(57)【要約】皮膚中のセラミド量を増加せしめることにより、皮膚のバリア能や保湿性を改善し、荒れ肌やしわなどの改善に役立つための技術を提供する。本発明の実施形態は、極めて高純度のスフィンゴミエリンを用いてリポソームを作り、それを化粧料に配合することを含む。スフィンゴミエリンをナノ化することにより、スフィンゴミエリンを皮膚の奥深くまで浸透せしめることができ、これによって角層のバリア能や保湿性が改善し、荒れ肌の改善やアトピー症状の緩和という効能がもたらされる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナノ化されたスフィンゴミエリンを含有する化粧料。
【請求項２】
殆ど又は全部がスフィンゴミエリンであるリン脂質で構成されたリポソームを含有する化粧料。
【請求項３】
前記リン脂質の９８％以上がスフィンゴミエリンである請求項２に記載の化粧料。
【請求項４】
殆ど又は全部がスフィンゴミエリンであるリン脂質で構成されたリポソームを含有する外用剤。
【請求項５】
前記リン脂質の９８％以上がスフィンゴミエリンである請求項４に記載の外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、荒れ肌やしみ、しわ、肌の老化、アトピー性皮膚炎などの改善を目的とする技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は生体を覆う最大の臓器であり、表皮、真皮および皮下組織からなる。表皮は、生きた紬胞（主に角化紬胞、keratinocyte）からなる基底層、有棘層および顆粒層と角化細胞が最終角化を終了して死紬胞（角質細胞、corneocyte）となり重層した角層に分けられる。角層は、角質紬胞間が角層間脂質で充たされており、皮膚からの物質透過の最大のパリアーを形成している。角層間脂質は層板顆粒に由来し、その組成はスフィンゴ脂質５０％、コレステロールエステル２０％、コレステロール１０％、脂肪酸２０％であり、スフィンゴ脂質の９５％がセラミドである。これらの脂質は角層間において水分子と水素結合のネットワークを形成し、中に水分子を構造単位で層状に含むラメラ構造を構築することにより水分保持（保湿）にも関与している。角層中のこれら脂質含量の乱れがドライスキン（いわゆる荒れ肌）やいくつかの皮膚疾患の病態を引き起こすと考えられている。例えば、アトピー性皮膚炎では角層中のスフィンゴ脂質、特にセラミドの有意な滅少がみられる。また一般的に、セラミドは年齢とともに減少しがちであり、しみ、しわ、肌の老化、アトピー性皮膚炎などに深く関係している。【０００３】
最近の脂質研究の進展により、セラミドがバリア形成能にのみに関与するだけでなく、細胞内でアポトーシスや細胞の分化誘導などの細胞間情報伝達を介した皮膚構造の維持にも関わることが明らかにされている。【０００４】
近年、スフィンゴリン脂質の生合成や代謝経路が明らかとなり、スフィンゴリン脂質やその代謝脂質が細胞の生存や増殖などに関与することが示唆されている。セラミドの１位水酸基にホスホコリンが結合したスフィンゴミエリンは、スフィンゴミエリナーゼにより加水分解されてセラミドとホスホコリンとなる。表皮での脂質合成および代謝は高い活性を示し、また大部分が全身循環系とは独立していると考えられていることから、スフィンゴミエリンを皮膚の奥深く浸透せしめることができた場合、角層間隙中のセラミド含量や角層より下の角化細胞中でのセラミド合成量に影響を及ぼすことが考えられる。角層間隙中のセラミド含量が変化した場合、皮膚のバリア能や保湿性にも大きく影響するであろう。しかし、このような現象はこれまで明らかにされてこなかった。【０００５】
特開昭６３−２１１２０８号公報にはスフィンゴミエリンを配合した化粧料が記載されている。この文献に開示される化粧料は、有効成分の皮膚浸透性が優れ、皮膚に塗布することにより皮膚細胞機能が活性化し、皮膚の保護及び美化に顕著な効果を発揮することが謳われている（２頁右上欄４行〜１８行）。しかしこの文献には、この文献に係る化粧料を皮膚に塗布したときにスフィンゴミエリンを皮膚の奥深くまで浸透せしめることができるか否かは記載されておらず、また、皮膚中のセラミド合成量が変化するか否かは記載されていない。【０００６】
ＷＯ９７／３０６９６号公報には、スフィンゴミエリンを膜構成脂質の主成分とするリポソームが記載されている。このリポソームは、薬剤を安定的に保持するために用いられる（請求項１〜３、要約）。しかしＷＯ９７／３０６９６は化粧料については全く触れおらず、セラミド生合成についても全く触れていない。
【特許文献１】特開昭６３−２１１２０８号公報
【特許文献２】ＷＯ９７／３０６９６号公報
【発明の開示】
【０００７】
このような背景の下、本発明は、皮膚中のセラミド量を増加せしめることにより、皮膚のバリア能や保湿性を改善し、荒れ肌やアトピー性皮膚炎などの改善に資する技術を提供することである。
【０００８】
本発明は、スフィンゴミエリンをナノ化することにより、スフィンゴミエリンを皮膚の奥深く浸透せしめることを、その特徴の一つとする。スフィンゴミエリンを化粧料に配合するアイディア自体は古くから存在し、上述のように特開昭６３−２１１２０８号公報にそのようなアイディアが既に記載されている。しかし本発明は、スフィンゴミエリンをナノ化して化粧料に配合することを特徴とする。ナノ化するという特徴のため、スフィンゴミエリンが皮膚の奥深くまで浸透することが可能となり、これが皮膚中、特に角層間隙中セラミド含量を増加せしめる。
【０００９】
セラミドの増加は、皮膚や毛髪の改善に、様々な効果を及ぼすことが期待される。セラミドは、優れたバリア形成能や生体適合性を有し、また、顕著な保湿効果を有する。したがって、本発明によるナノ化したスフィンゴミエリンを適用することにより、荒れ肌の改善や保湿性の改善という効果が期待できる。
【００１０】
さらにセラミドの増加は、バリア形成能の向上だけではなくバリア維持能の向上にもつながるため、皮膚の恒常性維持に大きく貢献する。したがって、本発明によるナノ化したスフィンゴミエリンを繰り返し適用することにより、乾燥肌の改善が期待できる。
【００１１】
セラミドは、皮膚だけでなく毛髪の細胞膜複合体における主要構成成分であり、その組成はセラミドＩＩ（８８％）・セラミドＶ（１２％）であることが報告されている。またセラミドは、ラメラ構造の安定化作用を有することも知られている。したがって、本発明によるナノ化したスフィンゴミエリンを、毛髪または頭皮細胞に適用すると、ダメージヘアのキューティクルの改善、引っ張り強度の改善効果が期待できる。
【００１２】
大寺章夫著「セラミド産生促進効果のある抗老化原料と、セラミドとマオリカインの相乗効果による抗シワ原料」（フレグランスジャーナル、２００４年１１月号）によれば、「セラミドは皮膚のバリア機能を担う主要な物質であり、アトピー性皮膚炎、加齢等による乾燥肌は、種々のセラミドの定量的・定性的な乱れが深く関わっている。また最近の研究によると、セラミドはＵＶにより生じる皮膚のダメージに対する防御メカニズムに重要な役割を果たしていることが分かってきている。ＵＶＢが皮膚に照射されると、ケラチノサイトはスフィンゴミエリネースを活性化し、細胞間セラミドを産生させる。これがセカンドメッセンジャーとして働き、細胞の分化・成長を止め、ケラチノサイトのアポトーシスが開始する。セラミドは、このようにして、ＵＶによりダメージを受けた細胞の状況を促進することで表皮の保護に役立っている。セラミドタイプＩＩは特にこのプロセスに深く関わっている。」ことが分かっている。
【００１３】
後述の実験結果から示されるように、本発明によるナノ化したスフィンゴミエリンを適用することにより、皮膚中のセラミドタイプＩＩの量が増加する。このため本発明の特定の実施形態は、ＵＶによりダメージを受けた皮膚や毛髪細胞の修復に寄与することができることが期待できる。
【００１４】
本発明は、アトピー性皮膚炎の改善にも資することが期待できる。厚生省心身障害研究によれば、アトピー性皮膚炎とは、「主としてアトピー素因のあるものに生じる慢性に経過する皮膚の湿疹病変である」が、角層中のセラミド量の低下がアトピー性皮膚炎の要因であるバリア機能の低下を引き起こしていることから、角層中のセラミド量を増やすことがアトピー性皮膚炎の改善に有効である。本発明によるナノ化したスフィンゴミエリンを適用することにより、皮膚中のセラミド量が増加するので、アトピー症状の改善が期待できる。
【００１５】
これらのことから理解されるように、本発明は、荒れ肌や乾燥肌の改善のための化粧料、紫外線でダメージを受けた皮膚の修復のための化粧料や外用剤、アトピー症状の緩和や改善のための化粧料や外用剤、頭髪キューティクルの改善や毛髪品質の改善のための化粧料など、皮膚や毛髪の改善を目的とした様々な化粧料や外用剤として実施されることができる。
【００１６】
本発明の好適な実施形態では、スフィンゴミエリンをナノ化する方法として、スフィンゴミエリンをリポソーム化する方法を採用する。よく知られているように、リポソームの直径は１００ｎｍ〜１μｍ程度であり、皮膚バリアを浸透して真皮まで達することが可能である。そこで発明者は、高純度のスフィンゴミエリンをリポソーム化することにより、皮膚の奥深くまでスフィンゴミエリンを浸透せしめることとした。
【００１７】
また本発明の好適な実施形態では、高純度のスフィンゴミエリンをリポソーム化したものを用いることを特徴とする。最も好適な実施形態では、９８％以上がスフィンゴミエリンであるリン脂質でリポソームを構成する。
【００１８】
本願発明者の知る限り、本願出願日以前において、かかる高純度のスフィンゴミエリンリポソームを用いた化粧料は知られていない。また、スフィンゴミエリンリポソームを用いて皮膚中のセラミド合成量を増加せしめ、もって荒れ肌の改善やアトピー症状の緩和といった効能を得ることについても、誰も想到することがなかった。従って、本発明の実施形態は、種々の形態の化粧品や外用剤を含む。
【実施例１】
【００１９】
次に、本発明の実施例の一つを、その効果を示すデータと共に紹介する。【００２０】
〔スフィンゴミエリンのナノ化〕
ナノ化するスフィンゴミエリンの原料として、例えば日本油脂株式会社製の"COATSOME（登録商標）NM-70""COATSOME（登録商標）NM-10""スフィンゴミエリンナチューレ（商標）"などを用いることができる。これらの原料は純度９８％のスフィンゴミエリンである。この高純度スフィンゴミエリンをリポソーム化することにより、ナノ化したスフィンゴミエリンを得ることができる。リポソームの製法については、上掲非特許文献２の５ページに説明があり、当該箇所は参照することにより本明細書に取り込まれる。【００２１】
〔スフィンゴミエリンリポソームの適用〕
維持培地で培養下にて1mLの1% スフィンゴミエリンリポソームをLabCyte EPI-model（商標） ６時間適用し、その後スフィンゴミエリンリポソーム製剤を適用部位から取り除いた。その後、角化促進培地を用いて１２時間又は２４時間培養した。スフィンゴミエリンリポソーム適用と比較するため、pH7.4 PBSを適用したものをコントロールとして用いた。【００２２】
〔脂質の抽質〕
Transwell（商標）からナイフを用いて剥がした培養皮膚を10 mLのスピッツ管に移し、6mLのクロロフォルム・メタノール混液（1:1）を加え、プローブ型の超音波装置（SONIFIER（商標）B-12, Branson sonic power company）で60W、5分間処理した。その後、得られた溶液を0.2μmのMillex（商標）-GN（Millipore corporation, Bedford, MA, U.S.A.）で濾過した後、回収されたろ液を50°Cで窒素乾固して皮膚中の脂質成分を得た。これらに200μLのクロロフォルム・メタノール混合液（1:1）を加え再度脂質成分を溶解させてHPTLC（High Performance Thin Layer Chromatography、高分離能・高感度検出用の薄層プレ−ト）用サンプルとした。【００２３】
〔展開・呈色〕
クロロフォルム：メタノール：酢酸（190:9:1）を展開溶媒として用い、HPTLC用サンプルをプロットし展開した。展開後、10%硫酸銅8％硝酸水溶液を用いて呈色した。呈色後、HPTLCをスキャナーで読み取り、Image J (http://rsb.info.nih.gov/ij/) を用いて解析した。【００２４】
〔結果〕
図１は、スフィンゴミエリンリポソーム製剤の適用時間６時間、培養時間１２時間の場合の結果である。また図２は、スフィンゴミエリンリポソーム製剤の適用時間６時間、培養時間２４時間の場合の結果である。両者とも、スフィンゴミエリンリポソームの適用例が２例、コントロールが２例、セラミドＩＩのみのHPTLCを２例、並べて観察した。【００２５】
培養時間１２時間の場合（図１）と２４時間の場合（図２）の両方において、コントロールに比べてスフィンゴミエリンリポソーム製剤を適用した場合にセラミドＩＩ付近でのバンドが濃くなっていることが分かる。このことから、スフィンゴミエリンリポソーム製剤の適用により、セラミドＩＩもしくはそれに類似した構造を有する脂質が増加することが確認できた。また、図１及び図２を観察すると、スフィンゴミエリンリポソーム製剤を適用した場合にオレイン酸が増加していることも認められる。オレイン酸はセラミドから作られるので、オレイン酸の増加もセラミドが増加したことを示していると考えられる。
【実施例２】
【００２６】
次に、本発明の別の実施例を、その効果を示すデータと共に紹介する。実施例２は、１％スフィンゴミエリンリポソーム水溶液を０．１％配合した化粧品を、アトピー様皮膚疾患を患っている３名に適用し、経過を観察した。【００２７】
〔被験者１：H.C様〕
年齢：38歳、性別：女性、職業：小学校教諭。軽度のアトピー疾患ながら、ほぼ全身に皮膚炎が認められ、痒みは全身で感じられた。
通常の生活の中で、朝・晩の顔の洗顔後あるいは入浴後（１日最低2回）にローション及びクリームを患部に塗布し、変化を観察した。
結果は一過間にて痒みの治まることを感じ、その後一ヶ月にてほぼ全身のガサガサ肌に改善が認められた。【００２８】
〔被験者２：M.M様〕
年齢：25歳、性別：女性、職業：パート。軽度のアトピー性疾患を患う。首筋の部分の患部が顕著。
上記H.Cと同様通常の生活の中で、朝・晩の顔の洗顔後あるいは入浴後（1日最低2回）にローション及びクリームを患部に塗布し、変化を観察した。
結果は、ローションを患部に塗布すると痒みが軽減することを感じ、首筋に認められたアトピー様疾患は、およそ一ヶ月にて治癒した。【００２９】
〔被験者３：K.H様〕
年齢：27歳、性別：女性、職業：会社員（薬局勤務）。アトピー性皮膚炎を全身に患う。皮膚の色が黒ずみ、全身に痒みを感じる。
上記H.Cと同様通常の生活の中で、朝・晩の顔の洗顔後あるいは入浴後（1日最低2回）にローション及びクリームを患部に塗布し、変化を観察した。K.Hの場合は、一日に塗布する回数は、痒みを覚えたときに塗布することとし、制限を設けなかった。
結果は、六ヶ月のなかで肌の黒ずみが薄れ、ガサガサの肌は健常人に肌に近づくほど改善が見られた。【００３０】
以上、本発明の実施形態を、効果を証明する試験例を紹介する説明してきたが、本発明の実施形態は、ここで説明した実施形態に限られるものではなく、本発明の思想の範囲内で、様々な実施形態をとりうることには留意されたい。  例えば本発明によるスフィンゴミエリンリポソームの中には適当な有効成分を封入することができる。  【００３１】
本発明の実施形態である化粧料は、より具体的に、例えば次のような化粧料であることができる：おしろい，フェースパウダー，紙おしろい，クリームおしろい，固形おしろい，粉おしろい，練りおしろい，水おしろい，皮膚用化粧品，化粧水，スキンローション，柔軟化粧水，収れん化粧水，粘液性化粧水，ハンドローション，ひげそり用化粧水，薬用化粧水，化粧液，保湿液，美容液，クリーム，油性クリーム，中油性クリーム，弱油性クリーム，クレンジングクリーム，コールドクリーム，ハイゼニッククリーム，バニシングクリーム，ハンドクリーム，ひげそり用クリーム，漂白クリーム，ファウンデーションクリーム，薬用クリーム，リップクリーム，乳液，ミルクローション，スキンミルク，日やけクリーム，日やけ止めクリーム，日やけ（用），日やけ止め（用），仕上用化粧品，ファンデーション，フェースカラー，コンシーラー，化粧下地，メークアップベース，プレメークアップ，紅，口紅，リップスティック，リップルージュ，リップカラー，リップペンシル，リップグロス，リップライナー，アイメークアップ，アイシャドウ，アイカラー，アイライナー，眉墨，アイブローペンシル，アイブローブラッシュ，マスカラ，まつげ化粧料，練紅，頬化粧料，頬紅，チークカラー，チークルージュ，ボディメークアップ，整髪料，養毛料，頭皮料，毛髪着色料，洗髪料，頭髪用化粧品，髪油，カラーリンス，コールドパーマ用液，すき油，セッティングローション，染毛剤，毛髪脱色剤，チック，パーマネント用液，びん付け油，ヘアクリーム，ヘアスプレー，ヘアトニック，ヘアフィクサー，ヘアラッカー，ヘアリンス，ベーラム，ポマード，ボディパウダー，タルカムパウダー，バスパウダー，パヒュームパウダー，ベビーパウダー，天爪粉，浴用化粧料，バスオイル，バスソルト，バブルバス，フォームバス，パック用化粧料。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】ナノ化したスフィンゴミエリンの効果を示す試験結果
【図２】ナノ化したスフィンゴミエリンの効果を示す試験結果
【図１】
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【図２】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年7月10日(2008.7.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
経皮塗布による皮膚中セラミド増量剤であって、純度９８％以上のスフィンゴミエリンで形成したリポソームを含むことを特徴とする、皮膚中セラミド増量剤。
【請求項２】
請求項１に記載の皮膚中セラミド増量剤を含む、化粧料。
【請求項３】
請求項１に記載の皮膚中セラミド増量剤を含む、外用剤。
【国際調査報告】
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