(57)【要約】  本発明は、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする炎症性腸疾患治療薬に関する。  本発明によれば、有効かつ安全な潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む炎症性腸疾患治療薬が提供できる。この化合物の炎症性腸疾患のような慢性炎症に対する治療効果と副作用のバランスは、アミノサリチル酸製剤やコルチコステロイド製剤よりも優れており、単なる下痢抑制作用では全く予想できないものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする炎症性腸疾患治療薬。
【請求項２】
炎症性腸疾患が、潰瘍性大腸炎又はクローン病である請求項１記載の炎症性腸疾患治療薬。
【請求項３】
有効成分が、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン塩酸塩である請求項１又は２記載の炎症性腸疾患治療薬。
【請求項４】
炎症性腸疾患治療薬製造のための、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項５】
炎症性腸疾患が、潰瘍性大腸炎又はクローン病である請求項４記載の使用。
【請求項６】
５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩が５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン塩酸塩である請求項４又は５記載の使用。
【請求項７】
５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを特徴とする炎症性腸疾患の治療方法。
【請求項８】
炎症性腸疾患が、潰瘍性大腸炎又はクローン病である請求項７記載の方法。
【請求項９】
５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩が５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン塩酸塩である請求項７又は８記載の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、炎症性腸疾患治療薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症性腸疾患（Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｄｉｓｅａｓｅ；ＩＢＤ）は、大腸及び小腸の粘膜に慢性の炎症又は潰瘍が引き起こされ、長期に下痢、血便が続き、再発を繰り返す原因不明の難病である。我が国では特定疾患に指定されており、同疾患対策研究事業の一環として各患者には同疾患治療医療受給者証が交付されている。ＩＢＤには２種類の主な疾患、クローン病（Ｃｒｏｈｎ  ｄｉｓｅａｓｅ，ＣＤ）及び潰瘍性大腸炎（Ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ  ｃｏｌｉｔｉｓ，ＵＣ）がある。
クローン病は限局性腸炎あるいは肉芽腫性回腸炎や回結腸炎ともいわれ、腸壁に起こる慢性炎症で消化管のどの部位にも起こる。潰瘍性大腸炎とは、大腸に炎症が起こり潰瘍を形成する慢性疾患で、出血性の下痢や腹部の激しい痛み、発熱を伴う発作を起こす。両疾患の患者数は欧米には及ばないものの、本邦でも増加の一途をたどっており、患者数は潰瘍性大腸炎が約７３，０００人（２００１年）で、クローン病は約２１，０００人（２００１年）である。また４６特定疾患中、前記受給者証の交付数としては、潰瘍性大腸炎は第１位、クローン病は第８位であった。【０００３】
炎症性腸疾患は、前記のように原因が不明であることから通常の下痢治療薬等は有効ではない。炎症性腸疾患の治療には、従来からアミノサリチル酸製剤（スルファサラジン、５−アミノサリチル酸）とコルチコステロイド製剤が第一及び第二選択薬として、広く使用されている。更に重症例では免疫抑制剤（アザチオプリン、６−メルカプトプリンなど）、抗サイトカイン製剤が使用されている。アミノサリチル酸製剤としてはスルファサラジン、５−アミノサリチル酸が広く使用されているが、投与患者の５０％程度で悪心、嘔吐、食欲不振及び肝機能障害などの消化器障害、顆粒球減少や溶血性貧血、葉酸欠乏性貧血などの血液系障害が発症する。またサリチル酸骨格を有するためサリチル酸系の薬剤に過敏症状を示す症例では副作用が出現する可能性があり、下痢、腹痛、アミラーゼ上昇や腎障害などを認めることがある。またスルファサラジンでは男性不妊や尿着色といった副作用が発現することから、患者には精神的にも大きなストレスとなる。コルチコステロイド製剤には骨粗鬆症、成長障害、続発性副腎不全、耐糖能異常、高血圧など様々な副作用がある。また、ＣＤやＵＣの緩解維持効果がないことも問題点である。一方、抗サイトカイン療法は、これら従来のものとはまったく異なる新しい治療法であり、最初に登場した薬剤がキメラ型抗ヒトＴＮＦ−αモノクローナル抗体のインフリキシマブである。ステロイド抵抗性の中度から重度なクローン病患者で有効であること（非特許文献１）、更に緩解維持にも有効であること（非特許文献２）が報告されている。副作用として高血圧、悪寒、発疹、発熱、頭痛、湿疹などが知られている。更にインフリキシマブはキメラ型抗体であるため、抗原性を示す可能性があり、急性の超過敏反応が起こることがある。また、最近では抗生物質が必要となるような感染症や癌原性が問題視されている。
【非特許文献１】Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，第３３７巻，第１０２９頁，１９９７年
【非特許文献２】Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，第１１７巻，第７６１頁，１９９９年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、新たな炎症性腸疾患治療薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、炎症性腸疾患のモデルとして知られている２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）誘発及びデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＤＳ）誘発ＩＢＤモデルを用い、種々の化合物を対象として炎症性腸疾患治療作用を検討してきたところ、全く意外にも、抗腫瘍効果の増強作用、癌転移抑制作用及び抗癌剤の副作用軽減作用が知られている５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン塩酸塩［化合物（１）］が、優れた炎症性腸疾患治療効果を有することを見出し、本発明を完成した。【０００６】
すなわち、本発明は、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン［化合物（Ｉ）］又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする炎症性腸疾患治療薬を提供するものである。【０００７】
また本発明は、炎症性腸疾患治療薬製造のための、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩の使用を提供するものである。【０００８】
更に本発明は、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを特徴とする炎症性腸疾患の治療方法を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、有効かつ安全な潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む炎症性腸疾患治療薬が提供できる。化合物（１）の炎症性腸疾患のような慢性炎症に対する治療効果と副作用のバランスは、アミノサリチル酸製剤やコルチコステロイド製剤よりも優れており、単なる下痢抑制作用では全く予想できないものである。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ＴＮＢＳ腸炎マウスにおける化合物（１）投与による炎症の抑制作用を示す図（ＨＥ染色図）である。
【図２】ＴＮＢＳ腸炎マウスにおける炎症インデックスを示す図である。
【図３】ＴＮＢＳ腸炎マウスにおける、化合物（１）投与による腸上皮細胞のアポトーシスの抑制作用を示す図である。
【図４】ＴＮＢＳ腸炎マウスにおけるアポトーシス誘導率を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明の医薬において有効成分として用いられる５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオンは、次の式（Ｉ）：【００１２】
【化１】
2007122812.tif 000002
【００１３】
で表される化合物である。当該化合物（Ｉ）は、公知化合物であり、その薬理作用については抗腫瘍効果の増強作用（国際特許公開ＷＯ／９６３０３４６号公報）、癌転移抑制作用（国際特許公開ＷＯ／９８１３０４５号公報）及び抗癌剤の副作用軽減作用（特開２０００−２７３０４４号公報）が知られているが、炎症性腸疾患に対する作用については一切知られていない。【００１４】
化合物（Ｉ）の薬学的に許容される塩としては、特に限定されないが薬学的に許容される酸を作用させた酸付加塩が好ましい。この酸付加塩としては、例えば塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸等の無機酸との塩；シュウ酸、マレイン酸、フマール酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等の有機酸との塩が例示できるが、塩酸又はｐ−トルエンスルホン酸との塩が好ましい。化合物（Ｉ）又はその塩の特に好ましい具体例としては、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン塩酸塩、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン  ｐ−トルエンスルホン酸塩が挙げられる。【００１５】
化合物（Ｉ）又はその塩は、後記実施例に示すように、炎症性腸疾患のモデルとして知られているＴＮＢＳ誘発又はＤＤＳ誘発ＩＢＤモデルに対し、極めて優れた抗炎症作用及び腸上皮細胞のアポトーシス抑制作用を有する。そして、その治療効果は、従来ＩＢＤに対して用いられているコルチコステロイド剤よりも優れている。また、化合物（Ｉ）又はその塩は、安全性が高く、従来の炎症性腸疾患治療薬が多くの副作用の問題を有していることを考慮すれば、従来にない全く新しい炎症性腸疾患治療薬として有用である。【００１６】
なお、化合物（Ｉ）又はその塩はチミジンホスホリラーゼ阻害剤であることが知られているが、実施例で使用したマウス、ラット等の齧歯類の消化管では、チミジンホスホリラーゼはほとんど発現しておらず、単純に化合物（Ｉ）がチミジンホスホリラーゼ阻害作用のみによって炎症性腸疾患治療効果を発揮しているとは考えにくい。また、抗癌剤に起因する下痢の抑制効果も知られているが、これは抗癌剤による細胞傷害の抑制効果を開示したものであり、当該知見からは本件のような慢性的な炎症疾患に対する治療効果は全く予想し得ない。加えて、チミジンホスホリラーゼはＰＤ−ＥＣＧＦとしての活性により血管新生を誘導することが知られているため、チミジンホスホリラーゼ阻害剤は血管新生阻害作用による癌転移抑制剤として利用する報告があるが、炎症性腸疾患治療剤としての有用性は未知である。
本発明の対象疾患は炎症性腸疾患であり、例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎、コラーゲン性大腸炎、リンパ球性大腸炎、経路変更後の大腸炎等が挙げられ、特にはクローン病、潰瘍性大腸炎である。【００１７】
化合物（Ｉ）又はその塩は、それぞれ単独で各種の投与単位形態に製剤化し、投与することができる。【００１８】
本発明の医薬を、人を含む哺乳動物のＩＢＤの治療剤として使用する際には、治療目的に応じて各種の薬学的投与形態とすることができ、具体的には錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の経口剤；注射剤、坐剤等の非経口剤とすることができる。これら投与剤は、薬学的に許容される担体等を用い、この分野で通常知られた慣用的な製剤方法により製剤化することができる。錠剤の形態に成形するに際しては、担体として、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、コーンスターチ、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等の崩壊剤；白糖、ステアリン酸、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤；グリセリン、デンプン等の保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤などを使用できる。更に、錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠、二重錠、多層錠等とすることができる。丸剤の形態に成形するに際しては、担体として、例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤；ラミナラン末、カンテン末等の崩壊剤などを使用できる。カプセル剤は常法に従い、上記で例示した各種の担体と混合して硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセル等に充填して調製される。経口用液体製剤とする場合は、矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を用い、常法により、内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。この場合、矯味剤としては、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が、緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。坐剤の形態に成形するに際しては、担体として、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を使用できる。注射剤とする場合、液剤、乳剤及び懸濁剤は殺菌され、且つ血液と等張であるのが好ましく、これらの形態に成形するに際しては、希釈剤として、例えば水、乳酸水溶液、エチルアルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレン化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を使用できる。尚、この場合、等張性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドウ糖又はグリセリンを医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。更に上記各製剤には必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や、他の医薬品を配合してもよい。本発明の製剤中に含まれる化合物（１）又はその薬学的に許容される塩の量は特に限定されず、適宜選択することができるが、いずれも通常製剤中０．０１〜７０重量％程度とするのが好ましい。【００１９】
本発明の医薬の投与方法は特に限定されず、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、患者の症状の程度等に応じて適宜決定される。例えば錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤及び乳剤は経口投与される。注射剤は単独で又はブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じて単独で動脈内、筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。坐剤は直腸内投与される。【００２０】
本発明の医薬の有効成分の投与量は、用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選択できる。通常化合物（Ｉ）又はその薬学的に許容される塩の投与量は０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ／日程度、好ましくは０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日程度を目安とするのがよい。また、これら本発明の製剤は１日１回又は２〜４回程度に分けて投与することができる。
【実施例】
【００２１】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００２２】
処方例１
化合物（１）                          ２５．０ｍｇ
乳  糖                                  ８．０ｍｇ
結晶セルロース                          ４．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                １．０ｍｇ
タルク                                  １．０ｍｇ
コーンスターチ                          ３．５ｍｇ
ヒドロキプロピルメチルセルロース        ２．５ｍｇ
１錠当り                              ４５．０ｍｇ
常法により、上記配合割合で錠剤を調製した。【００２３】
処方例２
化合物（１）                          ５０．０ｍｇ
乳  糖                                ８５．０ｍｇ
コーンスターチ                      １００．０ｍｇ
ヒドロキプロピルメチルセルロース        ３．０ｍｇ
１包当り                            ２３８．０ｍｇ
常法により、上記配合割合で顆粒剤を調製した。【００２４】
処方例３
化合物（１）                          ５０．０ｍｇ
乳  糖                                ２４．０ｍｇ
結晶セルロース                        １３．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                １．０ｍｇ
１カプセル当り                        ４５．０ｍｇ
常法により、上記配合割合でカプセル剤を調製した。【００２５】
処方例４  注射剤
化合物（１）                          ５０．０ｍｇ
注射用蒸留水                            適  量  
１アンプル当り                          ５ｍＬ
常法により１アンプル当り、上記配合割合で注射剤を調製した。【００２６】
処方例５  坐剤
化合物（１）                        １００．０ｍｇ
ウイテップゾールＷ−３５          １４００．０ｍｇ
（登録商標、ダイナマイトノーベル社製）            
１個当り                          １５００．０ｍｇ
常法により１個当り、上記配合割合で坐剤を調製した。【００２７】
実施例１（ＴＮＢＳ誘発ＩＢＤモデルでの作用）
本試験は、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ３２９（２００５）１２１７−１２２４記載の方法に準じて、クローン病モデルであるＴＮＢＳ腸炎マウスに対し化合物（１）（５０ｍｇ／ｋｇ）を連日経口投与し、抗炎症作用を評価した。
１群１０匹の８週齢雌のＢＡＬＢ／ｃマウス（日本ＳＬＣ（株））を２４時間絶食にした後、ジエチルエーテルにて麻酔後、５０％エタノール１ｍＬで希釈したＴＮＢＳ（２，４，６−ｔｒｉｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅ  ｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ（東京化成工業（株））２．０ｇをビニール製カテーテルを肛門から２．５ｃｍに挿入し注腸した。注腸後３０秒間逆さ吊りにし、すぐに肛門より注腸したＴＮＢＳ溶液が漏れないようにした。コントロール群にはＴＮＢＳの代わりに生理食塩水１ｍＬを注腸した。全てのマウスをＴＮＢＳもしくは生理食塩水注腸７日後に、二酸化炭素にて安楽死させ解剖をした。化合物（１）投与群にはＴＮＢＳ注腸前日より化合物（１）を連日５０ｍｇ／ｋｇ経口投与し、コントロール群、化合物（１）非投与群には注腸前日より飲料水を連日経口投与した。投与期間終了後に摘出したマウスの大腸を１ｃｍ毎に横軸方向に切離し１０％ホルマリンにて固定後パラフィンに包埋しＨＥ染色を行い、Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｃｏｒｅ（表１）を基に炎症所見を数値化した。【００２８】
生理食塩水を注腸したコントロール（図１）と比較しＴＮＢＳを注腸することで炎症細胞浸潤や粘膜の脱落がみられた。ＴＮＢＳ２．０ｍｇ投与群では、全層性の炎症細胞浸潤と広範囲の粘膜の脱落、高度の浮腫、ｃｒｙｐｔの消失を認めたが、化合物（１）投与群では炎症細胞浸潤、粘膜の脱落があるものの炎症の範囲、程度は軽度であった（図１）。Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｃｏｒｅ（表１）を用い、炎症の程度を数値化し、化合物（１）投与群及び化合物（１）非投与群の間で比較検討した（図２）。化合物（１）投与群は、化合物（１）非投与群と比較して有意にｓｃｏｒｅが減少された（ＴＮＢＳ  ２．０ｍｇ：１５．０±１．２ｐｏｉｎｔｓ，ＴＮＢＳ＋化合物（１）：９．８±２．１ｐｏｉｎｔｓ．）。【００２９】
【表１】
2007122812.tif 000003
【００３０】
実施例２（ＴＮＢＳ腸炎大腸における腸上皮細胞のアポトーシスの抑制）
ＴＮＢＳ腸炎大腸をギムザ染色にて核を染色し、腸上皮細胞のアポトーシスを検討した（図３）。細胞の縮小あるいは、核の断片化が認められる細胞をアポトーシス細胞とした。顕微鏡下それぞれの切片の細胞数を１０００個数え、アポトーシス細胞の割合（アポトーシス誘導率）を数値化した（図４）。ＴＮＢＳそれぞれの濃度において化合物（１）を投与することによって有意に腸上皮細胞のアポトーシスを抑制していることが明らかになった（ＴＮＢＳ：４０．０±３．０％，ＴＮＢＳ＋化合物（１）：２６．０±５．０％．）。【００３１】
実施例３（ＤＳＳ誘発ＩＢＤモデルにおける病態改善作用）
本試験は、ＰＥＤＩＡＴＲＩＣ  ＲＥＳＥＡＲＣＨ，Ｖｏｌ．５３，Ｎｏ．１，１４３−１４７，２００３記載の方法に準じて行った。すなわち、０日目に各群の平均体重が均等になるように、マウス（６週齢、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ  Ｊｃｌ，日本クレア）を８匹ずつ割り当てた。デキストラン硫酸ナトリウム（以下ＤＳＳ，和光純薬）を、精製水で３％ｗ／ｖになるように溶解した後、給水瓶よりマウスに５日間自由飲水させ（０〜４日目）、潰瘍性大腸炎モデルを作成した。実験群は薬剤非投与群（コントロール）、化合物（１）の１００ｍｇ／ｋｇ／日投与群、比較対照薬として５−アミノサリチル酸（以下、５−ＡＳＡ）の１００ｍｇ／ｋｇ／日投与群、プレドニゾロンの５ｍｇ／ｋｇ／日投与群を設定した（なお、当該対照薬の投与量は、薬効用量である）。更に３％ＤＳＳ水溶液の代わりに精製水を飲水させた無処置群を設定した。薬剤は３％ＤＳＳ水溶液飲水開始後４日目より７日間（４〜１０日目）投薬した。判定は薬剤投与最終日の翌日（１１日目）に実施した。評価指標として、大腸の長さと試験開始日（０日目）から試験終了日（１１日目）までの体重変化率を測定した。【００３２】
判定日のコントロール群の大腸の長さは無処置群と比較して７３．４％であり、顕著な萎縮が観察された。化合物（１）投与群とプレドニゾロン投与群の大腸の長さは無処置群と比較して、それぞれ８８．６％、９３．２％であり、それぞれの大腸の長さはコントロール群に比較して有意に長く、病態の改善が見られた。５−ＡＳＡ投与群はコントロールの８０．３％であり、大腸の萎縮を改善する傾向が認められたものの、有意差は認められなかった。【００３３】
一方、試験開始日と判定日の体重変化率において、コントロール群では１．７±１．８％の体重減少が観察されたのに対し、化合物（１）は０．４±１．２％の僅かながら体重増加傾向が観察された。しかし、プレドニゾロン投与群では３．９±１．０％、５−ＡＳＡ投与群では５．０±０．３％のコントロール群を上回る体重減少が観察され、薬剤の副作用によるものと推察された。【００３４】
以上の結果より、化合物（１）は既存の炎症性腸疾患治療剤に比して効果と副作用のバランスが優れており、潰瘍性大腸炎の治療薬として有用であることが示唆された。【００３５】
【表２】
2007122812.tif 000004
【００３６】
実施例４（単回経口投与毒性試験）
ＳＤ系ラット（６週齢）の雄性５匹、雌性５匹を用いて、化合物（１）２０００ｍｇ／ｋｇを０．５％ＨＰＭＣ溶液で懸濁調整し、１０ｍＬ／ｋｇの投与用量で単回経口投与した。結果、死亡例は全く見られず、体重変化も認められなかった。
【図２】
2007122812.tif 000005
【図４】
2007122812.tif 000006
【図１】
2007122812.tif 000007
【図３】
2007122812.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成21年2月16日(2009.2.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする炎症性腸疾患治療薬。
【請求項２】
炎症性腸疾患が、潰瘍性大腸炎又はクローン病である請求項１記載の炎症性腸疾患治療薬。
【請求項３】
有効成分が、５−クロロ−６−（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン塩酸塩である請求項１又は２記載の炎症性腸疾患治療薬。
【国際調査報告】
2007122812.tif 000009
2007122812.tif 000010
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2007122812.tif 000014