4］
工程3で得られたアセチル体（22 mg, 0.037 mmol）のエタノール溶液（1.0 mL）溶液に酸化白金（5.0 mg）を加え、水素雰囲気下、室温で5日間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/メタノール＝20/1）で精製し、リン酸ジエステルを得た。得られたリン酸ジエステルをエタノール(0.50 mL）に溶解し、酸化白金（10 mg）を加え、水素雰囲気下、室温で1日攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮し、脱フェニル体（11 mg, 収率68%）を得た。
FAB-MS m/z 441 (M-H)-.
［工程5］
工程4で得られた脱フェニル体（11 mg, 0.026 mmol）、アデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（11 mg, 0.026 mmol）およびテトラゾール（18 mg, 0.026 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物24のアンモニウム塩（15 mg, 収率72%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.52 (s, 1H), 8.23 (br s, 1H), 6.13 (dd, J = 6.5, 1.1 Hz, 1H), 5.37 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 10.1, 9.9 Hz, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.67 (dd, J = 5.1, 4.4 Hz, 1H), 4.49 (dd, J = 4.2, 3.9 Hz, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.25-4.15 (m, 3H), 4.00-3.82 (m, 3H), 3.53 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 2.14 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.95 (s, 3H).
FAB-MS m/z 770 (M-H)-.【０１４１】
参考例38：アデノシン=5’-(β-D-マンノピラニルメトキシ)ジホスファート（化合物25）の合成
参考例37で得られた化合物24のアンモニウム塩(15 mg, 0.019 mmol）より、実施例2と同様にして、化合物25（1.8 mg, 収率17%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm); 8.49 (s, 1H), 8.23 (br s, 1H), 6.11 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.70 (m, 1H), 4.48 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 4.9, 3.6 Hz, 1H), 4.19-4.15 (m, 2H), 4.04-3.93 (m, 2H), 3.81(dd, J = 10.1, 3.3 Hz, 1H), 3.70-3.60 (m, 2H), 3.54-3.49 (m, 2H), 3.20 (m, 1H), 3.13 (m, 1H).
FAB-MS m/z 602 (M-H)-.
【実施例１】
【０１４２】
アデノシン=5’-(2,3,4,7-テトラ-O-アセチル-6-デオキシ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物1）の合成
化合物P（0.030 g, 0.070 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.050 g, 0.070 mmol）をピリジン（1.0 mL）に溶解し、得られた溶液を減圧下で濃縮して乾燥した。残渣に、ピリジン（1.0 mL）およびモリキュラシーブス4A（5.0 mg）を加え、室温で5日間攪拌した。反応混合物からモレキュラシーブスを濾別し、濾液を減圧濃縮した。残渣をDEAE Sephadex A-25カラムクロマトグラフィー（アマシャムバイオサイエンス社製、酢酸でpH5.0に調整した酢酸アンモニウム溶液0.2-0.3 mmol/Lで溶出）で精製し、化合物1のアンモニウム塩（0.013 g, 収率23%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.53 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 6.12 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.48 (br s, 1H), 5.42 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.96 (dd, J = 10.1, 9.4 Hz, 1H), 4.72-4.68 (m, 2H), 4.47 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 4.16-4.04 (m, 3H), 3.66 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.88-1.75 (m, 2H).
FAB-MS m/z 770 (M-H)-.
【実施例２】
【０１４３】
アデノシン=5’-(6-デオキシ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物2）の合成
化合物1のアンモニウム塩（0.0080 g, 0.0093 mmol）をメタノール、重炭酸トリエチルアンモニウムバッファー液（pH = 8.0, 0.1 mol/L）およびトリエチルアミンの混合溶液（14/13/1, 7.2 mL）に溶解し、-30 ℃で2週間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、Dowex 50(H+ form)を加え、pH値を約4.0に調整した。レジンを濾別した後、濾液を高速液体クロマトグラフィー［カラム；Develosil RPAQURUS（野村化学株式会社）、直径；4.6 mmx25 cm、検出波長；260 nm、流出溶媒；0.5%酢酸水溶液（1.0 mL/分）、検出時間10-15分間］で分取精製し、化合物2（0.0016 g, 28%）を得た。
1H-NMR(500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.52 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 6.15 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.70 (m, 1H), 4.54 (dd, J = 5.1, 3.5 Hz, 1H), 4.41 (dd, J = 2.8, 2.7 Hz, 1H), 4.23-4.20 (m, 2H), 4.09 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 3.77 (m, 1H), 3.72 (m, 1H), 3.63 (dd, J = 9.4, 3.3 Hz, 1H), 3.44 (dd, J = 9.5, 9.4 Hz, 1H), 3.38 (ddd, J = 9.8, 9.5, 2.4 Hz, 1H), 2.16 (m, 1H), 1.66 (m, 1H).
FAB-MS m/z 602 (M-H)-.
【実施例３】
【０１４４】
アデノシン=5’-(7-O-アセチル-6-デオキシ-2,3,4-トリ-O-メチル-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物3）の合成
化合物R（0.027 g, 0.078 mmol）およびアデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.056 g, 0.079 mmol）より、実施例1と同様にして、化合物3のアンモニウム塩（0.0085 g, 収率15%）をアノマー位立体異性体混合物（α/β＝2/1）として得た。
FAB-MS m/z 686 (M-H)-.
【実施例４】
【０１４５】
アデノシン=5’-(6-デオキシ-2,3,4-トリ-O-メチル-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物4）の合成
化合物3（0.0050 g, 0.0073 mmol）より、実施例2と同様にして、化合物4のアンモニウム塩（0.0018 g, 収率16%）をアノマー位立体異性体混合物（α/β＝2/1）として得た。
FAB-MS m/z 644 (M-H)-.
【実施例５】
【０１４６】
アデノシン=5’-(2,3,4,7-ヘキサ-O-アセチル-6-デオキシ-β-D-マンノヘプトピラニルメトキシ)ジホスファート（化合物26）の合成
[工程1]
化合物T（0.19 g, 0.33 mmol）、DMAP（48 mg, 0.40 mmol）およびクロロリン酸ジフェニル（0.082 mL, 0.40 mmol）より、参考例3と同様にして、粗ジフェニルリン酸エステル（0.39 g）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.37-7.17 (m, 30H), 4.93 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.91 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 11.3 Hz, 2H), 4.45 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.86 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 3.59-3.51 (m, 4H), 3.35 (td, J = 9.3, 2.6 Hz, 1H), 2.15 (m, 1H), 1.74 (m, 1H).
ESI-MS m/z 801 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られた粗ジフェニルリン酸エステル（0.39 g, 0.33 mmol）および10%パラジウム炭素（18 mg）より、参考例37の工程2と同様にして、粗テトラヒドロキシ体（0.20 g）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.42-7.38 (m, 4H), 7.26-7.20 (m, 6H), 4.46-4.36 (m, 2H), 3.82 (br s, 1H), 3.71-3.65 (m, 3H), 3.42-3.39 (m, 2H), 3.22 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.69 (m, 1H).
ESI-MS m/z 441 (M+H)+.
[工程3]
工程2で得られた粗テトラヒドロキシ体（0.20 g）、ピリジン（1.0 mL）および無水酢酸（1.0 mL）より、参考例37の工程3と同様にして、テトラアセチル体（0.14 g, 収率70%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.38-7.30 (m, 4H), 7.22-7.18 (m, 6H), 5.45 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.09 (dd, J = 10.0, 9.8 Hz, 1H), 4.99 (dd, J = 10.0, 3.3 Hz, 1H), 4.33-4.06 (m, 4H), 3.86 (m, 1H), 3.48 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.87-1.72 (m, 2H).
ESI-MS m/z 609 (M+H)+.
[工程4]
工程3で得られたテトラアセチル体（0.14 g, 0.23 mmol）および酸化白金（40 mg）より、参考例37の工程4と同様にして、脱フェニル体（60 mg, 収率57%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ(ppm): 5.48 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.22-4.14 (m, 2H), 4.01-3.80 (m, 3H), 3.70-3.58 (m, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.93 (s, 3H), 1.88 (m, 1H), 1.75 (m, 1H).
FAB-MS m/z 455 (M-H)-.
[工程5]
工程4で得られた脱フェニル体（35 mg, 0.077 mmol）、アデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（54 mg, 0.077 mmol）およびテトラゾール（54 mg, 0.077 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物26のアンモニウム塩（30 mg，収率48%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.59 (s, 1H), 8.32 (br s, 1H), 6.19 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.42 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.02-5.00 (m, 2H), 4.73 (dd, J = 5.3, 5.2 Hz, 1H), 4.65 (m, 1H), 4.54 (dd, J = 5.2, 3.8 Hz, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.25-4.24 (m, 2H), 4.22-4.10 (m, 2H), 4.02-3.88 (m, 2H), 3.69 (m, 1H), 3.56 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.91 (m, 1H), 1.77 (m, 1H).
FAB-MS m/z 784 (M-H)-.
【実施例６】
【０１４７】
アデノシン=5’-(6-デオキシ-β-D-マンノヘプトピラニルメトキシ)ジホスファート（化合物27）の合成
化合物26のアンモニウム塩（15 mg, 0.018 mmol）より、実施例2と同様にして、化合物27（3.0 mg, 収率27%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O, 293K)δ(ppm): 8.43 (s, 1H), 8.34 (br s, 1H), 6.05 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.67 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.43 (dd, J = 4.9, 3.6 Hz, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.16-4.14 (m, 2H), 3.92-3.86 (m, 2H), 3.86 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 7.6, 5.3 Hz, 2H), 3.54 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 9.6, 3.4 Hz, 1H), 3.30 (dd, J = 9.6, 9.5 Hz, 1H), 3.13 (td, J = 9.5, 2.5 Hz, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.50 (ddt, J = 14.6, 9.5, 5.3 Hz, 1H).
FAB-MS m/z 616 (M-H)-.
【実施例７】
【０１４８】
アデノシン=5’-(6-デオキシ-β-D-マンノヘプトピラニルメチル)ジホスファート（化合物28）の合成
[工程1]
化合物T（1.1 g, 2.0 mmol）のトルエン溶液（10 mL）にトリフェニルホスフィン（0.79 g, 3.0 mmol）、ヨウ素（0.66 g, 2.6 mmol）およびイミダゾール（0.41 g, 6.0 mmol）を室温で加え、60 ℃で4時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝10/1）で精製し、ヨウ素体（0.66 g, 収率45%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.35-7.28 (m, 20H), 4.94 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.75 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.98 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 9.4, 9.1 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 9.4, 2.7 Hz, 1H), 3.56-3.52 (m, 3H), 3.34-3.17 (m, 3H), 2.34 (m, 1H), 1.93 (m, 1H).
ESI-MS m/z 679 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られたヨウ素体（0.61 g, 0.90 mmol）をトリエチルホスファイト（6.0 mL）に溶解し、130 ℃で1日攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/メタノール＝20/1）で精製し、粗りん酸エステル体（0.95 g）を得た。
ESI-MS m/z 689 (M+H)+.
[工程3]
工程2で得られた粗りん酸エステル体（0.050 g）の塩化メチレン（1.0 mL）に臭化トリメチルシリル（0.019 mL, 0.14 mmol）の塩化メチレン溶液（6.0 mL）を滴下し、室温で4日間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー[クロロホルム/メタノール/30%アンモニア水＝7/4/1]で精製し、リン酸体（6.5 mg, 収率51%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CD3OD)δ(ppm): 7.44-7.20 (m, 20H), 4.97 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.90-4.82 (m, 3H), 4.67 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.69 (dd, J = 9.2, 2.7 Hz, 1H), 3.64-3.56 (m, 3H), 2.30-2.10 (m, 2H), 1.92 (m, 1H), 1.65 (m, 1H).
ESI-MS m/z 631 (M-H)-.
[工程4]
工程3で得られたリン酸体（0.61 g, 0.96 mmol）、アデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.68 g, 0.96 mmol）およびテトラゾール（67 mg, 0.96 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物28のテトラベンジル体のアンモニウム塩（3.0 mg，収率2.0%）を得た。
FAB-MS m/z 960 (M-H)-.
[工程5]
工程4で得られた化合物28のテトラベンジル体のアンモニウム塩（3.0 mg, 0.0031 mmol）のメタノール/水/酢酸混合溶液（50/50/1, 10 mL）に10%パラジウム炭素（90 mg）を加え、水素雰囲気下、60 ℃で30分間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別した。濾液を濃縮し、残渣を高速液体クロマトグラフィー［カラム；Develosil RPAQURUS（野村化学株式会社）、直径；4.6 mmx25 cm、検出波長；260 nm、流出溶媒；0.5%酢酸水溶液（1.0 mL/分）、検出時間10-15分間］で分取精製し、化合物28（0.3 mg，収率16%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, D2O)δ(ppm): 8.47 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 6.10 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.37-4.30 (m, 2H), 4.26 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.09-4.06 (m, 2H), 3.72-3.65 (m, 3H), 3.50 (dd, J = 9.8, 9.1 Hz, 1H), 3.31 (m, 1H), 2.01 (m, 1H), 1.88 (m, 1H).
ESI-MS m/z 600 (M-H)-.
【実施例８】
【０１４９】
アデノシン=5’-(6-デオキシ-β-D-マンノヘプトピラニル)ジホスファート（化合物29）の合成
[工程1]
化合物N（0.98 g, 2.1 mmol）、酢酸（20 mL）および濃硫酸（0.010 mL）より、参考例34の工程2と同様にして、粗ジアセチル体（1.2 g）を得た。
FAB-MS m/z: 571 (M +Na)+.
[工程2]
工程1で得られた粗ジアセチル体（1.2 g, 2.1 mmol）の塩化メチレン溶液（20 mL）にトリメチルホスファート（0.63 mL, 5.0 mmol）およびトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（0.56 mL, 2.5 mmol）の塩化メチレン溶液（5.0 mL）を氷冷下で加え、同温度で2時間攪拌した。反応混合物を氷水に注ぎいれ、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル＝3/1）で精製し、リン酸エステル（0.32 g, 収率25%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.45-7.43 (m, 2H), 7.35-7.26 (m, 13H), 5.00 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 2.8, 0.9 Hz, 1H), 4.22-4.15 (m, 2H), 3.78-3.76 (m, 2H), 3.74-3.68 (m, 6H), 3.58 (dd, J = 9.3, 2.8 Hz, 1H), 3.33 (td, J = 9.3, 2.6 Hz, 1H), 2.20 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.83 (m, 1H).
FAB-MS m/z 599 (M+H)+.
[工程3]
工程2で得られたリン酸エステル（0.32 g, 0.54 mmol）および臭化トリメチルシリル（0.33 g, 22 mmol）より、実施例7の工程3と同様にして、リン酸体（0.22 g，収率72%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, CD3OD)δ(ppm): 7.49-7.47 (m, 2H), 7.35-7.33 (m, 2H), 7.29-7.26 (m, 11H), 4.93 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.85 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.40 (br s, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.64-3.58 (m, 3H), 3.30 (m, 1H), 2.12 (m, 1H), 1.97 (s, 3H), 1.74 (m, 1H).
FAB-MS m/z 571 (M+H)+.
[工程4]
工程3で得られたリン酸体（0.14 g, 0.25 mmol）、アデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.17 g, 0.25 mmol）およびテトラゾール（18 mg, 0.25 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物29の保護体のアンモニウム塩（45 mg，収率5.0%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.55 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.51 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.35-7.20 (m, 14H), 6.08 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.88 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.85-4.78 (m, 2H), 4.71 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.65-4.62 (m, 2H), 4.57 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.52-4.48 (m, 2H), 4.45 (m, 1H), 4.26-4.18 (m, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.82 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 3.66 (dd, J = 9.3, 2.9 Hz, 1H), 3.59 (dd, J = 9.4, 9.3 Hz, 1H), 3.33 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.95 (s, 3H), 1.70 (m, 1H).
FAB-MS m/z 944 (M-H+2Na)+; 922 (M+Na)+; 898 (M-H)-.
［工程5］
工程4で得られた化合物29の保護体のアンモニウム塩（24 mg, 0.027 mmol）より、実施例2と同様にして、脱アセチル体（14 mg, 収率44%）を得た。
FAB-MS m/z 887 (M+Na)+; 856 (M-H)-.
［工程6］
工程5で得られた脱アセチル体（10 mg, 0.012 mmol）および10%パラジウム炭素（10 mg）より、実施例7の工程5と同様にして、化合物29（3.0 mg, 収率43%）を得た。
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.62 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 6.19 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.80 (dd, J = 5.6, 5.0 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 5.0, 3.8 Hz, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.25-4.24 (m, 3H), 3.82 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.72 (m, 1H), 3.59 (dd, J = 9.6, 3.3 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 9.5, 9.4 Hz, 1H), 3.33 (td, J = 9.5, 2.6 Hz, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.67 (m, 1H).
ESI-MS m/z 588 (M+H)+; 586 (M-H)-.
【実施例９】
【０１５０】
アデノシン=5’-(6-デオキシ-β-D-マンノヘプトピラノシル)-a,β-メチレンジホスファート（化合物30）の合成
[工程1]
メチレンジリン酸トリベンジル（1.1 g, 2.5 mmol）および2’,3’-ジアセチルアデノシン（1.8 g, 5.0 mmol）をピリジン（1.0 mL）に溶解し、溶媒を減圧留去し、水分を完全に除去した。残渣をピリジン（2.0 mL）に溶解し、DIAD（10 mmol）のトルエン溶液（5.2 mL）およびトリフェニルホスフィン（2.6 g, 10 mmol）を加え、40 ℃で2時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/メタノール＝9/1）で精製し、テトラリン酸エステル（0.36 g, 収率18%）をジアステレオ混合物として得た。
ESI-MS m/z 779 (M+H)+.
[工程2]
工程1で得られたテトラリン酸エステル（0.36 g, 0.46 mmol）のDMF溶液（5.0 mL）にキヌクリジン（48 mg, 0.43 mmol）を加え、120 ℃で30分間攪拌した。その後、反応混合物を減圧濃縮し、残渣を高速液体クロマトグラフィー［カラム；ODS-3（GL-Science社）、直径；4.6 mmx25 cm、検出波長；260nm、流出溶媒；アセトリトリル/10 mmol/L酢酸アンモニウム水溶液＝15/85〜45/65グラジュエント（20分間、1.0 mL/分）、検出時間15-20分間］により精製し、トリリン酸エステル（96 mg, 収率30%）をジアステレオ混合物として得た。
ESI-MS m/z 687 (M-H)-.
[工程3]
工程2で得られたトリリン酸エステル（90 mg, 0.26 mmol)のTHF溶液（1.0 mL）に化合物O（180 mg, 0.52 mmol)、トリフェニルホスフィン（200 mg, 0.78 mmol）、DIAD（0.78 mmol）のトルエン溶液（0.39 mL）を加え、室温で1時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/メタノール＝9/1）で精製し、糖リン酸体（82 mg, 収率61%）を得た。
ESI-MS m/z 1034 (M+H)+.
[工程4]
工程3で得られた糖リン酸体（82 mg, 0.079 mmol）のエタノール溶液（1.0 mL）にパラジウム炭素（8.0 mg）を加え、水素雰囲気下、室温で1時間攪拌した。反応混合物から触媒を濾別し、濾液を濃縮して、残渣をメタノール/水/トリエチルアミン（3.7 mL）に溶解し、室温で5時間攪拌した。次いで濾過し、濾液を濃縮し、残渣をDEAE Sephadex A-25カラムクロマトグラフィー（アマシャムバイオサイエンス社製、酢酸でpH5.0に調整した酢酸アンモニウム溶液0.2-0.3 mmol/Lで溶出）で精製し、化合物30（11 mg, 収率17%）をアノマー位立体異性体混合物（α:β＝1:2）のアンモニウム塩として得た。
α体
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.62 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 6.16 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.45 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.81 (dd, J = 5.4, 5.3 Hz, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.19-4.18 (m, 2H), 4.01 (m, 1H), 3.89 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.74 (m, 1H), 3.52-3.42 (m, 2H), 2.27 (dd, J = 20.8, 20.5 Hz, 2H), 2.16 (m, 1H), 1.76 (m, 1H).
ESI-MS m/z 600 (M-H)-.
β体
1H-NMR (500 MHz, D2O)δ(ppm): 8.62 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 6.16 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.29 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.81 (dd, J = 5.4, 5.3 Hz, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.19-4.18 (m, 2H), 4.05(d, J = 3.2 Hz,1H), 3.89 (m, 1H), 3.73-3.69 (m, 2H), 3.65 (dd, J = 9.1, 3.3 Hz, 1H), 3.47-3.38 (m, 2H), 2.27 (dd, J = 20.8, 20.5 Hz, 2H), 2.09 (m, 1H), 1.65 (m, 1H).
ESI-MS m/z 600 (M-H)-.
【実施例１０】
【０１５１】
アデノシン=5’-(6,7-ジデオキシ-β-D-マンノオクトピラノシル)ジホスファート（化合物31）の合成
[工程1]
化合物U（0.52 g, 1.4 mmol)、DMAP（0.20 g, 1.7 mmol）およびクロロリン酸ジフェニル（0.37 mL, 1.7 mmol）より、参考例3と同様にして、粗ジフェニルリン酸エステル(0.39 g, 定量的）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 7.61-7.14 (m, 10H), 5.54 (dd, J = 6.8, 1.1 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 5.11 (dd, J = 9.9, 9.6 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 9.9, 3.1 Hz, 1H), 4.00 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.51 (m, 1H), 2.12 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.77 (m, 1H), 1.61-1.58 (m, 3H).
FAB-MS m/z: 609 (M+H)＋.
[工程2]
工程1で得られた粗ジフェニルリン酸エステル（0.17 g, 0.28 mmol）および酸化白金（20 mg）より、実施例5の工程2と同様にして、脱フェニル体（98 mg, 収率80%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm):  5.48 (dd, J = 3.2, 1.4 Hz, 1H), 5.40 (d, J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 5.14 (dd, J = 9.9, 3.2 Hz, 1H), 5.02 (dd, J = 9.9, 9.8 Hz, 1H), 4.08 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.62 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.78-1.64 (m, 3H), 1.53 (m, 1H).
ESI-MS m/z: 455 (M-H)-.
[工程3]
工程2で得られた脱フェニル体（97 mg, 0.20 mmol）、アデノシン=5’-ホスホモルホリデートの4’-モルホリン-N,N’-ジシクロヘキシルカルボキサミジニウム塩（0.14 g, 0.2 mmol）およびテトラゾール（14 mg, 0.20 mmol）より、参考例21と同様にして、化合物31のアンモニウム塩（1.6 mg, 収率2.0%）を得た。
1H-NMR (300 MHz, CDCl3)δ(ppm): 8.53 (br s, 1H), 8.27 (s, 1H), 6.12 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.47 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 5.38 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 5.04 (dd, J = 9.6, 3.2 Hz, 1H), 4.90 (dd, J = 9.7, 9.6 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.45 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.35 (m, 1H), 4.19-4.16 (m, 2H), 3.96-3.93 (m, 2H), 3.37 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.73 (m, 1H), 1.59-1.51 (m, 2H), 1.40 (m, 1H).
FAB-MS m/z 784 (M-H)-.
【実施例１１】
【０１５２】
微生物を利用したアデノシン=5’-(D-グリセロ-β-D-マンノヘプトピラノシル)ジホスファート（化合物16）の製造法
種菌としてKY13101株を用いた。該菌株を、下記の組成からなる殺菌前の培地（pH 7.0、10 mL：以下、種培地と呼ぶ）を入れた試験管に植菌した。レシプロシェーカーを用いた振盪培養（220 rpm）を28℃で3日間行うことにより、種培養し、第1種培養液を調製した。
種培地の組成：グルコース（10 g/L）、可溶性でんぷん（10 g/L）、肉エキス（3 g/L）、酵母エキス（5 g/L）、トリプトン（5 g/L）、KH2PO4（1 g/L）、MgSO4・7H2O（0.5 g/L）およびMg3(PO4)2・8H2O（0.5 g/L）
種培地（50 mL）を入れた300 mL三角フラスコに第1種培養液を2.5%（容量）の割合で植菌し、ロータリーシェーカーを用いた振盪培養（320 rpm）を28 ℃で2日間行い、第2種培養液を調製した。【０１５３】
種培地（50 mL）を入れた300 mL三角フラスコに第2種培養液を5%（容量）の割合で植菌し、ロータリーシェーカーを用いた振盪培養（320 rpm）を28 ℃で2日間行い、第3種培養液を調製した。
下記組成の発酵培地（2.5 L）を入れた5 Lのジャーファーメンターに、得られた第3種培養液を5%（容量）の割合で植菌し、通気攪拌培養（回転数 400 rpm、通気量 1.25 L/分）を28 ℃で行った。培養中、培地のpH値は特に制御せずに、5日間培養を行った。
発酵培地の組成：グルコース（10 g/L）、可溶性でんぷん（10 g/L）、さなぎ粉（10g/L）、酵母エキス（2 g/L）、ニトロフミン酸（0.25 g/L）、3−モルホリノプロパンスルホン酸（2 g/L：MOPS）、ZnSO4・7H2O（0.01g/L）、MnSO4・4−5H2O（0.01 g/L）、FeSO4・7H2O（0.01 g/L）、CoCl2・6H2O（0.01 g/L）およびMgSO4・7H2O（0.5 g/L）（殺菌前の培地：pH7.0、NaOHおよびH2SO4で調整）
5 Lジャーファーメンターで培養した培養物（12.3 L）を遠心分離することにより得られた「菌体を含む沈殿物」にエタノール（6.15 L）を加え、さらに遠心分離することにより得られた上清を抽出液として得た。この抽出液を濾過した後、0.2%酢酸水溶液を加え、ロータリーエバポレーターでエタノールを留去した。残渣をDiaion HP−20（三菱化学社製）に通塔した。非吸着画分と0.2%酢酸を含む水で洗浄することにより得られた画分をDEAE Sephadex A−25カラムクロマトグラフィー（ファルマシア社製）で精製した（酢酸でpH 5に調整した酢酸アンモニウム水溶液で、0.1 mol/L、0.2 mol/L、0.3 mol/L、0.4 mol/Lおよび0.5 mol/Lと段階的に溶出）。0.2 mol/Lおよび0.3 mol/Lで溶出された活性画分を凍結乾燥した。得られた粉末をカラムクロマトグラフィー［カラム；YMC-GEL ODS-AQ 120-S50（ワイエムシィ社製）、流出溶媒；0.2%酢酸水溶液（5 mL/分）］で精製した。活性画分を凍結乾燥して得られた粉末をToyopearl HW40 superfine（東ソー社製）で精製し（0.2%酢酸水溶液で溶出）、活性画分を凍結乾燥した。得られた粉末を逆相高速液体カラムクロマトグラフィー［カラム；Develosil RPAQUEOUSカラム（野村化学社製）、直径；4.6 x 250 mm、検出波長；260 nmの紫外吸収、流出溶媒；0.5%酢酸水溶液（1 mL/分）、カラム温度；30 ℃］で精製し、活性画分（保持時間 13.1分）を凍結乾燥した。さらに得られた粉末を逆相高速液体カラムクロマトグラフィー［カラム；Develosil RPAQUEOUSカラム（野村化学社製）、直径；4.6 x 250 mm、検出波長；260 nmの紫外吸収、流出溶媒；10 mmol/L酢酸アンモニウム水溶液とアセトニトリルの混合溶媒（99/1、1 mL/分）、カラム温度；30 ℃］で精製し、化合物16（0.07 mg）を得た。
【産業上の利用可能性】
【０１５４】
本発明により、TLR9作動薬、免疫促進剤、抗アレルギー剤、抗腫瘍剤、抗感染症剤等として有用なTLR9の作動活性を有する化合物等が提供される。
【配列表フリーテキスト】
【０１５５】
配列番号１−人工配列の説明：フォワードプライマー
配列番号２−人工配列の説明：リバースプライマー
配列番号３−人工配列の説明：フォワードプライマー
配列番号４−人工配列の説明：リバースプライマー
配列番号５−人工配列の説明：フォワードプライマー
配列番号６−人工配列の説明：リバースプライマー
配列番号７−人工配列の説明：フォワードプライマー
配列番号８−人工配列の説明：リバースプライマー
【図１】
2007119815.tif 000032
【図２】
2007119815.tif 000033
【図３】
2007119815.tif 000034
【配列表】
2007119815000001.app
【国際調査報告】
2007119815.tif 000035
2007119815.tif 000036
2007119815.tif 000037
2007119815.tif 000038
2007119815.tif 000039
2007119815.tif 000040
2007119815.tif 000041