(57)【要約】  特定の構造式を有するフェニルアラニン誘導体の結晶、特に、取り扱いに優れた結晶、保存安定性、耐湿性、あるいは溶解性に優れる結晶及び工業スケールでの製造に耐えうる結晶、それらの製造方法及びその使用、特に医薬組成物の有効成分としての使用を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）で示される化合物又はその塩の結晶。
2006137450.tif 000017
（I）
【請求項２】
式（I）で示される化合物の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｄ型結晶、Ｅ型結晶又はＦ型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000018
【請求項３】
式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Cl１型結晶、Cl２型結晶、Cl３型結晶、Cl４型結晶、又はCl5型結晶である請求項１記載の結晶
2006137450.tif 000019
【請求項４】
式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、NW1型結晶、NW2型結晶、NW4型結晶、NW5型結晶、N1型結晶、N2型結晶、N3型結晶、N4型結晶、N5型結晶、Cl6型結晶、Cl7型結晶又はCl8型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000020
【請求項５】
式（I）で示される化合物の硫酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Su１型結晶、Su２型結晶又はSu３型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000021
【請求項６】
式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Br１型結晶、Br２型結晶、Br３型結晶、Br４型結晶又はBr５型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000022
【請求項７】
式（I）で示される化合物の燐酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Pho１型結晶、Pho２型結晶、Pho３型結晶又はPho４型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000023
【請求項８】
式（I）で示される化合物のマレイン酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Mal１型結晶、Mal２型結晶又はMal３型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000024
【請求項９】
式（I）で示される化合物の酢酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Aca１型結晶、Aca２型結晶又はAca３型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000025
【請求項１０】
式（I）で示される化合物のD-酒石酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Tar１型結晶又はTar２型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000026
【請求項１１】
式（I）で示される化合物のL-酒石酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、L-Tar１型結晶又はL-Tar２型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000027
【請求項１２】
式（I）で示される化合物のメタンスルホン酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Ms1型結晶、Ms2型結晶、Ms3型結晶、Ms4型結晶又はMs5型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000028
【請求項１３】
式（I）で示される化合物のクエン酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Ca1型結晶、Ca2型結晶、Ca3型結晶又はCa4型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000029
【請求項１４】
粉末X線回折パターンにおいて、8.2、11.2、14.3、15.6の回折角（２θ）にピークを示す、請求項１記載の結晶。
【請求項１５】
図２０の13C-NMRスペクトルを有する、請求項１記載の結晶。
【請求項１６】
図２１の赤外スペクトルを有する、請求項１記載の結晶。
【請求項１７】
結晶が、式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶である請求項１４から１６いずれか１項記載の結晶。
【請求項１８】
粉末X線回折パターンにおいて、６．４、９．３、１２．９、１５．３の回折角（２θ）にピークを示す、請求項１記載の結晶。
【請求項１９】
図２８の13C-NMRスペクトルを有する、請求項１記載の結晶。
【請求項２０】
図２９の赤外スペクトルを有する、請求項１記載の結晶。
【請求項２１】
結晶が、式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶である請求項１８から２０いずれか１項記載の結晶。
【請求項２２】
式（I）で示される化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アミルアルコール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、ジエチルエーテル及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項２記載の結晶の製造方法。
【請求項２３】
式（I）で示される化合物の塩酸塩を、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、ジエチルエーテル、ニトロメタン、1,2-ジメトキシエタン、イソプロピルアセテート、エチルアセテート、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、４−トリフルオロメチルトルエン及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項３又は４記載の結晶の製造方法。
【請求項２４】
式（I）で示される化合物の硫酸塩を、メタノール、エタノール、1,2-エタンジオール、アセトン、ニトロメタン、エチルアセテート、1,2-ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、シクロヘキサノン、n-ヘプタン、テトラヒドロフラン及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項５記載の結晶の製造方法。
【請求項２５】
式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩を、水、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、ジイソプロピルエーテル、アセトニトリル、エチルアセテート、1,2-ジメトキシエタン、シクロヘキサノン及びテトラヒドロフランから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項６記載の結晶の製造方法。
【請求項２６】
式（I）で示される化合物のリン酸塩を、水、メタノール、プロパノール、アセトン、ジイソプロピルエーテル、ジエチルエーテル、アセトニトリル、エチルアセテート、イソプロピルアセテート、1,2-ジメトキシエタン、1,1,2,2-テトラクロロエタン、ニトロメタン、ジクロロメタン、2,2,2-トリフルオロエタノール、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、シクロヘキサノン、n-ヘプタン、テトラヒドロフラン及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項７記載の結晶の製造方法。
【請求項２７】
式（I）で示される化合物のマレイン酸塩を、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、アセトニトリル、エチルアセテート、イソプロピルアセテート、1,2-ジメトキシエタン及びニトロメタンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項８記載の結晶の製造方法。
【請求項２８】
式（I）で示される化合物の酢酸塩を、プロパノール、ブタノール、アセトン、アセトニトリル、エチルアセテート、イソプロピルアセテート及びニトロメタンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項９記載の結晶の製造方法。
【請求項２９】
式（I）で示される化合物のD-酒石酸塩を、メタノール、アセトン、1,2-ジメトキシエタン、ニトロメタン及びシクロヘキサノンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項１０記載の結晶の製造方法。
【請求項３０】
式（I）で示される化合物のL-酒石酸塩を、アセトン、1,2-ジメトキシエタンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項１１記載の結晶の製造方法。
【請求項３１】
式（I）で示される化合物のメタンスルホン酸塩を、メタノール、アセトン、1,2-ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン及びtert-ブチルメチルエーテルから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項１２記載の結晶の製造方法。
【請求項３２】
式（I）で示される化合物のクエン酸塩を、アセトン、1,2-ジメトキシエタン、ブタノール及びプロパノールから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする請求項１３記載の結晶の製造方法。
【請求項３３】
式（I）で示される化合物とアセトンを含む混合物に、塩化水素を加えることを特徴とする請求項１４〜１７のいずれか１項記載の結晶の製造方法。
【請求項３４】
式（I）で示される化合物の塩酸塩を、アセトンと水を含む溶媒中で加熱した後にアセトン溶媒を加え、冷却することを特徴とする請求項１４〜１７のいずれか１項記載の結晶の製造方法。
【請求項３５】
式（I）で示される化合物の塩酸塩と、アセトン、水、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアセテートからなるグループから選ばれる２以上の溶媒を混合し、懸濁溶液を得ることを特徴とする請求項１４〜１７のいずれか１項記載の結晶の製造方法。
【請求項３６】
式（I）で示される化合物の塩酸塩を、アセトニトリルと水を含む溶媒中で加熱した後にアセトン溶媒を加え、冷却することを特徴とする請求項１８〜２１のいずれか１項記載の結晶の製造方法。
【請求項３７】
請求項１〜２１のいずれか１項記載の結晶を含有する医薬組成物。
【請求項３８】
請求項１〜２１のいずれか１項記載の結晶を含有するα４インテグリン阻害剤。
【請求項３９】
請求項１〜２１のいずれか１項記載の結晶を有効成分とするα４インテグリン依存性の接着過程が病態に関与する炎症性疾患の治療剤または予防剤。
【請求項４０】
請求項１〜２１のいずれか１項記載の結晶を有効成分とするリウマチ様関節炎、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、喘息、乾せん、アレルギー、糖尿病、心臓血管性疾患、動脈硬化症、再狭窄、腫瘍増殖、腫瘍転移、移植拒絶のいずれかの治療剤または予防剤。
【請求項４１】
式（I）で示される化合物の塩酸塩、臭化水素酸塩、あるいはマレイン酸塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の構造式を有するフェニルアラニン誘導体の結晶、その製造方法及びその使用、特に医薬組成物の有効成分としての使用に関する。【０００２】
（発明の背景）
フェニルアラニン誘導体が、α４インテグリン阻害作用を有し、炎症性腸疾患等の治療薬として有用な化合物であることが既に知られている（特許文献１及び２）。
これに対して、本発明者らは、これらの特許文献に具体的に記載されていない特定の新規フェニルアラニン誘導体に、血清存在下でのα４インテグリン阻害活性が特に高く、全身クリアランスが低いこと、経口投与時の血漿中濃度時間下面積やバイオアベイラビリティーが高いこと、また、経口投与時の生体内でのα４インテグリン阻害活性が高いことを見出し、この知見に基づいてＰＣＴ出願（ＰＣＴ/ＪＰ/２００４/０１９７０４）を行なっている。
このＰＣＴ出願の実施例１５１に開示の後述の式（I）で示される化合物（以下、化合物（I）ともいう）またはその医薬的に許容される塩は、ＰＣＴ出願の実施例９９に開示の後述の式（II）で示される化合物のプロドラッグ体であって、活性化合物である式（II）で示される化合物は、極めて優れたα４インテグリン阻害活性を有し、全身クリアランスが低い（血漿中滞留性に優れる）という特徴を有する化合物であり、実用価値の高い化合物である。しかしながら、このＰＣＴ出願の実施例１５１に開示の後述の式（I）で示される化合物は、対応するカルボン酸、対応するアルコール、4Ｍ  塩化水素のジオキサン溶液の混合物を90℃で数時間撹拌し、溶媒を留去し、得られた粗製物を高速液体クロマトグラフィー（水・アセトニトリルそれぞれ0.1%のTFA入り）にて精製し、凍結乾燥を行い回収されたもの（実施例１０１〜１２１の方法Ｃ又は実施例５３の工程３に準じた方法）であって、トリフルオロ酢酸塩の、結晶性に劣る形状のものであった。
一般に、原薬の保存または製剤の加工若しくは保存時に、非晶質や非結晶性固体等の結晶性に劣る原薬では、温度、湿度、空気等の環境条件に対し、物理的および化学的に安定性が悪く又吸湿性が著しい。よって、高純度が必要とされる医薬品の開発に当たっては問題を生じやすく、また工業スケールでの製造には困難を伴いやすい。
また一般に、非晶質や非結晶性固体等の結晶性に劣る原薬は、吸湿分解性を有するため、製剤加工時に利用できる溶媒が無水物に限定され、製剤コストを上昇させる要因にもなりうる。【０００３】
【特許文献１】国際公開第０２/１６３２９号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０３/０７０７０９号パンフレット
【特許文献３】国際公開第０４/７４２６４号パンフレット
【発明の開示】
【０００４】
本発明は、取り扱いに優れた結晶の形態にある化合物（I）又はその塩を提供することを目的とする。
本発明は、又、化合物（I）又はその塩として保存安定性、耐湿性、あるいは溶解性に優れる結晶を提供することを目的とする。
本発明は、また、化合物（I）として工業スケールでの製造に耐えうる結晶を提供することを目的とする。
【０００５】
本発明者らは、上記課題を解決しようと鋭意検討した結果、化合物（I）またはその医薬的に許容される塩の結晶型を探索する中で、特定の溶媒中で加熱した後、特定の温度に冷却すると、種々の形態の結晶を生じ、この結晶を用いると上記課題を解決できるとの知見に基づいて、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、下記の通りである。
（1） 式（I）で示される化合物又はその塩の結晶。
2006137450.tif 000002
（I）
（2） 式（I）で示される化合物の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｄ型結晶、Ｅ型結晶又はＦ型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000003
【０００７】
（3） 式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Cl１型結晶、Cl２型結晶、Cl３型結晶、Cl４型結晶又はCl５型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000004
（4） 式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、NW1型結晶、NW2型結晶、NW4型結晶、NW5型結晶、N1型結晶、N2型結晶、N3型結晶、N4型結晶、N5型結晶、Cl6型結晶、Cl7型結晶又はCl8型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000005
【０００８】
（5） 式（I）で示される化合物の硫酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Su１型結晶、Su２型結晶又はSu３型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000006
（6） 式（I）で示される化合物の臭素酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Br１型結晶、Br２型結晶、Br３型結晶、Br４型結晶又はBr５型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000007
【０００９】
（7） 式（I）で示される化合物の燐酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Pho１型結晶、Pho２型結晶、Pho３型結晶又はPho４型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000008
【００１０】
（8） 式（I）で示される化合物のマレイン酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Mal１型結晶、Mal２型結晶又はMal３型結晶である請求項１記載の結晶。
2006137450.tif 000009
（9） 式（I）で示される化合物の酢酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Aca１型結晶、Aca２型結晶又はAca３型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000010
【００１１】
（10） 式（I）で示される化合物のD-酒石酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Tar１型結晶又はTar２型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000011
（11） 式（I）で示される化合物のL-酒石酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、L-Tar１型結晶又はL-Tar２型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000012
（12） 式（I）で示される化合物のメタンスルホン酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Ms1型結晶、Ms2型結晶、Ms3型結晶、Ms4型結晶又はMs5型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000013
【００１２】
（13） 式（I）で示される化合物のクエン酸塩の結晶が、粉末X線回折パターンにおいて下記の回折角（２θ）にピークを示す、Ca1型結晶、Ca2型結晶、Ca3型結晶又はCa4型結晶である（1）記載の結晶。
2006137450.tif 000014
（14） 粉末X線回折パターンにおいて、8.2、11.2、14.3、15.6の回折角（２θ）にピークを示す、(1)記載の結晶。
（15） 図２０の13C-NMRスペクトルを有する、(1)記載の結晶。
（16） 図２１の赤外スペクトルを有する、(1)記載の結晶。
（17） 結晶が、式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶である(14)から(16)いずれかに記載の結晶。
（18） 粉末X線回折パターンにおいて、６．４、９．３、１２．９、１５．３の回折角（２θ）にピークを示す、(1)記載の結晶。
（19） 図２８の13C-NMRスペクトルを有する、(1)記載の結晶。
（20） 図２９の赤外スペクトルを有する、(1)記載の結晶。
（21） 結晶が、式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶である(18)から(20)いずれか記載の結晶。
【００１３】
（22） 式（I）で示される化合物を、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アミルアルコール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、ジエチルエーテル及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却してすることを特徴とする（2）記載の結晶の製造方法。
（23） 式（I）で示される化合物の塩酸塩を、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、ジエチルエーテル、ニトロメタン、1,2-ジメトキシエタン、イソプロピルアセテート、エチルアセテート、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、４−トリフルオロメチルトルエン及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（3）又は（4）記載の結晶の製造方法。
【００１４】
（24） 式（I）で示される化合物の硫酸塩を、メタノール、エタノール、1,2-エタンジオール、アセトン、ニトロメタン、エチルアセテート、1,2-ジメトキシエタン、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、シクロヘキサノン、n-ヘプタン、テトラヒドロフラン及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（5）記載の結晶の製造方法。
（25） 式（I）で示される化合物の臭素酸塩を、水、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、ジイソプロピルエーテル、アセトニトリル、エチルアセテート、1,2-ジメトキシエタン、シクロヘキサノン及びテトラヒドロフランから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（6）記載の結晶の製造方法。
（26） 式（I）で示される化合物のリン酸塩を、水、メタノール、プロパノール、アセトン、ジイソプロピルエーテル、ジエチルエーテル、アセトニトリル、エチルアセテート、イソプロピルアセテート、1,2-ジメトキシエタン、1,1,2,2-テトラクロロエタン、ニトロメタン、ジクロロメタン、2,2,2-トリフルオロエタノール、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド、シクロヘキサノン、n-ヘプタン、テトラヒドロフラン及びピリジンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（7）記載の結晶の製造方法。
（27） 式（I）で示される化合物のマレイン酸塩を、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、アセトニトリル、エチルアセテート、イソプロピルアセテート、1,2-ジメトキシエタン及びニトロメタンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却してすることを特徴とする（8）記載の結晶の製造方法。
【００１５】
（28） 式（I）で示される化合物の酢酸塩を、プロパノール、ブタノール、アセトン、アセトニトリル、エチルアセテート、イソプロピルアセテート及びニトロメタンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（9）記載の結晶の製造方法。
（29） 式（I）で示される化合物のD-酒石酸塩を、メタノール、アセトン、1,2-ジメトキシエタン、ニトロメタン及びシクロヘキサノンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（10）記載の結晶の製造方法。
（30） 式（I）で示される化合物のL-酒石酸塩を、アセトン、1,2-ジメトキシエタンから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（11）記載の結晶の製造方法。
（31） 式（I）で示される化合物のメタンスルホン酸塩を、メタノール、アセトン、1,2-ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン及びtert-ブチルメチルエーテルから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする(12)記載の結晶の製造方法。
【００１６】
（32） 式（I）で示される化合物のクエン酸塩を、アセトン、1,2-ジメトキシエタン、ブタノール及びプロパノールから選ばれる溶媒中で加熱した後、０〜３０℃に冷却することを特徴とする（13）記載の結晶の製造方法。
（33） 式（I）で示される化合物とアセトンを含む混合物に、塩化水素を加えることを特徴とする（14）〜（17）のいずれかに記載の結晶の製造方法。
（34） 式（I）で示される化合物の塩酸塩を、アセトンと水を含む溶媒中で加熱した後にアセトン溶媒を加え、冷却することを特徴とする（14）〜（17）のいずれかに記載の結晶の製造方法。
（35） 式（I）で示される化合物の塩酸塩と、アセトン、水、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアセテートからなるグループから選ばれる２以上の溶媒を混合し、懸濁溶液を得ることを特徴とする（14）〜（17）のいずれかに記載の結晶の製造方法。
（36） 式（I）で示される化合物の塩酸塩を、アセトニトリルと水を含む溶媒中で加熱した後にアセトン溶媒を加え、冷却することを特徴とする（18）〜（21）のいずれか１項記載の結晶の製造方法。
（37） （1）〜（21）のいずれかに記載の結晶を含有する医薬組成物。
（38） （1）〜（21）のいずれかに記載の結晶を含有するα４インテグリン阻害剤。
（39） （1）〜（21）のいずれかに記載の結晶を有効成分とするα４インテグリン依存性の接着過程が病態に関与する炎症性疾患の治療剤または予防剤。
（40） （1）〜（21）のいずれかに記載の結晶を有効成分とするリウマチ様関節炎、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、喘息、乾せん、アレルギー、糖尿病、心臓血管性疾患、動脈硬化症、再狭窄、腫瘍増殖、腫瘍転移、移植拒絶いずれかの治療剤または予防剤。
（41） 式（I）で示される化合物の塩酸塩、臭化水素酸塩、あるいはマレイン酸塩。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明で対象とする上記式（I）で示される化合物は、下記式（II）である活性本体のプロドラッグである。
2006137450.tif 000015
（II）
上記（１）の結晶中、式（I）で示される化合物の塩としては、塩酸塩、臭素酸塩、及びマレイン酸塩が好ましく、特に塩酸塩が好ましい。
上記式（I）で示される化合物の結晶は、フリー体又はその水和物、溶媒和物の結晶であってもよい。これらは、上記（2）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Ａ型結晶、Ｂ型結晶、Ｄ型結晶、Ｅ型結晶又はＦ型結晶である。【００１８】
このうち、Ａ型結晶は、式（I）で示される化合物を、好ましくはジメチルホルムアミド又はピリジン、特に好ましくはピリジン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で急激に（例えば２０〜４０℃/時間の冷却速度、好ましくは３０℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約２４時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。このようにして得られた結晶は通常水和物の形態である。
Ｂ型結晶は、式（I）で示される化合物を、好ましくは1-ブタノール、ｔ-ブタノール、2-ブタノール、1-プロパノール、2-プロパノール、エタノール、ジエチルエーテル又はジメチルスルホキシド、特に好ましくは1-ブタノール、ｔ-ブタノール又はエタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で急激に（例えば２０〜４０℃/時間の冷却速度、好ましくは３０℃/時間）又は緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約２４時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Ｄ型結晶は、式（I）で示される化合物を、好ましくはメタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で急激に（例えば２０〜４０℃/時間の冷却速度、好ましくは３０℃/時間）又は緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約２４時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Ｅ型結晶は、式（I）で示される化合物を、好ましくはエタノール、ジクロロメタン又はジエチルエーテル、特に好ましくはエタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約２４時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。このようにして得られた結晶は通常無水物の形態である。
Ｆ型結晶は、式（I）で示される化合物を、好ましくはｔ-アミルアルコール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約２４時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。【００１９】
上記式（I）で示される化合物の塩酸塩の結晶は、上記（4）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Cl１型結晶、Cl２型結晶、Cl３型結晶、Cl４型結晶又はCl5型結晶である。又、上記（5）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、NW1型結晶、NW2型結晶、NW4型結晶、NW5型結晶、N1型結晶、N2型結晶、N3型結晶、N4型結晶、N5型結晶、Cl6型結晶、Cl7型結晶又はCl8型結晶である。Cl5型結晶は、上記(14）〜（17）に示したように、（14）に示した粉末X線回折パターンにおける特定の回折角（２θ）のピーク、図２０の13C-NMRスペクトル、及び／または図２１の赤外スペクトルによっても特定される。又、N2型結晶は、上記(18)〜（21）に示したように、（18）に示した粉末X線回折パターンにおける特定の回折角（２θ）のピーク、図２８の13C-NMRスペクトル、及び／または図２９の赤外スペクトルによっても特定される。
このうち、Cl１型結晶は、式（I）で示される化合物の塩酸塩を、好ましくは４−トリフルオロメチルトルエン、ピリジン又はアセトン、特に好ましくはピリジン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Cl２型結晶は、式（I）で示される化合物の塩酸塩を、好ましくはニトロメタン又はジエチルエーテル、特に好ましくはニトロメタン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。【００２０】
Cl３型結晶は、式（I）で示される化合物の塩酸塩を、好ましくは２−ブタノール又は1,2-ジメトキシエタン、特に好ましくは２−ブタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Cl４型結晶は、式（I）で示される化合物の塩酸塩を、好ましくはイソプロピルアセテート又はメタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。又、溶媒として2-プロパノール、アセトニトリル、エタノール又はエチルアセテート、好ましくは2-プロパノールを用いる場合には、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でCl４型結晶を得ることができる。
Cl５型結晶は、式（I）で示される化合物の塩酸塩を、好ましくはテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で、０．５〜１０℃/時間の冷却速度で、好ましくは緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、特に好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Cl5型結晶は、特に好ましい結晶である。
Cl5型結晶は、式（I）で示される化合物とアセトンの混合物に、塩化水素を加えることを特徴とする製造方法により得ることができる。ここで塩化水素を加える際には例えば、塩化水素ガス、塩酸、塩化水素を含有する炭素数１から６のアルコール等を用いることができる。【００２１】
より具体的には例えば、塩酸をアセトンで希釈して0.05〜1.00mmol/mlの塩化水素濃度に調製し、これを式（I）で示される化合物(フリー体)のアセトン溶液に加えて、その混合物を撹拌しながら好ましくは５０〜８０℃、特に好ましくは６０℃に加熱し、次に比較的緩慢に（０.５〜１０℃/時間の冷却速度）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間〜７２時間その温度で熟成させ、析出した結晶をろ別して６０〜８５℃で減圧乾燥することにより、Cl５型結晶を得ることができる。
Cl5型結晶は、又、式（I）で示される化合物の塩酸塩を、アセトンと水を含む混合溶媒中で加熱した後にアセトン溶媒を加え、冷却することを特徴とする製造方法により得ることができる。
より具体的には例えば、アセトンと水の混合溶媒と式（I）で示される化合物の塩酸塩との混合物を、好ましくは５０〜８０℃、特に好ましくは６５℃に加熱して該化合物を溶解し、溶解液を熱時ろ過し、ろ液にアセトンを滴下し、必要に応じてその途中で種晶を加え、得られたスラリーを２〜２０℃、好ましくは１０℃に冷却し、析出した結晶をろ別して６０〜８５℃、好ましくは８０℃で減圧乾燥することによりCl５型結晶を得ることができる。
Cl5型結晶は、又、式（I）で示される化合物の塩酸塩と、アセトン、水、THF、アセトニトリル、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアセテートからなるグループから選ばれる２以上の溶媒を混合し、懸濁溶液を得ることを特徴とする製造方法により得ることができる。
より具体的には例えば、Cl５型結晶ではない式（I）で示される化合物の塩酸塩をアセトンに懸濁させ、１０〜５５℃、好ましくは２５℃で撹拌し、結晶をろ別して６０〜８５℃、好ましくは８０℃で減圧乾燥することによりCl５型結晶を得ることができる。【００２２】
NW1型結晶、NW2型結晶、NW5型結晶は、例えば、式（I）で示される化合物の塩酸塩をアセトニトリル/水混合液と混合した後に冷却し、又は加熱した後冷却し、アセトニトリルあるいはアセトンを滴下し、結晶をスラリーから分離することによって得ることができる。ここで、アセトニトリル/水混合液と式（I）で示される化合物の塩酸塩との量比、その後の冷却又は加熱温度あるいは滴下溶媒の種類を調整することによって、NW1型結晶、NW2型結晶、NW5型結晶をそれぞれ得ることができる。
N1型結晶はNW1型結晶を減圧乾燥することによって得ることができる。N2型結晶はNW2型結晶を減圧乾燥することによって得ることができる。一方、NW2型結晶の溶媒付着状況によって、減圧乾燥によりN3型結晶を得ることができる。N5型結晶はNW5型結晶を減圧乾燥することによって得ることができる。
N2型結晶は又、式（I）で示される化合物の塩酸塩を、アセトニトリルと水を含む溶媒中で加熱した後にアセトン溶媒を加え、冷却することを特徴とする製造方法により得ることができる。
例えば、化合物（I）の塩酸塩を好ましくは５５〜９５vol.％、特に好ましくは７５vol.％のアセトニトリル/水混合液と混合し、好ましくは５５〜８５℃、特に好ましくは70℃に加熱し、均一とする。この溶液を好ましくは２５〜３５℃、特に好ましくは30℃まで冷却した後、アセトンを滴下し、一晩撹拌する。結晶をスラリーから分離し、得られたウェット結晶を好ましくは７０〜９０℃、特に好ましくは80℃に加熱しつつ減圧乾燥を行うことにより得ることができる。
NW4型結晶は、例えば、式（I）で示される化合物の塩酸塩をアセトニトリルと混合した後に、冷却し、又は加熱した後冷却し、結晶をスラリーから分離することによって得ることができる。ここで、アセトニトリルと式（I）で示される化合物の塩酸塩との量比、その後の冷却又は加熱温度を調整することによって、NW4型結晶を得ることができる。
N4型結晶はNW4型結晶を減圧乾燥することによって得ることができる。
Cl6型結晶、Cl7型結晶、Cl8型結晶は、各々ジエチルエーテル、１，２−ジメトキシエタン（DME）、2-プロパノールを溶媒として用い、塩酸を各溶媒で希釈して0.05〜1.00mmol/mlの濃度に調製し、これを式（I）で示される化合物(フリー体)に加えて、その混合物を撹拌しながら好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次に比較的緩慢に（０.５〜１０℃/時間の冷却速度）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間〜７２時間その温度で熟成させ、析出した結晶をろ別して室温で24時間以上減圧乾燥することにより得ることができる。【００２３】
上記式（I）で示される化合物の硫酸塩の結晶は、上記（5）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Su１型結晶、Su２型結晶又はSu３型結晶である。
このうち、Su１型結晶は、式（I）で示される化合物の硫酸塩を、好ましくは1,2-エタンジオール、シクロヘキサノン、ピリジン又はn-ヘプタン、特に好ましくはピリジン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Su２型結晶は、式（I）で示される化合物の硫酸塩を、好ましくはニトロメタン又はエチルアセテート、特に好ましくはニトロメタン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Su３型結晶は、式（I）で示される化合物の硫酸塩を、好ましくは1,2-ジメトキシエタン、エタノール、テトラヒドロフラン、アセトン又はジクロロメタン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。溶媒としてエチルアセテート、メタノール又はジエチルエーテルを用いる場合には、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でSu３型結晶を回収することにより得ることができる。【００２４】
上記式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩の結晶は、上記（6）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Br１型結晶、Br２型結晶、Br３型結晶、Br４型結晶又はBr５型結晶である。
このうち、Br１型結晶は、式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩を、好ましくはシクロヘキサノン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Br２型結晶は、式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩を、好ましくは水中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。しかしながら、溶媒として水又はエタノールを用い、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でBr２型結晶を得るのが好ましい。【００２５】
Br３型結晶は、式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩を、好ましくはアセトン、アセトニトリル又は2-プロパノール、特に好ましくはアセトニトリル中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Br４型結晶は、式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩を、好ましくは2-ブタノール、2-プロパノール又はテトラヒドロフラン、特に好ましくはテトラヒドロフラン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。しかしながら、溶媒として上記溶媒、アセトニトリル又はジイソプロピルエーテルを用い、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でBr４型結晶を得るのが好ましい。この場合、2-ブタノール又はテトラヒドロフランを用いるのが特に好ましい。
Br５型結晶は、式（I）で示される化合物の臭化水素酸塩を、好ましくはエチルアセテート、アセトン又は1,2-ジメトキシエタン、特に好ましくはエチルアセテート又は1,2-ジメトキシエタン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。しかしながら、溶媒としてエチルアセテート又は1,2-ジメトキシエタンを用い、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でBr５型結晶を得るのが好ましい。【００２６】
上記式（I）で示される化合物の燐酸塩の結晶は、上記（7）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Pho１型結晶、Pho２型結晶、Pho３型結晶又はPho４型結晶である。
このうち、Pho１型結晶は、式（I）で示される化合物のリン酸塩を、好ましくはシクロヘキサノン、ピリジン、アセトン又はジクロロメタン、特に好ましくはシクロヘキサノン、ピリジン又はアセトン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。しかしながら、溶媒としてＮ,Ｎ−ジメチルアセトアミド又はアセトンを用い、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でPho１型を得るのも好ましい。
Pho２型結晶は、式（I）で示される化合物のリン酸塩を、好ましくは1,1,2,2-テトラクロロエタン、1,2-ジメトキシエタン、ニトロメタン、水、n-ヘプタン、イソプロピルアセテート、アセトニトリル、エチルアセテート、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン又はジエチルエーテル、特に好ましくは水中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Pho３型結晶は、式（I）で示される化合物のリン酸塩を、好ましくはメタノールに、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Pho４型結晶は、式（I）で示される化合物のリン酸塩を、好ましくは2,2,2-トリフルオロエタノールに、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。【００２７】
上記式（I）で示される化合物のマレイン酸塩の結晶は、上記（8）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Mal１型結晶、Mal２型結晶又はMal３型結晶である。
このうち、Mal１型結晶は、式（I）で示される化合物のマレイン酸塩を、好ましくはニトロメタン、2-ブタノール、イソプロピルアセテート、2-プロパノール又はエタノール、特に好ましくは2-ブタノール、2-プロパノール又はエタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Mal２型結晶は、式（I）で示される化合物のマレイン酸塩を、好ましくは1,2-ジメトキシエタン、アセトニトリル又はエチルアセテート中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Mal３型結晶は、式（I）で示される化合物のマレイン酸塩を、好ましくはアセトン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。【００２８】
上記式（I）で示される化合物の酢酸塩の結晶は、上記（9）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Aca１型結晶、Aca２型結晶又はAca３型結晶である。
このうち、Aca１型結晶は、式（I）で示される化合物の酢酸塩を、好ましくはニトロメタン、アセトニトリル又はアセトン、特に好ましくはアセトン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。しかしながら、溶媒としてイソプロピルアセテート、アセトニトリル又はアセトンを用い、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でAca１型結晶を得るのが好ましい。
Aca２型結晶は、式（I）で示される化合物の酢酸塩を、好ましくは2-ブタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
Aca３型結晶は、式（I）で示される化合物の酢酸塩を、好ましくはエチルアセテート中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。しかしながら、溶媒として2-プロパノールを用い、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でAca１型結晶を得るのが好ましい。【００２９】
上記式（I）で示される化合物のD-酒石酸塩の結晶は、上記（10）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Tar１型結晶又はTar２型結晶である。
このうち、Tar１型結晶は、式（I）で示される化合物のD-酒石酸塩を、好ましくはシクロヘキサノン、ニトロメタン、1,2-ジメトキシエタン又はアセトン、特に好ましくはシクロヘキサノン中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。しかしながら、溶媒としてシクロヘキサノンを用い、熟成時間を約７２時間とする以外は上記と同じ方法でTar１型結晶を得るのが好ましい。
Tar２型結晶は、式（I）で示される化合物のD-酒石酸塩を、好ましくはメタノール中で、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で緩慢に（０.５〜３℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、約１時間又は７２時間その温度で熟成させ、次で生じた結晶を回収することにより得ることができる。
上記式（I）で示される化合物のL-酒石酸塩の結晶は、上記（11）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、L-Tar１型結晶又はL-Tar２型結晶である。
これらの結晶は、式（I）で示される化合物を、L-酒石酸と共に、好ましくは1,2-ジメトキシエタン（L-Tar１型結晶用）又はアセトン（L-Tar２型結晶用）に溶解し、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で比較的緩慢に（０.５〜１０℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、その温度で熟成させ、次で生じた結晶をろ別し、減圧乾燥して回収することにより得ることができる。【００３０】
上記式（I）で示される化合物のメタンスルホン酸塩の結晶は、上記（12）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Ms1型結晶、Ms2型結晶、Ms3型結晶、Ms4型結晶又はMs5型結晶である。
これらの結晶は、式（I）で示される化合物を、メタンスルホン酸と共に、好ましくはメタノール（Ms1型結晶用）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）（Ms2型結晶用）、t-ブチルメチルエーテル（Ms3型結晶用）、ＤＭＥ（１、２−ジメトキシエタン）（Ms4型結晶用）又はアセトン（Ms5型結晶用）に溶解し、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で比較的緩慢に（０.５〜１０℃/時間の冷却速度、好ましくは１℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、その温度で熟成させ、次で生じた結晶をろ別し、減圧乾燥して回収することにより得ることができる。
上記式（I）で示される化合物のクエン酸塩の結晶は、上記（13）に示したように、粉末X線回折パターンにおいて特定の回折角（２θ）にピークを示す、Ca1型結晶、Ca2型結晶、Ca3型結晶又はCa4型結晶である。
これらの結晶は、式（I）で示される化合物を、クエン酸と共に、好ましくはＩＰＡ（２−プロパノール）（Ca1型結晶用）、1-ブタノール（Ca2型結晶用）、ＤＭＥ（Ca3型結晶用）又はアセトン（Ca4型結晶用）に溶解し、好ましくは５０〜８０℃、特に６０℃で加熱し、次で比較的緩慢に（０.５〜１０℃/時間の冷却速度、好ましくは５℃/時間）２〜２０℃、好ましくは５℃に冷却し、その温度で熟成させ、次で生じた結晶をろ別し、減圧乾燥して得ることができる。【００３１】
本明細書において単に「プロパノール」とは１−プロパノールもしくは２−プロパノールを意味し、好ましくは２−プロパノールを意味する。また単に「ブタノール」とは１−ブタノール、２−ブタノール、２−メチル−１−プロパノールもしくはtert−ブタノールを意味し、好ましくは１−ブタノールを意味する。
なお、粉末X線回折パターンの回折角（２θ）のピーク値は測定条件等の微妙な違い等により若干変化しうる。本明細書記載の回折角は当然、そういった誤差を許容しうる。
又、13C-NMRスペクトル、赤外スペクトルやＤＳＣデータにおいても、結晶の同一性の認定においては全体的なパターンが重要であり、該スペクトル等は測定条件等によって多少変わりうる。
上記製造方法において、熟成時間１時間は、３０分〜５時間に変更することができ、又約７２時間は、４８時間以上、好ましくは４８〜１２０時間に変更することができる。
上記結晶中、Cl５型結晶、Br３型結晶、Br４型結晶、Br５型結晶及びMal２型結晶が好ましい。特にCl５型結晶及びBr５型結晶が好ましい。加えて、N2型結晶も特に好ましい結晶である。
本発明の結晶の製造に用いられる式（I）で示される化合物の塩は、溶媒に加えられる前から塩の形態となっているものでも、溶媒に加えられた状態で、そこに対応する酸を加えられて、系中で塩となったものでもよい。
又、上記塩を調製する場合には、式（I）で示される化合物（フリー体）に対して、塩化水素、臭化水素や酢酸などの酸が１：１モル比以上、好ましくは１：１.０５〜１：１.２モル比程度、特に好ましくは１：１.１モル比となるように塩酸などを添加するのがよい。
又、式（I）で示される化合物の塩、特に塩酸塩、臭化水素酸塩、及びマレイン酸塩は上記好ましい結晶の原料となる点でそれ自体、有用である。
又、結晶析出溶媒の量は任意とすることができるが、式（I）で示される化合物（フリー体）やその塩を１質量部とした場合、２〜１０００質量部とするのが好ましく、特に５〜４０質量部とするのがよい。
本発明の製造方法において、原料として用いる化合物（１）として、非晶質（アモルファス）や非結晶性固体を用いることのみならず、非晶質（アモルファス）や非結晶性固体を用いて一旦結晶を調製し、ついで、得られた結晶を用いて本発明の別の製造により別の結晶を製造してもよい。
本発明の結晶は、使用しやすい上、原薬若しくは製剤の「保存安定性」または「耐湿性」に優れる結晶であり、「工業スケールでの製造に耐えうる」結晶である点で有用である。さらには溶解性にもすぐれる。【００３２】
上記式（II）で表される化合物のプロドラッグである上記式（I）で表される化合物は、特に、経口投与後に優れた効果の持続性を示す。また膜透過性が良好で、経口投与における血漿中濃度時間下面積、バイオアベイラビリティーも良好である。また、安全性にも優れる。
従って、本発明の結晶は優れたα４インテグリン阻害剤として使用でき、さらには、α４インテグリン依存性の接着過程が病態に関与する炎症性疾患、リウマチ様関節炎、炎症性腸疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎を含む）、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、喘息、乾せん、アレルギー、糖尿病、心臓血管性疾患、動脈硬化症、再狭窄、腫瘍増殖、腫瘍転移、移植拒絶いずれかの治療剤または予防剤の有効成分として効果的に用いることができる。
また、子癇前症、虚血性脳障害（脳梗塞を含む）、全身性硬化症、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、サルコイドーシス、巨細胞性動脈炎、ブドウ膜炎、肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、変形性関節症、アルツハイマー病、脊髄損傷、外傷性脳損傷、原発性硬化性胆管炎、C型肝炎に起因した肝硬変、活動性慢性肝炎、仙腸骨炎、強直性脊椎炎、上強膜炎、虹彩炎、ブドウ膜炎、結節性紅斑、壊疽性膿皮症、自己免疫性肝炎いずれかの治療剤または予防剤の有効成分として効果的に用いることができる。【００３３】
さらには、上記疾患に限らず、α４インテグリンが病態に関与する可能性のある疾患の治療剤または予防剤の有効成分として効果的に用いることができる。
上記目的のために用いる投与量は、目的とする治療効果、投与方法、治療期間、年齢、体重などにより決定されるが、経口もしくは非経口（例えば、静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、坐薬、注腸、軟膏、貼布、舌下、点眼、吸入等）のルートにより、通常成人一日あたりの投与量として経口投与の場合で１μｇ〜５ｇ、好ましくは１ｍｇ〜１ｇ、非経口投与の場合で０.０１μｇ〜１ｇを用いる。
本発明の結晶は、種々の剤型への適用が可能であり、そのまま、若しくは各種の医薬的に許容しうる担体とともに医薬組成物に調製できる。
本発明の結晶を含有する医薬組成物として、実質的に治療効果を発揮できる割合以上に本発明の結晶を含有するものが好ましい。実質的に治療効果を発揮できる割合は該医薬組成物の投与量、目的とする治療効果などにより決定される。
医薬的に許容し得る担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が挙げられ、例えば、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、水溶性高分子、塩基性無機塩；液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等が挙げられる。また、必要に応じて、通常の防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、酸味剤、発泡剤、香料等の添加物を用いることもできる。
このような医薬組成物の剤形としては、例えば、錠剤、散剤、丸剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、液剤、糖衣剤、デボー剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤、トローチ剤、舌下剤、貼付剤、口腔内崩壊剤（錠）、吸入剤、注腸剤、軟膏剤、貼り布剤、テープ剤、点眼剤にしてよく、普通の製剤助剤を用いて常法に従って製造することができる。【００３４】
上記医薬組成物は、製剤技術分野において慣用の方法、例えば日本薬局方に記載の方法等により製造することができる。以下に、製剤の具体的な製造法について詳述する。
例えば、本発明の結晶を経口用製剤として調製する場合には、賦形剤、さらに必要に応じて、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により例えば、錠剤、散剤、丸剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、液剤、糖衣剤、デボー剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤、トローチ剤、舌下剤、口腔内崩壊剤（錠）、吸入剤などとする。賦形剤としては、例えば乳糖、コーンスターチ、白糖、ブトウ糖、ソルビット、結晶セルロースなどが、結合剤としては例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラック、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ポリビニルピロリドン等が、崩壊剤としては例えばデンプン、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カルシウム、デキストラン、ペクチン等が、滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、シリカ、硬化植物油等が、着色剤としては医薬品に添加することが許可されているものが、矯味矯臭剤としては、ココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、竜脳、桂皮末等が用いられる。これらの錠剤または顆粒剤には、糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コーティングすることはもちろん差しつかえない。
注射剤を調製する場合には必要により、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤などを添加し、常法により皮下、筋肉内、静脈内注射剤とする。
本発明をさらに具体的に説明する。下記に本発明の結晶の製造例について実施例を挙げて説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００３５】
参考例１  式（I）で表される化合物（フリー体）の合成
工程１：4−ニトロ−N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成
4−ニトロ−N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−L−フェニルアラニン （特許文献３：国際公開第2004/074264）(2.95g, 7.70mmol)にイソプロパノール(130ml)、テトラヒドロフラン(50ml)、硫酸(0.44ml)を加えて、50℃で5日間撹拌した。減圧下溶媒を留去し、得られた固体を水で洗浄後、乾燥させて表題化合物を得た(3.28g)。
MS(ESI) m/z 425(MH+)
工程２：4−アミノ−N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成  （すなわち(S)-2-(2,6-ジクロロベンゾイルアミノ)-3-(4-アミノフェニル)プロピオン酸  イソプロピルエステルの合成）
工程１で得られた化合物(98mg)にイソプロパノール(6ml)、テトラヒドロフラン(3ml)、3%Pt-S/C(20mg)を加えて、水素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。反応液をろ過し、イソプロパノールで洗浄し、ろ液を減圧濃縮して表題化合物を得た(92mg)。
MS(ESI) m/z 395(MH+)【００３６】
工程３：4−［（2−アミノ−5−ヨードベンゾイル）アミノ］−N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成
工程２で得られた化合物（26.9g）、1−ヒドロキシベンゾトリアゾール1水和物（11.5g）、5−ヨードアントラニル酸（17.8g）をジメチルホルムアミド（200 ml）に溶解させ、0℃に冷却した後、1−エチル−3−（3−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド  塩酸塩（13.7g）を加え、室温で16時間撹拌した。酢酸エチルを加えた有機層を、0.1N  水酸化ナトリウム水溶液、水、0.1N  塩酸、飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去した後、塩化メチレン、ヘキサンに懸濁させ、濾取、乾燥することで表題化合物を得た(37.06g)。
MS(ESI MH+): 640
工程４：N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−4−（6−ヨード−2,4−ジオキソ−1,2,3,4-テトラヒドロキナゾリン−3（2H）−イル）−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成
N,N−カルボニルジイミダゾール（28.16g）をジメチルホルムアミド150 mlに溶解し、80℃に加熱した。そこへ工程３で得られた化合物（37.06g）のジメチルホルムアミド溶液（150 ml）を滴下し、終夜撹拌した。室温に冷却後、酢酸エチル、水を加えて抽出操作を行い、その有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下溶媒を留去し、得られた固体を塩化メチレン、ヘキサンに懸濁させ、濾取、乾燥することで表題化合物を得た(33.06g)。
MS(ESI MH+):666【００３７】
工程５：N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−4−（6−ヨード−1−メチル−2,4−ジオキソ−1,2,3,4-テトラヒドロキナゾリン−3（2H）−イル）−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成
工程４で得られた化合物（33.06g）、炭酸カリウム（14.5g）をジメチルホルムアミド（200 ml）に加えた後、ヨードメタン（10 ml）を加えた。室温にて4時間撹拌した後、不溶物をセライトろ過し、濾液に酢酸エチル、水を加えて抽出操作を行った。得られた有機層を1N塩酸、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄し、溶媒を留去して得られた固体について、塩化メチレン、ヘキサンに懸濁させ、濾取、乾燥することで表題化合物を得た(31.85g)。
MS(ESI MH+): 680
工程６：N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−4−（6−カルボキシ−1−メチル−2,4−ジオキソ−1,2,3,4-テトラヒドロキナゾリン−3（2H）−イル）−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成
工程５で得られた化合物(31.85g)をジメチルホルムアミド（140 ml）に溶解し、トリエチルアミン（13.1 ml）、水（8.5 ml）を加え、一酸化炭素をバブリングした後、酢酸パラジウム（52mg）を加え、一酸化炭素雰囲気下70℃で11時間撹拌した。不溶物をセライトろ過した後、ジメチルホルムアミドを減圧下留去し、酢酸エチル、1N塩酸を加えて抽出操作を行った。得られた有機層を1N  塩酸、飽和食塩水で順次洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下溶媒を留去し、得られた固体について、塩化メチレン、ヘキサンに懸濁させ、濾取、乾燥することで表題化合物を得た(27.23g)。
MS(ESI MH+): 598【００３８】
工程７：N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−4−［6−（ヒドロキシメチル）−1−メチル−2,4−ジオキソ−1,2,3,4-テトラヒドロキナゾリン−3（2H）−イル］−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成
工程６で得られた化合物(27.23g)をテトラヒドロフラン（200 ml）に溶解し、トリエチルアミン（9.51 ml）を加え、0℃に冷却した。続いてクロロギ酸エチル（4.56 ml）を滴下し、30分撹拌した。不溶物を濾別した後、濾液を0℃に冷却、水素化ホウ素ナトリウム（2.58g）、氷（5かけら）を加えた。1時間撹拌した後、水素化ホウ素ナトリウム（0.25g）を加え、さらに20分撹拌した後、1N  塩酸、つづいて酢酸エチル、水を加えて抽出操作を行った。その有機層を0.3N塩酸、水、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄した後、溶媒を留去して、得られた固体について塩化メチレン、ヘキサンに懸濁させ濾取、乾燥することで表題化合物を得た(25.69g)。
MS(ESI MH+): 584【００３９】
工程８：4−［6−（クロロメチル）−1−メチル−2,4−ジオキソ−1,2,3,4-テトラヒドロキナゾリン−3（2H）−イル］−N−（2,6−ジクロロベンゾイル）−L−フェニルアラニンイソプロピルエステルの合成
塩化メチレン（140 ml）、ジメチルホルムアミド（140 ml）混合溶媒を0℃に冷却した後、オキシ塩化リン（4.1 ml）を加え、30分間撹拌した。工程７で得られた化合物（25.69g）を0℃で加え、室温で1時間撹拌した。さらにオキシ塩化リン（0.4 ml）を加え、1時間撹拌した後、酢酸エチル(400ml)、飽和重曹水（100ml）を加え、激しく撹拌した。さらに酢酸エチル（500 ml）、水（200 ml）を加え分層した後、有機層を飽和重曹水、1N  水酸化ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去し、得られた固体を、塩化メチレン、ヘキサンに懸濁させ、濾取、乾燥することで表題化合物を得た(20.32g)。
MS(ESI MH+): 602
工程９  N-(2,6--ジクロロベンゾイル)-4-[6-(メチルアミノ)メチル-1-メチル-2,4-ジオキソ-1,4-ジヒドロキナゾリン-3(2H)-イル]-L-フェニルアラニンイソプロピルエステル の合成[式（I）で表される化合物（フリー体）]
２Ｍメチルアミン−テトラヒドロフラン溶液(200ml)、アセトニトリル(100ml)の混合液中に、工程８で得られた化合物(20.32g)のアセトニトリル溶液(450ml)を滴下し、室温にて10時間撹拌した後に、溶媒を減圧下留去した。得られた粗製物の一部をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 5:1）にて精製し、その残渣をクロロホルムに溶かして濾過し、減圧下濃縮した後に、水−アセトニトリルを加え、アセトニトリルを減圧下留去してから凍結乾燥することで表題化合物を得た(2.04g)。
MS(ESI MH+) : 597
1H-NMR(DMSO-d6)：δ1.17(3H, d, J=6.3Hz), 1.21(3H, d, J=6.3Hz), 2.23(3H, s), 3.00(1H, dd, J=14.1, 9.9Hz), 3.17(1H, dd, J=14.1, 5.4Hz), 3.51(3H, s), 3.69(2H, s), 4.70-4.80(1H, m), 4.90-4.99(1H, m), 7.18(2H, d, J=8.3Hz), 7.35-7.45(6H, m), 7.74(1H, dd, J=8.6, 2.1Hz), 7.98(1H, d, J=2.1Hz), 9.22(1H, d, J=8.0Hz).【００４０】
参考例２  式（ＩＩ）で表される化合物（TFA塩）の合成
参考例１で得た化合物（I）(500mg,0.838mmol)に4N塩化水素-ジオキサン溶液(15ml)と水(3ml)を加えて、90℃で3時間撹拌した。溶媒を留去後、高速液体クロマトグラフィー（水・アセトニトリルそれぞれ0.1%TFA入り）を用いて精製を行い、目的物を得た(330mg)。
MS(ESI MH+)データ：555
1H-NMR(DMSO-d6)：δ2.58(3H, t, J=5.1Hz), 2.98(1H, dd, J=14.1, 10.5Hz), 3.24(1H, dd, J=14.1, 4.5Hz), 3.55(3H, s), 4.22-4.28(1H, m), 4.61-4.80(1H, m), 7.20(2H, d, J=8.4Hz), 7.39-7.46(5H, m), 7.60(1H, d, J=9.0Hz), 7.88(1H, d, J=6.9Hz), 8.24(1H, d, J=1.5Hz), 8.80(2H, brs), 9.15(1H, d, J=8.7Hz), 12.90(1H, brs)【００４１】
試験例１（血清存在下におけるVCAM-1／α4β1インテグリン結合阻害活性評価試験）
α４β１インテグリンを発現していることが知られているヒトT細胞系細胞株Jurkat（ATCC TIB-152）のVCAM-1への結合を阻害する試験物質の能力を測定した。
96ウェルのマイクロタイタープレート（Nunc Maxisorp）に、緩衝液A（0.1M NaHCO3、pH9.6）で希釈した組換えヒトVCAM-1/Fc（R&D systems）溶液（500ng/mL）を50μL／ウェル加え、4℃で一晩インキュベートした。PBSで1回洗浄後、ブロックエース（雪印乳業）をPBSで2倍に希釈した緩衝液（緩衝液B）を150μL／ウェル加え、室温で2時間インキュベートした。緩衝液Bの除去後に、PBSで1回洗浄を実施した。
Jurkat細胞をダルベッコ改変イーグル培地（SIGMA、以下DMEMと呼ぶ）中で1回洗浄し、結合緩衝液（20mM HEPES、0.1% BSA、2mM MnCl2および50%ヒト血清（Sigma）を含むDMEM）中に1×106細胞／mLになるように再懸濁した。【００４２】
96ウェル丸底プレート（IWAKI）に別途、結合緩衝液で希釈した種々の濃度の試験物質を60μL加え、直ちにJurkat細胞（1×106細胞／mL）を60μL加え、プレート振とう機（IKA-Labortechnik、IKA-SCHUTTLER MTS-4）上で1000rpm、10秒間振とうした。これら試験物質が加えられた細胞懸濁液１２０μLのうち、１００μLずつを直ちにVCAM-1/Fcがコーティングされたプレートに移し、室温、暗所で60分間インキュベートした。プレート振とう機上で1000rpm、30秒間振とうし、直ちに溶液を除去した後、PBSで1回洗浄することにより、結合していない細胞を除いた。プレートに緩衝液C（0.82% Triton X-100を含むPBS）を70μL／ウェルで加え、プレート振とう機上で1000rpm、5分間振とうすることによって、結合したJurkat細胞を溶解した。プレート遠心機（SIGMA 4-15C）で室温、2500rpm、5分間遠心した後、その上清50μLを新たに96ウェルのマイクロタイタープレート（Nunc Maxisorp）に移した。各々50μLのSubstrate Buffer（Promega、CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay）を加え、プレート振とう機上で1000rpm、10秒間振とうし、室温、暗所で30分反応させた。各々50μLのStop Solution（Promega、CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay）を加え、プレート振とう機上で1000rpm、10秒間振とうした後、プレートリーダー（Molecular Devices、Vmax）を用いて490nmの吸光度を測定した。
ここで得られた吸光度は、各ウェルの上清に溶出したlactate dehydrogenase（LDH）活性を検出しているものであり、すなわちVCAM-1に結合してプレート上に残ったJurkat細胞の数に比例する。試験はduplicateで行い、試験物質を含まないウェルの吸光度を100%、Jurkat細胞を含まないウェルの吸光度を0%とした時の種々の濃度における各物質の結合率を求め、50%結合阻害をもたらす濃度IC50を計算した。
その結果、式（II）で表される化合物のIC50は、１１.２ｎＭと、WO02/16329（特許文献１）中の実施例１の化合物のIC50値１４８.８ｎＭよりも格段に優れていた。【００４３】
試験例２（ラット静脈内投与時の体内動態評価試験）
活性本体である式（II）で表される化合物を秤量後、ジメチルスルホキシドで10mg/mLとなるようにし、ポリエチレングリコール４００及び蒸留水を加え、1mg/mLの投与液とした。Wistarラットに1mg/mLの投与液を1mL/kgの容量で単回静脈内投与し、1,5,10,30,60及び180分後に麻酔下、頚静脈から経時的に採血して得た血漿中の薬物濃度をLC/MSで測定した。得られた結果より、血漿中薬物濃度-時間推移曲線下面積の外挿値（AUCinf(iv)）を、薬物速度論的解析の台形計算法に従い算出し、投与用量（Dose, ［mg/kg］）及びAUC［μg×hr/mL］より、血漿中からの薬物消失の指標値として、全身クリアランス（CLtot, ［L/hr/kg］）をCLtot＝Dose÷AUCinf(iv)に従い算出した。
その結果、式（II）で表される化合物のCLtotは、０.２３[L/hr/kg]、WO02/16329（特許文献１）中の実施例１の化合物のCLtot値１.８９よりも格段に優れていた。【００４４】
試験例３（ラットにおける末梢血中リンパ球数の上昇活性）
α４インテグリンとVCAM-1の結合を阻害する物質が生体内に投与された後に、有効にその阻害活性を発揮すると、血管や組織に対するリンパ球の接着を阻害することにより、末梢血中のリンパ球数が上昇することが示唆されているので、式（I）で表される化合物のリンパ球数上昇活性を、ラットを用いて評価した。
投与液は、式（I）で表される化合物をジメチルスルホキシドに溶解し、ポリエチレングリコール400：プロピレングリコールを1：1に混合した溶液を加えて転倒混和して調製した。DMSOの最終濃度は2.5%とした。
雄性Wistarラット（6-8週齡）に試験物質（30mg/kg）の投与液を4mL/kgで経口投与した。投与後、適宜定めた時点に、麻酔下にて腹部大静脈から採血を行い、EDTA-2Kをコーティングしてある採血容器にて混和後、多項目自動血球分析装置（SF-3000, Sysmex社）で末梢血中のリンパ球数を測定した。試験はn=5で行い、溶媒投与群（コントロール群）における末梢血中リンパ球数の平均値を100%として、試験物質投与群の末梢血リンパ球数をコントロールに対する割合(%)で算出した。
WO02/16329（特許文献１）中の実施例１の化合物では、１２時間後の評価が不合格（１２０％）であったが、式（I）で表される化合物では合格（150%以上）であった。【００４５】
測定方法１  粉末Ｘ線回折パターン
実施例１〜１５に記載されている粉末Ｘ線回折パターンの測定条件は以下の通りである。
装置  ：  Bruker GADDS diffractometer      
Target ：ＣｕKα  モノクロメータ
Voltage：４０kV
Current：４０mV
積算時間：９０秒または１８０秒
２θrange：1.5〜41.5°【００４６】
実施例１（Ａ型結晶の調製）
工程１
参考例で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に溶解した後に溶媒を減圧留去し、化合物(I)のアモルファスを得た。
工程２
工程１で得た化合物（Ｉ）、３ｍｇをジメチルホルムアミド４０μｌに加え６０℃に加熱し、次で急激に（３０℃/時間の冷却速度）５℃に冷却し、その温度で約２４時間熟成させ、次で生じた結晶を採取した。得られた結晶は水和物の形態であった。その粉末Ｘ線回折パターンを図１に示す。【００４７】
実施例２（Ｂ型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）３ｍｇをｔ-ブタノール４０μｌに加え６０℃に加熱し、次で急激に（３０℃/時間の冷却速度）５℃に冷却し、その温度で約２４時間熟成させ、次で生じた結晶を採取した。
又、溶媒を1-ブタノール又はエタノールに変更した以外は同様にして結晶を採取した。
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図３に示す。
図中、００２  Ｂ２はｔ-ブタノールから得られた結晶、００２  Ｅ１は1-ブタノールから得られた結晶、００２  Ｅ２はエタノールから得られた結晶を示す。【００４８】
実施例３（Ｄ型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）をメタノールに、７５ｍｇ/メタノール１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱し、次で急激に（３０℃/時間の冷却速度）５℃に冷却し、その温度で約２４時間熟成させ、次で生じた結晶を採取した。このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図４にＡ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンと共に示す。図中、Ｄ型結晶をD form、Ａ型結晶をA formで示した。
実施例４（Ｅ型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）をエタノールに、７５ｍｇ/エタノール１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約２４時間熟成させ、次で生じた結晶を採取した。このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図５にＢ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンと共に示す。図中、Ｅ型結晶をE001_E8、Ｂ型結晶をB002_E2で示した。
実施例５（Ｆ型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）をｔ-アミルアルコールに、７５ｍｇ/ｔ-アミルアルコール１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約２４時間熟成させ、次で生じた結晶を採取した。このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図６にＡ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンと共に示す。図中、Ｆ型結晶をF001_H7、Ａ型結晶をＡで示した。【００４９】
実施例６（Cl２型結晶〜Cl４型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）に、該化合物と塩化水素のモル比が１：１．１となるように塩化水素を含有するニトロメタンを、フリー体として７５ｍｇに相当する量/ニトロメタン１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱して溶解し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約72時間熟成させ、次で生じたCl2型結晶を採取した。
以下に示す条件を変更した以外は、上記方法と同様にして、Cl３型結晶及びCl４型結晶を得た。
Cl３型結晶：溶媒として２−ブタノール使用
Cl４型結晶：溶媒として2-プロパノール使用
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図７に示す。【００５０】
実施例７（Su１型結晶〜Su３型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）に、該化合物と硫酸のモル比が１：１.１となるように硫酸水溶液を加え、次で水を蒸発させて硫酸塩を得た。このようにして得た硫酸塩をピリジンに、フリー体として７５ｍｇに相当する量/ピリジン１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱して溶解し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約72時間熟成させ、次で析出したSu１型結晶を採取した。
以下に示す条件を変更した以外は、上記方法と同様にして、Su２型結晶及びSu３型結晶を得た。
Su２型結晶：溶媒としてニトロメタン使用し、熟成時間を約1時間
Su３型結晶：溶媒としてエタノール使用し、熟成時間を約1時間
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図８に示す。【００５１】
実施例８（Br１型結晶〜Br５型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）に、該化合物と臭化水素のモル比が１：１．１となるように臭化水素を含有するシクロヘキサノンを、フリー体として７５ｍｇに相当する量/シクロヘキサノン１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱して溶解し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約72時間熟成させ、次で析出したBr１型結晶を採取した。
以下に示す条件を変更した以外は、上記方法と同様にして、Br２型結晶〜Br５型結晶を得た。
Br２型結晶：溶媒としてエタノール使用
Br３型結晶：溶媒としてアセトニトリル使用し、熟成時間を約1時間
Br４型結晶：溶媒としてテトラヒドロフラン（THF）使用
Br５型結晶：溶媒として1,2-ジメトキシエタン使用
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図９に示す。【００５２】
実施例９（Pho１型結晶〜Pho４型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）に、該化合物とリン酸のモル比が１：１.１となるようにリン酸水溶液を加え、次で水を蒸発させてリン酸塩を得た。このようにして得たリン酸塩をシクロヘキサノンに、フリー体として７５ｍｇに相当する量/シクロヘキサノン１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱して溶解し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約１時間熟成させ、次で析出したPho１型結晶を採取した。
以下に示す条件を変更した以外は、上記方法と同様にして、Pho２型結晶〜Pho４型結晶を得た。
Pho２型結晶：溶媒として水使用
Pho３型結晶：溶媒としてメタノール使用
Pho４型結晶：溶媒として2,2,2-トリフルオロエタノール使用
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図１１に示す。【００５３】
実施例１０（Mal１型結晶〜Mal３型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）に、該化合物とマレイン酸のモル比が１：１.１となるようにマレイン酸水溶液を加え、次で水を蒸発させてマレイン酸塩を得た。このようにして得たマレイン酸塩をエタノールに、フリー体として７５ｍｇに相当する量/エタノール１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱して溶解し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約１時間熟成させ、次で析出したMal１型結晶を採取した。
以下に示す条件を変更した以外は、上記方法と同様にして、Mal２型結晶及びMal３型結晶を得た。
Mal２型結晶：溶媒としてエチルアセテート使用
Mal３型結晶：溶媒としてアセトン使用
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図１２に示す。【００５４】
実施例１１（Aca１型結晶〜Aca３型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）に、該化合物と酢酸のモル比が１：１．１となるように酢酸を含有するアセトンを、フリー体として７５ｍｇに相当する量/アセトン１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱して溶解し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約１時間熟成させ、次で析出したAca１型結晶を採取した。
以下に示す条件を変更した以外は、上記方法と同様にして、Aca２型結晶及びAca３型結晶を得た。
Aca２型結晶：溶媒として2-ブタノール使用
Aca３型結晶：溶媒としてエチルアセテート使用
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図１３に示す。【００５５】
実施例１２（Tar１型結晶及びTar２型結晶の調製）
実施例１工程１で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）に、該化合物とD-酒石酸のモル比が１：１.１となるようにＤ−酒石酸水溶液を加え、次で水を蒸発させてD-酒石酸塩を得た。このようにして得たD-酒石酸塩をシクロヘキサノンに、フリー体として７５ｍｇに相当する量/シクロヘキサノン１ｍｌの濃度となるように加え、これを９６wellのプレートの１wellに入れ、６０℃に加熱して溶解し、次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約１時間熟成させ、次で析出したTar１型結晶を採取した。
以下に示す条件を変更した以外は、上記方法と同様にして、Tar２型結晶を得た。
Tar２型結晶：溶媒としてメタノール使用
このようにして得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定した。結果を図１４に示す。
実施例１３（Cl１型結晶の調製）
参考例で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）７６ｍｇ(0.127mmol)に、濃度０.１４mmol/mlの塩化水素を含有するように３７％塩酸を加えたアセトン溶液(1.0ml, 0.140mmol)を加えた（該化合物と塩化水素のモル比＝１：１.１）。マグネティックバーを入れて攪拌しながら、１℃/分の速度で加熱し、６０℃で３０分間保持した。次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約７２時間熟成させ、次で析出したCl１型結晶を採取した。
得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定したところ、図７に示したCl１型結晶と同じ粉末Ｘ線回折パターンを示した。【００５６】
実施例１４（Br４型結晶の調製[スケールアップ]）
参考例で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）８２．７ｍｇ(0.139mmol)に、濃度０.１４mmol/mlのＨＢｒを含有するように４８％臭化水素酸を加えたＴＨＦ溶液(1.1ml, 0.154mmol)を加えた（該化合物とＨＢｒのモル比＝１：１.１）。マグネティックバーを入れて攪拌しながら、１℃/分の速度で加熱し、６０℃で３０分間保持して臭化水素酸塩を溶解させた。次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約７２時間熟成させ、次で析出したBr４型結晶を採取した。
得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定したところ、実施例８で得られたBr４型結晶と同じ粉末Ｘ線回折パターンを示した。【００５７】
実施例１５（Mal２型結晶の調製[スケールアップ]）
参考例で調製した式（I）で表される化合物（フリー体）７５．３ｍｇ(0.126mmol)に、１６.３ｍｇのマレイン酸（純度９９％）をエチルアセテート１.００４ｍｌに溶解した溶液(0.140mmol)を加えた（該化合物とマレイン酸のモル比＝１：１.１）。マグネティックバーを入れて攪拌しながら、１℃/分の速度で加熱し、６０℃で３０分間保持してマレイン酸塩を溶解させた。次で緩慢に（１℃/時間）５℃に冷却し、その温度で約７２時間熟成させ、次で析出したMal２型結晶を採取した。
得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンを測定したところ、実施例１０で得られたMal２型結晶と同じ粉末Ｘ線回折パターンを示した。【００５８】
測定方法２  粉末Ｘ線回折測定
実施例１６〜１８及び実施例２４に記載されている粉末Ｘ線回折パターン測定条件は以下の通りである。
装置  ：粉末X線回折装置X'Pert-Pro-MPD（PANalytical社）
検出器：アレー式半導体検出器X'Celerator
Target ：Ｃｕ 全自動モノクロメータ
Voltage：４０kV
Current：４０mV
Slit     ：発散 1/2 °
：散乱 1/2 °
：受光 ０．１５mm
Scan Speed：2°/ min
２θrange：3〜30°【００５９】
実施例１６（Mal2型結晶の合成  スケールアップ）
マレイン酸を酢酸エチルに溶解して0.14mmol/mlの濃度に調製し、その10mlを参考例で調製した化合物（I）(750mg, 1.25mmol)に加えて、その混合物を撹拌しながら20℃から60℃まで昇温した（昇温速度=1℃/min）。60℃で30分間おいた後に、60℃から5℃まで55時間かけて冷却した（冷却速度=1℃/h）。そのまま5℃で14時間おいてから濾過し、減圧乾燥して(室温、24時間)、白色結晶を得た。
粉末Ｘ線回折パターン：  図１５
1H-NMR(DMSO-d6)：δ1.18(3H, d, J=6.3Hz), 1.23(3H, d, J=6.3Hz), 2.58(3H, s), 3.02(1H, dd, J=14.1, 9.9Hz), 3.19(1H, dd, J=14.1, 5.4Hz), 3.55(3H, s), 4.24(2H, s), 4.72-4.82(1H, m), 4.90-5.00(1H, m), 6.02(2H, s), 7.21(2H, d, J=8.4Hz), 7.39-7.48(5H, m), 7.59(1H, d, J=8.7Hz), 7.87(1H, dd, J=9.0, 2.4Hz), 8.24(1H, d, J=2.4Hz), 8.68-8.80(brs, 1H), 9.24(1H, d, J=8.1Hz).【００６０】
実施例１７（Cl５型結晶の調製）
（テトラヒドロフラン溶媒を用いる方法：製造方法１）
塩酸をテトラヒドロフランで希釈して0.14mmol/mlの濃度に調製し、その10mlを参考例で調製した化合物（Ｉ）(フリー体、750mg, 1.25mmol)に加えて、その混合物を撹拌しながら20℃から60℃まで昇温した（昇温速度=1℃/min）。60℃で30分間おいた後、60℃から5℃まで55時間かけて冷却した（冷却速度=1℃/h）。そのまま5℃で14時間おいてから濾過し、減圧乾燥して(室温、90時間)、白色結晶を得た(715mg)。
粉末Ｘ線回折パターンの結果をそれぞれ図１６に示す。
また、主なピークの回折角及び強度を以下に示す。
Ｃｌ５型
２θ        強度
5.4          強
8.2          強
11.2         強
12.4         弱
14.3         中
15.6         中
17.4         強
18.4         弱
18.8         弱
上記のうち、特に特徴的なピークは8.2、11.2、12.4、14.3、15.6であり、さらには8.2、11.2、14.3、15.6である。【００６１】
1H-NMR(DMSO-d6)：δ1.18(3H, d, J=6.3Hz), 1.23(3H, d, J=6.3Hz), 2.54(3H, s), 3.02(1H, dd, J=14.1, 9.9Hz), 3.19(1H, dd, J=14.1, 5.4Hz), 3.55(3H, s), 4.22(2H, s), 4.70-4.82(1H, m), 4.90-5.00(1H, m), 7.21(2H, d, J=8.4Hz), 7.35-7.48(5H, m), 7.59(1H, d, J=8.7Hz), 7.95(1H, dd, J=9.0, 2.4Hz), 8.23(1H, d, J=2.4Hz), 9.05-9.18(brs, 2H), 9.24(1H, d, J=8.1Hz).
(アセトン溶媒を用いる方法：製造方法２)
塩酸(5.92ml, 71.0mmol)をアセトン(76.6ml)で希釈して0.86mmol/mlの濃度に調製し、それを参考例で調製した化合物（Ｉ）(フリー体、38.3g, 64.1mmol)のアセトン溶液(433ml)に加えて、その混合物を撹拌しながら20℃から60℃まで昇温した（昇温速度=1℃/min）。60℃で30分間おいた後、60℃から5℃まで5.5時間かけて冷却した（冷却速度=10℃/h）。そのまま5℃で6時間おいてから濾過し、減圧乾燥して(60℃、数日間)、白色結晶を得た(36.23g)。これは粉末X線回折パターンの測定でCl5型を示した。
（含水アセトン晶析＋貧溶媒添加法：製造方法３）
アセトン２３ｍｌと水１５ｍｌを混合し、これに化合物（I）の塩酸塩（例えば、化合物（Ｉ）（フリー体）と塩化水素を含有するジオキサン溶液を混合した後に溶媒を留去することにより得られる）５．０４ｇを加えて、６５℃で加熱溶解させた。溶解液を熱時ろ過し、ろ液にアセトン２２０ｍｌを４０分かけて滴下し、その途中で種晶３０ｍｇを加えた。得られたスラリーを１０℃に冷却し、そのまま終夜撹拌させた後、結晶をろ別して冷アセトン３０ｍｌで洗浄した。得られた湿結晶を７０℃で減圧乾燥し、白色結晶性固体として４．４７ｇを得た（収率８８．７％）。これは粉末X線回折パターンの測定でCl5型を示した。
（アセトンスラリー懸濁化法：製造方法４）
化合物（I）の塩酸塩３０．４７ｇをアセトニトリル１１２．５ｍｌと水３７．５ｍｌに加えて８０℃で加熱溶解させた。３０℃に冷却してアセトン６００ｍｌを滴下した。析出した結晶スラリーを１０℃で終夜撹拌し、遠心分離機で結晶を分離し、ウェット結晶を６１．１１ｇ得た。このウェット結晶のX線回折パターンはNW2型を示した。この湿結晶１０．７５ｇ（乾燥重量５．０ｇ）をアセトン１００ｍｌに懸濁させ、２５℃で終夜撹拌した。結晶をろ別して８０℃で１８時間減圧乾燥し、白色結晶性固体として４．６３ｇ得た。この結晶の粉末X線回折パターンはCl５型を示した。
上記方法により製造したCl５型結晶の固体NMR（装置名=BRUKER社製  AVANCE400WB、測定法=13C-CPTOSS法、MAS=6KHz）のスペクトルデータを図２０、赤外スペクトル（装置名=島津製作所製 FTIR-8300、測定法=塩化カリウム法）のデータを図２１に示す。【００６２】
実施例１８（Br5型結晶の合成  スケールアップ）
臭化水素酸を1,2-ジメトキシエタンで希釈して0.14mmol/mlの濃度に調製し、その10mlを参考例で調製した化合物（I）(750mg, 1.25mmol)に加えて、その混合物を撹拌しながら20℃から60℃まで昇温した（昇温速度=1℃/min）。60℃で30分間おいた後に、60℃から5℃まで55時間かけて冷却した（冷却速度=1℃/h）。そのまま5℃で14時間おいてから濾過し、減圧乾燥して(室温、114時間)、白色結晶を得た(803mg)。
粉末Ｘ線回折パターン：  図１７
1H-NMR(DMSO-d6)：δ1.18(3H, d, J=6.3Hz), 1.23(3H, d, J=6.3Hz), 2.57(3H, s), 3.02(1H, dd, J=14.1, 9.9Hz), 3.20(1H, dd, J=14.1, 5.4Hz), 3.55(3H, s), 4.24(2H, s), 4.70-4.82(1H, m), 4.92-5.00(1H, m), 7.21(2H, d, J=8.4Hz), 7.38-7.48(5H, m), 7.59(1H, d, J=8.7Hz), 7.89(1H, dd, J=9.0, 2.4Hz), 8.23(1H, d, J=2.4Hz), 8.70-8.80(brs, 2H), 9.24(1H, d, J=8.1Hz).【００６３】
測定方法３  粉末Ｘ線回折測定
実施例１９〜２３に記載されている粉末Ｘ線回折パターン測定条件は以下の通りである。
装置  ：粉末X線回折装置X'Pert-Pro-MPD（PANalytical社）
検出器：アレー式半導体検出器X'Celerator
Target ：Ｃｕ 全自動モノクロメータ
Voltage：４０kV
Current：５５mV
Slit     ：発散 1/2 °
：散乱 1/2 °
：受光 ０．１５mm
２θrange：5〜40°
実施例１９（NW1型およびN1型結晶の調製）
化合物（I）の塩酸塩  20gを75vol.%アセトニトリル/水混合液（混合前のアセトニトリル（vol）：水（vol）＝７５：２５）100mlに懸濁させ、70℃に加熱し、均一とした。この溶液を30℃まで冷却した後、アセトニトリル500mlを滴下し、10℃で一晩撹拌した。結晶をスラリーから分離し、NW1型であるウェット結晶を32.79g得た。これを80℃で18時間減圧乾燥を行い、化合物（I）の塩酸塩（N1型）を白色結晶性固体として16.93g得た。
粉末Ｘ線回折パターン：  図２２及び図２３【００６４】
実施例２０（NW2型およびN2型結晶の調製）
化合物（I）の塩酸塩  １０ｇを75vol.%アセトニトリル/水混合液50mlに懸濁させ、７０℃に加熱し、均一とした。この溶液を30℃まで冷却した後、アセトン200mlを滴下し、10℃で一晩撹拌した。結晶をスラリーから分離し、NW2型であるウェット結晶を１９．２０ｇ得た。８０℃で18時間減圧乾燥を行い、化合物（I）の塩酸塩（N2型）を白色結晶性固体として８．７７ｇ得た。
粉末Ｘ線回折パターン：  図２５及び図２６
固体NMR（装置名=BRUKER社製  AVANCE400WB、測定法=13C-CPTOSS法、MAS=6KHz）スペクトルのデータを図２８、赤外スペクトル（装置名=島津製作所製 FTIR-8300、測定法=塩化カリウム法）のデータを図２９に示す。
実施例２１（N3型結晶の調製）
方法１  塩酸塩から導く方法
化合物（I）の塩酸塩  ２ｇを92.5vol%アセトニトリル/水混合液50mlに懸濁させ、10℃で２４時間撹拌した。結晶をスラリーから分離し、NW2型であるウェット結晶を得た。８０℃で１８時間減圧乾燥を行い、化合物（I）の塩酸塩（N3型）を白色結晶性固体として０．５２ｇ得た。
方法２  フリー体から導く方法
化合物（I）  ４２９ｍｇをアセトニトリル８ｍｌに加えて撹拌し、６０℃で加熱溶解させた。これに水０．８ｍｌを加え、次いで６N塩酸水溶液０．１２ｍｌを加えた。室温まで冷却し、析出した固体を分離してアセトニトリル２ｍｌで洗浄した。結晶を６０℃で減圧乾燥し、化合物（I）の塩酸塩（N3型）を白色結晶性固体として２１２ｍｇ得た。
粉末Ｘ線回折パターン：  図３０【００６５】
実施例２２（NW４型およびN４型結晶の調製）
化合物（I）の塩酸塩  2gをアセトニトリル60mlに懸濁させ、10℃で２４時間撹拌した。結晶をスラリーから分離し、NW4型であるウェット結晶を得た。８０℃で１８時間減圧乾燥を行い、化合物（I）の塩酸塩（N4型）を白色結晶性固体として0.73g得た。
粉末Ｘ線回折パターン：  図３２及び図３３【００６６】
実施例２３（NW５型およびN５型結晶の調製）
化合物（I）の塩酸塩  ７ｇを６０vol%アセトニトリル/水５０ｍｌに懸濁させ、５０℃で２４時間撹拌した。結晶をスラリーから分離し、NW5型であるウェット結晶を得た。80℃で18時間減圧乾燥を行い、化合物（I）の塩酸塩（N5型）を白色結晶性固体として２．１１ｇ得た。
粉末Ｘ線回折パターン：  図３５及び図３６【００６７】
実施例２４（Cl6, Cl7, Cl8, Ca1, Ca2, Ca3, Ca4, Ms1, Ms2, Ms3, Ms4, Ms5, L-Tar1, L-Tar2,型結晶の調製）
表１記載の酸と溶媒を用いて、0.14mmol/mlの酸溶液を調製した。この溶液6.7mlを参考例で調製した化合物（I）(500mg, 0.837mmol)に加え、撹拌しながら20℃から60℃まで昇温した（昇温速度=1℃/min）。60℃を30分間維持した後、60℃から5℃まで11時間かけて冷却した（冷却速度=5℃/h）。5℃を11時間維持した後、濾過し、減圧乾燥して(室温、48時間以上)、結晶を得た。
表１
2006137450.tif 000016
Ether：  ジエチルエーテル【００６８】
粉末Ｘ線回折パターン：  図３８〜図５１
以下に1H-NMR測定の結果を示す。
（Ca4型結晶）
1H-NMR(DMSO-d6)：δ1.19(3H, d, J=6.0Hz), 1.23(3H, d, J=6.0Hz), 2.45-2.58(m), 3.01(1H, dd, J=14.1, 9.9Hz), 3.19(1H, dd, J=14.4, 5.7Hz), 3.55(3H, s), 4.20(2H, s), 4.73-4.80(1H, m), 4.91-4.99(1H, m), 7.21(2H, d, J=9.0Hz), 7.37-7.47(5H, m), 7.58(1H, d, J=8.7Hz), 7.87(1H, d, J=8.4Hz), 8.22(1H, s), 9.24(1H, d, J=8.4Hz).
（Ms1型結晶）
1H-NMR(DMSO-d6)：δ1.19(3H, d, J=6.3Hz), 1.23(3H, d, J=6.3Hz), 2.31(3H, s), 2.58(3H, s), 3.01(1H, dd, J=14.1, 9.9Hz), 3.19(1H, dd, J=14.1, 5.4Hz), 3.55(3H, s), 4.24(2H, brs), 4.77(1H, m), 4.95(1H, m), 7.21(2H, m), 7.38-7.47(5H, m), 7.59(1H, d, J=8.7Hz), 7.88(1H, dd, J=8.7, 2.1Hz), 8.24(1H, d, J=2.1Hz), 8.75(brs, 2H), 9.24(1H, d, J=7.8Hz).
（L-Tar1型結晶）
1H-NMR(DMSO-d6)：δ1.19(3H, d, J=6.0Hz), 1.23(3H, d, J=6.0Hz), 3.01(1H, dd, J=13.8, 9.6Hz), 3.19(1H, dd, J=13.8, 5.4Hz), 3.54(3H, s), 3.91(2H, s), 4.13(2H, s), 4.73-4.80(1H, m), 4.91-4.99(1H, m), 7.20(2H, d, J=8.4Hz), 7.37-7.47(5H, m), 7.56(1H, d, J=8.7Hz), 7.87(1H, d, J=8.4Hz), 8.19(1H, s), 9.24(1H, d, J=8.1Hz).【００６９】
試験例
本発明の効果について以下の試験例で説明する。試験例４により、熱力学的に安定である結晶型を確認し、試験例５により、化学的に安定な結晶型を確認した。また、試験例６により、相対湿度に依存せず安定な結晶型を、試験例７により吸湿性が低い結晶型を確認した。
試験例４  示差走査熱量測定（Differential scanning calorimetry: DSC）
（１）測定方法、条件
上記で得られた各結晶（A型, Br4型,Cl5型, Br5型）の試料１〜５ｍｇを秤取し、アルミパン内に密封して、下記の条件で示差走査熱量測定を行った。
Reference：空のアルミパン
Sampling time：0.2 sec
Range：25〜350 ℃
Heating time: 10あるいは20 ℃/min【００７０】
結果を図２（Ａ型）、図１０（Ｂｒ４型）、図１８（Ｃｌ５型）、図１９（Ｂｒ５型）に示す。
Cl５型は２５５℃（２５０〜２６０℃）、Br5型は２２６℃（２２１〜２３１℃）付近の高温にＤＳＣ上の融点がある。
試験例５  保存安定性試験
Cl5型結晶, Br5型結晶, A型結晶について、下記の条件で保存した後に、試料中の不純物の量を比較したが、加温による不純物の増加を認めなかった。
期間：４週間
温度／湿度：  ４０℃／７５％相対湿度・開放
６０℃／開放
室温／気密  （コントロール）【００７１】
試験例６  相対湿度制御下での粉末Ｘ線回折測定
Cl5型結晶, Mal2型結晶について、下記の条件で粉末Ｘ線回折測定し、dry-wet間での回折パターンを比較したがいずれの結晶も相違はなかった。
乾燥条件(ｄｒｙ)：  試料を５０℃で減圧乾燥しつつ測定
湿気条件（wet）：  ８５％の相対湿度下で測定
粉末回折装置：  （株）リガク  RINT2100S  （及び同装置用の温湿度アタッチメント）湿度コントローラ：  神栄（株）  SRH-1R【００７２】
試験例７  水蒸気吸着等温線の作成
Cl5型結晶, Mal2型結晶、各５０ｍｇを秤取し、５０℃で一晩真空乾燥し
た後、２５℃の恒温下に、全自動水蒸気吸着測定装置（ＢＥＬＳＯＲＰ−１８：日本ベル社）で結晶の水分吸着量を測定した（Mitsuiki et al., J. Agric. Food Chem., Vol. 46, No.9, Page 3528-34, 1998年）。
Cl5型結晶, Mal2型結晶は、相対湿度１００％下においてでも水分吸着量が４％以下で少なかった。
試験例８  示差走査熱量測定（Differential scanning calorimetry: DSC）
（１）測定方法、条件
上記で得られた各結晶（N1〜N5型、Cl6〜Cl8型、Ms1型）の試料１〜５ｍｇを秤取し、アルミパン内に密封して、下記の条件で示差走査熱量測定を行った。
Reference：空のアルミパン
Sampling time：0.2 sec
Range：40〜300℃
Heating time: 10あるいは20 ℃/min【００７３】
結果を図２４（N1型）、図２７（N2型）、図３１（N3型）、図３４（N4型）、図３７（N5型）、図５２（Cl6型）、図５３（Cl7型）、図５４（Cl8型）、図５５（Ms1型））に示す。
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１】本発明の式（I）で表される化合物（フリー体）のＡ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図２】本発明の式（I）で表される化合物（フリー体）のＡ型結晶のＤＳＣ曲線を示す。（Ａ型結晶の調製）
【図３】本発明の式（I）で表される化合物（フリー体）のＢ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４】本発明の式（I）で表される化合物（フリー体）のＤ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図５】本発明の式（I）で表される化合物（フリー体）のＥ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図６】本発明の式（I）で表される化合物（フリー体）のＦ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図７】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl１型結晶〜Cl４型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図８】本発明の式（I）で表される化合物の硫酸塩のSu１型結晶〜Su３型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図９】本発明の式（I）で表される化合物の臭化水素酸塩のBr１型結晶〜Br５型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図１０】本発明の式（I）で表される化合物の臭化水素酸塩のBr４型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図１１】本発明の式（I）で表される化合物のリン酸塩のPho１型結晶〜Pho４型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図１２】本発明の式（I）で表される化合物のマレイン酸塩のMal１型結晶〜Mal３型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図１３】本発明の式（I）で表される化合物の酢酸塩のAca１型結晶〜Aca３型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図１４】本発明の式（I）で表される化合物の酒石酸塩のTar１型結晶及びTar２型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図１５】本発明の式（I）で表される化合物のマレイン酸塩のMal2型結晶の粉末Ｘ線回折パターン図を示す（横軸に回折角２θ〔度〕；縦軸に強度〔ＣＰＳ〕を表す）。
【図１６】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl5型結晶に関する粉末Ｘ線回折パターン図を示す（横軸に回折角２θ〔度〕；縦軸に強度〔ＣＰＳ〕を表す）。
【図１７】本発明の式（I）で表される化合物の臭化水素酸塩のBr5型結晶に関する粉末Ｘ線回折パターン図を示す（横軸に回折角２θ〔度〕；縦軸に強度〔ＣＰＳ〕を表す）。
【図１８】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl5型結晶のＤＳＣ曲線を示す。横軸はＴｅｍｐ（℃）。
【図１９】本発明の式（I）で表される化合物の臭化水素酸塩のBr5型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図２０】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl5型結晶の固体ＮＭＲスペクトルデータを示す。
【図２１】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl5型結晶の赤外スペクトルデータを示す。
【図２２】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のNW1型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図２３】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN1型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図２４】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN1型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図２５】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のNW2型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図２６】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN2型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図２７】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN2型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図２８】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN2型結晶の固体ＮＭＲスペクトルデータを示す。
【図２９】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN2型結晶の赤外スペクトルデータを示す。
【図３０】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN3型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図３１】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN3型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図３２】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のNW4型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図３３】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN4型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図３４】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN4型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図３５】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のNW5型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図３６】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN5型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図３７】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のN5型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図３８】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl6型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図３９】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl7型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４０】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl8型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４１】本発明の式（I）で表される化合物のクエン酸塩のCa1型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４２】本発明の式（I）で表される化合物のクエン酸塩のCa2型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４３】本発明の式（I）で表される化合物のクエン酸塩のCa3型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４４】本発明の式（I）で表される化合物のクエン酸塩のCa4型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４５】本発明の式（I）で表される化合物のメタンスルホン酸塩のMs1型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４６】本発明の式（I）で表される化合物のメタンスルホンル酸塩のMs2型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４７】本発明の式（I）で表される化合物のメタンスルホン酸塩のMs3型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４８】本発明の式（I）で表される化合物のメタンスルホン酸塩のMs4型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４９】本発明の式（I）で表される化合物のメタンスルホン酸塩のMs5型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図５０】本発明の式（I）で表される化合物のL-酒石酸塩のL-Tar1型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図５１】本発明の式（I）で表される化合物のL-酒石塩のL-Tar2型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図５２】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl6型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図５３】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl7型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図５４】本発明の式（I）で表される化合物の塩酸塩のCl8型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図５５】本発明の式（I）で表される化合物のメタンスルホン塩のMs1型結晶のＤＳＣ曲線を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【国際調査報告】
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